ES3022204T3 - Crystalline forms of ozanimod and ozanimod hydrochloride, and processes for preparation thereof - Google Patents

Abstract

Se describe una forma cristalina de ozanimod, una forma cristalina de su clorhidrato y un método de preparación. La forma cristalina de ozanimod y la forma cristalina de su clorhidrato pueden aplicarse al tratamiento de enfermedades autoinmunes, especialmente la esclerosis múltiple y la colitis ulcerosa. La forma cristalina de ozanimod y la forma cristalina de su clorhidrato presentan ventajas en al menos uno de los aspectos: solubilidad, punto de fusión, estabilidad, velocidad de disolución, biodisponibilidad y procesabilidad, lo que proporciona una nueva y mejor opción para la preparación farmacéutica de ozanimod y tiene un valor significativo para el desarrollo de medicamentos. (Traducción automática con Google Translate, sin valor legal)

Description

DESCRIPCIÓN

Formas cristalinas de ozanimod y clorhidrato de ozanimod, y procesos para la preparación de las mismas

La presente divulgación se refiere al campo de la química farmacéutica, particularmente se refiere a una forma cristalina de clorhidrato de ozanimod y a los procesos para la preparación de la misma.

Antecedentes

Ozanimod es un modulador selectivo oral novedoso del receptor de esfingosina-1-fosfato 1 (S1P1R), desarrollado por Receptos para el tratamiento de enfermedades autoinmunitarias. Ozanimod se encuentra en ensayos de fase III en EE. UU. para el tratamiento de la esclerosis múltiple (EM) y la colitis ulcerosa (CU). Ozanimod tiene excelentes datos farmacocinéticos, farmacodinámicos y de seguridad en ensayos clínicos, lo que lo convierte en el complemento perfecto para la estrategia de desarrollo diferenciada y se espera que sea el mejor fármaco modulador de SIPIR de segunda generación. La estructura química del fármaco se muestra como fórmula (I).

Una actividad farmacéutica específica es el requisito previo básico que debe cumplir un agente farmacéuticamente activo para aprobarse como un medicamento en el mercado. Sin embargo, existen diversos requisitos adicionales que debe cumplir un principio farmacéuticamente activo. Estos requisitos se basan en diversos parámetros relacionados con la naturaleza de la propia sustancia activa. Sin ánimo de limitarse a ellos, los ejemplos de estos parámetros son la estabilidad química, la estabilidad en estado sólido y la estabilidad de almacenamiento de la sustancia activa en diversas condiciones ambientales, la estabilidad durante la producción de la composición farmacéutica y la estabilidad de la sustancia activa en los productos farmacológicos finales, etc.

El agente farmacéuticamente activo usado para preparar las composiciones farmacéuticas debe ser lo más puro posible y su estabilidad durante el almacenamiento a largo plazo debe garantizarse en diversas condiciones ambientales. Es fundamental evitar el uso de composiciones farmacéuticas que contengan un agente distinto del agente activo real, por ejemplo, productos de descomposición del mismo. En tales casos, el contenido de agente activo en el fármaco puede ser menor que el especificado. Además, es importante que el agente farmacéuticamente activo sea no higroscópico, estable tanto a la degradación como a los cambios posteriores en la forma sólida. Si el agente farmacéuticamente activo es higroscópico en el sentido de que absorbe agua (ya sea lentamente o con el tiempo), es casi imposible formular de manera fiable el agente farmacéuticamente activo en un fármaco, ya que la cantidad de agente a añadir para proporcionar la misma dosificación variará en gran medida dependiendo del grado de hidratación. Además, las variaciones en la hidratación o en la forma sólida pueden provocar cambios en las propiedades fisicoquímicas, tales como la solubilidad o la velocidad de disolución, lo que a su vez puede conducir a una absorción oral inconsistente del paciente. Preferentemente, por lo tanto, una sustancia farmacéuticamente activa debería ser solo ligeramente higroscópica.

Por consiguiente, la estabilidad química, la estabilidad en estado sólido, la "semivida" y las propiedades de manipulación de materiales (tales como la facilidad de solubilización del compuesto) de la sustancia farmacéuticamente activa son factores muy importantes. En una situación ideal, la sustancia farmacéuticamente activa y cualquier composición que la contenga deberían poder almacenarse eficazmente durante períodos de tiempo apreciables, sin presentar un cambio significativo en las propiedades fisicoquímicas de la sustancia activa, tales como su actividad, contenido de humedad, solubilidad, forma sólida, etc. Además, la sustancia farmacéuticamente activa generalmente necesita ser procesada para lograr un tamaño de partícula adecuado para la inhalación y cualquier forma cristalina debe ser estable durante dicho procesamiento para que las propiedades del producto final sean predecibles y fiables. En resumen, en la producción de composiciones farmacéuticas comercialmente viables y farmacéuticamente aceptables, es deseable proporcionar la sustancia farmacéuticamente activa en una forma completamente cristalina y estable, siempre que sea posible.

Las diferentes formas cristalinas del mismo fármaco químico sólido son significativamente diferentes en solubilidad y estabilidad, lo que a su vez puede afectar a la absorción y biodisponibilidad de los productos farmacológicos. Los documentos CN102762100A o US2011172202A1 divulgaron el compuesto de fórmula (I), mientras que no hay forma sólida o forma cristalina de ozanimod divulgada en la técnica anterior. La técnica anterior no tiene ni directrices ni inspiración para encontrar las formas cristalinas. Por lo tanto, es necesario realizar un cribado polimorfo exhaustivo de ozanimod para seleccionar una forma cristalina que sea la más adecuada para el desarrollo de fármacos.

Los inventores de la presente divulgación han encontrado varias formas cristalinas de ozanimod y una forma cristalina de clorhidrato de ozanimod a través del proceso de investigación, lo que proporciona nuevas opciones para la preparación del producto farmacológico de ozanimod.

Sumario

La presente divulgación proporciona formas cristalinas novedosas de ozanimod y clorhidrato de ozanimod, y procesos para la preparación y uso de las mismas. La presente invención se define por las reivindicaciones.

Un objetivo de la presente divulgación es proporcionar una forma cristalina de ozanimod, designada Forma CS1.

El patrón de difracción de polvo de rayos X de la Forma CS1 muestra picos característicos a valores de 2theta de 12,1° ± 0,2°, 10,4° ± 0,2° y 4,2° ± 0,2° usando radiación CuKa.

Además, el patrón de difracción de polvo de rayos X de la Forma CS1 muestra uno o dos o tres picos de difracción a valores de 2theta de 7,4° ± 0,2°, 24,3° ± 0,2° y 17,7° ± 0,2°. Preferentemente, el patrón de difracción de polvo de rayos X de la Forma CS1 muestra tres picos de difracción a valores de 2theta de 7,4° ± 0,2°, 24,3° ± 0,2°, 17,7° ± 0,2°.

Además, el patrón de difracción de polvo de rayos X de la Forma CS1 muestra uno o dos o tres picos característicos a valores de 2theta de 12,8° ± 0,2°, 21,5° ± 0,2° y 18,2° ± 0,2°. Preferentemente, el patrón de difracción de polvo de rayos X de la Forma CS1 muestra tres picos de difracción a valores de 2theta de 12,8° ± 0,2°, 21,5° ± 0,2° y 18,2° ± 0,2°.

Además, el patrón de difracción de polvo de rayos X de la Forma CS1 muestra picos característicos a valores de 2theta de 4,2° ± 0,2°, 7,4° ± 0,2°, 10,4° ± 0,2°, 12,1° ± 0,2°, 12,8° ± 0,2°, 17,7° ± 0,2°, 18,2° ± 0,2°, 21,5° ± 0,2° y 24,3° ± 0,2°.

En una divulgación preferida, el patrón de difracción de polvo de rayos X de la Forma CS1 es sustancialmente como se representa en la figura 1.

En una divulgación preferida, la curva de calorimetría diferencial de barrido (DSC) de la Forma CS1 muestra el primer pico endotérmico cuando se calienta a aproximadamente 98 °C y el segundo pico endotérmico cuando se calienta a aproximadamente 134 °C, que es sustancialmente como se representa en la figura 2.

En una divulgación preferida, la curva de análisis termogravimétrico (TGA) de la Forma CS1 muestra una pérdida de peso de aproximadamente el 4,3 % cuando se calienta a 150 °C, que es sustancialmente como se representa en la figura 3.

La presente divulgación proporciona además el proceso para preparar la Forma CS1. El proceso comprende el método 1) o el método 2):

1) Suspender clorhidrato de ozanimod en un disolvente seleccionado de alcoholes, cetonas, ésteres y nitrilos y la suspensión se vuelve transparente después de añadir de 1,0 a 1,5 (preferentemente 1,0) equivalentes de solución de hidróxido de sodio. A continuación, un sólido de color blanco precipita de la solución después de la agitación a temperatura ambiente durante un período de tiempo. Aislar el sólido de color blanco por centrifugación, y a continuación se obtiene la Forma CS1 después de secar el sólido aislado. Dicho tiempo de agitación es de al menos 0,5 h, más preferentemente al menos 1 h, más preferentemente además 12 h; o

2) Suspender ozanimod en un alcohol, agitar, aislar y secar el sólido para obtener la Forma CS1 de ozanimod; en donde dicho tiempo de agitación es de al menos 0,5 horas, más preferentemente al menos 1 h, más preferentemente además 12 h.

