ES2846909T3 - Fitocomplejos que muestran múltiples actividades antioxidantes sinérgicas - Google Patents

Abstract

Una composición moduladora del estrés oxidativo que comprende: una cantidad de una combinación de extracto de manzana, extracto de uva, extracto de té verde y extracto de olivo que proporciona una actividad antioxidante combinada mayor que la proporcionada por la suma de las actividades antioxidantes individuales de los componentes individuales de la combinación.

Description

DESCRIPCIÓN

Fitocomplejos que muestran múltiples actividades antioxidantes sinérgicas

DATOS DE PRIORIDAD

Esta solicitud reivindica la prioridad de la solicitud de patente provisional de los Estados Unidos con número de serie 62/133.945 presentada el 16 de marzo de 2015.

Antecedentes de la invención

El estrés oxidativo influye en una serie de vías metabólicas in vivo y está implicado en muchas afecciones fisiopatológicas que incluyen trastornos asociados con la modulación específica de tejido de la actividad de las proteínas cinasas estimulada a través de la propagación de especies reactivas de oxígeno y nitrógeno. Las patologías relacionadas con el estrés oxidativo y los trastornos metabólicos pueden incluir síndrome metabólico, diabetes de tipo I y de tipo II, obesidad, niveles altos de colesterol acompañados de un aumento de colesterol LDL oxidado, ateroesclerosis, hipertensión arterial y diversas formas de inflamación, por nombrar solamente algunas.

Breve descripción de los dibujos

Las características y ventajas de la invención serán evidentes a partir de la descripción detallada que sigue, y que, tomada junto con las figuras adjuntas, juntas ilustran las características de la invención. Se entiende que las figuras simplemente representan realizaciones ilustrativas y, por lo tanto, no deben considerarse que limitan en alcance.

La fig. 1 muestra esquemáticamente la interacción del óxido nítrico, superóxido, peroxinitrito y dióxido de nitrógeno en una celda;

la fig. 2 muestra esquemáticamente las funciones que desempeña el macrófago (M) durante el desarrollo temprano de la lesión dentro de las placas ateroscleróticas del endotelio vascular; y

la fig. 3 muestra esquemáticamente los mecanismos de la disfunción cardiovascular en la diabetes que ilustra el papel del superóxido, peroxinitrito y las cascadas de señalización de cinasas específicas.

Descripción de las realizaciones

Antes de que se divulguen y describan las realizaciones de la invención, debe entenderse que no se pretende la limitación a las estructuras, etapas del proceso o materiales en particular divulgados en el presente documento, sino que también se incluyen los equivalentes de los mismos como reconocerían aquellos habitualmente expertos en las correspondientes materias. También debe entenderse que la terminología empleada en el presente documento se usa para describir únicamente ejemplos particulares y no pretende ser limitante. Los mismos números de referencia en diferentes dibujos representan el mismo elemento. Los números proporcionados en los diagramas de flujo y los procesos se proporcionan para mayor claridad al ilustrar las etapas y las funciones y no necesariamente indican un orden o secuencia en particular. A menos que se defina de otro modo, todos los términos técnicos y científicos usados en el presente documento tienen el mismo significado que el que entiende habitualmente un experto habitual en la materia a la que pertenece la presente divulgación. En la memoria descriptiva y reivindicaciones adjuntas, las formas en singular incluyen las referencias en plural a menos que el contexto indique claramente lo contrario.

Como se usa en la presente memoria descriptiva, las formas en singular "un", "uno/una", y "el/la" específicamente también son referentes en plural, a menos que el contenido indique claramente lo contrario. Por ejemplo, "un excipiente" se refiere a uno o más excipientes.

Adicionalmente, como se usa en el presente documento, a menos que se indique de manera específica lo contrario, la palabra "o" se usa en el sentido "inclusivo" de "y/o" y no en el sentido "exclusivo" de "uno u otro".

El término "aproximadamente" como se usa en el presente documento se refiere a un grado de desviación. Significa aproximadamente, en la región de, prácticamente, o alrededor. Cuando el término "aproximadamente" se utiliza junto con un intervalo numérico, modifica ese intervalo al extender los límites por encima y por debajo de los valores numéricos establecidos. Se entiende que el soporte en esta memoria descriptiva para los valores numéricos usados en relación con el término "aproximadamente" también se proporciona para el valor numérico exacto en sí, como si "aproximadamente" no se usara

Las concentraciones, cantidades y otros datos numéricos pueden expresarse o presentarse en el presente documento en un formato de intervalo. Ha de entenderse que dicho formato de intervalo se usa simplemente por conveniencia y brevedad y, por tanto, debe interpretarse de manera flexible para incluir no solamente los valores numéricos enumerados explícitamente como los límites o extremos del intervalo, sino que también incluye todos los valores numéricos individuales y/o subintervalos comprendidos dentro de ese intervalo como si cada valor numérico (incluyendo las fracciones) y subintervalo se enumerase explícitamente. Como ilustración, debe interpretarse que un intervalo numérico de "aproximadamente 1 a aproximadamente 5" incluye no solo los valores explícitamente enumerados de aproximadamente 1 a aproximadamente 5, sino que también incluye valores individuales y subintervalos dentro del intervalo indicado. Por lo tanto, en este intervalo numérico se incluyen valores individuales, tales como 2, 2,6, 3, 3,8 y 4, y subintervalos tales como de 1-3, de 2-4 y de 3-5, etc., así como 1, 2, 3, 4 y 5, individualmente.

Se debe suponer que los ingredientes de la formulación o composición incluidos o enumerados en el presente documento están en % en peso a menos que se indique específicamente lo contrario. Además, se supone que las cantidades de ingredientes presentadas en forma de relaciones están en proporciones de % en peso (p. ej.,% p/p). Como tal, una composición que contiene cuatro ingredientes en una relación 1:1:1:1 indicaría que cada ingrediente está presente en una cantidad del 25 % en peso. En consecuencia, en algunos aspectos, la cantidad de un ingrediente en una composición o formulación en términos de % en peso se puede obtener de un valor de relación numérica.

Como se usa en el presente documento, "comprende", "que comprende(n)", "que contiene/n" y "que tiene/n" y similares pueden tener el significado atribuido a las mismas en la ley de patentes de e E.UU., y pueden significar "incluye", "que incluye/n", y similares, y, en general, se interpretan como términos abiertos. Las expresiones "que consiste/n en" o "consiste en" son expresiones cerradas e incluyen solamente los componentes, estructuras, etapas o similares enumerados específicamente junto con dichas expresiones, así como lo que está de acuerdo con la ley de patentes de EE. UU. "Que consiste/n esencialmente en" o "consiste esencialmente en" tienen el significado generalmente atribuido a las mismas por la ley de patentes de EE.UU. En particular, dichas expresiones, en general, son expresiones cerradas, con la excepción de permitir la inclusión de artículos, materiales, componentes, etapas, o elementos adicionales, que no afecten de manera material a las características o funciones básicas y novedosas del o de los artículos utilizados en relación con las mismas. Por ejemplo, los oligoelementos presentes en una composición, pero que no afectan a la naturaleza ni a las características de la composición serían permisibles si estuvieran presentes en la expresión "que consisten esencialmente en", aunque no se citen expresamente en una lista de artículos que sigan a dicha terminología. Cuando se utiliza un término abierto en la memoria descriptiva, como "que comprende/n" o "que incluye/n", se entiende que también se debe prestar apoyo directo a la expresión "que consiste/n esencialmente en", así como a la expresión "que consiste/n en" como se indica explícitamente y vice versa.

Como se usa en el presente documento, "sustancial" o "sustancialmente" cuando se usa en referencia a una cantidad o valor de un material, o una característica específica del mismo, se refiere a una cantidad que es suficiente para proporcionar un efecto que el material o característica estaba destinado a proporcionar. El grado exacto de desviación permitido puede depender en algunos casos del contexto específico. De manera similar, "sustancialmente libre de" o similares se refiere a la falta de un elemento o agente identificado en una composición. De manera particular, los elementos que se identifican como que están "sustancialmente libres de" o bien están completamente ausentes de la composición o bien se incluyen solamente en cantidades que son lo suficientemente pequeñas como para no tener un efecto medible sobre la composición.

Como se usa en el presente documento, "agente activo", "agente activo", y similares se refieren a una molécula, compuesto, mezcla, o ingrediente que tiene un efecto fisiológico medible en un sujeto cuando se administra al mismo en una cantidad apreciable, tal como una cantidad eficaz o terapéuticamente eficaz. Términos similares tales como "fracción activa", "componente activo", y "constituyente activo" se puede usar indistintamente con el mismo. Cuando la actividad de un "agente activo" ejerce o da como resultado de otro modo, un efecto terapéutico beneficioso en un sujeto al que se le ha administrado el agente, el "agente activo" puede denominarse "agente terapéutico".

"Bergamota" se refiere a la naranja bergamota (Citrus bergamia Risso). Esta especie de cítricos, crece abundantemente en la región de Calabria, en el sur de Italia, y se ha utilizado en la medicina popular de Calabria para tratar dolencias cardiovasculares durante siglos. La bergamota comprende dos derivados de 3-hidroximetilglutarilo (HMG) de los glucósidos flavonoides brutieridina y melitidina de origen natural. Estos glucósidos son los derivados de HMG de hesperetina y naringenina glucosiladas, respectivamente, y tienen una similitud estructural con los inhibidores de HMG-CoA reductasa disponibles comercialmente conocidos como estatinas. Como se usa en el presente documento, la bergamota puede usarse indistintamente para referirse al fruto y/o al extracto.

Como se usa en el presente documento, un "concentrado" se refiere a un polvo seco derivado de un componente que no incluye el uso de ningún disolvente durante el proceso de concentración.

La expresión "unidad de dosificación" se entiende que significa una unitaria, es decir, una dosis única que se pueda administrar a un sujeto o paciente y que se pueda manipular y envasar fácilmente, permaneciendo como una dosis unitaria física y químicamente estable que comprende el principio activo como tal o una mezcla del mismo con materiales vehículos farmacéuticos sólidos o líquidos. Las dosis pueden ser orales, nasales, entéricas, parenterales, transdérmicas, transmucosas, etc.

El término "extracto" se refiere a aquellas sustancias preparadas usando un disolvente, p. ej., etanol, agua, vapor, agua sobrecalentada, metanol, hexano, líquido de cloroformo, CO ² líquido, N² líquido, propano, CO ² supercrítico o cualquier combinación de los mismos. Extractos, como se usa en el presente documento, puede referirse a un extracto en forma líquida, o puede referirse a un producto obtenido de un procesamiento posterior de la forma líquida, tal como un polvo seco u otra forma sólida. Los extractos pueden tomar muchas formas, incluidas, pero sin limitación: sólida, líquida, en partículas, troceada, destilada, etc. y pueden realizarse mediante cualquier número de procedimientos o protocolos, tales como trocear, triturar, pulverizar, hervir, vaporizar, macerar, remojar, infusionar, aplicar un gas, etc., y puede emplear cualquier reactivo adecuado, tal como agua, alcohol, vapor u otros materiales orgánicos. Los extractos generalmente tienen un porcentaje de pureza dado y pueden ser de relativamente a altamente puros. En algunas realizaciones, los extractos pueden ser fitoextractos elaborados a partir de partes específicas de una fuente, tal como la piel, pulpa, hojas, flores, frutos de una planta, etc., o pueden elaborarse a partir de toda la fuente. En algunos aspectos, un extracto puede incluir una o más fracciones activas o agentes activos. En algunos extractos, se puede añadir maltodextrina como transportador. En algunos aspectos, la pureza de un extracto se puede controlar o ser una función del proceso o protocolo de extracción.

Como se usa en el presente documento, "formulación" y "composición" se pueden usar indistintamente y se refieren a una combinación de al menos dos ingredientes. En algunas realizaciones, al menos un ingrediente puede ser un agente activo o de otro modo tener propiedades que ejerzan actividad fisiológica cuando se administra a un sujeto.

Como se usa en el presente documento, "aumento o disminución de la concentración, secreción o biosíntesis " significa un aumento o disminución apreciables en la cantidad (p. ej., en al menos un 3 %), concentración, tasa de secreción o cantidad de biosíntesis del compuesto de referencia.

Como se usa en el presente documento, "efecto inhibidor lineal" o "dosis-respuesta" se refiere a una disminución lineal en la secreción o biosíntesis resultante de todas las concentraciones del material inhibidor sobre una curva de dosisrespuesta. Por ejemplo, la inhibición a concentraciones bajas seguida de un fallo de la inhibición o un aumento de la secreción a concentraciones más altas representa una carencia de un efecto inhibidor lineal.

Como se usa en el presente documento, el "síndrome del intestino permeable (LGS, por sus siglas en inglés)" es un aumento en la permeabilidad de la mucosa intestinal a las macromoléculas luminales, antígenos y toxinas asociados con daño inflamatorio degenerativo y/o atrófico de la mucosa. El LGS puede provocar una serie de síntomas aparentemente no relacionados que afectan a todos los sistemas de órganos en el cuerpo. El LGS también se ha relacionado con el hecho de tener un papel causal en una gran cantidad de enfermedades distintas. Muchas de estas son enfermedades autoinmunitarias, lo que significa que el sistema inmunitario ataca las propias células del cuerpo. El LGS desempeña un papel en este tipo de enfermedades porque aumenta las reacciones inmunitarias en las partículas de los alimentos y después puede producirse una reactividad cruzada, lo que significa que el sistema inmunitario ataca los tejidos del cuerpo que son químicamente similares a los alimentos a los que se ha sensibilizado. Una muestra de las muchas enfermedades en las que el síndrome del intestino permeable puede tener un papel incluye: artritis reumatoide, osteoartritis, asma, esclerosis múltiple, vasculitis, enfermedad de Crohn, colitis, enfermedad de Addison, lupus, tiroiditis, síndrome de fatiga crónica y fibromialgia.

Como se usa en el presente documento, "farmacéuticamente aceptable" se refiere generalmente a materiales que son adecuados para la administración a un sujeto en relación con un agente o principio activo. Por ejemplo, un "transportador farmacéuticamente aceptable" puede ser cualquier sustancia o material que pueda combinarse adecuadamente con un agente activo para proporcionar una composición o formulación adecuada para la administración a un sujeto. Los excipientes, diluyentes y otros ingredientes usados en o usados para preparar una formulación o composición para su administración a un sujeto pueden usarse con dicha expresión.

Como se usa en el presente documento, la expresión "agente terapéutico primario" designa la presencia de un agente terapéutico en una composición en una cantidad más grande que la cantidad total combinada de los extractos que proporcionan un efecto sinérgico en la composición.

El término "prevenir'' y sus variantes se refieren a la profilaxis contra una afección fisiológica no deseable particular. La profilaxis puede ser parcial o completa. La profilaxis parcial puede dar como resultado la aparición tardía de una afección fisiológica. El experto en la materia reconocerá la conveniencia de retrasar el inicio de una afección fisiológica y sabrá administrar las composiciones de la invención a sujetos que están en riesgo de determinadas afecciones fisiológicas para retrasar la aparición de esas afecciones. Por ejemplo, el experto en la materia reconocerá que los sujetos obesos tienen un riesgo elevado de enfermedad de las arterias coronarias. Por lo tanto, el experto en la materia puede administrar composiciones para aumentar la sensibilidad a la insulina en un sujeto obeso, por lo que la aparición de diabetes mellitus o dislipemia se puede prevenir por completo o retrasar.

Como se usa en el presente documento, "estrés oxidativo" se refiere a un desequilibrio entre las manifestaciones de las especies reactivas de oxígeno (ROS, por sus siglas en inglés) y la capacidad de un sistema biológico para desintoxicar fácilmente los intermedios reactivos. Las ROS dan como resultado la formación de radicales libres. Los radicales libres (p. ej., hidroxilo, ácido nítrico, superóxido) o los no radicales (p. ej., peróxido de hidrógeno, peróxido de lípidos) provocan daño (llamado daño oxidativo) de moléculas específicas con la consiguiente lesión de células o tejidos. Las alteraciones en el estado redox normal de las células pueden provocar efectos tóxicos a través de la producción de peróxidos y radicales libres que dañan todos los componentes de la célula, incluyendo proteínas, lípidos y ADN. Si bien el estrés oxidativo a corto plazo puede ser beneficioso; con el tiempo, el estrés oxidativo puede estar implicado en la etiología de muchas afecciones y enfermedades. El aumento de la producción de ROS se produce como resultado de una infección fúngica o vírica, inflamación, envejecimiento, radiación UV, polución, consumo excesivo de alcohol, tabaquismo, etc. La eliminación o neutralización de ROS se logra con antioxidantes, endógenos (p. ej., catalasa, glutatión, superóxido dismutasa) o exógenos (p. ej., vitaminas A, C, E, bioflavonoides, carotenoides).

Como se usa en el presente documento, "patologías asociadas al estrés oxidativo" define cualquier afección que aumenta el estado de oxidación celular para producir una respuesta al estrés oxidativo que precede a una patología. Esto generalmente es el resultado del aumento de la producción de especies reactivas de oxígeno o de reactivas de nitrógeno (ROS y RNS, por sus siglas en inglés, respectivamente) (superóxido, peróxido de hidrógeno, radical hidroxilo, peroxinitrito, oxígeno singulete) en relación con las defensas antioxidantes celulares (antioxidantes, enzimas antioxidantes). Aunque una respuesta al estrés oxidativo no necesariamente da como resultado una enfermedad, es un componente importante en el mecanismo de muchas enfermedades. Un ejemplo no limitante de tal enfermedad incluye el síndrome metabólico, obesidad, ateroesclerosis, hipertensión arterial, diabetes (tipos 1, 2 y 3), disminución de la capacidad de ejercicio, eyaculación precoz, insuficiencia cardíaca congestiva, enfermedad cardiovascular incluyendo paro cardíaco e infarto de miocardio, disfunciones motoras, cataratas, trastornos cognitivos, incluida la enfermedad de Alzheimer, fenómeno de Raynaud, hipertensión esencial, accidente cerebrovascular, asma, esclerosis múltiple, vasculitis, pancreatitis por síndrome de X frágil, diversas formas de inflamación, incluida la osteoartritis, artritis reumatoide, enfermedad inflamatoria del intestino, colitis, síndrome del intestino permeable, enfermedades renales y hemodiálisis, conmoción, traumatismo, isquemia, enfermedad de Parkinson, reacciones farmacológicas, enfermedad de Crohn, enfermedad de Addison, lupus, tiroiditis, síndrome de fatiga crónica, fibromialgia, muchos cánceres, incluyendo cánceres de próstata y mama, quimioterapia potenciada contra el cáncer, enfermedades asociadas con la piel tal como cicatrización lenta de heridas, arrugas y signos prematuros de envejecimiento.

Como se usa en el presente documento, la expresión "agente terapéutico secundario" designa la presencia de un agente terapéutico en una composición en una cantidad menor que la cantidad total combinada de los extractos que proporcionan un efecto sinérgico en la composición.

La expresión, "sujeto", "sujetos", o "sujetos que lo necesitan" incluyen seres humanos y sujetos no humanos, particularmente animales domésticos y de granja. Se entenderá que el sujeto al que se administra un compuesto de la invención no necesita padecer un estado traumático específico. De hecho, los compuestos de la invención se pueden administrar de manera profiláctica, antes de cualquier desarrollo de síntomas. El término "terapéutico", "terapéuticamente", y similares se utilizan para abarcar usos terapéuticos, paliativos así como profilácticos.

Como se usa en el presente documento, el término "disolvente" se refiere a un líquido de naturaleza gaseosa, acuosa u orgánica que posee las características necesarias para extraer material sólido de un producto vegetal. Ejemplos de disolventes incluirían, pero sin limitación, agua, vapor, agua sobrecalentada, metanol, etanol, acetato de etilo, hexano, cloroformo, CO ² líquido, N² líquido, propano o cualquier combinación de dichos materiales.

Como se usa en el presente documento, "sinérgico" significa más que el efecto aditivo de los componentes individuales contra un mecanismo de acción. Por ejemplo, si F1 produce la respuesta X, F2 produce la respuesta Y, entonces la combinación de F1 F2 > X Y. En algunas situaciones, F2 no produce respuesta y el valor de Y es igual a cero.

La expresión "cantidad eficaz" "cantidad terapéuticamente eficaz", o "tasa o tasas terapéuticamente eficaces" de un principio activo se refiere a una cantidad o tasas de suministro no tóxicas del principio activo, pero suficientes, para lograr resultados terapéuticos en el tratamiento de una enfermedad o afección para la que se suministra el principio. Se entiende que distintos factores biológicos pueden afectar a la capacidad de una sustancia para realizar su tarea prevista. Por lo tanto, una "cantidad eficaz", "cantidad terapéuticamente eficaz", "o" tasa o tasas terapéuticamente eficaces" pueden depender en algunos casos de dichos factores biológicos. Adicionalmente, aunque el logro de los efectos terapéuticos puede medirse por un médico u otro personal médico cualificado usando evaluaciones conocidas en la técnica, se reconoce que la variación individual y la respuesta a los tratamientos pueden hacer que el logro de los efectos terapéuticos sea una decisión subjetiva. La determinación de una cantidad o tasa de suministro terapéuticamente eficaz está dentro de la experiencia habitual en la técnica de las ciencias farmacéuticas y la medicina.

Los términos "tratar'1, "que trata/n", o "tratamiento" como se usa en el presente documento y como se entiende bien en la técnica, significa una estrategia para obtener resultados beneficiosos o deseados, incluyendo, sin limitación, resultados clínicos en un sujeto que se está tratando. Los resultados beneficiosos o deseados pueden incluir, pero sin limitación, alivio o mejora de uno o más signos o síntomas de una afección, reducción del alcance de la enfermedad, estabilización (es decir, no empeoramiento) del estado de una enfermedad o afección, retraso o ralentización de la progresión de la enfermedad, mejora o paliación de la patología, disminución de la reaparición de la enfermedad y remisión (ya sea parcial o total), ya sea detectable o no detectable. Por ejemplo, cuando el estado fisiológico es mala tolerancia a la glucosa, "tratamiento" se refiere a mejorar la tolerancia a la glucosa de un sujeto tratado. Como otro ejemplo, cuando el estado fisiológico es la obesidad, el término "tratamiento" se refiere a reducir la masa grasa corporal, mejorar la masa corporal o mejorar la relación de grasa corporal de un sujeto. El tratamiento de la diabetes significa la mejora del control de la glucosa en sangre. El tratamiento de enfermedades inflamatorias significa reducir la respuesta inflamatoria sistémica o localmente dentro del cuerpo. "Tratar", "que trata/n", y "tratamiento" también puede significar prolongar la supervivencia en comparación con la supervivencia esperada si no se recibe tratamiento y puede ser profiláctico. Dicho tratamiento profiláctico también puede denominarse prevención o profilaxis de una enfermedad o afección. La profilaxis puede ser parcial o completa. La profilaxis parcial puede dar como resultado la aparición tardía de una afección fisiológica. El experto en la materia reconocerá que el tratamiento puede, pero no siempre es necesario, incluir remisión o curación.

