ES2725454T3 - Composición sinérgica que comprende propóleo y ácido carnósico para uso en la prevención y el tratamiento de candidiasis - Google Patents

Composición sinérgica que comprende propóleo y ácido carnósico para uso en la prevención y el tratamiento de candidiasis Download PDF

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Abstract

Composición sinérgica que comprende propóleo y ácido carnósico para uso en la prevención y el tratamiento de candidiasis. La invención se refiere a una composición sinérgica que comprende propóleo que comprende polifenoles a una concentración entre 70 y 90% en peso respecto al propóleo y ácido carnósico, para uso en la prevención y el tratamiento de candidiasis en humanos y/o en animales. La invención también se refiere a una composición farmacéutica y/o veterinaria sinérgica y a un producto alimenticio sinérgico.

Description

DESCRIPCIÓN
Composición sinérgica que comprende propóleo y ácido carnósico para uso en la prevención y el tratamiento de candidiasis
Campo de la invención
El campo de la invención es el tratamiento de infecciones por microorganismos del género Candida en humanos y animales. De forma particular la presente invención se refiere a una composición sinérgica que comprende propóleo y ácido carnósico para su uso en la prevención y el tratamiento de candidiasis.
Antecedentes de la invención
El género Candida, en especial Candida albicans, es en la actualidad el agente etiológico más prevalente de micosis sistémicas. Sin embargo, desde 1980 varios análisis epidemiológicos han documentado el impacto creciente de brotes causados por especies “no-C.albicans” en la corriente sanguínea; es el caso de C. glabrata en EE.UU y de C. parapsilosis y C. tropicalis en Europa, Canadá y Latinoamérica. Aunque consideradas menos virulentas que C. albicans estas especies de Candida tienen gran incidencia clínica, afectando especialmente a pacientes inmunocomprometidos o aquellos debilitados por cirugías invasivas y tratamientos prolongados con antiobióticos.
Las especies de Candida que han sido objeto de investigación general, y que hasta ahora no han podido ser combatidas eficazmente mediante compuestos de origen natural, son las que se enumeran a continuación:
• Candida parapsilopsis
• Candida glabrata
• Candida tropicalis
• Candida krusei
• Candida dubliniensis
• Candida guillermondi
• Candida lusitaniae
Siendo C. albicans la más virulenta y por ello centrando en mayor medida los esfuerzos de la comunidad científica para combatirla eficazmente.
C. albicans
La levadura Candida albicans se define como un hongo imperfecto, cuyo hábitat está obligatoriamente asociado a los seres humanos y otros animales de sangre caliente. Los estudios taxonómicos de homología de secuencias, así como los análisis de las semejanzas fisiológicas y fenotípicas sitúan a C. albicans dentro del grupo de levaduras ascomicetáceas sin verdadero ciclo sexual. El género Candida se caracteriza primariamente por englobar especies con morfología colonial no pigmentada, siendo esta ausencia de pigmentación visible por compuestos de naturaleza carotenoide, a la que hace referencia el nombre de la especie “albicans”. Son capaces de utilizar carbohidratos por vía fermentativa y crecer en el rango de temperatura de los microorganismos mesófilos (25-42° C). Como principal reserva hidrocarbonada acumula glucógeno y también sintetiza trehalosa, cuyo contenido varía dependiendo de la fase de crecimiento.
Sin embargo, la actividad biológica de C. albicans difiere sustancialmente en dos aspectos esenciales del resto de levaduras ascosporogénicas saprofíticas, ejemplificadas por Saccharomyces cerevisiae por:
Su asociación obligada con animales homeotermos, ya comentada.
• Su condición de hongo imperfecto, carente de verdadero ciclo sexual natural. C. albicans es un diploide permanente y, por tanto, se divide mediante reproducción asexual obligada. Esta propiedad conlleva una dificultad añadida al análisis genético, aunque en los últimos años se ha progresado considerablemente en el desarrollo de nuevas herramientas moleculares.
Importancia clínica
Candida albicans está considerado como el microorganismo patógeno oportunista más prevalente de la especie humana. Es un hongo habitual de la flora comensal en individuos sanos, causando infecciones tanto superficiales como sistémicas en la mucosa bucal, el aparato digestivo o el tracto vaginal. Como organismo comensal vive en equilibrio con su hospedador sin causar daños. Sin embargo, C. albicans se convierte en un agente patógeno muy virulento cuando el sistema inmune sufre depresión o debilitación severa, siendo muy frecuente la aparición de candidiasis invasivas en afectados de SIDA, diabéticos, pacientes sometidos a cirugía intensa o receptores de trasplantes, neonatos, ancianos y personas sujetas a terapia antitumoral o tratamientos antibióticos prolongado.
Candidiasis superficiales y sistémicas
Se denominan candidiasis a las infecciones causadas por distintas especies del género Candida. Aunque C. albicans es la más significativa, otras especies habituales como C. tropicalis, C. glabrata, C. krusei, C. dubliensis y C. lusitaniae, suelen aislarse en muestras clínicas como microorganismos patógenos muy virulentos. Las candidiasis pueden ser de dos tipos:
- Superficiales: Afectan fundamentalmente a la epidermis y las mucosas de las cavidades oral y vaginal, extendiéndose en ocasiones a uñas y cuero cabelludo
- Sistémicas: En este caso, las células del patógeno proliferan exhaustivamente en la sangre, afectando a uno o más órganos vitales y provocando generalmente un cuadro de septicemia (o candidemia).
La incidencia clínica de este hongo oportunista se ha visto incrementada en los últimos años con el aumento creciente del segmento de población que presenta sus defensas inmunológicas alteradas, y es igualmente un problema sanitario grave en infecciones nosocomiales de tipo hospitalario.
Factores de virulencia
Las posibles interacciones entre parásito y hospedador son un factor esencial de patogenicidad. Así, se consideran factores de virulencia en C. albicans todas las características genéticas y fisiológicas relacionadas con su habilidad para causar la infección del hospedador, resistir el tratamiento antifúngico, o lesionar las células y tejidos que invade. Entre los factores de virulencia de C. albicans destacan:
• La hidrofobicidad de la superficie celular.
• La síntesis de moléculas implicadas en la adhesión del hospedador.
• La formación de biopelículas sobre prótesis o catéteres.
• La secreción de enzimas hidrolíticas.
• El cambio dimórfico levadura-micelio y otros cambios fenotípicos (“switching”).
