ES2982308T3 - Péptido novedoso y composición farmacéutica para tratar una enfermedad ocular que comprende el mismo como un ingrediente farmacéutico activo - Google Patents

Péptido novedoso y composición farmacéutica para tratar una enfermedad ocular que comprende el mismo como un ingrediente farmacéutico activo Download PDF

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Abstract

La presente invención se refiere a un nuevo péptido y a una composición farmacéutica para el tratamiento de enfermedades oculares que comprende el nuevo péptido como ingrediente activo. Cuando el nuevo péptido de la presente invención se aplica a un ojo, aumenta la cantidad de secreción lagrimal y se cura una córnea dañada, de modo que el nuevo péptido puede utilizarse eficazmente como agente terapéutico para enfermedades oculares. (Traducción automática con Google Translate, sin valor legal)

Description

D E S C R IP C IÓ N
P ép tido n oved oso y co m p o s ic ió n fa rm a c é u tic a para tra ta r una e n fe rm e d a d o cu la r que co m p re n d e el m ism o com o un in g re d ie n te fa rm a c é u tic o a c tivo
C a m p o té cn ico
La p re se n te in ve n c ió n se re fie re a n u e vo s p é p tid o s y co m p o s ic io n e s fa rm a c é u tic a s para tra ta r e n fe rm e d a d e s o cu la re s q ue c o m p re n d e n los m ism o s com o un in g re d ie n te fa rm a c é u tic o activo .
T é cn ica a n te ce d e n te
El s ín d ro m e de l o jo seco o q u e ra to co n ju n tiv it is seca se p ue de defin ir, en un sen tido a m p lio , com o d año a la su p e rfic ie o c u la r d e b id o a tra s to rn o s de se c re c ió n lag rim a l (Jo ossen Ce t al., Exp. Eye Res.,146 :172 -8 , 2016). S e sa b e q ue el s ín d ro m e de l o jo se co ca u sa tra s to rn o s de s e c re c ió n la g rim a l y d a ñ o s e in c o m o d id a d e s en el g lo b o o c u la r d eb ido a una c o m b in a c ió n de va r io s fac to res . A u n q u e el in ic io de l s ín d ro m e de l o jo seco está e s tre ch a m e n te re la c io n a d o con la edad , la in c id e n c ia de l m ism o e stá a u m e n ta n d o en los g ru p o s de e da d m ás jó v e n e s d e b id o a una e xp o s ic ió n a la rgo p la zo a un a m b ie n te seco com o el uso de len tes de co n ta c to , c o m p u ta d o ra s y d isp o s itivo s in te lig e n te s (S te rn M Ee t al., Int. Rev. Im m unol.,32: 19 -41 ,2013 ).
E sp e c ífica m e n te , el s ín d rom e de l o jo seco re du ce la sec re c ió n de m o co de los e p ite lio s co rn e a le s y c o n ju n tiva le s y e l de las cé lu la s c a lic ifo rm e s s e c re to ra s de m oco , lo q ue re su lta en una fu e rte d is m in u c ió n de la lub rica c ió n de l g lo b o ocu lar. A d e m á s , el s ín d ro m e del o jo seco cau sa dañ o a la su p e rfic ie co rne a l, lo que a u m e n ta la p en e tra c ió n de un tin te de f lu o re sce ín a en la có rne a . E stos s ín to m a s del s ín d ro m e del o jo seco se p ue de n e va lu a r com o ca m b io s en la sec re c ió n lag rim a l a tra vé s de la p rue b a de S ch irm er, que usa p ap e l de c lo ru ro de cob a lto . A d e m á s, el dañ o a la có rne a que puede a co m p a ñ a r al s ín d ro m e de l o jo seco se p uede e v a lu a r fá c ilm e n te u sa nd o un tin te f lu o re sce n te g en e ra l y un flu o ro fo tó m e tro con lá m p a ra de h en d id u ra .
M ie n tra s tan to , la m a yo ría de los tra ta m ie n to s para el s ín d ro m e de l o jo seco se lim itan a las te ra p ia s de s ín to m a s , cuya e fica c ia de l tra ta m ie n to a m e nu do es m u y baja. A c tu a lm e n te , las lá g rim a s a rtific ia le s son la p rim e ra o pc ión para el tra ta m ie n to de l s ín d ro m e de l o jo seco . D ado que las lá g rim a s a rtific ia le s co m o te ra p ia s in to m á tica re p re se n ta tiva s im p le m e n te co m p le m e n ta n las lág rim as insu fic ie n te s ; ade m ás, su fren la d esven ta ja de que d eb en a d m in is tra rse a los o jos con fre cu e n c ia (K im C Se t al., N utrients8. pii: E 750 , 2016 ). El h ia lu ro n a to de sod io y las g o tas o cu la re s d e riva d a s de l sue ro a u tó lo g o se han d e sa rro lla d o y usa do en p a c ie n te s con s ín d ro m e de o jo seco . A d e m á s, se han d e sa rro lla d o y usado co m p u e s to s s in té tico s com o re b a m ip id a (O P C -127959 ) y d iq u a fo so l sód ico , que p rom ue ve n la sec re c ión de lág rim as y m oco. S in e m ba rg o , el uso a la rgo p lazo de e s to s m e d ica m e n to s p uede d a r lu g a r a d ive rso s e fe c to s se cu n d a rio s , ta le s com o h ip e re m ia o c u la r y c a lc if ica c ió n co rn e a l (B e rn a u e r Wet al., Br. J. O phthalm ol.,90: 285 -8 , 2006 ). P o r lo tan to , ha h ab ido una d e m a n d a para el d e s a rro llo de un a g e n te te ra p é u tico se g u ro y e fe c tivo p a ra tra ta r e l s ín d ro m e del o jo seco .
El d o cu m e n to W O 2017 /018613 d e sc rib e co m p o s ic io n e s fa rm a c é u tic a s para p re v e n ir o tra ta r los o jo s secos.
D ivu lg a c ió n de la in ve nc ión
P ro b le m a a re s o lv e r p o r la inve nc ión
P o r lo tan to , los p rese n te s inve n to re s se han e s fo rza d o p o r d e sa rro lla r a ge n tes te ra p é u tico s se g u ro s y e fe c tivo s para tra ta r una e n fe rm e d a d o cu la r y, co m o re su ltad o , co m p le ta ro n la p rese n te in ve n c ió n m e d ia n te la s ín te s is de n u e vo s pép tid os , a d m in is trá n d o lo s a los o jos de ra tas con s ín d ro m e de o jo seco y co n firm a n d o el e fe c to de p ro te cc ió n o c u la r a tra vé s de la p ru e b a de S c h irm e r y la p ru e b a de d e p o s ic ió n de tin te flu o re sce n te .
M e d io s para re s o lv e r e l p ro b le m a
P ara lo g ra r e l o b je to de la p re se n te inve nc ión , un a sp e c to de la p re se n te inve nc ión p ro p o rc io n a un co m p u e s to s e le c io n a d o de la s ig u ie n te ta b la
A d e m á s, o tro a sp e c to m ás de la p re se n te inve nc ión p ro p o rc io n a una co m p o s ic ió n fa rm a cé u tica para tra ta r una e n fe rm e d a d ocu lar, que co m p re n d e el co m p u e s to o el pép tido co m o se d e fine a n te r io rm e n te un ing re d ie n te fa rm a c é u tic o activo.
A d e m á s, o tro a sp ec to m ás de la p rese n te inve nc ión p ro p o rc io n a un co m p u e s to o el pép tid o com o se d e fine a n te r io rm e n te para uso en el tra ta m ie n to de una e n fe rm e d a d ocu lar.
E fe c to s de la inve nc ión
C u a n d o un p é p tid o n o ve d o so de la p re se n te inve n c ió n se a d m in is tra al ojo, a u m e n ta la can tid a d de sec re c ión la g rim a l y la re cu p e ra c ió n p ro m u e ve la re cu p e ra c ió n de la có rn e a dañada . P o r lo tan to , pueden u sa rse v e n ta jo sa m e n te co m o a g e n te s te ra p é u tico s p ara tra ta r e n fe rm e d a d e s o cu la res .
B re ve d e sc rip c ió n de las fig u ra s
La fig u ra 1 es un d ia g ra m a que m u e s tra la se cu e n c ia y las c a ra c te rís tica s de los p é p tid o s p re p a ra d o s de a cu e rd o con una re a liza c ió n de la p re se n te invenc ión .
La fig u ra 2 es un d ia g ram a que m u es tra un p roce so para s in te tiz a r los p é p tid os p rep a rad o s de a cu e rd o con una re a liza c ió n de la p re se n te inve nc ión .
La fig u ra 3 es un d ia g ra m a que m u es tra un p ro ce d im ie n to de p urificac ió n de los p é p tid o s p re p a ra d o s de a cu e rd o con una re a liza c ió n de la p re se n te invenc ión .
La fig u ra 4 es un d ia g ra m a q ue co n firm a la p u re za de Y D E -001 p re p a ra d o de a cu e rd o con una re a liza c ió n de la p re se n te inve nc ión a tra vé s de H PLC .
La fig u ra 5 es un d ia g ra m a q ue co n firm a la p u re za de Y D E -002 p re p a ra d o de a cu e rd o con una re a liza c ió n de la p re se n te inve nc ión a tra vé s de H PLC .
La fig u ra 6 es un d ia g ra m a q ue co n firm a la p u re za de Y D E -003 p re p a ra d o de a cu e rd o con una re a liza c ió n de la p re se n te inve nc ión a tra vé s de H PLC .
La fig u ra 7 es un d ia g ra m a q ue co n firm a la p u re za de Y D E -004 p re p a ra d o de a cu e rd o con una re a liza c ió n de la p re se n te inve nc ión a tra vé s de H PLC .
La fig u ra 8 es un d ia g ra m a q ue co n firm a la p u re za de Y D E -005 p re p a ra d o de a cu e rd o con una re a liza c ió n de la p re se n te inve nc ión a tra vé s de H PLC .
La fig u ra 9 es un d ia g ra m a q ue co n firm a la p u re za de Y D E -006 p re p a ra d o de a cu e rd o con una re a liza c ió n de la p re se n te inve n c ió n a tra vé s de H PLC.
La figu ra 10 es un d ia g ra m a q ue co n firm a la p u re za de Y D E -007 p rep a rad o de a cu e rd o con una re a liza c ió n de la p re se n te inve nc ión a tra vé s de H PLC .
La figu ra 11 es un d ia g ra m a q ue co n firm a la p u re za de Y D E -008 p rep a rad o de a cu e rd o con una re a liza c ió n de la p re se n te inve n c ió n a tra vé s de H PLC .
La figu ra 12 es un d ia g ra m a q ue co n firm a la p u re za de Y D E -009 p rep a rad o de a cu e rd o con una re a liza c ió n de la p re se n te inve nc ión a tra vé s de H PLC .
La figu ra 13 es un d ia g ra m a q ue co n firm a la p u re za de Y D E -010 p rep a rad o de a cu e rd o con una re a liza c ió n de la p re se n te inve nc ión a tra vé s de H PLC .
La figu ra 14 es un d ia g ra m a q ue co n firm a la p u re za de Y D E -011 p rep a rad o de a cu e rd o con una re a liza c ió n de la p re se n te inve nc ión a tra vé s de H PLC .
La figu ra 15 es un d ia g ra m a q ue co n firm a la p ureza de Y D E -012 p rep a rad o de a cu e rd o con una re a liza c ió n de la p re se n te inve nc ión a tra vé s de H PLC .
La figu ra 16 es un d ia g ra m a q ue co n firm a la p u re za de Y D E -013 p rep a rad o de a cu e rd o con una re a liza c ió n de la p re se n te inve nc ión a tra vé s de H PLC .
La figu ra 17 es un d ia g ra m a q ue co n firm a la p u re za de Y D E -014 p rep a rad o de a cu e rd o con una re a liza c ió n de la p re se n te inve nc ión a tra vé s de H PLC .
La figu ra 18 es un d ia g ra m a q ue co n firm a la p u re za de Y D E -015 p rep a rad o de a cu e rd o con una re a liza c ió n de la p re se n te inve nc ión a tra vé s de H PLC .
La figu ra 19 es un d ia g ra m a q ue co n firm a la p u re za de Y D E -016 p rep a rad o de a cu e rd o con una re a liza c ió n de la p re se n te inve nc ión a tra vé s de H PLC .
La figu ra 20 es un d ia g ra m a q ue co n firm a la p ureza de Y D E -017 p rep a rad o de a cu e rd o con una re a liza c ió n de la p re se n te inve nc ión a tra vé s de H PLC .
La figu ra 21 es un d ia g ra m a q ue co n firm a la p u re za de Y D E -018 p rep a rad o de a cu e rd o con una re a liza c ió n de la p re se n te inve n c ió n a tra vé s de H PLC.
