ES2856968T3 - Adquisición de imágenes de TEP cuantitativas de la expresión de factor tisular usando factor VII inhibido en el punto activo y marcado con 18F - Google Patents

Abstract

Un agente para la adquisición de imágenes de factor VIIa (FVIIa) emisor de positrones marcado con 18- F para uso en un diagnóstico mediante adquisición de imágenes de TEP de un tumor que expresa factor tisular en un ser humano, comprendiendo dicho agente FVIIa humano natural o una variante del mismo radiomarcados con 18-F, donde el agente se debe administrar en una dosis de 50-400 MBq, seguido de TEP 1-6 horas después de que se haya administrado el agente, cuantificación mediante SUVmáx y/o SUVmedio para obtener de ese modo una imagen de TEP para el diagnóstico del estado del factor tisular tumoral para uso en el diagnóstico, la supervisión del tratamiento o como diagnóstico complementario basado en la relación de diana a fondo o en la absorción absoluta (SUV).

Description

DESCRIPCIÓN

Adquisición de imágenes de TEP cuantitativas de la expresión de factor tisular usando factor VII inhibido en el punto activo y marcado con 18F

CAMPO DE LA INVENCIÓN

La presente invención se refiere a un factor VII emisor de positrones marcado con 18-F para la adquisición de imágenes de TEP no invasiva de tumores que expresan factor tisular en seres humanos, como se define en las reivindicaciones. Más específicamente, la invención se refiere a la adquisición de imágenes de TEP de FT humano de cualquier tumor sólido para el diagnóstico, la estadificación, la supervisión del tratamiento, el diagnóstico complementario y, especialmente, como un biomarcador de adquisición de imágenes para predecir el pronóstico, la progresión y la recurrencia.

ANTECEDENTES DE LA INVENCIÓN

El factor tisular (FT) es una proteína transmembranaria de 47 kDa que se une al factor VII (FVII) con afinidad alta. El complejo resultante inicia la cascada de coagulación extrínseca esencial para la hemostasia normal. Tras unirse al FT, el cimógeno FVII se activa convirtiéndose en la serina proteasa, FVIIa, y el complejo FT:FVIIa activa adicionalmente el factor X, lo que en última instancia conduce a la generación de trombina y a la hemostasia.

Además de su papel en la coagulación, el FT juega un papel fundamental en la progresión, angiogénesis, invasión y diseminación metastásica hematógena del cáncer. Muchos tumores expresan diversos niveles de FT en la superficie de las células, y se ha demostrado que el complejo FT:FVIIa activa el receptor 2 activado por proteasas (PAR2) y, a través de la transmisión de señales intracelulares, induce un efecto antiapoptótico y mejora el crecimiento, la migración y la angiogénesis tumorales. Además, el FT:FVIIa facilita más indirectamente la diseminación metastásica a través de la generación de trombina y la transmisión de señales de PAR1 (1-4).

Clínicamente, el FT se sobreexpresa en varios cánceres, entre otros, glioma, cáncer de mama, colorrectal, de próstata y pancreático (5-8). En el ámbito del cáncer de mama, gástrico, esofágico, de hígado, colorrectal y pancreático, se ha demostrado que el FT, medido mediante inmunohistoquímica, está asociado a enfermedad metastásica aumentada y es un marcador pronóstico de supervivencia global mala (1).

El direccionamiento al FT ha demostrado ser efectivo como terapia contra el cáncer en modelos preclínicos. Yu y col. demostraron que el silenciamiento del FT por el siRNA reducía el crecimiento tumoral en un modelo de ratón de cáncer colorrectal (11). Usando un inmunoconjugado con FVII como dominio de unión, Hu y col. inhibieron el crecimiento tumoral en un modelo de ratón de xenoinjerto de melanoma humano (12). Ngo y col. y Versteeg y col. demostraron que los anticuerpos anti-FT inhibían la metástasis en un modelo experimental de metástasis e inhibían el crecimiento tumoral en un modelo de cáncer de mama (13,14).

