ES2964320T3 - Proceso para la purificación de la sal sódica del ácido hialurónico, realizado en un solvente orgánico - Google Patents

Proceso para la purificación de la sal sódica del ácido hialurónico, realizado en un solvente orgánico Download PDF

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Abstract

La presente invención se refiere a un proceso para la preparación de ácido hialurónico de grado farmacéutico, inyectable u oftálmico, o una sal del mismo, para uso en el campo dermocosmético o farmacéutico o en dispositivos médicos, que comprende la disolución de ácido hialurónico o una sal del mismo en compuestos orgánicos. disolvente, un ciclo de calor y recuperación del producto mediante precipitación y lavados sucesivos en disolventes orgánicos. (Traducción automática con Google Translate, sin valor legal)

Description

DESCRIPCIÓN
Proceso para la purificación de la sal sódica del ácido hialurónico, realizado en un solvente orgánico
La presente invención se refiere a un proceso para la preparación de ácido hialurónico de calidad farmacéutica, inyectable u oftálmica, o una sal del mismo, para su uso en el campo dermocosmético o farmacéutico o en dispositivos médicos, que comprende la disolución del ácido hialurónico o una sal del mismo en un solvente orgánico, un ciclo de calor y la recuperación del producto mediante precipitación y lavados sucesivos en solventes orgánicos.
La presente invención describe el proceso para la purificación de ácido hialurónico (HA) o una sal del mismo mediante tratamiento térmico en un medio orgánico que, sorprendentemente, elimina tanto bacterias como endotoxinas, específicamente los lipopolisacáridos presentes en la membrana externa de las bacterias gramnegativas responsables de la respuesta inflamatoriain vivoy protege el ácido hialurónico nativo contra la degradación, inducida por la hidrólisis, de la cadena de polisacárido. El ácido hialurónico preparado mediante dicho proceso tiene un perfil microbiológico compatible con los ácidos hialurónicos de calidad farmacéutica, inyectable u oftálmica. El proceso ofrece ventajas en términos químicos y biológicos, al evitar la degradación hidrolítica, porque se realiza en un solvente orgánico no acuoso. El proceso también tiene un bajo impacto ambiental y económico porque no requiere los grandes volúmenes típicos de los procedimientos existentes y permite la recuperación completa de los solventes para su reutilización. Finalmente, la extrema simplicidad del proceso, que no implica técnicas costosas de filtración, diafiltración o intercambio iónico, tiene un efecto muy favorable en su coste, por tanto, se amplían las posibles aplicaciones económicamente sostenibles de un hialuronato de sodio con un alto grado de pureza y, por lo tanto, aumenta la seguridad de los productos que contienen dicho polisacárido que, generalmente, se destinan al uso humano.
Estado de la técnica
El ácido hialurónico es un glucosaminoglucano que consiste de unidades repetidas de ácido glucurónico y N-acetilglucosamina unidas entre sí, alternativamente, mediante enlaces glucosídicos (31—»4 y (31 —»3. Es un elemento esencial del tejido conjuntivo, y también está presente en el líquido sinovial, el humor vítreo y el cordón umbilical. El ácido hialurónico lo aisló Karl Meyer y John Palmer en 1934, y tiene numerosos usos tópicos, usos inyectables en implantes (subcutáneos o intraarticulares) y usos en el campo oftálmico. La carga biológica aceptable depende de la aplicación final del ácido hialurónico: para aplicaciones tópicas o aplicaciones en la mucosa externa, se usa el "de calidad cosmética" con un límite, definido como el recuento total de microorganismos aerobios (TAMC) y el recuento total de levaduras y mohos (TYMC), sobre el número de colonias bacterianas y de levaduras y mohos (hasta 103 unidades formadoras de colonias por gramo, o UFC/g), mientras que el límite de unidades de endotoxina no se ha definido; para aplicaciones más invasivas se usa la calidad "farmacéutica", "oftálmica" o "inyectable", con límites de carga biológica más estrictos en el recuento de bacterias y un contenido de endotoxinas inferior a 0,5 UE/mg para aplicaciones parenterales y 0,05 UE/mg para aplicaciones intraarticulares o intraoculares. En vista de las numerosas aplicaciones del ácido hialurónico en el campo oftálmico y como agente inyectable subdérmico o articular, es evidente la importancia de la investigación de métodos simples, fiables y baratos para purificar el ácido hialurónico. El documento WO2013/132506 describe un método de purificación de endotoxinas mediante el tratamiento con bentonita y la filtración a través de carbón activado; el documento WO00/44925 informa un método de filtración tangencial seguido de esterilización por filtración, mientras que en el documento US2018/014041 se usan técnicas de diafiltración en soluciones muy diluidas; y el documento CA02225866 describe resinas cargadas negativamente que se usan en secuencia. Todos estos procesos son muy complejos y usan una instrumentación y equipos muy costosos (unidades de ultrafiltración, columnas de intercambio iónico y liofilizadores), lo que dificulta su aplicación en otros procesos industriales que no sean extremadamente costosos. En el caso de las soluciones diluidas (documento US2018/014041), los volúmenes necesarios también tienen un alto impacto ambiental.