La figu ra 22 es un d ia g ra m a q ue co n firm a la p u re za de Y D E -019 p rep a rad o de a cu e rd o con una re a liza c ió n de la p re se n te inve nc ión a tra vé s de H PLC .
La figu ra 23 es un d ia g ra m a q ue co n firm a la p u re za de Y D E -020 p rep a rad o de a cu e rd o con una re a liza c ió n de la p re se n te inve nc ión a tra vé s de H PLC .
La figu ra 24 es un d ia g ra m a q ue co n firm a la p u re za de Y D E -021 p rep a rad o de a cu e rd o con una re a liza c ió n de la p re se n te inve nc ión a tra vé s de H PLC .
La figu ra 25 es un d ia g ra m a q ue co n firm a la p u re za de Y D E -022 p re p a ra d o de a cu e rd o con una re a liza c ió n de la p re se n te inve nc ión a tra vé s de H PLC .
La figu ra 26 es un d ia g ra m a q ue co n firm a la p u re za de Y D E -023 p rep a rad o de a cu e rd o con una re a liza c ió n de la p re se n te inve nc ión a tra vé s de H PLC .
La figu ra 27 es un d ia g ra m a que co n firm a la p ureza de Y D E -024 p rep a rad o de a cu e rd o con una re a liza c ió n de la p re se n te inve nc ión a tra vé s de H PLC .
La figu ra 28 es un d ia g ra m a q ue co n firm a la p u re za de Y D E -025 p rep a rad o de a cu e rd o con una re a liza c ió n de la p re se n te inve n c ió n a tra vé s de H PLC.
La figu ra 29 es un d ia g ra m a q ue co n firm a la p u re za de Y D E -026 p rep a rad o de a cu e rd o con una re a liza c ió n de la p re se n te inve nc ión a tra vé s de H PLC .
La figu ra 30 es un d ia g ra m a q ue co n firm a la p u re za de Y D E -027 p rep a rad o de a cu e rd o con una re a liza c ió n de la p re se n te inve nc ión a tra vé s de H PLC .
La figu ra 31 es un d ia g ra m a q ue co n firm a la p u re za de Y D E -028 p rep a rad o de a cu e rd o con una re a liza c ió n de la p re se n te inve nc ión a tra vé s de H PLC .
La figu ra 32 es un d ia g ra m a q ue co n firm a la p u re za de Y D E -029 p rep a rad o de a cu e rd o con una re a liza c ió n de la p re se n te inve nc ión a tra vé s de H PLC .
La figu ra 33 es un d ia g ra m a q ue co n firm a la p u re za de Y D E -030 p rep a rad o de a cu e rd o con una re a liza c ió n de la p re se n te inve n c ió n a tra vé s de H PLC .
La figu ra 34 es un d ia g ra m a q ue co n firm a la p u re za de Y D E -031 p rep a rad o de a cu e rd o con una re a liza c ió n de la p re se n te inve nc ión a tra vé s de H PLC .
La figu ra 35 es un d ia g ra m a q ue co n firm a la p u re za de Y D E -032 p re p a ra d o de a cu e rd o con una re a liza c ió n de la p re se n te inve nc ión a tra vé s de H PLC .
La figu ra 36 es un d ia g ra m a q ue co n firm a la p u re za de Y D E -033 p rep a rad o de a cu e rd o con una re a liza c ió n de la p re se n te inve nc ión a tra vé s de H PLC .
La figu ra 37 es un d ia g ra m a q ue co n firm a la p ureza de Y D E -034 p rep a rad o de a cu e rd o con una re a liza c ió n de la p re se n te inve nc ión a tra vé s de H PLC .
La figu ra 38 es un d ia g ra m a q ue co n firm a la p u re za de Y D E -035 p rep a rad o de a cu e rd o con una re a liza c ió n de la p re se n te inve nc ión a tra vé s de H PLC .
La figu ra 39 es un d ia g ra m a q ue co n firm a la p u re za de Y D E -036 p rep a rad o de a cu e rd o con una re a liza c ió n de la p re se n te inve nc ión a tra vé s de H PLC .
La figu ra 40 es un d ia g ra m a q ue co n firm a la p u re za de Y D E -037 p rep a rad o de a cu e rd o con una re a liza c ió n de la p re se n te inve nc ión a tra vé s de H PLC .
La figu ra 41 es un d ia g ra m a q ue co n firm a la p u re za de Y D E -038 p rep a rad o de a cu e rd o con una re a liza c ió n de la p re se n te inve nc ión a tra vé s de H PLC .
La figu ra 42 es un d ia g ra m a q ue co n firm a la p u re za de Y D E -039 p re p a ra d o de a cu e rd o con una re a liza c ió n de la p re se n te inve nc ión a tra vé s de H PLC .
La figu ra 43 es un d ia g ra m a q ue co n firm a la p u re za de Y D E -040 p rep a rad o de a cu e rd o con una re a liza c ió n de la p re se n te inve nc ión a tra vé s de H PLC .
La figu ra 44 es un d ia g ra m a que co n firm a la p ureza de Y D E -041 p rep a rad o de a cu e rd o con una re a liza c ió n de la p re se n te inve nc ión a tra vé s de H PLC .
La figu ra 45 es un d ia g ra m a q ue co n firm a la p u re za de Y D E -042 p rep a rad o de a cu e rd o con una re a liza c ió n de la p re se n te inve nc ión a tra vé s de H PLC .
La fig u ra 46 es un d ia g ra m a que co n firm a la p ureza de Y D E -043 p rep a rad o de a cu e rd o con una re a liza c ió n de la p re se n te inve nc ión a tra vé s de H PLC .
La figu ra 47 es un d ia g ra m a q ue co n firm a la p u re za de Y D E -044 p rep a rad o de a cu e rd o con una re a liza c ió n de la p re se n te inve nc ión a tra vé s de H PLC .
La figu ra 48 es un d ia g ra m a q ue co n firm a la p u re za de Y D E -045 p rep a rad o de a cu e rd o con una re a liza c ió n de la p re se n te inve nc ión a tra vé s de H PLC .
La figu ra 49 es un d ia g ra m a q ue co n firm a la p u re za de Y D E -047 p rep a rad o de a cu e rd o con una re a liza c ió n de la p re se n te inve nc ión a tra vé s de H PLC .
La figu ra 50 es un d ia g ra m a q ue co n firm a la p u re za de Y D E -048 p rep a rad o de a cu e rd o con una re a liza c ió n de la p re se n te inve nc ión a tra vé s de H PLC .
La figu ra 51 es un d ia g ra m a q ue co n firm a la p ureza de Y D E -049 p rep a rad o de a cu e rd o con una re a liza c ió n de la p re se n te inve nc ión a tra vé s de H PLC .
La figu ra 52 es un d ia g ra m a q ue co n firm a la p u re za de Y D E -050 p rep a rad o de a cu e rd o con una re a liza c ió n de la p re se n te inve n c ió n a tra vé s de H PLC.
La figu ra 53 es un d ia g ra m a q ue co n firm a la p u re za de Y D E -051 p rep a rad o de a cu e rd o con una re a liza c ió n de la p re se n te inve nc ión a tra vé s de H PLC .
La figu ra 54 es un d ia g ra m a q ue co n firm a la p u re za de Y D E -052 p rep a rad o de a cu e rd o con una re a liza c ió n de la p re se n te inve nc ión a tra vé s de H PLC .
La figu ra 55 es un d ia g ra m a q ue co n firm a la p u re za de Y D E -053 p rep a rad o de a cu e rd o con una re a liza c ió n de la p re se n te inve nc ión a tra vé s de H PLC .
La figu ra 56 es un d ia g ra m a q ue co n firm a la p u re za de Y D E -054 p re p a ra d o de a cu e rd o con una re a liza c ió n de la p re se n te inve nc ión a tra vé s de H PLC .
La figu ra 57 es un d ia g ra m a q ue co n firm a la p u re za de Y D E -055 p rep a rad o de a cu e rd o con una re a liza c ió n de la p re se n te inve nc ión a tra vé s de H PLC .
La figu ra 58 es un d ia g ra m a que co n firm a la p ureza de Y D E -056 p rep a rad o de a cu e rd o con una re a liza c ió n de la p re se n te inve nc ión a tra vé s de H PLC .
La figu ra 59 es un d ia g ra m a q ue co n firm a la p u re za de Y D E -057 p rep a rad o de a cu e rd o con una re a liza c ió n de la p re se n te inve nc ión a tra vé s de H PLC .
La figu ra 60 es un d ia g ra m a q ue co n firm a la p u re za de Y D E -058 p rep a rad o de a cu e rd o con una re a liza c ió n de la p re se n te inve n c ió n a tra vé s de H PLC .
La figu ra 61 es un d ia g ra m a q ue co n firm a la p u re za de Y D E -059 p rep a rad o de a cu e rd o con una re a liza c ió n de la p re se n te inve nc ión a tra vé s de H PLC .
La figu ra 62 es un d ia g ra m a q ue co n firm a la p u re za de Y D E -060 p re p a ra d o de a cu e rd o con una re a liza c ió n de la p re se n te inve nc ión a tra vé s de H PLC .
La figu ra 63 es un d ia g ra m a q ue co n firm a la p u re za de Y D E -064 p rep a rad o de a cu e rd o con una re a liza c ió n de la p re se n te inve nc ión a tra vé s de H PLC .
La figu ra 64 es un d ia g ra m a q ue co n firm a la p u re za de Y D E -066 p rep a rad o de a cu e rd o con una re a liza c ió n de la p re se n te inve nc ión a tra vé s de H PLC .
La figu ra 65 es un d ia g ra m a q ue co n firm a la p u re za de Y D E -072 p rep a rad o de a cu e rd o con una re a liza c ió n de la p re se n te inve n c ió n a tra vé s de H PLC .
La figu ra 66 es un d ia g ra m a q ue co n firm a la p u re za de Y D E -073 p rep a rad o de a cu e rd o con una re a liza c ió n de la p re se n te inve nc ión a tra vé s de H PLC .
La figu ra 67 es un d ia g ra m a q ue co n firm a la p u re za de Y D E -074 p rep a rad o de a cu e rd o con una re a liza c ió n de la p re se n te inve nc ión a tra vé s de H PLC .
La figu ra 68 es un d ia g ra m a q ue co n firm a la p u re za de Y D E -075 p rep a rad o de a cu e rd o con una re a liza c ió n de la p re se n te inve nc ión a tra vé s de H PLC .
La figu ra 69 es un d ia g ra m a que co n firm a el peso m o le c u la r de Y D E -001 p rep a rad o de a cu e rd o con una re a liza c ió n de la p re se n te inve n c ió n a tra vé s de e sp e c tro m e tría de m a sa s de iones.
La figu ra 70 es un d ia g ra m a que co n firm a el peso m o le c u la r de Y D E -002 p rep a rad o de a cu e rd o con una re a liza c ió n de la p re se n te inve nc ión a tra vé s de e sp e c tro m e tría de m a sa s de iones.
La figu ra 71 es un d ia g ra m a que co n firm a el peso m o le c u la r de Y D E -003 p rep a rad o de a cu e rd o con una re a liza c ió n de la p re se n te inve n c ió n a tra vé s de e sp e c tro m e tría de m a sa s de iones.
La figu ra 72 es un d ia g ra m a que co n firm a el peso m o le c u la r de Y D E -004 p rep a rad o de a cu e rd o con una re a liza c ió n de la p re se n te inve n c ió n a tra vé s de e sp e c tro m e tría de m a sa s de iones.
La figu ra 73 es un d ia g ra m a que co n firm a el peso m o le c u la r de Y D E -005 p re p a ra d o de a cu e rd o con una re a liza c ió n de la p re se n te inve n c ió n a tra vé s de e sp e c tro m e tría de m a sa s de iones.
La figu ra 74 es un d ia g ra m a que co n firm a el peso m o le c u la r de Y D E -006 p rep a rad o de a cu e rd o con una re a liza c ió n de la p re se n te inve n c ió n a tra vé s de e sp e c tro m e tría de m a sa s de iones.
La figu ra 75 es un d ia g ra m a que co n firm a el peso m o le c u la r de Y D E -007 p rep a rad o de a cu e rd o con una re a liza c ió n de la p re se n te inve n c ió n a tra vé s de e sp e c tro m e tría de m a sa s de iones.
La figu ra 76 es un d ia g ra m a que co n firm a el peso m o le c u la r de Y D E -008 p rep a rad o de a cu e rd o con una re a liza c ió n de la p re se n te inve n c ió n a tra vé s de e sp e c tro m e tría de m a sa s de iones.
La figu ra 77 es un d ia g ra m a que co n firm a el peso m o le c u la r de Y D E -009 p rep a rad o de a cu e rd o con una re a liza c ió n de la p re se n te inve n c ió n a tra vé s de e sp e c tro m e tría de m a sa s de iones.
