ES2962498T3 - Métodos que implican el inhibidor de elastasa de neutrófilos alvelestat para el tratamiento de enfermedades respiratorias mediadas por deficiencia de alfa-1 antitripsina - Google Patents

Abstract

La presente invención describe una forma de dosificación y un régimen de dosificación de 6-metil-5-(1-metil-1H-pirazol-5-il)-N-{[5-(metilsulfonil)piridin-2-il]metil}-2. -oxo-1-[3-(trifluorometil)fenil]-1,2-dihidropiridin-3-carboxamida (es decir, alvelestat) o sales de la misma, y métodos relacionados para usar la forma de dosificación y el régimen de dosificación. (Traducción automática con Google Translate, sin valor legal)

Description

DESCRIPCIÓN

Métodos que implican el inhibidor de elastasa de neutrófilos alvelestat para el tratamiento de enfermedades respiratorias mediadas por deficiencia de alfa-1 antitripsina

CAMPO DE LA INVENCIÓN

[0001]La presente invención, que se define en las reivindicaciones, se refiere a 6-metil-5-(1-metil-1H-pirazol-5-il)-N-{[5-(metilsulfonil)piridin-2-il]metil}-2-oxo-1-[3-(trifluorometil)fenil]-1 ,2-dihidropiridin-3-carboxamida y sales de la misma para su uso en un método de tratamiento de una enfermedad del sistema respiratorio mediada por deficiencia de a-1 antitripsina, en la que la enfermedad se selecciona entre enfermedad pulmonar obstructiva crónica (COPD), enfisema, asma y bronquiectasia, en un paciente que la necesite y que no haya respondido a una terapia previa con alfa-1 antitripsina (AAT).

FONDO DE LA INVENCIÓN

[0002]Las elastasas son posiblemente las enzimas más destructivas del organismo, ya que tienen la capacidad de degradar prácticamente todos los componentes del tejido conjuntivo.

[0003]La elastasa de neutrófilos humanos (hNE), miembro de la superfamilia de la quimotripsina de las proteasas de serina, es una enzima de 33-KDa almacenada en los gránulos azurófilos de los neutrófilos. En los neutrófilos, la concentración de NE (elastasa de neutrófilos) supera los 5 mM y su cantidad celular total se ha estimado en hasta 3 pg. Tras la activación, la NE se libera rápidamente de los gránulos al espacio extracelular (véase Kawabat et al. 2002, Eur. J. Pharmacol. 451,1-10). La principal función fisiológica intracelular de la NE es la degradación de moléculas orgánicas extrañas fagocitadas por los neutrófilos, mientras que el principal objetivo de la elastasa extracelular es la elastina (Janoff y Scherer, 1968, J. Exp. Med. 128, 1137-1155). La NE es única, en comparación con otras proteasas (por ejemplo, la proteinasa 3), ya que tiene la capacidad de degradar casi toda la matriz extracelular y las proteínas plasmáticas clave (véase Kawabat et al. , 2002, Eur. J. Pharmacol. 451,1-10), incluida la elastina, los colágenos de tipo 3 y 4, la laminina, la fibronectina, las citocinas, etc. (Ohbayashi, H., 2002, Expert Opin. Investig. Drugs, 11, 965-980). La NE es un importante mediador común de muchos cambios patológicos observados en las enfermedades pulmonares crónicas (Stockley, R. A.

1994, Am. J. Resp. Crit. Care Med. 150,109-113).

[0004]El papel destructivo de la NE se consolidó hace casi 40 años cuando Laurell y Eriksson informaron de una asociación de obstrucción crónica del flujo aéreo y enfisema con deficiencia de a1-antitripsina sérica (Laurell y Eriksson, 1963, Scand. J. Clin. Invest. 15,132-140), que resultó ser el inhibidor endógeno más importante de la NE. Se cree que el desequilibrio entre la NE y la antiproteasa endógena provoca un exceso de NE en los tejidos pulmonares, lo que se considera un factor patogénico importante en la enfermedad pulmonar obstructiva crónica (COPD). El exceso de NE destruye las estructuras pulmonares normales, seguido de la ampliación irreversible de los espacios aéreos respiratorios, como se observa principalmente en el enfisema. Se produce un aumento del reclutamiento de neutrófilos en los pulmones que se asocia con un aumento de la carga de elastasa pulmonar y enfisema en ratones deficientes en el inhibidor de a1-proteinasa (Cavarra et al., 1996, Lab. Invest. 75, 273-280). Los individuos con niveles más elevados del complejo inhibidor de la proteasa NE-a1 en el líquido de lavado broncoalveolar muestran una disminución significativamente acelerada de las funciones pulmonares en comparación con aquellos con niveles más bajos (Betsuyaku et al. 2000, Respiration, 67,261 267). La instilación de NE a través de la tráquea en ratas provoca hemorragia pulmonar, acumulación de neutrófilos durante la fase aguda y cambios enfisematosos durante la fase crónica (Karaki et al., 2002, Am. J. Resp. Crit. Care Med., 166, 496-500). Los estudios han demostrado que la fase aguda del enfisema pulmonar y la hemorragia pulmonar causada por la NE en hámsters puede inhibirse mediante el pretratamiento con inhibidores de la NE (Fujie et al., 1999, Inflamm. Res. 48,160-167).

[0005]La lesión pulmonar aguda causada por la endotoxina en animales de experimentación se asocia a niveles elevados de NE (Kawabata, et al., 1999, Am. J. Resp. Crit. Care, 161,2013-2018). Se ha demostrado que la inflamación pulmonar aguda causada por la inyección intratraqueal de lipopolisacárido en ratones eleva la actividad de la NE en el líquido de lavado broncoalveolar, que se inhibe significativamente con un inhibidor de la NE (Fujie et al. , 1999, Eur. J. Pharmacol., 374,117-125; Yasui, et al. , 1995, Eur. Resp. J. , 8,1293-1299). La NE también desempeña un papel importante en el aumento de la permeabilidad microvascular pulmonar inducido por neutrófilos observado en un modelo de lesión pulmonar aguda causado por el factor de necrosis tumoral < x (TNFce) y el acetato de forbol miristato (PMA) en pulmones de conejo perfundidos aislados (Miyazaki et al. , 1998, Am. J. Respir. Crit. Care Med., 157, 89-94).

[0006]La NE se ha implicado en la promoción o exacerbación de una serie de enfermedades como el enfisema pulmonar, la fibrosis pulmonar, el síndrome de dificultad respiratoria del adulto (SDRA), la lesión por isquemia de reperfusión, la artritis reumatoide y la hipertensión pulmonar.

[0007]La presente invención divulga formas farmacéuticas y regímenes de dosificación de derivados de 2-piridiona que son inhibidores de NE y serina proteasas homólogas tales como proteinasa 3 y elastasa pancreática, y por lo tanto son útiles en terapia.

[0008]WO 2005/026123 enseña una clase de inhibidores de NE que son útiles en terapia. El documento WO 2005/026123 divulga además un compuesto inhibidor específico de NE identificado en el mismo como 6-metil-5-(1-metil-1H-pirazol-5-il)-N-{[5-(metilsulfonil)piridin-2-il]metil}-2-oxo-1-[3-(trifluorometil)fenil]-1,2-dihidropiridin-3-carboxamida y sales del mismo (Ejemplo 94, página 85). Este compuesto se designa en el presente documento como compuesto (I). El compuesto (I) también se conoce como alvelestat, AZD9668 o MPH966.

[0009]De forma similar, el documento WO 2010/094964 enseña formas de sal del compuesto (I), como se ha mostrado anteriormente con respecto al documento WO 2005/026123. En este documento se informa de que el compuesto (I) se administra en una cantidad diaria máxima de 200 mg al día.

[0010]El compuesto (I) puede ser útil en el tratamiento de enfermedades del tracto/sistema respiratorio tales como enfermedades obstructivas de las vías respiratorias, incluyendo: asma, incluyendo asma bronquial, alérgica, intrínseca, extrínseca, inducida por el ejercicio, inducida por fármacos (incluyendo asma inducida por aspirina y NSAID) e inducida por polvo, tanto intermitente como persistente y de toda gravedad, y otras causas de hiperreactividad de las vías respiratorias; enfermedad pulmonar obstructiva crónica (COPD); bronquitis, incluyendo bronquitis infecciosa y eosinofílica; enfisema; bronquiectasias; fibrosis quística; sarcoidosis; pulmón de granjero y enfermedades afines; neumonitis por hipersensibilidad; síndrome de distrés respiratorio del adulto (SDRA); fibrosis pulmonar, incluidas la alveolitis fibrosante criptogénica, las neumonías intersticiales idiopáticas, la fibrosis que complica el tratamiento antineoplásico y la infección crónica, incluidas la tuberculosis y la aspergilosis y otras infecciones fúngicas; complicaciones del trasplante de pulmón; actividad antitusiva, incluido el tratamiento de la tos crónica asociada a afecciones inflamatorias y secretoras de las vías respiratorias, y la tos iatrogénica; rinitis aguda y crónica, incluida la rinitis medicamentosa, y rinitis vasomotora; rinitis alérgica perenne y estacional, incluida la rinitis nerviosa (fiebre del heno); poliposis nasal; infección vírica aguda, incluido el resfriado común, la hipertensión pulmonar y la infección debida al virus respiratorio sincitial, la gripe, el coronavirus (incluido el SARS) y el adenovirus.

[0011]Existe una necesidad significativa de evitar la activación inicial de NE. Una vez que se ha producido la activación, la cascada inflamatoria que sigue puede causar daños irreversibles, y en sí misma es difícil de revertir. Por lo tanto, la presente invención pretende proporcionar una inhibición de la NE altamente eficaz, mediante regímenes de dosis de 6-metil-5-(1-metil-1H-pirazol-5-il)-N-{[5-(metilsulfonil)piridin-2-il]metil}-2-oxo-1-[3-(trifluorometil)fenil]-1,2-dihidropiridina-3-carboxamida y sus sales, que alcanzan y mantienen niveles sanguíneos iguales o superiores a los necesarios para inhibir la NE durante todo el periodo de dosificación y, en particular, impiden la activación inicial de la NE.

[0012]El documento WO 2016/016364 se refiere a dihidropirimidinonas bicíclicas sustituidas y a su uso como inhibidores de la actividad de la elastasa de neutrófilos, a composiciones farmacéuticas que las contienen y a métodos de uso de las mismas como agentes para el tratamiento y/o la prevención de enfermedades pulmonares, gastrointestinales y genitourinarias, enfermedades inflamatorias de la piel y el ojo y otros trastornos autoinmunes y alérgicos, rechazo de aloinjertos y enfermedades oncológicas.

[0013]"Alvelestat (MPH966) for the Treatment of ALpha-1 ANTitrypsin Deficiency", 21 de septiembre de 2018, ClinicalTrials.gov archive, XP055810968, describe un estudio para evaluar alvelestat por su seguridad y tolerabilidad, así como el efecto mecanicista de la administración oral de alvelestat en sujetos con AATD confirmada definida como Pi*ZZ, Pi*SZ, Pi*null, u otro fenotipo/genotipo raro conocido por estar asociado con un nivel bajo (nivel sérico de AAT <11 pM o <57.2 mg/dL) o AAT funcionalmente alterada, incluyendo mutaciones "F" o "I".

