ES2896021T3 - Proteína de reprogramación modificada para uso en el tratamiento de un cáncer - Google Patents

Proteína de reprogramación modificada para uso en el tratamiento de un cáncer Download PDF

Info

Publication number
ES2896021T3
ES2896021T3 ES14855040T ES14855040T ES2896021T3 ES 2896021 T3 ES2896021 T3 ES 2896021T3 ES 14855040 T ES14855040 T ES 14855040T ES 14855040 T ES14855040 T ES 14855040T ES 2896021 T3 ES2896021 T3 ES 2896021T3
Authority
ES
Spain
Prior art keywords
protein
modified
reagent
cells
reprogramming
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Active
Application number
ES14855040T
Other languages
English (en)
Inventor
Jianjun Wang
Qianqian Li
Michael Chopp
Feng Jiang
Guojun Wu
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Wayne State University
Qurgen Inc
Original Assignee
Wayne State University
Qurgen Inc
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Wayne State University, Qurgen Inc filed Critical Wayne State University
Application granted granted Critical
Publication of ES2896021T3 publication Critical patent/ES2896021T3/es
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/56—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic macromolecular compound, e.g. an oligomeric, polymeric or dendrimeric molecule
    • A61K47/59—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic macromolecular compound, e.g. an oligomeric, polymeric or dendrimeric molecule obtained otherwise than by reactions only involving carbon-to-carbon unsaturated bonds, e.g. polyureas or polyurethanes
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N5/00—Undifferentiated human, animal or plant cells, e.g. cell lines; Tissues; Cultivation or maintenance thereof; Culture media therefor
    • C12N5/06—Animal cells or tissues; Human cells or tissues
    • C12N5/0602—Vertebrate cells
    • C12N5/0696—Artificially induced pluripotent stem cells, e.g. iPS
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • A61K38/1703—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from vertebrates
    • A61K38/1709—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from vertebrates from mammals
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/54—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic compound
    • A61K47/543—Lipids, e.g. triglycerides; Polyamines, e.g. spermine or spermidine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K48/00—Medicinal preparations containing genetic material which is inserted into cells of the living body to treat genetic diseases; Gene therapy
    • A61K48/0008—Medicinal preparations containing genetic material which is inserted into cells of the living body to treat genetic diseases; Gene therapy characterised by an aspect of the 'non-active' part of the composition delivered, e.g. wherein such 'non-active' part is not delivered simultaneously with the 'active' part of the composition
    • A61K48/0025—Medicinal preparations containing genetic material which is inserted into cells of the living body to treat genetic diseases; Gene therapy characterised by an aspect of the 'non-active' part of the composition delivered, e.g. wherein such 'non-active' part is not delivered simultaneously with the 'active' part of the composition wherein the non-active part clearly interacts with the delivered nucleic acid
    • A61K48/0041—Medicinal preparations containing genetic material which is inserted into cells of the living body to treat genetic diseases; Gene therapy characterised by an aspect of the 'non-active' part of the composition delivered, e.g. wherein such 'non-active' part is not delivered simultaneously with the 'active' part of the composition wherein the non-active part clearly interacts with the delivered nucleic acid the non-active part being polymeric
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/0012—Galenical forms characterised by the site of application
    • A61K9/0019—Injectable compositions; Intramuscular, intravenous, arterial, subcutaneous administration; Compositions to be administered through the skin in an invasive manner
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/16—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for liver or gallbladder disorders, e.g. hepatoprotective agents, cholagogues, litholytics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/18—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for pancreatic disorders, e.g. pancreatic enzymes
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P15/00—Drugs for genital or sexual disorders; Contraceptives
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A61P19/02—Drugs for skeletal disorders for joint disorders, e.g. arthritis, arthrosis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P21/00—Drugs for disorders of the muscular or neuromuscular system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P21/00—Drugs for disorders of the muscular or neuromuscular system
    • A61P21/02—Muscle relaxants, e.g. for tetanus or cramps
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/14—Drugs for disorders of the nervous system for treating abnormal movements, e.g. chorea, dyskinesia
    • A61P25/16—Anti-Parkinson drugs
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/04—Anorexiants; Antiobesity agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/08—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis
    • A61P3/10—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis for hyperglycaemia, e.g. antidiabetics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/04—Inotropic agents, i.e. stimulants of cardiac contraction; Drugs for heart failure
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/10—Drugs for disorders of the cardiovascular system for treating ischaemic or atherosclerotic diseases, e.g. antianginal drugs, coronary vasodilators, drugs for myocardial infarction, retinopathy, cerebrovascula insufficiency, renal arteriosclerosis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2501/00—Active agents used in cell culture processes, e.g. differentation
    • C12N2501/60—Transcription factors
    • C12N2501/602—Sox-2
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2501/00—Active agents used in cell culture processes, e.g. differentation
    • C12N2501/60—Transcription factors
    • C12N2501/603—Oct-3/4
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2501/00—Active agents used in cell culture processes, e.g. differentation
    • C12N2501/60—Transcription factors
    • C12N2501/605—Nanog
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2502/00—Coculture with; Conditioned medium produced by
    • C12N2502/30—Coculture with; Conditioned medium produced by tumour cells
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2506/00—Differentiation of animal cells from one lineage to another; Differentiation of pluripotent cells
    • C12N2506/30—Differentiation of animal cells from one lineage to another; Differentiation of pluripotent cells from cancer cells, e.g. reversion of tumour cells

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Neurology (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Cardiology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Orthopedic Medicine & Surgery (AREA)
  • Physical Education & Sports Medicine (AREA)
  • Neurosurgery (AREA)
  • Heart & Thoracic Surgery (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Marine Sciences & Fisheries (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Developmental Biology & Embryology (AREA)
  • Transplantation (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)

Abstract

Composición farmacéutica para su uso en un método de tratamiento del cáncer mediante la administración in vivo de la composición farmacéutica a un sujeto que lo necesite, comprendiendo una proteína de reprogramación aislada modificada con un reactivo de transducción de proteínas seleccionada del grupo consistente en Sox2, Oct4 y Nanog, donde el reactivo de transducción de proteínas comprende un reactivo catiónico y un lípido y donde el reactivo de transducción de proteínas no está unido de forma covalente a la proteína de reprogramación.

