ES2902995T3

ES2902995T3 - Compuestos de imidazopiridazina útiles como moduladores de respuestas a IL-12, IL-23 y/o IFN alfa

Info

Publication number: ES2902995T3
Application number: ES17784774T
Authority: ES
Inventors: Steven Spergel; Michael Mertzman
Original assignee: Bristol Myers Squibb Co
Current assignee: Bristol Myers Squibb Co
Priority date: 2016-10-07
Filing date: 2017-10-02
Publication date: 2022-03-30
Anticipated expiration: 2037-10-02
Also published as: WO2018067432A1; US10836770B2; US20190225620A1; CN110036015B; CN110036015A; JP7097875B2; KR102531036B1; JP2019530699A; MA46453A; EP3523305A1; KR20190057132A; EP3523305B1

Abstract

Un compuesto de fórmula (I) **(Ver fórmula)** en la que A es un grupo heteroarilo de 5 miembros que contiene 1-2 heteroátomos seleccionados independientemente de - N-, -O- o -S- sustituido con 0-2 Rx; Rx es H o alquilo C1-C6; R1 es H, alquilo C1-C6, cicloalquilo C3-C8, hidroxialquilo C1-C6 o alcoxialquilo C1-C6; R2 es H, alquilo C1-C6, cicloalquilo C3-C8, hidroxialquilo C1-C6, alcoxialquilo C1-C6, cicloalquil C3-C8-alquil C1-C6-, dialquil (C1-C4)-aminoalquil-, arilo, heteroarilo o heterociclil-alquil C1-C6-, sustituido con 0-2 R2a; R2a es halo o alquilo C1-C6; R3 es H, alquilo C1-C6, cicloalquilo C3-C8, hidroxialquilo C1-C6 o alcoxialquilo C1-C6; R4 es H, CD3, alquilo C1-C6, alcoxialquilo C1-C6, cicloalquilo monocíclico o bicíclico de 3 a 10 miembros, arilo monocíclico o bicíclico de 4 a 10 miembros, heterociclilo monocíclico o bicíclico de 4 a 10 miembros, o heteroarilo monocíclico o bicíclico de 4 a 10 miembros sustituido, conteniendo cada heterociclilo o cada heteroarilo 1-3 heteroátomos seleccionados entre N, O y S, cualquiera de dichos grupos distintos de H sustituido con 0-2 R4a; R4a es H, NR5R6, alquilo C1-C6, cicloalquilo C3-C8, hidroxialquilo C1-C6 o alcoxialquilo C1-C6; R5 y R6 son independientemente H o alquilo C1-C4; o R5 y R6 se toman junto con el átomo de nitrógeno al que están unidos para formar un anillo heterociclilo de 3-10 miembros sustituido con 0-2 sustituyentes seleccionados de H, alquilo C1-C4 y OH; o una sal, un tautómero o un estereoisómero del mismo farmacéuticamente aceptables.

Description

DESCRIPCIÓN

Compuestos de imidazopiridazina útiles como moduladores de respuestas a IL-12, IL-23 y/o IFN alfa

Campo de la invención

La presente invención se refiere a compuestos útiles en la modulación de IL-12, IL-23 y/o IFNa actuando sobre Tyk-2 para provocar la inhibición de la transducción de señales. En el presente documento, se proporcionan compuestos de imidazopirazina, composiciones que comprenden dichos compuestos y usos de los mismos. La invención se refiere además a composiciones farmacéuticas que contienen al menos un compuesto de acuerdo con la invención que son útiles para el tratamiento de afecciones relacionadas con la modulación de IL-12, IL-23 y/o IFNa en un mamífero.

Antecedentes de la invención

Las citocinas heterodiméricas interleucina IL-12 e IL-23, que comparten una subunidad p40 común, son producidas por células presentadoras de antígeno activadas, y son fundamentales en la diferenciación y proliferación de los linfocitos Th1 y Th17, dos linajes de linfocitos T efectores que desempeñan un papel clave en la autoinmunidad. IL-23 se compone de la subunidad p40 junto con una subunidad p19 única. IL-23, que actúa a través de un receptor heterodimérico compuesto de IL-23R e IL-12Rp1, es esencial para la supervivencia y expansión de los linfocitos Thl7, que producen citocinas proinflamatorias tales como IL-17A, IL-17F, IL-6 y TNF-a (McGeachy, M.J. et al., "The link entre IL-23 and Th17 cell-mediated immune pathologies", Semin. Immunol., 19:372-376 (2007)). Estas citocinas son fundamentales para mediar en la patobiología de varias enfermedades autoinmunitarias, incluyendo artritis reumatoide, esclerosis múltiple, enfermedad inflamatoria del intestino y lupus. IL-12, además de la subunidad p40 en común con la IL-23, contiene una subunidad p35 y actúa a través de un receptor heterodimérico compuesto por IL-12Rp1 e IL-12Rp2. IL-12 es esencial para el desarrollo de los linfocitos Th1 y la secreción de IFNy, una citocina que desempeña un papel fundamental en la inmunidad mediante la estimulación de la expresión del MHC, el cambio de clase de los linfocitos B a las subclases de IgG y la activación de macrófagos (Gracie, J.A. et al., "Interleukin-12 induces interferon-gamma-dependent switching of IgG alloantibody subclass", Eur. J. Immunol., 26:1217-1221 (1996); Schroder, K. et al., "Interferon-gamma: an overview of signals, mechanisms and functions", J. Leukoc. Biol., 75(2):163-189 (2004)).

La importancia de las citocinas que contienen p40 en la autoinmunidad se demuestra con el descubrimiento de que los ratones deficientes en cualquiera de p40, p19 o IL-23R están protegidos de la enfermedad en modelos de esclerosis múltiple, artritis reumatoide, enfermedad inflamatoria del intestino, lupus y psoriasis, entre otros (Kyttaris, V.C. et al., "Cutting edge: IL-23 receptor deficiency prevents the development of lupus nephritis in C57BL/6-lpr/lpr mice", J. Immunol., 184:4605-4609 (2010); Hong, K. et al., "IL-12, independently of IFN-gamma, plays a crucial role in the pathogenesis of a murine psoriasis like skin disorder", J. Immunol., 162:7480-7491 (1999); Hue, S. et al., " Interleukin-23 drives innate and T cell-mediated intestinal inflammation", J. Exp. Med., 203:2473-2483 (2006); Cua, D.J. et al., "Interleukin-23 rather than interleukin-12 is the critical cytokine for autoimmune inflammation of the brain", Nature, 421:744-748 (2003); Murphy, C.A. et al., "Divergent pro- and anti-inflammatory roles for IL-23 and IL-12 in joint autoimmune inflammation", J. Exp. Med., 198:1951-1957 (2003)).

En la enfermedad humana, se ha medido una alta expresión de p40 y p19 en las lesiones psoriásicas, y los linfocitos Th17 han sido identificados en las lesiones activas del cerebro de pacientes con EM y en la mucosa intestinal de pacientes con enfermedad de Crohn activa (Lee, E. et al., "Increased expression of interleukin 23 p19 and p40 in lesional skin of patients with psoriasis vulgaris", J. Exp. Med., 199:125-130 (2004); Tzartos, J.S. et al., "Interleukin-17 production in central nervous system infiltrating T cells and glial cells is associated with active disease in multiple sclerosis", Am. J. Pathol., 172:146-155 (2008)). Los niveles de ARNm de p19, p40 y p35 en pacientes con LES activo también mostraron ser significativamente más altos en comparación con los de pacientes con LES inactivo (Huang, X. et al., "Dysregulated expression of interleukin-23 and interleukin-12 subunits in systemic lupus erythematosus patients", Mod. Rheumatol., 17:220--223 (2007)), y los linfocitos T de pacientes con lupus tienen un fenotipo Th1 predominante (Tucci, M. et al., "Overexpression of interleukin-12 and T helper 1 predominance in lupus nephritis", Clin. Exp. Immunol., 154:247-254 (2008)).

Por otra parte, los estudios de asociación del genoma han identificado una serie de locus asociados a enfermedades inflamatorias y autoinmunitarias crónicas que codifican factores que funcionan en las vías IL-23 e IL-12. Estos genes incluyen IL23A, IL12A, IL12B, IL12RB1, IL12RB2, IL23R, JAK2, TYK2, STAT3 y STAT4 (Lees, C.W. et al., "New IBD genetics: common pathways with other diseases", Gut, 60:1739-1753 (2011); Tao, J.H. et al., "Meta-analysis of TYK2 gene polymorphisms association with susceptibility to autoimmune and inflammatory diseases", Mol. Biol. Rep., 38:4663-4672 (2011); Cho, J.H. et al., "Recent insights into the genetics of inflammatory bowel disease", Gastroenterology, 140:1704-1712 (2011)).

De hecho, el tratamiento anti-p40, que inhibe tanto la IL-12 como la IL-23, así como los tratamientos anti-p19 específicos de la IL-23 han demostrado ser eficaces en el tratamiento de la autoinmunidad en enfermedades incluyendo la psoriasis, la enfermedad de Crohn y la artritis psoriásica (Leonardi, C.L. et al., "PHOENIX 1 study investigators. Efficacy and safety of ustekinumab, a human interleukin-12/23 monoclonal antibody, in patients with psoriasis: 76-week results from a randomized, double-blind, placebo-controlled trial (PHOENIX 1)", Lancet, 371:1665-1674 (2008); Sandborn, W.J. et al., "Ustekinumab Crohn's Disease Study Group. A randomized trial of Ustekinumab, a human interleukin-12/23 monoclonal antibody, in patients with moderate-to-severe Crohn's disease", Gastroenterology, 135:1130-1141 (2008); Gottlieb, A. et al., "Ustekinumab, a human interleukin 12/23 monoclonal antibody, for psoriatic arthritis: randomized, double-blind, placebo-controlled, crossover trial", Lancet, 373:633-640 (2009)). Por lo tanto, se puede esperar que los agentes que inhiben la acción de IL-12 e IL-23 tengan un beneficio terapéutico en los trastornos autoinmunitarios humanos.

El grupo de tipo I de los interferones (IFN), que incluyen los miembros IFNa, así como IFNp, IFNe, IFNk e IFNui, actúan a través de un heterodímero receptor IFNa/p (IFNAR). Los IFN de tipo I tienen múltiples efectos tanto en el sistema inmunitario innato como en el adaptativo, incluyendo la activación de las respuestas inmunitarias tanto humorales como celulares, así como la potenciación de la expresión y la liberación de autoantígenos (Hall, J.C. et al., "Type I interferons: crucial participants in disease amplification in autoimmunity", Nat. Rev. Rheumatol., 6:40-49 (2010)).

En los pacientes con lupus eritematoso sistémico (LES), una enfermedad autoinmunitaria potencialmente fatal, se ha demostrado el aumento de los niveles en suero del interferón (IFN)-a (un interferón de tipo I) o una mayor expresión de los genes regulados por el IFN de tipo I (lo que se denomina distintivo de IFNa) en células mononucleares de sangre periférica y en órganos afectados en la mayoría de los pacientes (Bennett, et al., "Interferon and granulopoiesis signatures in systemic lupus erythematosus blood", J. Exp. Med., 197:711-723 (2003); Peterson, K.S. et al., "Characterization of heterogeneity in the molecular pathogenesis of lupus nephritis from transcriptional profiles of lasercaptured glomeruli", J. Clin. Invest., 113:1722—1733 (2004)), y varios estudios han demostrado que los niveles en suero de IFNa se correlacionan con la actividad y la gravedad de la enfermedad (Bengtsson, A.A. et al., "Activation of type I interferon system in systemic lupus erythematosus correlates with disease activity but not with antiretroviral antibodies", Lupus, 9:664-671 (2000)). Se evidencia un papel directo del IFNa en la patobiología del lupus gracias a la observación de que la administración de IFNa a pacientes con enfermedades malignas o víricas puede inducir un síndrome similar al lupus. Por otra parte, la eliminación del IFNAR en ratones propensos al lupus proporciona una alta protección contra la autoinmunidad, la gravedad de la enfermedad y la mortalidad (Santiago-Raber, M.L. et al., "Type-I interferon receptor deficiency reduces lupus-like disease in NZB mice", J. Exp. Med., 197:777-788 (2003)), y los estudios de asociación del genoma han identificado locus asociados al lupus que codifican factores que funcionan en la vía del interferón de tipo I, incluyendo IRF5, IKBKE, TYK2 y STAT4 (Deng, Y. et al., "Genetic susceptibility to systemic lupus erythematosus in the genomic era", Nat. Rev. Rheumatol., 6:683-692 (2010); Sandling, J.K. et al., "A candidate gene study of the type I interferon pathway implicates IKBKE and IL8 as risk loci for SLE", Eur. J. Hum. Genet., 19:479-484 (2011)). Además del lupus, existen evidencias de que la activación aberrante de las vías mediadas por el interferón de tipo I son importantes en la patobiología de otras enfermedades autoinmunitarias tales como el síndrome de Sjogren y la esclerodermia (Báve, U. et al., "Activation of the type I interferon system in primary Sjogren's syndrome: a possible etiopathogenic mechanism", Arthritis Rheum., 52:1185-1195 (2005); Kim, D. et al., "Induction of interferon-alpha by scleroderma sera containing autoantibodies to topoisomerase I: association of higher interferonalpha activity with lung fibrosis", Arthritis Rheum., 58:2163-2173 (2008)). Por lo tanto, cabe esperar que los agentes que inhiben la acción de las respuestas del interferón de tipo I tengan un beneficio terapéutico en los trastornos autoinmunitarios humanos.

La tirosina cinasa 2 (Tyk2) es un miembro de la familia de las tirosina cinasas no receptoras Janus (JAK), y se ha demostrado que es fundamental en la regulación de la cascada de transducción de señales cadena abajo de los receptores para la IL-12, la IL-23 y los interferones de tipo de I tanto en ratones (Ishizaki, M. et al., "Involvement of Tyrosine Kinase-2 in Both the IL-12/Th1 and IL-23/Th17 Axes In Vivo" J. Immunol., 187:181-189 (2011); Prchal-Murphy, M. et al., "TYK2 kinase activity is required for functional type I interferon responses in vivo" PLoS One, 7:e39141 (2012)) y seres humanos (Minegishi, Y. et al., "Human tyrosine kinase 2 deficiency reveals its requisite roles in multiple cytokine signals involved in innate and acquired immunity" Immunity, 25:745-755 (2006)). La Tyk2 media en la fosforilación inducida por el receptor de los miembros de la familia de factores de transcripción STAT, una señal esencial que conduce a la dimerización de las proteínas STAT y a la transcripción de genes proinflamatorios dependientes de STAT. Los ratones deficientes en Tyk2 son resistentes a los modelos experimentales de colitis, psoriasis y esclerosis múltiple, lo que demuestra la importancia de la señalización mediada por Tyk2 en la autoinmunidad y los trastornos relacionados (Ishizaki, M. et al., "Involvement of Tyrosine Kinase-2 in Both the IL-12/Th1 and IL-23/Th17 Axes In Vivo" J. Immunol., 187:181-189 (2011); Oyamada, A. et al., "Tyrosine kinase 2 plays critical roles in the pathogenic CD4 T cell responses for the development of experimental autoimmune encephalomyelitis" J. Immunol. 183:7539-7546 (2009)).

En los seres humanos, los individuos que expresan una variante inactiva de Tyk2 están protegidos de la esclerosis múltiple y, posiblemente, de otros trastornos autoinmunitarios (Couturier, N. et al., "Tyrosine kinase 2 variant influences T lymphocyte polarization and multiple sclerosis susceptibility" Brain 134:693-703 (2011)). Los estudios de asociación del genoma han demostrado que otras variantes de Tyk2 están asociadas a trastornos autoinmunitarios tales como la enfermedad de Crohn, la psoriasis, el lupus sistémico eritematoso y la artritis reumatoide, lo que demuestra aún más la importancia de Tyk2 en la autoinmunidad (Ellinghaus, D. et al., "Combined Analysis of Genome-wide Association Studies for Crohn Disease and Psoriasis Identifies Seven Shared Susceptibility Loci" Am. J. Hum. Genet. 90:636-647 (2012); Graham, D. et al. "Association of polymorphisms across the tyrosine kinase gene, TYK2 in UK SLE families" Rheumatology (Oxford) 46:927-930 (2007); Eyre, S. et al. "High-density genetic mapping identifies new susceptibility loci for rheumatoid arthritis" Nat. Genet. 44:1336-1340 (2012)).

Los documentos WO 2009/100375 y WO 2015/089143 desvelan imidazopiridazinas sustituidas útiles como inhibidores de cinasa y moduladores de las respuestas a IL-12, IL-23 y/o IFNa.

En vista de las afecciones que pueden beneficiarse del tratamiento que implica la modulación de la citocinas y/o de los interferones, nuevos compuestos capaces de modular las citocinas y/o los interferones, tales como IL-12, IL-23 y/o IFNa, y los métodos de uso de estos compuestos, pueden proporcionar beneficios terapéuticos sustanciales a una amplia diversidad de pacientes que lo necesitan.

Sumario de la invención

La invención se refiere a compuestos de Fórmula I, a continuación, que son útiles como moduladores de IL-12, IL-23 y/o IFNa mediante la inhibición de la transducción de señales mediada por Tyk2.

La presente invención también proporciona procesos y productos intermedios para fabricar los compuestos de la presente invención.

La presente invención también proporciona composiciones farmacéuticas que comprenden un portador farmacéuticamente aceptable y al menos uno de los compuestos de la presente invención.

La presente invención también proporciona al menos uno de los compuestos de la presente invención para su uso en el tratamiento de enfermedades proliferativas, metabólicas, alérgicas, autoinmunitarias e inflamatorias.

Una realización preferida es al menos uno de los compuestos de la presente invención para su uso en el tratamiento de enfermedades inflamatorias y autoinmunitarias. Para los propósitos de la presente invención, una enfermedad o trastorno inflamatorio y autoinmunitario incluye cualquier enfermedad que tenga un componente inflamatorio o autoinmunitario.

Una realización preferida es al menos uno de los compuestos de la presente invención para su uso en el tratamiento de enfermedades inflamatorias y autoinmunitarias en las que la enfermedad es esclerosis múltiple, artritis reumatoide, enfermedad inflamatoria del intestino, lupus eritematoso sistémico, psoriasis, artritis psoriásica, enfermedad de Crohn, síndrome de Sjogren o esclerodermia.

Una realización alternativa preferida es al menos uno de los compuestos de la presente invención para su uso en el tratamiento de enfermedades metabólicas, incluyendo la diabetes de tipo 2 y la aterosclerosis.

La presente invención también proporciona los compuestos de la presente invención para su uso en terapia.

Estas y otras características de la invención se explicarán de forma expandida conforme continúa la divulgación. Descripción detallada de las realizaciones de la invención

En un primer aspecto de la presente invención, se proporciona un compuesto de fórmula

en donde

A es un grupo heteroarilo de 5 miembros que contiene 1-2 heteroátomos seleccionados independientemente de -N-, -O- o -S- sustituido con 0-2 Rx;

Rx es H o alquilo Ci-C6;

R1 es H, alquilo C1-C6, cicloalquilo C3-C8, hidroxialquilo C1-C6 o alcoxialquilo C1-C6;

R2 es H, alquilo C1-C6, cicloalquilo C3-C8, hidroxialquilo C1-C6, alcoxialquilo C1-C6, cicloalquil C3-C8-alquil C1-C6-, dialquil (C1-C4)-aminoalquil-, arilo, heteroarilo o heterociclil-alquil C1-C6-, sustituido con 0-2 R2a;

R2a es halo o alquilo C1-C6;

R3 es H, alquilo C1-C6, cicloalquilo C3-C8, hidroxialquilo C1-C6 o alcoxialquilo C1-C6;

R4 es H, CD3, alquilo C1-C6, alcoxialquilo C1-C6, cicloalquilo monocíclico o bicíclico de 3 a 10 miembros, arilo monocíclico o bicíclico de 4 a 10 miembros, heterociclilo monocíclico o bicíclico de 4 a 10 miembros, o heteroarilo monocíclico o bicíclico de 4 a 10 miembros sustituido, conteniendo cada heterociclilo o heteroarilo 1-3 heteroátomos seleccionados entre N, O y S, cualquiera de dichos grupos distintos de H sustituido con 0-2 R4a; R4a es H, NR5R6, alquilo Ci-C6, cicloalquilo C3-C8, hidroxialquilo Ci-C6 o alcoxialquilo Ci-C6;

R5 y R6 son independientemente H o alquilo C1-C4; o

R5 y R6 se toman junto con el átomo de nitrógeno al que están unidos para formar un anillo heterociclilo de 3-10 miembros sustituido con 0-2 sustituyentes seleccionados de H, alquilo C1-C4 y OH;

o una sal farmacéuticamente aceptable, un tautómero o un estereoisómero del mismo.

