ES2949616T3 - Compuestos de aminotiazol como inhibidores de proteína cinasa - Google Patents

Compuestos de aminotiazol como inhibidores de proteína cinasa Download PDF

Info

Publication number
ES2949616T3
ES2949616T3 ES18817380T ES18817380T ES2949616T3 ES 2949616 T3 ES2949616 T3 ES 2949616T3 ES 18817380 T ES18817380 T ES 18817380T ES 18817380 T ES18817380 T ES 18817380T ES 2949616 T3 ES2949616 T3 ES 2949616T3
Authority
ES
Spain
Prior art keywords
cancer
compound
salt
alkyl
tyrosine kinase
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Active
Application number
ES18817380T
Other languages
English (en)
Inventor
Chuan Shih
Weir-Torn Jiaang
Hui-Jen Tsai
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
National Health Research Institutes
Original Assignee
National Health Research Institutes
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by National Health Research Institutes filed Critical National Health Research Institutes
Application granted granted Critical
Publication of ES2949616T3 publication Critical patent/ES2949616T3/es
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D417/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00
    • C07D417/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00 containing three or more hetero rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/505—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim
    • A61K31/506—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim not condensed and containing further heterocyclic rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/535—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with at least one nitrogen and one oxygen as the ring hetero atoms, e.g. 1,2-oxazines
    • A61K31/5355—Non-condensed oxazines and containing further heterocyclic rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/535—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with at least one nitrogen and one oxygen as the ring hetero atoms, e.g. 1,2-oxazines
    • A61K31/5375—1,4-Oxazines, e.g. morpholine
    • A61K31/5377—1,4-Oxazines, e.g. morpholine not condensed and containing further heterocyclic rings, e.g. timolol
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D417/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00
    • C07D417/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00 containing two hetero rings
    • C07D417/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00 containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Plural Heterocyclic Compounds (AREA)

Abstract

Compuestos de aminotiazol de Fórmula (I) que se muestran a continuación y composiciones farmacéuticas que contienen uno de tales compuestos. También se describen métodos para inhibir una tirosina quinasa y tratar el cáncer asociado con una tirosina quinasa con uno de los compuestos de aminotiazol. (Traducción automática con Google Translate, sin valor legal)

