ES3009460T3 - Compounds for use in regulating follicle maturation - Google Patents
Compounds for use in regulating follicle maturation Download PDFInfo
- Publication number
- ES3009460T3 ES3009460T3 ES22186835T ES22186835T ES3009460T3 ES 3009460 T3 ES3009460 T3 ES 3009460T3 ES 22186835 T ES22186835 T ES 22186835T ES 22186835 T ES22186835 T ES 22186835T ES 3009460 T3 ES3009460 T3 ES 3009460T3
- Authority
- ES
- Spain
- Prior art keywords
- compound
- follicles
- primordial
- follicle
- primary
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
- 230000035800 maturation Effects 0.000 title claims description 125
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 title abstract description 290
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 title abstract description 64
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract description 36
- 208000000509 infertility Diseases 0.000 claims abstract description 15
- 231100000535 infertility Toxicity 0.000 claims abstract description 15
- 230000036512 infertility Effects 0.000 claims abstract description 15
- 231100000502 fertility decrease Toxicity 0.000 claims abstract description 10
- 230000007704 transition Effects 0.000 claims description 78
- TZSYLWAXZMNUJB-UHFFFAOYSA-N 1-methylpyridin-1-ium-3-carboxylic acid;chloride Chemical compound [Cl-].C[N+]1=CC=CC(C(O)=O)=C1 TZSYLWAXZMNUJB-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 37
- WWNNZCOKKKDOPX-UHFFFAOYSA-N trigonelline Natural products C[N+]1=CC=CC(C([O-])=O)=C1 WWNNZCOKKKDOPX-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 27
- 208000011707 Ovulation disease Diseases 0.000 claims description 21
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 claims description 21
- 208000002500 Primary Ovarian Insufficiency Diseases 0.000 claims description 12
- 206010036601 premature menopause Diseases 0.000 claims description 12
- 201000010065 polycystic ovary syndrome Diseases 0.000 claims description 11
- 208000017942 premature ovarian failure 1 Diseases 0.000 claims description 10
- 208000018548 hypothalamic dysfunction Diseases 0.000 claims description 4
- VEEJXFUZYBSDQQ-UHFFFAOYSA-N 1-methylpyridin-1-ium-3-carbonyl chloride Chemical compound C[N+]1=CC=CC(C(Cl)=O)=C1 VEEJXFUZYBSDQQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 55
- 230000000925 erythroid effect Effects 0.000 abstract description 10
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 104
- 210000001672 ovary Anatomy 0.000 description 104
- 210000000287 oocyte Anatomy 0.000 description 81
- 230000033228 biological regulation Effects 0.000 description 32
- 102100024229 High affinity cAMP-specific and IBMX-insensitive 3',5'-cyclic phosphodiesterase 8B Human genes 0.000 description 30
- 101001117263 Homo sapiens High affinity cAMP-specific and IBMX-insensitive 3',5'-cyclic phosphodiesterase 8B Proteins 0.000 description 30
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 29
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 24
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 description 22
- 238000011282 treatment Methods 0.000 description 22
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 21
- 230000002611 ovarian Effects 0.000 description 21
- 101000855412 Homo sapiens Carbamoyl-phosphate synthase [ammonia], mitochondrial Proteins 0.000 description 20
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 20
- 102100026422 Carbamoyl-phosphate synthase [ammonia], mitochondrial Human genes 0.000 description 19
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 19
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 19
- 210000000799 primary oocyte Anatomy 0.000 description 19
- 102100022629 Fructose-2,6-bisphosphatase Human genes 0.000 description 18
- ZCVMWBYGMWKGHF-UHFFFAOYSA-N Ketotifene Chemical compound C1CN(C)CCC1=C1C2=CC=CC=C2CC(=O)C2=C1C=CS2 ZCVMWBYGMWKGHF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 18
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 18
- 229960004958 ketotifen Drugs 0.000 description 18
- DUYJMQONPNNFPI-UHFFFAOYSA-N osimertinib Chemical compound COC1=CC(N(C)CCN(C)C)=C(NC(=O)C=C)C=C1NC1=NC=CC(C=2C3=CC=CC=C3N(C)C=2)=N1 DUYJMQONPNNFPI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 18
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 18
- 210000002503 granulosa cell Anatomy 0.000 description 16
- LCQLHJZYVOQKHU-VKHMYHEASA-N carglumic acid Chemical compound NC(=O)N[C@H](C(O)=O)CCC(O)=O LCQLHJZYVOQKHU-VKHMYHEASA-N 0.000 description 15
- 101710086299 Fructose-2,6-bisphosphatase Proteins 0.000 description 14
- 101000588302 Homo sapiens Nuclear factor erythroid 2-related factor 2 Proteins 0.000 description 14
- 101000984551 Homo sapiens Tyrosine-protein kinase Blk Proteins 0.000 description 14
- 102100031701 Nuclear factor erythroid 2-related factor 2 Human genes 0.000 description 14
- 108010037543 Type 3 Cyclic Nucleotide Phosphodiesterases Proteins 0.000 description 14
- 102100027053 Tyrosine-protein kinase Blk Human genes 0.000 description 14
- 102100037094 cGMP-inhibited 3',5'-cyclic phosphodiesterase B Human genes 0.000 description 14
- KSCFJBIXMNOVSH-UHFFFAOYSA-N dyphylline Chemical compound O=C1N(C)C(=O)N(C)C2=C1N(CC(O)CO)C=N2 KSCFJBIXMNOVSH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 14
- 101001076292 Homo sapiens Insulin-like growth factor II Proteins 0.000 description 13
- 101001010823 Homo sapiens Receptor tyrosine-protein kinase erbB-4 Proteins 0.000 description 13
- 102100039688 Insulin-like growth factor 1 receptor Human genes 0.000 description 13
- 102100030485 Platelet-derived growth factor receptor alpha Human genes 0.000 description 13
- 101710148465 Platelet-derived growth factor receptor alpha Proteins 0.000 description 13
- -1 RO6839921 Chemical compound 0.000 description 13
- 102100029981 Receptor tyrosine-protein kinase erbB-4 Human genes 0.000 description 13
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 13
- 101710184277 Insulin-like growth factor 1 receptor Proteins 0.000 description 12
- 102100025947 Insulin-like growth factor II Human genes 0.000 description 12
- DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N Propylene glycol Chemical compound CC(O)CO DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- 102100037787 Protein-tyrosine kinase 2-beta Human genes 0.000 description 12
- 101710106759 Protein-tyrosine kinase 2-beta Proteins 0.000 description 12
- 239000012190 activator Substances 0.000 description 12
- 239000005557 antagonist Substances 0.000 description 12
- 235000013601 eggs Nutrition 0.000 description 12
- 230000003325 follicular Effects 0.000 description 12
- 229940068935 insulin-like growth factor 2 Drugs 0.000 description 12
- 239000012188 paraffin wax Substances 0.000 description 12
- ZFXYFBGIUFBOJW-UHFFFAOYSA-N theophylline Chemical compound O=C1N(C)C(=O)N(C)C2=C1NC=N2 ZFXYFBGIUFBOJW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- 108010011376 AMP-Activated Protein Kinases Proteins 0.000 description 11
- 102000014156 AMP-Activated Protein Kinases Human genes 0.000 description 11
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 11
- 230000037361 pathway Effects 0.000 description 11
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 11
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 11
- IVOMOUWHDPKRLL-KQYNXXCUSA-N Cyclic adenosine monophosphate Chemical compound C([C@H]1O2)OP(O)(=O)O[C@H]1[C@@H](O)[C@@H]2N1C(N=CN=C2N)=C2N=C1 IVOMOUWHDPKRLL-KQYNXXCUSA-N 0.000 description 10
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 10
- 229960002819 diprophylline Drugs 0.000 description 10
- XHBVYDAKJHETMP-UHFFFAOYSA-N dorsomorphin Chemical compound C=1C=C(C2=CN3N=CC(=C3N=C2)C=2C=CN=CC=2)C=CC=1OCCN1CCCCC1 XHBVYDAKJHETMP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- 230000014509 gene expression Effects 0.000 description 10
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 10
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 9
- 229960003278 osimertinib Drugs 0.000 description 9
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 9
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 9
- CLRSLRWKONPSRQ-CPOWQTMSSA-N (1s)-1-(4-chlorophenyl)-6-methoxy-2-[4-[methyl-[[4-(4-methyl-3-oxopiperazin-1-yl)cyclohexyl]methyl]amino]phenyl]-7-propan-2-yloxy-1,4-dihydroisoquinolin-3-one Chemical compound C1([C@@H]2N(C(=O)CC=3C=C(C(=CC=32)OC(C)C)OC)C=2C=CC(=CC=2)N(C)CC2CCC(CC2)N2CC(=O)N(C)CC2)=CC=C(Cl)C=C1 CLRSLRWKONPSRQ-CPOWQTMSSA-N 0.000 description 8
- LPFWVDIFUFFKJU-UHFFFAOYSA-N 1-[4-[4-(3,4-dichloro-2-fluoroanilino)-7-methoxyquinazolin-6-yl]oxypiperidin-1-yl]prop-2-en-1-one Chemical compound C=12C=C(OC3CCN(CC3)C(=O)C=C)C(OC)=CC2=NC=NC=1NC1=CC=C(Cl)C(Cl)=C1F LPFWVDIFUFFKJU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- CEGSUKYESLWKJP-UHFFFAOYSA-N 1-n-[2-(1h-indol-3-yl)ethyl]-4-n-pyridin-4-ylbenzene-1,4-diamine Chemical compound C=1NC2=CC=CC=C2C=1CCNC(C=C1)=CC=C1NC1=CC=NC=C1 CEGSUKYESLWKJP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- DRLCSJFKKILATL-YWCVFVGNSA-N 2-[(3r,5r,6s)-5-(3-chlorophenyl)-6-(4-chlorophenyl)-3-methyl-1-[(2s)-3-methyl-1-propan-2-ylsulfonylbutan-2-yl]-2-oxopiperidin-3-yl]acetic acid Chemical compound C1([C@@H]2[C@H](N(C([C@@](C)(CC(O)=O)C2)=O)[C@H](CS(=O)(=O)C(C)C)C(C)C)C=2C=CC(Cl)=CC=2)=CC=CC(Cl)=C1 DRLCSJFKKILATL-YWCVFVGNSA-N 0.000 description 8
- OCCZJXAHSUCJSA-UHFFFAOYSA-N 5-methyl-1h-1,6-naphthyridin-2-one Chemical compound N1C(=O)C=CC2=C1C=CN=C2C OCCZJXAHSUCJSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- UHDGCWIWMRVCDJ-CCXZUQQUSA-N Cytarabine Chemical compound O=C1N=C(N)C=CN1[C@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 UHDGCWIWMRVCDJ-CCXZUQQUSA-N 0.000 description 8
- 206010062767 Hypophysitis Diseases 0.000 description 8
- BYPFEZZEUUWMEJ-UHFFFAOYSA-N Pentoxifylline Chemical compound O=C1N(CCCCC(=O)C)C(=O)N(C)C2=C1N(C)C=N2 BYPFEZZEUUWMEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- JLRGJRBPOGGCBT-UHFFFAOYSA-N Tolbutamide Chemical compound CCCCNC(=O)NS(=O)(=O)C1=CC=C(C)C=C1 JLRGJRBPOGGCBT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- LUJZZYWHBDHDQX-QFIPXVFZSA-N [(3s)-morpholin-3-yl]methyl n-[4-[[1-[(3-fluorophenyl)methyl]indazol-5-yl]amino]-5-methylpyrrolo[2,1-f][1,2,4]triazin-6-yl]carbamate Chemical compound C=1N2N=CN=C(NC=3C=C4C=NN(CC=5C=C(F)C=CC=5)C4=CC=3)C2=C(C)C=1NC(=O)OC[C@@H]1COCCN1 LUJZZYWHBDHDQX-QFIPXVFZSA-N 0.000 description 8
- QBGKPEROWUKSBK-QPPIDDCLSA-N [(4s,5r)-2-(4-tert-butyl-2-ethoxyphenyl)-4,5-bis(4-chlorophenyl)-4,5-dimethylimidazol-1-yl]-[4-(3-methylsulfonylpropyl)piperazin-1-yl]methanone Chemical compound CCOC1=CC(C(C)(C)C)=CC=C1C(N([C@]1(C)C=2C=CC(Cl)=CC=2)C(=O)N2CCN(CCCS(C)(=O)=O)CC2)=N[C@@]1(C)C1=CC=C(Cl)C=C1 QBGKPEROWUKSBK-QPPIDDCLSA-N 0.000 description 8
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 8
- ULXXDDBFHOBEHA-CWDCEQMOSA-N afatinib Chemical compound N1=CN=C2C=C(O[C@@H]3COCC3)C(NC(=O)/C=C/CN(C)C)=CC2=C1NC1=CC=C(F)C(Cl)=C1 ULXXDDBFHOBEHA-CWDCEQMOSA-N 0.000 description 8
- RNLQIBCLLYYYFJ-UHFFFAOYSA-N amrinone Chemical compound N1C(=O)C(N)=CC(C=2C=CN=CC=2)=C1 RNLQIBCLLYYYFJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 8
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 8
- RRGUKTPIGVIEKM-UHFFFAOYSA-N cilostazol Chemical compound C=1C=C2NC(=O)CCC2=CC=1OCCCCC1=NN=NN1C1CCCCC1 RRGUKTPIGVIEKM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- IZEKFCXSFNUWAM-UHFFFAOYSA-N dipyridamole Chemical compound C=12N=C(N(CCO)CCO)N=C(N3CCCCC3)C2=NC(N(CCO)CCO)=NC=1N1CCCCC1 IZEKFCXSFNUWAM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 8
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 8
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 8
- JWNPDZNEKVCWMY-VQHVLOKHSA-N neratinib Chemical compound C=12C=C(NC(=O)\C=C\CN(C)C)C(OCC)=CC2=NC=C(C#N)C=1NC(C=C1Cl)=CC=C1OCC1=CC=CC=N1 JWNPDZNEKVCWMY-VQHVLOKHSA-N 0.000 description 8
- 210000003635 pituitary gland Anatomy 0.000 description 8
- TVTXCJFHQKSQQM-LJQIRTBHSA-N 4-[[(2r,3s,4r,5s)-3-(3-chloro-2-fluorophenyl)-4-(4-chloro-2-fluorophenyl)-4-cyano-5-(2,2-dimethylpropyl)pyrrolidine-2-carbonyl]amino]-3-methoxybenzoic acid Chemical compound COC1=CC(C(O)=O)=CC=C1NC(=O)[C@H]1[C@H](C=2C(=C(Cl)C=CC=2)F)[C@@](C#N)(C=2C(=CC(Cl)=CC=2)F)[C@H](CC(C)(C)C)N1 TVTXCJFHQKSQQM-LJQIRTBHSA-N 0.000 description 7
- 108010011536 PTEN Phosphohydrolase Proteins 0.000 description 7
- 102000014160 PTEN Phosphohydrolase Human genes 0.000 description 7
- CBPNZQVSJQDFBE-FUXHJELOSA-N Temsirolimus Chemical compound C1C[C@@H](OC(=O)C(C)(CO)CO)[C@H](OC)C[C@@H]1C[C@@H](C)[C@H]1OC(=O)[C@@H]2CCCCN2C(=O)C(=O)[C@](O)(O2)[C@H](C)CC[C@H]2C[C@H](OC)/C(C)=C/C=C/C=C/[C@@H](C)C[C@@H](C)C(=O)[C@H](OC)[C@H](O)/C(C)=C/[C@@H](C)C(=O)C1 CBPNZQVSJQDFBE-FUXHJELOSA-N 0.000 description 7
- 239000000556 agonist Substances 0.000 description 7
- 229950006647 cixutumumab Drugs 0.000 description 7
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 7
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 7
- 229950009645 istiratumab Drugs 0.000 description 7
- WVUNYSQLFKLYNI-AATRIKPKSA-N pelitinib Chemical compound C=12C=C(NC(=O)\C=C\CN(C)C)C(OCC)=CC2=NC=C(C#N)C=1NC1=CC=C(F)C(Cl)=C1 WVUNYSQLFKLYNI-AATRIKPKSA-N 0.000 description 7
- YJGVMLPVUAXIQN-HAEOHBJNSA-N picropodophyllotoxin Chemical compound COC1=C(OC)C(OC)=CC([C@@H]2C3=CC=4OCOC=4C=C3[C@H](O)[C@@H]3[C@H]2C(OC3)=O)=C1 YJGVMLPVUAXIQN-HAEOHBJNSA-N 0.000 description 7
- AGBSXNCBIWWLHD-FQEVSTJZSA-N siremadlin Chemical compound COC1=NC(OC)=NC=C1C(N1C(C)C)=NC2=C1[C@H](C=1C=CC(Cl)=CC=1)N(C=1C(N(C)C=C(Cl)C=1)=O)C2=O AGBSXNCBIWWLHD-FQEVSTJZSA-N 0.000 description 7
- 229960000235 temsirolimus Drugs 0.000 description 7
- QFJCIRLUMZQUOT-UHFFFAOYSA-N temsirolimus Natural products C1CC(O)C(OC)CC1CC(C)C1OC(=O)C2CCCCN2C(=O)C(=O)C(O)(O2)C(C)CCC2CC(OC)C(C)=CC=CC=CC(C)CC(C)C(=O)C(OC)C(O)C(C)=CC(C)C(=O)C1 QFJCIRLUMZQUOT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- ALKJNCZNEOTEMP-UHFFFAOYSA-N 4-n-(5-cyclopropyl-1h-pyrazol-3-yl)-6-(4-methylpiperazin-1-yl)-2-n-[(3-propan-2-yl-1,2-oxazol-5-yl)methyl]pyrimidine-2,4-diamine Chemical compound O1N=C(C(C)C)C=C1CNC1=NC(NC=2NN=C(C=2)C2CC2)=CC(N2CCN(C)CC2)=N1 ALKJNCZNEOTEMP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 102000012199 E3 ubiquitin-protein ligase Mdm2 Human genes 0.000 description 6
- WZUVPPKBWHMQCE-UHFFFAOYSA-N Haematoxylin Chemical compound C12=CC(O)=C(O)C=C2CC2(O)C1C1=CC=C(O)C(O)=C1OC2 WZUVPPKBWHMQCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 101000599951 Homo sapiens Insulin-like growth factor I Proteins 0.000 description 6
- 238000011161 development Methods 0.000 description 6
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 6
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 description 6
- 229940088597 hormone Drugs 0.000 description 6
- 239000005556 hormone Substances 0.000 description 6
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 6
- 230000001737 promoting effect Effects 0.000 description 6
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 6
- QFJCIRLUMZQUOT-HPLJOQBZSA-N sirolimus Chemical class C1C[C@@H](O)[C@H](OC)C[C@@H]1C[C@@H](C)[C@H]1OC(=O)[C@@H]2CCCCN2C(=O)C(=O)[C@](O)(O2)[C@H](C)CC[C@H]2C[C@H](OC)/C(C)=C/C=C/C=C/[C@@H](C)C[C@@H](C)C(=O)[C@H](OC)[C@H](O)/C(C)=C/[C@@H](C)C(=O)C1 QFJCIRLUMZQUOT-HPLJOQBZSA-N 0.000 description 6
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 6
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 6
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- UOWGYMNWMDNSTL-ONEGZZNKSA-N 3PO Chemical compound C=1C=NC=CC=1C(=O)\C=C\C1=CC=CN=C1 UOWGYMNWMDNSTL-ONEGZZNKSA-N 0.000 description 5
- MPLLLQUZNJSVTK-UHFFFAOYSA-N 5-[3-[4-[2-(4-fluorophenyl)ethoxy]phenyl]propyl]furan-2-carboxylic acid Chemical compound O1C(C(=O)O)=CC=C1CCCC(C=C1)=CC=C1OCCC1=CC=C(F)C=C1 MPLLLQUZNJSVTK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 102100037852 Insulin-like growth factor I Human genes 0.000 description 5
- 239000012819 MDM2-Inhibitor Substances 0.000 description 5
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 5
- IDSGFSCSMXRJON-UHFFFAOYSA-N N-Carbamyl-L-glutamicacid Chemical compound C1=CC([N+](=O)[O-])=CC=C1CC1=CC=CC=C1 IDSGFSCSMXRJON-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 5
- 108010022678 Phosphofructokinase-2 Proteins 0.000 description 5
- 230000003197 catalytic effect Effects 0.000 description 5
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 5
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 5
- 238000000370 laser capture micro-dissection Methods 0.000 description 5
- ZFLWDHHVRRZMEI-UHFFFAOYSA-N methyl 2,6-dimethyl-5-nitro-4-[2-(trifluoromethyl)phenyl]-1,4-dihydropyridine-3-carboxylate Chemical compound COC(=O)C1=C(C)NC(C)=C([N+]([O-])=O)C1C1=CC=CC=C1C(F)(F)F ZFLWDHHVRRZMEI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- PKCDDUHJAFVJJB-UHFFFAOYSA-N 3-[8-amino-1-(2-phenyl-7-quinolinyl)-3-imidazo[1,5-a]pyrazinyl]-1-methyl-1-cyclobutanol Chemical compound C1C(C)(O)CC1C1=NC(C=2C=C3N=C(C=CC3=CC=2)C=2C=CC=CC=2)=C2N1C=CN=C2N PKCDDUHJAFVJJB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- GZSKEXSLDPEFPT-UHFFFAOYSA-N 4-amino-n-(1-azabicyclo[3.3.1]nonan-4-yl)-5-chloro-2-methoxybenzamide Chemical compound COC1=CC(N)=C(Cl)C=C1C(=O)NC1C(C2)CCCN2CC1 GZSKEXSLDPEFPT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-O Ammonium Chemical compound [NH4+] QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-O 0.000 description 4
- MLDQJTXFUGDVEO-UHFFFAOYSA-N BAY-43-9006 Chemical compound C1=NC(C(=O)NC)=CC(OC=2C=CC(NC(=O)NC=3C=C(C(Cl)=CC=3)C(F)(F)F)=CC=2)=C1 MLDQJTXFUGDVEO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- ZBNZXTGUTAYRHI-UHFFFAOYSA-N Dasatinib Chemical compound C=1C(N2CCN(CCO)CC2)=NC(C)=NC=1NC(S1)=NC=C1C(=O)NC1=C(C)C=CC=C1Cl ZBNZXTGUTAYRHI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 229940083338 MDM2 inhibitor Drugs 0.000 description 4
- 102000008135 Mechanistic Target of Rapamycin Complex 1 Human genes 0.000 description 4
- 108010035196 Mechanistic Target of Rapamycin Complex 1 Proteins 0.000 description 4
- MZDKLVOWGIOKTN-UHFFFAOYSA-N N-methyl-N-[3-[[[2-[(2-oxo-1,3-dihydroindol-5-yl)amino]-5-(trifluoromethyl)-4-pyrimidinyl]amino]methyl]-2-pyridinyl]methanesulfonamide Chemical compound CS(=O)(=O)N(C)C1=NC=CC=C1CNC1=NC(NC=2C=C3CC(=O)NC3=CC=2)=NC=C1C(F)(F)F MZDKLVOWGIOKTN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 102000038030 PI3Ks Human genes 0.000 description 4
- 108091007960 PI3Ks Proteins 0.000 description 4
- 229940123940 PTEN inhibitor Drugs 0.000 description 4
- 239000002202 Polyethylene glycol Substances 0.000 description 4
- 238000003559 RNA-seq method Methods 0.000 description 4
- 108010065917 TOR Serine-Threonine Kinases Proteins 0.000 description 4
- 102000013530 TOR Serine-Threonine Kinases Human genes 0.000 description 4
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 4
- 229960001686 afatinib Drugs 0.000 description 4
- 229960002105 amrinone Drugs 0.000 description 4
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 4
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 4
- 125000002915 carbonyl group Chemical group [*:2]C([*:1])=O 0.000 description 4
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 4
- 229960004588 cilostazol Drugs 0.000 description 4
- 229960002482 dalotuzumab Drugs 0.000 description 4
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 4
- 229960002768 dipyridamole Drugs 0.000 description 4
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 4
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 description 4
- 238000010201 enrichment analysis Methods 0.000 description 4
- 229950004896 ganitumab Drugs 0.000 description 4
- 230000034659 glycolysis Effects 0.000 description 4
- 210000003016 hypothalamus Anatomy 0.000 description 4
- 229950002843 idasanutlin Drugs 0.000 description 4
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 4
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 4
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 4
- 229950001762 linsitinib Drugs 0.000 description 4
- PKCDDUHJAFVJJB-VLZXCDOPSA-N linsitinib Chemical compound C1[C@](C)(O)C[C@@H]1C1=NC(C=2C=C3N=C(C=CC3=CC=2)C=2C=CC=CC=2)=C2N1C=CN=C2N PKCDDUHJAFVJJB-VLZXCDOPSA-N 0.000 description 4
- 239000000463 material Substances 0.000 description 4
- 229950001826 medorinone Drugs 0.000 description 4
- 229950008835 neratinib Drugs 0.000 description 4
- HHZIURLSWUIHRB-UHFFFAOYSA-N nilotinib Chemical compound C1=NC(C)=CN1C1=CC(NC(=O)C=2C=C(NC=3N=C(C=CN=3)C=3C=NC=CC=3)C(C)=CC=2)=CC(C(F)(F)F)=C1 HHZIURLSWUIHRB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 4
- 230000016087 ovulation Effects 0.000 description 4
- 229950006299 pelitinib Drugs 0.000 description 4
- 229960001476 pentoxifylline Drugs 0.000 description 4
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 description 4
- 229950009876 poziotinib Drugs 0.000 description 4
- 230000002028 premature Effects 0.000 description 4
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 description 4
- 230000008569 process Effects 0.000 description 4
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 description 4
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 description 4
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 4
- 230000001850 reproductive effect Effects 0.000 description 4
- 238000011160 research Methods 0.000 description 4
- 238000012163 sequencing technique Methods 0.000 description 4
- 229950007933 serdemetan Drugs 0.000 description 4
- 238000007619 statistical method Methods 0.000 description 4
- 230000004936 stimulating effect Effects 0.000 description 4
- 230000035882 stress Effects 0.000 description 4
- VDLGAZDAHPLOIR-VAZUXJHFSA-N sulanemadlin Chemical compound CC(C)C[C@H](NC(C)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@]2(C)CCCCCC\C=C\CCC[C@](C)(NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CC3=CNC4=CC=CC=C34)NC(=O)[C@H](CC5=CC=C(O)C=C5)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC2=O)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@H](C)C(N)=O VDLGAZDAHPLOIR-VAZUXJHFSA-N 0.000 description 4
- 239000003826 tablet Substances 0.000 description 4
- 229960000278 theophylline Drugs 0.000 description 4
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 4
- 229960005371 tolbutamide Drugs 0.000 description 4
- YJCZPJQGFSSFOL-MNZPCBJKSA-N CCN1[C@H]([C@H](C2=CC=CC(Cl)=C2F)[C@]2(C(=O)NC3=CC(Cl)=CC=C23)C11CCCCC1)C(=O)NC12CCC(CC1)(CC2)C(O)=O Chemical compound CCN1[C@H]([C@H](C2=CC=CC(Cl)=C2F)[C@]2(C(=O)NC3=CC(Cl)=CC=C23)C11CCCCC1)C(=O)NC12CCC(CC1)(CC2)C(O)=O YJCZPJQGFSSFOL-MNZPCBJKSA-N 0.000 description 3
- 101150027068 DEGS1 gene Proteins 0.000 description 3
