ES2907424T3

ES2907424T3 - N-(5-(2,3-dihidrobenzo[b][1,4]dioxina-6-carboxamido)-2-fluorofenil)-2-((4-etilpiperazin-1-il)metil)quinolin-6- carboxamida deuterada

Info

Publication number: ES2907424T3
Application number: ES17783566T
Authority: ES
Inventors: Keith Jones; Matthew D Cheeseman; A Elisa Pasqua; Michael J Tucker
Original assignee: Cancer Research Technology Ltd
Current assignee: Cancer Research Technology Ltd
Priority date: 2016-10-07
Filing date: 2017-10-06
Publication date: 2022-04-25
Anticipated expiration: 2037-10-06
Also published as: GB201617103D0; WO2018065787A1; US11814370B2; US20200039965A1; EP3523295B1; EP3523295A1

Abstract

Un compuesto, o una de sus sales o solvatos farmacéuticamente aceptables, seleccionado de **(Ver fórmula)** y

Description

DESCRIPCIÓN

N-(5-(2,3-dihidrobenzo[b][1,4]dioxina-6-carboxamido)-2-fluorofenil)-2-((4-etilpiperazin-1-il)metil)quinolin-6-carboxamida deuterada

Introducción

La presente invención se refiere a nuevos compuestos deuterados que actúan como inhibidores de la actividad del factor 1 de choque térmico (HSF1). La presente invención se refiere además a composiciones farmacéuticas que os comprenden y a su uso en el tratamiento de afecciones o enfermedades mediadas por HSF1 (tales como cáncer, enfermedades autoinmunes y enfermedades virales).

Antecedentes de la invención

El cáncer es causado por una proliferación celular descontrolada y no regulada. Precisamente lo que hace que una célula se torne maligna y prolifere de forma descontrolada y no regulada ha sido objeto de intensas investigaciones en las últimas décadas. Esta investigación ha llevado a la identificación de una serie de objetivos moleculares asociados con vías metabólicas clave, de las que se sabe están asociadas con la malignidad.

El factor 1 de choque térmico (HSF1) es una de esas moléculas objetivo. HSF1 es el principal regulador de la respuesta al choque térmico, en la que se inducen múltiples genes en respuesta al aumento de la temperatura y otras tensiones. A temperaturas de no choque en humanos y otros vertebrados, HSF1 se produce de forma constitutiva, pero está inactivo y se une a la proteína HSP90. A una temperatura elevada, HSF1 es liberado por HSP90, se mueve desde el citoplasma al núcleo y se trimeriza. Esta forma HSF1 activa se une a secuencias llamadas elementos de choque térmico (HSE) en el ADN y activa la transcripción de genes de choque térmico por la ARN polimerasa II. E1HSE tiene una secuencia consenso de tres repeticiones de NGAAN y está presente en las regiones promotoras de los genes HSP90, HSP70 y HSP27. Durante el cese de la respuesta al choque térmico, HSF1 es fosforilado por proteínas quinasas activadas por mitógenos (MAPKs) y glucógeno sintetasa quinasa 3 (GSK3) y vuelve a un estado inactivo. La bioquímica de HSF1 se describe con más detalle en, entre otros, Chu et al. 1996 J. Biol. Chem. 271:30847-30857 y Huang et al. 1997 J. Biol. Chem. 272:26009-26016.

HSF1 también interactúa con factores adicionales. Por ejemplo, HSF1 se une a la proteína quinasa dependiente de ADN (DNA-PK), que está involucrada en la reparación del ADN. HSF1 también es el objetivo de las proteínas quinasas activadas por mitógenos, y su actividad se regula a la baja cuando la cascada de señalización RAS está activa.

Otras proteínas del factor de choque térmico en humanos incluyen HSF2, HSF3 y HSF4. HSF1, HSF2 y HSF3 son todos reguladores positivos de la expresión génica del choque térmico, mientras que HSF4 es un regulador negativo. HSF1, HSF2 y HSF4 desempeñan un papel en el control transcripcional de otras proteínas de choque térmico. Las diversas proteínas HSF comparten aproximadamente un 40 % de identidad de secuencia.

La actividad de HSF1 se ha implicado en varias enfermedades, incluido el cáncer y las enfermedades autoinmunes y virales. HSF1 y otras proteínas de choque térmico (cuya expresión es aumentada por HSF1) están sobreexpresadas o han estado implicadas de otro modo en cánceres de mama, endometrio, fibrosarcoma, gástrico, de riñón, de hígado, de pulmón, linfoma, neuroectodérmico, neuroblastoma, sarcoma de Ewing, cáncer de próstata, de piel, de células escamosas y testicular, leucemia (p. ej., leucemia promielocítica) y enfermedad de Hodgkin.

En consecuencia, existe la necesidad de agentes farmacológicamente activos que sean capaces de inhibir HSF1. Dichos agentes son agentes quimioterapéuticos potencialmente útiles para el tratamiento de enfermedades o afecciones en las que está mediada la actividad de HSF1. El documento EE. UU. 2016/289216 A1 divulga inhibidores de molécula pequeña de HSF-1.

Además, la eficacia de los agentes farmacológicos in vivo puede verse obstaculizada por propiedades deficientes de absorción, distribución, metabolismo y/o excreción (ADME). Por ejemplo, si un agente farmacológico se metaboliza rápidamente, el agente se eliminará antes de que tenga la oportunidad de modular eficazmente su objetivo.

La presente invención proporciona agentes alternativos o mejorados capaces de inhibir HSF1, que opcionalmente demuestran una o más propiedades ADME (por ejemplo, eliminación, estabilidad metabólica, semivida, volumen de distribución, biodisponibilidad) que indican idoneidad para administración in vivo, particularmente administración in vivo a humanos. En ciertas realizaciones, los compuestos de la presente invención demuestran una propiedad ADME mejorada (por ejemplo, eliminación, estabilidad metabólica, semivida, volumen de distribución, biodisponibilidad) en comparación con los análogos no deuterados.

Resumen de la invención

En un aspecto, la presente invención se relaciona con un compuesto, o una de sus sales o solvatos farmacéuticamente aceptables, seleccionado de

Ċ

y

En otro aspecto, la presente invención proporciona una composición farmacéutica que comprende un compuesto de la invención como se define en este documento, o una de sus sales o solvatos farmacéuticamente aceptables, y uno o más excipientes farmacéuticamente aceptables.

En otro aspecto, la presente invención proporciona un compuesto de la invención como se define en este documento, o una de sus sales o solvatos farmacéuticamente aceptables, o una composición farmacéutica como se define en este documento, para uso en terapia.

En otro aspecto, la presente invención proporciona un compuesto de la invención como se define en este documento, o una de sus sales o solvatos farmacéuticamente aceptables, o una composición farmacéutica como se define en este documento, para usar en el tratamiento de afecciones o enfermedades mediadas por HSF1 seleccionadas de cáncer, enfermedades autoinmunes o enfermedades virales.

En otro aspecto, la presente invención proporciona un compuesto de la invención como se define en este documento, o una de sus sales o solvatos farmacéuticamente aceptables, o una composición farmacéutica como se define en este documento, para usar en el tratamiento de una condición proliferativa.

En otro aspecto, la presente invención proporciona un compuesto de la invención como se define en el presente documento, o una de sus sales o solvatos farmacéuticamente aceptables, o una composición farmacéutica como se define en el presente documento, para uso en el tratamiento del cáncer. En una realización particular, el cáncer es un cáncer humano.

La presente descripción proporciona además un método para sintetizar un compuesto de la invención como se define en este documento, o una de sus sales o solvatos farmacéuticamente aceptables.

Descripción detallada de la invención

A menos que se indique de otro modo, los siguientes términos utilizados en la especificación y las reivindicaciones tienen los siguientes significados, establecidos a continuación.

Debe apreciarse que las referencias a "tratar" o "tratamiento" incluyen profilaxis así como el alivio de los síntomas establecidos de una afección. Por lo tanto, "tratar" o "tratamiento" de un estado, trastorno o condición incluye: (1) prevenir o retrasar la aparición de síntomas clínicos del estado, trastorno o condición que se desarrolla en un ser humano que puede estar afectado o predispuesto al estado, trastorno o condición, pero que aún no experimenta ni muestra síntomas clínicos o subclínicos del estado, trastorno o condición, (2 ) inhibir el estado, trastorno o condición, es decir, detener, reducir o retrasar el desarrollo de la enfermedad o una recaída de la misma (en caso de tratamiento de mantenimiento) o al menos un síntoma clínico o subclínico de la misma, o (3) aliviar o atenuar la enfermedad, es decir, provocar la regresión del estado, trastorno o condición o al menos uno de sus síntomas clínicos o subclínicos.

Una "cantidad terapéuticamente eficaz" significa la cantidad de un compuesto que, cuando se administra a un mamífero para tratar una enfermedad, es suficiente para efectuar dicho tratamiento para la enfermedad. La "cantidad terapéuticamente eficaz" variará dependiendo del compuesto, la enfermedad y su gravedad y la edad, peso, etc., del mamífero que se va a tratar.

La frase "compuesto de la invención" significa un compuesto, o una de sus sales o solvatos farmacéuticamente aceptables, seleccionado de

En los compuestos de la invención, a menos que se indique explícitamente de otro modo, cuando una posición se designa específicamente como "H" o "hidrógeno", se entendería que la posición está ocupada por hidrógeno en su abundancia isotópica natural (por ejemplo, alrededor del 99.98 % 1H).

En los compuestos de la invención, a menos que se indique explícitamente de otro modo, cuando una posición se designa específicamente como "D" o "deuterio", un experto en la materia entendería que la posición está ocupada por deuterio (2H) en una abundancia isotópica mayor que su abundancia isotópica natural (por ejemplo, mayor que aproximadamente 0.015 %).

En una realización, cuando una posición se designa como "D" o "deuterio", se entendería que la posición está ocupada por deuterio en al menos 3340 veces su abundancia isotópica natural. En una realización, una posición designada D se ocupa con deuterio a una pureza isotópica de 2H de al menos 50.1 %. La pureza isotópica se puede determinar utilizando métodos analíticos convencionales conocidos por un experto en la técnica, incluidas la espectrometría de masas y la espectroscopía de resonancia magnética nuclear.

En una realización, cuando una posición se designa como "D" o "deuterio", se entendería que la posición está ocupada por deuterio en al menos 4000 veces su abundancia isotópica natural. En una realización, una posición designada D se ocupa con deuterio a una pureza isotópica de 2H de al menos 60 %.

En otra realización, cuando una posición se designa como "D" o "deuterio", se entendería que la posición está ocupada por deuterio en al menos 4500 veces su abundancia isotópica natural. En una realización, una posición designada D se ocupa con deuterio a una pureza isotópica de 2H de al menos 67,5 %.

En otra realización, cuando una posición se designa como "D" o "deuterio", se entendería que la posición está ocupada por deuterio en al menos 5000 veces su abundancia isotópica natural. En una realización, una posición designada D se ocupa con deuterio a una pureza isotópica de 2H de al menos el 75 %.

En otra realización, cuando una posición se designa como "D" o "deuterio", se entendería que la posición está ocupada por deuterio en al menos 5500 veces su abundancia isotópica natural. En una realización, una posición designada D se ocupa con deuterio a una pureza isotópica de 2H de al menos el 82.5 %.

En otra realización, cuando una posición se designa como "D" o "deuterio", se entendería que la posición está ocupada por deuterio en al menos 6000 veces su abundancia isotópica natural. En una realización, una posición designada D se ocupa con deuterio a una pureza isotópica de 2H de al menos el 90 %.

En otra realización, cuando una posición se designa como "D" o "deuterio", se entendería que la posición está ocupada por deuterio en al menos 6333.5 veces su abundancia isotópica natural. En una realización, una posición designada D se ocupa con deuterio a una pureza isotópica de 2H de al menos el 95 %.

En otra realización, cuando una posición se designa como "D" o "deuterio", se entendería que la posición está ocupada por deuterio en al menos 6466.7 veces su abundancia isotópica natural. En una realización, una posición designada D se ocupa con deuterio a una pureza isotópica de 2H de al menos el 97 %.

En otra realización, cuando una posición se designa como "D" o "deuterio", se entendería que la posición está ocupada por deuterio en al menos 6533.3 veces su abundancia isotópica natural. En una realización, una posición designada D se ocupa con deuterio a una pureza isotópica de 2H de al menos el 98 %.

En otra realización, cuando una posición se designa como "D" o "deuterio", se entendería que la posición está ocupada por deuterio en al menos 6600 veces su abundancia isotópica natural. En una realización, una posición designada D se ocupa con deuterio a una pureza isotópica de 2H de al menos el 99 %.