Sensibilidad a antifúngicos
Los tratamientos con antifúngicos específicos convencionales, como los azoles (ketoconazol o fluconazol) o la anfotericina B, sólo se han revelado útiles en la reducción de candidiasis mucocutáneas (orofaríngea, esofágica o vaginal), así como de criptococosis en los pacientes de SIDA. Sin embargo, en el caso de las candidiasis generalizadas, se desaconseja la administración rutinaria de estos fármacos porque su absorción es deficiente, su eficacia limitada y tienden a favorecer la aparición de cepas resistentes.
La búsqueda de nuevas sustancias antifúngicas, dotadas tanto de potente acción farmacológica como de alta toxicidad selectiva, es una necesidad clínica urgente, debido al espectacular aumento de micosis sistémicas y nosocomiales. Los datos epidemiológicos demuestran como en los últimos cinco años, la incidencia de infecciones nosocomiales totales se ha multiplicado 10 veces (las candidiasis suponen un 17 % del total), y se han descrito numerosos casos de pacientes no inmunodeprimidos afectados.
Los principales esfuerzos investigadores se dirigen a la búsqueda de nuevas dianas antifúngicas. El estudio de la pared celular ha recibido atención preferente y así ya se ha aprobado el uso clínico de una nueva familia de antifúngicos, las Equinocandinas, que actúan como inhibidores específicos de la glucan sintetasa, implicada en la síntesis del p-(1,3)-glucano, componente principal de la pared. Las primeras evidencias demuestran que la aplicación de caspofungina a candidiasis invasivas, consigue una eficacia similar a los tratamientos con fluconazol o anfotericina B liposomal, pero la tolerabilidad es muy superior.
A pesar de que principios activos de extractos de origen natural como son: Cuminum cyminum, Salvadora pérsica, Syngonanthus nitens, Tulbaghia alliacea, Alternaría alternata, Trichoderma spp., Arthrinium arundinis, Selaginella tamariscina, Glycyrrhizine y Citrus bergamia, han sido estudiados en diferentes experimentos científicos, ninguno ha demostrado ser un agente antifúngico eficaz frente a infecciones por Candida.
En el mundo de la investigación, como de la aplicación de la misma a las patologías existentes en la materia que nos ocupa existen unas lagunas de aplicación y eficacia.
En este sentido, podríamos decir que en el estado actual nos encontramos con que cada dolencia es tratada de modo sectorial e individual, de suerte que es diferente el principio activo utilizado para tratar de combatir la piorrea, del mal de la candidiasis y la caries o el Streptococcus mutans.
Las soluciones ofrecidas son pues unilaterales y segmentadas para cada dolencia, por un lado, con lo que los principios activos ofrecidos no sólo no contemplan pérdidas globales de funcionalidad, sino que no hay patentado ningún producto que combata totalmente la candidiasis, porque cada principio activo único o la combinación que lo ha intentado ha fracasado en su noble y loable propósito de eliminar la patología.
El diseño de una estrategia efectiva frente a la actividad perniciosa de las especies de Candida descritas en las diversas patologías mencionadas, exige una concepción de doble vertiente, molecular por un lado y multidiana por otro. La combinación de extractos o productos naturales al azar no conduce en ningún caso a la obtención de resultados positivos, adecuados y susceptibles de ser aplicables en la realidad clínica.
Las labiadas son una peculiar y amplia familia de plantas y arbustos angiospermos dicotiledóneos caracterizados por tener un tallo cuadrado, hojas opuestas y decusadas, flores hermafroditas, frecuentemente zigomorfas, de vistosa coloración, cáliz persistente y corola con los pétalos soldados (gamopétala), cuyo extremo finaliza en dos partes o labios (bilabiadas), el superior formado por dos pétalos y el inferior por tres. En cuanto a su fruto, éste es seco y formado por cuatro núculas. Ejemplos ampliamente conocidos son el romero, la albahaca, el espliego, el tomillo y la salvia.
La bibliografía existente recoge diversos estudios en los que se emplean compuestos procedentes de Rosmarinus officinalis (romero) frente a candidiasis, pero empleando siempre la fracción de aceite esencial que contiene exclusivamente monoterpenos: cineol, canfor, borneol, verbenona, etc... y no la fracción polifenólica que contiene los diterpenos, y otros compuestos como triterpenos y derivados del ácido cafeico.
En nuestras investigaciones se empleó un extracto alta y específicamente enriquecido en diterpenos (concentración de diterpenos superior al 80 %) y sobre todo en ácido carnósico (concentración de ácido carnósico superior al 70 %), con la presencia adicional de pequeñas proporciones de carnosol y otros diterpenos de estructura similar.
El ácido carnósico, cuya estructura se muestra más abajo, es un diterpeno fenólico que se extrae de las hojas de la planta de romero (Rosmarinus officinalis) y sus propiedades antioxidantes, anticancerígenas, neuroprotectoras y antiinflamatorias, así como su efecto conservante de productos de diversa índole, son ampliamente conocidos.
Fórmula química del ácido carnósico
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Actualmente la información bibliográfica que se tiene sobre los mecanismos de actuación de este compuesto multifuncional es la que se detalla a continuación:
• No bloquea la liberación de histamina.
• Reduce la liberación de NO, PGE2 , TNF-alpha desencadenado por PGN.
• Suprime a nivel de trascripción la respuesta inflamatoria. Src/Syk podrían ser el objetivo de dicha respuesta, ya que suprime la actividad kinasa de éstas.
• Es un potente quimioprotector frente a la carcinogénesis oral, probablemente debido a su potencial antilipoperoxidativo y al efecto modulador en la detoxificación carcinógena de enzimas durante la carcinogénesis oral DMBA-inducida.
En la actualidad, el uso de extractos de romero ricos en diterpenos se centra exclusivamente en su aplicación como agentes antioxidantes, capaces de prevenir la oxidación, el “enranciamiento” de lípidos y algunas proteínas, sin embargo su uso como agentes “antimicrobianos” es casi nulo.
En cuanto a los propóleos, es bien conocido que se trata de un producto natural producido por las abejas, como resultado de la adición de secreciones mandibulares a las resinas recolectadas por éstas de diferentes plantas. En la colmena son utilizados para reducir las entradas, sellar grietas y embalsamar organismos muertos. Su composición es muy diversa ya que depende del lugar de recolección, de las plantas utilizadas para su producción y de la especie concreta de abeja. Entre sus propiedades destacan: acción antimicrobiana, antioxidante y antitumoral.
Se tiene constancia de cierto número de estudios científicos sobre el uso de propóleos de distinta naturaleza en el tratamiento de candidiasis de distintos orígenes, sin embargo, aunque en dichos estudios se sugiere que estos extractos poseen cierta naturaleza antifúngica, ninguno de ellos asevera de forma concluyente una aplicación efectiva, fiable y segura para la erradicación de los diferentes tipos de candidiasis.
