ES2982017T3 - Derivados de pirido-oxazina como inhibidores de ALK5 - Google Patents

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Paolo Bruno
Paolo Ronchi
Matteo Biagetti
Sara Guariento
Claudio Fiorelli
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Abstract

DERIVADOS DE PIRIDOOXAZINA COMO INHIBIDORES DE ALK5 La presente invención se refiere a un compuesto de fórmula general (I) que inhibe el receptor de tipo I del factor de crecimiento transformante β (TGF-β) (ALK5), a métodos para preparar dichos compuestos, a composiciones farmacéuticas que los contienen y a su uso terapéutico. Los compuestos de la invención pueden ser útiles en el tratamiento de enfermedades o afecciones asociadas con una desregulación de la vía de señalización de ALK5 en un mamífero. (Traducción automática con Google Translate, sin valor legal)

Description

DESCRIPCIÓN
Derivados de pirido-oxazina como inhibidores de ALK5
Campo de la invención
La presente invención se refiere generalmente a compuestos que inhiben el receptor tipo I del factor de crecimiento transformante p (TGF p) (ALK5) (en lo adelante inhibidores de ALK5), métodos para preparar dichos compuestos, composiciones farmacéuticas que los contienen y el uso terapéutico de estos.
Los compuestos de la invención pueden ser útiles, por ejemplo, en el tratamiento de muchas enfermedades, trastornos o afecciones asociadas con la vía de señalización de ALK5.
Antecedentes de la invención
El factor de crecimiento transformante p (TGF p) es una proteína perteneciente a la superfamilia del TGF p.
Está implicado en varios procesos, tanto celulares, tales como la proliferación, la migración y la diferenciación, como biológicos, lo que incluye la cicatrización de la herida, la inmunosupresión, la cancerogénesis y la producción de matriz extracelular.
La superfamilia del TGF p también incluye, entre otros, otros miembros conocidos como activinas (Act) (ver, por ejemplo, el documento de Hinck AP, FEbS Letters 586 (2012); 1860-1870).
La unión del péptido inicia la cascada de señalización del TGF p mediante la formación de un complejo heterotetramérico compuesto por dos receptores de serina/treonina quinasas diferentes: tipo 1 (TGFpR1/ALK5) y tipo 2 (TGFpR2).
TGFpR1/ALK5 se recluta y activa mediante la fosforilación de su dominio intracelular por TGFpR2, lo que a su vez conduce a la fosforilación de la familia Smad activada por receptores (R-Smad), lo que da como resultado la activación de la transcripción del gen objetivo (ver, por ejemplo, el documento de Sheppard D., Proc Am Thorac Soc. (2006);(3):413-417).
De manera similar a la señalización del TGF p, el receptor tipo I para la activina, ALK4, conduce a la activación de la transcripción del gen objetivo (ver, por ejemplo, el documento de Heldin CH y otros, Cold Spring Harb Perspect Biol. (2016) 1 de agosto;8(8)).
Varios estudios han vinculado una actividad excesiva y/o desregulada del TGFp con muchas enfermedades, lo que incluye el cáncer y la fibrosis (ver, por ejemplo, el documento de Syed V, J Cell Biochem. junio (2016); 117(6): 1279 87; Jakowlew SB. Cancer Metastasis Rev. septiembre (2006); 25(3):435-57). Entre los trastornos fibróticos, se ha demostrado un papel fundamental del TGFp en órganos tales como pulmón, corazón, hígado y riñón (ver, por ejemplo, el documento de Alhamad EH, J Thorac Dis. (2015);7(3):386-93). En particular, la expresión del TGFp aumenta en enfermedades pulmonares fibróticas, tales como fibrosis pulmonar idiopática (IPF), y en afecciones inflamatorias crónicas, tales como enfermedad pulmonar obstructiva crónica y asma (ver, por ejemplo, el documento de Thomas BJ y otros, Am J Respir Cell Mol Biol. (2016);(55):759-766).
En el pulmón, el TGFp se expresa en varios tipos de células, como células epiteliales, células endoteliales, células del tejido conjuntivo, macrófagos y fibroblastos.
Estas poblaciones celulares pueden producir un exceso de TGFp en el tejido pulmonar humano con IPF. Además, se han detectado niveles elevados de TGFp en tejido pulmonar y BAL de pacientes con IPF (ver, por ejemplo, el documento de Bergeron A y otros, Eur Respir J (2003); 22:69-76).
Se ha observado que la expresión del gen TGFp y la producción de la proteína TGFp aumentan en una variedad de modelos animales de fibrosis pulmonar provocada por bleomicina, sílice, asbesto y radiación (ver, por ejemplo, el documento de Wei F y otros, Int Immunopharmacol. julio (2017);48: 67-75; Choe J<y>y otros, Inflamm Res. marzo (2010);59(3): 177-88; Wang X y otros, Respir Res (2009); 10, 36) y también se ha informado cómo la expresión de TGFp es suficiente para inducir fibrosis progresiva en roedores (ver, por ejemplo, el documento de Sime PJ y otros, J Clin Invest (1997); 100:768-776; Kim KK y otros).
Por el contrario, la inhibición de la señalización del TGFp obtenida mediante el empleo de animales con desactivación génica (KO) puede inhibir el desarrollo de fibrosis mediante mecanismos ligados a TGFp (ver, por ejemplo, el documento de Bonniaud P y otros, Am J Respir Crit Care Med (2005); 171:889-898; 34).
Se han logrado resultados similares con la inhibición de TGFpR1 en el modelo de enfermedad por bleomicina en ratones (ver, por ejemplo, el documento de Wei Y y otros, J Clin Invest. (2017);127(10):3675-3688).
La desregulación de la señalización de activina, de manera similar al TGFp, está asociada a la proliferación de fibroblastos, la diferenciación a miofibroblastos y la acumulación de matriz extracelular (ECM) (ver, por ejemplo, el documento de Yamashita y otros, J. Am. Soc. Nephrol. (2004) 15, 91-101). Además, la sobreexpresión de la activina se ha vinculado con condiciones patológicas y el desarrollo de fibrosis en diferentes órganos, tales como el hígado (ver, por ejemplo, el documento de Patella y otros, Am. J. Physiol. Gastrointest. Liver Physiol. (2006) 290, G137-G144), el riñón (ver, por ejemplo, el documento de Agapova y otros, Kidney Int. (2016) 89, 1231-1243), el corazón (ver, por ejemplo, el documento de Yndestad y otros, Circulation (2004) 109,1379-1385), y el pulmón (ver, por ejemplo, el documento de De Kretsery otros, Crit. Care (2013) 17: R263).
Tomados en conjunto, estos datos sugieren la importancia de dirigirse a ALK5 y/o ALK4, preferentemente, ALK5, para tratar farmacológicamente las enfermedades mencionadas anteriormente, vinculadas con la desregulación de la vía de señalización del TGF.
La señalización del TGFp está fuertemente implicada en la homeostasis cardiovascular (ver, por ejemplo, el documento de van Meeteren LA y otros, Springer (2013)). Varios estudios en seres humanos y ratones han demostrado el papel principal del TGFp en la angiogénesis y la morfogénesis vascular. Además, el TGFp desempeña un papel clave en el desarrollo y funcionalidad de las válvulas cardiacas. Por lo tanto, es evidente la importancia de una regulación selectiva de la vía del TGFp para abordar los efectos patológicos, que evite la supresión de la señalización necesaria para una correcta homeostasis.
La respuesta a este punto fundamental podría abordarse mediante el uso de la vía de inhalación para suministrar un fármaco antiTGFp.
La vía inhalatoria permitiría el tratamiento del compartimiento pulmonar afectado, que evita el problema de la exposición del corazón.
Se han descrito diversos compuestos en la literatura como inhibidores de ALK5 y/o ALK4.
Los documentos WO2008/006583, WO2009/087212, WO2009/087224, WO2009/087225, WO2009/133070, WO2009/013335 y WO2009/050183 (Novartis) describen respectivamente derivados de pirimidina, piridina, imidazopiridina, pirrolopirimidina y pirrolopiridina, imidazopiridazina, imidazopiridina, útiles para el tratamiento de enfermedades mediadas por ALK4 o ALK5, tales como enfermedades inflamatorias u obstructivas de las vías respiratorias, la hipertensión pulmonar y la fibrosis pulmonar.
Los documentos WO00/61576 y US2003/0149277 (Smithkline Beecham Corp) describen derivados de triarilimidazol como inhibidores de ALK5 útiles para el tratamiento de, entre otras, enfermedades renales, cicatrización de la herida, enfermedades del riñón, insuficiencia cardiaca congestiva, úlceras, función neurológica alterada y cualquier enfermedad en donde la fibrosis sea un componente importante.
El documento WO01/62756 (Smithkline Beecham PLC) describe derivados de piridinilimidazol como inhibidores de ALK5 útiles para el tratamiento de, entre otras, enfermedades renales, cicatrización de la herida, enfermedades del riñón, insuficiencia cardiaca congestiva, úlceras, función neurológica alterada y cualquier enfermedad en donde la fibrosis sea un componente importante.
El documento WO03/087304 (Biogen Inc.) describe heteroarilos trisustituidos como inhibidores de ALK5 y/o ALK4 útiles para el tratamiento de, entre otras, fibrosis pulmonar idiopática, nefropatía diabética, fibrosis hepática, fibrosis pulmonar, lesión pulmonar aguda, fibrosis cardiaca postinfarto, cánceres fibróticos y fibromas.
El documento WO2013/009140 (SK Chemicals Co) describe derivados de imidazol sustituidos con 2-piridilo como inhibidores de los receptores ALK5 y/o ALK4 útiles para el tratamiento de, entre otras, fibrosis renal, hepática o pulmonar.
En la literatura se han descrito derivados de pirido-oxazina, pero no como inhibidores de ALK5.
El documento WO2013/093849 (Novartis) describe, entre otros compuestos, derivados de pirido-oxazina como inhibidores de Pi3K, en donde la piridina condensada al anillo de oxazina está unida a un anillo heterocíclico de 5 miembros mediante un puente de O o NH. Estos compuestos se describen como útiles para el tratamiento de, entre otros, trastornos o enfermedades seleccionadas de artritis reumatoide, lupus eritematoso sistémico, esclerosis múltiple, alergia y malaria.
Es de destacar que la inhibición del receptor ALK5 puede ser útil para el tratamiento de la fibrosis y de enfermedades, trastornos y afecciones que se producen como resultado de la fibrosis.
En los últimos años se han hecho varios esfuerzos para desarrollar nuevos inhibidores del receptor ALK5 útiles para el tratamiento de varias enfermedades y algunos de esos compuestos han demostrado eficacia también en seres humanos.
Sin embargo, aún existe potencial para desarrollar inhibidores del receptor ALK5 caracterizados por una buena potencia, útiles para el tratamiento de enfermedades o afecciones asociadas con una desregulación de la vía de señalización de ALK5, en particular la fibrosis.
En particular, aún existe potencial para desarrollar inhibidores del receptor ALK5 útiles para el tratamiento de enfermedades o afecciones asociadas con una desregulación de la vía de señalización de ALK5 en el campo respiratorio, en particular en la fibrosis pulmonar idiopática (IPF), para ser administrados por la vía de inhalación y caracterizados por un buen perfil inhalatorio, que corresponde a una buena actividad en el pulmón, una buena retención pulmonar y una baja estabilidad metabólica para minimizar la exposición sistémica y los problemas de seguridad correlacionados.
En esta dirección, hemos encontrado sorprendentemente una nueva serie de compuestos de fórmula general (I) que resuelven el problema de proporcionar potentes inhibidores del receptor ALK5 para su administración por inhalación, que muestran, al mismo tiempo, un buen perfil inhalatorio, baja estabilidad metabólica, baja exposición sistémica, mayor seguridad y tolerabilidad, y una buena selectividad en todo el quinoma.
Resumen de la invención
En un primer aspecto, la presente invención se refiere a compuestos de fórmula (I)
en donde
A se selecciona de los grupos que consisten en A1 y A2
R1 es H o se selecciona del grupo que consiste en -NR3C(O)R4 y -NR3R3;
X1 y X2 son independientemente N o CH;
R2 es arilo opcionalmente sustituido por uno o más grupos seleccionados de átomos de halógeno, -alquilo(C1-C6), cicloalquilo y -haloalquilo(C1-C4) o R2 es heteroarilo opcionalmente sustituido por uno o más átomos de halógeno; R3 es H o -alquilo(C1-C6);
R3’ es H o -alquilo(C1-C6);
R4 se selecciona del grupo que consiste en -alquilo(C1-C6), -NR<a>R<b>, -alquileno(C1-C6)-NRARB, -alquileno(C1-Ca)-O-alquilo(C1-C6), -NHalquileno(C1-C6)-heterocicloalquilo y -alquileno(C1-C6)-heterocicloalquilo, en donde dicho heterocicloalquilo está opcionalmente sustituido por uno o más grupos seleccionados de oxo, alcoxi, -alquileno(Cr Ca)-OH, -C(O)O-alquilo(C1-C6), -alquileno(C1-C6)-C(O)O-alquilo(C1-C6), -alquileno(C1-C6)-C(O)NH-alquilo(C1-C6), -alquileno(C1-C6)-C(O)NH-alquilo(C1-C6)-OH, -alquileno(C1-Ca)-NHSO2-alquilo(C1-Ca), -alquileno(C1-Ca)-CONH2, -alquileno(C1-Ca)-NRARB, y alquilo(C1-Ca);
Ra es H o se selecciona del grupo que consiste en -alquilo(C1-Ca), heterocicloalquilo e -hidroxialquilo(CrCa);
R<b>se selecciona del grupo que consiste en -alquilo(C1-Ca), -alquileno(C1-Ca)-C(O)O-alquilo(C1-Ca), heterocicloalquilo, -alquileno(C1-Ca)-heterocicloalquilo, -SO2-alquilo(C1- Ca), -alquileno(C1-Ca)-NH-SO2-alquilo(C1-Ca), -alquileno(C1-Ca)-SO2-alquilo(C1-Ca) e -hidroxialquilo(C1-Ca), en donde dicho heterocicloalquilo del -alquileno(Cr Ca)-heterocicloalquilo puede estar opcionalmente sustituido por uno o más -alquilo(C1-Ca);
R5 es H o se selecciona del grupo que consiste en -NH2, -C(O)OH, -C(O)O-alquilo(C1-Ca), -haloalquilo(CrCa) y -OH; y sales farmacéuticamente aceptables de estos.
En un segundo aspecto, la invención se refiere a una composición farmacéutica que comprende un compuesto de fórmula (I) y sales farmacéuticamente aceptables de este, mezclado con uno o más portadores o excipientes farmacéuticamente aceptables.
En un tercer aspecto, la invención se refiere a un compuesto de fórmula (I) y sales farmacéuticamente aceptables o a una composición farmacéutica que comprende un compuesto de fórmula (I) y sales farmacéuticamente aceptables de este para su uso como medicamento.
En un aspecto adicional, la invención se refiere a un compuesto de fórmula (I) y sales farmacéuticamente aceptables de este o a una composición farmacéutica que comprende un compuesto de fórmula (I) y sales farmacéuticamente aceptables de este para su uso en la prevención y/o tratamiento de una enfermedad, trastorno o afección mediada por el receptor ALK5 en un mamífero.
En un aspecto adicional, la invención se refiere a un compuesto de fórmula (I) y sales farmacéuticamente aceptables de este o a una composición farmacéutica que comprende un compuesto de fórmula (I) y sales farmacéuticamente aceptables de este para su uso en la prevención y/o tratamiento de la fibrosis y/o enfermedades, trastornos o afecciones que implican fibrosis.
En un aspecto adicional, la invención se refiere a un compuesto de fórmula (I) y sales farmacéuticamente aceptables de este o a una composición farmacéutica que comprende un compuesto de fórmula (I) y sales farmacéuticamente aceptables de este para su uso en la prevención y/o tratamiento de la fibrosis pulmonar idiopática (IPF).
Descripción detallada de la invención
Definiciones
A menos que se especifique de cualquier otra manera, se pretende que el compuesto de fórmula (I) de la presente invención incluya también estereoisómeros, tautómeros o sales o solvatos farmacéuticamente aceptables de este. El término “sales farmacéuticamente aceptables”, como se usa en la presente, se refiere a derivados de los compuestos de fórmula (I) en donde el compuesto original se modifica adecuadamente mediante la conversión de cualquiera de los grupos ácidos o básicos libres, si están presentes, en la sal de adición correspondiente con cualquier base o ácido convencionalmente indicado como farmacéuticamente aceptable.
Los ejemplos adecuados de dichas sales pueden incluir de esta forma sales de adición de ácidos minerales u orgánicos de residuos básicos tales como grupos amino, así como también sales de adición de bases minerales u orgánicas de residuos ácidos tales como grupos carboxílicos.
Los cationes de bases inorgánicas que pueden usarse adecuadamente para preparar sales comprenden iones de metales alcalinos o alcalinotérreos tales como potasio, sodio, calcio o magnesio.
Los obtenidos al hacer reaccionar el compuesto principal, que funciona como una base, con un ácido inorgánico u orgánico para formar una sal comprenden, por ejemplo, sales del ácido clorhídrico, ácido bromhídrico, ácido sulfúrico, ácido fosfórico, ácido metanosulfónico, ácido alcanforsulfónico, ácido acético, ácido oxálico, ácido maleico, ácido fumárico, ácido succínico y ácido cítrico.
El término "solvato" significa una asociación física de un compuesto de esta invención con una o más moléculas de solvente, ya sea orgánico o inorgánico. Esta asociación física incluye enlaces de hidrógeno. En ciertos casos, el solvato podrá aislarse, por ejemplo, cuando se incorporan una o más moléculas de solvente a la red cristalina del sólido cristalino. El solvato puede comprender una cantidad estequiométrica o no estequiométrica de las moléculas de solvente.
El término "estereoisómero" se refiere a isómeros de constitución idéntica que difieren en la disposición de sus átomos en el espacio. Los enantiómeros y diastereómeros son ejemplos de estereoisómeros.
El término "racemato" o "mezcla racémica" se refiere a una composición compuesta por cantidades equimolares de dos especies enantioméricas, en donde la composición carece de actividad óptica.
El término "tautómero" se refiere a cada uno de dos o más isómeros de un compuesto que existen juntos en equilibrio y se intercambian fácilmente mediante la migración de un átomo o grupo dentro de la molécula.
El término “halógeno” o “átomos de halógeno” o “halo”, como se usa en la presente, incluye el átomo de flúor, cloro, bromo y yodo.
El término "alquilo(Cx-Cy)", en donde x e y son números enteros, se refiere a un grupo alquilo de cadena lineal o ramificada que tiene de x a y átomos de carbono. De esta forma, cuando x es 1 e y es 6, por ejemplo, el término incluye metilo, etilo, n-propilo, isopropilo, n-butilo, isobutilo, sec-butilo, t-butilo, n-pentilo y n-hexilo.
El término “alcoxi(Cx-Cy)”, en donde x e y son números enteros, se refiere a un hidrocarburo lineal o ramificado del número de carbonos indicado, unido al resto de la molécula mediante un puente de oxígeno.
El término "alquileno(Cx-Cy)", en donde x e y son números enteros, se refiere a un radical alquiloCx- Cy que tiene en total dos valencias insatisfechas, tal como un radical metileno divalente.
Las expresiones “haloalquilo(Cx-Cy)”, en donde x e y son números enteros, se refieren a los grupos “alquilo(Cx-Cy)” definidos anteriormente, en donde uno o más átomos de hidrógeno se reemplazan por uno o más átomos de halógeno, que pueden ser iguales o diferentes entre sí.
Los ejemplos de dichos grupos “haloalquilo(Cx-Cy)” pueden incluir, por tanto, grupos alquilo halogenados, polihalogenados y completamente halogenados, en donde todos los átomos de hidrógeno se reemplazan por átomos de halógeno, por ejemplo, trifluorometilo.
El término “cicloalquilo(Cx-Cy)” en donde x e y son números enteros, se refiere a grupos hidrocarbonados cíclicos saturados que contienen el número indicado de átomos de carbono en el anillo. Los ejemplos incluyen ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopentilo, ciclohexilo y cicloheptilo.
El término “arilo” se refiere a sistemas de anillos de carbono monocíclicos que tienen un anillo de 6 miembros, en donde el anillo es aromático. Ejemplos de sistemas de anillos monocíclicos arilo adecuados incluyen, por ejemplo, fenilo.
El término "heteroarilo" se refiere a un grupo aromático mono o bicíclico que contiene uno o más heteroátomos seleccionados de S, N y O, e incluye grupos que tienen dos de dichos anillos monocíclicos, o uno de dichos anillos monocíclicos y un anillo arilo monocíclico, que se fusionan mediante un enlace común.
El término “heterocicloalquilo(Cx-Cy)”, en donde x e y son números enteros, se refiere a grupos cicloalquilo(Cx-Cy) monocíclicos saturados o parcialmente insaturados en los que al menos un átomo de carbono del anillo está reemplazado por al menos un heteroátomo (por ejemplo, N, S u O) o pueden portar un grupo sustituyente -oxo (=O). Dicho heterocicloalquilo puede estar además opcionalmente sustituido en las posiciones disponibles en el anillo, específicamente en un átomo de carbono, o en un heteroátomo disponible para la sustitución. La sustitución puede ser en un átomo de carbono, lo que incluye la espirodisustitución, formando un sistema bicíclico donde dos anillos heterocíclicos están conectados mediante un solo átomo de carbono, así como también en dos átomos de carbono adyacentes, formando un anillo heterocicloalquilo de 5 a 6 miembros condensado adicional. Además, dicho heterocicloalquilo puede ser un anillo diazabiciclo.
El término “hidroxialquilo(Cx-Cy)”, en donde x e y son números enteros, se refiere a los grupos “alquilo(C1-C6)” definidos anteriormente, en donde uno o más átomos de hidrógeno están reemplazados por uno o más grupos hidroxi (OH).
A lo largo de la descripción, el uso de un asterisco “*” en la definición de una fórmula estructural, indica el punto de unión del grupo radical al resto de la molécula.
Un guion (“-“) que no está entre dos letras o símbolos pretende representar el punto de unión para un sustituyente. El grupo carbonilo se representa en la presente descripción preferentemente como -C(O)- como alternativa a otras representaciones comunes tales como -CO-, -(CO)- o -C(=O)-.
En general, el grupo entre corchetes es un grupo lateral, no incluido en la cadena, y los corchetes se usan, cuando se considera útil, para ayudar a eliminar la ambigüedad entre fórmulas químicas lineales; por ejemplo, el grupo sulfonilo -SO2- también podría representarse como -S(O)2- para eliminar la ambigüedad, por ejemplo, con respecto al grupo sulfínico -S(O)O-.
La presente invención se refiere a nuevos compuestos que difieren de las estructuras descritas en la técnica al menos por una nueva armazón central común. De hecho, la invención se refiere a compuestos que son derivados de 2,3-dihidro-1H-pirido[3,4-b][1,4]oxazina, en donde el nitrógeno de la oxazina está unido a una piridina o a una piridina fusionada a un anillo heterocíclico de 5 miembros, que son inhibidores del receptor ALK5, que tienen características terapéuticamente convenientes, particularmente prometedores para algunas fibrosis, lo que incluye la fibrosis pulmonar idiopática (IPF).
Los compuestos de la invención son activos como inhibidores del receptor ALK5, son potentes y muestran propiedades mejoradas tales como un buen perfil inhalatorio, una baja estabilidad metabólica, baja exposición sistémica, mayor seguridad y tolerabilidad y una buena selectividad en todo el quinoma.
A este respecto, el estado de la técnica no describe ni sugiere derivados de pirido-oxazina de fórmula general (I) de la presente invención que tengan actividad inhibidora sobre el receptor ALK5 que representen una solución a la necesidad antes mencionada.
El documento WO2013/093849 (Novartis) describe, entre otros compuestos, derivados de pirido-oxazina. Los compuestos de fórmula (I) de la presente invención se diferencian de los de Novartis por los sustituyentes en la piridina condensada al anillo de oxazina y, también, por los sustituyentes en la piridina unida al anillo de oxazina. Novartis describe compuestos como inhibidores de Pi3K. Novartis no describe compuestos como inhibidores de ALK5, ni compuestos para el tratamiento de la fibrosis.
Con más detalle, la presente invención se refiere a una serie de compuestos representados mediante la fórmula general (I) como se describe en detalle en la presente descripción más abajo, que están dotados de una actividad inhibidora sobre el receptor ALK5.
Ventajosamente, la acción inhibidora sobre el receptor ALK5 puede ser efectiva en el tratamiento de aquellas enfermedades en las que estos receptores desempeñan un papel relevante en la patogénesis, tales como fibrosis y enfermedades, trastornos y afecciones derivadas de la fibrosis.
A diferencia de compuestos similares de la técnica anterior, los compuestos de fórmula (I) de la presente invención son capaces de actuar como inhibidores del receptor ALK5, algo particularmente apreciado por el experto cuando busca compuestos adecuados y eficaces útiles para el tratamiento de la fibrosis, en particular la fibrosis pulmonar idiopática.
Como se indica en la parte experimental, en particular en la Tabla 4, los compuestos de fórmula (I) de la presente invención muestran una potencia notable con respecto a su actividad inhibidora sobre el receptor ALK5, por debajo de aproximadamente 10 nM, lo que confirma que son capaces de inhibir el receptor ALK5 implicado en la fibrosis y las enfermedades que se producen como resultado de la fibrosis.
Como se indica en la parte experimental, ejemplos comparativos, en particular en la Tabla 5, se muestra que, a la inversa de los compuestos C1 y C2 caracterizados por un anillo pirido-oxazina en donde la oxazina está unida a un anillo heterocíclico de 5 miembros, en los compuestos de la presente invención, caracterizados por el anillo oxazina unido a una piridina o piridina fusionada a un anillo heterocíclico de 5 miembros, la presencia de dicha piridina o piridina fusionada a un anillo heterocíclico de 5 miembros determina de forma notable e inesperada un aumento relevante en la actividad inhibidora sobre el receptor ALK5.
Ventajosamente, los compuestos de la presente invención están dotados de una potencia muy alta, podrían administrarse en seres humanos en una dosis más baja con respecto a los compuestos de la técnica anterior, de esta forma se reducen los eventos adversos que se producen típicamente al administrar dosis más altas de fármaco. Además de ser notablemente potentes con respecto a su actividad inhibidora sobre el receptor ALK5, los compuestos de la presente invención también se caracterizan por un buen perfil inhalatorio, que les permite actuar con efectividad en el compartimiento pulmonar y tener, al mismo tiempo, una baja estabilidad metabólica, que permite minimizar los inconvenientes asociados con la exposición sistémica, tales como problemas de seguridad y tolerabilidad.
Por lo tanto, los compuestos de la presente invención son particularmente apreciados por el experto cuando busca compuestos adecuados y eficaces útiles para el tratamiento de la fibrosis, en particular la fibrosis pulmonar idiopática, administrados por vía de inhalación y caracterizados por un buen perfil inhalatorio, que corresponde a una buena actividad en el pulmón, una buena retención pulmonar y a una baja estabilidad metabólica, que minimiza la exposición sistémica y los problemas de seguridad correlacionados.
Por tanto, en un aspecto, la presente invención se refiere a un compuesto de fórmula general (I)
en donde
A se selecciona de los grupos que consisten en A1 y A2
Ri es H o se selecciona del grupo que consiste en -NR3C(O)R4 y -NR3R3;
X1 y X2 son independientemente N o CH;
R2 es arilo opcionalmente sustituido por uno o más grupos seleccionados de átomos de halógeno, -alquilo(C1-C6), cicloalquilo y -haloalquilo(C1-C4) o R2 es heteroarilo opcionalmente sustituido por uno o más átomos de halógeno; R3 es H o -alquilo(C1-C6);
R3’ es H o -alquilo(C1-C6);
R4 se selecciona del grupo que consiste en -alquilo(C1-C6), -NR<a>R<b>, -alquileno(C1-C6)-NRARB, -alquileno(C1-Ca)-O-alquilo(C1-C6), -NHalquileno(C1-C6)-heterocicloalquilo y -alquileno(C1-C6)-heterocicloalquilo, en donde dicho heterocicloalquilo está opcionalmente sustituido por uno o más grupos seleccionados de oxo, alcoxi, -alquileno(Cr Ca)-OH, -C(O)O-alquilo(C1-C6), -alquileno(C1-C6)-C(O)O-alquilo(C1-C6), -alquileno(C1-C6)-C(O)NH-alquilo(C1-C6), -alquileno(C1-C6)-C(O)NH-alquilo(C1-C6)-OH, -alquileno(C1-Ca)-NHSO2-alquilo(C1-Ca), -alquileno(C1-Ca)-CONH2, -alquileno(C1-Ca)-NRARB, y alquilo(C1-Ca);
Ra es H o se selecciona del grupo que consiste en -alquilo(C1-Ca), heterocicloalquilo e -hidroxialquilo(C1-Ca);
R<b>se selecciona del grupo que consiste en -alquilo(C1-Ca), -alquileno(C1-Ca)-C(O)O-alquilo(C1-Ca), heterocicloalquilo, -alquileno(C1-Ca)-heterocicloalquilo, -SO2-alquilo(C1- Ca), -alquileno(C1-Ca)-NH-SO2-alquilo(C1-Ca), -alquileno(C1-Ca)-SO2-alquilo(C1-Ca) e -hidroxialquilo(C1-Ca), en donde dicho heterocicloalquilo del -alquileno(Cr Ca)-heterocicloalquilo puede estar opcionalmente sustituido por uno o más -alquilo(CrCa);
R5 es H o se selecciona del grupo que consiste en -NH2, -C(O)OH, -C(O)O-alquilo(C1-Ca), -haloalquilo(C1-Ca) y -OH; y sales farmacéuticamente aceptables de este.
En otro aspecto, la presente invención se refiere a un compuesto de fórmula general (I) como inhibidores de ALK5
en donde
A se selecciona de los grupos que consisten en A1 y A2
R1 es H o se selecciona del grupo que consiste en -NR3C(O)R4 y-NR3R3;
X1 y X2 son independientemente N o CH;
R2 es arilo opcionalmente sustituido por uno o más grupos seleccionados de átomos de halógeno, -alquilo(CrCa), cicloalquilo y -haloalquilo(C1-C4) o R2 es heteroarilo opcionalmente sustituido por uno o más átomos de halógeno; R3 es H o -alquilo(C1-Ca);
R3’ es H o -alquilo(C1-Ca);
R4 se selecciona del grupo que consiste en -alquilo(C1-Ca), -alquileno(C1-Ca)-NRARB, y -alquileno(CrCa)-heterocicloalquilo, en donde dicho heterocicloalquilo esta opcionalmente sustituido por uno o más grupos seleccionados de oxo y -alquilo(C1-Ca);
Ra es H o se selecciona del grupo que consiste en -alquilo(C1-Ca), heterocicloalquilo e -hidroxialquilo(CrCa);
R<b>se selecciona del grupo que consiste en -alquilo(C1-Ca), -alquileno(C1-Ca)-C(O)O-alquilo(C1-Ca), heterocicloalquilo, -SO2-alquilo(C1-Ca), -alquileno(C1-Ca)-SO2-alquilo(C1-Ca) e -hidroxialquilo(CrCa);
R5 es H o -NH2;
y sales farmacéuticamente aceptables de este.
En un modalidad preferida, R5 es H.
En una modalidad preferida, R2 es fenilo sustituido por uno o dos grupos seleccionados de flúor, cloro, metilo, ciclopropilo e isopropilo, o R2 es piridilo opcionalmente sustituido por uno o más flúor o cloro.
En una modalidad particularmente preferida, la presente invención se refiere a un compuesto de fórmula (I), en donde A es A1
representado mediante la fórmula (Ia)
R1 es H o se selecciona del grupo que consiste en -NR3C(O)R4 y -NR3R3;
R2 es arilo opcionalmente sustituido por uno o más grupos seleccionados de átomos de halógeno, -alquilo(C1-C6), cicloalquilo y -haloalquilo(C1-C4) o R2 es heteroarilo opcionalmente sustituido por uno o más átomos de halógeno; R3 es H o -alquilo(C1-C6);
R3’ es H o -alquilo(C1-C6);
R4 se selecciona del grupo que consiste en -alquilo(C1-C6), -NRaRb, -alquileno(C1-C6)-NRARB, -alquileno(C1-Ca)-O-alquilo(C1-C6), -NHalquileno(C1-C6)-heterocicloalquilo y -alquileno(C1-C6)-heterocicloalquilo, en donde dicho heterocicloalquilo está opcionalmente sustituido por uno o más grupos seleccionados de oxo, alcoxi, -alquileno(Cr Ca)-OH, -C(O)O-alquilo(C1-C6), -alquileno(C1-C6)-C(O)O-alquilo(C1-C6), -alquileno(C1-C6)-C(O)NH-alquilo(C1-C6), -alquileno(C1-C6)-C(O)NH-alquilo(C1-C6)-OH, -alquileno(C1- Ca)-NHSO2-alquilo(C1-Ca), -alquileno(C1-Ca)-CONH2, -alquileno(C1-Ca)-NRARB, y alquilo(C1-Ca);
R<a>es H o se selecciona del grupo que consiste en -alquilo(C1-Ca), heterocicloalquilo e -hidroxialquilo(CrCa);
R<b>se selecciona del grupo que consiste en -alquilo(C1-Ca), -alquileno(C1-Ca)-C(O)O-alquilo(C1-Ca), heterocicloalquilo, -alquileno(C1-Ca)-heterocicloalquilo, -SO2-alquilo(C1- Ca), -alquileno(C1-Ca)-NH-SO2-alquilo(C1-Ca), -alquileno(C1-Ca)-SO2-alquilo(C1-Ca) e -hidroxialquilo(C1-Ca), en donde dicho heterocicloalquilo del -alquileno(C1-Ca)-heterocicloalquilo puede estar opcionalmente sustituido por uno o más -alquilo(C1-Ca);
R5 es H o se selecciona del grupo que consiste en -NH2, -C(O)OH, -C(O)O-alquilo(C1-Ca), -haloalquilo(C1-Ca) y -OH; y sales farmacéuticamente aceptables de este.