[0014]Nussbaum et al (Neutrophil elastase inhibitors for the treatment of (cardio)pulmonary diseases: Into clinical testing with pre-adaptive pharmacophores, Bioorganic & Medicinal Chemistry Letters, Volume 25, Emisión 20,2015, Páginas 4370-4381, ISSN 0960-894X, https://doi.org/10.1016/j.bmcl.2015.08.049) revisa el desarrollo de inhibidores eficaces de la elastasa de neutrófilos humanos, centrándose en los últimos avances.

[0015]El documento WO 2010/094964 se refiere al 6-metil-5-(1-metil-1H-pirazol-5-il)-N-{[5-(metilsulfonil)piridin-2-il]metil }-2-oxo-1-[3-(trifluorometil)fenil]-1,2-dihidropiridin-3-carboxamida 4-metilbencenosulfonato y a una forma cristalina del mismo, junto con procesos para preparar dicha sal y forma, composiciones farmacéuticas que comprenden dicha forma, y el uso de dicha sal y forma en terapia.

RESUMEN DE LA INVENCIÓN

[0016]La presente invención se define mediante las reivindicaciones. En un aspecto, la invención proporciona alvelestat o una sal del mismo para su uso en un método de tratamiento de una enfermedad del sistema respiratorio mediada por deficiencia de a-1 antitripsina, en el que la enfermedad se selecciona entre enfermedad pulmonar obstructiva crónica (COPD), enfisema, asma y bronquiectasia, en un paciente que lo necesita y que no ha respondido a una terapia previa con alfa-1 antitripsina (AAT), el método comprende administrar una cantidad eficaz de alvelestat o una sal del mismo al paciente, y en el que la cantidad de alvelestat o una sal del mismo administrada es de 120-300 mg BID.

[0017]En la invención puede utilizarse una forma farmacéutica sólida que comprende 120-300 mg de 6-metil-5-(1-metil-1H-pirazol-5-il)-N-{[5-(metilsulfonil)piridin-2-il]metil}-2-oxo-1-[3-(trifluorometil)fenil]-1,2-dihidropiridin-3-carboxamida o una sal de la misma.

[0018]En la invención puede utilizarse una forma farmacéutica sólida que comprende 220-300 mg de 6-metil-5-(1-metil-1H-pirazol-5-il)-N-{[5-(metilsulfonil)piridin-2-il]metil}-2-oxo-1-[3-(trifluorometil)fenil]-1,2-dihidropiridin-3-carboxamida o una sal de la misma.

[0019]En la invención puede utilizarse una(s) forma(s) farmacéutica(s) sólida(s) única(s) o múltiple(s) para la administración oral de 6-metil-5-(1-metil-1H-pirazol-5-il)-N-{[5-(metilsulfonil)piridin-2-il]metil}-2-oxo-1-[3-(trifluorometil)fenil]-1,2-dihidropiridin-3-carboxamida o una sal de la misma, para el tratamiento de una enfermedad del sistema respiratorio mediada por la deficiencia de a-1 antitripsina, que comprende un total de 120-300 mg de 6-metil-5-(I-metil-1H-pirazol-5-il)-N-{[5-(metilsulfonil)piridin-2-il]metil}-2-oxo-1-[3-(trifluorometil)fenil]-1,2-dihidropiridin-3-carboxamida o una sal de la misma por administración.

[0020]En la invención puede utilizarse una(s) forma(s) farmacéutica(s) sólida(s) única(s) o múltiple(s) para la administración oral de 6-metil-5-(1-metil-1H-pirazol-5-il)-N-{[5-(metilsulfonil)piridin-2-il]metil}-2-oxo-1-[3-(trifluorometil)fenil]-1,2-dihidropiridin-3-carboxamida o una sal de la misma, para el tratamiento de una enfermedad del sistema respiratorio mediada por la deficiencia de a-1 antitripsina, que comprende un total de 220-300 mg de 6-metil-5-(I-metil-1H-pirazol-5-il)-N-{[5-(metilsulfonil)piridin-2-il]metil}-2-oxo-1-[3-(trifluorometil)fenil]-1,2-dihidropiridin-3-carboxamida o una sal de la misma por administración.

[0021]En la invención puede usarse una(s) forma(s) farmacéutica(s) sólida(s) única(s) o múltiple(s) para la administración oral de 6-metil-5-(1-metil-1H-pirazol-5-il)-N-{[5-(metilsulfonil)piridin-2-il]metil}-2-oxo-1-[3-(trifluorometil)fenil]-1,2-dihidropiridina-3-carboxamida o una sal de la misma, para el tratamiento de una enfermedad del sistema respiratorio mediada por deficiencia de a-1 antitripsina, dicha(s) forma(s) farmacéutica(s) sólida(s) única(s) o múltiple(s) comprende(n) un total de 120-300 mg de 6-metil-5-(I-metil-1H-pirazol-5-il)-N-{[5-(metilsulfonil)piridin-2-il]metil}-2-oxo-1-[3-(trifluorometil)fenil]-1,2-dihidropiridin-3-carboxamida o una sal de la misma por administración, y en la que la administración de cada dosis tiene lugar dos veces al día, con al menos 8 horas entre administraciones.

[0022]En la invención puede usarse una(s) forma(s) farmacéutica(s) sólida(s) única(s) o múltiple(s) para la administración oral de 6-metil-5-(I-metil-1H-pirazol-5-il)-N-{[5-(metilsulfonil)piridin-2-il]metil}-2-oxo-1-[3-(trifluorometil)fenil]-1.,2-dihidropiridina-3-carboxamida o una sal de la misma, para el tratamiento de una enfermedad del sistema respiratorio mediada por deficiencia de a-1 antitripsina, dicha(s) forma(s) farmacéutica(s) sólida(s) única(s) o múltiple(s) comprende(n) un total de 220-300 mg de 6-metil-5-(1-metil-1H-pirazol-5-il)-N-{[5-(metilsulfonil)piridin-2-il]metil}-2-oxo-1-[3-(trifluorometil)fenil]-1,2-dihidropiridin-3-carboxamida o una sal de la misma por administración, y en la que la administración de cada dosis tiene lugar dos veces al día, con al menos 8 horas entre administraciones.

[0023]En la invención puede usarse un kit, que comprende una pluralidad de formas farmacéuticas sólidas para administración oral de 6-metil-5-(1-metil-1H-pirazol-5-il)-N-{[5-(metilsulfonil)piridin-2-il]metil}-2-oxo-1-[3-(trifluorometil)fenil]-1.[2-dihidropiridina-3-carboxamida o sal de la misma,2-dihidropiridin-3-carboxamida o una sal de la misma, conteniendo dicho kit instrucciones para administrar secuencialmente un total de 120-300 mg de dicha 6-metil-5-(1-metil-1H-pirazol-5-il)-N-{[5-(metilsulfonil)piridin-2-il]metil}-2-oxo-1-[3-(trifluorometil)fenil]-1,2-dihidropiridina-3-carboxamida o una sal de la misma por administración, y en la que la administración de cada dosis tiene lugar dos veces al día, con al menos 8 horas entre administraciones, para el tratamiento de una enfermedad del sistema respiratorio mediada por deficiencia de a-1 antitripsina.

[0024]En la invención puede usarse un kit, que comprende una pluralidad de formas farmacéuticas sólidas para administración oral de 6-metil-5-(1-metil-1H-pirazol-5-il)-N-{[5-(metilsulfonil)piridin-2-il]metil}-2-oxo-1-[3-(trifluorometil)fenil]-1.[2-dihidropiridina-3-carboxamida o sal de la misma,2-dihidropiridin-3-carboxamida o una sal de la misma, conteniendo dicho kit instrucciones para administrar secuencialmente un total de 220-300 mg de dicha 6-metil-5-(1-metil-1H-pirazol-5-il)-N-{[5-(metilsulfonil)piridin-2-il]metil}-2-oxo-1-[3-(trifluorometil)fenil]-1,2-dihidropiridina-3-carboxamida o una sal de la misma por administración, y en la que la administración de cada dosis tiene lugar dos veces al día, con al menos 8 horas entre administraciones, para el tratamiento de una enfermedad del sistema respiratorio mediada por deficiencia de a-1 antitripsina.

[0025]En la invención puede usarse un kit, que comprende una pluralidad de formas farmacéuticas sólidas para administración oral, cada forma farmacéutica que comprende 120-300 mg de 6-metil-5-(1-metil-1H-pirazol-5-il)-N-{[5(metilsulfonil)piridin-2-il]metil}-2-oxo-1-[3-(trifluorometil)fenil]-1.,2-dihidropiridina-3-carboxamida o una sal de la misma, dicho kit contiene instrucciones para la administración secuencial, dos veces al día, de cada dosis, para el tratamiento de una enfermedad del sistema respiratorio mediada por la deficiencia de a-1 antitripsina.

[0026]En la invención puede usarse un kit, que comprende una pluralidad de formas farmacéuticas sólidas para administración oral, cada forma farmacéutica que comprende 220-300 mg de 6-metil-5-(1-metil-1H-pirazol-5-il)-N-{[5-(metilsulfonil)piridin-2-il]metil}-2-oxo-1-[3-(trifluorometil)fenil]-1.,2-dihidropiridina-3-carboxamida o una sal de la misma, dicho kit contiene instrucciones para la administración secuencial, dos veces al día, de cada dosis, para el tratamiento de una enfermedad del sistema respiratorio mediada por la deficiencia de a-1 antitripsina.

[0027]La invención puede usarse para tratar una enfermedad del sistema respiratorio mediada por deficiencia de a-1 antitripsina, que comprende la administración oral dos veces al día de una(s) forma(s) farmacéutica(s) sólida(s) única(s) o múltiple(s), dicha(s) forma(s) farmacéutica(s) sólida(s) única(s) o múltiple(s) que comprende(n) un total de 120-300 mg de 6-metil-5-(1-metil-1H-pirazol-5-il)-N-{[5-(metilsulfonil)piridin-2-il]metil}-2-oxo-1-[3-(trifluorometil)fenil]-1,2-dihidropiridina-3-carboxamida o una sal de la misma por administración, a un paciente humano que padezca una enfermedad del sistema respiratorio mediada por deficiencia de a-1 antitripsina.

[0028]La invención puede usarse para tratar una enfermedad del sistema respiratorio mediada por deficiencia de a-1 antitripsina, que comprende la administración oral dos veces al día de una(s) forma(s) farmacéutica(s) sólida(s) única(s) o múltiple(s), dicha(s) forma(s) farmacéutica(s) sólida(s) única(s) o múltiple(s) comprende(n) un total de 220-300 mg de 6-metil-5-(1-metil-1H-pirazol-5-il)-N-{[5-(metilsulfonil)piridin-2-il]metil}-2-oxo-1 -[3-(trifluorometil)fenil]-1,2-dihidropiridina-3-carboxamida o una sal de la misma por administración, a un paciente humano que padezca una enfermedad del sistema respiratorio mediada por deficiencia de a-1 antitripsina.