Firas Abbas Al-Bayati describen la actividad antifúngica del ácido carnósico contra Candida albicans (Tikrit Journal of Pure Science, 11-6:4:16, 2011). EP2808009 describe el uso de extractos blandos de propóleo en una pasta de dientes para el tratamiento de la candidiasis. En Fungal Genet Biol. 2013 Nov;60:74-86, de Castro PA et al describen la actividad fungicida del propóleo contra los tres tipos morfogenéticos de C. albicans e indican que el propóleo podría usarse como estrategia para controlar la candidiasis.
En definitiva, a través de los diversos estudios de experimentación realizados en la presente invención se demuestra que sólo la combinación de ambos extractos muestra una eficacia fiable en el potencial tratamiento de la candidiasis. Los resultados obtenidos reflejan la significativa sinergia molecular entre el ácido carnósico (diterpenos) y los polifenoles y flavonoides presentes en los propóleos, superando incluso la variabilidad habitual en la distribución de polifenoles de éstos últimos.
Actualmente, el número de productos destinados a erradicar la candidiasis está creciendo dada la prevalencia de esta levadura en las infecciones nosocomiales en el ser humano. Sin embargo y a pesar de los esfuerzos de la comunidad científica en este aspecto, no se ha podido obtener un producto realmente efectivo.
El número de antifúngicos sintéticos/farmacológicos utilizados hasta ahora en el ámbito médico aumenta año tras año. Sin embargo, la eficacia de éstos no es todo lo deseable que el actual problema socio-sanitario requiere. Cabe destacar algunas familias de productos comercializados a nivel internacional en función del principio activo que contienen, como son:
Vía oral
• Fluconazol: comercializado también como Fluconazol Apotex, Diflucan y Gynflu-P.
• Micostantina: comercializado también como Nistatina, Bio-Statin o Micostatin.
• Itraconazol: comercializado también como Sopranos.
• Anfotericina B.
• Ketoconazol: comercializado también como Nizoral.
• Voriconazol: comercializado también como Vfend.
• Nilstat: comercializado también como Infestat, Korostatin, Mycostatin, Mykinac, Nysert, Nystalocal, Nystamont, Nystan, Nystatin, Nystex, Nystop.
• Candifix
• Claritromicina.
• Terbinafina: comercializado también como Lasimil.
• Micafungina.
Vía tópica
• Clotrimazol: comercializado también como Ginecanestén, Glynclox Lafrancol y Lotrimil.
• Miconazol: comercializado también como Daktarin y Gynflu-P
• Secnidazol: comercializado también como Gynflu-P.
• Clindamicina: comercializado también como Gynclox Lafrancol.
• Micostantina: comercializado también como Nistatina, Bio-Statin o Micostatin.
• Econazol.
• Fenticonazol.
• Ketoconazol: comercializado también como Nizoral.
• Sertaconazol.
• Tioconazol.
• Terbinafina: comercializado también como Lasimil.
Vía parenteral
• Anfotericina B.
• Voriconazol: comercializado también como Vfend.
• Claritromicina.
• Caspofungina.
• Micafungina.
Óvulos
• Butoconazol: comercializado también como Femstat.
• Clindamicina: comercializado también como Gynclox Lafrancol.
• Nistatina.
• Ketoconazol: comercializado también como Nizoral.
En cuanto a potenciales agentes de origen natural, existen en el mercado composiciones anticandida, de escasa efectividad y sin una base científica que sustente sus potenciales efectos antifúngicos ya que no se han realizado pruebas experimentales que hayan sido concluyentes en este aspecto. Se pueden encontrar productos de esta clase tanto de naturaleza probiótica (Saccharomyces boulardii, Lactobacillus acidophilus, etc.) como de origen vegetal (extracto de semilla de pomelo, aloe vera, ajo, etc.) dando lugar a mezclas heterogéneas sin una sinergia establecida, siendo simples “cócteles” que intentan cubrir espectros de acción de forma aleatoria y poco eficaz, obteniéndose productos eminentemente comerciales. Debido a que dichas mezclas son complejas e inespecíficas tanto en su composición como en sus mecanismos de actuación, algunas han llegado incluso a incluir, sin ningún fundamento sinérgico, entre sus más de quince o veinte compuestos propóleo o algunos extractos de plantas labiadas, conteniendo polifenoles del ácido cafeico, pero no de naturaleza diterpénica (ausencia de ácido carnósico y otros diterpenos), pudiéndose encontrar dichos productos en tiendas de naturopatía y portales inespecíficos de venta online, sin ningún fundamento médico ni científico. Cabe citar a modo de ejemplos “Puri-corp”, “Holoprolis spray”, “Candaway”, “Candinorm” o “Candi clear”.
A diferencia de los casos anteriormente citados, en la presente solicitud, los ensayos experimentales que se han llevado a cabo, estandarizados demuestran la efectividad de ésta, concluyendo que la magnitud de la sinergia resultante sobrepasa notablemente los productos anticandidiasis de mayor impacto empleados hasta ahora. Además de sustentarse en rotundas pruebas científicas, en la presente solicitud no se emplea una mezcla inespecífica para dar lugar a un “cóctel” que abarque unos amplísimos campos de actuación para tener la seguridad de que al menos alguno de los compuestos adicionados sea realmente efectivo en la aplicación deseada, sino que se han seleccionado de forma específica los dos compuestos que conforman la base de la patente y su aplicación concreta.
No se ha encontrado ningún documento en el estado de la técnica que describa el uso de los principios activos aquí empleados para combatir las candidiasis en sus diferentes manifestaciones.
En la presente solicitud, es de tal grado la innovación que presenta en su composición química que no hay ningún documento en el estado de la técnica, en relación con el objeto de la presente invención, que haya descrito la utilización de extractos de plantas labiadas con contenidos de diterpenos en proporciones superiores al 80 % y con una concentración de ácido carnósico superior al 70 % combinados con extractos de propóleo conteniendo polifenoles totales a una concentración entre 70 y 90 % en peso.
En la presente solicitud no se ha utilizado aceite esencial de romero ni en modo alguno utilizamos el ácido carnósico para fines de evitar el envejecimiento, con lo que la presente composición se dirige a tratar las candidiasis en todas sus formas ya sean tópicas o sistémicas, probando de modo riguroso, exacto y científico nuestras afirmaciones a través de la destrucción de la Candida observada en los ejemplos de la presente solicitud.
Descripción de la invención
La presente invención proporciona una composición sinérgica que comprende
- propóleo que comprende polifenoles a una concentración entre 70 y 90 % en peso respecto al propóleo y
- ácido carnósico,
para uso en la prevención y el tratamiento de candidiasis en humanos y/o en animales, en adelante composición para uso de la invención.