En otra realización, cuando una posición se designa como "D" o "deuterio", se entendería que la posición está ocupada por deuterio en al menos 6633.3 veces su abundancia isotópica natural. En una realización, una posición designada D se ocupa con deuterio a una pureza isotópica de 2H de al menos el 99,5 %.

En otra realización, donde una posición se designa como "D" o "deuterio", se entendería que la posición está ocupada por deuterio desde 3340 veces hasta 6633.3 veces su abundancia isotópica natural. En una realización, una posición designada D se ocupa con deuterio a una pureza isotópica de 2H de aproximadamente 50.1 % a aproximadamente 99.5 %.

En otra realización, donde una posición se designa como "D" o "deuterio", se entendería que la posición está ocupada por deuterio desde 4000 veces hasta 6633.3 veces su abundancia isotópica natural. En una realización, una posición designada D se ocupa con deuterio a una pureza isotópica de 2H de aproximadamente 60 % a aproximadamente 99.5 %.

En otra realización, donde una posición se designa como "D" o "deuterio", se entendería que la posición está ocupada por deuterio desde 4500 veces hasta 6633.3 veces su abundancia isotópica natural. En una realización, una posición designada D se ocupa con deuterio a una pureza isotópica de 2H de aproximadamente 67.5 % a aproximadamente 99.5 %.

En otra realización, donde una posición se designa como "D" o "deuterio", se entendería que la posición está ocupada por deuterio desde 5000 veces hasta 6633.3 veces su abundancia isotópica natural. En una realización, una posición designada D se ocupa con deuterio a una pureza isotópica de 2H de aproximadamente 75 % a aproximadamente 99.5 %.

En otra realización, donde una posición se designa como "D" o "deuterio", se entendería que la posición está ocupada por deuterio desde 5500 veces hasta 6633.3 veces su abundancia isotópica natural. En una realización, una posición designada D se ocupa con deuterio a una pureza isotópica de 2H de aproximadamente 82.5 % a aproximadamente 99.5 %.

En otra realización, donde una posición se designa como "D" o "deuterio", se entendería que la posición está ocupada por deuterio desde 6000 veces hasta 6633.3 veces su abundancia isotópica natural. En una realización, una posición designada D se ocupa con deuterio a una pureza isotópica de 2H de aproximadamente 90 % a aproximadamente 99.5 %.

En otra realización, donde una posición se designa como "D" o "deuterio", se entendería que la posición está ocupada por deuterio desde 3340 veces hasta 6533.3 veces su abundancia isotópica natural. En una realización, una posición designada D se ocupa con deuterio a una pureza isotópica de 2H de aproximadamente 50.1 % a aproximadamente 98 %.

En otra realización, donde una posición se designa como "D" o "deuterio", se entendería que la posición está ocupada por deuterio desde 4000 veces hasta 6533.3 veces su abundancia isotópica natural. En una realización, una posición designada D se ocupa con deuterio a una pureza isotópica de 2H de aproximadamente 60 % a aproximadamente 98 %.

En otra realización, donde una posición se designa como "D" o "deuterio", se entendería que la posición está ocupada por deuterio desde 4500 veces hasta 6533.3 veces su abundancia isotópica natural. En una realización, una posición designada D se ocupa con deuterio a una pureza isotópica de 2H de aproximadamente 67.5 % a aproximadamente 98 %.

En otra realización, donde una posición se designa como "D" o "deuterio", se entendería que la posición está ocupada por deuterio desde 5000 veces hasta 6533.3 veces su abundancia isotópica natural. En una realización, una posición designada D se ocupa con deuterio a una pureza isotópica de 2H de aproximadamente 75 % a aproximadamente 98 %.

En otra realización, donde una posición se designa como "D" o "deuterio", se entendería que la posición está ocupada por deuterio desde 5500 veces hasta 6533.3 veces su abundancia isotópica natural. En una realización, una posición designada D se ocupa con deuterio a una pureza isotópica de 2H de aproximadamente 82.5 % a aproximadamente 98 %.

En otra realización, donde una posición se designa como "D" o "deuterio", se entendería que la posición está ocupada por deuterio desde 6000 veces hasta 6533.3 veces su abundancia isotópica natural. En una realización, una posición designada D se ocupa con deuterio a una pureza isotópica de 2H de aproximadamente 90 % a aproximadamente 98 %.

En una realización, donde una posición se designa como "D" o "deuterio", la posición designada D se ocupa con deuterio con una pureza isotópica de 2H de alrededor del 98 %.

Como se usa en el presente documento, "sustituido con deuterio" se refiere al reemplazo de uno o más átomos de hidrógeno con un número correspondiente de átomos de deuterio.

Compuestos de la invención

En una realización, el compuesto de la invención se selecciona de:

o sales y solvatos farmacéuticamente aceptables de los mismos.

En otra realización, el compuesto de la invención es

o una de sus sales o solvatos farmacéuticamente aceptables.

En otra realización, el compuesto de la invención es

o una de sus sales o solvatos farmacéuticamente aceptables.

o una de sus sales o solvatos farmacéuticamente aceptables.

o una de sus sales o solvatos farmacéuticamente aceptables.

Una sal farmacéuticamente aceptable adecuada de un compuesto de la invención es, por ejemplo, una sal de adición de ácido de un compuesto de la invención que es suficientemente básica, por ejemplo, una sal de adición de ácido con, por ejemplo, un ácido inorgánico u orgánico, por ejemplo ácido clorhídrico, bromhídrico, sulfúrico, fosfórico, trifluoroacético, fórmico, cítrico o maleico. Además, una sal farmacéuticamente aceptable adecuada de un compuesto de la invención que es suficientemente ácida es una sal de metal alcalino, por ejemplo, una sal de sodio o potasio, una sal de metal alcalinotérreo, por ejemplo, una sal de calcio o magnesio, una sal de amonio o una sal con una base orgánica que proporcione un catión fisiológicamente aceptable, por ejemplo una sal con metilamina, dimetilamina, trimetilamina, piperidina, morfolina o tris-(2-hidroxietil)amina.

La presente invención también abarca compuestos de la invención tal como se definen en el presente documento, que comprenden una o más sustituciones isotópicas adicionales en una posición distinta de H. Por ejemplo, C puede estar en cualquier forma isotópica que incluye 12C, 13C, y 14C; y O puede estar en cualquier forma isotópica, incluyendo 16O y 18O; y similares.

También debe entenderse que ciertos compuestos de la invención pueden existir en formas solvatadas así como sin solvatar tales como, por ejemplo, formas hidratadas. Debe entenderse que la invención abarca todas las formas solvatadas que poseen actividad inhibidora de HSF1.

También debe entenderse que ciertos compuestos de la invención pueden exhibir polimorfismo, y que la invención abarca todas las formas que poseen actividad inhibidora de HSF1.

Los compuestos de la invención pueden existir en varias formas tautoméricas diferentes y las referencias a los compuestos de la invención incluyen todas esas formas. Para evitar dudas, cuando un compuesto pueda existir en una de varias formas tautoméricas, y solo una se describe o muestra específicamente, todas las demás, sin embargo, están incluidas en los compuestos de la invención. Los ejemplos de formas tautoméricas incluyen formas ceto, enol y enolato, como en, por ejemplo, los siguientes pares tautoméricos: ceto/enol (ilustrado a continuación), imina/enamina, amida/imino alcohol, amidina/amidina, nitroso/ oxima, tiocetona/enotiol y nitro/aci-nitro.

Los efectos in vivo de un compuesto de la invención pueden ser ejercidos en parte por uno o más metabolitos que se forman dentro del cuerpo humano o animal, después de la administración de un compuesto de la invención.

Síntesis

En la descripción de los métodos de síntesis descritos en el presente documento, debe entenderse que todas las condiciones de reacción propuestas, incluida la elección del disolvente, la atmósfera de reacción, la temperatura de reacción, la duración del experimento y los procedimientos de elaboración, pueden ser seleccionadas por un experto en la técnica.

Los expertos en la técnica de la síntesis orgánica entienden que la funcionalidad presente en diferentes porciones de la molécula tiene que ser compatible con los reactivos y las condiciones de reacción utilizadas.

Los materiales de partida necesarios pueden obtenerse mediante procedimientos estándar de química orgánica. La preparación de dichos materiales de partida se describe junto con las siguientes variantes de proceso representativas, y dentro de los Ejemplos adjuntos. Alternativamente, los materiales de partida necesarios se pueden obtener mediante procedimientos análogos a los ilustrados, que están dentro de la experiencia ordinaria de un químico orgánico.

Se apreciará que durante la síntesis de los compuestos de la invención en los procesos definidos a continuación, o durante la síntesis de ciertos materiales de partida, puede ser deseable proteger ciertos grupos sustituyentes, para evitar su reacción no deseada. El químico experto apreciará cuándo se requiere tal protección y cómo se pueden poner en su lugar dichos grupos protectores, y después eliminarlos.

Para ver ejemplos de grupos protectores, consulte uno de los muchos textos generales sobre el tema, por ejemplo, 'Protective Groups in Organic Synthesis' por Theodora Green (editor: John Wiley & Sons). Los grupos protectores pueden eliminarse mediante cualquier método conveniente descrito en la literatura o conocido por el químico experto como apropiado para la eliminación del grupo protector en cuestión, eligiéndose tales métodos para efectuar la eliminación del grupo protector con la mínima perturbación de los grupos en otra parte de la molécula.

Por lo tanto, si los reactivos incluyen, por ejemplo, grupos como amino, carboxi o hidroxi, puede ser deseable proteger el grupo en algunas de las reacciones mencionadas en este documento.

A modo de ejemplo, un grupo protector adecuado para un grupo amino o alquilamino es, por ejemplo, un grupo acilo, por ejemplo un grupo alcanoílo como acetilo, un grupo alcoxicarbonilo, por ejemplo un metoxicarbonilo, etoxicarbonilo o grupo f-butoxicarbonilo, un grupo arilmetoxicarbonilo, por ejemplo benciloxicarbonilo, o un grupo aroilo, por ejemplo benzoilo. Las condiciones de desprotección para los grupos protectores anteriores varían necesariamente con la elección del grupo protector. Así, por ejemplo, un grupo acilo tal como un grupo alcanoílo o alcoxicarbonilo o un grupo aroílo puede eliminarse, por ejemplo, por hidrólisis con una base adecuada tal como un hidróxido de metal alcalino, por ejemplo hidróxido de litio o de sodio. Alternativamente, un grupo acilo tal como un grupo fert-butoxicarbonilo puede eliminarse, por ejemplo, mediante tratamiento con un ácido adecuado como ácido clorhídrico, sulfúrico o fosfórico o ácido trifluoroacético y puede eliminarse un grupo arilmetoxicarbonilo, como un grupo benciloxicarbonilo, por ejemplo, mediante hidrogenación sobre un catalizador como paladio sobre carbono, o por tratamiento con un ácido de Lewis, por ejemplo BF3.OEt2. Un grupo protector alternativo adecuado para un grupo amino primario es, por ejemplo, un grupo ftaloílo que puede eliminarse mediante tratamiento con una alquilamina, por ejemplo, dimetilaminopropilamina, o con hidracina.

Un grupo protector adecuado para un grupo hidroxilo es, por ejemplo, un grupo acilo, por ejemplo, un grupo alcanoílo, como acetilo, un grupo aroílo, por ejemplo, benzoílo, o un grupo arilmetilo, por ejemplo, bencilo. Las condiciones de desprotección para los grupos protectores anteriores variarán necesariamente con la elección del grupo protector. Así, por ejemplo, un grupo acilo tal como un grupo alcanoílo o aroílo puede eliminarse, por ejemplo, por hidrólisis con una base adecuada tal como un hidróxido de metal alcalino, por ejemplo hidróxido de litio, sodio o amoníaco. Alternativamente, se puede eliminar un grupo arilmetilo, como un grupo bencilo, por ejemplo, mediante hidrogenación sobre un catalizador, como paladio sobre carbono.

Un grupo protector adecuado para un grupo carboxi es, por ejemplo, un grupo esterificante, por ejemplo un grupo metilo o etilo que puede eliminarse, por ejemplo, por hidrólisis con una base como hidróxido de sodio, o por ejemplo un grupo f-butilo que se puede eliminar, por ejemplo, mediante tratamiento con un ácido, por ejemplo, un ácido orgánico como el ácido trifluoroacético, o por ejemplo, un grupo bencilo que se puede eliminar, por ejemplo, mediante hidrogenación sobre un catalizador como el paladio sobre carbono.

