ES2649985T3 - Partículas y suspensiones radioterapéuticas - Google Patents

Abstract

Una partícula que comprende un compuesto degradable y un radionucleido emisor alfa y/o un radionucleido que genera un descendiente emisor alfa, en donde el radionucleido es el 224Ra, el compuesto degradable se selecciona del grupo que consiste en CaCO3, CaCO3 modificado con PEG, CaCO3 modificado con proteína, CaCO3 modificado con hidrato de carbono, CaCO3 modificado con lípido, CaCO3 modificado con vitamina, CaCO3 modificado con compuesto orgánico, CaCO3 modificado con polímero y/o CaCO3 modificado con cristal inorgánico, y la partícula es de 1 nm a 500 μm.

Description

imagen1

imagen2

imagen3

imagen4

imagen5

imagen6

imagen7

5

10

15

20

25

30

35

40

45

50

55

Se puede hacer una suspensión bifuncional, p. ej., mediante los siguiente: a una solución de 224Ra en tampón a pH 5-6 se añade anticuerpo marcado con TCMC en 1 mg/ml y se incuba desde 2 minutos a varias horas, después de lo cual la solución se añade a un vial con partículas de carbonato de calcio (CC) y se incuba durante 2 minutos a varias horas. La mezcla se debería administrar tan pronto como sea posible con el fin de evitar la reducción de la actividad específica del producto marcado con 212Pb. Este probablemente se usará mejor como un sistema de kit de modo que el 224Ra está en el vial A, la proteína conjugada con agente quelante está en el vial B y las partículas de CC están en el vial C.

También se puede añadir 212Pb para dar un conjugado de direccionamiento extrafuerte en la mezcla con las partículas de 224Ra-CC. Normalmente, la relación entre el 224Ra y el 212Pb en dicho sistema puede ser cercano a 1:1, pero en algunas situaciones de tratamiento, puede ser beneficioso aumentar la cantidad de conjugado de 212Pb frente a las partículas de 224Ra hasta tanto como 10:1 o superior. En este último caso sería necesario añadir 212Pb adicional antes de la preparación del conjugado de direccionamiento o extraer algunas de las partículas de 224Ra-CC antes de la administración de la mezcla terapéutica.

La presente invención se refiere a nuevos compuestos radioterapéuticos basados en emisores alfa como 224Ra con radionucleidos descendientes. El radio-224 es absorbido sobre las superficies de las partículas de carbonato de calcio o se puede cosedimentar durante la preparación usando vehículos, p. ej., cantidades en trazas de sulfato de bario.

En una realización especial, el 224Ra se puede cocristalizar con calcio para formar cristales de carbonato de modo que el 224Ra está dentro de los cristales y no sobre la superficie, para evitar que escapen los nucleidos descendientes.

Sin embargo, en algunos contextos, una liberación lenta parcial de radionucleidos puede ser beneficiosa ya que esto puede producir una mejor homogeneidad de la dosis, p. ej., en las superficies del peritoneo, y la disminución de los “puntos calientes” de radiación de agregados locales de partículas de cristal.

El alcance de la radiación del componente principal de la dosis de la serie de 224Ra, las partículas alfa, típicamente es menor de 0,1 mm en el tejido, permitiendo el suministro de niveles de dosis de radiación terapéuticamente relevantes a las superficies del peritoneo y los órganos presentes en la cavidad, sin causar daño a las regiones más profundas de los tejidos y del peritoneo. Se conoce de estudios anteriores que los coloides y partículas emisores beta pueden mostrar alguna actividad antitumoral cuando se usan como adyuvantes en la terapia intraperitoneal, pero los efectos posteriores debido a la radiación de los intestinos etc. ha hecho que la relación de coste-beneficio de estos productos sea desfavorable.

