ES3014384T3

ES3014384T3 - Peptides and compositions for use in cosmetics

Info

Publication number: ES3014384T3
Application number: ES20700237T
Authority: ES
Inventors: Ariadna Grau-Campistany; Silvia Pastor; Patricia Carulla; Juan Carlos Escudero
Original assignee: Lipotrue SL
Current assignee: Lipotrue SL
Priority date: 2019-01-08
Filing date: 2020-01-03
Publication date: 2025-04-22
Anticipated expiration: 2040-01-03
Also published as: JP2022516961A; US20220062145A1; EP3908252A1; EP3908252C0; PL3908252T3; CN113271920A; JP7560131B2; WO2020144109A1; AU2020206415B2; US12011499B2; KR20210113604A; EP3908252B1; CN113271920B; AU2020206415A1

Abstract

La presente invención se refiere a una familia de péptidos que previenen y/o reducen los signos del envejecimiento cutáneo (incluido el envejecimiento cronológico y/o ambiental) y que son útiles para la reafirmación de la piel; composiciones cosméticas que comprenden dichos péptidos y usos y métodos cosméticos de dichos péptidos o composiciones cosméticas. (Traducción automática con Google Translate, sin valor legal)

Description

DESCRIPCIÓN

Péptidos y composiciones para uso en cosméticos

La presente invención se refiere al campo de cosméticos, más precisamente a péptidos y composiciones con actividades reafirmantes y antienvejecimiento y métodos y usos de los mismos en el campo de cosméticos.

En las últimas décadas, la esperanza de vida de la población ha incrementado significativamente. Además, también hay una mayor preocupación en la población con respecto a la estética personal y para tratar de retrasar o minimizar la aparición de signos relacionados con el envejecimiento.

La piel es el órgano más grande en los seres humanos y debido a su ubicación, en la interfaz del cuerpo, está sujeta al envejecimiento intrínseco (cronológico) y al envejecimiento extrínseco, este último provocado por factores ambientales (tal como, por ejemplo, la radiación UV, el tabaquismo o la contaminación). Esta exposición continua y, obviamente, el envejecimiento, conduce a cambios en la piel y a la aparición de imperfecciones en la misma (por ejemplo, pérdida de firmeza, arrugas, rugosidad y/o flacidez).

Uno de los principales constituyentes de la piel es la matriz extracelular (en lo sucesivo, ECM).

Es ampliamente conocido que la ECM es una mezcla compleja de proteínas secretadas, principalmente, colágeno y fibras elásticas, que proporcionan resistencia a la tracción y que se incrustan en un gel viscoelástico que comprende proteoglicanos, glicoproteínas (tal como, fibronectina, laminina y tenascina) y agua.

Esta ECM es responsable de varias de las propiedades físicas de la piel como, por ejemplo, la turgencia, la firmeza y la viscoelasticidad. Por lo tanto, la mayoría de los signos de envejecimiento de la piel y pérdida de firmeza de la misma, se deben a cambios en la ECM de la piel (pérdida de estructura o contenido o alteraciones de la misma). Conforme la piel envejece, se observan cambios en el espesor de la piel y en la calidad de la dermis y la epidermis. Los niveles y la composición de glicosaminoglicanos presentes en la ECM (entre ellos encontramos, por ejemplo, ácido hialurónico), relevantes para el contenido de agua y, por lo tanto, para la turgencia de la piel, se vuelven progresivamente más bajos. Esto da por resultado que la piel sea progresivamente más seca y delgada. Otros constituyentes de la ECM como, por ejemplo, colágeno y fibras elásticas, se desorganizan y degradan. Esta pérdida general de integridad conduce a la rigidez de la piel y a la disminución de la elasticidad (Farage M.A. y Miller K.W.,Structural characteristics of the ageing skin: a review(2007) Cutaneous and ocular toxicology, 26, 343-357).

Los proteoglicanos son uno de los componentes principales de la ECM. Todos los proteoglicanos se caracterizan por una porción de proteína, llamada proteína de núcleo, y una o más cadenas de polisacáridos no ramificadas, largas y cargadas negativamente llamadas glicosaminoglicanos (en lo sucesivo, GAG) que se unen covalentemente a la proteína de núcleo. Dependiendo de la cadena GAG, los proteoglicanos se clasifican como proteoglicanos de sulfato de heparano (por ejemplo, perlecano), proteoglicanos de sulfato de condroitina (por ejemplo, agrecano), proteoglicanos de sulfato de dermatano (por ejemplo, versicano) y proteoglicanos de sulfato de queratano (por ejemplo, lumicano).

Entre estos proteoglicanos, uno que ha demostrado tener una función central en el mantenimiento y funcionamiento de la ECM es versicano (número de referencia de Uniprot: P13611 (CSPG2_HUMAN); SEQ ID NO: 1). Esta proteína es un proteoglicano de sulfato de condroitina grande, que se transcribe a partir de un gen individual localizado en el cromosoma 5q 12-14 en el genoma humano y se extiende a lo largo de 90 kb. El gen comprende 15 exones. Versicano comprende al menos cuatro variantes (VO, V1, V2 y V3) que resultan del empalme alternativo del ARNm de versicano.

Todas las variantes comprenden un dominio G1 amino terminal, que interactúa con el glicosaminoglicano hialuronano (por ejemplo, el presente en la ECM), y un dominio carboxilo terminal denominado dominio G3 que comprende un dominio de unión a lectina tipo C, dos repeticiones de factor de crecimiento epidérmico y una región reguladora de complemento. La diferencia entre las cuatro variantes se puede encontrar en la región central, que contiene los dominios de unión a glicosaminoglicanos. VO contiene los dominios a y p, V1 el dominio p, V2 el dominio a y V3 ninguno.

Dada la estructura anterior, se ha mostrado que versicano es, como ya se mencionó anteriormente, un componente importante de la ECM. Tiene una función estructural y biomecánica, puesto que se une al hialuronano, las microfibrillas de fibrilina y la elastina, uniendo las fibras elásticas a la materia fundamental, pero también una función biológica celular que influye en múltiples eventos celulares como la migración celular y la proliferación celular (Wight, TN.,Versican: a versatile extracellular matrixproteoglycan in cellbiology(2002) Current Opinion in Cell Biology, 14: 617-623).

Otras moléculas pertinentes de la ECM son, como ya se mencionó anteriormente:

- Fibras elásticas: Es ampliamente conocido que la degradación de las fibras elásticas es un factor importante que contribuye al envejecimiento, causando pérdida de elasticidad, arrugas, flacidez y textura rugosa de la piel. Con respecto a los componentes de las fibras elásticas, es importante tener en cuenta que la tropoelastina es necesaria para la formación de elastina madura, en tanto que la fibrilina-1 parece ser el principal componente estructural de las microfibrillas, donde actúa como el andamio para la deposición de elastina en los tejidos adultos y tiene funciones biomecánicas y bioquímicas clave en la piel (Langton A.K., Sherratt M.J., Griffiths C.E.M. y Watson R.E.B.,A new wrinkle on old skin: the role of elastic fibres in skin ageing(2010) International Journal of Cosmetic Science, 32, 330-339).

- Ácido hialurónico: es un componente de la ECM que se ha demostrado que está con relación a la hidratación de la piel y, por lo tanto, su turgencia, como resultado de su alta capacidad de retención de agua (Nemoto T., Kubota R., Murasawa Y e Isogai Z.,Viscoelastic properties of the human dermis and other connective tissue andits relevance to tissue aging and aging-related diseases(2012) Viscoelasticity - From Theory to Biological Applications, libro editado por Juan de Vicente). Adicionalmente, la interacción del hialuronano con diversas proteínas de unión (hialadherinas tal como los proteoglicanos, por citar algunas) hace que el ácido hialurónico sea una molécula clave para actuar sobre la firmeza y la tirantez de la piel, no sólo por vía tópica sino también como relleno dérmico (Weindl G., Schaller M., Schafer-Korting M., Korting H.C.,Hyaluronic Acid in the Treatment and Prevention of Skin Diseases: Molecular, Biological, Pharmaceutical and Clinical Aspects(2004) Skin Pharmacol Physiol, 17, 207-213).

En los últimos años, se ha incrementado considerablemente el número de ingredientes activos para mejorar los signos del envejecimiento de la piel, tal como la pérdida de firmeza, la textura de la piel y las arrugas. Los ejemplos de estos ingredientes activos son retinoides, vitaminas o extractos botánicos (Bradley e.j., Griffiths C.E.M., Sherratt M.J., Bell M. y Watson R.E.B.,Over-the-counter antiageing topical agents and their ability to protect and repair photoaged skin(2015) Maturitas, 80, 265-272).

En el caso de los retinoides, es de destacar el ácido retinoico, que hoy en día es el "estándar de oro" para la inducción de la síntesis de varias moléculas de la ECM (por ejemplo, colágeno, fibronectina o laminina; Varani J., Mitra R.S., Gibbs D., Phan S.H., Dixit V.M., Mitra R., Wang T., Siebert K.J., Nickoloff B.J., Voorhees J.J.,All-Trans Retinoic Acid Stimulates Growth and Extracellular Matrix Production in Growth-Inhibited Cultured Human Skin Fibroblasts(1990) The Journal of Investigative Dermatology, 94, 717- 723). Por lo tanto, el ácido retinoico se ha considerado uno de los compuestos más potentes para tratar los signos del envejecimiento, puesto que puede mejorar significativamente la apariencia clínica de las arrugas faciales por el aumento de manera regulada de la transcripción y síntesis de proteínas de la ECM, tal como el colágeno y la fibronectina, y la inhibición de las metaloproteinasas de matriz (en lo sucesivo, MMP) (Varani J., Mitra R.S., Gibbs D., Phan S.H., Dixit V.M., Mitra R., Wang T., Siebert K.J., Nickoloff B.J., Voorhees J.J.,All-Trans Retinoic Acid Stimulates Growth and Extracellular Matrix Production in Growth-Inhibited Cultured Human Skin Fibroblasts(1990) The Journal of Investigative Dermatology, 94, 717-723). Sin embargo, hay varios inconvenientes en el uso de ácido retinoico como, por ejemplo: el ácido retinoico se tiene que usar con precaución, puesto que puede producir fácilmente irritación de la piel y no se recomienda combinar el ácido retinoico y la exposición al sol. Otra preocupación importante cuando se usan retinoides es su inestabilidad, especialmente en la presencia de oxígeno y luz (Sorg O., Antilie C., Kaya G. y Saurat J-H.,Retinoids in cosmeceuticals(2006) Dermatologic Therapy, 19, 289-296).

Los antioxidantes también se utilizan a fin de reducir la concentración de radicales libres en la piel y, por lo tanto, contrarrestar la degradación del colágeno. Un ejemplo de estos antioxidantes es el ácido ascórbico (también conocido como vitamina C). El ácido ascórbico, además de su efecto antioxidante, induce la síntesis de proteínas de la ECM (colágeno I y III y elastina) a la vez que promueve la diferenciación epidérmica e inhibe la MMP1, entre otras. Desafortunadamente, el ácido ascórbico, es extremadamente inestable y experimenta oxidación especialmente a altas temperaturas, condiciones aeróbicas, pH alto y/o cuando se expone a la luz (Manela-Azulay M., Azulay V., Aguinaga F., Issa M.C.,Vitamins and other Antioxidants(2017) Daily Routine in Cosmetic Dermatology, 1-13).

Además de los compuestos sintetizados químicamente, se encuentra en el mercado un amplio intervalo de extractos botánicos y compuestos derivados de plantas con múltiples aplicaciones, tal como, por ejemplo, extractos de uva que comprenden resveratrol (un antioxidante); té verde que comprende polifenoles; o soja que comprende isoflavonas. Sin embargo, la eficaciain vivoy la composición de estos ingredientes no están suficientemente validadas científicamente.

El ácido hialurónico, debido a sus propiedades viscoelásticas y su capacidad de retención de agua, también se ha utilizado en la industria cosmética para mantener la piel hidratada, mantener la elasticidad y tratar las arrugas al mejorar la aspereza o incluso utilizado como un agente de relleno dérmico. Sin embargo, actualmente, el ácido hialurónico, se obtiene de varias fuentes, tal como crestas de gallo o extractos bacterianos y, en consecuencia, estos productos pueden contener impurezas y se necesitan caracterizar exhaustivamente (Kogan G., Soltes L, Stern R. y Gemeiner P,Hyaluronic acid: a natural biopolymer witha widerange of biomedical and industrial applications(2007) Biotechnological Letters 29, 17-25).

