ES2708854T3

ES2708854T3 - Formulaciones de lípidos que contienen ácido

Info

Publication number: ES2708854T3
Application number: ES08788417T
Authority: ES
Inventors: Catalin Nistor; Markus Johnsson; Fredrik Tiberg
Original assignee: Camurus AB
Current assignee: Camurus AB
Priority date: 2007-08-22
Filing date: 2008-08-22
Publication date: 2019-04-11
Anticipated expiration: 2028-08-22
Also published as: WO2009024795A1; US20120028890A1; JP2016006097A; GB0716385D0; SI2194969T1; WO2009024797A1; JP5851096B2; JP2010536838A; DK2194969T3; EP2194969B1; US9820934B2; CA2697034C; US20180207089A1; KR20160067063A; CN101861140A; CN105055303A; JP6411299B2; EP2194969A1; CA2697034A1; KR20100061493A

Abstract

Una preformulación no acuosa que comprende una mezcla de viscosidad baja de: a) 30-70% en peso de al menos un diacil-lípido neutro; b) 30-60% en peso de al menos un fosfolípido; c) al menos un disolvente orgánico biocompatible; d) al menos un agente activo peptídico; y e) al menos un ácido soluble en lípidos seleccionado de ácido metanosulfónico, ácido bencenosulfónico, ácido toluenosulfónico y HCl; en donde el ácido soluble en lípidos está presente en una ratio molar de agente activo peptídico a ácido soluble en lípidos comprendida en el intervalo de 1:1 a 1:30; en donde la mezcla de viscosidad baja tiene una viscosidad de 1 a 1000 mPas a 20°C; en donde la preformulación forma, o es capaz de formar, al menos una estructura de fase de cristal líquido por contacto con un fluido acuoso.

Description

DESCRIPCION

Formulaciones de lipidos que contienen acido

La presente invencion se refiere a precursores de formulacion (preformulaciones) para las composiciones de generacion in situ para la liberacion controlada de agentes activos peptidicos tales como el peptido-1 semejante a Glucagon (GLP-1) y/o analogos del mismo, y metodos de tratamiento con tales formulaciones. En particular, la invencion se refiere a preformulaciones de carga alta de componentes anfifilicos y al menos un agente activo de GLP-1 o analogos para aplicacion parenteral, que sufren transicion de fase por exposicion a fluidos acuosos, tales como fluidos corporales, formando con ello una matriz de liberacion controlada.

Muchos agentes bioactivos, con inclusion de productos farmaceuticos, nutrientes, vitaminas etc. tienen una "ventana funcional". Es decir, que existe un intervalo de concentraciones en el cual puede observarse que estos agentes proporcionan cierto efecto biologico. En los casos en que la concentracion en la parte apropiada del cuerpo (v. g. localmente o como se demuestra por concentracion en suero) cae por debajo de cierto nivel, no puede atribuirse efecto beneficio alguno al agente. Analogamente, existe generalmente un nivel superior de concentracion por encima del cual no se deriva beneficio adicional alguno por aumento de la concentracion. En algunos casos, el aumento de la concentracion por encima de un nivel particular da como resultado efectos indeseables o incluso peligrosos.

Algunos agentes bioactivos tienen una semivida biologica larga y/o una ventana funcional amplia, y por tanto pueden administrarse ocasionalmente, manteniendo una concentracion biologica funcional a lo largo de un periodo de tiempo sustancial (v. g. 6 h a varios dias). En otros casos, la velocidad de aclaramiento es alta y/o la ventana funcional es estrecha y por tanto para mantener una concentracion biologica dentro de esta ventana se requieren dosis regulares (o incluso continuas) de una pequena cantidad. Esto puede ser particularmente dificil en los casos en que son deseables o necesarias vias de administracion no orales (v. g. administracion parenteral), dado que la autoadministracion puede ser dificil y causar por tanto molestia y/o un cumplimiento deficiente. En tales casos seria ventajoso que una sola administracion proporcionara el agente activo a un nivel terapeutico a lo largo de todo el periodo durante el cual es necesaria la actividad.

Existe un potencial enorme en el uso de peptidos (con inclusion de proteinas) para el tratamiento de diversos estados de enfermedad, asi como en la profilaxis y la mejora del estado general de salud y bienestar de los individuos. Sin embargo, la eficiencia de los agentes peptidicos administrados esta limitada generalmente debido a una biodisponibilidad deficiente, que esta causada a su vez por la degradacion rapida de peptidos y proteinas en los fluidos biologicos. Esto aumenta la dosis que tiene que administrarse, y en muchos casos restringe las vias eficaces de administracion. Estos efectos se ven incrementados ulteriormente por la permeabilidad, a menudo limitada, de peptidos y proteinas a traves de las membranas biologicas.

Los peptidos y proteinas que se administran al cuerpo de los mamiferos (v. g. por via oral, intramuscular, etc.) estan sujetos a degradacion por diversas enzimas proteoliticas y sistemas presentes en todo el cuerpo. Sitios bien conocidos de actividad de las peptidasas incluyen el estomago (v. g. pepsina), y el tracto intestinal (v. g. tripsina, quimotripsina, y otras) pero otras peptidasas (v. g. las carboxipeptidasas A, B & C) se encuentran en todo el cuerpo. Despues de la administracion oral, la degradacion gastrica e intestinal reduce la cantidad de peptido o proteina que podria absorberse potencialmente a traves del revestimiento interior de la superficie intestinal y disminuir con ello su biodisponibilidad. Analogamente, los peptidos y proteinas libres en el torrente sanguineo de los mamiferos se ven sometidos tambien a degradacion enzimatica (v. g. por carboxipeptidasas plasmaticas, etc.).

Existen muchos agentes activos basados en peptidos, algunos de los cuales se exponen a continuacion. Entre estos, uno de particular interes es GLP-1.

El peptido semejante a glucagon (GLP)-1 es una hormona glucorreguladora potente que es liberada por las celulas intestinales L en la circulacion en respuesta a la ingestion de nutrientes y estimulos neurales y endocrinos. Estructuralmente, el precursor de GLP-1 (precursor de las formas activas) es un peptido de 37 aminoacidos con un PM de 4,2 kilodaltons, que tiene una secuencia altamente conservada entre diferentes especies. Despues de la escision posterior a la traduccion de los 6 primeros aminoacidos del precursor, se generan dos formas activas equipotentes de GLP-1 ((7-37) y (7-36)amida). GLP-1 esta implicado en la modificacion de la homeostasis de la glucosa por acciones que incluyen potenciacion de la secrecion de insulina estimulada por la glucosa y biosintesis y supresion de la secrecion de glucagon, vaciado gastrico, e ingesta de alimento. Las capacidades de GLP-1 para estimular la secrecion de insulina e inhibir la liberacion de glucagon son dependientes de la glucosa; asi, el riesgo de hipoglucemia con la administracion de GLP-1 es bajo. GLP-1 aumenta tambien la masa de celulas beta en modelos preclinicos de diabetes por mecanismos que incluyen estimulacion de la proliferacion y neogenesis de las celulas beta e inhibicion de la apoptosis de las celulas beta. Estudios tanto en animales como en humanos indican que GLP-1 puede desempenar tambien un papel protector en el sistema cardiovascular.

Las acciones combinadas de GLP-1 han generado un interes sustancial en la utilizacion de este peptido como agente terapeutico para el tratamiento de enfermedades metabolicas, con inclusion de diabetes tipo II y obesidad.

Sin embargo, el potencial terapeutico del GLP-1 nativo esta limitado por su semivida plasmatica muy corta (inferior a 2 minutos). Esto es debido tanto a la rapida desactivacion por la enzima proteolftica dipeptidil-peptidasa (DPP)-IV como al rapido aclaramiento renal. Por consiguiente, se han desarrollado analogos de GLP-1 de accion prolongada, resistentes a DPP-IV para uso clfnico, que incluyen exenatida (Byetta, Amylin-Lilly), liraglutida (Novo Nordisk), CJC-1131 (ConjuChem), AVE010 (Zealand Pharma - Sanofi-Aventis), LY548806 (Lilly), TH-0318 (TheraTechnologies), BIM 51077 (Ipsen-Roche). Todos estos son productos para administration una o dos veces al dfa; un producto de exenatida de liberation controlada (una semana) (Exenatida LAR Alkermes-Amylin-Lilly) se encuentra actualmente en fase de investigation clfnica. Estos mimeticos de GLP-1 se fijan a los receptores de G^lP-1 con afinidad similar o superior y producen acciones biologicas identicas a las de GLP-1 nativo, pero son resistentes a la desactivacion mediada por DPP-IV y al aclaramiento renal. Estos compuestos son capaces de ejercer una actividad similar a GLP-1 mas prolongada durante periodos de tiempo mas largos in vivo. Un enfoque terapeutico alternativo para prolongar la accion del GLP-1 nativo es inhibir la actividad de DPP-IV, evitando con ello la degradation de GLP-1. Varios agentes activos por via oral que inhiben la actividad de DPP-IV estan siendo evaluados tambien para el tratamiento de la diabetes tipo II.

Las estructuras y secuencias de GLP-1 y algunos analogos conocidos se muestran a continuation comenzando con dos formas equipotentes que existen naturalmente. Se utiliza un sistema directo para describir los fragmentos y analogos de GLP-1. Por ejemplo, Arg34- GLP-1 (7-37) designa un analogo de GLP-1 que se deriva formalmente del precursor de GLP-1 por deletion de los residuos de aminoacidos numeros 1 a 6 y sustitucion del residuo de aminoacido que existe naturalmente en la position 34 (Lys) por Arg.

GLP-1(7-37) nativo (humano):

His⁷-Ala-Glu-Gly¹⁰-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp¹⁵-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu²⁰-Glu-Gly-Gln-

Ala-Ala²⁵-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala³⁰-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Arg-Gly³⁷

Nativo (humano):

GLP-1(7-36)amida

NovoNordisk (Liraglutida)

Arg34Lys26-(N-£-(Y-Glu(N-a-hexadecanoflo )))-GLP-1 (7-37)

Conjuchem (CJC-1131)

D-Ala8Lys37-(2-(2-(2-maleimidopropionamido(etoxi)etoxi)acetamida))-GLP-1 (7-37)

Sanofi-Aventis/Zealand (AVE-010 (ZP10))

His-Gly-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Leu-Ser-Lys-Gln-Met-Glu-Glu-Glu-Ala-

Val-Arg-Leu-Phe-Ile-Glu-Trp-Leu-Lys-Asn-Gly-Gly-Pro-Ser-Ser-Gly-Ala-Pro-Pro-

Ser-Lys-Lys-Lys-Lys-Lys-Lys

Eli Lilly (Exenatida)

His⁷-Gly-Glu-Gly¹⁰-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp¹⁵-Leu-Ser-Lys-Gln-Met²⁰-Glu-Glu-Glu-

Ala-Val²⁵-Arg-Leu-Phe-Ile-Glu³⁰-Trp-Leu-Lys-Asn-Gly-Gly-Pro³⁷-Ser-Ser-Gly-Ala-Pro-Pro-Pro-Ser-Amida

Como se utiliza en esta memoria, "GLP-1 nativo" indica GLP-1 (7-37) humano y/o GLP-1 (7-36)amida humano, y los terminos "Liraglutida", "CJC-1131", "A V E-010", "exenatida" se utilizan para indicar los principios activos respectivos arriba indicados, con inclusion de sus sales, Esteres y derivados fisiologicamente aceptables donde el contexto lo permite. Todos estos, con inclusion de las secuencias de GLP-1 nativo estan incluidos en el termino "analogos de GLP-1" como se utiliza en esta memoria. Otros analogos de GLP-1 adecuados se describen en v. g. Knudsen et al. J. Med. Chem. 2000, 43, 1664-1669; Knudsen J. Med. Chem. 2004, 47, 4128-4134; Hui et al. Diabetes Metab. Res. Rev. 2005, 21,313-331 y Holz and Chepurny Curr. Med. Chem. 2003, 10, 2471-2483. Estas citas se incorporan aquf por referencia en sus totalidades, y aunque en esta memoria se hace referencia a pasajes especfficos, todas las secuencias analogas de GLP-1 y todos los agonistas del receptor de GLP-1 a los que se hace referencia en cualquiera de estos documentos son adecuados para uso en la presente invention. El termino agonistas del receptor de GLP-1 al que se hace referencia en esta memoria incluye todos los analogos de GLP-1 como se han descrito arriba y en las referencias citadas anteriormente.

Con respecto a la administracion, las afecciones tales como la diabetes tipo II son progresivas, y cualquier regimen de tratamiento implicara tfpicamente una terapia continua a largo plazo, durante periodos de meses o anos. Las terapias de GLP-1 disponibles actualmente son tfpicamente inyectables, requiriendo la administracion alrededor de dos veces al dia durante todo el periodo de tratamiento. Este se realizara generalmente por autoadministracion del paciente. Dado que la inyeccion frecuente durante un periodo largo no es una estrategia de administracion optima, existe claramente campo para que los usuarios de GLP-1 se beneficien de formulaciones sostenidas de accion prolongada, que podrian administrarse con frecuencia mucho menor.

