ES2639028T3 - Derivados de oxadiazol - Google Patents
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Abstract
Compuestos seleccionados a partir del siguiente grupo:**Tabla** y los solvatos, tautómeros, sales y estereoisómeros de los mismos, incluidas sus mezclas en todas las proporciones.
Description
Derivados de oxadiazol
La presente invencion se refiere a oxadiazoles, su uso como medicamentos y su uso para el tratamiento de la esclerosis multiple y otras enfermedades.
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y los solvatos, tautomeros, sales y estereoisomeros de los mismos, incluidas sus mezclas en todas las proporciones.
Los compuestos de la presente invencion se unen preferiblemente a receptores de esfingosina 1-fosfato (S1P). S1P es un metabolito esfingolipido bioactivo secretado por las celulas hematopoyeticas y almacenado y liberado por plaquetas activadas. Actua como agonista de una familia de receptores acoplados a proteina G (GPCR). Se han identificado cinco receptores de esfingosina 1-fosfato (S1Pi, SIP2, SIP3, SIP4 y SIP5, conocidos tambien como genes de diferenciacion endotelial, que son Edg1, Edg5, Edg3, Edg6 y Edg8, respectivamente) que presentan una amplia distribucion celular y tisular y estan bien conservados en humanos y en especies de roedores.
S1P participa en diversas funciones celulares, como la supervivencia, la proliferacion y las respuestas inmunitarias. Los compuestos de la presente invencion actuan preferiblemente como agonistas del receptor S1P1/Edg1 y, por consiguiente, tienen actividades inmunodepresoras a traves de la modulacion del trafico de leucocitos, secuestro de linfocitos en tejidos linfoides secundarios e interferencia con las interacciones celula-celula necesarias para conseguir una respuesta inmunitaria eficaz. La invencion tambien esta dirigida a composiciones farmaceuticas que contienen estos compuestos y a metodos de tratamiento o prevencion.
FTY720 o fingolimod, un agonista no selectivo de S1P1, ejerce una actividad inmunodepresora y muestra efectos terapeuticos en el tratamiento de la esclerosis multiple remitente-recidivante. Ya se han publicado numerosos articulos sobre este compuesto: Cyster JG Annu Rev Immunol 23:127-59, 2005, Rosen H Nat Rev Immunol 5:560570, 2005, Rosen H Trends Immunol 28:102-107, 2007, Yopp AC Clin Transplant 20:788-795, 2006, Kappos L N Engl J Med 355:1124-1140, 2006, Massberg S N Engl J Med 355:1088-1089, 2006.
Los agentes inmunodepresores son ademas utiles en una amplia variedad de enfermedades inflamatorias cronicas y autoinmunes, como lupus eritematoso sistemico, artritis reumatoide cronica, diabetes mellitus de tipo I, enfermedades inflamatorias intestinales, cirrosis biliar, uveitis y otros trastornos como enfermedad de Crohn, colitis ulcerosa, penfigoide ampolloso, sarcoidosis, psoriasis, miositis autoinmune, granulomatosis de Wegener, ictiosis, oftalmopatia de Graves, dermatitis atopica y asma. Tambien son utiles como parte de regimenes quimioterapeuticos para el tratamiento de canceres, linfomas y leucemias.
En la solicitud de patente WO2006/131336 se describen derivados de oxadiazoles que contienen un anillo bifenilo. Se conocen otros derivados de oxadiazol que contienen un grupo fenilo sustituido con un grupo cicloalquilo de Bioorg Med. Chem. Lett. 16 (2006) 3679-3683.
En la solicitud de patente EP07117921.2 se describen derivados de oxadiazol.
Se ha encontrado que los compuestos de la presente invencion son agonistas selectivos de S1P1 con propiedades farmacologicas y/o de otro tipo mejoradas.
La presente invencion utiliza compuestos de la presente invencion y sales, tautomeros, solvatos y estereoisomeros de los mismos farmaceuticamente utiles, incluidas sus mezclas en todas las proporciones, para la preparacion de
un medicamento para el tratamiento y/o la profilaxis de enfermedades en las que esta implicada la inhibicion, activacion, regulacion y/o modulacion de la senal de transduccion del receptor S1Pi.
De este modo, la presente invencion comprende preferiblemente compuestos que son agonistas del receptor SIPi/Edgl, que tiene selectividad por el receptor S1P3/Edg3 en especial. Un agonista selectivo del receptor 5 SIPi/Edgl tiene ventajas sobre las actuales terapias y amplla el rango terapeutico de los secuestradores de linfocitos, permitiendo una mejor tolerabilidad con dosis superiores y mejorando, por tanto, la eficacia.
La invencion ademas se refiere a la fabricacion de un medicamento para la mejora de la funcion vascular, ya sea en monoterapia o en combinacion con otros compuestos activos o terapias.
Los compuestos oxadiazol de la presente invencion se pueden preparar a partir de materiales de partida facilmente 10 asequibles usando los siguientes metodos y procedimientos generales. Se apreciara que cuando se proporcionan condiciones experimentales tlpicas o preferidas (es decir, temperaturas de reaccion, tiempo, moles de reactivos, solventes, etc.), tambien pueden usarse otras condiciones experimentales siempre que no se establezca lo contrario. Las condiciones optimas de reaccion pueden variar con los reactivos o solventes utilizados en particular, aunque estas condiciones pueden ser determinadas por un experto en la materia mediante procedimientos 15 rutinarios de optimizacion.
Las siguientes abreviaturas se refieren respectivamente a las definiciones que aparecen a continuacion:
ac (acuoso), h (hora), g (gramo), l (litro), mg (miligramo), MHz (megahercio), pM (micromolar), min (minuto), mm (millmetro), mmol (milimol), mM (milimolar), p.f. (punto de fusion), eq (equivalente), ml (mililitro), pl (microlitro), ACN (acetonitrilo), BINAp (2,2'-bis(disfenilfosfino)-1,i'-binaftaleno), BOC (terc-butoxi-carbonilo), CBZ (carbobenzoxi), 20 CDCl3 (cloroformo deuterado), CD3OD (metanol deuterado), CH3CN (acetonitrilo), c-hex (cHex), dCc (diciclohexil carbodiimida), DCM (DCM), dppf (1,1'-bis(difenilfosfino)ferroceno), DIC (diisopropil carbodiimida), DIEA (diisopropiletil-amina), DMF (dimetilformamida), DMSO (dimetilsulfoxido), DMSO-d6 (dimetilsulfoxido deuterado), EDC (1-(3-dimetil-amino-propil)-3-etilcarbodiimida), ESI (ionizacion por electropulverizacion), EtOAc (EtOAc), Et2O (eter dietllico), EtOH (etanol), FMOC (fluoroenilmetiloxicarbonilo), hAtU (hexafluorofosfato de dimetilamino-([1,2,3]- 25 triazolo[4,5-b]piridin-3-iloxi)-metilen]-dimetil-amonio), HPLC (cromatografla llquida de alta resolucion), i-PrOH (2- propanol), K2CO3 (carbonato de potasio), CL (cromatografla llquida), MD Autoprep (Autoprep dirigida a masa), MeOH (metanol), MgSO4 (sulfato de magnesio), EM (espectrometrla de masas), MtBE (eter metil terc-butllico), Mtr. (4-metoxi-2,3,6-trimetilbencenosulfonilo), MO (microondas), NBS (N-bromosuccinimida), NaHCO3 (bicarbonato sodico), NaBH4 (borohidruro sodico), NMM (N-metil morfolina), RMN (resonancia magnetica nuclear), POA 30 (fenoxiacetato), Py (piridina), PyBOP® (hexafluorofosfato de benzotriazol-1-il-oxi-tris-pirrolidino-fosfonio), TA (TA), tR (tiempo de retencion), SPE (extraccion en fase solida), TBTU (tetrafluoroborato de 2-(1-H-benzotriazol-1-il)- 1,1,3,3-tetrametiluromio), TEA (trietilamina), TFA (acido trifluoroacetico), THF (THF), TLC (cromatografla en capa fina), UV (ultravioleta).
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La preparacion de los compuestos de la presente invencion se demuestra a modo de ejemplo mediante la preparacion de los compuestos de formula (I):
R
donde
R1, R2 indican independientemente entre si H, Hal, CF3, OCF3, CN o NO2, OH,
S es OR3 o COOR3,
40 Q indica (CH2)mX(CH2)m*,
X es -NA-,
W indica CH,
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Ra
Rb
A
R3
m*
y
m*
Rs
G
es G donde Rs indica Hal, A, OR3, N(R3)2,
NR3COA, NR3CON(R3)2, NR3SO2A, COR3, SO2N(R3)2, independientemente entre si H, Hal o CH3, preferiblemente H,
NO2, CN, COOR3, SOA o SO2A,
CF3,
y
OCF3, CON(R3)2, Gi, G2 indican
es A, CF3, CH3, Hal, OCF3, CN, NO2, N(R3)2, CH2(NR3)2,
indica un alquilo lineal o ramificado con 1 a 6 atomos de C, preferiblemente de 1 a 3 atomos de carbono, donde un atomo de H puede estar sustituido por Hal, OH, COOR3, CN, N(R3)2 y donde un grupo CH2 puede estar sustituido por O, -NR3-, -NR3CO-, -CO- o S y/o por grupos -CH=Ch- o -CEC-,
es H o A,
es 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7 u 8,
es 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7 u 8
donde al menos uno de Rs y Rb indica CF3.
Dependiendo de la naturaleza de R1, R2, Ra, Rb, W, Q y S, se pueden seleccionar diferentes estrategias de slntesis para la slntesis de compuestos de formula (I). En el proceso ilustrado en los esquemas siguientes R1, R2, Ra, Rb, W, Q y S son como se define anteriormente en la descripcion.
En general, los compuestos oxadiazol segun la formula (I) de esta invencion pueden prepararse a partir de materiales de partida facilmente asequibles. Si dichos materiales de partida no estan disponibles en el mercado, se pueden preparar mediante tecnicas de slntesis convencionales. Los siguientes metodos y procedimientos generales descritos mas adelante en los ejemplos se pueden emplear para preparar compuestos de formula (I). Las condiciones de reaccion mostradas en los esquemas siguientes, como las temperaturas, solvente o correactivos, se proporcionan solo como ejemplos y no son restrictivos.
Los compuestos de formula (I) y formulas relacionadas, donde Ra, Rb, R1, R2, Q y S son como se define anteriormente, se pueden convertir a compuestos alternativos de formula (I) y formulas relacionadas, donde Ra, Rb, R1, R2, Q y S son como se define anteriormente, empleando tecnicas de interconversion adecuadas bien conocidas por una persona experta en la materia.
En general, los compuestos de formula (I'), donde R1, R2, Ra, Rb, W y Q son como se define anteriormente, pueden prepararse mediante hidrolisis de los derivados ester de formula (I''), donde R3 es como se define anteriormente y mas preferiblemente R3 es un grupo metilo o terc-butilo, usando condiciones bien conocidas por un experto en la materia, como un hidroxido de metal, por ejemplo, hidroxido de litio, hidroxido sodico o hidroxido de potasio, en un solvente adecuado como THF, metanol, etanol o agua o mezclas de los mismos, o usando un acido, por ejemplo HCl o TFA, en un solvente adecuado como dioxano, DCM, a una temperatura de entre aproximadamente 20 °C y aproximadamente 50 °C, preferiblemente a TA, durante unas horas, por ejemplo, de una hora a 24 h (esquema 1).
Esquema 1
O
-R
R1
(I'')
OH
El metodo para preparar los derivados ester de formula (I”) seleccionados a continuacion:
N-(3-{5-[2'-Etil-2-(metoximetil)bifenil-4-il]-1,2,4-oxadiazol-3-il}bencil)-N-metil-beta-alaninato de terc-butilo
5 N-(3-{5-[3-(Metoximetil)-4-(2-metilpiperidin-1-il)fenil]-1,2,4-oxadiazol-3-il}bencil)-N-metil-beta-alaninato de terc-butilo
N-(2-Fluoro-4-{5-[3-(metoximetil)-4-(2-metilpiperidin-1-il)fenil]-1,2,4-oxadiazol-3-il}benzoil)-beta-alaninato de etilo
[(3-{5-[3-(Metoximetil)-4-(2-metilpiperidin-1-il)fenil]-1,2,4-oxadiazol-3-il}bencil)oxi]acetato de terc-butilo
4-(2,3-Difluoro-5-{5-[2-(metoximetil)-2'-metilbifenil-4-il]-1,2,4-oxadiazol-3-il}fenoxi)butanoato de etilo
3-[(3-{5-[2-(Metoximetil)-2'-metilbifenil-4-il]-1,2,4-oxadiazol-3-il}bencil)oxi]propanoato de terc-butilo
10 3-[(3-{5-[3-(Metoximetil)-4-(2-metilpiperidin-1-il)fenil]-1,2,4-oxadiazol-3-il}bencil)oxi]propanoato de terc-butilo
N-(3-{5-[2'-Fluoro-2-(metoximetil)bifenil-4-il]-1,2,4-oxadiazol-3-il}bencil)-N-metilglicinato de terc-butilo
N-(3-{5-[2'-Cloro-2-(metoximetil)bifenil-4-il]-1,2,4-oxadiazol-3-il}bencil)-N-metilglicinato de terc-butilo
3-[(3-{5-[4-(2-Metilpiperidin-1-il)-3-(trifluorometil)fenil]-1,2,4-oxadiazol-3-il}bencil)oxi]propanoato de terc-butilo
N-Metil-N-(3-{5-[4-(2-metilpiperidin-1-il)-3-(trifluorometil)fenil]-1,2,4-oxadiazol-3-il}bencil)glicinato de terc-butilo
15 N-Metil-N-(3-{5-[2'-metil-2-(trifluorometil)bifenil-4-il]-1,2,4-oxadiazol-3-il}bencil}glicinato de terc-butilo
2-Cloro-4-{5-[2-(metoximetil)-2'-metilbifenil-4-il]-1,2,4-oxadiazol-3-il}benzoato de metilo Ejemplo 13, etapa 1
N-(2-Cloro-4-{5-[2-(metoximetil)-2'-metilbifenil-4-il]-1,2,4-oxadiazol-3-il}benzoil)-beta-alaninato de metilo
N-(4-{5-[2'-Etil-2-(metoximetil)bifenil-4-il]-1,2,4-oxadiazol-3-il}-2-fluorobenzoil)-beta-alaninato de etilo
N-(3-{5-[4-(2-Etilpiperidin-1-il)-3-(metoximetil)fenil]-1,2,4-oxadiazol-3-il}bencil)-N-metilglicinato de terc-butilo
20 N-(terc-Butoxicarbonil)-N-(3-{5-[2'-etil-2-(metoximetil) bifenil-4-il]-1,2,4-oxadiazol-3-il}bencil)-beta-alaninato de terc-
butilo
N-(2-Fluoro-5-{5-[3-(metoximetil)-4-(2-metilpiperidin-1-il)fenil]-1,2,4-oxadiazol-3-il}bencil)-N-metil-beta-alaninato de terc-butilo
N-(3-Fluoro-5-{5-[2-(metoximetil)-2'-metilbifenil-4-il]-1,2,4-oxadiazol-3-il}bencil)-N-metilglicinato de terc-butilo 25 N-(3-Fluoro-5-{5-[2-(metoximetil)-2'-metilbifenil-4-il]-1,2,4-oxadiazol-3-il}bencil)-N-metil-beta-alaninato de terc-butilo
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N-(3-{5-[3'-Fluoro-2-(metoximetil)-2'-metilbifenil-4-il]-1,2,4-oxadiazol-3-il}bencil)-N-metilglicinato de terc-butilo
N-(3-{5-[4'-Fluoro-2-(metoximetil)-2'-metilbifenil-4-il]-1,2,4-oxadiazol-3-il}bencil)-N-metilglicinato de terc-butilo
N-(3-{5-[5'-Fluoro-2-(metoximetil)-2'-metilbifenil-4-il]-1,2,4-oxadiazol-3-il}bencil)-N-metilglicinato de terc-butilo
[(3-{5-[4-(2-Metilpiperidin-1-il)-3-(trifluorometil)fenil]-1,2,4-oxadiazol-3-il}bencil)oxi]acetato de terc-butilo
N-(3-{5-[3',4'-Difluoro-2-(metoximetil)-2'-metilbifenil-4-il]-1,2,4-oxadiazol-3-il}bencil)-N-metilglicinato de terc-butilo
N-(3-{5-[2-(Metoximetil)-2'-metilbifenil-4-il]-1,2,4-oxadiazol-3-il}fenil)acetil)-beta-alaninato de etilo
N-[(3-{5-[2-(Metoximetil)-2'-metilbifenil-4-il]-1,2,4-oxadiazol-3-il}fenil)acetil]-N-metilglicinato de metilo
N-Metil-N-(3-{5-[4-[(2R)-2-metilpiperidin-1-il]-3-(trifluorometil)fenil]-1,2,4-oxadiazol-3-il}bencil)glicinato de terc-butilo
N-Metil-N-(3-{5-[4-[(2S)-2-metilpiperidin-1-il]-3-(trifluorometil)fenil]-1,2,4-oxadiazol-3-il}bencil)glicinato de terc-butilo
2,5-Difluoro-4-{5-[2-(metoximetil)-2'-metilbifenil-4-il]-1,2,4-oxadiazol-3-il}benzoato de metilo
N-(2,5-Difluoro-4-{5-[2-(metoximetil)-2'-metilbifenil-4-il]-1,2,4-oxadiazol-3-il}benzoil)-beta-alaninato de metilo
[(3-{5-[2'-Metil-2-(trifluorometil)bifenil-4-il]-1,2,4-oxadiazol-3-il}bencil)oxi]acetato de terc-butilo
N-(3-{5-[2-(Metoximetil)-2'-(trifluorometil)bifenil-4-il]-1,2,4-oxadiazol-3-il}bencil)-N-metilglicinato de terc-butilo
N-(3-{5-[4'-Fluoro-2-(metoximetil)-2'-(trifluorometil)bifenil-4-il]-1,2,4-oxadiazol-3-il}bencil)-N-metilglicinato de terc- butilo
N-(4-{5-[2-(Metoximetil)-2'-metilbifenil-4-il]-1,2,4-oxadiazol-3-il}bencil)-N-metilglicinato de terc-butilo
N-(2-Fluoro-4-{5-[2-(metoximetil)-2'-metilbifenil-4-il]-1,2,4-oxadiazol-3-il}bencil)-N-metilglicinato de terc-butilo
N-(2-Bromo-4-{5-[2-(metoximetil)-2'-metilbifenil-4-il]-1,2,4-oxadiazol-3-il}bencil)-N-metilglicinato de terc-butilo
N-(4-{5-[2'-Fluoro-2-(metoximetil)bifenil-4-il]-1,2,4-oxadiazol-3-il}bencil)-N-metilglicinato de terc-butilo
N-(2-Fluoro-4-{5-[2'-fluoro-2-(metoximetil)bifenil-4-il]-1,2,4-oxadiazol-3-il}bencil)-N-metilglicinato de terc-butilo
N-(3-Fluoro-5-{5-[4-(2-metilpiperidin-1-il)-3-(trifluorometil)fenil]-1,2,4-oxadiazol-3-il}bencil)-N-metilglicinato de terc- butilo
N-(3-Fluoro-5-{5-[2'-fluoro-2-(metoximetil)bifenil-4-il]-1,2,4-oxadiazol-3-il}bencil)-N-metilglicinato de terc-butilo N-Isopropil-N-(3-{5-[2-(metoximetil)-2'-metilbifenil-4-il]-1,2,4-oxadiazol-3-il}bencil)glicinato de terc-butilo N-(terc-Butoxicarbonil)-N-(4-{5-[2-(metoximetil)-2'-metilbifenil-4-il]-1,2,4-oxadiazol-3-il}bencil)glicinato de terc-butilo N-(terc-Butoxicarbonil)-N-(4-{5-[2'-fluoro-2-(metoximetil)bifenil-4-il]-1,2,4-oxadiazol-3-il}bencil)glicinato de terc-butilo N-etil-N-(3-{5-[2'-Fluoro-2-(metoximetil)bifenil-4-il]-1,2,4-oxadiazol-3-il}bencil)-beta-alaninato de terc-butilo N-Etil-N-(3-{5-[2-(metoximetil)-2'-metilbifenil-4-il]-1,2,4-oxadiazol-3-il}bencil)-beta-alaninato de terc-butilo N-(3-Fluoro-5-{5-[2'-metil-2-(trifluorometil)bifenil-4-il]-1,2,4-oxadiazol-3-il}bencil)-N-metilglicinato de terc-butilo N-(3-{5-[2'-Cloro-5'-fluoro-2-(metoximetil)bifenil-4-il]-1,2,4-oxadiazol-3-il}bencil)-N-metilglicinato de terc-butilo N-(2-Hidroxietil)-N-(3-{5-[2-(metoximetil)-2'-metilbifenil-4-il]-1,2,4-oxadiazol-3-il}bencil)-beta-alaninato de terc-butilo
5
10
15
20
25
30
35
N-(2-Fluoro-4-{5-[2'-metil-2-(trifluorometil)bifenil-4-il]-1,2,4-oxadiazol-3-il}bencil)-N-metilglicinato de terc-butilo
N-(2-Fluoro-4-{5-[2'-metil-2-(trifluorometil)bifenil-4-il]-1,2,4-oxadiazol-3-il}bencil)-N-metil-beta-alaninato de terc-butilo
N-(2-Fluoro-4-{5-[2-(metoximetil)-2'-metilbifenil-4-il]-1,2,4-oxadiazol-3-il}bencil)-N-metil-beta-alaninato de terc-butilo
N-(4-{5-[2-(Metoximetil)-2'-metilbifenil-4-il]-1,2,4-oxadiazol-3-il}bencil)-N-metil-beta-alaninato de terc-butilo
2-((2-Metoxi-4-(5-(2-(metoximetil)-2'-metilbifenil-4-il)-1,2,4-oxadiazol-3-il)bencil)(metil)amino)acetato de terc-butilo
N-Metil-N-(4-{5-[2'-metil-2-(trifluorometil)bifenil-4-il]-1,2,4-oxadiazol-3-il}bencil}glicinato de terc-butilo
N-(terc-Butoxicarbonil)-N-(2-fluoro-4-{5-[2'-fluoro-2-(metoximetil)bifenil-4-il]-1,2,4-oxadiazol-3-il}bencil)glicinato de terc-butilo
N-(terc-Butoxicarbonil)-N-(2-fluoro-4-{5-[2-(metoximetil)-2'-metilbifenil-4-il]-1,2,4-oxadiazol-3-il}bencil)glicinato de terc-butilo
N-(2-Fluoro-4-{5-[4-(2-metilpiperidin-1-il)-3-(trifluorometil)fenil]-1,2,4-oxadiazol-3-il}bencil)-N-metilglicinato de terc- butilo
N-[2-(3-{5-[2-(Metoximetil)-2'-metilbifenil-4-il]-1,2,4-oxadiazol-3-il}fenil)etil]-N-metilglicinato de terc-butilo,
N-(3-Fluoro-5-{5-[3'-fluoro-2-(metoximetil)-2'-metilbifenil-4-il]-1,2,4-oxadiazol-3-il}bencil)-N-metilglicinato de terc- butilo
N-(4-{5-[2'-Fluoro-2-(trifluorometil)bifenil-4-il]-1,2,4-oxadiazol-3-il}bencil)-N-metilglicinato de terc-butilo
N-(4-{5-[3'-Fluoro-2-(metoximetil)-2'-metilbifenil-4-il]-1,2,4-oxadiazol-3-il}bencil)-N-metilglicinato de terc-butilo
N-(2-Fluoro-4-{5-[3'-fluoro-2-(metoximetil)-2'-metilbifenil-4-il]-1,2,4-oxadiazol-3-il}bencil)-N-metilglicinato de terc- butilo
N-{4-[5-(2-Etoxi-2'-metilbifenil-4-il)-1,2,4-oxadiazol-3-il]-2-fluorobencil}-N-metilglicinato de terc-butilo
N-(3-Cloro-5-{5-[2-(metoximetil)-2'-metilbifenil-4-il]-1,2,4-oxadiazol-3-il}bencil)-N-metilglicinato de terc-butilo
N-(2-Fluoro-4-{5-[2-(metoximetil)-2'-(trifluorometil)bifenil-4-il]-1,2,4-oxadiazol-3-il}bencil)-N-metilglicinato de terc- butilo
N-(2-Fluoro-3-{5-[2-(metoximetil)-2'-metilbifenil-4-il]-1,2,4-oxadiazol-3-il}bencil)-N-metilglicinato de terc-butilo
N-(4-{5-[2-(Metoximetil)-2'-(trifluorometil)bifenil-4-il]-1,2,4-oxadiazol-3-il}bencil)-N-metilglicinato de terc-butilo
N-(terc-Oxicarbonil)-N-(2-fluoro-4-{5-[2'-metil-2-(trifluorometil)bifenil-4-il]-1,2,4-oxadiazol-3-il}bencil)glicinato de terc- butilo
N-{4-[5-(2-Etoxi-2'-etilbifenil-4-il)-1,2,4-oxadiazol-3-il]bencil}-N-metilglicinato de terc-butilo N-Metil-N-(4-{5-[2-metil-2'-(trifluorometil)bifenil-4-il]-1,2,4-oxadiazol-3-il}bencil}glicinato de terc-butilo N-Isopropil-N-(3-{5-[2'-metil-2-(trifluorometil)bifenil-4-il]-1,2,4-oxadiazol-3-il}bencil)-beta-alaninato de terc-butilo N-(3-Fluoro-5-{5-[2-metil-2'-(trifluorometil)bifenil-4-il]-1,2,4-oxadiazol-3-il}bencil)-N-metilglicinato de terc-butilo N-Isopropil-N-(3-{5-[2-(metoximetil)-2'-metilbifenil-4-il]-1,2,4-oxadiazol-3-il}bencil)-beta-alaninato de terc-butilo N-(4-{5-[2'-Etil-2-(trifluorometil)bifenil-4-il]-1,2,4-oxadiazol-3-il}bencil)-N-metilglicinato de terc-butilo N-(4-{5-[2'-Etil-2-(trifluorometil)bifenil-4-il]-1,2,4-oxadiazol-3-il}-2-fluorobencil)-N-metilglicinato de terc-butilo
5
10
15
20
25
30
N-(2-Fluoro-3-{5-[2'-metil-2-(trifluorometil)bifenil-4-il]-1,2,4-oxadiazol-3-il}bencil)-N-metilglicinato de terc-butilo
N-(2-Fluoro-3-{5-[2-(metoximetil)-2'-(trifluorometil)bifenil-4-il]-1,2,4-oxadiazol-3-il}bencil)-N-metilglicinato de terc- butilo
N-(4-{5-[2-Etoxi-2'-(trifluorometil)bifenil-4-il]-1,2,4-oxadiazol-3-il}bencil)-N-metilglicinato de terc-butilo
4-[Metil(4-{5-[2'-metil-2-(trifluorometil)bifenil-4-il]-1,2,4-oxadiazol-3-il}bencil)amino]butanoato de terc-butilo
N-(4-{5-[2'-Cloro-2-(metoximetil)bifenil-4-il]-1,2,4-oxadiazol-3-il}bencil)-N-metilglicinato de terc-butilo
N-(4-{5-[2'-Cloro-2-(metoximetil)bifenil-4-il]-1,2,4-oxadiazol-3-il}-2-fluorobencil)-N-metilglicinato de terc-butilo
[(2-Fluoro-4-{5-[2'-metil-2-(trifluorometil)bifenil-4-il]-1,2,4-oxadiazol-3-il}bencil)oxi]acetato de terc-butilo
N-(4-{5-[2'-Cloro-3'-fluoro-2-(metoximetil)bifenil-4-il]-1,2,4-oxadiazol-3-il}-2-fluorobencil)-N-metilglicinato de terc-butilo
N-(4-{5-[2'-Cloro-3'-fluoro-2-(metoximetil)bifenil-4-il]-1,2,4-oxadiazol-3-il}bencil)-N-metilglicinato de terc-butilo
N-(2-Etil-4-{5-[2-(metoximetil)-2'-metilbifenil-4-il]-1,2,4-oxadiazol-3-il}fenil)-N-metilglicinato de terc-butilo
N-(3,4-Difluoro-5-{5-[2-(metoximetil)-2'-metilbifenil-4-il]-1,2,4-oxadiazol-3-il}bencil)-N-metilglicinato de terc-butilo
N-(4-{5-[5'-Fluoro-2-(metoximetil)-2'-metilbifenil-4-il]-1,2,4-oxadiazol-3-il}bencil)-N-metilglicinato de terc-butilo
2-((2-Cloro-4-(5-(2-(metoximetil)-2'-metilbifenil-4-il)-1,2,4-oxadiazol-3-il)bencil)(metil)amino)acetato de terc-butilo
N-{4-[5-(2,2'-Dimetilbifenil-4-il)-1,2,4-oxadiazol-3-il]bencil}-N-metilglicinato de terc-butilo
N-{4-[5-(2,2'-Dimetilbifenil-4-il)-1,2,4-oxadiazol-3-il]-2-fluorobencil}-N-metilglicinato de terc-butilo
N-{3-[5-(2,2'-Dimetilbifenil-4-il)-1,2,4-oxadiazol-3-il]bencil}-N-metilglicinato de terc-butilo
N-{3-[5-(2,2'-Dimetilbifenil-4-il)-1,2,4-oxadiazol-3-il]-5-fluorobencil}-N-metilglicinato de terc-butilo
N-(4-{5-[2-Cloro-2'-(trifluorometil)bifenil-4-il]-1,2,4-oxadiazol-3-il}-2-fluorobencil)-N-metilglicinato de terc-butilo
N-(4-{5-[2-Cloro-2'-(trifluorometil)bifenil-4-il]-1,2,4-oxadiazol-3-il}bencil)-N-metilglicinato de terc-butilo
N-(3-{5-[2-Cloro-2'-(trifluorometil)bifenil-4-il]-1,2,4-oxadiazol-3-il}-5-fluorobencil)-N-metilglicinato de terc-butilo
N-(4-{5-[2'-(Difluorometil)-2-metilbifenil-4-il]-1,2,4-oxadiazol-3-il}bencil)-N-metilglicinato de terc-butilo
N-(2-Metoxietil)-N-(4-{5-[2'-metil-2-(trifluorometil)bifenil-4-il]-1,2,4-oxadiazol-3-il}bencil)glicinato de terc-butilo
[(4-{5-[2'-Metil-2-(trifluorometil)bifenil-4-il]-1,2,4-oxadiazol-3-il}bencil)oxi]acetato de terc-butilo
N-(4-{5-[2-(1-Metoxietil)-2'-metilbifenil-4-il]-1,2,4-oxadiazol-3-il}bencil)-N-metilglicinato de terc-butilo
[(4-{5-[2-(1-Metoxietil)-2'-metilbifenil-4-il]-1,2,4-oxadiazol-3-il}bencil)oxi]acetato de terc-butilo
2-((3-Cloro-4-(5-(2-(metoximetil)-2'-metilbifenil-4-il)-1,2,4-oxadiazol-3-il)bencil)(metil)amino)acetato de terc-butilo
2-((2,6-Difluoro-4-(5-(2'-metil-2-(trifluorometil)bifenil-4-il)-1,2,4-oxadiazol-3-il)bencil)(metil)amino)acetato de terc- butilo
N-(2-Etil-4-{5-[2'-metil-2-(trifluorometil)bifenil-4-il]-1,2,4-oxadiazol-3-il}fenil)-N-metilglicinato de terc-butilo se describe mas en particular en los ejemplos.
Alternativamente, los derivados de alcohol de formula (I''') pueden convertirse en los correspondientes derivados amina de formula (I), donde Q = (CH2)mX(CH2)m con X = -NR3-, y S, m, R1, R2, R3, Ra y Rb son como se define anteriormente, como se indica en el esquema 1a. Los compuestos de formula (I''') se pueden transformar primero en los correspondientes grupos mesilo o tosilo (I””), los cuales pueden reaccionar despues con una amina 5 HN(R3)(CH2)mS, obteniendose compuesto de formula (I) donde Q-S = (CH2)mN(R3)(CH2)mS y S, m, R1, R2, R3, Ra y
Rb son como se define anteriormente (esquema 1a). El alcohol (I''') se puede oxidar en el aldehldo (I...)
correspondiente usando condiciones bien conocidas por los expertos en la materia como por ejemplo, pero sin limitaciones, las condiciones de oxidacion de Swern, o el uso de MnO2 como agente oxidante para alcoholes bencllicos, como se ilustra en el esquema 1a. A continuacion, una aminacion reductora de los compuestos de
10 formula (I...) con una amina HN(R3)(CH2)mS adecuada, permite obtener compuestos de formula (I), donde S, m, R1,
R2, R3, Ra y Rb son como se define anteriormente.
Esquema 1a
jjtVsh
3
R
El metodo para preparar los derivados alcohol de formula (I''') seleccionados a continuacion:
15 (3-{5-[2-(metoximetil)-2'-metilbifenil-4-il]-1,2,4-oxadiazol-3-il}fenil)metanol
2-(3-{5-[2-(metoximetil)-2'-metilbifenil-4-il]-1,2,4-oxadiazol-3-il}fenil)etanol 2-(4-(5-(2-(metoximetil)-2'-metilbifenil-4-il)-1,2,4-oxadiazol-3-il)fenil)etanol (4-(5-(2-(metoximetil)-2'-metilbifenil-4-il)-1,2,4-oxadiazol-3-il)-3-metilfenil)metanol (4-(5-(2'-metil-2-(trifluorometil)bifenil-4-il)-1,2,4-oxadiazol-3-il)fenil)metanol 20 (4-(5-(2-(metoximetil)-2'-metilbifenil-4-il)-1,2,4-oxadiazol-3-il)-2-metilfenil)metanol
(3-fluoro-4-(5-(2-(metoximetil)-2'-metilbifenil-4-il)-1,2,4-oxadiazol-3-il)fenil)metanol (2,6-difluoro-4-(5-(2-(metoximetil)-2'-metilbifenil-4-il)-1,2,4-oxadiazol-3-il)fenil)metanol (2-metil-4-(5-(2'-metil-2-(trifluorometil)bifenil-4-il)-1,2,4-oxadiazol-3-il)fenil)metanol se describe mas en particular en los ejemplos.
25 El metodo para preparar los derivados aldehldo de formula (I...) seleccionados a continuacion:
4-(5-(2-(metoximetil)-2'-metilbifenil-4-il)-1,2,4-oxadiazol-3-il)-3-metilbenzaldehldo
4-(5-(2'-metil-2-(trifluorometil)bifenil-4-il)-1,2,4-oxadiazol-3-il)benzaldehldo
5
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30
4-(5-(2-(metoximetil)-2'-metilbifenil-4-il)-1,2,4-oxadiazol-3-il)-2-metilbenzaldehldo se describe mas en particular en los ejemplos.
Los compuestos de formula (I), donde R1, R2, Ra, Rb, W, Q y S son como se define anteriormente, se pueden obtener en un protocolo de dos etapas como se describe en el esquema 2. La primera etapa consiste en el acoplamiento de un acido carboxllico de formula (VII) con una amidoxima de formula (VI), donde R1, R2, Ra, Rb, W, Q y S son como se define anteriormente. Los protocolos generales de dicho acoplamiento se proporcionan a continuacion en los ejemplos, usando condiciones y metodos bien conocidos para los expertos en la materia para preparar amidoximas O-sustituidas (V) a partir de un acido carboxllico (VII) y una arilamidoxima (VI), con agentes de acoplamiento convencionales, como por ejemplo, pero sin limitaciones, EDC, HATU, TBTU, en presencia o ausencia de bases como TEA, DIEA, NMM en un solvente adecuado como DMC, ACN, THF o DMF, a una temperatura que se eleva de aproximadamente 20 °C a aproximadamente 50 °C, preferiblemente a TA, durante algunas horas, por ejemplo, de una hora a 24 h. Alternativamente, un derivado de acido carboxllico (p. ej., cloruro de acilo VIIa) puede acoplarse con la amidoxima (VI) usando condiciones y metodos bien conocidos por los expertos en la materia, en presencia de bases como TEA, DIEA, NMM en un solvente adecuado como DCM, THF o DMF, a una temperatura que se eleva de aproximadamente 20 °C a aproximadamente 50 °C, preferiblemente a TA, durante algunas horas, por ejemplo de una hora a 24 h (esquema 3). La segunda etapa consiste en la ciclacion y deshidratacion de las amidoximas O-sustituidas (V) a la forma oxadiazol (I). A continuacion, en los ejemplos se proporcionan las condiciones, usando metodos bien conocidos por los expertos en la materia para preparar oxadiazol, como termolisis a una temperatura que se eleva de TA a aproximadamente 150 °C, tlpicamente a 150 °C, usando posiblemente un horno microondas, durante un tiempo comprendido entre 15 minutos y 24 horas, preferiblemente durante 30 minutos, en un solvente o mezcla de solventes adecuada como ACN, THF, piridina, DMF, en presencia o ausencia de una base como DIEA, TEA o fluoruro de tetrabutilamonio.
Esquema 2
Q R1
H2N "N
(VI)
OH
O.^OH
W^Rb
Ra (VII)
S
R
+
EDC
THF, MeCN
Q ^R1
S
R
DIEA
THF, MeCN 150 °C en MO
Esquema 3
S
Q
R
.R1
HO^O
W
Rb
Ra
(VII)
1. (COCl)2, DMF, DCM Cl
2. MeOH, THF
W
O
Rb
h,n
N
(VI)
OH
DIEA, THF, MeCN
Ra
(VIIa)
Q R1
O...O
DIEA
THF, MeCN 150 °C en MO
N N
W*^ b
(V) YRb Ra
yf
R Rb
S
S
R
R
H2N 'N
Los compuestos de formula (VII), donde Ra, Rb y W son como se definen anteriormente, estan disponibles en el mercado o pueden prepararse mediante tecnicas de slntesis convencionales, como se describe a continuacion en los ejemplos, por ejemplo mediante reaccion de acoplamiento catalizada por metal o sustitucion nucleofllica aromatica en el correspondiente acido benzoico halogenado o benzoato de alquilo.
Alternativamente, los compuestos de formula (VII), donde Ra, Rb y W son como se definen anteriormente, pueden obtenerse mediante reaccion de acoplamiento cruzado catalizada por metal seguida de hidrolisis del ester (XI) resultante, como se muestra en el esquema 4 mas adelante. Mas en particular, pueden obtenerse mediante
5
10
15
20
25
reaccion de acoplamiento de Suzuki-Miyura entre un benzoato de alquilo (VIII), donde Rc puede ser preferiblemente Br, I o un ester de sulfonato como triflato, y un acido boronico (Xa) o su ester (Xb), usando condiciones de reaccion de Suzuki-Miyura bien conocidas como se muestra en el esquema 4 (Miyaura, N.; Suzuki, A. Chem. Rev. 1995, 95, 2457; Takahiro I. y Toshiaki M., Tetrahedron Lett. 2005, 46, 3573-3577). En un procedimiento tlpico, el benzoato de alquilo (VIII) y el acido boronico (Xa) o su ester (Xb) se calientan a diversas temperaturas mediante metodos termicos tradicionales o usando tecnologla de microondas en presencia de una base, como por ejemplo, pero sin limitaciones, una sal carbonato, por ejemplo, K2CO3, Na2CO3, Cs2CO3, y una cantidad catalltica de un catalizador de paladio, como Pd(PPh3)4, PdCh(PPh3)2, Pd(OAc)2, con la posible adicion de ligandos fosfina como PPh3, S-Phos, X- Phos en un solvente o mezcla de solventes apropiado como THF, tolueno, dioxano, MeOH, ACN, DMF o agua. Pueden usarse todas las diferentes combinaciones descritas anteriormente. Alternativamente, el benzoato de alquilo (IX) donde Rc es como se define anteriormente y el acido boronico (Xc) o su ester (Xd) pueden acoplarse con el mismo procedimiento catalizado por paladio descrito anteriormente. El ester (XI) resultante puede hidrolizarse a continuacion usando condiciones bien conocidas por los expertos en la materia como por ejemplo, pero sin limitaciones, el uso de un hidroxido de metal, por ejemplo, hidroxido de litio, hidroxido sodico o hidroxido de potasio, en un solvente adecuado como THF, metanol, etanol o agua o mezclas de los mismos, a una temperatura que se eleva de aproximadamente 20 °C a aproximadamente 60 °C, preferiblemente a TA, durante algunas horas, por ejemplo, de una hora a 24 h.