En una segunda realización, se proporciona un compuesto de fórmula

en donde

A es

Rx es H o alquilo C1-C6;

R2a es halo o alquilo C1-C6;

R4 es H, CD3, alquilo C1-C6, alcoxialquilo C1-C6, cicloalquilo monocíclico o bicíclico de 3 a 10 miembros, arilo monocíclico o bicíclico de 4 a 10 miembros, heterociclilo monocíclico o bicíclico de 4 a 10 miembros, o heteroarilo monocíclico o bicíclico de 4 a 10 miembros sustituido, conteniendo cada heterociclilo o heteroarilo 1-3 heteroátomos seleccionados entre N, O y S, cualquiera de dichos grupos distintos de H sustituido con 0-2 R4a;

R4a es H, NR5R6, alquilo Ci-C6, cicloalquilo C3-C8, hidroxialquilo Ci-C6 o alcoxialquilo Ci-C6

R5 y R6 son independientemente H o alquilo C1-C4; o

En una tercera realización, se proporciona un compuesto de fórmula

en donde

A es

Rx es alquilo C1-C3;

R2 es H, alquilo C1-C6, cicloalquilo C3-C8, hidroxialquilo C1-C6, alcoxialquilo C1-C6, cicloalquil C3-C8-al dialquil (C1-C4)-aminoalquil-, arilo, heteroarilo o heterociclil-alquil C1-C6-, sustituido con 0-2 R2a;

R2a es halo o alquilo C1-C6;

R4a es H, NR5R6, alquilo C1-C6, cicloalquilo C3-C8, hidroxialquilo C1-C6 o alcoxialquilo C1-C6;

R5 y R6 son independientemente H o alquilo C1-C4; o

R5 y R6 se toman junto con el átomo de nitrógeno al que están unidos para formar un anillo heterociclilo de 3-10

miembros sustituido con 0-2 sustituyentes seleccionados de H, alquilo Ci-C4y OH;

En una 4a realización, se proporciona un compuesto de fórmula II,

en donde

A es

Rx es alquilo C1-C3;

R2 es H, alquilo C1-C6, cicloalquilo C3-C8, hidroxialquilo C1-C6, alcoxialquilo C1-C6, cicloalquil dialquil (C1-C4)-aminoalquil-, arilo, heteroarilo o heterociclil-alquil C1-C6-, sustituido con 0-2 R2a;

R2a es halo o alquilo C1-C6;

R5 y R6 son independientemente H o alquilo C1-C4; o

En una 5a realización, se proporciona un compuesto de fórmula II

en donde

Rx es alquilo Ci-C3;

R2a es halo o alquilo C1-C6;

R5 y R6 son independientemente H o alquilo C1-C4; o

R5 y R6 se toman junto con el átomo de nitrógeno al que están unidos para formar un anillo heterociclilo de 3-10 miembros sustituido con 0-2 sustituyentes seleccionados de H, alquilo C1-C4y OH;

En otra realización, se proporciona un compuesto de fórmula,

en donde

R2a es halo o alquilo C1-C6;

R5 y R6 son independientemente H o alquilo C1-C4; o

En otra realización preferida, se proporciona un compuesto de fórmula,

en donde

R2 es H, alquilo Ci-C6, cicloalquilo C3-C8, hidroxialquilo Ci-C6, alcoxialquilo Ci-C6, cicloalquil dialquil (C1-C4)-aminoalquil-, arilo, heteroarilo o heterociclil-alquil C1-C6-, sustituido con 0-2 R2a;

R2a es halo o alquilo C1-C6;

R5 y R6 son independientemente H o alquilo C1-C4; o

En otra realización preferida, se proporciona un compuesto de fórmula,

en donde

Rx es alquilo C1-C3;

R2a es halo o alquilo C1-C6;

R5 y R6 son independientemente H o alquilo C1-C4; o

En otra realización preferida, se proporciona un compuesto de fórmula,

en donde

Rx es alquilo C1-C3;

R2 es H, alquilo C1-C6, cicloalquilo C3-C8, hidroxialquilo C1-C6, al

cicloalquil dialquil (C1-C4)-aminoalquil-, arilo, heteroarilo o heterociclil-alquil C1-C6-, sustituido con 0-2 R2a;

R2a es halo o alquilo C1-C6;

R5 y R6 son independientemente H o alquilo C1-C4; o

En otra realización preferida, se proporciona un compuesto de fórmula,

en donde

Rx es alquilo C1-C3;

R2a es halo o alquilo C1-C6;

R5 y R6 son independientemente H o alquilo C1-C4; o

En otra realización preferida, se proporciona un compuesto de fórmula,

en donde

Rx es alquilo C1-C3;

R2a es halo o alquilo C1-C6;

R5 y R6 son independientemente H o alquilo C1-C4; o

En otra realización preferida, se proporciona un compuesto de fórmula,

en donde

R2a es halo o alquilo C1-C6;

R5 y R6 son independientemente H o alquilo C1-C4; o

En otra realización preferida, se proporciona un compuesto de fórmula,

en donde

R2a es halo o alquilo C1-C6;

R5 y R6 son independientemente H o alquilo C1-C4; o

En otra realización preferida, se proporciona un compuesto de fórmula,

en donde

R2 es H, alquilo C1-C6, cicloalquilo C3-C8, hidroxialquilo C1-C6, alcoxialquilo C1-C6, cicloalquil C3-C8-alq dialquil (Ci-C4)-aminoalquil-, arilo, heteroarilo o heterociclil-alquil C1-C6-, sustituido con 0-2 R2a;

R2a es halo o alquilo C1-C6;

R5 y R6 son independientemente H o alquilo C1-C4; o

En otra realización preferida, se proporciona un compuesto de fórmula,

en donde

R2a es halo o alquilo C1-C6;

R5 y R6 son independientemente H o alquilo C1-C4; o

En otra realización preferida, se proporciona un compuesto de fórmula,

en donde

Rx es alquilo C1-C3;

R2a es halo o alquilo C1-C6;

R5 y R6 son independientemente H o alquilo C1-C4; o

En otro aspecto, se proporciona un compuesto seleccionado de los ejemplos ilustrados dentro del alcance del primer aspecto, o una sal farmacéuticamente aceptable, un tautómero o un estereoisómero del mismo.

En otro aspecto, se proporciona un compuesto seleccionado de cualquier lista de subconjuntos de compuestos dentro del alcance de cualquiera de los anteriores aspectos.

En otra realización, se proporciona una composición farmacéutica que comprende uno o más compuestos de fórmula (I) o estereoisómeros, tautómeros, sales farmacéuticamente aceptables o solvatos de los mismos, y un portador o diluyente farmacéuticamente aceptable.

La presente invención también se dirige a composiciones farmacéuticas útiles en el tratamiento de enfermedades asociadas a la modulación de IL-12, IL-23 y/o IFNa actuando sobre Tyk-2 para provocar la inhibición de la transducción de señales, que comprenden compuestos de fórmula I, o sales farmacéuticamente aceptables de los mismos, y portadores o diluyentes farmacéuticamente aceptables.

La invención se refiere además a un compuesto de acuerdo con la fórmula I para su uso en el tratamiento de enfermedades asociadas a la modulación de IL-12, IL-23 y/o IFNa.

La presente invención también proporciona al menos uno de los compuestos de la presente invención o estereoisómeros, tautómeros, sales farmacéuticamente aceptables o solvatos de los mismos para su uso en el tratamiento de enfermedades proliferativas, metabólicas, alérgicas, autoinmunitarias e inflamatorias.

La presente invención también proporciona un compuesto de Fórmula I para su uso en el tratamiento de una enfermedad inflamatoria o autoinmunitaria.

La presente invención también proporciona un compuesto de Fórmula I para su uso en el tratamiento de una enfermedad, en el que la enfermedad es artritis reumatoide, esclerosis múltiple, lupus eritematoso sistémico (LES), nefritis por lupus, lupus cutáneo, enfermedad inflamatoria del intestino, psoriasis, enfermedad de Crohn, artritis psoriásica, síndrome de Sjogren, esclerodermia sistémica, colitis ulcerosa, enfermedad de Grave, lupus discoide eritematoso, enfermedad de Still de aparición en el adulto, artritis idiopática juvenil de inicio sistémico, gota, artritis gotosa, diabetes de tipo 1, diabetes mellitus insulinodependiente, septicemia, choque séptico, Shigelosis, pancreatitis (aguda o crónica), glomerulonefritis, gastritis autoinmune, diabetes, anemia hemolítica autoinmune, neutropenia autoinmune, trombocitopenia, dermatitis atópica, miastenia grave, pancreatitis (aguda o crónica), espondilitis anquilosante, pénfigo vulgar, enfermedad de Goodpasture, síndrome antifosfolípido, trombocitopenia idiopática, vasculitis asociada a ANCA, pénfigo, enfermedad de Kawasaki, polineuropatía desmielinizante inflamatoria crónica (PDIC), dermatomiositis, polimiositis, uveítis, síndrome de Guillain-Barre, inflamación pulmonar autoinmune, tiroiditis autoinmune, enfermedad ocular inflamatoria autoinmune y polineuropatía desmielinizante crónica.

La presente invención también proporciona un compuesto de Fórmula I para su uso en el tratamiento de una enfermedad inflamatoria o autoinmunitaria, en el que la enfermedad se selecciona de lupus eritematoso sistémico (LES), nefritis por lupus, lupus cutáneo, enfermedad de Crohn, colitis ulcerosa, diabetes de tipo 1, psoriasis, artritis reumatoide, artritis idiopática juvenil de inicio sistémico, espondilitis anquilosante y esclerosis múltiple.

La presente invención también proporciona un compuesto de Fórmula I para su uso en el tratamiento de la artritis reumatoide.

Además, la presente invención también proporciona un compuesto de Fórmula I para su uso en el tratamiento de una afección, en el que la afección se selecciona de leucemia mielógena aguda, leucemia mielógena crónica, melanoma metastásico, sarcoma de Kaposi, mieloma múltiple, tumores sólidos, neovasculización ocular y hemangiomas infantiles, linfoma de linfocitos B, lupus eritematoso sistémico (LES), artritis reumatoide, artritis psoriásica, vasculitis múltiple, púrpura trombocitopénica idiopática (ITP), miastenia grave, rinitis alérgica, esclerosis múltiple (EM), rechazo de trasplante, diabetes de tipo I, nefritis membranosa, enfermedad inflamatoria del intestino, anemia hemolítica autoinmune, tiroiditis autoinmune, enfermedades de la aglutinina de frío y calor, síndrome de Evans, síndrome urémico hemolítico/púrpura trombocitopénica trombótica (SUH/PTT), sarcoidosis, síndrome de Sjogren, neuropatías periféricas, pénfigo vulgar y asma.

La presente invención también proporciona un compuesto de Fórmula I para su uso en el tratamiento de una enfermedad mediada por una enfermedad mediada por IL-12, IL-23 y/o IFNa.

La presente invención también proporciona un compuesto de Fórmula I para su uso en el tratamiento de una enfermedad mediada por IL-12, IL-23 y/o IFNa, en donde la enfermedad mediada por IL-12, IL-23 y/o IFNa es una enfermedad mediada por IL-12, IL-23 y/o IFNa.

La presente invención también proporciona un compuesto de fórmula I junto con otros agentes terapéuticos para su uso en el tratamiento de enfermedades, que comprende administrar a un paciente que necesite dicho tratamiento una cantidad terapéuticamente eficaz de.

En otra realización, los compuestos de fórmula I se seleccionan de compuestos ilustrados o combinaciones de compuestos ilustrados u otras realizaciones del presente documento.

En otra realización están los compuestos que tienen una CI50 <1000 nM en al menos uno de los ensayos descritos a continuación.

La presente invención abarca todas las combinaciones de aspectos preferidos y/o realizaciones de la invención indicadas en el presente documento. Se entiende que cualquiera y todas las realizaciones de la presente invención pueden tomarse junto con cualquier otra realización o realizaciones para describir realizaciones adicionales más preferidas. También ha de entenderse que cada elemento individual de las realizaciones preferidas es su propia realización preferida independiente. Asimismo, se entiende que cualquier elemento de una realización se combina con cualquiera y todos los demás elementos de cualquier realización para describir una realización adicional.

Descripción detallada de la invención

Lo siguiente son definiciones de términos usados en la presente memoria descriptiva y en las reivindicaciones adjuntas. La definición inicial proporcionada para un grupo o término en el presente documento se aplica a ese grupo o término a lo largo de la memoria descriptiva y de las reivindicaciones, individualmente o como parte de otro grupo, a menos que se indique otra cosa.

Los compuestos de la presente invención pueden tener uno o más centros asimétricos. A menos que se indique otra cosa, todas las formas quirales (enantioméricas y diastereoméricas) y racémicas de los compuestos de la presente invención están incluidas en la presente invención. Muchas formas geométricas de olefinas, dobles enlaces C=N y similares también pueden estar presentes en los compuestos, y todos estos isómeros estables están contemplados en la presente invención. Se describen los isómeros geométricos cis y trans de los compuestos de la presente invención y pueden aislarse en forma de una mezcla de isómeros o como formas isoméricas separadas. Los presentes compuestos pueden aislarse en formas ópticamente activas o racémicas. En la técnica, se sabe bien cómo preparar formas ópticamente activas, tales como por resolución de formas racémicas o por síntesis de materiales de partida ópticamente activos. Están contempladas todas las formas quirales (enantioméricas y diastereoméricas) y racémicas y todas las formas de isómeros geométricos de una estructura, salvo que se indique específicamente la estereoquímica o forma isomérica concretas.

Cuando cualquier variable (por ejemplo, R3) aparece más de una vez en cualquier constituyente o fórmula de un compuesto, su definición cada vez que aparece es independiente de su definición en cualquier otra aparición. Por tanto, por ejemplo, si se muestra que un grupo está sustituido con 0-2 R3, entonces dicho grupo puede estar opcionalmente sustituido hasta con dos grupos R3 y, en cada caso, R3 se selecciona independientemente entre la definición de R3. También, solo se permiten las combinaciones de sustituyentes y/o variables en caso de que dichas combinaciones den como resultado compuestos estables.

Cuando se muestra un enlace a un sustituyente que cruza un enlace que conecta dos átomos en un anillo, entonces dicho sustituyente puede unirse a cualquier átomo del anillo. Cuando se relaciona un sustituyente sin indicar el átomo mediante el cual dicho sustituyente se une al resto del compuesto de una fórmula dada, entonces dicho sustituyente puede unirse a través de cualquier átomo en dicho sustituyente. Solo se permiten las combinaciones de sustituyentes y/o variables en caso de que dichas combinaciones den como resultado compuestos estables.

En los casos en los que hay átomos de nitrógeno (por ejemplo, aminas) en los compuestos de la presente invención, estos se pueden convertir en N-óxidos mediante tratamiento con un agente oxidante (por ejemplo, MCPBA y/o peróxidos de hidrógeno) para proporcionar otros compuestos de esta invención. Por tanto, se considera que todos los átomos de nitrógeno mostrados y reivindicados incluyen tanto el nitrógeno mostrado como su derivado de N-óxido (N^O ).

De acuerdo con una convención usada en la técnica,

se usa en fórmulas estructurales del presente documento para representar el enlace que es el punto de unión del resto o sustituyente con el núcleo o la estructura principal.

Se usa un guión "-" que no está entre dos letras o símbolos para indicar un punto de unión para un sustituyente. Por ejemplo, -CONH2 está unido a través del átomo de carbono.

La expresión "opcionalmente sustituido" en referencia a un determinado resto del compuesto de Fórmula I (por ejemplo, un grupo heteroarilo opcionalmente sustituido) se refiere a un resto que tiene 0, 1, 2 o más sustituyentes. Por ejemplo, "alquilo opcionalmente sustituido" abarca tanto "alquilo" como "alquilo substituido" como se define posteriormente. Los expertos en la materia entenderán, con respecto a cualquier grupo que contenga uno o más sustituyentes, que dichos grupos no pretenden introducir sustitución o patrón de sustitución alguno que sea estéricamente irrealizable, sintéticamente no factible y/o inherentemente inestable.

Como se usa en el presente documento, la expresión "al menos una entidad química" es intercambiable con la expresión "un compuesto".

Como se usa en el presente documento, se pretende que el término "alquilo" o "alquileno" incluya grupos hidrocarburo alifáticos saturados de cadena tanto ramificada como lineal que tengan el número de átomos de carbono especificado.

Por ejemplo, "alquilo C1-10" (o alquileno), pretende incluir los grupos alquilo C1, C2, C3, C4, C5, Ce, Además, por ejemplo, "alquilo C1-C6" representa alquilo que tiene de 1 a 6 átomos de carbono. Los grupos alquilo pueden estar no sustituidos o sustituidos de forma que uno o más de sus átomos de hidrógeno se han sustituido con otro grupo químico. Los ejemplos de grupos alquilo incluyen, pero sin limitación, metilo (Me), etilo (Et), propilo (por ejemplo, n-propilo e isopropilo), butilo (por ejemplo, n-butilo, isobutilo, f-butilo), pentilo (por ejemplo, n-pentilo, isopentilo, neopentilo), y similares.

"Alquenilo" o "alquenileno" pretende incluir cadenas de hidrocarburo en configuración tanto lineal como ramificada, y que tiene uno o más dobles enlaces carbono-carbono que pueden aparecer en cualquier punto estable a lo largo de la cadena. Por ejemplo, "alquenilo C2-6 " (o alquenileno), pretende incluir los grupos alquenilo C2, C3, C4, C5 y Ce. Los ejemplos de alquenilo incluyen, pero sin limitación, etenilo, 1-propenilo, 2-propenilo, 2-butenilo, 3-butenilo, 2-pentenilo,

3-pentenilo, 4-pentenilo, 2-hexenilo, 3-hexenilo, 4-hexenilo, 5-hexenilo, 2-metil-2-propenilo, 4-metil-3-pentenilo, y similares.

"Alquinilo" o "alquinileno" pretende incluir cadenas de hidrocarburo de configuración tanto lineal como ramificada y que tienen uno o más triples enlaces carbono-carbono que pueden aparecer en cualquier punto estable a lo largo de la cadena. Por ejemplo, "alquinilo C2-6" (o alquinileno), pretende incluir los grupos alquinilo C2, C3, C4, C5 y Ce; tales como etinilo, propinilo, butinilo, pentinilo, hexinilo y similares.

Un experto en el campo entenderá que, cuando se usa la designación "CO2" en el presente documento, esta pretende referirse al grupo

^OII

Cuando se usa el término "alquilo", junto con otro grupo, tal como en "arilalquilo", esta conjunción define con más especificidad al menos uno de los sustituyentes que contendrá el alquilo sustituido. Por ejemplo, "arilalquilo" se refiere a un grupo alquilo sustituido como se ha definido anteriormente, donde al menos uno de los sustituyentes es un arilo, tal como bencilo. Por tanto, el término aril-alquilo (C0-4) incluye un alquilo inferior sustituido que tiene al menos un sustituyente arilo y también incluye un arilo directamente unido a otro grupo, es decir, arilalquilo (C0). El término "heteroarilalquilo" se refiere a un grupo alquilo sustituido como se ha definido anteriormente, donde al menos uno de los sustituyentes es un heteroarilo.

Cuando se hace referencia a un grupo alquenilo, alquinilo, alquileno, alquenileno o alquinileno sustituido, estos grupos están sustituidos con uno a tres sustituyentes como se ha definido anteriormente para los grupos alquilo sustituidos.

El término "alcoxi" se refiere a un átomo de oxígeno sustituido con alquilo o alquilo sustituido, como se define en el presente documento. Por ejemplo, el término "alcoxi" incluye el grupo -O-alquilo C1-6 tal como metoxi, etoxi, propoxi, isopropoxi, n-butoxi, sec-butoxi, ferc-butoxi, pentoxi, 2-pentiloxi, isopentoxi, neopentoxi, hexoxi, 2-hexoxi, 3-hexoxi, 3-metilpentoxi, y similares. "Alcoxi inferior" se refiere a grupos alcoxi que tienen de uno a cuatro átomos de carbono.

Debe entenderse que las selecciones para todos los grupos, incluyendo, por ejemplo, alcoxi, tioalquilo y aminoalquilo, serán realizadas por un experto en el campo, proporcionando compuestos estables.

El término "sustituido", como se usa en el presente documento, significa que uno cualquiera o más átomos de hidrógeno en el átomo o grupo designado está reemplazado con una selección del grupo indicado, siempre que no se supere la valencia normal del átomo designado. Cuando un sustituyente es oxo o ceto, (es decir, =O), entonces se reemplazan 2 átomos de hidrógeno en el átomo. Los sustituyentes ceto no están presentes en restos aromáticos. A menos que se especifique de otro modo, los sustituyentes se nombran en la estructura del núcleo. Por ejemplo, debe entenderse que cuando se enumera (cicloalquil)alquilo como posible sustituyente, el punto de unión de este sustituyente a la estructura del núcleo está en la parte alquilo. Los dobles enlaces de anillo, como se usan en el presente documento, son dobles enlaces que se forman entre dos átomos adyacentes del anillo (por ejemplo, C=C, C=N o N=N).

Las combinaciones de sustituyentes y/o variables son permisibles solo si dichas combinaciones dan lugar a compuestos estables o productos intermedios sintéticos útiles. Un compuesto estable o una estructura estable pretende implicar un compuesto que es suficientemente robusto para sobrevivir al aislamiento de una mezcla de reacción a un grado útil de pureza, y la formulación subsiguiente en un agente terapéutico eficaz. Se prefiere que los compuestos citados en el presente documento no contengan un grupo N-halo, S(O)2H o S(O)H.

El término "cicloalquilo" se refiere a grupos alquilo ciclados, incluyendo sistemas de anillos monocíclicos, bicíclicos o policíclicos. Cicloalquilo C3-7 pretende incluir grupos cicloalquilo C3, C4, C5, C6 y C7. Los ejemplos de grupos cicloalquilo incluyen, pero sin limitación, ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopentilo, ciclohexilo, norbornilo, y similares. Como se usa en el presente documento, "carbociclo" o "residuo carbocíclico" pretende referirse a cualquier anillo estable monocíclico o bicíclico de 3, 4, 5, 6 o 7 miembros o bicíclico o tricíclico de 7, 8, 9, 10, 11, 12 o 13 miembros, cualquiera de los cuales puede estar saturado, parcialmente insaturado, insaturado o aromático. Los ejemplos de dichos carbociclos incluyen, pero sin limitación, ciclopropilo, ciclobutilo, ciclobutenilo, ciclopentilo, ciclopentenilo, ciclohexilo, cicloheptenilo, cicloheptilo, cicloheptenilo, adamantilo, ciclooctilo, ciclooctenilo, ciclooctadienilo, [3.3.0]biciclooctano, [4.3.0]biciclononano, [4.4.0]biciclodecano, [2.2.2]biciclooctano, fluorenilo, fenilo, naftilo, indanilo, adamantilo, antracenilo y tetrahidronaftilo (tetralina). Como se ha mostrado anteriormente, los anillos puenteados también están incluidos en la definición de carbociclo (por ejemplo, [2.2.2]biciclooctano). Los carbociclos preferidos, a menos que se especifique de otro modo, son ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopentilo, ciclohexilo y fenilo. Cuando se usa el término "carbociclo", se pretende incluir "arilo". Un anillo puenteado se produce cuando uno o más átomos de carbono conectan dos átomos de carbono no adyacentes. Los puentes preferidos son uno o dos átomos de carbono. Obsérvese que un puente siempre convierte un anillo monocíclico en un anillo bicíclico. Cuando un anillo está puenteado, los sustituyentes citados para el anillo también pueden estar presentes en el puente.

El término "arilo" se refiere a grupos hidrocarburo aromático monocíclicos o bicíclicos que tienen de 6 a 12 átomos de carbono en la parte del anillo, tales como grupos fenilo y naftilo, cada uno de los cuales puede estar sustituido. Por consiguiente, en los compuestos de fórmula I, el término "cicloalquilo" incluye ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopentilo, ciclohexilo, cicloheptilo, biciclooctilo, etc., así como los sistemas de anillos tales como los siguientes:

y similares, que opcionalmente puede estar sustituido en cualquier átomo disponible del/de los anillo/s. Los grupos cicloalquilo preferidos incluyen ciclopropilo, ciclopentilo, ciclohexilo y

El término "halo" o "halógeno" se refiere a cloro, bromo, fluoro y yodo.