Por otro lado, los péptidos también se pueden incorporar en fórmulas cosméticas para mejorar los signos del envejecimiento de la piel. Los ejemplos de esto incluyen las siguientes solicitudes de patente: WO 2010/091893 A1, FR 3052453 A1 y KR 20140074527 A. Los péptidos bioactivos pueden imitar las moléculas propias del cuerpo e influir en procesos tal como la síntesis de colágeno, con la ventaja de que tienen una tolerabilidad y estabilidad mucho mejores. Además, se puede desarrollar un amplio intervalo de actividades, químicas e indicaciones para ellos (Zhang L. y Falla T.J.,Cosmeceuticals and peptides(2009) Clinics in dermatology, 27, 485-494).

A pesar de la amplia variedad de compuestos y/o extractos en el campo, aún existe la necesidad de composiciones alternativas con mecanismos de acción novedosos y que tengan un efecto general sobre la ECM (por ejemplo, actuando sobre uno o más componentes de esta matriz) que conduzcan a un efecto sobre la firmeza de la piel, y que permitan la prevención y/o reducción de los signos de envejecimiento de la piel (envejecimiento cronológico y/o ambiental), y mejorar la viscoelasticidad y firmeza de la piel.

Los inventores de la presente invención, después de una investigación extensa y exhaustiva, han encontrado sorprendentemente pequeños péptidos de seis aminoácidos derivados de la secuencia de péptido de señalización en la región N-terminal de versicano (SEQ ID NO: 1), y derivados o variaciones de estos péptidos como se reivindica, que muestran actividades directamente relacionadas con el mantenimiento y producción de ECM (como se demuestra en los ejemplos que se incluyen a continuación). Por lo tanto, estos péptidos de la presente invención son útiles para la prevención y/o reducción de signos de envejecimiento de la piel; y/o para reafirmar la piel.

Los inventores han demostrado que los péptidos con SEQ ID NO: 2 y 3 (que pertenece a la región N-terminal de versicano, donde se ubica el péptido de señalización, más precisamente, las posiciones 21 a 26 y 20 a 25 de SEQ ID NO: 1, respectivamente) tienen actividades importantes que inhiben la actividad de la elastasa e inhiben la producción de metaloproteinasas 1 y 3 (es decir, la inhibición de la degradación de la ECM); y promueven la síntesis de versicano, tropoelastina (precursor secretado de elastina), fibrilina-1 y ácido hialurónico (cuatro de los principales componentes estructurales de la ECM). Además, estos péptidos muestran una mejor calidad en la firmeza de la piel. Por lo tanto, estos péptidos tienen efectos reafirmantes y antienvejecimiento.

Por lo tanto, estos péptidos, son útiles en cosméticos para mejorar las características viscoelásticas y reafirmantes de la piel y, por lo tanto, son útiles para prevenir y/o reducir los signos de envejecimiento de la piel relacionados con alteraciones o deficiencias en la ECM actuando directamente en diversos aspectos relacionados con la integridad estructural de la ECM.

También dentro del alcance de la presente invención están los péptidos que resultan de sustituciones conservadoras en los péptidos mencionados anteriormente derivados de versicano (esto es, péptidos SEQ ID NO: 2 y SEQ ID NO: 3).

Por lo tanto, en una primera realización, la presente invención se refiere a un grupo de péptidos efectivos para mejorar las características viscoelásticas y reafirmantes de la piel, puesto que es directamente derivable de los resultados experimentales incluidos a continuación. Por lo tanto, estos péptidos son útiles en la prevención y/o reducción de los signos de envejecimiento de la piel.

En una realización adicional, la presente invención se refiere a una composición que comprende uno de los péptidos de la presente invención o una combinación de los mismos.

En una realización adicional, la presente invención se refiere al uso como cosmético de los péptidos o las composiciones cosméticas de la presente invención.

Una realización adicional de la presente invención se refiere al uso cosmético de los péptidos o las composiciones de la presente invención para mejorar las características viscoelásticas y reafirmantes de la piel, por lo tanto, prevenir y/o reducir los signos de envejecimiento de la piel.

En otra realización, la presente invención se refiere a un método para prevenir y/o reducir los signos de envejecimiento de la piel en un sujeto, caracterizado porque comprende el uso de un péptido o una composición de la presente invención.

En una realización final, la presente invención se refiere a un método para mejorar las características viscoelásticas y reafirmantes de la piel en un sujeto, caracterizado porque comprende el uso de un péptido o una composición de la presente invención.

El término "grupo alifático no cíclico" y su plural, como se utiliza en la presente, tienen el significado común dado en el estado de la técnica a estos términos. Por lo tanto, estos términos se refieren, por ejemplo, y no se limitan a, grupos alquilo, alquenilo y alquinilo lineales o ramificados.

El término "grupo alquilo" y su plural, como se usa en la presente, se refiere a un grupo saturado, lineal o ramificado, que tiene entre 1 y 24, preferentemente entre 1 y 16, más preferentemente entre 1 y 14, incluso más preferentemente entre 1 y 12, e incluso más preferentemente aún entre 1, 2, 3, 4, 5 o 6 átomos de carbono y que está unido al resto de la molécula por un enlace simple, que incluye, por ejemplo y no se limita a, metilo, etilo, isopropilo, n-propilo, i-propilo, isobutilo, ter-butilo, n-butilo, sec-butilo, n-pentilo, n-hexilo, heptilo, octilo, decilo, dodecilo, laurilo, hexadecilo, octadecilo, amilo, 2-etilhexilo, 2-metilbutilo, 5-metilhexilo y similares. Los grupos alquilo se pueden sustituir opcionalmente por uno o más sustituyentes, tal como, halo, hidroxi, alcoxi, carboxi, carbonilo, ciano, acilo, alcoxicarbonilo, amino, nitro, mercapto y alcoxitio.

El término "grupo alquenilo" y su plural, como se usa en la presente, se refiere a un grupo lineal o ramificado que tiene entre 2 y 24, preferentemente entre 2 y 16, más preferentemente entre 2 y 14, incluso más preferentemente entre 2 y 12, incluso más preferentemente aún 2, 3, 4, 5 o 6 átomos de carbono, con uno o más enlaces dobles carbono-carbono, preferentemente con 1, 2 o 3 enlaces dobles carbono-carbono, conjugado o no conjugado, que está unido al resto de la molécula a través de un enlace individual, que incluye, por ejemplo y no limitado a, los grupos vinilo, oleilo, linoleilo y similares. Los grupos alquenilo se pueden sustituir opcionalmente por uno o más sustituyentes, tal como, halo, hidroxi, alcoxi, carboxi, carbonilo, ciano, acilo, alcoxicarbonilo, amino, nitro, mercapto y alcoxitio.

El término "grupo alquinilo" y su plural, como se usa en la presente, se refiere a un grupo lineal o ramificado que tiene entre 2 y 24, preferentemente entre 2 y 16, más preferentemente entre 2 y 14, incluso más preferentemente entre 2 y 12, incluso más preferentemente aún 2, 3, 4, 5 o 6 átomos de carbono, con uno o más enlaces triples carbono-carbono, preferentemente con 1,2 o 3 enlaces triples carbono-carbono, conjugados o no conjugados, que se une al resto de la molécula a través de un enlace individual, que incluye, por ejemplo y no limitado a, el grupo etinilo, 1 -propinilo, 2-propinilo, 1-butinilo, 2-butinilo, 3-butinilo, pentinilo, tal como 1 -pentinilo y grupos similares. Los grupos alquinilo se pueden sustituir opcionalmente por uno o más sustituyentes, tal como, halo, hidroxi, alcoxi, carboxi, carbonilo, ciano, acilo, alcoxicarbonilo, amino, nitro, mercapto y alcoxitio.

El término "grupo alicíclico" y su plural, como se utiliza en la presente, tienen el significado común dado en el estado de la técnica a estos términos. Por lo tanto, estos términos se utilizan para referirse a, por ejemplo y sin limitarse a, grupos cicloalquilo o cicloalquenilo o cicloalquinilo.

El término "cicloalquilo" y su plural, como se usa en la presente, se refiere a un grupo alifático mono- o policíclico saturado que tiene entre 3 y 24, preferentemente entre 3 y 16, más preferentemente entre 3 y 14, incluso más preferentemente entre 3 y 12, incluso más preferentemente todavía 3, 4, 5 o 6 átomos de carbono y que se une al resto de la molécula a través de un enlace individual, incluyendo, por ejemplo y no limitado a, ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopentilo, ciclohexilo, cicloheptilo, metilciclohexilo, dimetilciclohexilo, octahidroindeno, decahidronaftaleno, dodecahidro-fenaleno, adamantilo y similares, y que puede estar opcionalmente sustituido por uno o más grupos, tal como, alquilo, halo, hidroxi, alcoxi, carboxi, carbonilo, ciano, acilo, alcoxi-carbonilo, amino, nitro, mercapto y alcoxitio.

El término "cicloalquenilo" y su plural, como se usa en la presente, se refiere a un grupo alifático mono o policíclico no aromático que tiene entre 5 y 24, preferentemente entre 5 y 16, más preferentemente entre 5 y 14, incluso más preferentemente entre 5 y 12, incluso más preferentemente aún 5 o 6 átomos de carbono, con uno o más dobles enlaces carbono-carbono, preferentemente con 1, 2 o 3 dobles enlaces carbono-carbono, conjugados o no conjugados, que está unido al resto de la molécula a través de un enlace individual, incluyendo, por ejemplo y no limitado a, el grupo ciclopent-1-en-1-ilo y grupos similares, y que puede estar opcionalmente sustituido por uno o más grupos, tal como, alquilo, halo, hidroxi, alcoxi, carboxi, carbonilo, ciano, acilo, alcoxi-carbonilo, amino, nitro, mercapto y alcoxitio.

El término "cicloalquinilo" y su plural, como se usa en la presente, se refiere a un grupo alifático mono o policíclico no aromático que tiene entre 8 y 24, preferentemente entre 8 y 16, más preferentemente entre 8 y 14, incluso más preferentemente entre 8 y 12, incluso más preferentemente todavía 8 o 9 átomos de carbono, con uno o más triples enlaces carbono-carbono, preferentemente con 1,2 o 3 triples enlaces carbono-carbono, conjugados o no conjugados, que se une al resto de la molécula a través de un enlace individual, incluyendo, por ejemplo y no limitado a, el grupo ciclooct-2-in-1-ilo y similares, y que puede estar opcionalmente sustituido por uno o más grupos, tal como, alquilo, halo, hidroxi, alcoxi, carboxi, carbonilo, ciano, acilo, alcoxicarbonilo, amino, nitro, mercapto y alcoxitio.

El término "grupo arilo" y su plural, como se usa en la presente, se refiere a un grupo aromático que tiene entre 6 y 30, preferentemente entre 6 y 18, más preferentemente entre 6 y 10, incluso más preferentemente 6 o 10 átomos de carbono, que comprende 1,2, 3 o 4 anillos aromáticos, unidos por un enlace carbono-carbono o condensados, y que se une al resto de la molécula a través de un enlace individual, que incluye, por ejemplo y no se limita a, fenilo, naftilo, difenilo, indenilo, fenantrilo o antranilo entre otros. El grupo arilo se puede sustituir opcionalmente por uno o más sustituyentes, tal como, halo, hidroxi, alcoxi, carboxi, carbonilo, ciano, acilo, alcoxicarbonilo, amino, nitro, mercapto y alcoxitio.

El término "grupo aralquilo" y su plural, como se usa en la presente, se refiere a un grupo alquilo sustituido por un grupo aromático, con entre 7 y 24 átomos de carbono e incluyendo, por ejemplo y no restringido a, -(CH2)1-6-fenilo, -(CH2)1-6-(1-naftilo), -(CH2)1-6-(2-naftilo), -(CH2)1-6-CH(fenil)2 y similares. Los grupos aralquilo se pueden sustituir opcionalmente por uno o más sustituyentes, tal como, halo, hidroxi, alcoxi, carboxi, carbonilo, ciano, acilo, alcoxicarbonilo, amino, nitro, mercapto y alcoxitio.

El término "grupo heterocíclico" y su plural, como se usa en la presente, se refiere a un anillo de heterociclo o hidrocarburo de 3-10 miembros, en el que uno o más de los átomos del anillo, preferentemente 1, 2 o 3 de los átomos del anillo, es un elemento diferente al carbono, tal como nitrógeno, oxígeno o azufre y puede estar saturado o insaturado. Con los propósitos de esta invención, el heterociclilo puede ser un sistema cíclico, monocíclico, bicíclico o tricíclico que puede incluir sistemas de anillos fusionados; y los átomos de nitrógeno, carbono o azufre se pueden oxidar opcionalmente en el radical heterociclilo; el átomo de nitrógeno se puede cuaternizar opcionalmente; y el radical heterociclilo se puede saturar parcial o completamente o puede ser aromático. Con preferencia creciente, el término heterocíclico se refiere a un anillo de 5 o 6 miembros. Los grupos heterocíclicos se pueden sustituir opcionalmente por uno o más sustituyentes, tal como, halo, hidroxi, alcoxi, carboxi, carbonilo, ciano, acilo, alcoxicarbonilo, amino, nitro, mercapto y alcoxitio.