La figu ra 78 es un d ia g ra m a que co n firm a el peso m o le c u la r de Y D E -010 p rep a rad o de a cu e rd o con una re a liza c ió n de la p re se n te inve n c ió n a tra vé s de e sp e c tro m e tría de m a sa s de iones.
La figu ra 79 es un d ia g ra m a que co n firm a el peso m o le c u la r de Y D E -011 p rep a rad o de a cu e rd o con una re a liza c ió n de la p re se n te inve n c ió n a tra vé s de e sp e c tro m e tría de m a sa s de iones.
La figu ra 80 es un d ia g ra m a que co n firm a el peso m o le c u la r de Y D E -012 p rep a rad o de a cu e rd o con una re a liza c ió n de la p re se n te inve n c ió n a tra vé s de e sp e c tro m e tría de m a sa s de iones.
La figu ra 81 es un d ia g ra m a que co n firm a el peso m o le c u la r de Y D E -013 p rep a rad o de a cu e rd o con una re a liza c ió n de la p re se n te inve n c ió n a tra vé s de e sp e c tro m e tría de m a sa s de iones.
La figu ra 82 es un d ia g ra m a que co n firm a el peso m o le c u la r de Y D E -014 p rep a rad o de a cu e rd o con una re a liza c ió n de la p re se n te inve n c ió n a tra vé s de e sp e c tro m e tría de m a sa s de iones.
La figu ra 83 es un d ia g ra m a que co n firm a el peso m o le c u la r de Y D E -015 p rep a rad o de a cu e rd o con una re a liza c ió n de la p re se n te inve n c ió n a tra vé s de e sp e c tro m e tría de m a sa s de iones.
La figu ra 84 es un d ia g ra m a que co n firm a el peso m o le c u la r de Y D E -016 p rep a rad o de a cu e rd o con una re a liza c ió n de la p re se n te inve n c ió n a tra vé s de e sp e c tro m e tría de m a sa s de iones.
La figu ra 85 es un d ia g ra m a que co n firm a el peso m o le c u la r de Y D E -017 p rep a rad o de a cu e rd o con una re a liza c ió n de la p re se n te inve n c ió n a tra vé s de e sp e c tro m e tría de m a sa s de iones.
La figu ra 86 es un d ia g ra m a que co n firm a el peso m o le c u la r de Y D E -018 p rep a rad o de a cu e rd o con una re a liza c ió n de la p re se n te inve n c ió n a tra vé s de e sp e c tro m e tría de m a sa s de iones.
La figu ra 87 es un d ia g ra m a que co n firm a el peso m o le c u la r de Y D E -019 p rep a rad o de a cu e rd o con una re a liza c ió n de la p re se n te inve n c ió n a tra vé s de e sp e c tro m e tría de m a sa s de iones.
La figu ra 88 es un d ia g ra m a que co n firm a el peso m o le c u la r de Y D E -020 p rep a rad o de a cu e rd o con una re a liza c ió n de la p re se n te inve n c ió n a tra vé s de e sp e c tro m e tría de m a sa s de iones.
La figu ra 89 es un d ia g ra m a que co n firm a el peso m o le c u la r de Y D E -021 p rep a rad o de a cu e rd o con una re a liza c ió n de la p re se n te inve n c ió n a tra vé s de e sp e c tro m e tría de m a sa s de iones.
La figu ra 90 es un d ia g ra m a que co n firm a el peso m o le c u la r de Y D E -022 p rep a rad o de a cu e rd o con una re a liza c ió n de la p re se n te inve n c ió n a tra vé s de e sp e c tro m e tría de m a sa s de iones.
La figu ra 91 es un d ia g ra m a que co n firm a el peso m o le c u la r de Y D E -023 p rep a rad o de a cu e rd o con una re a liza c ió n de la p re se n te inve n c ió n a tra vé s de e sp e c tro m e tría de m a sa s de iones.
La figu ra 92 es un d ia g ra m a que co n firm a el peso m o le c u la r de Y D E -024 p rep a rad o de a cu e rd o con una re a liza c ió n de la p re se n te inve n c ió n a tra vé s de e sp e c tro m e tría de m a sa s de iones.
La figu ra 93 es un d ia g ra m a que co n firm a el peso m o le c u la r de Y D E -025 p rep a rad o de a cu e rd o con una re a liza c ió n de la p re se n te inve n c ió n a tra vé s de e sp e c tro m e tría de m a sa s de iones.
La figu ra 94 es un d ia g ra m a que co n firm a el peso m o le c u la r de Y D E -026 p rep a rad o de a cu e rd o con una re a liza c ió n de la p re se n te inve n c ió n a tra vé s de e sp e c tro m e tría de m a sa s de iones.
La figu ra 95 es un d ia g ra m a que co n firm a el peso m o le c u la r de Y D E -027 p rep a rad o de a cu e rd o con una re a liza c ió n de la p re se n te inve n c ió n a tra vé s de e sp e c tro m e tría de m a sa s de iones.
La figu ra 96 es un d ia g ra m a que co n firm a el peso m o le c u la r de Y D E -028 p rep a rad o de a cu e rd o con una re a liza c ió n de la p re se n te inve n c ió n a tra vé s de e sp e c tro m e tría de m a sa s de iones.
La figu ra 97 es un d ia g ra m a que co n firm a el peso m o le c u la r de Y D E -029 p rep a rad o de a cu e rd o con una re a liza c ió n de la p re se n te inve n c ió n a tra vé s de e sp e c tro m e tría de m a sa s de iones.
La figu ra 98 es un d ia g ra m a que co n firm a el peso m o le c u la r de Y D E -030 p rep a rad o de a cu e rd o con una re a liza c ió n de la p re se n te inve n c ió n a tra vé s de e sp e c tro m e tría de m a sa s de iones.
La figu ra 99 es un d ia g ra m a que co n firm a el peso m o le c u la r de Y D E -031 p rep a rad o de a cu e rd o con una re a liza c ió n de la p re se n te inve n c ió n a tra vé s de e sp e c tro m e tría de m a sa s de iones.
La fig u ra 100 es un d ia g ra m a que co n firm a el peso m o le c u la r de Y D E -032 p rep a rad o de a cu e rd o con una re a liza c ió n de la p re se n te inve n c ió n a tra vé s de e sp e c tro m e tría de m a sa s de iones.
La fig u ra 101 es un d ia g ra m a que co n firm a el peso m o le c u la r de Y D E -033 p rep a rad o de a cu e rd o con una re a liza c ió n de la p re se n te inve n c ió n a tra vé s de e sp e c tro m e tría de m a sa s de iones.
La fig u ra 102 es un d ia g ra m a que co n firm a el peso m o le c u la r de Y D E -034 p rep a rad o de a cu e rd o con una re a liza c ió n de la p re se n te inve n c ió n a tra vé s de e sp e c tro m e tría de m a sa s de iones.
La fig u ra 103 es un d ia g ra m a que co n firm a el peso m o le c u la r de Y D E -035 p rep a rad o de a cu e rd o con una re a liza c ió n de la p re se n te inve n c ió n a tra vé s de e sp e c tro m e tría de m a sa s de iones.
La fig u ra 104 es un d ia g ra m a que co n firm a el peso m o le c u la r de Y D E -036 p rep a rad o de a cu e rd o con una re a liza c ió n de la p re se n te inve n c ió n a tra vé s de e sp e c tro m e tría de m a sa s de iones.
La fig u ra 105 es un d ia g ra m a que co n firm a el peso m o le c u la r de Y D E -037 p rep a rad o de a cu e rd o con una re a liza c ió n de la p re se n te inve n c ió n a tra vé s de e sp e c tro m e tría de m a sa s de iones.
La fig u ra 106 es un d ia g ra m a que co n firm a el peso m o le c u la r de Y D E -038 p rep a rad o de a cu e rd o con una re a liza c ió n de la p re se n te inve n c ió n a tra vé s de e sp e c tro m e tría de m a sa s de iones.
La fig u ra 107 es un d ia g ra m a que co n firm a el peso m o le c u la r de Y D E -039 p rep a rad o de a cu e rd o con una re a liza c ió n de la p re se n te inve n c ió n a tra vé s de e sp e c tro m e tría de m a sa s de iones.
La fig u ra 108 es un d ia g ra m a que co n firm a el peso m o le c u la r de Y D E -040 p rep a rad o de a cu e rd o con una re a liza c ió n de la p re se n te inve n c ió n a tra vé s de e sp e c tro m e tría de m a sa s de iones.
La fig u ra 109 es un d ia g ra m a que co n firm a el peso m o le c u la r de Y D E -041 p rep a rad o de a cu e rd o con una re a liza c ió n de la p re se n te inve n c ió n a tra vé s de e sp e c tro m e tría de m a sa s de iones.
La fig u ra 110 es un d ia g ra m a que co n firm a el peso m o le c u la r de Y D E -042 p rep a rad o de a cu e rd o con una re a liza c ió n de la p re se n te inve n c ió n a tra vé s de e sp e c tro m e tría de m a sa s de iones.
La fig u ra 111 es un d ia g ra m a que co n firm a el peso m o le c u la r de Y D E -043 p rep a rad o de a cu e rd o con una re a liza c ió n de la p re se n te inve n c ió n a tra vé s de e sp e c tro m e tría de m a sa s de iones.
La fig u ra 112 es un d ia g ra m a que co n firm a el peso m o le c u la r de Y D E -044 p rep a rad o de a cu e rd o con una re a liza c ió n de la p re se n te inve n c ió n a tra vé s de e sp e c tro m e tría de m a sa s de iones.
La fig u ra 113 es un d ia g ra m a que co n firm a el peso m o le c u la r de Y D E -045 p rep a rad o de a cu e rd o con una re a liza c ió n de la p re se n te inve n c ió n a tra vé s de e sp e c tro m e tría de m a sa s de iones.
La fig u ra 114 es un d ia g ra m a que co n firm a el peso m o le c u la r de Y D E -047 p rep a rad o de a cu e rd o con una re a liza c ió n de la p re se n te inve n c ió n a tra vé s de e sp e c tro m e tría de m a sa s de iones.
La fig u ra 115 es un d ia g ra m a que co n firm a el peso m o le c u la r de Y D E -048 p rep a rad o de a cu e rd o con una re a liza c ió n de la p re se n te inve n c ió n a tra vé s de e sp e c tro m e tría de m a sa s de iones.
La fig u ra 116 es un d ia g ra m a que co n firm a el peso m o le c u la r de Y D E -049 p rep a rad o de a cu e rd o con una re a liza c ió n de la p re se n te inve n c ió n a tra vé s de e sp e c tro m e tría de m a sa s de iones.
La fig u ra 117 es un d ia g ra m a que co n firm a el peso m o le c u la r de Y D E -050 p rep a rad o de a cu e rd o con una re a liza c ió n de la p re se n te inve n c ió n a tra vé s de e sp e c tro m e tría de m a sa s de iones.
La fig u ra 118 es un d ia g ra m a que co n firm a el peso m o le c u la r de Y D E -051 p rep a rad o de a cu e rd o con una re a liza c ió n de la p re se n te inve n c ió n a tra vé s de e sp e c tro m e tría de m a sa s de iones.
La fig u ra 119 es un d ia g ra m a que co n firm a el peso m o le c u la r de Y D E -052 p rep a rad o de a cu e rd o con una re a liza c ió n de la p re se n te inve n c ió n a tra vé s de e sp e c tro m e tría de m a sa s de iones.
La fig u ra 120 es un d ia g ra m a que co n firm a el peso m o le c u la r de Y D E -053 p rep a rad o de a cu e rd o con una re a liza c ió n de la p re se n te inve n c ió n a tra vé s de e sp e c tro m e tría de m a sa s de iones.
La fig u ra 121 es un d ia g ra m a que co n firm a el peso m o le c u la r de Y D E -054 p rep a rad o de a cu e rd o con una re a liza c ió n de la p re se n te inve n c ió n a tra vé s de e sp e c tro m e tría de m a sa s de iones.
La fig u ra 122 es un d ia g ra m a que co n firm a el peso m o le c u la r de Y D E -055 p rep a rad o de a cu e rd o con una re a liza c ió n de la p re se n te inve n c ió n a tra vé s de e sp e c tro m e tría de m a sa s de iones.
La fig u ra 123 es un d ia g ra m a que co n firm a el peso m o le c u la r de Y D E -056 p rep a rad o de a cu e rd o con una re a liza c ió n de la p re se n te inve n c ió n a tra vé s de e sp e c tro m e tría de m a sa s de iones.
La fig u ra 124 es un d ia g ra m a que co n firm a el peso m o le c u la r de Y D E -057 p rep a rad o de a cu e rd o con una re a liza c ió n de la p re se n te inve n c ió n a tra vé s de e sp e c tro m e tría de m a sa s de iones.