El documento EP 2865395 describe un ciclo de calor en agua seguido de esterilización por filtración. Los tiempos de proceso descritos, que oscilan entre 1 y 6 días, limitan el potencial del proceso debido a la sensibilidad del ácido hialurónico a la degradación hidrolítica dependiente de la temperatura.
El documento EP2039777 usa el proceso de extracción en un solvente orgánico. Consiste en un proceso de fases heterogéneas que implica un alto riesgo de ineficacia debido a la dificultad de eliminar completamente las impurezas microbiológicas atrapadas en el sólido amorfo, el cual consiste de ácido hialurónico, aunque hinchado.
Finalmente, el documento US5,079,236 describe la preparación de una formulación inyectable, que parte de un ácido hialurónico que ya es microbiológicamente puro, al disolverlo en agua hasta una concentración adecuada en presencia de conservantes parabenos. El proceso descrito en ese caso no implica una purificación propiamente dicha, sino un proceso de conservación mediante el uso de ingredientes que pueden tener contraindicaciones en términos de seguridad, especialmente en el caso de los dispositivos médicos inyectables.
En general, todos los procesos conocidos implican el uso de máquinas que son difíciles de introducir en los procesos industriales, tanto por su complejidad tecnológica como por su alto coste. Además, dichos procesos usan grandes volúmenes de solvente acuoso y orgánico, con repercusiones en los costes de eliminación y recuperación y en el impacto ambiental.
Además, como todos dichos procesos se realizan en agua o en mezclas acuosas y orgánicas, y requieren largos tiempos de proceso y temperaturas que exceden la temperatura ambiente, tienen efectos adversos sobre el peso molecular del ácido hialurónico debido a la degradación hidrolítica.
Finalmente, nunca se ha descrito un proceso que implique usar un ácido hialurónico de calidad cosmética o una sal del mismo y aumentar su pureza microbiológica hasta un nivel compatible con los ácidos hialurónicos de calidad farmacéutica, inyectable u oftálmica.
Ahora se ha encontrado un proceso que produce ácido hialurónico o una sal del mismo a partir de un producto con una calidad inferior (cosmética) de pureza microbiológica, que da lugar a un producto con un perfil microbiológico compatible con los ácidos hialurónicos de calidad farmacéutica, inyectable u oftálmica.
Se elimina la complejidad de los procesos existentes ya que el proceso, de acuerdo con la presente invención, se realiza en una fase homogénea en un solvente orgánico. La eficiencia del proceso limita los volúmenes de solvente usados, con efectos económicos y ambientales favorables. El uso de sistemas no acuosos evita la típica degradación hidrolítica que afecta negativamente a los procesos estándar. La posibilidad de partir de un ácido hialurónico o una sal del mismo que tenga una calidad inferior (cosmética) de pureza microbiológica para obtener una calidad superior de pureza microbiológica, aumenta exponencialmente la versatilidad del proceso, porque no se asocia a un proceso de fermentación, aumenta el valor del sustrato de partida por medio de un proceso rentable y de bajo impacto ambiental y permite, potencialmente, obtener diferentes niveles de pureza microbiológica a partir de un mismo material de partida, por tanto permite su uso en campos de aplicación de diferentes niveles de invasividad, con evidentes repercusiones en términos de eficiencia, seguridad y coste.
Descripción de la invención
El objeto de la presente invención es un proceso para la preparación de un ácido hialurónico de calidad farmacéutica, inyectable u oftálmica, o una sal del mismo, que comprende las siguientes etapas:
a) disolver el ácido hialurónico o una sal del mismo a una temperatura que oscila entre 50 °C y 100 °C en un solvente seleccionado entre dimetilformamida, dimetilacetamida, N-metilpirrolidona y formamida, y mantener la solución en agitación a dicha temperatura durante un período que oscila entre 1 hora a 48 horas;
b) reducir la temperatura hasta la temperatura ambiente y mantener la solución en agitación durante 1 hora a 48 horas;
c) precipitar el ácido hialurónico o una sal del mismo mediante la adición de un solvente seleccionado entre un alcohol alquílico (C1-C4), tal como metanol o isopropanol, o acetona;
d) eliminar las impurezas y cualquier subproducto con una serie de lavados en una mezcla de agua y un solvente seleccionado entre un alcohol alquílico (C1-C4), tal como metanol o isopropanol, o acetona.