Esquema 4
O-%3
W^Rb
Rc (VIII)
O-%3
W—Rc
R'
(IX)
OH
3'
OH
(Xa)
o
O-
O'
(Xb)
Rb—B
(Xc)
+ o or
OH
Pd(PPh3)4, K2CO3 tolueno, agua 100 °C
Rb—B
O
O'
(Xd)
EtOH/H2O
O^/OH
W^b
R
(VII)
+
Una ruta alternativa para la preparacion de compuestos de formula (VII), donde Ra, Rb y W son como se define anteriormente, puede ser a traves de la reaccion de acoplamiento de Suzuki-Miyura entre un benzoato de alquilo y acido boronico o su derivado ester de formula (XII) o (XIII), donde Rd es un acido boronico o tetrametil- dioxaborolano, con un arilo opcionalmente sustituido, respectivamente (Xe) y (Xf), donde Rc es preferiblemente Br, I o un ester sulfonato como triflato, usando las condiciones de reaccion de Suzuki-Miyura bien conocidos como se muestra en el esquema 5 mas adelante y se describe a continuacion. El ester resultante puede hidrolizarse en compuestos de formula (VII) en las condiciones descritas anteriormente y en los ejemplos que aparecen a continuacion.
- O*
- ra R3
- if
- s + R —Rc
- W,
- r Rb (Xe)
Pd(PPh3)4, K2CO3 tolueno, aguci 100 °C
(XII) donde Rd= -EB(OH)2 o-B'
^"OR3
+ R —Rc
Pd(PPh3)4, K2CO3 tolueno, agua 100°C
^-Rd
(Xf)
(XIII donde Rd=-E3(OH)2 o'-B'
- O
- V'O. O^/OH
- T R NaOH T
- ff
- EtOH/H2O (fi
- W.
- "T Rb
- Ra Ra
- (XI) (VII)
R
b
O
Una rutu alternative para la preparacion de compuestos de formula (VII), donde Ru, Rb y W se definen como unteriormente, puede ser la adicion de un derivado amino RaH de formula (Xg) a un benzoato de alquilo de formula 5 (VIIIa) o a un acido benzoico de formula (VI11 b), segun se describe en el esquema 6, en presencia opcional de una base adecuada, como TEA, DIEA, NMM en un solvente como THF o DMF, a una temperatura que se eleva de aproximadamente 20 °C a aproximadamente 100 °C, preferiblemente a TA, durante algunas horas, por ejemplo, de una a 24 h. Tambien puede usarse puro, como solvente, un derivado amino RaH de formula (Xg). Alternativamente, los compuestos de formula (VII) pueden obtenerse mediante la adicion de un derivado amino RbH de formula (Xh) a 10 un benzoato de alquilo (IXa) o un acido benzoico (IXb), segun se describe en el esquema 6, en las condiciones de reaccion descritas anteriormente y en los ejemplos que aparecen a continuacion. En los casos en que se obtiene primero el ester de formula (XI), este puede hidrolizarse en compuestos de formula (VII) en las condiciones descritas anteriormente y en los ejemplos que aparecen a continuacion. Alternativamente, puede anadirse un derivado amino de formula (Xg) y (Xh) respectivamente al benzonitrilo (XIVa) y (XIVb) en condiciones similares a las 15 descritas anteriormente y en los ejemplos que aparece a continuacion. El benzonitrilo resultante de formula (XIV) puede hidrolizarse en el ester correspondiente (XI), usando condiciones bien conocidas por los expertos en la materia como por ejemplo, pero sin limitaciones, el uso de un acido, por ejemplo, HCl, en un solvente adecuado como THF, metanol o agua o mezclas de los mismos, a una temperatura que se eleva de aproximadamente 20 °C a aproximadamente 100 °C, preferiblemente a 78 °C, durante 12 h a 48 h.
20
CN
wrV
F
(XlVa)
RaH
(Xg)
CN
r
w
Rb
Ra
(XIV)
RbH
(Xh)
CN
w
F Ra
(XlVb)
HCl, MeOH, 78 °C
- O\
- 1
- RaH 1 RbH 1
- f
- "j) (Xg) r (Xh) r 'll
- W^
- Ar. w^ /Lr. WT
- 1 F
- R a Ra
- (Vllla)
- (Xl) (l Xa)
- 1 1. (COCl)2 NaOH 1. (COCl)
- 2. MeOH 2. MeOH
- O^
- OH RaH °1 OH RbH /OH
- (Xg) _ r (Xh) -«-------- r
- w wi ^F
- F Ra R
- (Vlllb)
- (Vll) (lXb)
2
Los compuestos de formula (Villa) y (IXa), donde Ra, Rb y W son como se define anteriormente, estan disponibles en el mercado o se pueden preparar mediante tecnicas convencionales de slntesis, como se describe a 5 continuacion en los ejemplos. Tlpicamente, pueden prepararse mediante esterificacion del correspondiente acido benzoico, (Vlllb) y (IXb) respectivamente, como por ejemplo, pero sin limitaciones, la formacion del correspondiente cloruro de acido con cloruro oxalico, seguido de la adicion del alcohol adecuado, como MeOH para el carboxilato de metilo, a temperaturas que oscilan de aproximadamente 0 °C a aproximadamente 50 °C, preferiblemente a TA durante algunas horas, por ejemplo, de una hora a 24 horas.
10 Alternativamente, los compuestos de formula (Vll), donde Ra, Rb y W son como se definen anteriormente, pueden obtenerse mediante reaccion de acoplamiento cruzado catalizada por metal seguida de hidrolisis del ester (Xl) resultante, como se muestra en el esquema 7 mas adelante. Mas en particular, pueden obtenerse mediante reaccion de acoplamiento cruzado de Buchwald-Hartwig entre un benzoato de alquilo de formula (Vlll) o (lX), donde Rc puede ser preferiblemente Br, l o un ester de sulfonato como triflato y un derivado amino, respectivamente (Xg) o 15 (Xh), usando condiciones de reaccion de Buchwald-Hartwig bien conocidas como se muestra en el esquema 7 mas
adelante (Muci, A. R.; Buchwald, S. L. Top. Curr. Chem. 2002, 219, 131-209; Jiang, L.; Buchwald, S. L. Metal- Catalyzed Cross-Coupling Reactions (2a edicion) 2004, 2, 699-760). En un procedimiento tlpico, el benzoato de alquilo de formula (Vlll) y (lX), y los respectivos derivados amino (Xg) y (Xh) se calientan a diversas temperaturas mediante metodos termicos tradicionales o usando tecnologla de microondas en presencia de una base, como por 20 ejemplo, pero sin limitaciones, una sal carbonato, por ejemplo, K2CO3, Na2CO3, Cs2CO3 y una cantidad catalltica de un catalizador de paladio, como Pd(PPh3)4, PdCh(PPh3)2, Pd(OAc)2, con la posible adicion de ligandos fosfina como BlNAP, X-Phos en un solvente o mezcla de solventes apropiado como THF, tolueno, dioxano, MeOH, ACN, DMF o agua. Pueden usarse todas las diferentes combinaciones descritas anteriormente. El ester resultante de formula (Xl) puede hidrolizarse a continuacion usando condiciones bien conocidas por los expertos en la materia como por 25 ejemplo, pero sin limitaciones, el uso de un hidroxido de metal, por ejemplo, hidroxido de litio, hidroxido sodico o hidroxido de potasio, en un solvente adecuado como THF, metanol, etanol o agua o mezclas de los mismos, a una temperatura que se eleva de aproximadamente 20 °C a aproximadamente 60 °C, preferiblemente a TA, durante algunas horas, por ejemplo, de una hora a 24 h.
5
10
15
20
25
- O OR3 +
- Pd(OAc)2, BINAP, Cs2CO3
- R —H
- dioxnno 100 °C
- W h
- R c
- (Xg)
(VIII)
O-°'R3
- W
- + R —H
- W rc Rn
- (Xh)
- (IX)
Pd(OAc)2, BINAP CS2C^°3 dioxnno 100 °C
___________/
- O
- 3 O OH
- 1 R NnOH Y
- ff
- ■"Y EtOH/H2O if
- W.
- r" 'Rb W. R'
- Rn Rn
- (XI) (VII)
Alternntivnmente, los compuestos de formula (VII) donde W es como se define nnteriormente y donde Rn o Rb es OA pueden prepnrnrse nnndiendo bromuro de nlquilo (Xi) o (Xj) n los correspondientes compuestos intermedios de formuln (VIIIp) o (IXc) respectivnmente, en presencin de unn bnse, por ejemplo, K2CO3 en DMF n nproximndnmente 90 °C. Dichn trnnsformncion tnmbien puede renliznrse con compuestos de formuln (I), donde Rn o Rb es OH, como se describe mas ndelnnte en los ejemplos.
- O OR3
- +
- R —Br
- W Rb OH (VIIIp)
- (Xi)
- O OR3
- W OH + Rn
- R—Br (Xj)
- (IXc)
Esquema 8
K2CO3, DMF, 90 °C
K2CO3, DMF, 90 °C
O Or3
W Rb Rn (XI)
NaOH
Et0H/H20
b
(VII)
Los compuestos de formuln (VIII) estan disponibles en el mercndo o pueden prepnrnrse medinnte tecnicns de slntesis convencionnles, como se describe en los ejemplos de este documento. Tlpicnmente, cunndo Rb es (CH2)OH, (CH2)OA, (CH2)N(R3)2 o (CH2)SO2Me, Rc es F, Cl, Br, I o un ester sulfonnto como triflnto y R3 es como se define nnteriormente, los compuestos de formuln (VIII), respectivnmente (VII If), (VI11 g), (VIIIh) y (VIIIj), pueden prepnrnrse medinnte brominncion del correspondiente derivndo toluilo (VIIIc) seguidn de unn renccion Sn2 en el derivndo bromuro de bencilo (VIIId) con un grupo ndecundo, como por ejemplo, pero no exclusivnmente, unn snl ncetnto, por ejemplo NnOAc en HOAc, unn snl nlcoholnto, por ejemplo, NnOA en el correspondiente nlcohol, THF o DMF, un nlcohol, por ejemplo, HOA, que puede usnrse como solvente, unn nminn, por ejemplo HN(R3)2 o unn snl de tiolnto, por ejemplo, NnSA, en un solvente ndecundo como por ejemplo, pero no exclusivnmente, THF, MeCN, DMF, n unn tempernturn que osciln de TA n 130 °C, con el uso posible del microondns (vense el esquemn 9). Ln hidrolisis del grupo ncetnto en los compuestos de formuln (VIIIe), usnndo condiciones bien conocidns pnrn los expertos en ln mnterin, como por ejemplo, pero sin limitnciones, hidroxido sodico en EtOH n nproximndnmente 60 °C, proporciono compuestos de formuln (VII If). Ln oxidncion del sulfuro de los compuestos de formuln (VIIIi), usnndo condiciones bien conocidns pnrn los expertos en ln mnterin, como por ejemplo, pero sin limitnciones, mCPBA, proporciono compuestos de formuln (VIIIj). Los compuestos de formuln (VII If), cunndo Rb es (CH2)OH, pueden trnnsformnrse ndicionnlmente en el correspondiente sulfonnto de nlquilo (VI11 k) que puede usnrse como mnterinl de pnrtidn pnrn rencciones Sn2 de formn similnr n (VIIIb), como se muestrn en el esquemn 9. Estn diversificncion tnmbien puede renliznrse en unn etnpn posterior, sobre compuestos de formuln (I) donde Rb es (CH2)OH como se describe mas ndelnnte en los ejemplos.
] R NBS, AIBN CHCl3, 70 °C “■
Rc
(VIII c)
Alternativamente, los compuestos de formula (VII If) pueden prepararse mediante doble brominacion de (VIIIc), seguido de hidrolisis de (VIIIm), como se describe en el esquema 10. La reduccion del derivado benzaldehldo 5 resultante de formula (VI11 n), con un agente reductor adecuado como, pero sin limitaciones, NaBH4, produce del alcohol bencllico de (VII If), compuesto (VI11 o). La transformacion de compuestos de formula (VI11 n) en compuestos de formula (XIa) mediante reaccion de acoplamiento cruzado catalizada por metal o reaccion SNAr puede realizarse en primer lugar. A continuacion, la reduccion proporciona el correspondiente alcohol de formula (XIa), como se describe en el esquema 10.
10
Esquema 10
V°V
wy
Rc
(VIIIc)
NBS, AIBN
°~°V
w
Br
R Br (VIIIm)
CHCl3, 75 °C
1. Py, reflujo
2. HCI, ac
(VIIIn)
NaBH4
Me°H
(XIa)
NaBH4
Me°H
°-'°V
w
R
(XIb)
°H
Cuando Rb es (CH2)nNR3S°2A o (CH2)nNR3C°A, donde n = 0 y Ra, R3 y W son como se define anteriormente, los compuestos de formula (XIe) o (XIf) respectivamente pueden sintetizarse a partir de los compuestos de formula
(XIc), como se describe en el esquema 11. Tras la reduccion del grupo nitro, la anilina (Xld) resultante puede transformarse en una sulfonamida (XIe) con la adicion de ASO2Cl o en una amida (XIf) con la adicion de ACOCl, en presencia de una base, como por ejemplo, pero sin limitaciones, TEA, DIEA, NMM, piridina, en un solvente o mezcla de solventes como DCM, DMF, piridina. Esta diversificacion tambien puede realizarse en una etapa 5 posterior, sobre compuestos de formula (I) donde Rb es NH2, como se describe mas adelante en los ejemplos.
Esquema 11
V°R3
- O\/O.
- R3 T
- fS
- — rS
- w A
- w A
- Ra
- 'NO2 A
- (XIc)
- (XId)
R3
NH2
ASO2Cl,
Py
ACOCl, Py, DCM
Ra
(XIe)
OwO
N'S"A
H
V°r3
W^
Ra
(XIf)
O
A
A
Los compuestos de formula (VII b), donde Rb es (CH2)3OA, pueden sintetizarse a partir del compuesto (VI11 p) por medio de las reacciones de acoplamiento cruzado secuenciales de Sonogashira y Suzuki-Miyura, como se describe 10 en el esquema 12. Los compuestos de formula (VIIa) resultantes pueden reducirse a continuacion mediante tecnicas convencionales bien conocidas por los expertos en la materia como por ejemplo, pero sin limitaciones, Pd/C en atmosfera de H2, obteniendose compuestos de formula (VII b).
Esquema 12
OWOH
Cl
Eter de A-propargilo PdCh(PPh3)2, Cul
(VI11 p)
Pd(OAc)2, X-Phos KF, Tol/MeOH/agua
O^OH
[f
Cl '"'' A (VIIIq)
H2, Pd/Cal 10% MeOH ||
O.„
(VIIa)
R
(VII b)
15 Alternativamente, los compuestos de formula (VII), donde Ra, Rb y W se definen como anteriormente, pueden prepararse a partir de los compuestos de formula (XV) en un proceso de dos etapas, como se describe en el esquema 13. La primera etapa es un intercambio de metal halogeno con tlpicamente, pero no exclusivamente, una sal de alquilo de litio como nBuLi o fBuLi. La segunda etapa es la adicion de CO2, en estado de gas o solido, como electrofilo.
20
Esquema 13
- if\
- 1. tBuLi (2 eq), Et2O, -78 °C 2. CO2 (hielo se co picado) O^OH rf]
- V^R'
- Ra
- r-
- (XV)
- (VII)
El metodo para preparar acidos benzoicos de formula (VII) seleccionados a continuacion: acido 3'-fluoro-2-(metoximetil)-2'-metilbifenil-4-carboxllico acido 3-(metoximetil)-4-(2-metilpiperidin-1-il)benzoico 25 acido 2-(metoximetil)-2'-metil bifenil-4-carboxllico
acido 4-(2-metilpiperidin-1-il)-3-(trifluorometil) benzoico acido 2'-metil-2-(trifluorometil)bifenil-4-carboxllico acido 2'-etil-2-(metoximetil)-1, 1 '-bifenil-4-carboxllico acido 2-[(dimetilamino)metil]-2'-metilbifenil-4-carboxllico 5 acido 4-(2-etilpiperidin-1-il)-3-(metoximetil)benzoico
acido 4-[(2R)-2-metilpiperidin-1-il]-3-(trifluorometil)benzoico acido 4-[(2S)-2-metilpiperidin-1-il]-3-(trifluorometil)benzoico acido 2'-fluoro-2-(metoximetil)bifenil-4-carboxllico acido 2'-cloro-2-(metoximetil)bifenil-4-carboxllico 10 acido 3-(metoximetil)-4-(2-metilpirrolidin-1-il)benzoico
acido 2-(metoximetil)-2'-(trifluorometil)bifenil-4-carboxllico acido 2-etoxi-2'-metil-1, 1 '-bifenil-4-carboxllico acido 2-metil-2'-(trifluorometil)bifenil-4-carboxllico acido 2'-etil-2-(trifluorometil)bifenil-4-carboxllico 15 acido 2,2'-dimetil-1, 1 '-bifenil-4-carboxflico
acido 2-cloro-2'-(trifluorometil)bifenil-4-carboxllico acido 2'-(difluorometil)-2-metilbifenil-4-carboxllico acido 2'-fluoro-2-(trifluorometil)bifenil-4-carboxllico se describe mas en particular en los ejemplos.
20 Los compuestos de formula (VI), donde R1, R2, Q y S son como se define anteriormente, pueden prepararse segun el esquema 14 mediante la adicion de hidroxilamina al correspondiente benzonitrilo sustituido de formula (XVI) en un solvente o mezcla de solventes, como EtOH, agua, a una temperatura que oscila de aproximadamente 20 °C a aproximadamente 50 °C, preferiblemente a TA, durante algunas horas, por ejemplo, de una hora a 24 h.
Esquema 14
S
S
H,NOH
2
N
OH
(XVI)
(VI)
El metodo para preparar la amidoxima de formula (VI), seleccionada a continuacion:
N-{4-[amino(hidroxiimino)metil]-2-fluorobenzoil}-beta-alaninato de etilo
({4-[amino(hidroxiimino)metil]bencil}oxi)acetato de terc-butilo
3-[{3-[amino(hidroxiimino)metil]bencil}(metil)amino]propanoato de terc-butilo
5
10
15
20
25
30
({3-[amino(hidroxiimino)metil]bencil}oxi)acetato de terc-butilo 4-{5-[amino(hidroxiimino)metil]-2,3-difluoro fenoxi}butanoato de etilo N'-hidroxi-3-(metilsulfonil)bencenocarboximidamida 3-({3-[amino(hidroxiimino)metil]bencil}oxi)propanoato de terc-butilo [{3-[amino(hidroxiimino)metil]bencil}(metil)amino]acetato de terc-butilo N-{3-[amino(hidroxiimino)metil] bencil}-N-(terc-butoxicarbonil)-beta-alaninato de terc-butilo N-{5-[amino(hidroxiimino)metil]-2-fluorobencil}-N-metil-beta-alaninato de terc-butilo N-{3-[amino(hidroxiimino)metil]-5-fluorobencil}-N-metilglicinato de terc-butilo N-{3-[amino(hidroxiimino)metil]-5-fluorobencil}-N-metil-beta-alaninato de terc-butilo
3- [(2,3-dihidroxipropil)amino]-N'-hidroxibencenocarboximidamida N'-hidroxi-4-(2-hidroxietoxi)bencenocarboximidamida
4- (2-{[terc-butil(dimetil)silil]oxi}etoxi)-3-fluoro-N'-hidroxibencenocarboximidamida 3-{[(2,3-dihidroxipropil)(metil)amino]metil}-N'-hidroxibencenocarboximidamida
3- {[bis(2-hidroxietil)amino]metil}-N'-hidroxibencenocarboximidamida N-{4-[amino(hidroxiimino)metil]bencil}-N-metilglicinato de terc-butilo N-{4-[amino(hidroxiimino)metil]-2-fluorobencil}-N-metilglicinato de terc-butilo N-{4-[amino(hidroxiimino)metil]-2-bromobencil}-N-metilglicinato de terc-butilo
4- [amino(hidroxiimino)metil]-2-clorobenzoato de metilo 4-[amino(hidroxiimino)metil]-2-fluorobenzoato de metilo
N-{4-[amino(hidroxiimino)metil]bencil} -N-(terc-butoxicarbonil)glicinato de terc-butilo ester terc-butllico del acido 3-{etil-[3-(n-hidroxicarbamimidoil)-bencil]-amino}-propionico N-{3-[amino(hidroxiimino)metil]bencil}-N-(2-hidroxietil)-beta-alaninato de terc-butilo N-{4-[amino(hidroxiimino)metil]-2-fluorobencil}-N-metil-beta-alaninato de terc-butilo N-{4-[amino(hidroxiimino)metil]bencil}-N-metil-beta-alaninato de terc-butilo 4-[amino(hidroxiimino)metil]-2,5-difluorobenzoato de metilo N-{4-[amino(hidroxiimino)metil]-2-metoxibencil}-N-metilglicinato de terc-butilo N-{4-[amino(hidroxiimino)metil]-2-fluorobencil}-N-(terc-butoxicarbonil)glicinato de terc-butilo N-{2-fluoro-3-[(hidroxiamino)(imino)metil]bencil}-N-metilglicinato de terc-butilo ester terc-butllico del acido 3-{[3-(N-hidroxicarbamimidoil)-bencil]-isopropil-amino}-propionico N-{5-[amino(hidroxiimino)metil]-2-clorobencil}-N-metilglicinato de terc-butilo 4-[{4-[amino(hidroxiimino)metil]bencil}(metil)amino]butanoato de terc-butilo
2-((3-cloro-4-(N'-hidroxicarbamimidoil)bencil)(metil)amino)acetato de terc-butilo N'-hidroxi-4-(hidroximetil)-3-metilbencimidamida
2-((2-etil-4-(N'-hidroxicarbamimidoil)bencil)(metil)amino)acetato de terc-butilo N'-hidroxi-3-(hidroximetil)bencimidamida
5 N-{4-[amino(hidroxiimino)metil]bencil} -N-(2-metoxietil)glicinato de terc-butilo N'-hidroxi-4-(hidroximetil)bencenocarboximidamida
2-((3-cloro-4-(N'-hidroxicarbamimidoil)bencil)(metil)amino)acetato de terc-butilo 2-((2,6-difluoro-4-(N'-hidroxicarbamimidoil)bencil)(metil)amino)acetato de terc-butilo acido {3-[amino(hidroxiimino)metil]fenil}acetico 10 se describe mas en particular en los ejemplos.
Esquema 15
R
OH
Q R1
O'R O^
Q R1
R
N
(XVII)
N
(XVIa)
Los compuestos de formula (XVI), donde R1, R2, Q y S son como se define anteriormente, estan disponibles en el mercado o se pueden preparar mediante tecnicas convencionales de slntesis bien conocidas por los expertos en la 15 materia. Tlpicamente, cuando S es COOR3 como se define anteriormente, los compuestos de formula (XVIa) pueden prepararse acoplando el correspondiente acido carboxllico de formula (XVII) con un alcohol, usando condiciones, como por ejemplo, pero sin limitaciones, la formacion del correspondiente cloruro de acido de compuestos de formula (XVII) con cloruro de oxalilo, seguido de la adicion del alcohol adecuado, como MeOH a temperaturas que oscilan de aproximadamente 0 °C a aproximadamente 50 °C, preferiblemente a TA durante 20 algunas horas, por ejemplo, de una hora a 24 horas, como se describe en el esquema 15. Tambien pueden prepararse con agentes de acoplamiento convencionales como por ejemplo, pero sin limitaciones, EDC, HATU, TBTU, en presencia o ausencia de bases como TEA, DIEA, NMM en el alcohol adecuado, como MeOH, a una temperatura entre aproximadamente 20°C y aproximadamente 50 °C, preferiblemente a TA, durante algunas horas, por ejemplo, de una hora a 24 h.
25 Alternativamente, pueden prepararse compuestos de formula (XVIb) donde Q = (CH2)mX(CH2)m, X = -O-, y R1, R2, m y S se definen como anteriormente, a partir de alcohol (XVIII), mediante la adicion de un electrofilo, LG-(CH2)mS, donde LG- es un grupo saliente, como por ejemplo, pero no exclusivamente Br, I, OMs, en presencia de una base como LiHMDS, NaH, NaOH, en un solvente o una mezcla de solventes como THF o tolueno-agua en presencia de un agente de transferencia de fase, como por ejemplo, pero sin limitaciones, (Bu4N)HSO4 a temperaturas que 30 oscilan de TA a aproximadamente 100 °C como se describe en el esquema 16. Alternativamente, el alcohol (XVIII) puede transformarse en los correspondientes grupos mesilo o tosilo, que pueden reaccionar a continuacion con un alcohol (para X = -O-) o una amina (para X = -NR3-), obteniendose los compuestos de formula (XVIb) y (XVIc) respectivamente, donde Q = (CH2)mX(CH2)m y R1, R2, m y S son como se definen anteriormente (esquema 16). El alcohol (XVIII) puede oxidarse al correspondiente aldehldo (XVIIIb), segun el esquema 16.
35 A continuacion, una aminacion reductora de los compuestos de formula (XVIIIb) con una amina adecuada, da lugar a compuestos de formula (XVIc), donde Q = (CH2)mX(CH2)m con X = -Nr3-, y R1, R2, m y S son como se define anteriormente, segun el esquema 16. Las transformaciones diferentes descritas en el esquema 16 pueden realizarse en los compuestos de formula (I) con el patron de sustitucion adecuado, como se describe en los ejemplos.
X
SH
base
2
R
N
R
^X
m
SH
(XVIb) y (XVIc)
(XVII la)
ASO2Cl DIEA, DCM
OH
Br
SH
- r
- Jm (Bu4N)HSO4
- 1 N
- NaOH 50 % en agua tolueno, TA
- 1 N
2^tO+^SH
(XVIb)
R
R
2
R
(XVIII)
MnO2, dioxano
R3
HN-
SH
AcOH, NaBH(OAc)3 MeOH
Alternativamente, la adicion de un alcohol o una amina a bromuro de bencilo de formula (XVIIIc), como se describe en el esquema 17, en presencia de una base como, pero sin limitaciones, DIEA, TEA, K2CO3, CS2CO3, en un 5 solvente adecuado como MeCN, THF, DMF, produciendo los compuestos de formula (XVIb) y (XVIc), donde Q = (CH2)X(CH2)m, X = -O- o -NR3- respectivamente, y R1, R2, m y S son como se define anteriormente.
Br
(XVIIIc)
R
N
Esquema 17
S
base
II (XVIb) y (XVIc) N
Un derivado fenol de formula (XIX) puede transformarse en compuestos de formula (XVId) mediante una reaccion 10 de Mitsunobu o alquilacion, usando condiciones conocidas por el experto en la materia y como se describe a continuacion en los ejemplos. Tlpicamente, la alquilacion de fenol con LG-(CH2)mS, donde LG- es un grupo saliente, como por ejemplo, pero sin limitaciones, Br, I, OMs, se realiza en un solvente como THF o DMF, en presencia de una base como DIEA, TEA, K2CO3 o Cs2CO3, a una temperatura que oscila de TA a aproximadamente 100 °C.
Esquema 18
OH
(XIX)
R
R
base
5
10
15
20
25
30
Alternativamente, un derivado anilina de formula (XX) puede transformarse en compuestos de formula (XVIe) mediante una reaccion de alquilacion, usando condiciones conocidas por el experto en la materia y como se describe a continuacion en el esquema 19 y en los ejemplos. Tlpicamente, la alquilacion de anilina con LG-(CH2)mS, donde LG- es un grupo saliente como, pero sin limitaciones, Br, I, OMs, se realiza en un solvente como THF o DMF, en presencia de una base como DIEA, TEA, K2CO3 o Cs2CO3, a una temperatura que oscila de TA a aproximadamente 100 °C.
- R2^f
- Esquema 19 Br+imS R^TN+'tS
- 1 N
- ^ INI .2 | (XX) 1 base 1 N ^ H " J 1 (XVIe) 'J
Alternativamente, los compuestos de formula (XVI), donde Q, S, R1 y R2 son como se definen anteriormente, pueden obtenerse a partir del correspondiente fluoruro de arilo (XIII) mediante sustitucion nucleofllica aromatica con una sal de cianuro, tlpicamente, pero no exclusivamente, cianuro sodico en presencia de bromuro de tetrabutilamonio, en un solvente como DMF y a una temperatura que oscila de aproximadamente 20 °C a aproximadamente 100 °C, preferiblemente a aproximadamente 60 °C, durante varias horas, por ejemplo 12 h, como se describe en el esquema 20, segun Jenkins, T. J. y col. J. Med. Chem. 2007, 50, 566
La cianacion catalizada por metal del bromuro de arilo de formula (XIV) puede usarse como estrategia alternativa, como se muestra en el esquema 20. La adicion de Zn(CN)2 en presencia de un catalizador de paladio, como por ejemplo, pero sin limitaciones, Pd2(dba)3 o Pd(PPh3)4, con la adicion opcional de un ligando como dppf (segun Maligres, P. E. y col. Tetrahedron Lett. 1999, 40, 8193-8195), y derivados de cinc, como por ejemplo, pero sin limitaciones, polvo de Zn y Zn(OAc)2 (segun Chidambaram, R. y col. Tetrahedron Lett. 2004, 45, 1441-1444) en un solvente como DMF y a una temperatura que se eleva de TA a 150 °C, tlpicamente a 100 °C, lleva a la formacion de compuestos de formula (XI). La cianacion del bromuro de arilo de formula (XIV) puede tambien realizarse en ausencia de paladio, con el uso de CuCN en DMF (segun Couture. C.; Paine, A.J. Can. J. Chem. 1985, 63, 111120).
El grupo cianuro puede introducirse mediante reaccion de Sandmeyer, partiendo de una anilina de formula (XXI), como se describe en el esquema 20. Su transformacion en la correspondiente sal de diazonio puede conseguirse con nitrito de sodio en presencia de un acido mineral, como HCl en agua. A continuacion se puede hacer reaccionar adicionalmente con cianuro de cobre, preparado a partir de una mezcla de CuCN y KCN en agua a una temperatura que oscila de aproximadamente 20 °C a aproximadamente 100 °C obteniendose los compuestos de formula (XI) (segun Barraclough, P. y col. Arch. Pharm. 1990, 323, 507-512). Los derivados de anilina iniciales de formula (XXI) estan disponibles en el mercado o pueden obtenerse mediante la reduccion del correspondiente grupo nitro mediante hidrogenacion catalizada por Pd/C, como se describe a continuacion en los ejemplos.
Esquema 20
S
Q^^ ,_R1
F
(XIII)
S
/
Q^. ,R
Br
(XIV)
S
Q^. ,R1
N
(XXI)
NaCN, Bu4NBr, DMF
1 Zn(CN)2, Pd2(dba)3, dppf, DMF
a. NaNO2, HCI co nc.
b. CuCN, 60 °C
R
R
R
S
1
Q^
2
R
R1
N
Si los metodos de slntesis generales descritos anteriormente no fueran aplicables a la obtencion de compuestos de formula (I), podran usarse metodos adecuados para su preparacion conocidos por un experto en la materia.
Las sales cationicas farmaceuticamente aceptables de los compuestos de la presente invencion se preparan facilmente mediante la reaccion de las formas acidas con una base apropiada, normalmente un equivalente, en un 5 cosolvente. Las bases tlpicas son hidroxido sodico, metoxido sodico, etoxido sodico, hidruro sodico, hidroxido de potasio, metoxido de potasio, hidroxido de magnesio, hidroxido de calcio, benzatina, colina, dietanolamina, etilendiamina, meglumina, benetamina, dietilamina, piperazina y trometamina. La sal se alsla mediante concentracion hasta sequedad o adicion de un no solvente. En algunos casos, las sales pueden prepararse mezclando una solucion del acido con una solucion del cation (etilhexanoato sodico, oleato de magnesio), 10 empleando un solvente en el que precipita la sal cationica deseada, o puede aislarse por otra parte mediante la concentracion y adicion de un no solvente.
Segun un proceso general adicional, los compuestos de formula (I) y cualquier subformula pueden convertirse en compuestos alternativos de formula (I) y cualquier subformula, empleando tecnicas de interconversion adecuadas bien conocidas por un experto en la materia.
15 En general, la ruta de slntesis para cualquier compuesto individual de formula (I) dependera de los sustituyentes especlficos de cada molecula y de la facil disponibilidad de productos intermedios necesarios; siendo una vez mas apreciados estos factores por los expertos en la materia. Para obtener informacion sobre todos los metodos de proteccion y desproteccion, consulte Philip J. Kocienski, en «Protecting Groups», Georg Thieme Verlag Stuttgart, Nueva York, 1994 y Theodora W. Greene y Peter G. M. Wuts en «Protective Groups in Organic Synthesis», Wiley 20 Interscience, 3a edicion 1999.
Los compuestos de esta invencion pueden aislarse asociados con moleculas de solvente mediante cristalizacion a partir de la evaporacion de un solvente apropiado. Las sales de adicion de acido farmaceuticamente aceptables de los compuestos de formula (I), que contienen un centro basico, pueden prepararse de forma convencional. Por ejemplo, una solucion de la base libre puede tratarse con un acido adecuado, bien puro o en una solucion 25 adecuada, y la sal resultante puede aislarse mediante filtracion o evaporacion al vaclo del solvente de la reaccion. Las sales de adicion de base farmaceuticamente aceptables pueden obtenerse de forma analoga tratando una solucion de compuestos de formula (I), que contiene un centro acido, con una base adecuada. Ambos tipos de sales pueden obtenerse o interconvertirse usando tecnicas de resina de intercambio ionico.
Dependiendo de las condiciones usadas, los tiempos de reaccion generalmente estan entre algunos minutos y 30 14 dlas, y la temperatura de reaccion esta entre aproximadamente -30 °C y 140 °C, normalmente entre -10 °C y
90 °C, en particular entre aproximadamente 0 °C y aproximadamente 70 °C.
Los compuestos de formula (I) se pueden obtener ademas mediante la liberacion de compuestos de formula (I) a partir de uno de sus derivados funcionales mediante el tratamiento con un agente solvolizante o hidrogenolizante.
Los materiales de partida preferidos para la solvolisis o hidrogenolisis son aquellas que conforman la formula (I), 35 pero que contienen los correspondientes grupos amino y/o hidroxilo protegidos, en lugar de uno o mas grupos amino y/o hidroxilo libres, preferiblemente aquellos que llevan un grupo protector de amino en lugar de un atomo de H unido a un atomo de N, en particular aquellos que llevan un grupo R'-N, donde R' indica un grupo protector de amino, en lugar de un grupo hN, y/o aquellos que llevan un grupo protector de hidroxilo en lugar del atomo de H de un grupo hidroxilo, por ejemplo aquellas que conforman la formula (I), pero que llevan un grupo -COOR'', donde R'' 40 indica un grupo protector de hidroxilo, en lugar de un grupo -COOH.
Tambien es posible que en la molecula del material de partida se encuentren diversos grupos (identicos o diferentes) amino y/o hidroxilo protegidos. Si los grupos protectores presentes son diferentes entre si, en muchos casos, estos pueden escindirse de forma selectiva.
El termino «grupo protector de amino» se conoce en terminos generales y se refiere a grupos que son adecuados 45 para proteger (bloquear) un grupo amino frente a reacciones qulmicas, pero que se eliminan facilmente despues de que se haya llevado a cabo la reaccion qulmica deseada en cualquier otra parte de la molecula. Son tlpicos entre estos grupos, en particular, los grupos acilo, arilo, aralcoximetilo o aralquilo sustituidos o no sustituidos. Puesto que los grupos protectores de amino se eliminan tras la reaccion deseada (o secuencia de reaccion), su tipo y tamano no son por otra parte cruciales; sin embargo, se da preferencia a aquellos que tienen de 1 a 20, en particular de 1 a 50 8 atomos de carbono. El termino «grupo acilo» debe entenderse en el sentido mas amplio en conexion con el
presente proceso. Incluye grupos acilo derivados de acidos sulfonicos o acidos carboxllicos alifaticos, aralifaticos, aromaticos o heteroclclicos, y en particular, grupos alcoxicarbonilo, ariloxicarbonilo y especialmente aralcoxicarbonilo. Ejemplos de tales grupos acilo son alcanollo, como acetilo, propionilo y butirilo; aralcanollo, como fenilacetilo; arollo, como benzollo y tolilo; ariloxialcanollo, como POA; alcoxicarbonilo, como metoxicarbonilo, 55 etoxicarbonilo, 2,2,2-tricloroetoxicarbonilo, BOC (terc-butoxicarbonilo) y 2-yodoetoxicarbonilo; aralcoxicarbonilo,
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como CBZ («carbobenzoxi»), 4-metoxibenciloxicarbonilo y FMOC; y arilsulfonilo, como Mtr. Los grupos protectores de amino preferidos son BOC y Mtr, ademas de CBZ, Fmoc, bencilo y acetilo.
El termino «grupo protector de hidroxilo» es igualmente conocido en terminos generales y se refiere a grupos que son adecuados para proteger un grupo hidroxilo frente a reacciones qulmicas, pero que se elimina facilmente despues de que se ha llevado a cabo la reaccion qulmica deseada en cualquier otra parte de la molecula. Son tlpicos entre estos grupos los grupos arilo, aralquilo o acilo sustituidos o no sustituidos mencionados anteriormente, ademas de los grupos alquilo. La naturaleza y tamano de los grupos protectores de hidroxilo no son cruciales ya que se eliminan de nuevo despues de la reaccion qulmica o de la secuencia de reaccion deseada; se da preferencia a grupos que tienen de 1 a 20, en particular de 1 a 10 atomos de carbono. Ejemplos de grupos protectores de hidroxilo son, entre otros, bencilo, 4-metoxibencilo, p-nitrobenzollo, p-toluenosulfonilo, terc-butilo y acetilo, donde bencilo y terc-butilo son especialmente preferidos.
Los compuestos de formula (I) se liberan a partir de sus derivados funcionales (dependiendo del grupo protector utilizado), por ejemplo, usando acidos fuertes, usando de forma ventajosa TFA o acido perclorico, pero tambien usando otros acidos inorganicos fuertes, como acido clorhldrico o acido sulfurico, acidos carboxllicos organicos fuertes, como acido tricloroacetico, o acidos sulfonicos, como acido benceno- o p-toluenosulfonico. La presencia de un solvente inerte adicional es posible, aunque no siempre es necesario. Los solventes inertes adecuados son, preferiblemente, organicos, por ejemplo acidos carboxllicos, como acido acetico, eteres, como THF o dioxano, amidas, como DMF, hidrocarburos halogenados, como DCM, ademas tambien alcoholes como metanol, etanol o isopropanol, y agua. Adicionalmente, son adecuadas mezclas de los solventes mencionados anteriormente. Se usa preferiblemente TFA en exceso sin adicion de otro solvente, y el acido perclorico se usa preferiblemente en forma de mezcla de acido acetico y acido perclorico al 70 % en proporcion 9:1. Las temperaturas de reaccion para la escision estan, de forma ventajosa, entre aproximadamente 0 y aproximadamente 50 °C, preferiblemente entre 15 y 30 °C (TA).