Como se usa en el presente documento, los "compuestos" pueden identificarse por su estructura química, nombre químico o nombre común. Cuando la estructura química, nombre químico, o nombre común entran en conflicto, la estructura química es determinante de la identidad del compuesto. Los compuestos descritos en el presente documento pueden contener uno o más centros quirales y/o dobles enlaces y, por tanto, pueden existir en forma de estereoisómeros, tales como isómeros (es decir, isómeros geométricos), enantiómeros o diastereómeros de doble enlace. En consecuencia, las estructuras químicas representadas en el presente documento abarcan todos los enantiómeros y estereoisómeros posibles de los compuestos ilustrados o identificados, incluyendo la forma estereoisoméricamente pura (p. ej., geométricamente pura, enantioméricamente pura o diastereoméricamente pura) y mezclas enantioméricas y estereoisoméricas. Las mezclas enantioméricas y estereoisoméricas pueden resolverse en sus enantiómeros o estereoisómeros componentes usando técnicas de separación o técnicas de síntesis quiral bien conocidas para el experto en la materia. Los compuestos también pueden existir en varias formas tautoméricas, incluyendo la forma enol, la forma ceto y mezclas de las mismas. En consecuencia, las estructuras químicas abarcan todas las formas tautoméricas posibles de los compuestos ilustrados o identificados. Los compuestos descritos también abarcan compuestos marcados isotópicamente en los que uno o más átomos tienen una masa atómica diferente de la masa atómica que se encuentra convencionalmente en la naturaleza. Los ejemplos de isótopos que pueden incorporarse en compuestos de la invención incluyen, pero sin limitación, 2H, 3H, 13C, 14C, 15N, 18O, 17O, etc. Los compuestos pueden existir en formas no solvatadas así como en formas solvatadas, incluyendo formas hidratadas y como N-óxidos. En general, los compuestos pueden estar hidratados, solvatados o ser N-óxidos. Determinados compuestos pueden existir en múltiples formas cristalinas o amorfas. También se contemplan congéneres, análogos, productos de hidrólisis, metabolitos y precursores o profármacos del compuesto. En general, todas las formas físicas son equivalentes para los usos contemplados en el presente documento y están destinadas a estar dentro del alcance de la presente divulgación.

Expresiones comparativas tal como "más eficazmente" "más grande que", "mejorado", "potenciado", y expresiones similares se pueden usar para indicar un resultado logrado o una propiedad presente en una formulación o proceso que tiene un resultado mejor de manera medible o más positivo que el objeto con el que se hace la comparación. En algunos casos, se puede hacer una comparación con la técnica anterior.

En lo sucesivo, en el presente documento, se hace referencia en detalle a realizaciones específicas de la invención. Aunque la invención se describirá junto con estas realizaciones específicas, se entenderá que no se pretende limitar la invención a tales realizaciones específicas. Al contrario, pretende cubrir alternativas, modificaciones y equivalentes que pueden incluirse dentro del espíritu y alcance de la invención tal como se define en las reivindicaciones adjuntas. En la siguiente descripción, se exponen numerosos detalles específicos con el fin de proporcionar una comprensión profunda de la presente invención. La presente invención se puede poner en práctica sin algunos o sin la totalidad de estos detalles específicos. En otros casos, las funciones de proceso bien conocidas no se han descrito en detalle, con el fin de no complicar innecesariamente la presente invención.

Todas las formas de vida mantienen un ambiente reductor dentro de sus células. Este ambiente reductor es preservado por enzimas que mantienen el estado reducido mediante un aporte constante de energía metabólica. Las alteraciones en este estado redox normal pueden provocar efectos tóxicos a través de la producción de peróxidos y radicales libres que dañan todos los componentes de la célula, incluyendo proteínas, lípidos y ADN.

En los seres humanos, el estrés oxidativo está implicado en la etiología de muchas enfermedades. Por ejemplo, el estrés oxidativo está implicado en el síndrome metabólico, obesidad, ateroesclerosis, hipertensión arterial, diabetes (tipos I, II, y III), disminución de la capacidad de ejercicio, eyaculación precoz, insuficiencia cardíaca congestiva, enfermedad cardiovascular incluyendo paro cardíaco e infarto de miocardio, disfunciones motoras, cataratas, trastornos cognitivos, incluida la enfermedad de Alzheimer, fenómeno de Raynaud, hipertensión esencial, accidente cerebrovascular, asma, esclerosis múltiple, vasculitis, pancreatitis por síndrome de X frágil, diversas formas de inflamación, incluida la osteoartritis, artritis reumatoide, enfermedad inflamatoria del intestino, colitis, síndrome del intestino permeable, enfermedades renales y hemodiálisis, conmoción, traumatismo, isquemia, enfermedad de Parkinson, reacciones farmacológicas, enfermedad de Crohn, enfermedad de Addison, lupus, tiroiditis, síndrome de fatiga crónica, fibromialgia, muchos cánceres, incluyendo cánceres de próstata y mama, quimioterapia potenciada contra el cáncer, enfermedades asociadas con la piel tal como cicatrización lenta de heridas, arrugas, signos prematuros de envejecimiento, así como otros.

Las especies reactivas de oxígeno, especies reactivas de nitrógeno (RNS), otros radicales libres y fuentes oxidantes (colectivamente, es decir, O²', ¹ O² , HO-, NO', ONOO', HOCl, RO(O)', O(O)'), pueden provocar daño grave a las células del cuerpo. Por ejemplo, este daño puede ser en el ADN, proteínas y otras macromoléculas y constituye la base de una amplia variedad de enfermedades basadas en la inflamación.

La evidencia experimental sugiere directa o indirectamente que existen seis especies reactivas de oxígeno principales que provocan daño oxidativo en el cuerpo humano. Estas especies incluyen el anión superóxido (O-), peróxido de ^{hidrógeno (H2O2), radicales peroxilo (ROO-), radical hidroxilo (HO-), oxígeno singulete (}1^{O2) y peroxinitrito (ONOO-).}

Para combatir este daño, los antioxidantes inhiben la oxidación y previenen la formación de radicales libres. Dentro de los sistemas biológicos, hay al menos cuatro fuentes generales de antioxidantes: (1) enzimas, (es decir, superóxido dismutasa, glutatión peroxidasa y catalasa); (2) moléculas grandes (es decir, albúmina, ceruloplasmina, ferritina, otras proteínas); (3) moléculas pequeñas, ( ácido ascórbico, glutatión, ácido úrico, tocoferol, carotenoides, (poli)fenoles); y (4) algunas hormonas (estrógeno, angiotensina, melatonina, etc.).

Los oxidantes y antioxidantes pueden tener diferentes características físicas y químicas. Los antioxidantes individuales pueden actuar mediante múltiples mecanismos en un solo sistema o mediante un único mecanismo diferente y pueden responder de manera diferente a diferentes radicales o fuentes oxidantes. Por ejemplo, los carotenoides no son desactivadores particularmente buenos de radicales peroxilo en relación con los fenólicos y otros antioxidantes; sin embargo, los carotenoides son excepcionales para desactivar el oxígeno singulete, en el que la mayoría de los demás fenólicos y antioxidantes son relativamente ineficaces. El oxígeno singulete no es un radical y no reacciona a través de mecanismos de radicales, sino que reacciona principalmente mediante la adición de dobles enlaces, formando endoperóxidos que pueden reducirse a radicales alcoxilo que inician reacciones en cadena de radicales. Debido a las múltiples características y mecanismos de reacción, así como a las diferentes localizaciones de fase, que suelen estar implicadas, ningún ensayo por sí solo reflejará con precisión todas las fuentes de radicales o todos los antioxidantes en un sistema mixto o complejo.

Las células vivas tienen un sistema de defensa biológico compuesto por antioxidantes enzimáticos que convierten ROS/RNS en especies inofensivas. Por ejemplo, H²O² se puede convertir en agua y oxígeno mediante catalasa. En otro ejemplo, O- se convierte en oxígeno y peróxido de hidrógeno por la superóxido dismutasa (SOD) o reacciona con el óxido nítrico (NO-) para formar peroxinitrito. Cuando el óxido nítrico y el superóxido están presentes, también pueden reaccionar con dióxido de nitrógeno para formar N²O³ y peroxinitrato (véase la figura 1). El peroxinitrato se descompone para dar nitrito y oxígeno, mientras que N²O³ puede reaccionar con tioles para dar nitrosotioles o con anión hidróxido para dar nitrito. El peroxinitrato también reacciona a una velocidad limitada por difusión con peroxinitrito para producir dos moléculas de dióxido de nitrógeno y una de nitrito. Esto crea un ciclo para generar más dióxido de nitrógeno cuando se agregan bolos de peroxinitrito a pH neutro y aumenta sustancialmente el número de posibles reacciones que se producen. Estas mismas reacciones también se producirán in vivo, particularmente cuando el óxido nítrico se produce más rápido que el superóxido.

El peroxinitrito también puede producirse de manera natural por macrófagos alveolares (véase la figura 2). Cuando los macrófagos alveolares se estimulan para producir tanto superóxido como óxido nítrico, peroxinitrito se produce cuantitativamente como lo demuestra la cantidad de óxido nítrico y superóxido producidos y la cantidad de oxígeno consumido. La adición extracelular de superóxido dismutasa (SOD) en altas concentraciones no reduce significativamente la cantidad de peroxinitrito formado y, en cambio, sirve como catalizador de la nitración de tirosina. Esto sugiere que el superóxido producido en la superficie de la membrana y el óxido nítrico que se difunde a través de la membrana reaccionan en la interfaz de la membrana tan rápidamente que la SOD en la fase de volumen no puede competir.

El óxido nítrico (NO) y el peroxinitrito desempeñan papeles importantes en la fisiopatología cardiovascular. El NO puede activar la vía de transducción de señales de guanilato ciclasa soluble (sGC)-cGMP que media varios efectos fisiológicos/beneficiosos en el sistema cardiovascular, incluida la vasodilatación, inhibición de la agregación de plaquetas, efectos antiinflamatorios, antirremodeladores y antiapoptóticos. En afecciones patológicas asociadas con un aumento del estrés oxidativo y la inflamación (infarto de miocardio, cardiopatía isquémica, miocarditis, cardiomiopatía, hipertensión, etc.), el NO y superóxido (O²-) reaccionan para formar peroxinitrito (ONOO-) que induce daño celular a través de la peroxidación lipídica, inactivación de enzimas y otras proteínas por oxidación y nitración, y también activación de la señalización del estrés, metaloproteinasas de matriz (Mm P, por sus siglas en inglés) entre otras.

El peroxinitrito también desencadena la liberación de factores proapoptóticos tal como el citocromo c y el factor inductor de apoptosis (AIF, por sus siglas en inglés) de las mitocondrias, que median las vías de muerte apoptóticas dependientes e independientes de caspasa. Además, el peroxinitrito, junto con otros oxidantes, provoca roturas de hebras en el ADN, activando la enzima nuclear poli(ADP-ribosa) polimerasa-1 (PARP-1, por sus siglas en inglés). Un daño leve del ADN activa la maquinaria de reparación del ADN. Por el contrario, una vez que se produce un daño excesivo del ADN inducido por estrés oxidativo y nitrosativo, como en diversas formas de lesión por reperfusión miocárdica e insuficiencia cardíaca, PARP sobreactivada inicia un ciclo de consumo de energía mediante la transferencia de unidades de ADP-ribosa del nicotinamida adenina dinucleótido (NAD+) a proteínas nucleares, dando como resultado un rápido agotamiento de los grupos intracelulares de NAD+ y ATP, ralentizando la velocidad de la glucólisis y la respiración mitocondrial, conduciendo eventualmente a la disfunción celular y la muerte. La poli(ADP-ribosa) glicohidrolasa (PARG, por sus siglas en inglés) degrada los polímeros de poli(ADP-ribosa) (PAR), generando polímero PAR libre y ADP-ribosa. La PARP sobreactivada también facilita la expresión de una variedad de genes inflamatorios que conducen a un aumento de la inflamación y al estrés oxidativo asociado, facilitando así la progresión de la disfunción cardiovascular y cardíaca.

El peroxinitrito también funciona para amplificar la señalización inflamatoria en afecciones inflamatorias crónicas. Además, la inflamación se desencadena por la activación de múltiples cascadas de señalización que culminan en la producción regulada positivamente de una serie de citocinas y quimiocinas proinflamatorias. Aquellas inician una reacción inflamatoria más compleja caracterizada por la activación de células inflamatorias y la actividad estimulada de enzimas, incluida la NO sintasa inducible (iNOS, por sus siglas en inglés), que produce grandes cantidades de NO, y el superóxido (O²-) que produce las enzimas NADPH oxidasa (NADPHox) y xantina oxidasa (XO). La producción simultánea de NO y O²- da como resultado la generación de peroxinitrito (ONOo - ), que a su vez daña las moléculas diana, incluyendo proteínas, glutatión (GSH), mitocondrias y ADN. El daño del ADN puede iniciar la muerte celular apoptótica y también es el desencadenante obligatorio para la activación de la poli(ADP-ribosa) polimerasa (PARP), que puede inducir necrosis celular por agotamiento de ATP. Tanto ONOO- como PARP participan además en la regulación positiva de las vías de transducción de señales proinflamatorias, produciendo así un ciclo de autoamplificación de daño celular inflamatorio.

El superóxido y el peroxinitrito también coordinan la disfunción cardiovascular en la diabetes (véase la figura 3). La hiperglucemia induce un aumento de la producción del anión superóxido (O²-) a través de la activación de múltiples vías, incluyendo xantina y NAD(P)H oxidasas, ciclooxigenasa, óxido nítrico sintasa (NOS, por sus siglas en inglés) desacoplada, autooxidación de glucosa, cadena respiratoria mitocondrial, vía de los polioles y formación de productos finales de glicación avanzada (AGE, por sus siglas en inglés). El superóxido activa AGE, proteína cinasa C (PKC, por sus siglas en inglés), poliol (sorbitol), hexosamina y vías de señalización de estrés que conducen a una mayor expresión de citocinas inflamatorias, angiotensina II (Ang II), endotelina-1 (ET-1) y NAD(P)H oxidasas, que a su vez generan más superóxido a través de múltiples mecanismos. El aumento de la generación de superóxido inducida por la hiperglucemia también puede favorecer una mayor expresión de las óxido nítrico sintasas (NOS) a través de la activación de NFkB, lo que puede incrementar la generación de óxido nítrico (NO). El anión superóxido puede desactivar el NO, reduciendo así la eficacia de un potente sistema vasodilatador derivado del endotelio. El superóxido también se puede convertir en peróxido de hidrógeno (H²O²) por la superóxido dismutasa (SOD) e interactúa con NO para formar un peroxinitrito oxidante reactivo (ONOO-), que induce daño celular a través de la peroxidación lipídica, inactivación de enzimas y otras proteínas por oxidación y nitración, y activación de metaloproteinasas de matriz (MMP) entre otras.

El peroxinitrito también puede actuar sobre las mitocondrias [disminuyendo el potencial de membrana (V)], desencadenando la liberación de factores proapoptóticos como el citocromo c (Cyt c) y el factor inductor de apoptosis (AIF, por sus siglas en inglés). Estos factores median las vías de muerte apoptóticas dependientes de caspasa e independientes de caspasa.

El peroxinitrito, junto con otros oxidantes (p. ej., H²O²), puede provocar roturas de hebras en el ADN, activando la enzima nuclear poli(ADP-ribosa) polimerasa-1 (PARP-1, por sus siglas en inglés). Un daño leve al ADN activa la maquinaria de reparación del ADN. Una vez que se produce un daño excesivo del ADN inducido por estrés oxidativo y nitrosativo, PARP-1 sobreactivada inicia un ciclo de consumo de energía transfiriendo unidades de ADP-ribosa (pequeñas esferas rojas) de NAD+ a proteínas nucleares, dando como resultado un rápido agotamiento de los grupos intracelulares de NAD+ y ATP, ralentizando la velocidad de la glucólisis y la respiración mitocondrial y conduciendo, finalmente, a la disfunción celular y la muerte. La poli(ADP-ribosa) glicohidrolasa (PARG, por sus siglas en inglés) degrada los polímeros de poli(ADP-ribosa) (PAR), generando polímero de PAR libre y ADP-ribosa, que puede indicar a las mitocondrias que induzcan la liberación de AIF. La activación de PARP-1 también conduce a la inhibición de la actividad celular de gliceraldehído-3-fosfato deshidrogenasa (GAP-DH), que a su vez favorece la activación de PKC, AGE y la vía de la hexosamina que conduce a una mayor generación de superóxido. PARP-1 también regula la expresión de una variedad de mediadores inflamatorios, lo que podría facilitar la progresión de las complicaciones cardiovasculares diabéticas.

Las afecciones adicionales en las que se han detectado los productos de reacción del peroxinitrito y en las que se ha demostrado que la inhibición farmacológica de su formación o de su descomposición es beneficiosa incluyen enfermedades vasculares, lesión por isquemia-reperfusión, choque circulatorio, dolor y neurodegeneración.

Actualmente no se conoce ninguna acción enzimática que elimine ROO', HO', 1O2y ONOO'. Por lo tanto, la responsabilidad de la defensa se basa en una variedad de antioxidantes no enzimáticos tal como las vitaminas C y E y muchos fitoquímicos que tienen la propiedad de eliminar oxidantes y radicales libres. Para evaluar de forma exhaustiva la capacidad de eliminación de oxidantes de una muestra de alimento, los ensayos deben diseñarse para incluir estas ROS (es decir, ensayo ORAC (capacidad de absorbancia de radicales de oxígeno)).

A nivel celular, la transducción de señales se refiere al movimiento de una señal o resto de señalización desde el exterior de la célula al interior de la célula. La señal, tras alcanzar su receptor diana, puede iniciar interacciones ligandoreceptor necesarias para muchos eventos celulares, algunos de los cuales pueden actuar además como una señal posterior. Dichas interacciones sirven no solamente como una cascada en serie, sino también como una intrincada red interactiva o red de eventos de señales capaces de proporcionar un control preciso de los procesos homeostáticos. Sin embargo, esta red puede desregularse, dando como resultado, de ese modo, una alteración en la actividad celular y cambios en el programa de genes expresados dentro de la célula que responde.

Los receptores de transducción de señales se clasifican generalmente en tres clases. La primera clase de receptores son los que penetran la membrana plasmática y tienen alguna actividad enzimática intrínseca. Los receptores representativos que tienen actividad enzimática intrínseca incluyen: tirosina cinasas (p. ej., PDGF, insulina, receptores de EGF y FGF), tirosina fosfatasas (p. ej. proteína CD45 [cúmulo de determinante-45] de linfocitos T y macrófagos), guanilato ciclasas (p. ej., receptores de péptidos natriuréticos) y serina/treonina cinasas (p. ej., receptores de activina y TGF-p). Los receptores con actividad tirosina cinasa intrínseca son capaces de autofosforilación así como de fosforilación de otros sustratos.

Los receptores de segunda clase son los que están acoplados, en el interior de la célula, a proteínas de unión e hidrolización de GTP (denominadas proteínas G). Los receptores de esta clase que interactúan con las proteínas G tienen una estructura que se caracteriza por siete dominios que se extienden a través de la membrana. Estos receptores se denominan receptores en serpentina. Ejemplos de esta clase son los receptores adrenérgicos, receptores olfativos y determinados receptores hormonales (p. ej., glucagón, angiotensina, vasopresina y bradicinina).

La tercera clase de receptores puede describirse como receptores que se encuentran intracelularmente y tras unirse al ligando, migran al núcleo donde el complejo ligando-receptor afecta directamente la transcripción génica.

Las proteínas que codifican receptores tirosina cinasas (RTK) contienen cuatro dominios principales, siendo estos: a) un dominio transmembrana, b) un dominio de unión a ligando extracelular, c) un dominio regulador intracelular y d) un dominio tirosina cinasa intracelular. Las secuencias de aminoácidos de los RTK están muy conservadas con las de la proteína cinasa dependiente de AMPc (dentro de las regiones de unión a ATP y sustrato). Las proteínas RTK se clasifican en familias según las características estructurales en sus porciones extracelulares que incluyen los dominios ricos en cisteína, dominios de tipo inmunoglobulina, dominios cadherina, dominios ricos en leucina, dominios Kringle, dominios ácidos, repeticiones de fibronectina de tipo III, dominios de tipo discoidina I y dominios de tipo EGF. Basándose en la presencia de estos diversos dominios extracelulares, las RTK se han subdividido en al menos 14 familias diferentes.

Muchos receptores tienen actividad tirosina cinasa intrínseca tras la fosforilación y pueden interactuar con otras proteínas de la cascada de señalización. Estas otras proteínas contienen un dominio de secuencias de aminoácidos que son homólogas a un dominio identificado por primera vez en el protooncogén c-Src; estos dominios se denominan dominios SH2. Las interacciones de las proteínas que contienen dominios SH2 con RTK o tirosina cinasas asociadas a receptor conducen a la fosforilación de tirosina de las proteínas que contienen SH2. La fosforilación resultante produce una alteración (bien positiva bien negativa) en esa actividad. Varias proteínas que contienen SH2 que tienen actividad enzimática intrínseca incluyen fosfolipasa C-y (PLC-y), la proteína activadora de GTPasa asociada al protooncogén c-Ras (rasGAP), fosfatidilinositol-3-cinasa (PI-3K), proteína tirosina fosfatasa-1C (PTP1C), así como miembros de la familia Src de proteínas tirosina cinasas (PTK).

Las proteínas tirosina cinasas no receptoras (PTK) se acoplan en general a receptores celulares que carecen de actividad enzimática en sí mismos. Un ejemplo de señalización de receptor a través de la interacción de proteínas implica al receptor de insulina (IR, por sus siglas en inglés). Este receptor tiene actividad tirosina cinasa intrínseca pero no interactúa directamente, después de la autofosforilación, con proteínas enzimáticamente activas que contienen dominios SH2 (p. ej., PI-3K o PLC-y). En cambio, el principal sustrato de IR es una proteína denominada IRS-1.

Los receptores de la superfamilia de TGF-p representan el receptor serina/treonina cinasa (RSTK) modelo. Las proteínas multifuncionales de la superfamilia de TGF-p incluyen las activinas, inhibinas y las proteínas morfogenéticas óseas (BMP, por sus siglas en inglés). Estas proteínas pueden inducir y/o inhibir la proliferación o diferenciación celular y regular la migración y adhesión de varios tipos de células. Un efecto importante de TGF-p es la regulación de la progresión a través del ciclo celular. Adicionalmente, una proteína nuclear implicada en las respuestas de las células al TGF-p es c-Myc, que afecta directamente a la expresión de genes que albergan elementos de unión a Myc. Las PKA, PKC y MAP cinasas representan tres clases principales de serina/treonina cinasas no receptoras.

Puede haber una relación entre la actividad de la cinasa y las patologías. Dichas relaciones pueden ser causantes de la enfermedad en sí o estar íntimamente relacionadas con la expresión y progresión de la sintomatología y patología asociadas a la enfermedad. Por ejemplo, se cree que la actividad cinasa está implicada en trastornos cognitivos, incluyendo la enfermedad de Alzheimer, insuficiencia cardíaca congestiva, hipertensión pulmonar, cardiomiopatías, disfunción motora, fenómeno de Raynaud, hipertensión esencial, accidente cerebrovascular, asma, esclerosis múltiple, vasculitis, diversas formas de inflamación, incluida la osteoartritis, artritis reumatoide, diabetes de tipo I y de tipo II, síndrome metabólico, obesidad, enfermedad inflamatoria del intestino, enfermedad de Crohn, enfermedad de Addison, lupus, tiroiditis, síndrome de fatiga crónica y fibromialgia entre otros.

Las enfermedades autoinmunitarias son el resultado de una disfunción del sistema inmunitario en el que el cuerpo produce autoanticuerpos que atacan sus propios órganos, tejidos y células, un proceso mediado por la fosforilación de proteínas. Se han identificado más de 80 enfermedades autoinmunitarias clínicamente distintas que afectan en conjunto a aproximadamente 24 millones de personas en los Estados Unidos. Las enfermedades autoinmunitarias pueden afectar cualquier tejido u órgano del cuerpo. Debido a esta variabilidad, pueden provocar una amplia gama de síntomas y lesiones de órganos, dependiendo del sitio del ataque autoinmunitario. Aunque existen tratamientos para muchas enfermedades autoinmunitarias, no existen curas definitivas para ninguna de ellas. Los tratamientos para reducir la gravedad con frecuencia tienen efectos secundarios adversos.