La razón principal para los efectos secundarios es la penetración de la radiación en las regiones más profundas de los intestinos debido al alcance de la radiación de varios mm. Mediante el cambio a emisores alfa, se evita el problema de la irradiación profunda debajo de la superficie del tejido. Otro aspecto a favor de las partículas alfa es la transferencia lineal de energía alta de las partículas alfa que produce una fracción alta de roturas de doble cadena letales en las células y reduce el efecto del estado del oxígeno para que la célula sobreviva al tratamiento. También la eficacia biológica normalmente es considerablemente mayor para las partículas alfa frente a las betas.

La presente invención es diferente de los coloides emisores alfa previamente descritos en varios modos, (1) tiene una liberación lenta del 224Ra y el nucleido descendiente, lo que puede tener un efecto de “suavización” de la dosis reduciendo los problemas de distribución no homogénea de partículas alfa en la zona de administración. (2) El 212Pb, que es el descendiente de vida más larga (t1/2 = 10,6 h) después de la desintegración del 220Rn de vida corta (t1/2 = 56 s) y desintegración de 216Po (t1/2 = 0,15 s), es reabsorbido fácilmente por las partículas ensayadas, lo que podría reducir el escape de 212Pb a la circulación sistémica. Por lo tanto, se encontró que las partículas de carbonato de calcio son particularmente adecuadas como vehículo para el 224Ra. (3) El propio material de las partículas no es tóxico en los niveles usado y las partículas son lentamente degradables en iones no tóxicos, por lo tanto, muy biocompatibles.

Las partículas se pueden producir en tamaños desde nanómetros a varias decenas de micrómetros, y radiomarcar con altos rendimientos de marcaje y se pueden almacenar durante varios días, lo que es importante puesto que permite la producción centralizada y envío a los hospitales de las suspensiones de partículas listas para usar. Se pueden usar diferentes clases de cristales de CC que incluyen β-CaCO3 hexagonal, λ-CaCO3 ortorrómbico.

General

Debe entenderse que cualquier característica y/o aspecto descrito antes en relación con los compuestos y partículas de acuerdo con la descripción, se aplica de forma análoga a los métodos y aplicaciones descritos en la presente memoria.

Las siguientes figuras y ejemplos se proporcionan a continuación para ilustrar la presente invención.

5

10

15

20

25

30

35

40

45

50

55

Ejemplos

Ejemplo 1. Producción de 224Ra

Todo el trabajo con las preparaciones radiactivas concentradas incluyendo la evaporación del disolvente etc., se llevó a cabo en un aislador con guantes. Se adquirió una fuente de 228Th en HNO3 1 M en un proveedor comercial. La resina Ac se obtuvo de Eichrom Technologies LLC (Lisle, IL, EE.UU.) en forma de un cartucho preempaquetado.

Para usar un volumen de disolvente más pequeño, aproximadamente 30 por ciento de los materiales en un cartucho (cartucho 1) se extrajeron y se volvieron a empaquetar en una columna más pequeña (cartucho 2) hecha mediante una columna de filtración de 1 ml (Isolute SPE, Biotage AB, Uppsala, Suecia). Se usó una suspensión que representaba 20% del contenido del cartucho original para la inmovilización del 228Th en 500 microlitros de HNO3 1 M a la que se añadieron 500 microlitros de HCl 1 M y se incubó con agitación del vial (vial de 4 ml, muestra E-C, Wheaton, Millville, NJ, EE.UU.) durante al menos 4 horas. Al cartucho 2 se añadió una pequeña cantidad (aproximadamente 0,1 ml) de resina Ac. Después, la suspensión se añadió al cartucho 2 usando el material precargado como una capa receptora. El radio se podía eluir del cartucho 2 en 2 ml de HCl 1 M. La solución de radio de 2 ml se evaporó hasta sequedad, usando un bloque calefactor y lavando el vial por barrido con N2 gaseoso a través de una entrada del tubo de teflón y salida en el septum de caucho/teflón en el vial y llevando el vapor ácido a un vaso de precipitados de NaOH saturado mediante una corriente de N2 gaseoso.