Además, en el método 1), dicho alcohol es metanol; dicha cetona es acetona; dicho éster es acetato de isopropilo; dicho nitrilo es acetonitrilo. En el método 2), dicho alcohol es metanol.

Otro objetivo de la presente divulgación es proporcionar una forma cristalina de ozanimod, designada Forma CS2.

El patrón de difracción de polvo de rayos X de la Forma CS2 muestra picos característicos a valores de 2theta de 23,2° ± 0,2°, 18,5° ± 0,2° y 13,3° ± 0,2° usando radiación CuKa.

Además, el patrón de difracción de polvo de rayos X de la Forma CS2 muestra uno o dos o tres picos de difracción a valores de 2theta de 15,9° ± 0,2°, 30,0° ± 0,2° y 14,2° ± 0,2°. Preferentemente, el patrón de difracción de polvo de rayos X de la Forma CS2 muestra tres picos de difracción a valores de 2theta de 15,9° ± 0,2°, 30,0° ± 0,2° y 14,2° ± 0,2°.

Además, el patrón de difracción de polvo de rayos X de la Forma CS2 muestra uno o dos o tres picos característicos a valores de 2theta de 4,0° ± 0,2°, 26,5° ± 0,2° y 17,7° ± 0,2°. Preferentemente, el patrón de difracción de polvo de rayos X de la Forma CS2 muestra tres picos de difracción a valores de 2theta de 4,0° ± 0,2°, 26,5° ± 0,2° y 17,7° ± 0,2°.

Además, el patrón de difracción de polvo de rayos X de la Forma CS2 muestra picos característicos a valores de 2theta de 4,0° ± 0,2°, 13,3° ± 0,2°, 14,2° ± 0,2°, 15,9° ± 0,2°, 17,7° ± 0,2°, 18,5° ± 0,2°, 23,2° ± 0,2°, 26,5° ± 0,2° y 30,0° ± 0,2°.

En una divulgación preferida, el patrón de difracción de polvo de rayos X de la Forma CS2 es sustancialmente como se representa en la figura 4.

En una divulgación preferida, la curva de calorimetría diferencial de barrido (DSC) de la Forma CS2 muestra un pico endotérmico cuando se calienta a aproximadamente 134 °C, que es sustancialmente como se representa en la figura 5.

En una divulgación preferida, la curva de análisis termogravimétrico (TGA) de la Forma CS2 muestra una pérdida de peso de aproximadamente el 1,1 % cuando se calienta a 150 °C, que es sustancialmente como se representa en la figura 6.

La presente divulgación proporciona además el proceso para preparar la Forma CS2. El proceso comprende el método 1) o el método 2):

1) La Forma cristalina CS2 se prepara calentando la Forma CS1 a 100-130 °C, o

2) Suspender ozanimod en un disolvente seleccionado de nitrilos, cetonas, ésteres, hidrocarburos aromáticos, éteres cíclicos y agua, o una mezcla de disolventes seleccionados de alcoholes y agua, cetonas y agua, amidas y agua, y a continuación agitar, aislar y secar el sólido para obtener la Forma CS2 de ozanimod; dicho tiempo de agitación es de al menos 0,5 horas, más preferentemente al menos 1 h, más preferentemente además 12 h. Además, dicha temperatura de calentamiento en el método 1) es de 110 °C.

Además, en el método 2), dicho nitrilo es acetonitrilo; dicha cetona es acetona o metil isobutilcetona; dicho éster es acetato de etilo; dicho hidrocarburo aromático es tolueno; dicho éter cíclico es 2-metiltetrahidrofurano; dicha mezcla de disolventes es una mezcla de etanol y agua, acetona y agua, o N, N-dimetilformamida y agua.

Otro objetivo de la presente divulgación es proporcionar una forma cristalina de ozanimod, designada Forma CS3. El patrón de difracción de polvo de rayos X de la Forma CS3 muestra al menos un pico característico a valores de 2theta de 4,4° ± 0,2°, 5,7° ± 0,2°, 7,8° ± 0,2°, 11,0° ± 0,2°, 13,0° ± 0,2°, 13,7° ± 0,2°, 17,0° ± 0,2°, 23,2° ± 0,2°, 24,1° ± 0,2° y 26,0° ± 0,2°.

Además, el patrón de difracción de polvo de rayos X de la Forma CS3 muestra picos característicos a valores de 2theta de 4,4° ± 0,2°, 13,0° ± 0,2°, 26,0° ± 0,2° y 11,0° ± 0,2°.

Además, el patrón de difracción de polvo de rayos X de la Forma CS3 muestra uno o dos o tres picos de difracción a valores de 2theta de 7,8° ± 0,2°, 23,2° ± 0,2° y 17,0° ± 0,2°. Preferentemente, el patrón de difracción de polvo de rayos X de la Forma CS3 muestra tres picos de difracción a valores de 2theta de 7,8° ± 0,2°, 23,2° ± 0,2° y 17,0° ± 0,2°. Además, el patrón de difracción de polvo de rayos X de la Forma CS3 muestra uno o dos picos característicos a valores de 2theta de 13,7° ± 0,2° y 24,1° ± 0,2°. Preferentemente, el patrón de difracción de polvo de rayos X de la Forma CS3 muestra dos picos de difracción a valores de 2theta de 13,7° ± 0,2° y 24,1° ± 0,2°.

Además, el patrón de difracción de polvo de rayos X de la Forma CS3 muestra uno o dos picos característicos a valores de 2theta de 5,7° ± 0,2° y 24,1° ± 0,2°. Preferentemente, el patrón de difracción de polvo de rayos X de la Forma CS3 muestra dos picos de difracción a valores de 2theta de 5,7° ± 0,2° y 24,1° ± 0,2°.

En una divulgación preferida, el patrón de difracción de polvo de rayos X de la Forma CS3 muestra picos característicos a valores de 2theta de 4,4° ± 0,2°, 7,8° ± 0,2°, 11,0° ± 0,2°, 13,0° ± 0,2°, 13,7° ± 0,2°, 17,0° ± 0,2°, 23,2° ± 0,2°, 24,1° ± 0,2° y 26,0° ± 0,2°.

En una divulgación preferida, el patrón de difracción de polvo de rayos X de la Forma CS3 es sustancialmente como se representa en la figura 7.

En una divulgación preferida, la curva de calorimetría diferencial de barrido (DSC) de la Forma CS3 muestra el primer pico endotérmico cuando se calienta a aproximadamente 112 °C, muestra un pico exotérmico cuando se calienta a aproximadamente 121 °C y muestra el segundo pico endotérmico cuando se calienta a aproximadamente 133 °C que es sustancialmente como se representa en la figura 8.

En una divulgación preferida, la curva de análisis termogravimétrico (TGA) de la Forma CS3 muestra una pérdida de peso de aproximadamente el 3,1 % cuando se calienta a 130 °C, que es sustancialmente como se representa en la figura 9.

En una divulgación preferida, el patrón de difracción de polvo de rayos X de la Forma CS3 muestra picos característicos a valores de 2theta de 4,4° ± 0,2°, 5,7° ± 0,2°, 7,8° ± 0,2°, 11,0° ± 0,2°, 13,0° ± 0,2°, 17,0° ± 0,2°, 23,2° ± 0,2°, 24,1° ± 0,2° y 26,0° ± 0,2°.

En una divulgación preferida, el patrón de difracción de polvo de rayos X de la Forma CS3 es sustancialmente como se representa en la figura 53.

Otro objetivo de la presente divulgación es proporcionar el proceso para prepara la Forma CS3 de ozanimod. El proceso comprende: añadir ozanimod en un disolvente seleccionado de alcoholes, nitrilos, diclorometano, ésteres, sulfóxidos o una mezcla de glicol dimetil éter y agua, filtrar, evaporar el filtrado y recoger el sólido para obtener la Forma CS3 de ozanimod.

Preferentemente, dicho alcohol es metanol; dicho nitrilo es acetonitrilo; dicho éster es acetato de isopropilo; dicho sulfóxido es dimetilsulfóxido.

Otro objetivo de la divulgación es proporcionar una forma cristalina de ozanimod, designada Forma CS5.

El patrón de difracción de polvo de rayos X de la Forma CS5 muestra picos característicos a valores de 2theta de 4,3° ± 0,2°, 6,8° ± 0,2° y 16,4° ± 0,2° usando radiación CuKa.

Además, el patrón de difracción de polvo de rayos X de la Forma CS5 muestra uno o dos o tres picos de difracción a valores de 2theta de 21,6° ± 0,2°, 8,5° ± 0,2° y 13,6° ± 0,2°. Preferentemente, el patrón de difracción de polvo de rayos X de la Forma CS5 muestra tres picos de difracción a valores de 2theta de 21,6° ± 0,2°, 8,5° ± 0,2° y 13,6° ± 0,2°.