La etiología y patogenia de las enfermedades autoinmunitarias en seres humanos aún no se conocen bien, pero se considera que progresa en tres fases, una fase de iniciación, una fase efectora y una fase de activación. En la fase de iniciación, las células dendríticas presentan autoantígenos a los linfocitos T autorreactivos. Los linfocitos T activan los linfocitos B autorreactivos a través de citocinas que dan como resultado la producción de autoanticuerpos, que a su vez forman complejos inmunitarios en las articulaciones. En la fase efectora, los complejos inmunitarios se unen a los receptores Fcf en macrófagos y mastocitos, dando como resultado la liberación de citocinas y quimiocinas, inflamación y dolor. En la fase de activación, la fase final, las citocinas y quimiocinas activan y reclutan fibroblastos sinoviales, osteoclastos y neutrófilos polimorfonucleares que liberan proteasas, ácidos y ROS tal como O²-, dando como resultado destrucción irreversible de cartílago y hueso. La activación de los linfocitos B señaliza a través de la tirosina cinasa de bazo (Syk) y fosfoinosítido 3-cinasa (PI3K) después de la activación del receptor de antígenos. Después de la participación de los receptores de antígenos en los linfocitos B, Syk está fosforilado en tres tirosinas. Syk es una proteína tirosina cinasa de 72 kDa que desempeña un papel central en el acoplamiento de los receptores de reconocimiento inmunitario a múltiples vías de señalización posteriores. Esta función es una propiedad tanto de su actividad catalítica como de su capacidad para participar en interacciones con proteínas efectoras que contienen dominios SH2. La fosforilación de Tyr-317, 342 y 346 crea sitios de acoplamiento para múltiples proteínas que contienen dominios SH2. Asociación de la proteína tirosina cinasa Ptk72 de 72 kDa con el receptor de antígenos de linfocitos B. En un aspecto de la invención, se proporciona un enfoque de tratamiento a largo plazo seguro, para el alivio del dolor en estos pacientes que padecen trastornos autoinmunitarios. Debido a que los inductores de la síntesis de COX-2 e iNOS señalizan a través de Syk, PI3K, p38, vías dependientes de ERK1/2 y NF-kB, los inhibidores de estas vías pueden ser terapéuticos en afecciones autoinmunitarias y, en particular, en las articulaciones inflamadas y degeneradas de pacientes con artritis reumatoide (AR) u osteoartritis (OA).

Se ha demostrado que Syk es necesario para la activación de PI3K en respuesta a una variedad de señales que incluyen la participación del receptor de antígenos de linfocitos B (BCR, por sus siglas en inglés) y los receptores Fc de macrófagos o neutrófilos. En los linfocitos B, la activación de PI3K estimulada por BCR se puede lograr mediante la fosforilación de proteínas adaptadoras tales como BCAP, CD19, o Gab1, que crea sitios de unión para la subunidad reguladora p85 de PI3K. Las señales transmitidas por muchos receptores de IgG necesitan las actividades tanto de Syk como de PI3K y su reclutamiento en el sitio del receptor agrupado. En neutrófilos y monocitos, se propuso una asociación directa de PI3K con secuencias de motivos de activación inmunorreceptores basados en tirosina fosforilados sobre FcgRIIA como un mecanismo para el reclutamiento de PI3K al receptor. Se ha informado de una interacción molecular directa entre Syk y PI3K.

La cinasa de tipo cdc CLK1 está implicada en la proliferación celular como una cinasa de especificidad dual que actúa sobre sustratos que contienen tanto serina/treonina como tirosina; fosforila proteínas ricas en serina y arginina del complejo espliceosómico y puede ser un componente de una red de mecanismos reguladores que permiten a las proteínas s R controlar el corte y empalme del ARN. Las Clk también regulan el corte y empalme alternativo de la proteína tau asociada a microtúbulos y están implicados en la demencia frontotemporal y la enfermedad de Parkinson a través de la fosforilación de factores de corte y empalme. Los inhibidores de las isoformas de Clk pueden alterar estos eventos y podrían ser agentes útiles en fenotipos de enfermedades caracterizados por corte y empalme anormal.

Las vías de señalización identificadas para el receptor de insulina (IR) incluyen vías de señalización del receptor acoplado a proteínas G, activación de la actividad MAPK, activación de la actividad de la proteína cinasa B, proceso metabólico de carbohidratos, respuesta celular al estímulo de factores de crecimiento, desarrollo del páncreas exocrino, homeostasis de la glucosa, regulación positiva de la importación de glucosa, regulación positiva del proceso biosintético del glucógeno y regulación positiva de la glucólisis.

La glucógeno sintasa cinasa 3 (GSK3) se describió inicialmente como una enzima clave implicada en el metabolismo del glucógeno, pero ahora se sabe que regula una amplia gama de funciones celulares. Se han identificado previamente dos formas de la enzima, GSK-3a y GSK-3b. Los inhibidores de moléculas pequeñas de GSK-3 pueden tener, por lo tanto, varios usos terapéuticos, incluido el tratamiento de enfermedades neurodegenerativas, diabetes de tipo II, trastornos bipolares, accidente cerebrovascular, cáncer y enfermedad inflamatoria crónica. Inhibidores de la glucógeno sintasa cinasa 3 (GSK-3) como nuevos fármacos prometedores para la diabetes, neurodegeneración, cáncer e inflamación.

La proteína cinasa activada por AMP (AMPK) desempeña un papel clave como regulador principal de la homeostasis de la energía celular. La cinasa se activa en respuesta a tensiones que agotan los suministros de ATP celular, tal como glucosa baja, hipoxia, isquemia y choque térmico. Debido a su papel como regulador central del metabolismo tanto de lípidos como de glucosa, la AMPK se considera una posible diana terapéutica para el tratamiento de la diabetes mellitus de tipo II, obesidad y cáncer. AMPK también se ha implicado en varias especies como modulador importante del envejecimiento a través de sus interacciones con mTOR y sirtuinas.

En una realización de la invención, se muestran composiciones moduladoras del estrés oxidativo y métodos asociados. Una composición ilustrativa puede comprender una combinación de extractos de manzana, uva, té verde y de olivo en cantidades que proporcionan una mayor actividad antioxidante que la proporcionada por una cantidad equivalente de cualquier extracto o una suma de los extractos. En un ejemplo, los extractos de manzana, uva, té verde y olivo pueden comprender extractos formulados a partir de las hojas, piel, corteza, pulpa, zumo, semillas o combinaciones de estas materias primas.

En un ejemplo, el extracto de manzana puede comprender un extracto derivado de un miembro seleccionado del grupo que consiste en Malus domestica, Malus sieversii, Malus sylvestris, Malus pumila, y combinaciones de los mismos. En un ejemplo, el extracto de manzana se puede obtener de la especie Malus pumila. En un ejemplo, el extracto de manzana se puede obtener de una combinación de Malus domestica y Malus pumila. En algunas realizaciones, el extracto de manzana puede comprender cualquiera o todas las partes de la manzana, incluyendo pero sin limitación, la piel, carne/fruto (exocarpio, mesocarpio y/o endocarpio), semilla, pedúnculo, tallo, hoja, o una combinación de las mismas. En un ejemplo, el extracto de manzana comprende la piel y el fruto de la manzana. En algunas realizaciones, el extracto se puede obtener de manzanas inmaduras. En una realización, un disolvente de extracción puede ser etanol.

En un ejemplo, el extracto de uva puede comprender un miembro seleccionado del grupo que consiste en Vitis vinifera, Vitis labrusca, Vitis riparia, Vitis rotundifolia, Vitis rupestris, Vitis aestivalis, Vitis mustangensis, y combinaciones de los mismos. En un ejemplo, el extracto de uva se puede obtener de Vitis vinifera. En algunas realizaciones, el extracto de uva puede comprender cualquier parte o todas las partes de la uva, incluyendo, pero sin limitación, la piel, carne/fruto, semilla, haces vasculares, vid, hojas, o una combinación de los mismos. En una realización, el extracto de uva se puede obtener de las semillas. En otra realización, el extracto de uva se puede obtener de la piel. En otra realización más, el extracto de uva se puede obtener de las semillas y la piel de la uva. En algunas realizaciones, el extracto de uva comprende de aproximadamente un 75 % en peso a aproximadamente un 95 % en peso de fenoles basándose en el peso seco. En otras realizaciones, el extracto de uva puede comprender de aproximadamente un 80 % en peso a aproximadamente un 97 % en peso de fenoles basándose en el peso seco. En un ejemplo, el disolvente de extracción puede ser etanol, agua, o una mezcla de los mismos.

En un ejemplo, el extracto de té verde se puede obtener de Camellia sinensis. En algunas realizaciones, el extracto de té verde puede comprender cualquiera o todas las partes del té, incluyendo, pero sin limitación, la hoja, semilla, tallo, flor, o una combinación de las mismas. En una realización, el extracto de té verde se puede obtener de las hojas. En otro ejemplo, el disolvente del extracto puede ser agua, etanol, acetato de etilo o combinaciones de los mismos.

En un ejemplo, el extracto de olivo comprende una subespecie de Olea europea seleccionado del grupo que consiste en las subespecies europea, cuspidiata, guanchica, cerasiformis, maroccana, laperrinei, cerasiformis, o una combinación de las mismas. En algunas realizaciones, el extracto de olivo puede comprender cualquiera o todas las partes del olivo, incluyendo, pero sin limitación, la hoja, semilla, pulpa, fruto, tallo, o una combinación de los mismos. En una realización, el extracto de olivo se puede obtener de las hojas. En otro ejemplo, el disolvente de extracción puede ser una solución de etanol y agua.

En algunas realizaciones, la relación de planta o hierba a extracto puede oscilar de aproximadamente 1 a aproximadamente 10. En otros ejemplos, la relación de planta o hierba cruda a extracto puede ser de aproximadamente 2 a aproximadamente 5, de aproximadamente 4 a aproximadamente 7 o de aproximadamente 8 a aproximadamente 10. Además, la relación de los extractos puede estar presente en la formulación en cualquier relación con respecto a los otros extractos que proporcione una actividad antioxidante mayor que la proporcionada por una cantidad equivalente de cualquier extracto o una suma de los extractos. En un ejemplo, al menos uno de los extractos de la composición puede estar presente en una cantidad diferente a la de los otros extractos. En otro ejemplo, todos los extractos pueden estar presentes en la composición en la misma cantidad.

A modo de ejemplo, en algunas realizaciones, cada extracto puede estar presente en una relación de aproximadamente 1 a aproximadamente 50 veces la cantidad de otro extracto. Esto se aplica a todos y cada uno de los extractos de la formulación, incluidos los enumerados en los ejemplos a continuación. En un aspecto, el extracto de manzana puede estar presente en la formulación en una relación de 1 a 50 veces la cantidad de un extracto de uva, té verde o de olivo. En otro aspecto, el extracto de manzana puede estar presente en la formulación en una relación de aproximadamente 1 a 25 veces la cantidad de un extracto de uva, té verde o de olivo. En un aspecto adicional, el extracto de manzana puede estar presente en la formulación en una relación de 1 a 10 veces la cantidad de un extracto de uva, té verde o de olivo. En un aspecto adicional, el extracto de manzana puede estar presente en una relación de 1 a 5 veces la cantidad de un extracto de uva, té verde o de olivo. En otro aspecto más, el extracto de manzana puede estar presente en la formulación en una relación de 1 vez la cantidad de un extracto de uva, té verde o de olivo. Se incluye cualquier valor numérico específico dentro del intervalo numérico. De hecho, cada uno de los extractos de manzana, uva, té verde y olivo pueden estar presentes en una relación de cualquiera entre 1 a 50 veces y 1 vez la cantidad de los otros extractos. Por ejemplo, la cantidad de extracto de manzana a extracto de uva a extracto de té verde a extracto de olivo puede ser en algunas realizaciones de 1-25:1-25:1-25:1-25 respectivamente. Como tal, se puede usar cualquier relación de números específica dada que proporcione un efecto sinérgico como se indica en el presente documento, por ejemplo, 25:1:1:1 o 1:25:1:1, o 1:1:25:1, 1:1:1:25. Cuando se considera en términos de % en peso, esto equivaldría a que un ingrediente esté presente en una cantidad de 89,28 % en peso y los otros tres ingredientes estén presentes en cantidades de 3,57 % en peso. Esto se puede considerar bien en términos de la formulación en su conjunto (cuando solamente están presentes estos cuatro ingredientes), o en términos del extracto sinérgico o la porción potenciadora de la formulación solamente. Por ejemplo, en una formulación que contiene solo estos cuatro extractos, en una relación de 1:1:1:1, la cantidad relativa de cada uno sería del 25 % en peso de cada uno (es decir, 100/4 = 25). Sin embargo, en una formulación donde la cantidad de extractos de manzana, uva, té verde y olivo eran solamente el 20 % en peso de la formulación total y los extractos de cada uno estaban presentes en una relación de 1:1:1:1 respectivamente, se puede considerar que cada extracto está presente en la formulación general en una cantidad de 5 % en peso cada uno (25 x 20 x 0,001 = 5 % en peso).

Como se ha mencionado, se puede utilizar cualquier número de relaciones de un extracto a otro que dé como resultado un efecto sinérgico (es decir, más de una cantidad igual de actividad proporcionada por cualquier extracto o más que la simple suma de la actividad proporcionada por los extractos totales). Por ejemplo, manteniendo el orden de los extractos enumerados anteriormente, en una realización, las proporciones pueden ser cualquier número dentro del intervalo de 1-50 para cada extracto, tal como 1-10:1-10:1-10:1-10, que incluiría, sin limitación, 1:1:1:1, 1:2:1:2, 1:5:6:1, 10:1:5:2, 3:7:2:4 y 1:3:5:8 por ejemplo. Adicionalmente, estas proporciones e intervalos de proporciones se pueden aplicar no solamente a los cuatro ingredientes de extractos de manzana, uva, té verde y olivo, sino también a los otros extractos enumerados en los ejemplos a continuación como PC 4,1, 4,2, 8, 9 o 10. En algunas realizaciones, todos los extractos pueden estar presentes en una relación en peso de aproximadamente 1:1:1:1. En otras realizaciones, los extractos de manzana, uva, té verde y olivo pueden estar presentes en una relación en peso de aproximadamente 6:1:3:1.

En algunas realizaciones, la composición comprende además un agente terapéutico primario o uno secundario. En una realización, el agente terapéutico primario o secundario puede comprender un miembro seleccionado del grupo que consiste en bergamota, mangostán, berberina, arginina, citrulina, glutamina, zinc, remolacha, loclo, proteína, curcumina, fitoesteroles, aceite de pescado, CoQ10, vitaminas, fibra, inulina, aminogen®, biotina, polvo de judía negra, citrato de cobre, fumarato ferroso, fructosa, semilla de garbanzos, goma arábiga, óxido de magnesio, citrato de manganeso, triglicéridos de cadena media, fibra de guisante, aislado de proteína de guisante, citrato potásico, vitamina B6, riboflavina, salvado de arroz, proteína de arroz, citrato de sodio, selenato de sodio, HCl de tiamina, vitamina D2, vitamina E, citrato de zinc, judía adzuki, D-pantotenato de calcio, licopeno, polifenoles, ácido ascórbico, p-glucanos, luteína, arándano, aceite de borraja, flores de brócoli, raíz de zanahoria, fruto de arándano, nicotinato de cromo, cianocobalamina, semilla de lino/Linum usitatissimum, ácido fólico, extracto lo han, niacinamida, fruto de granada, vitamina A, carotenoides, vitamina E, fitoesteroles, lignina, CoQ10, glutatión y combinaciones de los mismos.

En otra realización, el agente terapéutico primario o secundario puede comprender un miembro seleccionado del grupo que consiste en bergamota, mangostán, berberina, arginina, citrulina, glutamina, zinc, remolacha, loclo, proteína, curcumina, fitoesteroles, aceite de pescado, CoQ10, vitaminas, fibra, inulina y combinaciones de los mismos. En una realización, el agente terapéutico primario o secundario puede ser extracto de bergamota. En otro ejemplo, el agente terapéutico primario o secundario puede ser extracto de mangostán. El extracto de mangostán puede ser un extracto de fruto de mangostán y/o un extracto de pericarpio de mangostán. En una realización adicional, el agente terapéutico primario o secundario puede comprender un extracto de pericarpio de mangostán y un extracto de bergamota. En otro ejemplo más, el agente terapéutico primario o secundario puede comprender berberina. En otro ejemplo, el agente terapéutico primario o secundario puede comprender arginina y remolacha o citrulina y remolacha. En una realización adicional, el agente terapéutico primario o secundario puede comprender fitoesteroles. En otra realización, el agente terapéutico primario o secundario puede comprender proteína. La proteína puede ser una proteína de suero de leche, proteína de soja, proteína de guisante, una proteína de caseinato de calcio o una combinación de las mismas. En otro ejemplo más, el agente terapéutico primario o secundario comprende curcumina. En una realización adicional, el agente terapéutico primario o secundario comprende una fuente de fibra y/o inulina.

En una realización, el extracto de bergamota se puede obtener de Citrus bergamia Risso. En una realización, el extracto de mangostán se puede obtener de Garcinia mangosana. En un ejemplo, el extracto de mangostán puede ser un extracto del fruto, el pericarpio, o tanto la fruto como el pericarpio. El extracto de fruto se puede obtener de cualquier parte del fruto, incluyendo, sin limitación, la pulpa, la corteza, las semillas, o una combinación de las mismas. En una realización, el extracto de pericarpio de mangostán se obtiene únicamente de la cáscara del fruto.

En algunas realizaciones, la composición de extractos de manzana, uva, té verde y olivo comprende además extracto/concentrado de arándanos, extracto de pimiento y extracto de cúrcuma. En un ejemplo, el extracto/concentrado de arándanos se puede obtener de Vaccinium angustifolium. En un ejemplo, el concentrado de arándanos puede ser un polvo seco creado sin el uso de un disolvente. En una realización, se pueden necesitar aproximadamente 5 kg, aproximadamente 8 kg, aproximadamente 10 kg o aproximadamente 12 kg de arándanos para obtener 1 kg de polvo seco. En una realización, el extracto de pimiento se puede obtener de Capsicum annuum. En algunas realizaciones, el extracto de pimiento se puede obtener de frutos maduros secos en polvo. En un ejemplo, el extracto de cúrcuma se puede obtener de Curcuma longa. En algunas realizaciones, el extracto de cúrcuma puede comprender un extracto de la raíz, el rizoma, o una combinación de los mismos. En otra realización, el extracto de cúrcuma se puede obtener de un polvo de cúrcuma. En una realización, el polvo de cúrcuma puede tener de aproximadamente 1 a aproximadamente 10 % de curcuminoides, de aproximadamente 3 a aproximadamente 5 % de curcuminoides, de aproximadamente 2 % a aproximadamente 8 % de curcuminoides, o de aproximadamente 4 % a aproximadamente 12 % de curcuminoides. En algunas realizaciones, el extracto de uva puede comprender un extracto de piel de uva y un extracto de semilla de uva. En una realización, la composición que comprende el concentrado de arándanos, extracto de pimiento y extracto de cúrcuma además de extracto de manzana, uva, té verde y olivo puede comprender adicionalmente un extracto de mangostán. El extracto de mangostán puede comprender un extracto de Garcinia mangostana y puede ser un extracto de fruto, un extracto de pericarpio o una combinación de los mismos. En otras realizaciones, la composición que comprende el concentrado de arándanos, extracto de pimiento y extracto de cúrcuma además de extracto de manzana, uva, té verde y olivo puede comprender adicionalmente un extracto de bergamota. En otra realización, la composición que comprende el concentrado de arándanos, extracto de pimiento y extracto de cúrcuma además de extracto de manzana, uva, té verde y olivo puede comprender adicionalmente un extracto de mangostán y un extracto de bergamota.

Las composiciones antioxidantes pueden tener una variedad de mecanismos de acción. En una realización, la composición antioxidante puede desactivar los radicales libres. En otra realización, la composición antioxidante puede modular la formación de peroxinitrato. En un ejemplo, la composición antioxidante modula las enzimas que señalan el estrés tal como las metaloproteinasas de matriz y la mieloperoxidasa.

Las composiciones antioxidantes pueden usarse para modular el estrés oxidativo en un mamífero que lo necesite. Las afecciones relacionadas con el estrés oxidativo pueden incluir, pero sin limitación, síndrome metabólico, diabetes de tipo I, de tipo II y de tipo III, obesidad, niveles altos de colesterol acompañados de un aumento de colesterol LDL oxidado, diversas formas de inflamación, incluida la osteoartritis, artritis reumatoide, endotoxemia, enfermedad inflamatoria del intestino, intestino permeable, enfermedad de Crohn, hiperplasia prostática, síntomas del tracto urinario inferior (LUTS, por sus siglas en inglés), hipertensión pulmonar arterial, disminución de la capacidad de ejercicio, eyaculación precoz, bajo deseo sexual femenino, trastornos congestivos, insuficiencia cardíaca, hipertensión pulmonar, diversas enfermedades cardiovasculares, disfunción motora, trastornos cognitivos, incluida la enfermedad de Alzheimer, fenómeno de Raynaud, hipertensión esencial, accidente cerebrovascular, asma, esclerosis múltiple, vasculitis, enfermedad de Addison, lupus, tiroiditis, síndrome de fatiga crónica, fibromialgia, trastornos de la piel tal como arrugas, decoloraciones y flacidez, así como cánceres que surgen del daño por oxidación al ADN, y otros trastornos asociados con la modulación específica de tejido de la actividad de las proteínas cinasas estimulada a través de la propagación de especies reactivas de oxígeno y nitrógeno. En un ejemplo, el mamífero que lo necesita tiene un colesterol LDL oxidado (LDL ox) elevado. En otro ejemplo, el mamífero que lo necesita tiene al menos uno de síndrome metabólico, diabetes de tipo I, II o III. En otro ejemplo, el mamífero que lo necesita tiene al menos uno de intestino permeable, endotoxemia o enfermedad inflamatoria intestinal.

Las composiciones antioxidantes pueden ser útiles para tratar un espectro de trastornos fisiológicos en los que participa el estrés oxidativo por etiología, expresión o progresión. Los fitocomplejos y diversas combinaciones de los mismos que se pueden utilizar para regular el estrés oxidativo para tratar numerosos signos y síntomas relacionados con enfermedades con un aumento concomitante de la calidad de vida. Las composiciones resultantes se pueden consumir como un suplemento dietético para abordar los factores de riesgo asociados con el estrés oxidativo, hiperplasia prostática benigna, obesidad, síndrome metabólico, diabetes, aumentar la resistencia al ejercicio u otras patologías de base inflamatoria.