El término "haloalquilo" significa un alquilo sustituido que tiene uno o más sustituyentes halo. Por ejemplo, "haloalquilo" incluye mono-, b i-y trifluorometilo.

El término "haloalcoxi" significa un grupo alcoxi que tiene uno o más sustituyentes halo. Por ejemplo, "haloalcoxi" incluye OCF3.

Por tanto, los ejemplos de grupos arilo incluyen:

(fluorenilo) y similares, que opcionalmente pueden estar sustituidos en cualquier átomo de carbono o nitrógeno disponible. Un grupo arilo preferido es fenilo opcionalmente sustituido.

Los términos "heterociclo", "heterocicloalquilo", "heterociclo", "heterocíclico" o "heterociclilo" se pueden usar indistintamente, y se refieren a grupos monocíclicos sustituidos y no sustituidos de 3 a 7 elementos, grupos bicíclicos de 7 a 11 elementos y grupos tricíclicos de 10 a 15 elementos, en los que al menos uno de los anillos tiene al menos un heteroátomo (O, S o N), dicho anillo que contiene el heteroátomo tiene preferentemente 1, 2 o 3 heteroátomos seleccionados de O, S y N. Cada anillo de dicho grupo que contiene un heteroátomo puede contener uno o dos átomos de oxígeno o azufre y/o de uno a cuatro átomos de nitrógeno, siempre que el número total de heteroátomos de cada anillo sea de cuatro o inferior, y además siempre que el anillo contenga al menos un átomo de carbono. Los átomos de nitrógeno y azufre pueden estar oxidados opcionalmente y los átomos de nitrógeno pueden estar opcionalmente cuaternizados. Los anillos condensados que completan los grupos bicíclicos y tricíclicos pueden contener solo átomos de carbono y pueden estar saturados, parcialmente saturados o completamente insaturados. El grupo heterociclo puede estar unido a cualquier átomo de nitrógeno o carbono disponible. Como se usan en el presente documento, los términos grupos "heterociclo", "heterocicloalquilo", "heterociclo", "heterocíclico" y "heterociclilo" incluyen grupos "heteroarilo", como se define a continuación.

Además de los grupos heteroarilo descritos a continuación, los grupos heterociclilo monocíclicos ilustrativos incluyen azetidinilo, pirrolidinilo, oxetanilo, imidazolinilo, oxazolidinilo, isoxazolinilo, tiazolidinilo, isotiazolidinilo, tetrahidrofuranilo, piperidilo, piperazinilo, 2-oxopiperazinilo, 2-oxopiperidilo, 2-oxopirrolodinilo, 2-oxoazepinilo, azepinilo, 1-piridonilo, 4-piperidonilo, tetrahidropiranilo, morfolinilo, tiamorfolinilo, sulfóxido de tiamorfolinilo, tiamorfolinil-sulfona, 1,3-dioxolano y tetrahidro-1,1-dioxotienilo y similares. Los grupos heterociclo bicíclicos ilustrativos incluyen quinuclidinilo. Los grupos heterociclilo monocíclicos adicionales incluyen

y

El término "heteroarilo" se refiere a grupos monocíclicos sustituidos y no sustituidos aromáticos de 5 o 6 elementos, grupos bicíclicos de 9 o 10 elementos y grupos tricíclicos de 11 a 14 elementos que tienen al menos un heteroátomo (O, S o N) en al menos uno de los anillos, dicho anillo que contiene el heteroátomo tiene preferentemente 1, 2 o 3 heteroátomos seleccionados de O, S y N. Cada anillo del grupo heteroarilo que contiene un heteroátomo puede contener uno o dos átomos de oxígeno o átomos de azufre y/o de uno a cuatro átomos de nitrógeno siempre que el número total de heteroátomos de cada anillo sea de cuatro o inferior y cada anillo tenga al menos un átomo de carbono. Los anillos condensados que completan los grupos bicíclicos y tricíclicos pueden contener solo átomos de carbono y pueden estar saturados, parcialmente saturados o insaturados. Los átomos de nitrógeno y azufre pueden estar oxidados opcionalmente y los átomos de nitrógeno pueden estar opcionalmente cuaternizados. Los grupos heteroarilo que son bicíclicos o tricíclicos deben incluir al menos un anillo completamente aromático, pero el otro anillo o anillos condensados pueden ser aromáticos o no aromáticos. El grupo heteroarilo puede unirse a cualquier átomo de nitrógeno o de carbono disponible de cualquier anillo. Según lo permita la valencia, si dicho anillo adicional es cicloalquilo o heterociclo, está opcionalmente sustituido con =O (oxo).

Los ejemplos de grupos heteroarilo monocíclicos incluyen pirrolilo, pirazolilo, pirazolinilo, imidazolilo, oxazolilo, isoxazolilo, tiazolilo, tiadiazolilo, isotiazolilo, furanilo, tienilo, oxadiazolilo, piridilo, pirazinilo, pirimidinilo, piridazinilo, triazinilo y similares.

Los grupos heteroarilo bicíclicos ilustrativos incluyen indolilo, benzotiazolilo, benzodioxolilo, benzoxazolilo, benzotienilo, quinolinilo, tetrahidroisoquinolinilo, isoquinolinilo, benzoimidazolilo, benzopiranilo, indolizinilo, benzofuranilo, cromonilo, cumarinilo, benzopiranilo, cinolinilo, quinoxalinilo, indazolilo, pirrolopiridilo, furopiridilo, dihidroisoindolilo, tetrahidroquinolinilo y similares.

Los ejemplos de grupos heteroarilo tricíclicos incluyen carbazolilo, benzindolilo, fenantrolinilo, acridinilo, fenantridinilo, xantenilo y similares.

En los compuestos de fórmula I, los grupos heteroarilo preferidos incluyen

y similares, que opcionalmente pueden estar sustituidos en cualquier átomo de carbono o nitrógeno disponible. A menos que se indique otra cosa, cuando se hace referencia a un arilo nombrado específicamente (por ejemplo, fenilo), cicloalquilo (por ejemplo, ciclohexilo), heterociclo (por ejemplo, pirrolidinilo, piperidinilo y morfolinilo) o heteroarilo (por ejemplo, tetrazolilo, imidazolilo, pirazolilo, triazolilo, tiazolilo y furilo) la referencia pretende incluir anillos que tienen de 0 a 3, preferentemente de 0 a 2, sustituyentes seleccionados de los mencionados anteriormente para los grupos arilo, cicloalquilo, heterociclo y/o heteroarilo, según sea adecuado.

El término "carbociclilo" o "carbocíclico" se refiere a un anillo monocíclico o bicíclico saturado o insaturado, en el que todos los átomos de todos los anillos son átomos de carbono. Por tanto, el término incluye anillos cicloalquilo y arilo. Los carbociclos monocíclicos tienen de 3 a 6 átomos por anillo, aún más normalmente 5 o 6 átomos por anillo. Los carbociclos bicíclicos tienen de 7 a 12 átomos por anillo, por ejemplo, dispuestos como un sistema biciclo [4,5], [5,5], [5,6] o [6,6], o 9 o 10 átomos por anillo dispuestos como un sistema biciclo [5,6] o [6,6]. Los ejemplos de carbociclos monocíclicos y bicíclicos incluyen ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopentilo, 1-ciclopent-1-enilo, 1-ciclopent-2-enilo, 1-ciclopent-3-enilo, ciclohexilo, 1-ciclohex-1-enilo, 1-ciclohex-2-enilo, 1-ciclohex-3-enilo, fenilo y naftilo. El anillo carbocíclico puede estar sustituido, en cuyo caso los sustituyentes se seleccionan entre los enumerados anteriormente para los grupos cicloalquilo y arilo.

El término "heteroátomos" debe incluir oxígeno, azufre y nitrógeno.

Cuando el término "insaturado" se usa en el presente documento para referirse a un anillo o grupo, el anillo o grupo puede estar totalmente insaturado o parcialmente insaturado.

A lo largo de la memoria descriptiva, los grupos y sustituyentes de los mismos pueden ser escogidos por un experto en el campo, proporcionando restos y compuestos estables y compuestos útiles como compuestos farmacéuticamente aceptables y/o compuestos intermedios útiles en la fabricación de compuestos farmacéuticamente aceptables. Los compuestos de fórmula I pueden existir en forma libre (sin ionización) o pueden formar sales, que también están dentro del alcance de esta invención. A menos que se indique otra cosa, se entiende que la referencia a un compuesto de la invención incluye una referencia a la forma libre y a sus sales. El término "sal(es)" representa sales ácidas y/o básicas formadas con ácidos y bases inorgánicas y/u orgánicas. Además, el término "sal(es) pueden incluir zwitteriones (sales internas), por ejemplo, cuando un compuesto de fórmula I, contiene tanto un resto básico, tal como una amina o una piridina o un anillo de imidazol, como un resto ácido, tal como un ácido carboxílico. Se prefieren las sales farmacéuticamente aceptables (es decir, no tóxicas, fisiológicamente aceptables), tales como, por ejemplo, sales de metal y amina aceptables en las que el catión no contribuye significativamente a la toxicidad o la actividad biológica de la sal. Sin embargo, pueden ser útiles otras sales, por ejemplo, en etapas de aislamiento o purificación, que pueden emplearse durante la preparación y, por lo tanto, se contemplan dentro del alcance de la invención. Las sales de los compuestos de la fórmula I se pueden formar, por ejemplo, haciendo reaccionar un compuesto de la fórmula I con una cantidad de ácido o base, tal como una cantidad equivalente, en un medio tal como uno en el que la sal precipita o en un medio acuoso seguido de liofilización.

Las sales de adición de ácidos de ejemplo incluyen acetatos (tales como los formados con ácido acético o ácido trihaloacético, por ejemplo, ácido trifluoroacético), adipatos, alginatos, ascorbatos, aspartatos, benzoatos, bencenosulfonatos, bisulfatos, boratos, butiratos, citratos, alcanforatos, alcanforsulfonatos, ciclopentanopropionatos, digluconatos, dodecilsulfatos, etanosulfonatos, fumaratos, glucoheptanoatos, glicerofosfatos, hemisulfatos, heptanoatos, hexanoatos, clorhidratos (formados con ácido clorhídrico), bromhidratos (formados con hidrogenobromuro), yodhidratos, 2-hidroxietanosulfonatos, lactatos, maleatos (formados con ácido maleico), metanosulfonatos (formados con ácido metanosulfónico), 2 -naftalenosulfonatos, nicotinatos, nitratos, oxalatos, pectinatos, persulfatos, 3-fenilpropionatos, fosfatos, picratos, pivalatos, propionatos, salicilatos, succinatos, sulfatos (tal como los formados con ácido sulfúrico), sulfonatos (tal como los mencionados en el presente documento), tartratos, tiocianatos, toluenosulfonatos tales como tosilatos, undecanoatos, y similares.

Las sales básicas de ejemplo incluyen sales de amonio, sales de metales alcalinos, tales como sales de sodio, litio y potasio; sales de metales alcalinotérreos, tales como sales de calcio y magnesio; bario, sales de cinc y aluminio; sales con bases orgánicas (por ejemplo, aminas orgánicas) tales como trialquilaminas tales como trietilamina, procaína, dibencilamina, N-bencil-p-fenetilamina, 1-efenamina, NN'-dibenciletilen-diamina, deshidroabietilamina, N-etilpiperidina, bencilamina, diciclohexilamina o aminas farmacéuticamente aceptables similares y sales con aminoácidos tales como arginina, lisina y similares. Los grupos que contienen nitrógeno básico pueden cuaternizarse con agentes tales como haluros de alquilo inferior (por ejemplo, cloruros, bromuros y yoduros de metilo, etilo, propilo y butilo), sulfatos de dialquilo (por ejemplo, sulfatos de dimetilo, dietilo, dibutilo y diamilo), haluros de cadena larga (por ejemplo, cloruros, bromuros y yoduros de decilo, laurilo, miristilo y estearilo), haluros de aralquilo (por ejemplo, bromuros de bencilo y fenetilo) y otros.

La expresión "farmacéuticamente aceptable" se emplea en el presente documento para referirse a aquellos compuestos, materiales, composiciones y/o formas farmacéuticas que, dentro del alcance del buen criterio médico, adecuados para su uso en contacto con los tejidos de seres humanos y animales sin toxicidad excesiva, irritación, respuesta alérgica u otro problema o complicación, acordes con una relación beneficio/riesgo razonable.

Como se usa en el presente documento, las "sales farmacéuticamente aceptables" se refieren a derivados de los compuestos divulgados en donde el compuesto parental se modifica fabricando sales ácidas o básicas del mismo. Los ejemplos de sales farmacéuticamente aceptables incluyen, pero sin limitación, sales de ácidos minerales u orgánicos de grupos básicos tales como aminas; y sales alcalinas u orgánicas de grupos ácidos tales como ácidos carboxílicos. Las sales farmacéuticamente aceptables incluyen las sales no tóxicas convencionales o las sales de amonio cuaternario del compuesto parental formado, por ejemplo, a partir de ácidos inorgánicos u orgánicos no tóxicos. Por ejemplo, dichas sales no tóxicas convencionales incluyen aquellas derivadas de ácidos inorgánicos tales como clorhídrico, bromhídrico, sulfúrico, sulfámico, fosfórico y nítrico; y las sales preparadas a partir de ácidos orgánicos, tales como acético, propiónico, succínico, glicólico, esteárico, láctico, málico, tartárico, cítrico, ascórbico, pamoico, maleico, hidroximaleico, fenilacético, glutámico, benzoico, salicílico, sulfanílico, 2-acetoxibenzoico, fumárico, toluenosulfónico, metanosulfónico, etano disulfónico, oxálico e isetiónico y similares.

Las sales farmacéuticamente aceptables de la presente invención pueden sintetizarse por métodos convencionales a partir del compuesto parental que contiene un resto básico o ácido. En general, dichas sales pueden prepararse haciendo reaccionar las formas de ácido o base libres de estos compuestos con una cantidad estequiométrica de la base o ácido adecuado en agua o en un disolvente orgánico o en una mezcla de ambos; en general, se prefieren los medios no acuosos como éter, acetato de etilo, etanol, isopropanol o acetonitrilo. Se pueden encontrar listas de las sales adecuadas en "Remington's Pharmaceutical Sciences", 18a edición, Mack Publishing Company, Easton, PA (1990), cuya divulgación se incorpora por la presente por referencia.

Se contemplan todos los estereoisómeros de los compuestos de la presente invención, tanto en premezcla como en forma pura o sustancialmente pura. Los estereoisómeros pueden incluir compuestos que son isómeros ópticos mediante la posesión de uno o más átomos quirales, así como compuestos que son isómeros ópticos en virtud de una rotación limitada de aproximadamente uno o más enlaces (atropisómeros). La definición de compuestos de acuerdo con la invención abarca todos los posibles estereoisómeros y sus mezclas. Abarca muy especialmente las formas racémicas y los isómeros ópticos aislados que tienen actividad específica. Las formas racémicas se pueden resolver por métodos físicos, tales como, por ejemplo, cristalización fraccionada, separación o cristalización de derivados diastereoméricos mediante cromatografía en columna quiral. Los isómeros ópticos individuales se pueden obtener a partir de los racematos por los métodos convencionales, tales como, por ejemplo, formación de la sal con un ácido ópticamente activo seguido de cristalización.

Se pretende que la presente invención incluya todos los isótopos de los átomos que se encuentran en los presentes compuestos. Los isótopos incluyen aquellos átomos que tienen el mismo número atómico pero diferentes números másicos. A modo de ejemplo general y sin limitación, los isótopos de hidrógeno incluyen deuterio y tritio. Los isótopos de carbono incluyen 13C y 14C. Los compuestos marcados isotópicamente de la invención se pueden preparar generalmente por técnicas convencionales conocidas por los expertos en la materia o por procedimientos análogos a los descritos en el presente documento, usando un reactivo marcado isotópicamente apropiado en lugar del reactivo no marcado empleado de otro modo.

El término "profármaco" denota un compuesto que, tras la administración a un sujeto, experimenta una conversión química mediante procesos metabólicos o químicos para producir un compuesto de la fórmula I, y/o una sal y/o un solvato del mismo. Cualquier compuesto que se convierta in vivo para proporcionar el agente bioactivo (es decir, el compuesto para la fórmula I) es un profármaco dentro del alcance y espíritu de la invención. Por ejemplo, los compuestos que contienen un grupo carboxi pueden formar ésteres fisiológicamente hidrolizables que sirven como profármacos al hidrolizarse en el cuerpo para producir los compuestos de fórmula I per se. Dichos profármacos se administran preferentemente por vía oral, ya que la hidrólisis en muchos casos se produce principalmente bajo la influencia de las enzimas digestivas. Puede usarse la administración parenteral cuando el éster es activo por sí mismo o en aquellos casos en los que la hidrólisis se produce en la sangre. Los ejemplos de ésteres fisiológicamente hidrolizables de compuestos de fórmula I incluyen alquil C-i--6-bencilo, 4-metoxibencilo, indanilo, ftalilo, metoximetilo, alcanoiloxi C-i-6-alquilo C1-6, por ejemplo, acetoximetilo, pivaloiloximetilo o propioniloximetilo, alcoxicarboniloxi C1-6-alquilo C1-6, por ejemplo, metoxicarbonil-oximetilo o etoxicarboniloximetilo, gliciloximetilo, fenilgliciloximetilo, (5-metil-2-oxo-1,3-dioxolen-4-il)-metilo y otros ésteres fisiológicamente hidrolizables bien conocidos usados, por ejemplo, en las técnicas de las penicilinas y cefalosporinas. Dichos ésteres pueden prepararse mediante técnicas convencionales conocidas en la materia.

Se conocen bien en la materia diversas formas de profármaco. Para ejemplos de dichos derivados de profármacos, véanse:

a) Bundgaard, H., ed., "Design of Prodrugs", Elsevier (1985) y Widder, K. et al., eds., Methods en Enzymology, 112: 309-396, Academic Press (1985);

b) Bundgaard, H., Capítulo 5, "Design and Application of Prodrugs", Krosgaard-Larsen, P. et al., eds., "A Textbook of Drug Design and Development", pág. 113-191, Harwood Academic Publishers (1991); y

c) Bundgaard, H., Adv. Drug Deliv. Rev., 8:1-38 (1992).

Los compuestos de la fórmula I y las sales de los mismos pueden existir en su forma tautomérica, en la que los átomos de hidrógeno se transponen a otras partes de las moléculas y, por consiguiente, se reordenan los enlaces químicos entre los átomos de las moléculas. Se ha de entender que todas las formas tautoméricas, en la medida en que puedan existir, se incluyen dentro de la invención. Además, los compuestos de la invención pueden tener isómeros trans y cis.

Se deberá entender además que los solvatos (por ejemplo, hidratos) de los compuestos de Fórmula I también están incluidos en el alcance de la presente invención. Los métodos de solvatación se conocen generalmente en la materia.

UTILIDAD

Los compuestos de la invención modulan las funciones celulares estimuladas por IL-23 y estimuladas por IFNa, incluyendo la transcripción de genes. Otros tipos de funciones celulares que pueden ser moduladas por los compuestos de la presente invención incluyen, pero sin limitación, las respuestas estimuladas con IL-12.

Por consiguiente, los compuestos de fórmula I tienen utilidad en el tratamiento de afecciones asociadas a la modulación de la función de IL-23 o IFNa y, en particular, la inhibición selectiva de la función de IL-23, IL-12 y/o IFNa, actuando sobre Tyk2 para mediar la transducción de señales. Dichas afecciones incluyen enfermedades asociadas a IL-23, IL-12 o IFNa, en las que los mecanismos patógenos están mediados por estas citocinas.

Como se usan en el presente documento, los términos "tratar" o "tratamiento" abarcan el tratamiento de una patología en un mamífero, particularmente en un ser humano, e incluyen: (a) prevenir o retrasar la aparición de la patología en un mamífero, en particular, cuando dicho mamífero tiene predisposición a la patología pero aún no se ha diagnosticado que la tenga; (b) inhibir la patología, es decir, detener su desarrollo; y/o (c) conseguir una reducción completa o parcial de los síntomas de la patología, y/o aliviar, mejorar, disminuir o curar la enfermedad o trastorno y/o sus síntomas.

En vista de su actividad como moduladores de las respuestas celulares estimuladas por IL-23, IL-12 e IFNa, los compuestos de Fórmula I son útiles en el tratamiento de enfermedades asociadas a IL-23, IL-12 o IFNa que incluyen, pero sin limitación, enfermedades inflamatorias tales como la enfermedad de Crohn, colitis ulcerosa, asma, enfermedad de injerto frente a huésped, rechazo de aloinjertos, enfermedad pulmonar obstructiva crónica; enfermedades autoinmunitarias tales como la enfermedad de Graves, artritis reumatoide, lupus sistémico eritematoso, lupus cutáneo, nefritis por lupus, lupus discoide eritematoso, psoriasis; enfermedades autoinflamatorias que incluyen CAPS, TRAPS, FMF, enfermedad de Still de aparición en el adulto, artritis idiopática juvenil de inicio sistémico, gota, artritis gotosa; enfermedades metabólicas que incluyen diabetes de tipo 2, ateroesclerosis, infarto de miocardio; trastornos óseos destructores tales como enfermedad de resorción ósea, artrosis, osteoporosis, trastorno óseo relacionado con el mieloma múltiple; trastornos proliferativos tales como leucemia mielógena aguda, leucemia mielógena crónica; trastornos angiogénicos tales como trastornos angiogénicos que incluyen tumores sólidos, neovasculización ocular y hemangiomas infantiles; enfermedades infecciosas tales como sepsis, choque séptico, y Shigelosis; enfermedades neurodegenerativas tales como enfermedad de Alzheimer, enfermedad de Parkinson, isquemias cerebrales, o enfermedad neurodegenerativa causada por una lesión traumática, enfermedades oncológicas y víricas tales como melanoma metastásico, sarcoma de Kaposi, mieloma múltiple e infección por VIH y retinitis por CMV, SIDA, respectivamente.