Description

DESCRIPCIÓN
Proteína de reprogramación modificada para uso en el tratamiento de un cáncer
CAMPO DE LA INVENCION
En general, la presente invención se refiere a composiciones o proteínas para su uso en un método de tratamiento del cáncer en un sujeto que lo necesita. En aspectos específicos, la presente invención se refiere a composiciones o a proteínas de reprogramación modificadas por un reactivo de transducción proteico aislado para la inducción de proteínas de conversión celular in vivo para su uso en un método de tratamiento de un cáncer en un sujeto que lo necesita.
ANTECEDENTES DE LA INVENCIÓN
A pesar de los recientes avances médicos, existe una necesidad continua de métodos y composiciones para el tratamiento de enfermedades y lesiones.
La WO 2012/151234 A2 describe el uso de una composición que comprende células madre pluripotentes inducidas por proteínas modificadas mediante reprogramación de proteínas como Oct4, Sox4, Nanog que se enlazan de forma no covalente a reactivos QQ para su uso en el tratamiento del cáncer. Así, la Wo 2012/151234 A2 se refiere al uso para modificaciones celulares in vitro, siendo las células modificadas posteriormente administradas a un sujeto. La WO 2010/075575 A1 y la WO 2013/013105 A2 describen el uso de una composición que comprende proteínas de reprogramación modificadas como Oct4, Sox4, Nanog o Sox9, Sox6, c-Myc, respectivamente, unidas de forma no covalente o covalente a un polímero lipídico catiónico (es decir, a "reactivo de transducción de un componente") para su uso en el tratamiento del cáncer y otras enfermedades.
SUMARIO DE LA INVENCIÓN
La presente invención está definida por sus reivindicaciones. De acuerdo con aspectos de la presente invención se proporcionan composiciones farmacéuticas para su uso en métodos de tratamiento de un cáncer en un sujeto que lo necesita, que incluyen la administración de una composición farmacéutica que comprende una proteína de reprogramación modificada con reactivo de transducción de proteínas al sujeto, donde el reactivo de transducción de proteínas se une de forma no covalente a la proteína de reprogramación y donde el reactivo de transducción de proteínas comprende un reactivo catiónico y un lípido. La proteína de reprogramación modificada con reactivo de transducción de proteínas se selecciona de Sox2, Oct4 y Nanog.
De acuerdo con aspectos de la presente invención, se proporcionan composiciones farmacéuticas para su uso en métodos para tratar a un sujeto que lo necesita, que incluyen la administración de una composición farmacéutica que comprende una proteína de reprogramación modificada con reactivo de transducción de proteínas seleccionadas de Sox2, Oct4 y Nanog al sujeto, donde el reactivo de transducción de proteínas se une de forma no covalente a la proteína de reprogramación y donde el reactivo de transducción de proteínas comprende un reactivo catiónico y un lípido, donde el sujeto tiene una enfermedad cancerosa.
De acuerdo con aspectos de la presente invención, se proporcionan composiciones farmacéuticas para su uso en métodos para tratar a un sujeto que tiene cáncer, que incluyen la administración de una composición farmacéutica que comprende una proteína de reprogramación modificada con reactivo de transducción de proteínas seleccionada del grupo consistente en Sox2 modificada con reactivo de transducción, Oct4 modificada con reactivo de transducción y Nanog modificada con reactivo de transducción.
De acuerdo con aspectos de la presente invención, se proporcionan composiciones farmacéuticas para su uso en métodos para tratar a un sujeto que tiene cáncer que incluyen Sox2 modificada con reactivo de transducción, Oct4 modificada con reactivo de transducción y Nanog modificada con reactivo de transducción.
De acuerdo con aspectos de la presente invención, se proporcionan composiciones farmacéuticas para su uso en métodos para tratar a un sujeto que padece un tumor cerebral o un cáncer de mama, que incluyen administrar una composición farmacéutica que incluye una proteína de reprogramación modificada con reactivo de transducción de proteínas seleccionada del grupo consistente en Sox2 modificada con reactivo de transducción, Oct4 modificada con reactivo de transducción y Nanog modificada con reactivo de transducción.
De acuerdo con aspectos de la presente invención, se proporcionan composiciones farmacéuticas para su uso en métodos para tratar a un sujeto que padece un tumor cerebral o un cáncer de mama, que incluyen administrar una composición farmacéutica que incluye Sox2 modificada con reactivo de transducción, Oct4 modificada con reactivo de transducción y Nanog modificada con reactivo de transducción.
El uso en métodos de acuerdo con la presente invención permite el suministro de proteínas de reprogramación modificadas con reactivo de transducción de proteínas a células cancerosas, tales como células tumorales, así como a células enfermas de tejidos enfermos.
De acuerdo con los aspectos de la presente invención, el uso en métodos proporciona la conversión de células enfermas en células normales in vivo mediante reprogramación celular in situ inducida por proteínas. El uso en métodos de acuerdo con los aspectos de la presente invención proporciona la conversión de células cancerosas en células normales in vivo mediante la reprogramación celular in situ inducida por proteínas.
De acuerdo con aspectos de la presente invención, se proporcionan proteínas de reprogramación modificadas con un reactivo de transducción aisladas para reprogramar in situ células cancerosas en células madre o células madre multipotentes inducidas por proteínas transitorias que luego son inducidas a diferenciarse en células normales en el tejido donde se localizaban las células cancerosas o enfermas. localizado se proporciona de acuerdo con aspectos de la presente invención.
Se proporcionan de acuerdo con aspectos de la presente invención una o más proteínas de reprogramación modificadas con un reactivo de transducción de proteínas aisladas para su uso en métodos de tratamiento del cáncer in vivo sin matar células cancerosas sino convirtiendo las células cancerosas en células no cancerosas mediante la administración, tal como la administración sistémica o local, de una o más proteínas de reprogramación modificadas con reactivo de transducción de proteínas aisladas.
BREVE DESCRIPCIÓN DE LAS FIGURAS
Figura 1A: imagen de resonancia magnética representativa de un cerebro de rata portador de un tumor intracraneal 9L que muestra una permeabilidad mejorada y un efecto de retención en un tumor cerebral 9L para QQ-ferritina, mostrando que la QQ-ferritina inyectada vía intravenosa (iv) se suministraba dentro de un tumor cerebral 9L mediante gracias a un mejor efecto de permeabilidad y retención, provocando una imagen de resonancia magnética negativa mejorada del tumor cerebral en la rata portadora de tumor cerebral 9L;
Figura 1B: imagen de resonancia magnética representativa de un cerebro de rata portador de tumor intracraneal 9L que no muestra una permeabilidad y un efecto de retención mejorados en un tumor cerebral 9L para ferritina no modificada en q Q, mostrando que la ferritina inyectada iv no alcanzaba el tumor cerebral 9L y sin observarse una imagen de resonancia magnética negativa mejorada del tumor cerebral en la rata portadora del tumor cerebral 9L;
Figura 2A: imagen de resonancia magnética representativa de un ratón que porta un tumor de mama 4T1 antes de una inyección de QQ-ferritina en la vena de la cola;
Figura 2B: imagen de resonancia magnética representativa de un ratón que tiene un tumor de mama 4T1 0,5 horas después de una inyección de QQ-ferritina en la vena de la cola;
Figura 2C: imagen de resonancia magnética representativa de un ratón con un tumor de mama 4T1 2 horas después de una inyección de QQ-ferritina en la vena de la cola;
Figura 2D: imagen de resonancia magnética representativa de un ratón que tiene un tumor de mama 4T1 3,5 horas después de una inyección de QQ-ferritina en la vena de la cola;
Figura 2E: imagen de resonancia magnética representativa de un ratón que tiene un tumor de mama 4T1 8 horas después de una inyección de QQ-ferritina en la vena de la cola;
Figura 2F: imagen de resonancia magnética representativa de un ratón que tiene un tumor de mama 4T1 18 horas después de una inyección de QQ-ferritina en la vena de la cola;
Figura 3A: gráfico que muestra la proliferación de células U251 y U251-piPSC controladas por el ensayo Ki67;
Figura 3B: gráfico que muestra la sensibilidad al fármaco quimioterapéutico dosis-dependiente de células (cuadrados) GBM (12-14) humanas primarias derivadas del paciente y (círculos) de GBM (12-14) -piPSCs frente al agente alquilante temozolomida;
Figura 3C: gráfico que muestra la sensibilidad al fármaco quimioterapéutico dosis-dependiente de las células 9L (cuadrados) y las 9L-piPSC (círculos) frente a carboplatino;
Figura 4A: imagen que muestra transferencias Western de varios marcadores epiteliales y mesenquimales de células U251 y U251-piPSC, incluyendo E-cadherina (E-cad), p-catenina (p-cat), vimentina (VMT), lo que indica una transición mesenquimal a epitelio (MET) durante la reprogramación celular. Además, la reprogramación celular de células 9L en 9L-piPSC también provocó una mayor expresión de la proteína ácida fibrilar glial (GFAP), un marcador de astrocitos;
Figura 4B: gráfico que muestra que la reducción de la tumorigenicidad de células U251 después de la reprogramación celular de acuerdo con aspectos de la presente invención se confirma mediante ensayos in vitro por migración celular de células U251 y U251-piPSc, lo que indica una migración significativamente reducida de U251-piPSC (p < 0,01) in vitro;
Figura 4C: gráfico que muestra que la reducción de la tumorigenicidad de células U251 después de la reprogramación celular de acuerdo con aspectos de la presente invención se confirma mediante ensayos in vitro por invasión de células U251 y U251-piPSC, lo que indica una invasión significativamente reducida por U251-piPSC (p < 0,01) in vitro;
Figura 4D: gráfico que muestra la menor proliferación de 4T1-piPSC y 67NR-piPSC en comparación con las propiedades de las células 4T1 parentales y células 67NR, lo que indica una tumorigenicidad significativamente reducida de las células 4T1 y las células 67NR después de la reprogramación celular en 4T1-piPSC y 67NR -piPSC in vitro;
Figura 4E: gráfico que muestra la formación reducida de esferas mamarias de 4T1-piPSC en comparación con las propiedades de las células 4T1 parentales, lo que indica una reducción significativa de la tumorigenicidad de las células 4T1 después de la reprogramación celular en 4T1-piPSC in vitro;
Figura 4F: gráfico que muestra la migración reducida de 4T1-piPSC en comparación con las propiedades de las células 4T1 parentales, lo que indica una tumorigenicidad significativamente reducida de las células 4T1 después de la reprogramación celular en 4T1-piPSC in vitro;
Figura 4G: gráfico que muestra la invasión reducida de 4T1-piPSC en comparación con las propiedades de las células 4T1 parentales, lo que indica una tumorigenicidad significativamente reducida de las células 4T1 después de la reprogramación celular en 4T1-piPSC in vitro;
Figura 5A: imagen que muestra la morfología celular de las células U251;
Figura 5B: imagen que muestra los cambios en la morfología celular de células U251 cocultivadas indirectamente con U251-piPSC durante 40-64 horas, indicativo de la transición mesenquimal a epitelial y que demuestra un efecto espectador de las U251-piPSC sobre las células U251;
Figura 5C: gráfico que muestra una proliferación significativamente reducida de células U251-piPSC y U251 cocultivadas indirectamente con U251-piPSC en una proporción 1:1 de células U251-piPSC y U251, lo que indica una tumorigenicidad significativamente reducida de las células cocultivadas u 251 y confirma la observación del efecto espectador;
Figura 5D: gráfico que muestra una migración significativamente reducida de células U251-piPSC y U251 cocultivadas indirectamente con U251-piPSC en proporciones 1:1 y 8:1 (U251:U251-piPSC), (p < 0,005), lo que indica una tumorigenicidad significativamente reducida de las células U251 cocultivadas y confirma la observación de un efecto espectador;
Figura 5E: gráfico que muestra una invasión significativamente reducida de células U251-piPSC y U251 cocultivadas indirectamente con U251-piPSC en proporciones 1:1 y 8:1 (U251:U251-piPSC), (p < 0,005), lo que indica una tumorigenicidad significativamente reducida de las células U251 cocultivadas y confirma la observación de un efecto espectador;
Figura 5F: gráfico que muestra una proliferación significativamente reducida de células 4T1 cocultivadas con 4T1-piPSCs durante 40 horas, lo que indica una tumorigenicidad significativamente reducida de las células 4T1 cocultivadas y confirma la observación de un efecto espectador;
Figura 5G: gráfico que muestra una migración significativamente reducida de células 4T1 cocultivadas con 4T1-piPSc durante 40 horas, lo que indica una tumorigenicidad significativamente reducida de las células 4T1 cocultivadas y confirma la observación de un efecto espectador;
Figura 5H: gráfico que muestra una invasión significativamente reducida de células 4T1 cocultivadas con 4T1-piPSC durante 40 horas, lo que indica una tumorigenicidad significativamente reducida de las células 4T1 cocultivadas y confirma la observación de un efecto espectador;
Figura 6A: gráfico que muestra el volumen del tumor (mm3) en ratas implantadas intracranealmente con células 9L o 9L-piPSC (n = 10) el día 14 y mostrando un volumen significativamente reducido de los tumores intracraneales 9L-piPSC en comparación con los tumores 9L, lo que indica una tumorigenicidad significativamente reducida de las células 9L después de la reprogramación celular en 9L-piPSC in vivo;
Figura 6B: gráfico que muestra el peso del tumor (gramos) en ratas implantadas subcutáneamente con células 9L y 9L-piPSC el día 25 después de la implantación (n = 6) y que muestra un peso significativamente reducido de los tumores 9L-piPSC subcutáneos en comparación con los de tumores 9L, lo que indica una tumorigenicidad in vivo significativamente reducida de las células 9L después de la reprogramación celular en 9L-piPSC in vivo;
Figura 6C: gráfico que muestra la curva de crecimiento tumoral 4T1- y 4T1-piPSC medida usando el volumen del tumor durante 25 días después de la implantación de 4T1- y 4T1-piPSC, lo que indica una estasis tumoral in vivo significativa de células 4T1 después de la reprogramación celular en 4T1-piPSC in vivo;
Figura 6D: gráfico que muestra la curva de crecimiento tumoral 4T1- y 4T1-piPSC medida usando el peso del tumor el día 25 después de la implantación de 4T1- y 4T1-piPSC, lo que indica una estasis tumoral in vivo significativa de células 4T1 después de la reprogramación celular en 4T1-piPSC in vivo;
Figura 6E: gráfico que muestra metástasis pulmonares en ratones implantados con células 4T1 o 4T1-piPSC el día 25 después de la implantación celular, lo que indica una inhibición importante de las metástasis in vivo causada por la reprogramación celular de células 4T1 en 4T1-piPSC in vivo; el pulmón se dividió en 200 campos y se contó el número de metástasis, señalándose en el eje Y;
Figura 6F: curva de supervivencia de Kaplan-Meier de ratones implantados con células 4T1 y 4T1-piPSC en las almohadillas grasas #4, lo que demuestra una supervivencia significativamente prolongada de las 4T1-piPSC durante este experimento de supervivencia de 250 días, lo que indica que la reprogramación celular de células cancerosas malignas en piPSC reduce significativamente la tumorigenicidad y las propiedades metastásicas de las células cancerosas parentales;
Figura 7A: gráfico que muestra las curvas de crecimiento tumoral de 9L dosis-dependientes medidas por el volumen tumoral en ratas tratadas con reactivo QQ en tampón PBS (n = 10), proteínas QQ-SON 1 pg/día (n = 5), proteínas QQ-SON 5 pg/día (n = 5) y proteínas QQ-So N 10 pg/día (n = 10) para 18 tratamientos diarios, donde el tratamiento comenzó el día 5 después de la implantación de células 9L y las ratas se sacrificaron el día 23;
Figura 7B: gráfico que muestra el peso del tumor 9L en ratas tratadas con reactivo QQ en tampón PBS (n = 10), proteínas QQ-SON 1 pg/día (n = 5), proteínas QQ-SON 5 pg/día (n = 5) y proteínas QQ-SON 10 pg/día (n = 10) para 18 tratamientos diarios, donde el tratamiento comenzó el día 5 después de la implantación de células 9L y las ratas se sacrificaron el día 23;
Figura 7C: curva de supervivencia de Kaplan-Meier (130 días) de ratas con tumores 9L subcutáneos tratadas con reactivo QQ en PBS (línea continua, n = 6; mediana de supervivencia = 21 días) o proteínas QQ-SON (línea discontinua, 10 pg/día, n = 8; mediana de supervivencia = 127 días) durante 30 tratamientos diarios, el criterio de valoración es el momento en que el volumen tumoral alcanza 12 cm3;
Figura 7D: gráfico que muestra los efectos de varias dosis de proteína QQ-SON sobre el crecimiento del tumor 4T1- siguiendo el volumen tumoral en la mama durante 25 días;
Figura 7E: gráfico que muestra los efectos de varias dosis de proteína QQ-SON sobre el peso del tumor 4T1 en la mama el día 25;
Figura 7F: gráfico que muestra los cambios de volumen tumoral en diferentes puntos de tiempo, determinados por imágenes de resonancia magnética, de ratones portadores de tumores 4T1 tratados con proteínas QQ-SON (n = 8) o QQ-PBS como control (n = 8) , que muestra una estasis tumoral importante sin extirpación del tumor primario;
Figura 7G: gráfico que muestra el peso del tumor de ratones portadores de tumor 4T1 tratados con proteínas QQ-SON (n = 8) o QQ-PBS como control (n = 8) el día 35, mostrando la estasis del tumor principal sin extirpación del tumor primario;
Figura 7H: curva de supervivencia de Kaplan-Meier de ratones portadores de cáncer de mama 4T1 tratados con proteínas QQ-PBS (control, línea de puntos) y QQ-SON (tratamiento, línea continua) durante un experimento de supervivencia de 60 días sin cáncer de mama 4T1 primario, eliminado como se muestra en la Figura 7H. El tratamiento se inició el día 5 después de la implantación de células 4T1. SE sacrificaron los ratones que cumplían el criterio de valoración, presentando carga del tamaño del tumor, dificultad para respirar, dolor incontrolable, etc.
Figura 7I: gráfico que muestra el porcentaje de ratones portadores de tumores 4T1 tratados con QQ-SON o QQ-PBS con lesiones metastásicas en el pulmón, sin extirpación del tumor primario, como se observa por resonancia magnética en los días indicados, lo que indica una inhibición importante de la metástasis en los ratones portadores de 4T1 debido al tratamiento con la proteína QQ-SON sin extirpación del tumor primario;
Figura 7J: gráfico que muestra el porcentaje de ratones portadores de tumores 4T1 tratados con QQ-SON o QQ-PBS con lesiones metastásicas en los ganglios linfáticos, sin extirpación del tumor primario, como se observa por resonancia magnética en los días indicados, lo que indica una inhibición importante de la metástasis en los ganglios linfáticos de los ratones portadores de 4T1 debido al tratamiento con proteína QQ-SON sin extirpación del tumor primario;
Figura 7K: gráfico que muestra el porcentaje de ratones portadores de tumores 4T1 tratados con QQ-SON o QQ-PBS con lesiones metastásicas en el hígado, sin extirpación del tumor primario, como se observa por resonancia magnética en los días indicados, lo que indica una inhibición importante de la metástasis de los ratones portadores de 4T1 debido al tratamiento con la proteína QQ-SON sin extirpación del tumor primario;
Figura 7L: gráfico que muestra el porcentaje de ratones portadores de tumores 4T1 tratados con QQ-SON o QQ-PBS con lesiones metastásicas en el bazo, sin extirpación del tumor primario, como se observa por resonancia magnética en los días indicados, lo que indica una inhibición importante de metástasis en los ratones portadores de 4T1 debido al tratamiento con la proteína QQ-SON sin extirpación del tumor primario;
Figura 7M: gráfico que muestra el número medio por ratón de ratones portadores de tumores 4T1 tratados con QQ-SON o QQ-PBS que tienen lesiones metastásicas en el pulmón, sin extirpación del tumor primario, como se observa por resonancia magnética en los días indicados, lo que indica una inhibición importante de metástasis en los ratones portadores de 4T1 debida al tratamiento con la proteína QQ-SON sin extirpación del tumor primario;
Figura 7N: gráfico que muestra el número medio por ratón de ratones portadores de tumores 4T1 tratados con QQ-SON o QQ-PBS que tienen lesiones metastásicas en los ganglios linfáticos, sin extirpación del tumor primario, como se observa por resonancia magnética en los días indicados, lo que indica una inhibición de metástasis importante en los ratones portadores de 4T1 causada por el tratamiento con proteína QQ-SON sin extirpación del tumor primario;
Figura 7O: gráfico que muestra el número medio por ratón de ratones portadores de tumores 4T1 tratados con QQ-SON o QQ-PBS que tienen lesiones metastásicas en el hígado, sin extirpación del tumor primario, como se observa por resonancia magnética en los días indicados, lo que indica una inhibición importante de metástasis en los ratones portadores de 4T1 debido al tratamiento con la proteína QQ-SON sin extirpación del tumor primario;
Figura 7P: gráfico que muestra el número medio por ratón de ratones portadores de tumores 4T1 tratados con QQ-SON o QQ-PBS que tienen lesiones metastásicas en el bazo, sin extirpación del tumor primario, como se observa por resonancia magnética en los días indicados, lo que indica una inhibición importante de metástasis en los ratones portadores de 4T1 debido al tratamiento con la proteína QQ-SON sin extirpación del tumor primario; y
Figura 8: curva de supervivencia de Kaplan-Meier (supervivencia de 250 días) de ratones portadores de cáncer de mama 4T1 después de la extirpación quirúrgica del cáncer de mama 4T1 primario el día 18 y del tratamiento con proteína QQ-SON iniciado el día 6.
DESCRIPCIÓN DETALLADA
Se pretende que los términos científicos y técnicos aquí empleados tengan los significados habitualmente entendidos por los expertos en la técnica. Dichos términos se definen y emplean en contexto en varias referencias estándar, que incluyen de manera ilustrativa J. Sambrook and D.W. Russell, Molecular Cloning: A Laboratory Manual, Cold Spring Harbor Laboratory Press; 3a Ed., 2001; F.M. Ausubel, Ed., Short Protocols in Molecular Biology, Current Protocols; 5a Ed., 2002; B. Alberts et al., Molecular Biology of the Cell, 4a Ed., Garland, 2002; D.L. Nelson and M.M. Cox, Lehninger Principles of Biochemistry, 4a Ed., W.H. Freeman & Company, 2004; Engelke, D.R., RNA Interference (RNAi): Nuts and Bolts of RNAi Technology, DNA Press LLC, Eagleville, PA, 2003; Herdewijn, P. (Ed.), Oligonucleotide Synthesis: Methods and Applications, Methods in Molecular Biology, Humana Press, 2004; A. Nagy, M. Gertsenstein, K. Vintersten, R. Behringer, Manipulating the Mouse Embryo: A Laboratory Manual, 3rd edition, Cold Spring Harbor Laboratory Press; December 15, 2002, ISBN-10: 0879695919; Kursad Turksen (Ed.), Embryonic stem cells: methods and protocols in Methods Mol Biol. 2002;185, Humana Press; Current Protocols in Stem Cell Biology, ISBN: 9780470151808.
Los términos en singular "un", "una" y "el" no pretenden ser limitantes e incluyen referencias en plural, a menos que se indique explícitamente lo contrario o el contexto indique claramente lo contrario.
Las composiciones farmacéuticas o las proteínas de reprogramación modificadas con un reactivo de transducción de proteínas aisladas para el uso en métodos de acuerdo con aspectos de la presente invención proporcionan una reprogramación celular in vivo inducida por proteínas para tratar el cáncer en un sujeto que lo necesite.
Las composiciones farmacéuticas o las proteínas de reprogramación modificadas con un reactivo de transducción de proteínas aisladas para el uso en métodos de acuerdo con aspectos de la presente invención proporcionan la conversión de células cancerosas en células normales mediante la introducción de una o más proteínas de reprogramación QQ-modificadas en las células cancerosas in vivo sin introducir ácidos nucleicos que codifiquen la una o más proteínas de reprogramación.
Las composiciones farmacéuticas o las proteínas de reprogramación modificadas con un reactivo de transducción de proteínas aisladas para el uso en métodos de acuerdo con aspectos de la presente invención proporcionan la conversión de células cancerosas en células no cancerosas mediante la introducción de una o más proteínas de reprogramación QQ-modificadas en las células cancerosas in vivo sin introducir ácidos nucleicos que codifiquen la una o más proteínas de reprogramación.
Se proporcionan composiciones farmacéuticas para el uso en métodos de tratamiento del cáncer a un sujeto que lo necesita de acuerdo con aspectos de la presente invención, incluyendo la administración sistémica y/o local de una composición farmacéutica que comprende una proteína de reprogramación modificada con un reactivo de transducción de proteínas al sujeto donde el reactivo de transducción de proteínas no está unido de forma covalente a la proteína de reprogramación y donde el reactivo de transducción de proteínas comprende un reactivo catiónico y un lípido.
Una "proteína de reprogramación modificada con un reactivo de transducción de proteínas" es una proteína de reprogramación que ha sido tratada con el reactivo de transducción de proteínas, también denominado aquí "reactivo QQ". El término "reactivo de transducción de proteínas" se refiere a una composición eficaz para permitir que una proteína unida no covalentemente al reactivo de transducción de proteínas sea administrada a células de mamíferos y, una vez presente en las células de mamíferos, se disocie de la proteína para permitir el suministro adecuado de la proteína en la ubicación subcelular adecuada. El reactivo de transducción de proteínas, también denominado aquí "reactivo QQ", incluye al menos un reactivo catiónico, al menos un lípido y opcionalmente un potenciador. El término "proteína de reprogramación QQ-modificada" y variantes gramaticales del mismo, tal como se usa aquí, es equivalente a "proteína de reprogramación modificada con un reactivo de transducción de proteína" y sus variantes gramaticales tal como se usan aquí. De manera similar, una o más proteínas denominadas proteínas "QQ" significa que las proteínas están modificadas por tratamiento con un reactivo de transducción de proteínas y es una "proteína de reprogramación modificada con un reactivo de transducción de proteínas". Por ejemplo, el término "QQ-SON" se refiere a una mezcla de proteínas Sox2, Oct4 y Nanog modificadas por tratamiento con un reactivo de transducción de proteínas como se describe aquí para producir proteínas Sox2, Oct4 y Nanog reprogramadas modificadas con el reactivo de transducción de proteínas.
Un ejemplo de reactivo catiónico apropiado es polietilenimina (PEI) tal cual o, entre otros, PEI Mw 1.200 (PEI 1.2K), PEI Mw 2000 (PEI 2K), PEI Mw 4000 (PEI 4K) y PEI Mw 8000 (PEI 8K). El lípido puede ser cualquier lípido conocido por los expertos en la técnica que tenga las mismas propiedades generales que las citadas en este documento. Ejemplos de tales lípidos incluyen, pero no se limitan a, DOTMA (cloruro de N-1(-(2,3-dioleiloxi)propil-N,N,N-trimetilamonio; d Og S (dioctadecilamido-glicilespermina); DOTAP, 1,2-dioleoil-3-trimetilamonio-propano; DOPE, 1,2-dioleoil-sn-glicero-3-fosfoetanolamina; POPC, 1 -palmitoil-2-oleoil-sn-glicero-3-fosfocolina y DMPE 1,2-dimiristoil-sn-glicero-3-fosfocolina.
Opcionalmente, el reactivo de transducción de proteínas incluye polietilenimina como reactivo catiónico y el lípido es DOTAP o DOTMA y DOPE o DOGS; POPC y DMPE; o DOTAP o DOTMA, DOPE o DOGS, POPC y DMPE. Opcionalmente, el reactivo de transducción de proteínas es QQ1a, QQ2a, QQ3a, QQ4a, QQ5a, QQ6a, QQ7a, QQ8a, QQ9a, tal como se describe en la Tabla 1.
El potenciador opcional puede ser cualquier potenciador que mejore significativamente la carga celular de las proteínas cationizadas. Ejemplos de tales potenciadores en cultivos celulares incluyen, pero no se limitan a, MG132, inhibidor de proteasa, CaCh, DMSO y factores de crecimiento. También se pueden usar otros potenciadores, incluyendo, pero sin limitarse a, tensioactivos de la membrana celular. El reactivo también puede incluir estabilizantes y otros vehículos inertes que no afecten a la función del reactivo. Como se muestra en la Tabla 1, las concentraciones y los compuestos específicos utilizados pueden variar.
El término "proteína de reprogramación" tal como se usa aquí se refiere a una proteína de factor de transcripción de unión a a Dn o a una parte eficaz de la misma que afecta a la transcripción de un gen y que induce un cambio de un primer tipo de célula diferenciada a un segundo tipo de célula diferenciada diferente. El cambio de un primer tipo de célula diferenciada a un segundo tipo de célula diferencia diferente normalmente se produce a través de un tipo de célula intermedio menos diferenciado, tal como una célula madre transitoria que incluye células madre pluripotentes inducidas por proteínas. Las proteínas reprogramadoras y los ácidos nucleicos que las codifican se han aislado de humanos y otras especies. Las proteínas de reprogramación incluyen Asc1, Ascl1, Brca-11, Brn2, C/EBPa, CEBPp, c-MYC, Dlx2, EKLF, Erg1, Er71, Fli1, Foxal, Foxa2, Foxa3, FoxC1, FoxC2, FOXG1, FOXP3, Gata1, Gata2, Gata3, Gata4, Gata6, GFI1, Hand2, Hb9, Hey1, Hey2, HNF4A, Hnfla, Klf4, Lhx3, LIN28A, Lmxla, Lsll, MafA, MEF2c, Mytll, MYF5, MyoD, NAB2, Nanog, NeuroD1, NEUROG2, NEUROG3, Nurr1, Oct4, Pdxl, Pax4, PAX5, Pax6, Prdm16, PU.1, ROR gamma, Runx2, SLC7A10, Slug, Sox2, Sox5, Sox6, Sox7, Sox9, Sox18, Stat5a, T-bet y Tbox5. Las secuencias de aminoácidos para tales proteínas de reprogramación son conocidas, como se ilustra con las secuencias aquí mostradas como SEQ ID NO: 1-63, junto con los ácidos nucleicos que las codifican aquí mostradas como SEQ ID NO: 65-127.
Una proteína de reprogramación a ser modificada con QQ se obtiene por métodos tales como aislamiento, síntesis o expresión recombinante de un ácido nucleico que codifica la proteína de reprogramación. Estas proteínas también se pueden obtener comercialmente.
El término "ácido nucleico" se refiere a moléculas de ARN o ADN que tienen más de un nucleótido en cualquier forma, incluidos oligonucleótidos o polinucleótidos monocatenarios, bicatenarios. El término "secuencia de nucleótidos" se refiere al orden de los nucleótidos en un oligonucleótido o polinucleótido en una forma monocatenaria de ácido nucleico.
La expresión recombinante de una proteína de reprogramación a ser modificada con QQ incluye la expresión de un ácido nucleico que codifica la proteína donde el ácido nucleico está incluido en un constructo de expresión.
Una célula huésped puede ser transfectada con el constructo de expresión que codifica la proteína de reprogramación deseada de manera que la proteína de reprogramación se exprese en la célula.
Los términos "constructo de expresión" y "casete de expresión" se utilizan aquí en referencia a una molécula de ADN recombinante de doble hebra que contiene una secuencia codificante de ácido nucleico deseada para que se exprese un factor de reprogramación y que contiene uno o más elementos reguladores necesarios o deseables para la expresión de la secuencia codificante operativamente unida.
Los constructos de expresión operativos para expresar una proteína deseada incluyen, por ejemplo, en un enlace operativo: un promotor, una secuencia de ADN que codifica una proteína deseada y un sitio de terminación de transcripción.
El término "elemento regulador" tal como se usa aquí se refiere a una secuencia de nucleótidos que controla algún aspecto de la expresión de las secuencias de ácido nucleico. Elementos reguladores ilustrativos incluyen un potenciador, un sitio de entrada de ribosoma interno (IRES), un intrón, un origen de replicación, una señal de poliadenilación (poliA), un promotor, una secuencia de terminación de transcripción y un dominio regulador aguas arriba, que contribuyen a la replicación, transcripción y procesamiento postranscripcional de una secuencia de ácido nucleico. Los expertos en la técnica pueden seleccionar y usar estos y otros elementos reguladores en un constructo de expresión sin más que experimentación rutinaria. Los constructos de expresión se pueden generar de forma recombinante o sintética utilizando metodologías bien conocidas.
El término "unido operativamente" tal como se aquí se refiere a un ácido nucleico en relación funcional con un segundo ácido nucleico.
En aspectos particulares, un elemento regulador incluido en un casete de expresión es un promotor.
El término "promotor" es bien conocido en la técnica y se refiere a una o más secuencias de ADN unidas operativamente a una secuencia de ácido nucleico a transcribir y que se unen a una ARN-polimerasa y permiten el inicio de la transcripción. Típicamente un promotor se sitúa aguas arriba (5') de un ácido nucleico que codifica un péptido o proteína a expresar.
Un promotor incluido puede ser un promotor constitutivo o puede proporcionar una expresión inducible. El experto en la técnica está familiarizado con diversos promotores bien conocidos y puede seleccionar un promotor adecuado para su uso en la expresión de un péptido o proteína en un entorno particular, tal como en un tipo celular específico.
Para la expresión en una célula huésped de levadura, los promotores adecuados incluyen, pero sin limitarse a, un promotor ADH1, un promotor PGK1, un promotor e No , un promotor PYK1 y similares; o un promotor regulable tal como un promotor GAL1, un promotor GAL 10, un promotor ADH2, un promotor PH05, un promotor CUP1, un promotor GAL7, un promotor MET25, un promotor MET3, un promotor CYC1, un promotor HIS3, un promotor ADH1, un promotor PGK, un promotor GAPDH, un promotor ADC1, un promotor TRP1, un promotor URA3, un promotor LEU2, un promotor ENO, un promotor TP1 y AOX1.
Para la expresión en una célula huésped procariota, los promotores incluyen, pero no se limitan a, un promotor de ARN-polimerasa del bacteriófago T7; un promotor trp; un promotor del operón lac; un promotor trc; un promotor tac; un promotor araBAD; un promotor ssaG; un promotor pagC, un promotor sigma70, un promotor dps, un promotor spv, un promotor SPI-2; un promotor actA, un promotor rps M; un promotor de tetraciclina, un promotor de SP6, un promotor de bacteriófago T3, un promotor de gpt y un promotor de bacteriófago lambda P.
Otros promotores bacterianos y eucariotas adecuados son bien conocidos, por ejemplo como se describen en Sambrook et al., Molecular Cloning, A Laboratory Manual, 2a ed. 1989; y 3a ed., 2001; Kriegler, Gene Transfer and Expression: A Laboratory Manual (1990); y Ausubel et al., Current Protocols in Molecular Biology, 2014.
Para la expresión en una célula eucariota, los promotores que pueden incluirse en un constructo de expresión incluyen, pero no se limitan a, un promotor temprano inmediato de citomegalovirus; un promotor de timidina-quinasa del virus herpes simple; promotores SV40 tempranos y tardíos; un promotor de fosfoglicerato-quinasa (PGK); un promotor presente en repeticiones terminales largas de un retrovirus; y un promotor de metalotioneína-I de ratón, un promotor de beta-actina, un promotor de ROSA26, un promotor de proteína de choque térmico 70 (Hsp70), un promotor de gen EF-1 alfa que codifica el factor de elongación 1 alfa (EF1), un factor de iniciación eucariota 4A (eIF-4A1), un promotor de cloranfenicol-acetiltransferasa (CAT) y la región de repetición terminal larga del virus del sarcoma de Rous (promotor RSV).
Además de un promotor, se pueden incluir una o más secuencias potenciadoras, tales como, pero sin limitarse a, un elemento potenciador temprano de citomegalovirus (CMV) y un elemento potenciador de SV40.
Otras secuencias incluidas presentan una secuencia de intrón, tal como el intrón de beta-globina o un intrón genérico, una secuencia de terminación de transcripción y una secuencia de poliadenilación de ARNm (pA), tal como, entre otros, SV40-pA, beta-globina-pA y SCF- pA.
Un constructo de expresión puede incluir las secuencias necesarias para la amplificación en células bacterianas, tal como un marcador de selección (por ejemplo gen de resistencia a kanamicina o ampicilina) y un replicón.
Un sitio de entrada de ribosoma interno (IRES) es una secuencia de ácido nucleico opcionalmente incluida que permite el inicio de la traducción en un sitio interno en un ARNm. Los IRES son bien conocidos en la técnica, por ejemplo como se describe en Pelletier, J. et al., Nature, 334: 320-325, 1988; Vagner, S. y col., EMBO Rep., 2: 893-898, 2001; y Hellen, C. U. y col., Genes Dev. 15: 1593-1612, 2001.
El término "sitio de terminación de transcripción" se refiere a una secuencia de ADN operativa para terminar la transcripción por una ARN-polimerasa. Un sitio de terminación de transcripción generalmente se sitúa aguas abajo (3') de un ácido nucleico que codifica un péptido o proteína a expresar.
Opcionalmente se incluye una secuencia líder en un constructo de expresión.
Puede emplearse optimización por codón de un ácido nucleico que codifica una proteína deseada para mejorar la expresión en un sistema de expresión particular, por ejemplo mejorando la eficiencia de la traducción. Un ácido nucleico seleccionado que codifica una proteína deseada puede tener un codón optimizado para la expresión en cualquier célula huésped designada, procariota o eucariota, tal como, pero sin limitarse a, bacterias, células de insectos, levaduras, hongos, huevos de aves y células de mamíferos.
Opcionalmente, una proteína expresada incluye un elemento N-terminal, tal como una secuencia líder y/o una metionina N-terminal.
Además de uno o más ácidos nucleicos que codifican una proteína de reprogramación deseada, se pueden incluir una o más secuencias de ácido nucleico que codifican proteínas adicionales en un vector de expresión. Por ejemplo, opcionalmente se incluye una secuencia de ácido nucleico que codifica un reporter, incluyendo, pero no sin limitarse a, beta-galactosidasa, proteína verde fluorescente e indicadores de resistencia a antibióticos. En otro ejemplo, opcionalmente se incluye una etiqueta his, una etiqueta GST o una etiqueta MBP.
Puede clonarse un ácido nucleico que codifica una proteína de reprogramación en un vector de expresión para la transformación en células procariotas o eucariotas y la expresión de los péptidos y/o proteínas codificados. Tal como se usa aquí, los "vectores de expresión" se definen como polinucleótidos que, cuando se introducen en una célula huésped apropiada, un sistema de expresión, se pueden transcribir y traducir, produciendo el o los polipéptidos codificados.
Los vectores de expresión son conocidos en la técnica e incluyen, por ejemplo, plásmidos, cósmidos, virus y bacteriófagos. Los vectores de expresión pueden ser vectores procarióticos, vectores de insectos o vectores eucarióticos, por ejemplo.
Por ejemplo, un constructo de expresión que incluye, unido operativamente, un promotor, una secuencia de a Dn que codifica una proteína deseada y un sitio de terminación de transcripción, se incluye en un vector de expresión de plásmido, cósmido, virus o bacteriófago.
Son conocidos vectores concretos en la técnica y el experto en la técnica reconocerá el vector apropiado para cada propósito específico.
Para la expresión de un factor de transcripción puede emplearse cualquier vector de expresión/sistema de célula huésped adecuado para la administración a un sujeto de acuerdo con los aspectos de la presente invención.
Se consigue la expresión de una proteína de reprogramación usando un vector de expresión recombinante mediante la introducción del vector de expresión en un sistema de expresión de una célula huésped eucariota o procariota, tal como una célula de insecto, de mamífero, de levadura, un hongo, un huevo de ave, una célula bacteriana o de cualquier otro organismo multicelular reconocido en la técnica.
Las células huésped que contienen el vector de expresión recombinante se mantienen bajo condiciones quye permiten producir la proteína deseada. Las células huésped se pueden cultivar y mantener usando técnicas de cultivo celular conocidas, tal como las descritas en Celis, Julio, ed., 1994, Cell Biology Laboratory Handbook, Academic Press, NY. El experto en la técnica puede seleccionar y optimizar diversas condiciones de cultivo para estas células, incluyendo la formulación de medios con respecto a nutrientes específicos, el oxígeno, la tensión, el dióxido de carbono y la reducción de los niveles séricos.
Como células huésped pueden emplearse células bacterianas para producir las proteínas de reprogramación. La expresión de proteína recombinante en células bacterianas y la purificación de la proteína producida se puede llevar a cabo empleando protocolos conocidos, tales como los descritos en Paulina Balbas, Argelia Lorence ed., 2004, Recombinant Gene Expression: Reviews and Protocols, Humana Press, New Jersey; Peter E. Vaillancourt, 2003, E. Coli Gene Expression Protocols, Springer Science & Business Media.
Opcionalmente, las proteínas de reprogramación producidas de forma recombinante se purifican para eliminar endotoxinas cuando se usa un tipo de célula huésped productora de endotoxinas. Por ejemplo, se puede añadir una etapa de lavado adicional durante la fase de purificación de proteínas usando 10 volúmenes de columna de Triton X114 al 0,2% para eliminar las endotoxinas de las proteínas de reprogramación recombinantes expresadas a partir de bacterias.
Alternativamente, con el fin de producir proteínas de reprogramación recombinantes que no desencadenan una respuesta endotóxica en células humanas, se puede usar una cepa bacteriana modificada genéticamente, ClearColi™ BL21 (DE3) como célula huésped, de modo que no se requiera la eliminación de endotoxinas.
Para la expresión en una célula huésped, se puede utilizar cualquiera de los procedimientos bien conocidos de introducir ácidos nucleicos recombinantes en células huésped, tales como transfección con fosfato cálcico, polibreno, fusión de protoplastos, electroporación, sonoporación, liposomas y microinyección, se describen ejemplos en Sambrook et al., Molecular Cloning: A Laboratory Manual, Cold Spring Harbor Laboratory Press, 2001; y Ausubel, F. et al., (Eds.), Current Protocols in Molecular Biology, 2014.
Opcionalmente se emplean sistemas de expresión libres de células para expresar una proteína de reprogramación, tal como se describe en Ausubel, F. et al., (Eds.), Current Protocols in Molecular Biology, 2014.
Las proteínas de reprogramación humanas aquí mostradas como SEQ ID NO: 1-63, y codificadas por las secuencias de ácido nucleico de SEQ ID NO: 65-127, y variantes de las mismas, pueden usarse en métodos según los aspectos aquí descritos.
Tal como se usa aquí, el término "variante" se refiere a una variación de una secuencia de ácido nucleico que codifica una proteína de reprogramación o una variación de una proteína de reprogramación en la que uno o más nucleótidos o residuos aminoácidos se han modificado mediante sustitución, adición o deleción de nucleótidos o aminoácidos mientras se mantienen la función de la secuencia de ácido nucleico de referencia o de la proteína de reprogramación. Las variantes de secuencia de un ácido nucleico o proteína de reprogramación aquí descritas se caracterizan por las propiedades funcionales conservadas en comparación con la secuencia de ácido nucleico o proteína de reprogramación correspondiente.
Se pueden introducir las mutaciones mediante técnicas estándar de biología molecular, tales como síntesis química, mutagénesis dirigida a sitio y mutagénesis mediada por PCR.
El experto en la técnica reconocerá que se pueden introducir una o más mutaciones de aminoácidos sin alterar las propiedades funcionales de una proteína de reprogramación deseada. Por ejemplo, se pueden realizar una o más sustituciones, adiciones o deleciones de aminoácidos sin alterar las propiedades funcionales de una proteína de reprogramación deseada.
El experto en la materia puede determinar fácilmente la actividad biológica de una variante de proteína de reprogramación, por ejemplo utilizando cualquiera de los ensayos funcionales aquí descritos u otros ensayos funcionales conocidos en la técnica.
Las variantes de una proteína de reprogramación aquí descritas se caracterizan por sus propiedades funcionales conservadas en comparación con la proteína de reprogramación correspondiente y tienen un 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% o más de identidad con la secuencia de aminoácidos de una proteína de reprogramación de referencia.
Cuando se compara una proteína de reprogramación de referencia con una variante, se puede considerar la similitud de los aminoácidos además de la identidad de los aminoácidos en las posiciones correspondientes en una secuencia de aminoácidos. La "similitud de aminoácidos" se refiere a la identidad de aminoácidos y sustituciones conservadoras de aminoácidos en un homólogo putativo en comparación con las posiciones de aminoácidos correspondientes en una proteína de referencia.
Las variantes de una proteína de reprogramación aquí descritas se caracterizan por propiedades funcionales conservadas en comparación con la proteína de reprogramación correspondiente y tienen una similitud del 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% o más con la secuencia de aminoácidos de una proteína de reprogramación de referencia.
Para producir variantes, pueden realizarse sustituciones conservadoras de aminoácidos en las proteínas de referencia.
Las sustituciones de aminoácidos conservadoras son sustituciones de un aminoácido por otro aminoácido de características similares reconocidas en la técnica. Por ejemplo, se puede describir que cada aminoácido tiene una o más de las siguientes características: electropositivo, electronegativo, alifático, aromático, polar, hidrófobo e hidrófilo. Una sustitución conservadora es una sustitución de un aminoácido que tiene una característica estructural o funcional especificada por otro aminoácido que tiene la misma característica. Los aminoácidos ácidos incluyen aspartato, glutamato; los aminoácidos básicos incluyen histidina, lisina, arginina; los aminoácidos alifáticos incluyen isoleucina, leucina y valina; los aminoácidos aromáticos incluyen fenilalanina, glicina, tirosina y triptófano; los aminoácidos polares incluyen aspartato, glutamato, histidina, lisina, asparagina, glutamina, arginina, serina, treonina y tirosina; y los aminoácidos hidrófobos incluyen alanina, cisteína, fenilalanina, glicina, isoleucina, leucina, metionina, prolina, valina y triptófano; y las sustituciones conservativas incluyen la sustitución entre aminoácidos de cada grupo. Los aminoácidos también pueden describirse en términos de su tamaño relativo, alanina, cisteína, aspartato, glicina, asparagina, prolina, treonina, serina, valina se consideran todos típicamente pequeños.
Una variante puede incluir análogos de aminoácidos sintéticos, derivados de aminoácidos y/o aminoácidos no estándar, que incluyen ilustrativamente, sin limitación, ácido alfa-aminobutírico, citrulina, canavanina, cianoalanina, ácido diaminobutírico, ácido diaminopimélico, dihidroxifenilalanina, ácido djenkólico, homoarginina, hidroxiprolina, norleucina, norvalina, 3-fosfoserina, homoserina, 5-hidroxitriptófano, 1-metilhistidina, 3-metilhistidina y ornitina.
El porcentaje de identidad se determina mediante la comparación de secuencias de aminoácidos o ácidos nucleicos que incluyen una secuencia de aminoácidos o ácidos nucleicos de referencia con una secuencia de aminoácidos o ácidos nucleicos putativa homóloga. Para determinar el porcentaje de identidad de dos secuencias de aminoácidos o de dos secuencias de ácidos nucleicos, las secuencias se alinean con fines de comparación óptimos (por ejemplo, se pueden introducir espacios en la secuencia de una primera secuencia de aminoácidos o ácidos nucleicos para una alineación óptima con una segunda secuencia de aminoácidos o ácidos nucleicos). A continuación, se comparan los residuos aminoácidos o nucleótidos en las correspondientes posiciones de aminoácidos o posiciones de nucleótidos. Cuando una posición en la primera secuencia está ocupada por el mismo residuo aminoácido o nucleótido que la posición correspondiente en la segunda secuencia, entonces las moléculas son idénticas en esa posición. El porcentaje de identidad entre ambas secuencias es función del número de posiciones idénticas compartidas por las secuencias (es decir, % de identidad = número de posiciones superpuestas idénticas / número total de posiciones x 100%). Generalmente, las dos secuencias comparadas tienen la misma longitud o casi la misma longitud.
También se puede determinar el porcentaje de identidad entre dos secuencias usando un algoritmo matemático. Algoritmos para la determinación del porcentaje de identidad incluyen ilustrativamente los algoritmos de S. Karlin y S. Altshul, PNAS, 90: 5873-5877, 1993; T. Smith y M. Waterman, Adv. Apl. Math.
2:482-489, 1981, S. Needleman y C. Wunsch, J. Mol. Biol., 48:443-453, 1970, W. Pearson y D. Lipman, PNAS, 85:2444-2448, 1988 y otros incorporados en implementaciones computerizizadas, tales como, pero sin limitarse a, GAP, BESTFIT, FASTA, TFASTA y BLAST, incorporado, por ejemplo, en el software de Wisconsin Genetics, Genetics Computer Group, 575 Science Drive, Madison, Wis.) y disponible para el público en el National Center for Biotechnology Information.
Un ejemplo no limitativo de algoritmo matemático utilizado para comparar dos secuencias es el algoritmo de Karlin y Altschul, 1990, PNAS 87: 2264-2268, modificado como en Karlin y Altschul, 1993, PNAS. 90: 5873-5877. Dicho algoritmo está incorporado en los programas NBLAST y XBLAST de Altschul et al., 1990, J. Mol. Biol. 215:403. Las búsquedas de nucleótidos BLAST se realizan con el conjunto de parámetros del programa de nucleótidos NBLAST, por ejemplo, para puntuación = 100, longitud de palabra = 12 para obtener secuencias de nucleótidos homólogas a las moléculas de ácido nucleico de la presente invención. Las búsquedas de proteínas BLAST se realizan con el conjunto de parámetros del programa XBLAST, por ejemplo, para puntuar 50, longitud de palabra = 3 para obtener secuencias de aminoácidos homólogas a una molécula de proteína de la presente invención. Para obtener alineaciones con huecos con fines comparativos, se utiliza Gapped BLAST como se describe en Altschul et al., 1997, Nucleic Acids Res.
25:3389-3402. Alternativamente, se emplea PSI BLAST para realizar una búsqueda iterada que detecta relaciones distantes entre moléculas. Cuando se utilizan los programas BLAST, Gapped BLAST y PSI Blast, se aplican los parámetros predeterminados de los programas respectivos (por ejemplo de XBLAST y NBLAST). Otro ejemplo preferido, no limitativo, de algoritmo matemático utilizado para la comparación de secuencias es el algoritmo de Myers y Miller, 1988, CABIOS 4: 11-17. Dicho algoritmo está incorporado en el programa ALIGN (versión 2.0) que forma parte del paquete de software de alineación de secuencias GCG. Cuando se utiliza el programa ALIGN para comparar secuencias de aminoácidos, se utiliza una tabla de residuos de peso PAM120, una penalización de longitud de hueco de 12 y una penalización de hueco de 4.
El porcentaje de identidad entre dos secuencias se determina usando técnicas similares a las descritas anteriormente, con o sin dejar espacios. Al calcular el porcentaje de identidad, normalmente solo se cuentan las coincidencias exactas.
El experto en la técnica reconocerá que se pueden introducir una o más mutaciones de ácidos nucleicos o aminoácidos sin alterar las propiedades funcionales de un ácido nucleico o proteína dados, respectivamente.
Como se señaló, las proteínas de reprogramación humanas aquí mostradas como SEQ ID NO: 1-63 están codificadas por las secuencias de ácido nucleico de SEQ ID NO: 65-127. Se apreciarás que, debido a la naturaleza degenerada del código genético, las secuencias de ácido nucleico alternativas codifican una proteína de reprogramación particular y que dichos ácidos nucleicos alternativos pueden expresarse para producir la proteína de reprogramación deseada.
El término "complementario" se refiere al emparejamiento de bases de Watson-Crick entre nucleótidos y específicamente se refiere a nucleótidos enlazados con hidrógeno con residuos de timina o uracilo unidos a residuos de adenina por dos enlaces de hidrógeno y residuos de citosina y guanina unidos por tres enlaces de hidrógeno. En general, un ácido nucleico incluye una secuencia de nucleótidos descrita que tiene un "porcentaje de complementariedad" con una segunda secuencia de nucleótidos especificada. Por ejemplo, una secuencia de nucleótidos puede tener un 80%, 90% o 100% de complementariedad con una segunda secuencia de nucleótidos especificada, lo que indica que 8 de 10, 9 de 10 o 10 de 10 nucleótidos de una secuencia son complementarios a la segunda secuencia de nucleótidos especificada. Por ejemplo, la secuencia de nucleótidos 3-TCGA-5 'es 100% complementaria a la secuencia de nucleótidos 5'-AGCT-3'. Además, la secuencia de nucleótidos 3-TCGA-5' es 100% complementaria a una región de la secuencia de nucleótidos 5'-TTAGCTGG-3'.
Los términos "hibridación" e "hibridizar" se refieren al emparejamiento y unión de ácidos nucleicos complementarios. La hibridación se produce en diferentes grados entre dos ácidos nucleicos, dependiendo de factores tales como el grado de complementariedad de los ácidos nucleicos, la temperatura de fusión, Tm, de los ácidos nucleicos y el rigor de las condiciones de hibridación, como es bien conocido en la técnica. El término "astringencia de las condiciones de hibridación" se refiere a las condiciones de temperatura, fuerza iónica y composición de un medio de hibridación con respecto a aditivos comunes particulares, tales como formamida y solución de Denhardt. La determinación de condiciones de hibridación particulares relacionadas con un ácido nucleico específico es rutinaria y bien conocida en la técnica, por ejemplo como se describe en J. Sambrook y D.W. Russell, Molecular Cloning: A Laboratory Manual, Cold Spring Harbor Laboratory Press; 3a Ed., 2001; y F.M. Ausubel, Ed., Short Protocols in Molecular Biology, Current Protocols; 5a Ed., 2002. Las condiciones de hibridación de alta astringencia son aquellas que solo permiten la hibridación de ácidos nucleicos esencialmente complementarios. Normalmente, los ácidos nucleicos que tienen aproximadamente un 85-100% de complementariedad se consideran altamente complementarios y se hibridan en condiciones de alta astringencia. Las condiciones de astringencia intermedia se ilustran mediante aquellas condiciones bajo las que los ácidos nucleicos que tienen una complementariedad intermedia, aproximadamente un 50-84% de complementariedad, así como los que tienen un alto grado de complementariedad, se hibridan. Por el contrario, las condiciones de hibridación de baja astringencia son aquellas en las que se hibridan ácidos nucleicos que tienen un bajo grado de complementariedad.
Los términos "hibridación específica" e "se hibrida específicamente" se refieren a la hibridación de un ácido nucleico particular con un ácido nucleico diana esencialmente sin hibridación con ácidos nucleicos distintos del ácido nucleico diana en una muestra.
La astringencia de las condiciones de hibridación y del lavado depende de varios factores, incluyendo la Tm de la sonda y diana y la fuerza iónica de las condiciones de hibridación y lavado, como es bien conocido por el experto en la materia. La hibridación y las condiciones para lograr una astringencia de hibridación deseada se describen, por ejemplo, en Sambrook et al., Molecular Cloning: A Laboratory Manual, Cold Spring Harbor Laboratory Press, 2001; y Ausubel, F. et al., (Eds.), Short Protocols in Molecular Biology, Wiley, 2002.
Un ejemplo de condiciones de hibridación de alta astringencia es la hibridación de ácidos nucleicos de aproximadamente 100 nucleótidos de longitud en una solución que contiene 6X SSC, 5X solución de Denhardt, formamida al 30% y 100 microgramos/ml de esperma de salmón desnaturalizado a 37 °C durante una noche, seguido de lavado en una solución de 0.1X SSC y 0,1% SDS a 60 °C durante 15 minutos. SSC es NaCl 0,15 M/citrato de Na 0,015 M. La solución de Denhardt es seroalbúmina bovina al 0,02% / FICOLL al 0,02% / polivinilpirrolidona al 0,02%.
Una proteína de reprogramación modificada con QQ es una proteína aislada según aspectos de la presente invención. El término "proteína aislada" indica que la proteína ha sido separada de aquellos materiales biológicos, como células, desechos celulares y otras proteínas, que pueden estar presentes en el sistema en el que se produce la proteína. El término "proteína aislada" puede indicar, pero no necesariamente, que la proteína está purificada. La proteína purificada incluida en los métodos y composiciones de la presente invención contiene al menos aproximadamente 1 -100% de la masa, en peso, tal como aproximadamente un 25%, 50%, 75%, 85%, 95%, 99% o más de aproximadamente el 99 % de la masa, en peso, de la proteína incluida.
El término "sujeto" se refiere a un individuo que necesita tratamiento para una enfermedad o lesión que responde a los efectos beneficiosos de la reprogramación celular y generalmente incluye mamíferos y aves, como, entre otros, humanos, otros primates, gatos, perros, ovejas, vacas, cabras, caballos, cerdos, aves de corral, conejos y roedores, como ratas, ratones y cobayas. Según aspectos de la presente invención, el sujeto es un ser humano.
Condición caracterizada por células dañadas y/o defectuosas.
Los términos "tratar" y "tratamiento" usados para referirse al tratamiento de una condición caracterizada por células dañadas y/o defectuosas, tal como una enfermedad o lesión de un sujeto, incluyen: inhibir o mejorar la enfermedad o lesión en el sujeto, por ejemplo ralentizar la progresión de la enfermedad, y/o reducir o mejorar un signo o síntoma de la enfermedad o lesión.
De acuerdo con aspectos de los métodos de la presente invención, se tratan afecciones caracterizadas por angiogénesis y se caracterizan por el suministro eficaz de proteínas de reprogramación modificadas con QQ a través de la permeabilidad mejorada y el efecto de retención (efecto EPR) de los vasos sanguíneos angiogénicos.
Las afecciones caracterizadas por células dañadas y/o defectuosas tratadas de acuerdo con la presente descripción son diversas afecciones humanas, que incluyen, sin limitarse a, cáncer; enfermedad o lesión cardiovascular, como infarto agudo y crónico de miocardio, isquemia, lesión cardiaca, enfermedad de las arterias coronarias, enfermedad cardiaca congénita, miocardiopatías como miocardiopatía alcohólica, miocardiopatía arritmogénica del ventrículo derecho, miocardiopatía hipertensiva, miocardiopatía dilatada, miocardiopatía hipertrófica, miocardiopatía inflamatoria, miocardiopatía isquémica, miocardiopatía secundaria a enfermedad metabólica sistémica, miocardiodistrofia, miocardiopatía de no compactación, miocardiopatía restrictiva y miocardiopatía valvular; enfermedad vascular o daño de los vasos sanguíneos; anemias; accidente cerebrovascular isquémico y hemorrágico; enfermedades o afecciones metabólicas, tales como diabetes tipo I y tipo II, y obesidad; enfermedades y lesiones neurológicas, como lesión de la médula espinal, lesión cerebral traumática, enfermedad de Huntington, esquizofrenia, enfermedad de Alzheimer, esclerosis lateral amiotrófica, ataxias, autismo, enfermedad de Lyme, meningitis, migraña, enfermedades de las neuronas motoras, trastornos del movimiento, como la enfermedad de Parkinson, neuropatías, dolor, dolor neuropático, trastornos de la médula espinal, trastornos del nervio periférico y central, trastornos del sistema nervioso autónomo, trastornos convulsivos como epilepsia, trastornos del sueño, demencias, como la enfermedad de Alzheimer, distrofia muscular, neuropatía de Charcot-Marie-Tooth tipo 1A y enfermedades desmielinizantes, tales como encefalomielitis diseminada aguda, adrenoleucodistrofia, adrenomieloneuropatía, esclerosis múltiple, neuromielitis óptica, neuritis óptica y mielitis transversa; heridas; condiciones inflamatorias; enfermedades y lesiones hepáticas como enfermedad hepática como hipercolesterolemia familiar (HF), síndrome de Crigler-Najjar, triosinemia I hereditaria, insuficiencia hepática fulminante, hepatitis viral, lesión hepática inducida por fármacos, cirrosis, insuficiencia hepática hereditaria como la debida a la enfermedad de Wilson, síndrome de Gilbert o deficiencia de a-antitripsina, carcinoma hepatobiliar, enfermedad hepática autoinmune, tal como hepatitis crónica autoinmune o cirrosis biliar primaria; enfermedades autoinmunes; osteoartritis; artritis reumatoide; enfermedad o lesión del cartílago, tal como debida a trastorno articular, osteoartritis, lesión del cartílago, ruptura o desprendimiento traumático, acondroplasia, costocondritis, hernia de disco espinal, policonritis recidivante, tumor, condroma, condrosarcoma y adenoma pleomórfico; enfermedad de Crohn y anomalías genéticas.
De acuerdo con la presente invención, el uso está dirigido a un método de tratamiento del cáncer. Los cánceres particulares tratados mediante el uso de los métodos y composiciones aquí descritos se caracterizan por una proliferación celular anormal, incluyendo, pero sin limitarse a, hiperproliferación preneoplásica, cáncer in situ, neoplasias y metástasis. Los términos "tratar" y "tratamiento" empleados para referirse al tratamiento de un cáncer en un sujeto incluyen: inhibir o mejorar el cáncer en el sujeto, tal como ralentizar la progresión del cáncer y/o reducir o mejorar un signo o síntoma del cáncer.
Una cantidad terapéuticamente eficaz de una composición que incluye una composición anticancerosa de la presente invención es una cantidad que tiene un efecto beneficioso en un sujeto que está siendo tratado En sujetos que tienen cáncer, tal como una afección caracterizada por una proliferación celular anormal que incluye, entre otros, hiperproliferación preneoplásica, cáncer in situ, neoplasias, metástasis, un tumor, un crecimiento benigno u otra afección que responde a una composición de la invención, una cantidad terapéuticamente eficaz de una proteína QQ-modificada es eficaz para mejorar uno o más signos y/o síntomas del cáncer. Por ejemplo, una cantidad terapéuticamente eficaz de una composición es eficaz para disminuir de forma detectable la proliferación de células de un cáncer caracterizado por una proliferación celular anormal que incluye, pero no se limita a, hiperproliferación preneoplásica, cáncer in situ, neoplasias, metástasis, un tumor, un crecimiento benigno u otra condición que responde a una administración de una proteína QQ-modificada.
Dichos cánceres incluyen cánceres sólidos y no sólidos, tales como cáncer de vejiga de mama, colorrectal, cervical, de esófago, de cabeza y cuello, de riñón, de pulmón, cánceres del sistema nervioso como glioblastoma, astrocitoma, ependimoma, neuroblastoma, retinoblastoma, meningiomas, tumores de células granulares y tumores de la vaina nerviosa; cáncer de ovario, de páncreas, de próstata, de piel, de estómago, de testículo, de garganta, de uraco o vaginal.
Una composición farmacéutica para su uso según aspectos de la presente invención incluye una proteína de reprogramación QQ-modificada y un vehículo farmacéuticamente aceptable.
El término "vehículo farmacéuticamente aceptable" tal como se usa aquí se refiere a un vehículo o diluyente que generalmente no es tóxico para un receptor previsto y que no inhibe significativamente la actividad de una proteína QQ-modificada u otro agente activo incluido en la composición.
Una composición para su uso de acuerdo con la presente invención generalmente incluye aproximadamente un 0,1-99% de una proteína de reprogramación QQ-modificada.
Las composiciones farmacéuticas adecuadas para la administración a un sujeto se pueden preparar de diversas formas, incluyendo, por ejemplo, soluciones, dispersiones, suspensiones o emulsiones acuosas o no acuosas estériles fisiológicamente aceptables, y polvos estériles para la reconstitución en soluciones o dispersiones inyectables estériles.
Las composiciones farmacéuticas incluyen opcionalmente un tampón, disolvente o diluyente.
Ejemplos de vehículos acuosos y no acuosos adecuados incluyen agua, etanol, polioles como propilenglicol, polietilenglicol y glicerol; aceites vegetales como aceite de oliva; y ésteres orgánicos inyectables, tales como etiloleato; y mezclas adecuadas de dos o más de los mismos.
Dichas formulaciones se administran por una vía adecuada, incluyendo la administración parenteral. Opcionalmente, la administración incluye la administración sistémica o local.
Estas composiciones también pueden contener adyuvantes, tales como agentes conservantes, humectantes, emulsionantes y dispersantes. La prevención de la acción de los microorganismos se puede asegurar mediante diversos agentes antibacterianos y antifúngicos, por ejemplo parabenos, clorobutanol, fenol, ácido sórbico y similares. Opcionalmente se incluyen uno o más agentes isotónicos, por ejemplo azúcares y/o sales como cloruro de sodio.
En aspectos particulares, las proteínas QQ-modificadas se administran mediante aplicación tópica.
Una formulación tópica puede ser una pomada, loción, crema o gel en aspectos particulares. Formas de dosificación tópicas, tales como pomadas, lociones, cremas o bases de gel, se describen en Remington: The Science and Practice of Pharmacy, 21a Ed., Lippincott Williams & Wilkins, 2006, p.880-882 y p.886-888; y en Allen, L. V. et al., Ansel's Pharmaceutical Dosage Forms and Drug Delivery Systems, 8a Ed., Lippincott Williams & Wilkins, 2005, p.277-297.
En la técnica se conocen vehículos farmacéuticamente aceptables y la formulación de composiciones farmacéuticas, incluyendo, por ejemplo, pero sin limitarse a, tal como se describe en Remington: The Science and Practice of Pharmacy, 2ia Ed., Lippincott, Williams & Wilkins, Philadelphia, PA, 2006; and Allen, L.V. et al., Ansel's Pharmaceutical Dosage Forms and Drug Delivery Systems, 8a Ed., Lippincott, Williams & Wilkins, Philadelphia, PA, 2005.
Una composición farmacéutica que incluye una proteína QQ-modificada es adecuada para la administración a un sujeto mediante diversas vías sistémicas y/o locales que incluyen, pero no se limitan a, parenteral, oral, rectal, nasal, pulmonar, epidural, ocular, ótica, intraarterial, intracardíaca, intracerebroventricular, intracraneal, intradérmica, intravenosa, intramuscular, intraperitoneal, intraósea, intratecal, intratumoral, intravesical, subcutánea, tópica, transdérmica y transmucosa, tal como por las vías de administración sublingual, bucal, vaginal e inhalatoria.
Administración de la composición farmacéutica
Una composición farmacéutica para su uso de acuerdo con la presente invención se puede administrar de forma aguda o crónica. Por ejemplo, una composición como se describe aquí se puede administrar como una dosis unitaria o en múltiples dosis durante un período de tiempo relativamente limitado, como segundos - horas. En una realización adicional, la administración puede incluir múltiples dosis administradas durante un período de días-años, tal como para el tratamiento crónico del cáncer.
La cantidad terapéuticamente eficaz de una proteína QQ-modificada variará dependiendo de la vía de administración y la forma de la composición que se administra y la composición particular que se administra, la gravedad y el tipo de afección que se está tratando en el sujeto, la especie del sujeto, la edad y sexo del sujeto y características físicas generales del sujeto a tratar. El experto en la técnica podría determinar la cantidad terapéuticamente eficaz en vista de estas y otras consideraciones típicas en la práctica médica sin experimentación indebida en vista de la presente descripción y lo que es conocido en la técnica. En general, se contempla que una cantidad terapéuticamente eficaz estaría en el intervalo de aproximadamente 0,001 ng/kg - 100 mg/kg de peso corporal, opcionalmente en el intervalo de aproximadamente 0,01 ng/kg - 1 mg/kg, y además opcionalmente en el intervalo de aproximadamente 0,1 ng/kg - 0,1 mg/kg. Además, la dosis puede ajustarse dependiendo de si el tratamiento debe ser agudo o continuado.
Normalmente se administran entre 1 y 100 dosis de una proteína QQ-modificada para tratar a un sujeto que lo necesita, aunque se pueden administrar más dosis. Se puede administrar una proteína QQ-modificada dos veces al día, diariamente, quincenalmente, semanalmente, cada dos semanas, mensualmente o en algún otro intervalo, para un curso de tratamiento que se extiende un día, 1 semana, 2 semanas, 4 semanas, 1 mes, 2 meses, 3-6 meses o más. Opcionalmente, el ciclo de tratamiento se repite y puede extenderse a un tratamiento crónico si es necesario.
La administración de una proteína QQ-modificada según aspectos del uso en un método de la presente invención incluye la administración según un régimen de dosificación para producir una respuesta deseada. Un programa adecuado para la administración de dosis depende de varios factores, que incluyen la edad, el peso, el sexo, el historial médico y el estado de salud del sujeto, el tipo de composición utilizada y la vía de administración, por ejemplo. El experto en la técnica puede determinar fácilmente la dosis y el programa de administración para un sujeto en particular.
El uso en los métodos de acuerdo con realizaciones de la presente invención incluye la administración de una proteína QQ-modificada como una formulación farmacéutica, tal como por administración sistémica o local. Vías de administración ilustrativas incluyen, pero no se limitan a, parenteral, oral, rectal, nasal, pulmonar, epidural, ocular, ótica, intraarterial, intracardíaca, intracerebroventricular, intracraneal, intradérmica, intravenosa, intramuscular, intraperitoneal, intraósea, intratecal, intratumoral, intravesical, subcutánea, tópica, transdérmica y transmucosa, como vía de administración sublingual, bucal, vaginal e inhalatoria.
La proteína QQ-modificada puede administrarse vía parenteral, por ejemplo por inyección, como inyección intravenosa, intramuscular, intraperitoneal, subcutánea, transdérmica, intratecal, intracraneal, intracerebrospinal y/o por infusión continua, por ejemplo con un dispositivo de infusión continua intravenoso o intracerebrospinal.
Según aspectos, una proteína de reprogramación modificada con un reactivo de transducción de proteínas es un factor de transcripción de unión al ADN. La administración de una proteína de reprogramación modificada con un reactivo de transducción de proteínas es eficaz para reprogramar uno o más tipos de células in situ en el sitio de la enfermedad o daño para tratar la enfermedad o daño in vivo de acuerdo con aspectos aquí descritos. La administración de una proteína de reprogramación modificada con un reactivo de transducción de proteínas es eficaz para reprogramar uno o más tipos de células in situ en el sitio de la enfermedad o daño, generando células madre transitorias que luego se diferencian en células normales in situ en el sitio de la enfermedad o daño in vivo para tratar la enfermedad o el daño de acuerdo con aspectos aquí descritos.
En métodos para tratar el cáncer según aspectos de la presente invención se emplean una o más de: Sox2 modificada con reactivo de transducción de proteínas, Oct4 modificada con reactivo de transducción de proteínas y Nanog modificada con reactivo de transducción de proteínas, incluyendo su administración. En métodos para tratar el cáncer según aspectos de la presente invención pueden emplearse dos o más de: Sox2 modificada con reactivo de transducción de proteínas, Oct4 modificada con reactivo de transducción de proteínas y Nanog modificada con reactivo de transducción de proteínas, incluyendo su administración. Dichos métodos producen nuevas células normales en el sitio del cáncer reprogramando las células cancerosas en el sitio.
En métodos para tratar tumores cerebrales según aspectos de la presente invención pueden emplearse uno o más de: Sox2 modificada con reactivo de transducción de proteínas, Oct4 modificada con reactivo de transducción de proteínas y Nanog modificada con reactivo de transducción de proteínas, incluyendo su administración. En métodos para tratar tumores cerebrales según aspectos de la presente invención pueden emplearse dos o más de: Sox2 modificada con reactivo de transducción de proteínas, Oct4 modificada con reactivo de transducción de proteínas y Nanog modificada con reactivo de transducción de proteínas, incluyendo su administración. En métodos para tratar tumores cerebrales según aspectos de la presente invención pueden emplearse: Sox2 modificada con reactivo de transducción de proteínas, Oct4 modificada con reactivo de transducción de proteínas y Nanog modificada con reactivo de transducción de proteínas, incluyendo su administración. Dichos métodos producen nuevas células normales en el sitio del tumor cerebral mediante la reprogramación de las células del tumor cerebral en el sitio.
En métodos para tratar tumores cerebrales según aspectos de la presente invención puede emplearse Sox2 modificada con reactivo de transducción de proteínas y, opcionalmente, NeuroD modificada con reactivo de transducción de proteínas, incluyendo su administración. En métodos para tratar el cáncer de páncreas según aspectos de la presente invención puede emplearse Sox2 modificada con reactivo de transducción de proteínas y, opcionalmente, NeuroD modificada con reactivo de transducción de proteínas, incluyendo su administración. Dichos métodos producen nuevas células normales en el sitio del cáncer de páncreas reprogramando las células pancreáticas cancerosas en el sitio.
En métodos para tratar el cáncer de mama según aspectos de la presente invención pueden emplearse uno o más de: Sox2 modificada con reactivo de transducción de proteínas, Oct4 modificada con reactivo de transducción de proteínas y Nanog modificada con reactivo de transducción de proteínas, incluyendo su administración. En métodos para tratar el cáncer de mama según aspectos de la presente invención pueden emplearse dos o más de: Sox2 modificada con reactivo de transducción de proteínas, Oct4 modificada con reactivo de transducción de proteínas y Nanog modificada con reactivo de transducción de proteínas aisladas, incluyendo su administración. En métodos para tratar el cáncer de mama según aspectos de la presente invención pueden emplearse Sox2 modificada con reactivo de transducción de proteínas, Oct4 modificada con reactivo de transducción de proteínas y Nanog modificada con reactivo de transducción de proteínas, incluyendo su administración. Dichos métodos producen nuevas células normales en el sitio del cáncer de mama mediante la reprogramación de las células del cáncer de mama en el sitio.
Los métodos para tratar el cáncer de mama aquí descritos incluyen la administración de uno o más de: Sox9 modificada con reactivo de transducción de proteínas, Slug modificada con reactivo de transducción de proteínas, Gata3 modificada con reactivo de transducción de proteínas, Brca-1 modificada con reactivo de transducción de proteínas y State5a modificada con reactivo de transducción de proteínas. Los métodos para el tratamiento del cáncer de mama aquí descritos incluyen la administración de dos o más de: Sox9 modificada con reactivo de transducción de proteínas, Slug modificada con reactivo de transducción de proteínas, Gata3 modificada con reactivo de transducción de proteínas, Brca-1 modificada con reactivo de transducción de proteínas y State5a modificada con reactivo de transducción de proteínas. Los métodos para tratar el cáncer de mama aquí descritos incluyen la administración de tres o más de: Sox9 modificada con reactivo de transducción de proteínas, Slug modificada con reactivo de transducción de proteínas, Gata3 modificada con reactivo de transducción de proteínas, Brca-1 modificada con reactivo de transducción de proteínas y State5a modificada con reactivo de transducción de proteínas. Los métodos para tratar el cáncer de mama aquí descritos incluyen la administración de cuatro o más de: Sox9 modificada con reactivo de transducción de proteínas, Slug modificada con reactivo de transducción de proteínas, Gata3 modificada con reactivo de transducción de proteínas, Brca-1 modificada con reactivo de transducción de proteínas y State5a modificada con reactivo de transducción de proteínas. Los métodos para tratar el cáncer de mama aquí descritos incluyen la administración de: Sox9 modificada con reactivo de transducción de proteínas, Slug modificada con reactivo de transducción de proteínas, Gata3 modificada con reactivo de transducción de proteínas, Brca-1 modificada con reactivo de transducción de proteínas y State5a modificada con reactivo de transducción de proteínas. Dichos métodos producen nuevas células normales en el sitio del cáncer de mama reprogramando las células del cáncer de mama en el sitio.