Además, el patrón de difracción de polvo de rayos X de la Forma CS5 muestra uno o dos o tres picos de difracción a valores de 2theta de 13,0° ± 0,2°, 25,0° ± 0,2° y 26,0° ± 0,2°. Preferentemente, el patrón de difracción de polvo de rayos X de la Forma CS5 muestra tres picos de difracción a valores de 2theta de 13,0° ± 0,2°, 25,0° ± 0,2° y 26,0° ± 0,2°.

Además, el patrón de difracción de polvo de rayos X de la Forma CS5 muestra picos característicos a valores de 2theta de 4,3° ± 0,2°, 6,8° ± 0,2°, 8,5° ± 0,2°, 13,0° ± 0,2°, 13,6° ± 0,2°, 16,4° ± 0,2°, 21,6° ± 0,2°, 25,0° ± 0,2° y 26,0° ± 0,2°.

En una divulgación preferida, el patrón de difracción de polvo de rayos X de la Forma CS5 es sustancialmente como se representa en la figura 10.

En una divulgación preferida, la curva de calorimetría diferencial de barrido (DSC) de la Forma CS5 muestra el primer pico endotérmico cuando se calienta a aproximadamente 65 °C, muestra un pico exotérmico cuando se calienta a aproximadamente 91 °C y muestra el segundo pico endotérmico cuando se calienta a aproximadamente 133 °C y que es sustancialmente como se representa en la figura 11.

Otro objetivo de la presente divulgación es proporcionar el proceso para preparar la Forma CS5 de ozanimod. El proceso comprende añadir el sólido de ozanimod en éteres cíclicos, filtrar, evaporar el filtrado y recoger el sólido para obtener la Forma CS5 de ozanimod.

Además, dicho éter cíclico es 2-metiltetrahidrofurano.

Otro objetivo de la presente divulgación es proporcionar una forma cristalina de ozanimod, designada Forma CS6.

El patrón de difracción de polvo de rayos X de la Forma CS6 muestra picos característicos a valores de 2theta de 4,4° ± 0,2°, 24,5° ± 0,2°, 26,5° ± 0,2° y 13,8° ± 0,2° usando radiación CuKa.

Además, el patrón de difracción de polvo de rayos X de la Forma CS6 muestra uno o dos picos de difracción a valores de 2theta de 13,0° ± 0,2° y 25,4° ± 0,2°. Preferentemente, el patrón de difracción de polvo de rayos X de la Forma CS6 muestra dos picos de difracción a valores de 2theta de 13,0° ± 0,2° y 25,4° ± 0,2°.

Además, el patrón de difracción de polvo de rayos X de la Forma CS6 muestra uno o dos o tres picos de difracción a valores de 2theta de 8,9° ± 0,2°, 13,4° ± 0,2° y 11,0° ± 0,2°. Preferentemente, el patrón de difracción de polvo de rayos X de la Forma CS6 muestra tres picos de difracción a valores de 2theta de 8,9° ± 0,2°, 13,4° ± 0,2° y 11,0° ± 0,2°.

Además, el patrón de difracción de polvo de rayos X de la Forma CS6 muestra picos característicos a valores de 2theta de 4,4° ± 0,2°, 8,9° ± 0,2°, 11,0° ± 0,2°, 13,0° ± 0,2°, 13,4° ± 0,2°, 13,8° ± 0,2°, 24,5° ± 0,2°, 25,4° ± 0,2° y 26,5° ± 0,2°.

En una divulgación preferida, el patrón de difracción de polvo de rayos X de la Forma CS6 es sustancialmente como se representa en la figura 16.

En una divulgación preferida, la curva de calorimetría diferencial de barrido (DSC) de la Forma CS6 muestra un pico exotérmico cuando se calienta a aproximadamente 110 °C y muestra un pico endotérmico cuando se calienta a aproximadamente 135 °C, que es sustancialmente como se representa en la figura 13.

En una divulgación preferida, la curva de análisis termogravimétrico (TGA) de la Forma CS6 muestra una pérdida de peso de aproximadamente el 1,2 % cuando se calienta a 120 °C, que es sustancialmente como se representa en la figura 14.

Otro objetivo de la presente divulgación es proporcionar el proceso para preparar la Forma CS6 de ozanimod. El proceso comprende añadir el sólido de ozanimod en un disolvente seleccionado de cetonas, cloroformo y similares, filtrar, evaporar el filtrado y recoger el sólido para obtener la Forma CS6 de ozanimod.

Preferentemente, dicha cetona es acetona.

Otro objetivo de la presente divulgación es proporcionar una composición farmacéutica que comprenda una cantidad terapéutica de la Forma CS1 o Forma CS2 de ozanimod o una combinación de las mismas y portadores, diluyentes o excipientes farmacéuticamente aceptables. Generalmente, se mezcla o se pone en contacto terapéuticamente una cantidad terapéutica de la Forma CS1 o CS2 o una combinación de las mismas y uno o más excipientes farmacéuticamente aceptables para elaborar una composición farmacéutica o productos farmacológicos, y la composición farmacéutica o los productos farmacológicos se preparan mediante un método bien conocido en el campo farmacéutico.

Se pueden usar la Forma CS1 o la Forma CS2 de ozanimod o combinaciones de las mismas proporcionadas por la presente divulgación para preparar fármacos para tratar enfermedades autoinmunitarias, particularmente se pueden usar para preparar productos farmacológicos para tratar la esclerosis múltiple y la colitis ulcerosa.

La presente divulgación también proporciona una composición farmacéutica que comprende una cantidad terapéutica de la Forma CS3, Forma CS5, Forma CS6 de ozanimod o combinaciones de las mismas y portadores, diluyentes o excipientes farmacéuticamente aceptables. Generalmente, se mezcla o se pone en contacto terapéuticamente una cantidad eficaz de la Forma CS3, Forma CS5, Forma CS6 o una combinación de las mismas y uno o más excipientes farmacéuticamente aceptables para elaborar una composición farmacéutica o productos farmacológicos, y la composición farmacéutica o los productos farmacológicos se preparan mediante un método bien conocido en el campo farmacéutico.

Se pueden usar la Forma CS3, Forma CS5 o la Forma CS6 de ozanimod o combinaciones de las mismas proporcionadas por la presente divulgación para preparar fármacos del modulador selectivo del receptor de esfingosina-1-fosfato 1.

Se pueden usar la Forma CS3, Forma CS5 o la Forma CS6 de ozanimod o combinaciones de las mismas proporcionadas por la presente divulgación para preparar fármacos para tratar enfermedades autoinmunitarias, particularmente se pueden usar para preparar productos farmacológicos para tratar la esclerosis múltiple y la colitis ulcerosa.

La presente divulgación proporciona además una composición farmacéutica que comprende una cantidad terapéutica de la Forma CS1, Forma CS2, Forma CS3, Forma CS5, Forma CS6 de ozanimod o combinaciones de las mismas y portadores, diluyentes o excipientes farmacéuticamente aceptables.

Además, la Forma CS1, Forma CS2, Forma CS3, Forma CS5, Forma CS6 de ozanimod o combinaciones de las mismas se pueden usar para preparar fármacos del modulador selectivo del receptor de esfingosina-1-fosfato 1.

La Forma CS1, Forma CS2, Forma CS3, Forma CS5, Forma CS6 de ozanimod o combinaciones de las mismas se pueden usar para preparar fármacos para tratar la colitis ulcerosa.

La Forma CS1, Forma CS2, Forma CS3, Forma CS5, Forma CS6 de ozanimod o combinaciones de las mismas se pueden usar para preparar fármacos para tratar la esclerosis múltiple.

Otro objetivo de la presente divulgación es proporcionar una forma cristalina de clorhidrato de ozanimod, designada Forma CS1 de clorhidrato de ozanimod.

El patrón de difracción de polvo de rayos X de la Forma CS1 de clorhidrato de ozanimod muestra picos característicos a valores de 2theta de 26,1° ± 0,2°, 24,4° ± 0,2° y 20,1° ± 0,2° usando radiación CuKa.

Además, el patrón de difracción de polvo de rayos X de la Forma CS1 de clorhidrato de ozanimod muestra uno o dos o tres picos de difracción a valores de 2theta de 3,9° ± 0,2°, 21,1° ± 0,2° y 7,9° ± 0,2°. Preferentemente, el patrón de difracción de polvo de rayos X de la Forma CS1 de clorhidrato de ozanimod muestra tres picos de difracción a valores de 2theta de 3,9° ± 0,2°, 21,1° ± 0,2° y 7,9° ± 0,2°.

Además, el patrón de difracción de polvo de rayos X de la Forma CS1 de clorhidrato de ozanimod muestra uno o dos o tres picos de difracción a valores de 2theta de 11,9° ± 0,2°, 19,6° ± 0,2° y 13,8° ± 0,2°. Preferentemente, el patrón de difracción de polvo de rayos X de la Forma CS1 de clorhidrato de ozanimod muestra picos de difracción a valores de 2theta de 11,9° ± 0,2°, 19,6° ± 0,2° y 13,8° ± 0,2°.