El unico producto de GLP-1 de accion prolongada que se sabe se halla en desarrollo es Exenatida LAR, desarrollado con la colaboracion de Alkermes, Amylin y Lilly. Este utiliza el sistema de suministro Alkermes Medisorb® constituido por microesferas de polimeros biodegradables. El sistema de liberacion comprende una formulacion de microesferas polimeras de poli(DL- lactida) (PDLL) suspendida en agua, que atrapa el analogo de GLP-1 exenatida. El nivel de carga de exenatida en la Exenatida LAR es tipicamente 0.8 a 2 mg por dosis administrada semanalmente. Evidentemente, dado que los pacientes sometidos a tratamiento con un agonista del receptor de GLP-1 requeriran tipicamente tratamiento continuo durante muchos meses o anos, un sistema de deposito que permitiera la carga y liberacion controlada de una dosis mayor durante un periodo mas largo ofreceria una ventaja considerable.

Las formulaciones de microesferas polimericas tienen que administrarse generalmente por medio de una aguja de diametro considerable, tipicamente de calibre 20 o mayor. Esto es necesario como resultado de la naturaleza de los sistemas de dosificacion polimericos utilizados, que son tipicamente suspensiones de polimericos. Evidentemente, seria ventajoso proporcionar un sistema de viscosidad baja, tal como una solucion homogenea, dispersion de particulas finas, o fase L2, que pudiera administrarse facilmente a traves de una aguja estrecha, reduciendo asi el malestar del paciente durante el procedimiento. En el caso de la diabetes tipo II, esta facilidad de administracion es particularmente importante dado que la mayoria de los pacientes se encontraran normalmente en un regimen de autoadministracion. La disponibilidad de una formulacion sostenida con una duracion de unos dias, pero cuya administracion es lo suficientemente compleja para que la misma requiera tratamiento por un profesional de atencion sanitaria no sera una ventaja para todos los pacientes sometidos a autoadministracion dos veces al dia o una vez al dia, y es probable que resulte mas cara. La puesta a disposicion de una formulacion que asegure una duracion suficientemente larga para justificar una visita a un profesional de atencion sanitaria para la administracion y/o una preparacion que pueda ser autoadministrada, asi como la reduccion del tiempo de preparacion de los profesionales de atencion sanitaria o los pacientes antes de la administracion son todos ellos problemas importantes.

Los polimeros poli-lactato, poli-glicolato y poli-lactato-co-glicolato utilizados tipicamente para la degradacion de formulaciones de liberacion lenta, y que se utilizan en el unico producto conocido de liberacion sostenida de GLP-1, son tambien la causa de cierta irritacion en al menos algunos pacientes. En particular, estos polimeros contienen tipicamente cierta proporcion de acido acetico como impureza, que puede irritar el punto de inyeccion despues de la administracion. Cuando el polimero se descompone ulteriormente, los productos de degradacion son acido lactico y acido glicolico, con lo cual se causa una irritacion adicional. Como resultado de los efectos combinados de la administracion con aguja de calibre ancho y los contenidos irritantes, el malestar en el sitio de administracion y la formacion de tejido conectivo de cicatriz son mayores que lo deseable.

Desde el punto de vista del suministro de farmaco, las composiciones de deposito de polimero tienen generalmente la desventaja de aceptar solo cargas de farmaco relativamente bajas y tener un perfil de liberacion "explosion/retraso". La naturaleza de la matriz polimerica, especialmente cuando se aplica en forma de solucion o prepolimero, causa una explosion inicial de liberacion de farmaco cuando se administra la composicion por primera vez. Esto va seguido por un periodo de liberacion lenta, mientras comienza la degradacion de la matriz, seguido finalmente por un aumento en la velocidad de liberacion hasta el perfil sostenido deseado. Este perfil de liberacion explosion/retraso puede causar que la concentracion del agente activo in vivo estalle por encima de la ventana funcional inmediatamente despues de la administracion, y descienda luego nuevamente hasta el fondo de la ventana funcional durante el periodo de retraso antes de alcanzar una concentracion funcional sostenida durante cierto periodo de tiempo. Evidentemente, desde un punto de vista funcional y toxicologico este perfil de liberacion explosion/retraso es indeseable y podria ser peligroso. El mismo puede limitar tambien la concentracion de equilibrio que puede proporcionarse debido al riesgo de efectos adversos en el punto "pico". La presencia de una fase de retraso puede requerir ademas la dosificacion suplementaria con inyecciones repetidas durante el periodo de inicio del tratamiento de deposito a fin de mantener una dosis terapeutica mientras las concentraciones de agente activo proporcionadas desde el deposito son subfuncionales.

Evidentemente, en el caso de los analogos de GLP-1, es importante que el periodo de "explosion" inmediatamente despues de la administracion, no sea tan pronunciado como para que cause hipoglucemia en el individuo. GLP-1 es mucho mas seguro a este respecto que la insulina, pero pruebas clinicas de algunos analogos de GLP-1 han demostrado efectos hipoglucemicos con formulaciones de liberacion no sostenida, y la dosis inyectada cuando una formulacion esta disenada para durar varias semanas sera correspondientemente mayor. Por esta razon, seria una ventaja considerable minimizar el efecto inmediato de "explosion" en el caso de la administracion de una composicion analoga de GLP-1.

La fabricacion de microglobulos y suspensiones de PLGA es adicionalmente una dificultad considerable con ciertos sistemas de deposito existentes. En particular, dado que los globulos son particulados, y los polimeros obstruyen las membranas, los mismos no pueden esterilizarse generalmente por filtracion y, ademas, dado que el copolimero PLGA se funde aproximadamente a 40° C, no pueden tratarse termicamente para su esterilizacion. Como resultado, un proceso de fabricacion complejo tiene que realizarse totalmente en condiciones de esterilidad alta.

Problemas adicionales con las microesferas polimericas biodegradables incluyen reconstitucion compleja antes de la inyeccion y estabilidad limitada durante el almacenamiento, debido tanto a la agregacion como a la degradacion del sistema de suministro y/o el agente activo.

En WO2006/131730 se describe una composicion alternativa de liberacion lenta de GLP-1 y analogos del mismo basada en lipidos. Esta es una formulacion altamente eficaz, pero la concentracion del analogo de GLP-1 que puede incluirse en la formulacion esta limitada por la solubilidad del agente activo (peptido). Evidentemente, una mayor concentracion de agente activo permite la posibilidad de productos de deposito de mayor duracion, productos que mantienen una concertacion sistemica mas alta, y productos que tienen un volumen de inyeccion menor, factores todos ellos que son considerablemente ventajosos en circunstancias apropiadas. Asi, seria considerablemente valioso establecer una via por la cual pudieran incluirse mayores concentraciones de GLP-1 o analogos de GLP-1 en una formulacion de deposito basada en lipidos.

Los presentes inventores han establecido ahora que por la puesta a disposicion de una preformulacion no acuosa conforme a la reivindicacion 1, puede generarse una preformulacion que aborda muchas de las carencias de las formulaciones de deposito conocidas, y que puede aplicarse para proporcionar un deposito de agonista del receptor de GLP-1. En particular, la preformulacion es facil de fabricar, puede esterilizarse por filtracion, tiene viscosidad baja (que permite la administracion facil y menos dolorosa tipicamente por medio de una aguja de calibre estrecho), permite la incorporacion de un nivel mayor de agente bioactivo que la que se ha demostrado anteriormente (permitiendo asi potencialmente la utilizacion de una cantidad menor de composicion), requiere inyeccion poco profunda y/o forma una composicion de deposito deseada no laminar in vivo que tiene un perfil de liberacion controlable de "explosion" o "sin explosion". Las composiciones estan formadas tambien a partir de materiales que son atoxicos, biotolerables y biodegradables, que pueden administrarse por via intramuscular o subcutanea, y son adecuadas para autoadministracion. Evidentemente, estas ventajas son igualmente aplicables a otros agentes activos adecuados, y en particular a peptidos.

En un primer aspecto, la presente invencion proporciona asi una preformulacion no acuosa que comprende una mezcla de viscosidad baja de:

a) 30-70% en peso de al menos un diacil-lipido neutro;

b) 30-60% en peso de al menos un fosfolipido;

c) al menos un disolvente organico biocompatible;

d) al menos un agente activo peptidico; y

e) al menos un acido soluble en lipidos seleccionado de acido metanosulfonico, acido bencenosulfonico, acido toluenosulfonico y HCl;

en donde el acido soluble en lipidos esta presente en una ratio molar de agente activo peptidico a acido soluble en lipidos comprendida en el intervalo de 1:1 a 1:30;

en donde la mezcla de viscosidad baja tiene una viscosidad de 1 a 1000 mPas a 20°C;

en donde la preformulacion forma, o es capaz de formar, al menos una estructura de fase de cristal liquido por contacto con un fluido acuoso.

La invencion proporciona tambien una preformulacion no acuosa que comprende una mezcla de viscosidad baja de: a) 30-70% en peso de al menos un diacil-glicerol;

b) 30-60% en peso de al menos una fosfatidil-colina;

c) al menos un disolvente organico biocompatible que contiene oxigeno;

d) al menos un agente activo peptidico; y

En una realizacion preferida, el agente activo peptidico es un agonista del receptor de GLP-1.

Generalmente, el fluido acuoso sera un fluido corporal, particularmente un fluido extravascular, fluido extracelular/fluido intersticial o plasma, y la preformulacion formara una estructura de fase de cristal liquido cuando esta en contacto con dicho fluido (v. g. in vivo). La preformulacion de la invencion no contendra generalmente una cantidad significativa de agua antes de la administracion.

En un aspecto preferido, la preformulacion no acuosa comprende una mezcla de viscosidad baja como se describe en un aspecto o realizacion preferido descrito en esta memoria.

En otro aspecto adicional, la presente invencion proporciona un proceso para la formacion de una preformulacion no acuosa adecuada para la administracion de un agente bioactivo peptfdico a un individuo, comprendiendo dicho proceso formar una mezcla de viscosidad baja de

a) al menos un diacil-lfpido neutro;

b) al menos un fosfolfpido;

c) al menos un disolvente organico biocompatible;

y disolver o dispersar al menos un agente activo peptfdico, y al menos un acido soluble en lfpidos seleccionado de acido metanosulfonico, acido bencenosulfonico, acido toluenosulfonico y HCl, en la mezcla de viscosidad baja, o en al menos uno de los componentes a), b) o c) antes de formar la mezcla de viscosidad baja;

en donde la preformulacion formada es una preformulacion conforme a cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5. En otro aspecto adicional, la presente invencion proporciona un metodo no terapeutico de tratamiento cosmetico de un individuo mamffero humano o no humano que comprende administrar a dicho individuo una preformulacion no acuosa conforme a cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5.

El metodo puede ser un metodo de tratamiento cosmetico (v. g. para ayudar a la reduccion del peso corporal) de un individuo sano (v. g. uno que tiene un IMC normal). Un metodo de tratamiento cosmetico de este tipo puede excluir tratamiento medico, y ser por tanto un metodo de tratamiento cosmetico, pero no medico.

En otro aspecto adicional, la presente invencion proporciona una preformulacion no acuosa conforme a cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5, para el uso en la formacion in vivo de un deposito para el tratamiento de diabetes tipo I, diabetes tipo II, peso corporal excesivo y/u obesidad, en donde la preformulacion comprende un agonista del receptor de GLP-1.

Las matrices de liberacion lenta preferidas son las indicadas en esta memoria con respecto a cualquier aspecto de la invencion.

La matriz de liberacion lenta en todos los aspectos de la invencion es una matriz basada en lfpidos, es decir una matriz que comprende al menos 80 % y que esta constituida con preferencia esencialmente por componentes lipfdicos (es decir anfifflicos).

En todos los aspectos de la invencion, la matriz lipfdica estara constituida por los componentes a) y b), como se indica en esta memoria. Los componentes a) y b) seran preferiblemente:

a) al menos un diacil-glicerol;

b) al menos una fosfatidil-colina.

En todos los aspectos, el componente c) sera preferiblemente al menos un disolvente organico biocompatible que contiene oxfgeno.

Las preformulaciones de la presente invencion son muy ventajosas por ser estables al almacenamiento prolongado en su forma final "lista para administracion". Como resultado, aquellas pueden suministrarse facilmente para administracion sea por profesionales de atencion sanitaria o por los pacientes o sus cuidadores, que no precisan ser profesionales sanitarios muy entrenados y pueden no tener la experiencia o las habilidades para realizar preparaciones complejas. Esto es particularmente importante en enfermedades de larga duracion y de efecto lento tales como la diabetes.

En otro aspecto adicional, la presente invencion proporciona un dispositivo de administracion desechable (que incluye tambien un componente de dispositivo) precargado con una dosis medida de una preformulacion no acuosa de la presente invencion. Un dispositivo de este tipo contendra tfpicamente una dosis simple lista para administracion, y estara envasado generalmente en condiciones esteriles de tal modo que la composicion se almacene dentro del dispositivo hasta su administracion.