La fig u ra 125 es un d ia g ra m a que co n firm a el peso m o le c u la r de Y D E -058 p rep a rad o de a cu e rd o con una re a liza c ió n de la p re se n te inve n c ió n a tra vé s de e sp e c tro m e tría de m a sa s de iones.
La fig u ra 126 es un d ia g ra m a que co n firm a el peso m o le c u la r de Y D E -059 p rep a rad o de a cu e rd o con una re a liza c ió n de la p re se n te inve n c ió n a tra vé s de e sp e c tro m e tría de m a sa s de iones.
La fig u ra 127 es un d ia g ra m a que co n firm a el peso m o le c u la r de Y D E -060 p rep a rad o de a cu e rd o con una re a liza c ió n de la p re se n te inve n c ió n a tra vé s de e sp e c tro m e tría de m a sa s de iones.
La fig u ra 128 es un d ia g ra m a que co n firm a el peso m o le c u la r de Y D E -064 p rep a rad o de a cu e rd o con una re a liza c ió n de la p re se n te inve n c ió n a tra vé s de e sp e c tro m e tría de m a sa s de iones.
La fig u ra 129 es un d ia g ra m a que co n firm a el peso m o le c u la r de Y D E -066 p rep a rad o de a cu e rd o con una re a liza c ió n de la p re se n te inve n c ió n a tra vé s de e sp e c tro m e tría de m a sa s de iones.
La fig u ra 130 es un d ia g ra m a que co n firm a el peso m o le c u la r de Y D E -072 p rep a rad o de a cu e rd o con una re a liza c ió n de la p re se n te inve n c ió n a tra vé s de e sp e c tro m e tría de m a sa s de iones.
La fig u ra 131 es un d ia g ra m a que co n firm a el peso m o le c u la r de Y D E -073 p rep a rad o de a cu e rd o con una re a liza c ió n de la p re se n te inve n c ió n a tra vé s de e sp e c tro m e tría de m a sa s de iones.
La fig u ra 132 es un d ia g ra m a que co n firm a el peso m o le c u la r de Y D E -074 p rep a rad o de a cu e rd o con una re a liza c ió n de la p re se n te inve n c ió n a tra vé s de e sp e c tro m e tría de m a sa s de iones.
La fig u ra 133 es un d ia g ra m a que co n firm a el peso m o le c u la r de Y D E -075 p rep a rad o de a cu e rd o con una re a liza c ió n de la p re se n te inve n c ió n a tra vé s de e sp e c tro m e tría de m a sa s de iones.
La figu ra 134 es una fo to g ra fía q ue m u es tra un p roce d im ie n to de e sc is ión e x tra o rb ita ria de la g lá n d u la lag rim al. La fig u ra 135 es un d ia g ra m a q ue m u e s tra un ca m b io en el p eso co rp o ra l de un m o d e lo de ra ta a cu yo s o jos se ha a d m in is tra d o Y D E -001 a Y D E -028.
La fig u ra 136 es un d ia g ra m a q ue m u e s tra un c a m b io en el p eso co rp o ra l de un m o d e lo de ra ta cu yo s a o jos se ha a d m in is tra d o Y D E -029 a Y D E -043.
La fig u ra 137 es una fo to g ra fía que m u e s tra un p ro ce d im ie n to para a d m in is tra r un a ge n te a los o jos de un m o d e lo de rata.
La fig u ra 138 es una fo to g ra fía q ue m u e s tra un p ro ce d im ie n to p ara m e d ir la ca n tid a d de se c re c ió n lag rim a l de un m o d e lo de ra ta u sa nd o pape l de c lo ru ro de coba lto .
La fig u ra 139 es una fo to g ra fía que m u e s tra los re su lta d o s de m e d ir la can tida d de sec re c ió n lag rim a l de un m o d e lo de ra ta a cu yo s o jo s se han a d m in is tra d o Y D E -001 a Y D E -028 u sa nd o pape l de c lo ru ro de coba lto .
La fig u ra 140 es un d ia g ra m a q ue m u e s tra los c a m b io s en la ca n tid a d de se c re c ió n la g rim a l de un m o d e lo de ra ta a cu yo s o jo s se han a d m in is tra d o Y D E -001 a Y D E -028.
La fig u ra 141 es una fo to g ra fía que m u e s tra los re su lta d o s de m e d ir la can tida d de sec re c ió n lag rim a l de un m o d e lo de ra ta a cu yo s o jo s se han a d m in is tra d o Y D E -029 a Y D E -043 u sa nd o pape l de c lo ru ro de coba lto . La fig u ra 142 es un d ia g ra m a q ue m u e s tra los c a m b io s en la ca n tid a d de se c re c ió n la g rim a l de un m o d e lo de ra ta a cu yo s o jo s se han a d m in is tra d o Y D E -029 a Y D E -043.
La fig u ra 143 es una fo to g ra fía q u e m u e s tra un p ro ce d im ie n to p ara a d m in is tra r una su s ta n c ia flu o re sc e n te a los o jo s de un m o de lo de ra ta para c o n firm a r el d añ o a la có rn e a de la m ism a.
La fig u ra 144 es una fo to g ra fía q ue m u e s tra los re su lta d o s de m e d ir el d añ o a la có rn e a de un m o d e lo de ra ta a cu yo s o jo s se han a d m in is tra d o Y D E -001 a Y D E -028 u sa nd o una su s ta n c ia flu o re sce n te .
La figu ra 145 es un d ia g ra m a que m u es tra la p e rm e a b ilid a d de un tin te de flu o re sc e n c ia para c o n firm a r la re cu p e ra c ió n de l d añ o co rn e a l de un m o de lo de ra ta a cu yo s o jos se han a d m in is tra d o Y D E -001 a Y D E -028. La fig u ra 146 es una fo to g ra fía q ue m u e s tra los re su lta d o s de m e d ir el d añ o a la có rn e a de un m o d e lo de ra ta a cu yo s o jo s se han a d m in is tra d o Y D E -029 a Y D E -043 u sa nd o una su s ta n c ia flu o re sce n te .
La figu ra 147 es un d ia g ra m a que m u es tra la p e rm e a b ilid a d de un tin te de flu o re sc e n c ia para c o n firm a r la re cu p e ra c ió n de l d añ o co rn e a l de un m o de lo de ra ta a cu yo s o jos se han a d m in is tra d o Y D E -029 a Y D E -043. La fig u ra 148 es un d ia g ra m a q ue m u e s tra la ta sa de c re c im ie n to c e lu la r d e sp u é s de 48 h o ra s de l tra ta m ie n to de h E G F en cé lu la s e p ite lia le s co rn e a le s h u m a n a s de la p laca No. 1.
La fig u ra 149 es un d ia g ra m a q ue m u e s tra la ta sa de c re c im ie n to c e lu la r d e sp u é s de 48 h o ra s de l tra ta m ie n to de h E G F en cé lu la s e p ite lia le s co rn e a le s h u m a n a s de la p laca No. 2.
La fig u ra 150 es un d ia g ra m a q ue m u e s tra la ta sa de c re c im ie n to c e lu la r d e sp u é s de 48 h o ra s de l tra ta m ie n to de h E G F en cé lu la s e p ite lia le s co rn e a le s h u m a n a s de la p laca No. 3.
La fig u ra 151 es un d ia g ra m a q ue m u e s tra la ta sa de c re c im ie n to c e lu la r d e sp u é s de 48 h o ra s de l tra ta m ie n to de h E G F en cé lu la s e p ite lia le s co rn e a le s h u m a n a s de la p laca No. 4.
La fig u ra 152 es un d ia g ra m a q ue m u e s tra la ta sa de c re c im ie n to c e lu la r d e sp u é s de 72 h o ra s de l tra ta m ie n to de h E G F en cé lu la s e p ite lia le s co rn e a le s h u m a n a s de la p laca No. 1.
La fig u ra 153 es un d ia g ra m a q ue m u e s tra la ta s a de c re c im ie n to c e lu la r d e sp u é s de 72 h o ra s de l tra ta m ie n to de h E G F en cé lu la s e p ite lia le s co rn e a le s h u m a n a s de la p laca No. 2.
La fig u ra 154 es un d ia g ra m a q ue m u e s tra la ta sa de c re c im ie n to c e lu la r d e sp u é s de 72 h o ra s de l tra ta m ie n to de h E G F en cé lu la s e p ite lia le s co rn e a le s h u m a n a s de la p laca No. 3.
La fig u ra 155 es un d ia g ra m a q ue m u e s tra la ta sa de c re c im ie n to c e lu la r d e sp u é s de 48 h o ra s de l tra ta m ie n to de h E G F en cé lu la s e p ite lia le s co rn e a le s h u m a n a s de la p laca No. 4.
Las fig u ra s 156 A y 156B son d ia g ra m a s q ue m u es tra n la ta sa de c re c im ie n to c e lu la r d e sp u é s de (F ig u ra 156A ) 48 h o ra s o (F ig u ra 156B ) 72 hora s d esde el tra ta m ie n to de Y Y -101 en cé lu la s e p ite lia le s co rn e a le s hum a na s . Las fig u ra s 157 A y 157B son d ia g ra m a s q ue m u es tra n la ta sa de c re c im ie n to ce lu la r d e sp u é s de (F ig u ra 157A ) 48 h o ra s o (F ig u ra 157B ) 72 hora s d e sd e el tra ta m ie n to de Y Y -102 en cé lu la s e p ite lia le s co rn e a le s hum a na s . Las fig u ra s 158 A y 158B son d ia g ra m a s q ue m u es tra n la ta sa de c re c im ie n to c e lu la r d e sp u é s de (F ig u ra 158A ) 48 hora s o (F ig u ra 158B ) 72 horas d esde el tra ta m ie n to de Y D E -011 en cé lu las e p ite lia le s co rn e a le s hum anas. Las fig u ra s 159 A y 15B son d ia g ra m a s q ue m u e s tra n la ta sa de c re c im ie n to c e lu la r d e sp u é s de (F ig u ra 159A ) 48 horas o (F ig u ra 159B ) 72 horas d esde el tra ta m ie n to de Y D E -038 en cé lu las e p ite lia le s co rn e a le s hum anas. Las fig u ra s 160 A y 160B son d ia g ra m a s q ue m u es tra n la ta sa de c re c im ie n to c e lu la r d e sp u é s de (F ig u ra 160A ) 48 horas o (F ig u ra 160B ) 72 horas d esde el tra ta m ie n to de Y D E -042 en cé lu las e p ite lia le s co rn e a le s hum anas. Las fig u ra s 161 A y 161B son d ia g ra m a s q ue m u es tra n la ta sa de c re c im ie n to c e lu la r d e sp u é s de (F ig u ra 161A ) 48 horas o (F ig u ra 161B ) 72 horas d esde el tra ta m ie n to de Y D E -043 en cé lu las e p ite lia le s co rn e a le s hum anas. Las fig u ra s 162 A y 162B son d ia g ra m a s q ue m u es tra n la ta sa de c re c im ie n to c e lu la r d e sp u é s de (F ig u ra 162A ) 48 horas o (F ig u ra 162B ) 72 horas d esde el tra ta m ie n to de Y D E -044 en cé lu las e p ite lia le s co rn e a le s hum anas. Las fig u ra s 163 A y 163B son d ia g ra m a s q ue m u es tra n la ta sa de c re c im ie n to c e lu la r d e sp u é s de (F ig u ra 163A ) 48 horas o (F igu ra 163B ) 72 h oras desde el tra ta m ie n to de Y D E -045 en cé lu la s e p ite lia le s co rn e a le s hum a na s . Las fig u ra s 164 A y 164B son d ia g ra m a s q ue m u es tra n la ta sa de c re c im ie n to c e lu la r d e sp u é s de (F ig u ra 164A) 48 horas o (F igu ra 164B ) 72 h oras desde el tra ta m ie n to de Y D E -049 en cé lu la s e p ite lia le s co rn e a le s hum a na s . Las fig u ra s 165 A y 165B son d ia g ra m a s que m u es tra n la ta sa de c re c im ie n to c e lu la r d e sp u é s de (F ig u ra 165A) 48 horas o (F igu ra 165B ) 72 h oras desde el tra ta m ie n to de Y D E -054 en cé lu la s e p ite lia le s co rn e a le s hum a na s . Las fig u ra s 166 A y 166B son d ia g ra m a s que m u es tra n la ta sa de c re c im ie n to ce lu la r d e sp u é s de (F ig u ra 166A) 48 horas o (F igu ra 166B ) 72 h oras desde el tra ta m ie n to de Y D E -057 en cé lu la s e p ite lia le s co rn e a le s hum a na s . Las fig u ra s 167 A y 167B son d ia g ra m a s que m u es tra n la ta sa de c re c im ie n to c e lu la r d e sp u é s de (F ig u ra 167A) 48 horas o (F igu ra 167B ) 72 h oras desde el tra ta m ie n to de Y D E -058 en cé lu la s e p ite lia le s co rn e a le s hum a na s . Las fig u ra s 168 A y 168B son d ia g ra m a s que m u es tra n la ta sa de c re c im ie n to c e lu la r d e sp u é s de (F ig u ra 168A) 48 horas o (F igu ra 168B ) 72 h oras desde el tra ta m ie n to de Y D E -059 en cé lu las e p ite lia le s co rn e a le s hum a na s . Las fig u ra s 169 A y 169B son d ia g ra m a s que m u es tra n la ta sa de c re c im ie n to c e lu la r d e sp u é s de (F ig u ra 169A) 48 horas o (F igu ra 169B ) 72 h oras desde el tra ta m ie n to de Y D E -060 en cé lu la s e p ite lia le s co rn e a le s hum a na s . Las fig u ra s 170 A y 170B son d ia g ra m a s que m u es tra n la ta sa de c re c im ie n to c e lu la r d e sp u é s de (F ig u ra 170A) 48 horas o (F igu ra 170B ) 72 h oras desde el tra ta m ie n to de Y D E -072 en cé lu las e p ite lia le s co rn e a le s hum a na s . Las fig u ra s 171 A y 171B son d ia g ra m a s que m u es tra n la ta sa de c re c im ie n to c e lu la r d e sp u é s de (F ig u ra 171A) 48 horas o (F igu ra 171B ) 72 h oras desde el tra ta m ie n to de Y D E -073 en cé lu la s e p ite lia le s co rn e a le s hum a na s . Las fig u ra s 172 A y 172B son d ia g ra m a s que m u es tra n la ta sa de c re c im ie n to c e lu la r d e sp u é s de (F ig u ra 172A) 48 horas o (F igu ra 172B ) 72 h oras desde el tra ta m ie n to de Y D E -074 en cé lu las e p ite lia le s co rn e a le s hum a na s . Las fig u ra s 173 A y 173B son d ia g ra m a s que m u es tra n la ta sa de c re c im ie n to c e lu la r d e sp u é s de (F ig u ra 173A) 48 horas o (F igu ra 173B ) 72 h oras desde el tra ta m ie n to de Y D E -075 en cé lu la s e p ite lia le s co rn e a le s hum a na s . D esc rip c ió n d e ta lla d a de la inve nc ión
En lo suce s ivo , la p re se n te in ve nc ión se d e sc rib irá en de ta lle .