Recientemente, se demostró que el direccionamiento al FT con un conjugado de anticuerpo-fármaco (CAF) tiene un efecto terapéutico potente y alentador en modelos murinos de cáncer, entre otros, modelos de xenoinjertos obtenidos de pacientes (15). Un procedimiento no invasivo para la evaluación específica del estado de expresión de FT tumoral resultaría valioso. Tal herramienta sería clínicamente relevante como orientación del tratamiento de los pacientes y como diagnóstico complementario para terapias emergentes dirigidas al FT.

Normalmente, el FT se expresa constitutivamente sobre la superficie de muchos tipos de células extravasculares que no están en contacto con la sangre, tales como fibroblastos, pericitos, células del músculo liso y células epiteliales, pero no sobre la superficie de células que entran en contacto con la sangre, tales como células endoteliales y monocitos. Sin embargo, el FT también se expresa en diversas afecciones fisiopatológicas en las que se cree que está implicado en la progresión de los estados de la enfermedad en el cáncer, la inflamación, la aterosclerosis y la isquemia/reperfusión. Por tanto, el FT se admite actualmente como una diana para la intervención terapéutica en afecciones asociadas a expresión aumentada.

El FVIIa es una serina proteasa plasmática bicatenaria de 50 kilodalton (kDa) y dependiente de la vitamina K que participa en la compleja regulación de la hemostasia in vivo. El FVIIa se genera a partir de la proteólisis de un único enlace peptídico de su cimógeno monocatenario, el factor VII (FVII), que está presente a aproximadamente 0,5 pg/ml en el plasma. El cimógeno es catalíticamente inactivo. La conversión del cimógeno FVII en la molécula bicatenaria activada se produce mediante escisión de un enlace peptídico interno. En presencia de iones de calcio, el FVIIa se une con afinidad alta al FT expuesto, que actúa como un cofactor para el FVIIa, mejorando la activación proteolítica de sus sustratos FVII, factor IX y FX.

Además de su papel demostrado como iniciador del proceso de coagulación, recientemente se demostró que el FT actúa como un mediador de actividades intracelulares, ya sea mediante interacciones del dominio citoplasmático del FT con el citoesqueleto o respaldando la transmisión de señales dependiente de proteasa FVIIa. Tales actividades pueden ser responsables, al menos en parte, del papel del FT implicado en el desarrollo, la metástasis y la angiogénesis tumorales. La exposición celular de actividad del FT es ventajosa en una crisis de lesión vascular, pero puede ser fatal cuando la exposición se mantiene, como ocurre en estas diversas enfermedades. Por tanto, es crítico regular la expresión de la función del FT en el mantenimiento de la salud.

Los agonistas del FT y/o antagonistas del FT radiomarcados pueden ser valiosos para la adquisición de imágenes de diagnóstico con una cámara gamma, una cámara de TEP o una cámara de TEP/TC, en particular para la evaluación de la expresión de FT de células tumorales, para clasificar la malignidad de células tumorales que se sabe que expresan receptores del FT, para la supervisión de tumores con expresión de FT durante la quimioterapia o radioterapia convencionales. También se podrían usar agonistas del FT y/o antagonistas del FT marcados con isótopos emisores de alfa o beta para terapia, posiblemente con unión biespecífica a compuestos con acción quimioterápica, que pueden estar relacionados con la presencia de receptores del FT. En esos casos, la adquisición de imágenes de diagnóstico puede ser importante para la evaluación de la respuesta tumoral esperada después de la terapia con fármacos que se unen al receptor de FT.

También se pueden observar otros tipos de enfermedades con expresión aumentada de receptores del FT accesibles superficialmente, tal vez enfermedades inflamatorias o autoinmunitarias, en las que el uso tanto diagnóstico como terapéutico de agonistas del FT y/o antagonistas del FT radiomarcados puede llegar a ser relevante.

