ES2863726T3

ES2863726T3 - Hidrogel de poliacrilamida para su uso en la prevención y/o el tratamiento de la sinovitis en un mamífero

Info

Publication number: ES2863726T3
Application number: ES17714636T
Authority: ES
Inventors: Ieva Ankorina-Stark; Lise Hanne Christensen
Original assignee: Contura Int AS
Current assignee: Contura Int AS
Priority date: 2016-03-31
Filing date: 2017-03-30
Publication date: 2021-10-11
Anticipated expiration: 2037-03-30
Also published as: HUE053532T2; EP3435992A1; DK3435992T3; EA036712B1; CN109069452B; KR20180123718A; US20190307925A1; EA201892183A1; AU2017243297B2; AU2017243297A1; EP3435992B1; PL3435992T3; CN109069452A; JP2019515944A; PT3435992T; IL261976A; WO2017167348A1; KR102442316B1; US10772991B2; RS61571B1

Abstract

Un hidrogel de poliacrilamida para su uso en la prevención y/o el tratamiento de la sinovitis en un mamífero mediante la formación de una nueva capa de revestimiento sinovial.

Description

DESCRIPCIÓN

Hidrogel de poliacrilamida para su uso en la prevención y/o el tratamiento de la sinovitis en un mamífero

Campo técnico de la invención

La presente invención se refiere a un hidrogel de poliacrilamida para su uso en la prevención y/o el tratamiento de la sinovitis en un mamífero.

Antecedentes de la invención

La sinovitis es el término médico para la inflamación de la membrana sinovial. Esta membrana reviste las articulaciones que poseen cavidades, conocidas como articulaciones sinoviales. La afección suele ser dolorosa, especialmente cuando se mueve la articulación. La articulación generalmente se hincha debido a la acumulación de líquido sinovial.

En principio, los cambios de la membrana sinovial pueden ser inflamatorios o no inflamatorios. A este último grupo pertenecen algunos tumores benignos, como el tumor tenosinovial de células gigantes, el lipoma o la condromatosis sinovial. Los cambios no inflamatorios raros son el grupo de enfermedades por almacenamiento. Las enfermedades sinoviales inflamatorias se pueden diferenciar en artropatía inducida por cristales, como gota y seudogota, enfermedades granulomatosas, como tuberculosis, sarcoidosis y reacciones a cuerpos extraños, y en el gran grupo de sinovitis no granulomatosas. Este último grupo es, con mucho, el más común y a menudo causa dificultades para asignar los hallazgos histopatológicos a un diagnóstico definitivo.

Por lo tanto, la sinovitis puede darse asociada a la artritis, así como a lupus, gota y otras afecciones. La sinovitis es más pronunciada en la artritis reumatoide que en otras formas de artritis y, por tanto, puede servir como factor distintivo, aunque también está presente en muchas articulaciones afectadas por osteoartritis (OA).

La visco-suplementación es el proceso de inyectar una sustancia similar a un gel en la articulación. Se considera a dicha sustancia un aditivo para el líquido articular, que lubrica el cartílago y mejora la flexibilidad de la articulación. Sin embargo, este método de tratamiento requiere inyecciones continuas, ya que los beneficios son solo temporales, porque las sustancias que se usan actualmente se degradan en semanas o meses. Las sustancias utilizadas en la visco-suplementación incluyen ácido hialurónico o HA (Legend®, Hylartin® y Synacid®, Synvisc, Euflexxa, Supartz, etc.) y glicosaminoglicanos poli-sulfatados (PSGAGS) como Adequan®.

El hidrogel de poliacrilamida (PAAG) es conocido por su capacidad para apoyar el crecimiento celular in vitroy permitir el crecimiento interno de las células del tejido hospedante in vivo. Esto se ha documentado en los tejidos subcutáneos blandos de ratones, ratas, conejos, cerdos y seres humanos. La integración del tejido comienza inmediatamente después de la inyección de PAAG como una especie de reacción de cuerpo extraño al PAAG. Los macrófagos del hospedador y las células gigantes de cuerpo extraño rodean inicialmente al PAAG y luego lo invaden. En el proceso, estas células se transforman gradualmente en fibroblastos y células endoteliales, que eventualmente forman en el interior del PAAG una red fibrosa delgada portadora de vasos. Sin embargo, la integración del PAAG en estos tejidos no se asoció con ninguna superficie luminal, y el PAAG contenía macrófagos y células gigantes hasta 14 meses después de la inyección.

El documento WO 02/16453 describe el uso de un hidrogel de poliacrilamida (PAAG) para tratar p.ej. artritis, donde se considera que el tratamiento se basa en un efecto lubricante y amortiguador del hidrogel. El documento WO 2012/123385 describe el uso de PAAG en el tratamiento y/o la prevención del hinchamiento de las articulaciones y/o del edema óseo en un mamífero que padece artritis. Ninguno de los documentos, ni el WO 02/16453 ni el WO 2012/123385, describen la prevención y/o el tratamiento de la sinovitis en un mamífero.

Christensen y Daugaard (J Arthritis 5: 217; 16 septiembre, 2016) presentan un caso clínico sobre el aspecto histológico de la membrana sinovial tras el tratamiento de osteoartritis de rodilla con inyecciones de gel de poliacrilamida.

Los síntomas comunes para todos los tipos de sinovitis en mamíferos incluyen niveles variados de dolor en mamíferos. Los síntomas de la sinovitis se pueden tratar con medicamentos antiinflamatorios como AINE. Otra posibilidad es la inyección de esteroides directamente en la articulación afectada. El tratamiento específico depende de la causa subyacente de la sinovitis. Algo común a los diversos tipos de tratamiento existentes es que todos tienen sus desventajas, p.ej., tratamiento a corto plazo, toxicidad y efectos secundarios.

Por tanto, existe la necesidad de una forma alternativa o mejorada para prevenir y/o tratar la sinovitis en un mamífero. Además, existe la necesidad de una forma alternativa o mejorada para prevenir y/o tratar el dolor de la sinovitis en un mamífero.

Sorprendentemente, los presentes inventores han descubierto que el hidrogel de poliacrilamida (PAAG) es útil en la prevención y/o el tratamiento de la sinovitis. Sin pretender establecer ninguna teoría particular, el efecto analgésico sobre la sinovitis se considera causado por una capa subsinovial estable y duradera de PAAG atravesada por delgadas hebras de tejido conectivo y cambios en la composición de las células sinoviales o la producción de citocinas. Por consiguiente, la presente invención ha demostrado sorprendentemente la formación de una nueva capa de revestimiento sinovial después de la integración del PAAG en las articulaciones de mamíferos, que persistió durante al menos 24 meses.

Sumario de la invención

Por tanto, un objetivo de la presente invención se refiere a la prevención y/o el tratamiento de la sinovitis en un mamífero. Otro objetivo de la invención es la prevención y/o el tratamiento del dolor asociado a la sinovitis.

En particular, un objetivo de la presente invención es proporcionar una forma alternativa o mejorada de prevenir y/o tratar la sinovitis en un mamífero que resuelve o reduce los problemas de la técnica anterior mencionados anteriormente de, p.ej., tratamiento a corto plazo, toxicidad y efectos secundarios.

Por tanto, un aspecto de la invención se refiere a un hidrogel de poliacrilamida para su uso en la prevención y/o el tratamiento de la sinovitis en un mamífero mediante la formación de una nueva capa de revestimiento sinovial.

Otro aspecto de la invención se refiere a un hidrogel de poliacrilamida para su uso en la prevención y/o el tratamiento de la sinovitis en un mamífero mediante la formación de una capa subsinovial.

En una realización, la invención se refiere a un hidrogel de poliacrilamida para su uso en la prevención y/o el tratamiento de la sinovitis en un mamífero mediante la formación de una capa subsinovial y una nueva capa de revestimiento sinovial.

En una realización, la invención se refiere a un método para la prevención y/o el tratamiento de la sinovitis en un mamífero, comprendiendo el método la administración a dicho mamífero de un hidrogel de poliacrilamida para formar una nueva capa de revestimiento sinovial.

En una realización, la invención se refiere a un método para la prevención y/o el tratamiento de la sinovitis en un mamífero, comprendiendo el método la administración a dicho mamífero de un hidrogel de poliacrilamida para formar una capa subsinovial.

En una realización, la invención se refiere a un método para la prevención y/o tratamiento de la sinovitis en un mamífero, comprendiendo el método la administración a dicho mamífero de un hidrogel de poliacrilamida para formar una capa subsinovial y una nueva capa de revestimiento sinovial.

En otra realización, la invención se refiere al uso de un hidrogel de poliacrilamida para la preparación de un medicamento para la prevención y/o el tratamiento de la sinovitis en un mamífero mediante la formación de una nueva capa de revestimiento sinovial.

En otra realización, la invención se refiere al uso de un hidrogel de poliacrilamida para la preparación de un medicamento para la prevención y/o el tratamiento de la sinovitis en un mamífero mediante la formación de una capa subsinovial.

En otra realización, la invención se refiere al uso de un hidrogel de poliacrilamida para la preparación de un medicamento para la prevención y/o el tratamiento de la sinovitis en un mamífero mediante la formación de una capa subsinovial y una nueva capa de revestimiento sinovial.