El término "grupo heteroarilalquilo" y su plural, como se usa en la presente, se refiere a un grupo alquilo sustituido con un grupo heterociclilo aromático sustituido o no sustituido, el grupo alquilo tiene de 1 a 6 átomos de carbono y el grupo heterociclilo aromático entre 2 y 24 átomos de carbono y de 1 a 3 átomos distintos de carbono e incluyendo, por ejemplo y no restringido a, -(CH2)1-6-imidazolilo, -(CH2)1-6-triazolilo, -(CH2)1-6-tienilo, -(CH2)1-6-furilo, -(CH2)1-6-pirrolidinilo y similares. Los grupos heteroarilalquilo se pueden sustituir opcionalmente por uno o más sustituyentes, tal como, halo, hidroxi, alcoxi, carboxi, carbonilo, ciano, acilo, alcoxicarbonilo, amino, nitro, mercapto y alcoxitio.

Los términos "halo" o "halógeno", como se usan en la presente, se refieren a flúor, cloro, bromo o yodo, y sus aniones se conocen como haluros.

Como se utiliza en el presente documento, el término "sal" y sus plurales se refieren a cualquier tipo de sal de entre las conocidas en el estado de la técnica, por ejemplo, sales de haluro, sales de hidroxiácido (tal como sales de oxiácido, sales de ácido, sales básicas y sales dobles), hidroxosales, sales mixtas, oxisales u otras sales hidratadas. Este término comprende tanto sales cosméticamente aceptables como sales cosméticamente inaceptables, puesto que estas últimas pueden ser útiles en la preparación de sales cosméticamente aceptables.

Como se utiliza en el presente documento, el término "isómero" y su plural se refieren a isómeros ópticos, enantiómeros, estereoisómeros o diastereoisómeros. Los enantiómeros o diastereoisómeros individuales, así como sus mezclas, se pueden separar por técnicas convencionales conocidas en el estado de la técnica.

Como se utiliza en la presente, el término "solvato" y su plural se refieren a cualquier solvato conocido en el estado de la técnica, tal como solvatos polares, apolares o anfifílicos, e incluyen cualquier solvato cosméticamente aceptable que, cuando se administra o aplica al sujeto interesado (de manera directa o indirectamente) proporciona el compuesto de interés (el péptido o péptidos de la presente invención). Preferentemente, el solvato es un hidrato, un solvato con un alcohol tal como metanol, etanol, propanol o isopropanol, un solvato con un éster tal como acetato de etilo, un solvato con un éter tal como metil éter, etil éter o THF (tetrahidrofurano) o un solvato con DMF (dimetilformamida), y más preferentemente un hidrato o un solvato con un alcohol tal como etanol.

Además, como se utiliza en la presente, el término “aminoácido” y su plural incluyen los aminoácidos codificados por el código genético, así como los aminoácidos no codificados, ya sean naturales o no y ya sean D- y L-aminoácidos. Los ejemplos de aminoácidos no codificados son, sin restricción, citrulina, ornitina, sarcosina, desmosina, norvalina, ácido 4-aminobutírico, ácido 2-aminobutírico, ácido 2-aminoisobutírico, ácido 6-aminohexanoico, 1 -naftilalanina, 2-naftilalanina, ácido 2-aminobenzoico, ácido 4-aminobenzoico, 4-clorofenilalanina, ácido 2,3-diaminopropiónico, ácido 2,4 diaminobutírico, cicloserina, carnitina, cisteína, penicilamina, ácido piroglutámico, tienilalanina, hidroxiprolina, alo-isoleucina, alo-treonina, ácido isonipecótico, isoserina, fenilglicina, estatina, p-alanina, norleucina, N-metilaminoácidos, a-aminoácidos y p-aminoácidos, entre otros. Sin embargo, se conocen otros aminoácidos antinaturales en el estado de la técnica (ver, por ejemplo,"Unusual amino acids in peptide synthesis"por D. C. Roberts y F Vellaccio, The Peptides, Vol. 5 (1983), Capítulo VI, Gross E. y Meienhofer J., Eds., Academic Press, Nueva York, EUA).

El "porcentaje de identidad" con respecto a péptidos, polipéptidos y proteínas, como se usa en la presente, tiene el significado comúnmente atribuido en el estado de la técnica y, por lo tanto, se refiere al porcentaje de aminoácidos que son idénticos entre dos secuencias de aminoácidos que se comparan después de una alineación óptima de estas secuencias, donde este porcentaje es simplemente estadístico y las diferencias entre las dos secuencias de aminoácidos se distribuyen aleatoriamente de principio a fin de la secuencia. "Alineamiento óptimo" se entiende como aquel alineamiento de secuencias de aminoácidos que da lugar a un mayor porcentaje de identidad. El porcentaje de identidad se calcula al determinar la cantidad de posiciones idénticas en las que un aminoácido es idéntico en las dos secuencias comparadas, al dividir la cantidad de posiciones idénticas por la cantidad de posiciones comparadas y al multiplicar el resultado obtenido por 100 para obtener el porcentaje de identidad entre las dos secuencias. Las comparaciones de secuencias entre dos secuencias de aminoácidos se pueden llevar a cabo manualmente o por medio de programas de computadora conocidos en el estado de la técnica, tal como el algoritmo BLAST (Herramienta Básica de Búsqueda de Alineación Local).

Como se indica anteriormente, en un primer aspecto, la presente invención se refiere a péptidos de la fórmula (I): Ri-(X)m-AAi-AA2-AA3-AA4-AA5-(Y)n-R2

(I)

sus isómeros, sales, solvatos cosméticamente aceptables y mezclas de los mismos, en donde:

X es Ala;

AA<1>es Leu;

AA<2>es His;

AA<3>es Lys;

AA<4>es Val;

AA<5>es Lys;

Y es Val;

n y m se seleccionan independientemente entre sí de 0 y 1;

R<1>se selecciona de H, grupo alifático no cíclico sustituido o insustituido, aliciclilo sustituido o insustituido, heterociclilo sustituido o insustituido, heteroarilalquilo sustituido o insustituido, arilo sustituido o insustituido, aralquilo sustituido o insustituido y R<5>-CO- en donde R<5>se selecciona del grupo formado por radical alquilo C<1>-C<24>sustituido o insustituido, alquenilo C<2>-C<24>sustituido o insustituido, alquinilo C<2>-C<24>sustituido o insustituido, cicloalquilo C<3>-C<24>sustituido o insustituido, cicloalquenilo C<5>-C<24>sustituido o insustituido, cicloalquinilo C<8>-C<24>sustituido o insustituido, arilo C<6>-C<30>sustituido o insustituido, aralquilo C<7>-C<24>sustituido o insustituido, anillo de heterociclilo sustituido o insustituido de 3 a 10 miembros, y heteroarilalquilo sustituido o insustituido de 2 a 24 átomos de carbono y 1 a 3 átomos distintos de carbono y una cadena de alquilo de 1 a 6 átomos de carbono; y

R<2>se selecciona de H, -NR<3>R<4>-, -OR<3>y -SR<3>-, en donde R<3>y R<4>se seleccionan independientemente de H, grupo alifático no cíclico sustituido o insustituido, aliciclilo sustituido o insustituido, heterociclilo sustituido o insustituido, heteroarilalquilo sustituido o insustituido, arilo sustituido o insustituido, y aralquilo sustituido o insustituido.

Se contempla que los aminoácidos utilizados o presentes en los péptidos de la presente invención son L-aminoácidos, D-aminoácidos o combinaciones de los mismos. En una realización preferida, los aminoácidos utilizados o presentes en los péptidos de la presente invención son L-aminoácidos.

Preferentemente, los isómeros mencionados anteriormente son estereoisómeros. Se contempla que estos estereoisómeros son enantiómeros o diastereoisómeros. Por lo tanto, en una realización preferida de la presente invención, el péptido es una mezcla racémica, una mezcla diastereomérica, un enantiómero puro o un diastereoisómero puro.

Dentro del alcance de la presente invención también se incluyen péptidos con sustituciones conservadoras con respecto a los péptidos de fórmula (I) de la presente invención. Por lo tanto, dentro del alcance de la presente invención están péptidos que son sustancialmente homólogos a los péptidos de fórmula (I) de la presente invención, que tienen al menos un 75%, preferentemente 80%, preferentemente 85%, preferentemente 90%, más preferentemente 95% e incluso más preferentemente 99% de identidad con un péptido de fórmula (I) de la presente invención como se describe en la presente, y que muestran una o más de las actividades y efectos descritos en la presente para los péptidos de la presente invención, preferentemente todas las actividades y efectos divulgados en la presente para los péptidos de la presente invención.

En una realización preferida, m es 1, y, preferentemente, n es 0.

En otra realización preferida, n es 1 y, preferentemente, m es 0.

Preferentemente, R<1>se selecciona de H o R<5>-CO-, en donde R<5>se selecciona del grupo formado por radical alquilo C<1>-C<24>sustituido o insustituido, alquenilo C<2>-C<24>sustituido o insustituido, alquinilo C<2>-C<24>sustituido o insustituido, cicloalquilo C<3>-C<24>sustituido o insustituido, cicloalquenilo C<5>-C<24>sustituido o insustituido, cicloalquinilo C<8>-C<24>sustituido o insustituido, arilo C<6>-C<30>sustituido o insustituido, aralquilo C<7>-C<24>sustituido o insustituido, anillo de heterociclilo sustituido o insustituido de 3 a 10 miembros, y heteroarilalquilo sustituido o insustituido de 2 a 24 átomos de carbono y 1 a 3 átomos distintos de carbono y una cadena de alquilo de 1 a 6 átomos de carbono. Más preferentemente, R<1>se selecciona de H, acetilo (en lo sucesivo, Ac), ter-butanoilo, hexanoilo, 2-metilhexanoilo, ciclohexanocarboxilo, octanoilo, decanoilo, lauroilmiristoilo, palmitoilo, estearoilo, oleoilo y linoleoilo. Incluso más preferentemente, R<1>es H, Ac, lauroilo, miristoilo o palmitoilo. En una realización aún más preferida, R<1>es Ac o miristoilo.

También, preferentemente, R<2>es H o NH<2>, más preferentemente NH<2>.

Por lo tanto, en la realización más preferida, R<1>es Ac o miristoilo y R<2>es H o NH<2>, más preferentemente NH<2>.

En una realización preferida, el péptido de la fórmula (I) es:

R<1>-Leu-His-Lys-Val-Lys-Val-R<2>(R<1>-SEQ ID NO:<2>-R<2>); o

R<1>-Ala-Leu-His-Lys-Val-Lys-R<2>(R<1>-SEQ ID NO:<3>-R<2>).

Más preferentemente, el péptido de la fórmula (I) es:

Miristoil-Leu-His-Lys-Val-Lys-Val-NH<2>(Miristoil-SEQ ID NO:<2>-NH<2>); o

Ac-Ala-Leu-His-Lys-Val-Lys-NH<2>(Ac-SEQ ID NO:<3>-NH<2>).

En la realización más preferida, el péptido de la fórmula (I) es:

R<1>-Ala-Leu-His-Lys-Val-Lys-R<2>(R<1>-SEQ ID NO:<3>-R<2>), aún más preferentemente Ac-Ala-Leu-His-Lys-Val-Lys-NH<2>(Ac-SEQ ID NO:<3>-NH<2>).

En otra realización más preferida, el péptido de la fórmula (I) es:

R<1>-Leu-His-Lys-Val-Lys-Val-R<2>(R<1>-SEQ ID NO:<2>-R<2>), aún más preferentemente Miristoil-Leu-His-Lys-Val-Lys-Val-NH<2>(Miristoil-SEQ ID NO:<2>-NH<2>).

De acuerdo con lo que ya se ha indicado anteriormente, dentro del alcance de la presente invención también se incluyen péptidos con sustituciones conservadoras con respecto a los péptidos R<1>-SEQ ID NO:2-R2 o R<1>-SEQ ID NO:<3>-R<2>. Por lo tanto, dentro del alcance de la presente invención están los péptidos que son sustancialmente homólogos a R<1>-SEQ ID NO:2- R<2>y R<1>-SEQ ID NO:<3>-R<2>, que tienen al menos un 75%, preferentemente 80%, preferentemente 85%, preferentemente 90%, más preferentemente 95% e incluso más preferentemente 99% de porcentaje de identidad con R<1>-SEQ ID NO:2-R2 o R<1>-SEQ ID NO:<3>-R<2>y que mantienen una o más de las actividades descritas en la presente para los péptidos de la presente invención, más preferentemente todas las actividades descritas en la presente para los péptidos de la presente invención. R<1>y R<2>son como se explica y divulga anteriormente.