Description

DESCRIPCIÓN
Compuestos de aminotiazol como inhibidores de proteína cinasa
ANTECEDENTES
Las proteínas cinasas son importantes en las vías de señalización celular que regulan diversas funciones celulares, que incluyen diferenciación, proliferación, migración y apoptosis. La desregulación de proteínas cinasas participa en el cáncer y en varias otras enfermedades.
Las tirosina cinasas, una subclase de las proteínas cinasas, regulan la función de proteínas diana mediante la transferencia de fosfato de ATP al grupo hidroxilo de una proteína tirosina diana. La tirosina cinasa 3 de tipo FMS ("FLT3"), el receptor del factor de crecimiento endotelial vascular ("VEGFR") y la tirosina-proteína cinasa kit ("c-Kit") son tres tirosina cinasas que se han estudiado como dianas terapéuticas atractivas en el tratamiento del cáncer. Las mutaciones de FLT3, una tirosina cinasa receptora, pueden conducir al desarrollo de cáncer, por ejemplo, leucemia mieloide aguda. Véase Pratz et al., Current Drug Targets, 2010, 11 (7), 781 -9.
Mediante la unión a VEGFR y activándolo por transfosforilación, el factor de crecimiento endotelial vascular, una proteína señalizadora, estimula el crecimiento de nuevos vasos sanguíneos. El VEGFR se ha identificado como el principal regulador de la angiogénesis tumoral. Véase Hicklin et al., J Clin Oncol., 2005, 23, 1011-1027.
c-Kit, también una tirosina cinasa receptora, participa en la señalización intracelular. La forma mutada de c-Kit desempeña una función crucial en la manifestación de algunos cánceres. La inhibición de c-Kit ha demostrado ser eficaz en el tratamiento de tumor del estroma gastrointestinal, leucemia mieloide aguda y melanoma. Véase Babaei et al., Drug Des Devel Ther., 2016 10, 2443-2459.
Los compuestos de aminotiazol, ampliamente explorados como potentes inhibidores de tirosina cinasas, presentan varios retos como candidatos a fármaco. Poseen mala selectividad por cinasas, frecuentemente provocan la muerte del animal en estudios de toxicidad y, en general, carecen de exposición in vivo adecuada para ejercer una eficacia deseable en estudios preclínicos o clínicos.
Existe una necesidad de desarrollar nuevos compuestos de aminotiazol que inhiban específicamente ciertas tirosina cinasas, demuestren perfiles de seguridad deseables y ejerzan eficacia in vivo suficiente en el tratamiento de los cánceres objetivo.
Los compuestos de aminotiazol se desvelan en los documentos de patente WO2004/041164, WO2006/135604 y US2012/225880
SUMARIO
La presente invención se basa en los inesperados descubrimientos de que ciertos compuestos de aminotiazol inhiben eficazmente múltiples tirosina cinasas, por ejemplo, FLT3, VEGFR y c-Kit.
La presente invención es como se describe en las reivindicaciones adjuntas.
En un aspecto, la presente invención se refiere a compuestos de aminotiazol de la fórmula (I):
Figure imgf000002_0001
en la que R1 es alquilo C1-6 o tioalquilo C1-6; X es NRa, Y es CRbRc o NRd, R2 es -CH2CH2Re o NRfR8, y R3 es heteroarilo de 6 miembros sustituido con uno o más restos (CH2)nZ independientemente,
en las que
Ra, junto con Rb, y el átomo de nitrógeno unido a Ra, y el átomo de carbono unido a Rb, es piperidinilo, o Ra, junto con Rd, los átomos de nitrógeno unidos a Ra y Rd, es piperazinilo;
Rc es H, halógeno, alquilo Ci -6, alcoxilo C i -6 o amino;
Re es H, halógeno, alquilo C1-6 u ORh, siendo Rh H o alquilo C1-6;
cada uno de Rf y R9, independientemente, es alquilo C1-6 o cicloalquilo C3-8;
n es 0 o 1; y
Z es H, halógeno, CN, OH, CF3, alquilo C1-6 o alcoxilo C1-6.
El término "alquilo" en el presente documento se refiere a un resto de hidrocarburo saturado, lineal o ramificado, tal como -CH3 o -C3H7 ramificado. El término "cicloalquilo" se refiere a un resto de hidrocarburo no aromático, monocíclico, bicíclico, tricíclico o tetracíclico, tal como ciclohexilo, ciclohexen-3-ilo o adamantilo. El término "alcoxilo" se refiere a un radical -O-alquilo. Los ejemplos de alcoxilo incluyen, pero no se limitan a, metoxi, etoxi, n-propoxi, isopropoxi, n-butoxi, iso-butoxi, sec-butoxi y terc-butoxi. El término "tioalquilo" se refiere a un radical -S-alquilo. Los ejemplos de tioalquilo incluyen, pero no se limitan a, metiltiol, etiltiol y benciltiol. El término "heterocicloalquilo" se refiere a un resto no aromático, monocíclico, bicíclico, tricíclico o tetracíclico que tiene uno o más heteroátomos de anillo (por ejemplo, N, O o S). Los ejemplos de heterocicloalquilo incluyen, pero no se limitan a, 4-morfolinilo, 1 -piperazinilo, 4-tetrahidropiranilo y 4-piranilo. El término "heteroarilo" se refiere a un resto que tiene uno o más anillos aromáticos que contienen al menos un heteroátomo (por ejemplo, N, O o S). Los ejemplos de restos heteroarilo incluyen furilo, furileno, fluorenilo, pirrolilo, tienilo, oxazolilo, imidazolilo, tiazolilo, piridilo, pirimidinilo, quinazolinilo, quinolilo, isoquinolilo e indolilo.
El alquilo, tioalquilo, alcoxilo, cicloalquilo, heterocicloalquilo y heteroarilo mencionados en el presente documento incluyen tanto restos sustituidos como sin sustituir, a menos que se especifique lo contrario. Los posibles sustituyentes en cicloalquilo, heterocicloalquilo y heteroarilo incluyen alquilo C1-10, alquenilo C2-10, alquinilo C2-10, cicloalquilo C3-20, cicloalquenilo C3-20, heterocicloalquilo C1-20, heterocicloalquenilo C1-20, alcoxi C1-10, arilo, ariloxi, heteroarilo, heteroariloxi, amino, alquil C1-10-amino, dialquil C1-20-amino, arilamino, diarilamino, hidroxilo, halógeno, tio, alquiltio C1-10, ariltio, alquil C1-10-sulfonilo, arilsulfonilo, acilamino, aminoacilo, aminotioacilo, amidino, guanidina, ureido, ciano, nitro, acilo, tioacilo, aciloxi, carboxilo y éster carboxílico. Por otra parte, posibles sustituyentes en el alquilo incluyen todos los sustituyentes anteriormente citados, excepto alquilo C1-10, alquenilo C2-10 y alquinilo C2-10. Cicloalquilo, heterocicloalquilo, arilo y heteroarilo también se pueden condensar entre sí.
Los compuestos de aminotiazol descritos anteriormente incluyen los propios compuestos, así como sus sales, profármacos y solvatos, si procede. Los profármacos y solvatos no son parte de la invención. Una sal, por ejemplo, se puede formar entre un anión y un grupo positivamente cargado (por ejemplo, amino) en un compuesto de aminotiazol. Los aniones adecuados incluyen cloruro, bromuro, yoduro, sulfato, nitrato, fosfato, citrato, metanosulfonato, trifluoroacetato, acetato, malato, tosilato, tartrato, fumarato, glutamato, glucuronato, lactato, glutarato y maleato. Asimismo, una sal también se puede formar entre un catión y un grupo negativamente cargado (por ejemplo, carboxilato) en un compuesto de aminotiazol. Los cationes adecuados incluyen ion sodio, ion potasio, ion magnesio, ion calcio y un catión amonio, tal como el ion tetrametilamonio. Los compuestos de aminotiazol también incluyen las sales que contienen átomos de nitrógeno cuaternario. Los ejemplos de profármacos incluyen ésteres y otros derivados farmacéuticamente aceptables que, tras la administración a un sujeto, son capaces de proporcionar compuestos activos de aminotiazol. Un solvato se refiere a un complejo formado entre un compuesto de aminotiazol activo y un disolvente farmacéuticamente aceptable. Los ejemplos de un disolvente farmacéuticamente aceptable incluyen agua, etanol, isopropanol, acetato de etilo, ácido acético y etanolamina.
En el presente documento se desvela un método de inhibición de una tirosina cinasa, que no es parte de la invención, por ejemplo, FLT3, VEGFR y c-Kit. El método incluye poner en contacto la tirosina cinasa con una cantidad eficaz de uno o más de los compuestos de aminotiazol anteriormente descritos.
También está dentro del alcance de la presente invención una cantidad eficaz de un compuesto o sal de la invención para su uso en un método de tratamiento del cáncer asociado a una tirosina cinasa. El método incluye administrar a un sujeto en necesidad del mismo una cantidad eficaz de uno o más de los compuestos de aminotiazol de la fórmula (I) descritos anteriormente.