El residuo se resolvió en 0,5 ml de HNO3 1 M y se cargó en un cartucho 3 que consistía en una columna Isolute de 1 ml empaquetada con aproximadamente 250 mg de intercambiador aniónico Dowex. El cartucho 3 se lavó con 7 ml de HNO3 1 M, que eliminó el 212Pb, y finalmente con 3-4 ml de HNO3 8 M para eluir el 224Ra. El eluato de 224Ra se evaporó hasta sequedad, usando el bloque calefactor y un flujo de N2 gaseoso, y el residuo se pudo disolver en HCl 0,1 M. Típicamente, se pudo extraer más de 70% del 224Ra presente en la fuente de 228Th y purificar usando los métodos descritos.

Más tarde, se abandonó la etapa de intercambio aniónico y los 2 ml de producto bruto en HCl 1 M se usaron sin evaporación y se cargaron en un segundo cartucho de resina Ac que se lavó con 0,5 ml adicionales de HCl para producir un eluato de 2,5 ml que contenía el 224Ra. Este se evaporó hasta sequedad y se disolvió en 0,2 ml o más de HCl 0,1 M. Antes de usar en el marcaje de las partículas, se añadió a la solución de 224Ra una cantidad que correspondía a 10% en volumen de acetato amónico 5 M para ajustar el pH a 5-6.

Ejemplo 2. Medición de muestras radiactivas

Las muestras radiactivas se contaron en un contador Cobra II Autogamma (Packard Instruments, Downer Grove, IL, EE.UU.) o un contador Hidex Automatic Gamma (Hidex, Turku, Finlandia). Durante la extracción del 224Ra de la fuente de 228Th, se usó un calibrador de dosificación CRC-25R (Capintec Inc., Ramsey, NJ, EE.UU.).

Para determinar la distribución de 224Ra, 212Pb y 212Bi en tiempo real en las muestras, se usó un detector de germanio de alta pureza enfriado en nitrógeno líquido (HPGe) (GWC6021, Canberra Industries, Meriden CT, EE.UU.). Este se combinó con un analizador de señal digital DSA 1000 y el software Genie 2000 (Canberra).

Ejemplo 3. Preparación de micropartículas

Se prepararon micropartículas de carbonato de calcio por un método de precipitación espontánea. Una solución de Na2CO3 0,33 M (Merck, Alemania) se vertió rápidamente en un volumen igual de CaCl2 0,33 M (Merck, Alemania). Después de mezcla vorticial intensa durante 30 segundos, la suspensión de partículas se dejó durante 5 minutos. Las partículas se separaron por filtración sobre un filtro de papel, se lavaron con aproximadamente 30 ml de agua y se secaron durante la noche a temperatura ambiente. La filtración y lavado se llevaron a cabo en un dispositivo de filtración a vacío de vidrio (Whatman) con un filtro de nitrocelulosa de 0,45 µm (Whatman). Las micropartículas secas se almacenaron a temperatura ambiente. Las micropartículas obtenidas eran de forma esférica con diámetros dentro de 1-10 µm y mediana de 3-5 µm como se indica por microscopía respaldada por análisis en un contador de células automatizado Countess™ (Invitrogen).

Ejemplo 4. Radiomarcaje de micropartículas

Se transfirió una cantidad deseada de partículas de CaCO3 a un tubo Eppendorf y se suspendieron en 1 ml de agua. La suspensión de partículas se trató con ultrasonidos en un baño de ultrasonidos durante 10-15 minutos, seguido de 4 etapas de lavado; primero 2 veces con 1 ml de agua y después 2 veces con 1 ml de Na2SO4 0,1 M (Alfa Aesar, Alemania). Las partículas se separaron de la solución de lavado por centrifugación. Después de lavado, las partículas se suspendieron en DPBS (Gibco, Life Technologies, Carlsbad, CA, EE.UU.) complementado con albúmina de suero bovino al 0,5% (0,1 ml por 15 mg de partículas) y se incubaron en un HulaMixer (Invitrogen, Life Technologies, Carlsbad, CA, EE.UU.) durante 30 minutos a temperatura ambiente. El programa de mezclamiento era el siguiente: el intervalo orbital de rotación era 14 rpm, el intervalo recíproco era 20° y el intervalo de vibración era 3°. Se añadió un volumen de una solución de Na2SO4 0,1 M que correspondía a 3 µg de SO4 por mg de partículas (0,3%) a la suspensión de partículas. Después, la solución de 224Ra se transfirió al tubo con la suspensión de partículas, seguido inmediatamente de la adición de solución de BaCl2·2H2O 0,07 M (Merck, Alemania) que