En algunas realizaciones, la actividad antioxidante puede tener una actividad antioxidante mayor que la proporcionada por una cantidad equivalente de cualquier extracto o una suma de los extractos. La actividad antioxidante sinérgica puede ser mayor de o aproximadamente 1,1 veces, aproximadamente 1,2 veces, aproximadamente 1,3 veces, aproximadamente 1,5, aproximadamente 1,75 veces, aproximadamente 2 veces, aproximadamente 2,5 veces o aproximadamente 3 veces mayor que la actividad antioxidante proporcionada por una cantidad equivalente de uno cualquiera de los extractos o una suma de los extractos. En una realización, una composición que comprende concentrado de arándanos, extracto de pimiento, cúrcuma, manzana, uva, té verde, olivo y fruto de mangostán pueden tener una actividad antioxidante igual a o superior a 1,2 veces la proporcionada por una cantidad equivalente de cualquier extracto o una suma de los extractos. En algunas realizaciones, esta composición puede tener más de 1,5 veces la actividad antioxidante proporcionada por una cantidad equivalente de cualquier extracto o una suma de los extractos. En otra realización, una composición que comprende concentrado de arándanos, extracto de pimiento, cúrcuma, manzana, uva, té verde, olivo y pericarpio de mangostán pueden tener una actividad antioxidante igual a o superior a 1,3 veces la proporcionada por una cantidad equivalente de cualquier extracto o una suma de los extractos. En otra realización más, una composición que comprende concentrado de arándanos, extracto de pimiento, cúrcuma, manzana, uva, té verde, olivo, fruto de mangostán y bergamota pueden tener una actividad antioxidante igual a o superior a 2,5 veces la proporcionada por una cantidad equivalente de cualquier extracto o una suma de los extractos. En una realización adicional, una composición que comprende concentrado de arándanos, extracto de pimiento, cúrcuma, manzana, uva, té verde, olivo, pericarpio de mangostán y bergamota pueden tener una actividad antioxidante igual a o superior a 1,5 veces la proporcionada por una cantidad equivalente de cualquier extracto o una suma de los extractos.

También se muestra en el presente documento una composición moduladora de proteínas cinasas, que comprende una combinación de extractos de manzana, uva, té verde y olivo en cantidades que proporcionan una mayor actividad moduladora de proteínas cinasas que la proporcionada por una cantidad equivalente de cualquier extracto o una suma de los extractos. La composición puede comprender además los extractos adicionales, el agente terapéutico primario y/o agentes terapéuticos secundarios como se identifica anteriormente. Los extractos, las cantidades de los componentes, los agentes terapéuticos primarios y/o los agentes terapéuticos secundarios pueden ser como se identifica anteriormente.

La composición moduladora de proteínas cinasas puede modular de forma espectacular y sinérgica la señalización de cinasas de cualquiera de las proteínas cinasas mostradas en la Tabla 14. En un ejemplo, la composición moduladora de proteínas cinasas modula la expresión de Abl, ACK1, ALK, Aurora, AMPK, CaMKII, EGFR, EphA, FAK, FGFR, GSK3, IGF-1 (activado), IKK, IR, MAPK1, Met, MTOR, NEK1/2/6, PAK1/4/5/6, PDGFR, PI3K, PKC, ROCKI/II, RSK1/2/34, SRC, Syk y combinaciones de los mismos. En una realización, la actividad moduladora de proteínas cinasas puede comprender PI3 cinasa. En otra realización, la actividad moduladora de proteínas cinasas puede comprender MET cinasa. En otra realización más, la actividad moduladora de proteínas cinasas puede comprender al menos una de las Aurora cinasas, Aurora-A, Aurora-B y Aurora-C.

En algunas realizaciones, la actividad de las proteínas cinasas se puede modular en el tejido diana seleccionado para tratar signos y síntomas asociados con enfermedades o afecciones seleccionadas del grupo que consiste en cáncer de próstata, LUTS, hipertensión pulmonar arterial, disminución de la capacidad de ejercicio, insuficiencia cardíaca congestiva, hipertensión pulmonar, diversas enfermedades cardiovasculares, disfunción motora, trastornos cognitivos, incluida la enfermedad de Alzheimer, fenómeno de Raynaud, hipertensión esencial, accidente cerebrovascular, asma, esclerosis múltiple, vasculitis, diversas formas de inflamación, incluida la osteoartritis, artritis reumatoide, diabetes de tipo I y de tipo II, síndrome metabólico, obesidad, endotoxemia, enfermedad inflamatoria del intestino, intestino permeable, enfermedad de Crohn, enfermedad de Addison, lupus, tiroiditis, síndrome de fatiga crónica, fibromialgia y otros trastornos asociados con la modulación específica de tejido de la actividad de las proteínas cinasas.

La modulación de la proteína cinasa puede reducir, minimizar o inhibir la producción o presencia de colesterol LDL oxidado (oxLDL) en el sujeto, puede mejorar al menos uno de los síntomas de síndrome metabólico, diabetes de tipo I, diabetes de tipo II o diabetes de tipo III, puede mejorar al menos uno de intestino permeable, endotoxemia o enfermedad inflamatoria intestinal, puede mejorar al menos uno de obesidad, afecciones inflamatorias que incluyen osteoartritis y artritis reumatoide, enfermedad de Crohn, hiperplasia prostática, síntomas del tracto urinario inferior, hipertensión pulmonar arterial, disminución de la capacidad de ejercicio, eyaculación precoz, bajo deseo sexual femenino, trastornos congestivos, insuficiencia cardíaca, hipertensión pulmonar, enfermedades cardiovasculares, disfunción motora, trastornos cognitivos, incluida la enfermedad de Alzheimer, fenómeno de Raynaud, hipertensión esencial, accidente cerebrovascular, asma, esclerosis múltiple, vasculitis, enfermedad de Addison, lupus, tiroiditis, síndrome de fatiga crónica, fibromialgia y trastornos de la piel, incluidas las arrugas de la piel, decoloraciones de la piel y flacidez de la piel, o puede dar como resultado al menos uno de estimulación de la oxidación de ácidos grasos del músculo esquelético y la captación de glucosa en el músculo, oxidación de ácidos grasos hepáticos y cetogénesis, inhibición de la síntesis de colesterol, lipogénesis, síntesis de triglicéridos, inhibición de la lipólisis y lipogénesis de los adipocitos y modulación de la secreción de insulina por las células beta pancreáticas.

En una realización, la modulación de las proteínas cinasas puede mejorar al menos uno de los casos de obesidad, afecciones inflamatorias que incluyen osteoartritis y artritis reumatoide, enfermedad de Crohn, hiperplasia prostática, síntomas del tracto urinario inferior, hipertensión pulmonar arterial, disminución de la capacidad de ejercicio, eyaculación precoz, bajo deseo sexual femenino, trastornos congestivos, insuficiencia cardíaca, hipertensión pulmonar, enfermedades cardiovasculares, disfunción motora, trastornos cognitivos, incluida la enfermedad de Alzheimer, fenómeno de Raynaud, hipertensión esencial, accidente cerebrovascular, asma, esclerosis múltiple, vasculitis, enfermedad de Addison, lupus, tiroiditis, síndrome de fatiga crónica, fibromialgia y trastornos de la piel, incluidas las arrugas de la piel, decoloraciones de la piel y flacidez de la piel. En otra realización, la modulación de las proteínas cinasas puede mejorar al menos uno de intestino permeable, endotoxemia y enfermedad inflamatoria intestinal. En una realización adicional, la modulación de las proteínas cinasas puede mejorar al menos uno de síndrome metabólico, diabetes de tipo I, diabetes de tipo II y diabetes de tipo III. En otra realización, la modulación de la proteína cinasa reduce, minimiza, o inhibe la producción o presencia de colesterol LDL oxidado (oxLDL) en el sujeto.

En algunas realizaciones, la actividad moduladora de proteínas cinasas puede tener una actividad moduladora de proteínas cinasas mayor que la proporcionada por una cantidad equivalente de cualquier extracto o una suma de los extractos. La actividad moduladora de proteínas cinasas sinérgica puede ser mayor de o aproximadamente 1,1 veces, aproximadamente 1,2 veces, aproximadamente 1,3 veces, aproximadamente 1,5, aproximadamente 1,75 veces, aproximadamente 2 veces, aproximadamente 2,5 veces o aproximadamente 3 veces mayor que la actividad moduladora de proteínas cinasas proporcionada por una cantidad equivalente de uno cualquiera de los extractos o una suma de los extractos.

En el presente documento también se muestran composiciones terapéuticas que comprenden un agente terapéutico primario y una combinación de extractos de manzana, uva, té verde y olivo en cantidades que aumentan el efecto terapéutico del agente terapéutico primario más que un aumento del efecto terapéutico proporcionado por una cantidad equivalente de cualquier extracto. Las composiciones pueden comprender además extractos adicionales y/o agentes terapéuticos secundarios como se identifica anteriormente. Los extractos, cantidades y agentes terapéuticos secundarios pueden ser como se identifica anteriormente.

El agente terapéutico primario puede ser cualquier antioxidante, agente metabólico o transductor de señales de la vía de las cinasas. En una realización, el agente terapéutico primario puede ser un antioxidante. En otra realización, el agente terapéutico primario puede ser un agente metabólico. En otra realización más, el agente terapéutico primario puede ser un transductor de señales de la vía de las cinasas. En otras realizaciones, el agente terapéutico primario puede ser un agente que potencia la producción de NO. En una realización, el agente terapéutico primario puede comprender un miembro seleccionado del grupo que consiste en bergamota, mangostán, berberina, arginina, citrulina, glutamina, zinc, remolacha, loclo, proteína, curcumina, fitoesteroles, aceite de pescado, CoQ10, vitaminas, fibra, inulina, aminogen®, biotina, polvo de judía negra, citrato de cobre, fumarato ferroso, fructosa, semilla de garbanzos, goma arábiga, óxido de magnesio, citrato de manganeso, triglicéridos de cadena media, fibra de guisante, aislado de proteína de guisante, citrato potásico, vitamina B6, riboflavina, salvado de arroz, proteína de arroz, citrato de sodio, selenato de sodio, HCl de tiamina, vitamina D2, vitamina E, citrato de zinc, judía adzuki, D-pantotenato de calcio, licopeno, polifenoles, ácido ascórbico, p-glucanos, luteína, arándano, aceite de borraja, flores de brócoli, raíz de zanahoria, fruto de arándano, nicotinato de cromo, cianocobalamina, semilla de lino/Linum usitatissimum, ácido fólico, extracto lo han, niacinamida, fruto de granada, vitamina A, carotenoides, vitamina E, fitoesteroles, lignina, CoQ10, glutatión y combinaciones de los mismos.

En un ejemplo, el agente terapéutico primario regula la disfunción metabólica. En algunas realizaciones, el agente terapéutico primario que regula la disfunción metabólica comprende un miembro seleccionado del grupo que consiste en aminogen®, biotina, polvo de judía negra, citrato de cobre, fumarato ferroso, fructosa, semilla de garbanzos, goma arábiga, inulina, óxido de magnesio, citrato de manganeso, triglicéridos de cadena media, fibra de guisante, aislado de proteína de guisante, citrato potásico, vitamina B6, riboflavina, salvado de arroz, proteína de arroz, citrato de sodio, selenato de sodio, HCl de tiamina, vitamina D2, vitamina E, citrato de zinc, judía adzuki, D-pantotenato cálcico y combinaciones de los mismos. En otra realización, el agente terapéutico puede ser aminogen®. En otro ejemplo, el agente terapéutico primario puede ser inulina.

En otro ejemplo, el agente terapéutico primario puede ser un antioxidante. En algunas realizaciones, el antioxidante comprende un miembro seleccionado del grupo que consiste en licopeno, polifenoles, ácido ascórbico, p-glucanos, luteína, arándano, aceite de borraja, flores de brócoli, raíz de zanahoria, fruto de arándano, nicotinato de cromo, cianocobalamina, semilla de lino/Linum usitatissimum, ácido fólico, extracto lo han, niacinamida, fruto de granada, vitamina A, carotenoides, vitamina E, zinc, selenato de sodio, fitoesteroles, lignina, CoQ10, glutatión y combinaciones de los mismos. En una realización, el antioxidante comprende un miembro seleccionado del grupo que consiste en ácido ascórbico, p-glucanos, arándano, aceite de borraja, flores de brócoli, raíz de zanahoria, fruto de arándano, nicotinato de cromo, cianocobalamina, semilla de lino/Linum usitatissimum, ácido fólico, extracto lo han, niacinamida, fruto de granada, vitamina A, fitoesteroles y combinaciones de los mismos.

En un ejemplo, el agente terapéutico primario puede comprender aceite de pescado. En un ejemplo, el aceite de pescado puede reducir TG, LDLc, oxLDLc, elevar HDLc, o cualquier combinación de los mismos. Los extractos cuando se combinan con el aceite de pescado pueden potenciar las propiedades reductoras de TG del aceite de pescado, mejorar la formación de NO y reducir la presión arterial. En un ejemplo, el aceite de pescado se puede incluir en la composición entre 1-5 gramos.

En otro ejemplo, el agente terapéutico primario puede ser berberina. En un ejemplo, la berberina puede influir en la endotoxemia y en la inflamación en el cuerpo. En un ejemplo, esta formulación puede inhibir o regular negativamente MPO, una enzima conocida por inhibir o eliminar a su vez la producción de eNOS y NO. La endotoxemia y la inflamación son iniciadores de disfunción metabólica/CVD(por sus siglas en inglés) y obesidad. La composición terapéutica que comprende berberina como agente terapéutico primario puede usarse para combatir la disfunción metabólica.

Las composiciones moduladoras del estrés oxidativo, las composiciones moduladoras de proteínas cinasas y/o las composiciones terapéuticas analizadas anteriormente se pueden proporcionar de cualquier forma conveniente. Estas composiciones se pueden proporcionar como suplemento dietético en forma de cápsulas o comprimidos. Pueden formularse en un alimento o refresco, y proporcionarse, por ejemplo, como una barra de snack, un cereal, una bebida, un chicle, o en cualquier otra forma de fácil ingestión. También se pueden proporcionar como crema o loción para aplicación tópica. En un ejemplo, la composición puede ser una composición oral en forma de unidades discretas como cápsulas, sobres, comprimidos, geles blandos o pastillas, conteniendo cada uno una cantidad predeterminada del principio activo; en forma de un polvo o gránulos; en forma de solución o suspensión en líquido acuoso o líquido no acuoso, tal como etanol o glicerol; o en forma de una emulsión de aceite en agua o una emulsión de agua en aceite. Dichos aceites pueden ser aceites comestibles, como, p. ej., aceite de semilla de algodón, aceite de sésamo, aceite de coco, aceite de girasol o aceite de cacahuete. Los agentes dispersantes o de suspensión adecuados para suspensiones acuosas incluyen gomas sintéticas o naturales tales como tragacanto, alginato, goma arábiga, dextrano, carboximetilcelulosa sódica, gelatina, metilcelulosa y polivinilpirrolidona. En otra realización, la forma de dosificación oral puede comprender una cápsula, un comprimido, un polvo, una bebida, un jarabe, una suspensión o un alimento.

Además, las composiciones se pueden formular como una preparación de depósito. Estas composiciones de acción prolongada pueden administrarse mediante implantación (p. ej., por vía subcutánea, por vía intraabdominal o por vía intramuscular) o mediante inyección intramuscular. Por lo tanto, por ejemplo, el principio activo puede formularse con materiales poliméricos o hidrófobos adecuados (por ejemplo, en forma de una emulsión en un aceite farmacéuticamente aceptable) o resina de intercambio iónico.

En algunas realizaciones, las composiciones moduladoras del estrés oxidativo, las composiciones moduladoras de proteínas cinasas y/o las composiciones terapéuticas analizadas anteriormente pueden comprender además un transportador farmacéuticamente aceptable. En algunas realizaciones, las formulaciones pueden comprender excipientes farmacéuticamente aceptables. Los excipientes farmacéuticamente aceptables ilustrativos se pueden seleccionar del grupo que consiste en recubrimientos, agentes isotónicos y retardantes de la absorción, aglutinantes, adhesivos, lubricantes, desintegrantes, agentes colorantes, agentes aromatizantes, agentes edulcorantes, absorbentes, detergentes y agentes emulsionantes.

Cuando la formulación incluye un agente emulsionante, los emulsionantes se pueden añadir para mejorar la estabilidad del producto final. Los emulsionantes ilustrativos incluyen, pero sin limitación, lecitina (p. ej., de huevo o soja) y/o mono y diglicéridos. Otros emulsionantes son fácilmente evidentes para el experto en la materia y la selección del o de los emulsionantes adecuados dependerá, en parte, de la formulación y del producto final.

La formulación puede incluir además aromatizantes, agentes colorantes, especias, frutos secos, conservantes, antioxidantes, vitaminas, minerales, proteínas, grasas y/o carbohidratos. La cantidad de otros ingredientes puede variar según el diseño particular, dosis prevista y método de administración. La cantidad total de otros ingredientes también puede depender, en parte, del estado y el peso del sujeto.

Se pueden incorporar aromatizantes, agentes colorantes, especias, frutos secos y similares al producto. Los aromatizantes pueden estar en forma de extractos aromatizados, aceites volátiles, aromatizantes de chocolate (p. ej., cacao o chocolate sin cafeína, sustitutos del chocolate tal como la algarroba), aromatizante de mantequilla de cacahuete, migas de galleta, arroz crujiente, vainilla o cualquier aromatizante disponible comercialmente. Los aromatizantes pueden protegerse con tocoferoles mixtos. Los ejemplos de aromatizantes útiles incluyen, pero sin limitación, extracto de anís puro, extracto de plátano sintético, extracto de cereza sintético, extracto de chocolate, extracto de limón puro, extracto de naranja pura, extracto de menta pura, extracto de piña sintético, extracto de ron sintético, extracto de fresa sintético o extracto puro de vainilla; o aceites volátiles, tales como aceite de bálsamo, aceite de laurel, aceite de bergamota, aceite de madera de cedro, aceite de cereza, aceite de nuez, aceite de canela, aceite de clavo de olor o aceite de menta; mantequilla de cacahuete, aromatizante de chocolate, miga de galleta de vainilla, caramelo o toffee. En una realización, la formulación puede contener aromas de bayas u otras frutos. Las composiciones alimenticias pueden revestirse adicionalmente, por ejemplo, con un revestimiento de yogur.

Se pueden añadir conservantes o estabilizantes a la formulación para extender la vida útil del producto. Los conservantes ilustrativos incluyen sorbato de potasio, sorbato de sodio, benzoato de potasio, benzoato de sodio o EDTA de calcio disódico.

La formulación también puede incluir edulcorantes naturales o artificiales. En una realización, los posibles edulcorantes pueden incluir glucosa, sacarosa, fructosa, sacáridos, ciclamatos, aspartamina, sucralosa, aspartamo, acesulfamo K, sorbitol, o una combinación de los mismos.

La formulación puede incluir además formas farmacéuticamente aceptables de vitaminas, minerales y otros nutrientes. Los nutrientes elegidos para su inclusión en la formulación pueden variar dependiendo del diseño particular, la dosis prevista, el método de administración y el estado del sujeto. Los expertos en la materia son conscientes de las vitaminas, minerales y otros nutrientes que se pueden incorporar a las formulaciones y cómo incorporarlos.

Los componentes de la formulación se pueden incluir como sales. En particular, se contemplan las sales farmacéuticamente aceptables de los componentes. Una "sal farmacéuticamente aceptable" es una combinación de un compuesto y bien un ácido o una base que forma una sal (tal como, por ejemplo, la sal de magnesio, denominado en el presente documento "Mg" o "Mag") con el compuesto. Un sujeto puede tolerar sales farmacéuticamente aceptables en condiciones terapéuticas. En general, una sal farmacéuticamente aceptable de un compuesto tendrá un índice terapéutico (la relación entre la dosis tóxica más baja y la dosis terapéuticamente eficaz más baja) de 1 o mayor. Los expertos en la materia reconocen que la dosis terapéuticamente eficaz más baja variará de un sujeto a otro y de indicación a otra y, por tanto, ajustará la formulación en consecuencia.

Además, se pueden añadir polímeros de acuerdo con metodologías convencionales en la técnica para la liberación sostenida de un compuesto dado.

Cualquier composición utilizada para tratar una enfermedad o afección utilizará un compuesto de grado farmacéutico y la composición comprenderá además un transportador farmacéuticamente aceptable. Se contempla además que estas composiciones de la invención se pueden preparar en formas de dosificación unitarias apropiadas tanto para la vía de administración como para la enfermedad y el paciente a tratar. Las composiciones se pueden presentar convenientemente en forma de dosificación unitaria y prepararse mediante cualquiera de los métodos bien conocidos en la técnica de la farmacia. Todos los métodos incluyen la etapa de asociar el principio activo en asociación con el vehículo que constituye uno o más constituyentes auxiliares. En general, las composiciones se preparan poniendo en asociación de manera uniforme e íntima el principio activo con un vehículo líquido o un vehículo sólido finamente dividido o con ambos y después, si es necesario, dando forma al producto en la composición deseada.

También se muestran en el presente documento métodos para regular el estrés oxidativo en un sujeto. El método puede comprender administrar al sujeto una combinación terapéuticamente eficaz de extractos de manzana, uva, té verde y olivo, en cantidades que proporcionen una actividad antioxidante combinada que sea mayor que la actividad antioxidante proporcionada por una cantidad equivalente de cualquier extracto o una suma de los extractos. En un ejemplo, el método puede comprender además administrar al sujeto al menos un agente terapéutico secundario. El agente terapéutico secundario puede administrarse conjuntamente en una única formulación, administrarse por separado, o administrarse secuencialmente con la administración de los extractos de manzana, uva, té verde y olivo. El método puede comprender administrar cualquiera de los extractos adicionales y/o agentes terapéuticos secundarios identificados anteriormente. Los extractos, cantidades y agentes terapéuticos secundarios pueden ser como se identifica anteriormente.

El método puede regular patologías relacionadas con el estrés y los trastornos metabólicos comprenden al menos un miembro seleccionado del grupo que consiste en síndrome metabólico, diabetes de tipo 1, diabetes de tipo 2, obesidad, niveles altos de colesterol, colesterol LDL oxidado, inflamación, osteoartritis, artritis reumatoide, endotoxemia, enfermedad inflamatoria del intestino, intestino permeable, enfermedad de Crohn, hiperplasia prostática, síntomas del tracto urinario inferior, hipertensión pulmonar arterial, disminución de la capacidad de ejercicio, eyaculación precoz, bajo deseo sexual femenino, trastornos congestivos, insuficiencia cardíaca, hipertensión pulmonar, diversas enfermedades cardiovasculares, disfunción motora, trastornos cognitivos, incluida la enfermedad de Alzheimer, fenómeno de Raynaud, hipertensión esencial, accidente cerebrovascular, asma, esclerosis múltiple, vasculitis, enfermedad de Addison, lupus, tiroiditis, síndrome de fatiga crónica, trastornos de la piel por fibromialgia, arrugas, decoloración de la piel, piel flácida, cánceres que surgen del daño por oxidación del ADN y combinaciones de los mismos.

En el presente documento se muestra además un método para regular la actividad de las proteínas cinasas asociada a la enfermedad en un sujeto que comprende administrar al sujeto una combinación terapéuticamente eficaz de un extracto de manzana, un extracto de uva, un extracto de té verde y un extracto de olivo, en cantidades que proporcionen una actividad reguladora de cinasas combinada que sea mayor que la actividad reguladora de cinasas proporcionada por una cantidad equivalente de cualquier extracto o una suma de los extractos. En un ejemplo, el método puede comprender además administrar al sujeto al menos un agente terapéutico secundario. El agente terapéutico secundario puede administrarse conjuntamente en una única formulación, administrarse por separado, o administrarse secuencialmente con la administración de los extractos de manzana, uva, té verde y olivo. El método puede comprender administrar cualquiera de los extractos adicionales y/o agentes terapéuticos secundarios identificados anteriormente. Los extractos, cantidades y agentes terapéuticos secundarios pueden ser como se identifica anteriormente.

El método puede modular la actividad de las proteínas cinasas de cualquiera de las proteínas cinasas mostradas en la Tabla 14. En un ejemplo, el método modula la expresión de: Abl, ACk 1, ALK, Aurora, AMPK, CaMKII, EGFR, EphA, FAK, FGFR, GSK3, IGF-1 (activado), IKK, IR, MAPK1, Met, MTOR, NEK1/2/6, PAK1/4/5/6, PDGFR, PI3K, PKC, ROCKI/II, RSK1/2/34, SRC, Syk y combinaciones de los mismos. En una realización, la actividad moduladora de proteínas cinasas puede comprender la cinasa PI3. En otra realización, la actividad moduladora de proteínas cinasas puede comprender MET cinasa. En otra realización más, la actividad moduladora de proteínas cinasas puede comprender al menos una de las Aurora cinasas, Aurora-A, Aurora-B y Aurora-C.