Los péptidos de la presente invención se pueden producir o sintetizar de acuerdo con cualquiera de los métodos conocidos en el estado de la técnica, por ejemplo, por síntesis química, biofermentación o producción transgénica. Más preferentemente, los péptidos de la presente invención se producen por medio de síntesis química.

Las actividades de los péptidos de la presente invención, es decir, la inhibición de la actividad elastasa y de la producción de metaloproteinasas 1 y 3; y la modulación de la síntesis de versicano, tropoelastina, fibrilina-1 y ácido hialurónico, demuestran, como ya se indicó anteriormente, que estos péptidos (y péptidos derivados de los mismos) y composiciones que comprenden los mismos son adecuados para usarse como o en formulaciones cosméticas destinadas a mejorar las características viscoelásticas y reafirmantes de la piel de un sujeto y, por lo tanto, son útiles para prevenir y/o reducir los signos de envejecimiento de la piel (por ejemplo, arrugas, aspereza y/o flacidez).

La aplicación tópica de estos péptidos mejora la viscoelasticidad y firmeza de la dermis debido a que, como se puede derivar directamente de los ejemplos que se incluyen a continuación:

- Hay un claro aumento en la síntesis de versicano, la molécula más pertinente implicada en esta característica de la piel.

- La distribución de fibras elásticas también se mejora puesto que también se puede observar un incremento de fibrilina-1 y tropoelastina. Además, se muestra que la actividad de elastasa se inhibe por los péptidos de la presente invención. Como se indicó anteriormente, es ampliamente conocido que la degradación de las fibras elásticas es un factor importante que contribuye al envejecimiento, causando pérdida de elasticidad, arrugas, flacidez y textura rugosa de la piel. Por lo tanto, el incremento en la síntesis de los componentes clave de las fibras elásticas y la inhibición de su degradación proporciona una mejora en los signos de envejecimiento mencionados anteriormente.

- Incremento de la síntesis de ácido hialurónico, que mejora la hidratación, firmeza y tirantez de la piel. - Disminución en la producción de metaloproteinasas 1 y 3 (disminución de manera regulada de su expresión), es decir, una disminución en la producción de moléculas responsables de la degradación de la ECM.

Además, como se puede derivar directamente de los ejemplos incluidos a continuación, los péptidos de la presente invención (y los péptidos derivados de los mismos) y las composiciones que comprenden los mismos proporcionan una calidad mejorada de la firmeza de la piel (por ejemplo, al mejorar la recuperación de la piel a estímulos o agresiones externos), preferentemente de la piel de la cara.

Por lo tanto, los péptidos de la presente invención resuelven el problema técnico mencionado anteriormente presente en el estado de la técnica.

En un segundo aspecto, la presente invención se refiere a una composición que comprende un péptido de la presente invención, como se divulga en la presente.

En una realización preferida de la presente invención, la composición es una composición cosmética que proporciona la prevención y/o reducción de los signos de envejecimiento de la piel, incluido el envejecimiento cronológico y/o ambiental. Además, la composición cosmética de la presente invención mejora la viscoelasticidad y la firmeza de la piel debido a las características mencionadas anteriormente de los péptidos de la presente invención.

Se contempla que la composición cosmética de la presente invención comprende un péptido de la presente invención o una combinación o mezcla de los péptidos de la presente invención.

En una realización, la composición cosmética descrita anteriormente comprende 0,1%- 0,0001% (masa/volumen; esto es, mg/ml) de un péptido de la presente invención o una combinación de péptidos de la presente invención. Más preferentemente, dicha composición comprende 0,05%-0,001% (m/v) de un péptido de la presente invención o una combinación de péptidos de la presente invención.

Se contempla que la composición cosmética de la presente invención también comprende ingredientes cosméticos adicionales. Estos ingredientes cosméticos adicionales comprenden los que se usan habitualmente en el estado de la técnica como, por ejemplo, adyuvantes tal como estabilizante, solubilizante, vitamina, colorante y perfumería; portadores; y/u otros ingredientes activos cosméticos.

Estos ingredientes cosméticos adicionales, deben ser de manera física y químicamente compatibles con el resto de los componentes de la composición y, especialmente, con los péptidos de la presente invención comprendidos en la composición de la presente invención. De manera similar, la naturaleza de estos ingredientes cosméticos adicionales no debe alterar inaceptablemente los beneficios de los compuestos de la presente invención. Estos ingredientes cosméticos adicionales pueden ser de origen sintético o natural, tal como, por ejemplo, extractos de plantas, o se pueden derivar de un proceso de biofermentación (ver, por ejemplo, CTFA Cosmetic Ingredient Handbook, Undécima Edición (2006)).

Se contempla que los ingredientes cosméticos adicionales mencionados anteriormente comprenden aquellos ingredientes comúnmente utilizados en composiciones para cuidar y/o limpiar la piel y/o el cabello tal como, por ejemplo, agentes que inhiben la síntesis de melanina, agentes blanqueadores o despigmentantes, agentes antienvejecimiento, agentes que inhiben la NO-sintasa, antioxidantes, agentes de contaminación antiatmosférica y/o de captura de radicales libres, agentes antiglicación, agentes emulsionantes, emolientes, solventes orgánicos, propulsores líquidos, acondicionadores de la piel tal como por ejemplo agentes humectantes, sustancias de retención de humedad, alfa hidroxiácidos, humectantes, vitaminas, pigmentos o colorantes, tintes, polímeros gelificantes, agentes espesantes, agentes tensioactivos, suavizantes, otros agentes antiarrugas, agentes capaces de reducir o eliminar bolsas debajo de los ojos, agentes exfoliantes, agentes antimicrobianos, agentes antimicóticos, bactericidas, agentes que estimulan la síntesis de macromoléculas dérmicas o epidérmicas y/o capaces de prevenir o inhibir su degradación, tal como, por ejemplo, agentes que estimulan la síntesis de colágenos, agentes que estimulan la síntesis de elastina, agentes que estimulan la síntesis de laminina, agentes que inhiben la degradación de colágeno, agentes que inhiben la degradación de elastina, agentes que estimulan la proliferación de fibroblastos, agentes que estimulan la proliferación de queratinocitos, agentes que estimulan la diferenciación de queratinocitos, agentes que estimulan la síntesis de lípidos y la síntesis de componentes delestrato córneo(ceramidas, ácidos grasos, etc.), agentes dermorrelajantes, agentes que estimulan la síntesis de glicosaminoglicanos, agentes reparadores de ADN, agentes protectores de ADN, agentes que estimulan la actividad del proteasoma, agentes antiprurito, agentes para tratar la piel sensible, agentes reafirmantes, agentes astringentes, agentes reguladores de la producción de sebo, agentes que estimulan la lipólisis, agentes anticelulíticos, agentes calmantes, agentes antiinflamatorios, agentes que actúan sobre la circulación capilar y/o la microcirculación, agentes que actúan sobre las mitocondrias celulares, agentes destinados a mejorar la unión dermoepidermal, conservadores, perfumes, agentes quelantes, extractos de plantas, aceites esenciales, extractos marinos, agentes derivados de un proceso de biofermentación, sales minerales, extractos celulares y/o filtros solares (agentes fotoprotectores orgánicos o minerales activos contra los rayos ultravioleta A y B) entre otros.

En una realización, al menos uno de los ingredientes cosméticos adicionales es un principio o sustancia cosmética activa que puede ejercer las mismas, similares, complementarias o diferentes actividades cosméticas que aquellas divulgadas anteriormente para los péptidos de la presente invención.

En una realización preferida, la composición cosmética de la presente invención comprende otros agentes antienvejecimiento, por ejemplo, agentes que estimulan la expresión y/o síntesis de colágeno I, III, IV y/o VI y laminina; agentes que estimulan la síntesis de glicosaminoglicanos o ácido hialurónico; agentes que estimulan la expresión y/o síntesis de elastina y otras proteínas relacionadas con fibras elásticas; agentes que inhiben la degradación de colágeno y/o fibras elásticas; agentes que estimulan la expresión y/o síntesis de proteínas relacionadas con mitocondrias (por ejemplo, sirtuinas y aconitasa); agentes que estimulan la expresión y/o síntesis de proteínas de adhesión focal; agentes que estimulan la proliferación y/o diferenciación de queratinocitos y/o fibroblastos; antioxidantes; agentes de contaminación antiatmosférica y/o atrapamiento de radicales libres; agentes antiglicación; agentes detoxificantes; agentes que disminuyen el envejecimiento cronológico, envejecimiento ambiental y envejecimiento inflamatorio; y agentes que disminuyen la producción de melanina e/o inhiben la tirosinasa y/o agentes que estimulan la síntesis de lípidos y síntesis de componentes de la epidermis (queratinas) y más específicamente el estrato corneal (queratinas, ceramidas, filaggrina, loricrina y SPR1B).

Además, la composición cosmética de la presente invención se puede formular como cualquier forma usualmente utilizada en el estado de la técnica como, por ejemplo, solución, suspensión, emulsión, pasta, gel, crema, polvo, pulverización, loción, aceite, linimento, suero, mousse, ungüento, barra o lápiz incluyendo formulaciones "de aplicación prolongada" y "de enjuague"'. La composición cosmética de la presente invención también se puede incorporar por medio de técnicas conocidas en el estado de la técnica a diferentes tipos de accesorios sólidos tal como toallitas, hidrogeles, parches adhesivos (o no adhesivos) o mascarillas faciales, o se podría incorporar a diferentes productos de línea de maquillaje tal como correctores, bases de maquillaje, lociones o lociones desmaquillantes, entre otros.

También se contempla que la composición cosmética de la presente invención o el péptido de la presente invención, ambos como se divulgan en la presente, también se pueden incorporar en sistemas de liberación sostenida cosméticos y/o portadores tal como liposomas, milipartículas, micropartículas y nanopartículas, así como en esponjas, vesículas, micelas, miliesferas, microesferas, nanoesferas, lipoesferas, milicápsulas, microcápsulas y nanocápsulas, así como en microemulsiones y nanoemulsiones, con el propósito de obtener una mayor penetración del ingrediente activo.

En una realización preferida, la composición cosmética de la presente invención es adecuada o está adaptada para aplicarse por vía tópica, en la cara y/o el cuerpo de un sujeto, más preferentemente en la cara, el cuello y/o la papada de un ser humano.

En un tercer aspecto, la presente invención se refiere al uso como cosmético de los péptidos o las composiciones cosméticas de la presente invención para prevenir y/o reducir los signos de envejecimiento de la piel y/o para reafirmar la piel en un sujeto.

El péptido, solo o dentro de la composición de la presente invención, se usa en una cantidad cosméticamente efectiva. Más preferentemente, esta cantidad cosméticamente efectiva es de 0,1% - 0,0001% (m/v), incluso más preferentemente, esta cantidad cosméticamente efectiva es de 0,05%-0,001% (m/v).

En una realización, el envejecimiento de la piel es un envejecimiento cronológico y/o ambiental.

En una realización preferida, los signos de envejecimiento de la piel son arrugas, aspereza y/o flacidez.

Por lo tanto, en una realización preferida, el uso mencionado anteriormente como cosmético de los péptidos o composiciones cosméticas de la presente invención es para prevenir y/o reducir los signos de envejecimiento de la piel (incluido el envejecimiento cronológico y/o ambiental), más preferentemente arrugas, aspereza y flacidez.

En otra realización preferida, el uso como cosmético de los péptidos o composiciones cosméticas de la presente invención es para reafirmar la piel, más preferentemente para mejorar la calidad de la firmeza de la piel (preferentemente, piel facial), incluso más preferentemente, para mejorar la recuperación de la piel a estímulos o agresiones externas.

El uso como cosmético de los péptidos o composiciones cosméticas de la presente invención, como ya se ha indicado anteriormente, también mejora la viscoelasticidad de la piel.

También en una realización preferida, el sujeto es un ser humano.

Se contempla que en el uso como un cosmético de la presente invención como se divulga anteriormente, el péptido o la composición de la presente invención se usa en combinación con uno o más principios activos y/o composiciones adicionales. Este uno o más principios activos y/o composiciones se pueden usar antes, juntos o después del péptido o composición de la presente invención.

En una realización preferida, en el uso de la presente invención como se divulga anteriormente, el péptido y/o la composición cosmética de la presente invención se aplica por vía tópica, en la cara y/o el cuerpo del sujeto, más preferentemente en la cara, el cuello y/o la papada de un ser humano.

En un cuarto aspecto, la presente invención se refiere al uso cosmético de los péptidos o las composiciones cosméticas de la presente invención, como se describe anteriormente, para prevenir y/o reducir los signos de envejecimiento de la piel y/o para reafirmar la piel en un sujeto.