Además, el patrón de difracción de polvo de rayos X de la Forma CS1 de clorhidrato de ozanimod muestra picos característicos a valores de 2theta de 3,9° ± 0,2°, 7,9° ± 0,2°, 11,9° ± 0,2°, 13,8° ± 0,2°, 19,6° ± 0,2°, 20,1° ± 0,2°, 21,1° ± 0,2°, 24,4° ± 0,2° y 26,1° ± 0,2°.

En una realización preferida, el patrón de difracción de polvo de rayos X de la Forma CS1 de clorhidrato es sustancialmente como se representa en la figura 17.

En una realización preferida, el patrón de difracción de polvo de rayos X de la Forma CS1 de clorhidrato es sustancialmente como se representa en la figura 20.

En una realización preferida, la curva de calorimetría diferencial de barrido (DSC) de la Forma CS1 de clorhidrato muestra un pico endotérmico cuando se calienta a aproximadamente 238 °C, que es sustancialmente como se representa en la figura 18.

En una realización preferida, la curva de análisis termogravimétrico (TGA) de la Forma CS1 de clorhidrato muestra una pérdida de peso de aproximadamente el 1,1 % cuando se calienta a 150 °C, que es sustancialmente como se representa en la figura 19.

Otro objetivo de la presente invención es proporcionar el proceso para preparar la Forma CS1 de clorhidrato de ozanimod. El proceso comprende el método 1) o el método 2) o el método 3) o el método 4),

1) Añadir clorhidrato de ozanimod en éteres y agitar durante un período de tiempo a una determinada temperatura (4-50 °C, preferentemente 25 °C), filtrar y secar para obtener un sólido de color blanco; dicho tiempo de agitación es de al menos 1 horas, preferentemente al menos 24 horas, más preferentemente siete días; o

2) Disolver el clorhidrato de ozanimod en un disolvente seleccionado de alcoholes y ésteres o una mezcla de disolventes de los mismos, evaporar a temperatura ambiente para obtener un sólido de color blanco; dicho "tiempo de evaporación" normalmente significa el tiempo o mayor que el tiempo para la precipitación sólida. El tiempo de evaporación es preferentemente de 0,5 días a 14 días, más preferentemente 7 días; o

3) Disolver el clorhidrato de ozanimod en un disolvente seleccionado de amidas o una mezcla de disolventes de las mismas, a continuación colocar la solución en un sistema que contenga antidisolvente de clorhidrato de ozanimod para la difusión de vapor líquido a temperatura ambiente, filtrar y secar para obtener un sólido de color blanco; dicho "tiempo de difusión" normalmente significa el tiempo o mayor que el tiempo para la precipitación sólida. El tiempo de difusión es preferentemente de 1 día a 14 días, más preferentemente 7 días; o

4) Disolver el clorhidrato de ozanimod en una mezcla de alcoholes y agua para formar una solución sobresaturada, el clorhidrato de ozanimod se disuelve completamente a 25-80 °C (preferentemente 50 °C), a continuación filtrar, enfriar el filtrado para la precipitación, filtrar y secar para obtener un sólido de color blanco de la Forma CS1 de clorhidrato de ozanimod.

Otro objetivo de la presente invención es proporcionar una composición farmacéutica que comprenda una cantidad terapéutica de la Forma CS1 de clorhidrato de ozanimod y portadores, diluyentes o excipientes farmacéuticamente aceptables. Generalmente, se mezcla o se pone en contacto terapéuticamente una cantidad eficaz de la Forma CS1 de clorhidrato de ozanimod y uno o más excipientes farmacéuticamente aceptables para hacer una composición farmacéutica o productos farmacológicos, y la composición farmacéutica o los productos farmacológicos se preparan mediante un método bien conocido en el campo farmacéutico.

Además, la Forma CS1 de clorhidrato de ozanimod proporcionada por la presente invención se puede usar para preparar fármacos para tratar enfermedades autoinmunitarias, particularmente se puede usar para preparar productos farmacológicos para tratar la esclerosis múltiple y la colitis ulcerosa.

Dicha "temperatura ambiente" en la presente divulgación no es un valor de temperatura exacto y se refiere a 10-30 °C.

El tiempo de reacción de "evaporación" y "difusión" en la presente divulgación se refiere al tiempo antes de la precipitación sólida o mayor.

Dicha "agitación" se logra mediante el uso de un método convencional en el campo, tal como una agitación magnética o una agitación mecánica y la velocidad de agitación es de 50 a 1800 r/min, preferentemente es de 300 a 900 r/min.

Dicha "separación" se logra mediante el uso de un método convencional en el campo, tal como centrifugación o filtración. La operación de "centrifugación" es la siguiente: La muestra a separar se coloca en el tubo de centrífuga y a continuación se centrifuga a una velocidad de 10000 r/min hasta que todo el sólido se hunde hasta el fondo del tubo.

Dicho "secado" se realiza a temperatura ambiente o a una temperatura más alta. La temperatura de secado es de la temperatura ambiente a aproximadamente 60 °C, o a 40 °C, o a 50 °C. El tiempo de secado puede ser de 2 a 48 horas, o durante una noche. El secado se realiza en una campana extractora, horno u horno de vacío.

Dicha "evaporación" se logra mediante el uso de un método convencional en el campo. Por ejemplo, la evaporación lenta consiste en sellar el recipiente con una película de sellado y perforar orificios para la evaporación. La evaporación rápida consiste en colocar el recipiente abierto para la evaporación.

Dicho "polímero" es una mezcla de masas equivalentes de policaprolactona, polioxietileno, metacrilato de polimetilo, alginato de sodio e hidroxietilcelulosa.

Los efectos beneficiosos de la presente divulgación son los siguientes:

En la actualidad, ninguna patente o bibliografía ha divulgado la forma cristalina de ozanimod y los inventores de la presente divulgación superaron este difícil problema y se encontraron varias formas cristalinas novedosas de ozanimod adecuadas para el desarrollo de fármacos.

Las formas cristalinas y la forma cristalina del clorhidrato proporcionadas por la presente divulgación tienen ventajas en cuanto a solubilidad, punto de fusión, estabilidad, disolución, biodisponibilidad y procesabilidad. En cuanto a la Forma cristalina CS1, Forma CS2, Forma CS3, Forma CS5, Forma CS6 y la Forma CS1 del clorhidrato, la higroscopicidad es baja, la estabilidad es buena, la solubilidad cumple con los requisitos medicinales, la distribución del tamaño de partícula es uniforme y la dispersión es buena. Estas ventajas ayudan a simplificar el proceso de preparación de fármacos después del tratamiento y proporcionan nuevas y mejores opciones para la preparación de productos farmacológicos de ozanimod, que son muy importantes para el desarrollo de fármacos.

Breve descripción de los dibujos

La figura 1 muestra un patrón XRPD de la Forma CS1 obtenida en el Ejemplo 1.

La figura 2 muestra una curva DSC de la Forma CS1 obtenida en el Ejemplo 1.

La figura 3 muestra una curva TGA de la Forma CS1 obtenida en el Ejemplo 1.

La figura 4 muestra un patrón XRPD de la Forma CS2 obtenida en el Ejemplo 3.

La figura 5 muestra una curva DSC de la Forma CS2 obtenida en el Ejemplo 3.

La figura 6 muestra una curva TGA de la Forma CS2 obtenida en el Ejemplo 3.

La figura 7 muestra un patrón XRPD de la Forma CS3 obtenida en el Ejemplo 5.

La figura 8 muestra una curva DSC de la Forma CS3 obtenida en el Ejemplo 5.

La figura 9 muestra una curva TGA de la Forma CS3 obtenida en el Ejemplo 5.

La figura 10 muestra un patrón XRPD de la Forma CS5 obtenida en el Ejemplo 8.

La figura 11 muestra una curva DSC de la Forma CS5 obtenida en el Ejemplo 8.

La figura 12 muestra un patrón XRPD de la Forma CS6 obtenida en el Ejemplo 9.

La figura 13 muestra una curva DSC de la Forma CS6 obtenida en el Ejemplo 10.

La figura 14 muestra una curva TGA de la Forma CS6 obtenida en el Ejemplo 10.

La figura 15 muestra un patrón XRPD de la Forma CS3 obtenida en el Ejemplo 6.

La figura 16 muestra un patrón XRPD de la Forma obtenida en el Ejemplo 10.

La figura 17 muestra un patrón XRPD de la Forma CS1 de clorhidrato.

La figura 18 muestra una curva DSC de la Forma CS1 de clorhidrato obtenida en el Ejemplo 11.

La figura 19 muestra una curva TGA de la Forma CS1 de clorhidrato obtenida en el Ejemplo 11.