Los grupos BOC, OBut y Mtr pueden, por ejemplo, escindirse preferiblemente usando TFA en DCM o usando HCl a aproximadamente 3 a 5 N en dioxano a 15-30 °C, y el grupo FMOC puede escindirse usando una solucion de aproximadamente el 5 al 50 % de dimetilamina, dietilamina o piperidina en DMF a 15-30 °C.
Los grupos protectores que pueden eliminarse hidrogenollticamente (por ejemplo, CBZ, bencilo o la liberacion del grupo amidino del derivado de oxadiazol de los mismos) pueden escindirse, por ejemplo, mediante tratamiento con hidrogeno en presencia de un catalizador (por ejemplo, un catalizador de un gas noble, como paladio, de forma ventajosa sobre un soporte como carbono). Los solventes adecuados aqul son aquellos indicados anteriormente, en particular, por ejemplo, alcoholes, como metanol o etanol, o amidas, como DMF. Generalmente, la hidrogenolisis se realiza a temperaturas de entre aproximadamente 0 y 100 °C y presiones de entre aproximadamente 1 y 200 bares, preferiblemente a 20-30 °C y 1-10 bares. La hidrogenolisis del grupo CBZ se produce bien, por ejemplo, en del 5 al 10 % de Pd/C en metanol o usando formato de amonio (en lugar de hidrogeno) en Pd/C en metanol/DMF a 20-30 °C.
Son ejemplos de solventes inertes adecuados hidrocarburos, como hexano, eter de petroleo, benceno, tolueno o xileno; hidrocarburos clorados, como tricloroetileno, 1,2-dicloroetano, tetraclorometano, trifluorometilbenceno, cloroformo o DCM; alcoholes, como metanol, etanol, isopropanol, n-propanol, n-butanol o terc-butanol; eteres, como eter dietllico, eter diisopropllico, tetrahidrofurano (THF) o dioxano; eteres glicolicos, como eter monometllico o monoetllico de etilenglicol o eter dimetllico de etilenglicol (diglima); cetonas, como acetona o butanona; amidas, como acetamida, dimetilacetamida, N-metilpirrolidona (NMP) o dimetilformamida (DMF); nitrilos, como acetonitrilo; sulfoxidos, como dimetilsulfoxido (DMSO); disulfuro de carbono; acidos carboxllicos, como acido formico o acido acetico; compuestos nitrogenados, como nitrometano o nitrobenceno; esteres, como EtOAc, o mezclas de dichos solventes.
Los esteres pueden estar saponificados, por ejemplo, usando LiOH, NaOH o KOH en agua, agua/THF, agua/THF/etanol o agua/dioxano, a temperaturas de entre 0 y 100 °C. Ademas, el ester puede estar hidrolizado, por ejemplo, usando acido acetico, TFA o HCl.
Los grupos amino libres pueden ademas acilarse de forma convencional usando un cloruro o un anhldrido de acido o alquilarse usando un haluro de alquilo sin sustituir o sustituido o hacerse reaccionar con CH3-C(=NH)-OEt, de forma ventajosa en un solvente inerte, como DCM o THF y/o en presencia de una base, como trietilamina o piridina, a temperaturas de entre -60 °C y +30 °C.
A lo largo de la memoria descriptiva, el termino grupo saliente preferiblemente indica Cl, Br, I o un grupo OH modificado reactivamente como, por ejemplo, un ester activado, una imidazolida o un grupo alquilsulfoniloxi con 1-6 atomos de carbono (preferiblemente metilsulfoniloxi o trifluorometilsulfoniloxi) o arilsulfoniloxi con 6-10 atomos de carbono (preferiblemente fenil- o p-tolilsulfoniloxi).
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En la literatura se describen radicales de este tipo para la activacion del grupo carboxilo en reacciones tlpicas de acilacion (por ejemplo en trabajos convencionales, como Houben-Weyl, Methoden der organischen Chemie [Metodos de qulmica organica], Georg-Thieme-Verlag, Stuttgart).
Los esteres activados se forman ventajosamente in situ, por ejemplo, mediante la adicion de HOBt o N-hidroxisuccinimida.
La formula (I) tambien abarca las formas opticamente activas (estereoisomeros), los enantiomeros, los racematos, los diastereomeros y los hidratos y solvatos de estos compuestos. El termino «solvatos de los compuestos» se refiere a aducciones de moleculas solventes inertes en los compuestos que se forman gracias a su fuerza de atraccion mutua. Los solvatos son, por ejemplo, mono o dihidratos o alcoholatos.
El termino «derivados farmaceuticamente utilizables» se refiere, por ejemplo, a las sales de los compuestos de la presente invencion y los denominados compuestos profarmaco.
El termino «derivados profarmaco» se refiere a compuestos de la presente invencion que han sido modificados, por ejemplo, con grupos alquilo o acilo, azucares u oligopeptidos y que son rapidamente escindidos en el organismo para formar los compuestos activos.
Estos tambien incluyen derivados de pollmeros biodegradables de los compuestos segun la invencion, como se describe, por ejemplo, en Int. J. Pharm. 115, 61-67 (1995).
La formula (I) tambien abarca mezclas de los compuestos de la presente invencion, por ejemplo, mezclas de dos diastereomeros, por ejemplo, en la relacion 1:1, 1:2, 1:3, 1:4, 1:5, 1:10, 1:100 o 1:1000.
Estas son mezclas especialmente preferidas de compuestos estereoisomericos.
En otra realizacion preferida, la invencion se refiere a compuestos de formula (I) donde Q esta en posicion meta con respecto al resto oxadiazol.
En otra realizacion preferida, los compuestos de la presente invencion muestran una selectividad por el receptor S1P1 por encima del receptor S1P3 de mas de 20 veces, preferiblemente mas de 50 veces, mas preferiblemente mas de 100 veces, incluso mas preferiblemente mas de 1000 veces.
Los compuestos preferidos de la presente invencion tienen una alta biodisponibilidad oral y/o un bajo aclaramiento. Mas especialmente, los compuestos de la presente invencion se caracterizan por una relacion Cl/F, donde Cl es el aclaramiento y F la biodisponibilidad, de 0,5 o inferior, mas preferiblemente inferior a 0,4 y, mas preferiblemente, de 0,3 o inferior.
En otra realizacion preferida, los compuestos de la presente invencion tienen un area bajo la curva (AUCm) en plasma de 80 000 h*ng/ml o superior, mas preferiblemente superior a 100 000 h*ng*/ml.
En otra realizacion preferida, los compuestos de la presente invencion muestran una selectividad por el receptor S1P1 por encima del receptor S1P3 de mas de 20 veces, preferiblemente mas de 50 veces, mas preferiblemente mas de 100 veces, incluso mas preferiblemente mas de 1000 veces y muestran una relacion Cl/F, donde Cl es el aclaramiento y F la biodisponibilidad, de 0,5 o inferior, mas preferiblemente inferior a 0,4 y, mas preferiblemente, de 0,3 o inferior.
En otra realizacion preferida, los compuestos de la presente invencion muestran una selectividad por el receptor S1P1 por encima del receptor S1P3 de mas de 20 veces, preferiblemente mas de 50 veces, mas preferiblemente mas de 100 veces, incluso mas preferiblemente mas de 1000 veces y tienen un area bajo la curva (AuC) en plasma de 80 000 h*ng/ml o superior, mas preferiblemente superior a 100 000 h*ng*/ml.
Los siguientes compuestos de los ejemplos 1 a 155 ilustran los compuestos de la presente memoria descriptiva:
- N.° de ejemplo
- Estructura N.° de ejemplo Estructura
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- 1 O N\\ /N ^y^O O ^VF 49 cmr —O ___/ \J~~£f F
- 50
- cri^r™ O N, N ^0 -O / F F 64 HO N — Q-f N=/ O^x-N fl^l ^ X Xf ^ril
- 67
- Vr'"Or'OH 1 o N\\ /N y-O 0% 68 cmr ^^O OXF
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- HO^0 X°y^ 70 1 O f^OH V Xn (/~~\~o Q^F
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y los solvatos, sales y estereoisomeros de los mismos farmaceuticamente utiles, incluidas sus mezclas en todas las proporciones.
Los compuestos de la presente invencion y tambien los materiales de partida para su preparacion se preparan, ademas, mediante metodos conocidos per se, como se describe en la literatura (por ejemplo, en trabajos convencionales como Houben-Weyl, Methoden der Organischen Chemie [Metodos de qulmica organica], Georg Thieme Verlag, Stuttgart), en las condiciones de reaccion que son conocidas y adecuadas para dichas reacciones. Para obtener informacion sobre todos los metodos de proteccion y desproteccion, consulte Philip J. Kocienski, en «Protecting Groups», Georg Thieme Verlag Stuttgart, Nueva York, 1994 y Theodora W. Greene y Peter G. M. Wuts en «Protective Groups in Organic Synthesis», Wiley Interscience, 3a edicion 1999.
Tambien puede hacerse uso aqul de variantes que son conocidas per se, aunque estas no se mencionan en este documento con mayor detalle.
Si se desea, los materiales de partida pueden formarse tambien in situ, de modo que no se alslen a partir de la mezcla de reaccion, sino que en su lugar se convierten inmediatamente en los compuestos de la presente invencion.
Los compuestos de partida para la preparacion de compuestos de la presente invencion son conocidos en general. Si son nuevos, pueden prepararse, sin embargo, mediante metodos conocidos per se.
Las reacciones se realizan preferiblemente en un solvente inerte.
Son ejemplos de solventes inertes adecuados hidrocarburos, como hexano, eter de petroleo, benceno, tolueno o xileno; hidrocarburos clorados, como tricloroetileno, 1,2-dicloroetano, tetraclorometano, cloroformo o DCM; alcoholes, como metanol, etanol, isopropanol, n-propanol, n-butanol o terc-butanol; eteres, como eter dietllico, eter diisopropllico, THF (THF) o dioxano; eteres glicolicos, como eter monometllico o monoetllico de etilenglicol o eter dimetllico de etilenglicol (diglima); cetonas, como acetona o butanona; amidas, como acetamida, dimetilacetamida o dimetilformamida (DMF); nitrilos, como acetonitrilo; sulfoxidos, como dimetilsulfoxido (DMSO); disulfuro de carbono; acidos carboxllicos, como acido formico o acido acetico; compuestos nitrogenados, como nitrometano o nitrobenceno; esteres, como EtOAc, o mezclas de dichos solventes.
Sales farmaceuticas y otras formas
Dichos compuestos de la presente invencion pueden usarse en su forma final no salina. Por otro lado, la presente invencion tambien se refiere al uso de estos compuestos en forma de sus sales farmaceuticamente aceptables, que pueden derivar de diversos acidos y bases organicos e inorganicos mediante procedimientos conocidos en la tecnica. Las formas salinas farmaceuticamente aceptables de los compuestos de formula I se preparan en su mayor parte mediante metodos convencionales. Si el compuesto de formula I contiene un centro acido, como un grupo carboxilo, se puede formar una de sus sales adecuadas haciendo reaccionar el compuesto con una base adecuada para obtener la correspondiente sal de adicion de base. Dichas bases son, por ejemplo, hidroxidos de metales alcalinos, como hidroxido de potasio e hidroxido sodico; hidroxidos de metales alcalinoterreos, como hidroxido de
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magnesio e hidroxido de calcio; y diversas bases organicas como piperidina, dietanolamina y N-metil-glucamina (meglumina), benzatina, colina, dietanolamina, etilendiamina, benetamina, dietilamina, piperazina, lisina, L-arginina, amonlaco, trietanolamina, betalna, etanolamina, morfolina y trometamina. En el caso de determinados compuestos de formula I, que contienen un centro basico, se pueden formar sales de adicion de acido tratando estos compuestos con acidos organicos e inorganicos farmaceuticamente aceptables, por ejemplo, haluros de hidrogeno, como cloruro de hidrogeno o bromuro de hidrogeno, otros acidos minerales y sus sales correspondientes, como sulfato, nitrato o fosfato y similares, y sulfonatos de alquilo y monoarilo, como metanosulfonato, etanosulfonato, toluenosulfonato y bencenosulfonato, y otros acidos organicos y sus sales correspondientes, como carbonato, acetato, trifluoroacetato, tartrato, maleato, succinato, citrato, benzoato, salicilato, ascorbato y similares. Por consiguiente, entre las sales de adicion de acido farmaceuticamente aceptables de los compuestos de formula I se incluyen las siguientes: acetato, adipato, alginato, aspartato, benzoato, bencenosulfonato (besilato), bisulfato, bisulfito, bromuro, alcanforato, alcanforsulfonato, caprato, caprilato, cloruro, clorobenzoato, citrato, ciclamato, cinamato, digluconato, dihidrogenofosfato, dinitrobenzoato, dodecilsulfato, etanosulfonato, formato, glicolato, fumarato, galacterato (a partir de acido mucico), galacturonato, glucoheptanoato, gluconato, glutamato, glicerofosfato, hemisuccinato, hemisulfato, heptanoato, hexanoato, hipurato, clorhidrato, bromhidrato, yodhidrato, 2- hidroxi-etano-sulfonato, yoduro, isetionato, isobutirato, lactato, lactobionato, malato, maleato, malonato, mandelato, metafosfato, metanosulfonato, metilbenzoato, monohidrogeno-fosfato, 2-naftalenosulfonato, nicotinato, nitrato, oxalato, oleato, palmoato, pectinato, persulfato, fenilacetato, 3-fenilpropionato, fosfato, fosfonato, ftalato, aunque esto no representa una limitacion. Ambos tipos de sales pueden obtenerse o interconvertirse preferiblemente usando tecnicas de resina de intercambio ionico.
Ademas, entre las sales de bases de los compuestos de la presente invencion se incluyen las sales de aluminio, amonio, calcio, cobre, hierro(III), hierro(II), litio, magnesio, manganeso(III), manganeso(II), potasio, sodio y cinc, aunque esto no pretende representar una limitacion. De las sales mencionadas anteriormente, se da preferencia a las de amonio, a las sales de metales alcalinos sodio y potasio y a las sales de metales alcalinoterreos calcio y magnesio. Las sales de los compuestos de formula I que derivan de bases organicas no toxicas farmaceuticamente aceptables incluyen sales de aminas primarias, secundarias y terciarias, aminas sustituidas, tambien incluyen aminas naturales sustituidas, aminas clclicas y resinas basicas de intercambio ionico, por ejemplo, arginina, betalna, cafelna, cloroprocalna, colina, N,N'-dibencil-etilendiamina (benzatina), diciclohexilamina, dietanolamina, dietilamina, 2-dietil-amino-etanol, 2-dimetil-amino-etanol, etanolamina, etilendiamina, N-etilmorfolina, N-etil- piperidina, glucamina, glucosamina, histidina, hidrabamina, isopropilamina, lidocalna, lisina, meglumina (N-metil-D- glucamina), morfolina, piperazina, piperidina, resinas de poliamina, procalna, purinas, teobromina, trietanolamina, trietilamina, trimetilamina, tripropilamina y tris(hidroximetil)-metilamina (trometamina), aunque esto no pretende representar una limitacion.
Los compuestos de la presente invencion que contienen grupos basicos que contiene N2 pueden cuaternizarse usando agentes como haluros de alquilo (C1-C4), por ejemplo cloruro, bromuro y yoduro de metilo, etilo, isopropilo y terc-butilo; sulfatos de dialquilo (C1-C4), por ejemplo, sulfato de dimetilo, dietilo y diamilo; haluros de alquilo (C10- C18), por ejemplo, cloruro, bromuro y yoduro de decilo, dodecilo, laurilo, miristilo y estearilo; y haluros de aril-alquilo (C1-C4), por ejemplo cloruro de bencilo y bromuro de fenetilo. Tanto los compuestos hidrosolubles como los liposolubles de formula I pueden prepararse usando estas sales.
Entre las sales farmaceuticas mencionadas anteriormente preferidas se incluyen acetato, trifluoroacetato, besilato, citrato, fumarato, gluconato, hemisuccinato, hipurato, clorhidrato, bromhidrato, isetionato, mandelato, meglumina, nitrato, oleato, fosfonato, pivalato, fosfato sodico, estearato, sulfato, sulfosalicilato, tartrato, tiomalato, tosilato y trometamina, aunque esto no pretende representar una limitacion.
Las sales de adicion de acido de compuestos basicos de la presente invencion se preparan poniendo la forma de base libre en contacto con una cantidad suficiente del acido deseado, provocando la formacion de la sal de manera convencional. La base libre puede regenerarse poniendo la forma de sal en contacto con una base y aislando la base libre de manera convencional. Las formas de base libre difieren en cierto modo de sus formas de sal correspondientes con respecto a determinadas propiedades flsicas, como la solubilidad en solventes polares; sin embargo, para los fines de la invencion, las sales se corresponden por lo demas con sus respectivas formas de base libre.
Como se ha mencionado, las sales de adicion de base farmaceuticamente aceptables de los compuestos de formula I se forman con metales o aminas, como metales alcalinos y metales alcalinoterreos o aminas organicas. Los metales preferidos son sodio, potasio, magnesio y calcio. Las aminas organicas preferidas son N,N'- dibenciletilendiamina, cloroprocalna, colina, dietanolamina, etilendiamina, N-metil-D-glucamina y procalna.
Las sales de adicion de base de compuestos acidos de la presente invencion se preparan poniendo la forma de acido libre en contacto con una cantidad suficiente de la base deseada, lo que provoca la formacion de la sal de manera convencional. El acido libre puede regenerarse poniendo la forma de sal en contacto con un acido y aislando el acido libre de manera convencional. Las formas de acido libre difieren en cierto modo de sus formas de sal correspondientes con respecto a determinadas propiedades flsicas, como la solubilidad en solventes polares;
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sin embargo, para los fines de la invencion, las sales se corresponden por lo demas con sus respectivas formas de acido libre.
Si un compuesto de la presente invencion contiene mas de un grupo que es capaz de formar sales farmaceuticamente aceptables de este tipo, la formula I abarca tambien sales multiples. Entre las formas de sales multiples tlpicas se incluyen, por ejemplo, bitartrato, diacetato, difumarato, dimeglumina, difosfato, disodio y triclorhidrato, aunque esto no pretende representar una limitacion.
Con respecto a lo indicado anteriormente, puede observarse que el termino «sal farmaceuticamente aceptable» en el presente contexto se entiende como un principio activo que comprende un compuesto de formula I en forma de una de sus sales, en particular si esta forma de sal aporta propiedades farmacocineticas mejoradas al principio activo en comparacion con la forma libre del principio activo o cualquier otra forma de sal del principio activo utilizado anteriormente. La forma de sal farmaceuticamente aceptable del principio activo tambien puede proporcionar este principio activo por primera vez con una propiedad farmacodinamica deseada que no tenia antes y puede incluso tener una influencia positiva sobre la farmacocinetica de este principio activo con respecto a su eficacia terapeutica en el organismo.
Debido a su estructura molecular, los compuestos de la presente invencion pueden ser quirales y, por consiguiente, pueden aparecer en diversas formas enantiomericas. Por tanto, pueden existir en forma racemica u opticamente activa.
Puesto que la actividad farmaceutica de los racematos o estereoisomeros de los compuestos segun la invencion puede diferir, serla deseable usar los enantiomeros. En estos casos, el producto final, o incluso los productos intermedios, pueden separarse en compuestos enantiomericos por medios qulmicos o flsicos conocidos por el experto en la materia o incluso emplearse como tal en la slntesis.
En el caso de aminas racemicas, los diastereomeros se forman a partir de la mezcla mediante reaccion con un agente de resolucion opticamente activo. Son ejemplos de agentes de resolucion adecuados los acidos opticamente activos, como las formas R y S del acido tartarico, acido diacetiltartarico, acido dibenzoiltartarico, acido mandelico, acido malico, acido lactico, acidos amino N-protegidos adecuados (por ejemplo, N-benzoilprolina o N- bencenosulfonilprolina) o los diversos acidos alcanforsulfonicos opticamente activos. Tambien resulta ventajosa la resolucion cromatografica de enantiomeros con la ayuda de un agente de resolucion opticamente activo (por ejemplo, dinitrobenzoilfenilglicina, triacetato de celulosa u otros derivados de hidratos de carbono o pollmeros de metacrilato quiralmente derivatizados inmovilizados en gel de sllice). Los eluyentes adecuados para este objetivo son mezclas de solventes acuosos o alcoholicos, como por ejemplo, hexano/isopropanol/acetonitrilo, por ejemplo en una proporcion 82:15:3.
La invencion ademas se refiere al uso de compuestos de la presente invencion, en combinacion con al menos un principio activo adicional de medicamento, preferiblemente medicamentos utilizados en el tratamiento de la esclerosis multiple como cladribina u otro coagente, como interferon, por ejemplo, interferones pegilados o no pegilados, preferiblemente interferon beta y/o con compuestos que mejoran la funcion vascular. Estos medicamentos adicionales, como el interferon beta, pueden administrarse de forma concomitante o secuencial, por ejemplo, a traves de las vlas subcutanea, intramuscular u oral.
Estas composiciones pueden usarse como medicamentos en los campos de la medicina y la veterinaria.
Las formulaciones farmaceuticas pueden administrarse en forma de unidades de dosis, que comprenden una cantidad predeterminada de principio activo por unidad de dosis. Dicha unidad puede comprender, por ejemplo, de 0,5 mg a 1 g, preferiblemente de 1 mg a 700 mg, en especial preferiblemente de 5 mg a 100 mg, de un compuesto segun la invencion, dependiendo de la enfermedad tratada, las formulaciones del metodo se pueden administrar en forma de unidades de dosis que comprendan una cantidad predeterminada de principio activo por unidad de dosis. Las formulaciones de unidad de dosis preferidas son aquellas que comprenden una dosis, o parte de la dosis, diaria como se indica anteriormente, o una fraccion correspondiente de la misma de un principio activo. Ademas, las formulaciones farmaceuticas de este tipo pueden prepararse usando un proceso, que generalmente es conocido en la tecnica farmaceutica.
Las formulaciones farmaceuticas pueden adaptarse para su administracion mediante cualquier metodo adecuado deseado, por ejemplo, mediante metodos orales (incluyendo bucal o sublingual), rectales, nasales, topicos (incluyendo bucal, sublingual o transdermico), vaginales o parenterales (incluyendo subcutaneo, intramuscular, intravenoso o intradermico). Estas formulaciones pueden prepararse usando todos los procesos conocidos en la tecnica farmaceutica mediante, por ejemplo, combinacion del principio activo con el excipiente (o excipientes) o el adyuvante (o adyuvantes).
Las formulaciones farmaceuticas adaptadas para la administracion oral pueden administrarse como unidades independientes como, por ejemplo, capsulas o comprimidos; polvos o granulos; soluciones o suspensiones en
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llquidos acuosos o no acuosos; espumas comestibles o alimentos en forma de espuma; o emulsiones llquidas de aceite en agua o emulsiones llquidas de agua en aceite.
Por tanto, por ejemplo, en el caso de administracion oral en forma de comprimido o capsula, el principio activo puede combinarse con un excipiente inerte, oral, no toxico y farmaceuticamente aceptable, como por ejemplo, etanol, glicerol, agua y similar. Los polvos se preparan triturando el compuesto hasta un tamano fino adecuado y mezclandolo con un excipiente farmaceutico triturado de forma similar, como por ejemplo, un hidrato de carbono comestible, como por ejemplo, almidon o manitol. Tambien pueden estar presentes un agente aromatizante, un conservante, un dispersante y un colorante.
Las capsulas se producen preparando una mezcla en polvo como se describe anteriormente y rellenando el envoltorio de gelatina conformado con la mezcla. Pueden anadirse a la mezcla en polvo agentes deslizantes y lubricantes, como por ejemplo, acido sillcico altamente disperso, talco, estearato de magnesio, estearato de calcio o polietilenglicol en forma solida antes de la operacion de llenado. Del mismo modo, puede anadirse un agente desintegrante o solubilizante, como por ejemplo, agar-agar, carbonato de calcio o carbonato sodico, para mejorar la disponibilidad del medicamento despues de que se haya tomado la capsula.
Ademas, si se desea o es necesario, pueden incorporarse tambien a la mezcla agentes aglutinantes, lubricantes y desintegrantes adecuados, as! como colorantes. Entre los aglutinantes idoneos se incluyen almidon, gelatina, azucares naturales, como por ejemplo, glucosa o beta-lactosa, edulcorantes a base de malz, caucho natural y sintetico, como por ejemplo, de acacia, tragacanto o alginato sodico, carboximetilcelulosa, polietilenglicol, ceras y similares. Entre los agentes lubricantes utilizados en estas formas de dosis se incluyen oleato sodico, estearato sodico, estearato de magnesio, benzoato sodico, acetato sodico, cloruro sodico y similares. Entre los agentes desintegrantes se incluyen, sin restricciones, almidon, metilcelulosa, agar, bentonita, goma de xantano y similares. Los comprimidos se formulan, por ejemplo, preparando una mezcla en polvo, granulando o prensando en seco la mezcla, anadiendo un lubricante y un desintegrante y prensando la mezcla completa para obtener los comprimidos. Se prepara una mezcla en polvo mezclando el compuesto triturado de forma adecuada con un diluyente o una base, como se describe anteriormente, y opcionalmente con un aglutinante como, por ejemplo, carboximetilcelulosa, un alginato, gelatina o polivinilpirrolidona, un retardante de disolucion, como por ejemplo, parafina, un acelerador de la absorcion, como por ejemplo, una sal cuaternaria, y/o un absorbente, como por ejemplo, bentonita, caolina o fosfato dicalcico. La mezcla en polvo puede granularse humedeciendola con un aglutinante, como por ejemplo, sirope, pasta de almidon, mucllago de acadia o soluciones de celulosa o materiales polimericos y haciendola pasar a traves de un tamiz. Como alternativa a la granulacion, la mezcla en polvo puede hacerse pasar a traves de una maquina de comprimidos, dando lugar a trozos de forma no uniforme que se rompen para formar los granulos. Los granulos pueden lubricarse mediante la adicion de acido estearico, una sal de estearato, talco o aceite mineral para evitar que se peguen a los moldes de vaciado de comprimidos. La mezcla con lubricante se prensa a continuacion para obtener los comprimidos. Los principios activos pueden tambien combinarse con un excipiente inerte de flujo libre y, a continuacion, prensarse directamente para obtener los comprimidos sin realizar las etapas de granulacion o prensado en seco. Puede haber una capa protectora transparente u opaca compuesta por una capa de sellado de laca shellac, una capa de azucar o material polimerico y una capa brillante de cera. Pueden anadirse colorantes a estos recubrimientos para diferenciar entre distintas unidades de dosis.
Pueden prepararse llquidos orales, como por ejemplo, soluciones, siropes y elixires, en forma de unidades de dosis, de modo que una cantidad determinada comprenda una cantidad preespecificada de los compuestos. Los siropes pueden prepararse disolviendo los compuestos en una solucion acuosa con un aromatizante adecuado, mientras que los elixires se preparan usando un vehlculo alcoholico no toxico. Las suspensiones pueden formularse mediante dispersion de los compuestos en un vehlculo no toxico. Pueden, as! mismo, anadirse solubilizantes y emulsionantes, como por ejemplo, alcoholes de isostearilo etoxilados y eteres de polioxietilensorbitol, conservantes, aditivos aromatizantes, como por ejemplo, aceite de menta o edulcorantes naturales o sacarina, u otros aromatizantes artificiales y similares.
Las formulaciones de unidad de dosis para administracion oral pueden, si se desea, encapsularse en microcapsulas. La formulacion tambien puede prepararse de manera que se prolongue o retrase la liberacion, por ejemplo, recubriendo o incluyendo el material particulado en pollmeros, cera y similares.
Los compuestos de la presente invencion y sales, solvatos y derivados fisiologicamente funcionales de los mismos y los demas principios activos pueden tambien administrarse en forma de sistemas de administracion de liposomas, como por ejemplo, veslculas unilamelares pequenas, veslculas unilamelares grandes y veslculas multilamelares. Los liposomas pueden formarse a partir de varios fosfollpidos como, por ejemplo, colesterol, estearilamina o fosfatidilcolinas.
Los compuestos de la presente invencion y las sales, solvatos y derivados fisiologicamente funcionales de los mismos y los demas principios activos tambien pueden administrarse usando anticuerpos monoclonales como vehlculos individuales a los que estan acopladas las moleculas del compuesto. Los compuestos tambien pueden
acoplarse con pollmeros solubles como vehlculos que dirigen el medicamento. Estos pollmeros pueden incluir polivinilpirrolidona, copollmero de pirano, polihidroxipropil-metacrilamidofenol, polihidroxietilaspartamidofenol u oxido de polietileno-polilisina, sustituidos por radicales palmitollo. Los compuestos pueden ademas estar acoplados con una clase de pollmeros biodegradables que son adecuados para conseguir la liberacion controlada de un 5 medicamento, por ejemplo acido polilactico, poliepsilon-caprolactona, acido polihidroxibutlrico, poliortoesteres,
poliacetales, polidihidroxipiranos, policianoacrilatos y copollmeros de hidrogeles entrecruzados o de bloque anfipaticos.
Las formulaciones farmaceuticas adaptadas para administracion transdermica pueden administrarse como yesos independientes para un contacto proximo y extenso con la epidermis del receptor. Por tanto, por ejemplo, el 10 principio activo puede administrarse a partir del yeso mediante iontoforesis, como se describe en terminos generales en Pharmaceutical Research, 3(6), 318 (1986).
Los compuestos farmaceuticos adaptados para la administracion topica pueden formularse como pomadas, cremas, suspensiones, lociones, polvos, soluciones, pastas, geles, pulverizadores, aerosoles o aceites.
Para el tratamiento de los ojos u otros tejidos externos, por ejemplo, la boca y la piel, las formulaciones se aplican 15 preferiblemente como una pomada o crema topica. En el caso de la formulacion para obtener una pomada, el
principio activo puede emplearse con una base de crema paraflnica o miscible con agua. Alternativamente, el principio activo puede formularse para obtener una crema con una base de crema de aceite en agua o una base de agua en aceite.
Entre las formulaciones farmaceuticas adaptadas para aplicacion topica en los ojos se incluyen colirios, en los que 20 el principio activo se disuelve o resuspende en un vehlculo adecuado, en particular, un solvente acuoso.
Las formulaciones farmaceuticas adaptadas para aplicacion topica en la boca abarcan pastillas para chupar, pastillas y colutorios.
Las formulaciones farmaceuticas adaptadas para la administracion rectal pueden administrarse en forma de supositorios o enemas.
25 Las formulaciones farmaceuticas adaptadas para administracion nasal en las que la sustancia vehlculo es un solido comprenden un polvo grueso con un tamano de partlcula, por ejemplo, en el intervalo de 20 a 500 micrometres, que se administra de manera que se aspira, es decir, mediante inhalacion rapida a traves de las fosas nasales a partir de un recipiente que contiene el polvo mantenido cerca de la nariz. Las formulaciones adecuadas para su administracion como aerosol nasal o gotas nasales con un llquido como sustancia vehlculo abarcan soluciones de 30 principios activos en agua o aceite.
Las formulaciones farmaceuticas adaptadas para la administracion mediante inhalacion abarcan polvos o vaporizados finamente particulados, que pueden generarse mediante diversos tipos de dispensadores presurizados con aerosoles, nebulizadores o insufladores.
Las formulaciones farmaceuticas adaptadas para la administracion vaginal pueden administrarse como 35 formulaciones de ovulos vaginales, tampones, cremas, geles, pastas, espumas o en aerosol.
Entre las formulaciones farmaceuticas adaptadas para administracion parenteral se incluyen soluciones acuosas y no acuosas esteriles para inyeccion que comprenden antioxidantes, tampones, bacteriostaticos y solutos, mediante las cuales la formulacion se hace isotonica con la sangre del receptor que se va a tratar; y suspensiones acuosas y no acuosas esteriles, que pueden comprender medios de suspension y espesantes. Las formulaciones pueden 40 administrarse en recipientes de dosis unica o multidosis, por ejemplo, en ampollas y viales sellados, y conservarse liofilizadas, de modo que solo sea necesaria la adicion del llquido vehlculo esteril, por ejemplo agua para inyeccion, inmediatamente antes de que sea necesario su uso.
Las soluciones y suspensiones para inyeccion preparadas segun la receta pueden prepararse a partir de polvos, granulos y comprimidos esteriles.
45 Resulta evidente que, ademas de los constituyentes especialmente mencionados anteriormente, las formulaciones tambien pueden comprender otros agentes normales en la tecnica con respecto al tipo de formulacion en particular; por tanto, por ejemplo, las formulaciones que son adecuadas para la administracion oral pueden comprender aromatizantes.
Una cantidad terapeuticamente eficaz de un compuesto de la presente invencion y del otro principio activo depende 50 de varios factores, como por ejemplo, la edad y el peso del animal, la enfermedad precisa que requiere tratamiento y su gravedad, la naturaleza de la formulacion y el metodo de administracion, y la determina finalmente el medico o
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veterinario responsable del tratamiento. Sin embargo, una cantidad eficaz de un compuesto generalmente esta en el intervalo de 0,1 a 100 mg/kg de peso corporal del receptor (mamifero) al dia y en particular, tipicamente en el intervalo de 1 a 10 mg/kg de peso corporal al dia. Por tanto, la cantidad real al dia para un mamifero adulto que pesa 70 kg normalmente esta entre 70 y 700 mg, donde esta cantidad puede administrarse como una dosis individual al dia o normalmente en una serie de dosis divididas (como, por ejemplo, dos, tres, cuatro, cinco o seis) al dia, de modo que la dosis total diaria sea la misma. Una cantidad eficaz de una sal o solvato, o de un derivado fisiologicamente funcional del mismo puede determinarse como la fraccion de la cantidad eficaz de compuesto per se.
La presente invencion se refiere ademas a un metodo para tratar a un sujeto que padece un trastorno asociado con esfingosina-1-fosfato que comprende la administracion a dicho sujeto de una cantidad eficaz de un compuesto de la presente invencion. La presente invencion preferiblemente se refiere a un metodo en el que el trastorno asociado con la esfingosina-1-fosfato-1 es un trastorno o afeccion autoinmune asociado con una respuesta inmunitaria hiperactiva.
La presente invencion se refiere ademas a un metodo para tratar a un sujeto que padece una anomalia inmunorreguladora, que comprende la administracion a dicho sujeto de un compuesto de formula I en una cantidad eficaz para tratar dicha anomalia inmunorreguladora. La presente invencion se refiere preferiblemente a un metodo en el que la anomalia inmunorreguladora es una enfermedad autoinmune o una enfermedad inflamatoria cronica seleccionada entre el grupo compuesto por: esclerosis lateral amiotrofica (ELA), lupus eritematoso sistemico, artritis reumatoide cronica, diabetes mellitus de tipo I, enfermedad inflamatoria intestinal, cirrosis biliar, uveitis, esclerosis multiple, enfermedad de Crohn, colitis ulcerosa, penfigoide ampolloso, sarcoidosis, psoriasis, miositis autoinmune, granulomatosis de Wegener, ictiosis, oftalmopatia de Graves y asma. La presente invencion ademas se refiere a un metodo en el que la anomalia inmunorreguladora es un rechazo de trasplante de medula osea o de organo, o una enfermedad de injerto contra huesped. La presente invencion se refiere ademas a un metodo en el que la anomalia inmunorreguladora se selecciona entre el grupo compuesto por: trasplante de organos o tejidos, enfermedades de injerto contra huesped causadas por trasplante, sindromes autoinmunes como artritis reumatoide, lupus eritematoso sistemico, tiroiditis de Hashimoto, esclerosis multiple, miastenia gravis, diabetes de tipo I, uveitis, uveitis posterior, encefalomielitis alergica, glomerulonefritis, enfermedades autoinmunes posinfecciosas como fiebre reumatica y glomerulonefritis posinfecciosa, enfermedades cutaneas inflamatorias e hiperproliferativas, psoriasis, dermatitis atopica, dermatitis de contacto, dermatitis eccematosa, dermatitis seborreica, liquen plano, penfigo, penfigoide ampolloso, epidermolisis ampollosa, urticaria, angioedemas, vasculitis, eritema, eosinofilia cutanea, lupus eritematoso, acne, alopecia areata, queratoconjuntivitis, conjuntivitis primaveral, uveitis asociada a la enfermedad de Behcet, queratitis, queratitis herpetica, queratocono, distrofia epitelial de la cornea, leucoma corneal, penfigo ocular, ulcera de Mooren, escleritis, oftalmopatia de Graves, sindrome de Vogt-Koyanagi-Harada, sarcoidosis, alergias al polen, enfermedad obstructiva de las vias respiratorias reversible, asma bronquial, asma alergico, asma intrinseco, asma extrinseco, asma por polvo, asma cronico o inveterado, asma tardio e hipersensibilidad de las vias respiratorias, bronquitis, ulceras gastricas, dano vascular causado por enfermedades isquemicas y trombosis, enfermedades isquemicas intestinales, enfermedades inflamatorias intestinales, enterocolitis necrosante, lesiones intestinales asociadas a quemaduras termicas, enfermedades celiacas, proctitis, gastroenteritis eosinofilica, mastocitosis, enfermedad de Crohn, colitis ulcerosa, migranas, rinitis, eccema, nefritis intersticial, sindrome de Goodpasture, sindrome uremico hemolitico, nefropatia diabetica, miositis multiple, sindrome de Guillain-Barre, enfermedad de Meniere, polineuritis, neuritis multiple, mononeuritis, radiculopatia, hipertiroidismo, enfermedad de Basedow, aplasia eritrocitaria pura, anemia aplasica, anemia hipoplasica, purpura trombocitopenica idiopatica, anemia hemolitica autoinmune, agranulocitosis, anemia perniciosa, anemia megaloblastica, aneritroplasia, osteoporosis, sarcoidosis, fibrosis pulmonar, neumonia intersticial idiopatica, dermatomiositis, leucodermia vulgar, ictiosis vulgar, sensibilidad fotoalergica, linfoma cutaneo de celulas T, leucemia linfocitica cronica, arterioesclerosis, ateroesclerosis, sindrome de aortitis, poliarteritis nodosa, miocardosis, escleroderma, granuloma de Wegener, sindrome de Sjogren, adiposis, fascitis eosinofilica, lesiones de la encia, periodontio, hueso alveolar y sustancia osea dentaria, glomerulonefritis, alopecia de patron masculino o alopecia senil previniendo la depilacion o proporcionando germinacion del pelo y/o favoreciendo la generacion y el crecimiento del pelo, distrofia muscular, pioderma y sindrome de Sezary, enfermedad de Addison, lesion de organos por isquemia-reperfusion que se produce tras su conservacion, trasplante o enfermedad isquemica, choque endotoxico, colitis pseudomembranosa, colitis causada por farmaco o radiacion, insuficiencia renal aguda isquemica, insuficiencia renal cronica, toxinosis causada por el oxigeno pulmonar o farmacos, cancer de pulmon, enfisema pulmonar, catarata, siderosis, retinitis pigmentosa, degeneracion macular senil, cicatrizacion del vitreo, quemadura de la cornea por alcalis, dermatitis eritema multiforme, dermatitis ampollosa por IgA lineal y dermatitis por cemento, gingivitis, periodontitis, septicemia, pancreatitis, enfermedades causadas por la contaminacion ambiental, envejecimiento, carcinogenesis, metastasis de carcinoma e hipobaropatia, enfermedad causada por la liberacion de histamina o leucotrieno-C4, enfermedad de Behcet, hepatitis autoinmune, cirrosis biliar primaria, colangitis esclerosante, reseccion hepatica parcial, necrosis hepatica aguda, necrosis causada por toxina, hepatitis virica, shock, anorexia, hepatitis B, hepatitis no A/no B, cirrosis, cirrosis alcoholica, insuficiencia hepatica, insuficiencia hepatica fulminante, insuficiencia hepatica de aparicion tardia, insuficiencia hepatica cronica reagudizada, aumento del efecto quimioterapeutico, infeccion por citomegalovirus, infeccion por HCMV, SIDA, cancer, demencia senil, traumatismo e infeccion bacteriana cronica.