De acuerdo con una modalidad preferida, la invención se refiere a al menos uno de los compuestos de fórmula (la) enumerados en la Tabla 1 más abajo y sales farmacéuticamente aceptables de estos.
En una modalidad más preferida, la presente invención se refiere a un compuesto de fórmula (I), en donde A es A1a
A 1 a
representado mediante la fórmula (laa)
Ri se selecciona del grupo que consiste en -NR3C(O)R4 y -NR3R3;
R2 es arilo opcionalmente sustituido por uno o más grupos seleccionados de átomos de halógeno, -alquilo(C1-C6), cicloalquilo y -haloalquilo(C1-C4) o R2 es heteroarilo opcionalmente sustituido por uno o más átomos de halógeno; R3 es H o -alquilo(C1-C6);
R3’ es H o -alquilo(C1-C6);
R4 se selecciona del grupo que consiste en -alquilo(C1-C6), -NR<a>R<b>, -alquileno(C1-C6)-NRARB, -alquileno(C1-Ca)-O-alquilo(C1-C6), -NHalquileno(C1-C6)-heterocicloalquilo y -alquileno(C1-C6)-heterocicloalquilo, en donde dicho heterocicloalquilo está opcionalmente sustituido por uno o más grupos seleccionados de oxo, alcoxi, -alquileno(Cr Ca)-OH, -C(O)O-alquilo(C1-C6), -alquileno(C1-C6)-C(O)O-alquilo(C1-C6), -alquileno(C1-Ca)-C(O)NH-alquilo(C1-Ca), -alquileno(C1-C6)-C(O)NH-alquilo(C1-C6)-OH, -alquileno(Ci- Ca)-NHSO2-alquilo(Ci-Ca), -alquileno(Ci-Ca)-CONH2, -alquileno(Ci-Ca)-NRARB, y alquilo(Ci-Ca);
R<a>es H o se selecciona del grupo que consiste en -alquilo(Ci-Ca), heterocicloalquilo e -hidroxialquilo(Ci-Ca);
R<b>se selecciona del grupo que consiste en -alquilo(Ci-Ca), -alquileno(Ci-Ca)-C(O)O-alquilo(Ci-Ca), heterocicloalquilo, -alquileno(C1-Ca)-heterocicloalquilo, -SO2-alquilo(C1- Ca), -alquileno(C1-Ca)-NH-SO2-alquilo(C1-Ca), -alquileno(Ci-Ca)-SO2-alquilo(Ci-C3) e -hidroxialquilo(Ci-Ca), en donde dicho heterocicloalquilo del -alquileno(Ci-Ca)-heterocicloalquilo puede estar opcionalmente sustituido por uno o más -alquilo(Ci-C3);
R5 es H o se selecciona del grupo que consiste en -NH2, -C(O)OH, -C(O)O-alquilo(Ci-C3), -haloalquilo(Ci-Ca) y -OH; y sales farmacéuticamente aceptables de este.
En una modalidad aún más preferida, la presente invención se refiere a un compuesto de fórmula (laa), en donde Ri es -NHC(O)R4;
R4 se selecciona del grupo que consiste en metilo, 4-etilmorfolina, (dimetilamino)etilo, 4-etilpiperazina, 1 -etil-4-metilpiperazina, 2-[bis(2-hidroxietil)amino]etilo, -[(2-hidroxietil)(metil)amino]etilo, 3-[bis(oxetan-3-il)amino]etilo, -3-(4-metil-3-oxopiperazin-1-il)etilo, metil-2-(etil(metil)amino)acetato, -etilmetanosulfonamida, -3-(4-metil-2-oxopiperazin-1-il)etilo, -3-[(2-metanosulfoniletil)amino]etilo, -3-[(2-metanosulfoniletil)(metil)amino]etilo, -3-[4-(2-hidroxietil)piperazin-1-il]etilo, -3-[(2-metanosulfonamidoetil)(metil)amino]etilo, -3-[4-(2-metanosulfonamidoetil)piperazin-1-il]etilo, -(4-etilpiperazin-1-il)-N-metilpropanamida, -3-(1 -metilpiperidin-4-il)etilo, -(4-etil)piperazin-1-il-N-(2-hidroxietil)propanamida, 3-(4-{2-[bis(2-hidroxietil)amino]etil}piperazin-1-il)etilo, 3-[4-(2-carbamoiletil)piperazin-1-il]etilo, -3-metoxietilo, -2-(4-metilpiperazin-1-il)metilo, 4-(etil)-1-metilpiperazin-2-carboxilato de metilo, 4-(etil)-piperazin-2-carboxilato de metilo, 2-[4-(etil)-1-metilpiperazin-2-il]acetato de metilo, 2-[4-(etil)-piperazin-2-il]acetato de metilo, 1-(etil)-4-metilpiperazin-2-carboxilato de metilo, 2-[1-(etil)-4-metilpiperazin-2-il]acetato de metilo, 2-{5-metil-2,5-diazabiciclo[2.2.1]heptan-2-il}metilo, 2-{a-metil-2,a-diazaespiro[3,3]heptan-2-il}metilo, 2-{2-metil-5-oxa-2,8-diazaespiro[3,5]nonan-8-il}metilo y -3-(2-(4-metilpiperazin-1-il)etil)urea.
De acuerdo con una modalidad preferida, la invención se refiere a al menos uno de los compuestos de fórmula (laa) enumerados en la Tabla 2 más abajo y sales farmacéuticamente aceptables de estos. Estos compuestos son particularmente activos sobre el receptor ALK5, como se muestra en la Tabla 4.
En otra modalidad más preferida, la presente invención se refiere a un compuesto de fórmula (I), en donde A es A2
representado mediante la fórmula (Ib)
Xi y X2 son independientemente N o CH;
R2 es arilo opcionalmente sustituido por uno o más grupos seleccionados de átomos de halógeno, -alquilo(C1-C6), cicloalquilo y -haloalquilo(C1-C4) o R2 es heteroarilo opcionalmente sustituido por uno o más átomos de halógeno; R5 es H;
y sales farmacéuticamente aceptables de este.
De acuerdo con una modalidad preferida, la invención se refiere a al menos uno de los compuestos de fórmula (Ib) enumerados en la Tabla 3 más abajo y sales farmacéuticamente aceptables de estos.
En una modalidad aún más preferida, la presente invención se refiere a un compuesto de fórmula (Ib), en donde X1 y X2 son CH.
Los compuestos de la invención, lo que incluye todos los compuestos enumerados anteriormente aquí, pueden prepararse a partir de materiales de partida fácilmente disponibles mediante el uso de los siguientes métodos y procedimientos o mediante el uso de procesos ligeramente modificados fácilmente disponibles para los expertos en la técnica. Aunque en la presente descripción se puede mostrar o describir una modalidad particular de la presente invención, los expertos en la técnica reconocerán que todas las modalidades o aspectos de la presente invención pueden obtenerse mediante el uso de los métodos descritos en la presente descripción o mediante el uso de otros métodos, reactivos y materiales de partida conocidos. Cuando se dan condiciones de proceso típicas o preferidas (es decir, temperaturas de reacción, tiempos, relaciones molares de reactivos, solventes, presiones, etc.), también pueden usarse otras condiciones de proceso a menos que se indique de cualquier otra manera. Si bien las condiciones de reacción óptimas pueden variar en dependencia de los reactivos o solventes particulares usados, dichas condiciones pueden determinarse fácilmente por los expertos en la técnica mediante procedimientos de optimización de rutina.
Por tanto, los procesos descritos más abajo no deben considerarse limitantes del alcance de los métodos sintéticos disponibles para la preparación de los compuestos de la invención.
En algunos casos en que se necesite una etapa para enmascarar o proteger restos sensibles o reactivos, se podrían emplear grupos protectores (PG) generalmente conocidos, de acuerdo con principios generales de la química (Protective group in organic syntheses, 3ra ed. T. W. Greene, P. G. M. Wuts).
Sorprendentemente se ha descubierto que los compuestos de fórmula (I) de la presente invención inhiben efectivamente el receptor ALK5. Ventajosamente, la inhibición de ALK5 puede dar como resultado el tratamiento eficaz de las enfermedades o afecciones en donde está implicado el receptor ALK5.
A este respecto, ahora se ha descubierto que los compuestos de fórmula (I) de la presente invención tienen una potencia farmacológica antagonista expresada como la concentración inhibidora media máxima (IC50) sobre ALK5 inferior o igual a 10 nM como se muestra en la presente parte experimental.
Preferentemente, los compuestos de la presente invención tienen una IC50 sobre ALK5 entre 5 y 10 nM.
Aún con mayor preferencia, los compuestos de la presente invención tienen una IC50 sobre ALK5 inferior a 1 nM. En un aspecto, la presente invención se refiere a un compuesto de fórmula (I) o una sal farmacéuticamente aceptable de este, para su uso como un medicamento. De esta forma, la invención se refiere a un compuesto de fórmula (I) en la preparación de un medicamento, preferentemente, para su uso en la prevención y/o tratamiento de una enfermedad, trastorno o afección asociada con la vía de señalización de ALK5.
En una modalidad preferida, la invención se refiere a un compuesto de fórmula (I) o una sal farmacéuticamente aceptable de este, para su uso en la prevención y/o tratamiento de una enfermedad, trastorno o afección asociada con la vía de señalización de ALK5. En una modalidad, la presente invención se refiere a un compuesto de fórmula (I) útil para la prevención y/o tratamiento de la fibrosis y/o enfermedades, trastornos o afecciones que implican fibrosis.
Los términos "fibrosis" o "trastorno fibrosante", como se usan en la presente, se refieren a afecciones que están asociadas con la acumulación anormal de células y/o fibronectina y/o colágeno y/o aumento del reclutamiento de fibroblastos e incluyen, pero no se limitan a, fibrosis de órganos o tejidos individuales tales como el corazón, riñón, hígado, articulaciones, pulmón, tejido pleural, tejido peritoneal, piel, córnea, retina, musculoesquelético y tubo digestivo.
Preferentemente, los compuestos de fórmula (I) de la presente invención, o una composición farmacéutica que comprende un compuesto de fórmula (I), son útiles para el tratamiento y/o prevención de la fibrosis tal como fibrosis pulmonar, fibrosis pulmonar idiopática (IPF), fibrosis hepática, fibrosis renal, fibrosis ocular, fibrosis cardiaca, fibrosis arterial y esclerosis sistémica.
Con mayor preferencia, los compuestos de fórmula (I) de la presente invención, o una composición farmacéutica que comprende un compuesto de fórmula (I), son útiles para el tratamiento de la fibrosis pulmonar idiopática (IPF).
Como se usa en la presente, "cantidad segura y efectiva" en referencia a un compuesto de fórmula (I) o una sal farmacéuticamente aceptable de este u otro agente farmacéuticamente activo, significa una cantidad del compuesto suficiente para tratar la afección del paciente pero lo suficientemente baja para evitar efectos secundarios graves y, sin embargo, puede ser determinada de forma rutinaria por el experto en la técnica.
Los compuestos de fórmula (I) se pueden administrar una vez o de acuerdo con un régimen de dosificación en donde se administran varias dosis a intervalos de tiempo variables durante un período de tiempo dado. Las dosificaciones diarias típicas pueden variar en dependencia de la vía de administración elegida.
La presente invención se refiere además a una composición farmacéutica que comprende un compuesto de fórmula (I) mezclado con al menos uno o más portadores o excipientes farmacéuticamente aceptables.
En una modalidad, la invención se refiere a una composición farmacéutica de compuestos de fórmula (I) en mezcla con uno o más portadores o excipientes farmacéuticamente aceptables, por ejemplo, los descritos en el documento Remington's Pharmaceutical Sciences Handbook, XVII Ed., Mack Pub., N.Y., EE. UU.
La administración de los compuestos de la invención y sus composiciones farmacéuticas puede llevarse a cabo de acuerdo con las necesidades del paciente, por ejemplo, por vía oral, nasal, parenteral (por vía subcutánea, intravenosa, intramuscular, intraesternal y por infusión) y por inhalación.
Preferentemente, los compuestos de la presente invención se administran por vía oral o por inhalación.
Con mayor preferencia, los compuestos de la presente invención se administran por inhalación.
En una modalidad preferida, la composición farmacéutica que comprende el compuesto de fórmula (I) es una forma de dosificación oral sólida, tal como comprimidos, cápsulas de gel, cápsulas, comprimidos oblongos, gránulos, pastillas y polvos a granel.
En una modalidad, la composición farmacéutica que comprende el compuesto de fórmula (I) es un comprimido. Los compuestos de la invención pueden administrarse solos o combinados con diversos portadores farmacéuticamente aceptables, diluyentes (tales como sacarosa, manitol, lactosa, almidones) y excipientes conocidos, lo que incluye agentes de suspensión, solubilizantes, agentes tamponantes, aglutinantes, disgregantes, conservantes, colorantes, saborizantes, lubricantes y similares.
En una modalidad adicional, la composición farmacéutica que comprende un compuesto de fórmula (I) es una forma de dosificación oral líquida tal como soluciones acuosas y no acuosas, emulsiones, suspensiones, jarabes y elíxires. Dichas formas de dosificación líquidas pueden contener además diluyentes inertes adecuados conocidos tales como agua y excipientes adecuados conocidos tales como conservantes, agentes humectantes, edulcorantes, saborizantes, así como también agentes para para emulsionar y/o suspender los compuestos de la invención.
En una modalidad adicional, la composición farmacéutica que comprende el compuesto de fórmula (I) es una preparación inhalable tal como polvos inhalables, aerosoles dosificadores que contienen propulsor o formulaciones inhalables sin propulsor.
Para la administración como un polvo seco, se pueden usar los inhaladores de una o de múltiples dosis conocidos de la técnica anterior. En ese caso el polvo puede rellenarse en cápsulas de gelatina, de plástico o de otras cápsulas, cartuchos o envases de burbuja o en un reservorio.
Un diluyente o portador químicamente inerte para los compuestos de la invención, por ejemplo, lactosa o cualquier otro aditivo adecuado para mejorar la fracción respirable puede añadirse a los compuestos en polvo de la invención. Los aerosoles para inhalación que contienen gas propulsor tal como hidrofluoroalcanos pueden contener los compuestos de la invención ya sea en solución o en forma dispersa. Las formulaciones impulsadas por gas propelente también pueden contener otros ingredientes tales como cosolventes, estabilizadores y opcionalmente otros excipientes.
Las formulaciones inhalables sin propulsor que comprenden los compuestos de la invención pueden estar en forma de soluciones o suspensiones en un medio acuoso, alcohólico o hidroalcohólico y pueden suministrarse mediante nebulizadores de chorro o ultrasónicos conocidos de la técnica anterior o mediante nebulizadores de niebla suave. Los compuestos de la invención pueden administrarse como el único agente activo o en combinación con otros ingredientes farmacéuticamente activos.
Las dosificaciones de los compuestos de la invención dependen de una variedad de factores, lo que incluye, entre otros, la enfermedad en particular a tratar, la gravedad de los síntomas, la vía de administración y similares.
La invención se dirige además a un dispositivo que comprende una composición farmacéutica que comprende un compuesto de fórmula (I) de acuerdo con la invención, en forma de un inhalador de polvo seco monodosis o multidosis o un inhalador de dosis medida.
Todos los grupos o modalidades preferidas descritas anteriormente para los compuestos de fórmula (I) se pueden combinar entre sí y aplicarse también mutatis mutandis.
Los compuestos de la invención, lo que incluye todos los compuestos enumerados anteriormente aquí, pueden prepararse a partir de materiales de partida fácilmente disponibles mediante el uso de los siguientes métodos y procedimientos generales o mediante el uso de procesos ligeramente modificados fácilmente disponibles para los expertos en la técnica. Aunque en la presente descripción se puede mostrar o describir una modalidad particular de la presente invención, los expertos en la técnica reconocerán que todas las modalidades o aspectos de la presente invención pueden obtenerse mediante el uso de los métodos descritos en la presente descripción o mediante el uso de otros métodos, reactivos y materiales de partida conocidos. Cuando se dan condiciones de proceso típicas o preferidas (es decir, temperaturas de reacción, tiempos, relaciones molares de reactivos, solventes, presiones, etc.), también pueden usarse otras condiciones de proceso a menos que se indique de cualquier otra manera. Si bien las condiciones de reacción óptimas pueden variar en dependencia de los reactivos o solventes particulares usados, dichas condiciones pueden determinarse fácilmente por los expertos en la técnica mediante procedimientos de optimización de rutina.
Por tanto, los procesos descritos más abajo e informados en los siguientes esquemas no deben verse como limitantes del alcance de los métodos sintéticos disponibles para la preparación de los compuestos de la invención.
Los compuestos de fórmula (I), lo que incluye todos los compuestos o al menos uno de los enumerados anteriormente aquí, pueden prepararse generalmente de acuerdo con el procedimiento descrito en detalle en los esquemas que se muestran más abajo, mediante el uso de métodos generalmente conocidos.
Esquema 1
El esquema 1 proporciona una posible ruta sintética para la preparación de un compuesto de fórmula (I), en donde A, R2 y R5 son como se definió anteriormente.
Se puede preparar un compuesto de fórmula (III) protegiendo el átomo de nitrógeno del compuesto de fórmula (II) con grupos protectores adecuados, tales como dicarbonato de di-ferc-butilo (anhídrido Boc, Boc2O) siguiendo procedimientos bien conocidos por un experto en la técnica.
Se puede preparar un compuesto de fórmula (IV) a partir del compuesto (III) mediante reacciones de acoplamiento cruzado catalizadas por metales tales como acoplamientos de Stille o Suzuki, o similares, como se describe en “Transition Metals for 15 Organic Synthesis", 2da edición, 1, 2004, con un reactivo adecuado. Las condiciones típicas de la reacción de Suzuki comprenden hacer reaccionar el compuesto (III) con ácido o éster borónico apropiado, en presencia de un catalizador de Pd, tal como Pd(dppf)Ch o Pd(Ph3P)4, una base adecuada, como por ejemplo, CsF, K2CO3 o NaHCO3, en una mezcla de solventes, tales como 1,4-dioxano y agua, a una temperatura apropiada bajo calentamiento convencional o irradiación con microondas. Las condiciones típicas del acoplamiento cruzado de Stille comprenden hacer reaccionar el compuesto (III) con un reactivo de organoestaño adecuado, en presencia de un catalizador de Pd, tal como Pd(Ph3P)4, en un solvente adecuado, tal como tolueno o DMF, y a una temperatura apropiada bajo calentamiento convencional o irradiación con microondas.
En algunos casos, por ejemplo, en donde R5 es hidrógeno, se puede obtener un compuesto de fórmula (I) a partir del compuesto (IV) mediante la eliminación del grupo protector de nitrógeno, por ejemplo, en condiciones ácidas, seguido de aminación de Buchwald-Hartwig en presencia de un haluro adecuado. Las condiciones típicas de Buchwald-Hartwig incluyen el uso de una base, como por ejemplo, ferc-butóxido de potasio, un catalizador de paladio adecuado, tal como Pd2dba3, en presencia de un ligando adecuado como Xantfos, en un solvente apropiado tal como 1,4-dioxano o tolueno y a una temperatura apropiada, por ejemplo, 120 °C.
En algunos otros casos, en donde R5 es diferente del hidrógeno como se definió anteriormente, un compuesto de fórmula (IV) se puede convertir en el n-óxido (VI) correspondiente en presencia de un oxidante adecuado, tal como, por ejemplo, ácido m-cloroperbenzoico, y tratado en condiciones de Reissert para obtener los compuestos (VII). Las condiciones de Reissert comprenden el uso de cianato de potasio y un agente metilante, tal como sulfato de dimetilo, en un solvente adecuado tal como 1,4-dioxano y a una temperatura apropiada, por ejemplo, 70 °C.
Se puede preparar un compuesto de fórmula (VIII) mediante hidrólisis de compuestos (VII) en condiciones básicas, tales como, por ejemplo, una solución acuosa de NaOH en metanol a una temperatura apropiada, como por ejemplo, 80 °C.
Los compuestos (VIII) se convirtieron finalmente en compuestos de fórmula (I) mediante aminación de Buchwald-Hartwig como se describió anteriormente.
En algunos casos seleccionados, en donde R5 es diferente de hidrógeno como se definió anteriormente y, por ejemplo, es igual a NH2, se puede preparar un compuesto de fórmula (I) por medio de transposición de Curtius del producto de aminación de Buchwald-Hartwig. Las condiciones típicas incluyen el uso de trimetilsililazida en presencia de un reactivo de acoplamiento, tal como, por ejemplo, T3P, y de una base orgánica como trietilamina, diisopropilamina, y similares. Como bien conoce un experto en la técnica, la reacción se puede llevar a cabo en un solvente aprótico polar tal como THF y a una temperatura adecuada, como por ejemplo, 80 °C.
Se puede preparar un compuesto de fórmula (II) como se describe en el Esquema 2, mediante el uso de métodos generalmente conocidos.
Se puede preparar un compuesto de fórmula (X) tratando piridina (IX) adecuadamente sustituida disponible comercialmente con un oxidante adecuado, tal como, por ejemplo, ácido m-cloroperbenzoico. El n-óxido (X) resultante puede someterse a nitración en presencia de una mezcla de ácidos fuertes, como ácido nítrico y ácido sulfúrico, a una temperatura apropiada que varía, por ejemplo, entre 0 y 70 °C, siguiendo procedimientos bien conocidos por un experto en la técnica.
Se puede obtener un compuesto de fórmula (XII) a partir del compuesto (XI) por reducción mediante el uso de, por ejemplo, polvo de hierro en presencia de ácidos, tales como ácido acético y ácido clorhídrico, a una temperatura adecuada en un solvente polar prótico, tal como etanol.
Se puede preparar un compuesto de fórmula (XIII) por desmetilación del compuesto (XII) de acuerdo con procedimientos conocidos aprovechando reactivos tales como tribromuro de boro en solventes apolares, como diclorometano.
Por último, se puede obtener un compuesto de fórmula (II) a partir del compuesto (XIII) por alquilación seguida de ciclación intramolecular. Las condiciones típicas incluyen agentes alquilantes, tales como 1,2-dibromoetano, en presencia de una base, como por ejemplo, carbonato de potasio, en solventes apróticos polares, como DMF, y a una temperatura adecuada, tal como 80 °C. Alternativamente, se puede preparar un compuesto de fórmula (II) a partir del compuesto (XIII) en dos etapas que comprenden acilación/ciclación en tándem, seguida de reducción de la lactama.
Un compuesto de fórmula (XIII) puede experimentar acilación cuando se trata con reactivos, como por ejemplo, cloruro de cloroacetilo o bromoacetilo en presencia de una base, en un solvente apropiado, tal como ACN, y a una temperatura adecuada, como por ejemplo, 80 °C. En las mismas condiciones, la ciclación intramolecular puede conducir al compuesto (XIV).
Se puede preparar un compuesto de fórmula (II) a partir del compuesto de fórmula (XIV) por reducción mediante el uso de, por ejemplo, complejos de borano, tales como complejo de borano tetrahidrofurano o complejo de dimetilsulfuro de borano en un solvente aprótico polar, tal como tetrahidrofurano a una temperatura apropiada. En algunos casos, la reducción, por ejemplo, también se puede llevar a cabo en presencia de complejo de Vaska en combinación con tetrametildisiloxano en un solvente adecuado, tal como DCM y a temperatura ambiente.
Finalmente, también se puede obtener un compuesto de fórmula (II) a partir del compuesto (XIV) disponible comercialmente por reducción de la lactama, como se describió anteriormente.
En algunas modalidades de la presente invención, los compuestos de fórmula (Iaa) se pueden preparar siguiendo la ruta A o la ruta B como se representa en el Esquema 3, en donde A, R<1>, R<2>y R<5>son como se definió anteriormente.
Esquema 3
(X V II) X V III)laa)
Se puede preparar un compuesto de fórmula (XV) a partir del compuesto (V) por aminación de Buchwald-Hartwig en presencia de un haluro adecuado, tal como, por ejemplo, 4-bromo-2-nitropiridina. Las condiciones de aminación estándar se describieron anteriormente para el esquema<1>.
Se puede preparar un compuesto de fórmula (XVI) a partir del compuesto (XV) por reducción del grupo nitro en condiciones bien conocidas por un experto en la técnica, como por ejemplo, polvo de hierro en presencia de un ácido en un solvente polar prótico, tal como etanol, a una temperatura adecuada que varía de temperatura ambiente a 85 °C.
Se puede obtener un compuesto de fórmula (Iaa) a partir del compuesto (XV) a través de una preparación en dos etapas. En primer lugar, el compuesto (XV) se puede hacer reaccionar con un agente acilante adecuado, tal como, por ejemplo, cloruro de cloroacetilo o cloruro de 3-bromopropionilo, en presencia de una base, tal como trietilamina o similar, en un solvente como DCM a una temperatura apropiada, tal como 0 °C o menos. A continuación, la adición de los reactivos adecuados en las condiciones de la adición de Michael puede conducir a compuestos de fórmula (Iaa).
Las condiciones típicas incluyen el uso de un nucleófilo adecuado, tal como una amina o un alcohol, una base tal como, por ejemplo, diisopropiletilamina, y similares, en un solvente prótico polar apropiado como metanol o etanol, a temperatura ambiente.
De acuerdo con la ruta B en el esquema 3, también se puede obtener un compuesto de fórmula (laa) partiendo de 4-bromo-2-aminopiridina (XVII) comercial y siguiendo una síntesis en dos etapas para introducir R1, como se definió anteriormente. Puede usarse acilación y adición de Michael mediante el uso de las condiciones típicas descritas para la ruta A esquema 3 para obtener compuestos de fórmula (XVIII).
Se puede obtener un compuesto de fórmula (Iaa) a partir del compuesto (XVIII) por medio de aminación de Hartwig-Buchwald de acuerdo con las condiciones descritas anteriormente.
Los diversos aspectos de la invención descritos en esta solicitud se ilustran mediante los siguientes ejemplos que no pretenden limitar de ninguna manera la invención.
Preparaciones de productos intermedios y ejemplos
Los nombres químicos de los compuestos se generaron con MarvinSketch Deuterium.3.
Todos los reactivos cuya síntesis no se describe en la parte experimental, están disponibles comercialmente, o son compuestos conocidos o pueden formarse a partir de compuestos conocidos mediante métodos conocidos por una persona experta en la técnica.
Abreviatura: significado (en orden alfabético)
ACN= acetonitrilo
AcOH= ácido acético
Ac= acuosa
BBr<3>= tribromuro de boro
BINAP= 2,2'-bis(difenilfosfino)-1,1-binaftaleno
Boc<2>O= dicarbonato de di-ferc-butilo
c-Hex: ciclohexano
Cs<2>CO<3>= carbonato de cesio
CsF= fluoruro de cesio
DCE= dicloroetano
DCM= diclorometano
DMF= dimetilformamida
DMAP= 4-dimetilaminopiridina
DMSO= dimetilsulfóxido
DIPEA= A/,W-diisopropiletilamina
EtOAc= acetato de etilo
h= hora
HATU: hexafluorofosfato de 3-óxido de 1-[bis(dimetilamino)metilen]-1H-1,2,3-triazolo[4,5-b]piridinio
HBr= ácido bromhídrico
HCl= ácido clorhídrico
HPLC= cromatografía líquida de alta resolución
I<2>= yodo
IPA= alcohol isopropílico
K<2>CO<3>= carbonato de potasio
LDA= diisopropilamida de litio
LCMS= cromatografía líquida espectrometría de masas
m-CPBA= ácido mefa-cloroperoxibenzoico
MeOH= metanol
MOMCl = clorometilmetiléter
Na<2>CO<3>= carbonato de sodio
NaHCO<3>= bicarbonato de sodio
NaOH= hidróxido de sodio
Na<2>SO<3>= sulfito de sodio
Na<2>SO<4>= sulfato de sodio
NH<3>= amoniaco
NH<4>Cl= cloruro de amonio
NH<4>OH= hidróxido de amonio
NMR= resonancia magnética nuclear
Pd/C= paladio sobre carbono
Pd dba<2>= bis(dibencilidenacetona)paladio(0)
PdChdppf= dicloruro de [1,1'-bis(difenilfosfino)ferroceno]paladio(N)
Pd<2>dba<3>= tris(dibencilidenacetona)dipaladio(0)
(Ph<3>P)<4>Pd= tetraquis(trifenilfosfino)paladio(0)
pTLC= cromatografía de capa fina preparativa
MR= mezcla de reacción
t.r.= tiempo de retención
TA= Temperatura ambiente
Sat.= saturada
SCX= Intercambio catiónico fuerte
SEM-Cl= (2-clorometoxietil)trimetilsilano
T3P= anhídrido propilfosfónico
TEA= trietilamina
TFA= ácido trifluoroacético
THF= tetrahidrofurano
TMSN<3>= trimetilsililazida
UPLC-MS= cromatografía líquida de ultra-rendimiento con espectrometría de masas
Xantfos= 4,5-bis(difenilfosfino)-9,9-dimetilxanteno
XantfosPdG3= metanosulfonato de [(4,5-bis(difenilfosfino)-9,9-dimetilxanteno)-2-(2-amino-1,1-bifenil)]paladio(II) Y= rendimiento
Detalles y métodos experimentales generales
Método analítico
Instrumentos, materiales y métodos empleados para los análisis:
Los espectros de 1H-NMR se registraron en un espectrómetro Bruker Avance III HD 400 MHz o en un Bruker Fourier 300 MHz, o en un espectrómetro Varian MR-400. Los cambios químicos se informan como valores de 8 en ppm con relación a las señales de los solventes residuales no deuterados usados para la preparación de muestras como estándar interno. Las constantes de acoplamiento (valores J) se dan en hercios (Hz) y las multiplicidades se informan mediante el uso de la siguiente abreviatura (br= señal ancha, s= singlete, d= doblete, dd= doblete de dobletes, ddd= doblete de doblete de dobletes, t= triplete, dt= doblete de tripletes, ddt= doblete de doblete de tripletes, td= triplete de dobletes, q= cuarteto, qd= cuarteto de dobletes, m= multiplete).
La purificación mediante HPLC preparativa se realizó en un Shimadzu FCV-200AL, acoplado con la bomba preparativa LC-20AP.
Las reacciones con microondas se llevaron a cabo mediante el uso de un sistema Anton Parr Monowave 450.
Métodos analíticos LC/UV/MS
Materiales: Ácido fórmico > 98 % (Sigma-Aldrich), acetonitrilo para HPLC grado de gradiente/UV (Baker), agua |jQ para LCMS
Las mediciones de UPLC-MS se realizaron en el sistema Waters ACQUITY UPLC I-Class PLUS con detector 2 Waters SQ (ESLMS, voltaje capilar: 3000 V, voltaje de cono: 40 V, gas de desolvatación: 1000 l/h, temp. de desolvatación: 500 °C), equipado con Acquity UPLC BEH C18 1,7 jm (2,1 x 100 mm), columna núm. 186002352, mediante el uso de 20-100 % de ACN en gradiente de agua con 0,1 % de ácido fórmico (flujo: 0,5 ml/min).
Métodos de LC-MS:
Las mediciones de LC-MS se realizaron en Dionex UHPLC Ultimate 3000 con sistema detector DAD/Thermo Scientific MSQ Plus (Métodos A-H) o con detector DAD/Thermo Scientific ISQ EC-MS (Métodos I-M), equipado con Kinetex® 2,6 jm XB-C18 (4,6 x 50 mm), 110 A, columna núm. 00B-4496-E0 (Métodos A-G y K-M), columna núm.
00B-4496-E0 (Métodos I y J) o ACQUITY UPLC BEH C8 1,7 jm (2,1 x 150 mm), 130 A, columna núm. 186003377 (Método H). Intervalo de detección: 190-350 nm ± 4 nm. Flujo 1,0 ml/min (Métodos A-G e I-M), 0,5 ml/min (Método H). Temperatura de la columna: 25 °C (Métodos A-G e I-M), 55 °C (Método H). Temperatura del automuestreador: 20 °C.
Método A. Tiempo de análisis: 6 min. Fase móvil A: solución de ácido fórmico en agua MQ al 0,1 % v/v. Fase móvil B: solución de ácido fórmico en acetonitrilo al 0,1 % v/v. Gradiente de elución: 0,00 min (90 % A, 10 % B), 3,35-3,75 min (40 % A, 60 % B), 3,90-4,75 min (5 % A, 95 % B), 5,00-6,00 min (90 % A, 10 % B).