Más particularmente, las afecciones o enfermedades específicas que se pueden tratar con los compuestos de la invención incluyen, sin limitación, pancreatitis (aguda o crónica), asma, alergias, síndrome de la dificultad respiratoria en adultos, enfermedad pulmonar obstructiva crónica, glomerulonefritis, artritis reumatoide, lupus sistémico eritematoso, lupus cutáneo, nefritis por lupus, lupus discoide eritematoso, esclerodermia, tiroiditis crónica, enfermedad de Grave, gastritis autoinmune, diabetes, anemia hemolítica autoinmune, neutropenia autoinmune, trombocitopenia, dermatitis atópica, hepatitis activa crónica, miastenia grave, esclerosis múltiple, enfermedad inflamatoria del intestino, colitis ulcerosa, enfermedad de Crohn, psoriasis, enfermedad de injerto contra hospedador, reacción inflamatoria inducida por endotoxinas, tuberculosis, ateroesclerosis, degeneración muscular, caquexia, artritis psoriásica, síndrome de Reiter, gota, artritis traumática, artritis por rubéola, sinovitis aguda, enfermedad de células p pancreáticas; enfermedades caracterizadas por la infiltración masiva de neutrófilos; espondilitis reumatoide, artritis gotosa y otras afecciones artríticas, malaria cerebral, enfermedad inflamatoria pulmonar crónica, silicosis, sarcoidosis pulmonar, enfermedad de resorción ósea, rechazo de aloinjerto, fiebre y mialgias debidas a una infección, caquexia secundaria a infección, formación de queloides, formación de tejido cicatricial, colitis ulcerosa, piresis, gripe, osteoporosis, artrosis, leucemia mielógena aguda, leucemia mielógena crónica, melanoma metastásico, sarcoma de Kaposi, mieloma múltiple, septicemia, choque séptico, y Shigelosis; enfermedad de Alzheimer, enfermedad de Parkinson, isquemias cerebrales o enfermedad neurodegenerativa causada por lesión traumática; trastornos angiogénicos que incluyen tumores sólidos, neovasculización ocular y hemangiomas infantiles; enfermedades víricas incluyendo la infección por hepatitis aguda (incluyendo hepatitis A, hepatitis B y hepatitis C), infección por VIH y retinitis por CMV, SIDA, ARC o malignidad, y herpes; ictus, isquemia miocárdica, isquemia en los ataques cardíacos por ictus, hipoxia orgánica, hiperplasia vascular, lesión por reperfusión cardíaca y renal, trombosis, hipertrofia cardíaca, agregación de plaquetas inducida por trombina, endotoxemia y/o síndrome de choque tóxico, afecciones asociadas a la prostaglandina endoperoxidasa sindasa-2 y pénfigo vulgar. Son realizaciones preferidas aquellas en las que la afección se selecciona de enfermedad de Crohn, colitis ulcerosa, rechazo de aloinjertos, artritis reumatoide, psoriasis, espondilitis anquilosante, artritis psoriásica y pénfigo vulgar. Como alternativa, son realizaciones preferidas aquellas en las que la afección se selecciona de lesión de reperfusión e isquemia, incluyendo la lesión por isquemia cerebral y reperfusión debida a apoplejía y la lesión por isquemia cardíaca y reperfusión debida al infarto de miocardio. Otra realización preferida es una en la que la afección es mieloma múltiple.

Cuando se usan las expresiones "afección asociada a IL-23, IL-12 y/o IFNa" o "enfermedad o trastorno asociado a IL-23, IL-12 y/o IFNa" en el presente documento, cada una pretende abarcar todas las afecciones anteriormente identificadas como si se repitiera en toda su longitud, así como cualquier otra afección que se vea afectada por IL-23, IL-12 y/o IFNa.

Por lo tanto, la presente divulgación proporciona métodos para tratar dichas afecciones, que comprenden administrar a un sujeto que lo necesita una cantidad terapéuticamente eficaz de al menos un compuesto de Fórmula I o una sal del mismo. "Cantidad terapéuticamente eficaz" pretende incluir una cantidad de un compuesto de la presente invención que es eficaz cuando se administra solo o en combinación para inhibir la función de IL-23, IL-12 y/o IFNa y/o tratar enfermedades.

Los métodos para tratar las afecciones asociadas a IL-23, IL-12 y/o IFNa pueden comprender la administración de compuestos de Fórmula I solos o en combinación entre sí y/u otros agentes terapéuticos adecuados útiles en el tratamiento de dichas afecciones. Por consiguiente, también se pretende que "cantidad terapéuticamente eficaz" incluya una cantidad de la combinación de compuestos reivindicados que es eficaz para inhibir la función de IL-23, IL-12 y/o IFNa y/o tratar enfermedades asociadas a IL-23, IL-12 y/o IFNa.

Los ejemplos de dichos otros agentes terapéuticos incluyen corticosteroides, rolipram, calfostina, fármacos antiinflamatorios supresores de citocinas (CSAID), interleucina-10, glucocorticoides, salicilatos, óxido nítrico, y otros inmunosupresores; inhibidores de la translocación nuclear, tales como desoxipergualina (DSG); fármacos antiinflamatorios no esteroideos (AINE) tales como ibuprofeno, celecoxib y rofecoxib; esteroides tales como prednisona o dexametasona; agentes antivíricos tales como abacavir; agentes antiproliferativos tales como metotrexato, leflunomida, FK506 (tacrolimus, PROGRAF®); fármacos contra la malaria tales como hidroxicloroquina; fármacos citotóxicos tales como azatiprina y ciclofosfamida; inhibidores de TNF-a tales como tenidap, anticuerpos dirigidos contra TNF o el receptor de TNF soluble, y rapamicina (sirolimus o RAPAMUNE®) o derivados de los mismos.

Los anteriores agentes terapéuticos diferentes, cuando se emplean en combinación con los compuestos de la presente invención, se pueden usar, por ejemplo, en las cantidades indicadas en "Physicians' Desk Reference" (PDR) o como se determina de otro modo por un experto en la materia. En las realizaciones de la presente invención, dichos uno o más agentes terapéuticos diferentes pueden administrarse antes, simultáneamente o después de la administración de los compuestos de la invención. La presente invención también proporciona composiciones farmacéuticas capaces de tratar afecciones asociadas a IL-23, IL-12 o IFNa mediante la inhibición de la transducción de señales mediada por Tyk2, incluyendo enfermedades mediadas por IL-23, IL-12 y/o IFNa, como se ha descrito anteriormente.

Las composiciones de la invención pueden contener otros agentes terapéuticos como se ha descrito anteriormente y se pueden formular, por ejemplo, empleando vehículos o diluyentes sólidos o líquidos convencionales, así como aditivos farmacéuticos de un tipo adecuado al modo de administración deseado (por ejemplo, excipientes, aglutinantes, conservantes, estabilizadores, aromas, etc.) de acuerdo con técnicas tales como aquellas bien conocidas en el campo de la formulación farmacéutica.

Por consiguiente, la presente invención incluye además composiciones que comprenden uno o más compuestos de Fórmula I y un portador farmacéuticamente aceptable.

Un "portador farmacéuticamente aceptable" se refiere a medios generalmente aceptados en la técnica para la administración de agentes biológicamente activos a animales, en particular, mamíferos. Los portadores farmacéuticamente aceptables se formulan de acuerdo con un número de factores bien dentro del alcance de los expertos en la materia. Estos incluyen sin limitación el tipo y la naturaleza del principio activo a formular; el sujeto al cual se vaya a administrar la composición que contiene el principio; la vía de administración prevista de la composición; y, la indicación terapéutica considerada como objetivo. Los portadores farmacéuticamente aceptables incluyen medios líquidos tanto acuosos como no acuosos, así como diversas formas farmacéuticas sólidas y semisólidas. Dichos portadores pueden incluir una serie de ingredientes y aditivos diferentes además del principio activo, incluyéndose dichos ingredientes adicionales en la formulación por diversos motivos, por ejemplo, estabilización del principio activo, aglutinantes, etc., bien conocidos por los expertos en la materia. Las descripciones de portadores farmacéuticamente aceptables adecuados y de los factores implicados en su selección, se encuentran en diversas fuentes fácilmente disponibles tales como, por ejemplo, "Remington's Pharmaceutical Sciences", 17a Edición (1985), que se incorpora en el presente documento como referencia en su totalidad.

Los compuestos de Fórmula I se pueden administrar por cualquier medio adecuado para la afección a tratar, que puede depender de la necesidad de tratamiento específico de sitio o la cantidad de fármaco a administrar. La administración tópica se prefiere en general para enfermedades relacionadas con la piel, y el tratamiento sistémico se prefiere para afecciones cancerosas o precancerosas, aunque se contemplan otras vías de administración. Por ejemplo, los compuestos pueden administrarse por vía oral, tal como en forma de comprimidos, cápsulas, gránulos, polvos, o formulaciones líquidas que incluyen jarabes; por vía tópica, tal como en forma de soluciones, suspensiones, geles o pomadas; por vía sublingual; por vía bucal; por vía parenteral, tal como mediante inyección subcutánea, intravenosa, intramuscular o intraesternal, o técnicas de infusión (por ejemplo, como soluciones o suspensiones inyectables estériles o no ac.); por vía nasal tal como mediante pulverizador de inhalación; por vía tópica, tal como en forma de una crema o pomada; por vía rectal tal como en forma de supositorios; o por vía liposómica. Se pueden administrar formulaciones de dosificación unitaria que contengan vehículos o diluyentes farmacéuticamente aceptables y no tóxicos. Los compuestos pueden administrarse en una forma adecuada para la liberación inmediata o la liberación extendida. La liberación inmediata o la liberación prolongada se pueden conseguir con composiciones farmacéuticas adecuadas o, particularmente en el caso de la liberación extendida, con dispositivos tales como implantes subcutáneos o bombas osmóticas.

Las composiciones ilustrativas para administración tópica incluyen un portador tópico tal como PLASTIBASE® (aceite mineral gelificado con polietileno).

Las composiciones ilustrativas para administración oral incluyen suspensiones que pueden contener, por ejemplo, celulosa microcristalina para transmitir volumen, ácido algínico o alginato de sodio como agente de suspensión, metilcelulosa como potenciador de la viscosidad, y edulcorantes o aromatizantes tal como es conocido en la materia; y comprimidos de liberación inmediata que pueden incluir, por ejemplo, celulosa microcristalina, fosfato dicálcico, almidón, estearato de magnesio y/o lactosa y/u otros excipientes, aglutinantes, agentes de liberación prolongada, disgregantes, diluyentes y lubricantes tales como los conocidas en la materia. Los compuestos de la invención también pueden administrarse mediante administración sublingual y/o bucal, por ejemplo, con comprimidos moldeados, fabricados por compresión o liofilizados. Las composiciones ilustrativas pueden incluir diluyentes de disolución rápida tales como manitol, lactosa, sacarosa, y/o ciclodextrinas. En dichas formulaciones también se pueden incluir excipientes de elevado peso molecular tales como celulosas (AVICEL®) o polietilenglicoles (PEG); un excipiente para ayudar a la adhesión a mucosas tales como hidroxipropil celulosa (HPC), hidroxipropilmetilcelulosa (HPMC), carboximetilcelulosa de sodio (SCMC) y/o copolímero de anhídrido maleico (por ejemplo, g An TREZ®); y agentes de control de la liberación tales como copolímero poliacrílico (por ejemplo, CARBOPOL 934®). Lubricantes, emolientes, aromas, agentes colorantes y estabilizadores también se pueden añadir para facilitar la fabricación y el uso.

Las composiciones ilustrativas para administración mediante aerosol o inhalación nasal incluyen soluciones que pueden contener, por ejemplo, alcohol bencílico u otros conservantes adecuados, promotores de la absorción para potenciar la absorción y/o la biodisponibilidad, y/u otros agentes de solubilización o dispersión tales como los conocidos en la materia.

Las composiciones ilustrativas para administración parenteral incluyen soluciones o suspensiones inyectables que pueden contener, por ejemplo, diluyentes o disolvente parenteralmente aceptables no tóxicos adecuados, tales como manitol, 1,3-butanodiol, agua, solución de Ringer, una solución isotónica de cloruro sódico, u otros agentes dispersantes o humectantes, y agentes de suspensión, incluidos monoglicéridos o diglicéridos sintéticos y ácidos grasos, incluido ácido oleico.

Las composiciones ilustrativas para administración rectal incluyen supositorios que pueden contener, por ejemplo, excipientes no irritantes adecuados, tal como manteca de cacao, ésteres de glicérido sintético o polietilenglicoles, que son sólidos a temperaturas ordinarias, pero que se licuan y/o se disuelven en la cavidad rectal para liberar el fármaco.

Un experto habitual en la materia puede determinar la cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto de la presente invención, e incluye cantidades de dosificación de ejemplo para un mamífero de aproximadamente 0,05 a 1000 mg/kg; 1-1000 mg/kg; 1-50 mg/kg; 5250 mg/kg; 250-1000 mg/kg de peso corporal de principio activo al día, que se pueden administrar en una sola dosis, o en forma de dosis individuales divididas, tales como de 1 a 4 veces por día. Se entenderá que el nivel de dosis específico y la frecuencia de la dosis para cualquier sujeto concreto se pueden variar y dependerán de diversos factores, que incluyen la actividad del compuesto específico empleado, la estabilidad metabólica y la duración de la acción de ese compuesto, la especie, la edad, el peso corporal, el estado de salud general, el sexo y la alimentación del sujeto, el modo y la frecuencia de administración, la tasa de excreción, la combinación de fármacos, y la gravedad de la afección particular. Los sujetos preferidos para el tratamiento incluyen animales, con máxima preferencia especie de mamífero tales como seres humanos y animales domésticos tales como perros, gatos, caballos, y similares. Por tanto, cuando el término "paciente" se usa en el presente documento, este término pretende incluir todos los sujetos, lo más preferentemente, las especies de mamíferos que se ven afectadas por la modulación de las funciones mediadas por IL-23, IL-12 y/o IFNa.

MÉTODOS DE PREPARACIÓN

Los compuestos de la presente invención pueden sintetizarse mediante cualquier método disponible para los expertos en la materia de la química orgánica. Los esquemas de síntesis generales para preparar compuestos de la presente invención se describen a continuación. Estos esquemas son ilustrativos y no pretenden limitar las posibles técnicas que un experto en la materia puede usar para preparar los compuestos divulgados en el presente documento. Serán evidentes para los expertos en la materia métodos diferentes para preparar los compuestos de la presente invención. Además, las diversas etapas de la síntesis pueden realizarse en una secuencia alternativa, dando el compuesto o los compuestos deseados.

Los ejemplos de compuestos de la presente invención preparados mediante los métodos descritos en los esquemas generales se dan en las secciones de preparaciones y ejemplos expuestas más adelante en el presente documento. Algunos de los compuestos descritos eran quirales y se prepararon homoquirales a partir de material de partida disponible comercialmente.

Esquema 1

Los compuestos de Fórmula (I) pueden prepararse de acuerdo con el Esquema 1. El tratamiento del derivado de imidazopiridazina (1) (documento WO 2009/100375) con amina protegida con p-metoxibencilo (R1NHPMB) proporciona el éster 2. Este último se hidroliza a ácido 3 , que posteriormente se convierte en la amida 4 mediante una reacción de acoplamiento convencional. La reacción de Buchwald de 4 con A , promovida por catalizadores tales como tris(dibencilidenoacetona)dipaladio (0)/XantPhos y acetato de paladio (II)/BrettPhos, proporciona 5. El compuesto 5, que en el caso del éster metílico o etílico se hidroliza en ácido carboxílico en condiciones básicas (mientras que en algunos casos la reacción de Buchwald produce el ácido carboxílico). El ácido carboxílico se acopla a aminas primarias usando reactivos de acoplamiento tales como, reactivo BOP, EDCI/HOBT o HATU. La eliminación del grupo de protección PMB en condiciones ácidas conduce a la formación del compuesto (I). Como alternativa, la reacción de Buchwald puede realizarse con 2 y A, seguida de las etapas de hidrólisis y acoplamiento para dar lugar a un intermedio, que luego se transforma en el compuesto (I) mediante hidrólisis, seguida de la formación de amida y la desprotección.

Intermedio A : El intermedio A , cuando X=N; Y=N-CH3; Z=CH está disponible comercialmente como el éster metílico o etílico. El intermedio A , cuando X=N-CH3; Y=N; Z=CH está disponible comercialmente como el éster metílico o etílico. El intermedio A , cuando X=CH; Y=N-CH3; X=N está disponible comercialmente como el éster metílico o etílico. El intermedio A , cuando X=N; Y=N-CH2CH3; Z=CH está disponible comercialmente como el éster metílico o etílico. El intermedio A , cuando X=S; Y=N-CH; Z=CH está disponible comercialmente como el éster metílico o etílico. El intermedio A , cuando X=O; Y=N-CH; Z=CH está disponible comercialmente como el éster metílico o etílico.

El intermedio A, cuando X=N; Y=N-NH; Z=CH puede prepararse a partir de 15 disponible comercialmente (Esquema 2). El compuesto 15 puede N-alquilarse de diversas formas para proporcionar 16. Puede N-alquilarse con cloruro de 4-metoxibencilo en presencia de una base tal como carbonato de potasio, carbonato de cesio e hidruro de sodio. A continuación, 16 se puede convertir en A usando métodos tales como cloruro de amonio, cinc en EtOH o cloruro de estaño (II), dihidrato en acetato de etilo a reflujo para producir A . El grupo 4-metoxibenilo se puede eliminar en la última etapa en condiciones ácidas que eliminan otros grupos protectores.

Esquema 2

El intermedio A , cuando X=N; Y=S; Z=CH puede prepararse a partir de 17 disponible comercialmente (Esquema 3).

17 se puede sulfonilar con cloruro de 4-toluenosulfonilo para producir 18 que se puede tratar con acetato de tiometilo en condiciones básicas para dar 19. El tratamiento con ácido da A .

Esquema 3

El intermedio A, cuando X=N; Y=CH; Z=S puede prepararse a partir de 20 disponible comercialmente (Esquema 4).

20 puede tratarse con benzofenona imina en condiciones de Buchwald para dar 21. El tratamiento con ácido da A.

Esquema 4

El intermedio A, cuando X=N; Y=C-CH3; Z=S puede prepararse a partir de 22 disponible comercialmente (Esquema 5). 22 puede tratarse con anhídrido acético en condiciones básicas, seguido de reactivo de Lawesson para dar A.

Esquema 5

Los compuestos de Fórmula (II) pueden prepararse de acuerdo con el Esquema 6. El tratamiento del derivado de imidazopiridazina (1) (documento WO 2009/100375) con amina protegida con p-metoxibencilo (R1NHPMB) proporciona el éster 2. Este último se hidroliza a ácido 3, que posteriormente se convierte en la amida 4 mediante una reacción de acoplamiento convencional. La reacción de Buchwald de 4 con A, potenciada por catalizadores tales como tris(dibencilidenacetona)dipaladio (0)/XantPhos y acetato de paladio (II)/BrettPhos, proporciona 5. El compuesto 5, que en el caso del éster metílico o etílico se hidroliza en ácido carboxílico en condiciones básicas (mientras que en algunos casos la reacción de Buchwald produce el ácido carboxílico). El ácido carboxílico se acopla a aminas primarias usando reactivos de acoplamiento tales como, reactivo BOP, EDCI/HOBT o HATU. La eliminación del grupo de protección PMB en condiciones ácidas conduce a la formación del compuesto (II). Como alternativa, la reacción de Buchwald puede realizarse con 2 y A, seguida de las etapas de hidrólisis y acoplamiento para dar lugar a un intermedio, que a continuación se transforma en el compuesto (II) por hidrólisis, seguida de la formación de amida y la desprotección.

Intermedio A : El intermedio A , cuando X=CH; Y=N; Z=N-CH3 está disponible comercialmente como el éster metílico o etílico. El intermedio A , cuando X=CH; Y=N-CH3; Z=N está disponible comercialmente como el éster metílico o etílico.

Método de HPLC analítica empleado en la caracterización de los ejemplos:

La HPLC analítica se realizó usando los siguientes métodos:

Método A:

Columna - Water Acquity UPLC (LCMS) BEH C18, 2,1 x 50 mm, partículas de 1,7 ^m; Fase móvil - (A) agua TFA al 0,05 %, (B) acetonitrilo TFA al 0,05 %, 2 %-98 % de B (0 a 1 min) 98 % de B (a 1,5 min) 98 %-2 % de B (a 1,6 min);

Tiempo de gradiente - 1,6 min; Caudal - 0,8 ml/min; Tiempo de análisis - 2,2 min; Detector 1: UV a 254 nm, Detector 2: MS (ESI+).

Método B:

Columna - (LCMS) Zorbax SB C18, 2,1 x 30 mm, partículas de 3,5 ^m; Fase móvil - (A) acetonitrilo formiato de amonio 10 mM en agua (2:98), (B) acetonitrilo formiato de amonio 10 mM en agua (98:2), 6 %-100 % de B (0 a 1,5 min) 100 % de B (a 2,2 min) 100 %-6 % de B (a 2,6 min) 6 % de B (a 3 min); Tiempo de gradiente - 3 min; Caudal - 1,5 ml/min; Tiempo de análisis - 3 min; Detector 1: UV a 254 nm, Detector 2: MS (ESI+).

Método C:

Columna - (HPLC) YMC CombiScreen ODS-A C18, 4,6 x 50 mm, partículas de 3,5 ^m; Fase móvil - (A) 90:10 de agua:MeOH TFA al 0,1 %, (B) 90:10 de MeOH:agua TFA al 0,1 %, del 0 al 100 % de B (a 4 min, 100 % de B (a 5 min); Tiempo de gradiente - 4 min; Caudal - 4 ml/min; Tiempo de análisis - 5 min; Detector 1: UV a 220 nm, Detector 2: UV a 254 nm.

Método D:

Columna - Water Acquity UPLC (LCMS) BEH C18, 2,1 x 50 mm, partículas de 1,7 ^m; Fase móvil - (A) 5:95 de acetonitrilo:agua T fA al 0,1 %; (B) 95:5 de acetonitrilo:agua TFA al 0,1 %, 0-100 % de B (0 a 3 min) 100 % de B (a 3,75 min); Tiempo de gradiente - 3 min; Caudal - 1,11 ml/min; Tiempo de análisis - 3,75 min; Detector 1: UV a 220 nm, Detector 2: MS (ESI+).

Método E: Columna: Waters Acquity UPLC BEH C18, 2,1 x 50 mm, partículas de 1,7 ^m; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo:agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo:agua con acetato de amonio 10 mM; Temperatura: 50 °C; Gradiente: 0-100 % de B durante 3 minutos, a continuación un mantenimiento de 0,75 minutos al 100% de B; Flujo: 1,11 ml/min.