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Los compuestos preferidos de la presente invencion muestran una EC50 en GTPTS para la union al receptor S1Pi de menos de aproximadamente 10 pM, preferiblemente menos de aproximadamente 5 pM, mas preferiblemente menos de aproximadamente 1 pM e incluso mas preferiblemente menos de aproximadamente 0,1 pM. Mas preferiblemente, los compuestos de formula (I) muestran una EC50 para la union a S1P1 de menos de 0,01 pM.
Los compuestos preferidos de la presente invencion muestran selectividad por el receptor S1P1 sobre el receptor S1P3 en una magnitud de mas de aproximadamente 20. Mas preferiblemente, los compuestos de formula (I) son 50 veces mas selectivos para S1P1 que para S1P3, mas preferiblemente, 100 veces.
Los compuestos de la invencion se han denominado segun los estandares usados en el programa «ACD/Name Batch» de Advanced Chemistry Development Inc., ACD/Labs (version 7.00) Version del producto: 7.10, desarrollado: 15 de septiembre de 2003.
A continuacion, la presente invencion se ilustrara a modo de algunos ejemplos que no deben interpretarse como una limitacion del alcance de la invencion.
Ejemplos
Los compuestos de la presente invencion se sintetizan segun los protocolos descritos en la solicitud de patente PCT/EP2008/063180.
Los compuestos oxadiazol de la presente invencion pueden prepararse a partir de materiales de partida facilmente disponibles mediante varias tecnicas de slntesis, usando tanto protocolos qulmicos en fase de solucion como en fase solida o protocolos con fases en solucion y solida mezcladas. A continuacion, en los ejemplos se describen ejemplos de rutas de slntesis.
Los materiales de partida disponibles en el mercado utilizados en la siguiente descripcion experimental se obtuvieron de Aldrich o Fluka, siempre que no se indique lo contrario.
Los datos de HPLC, RMN y EM proporcionados en los ejemplos descritos a continuacion se obtuvieron como sigue: Datos de HPLC:
Metodo A: columnas de HPLC: columna XbridgeTM C8; 50 mm x 4,6 mm a un caudal de 2 ml/min; gradiente de 8 min desde TFA al 0,1 % en H2O hasta TFA al 0,07 % en ACN.
Metodo B: columnas de HPLC: ATLANTIS C18; 75 x 4,6 mm 5U a un caudal de 1 ml/min; A-HCOOH al 0,1 %, B- ACN.
Metodo C: columnas de HPLC: C18 BDS; 50 x 4,6 mm, SC\307 a un caudal de 0,8 ml/min; A-TFA al 0,1 %, B- ACN: caudal: 0,8 ml/min.
Metodo D: columnas de HPLC: ATLANTIS C18; 75 x 4,6 mm 5U a un caudal de 0,8 ml/min; A-TFA al 0,1 %, B- ACN.
Metodo: E: columnas de HPLC: ATLANTIS C18; 75 x 4,6 mm 5U a un caudal de 0,8 ml/min; A-NH4OAC 10 Mm, B- ACN.
Metodo F: columnas de HPLC: Phenomenex Luna 5pm C18 (2), 100 x 4,6 mm (mas cartucho de proteccion) a un flujo de 2 ml/min; gradiente desde 3,5 min de 95:5 ([0,1 % (v/v) de acido formico en H2O]:[0,1 % (v/v) de acido formico en MeCN]) hasta 5:95 % ([0,1% (v/v) de acido formico en H2O]:[0,1 % (v/v) de acido formico en MeCN]) despues mantenido durante 2 minutos a 5:95 ([0,1 % (v/v) de acido formico en H2O]:[0,1 % (v/v) de acido formico en MeCN]).
Metodo G: columnas de HPLC: Waters Xterra MS 5pm C18, 100 x 4,6 mm (mas cartucho de proteccion) a un caudal de 2 ml/min; gradiente de 3,5 min desde 95:5 ([bicarbonato de amonio 10 mM en H2O]:MeCN) hasta 5:95 ([bicarbonato de amonio 10 mM en H2O]:MeCN) despues mantenido durante 1,5 minutos a 5:95 ([bicarbonato de amonio 10 mM en H2O]:MeCN).
Metodo H: columnas de HPLC: Waters Sunfire, 5 pm C18, 150 x 4,6 mm (mas cartucho de proteccion) a un caudal de 1 ml/min; gradiente desde 30 min desde 95:5 ([0,1 % (v/v) de acido formico en H2O]:[0,1 % (v/v) de acido formico en MeOH]) hasta 0,1 % (v/v) de acido formico en MeOH, despues mantenido durante 5 minutos al 0,1 % (v/v) de acido formico en MeOH.
Metodo I: gradiente del metodo H aplicado a las columnas de HPLC: Supelco, Ascentis® Express C18 o Hichrom Halo C18, 2,7pm C18, 100 x 4,6 mm.
Metodo J: columnas de HPLC: Waters Xterra 5pm C18, 250 x 4,6 mm (mas cartucho de proteccion) a un caudal de 1 ml/min; gradiente de 19,5 min desde 95:5 ([bicarbonato de amonio 10 mM en H2O]:MeCN) hasta MeCN despues 5 mantenido durante 4 minutos en MeCN.
Metodo K: columnas de HPLC: Waters Xterra 5pm C18, 150 x 4,6 mm (mas cartucho de proteccion) a un caudal de 1 ml/min; gradiente de 22 min desde 95:5 ([bicarbonato de amonio 10 mM en H2O]:MeOH) hasta MeOH despues mantenido durante 4 minutos en MeOH.
Deteccion UV (max. absor.) para todos los metodos.
10 Espectro de masas:
Metodo A: CL/EM Waters ZMD (ESI); CG/EM: GC Agilent 6890N & MS Agilent 5973.
Metodo B: UPLC/EM: Waters Acquity, columna Waters Acquity UPLC BEH C18 1,7 m; 2,1 x 50 mm, condiciones: solvente A (acetato de amonio 10 mM en agua + ACN al 5 %), solvente B (ACN), gradiente B al 5 % a B al 100 % en 3 min, deteccion UV (PDA, 230-400 nm) y deteccion por eM (detector SQ, modos ESI positivo y negativo, voltaje 15 de cono 30 V).
Datos de RMN 1H:
Bruker DPX-300 MHz siempre que no se indique otra cosa.
Purificaciones por HPLC preparativa:
Las purificaciones por HPLC preparativa se realizaron con el sistema HPLC waters Prep LC 4000 equipado con 20 columnas ®PrepMS C18 10m; 50 x 300 mm, salvo que se indique lo contrario. Todas las purificaciones por HPLC se realizaron con un gradiente de ACN/H2O o ACN/H2O/TFA (0,1 %).
Purificaciones por Autoprep dirigida a masa:
Las purificaciones de HPLC preparativas se realizaron con un Fractionlynx de autopurificacion dirigido por masa de Waters equipado con una columna Sunfire Prep C18 OBD de 19 x 100 mm 5 m, salvo que se indique lo contrario. 25 Todas las purificaciones por HPLC se realizaron con un gradiente de ACN/H2O o ACN/H2O/HCOOH (0,1 %).
La qulmica de microondas se realizo en un reactor de microondas de modo simple EmrysTM Optimiser de Personal Chemistry.
Procedimientos generales:
Procedimiento 1: formacion del resto amidoxima
30 A una solucion de derivado nitrilo (1 eq) en EtOH (1-5 ml/mmol de derivado nitrilo) se anadio una solucion acuosa de NH2OH (5 eq) al 50 %. La mezcla resultante se agito a una temperatura que oscilaba entre TA y 80 °C durante 1 a 72 horas. Cuando se observo precipitacion del compuesto esperado, el precipitado se filtro y lavo con un solvente adecuado, como EtOH, iPrOH o agua, y, a continuacion, se seco a presion reducida para obtener el derivado amidoxima esperado. En todos los demas casos, la mezcla de reaccion se concentro a presion reducida, se diluyo 35 con un solvente adecuado, como agua o iPrOH, hasta que se observo la precipitacion del compuesto esperado. El precipitado se filtro y lavo con un solvente adecuado, como iPrOH o agua y, a continuacion, se seco a presion reducida para obtener el derivado amidoxima esperado. Cuando no se produjo precipitacion, la mezcla concentrada se disolvio en EtOAc y agua, se lavo la capa organica con agua (dos veces) y salmuera (dos veces), a continuacion se seco sobre MgSO4, se filtro y se concentro al vaclo para obtener el derivado amidoxima esperado.
40 Procedimiento 2: formacion del resto amidoxima
A una solucion de derivado nitrilo (1 eq) en EtOH (1-5 ml/mmol de derivado nitrilo) se anadio NH2OH.HCl (1,1 eq) y Et3N (1,2 eq). La mezcla resultante se agito a una temperatura que oscilaba entre TA y 80 °C durante 1 a 72 horas. En caso de precipitacion del compuesto esperado, el precipitado se filtro y lavo con un solvente adecuado, como EtOH, iPrOH o agua, y, a continuacion, se seco a presion reducida para obtener el derivado amidoxima esperado. 45 En todos los demas casos, la mezcla de reaccion se concentro a presion reducida, se diluyo con un solvente
adecuado, como agua o iPrOH, hasta su precipitacion. El precipitado se filtro y lavo con un solvente adecuado, como iPrOH o agua y, a continuacion, se seco a presion reducida para obtener el derivado amidoxima esperado. Cuando no se produjo precipitacion, la mezcla concentrada se disolvio en EtOAc y agua, se lavo la capa organica con agua (dos veces) y salmuera (dos veces), a continuacion se seco sobre MgSO4, se filtro y se concentro al vaclo 5 para obtener el derivado amidoxima esperado.
Procedimiento 3: formacion del anillo oxadiazol
Se anadieron DIEA (2,0 a 2,2 eq) y HATU (1,0 a 1,1 eq) a una solucion del derivado acido carboxllico (1 eq) en DMF anhidro (4 ml/mmol del derivado acido carboxllico) enfriado a 0 °C. La mezcla resultante se agito a 0 °C durante un periodo de 5 a 30 minutos. A continuacion, el derivado amidoxima (1,0 a 1,2 eq) se anadio neto o como solucion de 10 DMF. La mezcla resultante se agito a 0 °C o a TA durante un periodo de 30 minutos a 18 horas. La mezcla de reaccion se diluyo con un solvente adecuado, como Et2O, MTBE o EtOAc y, a continuacion, se lavo con agua y salmuera. Las capas acuosas se extrajeron una vez. Las capas organicas se combinaron, se secaron (MgSO4 o Na2SO4) y los solventes se eliminaron a presion reducida. El residuo se recogio bien con tolueno (6 ml/mmol de derivado acido carboxllico) y piridina (2 ml/mmol de derivado acido carboxllico) o bien con ACN (8,5 ml/mmol de 15 derivado acido carboxllico). La mezcla resultante se calento a una temperatura de 80 °C a reflujo durante un periodo de 12 a 72 horas. La mezcla de reaccion se diluyo con un solvente adecuado, como Et2O, MTBE o EtOAc y, a continuacion, se lavo con agua y salmuera. Las capas acuosas se extrajeron una vez. Las capas organicas se combinaron, se secaron (MgSO4 o Na2SO4) y los solventes se evaporaron a presion reducida. La purificacion mediante cromatografla ultrarrapida o precipitacion permitio obtener el derivado de oxadiazol esperado.
20 Procedimiento 4: formacion del anillo oxadiazol
Se anadieron DIEA (2,0 a 2,2 eq) y HATU (1,0 a 1,1 eq) a una solucion del derivado acido carboxllico (1 eq) en DMF anhidro (4 ml/mmol del derivado acido carboxllico) enfriado a 0 °C. La mezcla resultante se agito a 0 °C durante un periodo de 5 a 30 minutos. A continuacion, el derivado amidoxima (1,0 a 1,2 eq) se anadio neto o como solucion de DMF. La mezcla resultante se agito a 0 °C o a TA durante un periodo de 30 minutos a 18 horas. La mezcla de 25 reaccion se diluyo con un solvente adecuado, como Et2O, MTBE o EtOAc y, a continuacion, se lavo con agua y salmuera. Las capas acuosas se extrajeron una vez. Las capas organicas se combinaron, se secaron (MgSO4 o Na2SO4) y los solventes se eliminaron a presion reducida. El residuo se recogio con ACN (8,5 ml/mmol de derivado acido carboxllico). La mezcla resultante se calento a 150 °C durante 30 minutos con radiacion de MO. La mezcla de reaccion se diluyo con un solvente adecuado, como Et2O, MTBE o EtOAc y, a continuacion, se lavo con agua y 30 salmuera. Las capas acuosas se extrajeron una vez. Las capas organicas se combinaron, se secaron (MgSO4 o Na2SO4) y los solventes se evaporaron a presion reducida. La purificacion mediante cromatografla ultrarrapida o precipitacion permitio obtener el derivado de oxadiazol esperado.
Procedimiento 5: formacion del anillo oxadiazol
A una suspension del derivado de acido carboxllico (1 eq) en tolueno seco (3,5 ml/mmol de acido carboxllico) a TA 35 bajo atmosfera de N2 se anadio cloruro de oxalilo (1,5 eq) y DMF (0,02 eq). La mezcla de reaccion se agito a TA durante 2 h y, a continuacion, se concentro al vaclo. A continuacion se disolvio el cloruro de acido resultante en tolueno seco (2,5 ml/mmol de acido carboxllico) y se anadio gota a gota a TA bajo atmosfera de N2 a una solucion de derivado amidoxima (1 eq) en piridina (1,3 ml/mmol de amidoxima) y tolueno (1,3 ml/mmol de amidoxima). La mezcla de reaccion se agito a TA durante 1 h y, a continuacion, se calento a reflujo durante toda la noche. La 40 mezcla de reaccion se enfrio a TA y se concentro al vaclo. El aceite resultante se recogio en EtOAc, se lavo con agua, solucion saturada de NaHCO3 (dos veces), solucion saturad de NaCl, a continuacion se seco sobre MgSO4, se filtro y se concentro al vaclo. La purificacion mediante cromatografla ultrarrapida o precipitacion permitio obtener el derivado de oxadiazol esperado.
Procedimiento 6: formacion del anillo oxadiazol
45 Se anadieron NMM (3 a 5 eq) y cloroformato de isobutilo (1,0 a 1,1 eq) a una solucion del derivado de acido carboxllico (1,0 eq) en un solvente adecuado, como dioxano o acetato de isopropilo y se agito a una temperatura comprendida entre 0 °C y la TA durante 10 minutos a unas horas. A continuacion, el derivado de amidoxima (1,0 a 1,2 eq) se anadio en una unica porcion y la mezcla de reaccion se agito a una temperatura que oscilaba entre 0 °C y TA durante 20 min a unas horas y luego se calento a una temperatura comprendida entre 80 °C y reflujo durante 50 un periodo de 12 a 24 horas. La mezcla de reaccion se diluyo con un solvente adecuado, como Et2O, MTBE o EtOAc y, a continuacion, se lavo con agua y salmuera. Las capas acuosas se extrajeron una vez. Las capas organicas se combinaron, se secaron (MgSO4 o Na2SO4) y los solventes se evaporaron a presion reducida. La purificacion mediante cromatografla ultrarrapida o precipitacion permitio obtener el derivado de oxadiazol esperado.
Procedimiento 7: formacion del anillo oxadiazol
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En un recipiente de microondas se anadio el derivado acido carboxllico (1 eq), el derivado amidoxima (1,1 eq), clorhidrato de 1-etil-3-(3-dimetilaminopropil)carbodiimida (1,1 eq), THF (2,7 ml/mmol de acido carboxllico) y CH3CN (2,7 ml/mmol de acido carboxllico). La mezcla de reaccion se agito a TA durante 2 horas y, a continuacion, se calento a 150 °C durante 30 minutos con irradiacion de microondas. La mezcla de reaccion se paso a traves de SPE NH2 y SPE SCX, se aclaro con ACN y los solventes se evaporaron. La purificacion mediante cromatografla ultrarrapida o precipitacion permitio obtener el derivado de oxadiazol esperado.
Procedimiento 8: hidrolisis del ester de terc-butilo
Al derivado ester de terc-butilo (1 eq) se le anadio acido clorhldrico en dioxano (4 N, 20-50 eq) y la mezcla de reaccion se agito a TA durante 1 a 24 horas. A continuacion la solucion se evaporo hasta sequedad y el residuo se purifico mediante precipitacion a partir de un solvente como CH3CN, DCM, MTBE o Et2O para obtener el compuesto del tltulo.
Procedimiento 9: hidrolisis de ester de metilo o etilo
Al derivado ester de metilo o etilo (1 eq) en una solucion de MeOH o EtOH (5 ml/mmol de derivado ester) o MeOH/THF 1:1 o EtOH/THF 1:1 (5 ml/mmol de derivado ester) se le anadio hidroxido sodico (5 M, 5 eq) y la mezcla de reaccion se agito a TA durante 1 hora a 24 horas. La solucion se evaporo hasta sequedad. El residuo se recogio con EtOAc y se lavo con una solucion acuosa 1 N de HCl y salmuera. La capa organica se seco (MgSO4) y se concentro al vaclo para obtener el compuesto del tltulo.
Procedimiento 10: sustitucion de bromuros de bencilo con aminas primarias y secundarias
A una solucion de derivado bromobencilo (1 eq) en CH3CN o DMF (1,5-3 ml/mmol de derivado bromobencilo) se anadio K2CO3 o NaHCO3 (2-3 eq) y una amina primaria o secundaria (1,2 eq). La mezcla de reaccion se agito durante toda la noche a TA o a 60 °C. El solvente se elimino al vaclo y la mezcla resultante se diluyo con agua, se extrajo con EtOAc, se lavo con una solucion saturada de NaCl, se seco sobre MgSO4 y se concentro al vaclo. La purificacion mediante cromatografla ultrarrapida o recristalizacion permitio obtener el derivado bencilamina esperado.
Procedimiento 11: reaccion de acoplamiento cruzado de Suzuki
Una mezcla del bromuro de arilo (1 eq), acido boronico o su derivado ester (1,2 a 2,0 eq), fluoruro de cesio (3 eq) y cloruro de bis(trifenilfosfina)paladio(II) (0,01 a 0,05 eq) se preparo en dioxano (10 ml/g de bromuro de arilo) y agua (4 ml/g de bromuro de arilo) bajo atmosfera de nitrogeno. La mezcla resultante se calento a una temperatura comprendida entre 80 °C y reflujo durante un periodo de 1 a 15 horas. La mezcla de reaccion se diluyo con MTBE (40 ml/g de bromuro de arilo) y se elimino la capa acuosa. La capa organica se seco (MgSO4 o Na2SO4) y se concentro al vaclo. El residuo se purifico mediante cromatografla ultrarrapida.
Procedimiento 12: cianacion aromatica
Una mezcla de haluro de arilo (1 eq), cianuro sodico (1,5 eq) y bromuro de tetrabutilamonio (1,5 eq) se disolvio en DMA (2 ml/mmol de haluro de arilo) y se calento a 120 °C durante 1 a 3 horas con irradiacion de microondas. La mezcla resultante se diluyo con EtOAc, se lavo con una solucion saturada de NaCl, se seco sobre MgSO4 y se concentro al vaclo. La purificacion mediante cromatografla ultrarrapida o recristalizacion permitio obtener el derivado de cianuro de arilo esperado.
Procedimiento 13: bromacion bencllica
A una solucion de derivado toluilo (1 eq) en CH3CN (1,5 ml/mmol de derivado toluilo) se anadio N-bromosuccinimida (1,2 eq) y 2,2'-azobis(2-metilpropionitrilo) (0,02 eq). La mezcla de reaccion se calento a 70 °C durante 1 a 48 horas. A continuacion, la mezcla de reaccion se enfrio a TA, se anadio agua y la mezcla se concentro al vaclo. El residuo se recogio en DCM y se lavo con una solucion acuosa al 10 % de NaHCO3 y salmuera, se seco sobre MgSO4 y se concentro al vaclo. La purificacion mediante cromatografla ultrarrapida o recristalizacion permitio obtener el derivado de bromuro de bencilo esperado.
Procedimiento 14: formacion de amida
A una solucion del derivado acido carboxllico (1 eq) en DCM (40 ml/mmol) se anadio cloruro de oxalilo (3 eq) y DMF (0,04 eq) en DCM (10 ml) y la mezcla resultante se agito a TA durante 1 hora. La solucion se evaporo hasta sequedad, el residuo se recogio en THF (10 ml) y despues se anadio a una mezcla del derivado amina (1 eq) y DIEA (4 eq) en THF (8 ml/mmol). La mezcla de reaccion se agito a TA durante 2 a 24 horas, se filtro a traves de una
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columna de SPE-NH2 y se aclaro con ACN. Tras la evaporacion de los solventes, el producto sin procesar se purifico mediante cromatografia ultrarrapida obteniendose el compuesto del titulo.
Procedimiento 15: reaccion de acoplamiento cruzado de Suzuki
Se preparo una mezcla del bromuro de arilo (1 eq), acido boronico o su derivado ester (1,2 a 2,0 eq.), fluoruro de cesio (3 eq), acetato de paladio (0,05 a 0,2 eq) y 2-diciclohexilfosfino-2',6'-dimetoxibifenilo (0,1 a 0,4 eq) en dioxano (10 ml/g de bromuro de arilo) y agua (5 ml/g de bromuro de arilo) bajo atmosfera de nitrogeno. La mezcla resultante se calento a una temperatura comprendida entre 80 °C y reflujo durante un periodo de 1 a 15 horas. La mezcla de reaccion se diluyo con MTBE (40 ml/g de bromuro de arilo) y se elimino la capa acuosa. La capa organica se seco (MgSO4 o Na2SO4) y se concentro al vacio. El residuo se purifico mediante cromatografia ultrarrapida.
Compuesto intermedio 5: acido 2'-metil-2-(trifluorometil)bifenil-4-carboxilico
F
Etapa 1: 4-bromo-3-(trifluorometil)benzoato de metilo
A una suspension de acido 4-bromo-3-(trifluorometil)benzoico (Acceledev 000625; 15,0 g; 55,8 mmol) en MeOH (300 ml) a TA se anadio cloruro de tionilo (16,2 ml; 223,0 mmol) gota a gota durante 15 min. La mezcla de reaccion se agito a TA durante 12 horas. La mezcla de reaccion se concentro y el residuo sin procesar se diluyo con EtOAc (500 ml). La capa organica se lavo con una solucion acuosa saturada de NaHCO3 (200 ml), agua (200 ml) y salmuera (200 ml), se seco sobre MgSO4 y se concentro obteniendose el compuesto del titulo como un solido de color naranja (14,8 g; 94 %). RMN 1H (DMSO-d6, 300 MHz) 8 8,26 (m, 1H), 8,14 (m, 2H), 3,93 (s, 3H). HPLC (metodo A), tR 4,71 min (pureza: 99,0 %).
Etapa 2: 2'-metil-2-(trifluorometil)bifenil-4-carboxilato de metilo
Se recogieron 4-bromo-3-(trifluorometil)benzoato de metilo (6,0 g; 21,2 mmol), acido o-tolilboronico (3,17 g; 23,3 mmol), carbonato potasico (14,7 g; 106,0 mmol), tetrakis(trifenilfosfina)paladio(0) (2,45 g; 2,12 mmol) en tolueno (30 ml) y agua (30 ml) bajo atmosfera de N2. La mezcla de reaccion se mantuvo a reflujo durante 3 horas. La mezcla de reaccion se enfrio a TA, se filtro sobre un relleno de celite y se aclaro con tolueno (200 ml). El filtrado se concentro para obtener un aceite de color marron que se recogio en EtOAc (200 ml). La capa organica se lavo con una solucion acuosa saturada de NaHCO3 (50 ml), agua (50 ml) y salmuera (50 ml), se seco sobre MgSO4 y se concentro obteniendose el compuesto del titulo como un aceite de color marron (6,4 g; cuantitativo). HPLC (metodo A), tR 5,33 min (pureza: 60 %).
Etapa 3: acido 2'-metil-2-(trifluorometil)bifenil-4-carboxnico
Se trato una solucion de 2'-metil-2-(trifluorometil)bifenil-4-carboxilato de metilo (5,0 g; 17,0 mmol) en EtOH (150 ml) a TA con una solucion acuosa 5 N de hidroxido sodico (10,2 ml; 51 mmol). La mezcla de reaccion se agito a 60 °C durante 2 horas. La mezcla de reaccion se concentro para obtener un solido de color marron que se recogio en agua (300 ml) y la fase acuosa se lavo dos veces con EtOAc. La capa acuosa se acidifico con una solucion acuosa concentrada de HCl (pH~2), a continuacion se concentro hasta su precipitacion (la mitad del volumen). La suspension se filtro para obtener el compuesto del titulo como un solido de color beis. RMN 1H (DMSO-d6, 300 MHz) 8 13,55 (sa, 1H), 8,31 (s, 1H), 8,25 (d, J = 7,9 Hz, 1H), 7,50 (d, J = 7,9 Hz 1H), 7,37-7,12 (m, 4H), 1,99 (s, 3H). CL/EM (metodo A): 278,9 (M-H)-. HPLC (metodo A), tR 4,57 min (pureza: 98,7 %).
Compuesto intermedio 16: 3-[{3-[amino(hidroxiimino)metil1bencil}(metil)amino]propanoato de terc-butilo
H2N
HO^
N
CH3
N
Etapa 1: 3-[(metilamino)metil]benzonitrilo
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A una solucion en agitacion de metilamina (al 40 % en agua, 200 ml) bajo atmosfera de N2, se anadio 3- (bromometil)benzonitrilo (10 g, 51 mmol) lentamente en porciones durante 10 minutos a 0 °C. Tras permanecer en agitacion a Ta durante 3 horas, la mezcla de reaccion se extrajo con DCM. A continuacion, la capa organica se lavo con salmuera y se seco sobre sulfato sodico y se concentro a presion reducida. El residuo se purifico mediante cromatografla (sllice, eter pet./EtOAc) para obtener el compuesto del tltulo como un llquido de color amarillo palido (6,1 g; 82 %). RMN 1H (DMSO-da, 400 MHz) 8 7,74 (s, 1H), 7,63-7,68 (m, 2H), 7,48-7,52 (m, 1H), 3,66 (s, 2H), 2,22 (s, 3H).
Etapa 2: 3-[(3-cianobencil)(metil)amino]propanoato de terc-butilo
A una solucion en agitacion de 3-[(metilamino)metil]benzonitrilo (6,1 g; 41,7 mmol) y bicarbonato sodico (7,0 g; 83,4 mmol) en ACN (70 ml) se anadio 3-bromo-propanoato de terc-butilo (7 ml; 41,7 mol) gota a gota. Tras permanecer en agitacion a TA durante 12 horas, la mezcla de reaccion se filtro y el filtrado se concentro a presion reducida. El residuo se purifico mediante cromatografla (sllice, eter pet./EtOAc) para obtener el compuesto del tltulo como un llquido de color amarillo palido. RMN 1H (DMSO-d6, 400 MHz) 8 7,70 (s, 2H), 7,60 (m, 1H), 7,51 (m, 1H), 3,49 (s, 2H), 2,58 (m, 2H), 2,36 (m, 2H), 2,09 (s, 3H), 1,38 (s, 9H).
Etapa 3: 3-[{3-[amino(hidroxiimino)metil]bencil}(metil)amino]propanoato de terc-butilo
El compuesto del tltulo se preparo siguiendo el procedimiento general 1 partiendo de 3-[(3-cianobencil)- (metil)amino]propanoato de terc-butilo. Se obtuvo como un solido gomoso de color blanco (4,50 g; 84 %). RMN 1H (DMSO-d6, 400 MHz) 8 9,56 (s, 1H), 7,52 (m, 2H), 7,29 (m, 2H), 5,74 (s, 2H), 3,44 (s, 2H), 2,57 (m, 2H), 2,36 (m, 2H), 2,09 (s, 3H), 1,37 (s, 9H). CL/EM (metodo B): 308,2 (M+H)+. HPLC (metodo B), tR 5,18 min (pureza: 96,5 %).
Compuesto intermedio 21: [{3-[amino(hidroxiimino)metil1bencil}(metil)amino1acetato de terc-butilo
Etapa 1: [(3-cianobencil)(metil)amino]acetato de terc-butilo
A una solucion en agitacion de clorhidrato de ester terc-butllico de sarcosina (8,1 g; 44,9 mmol) y trietilamina (17 ml; 122,4 mmol) en ACN (100 ml) se anadio por partes 3-(bromometil)benzonitrilo (8,0 g; 40,8 mmol) durante un periodo de 10 minutos a 0 °C. Despues de estar en agitacion a TA durante 3 horas, la mezcla de reaccion se vertio en agua y se extrajo con DCM. A continuacion, la capa organica se lavo con salmuera, se seco sobre sulfato sodico y se concentro a presion reducida para obtener el compuesto del tltulo como un llquido de color verde palido (9,0 g; 85 %). RMN 1H (DMSO-d6, 400 MHz) 8 7,72 (2H, m), 7,64 (1H, m), 7,54 (1H, m), 3,66 (2H, s), 3,18 (2H, s), 2,22 (3H, s), 1,41 (9H, s).
Etapa 2: [{3-[amino(hidroxiimino)metil]bencil}(metil)amino]acetato de terc-butilo
El compuesto del tltulo se preparo siguiendo el procedimiento general 1 partiendo de [(3-cianobencil)(metil)- amino]acetato de terc-butilo. Se obtuvo como un polvo de color blanco (8,5 g; 84 %). RMN 1H (DMSO-d6, 400 MHz) 8 9,57 (1H, s), 7,59 (1H, s), 7,53 (1H, m), 7,30 (2H, m), 5,75 (2H, s), 3,61 (2H, s), 3,15 (2H, s), 2,23 (3H, s), 1,41 (9H, s). CL/EM (metodo B): 294,0 (M+H)+. HPLC (metodo A), tR 3,31 min (pureza: 97,5 %).
Compuesto intermedio 22: N-{3-[amino(hidroxiimino)metil] bencil}-N-(terc-butoxicarbonil)-beta-alaninato de terc- butilo
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A una solucion en agitacion de clorhidrato del ester terc-butllico de p-alanina (7,1 g; 39,2 mmol) y trimetilamina (14,2 ml; 107 mmol) en acetonitrilo seco (100 ml) se anadio 3-(bromometil)benzonitrilo (7,0 g; 35,7 mmol) en porciones durante 10 min a 0 °C. Tras permanecer en agitacion a TA durante 5 horas, la mezcla de reaccion se lavo con agua (100 ml) y se extrajo con diclorometano (2 x 100 ml). Las capas organicas se combinaron, se secaron usando sulfato sodico y se concentraron a presion reducida. El residuo se purifico mediante cromatografla ultrarrapida para obtener el compuesto del tltulo como un llquido de color amarillo palido. RMN 1H (DMSO-d6, 400 MHz) 8 7,75 (s, 1H), 7,66 (m, 2H), 7,50 (m, 1H), 3,71 (s, 2H), 2,64 (t, 2H), 2,32 (m, 2H), 1,37 (s, 9H).
Etapa 2: N-(terc-butoxicarbonil)-N-(3-cianobencil)-beta-alaninato de terc-butilo
A una solucion de 3-[(3-cianobencil)amino]propanoato de ferc-butilo (3,7 g; 14,2 mmol) en THF anhidro (100 ml) se anadio dicarbonato de di-terc-butilo (3,1 g; 14,2 mmol). La mezcla resultante se calento a 50°C durante 6 horas. A continuacion, la mezcla de reaccion se concentro a presion reducida para obtener el compuesto del tltulo como un llquido de color amarillo palido (5,0 g; 98 %). RMN 1H (DMSO-d6, 400 MHz) 8 7,73 (t, 1H), 7,63 (s, 1H), 7,55 (d, 2H), 4,41 (s, 2H), 3,31 (t, 2H), 2,40 (t, 2H), 1,36 (m, 18H).
Etapa 3: N-{3-[amino(hidroxiimino)metil]bencil}-N-(terc-butoxicarbonil)-beta-alaninato de terc-butilo
El compuesto del tltulo se preparo siguiendo el procedimiento general 1, partiendo de N-(terc-butoxicarbonil)-N-(3- cianobencil)-beta-alaninato de terc-butilo (5,0 g; 13,8 mmol). Se aislo como un aceite de color amarillo palido (5,1 g; 93 %). RMN 1H (DMSO-d6, 400 MHz) 8 9,61 (s, 1H), 7,54 (m, 2H), 7,33 (m, 1H), 7,19 (d, 1H), 5,78 (s, 2H), 4,38 (s, 2H), 3,33 (m, 2H), 2,40 (m, 2H), 1,33-1,42 (m, 18H). CL/EM (metodo B): 394,0 (M+H)+. HPLC (metodo A), tR 3,47 min (pureza: 97,7 %). HPlC (metodo E), tR 3,71 min (pureza: 97,2 %).
Compuesto intermedio 23: N-{5-[amino(hidroxiimino)metil]-2-fluorobencil}-N-metil-beta-alaninato de terc-butilo
F O .
O
h2n ''N Oh
Etapa 1: N-(5-ciano-2-fluorobencil)-N-metil-beta-alaninato de terc-butilo
El compuesto del tltulo se preparo siguiendo el procedimiento general 10 partiendo de 5-ciano-2- fluorobencilbromuro (1,5 g; 7,0 mmol) y N-metil-beta-alaninato de terc-butilo (1,3 g; 8,4 mmol, preparado como se describe en Biorg. Med. Chem. (11) 2003, 3083-3099). Se aislo como un aceite de color amarillo palido (1,9 g; 92 %). RMN 1H (CDCla, 300 MHz) 8 7,79 (dd, J=6,7; 2,1 Hz, 1H), 7,57-7,52 (m, 1H), 7,11 (m, 1H), 3,57 (s, 2H), 2,74 (t, J=7,1 Hz, 2H), 2,43 (t, J=7,1 Hz, 2H), 2,22 (s, 3H), 1,45 (s, 9H). CL/EM (metodo B): 293,2 (M+H)+. HPLC (metodo A), tR 2,44 min (pureza: 86,4 %).
Etapa 2: N-{5-[amino(hidroxiimino)metil]-2-fluorobencil}-N-metil-beta-alaninato de terc-butilo
El compuesto del tltulo se preparo siguiendo el procedimiento general 1 partiendo de N-(5-ciano-2-fluorobencil)-N- metil-beta-alaninato de terc-butilo (1,39 g; 4,75 mmol). Se aislo como un aceite incoloro (1,6 g; cuantitativo). RMN 1H (CDCla, 300 MHz) 8 7,73 (dd, J=7,0; 2,3 Hz, 1H), 7,58-7,53 (m, 1H), 7,03 (dd, J=9,5; 8,7 Hz, 1H), 5,11 (sa, 2H), 3,59 (s, 2H), 2,69 (t, J=7,0 Hz, 2H), 2,45 (t, J=7,0 Hz, 2H), 2,28 (s, 3H), 1,45 (s, 9H). CL/EM (metodo B): 324,3 (M- H)-; 326,2 (M+H)+.
Compuesto intermedio 24: N-{3-[amino(hidroxiimino)metil]-5-fluorobencil}-N-metilglicinato de terc-butilo
F.
:r
O
h2n
^n
OH
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Etapa 1: 3-(bromometil)-5-fluorobenzonitrilo
Se preparo una solucion de 3-fluoro-5-metilbenzonitrilo (Hognda Trading Co) (100 g; 0,74 mol) en ACN (1 l) bajo atmosfera de nitrogeno. Se anadieron N-bromosuccinimida (105 g; 0,59 mol) y AIBN (2,4 g; 0,014 mol) y la mezcla de reaccion se calento a 70 °C durante 90 minutos. La mezcla de reaccion se concentro al vaclo. El residuo se diluyo en DCM, se enfrio a 0 °C y se agito durante 15 minutos. La succinimida precipitada se filtro y el filtrado se concentro para obtener el producto un aceite de color amarillo. El producto sin procesar se recogio sobre eter pet. (200 ml), se enfrio a -20 °C y se agito durante 30 minutos. El precipitado se filtro y se seco al vaclo para obtener el compuesto del tltulo como un solido de color blanco. RMN 1H (DMSO-d6, 400 MHz) 8 7,83 (m, 2H), 7,73 (m, 1H), 4,72 (s, 2H). HPLC (metodo A), tR 4,17 min (pureza: 99,4 %).
Etapa 2: N-(3-ciano-5-fluorobencil)-N-metilglicinato de terc-butilo
El compuesto del tltulo se preparo siguiendo el procedimiento general 10 partiendo de 3-(bromometil)-5- fluorobenzonitrilo y clorhidrato del ester terc-butllico de sarcosina. Se aislo como un aceite de color amarillo (3,5 g; 98 %). RMN 1H (DMSO-da, 400 MHz) 8 7,74 (m, 1H), 7,63 (m, 1H), 7,54 (m, 1H), 3,70 (sa, 2H), 3,22 (sa, 2H), 2,24 (s, 3H), 1,42 (s, 9H). CL/EM (metodo B) 262,2 (M+H)+. HPLC (metodo A), tR 2,42 min (pureza: 93,3 %).
Etapa 3: N-{3-[amino(hidroxiimino)metil]-5-fluorobencil}-N-metilglicinato de terc-butilo
El compuesto del tltulo se preparo siguiendo el procedimiento general 2, partiendo de N-(3-ciano-5-fluorobencil)-N- metilglicinato de terc-butilo. Se aislo como un solido de color amarillo. RMN 1H (DMSO-d6, 400 MHz) 8 9,75 (sa, 1H), 7,49 (s, 1H), 7,34 (m, 1H), 7,13 (m, 1H), 5,87 (sa, 2H), 3,65 (s, 2H), 3,19 (s, 2H), 2,25 (s, 3H), 1,43 (s, 9H). CL/EM (metodo B): 311,9 (M+H)+, 310,0 (M-H‘). HPLC (metodo A), tR 1,89 min (pureza: 53 %).
Compuesto intermedio 25: N-{3-[amino(hidroxiimino)metil]-5-fluorobencil}-N-metil-beta-alaninato de terc-butilo
O \
H,N
2 i
OH
Etapa 1: N-(3-ciano-5-fluorobencil)-N-metil-beta-alaninato de terc-butilo
El compuesto del tltulo se preparo siguiendo el procedimiento general 10 partiendo de 3-(bromometil)-5- fluorobenzonitrilo (etapa 1 del compuesto intermedio 24, 750 mg; 3,5 mmol) y N-metil-beta-alaninato de terc-butilo (670 mg; 4,2 mmol, preparado como se describe en Biorg. Med. Chem. (11) 2003, 3083-3099). Se aislo como un aceite de color amarillo palido. RMN 1H (DMSO-d6, 300 MHz) 8 7,73 (ddd, J=8,6; 2,6; 1,4 Hz, 1H), 7,61 (s, 1H), 7,567,45 (m, 1H), 3,53 (s, 2H), 2,60 (t, J=6,7 Hz, 2H), 2,38 (t, J=6,7 Hz, 2H), 2,12 (s, 3H), 1,40 (s, 9H). CL/EM (metodo B): 293,3 (M+H)+. HPLC (metodo A), tR 2,61 min (pureza: 96,2 %).