En métodos para tratar el cáncer de páncreas según aspectos de la presente invención pueden emplearse uno o más de: Sox2 modificada con reactivo de transducción de proteínas, Oct4 modificada con reactivo de transducción de proteínas y Nanog modificada con reactivo de transducción de proteínas, incluyendo su administración. En métodos para tratar el cáncer de páncreas según aspectos de la presente invención pueden emplearse dos o más de: Sox2 modificada con reactivo de transducción de proteínas, Oct4 modificada con reactivo de transducción de proteínas y Nanog modificada con reactivo de transducción de proteínas, incluyendo su administración. En métodos para tratar el cáncer de páncreas según aspectos de la presente invención pueden emplearse: Sox2 modificada con reactivo de transducción de proteínas, Oct4 modificada con reactivo de transducción de proteínas y Nanog modificada con reactivo de transducción de proteínas, incluyendo su administración. Dichos métodos producen nuevas células normales en el sitio del cáncer de páncreas reprogramando las células del cáncer de páncreas en el sitio.
Los métodos para tratar el cáncer de páncreas aquí descritos incluyen la administración de uno o más de: PDX1 modificada con reactivo de transducción de proteínas, PAX4 modificada con reactivo de transducción de proteínas, MafA modificada con reactivo de transducción de proteínas y Ngn3 modificada con reactivo de transducción de proteínas. Los métodos para tratar el cáncer de páncreas aquí descritos incluyen la administración de dos o más de: PDX1 modificada con reactivo de transducción de proteínas, PAX4 modificada con reactivo de transducción de proteínas, MafA modificada con reactivo de transducción de proteínas y Ngn3 modificada con reactivo de transducción de proteínas. Se describen métodos de tratamiento del cáncer de páncreas que incluyen la administración de tres o más de: PDX1 modificada con reactivo de transducción de proteínas, PAX4 modificada con reactivo de transducción de proteínas, MafA modificada con reactivo de transducción de proteínas y Ngn3 modificada con reactivo de transducción de proteínas. Se describen métodos para tratar el cáncer de páncreas que incluyen la administración de PDX1 modificada con reactivo de transducción de proteínas, PAX4 modificada con reactivo de transducción de proteínas, MafA modificada con reactivo de transducción de proteínas y Ngn3 modificada con reactivo de transducción de proteínas. Dichos métodos producen nuevas células normales en el sitio del cáncer de páncreas reprogramando las células del cáncer de páncreas en el sitio.
Se describen métodos para tratar una enfermedad cardíaca o daño cardíaco, tal como el daño debido a un infarto de miocardio agudo o crónico, e incluyen la administración de uno o más de: Gata4 modificada con reactivo de transducción de proteínas, Hand2 modificada con reactivo de transducción de proteínas, MEF2c modificada con reactivo de transducción de proteínas y Tbox5 modificada con reactivo de transducción de proteínas. Se describen métodos para tratar una enfermedad cardíaca o daño cardíaco que incluyen la administración de dos o más de: Gata4 modificada con reactivo de transducción de proteínas, Hand2 modificada con reactivo de transducción de proteínas, MEF2c modificada con reactivo de transducción de proteínas y Tbox5 modificada con reactivo de transducción de proteínas. Se describen métodos para tratar una enfermedad cardíaca o daño cardíaco e incluyen la administración de tres o más de: Gata4 modificada con reactivo de transducción de proteínas, Hand2 modificada con reactivo de transducción de proteínas, MEF2c modificada con reactivo de transducción de proteínas y Tbox5 modificada con reactivo de transducción de proteínas. Se describen métodos para tratar una enfermedad cardíaca o daño cardíaco e incluyen la administración de: Gata4 modificada con reactivo de transducción de proteínas, Hand2 modificada con reactivo de transducción de proteínas, MEF2c modificada con reactivo de transducción de proteínas y Tbox5 modificada con reactivo de transducción de proteínas. Dichos métodos producen nuevos cardiomiocitos, células de músculo liso y células endoteliales en el sitio de la enfermedad o daño mediante la reprogramación de fibroblastos en el sitio.
Se describen métodos para tratar una enfermedad hepática o daño hepático e incluyen la administración de uno o más de: Gata4 modificada con reactivo de transducción de proteínas, Hnfla modificada con reactivo de transducción de proteínas y Foxa3 modificada con reactivo de transducción de proteínas. Se describen métodos para tratar una enfermedad hepática o daño hepático e incluyen la administración de dos o más de: Gata4 modificada con reactivo de transducción de proteínas, Hnfla modificada con reactivo de transducción de proteínas y Foxa3 modificada con reactivo de transducción de proteínas. Se describen métodos para tratar una enfermedad hepática o daño hepático e incluyen la administración de: Gata4 modificada con reactivo de transducción de proteínas, Hnfla modificada con reactivo de transducción de proteínas y Foxa3 modificada con reactivo de transducción de proteínas. Tales métodos producen nuevos hepatocitos. en el sitio de la enfermedad o daño reprogramando los fibroblastos en el sitio. Ejemplos de estas enfermedades o daños hepáticos incluyen hipercolesterolemia familiar (FH), síndrome de Crigler-Najjar y triosinémica I hereditaria.
Se describen métodos para tratar una enfermedad hepática o daño hepático e incluyen la administración de uno o más de: Hnfla modificada con reactivo de transducción de proteínas, Foxal modificada con reactivo de transducción de proteínas, Foxa2 modificada con reactivo de transducción de proteínas y Foxa3 modificada con reactivo de transducción de proteínas. Se describen métodos para tratar una enfermedad hepática o daño hepático e incluyen la administración de dos o más de: Hnfla modificada con reactivo de transducción de proteínas, Foxal modificada con reactivo de transducción de proteínas, Foxa2 modificada con reactivo de transducción de proteínas y Foxa3 modificada con reactivo de transducción de proteínas. Se describen métodos para tratar una enfermedad hepática o daño hepático e incluyen la administración de: Hnfla modificada con reactivo de transducción de proteínas, Foxal modificada con reactivo de transducción de proteínas, Foxa2 modificada con reactivo de transducción de proteínas y Foxa3 modificada con reactivo de transducción de proteínas. Dichos métodos producen nuevos hepatocitos en el sitio de la enfermedad o daño mediante la reprogramación de fibroblastos en el sitio. Ejemplos de enfermedades o daños hepáticos incluyen hipercolesterolemia familiar (FH), síndrome de Crigler-Najjar y triosinémica I hereditaria.
Se describen métodos para tratar la aterosclerosis e incluyen la administración de uno o más de: CEBP/a/p modificada con reactivo de transducción de proteínas y Pu .1 modificada con reactivo de transducción de proteínas. Se describen métodos para tratar la aterosclerosis e incluyen la administración de CEBP/a/p y PU.1 modificada con reactivo de transducción de proteínas. Dichos métodos producen nuevas células espumosas y macrófagos en el sitio de la aterosclerosis reprogramando los fibroblastos en el sitio.
Se describen métodos para tratar una enfermedad neurodegenerativa o daño del tejido neuronal e incluyen la administración de uno o más de: Brn2 modificada con reactivo de transducción de proteínas, Sox2 modificada con reactivo de transducción de proteínas y Foxg1 modificada con reactivo de transducción de proteínas. Se describen métodos para tratar una enfermedad neurodegenerativa o daño del tejido neuronal e incluyen la administración de dos o más de: Brn2 modificada con reactivo de transducción de proteínas, Sox2 modificada con reactivo de transducción de proteínas y Foxgl modificada con reactivo de transducción de proteínas. Se describen métodos para tratar enfermedades neurodegenerativas o daño de tejido neuronal e incluyen la administración de: Brn2 modificada con reactivo de transducción de proteínas, Sox2 modificada con reactivo de transducción de proteínas y Foxgl modificada con reactivo de transducción de proteínas. Dichos métodos producen nuevas neuronas en el sitio de la enfermedad o daño mediante la reprogramación de fibroblastos en el sitio.
Se describen métodos para tratar una enfermedad neurodegenerativa o daño del tejido neuronal e incluyen la administración de uno o más de: Asc1 modificada con reactivo de transducción de proteínas, Lmxla modificada con reactivo de transducción de proteínas, Nurrl modificada con reactivo de transducción de proteínas, Brn2 modificada con reactivo de transducción de proteínas y Mytll modificada con reactivo de transducción de proteínas. Se describen métodos para tratar enfermedades neurodegenerativas o daño del tejido neuronal e incluyen la administración de dos o más de: Asc1 modificada con reactivo de transducción de proteínas, Lmxla modificada con reactivo de transducción de proteínas, Nurrl modificada con reactivo de transducción de proteínas, Brn2 modificada con reactivo de transducción de proteínas y Mytll modificada con reactivo de transducción de proteínas. Se describen métodos para tratar la enfermedad neurodegenerativa o el daño del tejido neuronal e incluyen la administración de tres o más de: Asc1 modificada con reactivo de transducción de proteínas, Lmxla modificada con reactivo de transducción de proteínas, Nurrl modificada con reactivo de transducción de proteínas, Brn2 modificada con reactivo de transducción de proteínas y Mytll modificada con reactivo de transducción de proteínas. Se describen métodos para tratar la enfermedad neurodegenerativa o el daño del tejido neuronal e incluyen la administración de cuatro o más de: Asc1 modificada con reactivo de transducción de proteínas, Lmxla modificada con reactivo de transducción de proteínas, Nurrl modificada con reactivo de transducción de proteínas, Brn2 modificada con reactivo de transducción de proteínas y Mytll modificada con reactivo de transducción de proteínas. Se descirben métodos de tratamiento de enfermedades neurodegenerativas o daño del tejido neuronal e incluyen la administración de: Asc1 modificada con reactivo de transducción de proteínas, Lmxla modificada con reactivo de transducción de proteínas, Nurrl modificada con reactivo de transducción de proteínas, Brn2 modificada con reactivo de transducción de proteínas y Mytll modificada con reactivo de transducción de proteínas. Dichos métodos producen nuevas neuronas glutamatérgicas en el sitio de la enfermedad o daño mediante la reprogramación de fibroblastos en el sitio.
Se describen aquí métodos para tratar una enfermedad neurodegenerativa o daño del tejido neuronal e incluyen la administración de uno o más de: Asc1 modificada con reactivo de transducción de proteínas, Brn2 modificada con reactivo de transducción de proteínas, Mytll modificada con reactivo de transducción de proteínas y NeuroDI modificada con reactivo de transducción de proteínas. Se describen aquí métodos para tratar enfermedades neurodegenerativas o daño del tejido neuronal e incluyen la administración de dos o más de: Asc1 modificada con reactivo de transducción de proteínas, Brn2 modificada con reactivo de transducción de proteínas, Mytll modificada con reactivo de transducción de proteínas y NeuroDI modificada con reactivo de transducción de proteínas. Se describen aquí métodos para tratar la enfermedad neurodegenerativa o el daño del tejido neuronal e incluyen la administración de tres o más de: Asc1 modificada con reactivo de transducción de proteínas, Brn2 modificada con reactivo de transducción de proteínas, Mytll modificada con reactivo de transducción de proteínas y NeuroDI modificada con reactivo de transducción de proteínas. Se describen aquí métodos para tratar enfermedades neurodegenerativas o daño del tejido neuronal e incluyen la administración de: Asc1 modificada con reactivo de transducción de proteínas, Brn2 modificada con reactivo de transducción de proteínas, Mytll modificada con reactivo de transducción de proteínas y NeuroDI modificada con reactivo de transducción de proteínas. Dichos métodos producen nuevas neuronas glutamatérgicas en el sitio de la enfermedad o daño mediante la reprogramación de fibroblastos en el sitio.
Se describen aquí métodos para tratar una enfermedad neurodegenerativa o daño del tejido neuronal e incluyen la administración de: Ngn2 modificada con reactivo de transducción de proteínas. Dichos métodos producen nuevas neuronas glutamatérgicas en el sitio de la enfermedad o daño mediante la reprogramación de astrocitos en el sitio.
Se describen aquí métodos para tratar una enfermedad neurodegenerativa o daño del tejido neuronal e incluyen la administración de uno o más de: Sox2 modificada con reactivo de transducción de proteínas y NeuroD1 modificada con reactivo de transducción de proteínas. Se describen métodos para tratar enfermedades neurodegenerativas o daño del tejido neuronal e incluyen la administración de: Sox2 modificada con reactivo de transducción de proteínas y NeuroD1 modificada con reactivo de transducción de proteínas. Dichos métodos producen nuevas células madre neurales en el sitio de la enfermedad o el daño.
Se describen métodos para tratar una enfermedad neurológica o daño del tejido neuronal e incluyen la administración de uno o más de: Brn2 modificada con reactivo de transducción de proteínas, Ascl1 modificada con reactivo de transducción de proteínas, Mytll modificada con reactivo de transducción de proteínas, Lhx3 modificada con reactivo de transducción de proteínas y Hb9 modificada con reactivo de transducción de proteínas. Se describen métodos para tratar enfermedades neurológicas o daño del tejido neuronal e incluyen la administración de dos o más de: Brn2 modificada con reactivo de transducción de proteínas, Ascl1 modificada con reactivo de transducción de proteínas, Mytll modificada con reactivo de transducción de proteínas, Lhx3 modificada con reactivo de transducción de proteínas y Hb9 modificada con reactivo de transducción de proteínas. Se describen métodos para tratar enfermedades neurológicas o daño del tejido neuronal e incluyen la administración de tres o más de: Brn2 modificada con reactivo de transducción de proteínas, Ascl1 modificada con reactivo de transducción de proteínas, Mytll modificada con reactivo de transducción de proteínas, Lhx3 modificada con reactivo de transducción de proteínas y Hb9 modificada con reactivo de transducción de proteínas. Se describen métodos para tratar enfermedades neurológicas o daño del tejido neuronal e incluyen la administración de cuatro o más de: Brn2 modificada con reactivo de transducción de proteínas, Ascl1 modificada con reactivo de transducción de proteínas, Mytll modificada con reactivo de transducción de proteínas, Lhx3 modificada con reactivo de transducción de proteínas y Hb9 modificada con reactivo de transducción de proteínas. Se describen métodos para tratar enfermedades neurológicas o daño del tejido neuronal e incluyen administrar: Brn2 modificada con reactivo de transducción de proteínas, Ascl1 modificada con reactivo de transducción de proteínas, Mytll modificada con reactivo de transducción de proteínas, Lhx3 modificada con reactivo de transducción de proteínas y Hb9 modificada con reactivo de transducción de proteínas. Dichos métodos producen nuevas neuronas motoras en el sitio de la enfermedad o daño mediante la reprogramación de fibroblastos en el sitio. Ejemplos de tales enfermedades neurológicas incluyen la esclerosis lateral amiotrófica (ELA).
Se describen métodos para tratar una enfermedad neurológica o daño del tejido neuronal e incluyen la administración de uno o más de: Brn2 modificada con reactivo de transducción de proteínas, Ascl1 modificada con reactivo de transducción de proteínas, Mytll modificada con reactivo de transducción de proteínas, Lhx3 modificada con reactivo de transducción de proteínas, Hb9 modificada con reactivo de transducción de proteínas, Lsll modificada con reactivo de transducción de proteínas y Ngn2 modificada con reactivo de transducción de proteínas. Se describen métodos para tratar enfermedades neurológicas o daño del tejido neuronal e incluyen la administración de dos o más de: Brn2 modificada con reactivo de transducción de proteínas, Ascl1 modificada con reactivo de transducción de proteínas, Mytll modificada con reactivo de transducción de proteínas, Lhx3 modificada con reactivo de transducción de proteínas, Hb9 modificada con reactivo de transducción de proteínas, Lsll modificada con reactivo de transducción de proteínas y Ngn2 modificada con reactivo de transducción de proteínas. Se describen métodos para tratar enfermedades neurológicas o daño del tejido neuronal e incluyen la administración de tres o más de: Brn2 modificada con reactivo de transducción de proteínas, Ascl1 modificada con reactivo de transducción de proteínas, Mytll modificada con reactivo de transducción de proteínas, Lhx3 modificada con reactivo de transducción de proteínas, Hb9 modificada con reactivo de transducción de proteínas, Lsll modificada con reactivo de transducción de proteínas y Ngn2 modificada con reactivo de transducción de proteínas. Se describen métodos para tratar enfermedades neurológicas o daño del tejido neuronal e incluyen la administración de cuatro o más de: Brn2 modificada con reactivo de transducción de proteínas, Ascl1 modificada con reactivo de transducción de proteínas, Mytll modificada con reactivo de transducción de proteínas, Lhx3 modificada con reactivo de transducción de proteínas, Hb9 modificada con reactivo de transducción de proteínas, Lsll modificada con reactivo de transducción de proteínas y Ngn2 modificada con reactivo de transducción de proteínas. Se describen métodos para tratar enfermedades neurológicas o daño del tejido neuronal e incluyen la administración de cinco o más de: Brn2 modificada con reactivo de transducción de proteínas, Ascl1 modificada con reactivo de transducción de proteínas, Mytll modificada con reactivo de transducción de proteínas, Lhx3 modificada con reactivo de transducción de proteínas , Hb9 modificada con reactivo de transducción de proteínas, Lsll modificada con reactivo de transducción de proteínas y Ngn2 modificada con reactivo de transducción de proteínas. Se describen métodos para tratar enfermedades neurológicas o daño del tejido neuronal e incluyen la administración de seis o más de: Brn2 modificada con reactivo de transducción de proteínas, Ascl1 modificada con reactivo de transducción de proteínas, Mytll modificada con reactivo de transducción de proteínas, Lhx3 modificada con reactivo de transducción de proteínas, Hb9 modificada con reactivo de transducción de proteínas, Lsll modificada con reactivo de transducción de proteínas y Ngn2 modificada con reactivo de transducción de proteínas. Se describen métodos para tratar enfermedades neurológicas o daño del tejido neuronal e incluyen la administración de: Brn2 modificada con reactivo de transducción de proteínas, Ascl1 modificada con reactivo de transducción de proteínas, Mytll modificada con reactivo de transducción de proteínas, Lhx3 modificada con reactivo de transducción de proteínas, Hbo modificada con reactivo de transducción de proteínas, Lsll modificada con reactivo de transducción de proteínas y Ngn2 modificada con reactivo de transducción de proteínas. Dichos métodos producen nuevas neuronas motoras en el sitio de la enfermedad o daño mediante la reprogramación de fibroblastos en el sitio. Ejemplos de tales enfermedades neurológicas incluyen la esclerosis lateral amiotrófica (ELA).
Se describen métodos para tratar una enfermedad neurológica o daño del tejido neuronal e incluyen la administración de: Dlx2 nodificada con reactivo de transducción de proteínas. Dichos métodos producen nuevas neuronas GABA en el sitio de la enfermedad o daño mediante la reprogramación de fibroblastos en el sitio. Ejemplos de tales enfermedades neurológicas incluyen la esclerosis lateral amiotrófica (ELA), la atrofia muscular espinal (SMA) y la enfermedad de Parkinson.
Se describen métodos para tratar una enfermedad neurológica o daño del tejido neuronal e incluyen la administración de: Dlx2 modificada con reactivo de transducción de proteínas y Ascl1 modificada con reactivo de transducción de proteínas. Dichos métodos producen nuevas neuronas GABA en el sitio de la enfermedad o daño mediante la reprogramación de astrocitos en el sitio. de tales enfermedades neurológicas incluyen la atrofia muscular espinal (SMA).
Se describen métodos para tratar una enfermedad neurológica o daño del tejido neuronal e incluyen la administración de uno o más de: Asc1 modificada con reactivo de transducción de proteínas, Brn2 modificada con reactivo de transducción de proteínas, Mytll modificada con reactivo de transducción de proteínas, Lmxla modificada con reactivo de transducción de proteínas y Foxa2 modificada con reactivo de transducción de proteínas. Se describen métodos para tratar enfermedades neurológicas o daño del tejido neuronal e incluyen la administración de dos o más de: Asc1 modificada con reactivo de transducción de proteínas, Brn2 modificada con reactivo de transducción de proteínas, Mytll modificada con reactivo de transducción de proteínas, Lmxla modificada con reactivo de transducción de proteínas y Foxa2 modificada con reactivo de transducción de proteínas. Se describen métodos de tratamiento de enfermedades neurológicas o daño del tejido neuronal e incluyen la administración de tres o más de: Asc1 modificada con reactivo de transducción de proteínas, Brn2 modificada con reactivo de transducción de proteínas, Mytll modificada con reactivo de transducción de proteínas, Lmxla modificada con reactivo de transducción de proteínas y Foxa2 modificada con reactivo de transducción de proteínas. Se describen métodos para tratar enfermedades neurológicas o daño del tejido neuronal e incluyen la administración de cuatro o más de: Asc1 modificada con reactivo de transducción de proteínas, Brn2 modificada con reactivo de transducción de proteínas, Mytll modificada con reactivo de transducción de proteínas, Lmxla modificada con reactivo de transducción de proteínas y Foxa2 modificada con reactivo de transducción de proteínas. Se describen métodos para tratar enfermedades neurológicas o daño del tejido neuronal e incluyen la administración de: Asc1 modificada con reactivo de transducción de proteínas, Brn2 modificada con reactivo de transducción de proteínas, Mytll modificada con reactivo de transducción de proteínas, Lmxla modificada con reactivo de transducción de proteínas y Foxa2 modificada con reactivo de transducción de proteínas. Dichos métodos producen nuevas neuronas dopamina en el sitio de la enfermedad o daño mediante la reprogramación de fibroblastos en el sitio. Ejemplos de tales enfermedades neurológicas incluyen la enfermedad de Parkinson.
Se describen métodos para tratar una enfermedad neurológica o daño del tejido neuronal e incluyen la administración de uno o más de: Asc1 modificada con reactivo de transducción de proteínas, Lmxla modificada con reactivo de transducción de proteínas y Nurr1 modificada con reactivo de transducción de proteínas. Se describen métodos para tratar una enfermedad neurológica o daño del tejido neuronal e incluyen la administración de dos o más de: Asc1 modificada con reactivo de transducción de proteínas, Lmxla modificada con reactivo de transducción de proteínas y Nurr1 modificada con reactivo de transducción de proteínas. Se describen métodos para tratar enfermedades neurológicas o daño del tejido neuronal e incluyen la administración de: Asc1 modificada con reactivo de transducción de proteínas, Lmxla modificada con reactivo de transducción de proteínas y Nurr1 modificada con reactivo de transducción de proteínas. Dichos métodos producen nuevas neuronas en el sitio de la enfermedad o daño mediante la reprogramación de fibroblastos en el sitio. Ejemplos de tales enfermedades neurológicas incluyen la enfermedad de Parkinson.
Se describen métodos para tratar una enfermedad o trastorno de la sangre e incluyen la administración de Oct4 modificada con reactivo de transducción de proteínas. Dichos métodos producen nuevas células hematopoyéticas en el sitio de la enfermedad o daño mediante la reprogramación de fibroblastos en el sitio.
Se describen métodos para tratar la diabetes, una enfermedad pancreática o daño del tejido pancreático e incluyen la administración de uno o más de: Ngn3 modificada con reactivo de transducción de proteínas, Pdxl modificada con reactivo de transducción de proteínas y Pax4 modificada con reactivo de transducción de proteínas. Se describen métodos para tratar la diabetes, una enfermedad pancreática o daño del tejido pancreático e incluyen la administración de dos o más de: Ngn3 modificada con reactivo de transducción de proteínas, Pdxl modificada con reactivo de transducción de proteínas y Pax4 modificada con reactivo de transducción de proteínas. Se describen métodos para tratar la diabetes, una enfermedad pancreática o daño del tejido pancreático e incluyen la administración de: Ngn3 modificada con reactivo de transducción de proteínas, Pdxl modificada con reactivo de transducción de proteínas y Pax4 modificada con reactivo de transducción de proteínas. Dichos métodos producen nuevas células beta pancreáticas en el sitio de la enfermedad o daño mediante la reprogramación de fibroblastos en el sitio.
Se describen métodos para tratar la diabetes, una enfermedad pancreática o daño del tejido pancreático e incluyen la administración de uno o más de: Ngn3 modificada con reactivo de transducción de proteínas, Pdxl modificada con reactivo de transducción de proteínas y MafA modificada con reactivo de transducción de proteínas. Se describen métodos para tratar la diabetes, una enfermedad pancreática o daño del tejido pancreático e incluyen la administración de dos o más de: Ngn3 modificada con reactivo de transducción de proteínas, Pdxl modificada con reactivo de transducción de proteínas y MafA modificada con reactivo de transducción de proteínas. Se describen métodos para tratar la diabetes, una enfermedad pancreática o daño del tejido pancreático e incluyen la administración de: Ngn3 modificada con reactivo de transducción de proteínas, Pdxl modificada con reactivo de transducción de proteínas y MafA modificada con reactivo de transducción de proteínas. Dichos métodos producen nuevas células beta pancreáticas en el sitio de la enfermedad o daño mediante la reprogramación de fibroblastos en el sitio.
Se describen métodos para tratar la diabetes, una enfermedad pancreática o daño del tejido pancreático e incluyen la administración de uno o más de: Ngn3 modificada con reactivo de transducción de proteínas, Pdxl modificada con reactivo de transducción de proteínas y MafA modificada con reactivo de transducción de proteínas. Se describen métodos para tratar la diabetes, una enfermedad pancreática o daño del tejido pancreático e incluyen la administración de dos o más de: Ngn3 modificada con reactivo de transducción de proteínas, Pdxl modificada con reactivo de transducción de proteínas y MafA modificada con reactivo de transducción de proteínas. Se describen métodos para tratar la diabetes, una enfermedad pancreática o daño del tejido pancreático e incluyen la administración de: Ngn3 modificada con reactivo de transducción de proteínas, Pdxl modificada con reactivo de transducción de proteínas y MafA modificada con reactivo de transducción de proteínas. Dichos métodos producen nuevas células beta pancreáticas en el sitio de la enfermedad o daño mediante la reprogramación de células exocrinas pancreáticas en el sitio.
Se describen métodos para tratar la obesidad e incluyen la administración de uno o ambos de: Prdm16 modificada con reactivo de transducción de proteínas y C/EBPb modificada con reactivo de transducción de proteínas. Se describen métodos para tratar la obesidad e incluyen la administración tanto de Prdm16 modificada con reactivo de transducción de proteínas como de C/EBPb modificada con reactivo de transducción de proteínas. Dichos métodos producen nuevos adipocitos marrones en el sitio de la enfermedad o daño mediante la reprogramación de adipocitos blancos en el sitio.
Se describen métodos para tratar una enfermedad muscular o daño muscular e incluyen la administración de MyoD modificada con reactivo de transducción de proteínas. Dichos métodos producen nuevas células musculares en el sitio de la enfermedad o daño mediante la reprogramación de fibroblastos en el sitio.
Se describen métodos para tratar la artritis, osteoartritis, la degeneración del cartílago y/o la lesión del cartílago e incluyen la administración de uno o más de: Sox9 modificada con reactivo de transducción de proteínas, Runx2 modificada con reactivo de transducción de proteínas, Sox5 modificada con reactivo de transducción de proteínas y Sox6 modificada con reactivo de transducción de proteínas. Se describen métodos de tratamiento de artritis, osteoartritis, degeneración del cartílago y/o lesión del cartílago e incluyen la administración de dos o más de: Sox9 modificada con reactivo de transducción de proteínas, Runx2 modificada con reactivo de transducción de proteínas, Sox5 modificada con reactivo de transducción de proteínas y Sox6 modificada con reactivo de transducción de proteínas. Se describen métodos para tratar la artritis, la osteoartritis, la degeneración del cartílago y/o la lesión del cartílago e incluyen la administración de tres o más de: Sox9 modificada con reactivo de transducción de proteínas, Runx2 modificada con reactivo de transducción de proteínas, Sox5 modificada con reactivo de transducción de proteínas y Sox6 modificada con reactivo de transducción de proteínas. Se describen métodos para tratar la artritis, la osteoartritis, la degeneración del cartílago y/o la lesión del cartílago e incluyen la administración de: Sox9 modificada con reactivo de transducción de proteínas, Runx2 modificada con reactivo de transducción de proteínas, Sox5 modificada con reactivo de transducción de proteínas y Sox6 modificada con reactivo de transducción de proteínas. Dichos métodos producen nuevos condrocitos en el sitio de la enfermedad o daño mediante la reprogramación de fibroblastos en el sitio.
Se describen métodos para tratar una enfermedad mamaria o daño del tejido mamario e incluyen la administración de uno o más de: Sox9 modificada con reactivo de transducción de proteínas, Slug modificada con reactivo de transducción de proteínas, Stat5a modificada con reactivo de transducción de proteínas, Gata3 modificada con reactivo de transducción de proteínas y Brca-1 modificada con reactivo de transducción de proteínas. Se describen métodos para tratar una enfermedad mamaria o daño del tejido mamario e incluyen la administración de Brca-1 modificada con reactivo de transducción de proteínas. Se describen métodos para tratar una enfermedad mamaria o daño al tejido mamario e incluyen la administración de dos o más de: Sox9 modificada con reactivo de transducción de proteínas, Slug modificada con reactivo de transducción de proteínas, Stat5a modificada con reactivo de transducción de proteínas, Gata3 modificada con reactivo de transducción de proteínas y Brca-1 modificada con reactivo de transducción de proteínas. Se describen métodos para tratar una enfermedad mamaria o daño en el tejido mamario e incluyen la administración de ambos: Sox9 modificada con reactivo de transducción de proteínas y Slug modificada con reactivo de transducción de proteínas. Se describen métodos para tratar una enfermedad mamaria o daño del tejido mamario e incluyen administrar ambos de: Stat5a modificada con reactivo de transducción de proteínas y Gata3 modificada con reactivo de transducción de proteínas. Se describen métodos para tratar una enfermedad mamaria o daño en el tejido mamario e incluyen la administración de tres o más de: Sox9 modificada con reactivo de transducción de proteínas, Slug modificada con reactivo de transducción de proteínas, Stat5a modificada con reactivo de transducción de proteínas, Gata3 modificada con reactivo de transducción de proteínas y Brca-1 modificada con reactivo de transducción de proteínas. Se describen métodos para tratar una enfermedad mamaria o daño al tejido mamario e incluyen la administración de cuatro o más de: Sox9 modificada con reactivo de transducción de proteínas, Slug modificada con reactivo de transducción de proteínas, Stat5a modificada con reactivo de transducción de proteínas, Gata3 modificada con reactivo de transducción de proteínas y Brca-1 modificada con reactivo de transducción de proteínas. Se describen métodos para tratar una enfermedad mamaria o daño al tejido mamario e incluyen la administración de: Sox9 modificada con reactivo de transducción de proteínas, Slug modificada con reactivo de transducción de proteínas, Stat5a modificada con reactivo de transducción de proteínas, Gata3 modificada con reactivo de transducción de proteínas y Brca-1 modificada con reactivo de transducción de proteínas. Dichos métodos producen nuevas células del conducto mamario en el sitio de la enfermedad o daño mediante la reprogramación de fibroblastos en el sitio.
Se describen métodos para tratar una enfermedad vascular o daño en los vasos sanguíneos e incluyen la administración de uno o más de: Erg1 modificada con reactivo de transducción de proteínas, Er71 modificada con reactivo de transducción de proteínas, Fli1 modificada con reactivo de transducción de proteínas y Gata2 modificada con reactivo de transducción de proteínas. Se describen métodos para tratar una enfermedad vascular o daño en los vasos sanguíneos e incluyen la administración de dos o más de: Erg1 modificada con reactivo de transducción de proteínas, Er71 modificada con reactivo de transducción de proteínas, Fli1 modificada con reactivo de transducción de proteínas y Gata2 modificada con reactivo de transducción de proteínas. Se describen métodos para tratar una enfermedad vascular o daño en los vasos sanguíneos e incluyen la administración de tres o más de: Erg1 modificada con reactivo de transducción de proteínas, Er71 modificada con reactivo de transducción de proteínas, Fli1 modificada con reactivo de transducción de proteínas y Gata2 modificada con reactivo de transducción de proteínas. Se describen métodos para tratar una enfermedad vascular o daño de los vasos sanguíneos e incluyen la administración de: Erg1 modificada con reactivo de transducción de proteínas, Er71 modificada con reactivo de transducción de proteínas, Fli1 modificada con reactivo de transducción de proteínas y Gata2 modificada con reactivo de transducción de proteínas. Dichos métodos producen nuevas células endoteliales en el sitio de la enfermedad o daño mediante la reprogramación de células en el sitio.
Se describen métodos para tratar una enfermedad vascular o daño en los vasos sanguíneos e incluyen la administración de uno o más de: Hey1 modificada con reactivo de transducción de proteínas, Hey2 modificada con reactivo de transducción de proteínas, FoxC1 modificada con reactivo de transducción de proteínas y FoxC2 modificada con reactivo de transducción de proteínas. Se describen métodos para tratar una enfermedad vascular o daño en los vasos sanguíneos e incluyen la administración de dos o más de: Hey1 modificada con reactivo de transducción de proteínas, Hey2 modificada con reactivo de transducción de proteínas, FoxC1 modificada con reactivo de transducción de proteínas y FoxC2 modificada con reactivo de transducción de proteínas. Se describen métodos para tratar una enfermedad vascular o daño en los vasos sanguíneos e incluyen la administración de tres o más de: Hey1 modificada con reactivo de transducción de proteínas, Hey2 modificada con reactivo de transducción de proteínas, FoxCI modificada con reactivo de transducción de proteínas y FoxC2 modificado con reactivo de transducción de proteínas. Se describen métodos para tratar una enfermedad vascular o daño de los vasos sanguíneos e incluyen la administración de: Hey1 modificada con reactivo de transducción de proteínas, Hey2 modificada con reactivo de transducción de proteínas, FoxC1 modificada con reactivo de transducción de proteínas y FoxC2 modificada con reactivo de transducción de proteínas. Dichos métodos producen nuevas células endoteliales arteriales en el sitio de la enfermedad o daño mediante la reprogramación de células en el sitio.
Se describen métodos para tratar una enfermedad vascular o daño de los vasos sanguíneos e incluyen la administración de uno o ambos de: Sox7 modificada con reactivo de transducción de proteínas y Sox18 modificada con reactivo de transducción de proteínas. Se describen métodos para tratar una enfermedad vascular o daño de los vasos sanguíneos e incluyen la administración tanto de Sox7 modificada con reactivo de transducción de proteínas como de Sox 18 modificada con reactivo de transducción de proteínas. Dichos métodos producen nuevas células endoteliales venosas en el sitio de la enfermedad o daño mediante la reprogramación de células en el sitio.
Tratamientos combinados
De acuerdo con aspectos de la presente invención, se administran combinaciones de agentes terapéuticos.
En los tratamiento combinados, al menos una proteína QQ-modificada a administrar se selecciona del grupo consistente en Sox2, Oct4 y Nanog
En algunos aspectos, se administran dos o más proteínas QQ-modificadas aisladas a un sujeto para su uso en el tratamiento cáncer en un sujeto que lo necesite.
En aspectos adicionales, al menos una proteína QQ-modificada aislada y al menos un agente terapéutico adicional se administran a un sujeto para su uso en el tratamiento del cáncer de un sujeto que lo necesita.
En otros aspectos más, al menos una proteína QQ-modificada aislada y al menos dos agentes terapéuticos adicionales se administran a un sujeto para su uso en el tratamiento del cáncer de un sujeto que lo necesite.
En algunos aspectos, se administran dos o más proteínas QQ-modificadas aisladas a un sujeto para su uso en el tratamiento del cáncer de un sujeto que lo necesite. En aspectos adicionales, se administran a un sujeto al menos una proteína QQ-modificada aislada y al menos un agente terapéutico adicional para su uso en el tratamiento del cáncer de un sujeto que lo necesite. En otros aspectos más, se administra al menos una proteína QQ-modificada aislada y al menos dos agentes terapéuticos adicionales a un sujeto para su uso en el tratamiento del cáncer de un sujeto que lo necesite.
El término "agente terapéutico adicional" se usa aquí para indicar un compuesto químico, una mezcla de compuestos químicos, una macromolécula biológica (tal como un ácido nucleico, un anticuerpo, una proteína o parte de ella, por ejemplo un péptido) o un extracto elaborado a partir de materiales biológicos tales como bacterias, plantas, hongos o células o tejidos animales (en particular de mamíferos) que es una sustancia (o sustancias) biológica, fisiológica o farmacológicamente activa que actúa local o sistémicamente en un sujeto.
Los agentes terapéuticos adicionales incluidos en aspectos de los métodos y composiciones de la presente invención incluyen, pero no se limitan a, antibióticos, antivirales, agentes antineoplásicos, analgésicos, antipiréticos, antidepresivos, antipsicóticos, agentes anticancerosos, antihistamínicos, agentes antiosteoporosis, agentes anti-osteonecrosis, agentes antiinflamatorios, ansiolíticos, agentes quimioterapéuticos, diuréticos, factores de crecimiento, hormonas, agentes antiinflamatorios no esteroideos, esteroides y agentes vasoactivos.
Las terapias de combinación que utilizan una o más proteínas QQ-modificadas aisladas y uno o más agentes terapéuticos adicionales pueden tener efectos sinérgicos, por ejemplo un efecto terapéutico mayor que el que se observaría utilizando una o más proteínas QQ-modificadas aisladas o uno o más agentes terapéuticos adicionales solos como monoterapia.
Según los aspectos, las terapias de combinación incluyen: (1) composiciones farmacéuticas que incluyen una o más proteínas QQ-modificadas en combinación con uno o más agentes terapéuticos adicionales; y (2) la coadministración de una o más proteínas QQ-modificadas aisladas con uno o más agentes terapéuticos adicionales donde la una o más proteínas QQ-modificadas aisladas y el uno o más agentes terapéuticos adicionales no se han formulado en la misma composición. Cuando se usan formulaciones separadas, la una o más proteínas QQ-modificadas aisladas se pueden administrar al mismo tiempo, en tiempos intermitentes, tiempos escalonados, antes, después o combinaciones de éstos con referencia a la administración de uno o más agentes terapéuticos adicionales. .
Los tratamientos combinados pueden permitir una dosificación eficaz reducida y un índice terapéutico aumentado de la una o más proteínas QQ-modificadas aisladas y del uno o más agentes terapéuticos adicionales usados en los métodos de la presente invención.
Opcionalmente, un método para tratar a un sujeto que tiene cáncer o que está en riesgo de tener cáncer incluye además un tratamiento anticanceroso complementario. Un tratamiento complementario contra el cáncer puede ser la administración de un agente contra el cáncer.
Agentes contra el cáncer se describen, por ejemplo, en Goodman y col., Goodman and Gilman's The Pharmacological Basis of Therapeutics, 8th Ed., Macmillan Publishing Co., 1990.
Agentes anticancerígenos ilustrativos incluyen: acivicina, aclarubicina, acodazol, acronina, adozelesina, aldesleucina, alitretinoína, alopurinol, altretamina, ambomicina, ametantrona, amifostina, aminoglutetimida, amsacrina, anastrozol, antramicina, trióxido de arsénico, asparaginasa, asperlina, azacitidina, azetepa, azotomicina, batimastat, benzodepa, bicalutamida, bisantreno, dimesilato de bisnafida, bizelesina, bleomicina, brequinar, bropirimina, busulfano, cactinomicina, calusterona, capecitabina, caracemida, carbetimer, carboplatino, carmustina, carubicina, carzelesina, cedefingol, celecoxib, clorambucilo, cirolemicina, cisplatino, cladribina, mesilato de crisnatol, ciclofosfamida, citarabina, dacarbazina, dactinomicina, daunorrubicina, decitabina, dexormaplatino, dezaguanina, mesilato de dezaguanina, diaziquona, docetaxel, doxorrubicina, droloxifeno, dromostanolona, duazomicina, edatrexato, eflomitina, elsamitrucina, enloplatino, enpromato, epipropidina, epirubucina, erbulozol, esorubicina, estramustina, etanidazol, etopósido, etoprina, fadrozol, fazarabina, fenretinida, floxuridina, fludarabina, fluorouracilo, flurocitabina, fosquidona, fostriecina, fulvestrant, gemcitabina, hidroxiurea, idarubicina, ifosfamida, ilmofosina, interleucina II (IL-2, incluida interleucina II recombinante o rIL2), interferón alfa-2a, interferón alfa-2b, interferón alfa-nl, interferón alfa-n3, interferón beta-la, interferón gamma-lb, iproplatino, irinotecán, lanreotida, letrozol, leuprolida, liarozol, lometrexol, lomustina, losoxantrona, masoprocol, maitansina, clorhidrato de mecloretamina, megestrol, acetato de melengestrol, melfalán, menogaril, mercaptopurina, metotrexato, metoprina, meturedepa, mitindomida, mitocarcina, mitocromina, mitogilina, mitomalcina, mitomicina, mitosper, mitotano, mitoxantrona, ácido micofenólico, nelarabina, nocodazol, nogalamicina, ormnaplatino, oxisurano, paclitaxel, pegaspargasa, peliomicina, pentamustina, peplomicina, perfosfamida, pipobromano, piposulfano, clorhidrato de piroxantron, plicamicina, plomestano, porfímero, porfiromicina, prednimustina, procarbazina, puromicina, pirazofurina, riboprina, rogletimida, safingol, semustina, simtrazeno, esparfosato, esparsomicina, espirogermanio, espiromustina, espiroplatino, estreptonigrina, estreptozocina, sulofenur, talisomicina, teoxifen, tecogalan, tegafur, teloxantrona, temoporfina, tenipósido, teroxirona, testolactona, tiamiprina, tioguanina, tiotepa, tiazofurina, tirapazamina, topotecan, toremifeno, trestolona, triciribina, trimetrexato, triptorelina, tubulozol, uramustina, uredepa, vapreotide, verteporfin, vinblastina, sulfato de vincristina, vindesina, vinepidina, vinglicinato, vinleurosina, vinorelbina, vinrosidina, vinzolidina, vorozol, zeniplatino, zinostatina, zoledronato y zorubicina.
Un tratamiento complementario contra el cáncer puede ser un tratamiento de radiación de un sujeto o de un área afectada del cuerpo de un sujeto.
En los siguientes ejemplos se ilustran realizaciones de composiciones y métodos de la invención. Estos ejemplos se proporcionan con fines ilustrativos.
Ejemplos
Ejemplo 1
Reprogramación de la expresión y preparación
Construcción del plásmido
El ADN que codifica cada una de las proteínas de reprogramación Oct4, Sox2, Klf4 y c-Myc, Nanog, GATA4, Hand2, Mef2c y Tbox5 se subclonó por separado en un vector de expresión bacteriano sHT-pET30a, donde una etiqueta de his corta: "HHHHHHSS" (SEQ ID NO: 64) reemplazó la etiqueta his larga del vector de expresión pET30a de Novagen. Se sitúa un sitio de escisión del factor Xa (IEGR) entre la etiqueta his corta y los genes codificantes. Las secuencias de los vectores de expresión bacterianos se confirmaron mediante secuenciación de ADN.
Expresión y purificación de proteínas
Los constructos de ADN de las proteínas de reprogramación se transformaron en células bacterianas de E. Coli cepa BL-21 (DE3) o ClearColi™ BL21 (De 3) individualmente. Las células bacterianas ClearColi™ BL21 (DE3) se utilizaron para la producción de proteínas de reprogramación recombinantes libres de endotoxinas. Se seleccionó una sola colonia para la expresión de proteínas bacterianas. Después de una breve optimización, se indujo la expresión de proteínas mediante IPTG 0,5-1,2 mM, dependiendo de las diferentes proteínas, y se continuó cultivando a 18 °C durante 12-16 horas. Las células se recogieron en el tampón de unión que contenía urea 6M y se sometieron a ultrasonidos varias veces para extraer las proteínas. Las proteínas de reprogramación recombinantes se purificaron usando una columna His-Bind Resin (Novagen) de acuerdo con el manual con modificaciones. Típicamente, el sobrenadante de extracción de proteínas se cargó en la columna dos veces, se lavó con 5 x volumen de columna de los tampones de unión. Cuando se usa la cepa bacteriana regular BL21 (DE3) para producir proteínas de reprogramación recombinantes, se puede añadir un paso de lavado adicional durante la etapa de purificación de proteínas usando 10 volúmenes de columna de Triton X-114 al 0,2% para eliminar endotoxinas de las proteínas de reprogramación recombinantes expresadas en las bacterias. La columna cargada con las proteínas recombinantes se lavó de nuevo usando tampón de lavado de 10 x volumen de columna que contiene imidazol 15-50 mM. Las proteínas purificadas se eluyeron de la columna usando tampón de elución que contenía imidazol 500 mM. Las proteínas purificadas se dializaron extensamente contra agua y se liofilizaron en polvos de proteína.
Ejemplo 2
Modificación QQ: modificación de proteínas de reprogramación expresadas con reactivo de transducción de proteínas para producir proteínas de reprogramación modificadas con reactivo de transducción de proteínas
El reactivo de transducción de proteínas (reactivo QQ) se puede ajustar alterando la composición para incluir reactivos como los mostrados en la Tabla 1 para obtener la mejor eficiencia de transducción de proteínas para la proteína de reprogramación y el tipo celular particulares.
Para aplicaciones in vivo, para un volumen total de 1 ml:
Tabla 1
Figure imgf000026_0001
La concentración de polietilenimina (PEI) para la solución madre:
Figure imgf000026_0002
Concentración de lípidos para la solución madre:
Figure imgf000026_0003
Se usa tampón PBS que contiene proteínas de reprogramación en urea 1-6 M y PEI especificada, se utilizan lípidos para 1 ml de volumen total.
La o las proteínas de reprogramación se disuelven primero en tampón de fosfato de sodio (pH 7,0, NaCl 50 mM) a concentraciones de 0,5 a 10 mg/ml, dependiendo de la solubilidad de la proteína. Se encontró que la solubilidad de las proteínas influye en la eficacia de la cationización. Para disolver completamente las proteínas, se lleva a cabo una agitación durante una noche de la solución de proteína a temperatura ambiente (con o sin DTT a 3 mM durante la noche, dependiendo de si la proteína de reprogramación tiene residuos cisteína). Las proteínas también se pueden disolver en urea 1-6 M para mejorar la solubilidad de las proteínas.
Se preparó una emulsión de lípidos DOTAP/DOPE (1:1) usando un método como el siguiente: se disolvió 1 mg de mezcla DOTAP/DOPE (0,5 mg:0,5 mg = 1:1l) en cloroformo y se secó bajo N2 gas. La película de lípidos seca se disolvió entonces en tampón PBS, pH 7,0, y la solución de lípidos se sonicó durante 3x30 segundos usando una potencia de 7-8 en un sonicador de Fisher Scientific (Sonic Dismembrator, Modelo 100) con microsonda. La solución de lípidos se incubó además a 37 °C durante 2 horas hasta que se volvió semitransparente. La emulsión preparada se almacenó a 4 °C y es estable durante un mes.
Los otros ingredientes de los reactivos QQ (sin incluir la emulsión lipídica o el Ca o DMSO opcional) se mezclaron en un tubo, de acuerdo con la receta descrita anteriormente. Luego, el reactivo QQ se tituló en la solución de proteína muy lentamente, gota a gota, mientras se agitaba y entonces se agregó la emulsión de lípidos. Una vez esto completado, la solución de proteína resultante se mantuvo a temperatura ambiente durante 4 horas antes de su uso. Durante este período es necesario agitar suavemente para mezclar el reactivo QQ con la solución de proteína y también para permitir que se complete la reacción de modificación de la proteína. Si se observa precipitación, la solución de proteína se puede centrifugar a 14.000 rpm durante 15 minutos para eliminar el precipitado. Si se produce el precipitado, se llevará a cabo un ensayo de proteína BCA utilizando el sobrenadante para comprobar la cantidad de proteína que queda en la solución. Para garantizar la eficacia de la transferencia de proteínas a las células, la concentración de proteína modificada debe ser lo suficientemente alta, > 0,1 mg/ml.
Normalmente, las proteínas QQ-modificadas se preparan a una concentración de 0,5 a 1,5 mg/ml, dependiendo de la solubilidad de la proteína, para la administración in vivo.
La modificación QQ se puede realizar en cada proteína individualmente o en una mezcla de proteínas a administrar juntas a un sujeto.
Opcionalmente, la modificación QQ se realiza en cada proteína individualmente, las proteínas QQ-modificadas se mezclan durante varias horas y luego se toman alícuotas en pequeños tubos a 1 ml/tubo y se almacenan a -20 °C, donde son estables durante varios meses.
Si precipita la mayor parte de la proteína de reprogramación, se puede utilizar otro reactivo QQ para la modificación de la proteína. Los reactivos de la serie QQ cubren una amplia gama de reactivos de cationización junto con diferentes lípidos y potenciadores, por lo que se resuelve cualquier problema de precipitación. El procedimiento anterior se puede repetir para preparar concentraciones más altas de proteína de reprogramación modificada con reactivo de transducción de proteínas.
La proteína de reprogramación modificada con reactivo de transducción de proteínas se hace pasara través de una columna de desalación para separar la proteína de reprogramación modificada con reactivo de transducción de proteínas de los materiales restantes que no han reaccionado. Las proteínas purificadas se pasan a través de un filtro (corte de 0,22 pm) para la esterilización antes de la administración in vivo. Las fracciones de proteína purificada se pueden concentrar antes o después de la esterilización, por ejemplo empleando una columna giratoria, y son estables y se pueden almacenar a -20 °C durante unas pocas semanas a unos pocos meses.
También se pueden usar diferentes reactivos QQ para la mejor eficiencia de transferencia de proteínas, así como la menor toxicidad celular. Además, se modifican diferentes proteínas con diferentes reactivos QQ para lograr la mejor eficiencia en la transferencia de proteínas a las células. En general, para una mejor eficacia de administración in vivo, se utilizan QQ5a-QQ9a. Sin embargo, esto puede causar una mayor toxicidad in vivo. Cuando se usa QQ5a-QQ9a, se enfatiza el uso de concentraciones más bajas de PEI y lípidos más grandes.
Para una buena eficiencia de administración in vivo, se utilizan QQla-QQ4a, con menos toxicidad in vivo. QQ1-QQ4 se pueden utilizar con concentraciones de lípidos más altas.
Ejemplo 3
Las proteínas de reprogramación se disolvieron en fosfato de sodio 50 mM, pH 7,4, con urea 2M. Los reactivos de transducción de proteínas (reactivos QQ) se prepararon en el momento según la receta. El reactivo QQ utilizado en este ejemplo es un cóctel de polietilenimina (PEI) 1200 (1,2 K, 0,05-1,0 mg/ml) y DOTAP/DOPE (25-100 |jg/ml). La modificación QQ de las proteínas de reprogramación se realizó mezclando el reactivo q Q con una o más proteínas de reprogramación, como Oct4/Sox2/Nanog: 1 mg/ml, durante 4 horas a temperatura ambiente o durante la noche en una habitación fría.
Ejemplo 4
Suministro de proteína QQ en tumores cerebrales en ratas mediante inyección intravenosa
La ferritina es una proteína ubicua que contiene hierro y es útil como reactivo de contraste negativo para la resonancia magnética (MRI).
En este ejemplo, la ferritina o ferritina tratada con reactivo QQ para producir QQ-ferritina se inyecta vía intravenosa en ratas que tienen tumores cerebrales generados por implantación de células de la línea celular 9L de gliosarcoma de rata.
Se prepararon en el momento células de una línea celular de gliosarcoma de rata 9L y se ajustaron a 1x106 células/ml antes de la implantación. Los xenoinjertos intracraneales se realizaron de acuerdo con protocolos estándar. Se anestesiaron ratas Fisher y se colocaron en un marco estereotáctico, y se expuso el cráneo. Se hizo un orificio 3 mm a la derecha y 1 mm anterior del bregma y se inyectaron células 9L (5x104 células en 5 j l) utilizando una jeringa Hamilton de 10 j l con una aguja de calibre 26 montada en un soporte estereotáctico (Bonaduz, GR, Suiza). La jeringa se bajó a una profundidad de 3,5 mm y luego se elevó a una profundidad de 3,0 mm. Las células tumorales se inyectaron a una velocidad de 0,5 pl/10 s, y la craneotomía se cubrió con cera para huesos de Horsley. 12 días después de la implantación de células 9L, se inyectó ferritina QQ-modificada o ferritina sola, 100 pg/100 pl/rata a través de la vena de la cola de la rata. Cuatro horas después de la inyección, se anestesió a las ratas y se obtuvieron imágenes de sus cerebros mediante resonancia magnética. Después de la resonancia magnética, se sacrificaron los animales. Los cerebros extraídos se fijaron en paraformaldehído al 4% durante la noche y luego se incluyeron en parafina para su posterior análisis. Se cortaron secciones delgadas de seis micrómetros de cada uno de los bloques y se tiñeron con hematoxilina y eosina. El tamaño de los tumores cerebrales se determinó microscópicamente.
Las Figuras 1A y 1B muestran la evidencia MRI de la administración dirigida de QQ-ferritina en el tumor cerebral 9L en ratas y sin ferritina detectable en el tumor cerebral 9L de ratas inyectadas con ferritina sola. La Figura 1A es una imagen MRI representativa de una rata con tumor cerebral 9L inyectado con QQ-ferritina a través de la vena de la cola. La flecha apunta a un tumor cerebral 9L y el color negro es indicativo de ferritina administrada al tumor. La figura 1B: es una imagen MRI representativa de una rata con tumor cerebral 9L inyectada con ferritina sin modificación con QQ. En este caso, no se observa ferritina en el tumor cerebral, aunque se sacrificó a la rata y se confirmó que tenía un gran tumor cerebral 9L.
Se realizaron inmunotinciones dobles de las secciones de tejido de tumor cerebral 9L inyectadas con QQ-ferritina usando un anticuerpo para un marcador de vasos sanguíneos, CD31, y un anticuerpo para ferritina. Los núcleos de las células cancerosas 9L en las secciones se tiñeron con DAPI. Se observó inmunotinción superpuesta para CD31 y ferritina en los vasos sanguíneos de los tumores cerebrales, lo que indica que la QQ-ferritina se filtró de los vasos sanguíneos por el efecto de mayor permeabilidad y retención (efecto EPR) de los vasos sanguíneos angiogénicos asociados al tumor cerebral. En el animal tratado con QQ-ferritina, se observó inmunotinción para ferritina dentro del citosol de las células tumorales cerca o junto a los vasos sanguíneos, lo que indica que la QQ-ferritina penetró en las células tumorales. Por el contrario, la inmunotinción de ferritina en las secciones del tumor 9L tratadas con ferritina sin modificación con QQ mostró que la ferritina sin modificación con QQ no penetró en las células tumorales, aunque la inmunotinción indicó que esta ferritina no modificada también se filtró fuera de los vasos sanguíneos angiogénicos asociados al tumor. Estas nanopartículas de ferritina no modificadas se observaron entre las células y probablemente no se acumularon debido al líquido entre las células dentro de los tejidos, por lo que no se observó ningún tumor por MRI sin modificación QQ de la ferritina.
Estos datos proporcionan evidencia MRI de la administración dirigida de ferritina al tumor cerebral en ratas mediante la tecnología de administración de proteína QQ, que se confirma mediante análisis histológico e inmunotinción de las secciones de tejido cerebral.
Ejemplo 5
Suministro de proteína QQ al cáncer de mama en ratones mediante inyección intravenosa
En este ejemplo, se inyectó ferritina o ferritina tratada con reactivo QQ para producir QQ-ferritina vía intravenosa en ratones con tumores de mama ortotópicos generados por implantación de células 4T1 de la línea celular de cáncer de mama metastásico de ratón. La implantación de células 4T1 de la línea celular de cáncer de mama metastásico de ratón en ratones es un modelo de ratón para el cáncer de mama metastásico espontáneo.
Se implantaron células 4T1 en la mama (almohadilla de grasa #4) de ratones hembra BALB/c de 2 meses de edad (20.000 células 4T1 en 50 pl/ratón). El día 18 después de la implantación de las células 4T1, los tumores 4T1 habían crecido en la mama del ratón hasta un tamaño de aproximadamente 1,0-1,5 cm de diámetro. Se inyectó ferritina QQ-modificada (100 pg/50 pl/ratón) a través de la vena de la cola. Los ratones se anestesiaron y se sometieron a MRI antes de la inyección de ferritina QQ-modificada y a las 0,5 horas, 2 horas, 3,5 horas, 8 horas y 18 horas después de la inyección.
Las figuras 2A-F son imágenes MRI representativas del transcurso del tiempo que muestran la ferritina suministrada QQ-modificada en el tumor primario de un ratón portador de cáncer de mama como áreas oscurecidas en el tumor primario. Esta oscuridad del tumor primario dependía del tiempo y alcanzó un máximo a las 8 horas, luego comenzó a disminuir en intensidad.
Los resultados MRI se confirmaron mediante análisis histológico utilizando tinción con azul de Prusia e inmunotinción de ferritina. La tinción inmunohistoquímica y la tinción con azul de Prusia de las secciones de tejido del tumor primario de un ratón portador de cáncer de mama 4T1 a las 18 horas después de la inyección de QQ-ferritina mostraron tinciones positivas de ferritina y azul de Prusia dentro del tumor primario. Este resultado histológico confirmó la observación MRI de ferritina modificada con QQ administrada dentro del tumor primario de ratones portadores de tumor 4T1.
Ejemplo 6
Suministro de proteína modificada con QQ Oct4 y Klf4 en los núcleos de las células de cáncer de mama 4T1 del tumor primario de ratones portadores de cáncer de mama 4T1
Se implantaron células 4T1 (2x104 células/50 pl/ratón) en ratones hembra BALB/c. 15 días después de la implantación de células tumorales se preparó Klf4 marcado con Alexa Fluor594. A continuación, se preparó Oct4 sin marcar modificada con QQ (QQ-Oct4) y Klf4 marcado con Alexa Fluor594 modificada con QQ. Se realizó una inyección intratumoral de 50 pg de proteínas Klf4 marcadas con QQ-Oct4 y QQ-Alexa Fluor594. Los ratones se sacrificaron 5 horas después de la inyección y se prepararon secciones de tejido tumoral para inmunotinción y microscopía de fluorescencia. La inmunotinción para Oct4 en las secciones primarias de tejido de cáncer de mama 4T1 demostró la localización nuclear de Oct4 en las células cancerosas 4T1 y la co-localización con DAPI. Las imágenes microscópicas de fluorescencia también mostraron la localización nuclear de Klf4 en las secciones primarias de tejido de cáncer de mama 4T1 y la co-localización con DAPI.
Ejemplo 7 (no según la invención)
Suministro de proteína QQ-modificada GATA4, OCT4 y SOX2 a corazones lesionados de ratas después de infarto agudo de miocardio
GATA4, Sox2 y Oct4 modificadas con QQ y marcadas con fluorescencia se administran mediante inyección intraperitoneal a ratas después de un infarto de miocardio y las proteínas QQ-modificadas y marcadas con fluorescencia se administraron a los tejidos cardíacos lesionados de los animales.
GATA4, Sox2 y Oct4 están etiquetados con Alexa Fluor488 de acuerdo con los métodos especificados por el fabricante. Las proteínas GATA4, Sox2 y Oct4 marcadas se purificaron con pequeñas columnas de centrifugación. Alexa Fluor488-GATA4, Alexa Fluor488-Sox2 y Alexa Fluor488-Oct4 luego se modifican con QQ para generar Alexa Fluor488-GATA4-QQ modificada, Alexa Fluor488-Sox2-QQmodificada y Alexa Fluor488-Oct4-QQ modificada.
Se anestesiaron ratas Lewis y se realizó una cirugía de ligadura de arterias coronarias para crear un infarto de miocardio en las ratas Lewis. 24 horas después de la cirugía de ligadura de arterias coronarias, se inyectaron intraperitonealmente GATA4 marcado con Alexa Fluor488 modificada con QQ, Sox2 marcado con Alexa Fluor488 modificada con QQ y Oct4 marcado con Alexa Fluor488 modificada con QQ (200 pg/100 pl/rata) en las ratas Lewis. 7 horas después de las inyecciones de proteína marcada con fluorescencia, las ratas se sacrificaron y se prepararon secciones de tejido cardíaco para tinción tricrómica para tamaños de infarto o para inmunotinción con un anticuerpo a-actinina, que es un marcador del músculo cardíaco indicativo de cardiomiocitos maduros.
El análisis microscópico de fluorescencia mostró colocalización de la proteína Alexa Fluor488-GATA4 con inmunofluorescencia de a-actinina, lo que indica que la inyección intraperitoneal de GATA4 marcada con fluorescencia QQ modificada dio como resultado la administración de la proteína GATA4 en la zona de la cicatriz del tejido cardíaco lesionado después de la ligadura de la arteria coronaria. De manera similar, el análisis microscópico de fluorescencia de Alexa Fluor488-Sox2 y la inmunofluorescencia de a-actinina indicó que la inyección intraperitoneal de Alexa Fluor488 etiquetada-Sox2 modificada con QQ dio como resultado la ubicación de la proteína Sox2 en la zona fronteriza del tejido cardíaco lesionado después de la ligadura de la arteria coronaria. Finalmente, las imágenes de fluorescencia de Alexa Fluor488-Oct4 mostraron la localización de Alexa Fluor488-Oct4 modificada con QQ inyectada en la zona de tejido cardíaco normal remoto. Estos resultados indican que GATA4, Sox2 y Oct4 marcadas con fluorescencia y modificadas con QQ administrados por inyección intraperitoneal alcanzaron los tejidos cardíacos lesionados en la zona de la cicatriz, la zona del borde y las zonas de tejido cardíaco normal. Estos datos demuestran el suministro de proteína QQ-modificada dirigido a administrar estas proteínas en los tejidos cardíacos lesionados.
Ejemplo 8
Se reprogramaron células de glioma maligno, incluidas 9L, U251, U87 y una línea celular primaria de GBM de un paciente en células madre pluripotentes inducidas por proteínas (piPSC) utilizando proteínas Sox2, Oct4 y Nanog (SON) modificadas con QQ de la siguiente manera: el día 0 se sembraron células de glioma durante 24 horas para permitirles crecer en una placa Petri de 50 mm. En el día 2, se agregaron proteínas QQ-SON al medio de cultivo a 0,5-2,0 pg/ml y se cultivó durante 24 horas. Al día siguiente, se añadieron proteínas QQ-SON frescas en un nuevo medio de cultivo y se cultivaron durante 24 horas. Dichos ciclos se repitieron durante 5-7 ciclos, dependiendo de las células de glioma utilizadas para la reprogramación celular. Al final de la reprogramación celular, los medios de cultivo se cambiaron por medio de mantenimiento durante 2 días. Durante la reprogramación celular, aparecieron colonias piPSC. El día 8, se realizó el pase de la placa completa para expandir las piPSC generadas. La inmunotinción de toda la placa de gliomapiPSCs que incluía tanto la monocapa como la colonia de 9L-piPSCs usando marcadores de pluripotencia, incluidos los marcadores nucleares Oct4, Nanog, Rex-1 y los marcadores de superficie ALP, Tral-60 y Tral-81, mostró que casi todas las células daban positivo para estos marcadores de pluripotencia. Por el contrario, las inmunotinciones de las células 9L mostraron tinciones negativas para estos marcadores. Estos datos indican una alta eficiencia de conversión de la reprogramación celular de células 9L en 9L-piPSC utilizando proteínas QQ-SON.
Esto se confirma mediante inmunotinción de todo el pocillo (96 pocillos) de 9L-piPSC utilizando Nanog y Oct4. Cuando se cuentan los clones positivos de 9L-piPSC en comparación con los clones negativos, se encuentra una eficiencia de conversión promedio de 96 ± 2%, ver tabla 2. Una inmunotinción de control de células 9L mostró tinciones negativas para estos dos marcadores de pluripotencia Nanog y Oct4. La eficiencia de conversión de 9L-piPSC de células 9L se calculó mediante colonias teñidas positivamente y 9L-piPSC de monocapa frente a colonias totales y células monocapa teñidas con DAPI utilizando el software proporcionado por el microscopio de fluorescencia EVOS Auto. Se utilizó la inmunotinción de las 9L-piPSC de 96 pocillos duplicados para calcular la eficiencia de conversión promedio y la desviación estándar.
Figure imgf000030_0001
Reprogramación celular de células 9L para generar 9L-piPSCs usando las proteínas QQ-SON (0,5 pg/ml.
Sox2:Oct4:Nanog = 1:1:1, 5 ciclos continuos).
Utilizando un protocolo de reprogramación celular similar, se generaron 4T1-piPSC a partir de células de cáncer de mama de ratón 4T1. La eficacia de conversión de reprogramación de las células 4T1 en 4T1-piPSCs es del 96 ± 1,3% utilizando el mismo método de recuento de pocillos completos (96 pocillos), véase la tabla 3.
Figure imgf000030_0002
Figure imgf000031_0001
Ejemplo 9
Se reprogramaron células de la línea celular de glioblastoma humano U251 en U251-piPSC utilizando proteínas Sox2, Oct4 y Nanog (SON) modificadas con QQ de la siguiente manera: el día 0, las células de glioblastoma U251 se sembraron durante 24 horas para permitirles crecer en un 50% en una placa de Petri de 50 mm. El día 2, se añadieron proteínas QQ-SON al medio de cultivo a 0,5-2,0 pg/ml y se cultivaron durante 24 horas. Al día siguiente, se añadieron proteínas QQ-SON frescas en un nuevo medio de cultivo y se cultivaron durante 24 horas. Dichos ciclos se repitieron durante 5-7 ciclos. Al final de la reprogramación celular, los medios de cultivo se cambiaron por medio de mantenimiento durante 2 días. Durante la reprogramación celular, aparecieron colonias de U251-piPSCs. El día 8, se realizó el pase de la placa completa para expandir las U251-piPSC generadas.
La actividad proliferativa de U251 y U251-piPSC se ensayó determinando el número de células positivas para Ki67. La figura 3A es un gráfico que muestra los resultados de este ensayo, indicando que la reprogramación celular de células de glioma en piPSC reduce significativamente su proliferación; la barra de error representa el error estándar de tres experimentos independientes.
Ejemplo 10
Se reprogramaron células de una línea celular de glioblastoma multiforme humano primario (GBM) derivada de un paciente, GBM (12-14), en GBM-piPSC utilizando proteínas Sox2, Oct4 y Nanog (SON) QQ-modificadas de la siguiente manera: el día 0, las células GBM se sembraron durante 24 horas para permitirles crecer en una placa de Petri de 50 mm. El día 2, se añadieron proteínas QQ-SON al medio de cultivo a 0,5-2,0 pg/ml y se cultivaron durante 24 horas. Al día siguiente, se añadieron proteínas QQ-SON frescas en un nuevo medio de cultivo y se cultivaron durante 24 horas. Dichos ciclos se repitieron durante 5-7 ciclos. Al final de la reprogramación celular, los medios de cultivo se cambiaron por medio de mantenimiento durante 2 días. Durante la reprogramación celular, aparecieron colonias GBM 1 -piPSCs. El día 8, se realizó el pase de la placa completa para expandir las GBM-piPSC generadas.
Se determinó la sensibilidad al fármaco quimioterapéutico dependiente de la dosis de células (cuadrados) GBM (12-14) humanas primarias derivadas del paciente y (círculos) de GBM (12-14) -piPSCs frente al agente alquilante temozolomida y los resultados se muestran en la figura 3B. Los experimentos se realizaron por triplicado, media ± DE, p <0,01. La sensibilidad al fármaco temozolomida de las GBM-piPSC se incrementó significativamente en comparación con las células de glioblastoma parentales.
Ejemplo 11
Se reprogramaron células de la línea celular de gliosarcoma de rata 9L en 9L-piPSC utilizando proteínas Sox2, Oct4 y Nanog (SON) QQ-modificadas de la siguiente manera: el día 0, se sembraron células de glioma 9L durante 24 horas para permitirles crecer en un 50% en una placa de Petri de 50 mm. El día 2, se añadieron proteínas QQ-SON al medio de cultivo a 0,5-2,0 pg/ml y se cultivaron durante 24 horas. Al día siguiente, se añadieron proteínas QQ-SON frescas en un nuevo medio de cultivo y se cultivaron durante 24 horas. Dichos ciclos se repitieron durante 5-7 ciclos. Al final de la reprogramación celular, los medios de cultivo se cambiaron por medio de mantenimiento durante 2 días. Durante la reprogramación celular, aparecieron colonias de 9L-piPSCs. El día 8, se realizó el pase de la placa completa para expandir las 9L-piPSC generadas.
La sensibilidad al fármaco quimioterapéutico dependiente de la dosis de las células 9L (cuadrados) y las 9L-piPSC (círculos) frente al carboplatino se determinó mediante un ensayo MTT y los resultados se muestran en la figura 3C. Los experimentos se realizaron por triplicado, media ± DE, p <0,01. La sensibilidad al fármaco de las 9L-piPSC se incrementó significativamente para el carboplatino en comparación con las células 9L parentales.
Ejemplo 12
Se reprogramaron células de la línea 4T1 de células tumorales mamarias de ratón en 4Tl-piPSC usando proteínas Sox2, Oct4 y Nanog (SON) QQ-modificadas de la siguiente manera: el día 0, las células 4T1 se sembraron durante 24 horas para permitirles crecer en un 50% en una placa de Petri de 50 mm. El día 2, se añadieron proteínas QQ-SON al medio de cultivo a 0,5-2,0 pg/ml y se cultivaron durante 24 horas. Al día siguiente, se añadieron proteínas QQ-SON frescas en un nuevo medio de cultivo y se cultivaron durante 24 horas. Dichos ciclos se repitieron durante 5-7 ciclos. Al final de la reprogramación celular, los medios de cultivo se cambiaron por medio de mantenimiento durante 2 días. Durante la reprogramación celular, aparecieron colonias de 4Tl-piPSCs. El día 8, se realizó el pase de la placa completa para expandir las 4TlpiPSC generadas.
La actividad proliferativa de las células 4T1 y las 4T1-piPSC se ensayó determinando el número de células positivas para Ki67 y se encontró que la reprogramación celular de las células de tumor mamario 4T1 en 4T1-piPSC reduce significativamente su proliferación.
La formación de esferas mamarias de 4T1-piPSC se redujo en comparación con la de las células 4T1.
Se determinó la sensibilidad al fármaco quimioterapéutico dependiente de la dosis de las células 4T1 y las 4T1-piPSC contra doxorrubicina y paclitaxel usando un ensayo MTT. La sensibilidad al fármaco de las 4T1-piPSC se incrementó significativamente frente a doxorrubicina y paclitaxel en comparación con las células 4T1 parentales.
Ejemplo 13
Diferenciación de piPSC derivada de células de glioma en tres capas germinales in vitro
Se prepararon cuerpos embrionarios (EB) para glioma-piPSC utilizando el método de hanging-drop. Las EB de glioma-piPSC se colocaron en un medio de diferenciación espontánea durante 10 días, seguido de inmunotinción con marcadores de ectodermo, mesodermo y endodermo, mostrando inmunotinciones positivas de PAX6 para ectodermo, inmunotinciones positivas de desmina para mesodermo e inmunotinciones positivas de a-fetoproteína (AFP) para endodermo. La inmunotinción de las células de control 9L fue negativa para estos marcadores. También se obtuvieron resultados similares para las 4T1-piPSC, lo que indica que las 4T1-piPSC también se diferenciaron en tres capas germinales.
Ejemplo 14
Diferenciación de piPSC derivada de células de glioma en linaje neural in vitro
Los EB de glioma-piPSC se colocaron en un medio de diferenciación inductor de linaje neural específico durante 14 días, seguido de inmunotinción con marcadores de linaje neural, que muestran inmunotinciones positivas de Tuj I para neuronas, inmunotinciones positivas de GFAP para astrocitos e inmunotinciones positivas de nestina para células madre neurales. Estas células neuronales diferenciadas específicamente también mostraron la morfología de células neuronales. La inmunotinción de las células de control 9L fue negativa para estos marcadores.
Ejemplo 15
La reprogramación celular provoca una transición mesenquimatosa a epitelial (MET) y una reducción de la tumorigenicidad in vitro
Los resultados del análisis de transferencia Western de varios marcadores epiteliales y mesenquimales de células U251 y U251-piPSC, incluyendo E-cadherina (E-cad), p-catenina (p-cat), vimentina (VMT), ver figura 4A, indican un MET durante la reprogramación celular que se confirma mediante cambios en la morfología celular y resultados de qRT-PCR. El nivel de proteína GFAP también mejora significativamente después de la reprogramación celular en U251-piPSC a partir de células U251, lo que indica que la reprogramación celular provocó una reducción significativa de la tumorigenicidad de las células u 251 in vitro durante la reprogramación celular. La expresión de la proteína actina se utilizó como control interno. La inmunotinción de células U251 y U251-piPSCs usando un anticuerpo anti-GFAP confirmó la expresión de proteína regulada positivamente de GFAP en U251-piPSCs como muestra el Western blot. Además, las células que expresan GFAP mostraron morfologías de células neurales.
La reducción de la tumorigenicidad de las células U251 después de la reprogramación celular se ha confirmado mediante ensayos in vitro para la migración celular, figura 4B, y la invasión, figura 4C, de las células U251 y U251-piPSC, lo que indica una migración e invasión significativamente reducidas de U251-piPSC (p<0,01).