La invención también se define como el uso de una composición sinérgica que comprende
- propóleo que comprende polifenoles a una concentración entre 70 y 90% en peso respecto al propóleo y - ácido carnósico,
para fabricar un medicamento para la prevención y/o el tratamiento de candidiasis en humanos y/o en animales. Otra realización es una composición sinérgica que consiste en:
- propóleo que comprende polifenoles a una concentración entre 70 y 90 % en peso respecto al propóleo y - ácido carnósico,
para uso en la prevención y el tratamiento de candidiasis en humanos y/o en animales.
La composición sinérgica para uso de la invención se emplea, a través de la administración de una dosis efectiva, como producto fundamental para prevenir y/o combatir la candidiasis en las mucosas del tracto vaginal, tanto en forma de gel, crema, ungüento y óvulos como de toallitas higiénicas.
La composición sinérgica para uso de la invención se emplea, a través de la administración de una dosis efectiva, como producto fundamental para prevenir y/o combatir las candidiasis en casos en que aparece como agente patógeno muy virulento, como sucede cuando el sistema inmune sufre depresión o debilitación severa, de pacientes sometidos a cirugía intensa o receptores de trasplantes, neonatos, ancianos y personas sujetas a terapia antitumoral o tratamientos antibióticos prolongados; así como la aparición de candidiasis invasivas en afectados de SIDA y septicemia.
La combinación de propóleo que comprende polifenoles a una concentración entre 70 y 90 % en peso respecto al propóleo y ácido carnósico también se emplea como ingrediente bioactivo en objetos para mascotas, así como en diversas aplicaciones veterinarias.
Otra realización es la composición sinérgica para uso de la invención, donde la concentración del propóleo es entre 20 y 80 % en peso respecto al total de la composición sinérgica.
Otra realización es la composición sinérgica para uso de la invención, donde la concentración de ácido carnósico es entre 10 y 60 % en peso respecto al total de la composición sinérgica.
Otra realización es la composición sinérgica para uso de la invención, donde la candidiasis es candidiasis epitelial. La composición sinérgica para uso de la invención se emplea, a través de la administración de una dosis efectiva, como producto fundamental para prevenir y/o erradicar la candidiasis epitelial, así como en el cuero cabelludo y uñas. Otra realización es la composición sinérgica para uso de la invención, que está seleccionada del grupo compuesto por crema, gel, ungüento, óvulos, spray, comprimidos, polvos de uso tópico, cápsulas, polvo para suspensión oral, gotas óticas, pasta dental, colutorio, perfusión, jarabe, toallitas, seda dental, hilo dental, cepillo dental y cepillo interdental. La composición sinérgica para uso de la invención se emplea en forma de spray (aerosol) para prevenir y/o combatir afecciones buco-faríngeas y bronquíticas.
La composición sinérgica para uso de la invención se emplea en forma de gotas óticas para la prevención y/o tratamiento de las otitis.
La composición sinérgica para uso de la invención se emplea como producto fundamental en la prevención y mantenimiento de una correcta higiene buco-dental, así como de prótesis dentales, especialmente en el caso de diabéticos, e implantes dentales susceptibles de desarrollar candidiasis, a través de la pasta dental, colutorio y líquidos de limpieza.
La invención también proporciona una composición farmacéutica y/o veterinaria sinérgica que comprende:
- propóleo que comprende polifenoles a una concentración entre 70 y 90 % en peso respecto al propóleo y - ácido carnósico,
junto con excipientes farmacéuticamente y/o veterinariamente aceptables, para uso en la prevención y el tratamiento de candidiasis en humanos y/o en animales, en adelante composición farmacéutica y/o veterinaria sinérgica de la invención.
En la presente invención se entiende por “excipiente” a aquella materia que, incluida en las formas galénicas, se añade a los principios activos o a sus asociaciones para posibilitar su preparación y estabilidad. Ejemplos de excipientes son aglutinantes, rellenos, desintegradores, lubricantes, recubridores, endulzantes, saborizantes y colorizantes. Ejemplos más concretos no limitantes de excipientes aceptables son almidones, azúcares, sorbitol, xilitol, fosfato de calcio, grasas esferoides, talco, sílice o glicerina entre otros.
Otra realización es la composición farmacéutica y/o veterinaria sinérgica de la invención, donde la concentración del propóleo es entre 20 y 80 % en peso respecto al total de la composición farmacéutica y/o veterinaria sinérgica.
Otra realización es la composición farmacéutica y/o veterinaria sinérgica de la invención, donde la concentración de ácido carnósico es entre 10 y 60 % en peso respecto al total de la composición farmacéutica y/o veterinaria sinérgica.
Otra realización es la composición sinérgica farmacéutica y/o veterinaria sinérgica de la invención, donde dichos excipientes están seleccionados del grupo compuesto por aglutinantes, rellenos, desintegradores, lubricantes, recubridores, endulzantes, saborizantes, colorizantes, azúcares, xilitol, fosfato de calcio, grasas esferoides, talco, polisorbato, propilenglicol, alcohol isopropílico, celulosa microcristalina, estearato de magnesio, lactosa, lactosa monohidrato, almidón de arroz, maltodextrinas, lauril sulfato de sodio, sorbitol, carbonato de calcio precipitado ligero, bicarbonato de sodio, solución de silicato de sodio, sacarina de sodio, carboximetil celulosa de sodio, aceite mineral ligero, agua purificada, dióxido de sílice coloidal, sacarosa, sílice coloidal anhidra, goma arábiga, citrato de sodio, ácido cítrico anhidro, cloruro de sodio, hidróxido de sodio, glicerina, hidroalcohólico con polimetacrilato de glicerilo, tensioactivos eudérmicos, etanol y cloruro de benzalconio.
La invención también proporciona un producto alimenticio sinérgico que comprende
- propóleo que comprende polifenoles a una concentración entre 70 y 90 % en peso respecto al propóleo y
- ácido carnósico,
para uso en la prevención y el tratamiento de candidiasis en humanos y/o en animales, en adelante producto alimenticio sinérgico de la invención.
La combinación de propóleo que comprende polifenoles a una concentración entre 70 y 90 % en peso respecto al propóleo y ácido carnósico también se emplea como ingrediente bioactivo en alimentos.
Otra realización es el producto alimenticio sinérgico de la invención, seleccionado del grupo compuesto por goma de mascar, gominola, piruleta y golosina.
Otra realización es el producto alimenticio sinérgico de la invención, donde la concentración del propóleo es entre 20 y 80 % en peso respecto al total del producto alimenticio.