Etapa 2: N-{3-[amino(hidroxiimino)metil]-5-fluorobencil}-N-metil-beta-alaninato de terc-butilo
El compuesto del tltulo se preparo siguiendo el procedimiento general 2 partiendo de N-(3-ciano-5-fluorobencil)-N- metil-beta-alaninato de terc-butilo (495 mg; 1,7 mmol). Se aislo como un aceite de color amarillo (524 mg; 95 %). RMN 1H (DMSO-d6, 300 MHz) 8 9,73 (s, 1H), 7,45 (s, 1H), 7,38-7,28 (m, 1H), 7,11 (d, J=9,7 Hz, 1H), 5,85 (s, 2H), 3,48 (s, 2H), 2,60 (t, J=6,9 Hz, 2H), 2,38 (t, J=6,9 Hz, 2H), 2,12 (s, 3H), 1,39 (s, 9H). CL/EM (metodo B): 324,3 (M- H)-.
Compuesto intermedio 29: 3-{[(2,3-dihidroxipropil)(metil)amino1metil}-N'-hidroxibencenocarboximidamida
OH
OH
h2n
Oh
Etapa 1: 3-{[(2,3-dihidroxipropil)(metil)amino]metil}benzonitrilo
5
10
15
20
25
30
El compuesto del tltulo se preparo siguiendo el procedimiento general 10 partiendo de 3-(bromometil)benzonitrilo y 3-(metilamino)-1,2-propanodiol. Se aislo como un aceite incoloro (920 mg; 82 %). CL/EM (metodo B): 221,1 (M+H)+.
Etapa 2: 3-{[(2,3-dihidroxipropil)(metil)amino]metil}-N'-hidroxibencenocarboximidamida
El compuesto del tltulo se preparo siguiendo el procedimiento general 1 partiendo de 3-[(2,3-dihidroxipropil)- (metil)amino]metil}benzonitrilo. Se aislo como un aceite incoloro. CL/EM (metodo B): 254,1 (M+H)+.
Compuesto intermedio 30: 3-{[bis(2-hidroxietil)amino]metil}-N'-hidroxibencenocarboximidamida
h2n
N
OH
OH
Etapa 1: 3-{[bis(2-hidroxietil)amino]metil}benzonitrilo
El compuesto del tltulo se preparo siguiendo el procedimiento general 10 partiendo de 3-(bromometil)benzonitrilo y dietanolamina. Se obtuvo como un aceite incoloro (820 mg; 73 %). CL/EM (metodo B): 219,1 (M-H)-; 221,1 (M+H)+.
Etapa 2: 3-{[bis(2-hidroxietil)amino]metil}-N'-hidroxibencenocarboximidamida
El compuesto del tltulo se preparo siguiendo el procedimiento general 2 partiendo de 3-{[bis(2-hidroxietil)- amino]metil}benzonitrilo. Se obtuvo como un aceite incoloro.
Compuesto intermedio 31: N-{4-[amino(hidroxiimino)metil]bencil}-N-metilglicinato de terc-butilo
- H2N
- ■C
- HO'N
<rr°
Etapa 1: N-(4-cianobencil)-N-metilglicinato de terc-butilo
Una mezcla de alfa-bromo-p-tolunitrilo (10,0 g; 51 mmol), clorhidrato del ester terc-butllico de sarcosina (10,2 g; 56 mmol) y carbonato de potasio (21,2 g; 153 mmol) en acetona (100 ml) se agito a 60 °C durante toda la noche. La suspension resultante se filtro y las sales se lavaron con acetona (2 x 150 ml). El filtrado se concentro a presion reducida. El residuo se diluyo con agua (200 ml) y se extrajo con EtOAc (2 x 150 ml). Las capas organicas combinadas se lavaron con agua (200 ml), se secaron (MgSO4) y los solventes se eliminaron a presion reducida para obtener el compuesto del tltulo como un aceite de color amarillo sin purificacion adicional (11,7 g; 88 %). RMN 1H (DMSO-d6, 300 MHz) 8 7,79 (d, J=8,4 Hz, 2H), 7,51 (d, J=8,4 Hz, 2H), 3,71 (s, 2H), 3,20 (s, 2H), 2,23 (s, 3H), 1,42 (s, 9H). CL/EM (metodo B): 260,9 (M+H)+.
Etapa 2: N-{4-[amino(hidroxiimino)metil]bencil}-N-metilglicinato de terc-butilo
Se anadio una solucion acuosa al 50 % de hidroxilamina (13,25 ml; 225 mmol) de una vez a una solucion de N-(4- cianobencil)-N-metilglicinato de terc-butilo (11,70 g; 45 mmol) en EtOH (75 ml). La mezcla de reaccion se agito durante la noche a TA. Los solventes se eliminaron a presion reducida para obtener un solido de color blanco. El solido se resuspendio en agua (200 ml) y se agito durante 20 minutos, a continuacion, se filtro, se lavo con agua y se seco para obtener el compuesto del tltulo como un polvo de color blanco (12,54 g; 95 %). RMN 1H (DMSO-d6, 300 MHz) 8 9,58 (s, 1H), 7,62 (d, J=8,3 Hz, 2H), 7,28 (d, J=8,3 Hz, 2H), 5,78 (s, 2H), 3,62 (s, 2H), 3,15 (s, 2H), 2,24 (s, 3H), 1,42 (s, 9H). CL/EM (metodo B): 294,0 (M+H)+.
Compuesto intermedio 32: N-{4-[amino(hidroxiimino)metil]-2-fluorobencil}-N-metilglicinato de terc-butilo
- h2n Y ^N
- F 1 F -^fO
- HO
Una mezcla de bromuro de 4-ciano-2-fluorobencilo (250 g; 1,17 mol), clorhidrato del ester terc-butllico de sarcosina (212,2 g; 1,17 mol) y carbonato potasico (484 g; 3,50 mol) en acetona (2 l) se agito durante 24 horas a 50 °C y 18 horas a TA. La mezcla de reaccion se filtro y el filtrado se concentro al vaclo. El residuo se recogio con agua (1 l) 5 y se extrajo en acetato de etilo (2 x 1 l). Las capas organicas combinadas se lavaron con agua (1 l), se secaron (MgSO4) y se concentraron al vaclo para obtener el compuesto del tltulo como un aceite de color marron amarillento (325 g; cuantitativo). RMN 1H (DMSO-da, 300 MHz) 8 7,82 (dd, J=9,9; 1,4 Hz, 1H), 7,70 (dd, J=7,9; 1,5 Hz, 1H), 7,64 (m, 1H), 3,78 (s, 2H), 3,23 (s, 2H), 2,27 (s, 3H), 1,42 (s, 9H). CL/EM (metodo B): 279,2 (M+H)+.
Etapa 2: N-{4-[amino(hidroxiimino)metil]-2-fluorobencil}-N-metilglicinato de terc-butilo
10 Se anadio una solucion acuosa al 50 % de hidroxilamina (345 ml; 5,85 mol) gota a gota durante 10 minutos a una solucion de N-(4-ciano-2-fluorobencil)-N-metilglicinato de terc-butilo (325 g; 1,17 mol) en EtOH (2,1 l). La mezcla de reaccion se agito a TA durante 20 horas. Los solventes se concentraron al vaclo y se anadio agua (2 l). La suspension resultante se filtro, se lavo con agua (1 l) y se seco al vaclo para obtener el compuesto del tltulo como un polvo de color blanco (323 g; 89 %). RMN 1H (DMSO-d6, 300 MHz) 8 9,74 (s, 1H), 7,51 (dd, J=8,0; 1,6 Hz, 1H), 15 7,45-7,36 (m, 2H), 5,87 (s, 2H), 3,70 (s, 2H), 3,17 (s, 2H), 2,26 (s, 3H), 1,42 (s, 9H). CL/EM (metodo B): 312,3
(M+H)+.
Compuesto intermedio 33: N-{4-[amino(hidroxiimino)metil]-2-bromobencil}-N-metilglicinato de terc-butilo
Etapa 1: N-(2-bromo-4-cianobencil)-N-metilglicinato de terc-butilo
20 El compuesto del tltulo se preparo siguiendo el procedimiento general 10 partiendo de bromuro de 2-bromo-4- cianobencil (Carbocor) y clorhidrato del ester terc-butllico de sarcosina. Se obtuvo como un solido de color blanco. RMN 1H (DMSO-d6, 300 MHz) 5 8,17 (d, J=1,6 Hz, 1H), 7,88 (dd, J=8,0; 1,6 Hz, 1H), 7,69 (d, J=8,0 Hz, 1H), 3,82 (s, 2H), 3,31 (s, 2H), 2,31 (s, 3H), 1,43 (s, 9H). CL/EM (metodo B): 338,9; 340,9 (M+H)+. HPLC (metodo A), tR 3,10 min (pureza: 99,6 %).
25 Etapa 2: N-{4-[amino(hidroxiimino)metil]-2-bromobencil}-N-metilglicinato de terc-butilo
El compuesto del tltulo se preparo siguiendo el procedimiento general 2, partiendo de N-(2-bromo-4-cianobencil)-N- metilglicinato de terc-butilo. Se aislo como un aceite incoloro (303 mg; 97%). RMN 1H DMSO-d6, 300 MHz) 5 9,74 (s, 1H), 7,87 (d, J=1,7 Hz, 1H), 7,67 (dd, J=8,0; 1,7 Hz, 1H), 7,47 (d, J=8,0 Hz, 1H), 5,88 (s, 2H), 3,75 (s, 2H), 3,26 (s, 2H), 2,31 (s, 3H), 1,43 (s, 9H). CL/EM (metodo B): 371,9; 373,9 (M+H)+. HPLC (metodo A), tR 1,53 min (pureza: 30 98,6 %).
Compuesto intermedio 34: 4-[amino(hidroxiimino)metil]-2-clorobenzoato de metilo
Etapa 1: 4-bromo-2-clorobenzoato de metilo
Se anadio cloruro de tionilo (1,23 ml; 17,0 mmol) gota a gota a una solucion de acido 4-bromo-2-clorobenzoico 35 (Combi-Blocks CA-4187; 1,0 g; 4,25 mmol) en MeOH (20 ml) a 0 °C. A continuacion, la mezcla de reaccion se agito a TA hasta su finalizacion. La mezcla de reaccion se concentro a presion reducida. El residuo se disolvio en EtOAc
5
10
15
20
25
30
35
y se lavo con una solucion acuosa saturada de NaHCO3 y salmuera. La capa organica se seco (MgSO4) y se concentro al vacio para obtener el compuesto del titulo (871 mg, 82 %). RMN 1H (CDCl3, 300 MHz) 8 7,72 (d, J=8,4 Hz, 1H), 7,64 (d, J=1,9 Hz, 1H), 7,46 (dd, J=8,4; 1,9 Hz, 1H), 3,93 (s, 3H). HPLC (metodo A), tR 4,22 min (pureza: 98,5 %).
Etapa 2: 2-cloro-4-cianobenzoato de metilo
Se preparo una mezcla de trifenilfosfina unida a polimero (239 mg; 0,72 mmol) y acetato de paladio(II) (75 mg; 0,33 mmol) en DMF (12 ml) bajo atmosfera de nitrogeno y se agito a TA durante 2 horas. Se anadieron cianuro de cinc (561 mg; 4,77 mmol) y 4-bromo-2-clorobenzoato de metilo (1,19 g; 4,77 mmol) y la mezcla resultante se calento con irradiacion de microondas a 140 °C durante 50 minutos. La mezcla de reaccion se filtro y la resina se lavo con Et2O (3 x 10 ml). Las capas organicas combinadas se lavaron con agua (3 x 5 ml) y salmuera (10 ml), se secaron (MgSO4) y se concentraron al vacio para obtener el compuesto del titulo como un polvo de color blanco. RMN 1H (DMSO-d6, 300 MHz) 8 8,23 (m, 1H), 7,96 (m, 2H), 3,90 (s, 3H). HPLC (metodo A), tR 3,39 min (pureza: 97,6 %).
Etapa 3: 4-[amino(hidroxiimino)metil]-2-clorobenzoato de metilo
El compuesto del titulo se preparo segun el procedimiento general 1 partiendo de 2-cloro-4-cianobenzoato de metilo. Se obtuvo como un solido de color beige (631 mg, cuantitativo). RMN 1H (DMSO-d6, 300 MHz) 8 10,02 (sa, 1H), 7,84 (d, J=1,6 Hz, 1H), 7,83 (d, J=8,2 Hz, 1H), 7,75 (dd, J=8,2; 1,6 Hz, 1H), 6,03 (sa, 2H), 3,86 (s, 3H). CL/EM (metodo B): 227,2 (M-H)-; 229,1 (M+H)+. HPLC (metodo A), tR 1,44 min (pureza: 63,4 %).
Compuesto intermedio 35: 4-[amino(hidroxiimino)metil]-2-fluorobenzoato de metilo
Etapa 1: 4-ciano-2-fluorobenzoato de metilo
Se anadieron cloruro de oxalilo (9,0 ml; 106,6 mmol) y DMF (0,5 ml) a una suspension de acido 4-ciano-2- fluorobenzoico (ABCR; 16 g; 96,9 mmol) en DCM anhidro (300 ml). La mezcla resultante se agito a TA y, a continuacion, se evaporo a presion reducida. El resido se recogio con THF anhidro (150 ml) y se anadio gota a gota a una solucion de metanol (50 ml) y trietilamina (25,8 ml; 193,8 mmol) a 4 °C. La mezcla de reaccion se diluyo con una solucion acuosa de HCl al 0,1 N (200 ml) y se extrajo con EtOAc (3 x 100 ml). Las capas organicas combinadas se lavaron con una solucion acuosa semisaturada de NaHCO3 (200 ml) y agua (200 ml), se seco (MgSO4) y se concentro para obtener el compuesto del titulo como un solido de color amarillo palido (17,8 g, cuantitativo). HPLC (metodo A), tR 2,81 min (pureza: 93,9 %).
Etapa 2: 4-[amino(hidroxiimino)metil]-2-fluorobenzoato de metilo
El compuesto del titulo se preparo segun el procedimiento general 1 partiendo de 4-ciano-2-fluorobenzoato de metilo. Se obtuvo como un solido de color blanco. RMN 1H (DMSO-d6, 300 MHz) 8 10,09 (s, 1H), 7,92 (m, 1H), 7,707,62 (m, 2H), 6,05 (s, 2H), 3,89 (s, 3H). CL/EM (metodo B): 210,9 (M-H)-; 212,9 (M+H)+. HPLC (metodo A), tR 0,97 min (pureza: 100 %).
Compuesto intermedio 36: N-{4-[amino(hidroxiimino)metil]bencil}-N-(terc-butoxicarbonil)glicinato de terc-butilo
5
10
15
20
25
30
35
El compuesto del tltulo se prepare siguiendo el procedimiento general 10 partiendo de bromuro de 4-cianobencilo y glicinato de terc-butilo. Se aislo como un aceite incoloro. RMN 1H (DMSO-d6, 300 MHz) 5 7,78 (d, J=8,3 Hz, 2H), 7,52 (d, J=8,3 Hz, 2H), 3,79 (s, 2H), 3,19 (s, 2H), 2,60 (sa, 1H), 1,41 (s, 9H). HPLC (metodo A), tR 2,17 min (pureza: 97,2 %).
Etapa 2: N-(terc-butoxicarbonil)-N-(4-cianobencil)glicinato de terc-butilo
Se prepare una mezcla de N-(4-cianobencil)glicinato de terc-butilo (1,1 g; 4,5 mmol), dicarbonato de di-terc-butilo (1,1 g; 4,9 mmol) y N-etildiisopropilamina (1,1 ml; 6,7 mmol) en DCM (22 ml) y se agito a TA durante 3,5 horas. La mezcla de reaccion se diluyo con DCM y se lavo con una solucion acuosa saturada de NaHCO3 (2x) y salmuera. La capa organica se seco (MgSO4) y concentro para obtener el compuesto del tltulo como un aceite incoloro (1,2 g; 77 %). RMN 1H (DMSO-d6, 300 MHz) 5 7,84-7,78 (m, 2H), 7,48 (d, J=8,0 Hz, 2H), 4,50-4,45 (m, 2H), 3,93-3,83 (m, 2H), 1,41-1,29 (m, 18H). CL/EM (metodo B): 347,1 (M+H)+. HPLC (metodo A), tR 5,10 min (pureza: 100,0 %).
Etapa 3: N-{4-[amino(hidroxiimino)metil]bencil}-N-(terc-butoxicarbonil)glicinato de terc-butilo
El compuesto del tltulo se prepare siguiendo el procedimiento general 2, partiendo de N-(terc-butoxicarbonil)-N-(4- cianobencil)glicinato de terc-butilo. Se obtuvo como un aceite incoloro (1,26 g; 97 %). RMN 1H (DMSO-d6, 300 MHz) 5 9,59 (s, 1H), 7,65-7,60 (m, 2H), 7,26 (d, J=8.3 Hz, 2H), 5,77 (s, 2H), 4,40 (s, 2H), 3,84-3,75 (m, 2H), 1,41-1,34 (m, 18H). CL/EM (metodo B): 380,1 (M+H)+. HPLC (metodo A), tR 3,31 min (pureza: 98,1 %).
Compuesto intermedio 37: N-{3-[amino(hidroxiimino)metil]bencil}-N-etil-beta-alaninato de terc-butilo
h2n
ho
II
,N
O
O
Etapa 1: 3-[(etilamino)metil]benzonitrilo
Se anadio 3-(bromometil)benzonitrilo (20,0 g; 0,1 mol) en porciones a una solucion 2 M de etilamina en THF (150 ml) a 0 °C. Despues de 5 horas, la mezcla de reaccion se concentro al vaclo. El residuo se recogio con agua y se extrajo con DCM. La capa organica se seco sobre sulfato sodico y se evaporo a presion reducida para obtener el compuesto del tltulo como un llquido de color amarillo (12 g, 73 %). RMN 1H (DMSO-d6, 400 MHz) 8 7,75 (s, 1H), 7,67 (d, 2H), 7,50 (m, 1H), 3,71 (s, 2H), 2,46 (m, 2H), 0,99 (m, 3H).
Etapa 2: N-(3-cianobencil)-N-etil-beta-alaninato de terc-butilo
Una mezcla de 3-[(etilamino)metil]benzonitrilo (5 g, 31 mmol) y acrilato de terc-butilo (4,6 ml; 31 mmol) se calento pura a 80 °C durante 12 horas. El material sin procesar se purifico mediante cromatografla ultrarrapida (sllice, eter pet/EtOAc) para obtener el compuesto del tltulo como un aceite incoloro. RMN 1H (DMSO-d6, 400 MHz) 8 7,69 (m, 2H), 7,62 (d, J=7,8 Hz, 1H), 7,50 (m, 1H), 3,56 (s, 2H), 2,64 (t, 2H), 2,40 (m, 2H), 2,32 (t, 2H), 1,39 (s, 9H), 0,93 (t, 3H).
Etapa 3: N-{3-[amino(hidroxiimino)metil]bencil}-N-etil-beta-alaninato de terc-butilo
El compuesto del tltulo se prepare siguiendo el procedimiento general 2 partiendo de N-(3-cianobencil)-N-etil-beta- alaninato de terc-butilo. Se aislo como un aceite incoloro (5,2 g; 86 %). RMN 1H (DMSO-d6, 400 MHz) 8 9,59 (1H, s), 7,59 (2H, m), 7,52 (d, J=5,8 Hz, 1H), 7,29 (d, J=5,8 Hz, 1H), 5,74 (s, 2H), 3,51 (s, 2H), 2,66 (t, 2H), 2,41 (m, 2H), 2,32 (t, 2H), 1.38 (s, 9H), 0,95 (t, 3H). CL/EM (metodo A) 322,0 (M+H)+. HPLC (metodo A), tR 2,09 min (pureza: 97,2 %).
Compuesto intermedio 38: N-{3-[amino(hidroxiimino)metil]bencil}-N-(2-hidroxietil)-beta-alaninato de terc-butilo
Etapa 1: 3-{[(2-hidroxietil)amino]metil}benzonitrilo
Se anadio 3-(bromometil)benzonitrilo (20,0 g; 0,125 mol) en porciones a una mezcla de etanolamina (11,4 g; 0,19 mol) y bicarbonato sodico (21,0 g; 0,25 mol) en ACN (200 ml) a 0 °C. La mezcla resultante se agito durante 4 horas. La mezcla de reaccion se concentro al vaclo. El residuo se recogio con agua y se extrajo con DCM (200 5 ml). La capa organica se seco sobre sulfato sodico y se evaporo a presion reducida. El residuo se purifico mediante cromatografla obteniendose el compuesto del tltulo como un solido de color blanco (9,8 g; 54 %). RMN 1H (DMSO- da, 400 MHz) 8 7,76 (s, 1H), 7,67 (m, 2H), 7,51 (m, 1H), 4,47 (sa, 1H), 3,74 (s, 2H), 3,44 (m, 2H), 2,51 (m, 2H), 2,12 (sa, 1H).
Etapa 2: N-(3-cianobencil)-N-(2-hidroxietil)-beta-alaninato de terc-butilo
10 Se anadio acrilato de terc-butilo (3,56 ml; 29 mmol) a una solucion de 3-{[(2-hidroxietil)amino]metil}benzonitrilo (4,9 g; 28 mmol) en DMF anhidro (5 ml) bajo atmosfera de nitrogeno. La mezcla resultante se calento a 80°C durante 12 horas. La mezcla de reaccion se diluyo con agua (100 ml) y se extrajo en acetato de etilo (100 ml). La fase organica separada se seco sobre sulfato sodico y se concentro a presion reducida para obtener el compuesto del tltulo como un llquido incoloro. RMN 1H (DMSO-da, 400 MHz) 8 7,75 (s, 1H), 7,69 (d, J=7,6 Hz, 1H), 7,62 (d, 15 J=7,9 Hz, 1H), 7,50 (m, 1H), 4,36 (t, 1H), 3,62 (s, 2H), 3,43 (m, 2H), 2,69 (t, 2H), 2,47 (m, 2H), 2,34 (t, 2H), 1,38 (s,
9H).
Etapa 3: N-{3-[amino(hidroxiimino)metil]bencil}-N-(2-hidroxietil)-beta-alaninato de terc-butilo
El compuesto del tltulo se preparo siguiendo el procedimiento general 2 partiendo de N-(3-cianobencil)-N-(2- hidroxietil)-beta-alaninato de terc-butilo. Se aislo como un aceite incoloro (4,0 g; 87 %). RMN 1H (DMSO-d6, 20 400 MHz) 8 9,57 (s, 1H), 7,58 (s, 1H), 7,51 (t, 1H), 7,28 (d, 2H), 5,74 (s, 2H), 4,30 (t, 1H), 3,57 (s, 2H), 3,41 (m, 2H),
2,70 (t, 2H), 2,47 (m, 2H), 2,34 (t, 2H), 1,37 (s, 9H). CL/EM (metodo A) 338,1 (M+H)+. HPLC (metodo A), tR 1,89 min (pureza: 98,2 %).
Compuesto intermedio 39: N-{4-[amino(hidroxiimino)metil]-2-fluorobencil}-N-metil-beta-alaninato de terc-butilo
25 Etapa 1: N-(4-ciano-2-fluorobencil)-N-metil-beta-alaninato de terc-butilo
El compuesto del tltulo se preparo siguiendo el procedimiento general 10 partiendo de bromuro de 4-ciano-2- fluorobencil (Fluorochem; 2,0 g; 9,3 mmol) y N-metil-beta-alaninato de terc-butilo (1,8 g; 11,2 mmol, preparado como se describe en Biorg. Med. Chem. (11) 2003, 3083-3099). Se aislo como un aceite de color amarillo (2,4 g; 87 %). RMN 1H (CDCla, 300 MHz) 8 7,82 (dd, J=10,0; 1,6 Hz, 1H), 7,69 (dd, J=7,8, 1,6 Hz, 1H), 7,60 (m, 1H), 3,58 30 (s, 2H), 2,61 (t, J=6,9 Hz, 2H), 2,38 (t, J=6,9 Hz, 2H), 2,14 (s, 3H), 1,38 (s, 9H). CL/EM (metodo B): 293,0 (M+H)+.
HPLC (metodo A), tR 2,44 min (pureza: 88,5 %).
Etapa 2: N-{4-[amino(hidroxiimino)metil]-2-fluorobencil}-N-metil-beta-alaninato de terc-butilo
El compuesto del tltulo se preparo siguiendo el procedimiento general 2, partiendo de N-(4-ciano-2-fluorobencil)-N- metil-beta-alaninato de terc-butilo (1,4 g; 4,8 mmol). Se obtuvo como un aceite de color amarillo (2,4 g; 90 %). RMN 35 1H (DMSO-d6, 300 MHz) 5 9,74 (sa, 1H), 7,49 (dd, J=8,0, 1,6 Hz, 1H), 7,42 (dd, J=11,6; 1,6 Hz, 1H), 7,37 (m, 1H),
5,87 (sa, 2H), 3,51 (s, 2H), 2,60 (t, J=7,0 Hz, 2H), 2,38 (t, J=7,0 Hz, 2H), 2,13 (s, 3H), 1,38 (s, 9H). CL/EM (metodo B): 326,0 (M+H)+. HPLC (metodo A), tR 1,57 min (pureza: 95,0 %).
Etapa 1: N-(4-cianobencil)-N-metil-beta-alaninato de terc-butilo
El compuesto del tltulo se prepare siguiendo el procedimiento general 10 partiendo de bromuro de 4-cianobencilo (1,5 g; 7,7 mmol) y N-metil-beta-alaninato de terc-butilo (1,5 g; 9,2 mmol, preparado como se describe en Biorg. 5 Med. Chem. (11) 2003, 3083-3099). Se aislo como un aceite de color amarillo (1,9 g; 89 %). RMN 1H (DMSO-d6, 300 MHz) 5 7,78 (d, J=8,3 Hz, 2H), 7,49 (d, J=8,3 Hz, 2H), 3,55 (s, 2H), 2,60 (t, J=6,9 Hz, 2H), 2,38 (t, J=6,9 Hz, 2H), 2,11 (s, 3H), 1,39 (s, 9H). CL/EM (metodo B): 275,0 (M+H)+. HPLC (metodo A), tR 2,40 min (pureza: 82,5 %).
Etapa 2: N-{4-[amino(hidroxiimino)metil]bencil}-N-metil-beta-alaninato de terc-butilo
El compuesto del tltulo se prepare siguiendo el procedimiento general 2 partiendo de N-(4-cianobencil)-N-metil- 10 beta-alaninato de terc-butilo (1,9 g; 6,8 mmol). Se aislo como un aceite de color amarillo (1,6 g; 77 %). RMN 1H (DMSO-d6, 300 MHz) 5 9,57 (sa, 1H), 7,61 (d, J=8,2 Hz, 2H), 7,27 (d, J=8,2 Hz, 2H), 5,77 (s, 2H), 3,51-3,45 (m, 2H), 2,59 (t, J=7,0 Hz, 2H), 2,38 (t, J=7,0 Hz, 2H), 2,10 (s, 3H), 1,40 (s, 9H). CL/EM (metodo B): 308,0 (M+H)+. HPLC (metodo A), tR 1,52 min (pureza: 82,3 %).
Compuesto intermedio 41: N-(3-{5-[4-bromo-3-(metoximetil)fenil1-1,2.4-oxadiazol-3-il}bencil)-N-metilglicinato de terc- 15 butilo
Etapa 1: acido 4-bromo-3-(metoximetil)benzoico
A una solucion de 4-bromo-3-(metoximetil)benzoato de metilo (etapa 2 del compuesto intermedio 1; 7,0 g; 27,0 mmol) en EtOH (210 ml) se anadio una solucion acuosa 5 N de NaOH (16 ml; 80,0 mmol). La mezcla resultante se 20 calento a 60 °C durante 1 hora. La mezcla de reaccion se enfrio a TA y se concentro al vaclo. El residuo se recogio con agua y se lavo con EtOAc. La capa acuosa se acidifico a continuacion con una solucion acuosa 1 N de HCl y se extrajo con EtOAc. La capa organica se seco (MgSO4) y se concentro al vaclo para obtener el compuesto del tltulo como un solido de color amarillo (5,81 g; 87 %). RMN 1H (DMSO-d6, 300 MHz) 13,19 (sa, 1H), 8,00 (m, 1H), 7,77 (m, 2H), 4,49 (s, 2H), 3,40 (s, 3H). CL/EM (metodo B): 245,0 (M-H)-. HPLC (metodo A), tR 3,63 min (pureza: 25 97,4 %).
Etapa 2: N-(3-{5-[4-bromo-3-(metoximetil)fenil]-1,2,4-oxadiazol-3-il}bencil)-N-metilglicinato de terc-butilo
Se anadio cloruro de oxalilo (7,8 ml; 91,8 mmol) y DMF (100 pl) a una solucion de acido 4-bromo-3- (metoximetil)benzoico (15,0 g; 61,2 mmol) en tolueno anhidro (225 ml). La mezcla resultante se agito a TA durante 2 horas y, a continuacion, se concentro al vaclo para obtener el derivado cloruro de acilo como un aceite de color 30 amarillo. Este cloruro de acilo se recogio con tolueno anhidro (150 ml) y se anadio gota a gota en una solucion del compuesto intermedio 21 (18,0 g; 61,2 mmol) en tolueno (75 ml) y piridina (75 ml). La mezcla resultante se agito a TA durante 2 horas y, a continuacion, se calento a reflujo durante 18 horas. La mezcla de reaccion se concentro al vaclo. El residuo se recogio con EtOAc (400 ml) y se lavo con agua (150 ml), una solucion acuosa saturada de NaHCO3 (2 x 150 ml) y salmuera (150 ml). La capa organica se seco (MgSO4) y se concentro al vaclo para obtener 35 un solido de color amarillo que se lavo con MeOH para obtener en compuesto del tltulo como un polvo de color beis. HPLC (metodo A), tR 4,8 min (pureza: 96,3 %). RMN 1H (DMSO-d6, 300 MHz) 8 8,23 (s, 1H), 8,07-7,91 (m, 4H), 7,54 (m, 2H), 4,57 (s, 2H), 3,74 (s, 2H), 3,47 (s, 3H), 3,22 (s, 2H), 2,29 (s, 3H), 1,45 (s, 9H).
O
.O
F
F
N^ NH2
i 2 OH
Etapa 1: 4-ciano-2,5-difluorobenzoato de metilo
Se disolvieron 2,4,5-trifluorobenzoato de metilo (DSL Chemical, 950 mg, 5 mmol), cianuro sodico (306 mg, 625 mmol) y bromuro de tetrabutilamino (2,01 g, 6,25 mmol) en DMF (10 ml) y la mezcla resultante se calento durante 5 toda la noche a 60 °C. Se anadio una cantidad adicional de cianuro sodico (306 mg; 6,25 mmol) y la mezcla se agito a 60 °C durante 24 horas mas. La mezcla de reaccion se diluyo con EtOAc y se lavo varias veces con salmuera. La capa organica se seco sobre MgSO4 y se concentro al vaclo. El residuo se purifico mediante cromatografla ultrarrapida (sllice, EtOAc/cHex) para obtener el compuesto del tltulo. RMN 1H (DMSO-d6, 300 MHz) 5 7,77 (dd, J = 8,4; 5,5 Hz, 1H), 7,42 (dd, J = 8,9; 5,0 Hz, 1H), 3,96 (s, 3H). CL/EM (metodo B): 463,2 (M-H)-; 465,2 10 (M+H)+. HPLC (metodo A), tR 3,63 min (pureza: 99,9 %).
Etapa 2: 4-[amino(hidroxiimino)metil]-2,5-difluorobenzoato de metilo
El compuesto del tltulo se preparo segun el procedimiento general 1 partiendo de 4-ciano-2,5-difluorobenzoato de metilo. Se obtuvo como un solido de color blanco (304 mg; 98 %). CL/EM (metodo B): 229,0 (M-H)'; 231,0 (M+H)+. HPLC (metodo A), tR 1,08 min (pureza: 98,7 %).
15 Compuesto intermedio 43: N-{3-[amino(hidroxiimino)metil1-5-clorobencil}-N-metilglicinato de terc-butilo
^YOV
1 O 1
N' NH2 OH
Etapa 1: 3-(bromometil)-5-clorobenzonitrilo
El compuesto del tltulo se preparo siguiendo el procedimiento general 13 partiendo de 3-cloro-5-metilbenzonitrilo (FluoroChem Ltd). Se aislo como un polvo de color amarillo. CL/EM (metodo B): 295,1 (M+H)+. HPLC (metodo A), tR 20 4,61 min (pureza: 96,8 %).
Etapa 2: N-(3-cloro-5-cianobencil)-N-metilglicinato de terc-butilo
El compuesto del tltulo se preparo siguiendo el procedimiento general 10 partiendo de 3-(bromometil)-5- clorobenzonitrilo y clorhidrato del ester terc-butllico de sarcosina. Se aislo como un aceite de color amarillo (570 mg; 78 %). CL/EM (metodo B): 295,1 (M+H)+.
25 Etapa 3: N-{3-[amino(hidroxiimino)metil]-5-clorobencil}-N-metilglicinato de terc-butilo
El compuesto del tltulo se preparo siguiendo el procedimiento general 2 partiendo de N-(3-cloro-5-cianobencil)-N- metilglicinato de terc-butilo. Se aislo como un aceite amarillento (550 mg; 88 %). CL/EM (metodo B): 326,2 (M-H)\
Compuesto intermedio 44: N-{4-[amino(hidroxiimino)metil1-2-metoxibencil}-N-metilglicinato de terc-butilo
5
10
15
20
25
30
El compuesto del titulo se prepare siguiendo el procedimiento general 10 partiendo de bromuro de 4-ciano-2- metoxibencilo (Carbocore) y clorhidrato del ester terc-butilico de sarcosina. Se aislo como un aceite incoloro. RMN 1H (DMSO-da, 300 MHz) 5 7,53 (d, J=7,7 Hz, 1H), 7,45-7,40 (m, 2H), 3,83 (s, 3H), 3,69 (s, 2H), 3,20 (s, 2H), 2,27 (s, 3H), 1,42 (s, 9H). CL/EM (metodo B): 291,0 (M+H)+. HPLC (metodo A), tR 2,52 min (pureza: 93,5 %).
Etapa 2: N-{4-[amino(hidroxiimino)metil]-2-metoxibencil}-N-metilglicinato de terc-butilo
El compuesto del titulo se prepare siguiendo el procedimiento general 2, partiendo de N-(4-ciano-2-metoxibencil)-N- metilglicinato de terc-butilo (1,0 g; 3,4 mmol). Se aislo como un aceite de color amarillo (860 mg; 77 %). RMN 1H (DMSO-d6, 300 MHz) 5 9,58 (s, 1H), 7,31-7,23 (m, 3H), 5,81 (s, 2H), 3,79 (s, 3H), 3,63 (s, 2H), 3,14 (s, 2H), 2,26 (s, 3H), 1,42 (s, 9H). CL/EM (metodo B): 324,0 (M+H)+. HPLC (metodo A), tR 1,49 min (pureza: 88,6 %).
Compuesto intermedio 45: N-{4-[amino(hidroxiimino)metil]-2-fluorobencil}-N-(terc-butoxicarbonil)glicinato de terc- butilo
F
OY°O X
iO^oV
H,N ''N
2 I
OH
Etapa 1: N-(4-ciano-2-fluorobencil)glicinato de terc-butilo
El compuesto del titulo se prepare siguiendo el procedimiento general 10 partiendo de bromuro de 4-ciano-2- fluorobencilo (Fluorochem) y glicinato de terc-butilo. Se aislo como un aceite de color amarillo (1,8 g; 74 %). RMN 1H (DMSO-d6, 300 MHz) 5 7,82-7,77 (m, 1H), 7,71-7,63 (m, 2H), 3,82 (s, 2H), 3,22 (s, 2H), 2,58 (sa, 1H), 1,40 (s, 9H). CL/EM (metodo B): 265,0 (M+H)+. HPLC (metodo A), tR 2,23 min (pureza: 98,0 %).
Etapa 2: N-(terc-butoxicarbonil)-N-(4-ciano-2-fluorobencil)glicinato de terc-butilo
A una solucion de N-(4-ciano-2-fluorobencil)glicinato de terc-butilo (1,8 g; 6,8 mmol) y dicarbonato de di-terc-butilo (1,6 g; 7,5 mmol) en DCM (36 ml) se anadio N-etildiisopropilamina (1,7 ml; 10,2 mmol). La mezcla resultante se agito a TA durante 3,5 horas. La mezcla de reaccion se diluyo con DCM y se lavo con una solucion acuosa saturada de NaHCO3 (2x) y salmuera. La capa organica se seco (MgSO4) y se concentro para obtener el compuesto del titulo como un aceite amarillento (2,1 g; 85 %). RMN 1H (DMSO-d6, 300 MHz) 5 7,84 (m, 1H), 7,71 (m, 1H), 7,58 (m, 1H), 4,52-4,48 (m, 2H), 3,95-3,87 (m, 2H), 1,48-1,31 (m, 18H). CL/EM (metodo B): 365,1 (M+H)+. HPLC (metodo A), tR 5,20 min (pureza: 97,1 %).
Etapa 3: N-{4-[amino(hidroxiimino)metil]-2-fluorobencil}-N-(terc-butoxicarbonil)glicinato de terc-butilo
El compuesto del titulo se prepare siguiendo el procedimiento general 2, partiendo de N-(terc-butoxicarbonil)-N-(4- ciano-2-fluorobecil)glicinato de terc-butilo (2,1 g; 5,8 mmol). Se aislo como un aceite de color amarillo (1,7 g; 74 %). RMN 1H (DMSO-d6, 300 MHz) 5 9,76 (s, 1H), 7,54-7,31 (m, 3H), 5,88 (s, 2H), 4,44 (s, 2H), 3,89-3,81 (m, 2H), 1,401,35 (m, 18H). CL/EM (metodo B): 396,2 (M-H)-; 398,0 (M+H)+. HPLC (metodo A), tR 3,39 min (pureza: 95,6 %).
Compuesto intermedio 47: acido 2-(metoximetil)-2'-(trifluorometil)bifenil-4-carboxilico
Se prepare una mezcla de 4-bromo-3-(metoximetil)benzoato de metilo (etapa 2 del compuesto intermedio 1; 8,0 g;
30,8 mmol), acido 2-(trifluorometil)fenilboronico (8,8 g; 46,3 mmol), fluoruro de cesio (14,0 g; 92,4 mmol), acetato de paladio (0,69 g; 3,1 mmol) y 2-diciclohexilfosfino-2,6-dimetoxibifenilo (3,16 g; 7,7 mmol) en una mezcla de dioxano 5 (80 ml) y agua (80 ml) bajo una atmosfera de nitrogeno y se calento a 100 °C durante 12 horas. La mezcla de
reaccion se concentro al vaclo. El residuo se diluyo con EtOAc (200 ml) y despues se lavo con agua (100 ml) y salmuera (100 ml). La capa organica se seco (Na2SO4) y se concentro al vaclo. Tras la purificacion mediante cromatografla ultrarrapida (sllice, eter pet./EtoAc), se obtuvo el compuesto del tltulo como un solido de color amarillo palido (8,0 g; 88 %). RMN 1H (CDCl3, 400 MHz) 8 8,22 (1H, s), 7,99 (1H, d, J=6,5 Hz), 7,78 (1H, d, 10 J=7,7 Hz), 7,57 (2H, m), 7,27 (2H, m), 4,19-4,10 (2H, m), 3,95 (3H, s), 3,26 (3H, s).