La tirosina cinasa asociada a un cáncer puede ser natural o mutante. Los ejemplos de la tirosina cinasa incluyen, pero no se limitan a, FLT3, FLT4, VEGFR, receptor del factor de crecimiento derivado de plaquetas (PDGFR) A, PDGFR B, c-Kit, c-Src (SRC), proteína tirosina cinasa Lyn (LYN) A, LYN B, reordenada durante la transfección tirosina cinasa (RET), proteína tirosina cinasa específica de linfocitos, homólogo del oncogén vírico del sarcoma felino de Gardner-Rasheed, receptor 1 del dominio de discoidina, receptor del dominio de inserción de cinasa, cinasa de linfocitos B, proteína tirosina cinasa Yes, homólogo 1 del oncogén vírico de la leucemia murina de Abelson (ABL1), proteína tirosina cinasa Tek, RET V804L, RET Y791 F, FLT3 D835Y, PDGFR A V561 D o ABL1 T315I.
En un método a modo de ejemplo, los compuestos de aminotiazol de la fórmula (I) se usan para tratar cáncer asociado a FLT3, VEGFR o c-Kit.
Los ejemplos de cáncer incluyen leucemia mieloide aguda, cloroma, leucemia mielógena crónica, leucemia linfoblástica aguda, leucemia linfocítica crónica, enfermedad de Hodgkin, linfoma no hodgkiniano, linfoma de linfocitos B, mieloma múltiple, macroglobulinemia de Waldenstrom, síndrome mielodisplásico, cáncer pancreático, cáncer de vejiga, cáncer colorrectal, cáncer de mama, cáncer del aparato genital masculino, cáncer renal, cáncer hepatocelular, cáncer de pulmón, cáncer de ovario, cáncer de cuello uterino, cáncer de útero, enfermedad trofoblástica gestacional, cáncer gástrico, cáncer de las vías biliares, cáncer de vesícula biliar, cáncer de intestino delgado, cáncer de esófago, cáncer bucofaríngeo, cáncer hipofaríngeo, cáncer de ojo, cáncer de nervio, cáncer de cabeza y cuello, melanoma, plasmacitoma, neoplasia de las glándulas endocrinas, cáncer neuroendocrino, tumor cerebral, cáncer de huesos y sarcoma (por ejemplo, tumor del estroma gastrointestinal o GIST).
También está dentro del alcance de la presente invención una composición farmacéutica que contiene uno o más de los compuestos de aminotiazol de la fórmula (I) anteriormente descritos. La composición farmacéutica se puede usar para tratar cáncer.
La presente invención también engloba el uso de uno o más de los compuestos de aminotiazol de la fórmula (I) anteriormente descritos para la fabricación de un medicamento para tratar cáncer.
El término "tratar" o "tratamiento" se refiere a administrar uno o más de los compuestos de aminotiazol a un sujeto, que tiene una enfermedad anteriormente descrita, es decir, cáncer, un síntoma de dicha enfermedad, o una predisposición hacia dicha enfermedad, con el fin de conferir un efecto terapéutico, por ejemplo, curar, aliviar, alterar, afectar, mejorar o prevenir la enfermedad anteriormente descrita, el síntoma de la misma o la predisposición hacia ella. "Una cantidad eficaz" se refiere a la cantidad de un compuesto activo que se requiere para conferir el efecto terapéutico. Dosis eficaces variarán, como es reconocido por los expertos en la técnica, dependiendo de los tipos de enfermedad tratada, la vía de administración, el uso de excipientes y la posibilidad de uso conjunto con otro tratamiento terapéutico.
Para poner en práctica el método como se describe en el presente documento o el uso médico de la presente invención, una composición que tiene uno o más de los compuestos de aminotiazol anteriormente descritos se puede administrar por vía parenteral, por vía oral, por vía nasal, por vía rectal, por vía tópica o por vía yugal. El término "parenteral", como se usa en el presente documento, se refiere a inyección subcutánea, intracutánea, intravenosa, intraperitoneal, intramuscular, intrarticular, intrarterial, intrasinovial, intraesternal, intratecal, intralesional o intracraneal, así como a cualquier técnica de infusión adecuada.
Una composición inyectable estéril puede ser una disolución o suspensión en un diluyente o disolvente no tóxico aceptable por vía parenteral, tal como una disolución en 1,3-butanodiol. Entre los vehículos y disolventes aceptables que se pueden emplear están manitol, agua, disolución de Ringer y solución isotónica de cloruro sódico. Además, convencionalmente se emplean aceites no volátiles como disolvente o medio de suspensión (por ejemplo, mono- o diglicéridos sintéticos). El ácido graso, tal como ácido oleico y sus derivados de glicérido, son útiles en la preparación de inyectables, ya que son aceites naturales farmacéuticamente aceptables, tales como aceite de oliva y aceite de ricino, especialmente en sus versiones polioxietiladas. Estas disoluciones o suspensiones de aceite también pueden contener un diluyente o dispersante de alcohol de cadena larga, carboximetilcelulosa, o dispersantes similares. También se pueden usar otros tensioactivos comúnmente usados, tales como Tweens y Spans, u otros emulsionantes similares o potenciadores de la biodisponibilidad que se usan comúnmente en la fabricación de formas farmacéuticas sólidas, líquidas, u otras, farmacéuticamente aceptables con el fin de formulación.
Una composición para administración por vía oral puede ser cualquier forma farmacéutica aceptable por vía oral que incluye cápsulas, comprimidos, emulsiones y suspensiones, dispersiones y disoluciones acuosas. En el caso de comprimidos, los vehículos comúnmente usados incluyen lactosa y almidón de maíz. También se añaden normalmente lubricantes, tales como estearato de magnesio. Para administración por vía oral en una forma de cápsula, diluyentes útiles incluyen lactosa y almidón de maíz secado. Cuando las suspensiones o emulsiones acuosas se administran por vía oral, el principio activo se puede suspender o disolver en una fase aceitosa combinada con emulsionantes o agentes de suspensión. Si se desea, se pueden añadir ciertos edulcorantes, aromatizantes o colorantes.
Se puede preparar un aerosol nasal o composición para inhalación según las técnicas bien conocidas en la técnica de la formulación farmacéutica. Por ejemplo, dicha composición se puede preparar como una disolución en solución salina, empleando alcohol bencílico u otros conservantes adecuados, promotores de la absorción para potenciar la biodisponibilidad, fluorocarbonos y/u otros agentes solubilizantes o dispersantes conocidos en la técnica.
Una composición que tiene uno o más de los compuestos de aminotiazol anteriormente descritos también se puede administrar en forma de supositorios para administración rectal.
El vehículo en la composición farmacéutica debe ser "aceptable" en el sentido de que es compatible con el principio activo de la composición (y preferentemente, capaz de estabilizar el principio activo) y no es perjudicial para el sujeto que se va a tratar. Se pueden utilizar uno o más solubilizantes como excipientes farmacéuticos para la administración de un compuesto activo de 1,5-difenil-penta-1,4-dien-3-ona. Los ejemplos de otros vehículos incluyen óxido de silicio coloidal, estearato de magnesio, celulosa, laurilsulfato de sodio y D&C Yellow # 10.
Los detalles de una o más realizaciones de la invención se exponen en la descripción que sigue. Otras características, objetos y ventajas de la invención serán evidentes a partir de la descripción y de las reivindicaciones.
DESCRIPCIÓN DETALLADA
Se desvelan con detalle compuestos de aminotiazol de la fórmula (I):
Figure imgf000005_0001
en la que las variables R1, R2, R3, X e Y se definen en la sección SUMARIO anteriormente.
Normalmente, los compuestos de la fórmula (I) tienen R3 que es un heteroarilo de 5 o 6 miembros sustituido con uno o más restos (CH2)nZ independientemente, en los que n es 0 o 1 y Z es H, halógeno, CN, OH, CF3, alquilo C1-6 o alcoxilo C1-6. Los compuestos a modo de ejemplo tienen R3 que es un heteroarilo de 6 miembros sustituido con un resto (CH2)nZ independientemente, en el que n es 0 o 1 y Z es H, halógeno, CN, OH, CF3, alquilo C1-6 o alcoxilo C1-6. Dos ejemplos de R3 son piridilo y pirimidilo.
Un grupo de los compuestos de aminotiazol novedosos anteriormente descritos son los compuestos de la fórmula (II):
Figure imgf000005_0002
en la que R1 es alquilo C1-6.
En un subconjunto,
los compuestos de la fórmula (II) tienen X que es NRa e Y que es CRbRc o NRd, en las que Ra, junto con Rb, el átomo de nitrógeno unido a Ra y el átomo de carbono unido a Rb, es piperidinilo; Rc es H, halógeno, alquilo C1-6, alcoxilo C1-6 o amino; y Ra, junto con Ra y los átomos de nitrógeno unidos a Ra y Ra, es piperazinilo.