Otra realización es el producto alimenticio sinérgico de la invención, donde la concentración de ácido carnósico es entre 10 y 60 % en peso respecto al total del producto alimenticio.
Breve descripción de las figuras
Figura 1. Ensayo de viabilidad en medio YPD líquido (A) y de formación de colonias en medio YPD sólido (B) en la cepa CAI-4 de C. albicans a diferentes concentraciones de ácido carnósico, propóleos 2 y 3. Se partió de un preinóculo incubado toda la noche a 28 °C; al día siguiente se refrescó en medio YPD a una D.O600nm= 0,3. El cultivo se dejo crecer hasta D.O600nm = 0,6 a 37 °C, momento en que se añadieron los compuestos objeto de estudio durante una hora a la misma temperatura. Adicionalmente, se incluyó un control positivo de actividad antifúngica con Anfotericina B, en las mismas condiciones.
Figura 2. Ensayo de viabilidad en medio líquido con la cepa estándar SC5314 de C. albicans a diferentes concentraciones de ácido carnósico y propóleo 1. Como control positivo se empleó Anfotericina B. Debido al comportamiento particular de la cepa CAI-4 al realizar las CMIs, se decidió utilizar la cepa silvestre SC5314 (parental de CAI-4), con el fin de validar el efecto de los compuestos de estudio en una cepa de referencia internacional de C. albicans. El ensayo siguió el mismo procedimiento descrito en la Figura 1.
Figura 3. Ensayo de formación macroscópica de colonias en medio YPD sólido. Se utilizó la cepa estándar SC5314 de C. albicans a las concentraciones indicadas de ácido carnósico y propóleo 1. Como control positivo se empleó Anfotericina B. Para otros detalles de metodología consultar la Figura 1.
Figura 4. Inspección de la morfología celular mediante microscopía óptica, aplicando el contraste interferencial de "Nomarsky" sobre levaduras (blastoconidios) de C. albicans CAl-4, tratadas con: propóleo 3 (200 |jg/ml), ácido carnósico (100 jg/m l) y la combinación de ambos compuestos. Se observó una mayor granularidad en las muestras tratadas con propóleo en relación al control. La presencia de ácido carnósico sólo y su tratamiento combinado con propóleo, provocó, además, una reducción significativa del tamaño celular, unido al aumento de la granularidad celular anteriormente mencionado.
Figura 5. Micrografías ópticas (100X) donde se puede apreciar como el tratamiento con dosis crecientes de ácido carnósico provocó alteraciones visibles en la morfología celular, dando lugar a células de aspecto más hinchado y deforme, con aumento de la refringencia y pérdida aparente de la capacidad de transición dimórfica a estructuras miceliares (hifas). La observación al microscopio óptico usando el contraste diferencial de Nomarsky, demostró como las células experimentaban una hinchazón creciente tras el tratamiento con 100 pg/ml de ácido carnósico.
Figura 6. Micrografías ópticas (40X) tomadas con objeto de ofrecer un mejor campo visual con mayor densidad celular, utilizando los mismos cultivos de la Figura 5. En la imagen con una concentración de ácido carnósico de 100 jg/m l resulta muy apreciable la presencia de células hinchadas. La última fotografía (500 jg/m l) muestra un pequeño número de células, debido probablemente al efecto letal del ácido carnósico a esa concentración.
Figura 7. Ensayo con la finalidad de medir la cinética de inhibición de blastoconidos CAI-4 frente a determinadas concentraciones de ácido carnósico, propóleo 3 y la mezcla de ambos compuestos, a distintos tiempos de exposición. Se siguió el mismo protocolo citado en la Figura 1, excepto que se prolongó el tiempo de tratamiento (una hora, tres horas y cinco horas) con ácido carnósico y propóleo 3 (PP).
Figura 8. (A) Medida de la cinética de crecimiento en la cepa parental SC5314. Respecto a ensayos previos, se utilizaron las siguientes modificaciones: (i) Reducir la concentración de ácido carnósico a 50 pg/ml, manteniendo la de propóleo 3 (PP) (200 jg/ml), con el fin de monitorizar más adecuadamente su efecto sobre la viabilidad celular. (ii) Incluir una combinación sinérgica de ambos compuestos, que provocó un efecto letal muy superior al resultante de sumar las dos acciones individuales. (B) Ensayo de formación de colonias en placa. Los resultados confirman los obtenidos en medio líquido.
Figura 9. Efecto de la adición de ácido carnósico sobre el porcentaje de transición dimórfica levadura-hifa en C. albicans inducida por suero humano a 37 °C. Cultivos exponenciales de la cepa SC5314 se centrifugaron y resuspendieron en medio YPD fresco precalentado a 37 °C. Muestras idénticas se trataron con ácido carnósico a las concentraciones indicadas, utilizando como controles una muestra sin tratar y otra mantenida a 28 °C. El porcentaje de emisión de tubos germinativos (primera etapa de la formación de hifas) se calculó por recuento microscópico directo con un hemocitómetro.
Figura 10. Micrografías ilustrativas del efecto del ácido carnósico sobre el dimorfismo de C. albicans. En el ensayo control y con la menor concentración de ácido carnósico se observó un alto porcentaje de filamentación (hifas agrupadas constituyendo un micelio) que se redujo proporcionalmente al aumentar la dosis de éste.
Figura 11. Antibiograma comparativo de la actividad antifúngica presente en pastas dentales comercializadas de marcas de prestigio internacional, así como de marcas blancas, frente a la pasta dental con la composición de la presente solicitud. Pastas dentales aplicadas 1:1 (1 g/1 ml) (50 pl). Pasta con carnósico y propóleo (M), pasta comercial 1 (S), pasta comercial 2 (C), pasta comercial marca blanca (D). Para otros detalles, consultar la descripción metodológica.
Figura 12. Antibiograma comparativo de la actividad antibacteriana presente en pastas dentales comercializadas de marcas de prestigio internacional, así como de marcas blancas frente a la pasta dental con el principio activo defendido en la presente patente. Para otros detalles, consultar la Figura 11 y la sección de Materiales y Métodos.
Modos de realización preferente
Materiales y métodos
Microorganismos y extractos
Las cepas de C. albicans utilizadas en este estudio se describen a continuación, indicando entre paréntesis sus genotipos:
- Cepa estándar de referencia SC5314
- Mutante isogénico CAI-4 (ura-3::imm-434/ura3::imm434)
Como fuente natural de ácido carnósico se empleó un extracto de plantas labiadas, en este caso concreto fue de romero (Rosmarinus officinalis).
- Extracto de labiadas-romero con un contenido en diterpenos superior al 80 %, siendo el ácido carnósico superior al 70 %
La composición de este extracto era como la siguiente.