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 102000009151 Luteinizing Hormone Human genes 0.000 description 3
- 108010073521 Luteinizing Hormone Proteins 0.000 description 3
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 3
- CTQNGGLPUBDAKN-UHFFFAOYSA-N O-Xylene Chemical compound CC1=CC=CC=C1C CTQNGGLPUBDAKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 102000003946 Prolactin Human genes 0.000 description 3
- 108010057464 Prolactin Proteins 0.000 description 3
- 102000001253 Protein Kinase Human genes 0.000 description 3
- UDMBCSSLTHHNCD-KQYNXXCUSA-N adenosine 5'-monophosphate Chemical compound C1=NC=2C(N)=NC=NC=2N1[C@@H]1O[C@H](COP(O)(O)=O)[C@@H](O)[C@H]1O UDMBCSSLTHHNCD-KQYNXXCUSA-N 0.000 description 3
- 230000003042 antagnostic effect Effects 0.000 description 3
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 3
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 3
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 description 3
- 239000002270 dispersing agent Substances 0.000 description 3
- 230000005059 dormancy Effects 0.000 description 3
- YQGOJNYOYNNSMM-UHFFFAOYSA-N eosin Chemical compound [Na+].OC(=O)C1=CC=CC=C1C1=C2C=C(Br)C(=O)C(Br)=C2OC2=C(Br)C(O)=C(Br)C=C21 YQGOJNYOYNNSMM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- YJGVMLPVUAXIQN-UHFFFAOYSA-N epipodophyllotoxin Natural products COC1=C(OC)C(OC)=CC(C2C3=CC=4OCOC=4C=C3C(O)C3C2C(OC3)=O)=C1 YJGVMLPVUAXIQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 230000004720 fertilization Effects 0.000 description 3
- 230000006870 function Effects 0.000 description 3
- 239000008187 granular material Substances 0.000 description 3
- 238000007490 hematoxylin and eosin (H&E) staining Methods 0.000 description 3
- 208000031424 hyperprolactinemia Diseases 0.000 description 3
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 3
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 3
- 208000021267 infertility disease Diseases 0.000 description 3
- 230000000366 juvenile effect Effects 0.000 description 3
- 229940043355 kinase inhibitor Drugs 0.000 description 3
- 229940040129 luteinizing hormone Drugs 0.000 description 3
- 238000013507 mapping Methods 0.000 description 3
- 210000004379 membrane Anatomy 0.000 description 3
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 3
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 3
- 239000003757 phosphotransferase inhibitor Substances 0.000 description 3
- 229940097325 prolactin Drugs 0.000 description 3
- 108060006633 protein kinase Proteins 0.000 description 3
- 102000019075 protein serine/threonine/tyrosine kinase activity proteins Human genes 0.000 description 3
- 108040008258 protein serine/threonine/tyrosine kinase activity proteins Proteins 0.000 description 3
- ZAHRKKWIAAJSAO-UHFFFAOYSA-N rapamycin Natural products COCC(O)C(=C/C(C)C(=O)CC(OC(=O)C1CCCCN1C(=O)C(=O)C2(O)OC(CC(OC)C(=CC=CC=CC(C)CC(C)C(=O)C)C)CCC2C)C(C)CC3CCC(O)C(C3)OC)C ZAHRKKWIAAJSAO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 229960002930 sirolimus Drugs 0.000 description 3
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 description 3
- 239000000375 suspending agent Substances 0.000 description 3
- 239000008096 xylene Substances 0.000 description 3
- SADXACCFNXBCFY-IYNHSRRRSA-N (e)-n-[4-[3-chloro-4-(pyridin-2-ylmethoxy)anilino]-3-cyano-7-ethoxyquinolin-6-yl]-3-[(2r)-1-methylpyrrolidin-2-yl]prop-2-enamide Chemical compound C=12C=C(NC(=O)\C=C\[C@@H]3N(CCC3)C)C(OCC)=CC2=NC=C(C#N)C=1NC(C=C1Cl)=CC=C1OCC1=CC=CC=N1 SADXACCFNXBCFY-IYNHSRRRSA-N 0.000 description 2
- 230000007730 Akt signaling Effects 0.000 description 2
- 108700032225 Antioxidant Response Elements Proteins 0.000 description 2
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 101150012716 CDK1 gene Proteins 0.000 description 2
- GSXOAOHZAIYLCY-UHFFFAOYSA-N D-F6P Natural products OCC(=O)C(O)C(O)C(O)COP(O)(O)=O GSXOAOHZAIYLCY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 101001098806 Dictyostelium discoideum cGMP-specific 3',5'-cGMP phosphodiesterase 3 Proteins 0.000 description 2
- 108050002772 E3 ubiquitin-protein ligase Mdm2 Proteins 0.000 description 2
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 2
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 2
- 108010086677 Gonadotropins Proteins 0.000 description 2
- 102000006771 Gonadotropins Human genes 0.000 description 2
- 101001034652 Homo sapiens Insulin-like growth factor 1 receptor Proteins 0.000 description 2
- 102000012435 Phosphofructokinase-1 Human genes 0.000 description 2
- 108010022684 Phosphofructokinase-1 Proteins 0.000 description 2
- 108090001050 Phosphoric Diester Hydrolases Proteins 0.000 description 2
- 102100033810 RAC-alpha serine/threonine-protein kinase Human genes 0.000 description 2
- 101710100969 Receptor tyrosine-protein kinase erbB-3 Proteins 0.000 description 2
- 102100029986 Receptor tyrosine-protein kinase erbB-3 Human genes 0.000 description 2
- 241000283984 Rodentia Species 0.000 description 2
- DPXJVFZANSGRMM-UHFFFAOYSA-N acetic acid;2,3,4,5,6-pentahydroxyhexanal;sodium Chemical compound [Na].CC(O)=O.OCC(O)C(O)C(O)C(O)C=O DPXJVFZANSGRMM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 description 2
- 230000002411 adverse Effects 0.000 description 2
- 150000001413 amino acids Chemical group 0.000 description 2
- 239000007900 aqueous suspension Substances 0.000 description 2
- 239000008135 aqueous vehicle Substances 0.000 description 2
- BGWGXPAPYGQALX-ARQDHWQXSA-N beta-D-fructofuranose 6-phosphate Chemical compound OC[C@@]1(O)O[C@H](COP(O)(O)=O)[C@@H](O)[C@@H]1O BGWGXPAPYGQALX-ARQDHWQXSA-N 0.000 description 2
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 2
- 238000001574 biopsy Methods 0.000 description 2
- 210000002459 blastocyst Anatomy 0.000 description 2
- 239000001768 carboxy methyl cellulose Substances 0.000 description 2
- 229960002779 carglumic acid Drugs 0.000 description 2
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 2
- 230000006369 cell cycle progression Effects 0.000 description 2
- 230000008859 change Effects 0.000 description 2
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 2
- 238000002512 chemotherapy Methods 0.000 description 2
- 239000003086 colorant Substances 0.000 description 2
- 210000005257 cortical tissue Anatomy 0.000 description 2
- 210000000805 cytoplasm Anatomy 0.000 description 2
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 2
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 2
- 239000003995 emulsifying agent Substances 0.000 description 2
- 230000001804 emulsifying effect Effects 0.000 description 2
- 229940011871 estrogen Drugs 0.000 description 2
- 239000000262 estrogen Substances 0.000 description 2
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 2
- 239000000796 flavoring agent Substances 0.000 description 2
- 230000008217 follicular development Effects 0.000 description 2
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 description 2
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 2
- 239000002622 gonadotropin Substances 0.000 description 2
- 238000001802 infusion Methods 0.000 description 2
- HQKMJHAJHXVSDF-UHFFFAOYSA-L magnesium stearate Chemical compound [Mg+2].CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O.CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O HQKMJHAJHXVSDF-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 230000036210 malignancy Effects 0.000 description 2
- 230000008774 maternal effect Effects 0.000 description 2
- 230000009245 menopause Effects 0.000 description 2
- 229920000609 methyl cellulose Polymers 0.000 description 2
- 125000002496 methyl group Chemical group [H]C([H])([H])* 0.000 description 2
- 239000001923 methylcellulose Substances 0.000 description 2
- 235000010981 methylcellulose Nutrition 0.000 description 2
- 238000000386 microscopy Methods 0.000 description 2
- 230000000877 morphologic effect Effects 0.000 description 2
- KJBZQIKLKWQVLL-UHFFFAOYSA-N n-[4-(3-chloro-4-fluoroanilino)-7-[(7-methyl-7-azaspiro[3.5]nonan-2-yl)methoxy]quinazolin-6-yl]prop-2-enamide Chemical compound C1CN(C)CCC11CC(COC=2C(=CC3=C(NC=4C=C(Cl)C(F)=CC=4)N=CN=C3C=2)NC(=O)C=C)C1 KJBZQIKLKWQVLL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000009806 oophorectomy Methods 0.000 description 2
- 150000007524 organic acids Chemical class 0.000 description 2
- 150000002895 organic esters Chemical class 0.000 description 2
- 238000007911 parenteral administration Methods 0.000 description 2
- 108010017843 platelet-derived growth factor A Proteins 0.000 description 2
- 230000002335 preservative effect Effects 0.000 description 2
- 230000006337 proteolytic cleavage Effects 0.000 description 2
- YAAWASYJIRZXSZ-UHFFFAOYSA-N pyrimidine-2,4-diamine Chemical compound NC1=CC=NC(N)=N1 YAAWASYJIRZXSZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229940075576 pyrotinib Drugs 0.000 description 2
- 150000003384 small molecules Chemical class 0.000 description 2
- 235000019812 sodium carboxymethyl cellulose Nutrition 0.000 description 2
- 229920001027 sodium carboxymethylcellulose Polymers 0.000 description 2
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 description 2
- UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N streptomycin Chemical compound CN[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@](C=O)(O)[C@H](C)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@H]1O UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N 0.000 description 2
- 230000008093 supporting effect Effects 0.000 description 2
- 238000012353 t test Methods 0.000 description 2
- 230000008685 targeting Effects 0.000 description 2
- 239000002562 thickening agent Substances 0.000 description 2
- 239000003440 toxic substance Substances 0.000 description 2
- 238000011222 transcriptome analysis Methods 0.000 description 2
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 2
- 235000015112 vegetable and seed oil Nutrition 0.000 description 2
- 239000008158 vegetable oil Substances 0.000 description 2
- 239000003981 vehicle Substances 0.000 description 2
- 235000012431 wafers Nutrition 0.000 description 2
- 238000009736 wetting Methods 0.000 description 2
- 239000000080 wetting agent Substances 0.000 description 2
- 229950008915 xentuzumab Drugs 0.000 description 2
- OSCCDBFHNMXNME-WDCZJNDASA-N (2s,3s,4r)-2-amino-4-hydroxy-3-methylpentanoic acid Chemical compound C[C@@H](O)[C@@H](C)[C@H](N)C(O)=O OSCCDBFHNMXNME-WDCZJNDASA-N 0.000 description 1
- ZORQXIQZAOLNGE-UHFFFAOYSA-N 1,1-difluorocyclohexane Chemical compound FC1(F)CCCCC1 ZORQXIQZAOLNGE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- IIZPXYDJLKNOIY-JXPKJXOSSA-N 1-palmitoyl-2-arachidonoyl-sn-glycero-3-phosphocholine Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP([O-])(=O)OCC[N+](C)(C)C)OC(=O)CCC\C=C/C\C=C/C\C=C/C\C=C/CCCCC IIZPXYDJLKNOIY-JXPKJXOSSA-N 0.000 description 1
- VOXZDWNPVJITMN-ZBRFXRBCSA-N 17β-estradiol Chemical compound OC1=CC=C2[C@H]3CC[C@](C)([C@H](CC4)O)[C@@H]4[C@@H]3CCC2=C1 VOXZDWNPVJITMN-ZBRFXRBCSA-N 0.000 description 1
- 102100036009 5'-AMP-activated protein kinase catalytic subunit alpha-2 Human genes 0.000 description 1
- 208000002874 Acne Vulgaris Diseases 0.000 description 1
- 201000000736 Amenorrhea Diseases 0.000 description 1
- 206010001928 Amenorrhoea Diseases 0.000 description 1
- 101100297694 Arabidopsis thaliana PIP2-7 gene Proteins 0.000 description 1
- 241000416162 Astragalus gummifer Species 0.000 description 1
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 description 1
- 101150071519 CPS1 gene Proteins 0.000 description 1
- 239000004375 Dextrin Substances 0.000 description 1
- 229920001353 Dextrin Polymers 0.000 description 1
- 101100296720 Dictyostelium discoideum Pde4 gene Proteins 0.000 description 1
- 101100407340 Drosophila melanogaster Pde8 gene Proteins 0.000 description 1
- 208000030814 Eating disease Diseases 0.000 description 1
- LVGKNOAMLMIIKO-UHFFFAOYSA-N Elaidinsaeure-aethylester Natural products CCCCCCCCC=CCCCCCCCC(=O)OCC LVGKNOAMLMIIKO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000019454 Feeding and Eating disease Diseases 0.000 description 1
- 208000007984 Female Infertility Diseases 0.000 description 1
- YXWOAJXNVLXPMU-ZXXMMSQZSA-N Fructose 2,6-diphosphate Chemical compound OP(=O)(O)O[C@]1(CO)O[C@H](COP(O)(O)=O)[C@@H](O)[C@@H]1O YXWOAJXNVLXPMU-ZXXMMSQZSA-N 0.000 description 1
- 108091006027 G proteins Proteins 0.000 description 1
- 102000003688 G-Protein-Coupled Receptors Human genes 0.000 description 1
- 108090000045 G-Protein-Coupled Receptors Proteins 0.000 description 1
- 102000030782 GTP binding Human genes 0.000 description 1
- 108091000058 GTP-Binding Proteins 0.000 description 1
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 description 1
- 108700039691 Genetic Promoter Regions Proteins 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 1
- 102000003886 Glycoproteins Human genes 0.000 description 1
- 108090000288 Glycoproteins Proteins 0.000 description 1
- 206010019044 Hair growth abnormal Diseases 0.000 description 1
- 101000783681 Homo sapiens 5'-AMP-activated protein kinase catalytic subunit alpha-2 Proteins 0.000 description 1
- 101001098818 Homo sapiens cGMP-inhibited 3',5'-cyclic phosphodiesterase A Proteins 0.000 description 1
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 description 1
- 208000026350 Inborn Genetic disease Diseases 0.000 description 1
- 206010021928 Infertility female Diseases 0.000 description 1
- 206010022489 Insulin Resistance Diseases 0.000 description 1
- 102000048143 Insulin-Like Growth Factor II Human genes 0.000 description 1
- 108090001117 Insulin-Like Growth Factor II Proteins 0.000 description 1
- 101150048929 Kl gene Proteins 0.000 description 1
- AGPKZVBTJJNPAG-WHFBIAKZSA-N L-isoleucine Chemical compound CC[C@H](C)[C@H](N)C(O)=O AGPKZVBTJJNPAG-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 1
- 229930182844 L-isoleucine Natural products 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 1
- 235000010643 Leucaena leucocephala Nutrition 0.000 description 1
- 240000007472 Leucaena leucocephala Species 0.000 description 1
- 101100236865 Mus musculus Mdm2 gene Proteins 0.000 description 1
- 101100407337 Mus musculus Pde8a gene Proteins 0.000 description 1
- 208000008589 Obesity Diseases 0.000 description 1
- 206010033165 Ovarian failure Diseases 0.000 description 1
- 229930040373 Paraformaldehyde Natural products 0.000 description 1
- 229930182555 Penicillin Natural products 0.000 description 1
- JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N Penicillin G Chemical compound N([C@H]1[C@H]2SC([C@@H](N2C1=O)C(O)=O)(C)C)C(=O)CC1=CC=CC=C1 JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N 0.000 description 1
- 102000004861 Phosphoric Diester Hydrolases Human genes 0.000 description 1
- 108091000080 Phosphotransferase Proteins 0.000 description 1
- 101100082610 Plasmodium falciparum (isolate 3D7) PDEdelta gene Proteins 0.000 description 1
- 108010038512 Platelet-Derived Growth Factor Proteins 0.000 description 1
- 102000010780 Platelet-Derived Growth Factor Human genes 0.000 description 1
- 241000288906 Primates Species 0.000 description 1
- 238000002123 RNA extraction Methods 0.000 description 1
- 238000011529 RT qPCR Methods 0.000 description 1
- 101100456541 Saccharomyces cerevisiae (strain ATCC 204508 / S288c) MEC3 gene Proteins 0.000 description 1
- 101100483663 Saccharomyces cerevisiae (strain ATCC 204508 / S288c) UFD1 gene Proteins 0.000 description 1
- 229940124639 Selective inhibitor Drugs 0.000 description 1
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 1
- 238000000692 Student's t-test Methods 0.000 description 1
- 241000583281 Sugiura Species 0.000 description 1
- AYFVYJQAPQTCCC-UHFFFAOYSA-N Threonine Natural products CC(O)C(N)C(O)=O AYFVYJQAPQTCCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004473 Threonine Substances 0.000 description 1
- 229920001615 Tragacanth Polymers 0.000 description 1
- 108091023040 Transcription factor Proteins 0.000 description 1
- 102000040945 Transcription factor Human genes 0.000 description 1
- 238000002679 ablation Methods 0.000 description 1
- 238000009825 accumulation Methods 0.000 description 1
- 206010000496 acne Diseases 0.000 description 1
- 230000009471 action Effects 0.000 description 1
- 230000003213 activating effect Effects 0.000 description 1
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 1
- 108060000200 adenylate cyclase Proteins 0.000 description 1
- 102000030621 adenylate cyclase Human genes 0.000 description 1
- 229910052783 alkali metal Inorganic materials 0.000 description 1
- 150000001340 alkali metals Chemical class 0.000 description 1
- 229910052784 alkaline earth metal Inorganic materials 0.000 description 1
- 231100000540 amenorrhea Toxicity 0.000 description 1
- 210000003484 anatomy Anatomy 0.000 description 1
- 208000022531 anorexia Diseases 0.000 description 1
- 230000000844 anti-bacterial effect Effects 0.000 description 1
- 230000001093 anti-cancer Effects 0.000 description 1
- 230000003178 anti-diabetic effect Effects 0.000 description 1
- 230000002460 anti-migrenic effect Effects 0.000 description 1
- 230000000118 anti-neoplastic effect Effects 0.000 description 1
- 239000008365 aqueous carrier Substances 0.000 description 1
- 235000021311 artificial sweeteners Nutrition 0.000 description 1
- 230000006472 autoimmune response Effects 0.000 description 1
- 239000003899 bactericide agent Substances 0.000 description 1
- 239000002585 base Substances 0.000 description 1
- 210000002469 basement membrane Anatomy 0.000 description 1
- 208000017529 benign neoplasm of pituitary gland Diseases 0.000 description 1
- WPYMKLBDIGXBTP-UHFFFAOYSA-N benzoic acid group Chemical group C(C1=CC=CC=C1)(=O)O WPYMKLBDIGXBTP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000011230 binding agent Substances 0.000 description 1
- 238000010364 biochemical engineering Methods 0.000 description 1
- 230000006696 biosynthetic metabolic pathway Effects 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 1
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 1
- 210000004556 brain Anatomy 0.000 description 1
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 1
- 238000010804 cDNA synthesis Methods 0.000 description 1
- 102100037093 cGMP-inhibited 3',5'-cyclic phosphodiesterase A Human genes 0.000 description 1
- 230000008777 canonical pathway Effects 0.000 description 1
- FFQKYPRQEYGKAF-UHFFFAOYSA-N carbamoyl phosphate Chemical compound NC(=O)OP(O)(O)=O FFQKYPRQEYGKAF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 231100000357 carcinogen Toxicity 0.000 description 1
- 239000003183 carcinogenic agent Substances 0.000 description 1
- 230000006652 catabolic pathway Effects 0.000 description 1
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 1
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 1
- 230000003915 cell function Effects 0.000 description 1
- 238000010224 classification analysis Methods 0.000 description 1
- 229940110456 cocoa butter Drugs 0.000 description 1
- 235000019868 cocoa butter Nutrition 0.000 description 1
- 230000001010 compromised effect Effects 0.000 description 1
- 238000010276 construction Methods 0.000 description 1
- 230000001054 cortical effect Effects 0.000 description 1
- 238000005138 cryopreservation Methods 0.000 description 1
- 238000012258 culturing Methods 0.000 description 1
- 210000001771 cumulus cell Anatomy 0.000 description 1
- 206010061428 decreased appetite Diseases 0.000 description 1
- 230000002950 deficient Effects 0.000 description 1
- 230000006735 deficit Effects 0.000 description 1
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000003111 delayed effect Effects 0.000 description 1
- 230000030609 dephosphorylation Effects 0.000 description 1
- 238000006209 dephosphorylation reaction Methods 0.000 description 1
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 1
- 230000001627 detrimental effect Effects 0.000 description 1
- 235000019425 dextrin Nutrition 0.000 description 1
- 235000014632 disordered eating Nutrition 0.000 description 1
- 238000002224 dissection Methods 0.000 description 1
- 230000003291 dopaminomimetic effect Effects 0.000 description 1
- 239000006196 drop Substances 0.000 description 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 1
- 230000008144 egg development Effects 0.000 description 1
- 230000002996 emotional effect Effects 0.000 description 1
- 230000019439 energy homeostasis Effects 0.000 description 1
- 229960005309 estradiol Drugs 0.000 description 1
- 229930182833 estradiol Natural products 0.000 description 1
- LVGKNOAMLMIIKO-QXMHVHEDSA-N ethyl oleate Chemical compound CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCC(=O)OCC LVGKNOAMLMIIKO-QXMHVHEDSA-N 0.000 description 1
- 229940093471 ethyl oleate Drugs 0.000 description 1
- 238000001704 evaporation Methods 0.000 description 1
- 230000008020 evaporation Effects 0.000 description 1
- 238000013401 experimental design Methods 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 235000019634 flavors Nutrition 0.000 description 1
- 210000001733 follicular fluid Anatomy 0.000 description 1
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 1
- 235000013355 food flavoring agent Nutrition 0.000 description 1
- 239000000417 fungicide Substances 0.000 description 1
- OSCCDBFHNMXNME-UHFFFAOYSA-N gamma-hydroxyisoleucine Natural products CC(O)C(C)C(N)C(O)=O OSCCDBFHNMXNME-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000003976 gap junction Anatomy 0.000 description 1
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 description 1
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 description 1
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 description 1
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 description 1
- 208000016361 genetic disease Diseases 0.000 description 1
- 238000010353 genetic engineering Methods 0.000 description 1
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 1
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 1
- 231100000451 gonadotoxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000003605 gonadotoxic effect Effects 0.000 description 1
- 229940094892 gonadotropins Drugs 0.000 description 1
- 230000003054 hormonal effect Effects 0.000 description 1
- 102000049167 human CPS1 Human genes 0.000 description 1
- 102000044162 human IGF1 Human genes 0.000 description 1
- 102000057877 human IGF2 Human genes 0.000 description 1
- 230000002267 hypothalamic effect Effects 0.000 description 1
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 description 1