Método F: Columna: Waters Acquity UPLC BEH C18, 2,1 x 50 mm, partículas de 1,7 ^m; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo:agua con TFA al 0,05 %; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo:agua con TFA al 0,05 %; Temperatura: 50 °C; Gradiente: 0-100 % de B durante 3 minutos, a continuación un mantenimiento de 0,75 minutos al 100 % de B; Flujo: 1,11 ml/min.

Ejemplo 1

1a

A una solución de 4-bromo-6-doropiridazin-3-amina (175 g, 840 mmol) en etanol (2 l) se le añadió 2-cloro-3-oxopropanoato de etilo (202 g, 1343 mmol) y la reacción se calentó a 80 °C durante 16 horas. Se retiró el disolvente al vacío, y se diluyó el material residual con agua y diclorometano. Se pasó la mezcla bifásica a través de un lecho de celite y se separó la fracción filtrada en dos capas. Se separó la capa de diclorometano, y luego se lavó con agua y solución acuosa saturada de cloruro de sodio (salmuera), luego se secó sobre sulfato de sodio anhidro, se filtró y se concentró. El producto bruto resultante se purificó usando cromatografía sobre gel de sílice (acetato de etilo del 0 al 20 % en éter de petróleo). Las fracciones de producto se secaron y a continuación se trituraron con metil ferc-butil éter al 10 % en éter de petróleo (500 ml). El producto se eliminó por filtración y se aclaró con éter de petróleo para proporcionar 1a (73 g, 33 % de rendimiento) en forma de una mezcla de las especies C8-bromo y C8-cloro (~80:20), la mezcla se usó tal cual en las etapas posteriores (denominada cloruro para simplificar).

1H RMN (300 MHz, CDCls):

Cloro: 58,37 (s, 1H), 7,38 (s, 1H), 4,47 (c, J = 7,2 Hz, 2H), 1,44 (t, J = 7,2 Hz, 3H).

Bromo: 58,38 (s, 1H), 7,57 (s, 1H), 4,47 (c, J = 7,2 Hz, 2H), 1,44 (t, J = 7,2 Hz, 3H).

Tiempo de retención de LC, cloro: 1,04 min [B]; bromo: 1,07 [B]. Espectrometría de masas ("MS")

(E+) m/z: 260 (cloro); 304 (bromo) (MH+).

1b:

Una solución de 8-cloro-6-cloroimidazo[1,2-b]piridazin-3-carboxilato de etilo (1a) (7,35 g, 28,3 mmol), 1-(4-metoxifenil)-N-metilmetanamina (4,74 g, 31,4 mmol) y trietilamina (6,73 ml, 48,3 mmol) en dioxano (75 ml) se calentó en un baño de aceite a 90 °C durante 2,5 horas. La reacción se enfrió hasta la temperatura ambiente y se concentró, proporcionando un lodo que se trituró con agua para proporcionar un sólido que se filtró, se enjuagó con agua y luego se recogió con diclorometano. La solución se secó sobre sulfato de sodio anhidro, se filtró y se concentró para proporcionar 1b (8,95 g, 84 % de rendimiento). 1H RMN (400 MHz, CLOROFORMO-d) 5 8,13 (s, 1H), 7,17 (d, J = 8,6 Hz, 2H), 6,87 (d, J = 8,6 Hz, 2H), 6,12 (s, 1H), 5,50 (s, 2H), 4,46 (c, J = 7,1 Hz, 2H), 3,81 (s, 3H), 3,18 (s, 3H), 1,74 - 1,58 (m, 1H), 1,44 (t, J = 7,2 Hz, 3H). Tiempo de retención de LC 1,04 min [A]. MS (E+) m/z: 375 (MH+).

1c:

A una solución de 6-cloro-8-((4-metoxibencil)(metil)amino)imidazo[1,2-b]piridazin-3-carboxilato de etilo (1b) (1,20 g, 3,20 mmol) en metanol (15 ml) y tetrahidrofurano (15 ml) se le añadió hidróxido de litio 0,5 M (acuoso) (25,6 ml, 12,81 mmol) y la reacción se agitó durante una noche. Se diluyó la reacción con agua y luego se eliminó el metanol al vacío, la solución resultante se ajustó a pH ~4 usando ácido clorhídrico (1 M acuoso), el producto se extrajo con diclorometano y las capas orgánicas combinadas se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron y se concentraron para proporcionar 1c (1,00 g, 81 % de rendimiento), el cual se usó sin más purificación. Tiempo de retención de LC 0,90 min [A]. MS (E+) m/z: 347 (MH+).

1d:

Una mezcla de ácido 6-doro-8-((4-metoxibencil)(metil)amino)imidazo[1,2-b]piridazin-3-carboxílico (1c) (536 mg, 1,546 mmol), ciclopropanamina (0,321 ml, 4,64 mmol) y trietilamina (0,646 ml, 4,64 mmol) en dimetilformamida (3 ml) se trató con hexafluorofosfato de (benzotriazol-1-iloxi)tris(dimetilamino)fosfonio (BOP, 752 mg, 1,700 mmol), y la reacción se agitó a temperatura ambiente durante 5 horas. El producto deseado se precipitó con agua (5 ml) y se recogió por filtración. Los sólidos se aclararon dos veces con agua, una vez con una pequeña cantidad de metanol, y se secaron al vacío para producir 6-cloro-N-ciclopropil-8-((4-metoxibencil)(metil)amino)imidazo[1,2-b]piridazin-3-carboxamida (1d) (480 mg, 80% de rendimiento). 1H RMN (400 MHz, DMSO-de) 58,55 (d, J = 3,5 Hz, 1H), 8,06 (s, 1H), 7,19 (d, J = 8,6 Hz, 2H), 6,89 (d, J = 8,8 Hz, 2H), 6,39 (s, 1H), 5,52 (s a, 2H), 3,73 (s, 3H), 3,31 (s, 3H), 2,88 (tc, J = 7,2, 3,8 Hz, 1H), 0,89 - 0,75 (m, 2H), 0,63 - 0,51 (m, 2H). Tiempo de retención de LC 1,04 min [A]. MS (E+) m/z: 386 (MH+).

1e:

Una mezcla de 6-cloro-N-ciclopropil-8-((4-metoxibencil)(metil) amino)imidazo[1,2-b]piridazin-3-carboxamida (1d) (125 mg, 0,324 mmol), 4-amino-1-metil-1H-pirazol-3-carboxilato de metilo (101 mg, 0,648 mmol) [(solución de bicarbonato de sodio/EtOAc) de base libre de sal HCl adquirida en Art-Chem-BB], Pd2(dba)3 (29,7 mg, 0,032 mmol), XANTPHOS (37,5 mg, 0,065 mmol) y Cs2CO3 (422 mg, 1,296 mmol) en DMA (2 ml) se desgasificó burbujeando N2 a través de la mezcla durante 5 minutos. El recipiente de reacción se cerró herméticamente y se calentó a 125 °C durante 8 h. Después del enfriamiento a ta, la mezcla de reacción se repartió entre EtOAc (30 ml) y agua (20 ml). La capa orgánica se extrajo con NaOH 1 N (10 ml) y las capas acuosas combinadas se lavaron con EtOAc (20 ml). La capa acuosa se acidificó a pH 1 con HCl 1 N y la mezcla se transfirió a un embudo de decantación y la capa acuosa se extrajo con EtOAc (3 x 25 ml). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con una solución al 10 % de LiCl (2 x 50 ml) y salmuera (50 ml). Después del secado (Na2SO4) y la filtración, la capa orgánica se concentró para proporcionar ácido 4-((3-(ciclopropilcarbamoil)-8-((4-metoxibencil)-(metil)amino)imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)amino)-1-metil-1H-pirazol-3-carboxílico (1e) (126 mg, 0,257 mmol, 79% de rendimiento) en forma de un sólido de color castaño. Tiempo de retención de LC 2,60 min [C]. MS (E+) m/z: 491 (MH+).

Ejemplo 1

Una mezcla de ácido 4-((3-(ciclopropilcarbamoil)-8-((4-metoxibencil)(metil)amino)imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)amino)-1-metil-1H-pirazol-3-carboxílico (1e) (12 mg, 0,024 mmol), metanamina, 2 M en t Hf (0,061 ml, 0,122 mmol), reactivo BOP (14,07 mg, 0,032 mmol) y trietilamina (10,23 pl, 0,073 mmol) en DMF (0,25 ml) se dejó en reposo a ta durante 1 h. Los volátiles se eliminaron al vacío para proporcionar un residuo de color amarillo que se trató con HCl, 4 N en dioxano (0,060 ml, 0,238 mmol) en Dc M (0,2 ml) y se dejó en reposo a ta durante 1 h. La mezcla de reacción se concentró y el residuo se disolvió en DMF. La solución se purificó a través de LC/MS preparativa con las siguientes condiciones: Columna: Waters XBridge C18, 19 x 250 mm, partículas de 5 ^m; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: 0 100 % de B durante 25 minutos, a continuación un mantenimiento de 5 minutos al 100 % de B; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación centrífuga para proporcionar N-ciclopropil-6-((1-metil-3-(metilcarbamoil)-1H-pirazol-4-il)amino)-8-(metilamino)imidazo[1,2-b]piridazin-3-carboxamida (1) (5,8 mg, 0,015 mmol, 63 % de rendimiento). Tiempo de retención de LC 0,99 min [D]. MS (E+) m/z: 384 (MH+). 1H RMN (500 MHz, DMSO-d6) 58,88 (s, 1H), 8,64 (d, J = 3,7 Hz, 1H), 8,22 (d, J = 4,9 Hz, 1H), 8,14 (s, 1H), 7,81 (s, 1H), 7,39 (d, J = 5,5 Hz, 1H), 5,98 (s, 1H), 3,93 (s, 3H), 2,92 - 2,89 (m, 1H), 2,86 (d, J = 4,9 Hz, 3H), 2,76 (d, J = 4,9 Hz, 3H), 0,84 - 0,72 (m, 2H), 0,57-0,47 (m, 2H).

Los siguientes Ejemplos se prepararon de una manera similar al Ejemplo 1

continuación

continuación

continuación

Ejemplo 28

28a:

Una mezcla de 6-cloro-N-ciclopropil-8-((4-metoxibencil)(metil) amino)imidazo[1,2-b]piridazin-3-carboxamida (1d) (125 mg, 0,324 mmol), 4-amino-1-etil-1H-pirazol-3-carboxilato de metilo [(solución de bicarbonato de sodio/EtOAc) de base libre de sal HCl adquirida en Princeton BioMolecular Research] (110 mg, 0,648 mmol), Pd2(dba)3 (29,7 mg, 0,032 mmol), XANTPHOS (37,5 mg, 0,065 mmol) y Cs2CO3 (422 mg, 1,296 mmol) en Dm A (2 ml) se desgasificó burbujeando N2 a través de la mezcla durante 5 minutos. El recipiente de reacción se cerró herméticamente y se calentó a 125 °C durante 8 h. Después del enfriamiento a ta, la mezcla de reacción se repartió entre EtOAc (30 ml) y agua (20 ml). La capa orgánica se extrajo con NaOH 1 N (10 ml) y las capas acuosas combinadas se lavaron con EtOAc (20 ml). La capa acuosa se acidificó a pH 1 con HCl 1 N y la mezcla se transfirió a un embudo de decantación y la capa acuosa se extrajo con EtOAc (3 x 25 ml). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con una solución al 10 % de LiCl (2 x 50 ml) y salmuera (50 ml). Después del secado (Na2SO4) y la filtración, la capa orgánica se concentró para proporcionar ácido 4-((3-(ciclopropilcarbamoil)-8-((4-metoxibencil)(metil)amino)imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)amino)-1-etil-1H-pirazol-3-carboxílico (125 mg, 0,248 mmol, 76% de rendimiento) en forma de un sólido de color castaño. Tiempo de retención de LC 2,67 min [C]. MS (E+) m/z: 505 (MH+).

Ejemplo 28

Una mezcla de ácido 4-((3-(cidopropilcarbamoil)-8-((4-metoxibencil)(metil) amino)imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)amino)-)-1-etil-1H-pirazol-3 -carboxílico (l2m g, 0,024 mmol), metanamina, 2 M en THF (0,059 ml, 0,119 mmol), BOP (13,67 mg, 0,031 mmol) y trietilamina (9,95 pl, 0,071 mmol) en DMF (0,25 ml) se dejó en reposo a ta durante 1 h. Los volátiles se eliminaron al vacío para proporcionar un aceite de color amarillo que se trató con HCl, 4 N en dioxano (0,058 ml, 0,232 mmol) en DCM (0,2 ml) y se dejó en reposo a ta durante 1 h. La mezcla de reacción se concentró y el residuo se purificó a través de LC/MS preparativa con las siguientes condiciones: Columna: Waters XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: 5-100% de B durante 15 minutos, a continuación un mantenimiento de 5 minutos al 100 % de B; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación centrífuga para proporcionar N-ciclopropil-6-((1-etil-3-(metilcarbamoil)-1H-pirazol-4-il)amino)-8-(metilamino)imidazo[1,2-b]piridazin-3-carboxamida (28) (5,8 mg, 0,015 mmol, 63% de rendimiento). Tiempo de retención de Le 1,04 min [D]. MS (E+) m/z: 398 (MH+). 1H RMN (500 MHz, DMSO-d6) 58,90 (s, 1H), 8,60 (d, J = 3,1 Hz, 1H), 8,24 (s, 1H), 8,18 (d, J = 4,9 Hz, 1H), 7,81 (s, 1H), 7,37 (d, J = 4,9 Hz, 1H), 5,97 (s, 1H), 4,20 (c, J = 7,3 Hz, 2H), 2,93 - 2,83 (m, 4H), 2,77 (d, J = 4,3 Hz, 3H), 1,47 (t, J = 7,3 Hz, 3H), 0,81 - 0,70 (m, 2H), 0,58-0,47 (m, 2H).

Los siguientes Ejemplos se prepararon de una manera similar al Ejemplo 28

Ejemplo 32

32a:

Una mezcla de 4-nitro-1H-pirazol-3-carboxilato de metilo (disponible comercialmente en CombiBlocks) (342 mg, 1,999 mmol), carbonato de potasio (552 mg, 4,00 mmol) y cloruro de 4-metoxibencilo (0,299 ml, 2,199 mmol) en DMF (10 ml) se agitó durante 18 h. La mezcla de reacción se repartió entre EtOAc (40 ml) y agua (40 ml). La capa orgánica se lavó con una solución al 10 % de LiCl (2 x 40 ml) y salmuera (25 ml). Después del secado (Na2SO4) y la filtración, la capa orgánica se concentró para dar un aceite de color amarillo que se sometió a cromatografía en un cartucho de gel de sílice ISCO de 40 g, eluyendo con un gradiente de EtOAc al 0-50 %/Hex. Las fracciones puras se concentraron para proporcionar 1-(4-metoxibencil)-4-nitro-1H-pirazol-3-carboxilato de metilo (32a) (481 mg, 1,651 mmol, 83 % de rendimiento) en forma de un aceite incoloro. Tiempo de retención de LC 1,96 min [C]. MS (E+) m/z: 292 (MH+). 1H RMN (400 MHz, CLOROFORMO-d) 57,95 (s, 1H), 7,42 - 7,18 (m, 2H), 6,94 (d, J = 8,8 Hz, 2H), 5,27 (s, 2H), 3,99 (s, 3H), 3,83 (s, 3H).

32b:

A una mezcla de 1-(4-metoxibencil)-4-nitro-1H-pirazol-3-carboxilato de metilo (475 mg, 1,631 mmol) y cloruro de amonio (32a) (872 mg, 16,31 mmol) en EtOH (12 ml) y agua (2 ml) a ta se le añadió cinc (1066 mg, 16,31 mmol) y la mezcla resultante se agitó a ta durante 30 minutos. La reacción después se diluyó con diclorometano (50 ml) y se filtró. El filtrado se lavó con agua (50 ml), se secó (Na2SO4) y se concentró para proporcionar 4-amino-1-(4-metoxibencil)-1H-pirazol-3-carboxilato de metilo (32b) (425 mg, 1,627 mmol, 100 % de rendimiento) en forma de un aceite incoloro espeso. Tiempo de retención de LC 0,89 min [C]. MS (E+) m/z: 262 (MH+). 1H RMN (400 MHz, CLOROFORMO-d) 5 7,19 (d, J = 8,8 Hz, 2H), 6,87 (d, J = 8,8 Hz, 2H), 6,84 (s, 1H), 5,18 (s, 2H), 4,05 (s a, 2H), 3,93 (s, 3H), 3,80 (s, 3H).

32c:

Una mezcla de 6-doro-N-cidopropil-8-((4-metoxibencil)(metil) amino)imidazo[1,2-b]piridazin-3-carboxamida (32b) (200 mg, 0,518 mmol), 4-amino-1-(4-metoxibencil)-1H-pirazol-3-carboxilato de metilo (203 mg, 0,778 mmol), Pd2(dba)3 (47,5 mg, 0,052 mmol), XANTPHOS (60,0 mg, 0,104 mmol) y Cs2CO3 (676 mg, 2,073 mmol) en DMA (3 ml) se desgasificó burbujeando N2 a través de la mezcla durante 5 minutos. El recipiente de reacción se cerró herméticamente y se calentó a 125 °C durante 4 h. Después del enfriamiento a ta, la mezcla de reacción se repartió entre EtOAc (30 ml) y agua (30 ml). La capa orgánica se lavó con LiCl al 10 % (2 x 30 ml) y salmuera (30 ml). Después del secado (Na2SO4) y la filtración, la capa orgánica se concentró para dar un aceite de color ámbar que se sometió a cromatografía en un cartucho de gel de sílice ISCO de 24 g, eluyendo con un gradiente de EtOAc al 0-100 %/Hex. Las fracciones puras se concentraron para proporcionar 4-((3-(ciclopropilcarbamoil)-8-((4-metoxibencil)(metil)amino)imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)amino)-1-(4-metoxibencil)-1H-pirazol-3-carboxilato de metilo (32c) (310 mg, 0,508 mmol, 98% de rendimiento) en forma de una espuma de color castaño. Tiempo de retención de LC 3,30 min [C]. MS (E+) m/z: 611 (MH+).

32d:

Una mezcla de 4-((3-(ciclopropilcarbamoil)-8-((4-metoxibencil) (metil)amino)imidazo [1,2-b]piridazin-6-il)amino)-)-1-(4-metoxibencil)-1H-pirazol-3-carboxilato de metilo (32c) (290 mg, 0,475 mmol) y NaOH, 1 N (2,374 ml, 2,374 mmol) en MeOH (3 ml) y THF (3 ml) se dejó en agitación a ta durante 1 h. Los disolventes orgánicos se eliminaron al vacío y el residuo se diluyó con agua. La capa acuosa se acidificó a pH 1 con HCl 1 N y la capa heterogénea se transfirió a un embudo de decantación y se extrajo con EtOAc (40 ml). La capa orgánica se lavó con salmuera (25 ml), se secó (Na2SO4) y se concentró para proporcionar ácido 4-((3-(ciclopropilcarbamoil)-8-((4-metoxibencil)(metil)amino)imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)amino)-1-(4-metoxibencil)-1H-pirazol-3-carboxílico (32d) (248 mg, 0,416 mmol, 88 % de rendimiento) en forma de un sólido de color castaño. Tiempo de retención de lC 3,15 min [C]. MS (E+) m/z: 597 (MH+).

Ejemplo 32

Una mezcla de ácido 4-((3-(ciclopropilcarbamoil)-8-((4-metoxibencil) (metil)amino)imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)amino)-1-(4-metoxibencil)-1H-pirazol-3-carboxílico (32d) (18 mg, 0,030 trietilamina (0,017 ml, 0,121 mmol) en DMF (0,25 ml) se agitó a ta durante 2 h. Los volátiles se eliminaron al vacío para proporcionar un aceite de color amarillo que se trató con TFA (0,5 ml) a 75 °C durante 2 h. Los volátiles se eliminaron al vacío y el residuo se purificó a través de LC/MS preparativa con las siguientes condiciones: Columna: Waters XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 ^m; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: 0-100 % de B durante 20 minutos, a continuación un mantenimiento de 0 minutos al 100 % de B; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación centrífuga para proporcionar N-ciclopropil-6-((3-(metilcarbamoil)-1H-pirazol-4-il)amino)-8-(metilamino)imidazo[1,2-b]piridazin-3-carboxamida (32) (7,2 mg, 0,019 mmol, 64% de rendimiento). Tiempo de retención de LC 0,82 min [D]. MS (E+) m/z: 370 (MH+). 1H RMN (500 MHz, DMSO-d6) 5 13,28 (s a, 1H), 8,85 (s, 1H), 8,61 (d, J = 3,1 Hz, 1H), 8,30 - 8,17 (m, 2H), 7,82 (s, 1H), 7,32 (d, J = 5,5 Hz, 1H), 5,97 (s, 1H), 2,92 - 2,82 (m, 4H), 2,78 (d, J = 4,9 Hz, 3H), 0,77 (d, J = 6,1 Hz, 2H), 0,52 (s a, 2H).

Los siguientes Ejemplos se prepararon de una manera similar al Ejemplo 32

Ejemplo 35

35a:

Una mezcla de 6-doro-N-cidopropil-8-((4-metoxibencil)(metil) amino)imidazo[1,2-b]piridazin-3-carboxamida (1d) (125 mg, 0,324 mmol), 3-amino-1-metil-1H-pirazol-4-carboxilato de etilo (disponible comercialmente en J and W Chemicals) (82 mg, 0,486 mmol), Pd2(dba)3 (29,7 mg, 0,032 mmol), XANTPHOS (37,5 mg, 0,065 mmol) y Cs2CO3 (422 mg, 1,296 mmol) en DMA (2 ml) se desgasificó burbujeando N2 a través de la mezcla durante 5 minutos. El recipiente de reacción se cerró herméticamente y se calentó a 125 °C durante 1 h. Después del enfriamiento a ta, la mezcla de reacción se repartió entre EtOAc (50 ml) y agua (50 ml). La capa orgánica se lavó con LiCl al 10 % (2 x 50 ml) y salmuera (50 ml). Después del secado (MgSO4) y la filtración, la capa orgánica se concentró para dar un aceite de color ámbar que se sometió a cromatografía en un cartucho de gel de sílice ISCO de 12 g, eluyendo con un gradiente de EtOAc al 0-100 %/Hex. Las fracciones puras se concentraron para proporcionar 3-((3-(ciclopropilcarbamoil)-8-((4-metoxibencil) (metil)amino)imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)amino)-1-metil-1H-pirazol-4-carboxilato de etilo (35a) (152 mg, 0,293 mmol, 90 % de rendimiento) en forma de un sólido de color amarillo claro. Tiempo de retención de lC 3,16 min [C]. MS (E+) m/z: 519 (MH+).