Un aspecto adicional de la invención se refiere a un hidrogel de poliacrilamida para su uso en la prevención y/o el tratamiento del dolor de sinovitis en un mamífero mediante la formación de una nueva capa de revestimiento sinovial.

Un aspecto adicional de la invención se refiere a un hidrogel de poliacrilamida para su uso en la prevención y/o el tratamiento del dolor por sinovitis en un mamífero mediante la formación de una capa subsinovial.

Una realización adicional de la invención se refiere a un hidrogel de poliacrilamida para su uso en la prevención y/o el tratamiento del dolor de sinovitis en un mamífero mediante la formación de una capa subsinovial y una nueva capa de revestimiento sinovial.

Una realización de este aspecto de la invención se refiere a un método para la prevención y/o el tratamiento del dolor de sinovitis en un mamífero, comprendiendo el método la administración a dicho mamífero de un hidrogel de poliacrilamida para formar una nueva capa de revestimiento sinovial.

Una realización de este aspecto de la invención se refiere a un método para la prevención y/o tratamiento del dolor de sinovitis en un mamífero, comprendiendo el método la administración a dicho mamífero de un hidrogel de poliacrilamida para formar una capa subsinovial.

Una realización de este aspecto de la invención se refiere a un método para la prevención y/o tratamiento del dolor de sinovitis en un mamífero, comprendiendo el método la administración a dicho mamífero de un hidrogel de poliacrilamida para formar una capa subsinovial y una nueva capa de revestimiento sinovial.

Otra realización se refiere al uso de un hidrogel de poliacrilamida para la preparación de un medicamento para la prevención y/o el tratamiento del dolor de sinovitis en un mamífero mediante la formación de una nueva capa de revestimiento sinovial.

Otra realización se refiere al uso de un hidrogel de poliacrilamida para la preparación de un medicamento para la prevención y/o el tratamiento del dolor de sinovitis en un mamífero mediante la formación de una capa subsinovial.

Otra realización se refiere al uso de un hidrogel de poliacrilamida para la preparación de un medicamento para la prevención y/o el tratamiento del dolor de sinovitis en un mamífero mediante la formación de una capa subsinovial y una nueva capa de revestimiento sinovial.

Breve descripción de las figuras

La Figura 1 muestra una articulación de rodilla normal de conejo inyectada con PAAG después de 10 días (a, b), después de 90 días (c) y después de 180 días (d). A los 10 días, el PAAG todavía estaba presente en la cavidad justo debajo del revestimiento sinovial (a, flecha) y estaba dominado por células sinoviales en proliferación (b, flecha). A los 90 y 180 días, el revestimiento sinovial estaba intacto (c, d, flechas) y el PAAG integrado contenía sólo células inflamatorias crónicas dispersas entremezcladas con la red fibrosa (d, en un círculo). HE x60 (a), HE x400 (b), HE x 100 (c), HE x300 (d).

La Figura 2 muestra la articulación del espolón de un caballo tratada con PAAG para OA después de 3 y 8 meses (a, b) y después de 24 meses (c, d). El revestimiento de la superficie sinovial está marcado con flechas.

La fina red fibrosa del interior del PAAG a los 24 meses está marcada con un círculo en d. HE x200 (a), HE x100 (b), HE x60 (c) y van Gieson/azul Alcián x150 (d).

Descripción detallada de la invención

El PAAG se prepara como se describe en el documento WO 02/16453, y adicionalmente en el documento WO 2012/123385. El PAAG puede comprender cualquier realización del hidrogel descrita en WO 02/16453 y WO 2012/123385.

Como se ha señalado anteriormente, un aspecto de la presente invención se refiere a un hidrogel de poliacrilamida para su uso en la prevención y/o el tratamiento de la sinovitis en un mamífero mediante la formación de una capa subsinovial y/o la formación de una nueva capa de revestimiento sinovial. En un aspecto relacionado, la invención se refiere a un hidrogel de poliacrilamida para su uso en la prevención y/o el tratamiento del dolor de sinovitis en un mamífero mediante la formación de una capa subsinovial y/o la formación de una nueva capa de revestimiento sinovial.

En una realización, la capa subsinovial y/o la nueva capa de revestimiento sinovial está presente/persiste hasta 1 mes (M) o más, como 2 M, como 3 M, como 4 M, como 5 M, como 6 M, como 7 M, como 8 M, como 9 M, como 10 M, como 11 M, como 12 M, como 13 M, como 14 M, como 15 M, como 16 M, como 17 M, como 18 M, como 19 M, como 20 M, como 21, como 22 M, como 23 M, como 24 M, como 24 M, como 25 M, como 26 M, como 27 M, como 28 M, como 29 M, como 30 M, como 30-35 M, como 35-40 M, como 40-45 M, como 45-50 M, como 50-55 M, como 55-60 M o más de 60 M.

Según la invención, la formación de una capa subsinovial y la formación de una nueva capa de revestimiento sinovial significa que en las articulaciones, tras la inyección de un hidrogel de poliacrilamida de la invención en la cavidad articular, el cuerpo añade/forma una nueva capa subsinovial encima de la membrana sinovial original. En otras palabras, se agrega una capa adicional a la membrana sinovial. Sobre la nueva capa subsinovial, orientada hacia la cavidad articular, se forma/agrega una nueva capa de revestimiento sinovial. Sorprendentemente, la nueva capa subsinovial añadida en la membrana sinovial y la nueva capa de revestimiento sinovial son estables y persisten durante mucho tiempo.

Según la invención, el dolor se evalúa mediante el uso del Índice de Artritis de las Universidades de Western Ontario y McMaster (WOMAC). Es un conjunto patentado de cuestionarios estandarizados que utilizan los profesionales de la salud para evaluar el estado de los pacientes con osteoartritis de rodilla y cadera, incluidos el dolor, la rigidez y el funcionamiento físico de las articulaciones. Por lo tanto, el WOMAC se utiliza para evaluar el dolor en la rodilla, la cadera, el codo, las articulaciones metacarpofalángicas e interfalángicas en manos y pies, la articulación sesamoidea y/o la articulación temporomandibular en humanos. El dolor en mamíferos como caballos o perros es evaluado subjetivamente por un veterinario.

Preferiblemente, según la invención, se administra un hidrogel de poliacrilamida mediante inyección en condiciones estériles. En una realización, el hidrogel de poliacrilamida se administra mediante inyección intraarticular.

La inyección de PAAG se puede realizar bajo anestesia local, pero no necesariamente se requiere anestesia local. Sin embargo, el procedimiento se realiza preferiblemente en condiciones estériles. Se rasura el pelo que cubre el área de inyección y se enjuaga la piel a fondo, p.ej., con clorhexidina y etanol (por ejemplo, 3 veces indistintamente). Luego, se inserta la cánula en la cavidad articular y se comprueba por aspiración que esté colocada correctamente intraarticularmente. Generalmente, la articulación se vacía en al menos la cantidad de líquido que se ha decidido inyectar y luego se inyecta la cantidad deseada de PAAG. Se puede incluir un antibiótico en el PAAg para prevenir la infección iatrogénica de la articulación.

En una realización de la invención, se administran de 0,1-20 ml de hidrogel de poliacrilamida mediante inyección en la cavidad intraarticular.

En otra realización, se administran de 0,1-20 ml de hidrogel de poliacrilamida mediante inyección en la cavidad intraarticular al menos una vez, por ejemplo, dos veces, tres veces, cuatro veces, 5 veces, 6 veces, 7 veces, 8 veces, 9 veces, 10 veces en la cavidad intraarticular. En una realización adicional, se administran 0,1-20 ml de hidrogel de poliacrilamida al menos 1-2 veces en total, tal como 1-5 veces en total, tal como 1-10 veces en total, tal como 1-15 veces en total, tal como 1 -20 veces en total, tal como 1 -30 veces en total, tal como 1 -40 veces en total, tal como incluso más de 40 veces en total. La administración puede realizarse durante un período de varios años, tal como durante un período de 1 año, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 o 10 años.

En otra realización adicional, se administran de 0,1-20 ml de hidrogel de poliacrilamida mediante inyección en la cavidad intraarticular a intervalos regulares, por ejemplo, una vez cada 2 semanas, tal como cada 4 semanas, tal como cada 6 semanas, tal como cada 8 semanas, tal como cada 10 semanas, tal como cada 12 semanas, tal como cada 14 semanas, tal como cada 16 semanas o incluso más en la cavidad intraarticular.

En otra realización adicional, se administran de 0,1-20 ml de hidrogel de poliacrilamida mediante inyección en la cavidad intraarticular a intervalos de p.ej. una vez cada 2 semanas, tal como cada 4 semanas, tal como cada 6 semanas, tal como cada 8 semanas, tal como cada 10 semanas, tal como cada 12 semanas, tal como cada 14 semanas, tal como cada 16 semanas o incluso más, para un total de, por ejemplo, 2 inyecciones, tal como 3, tal como 4, tal como 5, tal como 6, tal como 7, tal como 8, tal como 9, tal como 10 inyecciones en total.