[0029]En la invención puede utilizarse una(s) forma(s) farmacéutica(s) sólida(s) única(s) o múltiple(s) para la administración oral de 6-metil-5-(1-metil-1H-pirazol-5-il)-N-{[5-(metilsulfonil)piridin-2-il]metil}-2-oxo-1-[3-(trifluorometil)fenil]-1,2-dihidropiridin-3-carboxamida o una sal de la misma, para el tratamiento de la COPD (Enfermedad Pulmonar Obstructiva Crónica), comprendiendo dicha(s) forma(s) farmacéutica(s) sólida(s) única(s) o múltiple(s) un total de 120-300 mg de 6-metil-5-(1-metil-1H-pirazol-5-il)-N-{[5-(metilsulfonil)piridin-2-il]metil}-2-oxo-1-[3-(trifluorometil)fenil]-1.2- dihidropiridin-3-carboxamida o una sal de la misma por administración.

[0030]En la invención puede utilizarse una(s) forma(s) farmacéutica(s) sólida(s) única(s) o múltiple(s) para la administración oral de 6-metil-5-(1-metil-1H-pirazol-5-il)-N-{[5-(metilsulfonil)piridin-2-il]metil}-2-oxo-1-[3-(trifluorometil)fenil]-1,2-dihidropiridin-3-carboxamida o una sal de la misma, para el tratamiento de la COPD (Enfermedad Pulmonar Obstructiva Crónica), comprendiendo dicha(s) forma(s) farmacéutica(s) sólida(s) única(s) o múltiple(s) un total de 220-300 mg de 6-metil-5-(1-metil-1H-pirazol-5-il)-N-{[5-(metilsulfonil)piridin-2-il]metil}-2-oxo-1-[3-(trifluorometil)fenil]-1.2- dihidropiridin-3-carboxamida o una sal de la misma por administración.

[0031]En la invención puede utilizarse una(s) forma(s) farmacéutica(s) sólida(s) única(s) o múltiple(s) para la administración oral de 6-metil-5-(1-metil-1H-pirazol-5-il)-N-{[5-(metilsulfonil)piridin-2-il]metil}-2-oxo-1-[3-(trifluorometil)fenil]-1,2-dihidropiridin-3-carboxamida o una sal de la misma, para el tratamiento de la COPD (enfermedad pulmonar obstructiva crónica), dicha(s) forma(s) farmacéutica(s) sólida(s) única(s) o múltiple(s) comprende(n) un total de 120-300 mg de 6-metil-5-(1-metil-1H-pirazol-5-il)-N-{[5-(metilsulfonil)piridin-2-il]metil}-2-oxo-1-[3-(trifluorometil)fenil]-1,2-dihidropiridin-3-carboxamida o una sal de la misma por administración, y en la que la administración de cada dosis tiene lugar dos veces al día, con al menos 8 horas entre administraciones.

[0032]En la invención puede utilizarse una(s) forma(s) farmacéutica(s) sólida(s) única(s) o múltiple(s) para la administración oral de 6-metil-5-(1-metil-1H-pirazol-5-il)-N-{[5-(metilsulfonil)piridin-2-il]metil}-2-oxo-1-[3-(trifluorometil)fenil]-1,2-dihidropiridin-3-carboxamida o una sal de la misma, para el tratamiento de la COPD (enfermedad pulmonar obstructiva crónica), dicha(s) forma(s) farmacéutica(s) sólida(s) única(s) o múltiple(s) comprende(n) un total de 220-300 mg de 6-metil-5-(1-metil-1H-pirazol-5-il)-N-{[5-(metilsulfonil)piridin-2-il]metil}-2-oxo-1-[3-(trifluorometil)fenil]-1,2-dihidropiridin-3-carboxamida o una sal de la misma por administración, y en la que la administración de cada dosis tiene lugar dos veces al día, con al menos 8 horas entre administraciones.

[0033]En la invención puede utilizarse un kit que comprende una pluralidad de formas farmacéuticas ólidas para la administración oral de 6-metil-5-(1-metil-1H-pirazol-5-il)-N-{[5-(metilsulfonil)piridin-2-il]metil}-2-oxo-1-[3-(trifluorometil)fenil]-1,2-dihidropiridin-3-carboxamida o una sal de la misma, dicho kit contiene instrucciones para administrar secuencialmente un total de 120-300 mg de dicha 6-metil-5-(1-metil-1H-pirazol-5-il)-N-{[5-(metilsulfonil)piridin-2-il]metil}-2-oxo-1-[3-(trifluorometil)fenil]-1,2-dihidropiridina-3-carboxamida o una sal de la misma por administración, y en la que la administración de cada dosis tiene lugar dos veces al día, con al menos 8 horas entre administraciones, para el tratamiento de la COPD (Enfermedad Pulmonar Obstructiva Crónica).

[0034]En la invención puede utilizarse un kit que comprende una pluralidad de formas farmacéuticas ólidas para la administración oral de 6-metil-5-(1-metil-1H-pirazol-5-il)-N-{[5-(metilsulfonil)piridin-2-il]metil}-2-oxo-1-[3-(trifluorometil)fenil]-1,2-dihidropiridin-3-carboxamida o una sal de la misma, dicho kit contiene instrucciones para administrar secuencialmente un total de 220-300 mg de dicha 6-metil-5-(1-metil-1H-pirazol-5-il)-N-{[5-(metilsulfonil)piridin2-il]metil}-2-oxo-1-[3-(trifluorometil)fenil]-1,2-dihidropiridina-3-carboxamida o una sal de la misma por administración, y en la que la administración de cada dosis tiene lugar dos veces al día, con al menos 8 horas entre administraciones, para el tratamiento de la COPD (Enfermedad Pulmonar Obstructiva Crónica).

[0035] En la invención puede usarse un kit que comprende una pluralidad de formas farmacéuticas sólidas para administración oral, cada forma farmacéutica que comprende 120-300 mg de 6-metil-5-(1-metil-1H-pirazol-5-il)-N-{[5-(metilsulfonil)piridin-2-il]metil}-2-oxo-1-[3-(trifluorometil)fenil]-1.,2-dihidropiridina-3-carboxamida o una sal de la misma, conteniendo dicho kit instrucciones para la administración secuencial, dos veces al día, de cada dosis, para el tratamiento de la COPD (Enfermedad Pulmonar Obstructiva Crónica).

[0036] En la invención puede usarse un kit que comprende una pluralidad de formas farmacéuticas sólidas para administración oral, cada forma farmacéutica que comprende 220-300 mg de 6-metil-5-(1-metil-1H-pirazol-5-il)-N-{[5-(metilsulfonil)piridin-2-il]metil}-2-oxo-1-[3-(trifluorometil)fenil]-1.,2-dihidropiridina-3-carboxamida o una sal de la misma, conteniendo dicho kit instrucciones para la administración secuencial, dos veces al día, de cada dosis, para el tratamiento de la COPD (Enfermedad Pulmonar Obstructiva Crónica).

[0037] La invención puede utilizarse para tratar la COPD (enfermedad pulmonar obstructiva crónica), comprendiendo la administración oral dos veces al día de una(s) forma(s) farmacéutica(s) sólida(s) única(s) o múltiple(s), dicha(s) forma(s) farmacéutica(s) sólida(s) única(s) o múltiple(s) que comprende(n) un total de 120-300 mg de 6-metil-5-(1-metil-1H-pirazol-5-il)-N-{[5-(metilsulfonil)piridin-2-il]metil}-2-oxo-1-[3-(trifluorometil)fenil]-1,2-dihidropiridin-3-carboxamida o una sal de la misma por administración, a un paciente humano que padece COPD.

[0038] La invención puede utilizarse para tratar la COPD (enfermedad pulmonar obstructiva crónica), comprendiendo la administración oral dos veces al día de una(s) forma(s) farmacéutica(s) sólida(s) única(s) o múltiple(s), dicha(s) forma(s) farmacéutica(s) sólida(s) única(s) o múltiple(s) que comprende(n) un total de 220-300 mg de 6-metil-5-(1-metil-1H-pirazol-5-il)-N-{[5-(metilsulfonil)piridin-2-il]metil}-2-oxo-1-[3-(trifluorometil)fenil]-1,2-dihidropiridin-3-carboxamida o una sal de la misma por administración, a un paciente humano que padece COPD.

[0039] La enfermedad pulmonar obstructiva crónica (COPD) es un ejemplo de enfermedad del sistema respiratorio mediada por la deficiencia de a-1 antitripsina.

[0040] En cuanto a las enfermedades del sistema respiratorio y la EN, y en particular, la COPD y la EN, existe un vínculo patológico claro, ya que la deficiencia de a1-antitripsina (AATD) es un factor de riesgo específico para el desarrollo de daño pulmonar que se manifiesta como COPD. El principal efecto fisiológico de la a1-antitripsina es neutralizar la NE. Se considera que es la actividad de NE sin oposición la que impulsa la destrucción del tejido pulmonar en la COPD relacionada con la AATD, en particular el enfisema. El pulmón es especialmente susceptible por dos razones: (1) la inhalación diaria de sustancias nocivas, en particular el humo de los cigarrillos, son potentes activadores de los neutrófilos que provocan la liberación de NE; (2) la elastina, diana de la elastasa, es un componente importante del tejido pulmonar (más que de otros tejidos) y, sin la protección de los inhibidores de la NE, la elastina que soporta las delicadas estructuras del pulmón se descompone y el tejido pulmonar se destruye progresivamente.

[0041] Por lo tanto, en todos los aspectos de la invención, la enfermedad del sistema respiratorio, en particular la COPD, se asocia preferentemente con la deficiencia de a1-antitripsina (AATD). Del mismo modo, en todos los aspectos de la invención, la enfermedad del sistema respiratorio, por ejemplo la COPD, se trata preferentemente mediante la inhibición de la NE.

BREVE DESCRIPCIÓN DE LAS FIGURAS

[0042]

La figura 1 muestra un diagrama de cajas del porcentaje de inhibición de la actividad de NE estimulada por zimosán en plasma en función de la concentración de PK en plasma (estudio de dosis ascendente múltiple). Nota: el punto es el valor medio. La línea dentro del recuadro representa la mediana (percentil 50). Los bordes superior e inferior del recuadro representan los percentiles 75 y 25, respectivamente, es decir, el rango intercuartílico (IQR). Los bigotes representan la extensión de los datos con 1,5*IQR más allá de los percentiles superior e inferior. Se muestran los valores atípicos de este intervalo.

La figura 2 muestra los valores absolutos de la mediana de concentración plasmática simulada de PK poblacional para la sal de tosilato de dosis de hasta 240 mg administradas BID (dos veces al día) o QD (una vez al día) de 6-metil-5-(1-metil-1H-pirazol-5-il)-N-{[5-(metilsulfonil)piridin-2-il]metil}-2-oxo-1-[3-(trifluorometil)fenil]-1,2-dihidropiridina-3-carboxamida, mostrando los intervalos de confianza (CI) del 95% para las concentraciones mínimas (C<min>).