La figura 20 muestra un patrón XRPD de la Forma CS1 de clorhidrato obtenida en el Ejemplo 11. La figura 21 muestra un patrón XRPD de la Forma de clorhidrato obtenida en el Ejemplo 12. La figura 22 muestra un patrón XRPD de la Forma de clorhidrato obtenida en el Ejemplo 13. La figura 23 muestra un patrón XRPD de la Forma de clorhidrato obtenida en el Ejemplo 14. La figura 24 muestra un patrón XRPD de la Forma CS1 de clorhidrato obtenida en el Ejemplo 15. La figura 25 muestra un gráfico DVS de la Forma CS1 en el Ejemplo 16.

La figura 26 muestra un gráfico DVS de la Forma CS2 en el Ejemplo 17.

La figura 27 muestra un gráfico DVS de la Forma CS3 en el Ejemplo 18.

La figura 28 muestra un gráfico DVS de la Forma CS5 en el Ejemplo 19.

La figura 29 muestra un gráfico DVS de la Forma CS6 en el Ejemplo 20.

La figura 30 muestra un gráfico DVS de la Forma CS1 de clorhidrato en el Ejemplo 21.

La figura 31 muestra un patrón de comparación de XRPD de la Forma CS1 antes y después de la prueba de estabilidad en el Ejemplo 22.

La figura 32 muestra un patrón de comparación de XRPD de la Forma CS2 antes y después de la prueba de estabilidad en el Ejemplo 23.

La figura 33 muestra un patrón de comparación de XRPD de la Forma CS3 antes y después de la prueba de estabilidad en el Ejemplo 24.

La figura 34 muestra un patrón de comparación de XRPD de la Forma CS5 antes y después de la prueba de estabilidad en el Ejemplo 25.

La figura 35 muestra un patrón de comparación de XRPD de la Forma CS6 antes y después de la prueba de estabilidad en el Ejemplo 26.

La figura 36 muestra un patrón de comparación de XRPD de la Forma CS1 de clorhidrato antes y después de la prueba de estabilidad en el Ejemplo 27.

La figura 37 muestra un diagrama PSD de la Forma CS1 en el Ejemplo 28.

La figura 38 muestra un diagrama PSD de la Forma CS2 en el Ejemplo 28.

La figura 39 muestra un diagrama PSD de la Forma CS3 en el Ejemplo 28.

La figura 40 muestra un diagrama PSD de la Forma CS5 en el Ejemplo 28.

La figura 41 muestra un diagrama PSD de la Forma CS6 en el Ejemplo 28.

La figura 42 muestra un diagrama PSD de la Forma CS1 de clorhidrato en el Ejemplo 28.

La figura 43 muestra una imagen PLM de la Forma CS1 en el Ejemplo 28.

La figura 44 muestra una imagen PLM de la Forma CS2 en el Ejemplo 28.

La figura 45 muestra una imagen PLM de la Forma CS3 en el Ejemplo 28.

La figura 46 muestra una imagen PLM de la Forma CS5 en el Ejemplo 28.

La figura 47 muestra una imagen PLM de la Forma CS6 en el Ejemplo 28.

La figura 48 muestra una imagen PLM de la Forma CS1 de clorhidrato en el Ejemplo 28.

La figura 49 muestra un patrón de comparación de XRPD de la Forma CS3 antes y después de la prueba de molienda en el Ejemplo 31.

La figura 50 muestra un patrón de comparación de XRPD de la Forma CS5 antes y después de la prueba de molienda en el Ejemplo 31.

La figura 51 muestra un patrón de comparación de XRPD de la Forma CS6 antes y después de la prueba de molienda en el Ejemplo 31.

La figura 52 muestra un patrón de comparación de XRPD de la Forma CS1 de clorhidrato antes y después de la prueba de molienda en el Ejemplo 31.

La figura 53 muestra un patrón XRPD de la Forma CS3 en el Ejemplo 7.

Descripción detallada de la divulgación

La presente divulgación se ilustra adicionalmente con los siguientes ejemplos en detalle, pero no pretende limitar el alcance de la presente divulgación. Los expertos en la técnica pueden introducir mejoras en el proceso de preparación y en los instrumentos usados dentro del alcance de las reivindicaciones, y estas mejoras deben considerarse dentro del alcance de la presente divulgación. Por lo tanto, el alcance protector de la presente patente de divulgación debe estar definido por las reivindicaciones.

En los siguientes ejemplos, el método de prueba generalmente se implementa de acuerdo con una condición convencional o una condición recomendada por el fabricante.

Las abreviaturas usadas en la divulgación se explican de la siguiente manera:

XRPD: Difracción de polvo de rayos X

DSC: Calorimetría diferencial de barrido

TGA: Análisis termogravimétrico

DVS: Absorción dinámica de vapor

PSD: Distribución del tamaño de partícula

PLM: Microscopía de luz polarizada

El patrón de difracción de polvo de rayos X en la presente divulgación se adquirió mediante un difractómetro de polvo de rayos X Panalytical Empyrean. Los parámetros del método de difracción de polvo de rayos X de la presente divulgación fueron los siguientes:

Reflexión de rayos X: Cu, Ka

Ka1 (A): 1,540598; Ka2 (A): 1,544426

Relación de intensidad Ka2/Ka1: 0,50

Tensión: 45 (kV)

Corriente: 40 (mA)

Intervalo de barrido: de 3,0 grados a 40,0 grados

Los datos de calorimetría diferencial de barrido (DSC) en la presente divulgación se adquirieron mediante un TA Q2000. Los parámetros del método de calorimetría diferencial de barrido (DSC) de la presente divulgación fueron los siguientes:

Velocidad de calentamiento: 10 °C/min

Gas de purga: nitrógeno

Los datos del análisis termogravimétrico (TGA) en la presente divulgación se adquirieron mediante un TA Q5000. Los parámetros del método de análisis termogravimétrico (TGA) de la presente divulgación fueron los siguientes:

Velocidad de calentamiento: 10 °C/min

Gas de purga: nitrógeno

La absorción dinámica de vapor (DVS) se mide a través de una DVS intrínseca de SMS (Surface Measurement Systems Ltd ). Los parámetros típicos para la prueba DVS son los siguientes:

Temperatura: 25 °C

Gas y caudal: N<2>, 200 ml/min

dm/dt: 0,002 %/minuto

Intervalo de HR: 0 % de HR al 95 % de HR

La prueba de distribución del tamaño de partícula en la presente divulgación se adquiere mediante el analizador láser del tamaño de partícula S3500 de Microtrac. El Microtrac S3500 está equipado con el SDC (controlador de suministro de muestras). La prueba se realiza mediante un proceso húmedo y el medio de dispersión es Isopar G. Los parámetros son los siguientes:

Distribución de tamaño: Volumen Tiempo de ejecución: 10 s

Medio de dispersión: Isopar G Coordenadas de partículas: Estándar Número de ejecución: Promedio de 3 ejecuciones Índice de refracción del fluido: 1,42 Transparencia de partículas: Trans Residuales: Habilitado

Índice de refracción de partículas: 1,5 Caudal: 60 %* ;Forma de partícula: Irregular Filtración: Habilitada ;Potencia de ultrasonicación: 30 W_______________ Tiempo de ultrasonicación: 30 s ;*: El caudal del 60 % es el 60 % de 65 ml/s.

Las materias primas de ozanimod y/o clorhidrato del mismo usadas en los siguientes ejemplos se preparan mediante los métodos divulgados en el documento CN102762100A. Los ejemplos 11-15, 21 y 27-31 son ejemplos de trabajo relacionados con la Forma cristalina CS1 de clorhidrato de ozanimod reivindicada. Los ejemplos relacionados únicamente con una o más de la Forma cristalina CS1, Forma CS2, Forma CS3, Forma CS5 y la Forma CS6 de ozanimod se proporcionan como ejemplos de referencia.

Ejemplo 1

Preparación de la Forma CS1 de ozanimod:

Se añadieron aproximadamente 2,0 g de clorhidrato de ozanimod en un vial de vidrio de 150 ml seguido de la adición de 100 ml de metanol para formar una suspensión a temperatura ambiente. La suspensión se volvió transparente después de añadir gota a gota 7,0 ml de una solución de hidróxido de sodio (32 mg/ml). Y a continuación, el sólido de color blanco se eliminó por precipitación después de la agitación a temperatura ambiente durante 12 horas. La suspensión se centrifugó y se secó para aislar el sólido.

El sólido obtenido se identificó como la Forma CS1. Los datos de XRPD del sólido preparado en este ejemplo se enumeran en la Tabla 1. El patrón XRPD se muestra en la figura 1. La curva DSC se muestra en la figura 2. La curva TGA se muestra en la figura 3.

Tabla 1

continuación

Usando el método de preparación del Ejemplo 1, se suspendieron aproximadamente 10 mg de clorhidrato de ozanimod en metanol, acetona, acetato de isopropilo o acetonitrilo. La suspensión se volvió transparente después de añadir 1,0 1,5 equivalentes de una solución de hidróxido de sodio. A continuación, el sólido de color blanco se eliminó por precipitación después de agitar la solución a temperatura ambiente durante 12 horas. La suspensión se centrifugó para obtener un sólido. El sólido se secó al vacío. El sólido obtenido se identificó como la Forma CS1 y su patrón XRPD fue el mismo que el de la figura 1.