También se pueden administrar 0,1-20 ml de hidrogel de poliacrilamida por inyección en la cavidad intraarticular una vez al año o más, tal como dos, 3 veces, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11 o 12 veces al año durante una año o más, p.ej., 2, o 3, o 4, o 5, o 6, o 7, u 8, o 9 o 10 años.

Una cantidad apropiada de hidrogel de poliacrilamida estará en el rango de 0,1 ml a 20 ml, tal como 0,2, 0,3, 0,4, 0,5, 0,6, 0,7, 0,8, 0,9, 1,2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18 o 19 ml. Sin embargo, no es recomendable inyectar tanto hidrogel que la articulación se expanda. El médico tratante, o el veterinario, decidirá la cantidad exacta en función del tamaño de la articulación y la gravedad de la sinovitis.

Preferiblemente, se administra una cantidad de 1-2 ml o más, tal como 1-3, tal como 1-4, tal como 1-5, tal como 1-6, tal como 1 -7, tal como 1 -8, tal como 1 -9, tal como 1-10, tal como 1-11, tal como 1 -12, tal como 1 -13, tal como 1 -14, tal como 1-15, tal como 1-16, tal como 1-17, tal como 1-18, tal como 1-19 ml.

En una realización de la invención, el mamífero es un ser humano, un animal de carreras o un animal de compañía. Los mamíferos más relevantes son los seres humanos, los animales de carreras como caballos y camellos, y los animales de compañía como gatos y perros, pero también otros mamíferos que necesitan tratamiento tal como elefantes, jirafas, tigres, etc. En una realización preferida, el mamífero es un ser humano, un caballo o un perro. En una realización aún más preferida, el mamífero es un ser humano.

Se puede tratar cualquier articulación afectada por sinovitis. Ejemplos no limitantes son la rodilla, cadera, codo, las articulaciones metacarpofalángicas e interfalángicas en manos y pies de humanos, espolón, hueso del ataúd, cuartilla, babilla y articulación de rodilla de las patas traseras de caballos, y codo, rodilla y cadera de gatos y perros. También puede ser relevante el tratamiento de otras articulaciones como las articulaciones sesamoidea y temporomandibular.

En otra realización preferida de la invención, el mamífero a tratar es un ser humano y la articulación o articulaciones que se van a tratar son la rodilla, cadera, codo, las articulaciones metacarpofalángicas e interfalángicas en manos y pies, la articulación sesamoidea y/o la articulación temporomandibular.

En otra realización adicional de la invención, el mamífero que se va a tratar es un caballo y la articulación o articulaciones que se van a tratar es el espolón, el hueso del ataúd, la cuartilla, la babilla y/o la articulación de la rodilla de las patas traseras.

En otra realización adicional de la invención, el mamífero a tratar es un perro y la articulación o articulaciones que se van a tratar es el codo de la pata delantera o la articulación de la rodilla o cadera de las patas traseras.

En otra realización adicional de la invención, el mamífero padece sinovitis.

En una realización de la invención, el mamífero padece artritis, como osteoartritis o artritis reumatoide, lupus o gota.

La artritis es un grupo de afecciones que implican daño a las articulaciones del cuerpo. Hay más de 100 formas diferentes de artritis. La forma más común, la osteoartritis (enfermedad degenerativa de las articulaciones) es el resultado de un traumatismo en la articulación, una infección de la articulación o la edad. Otras formas de artritis son la artritis reumatoide, la artritis psoriásica y enfermedades autoinmunes relacionadas. La artritis séptica es causada por la infección de la articulación.

La osteoartritis (OA) es una enfermedad articular debilitante y dolorosa sin cura conocida. Se caracteriza por calor, dolor, hinchazón, crepitación (una sensación o sonido crepitante, arrugado o rechinante debajo de la piel) y una disminución del rango de movimiento en las articulaciones afectadas. En los humanos, afecta las manos, las rodillas, las caderas, la columna y otras articulaciones. Los caballos sufren de osteoartritis de las articulaciones principalmente en las articulaciones del hueso del ataúd, cuartilla, espolón, articulaciones carpianas y de babilla, y la incidencia depende de la edad, el peso y la raza.

La artritis reumatoide (AR) es un trastorno autoinmune de larga duración que afecta principalmente a las articulaciones.

El lupus o lupus eritematoso es un nombre que se le da a un conjunto de enfermedades autoinmunes en donde el sistema inmunológico humano se vuelve hiperactivo y ataca a tejidos normales y sanos, tal como las articulaciones.

La gota (también conocida como podagra cuando afecta a la articulación de la base del dedo gordo del pie) generalmente se caracteriza por ataques recurrentes de artritis inflamatoria: una articulación enrojecida, sensible, caliente e inflamada.

Independientemente del tipo de artritis, los síntomas comunes de todos los trastornos de la artritis incluyen niveles variados de dolor, hinchazón, rigidez de las articulaciones y a veces un dolor constante alrededor de la(s) articulación/articulaciones. La principal queja de las personas que padecen artritis es el dolor articular. El dolor suele ser constante y puede localizarse en la articulación afectada. El dolor de la artritis se produce debido a la inflamación que ocurre alrededor de la articulación, al daño a la articulación por enfermedad, al desgaste diario de la articulación, a distensiones musculares causadas por movimientos contundentes contra articulaciones rígidas y dolorosas y fatiga.

En otra realización de la invención, el mamífero padece osteoartritis o artritis reumatoide.

En una realización adicional de la invención, el mamífero padece osteoartritis.

En otra realización adicional de la invención, el mamífero padece artritis reumatoide.

Preparación del hidrogel de poliacrilamida (PAAG)

El hidrogel se puede preparar como se describe en el documento WO 02/16453. En lo que sigue, el hidrogel de poliacrilamida puede abreviarse como PAAG.

El hidrogel puede comprender cualquier realización del hidrogel tal como se describe en los documentos WO 02/16453 y WO 2012/123385. Preferiblemente, el hidrogel comprende de 0,5 a 25% en peso de poliacrilamida, en base al peso total del hidrogel. El hidrogel comprende además normalmente al menos un 75% en peso de agua libre de pirógenos o de disolución salina, preferiblemente agua libre de pirógenos.

El hidrogel se puede obtener combinando acrilamida y monómeros reticulantes, iniciando la polimerización por iniciación radicalaria; y lavado con agua libre de pirógenos o disolución salina, siendo la combinación en las cantidades, y el lavado tal, que proporcionen aproximadamente de 0,5 a 25% en peso de poliacrilamida, en base al peso total del hidrogel. El hidrogel así obtenido es tanto bioestable como biocompatible, y no es reabsorbido por el organismo.

Normalmente, el hidrogel se obtiene combinando acrilamida y agente de reticulación, tal como N,N'-metilen bisacrilamida, en una relación molar de 150:1 a 1000:1. El agente de reticulación, tal como N,N'-metilen bis-acrilamida, sirve para proporcionar reticulación entre cadenas poliméricas y la relación molar puede variarse para proporcionar diversas densidades de reticulación del hidrogel. Las condiciones para obtener el hidrogel pueden modificarse según, por ejemplo, la naturaleza de la articulación en donde se pretende inyectar el hidrogel. Las propiedades reológicas deseadas, tales como la elasticidad, pueden controlarse al menos en parte mediante el contenido de peso sólido del hidrogel. El hidrogel de la invención comprende aproximadamente de 0,5 a 25% en peso de poliacrilamida, en base al peso total del hidrogel. En realizaciones adecuadas de la invención, el hidrogel comprende menos del 15% en peso de poliacrilamida, en base al peso total del hidrogel, preferiblemente menos del 10% en peso, más preferiblemente menos del 7,5% en peso, incluso más preferiblemente menos del 5%, lo más preferiblemente menos del 3,5% en peso de poliacrilamida, en base al peso total del hidrogel.

La combinación implica combinar los componentes reactivos acrilamida y agente de reticulación, tal como N,N'-metilen bis-acrilamida, normalmente desgasificada y normalmente de una manera que minimice el contacto con el operario. Opcionalmente, los componentes reactivos pueden combinarse previamente para formar una mezcla inerte. Una mezcla inerte es aquella en donde no se produce ninguna reacción química entre los reactivos componentes. La combinación implica combinar acrilamida, agente de reticulación, tal como N,N'-metilen-bis-acrilamida, y un componente iniciador radicalario para iniciar la polimerización. En una realización adecuada, se combina una premezcla inerte de acrilamida, agente reticulante, tal como N,N'-metilen-bis-acrilamida, y N,N,N',N'-tetrametilenetilen-diamina (TEMED) con una disolución de iniciador de persulfato de amonio (AMPS). Sin embargo, los componentes pueden combinarse como singularidades o como premezclas plurales alternativas.