La figura 3 muestra una visualización de la metodología del modelo de desequilibrio proteinasa/antiproteinasa. Se muestran las siguientes etapas. [1] siembra de neutrófilos aislados a 1 millón de células/ml; 2] adición de sustrato (fibrinógeno) y estímulo (fMLP) comenzando un periodo de incubación de 15 minutos; 3] retirada de las células tratadas de la placa y centrifugación; 4-5] transferencia del sobrenadante y eliminación de las células. [B] indica el punto de adición de alvelestat a los neutrófilos en placa junto con la adición de sustrato y estímulo, es decir, incubación "en una sola etapa".

La figura 4 muestra que el aumento de fibrinógeno en un modelo cerrado incrementa la señal de elastasa.ANiveles de Aa-Val360 producidos por 1 millón de neutrófilos/ml cuando se incuban con concentraciones crecientes de fibrinógeno sin agitar durante 60 minutos; •= con neutrófilos, ■ = sin neutrófilos; n=3; las barras de error son la mediana /- IQR;BCantidad de Aa-Val360 producida por 1 millón de neutrófilos/ml al exponerlos a 550 nM de fibrinógeno no fijado; n=3; normalidad determinada por la prueba de normalidad de Shapiro-Wilk; significación de 0 a 550 determinada por la prueba t no apareada; significación de 550 a control determinada por la prueba de Mann-Whitney; barras de error media /- SEM.

La figura 5 muestra la actividad proteinasa tras la estimulación de neutrófilos con Cal. Niveles basales corregidos de Aa-Val360 tras la estimulación de neutrófilos a 2,5 millones/ml con Cal a 2,4/2,1/1,8/1,5/1,2/0,9/0,6/0,3 pM con fibrinógeno (550 nM) durante 60 minutos; n=3.

La figura 6 muestra la actividad de las proteinasas tras la estimulación de los neutrófilos con fMLP. Cambio en los niveles de Aa-Val360 tras la estimulación de neutrófilos a 2,5 millones/ml con fMLP a 0, 0,1,1,10 pM fMLP con fibrinógeno (550 nM) durante 15 minutos; n=3.

La figura 7 muestra la evaluación de la actividad del alvelestat. Actividad del alvelestat en presencia de concentraciones crecientes de NE; n=4; barras de error media /- SEM; línea de mejor ajuste calculada mediante regresión lineal simple y con control fijo al 100%; normalidad determinada mediante la prueba de Shapiro-Wilk. La figura 8 muestra que la introducción de AAT en el modelo de desequilibrio reduce la huella de la actividad NSP, y el efecto de concentraciones crecientes de AAT activa en la actividad elastasa de neutrófilos dentro de un modelo de desequilibrio proteinasa/antiproteinasa. Porcentaje de actividad de la elastasa de neutrófilos hasta 15 pM con 0 pM de AAT establecido como valor de referencia de actividad del 100%; n=4; media /- SEM.

La figura 9 muestra el efecto inhibidor del AZD9668 (alvelestat) sobre la actividad de la proteinasa. Cambio porcentual de la actividad producido por concentraciones crecientes de alvelestat (a 10 nM, 50 nM, 100 nM, 1000 nM) sobre la actividad de la elastasa de neutrófilos en un modelo de desequilibrio proteinasa/antiproteinasa. Sin inhibidor como base de actividad del 100%. Barras de error media /- SEM.

DESCRIPCIÓN DETALLADA

[0043]Se ha determinado que, para evitar la activación de la NE y, por tanto, evitar el daño asociado a la NE en enfermedades del sistema respiratorio mediadas por la deficiencia de a-1 antitripsina, como la COPD, el tratamiento inhibidor debe alcanzar y mantener un umbral Cmin (concentración plasmática mínima) en un ser humano de 300 nM o superior. Esto se muestra en la figura 1. Alcanzar y mantener dicho umbral de Cmin se correlaciona con una mayor probabilidad de supervivencia y una mejor calidad de vida en dichos pacientes.

[0044]Esto requiere una dosis sustancialmente mayor de 6-metil-5-(1-metil-1H-pirazol-5-il)-N-{[5-(metilsulfonil)piridin-2-il]metil}-2-oxo-1-[3-(trifluorometil)fenil]-1,2-dihidropiridin-3-carboxamida de lo que se pensaba anteriormente. Por ejemplo, el estado de la técnica indica que debe administrarse una cantidad diaria máxima de 200 mg.

[0045]Tal como se utiliza en el presente documento, una enfermedad del sistema respiratorio mediada por la deficiencia de a-1 antitripsina incluye el asma, incluido el asma bronquial, alérgica, intrínseca, extrínseca, inducida por el ejercicio, inducida por fármacos (incluidos la aspirina y los NSAID) e inducida por el polvo, tanto intermitente como persistente y de toda gravedad, y otras causas de hiperreactividad de las vías respiratorias; enfermedad pulmonar obstructiva crónica (COPD); bronquitis, incluidas la infecciosa y la eosinofílica; enfisema; bronquiectasias; fibrosis quística; sarcoidosis; pulmón de granjero y enfermedades afines; neumonitis por hipersensibilidad; síndrome de dificultad respiratoria del adulto (ARDS); fibrosis pulmonar, incluidas la alveolitis fibrosante criptogénica, las neumonías intersticiales idiopáticas, la fibrosis que complica el tratamiento antineoplásico y la infección crónica, incluidas la tuberculosis y la aspergilosis y otras infecciones fúngicas; complicaciones del trasplante pulmonar; actividad antitusiva, incluido el tratamiento de la tos crónica asociada a afecciones inflamatorias y secretoras de las vías respiratorias, y la tos iatrogénica; rinitis aguda y crónica, incluida la rinitis medicamentosa, y rinitis vasomotora; rinitis alérgica perenne y estacional, incluida la rinitis nerviosa (fiebre del heno); poliposis nasal; infección vírica aguda, incluido el resfriado común, hipertensión pulmonar e infección debida al virus respiratorio sincitial, gripe, coronavirus (incluido el SARS) y adenovirus.

[0046]En una realización preferida, la enfermedad del sistema respiratorio mediada por la deficiencia de a-1 antitripsina es la enfermedad pulmonar obstructiva crónica (COPD). En otra realización preferida, la enfermedad del sistema respiratorio mediada por la deficiencia de a-1 antitripsina es el enfisema. En otra realización preferida, la enfermedad del sistema respiratorio mediada por la deficiencia de a-1 antitripsina es la bronquiectasia. En otra realización preferida, la enfermedad del sistema respiratorio mediada por la deficiencia de a-1 antitripsina es el asma.

[0047]Tal como se utiliza en el presente documento, una enfermedad del sistema respiratorio mediada por la deficiencia de a-1 antitripsina incluye un paciente con deficiencia de a-1 antitripsina que padece una enfermedad del sistema respiratorio descrita en el presente documento, por ejemplo, enfermedad pulmonar obstructiva crónica (COPD) o enfisema.

[0048]Tal como se utiliza en el presente documento, una enfermedad mediada por la deficiencia de a-1 antitripsina incluye un paciente con deficiencia de a-1 antitripsina que padece una enfermedad. Tal como se utiliza aquí, una enfermedad mediada por la deficiencia de a-1 antitripsina incluye la paniculitis.

[0049]Se ha demostrado que se alcanzan y mantienen valores umbrales de C<min>cuando a un paciente que padece una enfermedad del sistema respiratorio mediada por deficiencia de a-1 antitripsina se le administra 120 mg de 6-metil-5-(1-metil-1H-pirazol-5-il)-N-[[5-(metilsulfonil)piridin-2-il]metil}-2-oxo-1-[3-(trifluorometil)fenil]-1,2-dihidropiridina-3-carboxamida o una sal de la misma, dos veces al día. Preferentemente, se administra un mínimo de 120 mg, dos veces al día, al paciente humano que padece una enfermedad del sistema respiratorio mediada por deficiencia de a-1 antitripsina, por ejemplo, COPD. Así, se administra una dosis diaria total mínima de 240 mg, preferiblemente 440 mg, más preferiblemente 480 mg.

[0050]En otras realizaciones de la invención, se administra un mínimo de 180 mg de alvelestat o una sal del mismo, dos veces al día, al paciente humano que padece una enfermedad del sistema respiratorio mediada por deficiencia de a-1 antitripsina, por ejemplo, COPD. Así, se administra una dosis diaria total mínima de 360 mg, preferiblemente 540 mg.

[0051]Además, se ha demostrado que dichos valores umbrales de C<min>se alcanzan y mantienen cuando a un paciente que padece una enfermedad respiratoria mediada por deficiencia de a-1 antitripsina, por ejemplo COPD, se le administran 240 mg de 6-metil-5-(1-metil-1H-pirazol-5-il)-N-{[5-(metilsulfonil)piridin-2-il]metil}-2-oxo-1-[3-(trifluorometil)fenil]-1,2-dihidropiridin-3-carboxamida o una sal de la misma, dos veces al día. Preferentemente, se administra un mínimo de 240 mg, dos veces al día, al paciente humano que padece una enfermedad del sistema respiratorio mediada por deficiencia de a-1 antitripsina, por ejemplo COPD. Así, se administra una dosis diaria total mínima de 440 mg, preferiblemente 480 mg.

[0052]C<min>es un término utilizado en farmacocinética para la concentración plasmática sanguínea mínima alcanzada por un fármaco antes de la administración de una segunda dosis. Por ejemplo, C<min>puede ser la concentración plasmática mínima observada en la Figura 2. C<min>es lo contrario de C<max>, la concentración máxima que alcanza el fármaco (por ejemplo, la concentración plasmática máxima).

[0053]Para todos los aspectos de la invención aquí divulgados, el alvelestat administrado o una sal del mismo da lugar a una concentración plasmática C<min>de al menos 300 nM en el paciente.

[0054]Para todos los aspectos de la invención aquí divulgados, preferiblemente el alvelestat administrado o una sal del mismo da lugar a una concentración plasmática C<max>de al menos 1000 nM en el paciente.

[0055]Para todos los aspectos de la invención aquí divulgados, preferiblemente el alvelestat administrado o una sal del mismo da lugar a una concentración plasmática C<min>de al menos 300 nM y una concentración plasmática C<max>de al menos 1000 nM en el paciente.

[0056]Para todos los aspectos de la invención aquí divulgados, cada forma farmacéutica es preferiblemente una entidad sólida única. Sin embargo, cada administración puede comprender una pluralidad de formas farmacéuticas sólidas, siempre que cada administración no contenga más de 300 mg de 6-metil-5-(1-metil-1H-pirazol-5-il)-N-{[5-(metilsulfonil)piridin-2-il]metil}-2-oxo-1-[3-(trifluorometil)fenil]-1,2-dihidropiridin-3-carboxamida o una sal de la misma, y preferiblemente 240-480 mg de 6-metil-5-(1-metil-1H-pirazol-5-il)-N-{[5-(metilsulfonil)piridin-2-il]metil}-2-oxo-1-[3-(trifluorometil)fenil]-1,2-dihidropiridin-3-carboxamida o una sal de la misma.