También se pueden usar resinas como grupo protector.

Los compuestos de la invención se pueden preparar utilizando métodos sintéticos conocidos en la técnica (como se ilustra en los ejemplos del presente documento).

Composiciones farmacéuticas

De acuerdo con otro aspecto de la invención, se proporciona una composición farmacéutica que comprende un compuesto de la invención como se define anteriormente, o una de sus sales o solvatos farmacéuticamente aceptables, en asociación con un diluyente o vehículo farmacéuticamente aceptable.

Las composiciones de la invención pueden estar en una forma adecuada para uso oral (por ejemplo, como tabletas, pastillas, cápsulas duras o blandas, suspensiones acuosas u oleosas, emulsiones, polvos o gránulos dispersables, jarabes o elíxires), para uso tópico (por ejemplo como cremas, ungüentos, geles o soluciones o suspensiones acuosas u oleosas), para administración por inhalación (por ejemplo, como un polvo finamente dividido o un aerosol líquido), para administración por insuflación (por ejemplo, como un polvo finamente dividido) o para administración parenteral administración (por ejemplo, como una solución acuosa u oleosa estéril para dosificación intravenosa, subcutánea, intramuscular, intraperitoneal o intramuscular o como un supositorio para dosificación rectal).

Las composiciones de la invención pueden obtenerse mediante procedimientos convencionales utilizando excipientes farmacéuticos convencionales, bien conocidos en la técnica. Así, las composiciones destinadas a uso oral pueden contener, por ejemplo, uno o más agentes colorantes, edulcorantes, aromatizantes y/o conservantes.

Una cantidad eficaz de un compuesto de la presente invención para usar en la terapia de la enfermedad proliferativa, es una cantidad suficiente para aliviar sintomáticamente los síntomas de la infección en un animal de sangre caliente, particularmente en un ser humano, para ralentizar la progresión de la infección o para reducir en pacientes con síntomas de infección, el riesgo de empeorar.

La cantidad de ingrediente activo que se combina con uno o más excipientes para producir una forma de dosificación individual, necesariamente variará dependiendo del huésped tratado y la vía particular de administración. Por ejemplo, una formulación destinada a la administración oral a humanos contendrá generalmente, por ejemplo, de 0.5 mg a 0.5 g de agente activo (más adecuadamente de 0.5 a 100 mg, por ejemplo de 1 a 30 mg) compuesto con una cantidad apropiada y conveniente de excipientes, que puede variar de aproximadamente 5 a aproximadamente 98 por ciento en peso de la composición total.

El tamaño de la dosis con fines terapéuticos o profilácticos de un compuesto de la fórmula (I) variará naturalmente de acuerdo con la naturaleza y gravedad de las condiciones, la edad y sexo del animal o paciente y la vía de administración, de acuerdo con principios bien conocidos de la medicina.

Al usar un compuesto de la invención con fines terapéuticos o profilácticos, generalmente se administrará de modo que se reciba una dosis diaria en el intervalo, por ejemplo, de 0.1 mg/kg a 75 mg/kg de peso corporal, administrada si es necesario en dosis divididas. En general, se administrarán dosis más bajas cuando se emplee una vía parenteral. Así, por ejemplo, para la administración intravenosa o intraperitoneal, generalmente se utilizará una dosis en el intervalo, por ejemplo, de 0.1 mg/kg a 30 mg/kg de peso corporal. De manera similar, para la administración por inhalación, se utilizará una dosis en el intervalo, por ejemplo, de 0.05 mg/kg a 25 mg/kg de peso corporal. También puede ser adecuada la administración oral, particularmente en forma de comprimidos. Típicamente, las formas de dosificación unitaria contendrán alrededor de 0.5 mg a 0.5 g de un compuesto de esta invención.

Usos y aplicaciones terapéuticas

Los compuestos de la presente invención funcionan como inhibidores de la actividad de HSF1. Por consiguiente, los compuestos de la invención son agentes potencialmente útiles para el tratamiento de enfermedades o afecciones en las que está implicada la actividad de HSF1.

En un aspecto, la presente invención proporciona un compuesto de la invención, o una de sus sales o solvatos farmacéuticamente aceptables, o una composición farmacéutica como se define en el presente documento, para uso en terapia.

En otro aspecto, la presente invención proporciona un compuesto de la invención como se define en el presente documento, o una de sus sales o solvatos farmacéuticamente aceptables, para uso en el tratamiento de una enfermedad o afección asociada con la actividad de HSF1, seleccionada de un cáncer, una enfermedad autoinmune o una enfermedad viral.

La actividad de HSF1 se ha implicado en varias enfermedades, incluido el cáncer y las enfermedades autoinmunes y virales.

La amplia actividad de HSF1 y el papel que desempeña en muchos estados de enfermedad se discute en la literatura científica, ver por ejemplo:

Evans, C. G.; Chang, L.; Gestwicki, J. E., Heat Shock Protein 70 (Hsp70) as an Emerging Drug Target. J Med Chem 2010, 53 (12), 4585-4602;

Calderwood, S. K.; Khaleque, M. A.; Sawyer, D. B.; Ciocca, D. R., Heat shock proteins in cancer: chaperones of tumorigenesis. Trends Biochem Sci 2006, 31 (3), 164-172;

Dai, C.; Whitesell, L.; Rogers, A. B.; Lindquist, S., Heat shock factor 1 is a powerful multifaceted modifier of carcinogenesis. Cell 2007, 130 (6), 1005-1018;

Whitesell, L.; Lindquist, S., Inhibiting the transcription factor HSF1 as an anticancer strategy. Expert Opin Ther Tar 2009, 13 (4), 469-478; and

Powers, M. V.; Workman, P., Inhibitors of the heat shock response: Biology and pharmacology. Febs Lett 2007, 581 (19), 3758-3769.

HSF1 y otras proteínas de choque térmico (cuya expresión es aumentada por HSF1) están sobreexpresadas en o han estado implicadas de otro modo en cánceres de mama, endometrio, fibrosarcoma, gástrico, de riñón, de hígado, de pulmón, linfoma, neuroectodérmico, neuroblastoma, sarcoma de Ewing, de próstata, de piel, de células escamosas y testiculares, leucemia (por ejemplo, leucemia promielocítica), cáncer de cabeza y cuello y enfermedad de Hodgkin.

En otro aspecto más, la presente invención proporciona un compuesto de la invención como se define en este documento, o una de sus sales o solvatos farmacéuticamente aceptables, para usar en el tratamiento de un trastorno proliferativo.

El término "trastorno proliferativo" se usa indistintamente en este documento y se refiere a una proliferación celular indeseada o descontrolada de células anormales o excesivas que no se desea, como el crecimiento neoplásico o hiperplásico, ya sea in vitro o in vivo. Los ejemplos de condiciones proliferativas incluyen, entre otros, proliferación celular premaligna y maligna, incluidos, entre otros, neoplasmas y tumores malignos, cánceres, leucemias, psoriasis, enfermedades óseas, trastornos fibroproliferativos (p. ej., de los tejidos conectivos), y aterosclerosis. Puede tratarse cualquier tipo de célula, incluida, entre otras, de pulmón, colon, mama, ovario, próstata, hígado, páncreas, cerebro y piel.

Los efectos antiproliferativos de los compuestos de la presente invención tienen una aplicación particular en el tratamiento de cánceres humanos, en virtud de sus propiedades inhibidoras de HSF1.

El efecto anticancerígeno puede surgir a través de uno o más mecanismos, incluidos, entre otros, la regulación de la proliferación celular, la inhibición de la angiogénesis (la formación de nuevos vasos sanguíneos), la inhibición de la metástasis (la propagación de un tumor desde su origen), la inhibición de la invasión (la propagación de células tumorales a las estructuras normales vecinas), o la promoción de la apoptosis (muerte celular programada).

Por lo tanto, en otro aspecto, la presente invención proporciona un compuesto, o una de sus sales o solvatos farmacéuticamente aceptables, o una composición farmacéutica como se define en el presente documento, para su uso en el tratamiento del cáncer.

En una realización, el paciente o sujeto que lo necesita es un ser humano.

Rutas de administración

Los compuestos de la invención o la composición farmacéutica que comprende el compuesto activo pueden administrarse a un sujeto por cualquier vía de administración conveniente, ya sea sistémica/periférica o tópicamente (es decir, en el sitio de la acción deseada).

Las rutas de administración incluyen, pero no se limitan a, oral (p. ej., por ingestión); bucal; sublingual; transdérmica (incluyendo, por ejemplo, mediante un parche, emplasto, etc.); transmucosal (incluyendo, por ejemplo, mediante un parche, emplasto, etc.); intranasal (p. ej., mediante atomización nasal); ocular (p. ej., mediante gotas para los ojos); pulmonar (p. ej., mediante terapia de inhalación o insuflación usando, p. ej., un aerosol, p. ej., a través de la boca o la nariz); rectal (p. ej., por supositorio o enema); vaginal (p. ej., por pesario); parenteral, por ejemplo, por inyección, incluyendo subcutánea, intradérmica, intramuscular, intravenosa, intraarterial, intracardíaca, intratecal, intraespinal, intracapsular, subcapsular, intraorbitaria, intraperitoneal, intratraqueal, subcuticular, intraarticular, subaracnoidea e intraesternal; por implante de un depósito o reservorio, por ejemplo, por vía subcutánea o intramuscular.

Terapias de combinación

El tratamiento antiproliferativo definido anteriormente puede aplicarse como terapia única o puede implicar, además del compuesto de la invención, cirugía convencional, radioterapia o terapia con un agente quimioterapéutico o un agente focalizado molecularmente. Tal terapia adicional puede incluir una o más de las siguientes categorías de agentes antitumorales:

(i) otros fármacos antiproliferativos/antineoplásicos y combinaciones de los mismos, tal como se utilizan en oncología médica, como agentes alquilantes (por ejemplo, cisplatino, oxaliplatino, carboplatino, ciclofosfamida, mostaza nitrogenada, melfalán, clorambucilo, busulfán, temozolamida y nitrosoureas); antimetabolitos (por ejemplo, gemcitabina y antifolatos tales como fluoropirimidinas como 5-fluorouracilo y tegafur, raltitrexed, metotrexato, arabinósido de citosina e hidroxiurea); antibióticos antitumorales (por ejemplo, antraciclinas como adriamicina, bleomicina, doxorrubicina, daunomicina, epirrubicina, idarrubicina, mitomicina-C, dactinomicina y mitramicina); agentes antimitóticos (por ejemplo, alcaloides de vinca como vincristina, vinblastina, vindesina y vinorelbina y taxoides como taxol e inhibidores de taxotere y poloquinasa); e inhibidores de topoisomerasa (por ejemplo, epipodofilotoxinas como etopósido y tenipósido, amsacrina, topotecán y camptotecina);

(ii) agentes citostáticos tales como antiestrógenos (por ejemplo, tamoxifeno, fulvestrant, toremifeno, raloxifeno, droloxifeno y yodoxifeno), antiandrógenos (por ejemplo, bicalutamida, flutamida, nilutamida y acetato de ciproterona), antagonistas o agonistas de LHRH (por ejemplo, goserelina, leuprorelina y buserelina), progestógenos (por ejemplo, acetato de megestrol), inhibidores de la aromatasa (por ejemplo, como anastrozol, letrozol, vorazol y exemestano) e inhibidores de 5a-reductasa, como finasteride;

(iii) agentes anti-invasión [por ejemplo, inhibidores de la familia de quinasas c-Src como 4-(6-cloro-2,3-metilendioxianilino)-7-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoxi]-5- tetrahidropiran-4-iloxiquinazolina (AZD0530; solicitud de patente internacional WO 01/94341), N-(2-cloro-6-metilfenil)-2-{6-[4-(2-hidroxietil)piperazin-1-il]-2-metilpirimidin-4-ilamino}tiazol-5-carboxamida (dasatinib, BMS-354825 ; J.Med. Chem., 2004. 47, 6658-6661) y bosutinib (Sk I-606), e inhibidores de metaloproteinasa como marimastat, inhibidores de la función del receptor activador del plasminógeno de uroquinasa o anticuerpos contra heparanasa];