En una realización preferida, los signos de envejecimiento de la piel (envejecimiento cronológico y/o ambiental) son arrugas, aspereza y/o flacidez.

Por lo tanto, en una realización preferida, el uso cosmético de los péptidos o composiciones de la presente invención es para prevenir y/o reducir los signos de envejecimiento de la piel (incluyendo, como se indicó anteriormente, envejecimiento cronológico y/o ambiental), más preferentemente estos signos son arrugas, aspereza y/o flacidez.

En otra realización preferida, el uso cosmético de los péptidos o composiciones de la presente invención es para reafirmar la piel, más preferentemente para mejorar la calidad de la firmeza de la piel (preferentemente, piel facial), incluso más preferentemente, para mejorar la recuperación de la piel a estímulos o agresiones externas.

El uso cosmético de los péptidos o composiciones cosméticas de la presente invención, como ya se ha indicado anteriormente, también mejora la viscoelasticidad de la piel.

También en una realización preferida, el sujeto es un ser humano.

Se contempla que en el uso cosmético de la presente invención como se divulga anteriormente, el péptido o la composición de la presente invención se usa en combinación con uno o más principios activos y/o composiciones adicionales. Este uno o más principios activos y/o composiciones se pueden usar antes, juntos o después del péptido o composición de la presente invención.

En una realización preferida, en el uso cosmético de la presente invención como se divulga anteriormente, el péptido y/o la composición cosmética de la presente invención se aplica tópicamente, en la cara y/o el cuerpo del sujeto, más preferentemente en la cara, el cuello y/o la papada de un ser humano.

En un quinto aspecto, la presente invención se refiere a un método para prevenir y/o reducir los signos de envejecimiento de la piel en un sujeto en necesidad de esto, caracterizado porque comprende el uso de un péptido o una composición cosmética de la presente invención.

En una realización preferida, el sujeto es un humano.

Se contempla que el péptido o composición de la presente invención se utiliza en el método de la presente invención por aplicación directa a la zona de la piel del cuerpo humano. En una realización preferida, el péptido o composición de la presente invención se aplica en la forma de solución, suspensión, emulsión, pasta, gel, crema, polvo, aerosol, loción, aceite, linimento, suero, mousse, ungüento, barra o lápiz que incluye formulaciones "de aplicación prolongada" y "de enjuague". Como se indica anteriormente, también se contempla que el péptido o composición de la presente invención también se puede incorporar por medio de técnicas conocidas en el estado de la técnica a diferentes tipos de accesorios sólidos tal como toallitas, hidrogeles, parches adhesivos (o no adhesivos) o máscaras faciales, o se puede incorporar a diferentes productos de línea de maquillaje tal como correctores, bases de maquillaje, lociones o lociones desmaquillantes, entre otros; y, por lo tanto, se utiliza en cualquiera de estas formas en el método de la presente invención.

Como se indica anteriormente, el método divulgado anteriormente es un método cosmético con efecto cosmético.

Se contempla que en el método de la presente invención como se divulga anteriormente, el péptido o la composición de la presente invención se usa en combinación con uno o más principios activos y/o composiciones adicionales. Este uno o más principios activos y/o composiciones se pueden usar antes, juntos o después del péptido o composición de la presente invención.

En una realización preferida, en el método de la presente invención como se divulga anteriormente, el péptido y/o la composición cosmética de la presente invención se aplica tópicamente, en la cara y/o el cuerpo del sujeto, más preferentemente en la cara, el cuello y/o la papada de un ser humano.

En un aspecto final, la presente invención se refiere a un método para reafirmar la piel en un sujeto en necesidad de esto, caracterizado porque comprende el uso de un péptido o una composición de la presente invención.

El método para reafirmar la piel de la presente invención incluye tanto la prevención de la pérdida de firmeza (y viscoelasticidad) de la piel, como el tratamiento o la corrección de la pérdida de firmeza (y viscoelasticidad) de la piel.

En una realización preferida, el método de la presente invención es para mejorar la calidad de la firmeza de la piel (preferentemente, piel facial), incluso más preferentemente, para mejorar la recuperación de la piel a estímulos o agresiones externas.

En una realización preferida, el sujeto es un humano.

Como ya se indicó anteriormente, los péptidos de la presente invención (y, por lo tanto, también las composiciones cosméticas de la presente invención) han mostrado un amplio espectro de actividades relacionadas con el mantenimiento y la producción de la ECM. Por lo tanto, dichos péptidos son adecuados para ser utilizados en cosméticos para reafirmar la piel y/o prevención, reducciones y/o remoción de los signos de envejecimiento de la piel.

Para permitir una mejor comprensión, la presente invención se describe en más detalle a continuación con referencia a las figuras anexas, que se presentan a manera de ejemplo, y con referencia a ejemplos ilustrativos y no limitativos.

La figura 1 muestra el porcentaje de inhibición de elastasa (y, por lo tanto, el papel protector contra la degradación de la matriz extracelular) de los péptidos de la presente invención en comparación con el control positivo (es decir, estableciendo el porcentaje de inhibición de elastasa de la muestra de control positivo como 100% y entonces realizando la comparación con el resto de las muestras). La figura 1 (A) muestra el resultado del porcentaje de inhibición de elastasa obtenido para el tratamiento con el péptido Miristoil-SEQ ID NO:<2>-NH<2>en las tres concentraciones probadas. Columnas de izquierda a derecha en el eje x: control positivo de inhibición (fenilmetanosulfonilo (PMSF)), 0,001 mg/ml, 0,005 mg/ml y 0,01 mg/ml del péptido de la presente invención. En su lado, la figura 1 (B) muestra el resultado del porcentaje de inhibición de elastasa obtenido para el tratamiento con el péptido Ac-SEQ ID NO:<3>-NH<2>en las tres concentraciones probadas. Columnas de izquierda a derecha en el eje x: control positivo de inhibición (PMSF), 0,005 mg/ml, 0,01 mg/ml y 0,05 mg/ml del péptido de la presente invención. Para ambas figuras 1 (A) y 1 (B), el eje y muestra el porcentaje de inhibición de la actividad de la elastasa (con respecto a la muestra de control positivo).

La figura 2 muestra la modulación de la síntesis de versicano por Ac-SEQ ID NO: 3-NH2. Esto se muestra por medio de la cantidad de versicano (secretado e intracelular) en la muestra probada en comparación con la cantidad de versicano en el control basal (células no tratadas), en donde la cantidad de versicano en el control basal se ajusta a 100% y entonces se realiza la comparación con el resto de las muestras. Las columnas de izquierda a derecha en el eje x se refieren a: control basal, muestra tratada con ácido retinoico 0,1 |jM (control positivo) y muestras tratadas con diferentes concentraciones de Ac-SEQ ID NO: 3-NH2 (0,01 mg/ml, 0,05 mg/ml y 0,1 mg/ml, respectivamente). El eje y muestra el porcentaje de síntesis de versicano con respecto al control basal.

La figura 3 muestra la modulación de la síntesis de tropoelastina por Ac-SEQ ID NO: 3-NH2. Esto se muestra por medio de la cantidad de tropoelastina (secretada e intracelular) en la muestra probada en comparación con la cantidad de tropoelastina en el control basal (células no tratadas), en donde la cantidad de tropoelastina en el control basal se ajusta como 100% y entonces se realiza la comparación con el resto de las muestras. Las columnas de izquierda a derecha en el eje x se refieren a: control basal y muestras tratadas con diferentes concentraciones de Ac-SEQ ID NO: 3-NH2 (0,01 mg/ml, 0,05 mg/ml, 0,1 mg/ml y 0,5 mg/ml, respectivamente). El eje y muestra el porcentaje de síntesis de tropoelastina con respecto al control basal.

La figura 4 muestra la modulación de la síntesis de fibrilina-1 por Ac-SEQ ID NO: 3-NH2. Esto se muestra por medio de la cantidad de fibrilina-1 secretada en la muestra probada en comparación con la cantidad de fibrilina-1 en el control basal (células no tratadas), en donde la cantidad de fibrilina-1 en el control basal se ajusta como 100% y entonces se realiza la comparación con el resto de las muestras. Las columnas de izquierda a derecha en el eje x se refieren a: control basal y muestras tratadas con diferentes concentraciones de Ac-SEQ ID NO: 3-NH2 (0,01 mg/ml, 0,05 mg/ml y 0,1 mg/ml, respectivamente). El eje y muestra el porcentaje de síntesis de fibrilina-1 con respecto al control basal.

La figura 5 muestra la modulación de la síntesis de ácido hialurónico por Ac-SEQ ID NO: 3-NH2. Esto se muestra por medio de la cantidad de ácido hialurónico secretado en la muestra probada en comparación con la cantidad de ácido hialurónico en el control basal (células no tratadas), en donde la cantidad de ácido hialurónico en el control basal se ajusta como 100% y entonces se realiza la comparación con el resto de las muestras. Las columnas de izquierda a derecha en el eje x se refieren a: control basal, control positivo (muestra tratada con ácido retinoico 0,1 j M) y muestras tratadas con diferentes concentraciones de Ac-SEQ ID NO: 3-NH2 (0,01 mg/ml, 0,05 mg/ml, 0,1 mg/ml y 0,5 mg/ml, respectivamente). El eje y muestra el porcentaje de síntesis de ácido hialurónico con respecto al control basal.

La figura 6 muestra el efecto del péptido Ac-SEQ ID NO: 3-NH2 en el perfil de expresión génica de células HDFa después de 6 horas de tratamiento con una concentración de péptido de 0,05 mg/ml (para Fibrilina-1 y Versicano) y 0,1 mg/ml (para Fibronectina 1 y metaloproteinasas 1 y 3). Los cambios en los niveles de expresión génica se representan como un cambio de veces positivo o negativo con respecto al control basal (células no tratadas). Las barras de arriba a abajo en el eje y se refieren a: Los genes de metaloproteinasa-1 (MMP1), metaloproteinasa-3 (MMP3), fibronectina 1 (FN1), fibrilina-1 (FBN1) y Versicano (VCAN), y el eje x se refieren al cambio en veces versus el control basal. El cambio de pliegue negativo significa que el gen correspondiente se reduce de manera regulada; y un cambio en veces positivo significa que el gen correspondiente se incrementa de manera regulada.

La figura 7 muestra la modulación de la síntesis de versicano por 0,005 mg/ml de Ac-SEQ ID NO: 3-NH2 después de su aplicación tópica en una formulación cosmética al 1% (m/v) a partir de una solución madre al 0,05 % (m/v) en explantes de piel humana. Esto se muestra por medio de la cantidad de superficie de la piel (epidermis y dermis) ocupada por la proteína de versicano en comparación con la cantidad de superficie de la piel ocupada por versicano en el control basal (explantes de piel no tratados), en donde la cantidad de superficie de la piel ocupada por versicano en el control basal se ajusta a 100% y entonces la comparación con el explante de piel tratado con Ac-SEQ ID NO: Se realiza 3-NH2. Las columnas de izquierda a derecha en el eje x se refieren a: explantes de piel no tratados y muestra de explante de piel tratada con 0,005 mg/ml de Ac-SEQ ID NO: 3-NH2, respectivamente. El eje y muestra el porcentaje de superficie de la piel ocupada por la proteína de versicano con respecto al control basal.

La figura 8 muestra la modulación de la síntesis de fibrilina-1 por 0,005 mg/ml de Ac-SEQ ID NO: 3-NH2 después de su aplicación tópica en una formulación cosmética al 1% (m/v) a partir de una solución madre al 0,05 % (m/v) en explantes de piel humana. Esto se muestra por medio de la cantidad de superficie de la piel (epidermis y dermis) ocupada por la proteína fibrilina-1 en comparación con la cantidad de superficie de la piel ocupada por la fibrilina-1 en el control basal (explantes de piel no tratados), en donde la cantidad de superficie de la piel ocupada por la fibrilina-1 en el control basal se ajusta a 100% y entonces la comparación con el explante de piel tratado con Ac-SEQ ID NO: Se realiza 3-NH2. Las columnas de izquierda a derecha en el eje x se refieren a: explantes de piel no tratados y muestra de explante de piel tratada con 0,005 mg/ml de Ac-SEQ ID NO: 3-NH2, respectivamente. El eje y muestra el porcentaje de superficie de la piel ocupada por la proteína fibrilina-1 con respecto al control basal.