Dispositivos adecuados incluyen cartuchos, ampollas y particularmente jeringuillas y cilindros de jeringuilla, sea con agujas integrales o con accesorios estandar (v. g. luer) adaptados para admitir una aguja desechable adecuada. Los dispositivos prellenados de la invencion pueden estar incluidos tambien adecuadamente en un kit de administracion, formando tambien dicho kit un aspecto adicional de la invencion. En otro aspecto adicional, la invencion proporciona por tanto un kit para la administracion de al menos un agente activo peptfdico (v. g. al menos un agonista del receptor de GLP-1), conteniendo dicho kit una dosis medida de una formulacion de la invencion y opcionalmente un dispositivo de administracion o componente del mismo. Preferiblemente, la dosis se mantendra en el interior del dispositivo o componente, que sera adecuado para administracion intramuscular o preferiblemente subcutanea. Los kits pueden incluir componentes de administracion adicionales tales como agujas, torundas, etc. y contendran opcional y preferiblemente instrucciones para administracion. Tales instrucciones se referiran tfpicamente a la administracion por una vfa como se describe aquf y/o al tratamiento de una enfermedad indicada anteriormente en esta memoria.

La invencion proporciona un dispositivo de administracion prellenado como se indica en esta memoria y un kit como se indica aquf que comprende una preformulacion no acuosa como se describe en esta memoria.

En un aspecto alternativo de la presente invencion, el "kit" puede contener al menos dos recipientes, conteniendo el primero una mezcla de viscosidad baja de los componentes a) a c), como se han descrito aqrn, y conteniendo el segundo una dosis medida de al menos un agente activo peptfdico (v. g. al menos un agonista del receptor de GLP-1) como se describe en esta memoria. El acido soluble en lfpidos (componente e)) puede estar formulado con el agente activo, o mas preferiblemente como parte de la mezcla de viscosidad baja, la cual comprendera entonces los componentes a) a c) y e).

Un "kit de dos componentes" de este tipo puede comprender el agente activo peptfdico (v. g. analogo de GLP-1) como una formulacion de polvo (que incluye opcionalmente el componente e)) en un solo vial o jeringuilla prellenada y los componentes matriz y disolvente de la formulacion (es decir, los componentes a) a c) (y preferiblemente e)) en un segundo vial o jeringuilla prellenada. En el caso de dos jeringuillas, antes de la inyeccion, las jeringuillas prellenadas se conectan y el polvo que comprende el agente activo se mezcla con la formulacion matriz moviendo los cilindros de las jeringuillas hacia atras y adelante, formando una solucion o suspension peptfdica que se inyecta. Alternativamente, la formulacion lipfdica lfquida se saca de un vial, o se llena previamente en una jeringuilla, y se inyecta en un vial que contiene el polvo de peptido. Esta formulacion puede mezclarse posteriormente por sacudidas a mano u otro metodo de reconstitucion adecuado (v. g. mezclado vorticial, etc.). El componente disolvente c) puede estar presente en uno cualquiera o ambos recipientes (v. g. viales o jeringuillas). En el caso de que el disolvente se reconstituya al menos en parte con el agente activo, este se encontrara generalmente en la forma de una solucion o suspension.

En este aspecto, la invencion proporciona por tanto un kit de dos componentes que comprende:

i) un primer recipiente que contiene una mezcla de viscosidad baja de los componentes a) a c) como se describe en esta memoria;

ii) un segundo recipiente que contiene al menos un agente activo peptfdico (preferiblemente al menos un agonista del receptor de GLP-1),

iii) un acido soluble en lfpidos opcionalmente en un tercer recipiente, preferiblemente en el segundo recipiente, o mas preferiblemente en el primer recipiente;

iv) opcional y preferiblemente al menos uno de:

1) al menos una jeringuilla (que puede ser uno o ambos de dichos recipientes primero y segundo); 2) una aguja para administracion, tal como las descritas en esta memoria;

3) instrucciones para la generacion de una composicion de la invencion a partir del contenido de los recipientes primero y segundo;

4) instrucciones para le administracion, para formar con ello un deposito como se describe en esta memoria.

Algunas de las formulaciones de la presente invencion generan una fase de cristal lfquido no laminar despues de la administracion. El uso de estructuras de fase no laminar (tales como fases de cristal lfquido) en el suministro de agentes bioactivos esta relativamente bien establecido en la actualidad. Un sistema de deposito lipfdico muy eficaz se describe en WO 2005/117830, y una matriz lipfdica muy preferida para uso en la presente invencion es la descrita en dicho documento, cuya descripcion se incorpora por la presente en esta memoria a modo de referencia. Para una descripcion de las estructuras de fase mas favorables de tales formulaciones, consultar el analisis en WO 2005/117830 y en particular a la pagina 29 del documento.

Como se utiliza en esta memoria, la expresion "mezcla de viscosidad baja" se utiliza para indicar una mezcla que puede ser administrada facilmente a un individuo y en particular administrada facilmente por medio de un dispositivo estandar de jeringuilla y aguja. Esto puede estar indicado, por ejemplo, por la posibilidad de dispensarse desde una jeringuilla desechable de 1 ml mediante una aguja de pequeno calibre. Preferiblemente, las mezclas de viscosidad baja pueden dispensarse mediante una aguja de 19 awg, preferiblemente menor que el calibre 19, mas preferiblemente una aguja de 23 awg (o muy preferiblemente incluso calibre 27) por presion manual. En una realizacion particularmente preferida, la mezcla de viscosidad baja deberfa ser una mezcla capaz de pasar a traves de una membrana estandar de filtracion esteril tal como un filtro de jeringuilla de 0,22 pm. El intervalo de viscosidades adecuadas es 1 a 1000 mPas a 20°C.

Se ha observado que, por la adicion de pequenas cantidades de disolvente de viscosidad baja, como se indica en esta memoria, puede proporcionarse un cambio de viscosidad muy significativo. Por ejemplo, la adicion de solo 5% de disolvente a una mezcla lipfdica puede reducir la viscosidad 100 veces y la adicion de 10% puede reducir la viscosidad hasta 10 000 veces. Con el objeto de lograr este efecto sinergico, no lineal, en la reduccion de la viscosidad, es importante que se emplee un disolvente de viscosidad adecuadamente baja y polaridad adecuada. Tales disolventes incluyen los descritos mas adelante en esta memoria. Mezclas de viscosidad baja preferidas incluyen soluciones moleculares, con inclusion de dispersiones del agente activo peptfdico en una solucion molecular de los otros componentes.

En un aspecto preferido, la presente invencion proporciona una preformulacion que comprende los componentes a, b, c, e y al menos un agonista del receptor de GLP-1 como se indica en esta memoria. Las cantidades de estos componentes estan comprendidas en el intervalo de 30-70 % a), 30-60% b) y tipicamente 0,1-20% c), estando presente tipicamente el agonista del receptor de GLP-1 en una proporcion de 0,01% a 10% (tal como 40-70% a), 30 60% b) y 0,1-10% c), estando presente el agonista del receptor de GLP-1 en una proporcion de 0,1% a 10%).

El componente e) esta presente en una ratio molar de agente activo peptidico (v. g. agonista del receptor de GLP-1) a acido soluble en lipidos de 1:1 a 1:30, preferiblemente 1:1 a 1:20, y muy preferiblemente 1:1 a 1:15, v. g. 1:2 a 1:10, Dado que los acidos solubles en lipidos son tipicamente de peso molecular menor que los peptidos tales como el agonista del receptor de GLP-1, la proporcion en peso de acido soluble en lipidos puede ser relativamente pequena. Por ejemplo, con un ajustador de pH de peso molecular bajo (v. g. menor que 500 amu), 0,1 a 5% de la composicion puede ser acido soluble en lipidos, preferiblemente 0,2 a 2%.

Todos los porcentajes se especifican en peso en esta memoria a todo lo largo de la misma, a no ser que se indique otra cosa. Las formulaciones pueden estar constituidas esencialmente solo por estos componentes, y en un aspecto estan constituidas enteramente por tales componentes.

Los intervalos preferibles para el componente a) son 33-60% (v. g. 43-60%), particularmente 35-55% (v. g. 40-55%) y los intervalos preferibles del componente b) son 33-55% en (v. g. 35-55 %), particularmente 35-50% (v. g. 40 a 50%).

Las ratios de a: b son tipicamente 40:60 a 70:30, preferiblemente 45:55 a 60:40 y mas preferiblemente 48:52 a 55:45. Los ratios de aproximadamente 50:50 son muy eficaces.

La cantidad de componente disolvente c) en la preformulacion no acuosa tendra un efecto considerable sobre varias caracteristicas. En particular, la viscosidad y la velocidad (y duracion) de liberacion se alteraran significativamente con el nivel de disolvente. La cantidad de disolvente sera por tanto al menos suficiente para proporcionar una mezcla de viscosidad baja, pero se determinara adicionalmente de tal modo que proporcione la velocidad de liberacion deseada. Esta puede determinarse por metodos rutinarios teniendo en cuenta los Ejemplos que siguen. Tipicamente, un nivel de 0,1 a 20%, particularmente 0,1 a 15% de disolvente proporcionara propiedades adecuadas de liberacion y viscosidad. Este sera preferiblemente 2 a 15% (v. g. 2 a 12%) y una cantidad de aproximadamente 10% es muy eficaz.

Una ventaja de las composiciones de la presente invencion sobre las formulaciones polimericas, tales como esferas de PLGA, es la liberacion inicial baja (perfil "sin explosion") de agente activo. Esta puede definirse de tal modo que el area bajo la curva de concentracion en plasma frente al tiempo durante las primeras 24 obras es menor que 15% del area bajo la curva para la curva entera (medida o extrapolada desde el tiempo 0 al infinito o desde el tiempo 0 al ultimo punto de toma de muestra), mas preferiblemente menor que 10% y muy preferiblemente menor que 7%. Esto es aplicable particularmente a los aspectos de acil-sacarido y lipido de la invencion y se discute con mayor detalle en WO 2005/117830.

Como se ha indicado arriba, la cantidad de componente c) en las preformulaciones de la invencion sera al menos suficiente para proporcionar una mezcla de viscosidad baja (v. g. una solucion molecular, vease arriba) de los componentes a), b) y c) y se determinara facilmente para cualquier combinacion particular de componentes por metodos estandar.

El comportamiento de fase puede analizarse por tecnicas tales como observacion visual en combinacion con microscopia de luz polarizada, resonancia magnetica nuclear, y microscopia electronica de crio-transmision (crio-TEM) para examinar soluciones, fases L2 o L3, o fases de cristal liquido o, como en el caso de la crio-TEM, fragmentos dispersados de tales fases. La viscosidad puede medirse directamente por medios estandar. Como se ha descrito arriba, una viscosidad practica apropiada es aquella que puede administrarse eficazmente con una jeringuilla y, en particular, esterilizarse por filtracion. Esto se evaluara facilmente como se indica en esta memoria.

Los sistemas matriz basados en lipidos descritos en esta memoria comprenden componentes lipidicos a) y b), mas los componentes disolvente (c), agente activo (d) y acido soluble en lipidos (e). El componente "a" como se indica en esta memoria es preferiblemente al menos un diacil-glicerol (DAG) y tiene por tanto dos grupos de "cola" no polares. Los dos grupos no polares pueden tener el mismo o diferente numero de atomos de carbono y pueden ser cada uno independientemente saturados o insaturados. Ejemplos de grupos no polares incluyen grupos alquilo y alquenilo C6-C32, que estan presentes tipicamente como los esteres de acidos carboxilicos de cadena larga. Estos se describen a menudo por referencia al numero de atomos de carbono y el numero de insaturaciones en la cadena de carbonos. Asi, CX:Z indica una cadena hidrocarbonada que tiene X atomos de carbono y Z insaturaciones. Ejemplos incluyen particularmente grupos caproilo (C6:0), capriloilo (C8:0), caprilo (C10:0), lauroilo (C12:0), miristoilo (C14:0), palmitoilo (C16:0), fitanoilo (C16:0), palmitoleoilo (C16:1), estearoilo (C18:0), oleoilo (C18:1), elaidoilo (C18:1), linoleoilo (C18:2), linolenoilo (C18:3), araquidonoilo (C20:4), behenoilo (C22:0) y lignoceroilo (C24:9). Asi, las cadenas no polares tipicas estan basadas en los acidos grasos de lipidos Ester naturales, con inclusion de los acidos caproico, caprilico, caprico, laurico, miristico, palmitico, fitanico, palmitoleico, estearico, oleico, elaidico, linoleico, linolenico, araquidonico, behenico o lignocerico, o los alcoholes correspondientes. Las cadenas no polares preferibles son los acidos palmitico, estearico, oleico y linoleico, particularmente el acido oleico.

Pueden utilizarse mezclas de cualquier numero de diacil-lipidos como componente a. Preferiblemente, este componente incluira al menos una porcion dioleato de glicerol (GDO). Un ejemplo muy preferido es DAG, que comprende al menos 50%, preferiblemente al menos 80% y que comprende incluso sustancialmente 100% de GDO.