Un ejemplo de un antagonista del FT, el FVII inactivado (FVIIai), es FVIIa modificado de tal manera que es catalíticamente inactivo. Por tanto, el FVllai no puede catalizar la conversión de FX en FXa, o de FIX en FIXa, pero sigue siendo capaz de unirse fuertemente al FT compitiendo con el FVIIa endógeno activo e inhibiendo de ese modo la función del fT.

Las solicitudes de patente internacional WO 92/15686, WO 94/27631, WO 96/12800 y WO 97/47651 se refieren al FVIIai y los usos del mismo. Las solicitudes de patente internacional WO 90/03390, ^w O 95/00541, WO 96/18653 y la patente europea EP 500800 describen péptidos obtenidos de FVIIa que tienen actividad antagonista del FT/FVIIa. La solicitud de patente internacional WO 01/21661 se refiere a un inhibidor bivalente del FVII y FXa.

Hu Z y Garen A (2001) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 98; 12180-12185, Hu Z y Garen A (2000) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 97; 9221-9225, Hu Z y Garen A (1999) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 96; 8161-8166, y la solicitud de patente internacional WO0102439 se refieren a inmunoconjugados que comprenden la región Fc de una inmunoglobulina IgG1 humana y un polipéptido de FVII mutante, que se une al FT, pero no inicia la coagulación sanguínea.

Además, la solicitud de patente internacional WO 98/03632 describe agonistas bivalentes que tienen afinidad por uno o más receptores acoplados a G, y Burgess, L.E. y col., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 96, 8348-8352 (julio de 1999) describen “inhibidores no peptídicos selectivos y potentes de triptasa pulmonar humana”.

El documento WO 2004/064870 describe diversos conjugados de agonistas del FT y antagonistas del FT enlazados a un radionúclido para uso en diagnóstico. El documento WO 2004/007557 describe antagonistas del FT enlazados a un dominio citotóxico, que se une al FT e inhibe su actividad e induce una respuesta citotóxica, así como su uso en la profilaxis o el tratamiento de enfermedades relacionadas con las funciones del FT. Los documentos WO 01/83725 y WO 02/22776 describen variantes de polipéptido de factor VIIa humano con actividad coagulante que comprenden la secuencia aminoacídica de factor VII de la coagulación humano natural donde se han sustituido uno o más aminoácidos específicos.

Knudsen T. y col. (2011, extraído de internet URL: https://www.b¡osc¡ence.org/fbs/getfile.php?F¡leName=/2011/v16/af/3906/3906.pdf?bframe=PDFII) proporcionan un análisis de las características del FT y FVIIa humanos, sus interacciones intermoleculares y los efectos biológicos de la formación de complejo FT-FVIIa y lo comparan con los hallazgos obtenidos en estudios que abordan los FT o FVII de origen no humano. Por ejemplo, se describe que, mientras que los estudios en perros recuerdan mucho al ámbito humano, la incompatibilidad del FVIIa humano con el FT de ratón es un obstáculo para abordar cuestiones sobre las interacciones FT-FVIIa en modelos murinos.

Erlandsson M. y col. (THE JOURNAL OF NUCLEAR MEDICINE, 2015, vol. 58, n.° 5, páginas 196-201) describen la síntesis de factor VII inhibido en el punto activo y marcado con 18F y estudian su uso potencial como trazador de tomografía por emisión de positrones para adquirir imágenes de la expresión de FT.

NIELSEN CH y col. (THE JOURNAL OF NUCLEAR MEDICINE, 2016, vol. 57, n.° 1, páginas 89-95) describen el uso del agente de adquisición de imágenes factor VII humano inhibido en el punto activo y marcado con 18F en tomografía por emisión de positrones (TEP) para la identificación y cuantificación de cánceres que expresan factor tisular en ratones. Los autores concluyen en este artículo que, aunque 18F-FVIIai es un trazador de TEP prometedor para la adquisición de imágenes específica y no invasiva de la expresión de FT tumoral, el trazador merece desarrollo adicional y traducción clínica, con posibilidad de llegar a ser un diagnóstico complementario para las terapias dirigidas al FT emergentes.