Un a sp e c to de la p re se n te inve nc ión p ro p o rc io n a un co m p u e s to se le cc io n a d o de la s ig u ie n te tab la :
El té rm in o "p é p t id o " u sa d o en la p re s e n te in v e n c ió n se re fie re a un c o m p u e s to en el q u e d o s o m ás a m in o á c id o s e s tá n u n id o s p o r un e n la ce p e p tíd ico . A d e m á s , se c la s if ic a en d ip é p tid o , tr ip é p tid o , te tra p é p tid o y s im ila re s de a c u e rd o con e l n ú m e ro de a m in o á c id o s c o n s titu y e n te s . Un o lig o p é p tid o t ie n e a p ro x im a d a m e n te 10 e n la c e s p e p tíd ic o s o m e n o s , y un p o lip é p tid o t ie n e u na p lu ra lid a d de e n la c e s p e p tíd ic o s . A d e m á s , un p é p tid o en la p re s e n te in v e n c ió n in c lu y e un p é p tid o m u ta d o en el q u e su re s id u o de a m in o á c id o e s tá s u s titu id o .
El té rm in o "H y P " u sa d o en la p re s e n te in v e n c ió n se re fie re a un a m in o á c id o lla m a d o h id ro x ip ro lin a , en el q ue un g ru p o h id ro x ilo (-O H ) e s tá u n id o al á to m o de c a rb o n o en la p o s ic ió n 4 de la p ro lin a . H yP t ie n e una e s tru c tu ra de C<5>H<9>N O<3>y p u e d e e s ta r re p re s e n ta d a p o r la s ig u ie n te F ó rm u la 2.
F ó rm u la 2
H yP p uede inc lu ir to d o s los isóm eros. A d e m á s, H yP puede s e r un isóm e ro re p re se n ta d o p o r la e s te re o q u ím ica de "2 S ,4 R " a m e no s q ue se e sp e c ifiq u e lo con tra rio .
El té rm in o "2 S ,4 R " está re p re se n ta d o p o r R y S q ue ind ican una con fig u ra c ió n e s te re o q u ím ica de una m o lécu la qu ira l. U na m o lé cu la q u ira l típ ic a tie n e un ce n tro q u ira l ta l com o un á to m o de ca rb o n o a s im é trico . D ado que el cen tro qu ira l tie n e cu a tro g ru p o s su s titu ye n te s d ife re n te s (o á to m o s de sus titu c ión ), su p rio ridad se de te rm ina m e d ia n te un p ro ce d im ie n to p re d e te rm in ad o . U na ve z que el o rden de los cua tro sus titu yen tes está d e te rm ina do p o r ( 1 ), (2 ), (3 ) y (4), el su s titu ye n te de o rde n m ás ba jo (4 ) se co lo ca m ás a le ja d o de la d ire cc ió n de l o jo , y los s u s titu ye n te s re s ta n te s se o rd e n a n d esde el o rde n s u p e r io r al in fe rio r. R (o rec to en latín, d e re ch a ) ind ica la d isp o s ic ió n en la que la se cu e n c ia de (1 ) a (2 ) a (3 ) g ira a la dere cha . S (o s in ie s tro , izq u ie rd a ) ind ica la d isp o s ic ió n en la q ue e sta se cu e n c ia g ira a la izqu ie rda .
El té rm in o "h o m o -S e r" u sado en la p rese n te inve nc ión se llam a h o m o se rin a y se re fie re a un a -a m in o á c id o que tie n e un g rup o h id ro x ilo en la ca d e n a la tera l. H o m o -S e r no es un a m in o á c id o q ue co n s titu ye una p ro te ína y es un p rese n te in te rm e d io en la b io s ín te s is de tre o n in a y m e tio n in a en m ic ro o rg a n ism o s y p lan tas . H o m o -S e r p ue de te n e r la s ig u ie n te F ó rm u la 3.
F ó rm u la 3
A d e m á s, la p re se n te in ve n c ió n p ro p o rc io n a una co m p o s ic ió n fa rm a c é u tic a para tra ta r una e n fe rm e d a d ocu lar, q ue co m p re n d e el c o m p u e s to o el p ép tid o com o in g re d ie n te fa rm a c é u tic o activo .
E sp e c ífica m e n te , la e n fe rm e d a d o cu la r p ue de se le cc io n a rs e de l g ru p o q ue co n s is te en re tino pa tía , q ue ra titis , d e g e n e ra c ió n m a cu la r seca , d e g e n e ra c ió n m a cu la r húm e da , s ín d ro m e del o jo seco, tra s to rn o de l e p ite lio q u e ra to co n ju n tiva l, v itre o rre tin o p a tía p ro life ra tiva , re tin o p a tía p ig m e n ta ria , re tin o p a tía d ia b é tica , re tin o p a tía del p rem a tu ro , re tin o p a tía de inm ad urez , re tin o p a tía p ro life ra tiva , re tin o p a tía isqu ém ica , q u e ra to co n ju n tiv it is e p id é m ica , q u e ra titis a tó p ica , q u e ra tit is lím b ica sup e rio r, q u e ra tit is p te rig ió n ica s icca , q u e ra to co n ju n tiv it is f ilc te n u la r, esc le ritis , re cha zo de tra sp la n te cornea l, n e o va scu la r iza c ió n co ro id ea , g la u co m a neo va scu la r, n e u ro p a tía ó p tica isqu ém ica , fib ro p la s ia s re tro le n ta le s , m á cu la d ia b é tica , e n fe rm e d a d n e o va scu la r de l iris, e ritro s is , m iopía , s ín d ro m e de V on H ipp e l-L in da u , h is to p la sm o s is ocu lar, o c lu s ió n de la ve n a cen tra l de la retina, s ín d ro m e de S jog ren y s ín d rom e de S te ve n s -Jo h n so n . P re fe rib le m e n te , la e n fe rm e d a d o cu la r puede s e le cc io n a rse de l g rup o q ue co n s is te en re tino pa tía , q ue ra titis , d e g e n e ra c ió n m acu la r, s ín d ro m e de l o jo seco y tra s to rn o del e p ite lio q u e ra to co n ju n tiva l.
El tra s to rn o del e p ite lio q u e ra to co n ju n tiva l p uede d eb e rse a c irug ía p osop era to ria , uso de d rogas, tra u m a tism o s o len tes de con tac to .
E sp e c ífica m e n te , la co m p o s ic ió n para tra ta r una e n fe rm e d a d ocu lar, que co m p re n d e el co m p u e s to o el pép tido com o in g re d ie n te fa rm a c é u tic o a ctivo , p uede c o m p re n d e r a d e m á s al m e no s un a d itivo se le cc io n a d o del g rupo q ue c o n s is te en un portado r, un e xc ip ie n te , un d e s in te g ra n te , un e d u lco ra n te , un a g e n te de re cu b rim ie n to , un a g e n te de h in ch a m ie n to , un lub rica n te , un a g e n te d e s liza n te , un sabor, un a n tio x id a n te , un a m o rtig u a d o r, un bac te rio s ta to , un d ilu yen te , un d isp e rsa n te , un te n s io a c tivo y un ag lu tin an te . E sp e c ífica m e n te , una fo rm u la c ió n p ara a d m in is tra c ió n p a re n te ra l p uede s e r una so lu c ió n a cu osa e s te riliza d a , una so lu c ió n no acu osa , una su sp e n s ió n , una em u ls ión , una p re p a ra c ió n lio filizad a , un s u p o s ito r io o s im ila res .
T o d a v ía o tro a sp e c to de la p rese n te inve nc ión p ro p o rc io n a un co m p u e s to o el p ép tido com o se d e fine en el p re se n te d o cu m e n to p ara su uso en el tra ta m ie n to de una e n fe rm e d a d ocu lar.
La d os is del c o m p u e s to o el p é p tid o p uede a ju s ta rse d e p e n d ie n d o de d ive rso s fa c to re s com o el tip o de e n fe rm e d a d , la g ra ve d a d de la e n fe rm e d a d , los tip o s y c a n tid a d e s de l in g re d ie n te fa rm a c é u tic o a c tivo y o tros in g re d ie n te s co n te n id o s en la co m p o s ic ió n fa rm a cé u tica , el tip o de la fo rm u la c ió n , la edad, el peso co rpo ra l, el e s ta d o g e n e ra l de sa lud , el se xo y la d ie ta del pac ien te , el t ie m p o y la ru ta de a d m in is tra c ió n , la d u ra c ión del tra ta m ie n to y los m e d ica m e n to s u sa do s s im u ltá n e a m e n te .
S in e m b a rg o , para el e fe c to d esea do , la ca n tid a d e fe c tiva de l c o m p u e s to o el p é p tid o co n te n id o en la co m p o s ic ió n fa rm a cé u tica puede s e r de 0.0001 p g /d ía a 100 pg/d ía . En ta l caso, la a d m in is tra c ió n puede lleva rse a cab o una ve z al d ía , o d iv id irse en v a r ia s dos is. E sp e c ífica m e n te , la c o n ce n tra c ió n de l c o m p u e s to o el p ép tid o co n te n id o en la co m p o s ic ió n fa rm a c é u tic a p uede s e r de 1000 pM a 0.001 pM. A d e m á s, la c o n ce n tra c ió n del co m p u e s to o el p é p tid o co n te n id o en la co m p o s ic ió n fa rm a cé u tica p uede s e r de 100 pM a 0.005 pM o de 50 pM a 0.02 pM.
A d e m á s , si es n ecesa rio , la co n ce n tra c ió n de l co m p u e s to o el p ép tid o co n te n id o en la co m p o s ic ió n fa rm a c é u tic a p ue de se r de 30 pM a 1 pM . A d e m á s, la co n ce n tra c ió n del co m p u e s to o el p ép tid o co n te n id o en la co m p o s ic ió n fa rm a c é u tic a p uede s e r de 0.01 pM a 1 pM.
A d e m á s, el su je to p ue de se r un m a m ífe ro , p a rticu la rm e n te un se r hum ano . La ru ta de a d m in is tra c ió n puede s e r s e le cc io n a d a a p ro p ia d a m e n te p o r una p e rso na e xp e rta en la té c n ica en co n s id e ra c ió n de l m é to do de a d m in is tra c ió n , el v o lu m e n y la v is c o s id a d de l flu id o co rp o ra l, y s im ila re s . E sp e c ífica m e n te , la a d m in is tra c ió n p ue de lleva rse a cab o a tra vé s de c u a lq u ie r ru ta s e le cc io n a d a del g rup o que co n s is te en una ap licac ión in traven o sa , in traa rte ria l, in trap e rito ne a l, in tram u scu la r, in trae s te rn a l, percu tá n ea , in tranasa l, inh a lac ión , tóp ica , rec ta l, o ra l, in tra o cu la r e in trad é rm ica . En p a rticu la r, se p uede a p lic a r p re fe rib le m e n te al o jo para u sa r com o una g o ta p ara los o jos.
