ES2665805T3 - Extractos de sen y usos de los mismos - Google Patents

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Abstract

Un extracto de Cassia acutifolia y/o Cassia angustifolia reducido en senósidos totales, en el que dichos senósidos totales tienen una concentración en porcentaje ponderal de <= 0,5 %.

Description

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Retirada de LPS y secado de la membrana IC:
Una vez completada la incubación de 1 hora, los insertos se retiran de los pocillos con las células y se transfieren a la placa vacía mientras que la placa con las células se coloca en una incubadora.
5 La solución de LPS aún presente se retira de los insertos, estos últimos se someten a un rápido lavado con agua estéril ultrapura y se dejan secar.
Disposición de la capa de muestra en el IC:
10 En la membrana semipermeable de los tres insertos para la muestra se inoculan 100 μl de una composición basada en alginato al 0,5 % y se deja estratificar durante 20 minutos mientras que en los insertos C+ y C- no se añade nada. Una vez han pasado los 20 minutos se elimina el exceso de muestra y se lavan las membranas con PBS de acuerdo con procedimientos especificados por el protocolo.
15 Adición de LPS a insertos de IC
Una vez están listos los insertos con la muestra, se añaden 300 μl de medio a todos los insertos (CAM, C+, C-). Los insertos se insertan en sus pocillos respectivos con las células y las placas se incuban durante 1 h a 37 °C.
20 Una vez completada la incubación de 1 hora, los insertos se eliminan y descartan y las placas se incuban de nuevo durante una noche (22-24 horas).
DÍA 3 25
4.7 RECOGIDA DE SOBRENADANTE E INMUNOENSAYO ENZIMÁTICO
Una vez han pasado las 22-24 horas, los sobrenadantes se recogen del BA y de las placas IC para realizar el ensayo ELISA y la dosificación semicuantitativa de IL-6. 30 EVALUACIÓN DEL EFECTO DE BARRERA (BE)
El BE de una sustancia o compuesto se expresa como % de reducción en la liberación de citocina IL-6 por células expuestas a LPS, donde la muestra se ha ensayado respecto al control positivo (C+), donde las células únicamente 35 se han expuesto a LPS.
BE = % de reducción en la liberación de citocina IL-6 = 100 - [(pg/μl de citocinas liberadas por muestra/pg/μl de citocinas liberadas de C+) x 100]
40 La tabla 1, presentada a continuación, muestra que el extracto de sen obtenido de acuerdo con la presente invención crea una barrera al pase de LPS.
MUESTRA
% DE INHIBICIÓN DE IL-6
Control interno
0
SEN, EXTRACTO REDUCIDO EN RESINAS Y SENÓSIDOS DE ACUERDO CON LA PRESENTE INVENCIÓN
47
SEN, EXTRACTO RESINOSO REDUCIDO EN SENÓSIDOS DE ACUERDO CON LA PRESENTE INVENCIÓN
60
Como puede observarse de los resultados anteriores, el extracto reducido en senósidos y resinas tiene excelentes
45 propiedades mucoadhesivas y un alto efecto de barrera; el extracto resinoso reducido en senósidos, aunque tiene propiedades mucoadhesivas sorprendentemente reducidas, tiene un efecto de barrera muy elevado.
Por tanto, evidentemente ambos extractos son adecuados para los usos descritos y las reivindicaciones, así como mezclas de los dos hacen posible aumentar el efecto de barrera manteniendo altas propiedades mucoadhesivas.
50
19

Claims (1)

  1. imagen1
    imagen2
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IT000294A ITRM20130294A1 (it) 2013-05-16 2013-05-16 Estratti di senna e loro usi
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