imagen8

5

10

15

20

25

30

35

40

45

50

55

del producto descendiente 212Pb. Esto podría reducir la toxicidad sistémica de la absorción de 212Pb en la sangre.

Ejemplo 7. Biodistribución in vivo y estabilidad de las micropartículas radiomarcadas.

Antecedentes: Para evaluar la utilidad de las partículas de carbonato de calcio marcadas con 224Ra para uso intracavitario, se inyectó una suspensión de partículas por vía intraperitoneal en ratones y se midió la posterior biodistribución de 224Ra. Métodos: se prepararon las micropartículas radiomarcadas como se ha descrito en el ejemplo 4. Después de lavar, el sedimento de partículas se volvió a suspender en tampón de sacarosa a pH 7-7,5 hasta una concentración de partículas de aproximadamente 13 mg/ml. Se usaron ratones atímicos Nude-Foxn1 nu hembra, de 6-19 semanas de edad, criados en institución, con pesos corporales de 17,1-28,3 g, para los estudios de biodistribución. Se les administraron 0,4 ml de suspensión de partículas por inyección intraperitoneal, que contenía 224Ra 11-18 kBq unido a aproximadamente 5 mg de micropartículas. Los ratones se sacrificaron y se recogieron diferentes tejidos para las mediciones de radiactividad a las 20 horas (n=2), 4 días (n=3) y 7 días (n=3) después de inyección. Como control, se llevaron a cabo experimentos de biodistribución con 224Ra libre (RaCl2 disuelto), administrando 0,25 ml de solución NaCl al 0,9% con 224Ra de aproximadamente 12 kBq por vía intraperitoneal a cada ratón. La solución de 224RaCl2 tenía un pH de 5,5. Para la comparación, se sacrificaron grupos de 3 ratones en los mismos tiempos de medición después de inyección que para el estudio de biodistribución con micropartículas radiomarcadas (figura 1A).

Resultados: Las figuras 1A y B muestran los perfiles de biodistribución del carbonato de calcio marcado con 224Ra y de 224Ra libre, respectivamente. Basándose en la absorción del fémur, la liberación de 224Ra de las partículas de carbonato de calcio marcado con 224Ra es lenta, con aproximadamente una quinta parte después de 20 horas, aumentando a aproximadamente una tercera parte a los 7 días después de administración. Esta liberación limitada del radionucleido puede ser, en un aspecto, beneficiosa puesto que puede reducir la heterogeneidad de la dosis a partir de las partículas radiomarcadas. Merece la pena destacar que hay una absorción considerable en la grasa i.p., lo cual es prometedor considerando la función de la grasa i.p. en la extensión intraperitoneal de las metástasis de cáncer. En conclusión, el carbonato de calcio marcado con 224Ra tiene propiedades de distribución muy prometedoras en relación con la radioterapia intracavitaria.