Cabe señalar que estos compuestos pueden tener X que es NRa, Y que es CRbRc y R2 que es NRfR8, en las que Ra, junto con Rb, el átomo de nitrógeno unido a Ra y el átomo de carbono unido a Rb, es piperidinilo; Rc es H, halógeno, alquilo C1-6, alcoxilo C1-6 o amino; y cada uno de Rf y R9 es alquilo C1-6. Normalmente, tienen R3 que es un heteroarilo de 6 miembros sustituido con uno o más restos (CH2)nZ independientemente, en los que n es 0 o 1 y Z es H, halógeno, CN, OH, CF3, alquilo C1-6 o alcoxilo C1-6. R3 puede ser piridilo o pirimidilo. Los compuestos a modo de ejemplo incluyen, pero no se limitan a, los siguientes compuestos:
Figure imgf000005_0003
Por otra parte, los compuestos en este subconjunto pueden tener X que es NRa, Y que es NRd y R2 que es -CH2CH2Re, en las que Ra, junto con Rd y los átomos de nitrógeno unido a Ra y Rd, es piperazinilo;
y Re es H, halógeno u ORh, siendo Rh H o alquilo C i -6. En general, estos compuestos tienen R3 que es un heteroarilo de 6 miembros sustituido con uno o más restos (CH2)nZ independientemente, en los que n es 0 o 1 y Z es H, halógeno, CN, OH, CF3, alquilo C1-6 o alcoxilo C1-6. Por ejemplo, R3 es piridilo o pirimidilo. Los compuestos a modo de ejemplo incluyen, pero no se limitan a, los siguientes compuestos:
Figure imgf000006_0001
Otro grupo de los novedosos compuestos de aminotiazol expuestos anteriormente son los compuestos de la fórmula (III):
Figure imgf000006_0002
en la que R1 es alquilo C1-6.
Un compuesto a modo de ejemplo de la fórmula (III) es
Figure imgf000006_0003
A continuación se enumeran compuestos a modo de ejemplo de la presente invención, cada uno asignado a un número de compuesto.
Figure imgf000007_0001
También está dentro de la presente invención una composición farmacéutica que contiene uno o más de los compuestos de aminotiazol de la fórmula (I) para tratar cáncer.
También está cubierto por la presente invención el compuesto de la invención para su uso en un método de tratamiento de cáncer, incluyendo el método administrar a un sujeto en necesidad del mismo una cantidad eficaz de un compuesto de la fórmula (I).
Las transformaciones de química sintética y las metodologías de grupos protectores (protección y desprotección) usadas para sintetizar los compuestos de la fórmula (I) se conocen bien en la técnica. Véanse, por ejemplo, R. Larock, Comprehensive Organic Transformations (2a Ed., VCH Publishers 1999); P. G. M. Wuts y T. W. Greene, Greene’s Protective Groups in Organic Synthesis (4a ed., John Wiley and Sons 2007); L. Fieser y M. Fieser, Fieser and Fieser’s Reagents for Organic Synthesis (John Wiley and Sons 1994); L. Paquette, ed., Encyclopedia of Reagents for Organic Synthesis (2a ed., John Wiley and Sons 2009); y G. J. Yu et al., J. Med. Chem. 2008, 51,6044-6054.
Los compuestos de la fórmula (I) así preparados pueden ser cribados inicialmente usando ensayos bioquímicos, por ejemplo, los ensayos de cinasas descritos en los Ejemplos 2-4 que siguen, o ensayos celulares, por ejemplo, el ensayo de actividad antineoplásica in vitro descrito en el Ejemplo 5 que sigue, para su potencia en inhibir tirosina cinasas o inhibir el crecimiento de células cancerosas que expresan ciertas tirosina cinasas. Pueden ser posteriormente evaluados usando ensayos in vivo, por ejemplo, un ensayo en modelo de animal de xenoinjerto, para su actividad en suprimir el crecimiento tumoral en un mamífero. Los compuestos seleccionados se pueden probar adicionalmente para verificar su eficacia en el tratamiento del cáncer. Por ejemplo, un compuesto se puede administrar a un animal (por ejemplo, un ratón) que tiene cáncer y entonces se evalúa su efecto terapéutico. Basándose en los resultados, se pueden investigar y determinar intervalos de dosis y vías de administración apropiados.
Sin más detalles, se cree que un experto en la técnica puede utilizar, basándose en la descripción anterior, la presente invención en toda su extensión. Los siguientes ejemplos específicos se deben interpretar, por lo tanto, como simplemente ilustrativos, y no limitantes en modo alguno del resto de la divulgación.
En el ejemplo 1 a continuación se muestra la síntesis y caracterización de 13 compuestos de la fórmula (I) a modo de ejemplo. Los datos analíticos para los compuestos así preparados también se exponen en el Ejemplo 1 y los procedimientos para probar estos compuestos se describen en los Ejemplos 2-5 que siguen.
Todas las sustancias químicas y disolventes se compraron de proveedores comerciales y se usaron como se recibieron. Todas las reacciones se llevaron a cabo bajo una atmósfera de nitrógeno seco. Las reacciones se monitorizaron por C C F usando placas con soporte de vidrio de gel de sílice Merck 60 F254 (5 x 10 cm); y las zonas se detectaron visualmente bajo irradiación ultravioleta (254 nm) o pulverizando con reactivo de ácido fosfomolíbdico (Aldrich) seguido de calentamiento a 80 °C . Toda la cromatografía en columna ultrarrápida se realizó con el gel de sílice ASTM de malla 230-400 Merck Kieselgel 60, N.° 9385, como fase estacionaria. Los espectros de resonancia magnética nuclear de protones (1H) se midieron en un espectrómetro Varian Mercury-300 o Varian Mercury-400. Los desplazamientos químicos se registraron en partes por millón (ppm) en la escala delta (5) con respecto a la resonancia del pico de disolvente. Las siguientes abreviaturas se usaron para describir el acoplamiento: s = singlete; d = doblete; t = triplete; q = cuadruplete; quin = quintuplete; a = ancho; y m = multiplete. Los datos de LCMS se midieron en un sistema Agilent MSD-1100 ESI-MS/MS, Agilent 1200 serie LC/MSD VL y Waters Acquity UPLC-ESI-MS/M S.
EJEMPLO 1: Síntesis de los compuestos 1-4 y 7-13
Los compuestos 1-4 y 7-13 se prepararon según la ruta de síntesis mostrada en el Esquema 1 que sigue. Entre los reactivos enumerados, TEA es trietilamina, KOAc es acetato de potasio, Pd(PPh3)4 es tetraquis(trifenilfosfina)paladio(0), DMAc es N,N-dimetilacetamida, C sF es fluoruro de cesio, HCl es ácido clorhídrico, NaHCO3 es bicarbonato sódico, NaH es hidruro de sodio, NMP es 1 -metil-2-pirrolidinona, KOH hidróxido potásico y DMSO es sulfóxido de dimetilo.
Figure imgf000008_0001
Etapa I. Síntesis de 2,2-dimetil-N-tiazol-2-il-propionamida B
A una mezcla de 2-aminotiazol A (300 mmoles) y trietilamina (330 mmoles) en CH2CL anhidro (250 ml) a 0 °C se añadió cloruro de trimetilacetilo (310 mmoles) y la mezcla se agitó a temperatura ambiente bajo una atmósfera de argón durante 1 h. La mezcla se lavó con HCl 6 N (60 ml) y la fase orgánica se separó, se secó sobre sulfato de magnesio (MgSO4) y se concentró a presión reducida. El residuo se purificó por cromatografía sobre gel de sílice (20 % de EtOAc/hexano) dando el producto B del título como un sólido blanquecino (72 % ). 1H RMN (300 MHz, DMsO-d6): 511,75 (s, 1H), 7,46 (d, J= 6,0 Hz, 1H), 7,17 (d, J= 6,0 Hz, 1H), 1,22 (s, 9H); MS (ES+) m/z calculado. para C8H12N2OS: 184,07; encontrado: 185,1 (M+H+).
Etapa II. Síntesis del compuesto C (Py= piridin-3-ilo, piridin-4-ilo y pirimidin-5-ilo)
Una mezcla de 2,2-dimetil-N-tiazol-2-il-propionamida B (30 mmoles), cloropiridina (30 mmoles), acetato de potasio (120 mmoles) y tetraquis(trifenilfosfina)paladio(0) (1,5 mmoles) en W,N-dimetilacetamida (60 ml) se calentó a 150 °C bajo una atmósfera de argón durante 24 h. La mayoría del disolvente se retiró mediante destilación (120 °C/160 mm Hg) y el residuo se lavó con agua (250 ml). El precipitado se recogió por filtración, se redisolvió en 10 % de CH3OH/CH2G 2 (200 ml) y se filtró a través de una almohadilla de Celite. El filtrado se concentró a presión reducida y se purificó por cromatografía sobre gel de sílice (1 % de MeOH/CH2Cl2) dando el producto deseado como un sólido blanquecino (40-85 %).
Etapa II. Síntesis del compuesto C (Py= piridin-2-ilo)
Una mezcla de 2,2-dimetil-N-tiazol-2-il-propionamida B (10 mmoles), cloropiridina (10 mmoles), fluoruro de cesio (20 mmoles) y tetraquis(trifenilfosfina)paladio(0) (0,5 mmoles) en sulfóxido de dimetilo (20 ml) se calentó a 160 °C bajo una atmósfera de argón durante 16 h. La mezcla resultante se repartió con HCl 0,5 N (150 ml) y CH2G 2 (150 ml). La fase orgánica se separó, se secó sobre MgSO4, se concentró a presión reducida y se purificó por cromatografía sobre gel de sílice (3 % de acetona/CH2Cl2) dando el producto deseado como un sólido marrón pálido (20 %)
Solo uno de C se seleccionó para mostrar su espectro de RMN y masa.