La figura 9 muestra la eficacia de Ac-SEQ ID NO: 3-NH2 después de su aplicación tópica en voluntarias caucásicas. Una formulación cosmética que comprende 3% (m/v) de péptido Ac-SEQ ID NO: 3-NH2 de una solución madre al 0,05% (m/v) o un placebo se aplicaron cada uno en la mitad de la cara (mejilla) y en cada voluntario. La figura 9 (A) muestra la deformación de la mejilla de los voluntarios por Dynaskin (Dynaskin es un complemento en el sistema dermaTop para proporcionar una evaluación de firmeza con un método completo sin contacto; produce una deformación cercana al enfoque clínico al soplar aire perpendicular al área de interés o con un ángulo dedicado de 45°; el sistema puede medir en cualquier posición; el sensor 3D, utilizando técnicas de proyección de flecos, captura justo antes de la deformación, la forma de la superficie local, luego cuando se aplica la deformación y justo después de ella) medido por medio del porcentaje promedio de cambio de volumen (mm3) de la mejilla con respecto al volumen de la mejilla al comienzo del tratamiento (tiempo= 0 días). En el eje x, de izquierda a derecha los grupos de tres columnas cada uno corresponde a: día 7, día 14 y día 56 todos desde el inicio del tratamiento, respectivamente. También en el eje x, en cada uno de los tres grupos de columnas, las columnas, de izquierda a derecha corresponden a: voluntarios tratados con una formulación cosmética (placebo), con la misma formulación pero que también comprenden 0,015 mg/ml de Ac-SEQ ID NO: 3-NH2 y voluntarios sensibles solamente (de aquellos tratados con la formulación cosmética que comprende 0,015 mg/ml de Ac-SEQ ID NO:<3>-NH<2>). El eje y muestra el porcentaje de variaciones de volumen versus el tiempo inicial para el promedio del grupo de tratamiento correspondiente o los voluntarios que responden. La figura 9 (B) muestra la deformación de la mejilla de los voluntarios medida por medio del porcentaje de variaciones en el área (mm2) de la región de la mejilla deformada por Dynaskin con respecto al área al inicio del tratamiento (tiempo= 0 días). En el eje x, de izquierda a derecha los grupos de tres columnas cada uno corresponde a: día 7, día 14 y día 56 todos desde el inicio del tratamiento, respectivamente. También en el eje x, en cada uno de los tres grupos de columnas, las columnas, de izquierda a derecha corresponden a: voluntarios tratados con una formulación cosmética (placebo), con la misma formulación pero que también contienen 0,015 mg/ml de Ac-SEQ ID NO:<3>-NH<2>y voluntarios sensibles solamente (de aquellos tratados con la formulación cosmética que comprende 0,015 mg/ml de Ac-SEQ ID NO:<3>-NH<2>). El eje y muestra el porcentaje de variaciones de área versus el tiempo inicial para el promedio del grupo de tratamiento correspondiente o los voluntarios que responden. En su lado, la figura 9 (C) muestra la deformación de la mejilla de los voluntarios medida por medio del porcentaje de variaciones en la profundidad (mm) de la región de la mejilla deformada por Dynaskin con respecto al área al inicio del tratamiento (tiempo= 0 días). En el eje x, de izquierda a derecha los grupos de tres columnas cada uno corresponde a: día 7, día 14 y día 56 todos desde el inicio del tratamiento, respectivamente. También en el eje x, en cada uno de los tres grupos de columnas, las columnas, de izquierda a derecha corresponden a: voluntarios tratados con una formulación cosmética (placebo), con la misma formulación pero que también comprenden 0,015 mg/ml de Ac-SEQ ID NO:<3>-NH<2>y voluntarios sensibles solamente (de aquellos tratados con la formulación cosmética que comprende 0,015 mg/ml de Ac-SEQ ID NO: 3-NH<2>). El eje y muestra el porcentaje de variaciones de profundidad versus el tiempo inicial para el promedio del grupo de tratamiento correspondiente o los voluntarios que responden. En las figuras 9(A) a 9(C), el porcentaje observado con la indicación “vol” se refiere al porcentaje de voluntarios que responden con respecto al número total de voluntarios tratados con la formulación cosmética que comprende el péptido de la presente invención.

Ejemplos

Abreviaturas:

Las abreviaturas utilizadas para los aminoácidos siguen las recomendaciones de la Comisión Conjunta IUPAC-IUB sobre Nomenclatura Bioquímica de 1983 descritas en Eur. J. Biochem. (1984) 138:937.

2-CITrt, 2-clorotritilo; Ac, acetilo; Ala, alanina; Arg, arginina; Boc, terc-butiloxicarbonilo; C-terminal, carboxi-terminal; DCM, diclorometano; DIEA, N,N'-diisopropiletilamina; DIPCDI, N,N'-diisopropilcarbodiimida; DMF, N,N-dimetilformamida; equiv, equivalente; ESI-MS, espectrometría de masas de ionización por electropulverización; Fmoc, 9-fluorenilmetiloxicarbonilo; His, histidina; HOBt, 1-hidroxibenzotriazol; HPLC, cromatografía líquida de alto rendimiento; HDFa, fibroblastos dérmicos humanos; Ile, isoleucina; INCI, Nomenclatura Internacional de Ingredientes Cosméticos; MBHA, p-metilbenzhidrilamina; Leu, leucina; Lys, lisina; Me, metilo; MeCN, acetonitrilo; MeOH, metanol; Myr, miristoilo; N-terminal, amino-terminal; Palm, palmitoilo; Pbf, 2,2,4,6,7-pentametildihidrobenzofuran-5-sulfonilo; PMSF, fenilmetanosulfonilo; RT, temperatura ambiente; TFA, ácido trifluoroacético; TIS, triisopropilsilano; Trp, triptófano; Trt, trifenilmetilo o tritilo; Val, valina; Z, benciloxicarbonilo.

Con respecto a los procedimientos de síntesis química incluidos en los ejemplos, se observa que todos los procesos sintéticos se llevaron a cabo en jeringas de polipropileno equipadas con discos de polietileno poroso o reactores PyrexMR equipados con placas porosas. Todos los reactivos y solventes fueron de calidad de síntesis y se utilizaron sin ningún tratamiento adicional. Los solventes y reactivos solubles se removieron por succión. El grupo Fmoc se removió con piperidina-DMF (2:8, v/v) (al menos 1x1 min, 2x10 min, 5 mL/g de resina) (Lloyd Williams P et al.,Chemical Approaches to the Synthesis of Peptides and Proteins,CRC, 1997, Boca Raton (Fla., EUA)). Los lavados entre las etapas de desprotección, acoplamiento y, de nuevo, desprotección, se llevaron a cabo con DMF (3x1 min) y DCM (3x1 min) cada vez usando 10 ml de solvente/g de resina. Las reacciones de acoplamiento se realizaron con 3 ml de solvente/g de resina. El control de los acoplamientos se realizó por la realización de la prueba de ninhidrina (Kaiser E. et al., Anal. Biochem., 1970, 34: 595598). Todas las reacciones sintéticas y lavados se llevaron a cabo a TA.

Ejemplo 1.Síntesis y preparación de los péptidos de la presente invención.

- Obtención de Fmoc-(X)m-AA1-AA2-AA3-AA4-AA5-(Y)n-R2-Rink-MBHA-resina, en donde AAi es L-Leu; AA<2>es His; AA<3>es L-Lys; AA<4>es L-Val; AA<5>es L-Lys; Y es L-Val; n es 1; y m es 0.

Los pesos se normalizaron. 4,8 g (2,5 mmol) de la resina Fmoc-Rink-MBHA con una funcionalización de 0,52 mmol/g se trataron con piperidina-DMF de acuerdo con el protocolo general descrito a fin de remover el grupo Fmoc. 2,55 g de Fmoc-L-Val- OH (7,5 mmol; 3 equiv.) se incorporaron en la resina desprotegida en la presencia de DIPCDI (1,17 mL; 7,5 mmol; 3 equiv.) y HOBt (1,01 g; 7,5 mmol; 3 equiv.) usando DMF como solvente durante una hora.

La resina se lavó entonces como se describe en los métodos generales y se repitió el tratamiento de desprotección del grupo Fmoc para acoplar el siguiente aminoácido. Siguiendo los protocolos descritos anteriormente 3,51 g de Fmoc-L-Lys(Boc)-OH (7,5 mmol; 3 equiv.); posteriormente 2,55 g de Fmoc-L-Val-OH (7,5 mmol; 3 equiv.); posteriormente 3,51 g de Fmoc-L-Lys(Boc)-OH (7,5 mmol; 3 equiv.); posteriormente 4,65 g de Fmoc-L-His(Trt)-OH (7,5 mmol; 3 equiv.) y posteriormente 2,65 g de Fmoc-L-Leu-OH (7,5 mmol; 3 equiv.) se acoplaron, secuencialmente, cada acoplamiento en la presencia de 1,01 g de HOBt (7,5 mmol; 3 equiv.) y 1,17 mL de DIPCDI (7,5 mmol; 3 equiv.). Como ya se indicó anteriormente, entre cada paso de adición de aminoácidos, se realizó un tratamiento de desprotección del grupo Fmoc.

Después de la síntesis, las resinas de péptido se lavaron con DCM (5 veces durante 3 minutos cada una) y se secaron bajo vacío.

- Obtención de Fmoc-(X)m-AA1-AA2-AA3-AA4-AA5-(Y)n-R2-Rink-MBHA, en donde X es L-Ala; AA<1>es L-Leu; AA<2>es His; AA<3>es L-Lys; AA<4>es L-Val; AA<5>es L-Lys; m es 1; y n es 0.

Los pesos se normalizaron. 4,8 g (2,5 mmol) de la resina Fmoc-Rink-MBHA con una funcionalización de 0,52 mmol/g se trataron con piperidina-DMF de acuerdo con el protocolo general descrito a fin de remover el grupo Fmoc. Se incorporaron 3,51 g de Fmoc-L-Lys(Boc)-OH (7,5 mmol; 3 equiv.) en la resina desprotegida en la presencia de DIPCDI (1,17 mL; 7,5 mmol; 3 equiv.) y HOBt (1,01 g; 7,5 mmol; 3 equiv.) usando DMF como un solvente durante una hora.

La resina se lavó entonces como se describe en los métodos generales y se repitió el tratamiento de desprotección del grupo Fmoc para acoplar el siguiente aminoácido. Siguiendo los protocolos descritos anteriormente 2,55 g de Fmoc-L-Val-OH (7,5 mmol; 3 equiv.); posteriormente 3,51 g de Fmoc-L-Lys(Boc)-OH (7,5 mmol; 3 equiv.); posteriormente 4,65 g de Fmoc-L-His(Trt)-OH (7,5 mmol; 3 equiv.); posteriormente 2,65 g de Fmoc-L-Leu-OH (7,5 mmol; 3 equiv.) y posteriormente 2,33 g de Fmoc-L-Ala-OH (7,5 mmol; 3 equiv.) se acoplaron, secuencialmente, cada acoplamiento en la presencia de 1,01 g de HOBt (7,5 mmol; 3 equiv.) y 1,17 mL de DIPCDI (7,5 mmol; 3 equiv.). Como ya se indicó anteriormente, entre cada paso de adición de aminoácidos, se realizó un tratamiento de desprotección del grupo Fmoc.

Usando los procedimientos de síntesis mencionados anteriormente, con la selección requerida de aminoácidos, se sintetizaron las siguientes secuencias:

Leu-His-Lys-Val-Lys-Val (SEQ ID NO: 2); y

Ala-Leu-His-Lys-Val-Lys (SEQ ID NO: 3).

Ejemplo 2.Remoción del grupo protector N-Terminal de Fmoc de los péptidos sintetizados de acuerdo con el ejemplo 1.

El grupo Fmoc N-terminal de las resinas de peptidilo se desprotegió con piperidina al 20% en DMF (1x1 min+2x10 min) (Lloyd Williams P et al. (1997)“Chemical Approaches to the Synthesis of Peptides and Proteins"CRC, Boca Raton (Fla., EUA)). Las resinas de peptidilo se lavaron con DMF (5x1 min), DCM (4x1 min), y se secaron bajo vacío.

Ejemplo 3. Proceso para introducir el grupo acetilo de R<1>en las resinas de peptidilo obtenidas de acuerdo con el ejemplo 2.

1 mmol (1 equiv.) de las resinas de peptidilo obtenidas de acuerdo con el ejemplo 2 se trató con 25 equivalentes de anhídrido acético en la presencia de 25 equivalentes de DIEA usando 5 mL de DMF como un solvente. Se dejaron reaccionar durante 30 minutos, después de lo cual las resinas de peptidilo se lavaron con DMF (5x1 min), DCM (4x1 min), y se secaron bajo vacío.

Ejemplo 4.Proceso para introducir el grupo miristoilo de R<1>en las resinas de peptidilo obtenidas en el ejemplo 2 10 equivalentes de ácido mirístico predisuelto en DMF (1 mL) se incorporaron en 1 mmol (1 equiv.) de las resinas de peptidilo obtenidas en el ejemplo 2, en la presencia de 10 equivalentes de HOBt y 10 equivalentes de DIPCDI. Se dejaron reaccionar durante la noche (aproximadamente 15 horas), después de lo cual las resinas se lavaron con DMF (5x1 min), DCM (4x1 min), MeOH (5x1 min) y se secaron bajo vacío.