(iv) inhibidores de la función del factor de crecimiento: por ejemplo, dichos inhibidores incluyen anticuerpos contra el factor de crecimiento y anticuerpos contra el receptor del factor de crecimiento (por ejemplo, el anticuerpo anti-erbB2 trastuzumab [HerceptinMR], el anticuerpo anti-EGFR panitumumab, el anticuerpo anti-erbB1 cetuximab [Erbitux, C225] y cualquier factor de crecimiento o anticuerpos contra el receptor del factor de crecimiento descritos por Stern et al. Critical reviews in oncology/haematology, 2005, vol. 54. págs. 11-29); tales inhibidores también incluyen inhibidores de la tirosina quinasa, por ejemplo, inhibidores de la familia del factor de crecimiento epidérmico (por ejemplo, inhibidores de la tirosina quinasa de la familia EGFR tales como A/-(3-cloro-4-fluorofenil)-7-metoxi-6-(3-morfolinopropoxi)quinazolin-4-amina (gefitinib, ZD1839), N-(3-etinilfenil)-6,7-bis(2-metoxietoxi )quinazolin-4-amina (erlotinib, OSI-774) y 6-acrilamido-W-(3-cloro-4-fluorofenil)-7-(3-morfolinopropoxi)-quinazolin-4-amina (Cl 1033), inhibidores de tirosina quinasa erbB2 tales como lapatinib); inhibidores de la familia del factor de crecimiento de hepatocitos; inhibidores de la familia del factor de crecimiento de la insulina; inhibidores de la familia de factor de crecimiento derivados de plaquetas como imatinib y/o nilotinib (AMN107); inhibidores de serina/treonina quinasas (por ejemplo, inhibidores de la señalización de Ras/Raf como los inhibidores de la farnesil transferasa, por ejemplo, sorafenib (BAY 43-9006), tipifarnib (R115777) y lonafarnib (SCH66336)), inhibidores de la señalización celular a través de MEK y/o quinasas AKT, inhibidores de kit c, inhibidores de quinasa abl, inhibidores de quinasa PI3, inhibidores de quinasa Plt3, inhibidores de quinasa CSF-1R, inhibidores de quinasa del receptor IGF (factor de crecimiento similar a la insulina); inhibidores de aurora quinasa (por ejemplo, AZD1152, PH739358, VX-680, MLN8054. R763, MP235, MP529, VX-528 y AX39459) e inhibidores de quinasa dependientes de ciclina tales como inhibidores de CDK2 y/o CDK4;

(v) agentes antiangiogénicos como los que inhiben los efectos del factor de crecimiento endotelial vascular, [por ejemplo, el anticuerpo anti-factor de crecimiento de células endoteliales vasculares bevacizumab (Avastin™MR) y, por ejemplo, un inhibidor de la tirosina quinasa del receptor VEGF como vandetanib (ZD6474), vatalanib (PTK787), sunitinib (SU11248), axitinib (AG-013736), pazopanib (GW 786034) y 4-(4-fluoro-2- metilindol-5-iloxi)-6-metoxi-7-(3-pirrolidin-1 -ilpropoxi)quinazolina (AZD2171; Ejemplo 240 dentro del documento WO 00/47212), compuestos como los divulgados en las Solicitudes de Patentes Internacionales WO97/22596, WO 97/30035, WO 97/32856 y WO 98/13354 y compuestos que funcionan por otros mecanismos (por ejemplo, linomida, inhibidores de la función de la integrina avp3 y angiostatina)];

(vi) agentes que dañan los vasos como Combretastatin A4 y compuestos divulgados en las solicitudes de patentes internacionales WO 99/02166, WO 00/40529, WO 00/41669, WO 01/92224. WO 02/04434 y WO 02/08213;

(vii) un antagonista del receptor de la endotelina, por ejemplo, zibotentan (ZD4054) o atrasentan;

(viii) inhibidores de HSP90 (por ejemplo, geldanamicina, radicicol o 17-N-alilamino-17-desmetoxigeldanamicina (17AAG));

(ix) terapias antisentido, por ejemplo aquellas que están dirigidas a los objetivos enumerados anteriormente, como ISIS 2503, un antisentido anti-ras;

(x) enfoques de terapia génica, incluyendo, por ejemplo, enfoques para reemplazar genes aberrantes como p53 aberrante o BRCA1 o BRCA2 aberrante, enfoques GDEPT (terapia con profármacos enzimáticos dirigidos por genes) como los que utilizan citosina desaminasa, timidina quinasa o una enzima nitrorreductasa bacteriana y enfoques para aumentar la tolerancia del paciente a la quimioterapia o radioterapia, como la terapia génica de resistencia a múltiples fármacos; y

(xi) enfoques de inmunoterapia, incluyendo, por ejemplo, enfoques ex-vivo e in vivo para aumentar la inmunogenicidad de las células tumorales del paciente, como la transfección con citocinas como la interleuquina 2, la interleuquina 4 o el factor estimulante de colonia de macrófago de granulocitos, enfoques para disminuir la anergia de las células T, enfoques que utilizan células inmunitarias transfectadas como las células dendríticas transfectadas con citoquinas, enfoques que usan líneas de células tumorales transfectadas con citoquinas y enfoques que usan anticuerpos antiidiotípicos.

Se anticipa que los inhibidores de HSF1 de la presente invención son particularmente adecuados para la terapia de combinación con agentes antitumorales que inhiben HSP90 (por ejemplo, geldanamicina, radicicol o 17-N-alilamino-17-desmetoxigeldanamicina (17AAG)).

Dicho tratamiento conjunto puede lograrse mediante la dosificación simultánea, secuencial o separada de los componentes individuales del tratamiento. Dichos productos de combinación emplean los compuestos de esta invención dentro del intervalo de dosificación descrito anteriormente y el otro agente farmacéuticamente activo dentro de su intervalo de dosificación aprobado.

De acuerdo con este aspecto de la invención, se proporciona una combinación adecuada para usar en el tratamiento de un cáncer (por ejemplo, un cáncer que involucra un tumor sólido) que comprende un compuesto de la invención como se define anteriormente, o una de sus sales o solvatos farmacéuticamente aceptables y otro agente antitumoral.

De acuerdo con este aspecto de la invención, se proporciona una combinación adecuada para usar en el tratamiento de un cáncer (por ejemplo, un cáncer que involucra un tumor sólido) que comprende un compuesto de la invención como se definió anteriormente, o una de sus sales o solvatos farmacéuticamente aceptables y uno cualquiera de los agentes antitumorales enumerados en (i) -(xi) anteriores.

En otro aspecto de la invención, se proporciona un compuesto de la invención o una de sus sales o solvatos farmacéuticamente aceptables, en combinación con un agente antitumoral seleccionado entre los enumerados en (i) -(xi) anteriormente.

En este documento, cuando se usa el término "combinación", debe entenderse que se refiere a la administración simultánea, separada o secuencial. En un aspecto de la invención, "combinación" se refiere a la administración simultánea. En otro aspecto de la invención, "combinación" se refiere a la administración por separado. En otro aspecto de la invención, "combinación" se refiere a la administración secuencial. Cuando la administración sea secuencial o separada, el retraso en la administración del segundo componente no debería ser tal que se pierda el efecto beneficioso de la combinación.

De acuerdo con otro aspecto de la invención, se proporciona una composición farmacéutica que comprende un compuesto de la invención, o una de sus sales o solvatos farmacéuticamente aceptables, en combinación con un agente antitumoral seleccionado entre los enumerados en (i) -(xi) en lo que antecede, en asociación con un diluyente o vehículo farmacéuticamente aceptable.

En otro aspecto, los compuestos de la presente invención pueden usarse para el tratamiento de otras enfermedades o afecciones mediadas por HSF1, tales como enfermedades autoinmunes y virales. En el caso de enfermedades autoinmunes, los compuestos de la invención pueden combinarse con otros agentes para el tratamiento de condiciones autoinmunes, por ejemplo, esteroides y otros agentes inmunosupresores. En el caso de enfermedades virales, los compuestos de la invención pueden administrarse con uno o más agentes antivirales adicionales.

Ejemplos

Química

A menos que se indique de otro modo, las reacciones se llevaron a cabo en cristalería secada en horno bajo una atmósfera de nitrógeno o argón utilizando disolventes anhidros. Todos los reactivos y disolventes obtenidos comercialmente se usaron tal como se recibieron.

La cromatografía en capa fina (TLC) se realizó en láminas de sílice de aluminio recubiertas previamente (60 F254 nm, Merck) y se visualizó usando luz UV de onda corta. La cromatografía ultrarrápida en columna se llevó a cabo en gel de sílice Merck 60 (tamaño parcial 40-65 |jm). La cromatografía en columna también se realizó en un sistema de purificación Biotage SP1 utilizando cartuchos de sílice Biotage Flash (SNAP KP-Sil). La cromatografía de intercambio iónico se realizó utilizando columnas ácidas Isolute Flash SCX-II.

Los espectros de 1H-RMN se registraron en espectrómetros Bruker AMX500 (500 MHz) utilizando un bloqueo de deuterio interno. Los desplazamientos químicos se expresan en partes por millón (ppm) utilizando las siguientes referencias internas: CDCh (8H 7,26), MeOD (SH 3,31) y DMSO-d6 (SH 2,50). Las multiplicidades de señal se registran como singlete (s), doblete (d), triplete (t), cuarteto (q) y multiplete (m), doblete de dobletes (dd), doblete de doblete de dobletes (ddd), aparente (app), amplio (br) u oscurecido (obs). Constantes de acoplamiento, J, se miden con una precisión de 0,1 Hz. Los espectros de 13C-RMN se registraron en espectrómetros Bruker AMX500 a 126 MHz utilizando un bloqueo interno de deuterio. Los desplazamientos químicos se establecieron a 0,01 ppm, a menos que se requiera una mayor precisión, utilizando las siguientes referencias internas: CDCh (SC 77,0), MeOD (SC 49,0) y DMSO-d6 (SC 39.5).

Los espectros de masas de alta resolución se registraron en un HPLC Agilent de la serie 1200 y detector de arreglo de diodos y acoplado a un espectrómetro de masas de tiempo de vuelo 6210 con fuente APCI/ESI multimodo dual, o en un UPLC Acquity de Waters y detector de matriz de diodos y acoplado a un espectrómetro de masas Waters G2 QToF equipado con una fuente ESI/APCI multimodal.

La separación analítica se llevó a cabo de acuerdo con los métodos enumerados a continuación. La fase móvil fue una mezcla de metanol (solvente A) y agua (solvente B), ambos conteniendo ácido fórmico al 0.1 %, la detección UV fue a 254 nm. Método I: HPLC Agilent serie 1200. columna Merck Purospher STAR (RP-18e, 30x4 mm) con un caudal de 1,5 ml/min en un gradiente de elución de 4 minutos. El gradiente de elución fue el siguiente: 10:90 (A/B) a 90:10 (A/B) durante 2,5 min, 90:10 (A/B) durante 1 min y después reversión a 10:90 (A/B) durante 0.3 min, finalmente 10:90 (a /B) durante 0.2 min. Método II: HPLC Agilent serie 1200. columna Merck chromolith Flash (RP-18e, 25 * 2 mm) a 30 °C con un caudal de 0.75 ml/min en un gradiente de elución de 4 minutos. El gradiente de elución fue el siguiente: 5:95 (A/B) a 100:0 (A/B) durante 2,5 min, 100:0 (A/B) durante 1 min y luego reversión a 5:95 (A/B) durante 0.1 min, finalmente 5:95 (A/B) durante 0.4 min. Método III: Up Lc Waters Acquity, columna Phenomenex KinetexXB-C18 (30 * 2,1 mm, 1,7 u, 100 A) a 30 °C con un caudal de 0.3 ml/min en un gradiente de elución de 4 minutos. El gradiente de elución fue el siguiente: 10:90 (A/B) a 90:10 (A/B) durante 3 min, 90:10 (A/B) durante 0.5 min y luego reversión a 10:90 (A/B) durante 0.3 min, finalmente 10:90 (A/B) durante 0.2 min; Método IV: UPLC Waters Acquity, columna Phenomenex Kinetex C18 (30 * 2.1 mm, 2.6 u, 100 A), velocidad de flujo y gradiente de elución de acuerdo con el Método III.

Se utilizaron las siguientes masas de referencia para el análisis HRMS: Agilent serie 1200: cafeína [M+H]+ 195.087652; hexakis(1H,1H,3H-tetrafluoropentoxi)fosfaceno [M+H]+ 922.009798 y hexakis(2.2-difluoroetoxi)fosfaceno [M+H]+ 622.02896 o reserpina [M+H]+ 609.280657; UPLC Waters Acquity : Ion de fragmento leucina encefalina [M+h ]+ 397.1876. Todos los compuestos tenían una pureza > 95 % por análisis LCMS a menos que se indique de otro modo.