Figure imgf000009_0001
2,2-Dimetil-N-(5-piridin-4-il-tiazol-2-il)-propionamida. 1H RMN (400 MHz, CDCh): 59,28 (s a, 1H), 8,61 (dd, J = 4,8, 1,6 Hz, 2H), 7,84 (s, 1H), 7,42 (dd, J = 4,8, 1,6 Hz, 2H), 1,38 (s, 9H); MS (ES+) m/z calculado. para C13H15N3OS: 261,09; encontrado: 262,1 (M+H+).
Etapa III. Síntesis del compuesto D
Una mezcla de C (5 mmoles ) y HCl 12 N (5 ml) en agua (5 ml) se calentó a reflujo durante 2 h. La mayoría del disolvente se retiró a presión reducida y el residuo se diluyó con CH3OH (15 ml). La mayoría del disolvente se retiró mediante destilación y el residuo se secó a vacío dando D clorhidrato como un sólido marrón pálido.
Una suspensión con agitación del sólido anterior en agua (30 ml) a temperatura ambiente se ajustó a pH = 7 con bicarbonato sódico y la mezcla se agitó a 50 °C durante 2 h. El precipitado se recogió por filtración y se secó a vacío dando el producto deseado D como un sólido marrón pálido (85-90 %).
Solo uno de D se seleccionó para mostrar su espectro de RMN y masa.
Figure imgf000009_0002
5-Piridin-4-il-tiazol-2-ilamina. 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6): 58,41 (dd, J= 4,8, 1,5 Hz, 2H), 7,73 (s, 1H), 7,48 (s, 2H), 7,35 (dd, J = 4,8, 1,5 Hz, 2H); MS (ES+) m/z calculado. para C8H7N3S: 177,04; encontrado: 178,1 (M+H+). Etapa IV. Síntesis del compuesto E
A una mezcla de D o 4-piridin-3-il-tiazol-2-ilamina comercialmente disponible (4 mmoles) y 4,6-dicloro-2-metilpirimidina (8 mmoles) en 1 -metil-2-pirrolidinona (20 ml) a 0 °C se añadió hidruro de sodio (60 % en aceite, 10 mmoles) y la mezcla se agitó a 0 °C bajo una atmósfera de argón durante 1 h. La reacción se inactivó con agua (100 ml) a 0 °C y se ajustó a pH = 2 con HCl 6 N. La suspensión se ajustó a pH = 7 con bicarbonato sódico y el precipitado se recogió por filtración, se lavó con agua (50 ml) y se secó a vacío. El residuo se purificó por cromatografía sobre gel de sílice (20 % de EtOAc/CH2Cl2, luego gradiente del 5 % al 10 % de MeOH/CH2Cl2) dando el producto deseado E como un sólido marrón (45-60 %).
Solo uno de E se seleccionó para mostrar su espectro de RMN y masa.
Figure imgf000010_0001
(6-Cloro-2-metil-pirimidin-4-il)-(5-piridin-4-il-tiazol-2-il)-amina. 1H RMN (300 MHz, DMSO-D6): 512,15 (s, 1H), 8,53 (dd, J = 4,5, 1,5 Hz, 2H), 8,18 (s, 1H), 7,59 (dd, J = 4,5, 1,5 Hz, 2H), 6,90 (s, 1H), 2,59 (s, 3H); m S (ES+) m/z calculado. para C13H10GN5S: 303,03; encontrado: 304,1 (M+H+).
Etapa V. Síntesis de los compuestos 1-4 y 7-13
Una mezcla del compuesto E (2 mmoles) y 1-etilpiperazina (8 mmoles) en sulfóxido de dimetilo (2 ml) se calentó a 100 °C durante 1 h. Después del enfriamiento hasta temperatura ambiente, la mezcla se diluyó con agua (50 ml). El precipitado se recogió por filtración, se lavó con agua (10 ml) y se secó a vacío. El residuo se purificó por cromatografía en óxido de aluminio (gradiente del 0,5 % al 1,5 % de MeOH/CH2Cl2) dando la base libre de cada uno de los compuestos 1-4 y 7-13 como un sólido blanquecino.
A HCl 6 N (10 ml) con agitación a 0 °C se añadió el sólido anterior y la disolución se filtró a través de una membrana de PVDF de 0,45 μm. Al filtrado con agitación se añadió acetona (40 ml) gota a gota durante el transcurso de 1 h y se agitó durante 1 h adicional a 0 °C. El precipitado se recogió por filtración, se lavó con acetona (15 ml) y se secó a vacío dando la sal de HCl de cada uno de los compuestos 1-4 y 7-13 como un sólido amarillo (90-95 %).
Sal de clorhidrato de [6-(4-etil-piperazin-1-il)-2-metil-pirimidin-4-il]-(5-piridin-4-il-tiazol-2-il)-amina (Compuesto 1). 1H RMN (400 MHz, DMSO-D6): 5 11,55 (s a, 1H), 8,72 (d, J = 5,6 Hz, 2H), 8,61 (s, 1H), 8,14 (d, J = 5,2 Hz, 2H), 6,27 (s, 1 H), 4,35 (d, J = 13,2 Hz, 2H), 3,55 (d, J= 12,0 Hz, 2H), 3,45 (t, J = 13,0 Hz, 2H), 3,13 (t, J = 5,8 Hz, 2H), 3,02 (c, J = 10,0 Hz, 2H), 2,50 (s, 3H), 1,28 (t, J= 6,8 Hz, 3H); MS (ES+) m/z calculado. para C19H23N7S: 381,17; encontrado: 382,2 (M+H+).
Sal de clorhidrato de {6-[4-(2-fluoro-etil)-piperazin-1-il]-2-metil-pirimidin-4-il}-(5-piridin-4-il-tiazol-2-il)-amina (Compuesto 2). 1H RMN (300 MHz, DMSO-D6): 511,89 (s a, 1H), 8,73 (d, J = 6,3 Hz, 2H), 8,62 (s, 1H), 8,15 (d, J = 5,7 Hz, 2H), 6,26 (s, 1H), 4,95 (d, J = 47,4 Hz, 2H), 4,38 (s, 2H, que se solapa con el pico del agua), 3,70-3,35 (m, 6H), 3.18 (s a, 2H), 2,50 (s, 3H); m S (ES+) m/z calculado. para C19H22FN7S: 399,16; encontrado: 400,1 (M+H+).
Sal de clorhidrato de 2-{4-[2-metil-6-(5-piridin-4-il-tiazol-2-ilamino)-pirimidin-4-il]-piperazin-1-il}-etanol (Compuesto 3). 1H RMN (400 MHz, DMSO-D6): 511,03 (s, 1 H), 8,73 (d, J = 7,2 Hz, 2H), 8,63 (s, 1H), 8,15 (d, J = 7,2 Hz, 2H), 6,26 (s, 1H), 4,34 (d, J = 12,4 Hz, 2H), 3,82 (t, J = 5,2 Hz, 2H), 3,62 (d, J = 12,0 Hz, 2H), 3,43 (t, J = 12,4 Hz, 2H), 3,30-3,09 (m, 4H), 2,49 (s, 3H); MS (ES+) m/z calculado. para C19H23N7OS: 397,17; encontrado: 398,1 (M+H+).
Sal de clorhidrato de [6-(4-dimetilamino-piperidin-1-il)-2-metil-pirimidin-4-il]-(5-piridin-4-il-tiazol-2-il)-amina (Compuesto 4). 1H RMN (300 MHz, DMSO-D6): 511,07 (s, 1 H), 8,73 (d, J = 6,9 Hz, 2H), 8,62 (s, 1H), 8,15 (d, J = 6,9 Hz, 2H), 6,25 (s, 1H), 4,43 (d, J = 12,9 Hz, 2H), 3,44 (quin, J = 5,2 Hz, 1H), 2,94 (t, J = 12,5 Hz, 2H), 2,69 (d, J = 4,5 Hz, 6H), 2,49 (s, 3H), 2,15 (d, J = 10,5 Hz, 2H), 1,60 (c, J = 11,0 Hz, 2H); MS (ES+) m/z calculado. para C20H25N7S: 395,19; encontrado: 396,1 (M+H+).
Sal de clorhidrato de [6-(4-etil-piperazin-1-il)-2-metil-pirimidin-4-il]-(5-piridin-3-il-tiazol-2-il)-amina (Compuesto 7). 1H RMN (400 MHz, DMSO-D6): 5 11,23 (s a, 1H), 9,15 (s, 1H), 8,68 (d, J = 5,2 Hz, 1H), 8,60 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 8.19 (s, 1H), 7,93 (t, J = 6,2 Hz, 1H), 6,21 (s, 1H), 4,35 (d, J = 14,4 Hz, 2H), 3,55 (d, J = 11,6 Hz, 2H), 3,40 (t, J = 13,2 Hz, 2H), 3,13 (t, J = 5,8 Hz, 2H), 3,01 (c, J = 6,9 Hz, 2H), 2,50 (s, 3H), 1,28 (t, J = 6,6 Hz, 3H); MS (ES+) m/z calculado. para C19H23N7S: 381,17; encontrado: 382,2 (M+H+).
Sal de clorhidrato de {6-[4-(2-fluoro-etil)-piperazin-1-il]-2-metil-pirimidin-4-il}-(5-piridin-3-il-tiazol-2-il)-amina (Compuesto 8). 1H RMN (400 MHz, DMSO-D6): 511,80 (s a, 1H), 9,16 (s, 1H), 8,68 (d, J = 5,6 Hz, 1H), 8,62 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 8,20 (s, 1 H), 7,95 (t, J = 6,8 Hz, 1 H), 6,22 (s, 1H), 4,98 (d, J = 46,8 Hz, 2H), 4,34 (s a, 2H), 3,70-3,35 (m, 6H), 3,16 (s a, 2H), 2,49 (s, 3H); MS (ES+) m/z calculado. para C19H22FN7S: 399,16; encontrado: 400,1 (M+H+). Sal de clorhidrato de 2-{4-[2-metil-6-(5-piridin-3-il-tiazol-2-ilamino)-pirimidin-4-il]-piperazin-1-il}-etanol (Compuesto 9). 1H RMN (400 MHz, DMSO-D6): 511,02 (s a, 1H), 9,18 (s, 1H), 8,69 (s, 1H), 8,64 (d, J= 7,6 Hz, 1H), 8,22 (s, 1 H), 7,96 (d, J= 5,2 Hz, 1H), 6,25 (s, 1H), 4,33 (d, J= 11,2 Hz, 2H), 3,80 (s, 1H), 3,60 (d, J= 11,6 Hz, 2H), 3,19 (s, 2H), 3,13 (s, 2H), 2,48 (s, 3H); MS (ES+) m/z calculado. para C19H23N7OS: 397,17; encontrado: 398,1 (M+H+). Sal de clorhidrato de [6-(4-dimetilamino-piperidin-1-il)-2-metil-pirimidin-4-il]-(5-piridin-3-il-tiazol-2-il)-amina (Compuesto 10). 1H RMN (400 MHz, DMSO-D6): 511,27 (s a, 1H), 9,18 (s, 1H), 8,69 (d, J = 5,2 Hz, 1H), 8,64 (d, J = 8.0 Hz, 1 H), 8,23 (s, 1H), 7,97 (t, J = 6,8 Hz, 1H), 6,36 (s a, 1H), 4,42 (d, J = 8,8 Hz, 2H), 3,43 (s a, 1 H), 2,99 (t, J = 12,4 Hz, 2H), 2,68 (s, 3H), 2,67 (s, 3H), 2,55 (s, 3H), 2,17 (d, J = 10,8 Hz, 2H), 1,64 (c, J = 9,2 Hz, 2H); MS (ES+) m/z calculado. para C20H25N7S: 395,19; encontrado: 396,2 (M+H+).
Sal de clorhidrato de [6-(4-etil-piperazin-1-il)-2-metil-pirimidin-4-il]-(5-piridin-2-il-tiazol-2-il)-amina (Compuesto 11). 1H RMN (300 MHz, DMSO-D6): 5 11,34 (s, 1H), 8,54 (d, J = 4,8 Hz, 1H), 8,32 (s, 1H), 8,01-7,96 (m, 2H), 7,40­ 7,34 (m, 1H), 6,31 (s, 1H), 4,37 (d, J = 13,2 Hz, 2H), 3,62-3,38 (m, 4H), 3,20-2,90 (m, 4H), 2,47 (s, 3H), 1,26 (t, J = 7,4 Hz, 3H); MS (ES+) m/z calculado. para C19H23N7S: 381,17; encontrado: 382,2 (M+H+).
Sal de clorhidrato de [6-(4-etil-piperazin-1-il)-2-metil-pirimidin-4-il]-(5-pirimidin-5-il-tiazol-2-il)-amina (Compuesto 12). 1H RMN (400 MHz, DMSO-D6): 511,35 (s a, 1H), 9,20-9,03 (m, 3H), 8,09 (s, 1H), 6,28 (s, 1H), 4,40 (s, 2H), 3,56 (d, J = 12,4 Hz, 2H), 3,44 (d, J = 7,4 Hz, 2H), 3,13 (s a, 2H), 3,02 (d, J = 8,0 Hz, 2H), 1,28 (s a, 3H); MS (ES+) m/z calculado. para C18H22N8S: 382,17; encontrado: 383,3 (M+H+).