35b:

Una mezcla de 3-((3-(ciclopropilcarbamoil)-8-((4-metoxibencil) (metil)amino)imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)amino)-1-metil-1H-pirazol-4-carboxilato de etilo (35a) (140 mg, 0,270 mmol) y NaOH, 1 N (1,350 ml, 1,350 mmol) en MeOH (1,5 ml) y THF (1,5 ml) se agitó a ta durante 2 h. Los disolventes orgánicos se eliminaron al vacío y el residuo se diluyó con agua. La capa acuosa se acidificó a pH 1 con HCl 1 N y la capa heterogénea se transfirió a un embudo de decantación y se extrajo con DCM (25 ml), CHCb (25 ml) y EtOAc (25 ml). La capa orgánica se secó (Na2SO4) y se concentró para proporcionar ácido 3-((3-(ciclopropilcarbamoil)-8-((4-metoxibencil)(metil)amino)imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)amino)-1-metil-1H-pirazol-4-carboxílico (35b) (130 mg, 0,265 mmol, 98 % de rendimiento) en forma de un sólido de color amarillo claro. Tiempo de retención de Lc 3,01 min [C]. MS (E+) m/z: 491 (MH+).

Ejemplo 35

Una mezcla de ácido 3-((3-(ciclopropilcarbamoil)-8-((4-metoxibencil) (metil)amino)imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)amino)-1-metil-1H-pirazol-4-carboxílico (35b) (15 mg, 0,031 mmol), metanamina, HCl (4,13 mg, 0,061 mmol), BOP (17,58 mg, 0,040 mmol) y Et3N (0,021 ml, 0,153 mmol) en DMF (0,25 ml) se agitó a ta durante 18 h a ta. Los volátiles se eliminaron al vacío para proporcionar un aceite de color amarillo que se trató con HCl, 4 N en dioxano (0,079 ml, 0,232 mmol) en DCM (1 ml) y se dejó en reposo a ta durante 1 h. La mezcla de reacción se concentró y el residuo se purificó a través de LC/MS preparativa con las siguientes condiciones: Columna: Waters XBridge C18, 19 x 250 mm, partículas de 5 ^m; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: 0-100% de B durante 25 minutos, a continuación un mantenimiento de 5 minutos al 100 % de B; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación centrífuga para proporcionar N-ciclopropil-6-((1-metil-4-(metilcarbamoil)-1H-pirazol-3-il)amino)-8-(metilamino)imidazo[1,2-b]piridazin-3-carboxamida (35) (5,9 mg, 0,015 mmol, 47% de rendimiento). Tiempo de retención de LC 0,89 min [D]. MS (E+) m/z: 384 (MH+). 1H RMN (500 MHz, DMSO-d6) 59,78 (s, 1H), 9,51 (d, J = 2,4 Hz, 1H), 8,17 (d, J = 4,9 Hz, 1H), 8,11 (s, 1H), 7,83 (s, 1H), 7,52 (d, J = 4,9 Hz, 1H), 6,17 (s, 1H), 3,96 -3,85 (m, 3H), 2,89 (d, J = 5,5 Hz, 3H), 2,80 (dd, J = 6,7, 3,7 Hz, 1H), 2,75 (d, J = 4,9 Hz, 3H), 0,91 - 0,77 (m, 2H), 0,64-0,54 (m, 2H).

Ejemplo 36

El Ejemplo 36 se preparó de una manera similar al Ejemplo 35: Tiempo de retención de LC 1,38 min [D]. MS (E+) m/z: 446 (MH+). 1H RMN (500 MHz, DMSO-de) 59,92 (s a, 1H), 9,65 - 9,45 (m, 2H), 8,45 (s, 1H), 7,84 (s, 1H), 7,68 (d, J = 7,3 Hz, 2H), 7,52 (s a, 1H), 7,41 - 7,27 (m, 2H), 7,09 (s a, 1H), 6,20 (s, 1H), 3,94 (s, 3H), 2,97 - 2,84 (m, 3H), 2,81 (s a, 1H), 0,83 (d, J = 4,9 Hz, 2H), 0,60 (s a, 2H).

Ejemplo 37

37a

Una mezcla de 6-cloro-N-ciclopropil-8-((4-metoxibencil)(metil) amino)imidazo[1,2-b]piridazin-3-carboxamida (1d) (100 mg, 0,259 mmol), 4-amino-1-metil-1H-pirazol-5-carboxilato de metilo [disponible comercialmente en ChemBridge) (80 mg, 0,518 mmol), Pd2(dba)3 (23,73 mg, 0,026 mmol), XANTPHOS (30,0 mg, 0,052 mmol) y Cs2COs (338 mg, 1,037 mmol) en DMA (2 ml) se desgasificó burbujeando N2 a través de la mezcla durante 5 minutos. El recipiente de reacción se cerró herméticamente y se calentó a 125 °C durante 2 h. Después del enfriamiento a ta, se añadieron agua (5 ml) seguido de NaOH 1 N (1 ml). Después de la dilución con 10 ml de agua, la mezcla se transfirió a un embudo de decantación y se extrajo con Et2O (20 ml). La capa acuosa se acidificó a ~pH 1 con HCl 1 N. Después de extraer el producto acuoso con EtOAc (2 x 30 ml), los extractos orgánicos combinados se lavaron con (solución al 10 % de LiCl (2 x 50 ml) y salmuera (50 ml). La capa orgánica se dejó secar sobre Na2SO4 durante una noche. La concentración proporcionó ácido 4-((3-(ciclopropilcarbamoil)-8-((4-metoxibencil)(metil)amino)imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)amino)-1-metil-1H-pirazol-5-carboxílico (125 mg, 0,255 mmol, 98% de rendimiento) en forma de un sólido de color castaño. Tiempo de retención de LC 2,79 min [C]. MS (E+) m/z: 491 (MH+).

Ejemplo 37

Una mezcla de ácido 4-((3-(cidopropilcarbamoil)-8-((4-metoxibencil)(metil) amino)imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)amino)-1-metiMH-pirazol-5-carboxíiico (18 mg, 0,037 mmol) y HCl, 4 N en dioxano (0,183 ml, 0,734 mmol) en DCM se dejaron en reposo a ta durante 1 h. Se añadió MeOH (1 ml) y la mezcla de reacción se concentró a sequedad. El residuo se purificó a través de LC/MS preparativa con las siguientes condiciones: Columna: Waters XBridge C18, 19 x 250 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo:agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo:agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: 5-75% de B durante 25 minutos, a continuación un mantenimiento de 5 minutos al 75 % de B; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación centrífuga para proporcionar ácido 4-((3-(ciclopropilcarbamoil)-8-(metNamino)imidazo[1,2-b]piridazin-6-N)amino)-1-metiMH-pirazol-5-carboxílico (7,8 mg, 0,021 mmol, 56% de rendimiento). Tiempo de retención de LC 0,88 min [D]. MS (E+) m/z: 371 (MH+). 1H RMN (500 MHz, DMSO-da) 88,58 (d, J = 4,0 Hz, 1H), 8,35 (s, 1H), 7,92 (s, 1H), 7,81 (s, 1H), 7,43 (d, J = 4,7 Hz, 1H), 6,04 (s, 1H), 4,07 (s, 3H), 2,93 -2,82 (m, 4H), 0,78 - 0,66 (m, 2H), 0,56 - 0,46 (m, 2H) Un protón intercambiable faltante.

Ejemplo 38

Una mezcla de ácido 4-((3-(ciclopropNcarbamoN)-8-((4-metoxibencN)(metN) amino)imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)amino)-1-metN-1H-pirazol-5-carboxílico (18 mg, 0,037 mmol), anilina (6,83 mg, 0,073 mmol), BOP (21,10 mg, 0,048 mmol) y Et3N (0,015 ml, 0,110 mmol) se agitó a ta durante 2,5 h. Los volátiles se eliminaron al vacío para proporcionar un aceite de color amarillo que se trató con HCl, 4 N en dioxano (0,177 ml, 0,707 mmol) en DCM a ta durante 1 h. Se añadió MeOH (1 ml) y la mezcla de reacción se concentró a sequedad. El residuo se purificó a través de LC/MS preparativa con las siguientes condiciones: Columna: Waters XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo:agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo:agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: 5-50 % de B durante 25 minutos, a continuación un mantenimiento de 10 minutos al 50 % de B; Flujo: 25 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación centrífuga N-ddopropN-6-((1-metN-5-(metNcarbamoN)-1H-pirazol-4-il)amino)-8-(metilamino)imidazo[1,2-b]piridazin-3-carboxamida (7,8 mg, 0,021 mmol, 56 % de rendimiento). Tiempo de retención de LC 1,14 min [D]. MS (E+) m/z: 446 (MH+). 1H RMN (500 MHz, DMSO-d6) 88,64 (d, J = 4,4 Hz, 1H), 7,77 (s, 1H), 7,70 (s, 1H), 7,59 (d, J = 7,7 Hz, 2H), 7,43 (d, J = 4,7 Hz, 1H), 7,31 (t, J = 7,9 Hz, 2H), 7,14 - 7,06 (m, 1H), 5,77 (s, 1H), 4,02 (s, 3H), 2,83 (d, J = 5,0 Hz, 4H), 0,80 - 0,60 (m, 2H), 0,45 - 0,31 (m, 2H) Dos protones intercambiables faltantes.

Ejemplo 39

39a:

Una mezcla de 6-doro-N-cidopropil-8-((4-metoxibencil)(metil) amino)imidazo[1,2-b]piridazin-3-carboxamida (1d) (125 mg, 0,324 mmol), 5-amino-1-metil-1H-pirazol-3-carboxilato de etilo [(solución de bicarbonato de sodio/EtOAc) de base libre de sal HCl adquirida en Acorn Pharma. Tech.] (88 mg, 0,518 mmol), Pd2(dba)3 (29,7 mg, 0,032 mmol), XANTPHOS (37,5 mg, 0,065 mmol) y Cs2CO3 (422 mg, 1,296 mmol) en DMA (2 ml) se desgasificó burbujeando N2 a través de la mezcla durante 5 minutos. El recipiente de reacción se cerró herméticamente y se calentó a 125 °C durante 2 h. Después del enfriamiento a ta, la mezcla de reacción se repartió entre EtOAc (50 ml) y agua (50 ml). La capa orgánica se lavó con una solución al 10 % de LiCl (2 x 50 ml) y salmuera (50 ml). Después del secado (Na2SO4) y la filtración, la capa orgánica se concentró para proporcionar un sólido de color castaño que se sometió a cromatografía en un cartucho de gel de sílice ISCO de 12 g, eluyendo con un gradiente de EtOAc al 0-100 %/Hex. Las fracciones puras se concentraron para proporcionar 5-((3-(ciclopropilcarbamoil)-8-((4-metoxibencil)(metil)amino)imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)amino)-1-metil-1H-pirazol-3-carboxilato de etilo (39a) (126 mg, 0,243 mmol, 75 % de rendimiento) en forma de un sólido de color castaño. Tiempo de retención de lC 2,77 min [C]. MS (E+) m/z: 519 (MH+).

39b:

Una mezcla de 5-((3-(ciclopropilcarbamoil)-8-((4-metoxibencil)(metil) amino)imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)amino)-1-metil-1H-pirazol-3-carboxilato de etilo (39a) (107 mg, 0,206 mmol) y NaOH, 1 N (1,032 ml, 1,032 mmol) en MeOH (3 ml) se agitó a ta durante 2 días. Se añadieron THF (1 ml) y NaOH, 1 N (1,032 ml, 1,032 mmol) y la mezcla de reacción se volvió homogénea. Después de agitar durante 24 h más, el MeOH y el THF se eliminaron en el evaporador rotatorio y la mezcla acuosa se acidificó a pH 1 con HCl 1 N. La suspensión se filtró. Se secó a alto vacío para dar un sedimento duro. Este sedimento se disolvió en DCM y MeOH y se transfirió para su concentración. La concentración y el secado proporcionaron ácido 5-((3-(ciclopropilcarbamoil)-8-((4-metoxibencil)(metil)amino)imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)amino)-1-metil-1H-pirazol-3-carboxílico (39b) (77 mg, 0,157 mmol, 76 % de rendimiento) en forma de un sólido de color blanco. Tiempo de retención de LC 2,41 min [C]. MS (E+) m/z: 491 (MH+).

Ejemplo 39

Una mezcla de ácido 5-((3-(cidopropilcarbamoil)-8-((4-metoxibencil)(metil) amino)imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)amino)-1-metil-1H-pirazol-3-carboxílico (39b) (12 mg, 0,024 mmol), metanamina, 2 M en THF (0,061 ml, 0,122 mmol), BOP (14,07 mg, 0,032 mmol) y Et3N (10,23 pl, 0,073 mmol) se agitó a ta durante 1 h. Los volátiles se eliminaron al vacío para proporcionar un aceite de color amarillo que se trató con HCl, 4 N en dioxano (0,089 ml, 0,357 mmol) en DCM (0,25 ml) a ta durante 1 h. La mezcla de reacción se concentró y el residuo se purificó a través de LC/MS preparativa con las siguientes condiciones: Columna: Waters XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo:agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo:agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: 0-40 % de B durante 25 minutos, a continuación un mantenimiento de 10 minutos al 40 % de B; Flujo: 25 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación centrífuga para proporcionar N-ciclopropil-6-((1-metil-3-(metilcarbamoil)-1H-pirazol-5-il)amino)-8-(metilamino)imidazo[1,2-b]piridazin-3-carboxamida (39) (5,3 mg, 0,014 mmol, 57% de rendimiento). Tiempo de retención de LC 0,74 min [D]. MS (E+) m/z: 384 (MH+). 1H RMN (500 MHz, DMSO-da) 8 9,05 (s, 1H), 8,49 (d, J = 4,3 Hz, 1H), 8,06 (d, J = 4,9 Hz, 1H), 7,81 (s, 1H), 7,63 (d, J = 4,9 Hz, 1H), 6,53 (s, 1H), 5,76 (s, 1H), 3,73 (s, 3H), 3,17 (d, J = 4,9 Hz, 3H), 2,94 - 2,82 (m, 3H), 2,74 (s, 1H), 0,64 - 0,53 (m, 2H), 0,34-0,22 (m, 2H).

Ejemplo 40

El Ejemplo 40 se preparó de una manera similar al Ejemplo 39: Tiempo de retención de LC 1,23 min [D]. MS (E+) m/z: 446. 1H RMN (500 MHz, DMSO-d6) 8 10,02 (s, 1H), 9,15 (s, 1H), 8,53 (d, J = 4,3 Hz, 1H), 7,88 - 7,78 (m, 3H), 7,67 (d, J = 4,9 Hz, 1H), 7,34 (t, J = 7,9 Hz, 2H), 7,14 - 7,05 (m, 1H), 6,75 (s, 1H), 5,81 (s, 1H), 3,83 (s, 3H), 2,90 (d, J = 4,9 Hz, 3H), 2,76 (d, J = 4,3 Hz, 1H), 0,66 - 0,53 (m, 2H), 0,38-0,29 (m, 2H).

Ejemplo 41

41a:

Una mezcla de 6-doro-N-cidopropil-8-((4-metoxibencil)(metil)amino)imidazo[1,2-b]piridazin-3-carboxamida (1d) (125 mg, 0,324 mmol), 3-amino-1-metil-1H-pirazol-5-carboxilato de metilo [disponible comercialmente en Princeton Bio] (101 mg, 0,648 mmol), Pd2(dba)3 (29,7 mg, 0,032 mmol), XANTPHOS (37,5 mg, 0,065 mmol) y Cs2CO3 (422 mg, 1,296 mmol) en DMA (2 ml) se desgasificó burbujeando N2 a través de la mezcla durante 5 minutos. El recipiente de reacción se cerró herméticamente y se calentó a 125 °C durante 2 h. El análisis por LCMS indicó una mezcla aproximadamente uniforme de éster y ácido. Después del enfriamiento a ta, se añadió NaOH 1 N (1 ml) y la agitación se continuó a ta durante 5 h. La mezcla de reacción se repartió entre EtOAc (30 ml) y agua (25 ml). La primera capa acuosa se apartó. La capa orgánica se lavó con una solución al 10 % de LiCl (2 x 25 ml) y salmuera (25 ml). Después del secado (Na2SO4) y la filtración, la capa orgánica se concentró para dar un residuo que se sometió a cromatografía en un cartucho de gel de sílice ISCO de 4 g, eluyendo con un gradiente de EtOAc al 0-100 %/Hex. No se aisló nada de producto. La mayor parte se repartió en el producto orgánico extraído del producto acuoso acidificado y se lleva en forma de una mezcla de ácido y éster a la etapa de hidrólisis. La primera capa acuosa se acidificó a pH ~1 con HCl 1 N y la mezcla turbia se transfirió a un embudo de decantación. La mezcla se extrajo con EtOAc (50 ml) y EtOAc:THF, 3:1 (40 ml). Los extractos orgánicos combinados se lavaron con LiCl al 10 % (2 x 40 ml) y salmuera (40 ml). Después del secado (MgSO4) y la filtración, la capa orgánica se concentró para proporcionar una mezcla ~5:4 de éster-ácido que se trató sin éxito con más cantidad de NaOH 1 N en MeOH y THF. La relación final de éster-ácido fue de 1:1. Este material se usó tal cual en futuras reacciones. Éster: Tiempo de retención de LC 2,76 min [C]. MS (E+) m/z: 505. Ácido: Tiempo de retención de LC 2,68 min [C]. MS (E+) m/z: 491.

Ejemplo 41

Una mezcla de 41a (30 mg, 0,061 mmol), metanamina, 2 M en THF (0,153 ml, 0,306 mmol), BOP (35,2 mg, 0,080 mmol) y Et3N (0,026 ml, 0,183 mmol) se agitó a ta durante 1 h. Los volátiles se eliminaron al vacío para proporcionar un aceite de color amarillo impuro que se trató con HCl, 4 N en dioxano (0,15 ml, 0,060 mmol) en DCM (1 ml) a ta durante 1 h. Los volátiles se eliminaron al vacío y el residuo se purificó a través de LC/MS preparativa con las siguientes condiciones: Columna: Waters XBridge C18, 19 x 250 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo:agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo:agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: 0-100 % de B durante 25 minutos, a continuación un mantenimiento de 5 minutos al 100 % de B; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación centrífuga N-ciclopropil-6-((1-metil-5-(metilcarbamoil)-1H-pirazol-3-il)amino)-8-(metilamino)imidazo[1,2-b]piridazin-3-carboxamida (41) (5,5 mg, 0,014 mmol, 23% de rendimiento). Tiempo de retención de LC 0,77 min [D]. MS (E+) m/z: 384 (MH+). 1H RMN (500 MHz, DMSO-d6) 89,41 (s, 1H), 8,93 (d, J = 3,7 Hz, 1H), 8,44 (d, J = 4,3 Hz, 1H), 7,82 (s, 1H), 7,49 (d, J = 4,9 Hz, 1H), 6,76 (s, 1H), 5,85 (s, 1H), 4,02 (s, 3H), 2,86 (d, J = 4,9 Hz, 3H), 2,82 (td, J = 7,3, 3,7 Hz, 1H), 2,76 (d, J = 4,9 Hz, 3H), 0,71 - 0,62 (m, 2H), 0,49-0,40 (m, 2H).

Ejemplo 42

El Ejemplo 42 se preparó de una manera similar al Ejemplo 41: Tiempo de retención de LC 1,25 min [D]. ]. MS (E+) m/z: 446. 1H RMN (500 MHz, DMSO-de) 510,22 (s, 1H), 9,52 (s, 1H), 8,94 (d, J = 3,1 Hz, 1H), 7,73 (d, J = 7,9 Hz, 2H), 7,50 (d, J = 4,9 Hz, 1H), 7,36 (t, J = 7,9 Hz, 2H), 7,16 - 7,07 (m, 3H), 5,86 (s, 1H), 4,05 (s, 3H), 2,86 (d, J = 4,9 Hz, 3H), 2,75 (dt, J = 7,3, 3,7 Hz, 1H), 0,62 - 0,49 (m, 2H), 0,46-0,36 (m, 2H).

Ejemplo 43

43a:

Una mezcla de 6-doro-N-cidopropil-8-((4-metoxibencil)(metil) amino)imidazo[1,2-b]piridazin-3-carboxamida (75 mg, 0,194 mmol), 3-aminotiofeno-2-carboxilato de metilo [disponible comercialmente en Matrix] (1d) (45,8 mg, 0,292 mmol), Pd2(dba)s (17,80 mg, 0,019 mmol), XANTPHOS (22,49 mg, 0,039 mmol) y Cs2COs (253 mg, 0,778 mmol) en DMA (1,25 ml) se desgasificó burbujeando N2 a través de la mezcla durante 5 minutos. El recipiente de reacción se cerró herméticamente y se calentó a 125 °C durante 1 h. Después del enfriamiento a ta, la mezcla de reacción se repartió entre EtOAc (30 ml) y agua (30 ml). La capa orgánica se lavó con LiCl al 10 % (2 x 30 ml) y salmuera (30 ml). Después del secado (Na2SO4) y la filtración, la capa orgánica se concentró para dar un aceite de color ámbar que se concentró y se sometió a cromatografía en un cartucho de gel de sílice Is Co de 12 g, eluyendo con un gradiente de EtOAc al 0-100 %/Hex. Las fracciones puras se concentraron para proporcionar 3-((3-(ciclopropilcarbamoil)-8-((4-metoxibencil)(metil)amino)imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)amino)tiofeno-2-carboxilato de metilo (43a) (74 mg, 0,146 mmol, 75 % de rendimiento) en forma de un aceite de color amarillo. Tiempo de retención de LC 3,51 min [C]. MS (E+) m/z: 507.