- 238000003364 immunohistochemistry Methods 0.000 description 1
- 239000007943 implant Substances 0.000 description 1
- 230000000977 initiatory effect Effects 0.000 description 1
- 150000007529 inorganic bases Chemical class 0.000 description 1
- 229910052500 inorganic mineral Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 1
- 230000003834 intracellular effect Effects 0.000 description 1
- 238000007917 intracranial administration Methods 0.000 description 1
- 238000007918 intramuscular administration Methods 0.000 description 1
- 238000007912 intraperitoneal administration Methods 0.000 description 1
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 1
- 238000011835 investigation Methods 0.000 description 1
- 230000001788 irregular Effects 0.000 description 1
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 1
- 238000003698 laser cutting Methods 0.000 description 1
- 239000000787 lecithin Substances 0.000 description 1
- 235000010445 lecithin Nutrition 0.000 description 1
- 229940067606 lecithin Drugs 0.000 description 1
- 239000003446 ligand Substances 0.000 description 1
- 239000007937 lozenge Substances 0.000 description 1
- 239000000314 lubricant Substances 0.000 description 1
- 238000010841 mRNA extraction Methods 0.000 description 1
- ZLNQQNXFFQJAID-UHFFFAOYSA-L magnesium carbonate Chemical compound [Mg+2].[O-]C([O-])=O ZLNQQNXFFQJAID-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 239000001095 magnesium carbonate Substances 0.000 description 1
- 229910000021 magnesium carbonate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000019359 magnesium stearate Nutrition 0.000 description 1
- 210000001161 mammalian embryo Anatomy 0.000 description 1
- 239000003550 marker Substances 0.000 description 1
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 1
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 description 1
- 238000002483 medication Methods 0.000 description 1
- 238000002844 melting Methods 0.000 description 1
- 208000030159 metabolic disease Diseases 0.000 description 1
- 230000006609 metabolic stress Effects 0.000 description 1
- XZWYZXLIPXDOLR-UHFFFAOYSA-N metformin Chemical compound CN(C)C(=N)NC(N)=N XZWYZXLIPXDOLR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960003105 metformin Drugs 0.000 description 1
- 238000001531 micro-dissection Methods 0.000 description 1
- 239000011707 mineral Substances 0.000 description 1
- 150000007522 mineralic acids Chemical class 0.000 description 1
- 230000004879 molecular function Effects 0.000 description 1
- 238000012544 monitoring process Methods 0.000 description 1
- 239000012120 mounting media Substances 0.000 description 1
- WNEILUNVMHVMPH-UHFFFAOYSA-N n-cyclopropyl-4-[6-(2,3-difluoro-4-methoxyphenoxy)-8-(3,3,3-trifluoropropylamino)imidazo[1,2-b]pyridazin-3-yl]-2-methylbenzamide Chemical compound FC1=C(F)C(OC)=CC=C1OC1=NN2C(C=3C=C(C)C(C(=O)NC4CC4)=CC=3)=CN=C2C(NCCC(F)(F)F)=C1 WNEILUNVMHVMPH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920001206 natural gum Polymers 0.000 description 1
- 235000021096 natural sweeteners Nutrition 0.000 description 1
- 230000019261 negative regulation of glycolysis Effects 0.000 description 1
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000002687 nonaqueous vehicle Substances 0.000 description 1
- 235000016709 nutrition Nutrition 0.000 description 1
- 235000020824 obesity Nutrition 0.000 description 1
- 235000008390 olive oil Nutrition 0.000 description 1
- 239000004006 olive oil Substances 0.000 description 1
- 238000012898 one-sample t-test Methods 0.000 description 1
- 238000001543 one-way ANOVA Methods 0.000 description 1
- 235000005985 organic acids Nutrition 0.000 description 1
- 150000007530 organic bases Chemical class 0.000 description 1
- 230000027758 ovulation cycle Effects 0.000 description 1
- 230000001590 oxidative effect Effects 0.000 description 1
- 238000007427 paired t-test Methods 0.000 description 1
- 229920002866 paraformaldehyde Polymers 0.000 description 1
- 230000007170 pathology Effects 0.000 description 1
- 239000001814 pectin Substances 0.000 description 1
- 235000010987 pectin Nutrition 0.000 description 1
- 229920001277 pectin Polymers 0.000 description 1
- 229940049954 penicillin Drugs 0.000 description 1
- 230000000737 periodic effect Effects 0.000 description 1
- 229940124531 pharmaceutical excipient Drugs 0.000 description 1
- 239000000825 pharmaceutical preparation Substances 0.000 description 1
- 229940127557 pharmaceutical product Drugs 0.000 description 1
- 230000000144 pharmacologic effect Effects 0.000 description 1
- 230000026731 phosphorylation Effects 0.000 description 1
- 238000006366 phosphorylation reaction Methods 0.000 description 1
- 102000020233 phosphotransferase Human genes 0.000 description 1
- 239000006187 pill Substances 0.000 description 1
- 231100000614 poison Toxicity 0.000 description 1
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 1
- 239000011148 porous material Substances 0.000 description 1
- 230000003389 potentiating effect Effects 0.000 description 1
- 244000062645 predators Species 0.000 description 1
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 description 1
- 208000016685 primary ovarian failure Diseases 0.000 description 1
- 230000004063 proteosomal degradation Effects 0.000 description 1
- 238000001959 radiotherapy Methods 0.000 description 1
- 239000000018 receptor agonist Substances 0.000 description 1
- 229940044601 receptor agonist Drugs 0.000 description 1
- 102000027426 receptor tyrosine kinases Human genes 0.000 description 1
- 108091008598 receptor tyrosine kinases Proteins 0.000 description 1
- 230000022983 regulation of cell cycle Effects 0.000 description 1
- 230000026367 regulation of glycolysis Effects 0.000 description 1
- 239000011347 resin Substances 0.000 description 1
- 229920005989 resin Polymers 0.000 description 1
- 230000000284 resting effect Effects 0.000 description 1
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 1
- 230000028327 secretion Effects 0.000 description 1
- 229910052711 selenium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011669 selenium Substances 0.000 description 1
- DMRMZQATXPQOTP-GWTDSMLYSA-M sodium;(4ar,6r,7r,7as)-6-(6-amino-8-bromopurin-9-yl)-2-oxido-2-oxo-4a,6,7,7a-tetrahydro-4h-furo[3,2-d][1,3,2]dioxaphosphinin-7-ol Chemical compound [Na+].C([C@H]1O2)OP([O-])(=O)O[C@H]1[C@@H](O)[C@@H]2N1C(N=CN=C2N)=C2N=C1Br DMRMZQATXPQOTP-GWTDSMLYSA-M 0.000 description 1
- 239000001593 sorbitan monooleate Substances 0.000 description 1
- 235000011069 sorbitan monooleate Nutrition 0.000 description 1
- 229940035049 sorbitan monooleate Drugs 0.000 description 1
- 230000000087 stabilizing effect Effects 0.000 description 1
- 239000008107 starch Substances 0.000 description 1
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 1
- 229960005322 streptomycin Drugs 0.000 description 1
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 1
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N sulfuric acid group Chemical class S(O)(O)(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000000829 suppository Substances 0.000 description 1
- 239000004094 surface-active agent Substances 0.000 description 1
- 238000013268 sustained release Methods 0.000 description 1
- 239000012730 sustained-release form Substances 0.000 description 1
- 235000020357 syrup Nutrition 0.000 description 1
- 239000006188 syrup Substances 0.000 description 1
- 239000000454 talc Substances 0.000 description 1
- 229910052623 talc Inorganic materials 0.000 description 1
- 229940124597 therapeutic agent Drugs 0.000 description 1
- 238000004448 titration Methods 0.000 description 1
- 231100000167 toxic agent Toxicity 0.000 description 1
- 239000003053 toxin Substances 0.000 description 1
- 231100000765 toxin Toxicity 0.000 description 1
- 239000000196 tragacanth Substances 0.000 description 1
- 235000010487 tragacanth Nutrition 0.000 description 1
- 229940116362 tragacanth Drugs 0.000 description 1
- 230000009466 transformation Effects 0.000 description 1
- 230000032258 transport Effects 0.000 description 1
- 230000004102 tricarboxylic acid cycle Effects 0.000 description 1
- 208000001072 type 2 diabetes mellitus Diseases 0.000 description 1
- 238000011870 unpaired t-test Methods 0.000 description 1
- 230000004143 urea cycle Effects 0.000 description 1
- 210000004291 uterus Anatomy 0.000 description 1
- 239000011345 viscous material Substances 0.000 description 1
- 239000008215 water for injection Substances 0.000 description 1
- 239000001993 wax Substances 0.000 description 1
- 230000004584 weight gain Effects 0.000 description 1
- 235000019786 weight gain Nutrition 0.000 description 1
- 230000004580 weight loss Effects 0.000 description 1
- 239000002676 xenobiotic agent Substances 0.000 description 1
- 230000002034 xenobiotic effect Effects 0.000 description 1
- 210000004340 zona pellucida Anatomy 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/33—Heterocyclic compounds
- A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
- A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/33—Heterocyclic compounds
- A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
- A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
- A61K31/44—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof
- A61K31/4425—Pyridinium derivatives, e.g. pralidoxime, pyridostigmine
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
- A61K35/12—Materials from mammals; Compositions comprising non-specified tissues or cells; Compositions comprising non-embryonic stem cells; Genetically modified cells
- A61K35/48—Reproductive organs
- A61K35/54—Ovaries; Ova; Ovules; Embryos; Foetal cells; Germ cells
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/0012—Galenical forms characterised by the site of application
- A61K9/0034—Urogenital system, e.g. vagina, uterus, cervix, penis, scrotum, urethra, bladder; Personal lubricants
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P15/00—Drugs for genital or sexual disorders; Contraceptives
- A61P15/08—Drugs for genital or sexual disorders; Contraceptives for gonadal disorders or for enhancing fertility, e.g. inducers of ovulation or of spermatogenesis
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N5/00—Undifferentiated human, animal or plant cells, e.g. cell lines; Tissues; Cultivation or maintenance thereof; Culture media therefor
- C12N5/06—Animal cells or tissues; Human cells or tissues
- C12N5/0602—Vertebrate cells
- C12N5/0603—Embryonic cells ; Embryoid bodies
- C12N5/0604—Whole embryos; Culture medium therefor
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Reproductive Health (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Gynecology & Obstetrics (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Public Health (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Developmental Biology & Embryology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Endocrinology (AREA)
- Pregnancy & Childbirth (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Immunology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Virology (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
Abstract
Se proporciona un compuesto y métodos para tratar, prevenir o mejorar la infertilidad o la fertilidad reducida en un individuo, en donde dicho compuesto es capaz de regular la actividad del factor nuclear eritroide 2 similar a 2 (NFE2L2). (Traducción automática con Google Translate, sin valor legal)
Description
DESCRIPCIÓN
Compuestos para uso en la regulación de la maduración del folículo
Campo técnico
La presente invención se refiere a un compuesto que regula la maduración del folículo, para uso en el tratamiento, prevención o mejora de un trastorno de la ovulación y métodos para el tratamiento de mujeres que padecen un trastorno de la ovulación.
Antecedentes
La activación de los folículos primordiales está marcada morfológicamente por la transición de primordial a primaria cuando las células de la granulosa aplanadas comienzan a proliferar y se vuelven cuboidales y el ovocito crece en tamaño. La transición de folículo primordial a primario es un proceso gradual en el que se pueden observar folículos intermedios con células de la granulosa tanto aplanadas como cuboidales. Mantener la latencia de los folículos primordiales por un lado y la activación gradual hacia la ovulación por el otro, es un proceso estrictamente regulado que involucra varias vías (Bonnet et al., 2013). Se sabe que los activadores e inhibidores de la transición del folículo primordial a primario son importantes para su regulación. Por ejemplo, la ablación condicional de Foxo3a, Pten y Tsc1/2 en los ovocitos desencadena una mayor activación de los ovocitos (Adhikari et al., 2009, Adhikari et al., 2012). Además, se ha demostrado que el cultivo in vitro de tejido ovárico humano con inhibición de PTEN y estimulación con AKT aumenta la activación del folículo primordial (Novella-Maestre et al., 2015). Se han realizado estudios en ovocitos humanos en un grupo de ovocitos aislados de folículos primordiales, intermedios y primarios (Markholt et al., 2012) o en combinación con las células de la granulosa circundantes (Kristensen et al., 2015). Sin embargo, no ha sido posible diseccionar específicamente la expresión génica en ovocitos de folículos primordiales y primarios, respectivamente.
Los déficits ováricos y, en consecuencia, la infertilidad son un problema creciente en todo el mundo y, a menudo, se atribuyen a una producción de óvulos comprometida o deficiente en las hembras. El tratamiento de la infertilidad es un desafío importante con numerosas implicaciones socioeconómicas y psicológicas negativas para el paciente. Impulsar la maduración de los óvulos puede ayudar a las mujeres con, por ejemplo, la disminución de los óvulos relacionada con la edad y/o mujeres con patologías como por ejemplo Síndrome de Ovario Poliquístico. Un desafío importante es proteger la reserva de óvulos en reposo, es decir, el potencial reproductivo, de la caducidad prematura. Por lo tanto, retrasar la maduración de los óvulos puede ayudar a las mujeres que necesitan mantener una reserva de óvulos, por ejemplo, durante el tratamiento de enfermedades, tal como el tratamiento del cáncer, o debido a enfermedades o trastornos genéticos que causan el agotamiento prematuro de los óvulos. Por lo tanto, existe una gran necesidad de controlar las primeras etapas más importantes del desarrollo del huevo.
El documento US2008221173 describe una composición farmacéutica que tiene actividad dopaminérgica y otras actividades farmacéuticas relacionadas que comprende Trigonelina o su(s) derivado(s) y 4-hidroxiisoleucina o su(s) derivado(s).
Compendio
La invención se define por las reivindicaciones. Cualquier materia que se encuentre fuera del alcance de las reivindicaciones se proporciona exclusivamente con fines informativos.
Los inventores de la presente descripción han identificado compuestos para uso en la regulación de la maduración de los folículos, en particular para uso en la regulación de la transición primordial a primaria de los folículos. La dinámica del transcriptoma asociada específicamente con los ovocitos humanos de los folículos primordiales y primarios, respectivamente, se ha caracterizado y utilizado para identificar objetivos y detectar compuestos potenciales que pueden regular la maduración del folículo, en particular, las primeras etapas de la maduración del folículo, como la transición primordial a primaria.
En consecuencia, un aspecto no reivindicado de la presente descripción se refiere a un método para detectar un compuesto que regula la maduración del folículo, en donde dicho método comprende
a. seleccionar un compuesto conocido para regular la actividad de al menos uno de los candidatos identificados en la tabla 1 y/o 2.
b. poner en contacto ovarios primordiales y/o primarios determinando dicho compuesto si dicho compuesto es capaz de regular la maduración del folículo determinando la cantidad de folículos primordiales y/o folículos primarios y compararlo con un control.
El método se ha utilizado para identificar los compuestos que se describen a continuación.
Por lo tanto, un aspecto no reivindicado de la presente descripción se refiere a un compuesto para uso en la regulación de la maduración del folículo, en donde dicho compuesto puede regular la actividad de la 6-fosfructo-2-quinasa.
En una realización preferida, dicho compuesto es un inhibidor de la 6-fosfructo-2-quinasa. Preferiblemente, dicho compuesto promueve la maduración del folículo. En una realización específica dicho compuesto es 3-(3-piridinil)-1-(4-piridinil)-2-propen-1-ona (3PO). En un aspecto específico, se proporciona un compuesto para uso en el tratamiento, prevención o mejora de la infertilidad o fertilidad reducida en un individuo, en donde dicho compuesto es capaz de regular la actividad del factor nuclear eritroide 2 similar a 2 (NFE2L2).
También se proporciona un método (no reivindicado) para tratar, prevenir o mejorar la infertilidad o la fertilidad reducida en un individuo, comprendiendo dicho método administrar a dicho individuo una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto que es capaz de regular la actividad del factor nuclear eritroide 2 similar a 2 (NFE2L2).
El compuesto es preferiblemente un inhibidor de NFE2L2.
En otro aspecto no reivindicado, se proporciona un método para estimular la maduración del folículo, comprendiendo dicho método
a) proporcionar una fuente de folículos primordiales,
b) proporcionar un compuesto capaz de regular la actividad del factor nuclear eritroide 2 similar a 2 (NFE2L2), y
c) poner dicho compuesto en contacto con dicha fuente de folículos primordiales.
El método puede comprender simplemente una muestra de folículos primordiales,
a) proporcionar un compuesto capaz de regular la actividad del factor nuclear eritroide 2 similar a 2 (NFE2L2), y
b) poner dicho compuesto en contacto con dicha fuente de folículos primordiales.
Este método puede ser un método in vitro, y el compuesto es preferiblemente un compuesto que es capaz de estimular la transición primordial a primaria de los folículos.
Otro aspecto no reivindicado de la presente descripción se refiere a un compuesto para uso en la regulación de la maduración del folículo, en donde dicho compuesto puede regular la actividad de la subunidad alfa 1 catalítica activada por AMP de proteína quinasa (PRKAA1).
En una realización preferida dicho compuesto es un activador de PRKAA1. Preferiblemente, dicho compuesto inhibe la maduración del folículo. En una realización específica dicho compuesto es 5-aminoimidazol-4-carboxamida-1-p-D-ribofuranosida (AICAR).
Otro aspecto no reivindicado de la presente descripción se refiere a un compuesto para uso en la regulación de la maduración del folículo, en donde dicho compuesto puede regular la actividad del receptor a del factor de crecimiento derivado de plaquetas (PDGFRA)
En una realización preferida dicho compuesto es un activador de PDGFRA. Preferiblemente, dicho compuesto promueve la maduración del folículo. En una realización específica, dicho compuesto comprende una secuencia de aminoácidos que tiene al menos 80 % identidad de secuencia con SEQ ID NO: 1.
Otro aspecto no reivindicado de la presente descripción se refiere a un compuesto para uso en la regulación de la maduración del folículo, en donde dicho compuesto puede regular la actividad de la fosfodiesterasa 8B (PDE8B).
En una realización preferida, dicho compuesto es un inhibidor de PDE8B. Preferiblemente, dicho compuesto inhibe la maduración del folículo. En una realización específica dicho compuesto es 4,9-dihidro-4-(1-metil-4-piper-idilidendeo)-10H-benzo(4,5)ciclohepta(1,2,b)tiofeno-10-ona (Ketotifeno).
Otro aspecto no reivindicado de la presente descripción se refiere a un compuesto para uso en la regulación de la maduración del folículo, en donde dicho compuesto puede regular la actividad de la fosfodiesterasa 3B (PDE3B).
En una realización preferida, dicho compuesto es un inhibidor de PDE3B. Preferiblemente, dicho compuesto inhibe la maduración del folículo. En una realización específica, dicho compuesto se selecciona del grupo que consiste en 7-(2,3-dihidroxipropil)-1,3-dimetilpurina-2,6-diona (difilina), 5-metil-1H-1,6-naftiridin-2-uno (medorinona), 6-[4-(1-ciclohexiltetrazol-5-il)butoxi]-3,4-dihidro-1H-quinolin-2-one (cilostazol), 2-[[2-[bis(2-hidroxietil)amino]-4,8-di(piperidin-1-il)pirimido[5,4-d]pirimidin-6-il]-(2-hidroxietil)amino]ethanol (dipiridamol), 3-amino-5-piridin-4-il-1H-piridin-2-ona (amrinona), 1-butil-3-(4-metilfenil)sulfonilurea (tolbutamida), 1,3-dimetil-7H-purina-2,6-diona (teofilina) y 3,7-dimetil-1-(5-oxohexil)purina-2,6-diona (pentoxifilina).
Otro aspecto no reivindicado de la presente descripción se refiere a un compuesto para uso en la regulación de la maduración del folículo, en donde dicho compuesto puede regular la actividad de la Carbamoil-Fosfato Sintasa 1 (CPS1).
En una realización preferida, dicho compuesto es un inhibidor de CPS1. Preferiblemente, dicho compuesto inhibe la maduración del folículo. En una realización específica dicho compuesto es ácido ((2S)-2-(carbamoilamino)pentanodioico (ácido N-Carbamil-L-glutámico).
La presente invención se refiere a un compuesto para uso en la regulación de la maduración del folículo, en donde dicho compuesto puede regular la actividad del factor nuclear eritroide 2 similar a 2 (NFE2L2).
En una realización preferida, dicho compuesto es un inhibidor de NFE2L2. Preferiblemente, dicho compuesto promueve la maduración del folículo. En una realización específica de la invención dicho compuesto es ácido 1-metilpiridin-1-io-3-carboxílico;cloruro (clorhidrato de Trigonelina).
Otro aspecto no reivindicado de la presente descripción se refiere a un compuesto para uso en la regulación de la maduración del folículo, en donde dicho compuesto puede regular la actividad de la proteína tirosina quinasa 2 beta (PTK2B).
En una realización preferida, dicho compuesto es un inhibidor de PTK2B. Preferiblemente, dicho compuesto inhibe la maduración del folículo. En una realización específica, dicho compuesto se selecciona del grupo que consiste en N-metil-N-[3-[[[2-[(2-oxo-1,3-dihidroindol-5-il)amino]-5-(trifluorometil)pirimidin-4-il]amino]metil]piridin-2-il]metanesulfonamida (PF-562271) y CT-707.
Otro aspecto no reivindicado de la presente descripción se refiere a un compuesto para uso en la regulación de la maduración del folículo, en donde dicho compuesto puede regular la actividad de MDM2.