Ejemplo 5.Proceso de escisión del soporte polimérico de las resinas de peptidilo obtenidas de acuerdo con los ejemplos 2, 3 y 4

Los pesos se normalizaron. 200 mg de la resina de peptidilo seca obtenida en cualquiera de los ejemplos 2, 3 o 4 se trataron con 5 mL de TFA/TIS/H2O (90:5:5) durante 2 horas a temperatura ambiente bajo agitación. Los productos filtrados se recolectaron y precipitaron usando 50 mL (8 a 10 veces) de éter dietílico frío. Las soluciones etéreas se evaporaron a sequedad a presión reducida y temperatura ambiente, los precipitados se volvieron a disolver en MeCN al 50% en H2O y se liofilizaron.

Ejemplo 6.Caracterización de los péptidos sintetizados y preparados de acuerdo con el ejemplo 5.

El análisis de HPLC de los péptidos obtenidos de acuerdo con el ejemplo 5 se llevó a cabo con un equipo Shimadzu (Kyoto, Japón) utilizando una columna de fase inversa (150x4,6 mm, péptido XBridge BEH C18, 3,5 |jm, Waters, EUA) en gradientes de MeCN (+0,036% TFA) en H2O (+0,045% TFA) a una velocidad de flujo de 1,25 mL/min y la detección se llevó a cabo a 220 nm. Todos los péptidos mostraron una pureza que excedía el 80%. La identidad de los péptidos obtenidos se confirmó mediante ESI-MS en un detector Water ZQ 4000 usando MeOH como fase móvil y una velocidad de flujo de 0,2 mL/min. Los resultados obtenidos demostraron que los péptidos Miristoil-Leu-His-Lys-Val-Lys-Val-NFL (Miristoil-SEQ ID NO:<2>-NH<2>); y Ac-Ala-Leu-His-Lys-Val-Lys-NH<2>(Ac-SEQ ID NO:<3>-NH<2>) se sintetizaron de manera efectiva.

Ejemplo 7.Medición de la inhibición de actividad de elastasa.

Ambos péptidos Miristoil-SEQ ID NO:<2>-NH<2>y Ac-SEQ ID NO:<3>-NH<2>, sintetizado de acuerdo con los ejemplos 1 a 5, se probaron para su capacidad para inhibir la actividad de elastasa.

Péptido Ac-SEQ ID NO:<3>-NH<2>se diluyó en H<2>O a una concentración de 0,005 mg/ml, 0,01 mg/ml y 0,05 mg/ml y péptido Miristoil-SEQ ID NO:<2>-NH<2>se diluyó a una concentración de 0,001 mg/ml, 0,005 mg/ml y 0,01 mg/ml. Entonces, las diluciones de péptidos se incubaron con enzima elastasa en condiciones controladas. El agente amortiguador de TRIS y el fenilmetanosulfonilo (en lo sucesivo, PMSF) se utilizaron como controles negativos y positivos para la inhibición de la actividad de elastasa, respectivamente. La adición posterior del sustrato de enzimas específico inició la reacción enzimática, que se monitoreó por medio de la absorbancia a 405 nm utilizando un lector de placas. La absorbancia se correlacionó con la actividad enzimática y, por lo tanto, la actividad inhibidora de elastasa se pudo obtener fácilmente.

Los resultados obtenidos en este ejemplo aparecen resumidos en la figura 1. En esta figura, se puede observar que todas las concentraciones probadas de Ac-SEQ ID NO:<3>-NH<2>mostró una actividad inhibidora de elastasa significativa que era de alrededor del 39% de esa observada en la muestra de control positivo. Por su parte, el péptido Miristoil-SEQ ID NO:2-NH2, en las dos concentraciones más bajas probadas también mostró actividad que inhibe la elastasa, que estaba entre 35% y 26% de esa observada en la muestra de control positivo. No se observó inhibición de la actividad de elastasa en el control negativo, es decir, muestras tratadas o incubadas con agente amortiguador de TRIS (no mostrado en la figura 1).

Por lo tanto, se puede concluir que estos péptidos fueron capaces de inhibir la elastasa en las condiciones probadas.

Ejemplo 8.Modulación de la síntesis de versicano en un cultivo celular.

El efecto del péptido Ac-SEQ ID NO:<3>-NH<2>(sintetizado de acuerdo con los ejemplos 1-3 y 5) en la producción de versicano se evaluóin vitroutilizando fibroblastos dérmicos humanos (en lo sucesivo, HDFa).

De forma breve, las células HDFa se sembraron en placas de 96 pocillos a 1 x 104 células/pocillo en medio de crecimiento de fibroblastos y se mantuvieron durante 24 horas en condiciones de cultivo estándar (37 °C, 95% de humedad, 5% de CO<2>). Después de la incubación mencionada anteriormente, se removió el medio y se adicionó un nuevo medio que contenía las concentraciones no citotóxicas del péptido Ac-SEQ ID NO:<3>-NH<2>de: 0,01 mg/ml, 0,05 mg/ml y 0,1 mg/ml y se incubó durante 24 horas. El ácido retinoico 0,1 jM se incluyó como control positivo para la estimulación versicano y las células no tratadas se incluyeron como control basal. Los medios de cultivo celular y el lisado celular se recolectaron de todos los pocillos al final del experimento y se almacenaron a -80 °C.La síntesis ex-novode versicano se midió por medio de ELISA de intercalación siguiendo las instrucciones del fabricante.

Los resultados obtenidos se muestran en la figura 2.

Como se indica anteriormente, se utilizó ácido retinoico como control positivo para la inducción de la síntesis de versicano.

Como se puede ver fácilmente en la figura 2, todas las concentraciones probadas mostraron un incremento significativo en la síntesis de versicano en comparación con el control basal. Este incremento en la síntesis de versicano siguió una curva de respuesta a la dosis (aumento en la síntesis de versicano de 24%, 35% y 62% en comparación con el control basal a una concentración de 0,01 mg/ml, 0,05 mg/ml y 0,10 mg/ml de péptido, respectivamente), alcanzando valores mayores que aquellos de ácido retinoico a la concentración más alta probada (esto es, 0,10 mg/ml).

Ejemplo 9.Modulación de la síntesis de tropoelastina en un cultivo celular.

El efecto potencial del péptido Ac-SEQ ID NO: 3-NH2 (sintetizado de acuerdo con los ejemplos 1-3 y 5) en la síntesis de tropoelastina se evaluóin vitroutilizando HDFa.

Se pusieron HDFa en cultivo a una densidad de 1 x 104 células/pocillo en placas de 96 pocillos y se incubaron durante 24 horas con concentraciones crecientes no citotóxicas de péptido Ac-SEQ ID NO: 3-NH2 (0,01 mg/ml, 0,05 mg/ml, 0,1 mg/ml y 0,5 mg/ml). Las células no tratadas se incluyeron como control basal. Al final del tiempo experimental monitoreado, los medios de cultivo celular y los lisados celulares se extrajeron de todos los pocillos y se almacenaron a -80°C.La síntesis ex novode tropoelastina se midió por medio de ELISA de intercalación siguiendo las instrucciones del fabricante.

Los resultados de este experimento aparecen resumidos en la figura 3, donde se puede ver que todas las concentraciones probadas del péptido Ac-SEQ ID NO: 3-NH2 incrementaron la síntesis de tropoelastina en comparación con el control basal. De manera similar, con respecto a la síntesis de versicano, el incremento mencionado anteriormente siguió una curva de respuesta a la dosis (incremento en la síntesis de tropoelastina del 3%, 11%, 20% y 31% en comparación con el control basal a una concentración de 0,01 mg/ml, 0,05 mg/ml, 0,10 mg/ml y 0,50 mg/ml de péptido, respectivamente).

Ejemplo 10.Modulación de la síntesis de fibrilina-1 en un cultivo celular.

Modulación de la síntesis de fibrilina-1 por péptido Ac-SEQ ID NO: 3-NH2 (sintetizado de acuerdo con los ejemplos 1-3 y 5) se evaluóin vitrousando HDFa.

Se sembraron HDFa en placas de 96 pocillos a una densidad de 1 x 104 células/pocillo y se pusieron en contacto con tres concentraciones no citotóxicas de péptido Ac-SEQ ID NO:<3>-NH<2>: 0,01 mg/ml, 0,05 mg/ml y 0,1 mg/ml durante 48 horas. Las células no tratadas se incluyeron como control basal. Al final del experimento monitoreado, los medios de cultivo celular se extrajeron de todos los pocillos y se almacenaron a -80°C. La modulación en los niveles de fibrilina-1 se analizó por medio de ELISA de arena siguiendo las instrucciones del fabricante.

Los resultados de este experimento aparecen resumidos en la figura 4, donde se puede observar que el péptido Ac-SEQ ID NO:<3>-NH<2>en todas las concentraciones probadas, incrementó la síntesis de fibrilina-1 en comparación al control basal. De manera similar, al efecto observado en la síntesis de versicano y tropoelastina, el incremento mencionado anteriormente también siguió una curva de respuesta a la dosis (incremento en la síntesis de fibrilina-1 del 18%, 30% y 41% en comparación con el control basal a una concentración de 0,01 mg/ml, 0,05 mg/ml y 0,10 mg/ml de péptido, respectivamente).

Ejemplo 11.Modulación de la síntesis de ácido hialurónico en un cultivo celular.

La modulación de la producción de ácido hialurónico por el péptido Ac-SEQ ID NO:<3>-NH<2>(sintetizado de acuerdo con los ejemplos 1-3 y 5) en HDFa se evaluóin vitro.

De forma breve, se sembraron HDFa en placas de 96 pocillos a una densidad de 1 x 104 células/pocillo y, entonces, se incubaron con concentraciones no citotóxicas de péptido Ac-SEQ ID NO:<3>-NH<2>, esto es 0,01 mg/ml, 0,05 mg/ml, 0,1 mg/ml y 0,5 mg/ml, durante 48 horas. El ácido retinoico 0,1 |jM se incluyó como control positivo y las células no tratadas se incluyeron como control basal. Al final del experimento, los medios de cultivo celular se extrajeron de todos los pocillos y se almacenaron a -80°C.Lasíntesisex novode ácido hialurónico se midió por medio de ELISA competitivo siguiendo las instrucciones del fabricante.

La figura 5 muestra los resultados obtenidos en este experimento para la modulación de la síntesis de ácido hialurónico por el péptido Ac-SEQ ID NO:<3>-NH<2>in vitroy en comparación con el control basal. El péptido Ac-SEQ ID NO:<3>-NH<2>indujo un incremento de la respuesta a la dosis del 3%, 8%, 10% y 18% en la producción de ácido hialurónico, que es estadísticamente significativo en las tres concentraciones más altas.

Ejemplo 12.Modulación de la expresión génica en cultivo celular.

La modulación de la expresión génica por el péptido Ac-SEQ ID NO: 3-NH2 (sintetizado de acuerdo con los ejemplos 1-3 y 5) en HDFa se evaluóin vitro.

De forma breve, las células de HDFa se sembraron por duplicado en placas de 6 pocilloes a una densidad de 4 x 105 células/pocillo y se mantuvieron en condiciones de cultivo estándar (37 °C, 95% de humedad, 5% de CO2) durante 24 horas. Entonces, las células se trataron con péptido Ac-SEQ ID NO: 3-NH2 a la concentración no citotóxica de 0,05 y 0,1 mg/ml durante 6 horas adicionales. Las células no tratadas se utilizaron como control basal. Las células entonces se lisaron para la extracción de ARN con un kit comercial de purificación de ARN siguiendo las instrucciones del fabricante (RNeasy mini kit - Qiagen, Países Bajos). Entonces, el ARN se cuantificó por nanodrop, se ajustó en concentración y se procesó para la retrotranscripción a ADNc utilizando un kit comercialmente disponible (kit de transcripción inversa de ADNc de alta capacidad - Thermofisher Scientific, EUA). El ADNc resultante se utilizó para realizar una RTqPCR (Reacción en cadena de la polimerasa cuantitativa en tiempo real) utilizando tecnología taqman y un panel de sondas diseñadas para dirigirse a genes específicos con relación a los componentes y la estructura de matriz extracelular.

Los resultados de este ejemplo aparecen resumidos en la figura 6. Esta figura muestra que el péptido Ac- SEQ ID NO: 3-NH2 induce una regulación negativa de las metaloproteinasas 1 y 3, que están implicadas en la degradación de la matriz extracelular, con un cambio en veces de -1,33 y -1,20, respectivamente. Además, la fibronectina 1, la fibrilina 1 y versicano, que son componentes de la matriz extracelular, se aumentan de manera regulada, con un cambio de 1,41, 1,55 y 1,22, respectivamente.