Dado que GDO y otros diacil-gliceroles son productos derivados de fuentes naturales, existe generalmente cierta proporcion de lipido "contaminante" que tiene otras longitudes de cadena, etc. En un aspecto, el GDO como se utiliza en esta memoria se utiliza por tanto para indicar cualquier grado comercial de GDO con impurezas concomitantes (es decir GDO de pureza comercial). Estas impurezas pueden separarse y eliminarse por purificacion, pero siempre y cuando la calidad sea uniforme esto es raras veces necesario. En caso necesario, sin embargo, el "GDO" puede ser esencialmente GDO quimicamente puro, tal como GDO al menos 80% puro, preferiblemente al menos 85% puro y mas preferiblemente al menos 90% puro.

El componente "b" en las matrices lipidicas preferidas de la presente invencion es al menos una fosfatidil-colina (PC). Como en el caso del componente a, este componente comprende un grupo de cabeza polar y al menos un grupo de cola no polar. La diferencia entre los componentes a y b reside principalmente en el grupo polar. Las porciones no polares pueden derivarse asi adecuadamente de los acidos grasos o los alcoholes correspondientes considerados arriba para el componente a. Como en el caso del componente a), la PC contendra dos grupos no polares.

La porcion de fosfatidil-colina, incluso mas convenientemente que cualquier porcion de diacil-glicerol, puede derivarse de una fuente natural. Fuentes adecuadas de fosfolipidos incluyen huevo, corazon (v. g. de bovino), cerebro, higado (v. g. de bovino) y fuentes vegetales con inclusion de soja. Tales fuentes pueden proporcionar uno o mas constituyentes del componente b, que pueden comprender cualquier mezcla de fosfolipidos. Puede utilizarse cualquier PC simple o mezcla de PCs de estas u otras fuentes, pero son muy adecuadas las mezclas que comprenden PC de soja o PC de huevo. El componente PC contiene preferiblemente al menos 50% de soja o PC de huevo, mas preferiblemente al menos 75% PC de soja o PC de huevo y muy preferiblemente PC de soja o PC de huevo esencialmente pura.

En una realizacion alternativa pero igualmente preferida, el componente PC puede comprender dioleoil-PC sintetica. Se cree que esta proporciona estabilidad incrementada y sera por tanto particularmente preferible para composiciones que precisen ser estables al almacenamiento a largo plazo, y/o que tengan un periodo de liberacion prolongado in vivo. En esta realizacion, el componente PC contiene preferiblemente al menos 50% de dioleoil-PC sintetica, mas preferiblemente al menos 75% de dioleoil-PC sintetica y muy preferiblemente dioleoil-PC sintetica esencialmente pura. Cualquier PC restante es preferiblemente PC de soja o de huevo como anteriormente.

Dado que las preformulaciones de la invencion deben administrarse a un individuo para la liberacion controlada de un agente activo peptidico, es importante que los componentes sean biocompatibles. A este respecto, las matrices lipidicas preferidas para uso en las preformulaciones de la presente invencion son sumamente ventajosas, dado que tanto PC como DAGs son bien tolerados y se descomponen in vivo en componentes que estan presentes naturalmente en el cuerpo de los mamiferos.

Una combinacion particularmente favorecida de los componentes a y b son GDO con PC, especialmente GDO con PC de soja. Cantidades apropiadas de cada componente adecuadas para la combinacion son aquellas cantidades indicadas en esta memoria para los componentes individuales en cualquier combinacion. Esto es aplicable tambien a cualesquiera combinaciones de componentes indicadas en esta memoria, donde el contexto lo permite.

El componente c) de las preformulaciones de la invencion es un disolvente organico biocompatible, preferiblemente un disolvente organico biocompatible que contiene oxigeno. Dado que la preformulacion tiene por objeto generar una composicion de deposito despues de la administracion (v. g. in vivo) despues del contacto con un fluido acuoso, es deseable que este disolvente sea tolerable para el individuo y sea susceptible de mezclado con el fluido acuoso, y/o difusion o disolucion desde la preformulacion en el fluido acuoso. Asi, se prefieren disolventes que tengan al menos una solubilidad moderada en agua.

En una version preferida, el disolvente es tal que una adicion relativamente pequena a la composicion matriz (es decir una mezcla que comprende a y b), es decir preferiblemente inferior a 15%, proporciona grandes reducciones de viscosidad, de un orden de magnitud o mas. Como se describe en esta memoria, la adicion de 10% de disolvente puede proporcionar una reduccion de dos o mas ordenes de magnitud de la viscosidad en la composicion exenta de disolvente, o en una matriz que contenga un disolvente inadecuado, tal como agua, o glicerol.

Disolventes tipicos adecuados para uso en la invencion incluyen al menos un disolvente seleccionado de alcoholes, cetonas, Esteres (con inclusion de lactonas), eteres, amidas y sulfoxidos. Los alcoholes son particularmente adecuados y forman la clase preferida de disolventes. Ejemplos de alcoholes adecuados incluyen etanol, isopropanol, alcohol bencilico y glicerol-formal. El etanol es el mas preferido. Los mono-alcoholes son preferidos a los dioles y polioles. En el caso de utilizar dioles o polioles, estos se encuentran preferiblemente en combinacion con una cantidad al menos igual de monoalcohol u otro disolvente preferido. Alternativamente, pueden utilizarse dioles tales como propilenglicol solos o mas preferiblemente con al menos una quinta parte de la cantidad de mono alcohol, especialmente etanol (en peso). Ejemplos de cetonas incluyen acetona, y carbonato de propileno. Eteres adecuados incluyen dietil-eter, glicofurol, dietilenglicol-monoetil eter, dimetil-isobarbida, y polietilen-glicoles. Esteres adecuados incluyen acetato de etilo, benzoato de bencilo y acetato de isopropilo, y el sulfuro de dimetilo es un disolvente sulfuro adecuado. Amidas adecuadas incluyen n-metil-pirrolidona (NMP), 2-pirrolidona y dimetilacetamida (DMA). Los sulfoxidos incluyen sulfoxido de metilo y sulfoxido de dimetilo (DMSO).

Una combinacion muy preferida para el aspecto de matriz lipidica es PC de soja, GDO y etanol. Como se ha indicado arriba, las cantidades apropiadas de cada componente adecuadas para la combinacion son aquellas cantidades indicadas en esta memoria para los componentes individuales, en cualquier combinacion.

Es preferible que poco o nada del componente c contenga hidrocarburos sustituidos con halogeno, dado que estos tienden a exhibir una biocompatibilidad mas baja. En el caso de que sea necesaria una porcion de disolvente halogenado tal como diclorometano o cloroformo, esta proporcion sera generalmente minima.

El componente c como se utiliza en esta memoria puede ser un disolvente simple o una mezcla de disolventes adecuados, pero generalmente sera de viscosidad baja. Esto es importante, debido a que uno de los aspectos fundamentales de la presente invencion es que la misma proporciona preformulaciones que son de viscosidad baja y una mision primaria de un disolvente adecuado es reducir esta viscosidad. Esta reduccion sera una combinacion del efecto de la menor viscosidad del disolvente y el efecto de las interacciones moleculares entre el disolvente y la composicion lipidica. Una observacion de los presentes inventores es que los disolventes de viscosidad baja que contienen oxigeno descritos en esta memoria exhiben interacciones moleculares sumamente ventajosas e inesperadas con las partes lipidicas de la composicion, proporcionando con ello una reduccion no lineal en la viscosidad con la adicion de un pequeno volumen de disolvente.

La viscosidad del componente c del disolvente de "baja viscosidad" (disolvente simple o mezcla) deberia ser tipicamente no mayor que 18 mPas a 20°C. Esta es preferiblemente no mayor que 15 mPas, mas preferiblemente no mayor que 10 mPas y muy preferiblemente no es mayor que 7 mPas a 20°C.

Las preformulaciones de la presente invencion no contienen tipicamente cantidades importantes de agua. Dado que es esencialmente imposible eliminar cualquier traza de agua de una composicion lipidica, esto debe tomarse como indicativo de que unicamente existen tales trazas minimas de agua que no pueden eliminarse facilmente. Una cantidad total sera generalmente menor que 1% en peso, preferiblemente menor que 0,5% referida al peso de la preformulacion. En un aspecto preferido, las preformulaciones de la invencion no contienen glicerol, etilenglicol o propilenglicol y contienen no mas de una traza de agua, como acaba de describirse. La posible excepcion a esto es cuando una cantidad mayor de agua esta contrarrestada por una cantidad apropiada de disolvente organico soluble en agua, como se ha descrito arriba.

Las preformulaciones de la presente invencion contienen uno o mas agentes activos peptidicos. Tales peptidos pueden existir naturalmente o derivarse de peptidos naturales, o pueden ser moleculas peptidicas quimicamente modificadas o totalmente sinteticas. Cualesquiera aminoacidos pueden estar comprendidos en los peptidos con inclusion de los descritos en esta memoria, y los peptidos pueden estar modificados quimica o enzimaticamente.

Los agentes activos peptidicos tipicos estaran comprendidos en el intervalo de 500 a 100 000 amu en peso molecular e incluyen evidentemente agentes activos proteinicos. En una realizacion, los peptidos pueden tener al menos una carga cationica a pH neutro y/o fisiologico, y muy preferiblemente requeriran al menos un contraion anionico a pH 6,5 o mayor, preferiblemente a pH 7,5 o mayor. Este contraion sera fisiologicamente aceptable, y puede ser por tanto un haluro o el ion de un acido fisiologicamente aceptable. Son particularmente preferidos los contraiones acetato, y por tanto en una realizacion de la invencion, el agente activo es un acetato peptidico. En una realizacion alternativa, el agente activo peptidico puede ser esencialmente neutro, y puede tener un punto isoelectrico comprendido entre pH 5 y pH 8, preferiblemente entre pH 5,2 y pH 7,5.

Ejemplos de clases adecuadas de peptidos incluyen hormonas peptidicas y analogos sinteticos (tales como la hormona liberadora de la hormona luteinizante (LHRH) y analogas (v. g., leuprorrelina, goserrelina, buserrelina, triptorrelina, degarrelix), incretinas y mimeticos de incretina (tales como GLP-1 y analogos o peptido insulinotropico dependiente de glucosa (GIP)), glucagon, insulina y analogos, interferones, vasopresinas, calcitoninas, etc.), citoquinas, fragmentos de anticuerpo (FAbs; scVFs), peptidos antimicrobianos (g, corticostatinas, defensinas, histatinas), peptidos de direccionamiento especifico (v. g., como los ejemplos descritos en Current Opinion Genetics & Development 10, 71-77 (2006)), peptidos venenosos (v. g., conopeptidos), y peptidos inmunogenos (v. g., fragmentos de proteinas utilizados para propositos de vacunacion).

En una realizacion preferida de la presente invencion, el agente activo peptidico no sera una somatostatina, o cualquier analogo o derivado de la misma.

Los agentes activos muy preferidos, que se utilizan a modo de ejemplo a todo lo largo de la presente memoria descriptiva, son agonistas del receptor de GLP-1. Dado que GLP-1 es una hormona peptfdica, los agonistas tfpicos del receptor de GLP-1 seran el GLP-1 nativo y sus analogos. Generalmente, estos seran peptidos, en especial de aproximadamente 30 aminoacidos, v. g. 20 a 48, especialmente 25 a 45 (v. g. 25 a 38). Preferiblemente, tales peptidos seran estructuralmente afines a GLP-1, extendina-4 y/o uno o mas de los analogos conocidos, con inclusion de los enumerados en esta memoria. Los peptidos pueden contener unicamente aminoacidos seleccionados de los 20 a-aminoacidos indicados en el codigo genetico, o mas preferiblemente pueden contener sus isomeros y otros aminoacidos naturales y no naturales, (generalmente a, p o y, L- o D-aminoacidos) y sus analogos y derivados. Aminoacidos preferidos incluyen los listados anteriormente como constituyentes de los analogos de GLP-1 conocidos.

Los derivados de aminoacidos son especialmente utiles en los extremos de los peptidos, donde el grupo terminal amino o carboxilato puede estar sustituido por o con cualquier otro grupo funcional tal como hidroxi, alcoxi, carboxi (en el extremo N-terminal), Ester, amida, tio, amido, amino (en el extremo C-terminal), alquilamino, di- o trialquilamino, alquilo (por el cual se entiende a todo lo largo de esta memoria C1-C20 alquilo, preferiblemente C1-C18 alquilo, v. g. metilo, etilo, n-propilo, isopropilo, n-butilo, iso-, sec- o t-butilo etc.), arilo (v. g. fenilo, bencilo, naftilo etc), heteroarilo, u otros grupos funcionales, preferiblemente con al menos un heteroatomo y preferiblemente que tenga no mas de 20 atomos en total, mas preferiblemente no mas de 10 y muy preferiblemente no mas de 6 atomos (opcionalmente con exclusion de los atomos de hidrogeno).