La acrilamida y el agente de reticulación, como N,N'-met¡len-b¡s-acr¡lamida, se combinan adecuadamente en una relación molar de aproximadamente de 150:1 a 1000:1, normalmente aproximadamente de 150:1 a 900:1, preferiblemente aproximadamente de 175:1 a 800:1, más preferiblemente aproximadamente de 200:1 a 600:1, lo más preferiblemente de 250:1 a 600:1. Como se muestra en las Tablas 2 y 3, pueden prepararse de manera controlable hidrogeles de diferente contenido en peso sólido y propiedades reológicas. El hidrogel que tiene las características reológicas deseadas se ha obtenido combinando acrilamida y N,N'-metilen-bis-acrilamida en una proporción de aproximadamente 250:1, aproximadamente 260:1, aproximadamente 270:1, aproximadamente 280:1, aproximadamente 290:1, aproximadamente 300:1, aproximadamente 310:1, aproximadamente 320:1, aproximadamente 330:1, aproximadamente 340:1, aproximadamente 350:1, aproximadamente 360:1, aproximadamente 370:1, aproximadamente 380:1, aproximadamente 390:1, aproximadamente 400:1, aproximadamente 410:1, aproximadamente 420:1, aproximadamente 430:1, aproximadamente 440:1, aproximadamente 450:1, aproximadamente 460:1, aproximadamente 470:1, aproximadamente 480:1, aproximadamente 490:1 y aproximadamente 500:1.

Particularmente en la realización en donde el hidrogel se inyecta en una articulación, la elasticidad del hidrogel es de gran relevancia. En una realización preferida, el hidrogel de la invención tiene un módulo de elasticidad de aproximadamente de 1 a 200 Pa, tal como aproximadamente de 2 a 175 Pa, normalmente aproximadamente de 5 a 150 Pa, tal como de 10 a 100 Pa. Los especialistas en la técnica serán conscientes de cómo obtener un hidrogel con una elasticidad adecuada para el uso previsto. Véanse también los ejemplos siguientes, que describen la preparación de hidrogeles con elasticidad baja, media y alta.

El hidrogel comprende al menos un 75% en peso de agua libre de pirógenos o disolución salina, preferiblemente agua libre de pirógenos. En una realización adecuada de la invención, el hidrogel comprende al menos 80% en peso de agua libre pirógenos o disolución salina, preferiblemente al menos 85%, más preferiblemente al menos 90%, incluso más preferiblemente al menos 95% en peso de agua libre de pirógenos o disolución salina.

Una disolución salina adecuada tiene una osmolaridad similar a la del líquido intersticial. Las disoluciones salinas adecuadas incluyen, entre otras, el grupo que comprende cloruro de sodio acuoso al 0,25-1%, una disolución de Ringer-Lockart, una disolución de Earle, una disolución de Hanks, un medio Eagle, una disolución de glucosa al 0,25-1%, una disolución de cloruro de potasio y una disolución de cloruro de calcio. En una realización preferida, la disolución salina es una disolución acuosa de cloruro de sodio al 0,8-1%, tal como una disolución acuosa de cloruro de sodio al 0,8, 0,9 o 1%, lo más preferiblemente aproximadamente al 0,9% de cloruro de sodio acuoso.

Como resultará obvio para el especialista en la técnica, en la realización en donde se usa disolución salina para la preparación del PAAG y/o para el lavado del PAAG, el contenido en peso sólido del PAAG será mayor que la contribución correspondiente a la poliacrilamida, pero normalmente no más de un 1% adicional.

En una realización particularmente adecuada de la invención, el hidrogel comprende aproximadamente un 2,5% en peso de poliacrilamida, en base al peso total del hidrogel y aproximadamente un 97,5% de agua libre de pirógenos.

Se utiliza agua libre de pirógenos o disolución salina para lavar el hidrogel en un proceso de lavado. El proceso de lavado sirve, en parte, para eliminar todo menos trazas de monómeros de acrilamida y el agente de reticulación, tal como N,N'-metilen-bis-acrilamida. Estos monómeros son tóxicos para el paciente y perjudiciales para la estabilidad del hidrogel. El proceso de lavado es preferiblemente tal que las concentraciones de los monómeros restantes de acrilamida y agente reticulante, tal como N,N'-metilen-bis-acrilamida, estén por debajo de 50 ppm, más preferiblemente por debajo de 40 ppm, tal como por debajo de 30 ppm, lo más preferiblemente por debajo de 20 ppm, normalmente por debajo de 10 ppm, de forma particularmente preferible por debajo de 5 ppm.

Agentes reticulantes

El hidrogel según la presente invención puede contener un agente de reticulación seleccionado del grupo que consiste en N,N'-metilen-bis-acrilamida, N,N'-etilen-bis-acrilamida, etilen-bis(oxietilen nitrilo)-óxido tetracético, ácido etilen-bis-(oxietilen nitrilo) tetracético y mezclas de los mismos. En una realización, dicho agente de reticulación se selecciona del grupo que consiste en N,N'-metilen-bis-acrilamida, N,N'-etilen-bis-acrilamida y mezclas de los mismos. En una realización adicional, dicho agente de reticulación es N,N'-metilen-bis-acrilamida.

Cabe señalar que las realizaciones y características descritas en el contexto de uno de los aspectos de la presente invención también se aplican a los otros aspectos de la invención.

La invención se describirá ahora con más detalle en los siguientes ejemplos.

Ejemplos

Ejemplo 1: preparación de hidrogel

Preparación de hidrogel:

El PAAG es un gel de poliacrilamida fabricado mediante polimerización de los monómeros de acrilamida (AM) y N,N'-metilen-bis-acrilamida (bisAM). El producto terminado puede tener diferentes módulos de elasticidad.

El hidrogel contiene normalmente aproximadamente un 95% de agua. Se ha demostrado que la concentración de los monómeros acrilamida y N,N'-metilen-bis-acrilamida es inferior a 10 ppm y es adecuada para la estabilidad deseada del producto final, a menudo inferior a 5 ppm.

El producto terminado debe ajustarse con respecto al pH, ausencia de metales pesados, índice de refracción, estabilidad, ausencia de pirógenos, y debe ser estéril, prácticamente inerte y sustancialmente libre de monómeros. Preparación 1.1

La preparación sintética implica de forma adecuada las siguientes operaciones:

1. Se preparan dos mezclas, A1 y A2. A1 comprende agua, acrilamida, N,N'-metilen-bis-acrilamida, N,N,N',N'-tetrametilen-etilen-diamina (TEMED). A2 comprende agua y persulfato de amonio;

2. Las dos mezclas se combinan en la siguiente proporción: 1990 ml de A1 y 10 ml de A2 y se mantienen a 45°C y se desgasifican con nitrógeno durante 20 segundos;

3. La mezcla de reacción se vierte en varios vasos de precipitados de 100 ml;

4. Se deja que se produzca la polimerización durante 0,5 a 1,5 horas;

5. El gel se desmolda;

6. Los monómeros residuales se extraen y equilibran en agua WFI durante 92 horas, cambiando el agua varias veces, normalmente 8 veces durante las 92 horas;

7. Los geles purificados se homogeneizan triturando con una rejilla de oscilación vertical;

8. Se llena una jeringa con el material de gel homogeneizado;

9. Autoclavado de la jeringa.

Un método típico para preparar el hidrogel se puede resumir como:

Preparación 1.2

Resumen del proceso

El gel se prepara mezclando una disolución acuosa de monómeros de acrilamida (AM) y N,N'-metilen-bis-acrilamida (bisAM) como reticulante con N,N,N',N'-tetrametilen etilendiamina (TEMED) como co-iniciador y persulfato de amonio (AMPS) como iniciador de radicales libres (sistema redox). Desgasificando una disolución a granel con nitrógeno, comienza la polimerización. Después de la polimerización final, el gel se transfiere a un tanque de lavado con bandejas de red sobre las que se coloca el gel. Durante el lavado con agua, el gel se hincha y se extraen los residuos de monómero. El gel hinchado se alimenta y se evacua en una unidad de llenado que tiene el gel administrado en una jeringa, que se esteriliza en autoclave. Se han preparado dos formulaciones alternativas, una de elasticidad de extremo inferior y otra de elasticidad de extremo superior.

Tabla 1

Las anteriores son preparaciones típicas del hidrogel y pueden ajustarse dentro de ciertos intervalos.

Preparación 1.3

Formulaciones de poliacrilamida a partir del proceso de reticulación en línea

Un método particularmente interesante para preparar los hidrogeles de la invención implica un proceso de reticulación en línea. Dos flujos individuales y eventualmente desgasificados, siendo uno una premezcla de acrilamida, N,N'-metilen-bis-acrilamida (el reticulante) y TEMED, siendo el otro la disolución de iniciador AMPS, se bombean a un mezclador estático para mezcla, iniciación química y posterior extrusión aguas abajo en un reactor tubular fabricado en teflón o acero en donde se produce la polimerización. El lavado del gel se simplifica debido a la gran superficie de gel del reactor.

Seleccionando las concentraciones de monómero, reticulante e iniciador y sus relaciones molares relativas, y regulando los dos caudales y las temperaturas de polimerización, es posible producir geles que varían en grado de reticulación y en contenido de sólidos.

Preparación 1.4

Los reactivos se combinaron en las proporciones descritas en las Tablas 2, 3 y 4, y se lavaron como se describe en las Tablas (con agua libre de pirógenos, a menos que se indique lo contrario) para dar lugar a formulaciones de elasticidad baja, media y alta. Se prepararon hidrogeles con contenidos de peso sólido entre 0,5 y 25% de poliacrilamida.