Sal de clorhidrato de [6-(4-etil-piperazin-1-il)-2-metil-pirimidin-4-il]-(4-piridin-3-il-tiazol-2-il)-amina (Compuesto 13). 1H RMN (400 MHz, DMSO-D6): 511,80 (s a, 1H), 11,54 (s a, 1H), 9,28 (s, 1H), 8,94 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 8,84 (d, J = 5,2 Hz, 1H), 8,15-8,07 (m, 2H), 6,31 (s a, 2H), 4,35 (d, J = 14,0 Hz, 2H), 3,55 (d, J = 12,0 Hz, 2H), 3,45 (t, J = 13,0 Hz, 2H), 3,15-3,07 (m, 2H), 3,00 (c, J = 10,0 Hz, 2H), 2,49 (s, 3H), 1,27 (t, J = 7,4 Hz, 3H); MS (ES+) m/z calculado. para C19H23N7S: 381,17; encontrado: 382,1 (M+H+).
EJEMPLO 2: Inhibición de la actividad de FLT3
Se llevó a cabo un estudio del siguiente modo para probar ciertos compuestos preparados según el Ejemplo 1 en inhibir la actividad de FLT3.
Se expresó GST-FLT3-KDwt que contenía el dominio catalítico de la cinasa FLT3 (residuos Y567-S993) en células de insecto Sf9 transfectadas en baculovirus que contenían el plásmido pBac-PAK8-GST-FLT3-KD. Se llevó a cabo un ensayo FLT3WT Kinase-Glo en placas de 96 pocillos a 30 °C durante 4 horas para probar el compuesto en un volumen final de 50 μl que incluía los siguientes componentes: 75 ng de proteínas GST-FLT3-KDwt, HEPES 25 mM, pH 7,4, MnCl24 mM, MgCl2 10 mM, DTT 2 mM, 0,02 % de Triton X-100, 0,1 mg/ml de albúmina de suero bovino, sustrato de péptido Her2 25 μM, Na3VO40,5 mM y ATP 1 μM. Tras la incubación, se añadió 50 μl de reactivo Kinase-Glo Plus (Promega, Madison, WI, EE. UU.) a cada pocillo y la mezcla se incubó a 25 °C durante 20 min. Se transfirió una alícuota de 70 μl de cada mezcla de reacción a una placa de microtitulación negra y se midió la luminiscencia en el contador multimarca Wallac Vector 1420 (PerkinElmer, Shelton, CT, EE. UU.).
Se probaron múltiples compuestos. Inesperadamente, los compuestos 1-4 y 7-11 mostraron valores de CI50 (la concentración de un inhibidor donde la respuesta se reduce la mitad) inferiores a 100 nM.
EJEMPLO 3: Inhibición de la actividad de VEGFR2
Se llevó a cabo un estudio del siguiente modo para probar ciertos compuestos preparados según el Ejemplo 1 en inhibir la actividad de VEGFR2. Obsérvese que VEGFR2 es uno de los tres subtipos principales de VEGFr .
Se expresó GST-VEGFR2 recombinante (residuos V789-V1356) que contenía el dominio de cinasa en células de insecto Sf9. El ensayo de cinasa se llevó a cabo en placas de 96 pocillos con compuesto de prueba en un volumen final de 50 μl de reacción a 30 °C durante 120 minutos con los siguientes componentes: HEPES 25 mM pH 7,4, MgCl2 10 mM, MnCl24 mM, Na3VO40,5 mM, DTT 2 mM, 0,02 % de Triton X100, 0,01 % de BSA, ATP 1 μM, péptido poliGlu4:Tyr 2 μM, 50~100 ng de VEGFR2 recombinante. Tras la incubación, se añadió 50 μl de reactivo Kinase-Glo Plus (Promega, Madison, WI, EE. UU.) a cada pocillo y la mezcla se incubó a 25 °C durante 20 min. Se transfirió una alícuota de 70 μl de cada mezcla de reacción a una placa de microtitulación negra y se midió la luminiscencia en el contador multimarca Wallac Vector 1420 (PerkinElmer, Shelton, CT, EE. UU.).
Se probaron múltiples compuestos en el ensayo de VEGFR2. Los compuestos 1,9 y 10 mostraron inesperadamente valores de CI50 inferiores a 30 nM.
EJEMPLO 4: Inhibición de la actividad de c-Kit
Se llevó a cabo un estudio del siguiente modo para probar ciertos compuestos preparados según el Ejemplo 1 en inhibir la actividad de c-Kit.
Las proteínas recombinantes c-KIT humanas marcadas con His en el extremo amino (residuos T544-V976), expresadas en sistemas de expresión de baculovirus-células de insecto Sf9, se purificaron para el ensayo c-KIT ADP Kinase-Glo. Se llevó a cabo un ensayo c-Kit-ADP Kinase-Glo en placas de 96 pocillos a 30 °C durante 150 min con un volumen final de 10 μl, que incluye Tris 40 mM pH 7,4, MgCl220 mM, MnCb 2 mM, DTT 2 mM, 0,01 % de BSA, ATP 20 μM, péptido poli(Glu,Tyr) 4:1 20 μM, Na3VO40,1 mM, 250 ng de proteínas c-Kit recombinantes y un compuesto de prueba a la concentración indicada. Las reacciones se detuvieron mediante la adición de 5 μl de reactivo ADP-Glo™ (Promega, Madison, WI, EE. UU.) a 25 C con 40 min de incubación, seguido por 10 μl de reactivo de detección de cinasa durante 30 min adicionales. Finalmente, se transfirió una alícuota de 30 μl de cada mezcla de reacción a una placa de microtitulación negra y la luminiscencia se midió en el contador multimarca Wallac Vector 1420 (Perkin-Elmer, Shelton, CT, EE. UU.).
Se probaron múltiples compuestos. Inesperadamente, los compuestos 1-4, 7 y 11-12 mostraron valores de CI50 inferiores a 100 nM.
EJEMPLO 5: Actividad antineoplásica in vitro
Se llevó a cabo un estudio del siguiente modo para evaluar la actividad antineoplásica in vitro de ciertos compuestos preparados según el Ejemplo 1 usando estirpes celulares y ensayos de viabilidad celular de MTS (MTS representa 3-(4,5-dimetiltiazol-2-il)-5-(3-carboximetoxifenil)-2-(4-sulfofenil)-2H-tetrazolio).
Se compraron las estirpes celulares de leucemia MOLM-13, MV4:11 y Kasumin-1 de la Colección Americana de Cultivos Tipo (ATCC, Manassas, VA, EE. UU.). Se compró la estirpe celular del tumor del estroma gastrointestinal humano GIST-T1 de Cosmo Bio Co., LTD (Tokio, Japón). Todas las estirpes celulares de leucemia se mantuvieron en medio RPMI 1640 complementado con 10 % de suero bovino fetal (FBS), 10 U/ml de penicilina y 10 g/ml de estreptomicina a 37 °C y 5 % de CO2. La estirpe celular GIST-T1 se cultivó en medio DMEM complementado con 10 % de FBS, 0,01 % de aminoácidos no esenciales, 10 U/ml de penicilina y 10 g/ml de estreptomicina.
Se cultivaron células GIST882, GIST48 y GIST430 en estufas de incubación mantenidas a 37 °C y 5 % de CO2. GIST882 se cultivó en RPMI-1640 complementado con 20 % de suero bovino fetal (FBS). GIST48 se cultivó con F10 complementado con 20 % de FBS, 0,5 % de Mito, sustituto del suero (BD Bioscience, 355006) y 1 % de extracto de pituitaria bovina (BD Bioscience 354123). GIST430 se cultivó en IMDM complementado con 20 % de FBS. Las células GIST882, GIST430 y GIST48 fueron proporcionadas por el Dr. Jonathan A. Fletcher (Escuela de Medicina de Harvard, EE. UU.).
Ensayos con MTS de MOLM-13, MV4:11 y Kasumin-1
Se sembraron células en placas de cultivo de 96 pocillos a una densidad de 1x104 células/100 μl/pocillo por triplicado y se trataron durante 72 horas con una concentración indicada de compuesto de prueba que variaba desde 1 nM hasta 10 μM. Se usó el ensayo de proliferación celular Colorimetric CellTiter 96® Aqueous One Solution (ensayo de MTS; Promega, Madison, WI, EE. UU.) para determinar la citotoxicidad. La densidad óptica a 492 nm se midió usando un fotómetro de microplacas (Victor2; Perkin-Elmer, Waltham, MA, EE. UU.). Los valores de CI50 se determinaron por el ensayo de MTS cuando las células se trataron con el compuesto de prueba durante 72 horas y se calcularon con GraphPad Prism 6. Cada experimento fue por triplicado.
Ensayo con MTS de GIST-T1
Se sembraron células GIST-T1 en placas de cultivo de 96 pocillos a una densidad de 8000 células/100 μl/pocillo por triplicado y se trataron durante 72 horas con una concentración indicada de compuesto de prueba que variaba desde 1 nM hasta 10 μM. Se usó el ensayo de proliferación celular Colorimetric CellTiter 96® Aqueous One Solution (ensayo de MTS; Promega, Madison, WI, EE. UU.) para determinar la citotoxicidad. La densidad óptica a 492 nm se midió usando un fotómetro de microplacas (Victor2; Perkin-Elmer, Waltham, MA, EE. UU.). Los valores de CI50 se determinaron por el ensayo de MTS cuando las células se trataron con el compuesto de prueba durante 72 horas y se calcularon con GraphPad Prism 6. Cada experimento fue por triplicado.
Ensayos con MTS de GIST882, GIST48 y GIST430
Se trataron células GIST (4 x 104) con diferentes dosis de compuestos. Las células GIST882 tratadas se incubaron durante 144 horas y las células GIST48 y GIST430 se incubaron durante 120 horas a 37 °C en 5 % de CO2. La proliferación celular se determinó incubando las células con azul de metileno (Clontech, CA, EE. UU.) durante 1 hora. La absorbancia se midió a 450 nm usando el lector de microplacas SpectraMax M5 (Molecular Devices, EE. UU.).
Los valores de GI50 (la concentración para el 50 % de inhibición máxima de la proliferación celular) de ciertos compuestos de la fórmula (I) se muestran en la tabla que sigue:
Figure imgf000013_0001