Ejemplo 2

Preparación de la Forma CS1 de ozanimod:

Se añadieron aproximadamente 10 mg de ozanimod y 0,5 ml de metanol en un vial de vidrio de 1,5 ml. La suspensión se agitó a temperatura ambiente durante 24 horas. El sólido de color blanco obtenido se identificó como la Forma CS1 y su patrón XRPD fue sustancialmente el mismo que el de la figura 1.

Ejemplo 3

Preparación de la Forma CS2 de ozanimod:

Se añadieron aproximadamente 20 mg de la Forma CS1 de ozanimod en un vial de vidrio de 3 ml. Y a continuación, el sólido se secó al vacío a 110 °C durante 1 hora. El sólido de color blanco obtenido se identificó como la Forma CS2. Los datos de XRPD del sólido preparado en este ejemplo se enumeran en la Tabla 2. El patrón XRPD se muestra en la figura 4. La curva DSC se muestra en la figura 5. La curva TGA se muestra en la figura 6.

Tabla 2

ocntinuación

Ejemplo 4a-4j

Preparación de la Forma CS2 de ozanimod:

Como se muestra en la Tabla 3, se añadieron aproximadamente 10 mg de ozanimod en viales de vidrio de 1,5 ml seguido de la adición de un determinado volumen de disolventes para formar las suspensiones. Estas suspensiones se agitaron a temperatura ambiente durante 24 horas. Los sólidos obtenidos se recogieron y se etiquetaron como muestras 1-10. Las muestras 1-10 se identificaron como Forma CS2. Los patrones de difracción de polvo de rayos X de estas muestras son los mismos que los de la figura 4, que muestra picos característicos a valores de 2theta de 4,0° ± 0,2°, 13,3° ± 0,2°, 14,2° ± 0,2°, 15,9° ± 0,2°, 17,7° ± 0,2°, 18,5° ± 0,2°, 23,2° ± 0,2°, 26,5° ± 0,2° y 30,0° ± 0,2°.

Tabla 3

___ ___

Ejemplo 5

Preparación de la Forma CS3 de ozanimod:

Se añadieron aproximadamente 5,0 mg de ozanimod en un vial de vidrio de 3 ml seguido de la adición de 0,4 ml de diclorometano. La mezcla se filtró y se añadieron aproximadamente 0,2 mg de polímero a la solución transparente. Y a continuación, la solución se evaporó lentamente a temperatura ambiente hasta que se obtuvo un sólido de color blanco. El sólido de color blanco obtenido se identificó como la Forma CS3.

Los datos de XRPD del sólido preparado en este ejemplo se enumeran en la Tabla 4. El patrón XRPD se muestra en la figura 7. La curva DSC se muestra en la figura 8. La curva TGA se muestra en la figura 9.

Tabla 4

Ejemplo 6

Preparación de la Forma CS3 de ozanimod:

Se añadieron aproximadamente 5 mg de sólido de ozanimod en un vial de vidrio de 3 ml seguido de la adición de 1,0 ml de acetonitrilo. La mezcla se filtró y se evaporó rápido a temperatura ambiente hasta que se obtuvo un sólido de color blanco.

El sólido de color blanco obtenido se identificó como la Forma CS3. Los datos de XRPD del sólido preparado en este ejemplo se enumeran en la Tabla 5. El patrón XRPD se muestra en la figura 15.

Tabla 5

continuación

Usando el método de preparación del Ejemplo 6, la Forma CS3 se puede preparar por evaporación en metanol, acetato de isopropilo y dimetilsulfóxido.

Ejemplo 7

Preparación de la Forma CS3 de ozanimod:

Se añadieron aproximadamente 15 mg de sólido de ozanimod en un vial de vidrio de 3 ml seguido de la adición de I , 0 ml de mezcla de disolventes de glicol dimetil éter y agua (1:1, v/v). La mezcla se filtró y se evaporó lentamente a temperatura ambiente hasta que se obtuvo un sólido de color blanco.

El sólido de color blanco obtenido se identificó como la Forma CS3, que muestra picos característicos a valores de 2theta de 4,42°, 5,70°, 7,85°, 11,06°, 12,99°, 17,04°, 23,21°, 24,11° y 26,04°. El patrón XRPD se muestra en la figura 53.

Ejemplo 8

Preparación de la Forma CS5 de ozanimod:

Se añadieron aproximadamente 10 mg de sólido de ozanimod en un vial de vidrio de 3 ml seguido de la adición de 2,4 ml de 2-metiltetrahidrofurano. La mezcla se filtró y se evaporó rápido a temperatura ambiente para obtener un sólido de color blanco.

El sólido de color blanco obtenido se identificó como la Forma CS5. Los datos de XRPD del sólido preparado en este ejemplo se enumeran en la Tabla 6. El patrón XRPD se muestra en la figura 10. La curva DSC se muestra en la figura I I .

Tabla 6

continuación

Ejemplo 9

Preparación de la Forma CS6 de ozanimod:

Se pesaron aproximadamente 15 mg de ozanimod en un vial de vidrio de 3 ml seguido de la adición de aproximadamente 0,2 ml de cloroformo. La mezcla se filtró y se evaporó rápido a temperatura ambiente para obtener un sólido de color blanco.

El sólido de color blanco obtenido se identificó como la Forma CS6. Los datos de XRPD del sólido preparado en este ejemplo se enumeran en la Tabla 7. El patrón XRPD se muestra en la figura 12.

Tabla 7

Usando el método de preparación del Ejemplo 9, la Forma CS6 se puede preparar mediante evaporación en acetona.

Ejemplo 10

Preparación de la Forma CS6 de ozanimod:

Se añadieron aproximadamente 5 mg de sólido de ozanimod en un vial de vidrio de 3 ml seguido de la adición de 0,4 ml de cloroformo. La mezcla se filtró y se evaporó rápido a temperatura ambiente para obtener un sólido de color blanco.

El sólido de color blanco obtenido se identificó como la Forma CS6. Los datos de XRPD del sólido preparado en este ejemplo se enumeran en la Tabla 8. El patrón XRPD se muestra en la figura 16.

Se prepararon de nuevo 10 mg de CS6 usando el método del Ejemplo 10, que se usó para la caracterización por DSC y TGA. La curva DSC se muestra en la figura 13. La curva TGA se muestra en la figura 14.

Tabla 8

Ejemplo 11

Preparación de la Forma CS1 de clorhidrato de ozanimod:

Se añadieron 10,1 mg de clorhidrato de ozanimod en un vial de vidrio de 1,5 ml seguido de la adición de 0,5 ml de 2-metiltetrahidrofurano para formar una suspensión. La suspensión se agitó a temperatura ambiente durante 1 semana, a continuación se obtuvo un sólido de color blanco después de la centrifugación y el secado.

El sólido de color blanco obtenido se identificó como la Forma CS1 de clorhidrato de ozanimod. Los datos de XRPD del sólido preparado en este ejemplo se enumeran en la Tabla 9. El patrón XRPD se muestra en la figura 20. La curva DSC se muestra en la figura 18. La curva TGA se muestra en la figura 19.

Tabla 9

continuación

Ejemplo 12

Preparación de la Forma CS1 de clorhidrato de ozanimod:

Se añadieron 6,0 mg de clorhidrato de ozanimod en un vial de vidrio de 1,5 ml seguido de la adición de 0,5 ml de metanol. La solución se filtró y se evaporó rápidamente a temperatura ambiente durante 1 semana para obtener un sólido.

El sólido obtenido se identificó como la Forma CS1 de clorhidrato de ozanimod. Los datos de XRPD del sólido preparado en este ejemplo se enumeran en la Tabla 10. El patrón XRPD se muestra en la figura 21.

Tabla 10

Ccontinuación

Ejemplo 13

Preparación de la Forma CS1 de clorhidrato de ozanimod:

Se añadieron 5,5 mg de clorhidrato de ozanimod en un vial de vidrio de 1,5 ml seguido de la adición de 0,8 ml de una mezcla de disolventes de metanol y acetato de etilo (3:1, v/v) y 0,2 mg de polímero. La mezcla se evaporó rápido a temperatura ambiente durante 1 semana para obtener un sólido.

El sólido obtenido se identificó como la Forma CS1 de clorhidrato de ozanimod. Los datos de XRPD del sólido preparado en este ejemplo se enumeran en la Tabla 11. El patrón XRPD se muestra en la figura 22.

Tabla 11

Ejemplo 14

Preparación de la Forma CS1 de clorhidrato de ozanimod:

Se añadieron 5,9 mg de clorhidrato de sólido de ozanimod en un vial de vidrio de 1,5 ml seguido de la adición de 0,3 ml de dimetilacetamida. La solución transparente se puso en un vial de vidrio de 20 ml que contenía 5 ml de tetrahidrofurano para la difusión de vapor líquido durante 1 semana. A continuación, la suspensión obtenida se filtró y se secó para obtener un sólido de color blanco.