Por "agonista del receptor de GLP-1", como se utiliza en esta memoria esta indicado cualquier agonista peptfdico del receptor de GLP-1, con inclusion de todos los peptidos modificados y no naturales tales como los descritos en esta memoria, incluyendo explfcitamente los descritos en esta memoria en la seccion de antecedentes. Preferiblemente, estos seran analogos de GLP-1 o analogos del agonista que existe naturalmente "exendina-4", con inclusion de formas de GLP-1 y exendina-4 que existen naturalmente, sean humanas o de cualquier otra especie. Estos analogos son peptidos, derivados de peptidos o mimeticos de peptidos. Son muy preferidos los agonistas del receptor de GLP-1 derivados de peptidos, tales como los arriba indicados y especialmente GLP-1(7-37), GLP-1(7-36)amida, Liraglutida, AVE-010 (ZP10), TH0318, BIM 51077, NN2211, CJC-1131, LY315902 y Exenatida (exendina-4). Las secuencias especfficas de varios agonistas del receptor de GLP-1 conocidos se muestran anteriormente en esta memoria, y todas estas son muy adecuadas. Agonistas del receptor de GLP-1 adecuados adicionales se proporcionan tambien en la bibliografta, y estos incluyen en particular los peptidos y acil-peptidos enumerados en J Med Chem 43, 1664-1669 (2000) (especialmente los analogos de GLP 1 que se muestran en la Tabla 1 en la pagina 1665); los derivados posibilitados por el trabajo proporcionado en J Med. Chem. 47, 4128-4134 (2004), y en particular las estructuras conforme a los aminoacidos esenciales, sitios que pueden derivatizarse con acidos grasos, y sitios modificables para resistencia mejorada a las peptidasas como se resumen en la Figura 3 en la pagina 4130; los analogos conocidos y todos los analogos puestos a disposicion por el trabajo descrito en Diabetes Metab. Res. Rev. 21, 313-331 (2005), con inclusion de los analogos descritos en las paginas 322 a 323, mas los analogos derivatizados o formulados para resistencia a las peptidasas descritos en las paginas 323 a 325; y todos los agonistas descritos en Curr. Med. Chem. 10, 2471-2483 (2003), en particular aquellos que tienen las secuencias y modificaciones descritas en la pagina 2477. Estos documentos, y en particular las partes indicadas forman parte de la descripcion de la presente invencion y se incorporan por tanto explfcitamente en esta memoria por referencia.

En una realizacion tfpica, el agente activo peptfdico (v. g. el agonista del receptor de GLP-1) se formulara generalmente como 0,02 a 12% en peso de la formulacion total. Los valores tfpicos seran 0,1 a 10%, preferiblemente 0,2 a 8% y mas preferiblemente 0,5 a 6%. Estos niveles pueden aplicarse a todos los aspectos de la invencion, donde el contexto lo permita.

En una realizacion affn, el agente activo peptfdico (v. g. agonista del receptor de GLP-1) se formulara a un nivel que no puede alcanzarse facilmente en ausencia del componente acido soluble en lfpidos de la mezcla. En una realizacion de este tipo, el contenido de agente activo peptfdico (v. g. agonista del receptor de GLP-1) es tfpicamente al menos 0,7%, preferiblemente al menos 1%, mas preferiblemente al menos 2% en peso de la formulacion. Niveles de al menos 3% y al menos 4% son alcanzables con la presente invencion, asf como niveles de carga hasta 8, 10 o 12%. Tales composiciones de la presente invencion no solo contienen tfpicamente un nivel muy alto de agente activo peptfdico (especialmente agonista del receptor de GLP-1), como se ha indicado, sino que son adicionalmente estables al almacenamiento sin perdida o degradacion del agente activo durante periodos considerables, como se indica en esta memoria. Tales periodos seran generalmente al menos un mes a 25°C o a 5°C, preferiblemente al menos 3 meses, y mas preferiblemente al menos 6 meses a 5°C o alternativamente a 25°C. Estos grados de estabilidad son aplicables a todos los aspectos de la invencion, donde el contexto lo permita.

En una realizacion, las composiciones de la presente invencion estan basadas en el efecto del acido soluble en lfpidos para permitir una carga de agente activo peptfdico (v. g. agonista del receptor de GLP-1) a un nivel superior al que podrfa alcanzarse en ausencia de dicho componente. Obviamente, un nivel de carga alto es sumamente ventajoso y ha sido establecido sorprendentemente por los presentes inventores que, por inclusion de los acidos solubles en lfpidos especificados en esta memoria, en las cantidades indicadas, puede obtenerse una carga mucho mas alta de agentes activos peptfdicos (particularmente agonistas del receptor de GLP-1) (veanse los Ejemplos). El nivel de agente activo peptfdico (v. g. agonista del receptor de GLP-1) que podrfa cargarse en una composicion se establece facilmente por equilibracion de la composicion con exceso de agente activo (v. g. por rotacion lenta de un lado a otro durante 5 dfas a 25°C - veanse los Ejemplos). Las presentes composiciones pueden contener y preferiblemente contienen de hecho una cantidad mayor de agente activo peptfdico (en particular agonista del receptor de GLP-1) que la que puede alcanzarse por equilibracion en ausencia del componente acido soluble en lfpidos. Esto puede aplicarse en todos los aspectos de la presente invencion, donde el contexto lo permita.

Donde el agente activo peptfdico es un agonista del receptor de GLP-1, las dosis adecuadas para inclusion en la formulacion, y por tanto el volumen de formulacion utilizado, dependeran de la velocidad de liberacion (controlada, por ejemplo, por el tipo de disolvente y la cantidad utilizada, el contenido de P80 etc.) y la duracion de la liberacion, asf como el nivel terapeutico deseado, la actividad del agente especffico, y la velocidad de aclaramiento del agente activo particular elegido. Tfpicamente, una cantidad del orden de 0,05 a 40 mg por semana de duracion del deposito, preferiblemente 0,1 a 20 mg por semana de duracion para una duracion de 1 a 24 semanas, preferiblemente 2 a 16 (v. g. 8, 10 o 12) semanas. Una dosis total de 0,05 a 250 mg por dosis serfa adecuada para proporcionar un nivel terapeutico durante entre 7 y 168 dfas. Esta sera preferiblemente 0,1 a 192 mg, v. g. 0,2 a 160 mg, 0,1 a 1,6 mg, 20 a 160 mg etc. Evidentemente, la estabilidad del agente activo y la linealidad de la velocidad de liberacion significaran que la relacion de carga a duracion puede no ser una relacion lineal. Un deposito administrado cada 30 dfas podrfa tener, por ejemplo 0,2 a 20 mg, o un deposito de 90 dfas podrfa tener 60 a 120 mg de agente activo, tal como uno de los agonistas del receptor de GLP-1 indicados en esta memoria. Evidentemente tambien, la semivida biologica del agente activo especffico sera particularmente importante. La semivida del GLP-1 humano nativo (GLP-1 (7-37) y GLP-1 (7-36)amida), que es un agente activo preferido, es menor que 5 minutos, y por tanto para liberacion sostenida, sera necesaria una cantidad relativamente grande (v. g. hacia el extremo superior del intervalo). Para un analogo tal como Exenatida, con una semivida mucho mas larga, la cantidad necesaria sera evidentemente menor. Niveles apropiados para otros agentes activos seran establecidos facilmente por los expertos en la tecnica haciendo referencia al nivel terapeutico conocido, la duracion de accion deseada y el volumen que debe inyectarse. Un calculo base satisfactorio serfa multiplicar una dosis diaria tfpica del agente activo por el numero de duracion del deposito en dfas. La formulacion puede ensayarse luego respecto a linealidad de liberacion y ajustarse segun sea apropiado.

Es un avance notable de las presentes formulaciones que agentes activos peptfdicos de semivida muy corta, con inclusion de GLP-1 humano nativo (GLP-1 (7-37) y GLP-1 (7-36)amida) pueden prepararse y administrarse en un precursor de deposito de la presente invencion, y proporcionaran una liberacion controlada durante varios dfas o incluso semanas. Esto ocurre a pesar de la semivida biologica notablemente corta del agente activo (v. g. menor que 1 hora, preferiblemente menor que 15 minutos, v. g. menor que 5 minutos). Una eficiencia de suministro tan alta de un agente activo de semivida corta no se conoce por otra parte y no se ha comunicado ningun otro sistema de deposito de lfpidos capaz de proporcionar una liberacion prolongada de GLP-1 humano nativo. Asf, en una realizacion, el agente activo tiene una semivida menor que 1 hora, v. g. menor que 15 minutos (tal como GLP-1 (7 37)) y la preformulacion forma un deposito que proporciona una liberacion sostenida durante al menos 7 dfas, preferiblemente al menos 14 dfas, mas preferiblemente al menos 28 dfas.

El componente "acido soluble en lfpidos" "e") como se utiliza en esta memoria se selecciona de acido metanosulfonico, acido bencenosulfonico, acido toluenosulfonico y HCl. Aunque aquf se hace referencia al mismo como un "acido", y actua como acido en soluciones acuosas, este componente no actua generalmente como un acido tfpico en las preformulaciones de la invencion, dado que estas no son acuosas. Dado que las matrices son generalmente hidrofobas o anfifflicas, se hace referencia a los acidos adecuados en esta memoria como "solubles en lfpidos". Dado que los acidos solubles en lfpidos deben administrarse como parte de un sistema parenteral de liberacion de farmacos, es tambien necesaria la biocompatibilidad en las cantidades relevantes.

En una realizacion alternativa de la invencion, el acido soluble en lfpidos no es HCl. En esta realizacion, se prefiere que el acido soluble en lfpidos sea un acido sulfonico.

En esta memoria, se hace referencia a los acidos solubles en lfpidos como "acidos", y en un aspecto preferido los mismos se formulan como estando constituidos esencialmente por el acido en forma de acido libre. En un aspecto alternativo, sin embargo, el acido soluble en lfpidos puede ser la sal del acido correspondiente como se describe en esta memoria, en donde el contraion es un ion fisiologicamente aceptable tal como un cation de metal alcalino o metal alcalinoterreo, un ion amonio o un ion amonio sustituido. Una mezcla de tales iones es tambien adecuada, evidentemente. En una realizacion correspondiente, el contraion es el cation del agente activo peptfdico, o una mezcla de iones que incluye el cation del agente activo peptfdico.

La funcion de los acidos solubles en lfpidos en las composiciones de la presente invencion no es inmediatamente evidente. Dado que las composiciones estan esencialmente exentas de agua, la concentracion acuosa de ion hidrogeno, que es la base normal del pH, no es directamente aplicable, y los acidos solubles en lfpidos deben tener un efecto adicional en estos sistemas. Sin quedar limitados por la teorfa, se cree que los iones de los acidos solubles en lfpidos sirven para estabilizar la disolucion de los agentes activos peptfdicos (v. g. agonistas del receptor de GLP-1), que estan formulados tambien tfpicamente como sales (generalmente la sal acetato). Sin embargo, los presentes inventores han observado que la forma de acido libre de los acidos solubles en lfpidos es significativamente mas eficaz en la estabilizacion de la disolucion de niveles altos de agente activo que la sal correspondiente. Se cree que esto es el resultado de la menor solubilidad en lfpidos de la forma ionica, especialmente en los casos en que el contraion positivo es escasamente soluble en lipidos. Como resultado, se prefiere que los acidos solubles en lipidos se utilicen en su forma de acido libre, o donde se utiliza un poli-acido, que todos los grupos acidos se encuentren en la forma de acido libre. Este puede ser el caso en todas las realizaciones de la invencion, pero es particularmente aplicable a los agonistas del receptor de GLP-1, Donde se utiliza una sal del acido, el contraion tiene que ser evidentemente biotolerable, pero es preferible que Este sea un contraion organico, tal como un ion amonio (v. g. R4N donde los cuatro grupos R son cada uno H o grupos organicos Ci a C6 (v. g. hidrocarbilo o heterociclicos), que pueden unirse para formar anillos, y preferiblemente no mas de tres grupos R son H). Los acidos solubles en lipidos no contienen preferiblemente iones metalicos, (v. g. iones de metal alcalino o alcalinoterreo), tales como iones sodio, potasio, magnesio o calcio. Preferiblemente, en las formulaciones no estan presentes iones sodio de los acidos solubles en lipidos, y/o no se anaden a las mismas o se formulan con ellas. Una vez mas, Este puede ser el caso en todas las realizaciones de la invencion, pero es particularmente aplicable a los agonistas del receptor de GLP-1.

En todos los aspectos de la invencion, el acido soluble en lipidos (componente e)) esta presente en una ratio molar de agente activo peptidico a acido soluble en lipidos de 1:1 a 1:30, preferiblemente 1:1 a 1:20, v. g. 1:1 a 1:15 y muy preferiblemente 1:2 a 1:10. Dado que los acidos solubles en lipidos son tipicamente de peso molecular inferior que el agente activo peptidico, la proporcion en peso del acido soluble en lipidos puede ser relativamente pequena. Por ejemplo, con un ajustador de pH de pequeno peso molecular (v. g. menor que 500 amu), 0,1 a 5% de la composicion puede ser acido soluble en lipidos, preferiblemente 0,2 a 2%.