Sigue habiendo una necesidad en la técnica de compuestos mejorados que inhiban efectivamente la función fisiopatológica del FT a dosis relativamente bajas y que no produzcan efectos secundarios indeseables.

RESUMEN DE LA INVENCIÓN

La invención se define mediante las reivindicaciones. Cualquier materia que no esté comprendida en el alcance de las reivindicaciones se proporciona únicamente a título informativo. Cualquier referencia en la descripción a procedimientos de tratamiento, diagnóstico o cirugía se refiere a los compuestos, las composiciones farmacéuticas y los medicamentos de la presente invención para uso en un procedimiento para el tratamiento, el diagnóstico o la cirugía del cuerpo humano o animal mediante terapia. Los presentes inventores han encontrado sorprendentemente que el factor Vllai marcado con 18-F (Egtl 18F-ASIS) es muy útil para la adquisición de imágenes de TEP de un tumor que expresa factor tisular en un ser humano. Hasta ahora, el factor VIIa humano marcado con 18-F únicamente se ha validado en ratones implantados con xenoinjertos humanos (véase el artículo mencionado anteriormente). Aunque el factor VIIa humano se une a tales xenoinjertos, el modelo de ratón no es un modelo representativo para uso humano, ya que el factor VIIa humano apenas se une al FT murino. Por consiguiente, las señales de fondo del tejido murino normal son muy bajas en tal modelo animal, lo que hace que cualquier conclusión sobre la aplicabilidad en seres humanos sea muy especulativa. Con el fin de abordar la aplicabilidad real del factor VIIa marcado con 18-F para TEP de tumores, los presentes inventores han demostrado en un modelo murino y canino (que es representativo para uso humano, ya que el ligando usado se une fuertemente al FT canino) que, sorprendentemente, la señal de fondo es lo suficientemente baja para obtener imágenes de TEP útiles para fines de diagnóstico.

Específicamente, la presente invención proporciona un agente de adquisición de imágenes de factor VIIa (FVIIa) emisor de positrones marcado con 18-F para uso en un diagnóstico mediante adquisición de imágenes de TEP de un tumor que expresa factor tisular en un ser humano, comprendiendo dicho agente FVIIa humano natural o una variante del mismo radiomarcados con 18-F, donde el agente se debe administrar en una dosis de 50-400 MBq, seguido de TEP 1-6 horas después de que se haya administrado el agente, cuantificación mediante SUVmáx y/o SUVmedio para obtener de ese modo una imagen de TEP para el diagnóstico del estado del factor tisular tumoral para uso en el diagnóstico, la supervisión del tratamiento o como diagnóstico complementario basado en la relación de diana a fondo o en la absorción absoluta (SUV).

Preferiblemente, FVIIa es factor VIIa inhibido en el punto activo (FVIIai) de SEQ ID NO: 1. En una realización particularmente preferida, FVllai ha sido marcado con 4-18Ffluorobenzoato de N-succinimidilo (18F-SFB) para producir:

Como se detalla en la parte experimental de la presente descripción, el agente de adquisición de imágenes de la invención es particularmente útil para diagnosticar cáncer de mama, gástrico, esofágico, de hígado, colorrectal y pancreático.

En un aspecto adicional, la presente invención proporciona un procedimiento para generar imágenes de la expresión de factor tisular en un ser humano mediante la adquisición de imágenes de diagnóstico, que implica administrar el agente de adquisición de imágenes de la invención al ser humano y generar una imagen de al menos una parte de dicho cuerpo a la que se administra dicho agente de adquisición de imágenes.

Por lo tanto, la presente invención también está dirigida a un procedimiento de diagnóstico mediante adquisición de imágenes de ^t E^p de un tumor que expresa factor tisular en un ser humano, comprendiendo dicho procedimiento: - administrar un agente de adquisición de imágenes de factor VIIa (FVIIa) emisor de positrones marcado con 18-F emisor de positrones comprendiendo dicho agente FVIIa humano natural o una variante del mismo radiomarcados con 18-F, donde el agente se administra en una dosis de 50-400 MBq, seguido de TEP 1-6 horas después de que se haya administrado el agente, cuantificación mediante SUVmáx y/o SUVmedio para obtener una imagen de TEP para el diagnóstico del estado del factor tisular tumoral.