Ácido carnósico 72-80 %, carnosol, 2-4 %, otros diterpenos minoritarios, 1-3 %; agua 1-2 %, sales minerales (propias de la planta) 2-4 %, lípidos (grasas) no activos 7-15 %.
Se emplearon tres extractos de propóleo diferentes en cuanto a su concentración y distribución de polifenoles y flavonoides (analizada por HPLC valorando todos los compuestos polifenólicos y flavonoides como pinocembrina (flavonoide característico de los propóleos), y por valoración espectrofotométrica mediante la técnica universalmente aceptada denominada Folin-Ciocalteau.
- Propóleo 1, con una concentración de activos del 55-60 %.
- Propóleo 2, con una concentración de activos del 70-75 %.
- Propóleo 3, con una concentración de activos del 85-90 %.
Viabilidad celular
Se llevaron a cabo ensayos en medio líquido YPD (1 % extracto de levadura; 2 % peptona y 2 % glucosa) a 37 °C. Inicialmente se utilizó la cepa CAI-4 de C. albicans, pero al presentar problemas de crecimiento durante el cálculo de las CMI, se sustituyó por su parental (SC5314, wild type), de amplio uso en el laboratorio. El procedimiento consistió en aplicar distintas concentraciones de carnósico y propóleos (una hora, salvo que se indiquen otros tiempos) sobre cultivos exponenciales de C. albicans crecidos en YPD. El porcentaje de viabilidad celular se determinó mediante recuento del número de viables en medio YPD sólido tras incubación a 37 °C durante 24-48 horas (Figura 1).
De acuerdo con los resultados presentados en la Figura 1, dos de los propóleos estudiados, (numerados como propoléo 2 y 3) causaron un grado apreciable de muerte celular sobre blastoconidios (levaduras) CAI-4 (alrededor del 30-35 %) con la menor concentración empleada (200 pg/ml), siendo mucho más drástica a una dosis de 2000 pg/ml. La acción antifúngica del propóleo 3 superior a la del propóleo 2 a 2000 pg/ml. Por otra parte, la inhibición causada por el propóleo 1 fue prácticamente nula (datos no mostrados).
A su vez, el ácido carnósico tuvo un fuerte efecto antifúngico a concentraciones de 200 y 2000 pg/ml (Figura 1). Dicho efecto fue notablemente superior al producido por los propóleos. Los resultados en medio líquido mostraron una buena correlación con el crecimiento colonial registrado mediante "gotas" en YPD sólido (Figura 1).
En todos los casos, se incluyó un control antifúngico positivo correspondiente al polieno Anfotericina B (AmB).
Cinética de inhibición
Como ya se ha indicado, la cepa CAI-4 tuvo dificultades de crecimiento durante el cálculo de las CMIs. En consecuencia, fue necesario repetir la aproximación experimental de la Figura 1, con una modificación consistente en adicionar varias concentraciones de ácido carnósico y propóleos sobre alícuotas idénticas de C. albicans SC5314 provenientes de cultivos líquidos YPD exponenciales. Como se muestra en las Figuras 2 y 3, el ácido carnósico causó un importante descenso de la viabilidad celular que fue proporcional a la dosis empleada; mientras el propóleo 1 no produjo efectos relevantes, como ya se había comentado previamente. La determinación paralela del crecimiento colonial en medio YPD sólido confirma la validez de estos ensayos. Considerando en conjunto los resultados descritos en las Figuras 1, 2 y 3, se concluyó que la muestra de propóleo 3, era la más adecuada para esta invención.
A través de todas las experiencias realizadas, se deduce la existencia de una relación relativamente proporcional entre el contenido total de compuestos polifenólicos y flavonoides presentes en los extractos de propóleo y su actividad antifúngica, independientemente de una distribución específica de dichos compuestos (fingerprint). Por consiguiente, la presente invención supone e incluye el uso de cualquier extracto de propóleo en su combinación sinérgica con el ácido carnósico (tal y como se describirá posteriormente), con la sencilla necesidad de establecer la proporción entre ambos extractos en función de dicha concentración de compuestos bioactivos.
La CMI para la cepa parental SC5314 del ácido carnósico fue de 250 pg/ml, un valor idéntico al previamente calculado para CAI-4.
Estudios sobre la morfología celular
Como herramienta fundamental en la comprensión de la eficacia de estos compuestos sobre la viabilidad celular de C. albicans, se realizaron estudios detallados sobre los efectos de su administración sobre la morfología celular de este agente patógeno oportunista, visualizada por microscopía óptica (Figuras 4, 5 y 6). En la cepa CAI-4, tras la aplicación del propóleo 3 (Figura 4), no se observó daño alguno sobre la apariencia externa de las células. Sin embargo, la presencia de ácido carnósico provocó una reducción del tamaño (volumen) celular aparente, más apreciable tras cinco horas de tratamiento, junto con un cierto incremento en la densidad interna y la granularidad citosólica celular. Un efecto más acusado sobre ambos procesos se observó tras la adición sinérgica de ambos compuestos.
En el caso de la cepa SC5314, se aprecia claramente como su morfología celular levaduriforme varía al aumentar la concentración de ácido carnósico aplicado (Figuras 5 y 6), siendo las células ligeramente más ovaladas y observándose algunas irregularidades en el contorno de ésta, debido probablemente a cambios osmóticos que han derivado en la muerte de dicha célula. En dichas imágenes, (Figuras 5 y 6), es destacable las alteraciones provocadas por el ácido carnósico en la morfología celular, causando hinchazón y deformación de las células levaduriformes (blastoconidios).
Ejemplo 1. Resultados de combinación de ambos extractos frente a Candida spp. Sinergia.
Una vez establecidas las bases de evaluación de la actividad antifúngica de los extractos empleados (incluida su influencia sobre la morfología celular), se establecía como premisa básica de esta patente la determinación de la potencial sinergia entre los componentes principales. A lo largo del estudio se emplearon los extractos de romero y de los denominados propóleos 2 y 3; si bien en estos ejemplos se recogen únicamente los resultados de la combinación (ácido carnósico más propóleo 3) por su especial y mayor relevancia. En primer lugar, se realizó una valoración preliminar con la cepa CAI-4, tal y como se describe en la Figura 7, empleando concentraciones predefinidas de ambos extractos: 100 pg/ml para el ácido carnósico y 200 pg/ml para el propóleo 3.
Debemos resaltar en este primer ensayo la existencia de la actuación sinérgica entre ambos compuestos, induciendo un grado de mortalidad muy elevado, casi absoluto tras una hora de tratamiento (Figura 7), notablemente superior al registrable por la acción individual de cada sustancia (Figura 7). De nuevo, la medida de crecimiento colonial en placa mostró concordancia con los resultados registrados en medio líquido (Figuras 7-9).