Método B. Tiempo de análisis: 6 min. Fase móvil A: solución de ácido fórmico en agua MQ al 0,1 % v/v. Fase móvil B: solución de ácido fórmico en acetonitrilo al 0,1 % v/v. Gradiente de elución: 0,00 min (90 % A, 10 % B), 3,35-3,75 min (30 % A, 70 % B), 3,90-4,75 min (5 % A, 95 % B), 5,00-6,00 min (90 % A, 10 % B).
Método C. Tiempo de análisis: 7 min. Fase móvil A: solución de ácido fórmico en agua MQ al 0,1 % v/v. Fase móvil B: solución de ácido fórmico en acetonitrilo al 0,1 % v/v. Gradiente de elución: 0,00 min (80 % A, 20 % B), 3,35-3,75 min (20 % A, 80 % B), 3,90-4,75 min (5 % A, 95 % B), 5,00-6,00 min (80 % A, 20 % B).
Método D. Tiempo de análisis: 7 min. Fase móvil A: solución de ácido fórmico en agua MQ al 0,1 % v/v. Fase móvil B: solución de ácido fórmico en acetonitrilo al 0,1 % v/v. Gradiente de elución: 0,00-1,00 min (95 % A, 5 % B), 4,75 5,25 min (40 % A, 60 % B), 6,00-7,00 min (95 % A, 5 % B).
Método E. Tiempo de análisis: 7 min. Fase móvil A: solución de ácido fórmico en agua MQ al 0,1 % v/v. Fase móvil B: solución de ácido fórmico en acetonitrilo al 0,1 % v/v. Gradiente de elución: 0,00-1,00 min (95 % A, 5 % B), 4,75 5,25 min (20 % A, 80 % B), 6,00-7,00 min (95 % A, 5 % B).
Método F. Tiempo de análisis: 6 min. Fase móvil A: solución de ácido fórmico en agua MQ al 0,1 % v/v. Fase móvil B: solución de ácido fórmico en acetonitrilo al 0,1 % v/v. Gradiente de elución: 0,00 min (80 % A, 20 % B), 3,35-3,75 min (60 % A, 40 % B), 3,90-4,75 min (5 % A, 95 % B), 5,00-6,00 min (80 % A, 20 % B).
Método G. Tiempo de análisis: 6 min. Fase móvil A: solución de ácido fórmico en agua MQ al 0,1 % v/v. Fase móvil B: solución de ácido fórmico en acetonitrilo al 0,1 % v/v. Gradiente de elución: 0,00 min (95 % A, 5 % B), 3,35-3,75 min (60 % A, 40 % B), 3,90-4,75 min (5 % A, 95 % B), 5,00-6,00 min (95 % A, 5 % B).
Método H. Tiempo de análisis: 10 minutos. Fase móvil A: solución de ácido fórmico en agua MQ al 0,1 % v/v. Fase móvil B: solución de ácido fórmico en acetonitrilo al 0,1 % v/v. Gradiente de elución: 0,00-0,50 min (99 % A, 1 % B), 3,00 min (70 % A, 30 % B), 6,5 min (50 % A, 50 % B), 7,50-8,00 min (20 % A, 80 % B ), 8,1-10 min (99 % A, 1 % B). Método I. Tiempo de análisis: 6 min. Fase móvil A: solución de ácido fórmico en agua MQ al 0,1 % v/v. Fase móvil B: solución de ácido fórmico en acetonitrilo al 0,1 % v/v. Gradiente de elución: 0,00 min (80 % A, 20 % B), 3,35-3,75 min (20 % A, 80 % B), 3,90-4,75 min (5 % A, 95 % B), 5,00-6,00 min (80 % A, 20 % B).
Método J. Tiempo de análisis: 7 min. Fase móvil A: solución de ácido fórmico en agua MQ al 0,1 % v/v. Fase móvil B: solución de ácido fórmico en acetonitrilo al 0,1 % v/v. Gradiente de elución: 0,00-1,00 min (95 % A, 5 % B), 4,75 5,25 min (20 % A, 80 % B), 6,00-7,00 min (95 % A, 5 % B).
Método K. Tiempo de análisis: 6 min. Fase móvil A: solución de ácido fórmico en agua MQ al 0,1 % v/v. Fase móvil B: solución de ácido fórmico en acetonitrilo al 0,1 % v/v. Gradiente de elución: 0,00 min (90 % A, 10 % B), 3,35-3,75 min (40 % A, 60 % B), 3,90-4,75 min (5 % A, 95 % B), 5,00-6,00 min (90 % A, 10 % B).
Método L. Tiempo de análisis: 6 min. Fase móvil A: solución de ácido fórmico en agua MQ al 0,1 % v/v. Fase móvil B: solución de ácido fórmico en acetonitrilo al 0,1 % v/v. Gradiente de elución: 0,00 min (90 % A, 10 % B), 3,35-3,75 min (30 % A, 70 % B), 3,90-4,75 min (5 % A, 95 % B), 5,00-6,00 min (90 % A, 10 % B).
Método M. Tiempo de análisis: 7 min. Fase móvil A: solución de ácido fórmico en agua MQ al 0,1 % v/v. Fase móvil B: solución de ácido fórmico en acetonitrilo al 0,1 % v/v. Gradiente de elución: 0,00-1, 00 min (95 % A, 5 % B), 4,75 5,25 min (20 % A, 80 % B), 6,00-7,00 min (95 % A, 5 % B).
La LCMS se puede registrar en las siguientes condiciones: los trazos cromatográficos DAD de matriz de diodos, los cromatogramas de masas y los espectros de masas se pueden tomar en el sistema UPLC/PDA/MS AcquityTM acoplado con un espectrómetro de masas de cuadrupolo simple Micromass ZQTM o Waters SQD operado en modo de ionización por electropulverización ES positiva y/o negativa y/o sistema Fractionlynx usado en modo analítico acoplado con un cuadrupolo simple ZQTM operado en modo de ionización por ES positiva y/o negativa. Métodos de control de calidad usados operados en condiciones de pH bajo o en condiciones de pH alto:
Método 1, columna de condiciones de pH bajo: Acquity CSH C182,1 x 50 mm 1,7 um, la temperatura de la columna fue 40 °C; el solvente A de la fase móvil fue agua milliQ+ácido fórmico al 0,1 % y el solvente B de la fase móvil ACN+ácido fórmico al 0,1 %. El régimen de flujo fue 1 ml/min.
La tabla de gradiente fue t=0 min 97 % A 3 % B, t=1,5 min 0,1 % A 99,9 % B, t=1,9 min 0,1 % A 99,9 % B y t=2 min 97 % A 3 % B. El intervalo de detección UV fue 210-350 nm y el intervalo ES+/ES- fue 100 a 1500 AMU.
Método 2, columna de condiciones de pH alto: Acquity Kinetex 1,7 um EVO C18 100 A, 2,1 x 50 mm, la temperatura de la columna fue 40 °C; el solvente A de la fase móvil fue una solución acuosa 10 mM de NH<4>HCO<3>ajustada a pH=10 con amoniaco, el solvente B de la fase móvil fue ACN. El régimen de flujo fue 1 ml/min. La tabla de gradiente fue t=0 min 97 % A 3 % B, t=1,5 min 0,1 % A 99,9 % B, t=1,9 min 0,1 % A 99,9 % B y t=2 min 97 % A 3 % B. El intervalo de detección UV fue 210-350 nm y el intervalo ES+/ES- fue 100 a 1500 AMU.
Preparaciones de los productos intermedios
Producto intermedio 1: 7-bromo-2,3-dihidro-1H-pirido[3,4-b][1,4]oxazina
Se disolvió 69,0 g (0,52 mol, 1,8 eq.) de m-CPBA en 1 litro de DCE. Se añadió gota a gota a la MR 50,0 g (0,27 mol, 1.0 eq.) de 2-bromo-5-metoxipiridina comercial en una atmósfera de argón. La MR se calentó a 60 °C durante 16 h. Se añadió una porción adicional (4,6 g) de m-CPBA y la mezcla se agitó a la misma temperatura durante 4 h. Pasado ese tiempo, se enfrió la MR hasta TA y la mitad se repartió entre 600 ml de DCM y 600 ml de solución acuosa saturada de Na<2>SO<3>. La capa orgánica se separó y la acuosa se extrajo con 2x500 ml de DCM. El procedimiento se repitió con la segunda parte de la MR. Se añadieron 1000 ml de solución ac. sat. de NaHCO<3>a las capas orgánicas combinadas y la mezcla se agitó durante una noche a TA. La capa orgánica se separó y la capa acuosa se extrajo con DCM (5x500 ml). Se combinaron las capas orgánicas, se secaron sobre Na<2>SO<4>, se filtraron y se eliminaron los volátiles bajo presión reducida para dar el N-óxido correspondiente (55,0 g, Y= 97 %), que se usó en la siguiente etapa sin purificación.
Se disolvieron 55,0 gramos de N-óxido en ácido sulfúrico concentrado (115 ml). Se añadieron lentamente 53 ml de ácido nítrico al 65 % a la solución a 0 °C y la MR se calentó hasta 40 °C y se agitó durante 15 min. Pasado ese tiempo, cuando se obtuvo una solución transparente, la mezcla se calentó hasta 75 °C y se agitó durante 2,75 h. La MR se enfrió hasta TA y se vertió sobre hielo. La mezcla fría se basificó hasta pH=11 mediante el uso de NaOH sólido. El sólido precipitado se separó por filtración y se lavó con metanol. Se obtuvo un derivado nitro (44,0 g, Y=<6 6>%) que se usó en la siguiente etapa sin purificación. Se suspendieron 40,0 g del derivado nitro en 2 litros de etanol (96 %) con 84 ml de AcOH y se añadió a la suspensión 40,0 g (4,5 eq.) de polvo de hierro. La MR se calentó hasta<80>°C y se añadieron 28 ml de HCl<6>N. Después de 0,75 h, la MR se enfrió hasta TA y se filtró a través de Celite®, que se lavó con metanol y DCM secuencialmente. Los filtrados combinados se concentraron bajo presión reducida, se diluyeron con DCM:IPA (mezcla 4:1) y se lavaron con solución ac. de NaOH<6>M. La capa acuosa se volvió a extraer con la mezcla anterior 3 veces. Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre Na<2>SO<4>y se secaron bajo presión reducida para dar el derivado amino (32,0 g, Y= 98 %). Se suspendieron 32,0 g del derivado amino en dCm seco (220 ml) y se enfriaron hasta -30 °C. Se añadieron gota a gota 110 ml de BBr<3>(solución 1 M en DCM) en una atmósfera de Ar con agitación vigorosa. La MR se calentó hasta TAy se agitó durante 18 h. El sólido precipitado se separó por filtración, se lavó con DCM y se secó al aire durante 20 h para dar el derivado hidroxi como una sal de HBr (56,0 g, Y = cuant.). Se suspendieron 40,0 g de sal de HBr del derivado hidroxi y 500 g de Cs<2>CO<3>(5,0 eq.) en 1.0 l de DMF seca y se calentaron hasta 70 °C con agitación mecánica. Se añadió gota a gota dibromoetano (3,0 eq.) y la MR se agitó a la misma temperatura durante 18 h. Se añadieron 300 gramos de K<2>CO<3>y la mezcla se agitó durante 24 h adicionales a 70 °C. Pasado ese tiempo, se añadieron 50,0 g de NaOH y la MR se agitó durante<6>h a 70 °C. La suspensión se diluyó con DCM, se filtró a través de Celite® y se concentró bajo presión reducida. El residuo de la suspensión se repartió entre DCM y agua. La fase orgánica se separó y la acuosa se extrajo con DCM (3x500 ml). Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre Na<2>SO<4>, se filtraron y se secaron bajo presión reducida para dar el Producto intermedio 1 crudo (20,0 g, crudo) como un sólido marrón. El compuesto del título se usó como tal en las siguientes etapas. UPLC-MS: 100 % (280 nm); t.r.= 1,14 min; m/z(+)= 214,9.
Producto intermedio 2: 7-(5-cloro-2-fluorofenil)-1H,2H,3H-pirido[3,4-b][1,4]oxazina
Se suspendieron 500 mg (1,0 eq.) del Producto intermedio 1 y 809 mg (2,0 eq.) de ácido 5-cloro-2-fluorofenilborónico en 10 ml de dioxano y 4 ml de agua. La MR se desgasificó durante al menos 10 minutos con argón en un baño ultrasónico. Se añadieron PdChdppf (0,2 eq.) y CsF (3,0 eq.). La MR se calentó hasta 150 °C bajo irradiación con microondas durante 15 min. La mezcla se diluyó con DCM y se filtró a través de Celite®. Los solventes se evaporaron bajo presión reducida y el residuo se disolvió en DCM y se lavó con agua. La purificación mediante cromatografía en columna en gel de sílice que eluye con un gradiente de 0 a 80 % de EtOAc en hexano TEA al 2 % produjo el Producto intermedio 2 (440 mg, Y= 72 %). UPLC-MS: 100 % (280 nm); t.r.= 1,32 min; m/z(+)= 265,5.
Producto intermedio 3: 4-[7-(5-cloro-2-fluorofenil)-1H,2H,3H-pirido[3,4-b][1,4]oxazin-1-il]-2-nitropiridina
Se suspendieron el Producto intermedio 2 (160 mg, 1,0 eq.) y 4-bromo-2-mtropindina (1,15 eq.) en tolueno seco (16 ml). La MR se desgasificó mediante burbujeo con argón en un baño ultrasónico durante al menos 10 minutos. Se añadieron Xantfos (0,2 eq.), Pd<2>dba<3>(0,1 eq.) y ferc-butóxido de sodio (2,0 eq.). La reacción se calentó hasta 100 °C bajo irradiación con microondas durante 45 min. Subsecuentemente, se desgasificó la MR mediante burbujeo con argón en un baño ultrasónico durante al menos 10 minutos y se añadieron más 4-bromo-2-nitropiridina (1,15 eq.), xantfos (0,2 eq.) y Pd<2>dba<3>(0,1 eq.). La MR se calentó hasta 100 °C bajo irradiación con microondas durante 30 min. La MR se diluyó con DCM y se filtró a través de Celite®. El filtrado se secó. La purificación mediante cromatografía en columna en gel de sílice que eluye con un gradiente de 0 a 100 % de EtOAc en hexano TEA al 2 % produjo el Producto Intermedio 3 (200 mg, Y = 85 %). UPLC-MS: 100 % (280 nm); t.r.= 1,64 min; m/z(+)= 387,4.
Producto intermedio 4: N-{4-[7-(5-cloro-2-fluorofenil)-1H,2H,3H-pirido[3,4-b][1,4]oxazin-1-il]piridin-2-il}prop-2-enamida
El Ejemplo 3 (80 mg, 1,0 eq.) se disolvió en DCM seco (4,0 ml) y se le añadió TEA (5,0 eq.). La MR se enfrió hasta -45 °C y se le añadió cloruro de 3-bromopropionilo (1,0 eq.). La MR se agitó durante 20 min a la misma temperatura. Subsecuentemente, se añadió cloruro de 3-bromopropionilo (0,5 eq.) y la MR se agitó durante 40 min. La mezcla se diluyó con DCM (5 ml) y se lavó con agua (5 ml). La capa acuosa se extrajo con DCM (3x7 ml). Los orgánicos combinados se secaron sobre Na<2>SO<4>, se filtraron y se evaporaron a TA para dar el Producto intermedio 4 crudo (125 mg) que se usó como tal en la siguiente etapa. UPLC-<m>S: 85 % (280 nm); t.r.= 1,48 min; m/z(+)= 411,4.
Producto intermedio 5: 2-cloro-6-(5-cloro-2-fluorofenil)piridin-3-ol
Se disolvieron 2-cloro-6-yodopiridin-3-ol (2,0 g, 1,0 eq.) y ácido 5-cloro-2-fluorofenilborónico (1,0 eq.) en EtOH al 96 % (4,0 ml) y agua (2,0 ml). A la mezcla se le añadió tolueno (4,0 ml). La MR se desgasificó mediante burbujeo con argón en un baño ultrasónico durante al menos 10 minutos antes de añadir Pd(PPh<3)4>(0,05 eq.) y NaHCO<3>(1,5 eq.). La MR se agitó a 100 °C durante 1 h. La suspensión se enfrió hasta TA, se diluyó con DCM y se filtró a través de Celite®. El filtrado se secó bajo presión reducida y el residuo se repartió entre agua (50 ml) y DCM (150 ml). Los compuestos orgánicos se lavaron con agua (2x50 ml). Se combinaron las capas acuosas y se añadieron 50 ml de salmuera. La capa acuosa se extrajo con DCM (3x100 ml). Los compuestos orgánicos combinados se secaron sobre Na<2>SO<4>, se filtraron y se eliminaron los volátiles bajo presión reducida para dar el Producto intermedio 5 crudo (2,4 g), que se usó como tal en la siguiente etapa. UPLC-MS: 91 % (280 nm); t.r.= 1,72 min; m/z(+)= 258,4.
Producto intermedio 6: 2-cloro-6-(5-cloro-2-fluorofenil)-4-yodopiridin-3-ol
El Producto intermedio 5 (2,3 g, 1,0 eq.) y Na<2>CO<3>(2,5 eq.) se suspendieron en agua (35 ml) y la MR se agitó durante 40 min a TA. Se añadió I<2>(1,3 eq.) y la suspensión se agitó a T<a>durante 19 h. Pasado ese tiempo, la MR se repartió entre 100 ml de solución ac. sat. de bisulfito de sodio y 150 ml de DCM. La capa acuosa se extrajo con 2x150 ml de DCM. La fase acuosa se filtró a través de Celite®, que se lavó con una mezcla DCM:MeOH:TEA (1:1:0,05 v/v/v). El filtrado se secó para dar el Producto intermedio 6 (2,0 g, Y= 60 %). UPLC-MS: 100 % (280 nm); t.r.= 1,84 min; m/z(+)= 384,3.
Producto intermedio 7: 2-cloro-6-(5-cloro-2-fluorofenil)-4-yodo-3-(metoximetoxi)piridina
Se disolvió el Producto intermedio 6 (1,9 g, 1,0 eq.) en DCM seco (57 ml). La MR se enfrió hasta 0 °C y se añadió gota a gota MOMCl (1,1 eq.). La MR se agitó durante 5 min y se añadió DIPEA (1,3 eq.). Después de agitar durante 20 min, la mezcla se repartió entre 70 ml de agua y 70 ml de DCM. La capa acuosa se extrajo con DCM (2x70 ml). Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre Na<2>SO<4>, se filtraron y se evaporaron bajo presión reducida para dar el Producto intermedio 6 (1,58 g, Y = 75 %). UPLC-MS: 100 % (280 nm); t.r.= 1,96 min; no ionizante.
Producto intermedio 8: 2-cloro-6-(5-cloro-2-fluorofenil)-3-(metoximetoxi)-N-(piridin-4-il)piridin-4-amina
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento usado para el Producto intermedio 3, partiendo del Producto intermedio 7 (150 mg, 1,0 eq.) y 4-aminopiridina (1,0 eq.). La suspensión se diluyó con EtOAc y MeOH y se filtró a través de Celite®. Se eliminaron los volátiles bajo presión reducida, y el residuo se recolectó con EtOAc (50 ml) y se lavó con agua (50 ml). La capa acuosa se extrajo con EtOAc (3x50 ml). Los compuestos orgánicos combinados se secaron sobre Na<2>SO<4>, se filtraron y se evaporaron. La purificación mediante cromatografía en columna en gel de sílice que eluye con un gradiente de 20 a 100 % de EtOAc en hexano TEA al 2 % produjo el Producto intermedio 8 (90 mg, Y = 60 %). UPLC-MS: 100 % (280 nm); t.r.= 1,49 min; m/z(+)= 394,2.
Producto intermedio 9: 2-cloro-6-(5-cloro-2-fluorofenil)-4-[(piridin-4-il)amino]piridin-3-ol
Se suspendió el Producto intermedio 8 (624 mg, 1,0 eq.) en DCM (12,0 ml) y se añadió TFA (3,1 ml). Después de agitar durante 20 minutos, la MR se secó bajo presión reducida para producir el Producto intermedio 9 crudo (994 mg, Y = 100 %) (calculado para 3xsal de TFA). UPLC-MS: 100 % (280 nm); t.r.= 1,43 min; m/z(+)= 350,1.
Producto intermedio 10: 4-[5-cloro-7-(5-cloro-2-fluorofenil)-1H,2H,3H-pirido[3,4-b][1,4]oxazin-1-il]piridina
El Producto intermedio 9 (916 mg, 1,0 eq.) y CS<2>CO<3>(5,0 eq.) se suspendieron en DMF seca (27,5 ml). La suspensión se calentó hasta 60 °C. Subsecuentemente, se añadió gota a gota 1,2-dibromoetano (3,0 eq.) y la MR se agitó durante 30 min a la misma temperatura. Pasado ese tiempo, la MR se evaporó hasta sequedad. El residuo se disolvió en DCM (100 ml) y se lavó con agua (2x50 ml). Las capas acuosas se combinaron y se extrajeron con DCM (3x50 ml). Los compuestos orgánicos combinados se secaron sobre Na<2>SO<4>y se evaporaron hasta sequedad para dar el Producto intermedio 10 crudo (620 mg, Y = cuant). UPLC-MS: 100 % (280 nm); t.r.= 1,56 min; m/z(+)= 376,2.
Producto intermedio 11: 7-(5-cloro-2-fluorofenil)-N-[(2,4-dimetoxifenil)metil]-1-(piridin-4-il)-1H,2H,3H-pirido[3,4-b][1,4]oxazin-5-amina
Se disolvieron el Producto intermedio 10 (170 mg, 1,0 eq.) y 2,4-dimetoxibencilamina<( 68>pl) en tolueno seco (17 ml). La MR se desgasificó mediante burbujeo con argón en un baño ultrasónico durante al menos 10 minutos. Se añadieron BINAP (0,2 eq.), Pddba<2>(0,1 eq.) y ferc-butóxido de sodio (2,0 eq.). La reacción se calentó hasta 115 °C bajo irradiación con microondas durante 3,5 h. La MR se diluyó con DCM:MeOH (9:1) y se filtró a través de Celite®. La capa orgánica se evaporó bajo presión reducida. El residuo se purificó mediante extracción dependiente del pH (HCl<6>M, DCM, NaOH<6>M) produciendo una mezcla del Producto intermedio 11 y el Ejemplo 2 (300 mg). UPLC-MS:<6 5>% (280 nm); t.r.=<1 , 88>min; no ionizante.
Producto intermedio 12: 7-(2,5-difluorofenil)-1H,2H,3H-pirido[3,4-b][1,4]oxazina
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento usado para la síntesis del Producto intermedio 2, partiendo del Producto intermedio 1 (300 mg, 1,0 eq.) y mediante el uso de ácido 2,5-difluorofenilborónico (2,0 eq.). La purificación mediante cromatografía en columna en gel de sílice mediante el uso de un gradiente de 0 a 100 % de EtOAc en hexano TEA al 2,5 % produjo el Producto intermedio 12 (210 mg, Y = 61 %). UPLC-MS: 100 % (280 nm); t.r.= 1,50 min; m/z(+)= 249,3.
Producto intermedio 13: 4-[7-(2,5-difluorofenil)-1H,2H,3H-pirido[3,4-b][1,4]oxazin-1-il]-2-nitropiridina
El compuesto del titulo se preparo siguiendo el procedimiento usado para la síntesis del Producto intermedio 3, partiendo del Producto intermedio 12 (90 mg, 1,0 eq.) y mediante el uso de 4-bromo-2-nitropiridina (1,15 eq.). La purificación mediante cromatografía en columna en gel de sílice mediante el uso de un gradiente de 0 a 100 % de EtOAc en hexano TEA al 2,5 % produjo el Producto intermedio 13 (100 mg, Y = 75 %). UPLC-MS: 100 % (280 nm); t.r.= 1,62 min; m/z(+)= 371,3.
Producto intermedio 14: 7-(3-clorofenil)-1H,2H,3H-pirido[3,4-b][1,4]oxazina
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento usado para la síntesis del Producto intermedio 2, partiendo del Producto intermedio 1 (300 mg, 1,0 eq.) y mediante el uso de ácido 3-clorofenilborónico (2,0 eq.). La purificación mediante cromatografía en columna en gel de sílice mediante el uso de un gradiente de 0 a 100 % de EtOAc en hexano TEA al 2,5 % produjo el Producto intermedio 14 (200 mg, Y = 58 %). UPLC-MS: 100 % (280 nm); t.r.= 1,40 min; m/z(+)= 247,2.
Producto intermedio 15: 4-[7-(3-clorofenil)-1H,2H,3H-pirido[3,4-b][1,4]oxazin-1-il]-2-nitropiridina
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento usado para la síntesis del Producto intermedio 3, partiendo del Producto intermedio 14 (120 mg, 1,0 eq.) y mediante el uso de 4-bromo-2-nitropiridina (1,15 eq.). La purificación mediante cromatografía en columna en gel de sílice mediante el uso de un gradiente de 0 a 100 % de EtOAc TEA al 2,5 % en hexano produjo el Producto intermedio 15 (140 mg, Y = 85 %). UPLC-MS: 100 % (280 nm); t.r.= 1,63 min; m/z(+)= 369,6.
Producto intermedio 16: 7-bromo-1H,2H,3H-pirido[3,4-b][1,4]oxazina-1-carboxilato de terc-butilo
Se disolvieron 2,0 g del Producto intermedio 1 en DCM seco. A la solución se le añadieron 5,5 ml (2,5 eq.) de TEA y 100 mg (0,1 eq.) de DMAP. Subsecuentemente, se añadieron 4,1 g (2,0 eq.) de Boc<2>O a la mezcla y se agitó a tA durante 72 h. La MR se diluyó con DCM y se lavó con agua y solución ac. 0,5 M de HCl. Se separaron las dos fases y la capa orgánica se secó sobre Na<2>SO<4>, se filtró y se secó. La purificación mediante cromatografía en columna en gel de sílice mediante el uso de un gradiente de 0 a 100 % de EtOAc en hexano produjo el Producto intermedio 16 (1,9 g, Y = 65 %). UPLC-MS: 100 % (280 nm); t.r.= 1,74 min; m/z(+)= 316,9.
Producto intermedio 17: 6-cloro-3-fluoro-2-(trimetilestanil)piridina
Se disolvieron 200 mg de 6-doro-3-fluoro-2-yodopiridina (1,0 eq.) en<8>ml de tolueno, seguido de la adición de 0,2 ml (1,2 eq.) de hexanometilditina y 4 mg (0,01 eq.) de Pd(PPh)<3>)<4>. La mezcla se agitó a 110 °C durante 3 h. La MR se enfrió hasta TA, se diluyó con hexano y se filtró a través de Celite®. El filtrado se secó bajo presión reducida para dar el Producto intermedio 17 crudo (280 mg), que se usó como tal en la siguiente etapa. UPLC-MS: 100 % (280 nm); t.r.= 1,86 min; m/z(+)= 295,9.
Producto intermedio 18: 7-(6-cloro-3-fluoropiridin-2-il)-1H,2H,3H-pirido[3,4-b][1,4]oxazina-1-carboxilato de terc-butilo
Se disolvieron 200 mg del Producto intermedio 16 (1,0 eq.) y 225 mg del Producto intermedio 17 en 10 ml de DMF seca. La solución se desgasificó mediante burbujeo con argón en un baño ultrasónico durante al menos 10 minutos, seguido de la adición de 24 mg (0,2 eq.) de CuI y 22 mg (0,05 eq.) de Pd[(PPh)<3>]<2>Cl<2>. La MR se agitó a 100 °C durante 1 h bajo irradiación con microondas. La mezcla se diluyó con EtOAc, se filtró a través de Celite® y se secó bajo presión reducida. El residuo se disolvió en EtOAc y se lavó con solución ac. de NH<4>. Se separaron las dos fases y la capa orgánica se secó sobre Na<2>SO<4>, se filtró y se evaporó. La purificación mediante cromatografía en columna en gel de sílice que eluye con hexano:EtOAc (4:1) produjo el Producto intermedio 18 (45 mg, Y = 19 %). UPLC-MS: 90 % (280 nm); t.r.= 1,70 min; m/z(+)= 366,6.
Producto intermedio 19: 6-cloro-3-fluoro-2-{1H,2H,3H-pirido[3,4-b][1,4]oxazin-7-il}piridina
A una solución de 45 mg del Producto intermedio 18 en 2 ml de MeOH, se le añadió 1 ml de HCl 4 M en dioxano. La MR se agitó a 50 °C durante 1 h. A continuación, se eliminaron los volátiles bajo presión reducida y el residuo se disolvió en 5 ml de agua. La neutralización con solución ac. sat. de NaHCO<3>y la extracción con DCM proporcionó el Producto intermedio 19 (31 mg, Y = cuant.). UPLC-MS: 94 % (280 nm); t.r.= 1,27 min; m/z(+)= 266,5.
Producto intermedio 20: 6-cloro-3-fluoro-2-[1 -(2-nitropiridin-4-il)-1H,2H,3H-pirido[3,4-b][1,4]oxazin-7-il]piridina
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento usado para la síntesis del Producto intermedio 3, partiendo del Producto intermedio 19 (12 mg, 1,0 eq.). La MR se calentó a 150 °C durante 20 minutos bajo irradiación con microondas. La MR se diluyó con EtOAc y se lavó con agua. La fase orgánica se secó sobre Na<2>SO<4>, se filtró y se evaporó. La purificación mediante pTLC (SO<2>, EtOAc:Hexano (4:1)) produjo el Producto intermedio 20 (6 mg, Y = 33 %). UPLC-MS: 100 % (280 nm); t.r.= 1,43 min; m/z(+)= 388,6.
Producto intermedio 21: 7-(2-fluoro-5-metilfenil)-1H,2H,3H-pirido[3,4-b][1,4]oxazina
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento usado para la síntesis del Producto intermedio 2, partiendo del Producto intermedio 1 (50 mg, 1,0 eq.) y mediante el uso de 39 mg (1,3 eq.) de ácido 5-metil-2-fluorofenilborónico. La MR se calentó hasta 150 °C bajo irradiación con microondas durante 15 min. La MR se diluyó con DCM y se filtró a través de Celite®. El filtrado se extrajo con 5x10 ml de HCl 6 M. Se combinaron las capas ácidas, se filtraron a través de Celite®, se basificaron con NaOH 6 M y se extrajeron con 5x20 ml de DCM. Los compuestos orgánicos combinados se secaron sobre Na<2>SO<4>y se evaporaron para dar el Producto intermedio 21 (46 mg, Y = 82 %). UPLC-MS: 100 % (280 nm); t.r.= 1,30 min; m/z(+)= 245,6.
Producto intermedio 22: 4-[7-(2-fluoro-5-metilfenil)-1H,2H,3H-pirido[3,4-b][1,4]oxazin-1-il]-2-nitropiridina
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento usado para la síntesis del Producto intermedio 3, partiendo del Producto intermedio 21 (54 mg, 1,0 eq.). La reacción se llevó a cabo bajo irradiación con microondas durante 45 min a 100 °C. A continuación, se desgasificó nuevamente la mezcla y se añadieron 52 mg (1,1 eq.) de 4-bromo-2-nitropiridina, 26 mg (0,2 eq.) de xantfos, 20 mg (0,1 eq.) de Pd<2>dba<3>. La MR se calentó en las mismas condiciones durante 30 min. Subsecuentemente, la MR se diluyó con DCM y se filtró a través de Celite®. El filtrado se evaporó hasta sequedad. La purificación mediante cromatografía en columna en gel de sílice mediante el uso de un gradiente de 0 a 100 % de EtOAc TEA al 2,5 % en hexano produjo el Producto intermedio 22 (58 mg, Y = 77 %). UPLC-MS: 94 % (280 nm); t.r.= 1,44 min; m/z(+)= 367,6.
Producto intermedio 23: 7-(5-ciclopropil-2-fluorofenil)-1H,2H,3H-pirido[3,4-b][1,4]oxazina
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento usado para la síntesis del Producto intermedio 2, partiendo del Producto intermedio 1 (50 mg, 1,0 eq.) y mediante el uso de 46 mg (1,3 eq.) de ácido 5-ciclopropil-2-fluorofenilborónico. La MR se calentó hasta 150 °C bajo irradiación con microondas durante 15 min. La MR se diluyó con DCM y se filtró a través de Celite®. El filtrado se extrajo con 5x10 ml de HCl 6 M. Se combinaron las capas ácidas, se filtraron a través de Celite®, se basificaron con NaOH 6 M y se extrajeron con 5x20 ml de DCM. Los compuestos orgánicos combinados se secaron sobre Na<2>SO<4>y se evaporaron para dar el Producto intermedio 23 (47 mg, Y = 75 %). UPLC-MS: 90 % (280 nm); t.r.= 1,41 min; m/z(+)= 271,5.
Producto intermedio 24: 4-[7-(5-ciclopropil-2-fluorofenil)-1H,2H,3H-pirido[3,4-b][1,4]oxazin-1-il]-2-nitropiridina
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento usado para la síntesis del Producto intermedio 3, partiendo del Producto intermedio 23 (64 mg, 1,0 eq.). Se obtuvo el Producto intermedio 24 (82 mg, Y = 88 %). UPLC-MS: 97 % (280 nm); t.r. = 1,49 min; m/z(+)= 393,7.