La etapa de administración del método de regulación del estrés oxidativo y el método de regulación de la actividad de las proteínas cinasas asociada a la enfermedad pueden administrarse a un sujeto que necesite dicha actividad. La formulación del método se puede administrar en forma oral, transdérmica, transmucosa, rectal, oftálmica (incluso intravítrea o intracameral), nasal, nasal por inhalación, tópica (incluyendo bucal y sublingual), vaginal, parenteral (incluyendo subcutánea, intramuscular, intravenosa, intradérmica e intratraqueal), por implantación o por vía intramuscular. En una realización ilustrativa, el método administra la formulación por vía oral.

La cantidad administrada puede coincidir con las cantidades diarias recomendadas de cada ingrediente. La cantidad real de cada ingrediente por dosis unitaria dependerá del número de unidades administradas diariamente al individuo que lo necesite. Esto es una cuestión de diseño del producto y está dentro de la habilidad del formulador de suplementos nutricionales.

Además, se muestran métodos para potenciar el efecto terapéutico de un agente terapéutico primario. En un ejemplo, el método puede comprender combinar un agente terapéutico primario con extractos de manzana, uva, té verde y olivo en cantidades que aumentan el efecto terapéutico del agente terapéutico primario más que un aumento proporcionado por una cantidad equivalente de cualquier extracto. En un ejemplo, el método puede comprender además administrar la formulación a un sujeto que lo necesite. En una realización, el método comprende adicionalmente administrar un agente terapéutico secundario que puede administrarse conjuntamente en una única formulación, administrarse por separado, o administrarse secuencialmente con la administración de los extractos de manzana, uva, té verde y olivo. El método puede comprender administrar cualquiera de los extractos adicionales y/o agentes terapéuticos secundarios identificados anteriormente. Los extractos, cantidades, agentes terapéuticos primarios y agentes terapéuticos secundarios pueden ser como se identifica anteriormente.

En el presente documento también se muestran métodos para preparar composiciones de actividad potenciada para regular el estrés oxidativo, métodos para preparar composiciones moduladoras de proteínas cinasas, y para preparar terapias, incluyendo composiciones terapéuticas específicas. Los métodos para preparar las composiciones moduladoras del estrés oxidativo y las composiciones moduladoras de proteínas cinasas pueden comprender combinar extractos de manzana, uva, té verde y olivo en cantidades que proporcionan una mayor actividad antioxidante que la proporcionada por una cantidad equivalente de cualquier extracto o una suma de los extractos. El método de preparación de la composición terapéutica comprende además proporcionar un agente terapéutico primario y combinar el agente terapéutico primario con extractos de manzana, uva, té verde y olivo.

En cualquiera o en todos los métodos anteriores, los extractos se pueden crear a partir de las materias primas. Cuando la formulación es a partir de materias primas, los extractos de manzana, uva, té verde y olivo se pueden extraer utilizando un disolvente de extracción seleccionado del grupo que consiste en agua, etanol, acetato de etilo y combinaciones de los mismos. En un ejemplo, el proceso de extracción puede incluir formar un concentrado de pulpa de la materia prima, extraer las materias primas, purificar las materias primas, eluir las materias primas, recoger el material eluido, concentrar el material y secar el material por atomización. En otro ejemplo, el proceso de extracción puede comprender además filtrar el material.

En un ejemplo, el método puede comprender además combinar al menos un agente terapéutico secundario con los extractos de manzana, uva, té verde y olivo. Los extractos, cantidades, agentes terapéuticos primarios y agentes terapéuticos secundarios pueden ser como se identifica anteriormente.

En algunas realizaciones, las composiciones, métodos de uso y métodos para preparar las composiciones moduladoras del estrés oxidativo, las composiciones moduladoras de proteínas cinasas y/o las composiciones terapéuticas analizadas anteriormente pueden incluir formular las composiciones en forma de un paquete o kit farmacéutico. El paquete o kit farmacéutico puede comprender uno o más recipientes llenos con uno o más de los ingredientes de las composiciones de la invención (p. ej., suplemento nutricional en forma de polvo y cápsulas). Opcionalmente asociado con dicho recipiente o recipientes puede haber un aviso en la forma prescrita por una agencia gubernamental que regula la fabricación, uso o venta de productos farmacéuticos, aviso que refleja la aprobación por la agencia de fabricación, uso o venta para administración a seres humanos. El paquete o kit se puede etiquetar con información sobre el modo de administración, la secuencia de administración (p. ej., por separado, secuencial o concurrentemente) o similares. El paquete o kit también puede incluir medios para recordarle al paciente que tome el tratamiento. El paquete o kit puede ser una dosis unitaria única de la terapia de combinación o puede ser una pluralidad de dosis unitarias. En particular, los agentes se pueden separar, mezclarse en cualquier combinación, estar presentes en una formulación o comprimido.

Realizaciones

La presente invención queda definida por las reivindicaciones. En una realización se proporciona, una composición moduladora del estrés oxidativo que comprende una combinación de extractos de manzana, uva, té verde y olivo en cantidades que proporcionan una mayor actividad antioxidante que la proporcionada por una cantidad equivalente de cualquier extracto o una suma de los extractos.

En una realización de la composición moduladora del estrés oxidativo, el extracto de manzana comprende un extracto de una especie Malus pumila.

En una realización de la composición moduladora del estrés oxidativo, el extracto de manzana en la composición comprende tanto una piel como un fruto de Malus pumila.

En una realización de la composición moduladora del estrés oxidativo, el extracto de uva comprende un extracto de una especie Vitis vinifera.

En una realización de la composición moduladora del estrés oxidativo, el extracto de uva en la composición comprende semillas de la Vitis vinifera.

En una realización de la composición moduladora del estrés oxidativo, el extracto de uva en la composición comprende de aproximadamente un 75 % en peso a aproximadamente un 95 % en peso de fenoles basándose en el peso seco.

En una realización de la composición moduladora del estrés oxidativo, el extracto de té verde comprende un extracto de hojas de una especie Camellia sinensis.

En una realización de la composición moduladora del estrés oxidativo, el extracto de olivo comprende un extracto de una subespecie Olea europea europaea.

En una realización de la composición moduladora del estrés oxidativo, el extracto de olivo en la composición comprende hojas de Olea europea europea.

En una realización de la composición moduladora del estrés oxidativo, al menos uno de los extractos en la composición está presente en una cantidad diferente a la cantidad de al menos un extracto diferente.

En una realización de la composición moduladora del estrés oxidativo, los extractos de manzana, uva, té verde y olivo están presentes en la composición en una relación en peso de aproximadamente 1:1:1:1.

En una realización de la composición moduladora del estrés oxidativo, los extractos de manzana, uva, té verde y olivo están presentes en la composición en una relación en peso de aproximadamente 6:1:3:1

En una realización de la composición moduladora del estrés oxidativo, los extractos de manzana, uva, té verde y olivo comprenden extractos formulados a partir de las hojas, piel, corteza, pulpa, zumo, semillas o combinaciones de los mismos.

En una realización, la composición moduladora del estrés oxidativo comprende además al menos un agente terapéutico primario o secundario.

En una realización de la composición moduladora del estrés oxidativo, el al menos un agente terapéutico primario o secundario comprende un miembro seleccionado del grupo que consiste en bergamota, mangostán, berberina, arginina, citrulina, glutamina, zinc, remolacha, loclo, proteína, curcumina, fitoesteroles, aceite de pescado, CoQ10, vitaminas, fibra, inulina y combinaciones de los mismos.

En una realización de la composición moduladora del estrés oxidativo, el al menos un agente terapéutico primario o secundario comprende bergamota.

En una realización de la composición moduladora del estrés oxidativo, el al menos un agente terapéutico primario o secundario comprende mangostán.

En una realización de la composición moduladora del estrés oxidativo, el al menos un agente terapéutico primario o secundario comprende berberina.

En una realización de la composición moduladora del estrés oxidativo, la composición que comprende una combinación de extracto de manzana, uva, té verde y olivo comprende además al menos un agente terapéutico secundario.

En una realización de la composición moduladora del estrés oxidativo, el al menos un agente terapéutico primario o secundario comprende arginina y remolacha.

En una realización de la composición moduladora del estrés oxidativo, el al menos un agente terapéutico primario o secundario comprende citrulina y remolacha.

En una realización de la composición moduladora del estrés oxidativo, el al menos un agente terapéutico primario o secundario comprende fitoesteroles.

En una realización de la composición moduladora del estrés oxidativo, el al menos un agente terapéutico primario o secundario comprende proteína.

En una realización de la composición moduladora del estrés oxidativo, la proteína comprende al menos un miembro seleccionado del grupo que consiste en proteína de suero de leche, proteína de soja, proteína de guisante, proteína de caseinato de calcio y combinaciones de las mismas.

En una realización de la composición moduladora del estrés oxidativo, el al menos un agente terapéutico primario o secundario comprende curcumina.

En una realización de la composición moduladora del estrés oxidativo, el al menos un agente terapéutico primario o secundario comprende una fuente de fibra e inulina.

En una realización de la composición moduladora del estrés oxidativo, la composición comprende además un transportador farmacéuticamente aceptable.

En una realización de la composición moduladora del estrés oxidativo, la composición es una formulación de dosificación oral.

En una realización de la composición moduladora del estrés oxidativo, la forma de dosificación oral comprende una cápsula, un comprimido, un polvo, una bebida, un jarabe, una suspensión o un alimento.

En una realización de la composición moduladora del estrés oxidativo, la actividad antioxidante modula las patologías y los trastornos metabólicos relacionados con el estrés.

En una realización de la composición moduladora del estrés oxidativo, la composición, la actividad antioxidante de la composición moduladora del estrés oxidativo modula las patologías y los trastornos metabólicos relacionados con el estrés.

En una realización de la composición moduladora del estrés oxidativo, las patologías y los trastornos metabólicos relacionados con el estrés comprenden al menos un miembro seleccionado del grupo que consiste en síndrome metabólico, diabetes de tipo 1, diabetes de tipo 2, obesidad, niveles altos de colesterol, colesterol LDL oxidado, inflamación, osteoartritis, artritis reumatoide, endotoxemia, enfermedad inflamatoria del intestino, intestino permeable, enfermedad de Crohn, hiperplasia prostática, síntomas del tracto urinario inferior, hipertensión pulmonar arterial, disminución de la capacidad de ejercicio, eyaculación precoz, bajo deseo sexual femenino, trastornos congestivos, insuficiencia cardíaca, hipertensión pulmonar, diversas enfermedades cardiovasculares, disfunción motora, trastornos cognitivos, incluida la enfermedad de Alzheimer, fenómeno de Raynaud, hipertensión esencial, accidente cerebrovascular, asma, esclerosis múltiple, vasculitis, enfermedad de Addison, lupus, tiroiditis, síndrome de fatiga crónica, trastornos de la piel por fibromialgia, arrugas, decoloración de la piel, piel flácida, cánceres que surgen del daño por oxidación del a Dn y combinaciones de los mismos.

En una realización de la composición moduladora del estrés oxidativo, la actividad antioxidante modula el LDL oxidado.

En una realización de la composición moduladora del estrés oxidativo, la actividad antioxidante modula al menos uno de síndrome metabólico, diabetes de tipo I, diabetes de tipo II o diabetes de tipo III.

En una realización de la composición moduladora del estrés oxidativo, la actividad antioxidante modula al menos uno de intestino permeable, endotoxemia o enfermedad inflamatoria intestinal.

En una realización de la composición moduladora del estrés oxidativo, la composición moduladora del estrés oxidativo comprende además concentrado de arándanos, extracto de pimiento y extracto de cúrcuma.

En una realización de la composición moduladora del estrés oxidativo que comprende además concentrado de arándanos, extracto de pimiento y extracto de cúrcuma, el concentrado de arándanos comprende Vaccinium angustifolium, el extracto de pimiento comprende Capsicum annuum, y el extracto de cúrcuma comprende Curcuma tonga.

En una realización de la composición moduladora del estrés oxidativo, el extracto de uva comprende piel de uva y semilla de uva de Vitis vinifera en la composición moduladora del estrés oxidativo, comprende además concentrado de arándanos, extracto de pimiento y extracto de cúrcuma.

En una realización de la composición moduladora del estrés oxidativo, la composición moduladora del estrés oxidativo comprende además concentrado de arándanos, extracto de pimiento, extracto de cúrcuma y extracto de fruto de mangostán.

En la realización de la composición moduladora del estrés oxidativo anterior, la composición comprende más de 1,5 veces la actividad antioxidante de una cantidad equivalente de cualquier extracto o concentrado o una suma de los extractos y concentrado.

En una realización de la composición moduladora del estrés oxidativo, la composición moduladora del estrés oxidativo comprende además concentrado de arándanos, extracto de pimiento, extracto de cúrcuma y extracto de bergamota.

En la realización de la composición moduladora del estrés oxidativo anterior, la composición comprende más de 1,5 veces la actividad antioxidante de una cantidad equivalente de cualquier extracto o concentrado o una suma de los extractos y concentrado.

En una realización de la composición moduladora del estrés oxidativo, el extracto de bergamota comprende Citrus bergamia Risso.

En una realización de la composición moduladora del estrés oxidativo, la composición moduladora del estrés oxidativo comprende además concentrado de arándanos, extracto de pimiento, extracto de cúrcuma y extracto de pericarpio de mangostán.

En la realización de la composición moduladora del estrés oxidativo anterior, la composición comprende más de 1,25 veces la actividad antioxidante de una cantidad equivalente de cualquier extracto o concentrado o una suma de los extractos y concentrado.

En una realización de la composición moduladora del estrés oxidativo, la composición moduladora del estrés oxidativo comprende además concentrado de arándanos, extracto de pimiento, extracto de cúrcuma, extracto de pericarpio de mangostán y extracto de bergamota.

En una realización, la composición moduladora del estrés oxidativo comprende además concentrado de arándanos, extracto de pimiento, extracto de cúrcuma, extracto de pericarpio de mangostán y extracto de bergamota modula el LDL oxidado.

En una realización, una composición moduladora de proteínas cinasas que comprende una combinación de extractos de manzana, uva, té verde y olivo en cantidades que proporcionan una mayor actividad moduladora de proteínas cinasas que la proporcionada por una cantidad equivalente de cualquier extracto o una suma de los extractos.

En una realización de la composición moduladora de proteínas cinasas, el extracto de manzana comprende un extracto de una especie Malus pumila.

En una realización de la composición moduladora de proteínas cinasas, el extracto de manzana comprende tanto la piel como el fruto de Malus pumila.

En una realización de la composición moduladora de proteínas cinasas, el extracto de uva comprende un extracto de una especie Vitis vinifera.

En una realización de la composición moduladora de proteínas cinasas, el extracto de uva contiene semillas de Vitis vinifera.

En una realización de la composición moduladora de proteínas cinasas, el extracto de uva comprende de aproximadamente un 75 % en peso a aproximadamente un 95 % en peso de fenoles basándose en el peso seco. En una realización de la composición moduladora de proteínas cinasas, el extracto de té verde comprende un extracto de hojas de una especie Camellia sinensis.

En una realización de la composición moduladora de proteínas cinasas, el extracto de olivo comprende un extracto de una subespecie Olea europea europaea.

En una realización de la composición moduladora de proteínas cinasas, el extracto de olivo comprende hojas de Olea europea europea.

En una realización de la composición moduladora de proteínas cinasas, al menos uno de los extractos en la composición está presente en una cantidad diferente a la cantidad de al menos un extracto diferente.

En una realización de la composición moduladora de proteínas cinasas, los extractos de manzana, uva, té verde y olivo están presentes en una relación en peso de aproximadamente 1:1:1:1.

En una realización de la composición moduladora de proteínas cinasas, los extractos de manzana, uva, té verde y olivo están presentes en una relación en peso de aproximadamente 6:1:3:1

En una realización de la composición moduladora de proteínas cinasas, los extractos de manzana, uva, té verde y olivo comprenden hojas, piel, corteza, pulpa, zumo, semillas o combinaciones de los mismos.

En una realización, la composición moduladora de proteínas cinasas comprende además al menos un agente terapéutico primario o secundario.

En una realización de la composición moduladora de proteínas cinasas, el al menos un agente terapéutico primario o secundario comprende un miembro seleccionado del grupo que consiste en bergamota, mangostán, berberina, arginina, citrulina, glutamina, remolacha, proteína, curcumina, fitoesteroles, aceite de pescado, CoQ10, vitaminas, fibra, inulina y combinaciones de los mismos.

En una realización de la composición moduladora de proteínas cinasas, el al menos un agente terapéutico primario o secundario comprende bergamota.

En una realización de la composición moduladora de proteínas cinasas, el al menos un agente terapéutico primario o secundario comprende mangostán.

En una realización de la composición moduladora de proteínas cinasas, el al menos un agente terapéutico primario o secundario comprende berberina.

En una realización de la composición moduladora de proteínas cinasas, el al menos un agente terapéutico primario o secundario comprende arginina y remolacha.

En una realización de la composición moduladora de proteínas cinasas, el al menos un agente terapéutico primario o secundario comprende citrulina y remolacha.

En una realización de la composición moduladora de proteínas cinasas, el al menos un agente terapéutico primario o secundario comprende fitoesteroles.

En una realización de la composición moduladora de proteínas cinasas, el al menos un agente terapéutico primario o secundario comprende proteína.

En una realización de la composición moduladora de proteínas cinasas, la proteína comprende al menos un miembro seleccionado del grupo que consiste en proteína de suero de leche, proteína de soja, proteína de guisante, proteína de caseinato de calcio y combinaciones de las mismas.

En una realización de la composición moduladora de proteínas cinasas, el al menos un agente terapéutico primario o secundario comprende curcumina.

En una realización de la composición moduladora de proteínas cinasas, el al menos un agente terapéutico primario o secundario comprende una fuente de fibra e inulina.

En una realización, la composición moduladora de proteínas cinasas comprende además un transportador farmacéuticamente aceptable.

En una realización, la composición moduladora de proteínas cinasas es una formulación de dosificación oral.

En una realización de la composición moduladora de proteínas cinasas, la forma de dosificación oral comprende una cápsula, un comprimido, un polvo, una bebida, un jarabe, una suspensión o un alimento.

En una realización de la composición moduladora de proteínas cinasas, la actividad moduladora de proteínas cinasas es un miembro seleccionado del grupo que consiste en: Abl, ACK1, ALK, Aurora, AMPK, CaMKII, EGFR, EphA, FAK, FGFR, GSK3, IGF-1 (activado), IKK, IR, MAPK1, Met, MTOR, NEK1/2/6, PAK1/4/5/6, PDGFR, PI3K, PKC, ROCKI/II, RSK1/2/34, SRC, Syk y combinaciones de los mismos.

En una realización de la composición moduladora de proteínas cinasas, la modulación de la proteína cinasa mejora al menos uno de los casos de obesidad, afecciones inflamatorias que incluyen osteoartritis y artritis reumatoide, enfermedad de Crohn, hiperplasia prostática, síntomas del tracto urinario inferior, hipertensión pulmonar arterial, disminución de la capacidad de ejercicio, eyaculación precoz, bajo deseo sexual femenino, trastornos congestivos, insuficiencia cardíaca, hipertensión pulmonar, enfermedades cardiovasculares, disfunción motora, trastornos cognitivos, incluida la enfermedad de Alzheimer, fenómeno de Raynaud, hipertensión esencial, accidente cerebrovascular, asma, esclerosis múltiple, vasculitis, enfermedad de Addison, lupus, tiroiditis, síndrome de fatiga crónica, fibromialgia y trastornos de la piel, incluidas las arrugas de la piel, decoloraciones de la piel y flacidez de la piel.

En una realización de la composición moduladora de proteínas cinasas, la modulación de la proteína cinasa mejora al menos uno de intestino permeable, endotoxemia y enfermedad inflamatoria intestinal.

En una realización de la composición moduladora de proteínas cinasas, la modulación de la proteína cinasa da como resultado la mejora de al menos uno de los síntomas de síndrome metabólico, diabetes de tipo I, diabetes de tipo II y diabetes de tipo III.

En una realización de la composición moduladora de proteínas cinasas, la modulación de la proteína cinasa reduce, minimiza, o inhibe la producción o presencia de colesterol LDL oxidado (oxLDL) en el sujeto.

En una realización, la composición moduladora de proteínas cinasas, además comprende concentrado de arándanos, extracto de pimiento y extracto de cúrcuma.

En una realización, la composición moduladora de proteínas cinasas comprende además concentrado de arándanos, extracto de pimiento y extracto de cúrcuma, el concentrado de arándanos comprende Vaccinium angustifolium, el extracto de pimiento comprende Capsicum annuum, y el extracto de cúrcuma comprende Curcuma longa.

En una realización, la composición moduladora de proteínas cinasas comprende además concentrado de arándanos, extracto de pimiento y extracto de cúrcuma, el extracto de uva comprende piel de uva y semilla de uva de Vitis vinifera. En una realización, la composición moduladora de proteínas cinasas comprende además concentrado de arándanos, extracto de pimiento, extracto de cúrcuma y un extracto de fruto de mangostán.

En una realización, la composición moduladora de proteínas cinasas comprende además concentrado de arándanos, extracto de pimiento, extracto de cúrcuma y extracto de bergamota Citrus bergamia Risso.

En una realización, la composición moduladora de proteínas cinasas comprende además concentrado de arándanos, extracto de pimiento, extracto de cúrcuma y un extracto de pericarpio de mangostán.

En una realización, la composición moduladora de proteínas cinasas comprende además concentrado de arándanos, extracto de pimiento, extracto de cúrcuma, extracto de pericarpio de mangostán y extracto de bergamota Citrus bergamia Risso.

En una realización, la composición moduladora de proteínas cinasas que comprende además concentrado de arándanos, extracto de pimiento, extracto de cúrcuma, extracto de pericarpio de mangostán y extracto de bergamota Citrus bergamia Risso, tiene una actividad moduladora de proteínas cinasas que comprende un miembro seleccionado del grupo que consiste en: Abl, ACK1, ALK, Aurora, AMPK, CaMKII, EGFR, EphA, FAK, FGFR, GSK3, IGF-1 (activado), IKK, IR, MAPK1, Met, MTOR, NEK1/2/6, PAK1/4/5/6, PDGFR, PI3K, PKC, ROCKI/II, RSK1/2/34, SRC, Syk y combinaciones de los mismos.

En una realización, la composición moduladora de proteínas cinasas que comprende además concentrado de arándanos, extracto de pimiento, extracto de cúrcuma, extracto de pericarpio de mangostán y extracto de bergamota Citrus bergamia Risso, tiene una actividad moduladora de proteínas cinasas que comprende la modulación de la cinasa PI3.

En una realización, la composición moduladora de proteínas cinasas que comprende además concentrado de arándanos, extracto de pimiento, extracto de cúrcuma, extracto de pericarpio de mangostán y extracto de bergamota Citrus bergamia Risso, tiene una actividad moduladora de proteínas cinasas que comprende la modulación de la cinasa MET.

En una realización, la composición moduladora de proteínas cinasas que comprende además concentrado de arándanos, extracto de pimiento, extracto de cúrcuma, extracto de pericarpio de mangostán y extracto de bergamota Citrus bergamia Risso, tiene una actividad moduladora de proteínas cinasas que comprende modular al menos una de las Aurora cinasas, Aurora-A, Aurora-B y Aurora-C.