Una mezcla de 3-((3-(ciclopropilcarbamoil)-8-((4-metoxibencil) (metil)amino)imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)amino)tiofeno-2-carboxilato de metilo (43a) (74 mg, 0,142 mmol) y NaOH, 1 N (0,711 ml, 0,711 mmol) en MeOH (1 ml) y THF (1 ml) se agitó a ta durante 2 h. Los disolventes orgánicos se eliminaron al vacío y el residuo se diluyó con agua. La capa acuosa se acidificó a pH 1 con HCl 1 N y la capa heterogénea se transfirió a un embudo de decantación y se extrajo con EtOAc (30 ml). La capa orgánica se lavó con salmuera (15 ml), se secó (Na2SO4) y se concentró para proporcionar ácido 3-((3-(ciclopropilcarbamoil)-8-((4-metoxibencil)(metil) amino)imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)amino)tiofeno-2-carboxílico (43b) (66 mg, 0,134 mmol, 94% de rendimiento) en forma de un sólido de color castaño. Tiempo de retención de LC 3,25 min [C]. MS (E+) m/z: 493.

Ejemplo 43

Una mezcla de ácido 3-((3-(ciclopropilcarbamoil)-8-((4-metoxibencil)(metil) amino)imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)amino)tiofeno-2-carboxílico (43b) (15 mg, 0,030 mmol), metanamina, HCl (4,11 mg, 0,061 mmol), BOP (17,51 mg, 0,040 mmol) y trietilamina (0,021 ml, 0,152 mmol) en DMF (0,25 ml) se agitó a ta durante 60 h. Los volátiles se eliminaron al vacío para proporcionar un aceite de color amarillo que se trató con HCl, 4 N en dioxano (0,074 ml, 0,297 mmol) en DCM (2 ml) a ta durante 3 h. Los volátiles se eliminaron al vacío y el residuo se purificó a través de LC/MS preparativa con las siguientes condiciones: Columna: Waters XBridge C18, 19 x 250 mm, partículas de 5 ^m; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: 10-50% de B durante 25 minutos, a continuación un mantenimiento de 7 minutos al 100 % de B; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación centrífuga para proporcionar N-ciclopropil-8-(metilamino)-6-((2-(metilcarbamoil)tiofen-3-il)amino)imidazo[1,2-b]piridazin-3-carboxamida (43) (4 mg, 0,01 mmol, 33% de rendimiento). Tiempo de retención de LC 1,13 min [D]. MS (E+) m/z: 386. 1H RMN (500 MHz, DMSO-d6) 510,22 (s, 1H), 8,56 (d, J = 3,7 Hz, 1H), 8,12 (d, J = 4,3 Hz, 1H), 7,84 (s, 1H), 7,80 - 7,75 (m, 1H), 7,74 -7,70 (m, 1H), 7,54 (d, J = 4,9 Hz, 1H), 5,91 (s, 1H), 2,94 - 2,81 (m, 4H), 2,76 (d, J = 4,3 Hz, 3H), 0,75 (d, J = 5,5 Hz, 2H), 0,49 (s a, 2H).

Los siguientes Ejemplos se prepararon de una manera similar al Ejemplo 43.

continuación

Ejemplo 51

51a:

Una mezcla de 6-cloro-N-ciclopropil-8-((4-metoxibencil)(metil) amino)imidazo[1,2-b]piridazin-3-carboxamida (1d) (150 mg, 0,389 mmol), 3-aminofuran-2-carboxilato de metilo [disponible comercialmente en Ark Chemical] (60,3 mg, 0,428 mmol), Pd2(dba)3 (35,6 mg, 0,039 mmol), XANTPHOS (45,0 mg, 0,078 mmol) y Cs2CO3 (507 mg, 1,555 mmol) en DMA (2,5 ml) se desgasificó burbujeando N2 a través de la mezcla durante 5 minutos. El recipiente de reacción se cerró herméticamente y se calentó a 125 °C durante 1,5 h. La mezcla de reacción se repartió entre EtOAc (30 ml) y agua (30 ml). Se reservó la primera capa acuosa. La capa orgánica se lavó con una solución al 10 % de LiCl (2 x 30 ml) y salmuera (30 ml). Después del secado (Na2S o4) y la filtración, la capa orgánica se concentró para proporcionar un aceite de color ámbar que se sometió a cromatografía en un cartucho de gel de sílice ISCO de 12 g, eluyendo con un gradiente de EtOAc al 0-100 %/Hex. Las fracciones puras se concentraron para proporcionar 3-((3-(cidopropilcarbamoil)-8-((4-metoxibencil)(metil)amino)imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)amino)furan-2-carboxilato de metilo (51a) (140 mg, 0,285 mmol, 73,4 % de rendimiento) en forma de un aceite de color amarillo. Tiempo de retención de LC 3,19 min [C]. MS (E+) m/z: 491.

51b:

Una mezcla de 3-((3-(ciclopropilcarbamoil)-8-((4-metoxibencil)(metil) amino)imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)amino)furan-2-carboxilato de metilo (51a) (128 mg, 0,261 mmol) y NaOH, 1 N (1,305 ml, 1,305 mmol) en MeOH (2 ml) y t Hf (2 ml) se agitó a ta durante 2 h. Los disolventes orgánicos se eliminaron al vacío y el residuo se diluyó con agua. La capa acuosa se acidificó a pH 1 con HCl 1 N y la capa heterogénea se transfirió a un embudo de decantación y se extrajo con EtOAc (30 ml). La capa orgánica se lavó con salmuera (15 ml), se secó (Na2SO4) y se concentró para proporcionar ácido 3-((3-(ciclopropilcarbamoil)-8-((4-metoxibencil)(metil) amino)imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)amino)furan-2-carboxílico (5lb) (81 mg, 0,170 mmol, 65,1% de rendimiento) en forma de un sólido de color castaño. Tiempo de retención de LC 2,93 min [C]. MS (E+) m/z: 477.

Ejemplo 51

Una mezcla de ácido 3-((3-(ciclopropilcarbamoil)-8-((4-metoxibencil)(metil) amino)imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)amino)furan-2-carboxílico (15 mg, 0,031 mmol), metanamina, HCl (4,25 mg, 0,063 mmol), BOP (18,10 mg, 0,041 mmol) y trietilamina (0,022 ml, 0,157 mmol) en DMF (0,25 ml) se agitó a ta durante 60 h. Los volátiles se eliminaron al vacío para dar un aceite de color amarillo que se trató con HCl (0,077 ml, 0,306 mmol) en DCM (1 ml) a ta durante 1 h. Los volátiles se eliminaron y el residuo se purificó a través de LC/MS preparativa con las siguientes condiciones: Columna: Waters XBridge C18, 19 x 250 mm, partículas de 5 ^m; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con ácido trifluoroacético al 0,1 %; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con ácido trifluoroacético al 0,1 %; Gradiente: 5-100 % de B durante 25 minutos, a continuación un mantenimiento de 5 minutos al 100 % de B; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación centrífuga para proporcionar N-ciclopropil-8-(metilamino)-6-((2-(metilcarbamoil)furan-3-il)amino)imidazo[1,2-b]piridazin-3-carboxamida (3,6 mg, 0,01 mmol, 31 % de rendimiento). Tiempo de retención de LC 1,03 min [D]. MS (E+) m/z: 370. 1H RMN (500 MHz, DMSO-d6) 58,86 (s, 1H), 8,63 (s a, 1H), 8,19 (s a, 1H), 7,84 (s, 1H), 7,76 (s, 1H), 7,41 (s a, 1H), 7,17 (s, 1H), 6,02 (s, 1H), 2,86 (d, J = 4,9 Hz, 4H), 2,75 (d, J = 4,3 Hz, 3H), 0,75 (d, J = 6,1 Hz, 2H), 0,49 (s a, 2H).

Los siguientes Ejemplos se prepararon de una manera similar al Ejemplo 51.

59a:

Una mezcla de 2-oxima de cianoglioxilato de etilo (5 g, 35,2 mmol) y cloruro de p-toluenosulfonilo (7,38 g, 38,7 mmol) en piridina (75 ml) se agitó a temperatura ambiente. Después de agitar durante el fin de semana, la reacción se completó por LC-MS. La mezcla de reacción se concentró para dar un aceite de color naranja, que a continuación se disolvió de nuevo en DCM y se cargó sobre una columna ISCO de 120 g para la purificación por cromatografía ultrarrápida, eluyendo con EtOAc al 0-100 % en hexanos. La concentración de las fracciones puras proporcionó 2-ciano-2-((tosiloxi)imino)acetato de (E)-etilo (59a) (7,75 g, 25,9 mmol, 73,6% de rendimiento) en forma de un aceite incoloro que se convirtió en un sólido cristalino de color blanco a alto vacío.

Tiempo de retención de LC 1,07 min [A]. MS (E+) m/z: 298 (MH+). 1H RMN (400 MHz, METANOL-d4) 87,96 - 7,90 (m, 2H), 7,51 (d, J = 8,1 Hz, 2H), 4,38 (c, J = 7,0 Hz, 2H), 2,51 -2,46 (m, 3H), 1,38-1,32 (m, 3H).

59b:

A una mezcla de 2-ciano-2-((tosiloxi)imino)acetato de (E)-etil (59a) (2,96 g, 9,99 mmol) y tioglicolato de metilo (1,364 ml, 14,98 mmol) en etanol absoluto (5 ml) se le añadió gota a gota piridina (1,022 ml, 12,64 mmol). La mezcla se convirtió en una solución de color amarillo durante 20 minutos. Después de 30 minutos, la mezcla de reacción se repartió entre éter frío y hielo-agua. La capa acuosa se extrajo con éter frío dos veces. Las capas de éter combinadas se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron y se concentraron. A una solución de este material en bruto en etanol absoluto (20 ml) se le añadió gota a gota trietilamina (1,858 ml, 13,33 mmol). La solución de color amarillo se volvió más roja a medida que se añadió trietilamina. Pocos minutos después de que se completara la adición, comenzó a formarse un precipitado después de agitar durante 30 minutos a temperatura ambiente, la mezcla de reacción se filtró y se secó para proporcionar 5-metil 4-aminoisotiazol-3,5-dicarboxilato de 3-etilo (59b) (1,1 g, 4,54 mmol, 45,4 % de rendimiento) en forma de un sólido de color blanco. Tiempo de retención de LC 0,81 min [A]. MS (E+) m/z: 231 (MH+).

1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) 86,66 (s a, 2H), 4,36 (c, J = 7,2 Hz, 2H), 3,84 (s, 3H), 1,32 (t, J = 7,0 Hz, 3H).

59c:

Una mezcla de 5-metil 4-aminoisotiazol-3,5-dicarboxilato de 3-etilo (59b) (0,85 g, 3,69 mmol) en HCl concentrado (10 ml) se calentó a reflujo durante 2 horas. La reacción se dejó enfriar a temperatura ambiente y después se puso sobre hielo. El producto se eliminó por precipitación de la solución y se eliminó por filtración en forma de un sólido de color blanco. El secado durante una noche al vacío proporcionó ácido 4-aminoisotiazol-3-carboxílico (59c) (438 mg, 3,04 mmol, 82 % de rendimiento) en forma de un sólido de color blanco. Tiempo de retención de LC 0,59 min [A]. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) 86,66 (s a, 2H), 4,36 (c, J = 7,2 Hz, 2H), 3,84 (s, 3H), 1,32 (t, J = 7,0 Hz, 3H).

1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) 514,08 - 13,54 (m, 1H), 7,75 (s, 1H), 6,69 (s a, 2H)

59d:

Se burbujeó gas HCl a través de una solución de ácido 4-aminoisotiazol-3-carboxílico (0,21 g, 1,457 mmol) en etanol (10 ml) a 0 °C durante cinco minutos. A continuación, la solución se calentó a reflujo durante 1 hora, después de lo cual la reacción se completó por LC-MS. La concentración y el secado proporcionaron 4-aminoisotiazol-3-carboxilato de etilo, HCl (59d) (237 mg, 1,124 mmol, 77% de rendimiento) en forma de un sólido de color blanco. Tiempo de retención de LC 0,96 min [A]. MS (E+) m/z: 173 (MH+). 1H RMN (400 MHz, DMSO-de) 57,93 (s, 1H), 5,86 (s a, 2H), 4,32 (c, J = 7,0 Hz, 2H), 1,32 (t, J = 7,2 Hz, 3H).

59e:

Una mezcla de 6-cloro-N-ciclopropil-8-((4-metoxibencil)(metil) amino)imidazo[1,2-b]piridazin-3-carboxamida (1d) (175 mg, 0,454 mmol), 4-aminoisotiazol-3-carboxilato de etilo (59d) (172 mg, 0,998 mmol), BrettPhos (48,7 mg, 0,091 mmol) en DMA (3 ml) se desgasificó burbujeando N2 a través de la mezcla durante 5 minutos. A continuación, se añadieron Pd2(dba)3 (83 mg, 0,091 mmol) y CS2CO3 (517 mg, 1,587 mmol) y el recipiente de reacción se cerró herméticamente y se calentó a 110 °C durante una noche. La mezcla de reacción se calentó adicionalmente a 125 °C durante 4 horas el día siguiente. La mezcla de reacción se repartió entre EtOAc (30 ml) y agua (30 ml). La capa acuosa se acidificó cuidadosamente con HCl 1 N (2 ml) y se extrajo con EtOAc (2 x 50 ml). Esta capa orgánica se lavó con una solución al 10 % de LiCl (2 x 30 ml) y salmuera (30 ml). Después del secado (Na2SO4) y la filtración, la capa orgánica se concentró para proporcionar ácido 4-((3-(ciclopropilcarbamoil)-8-((4-metoxibencil)(metil)amino)imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)amino)isotiazol-3-carboxílico (59e) (135 mg, 0,191 mmol, 42,2% de rendimiento) en forma de un sólido de color castaño. Tiempo de retención de LC 1,03 min [A]. MS (E+) m/z: 494.

Ejemplo 59

Una mezcla de ácido 4-((3-(ciclopropilcarbamoil)-8-((4-metoxibencil)(metil) amino)imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)amino)isotiazol-3-carboxílico (59e) (30 mg, 0,061 mmol), clorhidrato de metilamina (12,3 mg, 0,182 mmol), HATU (30 mg, 0,079 mmol) y N,N-diisopropiletilamina (0,064 ml, 0,365 mmol) en DMF (1 ml) se agitó a ta durante 2,5 h. Los volátiles se eliminaron al vacío para proporcionar un aceite de color amarillo que se trató con HCl (0,111 ml, 0,444 mmol) en DCM (1 ml) a ta durante 30 minutos. Los volátiles se eliminaron y el residuo se purificó a través de LC/MS preparativa con las siguientes condiciones: Columna: Waters XBridge C18, 19 x 250 mm, partículas de 5 ^m; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con ácido trifluoroacético al 0,1 %; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con ácido trifluoroacético al 0,1 %; Gradiente: 5-100 % de B durante 25 minutos, a continuación un mantenimiento de 5 minutos al 100 % de B; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación centrífuga para proporcionar 4-((3-(ciclopropilcarbamoil)-8-(metilamino)imidazo[1,2b]piridazin-6-il)amino)-N-metilisotiazol-3-carboxamida (59) (3,2 mg, 0,0081 mmol, 27 % de rendimiento). Tiempo de retención de LC 1,19 min [D]. MS (E+) m/z: 387. 1H RMN (500 MHz, DMSO-d6) 510,05 (s, 1H), 9,40 (s, 1H), 8,96 (d, J = 4,3 Hz, 1H), 8,49 (d, J = 3,7 Hz, 1H), 7,89 (s, 1H), 7,50 (d, J = 4,9 Hz, 1H), 5,99 (s, 1H), 2,92 - 2,86 (m, 4H), 2,84 (d, J = 4,3 Hz, 3H), 0,79 - 0,73 (m, 2H), 0,59-0,54 (m, 2H).

Los siguientes Ejemplos se prepararon de una manera similar al Ejemplo 59.

continuación

continuación

Ejemplo 78

78a:

Una mezcla de 5-bromotiazol-4-carboxilato de metilo (1,14 g, 5,13 mmol), benzofenona imina (1,287 ml, 7,70 mmol), carbonato de cesio (3,68 g, 11,29 mmol), xanthphos (0,535 g, 0,924 mmol) y aducto de tris(dibencilidenoacetona)dipaladio-cloroformo (0,292 g, 0,282 mmol) en tolueno (12 ml) se calentó a 80 °C durante una noche. Después de agitar durante una noche, la reacción se enfrió a temperatura ambiente. El análisis por LC-MS indicó que la reacción se había completado. Después de la evaporación de la mayor parte del tolueno, el material en bruto se suspendió en 150 ml de DCM y el carbonato de cesio insoluble se eliminó por filtración. A continuación, la solución resultante se concentró y se purificó por cromatografía ultrarrápida eluyendo con EtOAc al 0-100% en hexanos sobre una columna de 80 g. Las fracciones limpias se concentraron para proporcionar 5-((difenilmetileno)amino)tiazol-4-carboxilato de metilo (1,55 g, 4,81 mmol, 94% de rendimiento) (78a) en forma de un aceite de color amarillo. Tiempo de retención de LC 0,98 min [A]. MS (E+) m/z: 323 (MH+).

78b:

A una solución de 5-((difenilmetileno)amino)tiazol-4-carboxilato de metilo (78a) (1,55 g, 4,81 mmol) en THF (5 ml) se le añadió HCl 3 N (1,603 ml, 4,81 mmol). Esta solución se agitó a temperatura ambiente durante 1 h, a medida que el producto comenzó a precipitar de la solución. Después de eliminar por filtración un sólido de color blanquecino, este se repartió entre EtOAc y bicarbonato de sodio acuoso saturado. La capa acuosa se extrajo dos veces con EtOAc. Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera. Después del secado sobre sulfato de sodio y la filtración, el material en bruto se cargó sobre una columna de 24 g para la purificación por cromatografía ultrarrápida, eluyendo con EtOAc al 0-100 % en hexanos. La concentración de la fracción pura proporcionó 5-aminotiazol-4-carboxilato de metilo (78b) (687 mg, 4,34 mmol, 90% de rendimiento) en forma de un sólido de color blanco. Tiempo de retención de LC 0,46 min [A]. MS (E+) m/z: 159 (MH+). 1H RMN (400 MHz, CLOROFORMO-d) 57,88 (s, 1H), 6,01 (s a, 2H), 1,58 (s, 3H).

78c:

Un matraz que contenía una mezcla de 6-cloro-N-ciclopropil-8-((4-metoxibencil)(metil)amino)imidazo[1,2-b]piridazin-3-carboxamida (1d) (115 mg, 0,298 mmol), 5-aminotiazol-4-carboxilato de metilo (78b) (70,7 mg, 0,447 mmol) y BrettPhos (40,0 mg, 0,075 mmol) se lavó abundantemente con nitrógeno. Se añadió DMA (2,5 ml) y la mezcla heterogénea se roció con nitrógeno durante unos minutos. Se añadió carbonato de cesio (388 mg, 1,192 mmol), seguido de Pd2dba3 (68,2 mg, 0,075 mmol) y la mezcla resultante se calentó a 90 °C durante 72 horas. Después de que se completara la reacción, la reacción se enfrió a temperatura ambiente. El análisis por LC-MS indicó que la reacción se había completado. Se añadieron 15 ml de agua y la suspensión se extrajo con EtOAc (3 x 40 ml). Las capas de EtOAc combinadas se lavaron con LiCl al 10 % (40 ml) y salmuera (40 ml). El secado sobre sulfato de sodio, la filtración y la concentración proporcionaron un residuo que se purificó por cromatografía ultrarrápida eluyendo con EtOAc al 0-100% en hexanos en una columna de 12 g. Las fracciones limpias se concentraron para proporcionar 5-((3-(ciclopropilcarbamoil)-8-((4-metoxibencil)(metil)amino)imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)amino)tiazol-4-carboxilato de metilo (78c) (108 mg, 0,202 mmol, 67,8 % de rendimiento) en forma de un sólido de color castaño. Tiempo de retención de LC 0,93 min [A]. MS (E+) m/z: 508 (MH+).

78d:

A una solución de 5-((3-(ciclopropilcarbamoil)-8-((4-metoxibencil)(metil)amino)imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)amino)tiazol-4-carboxilato de metilo (78c) (88 mg, 0,173 mmol) en THF (1,5 ml) y metanol (0,15 ml) se le añadió NaOH 1 N (2,081 ml, 2,081 mmol). La solución resultante se agitó a 50 °C durante una noche. Después de agitar durante una noche, se añadió agua (15 ml), seguido de 2,2 ml de HCl 1 N para acidificar la reacción. La mezcla resultante se extrajo con EtOAc (3 x) y las capas orgánicas combinadas se secaron sobre sulfato de sodio. La filtración y la concentración proporcionaron ácido 5-((3-(ciclopropilcarbamoil)-8-((4-metoxibencil)(metil)amino)imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)amino)tiazol-4-carboxílico (78d) (79 mg, 0,152 mmol, 88 % de rendimiento).

en forma de un sólido de color blanco. Tiempo de retención de LC 0,83 min [A]. MS (E+) m/z: 494 (MH+).

Ejemplo 78

Una mezcla de ácido 5-((3-(ciclopropilcarbamoil)-8-((4-metoxibencil)(metil)amino)imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)amino)tiazol-4-carboxílico (78d) (13 mg, 0,026 mmol), metanamina, HCl (2,454 mg, 0,079 mmol), BOP (23,30 mg, 0,053 mmol) y DIEA (0,028 ml, 0,158 mmol) en DMF (1 ml) se agitó a temperatura ambiente durante una hora después de lo cual la reacción se completó por LC-MS. La mezcla de reacción se concentró para dar un sólido de color amarillo pálido. A una solución de esta 5-((3-(ciclopropilcarbamoil)-8-((4-metoxibencil)(metil)amino)imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)amino)-N-metiltiazol-4-carboxamida en bruto (13 mg, 0,026 mmol) en Dc M (1 ml) se le añadió HCl 4 N en 1,4-dioxano (0,096 ml, 0,385 mmol). Esta solución se agitó a temperatura ambiente durante 30 minutos. Los volátiles se eliminaron y el residuo se purificó a través de LC/MS preparativa con las siguientes condiciones: Columna: Waters XBridge C18, 19 x 250 mm, partículas de 5 ^m; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con ácido trifluoroacético al 0,1 %; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con ácido trifluoroacético al 0,1 %; Gradiente: 5-100 % de B durante 25 minutos, a continuación un mantenimiento de 5 minutos al 100% de B; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación centrífuga para proporcionar 5-((3-(ciclopropilcarbamoil)-8-(metilamino)imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)amino)-N-metiltiazol-4-carboxamida (77) (3,8 mg, 9,44 ^mol, 36,8% de rendimiento). Tiempo de retención de LC 1,18 min [D]. MS (E+) m/z: 387. 1H RMN (500 MHz, DMSO-d6) 511,19 (s, 1H), 8,69 (s, 1H), 8,53 - 8,45 (m, 2H), 7,90 (s, 1H), 7,72 (d, J = 4,9 Hz, 1H), 6,15 (s, 1H), 2,95 -2,88 (m, 4H), 2,84 (d, J = 4,9 Hz, 3H), 0,87 - 0,81 (m, 2H), 0,67 (d, J = 2,4 Hz, 2H).