Producto intermedio 25: 7-[2-fluoro-5-(propan-2-il)fenil]-1H,2H,3H-pirido[3,4-b][1,4]oxazina
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento usado para la síntesis del Producto intermedio 2, partiendo del Producto intermedio 1 (70 mg, 1,0 eq.) y mediante el uso de ácido 5-isopropil-2-fluorofenilborónico. Se obtuvo el Producto intermedio 25 (70 mg, Y = 79 %). UPLC-MS: 100 % (280 nm); t.r.= 1,46 min; m/z(+)= 273,5. Producto intermedio 26: 4-{7-[2-fluoro-5-(propan-2-il)fenil]-1H,2H,3H-pirido[3,4-b][1,4]oxazin-1-il}-2-nitropiridina
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento usado para la síntesis del Producto intermedio 3, partiendo del Producto intermedio 25 (63 mg, 1,0 eq.). Se obtuvo el Producto intermedio 26 (57 mg, Y = 63 %). UPLC-MS: 89 % (280 nm); t.r.= 1,60 min; m/z(+)= 395,8.
Producto intermedio 27: 4-bromo-1-{[2-(trimetilsilil)etoxi]metil}-LH-pirazolo[3,4-b]piridina
Se disolvieron 300 mg de 4-bromo-1H-pirazolo[3,4-b]piridina (1,0 eq.) en 4,50 ml de THF seco. Se añadieron 0,53 ml (2,5 eq.) de TEA a la solución seguido de la adición de 0,274 ml (1,5 eq.) de SEM-Cl a 0 °C. La MR se agitó a TA durante 18 h. La mezcla se diluyó con 20 ml de DCM y se lavó con 20 ml de agua. La capa acuosa se extrajo con DCM (3x20 ml). Los compuestos orgánicos combinados se secaron sobre Na<2>SO<4>y se evaporaron. La purificación mediante cromatografía en columna en gel de sílice que eluye con un gradiente de 0 a 100 % de EtOAc TEA al 2,5 % en hexano produjo el Producto intermedio 17 (150 mg, Y = 30 %). UPLC-MS: 90 % (280 nm); t.r.= 1,91 min; m/z(+)= 328,6.
Producto intermedio 28: 4-bromo-1 -{[2-(trimetilsMil)etoxi]metil}-1 H-pirrolo[2,3-b]piridina
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento usado para la síntesis del Producto intermedio 27, partiendo de 4-bromo-1H-pirrolo[2,3-b]piridina (1,0 g, 1,0 eq.). Se obtuvo el Producto intermedio 28 (341 mg, Y = 21 %). UPLC-MS: 93 % (280 nm); t.r.= 2,00 min; m/z(+)= 329,3.
Producto intermedio 29: 7-bromo-3/4-{[2-(trimetilsiNl)etoxi]metil}-3/4H-imidazo[4,5-b]pmdina
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento usado para la síntesis del Producto intermedio 27, partiendo de 7-bromo-3H-imidazo[4,5-b]pindina (200 mg, 1,0 eq.). Se obtuvo el Producto intermedio 29 como mezcla de regioisómeros (280 mg, Y = 85 %). UPLC-MS: 95 %-suma de ambos regioisómeros (280 nm); t.r.= 1,71 y 1,79 min; m/z(+)= 328,5.
Producto intermedio 30: 3-amino-N-{4-[7-(5-cloro-2-fluorofenil)-1H,2H,3H-pirido[3,4-b][1,4]oxazin-1-il]piridin-2-il}propenamida
Se disolvió el Ejemplo 3 (125 mg, 1,0 eq.) en THF seco (6,3 ml) y se le añadió TEA (8,0 eq.). Se enfrió la MR hasta -40 °C y se añadió una solución de cloruro de 3-(1,3-dioxo-1,3-dihidro-2H-isoindol-2-il)propanoilo (2,3 eq.) en THF seco (6,3 ml). La MR se agitó a TA durante 72 h. Se añadió TEA adicional (5,0 eq.) seguido de cloruro de 3-(1,3-dioxo-1,3-dihidro-2H-isoindol-2-il)propanoilo (0,5 eq.). La MR se calentó hasta 60 °C durante 18 h. Se eliminaron los volátiles y el residuo (400 mg) se disolvió en 20 ml de THF seco. Se añadió metilhidrazina (225 jl), la MR se agitó a 60 °C durante 18 h, después se añadió metilhidrazina adicional (75 jl) permitiendo que la mezcla se agitara a la misma temperatura durante 24 h. Se eliminaron los volátiles bajo presión reducida y el crudo se repartió entre agua (25 ml) y DCM (10 ml). La capa acuosa se extrajo con DCM (3x10 ml). Los compuestos orgánicos combinados se lavaron con salmuera y se secaron sobre Na<2>SO<4>, se filtraron y se evaporaron. El residuo se trituró con éter dietílico para proporcionar el Producto intermedio 30 (90 mg, Y = 60 %). UP<l>C-MS: 90 % (280 nm); t.r. = 1,71 y 1,49 min; m/z(+)= 428,2.
Producto intermedio 31: 5-bromo-1-{[2-(trimetilsilil)etoxi]metil}-1H-pirazol
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento usado para la síntesis del Producto intermedio 27, partiendo de 5-bromo-1H-pirazol (200 mg, 1,0 eq.). Se obtuvo el Producto intermedio 31 (300 mg, Y= 79 %). UPLC-MS: 95 % (254 nm); t.r.= 1,83; no ionizante.
Producto intermedio 32: N-[2-(piperazin-1-il)etil]metanosulfonamida
Se añadió cloruro de metanosulfonilo (0,7 ml, 1,55 eq.) a una solución fría (0 °C) de éster terc-butílico del ácido 4-(2-amino-etil)-piperazin-1-carboxílico (1,33 g, 1,0 eq.) en piridina (25,0 ml). La reacción se agitó durante 12 h a TAy se repartió entre solución ac. sat. de NaHCO<3>y DCM. La capa orgánica se separó, se secó sobre Na<2>SO<4>, se filtró y se secó bajo presión reducida. La purificación mediante cromatografía en columna en gel de sílice que eluye con un gradiente de 0 a 5 % de MeOH en DCM produjo el Producto intermedio 32 protegido con Boc (0,97 g, Y = 54 %) como un sólido blanco. Se disolvieron 0,5 g del sólido en 20 ml de DCM, se enfriaron hasta 0 °C y se añadió TFA (1,1 ml, 9,0 eq.) a la solución. Después de 4 h a TA, la MR se diluyó con 5 ml de MeOH y se basificó con NaHCO<3>sólido. Los sólidos se separaron por filtración y se eliminaron los volátiles bajo presión reducida. La purificación mediante cromatografía en columna en gel de sílice que eluye con un gradiente de 5 a 20 % de MeOH TEA al 2 % en DCM produjo el Producto intermedio 32 (130 mg, Y = 38 %) como un aceite higroscópico incoloro. 1H NMR (300 MHz, Cloroformo-d) 63,25-3,15 (m, 2H), 2,98 (s, 3H), 2,88 (t, J=4,9 Hz, 4H), 2,58-2,48 (m, 2H), 2,44 (t, J=4,8 Hz, 4H).
Producto intermedio 33: N-metil-3-(piperazin-1-il)propenamida
Se disolvieron 500 mg de ácido 3-{4-[(terc-butoxi)carbonil]piperazin-1-il}propanoico (1,0 eq.), 830 mg (1,2 eq.) de HATU y 700 mg (3,0 eq.) de DIPEA en 20 ml de DMF. Se añadieron a la solución 1,1 ml (1,0 eq.) de metilamina (2,0 M en THF) y la MR se agitó durante 18 h a TA. Se eliminaron los volátiles bajo presión reducida y el residuo se repartió entre EtOAc y agua. La capa acuosa se extrajo con EtOAc (3 x 20 ml), y los compuestos orgánicos combinados se lavaron con salmuera. Después de secar sobre Na<2>SO<4>y filtrar, las capas orgánicas se evaporaron para dar el Producto intermedio 33 crudo protegido con Boc (450 mg), que se disolvió en 10 ml de DCM y se enfrió hasta 0 °C antes de la adición de 2 ml (15,0 eq.) de TFA. La MR se agitó a TA durante 2 h. La eliminación de los volátiles bajo presión reducida proporcionó el Producto intermedio 33 crudo (1020 mg) como sal de TFA, que se usó como tal en la síntesis del Ejemplo 31. UPLC-MS: 53 % (detector MS+), t.r.= 0,53 min y 0,61 min; m/z(+) = 172,1.
Producto intermedio 34: N-(2-hidroxietil)-3-(piperazin-1-il)propenamida
Se disolvieron 550 mg de ácido 3-{4-[(terc-butoxi)carbonil]piperazin-1-il}propanoico (1,0 eq.) en 30 ml de DCM seco y se enfriaron hasta 0 °C. Se añadieron gota a gota a la solución 2,8 ml (16 eq.) de cloruro de tionilo. La MR se dejó calentar hasta TA y se agitó durante 3 h. Se eliminaron los volátiles bajo presión reducida para dar el cloruro de acilo crudo (590 mg). El cloruro se suspendió en 24 ml de THF seco y se añadieron a la suspensión 330 mg (3,0 eq.) de etanolamina. La mezcla se agitó a TA durante 2 h y se evaporó hasta sequedad bajo presión reducida para dar el Producto intermedio 34 crudo protegido con Boc (450 mg), que se disolvió en DCM seco (10 ml) y se enfrió hasta 0 °C antes de la adición de 2 ml (15,0 eq.) de TFA. La MR se agitó a TA durante 2 h. La eliminación de los volátiles bajo presión reducida proporcionó el Producto intermedio 34 crudo (1360 mg) como una sal de TFA, que se usó como tal en la síntesis del Ejemplo 35. UPLC-MS: 80 % (detector MS+), t.r.= 1,15 min; m/z(+) = 202,2.
Producto intermedio 35: 2-[(2-hidroxietil)[2-(piperazin-1-M)etil]amino]etan-1-ol
Se disolvieron 230 mg de 4-(2-aminoetil)piperazin-1-carboxilato de ferc-butilo (1,0 eq.) en 1,8 ml de THF seco en una atmósfera de argón. Se añadió gota a gota oxirano, solución 2,5-3,3 M en THF (0,7 ml, 2,0 eq.) a la solución y la MR se agitó a TA durante 18 h. Pasado ese tiempo, se eliminaron los volátiles bajo presión reducida para dar 760 mg de producto crudo. Se disolvieron 350 mg del Producto intermedio 35 crudo protegido con Boc en 7 ml de DCM seco y se enfriaron hasta 0 °C en una atmósfera de argón. Se añadieron gota a gota 2 ml (3,0 eq.) de TFA y la MR se agitó a TA durante 2 h. Se eliminaron los volátiles bajo presión reducida y el residuo se filtró mediante sílice mediante el uso de metanol como eluyente para producir el Producto intermedio 35 (320 mg, Y =<88>%) como sal de TFA. UPLC-MS: 80 % (detector MS+), t.r.= 1,27 min; m/z(+) = 259,1 (aducto de ACN).
Producto intermedio 36: 3-(piperazin-1-il)propenamida
Siguiendo el procedimiento de la literatura Collect. Czech. Chem. Commun., 1986, 51(11), 2598-2616, partiendo de piperazina comercial (4,3 g, 1,0 eq.), se obtuvo el Producto intermedio 36 (2,2 g, Y = 28 %). 1H Nm R (300 MHz, Cloroformo-d)<6>8,13 (s, 1H), 5,69 (s, 1H), 2,88 (t, J=4,9 Hz, 4H), 2,59 (dd, J=6,7, 5,4 Hz, 2H), 2,46 (s, 4H), 2,38 (dd, J=6,7, 5,4 Hz, 2H).
Producto intermedio 37: 2-cloro-5-fluoro-4-(trimetilestanil)piridina
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento usado para la síntesis del Producto intermedio 17, partiendo de 2-cloro-5-fluoro-4-yodopiridina (1 g, 1,0 eq). La mezcla se diluyó con hexano y se filtró a través de Celite®. La purificación mediante cromatografía en columna en gel de sílice que eluye con hexano con TEA al 5 % produjo el Producto intermedio 37 (945 mg, Y = 82 %) como un aceite incoloro. 1H NMR (300 MHz, Cloroformo-d)<6>8,14 (d, J=1,4 Hz, 1H), 7,33 (d, J=2,2 Hz, 1H),5,69 (s, 1H), 0,44 (s, 9H).
Producto intermedio 38: 7-(2-cloro-5-fluoropiridin-4-il)-1H,2H,3H-pirido[3,4-b][1,4]oxazina-1-carboxilato de terc-butilo
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento usado para la síntesis del Producto intermedio 18, partiendo del Producto intermedio 16 (100 mg, 1,0 eq.) y el Producto intermedio 37 (102 mg, 1,1 eq.). La mezcla se diluyó con DCM y se filtró a través de Celite®. El filtrado se concentró bajo presión reducida y el residuo se disolvió en DCM. La fase orgánica se lavó con una mezcla 1:1 de solución ac. sat. de NH<4>Cl y NH<4>ac. (3 x 15 ml) y con salmuera. Los compuestos orgánicos combinados se secaron sobre Na<2>SO<4>, se filtraron y se eliminaron los volátiles bajo presión reducida para dar el Producto intermedio 38 (107 mg, crudo), que se usó como tal en las siguientes etapas. UPLC-MS (254 nm): 60 % de Producto intermedio 38 (t.r.= 1,82, no ionizante), 30 % de Producto intermedio 39 (t.r.= 1,25 min; m/z(+) = 266,4).
Producto intermedio 39: 2-doro-5-fluoro-4-{1H,2H,3H-pirido[3,4-b][1,4]oxazin-7-il}piridina
Se disolvieron 123 mg del Producto intermedio 38 crudo (1,0 eq.) en 5 ml de MeOH y se añadieron a la solución 2,5 ml (2,6 eq.) de HCl 4 N en dioxano. La MR se agitó a 50 °C durante 1 h. La mezcla se secó bajo presión reducida y el residuo se disolvió en solución ac. de HCl 1 M y se lavó con DCM. La fase acuosa se basificó mediante el uso de solución ac. de NaOH 6 M y se extrajo con DCM. Los compuestos orgánicos combinados se secaron sobre Na<2>SO<4>, se filtraron y se eliminaron los volátiles bajo presión reducida para dar el Producto intermedio 39 (71 mg, Y = 80 %) como un polvo blanco. UPLC-MS (254 nm): 100 %, t.r.= 1,25 min; m/z(+) = 266,4.
Producto intermedio 40: 2-cloro-5-fluoro-4-[1-(2-nitropiridin-4-il)-1H,2H,3H-pirido[3,4-b][1,4]oxazin-7-il]piridina
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento usado para la síntesis del Producto intermedio 3, partiendo del Producto intermedio 39 (125 mg, 1,0 eq.). La MR se diluyó con DCM, se filtró a través de Celite® y se secó bajo presión reducida. La purificación mediante cromatografía en columna en gel de sílice mediante el uso de elución isocrática con una mezcla de EtOAc:hexano:TEA:MeOH (47:46:5:3, v/v/v/v) produjo el Producto intermedio 40 (122 mg, Y = 61 %) como un sólido amarillo. UPLC-MS: 100 % (280 nm); t.r.= 1,62 min; m/z(+)= 388,3.
Producto intermedio 41: 2-cloro-5-fluoro-4-[1-(2-aminopiridin-4-il)-1H,2H,3H-pirido[3,4-b][1,4]oxazin-7-il]piridina
A una solución agitada de 100 mg del Producto intermedio 40 (1,0 eq.) en etanol (25 ml) con AcOH (0,15 ml), se le añadieron 58 mg (4,0 eq.) de hierro en polvo a 85 °C, seguido de la adición de 1 gota de HCl concentrado. La MR se agitó a la misma temperatura durante 1 h, se enfrió hasta TA y se diluyó con DCM. La solución se filtró a través de Celite®, que se lavó con MeOH. El filtrado se secó bajo presión reducida y el residuo se repartió entre DCM y solución ac. de NaOH 6 M. La fase acuosa se extrajo con DCM. Los compuestos orgánicos combinados se secaron sobre Na<2>SO<4>, se filtraron y se eliminaron los volátiles bajo presión reducida para dar el Producto intermedio 41 crudo (47 mg) como un sólido marrón. UPLC-MS: 100 % (280 nm); t.r.= 1,40 min; m/z(+)= 358,4.
Producto intermedio 42: N-(4-bromopiridin-2-il)-2-(4-metilpiperazin-1-il)acetamida
A una solución agitada de 250 mg de 2-amino-4-bromopiridina (1,0 eq.) y 1,0 ml (5,0 eq.) de TEA en 12,5 ml de THF, se le añadió gota a gota cloruro de cloroacetilo (0,2 ml, 1,8 eq.) a 0 °C. Después de 40 minutos agitando a la misma temperatura, se añadió W-metilpiperazina (1,15 ml, 4,0 eq.) y la MR se dejó calentar hasta TA y se agitó adicionalmente a 50 °C durante 30 minutos. Se eliminaron los volátiles bajo presión reducida y el residuo se repartió entre DCM y agua. La fase acuosa se extrajo con DCM. Los compuestos orgánicos combinados se secaron sobre Na<2>SO<4>, se filtraron y se eliminaron los volátiles bajo presión reducida para dar el Producto intermedio 42 crudo (480 mg) como un sólido marrón, que se usó como tal en la síntesis del Ejemplo 43. UPLC-MS (254 nm): 100 %; t.r.= 1,29 min; m/z(+)= 313,4.
Producto intermedio 43: 7-(5-cloro-2-fluorofenil)-1H,2H,3H-pirido[3,4-b][1,4]oxazina-1-carboxilato de terc-butilo
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento usado para la síntesis del Producto intermedio 16, mediante el uso del Producto intermedio 2 (361 mg, 1,0 eq.). La mezcla se diluyó con DCM, se lavó con agua, se extrajo con solución ac. de HCl 1 M, se basificó con solución ac. sat. de K<2>CO<3>y se extrajo nuevamente a DCM. Los compuestos orgánicos combinados se secaron sobre Na<2>SO<4>, se filtraron y se secaron bajo presión reducida para dar el Producto intermedio 43 crudo (435 mg), que se usó como tal en las siguientes etapas. UPLC-MS (254 nm): 92 %; t.r.= 1,86 min; m/z(+)= 365,8.
Producto intermedio 44: 1-[(terc-butoxi)carbonil]-7-(5-cloro-2-fluorofenil)-1H,2H,3H-pirido[3,4-b][1,4]oxazin-6-io-6-olato
Se disolvieron 880 mg del Producto intermedio 43 (1,0 eq.) en 17,6 ml de DCE y se calentaron hasta 60 °C antes de la adición de 1200 mg (3,0 eq.) de m-CPBA. La MR se agitó a la misma temperatura durante 3 h. La solución se enfrió hasta TA, se diluyó con DCM y se lavó con agua. La capa orgánica se separó, se secó sobre Na<2>SO<4>, se filtró y se secó bajo presión reducida para dar el Producto intermedio 44 (825 mg, Y = 90 %) que se usó como tal en las siguientes etapas. UPLC-MS (280 nm): 81 %; t.r.= 1,65 min; m/z(+)= 381,2.
Producto intermedio 45: 7-(5-cloro-2-fluorofenil)-5-ciano-1H,2H,3H-pirido[3,4-b][1,4]oxazina-1-carboxilato de tercbutilo
Se suspendieron 641 mg del Producto intermedio 44 (1,0 eq.) en 12,8 ml de dioxano y se añadieron gota a gota 0,64 ml (4,0 eq.) de sulfato de dimetilo. La MR se agitó durante 30 minutos a 70 °C. A continuación, se enfrió hasta temperatura ambiente y se añadieron 1100 mg (10 eq.) de KCN y la mezcla se agitó a 70 °C durante 1 h. La MR se diluyó con EtOAc, se filtró a través de Celite® y se secó bajo presión reducida para dar el Producto intermedio 45 crudo (1030 mg) que se usó como tal en las siguientes etapas. 1H NMR (400 MHz, DMSO- d6) 58,68 (s, 1H), 7,84 (dd, J=6,7, 2,8 Hz, 1H), 7,58 (ddd, J=8,8, 4,2, 2,8 Hz,1H), 7,44 (dd, J=11,0, 8,8 Hz, 1H), 4,51 (dd, J=5,2, 3,8 Hz, 2H), 4,01-3,93 (m, 2H), 1,53 (s, 9H).
Producto intermedio 46: ácido 7-(5-cloro-2-fluorofenil)-1H,2H,3H-pirido[3,4-b][1,4]oxazina-5-carboxílico
Se disolvieron 1030 mg del Producto intermedio 45 crudo (1,0 eq.) en 21,0 ml de MeOH y 21 ml de solución ac. de NaOH<6>M. La MR se agitó durante 80 minutos a 70 °C. La MR se secó bajo presión reducida y el residuo se repartió entre solución ac. de HCl 1 M y DCM. La capa acuosa se secó y se trituró con MeOH seco para dar el Producto intermedio 46 crudo (996 mg). UPLC-MS (254 nm): 100 %; t.r.= 1,29 min; m/z(+)= 309,7.
Producto intermedio 47: N-(4-bromopiridin-2-il)-3-(4-metilpiperazin-1-il)propenamida
A una solución agitada de 2-amino-4-bromopiridina (2,5 g, 1,0 eq.) y TEA (10 ml, 5,0 eq.) en THF (125 ml), se le añadió gota a gota cloruro de 3-bromopropionilo (1,9 ml, 1,3 eq.) a 0 °C. Después de 30 minutos agitando a la misma temperatura, se añadió A/-metilpiperazina (6,4 ml, 4,0 eq.) y la MR se dejó calentar hasta TA y se agitó adicionalmente a 60 °C durante 60 minutos. La mezcla se filtró a través de Celite® y se secó bajo presión reducida. El residuo se disolvió en DCM y se lavó con agua tres veces. Los compuestos orgánicos combinados se secaron sobre Na<2>SO<4>, se filtraron y se eliminaron los volátiles bajo presión reducida. La purificación mediante cromatografía en columna en gel de sílice que eluye con un gradiente de 10 % a 50 % de MeOH en EtOAc produjo el Producto intermedio 47 (3130 mg, Y = 70 %) como cristales amarillos. UPLC-MS (254 nm): 100 %; t.r.= 1,27 min; m/z(+)= 327,2.
Producto intermedio 48: 7-(5-cloro-2-fluorofenil)-1H,2H,3H-pirido[3,4-b][1,4]oxazina-5-carboxilato de metilo
Se disolvieron 996 mg del Producto intermedio 46 crudo (1,0 eq.) en 30 ml de MeOH seco y se añadieron a la solución 10 ml de HCl 4 M en dioxano. La MR se agitó a 60 °C durante 18 h y se secó bajo presión reducida. El residuo se repartió entre DCM y agua. La fase acuosa se basificó con solución ac. sat. de K<2>CO<3>y se extrajo con DCM. Los compuestos orgánicos combinados se secaron sobre Na<2>SO<4>, se filtraron y se secaron bajo presión reducida para dar el Producto intermedio 48 crudo (148 mg). UPLC-MS (254 nm): 80 %; t.r.= 1,47 min; m/z(+)= 323,4.
Producto intermedio 49: 7-(5-cloro-2-fluorofenil)-1-(2-[3-(4-metilpiperazin-il)propanamido]piridin-4-il}-1H,2H,3H-pirido[3,4-b][1,4]oxazin-6-io-6-olato
Se suspendieron 150 mg del Producto intermedio 44 (1,0 eq.) en 5 ml de dioxano y se añadieron a la suspensión 0,7 ml de HCl concentrado. La MR se agitó a 60 °C durante 1 h. Se eliminaron los volátiles y el residuo se repartió entre DCM y agua. Se añadió NaHCO<3>sólido para alcalinizar ligeramente la fase acuosa. La fase orgánica se separó y la fase acuosa se extrajo con DCM tres veces. Los compuestos orgánicos combinados se secaron sobre Na<2>SO<4>, se filtraron y se secaron bajo presión reducida para dar el Producto intermedio 44 desprotegido (107 mg, Y = 97 %). Se suspendieron 57 mg de este producto intermedio (1,0 eq.) en 1 ml de dimetilacetamida y se añadieron 133 mg (2,0 eq.) de Cs<2>CO<3>con 133 mg (2,0 eq.) del Producto intermedio 47 a la suspensión. La mezcla se desgasificó y se saturó con Ar antes de la adición de XantfosPdG3 (0,1 eq.). La MR se agitó en un vial sellado a 100 °C durante 1 h. La mezcla se enfrió hasta TA, se diluyó con DCM, se filtró a través de Celite® y se secó bajo presión reducida. El residuo se trituró con ACN y se secó para dar el Producto intermedio 49 (42 mg, Y = 39 %) que se usó como tal en la síntesis del Ejemplo 46. UPLC-MS (254 nm): 90 %; t.r. = 1,32 min; m/z(+)= 527,5.
Producto intermedio 50: N-(4-bromopiridin-2-il)prop-2-enamida
A una suspensión agitada enfriada con hielo de 4-bromo-2-piridinamina (3 g, 1,0 eq.) y TEA (3,0 eq.) en DCM seco (80 ml), se añadió gota a gota cloruro de 3-cloropropanoilo (1,1 eq.) en DCM (20 ml). La solución se convirtió en una suspensión y esta se agitó a 0 °C durante 1 h. La mezcla se diluyó con solución sat. de NH<4>CL Se separaron las fases y la fase orgánica se lavó con salmuera, se filtró mediante un separador de fases y se concentró a vacío. La purificación mediante cromatografía ultrarrápida en gel de sílice mediante el uso de un gradiente de 0 % a 30 % de EtOAc en c-Hex proporcionó el Producto intermedio 2 (2,86 g, Y = 73 %) como un sólido amarillo pálido. LC-MS (ESI): m /z (M+2): 229,0 (Método 1)
Producto intermedio 51: 4-metilpiperazin-1,3-dicarboxilato de 1-terc-butil 3-metilo
A una suspensión de 4-boc-piperazin-2-carboxilato de metilo disponible comercialmente (150 mg, 1,0 eq.) en MeOH (2,05 ml), se le añadieron ácido acético (3,0 eq.) y formaldehído al 37 % p/p en agua (5,0 eq.). Esta mezcla se agitó a TA durante 30 min, antes de añadir cianoborohidruro de sodio (2,0 eq.). La suspensión se convirtió rápidamente en una solución. Después de 1 h, se eliminaron los volátiles a vacío, el material residual se recolectó con DCM, se lavó con solución ac. sat. de NaHCO<3>. La fase orgánica se filtró mediante un separador de fases y se concentró a vacío. La purificación mediante cromatografía ultrarrápida en gel de sílice mediante el uso de un gradiente de 0 % a 5 % de MeOH en DCM produjo el Producto intermedio 50 (124 mg, Y = 78 %) como un aceite amarillo pálido. LC-MS (ESI): m /z (M+1): 259,2 (Método 2)
Producto intermedio 52: clorhidrato de 1-metilpiperazin-2-carboxilato de metilo
Una solución del Producto intermedio 51 (124 mg, 1,0 eq.) en HCl 4,0 M en dioxano (10,0 eq.) y MeOH (1,2 ml) se agitó a TA durante 2 h. Se eliminaron los volátiles a vacío proporcionando el Producto intermedio de metilo 52 (160 mg, recuperación cuantitativa asumida) que se usó como tal en la siguiente etapa. LC-MS (ESI): m /z (M+1): 159,1 (Método 2)
Producto intermedio 53: 4-{2-[(4-bromopiridin-2-il)carbamoil]etil}-1-metilpiperazin-2-carboxilato de metilo
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento usado para la síntesis del Ejemplo 8, partiendo del Producto intermedio 50 (83 mg, 1,0 eq.) y mediante el uso del Producto intermedio 52 (1,3 eq.). La purificación mediante cromatografía ultrarrápida en gel de sílice mediante el uso de un gradiente de 0 % a 4 % de MeOH en DCM produjo el Producto intermedio 53 (135 mg, Y= 96 %) como un aceite amarillo pálido. LC-MS (ESI): m /z (M+1): 385,1 (Método 1)
Producto intermedio 54: 4-{2-[(4-bromopiridin-2-il)carbamoil]etil}piperazin-1,2-dicarboxilato de 1 -terc-butil 2-metilo
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento usado para la síntesis del Ejemplo 8, partiendo del Producto intermedio 50 (160 mg, 1,0 eq.) y mediante el uso del éster metílico del ácido N-Boc-piperazin-2-carboxílico disponible comercialmente (1,3 eq.). Se obtuvo el Producto intermedio 54 (248 mg, Y = 80 %). LC-MS (ESI): m/z (M+1): 471,1 (Método 1)
Producto intermedio 55: 4-[2-({4-[7-(5-cloro-2-fluorofenil)-1H,2H,3H-pirido[3,4-b][1,4]oxazin-1-il]piridin-2-il}carbamoil)etil]piperazin-1,2-dicarboxilato de 1 -terc-butil 2-metilo
El compuesto del título se preparó siguiendo un procedimiento similar al usado para la síntesis del Producto intermedio 3, partiendo del Producto intermedio 2 (44 mg, 1,0 eq.) y mediante el uso del Producto intermedio 54 (1,05 eq.), Cs<2>COa (1,9 eq.), Xantfos (0,11 eq.) y Pd(OAc<)2>(0,05 eq.) en 1,4-dioxano seco (2,16 ml). La purificación mediante cromatografía ultrarrápida modificada con NH mediante el uso de un gradiente de 0 % a 40 % de EtOAc en c-Hex produjo el Producto intermedio 55 (80 mg, Y = 73 %) como un sólido blanquecino. LC-MS (ESI): m /z (M+1): 655,0 (Método 2)
Producto intermedio 56: (2-£Z)-4-[bencil({2-[(trifenilmetil)amino]etil})amino]but-2-enoato de etilo
A una solución de N-bencil-N'-tritiletano-1,2-diamina (1,4 g, 1,0 eq.) en ACN (10 ml) se le añadieron K<2>CO<3>(2,0 eq.) y (2-£Z)-4-bromo-2-butenoato de etilo (1,0 eq.). La mezcla se calentó a 50 °C durante 90 min. Se añadieron agua y EtOAc, el producto se extrajo con EtOAc 2x, se recolectaron las fases orgánicas, se secaron y se evaporaron. La purificación mediante cromatografía ultrarrápida en gel de sílice mediante el uso de un gradiente de<0>a<10>% de EtOAc en c-Hex produjo el Producto intermedio 56 (1,57 g, Y = 87 %) como una cera blanca. LC- MS (ESI): m /z (M+1): 505,1 (Método 1).