En lo su ce s ivo , la p re se n te inve n c ió n se e xp lica con m ás d e ta lle m e d ia n te los s ig u ie n te s e je m p lo s de tra ba jo . S in e m ba rg o , los s ig u ie n te s e je m p lo s de tra b a jo p re te nd en ilu s tra r a d ic io n a lm e n te la p rese n te inve nc ión . El a lca n ce de la p re se n te inve n c ió n no e stá lim ita d o p o r ello.
E je m p lo de tra b a jo 1: p re p a ra c ió n de d e riva d o s de Y D E
Se llevó a cabo un a n á lis is de p ro te ín a s de la m a triz e x tra c e lu la r d e riva d a de c o n d ro c ito s a n im a le s en el g rupo de B a e k de l C e n tro de E sp e c tro m e tría de M a sa B io m é d ica (D ia te ch K orea C o., L td., S eú l, C orea ). La P ro lina -G Q D G L A G P K (P -G Q D G L A G P K ), que es parte de la se cu e n c ia de a m in o á c id o s de la p ro te ína a l de co lá g e n o tip o II, se o b tu vo a tra vé s de l a n á lis is de p ro te ín a s ante rio r. Los p é p tid o s Y D E -001 a Y D E -075 fue ro n s in te tiza d o s p o r A N Y G E N (G w a n g ju , C o re a ) s u s titu ye n d o una parte de l p ép tid o a n te r io r (F ig u ra 1 y T a b la 11).
El p ro ce so p ara s in te tiz a r los p é p tid o s Y D E -001 a Y D E -075 y e l p ro c e d im ie n to de p u rif ica c ió n de los m ism o s re a liza d o s p o r A N Y G E N se re p re se n ta n en las fig u ra s 2 y 3.
Los co m p u e s to s m a rca d o s con un a s te ris co (*) se inc lu ye n ú n ica m e n te con fine s de re fe renc ia . ; ; ; ; ;;; E je m p lo e x p e rim e n ta l 1: a n á lis is d e d e riv a d o s d e Y D E;;Los d e riva d o s de Y D E p rep a rad o s en el E jem p lo de tra b a jo 1 se a na liza ro n p o r H PLC . C om o re su ltad o , se co n firm ó que las p u re zas de Y D E -001 , Y D E -002 , Y D E -003 , Y D E -004 , Y D E -005 , Y D E -006 , Y D E -007 , Y D E -008, Y D E -009 , Y D E -010 , Y D E -011 , Y D E -012 , Y D E -013 , Y D E -014 , Y D E -015 , Y D E -016 , Y D E -017 , Y D E -018 , Y D E -019 , Y D E -020 , Y D E -021 , Y D E -022 , Y D E -023 , Y D E -024 , Y D E -025 , Y D E -026 , Y D E -027 , Y D E -028 , Y D E -029, Y D E -030 , Y D E -031 , Y D E -032 , Y D E -033 , Y D E -034 , Y D E -035 , Y D E -036 , Y D E -037 , Y D E -038 , Y D E -039 , Y D E -040 , Y D E -041 , Y D E -042 , Y D E -043 , Y D E -044 , Y D E -045 , Y D E -047 , Y D E -048 , Y D E -049 , Y D E -050 , Y D E -051, Y D E -052 , Y D E -053 , Y D E -054 , Y D E -055 , Y D E -056 , Y D E -057 , Y D E -058 , Y D E -059 , Y D E -060 , Y D E -064 , Y D E -066 , Y D E -072 , Y D E -073 , Y D E -074 , y Y D E -075 s in te tiza d o s e ran de 99.7% , 99.7% , 99.7% , 99.7% , 99.5% , 98.9% , 98.0% , 98.8% , 98.1% , 99.0% , 98.3% , 98.9% , 98.7% , 98.5% , 99.1% , 99.4% , 98.0% , 99.6% , 99.6% , 99.2% , 98.1% , 98.3% , 96.1% , 98.9% , 95.1% , 98.6% , 96.9% , 99.5% , 98.0% , 98.1% , 98.8% , 98.2% , 97.2% , 98.6% , 98.8% , 98.7% , 99.2% , 98.7% , 98.1% , 97.5% , 96.5% , 97.4% , 98.7% , 97.8% , 95.5% , 97.5% , 97.2% , 96.9% , 99.3% , 98.0% , 99.4% , 96.4% , 95.1% , 98.6% , 97.4% , 98.8% , 97.4% , 95.8% , 98.9% , 96.9% , 98.8% , 97.7% , 95.0% , 97.9% , and 96.3% , re sp e c tiva m e n te (F ig u ra s 4 a 68). ;A d e m á s , los d e riva d o s de Y D E p re p a ra d o s en el E je m p lo de tra b a jo 1 se a n a liza ro n p o r e sp e c tro m e tría de m a sa s de iones. C o m o re su ltad o , se co n firm ó q ue los pesos m o le cu la re s de Y D E -001 , Y D E -002 , Y D E -003 , Y D E -004 , Y D E -005 , Y D E -006 , Y D E -007 , Y D E -008 , Y D E -009 , Y D E -010 , Y D E -011 , Y D E -012 , Y D E -013 , Y D E -014, Y D E -015 , Y D E -016 , Y D E -017 , Y D E -018 , Y D E -019 , Y D E -020 , Y D E -021 , Y D E -022 , Y D E -023 , Y D E -024 , Y D E -025 , Y D E -026 , Y D E -027 , Y D E -028 , Y D E -029 , Y D E -030 , Y D E -031 , Y D E -032 , Y D E -033 , Y D E -034 , Y D E -035, Y D E -036 , Y D E -037 , Y D E -038 , Y D E -039 , Y D E -040 , Y D E -041 , Y D E -042 , Y D E -043 , Y D E -044 , Y D E -045 , Y D E -047 , Y D E -048 , Y D E -049 , Y D E -050 , Y D E -051 , Y D E -052 , Y D E -053 , Y D E -054 , Y D E -055 , Y D E -056 , Y D E -057, Y D E -058 , Y D E -059 , Y D E -060 , Y D E -064 , Y D E -066 , Y D E -072 , Y D E -073 , Y D E -074 , y Y D E -075 s in te tizad o s e ran de 969.6 , 954.8 , 967.7 , 977.1 , 968.1 , 926.9 , 941.1 , 910.7 , 939.7 , 953.0 , 953.7 , 987.8 , 1003.8 , 1025.9, 996.7 , 1011.0, 1011.4 , 968.7 , 1044.4, 1061.4 , 1084.5 , 1035.0, 984.9 , 999.1 , 969.7 , 942.0 , 937.6 , 967.3 , 988.1 , 960.6 , 954.2 , 991.1 , 954.4 , 990.7 , 950.9 , 937.6 , 968.1 , 955.4 , 966.0 , 709.3 , 622.2 , 486.8 , 951.3 , 951.3 , 911.4 , 967.5 , 896.5 , 911.0 , 967.3 , 911.2 , 953.2 , 967.2 , 927.4 , 896.4 , 952.8 , 953.4 , 670.1 , 953.3 , 599.7 , 486.5 , 966.1 , 895.8 , 909.1 , y 486.4 , re sp e c tiva m e n te (F ig u ra s 69 a 133). ;;E je m p lo e xp e rim e n ta l 2: E va lu ac ión del e fe c to de p ro te cc ió n o cu la r sob re el s ín d ro m e de l o jo seco p o r los d e riva d o s de Y D E ;;E je m p lo E xp e rim e n ta l 2.1 : P re p a ra c ió n de ra tas con s ín d ro m e de o jo seco ;;C on el fin de e va lu a r el e fe c to de p ro te cc ió n o cu la r en el s ín d ro m e del o jo seco p o r Y D E -001 a Y D E -028 p re p a ra d o en el E jem p lo de tra b a jo 1, se a da p ta ron un to ta l de 320 ra tas m a cho tip o S p ra g u e -D a w le y (O rie n tB io , S eu n gn am , C o re a ) d u ra n te 7 d ías. P os te rio rm en te , se indu jo el s ín d ro m e de l o jo seco en 264 ra tas de p ru e b a m e d ia n te e sc is ió n e x tra o rb ita l de la g lá n d u la la g rim a l (en a d e la n te , E LG E ). O ch o ra tas de p rue b a sin a n o rm a lid a d o cu la r fue ro n so m e tid a s a una o pe ra c ió n s im u la d a co m o g rup o de con tro l. ;;Las ra tas se a n e s te s ia ro n s is te m á tic a m e n te in h a la n d o un g as m ix to de 2 % a 3 % de iso flu ra n o (H a n a P harm . Co., H w a su n g , C orea ), 70 % de N2O y 28.6 % de O 2 usa nd o una m á qu ina de a ne ste s ia para ro e d o re s (S u rg ive t, W a u ke sh a , W is., E E .U U .) y un v e n tila d o r (M o d e lo 687, H arva rd A p p a ra tu s , C am b rid ge , R e ino U nido). P o s te rio rm e n te , la g lá n d u la lag rim a l e x tra o rb ita ria ub icad a en el á rea su b d é rm ica p or e nc im a del m ú scu lo m a se te ro y d e b a jo de l n e rv io ó p tico se e x tirp ó a tra vé s de una inc is ión tra n s v e rsa l de un ta m a ñ o de 10 m m en la parte a n te r io r de l tra g o de l o ído izqu ie rdo . La p ie l fue su tu ra d a p o r un m é to do genera l. El t ie m p o de o p e ra c ió n E LG E no e xce d ió los 5 m in u tos para cada rata. D e sp u é s de 6 d ía s d e sp u é s de la o pe ra c ió n E LG E , se llevó a cab o la co n firm a c ió n a tra vé s de la p ru e b a de S c h irm e r m id ie n d o la ca n tid a d de s e c re c ió n la g rim a l si se hab ía ind u c id o el s ín d ro m e de l o jo seco. M ie n tra s tan to , se co m p ro b ó la p rese nc ia y u b icac ión de la g lá n d u la lag rim a l e x tra o rb ita l a tra vé s de una inc is ión en la p ie l de cada rata de l g rup o de con tro l con la o p e ra c ió n s im u la da , y luego se su tu ró la p ie l s in e x tirp a r la (F igu ra 134). ;;El p eso p ro m e d io de l g ru p o de p ru e b a E LG E m e d id o a n te s de la o p e ra c ió n E LG E fu e de 241.59 ± 13.56 g, y el peso p ro m e d io m e d id o d e sp u é s de 6 d ías de la o pe ra c ió n E LG E fue de 297.38 ± 34.02 g. El peso p rom ed io del g rupo de co n tro l m e d ido antes de la ope ra c ió n s im u la d a fue de 240.13 ± 25.63 g, y el peso p rom ed io m edido d e sp u é s de 6 d ía s de la o p e ra c ió n s im u la d a fue de 297.38 ± 34.02 g (F ig u ra 135). ;;La ca n tid a d p ro m e d io de s e c re c ió n la g rim a l de l g ru p o co n tro l fue 8.34 ± 0.73 m m 3, y la c a n tid a d p ro m e d io de s e c re c ió n la g rim a l de l g ru p o de p ru e b a E LG E fu e 3.55 ± 0.70 m m 3. S e se le cc io n a ro n 8 ra tas p o r g ru p o y un to ta l de 32 g ru p o s en fu n c ió n de la can tid a d p rom ed io de sec re c ió n lag rim a l. ;;C om o fá rm a co de re fe ren c ia , se usó d iq u a fo so l sód ico al 3% (S a n te n , Tok io , Japón ; en a de lan te , DS), que a c tu a lm e n te se e n cu e n tra en el m ercado . ;;Las p re se n te s p ru e b a s en a n im a le s se re a liza ro n con la a p ro b a c ió n p rev ia del C om ité de É tica E xp e rim e n ta l A n im a l de la U n ive rs id a d D aegu H aa ny (A p ro b a c ió n No. D H U 2017 -003 , 12 de e ne ro de 2017 ). Se h izo q ue to d o s los a n im a le s de p rueba a yu n a ra n d u ra n te 18 horas a n te s de la o pe ra c ió n E LG E y el sa c rific io fina l, e xce p to para a lim e n ta r el agua. ;;Los 32 g ru p o s se re sum e n en la T a b la 12. ;;T a b la 12 ;; ; ;;; A d e m á s , para e va lu a r el e fe c to de p ro te cc ió n o cu la r en el s ín d ro m e del o jo seco p o r Y D E -029 a Y D E -043 p re p a ra d o en el E jem p lo de tra b a jo 1, se a da p ta ron un to ta l de 200 ra tas m a cho tip o S p ra g u e -D a w le y (O rien tB io , S eu n gn am , C o re a ) para 7 d ías. Se indu jo el s ín d ro m e de l o jo seco en 165 ra tas de p rueba a tra vé s de l E LG E . O ch o ra tas de p rueba sin la a n o rm a lid a d de l o jo fu e ro n so m e tid a s a la o pe ra c ió n s im u la d a com o g rup o de con tro l. El E LG E se llevó a ca b o com o se d e sc rib ió a n te rio rm e n te . ;;El p eso p ro m e d io de l g ru p o de p ru e b a E LG E m e d id o a n te s de la o p e ra c ió n E LG E fu e de 264.09 ± 11.53 g, y el peso p ro m e d io m e d id o d e sp u é s de 6 d ías de la o pe ra c ió n E LG E fue de 316.13 ± 15.77 g. El peso