Los siguientes ejemplos se prepararon de una manera similar al Ejemplo 78.

continuación

Ejemplo 84

84a:

1. anhídrido acético

DMAP, DCM

2. Reactivo de Lawesson

to ueno

84a

2-Amino-2-cianoacetato de etilo, sal p-toluenosulfonato (1 g, 3,34 mmol) se convirtió en la base libre disolviéndolo en 10 ml de bicarbonato de sodio acuoso saturado, a continuación se extrajo con diclorometano (3 x 10 ml). Las capas de diclorometano combinadas se secaron sobres sulfato de sodio, se filtraron y se concentraron hasta un volumen de ~25 ml. A esta solución se le añadió N,N-dimetilaminopiridina (0,041 g, 0,334 mmol), seguido de anhídrido acético (0,347 ml, 3,67 mmol). Después de la agitación durante 1 h a temperatura ambiente, la mezcla de reacción se inactivó con 5 ml de bicarbonato de sodio ac. sat. y 5 ml de agua. La mezcla de reacción se extrajo con DCM (3 x 25 ml). Las capas de DCM combinadas se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron y se concentraron para proporcionar el producto en bruto, 2-acetamido-2-cianoacetato de etilo (0,51 g, 3,00 mmol, 90% de rendimiento) en forma de un sólido de color amarillo. A continuación, una porción de este material (334 mg, 1,963 mmol) se disolvió en tolueno (7 ml). A esta solución se le añadió reactivo de Lawesson (397 mg, 0,981 mmol) y la mezcla resultante se agitó a 80 °C durante una noche. Después del enfriamiento a temperatura ambiente, la mezcla de reacción se evaporó sobre Celite. El material se purificó en primer lugar por columna de gel de sílice de 24 g, eluyendo con EtOAc al 0-100 % en hexanos, y a continuación por una segunda purificación en columna de gel de sílice de 24 g, eluyendo con MeOH al 0-10 % en DCM. La concentración de las fracciones puras proporcionó 5-amino-2-metiltiazol-4-carboxilato de etilo (84a) (35 mg, 0,188 mmol, 10 % de rendimiento) en forma de un aceite incoloro. Tiempo de retención de LC 0,54 min [A]. MS (E+) m/z: 187 (MH+). 1H RMN (400 MHz, CLOROFORMO-d) 86,03 - 5,76 (m, 2H), 4,39 (c, J = 7,0 Hz, 2H), 2,60 - 2,51 (m, 3H), 1,45 - 1,37 (m,3H).

84b:

Se añadieron 6-doro-N-cidopropil-8-((4-metoxibencil)(metil)amino)imidazo[1,2-b]piridazin-3-carboxamida (1d) (44 mg, 0,114 mmol), 5-amino-2-metiltiazol-4-carboxilato de etilo (84a) (31,9 mg, 0,171 mmol) y BrettPhos (12,24 mg, 0,023 mmol) en un matraz y posteriormente se lavó abundantemente con nitrógeno. Se añadió N,N-dimetilacetamida (1 ml) y la mezcla heterogénea se roció con nitrógeno durante unos minutos. Se añadieron carbonato de cesio (111 mg, 0,342 mmol) y Pd2dba3 (20,88 mg, 0,023 mmol), y a continuación la mezcla resultante se calentó a 115 °C durante una noche. Después del enfriamiento a ta, se añadió agua (15 ml) y la mezcla resultante se extrajo con EtOAc (3 x 40 ml). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con LiCl al 10 % (40 ml) y salmuera (40 ml) y se secaron sobre sulfato de sodio. Esta solución se filtró, se concentró y se purificó por cromatografía ultrarrápida eluyendo con EtOAc al 0-100 % en hexanos en una columna de 12 g. Las fracciones limpias se concentraron para proporcionar 5-((3-(ciclopropilcarbamoil)-8-((4-metoxibencil)(metil)amino)imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)amino)-2-metiltiazol-4-carboxilato de etilo (84b) (51 mg, 0,095 mmol, 83 % de rendimiento) en forma de un sólido de color castaño. Tiempo de retención de LC 0,98 min [A]. m S (E+) miz: 536 (MH+).

84c:

A una solución de 5-((3-(ciclopropilcarbamoil)-8-((4-metoxibencil) (metil)amino)imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)amino)-2-metiltiazol-4-carboxilato de etilo (84b) (50 mg, 0,093 mmol) en THF (1 ml) y metanol (0,1 ml) se le añadió NaOH 1 N (0,467 ml, 0,467 mmol), y la solución resultante se agitó a temperatura ambiente durante una noche a 40 °C. Tras el enfriamiento a ta, la mezcla de reacción se acidificó con 1 ml de HCl 1 N. A continuación, la mezcla resultante se extrajo con EtOAc (2 x). Los extractos orgánicos combinados se lavaron con salmuera y se secaron sobre sulfato de sodio. La filtración y la evaporación proporcionaron ácido 5-((3-(ciclopropilcarbamoil)-8-((4-metoxibencil)(metil) amino)imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)amino)-2-metiltiazol-4-carboxílico (84c) (37 mg, 0,073 mmol, 78 % de rendimiento) en forma de un sólido de color pardo claro. Tiempo de retención de LC 0,85 min [A]. MS (E+) miz: 508 (MH+).

Ejemplo 84

Una mezcla de ácido 5-((3-(cidopropilcarbamoil)-8-((4-metoxibencil)(metil) amino)imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)amino)-2-metiltiazol-4-carboxílico (13 mg, 0,026 mmol), clorhidrato de metilamina (5,19 mg, 0,077 mmol), BOP (22,66 mg, 0,051 mmol) y N,N-diisopropiletilamina (0,027 ml, 0,154 mmol) en DMF (1 ml) se agitó a temperatura ambiente durante 30 minutos, después de lo cual la reacción se completó por LC-MS. La mezcla de reacción se concentró para dar un sólido de color amarillo pálido. A una solución de esta 5-((3-(ciclopropilcarbamoil)-8-((4-metoxibencil)(metil)amino)imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)amino)-N,2-dimetiltiazol-4-carboxamida en bruto (13 mg, 0,025 mmol) en dCm (1 ml) se le añadió HCl 4 N en 1,4-dioxano (0,094 ml, 0,375 mmol). Esta solución se agitó a temperatura ambiente durante 30 minutos. Los volátiles se eliminaron y el residuo se purificó a través de LC/MS preparativa con las siguientes condiciones: Columna: Waters XBridge C18, 19 x 250 mm, partículas de 5 ^m; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con ácido trifluoroacético al 0,1 %; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con ácido trifluoroacético al 0,1 %; Gradiente: 5-100% de B durante 25 minutos, a continuación un mantenimiento de 5 minutos al 100 % de B; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación centrífuga para proporcionar 5-((3-(ciclopropilcarbamoil)-8-(metilamino) imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)amino)-N,2-dimetiltiazol-4-carboxamida (84) (1,26 mg, 2,93 ^mol, 11,72 % de rendimiento). Tiempo de retención de LC 1,24 min [D]. MS (E+) m/z: 401 (MH+). 1H RMN (500 MHz, DMSO-d6) 5 11,08 (s, 1H), 8,50 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 8,32 (d, J = 4,3 Hz, 1H), 7,90 (s, 1H), 7,70 (d, J = 4,9 Hz, 1H), 6,11 (s, 1H), 3,90 (s, 1H), 3,17 (d, J = 5.5 Hz, 3H), 2,81 (d, J = 4,3 Hz, 3H), 2,64 (s, 3H), 0,90 - 0,84 (m, 2H), 0,69 (d, J = 4,9 Hz, 2H).

Ejemplo 85

El Ejemplo 85 se preparó de una manera similar al Ejemplo 84: Tiempo de retención de LC 1,60 min [D]. MS (E+) m/z: 429 (MH+). 1H RMN (500 MHz, DMSO-d6) 5 11,08 (s, 1H), 8,51 (s a, 1H), 8,01 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 7,90 (s, 1H), 7,71 (d, J = 4,9 Hz, 1H), 6,14 (s, 1H), 4,20 - 4,10 (m, 1H), 2,96 - 2,86 (m, 4H), 2,64 (s, 3H), 1,20 (d, J = 6,7 Hz, 6H), 0,87 (d, J = 4,9 Hz, 2H), 0,69 (s a, 2H).

ENSAYOS BIOLÓGICOS

Los siguientes ensayos se usan para mostrar la actividad de los compuestos de la invención.

Ensayo de desplazamiento de sonda

El ensayo de desplazamiento de sonda se realiza de la siguiente manera: en una placa de 385 pocillos, los compuestos de prueba junto con proteína marcada con His expresada de manera recombinante correspondiente a los aminoácidos 575-869 de Tyk2 humano (secuencia que se muestra a continuación) a 2,5 nM, ((R)-N-(1-(3-(8-metil-5-(metilamino)-8H-imidazo[4,5-d]tiazolo[5,4-b]piridin-2-il)fenil)etil)-2-([3H]metilsulfonil)benzamida) 40 nM (preparación descrita a continuación) y 80 ^g/ml de perlas de ensayo de proximidad de centelleo de cobre His-Tag (Perkin Elmer, N.° de catálogo RPNQ0095) en HEPES 50 mM, pH 7,5, que contenían 100 ^g/ml de albúmina sérica bovina y DMSO al 5 % se incubaron durante 30 minutos a temperatura ambiente. Después, se cuantificó la cantidad de sonda radiomarcada (preparación descrita a continuación) unida a Tyk2 por recuento de centelleo, y se calculó la inhibición por el compuesto de ensayo mediante la comparación con los pocillos sin inhibidor (0 % de inhibición) o sin Tyk2 (100 % de inhibición). El valor de CI50 se define como la concentración de compuesto de ensayo necesaria para inhibir la unión de la sonda radiomarcada en un 50 %.

Secuencia proteica de Tyk2 recombinante marcada con Hig (575-869):

MGSSHHHHHH SSGETVRFQG HMNLSQLSFH RVDQKEITQL SHLGQGTRTN

VYEGRLRVEG SGDPEEGKMDDEDPLVPGRD RGQELRVVLK VLDPSHHDIA

LAFYETASLM SQVSHTHLAF VHGVCVRGPE NIMVTEYVEHGPLDVWLRRE

RGHYPMAWKM YYAQQLASAL SYLENKNLVH GNVCGRNILL ARLGLAEGTS

PFIKLSDPGVGLGALSREER VERIPWLAPE CLPGGANSLS TAMDKWGFGA

TLLEICFDGE APLQSRSPSE KEHFYQRQHRLPEPSCPQLA TLTSQCLTYE

PTQRPSFRTILRDLTRL. (SEQ ID NO: 1).

La preparación de la sonda radiomarcada, (R)-N-(1-(3-(8-metil-5-(metilamino)-8H-imidazo[4,5-d]tiazolo[5,4-b]piridin-2-il)fenil)etil)-2-([3H]metilsulfonil)benzamida, se realizó como se describe a continuación:

Ácido 2-([3H]metilsulfoml)benzoico: Se añadieron ácido 2-mercaptobenzoico (2,3 mg, 0,015 mmol) y carbonato de cesio (2 mg, 0,006 mmol) en un matraz de fondo redondo de 5 ml. El matraz se conectó a una línea de vacío de vidrio con puertos y se introdujo DMF anhidra (0,5 ml) con agitación magnética. Se añadió una ampolla de yoduro de metilo tritiado (200 mCi, lote 3643419 de Perkin-Elmer) en el matraz de reacción y la agitación se mantuvo a temperatura ambiente durante 3 h. El análisis de HPLC en proceso con detección radiométrica indicó una conversión del 80 % en el producto deseado en comparación con el patrón auténtico. Sin purificación, se hizo reaccionar el producto bruto con mCPBA (10 mg, 0,058 mmol) previamente disuelto en CH2Cl2 (1 ml) a temperatura ambiente con agitación. La reacción se agitó durante 7 h y se añadió más cantidad de mCPBA (10 mg, 0,058 mmol). La reacción se agitó durante aproximadamente 24 h y el análisis de HPLC indicó una conversión del 35-40 % en el producto de sulfonato deseado. El producto en bruto se purificó por HPLC semi-preparativa (Luna 5 um C18 (10 x 250 cm); A: MeOH/H2O = 15/85 (t Fa al 0,1 %); B: MeOH; 270 nm; 0-8 min 0 % de B a 1 ml/min; 8-10 min 0 % de B a 1-3 ml/min; 10-55 min 0 % de B a 3 ml/min; 55-65 min 0-10 % de B a 3 ml/min; 65-75 min 10-50 % de B a 3 ml/min; 75-80 min 50-100 % de B a 3 ml/min), dando 81 mCi (rendimiento radioquímico del 40 %) de producto de ácido 2-([3H]metilsulfonil)benzoico identificado por su coelución mediante HPLC con un patrón auténtico. La pureza radioquímica se midió mediante HPLC en un 99% (Luna 5 u C18 (4,6 x 150 cm); A: H2O (TFA al 0,1 %); B: MeOH; 1,2 ml/min; 270 nm; 0-10 min 20% de B; 10-15 min 20-100 % de B; 15-25 min 100 % de B. Se disolvió el producto en acetonitrilo anhidro, dando una actividad de la solución final de 5,8 mCi/ml.

(R)-N-(1-(3-(8-metil-5-(metilamino)-8H-imidazo[4,5-cf]tiazolo[5,4-b]piridin-2-il)fenil)etil)-2-([3H]metilsulfonil)benzamida: Se añadió una solución de ácido 2-([3H]metilsulfonil)benzoico (23,2 mCi) en acetonitrilo en un matraz de fondo redondo de 5 ml que a continuación se conectó a una línea de vacío y se evaporó cuidadosamente hasta sequedad. Se añadieron (R)-2-(3-(1-aminoetil)fenil)-N,8-dimetil-8H-imidazo[4,5-d]tiazolo[5,4-b]piridin-5-amina (preparada como se ha descrito en el documento w O 2004/106293 y Dyckman etal., Bioorganic and Medicinal Chemistry Letters, 383-386 (2011)) (1,1 mg, 0,0033 mmol) y PyBOP (2 mg, 0,0053 mmol) disuelto en DMF anhidra (1,5 ml) en el matraz seguido de N,N-diisopropiletilamina (0,010 ml). La solución transparente resultante se agitó a temperatura ambiente durante 18 h. El análisis por HPLC (Luna 5 u C18 (4,6 x 150 cm); A: H2O (TFA al 0,1 %); B: MeOH; 1,2 ml/min; 335 nm; 0 20 min 50 % de B; 20-25 min 50-100 % de B; 25-30 min 100 % de B) indicó una conversión de aproximadamente el 20 % en el producto deseado mediante la comparación del tiempo de retención con una muestra de (R)-N-(1-(3-(8-metil-5-(metilamino)-8H-imidazo[4,5-cf]tiazolo[5,4-b]piridin-2-il)fenil)etil)-2-(metilsulfonil)benzamida no radiomarcada. La mezcla de reacción en bruto se purificó por Hp Lc semi-preparativa (Luna 5 u C18 (10 x 250 cm); A: MeOH/H2O = 50/50 (TFA al 0,1 %); B: MeOH; 335 nm; 0-40 min 0 % de B a 3 ml/min; 40-45 min 0-100 % de B a 3 ml/min). Se realizó la rutina de purificación una segunda vez para producir un total de 1,7 mCi (rendimiento radioquímico del 7 %) del producto deseado al 99,9 % de pureza radioquímica. Se usó el análisis espectral de masas del producto tritiado (m/z M H 527,33) para establecer la actividad específica a 80,6 Ci/mmol.

Datos de des lazamiento de la sonda

continuación

continuación

Ensayo de linfocitos T Kit225

Se sembraron linfocitos T Kit225 con un indicador de luciferasa dependiente de STAT integrada de forma estable en medio RPMI (GIBCO) que contenía FBS inactivado con calor al 10 % (GIBCO) y 100 U/ml de PenStrep (GIBCO). Luego, las células se estimularon con 20 ng/ml de IL-23 humana recombinante o 200 U/m de IFNa humano recombinante (PBL InterferonSource) durante 5 a 6 horas. La expresión de la luciferasa se midió usando el sistema de ensayo de luciferasa STEADY-GLO® (PROMEGA®) de acuerdo con las instrucciones del fabricante. Se calcularon los datos de inhibición en comparación con los pocillos de control sin inhibidor para la inhibición del 0 % y los pocillos de control no estimulados para la inhibición del 100 %. Se generaron curvas de respuesta a la dosis para determinar la concentración requerida para inhibir el 50 % de la respuesta celular (CI50) derivada del análisis de regresión no lineal.

Datos de inhibición de linfocitos T Kit225

(continuación)

Claims

REIVINDICACIONES

1. Un compuesto de fórmula (I)

en la que

Rx es H o alquilo Ci-C6;

R2a es halo o alquilo C1-C6;

R4 es H, CD3, alquilo C1-C6, alcoxialquilo C1-C6, cicloalquilo monocíclico o bicíclico de 3 a 10 miembros, arilo monocíclico o bicíclico de 4 a 10 miembros, heterociclilo monocíclico o bicíclico de 4 a 10 miembros, o heteroarilo monocíclico o bicíclico de 4 a 10 miembros sustituido, conteniendo cada heterociclilo o cada heteroarilo 1-3 heteroátomos seleccionados entre N, O y S, cualquiera de dichos grupos distintos de H sustituido con 0-2 R4a; R4a es H, NR5R6, alquilo C1-C6, cicloalquilo C3-C8, hidroxialquilo C1-C6 o alcoxialquilo C1-C6;

R5 y R6 son independientemente H o alquilo C1-C4; o

o una sal, un tautómero o un estereoisómero del mismo farmacéuticamente aceptables.

2. El compuesto de acuerdo con la reivindicación 1 de fórmula II

en la que

A es

Rx es H o alquilo Ci-C6;

R2a es halo o alquilo C1-C6;

R5 y R6 son independientemente H o alquilo C1-C4; o

3. El compuesto de acuerdo con la reivindicación 2

en donde

A es

Rx es alquilo Ci-C3;

R2a es halo o alquilo C1-C6;

R5 y R6 son independientemente H o alquilo C1-C4; o

4. El compuesto de acuerdo con la reivindicación 3

en donde

A es

Rx es alquilo C1-C3;

R2a es halo o alquilo C1-C6;

R4 es H, CD3, alquilo C1-C6, alcoxialquilo C1-C6, cicloalquilo monocíclico o bicíclico de 3 a 10 miembros, arilo monocíclico o bicíclico de 4 a 10 miembros, heterociclilo monocíclico o bicíclico de 4 a 10 miembros, o heteroarilo monocíclico o bicíclico de 4 a 10 miembros sustituido, conteniendo cada heterociclilo o cada heteroarilo 1-3 heteroátomos seleccionados entre N, O y S, cualquiera de dichos grupos distintos de H sustituido con 0-2 R4a;

R5 y R6 son independientemente H o alquilo C1-C4; o

5. El compuesto de acuerdo con la reivindicación 4

en donde

Rx es alquilo C1-C3;

R2a es halo o alquilo C1-C6;

R5 y R6 son independientemente H o alquilo C1-C4; o

6. El compuesto de acuerdo con la reivindicación 4

en donde

R2a es halo o alquilo Ci-C6;

R5 y R6 son independientemente H o alquilo C1-C4; o

7. El compuesto de acuerdo con la reivindicación 4

en donde

Rx es alquilo C1-C3;

R2a es halo o alquilo C1-C6;

R5 y R6 son independientemente H o alquilo C1-C4; o

8. El compuesto de acuerdo con la reivindicación 4

en donde

Rx es alquilo C1-C3;

R2a es halo o alquilo C1-C6;

R5 y R6 son independientemente H o alquilo C1-C4; o

9. El compuesto de acuerdo con la reivindicación 4

en donde

Rx es alquilo Ci-C3;

R2a es halo o alquilo C1-C6;

R5 y R6 son independientemente H o alquilo C1-C4; o

10. El compuesto de acuerdo con la reivindicación 4

en donde

Rx es alquilo C1-C3;

R2a es halo o alquilo C1-C6;

R5 y R6 son independientemente H o alquilo C1-C4; o

11. El compuesto de acuerdo con la reivindicación 4

en donde

R2a es halo o alquilo C1-C6;

R5 y R6 son independientemente H o alquilo C1-C4; o

12. El compuesto de acuerdo con la reivindicación 4

en donde

R2a es halo o alquilo C1-C6;

R5 y R6 son independientemente H o alquilo C1-C4; o

13. El compuesto de acuerdo con la reivindicación 4

en donde

R2 es H, alquilo C1-C6, cicloalquilo C3-C8, hidroxialquilo C1-C6, alcoxialquilo C1-C6, cicloalquil dialquil (Ci-C4)-aminoalquil-, arilo, heteroarilo o heterociclil-alquil C1-C6-, sustituido con 0-2 R2a;

R2a es halo o alquilo C1-C6;

R5 y R6 son independientemente H o alquilo C1-C4; o

14. El compuesto de acuerdo con la reivindicación 4

en donde

R2a es halo o alquilo C1-C6;

R5 y R6 son independientemente H o alquilo C1-C4; o

15. El compuesto de acuerdo con la reivindicación 4

en donde

Rx es alquilo C1-C3;

R2a es halo o alquilo C1-C6;

R5 y R6 son independientemente H o alquilo C1-C4; o

16. Una composición farmacéutica que comprende uno o más compuestos de acuerdo con las reivindicaciones 1-15 y un portador o un diluyente farmacéuticamente aceptables.

17. Un compuesto de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1-15 o una sal, un tautómero o un estereoisómero del mismo farmacéuticamente aceptables, para su uso en el tratamiento de una enfermedad inflamatoria o autoinmunitaria.

18. El compuesto, la sal, el tautómero o el estereoisómero del mismo farmacéuticamente aceptables, para su uso de acuerdo con la reivindicación 17, en donde las enfermedades inflamatoria o autoinmunitaria son esclerosis múltiple, artritis reumatoide, enfermedad inflamatoria del intestino, lupus eritematoso sistémico, psoriasis, artritis psoriásica, enfermedad de Crohn, síndrome de Sjogren o esclerodermia.