Producto intermedio 57: 2-(4-bencilpiperazin-2-il)acetato de metilo
Se añadió HCl 4 M en dioxano (5,0 eq.) a una solución del Producto intermedio 56 (1,57 g, 1,0 eq.) en MeOH<( 6>ml) y la mezcla se sometió a reflujo durante 1 h. Se eliminaron los volátiles a vacío, el material residual se cargó en SCX, se lavó con MeOH y se eluyó con NH<3>1 N en MeOH. La evaporación de las fracciones básicas proporcionó el Producto intermedio 57 (560 mg, Y = 72 %) que se usó como tal en la siguiente etapa. LC-MS (ESI): m /z (M+1): 248,7 (Método 2)
Producto intermedio 58: 4-bencil-2-(2-metoxi-2-oxoetil)piperazin-1-carboxilato de terc-butilo
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento para la síntesis del Producto intermedio 16, mediante el uso del Producto intermedio 57 (560 mg, 1,0 eq.). La purificación mediante cromatografía ultrarrápida en gel de sílice mediante el uso de un gradiente de 0 a 15 % de EtOAc en c-Hex produjo el Producto intermedio 58 (410 mg, Y = 52 %) como un aceite incoloro. LC-MS (ESI): m /z (M+1): 349,2 (Método 1)
Producto intermedio 59: 2-(2-metoxi-2-oxoetil)piperazin-1-carboxilato de terc-butilo
Se burbujeó una solución del Producto intermedio 58 (410 mg, 1,0 eq.) en MeOH (8 ml) con N<2>, después se añadió Pd/C al 10 % (1,0 eq.), la suspensión resultante se agitó durante 12 h a TA en una atmósfera de H<2>. El catalizador se filtró sobre un lecho de Celite®, se enjuagó con MeOH, el solvente se eliminó bajo presión reducida produciendo el Producto intermedio 59 (280 mg, Y= 92 %) como un aceite incoloro. LC-MS (ESI): m /z (M+1): 259,1 (Método 1) Producto intermedio 60: 4-{2-[(4-bromopiridin-2-il)carbamoil]etil}-2-(2-metoxi-2-oxoetil)piperazin-1-carboxilato detercbutilo
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento usado para la síntesis del Ejemplo 8, partiendo del Producto intermedio 50 (200 mg, 1,0 eq.) y mediante el uso del Producto intermedio 59 (1,15 eq.). LC-Ms (ESI): m/z (M+1): 487,1 (Método 1)
Producto intermedio 61: 2-(4-{2-[(4-bromopiridin-2-il)carbamoil]etil}piperazin-2-il)acetato de metilo
Se añadió TFA (10,0 eq.) a una solución agitada del Producto intermedio 60 (100 mg, 1,0 eq.) en DCM (3 ml). La mezcla se agitó a TA durante 3 h, se eliminaron los volátiles a vacío, el residuo se cargó en SCX, se lavó con MeOH y eluyó con NH3 1 N en MeOH. La evaporación de la fracción básica proporcionó el Producto intermedio 61 (100 mg, recuperación cuantitativa asumida) usado como tal en la siguiente etapa. LC-MS (ESI): m /z (M+1): 387,1 (Método 2)
Producto intermedio 62: 2-(4-{2-[(4-bromopiridin-2-il)carbamoil]etil}-1-metilpiperazin-2-il)acetato de metilo
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento usado para la síntesis del Producto intermedio 51, partiendo del Producto intermedio 61 (100 mg, 1,0 eq.). Se obtuvo el Producto intermedio 62 (100 mg, Y = 97 %). LC-MS (ESI): m/z (M+1): 399,1 (Método 1)
Producto intermedio 63: 4-[2-({4-[7-(5-cloro-2-fluorofenil)-1H,2H,3H-pirido[3,4-b][1,4]oxazin-1-il]piridin-2-il}carbamoil)etil]-2-(2-metoxi-2-oxoetil)piperazin-1-carboxilato de terc-butilo
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento usado para la síntesis del Producto intermedio 55, partiendo del Producto intermedio 2 (45 mg, 1,0 eq.) y mediante el uso del Producto intermedio 60 (1,15 eq.). LC-MS (ESI): m/z (M+1): 669,5 (Método 2)
Producto intermedio 64: 4-metilpiperazin-1,2-dicarboxilato de 1-terc-butil 2-metilo
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento usado para la síntesis del Producto intermedio 51, partiendo del éster metílico del ácido N-Boc-piperazin-2-carboxílico disponible comercialmente (600 mg, 1,0 eq.). LC-MS (ESI): m/z (M+1): 259,9 (Método 2)
Producto intermedio 65: clorhidrato de 4-metilpiperazin-2-carboxilato de metilo
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento para la síntesis del Producto intermedio 52, mediante el uso del Producto intermedio 64 (470 mg, 1,0 eq.). Se obtuvo el Producto intermedio 65 (557 mg, recuperación cuantitativa asumida) que se usó como tal en la siguiente etapa. LC-MS (ESI): m/z (M+1): 159,7 (Método 2) Producto intermedio 66: 1-{2-[(4-bromopiridin-2-il)carbamoil]etil}-4-metilpiperazin-2-carboxilato de metilo
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento usado para la síntesis del Ejemplo 8, partiendo del Producto intermedio 50 (200 mg, 1,0 eq.) y mediante el uso del Producto intermedio 65 (1,15 eq.). Se obtuvo el Producto intermedio 66 (191 mg, Y = 38 %). LC-MS (ESI): m/z (M+1): 385,6 (Método 2)
Producto intermedio 67: 4-{2-[(4-bromopiridin-2-il)carbamoil]etil}-3-(2-metoxi-2-oxoetil)piperazin-1-carboxilato detercbutilo
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento usado para la síntesis del Ejemplo 8, partiendo del Producto intermedio 50 (200 mg, 1,0 eq.) y mediante el uso del éster metílico del ácido N-4-Boc-2-piperazinacético disponible comercialmente (1,15 eq.). Se obtuvo el Producto intermedio 67 (250 mg, Y = 78 %). LC-MS (ESI): m/z (M+1): 485,0 (Método 2)
Producto intermedio 68: 2-(1-{2-[(4-bromopiridin-2-il)carbamoil]etil}piperazin-2-il)acetato de metilo
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento para la síntesis del Producto intermedio 52, mediante el uso del Producto intermedio 67 (250 mg, 1,0 eq.). Se obtuvo el Producto intermedio 65 (185 mg, Y = 93 %) que se usó como tal en la siguiente etapa. LC-MS (ESI): m/z (M+1): 384,8 (Método 2)
Producto intermedio 69: 2-(1-{2-[(4-bromopiridin-2-il)carbamoil]etil}-4-metilpiperazin-2-il)acetato de metilo
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento usado para la síntesis del Producto intermedio 51, partiendo del Producto intermedio 68 (185 mg, 1,0 eq.). Se obtuvo el Producto intermedio 69 (175 mg, Y = 92 %). LC-MS (ESI): m/z (M+1): 399,6 (Método 2)
Producto intermedio 70: N-(4-bromopiridin-2-il)-2-{5-metil-2,5-diazabiciclo[2.2.1]heptan-2-il}acetamida
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento usado para la síntesis del Producto intermedio 42, partiendo de N-(4-bromopiridin-2-il)-2-doroacetamida recién preparada (50 mg, 1,0 eq.) y mediante el uso de 2-metil-2,5-diazabiciclo[2.2.1]heptano (2,0 eq.) disuelto en MeOH (1,0 ml). La purificación mediante cromatografía ultrarrápida en gel de sílice que eluye con hexano/EtOAc/MeOH/TEA (5:4:1:0,2 v/v/v/v) produjo el Producto intermedio 70 (21 mg, Y = 32 %) como un sólido amarillo. UPLC-MS (254 nm): 100 %; t.r.= 1,24 min; m/z(+)= 325,2. Producto intermedio 71: N-(4-bromopiridin-2-il)-2-{6-metil-2,6-diazaespiro[3,3]heptan-2-il}acetamida
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento usado para la síntesis del Producto intermedio 42, partiendo de N-(4-bromopiridin-2-il)-2-cloroacetamida recién preparada (50 mg, 1,0 eq.) y mediante el uso de bis(formiato de trifluorometilo) de 2-metil-2,6-diazaespiro[3,3]heptano (3,5 eq.) disuelto en MeOH (2,0 ml). La purificación mediante cromatografía ultrarrápida en gel de sílice que eluye con hexano/EtOAc/meOH/tea (5:4:1:0,5 v/v/v/v) produjo el Producto intermedio 71 (49 mg, Y = 57 %) como un sólido marrón. UPLC-MS (254 nm): 94 %; t.r.= 1,13 min; m/z(+)= 325,3.
Producto intermedio 72: N-(4-bromopiridin-2-il)-2-{2-metil-5-oxa-2,8-diazaespiro[3,5]nonan-8-il}acetamida
Se disolvió 5-oxa-2,8-diazaespiro[3,5]nonano-2-carboxilato de tere-butilo (550 mg, 1,0 eq.) en THF seco (15 ml) y la solución se enfrió hasta 0 °C. Se añadió gota a gota LiA<1>H<4>1,0 M en THF (7,2 ml, 3,0 eq.) y la mezcla resultante se calentó a 45 °C y se agitó durante 30 minutos. A continuación, se añadió una solución ac. de NaOH al 20 %, el producto precipitado se filtró, se lavó con THF y se secó para dar el producto crudo (294 mg) que se hizo reaccionar con N-(4-bromopiridin-2-il)-2-cloroacetamida recién preparada (117 mg, 1,0 eq.) siguiendo el procedimiento descrito para la síntesis del Producto intermedio 70. La purificación mediante cromatografía ultrarrápida en gel de sílice que eluye con hexano/EtOAc/MeOH/TEA (5:4:1:0,5 v/v/v/v) produjo el Producto intermedio 72 (83 mg, Y = 45 %) como un sólido marrón. UPLC-MS (254 nm): 79 %; t.r.= 1,50 min; m/z(+)= 355,6.
Producto intermedio 73: 1-(4-bromopiridin-2-il)-3-(2-(4-metilpiperazin-1-il)etil)urea
Etapa 1. A una solución de carbonato de bis(2,5-dioxopirrolidin-1-ilo) (537 mg, 1,0 eq.) en THF seco (10 ml), se le añadió 2-(4-metilpiperazin-1-il)etan-1-amina (300 mg, 1,0 eq.) y la reacción se agitó a 80 °C durante 1 h.
Etapa 2. A una solución de 4-bromopiridin-2-amina (1,0 eq.) en THF seco (10 ml), enfriada hasta -78 °C, se le añadió gota a gota LDA 2 M en THF (3,0 eq.). La reacción se agitó durante 10 min, y después se le añadió gota a gota a la mezcla la suspensión de la etapa 1 durante un período de 30 minutos. La reacción se agitó durante 30 minutos a -78 °C y durante 12 h a TA. La reacción se vertió en salmuera (20 ml) y la fase orgánica se extrajo con DCM (30 ml x 3). Los compuestos orgánicos combinados se filtraron mediante un tubo separador de fases y se eliminaron los volátiles bajo presión reducida. La purificación mediante cromatografía ultrarrápida modificada con NH mediante el uso de un gradiente de 0 a 5 % de EtOH en DCM produjo el Producto intermedio 73 (120 mg, Y = 24 %) como un sólido naranja. LC-MS (ESI): m/z (M+1): 342,2-344,2 (Método 1).
Producto intermedio 74: 7-bromo-5-(trifluorometil)-2,3-dihidro-1H-pirido[3,4-b][1,4]oxazina
A una suspensión del Producto intermedio 1 (200 mg, 1,0 eq.) en DCM (1,0 ml), se le añadieron TFA (2,0 eq.), trifluorometanosulfinato de zinc (1,0 eq.) y agua (1,0 ml). A continuación, se añadió 2-hidroperoxi-2-metilpropano (2,0 eq.) y la suspensión resultante se calentó hasta 60 °C y se agitó durante 12 h. Se eliminaron los volátiles bajo presión reducida y el Producto intermedio 74 se usó como tal en la siguiente etapa. LC-MS (ESI): m/z (M+1): 282,7 284,7 (Método 1).
Producto intermedio 75: 7-(5-cloro-2-fluorofenil)-5-(trifluorometil)-2,3-dihidro-1H-pirido[3,4-b][1,4]oxazina
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento usado para la síntesis del Producto intermedio 2, partiendo del Producto intermedio 74 (263 mg, 1,0 eq.) y mediante el uso del ácido (5-cloro-2-fluorofenil)borónico comercial (1,5 eq.), carbonato de potasio (3,0 eq.) y PdCh(dppf) (0,2 eq.). La purificación mediante cromatografía ultrarrápida de fase inversa mediante el uso de un gradiente de 0 a 50 % de B en A (A: agua/ACN 95:5 0,1 % de ácido fórmico, B: ACN/agua 95:5 0,1 % de ácido fórmico) produjo el Producto intermedio 75 (40 mg, Y = 13 %) como un sólido parduzco. LC-MS (ESI): m/z (M+1): 332,9 (Método 1).
Preparaciones de ejemplos
Ejemplo 1: 4-[7-(5-cloro-2-fluorofenil)-1H,2H,3H-pirido[3,4-b][1,4]oxazin-1-il]piridina
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento usado para la síntesis del Producto intermedio 3, mediante el uso del Producto intermedio 2 (50 mg, 1,0 eq.) y clorhidrato de 4-bromopiridina (1,5 eq.). La MR se diluyó con DCM y se filtró a través de Celite®. La capa orgánica se concentró y se repartió entre agua (25 ml) y DCM (25 ml). Se separaron las dos fases y la capa acuosa se extrajo adicionalmente con DCM (2 x 25 ml). Los compuestos orgánicos combinados se secaron sobre Na<2>SO<4>, se filtraron y se eliminaron los volátiles bajo presión reducida. La purificación mediante HPLC preparativa mediante el uso de un gradiente de ACN:agua con 0,1 % de ácido fórmico produjo el Ejemplo 1 (25 mg, Y= 40 %) como un polvo blanco. 1H NMR (300 MHz, DMSO-cfe) 58,56 8,48 (m, 2H), 8,24 (s, 1H), 7,92 (dd, J=6,9, 2,8 Hz, 1H), 7,60 (d, J=1,0 Hz, 1H), 7,46 (ddd, J=8,8, 4,2, 2,8 Hz, 1H), 7,40-7,26 (m, 3H), 4,39 (dd, J=5,2, 3,6 Hz, 2H), 3,89 (t, J=4,3 Hz, 2H). LCMS (Método E): 210 nm: 93,73 %, 254 nm: 95,02 %, 220 nm: 97,36 %; t.r.= 3,300 min; m/z(+)= 342,13.
Ejemplo 2: 7-(5-doro-2-fluorofenil)-1-(piridin-4-il)-1H,2H,3H-pirido[3,4-b][1,4]oxazin-5-amina
Se suspendieron 300 mg del Producto intermedio 11 en 4,5 ml de DCM y se añadieron 0,91 ml (20,0 eq.) de TEA. La MR se agitó durante 2 h a TA. Pasado ese tiempo, la mezcla se secó bajo presión reducida y el residuo se disolvió en 30 ml de DCM y se lavó con 10 ml de NaOH 6 M. La capa acuosa se extrajo con 3 x 30 ml de DCM. Los compuestos orgánicos combinados se secaron sobre Na<2>SO<4>, se filtraron y se evaporaron. La purificación mediante pTLC en gel de sílice, mediante el uso de una mezcla de DCM:MeOH:TEA (9,6:0,4:0,1) como eluyente, produjo el Ejemplo 2 (48 mg, Y = 30 %) como un polvo beige. 1H NMR (400 MHz, DMSO-da) 88,50-8,38 (m, 2H), 7,97 (dd, J=6,9, 2,8 Hz, 1H), 7,40 (ddd, J=8,7, 4,1, 2,8 Hz, 1H), 7,31-7,23 (m, 3H), 6,99 (d, J=1,0 Hz, 1H), 5,93 (s, 2H), 4,35 (dd, J=5,1, 3,5 Hz, 2H), 3,93-3,81 (m, 2H). LCMS (Método E): 254 nm: 98,44, 220 nm: 98,44 %, 205 nm: 98,70 %; t.r.= 2,877 min; m/z(+)= 497,78.
Ejemplo 3: 4-[7-(5-cloro-2-fluorofenil)-1H,2H,3H-pirido[3,4-b][1,4]oxazin-1-il]-2-aminopiridina
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento usado para la síntesis del Producto intermedio 41, partiendo del Producto intermedio 3 (800 mg, 1,0 eq.). La MR se diluyó con MeOH y se filtró a través de Celite®. La capa orgánica se evaporó hasta sequedad y el residuo se repartió entre 250 ml de DCM y 100 ml de NaOH 6 M. La emulsión resultante se filtró y se lavó con DCM. La capa básica se extrajo con 5 x 100 ml de DCM. Los compuestos orgánicos combinados se secaron sobre Na<2>SO<4>. Se añadieron 60 ml de MeOH y 10 ml de TEA al dCm y la suspensión se filtró a través de Celite® y una fina capa de gel de sílice. El filtrado se secó bajo presión reducida para dar el Ejemplo 3 (728 mg, Y= 99 %) como un polvo blanco. 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) 88,19 (s, 1H), 7,97-7,86 (m, 2H), 7,54 (d, J=1,0 Hz, 1H), 7,47 (ddd, J=8,8, 4,2, 2,8 Hz, 1H), 7,34 (dd, J=11,1, 8,8 Hz, 1H), 6,50 (dd, J=5,7, 2,0 Hz, 1H), 6,34 (d, J=2,0 Hz, 1H), 5,99 (s, 2H), 4,37 (dd, J=5,2, 3,4 Hz, 2H), 3,80 (t, J=4,3 Hz, 2H). LCMS (Método B): 220 nm: 92,37 %, 254 nm: 90,05 %; t.r.= 2,047 min; m/z(+)= 356,97.
Ejemplo 4: 4-[7-(2,5-difluorofenil)-1H,2H,3H-pirido[3,4-b][1,4]oxazin-1-il]piridin-2-amina
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento usado para la síntesis del Producto intermedio 41, partiendo del Producto intermedio 13 (100 mg, 1,0 eq.). La MR se procesó como para el Ejemplo 3. La purificación mediante pTLC en gel de sílice, mediante el uso de una mezcla de DCM:MeOH:TEA (9,6:0,4:0,25) como eluyente, eluido 3 veces, produjo el Ejemplo 4 (54 mg, Y = 60 %) como un polvo blanco. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 88,19 (s, 1H), 7,89 (d, J=5,7 Hz, 1H), 7,69 (ddd, J=9,6, 6,2, 3,3 Hz, 1H), 7,55 (d, J=0,9 Hz, 1H), 7,37-7,21 (m, 2H), 6,50 (dd, J=5,7, 2,1 Hz, 1H), 6,35 (d, J=2,0 Hz, 1H), 6,00 (s, 2H), 4,41 -4,31 (m, 2H), 3,79 (t, J=4,3 Hz, 2H). LCMS (Método B): 220 nm: 99,33 %, 254 nm: 98,71 %; t.r.= 1,740 min; m/z(+)= 340,97.
Ejemplo 5: 4-[7-(3-dorofenil)-1H,2H,3H-pirido[3,4-b][1,4]oxazin-1-il]piridin-2-amina
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento usado para la síntesis del Producto intermedio 41, partiendo del Producto intermedio 15 (120 mg, 1,0 eq.). La MR se procesó como para el Ejemplo 3. La purificación mediante pTLC en gel de sílice, mediante el uso de una mezcla de DCM:MeOH:TEA (9,6:0,4:0,25) como eluyente, eluido 2 veces, produjo el Ejemplo 5 (38 mg, Y = 30 %) como un polvo beige. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 88,16 (s, 1H), 7,94-7,88 (m, 2H), 7,77 (dt, J=7,5, 1,5 Hz, 1H), 7,55 (s, 1H), 7,48-7,38 (m, 2H), 6,52 (dd, J=5,7, 2,1 Hz, 1H), 6,40 (d, J=2,0 Hz, 1H), 6,00 (s, 2H), 4,42-4,30 (m, 2H), 3,79 (dd, J=5,9, 2,9 Hz, 2H). LCMS (Método E): 254 nm: 95,90 %, 220 nm: 98,64 %; t.r.= 3,020 min; m/z(+)= 338,97.
Ejemplo 6: N-{4-[7-(5-cloro-2-fluorofenil)-1H,2H,3H-pirido[3,4-b][1,4]oxazin-1-il]piridin-2-il}acetamida
Se suspendieron 145 mg del Ejemplo 3 (1,0 eq.) en 8,7 ml de DCM seco y se enfriaron hasta 0 °C. Se añadieron 0,57 ml (10,0 eq.) de TEA y 0,043 (1,5 eq.) de cloruro de acetilo a la MR y la mezcla se agitó durante 25 min a TA. Se evaporó la MR hasta sequedad bajo presión reducida y el residuo se suspendió en tolueno seco. A la mezcla se le añadieron 0,21 ml de TEA y se agitó a 100 °C durante 72 h. La MR se enfrió hasta TA, se diluyó con 20 ml de DCM y se lavó con 20 ml de agua. La capa acuosa se extrajo con DCM (3 x 20 ml). Los compuestos orgánicos combinados se secaron sobre Na<2>SO<4>, se filtraron y se secaron bajo presión reducida. La purificación mediante pTLC en gel de sílice, mediante el uso de una mezcla de DCM:MeOH:TEA (9,6:0,4:0,25) como eluyente, seguida de trituración con ACN proporcionó el Ejemplo 6 (85 mg, Y = 52 %) como un polvo beige. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 810,54 (s, 1H), 8,29-8,22 (m, 2H), 8,11 (s, 1H), 7,93 (dd, J=6,8, 2,8 Hz, 1H), 7,62 (s, 1H), 7,46 (ddd, J=8,8, 4,1, 2.8 Hz, 1H), 7,32 (dd, J=11,0, 8,8 Hz, 1H), 7,07 (dd, J=5,7, 2,2 Hz, 1H), 4,43-4,36 (m, 2H), 3,88 (t, J=4,3 Hz, 2H), 2.09 (s, 3H). LCMS (Método C): 220 nm: 98,65 %, 235 nm: 98,56 %, 254 nm: 98,36 %; t.r.= 1,617 min; m/z(+)= 398,87
Ejemplo 7: 4-[7-(6-cloro-3-fluoropiridin-2-il)-1H,2H,3H-pirido[3,4-b][1,4]oxazin-1-il]piridin-2-amina
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento usado para la síntesis del Producto intermedio 41, partiendo del Producto intermedio 20 (15 mg, 1,0 eq.). La MR se procesó como para el Ejemplo 3. La purificación mediante pTLC en sílice modificada con NH2 mediante el uso de DCM como eluyente produjo el Ejemplo 7 (9 mg, Y = 65 %) como un polvo beige. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 88,17 (s, 1H), 7,94-7,82 (m, 2H), 7,64 (s, 1H), 7,56 (dd, J=8,6, 2,9 Hz, 1H), 6,50 (dd, J=5,7, 2,1 Hz, 1H), 6,34 (d, J=2,0 Hz, 1H), 5,99 (s, 2H), 4,44-4,30 (m, 2H), 3,85 3,72 (m, 2H). LCMS (Método E): 220 nm: 97,57 %, 254 nm: 97,13 %, 310 nm: 97,30 %; t.r.= 2,630 min; m/z(+)= 357,96.
Ejemplo 8: N-{4-[7-(5-doro-2-fluorofenil)-1H,2H,3H-pirido[3,4-b][1,4]oxazin-1-il]piridin-2-il}-3-(morfolin-4-il)propenamida
Se disolvió el Producto intermedio 4 recién preparado (88 mg, 1,0 eq.) en MeOH (3,7 ml). Se añadieron morfolina (1,7 eq.) y TEA (1,25 eq.) y la MR resultante se agitó durante 18 h a Ta . La mezcla se evaporó hasta sequedad. La purificación mediante HPLC preparativa mediante el uso de un gradiente de ACN:agua con 0,1 % de ácido fórmico produjo el Ejemplo 8 (9 mg, Y= 8 %) como un polvo beige. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 610,72 (s, 1H), 8,29-8,19 (m, 2H), 8,14 (d, J=2,1 Hz, 1H), 7,93 (dd, J=6,8, 2,8 Hz, 1H), 7,61 (s, 1H), 7,46 (ddd, J=8,8, 4,2, 2,8 Hz, 1H), 7,31 (dd, J=11,0, 8,8 Hz, 1H), 7,07 (dd, J=5,7, 2,2 Hz, 1H), 4,40 (dd, J=5,1, 3,5 Hz, 2H), 3,88 (t, J=4,3 Hz, 2H), 3,57 (t, J=4,6 Hz, 4H), 2,61 (dd, J=7,4, 4,9 Hz, 2H), 2,56 (d, J=6,1 Hz, 2H), 2,40 (t, J=4,6 Hz, 4H). LCMS (Método E): 254 nm: 98,44, 220 nm: 98,44 %, 205 nm: 98,70 %; t.r.= 2,877 min; m/z(+)= 497,78.
Ejemplo 9: N-{4-[7-(5-cloro-2-fluorofenil)-1H,2H,3H-pirido[3,4-b][1,4]oxazin-1 -il]piridin-2-il}-3-(dimetilamino)propenamida
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento usado para la síntesis del Ejemplo 8, partiendo del Producto intermedio 4 recién preparado (100 mg, 1,0 eq.) y mediante el uso de clorhidrato de dimetilamina (1,7 eq.). La purificación mediante HPLC preparativa mediante el uso de un gradiente de ACN:agua con 0,1 % de ácido fórmico produjo el Ejemplo 9 (13 mg, Y= 12 %) como un polvo beige. 1H NMR (400 MHz, Cloroformo-d) 68,29 (s, 1H), 8,21 (d, J=5,7 Hz, 1H), 8,11 (d, J=2,2 Hz, 1H), 7,93 (dd, J=6,7, 2,8 Hz, 1H), 7,61 (d, J=1,3 Hz, 1H), 7,25-7,22 (m, 1H), 7,07-6,96 (m, 2H), 4,40 (t, J=4,4 Hz, 2H), 3,88 (t, J=4,4 Hz, 2H), 2,87 (t, J=6,2 Hz, 2H), 2,68 (t, J=6,3 Hz, 2H), 2,49 (s, 6H). LCMS (Método H): 254 nm: 93,80 %, 220 nm: 92,80 %, 240 nm: 94,42 %; t.r.= 4,197 min; m/z(+)= 456,00.
Ejemplo 10: N-{4-[7-(5-cloro-2-fluorofenil)-1H,2H,3H-pirido[3,4-b][1,4]oxazin-1-il]piridin-2-il}-3-(piperazin-1-il)propenamida
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento usado para la síntesis del Ejemplo 8, partiendo del Producto intermedio 4 recién preparado (100 mg, 1,0 eq.) y mediante el uso de piperazin-1-carboxilato de terc-butilo (1,7 eq.). La purificación mediante cromatografía en columna en gel de sílice que eluye con un gradiente de 0 a 100 % de EtOAc en hexano produjo el Ejemplo 10 protegido con Boc (77 mg, Y = 54 %). El producto protegido con Boc (30 mg, 1,0 eq.) se disolvió en 1,26 ml de HCl 1,25 M en MeOH y se agitó a TA durante 24 h. El Ejemplo 10 como sal de HCl se recolectó mediante filtración (28 mg, Y= 98 %) como un polvo blanco. 1H NMR (400 MHz, Metanol^) 6 8,45 (d, J=6,3 Hz, 1H), 8,42 (s, 1H), 7,97 (s, 1H), 7,85 (dd, J=6,4, 2,6 Hz, 1H), 7,70 (s, 1H), 7,66 (ddd, J=8,9, 4,4, 2,7 Hz, 1H), 7,48 (dd, J=6,2, 2,2 Hz, 1H), 7,39 (dd, J=10,1, 8,9 Hz, 1H), 4,64 (t, J=4,5 Hz, 2H), 4,21-4,15 (m, 2H), 3,66 (br s, 10H), 3,18 (t, J=6,7 Hz, 2H). LCMS (Método H): 220 nm: 95,26 %, 254 nm: 94,91 %, 240 nm: 95,52 %, t.r.= 4,043, m/z(+)= 496,99.
Ejemplo 11: 4-[7-(2-fluoro-5-metilfenil)-1H,2H,3H-pirido[3,4-b][1,4]oxazin-1-il]piridin-2-amina
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento usado para la síntesis del Producto intermedio 41, partiendo del Producto intermedio 22 (74 mg, 1,0 eq.). La MR se procesó como para el Ejemplo 3. La purificación mediante pTLC en gel de sílice, mediante el uso de una mezcla de DCM:MeOH:TEA (9,6:0,4:0,25) como eluyente, eluido 2 veces, produjo el Ejemplo 11 (31 mg, Y = 44 %) como un polvo beige. 1H NMR (400 MHz, DMSO-cfe) 68,17 (s, 1H), 7,88 (d, J=5,7 Hz, 1H), 7,69 (dd, J=7,9, 2,3 Hz, 1H), 7,48 (d, J=1,2 Hz, 1H), 7,21-7,16 (m, 1H), 7,12 (dd, J=11,4, 8,3 Hz, 1H), 6,50 (dd, J=5,7, 2,0 Hz, 1H), 6,34 (d, J=2,0 Hz, 1H), 6,00 (s, 2H), 4,35 (t, J=4,2 Hz, 2H), 3,79 (t, J=4,4 Hz, 2H), 2,32 (s, 3H). LCMS (Método B): 210 nm: 87,93 %, 220 nm: 92,67 %, 254 nm: 97,43 %, t.r.= 1,537 min; m/z(+)= 337,02.
Ejemplo 12: 4-[7-(5-ciclopropil-2-fluorofenil)-1H,2H,3H-pirido[3,4-b][1,4]oxazin-1-il]piridin-2-amina
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento usado para la síntesis del Producto intermedio 41, partiendo del Producto intermedio 24 (82 mg, 1,0 eq.). La MR se procesó como para el Ejemplo 3 para proporcionar el Ejemplo 12 (22 mg, Y = 29 %) como un polvo beige. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 68,17 (s, 1H), 7,88 (d, J=5,6 Hz, 1H), 7,59 (dd, J=7,7, 2,4 Hz, 1H), 7,47 (d, J=1,3 Hz, 1H), 7,19-7,02 (m, 2H), 6,49 (dd, J=5,7, 2,0 Hz, 1H), 6,33 (d, J=2,0 Hz, 1H), 5,96 (s, 2H), 4,35 (dd, J=5,0, 3,6 Hz, 2H), 3,78 (t, J=4,4 Hz, 2H), 1,98 (ddd, J=13,4, 8,5, 5,1 Hz, 1H), 1,02-0,86 (m, 2H), 0,72-0,58 (m, 2H). LCMS (Método B): 220 nm: 96,65 %, 254 nm: 97,36 %; t.r.= 1,870 min; m/z(+)= 363,04.
Ejemplo 13: 4-{7-[2-fluoro-5-(propan-2-il)fenil]-1H,2H,3H-pirido[3,4-b][1,4]oxazin-1-il}piridin-2-amina
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento usado para la síntesis del Producto intermedio 41, partiendo del Producto intermedio 26 (55 mg, 1,0 eq.). La MR se procesó como para el Ejemplo 3 para proporcionar el Ejemplo 13 (27 mg, Y = 53 %) como un polvo beige. 1H NMR (400 MHz, DMSO- de) 88,18 (s, 1H), 7,88 (d, J=5,7 Hz, 1H), 7,74 (dd, J=7,7, 2,5 Hz, 1H), 7,49 (d, J=1,2 Hz, 1H), 7,26 (ddd, J=7,5, 4,7, 2,4 Hz, 1H), 7,15 (dd, J=11,4, 8,5 Hz, 1H), 6,49 (dd, J=5,7, 2,1 Hz, 1H), 6,34 (d, J=2,0 Hz, 1H), 5,96 (s, 2H), 4,35 (t, J=4,3 Hz, 2H), 3,79 (t, J=4,4 Hz, 2H), 2,94 (p, J=6,9 Hz, 1H), 1,21 (d, J=6,9 Hz, 6H). LCMS (Método B): 220 nm: 95,95 %, 254 nm: 96,34 %; t.r.= 1,997 min; m/z(+)= 365,03.
Ejemplo 14: N-{4-[7-(5-cloro-2-fluorofenil)-1H,2H,3H-pirido[3,4-b][1,4]oxazin-1-il]piridin-2-il}-3-(4-metilpiperazin-1-il)propenamida
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento usado para la síntesis del Ejemplo 8, partiendo del Producto intermedio 4 recién preparado (130 mg, 1,0 eq.) y mediante el uso de W-metilpiperazina (1,7 eq.). La purificación mediante HPLC preparativa mediante el uso de un gradiente de ACN:agua con 0,1 % de ácido fórmico produjo una sal fórmica simple del Ejemplo 14 (63 mg, Y = 40 %) como un polvo beige. 1H NMR (400 MHz, Cloroformo-dJ 8 8,32 (s, 1H), 8,16-8,08 (m, 2H), 7,95 (dd, J=6,9, 2,7 Hz, 1H), 7,63 (d, J=1,2 Hz, 1H), 7,26 (dd, J=12,9, 2,8 Hz, 1H), 7,09 (dd, J=5,9, 2,2 Hz, 1H), 7,03 (dd, J=10,7, 8,7 Hz, 1H), 4,45-4,37 (m, 2H), 3,90 (t, J=4,5 Hz, 2H), 3,5-3,0 (m, 8H), 2,94 (t, J=6,1 Hz, 2H), 2,80 (s, 3H), 2,64 (d, J=6,3 Hz, 2H). LCMS (Método J): 254 nm: 98,51 %, 220 nm: 98,02%, 240 nm: 98,52 %; t.r.= 3,313 min; m/z(+)= 511,28.
Ejemplo 15: 7-(5-cloro-2-fluorofenil)-1-{1H-pirazolo[3,4-b]piridin-4-il}-1H,2H,3H-pirido[3,4-b][1,4]oxazina
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento usado para la síntesis del Producto intermedio 3, partiendo del Producto intermedio 2 (60 mg, 1,0 eq.) y mediante el uso del Producto intermedio 27 (1,15 eq.). La purificación mediante cromatografía en columna en gel de sílice que eluye con un gradiente de 0 a 100 % de EtOAc en hexano TEA al 2,5 % produjo el Ejemplo 15 puro protegido por SEM (96 mg, Y = 83 %). El producto protegido se disolvió en 2,5 ml de DCM y se añadieron a la solución 1,25 ml de TFA. La mezcla se agitó durante 1,5 h a TA. La MR se secó bajo presión reducida y el residuo se repartió entre 5 ml de DCM y 5 ml de solución ac. sat. de NaHCO<3>. La capa acuosa se extrajo con DCM ( 4 x 5 ml). Los compuestos orgánicos combinados se secaron sobre Na<2>SO<4>, se filtraron y se eliminaron los volátiles bajo presión reducida. El residuo se suspendió en MeOH y se acidificó mediante el uso de ácido fórmico. La purificación mediante HPLC preparativa mediante el uso de un gradiente de ACN:agua con 0,1 % de ácido fórmico produjo el Ejemplo 15 (36 mg, Y = 46 %) como un polvo blanco. 1H NMR (400 MHz, DMSO-da) 813,71 (s, 1H), 8,45 (d, J=5,2 Hz, 1H), 8,30 (s, 1H), 8,05 (s, 1H), 7,91 (dd, J=6,8, 2,8 Hz, 1H), 7,51 (d, J=0,9 Hz, 1H), 7,44 (ddd, J=8,8, 4,1, 2,8 Hz, 1H), 7,28 (dd, J=11,1, 8,8 Hz, 1H), 7,12 (d, J=5,2 Hz, 1H), 4,46 (dd, J=5,2, 3,5 Hz, 2H), 4,13 (t, J=4,3 Hz, 2H). LCMS (Método F): 220 nm: 99,41 %, 254 nm: 99,79 %, 205 nm: 99,08 %; t.r.= 2,323 min; m/z(+)= 381,91.