De manera similar, se compararon las inmunotinciones de 4T1-piPSCs y células 4T1 usando un marcador epitelial: E-cadherina y un marcador mesenquimatoso fibronectina y se mostró que mientras que las células 4T1 muestran inmunotinción de E-cadherina positiva, las 4Tl-piPSCs mostraron una inmunotinción de E-cadherina mucho más fuerte. Por el contrario, las células 4T1 mostraron una inmunotinción de fibronectina más fuerte y las 4T1-piPSC exhibieron una inmunotinción de fibronectina casi negativa. Estos resultados confirman un MET de células 4T1 durante la reprogramación celular en 4T1-piPSC. Además, 4T1-piPSCs también exhibieron una proliferación reducida, figura 4D, formación de esfera mamaria reducida, figura 4E, migración reducida, figura 4F, e invasión reducida, figura 4G, en comparación con las propiedades de las células 4T1 parentales, lo que indica una reducción significativa tumorigenicidad de las células 4T1 después de la reprogramación celular en 4T1-piPSC in vitro.
Ejemplo 16
El cultivo conjunto entre células de glioma y glioma-piPSC indicó que las glioma-piPSC mostraban un efecto de espectador para cambiar los fenotipos de las células de glioma circundantes y reducir la tumorigenicidad in vitro
Se observan cambios en la morfología celular de las células U251 cocultivadas indirectamente con U251-piPSC durante 40-64 horas, lo que indica una transición mesenquimatosa a epitelial (MET) de las células de glioma cocultivadas. La figura 5A es una imagen que muestra la morfología celular de las células U251 y la figura 5B es una imagen que muestra cambios en la morfología celular de las células U251 cocultivadas indirectamente con U251-piPSC durante 40-64 horas.
Este MET se confirmó mediante inmunotinción de células U251, U251-piPSC, primeras (1a) células U251 cocultivadas y segundas (2a) células U251 cocultivadas utilizando un anticuerpo anti-pan-cadherina, que muestra la localización citosol/nuclear de pan-cadherina en células U251 y localización en membrana/nuclear de U251-piPSCs y células U251 cocultivadas ia/2a, lo que sugiere una mejora importante de la adhesión célula-célula entre U251-piPSCs así como entre las células U251 cocultivadas ia/2a. Esto es una indicación de MET durante la reprogramación celular y las células U251 co-cultivadas ia/2a. Un cocultivo 2a es el experimento de cocultivo indirecto, que coloca las células cocultivadas ia en el inserto transwell y las células U251 frescas en la cámara basolateral. Inmunotinciones dobles de las células U251 y células U251 cocultivadas indirectamente utilizando anticuerpos anti-GFAP y anti-Tuj 1 claramente marcados muestran una expresión significativa de la proteína GFAP en las células U251 cocultivadas con morfología neural, mientras que las células U251 (morfología del huso) no lo expresan GFAP.
Los resultados del ensayo de proliferación de células U251, U251-piPSC y células U251 cocultivadas indirectamente mediante inmunotinción Ki-67 muestran una proliferación significativamente reducida de U251-piPSC y las células U251 cocultivadas, figura 5C. Los resultados de los ensayos de migración, figura 5D, y los ensayos de invasión, figura 5E, de células U251, U251-piPSC, células U251 cocultivadas directamente en proporciones 1:1 y 8:1 (U251:U251-piPSC) muestran una migración e invasión significativamente reducidas de las células U251 después de cocultivos con U251-piPSC (p<0,005).
Después de un experimento de cocultivo similar, se observó MET de células 4T1 cocultivadas con 4T1-piPSC. Las inmunotinciones de células 4T1 cocultivadas y 4T1-piPSC mostraron que ambas células tenían una alta expresión proteica de E-cadherina y una menor expresión proteica de fibronectina, lo que confirma un MET de las células 4T1 cocultivadas. Además, las células 4T1 co-cultivadas también mostraron una proliferación, figura 5F, migración, figura 5G e invasión, figura 5H, significativamente reducidas, lo que indica una tumorigenicidad significativamente reducida de las células 4T1 después de co-cultivar con 4T1-piPSCs durante 40 horas.
El cocultivo de células tumorales cerebrales primarias derivadas del paciente, GBM (12-14), con U251-piPSC también causa una transición mesenquimal a epitelial y una tumorigenicidad reducida de las células tumorales cerebrales primarias derivadas del paciente cocultivadas: un efecto espectador de U251-piPSCs.
Estos resultados indican que un efecto espectador de las piPSC cambia los fenotipos de las células cancerosas circundantes para reducir la tumorigenicidad y la malignidad. Este efecto espectador indica que un número menor de piPSC puede cambiar el fenotipo maligno de un gran número de células tumorales circundantes a través de este efecto de espectador, que actúa como mecanismo celular de una terapia contra el cáncer de conversión celular.
Ejemplo 17
Se redujo significativamente la tumorigenicidad y la inhibición de la metástasis/infiltración in vivo de las piPSC generadas a partir de células cancerosas malignas
En un primer grupo de animales, se implantaron intracranealmente cantidades iguales de células 9L o 9L-piPSC (5x104 células/5 j l ) en ratas Fisher. En un segundo grupo de animales, se implantaron cantidades iguales de células 9L o 9L-piPSCs (1x106 células/100 |jl) en ratas Fisher vía subcutánea.
Se midió el volumen tumoral (mm3) de ratas implantadas intracranealmente con células 9L o 9L-piPSC, n = 10, el día 14, ver figura 6 A. El peso del tumor en gramos de ratas implantadas vía subcutánea con células 9L y 9L-piPSC se midió el día 25 después de la implantación de células 4T1, n = 6 , véase la figura 6 B. Los resultados mostraron un volumen significativamente reducido de los tumores 9L-piPSC intracraneales y un peso significativamente reducido de los tumores 9L-piPSC subcutáneos en comparación con los tumores 9L, lo que indica una tumorigenicidad significativamente reducida de las células 9L después de la reprogramación celular en 9L-piPSC. Este resultado también se confirma mediante la tinción con hematoxilina y eosina (H&E) de los tumores de animales implantados con células 9L y 9L-piPSC, lo que indica una inhibición importante de la infiltración de células 9L, ya que el tumor intracraneal 9L-piPSC mostró un borde intacto claro. mientras que el tumor intracraneal 9L mostró un borde roto con una infiltración importante de las células tumorales 9L en los tejidos cerebrales normales.
Ejemplo 18
Reducción significativa de la tumorigenicidad y de la inhibición de la metástasis/infiltración in vivo de las piPSC generadas a partir de células malignas de cáncer de mama.
Se implantaron números iguales de células 4T1 y 4T1-piPSC (2 x 104 células/50 j l ) en las almohadillas de grasa # 4 de ratones hembra BALB/c de 2-3 meses de edad (20 gramos). Se observaron tumores de mama 4T1 el día 5-7 después de la implantación celular. El volumen del tumor y el peso corporal de los ratones se controlaron todos los días. El día 25, se sacrificaron los ratones y se pesaron los tumores. Para el experimento de supervivencia, los animales se sacrificaron una vez que alcanzaron la carga tumoral.
El crecimiento tumoral de 4T1 y 4T1-piPSC se midió mediante el volumen del tumor, figura 6 C, y el peso del tumor, figura 6 D, el día 25 después de la implantación de 4T1 y 4T1-piPSC, lo que indica una estasis tumoral significativa de las células 4T1 después de la reprogramación celular en 4T1-piPSC.
Las metástasis pulmonares de los ratones a los que se implantaron células 4T1 y 4T1-piPSC se analizaron el día 25 después de la implantación celular. Si bien todos los ratones implantados con células 4T1 mostraron muchas lesiones metastásicas, no se observaron metástasis pulmonares en los ratones implantados con 4T1-piPSC el día 25 después de la implantación celular, figura 6 E, lo que indica una inhibición importante de la metástasis causada por la reprogramación celular de las células 4T1 en 4T1-piPSC. Este resultado se confirmó mediante tinción H&E de las secciones de tejido pulmonar de ratones portadores de 4T1 y ratones portadores de 4T1-piPSC, que no mostraron metástasis pulmonar en los ratones implantados con 4T1-piPSC.
La curva de supervivencia de Kaplan-Meier de los ratones implantados con células 4T1 y 4T1 -piPSC en las almohadillas de grasa #4, figura 6 F, demuestra una supervivencia significativamente prolongada de los ratones que portan 4T1-piPSC durante este experimento de supervivencia de 250 días. Estos resultados demuestran que la preprogramación celular de células cancerosas malignas con piPSC reduce significativamente la tumorigenicidad y la propiedad metastásica de las células cancerosas parentales, prolongando así significativamente la supervivencia de los ratones implantados con 4T1-piPSC.
Ejemplo 19
Las piPSC derivadas de células tumorales se diferencian en diferentes tejidos normales in vivo, dependiendo de diferentes entornos tisulares de diferenciación
Las tinciones H&E de las secciones de tejido cerebral de ratas implantadas intracranealmente con 9L mostraron angiogénesis por glioma importante en los tejidos cerebrales normales y hemorragia grave dentro de los tumores cerebrales, mientras que se observaron mucho menos angiogénesis y hemorragia en las ratas implantadas intracranealmente con 9L-piPSC. Además, las ratas con implantes intracraneales de 9L-piPSC también mostraron rosetas neurales recién diferenciadas cerca de los tumores en el cerebro. Además, la tinción H&E de portaobjetos de tejido tumoral de ratas implantadas subcutáneamente con 9L-piPSC mostró glándulas sudoríparas inmaduras con células epiteliales cuboidales y columnares bajas y melanocitos con melanina de color marrón dentro de los tumores. Las tinciones H&E de portaobjetos de tejido tumoral de ratas implantadas subcutáneamente con 9L-piPSC también mostraron epitelio cutáneo con dos capas de epidermis y células epiteliales cilíndricas simples tempranas con forma y núcleos más largos en la base de las células.
De manera similar, la tinción H&E de las masas tumorales de los ratones portadores de 4T1-piPSC mostró una diferenciación in vivo de las 4T1-piPSC implantadas en tejidos mamarios normales, incluidos los adipocitos, incluidos los adipocitos marrones y blancos y los conductos mamarios maduros e inmaduros.
Estos resultados indican que las piPSC derivadas de células tumorales se diferencian en diferentes células de tejido normal in vivo dependiendo de diferentes entornos de tejido de diferenciación.
Ejemplo 20
El rastreo del linaje muestra que las piPSC derivadas de células tumorales se diferencian en tejidos normales
Para asegurar que las piPSC derivadas de células tumorales se diferencian en tejidos normales, se prepararon células 9L y 4T1 que expresan GFP.
Se prepararon GFP-9L-piPSC y GFP-4T1-piPSC.
Se realizaron experimentos de rastreo de linajes utilizando ambos tipos de células. Para GFP-9L-piPSC, las células se implantaron vía subcutánea en los flancos izquierdos de ratas Fisher. Para GFP-4T1-piPSC, las células se implantaron en la almohadilla de grasa # 4 de ratones hembra BALB/c. Se observó una pequeña masa tumoral el día 10-15 para las ratas implantadas con GFP-9L-piPSC y el día 20-25 para los ratones implantados con GFP-4T1-piPSC. Los animales se sacrificaron en diferentes días después de la implantación celular y se recolectaron masas tumorales y se usaron para hacer secciones de tejido para tinciones H&E e inmunotinción. Se realizó inmunotinción con anticuerpos marcadores neurales Tuj I y Nestin, adiponectina (un marcador de adipocitos), citoqueratina 8 , 14, 18 (CK8 , 14, 18) o citoqueratina 5,8 (CK5,8) (marcadores del conducto mamario) utilizando etiquetas diferencialmente detectables.
La tinción H&E tanto del centro como de los bordes de la masa tumoral de los ratones portadores de 4T1-piPSC mostró la aparición de adipocitos potenciales y conductos mamarios inmaduros en la masa tumoral. Las inmunotinciones de la sección de tejido de la masa tumoral GFP-9L-piPSC obtenidas del experimento de rastreo de linaje utilizando un anticuerpo anti-Tuj I mostraron inmunotinción positiva para Tuj I que se solapaba con fluorescencia de GFP de células que expresan GFP en las mismas secciones de tejido. Solo se observaron imágenes de fluorescencia de Tuj I y GFP superpuestas en las secciones de tejido, lo que indica que estas células positivas para Tuj I se originaron a partir de las 9L-piPSC que expresan GFP. Las células positivas para Tuj I GFP mostraron morfología de células neuronales. Estos datos demuestran que las 9L-piPSC que expresan GFP se diferenciaron in vivo en células de linaje neuronal positivas para Tuj I. Las inmunotinciones de la sección de tejido de la masa tumoral GFP-9L-piPSC obtenida del experimento de rastreo de linaje utilizando un anticuerpo anti-nestina mostraron inmunotinción de nestina positiva que se superpuso con la fluorescencia de GFP de células que expresan GFP de las mismas secciones de tejido. Solo se observaron imágenes de fluorescencia de nestina y GFP superpuestas en las secciones de tejido, lo que indica que estas células positivas para nestina se originaron a partir de las 9L-piPSC que expresan GFP. Estos datos demuestran que las 9L-piPSC que expresan GFP se diferenciaron in vivo en células de linaje neural positivo para nestina.
Las inmunotinciones de las secciones de tejido tumoral de los ratones portadores de 4T1-piPSC con un anticuerpo anti-adiponectina mostraron inmunotinción positiva para adiponectina que se superponía con la fluorescencia verde de las células que expresan GFP. Solo se observó fluorescencia de adiponectina y GFP superpuestas en las secciones de tejido en células con morfología de adipocitos, lo que indica la presencia de adipocitos en el medio de la masa tumoral de los ratones portadores de 4T1-piPSC y estos adipocitos se originaron a partir de la diferenciación de la GFP-4T1-piPSC implantada, ya que estos adipocitos expresaban GFP.
Las inmunotinciones de las secciones de tejido tumoral de los ratones portadores de 4T1-piPSC con anticuerpos anti-CK8,18, 14 y anti-CK5,8 mostraron inmunotinción positiva para CK8,18, 14 y anti-CK5,8 que se superponía con la fluorescencia verde. de las células que expresan GFP. Solo se observó fluorescencia de CK8 , 18,14 o anti-CK5,8 positivo y GFP superpuestos en las secciones de tejido en células con morfología de conducto mamario, lo que indica la presencia de conductos mamarios inmaduros que se originaron a partir de la diferenciación de la GFP-4T1piPSC implantada, ya que estos conductos mamarios expresaban GFP.
Ejemplo 21
Tratamiento de reprogramación celular inducida por proteína QQ-SON de tumores in vivo
Para generar ratas portadoras de tumores 9L, se implantaron células 9L (1x106 células/100 |jl) en ratas Fisher vía subcutánea. 5 días después de la implantación de 9L, se administró proteína QQ-SON mediante inyección intratumoral todos los días a razón de 1 pg/día (n = 5), 5 pg/día (n = 5) o 10 pg/día (n = 10) para 18 tratamientos diarios. Se administró reactivo q Q en tampón PBS mediante inyección intratumoral para las ratas control (n = 10). El volumen del tumor y el peso corporal de las ratas se controló todos los días. El día 23, se sacrificaron las ratas y se pesaron los tumores.
El crecimiento del tumor se midió en volumen, ver figura 7A y el peso del tumor en gramos, ver figura 7B. Las ratas se sacrificaron el día 23 y se pesaron los tumores. Estos datos indican que el tratamiento con QQ-SON indujo una reprogramación celular in situ que da como resultado estasis tumoral.
Para determinar el efecto del tratamiento con proteína QQ-SON en la supervivencia de las ratas implantadas subcutáneamente con células 9L, el día 5 después de la implantación de células 9L las ratas fueron tratadas con reactivos QQ en PBS (n = 8 ; mediana de supervivencia = 21 días) o proteínas QQ-SON (10 pg/día, n = 8 ; mediana de supervivencia = 127 días) para 30 tratamientos diarios. Los animales se sacrificaron una vez que alcanzaron la carga tumoral (< 12 cm3). La curva de supervivencia Kaplan-Meier (130 días) se muestra en la figura 7C. Estos datos indican que el tratamiento con proteína QQ-SON prolongó significativamente la supervivencia de ratas portadoras de tumores 9L.
Ejemplo 22
Tratamiento de reprogramación celular inducida por proteína QQ-SON de tumores in vivo
Para generar ratones portadores de cáncer de mama 4T1 ortotópicos, se implantaron células 4T1 (2x104 células/50 pl) en las almohadillas de grasa # 4 de ratones BALB/c hembra de 2-3 meses de edad (20 gramos). Se observaron tumores de mama 4T1 el día 5-7 después de la implantación celular. El volumen del tumor y el peso corporal de los ratones se controló todos los días. El día 25, se sacrificaron los ratones y se pesaron los tumores. Para el experimento de supervivencia, los animales se sacrificaron una vez que alcanzaron los puntos finales, incluida la carga tumoral (< 2 gramos), metástasis que causaba dificultad para respirar, dolor incontrolable, etc.
Se administraron varias dosis de proteínas QQ-SON, 0,5 pg de proteínas SON modificadas con QQ/ratón, 1,25 pg de proteínas SON modificadas con QQ/ratón o 2,5 pg de proteínas SON modificadas con QQ/ratón, y se compararon con el control QQ-PBS. La eficacia se determinó midiendo el volumen del tumor durante un tiempo de 25 días, figura 7D, y midiendo el peso del tumor en gramos, figura 7E, el día 25.
En otro experimento, se determinó el volumen tumoral de los ratones tratados con proteínas QQ-SON (n = 8 ) o QQ-PBS como control (n = 8 ) durante 35 días por resonancia magnética, ver figura 7F, y el peso de los tumores de ambos grupos pesando el día 35, ver figura 7G. El tratamiento con proteína q Q-SOn provocó una gran estasis tumoral sin extirpación del tumor primario.
Se analizaron los ratones para determinar el número y porcentaje de metástasis en el pulmón, figuras 7L y 7M, ganglios linfáticos, figuras 7J y 7N, hígado, figuras 7K y 7O, y bazo, figuras 7L y 7P, de ratones portadores de 4T1 tratados con QQ-SON y QQ-PBS sin extirpación del tumor primario, como se observó mediante MRI en los días indicados. Estos resultados demuestran que, en comparación con los ratones tratados con QQ-PBS, los ratones tratados con QQ-SON mostraron metástasis en fechas mucho más tardías después de la implantación de células 4T1 y muchas menos lesiones metastásicas en el pulmón, los ganglios linfáticos y no se observaron lesiones de metástasis en hígado y bazo. Estos datos indican una inhibición importante de la metástasis en los ratones portadores de 4T1 causada por el tratamiento con proteína QQ-SON sin extirpación del tumor primario.
Ejemplo 23
Análisis histológico de secciones de tejido tumoral tratadas con proteínas QQ-PBS y QQ-SON sin extirpar el tumor primario
Tinciones H&E de un portaobjetos de tejido tumoral 9L de una rata tratada con reactivos QQ en tampón PBS durante 18 tratamientos diarios muestran células tumorales uniformes con angiogénesis extensa. Las inmunotinciones de un portaobjetos de tejido cercano con anticuerpo anti-VE-cadherina confirmaron la angiogénesis. Esta rata se sacrificó el día 26 después de la implantación de células 9L subcutáneas con un tumor de 13,5 cm3 (alrededor de 15,5 g). Por el contrario, las tinciones H&E de un portaobjetos de tejido tumoral de una rata tratada con proteína QQ-SON durante 18 tratamientos diarios mostraron diferentes zonas celulares, incluida la zona de células tumorales, la zona de tejido conectivo y la zona de fibroblasto. Esta rata se sacrificó el día 49 después de la implantación de células 9L subcutáneas y su tumor se redujo significativamente de tamaño a 0,2 cm3 (alrededor de 0,6 g). La inmunotinción de la zona de fibroblastos de un portaobjetos de tejido tumoral cercano de la misma rata utilizando un anti-a-procolágeno, un marcador de fibroblastos, un anticuerpo, confirmó la zona de fibroblastos (teñida positivamente) y la zona de células tumorales (teñida negativamente). Las inmunotinciones de los portaobjetos de tejido tumoral de la misma rata tratadas con proteínas QQ-SON durante 18 tratamientos diarios utilizando anticuerpos anti-GFAP y anti-Tuj 1 mostraron tinciones positivas de ambos marcadores con morfología de células neuronales y formación de rosetas neurales. Estos datos indican que las proteínas QQ-SON inyectadas indujeron la generación in situ de 9L-piPSC transitorias que se diferencian en células no cancerosas, incluidas las células de linaje neuronal.
De manera similar, las tinciones H&E de portaobjetos de tejido tumoral 4T1 de los ratones tratados con proteína QQ-SON también mostraron adipocitos y conducto mamario, que se tiñeron positivamente con adiponectina y citocaratina 5/8/14, lo que indica que la proteína QQ-SON inyectada también indujo reprogramación in situ de células tumorales 4T1 dentro del tumor primario en 4Tl-piPSC que se diferencian en tejido mamario.
Ejemplo 24
El tratamiento con QQ-SON mejora significativamente la estabilidad del genoma de las células 9L tratadas in vivo
Se realizó el análisis del genoma SKY de células explantadas de dos ratas portadoras de tumor 9L subcutáneas, ambas tratadas con proteína QQ-SON durante 18 días. Una rata (n° 12) mostró una respuesta importante al tratamiento con QQ-SON y el tumor comenzó a encogerse. Antes de que el tumor desapareciera, se sacrificó la rata y se recogió el tumor para explantes y portaobjetos de tejido tumoral. Otra rata (n° 15) no mostró respuesta al tratamiento con proteína QQ-SON y el tumor continuó creciendo hasta alcanzar el punto final (> 12 cm3). Esta rata también se sacrificó y se prepararon explantes y portaobjetos de tejido tumoral.
Las células del explante de rata n° 15 crecieron rápidamente y alcanzaron la confluencia en 3 días. Las células mostraban una morfología típica de huso de células 9L. Sin embargo, las células del explante de rata n° 12 crecieron muy lentamente y solo dos semanas después se observaron algunas células con morfología neural con algunas colonias. Las inmunotinciones de los portaobjetos de tejido tumoral con GFAP y Tuj I mostraron tinciones positivas para ambos marcadores para aquellas células que mostraban morfología neural en la rata n° 12, pero tinciones negativas para estos dos marcadores para la rata n° 15. Las inmunotinciones adicionales con p-catenina, CK5/6, E-cadherina, Lefty, Nodal y Cripto-1 mostraron resultados opuestos para las ratas números 12 y 15. Aunque los portaobjetos de tejido tumoral de la rata n° 12 mostraron tinciones positivas de CK5/6, E-cadherina, Lefty y p-catenina, se observó una tinción negativa en los portaobjetos de tejido tumoral de la rata n° 15. Curiosamente, Lefty y E-cadherina se tiñeron conjuntamente en las mismas áreas de las secciones de tejido tumoral, así como CK5/6 y E-cadherina. Por el contrario, los portaobjetos de tejido tumoral de la rata n° 15 mostraron tinciones positivas para Nodal y Cripto-1, pero esas secciones de tejido del n° 12 mostraron tinciones negativas para estos dos marcadores. Estos resultados indican la conversión de células tumorales en células no cancerosas en la sección de tejido de la rata n° 12, mientras que las secciones de tejido de la rata n° 15 permanecieron como células tumorales 9L.
Para evaluar la estabilidad del genoma de las células del explante, se realizaron análisis citogenéticos moleculares. Se recogieron 20 imágenes mitóticas para cada explante de rata n° 15 y rata n° 12 y se analizó el número medio de cromosomas para la rata n° 15 y para la rata n° 12. La tabla 4 muestra una comparación de las aberraciones cromosómicas de la rata n° 15 y la rata n° 12. Los análisis citogenéticos moleculares indicaron un 35% de aberraciones cromosómicas no clonales (NCCA) y un 20% de aberraciones cromosómicas clonales (CCA) para la rata n° 12 y un 70% de NCCA y un 15% de CCA para la rata n° 15 (tabla 4). Dado que las frecuencias de los NCCA representan el nivel de inestabilidad del genoma, mientras que los CCA representan la estabilidad relativa, estos datos sugieren que el tumor que no respondió al tratamiento con la proteína QQ-SON (rata n° 15) mostró niveles más altos de heterogeneidad del genoma que los del tumor ( rata n° 12) que mostró una buena respuesta al tratamiento con QQ-SON. Este resultado indica que la reprogramación celular in situ inducida por proteínas mejora significativamente la estabilidad del genoma de las células cancerosas tratadas, lo que indica la conversión celular de células cancerosas
Figure imgf000037_0001
Ejemplo 25
La terapia del cáncer por conversión celular inducida por QQ-SON mediada por la reprogramación celular in situ inducida por proteínas provocó la curación del cáncer de ratas portadoras de tumores 9L subcutáneos y ratones portadores de 4T1 en etapa tardía después de la extirpación quirúrgica de tumores primarios.
Se implantaron vía subcutánea células 9L en ratas Fisher para generar ratas portadoras de tumores. Cinco días después de la implantación de las células tumorales, se realizaron inyecciones intratumorales diarias de proteínas SON modificadas con QQ (QQ-SON). También se realizó un control adecuado de los reactivos QQ en PBS (QQ-PBS). Se realizó un experimento de supervivencia de 90 días después de un régimen de tratamiento intratumoral de 18 días utilizando proteínas QQ-SON a razón de 10 pg/ratón/día. Durante los tratamientos, se observó una reducción significativa del crecimiento tumoral en todas las ratas tratadas. Después de los tratamientos de 18 días, el 50% de las ratas tratadas mostraron una disminución del volumen tumoral en el tiempo y estos animales no presentaban ningún tumor palpable. Las ratas tratadas restantes mostraron un crecimiento tumoral significativamente más lento. La mediana de supervivencia del grupo tratado fue de 49 ± 20 días (n = 8 ), mientras que la supervivencia en el grupo de control fue de 21 ± 4 días (n = 6 ). Se observó recurrencia tumoral en tres ratas tratadas los días 32, 43 y 62, con una recurrencia media de 45 ± 13 días. Los tumores recurrentes crecieron de manera muy agresiva y alcanzaron un volumen > 12 cm3 en 5-7 días (tabla 5, Tratamiento 1). La cuarta rata curada con glioma permaneció libre de tumores durante más de 30 meses, sin evidencia de formación de teratoma.
Cuando el régimen de tratamiento intratumoral diario se amplió a 30 días, se obtuvieron ratas 100% curadas con glioma dentro de los primeros 73 días durante un experimento de supervivencia de 400 días (n = 8 ). De nuevo, se observó la recurrencia del tumor en tres ratas tratadas en los días 73, 78 y 92 (recurrencia media: 81 ± 8 días), que fue mucho más tardía que la recurrencia del tumor observada en las ratas tratadas durante solo 18 días. Las 5 ratas restantes permanecieron libres de tumores durante 400 días. Las tres ratas con tumores recurrentes se trataron durante 30 días más (inyección intratumoral diaria, 10 pg/día de QQ-SON). De las tres ratas, dos tuvieron una progresión muy lenta y sobrevivieron durante 6 6 días más (aparición del tumor el día 78) o 68 días (reaparición del tumor el día 92). Sólo una rata mostró un crecimiento tumoral lento y fue sacrificada el día 109 (36 días después de que se identificó la recurrencia del tumor), cuando el tumor alcanzó un volumen de 12 cm3. La mediana de supervivencia de las ratas tratadas fue 280 ± 155 días (n = 8 ) en comparación con 21 ± 4 días para el grupo de control (n = 6 ) (tabla 5, Tratamiento 2).
Para asegurar que este resultado era reproducible, se repitió el experimento de tratamiento de 30 días anterior y se logró un 80% de ratas curadas con glioma dentro de los primeros 79 días. Dos ratas mostraron un crecimiento tumoral lento, pero habían alcanzado un volumen tumoral de 12 cm3 el día 29 y 48, respectivamente (tabla 5, Tratamiento 3). Sin embargo, dos ratas curadas con glioma mostraron recurrencia tumoral el día 79 y 11 (mediana de recurrencia: 95 ± 16 días). Estas dos ratas se trataron con las proteínas QQ-SON (10 pg/día) durante 30 días más. Una de las dos ratas mostró un crecimiento tumoral lento y alcanzó un volumen de 12 cm3 30 días después de que el tumor reapareciera el día 79. La otra rata sobrevivió durante 69 días más. La mediana de supervivencia de las ratas tratadas fue 276 ± 156 días (n = 10), mientras que las ratas de control tratadas con QQ-PBS solo sobrevivieron durante 23 ±3 días después de la implantación del tumor (n = 6 ). Las ratas curadas con tumores de ambos tratamientos 2 y 3 sobrevivieron durante más de 15 meses sin recurrencia del tumor y sin formación de teratoma.
Figure imgf000038_0001
Se observó un resultado similar para la etapa tardía de los ratones portadores de cáncer de mama 4T1 después de la extirpación quirúrgica de los tumores primarios el día 18 después de la implantación de células 4T1 para los ratones tratados con QQ-PBS y QQ-SON. El tratamiento diario con proteína QQ-SON intratumoral se realizó el día 5 y se continuó durante 40 días. Previamente, se demostró que la metástasis pulmonar comenzaba el día 7. El día 18, se observaron lesiones metastásicas pulmonares observables por resonancia magnética para cada ratón. Se realizó un experimento de supervivencia de 250 días. Los datos resultantes, tabla 6 , indicaron que, mientras que los ratones de control QQ-PBS murieron entre los días 25­ 47, los ratones tratados con QQ-SON sobrevivieron mucho más tiempo y el 61% (n = 11) de los ratones tratados con QQ-SON sobrevivieron 250 días sin recidiva tumoral y formación de teratoma (n = 18), ver figura 8. Los resultados de la MRI mostraron la desaparición de las lesiones metastásicas pulmonares. Estos datos demuestran una alta eficacia de tratamiento de esta terapia contra el cáncer de conversión de células inducida por QQ-SON.
Figure imgf000039_0001
La Figura 8 es una curva de supervivencia Kaplan-Meier (supervivencia de 250 días) de ratones portadores de cáncer de mama 4T1 después de la extirpación quirúrgica del cáncer de mama 4T1 primario el día 18. Estos ratones con cáncer de mama 4T1 se trataron con proteínas QQ-PBS (control) y QQ-SON (tratamiento) el día 6 después de la implantación de células 4T1 en la almohadilla de grasa # 4 de ratones BALB/c hembra. Los tumores primarios fueron palpables alrededor del día 5 y se extirparon quirúrgicamente el día 18. El tratamiento QQ-PBS / QQ-SON se realizó diariamente mediante inyecciones intratumorales (5 pg/ratón/día) e intraperitoneales (25 pg/ratón/día).
El día 0 en la curva de supervivencia de Kaplan-Meier de la figura 8 es el día en que se realizó la cirugía el día 18. Una pequeña población de ratones mostró recurrencia tumoral debido a la eliminación incompleta del tumor. Estos ratones se trataron con proteína QQ-SON o QQ-PBS mediante inyecciones intratumorales y también se comparó su supervivencia (curvas de supervivencia de puntos). Para aquellos ratones sin recurrencia tumoral, sus curvas de supervivencia se muestran en líneas continuas. Los ratones que sobrevivieron durante todo este experimento de supervivencia de 250 días sin recurrencia tumoral se consideran ratones curados de tumores. Se logró la curación tumoral en el 61% de la población de ratones tratados.
Por tanto, se demuestra la reprogramación celular in situ inducida por QQ-SON de las células cancerosas dentro del tumor para generar piPSC transitorias que se diferencian en diferentes células no cancerosas dentro de ese tejido. Los tipos de células no cancerosas diferenciadas dependen del entorno tisular específico. Esta interacción entre la reprogramación celular in situ inducida por QQ-SON y la diferenciación inducida por el entorno tisular regula con precisión la generación de piPSC transitorias dentro del tumor y la diferenciación inducida, evitando la formación de tumores y teratomas. Esta tecnología segura de reprogramación celular in situ inducida por proteínas in situ genera células madre que luego se diferencian en células normales inducidas por el entorno tisular para reemplazar las células enfermas con el fin de tratar muchas enfermedades y lesiones.
Secuencias
Homo sapiens SRY (región Y determinante del sexo) - box 2 (SOX2) (NM_003106) SEQ ID NO: 1 (proteína) y SEQ ID NO: 65 (ADN)
MYNMME TE LKP PGPQQT S GGGGGNS TAAAAGGNQKNS PDRVKRPMNAFMVWS RGQRRKMAQENPK MHNSEISKRLGAEWKLLSETEKRPFIDEAKRLRALHMKEHPDYKYRPRRKTKTLMKKDKYTLPGG LLAPGGNSMASGVGVGAGLGAGVNQRMDSYAHMNGWSNGSYSMMQDQLGYPQHPGLNAHGAAQMQ PMHRYDVSALQYNSMTSSQTYMNGSPTYSMSYSQQGTPGMALGSMGSWKSEASSSPPWTSSSH SRAPCQAGDLRDMISMYLPGAEVPEPAAPSRLHMSQHYQSGPVPGTAINGTLPLSHM (SEQ ID NO: 1)
a tg t a c a a c a tg a tg g a g a c g g a g c tg a a g c c g c c g g g c c c g c a g c a a a c t t c g g g g g g c g g c g g c g g c a a c tc c a c c g c g g c g g c g g c c g g c g g c a a c c a g a a a a a c a g c c c g g a c c g c g tc a a g c g g c c c a t g a a t g c c t t c a t g g t g t g g t c c c g c g g g c a g c g g c g c a a g a t g g c c c a g g a g a a c c c c a a g a tg c a c a a c t c g g a g a t c a g c a a g c g c c t g g g c g c c g a g t g g a a a c t t t t g t c g g a g a c g g a g a a g c g g c c g t t c a t c g a c g a g g c t a a g c g g c t g c g a g c g c t g c a c a t g a a g g a g c a c c c g g a t t a t a a a ta c c g g c c c c g g c g g a a a a c c a a g a c g c tc a tg a a g a a g g a ta a g ta c a c g c tg c c c g g c g g g c tg c tg g c c c c c g g c g g c a a t a g c a tg g c g a g c g g g g t c g g g g tg g g c g c c g g c c t g g g c g c g g g c g tg a a c c a g c g c a tg g a c a g t ta c g c g c a c a t g a a c g g c t g g a g c a a c g g c a g c t a c a g c a t g a tg c a g g a c c a g c tg g g c ta c c c g c a g c a c c c g g g c c tc a a tg c g c a c g g c g c a g c g c a g a tg c a g c c c a t g c a c c g c t a c g a c g t g a g c g c c c t g c a g t a c a a c t c c a t g a c c a g c t c g c a g a c c t a c a t g a a c g g c t c g c c c a c c t a c a g c a t g t c c t a c t c g c a g c a g g g c a c c c c t g g c a t g g c t c t t g g c t c c a t g g g t t c g g t g g t c a a g t c c g a g g c c a g c t c c a g c c c c c c t g t g g t t a c c t c t t c c t c c c a c t c c a g g g c g c c c t g c c a g g c c g g g g a c c t c c g g g a c a t g a t c a g c a t g t a t c t c c c c g g c g c c g a g g tg c c g g a a c c c g c c g c c c c c a g c a g a c t t c a c a t g t c c c a g c a c t a c c a g a g c g g c c c g g t g c c c g g c a c g g c c a t t a a c g g c a c a c t g c c c c t c t c a c a c a t g t g a (SEQ ID N O :65) Homo sapiens POU clase 5 homeobox 1 (POU5F1) también conocido como Oct4 (NM_002701) SEQ ID NO: 2 (proteína) y SEQ ID NO: 6 6 (ADN) MAGHLASDFAFSPPPGGGGDGPGGPEPGWVDPRTWLSFQGPPGGPGIGPGVGPGSEVWGIPPCPP PYEFCGGMAYCGPQVGVGLVPQGGLETSQPEGEAGVGVESNSDGASPEPCTVTPGAVKLEKEKLE Q NPEESQDIKALQKELEQFAKLLKQ KRITLG YTQADVGLTLGVLFGKVFSQTTICRFEALQLSFK: NMCKLRPLLQKWVEEADNNENLQEICKAETLVQARKRKRTSIENRVRGNLENLFLQCPKPTLQQI S HIAQQLGLEKDW RVW FCNRRQKGKRS S S DYAQRED FE AAGS P FS GGPVS FPLAPG PHFGTPGY GSPHFTALYSSVPFPEGEAFPPVSVTTLGSPMHSN (SEQ ID N O :2 )
a t g g c g g g a c a c c t g g c t t c g g a t t t c g c c t t c t c g c c c c c t c c a g g t g g t g g a g g t g a t g g g c c a g g g g g g c c g g a g c c g g g c t g g g t t g a t c c t c g g a c c t g g c t a a g c t t c c a a g g c c c t c c t g g a g g g c c a g g a a t c g g g c c g g g g g t t g g g c c a g g c t c t g a g g t g t g g g g g a t t c c c c c a t g c c c c c c g c c g t a t g a g t t c t g t g g g g g g a t g g c g t a c t g t g g g c c c c a g g t t g g a g t g g g g c t a g t g c c c c a a g g c g g c t t g g a g a c c t c t c a g c c t g a g g g c g a a g c a g g a g t c g g g g t g g a g a g c a a c t c c g a t g g g g c c t c c c c g g a g c c c t g c a c c g t c a c c c c t g g t g c c g t g a a g c t g g a g a a g g a g a a g c t g g a g c a a a a c c c g g a g g a g t c c c a g g a c a t c a a a g c t c t g c a g a a a g a a c t c g a g c a a t t t g c c a a g c t c c t g a a g c a g a a g a g g a t c a c c c t g g g a t a t a c a c a g g c c g a t g t g g g g c t c a c c c t g g g g g t t c t a t t t g g g a a g g t a t t c a g c c a a a c g a c c a t c t g c c g c t t t g a g g c t c t g c a g c t t a g c t t c a a g a a c a t g t g t a a g c t g c g g c c c t t g c t g c a g a a g t g g g t g g a g g a a g c t g a c a a c a a t g a a a a t c t t c a g g a g a ta tg c a a a g c a g a a a c c c t c g tg c a g g c c c g a a a g a g a a a g c g a a c c a g ta t c g a g a a c c g a g t g a g a g g c a a c c t g g a g a a t t t g t t c c t g c a g t g c c c g a a a c c c a c a c t g c a g c a g a t c a g c c a c a t c g c c c a g c a g c t t g g g c t c g a g a a g g a t g t g g t c c g a g t g t g g t t c t g t a a c c g g c g c c a g a a g g g c a a g c g a t c a a g c a g c g a c t a t g c a c a a c g a g a g g a t t t t g a g g c t g c t g g g t c t c c t t t c t c a g g g g g a c c a g t g t c c t t t c c t c t g g c c c c a g g g c c c c a t t t t g g t a c c c c a g g c t a t g g g a g c c c t c a c t t c a c t g c a c t g t a c t c c t c g g t c c c t t t c c c t g a g g g g g a a g c c t t t c c c c c t g t c t c c g t c a c c a c t c t g g g c t c t c c c a t g c a t t c a a a c t g a (SEQ ID N O :6 6 )
Homo sapiens Nanog homeobox (ANOG) (M_024865) SEQ ID NO: 3 (proteína) y SEQ ID NO: 67 (ADN) MSVDPACPQSLPCFEASDCKESSPMPVICGPEENYPSLQMSSAEMPHTETVSPLPSSMDLLIQDS PDSSTSPKGKQPTSAEKSVAKKEDKVPVKKQKTRTVFSSTQLCVLNDRFQRQKYLSLQQMQELSN ILNLSYKQVKTWFQNQRMKSKRWQKNNWPKNSNGVTQKASAPTYPSLYSSYHQGCLVNPTGNLPM WSNQTWNNSTWSNQTQNIQSWSNHSWNTQTWCTQSWNNQAWNSPFYNCGEESLQSCMQFQPNSPA SDLEAALEAAGEGLNVIQQTTRYFSTPQTMDLFLNYSMNMQPEDV (SEQ ID N O :3) a t g a g t g t g g a t c c a g c t t g t c c c c a a a g c t t g c c t t g c t t t g a a g c a t c c g a c t g t a a a g a a t c t t c a c e t a t g c c t g t g a t t t g t g g g c c t g a a g a a a a c t a t c c a t c c t t g c a a a t g t c t t c t g c t g a g a t g c c t c a c a c g g a g a c t g t c t c t c c t c t t c c t t c c t c c a t g g a t c t g c t t a t t c a g g a c a g c c c t g a t t c t t c c a c c a g t c c c a a a g g c a a a c a a c c c a c t t c t g c a g a g a a g a g t g t c g c a a a a a a g g a a g a c a a g g t c c c g g t c a a g a a a c a g a a g a c c a g a a c t g t g t t c t c t t c c a c c c a g c t g t g t g t a c t c a a t g a t a g a t t t c a g a g a c a g a a a t a c c t c a g c c t c c a g c a g a t g c a a g a a c t c t c c a a c a t c c t g a a c c t c a g c t a c a a a c a g g t g a a g a c c t g g t t c c a g a a c c a g a g a a t g a a a t c t a a g a g g tg g c a g a a a a a c a a c tg g c c g a a g a a t a g c a a t g g t g t g a c g c a g a a g g c c t c a g c a c c t a c c t a c c c c a g c c t t t a c t c t t c c t a c c a c c a g g g a t g c c t g g t g a a c c c g a c t g g g a a c c t t c c a a t g t g g a g c a a c c a g a c c t g g a a c a a t t c a a c c tg g a g c a a c c a g a c c c a g a a c a tc c a g t c c tg g a g c a a c c a c t c c t g g a a c a c t c a g a c c t g g t g c a c c c a a t c c t g g a a c a a t c a g g c c t g g a a c a g t c c c t t c t a t a a c t g t g g a g a g g a a t c t c t g c a g t c c t g c a t g c a g t t c c a g c c a a a t t c t c c t g c c a g t g a c t t g g a g g c t g c c t t g g a a g c t g c t g g g g a a g g c c t t a a t g t a a t a c a g c a g a c c a c t a g g t a t t t t a g t a c t c c a c a a a c c a t g g a t t t a t t c c t a a a c t a c t c c a t g a a c a t g c a a c c t g a a g a c g t g t g a (SEQ ID N O :67)
Homo sapiens homólogo A lin-28 (C. elegans) (LIN28A) (NM_024674) SEQ ID NO: 4 (proteína) y SEQ ID NO: 6 8 (ADN) MGSVSNQQFAGGCAKAAEEAPEEAPEDAARAADEPQLLHGAGICKWFNVRMGFGFLSMTARAGVA LDPPVDVFVHQSKLHMEGFRSLKEGEAVEFTFKKSAKGLESIRVTGPGGVFCIGSERRPKGKSMQ KRRSKGDRCYNCGGLDHHAKECKLPPQPKKCHFCQSISHMVASCPLKAQQGPSAQGKPTYFREEE EEIH SPTLLPEAQ N (SEQ ID N O :4)
a t g g g c t c c g t g t c c a a c c a g c a g t t t g c a g g t g g c t g c g c c a a g g c g g c a g a a g a g g c g c c c g a g g a g g c g c c g g a g g a c g c g g c c c g g g c g g c g g a c g a g c c tc a g c tg c t g c a c g g tg c g g g c a tc t g t a a g t g g t t c a a c g t g c g c a t g g g g t t c g g c t t c c t g t c c a t g a c c g c c c g c g c c g g g g t c g c g c t c g a c c c c c c a g t g g a t g t c t t t g t g c a c c a g a g t a a g c t g c a c a t g g a a g g g t t c c g g a g c t t g a a g g a g g g t g a g g c a g t g g a g t t c a c c t t t a a g a a g t c a g c c a a g g g t c t g g a a t c c a t c c g t g t c a c c g g a c c t g g t g g a g t a t t c t g t a t t g g g a g t g a g a g g c g g c c a a a a g g a a a g a g c a t g c a g a a g c g c a g a t c a a a a g g a g a c a g g t g c t a c a a c t g t g g a g g t c t a g a t c a t c a t g c c a a g g a a t g c a a g c t g c c a c c c c a g c c c a a g a a g t g c c a c t t c t g c c a g a g c a t c a g c c a t a t g g t a g c c t c a t g t c c g c t g a a g g c c c a g c a g g g c c c ta g tg c a c a g g g a a a g c c a a c c ta c t t t c g a g a g g a a g a a g a a g a a a t c c a c a g c c c t a c c c t g c t c c c g g a g g c a c a g a a t t g a (SEQ ID N O :6 8 ) Homo sapiens Factor 4 de tipo Krueppel (Klf4) (NP_004226) SEQ ID NO: 5 (proteína) y SEQ ID NO: 69 (ADN) MRQPPGESDMAVSDALLPSFSTFASGPAGREKTLRQAGAPNNRWREELSHMKRLPPVLPGRPYDL AAATVATDLESGGAGAACGGSNLAPLPRRETEEFNDLLDLDFILSNSLTHPPESVAATVSSSASA SSSSSPSSSGPASAPSTCSFTYPIRAGNDPGVAPGGTGGGLLYGRESAPPPTAPFNLADINDVSP SGGFVAELLRPELDPVYIPPQQPQPPGGGLMGKFVLKASLSAPGSEYGSPSVISVSKGSPDGSHP VWAPYNGGPPRTCPKIKQEAVSSCTHLGAGPPLSNGHRPAAHDFPLGRQLPSRTTPTLGLEEVL SSRDCHPALPLPPGFHPHPGPNYPSFLPDQMQPQVPPLHYQELMPPGSCMPEEPKPKRGRRSWPR KRTATHTCDYAGCGKTYTKSSHLKAHLRTHTGEKPYHCDWDGCGWKFARSDELTRHYRKHTGHRP FQCQKCDRAFSRSDHLALHMKRHF (SEQ ID N O :5)
Homo sapiens c-MYC (P_002458) SEQ ID NO: 6 (proteína) y SEQ ID NO: 70 (ADN) MDFFRWENQQPPATMPLNVSFTNRNYDLDYDSVQPYFYCDEEENFYQQQQQSELQPPAPSEDIW KKFELLPTPPLSPSRRSGLCSPSYVAVTPFSLRGDNDGGGGSFSTADQLEMVTELLGGDMVNQSF ICDPDDETFIKNIIIQDCMW SGFSAAAKLVSEKLASYQAARKDSGSPNPARGHSVCSTSSLYLQD LSAAASECIDPSW FPYPLNDSSSPKSCASQDSSAFSPSSDSLLSSTESSPQGSPEPLVLHEETP PTTSSDSEEEQEDEEEIDWSVEKRQAPGKRSESGSPSAGGHSKPPHSPLVLKRCHVSTHQHNYA APPSTRKDYPAAKRVKLDSVRVLRQISNNRKCTSPRSSDTEENVKRRTHNVLERQRRNELKRSFF ALR DQ IPELENNEKAPKW ILKKATAYILSVQ AEEQ KLISEEDLLRKRREQ LKHKLEQ LRNSCA (SEQ ID NO:6)
a t g g a t t t t t t t c g g g t a g t g g a a a a c c a g c a g c c t c c c g c g a c g a t g c c c c t c a a c g t t a g c t t c a c c a a c a g g a a c t a t g a c c t c g a c t a c g a c t c g g t g c a g c c g t a t t t c t a c t g c g a c g a g g a g g a g a a c t t c t a c c a g c a g c a g c a g c a g a g c g a g c tg c a g c c c c c g g c g c c c a g c g a g g a ta t c tg g a a g a a a t t c g a g c t g c t g c c c a c c c c g c c c c t g t c c c c t a g c c g c c g c t c c g g g c t c t g c t c g c c c t c c t a c g t t g c g g t c a c a c c c t t c t c c c t t c g g g g a g a c a a c g a c g g c g g t g g c g g g a g c t t c t c c a c g g c c g a c c a g c t g g a g a t g g t g a c c g a g c t g c t g g g a g g a g a c a t g g t g a a c c a g a g t t t c
a t c t g c g a c c c g g a c g a c g a g a c c t t c a t c a a a a a c a t c a t c a t c c a g g a c t g t a t g t g g a g c g g c t t c t c g g c c g c c g c c a a g c t c g t c t c a g a g a a g c t g g c c t c c t a c c a g g c t g c g c g c a a a g a c a g c g g c a g c c c g a a c c c c g c c c g c g g c c a c a g c g t c t g c t c c a c c t c c a g c t t g t a c c t g c a g g a t c t g a g c g c c g c c g c c t c a g a g t g c a t c g a c c c c t c g g t g g t c t t c c c c t a c c c t c t c a a c g a c a g c a g c t c g c c c a a g t c c t g c g c c t c g c a a g a c t c c a g c g c c t t c t c t c c g t c c t c g g a t t c t c t g c t c t c c t c g a c g g a g t c c t c c c c g c a g g g c a g c c c c g a g c c c c t g g t g c t c c a t g a g g a g a c a c c g c c c a c c a c c a g c a g c g a c t c t g a g g a g g a a c a a g a a g a t g a g g a a g a a a t c g a t g t t g t t t c t g t g g a a a a g a g g c a g g c t c c t g g c a a a a g g t c a g a g t c t g g a t c a c c t t c t g c t g g a g g c c a c a g c a a a c c t c c t c a c a g c c c a c t g g t c c t c a a g a g g t g c c a c g t c t c c a c a c a t c a g c a c a a c t a c g c a g c g c c t c c c t c c a c t c g g a a g g a c t a t c c t g c t g c c a a g a g g g t c a a g t t g g a c a g t g t c a g a g t c c t g a g a c a g a tc a g c a a c a a c c g a a a a t g c a c c a g c c c c a g g t c c t c g g a c a c c g a g g a g a a t g t c a a g a g g c g a a c a c a c a a c g t c t t g g a g c g c c a g a g g a g g a a c g a g c t a a a a c g g a g c t t t t t t g c c c t g c g t g a c c a g a t c c c g g a g t t g g a a a a c a a t g a a a a g g c c c c c a a g g t a g t t a t c c t t a a a a a a g c c a c a g c a t a c a t c c t g t c c g t c c a a g c a g a g g a g c a a a a g c t c a t t t c t g a a g a g g a c t t g t t g c g g a a a c g a c g a g a a c a g t t g a a a c a c a a a c t t g a a c a g c t a c g g a a c t c t t g t g c g t a a (SEQ ID N O :70
Homo sapiens proteína de unión 4 GATA 4 (GATA4) (NM_002052) SEQ ID NO: 7 (proteína) y SEQ ID NO: 71 (ADN)
MYQSLAMAANHGPPPGAYEAGGPGAFMHGAGAASSPVYVPTPRVPSSVLGLSYLQGGGAGSASGG ASGGSSGGAASGAGPGTQQGSPGWSQAGADGAAYTPPPVSPRFSFPGTTGSLAAAAAAAAAREAA AYSSGGGAAGAGLAGREQYGRAGFAGSYSSPYPAYMADVGASWAAAAAASAGPFDSPVLHSLPGR ANPAARHPNLDMFDDFSEGRECVNCGAMSTPLWRRDGTGHYLCNACGLYHKMNGINRPLIKPQRR LSASRRVGLSCANCQTTTTTLWRRNAEGEPVCNACGLYMKLHGVPRPLAMRKEGIQTRKRKPKNL NKSKTPAAPSGSESLPPASGASSNSSNATTSSSEEMRPIKTEPGLSSHYGHSSSVSQTFSVSAMS GHGPSIHPVLSALKLSPQGYASPVSQSPQTSSKQDSWNSLVLADSHGDIITA (SEQ ID NO: 7)
a tg t a t c a g a g c t t g g c c a t g g c c g c c a a c c a c g g g c c g c c c c c c g g t g c c t a c g a g g c g g g c g g c c c c g g c g c c t t c a t g c a c g g c g c g g g c g c c g c g t c c t c g c c a g t c t a c g t g c c c a c a c c g c g g g t g c c c t c c t c c g t g c t g g g c c t g t c c t a c c t c c a g g g c g g a g g c g c g g g c t c t g c g t c c g g a g g c g c c tc g g g c g g c a g c tc c g g tg g g g c c g c g t c tg g tg c g g g g c c c g g g a c c c a g c a g g g c a g c c c g g g a t g g a g c c a g g c g g g a g c c g a c g g a g c c g c t t a c a c c c c g c c g c c g g t g t c g c c g c g c t t c t c c t t c c c g g g g a c c a c c g g g t c c c t g g c g g c c g c c g c c g c c g c t g c c g c g g c c c g g g a a g c t g c g g c c ta c a g c a g tg g c g g c g g a g c g g c g g g tg c g g g c c tg g c g g g c c g c g a g c a g ta c g g g c g c g c c g g c t t c g c g g g c t c c t a c t c c a g c c c c t a c c c g g c t t a c a t g g c c g a c g t g g g c g c g t c c t g g g
c c g c a g c c g c c g c c g c c t c c g c c g g c c c c t t c g a c a g c c c g g t c c t g c a c a g c c t g c c c g g c c g g g c c a a c c c g g c c g c c c g a c a c c c c a a t c t c g a t a t g t t t g a c g a c t t c t c a g a a g g c a g a g a g t g t g t c a a c t g t g g g g c t a t g t c c a c c c c g c t c t g g a g g c g a g a t g g g a c g g g t c a c t a t c t g t g c a a c g c c t g c g g c c t c t a c c a c a a g a t g a a c g g c a t c a a c c g g c c g c t c a t c a a g c c t c a g c g c c g g c t g t c c g c c t c c c g c c g a g t g g g c c t c t c c t g t g c c a a c t g c c a g a c c a c c a c c a c c a c g c t g t g g c g c c g c a a t g c g g a g g g c g a g c c t g t g t g c a a t g c c t g c g g c c t c t a c a t g a a g c t c c a c g g g g t c c c c a g g c c tc t t g c a a tg c g g a a a g a g g g g a tc c a a a c c a g a a a a c g g a a g c c c a a g a a c c tg a a t a a a t c t a a g a c a c c a g c a g c t c c t t c a g g c a g t g a g a g c c t t c c t c c c g c c a g c g g t g c t t c c a g c a a c tc c a g c a a c g c c a c c a c c a g c a g c a g c g a g g a g a t g c g tc c c a t c a a g a c g g a g c c tg g c c t g t c a t c t c a c t a c g g g c a c a g c a g c t c c g t g t c c c a g a c g t t c t c a g t c a g t g c g a t g t c t g g c c a t g g g c c c t c c a t c c a c c c t g t c c t c t c g g c c c t g a a g c t c t c c c c a c a a g g c t a t g c g t c t c c c g t c a g c c a g t c t c c a c a g a c c a g c t c c a a g c a g g a c t c t t g g a a c a g c c t g g t c t t g g c c g a c a g t c a c g g g g a c a t a a t c a c t g c g t a a (SEQ ID N O :71 )
Derivados de corazón y cresta neural de Homo sapiens expresados 2 (HAND2) (M_021973) SEQ ID NO: 8 (proteína) y SEQ ID NO: 72 (ADN) MSLVGGFPHHPWHHEGYPFAAAAAAAAAAAASRCSHEENPYFHGWLIGHPEMSPPDYSMALSYS PEYASGAAGLDHSHYGGVPPGAGPPGLGGPRPVKRRGTANRKERRRTQSINSAFAELRECIPNVP ADTKLSKIKTLRLATSYIAYLM D LLAKD DQ NG EAEAFKAEIKKTD VKEEKR KKELN EILKSTVSS NDKKTKGRTGWPQHVWALELKQ (SEQ ID N O :8 )
a t g a g t c t g g t a g g t g g t t t t c c c c a c c a c c c g g t g g t g c a c c a c g a g g g c t a c c c g t t t g c c g c c g c c g c c g c c g c a g c t g c c g c c g c c g c c g c c a g c c g c t g c a g c c a t g a g g a g a a c c c c t a c t t c c a t g g c t g g c t c a t c g g c c a c c c c g a g a t g t c g c c c c c c g a c t a c a g c a t g g c c c t g t c c t a c a g c c c c g a g t a t g c c a g c g g c g c c g c c g g c c t g g a c c a c t c c c a t t a c g g g g g g g t g c c g c c g g g c g c c g g g c c c c c g g g c c tg g g g g g g c c g c g c c c g g tg a a g c g c c g a g g c a c c g c c a a c c g c a a g g a g c g g c g c a g g a c t c a g a g c a t c a a c a g c g c c t t c g c c g a a c t g c g c g a g t g c a t c c c c a a c g t a c c c g c c g a c a c c a a a c t c t c c a a a a t c a a g a c c c t g c g c c t g g c c a c c a g c t a c a t c g c c t a c c t c a t g g a c c tg c tg g c c a a g g a c g a c c a g a a tg g c g a g g c g g a g g c c t t c a a g g c a g a g a tc a a g a a g a c c g a c g tg a a a g a g g a g a a g a g g a a g a a g g a g c tg a a c g a a a tc t tg a a a a g c a c a g tg a g c a g c a a c g a c a a g a a a a c c a a a g g c c g g a c g g g c tg g c c g c a g c a c g tc tg g g c c c tg g a g c tc a a g c a g t g a (SEQ ID N O :72 )
Factor potenciador de miocitos de Homo sapiens 2C (MEF2C) (M_001193350) SEQ ID NO: 9 (proteína) y SEQ ID NO: 73 (ADN)
MGRKKIQITRIMDERNRQVT FTKRKFGLMKKAYELSVLCDCEIAL11FNSTNKLFQYAST DMDKV LLKYTEYNEPHESRTNSDIVETLRKKGLNGCDSPDPDADDSVGHSPESEDKYRKINEDIDLMISR
QRLCAVPPPNFEMPVSIPVSSHNSLVYSNPVSSLGNPNLLPLAHPSLQRNSMSPGVTHRPPSAGN T GGLMGGDLTS GAGTSAGNGYGNPRNS PGLLVS PGNLNKNMQAKSP PPMNLGMNNRKPDLRVLIP PGSKNTMPSVSEDVDLLLNQRINNSQSAQSLATPWSVATPTLPGQGMGGYPSAISTTYGTEYSL SSADLSSLSGFNTASALHLGSVTGWQQQHLHNMPPSALSQLGACTSTHLSQSSNLSLPSTQSLNI KSEPVSPPRDRTTTPSRYPQHTRHEAGRSPVDSLSSCSSSYDGSDREDHRNEFHSPIGLTRPSPD ERESPSVKRMRLSEGWAT (SEQ ID N O :9)
a t g g g g a g a a a a a a g a t t c a g a t t a c g a g g a t t a t g g a t g a a c g t a a c a g a c a g g t g a c a t t t a c a a a g a g g a a a t t t g g g t t g a t g a a g a a g g c t t a t g a g c t g a g c g t g c t g t g t g a c t g t g a g a t t g c g c t g a t c a t c t t c a a c a g c a c c a a c a a g c t g t t c c a g t a t g c c a g c a c c g a c a t g g a c a a a g t g c t t c t c a a g t a c a c g g a g ta c a a c g a g c c g c a t g a g a g c c g g a c a a a c tc a g a c a tc g tg g a g a c g t t g a g a a a g a a g g g c c t t a a t g g c t g t g a c a g c c c a g a c c c c g a t g c g g a c g a t t c c g t a g g t c a c a g c c c t g a g t c t g a g g a c a a g t a c a g g a a a a t t a a c g a a g a t a t t g a t c t a a t g a t c a g c a g g c a a a g a t t g t g t g c t g t t c c a c c t c c c a a c t t c g a g a t g c c a g t c t c c a t c c c a g t g t c c a g c c a c a a c a g t t t g g t g t a c a g c a a c c c t g t c a g c t c a c t g g g a a a c c c c a a c c t a t t g c c a c t g g c t c a c c c t t c t c t g c a g a g g a a t a g t a t g t c t c c t g g t g t a a c a c a t c g a c c t c c a a g t g c a g g t a a c a c a g g t g g t c t g a t g g g t g g a g a c c t c a c g t c t g g t g c a g g c a c c a g t g c a g g g a a c g g g t a t g g c a a t c c c c g a a a c t c a c c a g g t c t g c t g g t c t c a c c t g g t a a c t t g a a c a a g a a t a t g c a a g c a a a a t c t c c t c c c c c a a t g a a t t t a g g a a t g a a t a a c c g t a a a c c a g a t c t c c g a g t t c t t a t t c c a c c a g g c a g c a a g a a t a c g a t g c c a t c a g t g t c t g a g g a t g t c g a c c t g c t t t t g a a t c a a a g g a t a a a t a a c t c c c a g t c g g c t c a g t c a t t g g c t a c c c c a g t g g t t t c c g t a g c a a c t c c t a c t t t a c c a g g a c a a g g a a t g g g a g g a t a t c c a t c a g c c a t t t c a a c a a c a t a t g g t a c c g a g t a c t c t c t g a g t a g t g c a g a c c t g t c a t c t c t g t c t g g g t t t a a c a c c g c c a g c g c t c t t c a c c t t g g t t c a g t a a c t g g c t g g c a a c a g c a a c a c c t a c a t a a c a t g c c a c c a t c t g c c c t c a g t c a g t t g g g a g c t t g c a c t a g c a c t c a t t t a t c t c a g a g t t c a a a t c t c t c c c t g c c t t c t a c t c a a a g c c t c a a c a t c a a g t c a g a a c c t g t t t c t c c t c c t a g a g a c c g t a c c a c c a c c c c t t c g a g a t a c c c a c a a c a c a c g c g c c a c g a g g c g g g g a g a t c t c c t g t t g a c a g c t t g a g c a g c t g t a g c a g t t c g t a c g a c g g g a g c g a c c g a g a g g a t c a c c g g a a c g a a t t c c a c t c c c c c a t t g g a c t c a c c a g a c c t t c g c c g g a c g a a a g g g a a a g t c c c t c a g t c a a g c g c a t g c g a c t t t c t g a a g g a t g g g c a a c a t g a (SEQ ID N O :73)
Factor de transcripción humano TBX5 (U80987) SEQ ID NO: 10 (proteína) y SEQ ID NO: 74 (ADN) MADADEGFGLAHTPLEPDAKDLPCDSKPESALGAPSKSPSSPQAAFTQQGMEGIKVFLHERELWL KFHEVGTEMIITKAGRRMFPSYKVKVTGLNPKTKYILLMDIVPADDHRYKFADNKW SVTGKAEPA MPGRLYVHPDSPATGAHWMRQLVSFQKLKLTNNHLDPFGHIILNSMHKYQPRLHIVKADENNGFG
SKNTAFCTHVFPETAFIAVTSYQNHKITQLKIENNPFAKGFRGSDDMELHRMSRMQSKEYPW PR STVRQKVASNHSPFSSESRALSTSSNLGSQYQCENGVSGPSQDLLPPPNPYPLPQEHSQIYHCTK RKGECDHPWSICFLSYLFLSLGWG (SEQ ID N O :10)
a t g g c c g a c g c a g a c g a g g g c t t t g g c c t g g c g c a c a c g c c t c t g g a g c c t g a c g c a a a a g a c c t g c c c tg c g a t t c g a a a c c c g a g a g c g c g c t c g g g g c c c c c a g c a a g t c c c c g t c g t c c c c g c a g g c c g c c t t c a c c c a g c a g g g c a t g g a g g g a a t c a a a g t g t t t c t c c a t g a a a g a g a a c t g t g g c t a a a a t t c c a c g a a g t g g g c a c g g a a a t g a t c a t a a c c a a g g c t g g a a g g c g g a t g t t t c c c a g t t a c a a a g t g a a g g t g a c g g g c c t t a a t c c c a a a a c g a a g t a c a t t c t t c t c a t g g a c a t t g t a c c t g c c g a c g a t c a c a g a t a c a a a t t c g c a g a t a a t a a a t g g t c t g t g a c g g g c a a a g c t g a g c c c g c c a t g c c t g g c c g c c t g t a c g t g c a c c c a g a c t c c c c c g c c a c c g g g g c g c a t t g g a t g a g g c a g c t c g t c t c c t t c c a g a a a c t c a a g c t c a c c a a c a a c c a c c t g g a c c c a t t t g g g c a t a t t a t t c t a a a t t c c a t g c a c a a a t a c c a g c c t a g a t t a c a c a t c g t g a a a g c g g a t g a a a a t a a t g g a t t t g g c t c a a a a a a t a c a g c g t t c t g c a c t c a c g t c t t t c c t g a g a c t g c g t t t a t a g c a g t g a c t t c c t a c c a g a a c c a c a a g a t c a c g c a a t t a a a g a t t g a g a a t a a t c c c t t t g c c a a a g g a t t t c g g g g c a g t g a t g a c a t g g a g c t g c a c a g a a t g t c a a g a a t g c a a a g t a a a g a a t a t c c c g t g g t c c c c a g g a g c a c c g t g a g g c a a a a a g t g g c c t c c a a c c a c a g t c c t t t c a g c a g c g a g t c t c g a g c t c t c t c c a c c t c a t c c a a t t t g g g g t c c c a a t a c c a g t g t g a g a a t g g t g t t t c c g g c c c c t c c c a g g a c c t c c t g c c t c c a c c c a a c c c a t a c c c a c t g c c c c a g g a g c a t a g c c a a a t t t a c c a t t g t a c c a a g a g g a a a g g t g a g t g t g a t c a c c c c t g g t c a a t t t g c t t t c t t t c t t a c c t t t t c c t t t c c t t g g g t t g g g g g t g a (SEQ ID N O :74 )
Homo sapiens neurogenina 3 (EUROG3) (NM 020999.3) SEQ ID NO: 11 (proteína) y SEQ ID NO: 75 (ADN) MTPQPSGAPTVQVTRETERSFPRASEDEVTCPTSAPPSPTRTRGNCAEAEEGGCRGAPRKLRARR GGRSRPKSELALSKQRRSRRKKANDRERNRMHNLNSALDALRGVLPTFPDDAKLTKIETLRFAHN YIWALTQTLRIADHSLYALEPPAPHCGELGSPGGSPGDWGSLYSPVSQAGSLSPAASLEERPGLL GATFSACLSPGSLAFSDFL (SEQ ID N O :11)
a t g a c g c c t c a a c c c t c g g g t g c g c c c a c t g t c c a a g t g a c c c g t g a g a c g g a g c g g t c c t t c c c c a g a g c c tc g g a a g a c g a a g tg a c c tg c c c c a c g tc c g c c c c g c c c a g c c c c a c tc g c a c a c g g g g g a a c tg c g c a g a g g c g g a a g a g g g a g g c tg c c g a g g g g c c c c g a g g a a g c tc c g g g c a c g g c g c g g g g g a c g c a g c c g g c c ta a g a g c g a g t tg g c a c tg a g c a a g c a g c g a c g g a g tc g g c g a a a g a a g g c c a a c g a c c g c g a g c g c a a t c g a a t g c a c a a c c t c a a c t c g g c a c t g g a c g c c c t g c g c g g t g t c c t g c c c a c c t t c c c a g a c g a c g c g a a g c t c a c c a a g a t c g a g a c g c t g c g c t t c g c c c a c a a c t a c a t c t g g g c g c t g a c t c a a a c g c t g c g c a t a g c g g a c c a c a g c t t g t a c g c g c t g g a g c c g c c g g c g c c g c a c t g c g g g g a g c t g g g c a g c c c a g g c g g t t c c c c c g g g g a c t g g g g g t c c c t c t a c t c c c c a g t c t c c c a g g c t g g c a g c c t g a g t c c c g c c g c g t c g c t g g a g g a g c g a c c c g g g c t g c t g g g g g c c a c c t t t t c c g c c t g c t t g a g c c c a g g c a g t c t g g c t t t c t c a g a t t t t c t g t g a (SEQ ID N O :75 )
Homo sapiens paired box 4 (PAX4) (NM 006193,2} SEQ ID NO: 12 (proteína) y SEQ ID NO: 76 (ADN) M NQ LGG LFVNGRPLPLDTRQQIVRLAVSGMRPCDISRILKVSNGCVSKILGRYYRTGVLEPKGIG GSKPRLATPPW A R IA Q LK G E C PAL FAWEIQRQLCAE GLCTQDKTPSVS SINRVLRALQEDQGLP CTRLRSPAVLAPAVLTPHSGSETPRGTHPGTGHRNRTIFSPSQAEALEKEFQRGQYPDSVARGKL ATATSLPEDTVRVWFSNRRAKWRRQEKLKWEMQLPGASQGLTVPRVAPGIISAQQSPGSVPTAAL PALEPLGPSCYQLCWATAPERCLSDTPPKACLKPCWGHLPPQPNSLDSGLLCLPCPSSHCHLASL SGSQALLWPGCPLLYGLE (SEQ ID N O :12 )
a t g a a c c a g c t t g g g g g g c t c t t t g t g a a t g g c c g g c c c c t g c c t c t g g a t a c c c g g c a g c a g a t t g t g c g g c t a g c a g t c a g t g g a a t g c g g c c c t g t g a c a t c t c a c g g a t c c t t a a g g t a t c t a a t g g c t g t g t g a g c a a g a t c c t a g g g c g t t a c t a c c g c a c a g g t g t c t t g g a g c c a a a g g g c a t t g g g g g a a g c a a g c c a c g g c t g g c t a c a c c c c c t g t g g t g g c t c g a a t t g c c c a g c t g a a g g g t g a g t g t c c a g c c c t c t t t g c c t g g g a a a t c c a a c g c c a g c t t t g t g c t g a a g g g c t t t g c a c c c a g g a c a a g a c t c c c a g t g t c t c c t c c a t c a a c c g a g t c c t g c g g g c a t t a c a g g a g g a c c a g g g a c t a c c g t g c a c a c g g c t c a g g t c a c c a g c t g t t t t g g c t c c a g c t g t c c t c a c t c c c c a t a g t g g c t c t g a g a c tc c c c g g g g t a c c c a c c c a g g g a c c g g c c a c c g g a a t c g g a c t a t c t t c t c c c c a a g c c a a g c a g a g g c a c t g g a g a a a g a g t t c c a g c g t g g g c a g t a t c c t g a t t c a g t g g c c c g t g g a a a g c t g g c t a c t g c c a c c t c t c t g c c t g a g g a c a c g g t g a g g g t c t g g t t t t c c a a c a g a a g a g c c a a a t g g c g t c g g c a a g a g a a g c t c a a g t g g g a a a t g c a g c t g c c a g g t g c t t c c c a g g g g c t g a c t g t a c c a a g g g t t g c c c c a g g a a t c a t c t c t g c a c a g c a g t c c c c t g g c a g t g t g c c c a c a g c a g c c c t g c c t g c c c t g g a a c c a c t g g g t c c c t c c t g c t a t c a g c t g t g c t g g g c a a c a g c a c c a g a a a g g t g t c t g a g t g a c a c c c c a c c t a a a g c c t g t c t c a a g c c c t g c t g g g g c c a c t t g c c c c c a c a g c c g a a t t c c c t g g a c t c a g g a c t g c t t t g c c t t c c t t g c c c t t c c t c c c a c t g t c a c c t g g c c a g t c t t a g t g g c t c t c a g g c c c t g c t c t g g c c t g g c t g c c c a c t a c t g t a t g g c t t g g a a t g a (SEQ ID N O :76 )
Homeobox 1 pancreático y duodenal de Homo sapiens (PDX1) (M 000209.3) SEQ ID NO: 13 (proteína) y SEQ ID NO: 77 (ADN) MNGEEQYYAATQLYKDPCAFQRGPAPEFSASPPACLYMGRQPPPPPPHPFPGALGALEQGSPPDI SPYEVPPLADDPAVAHLHHHLPAQLALPHPPAGPFPEGAEPGVLEEPNRVQLPFPWMKSTKAHAW KGQWAGGAYAAEPEENKRTRTAYTRAQLLELEKEFLFNKYISRPRRVELAVMLNLTERHIKIWFQ
NRRMKWKKEEDKKRGGGTAVGGGGVAEPEQDCAVTSGEELLALPPPPPPGGAVPPAAPVAAREGR LPPGLSASPQPSSVAPRRPQEPR (SEQ ID N O :13)
a t g a a c g g c g a g g a g c a g t a c t a c g c g g c c a c g c a g c t t t a c a a g g a c c c a t g c g c g t t c c a g c g a g g c c c g g c g c c g g a g t t c a g c g c c a g c c c c c c t g c g t g c c t g t a c a t g g g c c g c c a g c c c c c g c c g c c g c c g c c g c a c c c g t t c c c t g g c g c c c t g g g c g c g c t g g a g c a g g g c a g c c c c c c g g a c a t c t c c c c g t a c g a g g t g c c c c c c c t c g c c g a c g a c c c c g c g g t g g c g c a c c t t c a c c a c c a c c t c c c g g c t c a g c t c g c g c t c c c c c a c c c g c c c g c c g g g c c c t t c c c g g a g g g a g c c g a g c c g g g c g t c c t g g a g g a g c c c a a c c g c g t c c a g c t g c c t t t c c c a t g g a t g a a g t c t a c c a a a g c t c a c g c g t g g a a a g g c c a g tg g g c a g g c g g c g c c ta c g c tg c g g a g c c g g a g g a g a a c a a g c g g a c g c g c a c g g c c t a c a c g c g c g c a c a g c t g c t a g a g c t g g a g a a g g a g t t c c t a t t c a a c a a g t a c a t c t c a c g g c c g c g c c g g g t g g a g c t g g c t g t c a t g t t g a a c t t g a c c g a g a g a c a c a t c a a g a t c t g g t t c c a a a a c c g c c g c a tg a a g tg g a a a a a g g a g g a g g a c a a g a a g c g c g g c g g c g g g a c a g c tg tc g g g g g t g g c g g g g t c g c g g a g c c t g a g c a g g a c t g c g c c g t g a c c t c c g g c g a g g a g c t t c t g g c g c t g c c g c c g c c g c c g c c c c c c g g a g g t g c t g t g c c g c c c g c t g c c c c c g t t g c c g c c c g a g a g g g c c g c c t g c c g c c t g g c c t t a g c g c g t c g c c a c a g c c c t c c a g c g t c g c g c c t c g g c g g c c g c a g g a a c c a c g a tg a (SEQ ID N O :77)
Proteína SOX9 humana (1-509) (Z46629.1) SEQ ID NO: 14 (proteína) y SEQ ID NO: 78 (ADN) MNLLDPEMKMTDEQEKGLSGAPSPTMSEDSAGSPCPSGSGSDTENTRPQENTFPKGEPDLKKESE EDKFPVCIREAVSQVLKGYDWTLVPMPVRVNGSSKNKPHVKRPMNAFMVWAQAARRKLADQYPHL HNAELSKTLGKLWRLLNESEKRPFVEEAERLRVQHKKDHPDYKYQPRRRKSVKNGQAEAEEATEQ THISPNAIFKALQADSPHSSSGMSEVHSPGEHSGQSQGPPTPPTTPKTDVQPGKADLKREGRPLP EGGRQPPIDFRDVDIGELSSDVISNIETFDVNEFDQYLPPNGHPGVPATHGQVTYTGSYGISSTA ATPASAGHVWMSKQQAPPPPPQQPPQAPPAPQAPPQPQAAPPQQPAAPPQQPQAHTLTTLSSEPG QSQRTHIKTEQLSPSHYSEQQQHSPQQIAYSPFNLPHYSPSYPPITRSQYDYTDHQNSSSYYSHA AGQGTGLYSTFTYMNPAQRPMYTPIADTSGVPSIPQTHSPQHWEQPVYTQLTRP (SEQ ID N O :14)
a t g a a t c t c c t g g a c c c c t t c a t g a a g a t g a c c g a c g a g c a g g a g a a g g g c c t g t c c g g c g c c c c c a g c c c c a c c a t g t c c g a g g a c t c c g c g g g c t c g c c c t g c c c g t c g g g c t c c g g c t c g g a c a c c g a g a a c a c g c g g c c c c a g g a g a a c a c g t tc c c c a a g g g c g a g c c c g a tc tg a a g a a g g a g a g c g a g g a g g a c a a g t t c c c c g t g t g c a t c c g c g a g g c g g t c a g c c a g g t g c t c a a a g g c t a c g a c t g g a c g c tg g tg c c c a t g c c g g t g c g c g t c a a c g g c t c c a g c a a g a a c a a g c c g c a c g t c a a g c g g c c c a t g a a c g c c t t c a t g g t g t g g g c g c a g g c g g c g c g c a g g a a g c t c g c g g a c c a g t a c c c g c a c t t g c a c a a c g c c g a g c tc a g c a a g a c g c tg g g c a a g c t c tg g a g a c t t c tg a a c g a g a g c g a g a a g c g g c c c t t c g t g g a g g a g g c g g a g c g g c t g c g c g t g c a g c a c a a g a a g g a c c a c c c g g a t t a c a a g t a c c a g c c g c g g c g g a g g a a g tc g g tg a a g a a c g g g c a g g c g g a g g c a g a g g a g g c c a c g g a g c a g a c g c a c a t c t c c c c c a a c g c c a t c t t c a a g g c g c t g c a g g c c g a c t c g c c a c a c t c c t c c t c c g g c a tg a g c g a g g tg c a c tc c c c c g g c g a g c a c t c g g g g c a a tc c c a g g g c c c a c c g a c c c c a c c c a c c a c c c c c a a a a c c g a c g t g c a g c c g g g c a a g g c tg a c c t g a a g c g a g a g g g g c g c c c c t t g c c a g a g g g g g g c a g a c a g c c c c c t a t c g a c t t c c g c g a c g t g g a c a t c g g c g a g c t g a g c a g c g a c g t c a t c t c c a a c a t c g a g a c c t t c g a t g t c a a c g a g t t t g a c c a g t a c c t g c c g c c c a a c g g c c a c c c g g g g g tg c c g g c c a c g c a c g g c c a g g tc a c c ta c a c g g g c a g c ta c g g c a tc a g c a g c a c c g c g g c c a c c c c g g c g a g c g c g g g c c a c g tg tg g a tg tc c a a g c a g c a g g c g c c g c c g c c a c c c c c g c a g c a g c c c c c a c a g g c c c c g c c g g c c c c g c a g g c g c c c c c g c a g c c g c a g g c g g c g c c c c c a c a g c a g c c g g c g g c a c c c c c g c a g c a g c c a c a g g c g c a c a c g c tg a c c a c g c tg a g c a g c g a g c c g g g c c a g tc c c a g c g a a c g c a c a tc a a g a c g g a g c a g c tg a g c c c c a g c c a c ta c a g c g a g c a g c a g c a g c a c t c g c c c c a a c a g a t c g c c t a c a g c c c c t t c a a c c t c c c a c a c t a c a g c c c c t c c t a c c c g c c c a t c a c c c g c t c a c a g t a c g a c t a c a c c g a c c a c c a g a a c t c c a g c t c c t a c t a c a g c c a c g c g g c a g g c c a g g g c a c c g g c c t c t a c t c c a c c t t c a c c t a c a t g a a c c c c g c t c a g c g c c c c a t g t a c a c c c c c a t c g c c g a c a c c t c t g g g g t c c c t t c c a t c c c g c a g a c c c a c a g c c c c c a g c a c t g g g a a c a a c c c g t c t a c a c a c a g c t c a c t c g a c c t t g a (SEQ ID N O :78 )
Gen SLUG (SLUG) proteína zinc finger Homo sapiens (AF084243.1} SEQ ID NO: 15 (proteína) y SEQ ID NO: 79 (ADN)
M PRSFLVKKHFNASKKPNYSELDTHTVIISPYLYESYSM PVIPQ PEILSSG AYSPITVW TTAAPF HAQLPNGLSPLSGYSSSLGRVSPPPPSDTSSKDHSGSESPISDEEERLQSKLSDPHAIEAEKFQC NLCNKTYSTFSGLAKHKQLHCDAQSRKSFSCKYCDKEYVSLGALKMHIRTHTLPCVCKICGKAFS RPWLLQGHIRTHTGEKP FSCPHCNRAFADRSNLRAHLQTHSDVKKYQCKNCSKT FSRMS LLHKHE ESGCCVAH (SEQ ID N O :15)
a t g c c g c g c t c c t t c c t g g t c a a g a a g c a t t t c a a c g c c t c c a a a a a g c c a a a c t a c a g c g a a c t g g a c a c a c a t a c a g t g a t t a t t t c c c c g t a t c t c t a t g a g a g t t a c t c c a t g c c t g t c a t a c c a c a a c c a g a g a t c c t c a g c t c a g g a g c a t a c a g c c c c a t c a c t g t g t g g a c t a c c g c t g c t c c a t t c c a c g c c c a g c t a c c c a a t g g c c t c t c t c c t c t t t c c g g a t a c t c c t c a t c t t t g g g g c g a g t g a g t c c c c c t c c t c c a t c t g a c a c c t c c t c c a a g g a c c a c a g t g g c t c a g a a a g c c c c a t t a g t g a t g a a g a g g a a a g a c t a c a g t c c a a g c t t t c a g a c c c c c a t g c c a t t g a a g c t g a a a a g t t t c a g t g c a a t t t a t g c a a t a a g a c c t a t t c a a c t t t t t c t g g g c t g g c c a a a c a t a a g c a g c t g c a c t g c g a t g c c c a g t c t a g a a a a t c t t t c a g c t g t a a a t a c t g t g a c a a g g a a t a t g t g a g c c t g g g c g c c c t g a a g a t g c a t a t t c g g a c c c a c a c a t t a c c t t g t g t t t g c a a g a t c t g c g g c a a g g c g t t t t c c a g a c c c t g g t t g c t t c a a g g a c a c a t t a g a a c t c a c a c g g g g g a g a a g c c t t t t t c t t g c c c t c a c t g c a a c a g a g c a t t t g c a g a c a g g t c a a a t c t g a g g g c t c a t c t g c a g a c c c a t t c t g a t g t a a a g a a a t a c c a g t g c a a a a a c t g c t c c a a a a c c t t c t c c a g a a t g t c t c t c c t g c a c a a a c a t g a g g a a t c t g g c t g c t g t g t a g c a c a c t g a (SEQ ID N O :79 )
Homólogo A del oncogén de fibrosarcoma musculoaponeurótico aviar de Homo sapiens v-maf (MafA) (M_201589.3) SEQ ID NO: 16 (proteína) y SEQ ID NO: 80 (ADN)
MAAELAMGAELPSSPLAIEYVNDFDLMKFEVKKEPPEAERFCHRLPPGSLSSTPLSTPCSSVPSS PSFCAPSPGTGGGGGAGGGGGSSQAGGAPGPPSGGPGAVGGTSGKPALEDLYWMSGYQHHLNPEA LNLTPEDAVEALIGSGHHGAHHGAHHPAAAAAYEAFRGPGFAGGGGADDMGAGHHHGAHHAAHHH HAAHHHHHHHHHHGGAGHGGGAGHHVRLEERFSDDQLVSMSVRELNRQLRGFSKEEVIRLKQKRR TLKNRGYAQSCRFKRVQQRHILESEKCQLQSQVEQLKLEVGRLAKERDLYKEKYEKLAGRGGPGS AGGAGFPREPSPPQAGPGGAKGTADFFL (SEQ ID N O :16)
a t g g c c g c g g a g c t g g c g a t g g g c g c c g a g c t g c c c a g c a g c c c g c t g g c c a t c g a g t a c g t c a a c g a c t t c g a c c t g a t g a a g t t c g a g g t g a a g a a g g a g c c t c c c g a g g c c g a g c g c t t c t g c c a c c g c c t g c c g c c a g g c t c g c t g t c c t c g a c g c c g c t c a g c a c g c c c t g c t c c t c c g t g c c c t c c t c g c c c a g c t t c tg c g c g c c c a g c c c g g g c a c c g g c g g c g g c g g c g g c g c g g g g g g c g g c g g c g g c tc g tc tc a g g c c g g g g g c g c c c c c g g g c c g c c g a g c g g g g g c c c c g g c g c c g tc g g g g g c a c c tc g g g g a a g c c g g c g c t g g a g g a t c t g t a c t g g a t g a g c g g c t a c c a g c a t c a c c t c a a c c c c g a g g c g c tc a a c c t g a c g c c c g a g g a c g c g g tg g a g g c g c tc a tc g g c a g c g g c c a c c a c g g c g c g c a c c a c g g c g c g c a c c a c c c g g c g g c c g c c g c a g c c ta c g a g g c t t t c c g c g g c c c g g g c t t c g c g g g c g g c g g c g g a g c g g a c g a c a tg g g c g c c g g c c a c c a c c a c g g c g c g c a c c a c g c c g c c c a c c a tc a c c a c g c c g c c c a c c a c c a c c a c c a c c a c c a c c a c c a c c a tg g c g g c g c g g g a c a c g g c g g tg g c g c g g g c c a c c a c g t g c g c c t g g a g g a g c g c t t c t c c g a c g a c c a g c t g g t g t c c a t g t c g g t g c g c g a g c t g a a c c g g c a g c tc c g c g g c t t c a g c a a g g a g g a g g tc a t c c g g c tc a a g c a g a a g c g g c g c a c g c t c a a g a a c c g c g g c t a c g c g c a g t c c t g c c g c t t c a a g c g g g t g c a g c a g c g g c a c a t t c t g g a g a g c g a g a a g tg c c a a c t c c a g a g c c a g g t g g a g c a g c tg a a g c t g g a g g t g g g g c g c c t g g c c a a a g a g c g g g a c c tg ta c a a g g a g a a a ta c g a g a a g c tg g c g g g c c g g g g c g g c c c c g g g a g c g c g g g c g g g g c c g g t t t c c c g c g g g a g c c t t c g c c g c c g c a g g c c g g tc c c g g c g g g g c c a a g g g c a c g g c c g a c t t c t t c c t g t a g (SEQ ID N O :80)
Diferenciación neuronal de Homo sapiens 1 (NEUROD 1) (NM_002500.4) SEQ ID NO: 17 (proteína) y SEQ ID NO: 81 (ADN)
MTKSYSESGLMGEPQPQGPPSWTDECLSSQDEEHEADKKEDDLEAMNAEEDSLRNGGEEEDEDED LEEEEEEEEEDDDQKPKRRGPKKKKMTKARLERFKLRRMKANARERNRMHGLNAALDNLRKWPC YSKTQKLSKIETLRLAKNYIW ALSEILRSGKSPDLVSFVQTLCKGLSQPTTNLVAGCLQLNPRTF LPEQNQDMPPHLPTASASFPVHPYSYQSPGLPSPPYGTMDSSHVFHVKPPPHAYSAALEPFFESP LTDCTSPSFDGPLSPPLSINGNFSFKHEPSAEFEKNYAFTMHYPAATLAGAQSHGSIFSGTAAPR CEIP IDNIM SFDSHSHHERVM SAQ LNAIFHD (SEQ ID N O :17 )
a t g a c c a a a t c g t a c a g c g a g a g t g g g c t g a t g g g c g a g c c t c a g c c c c a a g g t c c t c c a a g c t g g a c a g a c g a g tg t c t c a g t t c t c a g g a c g a g g a g c a c g a g g c a g a c a a g a a g g a g g a c g a c c t c g a a g c c a tg a a c g c a g a g g a g g a c tc a c tg a g g a a c g g g g g a g a g g a g g a g g a c g a a g a tg a g g a c c tg g a a g a g g a g g a a g a a g a g g a a g a g g a g g a tg a c g a tc a a a a g c c c a a g a g a c g c g g c c c c a a a a a g a a g a a g a t g a c t a a g g c t c g c c t g g a g c g t t t t a a a t t g a g a c g c a t g a a g g c t a a c g c c c g g g a g c g g a a c c g c a t g c a c g g a c t g a a c g c g g c g c t a g a c a a c c t g c g c a a g g t g g t g c c t t g c t a t t c t a a g a c g c a g a a g c t g t c c a a a a t c g a g a c t c t g c g c t t g g c c a a g a a c t a c a t c t g g g c t c t g t c g g a g a t c c t g c g c t c a g g c a a a a g c c c a g a c c t g g t c t c c t t c g t t c a g a c g c t t t g c a a g g g c t t a t c c c a a c c c a c c a c c a a c c t g g t t g c g g g c t g c c t g c a a c t c a a t c c t c g g a c t t t t c t g c c t g a g c a g a a c c a g g a c a t g c c c c c c c a c c t g c c g a c g g c c a g c g c t t c c t t c c c t g t a c a c c c c t a c t c c t a c c a g t c g c c t g g g c t g c c c a g t c c g c c t t a c g g t a c c a t g g a c a g c t c c c a t g t c t t c c a c g t t a a g c c t c c g c c g c a c g c c t a c a g c g c a g c g c t g g a g c c c t t c t t t g a a a g c c c t c t g a c t g a t t g c a c c a g c c c t t c c t t t g a t g g a c c c c t c a g c c c g c c g c t c a g c a t c a a t g g c a a c t t c t c t t t c a a a c a c g a a c c g t c c g c c g a g t t t g a g a a a a a t t a t g c c t t t a c c a t g c a c t a t c c t g c a g c g a c a c t g g c a g g g g c c c a a a g c c a c g g a t c a a t c t t c t c a g g c a c c g c t g c c c c t c g c t g c g a g a t c c c c a t a g a c a a t a t t a t g t c c t t c g a t a g c c a t t c a c a t c a t g a g c g a g t c a t g a g t g c c c a g c t c a a t g c c a t a t t t c a t g a t t a g (SEQ ID N O :81 )
Factor 5 miogénico de Homo sapiens (MYF5) (NM_005593.2) SEQ ID NO: 18 (proteína) y SEQ ID NO: 82 (ADN) MDVMDGCQFSPSEYFYDGSCIPSPEGEFGDEFVPRVAAFGAHKAELQGSDEDEHVRAPTGHHQAG HCLMWACKACKRKST TMDRRKAATMRERRRLKKVNQAFE T LKRCT TTNPNQRLPKVEILRNAIRY IESLQELLREQVENYYSLPGQSCSEPTSPTSNCSDGMPECNSPVWSRKSSTFDSIYCPDVSNVYA TDKNSLSSLDCLSNIVDRITSSEQPGLPLQDLASLSPVASTDSQPATPGASSSRLIYHVL (SEQ ID N O :18)
a t g g a c g t g a t g g a t g g c t g c c a g t t c t c a c c t t c t g a g t a c t t c t a c g a c g g c t c c t g c a t a c c g t c c c c c g a g g g t g a a t t t g g g g a c g a g t t t g t g c c g c g a g t g g c t g c c t t c g g a g c g c a c a a a g c a g a g c t g c a g g g c tc a g a tg a g g a c g a g c a c g tg c g a g c g c c ta c c g g c c a c c a c c a g g c tg g t c a c t g c c t c a t g t g g g c c t g c a a a g c c t g c a a g a g g a a g t c c a c c a c c a t g g a t c g g c g g a a g g c a g c c a c ta t g c g c g a g c g g a g g c g c c t g a a g a a g g t c a a c c a g g c t t t c g a a a c c c t c a a g a g g t g t a c c a c g a c c a a c c c c a a c c a g a g g c t g c c c a a g g t g g a g a t c c t c a g g a a t g c c a t c c g c t a c a tc g a g a g c c t g c a g g a g t t g c t g a g a g a g c a g g t g g a g a a c t a c t a t a g c c t g c c g g g a c a g a g c t g c t c g g a g c c c a c c a g c c c c a c c t c c a a c t g c t c t g a t g g c a t g c c c g a a t g t a a c a g t c c t g t c t g g t c c a g a a a g a g c a g t a c t t t t g a c a g c a t c t a c t g t c c t g a t g t a t c a a a t g t a t a t g c c a c a g a t a a a a a c t c c t t a t c c a g c t t g g a t t g c t t a t c c a a c a t a g t g g a c c g g a t c a c c t c c t c a g a g c a a c c t g g g t t g c c t c t c c a g g a t c t g g c t t c t c t c t c t c c a g t t g c c a g c a c c g a t t c a c a g c c t g c a a c t c c a g g g g c t t c t a g t t c c a g g c t t a t c t a t c a t g t g c t a t g a (SEQ ID N O :82)
Proteína 16 que contiene el dominio PR de Homo sapiens (PRDM16) (AF294278.1) SEQ ID NO: 19 (proteína) y SEQ ID NO: 83 (ADN) MRSKARARKLAKSDGDWNNMYEPNRDLLASHSAEDEAEDSAMSPIPVGSPPPFPTSEDFTPKEG S P YE AP V Y I PE D IP IP A D FE LRE S S IPG AG L GVWAKRKME AGERL G PC VW PRAAAKE T D FGWE Q ILTDVEVSPQEGCITKISEDLGSEKFCVDANQAGAGSW LKYIRVACSCDDQNLTMCQISEQVIYY KVIKDIEPGEELLVHVKEGVYPLGTVPPGLDEEPTFRCDECDELFQSKLDLRRHKKYTCGSVGAA LYEGLAEELKPEGLGGGSGQAHECKDCERMFPNKYSLEQHMVIHTEEREYKCDQCPKAFNWKSNF IRHQMSHDSGKRFECENCVKVFTDPSNLQRHIRSQHVGARAHACPDCGKTFATSSGLKQHKHIHS TVKPFICEVCHKSYTQFSNLCRHKRMHADCRTQIKCKDCGQMFSTTSSLNKHRRFCEGKNHYTPG GIFAPGLPLTPSPMMDKAKPSPSLNHASLGFNEYFPYRPHPGSLPFSTAPPTFPALTPGFPGIFP PSLYPRPPLLPPTSLLKSPLNHTQDAKLPSPLGNPALPLVSAVSNSSQGTTAAAGPEEKFESRLE DSCVEKLKTRSSDMSDGSDFEDVNTTTGTDLDTTTGTGSDLDSDVDSDPDKDKGKGKSAEGQPKF GGGLAPPGAPNSVAEVPVFYSQHSFFPPPDEQLLTATGAAGDSIKAIASIAEKYFGPGFMGMQEK KLGSLPYHSAFPFQFLPNFPHSLYPFTDRALAHNLLVKAEPKSPRDALKVGGPSAECPFDLTTKP KDVKPILPMPKGPSAPASGEEQPLDLSIGSRARASQNGGGREPRKNHVYGERKLGAGEGLPQVCP ARMPQQPPLHYAKPSPFFMDPIYRVEKRKVTDPVGALKEKYLRPSPLLFHPQMSAIETMTEKLES FAAMKADSGSSLQPLPHHPFNFRSPPPTLSDPILRKGKERYTCRYCGKIFPRSANLTRHLRTHTG EQPYRCKYCDRSFSISSNLQRHVRNIHNKEKPFKCHLCNRCFGQQTNLDRHLKKHEHENAPVSQH PGVLTNHLGTSASSPTSESDNHALLDEKEDSYFSEIRNFIANSEMNQASTRTEKRADMQIVDGSA QCPGLASEKQEDVEEEDDDDLEEDDEDSLAGKSQDDTVSPAPEPQAAYEDEEDEEPAASLAVGFD HTRRCAEDHEGGLLALEPMPTFGKGLDLRRAAEEAFEVKDVLNSTLDSEALKHTLCRQAKNQAYA MMLSLSEDTPLHTPSQGSLDAWLKVTGATSESGAFHPINHL (SEQ ID N O :19)