En una realización preferida, dicho compuesto es un inhibidor de MDM2. Preferiblemente, dicho compuesto promueve la maduración del folículo. En una realización específica dicho compuesto se selecciona del grupo que consiste en 1 -N-[2-(1 H-indol-3-il)etil]-4-N-piridin-4-ilbenceno-1,4-diamina (serdemetán), (1S)-1-(4-clorofenil)-6-metoxi-2-[4-[metil-[[4-(4-metil-3-oxopiperazin-1-il)ciclohexil]metil]amino]fenil]-7-propan-2-iloxi-1,4-dihidroisoquinolin-3-ona (CGM097), L-eritro-hexonamida, 2,6-anhidro-5-((((3'R,4'S,5'R)-6"-cloro-4'-(2-cloro-3-fluoro-4-piridinil)-1",2"-dihidro-4,4-dimetil-2"-oxodispiro(ciclohexano-1,2'-pirrolidina-3',3"-(3H)indol)-5'-il)carbonil)amino)-3,4,5-trideoxi-, 4-metilbencenosulfona (DS-3032b), 4-amino-1-[(2R ,3S,4S,5R)-3,4-dihidroxi-5-(hidroximetil)oxolan-2-il]pirimidin-2-ona (MK-8242), (6S)-5-(5-cloro-1,2-dihidro-1-metil-2-oxo-3-piridinil)-6-(4-clorofenil)-2-(2,4-dimetoxi-5-pirimidinil)-5,6-dihidro-1 -(1-metiletilo )-pirrolo[3,4-d]imidazol-4(1H)-ona (HDM201), ALRN-6924, ácido 4-{[(3S,4R,5S)-3-(3-cloro-2-fluorofenil)-4-(4-cloro-2-fluorofenil)-4-ciano-5-(2,2-dimetilpropil)-D-prolil]amino}-3-metoxibenzoico (idasanutlin), RO6839921, [(4S,5R)-2-(4-terc-butil-2-etoxifenil)-4,5-bis(4-clorofenil)-4,5-dimetilimidazol-1-il]-[4-(3-metilsulfonilpropil)piperazin-1-il]metanona (RO-5045337), ácido 2-[(3R,5R,6S)-5-(3-clorofenil)-6-(4-clorofenil)-3-metil-1-[(2S)-3-metil-1-propan-2-ilsulfonilbutan-2-il]-2-oxopiperidin-3-il]acético (AMG-232) y Ap G-115.
Otro aspecto no reivindicado de la presente descripción se refiere a un compuesto para uso en la regulación de la maduración del folículo, en donde dicho compuesto puede regular la actividad de la tirosina quinasa 4 del receptor Erb-B2 (ERBB4).
En una realización preferida, dicho compuesto es un inhibidor de la tirosina quinasa 4 del receptor Erb-B2 (ERBB4). Preferiblemente, dicho compuesto inhibe la maduración del folículo. En una realización específica, dicho compuesto se selecciona del grupo que consiste en [(3S)-morfolin-3-il]metil N-[4-[[1-[(3-fluorofenil)metil]indazol-5-il]amino]-5-metilpirrolo[2,1-f][1,2,4]triazin-6-il]carbamato (BMS-599626), (E)-N-[4-(3-cloro-4-fluoroanilino)-7-[(3S)-oxolan-3-il]oxiquinazolin-6-il]-4-(dimetilamino)but-2-enamida (afatinib), N-[2-[2-(dimetilamino)etilmetilamino]-4-metoxi-5-[[4-(1-metilindol-3-il)pirimidin-2-il]amino]fenil]prop-2-enamida (osimertinib), 1-[4-[4-(3,4-dicloro-2-fluoroanilino)-7-metoxiquinazolin-6-il]oxipiperidin-1-il]prop-2-en-1-ona (poziotinib), 4-metil-N-[3-(4-metilimidazol-1-ilo)-5-(trifluorometil)fenil]-3-[(4-piridin-3-ilpirimidin-2-il)amino]benzamida (pirotinib) y (E)-N-[4-(3-cloro-4-fluoroanilino)-3-ciano-7-etoxiquinolin-6-il]-4-(dimetilamino)but-2-enamida (pelitinib).
Otro aspecto no reivindicado de la presente descripción se refiere a un compuesto para uso en la regulación de la maduración del folículo, en donde dicho compuesto puede regular la actividad de la proteína quinasa de especificidad dual (TKK).
En una realización preferida, dicho compuesto es un inhibidor de TKK. Preferiblemente, dicho compuesto inhibe la maduración del folículo. En una realización específica dicho compuesto es metilo 2,6-dimetil-5-nitro-4-[2-(trifluorometil)fenil]-1,4-dihidropiridina-3-carboxilato (BAY 1217389).
Otro aspecto no reivindicado de la presente descripción se refiere a un compuesto para uso en la regulación de la maduración del folículo, en donde dicho compuesto puede regular la actividad de la tirosina quinasa linfoide B (BLK).
En una realización preferida, dicho compuesto es un inhibidor de BLK. Preferiblemente, dicho compuesto inhibe la maduración del folículo. En una realización específica dicho compuesto es N-[2-[2-(dimetilamino)etilmetilamino]-4-metoxi-5-[[4-(1-metilindol-3-il)pirimidin-2-il]amino]fenil]prop-2-enamida (osimertinib).
Otro aspecto no reivindicado de la presente descripción se refiere a un compuesto para uso en la regulación de la maduración del folículo, en donde dicho compuesto puede regular la actividad del receptor del factor de crecimiento derivado de plaquetas 1 (IGF1R)
En una realización preferida, dicho compuesto es un inhibidor de IGF1R. Preferiblemente, dicho compuesto inhibe la maduración del folículo. En una realización específica dicho compuesto se selecciona del grupo que consiste en (5R,5aR,8aS,9R)-5-hidroxi-9-(3,4,5-trimetoxifenil)-5a,6,8a,9-tetrahidro-5H-[2]benzofuro[5,6-f][1,3]benzodioxol-8-ona (picropodofilina), 3-[8-amino-1-(2-fenilquinolin-7-il)imidazo[1,5-a]pirazin-3-il]-1-metilciclobutan-1-ol)(LC Laboratories (linsitinib), cixutumumab, N-(2-cloro-6-metilfenil)-2-[[6-[4-(2-hidroxietil)piperazin-1-il]-2-metilpirimidin-4-il]amino]-1,3-tiazol-5-carboxamida (ganitumab), ((E)-N-[4-[3-cloro-4-(piridin-2-ilmetoxi)anilino]-3-ciano-7-etoxiquinolin-6-il]-4-(dimetilamino)but-2-enamida (neratinib), 4-N-(5-ciclopropil-1H-pirazol-3-il)-6-(4-metilpiperazin-1-il)-2-N-[(3-propan-2-il-1,2-oxazol-5-il)metil]pirimidina-2,4-diamina (XL228), 4-[4-[[4-cloro-3-(trifluorometil)fenil]carbamoilamino]fenoxi]-N-metil-piridin-2-carboxamida (BIIB022), 4-amino-N-(1-azabiciclo [3.3.1]nonan-4-il)-5-cloro-2-metoxibenzamida) (dalotuzumab) y MM-141.
Otro aspecto no reivindicado de la presente descripción se refiere a un compuesto para uso en la regulación de la maduración del folículo, en donde dicho compuesto puede regular la actividad del receptor del factor de crecimiento similar a insulina 2 (IGF2).
En una realización preferida, dicho compuesto es un inhibidor de IGF2. Preferiblemente, dicho compuesto inhibe la maduración del folículo. En una realización específica dicho compuesto es BI 836845.
Los compuestos descritos en el presente documento y anteriormente son para uso en la regulación de la maduración del folículoin vitro.
En otro aspecto no reivindicado, los compuestos descritos en el presente documento son para uso en la regulación de la maduración del folículoin vivo.
En una realización preferida de la presente invención, los compuestos son para uso en la regulación de la transición primordial a primaria de los folículos. Preferiblemente, dichos folículos son folículos de mamíferos. Se prefiere que dicho mamífero sea un ser humano.
Otro aspecto de la presente invención se refiere a un compuesto como se define en el presente documento para uso en el tratamiento, prevención o mejora de un trastorno de la ovulación.
En una realización, dicho trastorno de la ovulación se selecciona del grupo que consiste en síndrome de ovario poliquístico (PCOS), insuficiencia ovárica prematura (POI), disfunción hipotalámica y menopausia.
En otra realización, dicho trastorno de la ovulación está causado por hiperprolactinemia.
Otro aspecto más de la presente invención se refiere a una composición farmacéutica que comprende al menos Trigonelina para usar en el tratamiento, prevención o mejora de la infertilidad o reducción de la fertilidad en un individuo femenino.
Preferiblemente, dicha composición farmacéutica comprende además al menos un vehículo farmacéuticamente aceptable. En otra realización, dicha composición farmacéutica comprende además un agente activo adicional.
Dicha composición farmacéutica puede, por ejemplo, administrarsein vitroa los folículos primordiales de dicho individuo.
En una realización preferida, dicho individuo hembra es un mamífero hembra. Preferiblemente, dicho mamífero hembra es una hembra humana.
Otro aspecto no reivindicado de la presente descripción se refiere a un método para tratar, prevenir o mejorar la infertilidad de una mujer que tiene un trastorno de la ovulación, que comprende administrar a dicha persona una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto como se define en el presente documento.
Preferiblemente, dicho individuo hembra es una hembra de mamífero, tal como una hembra humana.
En un aspecto específico no reivindicado del compuesto para uso o métodos proporcionados en el presente documento, el tratamiento comprende las etapas de
a. retirar los ovocitos ovulados de dicho individuo,
b. someter dicho ovocito ovulado a fertilización in vitro obteniendo así un ovocito fertilizado que dio lugar a un cigoto,
c. cultivar dicho cigoto para obtener un blastocisto multicelular, y
d. transferir dicho blastocisto al útero de dicho individuo y/o una madre subrogada.
En un aspecto no reivindicado de la presente descripción, también se proporciona un método para estimular la maduración del folículo, comprendiendo dicho método
a) proporcionar un compuesto capaz de regular la actividad del factor nuclear eritroide 2 similar a 2 (NFE2L2), y
b) poner dicho compuesto en contacto con dicha fuente de folículos primordiales.
Descripción de los dibujos
Figura 1: Diseño experimental para identificación por microdisección y secuenciación (A-B), corte por láser y posterior captura de ovocitos de folículos primordiales (A) y primarios (B), revelando la precisión con la que se aislaron los ovocitos específicos de la etapa. Los ovocitos de los folículos primordiales y primarios, así como las células de la granulosa (GC) se indican mediante barras. Barra de escala de 50 pm. (C) Ovocitos de primordial (N=3 pacientes; n=185, n=181, n=70 ovocitos) y primaria (N=3 pacientes; n=76, n=61= n=45 ovocitos) se aislaron folículos de tres pacientes diferentes (paciente 1-3). Posteriormente, el ovocito adherido a la tapa se lisó para el aislamiento de ARNm, la síntesis de ADNc y la secuenciación de ARN. Después de la secuenciación, se realizó el mapeo de los datos al genoma humano antes de la anotación. Finalmente, cada gen se normalizó transformándolo a log2 (CPMS).
Figura 2: Construcción de listas SSCEG y DEG
Después de la secuenciación, mapeo, anotación y filtrado, como se ilustra en la Fig. 1b, los genes (11914 y 10186 de ovocitos de folículos primordiales y primarios, respectivamente) se filtraron para incluir transcripciones basadas en la prueba t, que seleccionaron solo genes expresados consistentemente para cada etapa de ovocitos (1099 SSCEG y 1046 SSCEG de ovocitos de folículos primordiales y primarios, respectivamente). A partir de esos genes SSCEG, se identificaron genes DEG (268 DEG regulados positivamente en ovocitos de folículos primordiales en comparación con ovocitos de folículos primarios y 223 DEG regulados negativamente en folículos de folículos primordiales a primarios). Para DEG, prueba t pareada p < 0,05 entre dos conjuntos de triplicados y/o cambio de veces del valor FPKM >2
Figura 3: Ovarios tratados con 3PO. (A)Tinción H&E de una sección en parafina de un ovario completo cultivado con 3PO 30 pM durante cuatro días. (B) Distribución de folículos de ovarios incubados con 3PO o en medios de control. Diferencias significativas (P < 0,05) están marcados con asteriscos.
Figura 4: Ovarios tratados con el activador de AMPK AICAR. (A) Sección de parafina teñida H&E de un ovario de ratón juvenil después de 4 días de cultivo con AICAR 1 mM. (B) Distribución de folículos de ovarios incubados con AICAR o en medios de control (ddH2O). Diferencias significativas (P<0.05) están marcados con asteriscos.,
Figura 5: Ovarios tratados con inhibidor AMPK de dorsomorfina. (A) Secciones de parafina teñidas con H&E de ovarios juveniles después de un cultivo de órganos de 4 días con dorsomorfina. (B) Distribución de folículos de ovarios incubados con dorsomorfina o en medios de control. Diferencias significativas (P<0,05) están marcados con asteriscos.
Figura 6: Efecto del Ketotifeno inhibidor de la PDE8B sobre la distribución folicular. (A) H & Secciones de parafina teñidas con E de ovarios cultivados durante 96 horas con ketotifeno 85 nM o (B) sin (control). (B) Distribución de folículos de ovarios incubados con Ketotifeno o en medios de control. Se contaron tres secciones para cada tratamiento. El promedio de folículos (%) se representa (± errores estándar de la media). Diferencias significativas (P<0,05) están marcados con asteriscos.
Figura 7. El efecto del NCG protector de CPS1 sobre la distribución folicular. (A) y (B) Los ovarios se trataron con NCG 10 mM y se cultivaron durante 96 horas. Las secciones se tiñeron con H&E. (A) aumento de 200x, (B) aumento de 400x. (C) Ovario tratado con medio de control con DMSO.
Figura 8. El efecto del Trigonelina inhibidor de NFE2L2 en la distribución del folículo. (A) Secciones de parafina teñidas con H&E tratadas con Trigonelina 1,0 pM o (B) sin (control). (C) Distribución de folículos de ovarios incubados con Trigonelina o en medios de control. Se contaron tres secciones para cada tratamiento. El promedio de folículos (%) se representa (± errores estándar de la media). Diferencias significativas (P<0,05) están marcados con asteriscos.
Figura 9. (A) Usamos cultivo de ovario de ratón para detectar el efecto de los compuestos, por su capacidad para inducir o inhibir la activación del folículo primordial. (B) Una vez que se evalúe el efecto (como se describe en (A), los folículos individuales se tratarán con compuestos en un cultivo 3D que contiene gel (Amoushahi et al, sin publicar), y el ovocito maduro se generará usando gonadotropina coridan humana (hCG), antes de la fertilización in vitro y la transferencia nuevamente a un ratón hembra. Para cada compuesto se valorará la capacidad de parir camadas.
Figura 10. (A) Efecto del bpV(HOpic) inhibidor de PTEN en la distribución de folículos. El promedio de folículos (%) están representados en tres estadios foliculares (Bruun et al, sin publicar). (A) Ovarios tratados con el Temsirolimus inhibidor de mTORCI. Se evaluó y contó la distribución de folículos, y se realizó una prueba t para determinar diferencias significativas (P < 0,05). Los resultados significativos están marcados con un asterisco
Figura 11 (A) Porcentaje de folículos en diferentes etapas de desarrollo en diferentes concentraciones de Trigonelina antes y después del cultivo de ovarios. Los valores se dan como media ± SE. a: Diferencias significativas con ovarios no cultivados (P < 0,05). b: Diferencias significativas con el grupo control (P < 0,05). c: Diferencias significativas con ovarios cultivados en 0,5 pM de Trigonelina (P < 0,05). (Amoushashi y Lykke-Hartmann, sin publicar)(B) Fotomicrografías de secciones de ovario de ratón completo usando tinción con hematoxilina y eosina sin cultivo (A) y después (B) de 7 días de cultivo, y con tratamientos de Trigonelina a (C) 0,5 pM, (D) 1 pM, (E) 5 pM, (F) 10 pM, (G) 15 pM y (H) 20 pM. Barras de escala de 100 o 50 pM, como se indica (Amoushashi y Lykke-Hartmann, sin publicar).
Figura 12. Distribución de folículos en ovarios tratados con 3PO. El gráfico ilustra la distribución de folículos en ovarios tratados con o sin 3PO. Diferencias significativas (P<0,05) están marcados con asteriscos
Figura 13: ovario tratado con activador de AMPK AICAR. Después de 4 días de cultivo con 1 mM de AICAR, se evaluó la distribución de folículos en los ovarios tratados con o sin AICAR. Los asteriscos indican diferencias significativas
Figura 14. Efecto del Ketotifeno inhibidor de la PDE8B sobre la distribución folicular. Ovarios cultivados durante 96 horas con ketotifeno 85 nM o sin (control). Se contaron tres secciones para cada tratamiento. El promedio de folículos (%) se representa (± errores estándar de la media).
Figura 15. El efecto del NCG protector de CPS1 sobre la distribución folicular. Los ovarios se cultivaron con NCG 10, 20 o 30 pM y la distribución de los folículos se evaluó después de 96 horas de incubación.
Figura 16. El efecto de la difilina en la distribución del folículo. Los ovarios se cultivaron con difilina 10 o 100 pM y la distribución de los folículos se evaluó después de 96 horas de incubación.
Descripción detallada
Definiciones
El término "ovario", como se usa en el presente documento, se refiere al órgano reproductor productor de óvulos, que es el sitio de producción y liberación periódica de óvulos, los gametos femeninos. En los ovarios, el óvulo en desarrollo (u ovocito) crece dentro del entorno proporcionado por los folículos.
El término "folículo", como se usa en el presente documento, se refiere a un conjunto de agregación celular aproximadamente esferoide que se encuentra en los ovarios. El folículo es una estructura anatómica en la que se desarrolla el ovocito primario. Los folículos están compuestos por diferentes tipos y número de células según la etapa de su maduración, y su tamaño es indicativo de la etapa de desarrollo del ovocito.
El término "folículo primordial", como se usa en el presente documento, se refiere a los folículos que se forman en el ovario femenino a las 18-22 semanas después de la concepción. Los folículos primordiales contienen ovocitos inmaduros rodeados de células de la granulosa planas y escamosas (las células de soporte) que están separadas del entorno del ovocito por la lámina basal. Están inactivos y muestran poca o ninguna actividad biológica.
El término "folículo primario" como se usa en este documento se refiere al folículo que se forma cuando las células de la granulosa de estos folículos primordiales cambian de una estructura plana a una cuboide, marcando el comienzo del folículo primario. Tanto el ovocito como el folículo crecen de forma espectacular, aumentando hasta casi 0,1 mm de diámetro. Una cápsula de polímero de glicoproteína llamada zona pelúcida se forma alrededor del ovocito, separándolo de las células de la granulosa circundantes.
El término "ovocito primordial", como se usa en el presente documento, se refiere a un ovocito de un folículo primordial.
El término "ovocito primario", como se usa en el presente documento, se refiere a un ovocito de un folículo primario.
El término "transición de folículos primordial a primario", como se usa en el presente documento, se refiere a la etapa en la que el folículo se desarrolla desde un folículo primordial a un folículo primario. Por lo tanto, la transición primordial a primaria es el proceso por el cual el folículo primordial 'despierta' y madura o se desarrolla en un folículo primario. Por ejemplo, cuando un compuesto promueve la transición primordial a primaria de los folículos, significa que el compuesto promueve o activa la maduración de los folículos primordiales en folículos primarios. Cuando un compuesto inhibe la transición primordial a primaria de los folículos, significa que el compuesto inhibe la maduración de los folículos primordiales en folículos primarios o simplemente mantiene los folículos primordiales en la etapa latente.
Método para la detección de compuestos (aspecto no reivindicado de la presente descripción)
Un aspecto de la presente descripción se refiere a un método para detectar un compuesto que regula la maduración del folículo, en donde dicho método comprende
c. seleccionar un compuesto conocido por regular la actividad de al menos uno de los candidatos identificados en la tabla 1 y/o 2.
d. poner en contacto con un ovario primordial y/o un primario con dicho compuesto
e. determinar si dicho compuesto es capaz de regular la maduración folicular determinando la cantidad de folículos primordiales y/o folículos primarios y compararlo con un control.
Los métodos para determinar si dicho compuesto es capaz de regular el desarrollo de folículos se describen en la sección de ejemplos.
En una realización, el compuesto a probar se disuelve en un disolvente adecuado y se añade a un medio de cultivo que comprende primordial y/o ovarios primarios. Como control, se puede añadir al medio de cultivo un disolvente que no comprende el compuesto.
El ovario puede ser un ovario de mamífero tal como, por ejemplo, un ovario de ratón o un ovario humano.
El compuesto también puede ponerse en contacto con una biopsia de un ovario, en particular una biopsia de un ovario humano.
La concentración del compuesto en el medio de cultivo depende del compuesto a probar. En una realización, la concentración del compuesto es al menos 0,01 micromolar (pM), tal como al menos 0,1 pM, al menos 0,5 |jM, al menos 1 pM o al menos 5 pM.
En una realización, la concentración del compuesto está entre 0,01 pM y 100 milimolar (mM), entre 0,01 pM y 50 mM o entre 0,1 pM y 50 mM.
El tiempo de incubación puede ser, por ejemplo, de al menos 10 horas, al menos 24 horas, al menos 48 horas, al menos 72 horas o al menos 96 horas. En una realización, el tiempo de incubación es de 1 día, 2 días, 3 días, 4 días o 5 días.
Los ovarios primordiales y/o primarios se incuban preferiblemente con el compuesto a 37°C. En particular, los ovarios primordiales y/o primarios se incuban preferiblemente con el compuesto a 37°C y 5% CO2
El número de folículos primordiales y primarios se puede determinar mediante microscopía para visualizar la morfología de los ovarios. Consulte la sección experimental para obtener más detalles.
Compuestos para uso en la regulación de la maduración del folículo
Los compuestos identificados por el método descrito anteriormente se analizan a continuación. Obsérvese que sólo la Trigonelina forma parte de la presente invención.
6-fosfructo-2-quinasa como diana
Un aspecto de la presente descripción se refiere a un compuesto para uso en la regulación de la maduración del folículo, en donde dicho compuesto puede regular la actividad de la 6-fosfructo-2-quinasa (PFKFB3). Se encontró que PFKFB3 se expresa de manera significativa y consistente en ovocitos primordiales y en ovocitos primarios. Además, se encontró que la regulación de PFKFB3 da como resultado una regulación de la maduración del folículo. Más específicamente, la inhibición de PFKFB3 promueve la maduración del folículo. Por lo tanto, en una realización preferida, dicho compuesto es un inhibidor de la 6-fosfructo-2-quinasa. En otra realización preferida, dicho compuesto o dicho inhibidor promueve la maduración del folículo. En una realización preferida, dicho compuesto o inhibidor de PFKFB3 regula la transición primordial a primaria de los folículos. En una realización preferida, dicho compuesto o inhibidor de PFKFB3 promueve la transición primordial a primaria de los folículos.
En una realización particular preferida, dicho compuesto o dicho inhibidor es 3-(3-piridinil)-1-(4-piridinil)-2-propen-1-ona (3PO). 3PO es un inhibidor de PFKFB3.
Por lo tanto, una realización preferida de la presente descripción se refiere a 3PO para uso en la regulación de la maduración de los folículos, tal como para uso en la regulación de la transición primordial a primaria de los folículos. Una realización preferida particular se refiere a 3PO para uso en la promoción de la maduración de los folículos, tal como para uso en la promoción de la transición primordial a primaria de los folículos.
Subunidad catalítica alfa activada por proteína quinasa AMP como diana
Otro aspecto de la presente descripción se refiere a un compuesto para uso en la regulación de la maduración del folículo, en donde dicho compuesto puede regular la actividad de la subunidad alfa 1 catalítica activada por proteína quinasa AMP (PRKAA1).
Se encontró que PRKAA1 se expresa de manera significativa y consistente en ovocitos primordiales y en ovocitos primarios. Además, se encontró que la regulación de PRKAA1 da como resultado una regulación de la maduración del folículo. Más específicamente, la activación de PRKAA1 inhibe la maduración del folículo. Por lo tanto, en una realización preferida dicho compuesto es un activador de PRKAA1. En otra realización preferida, dicho compuesto o dicho activador inhibe la maduración del folículo. En una realización preferida, dicho compuesto o activador de PRKAA1 regula la transición primordial a primaria de los folículos. En una realización preferida, dicho compuesto o inhibidor de PRKAA1 inhibe la transición primordial a primaria de los folículos.
En una realización particular, dicho compuesto o dicho activador es 5-aminoimidazol-4-carboxamida-1-p-D-ribofuranosida (AI<c>A<r>). AICAR es un activador de PRKAA1.
Por lo tanto, una realización preferida de la presente descripción se refiere a AICAR para uso en la regulación de la maduración de los folículos, tal como para uso en la regulación de la transición primordial a primaria de los folículos. Una realización preferida particular se refiere al AICAR para uso en la inhibición de la maduración de los folículos, tal como para uso en inhibir la transición primordial a primaria de los folículos.