En una realización en el presente documento se muestra una composición terapéutica que comprende un agente terapéutico primario y una combinación de extractos de manzana, uva, té verde y olivo en cantidades que aumentan el efecto terapéutico del agente terapéutico primario más que un aumento del efecto terapéutico proporcionado por una cantidad equivalente de cualquier extracto.

En una realización de la composición terapéutica, los extractos de manzana, uva, té verde y olivo están presentes en la composición en una relación en peso de aproximadamente 1:1:1:1.

En una realización de la composición terapéutica, los extractos de manzana, uva, té verde y olivo están presentes en la composición en una relación en peso de aproximadamente 6:1:3:1

En una realización, la composición terapéutica, comprende además al menos un agente terapéutico secundario.

En una realización de la composición terapéutica, el al menos un agente terapéutico secundario comprende un miembro seleccionado del grupo que consiste en bergamota, mangostán, berberina, arginina, citrulina, glutamina, zinc, remolacha, loclo, proteína, curcumina, fitoesteroles, aceite de pescado, CoQ10, vitaminas, fibra, inulina y combinaciones de los mismos.

En una realización de la composición terapéutica, el al menos un agente terapéutico secundario comprende mangostán y el mangostán comprende un extracto de fruto de mangostán, un extracto de pericarpio de mangostán o una combinación de los mismos.

En una realización de la composición terapéutica, el al menos un agente terapéutico secundario comprende bergamota.

En una realización de la composición terapéutica, la composición comprende además arginina y citrulina.

En una realización de la composición terapéutica, el agente terapéutico regula la disfunción metabólica.

En una realización de la composición terapéutica, el agente terapéutico comprende un miembro seleccionado del grupo que consiste en aminogen®, biotina, polvo de judía negra, citrato de cobre, fumarato ferroso, fructosa, semilla de garbanzos, goma arábiga, inulina, óxido de magnesio, citrato de manganeso, triglicéridos de cadena media, fibra de guisante, aislado de proteína de guisante, citrato potásico, vitamina B6, riboflavina, salvado de arroz, proteína de arroz, citrato de sodio, selenato de sodio, HCl de tiamina, vitamina D2, vitamina E, citrato de zinc, judía adzuki, D-pantotenato cálcico y combinaciones de los mismos.

En una realización de la composición terapéutica, el agente terapéutico comprende un antioxidante.

En una realización de la composición terapéutica, el agente terapéutico comprende un antioxidante seleccionado del grupo que consiste en ácido ascórbico, p-glucanos, arándano, aceite de borraja, flores de brócoli, raíz de zanahoria, fruto de arándano, nicotinato de cromo, cianocobalamina, semilla de lino/Linum usitatissimum, ácido fólico, extracto lo han, niacinamida, fruto de granada, vitamina A, fitoesteroles y combinaciones de los mismos.

En una realización en el presente documento, se muestra un método de regulación del estrés oxidativo en un sujeto que comprende, administrar al sujeto una combinación terapéuticamente eficaz de extractos de manzana, uva, té verde y olivo, en cantidades que proporcionen una actividad antioxidante combinada que sea mayor que la actividad antioxidante proporcionada por una cantidad equivalente de cualquier extracto o una suma de los extractos.

En una realización del método de regulación del estrés oxidativo en un sujeto, el extracto de manzana comprende un extracto de piel y fruto de Malus pumila; el extracto de uva comprende un extracto de semillas de Vitis vinifera; el extracto de té verde comprende un extracto de hojas de Camellia sinensis; y el extracto de olivo comprende hojas de Olea europea europaea.

En una realización del método de regulación del estrés oxidativo en un sujeto, los extractos de manzana, uva, té verde y olivo están presentes en una relación en peso de aproximadamente 1:1:1:1.

En una realización del método de regulación del estrés oxidativo en un sujeto, los extractos de manzana, uva, té verde y olivo están presentes en una relación en peso de aproximadamente 6:1:3:1

En una realización del método de regulación del estrés oxidativo en un sujeto, el método comprende además administrar al sujeto al menos un agente terapéutico primario o secundario.

En una realización del método de regulación del estrés oxidativo en un sujeto, el al menos un agente terapéutico primario o secundario se administra conjuntamente al sujeto con la combinación terapéuticamente eficaz de extractos de manzana, uva, té verde y olivo.

En una realización del método de regulación del estrés oxidativo en un sujeto, el al menos un agente terapéutico primario o secundario comprende un miembro seleccionado del grupo que consiste en bergamota, mangostán, berberina, arginina, citrulina, glutamina, zinc, remolacha, loclo, proteína, curcumina, fitoesteroles, aceite de pescado, CoQ10, vitaminas, fibra, inulina y combinaciones de los mismos.

En una realización del método de regulación del estrés oxidativo en un sujeto, la actividad antioxidante modula las patologías y los trastornos metabólicos relacionados con el estrés.

En una realización del método de regulación del estrés oxidativo en un sujeto, la actividad antioxidante modula patologías y trastornos metabólicos relacionados con el estrés y las patologías y trastornos metabólicos relacionados con el estrés comprenden al menos un miembro seleccionado del grupo que consiste en síndrome metabólico, diabetes de tipo 1, diabetes de tipo 2, obesidad, niveles altos de colesterol, colesterol LDL oxidado, inflamación, osteoartritis, artritis reumatoide, endotoxemia, enfermedad inflamatoria del intestino, intestino permeable, enfermedad de Crohn, hiperplasia prostática, síntomas del tracto urinario inferior, hipertensión pulmonar arterial, disminución de la capacidad de ejercicio, eyaculación precoz, bajo deseo sexual femenino, trastornos congestivos, insuficiencia cardíaca, hipertensión pulmonar, diversas enfermedades cardiovasculares, disfunción motora, trastornos cognitivos, incluida la enfermedad de Alzheimer, fenómeno de Raynaud, hipertensión esencial, accidente cerebrovascular, asma, esclerosis múltiple, vasculitis, enfermedad de Addison, lupus, tiroiditis, síndrome de fatiga crónica, trastornos de la piel por fibromialgia, arrugas, decoloración de la piel, piel flácida, cánceres que surgen del daño por oxidación del ADN y combinaciones de los mismos.

En una realización del método de regulación del estrés oxidativo en un sujeto, el método comprende además administrar al sujeto un concentrado de arándanos, un extracto de pimiento y un extracto de cúrcuma.

En una realización del método de regulación del estrés oxidativo en un sujeto, el método comprende además administrar al sujeto extracto de fruto de mangostán.

En una realización del método de regulación del estrés oxidativo en un sujeto, el método comprende además administrar al sujeto extracto de bergamota.

En una realización del método de regulación del estrés oxidativo en un sujeto, el método comprende además administrar al sujeto un extracto de pericarpio de mangostán.

En una realización del método de regulación del estrés oxidativo en un sujeto, el método comprende además administrar al sujeto extracto de pericarpio de mangostán y extracto de bergamota.

En una realización en el presente documento, se muestra un método para regular la actividad de las proteínas cinasas asociada a la enfermedad en un sujeto que comprende: administrar al sujeto una combinación terapéuticamente eficaz de un extracto de manzana, un extracto de uva, un extracto de té verde y un extracto de olivo, en cantidades que proporcionen una actividad reguladora de cinasas combinada que sea mayor que la actividad reguladora de cinasas proporcionada por una cantidad equivalente de cualquier extracto o una suma de los extractos.

En una realización del método para regular la actividad de las proteínas cinasas asociada a la enfermedad en un sujeto, el extracto de manzana comprende un extracto de piel y fruto de Malus pumila; el extracto de uva comprende un extracto de semillas de Vitis vinifera; el extracto de té verde comprende un extracto de hojas de Camellia sinensis; y el extracto de olivo comprende hojas de Olea europea europaea.

En una realización del método para regular la actividad de las proteínas cinasas asociada a la enfermedad en un sujeto, los extractos de manzana, uva, té verde y olivo están presentes en una relación en peso de aproximadamente 1:1:1:1.

En una realización del método para regular la actividad de las proteínas cinasas asociada a la enfermedad en un sujeto, los extractos de manzana, uva, té verde y olivo están presentes en una relación en peso de aproximadamente 6:1:3:1

En una realización del método para regular la actividad de las proteínas cinasas asociada a la enfermedad en un sujeto, el método comprende además administrar al sujeto al menos un agente terapéutico primario o secundario.

En una realización del método para regular la actividad de las proteínas cinasas asociada a la enfermedad en un sujeto, el al menos un agente terapéutico primario o secundario se administra conjuntamente al sujeto con la combinación terapéuticamente eficaz de extractos de manzana, uva, té verde y olivo.

En una realización del método para regular la actividad de las proteínas cinasas asociada a la enfermedad en un sujeto, el al menos un agente terapéutico primario o secundario comprende un miembro seleccionado del grupo que consiste en bergamota, mangostán, berberina, arginina, citrulina, glutamina, zinc, remolacha, loclo, proteína, curcumina, fitoesteroles, aceite de pescado, CoQ10, vitaminas, fibra, inulina y combinaciones de los mismos.

En una realización del método para regular la actividad de las proteínas cinasas asociada a la enfermedad en un sujeto, la actividad moduladora de proteínas cinasas es un miembro seleccionado del grupo que consiste en: Abl, ACK1, ALK, Aurora, AMPK, CaMKII, EGFR, EphA, FAK, FGFR, GSK3, IGF-1 (activado), IKK, IR, MAPK1, Met, MTOR, NEK1/2/6, PAK1/4/5/6, PDGFR, PI3K, PKC, ROCKI/II, RSK1/2/34, SRC, Syk y combinaciones de los mismos.

En una realización del método para regular la actividad de las proteínas cinasas asociada a la enfermedad en un sujeto, el método comprende además administrar al sujeto un concentrado de arándanos, un extracto de pimiento y un extracto de cúrcuma.

En una realización del método para regular la actividad de las proteínas cinasas asociada a la enfermedad en un sujeto, el método comprende además administrar al sujeto extracto de fruto de mangostán.

En una realización del método para regular la actividad de las proteínas cinasas asociada a la enfermedad en un sujeto, el método comprende además administrar al sujeto extracto de bergamota.

En una realización del método para regular la actividad de las proteínas cinasas asociada a la enfermedad en un sujeto, el método comprende además administrar al sujeto un extracto de pericarpio de mangostán.

En una realización del método para regular la actividad de las proteínas cinasas asociada a la enfermedad en un sujeto, el método comprende además administrar al sujeto extracto de pericarpio de mangostán y extracto de bergamota.

En una realización en el presente documento, se muestra un método para potenciar un efecto terapéutico proporcionado por un agente terapéutico primario que comprende: combinar el agente terapéutico primario con extractos de manzana, uva, té verde y olivo en cantidades que aumentan el efecto terapéutico del agente terapéutico primario más que un aumento proporcionado por una cantidad equivalente de cualquier extracto.

En una realización del método para potenciar un efecto terapéutico proporcionado por un agente terapéutico primario, el extracto de manzana comprende un extracto de piel y fruto de Malus pumila; el extracto de uva comprende un extracto de semillas de Vitis vinifera; el extracto de té verde comprende un extracto de hojas de Camellia sinensis; y el extracto de olivo comprende hojas de Olea europea europaea.

En una realización del método para potenciar un efecto terapéutico proporcionado por un agente terapéutico primario, los extractos de manzana, uva, té verde y olivo se combinan en una relación en peso de aproximadamente 1:1:1:1.

En una realización del método para potenciar un efecto terapéutico proporcionado por un agente terapéutico primario, los extractos de manzana, uva, té verde y olivo se combinan en una relación en peso de aproximadamente 6:1:3:1. En una realización del método para potenciar un efecto terapéutico proporcionado por un agente terapéutico primario, el método comprende además combinar el agente terapéutico primario y los extractos de manzana, uva, té verde y olivo con al menos un agente terapéutico secundario.

En una realización del método para potenciar un efecto terapéutico proporcionado por un agente terapéutico primario, en donde el al menos un agente terapéutico secundario comprende un miembro seleccionado del grupo que consiste en bergamota, mangostán, berberina, arginina, citrulina, glutamina, zinc, remolacha, loclo, proteína, curcumina, fitoesteroles, aceite de pescado, CoQ10, vitaminas, fibra, inulina y combinaciones de los mismos.

En una realización del método para potenciar un efecto terapéutico proporcionado por un agente terapéutico primario, el método comprende además combinar el agente terapéutico primario y los extractos de manzana, uva, té verde y olivo con un concentrado de arándanos, un extracto de pimiento y un extracto de cúrcuma.

En una realización del método para potenciar un efecto terapéutico proporcionado por un agente terapéutico primario, el método comprende además combinar el agente terapéutico primario, el concentrado de arándanos y los extractos de manzana, uva, té verde, olivo, pimiento y cúrcuma con un extracto del fruto de mangostán.

En una realización del método para potenciar un efecto terapéutico proporcionado por un agente terapéutico primario, el método comprende además combinar el agente terapéutico primario, el concentrado de arándanos y los extractos de manzana, uva, té verde, olivo, pimiento y cúrcuma con un extracto de bergamota.

En una realización del método para potenciar un efecto terapéutico proporcionado por un agente terapéutico primario, el método comprende además combinar el agente terapéutico primario, el concentrado de arándanos y los extractos de manzana, uva, té verde, olivo, pimiento y cúrcuma con un extracto de pericarpio de mangostán.

En una realización del método para potenciar un efecto terapéutico proporcionado por un agente terapéutico primario, el método comprende además combinar el agente terapéutico primario, el concentrado de arándanos y los extractos de manzana, uva, té verde, olivo, pimiento y cúrcuma con extracto de pericarpio de mangostán y extracto de bergamota.

En una realización en el presente documento, se muestra un método para preparar una composición de actividad potenciada para regular el estrés oxidativo en un sujeto, que comprende: combinar extractos de manzana, uva, té verde y olivo en cantidades que proporcionan una mayor actividad antioxidante que la proporcionada por una cantidad equivalente de cualquier extracto o una suma de los extractos.

En una realización del método para preparar una composición de actividad potenciada para regular el estrés oxidativo en un sujeto, los extractos de manzana, uva, té verde y olivo se extraen utilizando un disolvente de extracción seleccionado del grupo que consiste en agua, etanol, acetato de etilo y combinaciones de los mismos.

En una realización del método para preparar una composición de actividad potenciada para regular el estrés oxidativo en un sujeto, los extractos de manzana, uva, té verde y olivo se presentan combinados en una relación en peso de aproximadamente 1:1:1:1.

En una realización del método para preparar una composición de actividad potenciada para regular el estrés oxidativo en un sujeto, los extractos de manzana, uva, té verde y olivo se combinan en una relación en peso de aproximadamente 6:1:3:1.

En una realización del método para preparar una composición de actividad potenciada para regular el estrés oxidativo en un sujeto, el método comprende además combinar los extractos de manzana, uva, té verde y olivo con al menos un agente terapéutico primario o secundario.

En una realización del método para preparar una composición de actividad potenciada para regular el estrés oxidativo en un sujeto, el al menos un agente terapéutico primario o secundario comprende un miembro seleccionado del grupo que consiste en bergamota, mangostán, berberina, arginina, citrulina, glutamina, zinc, remolacha, loclo, proteína, curcumina, fitoesteroles, aceite de pescado, CoQ10, vitaminas, fibra, inulina y combinaciones de los mismos.

En una realización del método para preparar una composición de actividad potenciada para regular el estrés oxidativo en un sujeto, el método comprende además combinar los extractos de manzana, uva, té verde y olivo con un concentrado de arándanos, un extracto de pimiento y un extracto de cúrcuma.

En una realización del método para preparar una composición de actividad potenciada para regular el estrés oxidativo en un sujeto, el método comprende además combinar el concentrado de arándanos y los extractos de manzana, uva, té verde, olivo, pimiento y cúrcuma con un extracto del fruto de mangostán.

En una realización del método para preparar una composición de actividad potenciada para regular el estrés oxidativo en un sujeto, el método comprende además combinar el concentrado de arándanos y los extractos de manzana, uva, té verde, olivo, pimiento y cúrcuma con un extracto de bergamota.

En una realización del método para preparar una composición de actividad potenciada para regular el estrés oxidativo en un sujeto, el método comprende además combinar el concentrado de arándanos y los extractos de manzana, uva, té verde, olivo, pimiento y cúrcuma con un extracto de pericarpio de mangostán.

En una realización del método para preparar una composición de actividad potenciada para regular el estrés oxidativo en un sujeto, el método comprende además combinar el concentrado de arándanos y los extractos de manzana, uva, té verde, olivo, pimiento y cúrcuma con extracto de pericarpio de mangostán y extracto de bergamota.

En una realización en el presente documento, se muestra un método para preparar una composición de actividad potenciada para regular la actividad de las proteínas cinasas asociada a la enfermedad en un sujeto, que comprende: combinar extractos de manzana, uva, té verde y olivo en cantidades que proporcionan una mayor actividad reguladora de proteínas cinasas que la proporcionada por una cantidad equivalente de cualquier extracto o una suma de los extractos.

En una realización del método para preparar una composición de actividad potenciada para regular la actividad de las proteínas cinasas asociada a la enfermedad en un sujeto, los extractos de manzana, uva, té verde y olivo se extraen utilizando un disolvente de extracción seleccionado del grupo que consiste en agua, etanol, acetato de etilo y combinaciones de los mismos.

En una realización del método para preparar una composición de actividad potenciada para regular la actividad de las proteínas cinasas asociada a la enfermedad en un sujeto, los extractos de manzana, uva, té verde y olivo se presentan combinados en una relación en peso de aproximadamente 1:1:1:1.

En una realización del método para preparar una composición de actividad potenciada para regular la actividad de las proteínas cinasas asociada a la enfermedad en un sujeto, los extractos de manzana, uva, té verde y olivo se combinan en una relación en peso de aproximadamente 6:1:3:1.

En una realización del método para preparar una composición de actividad potenciada para regular la actividad de las proteínas cinasas asociada a la enfermedad en un sujeto, el método comprende además combinar los extractos de manzana, uva, té verde y olivo con al menos un agente terapéutico secundario.

En una realización del método para preparar una composición de actividad potenciada para regular la actividad de las proteínas cinasas asociada a la enfermedad en un sujeto, el al menos un agente terapéutico secundario comprende un miembro seleccionado del grupo que consiste en bergamota, mangostán, berberina, arginina, citrulina, glutamina, zinc, remolacha, loclo, proteína, curcumina, fitoesteroles, aceite de pescado, CoQ10, vitaminas, fibra, inulina y combinaciones de los mismos.

En una realización del método para preparar una composición de actividad potenciada para regular la actividad de las proteínas cinasas asociada a la enfermedad en un sujeto, el método comprende además combinar los extractos de manzana, uva, té verde y olivo con un concentrado de arándanos, un extracto de pimiento y un extracto de cúrcuma.

En una realización del método para preparar una composición de actividad potenciada para regular la actividad de las proteínas cinasas asociada a la enfermedad en un sujeto, el método comprende además combinar el concentrado de arándanos y los extractos de manzana, uva, té verde, olivo, pimiento y cúrcuma con un extracto del fruto de mangostán.

En una realización del método para preparar una composición de actividad potenciada para regular la actividad de las proteínas cinasas asociada a la enfermedad en un sujeto, el método comprende además combinar el concentrado de arándanos y los extractos de manzana, uva, té verde, olivo, pimiento y cúrcuma con un extracto de bergamota.

En una realización del método para preparar una composición de actividad potenciada para regular la actividad de las proteínas cinasas asociada a la enfermedad en un sujeto, el método comprende además combinar el concentrado de arándanos y los extractos de manzana, uva, té verde, olivo, pimiento y cúrcuma con un extracto de pericarpio de mangostán.

En una realización del método para preparar una composición de actividad potenciada para regular la actividad de las proteínas cinasas asociada a la enfermedad en un sujeto, el método comprende además combinar el concentrado de arándanos y los extractos de manzana, uva, té verde, olivo, pimiento y cúrcuma con extracto de pericarpio de mangostán y extracto de bergamota.

En una realización en el presente documento, se muestra un método para preparar una composición terapéutica que comprende: proporcionar un agente terapéutico primario; y combinar extractos de manzana, uva, té verde y olivo con el agente terapéutico primario en cantidades que aumentan un efecto terapéutico del agente terapéutico primario más que un aumento en el efecto terapéutico proporcionado por una cantidad equivalente de cualquiera de los extractos solo.

En una realización del método de elaboración de una composición terapéutica, el método comprende además extraer primero los extractos de manzana, uva, té verde y olivo utilizando un disolvente de extracción seleccionado del grupo que consiste en agua, etanol, acetato de etilo y combinaciones de los mismos.

En una realización del método de elaboración de una composición terapéutica, los extractos de manzana, uva, té verde y olivo se presentan combinados en una relación en peso de aproximadamente 1:1:1:1.

En una realización del método para preparar una composición terapéutica, los extractos de manzana, uva, té verde y olivo se combinan en una relación en peso de aproximadamente 6:1:3:1.

En una realización del método de elaboración de una composición terapéutica, el método comprende además combinar los extractos de manzana, uva, té verde y olivo con al menos un agente terapéutico secundario.

En una realización del método de elaboración de una composición terapéutica, el al menos un agente terapéutico secundario comprende un miembro seleccionado del grupo que consiste en bergamota, mangostán, berberina, arginina, citrulina, glutamina, zinc, remolacha, loclo, proteína, curcumina, fitoesteroles, aceite de pescado, CoQ10, vitaminas, fibra, inulina y combinaciones de los mismos.

En una realización del método de elaboración de una composición terapéutica, el método comprende además combinar el agente terapéutico primario, los extractos de manzana, uva, té verde y olivo con un concentrado de arándanos, un extracto de pimiento y un extracto de cúrcuma.

En una realización del método de elaboración de una composición terapéutica, el método comprende además combinar el agente terapéutico primario, el concentrado de arándanos y los extractos de manzana, uva, té verde, olivo, pimiento y cúrcuma con un extracto del fruto de mangostán.

En una realización del método de elaboración de una composición terapéutica, el método comprende además combinar el agente terapéutico primario, el concentrado de arándanos y los extractos de manzana, uva, té verde, olivo, pimiento y cúrcuma con un extracto de bergamota.

En una realización del método de elaboración de una composición terapéutica, el método comprende además combinar el agente terapéutico primario, el concentrado de arándanos y los extractos de manzana, uva, té verde, olivo, pimiento y cúrcuma con un extracto de pericarpio de mangostán.

En una realización del método de elaboración de una composición terapéutica, el método comprende además combinar el agente terapéutico primario, el concentrado de arándanos y los extractos de manzana, uva, té verde, olivo, pimiento y cúrcuma con extracto de pericarpio de mangostán y extracto de bergamota.

Las realizaciones de la presente divulgación se describirán con referencia a los siguientes ejemplos, que se proporcionan únicamente con fines ilustrativos y no deben utilizarse para limitar el alcance de la invención o interpretarla.

Ejemplos

Ejemplo 1

Un fitocomplejo de diez componentes ("PC10") muestra sinergia en la capacidad de absorbancia de radicales de oxígeno

Se prepara un fitocomplejo de 10 componentes (PC10) que muestra sinergia en su capacidad para absorber radicales de oxígeno usando el ensayo de capacidad de absorbancia de radicales de oxígeno (ORAC, por sus siglas en inglés) como se expone a continuación.

Productos químicos - Todos los productos químicos se compraron a proveedores de productos químicos convencionales(p. ej., Sigma, St. Louis, MO) y eran de la mayor pureza disponible comercialmente. Los reactivos utilizados incluyeron fosfato de potasio (k H2pO4) 75 mM (pH = 7,4); AAPH (dihidrocloruro de 2'2'-azobis (2-amidinopropano)) 0,64 M; Trolox (ácido 6-hidroxi-2,5,7,8-tetrametilcroman-2-carboxílico) 10 mM; fluoresceína patrón 4,4 x10-6 M, sal de sodio; y acetona/agua 1:1.