a t g c g a t c c a a g g c g a g g g c g a g g a a g c t a g c c a a a a g t g a c g g t g a c g t t g t a a a t a a t a t g t a tg a g c c c a a c c g g g a c c tg c tg g c c a g c c a c a g c g c g g a g g a c g a g g c c g a g g a c a g tg c c a tg t c g c c c a t c c c c g t g g g g t c a c c g c c c c c c t t c c c c a c c a g c g a g g a c t t c a c c c c c a a g g a g g g c t c g c c g t a c g a g g c c c c t g t c t a c a t t c c t g a a g a c a t t c c g a t c c c a g c a g a c t t c g a g c t c c g a g a g t c c t c c a tc c c a g g g g c tg g c c t g g g g g t c tg g g c c a a g a g g a a g a tg g a a g c c g g g g a g a g g c t g g g c c c c tg c g t g g tg g tg c c c c g g g c g g c g g c a a a g g a g a c a g a c t t c g g a tg g g a g c a a a t a c t g a c g g a c g t g g a a g t g t c g c c c c a g g a a g g c t g c a t c a c a a a g a t c t c c g a a g a c c t g g g c a g t g a g a a g t t c t g c g t g g a t g c a a a t c a g g c g g g g g c t g g c a g c t g g c t c a a g t a c a t c c g t g t g g c g t g c t c c t g c g a t g a c c a g a a c c t c a c c a t g t g t c a g a t c a g t g a g c a g g t a a t t t a c t a t a a a g t c a t t a a g g a c a t t g a g c c a g g t g a g g a g c t g c t g g t g c a c g t g a a g g a a g g c g t c t a c c c c c tg g g c a c a g t g c c g c c c g g c c t g g a c g a g g a g c c c a c g t t c c g c t g t g a c g a g t g t g a c g a a c t c t t c c a g t c c a a g c t g g a c c t g c g g c g c c a t a a g a a g t a c a c g t g t g g c t c a g t g g g g g c t g c g c tc ta c g a g g g c c tg g c tg a g g a g c t c a a g c c c g a g g g c c t t g g c g g t g g c a g c g g c c a a g c c c a c g a g t g c a a g g a c t g c g a g c g g a t g t t c c c c a a c a a g t a c a g c c t g g a g c a g c a c a t g g t c a t c c a c a c g g a g g a g c g c g a g t a c a a a t g c g a c c a g t g t c c c a a g g c c t t c a a c t g g a a g t c c a a c t t c a t c c g c c a c c a g a t g t c c c a c g a c a g c g g c a a a c g c t t c g a a t g t g a a a a c t g c g t g a a g g t g t t c a c g g a c c c c a g c a a c c t t c a g c g g c a c a t c c g c t c g c a g c a c g t g g g c g c t c g g g c c c a c g c c t g c c c c g a c t g c g g g a a g a c c t t c g c c a c g t c c t c c g g c c t c a a g c a g c a c a a g c a t a t c c a c a g c a c g g t g a a g c c t t t c a t a t g t g a g g t c t g c c a c a a g t c c t a c a c g c a g t t c t c c a a c c t g t g c c g g c a c a a g c g g a t g c a c g c c g a c t g c c g c a c g c a g a t c a a g t g c a a g g a c t g t g g c c a g a t g t t c a g c a c t a c c t c c t c c c t c a a c a a g c a c c g g c g c t t c t g c g a g g g c a a g a a c c a t t a c a c g c c g g g c g g c a t c t t t g c c c c g g g c c t g c c c t t g a c c c c c a g c c c c a t g a t g g a c a a g g c a a a a c c c t c c c c c a g c c t c a a t c a c g c c a g c c t g g g c t t c a a c g a g t a c t t t c c c t a c a g g c c g c a c c c g g g g a g c c t g c c c t t c t c c a c g g c g c c t c c c a c g t t c c c c g c a c t c a c c c c c g g c t t c c c g g g c a t c t t c c c t c c a t c c t t g t a c c c c c g g c c g c c t c t g c t a c c t c c c a c a t c g c t g c t c a a g a g c c c c c t g a a c c a c a c c c a g g a c g c c a a g c t c c c c a g t c c c c t g g g g a a c c c a g c c c t g c c c c t g g t c t c c g c c g t c a g c a a c a g c a g c c a g g g c a c g a c g g c a g c tg c g g g g c c c g a g g a g a a g t tc g a g a g c c g c c tg g a g g a c t c c t g t g t g g a g a a g c t g a a g a c c a g g a g c a g c g a c a t g t c g g a c g g c a g t g a c t t t g a g g a c g tc a a c a c c a c c a c g g g g a c c g a c c tg g a c a c g a c c a c g g g g a c g g g c tc g g a c c tg g a c a g c g a c g tg g a c a g c g a c c c tg a c a a g g a c a a g g g c a a g g g c a a g t c c g c c g a g g g c c a g c c c a a g t t t g g g g g c g g c t t g g c g c c c c c g g g g g c c c c g a a c a g c g t g g c c g a g g t g c c t g t c t t c t a t t c c c a g c a c t c a t t c t t c c c g c c a c c c g a c g a g c a g c t g c t g a c t g c a a c g g g c g c c g c c g g g g a c t c c a t c a a g g c c a t c g c a t c c a t t g c c g a g a a g t a c t t t g g c c c c g g c t t c a t g g g g a t g c a g g a g a a g a a g c t g g g c t c g c t c c c c t a c c a c t c g g c g t t c c c c t t c c a g t t c c t g c c c a a c t t c c c c c a c t c c c t t t a c c c c t t c a c g g a c c g a g c c c t c g c c c a c a a c t t g c t g g t c a a g g c c g a g c c a a a g t c a c c c c g g g a c g c c c t c a a g g t g g g c g g c c c c a g t g c c g a g t g c c c c t t t g a t c t c a c c a c c a a g c c c a a a g a c g t g a a g c c c a tc c t g c c c a tg c c c a a g g g c c c c t c g g c c c c c g c a tc c g g c g a g g a g c a g c c g c tg g a c c tg a g c a tc g g c a g c c g g g c c c g tg c c a g c c a a a a c g g c g g c g g g c g g g a g c c c c g c a a g a a c c a c g t c ta t g g g g a a c g c a a g c tg g g c g c c g g c g a g g g g c tg c c c c a g g tg tg c c c g g c g c g g a t g c c c c a g c a g c c c c c g c t c c a c t a c g c c a a g c c c t c g c c c t t c t t c a t g g a c c c c a t c ta c a g g g ta g a a a a g c g g a a g g t c a c a g a c c c c g tg g g a g c c c tg a a g g a g a a g ta c c tg c g g c c g t c c c c g c t g c t c t t c c a c c c c c a g a t g t c a g c c a t a g a g a c c a t g a c a g a g a a g c t g g a g a g c t t t g c a g c c a t g a a g g c g g a c t c g g g c a g c t c c c t g c a g c c c c t c c c c c a c c a c c c c t t c a a c t t c c g g tc c c c a c c c c c a a c g c t c t c c g a c c c c a t c c t c a g g a a g g g c a a g g a g c g a t a c a c g t g c a g g t a c t g t g g g a a g a t c t t c c c c a g a t c a g c c a a t c t c a c c a g a c a c c t g a g g a c g c a c a c t g g g g a g c a g c c g t a c a g g t g t a a g t a c t g c g a c c g c t c c t t c a g c a t c t c t t c g a a c c t c c a g c g g c a c g t c c g g a a c a t c c a c a a c a a g g a g a a g c c t t t c a a g t g c c a c c t g t g c a a c c g c t g c t t c g g g c a g c a g a c c a a c c tg g a c c g g c a c c tc a a g a a g c a c g a g c a c g a g a a c g c a c c a g tg a g c c a g c a c c c c g g g g t c c t c a c g a a c c a c c t g g g g a c c a g c g c g t c c t c t c c c a c c t c a g a g t c g g a c a a c c a c g c a c t t t t a g a c g a g a a a g a a g a c t c t t a t t t c t c g g a a a t c a g a a a c t t t a t t g c c a a t a g t g a g a tg a a c c a a g c a tc a a c g c g a a c a g a g a a a c g g g c g g a c a tg c a g a tc g tg g a c g g c a g tg c c c a g tg tc c a g g c c ta g c c a g tg a g a a g c a g g a g g a c g tg g a g g a g g a g g a c g a c g a tg a c c t g g a g g a g g a c g a t g a g g a c a g c c t g g c c g g g a a g tc g c a g g a tg a c a c c g t g t c c c c c g c a c c c g a g c c c c a g g c c g c c t a c g a g g a t g a g g a g g a t g a g g a g c c a g c c g c c t c c c t g g c c g t g g g c t t t g a c c a c a c c c g a a g g t g t g c t g a g g a c c a c g a a g g c g g t c t g t t a g c t t t g g a g c c g a t g c c g a c t t t t g g g a a g g g g c t g g a c c t c c g c a g a g c a g c t g a g g a a g c a t t t g a a g t t a a a g a t g t g c t t a a t t c c a c c t t a g a t t c t g a g g c t t t a a a a c a t a c a c t g t g c a g g c a g g c t a a g a a c c a g g c a t a t g c a a t g a t g c t g t c c c t t t c c g a a g a c a c t c c t c t c c a c a c c c c c t c c c a g g g t t c t c t g g a c g c t t g g t t g a a g g t c a c t g g a g c c a c g t c g g a g t c t g g a g c a t t t c a c c c c a t c a a c c a c c t c t g a (SEQ ID N O : 83)
Homo sapiens paired box 6 (PAX6 ) (M_001604.5) SEQ ID NO: 20 (proteína) y SEQ ID NO: 84 (ADN) MQNSHSGVNQLGGVFVNGRPLPDSTRQKIVELAHSGARPCDISRILQTHADAKVQVLDNQNVSNG C VSKILG RYYETG SIRPRAIG G SKPRVATPEW SKIAQ YKRECPSIFAW EIRDRLLSEG VCTNDN IP SVS SINRVLRNLASEKQQMGADGMYDKLRMLNGQTGSWGTRPGWYPGTSVPGQPTQDGCQQQE GGGENTNSISSNGEDSDEAQMRLQLKRKLQRNRTSFTQEQIEALEKEFERTHYPDVFARERLAAK IDLPEARIQVW FSNRRA-KW RREEKLRNQRRQASNTPSHIPISSSFSTSVYQPIPQPTTPVSSFTS GSMLGRTDTALTNTYSALPPMPSFTMANNLPMQPPVPSQTSSYSCMLPTSPSVNGRSYDTYTPPH MQTHMNSQPMGTSGTTSTGLISPGVSVPVQVPGSEPDMSQYWPRLQ (SEQ ID N O :20 )
a t g c a g a a c a g t c a c a g c g g a g t g a a t c a g c t c g g t g g t g t c t t t g t c a a c g g g c g g c c a c t g c c g g a c t c c a c c c g g c a g a a g a t t g t a g a g c t a g c t c a c a g c g g g g c c c g g c c g t g c g a c a t t t c c c g a a t t c t g c a g a c c c a t g c a g a t g c a a a a g t c c a a g t g c t g g a c a a t c a a a a c g t g t c c a a c g g a t g t g t g a g t a a a a t t c t g g g c a g g t a t t a c g a g a c t g g c t c c a t c a g a c c c a g g g c a a t c g g t g g t a g t a a a c c g a g a g t a g c g a c t c c a g a a g t t g t a a g c a a a a t a g c c c a g t a t a a g c g g g a g t g c c c g t c c a t c t t t g c t t g g g a a a t c c g a g a c a g a t t a c t g t c c g a g g g g g t c t g t a c c a a c g a t a a c a t a c c a a g c g t g t c a t c a a t a a a c a g a g t t c t t c g c a a c c t g g c t a g c g a a a a g c a a c a g a t g g g c g c a g a c g g c a t g t a t g a t a a a c t a a g g a t g t t g a a c g g g c a g a c c g g a a g c t g g g g c a c c c g c c c t g g t t g g t a t c c g g g g a c t t c g g t g c c a g g g c a a c c t a c g c a a g a t g g c t g c c a g c a a c a g g a a g g a g g g g g a g a g a a t a c c a a c t c c a t c a g t t c c a a c g g a g a a g a t t c a g a t g a g g c t c a a a t g c g a c t t c a g c t g a a g c g g a a g c t g c a a a g a a a t a g a a c a t c c t t t a c c c a a g a g c a a a t t g a g g c c c t g g a g a a a g a g t t t g a g a g a a c c c a t t a t c c a g a t g t g t t t g c c c g a g a a a g a c t a g c a g c c a a a a t a g a t c t a c c t g a a g c a a g a a t a c a g g t a t g g t t t t c t a a t c g a a g g g c c a a a t g g a g a a g a g a a g a a a a a c t g a g g a a t c a g a g a a g a c a g g c c a g c a a c a c a c c t a g t c a t a t t c c t a t c a g c a g t a g t t t c a g c a c c a g t g t c t a c c a a c c a a t t c c a c a a c c c a c c a c a c c g g t t t c c t c c t t c a c a t c t g g c t c c a t g t t g g g c c g a a c a g a c a c a g c c c t c a c a a a c a c c t a c a g c g c t c t g c c g c c t a t g c c c a g c t t c a c e a t g g c a a a t a a c c t g c c t a t g c a a c c c c c a g t c c c c a g c c a g a c c t c c t c a t a c t c c t g c a t g c t g c c c a c c a g c c c t t c g g t g a a t g g g c g g a g t t a t g a t a c c t a c a c c c c c c c a c a t a t g c a g a c a c a c a t g a a c a g t c a g c c a a t g g g c a c c t c g g g c a c c a c t t c a a c a g g a c t c a t t t c c c c t g g t g t g t c a g t t c c a g t t c a a g t t c c c g g a a g t g a a c c t g a t a t g t c t c a a t a c t g g c c a a g a t t a c a g t a a (SEQ ID N O :84 )
SEQ ID NO: 21: Homo sapiens HNF1 homeobox A (HNF1A) (NM_000545.5) SEQ ID NO: 21 (proteína) y SEQ ID NO: 85 (ADN) MVSKLSQLQTELLAALLESGLSKEALIQALGEPGPYLLAGEGPLDKGESCGGGRGELAELPNGLG ETRGSEDETDDDGEDFTPPILKELENLSPEEAAHQKAWETLLQEDPWRVAKMVKSYLQQHNIPQ REWDTTGLNQSHLSQHLNKGTPMKTQKRAALYTWYVRKQREVAQQFTHAGQGGLIEEPTGDELP TKKGRRNRFKWGPASQQILFQAYERQKNPSKEERETLVEECNRAECIQRGVSPSQAQGLGSNLVT EVRVYNWFANRRKEEAFRHKLAMDTYSGPPPGPGPGPALPAHSSPGLPPPALSPSKVHGVRYGQP ATSETAEVPSSSGGPLVTVSTPLHQVSPTGLEPSHSLLSTEAKLVSAAGGPLPPVSTLTALHSLE QTSPGLNQQPQNLIMASLPGVMTIGPGEPASLGPTFTNTGASTLVIGLASTQAQSVPVINSMGSS LTTLQPVQFSQPLHPSYQQPLMPPVQSHVTQSPFMATMAQLQSPHALYSHKPEVAQYTHTGLLPQ TMLITDTTNLSALASLTPTKQVFTSDTEASSESGLHTPASQATTLHVPSQDPAGIQHLQPAHRLS ASPTVSSSSLVLYQSSDSSNGQSHLLPSNHSVIETFISTQMASSSQ (SEQ ID N O :21 ) a t g g t t t c t a a a c t g a g c c a g c t g c a g a c g g a g c t c c t g g c g g c c c t g c t c g a g t c a g g g c t g a g c a a a g a g g c a c t g a t c c a g g c a c t g g g t g a g c c g g g g c c c t a c c t c c t g g c t g g a g a a g g c c c c c t g g a c a a g g g g g a g t c c t g c g g c g g c g g t c g a g g g g a g c t g g c t g a g c t g c c c a a t g g g c t g g g g g a g a c t c g g g g c tc c g a g g a c g a g a c g g a c g a c g a tg g g g a a g a c t t c a c g c c a c c c a tc c t c a a a g a g c t g g a g a a c c t c a g c c c t g a g g a g g c g g c c c a c c a g a a a g c c g t g g t g g a g a c c c t t c t g c a g g a g g a c c c g t g g c g t g t g g c g a a g a t g g t c a a g t c c t a c c t g c a g c a g c a c a a c a t c c c a c a g c g g g a g g t g g t c g a t a c c a c t g g c c t c a a c c a g t c c c a c c t g t c c c a a c a c c t c a a c a a g g g c a c t c c c a t g a a g a c g c a g a a g c g g g c c g c c c t g t a c a c c t g g t a c g t c c g c a a g c a g c g a g a g g t g g c g c a g c a g t t c a c c c a t g c a g g g c a g g g a g g g c t g a t t g a a g a g c c c a c a g g t g a t g a g c t a c c a a c c a a g a a g g g g c g g a g g a a c c g t t t c a a g t g g g g c c c a g c a t c c c a g c a g a t c c t g t t c c a g g c c ta tg a g a g g c a g a a g a a c c c ta g c a a g g a g g a g c g a g a g a c g c ta g t g g a g g a g tg c a a t a g g g c g g a a t g c a t c c a g a g a g g g g t g t c c c c a t c a c a g g c a c a g g g g c t g g g c t c c a a c c t c g t c a c g g a g g t g c g t g t c t a c a a c t g g t t t g c c a a c c g g c g c a a a g a a g a a g c c t t c c g g c a c a a g c t g g c c a t g g a c a c g t a c a g c g g g c c c c c c c c a g g g c c a g g c c c g g g a c c t g c g c t g c c c g c t c a c a g c t c c c c t g g c c t g c c t c c a c c t g c c c t c t c c c c c a g t a a g g t c c a c g g t g t g c g c t a t g g a c a g c c t g c g a c c a g t g a g a c t g c a g a a g t a c c c t c a a g c a g c g g c g g t c c c t t a g t g a c a g t g t c t a c a c c c c t c c a c c a a g t g t c c c c c a c g g g c c t g g a g c c c a g c c a c a g c c t g c t g a g t a c a g a a g c c a a g c t g g t c t c a g c a g c t g g g g g c c c c c t c c c c c c t g t c a g c a c c c t g a c a g c a c t g c a c a g c t t g g a g c a g a c a t c c c c a g g c c t c a a c c a g c a g c c c c a g a a c c t c a t c a t g g c c t c a c t t c c t g g g g t c a t g a c c a t c g g g c c t g g t g a g c c t g c c t c c c t g g g t c c t a c g t t c a c c a a c a c a g g t g c c t c c a c c c t g g t c a t c g g c c t g g c c t c c a c g c a g g c a c a g a g t g t g c c g g t c a t c a a c a g c a t g g g c a g c a g c c t g a c c a c c c t g c a g c c c g t c c a g t t c t c c c a g c c g c t g c a c c c c t c c t a c c a g c a g c c g c t c a t g c c a c c t g t g c a g a g c c a t g t g a c c c a g a g c c c c t t c a t g g c c a c c a t g g c t c a g c t g c a g a g c c c c c a c g c c c t c t a c a g c c a c a a g c c c g a g g t g g c c c a g t a c a c c c a c a c g g g c c t g c t c c c g c a g a c t a t g c t c a t c a c c g a c a c c a c c a a c c t g a g c g c c c t g g c c a g c c t c a c g c c c a c c a a g c a g g t c t t c a c c t c a g a c a c t g a g g c c t c c a g t g a g t c c g g g c t t c a c a c g c c g g c a t c t c a g g c c a c c a c c c t c c a c g t c c c c a g c c a g g a c c c t g c c g g c a t c c a g c a c c t g c a g c c g g c c c a c c g g c t c a g c g c c a g c c c c a c a g t g t c c t c c a g c a g c c t g g t g c t g t a c c a g a g c t c a g a c t c c a g c a a t g g c c a g a g c c a c c t g c t g c c a t c c a a c c a c a g c g t c a t c g a g a c c t t c a t c t c c a c c c a g a t g g c c t c t t c c t c c c a g t a a (SEQ ID N O :85 )
Homo sapiens forkhead box A3 (FOXA3) (M_004497.2) SEQ ID NO: 22 (proteína) y SEQ ID NO: 86 (DNA) MLGSVKMEAHDLAEWSYYPEAGEVYSPVTPVPTMAPLNSYMTLNPLSSPYPPGGLPASPLPSGPL APPAPAAPLGPTFPGLGVSGGSSSSGYGAPGPGLVHGKEMPKGYRRPLAHAKPPYSYISLITMAI QQAPGKMLTLSEIYQWIMDLFPYYRENQQRWQNSIRHSLSENDCFVKVARSPDKPGKGSYWALHP SSGNMFENGCYLRRQKRFKLEEKVKKGGSGAATTTRNGTGSAASTTTPAATVTSPPQPPPPAPEP EAQGGEDVGALDCGSPASSTPYFTGLELPGELKLDAPYNFNHPFSINNLMSEQTPAPPKLDVGFG GYGAEGGEPGVYYQGLYSRSLLNAS (SEQ ID N O :22 )
a t g c t g g g c t c a g t g a a g a t g g a g g c c c a t g a c c t g g c c g a g t g g a g c t a c t a c c c g g a g g c g g g c g a g g t c t a c t c g c c g g t g a c c c c a g t g c c c a c c a t g g c c c c c c t c a a c t c c t a c a t g a c c c t g a a t c c t c t a a g c t c t c c c t a t c c c c c t g g g g g g c t c c c t g c c t c c c c a c t g c c c t c a g g a c c c c t g g c a c c c c c a g c a c c t g c a g c c c c c c t g g g g c c c a c t t t c c c a g g c c t g g g t g t c a g c g g t g g c a g c a g c a g c t c c g g g t a c g g g g c c c c g g g t c c t g g g c t g g t g c a c g g g a a g g a g a t g c c g a a g g g g t a t c g g c g g c c c c t g g c a c a c g c c a a g c c a c c g t a t t c c t a t a t c t c a c t c a t c a c c a t g g c c a t c c a g c a g g c g c c g g g c a a g a t g c t g a c c t t g a g t g a a a t c t a c c a g t g g a t c a t g g a c c t c t t c c c t t a c t a c c g g g a g a a t c a g c a g c g c t g g c a g a a c t c c a t t c g c c a c t c g c t g t c t t t c a a c g a c t g c t t c g t c a a g g t g g c g c g t t c c c c a g a c a a g c c t g g c a a g g g c t c c t a c t g g g c c c t a c a c c c c a g c t c a g g g a a c a t g t t t g a g a a t g g c t g c t a c c t g c g c c g c c a g a a a c g c t t c a a g c t g g a g g a g a a g g t g a a a a a a g g g g g c a g c g g g g c tg c c a c c a c c a c c a g g a a c g g g a c a g g g t c tg c t g c c t c g a c c a c c a c c c c c g c g g c c a c a g t c a c c t c c c c g c c c c a g c c c c c g c c t c c a g c c c c t g a g c c t g a g g c c c a g g g c g g g g a a g a t g t g g g g g c t c t g g a c t g t g g c t c a c c c g c t t c c t c c a c a c c c t a t t t c a c t g g c c t g g a g c t c c c a g g g g a g c t g a a g c t g g a c g c g c c c t a c a a c t t c a a c c a c c c t t t c t c c a t c a a c a a c c t a a t g t c a g a a c a g a c a c c a g c a c c t c c c a a a c t g g a c g t g g g g t t t g g g g g c t a c g g g g c t g a a g g t g g g g a g c c t g g a g t c t a c t a c c a g g g c c t c t a t t c c c g c t c t t t g c t t a a t g c a t c c t a g (SEQ ID N O :8 6 )
Homo sapiens forkhead box Al (FOXA1) (M_004496.3) SEQ ID NO: 23 (proteína) y SEQ ID NO: 87 (DNA) MLGTVKMEGHETSDWNSYYADTQEAYSSVPVSNMNSGLGSMNSMNTYMTMNTMTTSGNMTPASEN MSYANPGLGAGLSPGAVAGMPGGSAGAMNSMTAAGVTAMGTALSPSGMGAMGAQQAASMNGLGPY AAAMNPCMSPMAYAPSNLGRSRAGGGGDAKTFKRSYPHAKPPYSYISLITMAIQQAPSKMLTLSE IYQWIMDLFPYYRQNQQRWQNSIRHSLSFNDCFVKVARSPDKPGKGSYWTLHPDSGNMFENGCYL RRQKRFKCEKQPGAGGGGGSGSGGSGAKGGPESRKDPSGASNPSADSPLHRGVHGKTGQLEGAPA PGPAASPQTLDHSGATATGGASELKTPASSTAPPISSGPGALASVPASHPAHGLAPHESQLHLKG DPHYSFNHPFSINNLMSSSEQQHKLDFKAYEQALQYSPYGSTLPASLPLGSASVTTRSPIEPSAL EPAYYQGVYSRPVLNTS (SEQ ID N O :23 )
a t g c t g g g c t c a g t g a a g a t g g a g g c c c a t g a c c t g g c c g a g t g g a g c t a c t a c c c g g a g g c g g g c g a g g t c t a c t c g c c g g t g a c c c c a g t g c c c a c c a t g g c c c c c c t c a a c t c c t a c a t g a c c c t g a a t c c t c t a a g c t c t c c c t a t c c c c c t g g g g g g c t c c c t g c c t c c c c a c t g c c c t c a g g a c c c c t g g c a c c c c c a g c a c c t g c a g c c c c c c t g g g g c c c a c t t t c c c a g g c c t g g g t g t c a g c g g t g g c a g c a g c a g c tc c g g g ta c g g g g c c c c g g g tc c tg g g c tg g tg c a c g g g a a g g a g a tg c c g a a g g g g t a t c g g c g g c c c c t g g c a c a c g c c a a g c c a c c g t a t t c c t a t a t c t c a c t c a t c a c c a t g g c c a t c c a g c a g g c g c c g g g c a a g a t g c t g a c c t t g a g t g a a a t c t a c c a g t g g a t c a t g g a c c t c t t c c c t t a c t a c c g g g a g a a t c a g c a g c g c t g g c a g a a c t c c a t t c g c c a c t c g c t g t c t t t c a a c g a c t g c t t c g t c a a g g t g g c g c g t t c c c c a g a c a a g c c t g g c a a g g g c t c c t a c t g g g c c c t a c a c c c c a g c t c a g g g a a c a t g t t t g a g a a t g g c t g c t a c c t g c g c c g c c a g a a a c g c t t c a a g c t g g a g g a g a a g g tg a a a a a a g g g g g c a g c g g g g c tg c c a c c a c c a c c a g g a a c g g g a c a g g g tc tg c tg c c t c g a c c a c c a c c c c c g c g g c c a c a g t c a c c t c c c c g c c c c a g c c c c c g c c t c c a g c c c c t g a g c c t g a g g c c c a g g g c g g g g a a g a t g t g g g g g c t c t g g a c t g t g g c t c a c c c g c t t c c t c c a c a c c c t a t t t c a c t g g c c t g g a g c t c c c a g g g g a g c t g a a g c t g g a c g c g c c c t a c a a c t t c a a c c a c c c t t t c t c c a t c a a c a a c c t a a t g t c a g a a c a g a c a c c a g c a c c t c c c a a a c t g g a c g t g g g g t t t g g g g g c t a c g g g g c t g a a g g t g g g g a g c c t g g a g t c t a c t a c c a g g g c c t c t a t t c c c g c t c t t t g c t t a a t g c a t c c t a g ( S E Q ID N O :87)
Homo sapiens forkhead box A2 (FOXA2) (NM_021784.4) SEQ ID NO: 24 (proteína) y SEQ ID O: 88 (DNA) MHSASSMLGAVKMEGHEPSDWSSYYAEPEGYSSVSNMNAGLGMNGMNTYMSMSAAAMGSGSGNMS AGSMNMSS YVGAGMS PS LAGMS PGAGAMAGMGGSAGAAGVAGMGPHLSPSLSPLGGQAAGAMGGL APYANMNSMSPMYGQAGLSRARDPKTYRRSYTHAKPPYSYISLITMAIQQSPNKMLTLSEIYQWI MDLFPFYRQNQQRWQNSIRHSLSFNDCFLKVPRSPDKPGKGSFWTLHPDSGNMFENGCYLRRQKR FKCEKQLALKEAAGAAG S GKKAAAGAQASQAQLGEAAGPASE TPAGTE SPHSSAS PCQEHKRGGL GELKGTPAAALSPPEPAPSPGQQQQAAAHLLGPPHHPGLPPEAHLKPEHHYAFNHPFSINNLMSS EQQHHHSHHHHQPHKMDLKAYEQVMHYPGYGSPMPGSLAMGPVTNKTGLDASPLAADTSYYQGVY SRPIMNSS (SEQ ID N O :24 )
a t g c a c t c g g c t t c c a g t a t g c t g g g a g c g g t g a a g a t g g a a g g g c a c g a g c c g t c c g a c t g g a g c a g c t a c t a t g c a g a g c c c g a g g g c t a c t c c t c c g t g a g c a a c a t g a a c g c c g g c c t g g g g a t g a a c g g c a tg a a c a c g ta c a t g a g c a tg t c g g c g g c c g c c a tg g g c a g c g g c tc g g g c a a c a tg a g c g c g g g c t c c a t g a a c a t g t c g t c g t a c g t g g g c g c t g g c a t g a g c c c g t c c c t g g c g g g g a t g t c c c c c g g c g c g g g c g c c a tg g c g g g c a tg g g c g g c tc g g c c g g g g c g g c c g g c g tg g c g g g c a tg g g g c c g c a c t t g a g t c c c a g c c tg a g c c c g c tc g g g g g g c a g g c g g c c g g g g c c a tg g g c g g c c tg g c c c c c ta c g c c a a c a t g a a c t c c a t g a g c c c c a t g t a c g g g c a g g c g g g c c t g a g c c g c g c c c g c g a c c c c a a g a c c t a c a g g c g c a g c t a c a c g c a c g c a a a g c c g c c c t a c t c g t a c a t c t c g c t c a t c a c c a t g g c c a t c c a g c a g a g c c c c a a c a a g a t g c t g a c g c t g a g c g a g a t c t a c c a g t g g a t c a t g g a c c t c t t c c c c t t c t a c c g g c a g a a c c a g c a g c g c t g g c a g a a c t c c a t c c g c c a c t c g c t c t c c t t c a a c g a c t g t t t c c t g a a g g t g c c c c g c t c g c c c g a c a a g c c c g g c a a g g g c t c c t t c t g g a c c c t g c a c c c t g a c t c g g g c a a c a t g t t c g a g a a c g g c t g c t a c c t g c g c c g c c a g a a g c g c t t c a a g tg c g a g a a g c a g c tg g c g c tg a a g g a g g c c g c a g g c g c c g c c g g c a g c g g c a a g a a g g c g g c c g c c g g a g c c c a g g c c t c a c a g g c tc a a c tc g g g g a g g c c g c c g g g c c g g c c tc c g a g a c tc c g g c g g g c a c c g a g tc g c c t c a c t c g a g c g c c tc c c c g tg c c a g g a g c a c a a g c g a g g g g g c c tg g g a g a g c t g a a g g g g a c g c c g g c tg c g g c g c tg a g c c c c c c a g a g c c g g c g c c c tc tc c c g g g c a g c a g c a g c a g g c c g c g g c c c a c c tg c t g g g c c c g c c c c a c c a c c c g g g c c t g c c g c c tg a g g c c c a c c t g a a g c c g g a a c a c c a c t a c g c c t t c a a c c a c c c g t t c t c c a t c a a c a a c c t c a t g t c c t c g g a g c a g c a g c a c c a c c a c a g c c a c c a c c a c c a c c a a c c c c a c a a a a tg g a c c tc a a g g c c ta c g a a c a g g t g a t g c a c t a c c c c g g c t a c g g t t c c c c c a t g c c t g g c a g c t t g g c c a t g g g c c c g g t c a c g a a c a a a a c g g g c c t g g a c g c c t c g c c c c t g g c c g c a g a t a c c t c c t a c t a c c a g g g g g t g t a c t c c c g g c c c a t t a t g a a c t c c t c t t a a (SEQ ID N O :8 8 )
SEQ ID NO: 25: Homo sapiens CCAAT / proteína de unión potenciadora (C/EBP), alfa (CEBPA) (NM_001287435.1) SEQ ID NO: 25 (proteína) y SEQ ID NO: 89 (ADN)
M SSHLQSPPHAPSSAAFGFPRGAGPAQPPAPPAAPEPLGGICEHETSIDISAYIDPAAFNDEFLA DLFQHSRQQEKAKAAVGPTGGGGGGDFDYPGAPAGPGGAVMPGGAHGPPPGYGCAAAGYLDGRLE PLYERVGAPALRPLVIKQEPREEDEAKQLALAGLFPYQPPPPPPPSHPHPHPPPAHLAAPHLQFQ IAHCGQTTMHLQPGHPTPPPTPVPSPHPAPALGAAGLPGPGSALKGLGAAHPDLRASGGSGAGKA KKSVDKNSNEYRVRRERNNIAVRKSRDKAKQRNVETQQKVLELTSDNDRLRKRVEQLSRELDTLR GIFRQLPESSLVKAMGNCA (SEQ ID N O :25 )
a t g a g c a g c c a c c t g c a g a g c c c c c c g c a c g c g c c c a g c a g c g c c g c c t t c g g c t t t c c c c g g g g c g c g g g c c c c g c g c a g c c t c c c g c c c c a c c tg c c g c c c c g g a g c c g c tg g g c g g c a tc t g c g a g c a c g a g a c g t c c a t c g a c a t c a g c g c c t a c a t c g a c c c g g c c g c c t t c a a c g a c g a g t t c c t g g c c g a c c tg t tc c a g c a c a g c c g g c a g c a g g a g a a g g c c a a g g c g g c c g tg g g c c c c a c g g g c g g c g g c g g c g g c g g c g a c t t tg a c ta c c c g g g c g c g c c c g c g g g c c c c g g c g g c g c c g tc a tg c c c g g g g g a g c g c a c g g g c c c c c g c c c g g c ta c g g c tg c g c g g c c g c c g g c ta c c tg g a c g g c a g g c tg g a g c c c c tg ta c g a g c g c g t c g g g g c g c c g g c g c tg c g g c c g c t g g tg a tc a a g c a g g a g c c c c g c g a g g a g g a t g a a g c c a a g c a g c t g g c g c t g g c c g g c c t c t t c c c t t a c c a g c c g c c g c c g c c g c c g c c g c c c t c g c a c c c g c a c c c g c a c c c g c c g c c c g c g c a c c tg g c c g c c c c g c a c c tg c a g t t c c a g a t c g c g c a c t g c g g c c a g a c c a c c a tg c a c c t g c a g c c c g g t c a c c c c a c g c c g c c g c c c a c g c c c g t g c c c a g c c c g c a c c c c g c g c c c g c g c tc g g tg c c g c c g g c c t g c c g g g c c c tg g c a g c g c g c tc a a g g g g c tg g g c g c c g c g c a c c c c g a c c tc c g c g c g a g tg g c g g c a g c g g c g c g g g c a a g g c c a a g a a g tc g g tg g a c a a g a a c a g c a a c g a g ta c c g g g tg c g g c g c g a g c g c a a c a a c a tc g c g g t g c g c a a g a g c c g c g a c a a g g c c a a g c a g c g c a a c g tg g a g a c g c a g c a g a a g g tg c tg g a g c tg a c c a g tg a c a a tg a c c g c c t g c g c a a g c g g g tg g a a c a g c t g a g c c g c g a a c tg g a c a c g c t g c g g g g c a t c t t c c g c c a g c t g c c a g a g a g c t c c t t g g t c a a g g c c a t g g g c a a c t g c g c g t g a (SEQ ID N O :89 )
Protooncogén de Homo sapiens Spi-1 (SPI1) (PU. L) (NM_001080547.1) SEQ ID NO: 26 (proteína) y SEQ ID NO: 90 (ADN)
MLQACKMEGFPLVPPQPSEDLVPYDTDLYQRQTHEYYPYLSSDGESHSDHYWDFHPHHVHSEFES FAENNFTELQSVQPPQLQQLYRHMELEQMHVLDTPMVPPHPSLGHQVSYLPRMCLQYPSLSPAQP
SSDEEEGERQSPPLEVSDGEADGLEPGPGLLPGETGSKKKIRLYQFLLDLLRSGDMKDSIWWVDK DKGTFQFSSKHKEALAHRWGIQKGNRKKMTYQKMARALRNYGKTGEVKKVKKKLTYQFSGEVLGR GGLAERRHPPH (SEQ ID N O :26 )
a t g t t a c a g g c g t g c a a a a t g g a a g g g t t t c c c c t c g t c c c c c c t c a g c c a t c a g a a g a c c t g g t g c c c t a t g a c a c g g a t c t a t a c c a a c g c c a a a c g c a c g a g t a t t a c c c c t a t c t c a g c a g t g a t g g g g a g a g c c a t a g c g a c c a t t a c t g g g a c t t c c a c c c c c a c c a c g t g c a c a g c g a g t t c g a g a g c t t c g c c g a g a a c a a c t t c a c g g a g c t c c a g a g c g t g c a g c c c c c g c a g c t g c a g c a g c t c t a c c g c c a c a t g g a g c t g g a g c a g a t g c a c g t c c t c g a t a c c c c c a t g g t g c c a c c c c a t c c c a g t c t t g g c c a c c a g g t c t c c t a c c t g c c c c g g a t g t g c c t c c a g t a c c c a t c c c t g t c c c c a g c c c a g c c c a g c t c a g a tg a g g a g g a g g g c g a g c g g c a g a g c c c c c c a c tg g a g g tg t c tg a c g g c g a g g c g g a t g g c c t g g a g c c c g g g c c t g g g c t c c t g c c t g g g g a g a c a g g c a g c a a g a a g a a g a t c c g c c t g t a c c a g t t c c t g t t g g a c c t g c t c c g c a g c g g c g a c a t g a a g g a c a g c a t c t g g t g g g t g g a c a a g g a c a a g g g c a c c t t c c a g t t c t c g t c c a a g c a c a a g g a g g c g c t g g c g c a c c g c t g g g g c a t c c a g a a g g g c a a c c g c a a g a a g a tg a c c ta c c a g a a g a tg g c g c g c g c g c tg c g c a a c ta c g g c a a g a c g g g c g a g g tc a a g a a g g t g a a g a a g a a g c t c a c c t a c c a g t t c a g c g g c g a a g t g c t g g g c c g c g g g g g c c tg g c c g a g c g g c g c c a c c c g c c c c a c tg a (SEQ ID N O :90)
Homo sapiens POU clase 3 homeobox 2 (POU3F2) (Brn2) (MM 005604.3) SEQ ID NO: 27 (proteína) y SEQ ID NO: 91 (ADN) MATAASNHYSLLTSSASIVHAEPPGGMQQGAGGYREAQSLVQGDYGALQSNGHPLSHAHQWITAL SHGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGDGSPWSTSPLGQPDIKPSVWQQGGRGDELHGPGALQQQHQQ QQQQQQQQQQQQQQQQQQQRPPHLVHHAANHHPGPGAWRSAAAAAHLPPSMGASNGGLLYSQPSF TVNGMLGAGGQPAGLHHHGLRDAHDEPHHADHHPHPHSHPHQQPPPPPPPQGPPGHPGAHHDPHS DEDTPTSDDLEQFAKQFKQRRIKLGFTQADVGLALGTLYGNVFSQTTICRFEALQLSFKNMCKLK PLLNKWLEEADSSSGSPTSIDKIAAQGRKRKKRTSIEVSVKGALESHFLKCPKPSAQEITSLADS LQLEKEWRVWFCNRRQKEKRMTPPGGTLPGAEDVYGGSRDTPPHHGVQTPVQ (SEQ ID N O :21)
a t g g c g a c c g c a g c g t c t a a c c a c t a c a g c c t g c t c a c c t c c a g c g c c t c c a t c g t g c a c g c c g a g c c g c c c g g c g g c a tg c a g c a g g g c g c g g g g g g c ta c c g c g a a g c g c a g a g c c tg g tg c a g g g c g a c t a c g g c g c t c t g c a g a g c a a c g g a c a c c c g c t c a g c c a c g c t c a c c a g t g g a t c a c c g c g c t g tc c c a c g g c g g c g g c g g c g g g g g c g g tg g c g g c g g c g g g g g g g g c g g g g g c g g c g g c g g g g g c g g c g g c g a c g g c t c c c c g t g g t c c a c c a g c c c c c t g g g c c a g c c g g a c a t c a a g c c c t c g g t g g t g g tg c a g c a g g g c g g c c g c g g a g a c g a g c tg c a c g g g c c a g g c g c c c tg c a g c a g c a g c a tc a g c a g c a g c a a c a g c a a c a g c a g c a g c a a c a g c a g c a a c a g c a g c a g c a g c a g c a g c a a c a g c g g c c g c c g c a tc tg g tg c a c c a c g c c g c ta a c c a c c a c c c g g g a c c c g g g g c a tg g c g g a g c g c g g c g g c tg
c a g c g c a c c t c c c a c c c t c c a t g g g a g c g t c c a a c g g c g g c t t g c t c t a c t c g c a g c c c a g c t t c a c g g tg a a c g g c a tg c tg g g c g c c g g c g g g c a g c c g g c c g g t c tg c a c c a c c a c g g c c tg c g g g a c g c g c a c g a c g a g c c a c a c c a tg c c g a c c a c c a c c c g c a c c c g c a c tc g c a c c c a c a c c a g c a g c c g c c g c c c c c g c c g c c c c c g c a g g g tc c g c c tg g c c a c c c a g g c g c g c a c c a c g a c c c g c a c tc g g a c g a g g a c a c g c c g a c c tc g g a c g a c c tg g a g c a g t t c g c c a a g c a g t t c a a g c a g c g g c g g a t c a a a c t g g g a t t t a c c c a a g c g g a c g t g g g g c t g g c t c t g g g c a c c c t g t a t g g c a a c g t g t t c t c g c a g a c c a c c a t c t g c a g g t t t g a g g c c c t g c a g c t g a g c t t c a a g a a c a t g t g c a a g c t g a a g c c t t t g t t g a a c a a g t g g t t g g a g g a g g c g g a c t c g t c c t c g g g c a g c c c c a c g a g c a t a g a c a a g a tc g c a g c g c a a g g g c g c a a g c g g a a a a a g c g g a c c tc c a tc g a g g tg a g c g tc a a g g g g g c tc t g g a g a g c c a t t t c c t c a a a t g c c c c a a g c c c t c g g c c c a g g a g a t c a c c t c c c t c g c g g a c a g c t t a c a g c t g g a g a a g g a g g t g g t g a g a g t t t g g t t t t g t a a c a g g a g a c a g a a a g a g a a a a g g a t g a c c c c t c c c g g a g g g a c t c t g c c g g g c g c c g a g g a tg tg ta c g g g g g g a g ta g g g a c a c t c c a c c a c a c c a c g g g g tg c a g a c g c c c g t c c a g tg a (SEQ ID N O :91 )
Homo sapiens forkhead box G1 (FOXG1) (M_005249.4) SEQ ID NO: 28 (proteína) y SEQ ID NO: 92 (DNA) MLDMGDRKEVKMIPKSSFSINSLVPEAVQNDNHHASHGHHNSHHPQHHHHHHHHHHHPPPPAPQP PPPPQQQQPPPPPPPAPQPPQTRGAPAADDDKGPQQLLLPPPPPPPPAAALDGAKADGLGGKGEP GGGPGELAPVGPDEKEKGAGAGGEEKKGAGEGGKDGEGGKEGEKKNGKYEKPPFSYNALIMMAIR QS P E K R LTLN G IYE FIMKNFPYYRENKQGWQNSIRHNLS LNKCFVKVPRHYDDPGKGNYWMLDPS SDDVFIGGTTGKLRRRSTTSRAKLAFKRGARLTSTGLTFMDRAGSLYWPMSPFLSLHHPRASSTL SYNGTTSAYPSHPMPYSSVLTQNSLGNNHSFSTANGLSVDRLVNGEIPYATHHLTAAALAASVPC GLSVPCSGTYSLNPCSVNLLAGQTSYFFPHVPHPSMTSQSSTSMSARAASSSTSPQAPSTLPCES LRPSLPSFTTGLSGGLSDYFTHQNQGSSSNPLIH (SEQ ID N O :28 )
a t g c t g g a c a t g g g a g a t a g g a a a g a g g t g a a a a t g a t c c c c a a g t c c t c g t t c a g c a t c a a c a g c c tg g t g c c c g a g g c g g t c c a g a a c g a c a a c c a c c a c g c g a g c c a c g g c c a c c a c a a c a g c c a c c a c c c c c a g c a c c a c c a c c a c c a c c a c c a c c a tc a c c a c c a c c c g c c g c c g c c c g c c c c g c a a c c g c c g c c g c c g c c g c a g c a g c a g c a g c c g c c g c c g c c g c c g c c c c c g g c a c c g c a g c c c c c c c a g a c g c g g g g c g c c c c g g c c g c c g a c g a c g a c a a g g g c c c c c a g c a g c tg c tg c tc c c g c c g c c g c c a c c g c c a c c a c c g g c c g c c g c c c tg g a c g g g g c ta a a g c g g a c g g g c tg g g c g g c a a g g g c g a g c c g g g c g g c g g g c c g g g g g a g c tg g c g c c c g tc g g g c c g g a c g a g a a g g a g a a g g g c g c c g g c g c c g g g g g g g a g g a g a a g a a g g g g g c g g g c g a g g g c g g c a a g g a c g g g g a g g g g g g c a a g g a g g g c g a g a a g a a g a a c g g c a a g t a c g a g a a g c c g c c g t t c a g c t a c a a c g c g c t c a t c a t g a t g g c c a t c c g g c a g a g c c c c g a g a a g c g g c t c a c g c t c a a c g g c a t c t a c g a g t t c a t c a t g a a g a a c t t c c c t t a c t a c c g c g a g a a c a a g c a g g g c t g g c a g a a c t c c a t c c g c c a c a a t c t g t c c c t c a a c a a g t g c t t c g t g a a g g t g c c g c g c c a c t a c g a c g a c c c g g g c a a g g g c a a c t a c t g g a t g c t g g a c c c g t c g a g c g a c g a c g t g t t c a t c g g c g g c a c c a c g g g c a a g c t g c g g c g c c g c t c c a c c a c c t c g c g g g c c a a g c t g g c c t t c a a g c g c g g t g c g c g c c t c a c c t c c a c c g g c c t c a c c t t c a t g g a c c g c g c c g g c t c c c t c t a c t g g c c c a t g t c g c c c t t c c t g t c c c t g c a c c a c c c c c g c g c c a g c a g c a c t t t g a g t t a c a a c g g c a c c a c g t c g g c c t a c c c c a g c c a c c c c a t g c c c t a c a g c t c c g t g t t g a c t c a g a a c t c g c t g g g c a a c a a c c a c t c c t t c t c c a c c g c c a a c g g c c t g a g c g t g g a c c g g c t g g t c a a c g g g g a g a t c c c g t a c g c c a c g c a c c a c c t c a c g g c c g c c g c g c t a g c c g c c t c g g t g c c c t g c g g c c t g t c g g t g c c c t g c t c t g g g a c c t a c t c c c t c a a c c c c t g c t c c g t c a a c c t g c t c g c g g g c c a g a c c a g t t a c t t t t t c c c c c a c g t c c c g c a c c c g t c a a t g a c t t c g c a g a g c a g c a c g t c c a t g a g c g c c a g g g c c g c g t c c t c c t c c a c g t c g c c g c a g g c c c c c t c g a c c c t g c c c t g t g a g t c t t t a a g a c c c t c t t t g c c a a g t t t t a c g a c g g g a c t g t c t g g g g g a c t g t c t g a t t a t t t c a c a c a t c a a a a t c a g g g g t c t t c t t c c a a c c c t t t a a t a c a t t a a (SEQ ID N O :92)
ARNm de Homo sapiens para proteína ASC1 (gen SLC7A10) (AJ277731.1) SEQ ID NO: 29 (proteína) y SEQ ID NO: 93 (ADN) MAGHTQQPSGRGNPRPAPSPSPVPGTVPGASERVALKKEIGLLSACTII IG N IIG S G IF IS P K G V LEHSGSVGLALFVW VLGGGVTALGSLCYAELGVAIPKSGGDYAYVTEIFGGLAGFLLLW SAVLIM YPTSLAVISMTFSNYVLQPVFPNCIPPTTASRVLSMACLMLLTWVNSSSVRWATRIQDMFTGGKL LALSLIIGVGLLQIFQGHFEELRPSNAFAFW MTPSVGHLALAFLQGSFAFSGW NFLNYVTEEMVD AR KNLPRAIFISIPLVTFVYTFTNIAYFTAM SPQ ELLSSNAVAVTFG EKLLG YFSW VM PVSVALS TFG G ING YLFTYSRLCFSG AREG HLPSLLAM IHVRHCTPIPALLVCCG ATAVIM LVG DTYTLINY V S F IN Y LC Y G V TILG LLLLR W R R P ALH R PIKVN LLIP VA YLVFW A FLLVFSFIS EPM VC G V G VII ILTGVPIFFLGVFWRSKPKCVHRLTESMTHWGQELCFWYPQDAPEEEENGPCPPSLLPATDKPS KPQ (SEQ ID N O :29 )
a tg g c c g g c c a c a c g c a g c a g c c g a g c g g g c g c g g g a a c c c c a g g c c tg c g c c c t c g c c c t c c c c a g t c c c a g g g a c c g t c c c c g g c g c c t c g g a g c g g g t g g c g c t c a a g a a g g a g a t c g g g c t g c t g a g c g c c t g c a c c a t c a t c a t c g g g a a c a t c a t c g g c t c g g g c a t c t t c a t c t c g c c c a a g g g g g t c c t g g a g c a c t c a g g c t c c g t g g g t c t g g c c c t g t t c g t c t g g g t c c t g g g t g g g g g c g t g a c g g c t c t g g g c t c c c t c t g c t a t g c a g a g c t g g g a g t c g c c a t c c c c a a g t c t g g c g g g g a c t a c g c c t a c g t c a c a g a g a t c t t c g g g g g c c t g g c t g g c t t t c t g c t g c t c t g g a g c g c c g t c c t c a t c a t g t a c c c c a c c a g c c t t g c t g t c a t c t c c a t g a c c t t c t c c a a c t a c g t g c t g c a g c c c g t g t t c c c c a a c t g c a t c c c c c c c a c c a c a g c c t c c c g g g t g c t g t c c a t g g c c t g c c t g a t g c t c c t g a c a t g g g t g a a c a g c t c c a g t g t g c g c t g g g c c a c g c g c a t c c a g g a c a t g t t c a c a g g c g g g a a g c t g c t g g c c t t g t c c c t c a t c a t c g g c g t g g g c c t t c t c c a g a t c t t c c a a g g a c a c t t c g a g g a g c t g a g g c c c a g c a a t g c c t t t g c t t t c t g g a t g a c g c c c t c c g t g g g a c a c c t g g c c c t g g c c t t c c t c c a g g g c t c c t t c g c c t t c a g t g g c t g g a a c t t c c t c a a c t a t g t c a c c g a g g a g a t g g t t g a c g c c c g a a a g a a c c t a c c t c g c g c c a t c t t c a t c t c c a t c c c a c t g g t g a c c t t c g t g t a c a c g t t c a c c a a c a t t g c c t a c t t c a c g g c c a t g t c c c c c c a g g a g c t g c t c t c c t c c a a t g c g g t g g c t g t g a c c t t c g g g g a g a a g c t g c t g g g c t a c t t t t c t t g g g t c a t g c c t g t c t c c g t g g c t c t g t c a a c c t t c g g a g g g a t c a a t g g t t a c c t g t t c a c c t a c t c c a g g c t g t g c t t c t c t g g a g c c c g c g a g g g g c a c c t g c c c a g c c t g c t g g c c a t g a t c c a c g t c a g a c a c t g c a c c c c c a t c c c c g c c c t c c t c g t c t g t t g c g g g g c c a c a g c c g t c a t c a t g c t c g t g g g c g a c a c g t a c a c g c t c a t c a a c t a t g t g t c c t t c a t c a a c t a c c t c t g c t a c g g c g t c a c c a t c c t g g g c c t g c t g c t g c t g c g c t g g a g g c g g c c t g c a c t c c a c a g g c c c a t c a a g g t g a a c c t t c t c a t c c c c g t g g c g t a c t t g g t c t t c t g g g c c t t c c t g c t g g t c t t c a g c t t c a t c t c a g a g c c t a t g g t c t g t g g g g t c g g c g t c a t c a t c a t c c t t a c g g g g g t g c c c a t t t t c t t t c t g g g a g t g t t c t g g a g a a g c a a a c c a a a g t g t g t g c a c a g a c t c a c a g a g t c c a t g a c a c a c t g g g g c c a g g a g c t g t g t t t c g t g g t c t a c c c c c a g g a c g c c c c c g a a g a g g a g g a g a a t g g c c c c t g c c c a c c c t c c c t g c t g c c t g c c a c a g a c a a g c c c t c g a a g c c a c a a tg a (SEQ ID N O :93 )
Homo sapiens factor de transcripción familia achaete-scute bHLH 1 (ASCL1) (M_004316.3) SEQ ID NO: 30 (proteína) y SEQ ID NO: 94 (ADN) MESSAKMESGGAGQQPQPQPQQPFLPPAACFFATAAAAAAAAAAAAAQSAQQQQQQQQQQQQAPQ LRPAADGQPSGGGHKSAPKQVKRQRSSSPELMRCKRRLNFSGFGYSLPQQQPAAVARRNERERNR VKLVNLGFATLREHVPNGAANKKMSKVETLRSAVEYIRALQQLLDEHDAVSAAFQAGVLSPTISP NYSNDLNSMAGSPVSSYSSDEGSYDPLSPEEQELLDFTNWF (SEQ ID N O :30 )
a t g g a a a g c t c t g c c a a g a t g g a g a g c g g c g g c g c c g g c c a g c a g c c c c a g c c g c a g c c c c a g c a g c c c t t c c t g c c g c c c g c a g c c t g t t t c t t t g c c a c g g c c g c a g c c g c g g c g g c c g c a g c c g c c g c a g c g g c a g c g c a g a g c g c g c a g c a g c a g c a g c a g c a g c a g c a g c a g c a g c a g c a g g c g c c g c a g c t g a g a c c g g c g g c c g a c g g c c a g c c c t c a g g g g g c g g t c a c a a g t c a g c g c c c a a g c a a g t c a a g c g a c a g c g c t c g t c t t c g c c c g a a c t g a t g c g c t g c a a a c g c c g g c t c a a c t t c a g c g g c t t t g g c t a c a g c c t g c c g c a g c a g c a g c c g g c c g c c g t g g c g c g c c g c a a c g a g c g c g a g c g c a a c c g c g t c a a g t t g g t c a a c c t g g g c t t t g c c a c c c t t c g g g a g c a c g t c c c c a a c g g c g c g g c c a a c a a g a a g a t g a g t a a g g t g g a g a c a c t g c g c t c g g c g g t c g a g t a c a t c c g c g c g c t g c a g c a g c t g c t g g a c g a g c a t g a c g c g g t g a g c g c c g c c t t c c a g g c a g g c g t c c t g t c g c c c a c c a t c t c c c c c a a c t a c t c c a a c g a c t t g a a c t c c a t g g c c g g c t c g c c g g t c t c a t c c t a c t c g t c g g a c g a g g g c t c t t a c g a c c c g c t c a g c c c c g a g g a g c a g g a g c t t c t c g a c t t c a c c a a c t g g t t c t g a (SEQ ID NO: 94)
Gen Nurrl de Homo sapiens (AB017586) SEQ ID NO: 31 (proteína) y SEQ ID NO: 95 (ADN)
MPCVQAQYGSSPQGASPASQSYSYHSSGEYSSDFLTPEFVKFSMDLTNTEITATTSLPSFSTEMD NYSTGYDVKPPCLYQMPLSGQQSSIKVEDIQMHNYQQHSHLPPQSEEMMPHSGSVYYKPSSPPTP TTPGFQVQHSPMWDDPGSLHNFHQNYVATTHMIEQRKTPVSRLSLFSFKQSPPGTPVSSCQMRFD GPLHVPMNPEPAGSHHWDGQTFAVPNPIRKPASMGFPGLQIGHASQLLDTQVPSPPSRGSPSNE GLCAVCGDNAACQHYGVRTCEGCKGFFKRTVQKNAKYVCLANKNCPVDKRRRNRCQYCRFQKCLA VGMVKEWRTDSLKGRRGRLPSKPKSPQEPSPPSPPVSLISALVRAHVDSNPAMTSLDYSRFQAN PDYQMSGDDTQHIQQFYDLLTGSMEIIRGWAEKIPGFADLPKADQDLLFESAFLELFVLRLAYRS NPVEGKLI F CNGWLHRLQCVRGFGEWIDSIVEFSSNLQNMNIDISAFSCIAALAMVTERHGLKE PKRVEELQNKIVNCLKDHVTFNNGGLNRPNYLSKLLGKLPELRTLCTQGLQRIFYLKLEDLVPPP AIIDKLFLDTLPF(SEQ ID NO: 31)
a t g c c t t g t g t t c a g g c g c a g t a t g g g t c c t c g c c t c a a g g a g c c a g c c c c g c t t c t c a g a g c t a c a g t t a c c a c t c t t c g g g a g a a t a c a g c t c c g a t t t c t t a a c t c c a g a g t t t g t c a a g t t t a g c a t g g a c c t c a c c a a c a c t g a a a t c a c t g c c a c c a c t t c t c t c c c c a g c t t c a g t a c c t t t a t g g a c a a c t a c a g c a c a g g c t a c g a c g t c a a g c c a c c t t g c t t g t a c c a a a t g c c c c t g t c c g g a c a g c a g t c c t c c a t t a a g g t a g a a g a c a t t c a g a t g c a c a a c t a c c a g c a a c a c a g c c a c c t g c c c c c c c a g t c t g a g g a g a t g a t g c c g c a c t c c g g g t c g g t t t a c t a c a a g c c c t c c t c g c c c c c g a c g c c c a c c a c c c c g g g c t t c c a g g t g c a g c a c a g c c c c a t g t g g g a c g a c c c g g g a t c t c t c c a c a a c t t c c a c c a g a a c t a c g t g g c c a c t a c g c a c a t g a t c g a g c a g a g g a a a a c g c c a g t c t c c c g c c t c t c c c t c t t c t c c t t t a a g c a a t c g c c c c c t g g c a c c c c g g t g t c t a g t t g c c a g a t g c g c t t c g a c g g g c c c c t g c a c g t c c c c a t g a a c c c g g a g c c c g c c g g c a g c c a c c a c g t g g t g g a c g g g c a g a c c t t c g c t g t g c c c a a c c c c a t t c g c a a g c c c g c g t c c a t g g g c t t c c c g g g c c t g c a g a t c g g c c a c g c g t c t c a g c t g c t c g a c a c g c a g g t g c c c t c a c c g c c g t c g c g g g g c t c c c c c t c c a a c g a g g g g c t g t g c g c t g t g t g t g g g g a c a a c g c g g c c t g c c a a c a c t a c g g c g t g c g c a c c t g t g a g g g c t g c a a a g g c t t c t t t a a g c g c a c a g t g c a a a a a a a t g c a a a a t a c g t g t g t t t a g c a a a t a a a a a c t g c c c a g t g g a c a a g c g t c g c c g g a a t c g c t g t c a g t a c t g c c g a t t t c a g a a g t g c c t g g c t g t t g g g a t g g t c a a a g a a g t g g t t c g c a c a g a c a g t t t a a a a g g c c g g a g a g g t c g t t t g c c c t c g a a a c c g a a g a g c c c a c a g g a g c c c t c t c c c c c t t c g c c c c c g g t g a g t c t g a t c a g t g c c c t c g t c a g g g c c c a t g t c g a c t c c a a c c c g g c t a t g a c c a g c c t g g a c t a t t c c a g g t t c c a g g c g a a c c c t g a c t a t c a a a t g a g t g g a g a t g a c a c c c a g c a t a t c c a g c a a t t c t a t g a t c t c c t g a c t g g c t c c a t g g a g a t c a t c c g g g g c t g g g c a g a g a a g a t c c c t g g c t t c g c a g a c c t g c c c a a a g c c g a c c a a g a c c t g c t t t t t g a a t c a g c t t t c t t a g a a c t g t t t g t c c t t c g a t t a g c a t a c a g g t c c a a c c c a g t g g a g g g t a a a c t c a t c t t t t g c a a t g g g g t g g t c t t g c a c a g g t t g c a a t g c g t t c g t g g c t t t g g g g a a t g g a t t g a t t c c a t t g t t g a a t t c t c c t c c a a c t t g c a g a a t a t g a a c a t c g a c a t t t c t g c c t t c t c c t g c a t t g c t g c c c t g g c t a t g g t c a c a g a g a g a c a c g g g c t c a a g g a a
c c c a a g a g a g t g g a a g a a c t g c a a a a c a a g a t t g t a a a t t g t c t c a a a g a c c a c g t g a c t t t c a a c a a t g g g g g g t t g a a c c g c c c c a a t t a t t t g t c c a a a c t g t t g g g g a a g c t c c c a g a a c t t c g t a c c c t t t g c a c a c a g g g g c t a c a g c g c a t t t t c t a c c t g a a a t t g g a a g a c t t g g t g c c a c c g c c a g c a a t a a t t g a c a a a c t t t t c c t g g a c a c t t t a c c t t t c t a a ( S E Q I D N O :95)
SEQ ID NO: 32: neurogenina 2 de Homo sapiens (EUROG2) (M_024019) SEQ ID NO: 32 (proteína) y SEQ ID NO: 96 (ADN) MFVKSETLELKEEEDVLVLLGSASPALAALTPLSSSADEEEEEEPGASGGARRQRGAEAGQGARG GVAAGAEGCRPARLLGLVHDCKRRPSRARAVSRGAKTAETVQRIKKTRRLKANNRERNRMHNLNA ALDALREVLPTFPEDAKLTKIETLRFAHNYIWALTETLRLADHCGGGGGGLPGALFSEAVLLSPG GASAALSSSGDSPSPASTWSCTNSPAPSSSVSSNSTSPYSCTLSPASPAGSDMDYWQPPPPDKHR Y A P H LP IA R D C I(S E Q ID N O :32 )
a t g t t c g t c a a a t c c g a g a c c t t g g a g t t g a a g g a g g a a g a g g a c g t g t t a g t g c t g c t c g g a t c g g c c t c c c c c g c c t t g g c g g c c c t g a c c c c g c t g t c a t c c a g c g c c g a c g a a g a a g a g g a g g a g g a g c c g g g c g c g t c a g g c g g g g c g c g t c g g c a g c g c g g g g c t g a g g c c g g g c a g g g g g c g c g g g g c g g c g t g g c t g c g g g t g c g g a g g g c t g c c g g c c c g c a c g g c t g c t g g g t c t g g t a c a c g a t t g c a a a c g g c g c c c t t c c c g g g c g c g g g c c g t c t c c c g a g g c g c c a a g a c g g c c g a g a c g g t g c a g c g c a t c a a g a a g a c c c g t a g a c t g a a g g c c a a c a a c c g c g a g c g a a a c c g c a t g c a c a a c c t c a a c g c g g c a c t g g a c g c g c t g c g c g a g g t g c t c c c c a c g t t c c c c g a g g a c g c c a a g c t c a c c a a g a t c g a g a c c c t g c g c t t c g c c c a c a a c t a c a t c t g g g c a c t c a c c g a g a c c c t g c g c c t g g c g g a t c a c t g c g g g g g c g g c g g c g g g g g c c t g c c g g g g g c g c t c t t c t c c g a g g c a g t g t t g c t g a g c c c g g g a g g a g c c a g c g c c g c c c t g a g c a g c a g c g g a g a c a g c c c c t c g c c c g c c t c c a c g t g g a g t t g c a c c a a c a g c c c c g c g c c g t c c t c c t c c g t g t c c t c c a a t t c c a c c t c c c c c t a c a g c t g c a c t t t a t c g c c c g c c a g c c c g g c c g g g t c a g a c a t g g a c t a t t g g c a g c c c c c a c c t c c c g a c a a g c a c c g c t a t g c a c c t c a c c t c c c c a t a g c c a g g g a t t g t a t c t a g ( S E Q I D N O : 96)
Homo sapiens LIM factor de transcripción homeobox 1, alfa (LMX1A) (M_177398) SEQ ID NO: 33 (proteína) y SEQ ID NO: 97 (ADN) MLDGLKMEENFQSAIDTSASFSSLLGRAVSPKSVCEGCQRVILDRFLLRLNDSFWHEQCVQCASC KEPLETTCFYRDKKLYCKYDYEKLFAVKCGGCFEAIAPNEFVMRAQKSVYHLSCFCCCVCERQLQ KGDEFVLKEGQLLCKGDYEKERELLSLVSPAASDSGKSDDEESLCKSAHGAGKGTAEEGKDHKRP KRPRTILTTQQRRAFKAS FEVS SKPCRKVRETLAAETGLS VRWQVWFQNQRAKMKKLARRQQQQ QQDQQNTQRLSSAQTNGGGSAGMEGIMNPYTALPTPQQLLAIEQSVYSSDPFRQGLTPPQMPGDH MHPYGAEPLFHDLDSDDTSLSNLGDCFLATSEAGPLQSRVGNPIDHLYSMQNSYFTS ( SEQ ID N O :33)
a t g c t g g a c g g c c t a a a g a t g g a g g a g a a c t t c c a a a g c g c g a t c g a c a c c t c g g c c t c c t t c t c c t c g c t g c t g g g c a g a g c g g t g a g c c c c a a g t c t g t c t g c g a g g g c t g t c a g c g g g t c a t c t t g g a c a g g t t t c t g c t g c g g c t c a a c g a c a g c t t c t g g c a t g a g c a g t g c g t g c a g t g c g c c t c c t g c a a a g a g c c c c t g g a g a c c a c c t g c t t c t a c c g g g a c a a g a a g c t g t a c t g c a a g t a t g a c t a c g a g a a g c t g t t t g c t g t t a a a t g t g g g g g c t g c t t c g a g g c c a t c g c t c c c a a t g a g t t t g t t a t g c g g g c c c a g a a g a g t g t a t a c c a c c t g a g c t g c t t c t g c t g c t g t g t c t g c g a g c g a c a g c t t c a g a a g g g t g a t g a g t t t g t c c t g a a g g a g g g g c a g c t g c t c t g c a a a g g g g a c t a t g a g a a g g a g c g g g a g c t g c t c a g c c t g g t g a g c c c a g c a g c c t c a g a c t c a g g t a a a a g t g a t g a t g a a g a a a g t c t c t g c a a g t c a g c c c a t g g g g c a g g g a a a g g a a c t g c t g a g g a a g g c a a g g a c c a t a a g c g c c c c a a a c g t c c g a g a a c c a t c t t g a c a a c t c a a c a g a g g c g a g c a t t c a a g g c c t c a t t t g a a g t a t c c t c c a a g c c c t g c a g g a a g g t g a g a g a g a c t c t g g c t g c a g a g a c a g g g c t g a g t g t c c g t g t c g t c c a g g t g t g g t t c c a a a a c c a g a g a g c g a a g a t g a a g a a g c t g g c c a g g c g a c a g c a g c a g c a g c a g c a a g a t c a g c a g a a c a c c c a g a g g c t g a g c t c t g c t c a g a c a a a c g g t g g t g g g a g t g c t g g g a t g g a a g g a a t c a t g a a c c c c t a c a c g g c t c t g c c c a c c c c a c a g c a g c t c c t g g c c a t c g a g c a g a g t g t c t a c a g c t c a g a t c c c t t c c g a c a g g g t c t c a c c c c a c c c c a g a t g c c t g g a g a c c a c a t g c a c c c t t a t g g t g c c g a g c c c c t t t t c c a t g a c c t g g a t a g c g a c g a c a c c t c c c t c a g t a a c c t g g g t g a t t g t t t c c t a g c a a c c t c a g a a g c t g g g c c t c t g c a g t c c a g a g t g g g a a a c c c c a t t g a c c a t c t g t a c t c c a t g c a g a a t t c t t a c t t c a c a t c t t g a (SEQ I D N O :97) Gen homeobox de Homo sapiens HB9, (U07663) SEQ ID NO: 34 (proteína) y SEQ ID NO: 98 (ADN) MEKSKNFRIEPCWRWTPHEPPLAERALAKVTSPPVPASGTGGGGGGGGASGGTSGSCSPASSEPP AAPADRLRAESPSPPRLLAAHCALLPKPGFLGAGGGGGGTGGGHGGPHHHAHPGAAAAAAAAAAA AAAAAGGLALGLHPGGAQGGAGLPAQAALYGHPVYGYSAAAAAAALAGQHPALSYSYPQVQGAHP AHPADPIKLGAGTFQLDQWLRATAGMILPKMPDFNSQAQSNLLGKCRRPRTAFTSQQLLELEHQF KFNKYLSRPKRFEVATSLMLTETQVKIWFQNRRMKWKRSKKAKEQAAQEAEKQKGGGGGAGKGGA EEPGAEELLGPPAPRDKGSGPPADLRDSDPEEDEDEDDEDHFPYSNGASVHAASSDCSSEDDSPP PRPSHQPAPQ (SEQ ID N O :34)
a t g g a a a a a t c c a a a a a t t t c c g c a t c g a g c c c t g c t g g c g g t g g a c c c c c c a c g a g c c g c c t c t c g c a g a g c g c g c g c t g g c c a a g g t c a c g t c g c c g c c c g t g c c c g c a t c t g g c a c c g g a g g t g g c g g c g g c g g c g g c g g g g c g a g c g g c g g g a c t a g c g g c a g c t g c a g c c c c g c g t c c t c g g a g c c g c c g g c t g c g c c c g c c g a c c g c c t g c g c g c c g a g a g c c c g t c g c c g c c g c g c c t g c t g g c c g c g c a c t g c g c g c t g c t g c c c a a g c c g g g c t t c c t g g g c g c g g g c g g c g g c g g c g g c g g c a c g g g c g g c g g g c a c g g g g g g c c c c a c c a c c a c g c g c a t c c g g g c g c a g c g g c c g c t g c c g c c g c c g c c g c c g c c g c c g c c g c c g c c g c c g c t g g g g g c c t g g c g c t g g g g c t g c a c c c t g g g g g c g c g c a g g g c g g c g c g g g c c t c c c g g c g c a g g c g g c g c t c t a c g g c c a c c c g g t c t a c g g c t a c t c c g c g g c g g c g g c g g c g g c t g c g c t g g c g g g c c a g c a c c c g g c g c t c t c c t a c t c g t a c c c g c a g g t g c a a g g c g c g c a c c c c g c g c a c c c c g c c g a c c c c a t c a a g c t g g g c g c c g g c a c c t t c c a g c t g g a c c a g t g g c t g c g c g c g t c c a c c g c g g g c a t g a t c c t g c c t a a g a t g c c c g a c t t c a a c t (SEQ I D N O :98) Homo sapiens LIM homeobox 3 (LHX3) (NMJ78138) SEQ ID NO: 35 (proteína) y SEQ ID NO: 99 (ADN) MLLETGLERDRARPGAAAVCTLGGTREIPLCAGCDQHILDRFILKALDRHWHSKCLKCSDCHTPL AERCFSRGESVYCKDDFFKRFGTKCAACQLGIPPTQWRRAQDFVYHLHCFACWCKRQLATGDE FYLMEDSRLVCKADYETAKQREAEATAKRPRT TITAKQ LETLKSAYNTS PKPARHVREQLS S E TG LDMRWQVWFQNRRAKEKRLKKDAGRQRWGQYFRNMKRSRGGSKSDKDSVQEGQDSDAEVSFPDE PSLAEMGPANGLYGSLGEPTQALGRPSGALGNFSLEHGGLAGPEQYRELRPGSPYGVPPSPAAPQ SLPGPQPLLSSLVYPDTSLGLVPSGAPGGPPPMRVLAGNGPSSDLSTGSSGGYPDFPASPASWLD EVDHAQF (SEQ ID N O :35)
atgctgctggaaacggggctcgagcgcgaccgagcgaggcccggggccgccgccgtctgcacctt gggcgggactcgggagatcccgctgtgcgctggctgtgaccagcacatcctggaccgcttcatcc tcaaggctctggaccgccactggcacagcaagtgtctcaagtgcagcgactgccacacgccactg gccgagcgctgcttcagccgaggggagagcgtttactgcaaggacgactttttcaagcgcttcgg gaccaagtgcgccgcgtgccagctgggcatcccgcccacgcaggtggtgcgccgcgcccaggact tcgtgtaccacctgcactgctttgcctgcgtcgtgtgcaagcggcagctggccacgggcgacgag ttctacctcatggaggacagccggctcgtgtgcaaggcggactacgaaaccgccaagcagcgaga ggccgaggccacggccaagcggccgcgcacgaccatcaccgccaagcagctggagacgctgaaga gcgcttacaacacctcgcccaagccggcgcgccacgtgcgcgagcagctctcgtccgagacgggc ctggacatgcgcgtggtgcaggtttggttccagaaccgccgggccaaggagaagaggctgaagaa ggacgccggccggcagcgctgggggcagtatttccgcaacatgaagcgctcccgcggcggctcca agtcggacaaggacagcgttcaggaggggcaggacagcgacgctgaggtctccttccccgatgag ccttccttggcggaaatgggcccggccaatggcctctacgggagcttgggggaacccacccaggc cttgggccggccctcgggagccctgggcaacttctccctggagcatggaggcctggcaggcccag agcagtaccgagagctgcgtcccggcagcccctacggtgtccccccatcccccgccgccccgcag agcctccctggcccccagcccctcctctccagcctggtgtacccagacaccagcttgggccttgt gccctcgggagcccccggcgggcccccacccatgagggtgctggcagggaacggacccagttctg acetatccacggggagcagcgggggttaccccgacttccctgccagccccgcctcctggctggat gaggtagaccacgctcagttctga (seq id no:99)
Homeobox 2 sin distal de Homo sapiens (DLX2) (NM_004405) SEQ ID NO: 36 (proteína) y SEQ ID NO: 100 (ADN)
MTGVFDSLVADMHSTQIAASSTYHQHQQPPSGGGAGPGGNSSSSSSLHKPQESPTLPVSTATDSS YYTNQQHPAGGGGGGGSPYAHMGSYQYQASGLNNVPYSAKSSYDLGYTAAYTSYAPYGTSSSPAN NEPEKEDLEPEIRIVNGKPKKVRKPRTIYSSFQLAALQRRFQKTQYLALPERAELAASLGLTQTQ VKIWFQNRRSKFKKMWKSGEIPSEQHPGASASPPCASPPVSAPASWDFGVPQRMAGGGGPGSGGS GAGSSGSSPSSAASAFLGNYPWYHQTSGSASHLQATAPLLHPTQTPQPHHHHHHHGGGGAPVSAG T I F (SEQ ID N O :36)
a t g a c t g g a g t c t t t g a c a g t c t a g t g g c t g a t a t g c a c t c g a c c c a g a t c g c c g c c t c c a g c a c g t a c c a c c a g c a c c a g c a g c c c c c g a g c g g c g g c g g c g c c g g c c c g g g t g g c a a c a g c a g c a g c a g c a g c a g c c t c c a c a a g c c c c a g g a g t c g c c c a c c c t t c c g g t g t c c a c c g c c a c c g a c a g c a g c t a c t a c a c c a a c c a g c a g c a c c c g g c g g g c g g c g g c g g c g g c g g g g g c t c g c c c t a c g c g c a c a t g g g t t c c t a c c a g t a c c a a g c c a g c g g c c t c a a c a a c g t c c c t t a c t c c g c c a a g a g c a g c t a t g a c c t g g g c t a c a c c g c c g c c t a c a c c t c c t a c g c t c c c t a t g g a a c c a g t t c g t c c c c a g c c a a c a a c g a g c c t g a g a a g g a g g a c c t t g a g c c t g a a a t t c g g a t a g t g a a c g g g a a g c c a a a g a a a g t c c g g a a a c c c c g c a c c a t c t a c t c c a g t t t c c a g c t g g c g g c t c t t c a g c g g c g t t t c c a a a a g a c t c a a t a c t t g g c c t t g c c g g a g c g a g c c g a g c t g g c g g c c t c t c t g g g c c t c a c c c a g a c t c a g g t c a a a a t c t g g t t c c a g a a c c g c c g g t c c a a g t t c a a g a a g a t g t g g a a a a g t g g t g a g a t c c c c t c g g a g c a g c a c c c t g g g g c c a g c g c t t c t c c a c c t t g t g c t t c g c c g c c a g t c t c a g c g c c g g c c t c c t g g g a c t t t g g t g t g c c g c a g c g g a t g g c g g g c g g c g g t g g t c c g g g c a g t g g c g g c a g c g g c g c c g g c a g c t c g g g c t c c a g c c c g a g c a g c g c g g c c t c g g c t t t t c t g g g c a a c t a c c c c t g g t a c c a c c a g a c c t c g g g a t c c g c c t c a c a c c t g c a g g c c a c g g c g c c g c t g c t g c a c c c c a c t c a g a c c c c g c a g c c g c a t c a c c a c c a c c a c c a t c a c g g c g g c g g g g g c g c c c c g g t g a g c g c g g g g a c g a t t t t c t a a (SEQ ID N O : 100 )
Factor de transcripción 2 relacionado con runt de Homo sapiens (RUNX2) (NM_001024630) SEQ ID NO: 37 (proteína) y SEQ ID NO: 101 (ADN)
MASNS L FS TVT PCQQNFFWDPS TSRRFSPPSSS LQPGKMSDVS PWAAQQQQQQQQQQQQQQQQQ QQQQQQEAAAAAAAAAAAAAAAAAVPRLRPPHDNRTMVEIIADHPAELVRTDSPNFLCSVLPSHW RCNKTLPVAFKWALGEVPDGTWTVMAGNDENYSAELRNASAVMKNQVARFNDLRFVGRSGRGK SFTLTITVFTNPPQVATYHRAIKVTVDGPREPRRHRQKLDDSKPSLFSDRLSDLGRIPHPSMRVG VPPQNPRPSLNSAPSPFNPQGQSQITDPRQAQSSPPWSYDQSYPSYLSQMTSPSIHSTTPLSSTR GTGLPAITDVPRRISDDDTATSDFCLWPSTLSKKSQAGASELGPFSDPRQFPSISSLTESRFSNP RMHYPATFTYTPPVTSGMSLGMSATTHYHTYLPPPYPGSSQSQSGPFQTSSTPYLYYGTSSGSYQ FPMVPGGDRSPSRMLPPCTTTSNGSTLLNPNLPNQNDGVDADGSHSSSPTVLNSSGRMDESVWRP
Y (SEQ ID NO : 37)
a t g g c a t c a a a c a g c c t c t t c a g c a c a g t g a c a c c a t g t c a g c a a a a c t t c t t t t g g g a t c c g a g c a c c a g c c g g c g c t t c a g c c c c c c c t c c a g c a g c c t g c a g c c c g g c a a a a t g a g c g a c g t g a g c c c g g t g g t g g c t g c g c a a c a g c a g c a g c a a c a g c a g c a g c a g c a a c a g c a g c a g c a g c a g c a g c a a c a g c a g c a g c a g c a g c a g g a g g c g g c g g c g g c g g c t g c g g c g g c g g c g g c g g c t g c g g c g g c g g c a g c t g c a g t g c c c c g g t t g c g g c c g c c c c a c g a c a a c c g c a c c a t g g t g g a g a t c a t c g c c g a c c a c c c g g c c g a a c t c g t c c g c a c c g a c a g c c c c a a c t t c c t g t g c t c g g t g c t g c c c t c g c a c t g g c g c t g c a a c a a g a c c c t g c c c g t g g c c t t c a a g g t g g t a g c c c t c g g a g a g g t a c c a g a t g g g a c t g t g g t t a c t g t c a t g g c g g g t a a c g a t g a a a a t t a t t c t g c t g a g c t c c g g a a t g c c t c t g c t g t t a t g a a a a a c c a a g t a g c a a g g t t c a a c g a t c t g a g a t t t g t g g g c c g g a g t g g a c g a g g c a a g a g t t t c a c c t t g a c c a t a a c c g t c t t c a c a a a t c c t c c c c a a g t a g c t a c c t a t c a c a g a g c a a t t a a a g t t a c a g t a g a t g g a c c t c g g g a a c c c a g a a g g c a c a g a c a g a a g c t t g a t g a c t c t a a a c c t a g t t t g t t c t c t g a c c g c c t c a g t g a t t t a g g g c g c a t t c c t c a t c c c a g t a t g a g a g t a g g t g t c c c g c c t c a g a a c c c a c g g c c c t c c c t g a a c t c t g c a c c a a g t c c t t t t a a t c c a c a a g g a c a g a g t c a g a t t a c a g a c c c c a g g c a g g c a c a g t c t t c c c c g c c g t g g t c c t a t g a c c a g t c t t a c c c c t c c t a c c t g a g c c a g a t g a c g t c c c c g t c c a t c c a c t c t a c c a c c c c g c t g t c t t c c a c a c g g g g c a c t g g g c t t c c t g c c a t c a c c g a t g t g c c t a g g c g c a t t t c a g a t g a t g a c a c t g c c a c c t c t g a c t t c t g c c t c t g g c c t t c c a c t c t c a g t a a g a a g a g c c a g g c a g g t g c t t c a g a a c t g g g c c c t t t t t c a g a c c c c a g g c a g t t c c c a a g c a t t t c a t c c c t c a c t g a g a g c c g c t t c t c c a a c c c a c g a a t g c a c t a t c c a g c c a c c t t t a c t t a c a c c c c g c c a g t c a c c t c a g g c a t g t c c c t c g g t a t g t c c g c c a c c a c t c a c t a c c a c a c c t a c c t g c c a c c a c c c t a c c c c g g c t c t t c c c a a a g c c a g a g t g g a c c c t t c c a g a c c a g c a g c a c t c c a t a t c t c t a c t a t g g c a c t t c g t c a g g a t c c t a t c a g t t t c c c a t g g t g c c g g g g g g a g a c c g g t c t c c t t c c a g a a t g c t t c c g c c a t g c a c c a c c a c c t c g a a t g g c a g c a c g c t a t t a a a t c c a a a t t t g c c t a a c c a g a a t g a t g g t g t t g a c g c t g a t g g a a g c c a c a g c a g t t c c c c a a c t g t t t t g a a t t c t a g t g g c a g a a t g g a t g a a t c t g t t t g g c g a c c a t a t t g a (SEQ ID N O :101 )
Homo sapiens SRY (región determinante del sexo Y) - box 5 (SOX5) (M_006940) SEQ ID NO: 38 (proteína) y SEQ ID NO: 102 (ADN)
MLTDPDLPQEFERMSSKRPASPYGEADGEVAMVTSRQKVEEEESDGLPAFHLPLHVSFPNKPHSE EFQPVSLLTQETCGHRTPTSQHNTMEVDGNKVMSSFAPHNSSTSPQKAEEGGRQSGESLSSTALG TPERRKGSLADWDTLKQRKMEELIKNEPEETPSIEKLLSKDWKDKLLAMGSGNFGEIKGTPESL AEKERQLMGMINQLTSLREQLLAAHDEQKKLAASQIEKQRQQMELAKQQQEQIARQQQQLLQQQH KINLLQQQIQVQGQLPPLMIPVFPPDQRTLAAAAQQGFLLPPGFSYKAGCSDPYPVQLIPTTMAA AAAATPGLGPLQLQQLYAAQLAAMQVSPGGKLPGIPQGNLGAAVSPTSIHTDKSTNSPPPKSKDE VAQPLNLSAKPKTSDGKSPTSPTSPHMPALRINSGAGPLKASVPAALASPSARVSTIGYLNDHDA VTKAIQEARQMKEQLRREQQVLDGKVAWNSLGLNNCRTEKEKTTLESLTQQLAVKQNEEGKFSH
AMMDFNLSGDSDGSAGVSESRIYRESRGRGSNEPHIKRPMNAFMVWAKDERRKILQAFPDMHNSN
ISKILGSRWKAMTNLEKQPYYEEQARLSKQHLEKYPDYKYKPRPKRTCLVDGKKLRIGEYKAIMR
NRRQEMRQYFNVGQQAQIPIATAGWYPGAIAMAGMPSPHLPSEHSSVSSSPEPGMPVIQSTYGV
KGEEPHIKEEIQAEDINGEIYDEYDEEEDDPDVDYGSDSENHIAGQAN (SEQ ID NO:38) a t g c t t a c t g a c c c t g a t t t a c c t c a g g a g t t t g a a a g g a t g t c t t c c a a g c g a c c a g c c t c t c c g t a t g g g g a a g c a g a t g g a g a g g t a g c c a t g g t g a c a a g c a g a c a g a a a g t g g a a g a a g a g g a g a g t g a c g g g c t c c c a g c c t t t c a c c t t c c c t t g c a t g t g a g t t t t c c c a a c a a g c c t c a c t c t g a g g a a t t t c a g c c a g t t t c t c t g c t g a c g c a a g a g a c t t g t g g c c a t a g g a c t c c c a c t t c t c a g c a c a a t a c a a t g g a a g t t g a t g g c a a t a a a g t t a t g t c t t c a t t t g c c c c a c a c a a c t c a t c t a c c t c a c c t c a g a a g g c a g a a g a a g g t g g g c g a c a g a g t g g c g a g t c c t t g t c t a g t a c a g c c c t g g g a a c t c c t g a a c g g c g c a a g g g c a g t t t a g c t g a t g t t g t t g a c a c c t t g a a g c a g a g g a a a a t g g a a g a g c t c a t c a a a a a c g a g c c g g a a g a a a c c c c c a g t a t t g a a a a a c t a c t c t c a a a g g a c t g g a a a g a c a a g c t t c t t g c a a t g g g a t c g g g g a a c t t t g g c g a a a t a a a a g g g a c t c c c g a g a g c t t a g c t g a g a a a g a a a g g c a a c t c a t g g g t a t g a t c a a c c a g c t g a c c a g c c t c c g a g a g c a g c t g t t g g c t g c c c a c g a t g a g c a g a a g a a a c t a g c t g c c t c t c a g a t t g a g a a a c a g c g t c a g c a a a t g g a g c t g g c c a a g c a g c a a c a a g a a c a a a t t g c a a g a c a g c a g c a g c a g c t t c t a c a g c a a c a a c a c a a a a t c a a t t t g c t c c a g c a a c a g a t c c a g g t t c a a g g t c a g c t g c c g c c a t t a a t g a t t c c c g t a t t c c c t c c t g a t c a a c g g a c a c t g g c t g c a g c t g c c c a g c a a g g a t t c c t c c t c c c t c c a g g c t t c a g c t a t a a g g c t g g a t g t a g t g a c c c t t a c c c t g t t c a g c t g a t c c c a a c t a c c a t g g c a g c t g c t g c c g c a g c a a c a c c a g g c t t a g g c c c a c t c c a a c t g c a g c a g t t a t a t g c t g c c c a g c t a g c t g c a a t g c a g g t a t c t c c a g g a g g g a a g c t g c c a g g c a t a c c c c a a g g c a a c c t t g g t g c t g c t g t a t c t c c t a c c a g c a t t c a c a c a g a c a a g a g c a c a a a c a g c c c a c c a c c c a a a a g c a a g g a t g a a g t g g c a c a g c c a c t g a a c c t a t c a g c t a a a c c c a a g a c c t c t g a t g g c a a a t c a c c c a c a t c a c c c a c c t c t c c c c a t a t g c c a g c t c t g a g a a t a a a c a g t g g g g c a g g c c c c c t c a a a g c c t c t g t c c c a g c a g c g t t a g c t a g t c c t t c a g c c a g a g t t a g c a c a a t a g g t t a c t t a a a t g a c c a t g a t g c t g t c a c c a a g g c a a t c c a a g a a g c t c g g c a a a t g a a g g a g c a a c t c c g a c g g g a a c a a c a g g t g c t t g a t g g g a a g g t g g c t g t t g t g a a t a g t c t g g g t c t c a a t a a c t g c c g a a c a g a a a a g g a a a a a a c a a c a c t g g a g a g t c t g a c t c a g c a a c t g g c a g t t a a a c a g a a t g a a g a a g g a a a a t t t a g c c a t g c a a t g a t g g a t t t c a a t c t g a g t g g a g a t t c t g a t g g a a g t g c t g g a g t c t c a g a g t c a a g a a t t t a t a g g g a a t c c c g a g g g c g t g g t a g c a a t g a a c c c c a c a t a a a g c g t c c a a t g a a t g c c t t c a t g g t g t g g g c t a a a g a t g a a c g g a g a a a g a t c c t t c a a g c c t t t c c t g a c a t g c a c a a c t c c a a c a t c a g c a a g a t a t t g g g a t c t c g c t g g a a a g c t a t g a c a a a c c t a g a g a a a c a g c c a t a t t a t g a g g a g c a a g c c c g t c t c a g c a a g c a g c a c c t g g a g a a g t a c c c t g a c t a t a a g t a c a a g c c c a g g c c a a a g c g c a c c t g c c t g g t g g a t g g c a a a a a g c t g c g c a t t g g t g a a t a c a a g g c a a t c a t g c g c a a c a g g c g g c a g g a a a t g c g g c a g t a c t t c a a t g t t g g g c a a c a a g c a c a g a t c c c c a t t g c c a c t g c t g g t g t t g t g t a c c c t g g a g c c a t c g c c a t g g c t g g g a t g c c c t c c c c t c a c c t g c c c t c g g a g c a c t c a a g c g t g t c t a g c a g c c c a g a g c c t g g g a t g c c t g t t a t c c a g a g c a c t t a c g g t g t g a a a g g a g a g g a g c c a c a t a t c a a a g a a g a g a t a c a g g c c g a g g a c a t c a a t g g a g a a a t t t a t g a t g a g t a c g a c g a g g a a g a g g a t g a t c c a g a t g t a g a t t a t g g g a g t g a c a g t g a a a a c c a t a t t g c a g g a c a a g c c a a c t g a (SEQ ID N O : 102 )
ARNm de SOX6 de Homo sapiens (AF309034) SEQ ID NO: 39 (proteína) y SEQ ID NO: 103 (ADN) MSSKQATSPFACAADGEDAMTQDLTSREKEEGSDQHVASHLPLHPIMHNKPHSEELPTLVSTIQQ DADWDSVLSSQQRMESENNKLCSLYSFRNTSTSPHKPDEGSRDREIMTSVTFGTPERRKGSLADV VDTLKQKKLEEMTRTEQEDSSCMEKLLSKDWKEKMERLNTSELLGEIKGTPESLAEKERQLSTMI TQLISLREQLLAAHDEQKKLAAS QIEKQRQQMDLARQQQEQIARQQQQLLQQQHKINLLQQQIQV QGHMPPLMIPIFPHDQRTLAAAAAAQQGFLFPPGITYKPGDNYPVQFIPSTMAAAAASGLSPLQL QKGHASHPQINQRLKGLSDRFGRNLDTFEHGGGHSYNHKQIEQLYAAQLASMQVSPGAKMPSTPQ PPNTAGTVSPTGIKNEKRGTSPVTQVKDEAAAQPLNLSSRPKTAEPVKSPTSPTQNLFPASKTSP VNLPNKSSIPSPIGGSLGRGSSLDILSSLNSPALFGDQDTVMKAIQEARKMREQIQREQQQQQPH GVDGKLSSINNMGLNSCRNEKERTRFENLGPQLTGKSNEDGKLGPGVIDLTRPEDAEGGATVAEA RVYRDARGRASSEPHIKRPMNAFMVWAKDERRKILQAFPDMHNSNISKILGSRWKSMSNQEKQPY YEEQARLSKIHLEKYPNYKYKPRPKRTCIVDGKKLRIGEYKQLMRSRRQEMRQFFTVGQQPQIPI TTGTGWYPGAITMATTTPSPQMTSDCSSTSASPEPSLPVIQSTYGMKTDGGSLAGNEMINGEDE MEMYDDYEDDPKSDYSSENEAPEAVSAN (SEQ ID N O :39)
a t g t c t t c c a a g c a a g c c a c c t c t c c a t t t g c c t g t g c a g c t g a t g g a g a g g a t g c a a t g a c c c a g g a t t t a a c c t c a a g g g a a a a g g a a g a g g g c a g t g a t c a a c a t g t g g c c t c c c a t c t g c c t c t g c a c c c c a t a a t g c a c a a c a a a c c t c a c t c t g a g g a g c t a c c a a c a c t t g t c a g t a c c a t t c a a c a a g a t g c t g a c t g g g a c a g c g t t c t g t c a t c t c a g c a a a g a a t g g a a t c a g a g a a t a a t a a g t t a t g t t c c c t a t a t t c c t t c c g a a a t a c c t c t a c c t c a c c a c a t a a g c c t g a c g a a g g g a g t c g g g a c c g t g a g a t a a t g a c c a g t g t t a c t t t t g g a a c c c c a g a g c g c c g c a a a g g g a g t c t t g c c g a t g t g g t g g a c a c a c t g a a a c a g a a g a a g c t t g a g g a a a t g a c t c g g a c t g a a c a a g a g g a t t c c t c c t g c a t g g a a a a a c t a c t t t c a a a a g a t t g g a a g g a a a a a a t g g a a a g a c t a a a t a c c a g t g a a c t t c t t g g a g a a a t t a a a g g t a c a c c t g a g a g c c t g g c a g a a a a a g a a c g g c a g c t c t c c a c c a t g a t t a c c c a g c t g a t c a g t t t a c g g g a g c a g c t a c t g g c a g c g c a t g a t g a a c a g a a a a a a c t g g c a g c g t c a c a a a t t g a g a a a c a a c g g c a g c a a a t g g a c c t t g c t c g c c a a c a g c a a g a a c a g a t t g c g a g a c a a c a g c a g c a a c t t c t g c a a c a g c a g c a c a a a a t t a a t c t c c t g c a g c a a c a g a t c c a g g t t c a g g g t c a c a t g c c t c c g c t c a t g a t c c c a a t t t t t c c a c a t g a c c a g c g g a c t c t g g c a g c a g c t g c t g c t g c c c a a c a g g g a t t c c t c t t c c c c c c t g g a a t a a c a t a c a a a c c a g g t g a t a a c t a c c c c g t a c a g t t c a t t c c a t c a a c a a t g g c a g c t g c t g c t g c t t c t g g a c t c a g c c c t t t a c a g c t c c a g a a g g g t c a t g c c t c c c a c c c a c a a a t t a a c c a a a g g c t a a a g g g c c t a a g t g a c c g t t t t g g c a g g a a t t t g g a c a c c t t t g a a c a t g g t g g t g g c c a c t c t t a c a a c c a c a a a c a g a t t g a g c a g c t c t a t g c c g c t c a g c t g g c c a g c a t g c a g g t g t c a c c t g g a g c a a a g a t g c c a t c a a c t c c a c a g c c a c c a a a c a c a g c a g g g a c g g t c t c a c c t a c t g g g a t a a a a a a t g a a a a g a g a g g g a c c a g c c c t g t a a c t c a a g t t a a g g a t g a a g c a g c a g c a c a g c c t c t g a a t c t c t c a t c c c g a c c c a a g a c a g c a g a g c c t g t a a a g t c c c c a a c g t c t c c c a c c c a g a a c c t c t t c c c a g c c a g c a a a a c c a g c c c t g t c a a t c t g c c a a a c a a a a g c a g c a t c c c t a g c c c c a t t g g a g g a a g c c t g g g a a g a g g a t c c t c t t t a g a t a t c c t a t c t a g t c t c a a c t c c c c t g c c c t t t t t g g g g a t c a g g a t a c a g t g a t g a a a g c c a t t c a g g a g g c g c g g a a g a t g c g a g a g c a g a t c c a g c g g g a g c a a c a g c a g c a a c a g c c a c a t g g t g t t g a c g g g a a a c t g t c c t c c a t a a a t a a t a t g g g g c t g a a c a g c t g c a g g a a t g a a a a g g a a a g a a c g c g c t t t g a g a a t t t g g g g c c c c a g t t a a c g g g a a a g t c a a a t g a a g a t g g a a a a c t g g g c c c a g g t g t c a t c g a c c t t a c t c g g c c a g a a g a t g c a g a g g g a g g t g c c a c t g t g g c t g a a g c a c g a g t c t a c a g g g a c g c c c g c g g c c g t g c c a g c a g c g a g c c a c a c a t t a a g c g a c c a a t g a a t g c a t t c a t g g t t t g g g c a a a g g a t g a g a g g a g a a a a a t c c t t c a g g c c t t c c c c g a c a t g c a t a a c t c c a a c a t t a g c a a a a t c t t a g g a t c t c g c t g g a a a t c a a t g t c c a a c c a g g a g a a g c a a c c t t a t t a t g a a g a g c a g g c c c g g c t a a g c a a g a t c c a c t t a g a g a a g t a c c c a a a c t a t a a a t a c a a a c c c c g a c c g a a a c g c a c c t g c a t t g t t g a t g g c a a a a a g c t t c g g a t t g g g g a g t a t a a g c a a c t g a t g a g g t c t c g g a g a c a g g a g a t g a g g c a g t t c t t t a c t g t g g g g c a a c a g c c t c a g a t t c c a a t c a c c a c a g g a a c a g g t g t t g t g t a t c c t g g t g c t a t c a c t a t g g c a a c t a c c a c a c c a t c g c c t c a g a t g a c a t c t g a c t g c t c t a g c a c c t c g g c c a g c c c g g a g c c c a g c c t c c c g g t c a t c c a g a g c a c t t a t g g t a t g a a g a c a g a t g g c g g a a g c c t a g c t g g a a a t g a a a t g a t c a a t g g a g a g g a t g a a a t g g a a a t g t a t g a t g a c t a t g a a g a t g a c c c c a a a t c a g a c t a t a g c a g t g a a a a t g a a g c c c c g g a g g c t g t c a g t g c c a a c t g a (SEQ ID N O :103 )
Homo sapiens proteína de unión a GATA 6 (GATA6 ) (NM_005257) SEQ ID NO: 40 (proteína) y SEQ ID NO: 104 (ADN)
MALTDGGWCLPKRFGAAGADASDSRAFPAREPSTPPSPISSSSSSCSRGGERGPGGASNCGTPQL DTEAAAGPPARSLLLSSYASHPFGAPHGPSAPGVAGPGGNLSSWEDLLLFTDLDQAATASKLLWS SRGAKLSPFAPEQPEEMYQTLAALSSQGPAAYDGAPGGFVHSAAAAAAAAAAASSPVYVPTTRVG SMLPGLPYHLQGSGSGPANHAGGAGAHPGWPQASADSPPYGSGGGAAGGGAAGPGGAGSAAAHVS ARFPYSPSPPMANGAAREPGGYAAAGSGGAGGVSGGGSSLAAMGGREPQYSSLSAARPLNGTYHH HHHHHHHHPSPYSPYVGAPLTPAWPAGPFETPVLHSLQSRAGAPLPVPRGPSADLLEDLSESREC VNCGSIQTPLWRRDGTGHYLCNACGLYSKMNGLSRPLIKPQKRVPSSRRLGLSCANCHTTTTTLW RRNAEGEPVCNACGLYMKLHGVPRPLAMKKEGIQTRKRKPKNINKSKTCSGNSNNSIPMTPTSTS SNSDDCSKNTSPTTQPTASGAGAPVMTGAGESTNPENSELKYSGQDGLYIGVSLASPAEVTSSVR PDSWCALALA (SEQ ID N O :40)
a t g g c c t t g a c t g a c g g c g g c t g g t g c t t g c c g a a g c g c t t c g g g g c c g c g g g t g c g g a c g c c a g c g a c t c c a g a g c c t t t c c a g c g c g g g a g c c c t c c a c g c c g c c t t c c c c c a t c t c t t c c t c g t c c t c c t c c t g c t c c c g g g g c g g a g a g c g g g g c c c c g g c g g c g c c a g c a a c t g c g g g a c g c c t c a g c t c g a c a c g g a g g c g g c g g c c g g a c c c c c g g c c c g c t c g c t g c t g c t c a g t t c c t a c g c t t c g c a t c c c t t c g g g g c t c c c c a c g g a c c t t c g g c g c c t g g g g t c g c g g g c c c c g g g g g c a a c c t g t c g a g c t g g g a g g a c t t g c t g c t g t t c a c t g a c c t c g a c c a a g c c g c g a c c g c c a g c a a g c t g c t g t g g t c c a g c c g c g g c g c c a a g c t g a g c c c c t t c g c a c c c g a g c a g c c g g a g g a g a t g t a c c a g a c c c t c g c c g c t c t c t c c a g c c a g g g t c c g g c c g c c t a c g a c g g c g c g c c c g g c g g c t t c g t g c a c t c t g c g g c c g c g g c g g c a g c a g c c g c g g c g g c g g c c a g c t c c c c g g t c t a c g t g c c c a c c a c c c g c g t g g g t t c c a t g c t g c c c g g c c t a c c g t a c c a c c t g c a g g g g t c g g g c a g t g g g c c a g c c a a c c a c g c g g g c g g c g c g g g c g c g c a c c c c g g c t g g c c t c a g g c c t c g g c c g a c a g c c c t c c a t a c g g c a g c g g a g g c g g c g c g g c t g g c g g c g g g g c c g c g g g g c c t g g c g g c g c t g g c t c a g c c g c g g c g c a c g t c t c g g c g c g c t t c c c c t a c t c t c c c a g c c c g c c c a t g g c c a a c g g c g c c g c g c g g g a g c c g g g a g g c t a c g c g g c g g c g g g c a g t g g g g g c g c g g g a g g c g t g a g c g g c g g c g g c a g t a g c c t g g c g g c c a t g g g c g g c c g c g a g c c c c a g t a c a g c t c g c t g t c g g c c g c g c g g c c g c t g a a c g g g a c g t a c c a c c a c c a c c a c c a c c a c c a c c a c c a c c a t c c g a g c c c c t a c t c g c c c t a c g t g g g g g c g c c a c t g a c g c c t g c c t g g c c c g c c g g a c c c t t c g a g a c c c c g g t g c t g c a c a g c c t g c a g a g c c g c g c c g g a g c c c c g c t c c c g g t g c c c c g g g g t c c c a g t g c a g a c c t g c t g g a g g a c c t g t c c g a g a g c c g c g a g t g c g t g a a c t g c g g c t c c a t c c a g a c g c c g c t g t g g c g g c g g g a c g g c a c c g g c c a c t a c c t g t g c a a c g c c t g c g g g c t c t a c a g c a a g a t g a a c g g c c t c a g c c g g c c c c t c a t c a a g c c g c a g a a g c g c g t g c c t t c a t c a c g g c g g c t t g g a t t g t c c t g t g c c a a c t g t c a c a c c a c a a c t a c c a c c t t a t g g c g c a g a a a c g c c g a g g g t g a a c c c g t g t g c a a t g c t t g t g g a c t c t a c a t g a a a c t c c a t g g g g t g c c c a g a c c a c t t g c t a t g a a a a a a g a g g g a a t t c a a a c c a g g a a a c g a a a a c c t a a g a a c a t a a a t a a a t c a a a g a c t t g c t c t g g t a a t a g c a a t a a t t c c a t t c c c a t g a c t c c a a c t t c c a c c t c t t c t a a c t c a g a t g a t t g c a g c a a a a a t a c t t c c c c c a c a a c a c a a c c t a c a g c c t c a g g g g c g g g t g c c c c g g t g a t g a c t g g t g c g g g a g a g a g c a c c a a t c c c g a g a a c a g c g a g c t c a a g t a t t c g g g t c a a g a t g g g c t c t a c a t a g g c g t c a g t c t c g c c t c g c c g g c c g a a g t c a c g t c c t c c g t g c g a c c g g a t t c c t g g t g c g c c c t g g c c c t g g c c t g a (SEQ ID N O : 104 )
Homo sapiens proteína de unión a GATA 1 (GATA1) (NM_002049) SEQ ID NO: 41 (proteína) y SEQ ID NO: 105 (ADN)
MEFPGLGSLGTSEPLPQFVDPALVSSTPESGVFFPSGPEGLDAAASSTAPSTATAAAAALAYYRD AEAYRHS PVFQVYPLLNCME G I PGGS PYAGWAYGKTGLYPAS TVCPTREDS PPQAVE DLDGKGS T SFLETLKTERLSPDLLTLGPALPSSLPVPNSAYGGPDFSSTFFSPTGSPLNSAAYSSPKLRGTLP LPPCEARECVNCGATATPLWRRDRTGHYLCNACGLYHKMNGQNRPLIRPKKRLIVSKRAGTQCTN CQTTTTTLWRRNASGDPVCNACGLYYKLHQVNRPLTMRKDGIQTRNRKASGKGKKKRGSSLGGTG AAEGPAGGFMWAGGSGSGNCGEVASGLTLGPPGTAHLYQGLGPWLSGPVSHLMPFPGPLLGSP TGSFPTGPMPPTTSTTWAPLSS (SEQ ID NO: 41)