"La calidad farmacéutica, inyectable u oftálmica” significa un ácido hialurónico o una sal del mismo con un perfil microbiológico tal que cumpla los requisitos establecidos en la farmacopea para el grado de pureza correspondiente. El ácido hialurónico de calidad farmacéutica, inyectable u oftálmica o una sal del mismo, preparado mediante el proceso de acuerdo con la invención tiene, preferentemente, un valor máximo de 103 UFC/g y un contenido de endotoxinas inferior a 0,5 UE/mg.
La sal de ácido hialurónico es una sal aceptable para uso farmacéutico o cosmético o en dispositivos médicos, tal como la sal de sodio, potasio, litio o amonio cuaternario, por ejemplo, tetrabutilamonio, preferentemente la sal de sodio.
La etapa a) se realiza preferentemente a una temperatura que oscila entre 80 °C y 100 °C.
El solvente usado en la etapa a) es, preferentemente, la formamida.
El solvente usado para la precipitación en la etapa c) es, preferentemente, la acetona.
El precipitado obtenido en la etapa c) se lava, preferentemente, con un solvente seleccionado entre isopropanol y metanol, preferentemente metanol, y se filtra.
El ácido hialurónico o una sal del mismo usado en el proceso tiene, preferentemente, un peso molecular promedio que oscila entre 103 y 106 Dalton.
El proceso, de acuerdo con la invención, produce ácido hialurónico o una sal del mismo a partir del producto con un grado inferior de pureza microbiológica (por ejemplo, calidad cosmética), y da lugar a un producto compatible con aplicaciones inyectables (mesodérmica, subdérmica o intraarticular), farmacéuticas u oftálmicas.
El ácido hialurónico de partida suele ser de calidad cosmética.
Para aumentar el grado de purificación del producto, las etapas a), b), c) y d) del proceso, de acuerdo con la invención, se pueden repetir al menos una vez.
El ácido hialurónico, o una sal del mismo, obtenido mediante el proceso, de acuerdo con la invención, tiene un perfil microbiológico compatible con su uso en formulaciones farmacéuticas o dermocosméticas o en dispositivos médicos. El ácido hialurónico obtenido mediante el proceso, de acuerdo con la invención, puede usarse en formulaciones farmacéuticas o dermocosméticas, que comprenden ácido hialurónico de calidad farmacéutica, inyectable u oftálmica o una sal aceptable del mismo, para su uso en el campo dermocosmético o farmacéutico, en dispositivos médicos o como suplemento, ya sea solo o con al menos un excipiente y/o portador aceptable para uso farmacéutico o dermocosmético o como dispositivo médico.
Ejemplos
Métodos
Medición del nivel de endotoxinas (prueba LAL)
Las endotoxinas se cuantificaron con el método EU PHARMA 0172018.20614, correspondiente al documento USP 41 NF 362018 párrafos 85-161.
La sal sódica de ácido hialurónico de calidad cosmética usada para las siguientes pruebas experimentales posee un nivel de endotoxinas de 0,82 UE/mg, evaluado mediante dicho método.
Ejemplo 1: Preparación de la sal sódica de ácido hialurónico de calidad farmacéutica con un PM de 1500 kDa: (etapa a) 95 °C: 1 h; etapa b) 25 °C: 19 h)
En un matraz de tres bocas de 500 ml se introdujeron 200 ml de formamida, seguidos de 10 g de sal sódica de ácido hialurónico de calidad cosmética con un peso molecular de 1500 kDa. Con un termostato se controló la temperatura de la mezcla a 95 °C y se mantuvo en agitación a temperatura constante durante 1 h. Luego se redujo la temperatura a 25 °C y la mezcla se mantuvo en agitación durante 19 h a la misma temperatura.
Luego se añadieron 2,6 g de cloruro de sodio disueltos en 14 ml de agua para inyección y la mezcla se dejó en agitación durante aproximadamente 1 h. El producto se aisló mediante precipitación en acetona y subsecuente filtración.