Receptor a del factor de crecimiento derivado de plaquetas
Un aspecto adicional de la presente descripción se refiere a un compuesto para uso en la regulación de la maduración del folículo, en donde dicho compuesto puede regular la actividad del receptor a del factor de crecimiento derivado de plaquetas (PDGFRA)
Se encontró que PDGFRA se expresa de manera significativa y consistente en ovocitos primordiales y en ovocitos primarios.
En una realización, la activación de PDGFRA promueve la maduración del folículo. Por lo tanto, preferiblemente, dicho compuesto es un activador de PDGFRA. En otra realización preferida, dicho compuesto o dicho activador promueve la maduración del folículo. En una realización preferida, dicho compuesto o activador de PDGFRA regula la transición primordial a primaria de los folículos. En una realización preferida, dicho compuesto o inhibidor de PDGFRA promueve la transición primordial a primaria de los folículos.
En una realización particular, dicho compuesto comprende una secuencia de aminoácidos que tiene al menos 75 % de identidad de secuencia con s Eq ID NO: 1, tal como al menos 80 % de identidad de secuencia, tal como al menos 85 % de identidad de secuencia, tal como al menos 90 % de identidad de secuencia, tal como al menos 95 % de identidad de secuencia, tal como al menos 96 % de identidad de secuencia, tal como al menos 97 % de identidad de secuencia, tal como al menos 98 % de identidad de secuencia o tal como al menos 99 % de identidad de secuencia con SEQ ID NO: 1.
SEQ ID NO: 1 codifica el péptido PDGF-AA que se une y activa PDGFRA
Fosfodiesterasa 8B como diana
Aún otro aspecto de la presente descripción se refiere a un compuesto para uso en la regulación de la maduración del folículo, en donde dicho compuesto puede regular la actividad de la fosfodiesterasa 8B (PDE8B).
Se encontró que PDE8B se expresa de manera significativa y consistente en ovocitos primordiales y en ovocitos primarios. Además, se encontró que la regulación de PDE8B da como resultado una regulación de la maduración del folículo. Más específicamente, la inhibición de PDE8B inhibe la maduración del folículo.
Por lo tanto, en una realización preferida, dicho compuesto es un inhibidor de PDE8B. En otra realización preferida, dicho compuesto o dicho inhibidor inhibe la maduración del folículo. En una realización preferida, dicho compuesto o inhibidor de PDE8B regula la transición primordial a primaria de los folículos. En una realización preferida, dicho compuesto o inhibidor de PDE8B inhibe la transición primordial a primaria de los folículos.
En una realización particular, dicho compuesto o dicho inhibidor es 4,9-dihidro-4-(1-metil-4-piper-idilidendeo)-10H-benzo(4,5)ciclohepta(1,2,b)tiofeno-10-ona. 4,9-dihidro-4-(1-metil-4-piper-idilidendeo)-10H-benzo(4,5)ciclohepta(1,2,b)tiofeno-10-ona también se conoce como ketotifeno. El ketotifeno es un inhibidor de la PDE8B.
Por lo tanto, una realización preferida de la presente descripción se refiere a ketotifeno para uso en la regulación de la maduración de los folículos, tal como para uso en la regulación de la transición primordial a primaria de los folículos. Una realización preferida particular se refiere al ketotifeno para uso en la inhibición de la maduración de los folículos, tal como para uso en inhibir la transición primordial a primaria de los folículos.
Fosfodiesterasa 3B como diana
Un aspecto adicional de la presente descripción se refiere a un compuesto para uso en la regulación de la maduración del folículo, en donde dicho compuesto puede regular la actividad de la fosfodiesterasa 3B (PDE3B).
Se encontró que PDE3B se expresa de manera significativa y consistente en ovocitos primordiales y en ovocitos primarios.
En una realización, la inhibición de PDE3B inhibe la maduración del folículo. Por lo tanto, preferiblemente, dicho compuesto es un inhibidor de PDE3B. En otra realización preferida, dicho compuesto o dicho inhibidor inhibe la maduración del folículo. En una realización preferida, dicho compuesto o inhibidor de PDE3B regula la transición primordial a primaria de los folículos. En una realización preferida, dicho compuesto o inhibidor de PDE3B inhibe la transición primordial a primaria de los folículos.
En una realización, dicho compuesto se selecciona del grupo que consiste en 7-(2,3-dihidroxipropil)-1,3-dimetilpurina-2,6-diona (difilina), 5-metil-1H-1,6-naftiridina-2-ona (medorinona), 6-[4-(1-ciclohexiltetrazol-5-il)butoxi]-3,4-dihidro-1H-quinolin-2-ona (cilostazol), 2-[[2-[bis(2-hidroxietil)amino]-4,8-di(piperidin-1-il)pirimido[5,4-d]pirimidin-6-il]-(2-hidroxietil)amino]etanol (dipiridamol), 3-amino-5-piridin-4-il-1H-piridin-2-ona (amrinona), 1-butil-3-(4-metilfenil)sulfonilurea (tolbutamida), 1,3-dimetil-7H-purina-2,6-diona ( teofilina) y 3,7-dimetil-1-(5-oxohexil)purina-2,6-diona (pentoxifilina).
Por lo tanto, una realización preferida de la presente descripción se refiere a un compuesto seleccionado del grupo que consiste en 7-(2,3-dihidroxipropil)-1,3-dimetilpurina-2,6-diona (difilina), 5-metil-1H-1,6-naftiridin-2-ona (medorinona), 6-[4-(1-ciclohexiltetrazol-5-il)butoxi]-3,4-dihidro-1H-quinolin-2-ona (cilostazol), 2-[ [2-[bis(2hidroxietil)amino]-4,8-di(piperidin-1-il)pirimido[5,4-d]pirimidin-6-il]-(2-hidroxietil)amino]etanol (dipiridamol ), 3-amino-5-piridin-4-il-1H-piridin-2-ona (amrinona), 1-butil-3-(4-metilfenil)sulfonilurea (tolbutamida), 1,3-dimetil-7H-purina-2,6-diona (teofilina) y 3,7-dimetil-1-(5-oxohexil)purina-2,6-diona (pentoxifilina) para usar en la regulación de la maduración del folículo, tal como para uso en la regulación de primordial a primaria transición de folículos.
Una realización preferida particular se refiere a un compuesto seleccionado del grupo que consiste en 7-(2,3-dihidroxipropil)-1,3-dimetilpurina-2,6-diona (difilina), 5-metil-1H-1,6-naftiridina-2-ona (medorinona), 6-[4-(1-ciclohexiltetrazol-5-il)butoxi]-3,4-dihidro-1H-quinolin-2-ona (cilostazol), 2-[[2-[bis (2-hidroxietil)amino]-4,8-di(piperidin-1-il)pirimido[5,4-d]pirimidin-6-il]-(2-hidroxietil)amino]etanol (dipiridamol), 3-amino-5-piridin-4-il-1H-piridin-2-ona (amrinona), 1-butil-3-(4-metilfenil)sulfonilurea (tolbutamida), 1,3-dimetil-7H-purina-2,6-diona (teofilina) y 3,7-dimetil-1-(5-oxohexil)purina-2,6-diona (pentoxifilina) para uso en la inhibición de la maduración de los folículos, tal como para uso en la inhibición de la transición primordial a primaria de los folículos.
Carbamoil-fosfato sintasa 1 como diana
En otro aspecto, la presente descripción se refiere a un compuesto para uso en la regulación de la maduración folicular, en donde dicho compuesto puede regular la actividad de la carbamoil fosfato sintasa 1 (CPS1).
Se encontró que CPS1 se expresaba de manera significativa y consistente en ovocitos primarios y significativamente regulado negativamente en ovocitos primarios en comparación con los ovocitos primordiales.
En una realización, la inhibición de CPS1 inhibe la maduración del folículo. Por lo tanto, preferiblemente, dicho compuesto es un inhibidor de CPS1. En otra realización preferida, dicho compuesto o dicho inhibidor inhibe la maduración del folículo. En una realización preferida, dicho compuesto o inhibidor de CPS1 regula la transición primordial a primaria de los folículos. En una realización preferida particular, dicho compuesto o inhibidor de CPS1 inhibe la transición primordial a primaria de los folículos.
En una realización particular, dicho compuesto o dicho inhibidor es el ácido ((2S)-2-(carbamoilamino)pentanodioico (ácido N-Carbamil-L-glutámico).
Por lo tanto, una realización preferida de la presente descripción se refiere al ácido N-carbamil-L-glutámico para uso en la regulación de la maduración de los folículos, tal como para uso en la regulación de la transición primordial a primaria de los folículos. Una realización preferida particular se refiere al ácido N-carbamil-L-glutámico para uso en la inhibición de la maduración de los folículos, tal como para uso en la inhibición de la transición primordial a primaria de los folículos.
Factor nuclear eritroide 2 similar a 2 como diana
Aún otro aspecto de la presente descripción se refiere a un compuesto para uso en la regulación de la maduración del folículo, en donde dicho compuesto puede regular la actividad del factor nuclear eritroide 2 similar a 2 (NFE2L2).
Se encontró que NFE2L2 se expresaba de manera significativa y constante en los ovocitos primarios.
Además, se encontró que la regulación de NFE2L2 da como resultado una regulación de la maduración del folículo. Más específicamente, la inhibición de NFE2L2 promueve la maduración del folículo.
Por lo tanto, en una realización preferida, dicho compuesto es un inhibidor de NFE2L2. En otra realización preferida, dicho compuesto o dicho inhibidor promueve la maduración del folículo. En una realización preferida, dicho compuesto o inhibidor de NFE2L2 regula la transición primordial a primaria de los folículos. En una realización preferida, dicho compuesto o inhibidor de NFE2L2 promueve la transición primordial a primaria de los folículos.
En una realización particular de la invención, dicho compuesto o dicho inhibidor es ácido 1-metilpiridin-1-io-3-carboxílico;clorururo (clorhidrato de Trigonelina). El clorhidrato de Trigonelina es un inhibidor de NFE2L2.
Por lo tanto, una realización preferida de la presente invención se refiere al clorhidrato de Trigonelina para uso en la regulación de la maduración de los folículos, tal como para uso en la regulación de la transición primordial a primaria de los folículos. Una realización preferida particular se refiere al clorhidrato de Trigonelina para uso en la regulación de la maduración de los folículos, tal como para uso en promover la transición primordial a primaria de los folículos.
Proteína Tirosina Quinasa 2 Beta como diana
Un aspecto de la presente descripción se refiere a un compuesto para uso en la regulación de la maduración del folículo, en donde dicho compuesto puede regular la actividad de la proteína tirosina quinasa 2 beta (PTK2B).
Se encontró que PTK2B se expresaba de manera significativa y constante en los ovocitos primarios.
En una realización, la inhibición de PTK2B inhibe la maduración folicular. Por lo tanto, preferiblemente, dicho compuesto es un inhibidor de PTK2B. En otra realización preferida, dicho compuesto o dicho inhibidor inhibe la maduración del folículo. En una realización preferida, dicho compuesto o inhibidor de PTK2B regula la transición primordial a primaria de los folículos. En una realización particularmente preferida, dicho compuesto o inhibidor de PTK2B inhibe la transición primordial a primaria de los folículos.
En una realización, dicho compuesto o dicho inhibidor se selecciona del grupo que consiste en N-metil-N-[3-[[[2-[(2-oxo-1,3-dihidroindol-5-il)amino]-5-(trifluorometil)pirimidin-4-il]amino]metil]piridin-2-il]metanesulfonamida (PF-562271) y CT-707. Estos compuestos son inhibidores de PTK2B.
Por lo tanto, una realización preferida de la presente descripción se refiere a un compuesto o un inhibidor seleccionado del grupo que consiste en N-metil-N-[3-[[[2-[(2-oxo-1,3-dihidroindol-5-il)amino]-5-(trifluorometil)pirimidin-4-il]amino]metil]piridin-2-il]metanosulfonamida (PF-562271) y CT-707 para uso en la regulación de la maduración del folículo, tal como para uso en la regulación de la transición primordial a primaria de los folículos.
Una realización preferida particular se refiere a un compuesto o un inhibidor seleccionado del grupo que consiste en N-metil-N-[3-[[[2-[(2-oxo-1,3-dihidroindol-5-il)amino]-5-(trifluorometil)pirimidin-4-il]amino]metil]piridin-2-il]metanosulfonamida (PF-562271) y CT-707 para uso en la inhibición de la maduración del folículo, tal como para uso en la inhibición de la transición primordial a primaria de los folículos.
Homólogo del doble minuto 2 de ratón
En otro aspecto, la presente descripción se refiere a un compuesto para uso en la regulación de la maduración del folículo, en donde dicho compuesto puede regular la actividad del homólogo del doble minuto 2 de ratón (MDM2). MDM2 también se conoce como ubiquitina-proteína ligasa E3 Mdm2. Se encontró que MDM2 expresaba de manera significativa y constante en los ovocitos primarios.
En una realización, la inhibición de MDM2 promueve la maduración del folículo. Por lo tanto, preferiblemente, dicho compuesto es un inhibidor de MDM2. En otra realización preferida, dicho compuesto o dicho inhibidor promueve la maduración del folículo. En una realización preferida, dicho compuesto o inhibidor de MDM2 regula la transición primordial a primaria de los folículos. En una realización preferida particular, dicho compuesto o inhibidor de MDM2 promueve la transición primordial a primaria de los folículos.
En una realización preferida particular, dicho compuesto o dicho inhibidor se selecciona del grupo que consiste en 1 -N-[2-(1 H-indol-3-il)etil]-4-N-piridin-4-ilbenceno-1,4-diamina (serdemetán), (1S)-1-(4-clorofenil)-6-metoxi-2- [4-[metil-[[4-(4-metil-3-oxopiperazin-1-il)ciclohexil]metil] amino]fenil]-7-propan-2-iloxi-1,4-dihidroisoquinolin-3- ona (CGM097), L-eritro-hexonamida, 2,6-anhidro-5-((((3'R,4'S,5'R)-6"-cloro-4'-(2-cloro-3-fluoro-4-piridinil)-1",2"-dihidro-4,4-dimetil-2"-oxodispiro(ciclohexano-1,2'-pirrolidina-3',3"-(3H)indol)-5'-il)carbonil)amino)-3,4,5-trideoxi-, 4-metilbencenosulfona (DS-3032b), 4-amino-1-[(2R,3S,4S,5R)-3,4-dihidroxi-5-(hidroximetil)oxolan-2-il]pirimidin-2-ona (MK-8242), (6S)-5-(5-cloro-1,2-dihidro-1-metil-2-oxo-3-piridinil)-6-(4-clorofenil)-2-(2,4-dimetoxi-5-pirimidinil)-5,6-dihidro-1-(1-metiletil)-pirrolo[3,4-d]imidazol-4(1H)-ona (HDM201), ALRN-6924, 4-{[(3S,4R,5S)-3-(3-cloro-2-fluorofenil)-4-(4-cloro-2-fluorofenil)-4-ciano-5-(2,2-dimetilpro pil)-D-prolil]amino}-3-metoxibenzoico (idasanutlin), RO6839921, [(4S,5R)-2-(4-terc-butil-2-etoxifenil)-4,5-bis(4-clorofenilo)-4,5-dimetilimidazol-1-il]-[4-(3-metilsulfonilpropil)piperazin-1-il]metanona (RO-5045337), 2-[(3R,5R,6S)-5-(3-ácido clorofenil)-6-(4-clorofenil)-3-metil-1-[(2S)-3-metil-1-propan-2-ilsulfonilbutan-2-il]-2-oxopiperidin-3-il]acético ( AMG-232) y APG-115. Estos compuestos son inhibidores de MDM2.
Por lo tanto, una realización preferida de la presente descripción se refiere a un compuesto o un inhibidor seleccionado del grupo que consiste en 1 -N-[2-(1 H-indol-3-il)etil]-4-N-piridin-4-ilbenceno-1,4-diamina (serdemetán), (1S)-1-(4-clorofenil)-6-metoxi-2-[4-[metil-[[4-(4-metil-3-oxopiperazin-1-ilo)ciclohexil]metil]amino]fenil]-7-propan-2-iloxi-1,4-dihidroisoquinolin-3-ona (CGM097), L-eritro-hexonamida, 2,6-anhidro-5-((((3 'R,4'S,5'R)-6"-cloro-4'-(2-cloro-3-fluoro-4-piridinil)-1",2"-dihidro-4,4-dimetil-2"-oxodispiro (ciclohexano-1,2'-pirrolidina-3',3"-(3H)indol)-5'-il)carbonil)amino)-3,4,5-tridesoxi-, 4-metilbencenosulfona (DS-3032b ), 4-amino-1-[(2R,3S,4S,5R)-3,4-dihidroxi-5-(hidroximetil)oxolan-2-il]pirimidin-2-ona (MK-8242), (6S)-5-(5-cloro-1,2-dihidro-1-metil-2-oxo-3-piridinil)-6-(4-clorofenil)-2-(2,4-dimetoxi-5-pirimidinil)-5,6-dihidro-1-(1-metiletil)-pirrolo[3,4-d]imidazol-4(1H)-ona (HDM201), ALRN-6924, ácido 4-{[(3S,4R,5S)-3-( 3-cloro-2-fluorofenil)-4-(4-cloro-2-fluorofenil)-4-ciano no-5-(2,2-dimetilpropil)-D-prolil]amino}-3-metoxibenzoico (idasanutlin), RO6839921, [(4S,5R)-2-(4-terc-butil-2-etoxifenil)-4,5-bis(4-clorofenil)-4,5-dimetilimidazol-1-il]-[4-(3-metilsulfonilpropil)piperazin-1-il]metanona (RO-5045337), ácido 2-[(3R,5R ,6S)-5-(3-clorofenil)-6-(4clorofenil)-3-metil-1-[(2S)-3-metil-1-propan-2-ilsulfonilbutan-2-il]-2-oxopiperidin-3-il]acético (AMG-232) y APG-115 para uso en la regulación de la maduración de los folículos, tal como para uso en la regulación de la transición primordial a primaria de los folículos.
Una realización preferida particular se refiere a un compuesto o un inhibidor seleccionado del grupo que consiste en 1 -N-[2-(1 H-indol-3-il)etil]-4-N-piridin-4-ilbenceno-1,4-diamina (serdemetán), (1S)-1-(4-clorofenil)-6-metoxi-2-[4-[metil-[[4-(4-metil-3-oxopiperazin-1-il)ciclohexil]metil] amino]fenil]-7-propan-2-iloxi-1,4-dihidroisoquinolin-3-ona (CGM097), L-eritro-hexonamida, 2,6-anhidro-5-((((3'R,4'S,5'R)-6"-cloro-4'-(2-cloro-3-fluoro-4-piridinil)-1",2"-dihidro-4,4-dimetil-2"-oxodispiro(ciclohexano-1, 2'-pirrolidina-3',3"-(3H)indol)-5'-il)carbonil)amino)-3,4,5-trideoxi-, 4-metilbencenosulfona (DS-3032b), 4-amino-1-[(2R,3S,4S,5R)-3,4-dihidroxi-5-(hidroximetil)oxolan-2-il]pirimidin-2-ona (MK-8242), (6S)-5-(5-cloro-1,2-dihidro-1-metil-2-oxo-3-piridinil)-6-(4-clorofenil)-2-(2,4-dimetoxi-5-pirimidinil)-5,6-dihidro-1-(1-metiletil)-pirrolo[3,4-d]imidazol-4(1H)-ona (Hd M201), ALRN-6924, 4-{[(3S,4R,5S)-3-(3-cloro-2-fluorofenil)-4-(4-cloro-2-fluorofenil)-4-ciano-5-(2,2-dimetilpropil)-D-prolil]amino}-3-metoxibenzoico (idasanutlin), RO6839921, [(4S,5R)-2-(4-terc-butil-2-etoxifenil)-4,5-bis(4-clorofenilo)-4,5-dimetilimidazol-1-il]-[4-(3-metilsulfonilpropil)piperazin-1-il]metanona (RO-5045337), ácido 2-[(3R,5R,6S)-5-(3-clorofenil)-6-(4-clorofenil)-3-metil-1-[(2S)-3-metil-1-propan-2-ilsulfonilbutan-2-il]-2-oxopiperidin-3-il]acético ( AMG-232) y APG-115 para uso en la promoción de la maduración de los folículos, tal como para uso en la promoción de la transición primordial a primaria de los folículos.
Tirosina quinasa 4 del receptor Erb-B2 como diana
En otro aspecto, la presente descripción se refiere a un compuesto para uso en la regulación de la maduración del folículo, en donde dicho compuesto puede regular la actividad de la tirosina quinasa 4 del receptor Erb-B2 (ERBB4).
Se encontró que ERBB4 expresaba de manera significativa y constante en los ovocitos primarios.
En una realización, la inhibición de ERBB4 inhibe la maduración del folículo. Por lo tanto, preferiblemente, dicho compuesto es un inhibidor de ERBB4. En otra realización preferida, dicho compuesto o dicho inhibidor inhibe la maduración del folículo. En una realización preferida, dicho compuesto o inhibidor de ERBB4 regula la transición primordial a primaria de los folículos. En una realización preferida, dicho compuesto o inhibidor de ERBB4 inhibe la transición primordial a primaria de los folículos.
En una realización particular dicho compuesto o dicho inhibidor se selecciona del grupo que consiste en [(3S)-morfolin-3-il]metil N-[4-[[1-[(3-fluorofenil)metil]indazol-5-ilo ]amino]-5-metilpirrolo[2,1-f][1,2,4]triazin-6-il]carbamatos (BMS-599626), (E)-N-[4-(3-cloro-4-fluoroanilino)-7-[(3s)-oxolan-3-il]oxiquinazolin-6-il]-4-(dimetilamino)but-2-enamida (afatinib), N-[2-[2-(dimetilamino)etil-metilamino]-4-metoxi-5-[[4-(1-metilindol-3-il)pirimidin-2-il]amino]fenil]prop-2-enamida (osimertinib), 1-[4-[4-( 3,4-dicloro-2-fluoroanilino)-7-metoxiquinazolin-6-il]oxipiperidin-1-il]prop-2-en-1-ona (poziotinib), 4-metil-N-[3-(4-metilimidazol-1-il)-5-(trifluorometil)fenil]-3-[(4-piridin-3-ilpirimidin-2-il)amino]benzamida (pirotinib) y (E)-N-[4-(3-cloro-4-fluoroanilino)-3-ciano-7-etoxiquinolin-6-il]-4-(dimetilamino)but-2-enamida (pelitinib). Estos compuestos son inhibidores de ERBB4.
Por tanto, una realización preferida de la presente descripción se refiere a un compuesto o un inhibidor seleccionado del grupo que consiste en [(3S)-morfolin-3-il]metil N-[4-[[1-[(3-fluorofenil)metil]indazol-5-ilo ]amino]-5-metilpirrolo[2,1-f][1,2,4]triazin-6-il]carbamatos (BMS-599626), (E)-N-[4-(3-cloro-4-fluoroanilino)-7-[(3S)-oxolan-3-il]oxiquinazolin-6-il]-4-(dimetilamino)but-2-enamida (afatinib), N-[2-[2-(dimetilamino)etilmetilamino]-4-metoxi-5-[[4-(1-metilindol-3-il)pirimidin-2-il]amino]fenil]prop-2-enamida (osimertinib), 1-[4-[4-( 3,4-dicloro-2-fluoroanilino)-7-metoxiquinazolin-6-il]oxipiperidin-1-il]prop-2-en-1-ona (poziotinib), 4-metil-N-[3-(4-metilimidazol-1-il)-5-(trifluorometil)fenil]-3-[(4-piridin-3-ilpirimidin-2-il)amino]benzamida (pirotinib) y (E)-N-[4-(3-cloro-4-fluoroanilino)-3-ciano-7-etoxiquinolin-6-il]-4-(dimetilamino)but-2-enamida (pelitinib) para uso en la regulación de la maduración del folículo, tal como para uso en la regulación de la transición primordial a primaria de los folículos.