Tabla 2: Parámetros de proceso y características del gel resultante: formulaciones de elasticidad baja

a) el material era líquido, por lo que el lavado fue una dilución.

b) infinito.

c) dado que el lavado no fue una extracción sino una dilución, el monómero residual simplemente disminuyó por el factor de dilución (de 508 ppm a 254 ppm).

d) colada y lavado con disolución acuosa de NaCl al 0,9%.

e) colada con agua; lavado realizado con disolución acuosa de NaCl al 0,9%.

f) valores de prelavado: el lavado suele reducir el valor en un 30-55%.

g) valores de prelavado: el lavado suele reducir el valor en un 20-40%.

h) muy sensible a la muesca.

i) las variaciones en los valores pueden deberse a técnicas de rendimiento de medición o a la ubicación en el lote del que se tomó la muestra.

Tabla 3: Parámetros de proceso y características del gel resultante: formulaciones de elasticidad media

Tabla 4: Parámetros de proceso y características del gel resultante: formulaciones de elasticidad alta

Ejemplo 2: Estudio de la integración de PAAG (hidrogel de poliacrilamida) en articulaciones de animales

El objetivo de este estudio histopatológico fue investigar si, y de ser así, dónde, la inyección intraarticular de PAAG se integra en articulaciones de animales normales y con OA, y si dicha integración se mantiene en el tiempo.

Métodos

Se examinaron dos tipos de articulaciones de animales. En primer lugar, realizamos un estudio prospectivo, longitudinal y controlado sobre articulaciones de rodilla normales en conejos y, en segundo lugar, se realizó un examen post-mortem en articulaciones de caballos con OA que habían sido tratadas con PAAG en diferentes momentos antes de la muerte. El PAAG utilizado en todos estos casos fue Aquamid Reconstruction® (Contura International A/S, Soeborg, Dinamarca). Se obtuvo la aprobación ética de la Organización Danesa de Bienestar Animal (dyreforsogstilsynet, referencia J.nr. 2010/561-1774).

Estudio prospectivo comparativo en articulaciones normales de conejo

Se utilizaron un total de 10 conejos blancos de Nueva Zelanda de dos años. Los 4 primeros recibieron inyecciones en la rodilla derecha con PAAG al 2,5% y en la rodilla izquierda con disolución salina como control. Los 6 conejos restantes también recibieron inyecciones de PAAG en la rodilla derecha, pero en la rodilla izquierda recibieron hialuronano (HA, Durolane 20 mg/ml, Galderma, Suiza) como control. El volumen de PAAG, disolución salina o HA inyectados fue de 0,3 ml por rodilla. Este se administró después de haber extraído unas gotas de líquido articular. Se observó diariamente el bienestar de los conejos y se midió su peso una vez a la semana, y se mantuvieron en condiciones estándar en parejas. Los primeros 4 conejos (grupo de control de disolución salina) se sacrificaron después de 10 días. Los 6 conejos restantes se sacrificaron, 2 de cada vez, después de 3, 6 y 12 meses. Para los 10 conejos, se extrajeron ambas articulaciones de la rodilla y se inspeccionaron macroscópicamente. Todo el tejido sinovial, cartilaginoso, tendinoso y graso de la articulación se extrajo y procesó para su examen histopatológico utilizando tinciones de H&E y van Gieson/azul Alcián como marcadores de tejido.

Un estudio de las articulaciones osteoartríticas en el caballo.

Este estudio incluyó a 7 caballos (de 5-13 años de edad, mediana de 10 años) que presentaban un total de 13 articulaciones con OA diagnosticada por un veterinario que habían sido tratadas con PAAG. Cinco articulaciones sin OA sirvieron como controles. Los caballos formaron parte de un gran estudio clínico prospectivo llevado a cabo en 3 centros equinos diferentes, donde se habían inyectado 1-4 (media 2) ml de PAAG por articulación y donde se siguió el efecto del tratamiento postoperatoriamente durante hasta 2 años. Se llevó a cabo un examen histopatológico en las articulaciones de las patas de los caballos que perecieron durante ese período. El tratamiento con PAAG se había realizado desde 7 días hasta 2 años antes. Todos los caballos habían sido sacrificados por causas no relacionadas con el tratamiento con PAAG. Después de la disección y la inspección macroscópica de las articulaciones, todo el tejido sinovial que representa la cápsula interna se fijó de forma rutinaria, se embebió en parafina y se tiñó para microscopía óptica. También se examinaron muestras de cartílago (2 de cada articulación).

Resultados - Estudio en conejos

Los conejos con articulaciones normales estaban todos sanos en el momento de la inyección y permanecieron así durante el estudio sin cambios en el movimiento de las articulaciones (por ejemplo, restricción de actividad o cojera) en ningún momento. En una inspección general, no hubo diferencias, salvo en 2 casos de hemorragia leve de la cápsula en el lugar de la inyección. Al abrir la cavidad articular, tanto el líquido sinovial como el revestimiento sinovial interno aparecieron ligeramente engrosados en el lado tratado con PAAG en comparación con el lado tratado con disolución salina el día 10. No se pudieron discernir diferencias macroscópicas entre las articulaciones tratadas con PAAG y HA en ningún momento punto.

La microscopía óptica en el lado tratado con PAAG en el día 10 mostró una nueva capa de revestimiento sinovial que era 5-10 veces más gruesa que en el lado inyectado con disolución salina (Figura 1 a), debido a que el PAAG contenía células sinoviales en proliferación (Figura 1b).

En los días 90, 180 y 360, la capa sinovial era todavía hasta 10 veces más gruesa en el lado tratado con PAAG (Figura 1c), y el revestimiento sinovial estaba presente en la parte superior del PAAG orientado hacia la cavidad. A estas alturas, solo se veían células sinoviales dispersas dentro del PAAG entremezcladas con una fina red fibrosa (Figura 1d), y no se encontró PAAG dentro de la cavidad articular (Figuras 1c y 1d).

Resultados - Estudio en caballos

Hallazgos macroscópicos: el hueso del ataúd, el espolón y las articulaciones de la rodilla habían sido tratados con PAAG. Tres articulaciones de hueso del ataúd sin tratar y 2 articulaciones de espolón sirvieron como controles. Al abrir la cavidad articular, solo se pudieron ver varios grados de formación de osteofitos y/o defecto(s) del cartílago en 3 de las 5 articulaciones de espolón tratadas. El PAAG apareció como una sustancia amarilla espesa, lisa, brillante, o en la articulación del hueso del ataúd como pequeños depósitos transparentes a lo largo de la parte interna del tendón longitudinal anterior orientado hacia la cavidad. El PAAG libre dentro de la cavidad no se pudo distinguir del líquido articular a simple vista.

Hallazgos de microscopía óptica: a corto plazo, 1 y 2 semanas después del tratamiento, el PAAG apareció como una capa interna dentro del revestimiento sinovial entremezclada con células sinoviales en proliferación, similar a la histología observada en el modelo de conejo. Al mes, las células sinoviales aparentemente se habían reubicado hacia la superficie, y a los 3 meses se había formado una capa distinta de células sinoviales en la parte superior del PAAG integrado (Figura 2a). El mismo patrón se encontró a los 8 meses (Figura 2b) y a los 24 meses (Figuras 2c y 2d). En general, no hubo reducción en el grosor de la membrana del PAAG integrado y, a mayores aumentos, se pudo ver que el PAAG se había materializado como una zona integrada gruesa inicialmente con células inflamatorias dispersas, posiblemente células sinoviales (Figura 2a), y posteriormente con una fina red fibrosa y muy pocas células inflamatorias (Figura 2d).

Resumen de resultados

La integración del PAAG inyectado fue evidente el día 10 en el conejo y el día 14 en el caballo, con proliferación e invasión de células sinoviales en el PAAG. Para el día 90 en las articulaciones del conejo y para el día 30 en las articulaciones del caballo, el PAAG había formado una capa subsinovial, que estaba atravesada por delgadas hebras de tejido conectivo con vasos y cubierta por un nuevo revestimiento sinovial orientado hacia la cavidad articular. Este aspecto histológico persistió hasta 2 años después de la inyección en las articulaciones de los caballos.

Conclusión

La inyección intraarticular de PAAG da como resultado una capa subsinovial estable y duradera de PAAG atravesada por finas hebras de tejido conectivo. Además, el PAAG inyectado no contenía macrófagos ni células gigantes. Las células gigantes pueden surgir en respuesta a una infección y, por tanto, su presencia en este contexto podría haber sido un signo de inflamación o de integración no estable del PAAG. Por lo tanto, el estudio actual demostró de manera sorprendente y única la formación de una nueva capa de revestimiento sinovial, analgésica, no tóxica, duradera y estable, después de la integración del PAAG, que no contenía células gigantes en ningún momento (Figura 1 (a, c, d) y Figura 2 (a-d)).

Sin pretender imponer ninguna teoría, se ha descubierto que son los cambios en la composición de las células sinoviales o la producción de citocinas los que proporcionan la prevención y/o el tratamiento de la sinovitis dolorosa en un mamífero. Por tanto, el PAAG intraarticular está presente en el líquido sinovial articular y persiste a lo largo del tiempo.