Preferiblemente, el procedimiento incluye además la etapa de supervisión del tratamiento o como un diagnóstico complementario basado en la relación de señal a fondo o en la absorción absoluta (SUV).

BREVE DESCRIPCIÓN DE LOS DIBUJOS

La Figura 1 muestra imágenes de TEP de ratones con tumores de xenoinjerto pancreático humano subcutáneo detectados con 18F-FVIIai murino (A) y 18F-FVIIai humano (B).

La Figura 2 muestra la biodistribución ex vivo de ratones con tumores de BxPC-3 realizada 4 horas después de la inyección de 18F-FVIIai de origen humano o murino.

La Figura 3 muestra factor VII humano que tiene la secuencia de SEQ ID NO: 1.

DESCRIPCIÓN DETALLADA DE LA INVENCIÓN

Los agentes de adquisición de imágenes de factor VIIa marcado con 18-F de la presente invención se pueden sintetizar y purificar según la solicitud de patente internacional WO2004064870.

Los términos “variante” o “variantes”, como se emplean en esta memoria, están destinados a designar factor VII humano que tiene la secuencia de SEQ ID NO: 1, donde uno o más aminoácidos de la proteína precursora han sido sustituidos por otro aminoácido y/o donde uno o más aminoácidos de la proteína precursora han sido eliminados y/o donde uno o más aminoácidos han sido insertados en la proteína y/o donde uno o más aminoácidos han sido añadidos a la proteína precursora. Tal adición puede tener lugar indistintamente en el extremo aminoterminal o en el extremo carboxiterminal de la proteína precursora o en ambos. En una realización de la invención, la variante tiene una cantidad total de sustituciones y/o adiciones y/o eliminaciones aminoacídicas seleccionadas independientemente del grupo que consiste en 1,2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 y 10. La activación de factor VII a factor VIIa implica la hidrólisis de un único enlace peptídico entre Arg152 e Ile153, lo que da como resultado una molécula bicatenaria que consiste en una cadena ligera de 152 residuos aminoacídicos y una cadena pesada de 254 residuos aminoacídicos unidos por un único enlace disulfuro.

Preferiblemente, el FVIIa de SEQ ID NO: 1 es factor VIIa inhibido en el punto activo (FVIIai) y modificado de tal manera que es catalíticamente inactivo, tal como que tiene la modificación aminoacídica compuesta por Ser344, Asp242 e His193.

Por “inactivado catalíticamente en el punto activo del polipéptido de FVIIa” se entiende que un inhibidor de FVIIa está unido al polipéptido de FVIIa y reduce o impide la conversión catalizada por FVIIa de FX a FXa. Un inhibidor de FVIIa se puede identificar como una sustancia que reduce la actividad amidolítica en al menos 50 % a una concentración de la sustancia de 400 pM en el ensayo amidolítico de FVIIa descrito por Persson y col. (Persson y col., J. Biol. Chem.

272: 19919-19924 (1997)). Se prefieren sustancias que reducen la actividad amidolítica en al menos 50 % a una concentración de la sustancia de 300 pM; más preferidas son las sustancias que reducen la actividad amidolítica en al menos 50 % a una concentración de la sustancia de 200 pM.

El “inhibidor de FVIIa” se puede seleccionar de entre uno cualquiera de varios grupos de inhibidores dirigidos al FVIIa. Tales inhibidores se clasifican en líneas generales para el fin de la presente invención en i) inhibidores que se unen reversiblemente a FVIIa y son escindibles por FVIIa, ii) inhibidores que se unen reversiblemente a FVIIa pero no pueden ser escindidos e iii) inhibidores que se unen irreversiblemente a FVIIa. Para consultar un análisis de inhibidores de serina proteasas, véase Proteinase Inhibitors (Research Monographs in cell and Tissue Physiology; v. 12) Elsevier Science Publishing Co., Inc., Nueva York (1990).