Un componente azucar puede estar presente en las composiciones de la presente invencion, y Este puede servir tambien para aumentar la carga y estabilidad del agente activo. Componentes azucar preferidos incluyen lactosa, y mas preferiblemente sacarosa o trehalosa. En caso de presencia, el componente azucar puede estar presente en una proporcion de 0,1 hasta 20%, preferiblemente 0,5 hasta 10% en peso, mas preferiblemente 1 a 5% en peso.

Alternativamente, puede no estar presente cantidad alguna de componente azucar, por ejemplo, puede no existir cantidad alguna de sacarosa, lactosa, y/o trehalosa en la composicion. Estoos pueden estar presentes tambien a un nivel bajo, tal que los azucares (v. g. sacarosa, lactosa, y/o trehalosa) pueden estar presentes independientemente cada uno en una proporcion de 0 hasta 1%, preferiblemente 0 a 0,5%.

En una realizacion alternativa, puede estar presente en la composicion un azucar (tal como sacarosa, lactosa o preferiblemente trehalosa), y en particular puede estar presente en una proporcion superior a 1%, por ejemplo, en una proporcion de 1,5 a 5%. En tales composiciones, se prefiere que cuando el agente activo peptidico es un agonista del receptor de GLP-1 (especialmente un GLP-1 humano), el nivel de agente activo peptidico sera mayor que 2% en peso, preferiblemente mayor que 2,5% en peso, v. g. al menos 3% en peso. Intervalos adecuados incluyen 2 a 15% en peso, v. g. 2,5 a 12% en peso, o 3 a 10% en peso de la composicion total.

En una realizacion particularmente preferida de la presente invencion, las composiciones (preformulaciones y depositos resultantes) pueden incluir al menos un agente de fragmentacion biocompatible de polioxido de etileno o poli(etilenglicol) (PEG), tal como un lipido y/o surfactante injertado en PEG. Estos agentes son utiles en todas las composiciones, y se cree que aumentan la estabilidad del agente activo peptidico (v. g. agonista del receptor de GLP-1), incluso a bajas concentraciones. Sin embargo, en una realizacion particularmente ventajosa, estos pueden ser sumamente utiles para proporcionar depositos lipidicos con duracion mas corta (v. g. 5 a 30 dias, especialmente 7 a 21 dias). Esto se debe a que un componente de este tipo tendera a fragmentar el deposito en piezas mas pequenas in situ y por tanto la degradacion del deposito sera no solo biodegradacion sino tambien erosion "fisica", permitiendo asi una liberacion mas rapida (pero todavia sin explosion significativa alguna). Estoos son muy preferibles con las matrices lipidicas descritas en esta memoria.

Si se incluye en la preformulacion basada en lipidos, el contenido de un componente agente de fragmentacion de este tipo podria ser 0,1-30%, mas preferiblemente 0,5-25% y muy preferiblemente 2-20%. En particular, 0,1 a 1% (preferiblemente 0,2 a 0,7%) es particularmente util para la estabilizacion del agente activo, tal como el agonista del receptor de GLP-1, y 1 a 25%, preferiblemente 5 a 20 % es beneficioso para controlar el periodo de liberacion del deposito. Otra ventaja de la inclusion de un agente de fragmentacion es que el mismo puede ser beneficioso desde un punto de vista de uso cronico. Los usuarios de productos de deposito agonistas del receptor de GLP-1, asi como los usuarios de muchos otros productos de deposito peptidicos son tipicamente usuarios de larga duracion, y un deposito de este tipo se erosiona mas rapidamente, por lo que el deposito desaparecera con mayor rapidez del sitio de inyeccion, permitiendo una reutilizacion mas temprana del sitio y causando una acumulacion menor de tejido conectivo alrededor de los sitios de inyeccion. Ademas, la inclusion de un agente de este tipo puede mejorar incluso la ya buena biotolerabilidad/biocompatibilidad.

El agente de fragmentacion mas preferido es Polysorbate 80 (P80). Otros agentes utiles incluyen otros Polisorbatos (v. g. Polysorbate 20), fosfolipidos PEGilados (lipidos de PEG como DSPE-PEG(2000), DSPE-PEG(5000), DOPE-PEG(2000) y DOPE-PEG(5000)), Solutol HS 15, acidos grasos PEGilados (v. g. PEG-oleato), copolimeros de bloques tales como Pluronic® F127 y Pluronic® F68, derivados etoxilados de aceite de ricino (v. g. Chremophores), Esteres de acidos grasos PEGilados de glicerilo (tales como TMGO-15 de Nikko Chemicals) y tocoferoles PEGilados (tales como succinato de d-a-tocoferil-poli(etilenglicol) 1000 conocido como Vitamin E TPGS de Eastman.

El peptido activo (v. g. agonista del receptor de GLP-1) en forma de polvo (v. g. en el kit de la invencion), asi como el agente activo disuelto en la formulacion lipidica, puede ganar estabilidad (tanto al almacenamiento como estabilidad in vivo) por ciertos aditivos estabilizadores. Tales aditivos incluyen azucares (v. g. sacarosa, trehalosa, lactosa, etc.), polimeros (v. g. polioles tales como carboximetil-celulosa), pequenas cantidades de agentes tensioactivos (v. g. P 80, vease anteriormente), antioxidantes (tales como acido ascorbico, EDTA y acido citrico), aminoacidos (tales como metionina, glutamato, lisina etc.) y lipidos y agentes tensioactivos anionicos (tales como dioleoil-fosfatidilglicerol (DOPG), palmitoiloleoil-fosfatidilglicerol (POPG) y acido oleico (OA)).

Un agente aditivo preferido es un antioxidante basado en tiol. Al igual que esencialmente todas las moleculas organicas, los lipidos y agentes biologicamente activos son termodinamicamente inestables a la oxidacion. Como resultado, muchas formulaciones lipidicas, con inclusion de aquellas que comprenden agentes bioactivos tales como APIe, son susceptibles a la degradacion durante el almacenamiento, especialmente por oxidacion.

Lamentablemente, muchos antioxidantes comunes no son muy compatibles con los sistemas lipidicos. De hecho, los presentes inventores han establecido sorprendentemente que algunos antioxidantes utilizados comunmente en sistemas anteriores pueden causar una degradacion incrementada de los agentes activos en un sistema lipidico. Esto es particularmente aplicable a los agentes activos peptidicos. Los presentes inventores han analizado por esta razon una diversidad de compuestos y clases de antioxidantes potenciales para su uso con sistemas matriz basados en lipidos y han encontrado sorprendentemente que una clase particular de antioxidantes es inusualmente muy adecuada para usarse en estos sistemas.

Los presentes inventores han establecido ahora que los antioxidantes tiolados, particularmente mono-tioglicerol (MTG), cisteina, y analogos de cisteina tales como N-acetil-cisteina, son muy eficaces en sistemas basados en lipidos, especialmente en combinacion con los acidos solubles en lipidos como se indica en esta memoria. Asi, en una realizacion preferida de la presente invencion, se incluye un componente antioxidante que comprende un antioxidante tiolado, preferiblemente azucar tiolado, aminoacido tiolado, un aminoEster tiolado, o un poliol tiolado. Los antioxidantes tiolados preferidos son mono-tioglicerol, N-acetilcisteina o cisteina.

El componente antioxidante se incluye generalmente en el intervalo de 0,01 a 2,0% en peso de la preformulacion total. Este valor es muy preferiblemente 0,05 a 1,0%, prefiriendose particularmente alrededor de 0,2 a 0,5% de antioxidante (en particular MTG), especialmente en combinacion con los otros componentes e intervalos preferidos indicados en esta memoria anteriormente y mas adelante.

Se desconoce en particular el motivo de la utilidad de los antioxidantes tiolados y MTG. Sin quedar ligados por la teoria, se cree que MTG actua como un antioxidante eficaz donador de la ruptura de cadenas conforme a mecanismos establecidos por los cuales se neutralizan los radicales peroxilo (ROO-). Su extincion por los antioxidantes tiolados rompe el ciclo de la degradacion oxidativa ulterior. Tioles tales como MTG y N-acetilcisteina pueden regenerar tambien ciertos componentes a partir de sus formas oxidadas.

Los datos de estabilidad utilizando cierto numero de diferentes antioxidantes demuestran que los antioxidantes tiolados son sorprendentemente mas eficaces que otros antioxidantes en lo que respecta a la supresion de la degradacion oxidativa de los agentes bioactivos. Los antioxidantes tiolados pueden exhibir tambien un efecto sinergico en combinacion con los acidos solubles en lipidos de la presente invencion, en el mantenimiento de la estabilidad quimica y fisica del agente activo peptidico y la preformulacion completa.

Las preformulaciones de la presente invencion se formulan generalmente para administracion parenteral. Esta administracion no sera generalmente un metodo intravascular, sino que preferiblemente sera subcutanea (s.c.), intracavitaria o intramuscular (i.m.). Tipicamente, la administracion sera por inyeccion, termino que se utiliza en esta memoria para indicar cualquier metodo en el cual la formulacion se introduce a traves de la piel, tal como por medio de una aguja, un cateter o un inyector sin aguja (exento de aguja). No obstante, es posible aprovechar la ventaja de la carga alta y otras caracteristicas beneficiosas de la presente formulacion en aplicaciones no parenterales, con inclusion de la aplicacion topica o sistemica en la piel, membranas mucosas, y las cavidades nasal, bucal y/u oral. Preferiblemente, dicha administracion no parenteral es para uso topico.

La administracion parenteral preferida es por inyeccion i.m. o s.c., muy preferiblemente por inyeccion s.c. profunda. Una caracteristica importante de la composicion de la invencion es que la misma puede administrarse tanto por i.m. y s.c. como por otras vias sin toxicidad o efectos locales importantes. La misma es adecuada tambien para administracion intracavital. La inyeccion s.c. profunda tiene la ventaja de ser menos profunda y menos dolorosa para el individuo que la inyeccion i.m. (profunda) utilizada para algunos depositos actuales y es tecnicamente muy adecuada en el caso presente dado que combina facilidad de inyeccion con riesgo bajo de efectos secundarios locales. Es una observacion sorprendente de los presentes inventores que las formulaciones proporcionan liberacion prolongada del agente activo a lo largo de un periodo de tiempo predecible tanto por inyeccion subcutanea como por inyeccion intramuscular. Por tanto, esto permite variar ampliamente el sitio de inyeccion y permite que la dosis se administre sin consideracion detallada de la profundidad del tejido en el sitio de inyeccion.

Las preformulaciones basadas en matriz lipidica de la presente invencion proporcionan composiciones de deposito de cristal liquido no laminares despues de la exposicion a fluidos acuosos, especialmente in vivo. Como se utiliza en esta memoria, la expresion "no laminar" se utilizan para indicar una fase de cristal liquido (tal como una fase cubica o hexagonal) normal o inversa o la fase L3 o cualquier combinacion de las mismas. El termino cristal liquido indica todas las fases de cristal liquido hexagonales o cubicas y/o todas las mezclas de las mismas. Hexagonal, como se utiliza en esta memoria, indica hexagonal "normal" o "inverso" (preferiblemente inverso) y "cubico" indica cualquier fase de cristal liquido cubica a no ser que se especifique otra cosa. El lector experto no tendra dificultad alguna en identificar aquellas composiciones que tienen un comportamiento de fase apropiado por referencia a la descripcion y los Ejemplos proporcionados en esta memoria, y a WO2005/117830, pero el area de composicion mas favorable para el comportamiento de fase es donde la ratio de componentes a:b se encuentra en la region de igualdad (v. g. alrededor de 35:65 a 65:35, preferiblemente 42:58 a 58:42, muy preferiblemente 46:54 a 54:46).

Es importante apreciar que las preformulaciones de la presente invencion son de viscosidad baja. Como resultado, estas preformulaciones no tienen que encontrarse en ninguna fase de cristal liquido a granel, dado que todas las fases de cristal liquido tienen una viscosidad significativamente mayor que podria administrarse por jeringuilla o dispensador de nebulizacion. Las preformulaciones de la presente invencion se encontraran por tanto en un estado no de cristal liquido, tal como una solucion, fase L2 o L3, particularmente solucion o L2, La fase L2 como se utiliza a lo largo de esta memoria es preferiblemente una fase L2 "hinchada" que contiene mas de 10% en peso de disolvente (componente c) que tiene un efecto reductor de la viscosidad. Esto esta en contraste con una fase L2 "concentrada" o "no hinchada" que no contiene disolvente alguno, o una cantidad menor de disolvente, o que contiene un disolvente (o mezcla) que no proporciona la disminucion de viscosidad asociada con los disolventes de viscosidad baja que contienen oxigeno especificados en esta memoria.