Una realización preferida particular se refiere a un compuesto o un inhibidor seleccionado del grupo que consiste en [(3S)-morfolin-3-il]metil N-[4-[[1-[(3-fluorofenil)metil]indazol-5-yl]amino]-5-metilpirrolo[2,1-f][1,2,4]triazin-6-il]carbamatos (BMS-599626), (E)-N-[4-(3-cloro-4-fluoroanilino)-7-[(3s)-oxolan-3-il]oxiquinazolin-6-il]-4-(dimetilamino)but-2-enamida (afatinib), N-[2-[2-(dimetilamino)etilo-metilamino]-4-metoxi-5-[[4-(1-metilindol-3-il)pirimidin-2-il]amino]fenil]prop-2-enamida (osimertinib), 1-[4-[4-(3,4-dicloro-2-fluoroanilino)-7-metoxiquinazolin-6-il]oxipiperidin-1-il]prop-2-en-1-ona (poziotinib), 4-metil-N-[3-(4-metilimidazol-1-il)-5-(trifluorometil)fenil]-3-[(4-piridin-3-ilpirimidin-2-il)amino]benzamida (pirotinib) y (E)-N-[4-(3-cloro-4-fluoroanilino)-3-ciano-7-etoxiquino¡in-6-il]-4-(dimetilamino)but-2-enamida (pelitinib) para uso en la inhibición de la maduración del folículo, tal como para uso en la inhibición de la transición primordial a primaria de los folículos.
Proteína quinasa de doble especificidad como diana
Otro aspecto más de la presente descripción se refiere a un compuesto para uso en la regulación del desarrollo de folículos primordiales, en donde dicho compuesto puede regular la actividad de la proteína quinasa de doble especificidad (TKK).
Se encontró que TKK se expresaba de manera significativa y consistente en los ovocitos primarios (véase la Tabla 2).
En una realización, la inhibición de TKK inhibe la maduración folicular. Por lo tanto, preferiblemente, dicho compuesto es un inhibidor de TKK. En otra realización preferida, dicho compuesto o dicho inhibidor inhibe la maduración del folículo. En una realización preferida, dicho compuesto o inhibidor de TKK regula la transición primordial a primaria de los folículos. En una realización preferida, dicho compuesto o inhibidor de TKK inhibe la transición primordial a primaria de los folículos.
En una realización, dicho compuesto o dicho inhibidor es metilo 2,6-dimetil-5-nitro-4-[2-(trifluorometil)fenil]-1,4-dihidropiridina-3-carboxilato. Metilo 2,6-dimetil-5-nitro-4-[2-(trifluorometil)fenil]-1,4-dihidropiridina-3-carboxilato es un inhibidor de TKK.
Por lo tanto, una realización preferida de la presente descripción se refiere a metil 2,6-dimetil-5-nitro-4-[2-(trifluorometil)fenil]-1,4-dihidropiridina-3-carboxilato para uso en la regulación de la maduración de los folículos, tal como para uso en la regulación de la transición primordial a primaria de los folículos.
Una realización preferida particular se refiere a metil 2,6-dimetil-5-nitro-4-[2-(trifluorometil)fenil]-1,4-dihidropiridina-3-carboxilato para uso en la inhibición de la maduración de los folículos, tal como para uso en la regulación de la transición primordial a primaria de los folículos.
Tirosina quinasa linfoide B como diana
Un aspecto adicional de la presente descripción se refiere a un compuesto para uso en la regulación del desarrollo de folículos primordiales, en donde dicho compuesto puede regular la actividad de la tirosina quinasa linfoide B (BLK).
Se encontró que BLK se expresaba significativamente de manera consistente en los ovocitos primordiales y la expresión de BLK estaba regulada negativamente en los ovocitos primarios en comparación con los ovocitos primordiales.
En una realización, la inhibición de BLK inhibe la maduración folicular. Por lo tanto, preferiblemente, dicho compuesto es un inhibidor de BLK. En otra realización preferida, dicho compuesto o dicho inhibidor inhibe la maduración del folículo. En una realización preferida, dicho compuesto o inhibidor de BLK regula la transición primordial a primaria de los folículos. En una realización preferida particular, dicho compuesto o dicho inhibidor de BLK inhibe la transición primordial a primaria de los folículos..
En una realización dicho compuesto o dicho inhibidor es N-[2-[2-(dimetilamino)etil-metilamino]-4-metoxi-5-[[4-(1-metilindol-3-il)pirimidin-2-il]amino]fenil]prop-2-enamida (osimertinib). N-[2-[2-(dimetilamino)etil-metilamino]-4-metoxi-5-[[4-(1-metilindol-3-il)pirimidin-2-il]amino]fenil]prop-2-enamida (osimertinib) es un inhibidor de TKK.
Por lo tanto, una realización preferida de la presente descripción se refiere a N-[2-[2-(dimetilamino)etilmetilamino]-4-metoxi-5-[[4-(1-metilindol-3-il)pirimidin-2-il]amino]fenil]prop-2-enamida (osimertinib) para uso en la regulación de la maduración de los folículos, tal como para uso en la regulación de la transición primordial a primaria de los folículos.
Una realización preferida particular se refiere a N-[2-[2-(dimetilamino)etil-metilamino]-4-metoxi-5-[[4-(1-metilindol-3-il)pirimidin-2-il]amino]fenil]prop-2-enamida (osimertinib) para uso en la inhibición de la maduración de los folículos, tal como para uso en la inhibición de la transición primordial a primaria de los folículos.
Receptor del factor de crecimiento similar a la insulina 1 como diana
Otro aspecto de la presente descripción se refiere a un compuesto para uso en la regulación de la maduración del folículo, en donde dicho compuesto puede regular la actividad del receptor del factor de crecimiento similar a insulina 1 (IGF1R).
Se encontró que IGF1R se expresaba de manera significativa y constante en los ovocitos primordiales y en los ovocitos primarios.
En una realización, la inhibición de IGF1R inhibe la maduración del folículo. Por lo tanto, preferiblemente, dicho compuesto es un inhibidor de IGF1R. En otra realización preferida, dicho compuesto o dicho inhibidor inhibe la maduración del folículo. En una realización preferida, dicho compuesto o inhibidor de IGF1R regula la transición primordial a primaria de los folículos. En una realización preferida, dicho compuesto o inhibidor de BLK inhibe la transición primordial a primaria de los folículos.
En una realización dicho compuesto o dicho inhibidor se selecciona del grupo que consiste en (5R,5aR,8aS,9R)-5-hidroxi-9-(3,4,5-trimetoxifenil)-5a,6,8a,9-tetrahidro-5H-[2]benzofuro[5,6-f][1,3]benzodioxol-8-ona (picropodofilina), 3-[8-amino-1-(2-fenilquinolin-7-il)imidazo[1,5-a]pirazin-3-il]-1-metilciclobutan-1-ol)(LC Laboratories (linsitinib), cixutumumab, N-(2-cloro-6-metilfenil)-2-[[6-[4-( 2-hidroxietil)piperazin-1-il]-2-metilpirimidin-4-il]amino]-1,3-tiazol-5-carboxamida (ganitumab), ((E)-N-[4-[3-cloro-4-(piridin-2-ilmetoxi)anilino]-3- ciano-7-etoxiquinolin-6-il]-4-(dimetilamino)but-2-enamida (neratinib), 4-N-(5-ciclopropil-1H-pirazol-3-il)-6-(4-metilpiperazin-1-il)-2-N-[(3-propan-2-il-1,2-oxazol-5-il)metil]pirimidina-2,4-diamina (XL228), 4-[4-[[4-cloro-3-(trifluorometil)fenil]carbamoilamino]fenoxi]-N-metil-piridin-2-carboxamida (BIIB022), 4-amino-N-(1-azabiciclo[3.3.1]nonan-4-il)-5-cloro-2-metoxibenzamida) (dalotuzumab) y MM-141. Estos compuestos son inhibidores de BLK.
El cixutumumab (IMC-A12) es un anticuerpo monoclonal humano que normalmente se usa para el tratamiento de tumores sólidos. Es un anticuerpo monoclonal IgG1 totalmente humano dirigido contra el receptor del factor de crecimiento similar a la insulina 1 (IGF-1R) humano con actividad antineoplásica potencial. Cixutumumab se une selectivamente al IGF-1R unido a la membrana, evitando así la unión del ligando IGF-1 y la subsiguiente activación de la vía de señalización PI3K/AKT.
Por lo tanto, una realización preferida de la presente descripción se refiere a un compuesto o un inhibidor que se selecciona del grupo que consiste en (5R,5aR,8aS,9R)-5-hidroxi-9-(3,4,5-trimetoxifenil)-5a ,6,8a,9-tetrahidro-5H-[2]benzofuro[5,6-f][1,3]benzodioxol-8-ona (piropodofilina), 3-[8-amino-1-(2-fenilquinolina-7-il)imidazo[1,5-a]pirazin-3-il]-1-metilciclobutan-1-ol)(LC Laboratories (linsitinib), cixutumumab, N-(2-cloro-6-metilfenil)-2-[[6-[4-(2-hidroxietil)piperazin-1-il]-2-metilpirimidin-4-il]amino]-1,3-tiazol-5-carboxamida (ganitumab), ((E)-N-[4-[3-cloro-4-(piridin-2-ilmetoxi)anilino]-3-ciano-7-etoxiquinolin-6-il]-4-(dimetilamino)but-2-enamida (neratinib), 4-N-(5-ciclopropil-1H-pirazol-3-il)-6-(4-metilpiperazin-1-il)-2-N-[(3-propan-2-iM,2-oxazol-5-ilo )metil]pirimidina-2,4-diamina (XL228), 4-[4-[[4-cloro-3-(trifluorometil)fenil]carbamoilamino]fenoxi]-N-metilpiridina-2-carboxamida (BIIB022), 4-amino-N-(1-azabiciclo[3.3.1]nonan-4-il)-5-cloro-2-metoxibenzamida) (dalotuzumab) y MM-141 para uso en la regulación de la maduración del folículo, tal como para uso en la regulación de la transición primordial a primaria de folículos.
Una realización preferida particular se refiere a un compuesto o un inhibidor que se selecciona del grupo que consiste en (5R,5aR,8aS,9R)-5-hidroxi-9-(3,4,5-trimetoxifenil)-5a,6,8a, 9-tetrahidro-5H-[2]benzofuro[5,6-f][1,3]benzodioxol-8-ona (picropodofilina), 3-[8-amino-1-(2-fenilquinolin-7-il)imidazo [1,5-a]pirazin-3-il]-1-metilciclobutan-1-ol(LC Laboratories (linsitinib), cixutumumab, N-(2-cloro-6-metilfenil)-2-[[6-[ 4-(2-hidroxietil)piperazin-1-il]-2-metilpirimidin-4-il]amino]-1,3-tiazol-5-carboxamida (ganitumab), ((E)-N-[4-[3-cloro-4- (piridin-2-ilmetoxi)anilino]-3-ciano-7-etoxiquinolin-6-il]-4-(dimetilamino)but-2-enamida (neratinib), 4-N-(5-ciclopropilo)-1H-pirazol-3-il)-6-(4-metilpiperazin-1-il)-2-N-[(3-propan-2-il-1,2-oxazol-5-il)metil]pirimidina-2,4-diamina (XL228), 4-[4-[[4-cloro-3-(trifluorometil)fenil]carbamoilamino]fenoxi]-N-metil-piridin-2-carboxamida (BIIB022), 4-amino-N-(1-azabiciclo[3.3.1]nonan-4-il)-5-cloro-2-metoxibenzamida) (dalotuzumab) y MM-141 para uso en la inhibición de la maduración del folículo, tal como para uso en la inhibición de la transición primordial a primaria de los folículos.
MM-141 también se conoce como istiratumab. MM-141 es un anticuerpo biespecífico tetravalente que se dirige al receptor del factor de crecimiento similar a la insulina 1 (IGF-1) (IGF1R; CD221) y al receptor Erb-b2 de tirosina quinasa 3 (ERBB3; HER3; EGFR3).
Factor de crecimiento similar a la insulina 2 como diana
Otro aspecto más de la presente descripción se refiere a un compuesto para uso en la regulación de la maduración del folículo, en donde dicho compuesto puede regular la actividad del Factor de crecimiento similar a la insulina 2 (IGF2).
Se encontró que IGF2 expresaba de manera significativa y constante en los ovocitos primarios.
En una realización, la inhibición de IGF2 inhibe la maduración del folículo. Por lo tanto, preferiblemente, dicho compuesto es un inhibidor de IGF2. En otra realización preferida, dicho compuesto o dicho inhibidor inhibe la maduración del folículo. En una realización preferida, dicho compuesto o inhibidor de IGF2 regula la transición primordial a primaria de los folículos. En una realización preferida particular, dicho compuesto o dicho inhibidor de IGF2 inhibe la transición primordial a primaria de los folículos.
En una realización, dicho compuesto o dicho inhibidor es BI 836845. BI 836845 es un anticuerpo que se une e inhibe IGF2.
BI 836845 también se conoce como Xentuzumab. Xentuzumab es un anticuerpo monoclonal de inmunoglobulina G1 humanizada (lgG1) que se une y neutraliza la función del factor de crecimiento similar a la insulina humana 1 y 2 (IGF-1, IGF-2). Esto da como resultado una inhibición eficaz de la activación inducida por IGF tanto de IGF-IR como de IR-A (Friedbichler K, et al., Mol Cancer Ther 2014; 13(2):399-409).
Por lo tanto, una realización preferida de la presente descripción se refiere al BI 836845 para uso en la regulación de la maduración del folículo, tal como para uso en la regulación de la transición primordial a primaria de los folículos.
Una realización preferida particular se refiere al BI 836845 para uso en la regulación de la maduración del folículo, tal como para uso en promover la transición primordial a primaria de los folículos.
Uso de los compuestos según la presente invención
Los compuestos según la presente descripción se pueden usar in vivo en donde se administran a un individuo femenino que lo necesite. Por lo tanto, en un aspecto no reivindicado, los compuestos descritos en el presente documento y anteriormente son para uso en la regulación de la maduración del folículoin vivo.
Los compuestos también se pueden usar in vitro en donde se añaden in vitro a los folículos. Por lo tanto, en otra realización, los compuestos descritos en el presente documento y anteriormente son para uso en la regulación de la maduración del folículoin vitro.
En una realización preferida de la presente invención, los compuestos descritos en el presente documento y anteriormente son para uso en la regulación de la transición primordial a primaria de los folículos. Por lo tanto, un aspecto de la presente invención se refiere a un compuesto como se define en el presente documento y anteriormente para uso en la regulación de la transición primordial a primaria de los folículos.
En una realización preferida, dichos folículos son folículos de mamíferos. El mamífero puede ser cualquier mamífero tal como, por ejemplo, un roedor, un primate o un carnívoro. En una realización preferida, el roedor es un ratón.
En una realización preferida, el mamífero es una hembra humana.
Los compuestos como se definen en el presente documento y anteriormente se pueden usar para ejercer un control farmacológico de la regulación del folículo, en particular la regulación del folículo primordial a primario.
Varias enfermedades o trastornos están asociados con un control deficiente en la primera etapa de la regulación del folículo, es decir, la regulación del folículo primordial a primario. Estos trastornos se conocen comúnmente como trastornos de la ovulación. Problemas con la regulación de las hormonas reproductivas por parte del hipotálamo o la glándula pituitaria, o problemas en el ovario, pueden causar trastornos de la ovulación.
Por tanto, la presente invención se refiere a Trigonelina para usar en el tratamiento, prevención o mejora de la infertilidad o reducción de la fertilidad en un individuo hembra.
Por ejemplo, la presente invención se refiere a Trigonelina para uso en el tratamiento, prevención o mejora de la infertilidad o reducción de la fertilidad en un mamífero hembra.
Preferiblemente dicho individuo femenino es un mamífero hembra. El mamífero es como se ha definido anteriormente. Por lo tanto, preferiblemente, dicho mamífero hembra es una hembra humana.
Un aspecto de la presente invención se refiere a un compuesto como se describe y define en el presente documento y anteriormente para uso en el tratamiento, prevención o mejora de un trastorno de la ovulación, tal como un trastorno de la ovulación.
En una realización, dicho trastorno de la ovulación es un trastorno de infertilidad.
En una realización, dicho trastorno de la ovulación se selecciona del grupo que consiste en síndrome de ovario poliquístico (PCOS), insuficiencia ovárica prematura (POI), disfunción hipotalámica y menopausia.
El PCOS causa un desequilibrio hormonal que afecta a la ovulación (entre otras cosas, es una enfermedad metabólica endógena). El PCOS es una afección que hace que las mujeres no ovulen o que ovulen de manera irregular. El PCOS está asociado con la resistencia a la insulina y la obesidad, el crecimiento anormal de vello en la cara o el cuerpo y el acné. El PCOS es la causa más común de infertilidad femenina.
La insuficiencia ovárica prematura (POI), también llamada insuficiencia ovárica primaria, es un trastorno generalmente causado por una respuesta autoinmune o por la pérdida prematura de óvulos de su ovario (posiblemente debido a la genética o la quimioterapia). La POI, a veces denominada menopausia prematura, ocurre cuando los ovarios de una mujer fallan antes de los 40 años. El ovario ya no produce óvulos y reduce la producción de estrógeno en mujeres menores de 40 años. Aunque ciertas exposiciones, tales como la quimioterapia o la radioterapia pélvica, y ciertas condiciones médicas pueden causar la POI, la causa a menudo no se explica.
La disfunción hipotalámica, también llamada amenorrea hipotalámica funcional (FHA), es una afección causada por el ejercicio excesivo, el estrés o el bajo peso corporal. A veces se asocia con trastornos alimentarios tales como la anorexia. Dos hormonas producidas por la glándula pituitaria son responsables de estimular la ovulación cada mes: (FSH) y la hormona luteinizante (LH). El exceso de estrés físico o emocional, un peso corporal muy alto o muy bajo, o un aumento o pérdida de peso sustancial reciente pueden interrumpir la producción de estas hormonas y afectar la ovulación. Los períodos irregulares o ausentes son los signos más comunes.
El trastorno de la ovulación también puede ser causado por hiperprolactinemia, en donde se produce demasiada prolactina. Por ejemplo, la glándula pituitaria puede causar un exceso de producción de prolactina (hiperprolactinemia), lo que reduce la producción de estrógeno y puede causar infertilidad. Normalmente relacionado con un problema de la glándula pituitaria, esto también puede ser causado por medicamentos que está tomando para otra enfermedad.
En otra realización, el trastorno de la ovulación está causado por una función inadecuada del hipotálamo y las glándulas pituitarias. El hipotálamo y las glándulas pituitarias en el cerebro producen hormonas que mantienen la función ovárica normal. La producción excesiva de la hormona prolactina por parte de la glándula pituitaria (a menudo como resultado de un tumor benigno de la glándula pituitaria) o el funcionamiento inadecuado del hipotálamo o la glándula pituitaria pueden hacer que una mujer no ovule.
Formulación farmacéutica
Si bien es posible que los compuestos de la presente invención se administren solos, se prefieren presentarlos en forma de una formulación farmacéutica.
Por lo tanto, otro aspecto de la presente descripción se refiere a una composición farmacéutica que comprende al menos un compuesto como se define en el presente documento para uso en el tratamiento, la prevención o la mejora de la infertilidad o la reducción de la fertilidad.
Por ejemplo, la presente descripción se refiere a una composición farmacéutica que comprende al menos un compuesto como se define en el presente documento para uso en el tratamiento, prevención o mejora de la infertilidad o reducción de la fertilidad en un mamífero hembra.
Preferiblemente dicho individuo hembra es un mamífero hembra. El mamífero es como se ha definido anteriormente. Por lo tanto, preferiblemente, dicho mamífero hembra es una hembra humana.
Un aspecto de la presente descripción se refiere a una composición farmacéutica que comprende al menos un compuesto como se define en el presente documento para uso en el tratamiento, prevención o mejora de un trastorno de la ovulación, tal como un trastorno de infertilidad.
El trastorno de la ovulación es como se describe en el presente documento y anteriormente.
Se prefiere que la composición farmacéutica comprenda además al menos un vehículo farmacéuticamente aceptable. Los vehículos adecuados y la formulación de dichos productos farmacéuticos son conocidos por los expertos en la materia.
Los vehículos farmacéuticamente aceptables pueden ser sólidos o líquidos. Las preparaciones en forma sólida incluyen polvos, comprimidos, píldoras, cápsulas, obleas, supositorios y gránulos dispersables. Un vehículo sólido puede ser uno o más excipientes que también pueden actuar como diluyentes, agentes aromatizantes, solubilizantes, lubricantes, agentes de suspensión, aglutinantes, conservantes, agentes humectantes, agentes desintegradores de comprimidos o un material encapsulante.
También se incluyen preparaciones en forma sólida que están destinadas a convertirse, poco antes de uso, en preparaciones en forma líquida para administración oral. Tales formas líquidas incluyen soluciones, suspensiones y emulsiones. Estas preparaciones pueden contener, además del componente activo, colorantes, saborizantes, estabilizantes, amortiguadores, edulcorantes artificiales y naturales, dispersantes, espesantes, agentes solubilizantes y similares.
Los compuestos de la presente descripción pueden formularse para administración parenteral y pueden presentarse en forma de dosis unitaria en ampollas, jeringas precargadas, infusión de pequeño volumen o en recipientes multidosis, opcionalmente con un conservante añadido. Las composiciones pueden tomar formas tales como suspensiones, soluciones o emulsiones en vehículos oleosos o acuosos, por ejemplo, soluciones en polietilenglicol acuoso. Los ejemplos de portadores, diluyentes, solventes o vehículos aceitosos o no acuosos incluyen propilenglicol, polietilenglicol, aceites vegetales (por ejemplo, aceite de oliva) y ésteres orgánicos inyectables (por ejemplo, oleato de etilo), y pueden contener agentes como agentes conservantes, humectantes, emulsionantes o de suspensión, estabilizantes y / o dispersantes. Alternativamente, el principio activo puede estar en forma de polvo, obtenido por aislamiento aséptico de sólido estéril o por liofilización de una solución, para constituir antes de uso con un excipiente líquido adecuado, p. ej., agua estéril, libre de pirógenos.
Preferiblemente, la formulación comprenderá aproximadamente de 0,5% a 75% en peso del principio o principios activos y el resto consistirá en excipientes farmacéuticos adecuados como se describe en esta invención.
Las sales farmacéuticamente aceptables de los presentes compuestos, cuando pueden prepararse, también están destinadas a estar cubiertas por esta invención. Estas sales serán las que sean aceptables en su aplicación para un uso farmacéutico. Con esto quiere decirse que la sal retendrá la actividad biológica del compuesto precursor y que la sal no tendrá efectos adversos o perjudiciales en su aplicación y uso en el tratamiento de enfermedades.
Las sales farmacéuticamente aceptables se preparan de una manera estándar. Si el compuesto precursor es una base, se trata con un exceso de un ácido orgánico o inorgánico en un disolvente adecuado. Si el compuesto precursor es un ácido, se trata con una base inorgánica u orgánica en un disolvente adecuado.
Los compuestos de la invención pueden administrarse en forma de una sal de metal alcalino o metal alcalinotérreo de los mismos, paralelamente, simultáneamente o junto con un vehículo o diluyente farmacéuticamente aceptable, especialmente y preferiblemente en forma de una composición farmacéutica de los mismos, ya sea por vía oral, rectal o parenteral (incluyendo la subcutánea), en una cantidad eficaz.
Los ejemplos de sales de adición de ácido farmacéuticamente aceptables para su uso en la presente composición farmacéutica de la invención incluyen las obtenidas de ácidos minerales, tales como los ácidos clorhídrico, bromhídrico, fosfórico, metafosfórico, nítrico y sulfúrico, y ácidos orgánicos, tales como los ácidos tartárico, acético, cítrico, málico, láctico, fumárico, benzoico, glicólico, glucónico, succínico, p-toluenosulfónico y arilsulfónico, por ejemplo.
El compuesto de la presente descripción se puede formular en una amplia variedad de formulaciones para administración por vía oral.
Para las inyecciones e infusiones, las formulaciones pueden tomar formas tales como suspensiones, soluciones o emulsiones en vehículos oleosos o acuosos, por ejemplo, soluciones en polietilenglicol acuoso. Alternativamente, el principio activo puede estar en forma de polvo, obtenido por aislamiento aséptico de sólido estéril o por liofilización de una solución, para constituir antes de uso con un excipiente líquido adecuado, p. ej., agua estéril, libre de pirógenos. Las formulaciones pueden presentarse en contenedores sellados de dosis unitarias o de dosis múltiples, tales como ampollas y viales, y pueden almacenarse en una condición de secado por congelación (liofilización) que requiera solamente la adición del excipiente líquido estéril, por ejemplo, agua, para inyecciones, inmediatamente antes del uso. Las soluciones y suspensiones inyectables extemporáneas se pueden preparar a partir de polvos estériles, gránulos y comprimidos.