W-(2-fluoro-5-nitrofenil)-2-metilquinolina-6-carboxamida

En un RBF de 250 ml secado en horno bajo atmósfera inerte, se añadió gota a gota cloruro de oxalilo (3.25 ml, 38.4 mmol) a una solución de ácido 2-metilquinolin-6-carboxílico (6.59 g, 35.2 mmol) y DMF (0.0062 ml, 0.080 mmol) en diclorometano anhidro (80 ml). Se agitó la mezcla de reacción a temperatura ambiente durante 3 h y después se concentró a presión reducida. Se disolvió el residuo en diclorometano y se concentró de nuevo a presión reducida. Se disolvió el residuo seco obtenido en piridina (80 ml) y se añadió en una porción 2-fluoro-5-nitroanilina (5.00 g, 32.00 mmol). Se agitó la mezcla de reacción a temperatura ambiente durante 18 h y después se vertió sobre agua (100 ml).

Se filtró el precipitado verde y se lavó varias veces con agua, éter dietílico y finalmente con una cantidad mínima de diclorometano para proporcionar el compuesto del título (10.42 g) como un sólido verde claro que se llevó al siguiente paso como un producto crudo. 1RMN H (500 MHz, DMSO-de) 810.70 (s, 1H), 8.72 (dd, J = 6.45. 2.93 Hz, 1H), 8.63 (d, J = 2.02 Hz, 1H), 8.43 (d, J = 8.46 Hz, 1H), 8.23 (dd, J = 8.48. 2.02 Hz, 1H), 8.21 - 8.16 (m, 1H), 8.05 (d, J = 8.86 Hz, 1H), 7.65 (app t, J = 9.25 Hz, 1H), 7.54 (d, J = 8.46 Hz, 1H), 2.71 (s, 3H). HRMS (ESI+): Encontrado [M+H]+ 326.0934 C17H13FN3O3 requiere 326.0935.

N-(5-amino-2-fluorofenil)-2-metilquinolina-6-carboxamida

En un RBF de 250 ml, a una solución de N-(2-fluoro-5-nitrofenil)-2-metilquinolina-6-carboxamida (10.42 g, 32.00 mmol) en etanol (120 ml) y agua (40 ml), se añadieron cloruro de amonio (11.99 g, 224 mmol) y polvo de hierro (12.52 g, 224 mmol) en una porción y la suspensión resultante se dejó en agitación a 90 °C durante 1 h. Se dejó enfriar la mezcla de reacción a temperatura ambiente, se diluyó con una mezcla de MeOH y diclorometano 1:9 (50 ml) y se filtró a través de una capa de Celite®. El filtrado resultante se concentró al vacío para producir un sólido marrón claro que disolvió nuevamente en una mezcla de diclorometano/MeOH 9:1 (150 ml) y se lavó con solución acuosa saturada de NaHCO3 (150 ml). La fase orgánica se secó sobre Na2SO4, se filtró y se concentró bajo presión reducida para proporcionar un sólido amarillo como producto crudo, que se llevó al paso siguiente sin purificación (9.46 g). 1RMN-H (500 MHz, DMSO-d6) 810.05 (s, 1H), 8.57 (d, J = 1.67 Hz, 1H), 8.39 (d, J = 8.74 Hz, 1H), 8.19 (dd, J = 8.74. 1.67 Hz, 1H), 8.01 (d, J = 8.74 Hz, 1H), 7.52 (d, J = 8.33 Hz, 1H), 6.94 (dd, J = 9.78. 8.28 Hz, 1H), 6.89 (dd, J = 6.58. 2.74 Hz, 1H), 6.46 - 6.39 (m, 1H), 5.05 (bs, 2H), 2.70 (s, 3H). HRMS (ESI+): Encontrado [M+H]+ 296.1191 C17H15FN3O requiere 296.1194.

N-(5-(2,3-dihidrobenzo[6][1.4]dioxina-6-carboxamido)-2-fluorofenil)-2-metilquinolina-6-carboxamida

En un RBF de 250 ml secado en horno bajo atmósfera inerte, a una suspensión de ácido 2,3-dihidrobenzo[b][1.4]dioxina-6-carboxílico (12.70 g, 70.5 mmol) en diclorometano anhidro (100 ml), se añadieron gota a gota una cantidad catalítica de DMF seco (6.16 |jl, 0.080 mmol) y cloruro de oxalilo (6.51 ml, 77 mmol) y se dejó la solución verde resultante en agitación a temperatura ambiente durante 3 h, después de lo cual la mezcla de reacción se concentró al vacío para proporcionar un sólido verde pálido seco. El sólido se disolvió en piridina (100 ml) y se añadió en una porción N-(5-amino-2-fluorofenil)-2-metilquinolin-6-carboxamida (9.46 g, 32.0 mmol). La suspensión de color amarillo oscuro resultante se dejó en agitación durante 2 h, después de lo cual se vertió en agua (100 ml). El precipitado amarillo se filtró y se lavó varias veces con agua, éter dietílico y finalmente con una cantidad mínima de diclorometano para dar el producto crudo como un sólido amarillo pálido que no requiere purificación adicional (12.5 g). ¹RMN-H (500 MHz, DMSO-d⁶): 810.37 (s, 1H), 10.18 (s, 1H), 8.62 (d, J = 1.65 Hz, 1H), 8.41 (d, J = 8.77 Hz, 1H), 8.23 (dd, J = 8.77. 2.19 Hz, 1H), 8.13 (dd, J = 7.01. 2.63 Hz, 1H), 8.03 (d, J = 8.51 Hz, 1H), 7.68 — 7.63 (m, 1H), 7.55 — 7.53 (m, 2H), 7.52 (dd, J = 8.51,2.09 Hz, 1H), 7.29 (dd, J = 9.98, 8.69 Hz, 1H), 6.99 (d, J = 8.51 Hz, 1H), 4.34 - 4.28 (m, 4H), 2.71 (s, 3H). HRMS (ESI⁺): Encontrado [M+H]⁺459.1520 C²⁶H²¹FN³O⁴requiere 459.1542.

N-(5-(2,3-dihidrobenzo[6][1.4]dioxina-6-carboxamido)-2-fluorofenil)-2-formilquinolina-6-carboxamida

En un RBF de 250 ml secado en horno bajo atmósfera inerte, se calentó en reflujo una solución de N-(5-(2,3-dihidrobenzo[b][1.4]dioxina-6-carboxamido)-2-fluorofenil)-2-metilquinolina-6-carboxamida (5.00 g, 10.93 mmol) y dióxido de selenio (1.334 g, 12.02 mmol) en DMF anhidro (40.00 ml) y 1.4-dioxano (120.00 ml) a reflujo durante 1 h, después de lo cual la mezcla de reacción se dejó enfriar a temperatura ambiente, se diluyó con diclorometano (100 ml) y se filtró a través de una capa de Celite^®. El filtrado se concentró al vacío (usando un azeótropo de heptano/acetato de etilo para eliminar la DMF) para dar el producto crudo como un sólido amarillo, que se llevó al paso siguiente sin purificación adicional (5.15 g). ¹RMN-H (500 MHz, DMSO-d⁶): 810.54 (s, 1H), 10.19 (s, 1H), 10.17 (s, 1H), 8.81 — 8.77 (m, 2H), 8.39 (dd, J = 8.73, 1.95 Hz, 1H), 8.36 (d, J = 8.73 Hz, 1H), 8.17 (dd, J = 6.93. 2.57 Hz, 1H), 8.09 (d, J = 9.26 Hz, 1H), 7.69 -7.64 (m, 1H), 7.55 (d, J = 1.99 Hz, 1H), 7.52 (dd, J = 8.30, 1.99 Hz, 1H), 7.31 (app t, J = 9.97 Hz, 1H), 6.99 (d, J = 8.30 Hz, 1H), 4.36 - 4.27 (m, 4H). HRMS (ESI⁺): Encontrado [M+H]⁺472.1286 C²⁶H¹⁹FN³O⁵requiere 472.1303.

Terf-butil 4-etil-d⁵-piperazina-1-carboxilato

Se suspendieron ferf-butil piperazina-1-carboxilato (538 mg, 2.89 mmol) y NaHCO3 (364 mg, 4.33 mmol) en THF anhidro (25 ml) en atmósfera inerte. La mezcla resultante se enfrió a 0 °C, después se añadió gota a gota yodoetanods (0.231 ml, 2.89 mmol) y la mezcla de reacción se dejó en agitación a 50 °C. Después de 2 h se eliminó el calentamiento y la mezcla de reacción se dejó en agitación a 20 °C durante la noche. El solvente se eliminó bajo presión reducida para producir un sólido blanco, que se disolvió nuevamente en una mezcla de diclorometano/MeOH 9:1 (20 ml) y se lavó con solución acuosa saturada de NaHCO3 (20 ml). A la fase acuosa se realizó extracción con una mezcla de diclorometano/MeOH 9:1 (3 x 20 ml). Las capas orgánicas se combinaron, se secaron sobre MgSO4, se filtró y se concentró bajo presión reducida para proporcionar un aceite espeso de color amarillo como producto crudo. El producto crudo se purificó mediante cromatografía en columna sobre gel de sílice en un gradiente de diclorometano/MeOH al 0-1 %, para proporcionar el compuesto del título (0.33 g, 52 %) como un aceite de color amarillo pálido. 1RMN H (500 MHz, cloroformo-d) 83.32 - 3.23 (m, 4H), 2.66 (t, J = 5.1 Hz, 2H), 2.22 (t, J = 5.0 Hz, 2H), 1.26 (s, 9H). HRMS (ESI+): Encontrado [M+Na]+ 242.1889 CnH 17DaN2NaO2 requiere 242.1887.

1 -etil-d⁵-piperazina

Se disolvió ferf-butil 4-etil-d⁵-piperazina-1-carboxilato (0.327 g, 1.491 mmol) en diclorometano anhidro (10 ml) y se añadió gota a gota HCl 4.0 M en 1.4-dioxano (5.59 ml, 22.36 mmol). La mezcla de reacción se dejó en agitación a 20 °C durante 24 h y después se concentró bajo presión reducida para proporcionar un sólido blanco como producto crudo, que se llevó al siguiente paso sin purificación. ¹H RMN (500 Mh z , DMSO-d⁶) 8 3.84 - 3.19 (m, 8H). LCMS (ESI)⁺: TR 0.15 min, m/z 120.1590 [M+H]⁺.

W-('5-(2,3-dihidrobenzo[8][1.4]dioxina-6-carboxamido)-2-fluorofenil)-2-((4-etil-d⁵-piperazin-1-il)metil)quinolina-6-carboxamida (Compuesto A)

Se suspendieron A/-('5-(2,3-dihidrobenzo[b][1.4]dioxina-6-carboxamido)-2-fluorofenil)-2-formilquinolina-6-carboxamida (235 mg, 0.498 mmol) y el compuesto 1-etil-ds-piperazina (178 mg, 1.493 mmol) en diclorometano anhidro (7 ml) y la suspensión roja resultante se dejó en agitación a 20 °C durante 20 h. Después se añadió triacetoxiborohidruro de sodio (316 mg, 1.493 mmol) en una porción y la mezcla resultante se dejó en agitación durante 1 h. La mezcla de reacción se diluyó con diclorometano (5 ml) y se lavó con solución acuosa saturada de NaHCO3 (10 ml). A la fase acuosa se realizó extracción con una mezcla de diclorometano/MeOH 9:1 (3 x 10 ml). Las capas orgánicas se combinaron, se secaron sobre Na2SO4, se filtraron y se concentraron bajo presión reducida para dar un sólido pardo como producto crudo. La purificación por cromatografía en columna sobre gel de sílice en gradiente de diclorometano/MeOH 0-7.5 %, seguida de trituración en éter dietílico y acetato de etilo proporcionó el compuesto del título como un sólido beige claro (0.06 g, 21 %). 1RMN H (500 MHz, DMSO-d6) 810.40 (s, 1H), 10.19 (s, 1H), 8.65 (d, J = 2.1 Hz, 1H), 8.49 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 8.25 (dd, J = 8.8.2.1 Hz, 1H), 8.17 — 8.05 (m, 2H), 7.73 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 7.66 (dt, J = 8.9. 3.4 Hz, 1H), 7.57 — 7.49 (m, 2H), 7.29 (t, J = 9.5 Hz, 1H), 6.99 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 4.31 (td, J = 5.1.