Ejemplo 3: Estudio clínico de la puntuación del dolor humano en articulaciones con osteoartritis

Resumen del estudio clínico

Título del ensayo:

Estudio observacional retrospectivo y prospectivo de Aquamid Reconstruction® en pacientes con osteoartritis de rodilla.

Periodo de la prueba:

Los pacientes fueron tratados entre marzo de 2010 y enero de 2015, y se les dio seguimiento durante al menos 12 semanas después del tratamiento.

Objetivos:

El objetivo principal fue evaluar el resultado respecto a la línea base en las sub-puntuaciones de dolor WOMAC al menos 12 semanas después del tratamiento con Aquamid Reconstruction®.

Los objetivos secundarios fueron 1) Evaluar el resultado respecto a la línea base en la puntuación total de WOMAC y en las sub-puntuaciones de rigidez y funcionalidad; 2) Evaluar la percepción subjetiva del paciente sobre la efectividad del tratamiento al menos 12 semanas después de la inyección de Aquamid Reconstruction®.

Metodología:

Este fue un estudio de seguimiento no intervencionista de pacientes que habían sido tratados fuera de la etiqueta con Aquamid Reconstruction para la osteoartritis de rodilla.

El estudio consistió en una parte retrospectiva en donde se recuperaron las características demográficas y basales de los registros médicos de los pacientes, y una parte prospectiva de seguimiento en donde los pacientes con una sub puntuación de dolor WOMAC basal podían participar en el estudio. Para la parte prospectiva, la mayoría de los datos se recopilaron de los Formularios de Informes de Casos. Los pacientes fueron seguidos después de un mínimo de 12 semanas desde el tratamiento con Aquamid Reconstruction®.

Número de Pacientes:

Se incluyeron 24 pacientes con un total de 32 articulaciones de rodilla tratadas.

Diagnóstico y criterios de inclusión:

Para ser elegibles para este estudio, los pacientes deben:

1) Haber sido tratados con Aquamid Reconstruction® para la osteoartritis de rodilla, con síntomas subjetivos como dolor, hinchazón, exceso de líquido y limitación en los movimientos articulares y clasificados como de osteoartritis de moderada a grave según los criterios establecidos por el American College of Rheumatology y en los que previamente hayan fallado otros tratamientos.

2) Haber firmado un formulario de consentimiento informado.

Criterios de evaluación:

Eficacia: El criterio principal de valoración de la eficacia es el cambio en la subpuntuación de dolor WOMAC desde el inicio hasta al menos 12 semanas de seguimiento.

Los criterios de valoración secundarios de la eficacia son el cambio en la puntuación total de WOMAC y las subpuntuaciones de rigidez y funcionalidad desde el inicio hasta al menos 12 semanas, así como la percepción subjetiva del paciente de la eficacia del tratamiento.

Resultados:

Eficacia: Hubo una mejora estadísticamente significativa en el cambio medio en la subpuntuación de dolor WOMAC (P = 0,0002) y en cada uno de los tres criterios de valoración secundarios de eficacia (puntuación total WOMAC y subpuntuaciones de rigidez y función física) desde el inicio hasta la última visita de seguimiento, (P = 0,0012), (P = 0,0008) y (P = 0,0048), respectivamente.

Seguridad: No se informaron eventos adversos graves. Se observaron efectos adversos leves y transitorios genéricos a la inyección, como hinchazón y malestar, en unos pocos pacientes en el período perioperatorio y postoperatorio, pero no se observaron complicaciones importantes como infecciones. Ningún paciente informó molestias/eventos adversos durante el seguimiento.

Conclusión:

Aquamid Reconstruction® es un tratamiento eficaz y seguro para pacientes con osteoartritis de la articulación de la rodilla con efecto sostenido.

Detalles del estudio clínico

Aquamid Reconstruction® (AR) es un hidrogel de poliacrilamida (PAAG).

1. Antecedentes

Entre marzo de 2010 y enero de 2015, se inyectó AR a 24 pacientes con OA de la rodilla según los criterios establecidos por el American College of Rheumatology. Un total de 32 articulaciones de rodilla recibieron tratamiento con AR. Antes de la inyección, se determinó un diagnóstico de OA mediante rayos X y la gravedad de la OA se calificó según Kellgren y Lawrence, que consta de 5 puntajes (0, Ninguno; 1, Dudoso; 2, Mínimo; 3, Moderado; 4, Grave). Los criterios de valoración de la eficacia son el cambio en las subpuntuaciones de WOMAC y la puntuación total y la percepción subjetiva del paciente del resultado del tratamiento al menos 12 semanas después del tratamiento inicial. El tratamiento con Aquamid Reconstruction® en pacientes con OA en las articulaciones de la rodilla se realizó en un entorno fuera de lo aprobado en pacientes que no habían tenido una respuesta adecuada a otros tratamientos (no farmacológicos y farmacológicos) y que expresaron el deseo de un tratamiento donde podrían posponer o potencialmente evitar por completo un reemplazo total de rodilla.

1.1 Dispositivo de investigación

AR contiene 2,5% de poliacrilamida y 97,5% de agua apirogénica. AR es biocompatible, no biodegradable, estable y estéril.

El gel se presenta en una jeringa sellada de 1 ml, precargada y estéril. El gel se inyectó intraarticularmente con una aguja estéril de 21G x 2 pulgadas (0,8 x 50 mm).

El gel debe almacenarse en un ambiente seco a temperatura ambiente normal (por debajo de 30°C).

Está diseñado para un solo uso. Antes de la inyección, se debe verificar que el paquete no esté dañado y no tenga alteraciones visuales.

1.2 Método de administración

Se utilizó la siguiente estrategia para todos los pacientes inyectados con AR:

El procedimiento se realizó en condiciones asépticas. Antes de la inyección, el lugar de la inyección se lavó en un radio de al menos 5 cm alrededor del lugar de la inyección con clorhexidina con alcohol tres veces con un intervalo de un minuto. La inyección se administró en el espacio articular. En caso de derrame articular, éste se eliminó antes de la inyección, utilizando la misma aguja. Se utilizó una aguja de 21 G x 2" (0,8 x 50 mm). La inyección del hidrogel se realizó con anestesia local (tanto dentro de la articulación como directamente en el lugar de la inyección).

Las inyecciones se realizaron con la ayuda de ultrasonidos en el receso proximal lateral. Los pacientes estaban acostados o sentados con la rodilla doblada entre 80°-90°.

La jeringa, la aguja y cualquier material sobrante se desechó después de la sesión de tratamiento.

1.3 Dosificación

Inicialmente se inyectaron de 1-5 ml. En caso de no obtener una eficacia suficiente, se inyectaron otros 1 -6 ml después de un mínimo de dos semanas. Algunos pacientes recibieron hasta 3 inyecciones. Véase la Tabla 6.

1.4 Diseño de la prueba

Este estudio no intervencionista consistió en una parte retrospectiva donde se recuperaron los datos históricos de los registros médicos de los pacientes y una parte de seguimiento donde los datos se recopilaron de forma prospectiva en las visitas de seguimiento. Las inyecciones de AR y los datos asociados se recopilaron como parte del trabajo clínico de rutina, por lo que no se planificaron intervalos de seguimiento específicos ni se siguió un cronograma de evaluación estricto.

Se incluyeron pacientes que tenían una puntuación WOMAC inicial y un seguimiento durante al menos 12 semanas después de la inyección de AR inicial. Los siguientes datos, registrados antes y/o después del tratamiento, se obtuvieron de los registros médicos y los CFR de los pacientes:

• Fecha (s) de tratamiento.

• Características demográficas (edad, sexo, altura, peso).

• Severidad de la osteoartritis de rodilla (clasificación de Kellgren Lawrence).

• Otros tratamientos/intervenciones previas al tratamiento de AR.

• Detalles sobre el tratamiento (volumen inyectado).

• Puntuaciones WOMAC.

• Percepción subjetiva del resultado del tratamiento.

• Complicaciones/eventos adversos.

Los pacientes acudieron a la clínica o fueron contactados por teléfono para completar el cuestionario WOMAC y proporcionar su percepción subjetiva de la efectividad del tratamiento, así como para proporcionar información sobre cualquier complicación/problema médico que pudieran haber tenido después del tratamiento con AR.

1.5 Criterios de elegibilidad

Para recibir el tratamiento con AR el paciente tenía que cumplir los siguientes criterios:

1. OA de la rodilla según los criterios establecidos por el American College of Rheumatology.

2. Formulario de consentimiento informado firmado.

2. Eficacia

2.1 Índice de osteoartritis de las Universidades de Western Ontario y McMaster (WOMAC)

El índice de osteoartritis de las Universidades de Western Ontario y McMaster (WOMAC) es un cuestionario específico de la enfermedad diseñado para ser completado por pacientes con osteoartritis de cadera y/o rodilla con el fin de evaluar el dolor, la rigidez y la función física. El cuestionario WOMAC está disponible en formato de tipo Likert de 5 puntos y de escala analógica visual (VAS) de 100 mm. Las respuestas de las escalas VAS y Likert están altamente correlacionadas; sin embargo, se considera que la escala Likert es más fácil de administrar ya que los pacientes comprenden mejor las casillas de verificación asociadas con una palabra o frase que marcar una X en una línea continua. La versión de la escala Likert, que se utilizó para todos los pacientes, utiliza los siguientes descriptores para todos los ítems: ninguno, leve, moderado, severo y extremo. Estos corresponden a una escala ordinal de 0-4.