[0057]La administración dos veces al día significa que la administración tiene lugar a intervalos espaciados regulares, preferiblemente con un intervalo de al menos 8 horas, más preferiblemente con un intervalo de al menos 10 horas, por ejemplo con un intervalo de aproximadamente 12 horas ± 1 hora.

[0058]Para todos los aspectos de la invención aquí divulgados, preferiblemente no se excede una dosis diaria máxima de 600 mg, más preferiblemente no más de 500 mg.

[0059]Para todos los aspectos de la invención aquí divulgados, preferiblemente cada dosis individual contiene entre 120 y 250 mg de 6-metil-5-(1-metil-1H-pirazol-5-il)-N-{[5-(metilsulfonil)piridin-2-il]metil}-2-oxo-1-[3-(trifluorometil)fenil]-1,2-dihidropiridin-3-carboxamida o una sal de la misma, por ejemplo 120 mg, 180 mg o 240 mg.

[0060]Para todos los aspectos de la invención aquí divulgados, preferentemente cada dosis individual contiene entre 160 y 250 mg de 6-metil-5-(1-metil-1H-pirazol-5-il)-N-{[5-(metilsulfonil)piridin-2-il]metil}-2-oxo-1-[3-(trifluorometil)fenil]-1,2-dihidropiridin-3-carboxamida o una sal de la misma, por ejemplo 180 mg.

[0061]Para todos los aspectos de la invención aquí divulgados, preferiblemente cada dosis individual contiene entre 220 y 250 mg de 6-metil-5-(1-metil-1H-pirazol-5-il)-N-{[5-(metilsulfonil)piridin-2-il]metil}-2-oxo-1-[3-(trifluorometil)fenil]-1,2-dihidropiridin-3-carboxamida o una sal de la misma, por ejemplo 240 mg.

[0062]La administración de 6-metil-5-(1-metil-1H-pirazol-5-il)-N-{[5-(metilsulfonil)piridin-2-il]metil}-2-oxo-1-[3-(trifluorometil)fenil]-1,2-dihidropiridin-3-carboxamida o una sal de la misma tiene lugar preferentemente de forma crónica. Por lo tanto, una realización preferida de un kit comprende un suministro definido de formas farmacéuticas, como un suministro semanal, quincenal o mensual de formas farmacéuticas de 6-metil-5-(1-metil-1H-pirazol-5-il)-N-{[5-(metilsulfonil)piridin-2-il]metil}-2-oxo-1-[3-(trifluorometil)fenil]-1,2-dihidropiridin-3-carboxamida o una sal de la misma.

[0063]En una realización de la invención, la sal de 6-metil-5-(1-metiMH-pirazol-5-il)-N-([5-(metilsulfonil)piridin-2-il]metil}-2-oxo-1-[3-(trifluorometil)fenil]-1,2-dihidropiridina-3-carboxamida es la sal de tosilato de 6-metil-5-(1-metil-1H-pirazol-5-il)-N-{[5-(metilsulfonil)piridin-2-il]metil}-2-oxo-1-[3-(trifluorometil)fenil]-1,2-dihidropiridina-3-carboxamida.

[0064]La 6-metil-5-(1-metil-1H-pirazol-5-il)-N-{[5-(metilsulfonil)piridin-2-il]metil}-2-oxo-1-[3-(trifluorometil)fenil]-1,2-dihidropiridin-3-carboxamida, o una sal de la misma, puede administrarse a un individuo de acuerdo con un régimen de dosificación eficaz durante un periodo de tiempo o duración deseados, por ejemplo, al menos una semana, al menos un mes, al menos 2 meses, al menos 3 meses, al menos 6 meses, al menos 12 meses, al menos 24 meses o más. Por ejemplo, el compuesto puede administrarse de forma diaria o intermitente durante toda la vida del sujeto.

[0065]La dosis de 6-metil-5-(1-metil-1H-pirazol-5-il)-N-{[5-(metilsulfonil)piridin-2-il]metil}-2-oxo-1-[3-(trifluorometil)fenil]-1,2-dihidropiridin-3-carboxamida o una sal de la misma puede administrarse según un régimen de aumento de dosis de la invención. Esto permite una titulación segura hasta una dosis diaria de alvelestat, por ejemplo de 120 mg dos veces al día (BID). Por ejemplo, un régimen de escalada de dosis hasta una dosis de 120 mg dos veces al día de alvelestat según la invención comprende la administración de alvelestat o una sal del mismo a una dosis de 60 mg de alvelestat dos veces al día durante un primer periodo de tiempo, seguida de 120 mg dos veces al día a partir de entonces. El primer período puede ser de 5-20 días, preferiblemente cada uno de aproximadamente una semana (7 días). En particular, alvelestat o una sal del mismo se administra a 60 mg dos veces al día durante una semana, seguido de 120 mg dos veces al día a partir de entonces. Las dosis se refieren a la cantidad equivalente de alvelestat base libre.

[0066]También se puede utilizar un régimen de escalada de dosis para permitir una titulación segura hasta una dosis diaria de alvelestat, por ejemplo, de 240 mg dos veces al día (BID). Por ejemplo, un régimen de escalada de dosis hasta una dosis de 240 mg dos veces al día de alvelestat según la invención comprende la administración de alvelestat o una sal del mismo a una dosis de 60 mg de alvelestat dos veces al día durante un primer periodo de tiempo, seguida de 120 mg dos veces al día durante un segundo periodo de tiempo, seguida de 180 mg dos veces al día durante un tercer periodo de tiempo, y 240 mg dos veces al día a partir de entonces. Los periodos primero, segundo y tercero pueden ser cada uno de 5-20 días, preferiblemente cada uno de aproximadamente una semana (7 días). En particular, alvelestat o una sal del mismo se administra a 60 mg dos veces al día durante una semana, seguido de 120 mg dos veces al día durante una semana, seguido de 180 mg dos veces al día durante una semana, y 240 mg dos veces al día a partir de entonces. Las dosis se refieren a la cantidad equivalente de alvelestat base libre.

[0067]En una realización de la invención, la cantidad (por ejemplo, mg) de alvelestat o una sal del mismo a la que se hace referencia en la cantidad administrada, la dosis o la forma farmacéutica sólida, es la cantidad correspondiente de base libre de alvelestat en el alvelestat o la sal del mismo. Por ejemplo, si un método de la invención requiere la administración de una dosis de 240 mg de alvelestat o una sal del mismo, la cantidad de una sal de alvelestat utilizada será equivalente a 240 mg de alvelestat base libre.

[0068]Como se muestra en los ejemplos, las concentraciones Cmáx de alvelestat alcanzadas por el régimen de dosificación descrito suprimieron la actividad de la elastasa de neutrófilos (NE) en un 72,6% (ver Figura 9). Por el contrario, la AAT en las concentraciones alcanzadas terapéuticamente en el tratamiento de la deficiencia de alfa-1, mediante el uso de "aumento" de sustitución de la AAT, suprimió la actividad NE en sólo un 56,7% (véase la figura 8). Así pues, el alvelestat puede ser un inhibidor más potente de la NE que la terapia de aumento de la AAT. Por lo tanto, se cree que el alvelestat puede ser útil en el tratamiento de pacientes que no han respondido bien a la terapia de aumento de la AAT. Dicha terapia de aumento implica la administración de AAT por vía intravenosa con el fin de ralentizar la progresión de las enfermedades del sistema respiratorio mediadas por la AATD.

[0069] Así, la invención proporciona alvelestat o una sal del mismo para su uso en un método de tratamiento de una enfermedad del sistema respiratorio mediada por deficiencia de a-1 antitripsina (por ejemplo, COPD) en un paciente que lo necesite y que no haya respondido al tratamiento con AAT, que comprende la administración al paciente de una cantidad eficaz de alvelestat o una sal del mismo según se describe en el presente documento (por ejemplo, 120-300 mg BID, en particular 220-300 mg BID). En una realización, la administración de alvelestat o una sal del mismo es en lugar de, o en combinación con, la terapia de aumento de AAT. Los no respondedores pueden ser pacientes en los que la AAT no trata ni retrasa la progresión de una enfermedad del sistema respiratorio mediada por la AATD, por ejemplo, la COPD.

[0070]Por lo tanto, para todos los aspectos de la invención aquí divulgados, el paciente que necesita tratamiento puede haber sido tratado previamente por deficiencia de a-1 antitripsina, o estar siendo tratado actualmente, mediante la administración de AAT. El compuesto (I) o sal del mismo puede utilizarse solo cuando sea apropiado, o en forma de composición farmacéutica apropiada que comprenda el compuesto de la invención en combinación con un diluyente, adyuvante o portador farmacéuticamente aceptable. Se prefieren especialmente las composiciones que no contienen material capaz de provocar una reacción adversa, por ejemplo, una reacción alérgica.

[0071]La forma o formas farmacéuticas sólidas aquí definidas se presentan preferentemente en forma de comprimido, tabletas, cápsula o cápsulas, más preferentemente un comprimido.

[0072]Según la invención, se proporciona una composición farmacéutica que comprende un compuesto (I) o sal del mismo en mezcla con un diluyente o portador farmacéuticamente aceptable. El compuesto (I) o su sal se utiliza preferentemente en forma micronizada o molida. El compuesto (I) o sal del mismo es preferiblemente inferior al 50% en peso y más preferiblemente inferior al 30% en peso del peso total de la composición en las composiciones descritas en el presente documento (incluidas las composiciones orales).

[0073]En una realización de los métodos aquí descritos, se administra alvelestat o una sal del mismo a un paciente humano que lo necesite.

[0074]Para la administración oral, el compuesto (I) o sus sales pueden, por ejemplo, mezclarse con un adyuvante, diluyente o un relleno, por ejemplo, lactosa, sacarosa, sorbitol, manitol, fosfato cálcico dibásico (fosfato dicálcico), incluidas las formas hidratada y anhidra; un almidón, por ejemplo, almidón de patata, almidón de maíz o amilopectina; un derivado de la celulosa como la celulosa microcristalina (MCC) o la celulosa microcristalina silicificada (SMCC) y similares. En algunas realizaciones se pueden utilizar mezclas de los mismos. En una realización, el compuesto (I) tosilato no se mezcla con manitol. En una realización, la cantidad de celulosas hidrófilas, como la MCC, en la formulación completa oscila entre el 50 % y el 98 %. Estos adyuvantes, diluyentes y cargas se utilizan en total en 60 a 98 partes, preferentemente en 70 a 95 partes, de los mismos por cada 100 partes en peso de la formulación sólida. Algunos ejemplos de derivados de la celulosa, como la celulosa microcristalina, son Avicel PHIOI, PH 102, PH 102 SCG, PH200,<p>H301, PH302 y PH-F20, Avicel RC-A591NF. Un ejemplo de productos de celulosa microcristalina silicificada es ProSolv 90 HD, una mezcla de MCC y dióxido de silicio coloidal (fabricado por JRS Pharma). Ejemplos de productos de fosfato cálcico dibásico dihidratado son Calipharm D (de ThermoPhos), ICL D (de ICL Performance Products), Calstar (FMC Biopolymer), Di-Cafos (Chemische Fabrik Budenheim), DI-TAB (Innophos) y Emcompress (JRS Pharma LP). Ejemplos de fosfato cálcico dibásico anhidro son ICL A (de ICL Performance Products), Fuji Calin (de Fuji Chemicals), A-TAB (Innophos), Di-Cafos AN (Chemische Fabrik Budenheim) y Emcompress Anhydrous (JRS Pharma LP). Ejemplos de productos a base de manitol son Pearlitol DC 300 y Pearlitol SD200 (fabricados por Roquette). Un ejemplo de producto con lactosa es Pharmatose DCL 15 (fabricado por DMV).