3.3 Hz, 4H), 3.79 (s, 2H), 2.50 (s, 8H). HRMS (ESI+): Encontrado [M+H]+ 575.2821 C32H28D5FN5O4 requiere 575.2825.

Terf-butil 4-etilpiperazina-ds-1-carboxilato

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A una solución de tert-butil piperazina-d8-1-carboxilato (154 mg, 0.793 mmol) en MeOH anhidro (10 ml), se añadió cianoborohidruro de sodio (158 mg, 3.96 mmol) en una porción. La mezcla resultante se enfrió a 0 °C y se añadió acetaldehído (0.031 ml, 0.555 mmol) lentamente y gota a gota. La solución transparente de color amarillo pálido resultante se dejó en agitación a 20 °C durante 3 h. La mezcla de reacción se concentró bajo presión reducida, después se disolvió nuevamente en una mezcla de diclorometano/MeOH 9:1 (10 ml) y se lavó con solución acuosa de NaOH (1 N) (10 ml). A la fase acuosa se realizó extracción con una mezcla de diclorometano/MeOH 9:1 (3 x 10 ml). Las capas orgánicas se combinaron, se secaron sobre MgSO4, se filtraron y se concentraron bajo presión reducida para dar el producto crudo como un sólido incoloro vítreo. La purificación por cromatografía en columna sobre una paleta corta de sílice en elución isocrática con mezcla de CHCh/MeOH 9:1 proporcionó el compuesto del título como un aceite espeso incoloro (0.04 g, 23 %). 1RMN H (500 MHz, m etano l^) 82.46 (q, J = 7.3 Hz, 2H), 1.47 (s, 9H), 1.12 (t, J = 7.2 Hz, 3H). LCMS (ESI)+: TR 0.37 min, m/z 223.2276 [M+H]+.

1-etil-piperazina-d8

Se disolvió tert-butil 4-etilpiperazina-d⁸-1-carboxilato (39 mg, 0.175 mmol) en MeOH anhidro (1.5 ml), después se añadió gota a gota HCl 4.0 M en 1.4-dioxano (0.658 ml, 2.63 mmol) y la solución transparente de color amarillo pálido resultante se dejó en agitación a 20 °C durante 2 h. Después, la mezcla de reacción se concentró bajo presión reducida para proporcionar un sólido de color beige claro como producto crudo, que se llevó al siguiente paso sin purificación. LCMS (ESI)⁺: TR 0.15 min, m/z 123.1777 [M+H]⁺.

W-('5-(2,3-dihidrobenzo[b][1.4]dioxina-6-carboxamido)-2-fluorofenil)-2-((4-etil-piperazina-d⁸-1-il)metil)quinolina-6-carboxamida (Compuesto B de referencia)

Se suspendieron A/-('5-(2,3-dihidrobenzo[b][1.4]dioxina-6-carboxamido)-2-fluorofenil)-2-formilquinolina-6-carboxamida (27.0 mg, 0.057 mmol) y 1-etil-piperazina-d8 (21 mg, 0.172 mmol) en MeOH anhidro (1.0 ml) y la suspensión roja resultante se dejó en agitación a 20 °C durante 20 h. Después se añadió en una porción cianoborohidruro de sodio (10.80 mg, 0.172 mmol) y la mezcla resultante se dejó en agitación durante 1 h. La mezcla de reacción se concentró bajo presión reducida se disolvió nuevamente en una mezcla de diclorometano/MeOH 9:1 (5 ml) y se lavó con solución acuosa de NaOH (1 N) (5 ml). A la fase acuosa se realizó extracción con una mezcla de diclorometano/MeOH 9:1 (3 x 5 ml). Las capas orgánicas se combinaron, se secaron sobre Na2SO4, se filtraron y se concentraron bajo presión reducida para proporcionar un sólido marrón claro como producto crudo. La purificación mediante cromatografía en columna sobre gel de sílice en gradiente de diclorometano/MeOH al 0-10 % proporcionó el compuesto del título como un sólido blanco (1.59 mg, 32 %). 1RMN H (500 MHz, metanol-d4) 88.77 — 8.63 (bs, 2H), 8.40 (dd, J = 8.8. 2.0 Hz, 1H), 8.30 - 8.20 (m, 2H), 7.91 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 7.58 (ddd, J = 8.9. 4.3. 2.7 Hz, 1H), 7.55 - 7.46 (m, 2H), 7.26 (dd, J = 10.1. 9.0 Hz, 1H), 6.97 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 4.36 — 4.31 (m, 4H), 4.21 (s, 2H), 3.28 (q, J = 7.4 Hz, 2H), 1.39 (t, J = 7.3 Hz, 3H). HRMS (ESI+): Encontrado [M+H]+ 578.2957 C32H25D8FN5O4 requiere 578.3013.

2-((tert-butildimetilsilil)oxi)etanol-d4

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A una solución agitada de etilen-d4 glicol (1.0 g, 15.13 mmol) y trietilamina (1.093 ml, 15.13 mmol) en diclorometano anhidro (20 ml) a 0 °C se añadió gota a gota una solución de tert-butilclorodimetilsilano (1.14 g, 7.57 mmol) en diclorometano anhidro (12 ml), y la mezcla resultante se dejó calentar a temperatura ambiente y se agitó durante 16 h. La reacción se detuvo con solución acuosa saturada de NaHCO3 (20 ml) y las capas se separaron. A la capa acuosa se realizó extracción con diclorometano (3 x 20 ml) y las capas orgánicas combinadas se secaron sobre MgSO4, se filtraron y concentraron al vacío. La purificación mediante cromatografía en columna ultrarrápida (EtOAc al 0-50 % en ciclohexano) proporcionó el compuesto del título como un aceite incoloro (2.62 g, 96 %). 1RMN H (500 MHz, cloroformo-d) 80.86 (s, 9H), 0.04 (s, 6H). HRMS (ESI+): Encontrado [M+H]+ 182.1584 C8H17D4O2SÍ requiere 182.1577.

Se añadió DIAD (0.434 ml, 2.230 mmol) a una solución agitada de 2-((terfbutildimetilsilil)oxi)etanol-d⁴(322 mg, 1.784 mmol), 3.4-dihidroxibenzoato de metilo (250 mg, 1.487 mmol) y trifenilfosfina (585 mg, 2.230 mmol) en THF anhidro (10 ml) a temperatura ambiente. La mezcla de reacción se dejó en agitación durante 16 horas a temperatura ambiente. La reacción se inactivó con agua (20 ml) y se diluyó con acetato de etilo (40 ml) y las capas se separaron. La capa acuosa se lavó con acetato de etilo (3 x 40 ml) y las capas orgánicas combinadas se secaron sobre MgSO4, se filtraron y concentraron al vacío. La purificación mediante cromatografía en columna ultrarrápida (0-10 % de ciclohexanoacetato de etilo) proporcionó el compuesto del título como un aceite incoloro (482 mg, 98 %). ¹RMN H (500 MHz, cloroformo-d) 87.61 (d, J = 2.1 Hz, 1H), 7.59 - 7.54 (m, 2H), 3.84 (s, 3H), 0.93 (s, 9H), 0.12 (s, 6H) (mezcla de regioisómeros, producto principal reportado). HRMS (ESI⁺): Encontrado [M+H]⁺333.1889 C-ⁱ⁶H²³D⁴O⁵Si requiere 333.1883.

Metil 4-hidroxi-3-(2-hidroxieth-d⁴-oxi)benzoato

Se añadió TBAF (0.363 ml, 0.363 mmol) a una solución agitada de metil 3-(2-((terf-butildimetilsilil)oxi)et-d⁴-oxi)-4-hidroxibenzoato (80 mg, 0.242 mmol) en THF anhidro (10 ml) a temperatura ambiente durante 1 h. La mezcla de reacción se inactivó con solución acuosa saturada de NH⁴Cl (10 ml) y se diluyó con acetato de etilo (10 ml). Las capas se separaron. A la capa acuosa se realizó extracción con acetato de etilo (3 x 10 ml) y las capas orgánicas combinadas se secaron sobre MgSO4, se filtraron y concentraron al vacío. La purificación mediante cromatografía en columna ultrarrápida (0-50 % de ciclohexano-acetato de etilo) proporcionó el compuesto del título (47 mg, 90 %). ¹RMN H (500 MHz, cloroformo-d) 87.64 — 7.57 (m, 2H), 6.90 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 3.90 (s, 3H). HRMS (ESI⁺): Encontrado [M+H]⁺218.1048 C¹⁰H⁹D⁴O⁵requiere 218.1043.

Metil 2 ,3-dih¡drobenzo-d⁴-[£>][1.4]d¡oxina-6-carbox¡lato

Se añadió DIAD (0.081 ml, 0.416 mmol) a una solución agitada de metil 4-hidroxi-3-(2-hidroxiet-d⁴-oxi)benzoato (60 mg, 0.277 mmol) y trifenilfosfina (109 mg, 0.416 mmol) en THF anhidro (6 ml) a temperatura ambiente y la mezcla resultante se dejó en agitación durante 16 h. La mezcla de reacción se inactivó con agua (20 ml) y se diluyó con acetato de etilo (40 ml) y las capas se separaron. La capa acuosa se lavó con acetato de etilo (3 x 40 ml) y las capas orgánicas combinadas se secaron sobre MgSO4, se filtraron y concentraron al vacío. La purificación mediante cromatografía en columna ultrarrápida (0-10 % de ciclohexano-acetato de etilo) proporcionó el compuesto del título como un sólido blanco (52 mg, 95 %). ¹RMN H (500 MHz, cloroformo-d) 88.39 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.95 (dd, J = 8.5.

2.0 Hz, 1H), 7.02 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 3.91 (s, 3H). HRMS (ESI⁺): Encontrado [M+H]⁺199.0917 C¹⁰H⁷D⁴O⁴requiere 199.0903.

2 ,3-dihidrobenzo-d⁴-[8][1.4]dioxina-6-ácido carboxílico

Se añadió hidróxido de sodio (60.5 mg, 1.514 mmol) a una solución agitada de metil 2 ,3-dihidrobenzo-d⁴-[8][1.4]dioxina-6-carboxilato (60 mg, 0.303 mmol) en MeOH (3.00 ml) y agua (3 ml) a temperatura ambiente. La reacción se dejó en agitación durante la noche y después se concentró al vacío para eliminar el MeOH. La mezcla se acidificó a pH 1 usando una solución acuosa 1 M de HCl y se diluyó con agua (7 ml) y acetato de etilo. Las capas se separaron y a la capa acuosa se realizó extracción con acetato de etilo (10 ml). Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre MgSO4, se filtraron y se concentraron al vacío. El producto se obtuvo como un sólido blanquecino y se llevó al siguiente paso sin purificación (32 mg, 57 %). ¹RMN H (500 MHz, DMSO-d⁶) 812.67 (s, 1H), 7.55 — 7.29 (m, 2H), 6.94 (d, J = 8.4 Hz, 1H). HRMS (ESI⁺): Encontrado [M+H]⁺185.0757 C⁹H⁵D⁴O⁴requiere 185.0746.

^{W -(}'5-(2 ,3-dihidrobenzo-d⁴-[⁶][1.4]dioxina-6-carboxamido)-2-fluorofenil)-2-metilquinolina-6-carboxamida

Se disolvieron W-^-amino^-fluorofenil^-metilquinolina^-carboxamida (40.1 mg, 0.136 mmol), ácido 2,3-dihidrobenzo-d⁴-[8 ][1.4]dioxina-6-carboxílico (30.0 mg, 0.163 mmol) y HATU (77 mg, 0.204 mmol) en DMF anhidro (1.0 ml), después se añadió gota a gota DIPEA (0.071 ml, 0.407 mmol) y la solución parda resultante se dejó en agitación a 20 °C durante 20 h. La mezcla de reacción se vertió sobre agua y el precipitado amarillo resultante se lavó varias veces con agua. El producto crudo se purificó mediante cromatografía en columna en gradiente de diclorometano/MeOH al 0-10 % para proporcionar el compuesto del título como un sólido amarillo pálido (39 mg, 62 %). ¹RMN H (500 MHz, DMSO-d^a) 810.37 (s, 1H), 10.18 (s, 1H), 8.62 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 8.44 — 8.38 (m, 1H), 8.23 (dd, J = 8.7, 2.1 Hz, 1H), 8.13 (dd, J = 7.1, 2.7 Hz, 1H), 8.03 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 7.65 (ddd, J = 9.1. 4.3. 2.7 Hz, 1H), 7.56 — 7.48 (m, 3H), 7.29 (dd, J = 10.1, 9.0 Hz, 1H), 6.99 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 2.71 (s, 3H). HRMS (ESI⁺): Encontrado [M+H]⁺462.1744 C²⁶H¹⁷D⁴FN³O⁴requiere 462.1762.