Materiales de PC10 - Se probaron diez muestras comerciales de extracto de fruto de manzana (R11309), extracto de fruto de bergamota (R 13216), concentrado de fruto de arándanos (R10990), fruto de pimiento (R11505), extracto de semilla de uva (R13545), extracto de piel de uva (R13555), extracto de hoja de té verde (R13568), extracto de pericarpio de mangostán (R26699), extracto de hoja de olivo (R15020) y extracto de raíz y rizoma de cúrcuma (R17065) de forma individual y en diversas combinaciones para determinar su actividad de eliminación de radicales de oxígeno.

Preparación de muestras - Las muestras se trituraron hasta obtener un polvo fino y se mezclaron completamente. Se transfirieron cincuenta mg (con una precisión de 0,1 mg) de muestra a un tubo de centrífuga de 35 ml y se mezclaron con 25 ml de solución de extracción de acetona/agua (50:50, v/v). A continuación, las muestras se sometieron a ultrasonidos durante 60 min (agitadas de 20 a 40 min) y se centrifugaron a 3,5 K rpm durante 10 min.

El material de PC10 se formuló combinando extracto de manzana, extracto de fruto de bergamota, concentrado de fruto de arándano, fruto de pimiento, extracto de semilla de uva, extracto de piel de uva, extracto de hoja de té verde, extracto de pericarpio de mangostán, extracto de hoja de olivo y extracto de raíz y rizoma de cúrcuma en una serie de relaciones que comienzan con 1:1:1:1:1:1:1:1:1 y aumentan o disminuyen la cantidad relativa de un componente según la actividad de ORAC y el coste del ingrediente.

Metodología de ensayo - Las cubetas para blanco, patrón y muestras se colocaron en baño seco a 28 ± 1 °C. y se añadieron 100 pl de fluoresceína 8,8 x 10-8 M y 2,50 ml de tampón en cada cubeta y se añadieron 50 pl de tampón para el blanco. Se añadieron cincuenta pl de solución de muestra a la cubeta de muestra. Las cubetas se taparon y se mezclaron brevemente. Las cubetas se colocaron en el soporte de un espectrofluorofotómetro RF-150 y la fluorescencia inicial se registró como f0. Se añadieron cien pl de AAPH a cada cubeta en el momento t = 0. La cubeta se tapó y se agitó con formación de vórtice brevemente. Se midió la fluorescencia (UFR) a intervalos de cinco minutos hasta que cesó la caída de la fluorescencia o el valor de la fluorescencia fue < 5 % de la lectura de fluorescencia inicial. Las UFR se registraron como f1, f2, etc. La disminución de la fluorescencia se completó en 60 min.

Cálculos - La media de la concentración inhibitoria (CI⁵⁰) para la actividad de eliminación de radicales de oxígeno en este ejemplo se calculó interpolando la concentración necesaria para la inhibición de la disminución de la fluorescencia en un 50 por ciento en 20 minutos. A continuación, se cuantificó la sinergia de los componentes de la prueba utilizando el parámetro del índice de combinación (IC). Este parámetro define solamente el efecto aditivo en lugar de sinergismo o antagonismo. La sinergia, sin embargo, se definió como un efecto aditivo superior al esperado (IC > 1) y el antagonismo como un efecto aditivo inferior al esperado (CI < 1) como se describe a continuación.

Las medias de las concentraciones inhibitorias esperadas de cualquier combinación de múltiples componentes se estimaron utilizando la relación:

[1/Cl50esperada] = [Fa/CI50A] [Fb/CIsce] ... [Fn/CI50N] y Fa Fb ... Fn = 1

donde Fa = fracción molar del componente A en la combinación y Fn = fracción molar de la combinación del componente no y CI⁵⁰A = la CI⁵⁰ observada del componente A. El IC se calculó de esta manera, IC = [CI⁵⁰ esperada]/[CI50 observada]. Usando la denominación de IC = 1 como efecto aditivo, para compuestos mutuamente excluyentes que tienen el mismo modo de acción o para fármacos mutuamente no excluyentes que tienen modos de acción totalmente independientes, se definen las siguientes relaciones: IC <1, = 1 y > 1 indica antagonismo, aditividad y sinergia, respectivamente.

Resultados - Como se observa en la Tabla 1, la CI⁵⁰ observada del fitocomplejo de diez componentes fue 18,6 mg/l, mientras que el valor calculado de CI ⁵⁰ esperada fue 26,5 mg/l dando como resultado un IC = 1,43. Este nivel de diferencia fue inesperado y constituye un hallazgo novedoso, hallazgo inesperado de la actividad de eliminación de radicales de oxígeno de la formulación PC 10.

Tabla 1: Determinación del índice de combinación para la capacidad de absorbancia de radicales de oxígeno de un

Conclusión -El fitocomplejo de diez componentes (PC10) en las proporciones de aproximadamente 6:50:1:1:1:3:1:1:6 mostró un aumento inesperado de 1,42 veces la actividad de eliminación de radicales de oxígeno en relación con la suma de sus componentes individuales.

Ejemplo 2

Un fitocomplejo de ocho componentes muestra sinergia en la capacidad de absorbancia de radicales de oxígeno

Se prepara un fitocomplejo de nueve componentes en relación con la suma de las contribuciones esperadas de sus componentes en el ensayo ORAC convencional como expone a continuación.

Productos químicos - Todos los productos químicos usados en este ejemplo fueron los descritos previamente en el Ejemplo 1.

Materiales de PC8 - Con la exclusión de bergamota y pericarpio de mangostán, los materiales de prueba usados en este ejemplo incluyeron los descritos previamente para el Ejemplo 1.

Metodología de ensayo - La metodología fue generalmente como se describe en el Ejemplo 1 con la excepción de que los ensayos se realizaron en un fluorímetro de microplacas de 96 pocillos a una longitud de onda de 493 nm (excitación)/520 nm (emisión) cada 2 minutos durante 20 minutos.

Cálculos - La media de la concentración inhibitoria (IC50) para la actividad de eliminación de radicales de oxígeno se calculó utilizando CalcuSyn (BIOSOFT, Ferguson, MO). Este paquete estadístico realiza múltiples cálculos de dosisefecto de fármacos utilizando los métodos de efecto medio descritos por TC Chou y P. Talaly [(1984) Quantitative analysis of dose-effect relationships: the combined effects of multiple drugs or enzyme inhibitors. Adv Enzyme Regul 22, 27-55.]

Brevemente, el análisis correlaciona la "Dosis" y el "Efecto" de la forma más simple posible: fa/fu = (C/Cm)m, donde C es la concentración o dosis del compuesto y Cm es la dosis media eficaz que significa la potencia. Cm se determina a partir de la intersección con el eje x del gráfico de efecto medio. La fracción afectada por la concentración del material de ensayo es fa y la fracción no afectada por la concentración es fu (fu = 1 - fa). El exponente m es el parámetro que significa la sigmoidicidad o forma de la curva dosis-efecto; se estima mediante la pendiente de la gráfica de efecto medio.

La gráfica de efecto medio es una gráfica de x = log(C) vs y = log(fa/fu) y se basa en la forma logarítmica de la ecuación de efecto medio de Chou. La bondad de ajuste de los datos a la ecuación de efecto medio se representa mediante el coeficiente de correlación lineal r de la gráfica de efecto medio. Habitualmente, los datos experimentales de los sistemas de enzimas o receptores tienen una r > 0,96, a partir de cultivo de tejidos una r > 0,90 y de sistemas animales r > 0,85.

La sinergia de los componentes de prueba se cuantificó usando el parámetro de índice de combinación (IC) como se define en el Ejemplo 1.

Las medias de las concentraciones inhibitorias esperadas de cualquier combinación de múltiples componentes se estimaron utilizando la relación:

[1/CI50esperada] = [Fa/CI50A] [Fb/CIsce] ... [Fn/CI50N] y Fa Fb ... Fn = 1

donde Fa = fracción molar del componente A en la combinación y Fn = fracción molar de la combinación del componente no y CI⁵⁰A = la CI⁵⁰ observada del componente A. El IC se calculó de esta manera, IC = [CI⁵⁰ esperada]/[Cl50 observada].

Usando la denominación de IC = 1 como efecto aditivo, obtenemos para compuestos mutuamente excluyentes que tienen el mismo modo de acción o para fármacos mutuamente no excluyentes que tienen modos de acción totalmente independientes las siguientes relaciones: IC < 1, = 1, y> 1 indica antagonismo, aditividad y sinergia, respectivamente.

Resultados - La concentración inhibitoria media (CI⁵⁰) de PC8 fue 0,0350 pg/ml, mientras que la CI ⁵⁰ esperada calculada fue 0,0436 pg/l dando como resultado un IC = 1,31. Por lo tanto, el PC8 produjo sinérgicamente 1,3 veces la actividad de eliminación de radicales de oxígeno de lo esperado a partir de la suma de la actividad de sus componentes.

Tabla 2:

fi m l h m n n P

continuación

Conclusión - Con IC = 1,31, PC8 produjo inesperadamente 1,31 veces la actividad de eliminación de radicales de oxígeno de lo esperado a partir de la suma de sus componentes.

Ejemplo 3

Un fitocomplejo de nueve componentes que contiene fruto de mangostán ("PC9f') muestra sinergia en la capacidad de absorbancia de radicales de oxígeno

Se prepara un fitocomplejo de nueve componentes en relación con la suma de las contribuciones esperadas de sus componentes correspondientes en el ensayo ORAC convencional como expone a continuación.

Todos los productos químicos, métodos y cálculos se realizaron como se describe en el Ejemplo 2.

Material de PC9f - El material de prueba utilizado en este ejemplo contenía los ingredientes y las cantidades correspondientes enumerados en la Tabla 3.

Resultados - La CI⁵⁰ de PC9f fue 0,0410 pg/ml, mientras que la CI⁵⁰ esperada calculada fue 0,0049 pg/l dando como resultado un IC = 1,20. Por lo tanto, el PC9f produjo sinérgicamente 1,20 veces la actividad de eliminación de radicales de oxígeno de lo esperado a partir de la actividad de la suma de sus componentes.

Tabla 3: Determinación del índice de combinación para la capacidad de absorbancia de radicales de oxígeno de un fi m l n m n n n i n fr m n n P f

Conclusión - Con IC = 1,20, PC9f produjo inesperadamente 1,2 veces la actividad de eliminación de radicales de oxígeno de lo esperado a partir de la suma de sus componentes.

Ejemplo 4

Un fitocomplejo de ocho componentes (PC8) muestra sinergia en la desactivación de radicales libres

Se prepara un fitocomplejo de ocho componentes en relación con la suma de las contribuciones esperadas de sus componentes para eliminar los radicales libres como se expone a continuación.

Metodología - Se usó el ensayo con 2,2-difenil-1 -picrilhidrazilo (DPPH) para evaluar la eliminación de radicales libres por los materiales de prueba. Este ensayo se basa en la teoría de que un donante de hidrógeno es un antioxidante. El ensayo mide compuestos que son eliminadores de radicales. El DPPH* estable de radicales libres acepta hidrógeno de un antioxidante. El efecto antioxidante es proporcional a la desaparición de DPPH' en muestras de prueba. El procedimiento descrito por Dudonne se utilizó con la modificación de que el ensayo se realizó en placas de microtitulación de 96 pocillos [Dudonne, S., Vitrac, X., Coutiere, P., Woillez, M. y Merillon, J. M. (2009) Comparative Study of Antioxidant Properties and Total Phenolic Content of 30 Plant Extracts of industrial Interest ilsing DPPH, ABTS, FRAP, SOD, and ORAC Assays, J Agrie Food Chem 57, 1768-1774].

Material de PC8 - El material de prueba utilizado en este estudio era como se describe en el ejemplo 2 y en las tablas 2 y 4.

Cálculos - Los cálculos se realizaron como se describe en el Ejemplo 2.

Resultados - La concentración inhibitoria media (CI⁵⁰) de PC8 fue 15,6 pg/ml, mientras que la Ci ⁵⁰ esperada calculada fue 17,9 pg/l dando como resultado un IC = 1,15. Por lo tanto, PC8 produjo sinérgicamente 1,2 veces la actividad de desactivación de radicales libres que la de la suma de sus componentes.

Tabla 4: Determinación del índice de combinación para la capacidad de desactivación de radicales libres de un fi m l h m n n P

Conclusión - Con IC = 1,15, PC8 produjo inesperadamente 1,2 veces la actividad de desactivación de radicales libres que la de la suma de sus componentes.

Ejemplo 5

Un fitocomplejo de nueve componentes que contiene fruto de mangostán ("PC9f") muestra sinergia en la desactivación de radicales libres

Se prepara un fitocomplejo de nueve componentes en relación con la contribución esperada de sus componentes para eliminar los radicales libres como se expone a continuación.

Todos los productos químicos y cálculos fueron como se describe en el ejemplo 2 y los Métodos fueron como se presentó previamente en el ejemplo 4.

Material de PC9f - el material de prueba utilizado en este ejemplo contenía los ingredientes y las cantidades correspondientes enumerados en las tablas 3 y 5.

Resultados - La CI⁵⁰ de PC9f fue 16,2 pg/ml, mientras que la CI ⁵⁰ calculada, esperada fue 18,8 pg/l dando como resultado un IC = 1,16. Por lo tanto, el PC9f produjo sinérgicamente 1,8 veces la actividad de eliminación de radicales de oxígeno de lo esperado a partir de la actividad de la suma de sus componentes.

Tabla 5: Determinación del índice de combinación para la capacidad de desactivación de radicales libres de un

Conclusión - Con IC = 1,16, PC9f produjo inesperadamente 1,2 veces la actividad de eliminación de radicales de oxígeno de lo esperado a partir de la suma de sus componentes.

Ejemplo 6

Un fitocomplejo de nueve componentes que contiene pericarpio de mangostán ("PC9p") muestra sinergia en la desactivación de radicales libres

Se prepara un fitocomplejo de nueve componentes en relación con la contribución esperada de sus componentes para eliminar los radicales libres como se expone a continuación.

Los productos químicos y métodos fueron como se presenta previamente en el ejemplo 4, mientras que los cálculos fueron como se describe en el ejemplo 2.

Material de PC9p - el material de prueba utilizado en este ejemplo contenía los ingredientes y las cantidades correspondientes descritos en la Tabla 6.

Tabla 6: Determinación del índice de combinación para la capacidad de desactivación de radicales libres de un

Resultados - La CI⁵⁰ de PC9p fue 013,4 pg/ml, mientras que la CI ⁵⁰ esperada calculada fue 18,2 pg/l dando como resultado un IC = 1,36. Por lo tanto, el PC9p produjo sinérgicamente 1,4 veces la actividad de desactivación de radicales libres de lo esperado a partir de la actividad de la suma de sus componentes.

Conclusión - Con IC = 1,36, PC9p produjo inesperadamente 1,4 veces la actividad de desactivación de radicales libres que la de la suma de sus componentes.

Ejemplo 7

Un fitocomplejo de nueve componentes ("PC9b") muestra sinergia en la capacidad de eliminación de peroxinitrito (ONOQ-)

El potencial de sinergia de un fitocomplejo de nueve componentes en relación con la suma de las contribuciones esperadas de sus componentes en la eliminación de peroxinitrito se prepara como se expone a continuación.

Metodología - La capacidad de eliminación de peroxinitrito (ONOO-) se midió de acuerdo con el procedimiento descrito por Kim et al. [Kim, J. Y., Kim, H. S., Kang, H. S., Choi, J. S., Yokozawa, T. y Chung, H. Y. (2008) Antioxidant potential of dimethyl lithospermate isolated from Salvia miltiorrhiza (red sage) against peroxynitrite, J Med Food 11, 21-28] con la modificación de que los ensayos se realizaron en placas de microtitulación de 96 pocillos en lugar de en cubetas. Los Cálculos fueron como se describe en el ejemplo 2.

Material de PC9b - Además del extracto de bergamota como se describe en el ejemplo 1, el material de prueba restante usado en este estudio fue como se describe en el ejemplo 2 y en las tablas 2 y 4 como PC8.

La CI⁵⁰ de PC9b fue 0,974 pg/ml, mientras que la CI ⁵⁰ esperada calculada fue 1,67 pg/l dando como resultado un IC = 1,71. Por lo tanto, PC9b produjo sinérgicamente 1,7 veces la capacidad de eliminación de peroxinitrito de lo esperado a partir de la suma de sus componentes.

Tabla 7: Determinación del índice de combinación para la capacidad de eliminación de peroxinitrito (ONOO-) de un fi m l n m n n P n i n r m

continuación

Conclusión - Con IC = 1,71, PC9b produjo inesperadamente 1,7 veces la capacidad de eliminación de peroxinitrito de lo esperado a partir de la suma de sus componentes.

Ejemplo 8

Un fitocomplejo de nueve componentes ("PC9f') muestra sinergia en la capacidad de eliminación de peroxinitrito (ONOO-)

Se evaluó el potencial de sinergia de un fitocomplejo de nueve componentes nuevo que contiene fruto de mangostán en relación con la suma de las contribuciones esperadas de sus componentes en la eliminación de peroxinitrito.

Metodología - Los métodos y cálculos fueron los descritos anteriormente en el ejemplo 7, mientras que los cálculos fueron como se describe en el ejemplo 2.

Material PC9f - PC9f y los componentes descritos en el Ejemplo 3 y las Tablas 3 y 8 fueron los materiales de prueba en este ejemplo. La CI⁵⁰ de PC9f fue 0,486 pg/ml, mientras que la CI ⁵⁰ esperada calculada fue 0,777 pg/l dando como resultado un IC = 1,60. Por lo tanto, PC9f produjo sinérgicamente 1,6 veces la capacidad de eliminación de peroxinitrito de lo esperado a partir de la suma de sus componentes.

Tabla 8: Determinación del índice de combinación para la capacidad de eliminación de peroxinitrito (ONOO-) de un _________________ fitocomplejo de nueve componentes (PC9f)______ ________________________ Material de pr servada /ml Cantidad relativa F Fn I50] [pg/ml]-1 Fruto de manzana ! 0,875 0,286 0,326 fruto de arándano* 35,7 0,0476 0,001

Fruto de pimiento! 31,0 0,0476 0,002 Semilla de uva! 0,472 0,0476 0,101 Piel de uva! 3,11 0,0476 0,015 Hoja de té verde! 0,185 0,143 0,773

Fruto de mangostá 68,3 0,0476 0,001

Hoja de olivo! 1,17 0,0476 0,041

Raíz y rizoma de c

10,3

0,286

0,028 Fitocomplejo (PC9f) 0,486 1,000 1,29

! extracto/* concentrado/** El fitocomplejo PC9f contiene cantidades relativas [F] de cada uno de los nueve materiales de prueba; CI⁵⁰ esperada para PC9f = 1/[1,29] = 0,777 pg/ml.

Conclusión - Con IC = 1,60, PC9f produjo inesperadamente 1,6 veces la capacidad de eliminación de peroxinitrito de lo esperado a partir de la suma de sus componentes.

Ejemplo 9

Un fitocomplejo de nueve componentes (PC9f) más bergamota muestra sinergia en la capacidad de eliminación de peroxinitrito (ONOO-)

Se evaluó el potencial de sinergia de un fitocomplejo de nueve componentes nuevo que contiene fruto de mangostán y bergamota en relación con la suma de las contribuciones esperadas de sus componentes en la eliminación de peroxinitrito.

Metodología - Los métodos y cálculos fueron los descritos anteriormente en los ejemplos 7 y 2, respectivamente.

Material de Pc9f más bergamota - PC9f y los componentes como se describe en el ejemplo 3 y en las tablas 3 y 9 fueron los materiales de prueba en este ejemplo junto con el extracto de bergamota como se describe en el ejemplo 1. La CI⁵⁰ de PC9f más extracto de fruto de bergamota fue 0,556 pg/ml, mientras que la CI ⁵⁰ esperada calculada fue 1,69 |jg/l dando como resultado un IC = 3,04. Por lo tanto, PC9f más extracto de fruto de bergamota produjeron de forma sinérgica 3,0 veces la capacidad de eliminación de peroxinitrito de lo esperado a partir de la suma de sus componentes.

Tabla 9: Determinación del índice de combinación de la capacidad de eliminar peroxinitrito (ONOO-) de un fi m l n m n n P f m x r fr r m

Conclusión - Con IC = 3,04, el PC9f extracto de fruto de bergamota produjo inesperadamente 3,0 veces la capacidad de eliminación de peroxinitrito de lo esperado a partir de la suma de sus componentes

Ejemplo 10

Un fitocomplejo de nueve componentes (PC9p) muestra sinergia en la capacidad de eliminación de peroxinitrito (ONOO-)

Se evaluó el potencial de sinergia de un fitocomplejo de nueve componentes nuevo que contiene pericarpio de mangostán (PC9p) en relación con la suma de las contribuciones esperadas de sus componentes en la eliminación de peroxinitrito.

Metodología - Los métodos y cálculos fueron los descritos anteriormente en los ejemplos 7 y 2, respectivamente.

Material de PC9p - El PC9p y los componentes descritos en la tabla 10 fueron los materiales de prueba en este ejemplo. La CI⁵⁰ de PC0p fue 0,523 jg/ml, mientras que la CI ⁵⁰ esperada calculada fue 0,768 jg /l dando como resultado un IC = 1,47. Por lo tanto, PC9p produjo sinérgicamente 1,5 veces la capacidad de eliminación de peroxinitrito de lo esperado a partir de la suma de sus componentes.

Tabla 10: Determinación del índice de combinación para la capacidad de eliminación de peroxinitrito (ONOO) de un _________________ fitocomplejo de nueve componentes (PC9p)______________________________ Material de pr servada /ml Cantidad relativa [F] Fn/[CI50] [jg/m l]-1 Fruto de manzana ! 0,875 0,286 0,326 fruto de arándano* 35,7 0,048 0,00133 Fruto de pimiento! 31,0 0,048 0,00154 Semilla de uva! 0,472 0,048 0,101

Piel de uva! 3,11 0,048 0,0153 Hoja de té verde! 0,185 0,143 0,773 Pericarpio de man 3,26 0,048 0,0146 Hoja de olivo! 1,17 0,048 0,0408 Raíz y rizoma de c

10,3

0,286

0,0278 Fitocomplejo (PC9p) 0,523 1,00 1,30

! extracto/* concentrado/** El fitocomplejo PC9p bergamota contiene cantidades relativas [F] de cada uno de los nueve materiales de prueba ; CI⁵⁰ esperada para PC9p bergamota = 1/[1,30] = 0,768 jg/ml.

Conclusión - Con IC = 1,47, PC9p produjo inesperadamente 1,5 veces la capacidad de eliminación de peroxinitrito de lo esperado a partir de la suma de sus componentes.

Ejemplo 11

Un fitocomplejo de diez componentes (PC10) muestra sinergia en la capacidad de eliminación de peroxinitrito (ONOO) Se evaluó el potencial de sinergia de un fitocomplejo de diez componentes (PC10) nuevo en relación con la suma de las contribuciones esperadas de sus componentes en la eliminación de peroxinitrito.

Metodología - Los métodos y cálculos fueron los descritos anteriormente en los ejemplos 7 y 2, respectivamente. Material de PC10 - PC10 y los componentes descritos en el ejemplo 1 y en la Tabla 1 fueron los materiales de prueba en este ejemplo.

Conclusión - La CI⁵⁰ de PC 10 fue 1,02 pg/ml, mientras que la CI ⁵⁰ esperada calculada fue 1,68 pg/l dando como resultado un IC = 1,64. Por lo tanto, PC10 produjo sinérgicamente 1,6 veces la capacidad de eliminación de peroxinitrito de lo esperado a partir de la suma de sus componentes.