El producto se sometió a varios lavados con metanol, cada uno seguido de filtración a baja presión. El precipitado se secó a baja presión a temperatura ambiente durante aproximadamente 16 h en una campana de flujo laminar.
Una muestra de 5 g de producto sometida a la prueba LAL demostró tener un contenido de endotoxinas de 0,36 UE/mg.
Ejemplo 2: Preparación de la sal sódica de ácido hialurónico de calidad farmacéutica con un PM de 300 kDa: (etapa a) 95 °C: 1 h; etapa b) 25 °C: 19 h)
En un matraz de tres bocas de 500 ml se introdujeron 200 ml de formamida, seguidos de 10 g de sal sódica de ácido hialurónico de calidad cosmética con un peso molecular de 300 kDa. Con un termostato se controló la temperatura de la mezcla a 95 °C y se mantuvo en agitación a temperatura constante durante 1 h. Luego se redujo la temperatura a 25 °C y la mezcla se mantuvo en agitación durante 19 h a la misma temperatura.
Luego se añadieron 2,6 g de cloruro de sodio disueltos en 14 ml de agua para inyección y la mezcla se dejó en agitación durante aproximadamente 1 h. El producto se aisló mediante precipitación en acetona y subsecuente filtración.
El producto se sometió a varios lavados con metanol, cada uno seguido de filtración a baja presión. El precipitado se secó a baja presión a temperatura ambiente durante aproximadamente 16 h en una campana de flujo laminar.
Una muestra de 5 g de producto sometida a la prueba LAL demostró tener un contenido de endotoxinas de 0,27 UE/mg.
Ejemplo 3: Preparación de la sal sódica de ácido hialurónico de calidad farmacéutica con un PM de 25 kDa: (etapa a) 95 °C: 1 h; etapa b) 25 °C: 19 h)
En un matraz de tres bocas de 500 ml se introdujeron 200 ml de formamida, seguidos de 20 g de sal sódica de ácido hialurónico de calidad cosmética con un peso molecular de 25 kDa. Con un termostato se controló la temperatura de la mezcla a 95 °C y se mantuvo en agitación a temperatura constante durante 1 h. Luego se redujo la temperatura a 25 °C y la mezcla se mantuvo en agitación durante 19 h a la misma temperatura.
Luego se añadieron 4 g de cloruro de sodio disueltos en 20 ml de agua para inyección y la mezcla se dejó en agitación durante aproximadamente 1 h. El producto se aisló mediante precipitación en acetona y subsecuente filtración.
El producto se sometió a varios lavados con metanol, cada uno seguido de filtración a baja presión. El precipitado se secó a baja presión a temperatura ambiente durante aproximadamente 16 h en una campana de flujo laminar. Una muestra de 5 g de producto sometida a la prueba LAL demostró tener un contenido de endotoxinas de 0,38 UE/mg.
Ejemplo 4: Preparación de la sal sódica de ácido hialurónico de calidad farmacéutica con un PM de 1500 kDa: (etapa a) 95 °C: 1 h; etapa b) 25 °C: 43 h)
En un matraz de tres bocas de 500 ml se introdujeron 200 ml de formamida, seguidos de 5 g de sal sódica de ácido hialurónico de calidad cosmética con un peso molecular de 1500 kDa. Con un termostato se controló la temperatura de la mezcla a 95 °C y se mantuvo en agitación a temperatura constante durante 1 h. Luego se redujo la temperatura a 25 °C y la mezcla se mantuvo en agitación durante 43 h a la misma temperatura.
Luego se añadieron 2,6 g de cloruro de sodio disueltos en 28 ml de agua para inyección y la mezcla se dejó en agitación durante aproximadamente 1 h. El producto se aisló mediante precipitación en acetona y subsecuente filtración.
El producto se sometió a varios lavados con metanol, cada uno seguido de filtración a baja presión. El precipitado se secó a baja presión a temperatura ambiente durante aproximadamente 16 h en una campana de flujo laminar. Una muestra de 5 g de producto sometida a la prueba LAL demostró tener un contenido de endotoxinas de 0,15 UE/mg.
Ejemplo 5: Preparación de la sal sódica de ácido hialurónico de calidad farmacéutica con un PM de 300 kDa: (etapa a) 95 °C: 1 h; etapa b) 25 °C: 43 h)
En un matraz de tres bocas de 500 ml se introdujeron 200 ml de formamida, seguidos de 10 g de sal sódica de ácido hialurónico de calidad cosmética con un peso molecular de 300 kDa. Con un termostato se controló la temperatura de la mezcla a 95 °C y se mantuvo en agitación a temperatura constante durante 1 h. Luego se redujo la temperatura a 25 °C y la mezcla se mantuvo en agitación durante 43 h a la misma temperatura.