Ejemplo 8. Actividad antitumoral de las micropartículas marcadas con 224Ra en un modelo de cáncer i.p. de ratón atímico

Antecedentes: Para ensayar la actividad terapéutica de las micropartículas de carbonato de calcio marcadas con 224Ra, se usó un modelo de tumor en ratón atímico de micrometástasis intraperitoneales. Materiales y métodos: se inyectaron células SKOV-3-luc (5·106 células en 0,25 ml de RPMI) por vía intraperitoneal, en ratones atímicos Nude-Foxn1 nu, hembra de 6 semanas de edad, criados en institución, con pesos corporales de 17,7-23,6 g. Tres días más tarde, los ratones se trataron con inyecciones intraperitoneales de micropartículas de carbonato de calcio marcadas con 224Ra en tampón de sacarosa con actividades de 200 kBq/kg (0,25-0,3 ml), 600 kBq/kg (0,35-0,4 ml) o 3 inyecciones de 200 kBq/kg (0,25-0,4 ml). En el último grupo el tiempo entre cada fracción inyectada era 48 horas. Los animales de control recibieron solución salina (0,4 ml) o 200 mg/kg (0,35-0,4 ml) de micropartículas no marcadas en tampón de sacarosa. Los ratones se repartieron aleatoriamente en grupos de tratamiento antes de inoculación de las células, consistiendo cada grupo en 8 ratones. El día 44 y 45 después de iniciar el tratamiento se sacrificaron todos los animales por dislocación cervical. Durante la disección, se evaluó la presencia de tumores macroscópicos por inspección visual cuidadosa de cada animal y todos los tumores visibles en la cavidad peritoneal se retiraron y pesaron.

Resultados: Los datos se muestran en la figura 2. No había diferencia significativa entre los pesos tumorales medios de los dos grupos de control que recibieron bien solución salina o micropartículas de carbonato de calcio no marcadas. Todos los grupos que recibieron micropartículas marcadas con 224Ra tuvieron una supresión fuerte del crecimiento tumoral, como se muestra por la fuerte reducción de los pesos tumorales que era estadísticamente significativa comparado con los controles. Aunque no había diferencia estadística entre los grupos de tratamiento con 224Ra, había una tendencia hacia mayor supresión del crecimiento tumoral con la dosis más alta de 224Ra y el tratamiento fraccionado.

En conclusión, las micropartículas de carbonato de calcio marcadas con 224Ra mostraban una actividad antitumoral fuerte y consistente en ratones con tumores intraperitoneales.

Ejemplo 9. Efectos terapéuticos en un modelo de ascitis por cáncer agresivo.

Antecedentes: el cáncer de ovario humano a menudo conduce a ascitis intraperitoneal. La línea de células de cáncer de ovario humano ES-2 produce crecimiento de células tumorales agresivas y ascitis cancerosa en ratones atímicos.

Materiales y métodos: Se inyectaron células ES-2 (10·106 células en 0,3 ml de RPMI) por vía intraperitoneal en ratones atímicos Nude-Foxn1 nu, hembra de 6 semanas de edad, criados en institución, con pesos corporales de 18,1-23,2 g. 25 horas más tarde, los ratones se trataron con inyecciones intraperitoneales de micropartículas de carbonato de calcio marcadas con 224Ra en tampón de sacarosa con actividades de 100 kBq/kg (0,3 ml), 300 kBq/kg (0,3-0,35 ml) o 500 kBq/kg (0,3-0,35 ml). Los animales de control recibieron 0,35 ml de solución salina. Los ratones se repartieron aleatoriamente en grupos de tratamiento antes de la inoculación de células, consistiendo cada grupo

5

10

15

20

25

30

35

40

45

en 7-8 ratones. Los animales se pesaron y se vigiló el progreso de la enfermedad un mínimo de 3 veces por semana, y cada día cuando presentaban signos clínicos que indicaban que se acercaba la fase final de la enfermedad. Todos los ratones se sacrificaron por dislocación cervical el día que alcanzaron el criterio de valoración de pérdida de bienestar, teniendo en cuenta las distensiones abdominales que dificultan la movilidad o respiración, la pérdida o ganancia rápida de peso corporal junto con el aspecto y comportamiento generales del animal. Después de la eutanasia se llevó a cabo la necropsia para el examen patológico general.