Etapa 2: acido 2-(metoximetil)-2'-(trifluorometil)bifenil-4-carboxllico
Se anadio hidroxido de litio monohidrato (2,29 g; 54,7 mmol) a una solucion de 2-(metoximetil)-2'- (trifluorometil)bifenil-4-carboxilato de metilo (8,0 g; 27,3 mmol) en THF (100 ml), MeOH (30 ml) y agua (30 ml). La mezcla resultante se agito a TA durante 12 h y, a continuacion, la mezcla de reaccion se concentro al vaclo. La 15 capa acuosa restante se acidifico con una solucion acuosa concentrada de HCl y se extrajo con EtOAc. A continuacion, la capa organica se lavo con agua y salmuera y, despues se seco (Na2SO4) y se concentro al vaclo. El solido resultante se suspendio en Et2O (30 ml), se filtro y se seco al vaclo para obtener el compuesto del tltulo como un solido de color amarillo palido (6,2 g, 74 %). Cl/EM (metodo B): 309,0 (M-H)-. RMN 1H (DMSO-d6, 400 MHz) 8 13,08 (1H, s), 8,06 (1H, s), 7,87 (2H, m), 7,73 (1H, m), 7,65 (1H, m), 7,35 (1H, d, J=7,5 Hz), 7,27 (1H, d, 20 J=7,9 Hz), 4,11-4,03 (2H, m), 3,15 (3H, s).
Compuesto intermedio 50: acido 2-metil-2'-(trifluorometil)bifenil-4-carboxilico
COOH
F
F
Se prepare una mezcla de 4-bromo-3-metilbenzoato de metilo (20,0 g; 87,3 mmol), acido 2-(trifluorometil)- bencenoboronico (24,9 g; 131,0 mmol), carbonato de potasio (24,1 g; 174,6 mmol) y dicloruro de 25 bis(triciclohexilfosfina)paladio (II) (64,5 mg; 0,09 mmol) en dioxano (200 ml) y agua (50 ml) bajo una atmosfera de N2. La mezcla se calento a 100 °C durante 3 horas. Se anadio una solucion acuosa 5 N de NaOH (100 ml) y la mezcla de reaccion se agito a 100 °C durante una hora mas. La mezcla de reaccion se enfrio a TA y se elimino la capa acuosa. La capa organica se filtro a traves de un relleno de Celite, se concentro hasta 75 ml a presion reducida, se diluyo con agua (125 ml) y se lavo con MTBE (2 x 200 ml). La capa acuosa se acidifico con una
30 solucion acuosa 5 N de HCl (25 ml, pH ~1) y se extrajo con MTBE (2 x 100 ml). Las capas organicas se
combinaron, se secaron (Na2SO4) y se filtraron a traves de un relleno de Celite. La solucion se concentro hasta 100 ml y, a continuacion, se anadio heptano (200 ml). La mezcla se concentro hasta 100 ml. El precipitado se filtro y se lavo dos veces con heptano y posteriormente se seco a presion reducida para obtener el compuesto del tltulo como un polvo de color blanco (22,5 g; 92 %). HPLC (metodo A), tR 4,4 min (pureza: 100 %). CL/EM (metodo B): 35 279,0 (M-H)-. RMN 1H (DMSO-d6, 300 MHz) 8 13,00 (s, 1H), 7,87 (m, 2H), 7,80 (dd, J = 7,9, 1,6 Hz, 1H), 7,75 (m,
1H), 7,64 (m, 1H), 7,34 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 7,23 (d, J = 7,9 Hz, 1H), 2,02 (s, 3H).
Compuesto intermedio 51: acido 2'-etil-2-(trifluorometil)bifenil-4-carboxilico
Etapa 1: 4-bromo-3-(trifluorometil)benzoato de metilo
40 A una suspension de acido 4-bromo-3-(trifluorometil)benzoico (APAC, Pharmaceuticals,, 20 g; 74,35 mmol) en MeOH (400 ml) a 0 °C se anadio cloruro de tionilo (21,6 ml; 297 mmol) gota a gota. La mezcla de reaccion se agito a TA durante 24 horas. El solvente se concentro al vaclo y el residuo sin procesar se diluyo con EtOAc (250 ml). La
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40
45
capa organica se lavo con una solucion saturada de NaHCO3 (100 ml), agua (100 ml) y salmuera (100 ml), se seco sobre MgSO4 y se concentro al vaclo para obtener el compuesto del tltulo como un solido de color amarillo (19,13 g; 91 %). HPLC (metodo A), tR 5,12 min (pureza: 99,2 %).
Etapa 2: 2'-etil-2-(trifluorometil)bifenil-4-carboxilato de metilo
Se preparo una mezcla de 4-bromo-3-(trifluorometil)benzoato de metilo (3,0 g; 10,6 mmol), acido 2-etilfenilboronico (2,38 g; 15,9 mmol), fluoruro de cesio (4,83 g; 31,8 mmol), acetato de paladio (48 mg; 0,21 mmol) y 2- diciclohexilfosfino-2',6'-dimetoxibifenilo (261 mg; 0,64 mmol) en dioxano (30 ml) y agua (15 ml) y, a continuacion, se calento a 90 °C durante 2,5 horas. La mezcla de reaccion se diluyo con MTBE (150 ml) y se lavo con agua (50 ml) y salmuera (50 ml). Las capas acuosas se extrajeron con MTBE (75 ml). Las capas organicas se combinaron, se secaron (MgSO4) y se concentraron al vaclo. Tras la purificacion mediante cromatografla ultrarrapida (sllice, heptano/EtOAc), se obtuvo el compuesto del tltulo como un aceite incoloro (3,05 g; 93 %). HPLC (metodo A), tR 5,6 min (pureza: 97,3 %).
Etapa 3: acido 2'-etil-2-(trifluorometil)bifenil-4-carboxllico
Se anadio una solucion acuosa 5 N de NaOH (3 ml, 15 mmol) a una solucion de 2'-etil-2-(trifluorometil)bifenil-4- carboxilato de metilo (3,05 g; 9,89 mmol) en EtOH (30 ml) y la mezcla resultante se calento a 60 °C durante 45 minutos. La mezcla de reaccion se concentro al vaclo. El residuo se recogio con agua (50 ml) y una solucion acuosa 5 N de HCl (5 ml) y, a continuacion, se extrajo con MTBE (2 * 100 ml). Las capas organicas se lavaron con salmuera (50 ml), se combinaron, se secaron (MgsO4) y el solvente se elimino a presion reducida para obtener el compuesto del tltulo como un polvo de color blanco (2,71 g; 93 %). HPLC (metodo A), tR 4,8 min (pureza: 97,3 %). CL/EM (metodo B): 293,1 (M-H)-. RMN 1H (DMSO-d6, 300 MHz) 8 13,54 (s, 1H), 8,29 (d, J=1,5 Hz, 1H), 8,22 (dd, J=7,9; 1,5 Hz, 1H), 7,50 (d, J=7,9 Hz, 1H), 7,42-7,32 (m, 2H), 7,24 (m, 1H), 7,10 (d, J=7,5 Hz, 1H), 2,39-2,13 (m, 2H), 1,00 (t, J=7,6 Hz, 3H).
Compuesto intermedio 52: acido 2-etoxi-2'-(trifluorometil)bifenil-4-carboxilico
>
O
Etapa 1: 2-hidroxi-2'-(trifluorometil)bifenil-4-carboxilato de metilo
Se preparo una mezcla de 4-bromo-3-hidroxibenzoato de metilo (Combi-Blocks CA-4189, 4,00 g; 17,3 mmol), acido 2-(trifluorometil)fenilboronico (3, 95 g; 20,8 mmol), fluoruro de cesio (7,90 g; 52 mmol), acetato de paladio(II) (78 mg; 0,35 mmol) y 2-diciclohexilfosfino-2',6'-dimetoxibifenilo (426 g; 1,05 mmol) en dioxano (40 ml) y agua (20 ml) bajo atmosfera de N2. La mezcla de reaccion se calento a 90 °C. Transcurridos 90 minutos, se anadieron cantidades adicionales de acido 2-(trifluorometil)fenilboronico (1,90 g; 10 mmol), acetato de paladio(II) (78 mg; 0,35 mmol) y 2- diciclohexilfosfino-2',6'-dimetoxibifenilo (426 mg; 1,05 mmol). Transcurridos 45 minutos mas, se anadieron cantidades adicionales de acido 2-(trifluorometil)fenilboronico (2,7 g; 14,2 mmol), acetato de paladio(II) (78 mg; 0,35 mmol) y 2-diciclohexilfosfino-2',6'-dimetoxibifenilo (426 mg; 1,05 mmol). Despues de 15 horas, la mezcla de reaccion se enfrio a TA, se diluyo con MTBE (200 ml) y, a continuacion, se lavo con agua (30 ml) y salmuera (50 ml). Las capas acuosas se extrajeron con MTBE (100 ml). Las capas organicas se combinaron, se secaron sobre MgSO4 y se concentraron a presion reducida. Tras la purificacion mediante cromatografla ultrarrapida (sllice, EtOAc/heptano), se obtuvo el compuesto del tltulo como un aceite de color amarillo (5,03 g con 12 % v/v de DCM). HPLC (metodo A), tR 3,6 min (pureza: 98,8 %). CL/EM (metodo B): 297,0 (M+H)+. 295,0 (M-H)-.
Etapa 2: 2-etoxi-2'-(trifluorometil)bifenil-4-carboxilato de metilo
Se preparo una mezcla de 2-hidroxi-2'-(trifluorometil)bifenil-4-carboxilato de metilo (5,03 g), carbonato de potasio anhidro (7,05 g; 51 mmol) and bromoetano (6,35 ml; 85 mmol) en ACN anhidro (75 ml) y se calento a 50 °C durante 15 horas. La mezcla de reaccion se enfrio a TA, se filtro y se concentro a presion reducida. Tras la purificacion mediante cromatografla ultrarrapida (sllice, EtOAc/heptano), se obtuvo el compuesto del tltulo como un aceite incoloro (4,45 g; 79 % en dos etapas). HPLC (metodo A), tR 5,3 min (pureza: 99,0 %). CL/EM (metodo B): 325,0 (M+H)+.
Etapa 3: acido 2-etoxi-2'-(trifluorometil)bifenil-4-carboxllico
Se anadio una solucion acuosa 5 N de NaOH (4,1 ml; 20,5 mmol) a una solucion de 2-etoxi-2'-(trifluorometil)bifenil- 4-carboxilato de metilo (4,45 g; 13,7 mmol) en EtOH (45 ml). La mezcla de reaccion se calento a 60 °C durante 30 minutos y, a continuacion, se concentro a presion reducida. El residuo se recogio con agua (50 ml) y una solucion acuosa 5 N de HCl (7 ml) y, a continuacion, se extrajo con MTBE (2 x 100 ml). Las capas organicas se 5 lavaron con salmuera (50 ml), se secaron sobre MgSO4 y se concentraron a presion reducida para obtener un aceite incoloro. Tras la precipitacion con pentano, se obtuvo el compuesto del tltulo como un polvo de color blanco. HPLC (metodo A), tR 4,3 min (pureza: 99,7 %). CL/EM (metodo B): M-(ESI): 309,0.
Compuesto intermedio 54: acido 2-cloro-2'-(trifluorometil)bifenil-4-carboxilico
Cl.
// vh OH
F
10 Etapa 1: 2-cloro-2'-(trifluorometil)bifenil-4-carboxilato de metilo
Se preparo una mezcla de 4-boro-3-clorobenzoato de metilo (Combi-Blocks BB-3530, 1,5 g; 7,0 mmol), 2- bromobenzotrifluoruro (1,9 g; 8,4 mmol), fluoruro de cesio (3,2 g; 21,0 mmol) y cloruro de bis(trifenilfosfina)- paladio(II) (98 mg; 0,14 mmol) en dioxano (15 ml) y agua (7,5 ml) bajo atmosfera de nitrogeno y, a continuacion, se calento a 90 °C durante 30 minutos. La mezcla de reaccion se diluyo con MTBE (30 ml) y se lavo con agua y 15 salmuera. Las capas acuosas se extrajeron con MTBE (30 ml). Las capas organicas combinadas se secaron (MgSO4) y se concentraron al vaclo. Tras dos purificaciones mediante cromatografla ultrarrapida (sllice, heptano/DCM, a continuacion heptano/EtOAc), se obtuvo el compuesto del tltulo como un aceite de color amarillo. HPLC (metodo A), tR 5,3 min (pureza: 99,7 %).
Etapa 2: acido 2-cloro-2'-(trifluorometil)bifenil-4-carboxllico
20 Se anadio una solucion acuosa 5 N de NaOH (4 ml, 20 mmol) a una solucion de 2-cloro-2'-(trifluorometil)bifenil-4- carboxilato de metilo (1,07 g; 3,40 mmol) en MeOH (16 ml) y se agito a TA durante 30 minutos. La mezcla de reaccion se concentro al vaclo. El residuo se recogio con EtOAc y se lavo con una solucion acuosa 1 N de HCl (3x) y salmuera y, a continuacion, se seco (MgSO4) y se concentro al vaclo para obtener el compuesto del tltulo como un polvo de color blanco (950 mg; 93 %). HPlC (metodo A), tR 4,9 min (pureza: 99,4 %). CL/EM (metodo B): 299,1 25 (M-H)-. RMN 1H (DMSO-d6, 300 MHz) 8 13,48 (s, 1H), 8,03 (d, J=1,6 Hz, 1H), 7,94 (dd, J=7,9; 1,6 Hz, 1H), 7,89 (d,
J=7,8 Hz, 1H), 7,78 (m, 1H), 7,69 (m, 1H), 7,49 (d, J=7,9 Hz, 1H), 7,41 (d, J=7,4 Hz, 1H).
Compuesto intermedio 56: acido 2'-fluoro-2-(trifluorometil)bifenil-4-carboxilico
F
F
COOH
F
Se preparo una mezcla de acido 4-bromo-3-(trifluorometil)benzoico (15,0 g; 55,7 mmol), acido 2-fluorofenilboronico 30 (9,4 g; 66,9 mmol), fluoruro de cesio (25,4 g; 167 mmol), 2-diciclohexilfosfino-2',6'-dimetoxibifenilo (5,7 g;
13.9 mmol) y acetato de paladio(II) (1,25 g; 5,6 mmol) en dioxano (150 ml) y agua (150 ml) bajo una atmosfera de N2. La mezcla de reaccion se purgo con vaclo durante 5 minutos y, a continuacion, la mezcla de reaccion se degaseo con N2 a TA durante 10 min. La mezcla de reaccion se calento a 110 °C durante 3 horas. La mezcla de reaccion se enfrio a TA y se filtro a traves de un relleno de Celite. El filtrado se concentro al vaclo para obtener un
35 solido de color amarillo. Tras la purificacion mediante cromatografla ultrarrapida (sllice, DCM con 1 % de AcOH), se obtuvo el compuesto del tltulo como un polvo de color amarillo palido. HPLC (metodo A), tR 4,3 min (pureza:
99.9 %). CL/EM (metodo B): 283,0 (M-H)'. RMN 1H (DMSO-d6, 300 MHz) 8 13,60 (s, 1H), 8,31 (d, J=1,4 Hz, 1H), 8,25 (dd, J=8,0; 1,4 Hz, 1H), 7,60 (d, J=8,0 Hz, 1H), 7,52 (m, 1H), 7,38-7,26 (m, 3H).
5
10
15
20
25
30
rxOV
n" nh2 \ 2 OH
Etapa 1: 3-(bromometil)-2-fluorobenzonitrilo
El compuesto del titulo se preparo siguiendo el procedimiento general 13 partiendo de 2-fluoro-3-metilbenzonitrilo (Matrix Scientific). Se obtuvo como un solido de color naranja. HPLC (metodo A), tR 3,72 (pureza: 99,3 %).
Etapa 2: N-{2-fluoro-3-[(hidroxiamino)(imino)metil]bencil}-N-metilglicinato de terc-butilo
N-(3-ciano-2-fluorobencil)-N-metilglicinato de terc-butilo se preparo siguiendo el procedimiento general 10 partiendo de 3-(bromometil)-2-fluorobenzonitrilo y clorhidrato del ester terc-butilico de sarcosina. Se asilo como un aceite (1,05 g; 88 %). Se sometio al procedimiento general 2, obteniendose el compuesto del titulo como un aceite de color amarillo (1 g; 85 %). HPLC (metodo A), tR 1,09 (pureza: 92 %).
Compuesto intermedio 59: N-{3-[amino(hidroxiimino)metil]bencil}-N-isopropil-beta-alaninato de terc-butilo
h2n
HO"
N
N
O
O
Etapa 1: 3-[(isopropilamino)metil]benzonitrilo
El compuesto del titulo se preparo siguiendo el procedimiento general 10 partiendo de 3-(bromometil)benzonitrilo e isopropilamina. Se aislo como un liquido de color amarillo (5,7 g; 92 %). RMN 1H (DMSO-d6, 400 MHz) 8 7,73 (s, 1H), 7,67 (d, J=7,7 Hz, 1H), 7,63 (d, J=7,8 Hz, 1H), 7,49 (m, 1H), 3,56 (s, 2H), 2,75 (m, 1H), 0,83 (d, J= 8,8 Hz, 6H).
Etapa 2: N-(3-cianobencil)-N-isopropil-beta-alaninato de terc-butilo
Una mezcla de 3-[isopropilamino)metil]benzonitrilo (5,7 g; 32,7 mmol), acrilato de terc-butilo (4,78 ml; 32,7 mmol) y DBU (5,0 ml; 32,7 mmol) se calento pura a 80 °C durante 24 horas. La mezcla de reaccion se diluyo con agua y se extrajo con DCM. La capa organica se seco sobre sulfato sodico y se concentro a presion reducida. Tras la purificacion mediante cromatografia (silice, eter pet./EtOAc), se obtuvo el compuesto del titulo como un aceite incoloro. RMN 1H (DMSO-d6, 400 MHz) 8 7,73 (s, 1H,), 7,67 (d, J=7,7 Hz, 1H), 7,63 (d, J=7,8 Hz, 1H), 7,49 (t, J=7,7 Hz, 1H), 3,56 (s, 2H), 2,75 (m, 1H), 2,62 (t, J=6,5 Hz, 2H), 2,25 (t, J=6,4 Hz, 2H), 1,39 (s, 9H), 0,83 (d, J= 8,8 Hz, 6H).
Etapa 3: N-{3-[amino(hidroxiimino)metil]bencil}-N-isopropil-beta-alaninato de terc-butilo
El compuesto del titulo se preparo siguiendo el procedimiento general 2 partiendo de N-(3-cianobencil)-N-isopropil- beta-alaninato de terc-butilo. Se obtuvo como un aceite incoloro (4,8 g; 90 %). RMN 1H (DMSO-d6, 400 MHz) 8 9,56 (s, 1H), 7,59 (s, 1H), 7,50 (d, J=7,6 Hz, 1H), 7,34 (d, J=7,6 Hz, 1H), 7,27 (m, 1H), 5,73 (s, 2H), 3,51 (s, 2H), 2,80 (m, 1H), 2,62 (t, J=6,8 Hz, 2H), 2,27 (t, J=6,8 Hz, 2H), 1,37 (s, 9H), 0,94 (d, J=6,6 Hz, 6H). CL/EM (metodo A): 336,3 (M+H)+. HPLC (metodo A), tR 2,19 min (pureza: 97,4 %).
Compuesto intermedio 60: N-{5-[amino(hidroxiimino)metil]-2-clorobencil}-N-metilglicinato de terc-butilo
Cl
N^r°
1 O
N' NH2 OH
Etapa 1: 3-(bromometil)-4-clorobenzonitrilo
5
10
15
20
25
30
El compuesto del tltulo se preparo siguiendo el procedimiento general 13, partiendo de 4-cloro-3-metilbenzonitrilo (TransWorld Chemicals) y se aislo como un polvo de color amarillo palido (1,8 g; 59 %). HPLC (metodo A), tR 4,05 (pureza: 97 %).
Etapa 2: N-(2-cloro-5-cianobencil)-N-metilglicinato de terc-butilo
El compuesto del tltulo se preparo siguiendo el procedimiento general 10 partiendo de 3-(bromometil)-4- clorobenzonitrilo y clorhidrato del ester terc-butllico de sarcosina. Se obtuvo como un aceite incoloro (1,9 g; 86 %). CL/EM (metodo B): 295,1 (M+H)+.
Etapa 3: N-{5-[amino(hidroxiimino)metil]-2-clorobencil}-N-metilglicinato de terc-butilo
El compuesto del tltulo se preparo siguiendo el procedimiento general 1 partiendo de N-(2-cloro-5-cianobencil)-N- metilglicinato de terc-butilo y se aislo como un aceite incoloro (1,55 g; 73 %). CL/EM (metodo B): 328,1 (M+H)+.
Compuesto intermedio 61: 4-[{4-[amino(hidroxiimino)metil1bencil}(metil)amino1butanoato de terc-butilo
HO.
N
NH2
O
Etapa 1: 4-[(4-cianobencil)(metil)amino]butanoato de terc-butilo
El compuesto del tltulo se preparo siguiendo el procedimiento general 10 partiendo de bromuro de 4-cianobencilo y clorhidrato de 4-(metilamino)butanoato de terc-butilo (Watanabe). Se obtuvo como un aceite de color amarillo (586 mg; cuantitativo). CL/EM (metodo B): 289,2 (M+H)+. HPLC (metodo A), tR 3,02 (pureza: 91,8 %).
Etapa 2: 4-[{4-[amino(hidroxiimino)metil]bencil}(metil)amino]butanoato de terc-butilo
El compuesto del tltulo se preparo siguiendo el procedimiento general 2 partiendo de 4-[(4- cianobencil)(metil)amino]butanoato de terc-butilo y se aislo como un polvo de color blanco (468 mg; 73 %). HPLC (metodo A), tR 2,1 (pureza: 98,7 %). CL/EM (metodo B): 322,2 (M+H)+.
Compuesto intermedio 64: 3,5-difluoro-N'-hidroxi-4-(hidroximetil)bencimidamida
OH
N' NH2
i 2
OH
Etapa 1: 3,5-difluoro-4-(hidroximetil)benzonitrilo
Se preparo una mezcla de (4-bromo-2,6-difluorofenil)metanol (1,12 g; 5,0 mmol), Pd(PPH3)4 (323 mg; 0,28 mmol) y cianuro de cinc (587 mg; 5,0 mmol) en DMF (7 ml) bajo atmosfera de nitrogeno y se calento a 90 °C durante 18 horas. La mezcla se diluyo con DCM y agua. La fase organica se paso a traves de una frita hidrofoba y el solven- te se evaporo al vaclo. El residuo se purifico mediante cromatografla ultrarrapida (sllice, /so-hexano/EtOAc) para obtener el compuesto del tltulo. RMN 1H (CDCb, 400 MHz) 8 7,28-7,21 (2H, m), 4,83 (2H, d, J=6,7 Hz), 1,95 (1H, t, J=6,7 Hz).
Etapa 2: 3,5-difluoro-N'-hidroxi-4-(hidroximetil)bencimidamida
El compuesto del tltulo se preparo siguiendo el procedimiento general 1 partiendo de 3,5-difluoro-4- (hidroximetil)benzonitrilo. Se obtuvo como un solido blanquecino (512 mg, 84 %). RMN 1H (DMSO-d6, 400 MHz) 8 9,95 (1H, s), 7,39 (2H, d, J=8,5 Hz), 6,00 (2H, sa), 5,30 (1H, t, J=5,6 Hz), 4,52 (2H, d, J=5,6 Hz).
Compuesto intermedio 65: 2-((3-cloro-4-(N'-hidroxicarbamimidoil)bencil)(metil)amino)acetato de terc-butilo
5
10
15
20
25
30
35
OH
Etapa 1: 2-((4-ciano-3-clorobencil)(metil)amino)acetato de terc-butilo
Una solucion de 4-metil-2-clorobenzonitrilo (1,51 g; 10 mmol), N-bromosuccinimida (2,14 g; 12,0 mmol) y AIBN (33 mg; 0,20 mmol) en ACN (40 ml) se calento a reflujo durante 18 horas. La mezcla de reaccion se diluyo con EtOAc y se lavo con una solucion acuosa saturada de Na2CO3 y salmuera. La capa organica se seco (MgSO4) y se concentro al vaclo. El residuo se trato con clorhidrato del ester terc-butllico de sarcosina (1,44 g; 7,92 mmol) y K2CO3 (2,74 g; 19,8 mmol) en ACN (10 ml). La mezcla se calento a 100 °C durante 2 horas. El solvente se evaporo al vaclo. El residuo se disolvio en una mezcla de DCM y agua y luego se vertio a traves de una frita hidrofoba. El solvente se evaporo al vaclo. El residuo se purifico mediante cromatografla ultrarrapida (sllice, /so-hexano/Et2O) para obtener el compuesto del tltulo (1,95 g; cuantitativo). RMN 1H (CDCl3, 400 MHz) 5 7,61 (1H, d, J=8,0 Hz), 7,57 (1H, s), 7,36 (1H, m), 3,73 (2H, s), 3,21 (2H, s), 2,36 (3H, s), 1,48 (9H, s).
Etapa 2: 2-((3-cloro-4-(N'-hidroxicarbamimidoil)bencil)(metil)amino)acetato de terc-butilo
Se calento a 80 °C durante 5 horas una solucion de 2-((4-ciano-3-clorobencil)(metil)amino)acetato de terc-butilo (1,95 g; 6,60 mmol) e hidroxilamina acuosa al 50 % (2,02 ml) en etanol (10 ml). El solvente se evaporo al vaclo. El residuo se repartio entre DCM y agua. La fase organica se vertio a traves de una frita hidrofoba y se evaporo al vaclo para obtener el compuesto del tltulo (2,16 g; cuantitativo). RMN 1H (CDCI3, 400 MHz) 5 7,48-7,42 (2 H, m), 7,28 (1H, m), 4,97 (2H, s), 3,69 (2H, s), 3,18 (2H, s), 2,37 (3H, s), 1,48 (9H, s).
Compuesto intermedio 66: N'-hidroxi-4-(hidroximetil)-3-metilbencimidamida
,OH
N^ NH2 1 2
OH
Etapa 1: (4-bromo-2-metilfenil)metanol
A una solucion de acido 4-bromo-2-metilbenzoico (1,0 g; 4,65 mmol) en Et2O (15 ml) se anadio hidruro de aluminio y litio (370 mg; 10,23 mmol) y la mezcla se agito durante 4 horas. La mezcla de reaccion se diluyo con agua (100 ml) y se extrajo en EtOAc (4 x 100 ml). Las fracciones organicas combinadas se secaron (MgSO4) y se concentraron al vaclo. El residuo se purifico mediante cromatografla ultrarrapida (sllice, eter pet./EtOAc) para obtener el compuesto del tltulo como una goma incolora (752 mg, 80 %). RMN 1H (cDcI3, 400 MHz) 5 7,35-7,30 (2 H, m), 7,24 (1H, m), 4,65 (2H, s), 2,32 (3H, s).
Etapa 2: 4-(hidroximetil)-3-metilbenzonitrilo
Se preparo una mezcla de (4-bromo-2-metilfenil)metanol (603 mg; 3,0 mmol), Pd2(dba)3 (110 mg; 0,12 mmol), S- Phos (99 mg; 0,24 mmol) y cianuro de cinc (421 mg; 3,6 mmol) en una mezcla de DMF/agua (99:1; 5 ml) bajo atmosfera de nitrogeno y se calento a 130 °C durante 30 minutos con irradiacion de microondas. La suspension se filtro a traves de un relleno de Celite y la torta de filtracion se lavo con EtOAc. El filtrado se lavo con agua y salmuera. La fase organica se paso a traves de una frita hidrofoba y el solvente se evaporo al vaclo. El residuo se purifico mediante cromatografla ultrarrapida (sllice, eter de petroleo/EtOAc) para obtener el compuesto del tltulo. RMN 1H (CDCI3, 400 MHz) 5 7,58-7,48 (2H, m), 7,44 (1H, s), 4,75 (2H, d, J=5,5 Hz), 2,33 (3 H, s), 1,85-1,78 (1 H, m).
Etapa 3: N'-hidroxi-4-(hidroximetil)-3-metilbencimidamida
5
10
15
20
25
30
35
La amidoxima se preparo siguiendo el procedimiento 1, aunque partiendo de 4-(hidroximetil)-3-metilbenzonitrilo. Se obtuvo como un solido de color blanco (741 mg; 71 %). RMN 1H (DMSO-da, 400 MHz) 8 9,51 (1H, s), 7,46 (2H, m), 7,34 (1H, d, J=7,7 Hz), 5,72 (2H, s), 5,09 (1H, s), 4,50 (2H, s), 2,26 (3H, s).
Compuesto intermedio 67: N-{4-[amino(hidroxiimino)metil1-2-etilbencil}-N-metilglicinato de terc-butilo
O
OtBu
Etapa 1: N-(4-ciano-2-vinilbencil)-N-metilglicinato de terc-butilo
Se preparo una mezcla de N-(2-bromo-4-cianobencil)-N-metilglicinato de terc-butilo (etapa 1 del compuesto intermedio 33, 658 mg; 1,94 mmol), ester de pinacol del acido vinilboronico (597 mg; 3,88 mmol), K2CO3 (536 mg; 3,88 mmol) y fefratos-trifenilfosfina-paladio(0) (224 mg; 0,19 mmol) en una mezcla de dioxano/agua (5:1; 6 ml) y se ca- lento a 100 °C durante 18 horas. La mezcla de reaccion se diluyo con DCM/agua y se separo. La fase organica se paso a traves de una frita hidrofoba y los solventes se evaporaron al vaclo. El residuo se purifico mediante croma- tografla ultrarrapida (sllice, /so-hexano/EtOAc) para obtener el compuesto del tltulo (508 mg; 92 %). RMN 1H (CDCla, 400 MHz) 8 7,77 (1H, s), 7,58-7,43 (2H, m), 7,13 (1H, dd, J=17,4; 11,0 Hz), 5,69 (1H, d, J=17,4 Hz), 5,42 (1H, d, J=11,0 Hz), 3,80 (2H, s), 3,18 (2H, s), 2,36 (3H, s), 1,50 (9H, s).
Etapa 2: N-(4-ciano-2-etilbencil)-N-metilglicinato de terc-butilo
Una mezcla de N-(4-ciano-2-vinilbencil)-N-metilglicinato de terc-butilo (500 mg; 1,75 mmol) y paladio al 10 % sobre carbono (50 mg) en metanol (5 ml) se agito bajo atmosfera de hidrogeno durante 18 horas. La suspension se filtro a traves de un relleno de Celite y la torta de filtracion se lavo con DCM. El filtrado se evaporo al vaclo para obtener el compuesto del tltulo (474 mg; 94 %).
Etapa 3: N-{4-[amino(hidroxiimino)metil]-2-etilbencil}-N-metilglicinato de terc-butilo
Se calento a 80 °C durante 18 horas una solucion de N-(4-ciano-2-etilbencil)-N-metilglicenato de terc-butilo (570 mg; 1,98 mmol) e hidroxilamina acuosa al 50 % (0,6 ml; 10 mmol) en etanol (10 ml). El solvente se evaporo al vaclo. El residuo se repartio entre DCM y agua. La fase organica se paso a traves de una frita hidrofoba y se evaporo al vaclo para obtener el compuesto del tltulo (658 mg; cuantitativo). RMN 1H (CDCl3, 400 MHz) 8 7,46 (1H, s), 7,39 (2H, s), 4,85 (2H, sa), 3,73 (2H, s), 3,16 (2H, s), 2,73 (2H, c, J=7,6 Hz), 2,37 (3H, s), 1,47 (9H, s), 1,25-1,19 (3H, m).
Compuesto intermedio 68: N'-hidroxi-3-(hidroxietil)bencenocarboximidamida
El compuesto del tltulo se preparo siguiendo el procedimiento general 1, aunque partiendo de 3- (hidroxietil)benzonitrilo (912 mg; 6,20 mmol). Se obtuvo como un solido de color blanco (1,05 g; 94 %). RMN 1H (DMSO-d6, 400 MHz) 8 9,59 (1H, s), 7,55 (1H, s), 7,51 (1H, d, J=7,7 Hz), 7,33-7,21 (2H, m), 5,77 (2H, s), 4,66 (1H, t, J=5,2 Hz), 3,65 (2H, m), 2,77 (2H, t, J=7,1 Hz). CL/EM (metodo A): 181 (M+H)+. HPLC (metodo J), tR = 8,26 min (pureza: 99,9 %).
Compuesto intermedio 69: N'-hidroxi-4-(hidroxietil)bencenocarboximidamida
HO.
H2N
N
OH
El compuesto del tltulo se preparo siguiendo el procedimiento general 1, aunque partiendo de 4- (hidroxietil)benzonitrilo (2,43 g; 16,5 mmol). Se obtuvo como un solido de color blanco (2,95 g; 99 %). RMN 1H
5
10
15
20
25
30
35
(DMSO-da, 400 MHz) 8 9,58 (1H, s), 7,60 (2H, d, J=7,9 Hz), 7,24 (2H, d, J=7,9 Hz), 5,75 (2H, s), 4,72 (1H, m), 3,64 (2H, m), 2,76 (2 H, m). CL/EM (metodo A): 181 (M+H)+. HPLC (metodo J), tR = 8,15 min (pureza: 98,7 %).
Compuesto intermedio 70: N'-hidroxi-3-(hidroximetil)bencimidamida
HO.
N
II
h2n
Oh
El compuesto del tltulo se preparo siguiendo el procedimiento general 1, aunque partiendo de 3- (hidroximetil)benzonitrilo (8,43 g; 63,4 mmol). Se obtuvo como un solido de color blanco (9,15 g; 86 %). RMN 1H (DMSO-d6, 400 MHz) 8 9,63 (1H, s), 7,67 (1H, s), 7,56 (1H, m), 7,35 (2H, m), 5,82 (2H, s), 5,27 (1H, t, J=5,7 Hz), 4,54 (2H, d, J=5,7 Hz).
Compuesto intermedio 71: N-{4-[amino(hidroxiimino)metil1bencil} -N-(2-metoxietil)glicinato de terc-butilo
h2n
n
HO""
N
O
O
O
Etapa 1: 4-{[(2-metoxietil)amino]metil}benzonitrilo
Se anadio 2-metoxietilamina (2,2 ml; 25,5 mmol) a una solucion de bromuro de 4-cianobencilo (1,0 g; 5,1 mmol) en ACN (10 ml) y la mezcla resultante se agito a TA durante 1 hora. La mezcla de reaccion se concentro al vaclo. El producto sin procesar se disolvio en EtOAc y, a continuacion, se lavo con una solucion acuosa saturada de NaHCO3 y salmuera, se seco (MgSO4) y se concentro al vaclo para obtener el compuesto del tltulo (958 mg; 99 %). CL/EM (metodo B): 191,0 (M+H)+. HPLC (metodo A), tR 1,44 min (pureza: 93,4 %).
Etapa 2: N-(4-cianobencil)-N-(2-metoxietil)glicinato de terc-butilo
Se anadio bromoacetato de terc-butilo (1,64 ml; 11,1 mmol) a una mezcla de 4-{[(2-metoxietil)amino]metil}- benzonitrilo (958 mg; 5,04 mmol) y K2CO3 (3,06 g; 22,2 mmol) en ACN (20 ml). La mezcla resultante se agito durante toda la noche a TA. La mezcla de reaccion se diluyo con EtOAc y, a continuacion, se lavo con agua y salmuera, se seco (MgSO4) y se concentro al vaclo. El residuo se purifico mediante cromatografla ultrarrapida (sllice, cHex/EtOAc) para obtener el compuesto del tltulo como un aceite incoloro. CL/EM (metodo B): 305,1 (M+H)+. HPLC (metodo A), tR 3,09 min (pureza: 91,1 %).
Etapa 3: N-{4-[amino(hidroxiimino)metil]bencil}-N-(2-metoxietil)glicinato de terc-butilo
El compuesto del tltulo se preparo segun el procedimiento general 1 partiendo de N-(4-cianobencil)-N-(2- metoxietil)glicinato de terc-butilo y se aislo como un aceite. RMN 1H (DMSO-d6, 400 MHz) 8 9,58 (sa, 1H), 7,61 (d, J=8,0Hz, 1H), 7,29 (d, J=8,0Hz, 1H), 5,78 (s, 2H), 3,77 (s, 2H), 3,44-3,36 (m, 2H), 3,25 (s, 2H), 3,20 (s, 3H), 2,792,71 (m, 2H), 1,42 (s, 9H). CL/EM (metodo B): 338,2 (M+H)+.
Compuesto intermedio 72: N'-hidroxi-4-(hidroximetil)bencenocarboximidamida
HO
N
II
H2N y
OH
El compuesto del tltulo se preparo segun el procedimiento general 1 partiendo de 4-(hidroximetil)benzonitrilo. Se obtuvo como un solido de color blanco (13,1 g; 95 %). RMN 1H (DMSO-d6, 400 MHz) 8 9,58 (1H, s), 7,66 (2H, m), 7,34 (2H, d, J=8,1 Hz), 5,79 (2H, s), 5,23 (1H, t, J=5,6 Hz), 4,54 (2H, d, J=5,6 Hz).
Compuesto intermedio 73: N'-hidroxi-4-(hidroximetil)-2-metilbencimidamida
HNs_J=\
OH
Etapa 1: 4-(hidroximetil)-2-metilbenzonitrilo
Se anadio borohidruro de litio (33 mg; 1,54 mmol) a una solucion de 4-ciano-3-metilbenzoato de metilo (245 mg; 1,40 mmol) en THF (3 ml) y la mezcla resultante se agito a TA durante 4 horas. La mezcla de reaccion se diluyo con 5 agua (10 ml) y se extrajo en EtOAc (4 x 20 ml). Las fracciones organicas combinadas se secaron (MgSO4) y se concentraron al vaclo. El residuo se purifico mediante cromatografla ultrarrapida (sllice, eter pet./EtOAc) para obtener el compuesto del tltulo como una goma incolora (195 mg, 95 %). RMN 1H (CDCl3, 400 mHz) 5 7,58 (1H, d, J=7,9 Hz), 7,33 (1H, s), 7,26 (1H, m), 4,74 (2H, s), 2,55 (3H, s), 1,95 (1H, s). CL/EM (metodo A): 144 (M+H)+. HPLC (metodo F), tR 3,95 min (pureza: 95,3 %).
10 Etapa 2: N'-hidroxi-4-(hidroximetil)-2-metilbencimidamida
El compuesto del tltulo se preparo siguiendo el procedimiento general 1 partiendo de 4-(hidroximetil)-2- metilbenzonitrilo. Se obtuvo como un solido de color blanco. RMN 1H (DMSO-d6, 400 MHz) 8 9,29 (1H, s), 7,24 (1H, d, J=7,7 Hz), 7,18-7,09 (2H, m), 5,68 (2H, s), 5,17 (1H, t, J=5,7 Hz), 4,48 (2H, d, J=5,7 Hz), 2,35 (3H, s). CL/EM (metodo A): 181 (M+H)+. HPLC (metodo F), tR 1,10 min (pureza: 91,3 %).