Las puntuaciones se suman para los elementos de cada subescala, con los siguientes rangos posibles: dolor = 0-20, rigidez = 0-8, función física = 0-68. Se crea una puntuación total de WOMAC sumando los elementos de las tres subescalas. Los puntajes más altos de WOMAC indican un peor dolor, rigidez y limitaciones funcionales. La puntuación total más alta posible es 96.

El índice de osteoartritis WOMAC consta de 24 ítems divididos en 3 subescalas:

• Dolor (5 ítems): al caminar, al usar escaleras, en la cama, sentado o acostado y de pie.

• Rigidez (2 ítems): después de despertarse por primera vez y más tarde en el día.

• Función física (17 ítems): uso de escaleras, levantarse después de estar sentado, pararse, agacharse, caminar, entrar/salir de un automóvil, ir de compras, ponerse/quitarse los calcetines, levantarse de la cama, acostarse en la cama, entrar/salir del baño, sentarse, sentarse/levantarse del inodoro, tareas domésticas pesadas, tareas domésticas ligeras.

El cuestionario, que se puede completar en persona, por teléfono o por ordenador, se completó principalmente en la clínica cuando los pacientes acudieron a las visitas de seguimiento, pero algunos se completaron por teléfono. 2.2 Percepción subjetiva del paciente

Se pidió a los pacientes que indicaran su percepción del resultado del tratamiento seleccionando una de las cuatro alternativas para describir su condición: sin dolor (curado), mejorado, sin cambios, empeorado.

Además, se les preguntó si habían recibido un reemplazo total de rodilla.

2.3 Seguridad

En cada visita de seguimiento, se preguntó a los pacientes sobre la aparición de EA/problemas médicos desde la inyección de AR. Cualquier complicación o problema médico se registró en el CRF. Las complicaciones perioperatorias y postoperatorias/EA, en caso de producirse, se anotaron en los registros médicos.

3. Metodología estadística

3.1 Consideración del tamaño de muestra

El número de pacientes vino determinado por los datos disponibles. Por lo tanto, no se realizó una evaluación del tamaño de la muestra ni un cálculo del poder estadístico.

3.2 Estrategia general para la presentación de informes de resultados

Los datos recopilados se resumen utilizando estadísticas descriptivas. Las estadísticas descriptivas para los parámetros continuos incluyen, según corresponda, el número de observaciones (n), el número de observaciones faltantes (nmiss), la media, la desviación estándar (SD), la mediana, los valores mínimo (mín) y máximo (máx), mientras que los parámetros categóricos incluyen la frecuencia y porcentaje.

Las estimaciones se presentan con intervalos de confianza del 95% cuando corresponde. No se aplicará ninguna corrección por multiplicidad. No se realizarán pruebas formales de hipótesis.

3.3 Análisis e informe del criterio de valoración de eficacia

El criterio principal de valoración de la eficacia es el cambio en la subpuntuación del dolor WOMAC respecto a la línea base hasta el seguimiento de 12 semanas. El valor de la línea base se define como la última subpuntuación de dolor de WOMAC evaluada antes o el día de la administración. El seguimiento de 12 semanas se define como la primera subpuntuación de dolor WOMAC evaluada en o después de las 12 semanas (definido como un día relativo para la evaluación mayor o igual a 12 semanas multiplicado por 7 días, siendo el día 1 el día de administración).

Se presentarán estadísticas descriptivas que incluyen la media y la desviación estándar para el criterio de valoración principal. Si corresponde, se presentará un intervalo de confianza del 95% para la media asumiendo una distribución normal del criterio de valoración. Los supuestos para el uso de la distribución normal se investigarán gráficamente presentando la distribución del criterio de valoración. Si se considera que los supuestos no se cumplen, se utilizarán otras estrategias de análisis, como la transformación del punto final o el uso de métodos no paramétricos. Si corresponde, el cambio se corregirá respecto al valor de línea base.

A los efectos de los análisis exploratorios, se pueden introducir más definiciones de respondedor, como definir la respuesta como al menos un 20% de mejora con respecto al valor de línea base.

3.4 Informe de punto final de seguridad

El número de complicaciones y eventos adversos se resumirá de forma descriptiva y se presentará como número total y por tiempo (antes de la administración y después de la administración, y que ocurran al menos 12 semanas después de la administración) y, si corresponde, por número de secuencia de inyección.

Tabla 5 Características demográficas y basales

3.5 Información de tratamiento y seguimiento

Veinticuatro pacientes con 32 rodillas recibieron el tratamiento con AR. De las 32 rodillas tratadas, 26 rodillas (81,3%) fueron reinyectadas; 23 rodillas recibieron dos inyecciones y tres rodillas recibieron tres inyecciones.

La mediana del volumen total inyectado en cada articulación fue de 6,50 ml (rango 2,0-11,0). Para obtener más información, consulte la Tabla 6. La mayoría de los pacientes recibieron la segunda inyección entre 2-14 semanas después de la inyección inicial; sin embargo, tres pacientes recibieron el segundo tratamiento 26, 32 y 212 semanas después de la primera inyección.

Tabla 6: Información sobre el tratamiento

Antes del tratamiento y en las visitas de seguimiento, los pacientes completaron el cuestionario WOMAC. En las visitas de seguimiento, también se preguntó a los pacientes sobre su percepción del resultado del tratamiento y si habían recibido un reemplazo total de rodilla. El tiempo de seguimiento medio ± SD (mediana) desde el primer tratamiento con AR fue de 428 ± 522 (210) días (rango 104-1744).

4. Datos de evaluación de la eficacia (datos no mostrados, pero resumidos a continuación).

4.1 Percepción subjetiva del paciente del resultado del tratamiento.

La evaluación subjetiva del paciente del resultado del tratamiento mostró que 20 rodillas (62,6%) se clasificaron como "curadas/sin dolor" (6,3%) o como "mejoradas" (56,3%). Se informó que ocho rodillas (25,0%) "no cambiaron" y 3 rodillas (9,4%) "empeoraron". Un paciente tuvo un reemplazo total de rodilla de la rodilla izquierda durante el estudio ("extirpado").

La percepción subjetiva del paciente sobre el resultado del tratamiento se proporciona en la Tabla 7.

Tabla 7: Percepción subjetiva del paciente sobre el resultado del tratamiento

Los pacientes que informaron que no tenían dolor (curados), o que habían mejorado, también demostraron el cambio más alto en la sub-puntuación de dolor WOMAC, (-10,0) y (-4,9), respectivamente. Se observa una relación similar para la puntuación total de WOMAC y las dos sub-puntuaciones (rigidez y función física). Para las puntuaciones WOMAC asociadas con el resultado del tratamiento informado por el paciente, los resultados se muestran en la Tabla 8.

Tabla 8: Sub-puntuación de dolor WOMAC para el resultado del tratamiento informado por el paciente

1 El paciente ID 54 recibió una inyección en la rodilla izquierda con una buena respuesta inicial al tratamiento que disminuyó a los dos meses, donde el paciente regresó y recibió una segunda inyección en la rodilla izquierda. Al mismo tiempo, también se inyectó AR en la rodilla derecha. Tanto la rodilla izquierda como la derecha mostraron una buena mejoría y el paciente montaba en bicicleta 40 km al día. Esta mejora duró aproximadamente 6 meses y, tras una disminución del efecto en la rodilla izquierda, se programó al paciente para un reemplazo total de rodilla. No se obtuvo un WOMAC de pre-tratamiento para la rodilla derecha, pero esta rodilla se encontraba muy bien 42 meses después de la inyección. Se tomó un WOMAC post-tratamiento 3,5 meses después de la inyección de AR.

5. Evaluación de la seguridad

5.1 Eventos adversos.

No se informaron eventos adversos graves. Se observaron efectos adversos leves y transitorios genéricos a la inyección, como hinchazón y malestar, en unos pocos pacientes en el período perioperatorio y postoperatorio, pero no se observaron complicaciones importantes como infecciones.

Ningún paciente informó molestias/eventos adversos durante el seguimiento.

El número de pacientes tratados es limitado, lo que puede explicar la ausencia de complicaciones observadas. Sin embargo, el PAAG ha demostrado un buen perfil de seguridad, con pocas complicaciones en otras indicaciones.

6. Conclusión

La reducción de la puntuación WOMAC observada en este estudio de 32 rodillas seguidas durante una mediana de 7 meses después del tratamiento con PAAG fue estadísticamente significativa para la puntuación total WOMAC, así como para todas las sub-puntuaciones. Se sabe que el efecto placebo dura hasta 6 meses para los tratamientos no invasivos actuales. Después de ese tiempo, los síntomas reaparecen sin necesidad de reinyecciones.