Despues de la administracion, las preformulaciones basadas en lipidos preferidas de la presente invencion sufren una transicion de estructura de fases desde una mezcla de viscosidad baja a una composicion de deposito de viscosidad alta (generalmente adherente a los tejidos). Por lo general esta sera una transicion desde una mezcla molecular, fase L2 y/o L3 hinchada a una o mas fases de cristal liquido (de alta viscosidad) tales como fases de cristal liquido hexagonales o cubicas normales o inversas, o mezclas de las mismas. Transiciones de fase adicionales pueden tambien tener lugar despues de la administracion. Obviamente, no es necesaria una transicion de fase completa para el funcionamiento de la invencion, pero al menos una capa superficial de la mezcla administrada formara una estructura de cristal liquido. Generalmente, esta transicion sera rapida para al menos la region superficial de la formulacion administrada (aquella parte que esta en contacto directo con el aire, las superficies corporales y/o los fluidos corporales). Esta tendra muy preferiblemente una duracion de unos pocos segundos o minutos (v. g. desde 1 segundo hasta 30 minutos, preferiblemente hasta 10 minutos, mas preferiblemente 5 minutos o menos). El resto de la composicion puede cambiar de fase a una fase de cristal liquido mas lentamente por difusion y/o a medida que se dispersa la region superficial.

Sin ligarse a la teoria, se cree que despues de la exposicion (v. g. a los fluidos corporales), las preformulaciones de la invencion pierden algo o la totalidad del disolvente organico incluido en ellas (v. g. por difusion) e incorporan fluido acuoso del medio corporal (v. g. el medio in vivo). En el caso de una matriz lipidica, al menos una parte de la formulacion genera una estructura no laminar, particularmente una estructura de fase de cristal liquido. En la mayoria de los casos estas estructuras no laminares son altamente viscosas y no se disuelven o dispersan facilmente en el medio in vivo. El resultado es un "deposito" monolitico generado in vivo con solo un area limitada de exposicion a los fluidos del cuerpo. Adicionalmente, debido a que la estructura no laminar tiene grandes regiones polares y apolares y regiones limite, el deposito lipidico es altamente eficaz en la solubilizacion y estabilizacion de agentes activos tales como peptidos y en la proteccion de estos contra los mecanismos de degradacion. A medida que la composicion de deposito formada a partir de la preformulacion se degrada gradualmente durante un periodo de dias, semanas o meses, el agente activo se libera y/o dispersa gradualmente desde la composicion. Dado que el medio interior de la composicion de deposito esta relativamente protegido, las preformulaciones de la invencion son muy adecuadas para agentes activos que tienen una semivida biologica relativamente corta (vease arriba).

Los sistemas de deposito formados por las formulaciones de la presente invencion son muy eficaces en la proteccion del agente activo contra la degradacion, y por tanto permiten un periodo de liberacion prolongado. Se han llevado a cabo ensayos comparativos entre el producto de liberacion lenta PLGA conocido y formulaciones preferidas de la presente invencion que contienen GDO, PC de soja, etanol y agentes activos. Estos indican que las formulaciones de la presente invencion conducen a una menor degradacion en condiciones in vivo simuladas que las composiciones conocidas. Las formulaciones de la invencion pueden proporcionar asi depositos in vivo de agonistas del receptor de GLP-1 que requieren administracion solamente una vez cada 7 a 360 dias (v. g. 20 a 360 dias), preferiblemente 30 a 240 dias (v. g. 30 a 168 dias), mas preferiblemente 60 a 180 dias (v. g. alrededor de 90 dias, tal como 60 a 120 o 90 ±7 dias). Alternativamente, en una realizacion preferida adicional, las duraciones son algo mas cortas, preferiblemente 10 a 240 dias (e. g. 20 a 168 dias), mas preferiblemente 14 a 180 dias (v. g. alrededor de 60 dias, tal como 6 a 10 semanas). Evidentemente, es deseable un periodo de liberacion estable mas largo para comodidad y eumplimiento del paciente, ademas de exigir menos tiempo de los profesionales de atencion sanitaria si la composicion no puede autoadministrarse. Donde la composicion debe autoadministrarse, el cumplimiento por parte del paciente puede verse favorecido por una administracion semanal (v. g. cada 7 dias, opcionalmente ±1 dia) o mensual (v. g. cada 28 o 30 dias (opcionalmente ± 7 dias)) a fin de que no se olvide la necesidad de administracion.

Una ventaja considerable de los precursores de deposito de la presente invencion es que los mismos son fases homogeneas estables. Es decir, que los mismos pueden almacenarse durante periodos considerables (preferiblemente al menos 6 meses) a la temperatura ambiente o en el refrigerador, sin separacion de fases. Ademas de proporcionar almacenamiento ventajoso y facilidad de administracion, esto hace posible que la dosis del agonista del receptor de GLP-1 se seleccione con referencia a la especie, edad, sexo, peso, y/o estado fisico del sujeto individual, mediante la inyeccion de un volumen seleccionado.

La presente invencion proporciona por tanto metodos que comprenden la seleccion de una cantidad especifica de dosis para un individuo, particularmente por peso del individuo. El medio para esta seleccion de dosis es la eleccion del volumen de administracion.

En combinacion con las caracteristicas y caracteristicas preferidas indicadas en esta memoria, las preformulaciones de la invencion pueden tener una o mas de las caracteristicas preferidas siguientes, independientemente o en combinacion:

Todas las proporciones indicadas en esta memoria pueden variarse opcionalmente en hasta 10% de la cantidad especificada, opcional y preferiblemente en hasta 5%.

El componente a) comprende, esta constituido esencialmente por o esta constituido preferiblemente por GDO. El componente b) comprende, esta constituido esencialmente por o esta constituido preferiblemente por PC de soja. El componente c) comprende, esta constituido esencialmente por o esta constituido preferiblemente por un alcohol de 1,2, 3 o 4 carbonos, preferiblemente isopropanol o mas preferiblemente etanol.

El componente e) comprende, esta constituido esencialmente por o esta constituido preferiblemente por acido metanosulfonico (MeSulf), acido bencenosulfonico (BzSulf), acido toluenosulfonico (TSulf), o cloruro de hidrogeno anhidro.

La preformulacion contiene al menos un agonista del receptor de GLP-1 seleccionado de los descritos o a los que se hace referencia en esta memoria, preferiblemente GLP-1 (7-37), GLP-1 (7-36)amida, Liraglutida, AVE-010, TH-0318, LY 548806 o exenatida.

La preformulacion tiene una viscosidad baja como se indica en esta memoria.

La preformulacion comprende una matriz lipidica y forma una fase de cristal liquido como se indica en esta memoria despues de administracion in vivo.

La preformulacion genera un deposito despues de la administracion in vivo, deposito que libera al menos un agonista del receptor de GLP-1 a un nivel terapeutico a lo largo de un periodo de al menos 7 dias, preferiblemente al menos 21 dias, mas preferiblemente al menos 30 dias.

La preformulacion tiene una carga mayor de agente activo peptidico (v. g. agonista del receptor de GLP-1) que es estable en la misma formulacion en ausencia del componente de ajuste del pH e) (acido soluble en lipidos).

La preformulacion tiene una carga mayor de agente activo peptidico (v. g. agonista del receptor de GLP-1) que puede obtenerse por equilibracion a 25°C de la misma formulacion en ausencia del componente de ajuste del pH e). En combinacion con las caracteristicas y caracteristicas preferidas indicadas en esta memoria, el o los metodos no terapeuticos de tratamiento cosmetico de la presente invencion puede(n) tener una o mas de las caracteristicas preferidas siguientes, independientemente o en combinacion:

El metodo comprende la administracion de al menos una formulacion con una o mas caracteristicas preferidas como se han indicado arriba;

El metodo comprende la administracion de al menos una formulacion como se indica en esta memoria por inyeccion i.m., s.c. o preferiblemente s.c. profunda.

El metodo comprende la administracion por medio de un dispositivo de administracion prellenado como se indica en esta memoria.

El metodo comprende la administracion por medio de una aguja no mayor que el calibre 20, preferiblemente mas pequena que el calibre 20, y muy preferiblemente calibre 23 o mas pequena.

El metodo comprende una sola administracion cada 7 a 360 dias, preferiblemente 7 a 120 dias, mas preferiblemente 14 a 60 dias.

El metodo comprende una sola administracion cada 14 a 180 dias, preferiblemente alrededor de 60 dias.

En combinacion con las caracteristicas y caracteristicas preferidas indicadas en esta memoria, los dispositivos prellenados de la invencion pueden tener una o mas de las siguientes caracteristicas preferidas, independientemente o en combinacion:

Los mismos contienen una formulacion preferida como se indica en esta memoria.

Comprenden una aguja mas pequena que el calibre 20, preferiblemente no mayor que el calibre 23.

Contienen una sola dosis de 0,05 a 250 mg de agonista del receptor de GLP-1, preferiblemente 0,1 a 100 mg y mas preferiblemente 1-50 mg.

Contienen GLP-1(7-37), GLP-1(7-36)amida, TH-0318, Liraglutida, exenatida o AVE-010, en una cantidad de alrededor de 0,05 a 250 mg.

Contienen una mezcla homogenea de una composicion de la invencion en forma lista para inyectar.

Contienen una formulacion de los componentes a) a c) para combinacion con un agonista del receptor de GLP-1 formando con ello una preformulacion de la invencion.

Contienen un agonista del receptor de GLP-1 para combinacion con una formulacion de los componentes a) a c), formando con ello una preformulacion de la invencion.

Contienen un volumen total para administracion no mayor que 5 ml, preferiblemente no mayor que 3 ml, mas preferiblemente no mayor que 2 ml.

En combinacion con las caracteristicas y caracteristicas preferidas indicadas en esta memoria, los kits de la invencion pueden tener una o mas de las caracteristicas preferidas siguientes, independientemente o en combinacion:

Contienen una formulacion preferida como se indica en esta memoria.

Contienen un dispositivo prellenado como se indica en esta memoria.

Contienen una aguja mas pequena que el calibre 20, preferiblemente no mayor que el calibre 23.

Contienen GLP-1(7-37), GLP-1(7-36)amida, TH-0318, Liraglutida, o AVE-010, en una cantidad de alrededor de 0,05 a 250 mg.

Contienen un "kit de dos compartimientos" que comprende al menos dos recipientes que contienen una formulacion lipidica de la invencion y un polvo de agonista del receptor de GLP-1, respectivamente.

Contienen un volumen total para administracion no mayor que 5 ml, preferiblemente no mayor que 3 ml, y mas preferiblemente no mayor que 2 ml.

Contienen instrucciones para administracion por una via y/o con una frecuencia como se indica en esta memoria. Contienen instrucciones para la administracion para su uso en un metodo de tratamiento como se describe en esta memoria.

La invencion se ilustrara adicionalmente por referencia a los Ejemplos no limitantes que siguen y las Figuras adjuntas, en las cuales:

La Figura 1 muestra el efecto reductor de la viscosidad por adicion de disolventes.

La Figura 2 presenta datos de estabilidad que respaldan la estabilidad muy favorable al almacenamiento obtenida con las composiciones de formulacion de la invencion.

La Figura 3 muestra el nivel de productos de descomposicion en una composicion de la invencion almacenada durante 4 semanas a 5°C.

Ejemplos

Ejemplo 1: Disponibilidad de varias fases de cristal liquido en el deposito por eleccion de la composicion Se prepararon formulaciones inyectables que contenian proporciones diferentes de fosfatidil-colina (PC) ("SPC" -Lipoid S100) y dioleato de glicerol (GDO) y con etanol (EtOH) como disolvente para ilustrar que es posible acceder a diversas fases de cristal liquido despues de equilibracion de la formulacion del precursor de deposito con exceso de agua.

Se pesaron cantidades apropiadas de PC, GDO y EtOH en viales de vidrio y la mezcla se puso en una maquina de sacudidas hasta que la PC se disolvio completamente para formar una solucion liquida clara. Se anadio luego GDO para formar una solucion inyectable homogenea.

Cada formulacion se inyecto en un vial y se equilibro con exceso de agua. El comportamiento de fases se evaluo visualmente y entre polarizadores cruzados a 25°C. Los resultados se presentan en la Tabla 1,

TABLA 1

Formulacion PC (% en peso) GDO (% en peso) EtOH (% en peso) Fase en H2O A 22,5 67,5 10,0 L2

B 28,8 61,2 10,0 I2

C 45,0 45,0 10,0 I2/H11

D 63,0 27,0 10,0 Hll/La

L2 = fase micelar inversa

I2 = fase de cristal liquido cubica inversa

Hⁱⁱ= fase de cristal liquido hexagonal inversa

La = fase laminar

Ejemplo 2

Viscosidad en PC/GDO (5:5) o PC/GDO (4:6) despues de la adicion de disolvente (EtOH, PG y NMP) Una mezcla de PC/GDO/EtOH con aproximadamente 25% de EtOH se fabrico conforme al metodo del Ejemplo 1. La totalidad, o practicamente la totalidad, del EtOH se elimino de la mezcla con un evaporador rotativo (vacio, 40°C durante 1 hora, seguido por 50°C durante 2 h) y la mezcla resultante se peso en un vial de vidrio, despues de lo cual se anadio 1, 3, 5, 10 o 20% de un disolvente (EtOH, propilenglicol (PG) o n-metil-pirrolidona (NMP)). Se dejo que las muestras se equilibraran durante varios dias antes de medir la viscosidad con un reometro CarriMed CSL 100 equipado con ajuste de abertura automatico.