Resultados: Los tiempos de supervivencia se registraron como días después de inoculación de células tumorales, y se presenta una curva de supervivencia preliminar que incluye datos hasta el día 20 de seguimiento (figura 3). El día 19 después de inoculación de las células tumorales, se sacrificaron todos los ratones en los grupos de solución salina y de la dosis más baja (100 kBq/kg), mientras que 86% de los ratones (6/7) en el grupo de dosis media (300 kBq/kg) y alta (500 kBq/kg) no alcanzaron el criterio de valoración del estudio. Estos animales que quedaban se censuraron el día 20. La supervivencia mediana de cada grupo se presenta en la tabla 4.

Tabla 4. Supervivencia mediana de ratones con ascitis intraperitoneal por cáncer ES-2 tratados con solución salina o carbonato de calcio marcado con 224Ra

Grupo de tratamiento

Número de ratones por grupo Tiempo de supervivencia mediano después de inoculación de células

NaCl

8 12 días

100 kBq/kg micropartículas de 224Ra-CaCO3

8 13 días

300 kBq/kg micropartículas de 224Ra-CaCO3

7 Más de 20 días

500 kBq/kg micropartículas de 224Ra-CaCO3

7 Más de 20 días

En conclusión: Se obtuvo una prolongación considerable de la vida sin enfermedad con las micropartículas de carbonato de calcio marcadas con 224Ra, lo que indicaba un potencial significativo para la ascitis intracavitaria.

Ejemplo 10 A. Preparación de una mezcla radioterapéutica de dos componentes.

En algunos aspectos puede ser beneficioso combinar las partículas de carbonato de calcio marcadas con 224Ra con un producto radiofarmacéutico específico de células. Esto se obtiene cuando una solución de 224Ra en equilibrio con los nucleidos descendientes se combina con un conjugado de quelato que se une al 212Pb, antes de ponerla en contacto con las partículas de carbonato de calcio.

Métodos: A 0,2 ml de solución en acetato amónico 0,5 M de 224Ra en equilibrio con los nucleidos descendientes, se añadió 1 mg/ml de anticuerpo monoclonal (mAb) marcado con TCMC (trastuzumab, cetuximab o OI-3) y se incubó durante 60 minutos. Después, la mezcla de reacción se añadió a 30 mg de micropartículas de carbonato de calcio en 0,2 ml de albúmina de suero bovino al 1% y se mezcló durante 30 minutos. Después la mezcla se centrifugó y el líquido sobrenadante y el sedimento se contaron por separado en un contador gamma y se analizó con un detector de germanio.

Se preparó una mezcla radioterapéutica que consistía en anticuerpo marcado con 212Pb y micropartículas de 224Ra-CaCO3. Para el marcaje del anticuerpo con 212Pb, el anticuerpo cetuximab se conjugó primero con un agente de quelación, TCMC.

Para preparar el radioinmunoconjugado, se mezcló solución de 224Ra con acetato amónico 0,5 M (pH entre 5 y 6) con TCMC-Cetuximab y se hizo reaccionar durante 30 minutos a 37ºC con una velocidad de rotación de 350 rpm. La pureza radioquímica del producto resultante se evaluó con tiras cromatográficas (Biodex), y se encontró que era aproximadamente 95% para el 212Pb. Se prepararon micropartículas de CaCO3 como se ha descrito para el procedimiento de radiomarcaje, excepto que la solución de radiactividad añadida era la solución descrita antes, que contenía tanto 224Ra libre como TCMC-Cetuximab marcado con 212Pb. Después de 1,5 horas de incubación a temperatura ambiente en un HulaMixer, las partículas en la solución de radiomarcaje se centrifugaron y se separaron el líquido sobrenadante y la fracción de partículas. La distribución de la actividad del 224Ra y 212Pb en el sedimento de partículas y el líquido sobrenadante se determinó con el detector HPGe. Se llevó a cabo un análisis de pureza radioquímica en una parte alícuota del líquido sobrenadante.