A continuación, en la cepa SC5314, por ser una estirpe de referencia, se realizaron nuevos experimentos midiendo simultáneamente la cinética de inhibición de la viabilidad celular a concentraciones subinhibitorias del ácido carnósico (hasta 50 pg/ml) y el propóleo 3 (200 pg/ml), junto con los ensayos de sinergismo entre ambos. Las alícuotas probadas proceden de un único cultivo exponencial inicial y, por tanto, el estado fisiológico de las células es idéntico.
Al utilizar la cepa de referencia reseñada, homologable en cualquier laboratorio del mundo, la acción fungicida registrada fue aún más evidente (Figuras 8 y 9), utilizando incluso concentraciones inferiores a la CMI (50 pg/ml). De hecho, los resultados representados en las Figuras 8 y 9 confirman la fuerte acción antifúngica del ácido carnósico y la más débil en el caso del propóleo 3, considerados individualmente. Concretamente, en la Figura 8, se aprecia como en la columna de sinergismo (S), no se observa crecimiento una hora y además, es virtualmente nula la formación colonial a tres y cinco horas. Sin embargo, el crecimiento es visible en los experimentos con ácido carnósico y propóleo (individualmente), siendo equiparable al control en las diluciones 0 y -1. Estos datos apoyan la existencia de un fuerte efecto sinérgico entre el ácido carnósico y el propóleo 3.
Estos ensayos se complementan igualmente con la evaluación de la influencia sobre la morfología (dimorfismo) de C. albicans. En las Figuras 9 y 10, se analizó el efecto del ácido carnósico sobre la transición dimórfica de la cepa SC5314 de C. albicans, dado que la transición dimórfica levadura-micelio está considerada como un factor de virulencia en este patógeno oportunista. Para ello, un cultivo “overnight” se refrescó a una densidad óptica baja (0,1) y se dejó crecer hasta 0,3 a 37 °C. A continuación, las células se trataron con distintas concentraciones de ácido carnósico en medio YPD más suero humano al 10%. Un cultivo a 28 °C sin suero se dejó crecer en paralelo como control negativo de la filamentación. Se puede observar claramente como el ácido carnósico, redujo la filamentación de C. albicans de una forma dosis-dependiente. Pero el dato más destacable es la confirmación de la fuerte acción sinérgica obtenida tras el suplemento con los dos componentes, muy superior a la resultante de sumar los efectos individuales (Figura 8). En principio, debemos asumir que ambos compuestos son relativamente estables durante el tiempo de exposición (hasta cinco horas), y que el pequeño incremento en la tasa de viabilidad registrada es debido, posiblemente, a la fracción de células que sobrevive a la acción fungicida, que fue capaz de crecer en el medio rico empleado (YPD).
Los datos experimentales confirman el efecto fungicida (letal) del ácido carnósico junto al propóleo 3, antes que fungistático. Como se ha comentado anteriormente, con la cepa SC5314, la sinergia resultante de la combinación de ambos biocompuestos es notablemente superior en relación a los ensayos con la cepa CAI-4, pudiendo en algunos casos disminuir la concentración de alguno de ellos, y no por ello perjudicar el efecto antifúngico de la composición de la invención.
Ejemplo 2. Aplicación en salud buco-dental: Candida albicans y salud bucal
Según estudios científicos, algunos tratamientos antisépticos pueden no ser suficientes por si solos para erradicar los microorganismos potencialmente responsables de las caries, especialmente si determinados hongos patógenos están presentes, por lo que se podría considerar la cavidad oral como un reservorio fúngico en general y de Candida en particular. Por tanto, para su eliminación sería necesario prevenir tanto la exacerbación de la caries como su colonización por Candida.
Por otra parte, se ha constatado una alta prevalencia de C. albicans, especialmente en las caries cervicales, que representa, independientemente del nivel socioeconómico de los pacientes con caries, la especie fúngica oportunista más común seguida de C. tropicales, C. krusei y C. parapsilosis.
En ensayos realizados con distintas pastas dentales comercializadas, ampliamente utilizadas y aceptadas a nivel internacional, frente a diversos microorganismos infecciosos como son: Candida albicans, Candida parapsilosis, Escherichia coli, Streptococcus mutans y Staphylococcus epidermidis, se observa que la efectividad de éstas en relación a la pasta dental formulada de acuerdo con la composición de la presente solicitud es notablemente menor, no sólo contra especies de Candida (incluidos aislados clínicos) como se pone de manifiesto en la Figura 11, sino también frente al resto de patógenos mencionados (Figura 12).
La Tabla 1 recoge un análisis comparativo de la eficacia de cada una de las pastas empleadas.
Tabla 1
Figure imgf000012_0001
Tabla 1. Diámetro de los halos de inhibición (en milímetros) producidos por distintas pastas dentales comercializadas frente a diversos microorganismos patógenos. Se aprecian unos diámetros notablemente mayores en el caso de la pasta dental formulada con los ingredientes defendidos en la presente patente frente a todos los microorganismos, poniendo de manifiesto una vez más su mayor poder antimicrobiano.
Por otra parte, si se fomenta el crecimiento los microorganismos antes de aplicar el dentífrico, para emular más fielmente su aplicación real, permitiendo que éstos tengan la oportunidad de alcanzar su potencial umbral patógeno, los efectos antimicrobianos observados son igualmente notables en el dentífrico que contiene los principios activos descritos en la patente al compararlos con el resto (Tablas 2 y 3).
Tabla 2
Figure imgf000012_0002
Tabla 2. Diámetro de los halos de inhibición (en milímetros) producidos por distintas pastas dentales comercializadas frente a diversos microorganismos patógenos. En este ensayo se permitió el crecimiento microbiano (cinco horas) mediante preincubación de las placas a 37 °C antes de adicionar los compuestos, para que alcancen mayor potencial patógeno. Se aprecian unos diámetros notablemente mayores en el caso de la pasta dental formulada con los ingredientes defendidos en la presente patente frente a todos los microorganismos, poniendo de manifiesto una vez más el mayor poder antimicrobiano de ésta.
Tabla 3
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Tabla 3. Diámetro de los halos de inhibición (en milímetros) producidos por distintas pastas dentales comercializadas frente a diversos microorganismos patógenos. En este caso se permitió el crecimiento previo (doce horas de preincubación) de los cultivos para que alcancen mayor potencial patógeno. Como se puede apreciar, sólo la pasta dental formulada con los ingredientes defendidos en la presente patente produce halos de inhibición apreciables, mientras que con las otras pastas dentales comercializadas no se aprecia ningún halo de inhibición.