Ejemplo 16: 7-(5-cloro-2-fluorofenil)-1-{1H-pirrolo[2,3-b]piridin-4-il}-1H,2H,3H-pirido[3,4-b][1,4]oxazina
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento usado para la síntesis del Producto intermedio 3, partiendo del Producto intermedio 2 (50 mg, 1,0 eq.) y mediante el uso del Producto intermedio 28 (1,15 eq.). La purificación mediante pTLC en gel de sílice, mediante el uso de hexano:AcOEt:TEA (8:2:1), eluido dos veces, produjo el Ejemplo 16 protegido por SEM (75 mg, Y= 78 %). El producto se disolvió en DCM (5,66 ml) y se añadieron 0,5 ml de TFA a la solución agitada. Después de 24 h, la MR se secó bajo presión reducida y el residuo se suspendió en 4,5 ml de dioxano. Se añadieron 4,5 ml de NH<3>(ac.) al 25 % a la mezcla y se agitó durante 2 h a TA. La MR se evaporó hasta sequedad y el residuo se repartió entre 5 ml de agua y 5 ml de DCM. La capa acuosa se extrajo con<d>C<m>( 3 x 5 ml). Los compuestos orgánicos combinados se secaron sobre Na<2>SO<4>, se filtraron y se eliminaron los volátiles bajo presión reducida. La trituración con MeOH produjo el Ejemplo 16 (15 mg, Y= 32 %) como un polvo blanco. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 8 11,81 (s, 1H), 8,29-8,17 (m, 2H), 7,88 (dd, J=6,8, 2,8 Hz, 1H), 7,49-7,37 (m, 2H), 7,28-7,16 (m, 2H), 7,07 (d, J=5,2 Hz, 1H), 6,31 (d, J=3,5 Hz, 1H), 4,45 (dd, J=5,2, 3,4 Hz, 2H), 4,03 (q, J=4,2, 3,1 Hz, 2H). LCMS (Método B): 220 nm: 98,95 %, 254 nm: 98,94 %; t.r.= 2,140 min; m/z(+)= 380,90.
Ejemplo 17: 7-(5-cloro-2-fluorofenil)-1-{3H-imidazo[4,5-b]piridin-7-il}-1H,2H,3H-pirido[3,4-b][1,4]oxazina
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento usado para la síntesis del Producto intermedio 3, partiendo del Producto intermedio 2 (40 mg, 1,0 eq.) y mediante el uso del Producto intermedio 29 (1,15 eq.). La purificación mediante pTLC en gel de sílice, mediante el uso de hexano:AcOEt:TEA (8:2:1), eluido dos veces, produjo el Ejemplo 17 protegido por SEM (55 mg, Y = 71 %) como un regioisómero único. El producto se disolvió en DCM (9,2 ml) y se le añadieron 2,7 ml de TFA. Después de 7 h, se eliminaron los volátiles y el residuo se repartió entre 7 ml de DCM y 5 ml de solución ac. sat. de NaHCO<3>. La capa acuosa se extrajo con DCM ( 3 x 7 ml). Los compuestos orgánicos combinados se secaron sobre Na<2>SO<4>, se filtraron y se eliminaron los volátiles bajo presión reducida. La trituración con ACN produjo el Ejemplo 17 (20 mg, Y= 49 %) como un polvo marrón. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 8 12,92 (s, 1H), 8,38 (s, 1H), 8,20 (s, 1H), 8,09 (d, J=8,5 Hz, 1H), 7,92 (dd, J=6,8, 2,8 Hz, 1H), 7,77 (s, 1H), 7,44 (ddd, J=8,8, 4,1, 2,8 Hz, 1H), 7,29 (dt, J=8,8, 5,7 Hz, 2H), 4,42 (dd, J=5,1, 3,6 Hz, 2H), 4,06-3,99 (m, 2H). LCMS (Método E): 220 nm: 98,22 %, 254 nm: 98,38 %, 205 nm: 98,57 %; t.r.= 2,937 min; m/z(+)= 381,89.
- - - - - - - - - - , , - , - , - - - -il}propanamida
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento usado para la síntesis del Ejemplo 8, partiendo del Producto intermedio 4 recién preparado (500 mg, 1,0 eq.) y mediante el uso de dietanolamina (2,1 eq.). La purificación mediante cromatografía en columna en gel de sílice que eluye con un gradiente de 2 % a 5 % de MeOH en DCM produjo el Ejemplo 18 (225 mg, Y = 46 %) como un polvo gris. 1H NMR (400 MHz, DMSO-cfe) 6 10,82 (s, 1H), 8,25 (t, J=2,8 Hz, 2H), 8,12 (d, J=2,2 Hz, 1H), 7,93 (dd, J=6,8, 2,8 Hz, 1H), 7,62 (s, 1H), 7,46 (ddd, J=8,8, 4,2, 2,8 Hz, 1H), 7,31 (dd, J=11,0, 8,8 Hz, 1H), 7,07 (dd, J=5,7, 2,2 Hz, 1H), 4,40 (q, J=4,3, 3,2 Hz, 4H), 3,88 (t, J=4,3 Hz, 2H), 3,45 (q, J=6,0 Hz, 4H), 2,82 (t, J=6,8 Hz, 2H), 2,57 (t, J=6,3 Hz, 4H). LCMS (Método A): 220 nm: 94,57 %, 240 nm: 96,21 %, 254 nm: 97,43 %; t.r.= 1,640; m/z(+)= 516,12.
Ejemplo 19: N-{4-[7-(5-cloro-2-fluorofenil)-1H,2H,3H-pirido[3,4-b][1,4]oxazin-1-il]piridin-2-il}-3-[metil(oxetan-3-il)amino]propenamida
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento usado para la síntesis del Ejemplo 8, partiendo del Producto intermedio 4 recién preparado (123 mg, 1,0 eq.) y mediante el uso de W-metil oxetano amina (3,4 eq.). La purificación mediante HPLC preparativa mediante el uso de un gradiente de ACN:agua con 0,1 % de ácido fórmico produjo el Ejemplo 19 (27 mg, Y = 18 %) como un polvo blanco. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 610,61 (s, 1H), 8,30 - 8,21 (m, 2H), 8,14 (d, J=2,2 Hz, 1H), 7,92 (dd, J=6,8, 2,8 Hz, 1H), 7,62 (s, 1H), 7,45 (ddd, J=8,7, 4,1, 2,8 Hz, 1H), 7,29 (dd, J=11,0, 8,8 Hz, 1H), 7,06 (dd, J=5,7, 2,2 Hz, 1H), 4,49 (t, J=6,5 Hz, 2H), 4,38 (q, J=6,2, 5,6 Hz, 4H), 3,88 (t, J=4,4 Hz, 2H), 3,50 (q, J=6,4 Hz, 1H), 2,06 (s, 3H). LCMS (Método G): 220 nm: 96,68 %, 240 nm: 97,02 %, 254 nm: 96,48 %, t.r.= 2,410 min; m/z(+) = 497,79.
Ejemplo 20: N-{4-[7-(5-cloro-2-fluorofenil)-1H,2H,3H-pirido[3,4-b][1,4]oxazin-1-il]piridin-2-il}-3-[(2-hidroxietil)(metil)amino]propenamida
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento usado para la síntesis del Ejemplo 8, partiendo del Producto intermedio 4 recién preparado (123 mg, 1,0 eq.) y mediante el uso de W-metiletanolamina (3,4 eq.). La purificación mediante HPLC preparativa mediante el uso de un gradiente de ACN:agua con 0,1 % de ácido fórmico produjo el Ejemplo 20 (37 mg, Y = 40 %) como un polvo blanco. 1H NMR (400 MHz, DMSO-cfe) 810,80 (s, 1H), 8,27 - 8,21 (m, 2H), 8,12 (d, J=2,2 Hz, 1H), 7,92 (dd, J=6,8, 2,8 Hz, 1H), 7,61 (s, 1H), 7,45 (ddd, J=8,8, 4,1, 2,8 Hz, 1H), 7,30 (dd, J=11,0, 8,8 Hz, 1H), 7,06 (dd, J=5,7, 2,2 Hz, 1H), 4,42-4,36 (m, 3H), 3,87 (t, J=4,3 Hz, 2H), 3,48 (br, s, 2H), 2,67 (d, J=13,5 Hz, 2H), 2,53-2,50 (m, 2H), 2,44 (t, J=6,3 Hz, 2H), 2,21 (s, 3H). LCMS (Método D): 205 nm: 95,53 %, 220 nm: 96,27 %, 254 nm: 96,53 %; t.r.= 3,030 min; m/z(+) = 486,00.
Ejemplo 21: 3-[bis(oxetan-3-il)amino]-N-{4-[7-(5-cloro-2-fluorofenil)-1H,2H,3H-pirido[3,4-b][1,4]oxazin-1-il]piridin-2-il}propanamida
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento usado para la síntesis del Ejemplo 8, partiendo del Producto intermedio 4 recién preparado (123 mg, 1,0 eq.) y W-(oxetan-3-il)oxetan-3-amina (3,4 eq.) y ácido ptoluenosulfónico monohidratado (0,25 eq.). La purificación mediante HPLC preparativa mediante el uso de un gradiente de ACN:agua con 0,1 % de ácido fórmico produjo el Ejemplo 21 (16 mg, Y = 10 %) como un polvo blanco.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 8 10,59 (s, 1H), 8,30-8,21 (m, 2H), 8,12 (d, J=2,1 Hz, 1H), 7,93 (dd, J=6,8, 2,8 Hz, 1H), 7,62 (s, 1H), 7,45 (ddd, J=8,8, 4,2, 2,8 Hz, 1H), 7,30 (dd, J=11,0, 8,8 Hz, 1H), 7,07 (dd, J=5,7, 2,2 Hz, 1H), 4,46 (dd, J=7,1, 1,7 Hz, 8H), 4,39 (t, J=4,3 Hz, 2H), 4,00 (p, J=7,2 Hz, 2H), 3,87 (t, J=4,4 Hz, 2H), 2,83 (t, J=7,0 Hz, 2H), 2,44 (t, J=6,9 Hz, 2H). LCMS (Método B): 220 nm: 95,22 %, 240 nm: 96,08 %, 254 nm: 96,07 %; t.r.= 1,727 min; m/z(+)= 513,72.
Ejemplo 22: N-{4-[7-(5-cloro-2-fluorofenil)-1H,2H,3H-pirido[3,4-b][1,4]oxazin-1-il]piridin-2-il}-3-(4-metil-3-oxopiperazin-1-il)propenamida
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento usado para la síntesis del Ejemplo 8, partiendo del Producto intermedio 4 recién preparado (135 mg, 1,0 eq.) y mediante el uso de 1-metilpiperazin-2-ona (1,7 eq.). La purificación mediante pTLC en gel de sílice, mediante el uso de MeOH al 8 % en DCM como eluyente, seguido de trituración con MeOH/éter dietílico produjo el Ejemplo 22 (50 mg, Y = 13 %) como un polvo blanco. 1H NMR (400 MHz, DMSO-cfe) 810,61 (s, 1H), 8,31-8,21 (m, 2H), 8,14 (d, J=2,1 Hz, 1H), 7,93 (dd, J=6,8, 2,8 Hz, 1H), 7,61 (s, 1H), 7,50-7,42 (m, 1H), 7,31 (dd, J=10,9, 8,8 Hz, 1H), 7,07 (dd, J=5,7, 2,3 Hz, 1H), 4,45-4,32 (m, 2H), 3,87 (t, J=4,3 Hz, 2H), 3,23 (t, J=5,5 Hz, 2H), 3,01 (s, 2H), 2,79 (s, 3H), 2,66 (d, J=2,7 Hz, 4H), 2,57 (d, J=6,5 Hz, 2H). LCMS (Método E): 220 nm: 96,46 %, 235 nm: 97,00 %, 254 nm: 96,51 %; t.r.= 2,910 min; m/z(+) = 524,96.
Ejemplo 23: 2-{[2-({4-[7-(5-cloro-2-fluorofenil)-1H,2H,3H-pirido[3,4-b][1,4]oxazin-1-il]piridin-2-il}carbamoil)etil](metil)amino}acetato de metilo
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento usado para la síntesis del Ejemplo 8, partiendo del Producto intermedio 4 recién preparado (135 mg, 1,0 eq.) y mediante el uso de clorhidrato de éster metílico de sarcosina (1,7 eq.). La purificación mediante pTLC en gel de sílice, mediante el uso de MeOH al 5 % en DCM como eluyente, produjo el Ejemplo 23 (55 mg, Y= 36 %) como un polvo verde. 1H NMR (400 MHz, DMSO-cfe) 5 10,60 (s, 1H), 8,28 - 8,21 (m, 2H), 8,13 (d, J=2,1 Hz, 1H), 7,92 (dd, J=6,8, 2,8 Hz, 1H), 7,61 (s, 1H), 7,45 (dt, J=8,8, 3,6 Hz, 1H), 7,30 (dd, J=11,0, 8,8 Hz, 1H), 7,06 (dd, J=5,7, 2,2 Hz, 1H), 4,39 (t, J=4,3 Hz, 2H), 3,87 (t, J=4,2 Hz, 2H), 3,59 (s, 3H), 3,31 (s, 2H), 2,79 (t, J=6,9 Hz, 2H), 2,56-2,53 (m, 2H), 2,29 (s, 3H). LCMS (Método B): 220 nm: 95,22 %, 240 nm: 96,08 %, 254 nm: 96,07 %; t.r.= 1,727 min; m/z(+)= 513,72.
Ejemplo 24: N-{4-[7-(5-cloro-2-fluorofenil)-1H,2H,3H-pirido[3,4-b][1,4]oxazin-1-il]piridin-2-il}-3-metanosulfonamidopropanamida
Se disolvió el Producto intermedio 30 (20 mg, 1,0 eq.) en DCM seco (2 ml) y se añadió TEA (5,0 eq.). La MR se enfrió hasta 0 °C y se le añadió cloruro de mesilo (1,2 eq.). La MR se calentó hasta TA y se agitó durante 1 h. Se eliminaron los volátiles. La purificación mediante pTLC en gel de sílice mediante el uso de MeOH al 8 % en DCM como eluyente produjo el Ejemplo 24 (8,5 mg, Y = 43 %) como un polvo beige. 1H NMR (400 MHz, DMSO-cfe) 58,29 8,21 (m, 2H), 8,13 (d, J=2,1 Hz, 1H), 7,93 (dd, J=6,9, 2,8 Hz, 1H), 7,61 (s, 1H), 7,46 (ddd, J=8,8, 4,2, 2,8 Hz, 1H), 7,31 (dd, J=11,0, 8,8 Hz, 1H), 7,07 (dd, J=5,7, 2,2 Hz, 1H), 4,43-4,36 (m, 2H), 3,87 (t, J=4,3 Hz, 2H), 3,22 (t, J=6,9 Hz, 2H), 2,85 (s, 3H), 2,61 (t, J=6,9 Hz, 2H). LCMS (Método B): 220 nm: 96,98 %, 235 nm: 97,57 %, 254 nm: 97,95 %; t.r.= 2,190 min; m/z(+)= 505,97.
Ejemplo 25: N-{4-[7-(5-cloro-2-fluorofenil)-1H,2H,3H-pirido[3,4-b][1,4]oxazin-1-il]piridin-2-il}-3-(4-metil-2-oxopiperazin-1-il)propenamida
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento usado para la síntesis del Ejemplo 8, partiendo del Producto intermedio 4 recién preparado (100 mg, 1,0 eq.) y mediante el uso de 1-metilpiperazin-3-ona (1,1 eq.) y NaOH (0,3 eq.). La purificación mediante pTLC en gel de sílice mediante el uso de MeOH al 8 % en DCM como eluyente produjo el Ejemplo 25 (30 mg, Y = 29 %) como un polvo beige. 1H NMR (400 MHz, DMSO-cfe) 6 10,61 (s, 1H), 8,31-8,20 (m, 2H), 8,10 (s, 1H), 7,93 (dd, J=6,8, 2,8 Hz, 1H), 7,62 (s, 1H), 7,46 (ddd, J=8,8, 4,1, 2,8 Hz, 1H), 7,30 (dd, J=11,0, 8,8 Hz, 1H), 7,07 (dd, J=5,7, 2,2 Hz, 1H), 4,39 (t, J=4,3 Hz, 2H), 3,88 (t, J=4,4 Hz, 2H), 3,52 (t, J=7,1 Hz, 2H), 3,29 (t, J=5,5 Hz, 2H), 2,87 (s, 2H), 2,63 (q, J=6,8 Hz, 2H), 2,53-2,50 (m, 2H), 2,18 (s, 3H). LCMS (Método A): 205 nm: 96,90 %, 220 nm: 96,92 %, 254 nm: 97,47 %; r.t =1,717 min; m/z(+) = 525,15.
Ejemplo 26: N-{4-[7-(5-cloro-2-fluorofenil)-1H,2H,3H-pirido[3,4-b][1,4]oxazin-1-il]piridin-2-il}-3-[(2-metanosulfoniletil)amino]propenamida
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento usado para la síntesis del Ejemplo 24, partiendo del Producto intermedio 30 (80 mg, 1,0 eq.) y mediante el uso de metil vinil sulfona (1,1 eq.). La purificación mediante pTLC en gel de sílice mediante el uso de MeOH al 10 % en DCM como eluyente (eluido dos veces) produjo el Ejemplo 26 (13 mg, Y= 15 %) como un polvo beige. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 610,64 (s, 1H), 8,25 (d, J=5,5 Hz, 2H), 8,13 (d, J=2,1 Hz, 1H), 7,93 (dd, J=6,8, 2,8 Hz, 1H), 7,61 (s, 1H), 7,46 (ddd, J=8,7, 4,1, 2,8 Hz, 1H), 7,32 (dd, J=11,0, 8,8 Hz, 1H), 7,08 (dd, J=5,7, 2,2 Hz, 1H), 4,40 (t, J=4,3 Hz, 2H), 3,88 (t, J=4,3 Hz, 2H), 3,20 (q, J=6,0, 5,4 Hz, 2H), 3,00-2,98 (m, 4H), 2,92 (d, J=5,4 Hz, 2H), 2,81 (d, J=6,5 Hz, 2H), 2,54-2,52 (m, 2H), 2,08-1,97 (br, s, 1H). LCMS (Método E): 205 nm: 99,67 %, 220 nm: 99,23 %, 254 nm: 98,66 %; t.r.= 2,850 min; m/z(+) = 534,06.
Ejemplo 27: N-{4-[7-(5-cloro-2-fluorofenil)-1H,2H,3H-pirido[3,4-b][1,4]oxazin-1-il]piridin-2-il}-3-[(2-metanosulfoniletil)(metil)amino]propenamida
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento usado para la síntesis del Ejemplo 8, partiendo del Producto intermedio 4 recién preparado (146 mg, 1,0 eq.) y mediante el uso de 2-(metilamino)-1-(metilsulfonil)etano (2,2 eq.). La purificación mediante pTLC en gel de sílice mediante el uso de MeOH al 5 % en DCM produjo el Ejemplo 27 (50 mg, Y = 41 %) como un polvo gris. 1H NMR (400 MHz, DMSO-cfe) 610,61 (s, 1H), 8,34-8,23 (m, 2H), 8,12 (d, J=2,2 Hz, 1H), 7,94 (dd, J=6,8, 2,8 Hz, 1H), 7,62 (s, 1H), 7,51-7,43 (m, 1H), 7,31 (dd, J=10,9, 8,8 Hz, 1H), 7,08 (dd, J=5,7, 2,2 Hz, 1H), 4,40 (t, J=4,3 Hz, 2H), 3,88 (t, J=4,2 Hz, 2H), 3,25 (t, J=6,9 Hz, 2H), 2,95 (s, 3H), 2,77 (t, J=7,0 Hz, 2H), 2,69 (m, 2H), 2,54 (m, 2H), 2,22 (s, 3H). LCMS (Método E): 254 nm: 98,81 %, 220 nm: 99,18 %; 240 nm (máx. abs.): 99,07 %, t.r.= 2,880 min; m/z(+)= 547,15.
empo : - - - -coro- - uoroen - , , -pr o , - , oxazn- - pr n- - - - - -hidroxietil)piperazin-1-il}propanamida
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento usado para la síntesis del Ejemplo 8, partiendo del Producto intermedio 4 recién preparado (146 mg, 1,0 eq.) y mediante el uso de 1 -(2-hidroxietil)piperazina (2,2 eq.). La purificación mediante pTLC en gel de sílice mediante el uso de MeOH al 5 % en DCM produjo el producto que se disolvió en ACN y precipitó en agua. Se obtuvo el Ejemplo 28 (20 mg, Y = 16 %) como un polvo beige. 1H NMR (400 MHz, DMSO-cfe) 810,75 (s, 1H), 8,31-8,22 (m, 2H), 8,14 (d, J=2,1 Hz, 1H), 7,93 (dd, J=6,8, 2,8 Hz, 1H), 7,61 (s, 1H), 7,46 (ddd, J=8,7, 4,1, 2,8 Hz, 1H), 7,31 (dd, J=11,0, 8,8 Hz, 1H), 7,07 (dd, J=5,7, 2,2 Hz, 1H), 4,44-4,31 (m, 2H), 3,88 (t, J=4,3 Hz, 2H), 3,48 (t, J=6,5 Hz, 2H), 2,59 (d, J=6,1 Hz, 2H), 2,45-2,32 (m, 10H). LCMS (Método E): 254 nm: 97,03 %, 220 nm: 97,68 %; 205 nm (máx. abs.): 97,15 %, t.r.= 2,770 min; m/z(+)= 541,20.
Ejemplo 29: N-{4-[7-(5-cloro-2-fluorofenil)-1H,2H,3H-pirido[3,4-b][1,4]oxazin-1-il]piridin-2-il}-3-[(2-metanosulfonamidoetil)(metil)amino]propenamida
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento usado para la síntesis del Ejemplo 8, partiendo del Producto intermedio 4 recién preparado (146 mg, 1,0 eq.) y mediante el uso de clorhidrato de 2-(metilamino)-1-(metilsulfonilamida)etano (2,2 eq.). La purificación mediante pTLC en gel de sílice mediante el uso de MeOH al 5 % en DCM produjo el producto que se disolvió en ACN y precipitó en agua. Se obtuvo el Ejemplo 29 (36 mg, Y = 18 %) como un polvo gris. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 8 10,78 (s, 1H), 8,29-8,22 (m, 2H), 8,13 (d, J=2,2 Hz, 1H), 7,93 (dd, J=6,8, 2,8 Hz, 1H), 7,62 (s, 1H), 7,46 (ddd, J=8,8, 4,2, 2,8 Hz, 1H), 7,31 (dd, J=11,0, 8,8 Hz, 1H), 7,08 (dd, J=5,7, 2,2 Hz, 1H), 6,79 (s, 1H), 4,40 (dd, J=5,1, 3,5 Hz, 2H), 3,88 (t, J=4,4 Hz, 2H), 3,05 (d, J=5,4 Hz, 2H), 2,89 (s, 3H), 2,68 (m, 2H), las señales de los protones etileno se solaparon por DMSO, 2,22 (s, 3H). LCMS (Método E): 254 nm: 98,13 %, 220 nm: 98,44 %; 205 nm (máx. abs.): 98,51 %, t.r.= 2,867 min; m/z(+)= 563,13.
Ejemplo 30: N-{4-[7-(5-cloro-2-fluorofenil)-1H,2H,3H-pirido[3,4-b][1,4]oxazin-1-il]piridin-2-il}-3-[4-(2-metanosulfonamidoetil)piperazin-1-il}propenamida
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento usado para la síntesis del Ejemplo 8, partiendo del Producto intermedio 4 recién preparado (72 mg, 1,0 eq.), mediante el uso del Producto intermedio 32 (3,6 eq.) y una mezcla 1:1 de THF/DCM (6 ml) como solvente. La purificación mediante pTLC en gel de sílice que eluye con MeOH al 15 % en DCM, seguido de una purificación adicional mediante pTLC mediante el uso de hexano/THF/MeOH 4:4:3 (v:v:v) produjo el Ejemplo 30 (32 mg, Y = 29 %) como un polvo blanco. 1H NMR (400 MHz, DMSO-cfe) 5 10,73 (s, 1H), 8,32-8,19 (m, 2H), 8,13 (d, J=2,1 Hz, 1H), 7,93 (dd, J=6,9, 2,8 Hz, 1H), 7,61 (s, 1H), 7,46 (ddd, J=8,7, 4,1, 2,8 Hz, 1H), 7,30 (dd, J=11,0, 8,8 Hz, 1H), 7,06 (dd, J=5,7, 2,2 Hz, 1H), 6,84 (s, 1H), 4,39 (dd, J=5,1, 3,4 Hz, 2H), 3,87 (t, J=4,3 Hz, 2H), 3,03 (t, J=6,8 Hz, 2H), 2,91 (s, 3H), 2,60 (t, J=6,6 Hz, 2H), 2,39 (m, solapada parcialmente por DMSO, 12H). LCMS (Método K): 254 nm: 97,34 %, 220 nm: 97,35 %; 240 nm (máx. abs.): 97,80 %, t.r.= 1,753 min; m/z(+)= 618,01.
Ejemplo 31: 3-{4-[2-({4-[7-(5-cloro-2-fluorofenil)-1H,2H,3H-pirido[3,4-b][1,4]oxazin-1-il]piridin-2-il}carbamoil)etil]piperazin-1-il}-N-metilpropanamida
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento usado para la síntesis del Ejemplo 8, partiendo del Producto intermedio 4 recién preparado (65 mg, 1,0 eq.) y mediante el uso del Producto intermedio 33 (2,2 eq.). La purificación mediante HPLC preparativa mediante el uso de gradiente de ACN:agua con 0,1 % de ácido fórmico, seguido de neutralización con solución ac. sat. de NaHCO<3>produjo el Ejemplo 31 (17 mg, Y = 31 %) como un polvo blanco. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 5 10,74 (s, 1H), 8,33 -8,19 (m, 2H), 8,14 (d, J=2,2 Hz, 1H), 7,93 (dd, J=6,8, 2,8 Hz, 1H), 7,79 (d, J=5,0 Hz, 1H), 7,61 (s, 1H), 7,46 (dt, J=8,9, 3,6 Hz, 1H), 7,31 (dd, J=10,9, 8,8 Hz, 1H), 7,07 (dd, J=5,7, 2,2 Hz, 1H), 4,40 (t, J=4,3 Hz, 2H), 3,88 (t, J=4,4 Hz, 2H), 2,59 (d, J=6,1 Hz, 2H), 2,56 (m, J=4,7 Hz, 7H), 2,38 (br s, 8H), 2,20 (t, J=7,3 Hz, 2H). LCMS (Método B): 254 nm: 98,54 %, 220 nm: 98,50 %; 235 nm (máx. abs.): 98,77 %, t.r.= 1,600 min; m/z(+)= 582,26.
Ejemplo 32: N-{4-[7-(5-cloro-2-fluorofenil)-1H,2H,3H-pirido[3,4-b][1,4]oxazin-1-il]piridin-2-il}-3-(1 -metilpiperidin-4-il)propenamida
Se disolvió clorhidrato de ácido 3-(1-metilpiperidin-4-il)propanoico (30 mg, 1,0 eq.) en DMF (0,5 ml) y se le añadió HATU (1,2 eq.) seguido de DIPEA (4,0 eq.). La MR se agitó durante 30 min a TA y se añadió gota a gota el Ejemplo 3 (0,9 eq.), disuelto en DMF (0,2 ml). La MR se agitó a 100 °C durante 2 h. Se eliminaron los volátiles bajo presión reducida y el residuo se disolvió en DCM y se lavó con solución ac. sat. de NaHCO<3>y agua. Los compuestos orgánicos se secaron sobre Na<2>SO<4>, se filtraron y se eliminó el solvente bajo presión reducida. La purificación mediante HPLC preparativa mediante el uso de un gradiente de ACN:agua con 0,1 % de ácido fórmico, seguido de neutralización mediante el uso de solución ac. sat. de NaHCO<3>produjo el Ejemplo 32 (5 mg, Y = 8 %) como un polvo beige. 1H NMR (400 MHz, DMSO-cfe) 510,50 (s, 1H), 8,24 (d, J=5,7 Hz, 2H), 8,14 (d, J=2,1 Hz, 1H), 7,93 (dd, J=6,8, 2,8 Hz, 1H), 7,61 (s, 1H), 7,46 (ddd, J=8,8, 4,1, 2,8 Hz, 1H), 7,29 (dd, J=11,0, 8,8 Hz, 1H), 7,05 (dd, J=5,7, 2,2 Hz, 1H), 4,39 (t, J=4,4 Hz, 2H), 3,87 (t, J=4,4 Hz, 2H), 2,71 (d, J=11,2 Hz, 2H), 2,39 (t, J=7,5 Hz, 2H), 2,11 (s, 3H), 1,76 (t, J=10,6 Hz, 2H), 1,60 (d, J=9,9 Hz, 2H), 1,50 (q, J=7,0 Hz, 2H), 1,33-0,99 (m, 4H). LCMS (Método B): 254 nm: 93,96 %, 220 nm: 92,61 %; 235 nm (máx. abs.): 93,95 %, t.r.= 1,763 min; m/z(-)= 507,98.
Ejemplo 33: N-{4-[7-(5-ciclopropil-2-fluorofenil)-1H,2H,3H-pirido[3,4-b][1,4]oxazin-1 -il]piridin-2-il}-3-(4-metilpiperazin-1-il)propenamida
Siguiendo el procedimiento usado para la síntesis del Producto intermedio 4, partiendo del Ejemplo 12 (50 mg, 1,0 eq.), se preparó la acrilamida correspondiente y se hizo reaccionar con W-metilpiperazina (2,0 eq.) de acuerdo con el procedimiento descrito para la síntesis del Ejemplo 8. La purificación mediante pTLC en gel de sílice que eluye con DCM:MeOH (9:1) seguida de trituración en ACN produjo el Ejemplo 33 (20 mg, Y = 28 %) como un polvo blanco. 1H NMR (400 MHz, DMSO-da) 8 10,73 (s, 1H), 8,27-8,19 (m, 2H), 8,13 (d, J=2,2 Hz, 1H), 7,62-7,55 (m, 1H), 7,53 (s, 1H), 7,14-7,00 (m, 3H), 4,38 (t, J=4,3 Hz, 2H), 3,86 (t, J=4,4 Hz, 2H), 2,58 (d, J=6,0 Hz, 2H), 2,54-2,21 (br s, 10H), 2,13 (s, 3H), 1,98 (tt, J=8,5, 5,1 Hz, 1H), 0,98-0,90 (m, 2H), 0,70-0,62 (m, 2H). LCMS (Método B): 254 nm: 95,75 %, 220 nm: 96,94 %; 235 nm (máx. abs.): 96,85 %, t.r.= 1,577 min; m/z(-)= 517,26.
Ejemplo 34: N-(4-{7-[2-fluoro-5-(propan-2-il)fenil]-1H,2H,3H-pindo[3,4-b][1,4]oxazin-1-il}pmdin-2-il)-3-(4-metilpiperazin-1-il)propenamida
Siguiendo el procedimiento usado para la síntesis del Producto intermedio 4, partiendo del Ejemplo 13 (65 mg, 1,0 eq.), se preparó la acrilamida correspondiente y se hizo reaccionar con W-metilpiperazina (2,5 eq.) de acuerdo con el procedimiento descrito para la síntesis del Ejemplo 8. La purificación mediante pTLC en gel de sílice que eluye con DCM:MeOH (9:1) seguida de trituración en A<c>N y MeOH produjo el Ejemplo 34 (20 mg, Y = 28 %) como un polvo blanco. 1H NMR (400 MHz, DMSO-cfe) 810,72 (s, 1H), 8,28-8,21 (m, 2H), 8,14 (d, J=2,2 Hz, 1H), 7,74 (dd, J=7,8, 2,4 Hz, 1H), 7,54 (s, 1H), 7,25 (ddd, J=7,7, 4,7, 2,4 Hz, 1H), 7,12 (dd, J=11,3, 8,4 Hz, 1H), 7,05 (dd, J=5,7, 2,2 Hz, 1H), 4,38 (t, J=4,3 Hz, 2H), 3,87 (t, J=4,3 Hz, 2H), 2,94 (p, J=7,1 Hz, 1H), 2,58 (d, J=6,0 Hz, 2H), 2,54-2,21 (br s, 10H), 2,14 (s, 3H), 1,21 (d, J=6,9 Hz, 6H). LCMS (Método B): 254 nm: 97,58 %, 220 nm: 96,60 %; 240 nm (máx. abs.): 96,88 %, t.r.= 1,677 min; m/z(-)= 519,28.