El criterio de valoración principal del estudio, el cambio en la sub-puntuación de dolor de WOMAC, se redujo significativamente (P = 0,0002) en aproximadamente un 40% para todos los grupos de gravedad de OA. Los grupos de gravedad de OA 1 y 2 demostraron un efecto numéricamente mayor en la puntuación de dolor (cambio medio -5,5) que los grupos de gravedad de OA 3 y 4 (cambio medio -2,0).

Curiosamente, el cambio en la sub-puntuación de dolor WOMAC fue significativo (P = 0,0107) para la puntuación de gravedad de OA 3 y 4.

Sorprendentemente, los presentes inventores han descubierto que el hidrogel de poliacrilamida (PAAG) es útil en la prevención y/o el tratamiento del dolor en seres humanos que padecen osteoartritis (OA).

La sinovitis está presente en muchas articulaciones afectadas por la osteoartritis (OA). Por lo tanto, sin estar sujeto a una teoría en particular, se considera que el efecto analgésico observado en este estudio en humanos que padecen osteoartritis es causado por la presencia de una nueva capa de revestimiento sinovial y/o una nueva capa subsinovial después de la integración del PAAG en las articulaciones humanas y por lo tanto una reducción del dolor sinovial.

Ejemplo 4 - Investigaciones de tejidos de rodillas de pacientes humanos

Antecedentes clínicos

Las articulaciones de la rodilla de dos pacientes que padecían osteoartritis se inyectaron con PAAG (Aquamid), que por su integración pasiva y efecto de relleno sobre la membrana sinovial proporcionó una reducción o eliminación completa del dolor. Dependiendo de la gravedad de la osteoartritis, este alivio del dolor duró hasta 2 años y 5 meses. Después de eso, se realizó una TKA (aloplastia total de rodilla, es decir, reemplazo de rodilla).

Hallazgos patológicos de las TKA

Se obtuvieron huesos, cartílagos y tejidos blandos de cirugías estándar de TKA después de la extracción de aproximadamente la misma cantidad de tejido en cada cirugía, correspondiente a una décima parte de la articulación de la rodilla. Los tejidos blandos y el hueso recubierto de cartílago se cortaron en pequeños trozos y se procesaron para su examen histológico. Se examinó todo el tejido, con la excepción de las tres cuartas partes del hueso. La cantidad de tejido blando varió ligeramente de una rodilla a otra.

Solo se extrajo una décima parte del tejido de la articulación de la rodilla durante la cirugía TKA, y la falta observada de Aquamid integrado es probablemente una consecuencia de las diferentes captaciones de Aquamid en diferentes partes de la articulación.

Paciente 1

Clínica: Una mujer de 77 años con osteoartritis de rodilla severa bilateral fue inyectada en ambas rodillas con 5 ml de Aquamid el 7 y el 28 de agosto de 2014 (total 10 ml por rodilla). El gel había ayudado durante los primeros 2 de los aproximadamente 21/2 años, pero el 12 de septiembre de 2016, se realizó una t Ka del lado izquierdo debido a una OA grave en etapa terminal.

Se observó una abundancia de gel completamente integrado dentro de todos los tejidos blandos examinados. También se observaron áreas de inflamación perivascular, tiras de fibras de tejido conectivo y focos de macrófagos de células claras dentro del tejido blando sinovial. Un depósito de gel profundamente asentado que contenía células gigantes dio la impresión de una inyección directa de gel en los tejidos blandos y no, como se esperaba, solo en la cavidad. En ningún caso había gel en el cartílago o el hueso. El gel se había inyectado 2 años y 5 meses antes.

Paciente 2

Clínica: A una mujer de 69 años con osteoartritis moderada de rodilla se le inyectó un total de 3 ml de Aquamid el 17 de marzo de 2014. La inyección de Aquamid ayudó inicialmente, pero dos años más tarde el dolor de la osteoartritis había reaparecido y se realizó una TKA.

Se observó un gel de Aquamid bien integrado en un tercio de las biopsias. El gel se integró completamente con una red madura y células inflamatorias y fibroblásticas dispersas. No había células gigantes ni áreas que dieran la impresión de inyecciones de gel profundamente asentadas directamente en los tejidos blandos. En ningún caso había gel en el cartílago o el hueso. El gel se había inyectado 2 años antes.

Conclusión

El gel Aquamid se integra en la membrana sinovial mediante una combinación de transposición del revestimiento sinovial y crecimiento interno de las células huésped circundantes, es decir, mediante la formación de una capa subsinovial y/o una nueva capa de revestimiento sinovial. La celularidad dentro del gel es menor que la del tejido sinovial normal, y parte del efecto reductor del dolor de las inyecciones de Aquamid probablemente sea causado por la escasez de células, vasos sanguíneos y nervios asociados.

Claims

REIVINDICACIONES

1. Un hidrogel de poliacrilamida para su uso en la prevención y/o el tratamiento de la sinovitis en un mamífero mediante la formación de una nueva capa de revestimiento sinovial.

2. Un hidrogel de poliacrilamida para su uso según la reivindicación 1, en la prevención y/o el tratamiento de la sinovitis en un mamífero mediante la formación de una capa subsinovial y una nueva capa de revestimiento sinovial.

3. El hidrogel de poliacrilamida para su uso según cualquiera de las reivindicaciones 1-2, en donde la capa subsinovial y/o la nueva capa de revestimiento sinovial está presente/persiste hasta 15 meses, tal como 18 meses, tal como 24 meses.

4. El hidrogel de poliacrilamida para su uso según cualquiera de las reivindicaciones 1-3, en donde el hidrogel de poliacrilamida se administra mediante inyección en condiciones estériles.

5. El hidrogel de poliacrilamida para su uso según cualquiera de las reivindicaciones 1-4, en donde el hidrogel de poliacrilamida se administra mediante inyección intraarticular.

6. El hidrogel de poliacrilamida para su uso según una cualquiera de las reivindicaciones 1-5, en donde se administran de 0,1-20 ml de hidrogel de poliacrilamida mediante inyección en la cavidad intraarticular.

7. El hidrogel de poliacrilamida para su uso según la reivindicación 6, en donde se administran de 0,1-20 ml de hidrogel de poliacrilamida mediante inyección en la cavidad intraarticular al menos una vez, tal como dos veces, tal como tres veces, tal como cuatro veces, tal como 5 veces, tal como 6 veces, tal como 7 veces, tal como 8 veces, tal como 9 veces, tal como 10 veces en la cavidad intraarticular.

8. El hidrogel de poliacrilamida para su uso según la reivindicación 6, en donde se administran de 0,1-20 ml de hidrogel de poliacrilamida mediante inyección en la cavidad intraarticular a intervalos regulares, tal como una vez cada 2 semanas, tal como cada 4 semanas, tal como cada 6 semanas, tal como cada 8 semanas, tal como cada 10 semanas, tal como cada 12 semanas, tal como cada 14 semanas, tal como cada 16 semanas o incluso más en la cavidad intraarticular.

9. El hidrogel de poliacrilamida para su uso según una cualquiera de las reivindicaciones 1 -8, en donde el mamífero es un ser humano, un animal de carreras o un animal de compañía.

10. El hidrogel de poliacrilamida para su uso según una cualquiera de las reivindicaciones 1 -9, en donde el mamífero que va a tratarse es un ser humano y la articulación o articulaciones que se inyectará(n) es la rodilla, cadera, codo, articulaciones metacarpofalángicas e interfalángicas de manos y pies, la articulación sesamoidea y/o la articulación temporomandibular.

11. El hidrogel de poliacrilamida para su uso según una cualquiera de las reivindicaciones 1 -9, en donde el mamífero que va a tratarse es un caballo y la articulación o articulaciones que se inyectará(n) es el espolón, hueso del ataúd, cuartilla, babilla y/o la articulación de la rodilla de las patas traseras.

12. El hidrogel de poliacrilamida para su uso según una cualquiera de las reivindicaciones 1 -9, en donde el mamífero que va a tratarse es un perro y la articulación o articulaciones que se inyectará(n) es el codo de la pata delantera o la articulación de la rodilla o de la cadera de las patas traseras.

13. El hidrogel de poliacrilamida para su uso según una cualquiera de las reivindicaciones 1 -12, en donde el mamífero padece sinovitis.

14. El hidrogel de poliacrilamida para su uso según una cualquiera de las reivindicaciones 1 -13, en donde el mamífero padece artritis, tal como osteoartritis o artritis reumatoide, lupus o gota.

15. El hidrogel de poliacrilamida para su uso según la reivindicación 14, en donde el mamífero padece osteoartritis o artritis reumatoide.

16. Un hidrogel de poliacrilamida para su uso en la prevención y/o el tratamiento del dolor de sinovitis en un mamífero mediante la formación de una nueva capa de revestimiento sinovial.

17. Un hidrogel de poliacrilamida para su uso según la reivindicación 16 en la prevención y/o el tratamiento del dolor de sinovitis en un mamífero mediante la formación de una capa subsinovial y una nueva capa de revestimiento sinovial.

18. Un hidrogel de poliacrilamida para su uso según la reivindicación 16 o 17, en donde el uso es como se define en una cualquiera de las reivindicaciones 2-15.