p rom ed io del g rupo de con tro l m e d id o an tes de la o pe ra c ió n s im u la d a fue de 263.50 ± 9.24 g, y el peso p rom ed io m edido d e sp u é s de 6 d ía s d e sd e la o p e ra c ió n s im u la d a fue de 315.25 ± 10.85 g (F ig u ra 136). ;;La can tid a d p rom ed io de sec re c ió n lag rim a l de l g rup o de co n tro l fue de 10.90 ± 1.69 m m 3, y la can tida d p ro m e d io de se c re c ió n lag rim a l de l g rup o de p rue b a E LG E fue de 4.83 ± 0.99 m m 3. S e s e le cc io n a ro n 8 ra tas p o r g rup o y un to ta l de 20 g ru p o s en fu n c ió n de la can tid a d p ro m e d io de se c re c ió n lag rim a l. ;;C o m o m e d ica m e n to de re fe ren c ia , se usó el 3 % DS, que a c tu a lm e n te se e n cu e n tra en el m ercado . ;;Las p re se n te s p ru e b a s con a n im a le s se re a liza ro n con la a p ro b a c ió n p rev ia de l C o m ité de É tica E xp e rim e n ta l A n im a l de la U n ive rs id a d D aegu H aa ny (A p ro b a c ió n No. D H U 2017 -050 , 08 de ju n io de 2017). S e h izo que to d o s los a n im a le s de p rueba a yu n a ra n d u ra n te 18 horas a n te s de la o pe ra c ió n E LG E y el sa c rific io fina l, e xce p to para a lim e n ta r el agua. ;;Los 20 g ru p o s se re su m ie ro n en la T a b la 13. ;;T a b la 13 ;; ;;; E je m p lo E xp e rim e n ta l 2.2 : A d m in is tra c ió n de los d e riva d o s de Y D E ;;P ara Y D E -001 a Y D E -028 , Y Y -102 y la se rie 28 Y D E se d iso lv ie ro n en so lu c ió n sa lin a fis io ló g ica a una c o n ce n tra c ió n de 3 m g /m l y se a d m in is tra ro n a una dos is de 5 p l/o jo a las 9 :30 a .m . y 3 :30 p.m . d ia ria m e n te d u ra n te 14 d ía s d e sp u é s de 7 d ía s d e sd e la o p e ra c ió n E LG E p o r un to ta l de 28 ve ce s . La so lu c ió n de DS se d iso lv ió en so lu c ió n sa lin a fis io ló g ica a una c o n ce n tra c ió n de 30 m g /m l y se a d m in is tró a una d os is de 5 p l/o jo d os ve ce s al d ía d u ra n te 14 d ías d e sp u é s de 7 d ías d esde la o pe ra c ió n E LG E d u ra n te un to ta l de 28 vece s. P ara el con tro l s im u la d o y los g ru p o s de co n tro l E LG E , se a p licó la m ism a e s tim u la c ió n q ue la a d m in is tra c ió n . P ara e v ita r la se q u e d a d o cu la r exce s iva , se a p licó el m ism o v o lu m e n de so lu c ió n sa lina fis io ló g ica de la m ism a m a n e ra en lu g a r de las s u s ta n c ia s de p rueba. ;;A d e m á s , para Y D E -029 a Y D E -043 , Y Y -102 y la se r ie 15 Y D E se d iso lv ie ro n en so lu c ió n sa lin a fis io ló g ic a a una c o n ce n tra c ió n de 3 m g /m l y se a d m in is tra ro n a una dos is de 5 p l/o jo a las 9 :30 a.m . y 3 :30 p.m . d ia ria m e n te d u ra n te 14 d ía s d e sp u é s de 7 d ía s d e sd e la o p e ra c ió n E LG E p o r un to ta l de 28 ve ce s . La so lu c ió n de DS se d iso lv ió en so lu c ió n sa lin a fis io ló g ic a a una c o n ce n tra c ió n de 30 m g /m l y se a d m in is tró a una d os is de 5 p l/o jo d os ve ce s al d ía d u ra n te 14 d ías d e sp u é s de 7 d ías d esde la o pe ra c ió n E LG E d u ra n te un to ta l de 28 vece s. P ara el co n tro l s im u la d o y los g ru p o s de con tro l E LG E , se a p licó la m ism a e s tim u la c ió n q ue la a d m in is tra c ió n . P ara e v ita r la seq ue da d o cu la r exce s iva , se a p licó el m ism o v o lu m e n de so lu c ió n sa lina fis io ló g ica de la m ism a m a n e ra en lu g a r de las s u s ta n c ia s de p rue b a (F ig u ra 137). ;;E je m p lo de p rueba 2.3: C o n firm a c ió n de los ca m b io s en la ca n tid a d de sec re c ió n lag rim a l p o r los d e riva do s Y D E ;;D e sp u é s de 6 d ía s de la c iru g ía E LG E , los ca m b io s en la can tida d de sec re c ió n lag rim a l se m id ie ron el d ía 7 y el d ía 14 d e sp u é s de la a d m in is tra c ió n de Y D E -001 a Y D E -043. La can tida d de sec re c ió n lag rim a l se m id ió p o r la d ism in u c ió n en la d is ta n c ia de re co rrid o de las lág rim as a b so rb id a s p o r el p ap e l de c lo ru ro de cob a lto en un ta m a ñ o de 1 x 15 m m (T oyo R osh i K a isha , Jap ón ). ;;El pape l de c lo ru ro de co b a lto se co lo có en el can to la te ra l de una ra ta d u ra n te 60 se g u n d o s para a b s o rb e r las lá g rim a s (F ig u ra 139). La long itud del á rea a bso rb id a d esde la e sq u in a de l papel de c lo ru ro de coba lto se m id ió con un c a lib ra d o r d ig ita l e le c tró n ico (M ytu to yo , T o k io , Ja p ó n ) (F ig u ra 138). ;;La fig u ra 139 m u e s tra los re su lta d o s de la p rueba , en la q ue A es para el g rup o de con tro l s im u la do , B es para el g rup o de co n tro l E LG E , C es p ara el g rup o de re fe re n c ia DS, D es para el g rup o a d m in is tra d o Y Y -102 y E a A F son p ara los g ru p o s a d m in is tra d o s Y D E -001 a Y D E -028 en orden . ;;C om o re su ltad o , se co n firm ó que la can tida d de sec re c ió n lag rim a l d ism in u yó d e sp u é s de 6 d ías d esde la o p e ra c ió n E LG E en los d ía s 7 y 14 d e s p u é s de la a p lica c ió n de so lu c ió n sa lin a f is io ló g ic a en e l g ru p o co n tro l E LG E en co m p a ra c ió n con el g rup o con tro l s im u la do . En los g ru p o s tra ta d o s con d e riva d o s de Y D E y el g rupo de re fe re n c ia DS, la can tid a d de sec re c ió n lag rim a l se in c re m e n tó en co m p a ra c ió n con el g rup o de con tro l E LG E , e xce p to en los g rup o s tra ta d o s con una so lu c ió n a l 0.3 % de Y D E -9 , Y D E -10 , Y D E -17 , Y D E -19 , Y D E -20, Y D E -21 , Y D E -22 , Y<d>E -25, Y D E -27 e Y D E -28 , que no m o stra ro n ca m b io s s ig n ifica tivo s en la can tid a d de se c re c ió n la g rim a l d e sp u é s de la a d m in is tra c ió n de la m ism a d u ra n te 14 d ías. E sp e c ia lm e n te , la ca n tid a d de sec re c ión lag rim a l se in c re m e n tó en m ás del 20 % en los g rup o s tra ta d o s con una so lu c ió n al 0.3 % de Y D E -15 , Y D E -11 , Y D E -08 , Y D E -26 , Y D E -16 , Y D E -01 , Y D E - 23, y y Y -102 en c o m p a ra c ió n con el g rup o de re fe ren c ia DS. ;;Las c a n tid a d e s e sp e c ífica s de se c re c ió n lag rim a l se m u e s tra n en la fig u ra 140 y la ta b la 14. ;;T a b la 14 ;; ; ;;; La fig u ra 141 m u es tra los re su lta d o s de la p rueba , en la que A es para el g rupo de con tro l s im u la do , B es para el g rup o de co n tro l E LG E , C es p ara el g rup o de re fe re n c ia DS, D es para el g rup o a d m in is tra d o Y Y -102 y E a S son p ara los g ru p o s a d m in is tra d o s Y D E -029 a Y D E -043 en orden . ;C om o re su ltad o , se co n firm ó que la can tida d de sec re c ió n lag rim a l d ism in u yó d e sp u é s de 6 d ías d esde la o p e ra c ió n E LG E en los d ía s 7 y 14 d e s p u é s de la a p lica c ió n de so lu c ió n sa lin a f is io ló g ic a en e l g ru p o co n tro l E LG E en co m p a ra c ió n con el g rup o con tro l s im u la do . En los g rup o s tra ta d o s con d e riva d o s Y D E y el g rup o de re fe re n c ia DS, la can tida d de sec re c ió n lag rim a l se in c re m e n tó en co m p a ra c ió n con el g rup o co n tro l ELG E, e xce p to en los g ru p o s tra ta d o s con una so lu c ió n al 0.3 % de Y D E -029 , Y D E -030 , Y D E -032 , Y D E -033 , Y D E -034, Y D E -036 e Y D E -41 , que no m o stra ro n ca m b io s s ig n ifica tivo s en la can tida d de secre c ión lag rim a l d espu és de la a d m in is tra c ió n de la m ism a d u ra n te 14 d ías. E sp e c ia lm e n te , la ca n tid a d de se c re c ió n la g rim a l a u m e n tó en m ás del 20 % en los g ru p o s tra ta d o s con una so lu c ió n al 0.3 % de Y D E -040 , Y D E -043 e Y D E -042 en o rden en co m p a ra c ió n con el g rup o de re fe re n c ia DS. ;Las c a n tid a d e s e sp e c ífica s de se c re c ió n lag rim a l se m u es tra n en la fig u ra 142 y la T a b la 15. ;T a b la 15 ;; ; ;;; E je m p lo E xp e rim e n ta l 2.4 : C o n firm a c ió n de los ca m b io s en el d año co rne a l p o r los d e riva d o s Y D E ;;D e sp u é s de que Y D E -001 a Y D E -028 se a dm in is tra ro n cada uno a los o jos 14 vece s, se ve rifica ro n los cam b ios en la p e rm e a b ilid a d co rnea l. ;;P ara m e d ir la p e rm ea b ilid ad cornea l, se inyectó in trap e rito n e a lm e n te a una dos is de 25 m g /kg de Z o le th y l 50TM (V irb a c Lab., C arros , F ranc ia ), un a n e s té s ico a n im a l. P o s te rio rm e n te , se a p licó so lu c ió n sa lin a q ue co n te n ía una so lu c ió n flu o re sc e n te al 1% (v /v ) (sa l de f lu o re sc e ín a sód ica , T o kyo K ase i K og yo C o., T o k io , J a p ó n ) a los o jo s a una d o s is de 5 p l/o jo . L os o jo s a s í tra ta d o s se ce rra ro n y se fija ro n con una c in ta . D e sp u é s de 1 hora, la so lu c ió n flu o re sce n te re s ta n te se e lim in ó usa nd o un b as to n c illo de a lg o dó n (F ig u ra 142). D e sp u é s de 12 hora s a 24 horas, se m id ió la p e rm e a b ilid a d co rn e a l u sando una lám pa ra de tu n g s te n o de luz azu l y un b io m ic ro sco p io de m e sa con lám pa ra de h en d id u ra o ftá lm ica (M o d e lo S M -70 N ; T a ka c i S e iko Co., N akano, Ja p ó n ) (F ig u ra 143). ;;La fig u ra 144 m u e s tra los re s u lta d o s de la p ru e b a , en la q u e A es p a ra el g ru p o de c o n tro l s im u la d o , B es p a ra el g ru p o de c o n tro l E LG E , C es p a ra el g ru p o de re fe re n c ia DS, D es p a ra el g ru p o a d m in is tra d o Y Y -102 y E a A f son p a ra los g ru p o s a d m in is tra d o s Y D E -001 a Y D E -028 en o rd e n . ;;C o m o re s u lta d o , la p e rm e a b ilid a d d e l t in te f lu o re s c e n te a u m e n tó en el g ru p o de c o n tro l E L G E en c o m p a