Tabla 11: Determinación del índice de combinación para la capacidad de eliminación de peroxinitrito (ONOO-) de un

Conclusión - Con IC = 1,64, PC10 produjo inesperadamente 1,6 veces la capacidad de eliminación de peroxinitrito de lo esperado a partir de la suma de sus componentes

Ejemplo 12

Dos formulaciones de un fitocomplejo de cuatro componentes (PC4) muestran sinergia en la capacidad de eliminación de peroxinitrito (ONOO-)

Se evaluó el potencial de sinergia de un fitocomplejo de cuatro componentes (PC4) nuevo en relación con la suma de las contribuciones esperadas de sus componentes en la eliminación de peroxinitrito cuando se probó en dos formulaciones.

Metodología - Los métodos y cálculos fueron los descritos anteriormente en los ejemplos 7 y 2, respectivamente. Material de PC4 - PC4 consistía en los componentes enumerados en las tablas 12 y 13 y como se describe en el ejemplo 1. Las cantidades correspondientes de los cuatro componentes individuales fueron 1:1:1:1 = PC4.1 (Tabla 13) y 6:3:1:1 = PC4.2.

Conclusión - La CI⁵⁰ de PC4.1 fue 0,216 pg/ml, mientras que la CI ⁵⁰ esperada calculada fue 0,420 pg/l dando como resultado un IC = 1,95. Por lo tanto, PC4.1 produjo sinérgicamente 2,0 veces la capacidad de eliminación de peroxinitrito de lo esperado a partir de la suma de sus componentes.

Tabla 12: Determinación del índice de combinación para la capacidad de eliminación de peroxinitrito (ONOO-) de un

Conclusión - Con IC = 1,95, PC4.1 produjo inesperadamente 2,0 veces la capacidad de eliminación de peroxinitrito de lo esperado a partir de la suma de sus componentes

Tabla 13: Determinación del índice de combinación para la capacidad de eliminación de peroxinitrito (ONOO-) de un fi m l r m n n P 42

Resultados - La CI⁵⁰ de PC4.2 fue 0,201 pg/ml, mientras que la CI ⁵⁰ esperada calculada fue 0,422 pg/l dando como resultado un IC = 2,10. Por lo tanto, PC4.2 produjo sinérgicamente 2,0 veces la capacidad de eliminación de peroxinitrito de lo esperado a partir de la suma de sus componentes.

Conclusión - Con IC = 2,10, PC4.2 produjo inesperadamente 2,0 veces la capacidad de eliminación de peroxinitrito de lo esperado a partir de la suma de sus componentes

Ejemplo 13

Interacciones sinérgicas de PC9p y bergamota (PC10) en 295 proteínas cinasas

Las proteínas cinasas representan una clase de enzimas transferasas que pueden transferir un grupo fosfato de una molécula donante (generalmente ATP) a un resto de aminoácido de una proteína (generalmente treonina, serina o tirosina). Las cinasas se utilizan en la transducción de señales para la regulación de enzimas, es decir, pueden inhibir o activar la actividad de una enzima, tal como en la biosíntesis de colesterol, transformaciones de aminoácidos o recambio de glucógeno. Si bien la mayoría de las cinasas están especializadas en un solo tipo de resto de aminoácido, algunas cinasas muestran una actividad dual porque pueden fosforilar dos tipos diferentes de aminoácidos.

Métodos - El efecto inhibidor del PC9p, bergamota y la combinación de PC9p y bergamota (la formulación de PC10) se probaron individualmente sobre la actividad cinasa humana en un grupo de 295 cinasas en el ensayo KinaseProfiler™ (Millipore UK Ltd. Dundee, Reino Unido). Los protocolos de ensayo para las cinasas específicas enumeradas en la tabla 14 se resumen en http://www.millipore.com/techpublications/techl/pf3036.

Se determinaron las concentraciones inhibitorias medias (CI⁵⁰) para el PC9p, bergamota y PC10 por interpolación simple cuando se observó una dosis-respuesta en las tres concentraciones que capturaron la concentración eficaz media. La CI⁵⁰ estimada para la formulación de PC10 se calculó como se describe en el ejemplo 2 usando las CI⁵⁰ observadas para PC9p y PC10 en una relación de 3:7.

A continuación, se cuantificó la sinergia de los componentes de la prueba utilizando el parámetro del índice de combinación (IC). Este parámetro define solamente el efecto aditivo en lugar de sinergismo o antagonismo. La sinergia, sin embargo, se definió como un efecto aditivo superior al esperado (IC > 1) y el antagonismo como un efecto aditivo inferior al esperado (CI < 1) como se describe a continuación.

Las medias de las concentraciones inhibitorias esperadas de cualquier combinación de múltiples componentes se estimaron utilizando la relación:

[1 /CI⁵⁰ esperada] = [0,3/CI50PC9p] [0,7/CI50Bergamota]

El IC se calculó entonces de la siguiente manera, IC = [CI⁵⁰ esperada]/[CI50 observada]. Usando la denominación de IC = 1 como efecto aditivo, para compuestos mutuamente excluyentes que tienen el mismo modo de acción o para fármacos mutuamente no excluyentes que tienen modos de acción totalmente independientes, se definen las siguientes relaciones: IC <1, = 1, y > 1 indica antagonismo, aditividad y sinergia respectivamente. En estos estudios, los CI > 1,10 se consideraron evidencia de sinergia entre las formulaciones.

T l 14 Ín i m in i n r l in r i n P f B r m P 1 n 2 in

continuación

continuación

continuación

continuación

continuación

continuación

Las cinasas identificadas anteriormente pueden modularse todas mediante la composición moduladora de proteínas cinasas proporcionada en el presente documento.

Los siguientes párrafos resumen brevemente el funcionamiento celular de las cinasas más afectadas por la interacción sinérgica de los materiales, como lo demuestra el IC > 1,05. La agrupación se proporciona únicamente para subrayar las vías de señalización primarias en las que funciona la cinasa y no pretende ser exhaustiva.

PC10 modula drásticamente y sinérgicamente la señalización de cinasas de Abl, ACK1, ALK, Aurora, AMPK, CaMKII, EGFR, EphA, FAK, FGFR, GSK3, IGF-1 (activado), IKK, IR, MAPK1, Met, MTOR, NEK1/2/6, PAK1/4/5/6, PDGFR, PI3K, PKC, ROCKI/II, RSK1/2/34, SRC y Syk que implican la estimulación de la oxidación de ácidos grasos del músculo esquelético y captación de glucosa del músculo, oxidación de ácidos grasos hepáticos y cetogénesis, inhibición de la síntesis de colesterol, lipogénesis y síntesis de triglicéridos, inhibición de la lipólisis y lipogénesis de los adipocitos y modulación de la secreción de insulina por las células beta pancreáticas.

Curiosamente, varias cinasas implicadas en el metabolismo de la glucosa se vieron afectadas sinérgicamente por la formulación de PC10, incluidas las cinasa PI3 y MET, así como el propio receptor de insulina (IR). También se inhibieron sinérgicamente ambas isoformas de AMPK por la formulación de PC 10.

PC10 inhibió sinérgicamente las siete cinasas MET. En adultos, MET participa en la cicatrización de heridas y en la regeneración de órganos, en la remodelación de tejidos y en determinados aspectos del desarrollo del cerebro. La vía de MET también regula la respuesta inmunitaria y el desarrollo y reparación del tracto gastrointestinal.

MET es un receptor tirosina cinasa que transduce señales de la matriz extracelular al citoplasma uniéndose al factor de crecimiento de hepatocitos/ligando de HGF. Regula muchos procesos fisiológicos, incluida la proliferación, dispersión, morfogénesis y supervivencia. La unión del ligando en la superficie celular induce la autofosforilación de MET en su dominio intracelular que proporciona sitios de acoplamiento para moléculas de señalización posteriores. Después de la activación por ligando, interactúa con la subunidad de la cinasa PI3 PIK3R1, PLCG1, SRC, GRB2, STAT3 o el adaptador Ga B1.

Las tres Aurora cinasas se inhibieron sinérgicamente por PC10. La mayoría de las células cancerosas humanas se caracterizan por cambios en la cantidad u organización del ADN que dan como resultado la inestabilidad cromosómica y aneuploidía. Varias cinasas mitóticas, Aurora cinasas entre otras, regulan la progresión de la célula a través de la mitosis. Hasta ahora se han identificado tres Aurora cinasas en el ser humano: Aurora-A, Aurora-B y Aurora-C. Las Aurora cinasas se identificaron recientemente como una posible diana en la terapia contra el cáncer, y se están desarrollando varios inhibidores de las cinasas Aurora-A y Aurora-B [Kitzen, J. J., de Jonge, M. J., y Verweij, J. (2010) Aurora kinase inhibitors, Crit Rev Oncol Hematol 73, 99-110]. En células cancerosas, la sobreexpresión de estas enzimas provoca una distribución desigual de la información genética, creando células aneuploides, un sello distintivo del cáncer.

Cuatro de las seis isoformas de Abl se inhibieron sinérgicamente por PC10. Abl es una proteína tirosina cinasa no receptora que desempeña un papel en muchos procesos clave relacionados con el crecimiento y la supervivencia celular, tal como la remodelación del citoesqueleto en respuesta a estímulos extracelulares, motilidad y adhesión celular, endocitosis de receptores, autofagia, respuesta al daño del ADN y apoptosis.

Ejemplo 14

Evaluación clínica de PC 10 en sujetos normales y prediabéticos

La seguridad y la eficacia clínicas de la fórmula PC10, anterior se estudió en un ensayo clínico observacional sin enmascaramiento. La población de estudio incluyó hombres y mujeres entre las edades de 18 a 72 años inclusive que mostraban las siguientes variables lipídicas: triglicéridos séricos > 150 mg/dl y/o colesterol de lipoproteínas de baja densidad (calculado) en suero > 150 mg/dl. Durante el estudio de 12 semanas, los sujetos se asignaron a uno de los tres grupos para recibir, respectivamente, 500, 750 o 1000 mg de PC10 para tomar en 2, 3 o 4 cápsulas una vez al día con la cena.

Se indicó a los sujetos que mantuvieran sus estilos de vida actuales, incluida la dieta, ejercicio y prácticas mente cuerpo espíritu sin cambios durante la participación en el ensayo. También se les indicó a los sujetos que no hicieran cambios en su prescripción actual, medicamentos sin receta, alimentos para usos médicos o suplementos nutricionales durante el estudio.

Al mes, a los dos y a los tres meses, se extrajo sangre para su análisis, incluido el hemograma completo (CBC, por sus siglas en inglés), panel metabólico completo (CMP, por sus siglas en inglés), panel de lípidos en ayunas que incluye colesterol total, triglicéridos, HDLc, l Dlc, oxLDL, Mp O, PAI-1 y HbA1c.

Durante esta prueba de 12 semanas, no se indicaron eventos adversos relacionados con el PC10 en los grupos de 500, 750 o 1000 mg/día (N = 35). La eficacia se evaluó solamente para la posible formulación comercial de 500 mg de PC10 (n-11).

La tabla 15 resume los cambios (Inicial - 3 meses) en la media de las variables de lípidos en sujetos que consumieron 500 mg diarios de la formulación de PC10 durante tres meses. Se observaron cambios estadísticamente significativos en el colesterol total, relación colesterol total/HDL, LDL-c (calculado), Apo B y no HDL para el grupo de once. El cambio en el colesterol total del 7 % y el LDL-c (calculado) del 10 % se considera clínicamente significativo.

Adicionalmente, se realizó un análisis de subgrupos para sujetos con una HbAIC > 5,5 % (todos ellos resistentes a la insulina con puntuaciones HOMA superiores a 2). Se observaron cambios estadísticamente significativos en el colesterol total, relación colesterol total/HDL, LDL-c (calculado), Apo B, relación LDL-c (calculado)/HDL, oxLDL, relación oxLDL/HDL, no HDL, triglicéridos, relación TG/HDL e inhibidor del activador del plasminógeno-1 (PAI-1) en este grupo de ocho sujetos. El cambio en el colesterol total del 10 %, LDL-c (calculado) del 10 %, oxLDL del 19 %, TG del 27 % y PAI-1 del 37 % son clínicamente significativos y demuestran el amplio espectro de acción de la formulación de PC10.

Tabla 15: Cambios medios en los biomarcadores de lípidos en todos los sujetos y subconjuntos de sujetos con H Al l n m n m i ri l f rm l i n P 1 r n r m

De particular interés en ambos grupos fue el efecto de PC10 sobre los niveles de oxLDL, que es considerado por muchos como el factor de riesgo más importante para el desarrollo de aterosclerosis [Johnston, N., Jernberg, T., Lagerqvist, B., Siegbahn, A. y Wallentin, L. (2006) Improved identification of patients with coronary artery disease by the use of new lipid and lipoprotein biomarkers, Am J Cardiol 97, 640-645]. Para el grupo en general, hubo una reducción del 10 % que casi emplazó a los sujetos al finalizar en el grupo de bajo riesgo. El subgrupo comenzó el ensayo con riesgo moderado y había mejorado con una caída al grupo de bajo riesgo al finalizar. Esta reducción en un factor de riesgo importante para el desarrollo de enfermedad de las arterias coronarias ofrece una oportunidad adicional para promover un envejecimiento saludable. Los componentes antioxidantes de la fórmula funcionan para ayudar a reducir los niveles de oxLDL y promover un metabolismo saludable del colesterol para ofrecer protección al sistema de órganos.

Esta es la primera demostración clínica de una formulación que contiene oxLDL reductora de bergamota. Además, no se ha demostrado que los componentes restantes de frutos y hierbas de PC 10 reduzcan oxLDL en las dosis utilizadas en este estudio, una indicación más de la sinergia coordinada incorporada en el desarrollo de PC 10 y formulaciones relacionadas.

Ejemplo 15

Interacciones sinérgicas de PC8 y bergamota (PC10) en la inhibición de la oxidación de LDL ex vivo

Objetivo - El objetivo de este ejemplo es demostrar la interacción sinérgica entre varias formas del fitocomplejo y la bergamota en la inhibición de la oxidación de LDL ex vivo.

Método - Este método induce artificialmente la autooxidación del ácido linoleico o LDL por el Cu(II) o un iniciador azo, según lo indicado por Pryor y colaboradores [Pryor, W. A.; Cornicelli, J. A.; Devall, L. J.; Tait, B.; Trivedi, B. K.; Witiak, D. T.; Wu, M. A rapid screening test to determine the antioxidants potencies of natural and synthetic antioxidants. J. Org. Chem. 1993, 58, 3521-3532]. El progreso de la autooxidación se monitoriza mediante absorbancia UV a 234 nm.

Materiales - En este ejemplo se usan PC8, PC9f, PC9p y bergamota y sus composiciones son como se describen previamente en ejemplos anteriores.

Cálculos - Las concentraciones inhibitorias medias (CI⁵⁰) se calculan a partir de un mínimo de cuatro concentraciones que rodean uniformemente el efecto medio. El índice de combinación (IIC) se calcula como se describe anteriormente.

Conclusión - EL IC para PC8 más bergamota, PC9f más bergamota y PC9f más bergamota son todos superiores a 3,0, lo que indica un alto grado de sinergia en la prevención de la oxidación de LDL ex vivo. Estos resultados apoyan los hallazgos clínicos del ejemplo 14 y subrayan la novedad de la inhibición de LDL oxidado para las combinaciones.

Por lo tanto, entre las diversas formulaciones enseñadas, se han descrito nuevos métodos y composiciones de extractos de frutos y hierbas que mostraron actividad antioxidante sinérgica hacia diferentes oxidantes en varias configuraciones.

Ejemplo 16

Fitocomplejo (PC4) mediante la inhibición de la formación de peroxinitrito

Este ejemplo describe fórmulas para la potenciación de la función de formulaciones dirigidas a trastornos metabólicos asociados con el estrés oxidativo como se describe anteriormente con la adición de PC4.1 o PC4.2 que funcionan como inhibidores sinérgicos de la producción de ONOO‘ por macrófagos (véase la figura 2). En afecciones patológicas asociadas con un aumento del estrés oxidativo y la inflamación (infarto de miocardio, cardiopatía isquémica, miocarditis, cardiomiopatía, hipertensión, obesidad, intoxicación crónica, etc.), NO y superóxido (O²-) reaccionan para formar ONOO’ que induce daño celular a través de la peroxidación lipídica, inactivación de enzimas y otras proteínas por oxidación y nitración, y también activación de enzimas señalizadoras de estrés como metaloproteinasas de matriz y mieloperoxidasa entre otras. Dicha señalización de estrés da como resultado la atenuación de muchos productos originalmente diseñados para abordar estas afecciones

La administración de cantidades terapéuticas de PC4.1 o PC4.2 en combinación con formulaciones de productos específicas funcionaría para aliviar el estrés oxidativo y mejorar el rendimiento del producto. En las siguientes tablas se pueden encontrar ejemplos de formulaciones en las que PC4.1 o PC4.2 serían útiles para mejorar su rendimiento. Sin embargo, se observa que también se podrían usar las otras formulaciones mencionadas anteriormente como PC8, PC9 y PC10 en algunas realizaciones.

continuación

T l 1 F rm l i n P 41 n r inin r ni r l r i n xi níri

Ácido fólico [10 %, trituración]______________________________|_______________ 3

continuación

T l 1 F rm l i n P 42 n fi r l

Tabla

T l 21 F rm l i n P 42 r n in xi i n ni

L-Glutamina

150

continuación

T l 22 F rm l i n P 42 r n in xi i n ni

T l 2 F rm l i n m li i míni P 42 r n i i ni xi n ni

Niacinamida [97 %, granulado fino]______________________ |_____________ 18

continuación

T l 24 F rm l P 42 r m l z mi r l i i r i ni

Extracto de fruto de manzana [75% de polifenolesl_____________________|_______________ 30

continuación

Tabla 26: a

Tabla 27: Formulación de PC4.2 con gel suave de aceite de pescado para una actividad de reducción de lípidos

Claims (15)

REIVINDICACIONES

1. Una composición moduladora del estrés oxidativo que comprende:

una cantidad de una combinación de extracto de manzana, extracto de uva, extracto de té verde y extracto de olivo que proporciona una actividad antioxidante combinada mayor que la proporcionada por la suma de las actividades antioxidantes individuales de los componentes individuales de la combinación.

2. La composición de la reivindicación 1,

i) en donde el extracto de manzana comprende un extracto de una especie Malus pumila;

o

ii) en donde el extracto de uva comprende un extracto de una especie Vitis vinifera;

o

iii) en donde el extracto de té verde comprende un extracto de hojas de una especie Camellia sinensis;

o

iv) en donde el extracto de olivo comprende un extracto de una subespecie Olea europea europaea.

3. La composición de la reivindicación 1,

i) en donde al menos uno de los extractos en la composición está presente en una cantidad diferente a la cantidad de al menos un extracto diferente;

o

ii) en donde los extractos de manzana, uva, té verde y olivo están presentes en la composición en una relación en peso de aproximadamente 1:1:1:1;

o

ii) en donde los extractos de manzana, uva, té verde y olivo están presentes en la composición en una relación en peso de aproximadamente 6:1:3:1.

4. La composición de la reivindicación 1, en donde los extractos de manzana, uva, té verde y olivo comprenden hojas, piel, corteza, pulpa, zumo, semillas o combinaciones de los mismos.

5. La composición de la reivindicación 1, que comprende además al menos un agente terapéutico primario o secundario; en particular en donde

i) el al menos un agente terapéutico primario o secundario comprende un miembro seleccionado del grupo que consiste en bergamota, mangostán, berberina, arginina, citrulina, glutamina, zinc, remolacha, loclo, proteína, curcumina, fitoesteroles, aceite de pescado, CoQ10, vitaminas, fibra, inulina y combinaciones de los mismos, o

ii) en donde el al menos un agente terapéutico primario o secundario comprende bergamota, mangostán o berberina.

6. La composición de la reivindicación 1, en donde la composición comprende adicionalmente un transportador farmacéuticamente aceptable.

7. La composición de la reivindicación 1, en donde la composición es una formulación de dosificación oral, particularmente en donde la forma de dosificación oral comprende una cápsula, un comprimido, un polvo, una bebida, un jarabe, una suspensión o un alimento.

8. La composición de la reivindicación 1,

i) en donde la actividad antioxidante modula patologías y trastornos metabólicos relacionados con el estrés, o

ii) en donde la actividad antioxidante modula el LDL oxidado.

9. La composición de la reivindicación 1, que comprende además concentrado de arándanos, extracto de pimiento y extracto de cúrcuma.

10. La composición de la reivindicación 9,

i) en donde el concentrado de arándanos comprende Vaccinium angustifolium, el extracto de pimiento comprende Capsicum annuum y el extracto de cúrcuma comprende Curcuma longa;

o

ii) en donde la composición comprende además extracto de fruto de mangostán,

particularmente en donde la composición comprende más de 1,5 veces la actividad antioxidante de una cantidad equivalente de cualquier extracto o concentrado o una suma de los extractos y concentrado;

o

iii) en donde la composición comprende además extracto de bergamota,

particularmente en donde el extracto de bergamota comprende Citrus bergamia Risso,

especialmente en donde la composición comprende más de 1,5 veces la actividad antioxidante de una cantidad equivalente de cualquier extracto o concentrado o una suma de los extractos y concentrado;

o

iv) en donde la composición comprende además un extracto de pericarpio de mangostán,

particularmente en donde la composición comprende más de 1,25 veces la actividad antioxidante de una cantidad equivalente de cualquier extracto o concentrado o una suma de los extractos y concentrado;

o

v) en donde la composición comprende además extracto de pericarpio de mangostán y extracto de bergamota.

11. La composición de cualquiera de las reivindicaciones 1 a 10, en donde la composición comprende más de 1,5 veces la actividad antioxidante de una cantidad equivalente de cualquier extracto o concentrado o una suma de los extractos.

12. Una composición que comprende extracto o extractos de manzana, uva, té verde y/u olivo para su uso en un método de regulación del estrés oxidativo en un sujeto que lo necesite, que comprende:

administrar al sujeto una combinación terapéuticamente eficaz de extractos de manzana, uva, té verde y olivo, en cantidades que proporcionen una actividad antioxidante combinada que sea mayor que la actividad antioxidante proporcionada por una cantidad equivalente de cualquier extracto o una suma de los extractos.

13. La composición para el uso de la reivindicación 12,

i) en donde;

el extracto de manzana comprende un extracto de piel y fruto de Malus pumila;

el extracto de uva comprende un extracto de semillas de Vitis vinifera;

el extracto de té verde comprende un extracto de hojas de Camellia sinensis; y

el extracto de olivo comprende hojas de Olea europea europaea,

o

ii) en donde los extractos de manzana, uva, té verde y olivo están presentes en una relación en peso de aproximadamente 1:1:1:1,

o

ii) en donde los extractos de manzana, uva, té verde y olivo están presentes en una relación en peso de aproximadamente 6:1:3:1.

14. La composición para el uso de la reivindicación 12, en donde dicho método comprende además administrar al sujeto al menos un agente terapéutico secundario;

particularmente

i) en donde el al menos un agente terapéutico secundario se administra conjuntamente al sujeto con la combinación terapéuticamente eficaz de extractos de manzana, uva, té verde y olivo,

o

ii) donde el al menos un agente terapéutico secundario comprende un miembro seleccionado del grupo que consiste en bergamota, mangostán, berberina, arginina, citrulina, glutamina, zinc, remolacha, loclo, proteína, curcumina, fitoesteroles, aceite de pescado, CoQ10, vitaminas, fibra, inulina y combinaciones de los mismos.

15. La composición para el uso de la reivindicación 12, en donde la actividad antioxidante modula patologías y trastornos metabólicos relacionados con el estrés.