15 Compuesto intermedio 74: 2-((4-(N'-hidroxicarbamimidoil)-2-(trifluorometil)bencil)(metil)amino)acetato de terc-butilo
Etapa 1: 2-((4-ciano-2-(triflurometil)bencil)(metil)amino)acetato de terc-butilo
Una solucion de 4-metil-3-(trifluorometil)benzonitrilo (1,85 g; 10 mmol), N-bromosuccinimida (2,14 g; 12,0 mmol) y AIBN (0,033 g; 0,2 mmol) en ACN (40 ml) se calento a reflujo durante 18 horas. La mezcla de reaccion se diluyo 20 con EtOAc y agua. La suspension se filtro y el filtrado se separo. La capa organica se lavo con salmuera, se seco (MgSO4) y se concentro al vaclo. El residuo se purifico mediante cromatografla ultrarrapida (sllice, iso- hexano/EtOAc). El material se trato con clorhidrato del ester terc-butllico de sarcosina (0,516 g; 2,84 mmol) y K2CO3 (0,980 g; 7,1 mmol) en ACN (10 ml). La mezcla se calento a 70 °C durante 18 horas. El solvente se evaporo al vaclo. El residuo se disolvio en una mezcla de DCM y agua y luego se vertio a traves de una frita hidrofoba. El 25 solvente se evaporo al vaclo. El residuo se purifico mediante cromatografla ultrarrapida (sllice, iso-hexano/EtOAc) para obtener el compuesto del tltulo (0,543 g; 70 %). RMN 1H (CDCla, 400 MHz) 8 5 8,15 (1H, d, J=8,2 Hz), 7,90 (1H, s), 7,83 (1H, d, J=8,2 Hz), 3,90 (2H, s), 3,26 (2H, s), 2,37 (3H, s), 1,48 (9H, s).
Etapa 2: 2-((4-(N'-hidroxicarbamimidoil)-2-(trifluorometil)bencil)(metil)amino)acetato de terc-butilo
Se calento a 75 °C durante 2 horas una solucion de 2-((4-ciano-2-(trifluorometil)bencil)(metil)amino)acetato de terc- 30 butilo (0,541 g; 1,65 mmol) e hidroxilamina acuosa al 50 % (0,50 ml) en etanol (2 ml). El solvente se evaporo al vaclo. El residuo se repartio entre DCM y agua. La fase organica se paso a traves de una frita hidrofoba y se evaporo al vaclo para obtener el compuesto del tltulo (0,460 g; 77 %). RMN 1H (CDCl3, 400 MHz,) 5 7,97 (1H, d, J=8,1 Hz), 7,89 (1H, s), 7,78 (1H, d, J=8,1 Hz), 4,86 (2H, sa), 3,86 (2H, s), 3,23 (2H, s), 2,37 (3H, s), 1,48 (9H, s).
Compuesto intermedio 75: 2-((2-cloro-4-(N'-hidroxicarbamimidoil)bencil)(metil)amino)acetato de terc-butilo
5
10
15
20
25
30
35
Etapa 1: 2-((4-ciano-2-clorobencil)(metil)amino)acetato de terc-butilo
Una solucion de 4-metil-3-clorobenzonitrilo (4,69 g; 31 mmol), N-bromosuccinimida (6,04 g; 34,2 mmol) y peroxido de benzollo (0,750 g; 3,10 mmol) en ACN (20 ml) se calento a reflujo durante 18 horas. La mezcla de reaccion se diluyo con EtOAc y se lavo con una solucion acuosa saturada de Na2CO3 y salmuera. La fase organica se seco (MgSO4) y se concentro al vaclo. Una parte del residuo (1,0 g; 4,34 mmol) se trato con clorhidrato del ester terc- butllico de sarcosina (1,57 g; 8,69 mmol) y K2CO3 (2,39 g; 17,4 mmol) en dioxano (5 ml). La mezcla resultante se calento a 100 °C durante 2 h y, a continuacion, se concentro al vaclo. El residuo se disolvio en una mezcla de DCM y agua y luego se paso a traves de una frita hidrofoba. El solvente se evaporo al vaclo para obtener el compuesto del tltulo (0,952 g; 74 %).
Etapa 2: 2-((2-cloro-4-(N'-hidroxicarbamimidoil)bencil)(metil)amino)acetato de terc-butilo
Se calento a 80 °C durante 5 horas una solucion de 2-((4-ciano-2-clorobencil)(metil)amino)acetato de terc-butilo (1,25 g; 4,25 mmol) e hidroxilamina acuosa al 50 % (1,30 ml) en etanol (10 ml). El solvente se evaporo al vaclo. El residuo se repartio entre DCM y agua. La fase organica se paso a traves de una frita hidrofoba y se concentro al vaclo para obtener el compuesto del tltulo (1,34 g; 76 %). rMn1H (CDCb, 400 MHz) 5 7,63 (1H, d, J=1,8 Hz), 7,59 (1H, d, J=8,0 Hz), 7,50 (1H, dd, J=8,0; 1,8 Hz), 4,84 (2H, s), 3,83 (2H, s), 3,25 (2H, s), 2,42 (3H, s), 1,48 (9H, s).
Compuesto intermedio 76: 2-((2,6-difluoro-4-(N'-hidroxicarbamimidoil)bencil)(metil)amino)acetato de terc-butilo
Etapa 1: 2-((4-ciano-2,6-difluorobencil)(metil)amino)acetato de terc-butilo
A una solucion degaseada de 3,5-difluoro-4-metilbenzonitrilo (1,53 g; 10 mmol) y AIBN (0,033 g; 0,20 mmol) en ACN (40 ml) se anadio N-bromo-succinimida (2,14 g; 12,0 mmol). La mezcla de reaccion se calento a 90 °C durante 24 horas. El solvente se evaporo al vaclo y el residuo se repartio entre agua y DCM. La fase organica se paso a traves de una frita hidrofoba y el solvente se evaporo al vaclo. El residuo se disolvio en CAN, y se anadio clorhidrato del ester t-butllico de sarcosina (1,09 g; 6,0 mmol) y K2CO3 (2,07 g; 15 mmol). La mezcla de reaccion se agito a 70 °C durante 18 horas. La suspension se filtro y el filtrado se evaporo al vaclo. El residuo se purifico mediante cromatografla ultrarrapida (sllice, /so-hexano/EtOAc) para obtener el compuesto del tltulo. RMN 1H (CDCb, 400 MHz) 8 7,22 (2H, d, J=5,9 Hz), 3,94 (2H, s), 3,21 (2H, s), 2,41 (3H, s), 1,48 (9H, s).
Etapa 2: 2-((2,6-difluoro-4-(N'-hidroxicarbamimidoil)bencil)(metil)amino)acetato de terc-butilo
Se calento a 75 °C durante 18 horas una solucion de 2-((4-ciano-2,6-difluorobencil)(metil)amino)acetato de terc- butilo (0,281 g; 0,95 mmol) e hidroxilamina acuosa al 50 % (0,32 ml) en etanol (1,3 ml). El solvente se evaporo al vaclo. El residuo se repartio entre EtOAc y agua y, a continuacion, la fase organica se paso a traves de una frita hidrofoba. El solvente se evaporo al vaclo para obtener el compuesto del tltulo. RMN 1H (CDCb, 400 MHz) 8 7,227,13 (2H, m), 4,81 (2H, sa), 3,91 (2H, s), 3,20 (2H, s), 2,40 (3H, s), 1,48 (9H, s).
Los ejemplos marcados con * son ejemplos de referencia.
Ejemplo 14: N-metil-N-(3-{5-[2,-metil-2-(trifluorometil)bifenil-4-il]-1,2,4-oxadiazol-3-il}bencil}glicina
OH
Se prepare N-metil-N-(3-{5-[2'-metil-2-(trifluorometil)bifenil-4-il]-1,2,4-oxadiazol-3-il}bencil)glicinato de terc-butilo siguiendo el procedimiento general 7 partiendo del compuesto intermedio 21 y del compuesto intermedio 5. Se hidrolizo siguiendo el procedimiento 8, obteniendose el compuesto del tltulo como un polvo de color blanco. RMN 5 1H (DMSO-d6, 300 MHz) 8 8,55 (s, 1H), 8,50 (d, J=8,0 Hz, 1H), 8,36 (s, 1H), 8,23 (d, J=7,8 Hz, 1H), 7,83 (d,
J=7,8 Hz, 1H), 7,78-7,63 (m, 2H), 7,42-7,12 (m, 3H), 7,17 (d, J=7,4 Hz, 1H), 4,51 (s, 2H), 4,12 (s, 2H), 2,81 (s, 3H), 2,02 (s, 3H). HPLC (metodo A), tR 4,20 min (pureza: 99,48 %). Analisis de CHN: [C26H22O3F3N3-HCl] Calculado: C 60,29 %; H 4,48 %; N 8,11 %; Encontrado: C 60,08 %, H 4,42 %, N 7,91 %.
* Ejemplo 49: N-(3-{5-[2-(metoximetil)-2,-(trifluorometil)bifenil-4-il]-1,2,4-oxadiazol-3-il}bencil)-N-
10 metilglicina, sal clorhidrato
Se prepare N-(3-{5-[2-(metoximetil)-2'-(trifluorometil)bifenil-4-il]-1,2,4-oxadiazol-3-il}bencil)-N-metilglicinato de terc- butilo siguiendo el procedimiento general 3 partiendo del compuesto intermedio 21 y del compuesto intermedio 47. Tras la purificacion mediante cromatografla ultrarrapida (sllice, heptano/EtOAc), se hidrolizo el derivado ester 15 siguiendo el procedimiento general 8. Tras la purificacion mediante precipitacion a partir de una mezcla de ACN y agua, se obtuvo el compuesto del tltulo como un polvo de color blanco (876 mg; 70 % en 2 etapas). HPLC (metodo A), tR 4,1 min (pureza: 99,6 %). CL/EM (metodo B): 510,1 (M-H)-; 512,0 (M+H)+. Punto de fusion: 207 °C. Analisis elemental: [C27H24N3O4F3- HCl] Corregido: C 59,18 %, H 4,60 %, N 7,67 %, Cl 6,47 %; Encontrado: C 58,96 %, H 4,52 %, N 7,78 %, Cl 6,69 %. RMN 1H (DMSO-d6, 300 MHz) 8 8,35 (s, 1H), 8,33 (d, J=1,8 Hz, 1H), 8,22 (d, J=7,8 Hz, 20 1H), 8,17 (dd, J=8,0; 1,8 Hz, 1H), 7,92 (d, J=7,5 Hz, 1H), 7,84-7,68 (m, 4H), 7,48 (d, J=8,0 Hz, 1H), 7,43 (d,
J=7,3 Hz, 1H), 4,51 (s, 2H), 4,22 (d, J=13,0 Hz, 1H), 4,13 (d, J=13,0 Hz, 1H), 4,12 (s, 2H), 3,25 (s, 3H), 2,82 (s, 3H).
* Ejemplo 50: N-(3-{5-[4'-fluoro-2-(metoximetil)-2'-(trifluorometil)bifenil-4-il]-1,2,4-oxadiazol-3-il}bencil)-N- metilglicina, sal clorhidrato
25 Se prepare N-(3-{5-[4'-fluoro-2-(metoximetil)-2'-(trifluorometil)bifenil-4-il]-1,2,4-oxadiazol-3-il}bencil)-N-metilglicinato de terc-butilo siguiendo el procedimiento general 15 partiendo del compuesto intermedio 41 y de acido 4-fluoro-2- (trifluorometil)bencenoboronico (Fluorochem 33830). Tras la purificacion mediante cromatografla ultrarrapida (sllice, cHex/EtOAc), se hidrolizo el derivado ester siguiente el procedimiento general 8. Tras la purificacion mediante precipitacion a partir de ACN, se obtuvo el compuesto del tltulo como un polvo de color blanco. HPLC (metodo A), 30 tR 3,2 min (pureza: 97,3 %). CL/EM (metodo B): 528,1 (M-H)-; 530,0 (M+H)+. RMN 1H (DMSO-d6, 300 MHz) 8 8,33 (m, 2H), 8,22 (d, J=7,8 Hz, 1H), 8,18 (dd, J=7,9; 1,6 Hz, 1H), 7,86-7,79 (m, 2H), 7,75-7,64 (m, 2H), 7,51 (m, 2H), 4,50 (s, 2H), 4,22 (d, J=13,0 Hz, 1H), 4,15 (d, J=13,0 Hz, 1H), 4,11 (s, 2H), 3,25 (s, 3H), 2,81 (s, 3H). *
* Ejemplo 64: N-(3-fluoro-5-{5-[2'-metil-2-(trifluorometil)bifenil-4-il]-1,2,4-oxadiazol-3-il}bencil)-N-
metilglicina, sal clorhidrato
5
10
15
20
25
30
Se preparo N-(3-fluoro-5-{5-[2'-metil-2-(trifluorometil)bifenil-4-il]-1,2,4-oxadiazol-3-il}bencil)-N-metilglicinato de terc- butilo siguiendo el procedimiento general 3 partiendo del compuesto intermedio 5 y del compuesto intermedio 24. Se hidrolizo siguiendo el procedimiento general 8 para obtener el compuesto del tltulo como un polvo de color blanco. RMN 1H (DMSO-da, 300 MHz) 8 8,56 (m, 1H), 8,51 (dd, J=7,6 Hz, 1H), 8,20 (m, 1H), 8,01 (m, 1H), 7,71 (m, 2H), 7,43-7,34 (m, 2H), 7,17 (m, 1H), 4,45 (sa, 2H), 4,07 (sa, 2H), 2,79 (s, 3H), 2,03 (s, 3H). CL/EM (metodo B): 500,2 (M+H)+, 498,2 (M-H)-. HPLC (metodo A), tR 4,92 min (pureza: 99,8 %).
* Ejemplo 69: N-etil-N-(3-{5-[2,-metil-2-(trifluorometil)bifenil-4-il]-1,2,4-oxadiazol-3-il}bencil)-beta-alanina, sal clorhidrato
Se preparo N-etil-N-(3-{5-[2'-metil-2-(trifluorometil)bifenil-4-il]-1,2,4-oxadiazol-3-il}bencil)-beta-alaninato de terc-butilo siguiendo el procedimiento general 3 partiendo del compuesto intermedio 5 y del compuesto intermedio 37. Se desprotegio siguiendo el procedimiento general 8 para obtener el compuesto del tltulo como un polvo de color blanco. RMN 1H (DMSO-d6, 300 MHz) 8 12,75 (sa, 1H), 10,30 (sa, 1H), 8,55 (m, 1H), 8,51 (d, J=8,0 Hz, 1H), 8,23 (d, J=7,9 Hz, 1H), 7,90 (m, 1H), 7,72 (m, 2H), 7,43-7,33 (m, 2H) 7,29 (m, 1H), 7,17 (m, 1H), 4,50 (sa, 2H), 3,29 (m, 2H), 3,13 (m, 2H), 2,83 (m, 2H), 2,03 (s, 3H), 1,28 (t, J=7,2 Hz, 3H). CL/EM (metodo B): 510,2 (M+H)+, 508,2 (M-H)'. HPLC (metodo A), tR 4,90 min (pureza: 99,6 %).
* Ejemplo 70: N-(2-fluoro-4-{5-[2'-metil-2-(trifluorometil)bifenil-4-il]-1,2,4-oxadiazol-3-il}bencil)-N-
metilglicina, sal clorhidrato
F
Se preparo N-(2-fluoro-4-{5-[2'-metil-2-(trifluorometil)bifenil-4-il]-1,2,4-oxadiazol-3-il}bencil)-N-metilglicinato de terc- butilo siguiendo el procedimiento general 4 partiendo del compuesto intermedio 5 y del compuesto intermedio 32. Se desprotegio siguiendo el procedimiento general 8, obteniendose el compuesto del tltulo como un polvo de color blanco. RMN 1H (DMSO-d6, 300 MHz) 8 8,56 (d, J=1,3 Hz, 1H), 8,51 (dd, J=7,9; 1,5 Hz, 1H), 8,09 (dd, J=8,0; 1,5 Hz, 1H), 8,02 (dd, J=10,2; 1,3 Hz, 1H), 7,91 (t, J=7,7 Hz, 1H), 7,69 (d, J=8,0 Hz, 1H), 7,42-7,26 (m, 3H), 7,17 (d, J=7,5 Hz, 1H), 4,50 (s, 2H), 4,13 (s, 2H), 2,81 (s, 3H), 2,03 (s, 3H). CL/EM (metodo B): 498,1 (M-H)-; 500,0 (M+H)+. HPLC (metodo A), tR 4,35 min (pureza: 99,9 %). Analisis elemental: [C26H21N3O3F4-HCl-H2O] Corregido: C 56,38 %, H 4,37 %, N 7,59 %, Cl 6,40 %; Encontrado: C 56,18 %, H 4,29 %, N 7,51 %, Cl 6,12. Punto de fusion: 183 °C *
* Ejemplo 71: N-(2-fluoro-4-{5-[2'-metil-2-(trifluorometil)bifenil-4-il]-1,2,4-oxadiazol-3-il}bencil)-N-metil-beta- alanina, sal clorhidrato
Se preparo N-(2-fluoro-4-{5-[2'-metil-2-(trifluorometil)bifenil-4-il]-1,2,4-oxadiazol-3-il}bencil)-N-metil-beta-alaninato de terc-butilo siguiendo el procedimiento general 4 partiendo del compuesto intermedio 5 y del compuesto intermedio
5
10
15
20
25
30
39. Se desprotegio siguiendo el procedimiento general 8, obteniendose el compuesto del tltulo como un polvo de color blanco. RMN 1H (DMSO-d6, 300 MHz) 8 8,56 (d, J=1,3 Hz, 1H), 8,51 (dd, J=8,0; 1,4 Hz, 1H), 8,09 (dd, J=8,0; 1,5 Hz, 1H), 8,06-7,97 (m, 2H), 7,68 (d, J=8,1 Hz, 1H), 7,42-7,26 (m, 3H), 7,17 (d, J=7,5 Hz, 1H), 4,50 (s, 2H), 3,45 (sa, 2H), 2,90 (t, J=7,5 Hz, 2H), 2,75 (s, 3H), 2,03 (s, 3H). CL/EM (metodo A): 512,1 (M-H)-; 514,0 (M+H)+. HPLC (metodo A), tR 4,36 min (pureza: 99,6 %).
Ejemplo 81: N-metil-N-(4-{5-[2,-metil-2-(trifluorometil)bifenil-4-il]-1,2,4-oxadiazol-3-il}bencil)glicina, sal clorhidrato
O
terc-butilo siguiendo el procedimiento general 4 partiendo del compuesto intermedio 5 y del compuesto intermedio 31. Se hidrolizo siguiendo el procedimiento general 8, obteniendose el compuesto del tltulo como un polvo de color blanco. RMN 1H (DMSO-d6, 300 MHz) 5 8,55 (s, 1H), 8,51 (d, J=8,0 Hz, 1H), 8,23 (d, J=8,1 Hz, 2H), 7,80 (d, J=8,1 Hz, 2H), 7,68 (d, J=7,9 Hz, 1H), 7,42-7,26 (m, 3H), 7,17 (d, J=7,3 Hz, 1H), 4,46 (s, 2H), 4,10 (s, 2H), 2,80 (s, 3H), 2,03 (s, 3H). CL/EM (metodo B): 480,1 (M-H)-; 482,0 (M+H)+. HPLC (metodo A), tR 4,76 min (pureza: 100,0 %).
* Ejemplo 89: N-(4-{5-[2'-fluoro-2-(trifluorometil)bifenil-4-il]-1,2,4-oxadiazol-3-il}bencil)-N-metilglicina, sal clorhidrato
Se preparo N-(4-{5-[2'-fluoro-2-(trifluorometil)bifenil-4-il]-1,2,4-oxadiazol-3-il}bencil)-N-metilglicinato de terc-butilo siguiendo el procedimiento general 4 partiendo del compuesto intermedio 56 y del compuesto intermedio 31. Se hidrolizo siguiendo el procedimiento general 8, obteniendose el compuesto del tltulo como un polvo de color blanco. RMN 1H (DMSO-d6, 300 MHz) 5 8,58-8,52 (m, 2H), 8,24 (d, J=8,3 Hz, 2H), 7,83-7,77 (m, 3H), 7,62-7,54 (m, 1H), 7,46-7,32 (m, 3H), 4,46 (s, 2H), 4,10 (s, 2H), 2,81 (s, 3H). CL/EM (metodo B): 484,1 (M-H)-; 486,0 (M+H)+. HPLC (metodo A), tR 4,08 min (pureza: 99,9 %).
* Ejemplo 95: N-(2-fluoro-4-{5-[2-(metoximetil)-2'-(trifluorometil)bifenil-4-il]-1,2,4-oxadiazol-3-il}bencil)-N- metilglicina, sal clorhidrato
F F
OH
Se preparo N-(2-fluoro-4-{5-[2-(metoximetil)-2'-(trifluorometil)bifenil-4-il]-1,2,4-oxadiazol-3-il}bencil)-N-metilglicinato de terc-butilo siguiendo el procedimiento general 3 partiendo del compuesto intermedio 47 y del compuesto intermedio 32. Se hidrolizo siguiendo el procedimiento general 8 para obtener el compuesto del tltulo como un polvo de color blanco. CL/EM (metodo B): 530,0 (M+H)+, 528,1 (M-H)-. HPLC (metodo A), tR 4,14 min (pureza: 98,9 %).
Ejemplo 97: N-(4-{5-[2-(metoximetil)-2'-(trifluorometil)bifenil-4-il]-1,2,4-oxadiazol-3-il}bencil)-N-metilglicina, sal clorhidrato
Se prepare N-(4-{5-[2-(metoximetil)-2'-(trifluorometil)bifenil-4-il]-1,2,4-oxadiazol-3-il}bencil)-N-metilglicinato de terc- butilo siguiendo el procedimiento general 3 partiendo del compuesto intermedio 47 y del compuesto intermedio 31. Se hidrolizo siguiendo el procedimiento general 8 para obtener el compuesto del tltulo como un polvo blanquecino. 5 CL/EM (metodo B): 512,0 (M+H)+, 510,0 (M-H)-. HPLC (metodo A), tR 4,04 min (pureza: 98,8 %).
* Ejemplo 100: N-metil-N-(4-{5-[2-metil-2,-(trifluorometil)bifenil-4-il]-1,2,4-oxadiazol-3-il}bencil)glicina, sal clorhidrato
OH
O
Se prepare N-metil-N-(4-{5-[2-metil-2'-(trifluorometil)bifenil-4-il]-1,2,4-oxadiazol-3-il}bencil)glicinato de terc-butilo 10 siguiendo el procedimiento general 3 partiendo del compuesto intermedio 50 y del compuesto intermedio 31. Se desprotegio siguiendo el procedimiento general 8, obteniendose el compuesto del tltulo como un polvo de color blanco (433 mg; 75 %). RMN 1H (DMSO-da, 300 MHz) 5 8,25-8,16 (m, 3H), 8,12-8,05 (m, 1H), 7,91 (d, J=7,2 Hz, 1H), 7,84-7,76 (m, 3H), 7,74-7,65 (m, 1H), 7,47-7,37 (m, 2H), 4,47 (s, 2H), 4,11 (s, 2H), 2,81 (s, 3H), 2,12 (s, 3H). CL/EM (metodo B): 480,1 (M-H)'; 482,0 (M+H)+. HPLC (metodo A), tR 4,18 min (pureza 99,8 %). Analisis elemental: 15 [C26H22N3O3F3- HCl] Calculado: C 60,29 %, H 4,48 %, N 8,11 %, Cl 6,85 %; Encontrado: C 60,14 %, H 4,36 %, N
8,12 %, Cl 6,81 %.
* Ejemplo 101: N-metil-N-(3-{5-[2-metil-2'-(trifluorometil)bifenil-4-il]-1,2,4-oxadiazol-3-il}bencil)glicina, sal clorhidrato
OH
20 Se prepare N-isopropil-N-(3-{5-[2'-metil-2-(trifluorometil)bifenil-4-il]-1,2,4-oxadiazol-3-il}bencil)-beta-alaninato de terc- butilo siguiendo el procedimiento general 3 partiendo del compuesto intermedio 50 y del compuesto intermedio 21. Se hidrolizo siguiendo el procedimiento general 8 para obtener el compuesto del tltulo como un polvo de color blanco. RMN 1H (DMSO-d6, 300 MHz) 8 8,33 (sa, 1H), 8,21 (m, 1H), 8,16 (m, 1H), 8,07 (m, 1H), 8,01 (m, 1H), 7,847,65 (m, 4H), 7,42 (m, 2H), 4,50 (sa, 2H), 4,12 (sa, 2H), 2,82 (s, 3H), 2,12 (s, 3H). CL/EM (metodo B): 482,0 (M+H)+, 25 480,2 (M-H)-. HPLC (metodo A), tR 4,17 min (pureza: 99,7 %).
Ejemplo 103: acido 2-(metil(3-metil-4-(5-(2'-metil-2-(trifluorometil)bifenil-4-il)-1,2,4-oxadiazol-3-il)bencil)- amino)acetico
El compuesto del tltulo se preparo siguiendo el procedimiento descrito en el ejemplo 102, pero utilizando el compuesto intermedio 5 en la etapa 1. Se aislo como un solido de color blanco. RMN 1H (DMSO-d6, 400 MHz) 8 8,60-8,54 (1H, m), 8,56-8,49 (1H, m), 8,07 (1H, d, J=7,7 Hz), 7,69 (1H, d, J=7,9 Hz), 7,46-7,35 (4H, m), 7,35-7,29 (1H, m), 7,21 (1H, d, J=7,5 Hz), 3,78 (2H, s), 3,27 (2H, s), 2,67 (3H, s), 2,34 (3H, s), 2,06 (3H, s). CL/EM (metodo A): 5 496 (M+H)+. HPLC (metodo F), tR 3,33 min (pureza: 97,8 %).
* Ejemplo 104: N-(3-fluoro-5-{5-[2-metil-2,-(trifluorometil)bifenil-4-il]-1,2,4-oxadiazol-3-il}bencil)-N-
metilglicina, sal clorhidrato
Se preparo N-(3-fluoro-5-{5-[2-metil-2'-(trifluorometil)bifenil-4-il]-1,2,4-oxadiazol-3-il}bencil)-N-metilglicinato de terc- 10 butilo siguiendo el procedimiento general 4 partiendo del compuesto intermedio 50 y del compuesto intermedio 24. Se hidrolizo siguiendo el procedimiento general 8, obteniendose el compuesto del tltulo como un polvo de color blanco. RMN 1H (DMSO-d6, 300 MHz) 5 8,19 (s, 2H), 8,08 (dd, J=7,9; 1,5 Hz, 1H), 7,98 (d, J=8,2 Hz, 1H), 7,92 (d, J=7,6 Hz, 1H), 7,84-7,65 (m, 3H), 7,47-7,37 (m, 2H), 4,49 (s, 2H), 4,11 (s, 2H), 2,82 (s, 3H), 2,12 (s, 3H). CL/EM (metodo A): 498,2 (M-H)-; 500,1 (M+H)+. HPLC (metodo A), tR 4,34 min (pureza: 99,7 %). Punto de fusion: 207 °C.
15 Ejemplo 109: N-(4-{5-[2'-etil-2-(trifluorometil)bifenil-4-il]-1,2,4-oxadiazol-3-il}bencil)-N-metilglicina, sal clorhidrato
Se preparo N-(4-{5-[2'-etil-2-(trifluorometil)bifenil-4-il]-1,2,4-oxadiazol-3-il}bencil)-N-metilglicinato de terc-butilo siguiendo el procedimiento general 3 partiendo del compuesto intermedio 51 y del compuesto intermedio 31. Se
20 hidrolizo siguiendo el procedimiento general 8 para obtener el compuesto del tltulo como un polvo de color blanco. RMN 1H (DMSO-d6, 300 MHz) 8 8,54 (sa, 1H), 8,50 (m, 1H), 8,23 (d, J=8,3 Hz, 2H), 7,79 (d, J=8,3 Hz, 2H), 7,70 (d, J=8,1 Hz, 1H), 7,47-7,37 (m, 2H), 7,29 (m, 1H), 7,15 (d, J=7,6 Hz, 1H), 4,45 (sa, 2H), 4,08 (sa, 2H), 2,79 (s, 3H), 2,44-2,17 (m, 2H), 1,13 (t, J=7,6 Hz, 3H). CL/EM (metodo B): 496,0 (M+H)+, 494,2 (M-H)'. HPLC (metodo A), tR 4,44 min (pureza: 99,8 %).
25 * Ejemplo 110: N-(4-{5-[2'-etil-2-(trifluorometil)bifenil-4-il]-1,2,4-oxadiazol-3-il}-2-fluorobencil)-N-
metilglicina, sal clorhidrato
Se preparo N-(4-{5-[2'-etil-2-(trifluorometil)bifenil-4-il]-1,2,4-oxadiazol-3-il}-2-flurobencil)-N-metilglicinato de terc- butilo siguiendo el procedimiento general 3 partiendo del compuesto intermedio 51 y del compuesto intermedio 32. 30 Se hidrolizo siguiendo el procedimiento general 8 para obtener el compuesto del tltulo como un polvo de color blanco. RMN 1H (DMSO-d6, 300 MHz) 8 8,54 (d, J=1,4 Hz, 1H), 8,50 (dd, J=8,0; 1,4Hz, 1H), 8,08 (dd, J=7,9; 1,5 Hz, 1H), 8,01 (dd, J=10,2; 1,5 Hz, 1H), 7,93 (m, 1H), 7,70 (d, J=8,0 Hz, 1H), 7,41 (m, 2H), 7,28 (m, 1H), 7,15 (d,
J=7,6 Hz, 1H), 4,52 (s, 2H), 4,14 (s, 2H), 2,82 (s, 3H), 2,45-2,17 (m, 2H), 1,03 (t, J=7,6 Hz, 3H). CL/EM (metodo B): 514,0 (M+H)+, 512,2 (M-H)-. HPLC (metodo A), tR 4,50 min (pureza: 99,8 %).
* Ejemplo 111: N-(2-cloro-5-{5-[2,-metil-2-(trifluorometil)bifenil-4-il]-1,2,4-oxadiazol-3-il}bencil)-N-
metilglicina, sal clorhidrato
5
O-N
Cl
Se preparo N-(2-cloro-5-{5-[2'-metil-2-(trifluorometil)bifenil-4-il]-1,2,4-oxadiazol-3-il}bencil)-N-metilglicinato de terc- butilo siguiendo el procedimiento general 3 partiendo del compuesto intermedio 5 y del compuesto intermedio 60. Se hidrolizo siguiendo el procedimiento general 8 para obtener el compuesto del tltulo como un polvo de color blanco. RMN 1H (DMSO-d6, 300 MHz) 8 8,53 (m, 3H), 8,22 (m, 2H), 7,84 (d, J=8,3 Hz, 1H), 7,69 (d, J=8,0 Hz, 1H), 10 7,43-7,33 (m, 2H), 7,29 (m, 1H), 7,17 (m, 1H), 4,59 (m, 2H), 4,17 (m, 2H), 2,81 (s, 3H), 2,02 (s, 3H). CL/EM (metodo
B): 516,0 (M+H)+, 514,1 (M-H)-. HPLC (metodo A), tR 4,39 min (pureza: 99,6 %).
* Ejemplo 112: N-(2-fluoro-3-{5-[2'-metil-2-(trifluorometil)bifenil-4-il]-1,2,4-oxadiazol-3-il}bencil)-N-
metilglicina, sal clorhidrato
O-N
15 Se preparo N-(2-fluoro-3-{5-[2'-metil-2-(trifluorometil)bifenil-4-il]-1,2,4-oxadiazol-3-il}bencil)-N-metilglicinato de terc- butilo siguiendo el procedimiento general 3 partiendo del compuesto intermedio 5 y del compuesto intermedio 58. Se hidrolizo siguiendo el procedimiento general 8 para obtener el compuesto del tltulo como un polvo de color blanco. RMN 1H (DMSO-d6, 300 MHz) 8 8,55 (m, 1H), 8,51 (m, 1H), 8,30 (m, 1H), 7,91 (m, 1H), 7,68 (d, J=8,0 Hz, 1H), 7,58 (m, 1H), 7,42-7,33 (m, 2H), 7,29 (m, 1H), 7,17 (m, 1H), 4,53 (m, 2H), 4,16 (m, 2H), 2,81 (s, 3H), 2,02 (s, 20 3H). CL/EM (metodo B): 500,0 (M+H)+, 498,1 (M-H)-. HPLC (metodo A), tR 4,22 min (pureza: 100 %).
Ejemplo 113: acido (isopropil-{4-[5-(2'-metil-2-trifluorometil-bifenil-4-il)-[1,2,4]oxadiazol-3-il]-bencil}-amino)- acetico
Etapa 1: (4-(5-(2'-metil-2-(trifluorometil)bifenil-4-il)-1,2,4-oxadiazol-3-il)fenil)metanol
25 A una solucion del compuesto intermedio 5 (4,32 g; 15,4 mmol) en MeCH (15 ml) se anadio 1 -etil-3-dimetil aminopropilcarbodiimida (4,14 g; 21,6 mmol) seguido del compuesto intermedio 72 (2,81 g; 17,0 mmol). La mezcla se agito a TA durante 18 horas y, a continuacion, se anadio piridina (5 ml). La mezcla se calento mediante irradiacion con microondas a 150 °C durante 30 minutos. El solvente se elimino al vaclo y el residuo se repartio
10
15
20
25
30
35
entre DCM y H2O. Las capas se separaron, la capa organica se lavo con H2O y la mezcla se paso a traves de una frita hidrofoba. El solvente se elimino al vacio y el residuo se recristalizo a partir de EtOAc y petroleo para obtener el compuesto del titulo como un solido de color blanco. RMN 1H (CDCl3, 400 MHz) 8 8,63 (1H, s), 8,40 (1H, d, J=8,0 Hz), 8,20 (2H, d, J=8,0 Hz), 7,54 (2H, d, J=7,9 Hz), 7,47 (1H, d, J=7,9 Hz), 7,38-7,21 (3H, m), 7,16 (1H, d, J=7,5 Hz), 4,81 (2H, d, J=5,7 Hz), 2,14-1,94 (3H, m). CL/EM (metodo A): 411 (M+H)+. HPLC (metodo G), tR 4,50 min (pureza: 97,9 %).
Etapa 2: 4-(5-(2'-metil-2-(trifluorometil)bifenil-4-il)-1,2,4-oxadiazol-3-il)benzaldel"Hdo
Se disolvio (4-(5-(2'-metil-2-(trifluorometil)bifenil-4-il)-1,2,4-oxadiazol-3-il)fenil)metanol (5,89 g; 14,4 mmol) en dioxano (100 ml) y se anadio dioxido de manganeso (10 g; 116,0 mmol). La mezcla se calento a 70 °C durante toda la noche y, a continuacion, el solvente se elimino al vacio. El residuo se trituro con una mezcla de petroleo/eter dietilico para obtener el compuesto del titulo como un solido de color blanco (5,72 g; 97 %). RMN 1H (CDCb, 400 MHz) 5 10,13 (1H, s), 8,64 (1H, s), 8,43-8,36 (3H, m), 8,06 (2H, d, J=8,0 Hz), 7,49 (1H, d, J=8,0 Hz), 7,38-7,21 (3H, m), 7,15 (1H, d, J=7,6 Hz), 2,07 (3H, s). CL/EM (metodo A): 409 (M+H)+. HPLC (metodo G), tR 4,89 min (pureza: 95,7 %).
Etapa 3: acido (isopropil-{4-[5-(2'-metil-2-trifluorometil-bifenil-4-il)-[1,2,4]oxadiazol-3-il]-bencil}-amino)-acetico
Se anadio cianoborohidruro sodico (18 mg; 0,28 mmol) a una solucion de 4-(5-(2'-metil-2-(trifluorometil)bifenil-4-il)- 1,2,4-oxadiazol-3-il)benzaldehido (0,25 mmol) y acido 2-aminoacetico (23 mg; 0,25 mmol) en una mezcla de metanol (3 ml), DCM (3 ml) y acido acetico (38 pl). La mezcla se agito a temperatura ambiente durante toda la noche y se filtro a traves de una frita con presion positiva. Al filtrado se le anadio acetona (67 mg; 1,5 mmol) seguido por la adicion de AcOH hasta que el pH estuvo en el intervalo de 3-4 (240 ml). A la mezcla resultante se le anadio cianoborohidruro sodico (79 mg; 1,26 mmol), la mezcla se agito durante 16 horas, el solvente se elimino al vacio y el residuo se purifico mediante HPLC en fase inversa para obtener el compuesto del titulo como un solido de color blanco. RMN 1H (DMSO-d6, 400 MHz) 5 8,55-8,53 (1H, m), 8,53-8,48 (1H, m), 8,13-8,09 (2H, m), 7,71 (1H, d, J=7,9 Hz), 7,63 (2H, d, J=8,0 Hz), 7,37-7,34 (2H, m), 7,28-7,24 (1H, m), 7,15 (1H, d, J=7,5 Hz), 4,02 (2H, s), 3,243,22 (3H, m), 2,01 (3H, s), 1,11 (6H, d, J=6,5 Hz). CL/EM (metodo A): 510 (M+H)+. HPLC (metodo F), tR 3,39 min (pureza: 99,1 %).
* Ejemplo 114: N-(2-fluoro-3-{5-[2-(metoximetil)-2,-(trifluorometil)bifenil-4-il]-1,2,4-oxadiazol-3-il}bencil)- N-metilglicina, sal clorhidrato
Se preparo N-(2-fluoro-3-{5-[2-(methoximetil)-2'-(trifluorometil)bifenil-4-il]-1,2,4-oxadiazol-3-il}bencil)-N-metilglicinato de terc-butilo siguiendo el procedimiento general 3 partiendo del compuesto intermedio 47 y del compuesto intermedio 58. Se hidrolizo siguiendo el procedimiento general 8 para obtener el compuesto del titulo como un polvo de color blanco. RMN 1H (DMSO-d6, 300 MHz) 8 8,33 (d, J=1,7 Hz, 1H), 8,28 (m, 1H), 8,18 (dd, J=8,0; 1,7, 1H), 7,90 (m, 2H), 7,79 (m,1H), 7,71 (m, 1H), 7,57 (m, 1H), 7,48 (d, J=8,0 Hz, 1H), 7,43 (d, J=7,3 Hz, 1H), 4,52 (s, 2H), 4,244,10 (m, 4H), 3,24 (s, 3H), 2,81 (s, 3H). CL/EM (metodo B): 530,1 (M+H)+, 528,2 (M-H)'. HPLC (metodo A), tR 4,22 min (pureza: 100 %). *
* Ejemplo 115: N-(4-{5-[2-etoxi-2'-(trifluorometil)bifenil-4-il]-1,2,4-oxadiazol-3-il}bencil)-N-metilglicina, sal clorhidrato
O
Se preparo N-(4-{5-[2-etoxi-2'-(trifluorometil)bifenil-4-il]-1,2,4-oxadiazol-3-il}bencil)-N-metilglicinato de terc-butilo siguiendo el procedimiento general 4 partiendo del compuesto intermedio 52 y del compuesto intermedio 31. Se desprotegio siguiendo el procedimiento general 8, obteniendose el compuesto del tltulo como un polvo de color blanco. RMN 1H (DMSO-da, 300 MHz) 5 8,21 (d, J=8,3 Hz, 2H), 7,85 (dd, J=7,7, 1,5 Hz, 2H), 7,81-7,71 (m, 4H), 7,65 5 (t, J=7,7 Hz, 1H), 7,44 (d, J=7,9 Hz, 1H), 7,39 (d, J=7,7 Hz, 1H), 4,44 (s, 2H), 4,25-4,04 (m, 4H), 2,79 (s, 3H), 1,18 (t,
J=6,9 Hz, 3H). CL/EM (metodo B): 510,1 (M-H)-; 512,0 (M+H)+. HPLC (metodo A), tR 4,27 min (pureza: 100 %). Punto de fusion: 210 °C
* Ejemplo 116: acido 4-[metil(4-{5-[2'-metil-2-(trifluorometil)bifenil-4-il]-1,2,4-oxadiazol-3-il}bencil)- aminojbutanoico, sal clorhidrato
10
Se preparo 4-[metil(4-{5-[2'-metil-2-(trifluorometil)bifenil-4-il]-1,2,4-oxadiazol-3-il}bencil)amino]butanoato de terc- butilo siguiendo el procedimiento general 3 partiendo del compuesto intermedio 5 y del compuesto intermedio 61. Se hidrolizo siguiendo el procedimiento general 8 para obtener el compuesto del tltulo como un polvo de color blanco. RMN 1H (DMSO-d6, 300 MHz) 8 12,31 (sa, 1H), 10,92 (sa, 1H), 8,53 (sa, 1H), 8,50 (d, J=8,5 Hz,1H), 8,22 (d, 15 J=8,1 Hz, 2H), 7,86 (d, J=8,1 Hz, 2H), 7,67 (d, J=7,9 Hz, 1H), 7,42-7,32 (m, 2H), 7,32-7,25 (m, 1H), 7,20-7,12 (m,
1H), 4,42 (sa, 2H), 3,08 (sa, 2H), 2,68 (s, 3H), 2,34 (m, 2H), 2,02 (s, 3H), 1,98 (m, 2H). CL/EM (metodo B): 510,1 (M+H)+, 508,2 (M-H)-. HPLC (metodo A), tR 4,30 min (pureza: 99,6 %).