Luego se añadieron 2,6 g de cloruro de sodio disueltos en 28 ml de agua para inyección y la mezcla se dejó en agitación durante aproximadamente 1 h. El producto se aisló mediante precipitación en acetona y subsecuente filtración.
El producto se sometió a varios lavados con metanol, cada uno seguido de filtración a baja presión. El precipitado se secó a baja presión a temperatura ambiente durante aproximadamente 16 h en una campana de flujo laminar. Una muestra de 5 g de producto sometida a la prueba LAL demostró tener un contenido de endotoxinas de 0,14 UE/mg.
Ejemplo 6: Preparación de la sal sódica de ácido hialurónico de calidad farmacéutica con un PM de 25 kDa: (etapa a) 95 °C: 1 h; etapa b) 25 °C: 43 h)
En un matraz de tres bocas de 500 ml se introdujeron 200 ml de formamida, seguidos de 20 g de sal sódica de ácido hialurónico de calidad cosmética con un peso molecular de 25 kDa. Con un termostato se controló la temperatura de la mezcla a 95 °C y se mantuvo en agitación a temperatura constante durante 1 h. Luego se redujo la temperatura a 25 °C y la mezcla se mantuvo en agitación durante 43 h a la misma temperatura.
Luego se añadieron 4 g de cloruro de sodio disueltos en 35 ml de agua para inyección y la mezcla se dejó en agitación durante aproximadamente 1 h. El producto se aisló mediante precipitación en acetona y subsecuente filtración.
El producto se sometió a varios lavados con metanol, cada uno seguido de filtración a baja presión. El precipitado se secó a baja presión a temperatura ambiente durante aproximadamente 16 h en una campana de flujo laminar. Una muestra de 5 g de producto sometida a la prueba LAL demostró tener un contenido de endotoxinas de 0,15 UE/mg.
Ejemplo 7: Preparación de la sal sódica de ácido hialurónico de calidad farmacéutica con un PM de 300 kDa: (etapa a) 95 °C: 43 h; etapa b) 25 °C: 1 h)
En un matraz de tres bocas de 500 ml se introdujeron 200 ml de formamida, seguidos de 10 g de sal sódica de ácido hialurónico de calidad cosmética con un peso molecular de 300 kDa. Con un termostato se controló la temperatura de la mezcla a 95 °C y se mantuvo en agitación a temperatura constante durante 43 h. Luego se redujo la temperatura a 25 °C, se añadieron 2,6 g de cloruro de sodio disueltos en 28 ml de agua para inyección y la mezcla se dejó en agitación durante 1 h a la misma temperatura.
El producto se aisló mediante precipitación en acetona y subsecuente filtración.
El producto se sometió a varios lavados con metanol, cada uno seguido de filtración a baja presión. El precipitado se secó a baja presión a temperatura ambiente durante aproximadamente 16 h en una campana de flujo laminar. Una muestra de 5 g de producto sometida a la prueba LAL demostró tener un contenido de endotoxinas < 0,05 UE/mg.
Ejemplo 8: Preparación de la sal sódica de ácido hialurónico de calidad farmacéutica con un PM de 25 kDa: (etapa a) 95 °C: 1 h; etapa b) 25 °C: 43 h)
En un matraz de tres bocas de 500 ml se introdujeron 300 ml de formamida, seguidos de 6 g de sal sódica de ácido hialurónico de calidad cosmética con un peso molecular de 25 kDa. Con un termostato se controló la temperatura de la mezcla a 95 °C y se mantuvo en agitación a temperatura constante durante 1 h. Luego se redujo la temperatura a 25 °C y la mezcla se mantuvo en agitación durante 43 h a la misma temperatura.
Luego se añadieron 3 g de cloruro de sodio disueltos en 15 ml de agua para inyección y la mezcla se dejó en agitación durante aproximadamente 1 h. El producto se aisló mediante precipitación en acetona y subsecuente filtración.
El producto se sometió a varios lavados con metanol, cada uno seguido de filtración a baja presión. El precipitado se secó a baja presión a temperatura ambiente durante aproximadamente 16 h en una campana de flujo laminar. Una muestra de 5 g de producto sometida a la prueba LAL demostró tener un contenido de endotoxinas de 0,12 UE/mg.