a t g g a g t t c c c t g g c c t g g g g t c c c t g g g g a c c t c a g a g c c c c t c c c c c a g t t t g t g g a t c c t g c t c t g g t g t c c t c c a c a c c a g a a t c a g g g g t t t t c t t c c c c t c t g g g c c t g a g g g c t t g g a t g c a g c a g c t t c c t c c a c t g c c c c g a g c a c a g c c a c c g c t g c a g c t g c g g c a c t g g c c t a c t a c a g g g a c g c t g a g g c c t a c a g a c a c t c c c c a g t c t t t c a g g t g t a c c c a t t g c t c a a c t g t a t g g a g g g g a t c c c a g g g g g c t c a c c a t a t g c c g g c t g g g c c t a c g g c a a g a c g g g g c t c t a c c c t g c c t c a a c t g t g t g t c c c a c c c g c g a g g a c t c t c c t c c c c a g g c c g t g g a a g a t c t g g a t g g a a a a g g c a g c a c c a g c t t c c t g g a g a c t t t g a a g a c a g a g c g g c t g a g c c c a g a c c t c c t g a c c c t g g g a c c t g c a c t g c c t t c a t c a c t c c c t g t c c c c a a t a g t g c t t a t g g g g g c c c t g a c t t t t c c a g t a c c t t c t t t t c t c c c a c c g g g a g c c c c c t c a a t t c a g c a g c c t a t t c c t c t c c c a a g c t t c g t g g a a c t c t c c c c c t g c c t c c c t g t g a g g c c a g g g a g t g t g t g a a c t g c g g a g c a a c a g c c a c t c c a c t g t g g c g g a g g g a c a g g a c a g g c c a c t a c c t a t g c a a c g c c t g c g g c c t c t a t c a c a a g a t g a a t g g g c a g a a c a g g c c c c t c a t c c g g c c c a a g a a g c g c c t g a t t g t c a g t a a a c g g g c a g g t a c t c a g t g c a c c a a c t g c c a g a c g a c c a c c a c g a c a c t g t g g c g g a g a a a t g c c a g t g g g g a t c c c g t g t g c a a t g c c t g c g g c c t c t a c t a c a a g c t a c a c c a g g t g a a c c g g c c a c t g a c c a t g c g g a a g g a t g g t a t t c a g a c t c g a a a c c g c a a g g c a t c t g g a a a a g g g a a a a a g a a a c g g g g c t c c a g t c t g g g a g g c a c a g g a g c a g c c g a a g g a c c a g c t g g t g g c t t t a t g g t g g t g g c t g g g g g c a g c g g t a g c g g g a a t t g t g g g g a g g t g g c t t c a g g c c t g a c a c t g g g c c c c c c a g g t a c t g c c c a t c t c t a c c a a g g c c t g g g c c c t g t g g t g c t g t c a g g g c c t g t t a g c c a c c t c a t g c c t t t c c c t g g a c c c c t a c t g g g c t c a c c c a c g g g c t c c t t c c c c a c a g g c c c c a t g c c c c c c a c c a c c a g c a c t a c t g t g g t g g c t c c g c t c a g c t c a t g a (SEQ ID N O :105 )
Protooncogén Homo sapiens Fli-1, factor de transcripción ETS (FLI1) (NM_002017) SEQ ID NO: 42 (proteína) y SEQ ID NO: 106 (ADN) MDGTIKEALSWSDDQSLFDSAYGAAAHLPKADMTASGSPDYGQPHKINPLPPQQEWINQPVRVN VKREYDHMNGSRESPVDCSVSKCSKLVGGGESNPMNYNSYMDEKNGPPPPNMTTNERRVIVPADP TLWTQEHVRQWLEWAIKEYSLMEIDTSFFQNMDGKELCKMNKEDFLRATTLYNTEVLLSHLSYLR ESSLLAYNTTSHTDQSSRLSVKEDPSYDSVRRGAWGNNMNSGLNKSPPLGGAQTISKNTEQRPQP DPYQILGPTSSRLANPGSGQIQLWQFLLELLSDSANASCITWEGTNGEFKMTDPDEVARRWGERK SKPNMNYDKLSRALRYYYDKNIMTKVHGKRYAYKFDFHGIAQALQPHPTESSMYKYPSDISYMPS YHAHQQKVNFVPPHPSSMPVTSSSFFGAASQYWTSPTGGIYPNPNVPRHPNTHVPSHLGSYY
(SEQ ID N O :42 )
a t g g a c g g g a c t a t t a a g g a g g c t c t g t c g g t g g t g a g c g a c g a c c a g t c c c t c t t t g a c t c a g c g t a c g g a g c g g c a g c c c a t c t c c c c a a g g c c g a c a t g a c t g c c t c g g g g a g t c c t g a c t a c g g g c a g c c c c a c a a g a t c a a c c c c c t c c c a c c a c a g c a g g a g t g g a t c a a t c a g c c a g t g a g g g t c a a c g t c a a g c g g g a g t a t g a c c a c a t g a a t g g a t c c a g g g a g t c t c c g g t g g a c t g c a g c g t t a g c a a a t g c a g c a a g c t g g t g g g c g g a g g c g a g t c c a a c c c c a t g a a c t a c a a c a g c t a t a t g g a c g a g a a g a a t g g c c c c c c t c c t c c c a a c a t g a c c a c c a a c g a g a g g a g a g t c a t c g t c c c c g c a g a c c c c a c a c t g t g g a c a c a g g a g c a t g t g a g g c a a t g g c t g g a g t g g g c c a t a a a g g a g t a c a g c t t g a t g g a g a t c g a c a c a t c c t t t t t c c a g a a c a t g g a t g g c a a g g a a c t g t g t a a a a t g a a c a a g g a g g a c t t c c t c c g c g c c a c c a c c c t c t a c a a c a c g g a a g t g c t g t t g t c a c a c c t c a g t t a c c t c a g g g a a a g t t c a c t g c t g g c c t a t a a t a c a a c c t c c c a c a c c g a c c a a t c c t c a c g a t t g a g t g t c a a a g a a g a c c c t t c t t a t g a c t c a g t c a g a a g a g g a g c t t g g g g c a a t a a c a t g a a t t c t g g c c t c a a c a a a a g t c c t c c c c t t g g a g g g g c a c a a a c g a t c a g t a a g a a t a c a g a g c a a c g g c c c c a g c c a g a t c c g t a t c a g a t c c t g g g c c c g a c c a g c a g t c g c c t a g c c a a c c c t g g a a g c g g g c a g a t c c a g c t g t g g c a a t t c c t c c t g g a g c t g c t c t c c g a c a g c g c c a a c g c c a g c t g t a t c a c c t g g g a g g g g a c c a a c g g g g a g t t c a a a a t g a c g g a c c c c g a t g a g g t g g c c a g g c g c t g g g g c g a g c g g a a a a g c a a g c c c a a c a t g a a t t a c g a c a a g c t g a g c c g g g c c c t c c g t t a t t a c t a t g a t a a a a a c a t t a t g a c c a a a g t g c a c g g c a a a a g a t a t g c t t a c a a a t t t g a c t t c c a c g g c a t t g c c c a g g c t c t g c a g c c a c a t c c g a c c g a g t c g t c c a t g t a c a a g t a c c c t t c t g a c a t c t c c t a c a t g c c t t c c t a c c a t g c c c a c c a g c a g a a g g t g a a c t t t g t c c c t c c c c a t c c a t c c t c c a t g c c t g t c a c t t c c t c c a g c t t c t t t g g a g c c g c a t c a c a a t a c t g g a c c t c c c c c a c g g g g g g a a t c t a c c c c a a c c c c a a c g t c c c c c g c c a t c c t a a c a c c c a c g t g c c t t c a c a c t t a g g c a g c t a c t a c t a g (SEQ ID N O :106 )
Gen EKLF del factor eritroide de tipo Kruppel humano (U37106) SEQ ID NO: 43 (proteína) y SEQ ID NO: 107 (ADN) MATAETALPSISTLTALGPFPDTQDDFLKWWRSEEAQDMGPGPPDPTEPPLHVKSEDQPGEEEDD ERGADATWDLDLLLTNFSGPEPGGAPQTCALAPSEASGAQYPPPPETLGAYAGGPGLVAGLLGSE DHS GWVRPALRARAPDAFVG PALAPAPAPE PKALALQPVYPG PGAGS S GGYFPRTGL SVPAAS GA PYGLLSGYPAMYPAPQYQGHFQLFRGLQGPAPGPATSPSFLSCLGPGTVGTGLGGTAEDPGVIAE TAPSKRGRRSWARKRQAAHTCAHPGCGKSYTKSSHLKAHLRTHTGEKPYACTWEGCGWRFARSDE LTRHYRKHTGQRPFRCQLCPRAFSRSDHLALHMKRHL (SEQ I D N O :43)
a t g g c c a c a g c c g a g a c c g c c t t g c c c t c c a t c a g c a c a c t g a c c g c c c t g g g c c c c t t c c c g g a c a c a c a g g a t g a c t t c c t c a a g t g g t g g c g c t c c g a a g a g g c g c a g g a c a t g g g c c c g g g t c c t c c t g a c c c c a c g g a g c c g c c c c t c c a c g t g a a g t c t g a g g a c c a g c c c g g g g a g g a a g a g g a c g a t g a g a g g g g c g c g g a c g c c a c c t g g g a c c t g g a t c t c c t c c t c a c c a a c t t c t c g g g c c c g g a g c c c g g t g g c g c g c c c c a g a c c t g c g c t c t g g c g c c c a g c g a g g c c t c c g g g g c g c a a t a t c c g c c g c c g c c c g a g a c t c t g g g c g c a t a t g c t g g c g g c c c g g g g c t g g t g g c t g g g c t t t t g g g t t c g g a g g a t c a c t c g g g t t g g g t g c g c c c t g c c c t g c g a g c c c g g g c t c c c g a c g c c t t c g t g g g c c c a g c c c t g g c t c c a g c c c c g g c c c c c g a g c c c a a g g c g c t g g c g c t g c a a c c g g t g t a c c c g g g g c c c g g c g c c g g c t c c t c g g g t g g c t a c t t c c c g c g g a c c g g g c t t t c a g t g c c t g c g g c g t c g g g c g c c c c c t a c g g g c t a c t g t c c g g g t a c c c c g c g a t g t a c c c g g c g c c t c a g t a c c a a g g g c a c t t c c a g c t c t t c c g c g g g c t c c a g g g a c c c g c g c c c g g t c c c g c c a c g t c c c c c t c c t t c c t g a g t t g t t t g g g a c c c g g g a c g g t g g g c a c t g g a c t c g g g g g g a c t g c a g a g g a t c c a g g t g t g a t a g c c g a g a c c g c g c c a t c c a a g c g a g g c c g a c g t t c g t g g g c g c g c a a g a g g c a g g c a g c g c a c a c g t g c g c g c a c c c g g g t t g c g g c a a g a g c t a c a c c a a g a g c t c c c a c c t g a a g g c g c a t c t g c g c a c g c a c a c a g g g g a g a a g c c a t a c g c c t g c a c g t g g g a a g g c t g c g g c t g g a g a t t c g c g c g c t c g g a c g a g c t g a c c c g c c a c t a c c g g a a a c a c a c g g g g c a g c g c c c c t t c c g c t g c c a g c t c t g c c c a c g t g c t t t t t c g c g c t c t g a c c a c c t g g c c t t g c a c a t g a a g c g c c a c c t t t g a (SEQ ID N O : 107 ) MyoD humano (X56677) SEQ ID NO: 44 (proteína) y SEQ ID NO: 108 (ADN) MELLSPPLRDVDLTAPDGSLCSFATTDDFYDDPCFDSPDLRFFEDLDPRLMHVGALLKPEEHSHF PAAVHPAPGAREDEHVRAPSGHHQAGRCLLWACKACKRKTTNADRRKAATMRERRRLSKVNEAFE TLKRCTSSNPNQRLPKVEILRNAIRYIEGLQALLRDQDAAPPGAAAFYAPGPLPPGRGGEHYSGD SDASSPRSNCSDGMMDYSGPPSGARRRNCYEGAYYNEAPSEPRPGKSAAVSSLDYLSSIVERIST ESPAAPALLLADVPSESPPRRQEAAAPSEGESSGDPTQSPDAAPQCPAGANPNPIYQVL (SEQ ID N O :44)
a t g g a g c t a c t g t c g c c a c c g c t c c g c g a c g t a g a c c t g a c g g c c c c c g a c g g c t c t c t c t g c t c c t t t g c c a c a a c g g a c g a c t t c t a t g a c g a c c c g t g t t t c g a c t c c c c g g a c c t g c g c t t c t t c g a a g a c c t g g a c c c g c g c c t g a t g c a c g t g g g c g c g c t c c t g a a a c c c g a a g a g c a c t c g c a c t t c c c c g c g g c g g t g c a c c c g g c c c c g g g c g c a c g t g a g g a c g a g c a t g t g c g c g c g c c c a g c g g g c a c c a c c a g g c g g g c c g c t g c c t a c t g t g g g c c t g c a a g g c g t g c a a g c g c a a g a c c a c c a a c g c c g a c c g c c g c a a g g c c g c c a c c a t g c g c g a g c g g c g c c g c c t g a g c a a a g t a a a t g a g g c c t t t g a g a c a c t c a a g c g c t g c a c g t c g a g c a a t c c a a a c c a g c g g t t g c c c a a g g t g g a g a t c c t g c g c a a c g c c a t c c g c t a t a t c g a g g g c c t g c a g g c t c t g c t g c g c g a c c a g g a c g c c g c g c c c c c t g g c g c a g c c g c c t t c t a t g c g c c g g g c c c g c t g c c c c c g g g c c g c g g c g g c g a g c a c t a c a g c g g c g a c t c c g a c g c g t c c a g c c c g c g c t c c a a c t g c t c c g a c g g c a t g a t g g a c t a c a g c g g c c c c c c g a g c g g c g c c c g g c g g c g g a a c t g c t a c g a a g g c g c c t a c t a c a a c g a g g c g c c c a g c g a a c c c a g g c c c g g g a a g a g t g c g g c g g t g t c g a g c c t a g a c t a c c t g t c c a g c a t c g t g g a g c g c a t c t c c a c c g a g a g c c c t g c g g c g c c c g c c c t c c t g c t g g c g g a c g t g c c t t c t g a g t c g c c t c c g c g c a g g c a a g a g g c t g c c g c c c c c a g c g a g g g a g a g a g c a g c g g c g a c c c c a c c c a g t c a c c g g a c g c c g c c c c g c a g t g c c c t g c g g g t g c g a a c c c c a a c c c g a t a t a c c a g g t g c t c t g a (SEQ ID N O :108 )
Homo sapiens proteína de unión a NGFI-A 2 (proteína de unión a EGR1 2) (NAB2) (NM_005967) SEQ ID NO: 45 (proteína) y SEQ ID NO: 109 (ADN) MHRAPSPTAEQPPGGGDSARRTLQPRLKPSARAMALPRTLGELQLYRVLQRANLLSYYETFIQQG GDDVQQLCEAGEEEFLEIMALVGMATKPLHVRRLQKALREWATNPGLFSQPVPAVPVSSIPLFKI SETAGTRKGSMSNGHGSPGEKAGSARSFSPKSPLELGEKLSPLPGGPGAGDPRIWPGRSTPESDV GAGGEEEAGSPPFSPPAGGGVPEGTGAGGLAAGGTGGGPDRLEPEMVRMWESVERIFRS FPRGD AG EVTSLLKLNKKLARSVGHIFEMDDNDSQKEEEIRKYSIIYGRFDSKRREGKQLSLHELTINEA AAQFCMRDNTLLLRRVELFSLSRQVARESTYLSSLKGSRLHPEELGGPPLKKLKQEVGEQSHPEI QQPPPGPESYVPPYRPSLEEDSASLSGESLDGHLQAVGSCPRLTPPPADLPLALPAHGLWSRHIL QQTLMDEGLRLARLVSHDRVGRLSPCVPAKPPLAEFEEGLLDRCPAPGPHPALVEGRRSSVKVEA EASRQ (SEQ ID N O :45)
a t g c a c a g a g c g c c t t c c c c c a c a g c c g a g c a g c c g c c g g g c g g a g g g g a c a g c g c c c g c c g g a c c c t g c a g c c c a g a c t c a a g c c c a g t g c c c g a g c c a t g g c a c t g c c t c g g a c g c t g g g g g a g c t g c a g c t g t a c c g g g t c c t g c a g c g c g c c a a c c t c c t t t c c t a c t a t g a g a c c t t c a t c c a g c a g g g a g g g g a c g a c g t g c a g c a g c t g t g t g a g g c g g g t g a g g a g g a g t t t c t g g a g a t c a t g g c a c t t g t g g g c a t g g c c a c c a a g c c c c t c c a t g t c c g g c g c c t g c a g a a g g c a c t g a g a g a g t g g g c c a c c a a t c c a g g g c t c t t c a g t c a a c c a g t g c c t g c t g t t c c c g t c t c c a g c a t c c c g c t c t t c a a g a t c t c t g a g a c t g c g g g t a c c c g g a a a g g g a g c a t g a g c a a t g g g c a t g g c a g c c c a g g g g a a a a g g c a g g c a g t g c c c g c a g t t t t a g c c c c a a g a g c c c c c t t g a a c t t g g a g a g a a g c t a t c a c c a c t g c c t g g g g g a c c t g g g g c a g g g g a c c c c c g g a t c t g g c c a g g c c g g a g c a c t c c a g a g t c g g a c g t t g g g g c a g g a g g a g a a g a g g a g g c t g g c t c g c c c c c c t t c t c c c c c c c t g c a g g g g g a g g a g t c c c t g a g g g g a c t g g g g c t g g g g g g c t g g c a g c a g g t g g g a c t g g g g g t g g t c c a g a c c g a c t g g a g c c a g a g a t g g t a c g c a t g g t g g t g g a a a g t g t g g a g a g g a t c t t c c g g a g c t t c c c a a g g g g g g a t g c t g g g g a g g t c a c a t c c c t g c t a a a g c t g a a t a a g a a g c t g g c a c g g a g c g t t g g g c a c a t c t t t g a g a t g g a t g a t a a t g a c a g c c a g a a g g a a g a g g a g a t c c g c a a a t a c a g c a t c a t c t a t g g c c g t t t c g a c t c t a a g c g g c g g g a g g g c a a g c a g c t c a g c c t g c a c g a g c t c a c c a t c a a c g a g g c t g c t g c c c a g t t c t g c a t g a g g g a c a a c a c g c t c t t a t t a c g g a g a g t g g a g c t c t t c t c t t t g t c c c g c c a a g t a g c c c g a g a g a g c a c c t a c t t g t c c t c c t t g a a g g g c t c c a g g c t t c a c c c t g a a g a a c t g g g a g g c c c t c c a c t g a a g a a g c t g a a a c a a g a g g t t g g a g a a c a g a g t c a c c c t g a a a t c c a g c a g c c t c c c c c a g g c c c t g a g t c c t a t g t a c c c c c a t a c c g c c c c a g c c t g g a g g a g g a c a g c g c c a g c c t g t c t g g g g a g a g t c t g g a t g g a c a t t t g c a g g c t g t g g g g t c a t g t c c a a g g c t g a c g c c g c c c c c t g c t g a c c t g c c t c t g g c a t t g c c a g c c c a t g g g c t a t g g a g c c g a c a c a t c c t g c a g c a g a c a c t g a t g g a c g a g g g g c t g c g g c t c g c c c g c c t c g t c t c c c a c g a c c g c g t g g g c c g c c t c a g c c c c t g t g t g c c t g c g a a g c c a c c t c t c g c a g a g t t c g a g g a a g g g c t g c t g g a c a g a t g t c c t g c c c c a g g a c c c c a t c c c g c g c t g g t g g a g g g t c g c a g g a g c a g c g t g a a a g t g g a g g c t g a g g c c a g c c g g c a g t g a (SEQ ID N O : 109 )
Respuesta 1 de crecimiento temprano de Homo sapiens (EGR1) (M_001964) SEQ ID NO: 46 (proteína) y SEQ ID NO: 110 (ADN)
MAAAKAEMQLMSPLQISDPFGSFPHSPTMDNYPKLEEMMLLSNGAPQFLGAAGAPEGSGSNSSSS SSGGGGGGGGGSNSSSSSSTFNPQADTGEQPYEHLTAESFPDISLNNEKVLVETSYPSQTTRLPP ITYTGRFSLEPAPNSGNTLWPEPLFSLVSGLVSMTNPPASSSSAPSPAASSASASQSPPLSCAVP SNDSSPIYSAAPTFPTPNTDIFPEPQSQAFPGSAGTALQYPPPAYPAAKGGFQVPMIPDYLFPQQ QGDLGLGTPDQKPFQGLESRTQQPSLTPLSTIKAFATQSGSQDLKALNTSYQSQLIKPSRMRKYP NRPSKTPPHERPYACPVESCDRRFSRSDELTRHIRIHTGQKPFQCRICMRNFSRSDHLTTHIRTH TGEKPFACDICGRKFARSDERKRHTKIHLRQKDKKADKSWASSATSSLSSYPSPVATSYPSPVT TSYPSPATTSYPSPVPTSFSSPGSSTYPSPVHSGFPSPSVATTYSSVPPAFPAQVSSFPSSAVTN SFSASTG LSDM TATFSPRTIE IC (SEQ ID N O :46)
a t g g c c g c g g c c a a g g c c g a g a t g c a g c t g a t g t c c c c g c t g c a g a t c t c t g a c c c g t t c g g a t c c t t t c c t c a c t c g c c c a c c a t g g a c a a c t a c c c t a a g c t g g a g g a g a t g a t g c t g c t g a g c a a c g g g g c t c c c c a g t t c c t c g g c g c c g c c g g g g c c c c a g a g g g c a g c g g c a g c a a c a g c a g c a g c a g c a g c a g c g g g g g c g g t g g a g g c g g c g g g g g c g g c a g c a a c a g c a g c a g c a g c a g c a g c a c c t t c a a c c c t c a g g c g g a c a c g g g c g a g c a g c c c t a c g a g c a c c t g a c c g c a g a g t c t t t t c c t g a c a t c t c t c t g a a c a a c g a g a a g g t g c t g g t g g a g a c c a g t t a c c c c a g c c a a a c c a c t c g a c t g c c c c c c a t c a c c t a t a c t g g c c g c t t t t c c c t g g a g c c t g c a c c c a a c a g t g g c a a c a c c t t g t g g c c c g a g c c c c t c t t c a g c t t g g t c a g t g g c c t a g t g a g c a t g a c c a a c c c a c c g g c c t c c t c g t c c t c a g c a c e a t c t c c a g c g g c c t c c t c c g c c t c c g c c t c c c a g a g c c c a c c c c t g a g c t g c g c a g t g c c a t c c a a c g a c a g c a g t c c c a t t t a c t c a g c g g c a c c c a c c t t c c c c a c g c c g a a c a c t g a c a t t t t c c c t g a g c c a c a a a g c c a g g c c t t c c c g g g c t c g g c a g g g a c a g c g c t c c a g t a c c c g c c t c c t g c c t a c c c t g c c g c c a a g g g t g g c t t c c a g g t t c c c a t g a t c c c c g a c t a c c t g t t t c c a c a g c a g c a g g g g g a t c t g g g c c t g g g c a c c c c a g a c c a g a a g c c c t t c c a g g g c c t g g a g a g c c g c a c c c a g c a g c c t t c g c t a a c c c c t c t g t c t a c t a t t a a g g c c t t t g c c a c t c a g t c g g g c t c c c a g g a c c t g a a g g c c c t c a a t a c c a g c t a c c a g t c c c a g c t c a t c a a a c c c a g c c g c a t g c g c a a g t a c c c c a a c c g g c c c a g c a a g a c g c c c c c c c a c g a a c g c c c t t a c g c t t g c c c a g t g g a g t c c t g t g a t c g c c g c t t c t c c c g c t c c g a c g a g c t c a c c c g c c a c a t c c g c a t c c a c a c a g g c c a g a a g c c c t t c c a g t g c c g c a t c t g c a t g c g c a a c t t c a g c c g c a g c g a c c a c c t c a c c a c c c a c a t c c g c a c c c a c a c a g g c g a a a a g c c c t t c g c c t g c g a c a t c t g t g g a a g a a a g t t t g c c a g g a g c g a t g a a c g c a a g a g g c a t a c c a a g a t c c a c t t g c g g c a g a a g g a c a a g a a a g c a g a c a a a a g t g t t g t g g c c t c t t c g g c c a c c t c c t c t c t c t c t t c c t a c c c g t c c c c g g t t g c t a c c t c t t a c c c g t c c c c g g t t a c t a c c t c t t a t c c a t c c c c g g c c a c c a c c t c a t a c c c a t c c c c t g t g c c c a c c t c c t t c t c c t c t c c c g g c t c c t c g a c c t a c c c a t c c c c t g t g c a c a g t g g c t t c c c c t c c c c g t c g g t g g c c a c c a c g t a c t c c t c t g t t c c c c c t g c t t t c c c g g c c c a g g t c a g c a g c t t c c c t t c c t c a g c t g t c a c c a a c t c c t t c a g c g c c t c c a c a g g g c t t t c g g a c a t g a c a g c a a c c t t t t c t c c c a g g a c a a t t g a a a t t t g c t a a (SEQ I D N O :110 )
Represor de transcripción independiente del factor de crecimiento de Homo sapiens 1 (GF11) (NM_005263) SEQ ID NO: 47 (proteína) y SEQ ID NO: 11 (ADN) MPRSFLVKSKKAHSYHQPRSPGPDYSLRLENVPAPSRADSTSNAGGAKAEPRDRLSPESQLTEAP' DRASASPDSCEGSVCERSSEFEDFWRPPSPSASPASEKSMCPSLDEAQPFPLPFKPYSWSGLAGS DLRHLVQSYRPCGALERGAGLGLFCEPAPEPGHPAALYGPKRAAGGAGAGAPGSCSAGAGATAGP' GLGLYGDFGSAAAGLYERPTAAAGLLYPERGHGLHADKGAGVKVESELLCTRLLLGGGSYKCIKC: SKVFSTPHGLEVHVRRSHSGTRPFACEMCGKTFGHAVSLEQHKAVHSQERSFDCKICGKSFKRSS
t l s t h l l i h s d t r p y p c q y c g k r f h q k s d m k k h t f i h t g e k p h k c q v c g k a f s q s s n l i t h s r k h : TGFKPFGCDLCGKGFQRKVDLRRHRETQHGLK (SEQ ID N O :47)
a t g c c g c g c t c a t t t c t c g t c a a a a g c a a g a a g g c t c a c a g c t a c c a c c a g c c g c g c t c c c c a g g a c c a g a c t a t t c c c t c c g t t t a g a g a a t g t a c c g g c g c c t a g c c g a g c a g a c a g c a c t t c a a a t g c a g g c g g g g c g a a g g c g g a g c c c c g g g a c c g t t t g t c c c c c g a a t c g c a g c t g a c c g a a g c c c c a g a c a g a g c c t c c g c a t c c c c a g a c a g c t g c g a a g g c a g c g t c t g c g a a c g g a g c t c g g a g t t t g a g g a c t t c t g g a g g c c c c c g t c a c c c t c c g c g t c t c c a g c c t c g g a g a a g t c a a t g t g c c c a t c g c t g g a c g a a g c c c a g c c c t t c c c c c t g c c t t t c a a a c c g t a c t c a t g g a g c g g c c t g g c g g g t t c t g a c c t g c g g c a c c t g g t g c a g a g c t a c c g a c c g t g t g g g g c c c t g g a g c g t g g c g c t g g c c t g g g c c t c t t c t g c g a a c c c g c c c c g g a g c c t g g c c a c c c g g c c g c g c t g t a c g g c c c g a a g c g g g c t g c c g g c g g c g c g g g g g c c g g g g c g c c a g g g a g c t g c a g c g c a g g g g c c g g t g c c a c c g c t g g c c c t g g c c t a g g g c t c t a c g g c g a c t t c g g g t c t g c g g c a g c c g g g c t g t a t g a g a g g c c c a c g g c a g c g g c g g g c t t g c t g t a c c c c g a g c g t g g c c a c g g g c t g c a c g c a g a c a a g g g c g c t g g c g t c a a g g t g g a g t c g g a g c t g c t g t g c a c c c g c c t g c t g c t g g g c g g c g g c t c c t a c a a g t g c a t c a a g t g c a g c a a g g t g t t c t c c a c g c c g c a c g g g c t c g a g g t g c a c g t g c g c a g g t c c c a c a g c g g t a c c a g a c c c t t t g c c t g c g a g a t g t g c g g c a a g a c c t t c g g g c a c g c g g t g a g c c t g g a g c a g c a c a a a g c c g t g c a c t c g c a g g a a c g g a g c t t t g a c t g t a a g a t c t g t g g g a a g a g c t t c a a g a g g t c a t c c a c a c t g t c c a c a c a c c t g c t t a t c c a c t c a g a c a c t c g g c c c t a c c c c t g t c a g t a c t g t g g c a a g a g g t t c c a c c a g a a g t c a g a c a t g a a g a a a c a c a c t t t c a t c c a c a c t g g t g a g a a g c c t c a c a a g t g c c a g g t g t g c g g c a a g g c a t t c a g c c a g a g c t c c a a c c t c a t c a c c c a c a g c c g c a a a c a c a c a g g c t t c a a g c c c t t c g g c t g c g a c c t c t g t g g g a a g g g t t t c c a g a g g a a g g t g g a c c t c c g a a g g c a c c g g g a g a c g c a g c a t g g g c t c a a a t g a (SEQ ID N O :111 )
Homo sapiens paired box 5 (PAX5) (M_016734) SEQ ID NO: 48 (proteína) y SEQ ID O: 112 (ADN) MDLEKNYPTPRTSRTGHGGVNQLGGVFVNGRPLPDWRQRIVELAHQGVRPCDISRQLRVSHGCV SKILGRYYETGSIKPGVIGGSKPKVATPKWEKIAEYKRQNPTMFAWEIRDRLLAERVCDNDTVP SVSSINRIIRTKVQQ PPNQPVPASSHSIVSTGSVTQVSSVSTDSAGSSYSISGILGITSPSADTN KRKRDEGIQESPVPNGHSLPGRDFLRKQMRGDLFTQQQLEVLDRVFERQHYSDIFTTTEPIKPEQ TTEYSAMASLAGGLDDMKANLASPTPADIGSSVPGPQSYPIVTGRDLASTTLPGYPPHVPPAGQG SYSAPTLTGMVPGSEFSGSPYSHPQYSSYNDSWRFPNPGLLGSPYYYSAAARGAAPPAAATAYDR
H (SEQ I D N O :48)
a t g g a t t t a g a g a a a a a t t a t c c g a c t c c t c g g a c c a g c a g g a c a g g a c a t g g a g g a g t g a a t c a g c t t g g g g g g g t t t t t g t g a a t g g a c g g c c a c t c c c g g a t g t a g t c c g c c a g a g g a t a g t g g a a c t t g c t c a t c a a g g t g t c a g g c c c t g c g a c a t c t c c a g g c a g c t t c g g g t c a g c c a t g g t t g t g t c a g c a a a a t t c t t g g c a g g t a t t a t g a g a c a g g a a g c a t c a a g c c t g g g g t a a t t g g a g g a t c c a a a c c a a a g g t c g c c a c a c c c a a a g t g g t g g a a a a a a t c g c t g a a t a t a a a c g c c a a a a t c c c a c c a t g t t t g c c t g g g a g a t c a g g g a c c g g c t g c t g g c a g a g c g g g t g t g t g a c a a t g a c a c c g t g c c t a g c g t c a g t t c c a t c a a c a g g a t c a t c c g g a c a a a a g t a c a g c a g c c a c c c a a c c a a c c a g t c c c a g c t t c c a g t c a c a g c a t a g t g t c c a c t g g c t c c g t g a c g c a g g t g t c c t c g g t g a g c a c g g a t t c g g c c g g c t c g t c g t a c t c c a t c a g c g g c a t c c t g g g c a t c a c g t c c c c c a g c g c c g a c a c c a a c a a g c g c a a g a g a g a c g a a g g t a t t c a g g a g t c t c c g g t g c c g a a c g g c c a c t c g c t t c c g g g c a g a g a c t t c c t c c g g a a g c a g a t g c g g g g a g a c t t g t t c a c a c a g c a g c a g c t g g a g g t g c t g g a c c g c g t g t t t g a g a g g c a g c a c t a c t c a g a c a t c t t c a c c a c c a c a g a g c c c a t c a a g c c c g a g c a g a c c a c a g a g t a t t c a g c c a t g g c c t c g c t g g c t g g t g g g c t g g a c g a c a t g a a g g c c a a t c t g g c c a g c c c c a c c c c t g c t g a c a t c g g g a g c a g t g t g c c a g g c c c g c a g t c c t a c c c c a t t g t g a c a g g c c g t g a c t t g g c g a g c a c g a c c c t c c c c g g g t a c c c t c c a c a c g t c c c c c c c g c t g g a c a g g g c a g c t a c t c a g c a c c g a c g c t g a c a g g g a t g g t g c c t g g g a g t g a g t t t t c c g g g a g t c c c t a c a g c c a c c c t c a g t a t t c c t c g t a c a a c g a c t c c t g g a g g t t c c c c a a c c c g g g g c t g c t t g g c t c c c c c t a c t a t t a t a g c g c t g c c g c c c g a g g a g c c g c c c c a c c t g c a g c c g c c a c t g c c t a t g a c c g t c a c t g a (SEQ ID N O : 112 )
Factor de transcripción específico de células T de Homo sapiens T-box ARNm de T-bet (AF241243) SEQ ID NO: 49 (proteína) y SEQ ID NO: 113 (ADN)
MGIVEPGCGDMLTGTEPMPGSDEGRAPGADPQHRYFYPEPGAQDADERRGGGSLGSPYPGGALVP APPSRFLGAYAYPPRPQAAGFPGAGESFPPPADAEGYQPGEGYAAPDPRAGLYPGPREDYALPAG LEVSGKLRVALNNHLLWSKFNQHQTEMIITKQGRRMFPFLSFTVAGLEPTSHYRMFVDWLVDQH HWRYQSGKWVQCGKAEGSMPGNRLYVHPDSPNTGAHWMRQEVSFGKLKLTNNKGASNNVTQMIVL QSLHKYQPRLHIVEVNDGEPEAACNASNTHIFTFQETQFIAVTAYQNAEITQLKIDNNPFAKGFR ENFESMYTSVDTSIPSPPGPNCQFLGGDHYSPLLPNQYPVPSRFYPDLPGQAKDWPQAYWLGAP RDHSYEAEFRAVSMKPAFLPSAPGPTMSYYRGQEVLAPGAGWPVAPQYPPKMGPASWFRPMRTLP MEPGPGGSEGRGPEDQGPPLVWTEIAPIRPESSDSGLGEGDSKRRRVSPYPSSGDSSSPAGAPSP FDKEAEGQFYNYFPN (SEQ ID N O :49)
a t g g g c a t c g t g g a g c c g g g t t g c g g a g a c a t g c t g a c g g g c a c c g a g c c g a t g c c g g g g a g c g a c g a g g g c c g g g c g c c t g g c g c c g a c c c g c a g c a c c g c t a c t t c t a c c c g g a g c c g g g c g c g c a g g a c g c g g a c g a g c g t c g c g g g g g c g g c a g c c t g g g g t c t c c c t a c c c g g g g g g c g c c t t g g t g c c c g c c c c g c c g a g c c g c t t c c t t g g a g c c t a c g c c t a c c c g c c g c g a c c c c a g g c g g c c g g c t t c c c c g g c g c g g g c g a g t c c t t c c c g c c g c c c g c g g a c g c c g a g g g c t a c c a g c c g g g c g a g g g c t a c g c c g c c c c g g a c c c g c g c g c c g g g c t c t a c c c g g g g c c g c g t g a g g a c t a c g c g c t a c c c g c g g g a c t g g a g g t g t c g g g g a a a c t g a g g g t c g c g c t c a a c a a c c a c c t g t t g t g g t c c a a g t t t a a t c a g c a c c a g a c a g a g a t g a t c a t c a c c a a g c a g g g a c g g c g g a t g t t c c c a t t c c t g t c a t t t a c t g t g g c c g g g c t g g a g c c c a c c a g c c a c t a c a g g a t g t t t g t g g a c g t g g t c t t g g t g g a c c a g c a c c a c t g g c g g t a c c a g a g c g g c a a g t g g g t g c a g t g t g g a a a g g c c g a g g g c a g c a t g c c a g g a a a c c g c c t g t a c g t c c a c c c g g a c t c c c c c a a c a c a g g a g c g c a c t g g a t g c g c c a g g a a g t t t c a t t t g g g a a a c t a a a g c t c a c a a a c a a c a a g g g g g c g t c c a a c a a t g t g a c c c a g a t g a t t g t g c t c c a g t c c c t c c a t a a g t a c c a g c c c c g g c t g c a t a t c g t t g a g g t g a a c g a c g g a g a g c c a g a g g c a g c c t g c a a c g c t t c c a a c a c g c a t a t c t t t a c t t t c c a a g a a a c c c a g t t c a t t g c c g t g a c t g c c t a c c a g a a t g c c g a g a t t a c t c a g c t g a a a a t t g a t a a t a a c c c c t t t g c c a a a g g a t t c c g g g a g a a c t t t g a g t c c a t g t a c a c a t c t g t t g a c a c c a g c a t c c c c t c c c c g c c t g g a c c c a a c t g t c a a t t c c t t g g g g g a g a t c a c t a c t c t c c t c t c c t a c c c a a c c a g t a t c c t g t t c c c a g c c g c t t c t a c c c c g a c c t t c c t g g c c a g g c g a a g g a t g t g g t t c c c c a g g c t t a c t g g c t g g g g g c c c c c c g g g a c c a c a g c t a t g a g g c t g a g t t t c g a g c a g t c a g c a t g a a g c c t g c a t t c t t g c c c t c t g c c c c t g g g c c c a c c a t g t c c t a c t a c c g a g g c c a g g a g g t c c t g g c a c c t g g a g c t g g c t g g c c t g t g g c a c c c c a g t a c c c t c c c a a g a t g g g c c c g g c c a g c t g g t t c c g c c c t a t g c g g a c t c t g c c c a t g g a a c c c g g c c c t g g a g g c t c a g a g g g a c g g g g a c c a g a g g a c c a g g g t c c c c c c t t g g t g t g g a c t g a g a t t g c c c c c a t c c g g c c g g a a t c c a g t g a t t c a g g a c t g g g c g a a g g a g a c t c t a a g a g g a g g c g c g t g t c c c c c t a t c c t t c c a g t g g t g a c a g c t c c t c c c c t g c t g g g g c c c c t t c t c c t t t t g a t a a g g a a g c t g a a g g a c a g t t t t a t a a c t a t t t t c c c a a c t g a (SEQ ID N O :113 ) Homo sapiens proteína de unión a GATA 3 (GATA3) (NM_001002295) SEQ ID NO: 50 (proteína) y SEQ ID NO: 114 (ADN) MEVTADQPRWVSHHHPAVLNGQHPDTHHPGLSHSYMDAAQYPLPEEVDVLFNIDGQGNHVPPYYG NSVRATVQRYPPTHHGSQVCRPPLLHGSLPWLDGGKALGSHHTASPWNLSPFSKTSIHHGSPGPL SVYPPASSSSLSGGHASPHLFTFPPTPPKDVSPDPSLSTPGSAGSARQDEKECLKYQVPLPDSMK LESSHSRGSMTALGGASSSTHHPITTYPPYVPEYSSGLFPPSSLLGGSPTGFGCKSRPKARSSTE GRECVNCGATSTPLWRRDGTGHYLCNACGLYHKMNGQNRPLIKPKRRLSAARRAGTSCANCQTTT TTLWRRNANGDPVCNACGLYYKLHNINRPLTMKKEGIQTRNRKMSSKSKKCKKVHDSLEDFPKNS SFNPAALSRHMSSLSHISPFSHSSHMLTTPTPMHPPSSLSFGPHHPSSMVTAMG (SEQ ID N O :50)
a t g g a g g t g a c g g c g g a c c a g c c g c g c t g g g t g a g c c a c c a c c a c c c c g c c g t g c t c a a c g g g c a g c a c c c g g a c a c g c a c c a c c c g g g c c t c a g c c a c t c c t a c a t g g a c g c g g c g c a g t a c c c g c t g c c g g a g g a g g t g g a t g t g c t t t t t a a c a t c g a c g g t c a a g g c a a c c a c g t c c c g c c c t a c t a c g g a a a c t c g g t c a g g g c c a c g g t g c a g a g g t a c c c t c c g a c c c a c c a c g g g a g c c a g g t g t g c c g c c c g c c t c t g c t t c a t g g a t c c c t a c c c t g g c t g g a c g g c g g c a a a g c c c t g g g c a g c c a c c a c a c c g c c t c c c c c t g g a a t c t c a g c c c c t t c t c c a a g a c g t c c a t c c a c c a c g g c t c c c c g g g g c c c c t c t c c g t c t a c c c c c c g g c c t c g t c c t c c t c c t t g t c g g g g g g c c a c g c c a g c c c g c a c c t c t t c a c c t t c c c g c c c a c c c c g c c g a a g g a c g t c t c c c c g g a c c c a t c g c t g t c c a c c c c a g g c t c g g c c g g c t c g g c c c g g c a g g a c g a g a a a g a g t g c c t c a a g t a c c a g g t g c c c c t g c c c g a c a g c a t g a a g c t g g a g t c g t c c c a c t c c c g t g g c a g c a t g a c c g c c c t g g g t g g a g c c t c c t c g t c g a c c c a c c a c c c c a t c a c c a c c t a c c c g c c c t a c g t g c c c g a g t a c a g c t c c g g a c t c t t c c c c c c c a g c a g c c t g c t g g g c g g c t c c c c c a c c g g c t t c g g a t g c a a g t c c a g g c c c a a g g c c c g g t c c a g c a c a g a a g g c a g g g a g t g t g t g a a c t g t g g g g c a a c c t c g a c c c c a c t g t g g c g g c g a g a t g g c a c g g g a c a c t a c c t g t g c a a c g c c t g c g g g c t c t a t c a c a a a a t g a a c g g a c a g a a c c g g c c c c t c a t t a a g c c c a a g c g a a g g c t g t c t g c a g c c a g g a g a g c a g g g a c g t c c t g t g c g a a c t g t c a g a c c a c c a c a a c c a c a c t c t g g a g g a g g a a t g c c a a t g g g g a c c c t g t c t g c a a t g c c t g t g g g c t c t a c t a c a a g c t t c a c a a t a t t a a c a g a c c c c t g a c t a t g a a g a a g g a a g g c a t c c a g a c c a g a a a c c g a a a a a t g t c t a g c a a a t c c a a a a a g t g c a a a a a a g t g c a t g a c t c a c t g g a g g a c t t c c c c a a g a a c a g c t c g t t t a a c c c g g c c g c c c t c t c c a g a c a c a t g t c c t c c c t g a g c c a c a t c t c g c c c t t c a g c c a c t c c a g c c a c a t g c t g a c c a c g c c c a c g c c g a t g c a c c c g c c a t c c a g c c t g t c c t t t g g a c c a c a c c a c c c c t c c a g c a t g g t c a c c g c c a t g g g t t a g (SEQ ID N O : 114 )
Homo sapiens FOXP3 (EF534714) SEQ ID NO: 51 (proteína) y SEQ ID NO: 115 (ADN) MPNPRPGKPSAPSLALGPSPGASPSWRAAPKASDLLGARGPGGTFQGRDLRGGAHASSSSLNPMP
PSQLQLPTLPLVMVAPSGARLGPLPHLQALLQDRPHFMHQLSTVDAHARTPVLQVHPLESPAMIS
LTPPTTATGVFSLKARPGLPPGINVASLEWVSREPALLCTFPNPSAPRKDSTLSAVPQSSYPLLA
NGVCKWPGCEKVFEEPEDFLKHCQADHLLDEKGRAQCLLQREMVQSLEQQLVLEKEKLSAMQAHL
AGKMALTKASSVASSDKGSCCIVAAGSQGPWPAWSGPREAPDSLFAVRRHLWGSHGNSTFPEFL
HNMDYFKFHNMRPPFTYATLIRWAILEAPEKQRTLNEIYHWFTRMFAFFRNHPATWKNAIRHNLS
LHKCFVRVESEKGAVWTVDELEFRKKRSQRPSRCSNPTPGP (SEQ ID NO: 51)
a t g c c c a a c c c c a g g c c t g g c a a g c c c t c g g c c c c t t c c t t g g c c c t t g g c c c a t c c c c a g g a g c c t c g c c c a g c t g g a g g g c t g c a c c c a a a g c c t c a g a c c t g c t g g g g g c c c g g g g c c c a g g g g g a a c c t t c c a g g g c c g a g a t c t t c g a g g c g g g g c c c a t g c c t c c t c t t c t t c c t t g a a c c c c a t g c c a c c a t c g c a g c t g c a g c t g c c c a c a c t g c c c c t a g t c a t g g t g g c a c c c t c c g g g g c a c g g c t g g g c c c c t t g c c c c a c t t a c a g g c a c t c c t c c a g g a c a g g c c a c a t t t c a t g c a c c a g c t c t c a a c g g t g g a t g c c c a c g c c c g g a c c c c t g t g c t g c a g g t g c a c c c c c t g g a g a g c c c a g c c a t g a t c a g c c t c a c a c c a c c c a c c a c c g c c a c t g g g g t c t t c t c c c t c a a g g c c c g g c c t g g c c t c c c a c c t g g g a t c a a c g t g g c c a g c c t g g a a t g g g t g t c c a g g g a g c c g g c a c t g c t c t g c a c c t t c c c a a a t c c c a g t g c a c c c a g g a a g g a c a g c a c c c t t t c g g c t g t g c c c c a g a g c t c c t a c c c a c t g c t g g c a a a t g g t g t c t g c a a g t g g c c c g g a t g t g a g a a g g t c t t c g a a g a g c c a g a g g a c t t c c t c a a g c a c t g c c a g g c g g a c c a t c t t c t g g a t g a g a a g g g c a g g g c a c a a t g t c t c c t c c a g a g a g a g a t g g t a c a g t c t c t g g a g c a g c a g c t g g t g c t g g a g a a g g a g a a g c t g a g t g c c a t g c a g g c c c a c c t g g c t g g g a a a a t g g c a c t g a c c a a g g c t t c a t c t g t g g c a t c a t c c g a c a a g g g c t c c t g c t g c a t c g t a g c t g c t g g c a g c c a a g g c c c t g t c g t c c c a g c c t g g t c t g g c c c c c g g g a g g c c c c t g a c a g c c t g t t t g c t g t c c g g a g g c a c c t g t g g g g t a g c c a t g g a a a c a g c a c a t t c c c a g a g t t c c t c c a c a a c a t g g a c t a c t t c a a g t t c c a c a a c a t g c g a c c c c c t t t c a c c t a c g c c a c g c t c a t c c g c t g g g c c a t c c t g g a g g c t c c a g a g a a g c a g c g g a c a c t c a a t g a g a t c t a c c a c t g g t t c a c a c g c a t g t t t g c c t t c t t c a g a a a c c a t c c t g c c a c c t g g a a g a a c g c c a t c c g c c a c a a c c t g a g t c t g c a c a a g t g c t t t g t g c g g g t g g a g a g c g a g a a g g g g g c t g t g t g g a c c g t g g a t g a g c t g g a g t t c c g c a a g a a a c g g a g c c a g a g g c c c a g c a g g t g t t c c a a c c c t a c a c c t g g c c c c t g a
(SEQ ID NO: 115)
Receptor humano orphan ROR gamma (U16997) SEQ ID NO: 52 (proteína) y SEQ ID NO: 116 (ADN)
MDRAPQRQHRASRELLAAKKTHTSQIEVIPCKICGDKSSGIHYGVITCEGCKGFFRRSQRCNAAY
SCTRQQNCPIDRTSRNRCQHCRLQKCLALGMSRDAVKFGRMSKKQRDSLHAEVQKQLQQRQQQQQ EPWKTPPAGAQGADTLTYTLGLPDGQLPLGSSPDLPEASACPPGLLKASGSGPSYSNNLAKAGL NGASCHLEYSPERGKAEGRESFYSTGSQLTPDRCGLRFEEHRHPGLGELGQGPDSYGSPSFRSTP EAPYASLTEIEHLVQSVCKSYRETCQLRLEDLLRQRSNIFSREEVTGYQRKSMWEMWERCAHHLT EAIQYWEFAKRLSGFMELCQNDQIVLLKAGAMEWLVRMCRAYNADNRTVFFEGKYGGMELFRA. LGCSELISSIFDFSHSLSALHFSEDEIALYTALVLINAHRPGLQEKRKVEQLQYNLELAFHHHLC KTHRQSILAKLPPKGKLRSLCSQHVERLQIFQHLHPIWQAAFPPLYKELFSTETESPVGCPSDL EEGLLASPYGLLATSLDPVPPSPFSFPMNPGGWSPPALWK (SEQ I D N O :52)
a t g g a c a g g g c c c c a c a g a g a c a g c a c c g a g c c t c a c g g g a g c t g c t g g c t g c a a a g a a g a c c c a c a c c t c a c a a a t t g a a g t g a t c c c t t g c a a a a t c t g t g g g g a c a a g t c g t c t g g g a t c c a c t a c g g g g t t a t c a c c t g t g a g g g g t g c a a g g g c t t c t t c c g c c g g a g c c a g c g c t g t a a c g c g g c c t a c t c c t g c a c c c g t c a g c a g a a c t g c c c c a t c g a c c g c a c c a g c c g a a a c c g a t g c c a g c a c t g c c g c c t g c a g a a a t g c c t g g c g c t g g g g a t g t c c c g a g a t g c t g t c a a g t t c g g c c g c a t g t c c a a g a a g c a g a g g g a c a g c c t g c a t g c a g a a g t g c a g a a a c a g c t g c a g c a g c g g c a a c a g c a g c a a c a g g a a c c a g t g g t c a a g a c c c c t c c a g c a g g g g c c c a a g g a g c a g a t a c c c t c a c c t a c a c c t t g g g g c t c c c a g a c g g g c a g c t g c c c c t g g g c t c c t c g c c t g a c c t g c c t g a g g c t t c t g c c t g t c c c c c t g g c c t c c t g a a a g c c t c a g g c t c t g g g c c c t c a t a t t c c a a c a a c t t g g c c a a g g c a g g g c t c a a t g g g g c c t c a t g c c a c c t t g a a t a c a g c c c t g a g c g g g g c a a g g c t g a g g g c a g a g a g a g c t t c t a t a g c a c a g g c a g c c a g c t g a c c c c t g a c c g a t g t g g a c t t c g t t t t g a g g a a c a c a g g c a t c c t g g g c t t g g g g a a c t g g g a c a g g g c c c a g a c a g c t a c g g c a g c c c c a g t t t c c g c a g c a c a c c g g a g g c a c c c t a t g c c t c c c t g a c a g a g a t a g a g c a c c t g g t g c a g a g c g t c t g c a a g t c c t a c a g g g a g a c a t g c c a g c t g c g g c t g g a g g a c c t g c t g c g g c a g c g c t c c a a c a t c t t c t c c c g g g a g g a a g t g a c t g g c t a c c a g a g g a a g t c c a t g t g g g a g a t g t g g g a a c g g t g t g c c c a c c a c c t c a c c g a g g c c a t t c a g t a c g t g g t g g a g t t c g c c a a g a g g c t c t c a g g c t t t a t g g a g c t c t g c c a g a a t g a c c a g a t t g t g c t t c t c a a a g c a g g a g c a a t g g a a g t g g t g c t g g t t a g g a t g t g c c g g g c c t a c a a t g c t g a c a a c c g c a c g g t c t t t t t t g a a g g c a a a t a c g g t g g c a t g g a g c t g t t c c g a g c c t t g g g c t g c a g c g a g c t c a t c a g c t c c a t c t t t g a c t t c t c c c a c t c c c t a a g t g c c t t g c a c t t t t c c g a g g a t g a g a t t g c c c t c t a c a c a g c c c t t g t t c t c a t c a a t g c c c a t c g g c c a g g g c t c c a a g a g a a a a g g a a a g t a g a a c a g c t g c a g t a c a a t c t g g a g c t g g c c t t t c a t c a t c a t c t c t g c a a g a c t c a t c g c c a a a g c a t c c t g g c a a a g c t g c c a c c c a a g g g g a a g c t t c g g a g c c t g t g t a g c c a g c a t g t g g a a a g g c t g c a g a t c t t c c a g c a c c t c c a c c c c a t c g t g g t c c a a g c c g c t t t c c c t c c a c t c t a c a a g g a g c t c t t c a g c a c t g a a a c c g a g t c a c c t g t g g g c t g t c c a a g t g a c c t g g a a g a g g g a c t c c t t g c c t c t c c c t a t g g c c t g c t g g c c a c c t c c c t g g a c c c c g t t c c a c c c t c a c c c t t t t c c t t t c c c a t g a a c c c t g g a g g g t g g t c c c c a c c a g c t c t t t g g a a g t g a (SEQ ID N O :116 )
Factor nuclear 4 de hepatocito de Homo sapiens, alfa (HNF4A), (M_178849) SEQ ID NO: 53 (proteína) y SEQ ID NO: 117 (ADN)
MRLSKTLVDMDMADYSAALDPAYTTLEFENVQVLTMGNDTSPSEGTNLNAPNSLGVSALCAICGD RATGKHYGASSCDGCKGFFRRSVRKNHMYSCRFSRQCWDKDKRNQCRYCRLKKCFRAGMKKEAV QNERDRISTRRSSYEDSSLPSINALLQAEVLSRQITSPVSGINGDIRAKKIASIADVCESMKEQL LVLVEWAKYIPAFCELPLDDQVALLRAHAGEHLLLGATKRSMVFKDVLLLGNDYIVPRHCPELAE M SR VSIR ILD ELVLPFQ ELQ IDDNEYAYLKAIIFFDPDAKG LSDPG KIKRLRSQ VQ VSLEDYIND RQYDSRGRFGELLLLLPTLQSITWQMIEQIQFIKLFGMAKIDNLLQEMLLGGSPSDAPHAHHPLH PHLMQEHMGTNVIVANTMPTHLSNGQMSTPETPQPSPPGGSGSEPYKLLPGAVATIVKPLSAIPQ P T IT K Q E V I (SEQ I D N O :53)
a t g c g a c t c t c c a a a a c c c t c g t c g a c a t g g a c a t g g c c g a c t a c a g t g c t g c a c t g g a c c c a g c c t a c a c c a c c c t g g a a t t t g a g a a t g t g c a g g t g t t g a c g a t g g g c a a t g a c a c g t c c c c a t c a g a a g g c a c c a a c c t c a a c g c g c c c a a c a g c c t g g g t g t c a g c g c c c t g t g t g c c a t c t g c g g g g a c c g g g c c a c g g g c a a a c a c t a c g g t g c c t c g a g c t g t g a c g g c t g c a a g g g c t t c t t c c g g a g g a g c g t g c g g a a g a a c c a c a t g t a c t c c t g c a g a t t t a g c c g g c a g t g c g t g g t g g a c a a a g a c a a g a g g a a c c a g t g c c g c t a c t g c a g g c t c a a g a a a t g c t t c c g g g c t g g c a t g a a g a a g g a a g c c g t c c a g a a t g a g c g g g a c c g g a t c a g c a c t c g a a g g t c a a g c t a t g a g g a c a g c a g c c t g c c c t c c a t c a a t g c g c t c c t g c a g g c g g a g g t c c t g t c c c g a c a g a t c a c c t c c c c c g t c t c c g g g a t c a a c g g c g a c a t t c g g g c g a a g a a g a t t g c c a g c a t c g c a g a t g t g t g t g a g t c c a t g a a g g a g c a g c t g c t g g t t c t c g t t g a g t g g g c c a a g t a c a t c c c a g c t t t c t g c g a g c t c c c c c t g g a c g a c c a g g t g g c c c t g c t c a g a g c c c a t g c t g g c g a g c a c c t g c t g c t c g g a g c c a c c a a g a g a t c c a t g g t g t t c a a g g a c g t g c t g c t c c t a g g c a a t g a c t a c a t t g t c c c t c g g c a c t g c c c g g a g c t g g c g g a g a t g a g c c g g g t g t c c a t a c g c a t c c t t g a c g a g c t g g t g c t g c c c t t c c a g g a g c t g c a g a t c g a t g a c a a t g a g t a t g c c t a c c t c a a a g c c a t c a t c t t c t t t g a c c c a g a t g c c a a g g g g c t g a g c g a t c c a g g g a a g a t c a a g c g g c t g c g t t c c c a g g t g c a g g t g a g c t t g g a g g a c t a c a t c a a c g a c c g c c a g t a t g a c t c g c g t g g c c g c t t t g g a g a g c t g c t g c t g c t g c t g c c c a c c t t g c a g a g c a t c a c c t g g c a g a t g a t c g a g c a g a t c c a g t t c a t c a a g c t c t t c g g c a t g g c c a a g a t t g a c a a c c t g t t g c a g g a g a t g c t g c t g g g a g g g t c c c c c a g c g a t g c a c c c c a t g c c c a c c a c c c c c t g c a c c c t c a c c t g a t g c a g g a a c a t a t g g g a a c c a a c g t c a t c g t t g c c a a c a c a a t g c c c a c t c a c c t c a g c a a c g g a c a g a t g t c c a c c c c t g a g a c c c c a c a g c c c t c a c c g c c a g g t g g c t c a g g g t c t g a g c c c t a t a a g c t c c t g c c g g g a g c c g t c g c c a c a a t c g t c a a g c c c c t c t c t g c c a t c c c c c a g c c g a c c a t c a c c a a g c a g g a a g t t a t c t a g (SEQ ID N O :117 )
Transductor de señal humano y activador de la transcripción Stat5A (U43185) SEQ ID NO: 54 (proteína) y SEQ ID NO: 118 (ADN)
MAGWIQAQQLQGDALRQMQVLYGQHFPIEVRHYLAQWIESQPWDAIDLDNPQDRAQATQLLEGLV QELQKKAEHQVGEDGFLLKIKLRHYATQLQKTYDRCPLELVRCIRHILYNEQRLVREANNCSSPA GILVDAMSQKHLQINQTFEELRLVTQDTENELKKLQQTQEYFIIQYQESLRIQAQFAQLAQLSPQ ERLSRETALQQKQVSLEAWLQREAQTLQQYRVELAEKHQKTLQLLRKQQTIILDDELIQWKRRQQ LAGNGGPPEGSLDVLQSWCEKLAEIIWQNRQQIRRAEHLCQQLPIPGPVEEMLAEVNATITDIIS ALVTSTFIIEKQPPQVLKTQTKFAATVRLLVGGKLNVHMNPPQVKATIISEQQAKSLLKNENTRN ECSGEILNNCCVMEYHQATGTLSAHFRNMSLKRIKRADRRGAESVTEEKFTVLFESQFSVGSNEL VFQVKTLSL PWVI VHGSQDHNATATVLWDNAFAEPGRVPFAVPDKVLWPQLCEALNMKFKAEVQ SNRGLTKENLVFLAQKLFNNSSSHLEDYSGLSVSWSQFNRENLPGWNYTFWQWFDGVMEVLKKHH KPHWNDGAILGFVNKQQAHDLLINKPDGTFLLRFSDSEIGGITIAWKFDSPERNLWNLKPFTTRD FSIRSLADRLGDLSYLIYVFPDRPKDEVFSKYYTPVLAKAVDGYVKPQIKQWPEFVNASADAGG SSATYMDQAPSPAVCPQAPYNMYPQNPDHVLDQDGEFDLDETMDVARHVEELLRRPMDSLDSRLS PPAGLFTSARGSLS (SEQ ID NO: 54)
a t g g c g g g c t g g a t c c a g g c c c a g c a g c t g c a g g g a g a c g c g c t g c g c c a g a t g c a g g t g c t g t a c g g c c a g c a c t t c c c c a t c g a g g t c c g g c a c t a c t t g g c c c a g t g g a t t g a g a g c c a g c c a t g g g a t g c c a t t g a c t t g g a c a a t c c c c a g g a c a g a g c c c a a g c c a c c c a g c t c c t g g a g g g c c t g g t g c a g g a g c t g c a g a a g a a g g c g g a g c a c c a g g t g g g g g a a g a t g g g t t t t t a c t g a a g a t c a a g c t g a g g c a c t a c g c c a c g c a g c t c c a g a a a a c a t a t g a c c g c t g c c c c c t g g a g c t g g t c c g c t g c a t c c g g c a c a t t c t g t a c a a t g a a c a g a g g c t g g t c c g a g a a g c c a a c a a t t g c a g c t c t c c g g c t g g g a t c c t g g t t g a c g c c a t g t c c c a g a a g c a c c t t c a g a t c a a c c a g a c a t t t g a g g a g c t g c g a c t g g t c a c g c a g g a c a c a g a g a a t g a g c t g a a g a a a c t g c a g c a g a c t c a g g a g t a c t t c a t e a t c c a g t a c c a g g a g a g c c t g a g g a t c c a a g c t c a g t t t g c c c a g c t g g c c c a g c t g a g c c c c c a g g a g c g t c t g a g c c g g g a g a c g g c c c t c c a g c a g a a g c a g g t g t c t c t g g a g g c c t g g t t g c a g c g t g a g g c a c a g a c a c t g c a g c a g t a c c g c g t g g a g c t g g c c g a g a a g c a c c a g a a g a c c c t g c a g c t g c t g c g g a a g c a g c a g a c c a t c a t c c t g g a t g a c g a g c t g a t c c a g t g g a a g c g g c g g c a g c a g c t g g c c g g g a a c g g c g g g c c c c c c g a g g g c a g c c t g g a c g t g c t a c a g t c c t g g t g t g a g a a g t t g g c c g a g a t c a t c t g g c a g a a c c g g c a g c a g a t c c g c a g g g c t g a g c a c c t c t g c c a g c a g c t g c c c a t c c c c g g c c c a g t g g a g g a g a t g c t g g c c g a g g t c a a c g c c a c c a t c a c g g a c a t t a t c t c a g c c c t g g t g a c c a g c a c a t t c a t c a t t g a g a a g c a g c c t c c t c a g g t c c t g a a g a c c c a g a c c a a g t t t g c a g c c a c c g t a c g c c t g c t g g t g g g c g g g a a g c t g a a c g t g c a c a t g a a t c c c c c c c a g g t g a a g g c c a c c a t c a t c a g t g a g c a g c a g g c c a a g t c t c t g c t t a a a a a t g a g a a c a c c c g c a a c g a g t g c a g t g g t g a g a t c c t g a a c a a c t g c t g c g t g a t g g a g t a c c a c c a a g c c a c g g g c a c c c t c a g t g c c c a c t t c a g g a a c a t g t c a c t g a a g a g g a t c a a g c g t g c t g a c c g g c g g g g t g c a g a g t c c g t g a c a g a g g a g a a g t t c a c a g t c c t g t t t g a g t c t c a g t t c a g t g t t g g c a g c a a t g a g c t t g t g t t c c a g g t g a a g a c t c t g t c c c t a c c t g t g g t t g t c a t c g t c c a c g g c a g c c a g g a c c a c a a t g c c a c g g c t a c t g t g c t g t g g g a c a a t g c c t t t g c t g a g c c g g g c a g g g t g c c a t t t g c c g t g c c t g a c a a a g t g c t g t g g c c g c a g c t g t g t g a g g c g c t c a a c a t g a a a t t c a a g g c c g a a g t g c a g a g c a a c c g g g g c c t g a c c a a g g a g a a c c t c g t g t t c c t g g c g c a g a a a c t g t t c a a c a a c a g c a g c a g c c a c c t g g a g g a c t a c a g t g g c c t g t c c g t g t c c t g g t c c c a g t t c a a c a g g g a g a a c t t g c c g g g c t g g a a c t a c a c c t t c t g g c a g t g g t t t g a c g g g g t g a t g g a g g t g t t g a a g a a g c a c c a c a a g c c c c a c t g g a a t g a t g g g g c c a t c c t a g g t t t t g t g a a t a a g c a a c a g g c c c a c g a c c t g c t c a t c a a c a a g c c c g a c g g g a c c t t c t t g t t g c g c t t t a g t g a c t c a g a a a t c g g g g g c a t c a c e a t c g c c t g g a a g t t t g a t t c c c c g g a a c g c a a c c t g t g g a a c c t g a a a c c a t t c a c c a c g c g g g a t t t c t c c a t c a g g t c c c t g g c t g a c c g g c t g g g g g a c c t g a g c t a t c t c a t c t a t g t g t t t c c t g a c c g c c c c a a g g a t g a g g t c t t c t c c a a g t a c t a c a c t c c t g t g c t g g c t a a a g c t g t t g a t g g a t a t g t g a a a c c a c a g a t c a a g c a a g t g g t c c c t g a g t t t g t g a a t g c a t c t g c a g a t g c t g g g g g c a g c a g c g c c a c g t a c a t g g a c c a g g c c c c c t c c c c a g c t g t g t g c c c c c a g g c t c c c t a t a a c a t g t a c c c a c a g a a c c c t g a c c a t g t a c t c g a t c a g g a t g g a g a a t t c g a c c t g g a t g a g a c c a t g g a t g t g g c c a g g c a c g t g g a g g a a c t c t t a c g c c g a c c a a t g g a c a g t c t t g a c t c c c g c c t c t c g c c c c c t g c c g g t c t t t t c a c c t c t g c c a g a g g c t c c c t c t c a t g a (SEQ ID N O : 118 ) ARNm de escualeno epoxidasa de Homo sapiens (ERG1), (AF098865) SEQ ID NO: 55 (proteína) y SEQ ID NO: 119 (ADN) MWTFLGIATFTYFYKKFGDFITLANREVLLCVLVFLSLGLVLSYRCRHRNGGLLGRQQSGSQFAL FSDILSGLPFIGFFWAKSPPESENKEQLEARRRRKGTNISETSLIGTAACTSTSSQNDPEVIIVG AGVLGSALAAVLSRDGRKVTVTERDLKEPDRIVGEFLQPGGYHVLKDLGLGDTVEGLDAQWNGY MIHDQESKSEVQIPYPLSENNQVQSGRAFHHGRFIMSLRKAAMAEPNAKFIEGWLQLLEEDDW MGVQYKDKETGDIKELHAPLTWADGLFSKFRKSLVSNKVSVSSHFVGFLMKNAPQFKANHAELI LANPSPVLIYQISSSETRVLVDIRGEMPRNLREYMVEKIYPQIPDHLKEPFLEATDNSHLRSMPA SFLPPSSVKKRGVLLLGDAYNMRHPLTGGGMTVAFKDIKLWRKLLKGIPDLYDDAAIFEAKKSFY WARKTSHSFWNILAQALYELFSATDDSLHQLRKACFLYFKLGGECVAGPVGLLSVLSPNPLVLI GHFFAVAIYAVYFCFKSEPWITKPRALLS SGAVLYKACSVIFPLIYSEMKYMVH (SEQ ID N O :55)
a t g t g g a c t t t t c t g g g c a t t g c c a c t t t c a c c t a t t t t t a t a a g a a g t t c g g g g a c t t c a t c a c t t t g g c c a a c a g g g a g g t c c t g t t g t g c g t g c t g g t g t t c c t c t c g c t g g g c c t g g t g c t c t c c t a c c g c t g t c g c c a c c g a a a c g g g g g t c t c c t c g g g c g c c a g c a g a g c g g c t c c c a g t t c g c c c t c t t c t c g g a t a t t c t c t c a g g c c t g c c t t t c a t t g g c t t c t t c t g g g c c a a a t c c c c c c c t g a a t c a g a a a a t a a g g a g c a g c t c g a g g c c a g g a g g c g c a g a a a a g g a a c c a a t a t t t c a g a a a c a a g c t t a a t a g g a a c a g c t g c c t g t a c a t c a a c a t c t t c t c a g a a t g a c c c a g a a g t t a t c a t c g t g g g a g c t g g c g t g c t t g g c t c t g c t t t g g c a g c t g t g c t t t c c a g a g a t g g a a g a a a g g t g a c a g t c a t t g a g a g a g a c t t a a a a g a g c c t g a c a g a a t a g t t g g a g a a t t c c t g c a g c c g g g t g g t t a t c a t g t t c t c a a a g a c c t t g g t c t t g g a g a t a c a g t g g a a g g t c t t g a t g c c c a g g t t g t a a a t g g t t a c a t g a t t c a t g a t c a g g a a a g c a a a t c a g a g g t t c a g a t t c c t t a c c c t c t g t c a g a a a a c a a t c a a g t g c a g a g t g g a a g a g c t t t c c a t c a c g g a a g a t t c a t c a t g a g t c t c c g g a a a g c a g c t a t g g c a g a g c c c a a t g c a a a g t t t a t t g a a g g t g t t g t g t t a c a g t t a t t a g a g g a a g a t g a t g t t g t g a t g g g a g t t c a g t a c a a g g a t a a a g a g a c t g g a g a t a t c a a g g a a c t c c a t g c t c c a c t g a c t g t t g t t g c a g a t g g g c t t t t c t c c a a g t t c a g g a a a a g c c t g g t c t c c a a t a a a g t t t c t g t a t c a t c t c a t t t t g t t g g c t t t c t t a t g a a g a a t g c a c c a c a g t t t a a a g c a a a t c a t g c t g a a c t t a t t t t a g c t a a c c c g a g t c c a g t t c t c a t c t a c c a g a t t t c a t c c a g t g a a a c t c g a g t a c t t g t t g a c a t t a g a g g a g a a a t g c c a a g g a a t t t a a g a g a a t a c a t g g t t g a a a a a a t t t a c c c a c a a a t a c c t g a t c a c c t g a a a g a a c c a t t c t t a g a a g c c a c t g a c a a t t c t c a t c t g a g g t c c a t g c c a g c a a g c t t c c t t c c t c c t t c a t c a g t g a a g a a a c g a g g t g t t c t t c t t t t g g g a g a c g c a t a t a a t a t g a g g c a t c c a c t t a c t g g t g g a g g a a t g a c t g t t g c t t t t a a a g a t a t a a a a c t a t g g a g a a a a c t g c t a a a g g g t a t c c c t g a c c t t t a t g a t g a t g c a g c t a t t t t c g a g g c c a a a a a a t c a t t t t a c t g g g c a a g a a a a a c a t c t c a t t c c t t t g t c g t g a a t a t c c t t g c t c a g g c t c t t t a t g a a t t a t t t t c t g c c a c a g a t g a t t c c c t g c a t c a a c t a a g a a a a g c c t g t t t t c t t t a t t t c a a a c t t g g t g g c g a a t g t g t t g c g g g t c c t g t t g g g c t g c t t t c t g t a t t g t c t c c t a a c c c t c t a g t t t t a a t t g g a c a c t t c t t t g c t g t t g c a a t c t a t g c c g t g t a t t t t t g c t t t a a g t c a g a a c c t t g g a t t a c a a a a c c t c g a g c c c t t c t c a g t a g t g g t g c t g t a t t g t a c a a a g c g t g t t c t g t a a t a t t t c c t c t a a t t t a c t c a g a a a t g a a g t a t a t g g t t c a t t a a (SEQ ID N O : 119 )
Homo sapiens ets variante 2 (ETV2 / ER71), (M_014209) SEQ ID NO: 56 (proteína) y SEQ ID NO: 120 (ADN) MDLWNWDEASPQEVPPGNKLAGLEGAKLGFCFPDLALQGDTPTATAETCWKGTSSSLASFPQLDW GSALLHPEVPWGAEPDSQALPWSGDWTDMACTAWDSWSGASQTLGPAPLGPGPIPAAGSEGAAGQ NCVPVAGEATSWSRAQAAGSNTSWDCSVGPDGDTYWGSGLGGEPRTDCTISWGGPAGPDCTTSWN PGLHAGGTTSLKRYQSSALTVCSEPSPQSDRASLARCPKTNHRGPIQLWQFLLELLHDGARSSCI RWTGNSREFQLCDPKEVARLWGERKRKPGMNYEKLSRGLRYYYRRDIVRKSGGRKYTYRFGGRVP SLAYPDCAGGGRGAETQ (SEQ ID N O :56)
a t g g a c c t g t g g a a c t g g g a t g a g g c a t c c c c a c a g g a a g t g c c t c c a g g g a a c a a g c t g g c a g g g c t t g a a g g a g c c a a a t t a g g c t t c t g t t t c c c t g a t c t g g c a c t c c a a g g g g a c a c g c c g a c a g c g a c a g c a g a g a c a t g c t g g a a a g g t a c a a g c t c a t c c c t g g c a a g c t t c c c a c a g c t g g a c t g g g g c t c c g c g t t a c t g c a c c c a g a a g t t c c a t g g g g g g c g g a g c c c g a c t c t c a g g c t c t t c c g t g g t c c g g g g a c t g g a c a g a c a t g g c g t g c a c a g c c t g g g a c t c t t g g a g c g g c g c c t c g c a g a c c c t g g g c c c c g c c c c t c t c g g c c c g g g c c c c a t c c c c g c c g c c g g c t c c g a a g g c g c c g c g g g c c a g a a c t g c g t c c c c g t g g c g g g a g a g g c c a c c t c g t g g t c g c g c g c c c a g g c c g c c g g g a g c a a c a c c a g c t g g g a c t g t t c t g t g g g g c c c g a c g g c g a t a c c t a c t g g g g c a g t g g c c t g g g c g g g g a g c c g c g c a c g g a c t g t a c c a t t t c g t g g g g c g g g c c c g c g g g c c c g g a c t g t a c c a c c t c c t g g a a c c c g g g g c t g c a t g c g g g t g g c a c c a c c t c t t t g a a g c g g t a c c a g a g c t c a g c t c t c a c c g t t t g c t c c g a a c c g a g c c c g c a g t c g g a c c g t g c c a g t t t g g c t c g a t g c c c c a a a a c t a a c c a c c g a g g t c c c a t t c a g c t g t g g c a g t t c c t c c t g g a g c t g c t c c a c g a c g g g g c g c g t a g c a g c t g c a t c c g t t g g a c t g g c a a c a g c c g c g a g t t c c a g c t g t g c g a c c c c a a a g a g g t g g c t c g g c t g t g g g g c g a g c g c a a g a g a a a g c c g g g c a t g a a t t a c g a g a a g c t g a g c c g g g g c c t t c g c t a c t a c t a t c g c c g c g a c a t c g t g c g c a a g a g c g g g g g g c g a a a g t a c a c g t a c c g c t t c g g g g g c c g c g t g c c c a g c c t a g c c t a t c c g g a c t g t g c g g g a g g c g g a c g g g g a g c a g a g a c a c a a t a a (SEQ ID N O :120)
Homo sapiens proteína de unión a GATA 2 (GATA2) (NM_001145661) SEQ ID NO: 57 (proteína) y SEQ ID NO: 121 (ADN) MEVAPEQPRWMAHPAVLNAQHPDSHHPGLAHNYMEPAQLLPPDEVDVFFNHLDSQGNPYYANPAH ARARVSYSPAHARLTGGQMCRPHLLHSPGLPWLDGGKAALSAAAAHHHNPWTVSPFSKTPLHPSA AGGPGGPLSVYPGAGGGSGGGSGSSVASLTPTAAHSGSHLFGFPPTPPKEVSPDPSTTGAASPAS SSAGGSAARGEDKDGVKYQVSLTESMKMESGSPLRPGLATMGTQPATHHPIPTYPSYVPAAAHDY SSGLFHPGGFLGGPASSFTPKQRSKARSCSEGRECVNCGATATPLWRRDGTGHYLCNACGLYHKM NGQNRPLIKPKRRLSAARRAGTCCANCQTTTTTLWRRNANGDPVCNACGLYYKLHNVNRPLTMKK EGIQTRNRKMSNKSKKSKKGAECFEELSKCMQEKSSPFSAAALAGHMAPVGHLPPFSHSGHILPT PTPIHPSSSLSFGHPHPSSMVTAMG (SEQ ID N O :57)
a t g g a g g t g g c g c c c g a g c a g c c g c g c t g g a t g g c g c a c c c g g c c g t g c t g a a t g c g c a g c a c c c c g a c t c a c a c c a c c c g g g c c t g g c g c a c a a c t a c a t g g a a c c c g c g c a g c t g c t g c c t c c a g a c g a g g t g g a c g t c t t c t t c a a t c a c c t c g a c t c g c a g g g c a a c c c c t a c t a t g c c a a c c c c g c t c a c g c g c g g g c g c g c g t c t c c t a c a g c c c c g c g c a c g c c c g c c t g a c c g g a g g c c a g a t g t g c c g c c c a c a c t t g t t g c a c a g c c c g g g t t t g c c c t g g c t g g a c g g g g g c a a a g c a g c c c t c t c t g c c g c t g c g g c c c a c c a c c a c a a c c c c t g g a c c g t g a g c c c c t t c t c c a a g a c g c c a c t g c a c c c c t c a g c t g c t g g a g g c c c t g g a g g c c c a c t c t c t g t g t a c c c a g g g g c t g g g g g t g g g a g c g g g g g a g g c a g c g g g a g c t c a g t g g c c t c c c t c a c c c c t a c a g c a g c c c a c t c t g g c t c c c a c c t t t t c g g c t t c c c a c c c a c g c c a c c c a a a g a a g t g t c t c c t g a c c c t a g c a c c a c g g g g g c t g c g t c t c c a g c c t c a t c t t c c g c g g g g g g t a g t g c a g c c c g a g g a g a g g a c a a g g a c g g c g t c a a g t a c c a g g t g t c a c t g a c g g a g a g c a t g a a g a t g g a a a g t g g c a g t c c c c t g c g c c c a g g c c t a g c t a c t a t g g g c a c c c a g c c t g c t a c a c a c c a c c c c a t c c c c a c c t a c c c c t c c t a t g t g c c g g c g g c t g c c c a c g a c t a c a g c a g c g g a c t c t t c c a c c c c g g a g g c t t c c t g g g g g g a c c g g c c t c c a g c t t c a c c c c t a a g c a g c g c a g c a a g g c t c g t t c c t g t t c a g a a g g c c g g g a g t g t g t c a a c t g t g g g g c c a c a g c c a c c c c t c t c t g g c g g c g g g a c g g c a c c g g c c a c t a c c t g t g c a a t g c c t g t g g c c t c t a c c a c a a g a t g a a t g g g c a g a a c c g a c c a c t c a t c a a g c c c a a g c g a a g a c t g t c g g c c g c c a g a a g a g c c g g c a c c t g t t g t g c a a a t t g t c a g a c g a c a a c c a c c a c c t t a t g g c g c c g a a a c g c c a a c g g g g a c c c t g t c t g c a a c g c c t g t g g c c t c t a c t a c a a g c t g c a c a a t g t t a a c a g g c c a c t g a c c a t g a a g a a g g a a g g g a t c c a g a c t c g g a a c c g g a a g a t g t c c a a c a a g t c c a a g a a g a g c a a g a a a g g g g c g g a g t g c t t c g a g g a g c t g t c a a a g t g c a t g c a g g a g a a g t c a t c c c c c t t c a g t g c a g c t g c c c t g g c t g g a c a c a t g g c a c c t g t g g g c c a c c t c c c g c c c t t c a g c c a c t c c g g a c a c a t c c t g c c c a c t c c g a c g c c c a t c c a c c c c t c c t c c a g c c t c t c c t t c g g c c a c c c c c a c c c g t c c a g c a t g g t g a c c g c c a t g g g c t a g (SEQ I D N O : 121 )
Factor de transcripción bHLH de la familia relacionada con hes de Homo sapiens con motivo YRPW 1 (HEY1) (M_012258) SEQ ID NO: 58 (proteína) y SEQ ID NO: 122 (ADN)
MKRAHPEYSSSDSELDETIEVEKESADENGNLSSALGSMSPTTSSQILARKRRRGIIEKRRRDRI NNSLSELRRLVPSAFEKQGSAKLEKAEILQMTVDHLKMLHTAGGKGYFDAHALAMDYRSLGFREC LAEVARYLSIIEGLDASDPLRVRLVSHLNNYASQREAASGAHAGLGHIPWGTVFGHHPHIAHPLL LPQNGHGNAGTTASPTEPHHQGRLGSAHPEAPALRAPPSGSLGPVLPWTSASKLSPPLLSSVAS LSAFPFSFGSFHLLSPNALSPSAPTQAANLGKPYRPWGTEIGAF (SEQ ID N O :58)
a t g a a g c g a g c t c a c c c c g a g t a c a g c t c c t c g g a c a g c g a g c t g g a c g a g a c c a t c g a g g t g g a g a a g g a g a g t g c g g a c g a g a a t g g a a a c t t g a g t t c g g c t c t a g g t t c c a t g t c c c c a a c t a c a t c t t c c c a g a t t t t g g c c a g a a a a a g a c g g a g a g g a a t a a t t g a g a a g c g c c g a c g a g a c c g g a t c a a t a a c a g t t t g t c t g a g c t g a g a a g g c t g g t a c c c a g t g c t t t t g a g a a g c a g g g a t c t g c t a a g c t a g a a a a a g c c g a g a t c c t g c a g a t g a c c g t g g a t c a c c t g a a a a t g c t g c a t a c g g c a g g a g g g a a a g g t t a c t t t g a c g c g c a c g c c c t t g c t a t g g a c t a t c g g a g t t t g g g a t t t c g g g a a t g c c t g g c a g a a g t t g c g c g t t a t c t g a g c a t c a t t g a a g g a c t a g a t g c c t c t g a c c c g c t t c g a g t t c g a c t g g t t t c g c a t c t c a a c a a c t a c g c t t c c c a g c g g g a a g c c g c g a g c g g c g c c c a c g c g g g c c t c g g a c a c a t t c c c t g g g g g a c c g t c t t c g g a c a t c a c c c g c a c a t c g c g c a c c c g c t g t t g c t g c c c c a g a a c g g c c a c g g g a a c g c g g g c a c c a c g g c c t c a c c c a c g g a a c c g c a c c a c c a g g g c a g g c t g g g c t c g g c a c a t c c g g a g g c g c c t g c t t t g c g a g c g c c c c c t a g c g g c a g c c t c g g a c c g g t g c t c c c t g t g g t c a c c t c c g c c t c c a a a c t g t c g c c g c c t c t g c t c t c c t c a g t g g c c t c c c t g t c g g c c t t c c c c t t c t c t t t c g g c t c c t t c c a c t t a c t g t c t c c c a a t g c a c t g a g c c c t t c a g c a c c c a c g c a g g c t g c a a a c c t t g g c a a g c c c t a t a g a c c t t g g g g g a c g g a g a t c g g a g c t t t t t a a (SEQ ID N O :122 )
Homo sapiens Hey2 (AB044755) SEQ ID NO: 59 (proteína) y SEQ ID NO: 123 (ADN) MKRPCEETTSESDMDETIDVGSENNYSGQSTSSVIRLNSPTTTSQIMARKKRRGIIEKRRRDRIN NSLSELRRLVPTAFEKQGSAKLEKAEILQMTVDHLKMLQATGGKGYFDAHALAMDFMSIGFRECL TEVARYLSSVEGLDSSDPLRVRLVSHLSTCATQREAAAMTSSMAHHHHPLHPHHWAAAFHHLPAA LLQPNGLHASESTPCRLSTTSEVPPAHGSALLTATFAHADSALRMPSTGSVAPCVPPLSTSLLSL SATVHAAAAAATAAAHSFPLSFAGAFPMLPPNAAAAVAAATAISPPLSVSATSSPQQTSSGTNNK PYRPWGTEVGAF (SEQ ID N O :59)
a t g a a g c g c c c c t g c g a g g a g a c g a c c t c c g a g a g c g a c a t g g a c g a g a c c a t c g a c g t g g g g a g c g a g a a c a a t t a c t c g g g g c a a a g t a c t a g c t c t g t g a t t a g a t t g a a t t c t c c a a c a a c a a c a t c t c a g a t t a t g g c a a g a a a g a a a a g g a g a g g g a t t a t a g a g a a a a g g c g t c g g g a t c g g a t a a a t a a c a g t t t a t c t g a g t t g a g a a g a c t t g t g c c a a c t g c t t t t g a a a a a c a a g g a t c t g c a a a g t t a g a a a a a g c t g a a a t a t t g c a a a t g a c a g t g g a t c a t t t g a a g a t g c t t c a g g c a a c a g g g g g t a a a g g c t a c t t t g a c g c a c a c g c t c t t g c c a t g g a c t t c a t g a g c a t a g g a t t c c g a g a g t g c c t a a c a g a a g t t g c g c g g t a c c t g a g c t c c g t g g a a g g c c t g g a c t c c t c g g a t c c g c t g c g g g t g c g g c t t g t g t c t c a t c t c a g c a c t t g c g c c a c c c a g c g g g a g g c g g c g g c c a t g a c a t c c t c c a t g g c c c a c c a c c a t c a t c c g c t c c a c c c g c a t c a c t g g g c c g c c g c c t t c c a c c a c c t g c c c g c a g c c c t g c t c c a g c c c a a c g g c c t c c a t g c c t c a g a g t c a a c c c c t t g t c g c c t c t c c a c a a c t t c a g a a g t g c c t c c t g c c c a c g g c t c t g c t c t c c t c a c g g c c a c g t t t g c c c a t g c g g a t t c a g c c c t c c g a a t g c c a t c c a c g g g c a g c g t c g c c c c c t g c g t g c c a c c t c t c t c c a c c t c t c t c t t g t c c c t c t c t g c c a c c g t c c a c g c c g c a g c c g c a g c a g c c a c c g c g g c t g c a c a c a g c t t c c c t c t g t c c t t c g c g g g g g c a t t c c c c a t g c t t c c c c c a a a c g c a g c a g c a g c a g t g g c c g c g g c c a c a g c c a t c a g c c c g c c c t t g t c a g t a t c a g c c a c g t c c a g t c c t c a g c a g a c c a g c a g t g g a a c a a a c a a t a a a c c t t a c c g a c c c t g g g g g a c a g a a g t t g g a g c t t t t t a a (SEQ ID N O :123 )
Forkhead box de Homo sapiens C1 (FOXC1) (M_001453) SEQ ID NO: 60 (proteína) y SEQ ID NO: 124 (ADN) MQARYSVSSPNSLGWPYLGGEQSYYRAAAAAAGGGYTAMPAPMSVYSHPAHAEQYPGGMARAYG PYTPQPQPKDMVKPPYSYIALITMAIQNAPDKKITLNGIYQFIMDRFPFYRDNKQGWQNSIRHNL SLNECFVKVPRDDKKPGKGSYWTLDPDSYNMFENGSFLRRRRRFKKKDAVKDKEEKDRLHLKEPP PPGRQPPPAPPEQADGNAPGPQPPPVRIQDIKTENGTCPSPPQPLSPAAALGSGSAAAVPKIESP DSSSSSLSSGSSPPGSLPSARPLSLDGADSAPPPPAPSAPPPHHSQGFSVDNIMTSLRGSPQSAA AELSSGLLASAAASSRAGIAPPLALGAYSPGQSSLYSSPCSQTSSAGSSGGGGGGAGAAGGAGGA GTYHCNLQAMSLYAAGERGGHLQGAPGGAGGSAVDDPLPDYSLPPVTSSSSSSLSHGGGGGGGGG
GQEAGHHPAAHQGRLTSWYLNQAGGDLGHLASAAAAAAAAGYPGQQQNFHSVREMFESQRIGLNN SPVNGNSSCQMAFPSSQSLYRTSGAFVYDCSKF (SEQ I D N O : 60)
a t g c a g g c g c g c t a c t c c g t g t c c a g c c c c a a c t c c c t g g g a g t g g t g c c c t a c c t c g g c g g c g a g c a g a g c t a c t a c c g c g c g g c g g c c g c g g c g g c c g g g g g c g g c t a c a c c g c c a t g c c g g c c c c c a t g a g c g t g t a c t c g c a c c c t g c g c a c g c c g a g c a g t a c c c g g g c g g c a t g g c c c g c g c c t a c g g g c c c t a c a c g c c g c a g c c g c a g c c c a a g g a c a t g g t g a a g c c g c c c t a t a g c t a c a t c g c g c t c a t c a c e a t g g c c a t c c a g a a c g c c c c g g a c a a g a a g a t c a c c c t g a a c g g c a t c t a c c a g t t c a t e a t g g a c c g c t t c c c c t t c t a c c g g g a c a a c a a g c a g g g c t g g c a g a a c a g c a t c c g c c a c a a c c t c t c g c t c a a c g a g t g c t t c g t c a a g g t g c c g c g c g a c g a c a a g a a g c c g g g c a a g g g c a g c t a c t g g a c g c t g g a c c c g g a c t c c t a c a a c a t g t t c g a g a a c g g c a g c t t c c t g c g g c g g c g g c g g c g c t t c a a g a a g a a g g a c g c g g t g a a g g a c a a g g a g g a g a a g g a c a g g c t g c a c c t c a a g g a g c c g c c c c c g c c c g g c c g c c a g c c c c c g c c c g c g c c g c c g g a g c a g g c c g a c g g c a a c g c g c c c g g t c c g c a g c c g c c g c c c g t g c g c a t c c a g g a c a t c a a g a c c g a g a a c g g t a c g t g c c c c t c g c c g c c c c a g c c c c t g t c c c c g g c c g c c g c c c t g g g c a g c g g c a g c g c c g c c g c g g t g c c c a a g a t c g a g a g c c c c g a c a g c a g c a g c a g c a g c c t g t c c a g c g g g a g c a g c c c c c c g g g c a g c c t g c c g t c g g c g c g g c c g c t c a g c c t g g a c g g t g c g g a t t c c g c g c c g c c g c c g c c c g c g c c c t c c g c c c c g c c g c c g c a c c a t a g c c a g g g c t t c a g c g t g g a c a a c a t c a t g a c g t c g c t g c g g g g g t c g c c g c a g a g c g c g g c c g c g g a g c t c a g c t c c g g c c t t c t g g c c t c g g c g g c c g c g t c c t c g c g c g c g g g g a t c g c a c c c c c g c t g g c g c t c g g c g c c t a c t c g c c c g g c c a g a g c t c c c t c t a c a g c t c c c c c t g c a g c c a g a c c t c c a g c g c g g g c a g c t c g g g c g g c g g c g g c g g c g g c g c g g g g g c c g c g g g g g g c g c g g g c g g c g c c g g g a c c t a c c a c t g c a a c c t g c a a g c c a t g a g c c t g t a c g c g g c c g g c g a g c g c g g g g g c c a c t t g c a g g g c g c g c c c g g g g g c g c g g g c g g c t c g g c c g t g g a c g a c c c c c t g c c c g a c t a c t c t c t g c c t c c g g t c a c c a g c a g c a g c t c g t c g t c c c t g a g t c a c g g c g g c g g c g g c g g c g g c g g c g g g g g a g g c c a g g a g g c c g g c c a c c a c c c t g c g g c c c a c c a a g g c c g c c t c a c c t c g t g g t a c c t g a a c c a g g c g g g c g g a g a c c t g g g c c a c t t g g c g a g c g c g g c g g c g g c g g c g g c g g c c g c a g g c t a c c c g g g c c a g c a g c a g a a c t t c c a c t c g g t g c g g g a g a t g t t c g a g t c a c a g a g g a t c g g c t t g a a c a a c t c t c c a g t g a a c g g g a a t a g t a g c t g t c a a a t g g c c t t c c c t t c c a g c c a g t c t c t g t a c c g c a c g t c c g g a g c t t t c g t c t a c g a c t g t a g c a a g t t t t g a (SEQ I D N O : 124 )
Homo sapiens forkhead box C2 (MFH-1, forkhead 1 mewsenquimal) (FOXC2) (M_005251) SEQ ID NO: 61 (proteína) y SEQ ID NO: 125 (DNA)
MQARYSVSDPNALGWPYLSEQNYYRAAGSYGGMAS PMGVYSGHPEQYSAGMGRSYAPYHHHQPA APKDLVKPPYSYIALITMAIQNAPEKKITLNGIYQFIMDRFPFYRENKQG W QNSIRHNLSLNECF VKVPRDDKKPGKGSYWTLDPDSYNMFENGSFLRRRRRFKKKDVSKEKEERAHLKEPPPAASKGAP ATPHLADAPKEAEKKWTKSEAASPALPVTTKVETLSPESALQGSPRSAASTPAGSPDGSLPEHH
AAAPNGLPGFSVENIMTLRTSPPGGELSPGAGRAGLWPPLALPYAAAPPAAYGQPCAQGLEAGA AGGYQCSMRAMSLYTGAERPAHMCVPPALDEALSDHPSGPTSPLSALNLAAGQEGALAATGHHHQ HHGHHHPQAPPPPPAPQPQPTPQPGAAAAQAASWYLNHSGDLNHLPGHTFAAQQQTFPNVREMFN SHRLGIENSTLGESQVSGNASCQLPYRSTPPLYRHAAPYSYDCTKY (SEQ ID N O : 61) a t g c a g g c g c g c t a c t c c g t g t c c g a c c c c a a c g c c c t g g g a g t g g t g c c c t a c c t g a g c g a g c a g a a t t a c t a c c g g g c t g c g g g c a g c t a c g g c g g c a t g g c c a g c c c c a t g g g c g t c t a t t c c g g c c a c c c g g a g c a g t a c a g c g c g g g g a t g g g c c g c t c c t a c g c g c c c t a c c a c c a c c a c c a g c c c g c g g c g c c t a a g g a c c t g g t g a a g c c g c c c t a c a g c t a c a t c g c g c t c a t c a c c a t g g c c a t c c a g a a c g c g c c c g a g a a g a a g a t c a c c t t g a a c g g c a t c t a c c a g t t c a t c a t g g a c c g c t t c c c c t t c t a c c g g g a g a a c a a g c a g g g c t g g c a g a a c a g c a t c c g c c a c a a c c t c t c g c t c a a c g a g t g c t t c g t c a a g g t g c c c c g c g a c g a c a a g a a g c c c g g c a a g g g c a g t t a c t g g a c c c t g g a c c c g g a c t c c t a c a a c a t g t t c g a g a a c g g c a g c t t c c t g c g g c g c c g g c g g c g c t t c a a a a a g a a g g a c g t g t c c a a g g a g a a g g a g g a g c g g g c c c a c c t c a a g g a g c c g c c c c c g g c g g c g t c c a a g g g c g c c c c g g c c a c c c c c c a c c t a g c g g a c g c c c c c a a g g a g g c c g a g a a g a a g g t g g t g a t c a a g a g c g a g g c g g c g t c c c c g g c g c t g c c g g t c a t c a c c a a g g t g g a g a c g c t g a g c c c c g a g a g c g c g c t g c a g g g c a g c c c g c g c a g c g c g g c c t c c a c g c c c g c c g g c t c c c c c g a c g g c t c g c t g c c g g a g c a c c a c g c c g c g g c g c c c a a c g g g c t g c c t g g c t t c a g c g t g g a g a a c a t c a t g a c c c t g c g a a c g t c g c c g c c g g g c g g a g a g c t g a g c c c g g g g g c c g g a c g c g c g g g c c t g g t g g t g c c g c c g c t g g c g c t g c c c t a c g c c g c c g c g c c g c c c g c c g c c t a c g g c c a g c c g t g c g c t c a g g g c c t g g a g g c c g g g g c c g c c g g g g g c t a c c a g t g c a g c a t g c g a g c g a t g a g c c t g t a c a c c g g g g c c g a g c g g c c g g c g c a c a t g t g c g t c c c g c c c g c c c t g g a c g a g g c c c t c t c g g a c c a c c c g a g c g g c c c c a c g t c g c c c c t g a g c g c t c t c a a c c t c g c c g c c g g c c a g g a g g g c g c g c t c g c c g c c a c g g g c c a c c a c c a c c a g c a c c a c g g c c a c c a c c a c c c g c a g g c g c c g c c g c c c c c g c c g g c t c c c c a g c c c c a g c c g a c g c c g c a g c c c g g g g c c g c c g c g g c g c a g g c g g c c t c c t g g t a t c t c a a c c a c a g c g g g g a c c t g a a c c a c c t c c c c g g c c a c a c g t t c g c g g c c c a g c a g c a a a c t t t c c c c a a c g t g c g g g a g a t g t t c a a c t c c c a c c g g c t g g g g a t t g a g a a c t c g a c c c t c g g g g a g t c c c a g g t g a g t g g c a a t g c c a g c t g c c a g c t g c c c t a c a g a t c c a c g c c g c c t c t c t a t c g c c a c g c a g c c c c c t a c t c c t a c g a c t g c a c g a a a t a c t g a (SEQ I D N O : 125 )
SEQ ID NO: 62: Homo sapiens SRY (región determinante del sexo Y) -box 7 (SOX7) NM_031439 SEQ ID NO: 62 (proteína) y SEQ ID NO: 126 (ADN) MASLLGAYPWPEGLECPALDAELSDGQSPPAVPRPPGDKGSESRIRRPMNAFMVWAKDERKRLAV QNPDLHNAELSKMLGKSWKALTLSQKRPYVDEAERLRLQHMQDYPNYKYRPRRKKQAKRLCKRVD PGFLLSSLSRDQNALPEKRSGSRGALGEKEDRGEYSPGTALPSLRGCYHEGPAGGGGGGTPSSVD TYPYGLPTPPEMSPLDVLEPEQTFFSSPCQEEHGHPRRIPHLPGHPYSPEYAPSPLHCSHPLGSL
ALGQSPGVSMMSPVPGCPPSPAYYSPATYHPLHSNLQAHLGQLSPPPEHPGFDALDQLSQVELLG
DMDRNEFDQYLNTPGHPDSATGAMALSGHVPVSQVTPTGPTETSLISVTiADATATYYNSYSVS
(SEQ ID NO: 62)
a t g g c t t c g c t g c t g g g a g c c t a c c c t t g g c c c g a g g g t c t c g a g t g c c c g g c c c t g g a c g c c g a g c t g t c g g a t g g a c a a t c g c c g c c g g c c g t c c c c c g g c c c c c g g g g g a c a a g g g c t c c g a g a g c c g t a t c c g g c g g c c c a t g a a c g c c t t c a t g g t t t g g g c c a a g g a c g a g a g g a a a c g g c t g g c a g t g c a g a a c c c g g a c c t g c a c a a c g c c g a g c t c a g c a a g a t g c t g g g a a a g t c g t g g a a g g c g c t g a c g c t g t c c c a g a a g a g g c c g t a c g t g g a c g a g g c g g a g c g g c t g c g c c t g c a g c a c a t g c a g g a c t a c c c c a a c t a c a a g t a c c g g c c g c g c a g g a a g a a g c a g g c c a a g c g g c t g t g c a a g c g c g t g g a c c c g g g c t t c c t t c t g a g c t c c c t c t c c c g g g a c c a g a a c g c c c t g c c g g a g a a g a g a a g c g g c a g c c g g g g g g c g c t g g g g g a g a a g g a g g a c a g g g g t g a g t a c t c c c c c g g c a c t g c c c t g c c c a g c c t c c g g g g c t g c t a c c a c g a g g g g c c g g c t g g t g g t g g c g g c g g c g g c a c c c c g a g c a g t g t g g a c a c g t a c c c g t a c g g g c t g c c c a c a c c t c c t g a a a t g t c t c c c c t g g a c g t g c t g g a g c c g g a g c a g a c c t t c t t c t c c t c c c c c t g c c a g g a g g a g c a t g g c c a t c c c c g c c g c a t c c c c c a c c t g c c a g g g c a c c c g t a c t c a c c g g a g t a c g c c c c a a g c c c t c t c c a c t g t a g c c a c c c c c t g g g c t c c c t g g c c c t t g g c c a g t c c c c c g g c g t c t c c a t g a t g t c c c c t g t a c c c g g c t g t c c c c c a t c t c c t g c c t a t t a c t c c c c g g c c a c c t a c c a c c c a c t c c a c t c c a a c c t c c a a g c c c a c c t g g g c c a g c t t t c c c c g c c t c c t g a g c a c c c t g g c t t c g a c g c c c t g g a t c a a c t g a g c c a g g t g g a a c t c c t g g g g g a c a t g g a t c g c a a t g a a t t c g a c c a g t a t t t g a a c a c t c c t g g c c a c c c a g a c t c c g c c a c a g g g g c c a t g g c c c t c a g t g g g c a t g t t c c g g t c t c c c a g g t g a c a c c a a c g g g t c c c a c a g a g a c c a g c c t c a t c t c c g t c c t g g c t g a t g c c a c g g c c a c g t a c t a c a a c a g c t a c a g t g t g t c a t a g (SEQ ID NO: 126)
Homo sapiens SOX18 (AB033888) SEQ ID NO: 63 (proteína) y SEQ ID NO: 127 (ADN)
MQRSPPGYGAQDDPPARRDCAWAPGHGAAADTRGLAAGPAALAAPAAPASPPSPQRSPPRSPEPG
RYGLSPAGRGERQAADESRIRRPMNAFMVWAKDERKRLAQQNPDLHNAVLSKMLGKAWKELNAAE
KRPFVEEAERLRVQHLRDHPNYKYRPRRKKQARKARRLEPGLLLPGLAPPQPPPEPFPAASGSAR
AFRELPPLGAEFDGLGLPTPERSPLDGLEPGEAAFFPPPAAPEDCALRPFRAPYAPTELSRDPGG
CYGAPLAEALRTAPPAAPLAGLYYGTLGTPGPYPGPLSPPPEAPPLESAEPLGPAADLWADVDLT
EFDQYLNCSRTRPDAPGLPYHVALAKLGPRAMSCPEESSLISALSDASSAVYYSACISG (SEQ
ID NO: 63)
a t g c a g a g a t c g c c g c c c g g c t a c g g c g c a c a g g a c g a c c c g c c c g c c c g c c g c g a c t g t g c a t g g g c c c c g g g a c a c g g g g c c g c c g c t g a c a c g c g c g g c c t c g c c g c c g g c c c c g c c g c c c t c g c c g c g c c c g c c g c g c c c g c c t c g c c g c c c a g c c c g c a g c g c a g t c c c c c g c g c a g c c c c g a g c c g g g g c g c ta tg g c c tc a g c c c g g c c g g c c g c g g g g a a c g c c a g g c g g c a g a c g a g tc g c g c a tc c g g c g g c c c a tg a a c g c c t t c a tg g tg tg g g c a a a g g a c g a g c g c a a g c g g c tg g c t c a g c a g a a c c c g g a c c tg c a c a a c g c g g tg c t c a g c a a g a tg c tg g g c a a a g c g tg g a a g g a g c tg a a c g c g g c g g a g a a g c g g c c c t t c g tg g a g g a a g c c g a a c g g c tg c g c g tg c a g c a c t tg c g c g a c c a c c c c a a c ta c a a g ta c c g g c c g c g c c g c a a g a a g c a g g c g c g c a a g g c c c g g c g g c tg g a g c c c g g c c tc c tg c t c c c g g g a t t a g c g c c c c c g c a g c c a c c g c c c g a g c c t t t c c c c g c g g c g t c t g g c t c g g c t c g c g c c t t c c g c g a g c t g c c c c c g c t g g g c g c c g a g t t c g a c g g c c t g g g g c t g c c c a c g c c c g a g c g c t c g c c t c t g g a c g g c c t g g a g c c c g g c g a g g c t g c c t t c t t c c c a c c g c c c g c g g c g c c c g a g g a c t g c g c g c t g c g g c c c t t c c g c g c g c c c t a c g c g c c c a c c g a g t t g t c g c g g g a c c c c g g c g g t t g c t a c g g g g c t c c c c t g g c g g a g g c g c t c a g g a c c g c g c c c c c c g c g g c g c c g c t c g c t g g c c t g ta c t a c g g c a c c c tg g g c a c g c c c g g c c c g t a c c c c g g c c c g c tg t c g c c g c c g c c c g a g g c c c c g c c g c tg g a g a g c g c c g a g c c g c t g g g g c c c g c c g c c g a tc tg tg g g c c g a c g t g g a c c t c a c c g a g t t c g a c c a g t a c c t c a a c t g c a g c c g g a c t c g g c c c g a c g c c c c c g g g c t c c c g t a c c a c g t g g c a c tg g c c a a a c tg g g c c c g c g c g c c a t g t c c t g c c c a g a g g a g a g c a g c c t g a t c t c c g c g c t g t c g g a c g c c a g c a g c g c g g t c t a t t a c a g c g c g t g c a t c t c c g g c t a g (SEQ ID N O :127 )
Las composiciones y métodos aquí descritos son actualmente representativos de realizaciones preferentes y son ilustrativas.