Ejemplo 35: 3-{4-[2-({4-[7-(5-cloro-2-fluorofenil)-1H,2H,3H-pirido[3,4-b][1,4]oxazin-1-il]piridin-2-il}carbamoil)etil]piperazin-1-il}-N-(2-hidroxietil)propenamida
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento usado para la síntesis del Ejemplo 8, partiendo del Producto intermedio 4 recién preparado (100 mg, 1,0 eq.) y mediante el uso del Producto intermedio 34 (2,2 eq.). La purificación mediante HPLC preparativa mediante el uso de un gradiente de ACN:agua con 0,1 % de ácido fórmico, seguido de neutralización mediante el uso de solución ac. sat. de NaHCO<3>produjo el Ejemplo 35 (13 mg, Y = 15 %) como un polvo blanco. 1H NMR (400 MHz, Cloroformo-d) 88,31 (s, 1H), 8,20 (d, J=5,6 Hz, 1H), 8,08 (d, J=2,1 Hz, 1H), 7,96 (dd, J=6,8, 2,8 Hz, 1H), 7,64 (d, J=1,3 Hz, 1H), 7,29 (s, 1H), 7,09-7,00 (m, 2H), 4,42 (t, J=4,4 Hz, 2H), 3,93 3,87 (m, 2H), 3,80-3,73 (m, 2H), 3,45 (q, J=5,2 Hz, 2H), 3,00 (br s, 6H), 2,88 (br s, 6H), 2,67 (br s, 2H), 2,62 (br s, 2H). LCMS (Método K): 254 nm: 92,60 %, 220 nm: 93,23 %; 205 nm (máx. abs.): 92,81 %, t.r.= 1,670 min; m/z(-)= 612,11.
Ejemplo 36: 3-(4-{2-[bis(2-hidroxietil)amino]etil}piperazin-1-il)-N-[4-[7-(5-doro-2-fluorofenil)-1H,2H,3H-pirido[3,4-b][1,4]oxazin-1-il]piridin-2-il}propenamida
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento usado para la síntesis del Ejemplo 8, partiendo del Producto intermedio 4 recién preparado (100 mg, 1,0 eq.) y mediante el uso del Producto intermedio 35 (2,2 eq.). La purificación mediante HPLC preparativa mediante el uso de un gradiente de ACN:agua con 0,1 % de ácido fórmico, seguido de neutralización mediante el uso de solución ac. sat. de NaHCO<3>produjo el Ejemplo 36 (9 mg, Y = 10 %) como un polvo beige. 1H NMR (400 MHz, CDCla) 88,28 (s, 1H), 8,17 (d, J=5,7 Hz, 1H), 8,05 (d, J=2,2 Hz, 1H), 7,93 (dd, J=6,8, 2,8 Hz, 1H), 7,61 (d, J=1,3 Hz, 1H), 7,25-7,20 (m, 1H), 7,06-6,97 (m, 2H), 4,39 (dd, J=5,1, 3,7 Hz, 2H), 3,91-3,83 (m, 2H), 3,65 (s, 4H), 2,68 (señal ancha, 16H). LCMS (Método M): 254 nm: 92,34 %, 220 nm: 93,53 %, 240 nm (máx. abs.): 93,77 %; t.r.= 2,570 min; m/z(+)= 628,35.
Ejemplo 37: 3-[4-(2-carbamoiletil)piperazin-1-il]-N-{4-[7-(5-cloro-2-fluorofenil)-1H,2H,3H-pirido[3,4-b][1,4]oxazin-1-il]piridin-2-il}propenamida
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento usado para la síntesis del Ejemplo 8, partiendo del Producto intermedio 4 recién preparado (100 mg, 1,0 eq.) y mediante el uso del Producto intermedio 36 (2,1 eq.). La purificación mediante pTLC en gel de sílice que eluye con DCM:MeOH (85:15), seguida de trituración con ACN y MeOH produjo el Ejemplo 37 (38 mg, Y = 34 %) como un polvo beige. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 810,74 (s, 1H), 8,29-8,22 (m, 2H), 8,14 (d, J=2,1 Hz, 1H), 7,93 (dd, J=6,8, 2,8 Hz, 1H), 7,62 (s, 1H), 7,46 (ddd, J=8,7, 4,1, 2,8 Hz, 1H), 7,34 (s, 1H), 7,31 (dd, J=10,9, 8,8 Hz, 1H), 7,07 (dd, J=5,7, 2,2 Hz, 1H), 6,75 (s, 1H), 4,40 (t, J=4,4 Hz, 2H), 3,88 (t, J=4,2 Hz, 2H), 2,59 (m, 2H), 2,55-2,46 (señal solapada por DMSO, 6H) 2,39 (br s, 6H), 2,19 (t, J=7,2 Hz, 2H). LCMS (Método M): 254 nm: 98,39 %, 220 nm: 97,10 %, 240 nm (máx. abs.): 98,54 %; t.r.= 2,773 min; m/z(+)= 568,08.
Ejemplo 38: N-{4-[7-(6-cloro-3-fluoropiridin-2-il)-1H,2H,3H-pirido[3,4-b][1,4]oxazin-1 -il]piridin-2-il}-3-(4-metilpiperazin-1-il)propenamida
Siguiendo el procedimiento usado para la síntesis del Producto intermedio 4, partiendo del Ejemplo 7 (90 mg, 1,0 eq.), se preparó la acrilamida correspondiente y se hizo reaccionar con W-metilpiperazina (2,5 eq.) de acuerdo con el procedimiento descrito para la síntesis del Ejemplo 8. La purificación mediante pTLC en gel de sílice que eluye con DCM:MeOH (9:1) TEA al 0,1 % seguido de trituración en ACN produjo el Ejemplo 38 (45 mg, Y = 35 %) como un polvo beige. 1H NMR (400 MHz, DMSO-da) 8 10,75 (s, 1H), 8,29-8,21 (m, 2H), 8,10 (d, J=2,2 Hz, 1H), 7,90 (dd, J=10,2, 8,6 Hz, 1H), 7,75 (s, 1H), 7,57 (dd, J=8,6, 2,9 Hz, 1H), 7,09 (dd, J=5,7, 2,2 Hz, 1H), 4,42 (dd, J=5,1, 3,5 Hz, 2H), 3,88 (t, J=4,3 Hz, 2H), 2,58 (m, 2H), 2,52 (m, 2H, solapada por DMSO), 2,40 (br s, 4H), 2,30 (br s, 4H), 2,14 (s, 3H). LCMS (Método E): 254 nm: 99,59 %, 220 nm: 100,00 %, 240 nm (máx. abs.): 99,64 %; t.r.= 2,493 min; m/z(+)= 512,16.
Ejemplo 39: N-{4-[7-(6-cloro-3-fluoropiridin-2-il)-1H,2H,3H-pirido[3,4-b][1,4]oxazin-1-il]piridin-2-il}-3-(4-metilpiperazin-1-il)propenamida
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento usado para la síntesis del Producto intermedio 33, partiendo del Ejemplo 7 (30 mg, 1,0 eq.) y mediante el uso de clorhidrato de 3-(1-metilpiperidin-4-il)propanamida (35 mg, 2,0 eq.). La purificación mediante pTLC en gel de sílice que eluye con EtOAc: MeOH (10:1) TEA al 2,5 % produjo el Ejemplo 39 (13 mg, Y = 13 %) como un polvo beige. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 810,52 (s, 1H), 8,28 8,21 (m, 2H), 8,10 (d, J=2,1 Hz, 1H), 7,94-7,85 (m, 1H), 7,75 (s, 1H), 7,57 (dd, J=8,6, 2,9 Hz, 1H), 7,08 (dd, J=5,7, 2,2 Hz, 1H), 4,44-4,38 (m, 2H), 3,88 (t, J=4,4 Hz, 2H), 2,87 (m, 1H), 2,52 (pico solapado por DMSO), 2,39 (t, J=7,6 Hz, 2H), 2,26 (s, 2H), 1,65 (d, J=11,6 Hz, 2H), 1,49 (q, J=7,1 Hz, 2H), 1,18 (dd, J=27,2, 15,6 Hz, 4H). LCMS (Método M): 254 nm: 96,91 %, 220 nm: 96,39 %, 240 nm (máx. abs.): 97,29 %; t.r.= 2,673 min; m/z(+)= 510,90.
Ejemplo 40: N-{4-[7-(5-cloro-2-fluorofenil)-1H,2H,3H-pirido[3,4-b][1,4]oxazin-1-il]piridin-2-il}-3-metoxipropanamida
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento usado para la síntesis del Ejemplo 8, partiendo del Producto intermedio 4 recién preparado (220 mg, 1,0 eq.) y mediante el uso de MeOH (11,3 ml). La purificación mediante cromatografía en columna en gel de sílice que eluye con un gradiente de 0 a 50 % de MeOH en DCM seguido de p-TLC en gel de sílice que eluye con DCM:MeOH (9,5:0,5) TEA al 0,1 % produjo el Ejemplo 40 (18 mg, Y = 11 %) como un polvo beige. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 8 8,19 (s, 1H), 7,96 (d, J=5,7 Hz, 1H), 7,92 (dd, J=6,8, 2,8 Hz, 1H), 7,52 (d, J=1,0 Hz, 1H), 7,46 (ddd, J=8,7, 4,1, 2,8 Hz, 1H), 7,32 (dd, J=11,1, 8,8 Hz, 1H), 6,67 (t, J=5,8 Hz, 1H), 6,53 (dd, J=5,7, 2,0 Hz, 1H), 6,37 (d, J=2,0 Hz, 1H), 4,36 (dd, J=5,1, 3,5 Hz, 2H), 3,80 (t, J=4,3 Hz, 2H), 3,59 (s, 3H), 3,49 (q, J=6,5 Hz, 2H), 2,58 (t, J=6,8 Hz, 2H). LCMS (Método C): 254 nm: 96,37 %, 220 nm: 93,58 %, 240 nm (máx. abs.): 93,94 %; t.r.= 1,700 min; m/z(+)= 443,06.
Ejemplo 41: N-{4-[7-(2-cloro-5-fluoropiridin-4-il)-1H,2H,3H-pirido[3,4-b][1,4]oxazin-1-il]piridin-2-il}-3-(1-metilpiperidin-4-il)propenamida
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento usado para la síntesis del Producto intermedio 33, partiendo del Producto intermedio 41 (27 mg, 1,0 eq.) y mediante el uso de clorhidrato de 3-(1 -metilpiperidin-4-il)propanamida (2,0 eq.). La purificación mediante pTLC en gel de sílice que eluye con EtOAc:MeOH (9:1) TEA al 5 % produjo el Ejemplo 41 (11 mg, Y = 29 %) como un polvo blanco. 1H NMR (400 MHz, DMSO-da) 8 10,53 (s, 1H), 8,48 (d, J=2,7 Hz, 1H), 8,31-8,21 (m, 2H), 8,15 (d, J=2,2 Hz, 1H), 7,99 (d, J=5,7 Hz, 1H), 7,76 (s, 1H), 7,07 (dd, J=5,7, 2,2 Hz, 1H), 4,42 (t, J=4,3 Hz, 2H), 3,89 (t, J=4,5 Hz, 2H), 2,72 (d, J=11,2 Hz, 2H), 2,39 (d, J=7,5 Hz, 2H), 2,12 (s, 3H), 1,78 (br s, 2H), 1,60 (d, J=10,4 Hz, 2H), 1,50 (q, J=7,0 Hz, 2H), 1,18-1,07 (m, 3H). LCMS (Método L): 254 nm: 96,92%, 220 nm: 95,60 %, 235 nm (máx. abs.): 96,19 %; t.r.= 1,843 min; m/z(+)= 511,02.
Ejemplo 42: N-{4-[7-(2-cloro-5-fluoropiridin-4-il)-1H,2H,3H-pirido[3,4-b][1,4]oxazin-1-il]piridin-2-il}-3-(4-metilpiperazin-1-il)propenamida
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento usado para la síntesis del Ejemplo 8, partiendo del Producto intermedio 4 recién preparado (220 mg, 1,0 eq.) y mediante el uso de W-metilpiperazina (3,5 eq.). La purificación mediante pTLC en gel de sílice que eluye con EtOAc:MeOH (10:1) TEA al 2,5 % produjo el Ejemplo 42 (9 mg, Y = 21 %) como un polvo beige. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 810,75 (s, 1H), 8,48 (d, J=2,7 Hz, 1H), 8,32 8,24 (m, 2H), 8,14 (d, J=2,1 Hz, 1H), 7,99 (d, J=5,7 Hz, 1H), 7,75 (s, 1H), 7,07 (dd, J=5,7, 2,2 Hz, 1H), 4,42 (t, J=4,3 Hz, 2H), 3,92-3,85 (m, 2H), 2,60-2,50 (m, solapada por DMSO, 4H), 2,41 (br s, 4H), 2,30 (br s, 4H), 2,14 (s, 3H). LCMS (Método L): 254 nm: 88,46 %, 220 nm: 87,31 %, 205 nm (máx. abs.): 89,43 %; t.r.= 1,720 min; m/z(+)= 511,91.
Ejemplo 43: N-{4-[7-(5-cloro-2-fluorofenil)-1H,2H,3H-pirido[3,4-b][1,4]oxazin-1-il]piridin-2-il}-2-(4-metilpiperazin-1-il)acetamida
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento usado para la síntesis del Producto intermedio 3, partiendo del Producto intermedio 2 (200 mg, 1,0 eq.), mediante el uso del Producto intermedio 42 (2,0 eq.), XantfosPdG3 (0,2 eq.) y Cs<2>CO<3>(2,0 eq.). La purificación mediante cromatografía en columna en gel de sílice que eluye con un gradiente de 0 a 100 % de EtOAc TEA al 2,5 % en hexano seguido de trituración en MeOH produjo el Ejemplo 43 (88 mg, Y = 24 %) como un polvo blanco. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 89,93 (s, 1H), 8,30-8,22 (m, 2H), 8,12 (d, J=2,1 Hz, 1H), 7,92 (dd, J=6,8, 2,8 Hz, 1H), 7,63 (s, 1H), 7,45 (ddd, J=8,8, 4,1, 2,8 Hz, 1H), 7,30 (dd, J=11,0, 8,8 Hz, 1H), 7,10 (dd, J=5,7, 2,2 Hz, 1H), 4,42-4,37 (m, 2H), 3,88 (t, J=4,4 Hz, 2H), 3,16 (s, 2H), 2,53 (br s, 4H), 2,36 (br s, 4H), 2,17 (s, 3H). LCMS (Método K): 254 nm: 97,43 %, 220 nm: 97,52 %, 240 nm (máx. abs.): 97,46 %; t.r.= 1,737 min; m/z(+)= 497,18
Ejemplo 44: ácido 7-(5-doro-2-fluorofenil)-1-{2-[3-(4-metilpiperazin-1-il)propanamido]piridin-4-il}-1H,2H,3H-pirido[3,4-b][1,4]oxazina-5- carboxílico
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento usado para la síntesis del Ejemplo 43, mediante el uso de 28 mg del Producto intermedio 46 (28 mg, 1,0 eq.) y el Producto intermedio (2,0 eq.). La purificación mediante HPLC preparativa mediante el uso de un gradiente de ACN:agua con 0,1 % de ácido fórmico produjo el Ejemplo 44 (4 mg, Y = 10 %) como una sal doble de ácido fórmico en forma de un polvo blanco. 1H NMR (400 MHz, DMSO-cfe) 6 10,69 (s, 1H), 8,27 (s, 2H, 2 x formilo), 8,22 (d, J=5,7 Hz, 1H), 8,09 (d, J=2,2 Hz, 1H), 7,94 (dd, J=6,8, 2,8 Hz, 1H), 7,48 (s, 1H), 7,43 (dt, J=7,1, 3,4 Hz, 1H), 7,27 (dd, J=11,0, 8,7 Hz, 1H), 7,03 (dd, J=5,7, 2,2 Hz, 1H), 4,32 (d, J=4,8 Hz, 2H), 3,86-3,80 (m, 2H), 2,63-2,57 (m, 2H), 2,56-2,26 (señal ancha solapada por DMSO, 10H), 2,30 (s, 2H), 2,14 (s, 3H). LCMS (Método B): 254 nm: 98,12 %, 205 nm (máx.abs.): 98,18 %; t.r.= 1,477 min; m/z(+)= 555,18 Ejemplo 45: 4-[2-({4-[7-(5-cloro-2-fluorofenil)-1H,2H,3H-pirido[3,4-b][1,4]oxazin-1-il]piridin-2-il}carbamoil)etil]-1-metilpiperazin-2-carboxilato de metilo
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento usado para la síntesis del Producto intermedio 55, partiendo del Producto intermedio 2 (25 mg, 1,0 eq.) y mediante el uso del Producto intermedio 53 (1,1 eq.). La purificación mediante cromatografía ultrarrápida en NH mediante el uso de un gradiente de 0 a 60 % de EtOAc en c-Hex produjo el Ejemplo 45 (32 mg, Y = 60 %) como un sólido blanquecino. 1H NMR (400 MHz, DMSO-cfe) 6 ppm 10,60 (s, 1H), 8,24-8,26 (m, 1H), 8,24 (s, 1H), 8,12 (d, J=1,8 Hz, 1H), 7,92 (dd, J=6,7, 2,7 Hz, 1H), 7,60 (s, 1H), 7,41 7,51 (m, 1H), 7,30 (dd, J=Í1,0, 8,8 Hz, 1H), 7,06 (dd, J=5,7, 2,2 Hz, 1H), 4,31-4,48 (m, 2H), 3,78-3,94 (m, 2H), 3,59 (s, 3H), 2,91-2,99 (m, 1H), 2,65-2,75 (m, 1H), 2,47-2,64 (m, 4 H), 2,25-2,44 (m, 1H), 2,20 (s, 3H), 2,12-2,89 (m, 4 H). LC-MS (ESI): m /z (M+1): 569,4 (Método 2)
Ejemplo 46: 4-[2-({4-[7-(5-cloro-2-fluorofenil)-1H,2H,3H-pirido[3,4-b][1,4]oxazin-1-il]piridin-2-il}carbamoil)etil]piperazin-2-carboxilato de metilo
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento usado para la síntesis del Producto intermedio 52, partiendo del Producto intermedio 55 (80 mg, 1,0 eq.). La purificación mediante cromatografía ultrarrápida en NH mediante el uso de un gradiente de 0 a 2 % de MeOH en DCM produjo el Ejemplo 46 (49 mg, Y = 72 %) como un sólido vitreo blanco. 1H NMR (500 MHz, D M S O d ) 8 ppm 10,67 (s, 1H), 8,25 (d, J=5,7 Hz, 1H), 8,24 (s, 1H), 8,13 (d, J=1,5 Hz, 1H), 7,92 (dd, J=6,8, 2,8 Hz, 1H), 7,60 (s, 1H), 7,40-7,51 (m, 1H), 7,30 (dd, J=10,9, 8,8 Hz, 1H), 7,06 (dd, J=5,7, 2,1 Hz, 1H), 4,30-4,50 (m, 2H), 3,81-3,96 (m, 2H), 3,60 (s, 3H), 3,43 (dd, J=7,7, 2,9 Hz, 1H), 2,82-2,93 (m, 1H), 2,74 (br d, J=9,3 Hz, 1H), 2,56-2,66 (m, 3H), 2,44-2,55 (m, 3H), 2,40 (br s, 1H), 2,24-2,35 (m, 1H), 2,16 (br t, J=8,3 Hz, 1H). LC-MS (ESI): m /z (M+1): 555,4 (Método 2)
Ejemplo 47: 2-{4-[2-({4-[7-(5-cloro-2-fluorofenil)-1H,2H,3H-pirido[3,4-b][1,4]oxazin-1-il]piridin-2-il}carbamoil)etil]-1-metilpiperazin-2-il}acetato de metilo
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento usado para la síntesis del Producto intermedio 55, partiendo del Producto intermedio 2 (45 mg, 1,0 eq.) y mediante el uso del Producto intermedio 62 (1,1 eq.). La purificación mediante cromatografía ultrarrápida en NH mediante el uso de un gradiente de 0 a 60 % de EtOAc en c-Hex, seguida de cromatografía ultrarrápida en gel de sílice mediante el uso de un gradiente de 0 a 8 % de MeOH en DCM produjo el Ejemplo 47 (24 mg, Y = 24 %) como un sólido blanco. 1H NMR (400 MHz, D M S O d ) 8 ppm 10,91 (br s, 1H), 8,29 (s, 1H), 8,21 (d, J=5,5 Hz, 1H), 8,07 (d, J=2,0 Hz, 1H), 7,94 (dd, J=6,8, 2,6 Hz, 1H), 7,62 (s, 1H), 7,21-7,26 (m, 1H), 6,95-7,07 (m, 2H), 4,34-4,45 (m, 2H), 3,84-3,93 (m, 2H), 3,68 (s, 3H), 2,75 (br t, J=4,7 Hz, 2H), 2,52-2,57 (m, 2H), 2,31-2,42 (m, 3H), 2,27-3,10 (m, 9 H). LC-MS (ESI): m/z (M+1): 583,4 (Método 2)
Ejemplo 48: 2-{4-[2-({4-[7-(5-cloro-2-fluorofenil)-1H,2H,3H-pirido[3,4-b][1,4]oxazin-1-il]piridin-2-il}carbamoil)etil]piperazin-2-il}acetato de metilo
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento usado para la síntesis del Producto intermedio 52, partiendo del Producto intermedio 63 (105 mg, 1,0 eq.). La purificación mediante cromatografía ultrarrápida en NH mediante el uso de un gradiente de 0 a 2 % de MeOH en DCM produjo el Ejemplo 48 (60 mg, Y = 67 %) como un sólido blanco. 1H NMR (500 MHz, D M S O d ) 8 ppm 11,14 (s, 1H), 8,29 (s, 1H), 8,21 (d, J=5,6 Hz, 1H), 8,07 (d, J=2,1 Hz, 1H), 7,94 (dd, J=6,9, 2,7 Hz, 1H), 7,61 (d, J=0,8 Hz, 1H), 7,23-7,26 (m, 1H), 6,98-7,07 (m, 2H), 4,35-4,46 (m, 2H), 3,83-3,94 (m, 2H), 3,71 (s, 3H), 3,33-3,44 (m, 1H), 3,02-3,19 (m, 2H), 2,86-2,98 (m, 2H), 2,69-2,79 (m, 2H), 2,52-2,61 (m, 2H), 2,48 (br d, J=6,3 Hz, 2H), 2,23-2,31 (m, 1H), 2,02 (brt, J=10,1 Hz, 1H). LC-MS (ESI): m/z (M+1): 569,4 (Método 2)
Ejemplo 49: 1-[2-({4-[7-(5-doro-2-fluorofenil)-1H,2H,3H-pirido[3,4-b][1,4]oxazin-1-il]piridin-2-il}carbamoil)etil]-4-metilpiperazin-2-carboxilato de metilo
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento usado para la síntesis del Producto intermedio 55, partiendo del Producto intermedio 2 (25 mg, 1,0 eq.) y mediante el uso del Producto intermedio 53 (1,1 eq.). La purificación mediante cromatografía ultrarrápida en NH mediante el uso de un gradiente de 0 a 60 % de EtOAc en c-Hex produjo el Ejemplo 49 (46 mg, Y = 49 %) como un sólido blanco. 1H NMR (400 MHz, D M S O d ) 8 ppm 10,47 (s, 1H), 8,29 (s, 1H), 8,23 (d, J=5,7 Hz, 1H), 8,08 (d, J=2,1 Hz, 1H), 7,94 (dd, J=6,8, 2,7 Hz, 1H), 7,62 (d, J=0,8 Hz, 1H), 7,22-7,26 (m, 1H), 6,99-7,08 (m, 2H), 4,33-4,49 (m, 2H), 3,82-3,96 (m, 2H), 3,75 (s, 3H), 3,51 (br t, J=3,9 Hz, 1H), 3,10-3,37 (m, 2H), 2,81-3,04 (m, 2H), 2,75 (br dd, J=11,2, 3,1 Hz, 1H), 2,64 (br d, J=6,5 Hz, 2H), 2,42-2,57 (m, 3H), 2,33 (s, 3H). LC-MS (ESI): m/z (M+1): 569,0 (Método 2).
Ejemplo 50: 2-{1-[2-({4-[7-(5-cloro-2-fluorofenil)-1H,2H,3H-pirido[3,4-b][1,4]oxazin-1-il]piridin-2-il}carbamoil)etil]-4-metilpiperazin-2-il}acetato de metilo
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento usado para la síntesis del Producto intermedio 55, partiendo del Producto intermedio 2 (50 mg, 1,0 eq.) y mediante el uso del Producto intermedio 69 (1,1 eq.). La purificación mediante cromatografía ultrarrápida en NH mediante el uso de un gradiente de 0 a 60 % de EtOAc en c-Hex, seguida de cromatografía ultrarrápida en gel de sílice mediante el uso de un gradiente de 0 a 8 % de MeOH en DCM produjo el Ejemplo 49 (56 mg, Y = 51 %) como un sólido blanco. 1H NMR (400 MHz, D M S O d ) 8 ppm 10,74 (br s, 1H), 8,29 (s, 1H), 8,21 (d, J=5,6 Hz, 1H), 8,06 (d, J=2,0 Hz, 1H), 7,94 (dd, J=6,8, 2,6 Hz, 1H), 7,62 (d, J=0,9 Hz, 1H), 7,21-7,26 (m, 1H), 6,98-7,08 (m, 2H), 4,25-4,54 (m, 2H), 3,80-3,96 (m, 2H), 3,69 (s, 3H), 3,29 (br s, 1H), 2,40-3,03 (m, 12H), 2,31 (s, 3H). LC-MS (ESI): m/z (M+1): 583,4 (Método 2)
Ejemplo 51: N-{4-[5-amino-7-(5-cloro-2-fluorofenil)-1H,2H,3H-pirido[3,4-b][1,4]oxazin-1-il]piridin-2-il}-3-(4-metilpiperazin-1-il)propenamida
Se suspendió el Ejemplo 44 (20 mg, 1,0 eq.) en THF seco (1,0 ml) y T3P (solución al 50 % en EtOAc, 5,0 eq.), se añadieron TMSN<3>(5,0 eq.), TEA (5,0 eq.) y ferc-butanol (10 eq.). La MR se selló y se agitó a 78 °C durante 15 minutos. La MR se enfrió hasta TA y se repartió entre DCM y agua. La fase acuosa se alcalinizó mediante el uso de solución ac. de NaOH 6 M y se extrajo con DCM. Los compuestos orgánicos combinados se secaron sobre Na<2>SO<4>, se filtraron y se secaron bajo presión reducida. La purificación mediante HPLC preparativa en condiciones básicas mediante el uso de un gradiente de agua con NH<3>al 0,05 % y ACN produjo el Ejemplo 51 (4 mg, Y = 21 %) como un polvo blanco. 1H NMR (400 MHz, DMSO-da) 810,64 (s, 1H), 8,17 (d, J=5,7 Hz, 1H), 8,05 (d, J=2,1 Hz, 1H), 7,97 (dd, J=6,9, 2,8 Hz, 1H), 7,39 (ddd, J=8,6, 4,1, 2,8 Hz, 1H), 7,24 (dd, J=11,1, 8,7 Hz, 1H), 7,00-6,93 (m, 2H), 5,90 (s, 2H), 4,34 (t, J=4,3 Hz, 2H), 3,83 (t, J=3,9 Hz, 2H), 2,58 (d, J=6,1 Hz, 2H), 2,55-2,22 (m, 10H), 2,14 (s, 3H). LCMS (Método H): 254 nm: 98,77 %, 220 nm (máx. abs.): 96,58 %; t.r.= 2,623 min; m/z(+)= 526,37.
Ejemplo 52: N-{4-[7-(5-cloro-2-fluorofenil)-1H,2H,3H-pirido[3,4-b][1,4]oxazin-1-il]piridin-2-il}-2-{5-metil-2,5-diazabiciclo[2.2.1]heptan-2-il}acetamida
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento usado para la síntesis del Producto intermedio 3, partiendo del Producto intermedio 2 (9 mg, 1,0 eq.) y mediante el uso del Producto intermedio 70 (2,0 eq.), Cs<2>CO<3>(2,0 eq.) y XantfosPdG3 (0,2 eq.). La purificación mediante HPLC preparativa en condiciones básicas mediante el uso de un gradiente de agua con NH<3>al 0,05 % y ACN produjo el Ejemplo 52 (10,6 mg, Y = 43 %) como un polvo beige. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 89,88 (s, 1H), 8,26 (d, J=5,1 Hz, 2H), 8,11 (d, J=2,1 Hz, 1H), 7,91 (dd, J=6,8, 2,8 Hz, 1H), 7,62 (s, 1H), 7,46 (ddd, J=8,8, 4,1, 2,8 Hz, 1H), 7,31 (dd, J=11,0, 8,8 Hz, 1H), 7,11 (dd, J=5,7, 2,2 Hz, 1H), 4,39 (dd, J=5,1, 3,4 Hz, 2H), 3,88 (t, J=4,2 Hz, 2H), 3,31 (s, 2H), 3,17 (s, 1H), 2,76 (d, J=9,5 Hz, 1H), 2,69 (d, J=2,5 Hz, 2H), 2,58 (d, J=1,5 Hz, 2H), 2,26 (s, 3H), 1,63 (d, J=2,1 Hz, 2H). LCMS (Método E): 254 nm: 95,16 %, 240 nm (máx. abs.): 94,56 %, 220 nm: 93,91 %; t.r.= 1,743 min; m/z(+)= 509,14.
Ejemplo 53: N-{4-[7-(5-cloro-2-fluorofenil)-1H,2H,3H-pirido[3,4-b][1,4]oxazin-1-il]piridin-2-il}-2-{6-metil-2,6-diazaespiro[3,3]heptan-2-il}acetamida
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento usado para la síntesis del Producto intermedio 3, partiendo del Producto intermedio 2 (20 mg, 1,0 eq.) y mediante el uso del Producto intermedio 71 (2,0 eq.), Cs<2>CO<3>(2,0 eq.) y XantfosPdG3 (0,2 eq.). La purificación mediante TLC preparativa con sílice modificada con NH<2>que eluye con DCM/MeOH al 5 % produjo el Ejemplo 53 (6,0 mg, Y = 16 %) como un polvo blanco. 1H NMR (400 MHz, DMs O-d6) 89,95 (s, 1H), 8,25 (t, J=2,8 Hz, 2H), 8,07 (d, J=2,2 Hz, 1H), 7,91 (dd, J=6,8, 2,8 Hz, 1H), 7,61 (s, 1H), 7,46 (ddd, J=8,8, 4,2, 2,8 Hz, 1H), 7,31 (dd, J=11,0, 8,8 Hz, 1H), 7,09 (dd, J=5,7, 2,2 Hz, 1H), 4,43-4,34 (m, 2H), 3,87 (t, J=4,3 Hz, 2H), 3,33 (s, 2H, solapada por H2O), 3,23-3,11 (m, 8H), 2,13 (s, 3H). LCMS (Método E): 254 nm: 95,16 %, 240 nm (máx. abs.): 94,56 %, 220 nm: 93,91 %, ; t.r.= 1,743 min; m/z(+)= 509,14.
Ejemplo 54: N-{4-[7-(5-doro-2-fluorofenil)-1H,2H,3H-pirido[3,4-b][1,4]oxazin-1-il]piridin-2-il}-2-{2-metil-5-oxa-2,8-diazaespiro[3,5]nonan-8-il}acetamida
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento usado para la síntesis del Producto intermedio 3, partiendo del Producto intermedio 2 (31 mg, 1,0 eq.) y mediante el uso del Producto intermedio 72 (2,0 eq.), Cs<2>CO<3>(2,0 eq.) y XantfosPdG3 (0,2 eq.). La purificación mediante HPLC preparativa en condiciones básicas mediante el uso de un gradiente de agua con NH<3>al 0,05 % y ACN produjo el Ejemplo 54 (12 mg, Y = 19 %) como un polvo blanco. 1H NMR (400 MHz, DMSO-cfe)<8>10,04 (s, 1H), 8,29-8,23 (m, 2H), 8,14 (d, J=2,2 Hz, 1H), 7,92 (dd, J=<6>,<8>, 2,8 Hz, 1H), 7,64 (s, 1H), 7,45 (ddd, J=<8>,<8>, 4,1, 2,8 Hz, 1H), 7,31 (dd, J=11,0,<8 , 8>Hz, 1H), 7,11 (dd, J=5,7, 2,2 Hz, 1H), 4,40 (t, J=4,3 Hz, 2H), 3,89 (t, J=4,4 Hz, 2H), 3,55 (t, J=4,7 Hz, 2H), 3,21 (s, 2H), 2,78 (d, J=7,7 Hz, 2H), 2,62 (s, 2H), 2,53-2,51 (m, 4H), 2,24 (s, 3H). LCMS (Método F): 254 nm: 99,49 %, 240 nm (máx. abs.): 99,71 %, 220 nm: 99,86 %; t.r.= 1,860 min; m/z(+)= 539,19.
Ejemplo 55: 1 -(4-(7-(5-cloro-2-fluorofenil)-2,3-dihidro-1H-pirido[3,4-b][1,4]oxazin-1 -il)piridin-2-il)-3-(2-(4-metilpiperazin-<1>-il)etil)urea
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento usado para la síntesis del Producto intermedio 3, partiendo del Producto intermedio 2 (100 mg, 1,0 eq.) y mediante el uso del Producto intermedio 73 (1,5 eq.), Cs<2>COa (2,0 eq.) y XantfosPdG3 (0,2 eq.). La purificación mediante cromatografía ultrarrápida de fase inversa mediante el uso de un gradiente de 0 a 50 % de B en A (A:agua/ACN 95:5 0,1 % de ácido fórmico, B: ACN/agua 95:5 0,1 % de ácido fórmico) produjo el Ejemplo 55<( 8>mg, Y = 4 %) como un sólido amarillento. LC-MS (ESI): m/z (M+1): 526,3 (Método 1). 1H NMR (400 MHz, DMSO-d<6>)<8>9,24 (s, 1H), 8,27 (br s, 1H), 8,23 (s, 1H), 8,12 (d, J=5,70 Hz, 1H), 7,93 (dd, J=6,69, 1,86 Hz, 1H), 7,59 (s, 1H), 7,41-7,50 (m, 1H), 7,28-7,36 (m, 2H), 6,91 (br d, J=5,70 Hz, 1H), 4,34-4,42 (m, 2H), 3,78-3,90 (m, 2H), 3,23-3,27 (m, 2H), 2,40 (brt, J=6,03 Hz, 2H), 2,31-2,43 (m,<8>H), 2,16 (s, 3H).