Ejemplo 117: acido (isopropil-{3-[5-(2'-metil-2-trifluorometil-bifenil-4-il)-[1,2,4]oxadiazol-3-il]-bencil}-amino)- acetico
20
El compuesto del tltulo se preparo siguiendo el procedimiento descrito en el ejemplo 113, pero utilizando el compuesto intermedio 70 en la etapa 1. Se aislo como un aceite de color amarillo palido. CL/EM (metodo B): 508 (M-H)-; 510 (M+H)+. HPLC (metodo F), tR 3,41 min (pureza: 99,2 %).
* Ejemplo 123: N-(2-fluoro-4-{5-[2-metil-2'-(trifluorometil)bifenil-4-il]-1,2,4-oxadiazol-3-il}bencil)-N-
25 metilglicina
El compuesto del tltulo se preparo siguiendo el procedimiento general 4 partiendo del compuesto intermedio 50 y del compuesto intermedio 32. Se desprotegio durante el calentamiento con microondas obteniendose el compuesto del tltulo mediante filtracion como un polvo de color beis. RMN 1H (DMSO-d6, 300 MHz) 5 12,22 (sa, 1H), 8,17 (s, 30 1H), 8,07 (dd, J=7,9; 1,4 Hz, 1H), 7,96 (dd, J=8,0; 1,6 Hz, 1H), 7,91 (d, J=7,8 Hz, 1H), 7,84 (dd, J=10,6; 1,5 Hz, 1H),
7,78 (d, J=7,5 Hz, 1H), 7,74-7,65 (m, 2H), 7,46-7,38 (m, 2H), 3,84 (s, 2H), 3,30 (s, 2H), 2,33 (s, 3H), 2,12 (s, 3H). CL/EM (metodo B): 498,2 (M-H)-; 500,1 (M+H)+. HPLC (metodo A), tR 4,27 min (pureza: 99,6 %). *
* Ejemplo 129: acido 2-((4-(5-(2-(trifluorometil)-2'-metilbifenil-4-il)-1,2,4-oxadiazol-3-il)-2-cloro-
bencil)(metil)amino)acetico
El compuesto del tltulo se preparo siguiendo el procedimiento descrito en el ejemplo 128, pero utilizando el compuesto intermedio 5 en la etapa 1. Se obtuvo como un solido de color blanco. RMN 1H (DMSO-d6, 400 MHz) 8 8,54 (1H, s), 8,50 (1H, d, J=8,1 Hz), 8,10-8,04 (2H, m), 7,83 (1H, d, J=7,9 Hz), 7,65 (1H, d, J=8,0 Hz), 7,41-7,34 (2H, 5 m), 7,30 (1H, td, J=3,8; 2,2 Hz), 7,17 (1H, d, J=7,6 Hz), 3,84 (2H, s), 3,00 (2H, s), 2,31 (3H, s), 2,02 (3H, s). CL/EM
(metodo A): 516 (M+H)+. HPLC (metodo F), tR 3,45 min (pureza: 98,7 %).
* Ejemplo 134: N-(4-{5-[2-cloro-2,-(trifluorometil)bifenil-4-il]-1,2,4-oxadiazol-3-il}-2-fluorobencil)-N-
metilglicina, sal clorhidrato
10 Se preparo N-(4-{5-[2-cloro-2'-(trifluorometil)bifenil-4-il]-1,2,4-oxadiazol-3-il}-2-flurobencil)-N-metilglicinato de terc-
butilo siguiendo el procedimiento general 3 partiendo del compuesto intermedio 54 y del compuesto intermedio 32. Se desprotegio siguiendo el procedimiento general 8, obteniendose el compuesto del tltulo como un polvo de color blanco. CL/EM (metodo B): 518,3 (M-H)-; 520,2 (M+H)+. HPLC (metodo A), tR 4,25 min (pureza: 99,8 %).
* Ejemplo 135: N-(4-{5-[2-cloro-2'-(trifluorometil)bifenil-4-il]-1,2,4-oxadiazol-3-il}bencil)-N-metilglicina, 15 sal clorhidrato
Se preparo N-(4-{5-[2-cloro-2'-(trifluorometil)bifenil-4-il]-1,2,4-oxadiazol-3-il}bencil)-N-metilglicinato de terc-butilo siguiendo el procedimiento general 3 partiendo del compuesto intermedio 54 y del compuesto intermedio 31. Se desprotegio siguiendo el procedimiento general 8, obteniendose el compuesto del tltulo como un polvo de color 20 blanco. CL/EM (metodo B): 500,2 (M-H)-; 502,2 (M+H)+. HPLC (metodo A), tR 4,18 min (pureza: 99,8 %).
* Ejemplo 136: N-(3-{5-[2-cloro-2'-(trifluorometil)bifenil-4-il]-1,2,4-oxadiazol-3-il}-5-fluorobencil)-N-
metilglicina, sal clorhidrato
F
O' OH
Se preparo N-(3-{5-[2-cloro-2'-(trifluorometil)bifenil-4-il]-1,2,4-oxadiazol-3-il}-5-flurobencil)-N-metilglicinato de terc- 25 butilo siguiendo el procedimiento general 4 partiendo del compuesto intermedio 54 y del compuesto intermedio 24.
Se desprotegio siguiendo el procedimiento general 8, obteniendose el compuesto del tltulo como un polvo de color blanco. RMN 1H (DMSO-d6, 300 MHz) 5 8,37 (d, J=1,6 Hz, 1H), 8,23 (dd, J=8,0, 1,6 Hz, 1H), 8,20 (s, 1H), 8,00 (d, J=8,2 Hz, 1H), 7,93 (d, J=7,7 Hz, 1H), 7,87-7,72 (m, 3H), 7,69 (d, J=8,2 Hz, 1H), 7,47 (d, J=7,5 Hz, 1H), 4,51 (s, 2H), 4,12 (s, 2H), 2,83 (s, 3H). CL/EM (metodo B): 518,2 (M-H)-; 520,2 (M+H)+. HPLC (metodo A), tR 4,82 min (pureza: 5 99,1 %). Punto de fusion: 212 °C
* Ejemplo 138: N-(2-metoxietil)-N-(4-{5-[2,-metil-2-(trifluorometil)bifenil-4-il]-1,2,4-oxadiazol-3-
il}bencil)glicina, sal clorhidrato
Se preparo N-(2-metoxietil)-N-(4-{5-[2'-metil-2-(trifluorometil)bifenil-4-il]-1,2,4-oxadiazol-3-il}bencil)glicinato de terc- 10 butilo siguiendo el procedimiento general 3 con el compuesto intermedio 5 y del compuesto intermedio 71. Este compuesto se hidrolizo segun el procedimiento general 8, obteniendose el compuesto del tltulo como un solido de color blanco. RMN 1H (DMSO-d6, 300 MHz) 8 8,55 (m, 1H), 8,51 (m, 1H), 8,21 (d, J=8,4 Hz, 2H), 7,77 (d, J=7,7 Hz, 2H), 7,68 (d, J=7,7 Hz, 1H), 7,44-7,25 (m, 3H), 7,17 (d, J=7,7 Hz, 1H), 4,43 (sa, 2H), 3,95 (sa, 2H), 3,68 (m, 2H), 3,30 (m, 2H), 3,27 (s, 3H), 2,03 (s, 3H). CL/EM (metodo B): 524,3 (M-H)-; 526,3 (M+H)+. HPLC (metodo A), tR 4,93 15 min (pureza: 99,5 %).
* Ejemplo 145: acido 2-((4-(5-(2-(trifluorometil)-2'-metilbifenil-4-il)-1,2,4-oxadiazol-3-il)-3-cloro-
bencil)(metil)amino)acetico, sal clorhidrato
El compuesto del tltulo se preparo siguiendo el procedimiento descrito en el ejemplo 144, pero utilizando el 20 compuesto intermedio 5 en la etapa 1. RMN 1H (DMSO-d6, 400 MHz) 8 8,58 (1H, s), 8,54 (1H, dd, J=8,0, 1,7 Hz), 8,20 (1H, d, J=8,0 Hz), 7,96 (1H, s), 7,76 (1H, dd, J=8,0; 1,7 Hz), 7,72 (1H, d, J=8,0 Hz), 7,45-7,38 (2H, m), 7,34 (1H, td, J=3,7; 2,3 Hz), 7,21 (1H, d, J=7,6 Hz), 4,43 (2H, s), 4,10 (2H, s), 2,82 (3H, s), 2,06 (3H, s). CL/EM (metodo A): 516 (M+H)+. HPLC (metodo F), tR 3,34 min (pureza: 99,9 %).
* Ejemplo 148: acido 2-((2,6-difluoro-4-(5-(2,-metil-2-(trifluorometil)bifenil-4-il)-1,2,4-oxadiazol-3- 25 il)bencil)(metil)amino)acetico, sal clorhidrato
Etapa 1: 2-((2,6-difluoro-4-(5-(2'-metil-2-(trifluorometil)bifenil-4-il)-1,2,4-oxadiazol-3-il)bencil)(metil)amino)acetato de terc-butilo
A una solucion del compuesto intermedio 76 (0,148 g; 0,45 mmol) y del compuesto intermedio 5 (0,107 mg; 0,375 mmol) en ACN (2,5 ml) se anadio EDC (0,101 g; 0,53 mmol). La mezcla de reaccion se agito a temperatura 5 ambiente durante 18 h. La mezcla de reaccion se diluyo con piridina (2,5 ml) y se calento a 150 °C en el microondas durante 30 minutos. El solvente se elimino al vaclo y el residuo se disolvio en DCM. La mezcla se lavo con agua y la fase organica se paso a traves de una frita hidrofoba. El solvente se evaporo al vaclo. El residuo se purifico mediante cromatografla ultrarrapida (sllice, /so-hexano/EtOAc) para obtener el compuesto del tltulo. RMN 1H (CDCl3, 400 MHz) 8 8,62 (1H, d, J=1,7 Hz), 8,39 (1H, dd, J=8,0; 1,7 Hz), 7,76 (2H, d, J=7,1 Hz), 7,49 (1H, d, 10 J=8,0 Hz), 7,38-7,22 (3H, m), 7,15 (1H, d, J=7,6 Hz), 3,99 (2H, s), 3,25 (2H, s), 2,45 (3H, s), 2,07 (3H, s), 1,50 (9H,
s).
Etapa 2: acido 2-((2,6-difluoro-4-(5-(2'-metil-2-(trifluorometil)bifenil-4-il)-1,2,4-oxadiazol-3-il)bencil)(metil)-
amino)acetico, sal clorhidrato
A 2-((2,6-difluoro-4-(5-(2'-metil-2-(trifluorometil)bifenil-4-il)-1,2,4-oxadiazol-3-il)bencil)(metil)amino)acetato de terc- 15 butilo (0,101 g; 0,18 mmol) se anadio una solucion 4 N de HCl en dioxano (4,5 ml) y la mezcla de reaccion se agito a 70 °C durante 1 hora. La mezcla de reaccion se dejo enfriar y el solvente se evaporo al vaclo. El residuo se trituro con ACN para obtener el compuesto del tltulo (0,087 g; 87 %). RMN 1H (DMSO-d6, 400 MHz) 8 8,60 (1H, d, J=1,7 Hz), 8,55 (1H, dd, J=8,0; 1,7 Hz), 7,98 (2H, d, J=7,7 Hz), 7,72 (1H, d, J=8,0 Hz), 7,45-7,38 (2H, m), 7,33 (1H, ddd, J=7,6; 6,5; 2,3 Hz), 7,20 (1H, d, J=7,6 Hz), 4,51 (2H, sa), 4,15 (2H, sa), 2,81 (3H, sa), 2,06 (3H, sa). CL/EM 20 (metodo A): 518 (M+H)+. HPLC (metodo F), tR 3,38 min (pureza: 99,5 %).
* Ejemplo 150: acido 2-((2,3-difluoro-4-(5-(2-(trifluorometil)-2'-metilbifenil-4-il)-1,2,4-oxadiazol-3- il)bencil)(metil)amino)acetico, sal clorhidrato
El compuesto del tltulo se preparo segun los protocolos descritos para el ejemplo 148 y el compuesto intermedio 25 76, pero utilizando 2,3-difluoro-4-metilbenzonitrilo. RMN 1H (DMSO-d6, 400 MHz) 8 8,59 (1H, d, J=1,7 Hz), 8,55 (1H,
dd, J=8,0; 1,7 Hz), 8,12 (1H, ddd, J=8,2; 6,2; 1,6 Hz), 7,78-7,70 (2H, m), 7,45-7,38 (2H, m), 7,33 (1 H, ddd, J=7,6; 6,5; 2,3 Hz), 7,21 (1H, d, J=7,6 Hz), 4,53 (2H, s), 4,13 (2H, s), 2,84 (3H, s), 2,06 (3H, s). CL/EM (metodo A): 518 (M+H)+. HPLC (metodo F), tR 3,34 min (pureza: 99,0 %).
* Ejemplo 152: acido 2-((2,3-difluoro-4-(5-(2-metil-2'-(trifluorometil)bifenil-4-il)-1,2,4-oxadiazol-3- 30 il)bencil)(metil)amino)acetico, sal clorhidrato
El compuesto del tltulo se preparo segun el protocolo descrito para el ejemplo 148, pero utilizando el compuesto intermedio 50, y el protocolo descrito para el compuesto intermedio 76, pero utilizando 2,3-difluoro-4- metilbenzonitrilo. Se obtuvo como un solido de color blanco. RMN 1H (DMSO-d6, 400 MHz) 8 8,21 (1H, d, J=1,7 Hz), 35 8,14-8,05 (2H, m), 7,95 (1H, d, J=7,9 Hz), 7,83 (1H, t, J=7,5 Hz), 7,76-7,67 (2H, m), 7,46 (2H, m), 4,50 (2H, sa), 4,10
(2H, sa), 2,82 (3H, sa), 2,16 (3H, sa). CL/EM (metodo A): 518 (M+H)+. HPLC (metodo F), tR 3,26 min (pureza: 98,7 %). *
* Ejemplo 153: acido 2-((3-cloro-4-(5-(2-metil-2'-(trifluorometil)bifenil-4-il)-1,2,4-oxadiazol-3-il)-
bencil)(metil)amino)acetico, sal clorhidrato
El compuesto del tltulo se prepare segun el procedimiento descrito en el ejemplo 105, pero utilizando el compuesto intermedio 50 y el compuesto intermedio 65. Se obtuvo como un solido de color blanco. RMN 1H (DMSO-d6, 400 MHz) 8 8,20 (1H, d, J=1,7 Hz), 8,16 (1H, d, J=8,0 Hz), 8,11 (1H, dd, J=8,0; 1,8 Hz), 7,95 (2H, d, J=8,1 Hz), 7,83 5 (1H, t, J=7,6 Hz), 7,78-7,69 (2H, m), 7,46 (2H, m), 4,44 (2H, sa), 4,11 (2H, sa), 2,83 (3H, sa), 2,15 (3H, sa). CL/EM
(metodo A): 516 (M+H)+. HPLC (metodo F), tR 3,25 min (pureza: 97,5 %).
Ejemplo 154: acido 2-(metil(2-metil-4-(5-(2,-metil-2-(trifluorometil)bifenil-4-il)-1,2,4-oxadiazol-3-il)-
bencil)amino)acetico
10 Se prepare (2-metil-4-(5-(2'-metil-2-(trifluorometil)bifenil-4-il)-1,2,4-oxadiazol-3-il)fenil)metanol siguiendo el
procedimiento descrito para el ejemplo 113, pero usando el compuesto intermedio 66, y se aislo como un solido de color blanco. Este compuesto se utilizo para la preparacion del compuesto del tltulo, siguiendo el procedimiento descrito para el ejemplo 125. El compuesto del tltulo se aislo como un solido de color blanco. RMN 1H (DMSO-d6, 400 MHz) 5 8,55 (1H, s), 8,51 (1H, d, J=8,1 Hz), 7,99-7,92 (2H, m), 7,65 (1H, d, J=8,0 Hz), 7,60 (1H, d, J=7,8 Hz), 15 7,43-7,35 (2H, m), 7,31 (1H, td, J=7,2; 2,1 Hz), 7,18 (1H, d, J=7,6 Hz), 3,93 (2H, s), 3,32 (2H, s), 2,48 (3H, s), 2,44
(3H, s), 2,03 (3H, s). CL/EM (metodo A): 496 (M+H)+. HPLC (metodo F), tR 3,33 min (pureza: 99,8 %).
* Ejemplo 155: acido 2-((2-etil-4-(5-(2'-metil-2-(trifluorometil)bifenil-4-il)-1,2,4-oxadiazol-3-il)-
bencil)(metil)amino)acetico
20 Etapa 1: N-(2-etil-4-{5-[2'-metil-2-(trifluorometil)bifenil-4-il]-1,2,4-oxadiazol-3-il}fenil)-N-metilglicinato de terc-butilo
A una solucion del compuesto intermedio 67 (0,222 g; 0,69 mmol) y del compuesto intermedio 5 (0,232 mg; 0,83 mmol) en ACN (3 ml) se anadio EDC (0,159 g; 0,83 mmol). La mezcla de reaccion se agito a temperatura ambiente durante 18 h. La mezcla de reaccion se diluyo con piridina (2 ml) y se calento a 150 °C con irradiacion de microondas durante 30 minutos. El solvente se elimino al vaclo y el residuo se disolvio en DCM. La mezcla se lavo 25 con agua y la fase organica se paso a traves de una frita hidrofoba. El solvente se evaporo al vaclo. El residuo se purifico mediante cromatografla ultrarrapida (sllice, /so-hexano/EtOAc), obtenlendose el compuesto del tltulo. RMN 1H (CDCla, 400 MHz) 8 8,64 (1H, d, J=1,2 Hz), 8,42-8,40 (1H, m), 8,03 (1H, m), 8,00-7,98 (1H, m), 7,57-7,55 (1H, m), 7,48-7,46 (1H, m), 7,36-7,15 (4H, m), 3,81 (2H, s), 3,24 (2H, s), 2,86-2,82 (2H, m), 2,44 (3H, s), 2,07 (3H, s), 1,49 (9H, s), 1,32-1,29 (3H, m).
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
Etapa 2: acido 2-((2-etil-4-(5-(2'-metil-2-(trifluorometil)bifenil-4-il)-1,2,4-oxadiazol-3-il)bencil)(metil)amino)acetico
A N-(2-etil-4-{5-[2'-metil-2-(trifluorometil)bifenil-4-il]-1,2,4-oxadiazol-3-il}fenil)-N-metilglicinato de terc-butilo (0,109 g; 0,19 mmol) se anadio una solucion 4 N de HCl en dioxano (4 ml) y la mezcla de reaccion se agito a temperatura ambiente durante 18 horas. El solvente se evaporo al vaclo y el residuo triturado con EtOAc caliente para obtener el compuesto del tltulo como un solido blanquecino. RMN 1H (DMSO-d6, 400 MHz) 8 8,56 (2H, m), 8,10 (2H, m), 7,84 (1H, d, J=8,0 Hz), 7,72 (1H, d, J=8,0 Hz), 7,42 (2H, m), 7,33 (1H, m), 7,22 (1H, d, J=7,6 Hz), 4,50 (2H, sa), 4,17 (2H, sa), 2,96 (2H, c, J=7,2 Hz), 2,80 (3H, s), 2,06 (3H, s), 1,27 (3H, t, J=7,2 Hz). CL/EM (metodo A): 510 (M+H)+. HPLC (metodo G), tR 3,35 min (pureza: 94,9 %).
Ejemplo 156: ensayos in vitro
Preparacion de membranas: se prepararon membranas a partir de celulas CHO que expresaban S1P1 o S1P3 para su uso en estudios de union a ligando y a 35S-GTPTS. Las celulas se resuspendieron en TRIS 50 mM, pH 7,4, EDTA 2 mM, sacarosa 250 mM (tampon A) y en mezcla de inhibidores de proteasas completa 1* (Roche) y se rompieron a 4 °C mediante descompresion de N2 usando una bomba de disrupcion celular (Parr Instrument). Despues de la centrifugacion a 1000 RPM durante 10 min a 4 °C, el sobrenadante se diluyo (2*) en tampon A y se centrifugo de nuevo a 19 000 RPM durante 75 min a 4 °C. A continuation, el sedimento se resuspendio en HEpES 10 mM, pH 7,4, EDTA 1 mM, sacarosa 250 mM (tampon B) y un coctel completo de inhibidores de proteasas sin EDTA 1*, y se homogeneizo usando un homogeneizador manual. Las membranas se ultracongelaron en N2 llquido y se conservaron a -80 °C.
Ensayo de union al receptor: se anadio [33P]esfingosina 1-fosfato (3000 Ci/mmol; American Radiolabeled Chemicals, Inc.) para realizar ensayos de competencia en DMSO al 20 % con los compuestos. Se anadieron las membranas y microesferas para SPA con WGA (GE Healthcare) para dar un volumen final de 100 pl en placas de 96 pocillos o 50 pl en placas de 384 pocillos con concentraciones de ensayo de [33P]esfingosina 1-fosfato 30 pM o 15 pM (para S1P1 o S1P3, respectivamente), HEPES 50 mM, pH 7,5, MgCl2 5 mM, NaCl 100 mM, BSA sin acidos grasos al 0,4 %, 1-5 pg/pocillo de protelnas en placas de 96 pocillos frente a 0,6-1 pg/pocillo de protelnas en placas de 384 pocillos y 100 pg/pocillo de microesferas para SPA con WGA en placas de 96 pocillos frente a 75 pg/pocillo de microesferas para SPA con WGA en placas de 384 pocillos. La union se realizo durante 60 min a TA en un agitador y la radiactividad unida se midio en un contador MicroBeta 1450 de PerkinElmer. Las muestras por triplicado se promediaron y normalizaron como porcentaje de inhibition con respecto a la inhibition total (solo DMSO en el pocillo) y union inespeclfica (exceso de 1000 veces de S1P no marcado). Los datos de union se analizaron usando el programa GraphPad Prism o el software Genedata.
Medidas de la union de 35S-GTPTS: las membranas (1 a 10 pg de protelnas) preparadas como se describe anteriormente, se incubaron en placas de centelleo de 96 pocillos (PerkinElmer) con compuestos de ensayo diluidos en DMSO, en 140 pl de HEPES 20 mM, pH 7,4, MgCl2 10 mM, 2 pg/pocillo de saponina, BSA sin acidos grasos al 0,2 % (tampon de ensayo), NaCl 125 nM y GDP 1,5 pM. El ensayo se initio con la adicion de 60 pl de [35S]-GTPTS 1,5 nM (1100 Ci/mmol; GE Healthcare) en tampon de ensayo. Despues de 60 min de incubation a 30°C en un agitador, las placas se centrifugaron durante 10 min a 2000 RPM. Se desecho el sobrenadante y la radioactividad unida a la membrana se midio en un contador 1450 MicroBeta de PerkinElmer. Se realizaron las medias de las muestras por triplicado y se expresaron como % de la respuesta relativa a la activation de S1P en ausencia de compuesto (n = 2).
Ensayos funcionales celulares: internalization del receptor 1 de esfingosina-1-fosfato (S1P1) en una llnea celular humana (U2OS) en un formato de placa de 384 pocillos usando un analisis por imagen celular.
Jo, E.; Sanna, M. G.; Gonzalez-Cabrera, P. J.; Thangada, S.; Tigyi, S.; Osborne, D. A.; Hla, T.; Parrill, A. L.; Rosen, H. Chem. Biol. 2005, 12, 703
El ensayo de internalizacion de S1P1 se realizo en placas de 384 pocillos (Corning® 384 negra con fondo transparente 3712) usando celulas S1P1-U2OS de Biolmage (C039A), una llnea celular epitelial humana (celulas epiteliales de osteosarcoma oseo humano). Estas celulas expresaban el receptor S1P1 humano fusionado a la protelna fluorescente verde (EGFP). Un promotor estandar de CMV (promotor de citomegalovirus) controla la expresion de S1P1-EGFP y la expresion continua se mantuvo mediante la adicion de geneticina al medio de cultivo.
La desensibilizacion del receptor S1P1 inducla la internalizacion en los endosomas de la protelna de fusion S1P1- EGFP localizada en membrana, lo que puede controlarse mediante analisis por imagen celular.
Las celulas se dispusieron en placas en medio con bajo contenido en suero (medio de Eagle modificado por Dulbecco [DMEM] con Glutamax-1 y alto contenido en glucosa, penicilina/estreptomicina al 1 %, suero de ternera fetal [STF] al 1 % y 0,5 mg/ml de geneticina) y se dejaron toda la noche.
Al dla siguiente, las celulas S1Pi-U2OS se incubaron en 20 |jl de medio sin suero (DMEM con Glutamax-1 y alto contenido en glucosa, albumina serica bovina [BSA] sin acidos grasos al 0,1 %, 10 mM, acido N'-2- hidroxietilpiperazin-N'-2 etanosulfonico [HEPES] 1 M) durante 2 horas a 37 °C/5 % CO2.
Las celulas se trataron a continuacion con 4 jl de compuestos/agonistas (6x/3 % DMSO) para un volumen total de 5 24 jl y las placas se incubaron durante 1 hora a 37 °C/5 % CO2.
Las celulas S1P1-U2OS se fijaron con 25 jl de paraformaldehldo al 8 % y se tineron con colorante Hoechst 33345 (1:1.000) durante 20 minutos.
Se lavaron tres veces con solucion salina tamponada con fosfato (PBS) y se sellaron las placas.
La internalizacion del receptor S1P1-EGFP se midio en Cellomics calculando el «recuento de manchas por objeto» 10 («objeto» corresponde al nucleo y «mancha» corresponde al receptor S1P1-EGFP). Los datos de internalizacion se visualizaron gracias a vHCS View y se analizaron usando el software Genedata®.
Los compuestos de formula (I) tienen utilidad como agentes inmunorreguladores como ha demostrado su actividad como agonistas potentes del receptor S1P1 segun se midio en los ensayos descritos anteriormente. Las EC50 de los compuestos de formula (I) y subformulas de S1P1 son inferiores a 0,1 mM. Los compuestos preferidos de formula (I) 15 muestran una EC50 para el receptor de S1P1 por debajo de 0,01 mM. Los compuestos mas preferidos de formula (I) muestran EC50 para S1P1 inferiores a 0,001 mM. Los compuestos de formula (I) muestran una selectividad por el receptor S1P1 por encima de los receptores S1P3 segun se midio mediante el cociente entre la EC50 para el receptor S1P1 y la EC50 para el receptor S1P3 segun se evaluo en el ensayo de union a 35S-GTP7S descrito anteriormente. El cociente entre la EC50 de S1P1 y la EC50 de S1P3 es superior a 20, preferiblemente mas de 50, mas 20 preferiblemente mas de 100 e, incluso mas preferiblemente, mas de 1000.
La «potencia» y la «actividad» de los compuestos se determina mediante los valores EC50 segun lo evaluado en el ensayo de union de 35S-GTPTS descrito anteriormente. Los valores de EC50 mas bajos caracterizan los compuestos mas potentes y activos, segun la presente invencion.
Se han obtenido los siguientes resultados:
- N.°
- Estructura EC50 S1P1/G TPG (M) EC50 S1P3/G TPG (M) Union a S1P1 Ki (M) (placa 96 pocillos) Union a S1P3 Ki (M) (placa 96 pocillos) Union a S1P1 Ki (M) (placa 384 pocillos) Union a S1P3 Ki (M) (placa 384 pocillos) Internaliza cion de S1P1 EC50 (M)
- 14
- crrr nA 0%F 1,24E-09 --- 4,47E-10 2,36E- 07 1,93E- 09 1,68E- 07 8,75E-09
- 49
- rrnOH ~O /==/ C^~fF F --- --- 8,70E-10 1,50E- 06 2,35E- 09 1,41E- 06 1,13E-08
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- 89
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- 97
- HO y^\ O N— v} )=N N^O sFT^ fti O' --- --- --- 1,57E- 06 2,08E- 09 2,22E- 06 1,20E-08
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- 135
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- 136
- OH r^i —N O f^Q ^=N nvO R/F J^s'c| FU --- --- --- --- 4,27E- 09 2,32E- 06 4,09E-08
- 138
- O'' ^ O jXAoh N^N ^O O FVF --- --- --- --- 5,16E- 09 4,79E- 07 2,61 E-08
- 145
- OH Oj) VN / O i) /\ F/—F VJ F --- --- --- --- 2,22E- 09 2,85E- 07 9,44E-09
- 148
- — — — — 2,38E- 09 LU 00 2,47E-08
- 150
- A % / O y) — — — — 2,07E- 09 LU CM 1,80E-08
- 152
- Tl \ 'TI °'J~\J~-y — — — — 3,71E- 09 1,25E- 05 6,84E-08
- 153
- OH oJ) —N ,-A N^i II N — — — — 3,32E- 09 7,50E- 06 5,09E-08
Ejemplo 157: modelos animales para evaluar la eficacia in vivo de agonistas de S1P
Modelo de linfopenia inducida por agonistas de S1P en ratones
Los ratones C57BL/6 hembra (Elevage Janvier) (8 semanas de edad) reciben agonistas de S1P por via oral. Se 5 extrae sangre de ratones heparinizados (100 UI/kg, i.p.) anestesiados con isoflurano mediante puncion intracardlaca o retroorbital de 2 a 120 horas despues del tratamiento con el farmaco. Se hace un recuento de los leucocitos (linfocitos y neutrofilos) usando un contador Beckman/Coulter. La calidad de las muestras de sangre se evalua mediante el recuento de eritrocitos y plaquetas.
Modelo de encefalomielitis autoinmune experimental (EAE) inducida por MOG en ratones
10 La EAE se indujo en ratones hembra de 9 semanas de edad (C57BL/6, Elevage Janvier) mediante inmunizacion frente a MOG. Los ratones recibieron toxina pertussis (Alexis, 300 ng/raton en 200 ql de PBS) por via i.p. y 100 ql de una emulsion que contenla el peptido MOG35-55 (NeoMPS, 200 qg/raton) y Mycobacterium tuberculosis (0,25 mg/raton) en adyuvante completo de Freund (DIFCO) mediante inyeccion subcutanea en el lomo. Dos dlas despues se administro una inyeccion adicional de toxina pertussis (Alexis, 300 ng/raton en 200 ql de PBS) por via 15 i.p. Tras la induccion de EAE, los ratones se pesaron diariamente y el deterioro neurologico se cuantifico usando una escala cllnica de 15 puntos en la que se evaluaba la paralisis (cola, patas traseras y patas delanteras), la incontinencia y la muerte.
Datos farmacocineticos:
Las propiedades farmacocineticas del compuesto del ejemplo 70, N-(2-fluoro-4-{5-[2'-metil-2-(trifluorometil)bifenil-4- 20 il]-1,2,4-oxadiazol-3-il}bencil)-N-metilglicina, son las siguientes:
- % de iinfopenia en raton a ias 48 h
- 72+/-8
- Parametros FC de Iinfopenia (raton)
- FC-FD (30 mpk)
- AUCm piasmatica (h*ng/mi)
- 103 845
- Cmax (ng/mi)
- 8780
- Tmax (h)
- 2
- T1/2 (h)
- 7,5
- Ci/F (i/kg/h)
- 0,3
- Reiacion cerebro/piasma: AUCZ (h*ng/mi)
- 2,4
- Reiacion gangiio iinfatico/piasma: 24h / 48h
- 4,4 / 4,0
Puntuacion cilnica
5
10
15
20
-1- Cola
- Puntuacion = 0
- Puntuacion = 1
- Puntuacion = 2 -2- Patas traseras
- Puntuacion = 0
- Puntuacion = 1
Raton normal que mantiene ia coia erecta cuando se mueve.
Si ia extremidad de ia coia esta fiacida con tendencia a caerse.
Si ia coia esta compietamente fiacida y ia arrastra sobre ia mesa.
Raton normai con caminar energico y que no arrastra ias patas. Aiguna de ias pruebas siguientes es positiva:
-a- Prueba de voiteo (fiip test): sujetando ia coia entre ei puigar y ei Indice, se coioca ai animai sobre su iomo y se observa ei tiempo que tarda en darse ia vueita por si soio. Un raton sano se dara ia vueita inmediatamente. Ei retraso sugiere debiiidad en ias patas traseras.
-b- Se coioca ai raton en ia rejiiia superior de ia jauia y se observa si pasa de un iado ai otro. Si una o ambas patas resbaia con frecuencia entre ias barras se considera que ei animai sufre paraiisis parciai.
- Puntuacion = 2 Ambas pruebas previas son positivas.
- Puntuacion = 3 Una o ambas patas traseras muestran signos de paraiisis aunque se conservan determinados movimientos; por ejempio, ei animai puede agarrarse y mantenerse agarrado a ia rejiiia superior de ia jauia por ia parte interior durante un corto espacio de tiempo antes de soitarse.
- Puntuacion = 4 Cuando ambas patas superiores estan paraiizadas y ei raton ias arrastra ai moverse.
-3- Patas anteriores:
- Puntuacion = 0 Raton normai que usa sus patas anteriores de forma activa para agarrarse y caminar y mantiene su cabeza erecta.
25 - Puntuacion = 1 Puede caminar aunque con dificuitad debido a debiiidad en una o ambas patas,
por ejempio, se considera que ei raton presenta debiiidad en ias patas deianteras cuando ei animai tiene
5
10
15
20
25
30
35
40
dificultad para agarrarse a la rejilla superior de la jaula por la parte interior. Otro signo de debilidad es que al animal se le cae la cabeza.
- Puntuacion = 2 Cuando una de las patas delanteras esta paralizada (imposibilidad de agarrarse y el raton da vueltas alrededor de la pata paralizada). En este momento, la cabeza tambien ha perdido la mayor parte de su tono muscular.
- Puntuacion = 3 El raton no puede moverse y es incapaz de alcanzar el alimento o el agua.
-4- Vejiga:
Puntuacion = 0 Raton normal que controla por completo su vejiga.
Puntuacion = 1 Se considera que el raton presenta incontinencia cuando la parte inferior de su
cuerpo aparece empapado de orina.
-5- Muerte:
Puntuacion = 15
La puntuacion final para cada animal se determina mediante la suma de todas las categorlas mencionadas anteriormente. La puntuacion maxima para los animales vivos es de 10.
A dla 12 (primeros signos de paralisis) los ratones se estratificaron en grupos experimentales (n = 10) segun la puntuacion cllnica y la perdida de peso corporal. El tratamiento semicurativo se inicio el dla 14.
Ejemplo 158: preparacion de una formulacion farmaceutica
Formulacion 1: comprimidos
Un compuesto de formula (I) se mezcla como polvo seco con un aglutinante de gelatina seca en una proporcion en peso aproximada de 1:2. Se anade una cantidad pequena de estearato de magnesio como lubricante. La mezcla se conforma en comprimidos de 240-270 mg (80-90 mg de compuesto activo segun la invencion por comprimido) en una prensa de comprimidos.
Formulacion 2: capsulas
Un compuesto de formula (I) se mezcla como un polvo seco con un diluyente de almidon en una proporcion en peso aproximada de 1:1. La mezcla se coloca dentro de capsulas de 250 mg (125 mg por capsula de compuesto activo segun la invencion).
Formulacion 3: liauido
Un compuesto de formula (I) (1250 mg), sacarosa (1,75 g) y goma de xantano (4 mg) se mezclan, se pasan a traves de un tamiz U.S. n.° de malla 10 y, a continuacion, se mezclan con una solucion previamente preparada de celulosa microcristalina y carboximetilcelulosa sodica (11:89; 50 mg) en agua. Se diluyen en agua benzoato sodico (10 mg), un saborizante y un colorante y se anaden con agitacion. A continuacion se anade agua suficiente para obtener un volumen total de 5 ml.
Formulacion 4: comprimidos
Un compuesto de formula (I) se mezcla como polvo seco con un aglutinante de gelatina seca en una proporcion en peso aproximada de 1:2. Se anade una cantidad pequena de estearato de magnesio como lubricante. La mezcla se conforma en comprimidos de 450-900 mg (150-300 mg de compuesto activo segun la invencion) en una prensa de comprimidos.
Formulacion 5: inyeccion
Un compuesto de formula (I) se disuelve en un medio acuoso inyectable de solucion salina esteril tamponada a una concentracion de aproximadamente 5 mg/ml.
Claims (6)
-
imagen1 imagen2 imagen3 y los solvatos, tautomeros, sales y estereoisomeros de los mismos, incluidas sus mezclas en todas las proporciones. - 2. Una composicion farmaceutica que comprende al menos un compuesto segun la reivindicacion 1 y/o 5 tautomeros, sales, solvatos y estereoisomeros de los mismos, incluyendo sus mezclas en todas las proporciones y,opcionalmente, excipientes y/o adyuvantes.
- 3. Una composicion farmaceutica que comprende al menos un compuesto segun la reivindicacion 1 y/o tautomeros, sales, solvatos y estereoisomeros de los mismos, incluyendo sus mezclas en todas las proporciones y al menos un principio activo adicional.10 4. Conjunto compuesto por envases independientes dea) una cantidad eficaz de un compuesto segun la reivindicacion 1 y/o tautomeros, sales, solvatos y estereoisomeros de los mismos, incluidas sus mezclas en todas las proporciones y(b) una cantidad eficaz de un principio activo adicional de un medicamento.
- 5. Compuestos segun la reivindicacion 1, y sales, tautomeros, solvatos y estereoisomeros de los mismos, 15 incluidas sus mezclas en todas las proporciones, para su uso en la preparacion de un medicamento para altratamiento y/o profilaxis de un trastorno o afeccion autoinmune asociada con una respuesta inmunitaria hiperactiva.
- 6. Compuestos segun la reivindicacion 1, y sales, tautomeros, solvatos y estereoisomeros de los mismos, incluidas sus mezclas en todas las proporciones, para su uso en la preparacion de un medicamento para el tratamiento y/o profilaxis de una anomalla inmunorreguladora.20
- 7. Compuesto de la reivindicacion 1 para su uso segun la reivindicacion 6, en el que la anomalla inmunorreguladora es una enfermedad inflamatoria autoinmune o cronica seleccionada a partir del grupo compuesto por: lupus eritematoso sistemico, artritis reumatoide cronica, enfermedad inflamatoria intestinal, esclerosis multiple, esclerosis amiotrofica lateral (ELA), arterioesclerosis, ateroesclerosis, escleroderma, hepatitis25 autoinmune.
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