Claims (9)

REIVINDICACIONES
1. Composición farmacéutica para su uso en un método de tratamiento del cáncer mediante la administración in vivo de la composición farmacéutica a un sujeto que lo necesite, comprendiendo una proteína de reprogramación aislada modificada con un reactivo de transducción de proteínas seleccionada del grupo consistente en Sox2, Oct4 y Nanog, donde el reactivo de transducción de proteínas comprende un reactivo catiónico y un lípido y donde el reactivo de transducción de proteínas no está unido de forma covalente a la proteína de reprogramación.
2. Composición farmacéutica para su uso en el método de la reivindicación 1, donde el reactivo catiónico comprende polietilenimina.
3. Composición farmacéutica para su uso en el método de la reivindicación 1 o 2, donde el cáncer se selecciona de cáncer de vejiga, de mama, colorrectal, cervical, de esófago, de cabeza y cuello, renal, de pulmón, cánceres del sistema nervioso como glioblastoma, astrocitoma, ependimoma, neuroblastoma, retinoblastoma, meningiomas, tumores celulares granulares y tumores de la vaina nerviosa, cáncer de ovario, de páncreas, de próstata, de piel, de estómago, de testículo, de garganta, de uraco o vaginal.
4. Proteína de reprogramación aislada modificada con un reactivo de transducción de proteínas para su uso en un método de tratamiento del cáncer mediante la administración in vivo de la proteína de reprogramación modificada con un reactivo de transducción de proteínas a un sujeto que lo necesite seleccionada del grupo consistente en Sox2, Oct4 y Nanog, donde el reactivo de transducción de proteínas comprende un reactivo catiónico y un lípido y donde el reactivo de transducción de proteínas no está unido de forma covalente a la proteína de reprogramación.
5. Proteína de reprogramación aislada modificada con un reactivo de transducción de proteínas para su uso en el método de la reivindicación 4, donde el sujeto tiene un cáncer caracterizado por células dañadas y/o defectuosas.
6. Proteína de reprogramación aislada modificada con un reactivo de transducción de proteínas para su uso en el método según cualquiera de las reivindicaciones 4 o 5, donde el sujeto tiene cáncer y las una o más proteínas de reprogramación modificadas con un reactivo de transducción de proteínas comprenden Sox2, Oct4 y Nanog.
7. Proteína de reprogramación aislada modificada con un reactivo de transducción de proteínas para su uso en el método según cualquiera de las reivindicaciones 4 - 6, donde el sujeto tiene un tumor cerebral o cáncer de mama.
8. Proteína de reprogramación aislada modificada con un reactivo de transducción de proteínas para su uso en el método según cualquiera de las reivindicaciones 4 - 6, donde el sujeto tiene un tumor cerebral o cáncer de mama y las una o más proteínas de reprogramación modificadas con un reactivo de transducción de proteínas comprenden Sox2, Oct4 y Nanog.
9. Proteína de reprogramación aislada modificada con un reactivo de transducción de proteínas para su uso en el método según de la reivindicación 4 o 5, donde el cáncer se selecciona de cáncer de vejiga, de mama, colorrectal, cervical, de esófago, de cabeza y cuello, renal, de pulmón, cánceres del sistema nervioso como glioblastoma, astrocitoma, ependimoma, neuroblastoma, retinoblastoma, meningiomas, tumores celulares granulares y tumores de la vaina nerviosa, cáncer de ovario, de páncreas, de próstata, de piel, de estómago, de testículo, de garganta, de uraco o vaginal.
ES14855040T 2013-10-25 2014-10-27 Proteína de reprogramación modificada para uso en el tratamiento de un cáncer Active ES2896021T3 (es)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US201361895562P 2013-10-25 2013-10-25
PCT/US2014/062400 WO2015061779A1 (en) 2013-10-25 2014-10-27 Methods, systems and compositions relating to cell conversion via protein induced in-vivo cell reprogramming