El sólido de color blanco obtenido se identificó como la Forma CS1 de clorhidrato de ozanimod. Los datos de XRPD del sólido preparado en este ejemplo se enumeran en la Tabla 12. El patrón XRPD se muestra en la figura 23.

Tabla 12

Ejemplo 15

Preparación de la Forma CS1 de clorhidrato de ozanimod:

Se añadieron 5,4 mg de clorhidrato de ozanimod en un vial de vidrio de 1,5 ml seguido de la adición de 0,3 ml de una mezcla de disolventes de metanol y agua (9:1, v/v) a 50 °C. La mezcla se filtró y se enfrió rápido a -20 °C para obtener un sólido.

El sólido de color blanco obtenido se identificó como la Forma CS1 de clorhidrato de ozanimod. Los datos de XRPD del sólido preparado en este ejemplo se enumeran en la Tabla 13. El patrón XRPD se muestra en la figura 24.

Tabla 13

continuación

Ejemplo 16

Evaluación de la higroscopicidad de la Forma CS1 de ozanimod:

Se aplicó absorción dinámica de vapor (DVS) para ensayar la higroscopicidad de la Forma CS1 con aproximadamente 10 mg de muestras. El resultado se enumera en la Tabla 14. El gráfico DVS se muestra en la figura 25.

Tabla 14

Los resultados indican que el aumento de peso de la Forma CS1 por debajo del 80 % de HR es del 0,36 %. De acuerdo con la definición de higroscopicidad, la Forma CS1 pertenece a ligeramente higroscópica.

Ejemplo 17

Evaluación de la higroscopicidad de la Forma CS2 de ozanimod:

Se aplicó absorción dinámica de vapor (DVS) para ensayar la higroscopicidad de la Forma CS2 con aproximadamente 10 mg de muestras. El resultado se enumera en la Tabla 15. El gráfico DVS se muestra en la figura 26.

Tabla 15

Los resultados indican que el aumento de peso de la Forma CS2 por debajo del 80 % de HR es del 0,25 %. De acuerdo con la definición de higroscopicidad, la Forma CS2 pertenece a ligeramente higroscópica.

Ejemplo 18

Evaluación de la higroscopicidad de la Forma CS3 de ozanimod:

Se aplicó absorción dinámica de vapor (DVS) para ensayar la higroscopicidad de la Forma CS3 con aproximadamente 10 mg de muestras. El resultado se enumera en la Tabla 16. El gráfico DVS se muestra en la figura 27.

Tabla 16

Los resultados indican que el aumento de peso de la Forma CS3 por debajo del 80 % de HR es del 2,25 %.

Ejemplo 19

Evaluación de la higroscopicidad de la Forma CS5 de ozanimod:

Se aplicó absorción dinámica de vapor (DVS) para ensayar la higroscopicidad de la Forma CS5 con aproximadamente 10 mg de muestras. El resultado se enumera en la Tabla 17. El gráfico DVS se muestra en la figura 28.

Tabla 17

Los resultados indican que el aumento de peso de la Forma CS5 por debajo del 80 % de HR es del 0,23 %. De acuerdo con la definición de higroscopicidad, la Forma CS5 pertenece a ligeramente higroscópica.

Ejemplo 20

Evaluación de la higroscopicidad de la Forma CS6 de ozanimod:

Se aplicó absorción dinámica de vapor (DVS) para ensayar la higroscopicidad de la Forma CS6 con aproximadamente 10 mg de muestras. El resultado se enumera en la Tabla 18. El gráfico DVS se muestra en la figura 29.

Tabla 18

Los resultados indican que el aumento de peso de la Forma CS6 por debajo del 80 % de HR es del 1,68 %.

Ejemplo 21

Evaluación de la higroscopicidad de la Forma CS1 de clorhidrato de ozanimod:

Se aplicó absorción dinámica de vapor (DVS) para ensayar la higroscopicidad de la Forma CS1 de clorhidrato de ozanimod con aproximadamente 10 mg de muestras. El resultado se enumera en la Tabla 19. El gráfico DVS se muestra en la figura 30.

Tabla 19

Los resultados indican que el aumento de peso de la Forma CS1 de clorhidrato de ozanimod por debajo del 80 % de HR es del 0,55 %. De acuerdo con la definición estándar de higroscopicidad, la Forma CS1 de clorhidrato de ozanimod era ligeramente higroscópica.

Descripción y definición de higroscopicidad (Chinese Pharmacopoeia, edición de 2015, Anexo Drug hygroscopic test guidelines, prueba a 25 °C+/-1 °C, 80 % de Hr ).

- Delicuescente: Se absorbe suficiente agua para formar un líquido;

- muy higroscópica: El aumento de la masa es igual o superior al 15 por ciento;

- higroscópica: El aumento de la masa es inferior al 15 por ciento e igual o superior al 2 por ciento;

- ligeramente higroscópica: El aumento de la masa es inferior al 2 por ciento e igual o superior al 0,2 por ciento. - No higroscópica o casi no higroscópica: El aumento de la masa es inferior al 0,2 por ciento.

Ejemplo 22

Evaluación de la estabilidad de la Forma CS1 de ozanimod:

Tres muestras sólidas de la Forma CS1 se colocaron en cámaras de temperatura y humedad constantes a 25 °C/60 % de HR, 40 °C/75 % de HR y 60 °C/75 % de HR durante 4 semanas. Se usó XRPD para ensayar la forma cristalina al final de la semana 4. Se usó HPLC para medir la pureza química al final de las semanas 1, 2 y 4. El resultado de comparación de XRPD se muestra en la figura 31 (de arriba a abajo: Patrón XRPD de la Forma CS1 antes y después de almacenarse por debajo de 25 °C/60 % de HR, 40 °C/75 % de HR y 60 °C/75 % de HR durante 4 semanas), y los resultados se muestran en la Tabla 20.

Tabla 20

No se observó ningún cambio de forma ni una disminución evidente de la pureza para la Forma CS1 después de almacenarse a 25 °C/60 % de HR, 40 °C/75 % de HR y 60 °C/75 % de HR durante 4 semanas. El resultado muestra que la Forma CS1 tiene buena estabilidad.

Ejemplo 23

Evaluación de la estabilidad de la Forma CS2 de ozanimod:

Cuatro muestras sólidas de la Forma CS2 se colocaron en cámaras de temperatura y humedad constantes a 25 °C/60 % de HR, 40 °C/75 % de HR y 60 °C/75 % de HR durante 4 semanas y 80 °C durante 1 semana. Se usó XRPD para ensayar la forma cristalina al final de la semana 4. Se usó HPLC para medir la pureza química al final de las semanas 1, 2 y 4. El resultado de comparación de XRPD se muestra en la figura 32 (de arriba a abajo: Patrón XRPD de la Forma CS2 antes y después de almacenarse por debajo de 25 °C/60 % de HR, 40 °C/75 % de HR y 60 °C/75 % de HR durante 4 semanas y 80 °C durante 1 semana), y los resultados se muestran en la Tabla 21.

Tabla 21

No se observó ningún cambio de forma ni una disminución evidente de la pureza para la Forma CS2 después de almacenarse a 25 °C/60 % de HR, 40 °C/75 % de HR y 60 °C/75 % de HR durante 4 semanas y 80 °C durante 1 semana. Se puede observar que la Forma CS2 tiene buena estabilidad.

Ejemplo 24

Evaluación de la estabilidad de la Forma CS3 de ozanimod:

Tres muestras sólidas de la Forma CS3 se colocaron en cámaras de temperatura y humedad constantes a 25 °C/60 % de HR, 40 °C/75 % de HR y 60 °C/75 % de HR durante 4 semanas. Se usó XRPD para ensayar la forma cristalina al final de la semana 4. Se usó HPLC para medir la pureza química al final de las semanas 1, 2 y 4. El patrón de comparación de XRPD se muestra en la figura 33 (de arriba a abajo: Patrón XRPD de la Forma CS3 antes y después de almacenarse por debajo de 25 °C/60 % de HR, 40 °C/75 % de HR y 60 °C/75 % de HR durante 4 semanas), y los resultados se muestran en la Tabla 22.

Tabla 22

No se observó ningún cambio de forma ni una disminución evidente de la pureza para la Forma CS3 después de almacenarse a 25 °C/60 % de HR, 40 °C/75 % de HR y 60 °C/75 % de HR durante 4 semanas. Se puede observar que la Forma CS3 tiene buena estabilidad.

Ejemplo 25

Evaluación de la estabilidad de la Forma CS5 de ozanimod:

Tres muestras sólidas de la Forma CS5 se colocaron en cámaras de temperatura y humedad constantes a 25 °C/60%de HR, 40 °C/75 % de HR y 60 °C/75 % de HR durante 2 semanas. Se usó XRPD para ensayar la forma cristalina al final de la semana 4. El patrón de comparación de XRPD se muestra en la figura 34 (de arriba a abajo: Patrón XRPD de la Forma CS5 antes y después de almacenarse por debajo de 25 °C/60 % de HR, 40 °C/75 % de HR y 60 °C/75 % de HR durante 2 semanas), y los resultados se muestran en la Tabla 23.