El resto de inhibidor de FVIIa también puede ser un inhibidor de serina proteasa FVIIa irreversible. Tales inhibidores de punto activo irreversibles generalmente forman enlaces covalentes con el punto activo de las proteasas. Tales inhibidores irreversibles incluyen inhibidores de serina proteasas generales tales como clorometilcetonas peptídicas (véase, Williams y col., J. Biol. Chem. 264:7536-7540 (1989)) o clorometanos peptidílicos; azapéptidos; agentes acilantes tales como diversos derivados de guanidinobenzoato y las 3-alcoxi-4-cloroisocumarinas; fluoruros de sulfonilo tales como fluoruro de fenilmetilsulfonilo (PMSF); fluorofosfato de diisopropilo (DFP); tosil-propil-clorometil cetona (TPCK); tosil-lisil-clorometil cetona (TLCK); nitrofenilsulfonatos y compuestos relacionados; inhibidores de proteasas heterocíclicas tales como isocumarinas y cumarinas.

EJEMPLO 1

Se evaluaron las propiedades in vivo de 18F-FVIIai para la adquisición de imágenes de TEP en un modelo de ratón de cáncer pancreático humano usando TEP/TC de animales pequeños. La absorción de 18F-FVIIai medida mediante TEP se correlacionó con la expresión de FT medida ex vivo para confirmar la adquisición de imágenes específicas de la expresión de FT tumoral.

El factor VIIa inhibido en el punto activo (FVIIai) se obtuvo mediante inactivación con fenilalanina-fenilalanina-argininaclorometil cetona. El FVIIai se radiomarcó con 4-18Ffluorobenzoato de N-succinimidilo (18F-SFB) y se purificó. El producto correspondiente, 18F-FVIIai, se inyectó en ratones sin pelo con tumores de xenoinjerto pancreático humano subcutáneo (BxPC-3) y se investigó usando adquisición de imágenes de TEP/TC de animales pequeños 1, 2 y 4 horas después de la inyección. La biodistribución ex vivo se realizó después de la última sesión de adquisición de imágenes y el tejido tumoral se conservó para el análisis molecular. Se realizó un experimento de bloqueo en un segundo conjunto de ratones. El patrón de expresión de FT en los tumores se visualizó mediante inmunohistoquímica y la cantidad de FT en los homogeneizados tumorales se midió mediante ELISA y se correlacionó con la absorción de 18F-FVIIai en los tumores medida in vivo mediante adquisición de imágenes de TEP.

Las imágenes de TEP mostraron absorción alta de 18F-FVIIai en las regiones tumorales, con una absorción media de 2,5 ± 0,3 por ciento de dosis inyectada por gramo (% de DI/g) (media ± EEM) 4 horas después de la inyección de 7,3­ 9,3 MBq de 18F-FVIIai y con una absorción máxima promedio en los tumores de 7,1 ± 0,7 % de DI/g a las 4 horas. En comparación, la absorción muscular fue 0,2 ± 0,01 % de DI/g a las 4 horas. A las 4 horas, los tumores tenían la absorción máxima de cualquier órgano. El bloqueo con FVIIai redujo significativamente la absorción de 18F-FVIIai de 2,9 ± 0,1 a 1,4 ± 0,1 % de DI/g (P < 0,001). La absorción de [18F]FVIIai medida in vivo mediante adquisición de imágenes de TEP se correlacionaba (r = 0,72, P < 0,02) con la concentración de proteína de FT medida ex vivo. Una limitación del estudio es la ausencia de FT humano fuera de las regiones tumorales en el modelo de ratón de xenoinjerto utilizado. Se ha demostrado anteriormente que la compatibilidad entre especies para el FT/FVII es bastante baja, de tal manera que el FVIIai humano se une con una afinidad mucho más baja al FT murino que al humano (28,33). Por tanto, el modelo de ratón subestima la absorción de fondo de FVllai que se observa en tejidos humanos. En lo que respecta a la Figura 1A, se muestran ratones con tumores de xenoinjerto humano positivos para factor tisular (BxPC-3) que fueron inyectados con 18 F-FVIIai murino y examinados con un escáner de TEP/TC específico para animales pequeños1, 2 y 4 horas después de la inyección. El 18F-FVIIai se acumula en el tumor positivo para factor tisular (flechas) a pesar del factor VII endógeno. Asimismo, y sorprendentemente, la expresión de fondo de factor tisular en el animal no impide la visualización del tumor positivo para el factor tisular. En la Figura 1B se muestra un experimento equivalente con 18F-FVIIai de origen humano. Los tumores son claramente visibles (flecha). La absorción muscular sigue siendo baja y se obtiene un contraste bueno de tumor a músculo a las 4 horas.