Los datos se presentan en las tablas 5 y 6. La tabla 6 muestra que se encontró 66,39% de la actividad total del 212Pb en el líquido sobrenadante, mientras que 98,41% del 224Ra se retuvo en las partículas. Del 212Pb liberado, al menos 98% estaba unido a proteína (tabla 5), lo que representa la fracción del anticuerpo unido al 212Pb antes de que el anticuerpo se mezclara con las partículas. En la tabla 6, se presenta la fracción de conjugado de 212Pb-anticuerpo y 224Ra libre en la circulación y unido a las partículas de carbonato de calcio. Los datos muestran que el 224Ra se une a las partículas mientras que la mayor parte del conjugado de 212Pb está libre para circular en el medio. Por lo tanto,

se obtuvo una mezcla radioterapéutica bifuncional adecuada para la inyección.

En conclusión, las soluciones de 224Ra mezcladas con los conjugados de 212Pb-TCMC-anticuerpo se pueden usar para preparar micropartículas de 224Ra-CC dando una mezcla terapéutica de dos componentes con radioinmunoconjugado (RIC) y micropartículas radiomarcadas con propiedades de direccionamiento de antígeno así

5 como propiedades radioterapéuticas de micropartículas. Esto puede ser ventajoso en la producción de una combinación de irradiación de la cavidad general y un tratamiento con RIC dirigido a la célula tumoral específica contra el cáncer. La adición del RIC puede potenciar la microdistribución de radiación alfa para mejorar el efecto terapéutico en células de cáncer resistentes.

Tabla 5. Análisis por cromatografía de capa fina de conjugado de 212Pb-TCMC-anticuerpo antes y después de 10 absorción en partículas de carbonato de calcio.

Análisis de RCP de la fracción unida a proteína

Tiempo en el tampón de formulación

Espectroscopía gamma detector de germanio Canberra Contador gamma Cobra II Nal

212Pb

70-80 keV 220-260 keV

Antes de mezclar con las partículas

13 minutos 98,2 % 97,2 % 95,2 %

20 minutos

99,6% 98,1 %

Después de marcaje de las partículas

10 minutos 100,0 % 98,1 %

20 minutos

98,2 % 100,0 %

Tabla 6. Absorción en las partículas de la solución de 224Ra que contiene 212Pb-TCMC-anticuerpo

% de la actividad total

212 Pb

224 Ra

Partículas

33,61 % 98,41 %

Fracción en líquido sobrenadante/ anticuerpo

66,39 % 1,59 %

Ejemplo 10 B. Descripción de un sistema de kit para preparar una mezcla radioterapéutica de radioinmunoconjugado 15 de 212Pb y micropartículas de 224Ra.

Un vial (A) con solución de 224Ra en una solución acuosa (p. ej., acetato amónico 0,5 M, pH 5-6) se deja que se desintegre durante 1 día o más para producir 212Pb. Una solución acuosa (B) de conjugado de TCMC-anticuerpo o anticuerpo conjugado con quelato similar y un vial (C) con micropartículas de carbonato de calcio secas o acuosas. Se mezclan entre sí los contenidos del vial A y B en uno de los viales y se incuba durante 1 min a 4 horas y después

20 se mezcla con el vial C y se incuba durante 1 minuto a 4 horas. Después de cada una de las etapas de incubación, se puede llevar a cabo o no un control de calidad. Finalmente, la mezcla combinada de A, B y C se extrae en una jeringa y se administra a un paciente.

imagen9

5

10

15

20

25

30

35

40

45

Ítems de la descripción

1.

Una partícula que comprende un compuesto degradable y un radionucleido emisor alfa y/o un radionucleido que genera un descendiente emisor alfa.

2.

La partícula según el ítem 1, en donde el radionucleido se selecciona del grupo que consiste en

224Ra, 212Bi, 212Pb 223Ra, 225Ra, 225Ac, 213Bi, 211At, 227Th.

3.