[0075]Puede utilizarse opcionalmente un aglutinante, por ejemplo, hidroxipropilcelulosa (HPC), hidroxipropilmetilcelulosa (HPMC), polivinilpirrolidona (PVP) o gelatina, y se utilizan de 0,5 a 10 partes, preferiblemente de 1 a 4 partes, de las mismas por cada 100 partes en peso de la formulación farmacéutica sólida. Un ejemplo de hidroxipropilcelulosa incluye HPC LF. Algunos ejemplos de hidroxipropilmetilcelulosa son PVP K30 y PVP K90.

[0076]Los agentes desintegrantes incluyen, por ejemplo, carmelosa cálcica, carboximetilalmidón sódico, croscarmelosa sódica, crospovidona (polivinilpirrolidona reticulada) y similares, y se utilizan de 0,5 a 15 partes, preferiblemente de 2 a 10 partes, de los mismos por cada 100 partes en peso de la formulación farmacéutica sólida. Entre los agentes desintegrantes se encuentra el Kollidon CL (fabricado por BASF).

[0077]Los lubricantes incluyen estearato de magnesio, estearato de calcio, ésteres de sacarosa de ácidos grasos, estearil fumarato de sodio, ácido esteárico, polietilenglicol, cera, parafina y similares. La cantidad de lubricante está comprendida entre el 0,05 % y el 5 %, y preferentemente entre el 0,5 % y el 3,5 %, siendo el % en peso de la formulación.

[0078]Los tensioactivos incluyen lauril sulfato sódico, polisorbato 80, aceite hidrogenado, polioxietileno(160)polioxipropileno(30)glicol y similares. La cantidad de tensioactivo es inferior al 2 %, convenientemente inferior al 1,5 %, por ejemplo inferior al 1,1 %, donde el % es en peso de la formulación.

EJEMPLOS

Ejemplo 1

[0079]Se evaluó el efecto del alvelestat sobre la actividad de la elastasa de neutrófilos (NE) ex vivo estimulada por zimosán en sangre total. Se recogió sangre de voluntarios sanos de un estudio de dosis múltiples ascendentes (MAD) de alvelestat al inicio del estudio (antes del tratamiento con alvelestat) y en las diferentes dosis de tratamiento con alvelestat o placebo. Las muestras de sangre citratada se incubaron con zymosan, y la actividad NE resultante se midió mediante un ensayo fluorogénico basado en la generación del producto de escisión fluorescente, 7-amino-4-metilcumarina. El efecto supresor de la NE de alvelestat o placebo se expresó como el porcentaje de inhibición de la NE estimulada por zimosán antes del tratamiento (línea de base). Las concentraciones de alvelestat se midieron en plasma mediante precipitación de proteínas seguida de cromatografía líquida y espectrometría de masas en tándem, medidas en los mismos puntos temporales que la actividad NE. Las concentraciones plasmáticas se agruparon para su análisis en <3 nM; 3-30 nM; 30 300 nM y >300 nM.

[0080]La Figura 1 muestra el porcentaje de inhibición de la elastasa de neutrófilos (NE) estimulada por zimosán en plasma a concentraciones crecientes de alvelestat, e indica que se puede lograr una inhibición de la Ne del -100% con una concentración plasmática de alvelestat de 300 nM o superior.

Ejemplo 2

[0081]La Figura 2 muestra las concentraciones plasmáticas medias simuladas de PK poblacional (línea oscura) para la sal de tosilato de dosis de hasta 240 mg administradas BID (dos veces al día) o QD (una vez al día) de 6-metil-5-(1-metil-1H-pirazol-5-il)-N-{[5-(metilsulfonil)piridin-2-il]metil}-2-oxo-1 -[3-(trifluorometil)fenM]-12-dihidropiridina-3-carboxamida, con un IC del 95%. La mediana y los límites del IC del 95% (en gris) muestran que los niveles PK predichos de 240 mg BID cumplen el umbral superior a 300nM (línea de puntos). La Figura 2 también muestra que los niveles PK predichos de 120 mg BID cumplen el umbral de 300nM (línea de puntos).

[0082]La Tabla 1 muestra las concentraciones plasmáticas medianas simuladas de PK poblacional para la sal de tosilato de dosis de hasta 240 mg administradas BID (dos veces al día) o QD (una vez al día) de 6-metil-5-(1-metil-1H-pirazol-5-il)-N-{[5-(metilsulfonil)piridin-2-il]metil}-2-oxo-1-[3-(trifluorometil)fenil]-1.,2-dihidropiridina-3-carboxamida, mostrando la mediana, rangos intercuartílicos inferior y superior (lIQ y uIQ), IC 95% inferior y superior (i95%CI) y u95%CI) para los regímenes de dosificación QD y BID. Todos ellos muestran que los niveles PK previstos de 240 mg BID cumplen el umbral superior a 300nM (línea de puntos). La mediana muestra que los niveles PK predichos de 120 mg BID cumplen el umbral superior a 300nM (línea de puntos).

[0083]Puede observarse que para alcanzar un umbral medio de Cmin (concentración plasmática mínima) en un ser humano de al menos 300 nM, y teniendo en cuenta una variación de hasta el 125% en torno a la Cmin prevista según las directrices reguladoras (incluidos los reguladores de la UE y EE.UU.), se requiere una dosis mínima BID de 120 mg.

[0084]Preferiblemente, para lograr un umbral más bajo de Cmin (concentración plasmática mínima) del 95% Cl en un ser humano de al menos 300 nM, y permitiendo una variación de hasta el 125% en torno a la Cmin prevista según las directrices reguladoras (incluidos los reguladores de la UE y EE.UU.), se prefiere una dosis mínima BID de 240 mg.

Tabla 1: Concentraciones plasmáticas de simulación PopPK (Cmin) para la sal de tosilato

Ejemplo 3: la protección del daño pulmonar asociado a la proteinasa mediante alvelestat (un inhibidor de la elastasa de neutrófilos)

Resumen

[0085]La deficiencia de alfa-1 antitripsina (AATD) es una afección genética que puede dar lugar a una liberación reducida o nula de la antiproteinasa protectora alfa-1 antitripsina (AAT). La falta de este importante inhibidor de proteinasas potencialmente destructivas, da lugar a un estado persistente de desequilibrio proteinasa/antiproteinasa. La actividad desinhibida de la proteinasa, en particular de la elastasa, provoca cambios estructurales en el pulmón y conduce al enfisema y a la obstrucción de las vías respiratorias. La utilización de un modelo in vitro de este desequilibrio permite evaluar fisiológicamente el efecto de los inhibidores de la elastasa sobre las proteinasas de serina de los neutrófilos (PNE) implicadas en la fisiopatología.

[0086]Este ejemplo describe el efecto de añadir alvelestat en un modelo de tampón neutrófilo-fibrinógeno estimulado para evaluar los cambios en la actividad de la elastasa mediante la monitorización de la liberación de marcadores específicos de elastasa del proceso.

[0087]Se desarrolló y validó un modelo del desequilibrio proteinasa/antiproteinasa describiendo el efecto del inhibidor fisiológico AAT sobre la actividad NSP desinhibida mediante inmunoensayos de actividad de huella de elastasa. A continuación, se añadió Alvelestat al modelo.

[0088]Los resultados obtenidos mediante la adición de alvelestat indican que el compuesto es capaz de inhibir con éxito y rapidez la actividad de la elastasa in vitro y con mayor eficacia que el inhibidor fisiológico AAT.

Introducción

[0089] La deficiencia de alfa-1 antitripsina (AATD) es una afección genética que surge de una mutación en el gen SERPINA1 [1] que codifica la glicoproteína alfa-1 antitripsina (AAT) crucial para la inhibición de las proteinasas de serina destructivas de los neutrófilos. La mutación del gen SERPINA1 produce variantes de la AAT que conducen a una secreción escasa o nula en la sangre y los tejidos, reduciendo así el control fisiológico de las proteinasas potencialmente dañinas.

[0090] En tejidos sanos, las proteinasas destructivas son moduladas por antiproteinasas (principalmente AAT), sin embargo en la AATD , la falta de AAT significa que estas proteinasas retienen una actividad excesiva; llevando a un desequilibrio mayor de proteinasa/antiproteinasa [2] [3] [4].

[0091] Se cree que este desequilibrio proteinasa/antiproteinasa es la causa de los cambios enfisematosos fisiopatológicos irreversibles asociados a los pacientes con COPD (enfermedad pulmonar obstructiva crónica) [4].

[0092] Las proteinasas desinhibidas son libres de escindir las principales proteínas de la matriz extracelular (ECM), como la elastina, el colágeno y el fibrinógeno, dañando la estructura pulmonar y provocando enfisema [5].

[0093] De hecho, clínicamente, una concentración sérica de AAT por debajo de 11 pM se considera clave para una interacción no fisiológica que resulta en un aumento de los cambios enfisematosos y, por lo tanto, de la enfermedad pulmonar clínica, y se denomina el "umbral de riesgo" putativo [6].

[0094] Históricamente, el daño por proteinasas en la COPD se ha atribuido principalmente a la actividad de la elastasa de neutrófilos (NE), como lo demuestran los estudios en animales [7].

[0095] El desarrollo reciente de inmunoensayos de huella de actividad de proteinasa in vivo para NE, basados en la detección de productos específicos de escisión de fibrinógeno en el plasma del sujeto, han apoyado la teoría de la importancia del desequilibrio proteinasa/antiproteinasa en la AATD [8].

[0096] Todos los fenotipos AAT deficientes medidos para la actividad NE demostraron una mayor evidencia de estas huellas en comparación con los voluntarios fumadores sanos, y demostraron diferentes perfiles entre los fenotipos AAT [8].

[0097] Se planteó la hipótesis de que la adición de alvelestat en el modelo proporcionaría datos sobre el efecto del fármacoin vitro,incluida la respuesta a la exposición para respaldar el rango de dosis utilizado en el ensayo clínico, y respaldaría los productos de este modelo como biomarcador de la eficacia farmacéutica y, por lo tanto, clínica.

[0098] El propósito principal de este modelo es describir los cambios en la actividad de la elastasa relacionados con la aplicación del inhibidor alvelestat NE.