Claims (14)

REIVINDICACIONES
1.Un compuesto de la fórmula (I) que sigue o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo:
Figure imgf000014_0001
en donde
R1 es alquilo C1-6 o tioalquilo C1-6;
X es NRa;
Y es CRbRc o NRd;
R2 es -CH2CH2Re o NRfRg; y
R3 es un heteroarilo de 6 miembros sustituido con uno o más restos (CH2)nZ independientemente,
en las que
Ra, junto con Rb, y el átomo de nitrógeno unido a Ra, y el átomo de carbono unido a Rb, es piperidinilo, o Ra, junto con Rd, los átomos de nitrógeno unidos a Ra y Rd, es piperazinilo;
Rc es H, halógeno, alquilo C1-6, alcoxilo C1-6 o amino;
Re es H, halógeno, alquilo C1-6 u ORh, siendo Rh H o alquilo C1-6;
cada uno de Rf y R9, independientemente, es alquilo C1-6 o cicloalquilo C3-8;
n es 0 o 1; y
Z es H, halógeno, CN, OH, CF3, alquilo C1-6 o alcoxilo C1-6.
2. El compuesto o sal de la reivindicación 1, en donde Y es CRbRc y R2 es NRfR8, en las que Rc es H y cada uno de Rf y R9 es alquilo C1-6, o en donde Y es NRd y R2 es -CH2CH2Re, en la que Re es H, halógeno u ORh.
3. El compuesto o sal de la reivindicación 1, en donde R3 es un heteroarilo de 6 miembros sustituido con un resto (CH2)nZ.
4. El compuesto o sal de la reivindicación 3, en donde R3 es piridilo o pirimidilo.
5. El compuesto o sal de la reivindicación 2, en donde Y es CRbRc, R2 es NRfR8 y R3 es piridilo o pirimidilo.
6.El compuesto o sal de la reivindicación 5, en donde el compuesto es
Figure imgf000014_0002
7. El compuesto o sal de la reivindicación 2, en donde Y es NRd, R2 es -CH2CH2Re y R3 es piridilo o pirimidilo.
8. El compuesto o sal de la reivindicación 7, en donde el compuesto es uno de los siguientes compuestos:
Figure imgf000014_0003
Figure imgf000015_0001
9.El compuesto o sal de la reivindicación 1, en donde el compuesto es uno de los siguientes compuestos:
Figure imgf000015_0002
10.El compuesto o sal de la reivindicación 1, en donde el compuesto es de la fórmula (II):
Figure imgf000015_0003
en la que R1 es alquilo C1-6 , o
en donde el compuesto es de la fórmula (III):
Figure imgf000016_0001
en la que R1 es alquilo C1-6.
11. Una composición farmacéutica que comprende un vehículo farmacéuticamente aceptable y un compuesto o sal de la reivindicación 1.
12. Una cantidad eficaz de un compuesto o sal de la reivindicación 1 para su uso en un método de tratamiento de cáncer asociado a una tirosina cinasa en un sujeto en necesidad del mismo.
13. La cantidad eficaz del compuesto o sal para el uso de la reivindicación 12, en donde la tirosina cinasa es tirosina cinasa 3 de tipo FMS (FLT3), tirosina cinasa 4 de tipo FMS, receptor del factor de crecimiento endotelial vascular (VEGFR), receptor del factor estimulante de colonias 1 (CSF1R), receptor del factor de crecimiento derivado de plaquetas (Pd Gf R) A, PDGFR B, proteína tirosina cinasa kit (c-KIT), c-Src (SRC), proteína tirosina cinasa Lyn (LYN) A, LYN B, reordenada durante la transfección tirosina cinasa (RET), proteína tirosina cinasa específica de linfocitos, homólogo del oncogén vírico del sarcoma felino de Gardner-Rasheed, receptor 1 del dominio de discoidina, receptor del dominio de inserción de cinasa, cinasa de linfocitos B, proteína tirosina cinasa Yes, homólogo 1 del oncogén vírico de la leucemia murina de Abelson (ABL1), tirosina cinasa receptora TRKA, TRKΒ, TRKC, ZAK/MLTK, IRAK4, RET V804L, RET Y791 F, FLT3 D835Y, PDGFR A V561D o ABL1 T315I.
14. La cantidad eficaz del compuesto o sal para el uso de la reivindicación 12 o 13, en donde el cáncer es leucemia mieloide aguda, cloroma, leucemia mielógena crónica, leucemia linfoblástica aguda, leucemia linfocítica crónica, enfermedad de Hodgkin, linfoma no hodgkiniano, linfoma de linfocitos B, mieloma múltiple, macroglobulinemia de Waldenstrom, síndrome mielodisplásico, cáncer pancreático, cáncer de vejiga, cáncer colorrectal, cáncer de mama, cáncer del aparato genital masculino, cáncer renal, cáncer hepatocelular, cáncer de pulmón, cáncer de ovario, cáncer de cuello uterino, cáncer de útero, enfermedad trofoblástica gestacional, cáncer gástrico, cáncer de las vías biliares, cáncer de vesícula biliar, cáncer de intestino delgado, cáncer de esófago, cáncer bucofaríngeo, cáncer hipofaríngeo, cáncer de ojo, cáncer de nervio, cáncer de cabeza y cuello, melanoma, plasmacitoma, neoplasia de las glándulas endocrinas, cáncer neuroendocrino, tumor cerebral, cáncer de huesos o sarcoma.
ES18817380T 2017-06-13 2018-06-13 Compuestos de aminotiazol como inhibidores de proteína cinasa Active ES2949616T3 (es)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US201762518855P 2017-06-13 2017-06-13
PCT/US2018/037221 WO2018231910A1 (en) 2017-06-13 2018-06-13 Aminothiazole compounds as protein kinase inhibitors