W-('5-(2 ,3-dihidrobenzo-d4-[8][1.4]dioxina-6-carboxamido)-2-fluorofenil)-2-formilquinolina-6-carboxamida

Se calentó a reflujo una suspensión de W-('5-(2 ,3-dihidrobenzo-d⁴-[8][1.4]dioxina-6-carboxamido)-2-fluorofenil)-2-metilquinolina-6-carboxamida (34.9 mg, 0.076 mmol) y SeO²(9.23 mg, 0.083 mmol) en DMF anhidro (0.2 ml) y 1.4-dioxano anhidro (0.9 ml). Después de 1 h, la mezcla de reacción se dejó enfriar a temperatura ambiente, se diluyó con diclorometano y se filtró a través de una capa de Celite^®. El filtrado se concentró bajo presión reducida para dar el producto crudo como un sólido amarillo, que se llevó al siguiente paso sin purificación adicional. HRMS (ESI⁺): Encontrado [M+H]⁺476.1516 C²⁶H¹⁵D⁴FN³O⁵requiere 476.1554.

W-('5-(2 ,3-dihidrobenzo-d4-[8][1.4]dioxina-6-carboxamido)-2-fluorofenil)-2-((4-etilpiperazin-1-il)metil)quinolina-6-carboxamida (Compuesto C de referencia)

Se suspendieron A/-('5-(2 ,3-dihidrobenzo-d⁴-[£>][1.4]dioxina-6-carboxamido)-2-fluorofenil)-2-formilquinolina-6-carboxamida (36 mg, 0.076 mmol) y 1 -etilpiperazina (0.029 ml, 0.227 mmol) en diclorometano anhidro (1.0 ml) y la suspensión roja resultante se dejó en agitación a 20 °C durante 20 h. Después se añadió triacetoxiborohidruro de sodio (48.1 mg, 0.227 mmol) en una porción y la mezcla resultante se dejó en agitación durante 24 h. La reacción se diluyó con diclorometano (1 ml) y se lavó con solución acuosa saturada de NaHCO³(2 ml). A la fase acuosa se realizó extracción con una mezcla de diclorometano/MeOH 9:1 (3 x 5 ml) y las capas orgánicas se recogieron, se secaron sobre Na²SO^4,se filtraron y se concentraron bajo presión reducida para proporcionar un aceite espeso de color naranja oscuro como producto crudo. El producto crudo se purificó por cromatografía en columna en gradiente de diclorometano/MeOH 0-10 %, seguido de purificación por columna Isolute SCX-II en diclorometano/MeOH/NH³para proporcionar el compuesto del título como un sólido blanco (11.4 mg, 26 %). ¹RMN H (500 MHz, DMSO-d⁶) 810.39 (s, 1H), 10.18 (s, 1H), 8.65 (d, J = 1.7 Hz, 1H), 8.49 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 8.25 (dd, J = 8.8. 1.9 Hz, 1H), 8.21 - 8.02 (m, 2H), 7.78 - 7.62 (m, 2H), 7.61 - 7.43 (m, 2H), 7.29 (t, J = 9.5 Hz, 1H), 6.99 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 3.81 (s, 2H), 2.70 - 2.35 (m, 10H), 1.03 (s, 3H). HRMS (ESI⁺): Encontrado [M+H]⁺575.2773 C³²H²⁹D⁴FN⁵O⁴requiere 575.2793.

W-('5-(2,3-dihidrobenzo[8][1.4]dioxina-6-carboxamido)-2-fluorofenil)-2-((4-etilpiperazin-1-il)metil)quinolina-6-carboxamida (Compuesto D de referencia)

Se dejó en agitación a 20 °C durante 6 h una solución de W-('5-(2,3-dihidrobenzo[b][1.4]dioxina-6-carboxamido)-2-fluorofenil)-2-formilquinolina-6-carboxamida (1.19 g, 2.52 mmol) y 1 -etilpiperazina en diclorometano anhidro (20 ml), después de lo cual se añadió triacetoxiborohidruro de sodio (1.605 g, 7.57 mmol) en una porción y la mezcla resultante se dejó en agitación a 20 °C durante 2 h. La reacción se detuvo con solución acuosa saturada de NaHCO3 (20 ml) y se realizó extracción con una mezcla diclorometano/MeOH 9/1 (3 x 20 ml). La purificación por cromatografía sobre gel de sílice en gradiente (diclorometano/MeOH) proporcionó un sólido amarillo, que se disolvió nuevamente en una mezcla de diclorometano/MeOH 9:1 (100 ml) y se lavó con agua (100 ml). La fase orgánica se secó sobre Na²SO^4,se filtró y concentró a presión reducida. La trituración final en éter dietílico proporcionó el producto deseado como un sólido blanco (0.950 g, 66 %). ¹RMN-H (500 MHz, DMSO-d^a): 810.41 (s, 1H), 10.20 (s, 1H), 8.66 (d, J = 1.86 Hz, 1H), 8.49 (d, J = 8.67 Hz, 1H), 8.26 (dd, J = 8.67. 1.86 Hz, 1H), 8.14 (dd, J = 7.14. 2.55 Hz, 1H), 8.08 (d, J = 8.67 Hz, 1H), 7.73 (d, J = 8.27 Hz, 1H), 7.69 — 7.62 (m, 1H), 7.55 (d, J = 1.83 Hz, 1H), 7.53 (dd, J = 8.53. 1.83 Hz, 1H), 7.29 (app t, J = 9.16 Hz, 1H), 6.99 (d, J = 8.53 Hz, 1H), 4.36 - 4.25 (m, 4H), 3.79 (s, 2H), 2.64 - 2.18 (m, 10H), 0.99 (t, J = 6.41 Hz, 3H). HRMS (ESI⁺): Encontrado [M+H]⁺571.2527 C³²H³³FN⁵O⁴requiere 571.2542.

Biología

Línea celular: Se obtuvo la línea (SK-OV-3) celular de carcinoma de ovario humano de un colaborador de ICR en la década de 1990. Antes de su uso, las células se analizaron mediante perfiles de repetición en tándem corto (STR). Los loci STR polimórficos se amplificaron utilizando un conjunto de cebadores de reacción en cadena de la polimerasa (PCR). El producto de PCR (cada locus se marcó con un fluoróforo diferente) se analizó simultáneamente con los estándares de tamaño mediante detección fluorescente automatizada. Se utilizó el número de repeticiones en 10 loci diferentes (de acuerdo con lo recomendado por la American Type Culture Collection, ATCC) para definir el perfil STR y se cotejó con bases de datos en línea para confirmar la autenticidad. Usando este método, la sublínea in vivo mostró una identidad aceptable del 85.71 % con la línea de referencia de ATCC (LGC Promochem, Reino Unido). Las células estaban libres de contaminación por micoplasma, de acuerdo con lo determinado por un protocolo de PCR anidado sensible (kit Venor GeM, Minerva Biolabs, Alemania). Las células se cultivaron en DMEM/FCS al 10 %, glutamina 2 mM y aminoácidos no esenciales en CO²al 5 %.

ELISA basado en células (Cellisa) para la expresión de HSP72

Para seguir la expresión de la proteína HSP72. un producto de la actividad transcripcional de HSF1. se desarrolló Cellisa. Se sembraron células (~5-8*10⁴células/ml) en placas de 96 pocillos y se incubaron a 37 °C durante 48 h. Después se agregaron los compuestos en un intervalo de concentraciones y se incubaron durante 1 hora antes de agregar 17-AAG (250 nM). A continuación, las células se incubaron durante 18 h. Se eliminó el medio y las células se fijaron con solución fijadora (paraformaldehído al 4 %, TritonX-100 al 0.3 % en tampón PBS) durante 30 min a 4 °C. Después, las placas se lavaron con Tween-20 al 0.1 %/agua desionizada, antes de bloquear con leche al 5 % durante 30 minutos a 37 °C. Después de lavar las placas, se añadió el anticuerpo HSP72 (SPA-810. Enzo Life) durante 1.5 horas a 37 °C. Después de 4 lavados, las placas se incubaron con anticuerpo anti-ratón marcado con europio (0.6 |jg/ml) en tampón de ensayo Delfia (Perkin Elmer) durante 1 hora a 37 °C. Después de lavar las placas, se añadió solución de mejora Delfia, se agitó durante 10 min antes de leer en el lector de placas Envision (Perkin-Elmer) con excitación a 340 nm y emisión a 615 nm. Las placas se lavaron de nuevo antes de la determinación de proteína total utilizando el ensayo Pierce BCA (Thermo Scientific) siguiendo el protocolo estándar del fabricante. Los recuentos de europio se normalizaron para la cantidad de proteína en cada pocillo. La concentración inhibitoria al 50 % (IC⁵⁰) del compuesto se determinó ajustando los datos a una curva dosis-respuesta sin límites usando regresión no lineal. Cada concentración se ensayó una vez.

Ensayo in vitro de viabilidad celular

El ensayo Cell Titer Blue Viability (CTB) (Promega) proporciona un método fluorométrico homogéneo para estimar el número de células viables. Utiliza el colorante indicador azul oscuro resazurina para medir la capacidad metabólica de las células, que es un indicador de la viabilidad celular. Las células viables pueden reducir la resazurina en resorufina (rosa), que es altamente fluorescente. Brevemente, las células (~6 * 10³células/ml) se sembraron en placas de 384 pocillos y se incubaron durante 24 h. Los compuestos (en un intervalo de concentraciones) se agregaron utilizando el manipulador de líquidos ECHO 550 (Labcyte, EE. UU.) y después se dejaron a 37 °C durante 96 h. Se añadió reactivo de título azul a cada pocillo y se dejó a 37 °C durante 3-4 h. La fluorescencia se midió utilizando la máquina Envision (Perkin Elmer, Reino Unido). La concentración inhibidora del crecimiento del 50 % (GI⁵⁰) se determinó ajustando los datos a una curva dosis-respuesta sin límites mediante regresión no lineal. Cada concentración se ensayó dos veces.

Ensayo in vitro de estabilidad de hepatocitos (Cyprotex)

Resumen del protocolo

El compuesto de ensayo (1 jM ) se incuba con hepatocitos crioconservados en suspensión. Las muestras se retiran en 6 puntos de tiempo en el transcurso de un experimento de 60 min y el compuesto de prueba se analiza mediante LC-MS/MS. Se entrega un valor (CL ^int) de autorización intrínseca con error estándar y semivida (t^y2).

Objetivo

Determinar la estabilidad del compuesto de ensayo en presencia de hepatocitos crioconservados.

Procedimiento experimental

Se adquieren los hepatocitos agrupados crioconservados de un proveedor comercial de confianza. Una variedad de especies y cepas está disponible a pedido. Los hepatocitos crioconservados se almacenan en nitrógeno líquido antes de su uso.

Los medios Williams E suplementados con L-glutamina 2 mM y HEPES 25 mM y el compuesto de ensayo (concentración final de sustrato 1 |jM; concentración final de DMSO 0.25 %) se preincuban a 37 °C antes de añadir una suspensión de hepatocitos crioconservados (densidad celular final 0.5 * 10⁶células viables/ml en medio Williams E suplementado con L-glutamina 2 mM y HEPES 25 mM) para iniciar la reacción. El volumen final de incubación es de 500 jl. Se incluyen dos compuestos de control con cada especie, junto con el control de vehículo apropiado.

Las reacciones se detienen transfiriendo 50 j l de incubado a 100 j l de metanol que contiene el estándar interno en los puntos de tiempo apropiados. Las placas de terminación se centrifugan a 2500 rpm a 4 °C durante 30 min, para precipitar la proteína.

Análisis cuantitativo

Después de la precipitación de la proteína, los sobrenadantes de la muestra se combinan en casetes de hasta 4 compuestos y se analizan utilizando las condiciones genéricas de LC-MS/MS de Cyprotex.

Análisis de los datos

A partir de un gráfico de la relación del área del pico In (área del pico compuesto/área del pico estándar interno) frente al tiempo, se determina el gradiente de la línea. Posteriormente, se calculan la semivida (t^y2) y autorización intrínseca (CL^int) utilizando las siguientes ecuaciones:

Constante de tasa de eliminación (k) = (- gradiente)

Semivida (t ^y2) (min) =

Autorización intrínseca (CL¡nt)(|Jl/rn¡n/rn¡llón de células) = Vx p

ty2

donde V = Volumen de incubación (jl)/Número de células

Se incluyen en el ensayo dos compuestos de control para cada especie y si los valores de estos compuestos no están dentro de los límites especificados, los resultados se rechazan y se repite el experimento.