Materiales y Métodos:

Cinética enzimática

[0099] Las primeras etapas consistieron en evaluar la actividad biológica de las enzimas y los inhibidores que se utilizarían en los experimentos más fisiológicos.

[0100] La etapa 1 consistió en la evaluación de la actividad de la elastasa pancreática porcina mediante el análisis gráfico recíproco de Lineweaver-Burk [9].

[0101] Etapa 2 Una vez confirmada la actividad PPE, se determinó la función inhibidora de un lote purificado de AAT (Athens Research & Technology, US) frente a esta enzima y se utilizó para todos los experimentos posteriores.

[0102] La etapa 3 consistió en utilizar la AAT pura para evaluar la inhibición de preparaciones puras de NE (Athens Research and Technology, US) para derivar su función activa. A continuación, se utilizó la actividad enzimática para evaluar la actividad del alvelestat.

[0103] La actividad del alvelestat se calculó midiendo la escisión de N-succinil-Ala-Ala-p-nitroanilida (SlaaapN) cuando el compuesto se tituló contra elastasa de concentración y actividad conocidas [2]. Utilizando estos métodos, se concluyó que la actividad del alvelestat contra la NE era del 88%. Los resultados se determinaron computacionalmente utilizando el software Prism.

El modelo de desequilibrio proteinasa/antiproteinasa

[0104] Se aislaron neutrófilos de voluntarios jóvenes sanos utilizando un método ampliamente descrito por Jepsen y Skottun [10].

[0105] A continuación, los neutrófilos se incubaron durante 15 minutos a 37°C con 550 nM de fibrinógeno (Calbiochem, San Diego, CA, EE.UU.), 10 pM de N-formil-L-metionil-L-leucil-fenilalanina (fMLP; Sigma-Aldrich, St. Louis, Mo , EE.UU.), así como concentraciones de AAT activa entre 0-11 pM (Athens Research and Technology, Athens, GA, EE.UU.) y concentraciones crecientes de AZD9668 en medio 1640 del Roswell Park Memorial Institute (RPMI; Sigma-Aldrich; con L-glutamina y bicarbonato sódico) suplementado con penicilina-estreptomicina (1% v/v; Sigma-Aldrich) - figura 3.

[0106]El sobrenadante se obtuvo por centrifugación y se midieron las huellas de actividad NE.

Ensayos de actividad de proteinasas específicas

[0107]Se utilizaron los métodos de inmunoensayo de fluorescencia inversa descritos anteriormente por Carteret al.y Newbyet al.[8] para medir las huellas de actividad de la elastasa de neutrófilos y de la proteinasa 3.

Sujetos del estudio

[0108]Se recogió sangre y plasma de personas sanas, jóvenes (<35 años) y no fumadoras con aprobación ética en el marco de las "Investigaciones sobre el envejecimiento del sistema inmunitario" (ERN_12-1184) del Instituto de Inflamación y Envejecimiento de la Universidad de Birmingham.

Resultados

1. Desarrollo de un nuevo modelo in vitro con neutrófilos aislados en un tampón con fibrinógeno

[0109]Para generar un modelo apropiado para la evaluación de alvelestat, se exploraron individualmente los parámetros implicados en el desarrollo de un modelo de neutrófilo en tampón de fibrinógeno y se seleccionaron las condiciones óptimas.

1. Validación del ensayo Aa-Val<360>con neutrófilos en reposo.

[0110]Para seleccionar las concentraciones óptimas de fibrinógeno, se incubaron neutrófilos a lo largo de una curva de titulación de fibrinógeno no salvado, que oscilaba entre 0-8797 nM. 8797 nM es la concentración media de fibrinógeno en sangre humana descrita en la literatura. La curva se midió junto con un control negativo sin neutrófilos (véase la figura 4). ii. Validación del ensayo Aa-Val<360>con neutrófilos estimulados.

[0111]Para determinar la estimulación máxima, se tituló un potente estimulador de neutrófilos, Cal, [11] de 0-2,4 pM y se midió el producto específico de la proteinasa fibrinógeno-clavado.

[0112]La huella de actividad NE aumentó rápidamente en 43,8 nM (+/- 17,1) tras la estimulación de neutrófilos con 0,3 pM Cal y luego también se estabilizó (Figura 5).

[0113]La citometría de flujo confirmó la degranulación de neutrófilos y, además, a pesar de la fuerte estimulación, la viabilidad de los neutrófilos se mantuvo alta. La evaluación por citometría de flujo confirmó que el DMSO utilizado para disolver el alvelestat no estimulaba la degranulación de los neutrófilos.

[0114]Para evaluar un estímulo más fisiológico, a continuación se incubaron neutrófilos con N-formilmetionina-leucilfenilalanina (fMLP).

[0115]Se observó un rápido aumento de la actividad proteinasa con estimulaciones de 0-1 pM. A 0,1 pM.

[0116]A 0,1 pM, la actividad NE aumentó en 11,4 nM, y a 1 pM la actividad aumentó aún más en 7,3 nM. La actividad siguió aumentando hasta 35,0 a 10 pM de fMLP, aunque la velocidad de aumento fue menor (Figura 6).

[0117]Nuevamente, la evaluación por citometría de flujo confirmó que el fMLP estimuló la degranulación, sin afectar la viabilidad celular y que el DMSO no estimuló la degranulación de los neutrófilos.

2. Actividad enzimática

i. Actividad de la elastasa pancreática porcina

[0118]Antes de la aplicación de inhibidores, se determinó la actividad de PPE midiendo la densidad óptica del sustrato durante una hora, luego se calculó la velocidad de reacción y la escisión del sustrato. El gráfico de Michaelis-Menten demostró una curva parabólica, por lo que la reacción puede describirse mediante la ecuación habitual de Michaelis-Menten y no es cooperativa ni alostérica [12]. Cambio en la absorbancia (a 410 nm) del PPE incubado con 6 concentraciones de sustrato SlaaapN (N-succinil-Ala-Ala-p-nitroanilida - Número CAS: 52299-14-6) durante 15 minutos (450 segundos). También se elaboró un gráfico Lineweaver-Burk. Utilizando los puntos de cruce de los ejes obtenidos computacionalmente, se pudieron calcular los valores de la velocidad máxima (V<max>) y la constante de Michaelis (K<m>). La N-succinil-Ala-Ala-p-nitroanilida puede ser un sustrato cromogénico para la proteasa de serina tipo quimotripsina, la elastasa pancreática y la endopeptidasa de serina. Se conocen los procedimientos para medir los productos de elastasa utilizando SlaaapN como sustrato.

[0119]Utilizando estos valores y el valor publicado conocido para la eficiencia catalítica [13], se pudo determinar la actividad funcional del PPE y este valor se utilizó para los experimentos posteriores. Se concluyó que la actividad del EPP era del 81,5%.

ii. Actividad de la alfa-1 antitripsina

[0120]La actividad de la AAT se evaluó cinéticamente midiendo la escisión de SlaaapN por PPE de una actividad conocida, tras la incubación de una concentración molar activa conocida de PPE con AAT.

[0121]Con el tiempo, la cantidad de SlaaapN escindida aumentó. A medida que aumentaba la relación molar AAT:[PPE activo], cuando había mayores concentraciones de inhibidor, se producían menores tasas de escisión. Sin AAT, la actividad PPE era del 100%, y se requería una concentración molar de 1,208 Mol de AAT por 1 Mol de PPE para neutralizar la actividad PPE.

[0122]Esto significaba que se requerían 1,208 moles de AAT para inhibir 1 mol de PPE activo. Si la AAT está totalmente activa, la PPE debe inhibirse en 1:1. Por lo tanto, se puede calcular que la actividad funcional de la AAT es del 83%. iii. Actividad de la elastasa de neutrófilos

[0123]La actividad de NE se evaluó entonces cinéticamente midiendo la escisión de SlaaapN por NE cuando se inhibía con una concentración molar activa conocida de AAT. Con el tiempo, la cantidad de SlaaapN escindida aumentó. A medida que aumentaba la relación molar [AAT activa]:NE, donde había mayores concentraciones de inhibidor, se producían menores tasas de escisión.

[0124]Esto significaba que la AAT activa pura inhibía la NE en una proporción molar de 0.99:1confirmando que la NE era completamente activa.

iv. Actividad de Alvelestat

[0125]La actividad del alvelestat se evaluó cinéticamente midiendo la escisión del sustrato por la elastasa de actividad conocida en presencia del inhibidor, con el inhibidor a lo largo de una curva de inhibición. Con el tiempo, la cantidad de SlaaapN escindida disminuyó.

[0126]El análisis cinético demostró que el alvelestat es un inhibidor reversible altamente potente y rápido de la NE [14]. La proporción molar de compuesto necesaria para inhibir completamente la NE es de 0,87:1, como se indica a continuación.

[0127]Podemos concluir de esto que por extrapolación se requiere 0.87 mol de alvelestat para inhibir 1 mol de NE. Por lo tanto, se puede determinar que la actividad dentro de los errores del experimento es plena.

Tabla 2. Intercepción computacional del eje en la figura 7.

[0128]Leyenda: Valores de mejor ajuste de la intercepción y la pendiente del eje obtenidos comparando las relaciones alvelestat:NE con la actividad enzimática calculada de NE contra SlaaapN en presencia de alvelestat.

[0129]3. La Generación de Péptidos de Serina Proteinasa en presencia de Dosis Crecientes de AAT

[0130]Se añadió AAT en concentraciones funcionales crecientes al modelo de proteinasa/antiproteinasa junto con sustrato (fibrinógeno) y estímulo (fMLP). Las concentraciones fisiopatológicas se seleccionaron para imitar las concentraciones de AAT de los diferentes genotipos de la enfermedad, según lo descrito por la American Thoracic and European Respiratory Societies: 0 pM representando un genotipo Pi'nulo',2,6-6,5 pM representando un genotipo PiZZ, y 10,4-14,3 pM representando un genotipo PiSZ [15].

[0131]A medida que la concentración de AAT aumentaba, las señales de actividad de la proteinasa se reducían para NE y se estabilizaban alrededor de 11 pM (Figura 8). El examen del cambio en la actividad por productos específicos de escisión de fibrinógeno por proteinasas (línea de base fijada en 0 pM como 100% activa) encontró que esto representaba una disminución porcentual del 56,7% para NE (Figura 8).

[0132]4. Generación de péptidos de serina proteinasa en presencia de dosis crecientes de alvelestat

[0133]Se añadió Alvelestat en el modelo a lo largo de una curva dosis-respuesta utilizando concentraciones farmacológicamente activas previamente reportadas en la literatura. Cuando se reevaluó para tener en cuenta la actividad enzimática, se evaluó el efecto de las concentraciones activas de alvelestat a 1000 nM, 100 nM, 50 nM, 10 nM y 0 nM sobre la actividad de la NE dentro de un modelo de desequilibrio proteinasa/antiproteinasa (n=3).