Ejemplos de vehículos, diluyentes, disolventes o vehículos aceitosos o no acuosos incluyen propilenglicol, polietilenglicol, aceites vegetales y ésteres orgánicos inyectables, y pueden contener agentes como agentes conservantes, humectantes, emulsionantes o de suspensión, estabilizantes y/o dispersantes.
Las formulaciones para inyección típicamente contendrán de aproximadamente 0,5 a aproximadamente 25% en peso del principio activo en solución.
El compuesto de la presente descripción se puede formular en una amplia variedad de formulaciones para administración por vía oral. Las preparaciones en forma sólida pueden incluir polvos, comprimidos, gotas, cápsulas, obleas, pastillas para chupar y gránulos dispersables. Otras formas adecuadas para la administración por vía oral pueden incluir preparaciones en forma líquida que incluyen emulsiones, jarabes, elixires, disoluciones acuosas, suspensiones acuosas, o preparaciones en forma sólida que estén destinadas a convertirse poco antes de uso en preparaciones en forma líquida, tales como disoluciones, suspensiones y emulsiones.
En los polvos, el vehículo es un sólido dividido en partículas finas mezclado con el componente activo en partículas finas. En los comprimidos, el componente activo se mezcla con el vehículo que tiene la capacidad de unión necesaria en proporciones adecuadas y se compacta en la forma y el tamaño deseados. Los vehículos adecuados son carbonato de magnesio, estearato de magnesio, talco, azúcar, lactosa, pectina, dextrina, almidón, gelatina, tragacanto, metilcelulosa, carboximetilcelulosa de sodio, una cera con bajo punto de fusión, manteca de cacao y similares.
Las gotas según la presente descripción pueden comprender soluciones o suspensiones acuosas u oleosas estériles o no estériles, y pueden prepararse disolviendo el principio activo en una solución acuosa adecuada, incluyendo opcionalmente un agente bactericida. y/o agente fungicida y/o cualquier otro conservante adecuado, y opcionalmente incluyendo un agente tensioactivo. Los disolventes adecuados para la preparación de una disolución oleosa incluyen glicerol, alcohol diluido y propilenglicol.
Las emulsiones se pueden preparar en disoluciones acuosas de propilenglicol o pueden contener agentes emulsionantes como lecitina, monooleato de sorbitán o goma arábiga. Se pueden preparar disoluciones acuosas disolviendo el componente activo en agua y añadiendo los colorantes, saborizantes, estabilizantes y agentes espesantes adecuados. Se pueden preparar suspensiones acuosas dispersando en agua el componente activo finamente dividido con material viscoso, tal como gomas sintéticas o naturales, resinas, metilcelulosa, carboximetilcelulosa sódica y otros agentes de suspensión bien conocidos.
En algunas realizaciones, la composición farmacéutica comprende adicionalmente un agente terapéutico adicional. La composición farmacéutica también puede comprender una combinación de los compuestos descritos en el presente documento y anteriormente.
Formas de administración
Como se ha descrito anteriormente en el presente documento, las formas de administración incluyen pero no se limitan a la administración oral, parenteral, enteral, rectal o bucal.
En un aspecto no reivindicado, la composición farmacéutica se administra o se adapta para la administración por vía enteral, parenteral o como parte de un implante de liberación sostenida. La administración parenteral puede ser por ejemplo intravenosa, subcutánea, intramuscular, intracraneal o intraperitoneal.
En un aspecto no reivindicado preferido, se administra la composición farmacéutica mediante o se adapta para inyección. En una realización preferida, se administra la composición farmacéutica mediante o se adapta para inyección.
Se aprecia que la composición farmacéutica de la presente descripción comprende al menos 30 % en peso compuesto, tal como al menos 25 % en peso de compuesto, tal como por ejemplo al menos 20 % en peso de compuesto, al menos 15 % en peso de compuesto, tal como al menos 25 % en peso de compuesto, tal como por ejemplo al menos 20 % en peso de compuesto, al menos 15 % en peso de compuesto, tal como al menos 10 % en peso de compuesto, tal como por ejemplo al menos 8 % en peso de compuesto, al menos 5 % en peso de compuesto, tal como al menos 4 % en peso de compuesto, tal como por ejemplo al menos 3 % en peso de compuesto, al menos 2 % en peso de compuesto, tal como al menos 1 % en peso de compuesto, tal como por ejemplo al menos 0,5 % en peso de compuesto o al menos 0,5 % en peso de compuesto.
% en peso es una abreviatura de porcentaje de peso. El compuesto es cualquier compuesto definido en el presente documento.
En una realización, el compuesto como se describe en el presente documento se administrará en una dosis de 1 pg/kg-30.000 pg/kg peso corporal, como 1 pg/kg-7.500 pg/kg, como 1 pg/kg-5.000 pg/kg, como 1 pg/kg-2.000 |jg/kg, como 1 pg/kg-1.000 pg/kg, como 1 pg/kg-700 pg/kg, como 5 pg/kg-500 pg/kg, como 10 pg/kg a 100 pg/kg peso corporal. En otra realización, el compuesto como se describe en el presente documento se administrará en una dosis de 1 pg/kg-1.000 pg/kg peso corporal, como 1 pg/kg-500 pg/kg, como 1 pg/kg-250 pg/kg, como 1 pg/kg-100 pg/kg, como 1 pg/kg-50 pg/kg, como 1 pg/kg a 10 pg/kg peso corporal. En aún otra realización, el compuesto como se describe en el presente documento se administrará en una dosis de 10 pg/kg-30.000 pg/kg peso corporal, como 10 pg/kg-7.500 pg/kg, como 10 pg/kg-5.000 pg/kg, como 10 pg/kg-2.000 pg/kg, como 10 pg/kg-1.000 pg/kg, como 10 pg/kg-700 pg/kg, como 10 pg/kg-500 pg/kg, como 10 pg/kg a 100 pg/kg peso corporal.
En una realización, la administración de la composición farmacéutica como se describe en el presente documento se repite al menos 1, 2, 3, 4, 5 o 6 veces por semana. En otra realización, la administración se repite al menos 1-3 veces por semana, tal como 2-5 veces por semana, tal como 3-6 veces por semana.
La composición farmacéutica de la presente invención se administrain vitroa los folículos primordiales de dicho individuo hembra. Por lo tanto, los folículos primordiales pueden tomarse de un individuo que los necesite, tratarse in vitro con al menos un compuesto de la presente invención y reinsertarse en dicho individuo hembra.
En una realización preferida, dicho individuo hembra es un mamífero hembra. Preferiblemente, dicho mamífero hembra es una hembra humana.
Métodos (no reivindicados)
Un aspecto adicional de la presente descripción se refiere a un método para tratar, prevenir o mejorar la infertilidad de una mujer que tiene un trastorno de la ovulación, que comprende administrar a dicha persona una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto como se define en el presente documento.
El compuesto también se puede administrar en forma de una composición farmacéutica como se describe en el presente documento y anteriormente. Las formas de administración y las dosis son las descritas en el presente documento y anteriormente.
El trastorno de la ovulación es como se describe en el presente documento y anteriormente. En una realización, dicho trastorno de la ovulación es un trastorno de infertilidad.
Preferiblemente, dicho individuo hembra es una hembra de mamífero, tal como una hembra humana.
Ejemplos
Materiales y Métodos
Participantes
Se obtuvieron muestras de ovocitos de tejido cortical ovárico obtenido de tres pacientes que se sometieron a ovariectomía unilateral antes del tratamiento gonadotóxico por una enfermedad maligna (no relacionada con ninguna neoplasia maligna de ovario). Las pacientes eran normoovulatorias, con hormonas reproductivas normales y no habían recibido estimulación ovárica con gonadotropinas exógenas. Todos los procedimientos se llevaron a cabo según las pautas y regulaciones pertinentes, y los Comités de Ética de Investigación Biomédica de la Región Central de Dinamarca y la Agencia Danesa de Protección de Datos aprobaron el estudio. Se obtuvo el consentimiento informado de todos los sujetos antes de la inclusión. Los pacientes dieron su consentimiento para la investigación realizada. En sujetos sometidos a ooforectomía, se utiliza una pequeña porción de la corteza ovárica para evaluar la reserva ovárica y con fines de investigación. El tejido cortical ovárico, recolectado en un momento aleatorio del ciclo menstrual, se crioconservó y clasificó el tejido como normal mediante evaluación morfológica (Rosendahlet al.,2011). Después de la crioconservación, se seleccionó aleatoriamente una pequeña pieza de corteza ovárica de cada paciente para el presente estudio. Hasta uso, la muestra cortical se almacenó en nitrógeno líquido (-196 °C), como se describió anteriormente (Andersenet al.,2008).
Microdisección de Captura Láser (LCM).
De cada una de las tres pacientes, se realizaron los siguientes tipos de aislamiento a) grupos de ovocitos primordiales puros y b) grupos de ovocitos primarios puros.
Los detalles sobre el aislamiento de ARN, la preparación y secuenciación de bibliotecas, el mapeo y el análisis estadístico, la bioinformática, la qPCR y la inmunohistoquímica están disponibles en Información complementaria.
Resultados
Ejemplo 1
Identificación de candidatos que intervienen en el desarrollo del folículo.
Sólo la Trigonelina forma parte de la presente invención.
Preparación de datos y filtración de datos transcriptómicos de ovocitos
Los folículos se estadificaron con precisión en función de su morfología (Fig. 1A y Fig. 1B) y los ovocitos se extirparon rigurosamente utilizando LCM, lo que permitió la recolección de ovocitos puros de folículos primordiales (N=3 pacientes, n=436 ovocitos) y primarios (N=3 pacientes, n=182 ovocitos), respectivamente. Las muestras de LCM recolectadas se agruparon posteriormente en tres muestras principales para cada etapa, haciendo un total de seis muestras (dos de cada paciente), antes de la preparación de la biblioteca y la secuenciación del ARN (Fig. 1C y Fig. 2). La secuenciación de ARN generó un promedio de 77 millones de lecturas por muestra (intervalo: 64-110 millones de lecturas) que se asignó al genoma humano (hg19) (asignación promedio: 35 millones de lecturas, intervalo: 23-65 millones de lecturas), usando genes RefSeq como modelo.
Análisis de clasificación y enriquecimiento de datos de secuenciación de ARN de ovocitos de folículos primordiales y primarios
Se encontró un total de 1099 transcripciones expresadas significativamente en ovocitos de folículos primordiales (Tabla 1, Fig. 2), y 1046 transcripciones expresadas significativamente en ovocitos de folículos primarios (Tabla 2, Fig. 2). Usando una prueba t estricta de una muestra (p < 0,05) como punto de corte estadístico, se generó una lista de SSCEG para ovocitos de folículos primordiales y primarios, respectivamente, y se seleccionaron para un análisis posterior (Fig. 2).
El análisis SSCEG reveló 1099 transcripciones (9,22%) (ovocitos de folículos primordiales y 1046 transcripciones (10,27%) (ovocitos de folículos primarios, de los genes expresados que se expresaron de manera significativa y consistente de una manera específica de etapa en ovocitos de folículos primarios y primarios, respectivamente (Fig. 2).
El SSCEG de ovocitos de folículos primordiales (1099) y primarios (1046) se utilizó para identificar genes que se expresaron de manera diferencial entre los dos grupos. El análisis DEG identificó 223 genes que estaban significativamente regulados negativamente durante la transición de los ovocitos de primordiales a primarios (la expresión más alta en los ovocitos de los folículos primordiales) y 268 genes que estaban significativamente regulados positivamente (la expresión más alta en los ovocitos de los folículos primarios) ( Fig. 2).
Se generó un mapa de calor de los datos de DEG FPKM para mostrar la expresión de los dos estadios celulares diferentes en los aislamientos, y la correlación entre los aislamientos por triplicado específicos de la etapa.
La identidad específica de los ovocitos aislados por LCM se evaluó mediante la presencia de varios transcritos específicos de ovocitos y la ausencia (o presencia escasa e inconsistente) de transcritos específicos de células de la granulosa.
El análisis de enriquecimiento continuo generado por IPA® de los transcriptomas se realizó en los siguientes cuatro grupos.
1) SSCEG en ovocitos de folículos primordiales (1099 genes) 2) SSCEG en ovocitos de folículos primarios (1046 genes). 3) DEG regulado negativamente (223) o 4) DEG regulado positivamente (268) en ovocitos durante la transición de folículo primordial a primario (Fig. 2).
Se empleó el software IPA® para realizar el análisis de enriquecimiento. En este análisis de enriquecimiento, se seleccionaron tres grupos de Sistemas Biológicos para analizar los transcriptomas; 1) 'Vías canónicas' 2) 'Funciones moleculares y celulares' y 3) 'Redes biológicas', y solo significativas (p < 0,05) se incluyen enriquecimientos en el texto.
En base en los datos del transcriptoma, los candidatos mencionados en las tablas 1a o 2 fueron identificados como candidatos para uso en la regulación del desarrollo del folículo al añadir un compuesto que cambia la actividad del candidato y determinar si dicho compuesto era capaz de regular la maduración del folículo, en particular, regular las transiciones primordiales a primarias de los folículos.
Tabla 1
Tabla 2
Ejemplo 2:
Materiales y métodos
Cultivos de ovarios
Los ovarios obtenidos de ratones se lavaron dos veces con medio de cultivo. Los antagonistas o agonistas a ensayar se disolvieron en disolventes adecuados y se añadieron al medio. Como medio de control que comprende disolvente se utilizó el antagonista o agonista. Uno de los ovarios se cultivó en medio control y otro se cultivó con el antagonista o agonista. Los antagonistas o agonistas probados y sus concentraciones se describen en la tabla 2.
Los ovarios se incubaron con antagonista a 37°C y 5% CO2 durante 24 y 96 horas, respectivamente (véase tabla 3).
Tabla 3:
Antagonista o Sustrato Concentración de Tiempo de agonista antagonista/agonista incubación AICAR Activador de la proteína quinasa activada por 1mM 96 horas AMP (AMPK)
Dorsomorfina Inhibidor de AMPK inhibidor de 6-fosfructo-2- 5 |<j>M 96 horas<3PO quinasa>30 j M 96 horasPDGF-AA Agonista del receptor a del factor de 10 ng/mL 96 horas (Sigma) crecimiento derivado de plaquetas
(PDGFRA)
PDE8B ketotifeno 85nM 96 horas CPS1 Ácido N-Carbamil-L-glutámico 10mM 96 horas NFE2L2 Clorhidrato de trigonelina 1,0 j M 96 horas
Los ovarios de los cultivos se fijaron, se incluyeron en parafina y se miraron al microscopio en rodajas. Los ovarios seccionados se tiñeron con hematoxilina y eosina (H&E) para visualizar la morfología del ovario por microscopía.
Análisis histológico y clasificación de folículos
Se determinó el número de folículos primordiales, primarios y secundarios, y se determinó si el antagonista o agonista era capaz de regular la foliculogénesis.
3PO -un inhibidor de PFKFB3 que
El inhibidor de PFKFB33PO (30<j>M) se añadió al medio y los ovarios se cultivaron en él durante cuatro días. Para el análisis estadístico solo se contaron los folículos sanos. Los ovarios cultivados con 3PO contenían 63,11 ± 8,83% de folículos primordiales, mientras que los ovarios de control contenían 76,15±5,81%, lo que resulta en una disminución significativa en los folículos primordiales (P=0,01282) cuando se trata con 3PO. Los ovarios de control tenían 13,50 ± 4,02 % de folículos primarios y los ovarios tratados con 3PO tenían 26,60 ± 11,24 % de folículos primarios. La diferencia entre los dos grupos de folículos primarios fue significativamente diferente (P=0,022794). Los ovarios tratados con 3PO contenían 11,58 ± 9,07 % de folículos secundarios y los ovarios de control contenían 10,35 ± 2,89 % de folículos secundarios. La distribución de folículos se ilustra en la Figura 3B.
AICAR - activador de AMPK
Para investigar los efectos de AICAR en la transición del folículo primordial a primario in vitro, se cultivaron ovarios en medio que contenía AICAR 1 mM (Figura 4A) o ddH2o (apéndice 14) durante cuatro días. Se observó que los ovarios cultivados en medio con AICAR contenían 86,02±5,84 % de folículos primordiales mientras que los ovarios no tratados solo contenían 68,25±5,965 % de folículos primordiales, por lo que la incubación con AICAR da como resultado una diferencia significativa en el número de folículos primordiales (P=0,00022). También hubo diferencia significativa en el número de folículos primarios en ovarios amenazados con o sin A<i>C<a>R (P=0,00428), ya que los ovarios tratados con AICAR solo contenían 10,82 ± 4,98 % de folículos primarios frente a los ovarios no tratados que contenían 20,90 ± 4,52 % de folículos primarios. Además, se observó que solo el 3,0±3,09% de todos los folículos se caracterizaron de forma secundaria cuando se trataron con AICAR, mientras que el 10,73±2,92% se caracterizaron de forma secundaria en el medio de control, diferencia que es significativa (P=0,00122). La distribución del folículo se presenta en la Figura 4B.
Dorsomorfina
Para verificar si la inhibición de AMPK podría estar involucrada en la transición del folículo primordial a primario, se añadió dorsomorfina 5 j M al medio y se incubó durante cuatro días (figura 15A y apéndice 16). El medio de control estaba contaminado, por lo que los resultados de los ovarios tratados con dorsomorfina se comparan con los resultados ilustrados en la figura 7. Los ovarios tratados con dorsomorfina contenían 71,32 ± 5,50 % de folículos primordiales mientras que los ovarios de control contenían 76,15 ± 4,02 % de folículos primordiales; diferencia entre los dos grupos no es significativa (P=0,1694). El número de folículos primarios tampoco es significativo (P=0,74224), ya que los ovarios tratados con dorsomorfina contienen 12,78 ± 2,23 % de folículos primarios y los ovarios no tratados contienen 13,495 ± 4,02 % de folículos primarios. Sin embargo, hubo una diferencia significativa entre el número de folículos secundarios (P=0,00938), ya que los ovarios tratados con dorsomorfina contenían 15,87 ± 3,06 % de folículos secundarios y los ovarios no tratados contenían 10,35±2,89%. La distribución de folículos se ilustra en la Figura 5B.
Ketotifeno - un inhibidor de la PDE8B
El estudio del transcriptoma discutido en el Ejemplo 1 muestra que PDE8B estaba regulado positivamente y, por lo tanto, tenía una expresión más alta en los folículos primarios que en los folículos primordiales.
PDE8B es el gen que codifica la proteína fosfodiesterasa 8B. Los ovarios se cultivaron con ketotifeno 85 nM durante 96 horas. Posteriormente se deshidrataron, se incluyeron en parafina y se tiñeron con H&E en secciones de 5 jm . Nuestro análisis mostró una diferencia significativa (P<0,05) entre el grupo tratado (Ketotifeno) y el grupo control (Figura 6). Cuando se trataron los ovarios con el inhibidor de la PDE8B, hubo aproximadamente 9% más folículos primordiales (P=0,029), 44% menos folículos primarios y 65% menos folículos secundarios (P=0,019).
Ácido N-Carbamoil-L-glutámico - regula positivamente la actividad de CPS1
El estudio del transcriptoma descrito en el Ejemplo 1 muestra que el gen de la carbamoil-fosfato sintasa 1(CPS1)está regulado negativamente. El genCPSltuvo una mayor expresión en los folículos primordiales en comparación con los folículos primarios. Se añadió ácido N-carbamoil-L-glutámico (NCG) al medio en una concentración de 10 mM. La Figura 7 demuestra que los folículos estaban muy bien formados y los ovocitos estaban intactos cuando se trataron con NCG en comparación con otros tratamientos (Figura 7).
Clorhidrato de Trigonelina - un inhibidor de Nrf2
Se indica que el factor nuclear, el gen eritroide 2 similar a 2 (NFE2L2 o Nrf2) está regulado positivamente en los folículos primarios según el estudio del transcriptoma descrito en el Ejemplo 1. Los ovarios se cultivaron durante 96 horas en medio suplementado con clorhidrato de Trigonelina 1,0 pM. La Figura 11 muestra los ovarios tratados con medio de clorhidrato de Trigonelina y medio de control después de la tinción H&E. El análisis estadístico mostró que hubo una disminución significativa (~20%) en el número promedio de folículos primordiales (P=9,9-10‘4) y un aumento significativo (~74%) en comparación con el control (P=9,5-10‘4) (véase Figura 9).
Ejemplo 3
Métodos
Animales
Se alojaron y criaron ratones híbridos C57BL/6jxCBA F1 (Janvier Labs, Francia) en las instalaciones para animales del Departamento de Biomedicina de la Universidad de Aarhus. Los animales fueron alojados en un ambiente controlado de luz-oscuridad 12:12 h y se les proporcionó alimento y aguaad libitum.Para el estudio se utilizaron cachorros hembras de 7 días de edad.
Aislamiento de ovarios y cultivo de órganos
Se sacrificaron las crías y se extirparon los ovarios. Usando un estereomicroscopio MZ75 (Leica Microsystems, Alemania), se eliminó el exceso de tejido. Durante la disección, los ovarios se mantuvieron a 37°C en medio de cultivo: aMEM (Thermo Fisher) suplementado con 10% FBS (Thermo Fisher), 100 mlU/mL de FSH (Sigma-Aldrich), 100 lU/mL penicilina (Thermo Fisher), 100 pg/mL estreptomicina (Thermo Fisher) y 1% Insulina-Transferrina-Selenio (Thermo Fisher). Los ovarios aislados se transfirieron a insertos de pocillos (membrana de PET ThinCert, tamaño de poro de 0,4 pm; Greiner bio-one) en placas de 24 pocillos (placas de cultivo celular tratadas con cultivo de tejidos; Costar). Se agregaron 200-300 pL de medio de cultivo al pocillo debajo del inserto y se colocaron hasta dos ovarios en la membrana de cada inserto. El medio de cultivo se complementó con diferentes concentraciones de los compuestos ensayados; bpV(HOpic) (Sigma-Aldrich), Temsirolimus (Sigma-Aldrich), Ketotifeno (Sigma-Aldrich), 3PO (Sigma-Aldrich), Dorsomorfina (Sigma-Aldrich), AICAR (Sigma-Aldrich), NCG (Sigma-Aldrich), y Difilina (Cayman Chemical). Se usaron hasta seis pozos en la placa de 24 pozos para insertos. Se añadió dH2O estéril al resto de los pocillos para asegurar la humedad y reducir la evaporación. Los ovarios se cultivaron a 37°C, 5% CO2 durante cuatro días. Se reemplazaron 150 pl de medio cada dos días con medio de cultivo fresco.
Análisis histológico y recuento de folículos
Los ovarios mantenidos en cultivo de órganos durante cuatro días se fijaron durante 24 horas en solución de paraformaldehído al 4% a 4°C. Después de la fijación, los ovarios se deshidrataron en series de etanol utilizando etanol al 70%, 96% y 99,9%. Se usó xileno como agente de limpieza antes de infiltrar los ovarios en cera de parafina. Se cortaron secciones de 5 pm de muestras en parafina utilizando un micrótomo (Cut 6062, SLEE medical, Alemania). Las secciones de parafina se montaron en portaobjetos de vidrio, la parafina se fundió a 60 °C y las muestras se tiñeron con hematoxilina y eosina (usando protocolos estándar).
Las muestras se desparafinizaron incubando en xileno durante 2x 15 min. y posteriormente rehidratado en serie de etanol; 3 * 2 min. en etanol al 99,9%, 2 min. en etanol al 96% y 2 min. en etanol al 70%. A continuación, las muestras se enjuagaron con dH2O, se tiñeron con hematoxilina durante 40 segundos, se enjuagaron con dH2O durante 5 minutos y se tiñeron con eosina durante 46 s. Las muestras se deshidrataron en etanol: 2x 2 min. en etanol al 96 %, 2 x 2 min en etanol al 99,9 % y finalmente aclarado en xileno durante al menos 30 min antes de montar las muestras utilizando medio de montaje Eukitt (Sigma-Aldrich) y cubreobjetos.