Farmacocinética in vivo

Estudios in vivo

El trabajo experimental se realizó de acuerdo con las regulaciones del Ministerio del Interior bajo la Animals (Scientific Procedures) Act) de 1986. los procesos de revisión ética de ICR y de acuerdo con National Cancer Research CRI Guidelines del Reino Unido con la aprobación del Comité Ético local. (Workman, P.; Aboagye, EO; Balkwill, F.; Balmain, A.; Bruder, G.; Chaplin, DJ; Double, JA; Everitt, J.; Farningham, D.; Glennie, MJ; Kelland, LR ; Robinson, V.; Stratford, IJ; Tozer, GM; Watson, S.; Wedge, SR; Eccles, SA Guidelines for the welfare and use of animals in cancer research. Br. J. Cancer 2010. 102. 1555-1577).

Farmacocinética del ratón

Se obtuvieron ratones hembra Balb/C de Charles River (Margate, Reino Unido). Los animales se adaptaron a las condiciones de laboratorio durante al menos 1 semana antes de la dosificación y se les permitió comida y agua ad libitum. Los compuestos se administraron iv o po (0.1 ml/10 g) en DMSO al 10 % en hidroxipropil beta ciclodextrina al 25 % p/v en tampón de citrato de sodio 50 mM. Se recogieron muestras de sangre de la vena de la cola (20 j l ) en 8 puntos de tiempo durante 24 h después dosificación y se aplicaron en tarjetas Whatman FTA-DMPK B (VWR) junto con una curva de calibración y controles de calidad añadidos a sangre de control. Las tarjetas se dejaron secar a temperatura ambiente durante al menos 2 h. Se perforaron discos de 6 mm de las tarjetas y se les realizó extracción con 200 j l de metanol que contenía olomucina 500 nM como patrón interno. Después de la centrifugación, los extractos se analizaron mediante el control de reacciones múltiples de iones precursores y productos mediante LC-ESI-MS/MS en un QTRAP 4000 (Sciex, Warrington, Reino Unido) usando un gradiente corto que constaba de ácido fórmico al 0.1 % y metanol en un Phenomenex ( Macclesfield, Reino Unido) columna UHPLC KinetexMR C18 de 5 cm * 2.6 jm , 2.1 mm de d.i. Los parámetros farmacocinéticos se derivaron del análisis no compartimental utilizando Phoenix (modelo 200 y 201) Pharsight WinNonlin® versión 6.1/6.3.

Farmacocinética de ratas

Se obtuvieron ratas CD hembra de Charles River (Margate, Reino Unido). Los animales se adaptaron a las condiciones de laboratorio durante al menos 5 días antes de la dosificación y se les permitió comida y agua ad libitum. Los compuestos se administraron iv o po (1 ml/200 g) en DMSO al 10 % en hidroxipropil beta ciclodextrina al 25 % p/v en tampón de citrato de sodio 50 mM. Se recogieron muestras de sangre de la vena de la cola (20 |jl) en 8 puntos de tiempo durante 24 horas después de la dosificación y se aplicaron en tarjetas Whatman FTA-DMPK B (VWR) junto con una curva de calibración y controles de calidad añadidos a la sangre de control. Las tarjetas se dejaron secar a temperatura ambiente durante al menos 2 h. Se perforaron discos de 6 mm de las tarjetas y se extrajeron con 200 j l de patrón interno que contenía metanol. Después de la centrifugación, los extractos se analizaron mediante el control de reacciones múltiples de iones precursores y productos mediante LC-ESI-MS/MS en un QTRAP 4000 (Sciex, Warrington, Reino Unido) usando un gradiente corto que constaba de ácido fórmico al 0.1 % y metanol en un Phenomenex ( Macclesfield, Reino Unido) columna UHpLC KinetexMR C18. de 5 cm * 2.6 jm , 2.1 mm de d.i. Los parámetros farmacocinéticos se derivaron del análisis no compartimental utilizando Phoenix (modelo 200 y 201) Pharsight WinNonlin® versión 6.1/6.3.

Enlace proteico

La unión a proteínas se midió mediante Rapid Equilibrium Dialysis (RED, Thermo Fisher Scientific, Loughborough, Reino Unido). El plasma se obtuvo de ratones Balb/C hembra o de ratas CD (SD) hembra (Charles River, Margate, Reino Unido) y se almacenó a -20 °C. El medio de cultivo celular fue DMEM (Sigma Aldrich, Dorset, Reino Unido) suplementado con FCS al 10 % (Invitrogen), 2 mmol/l de L-glutamina y 1 * aminoácidos no esenciales. Las soluciones de placa RED, tampón, plasma y medios se calentaron a 37 °C antes de la diálisis. El compuesto de prueba en DMSO se añadió a plasma diluido (dilución de 10 veces en tampón de fosfato 100 mM) o medios de cultivo celular, según fuera apropiado, lo que dio como resultado una concentración de 5 jM para diálisis, que contenía 1 % de DMSO. Se agregaron 300 j l de plasma o medio diluido enriquecido al lado del donador de la placa RED, y 500 j l de tampón de fosfato 100 mM al pocillo del receptor. La placa se selló con una tapa permeable a los gases y la diálisis se realizó con agitación durante 4 h a 37 °C. Después de la diálisis, las muestras se transfirieron de la placa RED y las muestras del donador y del receptor se emparejaron en matriz, seguido de la precipitación de la proteína con un estándar interno que contenía metanol. Las muestras se mezclaron, centrifugaron y se tomó el sobrenadante para su análisis mediante ESI-LCMS/MS en un QTRAP 4000 (Sciex, Warrington, Reino Unido) utilizando un gradiente corto que consistía en ácido fórmico al 0.1 % y metanol en una columna UHPLC Phenomenex (Macclesfield, Reino Unido) Kinetex^MRC18. de 5 cm * 2.6 jm , 2.1 mm de d.i. La fracción no ligada (f^u) se calculó de la siguiente manera:

donde PAR = Relación de área de pico de analito/patrón interno.

donde factor de dilución = 10 para plasma, 1 para medios.

Proporción de sangre a plasma

Se obtuvo sangre fresca de ratones Balb/C hembra o de ratas CD (SD) hembra (Charles River, Margate, Reino Unido) y se centrifugó una alícuota para obtener plasma. La sangre y el plasma se precalentaron a 37 °C. El compuesto de prueba se añadió a la sangre y al plasma hasta una concentración final de 1 jM que contenía 1 % de metanol:agua y <0.1 % de DMSO. Las muestras enriquecidas se incubaron durante 30 minutos a 37 °C. Después se centrifugó la sangre para obtener plasma. Se precipitaron volúmenes iguales de plasma de sangre centrifugada y de muestras de plasma enriquecidas originales, con proteína con 10 veces metanol que contenía estándar interno, se mezclaron y centrifugaron. Se tomó el sobrenadante para su análisis mediante ESI-LCMS/MS en un QTRAP 4000 (Sciex, Warrington, Reino Unido) usando un gradiente corto que constaba de ácido fórmico al 0.1 % y metanol en una columna UHPLC Phenomenex (Macclesfield, Reino Unido) KinetexMR C18. de 5 cm * 2.6 jm , 2.1 mm de d.i. La relación sangre/plasma se calculó como:

PAR en plasma enriquecido

PAR en plasma de sangre enriquecida

donde PAR = Relación de área de pico de analito/patrón interno.

Resultados

Actividad celular

Tabla 1. Actividad celular de los compuestos deuterados en la línea celular SK-OV-3 de cáncer de ovario.

Metabolismo in vitro

Tabla 2. Estabilidad de hepatocitos de compuestos deuterados en un ensayo in vitro.

Farmacocinética in vivo

Tabla 3. Parámetros farmacocinéticos en sangre de ratón para el Compuesto D y el Compuesto A.

Tabla 4. Parámetros farmacocinéticos de sangre de rata para el Compuesto D y el Compuesto A.

Tabla 5. Parámetros farmacocinéticos no unidos del ratón para el Compuesto D y el Compuesto A.

Tabla 6. Parámetros farmacocinéticos no unidos de rata para el Compuesto D y el Compuesto A.

Discusión

El compuesto A mostró una potente actividad celular en la línea celular de cáncer de ovario SK-OV-3 y mejoró propiedades in vitro en un ensayo de estabilidad de hepatocitos humanos en comparación, con el Compuesto D de referencia. Por lo tanto, la presente invención proporciona agentes capaces de inhibir HSF1 con propiedades ADME mejoradas, lo que indica idoneidad para administración in vivo a humanos. Por el contrario, el Compuesto A no mostró ninguna ventaja ADME in vivo cuando se comparó en ratas y ratones con el Compuesto D. Sin embargo, se sabe en la técnica que el cambio metabólico es muy complejo y que puede ocurrir de manera diferencial entre diferentes modelos animales y también entre modelos animales y humanos, a medida que los estudios se trasladan de las etapas preclínicas a las clínicas (Drug Metab Dispos. 2012; 40(3):625-34). La falta de beneficio en ratones y ratas in vivo por lo tanto, no es indicativo de falta de beneficio en humanos in vivo. Además, la técnica aclara que los hepatocitos metabólicamente activos son los sustitutos in vitro más cercanos para el metabolismo hepático in vivo (Eur J Drug Metab Pharmacokinet 1990; 15:165-171). Por lo tanto, la mejora de la estabilidad de los hepatocitos humanos es un indicador de la mejora del metabolismo hepático in vivo, lo que indica la idoneidad para administración in vivo a humanos. A partir de datos de hepatocitos in vitro, el compuesto D tiene una autorización en humanos no unida prevista de 54 ml/min/kg mientras el compuesto A tiene una autorización en humanos no unida prevista de 30 ml/min/kg, por lo que predice una mejora del doble en la autorización en humanos no unida.

Todos los títulos y subtítulos se utilizan en el presente documento solo por conveniencia, y de ninguna manera deben interpretarse como una limitación de la invención.

El uso de todos y cada uno de los ejemplos, o lenguaje ilustrativo (p. ej., "tal como") proporcionado en este documento, pretende simplemente iluminar mejor la invención y no supone una limitación en el alcance de la invención a menos que se indique de otro modo. Ningún lenguaje en la especificación debe interpretarse como una indicación de cualquier elemento no incluido en párrafos como esencial para la práctica de la invención.

La citación de los documentos de patentes en el presente documento se hace únicamente por conveniencia y no refleja ningún punto de vista sobre la validez, patentabilidad y/o exigibilidad de dichos documentos de patentes.

Claims

REIVINDICACIONES

1. Un compuesto, o una de sus sales o solvatos farmacéuticamente aceptables, seleccionado de

y

2. Un compuesto, o una de sus sales o solvatos farmacéuticamente aceptables, de acuerdo con la reivindicación 1 que es

3. Un compuesto, o una de sus sales o solvatos farmacéuticamente aceptables, de acuerdo con la reivindicación 1 que es

4. Un compuesto, o una de sus sales o solvatos farmacéuticamente aceptables, de acuerdo con la reivindicación 1 que es

5. Un compuesto, o una de sus sales o solvatos farmacéuticamente aceptables, de acuerdo con la reivindicación 1 que es

6. Una composición farmacéutica que comprende un compuesto de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5, o una de sus sales o solvatos farmacéuticamente aceptables, mezclado con un diluyente o vehículo farmacéuticamente aceptable.

7. Un compuesto como se define en una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5, o una de sus sales o solvatos farmacéuticamente aceptables, para uso en terapia.

8. Un compuesto como se define en una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5, o una de sus sales o solvatos farmacéuticamente aceptables, para uso en el tratamiento de una afección o enfermedad mediada por HSF1 seleccionada de un cáncer, una enfermedad autoinmune o una enfermedad viral.

9. Un compuesto como se define en una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5, o una de sus sales o solvatos farmacéuticamente aceptables, para uso en el tratamiento de un trastorno proliferativo.

10. Un compuesto o una de sus sales o solvatos farmacéuticamente aceptables, para uso de acuerdo con la reivindicación 9, en el que el trastorno proliferativo es una leucemia.

11. Un compuesto como se define en una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5, o una de sus sales o solvatos farmacéuticamente aceptables, para uso en el tratamiento de un cáncer.

12. Un compuesto, o una de sus sales o solvatos farmacéuticamente aceptables, para uso de acuerdo con la reivindicación 11 en el que el cáncer se selecciona de cáncer de pulmón, colon, mama, ovario, próstata, hígado, páncreas, cerebro y piel.