[0134]Los datos mostraron que cuando se añadieron 10 nM del compuesto en el modelo, el cambio en la actividad definida por los productos específicos de escisión de fibrinógeno por la elastasa de neutrófilos (línea de base fijada en 0 |jM como 100% activa) disminuyó a 60.1% para NE (Figura 9). Cuando se trató con una concentración superior de 1000 nM, la actividad NE cayó aún más hasta el 27,4% del valor sin tratar.

Debate

[0135]La literatura describe alvelestat como un potente inhibidor de elastasa in vitro [14] [16], y esto es apoyado por los datos en este reporte usando el modelo de biomarcador de proteinasa/anti-proteinasa. Se observó que a medida que aumentaba la concentración de este antielastasa, disminuía rápidamente la cantidad de productos específicos de fibrinógeno escindido por elastasa.

[0136] Sin embargo, la inhibición de la actividad de la elastasa ocurrió a una concentración molar más baja que la observada para la AAT. Esto implicaría que el compuesto podría inhibir la elastasa que no es accesible a la molécula de AAT más grande, lo que indicaría quizás un componente inhibidor intracelular o unido a la membrana celular.

[0137]La evidencia publicada que describe las interacciones moleculares del alvelestat es limitada. Por lo tanto, proponemos que el compuesto también podría ser un inhibidor eficaz de la proteinasa celular antes de la unión al sustrato.

Declaraciones sumarias

[0138]Este informe demuestra el efecto de alvelestat en la actividad de la proteinasa dentro de un modelo más fisiológico del desequilibrio proteinasa/antiproteinasa relevante en la deficiencia de alfa-1 antitripsina y su tratamiento.

[0139]Los datos del modelo proteinasa/antiproteinasa, recogidos en este ejemplo, apoyan el papel del alvelestat como potente inhibidor de la actividad de la elastasa. Además, los datos apoyan que el alvelestat puede "normalizar" la disfunción asociada a la enfermedad asociada a la AATD, siendo más eficaz en la supresión de la elastasa que la proteína AAT fisiológica. Los datos también sugieren que el modo de acción del inhibidor excede lo esperado, sugiriendo que la actividad contra la NE es a través de un mecanismo diferente a los inhibidores fisiológicos como la AAT. El alvelestat puede, a las concentraciones alcanzadas por los regímenes de dosificación descritos en la solicitud, proporcionar una inhibición de la NE mayor que la AAT a la concentración de proteína alcanzada por el tratamiento de aumento en la AATD. Esto respalda el uso de alvelestat como tratamiento de la AATD, incluso en pacientes en los que el aumento no ha funcionado, ya sea como sustituto del aumento o en combinación con éste.

Otros Puntos del Resumen:

[0140]

1. Alvelestat o una sal del mismo, a dosis de 120-300 mg, y alternativamente 220-300 mg, BID, demuestra actividad en la inhibición de la elastasa de neutrófilos (NE). Esto puede verse en la Figura 1, donde se observó una inhibición de la NE de aproximadamente el 100% a una concentración plasmática de unos 300 nM de alvelestat. La modelización P<k>simulada (Figura 2) sugiere que para alcanzar una concentración plasmática de aproximadamente 300 nM de alvelestat (o una sal del mismo) en un sujeto, se requiere una dosis de 120-300 mg BID. Para tener una mayor confianza en alcanzar una concentración plasmática de unos 300 nM de alvelestat (o una sal del mismo), se requiere una dosis de 220-300 mg BID. Por último, el ejemplo 3, muestra que Alvelestat o una sal del mismo, a dosis de 120-300 mg, y alternativamente 220-300 mg, BID, demuestra actividad en la inhibición de la elastasa de neutrófilos (NE), por ejemplo, medida por A-a-Val360 (Figura 9). La figura 9 muestra que el alvelestat a una concentración de 300 nm logra la inhibición de la NE mediante la medición del cambio porcentual en A-a-Val360. El Ejemplo 3 también muestra que A-a-Val360 es un producto específico de la elastasa de neutrófilos. Se ha demostrado que A-a-Val360 está elevado en pacientes con AATD. Una mayor concentración de A-a-Val360 está relacionada con una mayor gravedad de la enfermedad, por ejemplo, la AATD. Por lo tanto, los niveles elevados de A-a-Val360 en un paciente pueden identificarlos como posibles respondedores al tratamiento con alvelestat.

2. La eficacia inhibidora de la NE del alvelestat se comparó con la eficacia inhibidora de la NE de la AAT, la proteína natural. La inhibición de la NE por la AAT se estabilizó en un 56,7% de inhibición (es decir, un 43,3% por encima de la línea de base - Figura 8), mientras que la inhibición por el alvelestat mostró una mayor inhibición en un 72,6% (es decir, un 27,4% por encima de la línea de base - Figura 9) a 1000 nM de alvelestat. Aquí mostramos mediante concentraciones Cmax PK simuladas que se alcanzarían concentraciones de alvelestat de aproximadamente 1000 nM tras la dosificación con las dosis/regímenes de dosificación propuestos de la presente invención (por ejemplo, a dosis de 120-300 mg, y 220-300 mg, BID) (Tabla 3). La Tabla 3 muestra las concentraciones plasmáticas Cmax simuladas de PK poblacional seleccionadas para el tosilato de alvelestat a dosis de alvelestat de 120 mg y 240 mg administradas BID (dos veces al día), mostrando la mediana, los rangos intercuartílicos inferior y superior (lIQ y uIQ), el 95% Cl inferior y superior (l95%Cl) y u95%Cl) para los regímenes de dosificación BID. Como puede observarse, los valores de la Tabla 3 son de 1000 nM o mayores, y por lo tanto, los regímenes de dosificación de la presente invención proporcionan las concentraciones de alvelestat para lograr una supresión mejorada de la NE con fines terapéuticos en comparación con la AAT a concentraciones logradas terapéuticamente en el tratamiento de la deficiencia de alfa-1, mediante el uso de "aumento" de sustitución de la AAT.

Tabla 3 Concentraciones plasmáticas de simulación PopPK (Cmax) para la sal de tosilato

[0141]3.Alvelestat sorprendentemente mostró mayor potencia en comparación con el inhibidor natural (AAT). Este efecto podría deberse a la capacidad del alvelestat para inhibir la elastasa de la superficie celular (que la AAT inhibe mal debido al impedimento estérico). El efecto también podría deberse a la capacidad del alvelestat para inhibir la elastasa que contiene exosomas, que se libera en la activación de los neutrófilos (pero es resistente a la AAT), ya que la AAT no puede entrar en las células, por lo que no puede producir una inhibición intracelular.

Referencias:

[0142]

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4027-32.

14. Stevens, T., et al., AZD9668: Pharmacological Characterization of a Novel Oral Inhibitor of Neutrophil Elastase. Journal of Pharmacology and Experimental Therapeutics, 2011. 339(1): p. 313.

15. American Thoracic Society/European Respiratory Society, American Thoracic Society/European Respiratory Society Statement. American Journal of Respiratory and Critical Care Medicine, 2003. 168(7): p. 818-900.

16. Gunawardena, K.A., H. Gullstrand, and J. Perrett, Pharmacokinetics and safety of AZD9668, an oral neutrophil elastase inhibitor, in healthy volunteers and patients with COPD. Int J Clin Pharmacol Ther, 2013. 51(4): p. 288-304.

Claims (11)

REIVINDICACIONES

1. Alvelestat o una sal del mismo para su uso en un método de tratamiento de una enfermedad del sistema respiratorio mediada por deficiencia de a-1 antitripsina, en el que la enfermedad se selecciona entre enfermedad pulmonar obstructiva crónica (COPD), enfisema, asma y bronquiectasia, en un paciente que lo necesita y que no ha respondido a una terapia previa con alfa-1 antitripsina (AAT), el método comprende administrar una cantidad eficaz de alvelestat o una sal del mismo al paciente, y en el que la cantidad de alvelestat o una sal del mismo administrada es de 120-300 mg BID.

2. Alvelestat o una sal del mismo para su uso en un método de tratamiento de una enfermedad del sistema respiratorio mediada por deficiencia de a-1 antitripsina, en el que la enfermedad se selecciona entre enfermedad pulmonar obstructiva crónica (COPD), enfisema, asma y bronquiectasia, en un paciente que lo necesita y que no ha respondido a una terapia previa con alfa-1 antitripsina (AAT), el método comprende administrar una cantidad eficaz de alvelestat o una sal del mismo al paciente, y administrar alvelestat o una sal del mismo en un régimen de aumento de dosis que comprende:

- administrar alvelestat o una sal del mismo a una dosis de 60 mg dos veces al día durante un primer periodo de tiempo,

- administrar alvelestat o una sal del mismo a una dosis de 120 mg dos veces al día a partir de entonces,

en el que el primer período es de 5-20 días, preferiblemente de aproximadamente una semana (7 días).

3. Alvelestat o una sal del mismo para su uso en un método de tratamiento de una enfermedad del sistema respiratorio mediada por deficiencia de a-1 antitripsina, en el que la enfermedad se selecciona entre enfermedad pulmonar obstructiva crónica (COPD), enfisema, asma y bronquiectasia, en un paciente que lo necesita y que no ha respondido a una terapia previa con alfa-1 antitripsina (AAT), el método comprende administrar una cantidad eficaz de alvelestat o una sal del mismo al paciente, y administrar alvelestat o una sal del mismo en un régimen de aumento de dosis que comprende:

- administrar alvelestat o una sal del mismo a una dosis de 60 mg dos veces al día durante un primer periodo de tiempo,

- administrar alvelestat o una sal del mismo a una dosis de 120 mg dos veces al día durante un segundo periodo de tiempo,

- administrar alvelestat o una sal del mismo a una dosis de 180 mg dos veces al día durante un tercer periodo de tiempo, y

- administrar alvelestat o una sal del mismo a una dosis de 240 mg dos veces al día a partir de entonces,

en los que el primer, segundo y tercer periodos son de 5-20 días, preferiblemente de aproximadamente una semana (7 días).

4. Alvelestat o una sal del mismo para su uso según la reivindicación 1, en el que la cantidad de alvelestat o una sal del mismo administrada es de 220-300 mg BID.

5. Alvelestat o una sal del mismo para su uso según la reivindicación 1, en la que se administran 120 mg de alvelestat o una sal del mismo por administración.

6. Alvelestat o una sal del mismo para su uso según la reivindicación 1, en la que se administran 240 mg de alvelestat o una sal del mismo por administración.

7. Alvelestat o una sal del mismo para su uso según cualquiera de las reivindicaciones 1-6, en el que la enfermedad es COPD.

8. Alvelestat o una sal del mismo para su uso según cualquiera de las reivindicaciones 1-6, en el que la enfermedad es enfisema.

9. Alvelestat o una sal del mismo para su uso según cualquiera de las reivindicaciones 1-6, en el que la enfermedad es asma.

10. Alvelestat o una sal del mismo para su uso según cualquiera de las reivindicaciones 1-6, en el que la enfermedad es bronquiectasia.

11. Alvelestat o una sal del mismo para su uso según cualquiera de las reivindicaciones 1-10, en el que el principio activo comprende o consiste en la sal tosilato de alvelestat.