En lo que respecta a la Figura 2, se muestra la biodistribución ex vivo de ratones con tumores de BxPC-3 realizada 4 horas después de la inyección de 18F-FVIIai de origen humano o murino. La absorción de 18F-FVIIai murino en los tumores no se ve afectada por la capacidad para unir factor tisular murino expresado en tejido normal o por la competencia con factor VII endógeno. Los resultados de la biodistribución ex vivo demuestran claramente que la biodistribución usando 18F-FVIIai humano que no se une a factor tisular de ratón no puede predecir de ninguna manera la biodistribución en presencia de unión de fondo fuera del tumor (factor tisular murino).

Sorprendentemente, la proteína radiomarcada de la presente invención es muy útil en la visualización de tumores positivos para FT a pesar de la presencia de expresión de fondo de FT y competencia con FVII endógeno. Este resultado merece la traducción clínica.

EJEMPLO 2

Las propiedades in vivo de 18F-FVIIai para la adquisición de imágenes de TEP se evaluaron en una serie de perros con diversos tumores espontáneos usando un escáner de TEP/TC clínico. El 18F-FVNai humano también tiene actividad de unión alta al FT canino y ha demostrado ser muy útil en la visualización de tumores positivos para FT a pesar de la presencia de expresión de fondo de FT y competencia con FVII endógeno.

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Claims (4)

REIVINDICACIONES

1. Un agente para la adquisición de imágenes de factor VIIa (FVIIa) emisor de positrones marcado con 18-F para uso en un diagnóstico mediante adquisición de imágenes de TEP de un tumor que expresa factor tisular en un ser humano, comprendiendo dicho agente FVIIa humano natural o una variante del mismo radiomarcados con 18-F, donde el agente se debe administrar en una dosis de 50-400 MBq, seguido de TEP 1-6 horas después de que se haya administrado el agente, cuantificación mediante SUVmáx y/o SUVmedio para obtener de ese modo una imagen de TEP para el diagnóstico del estado del factor tisular tumoral para uso en el diagnóstico, la supervisión del tratamiento o como diagnóstico complementario basado en la relación de diana a fondo o en la absorción absoluta (SUV).

2. El agente de adquisición de imágenes de factor VIIa (FVIIa) marcado con 18-F para uso según la reivindicación 1, donde el FVIIa es la SEQ ID NO: 1 y factor VIIa inhibido en el punto activo (FVIIai) y modificado de tal manera que es catalíticamente inactivo.

3. El agente de adquisición de imágenes de factor VIIa (FVIIa) marcado con 18-F para uso según la reivindicación 2, donde FVIIai ha sido marcado con 4-18Ffluorobenzoato de N-succinimidilo (18F-SFB) para producir:

4. El agente de adquisición de imágenes de factor VIIa (FVIIa) marcado con 18-F para uso según una cualquiera de las reivindicaciones 1-3 para diagnosticar, estadificar o supervisar la terapia en cáncer de mama, gástrico, esofágico, de hígado, colorrectal y pancreático.