Este ejemplo ilustra claramente la necesidad de disolvente con ciertos precursores de deposito a fin de obtener una formulacion inyectable (vease Figura 1). La viscosidad de las mezclas PC/GDO exentas de disolvente aumenta con la ratio creciente de PC. Los sistemas con ratio PC/GDO baja (mas GDO) pueden inyectarse con una concentracion menor de disolvente.

Ejemplo 3: Degradacion de la formulacion de deposito en la rata

Se inyectaron diversos volumenes (1, 2, 6 ml/kg) del precursor de deposito (36% en peso de PC, 54% en peso de GDO, y 10% en peso de EtOH) en la rata y se eliminaron de nuevo despues de un periodo de 14 dias. Se encontro que estaban todavia presentes subcutaneamente en la rata cantidades sustanciales de las formulaciones despues de dicho tiempo, vease la Tabla 3.

TABLA 3

Dosis (ml/kg) Diametro medio el dia 3 (mm) Diametro medio el dia 14 (mm)

1 (n=3) 15,8 12,5

2 (n=3) 18,5 15,3

6 (n=3) 23,3 19,3

Ejemplo 4. Preparacion de una formulacion de GLP-1 sin agente de ajuste del pH.

La sustancia de GLP-1 y los excipientes utilizados en los Ejemplos 4 a 8 se presentan en la Tabla siguiente.

Sustancia de GLP-1 y excipientes utilizados en los Ejemplos 4 a 8:

Nombre Abreviatura Suministrador

GLP-1 (7-36)amida, sal acetato GLP-1 (Ac) PolyPeptide Laboratories, Inc., CA, USA Fosfatidilcolina de soja SPC Lipoid, Alemania

Dioleato de glicerol GDO Danisco, Dinamarca

Etanol (99,5%) EtOH Kemetyl, Suecia

Propilenglicol PG Apoteket, Suecia

Una formulacion lipidica que comprendia 1,08 g de SPC, 1,08 g de GDO, 0,08 g de EtOH y 0,26 g de PG se mezclo en un vial de vidrio de 5 ml (composicion: SPC/GDO/EtOH/PG = 43,2/43,2/3,2/10,4% en peso). El vial se puso en una mesa mezcladora (mezcladura de un lado a otro) durante aproximadamente 2 h a la temperatura ambiente. Se obtuvo una formulacion transparente y homogenea.

Se pesaron 0,02 g de GLP-1(Ac) en un vial de vidrio de 2 ml y se anadieron 1,98 g de la formulacion lipidica, preparada como anteriormente (dando un total de carga de GLP-1 (Ac) de 1% en peso). La formulacion se mezclo en un mezclador vorticial (para dispersar el polvo de GLP-1(Ac) en la formulacion) y se puso luego en una mesa mezcladora a la temperatura ambiente para una mezcladura constante de un lado a otro. Despues de 5 dias, la muestra contenia todavia mucho GLP-1 (Ac) sin disolver como se evaluo visualmente, y la muestra se centrifugo por tanto a 5000 revoluciones por minuto durante 15 minutos para obtener un sobrenadante claro.

Se ensayo la concentracion de GLP-1 en el sobrenadante por un metodo HPLC en fase normal (NP) utilizando deteccion UV.

La concentracion de GLP-1 ensayada (equivalentes, base - GLP-1 (0)) en la muestra era 6,25 mg/g (0,625% en peso). Debido al largo tiempo de equilibracion utilizado (5 dias), este valor se toma como la concentracion maxima de GLP-1 alcanzable en la formulacion lipidica sin la adicion de agente de ajuste del pH.

Ejemplo 5. Preparacion de formulaciones de GLP-1 con acido metanosulfonico (MeSulf) como agente de ajuste del pH.

Se preparo una formulacion lipidica que comprendia SPC, GDO, EtOH, PG y MeSulf (Sigma-Aldrich, Suecia) como se describe en el Ejemplo 4. La composicion lipidica era la siguiente: SPC/GDO/EtOH/PG/MeSulf = 43,2/43,2/3,0/10,0/0,5% en peso.

Se peso la cantidad requerida de polvo de GLP-1(Ac) en viales de vidrio de 2 ml seguido por adicion de la formulacion lipidica en una cantidad apropiada para alcanzar cargas nominales de farmaco de aproximadamente 3 a 6% en peso de GLP-1(0). Las muestras se agitaron vorticialmente durante un breve periodo seguido por rotacion continua de un lado a otro a la temperatura ambiente hasta que se obtuvieron muestras completamente homogeneas y transparentes (1-3 dias).

La concentracion de GLP-1 (expresada como equivalentes de GLP-1, base = GLP-1(0)) en las formulaciones respectivas como se determino por HPLC se da en la Tabla siguiente.

Carga de farmaco GLP-1 en formulaciones lipidicas que contenian MeSulf

Formulacion Conc. nominal de Conc. de GLP-1(0) ensayada Exceso de carga de GLP-1 GLP-1(0)/% en peso (HPLC)/% en peso comparado con el Ejemplo 4* A 3,00 3,07 4,91

B 3,73 3,77 6,03

C 4,61 4,58 7,33

D 5,43 5,36 8,54

*Calculado como la ratio entre la concentracion ensayada de GLP-1 (0) con MeSulf como agente de ajuste del pH y la concentracion encontrada en la formulacion sin MeSulf (Ejemplo 4)

Ejemplo 6. Preparacion de una formulacion de GLP-1 con cloruro de hidrogeno anhidro (HCl) como agente de ajuste del pH.

Se preparo una formulacion lipidica que comprendia SPC, GDO, PG y EtOHHCl (HCl 1,25M en EtOH de Fluka, Suecia) como se describe en el Ejemplo 4. La composicion lipidica era la siguiente: SPC/GDO/PG/EtOHHCl = 43,0/43,0/10,0/4,0% en peso.

Se peso la cantidad requerida de polvo de GLP-1(Ac) en un vial de vidrio de 2 ml seguido por adicion de la formulacion lipidica. La muestra se agito vorticialmente durante un breve periodo, seguido por rotacion continua de un lado a otro a la temperatura ambiente hasta que se obtuvo una muestra completamente homogenea y transparente (1 dia).

La concentracion de GLP-1 (expresada como GLP-1 base = GLP-1(0)) en la formulacion como se determino por HPLC se da en la Tabla siguiente.

Carga de farmaco GLP-1 en las formulaciones lipidicas que contenian HCl

Formulacion Conc. nominal de Conc. de GLP-1(0) ensayada Exceso de carga de GLP-1 GLP-1(0)/% en peso (HPLC)/% en peso comparado con el Ejemplo 4*

E 3,68 3,66 5,86

*Calculado como la ratio entre la concentracion ensayada de GLP-1(0) con HCl como agente de ajuste del pH y la concentracion encontrada en la formulacion sin HCl (Ejemplo 4).

Ejemplo 7. Preparacion de formulaciones de GLP-1 que contienen polisorbato 80 (P80) y con acido metanosulfonico (MeSulf) como agente de ajuste del pH.

Se preparo una formulacion lipidica que comprendia SPC, GDO, P80 (Croda, EE. UU.), EtOH, PG y MeSulf como se describe en el Ejemplo 4. La composicion lipidica era la siguiente: SPC/GDO/P80/EtOH/PG/MeSulf = 41,0/41,0/5,0/3,0/10,0/0,5% en peso.

Se peso la cantidad requerida de polvo de GLP-1(Ac) en un vial de vidrio de 2 ml seguido por adicion de la formulacion lipidica en una cantidad apropiada para alcanzar cargas nominales de farmaco de 3, 4, 5 y 6% en peso de GLP-1(0). Las muestras se agitaron vorticialmente durante un breve periodo seguido por rotacion continua de un lado a otro a la temperatura ambiente hasta que se obtuvieron muestras completamente homogeneas y transparentes (1 -3 dias) que indicaban la disolucion completa de GLP-1 en la formulacion lipidica.

Ejemplo 8. Estabilidad de GLP-1 en formulaciones que contienen MeSulf como agente de ajuste del pH. Se prepararon formulaciones lipidicas que contenian MeSulf como se describe en el Ejemplo 4.

Se peso la cantidad requerida de polvo de GLP-1(Ac) en viales de vidrio de 6 ml seguido por adicion de la formulacion lipidica en una cantidad apropiada para alcanzar cargas nominales de farmaco de 3% en peso de GLP-1(0). Las muestras se agitaron vorticialmente durante un breve periodo seguido por rotacion continua de un lado a otro a la temperatura ambiente hasta que se obtuvieron muestras completamente homogeneas y transparentes (1-3 dias). La composicion nominal de las muestras se da en la Tabla siguiente.

Composicion nominal (% en peso) de las formulaciones para el estudio de estabilidad

Formulacion GLP-1(0)* SPC DOPC** GDO PG EtOH MeSulf F 3,0 41,7 - 41,7 10,0 3,0 0,5 G 3,0 - 41,7 41,7 10,0 3,0 0,5 *Equivalentes de GLP-1 base libre (GLP-1(0)).

**Dioleoil-fosfatidilcolina (DOPC) sintetica de Lipoid, Alemania.

Las muestras se llenaron en viales de vidrio de 1 ml, tapados con tapones de caucho recubiertos de teflon, y se guardaron a 5°C en una camara climatizada Termak. Al cabo de 4 semanas, se retiraron las muestras para analisis del contenido de GLP-1, ID y productos de degradacion utilizando un ensayo HPLC en fase normal y deteccion UV (214 nm). Los resultados presentados en las figuras 2 y 3 revelan la estabilidad al almacenamiento sumamente favorable de las formulaciones, esencialmente sin degradacion alguna (dentro de los limites de error del ensayo) de GLP-1 durante el periodo de tiempo investigado.

Claims

REIVINDICACIONES

1) Una preformulacion no acuosa que comprende una mezcla de viscosidad baja de:

a) 30-70% en peso de al menos un diacil-lfpido neutro;

b) 30-60% en peso de al menos un fosfolfpido;

c) al menos un disolvente organico biocompatible;

d) al menos un agente activo peptfdico; y

e) al menos un acido soluble en lfpidos seleccionado de acido metanosulfonico, acido bencenosulfonico, acido toluenosulfonico y HCl; en donde el acido soluble en lfpidos esta presente en una ratio molar de agente activo peptfdico a acido soluble en lfpidos comprendida en el intervalo de 1:1 a 1:30;

en donde la preformulacion forma, o es capaz de formar, al menos una estructura de fase de cristal lfquido por contacto con un fluido acuoso.

2) Una preformulacion no acuosa conforme a la reivindicacion 1 que comprende:

a) 30-70% en peso de al menos un diacil-glicerol;

b) 30-60% en peso de al menos una fosfatidil-colina;

c) al menos un disolvente organico biocompatible que contiene oxfgeno;

d) al menos un agente activo peptfdico; y

e) al menos un acido soluble en lfpidos seleccionado de acido metanosulfonico, acido bencenosulfonico, acido toluenosulfonico y HCl.

3) Una preformulacion no acuosa conforme a cualquiera de las reivindicaciones 1 o 2, en donde el agente activo peptfdico es un agonista del receptor de GLP-1.

4) Una preformulacion no acuosa conforme a las reivindicaciones 1 a 3, en donde el disolvente organico esta presente a un nivel de 0,1 a 20% en peso.

5) Una preformulacion no acuosa conforme a las reivindicaciones 1 a 4, en donde el disolvente organico comprende etanol y opcionalmente propilenglicol.

6) Un proceso para la formacion de una preformulacion no acuosa adecuada para la administracion de un agente bioactivo peptfdico a un individuo, comprendiendo dicho proceso formar una mezcla de viscosidad baja de: a) al menos un diacil-lfpido neutro;

b) al menos un fosfolfpido;

c) al menos un disolvente organico biocompatible;

en donde la preformulacion formada es una preformulacion conforme a cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5.

7) Un metodo no terapeutico de tratamiento cosmetico de un individuo humano o mamffero no humano que comprende administrar a dicho individuo una preformulacion no acuosa conforme a cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5.

8) Una preformulacion no acuosa conforme a cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5 para uso en la formacion in vivo de un deposito para el tratamiento de diabetes tipo I, diabetes tipo II, peso corporal excesivo y/u obesidad, en donde las preformulaciones comprenden un agonista del receptor de GLP-1.

9) Un dispositivo de administracion pre-llenado que contiene una preformulacion no acuosa conforme a cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5.

10) Un kit que comprende un dispositivo de administracion conforme a la reivindicacion 9.

11) Una preformulacion no acuosa conforme a la reivindicacion 1, que comprende:

a) 30-70% en peso de al menos un diacil-glicerol;

b) 30-60% en peso de al menos una fosfatidil-colina;

c) al menos un disolvente organico biocompatible que contiene oxfgeno;

d) al menos un agente activo peptfdico; y

e) HCl.