La partícula según uno cualquiera de los ítems 1-2, en donde el compuesto degradable se selecciona del grupo que consiste en CaCO3, CaCO3 modificado con PEG, CaCO3 modificado con proteína, CaCO3 modificado con hidrato de carbono, CaCO3 modificado con lípido, CaCO3 modificado con vitamina, CaCO3 modificado con compuesto orgánico, CaCO3 modificado con polímero y/o CaCO3 modificado con cristal inorgánico.

4.

La partícula según uno cualquiera de los ítems 1-3, en donde el tamaño de la partícula es de 1 nm a 500 µm.

5.

La partícula según uno cualquiera de los ítems 1-4, que además comprende uno o más compuestos seleccionados del grupo que consiste en un anticuerpo monoclonal, un anticuerpo policlonal, un radioinmunoconjugado, un inmunoconjugado, un conjugado de quelato y anticuerpo, vitaminas que incluyen folato y derivados de folato, péptidos, minicuerpos y aficuerpos.

6.

Una composición farmacéutica que comprende una o más partículas según uno cualquiera de los ítems 1-5 y un diluyente, vehículo, tensioactivo y/o excipiente.

7.

La composición farmacéutica según el ítem 6, preparada con una cantidad de radionucleido que es de 1 kBq a 10 GBq por dosis.

8.

La composición farmacéutica según uno cualquiera de los ítems 6-7, preparada con una cantidad de radionucleido que es de 50 MBq a 100 GBq adecuada para la producción a escala industrial de multidosis.

9.

La composición farmacéutica según uno cualquiera de los ítems 6-8, en donde la composición es una suspensión de partículas que comprende partículas monodispersas o polidispersas marcadas con un radionucleido emisor alfa y/o un radionucleido que genera un descendiente emisor alfa.

10.

La composición farmacéutica según uno cualquiera de los ítems 6-9, que es adecuada para la inyección intravenosa o intracavitaria.

11.

La partícula según uno cualquiera de los ítems 1-5 o la composición farmacéutica según los ítems 6-9, para usar como un medicamento.

12.

La partícula según uno cualquiera de los ítems 1-5 o la composición farmacéutica según los ítems 6-9, para usar en terapia intracavitaria, radioembolización o radiosinovectomía.

13.

La partícula según uno cualquiera de los ítems 1-5 o la composición farmacéutica según los ítems 6-9, para usar en el tratamiento del cáncer.

14.

La partícula según uno cualquiera de los ítems 1-5 o la composición farmacéutica según los ítems 6-9, para usar según los ítems 12-13, en donde el cáncer se selecciona del grupo que consiste en cánceres intraperitoneales, cánceres intracraneales, cánceres pleurales, cánceres de vejiga, cánceres cardiacos y cánceres en la cavidad subaracnoidea.

15.

Un método de tratamiento o mejora que comprende la administración de las partículas según uno cualquiera de los ítems 1-5 o la composición farmacéutica según los ítems 6-9, a un individuo que lo necesite usando tratamiento único o dosis repetidas.

16.

Un método para preparar una partícula según uno cualquiera de los ítems 1-6, comprendiendo el método poner en contacto entre sí un radionucleido emisor alfa y un compuesto biodegradable con o sin usar un vehículo para el radionucleido.

17.

Un kit que comprende

-una nanopartícula o micropartícula según uno cualquiera de los ítems 1-6,

-un radionucleido emisor alfa o un radionucleido que genera un descendiente emisor alfa,

-un vehículo, diluyente y/o excipiente, y

-opcionalmente instrucciones para usar el kit.

18. Un kit que comprende

-una nanopartícula o micropartícula según uno cualquiera de los ítems 1-6, -un radionucleido emisor alfa o un radionucleido que genera un descendiente emisor alfa, -un vehículo, diluyente y/o excipiente, y -opcionalmente instrucciones para usar el kit para preparar una solución farmacéutica bifuncional que comprende

suspensión de partículas y solución de radioinmunoconjugado.

19. Un kit según el ítem 18, que además comprende una molécula conjugada con agente quelante, que incluye un anticuerpo monoclonal.

Claims (1)

1. imagen1