Todos los experimentos anteriores muestran que los péptidos de la presente invención ejercen una actividad importante hacia ambos, manteniendo la integridad de la matriz extracelular (al inhibir la actividad de elastasa y reducir de manera regulada la expresión de metaloproteinasas a nivel genético) y produciendo componentes relacionados con la matriz extracelular, por ejemplo, tropoelastina, versicano, fibrilina-1 y ácido hialurónico, tanto a nivel genético como a nivel de proteína. Por lo tanto, los resultados anteriores muestran la utilidad de los péptidos de la presente invención en el campo de los cosméticos como agentes reafirmantes que se pueden utilizar en productos antienvejecimiento.

Ejemplo 13.Modulación de la síntesis versicano en explantes de piel humana.

El efecto del péptido Ac-SEQ ID NO:<3>-NH<2>(sintetizado de acuerdo con los ejemplos 1-3 y 5) sobre la producción de versicano se evaluó en explantes de piel humana de una donadora caucásica de 46 años.

De forma breve, los explantes de piel se obtuvieron de un donador voluntario que se sometió a un procedimiento de cirugía plástica. El exceso de piel fue donado para el presente estudio. Los explantes de piel se trataron con una formulación cosmética que contenía 1% (m/v) de una solución madre al 0,05% (m/v) de Ac-SEQ ID NO:<3>-NH<2>(concentración final efectiva de Ac-SEQ ID NO:<3>-NH<2>, 0,005 mg/ml). En los días 0, 2, 4 y 7, el producto probado se aplicó tópicamente sobre la base de 2 |jl por cm2 de explante de piel y se extendió usando una pequeña espátula. Los explantes no tratados no recibieron ningún tratamiento, excepto la renovación de la mitad del medio de cultivo (esto es, 1 ml) los días 2, 4 y 7.

El día 9, se recolectaron 3 explantes de cada condición y se fijaron en una solución de formalina amortiguada. Después de la fijación durante 24 horas en formalina amortiguada, las muestras se deshidrataron e impregnaron y se incrustaron en parafina. Se realizaron secciones de 5 jm de espesor utilizando un micrótomo tipo Leica RM 2125 Minot, y las secciones se montaron en portaobjetos de vidrio histológico SuperfrostMR Las observaciones microscópicas se realizaron utilizando un microscopio Leica DM LB u Olympus BX43. Las imágenes se digitalizaron con una cámara numérica DP72 Olympus con software de almacenamiento CellD.

La inmunotinción de Versicano se realizó con un anticuerpo anti-versicano policlonal (OriGene) diluido a 1/1000 en PBS-BSA al 0,3% (m/v) -Tween 20 al 0,05% (v/v) durante 1 h a temperatura ambiente, amplificado usando un sistema de biotina/ estreptavidina (RTU, vector Kit) y revelado por VIP, un sustrato de peroxidasa (Vector). La inmunotinción se realizó utilizando un sistema de procesamiento de portaobjetos automatizado (Dako, AutostainerPlus). La tinción se evaluó por observación microscópica y análisis de imágenes.

Los resultados obtenidos se muestran en la figura 7.

Como se puede ver fácilmente en la figura 7, 0,005 mg/ml de Ac-SEQ ID NO:<3>-NH<2>mostró un incremento significativo en la superficie de la piel ocupada por la proteína versicano en comparación con los explantes no tratados (el incremento en la superficie ocupada por la proteína versicano fue del 29% en comparación al control basal).

Ejemplo 14.Modulación de la síntesis de fibrilina-1 en explantes de piel humana.

El efecto del péptido Ac-SEQ ID NO:<3>-NH<2>(sintetizado de acuerdo con los ejemplos 1-3 y 5) sobre la producción de fibrilina-1 se evaluó en explantes de piel humana de una donadora caucásica de 46 años.

De forma breve, los explantes de piel se trataron con una formulación cosmética que contenía 1% (m/v) de una solución madre al 0,05% (m/v) de Ac-SEQ ID NO: 3-NH2 (concentración final efectiva de Ac-SEQ ID NO: 3-NH2, 0,005 mg/ml). En los días 0, 2, 4 y 7, el producto probado se aplicó tópicamente sobre la base de 2 |jl por cm2 de explante de piel y se extendió usando una pequeña espátula. Los explantes no tratados no recibieron ningún tratamiento, excepto la renovación de la mitad del medio de cultivo (esto es, 1 ml) los días 2, 4 y 7.

El día 9, se recolectaron 3 explantes de cada condición y se congelaron a -80°C. Las muestras congeladas se cortaron en secciones de 7 jm de espesor usando un criostato Leica CM 3050. Las secciones se montaron entonces en portaobjetos de vidrio silanizado SuperfrostMR plus. Las observaciones microscópicas se realizaron utilizando un microscopio Leica DM LB u Olympus BX43. Las imágenes se digitalizaron con una cámara numérica DP72 Olympus con software de almacenamiento CellD.

La inmunotinción de fibrilina-1 se realizó en secciones congeladas con un anticuerpo monoclonal anti-fi brilina-1 (Novus biologicals) diluido a 1/500 en PBS-BSA al 0,3% (m/v) -Tween 20 al 0,05% (v/v) durante 1 h a temperatura ambiente, amplificado usando un sistema de biotina/ estreptavidina (RTU, vector de kit) y revelado por FITC (Invitrogen). Los núcleos se contratiñeron usando yoduro de propidio. La inmunotinción se realizó utilizando un sistema de procesamiento de portaobjetos automatizado (Dako, AutostainerPlus). La tinción se evaluó por observación microscópica y análisis de imágenes.

Los resultados obtenidos se muestran en la figura 8.

Como se puede ver fácilmente en la figura 8, 0,005 mg/ml de Ac-SEQ ID NO: 3-NH2 mostró un incremento significativo en la superficie de la piel ocupada por la proteína fibrilina-1 en comparación con los explantes no tratados (el incremento en la superficie ocupada por la proteína fibrilina-1 fue de 24% en comparación con el control basal).

Ejemplo 15.Evaluación clínica de firmeza de la piel y eficacia antienvejecimiento en voluntarias

El efecto del péptido Ac-SEQ ID NO: 3-NH2 (sintetizado de acuerdo con los ejemplos 1-3 y 5) sobre la firmeza de la piel facial se evaluó en 22 voluntarias caucásicas.

De forma breve, los voluntarios aplicaron una formulación cosmética con 3% (m/v) de una solución madre al 0,05% (m/v) de Ac-SEQ ID NO: 3-NH2 (concentración final efectiva de Ac-SEQ ID NO: 3-NH2, 0,015 mg/ml) o sin (placebo). El régimen de aplicación fue de dos veces al día durante 56 días, temprano en la mañana y antes de acostarse. Las formulaciones cosméticas se aplicaron en ya se ala mitad de la cara limpia para comparar el efecto del placebo y el activo en el mismo voluntario.

En los días 0, 7, 14 y 56, se utilizó un dispositivo Dynaskin en cada voluntario para medir la calidad de firmeza de la piel de acuerdo con tres parámetros: volumen (mm3), área (mm2) y profundidad (mm). Dynaskin utiliza una proyección de haz de aire sobre el área de la mejilla que provoca una deformación de la piel. Esta magnitud de deformación se mide por medio de un software específico que recolecta datos de los tres parámetros anteriores para cada voluntario y en cada mitad de cara.

Una disminución de cualquiera de los tres parámetros dentro de los días de tratamiento indicó un incremento de la firmeza en la cara, por lo tanto, un beneficio antienvejecimiento.

Los resultados obtenidos se muestran en la figura 9.

Como se puede ver fácilmente en las figuras 9 (A) a 9 (C), 0,015 mg/ml de Ac-SEQ ID NO: 3-NH2 en una formulación cosmética, mostró disminuciones de volumen, área y/o profundidad en la región de la piel facial estudiada en todos los tiempos estudiados en comparación con el tiempo inicial (la disminución en cualquiera o todos estos tres parámetros muestra un incremento en la firmeza de la piel y/o un efecto de estiramiento facial). Se observó hasta un 20% de disminución en el volumen, un 7% de disminución en el área y un 14,5% de disminución en la profundidad después de 56 días de tratamiento (en todo el grupo tratado con la formulación cosmética que comprende el péptido de la presente invención; estos porcentajes son aún más altos si sólo se consideran los voluntarios que responden).

Claims

REIVINDICACIONES

1. Péptido de la fórmula (I):

Ri-(X)m-AAi-AA2-AA3-AA4-AA5-(Y)n-R2

(1)

sus isómeros, sales y/o solvatos cosméticamente aceptables y mezclas de los mismos, donde:

X es Ala;

AA<1>es Leu;

AA<2>es His;

AA<3>es Lys;

AA<4>es Val;

AA<5>es Lys;

Y es Val;

n y m se seleccionan independientemente entre sí de 0 y 1;

R<1>se selecciona de H, grupo alifático no cíclico sustituido o insustituido, aliciclilo sustituido o insustituido, heterociclilo sustituido o insustituido, heteroarilalquilo sustituido o insustituido, arilo sustituido o insustituido, aralquilo sustituido o insustituido y R<5>-CO- en donde R<5>se selecciona del grupo formado por radical alquilo C<1>-C<24>sustituido o insustituido, alquenilo C<2>-C<24>sustituido o insustituido, alquinilo C<2>-C<24>sustituido o insustituido, cicloalquilo C<3>-C<24>sustituido o insustituido, cicloalquenilo C<5>-C<24>sustituido o insustituido, cicloalquinilo C<8>-C<24>sustituido o insustituido, arilo C<6>-C<30>sustituido o insustituido, aralquilo C<7>-C<24>sustituido o insustituido, anillo de heterociclilo sustituido o insustituido de 3 a 10 miembros, y heteroarilalquilo sustituido o insustituido de 2 a 24 átomos de carbono y 1 a 3 átomos distintos de carbono y una cadena de alquilo de 1 a 6 átomos de carbono; y R<2>se selecciona de H, -NR<3>R<4>-, -OR<3>y -SR<3>-, donde R<3>y R<4>se seleccionan independientemente de H, grupo alifático no cíclico sustituido o insustituido, aliciclilo sustituido o insustituido, heterociclilo sustituido o insustituido, heteroarilalquilo sustituido o insustituido, arilo sustituido o insustituido, y aralquilo sustituido o insustituido.

2. El péptido, de acuerdo con la reivindicación 1, caracterizado porque los aminoácidos son L-aminoácidos.

3. Péptido, de acuerdo con la reivindicación 1 o la reivindicación 2, caracterizado porque m es 1 y n es 0.

4. El péptido, de acuerdo con la reivindicación 1 o la reivindicación 2, caracterizado porque m es 0 y n es 1.

5. Péptido, de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4, caracterizado porque R<1>es acetilo (Ac) o miristoilo.

6. Péptido, de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5, caracterizado porque R<2>es H o NH<2>.

7. Péptido, de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 6, caracterizado porque el péptido de la fórmula (I) es:

R<1>-Leu-His-Lys-Val-Lys-Val-R<2>(R<1>-SEQ ID NO:<2>-R<2>); o

R<1>-Ala-Leu-His-Lys-Val-Lys-R<2>(R<1>-SEQ ID NO:<3>-R<2>).

8. Péptido, de acuerdo con la reivindicación 7, caracterizado porque el péptido de la fórmula (1) es:

Miristoil-Leu-His-Lys-Val-Lys-Val-NH<2>(Miristoil-SEQ ID NO:<2>-NH<2>); o

Ac-Ala-Leu-His-Lys-Val-Lys-NH<2>(Ac-SEQ ID NO:<3>-NH<2>).

9. Composición cosmética que comprende un péptido de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 8.

10. Uso como un cosmético del péptido de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 8 o de una composición cosmética de acuerdo con la reivindicación 9 para prevenir y/o reducir los signos de envejecimiento de la piel y/o para reafirmar la piel en un sujeto.

11. Uso cosmético de un péptido de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 8 o de una composición cosmética de acuerdo con la reivindicación 9 para prevenir y/o reducir los signos de envejecimiento de la piel y/o para reafirmar la piel en un sujeto.

12. Método cosmético para prevenir y/o reducir los signos de envejecimiento de la piel en un sujeto en necesidad de esto, caracterizado porque comprende el uso de un péptido de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 8 o una composición de acuerdo con la reivindicación 9.

13. Método cosmético para reafirmar la piel en un sujeto en necesidad de esto, caracterizado porque comprende el uso de un péptido de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 8 o una composición cosmética de acuerdo con la reivindicación 9.