Publications (1)

Publication Number Publication Date
ES2896021T3 true ES2896021T3 (es) 2022-02-23

Family

ID=52993686

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
ES14855040T Active ES2896021T3 (es) 2013-10-25 2014-10-27 Proteína de reprogramación modificada para uso en el tratamiento de un cáncer

Country Status (14)

Country Link
US (2) US10076574B2 (es)
EP (2) EP3954381A1 (es)
JP (3) JP6415582B2 (es)
KR (2) KR102113829B1 (es)
CN (2) CN106170295B (es)
AU (3) AU2014339843B2 (es)
CA (3) CA2934065C (es)
DK (1) DK3060237T3 (es)
ES (1) ES2896021T3 (es)
IL (3) IL245300B (es)
PL (1) PL3060237T3 (es)
PT (1) PT3060237T (es)
SG (1) SG11201603230UA (es)
WO (1) WO2015061779A1 (es)

Families Citing this family (38)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US10704021B2 (en) 2012-03-15 2020-07-07 Flodesign Sonics, Inc. Acoustic perfusion devices
WO2015105955A1 (en) 2014-01-08 2015-07-16 Flodesign Sonics, Inc. Acoustophoresis device with dual acoustophoretic chamber
JP6530206B2 (ja) * 2015-03-17 2019-06-12 学校法人同志社 上皮間葉転換阻害剤及び癌転移治療剤
US11708572B2 (en) 2015-04-29 2023-07-25 Flodesign Sonics, Inc. Acoustic cell separation techniques and processes
US11377651B2 (en) 2016-10-19 2022-07-05 Flodesign Sonics, Inc. Cell therapy processes utilizing acoustophoresis
US11214789B2 (en) 2016-05-03 2022-01-04 Flodesign Sonics, Inc. Concentration and washing of particles with acoustics
CN106110297B (zh) * 2016-07-05 2019-12-17 南通大学 Gfi1截短体的应用
WO2018112545A1 (en) * 2016-12-23 2018-06-28 The University Of Queensland Inhibitors of sox18 protein activity for treating angiogenesis- and/or lymphangiogenesis-related diseases
JP2018132365A (ja) * 2017-02-14 2018-08-23 株式会社神戸製鋼所 マーキング装置
IL274926B2 (en) 2017-12-01 2026-04-01 Encoded Therapeutics Inc Pyrazolopyrimidines with activity against respiratory syncytial virus
WO2019118921A1 (en) 2017-12-14 2019-06-20 Flodesign Sonics, Inc. Acoustic transducer drive and controller
US11340226B2 (en) * 2018-03-02 2022-05-24 The Chinese University Of Hong Kong Squalene epoxidase in the diagnosis and treatment of non-alcoholic fatty liver diseases
WO2019168697A1 (en) * 2018-03-02 2019-09-06 Northwestern University Overexpression of foxc1 to treat corneal vascularization
JP7217542B2 (ja) * 2018-03-29 2023-02-03 国立大学法人 琉球大学 分化コントロール化合物を用いて造腫瘍性をもつおそれのある未分化ｉＰＳ細胞等の混入を除去する方法
US12274733B2 (en) 2018-09-28 2025-04-15 President And Fellows Of Harvard College Cellular reprogramming to reverse aging and promote organ and tissue regeneration
MX2021003663A (es) 2018-09-28 2021-05-28 Harvard College Reprogramacion celular para revertir el envejecimiento y promover la regeneracion de organos y tejidos.
US20220143142A1 (en) * 2019-03-17 2022-05-12 Baylor College Of Medicine Direct reprogramming of cardiac fibroblasts into cardiomyocytes using an endothelial cell transdifferentiation strategy
CN113710285A (zh) * 2019-03-26 2021-11-26 宾州研究基金会 用于治疗癌症的方法和材料
KR102150489B1 (ko) * 2019-04-09 2020-09-01 고려대학교 산학협력단 소변세포로부터 신장전구세포로의 직접 역분화를 유도하는 방법 및 이의 방법으로 역분화된 신장전구세포를 포함하는 신장세포 손상 질환 예방 또는 치료용 약학 조성물
WO2020243651A1 (en) 2019-05-29 2020-12-03 Encoded Therapeutics, Inc. Compositions and methods for selective gene regulation
AU2020368526A1 (en) * 2019-10-17 2022-05-12 The Penn State Research Foundation Regenerating functional neurons for treatment of neurological disorders
CN114729018A (zh) * 2019-10-17 2022-07-08 宾州研究基金会 再生功能神经元以治疗出血性中风
CA3157523A1 (en) * 2019-10-17 2021-04-22 Gong Chen Regenerating functional neurons for treatment of spinal cord injury and als
EP4065227A4 (en) * 2019-11-25 2023-12-20 The Penn State Research Foundation BRAIN REGENERATION AFTER TRAUMATIC BRAIN INJURY BY NEUROD1-MEDIATED ASTROCYTE-TO-NEURON CONVERSION
CN112877364B (zh) * 2019-11-29 2023-07-28 中国医学科学院药物研究所 软骨下骨细胞向关节软骨细胞直接转化的重编程诱导方案
WO2021149823A1 (ja) * 2020-01-24 2021-07-29 アイ ピース， インコーポレイテッド 因子を導入された細胞の培養方法
CN111214660B (zh) * 2020-02-25 2022-01-18 北京大学第三医院（北京大学第三临床医学院） Pax4基因表达抑制剂在制备抑制纤维化的药物中的应用
US11091524B1 (en) 2020-04-22 2021-08-17 Houston Gene Therapeutics Llc Compositions for treatment of vascular disease
CN114231489A (zh) * 2020-09-08 2022-03-25 纽伦捷生物医药科技（苏州）有限公司 用于重编程的功能性片段、组合及其应用
US20220098255A1 (en) * 2020-09-29 2022-03-31 NeuExcell Therapeutics Inc. Neurod1 combination vector
PH12023550859A1 (en) * 2020-09-29 2023-11-20 Neuexcell Therapeutics Inc Dlx2 vector
JP2023543361A (ja) * 2020-09-29 2023-10-13 ニューエクセル・セラピューティクス・インコーポレイテッド Ｎｅｕｒｏｄ１及びｄｌｘ２ベクター
JP2022104813A (ja) 2020-12-29 2022-07-11 アイ ピース，インコーポレイテッド リプログラミング因子を導入された細胞の培養方法
CN113563428B (zh) * 2021-06-22 2022-08-02 呈诺再生医学科技(珠海横琴新区)有限公司 特定空间结构多肽及其在制备iPSC中的应用
CN117070477A (zh) * 2022-05-10 2023-11-17 纽伦捷生物医药科技（上海）有限公司 重组溶瘤病毒的重编程的功能性片段、组合及其应用
KR102902484B1 (ko) * 2022-11-25 2025-12-22 고려대학교 산학협력단 방사선 치료에 의하여 손상된 근육 재생을 위한 고기능성 세포 치료제 조성물
US12252518B2 (en) 2023-01-06 2025-03-18 Life Biosciences, Inc. Methods of treating non-arteritic anterior ischemic optic neuropathy
WO2025106947A1 (en) * 2023-11-17 2025-05-22 Exir, Inc. Compositions and methods for induced stem cell differentiation to neuronal lineage

Family Cites Families (32)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4666828A (en) 1984-08-15 1987-05-19 The General Hospital Corporation Test for Huntington's disease
US4683202A (en) 1985-03-28 1987-07-28 Cetus Corporation Process for amplifying nucleic acid sequences
US4801531A (en) 1985-04-17 1989-01-31 Biotechnology Research Partners, Ltd. Apo AI/CIII genomic polymorphisms predictive of atherosclerosis
US5272057A (en) 1988-10-14 1993-12-21 Georgetown University Method of detecting a predisposition to cancer by the use of restriction fragment length polymorphism of the gene for human poly (ADP-ribose) polymerase
US5192659A (en) 1989-08-25 1993-03-09 Genetype Ag Intron sequence analysis method for detection of adjacent and remote locus alleles as haplotypes
DE69332485T2 (de) 1992-08-11 2003-11-13 The President And Fellows Of Harvard College, Cambridge Immunmodulierende peptide
FR2766195A1 (fr) 1997-07-21 1999-01-22 Transgene Sa Polymeres cationiques, complexes associant lesdits polymeres cationiques et des substances therapeutiquement actives comprenant au moins une charges negative, notamment des acides nucleiques, et leur utilisation en therapie genique
DE19839491A1 (de) 1998-08-29 2000-03-02 Hermann Heumann Verfahren zur Markierung von Biopolymeren mit Isotopen
US20040142474A1 (en) 2000-09-14 2004-07-22 Expression Genetics, Inc. Novel cationic lipopolymer as a biocompatible gene delivery agent
US6696038B1 (en) 2000-09-14 2004-02-24 Expression Genetics, Inc. Cationic lipopolymer as biocompatible gene delivery agent
ES2315384T3 (es) 2001-07-06 2009-04-01 Merck Patent Gmbh Procedimiento para el seguimiento y la modulacion del plegamiento de proteinas.
EP1448772B1 (en) 2001-11-30 2007-07-18 Applied Research Systems ARS Holding N.V. Methods of increasing expression levels of human tnf receptor
US20030134352A1 (en) 2002-01-04 2003-07-17 Freimuth Paul I. Facilitating protein folding and solubility by use of peptide extensions
WO2003057897A2 (en) 2002-01-07 2003-07-17 European Molecular Biology Laboratory Recombinant protein expression
WO2005026196A2 (en) 2003-09-12 2005-03-24 Novexin Limited Methods for folding proteins and reducing protein aggregation
WO2005051421A2 (en) 2003-11-25 2005-06-09 The Government Of The United States, As Represented By The Secretary Of The Army Use of shigella invaplex to transport functional proteins and transcriptionally active nucleic acids across mammalian cell membranes in vitro and in vivo
RU2450832C2 (ru) 2006-10-25 2012-05-20 Конинклейке Филипс Электроникс Н.В. Контрастные вещества для детекции рака предстательной железы
SG188904A1 (en) 2008-03-17 2013-04-30 Scripps Research Inst Combined chemical and genetic approaches for generation of induced pluripotent stem cells
US8722348B2 (en) 2008-05-28 2014-05-13 Wayne State University Method and composition for a protein transduction technology and its applications
JP2012513218A (ja) * 2008-12-23 2012-06-14 ヴィヴォスクリプト，インコーポレイテッド 遺伝子改変を伴わずに細胞を再プログラミングするための組成物および方法
KR20110134939A (ko) 2009-04-03 2011-12-15 더 맥클린 하스피털 코퍼레이션 유도된 다능성 줄기 세포
US20120115225A1 (en) 2009-04-23 2012-05-10 Xu C W Reprogramming of somatic cells with purified proteins
EP2253700A1 (en) 2009-05-13 2010-11-24 Helmholtz-Zentrum für Infektionsforschung GmbH A method for producing test systems from donors suffering from adverse effects of medicaments and /or medical treatments, and uses of said systems
JP2013510563A (ja) 2009-11-13 2013-03-28 アンスティチュ ナショナル ドゥ ラ サンテ エ ドゥ ラ ルシェルシュ メディカル 操作された微小胞を用いた真核細胞のリプログラミング
JP2011135864A (ja) * 2009-12-30 2011-07-14 Korea Univ Research & Business Foundation Ｏｃｔ４及びＢｍｉ１、またはその上位調節子を用いて体細胞から胚幹細胞類似細胞への逆分化を誘導する組成物及びこれを用いた胚幹細胞類似細胞の製造方法
EP2531599A4 (en) * 2010-02-04 2014-01-08 Vivoscript Inc COMPOSITIONS AND METHODS OF RENEWING CELLS WITHOUT GENETIC MODIFICATION FOR THE TREATMENT OF NEUROLOGICAL SUFFERING
BR112013003031A2 (pt) * 2010-08-19 2016-06-14 Hoffmann La Roche método de produção de células hastes neurais (chn), células hastes neurais e seu uso, composição terapêutica e banco biológico de nscs
WO2012116064A1 (en) * 2011-02-22 2012-08-30 The Board Of Regents Of The University Of Texas Cardiac repair by reprogramming of cardiac fibroblasts into cardiomyocytes
PT2705143T (pt) 2011-05-02 2021-04-07 Univ Wayne State Tecnologia de células pluripotentes induzidas por proteínas e utilizações da mesma
EP2734622B1 (en) * 2011-07-19 2018-09-05 Vivoscript, Inc. Compositions and methods for re-programming cells without genetic modification for repairing cartilage damage
WO2013033213A1 (en) 2011-08-30 2013-03-07 The J. David Gladstone Institutes Methods for generating cardiomyocytes
US20180223260A1 (en) * 2011-10-21 2018-08-09 Stemgenics, Inc. Functionalized nanoparticles for the intracellular delivery of biologically active molecules and methods for their manufacture and use

Also Published As

Publication number Publication date
US20160263233A1 (en) 2016-09-15
IL245300B (en) 2019-06-30
EP3060237A4 (en) 2017-10-11
JP2017503849A (ja) 2017-02-02
JP6577112B2 (ja) 2019-09-18
IL272324B (en) 2022-06-01
CN112245592A (zh) 2021-01-22
KR102113829B1 (ko) 2020-05-25
IL245300A0 (en) 2016-06-30
KR20160115908A (ko) 2016-10-06
CN106170295B (zh) 2020-11-06
CA3194454C (en) 2026-03-31
AU2021204485A1 (en) 2021-07-29
US10076574B2 (en) 2018-09-18
US10548983B2 (en) 2020-02-04
JP6880125B2 (ja) 2021-06-02
AU2021204485B2 (en) 2024-07-04
CA2934065A1 (en) 2015-04-30
EP3954381A1 (en) 2022-02-16
US20190000982A1 (en) 2019-01-03
CA2934065C (en) 2023-05-09
CA3291355A1 (en) 2026-02-10
SG11201603230UA (en) 2016-05-30
PT3060237T (pt) 2021-11-09
KR20200057108A (ko) 2020-05-25
CN106170295A (zh) 2016-11-30
AU2019204630B2 (en) 2021-04-08
AU2019204630A1 (en) 2019-07-18
IL266705B (en) 2020-02-27
JP6415582B2 (ja) 2018-10-31
DK3060237T3 (da) 2021-10-25
IL266705A (en) 2019-07-31
PL3060237T3 (pl) 2022-02-21
IL272324A (en) 2020-03-31
JP2019031512A (ja) 2019-02-28
JP2020007330A (ja) 2020-01-16
EP3060237A1 (en) 2016-08-31
EP3060237B1 (en) 2021-08-18
AU2014339843B2 (en) 2019-04-04
WO2015061779A1 (en) 2015-04-30
AU2019204630C1 (en) 2021-10-14
CA3194454A1 (en) 2015-04-30

Similar Documents

Publication Publication Date Title
ES2896021T3 (es) Proteína de reprogramación modificada para uso en el tratamiento de un cáncer
AU2014339843A1 (en) Methods, systems and compositions relating to cell conversion via protein induced in-vivo cell reprogramming
Li et al. A siRNA-induced peptide co-assembly system as a peptide-based siRNA nanocarrier for cancer therapy
AU2016245347A1 (en) Polypeptide-based shuttle agents for improving the transduction efficiency of polypeptide cargos to the cytosol of target eukaryotic cells, uses thereof, methods and kits relating to same
JP2014525743A (ja) 軟骨損傷を修復するために遺伝子改変を伴わずに細胞を再プログラミングするための組成物および方法
ES2875315T3 (es) Células de Schwann y método para prepararlas
JP2013534525A (ja) 心臓疾患の治療のために遺伝子改変を伴わずに細胞を再プログラミングするための組成物および方法
Kim et al. In situ chondrogenic differentiation of bone marrow stromal cells in bioactive self-assembled peptide gels
Liu et al. A programmable hierarchical-responsive nanoCRISPR elicits robust activation of endogenous target to treat cancer
JP7165979B2 (ja) 骨格筋細胞及びその誘導方法
Zhu et al. Nanovector-based prolyl hydroxylase domain 2 silencing system enhances the efficiency of stem cell transplantation for infarcted myocardium repair
KR20200004744A (ko) Oct4를 포함하는 골 관련 세포 직접교차분화 유도용 조성물
HK40069636A (en) Methods, systems and compositions relating to cell conversion via protein induced in-vivo cell reprogramming
HK1228267B (en) Modified reprogramming protein for use in treating a cancer
CN114072182A (zh) 增强转染
CN103520740A (zh) 肝纤维化治疗方法
CN106459902B (zh) 组织再生促进剂
CN114667348A (zh) 一种尿路上皮细胞的诱导剂和尿路上皮细胞的诱导方法
CN114341156A (zh) 包封有肽的铁蛋白
WO2019117976A1 (en) Peptide hydrogels and use thereof
Xu et al. Exploring the therapeutic potential of small extracellular vesicles derived from induced pluripotent stem cell in periodontal regeneration
Wang et al. Autophagy of umbilical cord mesenchymal stem cells conduces to pro-angiogenic function of conditioned medium
HK40041376A (en) Methods, systems and compositions relating to cell conversion via protein induced in-vivo cell reprogramming