El número de folículos en cada etapa de desarrollo se contó utilizando un microscopio de investigación invertido (DMI4000B, Leica Microsystems, Alemania). Se contaron los folículos de cada 3' a 4' sección de cada ovario y se determinó la distribución de folículos en los diferentes estadios en porcentaje. Cada tratamiento se repitió en al menos tres repeticiones biológicas. Solo se contaron los folículos con un núcleo de ovocito visible. Los folículos se clasificaron en primordiales, primarios y secundarios. Brevemente, los folículos primordiales consisten en un ovocito encapsulado por células de la granulosa escamosas aplanadas. Los folículos primarios son ovocitos encapsulados por una capa de células de la granulosa cuboidales y los folículos secundarios consisten en ovocitos encapsulados por más de una capa de células de la granulosa cuboidales.
Análisis estadístico
Se promediaron los porcentajes de folículos en las diferentes etapas de cada repetición biológica. Al comparar dos grupos, se realizó una prueba t no pareada. Se realizó ANOVa unidireccional seguido de la determinación de la significación estadística utilizando el método de Holm-Sidak cuando se compararon más de dos grupos. Las diferencias se consideraron significativas cuando P<0,05. Las estadísticas se calcularon con la ayuda de GraphPad Prism (versión 7.00 GraphPad Software, La Jolla, CA, EE. UU.).
Resultados
Usando el ratón como nuestro sistema modelo experimental, hemos optimizado un sistemain vitromuy robusto y confiable para probar los compuestos por su capacidad para activar, o inhibir, los ovocitos de los folículos primordiales y, posteriormente, evaluar la distribución de los folículos primarios y secundarios (Fig. 9A), Tenemos excelentes pruebas de punto final para abordar funcionalmente si la calidad de las células se mantiene lo suficientemente bien como para que el ovocito sea fertilizado. Una vez que se selecciona un compuesto para pruebas adicionales, los folículos individuales se rizarán en un gel 3D (Fig. 9B), y los ovocitos maduros resultantes se someterán a fertilización in vitro y se transferirán nuevamente a un ratón hembra, para evaluar su potencial para formar un embrión (Fig 9B).
Como experiencias de control, apuntamos a la vía PI3K/PTEN/Akt, el bpV(HOpic) inhibidor de PTEN, un inhibidor de bisperoxovanadio que ha demostrado tener un efecto aparente sobre la activación del folículo primordial 1318-20. Además, nos enfocamos en la vía mTOR/Tsc mediante la inhibición de mTORC1 utilizando el análogo de rapamicina Temsirolimus (C56H87NO16) con el objetivo de disminuir la activación del folículo, ya que la rapamicina parece tener un efecto antagonista sobre la activación del folículo primordial21. Mediante el uso de estos dos antagonistas, establecimos un sistema que nos permite manipular la tasa de transición de primordial a primaria, así como disminuir la tasa de transición de primordial a primaria.
Compuestos de control.
Para establecer el sistema de detecciónin vitro, probamos nuestro sistema utilizando dos compuestos conocidos que inducen e inhiben la activación del folículo primordial, respectivamente. Para dirigirse a la vía PI3K/PTEN/Akt, se eligió el bpV(HOpic) inhibidor de PTEN. Se ha demostrado que este inhibidor tiene un efecto aparente sobre la activación del folículo primordial1318-20. Nuestro análisis del transcriptoma sugirió que la vía PI3K/AKT/PTEN se expresa diferencialmente, lo que hizo de PTEN un gran objetivo de control. Para dirigirse a la vía mTOR/Tsc, se utilizó la inhibición de mTORC1 con el análogo de rapamicina temsirolimus con el objetivo de disminuir la activación del folículo, ya que la rapamicina parece tener un efecto antagonista sobre la activación del folículo primordial21.
bpV(HOpic)
Estudios bioquímicos y de manipulación genética en ratones han identificado la vía de señalización PI3K-AKT como un mecanismo clave implicado en el mantenimiento del crecimiento y la pérdida de folículos 13. La vía se invierte por la acción de PTEN que provoca la desfosforilación de PIP3, regulando así el inicio del crecimiento del folículo y previniendo el agotamiento prematuro de la reserva de folículos.
El inhibidor de PTEN bpV(HOpic) es un inhibidor de bisperoxovanadio que afecta la activación del folículo primordial 13 al inhibir la vía PI3K/PTEN/Akt. Utilizando bpV(HOpic), demostramos que el sistema in vitro nos permite manipular el aumento de la tasa de transición de primordial a primario (Fig. 10A)
Temsirolimus
La inhibición de mTORC1 utilizando el análogo de rapamicina Temsirolimus (C56H87NO16) inhibe la vía mTOR/Tsc y, por lo tanto, disminuye la activación del folículo, ya que la rapamicina parece tener un efecto antagonista sobre la activación del folículo primordial21. Mediante el uso de Temsirolimus, demostramos que el sistema nos permite manipular una disminución de la tasa de transición primordial a primaria (Fig. 10B).
NRF2
NRF2 es un factor de transcripción que aumenta la expresión de una batería de genes para combatir el estrés oxidativo y electrofílico. Bajo condiciones sin estrés, NRF2 forma un complejo que conduce a su degradación. Tras la exposición a una variedad de factores estresantes, incluyendo ROS, sustancias tóxicas y carcinógenos, NRF2 se libera y se traslada al núcleo y se une a los elementos de respuesta antioxidante (ARE) en la región promotora de varios genes. Utilizamos Trigonelina inhibidor de NRF2 en nuestro sistema de cultivo in vitro de ovario. El valor médico de Trigonelina es muy alto y ya está clínicamente aprobado para otras afecciones, como la disminución de los niveles de glucosa en sangre, y posee actividades anticancerígenas, antimigrañosas, hipocolesterolémicas y antidiabéticas. Llevamos a cabo un intervalo de titulación de las concentraciones de Trigonelina (Fig. 11A) y monitorizamos la apariencia morfológica (Fig. 11B). Encontramos que la mayoría de las concentraciones de Trigonelina causaron una disminución significativa de los folículos primordiales en comparación con los grupos de control (Fig. 11A)
3PO
Además, probamos 3PO (Sigma-Aldrich) (antagonista, inhibidor), antagonista de molécula pequeña 3-(3-piridinil)-1-(4-piridinil)-2-propen-1-ona) que es un inhibidor potente y selectivo de PFKFB3 (6-fosfofructo-2-quinasa/fructosa-2,6-bisfosfatasa), y encontró que los ovarios cultivados con 3PO contenían 63,11 ± 8,83% de folículos primordiales, mientras que los ovarios de control contenían 76,15±5,81%, lo que resulta en una disminución significativa en los folículos primordiales (p=0,01282) cuando se trata con 3PO (Fig. 12).
AMPK
Probamos AICAR (Sigma-Aldrich), un activador de AMPK. Los ovarios aislados de ratones juveniles F1 se cultivaronin vitrodurante cuatro días en medio de control (0 mM AICAR) o medio que contenía diferentes concentraciones de AICAR: 0,1 mM, 0,2 mM, 0,4 mM, 0,5 mM, 1 mM para determinar la concentración óptima para ovarios para ser incubados con AICAR. AICAR es un activador de AMPK, y planteamos la hipótesis de que la activación de AMPK mantendría más folículos primordiales en latencia. Sin embargo, los folículos en crecimiento dentro del ovario tendían a parecer poco saludables y los ovocitos no podían mantener una estructura redonda, sin embargo, la distribución de folículos se contó de todos modos.
Los ovariosin vitrose cultivaron en medio que contenía 1 mM de AICAR y se encontró que la incubación de los ovarios cultivados en medio con AICAR contenía 86,02 ± 5,84 % de folículos primordiales, mientras que los ovarios no tratados solo contenían 68,25 ± 5,965 % de folículos primordiales, por lo que la incubación con AICAR da como resultado una diferencia significativa en el número de folículos primordiales (P=0,00022). También hubo diferencia significativa en el número de folículos primarios en ovarios amenazados con o sin AICAR (P=0,00428), ya que los ovarios tratados con AICAR solo contenían 10,82 ± 4,98 % de folículos primarios frente a los ovarios no tratados que contenían 20,90 ± 4,52 % de folículos primarios. Además, se observó que solo el 3,0±3,09% de todos los folículos se caracterizaron de forma secundaria cuando se trataron con AICAR, mientras que el 10,73±2,92% se caracterizaron de forma secundaria en el medio de control, una diferencia que es significativa (P=0,00122) (Fig. 13).
También probamos una concentración más baja. También probamos una concentración más baja. Los ovarios cultivados con 0,5 mM de AICAR contenían 83,83 ± 3,06 % (n=1) lo que significa que 0,5 mM de AICAR también fueron capaces de inhibir significativamente la activación de los folículos primordiales (P=0,0079) (datos no mostrados), sin embargo, la concentración todavía parecía demasiado dura para los folículos en crecimiento.
Ahora estamos en proceso de probar la metformina, como alternativa, un activador de AMPK.
PDE8B
PDE8Bes el gen que codifica la proteína fosfodiesterasa 8B (PDE8B). Se ha demostrado previamente quePDE8Bjunto con otros genes de fosfodiesterasa están presentes en el ovario humano (Petersen et al.
2015; Guillemette et al. 2009). Las fosfodiesterasas son enzimas que degradan el monofosfato de adenosina cíclico (cAMP). El cAMP se produce como resultado de la activación del receptor de la pareja de proteína G (GPCS) por la adenilato ciclasa. Tanto la FSH como la LH se unen a los GPCR, lo que lleva a la formación de cAMP. El cAMP es un segundo mensajero importante y los estudios indicaron que aumentó el crecimiento folicular y la expresión del gen KL en las células de la granulosa cuando se cultivaron chips de ovario humano con 8-bromo-cAMP (Zhang et al. 2004). Por lo tanto, se teorizó que la inhibición de PDE8B conduciría a un mayor crecimiento de folículos debido al aumento de cAMP intracelular. Contrariamente a esta hipótesis, Conti et al. (2002) describe cómo los niveles altos de cAMP dentro del ovocito pueden inhibir la reanudación meiótica de los ovocitos al mantener la fosfoquinasa A en un estado activo. Teorizaron que la alta concentración de cAMP intraovocitos puede ser producida por el transporte de cAMP desde las células de la granulosa a través de las uniones comunicantes. Esto se postuló porque se descubrió que la inhibición de la PDE3A (PDE en los ovocitos) prevenía la maduración de los ovocitos, mientras que los inhibidores de la PDE4 (PDE en las células de la granulosa) conducían a la continuación de la maduración de los ovocitos en los ovarios de ratón (Conti et al. 2002). Guillemette et al. (2009) demostraron que la inhibición de PDE8 en las células del cúmulo aumentaba el cAMP en el complejo cúmulo-ovocitos, lo que provocaba un retraso en la maduración de los ovocitos en los ovarios bovinos.
Como objetivo de PDE8B, usamos ketotifeno. Ovarios cultivados durante 96 horas con ketotifeno 85 nM. Posteriormente se deshidrataron, se incluyeron en parafina y se tiñeron con H&E en secciones de 5 pm. Nuestro análisis mostró una diferencia significativa (P<0,05) entre el grupo tratado (Ketotifeno) y su grupo de control (que recibió medio suplementado con ddH2O) (Fig. 14). Cuando se trataron los ovarios con el inhibidor de PDE8B, hubo aproximadamente 9% más folículos primordiales (P=0,029), 44% menos folículos primarios y 65% menos folículos secundarios (P=0,019) (Fig. 14)
CPS1
CPS1 es una enzima importante para el ciclo de la urea que cataliza la primera reacción: la conversión de amonio en fosfato de carbamoilo. Se ha sugerido que la acumulación de amonio en el líquido folicular y la alteración del perfil de expresión génica se asociaron con una reserva ovárica reducida y una edad materna avanzada Pacella-ince et al. (2014). Los niveles de amonio se utilizaron como marcador de la actividad de CPS1 y su estudio indicó que las mujeres con reserva ovárica reducida y edad materna avanzada tenían un aumento en los niveles de amonio, por lo tanto, una disminución en la actividad de CPS1 (Pacella-ince et al.
2014). Según este informe (Pacella-ince et al. 2014), sería interesante probar cómo la protección contra la escisión proteolítica y otros factores degradantes de CPS1 afectarían a nuestros ovarios cultivadosin vitro.
Se ha informado que el ácido N-carbamoil-L-glutámico (NCG) protege a la CPS1 humana contra la escisión proteolítica (Diez-Fernandez et al. 2013). Se añadió NCG al medio de cultivo de ovario en una concentración de 10, 20 y 30 pM. Esto reveló que NCG tiene el potencial de activar la distribución de folículos primordiales (Fig. 15).
PDE3B
La fosfodiesterasa-3 (PDE3) es una de las principales PDE hidrolizantes de cAMP en los ovocitos 24 Analizamos el potencial de la PDE3B para manipular la distribución de folículos mediante el uso de Dyphilline. Se añadió difilina al medio de cultivo de ovario en una concentración de 10 y 100 pM. Esto reveló que la difilina tiene el potencial de activar la distribución de folículos primordiales (Fig. 16), aunque el número analizado todavía es demasiado pequeño para realizar pruebas estadísticas.
Discusión
El impacto potencial de los resultados presentados en nuestra comprensión de la latencia, activación e integridad del folículo humano se analiza a continuación.
NRF2
NFR2 es un regulador de sustancias potencialmente tóxicas. Como se informó en la Sección 4.3.3, los ratones nulosNrf2tratados con una toxina ovárica mostraron un desarrollo folicular acelerado (Hu et al. 2006). El estudio actual también indica que Nrf2 es importante para mantener la latencia de los folículos. Se observó una disminución significativa en la distribución de folículos primordiales y un aumento significativo en la distribución de folículos primordiales en los ovarios tratados con el inhibidor de Nrf2 en comparación con el control. Como Hu et al. (2006) plantearon la hipótesis de que un aumento en el desarrollo folicular podría deberse a una expresión de Foxo3a reducida. De hecho, los ratones nulosNFE2L2mostraron Foxo3a significativamente reducido (Hu et al. 2006). Las investigaciones de la interacción entre la vía mTORC1 y la actividad de Nrf2 serían un tema interesante.
PFKFB3
PFKFB3 es importante para la regulación de la glucólisis en el citoplasma, pero también para el control del ciclo celular en el núcleo. PFKFB3 convierte la fructosa-6-fosfato (F6P) en fructosa-2,6-bisfosfato (F2,6BP), que a su vez activa la 6-fosfofructo-1-quinasa (PFK-1) y la glucólisis en el citoplasma, sin embargo, en el núcleo F2,6BP activa Cdk1. Cdk1 es un jugador central en la progresión del ciclo celular. F26BP estimula la fosforilación de p27 mediada por Cdk en la treonina 187, lo que a su vez da como resultado la uniquitinación de p27 y la degradación del proteasoma. Se ha demostrado que un antagonista de molécula pequeña 3-(3-piridinil)-1-(4-piridinil)-2-propen-1-ona (3PO) de FPKFB3 aumenta la proteína p27 no fosforilada 28
Los ovarios tratados con 3PO generalmente contenían menos folículos que los vistos anteriormente, además, varios de los folículos parecían atrésicos. A pesar de esta mala base, se contaron los folículos sanos y el resultado reveló que 3pO podía promover la transición de primordial a primaria. Previamente, Sugiura (2004) dio a entender que los ovocitos regulan la glucólisis y el ciclo del ácido cítrico en los GC, proporcionando así apoyo nutricional para los ovocitos. Además, Boland (1994) determinó que los folículos utilizan predominantemente la glucólisis para la producción de energía, y también se requiere la glucólisis folicular para el crecimiento y la secreción de estradiol. Este conocimiento indica que la inhibición de la glucólisis es adversa, por lo que se debe utilizar otro método para investigar el efecto de la 3PO en el ovocito.
PRKAA1
La proteína quinasa activada por AMP (AMPK) es un sensor del estado energético celular y está compuesta por una subunidad catalítica a y dos subunidades reguladoras: p y<y>. En los mamíferos, la subunidad catalítica está codificada por dos genes alternativos: PRKAA1, PRKAA2. Según los datos transcriptómicos, PRKAA1 se expresa en gran medida en los folículos primordiales y el análisis IPA ® determinó que estaba involucrado con la vía mTOR. La AMPK se activa por estrés metabólico y compuestos xenobióticos que dan como resultado un desequilibrio del estado energético celular causado por un aumento en el ADP celular: ATP y/o relaciones AMP: ATP. Una vez activada, la AMPK activa las vías catabólicas que generan ATP, al tiempo que desactiva las vías biosintéticas y la progresión del ciclo celular, con el deseo de restaurar la homeostasis energética
Claims (7)
1. Trigonelina para su uso en un método de tratamiento de la infertilidad o fertilidad reducida en un individuo hembra, en donde dicho método comprende tomar folículos primordiales de dicho individuo, tratar dichos folículos in vitro con trigonelina y reinsertarlos en dicho individuo.
2. La trigonelina para uso según la reivindicación 1, en donde la trigonelina es clorhidrato de trigonelina (cloruro de ácido 1 -metilpiridin-1 -io-3-carboxílico).
3. La trigonelina para uso según cualquiera de las reivindicaciones anteriores, en donde dicha trigonelina promueve la maduración del folículo.
4. La trigonelina para uso según cualquiera de las reivindicaciones anteriores, en donde dicha trigonelina estimula la transición primordial a primaria de los folículos.
5. La trigonelina para uso según cualquiera de las reivindicaciones anteriores, en donde dicho individuo es un ser humano.
6. La trigonelina para uso según cualquiera de las reivindicaciones anteriores, en donde dicha infertilidad o fertilidad reducida está influenciada por un trastorno de la ovulación.
7. La trigonelina para uso según la reivindicación 6, en donde dicho trastorno de la ovulación se selecciona del grupo que consiste en síndrome de ovario poliquístico (PCOS), insuficiencia ovárica prematura (POI), disfunción hipotalámica y menopausia prematura.
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| EP17173965 | 2017-06-01 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| ES3009460T3 true ES3009460T3 (en) | 2025-03-27 |
Family
ID=59061826
Family Applications (2)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| ES18729623T Active ES2928991T3 (es) | 2017-06-01 | 2018-05-31 | Compuestos para uso en la regulación de la maduración del folículo |
| ES22186835T Active ES3009460T3 (en) | 2017-06-01 | 2018-05-31 | Compounds for use in regulating follicle maturation |
Family Applications Before (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| ES18729623T Active ES2928991T3 (es) | 2017-06-01 | 2018-05-31 | Compuestos para uso en la regulación de la maduración del folículo |
Country Status (5)
| Country | Link |
|---|---|
| US (2) | US11666561B2 (es) |
| EP (2) | EP4129285B1 (es) |
| DK (1) | DK3630106T3 (es) |
| ES (2) | ES2928991T3 (es) |
| WO (1) | WO2018220126A1 (es) |
Families Citing this family (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US11850239B2 (en) | 2019-12-19 | 2023-12-26 | Ascentage Pharma (Suzhou) Co., Ltd. | MDM2 inhibitor and a platinum compound for cancer treatment |
| CN113087709A (zh) * | 2020-01-09 | 2021-07-09 | 沈阳药科大学 | 吡咯并嘧啶类衍生物及其制备方法和应用 |
| KR20220127239A (ko) * | 2020-01-10 | 2022-09-19 | 오르후스 우니베르시테트 | 난포 성숙을 촉진하기 위한 화합물 |
| CN114703121A (zh) * | 2022-03-29 | 2022-07-05 | 广西大学 | 一种水牛卵巢皮质体外培养用激活培养基及体外培养方法 |
| CN115624553B (zh) * | 2022-10-24 | 2024-08-23 | 华南理工大学 | 氨茶碱在制备激活原始卵泡的药物中的应用 |
Family Cites Families (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CA2679206C (en) * | 2007-03-05 | 2015-02-24 | Indus Biotech Private Limited | Pharmaceutical compositions comprising trigonelline and 4-hydroxyisoleucine and a process thereof |
| ES2688424T3 (es) * | 2009-06-11 | 2018-11-02 | Dsm Ip Assets B.V. | Trigonelina como estimulante muscular |
| BR112015013106A2 (pt) * | 2012-12-05 | 2017-07-11 | Ge Nutrients Inc | uso de extrato de feno-grego para melhorar a libido feminina |
-
2018
- 2018-05-31 US US16/616,769 patent/US11666561B2/en active Active
- 2018-05-31 WO PCT/EP2018/064359 patent/WO2018220126A1/en not_active Ceased
- 2018-05-31 ES ES18729623T patent/ES2928991T3/es active Active
- 2018-05-31 ES ES22186835T patent/ES3009460T3/es active Active
- 2018-05-31 EP EP22186835.9A patent/EP4129285B1/en active Active
- 2018-05-31 DK DK18729623.1T patent/DK3630106T3/da active
- 2018-05-31 EP EP18729623.1A patent/EP3630106B1/en active Active
-
2023
- 2023-04-10 US US18/298,023 patent/US12194031B2/en active Active
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| EP4129285C0 (en) | 2024-11-20 |
| US11666561B2 (en) | 2023-06-06 |
| ES2928991T3 (es) | 2022-11-24 |
| US12194031B2 (en) | 2025-01-14 |
| EP4129285B1 (en) | 2024-11-20 |
| EP4129285A1 (en) | 2023-02-08 |
| DK3630106T3 (da) | 2022-10-24 |
| EP3630106A1 (en) | 2020-04-08 |
| WO2018220126A1 (en) | 2018-12-06 |
| US20210145809A1 (en) | 2021-05-20 |
| US20230285375A1 (en) | 2023-09-14 |
| EP3630106B1 (en) | 2022-07-27 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US12194031B2 (en) | Compounds for use in regulating follicle maturation | |
| Dimitriadis et al. | Effects of phosphodiesterase 5 inhibitors on sperm parameters and fertilizing capacity | |
| RU2303259C2 (ru) | Терапевтическое применение селективных ингибиторов pde10 | |
| TWI620565B (zh) | 治療及預防移植物抗宿主病之方法 | |
| EP3060204B1 (en) | Beta-catenin | |
| Valvezan et al. | IMPDH inhibitors for antitumor therapy in tuberous sclerosis complex | |
| US20150119399A1 (en) | Beta-cell replication promoting compounds and methods of their use | |
| CN104994879A (zh) | 治疗癌症和预防药物抗性的方法 | |
| EP2187967B1 (en) | Methods and compositions for treating cancers | |
| KR20230092962A (ko) | 암, 자가면역 장애, 및 염증성 장애의 치료에서의 n-미리스토일 트랜스퍼라제(nmt) 억제제의 용도 | |
| CN117202908A (zh) | Wee1激酶抑制剂在治疗癌症疾病中的应用 | |
| Vallet et al. | Can some anticancer treatments preserve the ovarian reserve? | |
| EP4241773A1 (en) | Pharmaceutical composition for treating leukemia comprising flt3 inhibitor | |
| CN118338905A (zh) | Wee1激酶抑制剂在治疗癌症中的应用 | |
| Tan et al. | Thyroid hormone plus dual-specificity phosphatase-5 siRNA increases the number of cardiac muscle cells and improves left ventricular contractile function in chronic doxorubicin-injured hearts | |
| EP1706114B1 (en) | Chemical inhibitors of soluble adenylyl cyclase (sac) | |
| JP2016537400A (ja) | 幹細胞調節ｉｉ | |
| US12233047B2 (en) | Pharmaceutical combination and use thereof | |
| Lee et al. | Novel PDE9 inhibitors, KR39526 and KR39582, attenuate cardiac hypertrophy and fibrosis induced by pressure overload | |
| Krasinska et al. | Selective chemical inhibition as a tool to study Cdk1 and Cdk2 functions in the cell cycle | |
| Carr et al. | A Cdc25A antagonizing K vitamin inhibits hepatocyte DNA synthesis in vitro and in vivo | |
| US20180071280A1 (en) | Modulators of cell death processes | |
| KR20240001703A (ko) | 유비퀴틴 특이적 펩티다제 22 (usp22)의 억제제 및 질환 및 장애를 치료하기 위한 그의 용도 | |
| US20200316072A1 (en) | Compounds for use in regulating follicle maturation | |
| KR101519311B1 (ko) | 과호산구성 증후군을 위한 피리미딜아미노벤즈아미드 유도체 |