Publications (1)

Publication Number Publication Date
ES2949616T3 true ES2949616T3 (es) 2023-10-02

Family

ID=64562741

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
ES18817380T Active ES2949616T3 (es) 2017-06-13 2018-06-13 Compuestos de aminotiazol como inhibidores de proteína cinasa

Country Status (13)

Country Link
US (1) US10300061B2 (es)
EP (1) EP3638237B1 (es)
JP (1) JP6979595B2 (es)
KR (1) KR102372288B1 (es)
CN (1) CN110831596B (es)
AU (1) AU2018284249B2 (es)
CA (1) CA3064081C (es)
ES (1) ES2949616T3 (es)
MX (1) MX393992B (es)
MY (1) MY201291A (es)
TW (1) TWI667236B (es)
WO (1) WO2018231910A1 (es)
ZA (1) ZA202000107B (es)

Families Citing this family (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN112469414A (zh) 2018-05-25 2021-03-09 昂科库博疗法有限责任公司 作为新型候选抗癌药物的高效力tacc3抑制剂
CN115279754A (zh) * 2019-11-14 2022-11-01 A2A制药有限公司 靶向tacc3的异恶唑衍生物作为抗癌剂
US20230131830A1 (en) * 2020-03-06 2023-04-27 National Health Research Institutes Pyrimidine compounds and their pharmaceutical uses
US11299489B1 (en) 2020-11-19 2022-04-12 National Health Research Institutes Thiazole compounds as protein kinase inhibitors
KR20240005751A (ko) * 2021-04-12 2024-01-12 에이2에이 파마수티칼스, 잉크. 암 치료를 위한 조성물 및 방법
EP4499625A4 (en) 2022-03-24 2026-03-18 A2A Pharmaceuticals Inc CANCER COMPOSITIONS AND TREATMENT METHODS

Family Cites Families (11)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CA2503715A1 (en) * 2002-10-30 2004-05-21 Merck & Co., Inc. Kinase inhibitors
WO2006106437A2 (en) 2005-04-04 2006-10-12 Ab Science Substituted oxazole derivatives and their use as tyrosine kinase inhibitors
EP1893607A4 (en) * 2005-06-09 2010-07-21 Merck Sharp & Dohme CHECKPOINT KINASE INHIBITORS
GB0610909D0 (en) 2006-06-05 2006-07-12 Merck Sharp & Dohme Therapeutic treatment
AU2007296743B2 (en) 2006-09-11 2012-02-16 Curis, Inc. Tyrosine kinase inhibitors containing a zinc binding moiety
TW200906825A (en) * 2007-05-30 2009-02-16 Scripps Research Inst Inhibitors of protein kinases
US9255072B2 (en) * 2011-03-04 2016-02-09 National Health Rsearch Institutes Pyrazole compounds and thiazole compounds as protein kinases inhibitors
CN103717591B (zh) 2011-07-27 2016-08-24 Ab科学有限公司 作为选择性蛋白激酶(c-kit)抑制剂的噁唑和噻唑衍生物
WO2013143466A1 (zh) * 2012-03-27 2013-10-03 广东东阳光药业有限公司 作为欧若拉激酶抑制剂的取代嘧啶衍生物
CN106279143A (zh) * 2015-05-11 2017-01-04 天津国际生物医药联合研究院 噻唑杂环类化合物及其制备方法和应用
WO2018106643A1 (en) 2016-12-06 2018-06-14 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Heterocyclic azoles for the treatment of demyelinating diseases

Also Published As

Publication number Publication date
MX2019014845A (es) 2020-08-06
MX393992B (es) 2025-03-24
KR102372288B1 (ko) 2022-03-08
EP3638237B1 (en) 2023-04-19
RU2019137573A3 (es) 2021-07-23
MY201291A (en) 2024-02-15
CN110831596A (zh) 2020-02-21
US20180353509A1 (en) 2018-12-13
AU2018284249A1 (en) 2019-12-12
BR112019026577A2 (pt) 2020-06-23
TWI667236B (zh) 2019-08-01
NZ759327A (en) 2021-08-27
CA3064081A1 (en) 2018-12-20
BR112019026577A8 (pt) 2023-04-11
US10300061B2 (en) 2019-05-28
EP3638237A1 (en) 2020-04-22
JP6979595B2 (ja) 2021-12-15
TW201906836A (zh) 2019-02-16
AU2018284249B2 (en) 2021-06-24
ZA202000107B (en) 2020-12-23
KR20200014350A (ko) 2020-02-10
WO2018231910A1 (en) 2018-12-20
JP2020523348A (ja) 2020-08-06
EP3638237A4 (en) 2021-01-13
CA3064081C (en) 2023-03-21
RU2019137573A (ru) 2021-05-24
CN110831596B (zh) 2025-01-24

Similar Documents

Publication Publication Date Title
ES2949616T3 (es) Compuestos de aminotiazol como inhibidores de proteína cinasa
ES2909612T3 (es) Compuestos de aminotiazol y uso de los mismos
BR112012010085B1 (pt) composto, quantidade terapeuticamente eficaz de um composto, formulação farmacêutica
CN110772638A (zh) Fak/alk/ros1抑制剂与egfr抑制剂的组合治疗癌症的方法
ES2663237T3 (es) Profármacos del inhibidor de la quinasa amino quinazolina
BR112021005750A2 (pt) inibidor de fgfr4 e uso do mesmo
KR20230026445A (ko) 산화아릴인 화합물 및 이의 용도
AU2026201586A1 (en) Crystalline polymorphs of a 1-thiazol-2-yl-pyrazole-5-carboxylic acid derivative
CN112313213A (zh) 3-氨基吡唑类化合物及其应用
AU2022312332A1 (en) Novel pyrimidine-2,4-diamine derivatives, preparation method therefor, and pharmaceutical composition containing same as active ingredient for prevention or treatment of cancer
KR102568168B1 (ko) 신규한 피리미딘-2,4-디아민 유도체, 이의 제조방법 및 이를 유효성분으로 포함하는 암의 예방 또는 치료용 약학적 조성물
RU2772645C2 (ru) Аминотиазольные соединения в качестве ингибиторов протеинкиназ
TWI750905B (zh) 噻唑化合物作為蛋白質激酶抑制劑
BR112019026577B1 (pt) Compostos aminotiazol, composição farmacêutica e uso como inibidores de proteína quinase e no tratamento de câncer
US11299489B1 (en) Thiazole compounds as protein kinase inhibitors
NZ759327B2 (en) Aminothiazole compounds as protein kinase inhibitors
AU2022321449B2 (en) Pyrimidine-4,6-diamine derivative, a preparation method therefor, and a pharmaceutical application thereof
HK40017909B (zh) 作为蛋白激酶抑制剂的氨基噻唑化合物
HK40017909A (en) Aminothiazole compounds as protein kinase inhibitors
KR20160042306A (ko) 4-(1-퍼롤-3,4-디카르복시아미드)피리미딘 유도체, 이의 제조방법 및 이를 유효성분으로 함유하는 암의 예방 또는 치료용 약학적 조성물