Ejemplo 56: N-(3-(7-(5-cloro-2-fluorofenil)-5-(trifluorometil)-2,3-dihidro-1H-pirido[3,4-b][1,4]oxazin-1-il)fenil)-3-(4-metilpiperazin-<1>-il)propenamida
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento usado para la síntesis del Producto intermedio 3, partiendo del Producto intermedio 75 (40 mg, 1,0 eq.) y mediante el uso del Producto intermedio 47 (1,0 eq.). La purificación mediante cromatografía ultrarrápida de fase inversa mediante el uso de un gradiente de 0 a 50 % de B en A (A: agua/ACN 95:5 0,1 % de ácido fórmico, B: ACN/agua 95:5 0,1 % de ácido fórmico) produjo el Ejemplo 56 (7 mg, Y = 11 %) como un sólido amarillento. LC-MS (ESI): m/z (M+1): 579,1 (Método 1). 1H NMR (600 MHz, DMSO-da)<8>10,80 (s, 1H) 8,31 (d, J=5,64 Hz, 1H) 8,15 (s, 1H) 7,87 (dd, J=6,67, 2,82 Hz, 1H) 7,72 (s, 1H) 7,47-7,56 (m, 1H) 7,33 (dd, J=10,77, 8,85 Hz, 1H) 7,13 (dd, J=5,51, 2,18 Hz, 1H) 4,48-4,56 (m, 2H) 3,90-3,98 (m, 2H) 2,58 2,62 (m, 2H) 2,52-2,55 (m, 2H) 2,15-2,49 (m,<8>H) 2,14 (s, 3H).
Compuestos comparativos recién sintetizados que tienen un anillo heterocíclico de 5 miembros unido a la oxazina del anillo de pirido-oxazina, mientras que en esa posición, los compuestos de la presente invención muestran una piridina o piridina fusionada a un heterocicloalquilo de 5 miembros unido a la oxazina del anillo de pirido-oxazina: Ejemplo C1: 5-[7-(5-cloro-2-fluorofenil)-1H,2H,3H-pirido[3,4-b][1,4]oxazin-1-il]-1H-pirazol
El compuesto del titulo se preparó siguiendo el procedimiento usado para la síntesis del Producto intermedio 3, partiendo de 60 mg del Producto intermedio 2 (60 mg, 1,0 eq.) y mediante el uso del Producto intermedio 31 (1,15 eq.). La purificación mediante pTLC en gel de sílice que eluye dos veces con hexano:EtOAc (8:2) TEA al 1 % produjo un compuesto protegido por SEM (70 mg) como una mezcla de regioisómeros. El producto se disolvió en DCM (9,6 ml) y se le añadió TFA (3,0 ml). Después de 17 h, la MR se secó bajo presión reducida y el residuo se suspendió en una mezcla 1:1 de dioxano (12 ml) y solución ac. de NH<3>al 25 % (12 ml). Después de agitar durante 1 h, se eliminaron los volátiles y el residuo se lavó con agua y MeOH produciendo CHD-065479 (40 mg, Y= 53 %) como un polvo beige. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d<6>)<8>12,65 (s, 1H), 8,10 (s, 1H), 8,04 (d, J=1,4 Hz, 1H), 7,89 (dd, J=<6>,<8>, 2,8 Hz, 1H), 7,79 (t, J=1,9 Hz, 1H), 7,45 (ddd, J=<8>,<8>, 4,2, 2,8 Hz, 1H), 7,33 (dd, J=11,0,<8 , 8>Hz, 1H), 6,24 (t, J=2,1 Hz, 1H), 4,37 (dd, J=5,2, 3,7 Hz, 2H), 3,85 (t, J=4,5 Hz, 2H). LCMS (Método A): 210 nm: 94,02 %, 254 nm: 94,27 %; t.r.= 1,997 min; m/z(+)= 330,88.
Ejemplo C2: 5-[7-(5-cloro-2-fluorofenil)-1H,2H,3H-pirido[3,4-b][1,4]oxazin-1-il]-1,3-tiazol
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento usado para la síntesis del Producto intermedio 3, partiendo del Producto intermedio 2 (40 mg, 1,0 eq.) y mediante el uso de 5-bromo-1,3-tiazol (0,9 eq.). La purificación mediante HPLC preparativa mediante el uso de un gradiente de ACN:agua con 0,1 % de ácido fórmico produjo CHD-064783 (19 mg, Y= 36 %) como un polvo beige. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d<6>)<8>9,07 (d, J=0,8 Hz, 1H), 8,16 (s, 1H), 7,92 (d, J=0,8 Hz, 1H), 7,89 (dd, J=<6>,<8>, 2,8 Hz, 1H), 7,46 (ddd, J=<8>,<8>, 4,2, 2,8 Hz, 1H), 7,30 (dd, J=11,2,<8 , 8>Hz, 1H), 7,11 (d, J=1,2 Hz, 1H), 4,43 (dd, J=5,2, 3,7 Hz, 2H), 3,87-3,80 (m, 2H). LCMS (Método I): 254 nm: 99,45 %, 220 nm: 99,56 %; t.r.= 1,950 min; m/z(+)= 347,98.
Actividad farmacológica de los compuestos de la invención
Ensayo in vitro
La actividad enzimática de los compuestos de la presente invención se monitoreó mediante la medición de la formación de ADP mediante el uso del ensayo de quinasas ADP-GLO. Después de la incubación de la enzima purificada, un sustrato y ATP, el ADP producido se convirtió en ATP, que a su vez se convirtió en luz mediante la luciferasa Ultra-Glo. La señal luminiscente se correlacionó positivamente con la cantidad de ADP y la actividad de quinasa. Brevemente, la reacción de quinasa se realizó al incubar 2,6 nM de ALK5 humano purificado y disponible comercialmente (TGFp1 recombinante etiquetado con GST en el N-terminal, extremo-80), una concentración final de péptido TGFp1 de 94,5 pM (Promega, T36-58) y ATP ultrapuro (Promega V915B). La concentración de ATP se fijó en el valor Km (concentración de sustrato que permite que la enzima alcance la velocidad media máxima (Vmáx)) de ALK5 (5 pM). Todas las reacciones/incubaciones se realizaron a 25 °C. Se mezclaron el compuesto y la quinasa ALK5 y se incubaron durante 15 min. Las reacciones se iniciaron mediante la adición de ATP a una concentración final en el ensayo de 0,83 pM. Después de una incubación de 150 min, se detuvo la reacción y se detectó la producción de ADP con el kit ADP-Glo de acuerdo con las indicaciones del fabricante. El ensayo se realizó en formato de 384 pocillos y se validó mediante el uso de una selección de compuestos de referencia que se sometió a prueba en una curva de concentración-respuesta de 11 puntos.
Los resultados para compuestos individuales se proporcionan más abajo en la Tabla 4, en donde los compuestos se clasifican en términos de potencia (nM) con respecto a su actividad inhibidora sobre el receptor ALK5
Tabla 4
Como se puede apreciar, todos los compuestos de la Tabla 4 muestran una buena actividad como inhibidores del receptor ALK5.
Ejemplos comparativos
Los compuestos de los ejemplos C1 y C2 se sometieron a prueba en el mismo ensayo in vitro descrito anteriormente.
Tabla 5
Los compuestos de la presente invención, como se muestra en la Tabla 4, tienen una potencia incluso inferior a 1 nM, mientras que los ejemplos comparativos C1 y C2 tienen una potencia superior a 9000 nM e incluso muy superior.
Estos datos, ni siquiera comparables, demuestran que, a la inversa de los compuestos C1 y C2 caracterizados por un anillo de pirido-oxazina unido a un anillo heterocíclico de 5 miembros, en los compuestos de la presente invención, caracterizados por un anillo de oxazina unido a una piridina o piridina fusionada a un anillo heterocíclico de 5 miembros, la presencia de dicha piridina o piridina fusionada a un anillo heterocíclico de 5 miembros determina inesperada y notablemente un aumento relevante en la actividad inhibidora sobre el receptor ALK5.

Claims (5)

  1. REIVINDICACIONES 1. Un compuesto de fórmula general (I)
    en donde A se selecciona de los grupos que consisten en A1 y A2
    R<1>es H o se selecciona del grupo que consiste en -NR<3>C(O)R<4>y -NR<3>R<3>; X<1>y X<2>son independientemente N o CH; R<2>es arilo opcionalmente sustituido por uno o más grupos seleccionados de átomos de halógeno, -alquilo(C<1>-Ca), cicloalquilo y -haloalquilo(C<1>-C<4>) o R<2>es heteroarilo opcionalmente sustituido por uno o más átomos de halógeno; R<3>es H o -alquilo(CrCa); R<3>’ es H o -alquilo(C<1>-Ca); R<4>se selecciona del grupo que consiste en -alquilo(C-i-Ca), -NR<a>R<b>, -alquileno(C<1>-Ca)-NRARB, -alquileno(C-i-Ca)-O-alquilo(CrCa), -NHalquileno(C<1>-Ca)-heterocicloalquilo y -alquileno(C<1>-Ca)-heterocicloalquilo, en donde dicho heterocicloalquilo está opcionalmente sustituido por uno o más grupos seleccionados de oxo, alcoxi, -alquileno(C<1>-Ca)-OH, -C(O)O-alquilo(C<1>-Ca), -alquileno(C<1>-Ca)-C(O)O-alquilo(C<1>-Ca), -alquileno(C<1>-Ca)-C(O)NH-alquilo(C<1>-Ca), -alquileno(C<1>-Ca)-C(O)NH-alquilo(C<1>-Ca)-OH, -alquileno(C<1>-Ca)-NHSO<2>-alquilo(C<1>-Ca), -alquileno(C<1>-Ca)-CONH<2>, -alquileno(C<1>-Ca)-NRARB y -alquilo(C<1>-Ca); R<a>es H o se selecciona del grupo que consiste en -alquilo(C<1>-Ca), heterocicloalquilo e -hidroxialquilo(CrCa); R<b>se selecciona del grupo que consiste en -alquilo(C<1>-Ca), -alquileno(C<1>-Ca)-C(O)O-alquilo(C-i-Ca), heterocicloalquilo, -alquileno(C<1>-Ca)-heterocicloalquilo, -SO<2>-alquilo(C<1>-Ca), -alquileno(C<1>-Ca)-NH-SO<2>-alquilo(Cr Ca), -alquileno(C<1>-Ca)-SO<2>-alquilo(C<1>-Ca) e -hidroxialquilo(C<1>-Ca), en donde dicho heterocicloalquilo del alquileno-(C<1>-Ca)-heterocicloalquilo puede estar opcionalmente sustituido por uno o más -alquilo(C-i-Ca); R<5>es H o se selecciona del grupo que consiste en -NH<2>, -C(O)OH, -C(O)O-alquilo(C<1>-Ca), -haloalquilo(C<1>-Ca) y -OH; y sales farmacéuticamente aceptables de este.
  2. 2. El compuesto de fórmula (I) de acuerdo con la reivindicación 1, en donde A es grupo A1
    representado mediante la fórmula (la)
    Ri es H o se selecciona del grupo que consiste en -NR<3>C(O)R<4>y -NR<3>R<3>; R<2>es arilo opcionalmente sustituido por uno o más grupos seleccionados de átomos de halógeno, -alquilo(C<1>-Ca), cicloalquilo y -haloalquilo(C<1>-C<4>) o R<2>es heteroarilo opcionalmente sustituido por uno o más átomos de halógeno; R<3>es H o -alquilo(Ci-Ca); R<3>’ es H o -alquilo(Ci-Ca); R<4>se selecciona del grupo que consiste en -alquilo(Ci-Ca), -NRaRb, -alquileno(Ci-Ca)-NRARB, -alquileno(Ci-Ca)-O-alquilo(Ci-Ca), -NHalquileno(Ci-Ca)-heterocicloalquilo y -alquileno(Ci-Ca)-heterocicloalquilo, en donde dicho heterocicloalquilo está opcionalmente sustituido por uno o más grupos seleccionados de oxo, alcoxi, -alquileno(Ci-Ca)-OH, -C(O)O-alquilo(Ci-Ca), -alquileno(Ci-Ca)-C(O)O-alquilo(Ci-Ca), -alquileno(Ci-Ca)-C(O)NH-alquilo(Ci-Ca), -alquileno(Ci-Ca)-C(O)NH-alquilo(Ci-Ca)-OH, -alquileno(Ci-Ca)-NHSO<2>-alquilo(Ci-Ca), -alquileno(Ci-Ca)-CONH<2>, -alquileno(Ci-Ca)-NRARB y -alquilo(Ci-Ca); R<a>es H o se selecciona del grupo que consiste en -alquilo(Ci-Ca), heterocicloalquilo e -hidroxialquilo(Ci-Ca); R<b>se selecciona del grupo que consiste en -alquilo(Ci-Ca), -alquileno(Ci-Ca)- C(O)O-alquilo(Ci-Ca), heterocicloalquilo, -alquileno(Ci-Ca)-heterocicloalquilo, -SO<2>-alquilo(Ci-Ca), -alquileno(Ci-Ca)-NH-SO<2>-alquilo(Ci-Ca), -alquileno(Ci-Ca)-SO<2>-alquilo(Ci-Ca) e -hidroxialquilo(Ci-Ca), en donde dicho heterocicloalquilo del -alquileno(Ci-Ca)-heterocicloalquilo puede estar opcionalmente sustituido por uno o más -alquilo(Ci-Ca); R<5>es H o se selecciona del grupo que consiste en -NH<2>, -C(O)OH, -C(O)O-alquilo(Ci-Ca), -haloalquilo(Ci-Ca) y -OH; y sales farmacéuticamente aceptables de este.
  3. 3. El compuesto de fórmula (la) de acuerdo con la reivindicación 2, seleccionado de al menos uno de: 4-[7-(5-cloro-2-fluorofenil)-iH,2H,3H-pirido[3,4-b][i,4]oxazin-i-il]piridina; 7-(5-cloro-2-fluorofenil)-i-(piridin-4-il)-iH,2H,3H-pirido[3,4-b][i,4]oxazin-5-amina; 4-[7-(5-cloro-2-fluorofenil)-iH,2H,3H-pirido[3,4-b][i,4]oxazin-i-il]piridin-2-amina; 4-[7-(2,5-difluorofenil)-iH,2H,3H-pirido[3,4-b][i,4]oxazin-i-il]piridin-2-amina; 4-[7-(3-clorofenil)-iH,2H,3H-pirido[3,4-b][i,4]oxazin-i-il]piridin-2-amina; N-{4-[7-(5-cloro-2-fluorofenil)-iH,2H,3H-pirido[3,4-b][i,4]oxazin-i-il]piridin-2-il}acetamida; [7-(a-cloro-3-fluoropiridin-2-il)-iH,2H,3H-pirido[3,4-b][i,4]oxazin-i-il]piridin-2-amina; N-{4-[7-(5-cloro-2-fluorofenil)-iH,2H,3H-pirido[3,4-b][i,4]oxazin-i-il]piridin-2-il}-3-(morfolin-4-il)propanamida; N-{4-[7-(5-cloro-2-fluorofenil)-iH,2H,3H-pirido[3,4-b][i,4]oxazin-i-il]piridin-2-il}-3-(dimetilamino)propanamida; N-{4-[7-(5-cloro-2-fluorofenil)-iH,2H,3H-pirido[3,4-b][i,4]oxazin-i-il]piridin-2-il}-3-(piperazin-i-il)propanamida; 4-[7-(2-fluoro-5-metilfenil)-iH,2H,3H-pirido[3,4-b][i,4]oxazin-i-il]piridin-2-amina; 4-[7-(5-ciclopropil-2-fluorofenil)-iH,2H,3H-pirido[3,4-b][i,4]oxazin-i-il]piridin-2-amina; 4-{7-[2-fluoro-5-(propan-2-il)fenil]-iH,2H,3H-pirido[3,4-b][i,4]oxazin-i-il}piridin-2-amina; N-{4-[7-(5-cloro-2-fluorofenil)-iH,2H,3H-pirido[3,4-b][i,4]oxazin-i-il]piridin-2-il}-3-(4-metilpiperazin-iil)propanamida; 3-[bis(2-hidroxietil)amino]-N-{4-[7-(5-cloro-2-fluorofenil)-iH,2H,3H-pirido[3,4-b][i,4]oxazin-i-il]piridin-2-il}propanamida; N-{4-[7-(5-cloro-2-fluorofenil)-iH,2H,3H-pirido[3,4-b][i,4]oxazin-i-il]piridin-2-il}-3-[metil(oxetan-3-il)amino]propanamida; N-{4-[7-(5-cloro-2-fluorofenil)-iH,2H,3H-pirido[3,4-b][i,4]oxazin-i-il]piridin-2-il}-3-[(2-hidroxietil)(metil)amino]propanamida; 3-[bis(oxetan-3-il)amino]-N-{4-[7-(5-cloro-2-fluorofenil)-iH,2H,3H-pirido[3,4-b][i,4]oxazin-i-il]piridin-2-il}propanamida; N-{4-[7-(5-cloro-2-fluorofenil)-iH,2H,3H-pirido[3,4-b][i,4]oxazin-i-il]piridin-2-il}-3-(4-metil-3-oxopiperazin-iil)propanamida; 2-{[2-({4-[7-(5-cloro-2-fluorofenil)-iH,2H,3H-pirido[3,4-b][i,4]oxazin-i-il]piridin-2-il}carbamoil)etil](metil)amino}acetato de metilo; N-{4-[7-(5-cloro-2-fluorofenil)-iH,2H,3H-pirido[3,4-b][i,4]oxazin-i-il]piridin-2-il}-3-metanosulfonamidopropanamida; N-{4-[7-(5-cloro-2-fluorofenil)-iH,2H,3H-pirido[3,4-b][i,4]oxazin-i-il]piridin-2-il}-3-(4-metil-2-oxopiperazin-iil)propanamida; N-{4-[7-(5-doro-2-fluorofeml)-1H,2H,3H-pirido[3,4-b][1,4]oxazin-1-N]pindin-2-N}-3-[(2-metanosulfoniletil)amino]propanamida; N-{4-[7-(5-doro-2-fluorofeml)-1H,2H,3H-pirido[3,4-b][1,4]oxazin-1-N]pindin-2-N}-3-[(2-metanosulfoniletil)(metil)amino]propanamida; N-{4-[7-(5-doro-2-fluorofenil)-lH,2H,3H-pirido[3,4-b][1,4]oxazin-1-il]piridin-2-il}-3-[4-(2-hidroxietil)piperazin-1-il]propanamida; N-{4-[7-(5-doro-2-fluorofenil)-1H,2H,3H-pirido[3,4-b][1,4]oxazin-1-il]piridin-2-il}-3-[(2-metanosulfonamidoetil)(metil)amino]propanamida; N-{4-[7-(5-doro-2-fluorofenil)-1H,2H,3H-pirido[3,4-b][1,4]oxazin-1-il]piridin-2-il}-3-[4-(2-metanosulfonamidoetil)piperazin-1-il]propanamida; 3-{4-[2-({4-[7-(5-doro-2-fluorofenil)-lH,2H,3H-pirido[3,4-b][1,4]oxazin-1-il]piridin-2-il}carbamoil)etil]piperazin-1-il}-N-metilpropanamida; N-{4-[7-(5-doro-2-fluorofenil)-1H,2H,3H-pirido[3,4-b][1,4]oxazin-1-il]piridin-2-il}-3-(1-metilpiperidin-4-il)propanamida; N-{4-[7-(5-ciclopropil-2-1f1uorofenil)-1H,2H,3H-pirido[3,4-b][1,4]oxazin-1-il]piridin-2-il}-3-(4-metilpiperazin-1-il)propanamida; N-(4-{7-[2-fluoro-5-(propan-2-il)fenil]-1H,2H,3H-pirido[3,4-b][1,4]oxazin-1-il}piridin-2-il)-3-(4-metilpiperazin-1-il)propanamida; 3-{4-[2-({4-[7-(5-doro-2-fluorofenil)-1H,2H,3H-pirido[3,4-b][1,4]oxazin-1-il]piridin-2-il}carbamoil)etil]piperazin-1-il}-N-(2-hidroxietil)propanamida; 3-(4-{2-[bis(2-hidroxietil)amino]etil}piperazin-1-il)-N-{4-[7-(5-doro-2-fluorofenil)-1H,2H,3H-pirido[3,4-b][1,4]oxazin-1- il]piridin-2-il}propanamida; 3- [4-(2-carbamoiletil)piperazin-1-il]-N-{4-[7-(5-doro-2-fluorofenil)-1H,2H,3H-pirido[3,4-b][1,4]oxazin-1-il]piridin-2-il}propanamida; N-{4-[7-(6-doro-3-fluoropiridin-2-il)-1H,2H,3H-pirido[3,4-b][1,4]oxazin-1-il]piridin-2-il}-3-(4-metilpiperazin-1-il)propanamida; N-{4-[7-(6-doro-3-fluoropiridin-2-il)-1H,2H,3H-pirido[3,4-b][1,4]oxazin-1-il]piridin-2-il}-3-(1-metilpiperidin-4-il)propanamida; N-{4-[7-(5-doro-2-fluorofenil)-1H,2H,3H-pirido[3,4-b][1,4]oxazin-1-il]piridin-2-il}-3-metoxipropanamida; N-{4-[7-(2-doro-5-fluoropiridin-4-il)-1H,2H,3H-pirido[3,4-b][1,4]oxazin-1-il]piridin-2-il}-3-(1-metilpiperidin-4-il)propanamida; N-{4-[7-(2-doro-5-fluoropiridin-4-il)-1H,2H,3H-pirido[3,4-b][1,4]oxazin-1-il]piridin-2-il}-3-(4-metilpiperazin-1-il)propanamida; N-{4-[7-(5-doro-2-fluorofenil)-1H,2H,3H-pirido[3,4-b][1,4]oxazin-1-il]piridin-2-il}-2-(4-metilpiperazin-1-il)acetamida; ácido 7-(5-doro-2-fluorofenil)-1-{2-[3-(4-metilpiperazin-1-il)propanamido]piridin-4-il}-1H,2H,3H-pirido[3,4-b][1,4]oxazina-5-carboxílico; 4- [2-({4-[7-(5-doro-2-fluorofenil)-1H,2H,3H-pirido[3,4-b][1,4]oxazin-1-il]piridin-2-il}carbamoil)etil]-1-metilpiperazin-2- carboxilato de metilo; 4-[2-({4-[7-(5-cloro-2-fluorofenil)-1H,2H,3H-pirido[3,4-b][1,4]oxazin-1-il]piridin-2-il}carbamoil)etil]piperazin-2-carboxilato de metilo; 2-{4-[2-({4-[7-(5-cloro-2-fluorofenil)-1H,2H,3H-pirido[3,4-b][1,4]oxazin-1-il]piridin-2-il}carbamoil)etil]-1-metilpiperazin-2-il}acetato de metilo; 2-{4-[2-({4-[7-(5-cloro-2-fluorofenil)-1H,2H,3H-pirido[3,4-b][1,4]oxazin-1-il]piridin-2-il}carbamoil)etil]piperazin-2-il}acetato de metilo; 1- [2-({4-[7-(5-cloro-2-fluorofenil)-1H,2H,3H-pirido[3,4-b][1,4]oxazin-1-il]piridin-2-il}carbamoil)etil]-4-metilpiperazin-2- carboxilato de metilo; 2-{1-[2-({4-[7-(5-cloro-2-fluorofenil)-1H,2H,3H-pirido[3,4-b][1,4]oxazin-1-il]piridin-2-il}carbamoil)etil]-4-metilpiperazin-2-il}acetato de metilo; N-{4-[5-amino-7-(5-cloro-2-fluorofenil)-1H,2H,3H-pirido[3,4-b][1,4]oxazin-1-il]piridin-2-il}-3-(4-metilpiperazin-1-il)propanamida; N-{4-[7-(5-cloro-2-fluorofenil)-1H,2H,3H-pirido[3,4-b][1,4]oxazin-1-il]piridin-il}-2-{5-metil-2,5-diazabiciclo[2.2.1]heptan-2-il}acetamida; N-{4-[7-(5-cloro-2-fluorofenil)-1H,2H,3H-pirido[3,4-b][1,4]oxazin-1-il]piridin-2-il}-2-{6-metil-2,6-diazaespiro[3,3]heptan-2-il}acetamida; N-{4-[7-(5-cloro-2-fluorofenil)-1H,2H,3H-pirido[3,4-b][1,4]oxazin-1-il]piridin-2-il}-2-{2-metil-5-oxa-2,8-diazaespiro[3,5]nonan-8-il}acetamida; 1-(4-(7-(5-cloro-2-fluorofenil)-2,3-dihidro-1H-pirido[3,4-b][1,4]oxazin-1-il)piridin-2-il)-3-(2-(4-metilpiperazin-1-il)etil)urea; N-(3-(7-(5-cloro-2-fluorofenil)-5-(trifluorometil)-2,3-dihidro-1H-pirido[3,4-b][1,4]oxazin-1-il)fenil)-3-(4-metilpiperazin-1-il)propanamida.
  4. 4. El compuesto de fórmula (Ia) de acuerdo con la reivindicación 2, en donde A es A1a
    representado mediante la fórmula (laa)
    Ri se selecciona del grupo que consiste en -NR<3>C(O)R<4>y -NR<3>R<3>; R<2>es arilo opcionalmente sustituido por uno o más grupos seleccionados de átomos de halógeno, -alquilo(C<1>-Ca), cicloalquilo y -haloalquilo(C<1>-C<4>) o R<2>es heteroarilo opcionalmente sustituido por uno o más átomos de halógeno; R<3>es H o -alquilo(Ci-Ca); R<3>’ es H o -alquilo(Ci-Ca); R<4>se selecciona del grupo que consiste en -alquilo(Ci-Ca), -NRaRb, -alquileno(Ci-Ca)-NRARB, -alquileno(Ci-Ca)-0 - alquilo(Ci-Ca), -NHalquileno(Ci-Ca)-heterocicloalquilo y -alquileno(Ci-Ca)-heterocicloalquilo, en donde dicho heterocicloalquilo está opcionalmente sustituido por uno o más grupos seleccionados de oxo, alcoxi, -alquileno(C1-Ca)-OH, -C(O)O-alquilo(C1-Ca), -alquileno(C1-Ca)-C(O)O-alquilo(C1-Ca), -alquileno(C1-Ca)-C(O)NH-alquilo(Ci-Ca), -alquileno(Ci-Ca)-C(O)NH-alquilo(Ci-Ca)-OH, -alquileno(Ci-Ca)-NHSO<2>-alquilo(Ci-Ca), -alquileno(Ci-Ca)-CONH<2>, -alquileno(Ci-Ca)-NRARB y -alquilo(Ci-Ca); Ra es H o se selecciona del grupo que consiste en -alquilo(Ci-Ca), heterocicloalquilo e -hidroxialquilo(Ci-Ca); R<b>se selecciona del grupo que consiste en -alquilo(Ci-Ca), -alquileno(Ci-Ca)- C(O)O-alquilo(Ci-Ca), heterocicloalquilo, -alquileno(Ci-Ca)-heterocicloalquilo, -SO<2>-alquilo(Ci-Ca), -alquileno(Ci-Ca)-NH-SO<2>-alquilo(Ci-Ca), -alquileno(Ci-Ca)-SO<2>-alquilo(Ci-Ca) e -hidroxialquilo(Ci-Ca), en donde dicho heterocicloalquilo del -alquileno(C<1>-Ca)-heterocicloalquilo puede estar opcionalmente sustituido por uno o más -alquilo(C<1>-Ca); R<5>es H o se selecciona del grupo que consiste en -NH<2>, -C(O)OH, -C(O)O-alquilo(Ci-C<3>), -haloalquilo(Ci-Ca) y -OH; y sales farmacéuticamente aceptables de este.
  5. 5. El compuesto de fórmula (laa) de acuerdo con la reivindicación 4, en donde Ri es -NHC(O)R4; R<4>se selecciona del grupo que consiste en metilo, 4-etilmorfolina, (dimetilamino)etilo, 4-etilpiperazina, 1 -etil-4-metilpiperazina, 2-[bis(2-hidroxietil)amino]etilo, -[(2-hidroxietil)(metil)amino]etilo, 3-[bis(oxetan-3-il)amino]etilo, -3-(4-metil-3-oxopiperazin-1-il)etilo, metil-2-(etil(metil)amino)acetato, -etilmetanosulfonamida, -3-(4-metil-2-oxopiperazin-1-il)etilo, -3-[(2-metanosulfoniletil)amino]etilo, -3-[(2-metanosulfoniletil)(metil)amino]etilo, -3-[4-(2-hidroxietil)piperazin-1-il]etilo, -3-[(2-metanosulfonamidoetil)(metil)amino]etilo, -3-[4-(2-metanosulfonamidoetil)piperazin-1-il]etilo, -(4-etilpiperazin-1-il)-N-metilpropanamida, -3-(1-metilpiperidin-4-il)etilo, -(4-etil)piperazin-1-il-N-(2-hidroxietil)propanamida, 3-(4-{2-[bis(2-hidroxietil)amino]etil}piperazin-1-il)etilo, 3-[4-(2-carbamoiletil)piperazin-1-il]etilo, -3-metoxietilo, -2-(4-metilpiperazin-1-il)metilo, 4-(etil)-1-metilpiperazin-2-carboxilato de metilo, 4-(etil)-piperazin-2-carboxilato de metilo, 2-[4-(etil)-1-metilpiperazin-2-il]acetato de metilo, 2-[4-(etil)-piperazin-2-il]acetato de metilo, 1-(etil)-4-metilpiperazin-2-carboxilato de metilo, 2-[1-(etil)-4-metilpiperazin-2-il]acetato de metilo, 2-{5-metil-2,5-diazabiciclo[2.2.1]heptan-2-il}metilo, 2-{a-metil-2,adiazaespiro[3,3]heptan-2-il}metilo, 2-{2-metil-5-oxa-2,8-diazaespiro[3,5]nonan-8-il}metilo y -3-(2-(4-metilpiperazin-1- il)etil)urea. a. El compuesto de fórmula (I) de acuerdo con la reivindicación 1, en donde A es A2
    representado mediante la fórmula (Ib)
    Xi y X<2>son independientemente N o CH; R<2>es arilo opcionalmente sustituido por uno o más grupos seleccionados de átomos de halógeno, -alquilo(C<1>-Ca), cicloalquilo y -haloalquilo(C<1>-C<4>) o R<2>es heteroarilo opcionalmente sustituido por uno o más átomos de halógeno; R<5>es H; y sales farmacéuticamente aceptables de este. 7. El compuesto de fórmula (Ib) de acuerdo con la reivindicación 6, seleccionado de al menos uno de: 7-(5-cloro-2-fluorofenil)-1-{1H-pirazolo[3,4-b]piridin-4-il}-1H,2H,3H-pirido[3,4-b][1,4]oxazina; 7-(5-cloro-2-fluorofenil)-1-{1H-pirrolo[2,3-b]piridin-4-il}-1H,2H,3H-pirido[3,4-b][1,4]oxazina; 7-(5-cloro-2-fluorofenil)-1-{3H-imidazo[4,5-b]piridin-7-il}-1H,2H,3H-pirido[3,4-b][1,4]oxazina. 8. Una composición farmacéutica que comprende un compuesto de fórmula (I) de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 7, en una mezcla con uno o más portadores o excipientes farmacéuticamente aceptables. 9. La composición farmacéutica de acuerdo con la reivindicación 8, para la administración por inhalación. 10. Un compuesto de fórmula (I) de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 7, o una composición farmacéutica de acuerdo con las reivindicaciones 8 y 9, para su uso como un medicamento. 11. Un compuesto de fórmula (I) o una composición farmacéutica para su uso de acuerdo con la reivindicación 10 en la prevención y/o tratamiento de una enfermedad, trastorno o afección mediada por la vía de señalización de ALK5 en un mamífero. 12. Un compuesto de fórmula (I) o una composición farmacéutica para su uso de acuerdo con las reivindicaciones 10 y 11 en la prevención y/o tratamiento de la fibrosis y/o enfermedades, trastornos o afecciones que implican fibrosis. 13. Un compuesto de fórmula (I) o una composición farmacéutica para su uso de acuerdo con la reivindicación 12 en la prevención y/o tratamiento de la fibrosis, que incluye fibrosis pulmonar, fibrosis pulmonar idiopática (IPF), fibrosis hepática, fibrosis renal, fibrosis ocular, fibrosis cardiaca, fibrosis arterial y esclerosis sistémica. 14. Un compuesto de fórmula (I) o una composición farmacéutica para su uso de acuerdo con la reivindicación 13 en la prevención y/o tratamiento de la fibrosis pulmonar idiopática (IPF).
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