ra c ió n con el g ru p o de c o n tro l s im u la d o . La p e rm e a b ilid a d de l c o lo ra n te f lu o re s c e n te no d is m in u y ó en lo s g ru p o s tra ta d o s con u n a s o lu c ió n al 0.3 % de Y D E -10 , Y D E -20 , Y D E -22 , Y D E -25 , Y D E -27 e Y D E -28 en c o m p a ra c ió n co n e l g ru p o de c o n tro l E L G E a l d ía 14 d e s p u é s de la a d m in is tra c ió n . En los g ru p o s tra ta d o s con d e r iv a d o s de Y D E y el g ru p o de re fe re n c ia DS, la p e rm e a b ilid a d c o rn e a l d e l c o lo ra n te f lu o re s c e n te se re d u jo en c o m p a ra c ió n con el g ru p o de c o n tro l E L G E , e x c e p to en los g ru p o s tra ta d o s con u na s o lu c ió n al 0.3 % de Y D E -10 , Y D E -20 , Y D E -22 , Y D E -25 , Y D E -27 y Y D E -28. E s p e c ia lm e n te , la p e rm e a b ilid a d de l c o lo ra n te f lu o re s c e n te d is m in u y ó en m á s de l 20% en los g ru p o s tra ta d o s con una s o lu c ió n al 0.3 % de Y D E -15 , Y D E -11 , Y D E -08 , Y D E -26 , Y D E -16 , Y D E -01 , Y D E -23 e Y Y -102 , en c o m p a ra c ió n con el g ru p o de re fe re n c ia DS. ;;Las p e rm e a b ilid a d e s e sp e c ífica s de l t in te flu o re sce n te se m u e s tra n en la fig u ra 145 y la T a b la 16. ;;T a b la 16 ;; ; ;;; A d e m á s, Y D E -029 a Y D E -043 se adm in is tra ro n cada uno a los o jos 14 vece s, y luego se ve rifica ro n los cam b ios en la p e rm e a b ilid a d cornea l. La m e d ic ión de la p e rm e a b ilid a d co rne a l se llevó a cab o de la m ism a m a ne ra que la d e sc rita a n te r io rm e n te (F ig u ra 146). ;;C om o re su ltad o , la p e rm e a b ilid a d de l t in te f lu o re sce n te a u m e n tó en el g rup o de con tro l E LG E en co m p a ra c ió n con el g rup o de co n tro l s im u la do . La p e rm e a b ilid a d de l co lo ra n te f lu o re sce n te no d ism in u yó en los g rupos tra ta d o s con una so lu c ió n al 0.3 % de Y<d>E -29, Y D E -32 , Y D E -33 , Y D E -36 e Y D E-41 en co m p a ra c ió n con el g rup o de con tro l E LG E el d ía 14 d e sp u é s la a d m in is tra c ió n . En los g rup o s tra ta d o s con d e riva d o s de Y D E y el g rup o de re fe re n c ia DS, la p e rm e a b ilid a d co rn e a l de l tin te flu o re sce n te se re du jo en co m p a ra c ió n con el g rupo de con tro l E LG E , e xce p to en los g ru p o s tra ta d o s con una so luc ión al 0.3 % de Y D E -29 , y D e - 32, Y D E -33 , Y D E -36 y Y D E -41. E sp e c ia lm e n te , la p e rm e a b ilid a d de l t in te flu o re sc e n te se re du jo en m ás de l 20 % en los g rup o s tra ta d o s con una so lu c ió n al 0 ,3 % de Y D E -40 , Y D E -43 e Y D E -42 , en c o m p a ra c ió n con el g ru p o de re fe re n c ia DS. ;;Las p e rm e a b ilid a d e s e sp e c ífica s de l t in te flu o re sce n te se m u e s tra n en la fig u ra 147 y la T a b la 17. ;T a b la 17 ;; ;;; E je m p lo e xp e rim e n ta l 3: E va lu ac ión de la e s ta b ilid a d de los d e riva d o s de Y D E ;;P ara c o n firm a r la e s ta b ilid a d de cad a su s ta n c ia de p rue b a en una so lu c ió n a cu o sa , se d iso lv ie ro n 10 m g de cad a m u es tra en 1 m l de a gu a a una co n ce n tra c ió n de 1 m g/m l, que luego se ca rgó en un v ia l de v id rio , ta p a d o con una ta p a de g om a, s e lla d o con una ta p a de a lu m in io y a lm a c e n a d o ba jo co n d ic io n e s de a lm a c e n a m ie n to a la rgo p lazo (25°C , 75% HR). La e s ta b ilid a d de la su s ta n c ia de p rue b a se e va luó m id ie n d o la can tid a d de su s ta n c ia s re la c io n a d a s en el m o m en to de una sem a na , dos sem a na s , cua tro sem a na s , o ch o sem a n a s y doce se m a n a s en co n d ic io n e s de a lm a ce n a m ie n to a la rgo p lazo. ;;C om o resu ltado , el 66.5 % de las su s ta n c ia s re la c io n a d a s se g en e ró en Y Y-101 d e sp u é s de dos sem a na s . P o r el con tra rio , de 1.1% a 30.6 % de las s u s ta n c ia s re la c io n a d a s se g en e ró en Y D E -001 a Y D E -028 d e sp u é s de 12 sem a n a s . Las ca n tid a d e s e sp e c ífica s se m u e s tra n en la T a b la 18. ;;T a b la 18 ;; ; ;;; E je m p lo de p rue b a 4: E va lu a c ió n de la re cu p e ra c ió n de l d añ o co rn e a l p o r los d e riva d o s Y D E ;;P ara c o n firm a r si los d e riva d o s de Y D E p od rían re c u p e ra r el d año corne a l, se v e r ific ó la ta s a de c re c im ie n to c e lu la r de las cé lu la s e p ite lia le s co rn e a le s p rim a ria s hum anas. ;;E sp e c ífica m e n te , se se m b ra ro n cé lu la s e p ite lia le s co rn e a le s p rim a ria s (A T C C , A T C C P C S -700 -010 ) en una p laca de cu ltivo de 96 p oc illos (P e rk in E lm er, 6005680 ) que co n te n ía el m e d io b asa l de cé lu la s e p ite lia les co rn e a le s (A T C C , A T C C P C S -700 -030 ) en el K it de c re c im ie n to de cé lu las e p ite lia le s co rn e a le s (A T c C, A T C C P C S -700 -040 ) en una can tida d de 5 * 103 cé lu la s p o r poc illo , que luego se cu ltivó d u ra n te 24 hora s en co n d ic io n e s de 37°C y 5% de C O 2.
Y D E -001 a Y D E -075 se d iso lv ie ro n cad a uno en D M S O al 100% (S igm a , D 2660 ) a una c o n ce n tra c ió n de 10 m M , que luego se d ilu yó con D M S O al 100% a una co n ce n tra c ió n del co m p u e s to de 6, 1.9, 0.6, 0.2, 0.06, 0.02, 0.006 y 0.002 m M . S e a ñ a d ie ro n 20 pl d e l d e riv a d o de Y D E d ilu id o a una m ic ro p la ca de 96 p o c illo s (G re in e r B io -O n e, 651201 ) que co n te n ía 380 pl del M e d io basa l de cé lu las e p ite lia le s co rn e a le s de m o do que la co n ce n tra c ió n de D M S O se d ilu yó al 5%.
D e sp u é s de 24 horas, se a ña d ie ro n 20 pl de cada uno de los d e riva d o s de Y D E d ilu ido s en la m ic ro p la ca de 96 p oc illos a la p laca de cu ltivo de 96 p oc illos q ue co n te n ía las cé lu las . C o m o g rup o de con tro l, se tra tó hE G F (S ig m a , E 9644 ) a la m ism a co n c e n tra c ió n q ue los d e riv a d o s de Y D E . Las c é lu la s tra ta d a s con los d e riva d o s Y D E o h E G F se cu ltiv a ro n d u ra n te 48 h o ra s y 72 h o ra s en c o n d ic io n e s de 37°C y 5% de C O 2 (F ig u ra s 148 a 155).
Las cé lu la s cu ltiva d a s se tra ta ro n con el re ac tivo lu m in isce n te C e llT ite r-G lo (P rom e ga , G 7573 ) de a cu e rd o con las in s tru cc io n e s de l fa b ric a n te y re a cc io n a ro n d u ra n te 30 m in u to s a te m p e ra tu ra am b ie n te . P os te rio rm e n te , la se ñ a l flu o re sc e n te (o señ a l de lu m in isce n c ia ) se v e r ificó u sa n d o un le c to r de p la cas de e tiq u e ta s m ú ltip les E nv is ion 2014. Los va lo re s m e d id o s se n o rm a liza ro n u sando un con tro l de ve h ícu lo (100 % de p ro life ra c ió n ce lu la r).
C om o re su ltad o , la p ro life ra c ió n ce lu la r se o b se rvó a c o n c e n tra c io n e s de 0.3 pM o m e no s en Y Y -101 , Y Y -102 , Y D E -011 , Y D E -038 , Y D E -042 , Y D E -043 , Y D E -044 , Y D E -045 , Y D E -049 , Y D E -054 , Y D E -057 , Y D E -058 , Y D E -059 y Y D E -060. E sp e c ia lm e n te , se m o stró una a lta ta s a de p ro life ra c ió n c e lu la r en Y Y -102 , Y D E -011 , Y D E -045, Y D E -057 e Y D E -060 (F ig u ra s 156 A a 173B).

Claims (16)

  1. R E IV IN D IC A C IO N E S 1. Un co m p u e s to se le cc io n a d o de la s ig u ie n te tab la :
    <N i r>
  2. 2. El co m p u e s to de la re iv in d ica c ió n 1, s e le cc io n a d o de la s ig u ie n te tab la :
  3. 3. El co m p u e s to de la re iv in d ica c ió n 2, se le cc io n a d o de la s ig u ie n te tab la :
  4. 4. El co m p u e s to de la re iv in d ica c ió n 3, s e le cc io n a d o de la s ig u ie n te tab la :
  5. 5. El c o m p u e s to de la re iv in d ica c ió n 4, que tie n e la e stru c tu ra :
  6. 6. El c o m p u e s to de la re iv in d ica c ió n 4, que tie n e la e stru c tu ra :
  7. 7. El co m p u e s to de la re iv in d ica c ió n 4, que tie n e la e stru c tu ra :
  8. 8. El co m p u e s to de la re iv in d ica c ió n 1, se le cc io n a d o de la s ig u ie n te tab la :
  9. 9. El co m p u e s to de la re iv in d ica c ió n 1, se le cc io n a d o de la s ig u ie n te tab la :
  10. 10. El co m p u e s to de la re iv in d ica c ió n que tiene la e s tru c tu ra :
  11. 11. U na com p os ic ión fa rm a cé u tica para el tra ta m ie n to de una e n fe rm e d a d ocu lar, que co m p re n d e el com p ue s to de a cu e rd o con una cu a lq u ie ra de las re iv in d ica c io n e s 1 a 10 , com o in g re d ie n te fa rm a c é u tic o activo .
  12. 12. Un co m p u e s to de a cu e rd o con una cu a lq u ie ra de las re iv in d ica c io n e s 1 a 10 , para uso en el tra ta m ie n to de una e n fe rm e d a d ocu lar.
  13. 13. Un c o m p u e s to para su uso de a cu e rd o con la re iv in d ica c ió n 12, en el que la e n fe rm e d a d o cu la r se se le cc io n a de l g rup o q ue con s is te en re tinopa tía , que ra titis , d e g e n e ra c ió n m a cu la r seca, d e g e n e ra c ió n m a cu la r húm e da , s ín d ro m e del o jo seco, q u e ra to co n ju n tiv it is se ca y tra s to rn o de l e p ite lio q u e ra to co n ju n tiva l.
  14. 14. Un co m p u e s to para uso de a cu e rdo con la re iv ind ica c ión 13, en el q ue la e n fe rm e d a d o cu la r es el s ín d rom e del o jo seco.
  15. 15. Un co m p u e s to para uso de a cu e rd o con la re iv in d ica c ió n 13, en el que la e n fe rm e d a d o cu la r es d e g e n e ra c ió n m a cu la r seca.
  16. 16. Un co m p u e s to para uso de a cu e rd o con una la re iv in d ica c ió n 13, en el que la e n fe rm e d a d o cu la r es d e g e n e ra c ió n m a cu la r húm eda .
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