Finalmente, se han llevado a cabo experimentos con aislados clínicos orales de cepas de C. albicans con el objetivo de llevar la parte experimental hasta el extremo más realista posible, siendo idénticas las conclusiones a las anteriormente expuestas (Figura 11 y Tablas 1-3).
Ejemplo 3. Ejemplos de forma de aplicación, vehículos y sistemas de aplicación-dosificación.
Aplicabilidad
Considerando las múltiples posibilidades y necesidades de aplicación de esta combinación sinérgica, se incluyen las diferentes formas y sistemas de dosificación de la misma. La aplicación de la citada fórmula exige distintas aplicaciones:
En el caso de salud buco-dental, la pasta dental representa un mecanismo de actuación multifactorial simultánea frente a degeneraciones-pérdidas de función de origen también multifactorial, abarcando tanto la candidiasis, como la evitación de caries y gingivitis, así como la normalización salival y flora buco-dental.
En infección en las partes íntimas de la mujer, la aplicación tendría lugar a través de toallitas, considerando que boca y vagina tienen la misma composición epitelial, de lisozimas y de mucosas. A su vez, en candidiasis sistémicas, la aplicación sería a través de la forma de jarabe o inyección.
Para establecer la correcta aplicabilidad de la composición sinérgica de la presente solicitud, se realizaron todas las pruebas de adecuación de dicha formulación con los excipientes descritos a continuación, resultando correcta la misma en todos los casos incluidos:
CREMA
1. Propilenglicol
2. Polisorbato
SPRAY
1. Propilenglicol
2. Alcohol isopropílico
COMPRIMIDOS
1. Celulosa microcristalina
2. Estearato de magnesio
3. Lactosa
POLVOS USO TÓPICO
1. Almidón de arroz
2. Maltodextrinas
CÁPSULAS
1. Lactosa o lactosa monohidrato
2. Celulosa microcristalina
3. Almidón de maíz
4. Estearato de magnesio
5. Lauril sulfato de sodio
6. Dióxido de sílice coloidal
POLVO PARA SUSPENSIÓN ORAL
1. Sacarosa
2. Sílice coloidal anhidra
3. Goma arábiga
4. Citrato de sodio
5. Ácido cítrico anhidro
PERFUSIÓN
1. Cloruro de sodio
2. Hidróxido de sodio para ajustar pH
JARABE
1. Glicerina
TOALLITAS
1. Hidroalcohólico con polimetacrilato de glicerilo 2. Tensioactivos eudérmicos
3. Etanol
4. Propilenglicol
5. Cloruro de benzalconio

Claims (13)

REIVINDICACIONES
1. Composición sinérgica que comprende:
- propóleo que comprende polifenoles a una concentración entre 70 y 90 % en peso respecto al propóleo y - ácido carnósico,
para uso en la prevención y el tratamiento de candidiasis en humanos y/o en animales.
2. Composición sinérgica para uso según la reivindicación 1, caracterizada por que la candidiasis es candidiasis epitelial.
3. Composición sinérgica para uso según la reivindicación 1 ó 2, caracterizada por que la concentración del propóleo es entre 20 y 80 % en peso respecto al total de la composición sinérgica.
4. Composición sinérgica para uso según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, caracterizada por que la concentración de ácido carnósico es entre 10 y 60 % en peso respecto al total de la composición sinérgica.
5. Composición sinérgica para uso según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4, caracterizada por que está seleccionada del grupo compuesto por crema, gel, ungüento, óvulos, spray, comprimidos, polvos de uso tópico, cápsulas, polvo para suspensión oral, gotas óticas, pasta dental, colutorio, perfusión, jarabe, toallitas, seda dental, hilo dental, cepillo dental y cepillo interdental.
6. Composición farmacéutica y/o veterinaria sinérgica que comprende:
- propóleo que comprende polifenoles a una concentración entre 70 y 90 % en peso respecto al propóleo y - ácido carnósico,
junto con excipientes farmacéuticamente y/o veterinariamente aceptables, para uso en la prevención y el tratamiento de candidiasis en humanos y/o en animales.
7. Composición farmacéutica y/o veterinaria sinérgica para uso según la reivindicación 6, caracterizada por que la concentración del propóleo es entre 20 y 80 % en peso respecto al total de la composición farmacéutica y/o veterinaria sinérgica.
8. Composición farmacéutica y/o veterinaria sinérgica para uso según la reivindicación 6 o 7, caracterizada por que la concentración de ácido carnósico es entre 10 y 60 % en peso respecto al total de la composición farmacéutica y/o veterinaria sinérgica.
9. Composición farmacéutica y/o veterinaria sinérgica para uso según cualquiera de las reivindicaciones 6 a 8, caracterizada por que dichos excipientes están seleccionados del grupo compuesto por aglutinantes, rellenos, desintegradores, lubricantes, recubridores, endulzantes, saborizantes, colorizantes, azúcares, xilitol, fosfato de calcio, grasas esferoides, talco, polisorbato, propilenglicol, alcohol isopropílico, celulosa microcristalina, estearato de magnesio, lactosa, lactosa monohidrato, almidón de arroz, maltodextrinas, lauril sulfato de sodio, sorbitol, carbonato de calcio precipitado ligero, bicarbonato de sodio, solución de silicato de sodio, sacarina de sodio, carboximetil celulosa de sodio, aceite mineral ligero, agua purificada, dióxido de sílice coloidal, sacarosa, sílice coloidal anhidra, goma arábiga, citrato de sodio, ácido cítrico anhidro, cloruro de sodio, hidróxido de sodio, glicerina, hidroalcohólico con polimetacrilato de glicerilo, tensioactivos eudérmicos, etanol y cloruro de benzalconio.
10. Producto alimenticio sinérgico que comprende
- propóleo que comprende polifenoles a una concentración entre 70 y 90 % en peso respecto al propóleo y - ácido carnósico,
para uso en la prevención y el tratamiento de candidiasis en humanos y/o en animales.
11. Producto alimenticio sinérgico según la reivindicación 10, caracterizado por que está seleccionado del grupo compuesto por goma de mascar, gominola, piruleta y golosina.
12. Producto alimenticio sinérgico según la reivindicación 10 u 11, caracterizado por que la concentración del propóleo es entre 20 y 80 % en peso respecto al total del producto alimenticio.
13. Producto alimenticio sinérgico según cualquiera de las reivindicaciones 10 a 12, caracterizado por que la concentración de ácido carnósico es entre 10 y 60 % en peso respecto al total del producto alimenticio.
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