Ejemplo 9: Preparación de la sal sódica de ácido hialurónico de calidad farmacéutica con un PM de 300 kDa: (etapa a) 95 °C: 17 h; etapa b) 25 °C: 1 h)
En un matraz de tres bocas de 500 ml se introdujeron 200 ml de formamida, seguidos de 20 g de sal sódica de ácido hialurónico de calidad cosmética con un peso molecular de 300 kDa. Con un termostato se controló la temperatura de la mezcla a 95 °C y se mantuvo en agitación a temperatura constante durante 17 h. Luego se redujo la temperatura a 25 °C.
Luego se añadieron 2,6 g de cloruro de sodio disueltos en 28 ml de agua para inyección y la mezcla se dejó en agitación durante aproximadamente 1 h. El producto se aisló mediante precipitación en acetona y subsecuente filtración.
El producto se sometió a varios lavados con metanol, cada uno seguido de filtración a baja presión. El precipitado se secó a baja presión a temperatura ambiente durante aproximadamente 16 h en una campana de flujo laminar. Una muestra de 5 g de producto sometida a la prueba LAL demostró tener un contenido de endotoxinas de 0,20 UE/mg.
Ejemplo 10: Preparación de la sal sódica de ácido hialurónico de calidad farmacéutica con un PM de 300 kDa: repetición del proceso de purificación (etapa a) 95 °C: 17 h; etapa b) 25 °C: 1 h)
En un matraz de tres bocas de 500 ml se introdujeron 100 ml de formamida, seguidos de 10 g de ácido hialurónico, como se obtuvo en el Ejemplo 9. Con un termostato se controló la temperatura de la mezcla a 95 °C y se mantuvo en agitación a temperatura constante durante 17 h. Luego se redujo la temperatura a 25 °C, se añadieron 1,3 g de cloruro de sodio disueltos en 14 ml de agua para inyección y la mezcla se dejó en agitación durante aproximadamente 1 h. El producto se aisló mediante precipitación en acetona y subsecuente filtración.
El producto se sometió a varios lavados con metanol, cada uno seguido de filtración a baja presión. El precipitado se secó a baja presión a temperatura ambiente durante aproximadamente 16 h en una campana de flujo laminar. Una muestra de 5 g de producto sometida a la prueba LAL demostró tener un contenido de endotoxinas de 0,09 UE/mg.

Claims (8)

REIVINDICACIONES
1. Un proceso para la preparación de ácido hialurónico o una sal del mismo, de calidad farmacéutica, inyectable u oftálmica, que comprende las siguientes etapas:
a) disolver el ácido hialurónico o una sal del mismo a una temperatura que oscila entre 50 °C y 100 °C en un solvente seleccionado entre dimetilformamida, dimetilacetamida, N-metilpirrolidona y formamida, y mantener la solución en agitación a dicha temperatura durante un período de 1 hora a 48 horas;
b) disminuir la temperatura a temperatura ambiente y mantener la solución en agitación durante 1 hora a 48 horas;
c) precipitar el ácido hialurónico o una sal del mismo mediante la adición de un solvente seleccionado entre un alcohol alquílico (C1-C4), tal como metanol o isopropanol, o acetona;
d) eliminar las impurezas y cualquier subproducto mediante una serie de lavados en una mezcla de agua y un solvente seleccionado entre un alcohol alquílico (C1-C4), tal como metanol o isopropanol, o acetona.
2. El proceso de acuerdo con la reivindicación 1, en donde el ácido hialurónico o una sal del mismo, de calidad farmacéutica, inyectable u oftálmica, es ácido hialurónico o una sal del mismo con un valor máximo de 103 UFC/g y un contenido de endotoxinas inferior a 0,5 UE/mg.
3. El proceso de acuerdo con la reivindicación 1 o 2, en donde la temperatura de la etapa a) oscila entre 80 °C y 100 °C.
4. El proceso de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones anteriores, en donde el solvente usado en la etapa a) es la formamida.
5. El proceso de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones anteriores, en donde el solvente usado en la etapa c) para la precipitación es la acetona.
6. El proceso de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones anteriores, en donde el producto precipitado obtenido en la etapa c) se lava con un solvente seleccionado entre isopropanol y metanol y se filtra.
7. El proceso de acuerdo con la reivindicación 6, en donde el producto precipitado obtenido en la etapa c) se lava con metanol y se filtra.
8. El proceso de acuerdo con cada una de las reivindicaciones anteriores, en donde las etapas a), b), c) y d) se repiten al menos una vez.
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