Tabla 23

No se observó ningún cambio de forma ni una disminución evidente de la pureza para la Forma CS5 después de almacenarse a 25 °C/60 % de HR, 40 °C/75 % de HR y 60 °C/75 % de HR durante 2 semanas. Se puede observar que la Forma CS5 tiene buena estabilidad.

Ejemplo 26

Evaluación de la estabilidad de la Forma CS6 de ozanimod:

Dos muestras de la Forma CS6 se colocaron en cámaras de temperatura y humedad constantes a 25 °C/60 % de HR y 40 °C/75 % de HR durante 4 semanas. Se usó XRPD para ensayar la forma cristalina al final de la semana 4. Se usó HPLC para medir la pureza química al final de las semanas 1, 2 y 4. El resultado de comparación de XRPD se muestra en la figura 35 (de arriba a abajo: Patrón XRPD de la Forma CS6 antes y después de almacenarse por debajo de 25 °C/60 % de HR y 40 °C/75 % de HR durante 4 semanas), y los resultados se muestran en la Tabla 24.

Tabla 24

No se observó ningún cambio de forma ni una disminución evidente de la pureza para la Forma CS6 después de almacenarse a 25 °C/60 % de HR y 40 °C/75 % de HR durante 4 semanas. Se puede observar que la Forma CS6 tiene buena estabilidad.

Ejemplo 27

Evaluación de la estabilidad de la Forma CS1 de clorhidrato de ozanimod:

Cuatro muestras de la Forma CS1 de clorhidrato de ozanimod se colocaron en cámaras de temperatura y humedad constantes a 25 °C/60 % de HR, 40 °C/75 % de HR y 60 °C/75 % de HR durante 4 semanas y 80 °C durante 1 semana. Se usó XRPD para ensayar la forma cristalina al final de la semana 4. Se usó HPLC para medir la pureza química al final de las semanas 1,2 y 4. El patrón de comparación de XRPD se muestra en la figura 36 (de arriba a abajo: Patrón XRPD de clorhidrato de ozanimod Forma CS1 antes y después de almacenarse por debajo de 25 °C/60 % de HR, 40 °C/75 % de HR y 60 °C/75 % de HR durante 4 semanas y 80 °C durante 1 semana), y los resultados se muestran en la Tabla 25.

Tabla 25

continuación

No se observó ningún cambio de forma ni una disminución evidente de la pureza para la Forma CS1 de clorhidrato de ozanimod después de almacenarse a 25 °C/60 % de HR, 40 °C/75 % de Hr y 60 °C/75 % de HR durante 4 semanas y 80 °C durante 1 semana. Se puede observar que la Forma CS1 de clorhidrato de ozanimod tiene buena estabilidad.

Ejemplo 28

Distribución del tamaño de partícula:

Se tomó determinada cantidad de muestras de la Forma CS1, Forma CS2, Forma CS3, Forma CS5, Forma CS6 de ozanimod y la Forma CS1 de clorhidrato de ozanimod para la prueba de distribución del tamaño de partícula. Los resultados se muestran en la Tabla 26.

Tabla 26

El diagrama de distribución del tamaño de partícula de la Forma CS1 se muestra en la figura 37. El resultado muestra que el tamaño de partícula promedio de la Forma CS1 es de 22,40 pm, y la distribución del tamaño de partícula es estrecha, lo que presenta una distribución casi normal y uniforme.

El diagrama de distribución del tamaño de partícula de la Forma CS2 se muestra en la figura 38. El resultado muestra que el tamaño de partícula promedio de la Forma CS2 es de 23,24 pm, y la distribución del tamaño de partícula es estrecha, lo que presenta una distribución casi normal y uniforme.

El diagrama de distribución del tamaño de partícula de la Forma CS3 se muestra en la figura 39. El resultado muestra que el tamaño de partícula promedio de la Forma CS3 es de 66,62 pm, y la distribución del tamaño de partícula es estrecha, lo que presenta una distribución casi normal y uniforme.

El diagrama de distribución del tamaño de partícula de la Forma CS5 se muestra en la figura 40. El resultado muestra que el tamaño de partícula promedio de la Forma CS5 es de 68,84 pm, y la distribución del tamaño de partícula es estrecha, lo que presenta una distribución casi normal y uniforme.

El diagrama de distribución del tamaño de partícula de la Forma CS6 se muestra en la figura 41. El resultado muestra que el tamaño de partícula promedio de la Forma CS6 es de 68,91 pm, y la distribución del tamaño de partícula es estrecha, lo que presenta una distribución casi normal y uniforme.

El diagrama de distribución del tamaño de partícula de la Forma CS1 de clorhidrato de ozanimod se muestra en la figura 42. El resultado muestra que el tamaño de partícula promedio de la Forma CS1 de clorhidrato de ozanimod es de 200,7 pm, y el tamaño de partícula es grande, lo que conduce a la separación durante la producción.

Además, los gráficos PLM de la Forma CS1, Forma CS2, Forma CS3, Forma CS5, Forma CS6 de ozanimod y la Forma CS1 de clorhidrato de ozanimod se mostraron en la figura 43, figura 44, figura 45, figura 46, figura 47 y la figura 48, respectivamente. La Forma CS3 tenía forma de escamas, la Forma CS1, la Forma CS2, la Forma CS5, la Forma CS6 y la Forma CS1 de clorhidrato de ozanimod tenían forma de varillas cortas con buena dispersión, menos aglomeración y un tamaño de partícula uniforme.

El tamaño de partícula uniforme ayuda a simplificar el proceso de postratamiento y a mejorar el control de calidad.

Ejemplo 29

Evaluación de la solubilidad de la Forma CS1 de ozanimod y la Forma CS1 de clorhidrato de ozanimod:La Forma CS1 y la Forma CS1 de clorhidrato de ozanimod se suspendieron en SGF (fluidos gástricos simulados) y FeSSIF (fluidos intestinales simulados en estado pospandrial, pH = 5,0) para obtener soluciones saturadas. Después de equilibrarse durante 1 h, 4 h y 24 h, las concentraciones de las soluciones saturadas se midieron por HPLC. Los resultados se enumeraron en la Tabla 27.

Tabla 27

Ejemplo 30

Evaluación de la solubilidad:

La Forma CS3 y la Forma CS5 se suspendieron en SGF (fluidos gástricos simulados) y agua, y la Forma CS2 se suspendió en FeSSIF (fluidos intestinales simulados en estado pospandrial) para obtener soluciones saturadas. Después de equilibrarse durante 1 h, 4 h y 24 h, las concentraciones de las soluciones saturadas se midieron por HPLC. Los resultados se enumeraron en la Tabla 28.

Tabla 28

Ejemplo 31

Estabilidad mecánica de la Forma CS3, Forma CS5, Forma CS6 de ozanimod y la Forma CS1 de clorhidrato de ozanimod:

Las muestras sólidas de la Forma CS3, Forma CS5, Forma CS6 de ozanimod y la Forma CS1 de clorhidrato de ozanimod se molieron manualmente durante 5 minutos en mortero. Los patrones XRPD se mostraron en la figura 49, figura 50, figura 51 y la figura 52, respectivamente (el patrón superior es antes de la molienda y el patrón inferior es después de la molienda).

No se observó ningún cambio de forma para la Forma CS3, Forma CS5, Forma CS6 de ozanimod y la Forma CS1 de clorhidrato de ozanimod bajo un determinado estrés mecánico con una ligera disminución de la cristalinidad. Las buenas propiedades físicas y químicas, incluida la estabilidad, hicieron que estas formas fueran adecuadas para la preparación y el almacenamiento de fármacos.

Las formas cristalinas con mejor estabilidad mecánica tienen buenas propiedades fisicoquímicas y permanecen estables bajo determinado estrés mecánico. El fármaco cristalino con mejor estabilidad mecánica tiene bajos requisitos en el equipo de cristalización y no se requiere ninguna condición postratamiento especial. Es más estable en el proceso de formulación, puede reducir significativamente el coste de desarrollo de los productos farmacológicos, mejorar la calidad del fármaco y tiene un fuerte valor económico.

Cabe señalar que la Forma CS1 usada en los Ejemplos 16 a 31 de la presente divulgación se prepara mediante el método del Ejemplo 1; la Forma CS2 se prepara mediante el método del Ejemplo 3; la Forma CS3 se preparó mediante el método del Ejemplo 6; la Forma CS5 se preparó mediante el método del Ejemplo 9; la Forma CS6 se preparó mediante el método del Ejemplo 10; la Forma CS1 de clorhidrato de ozanimod se preparó mediante el método del Ejemplo 11.

Los ejemplos descritos anteriormente son solo para ilustrar los conceptos técnicos y las características de la presente divulgación, y tienen la intención de hacer que los expertos en la técnica puedan comprender la presente divulgación y, por lo tanto, implementarla.

Claims (9)

REIVINDICACIONES

1. Una Forma cristalina CS1 de clorhidrato de ozanimod, en donde el patrón de difracción de polvo de rayos X muestra picos característicos a valores de 2theta de 26,1° ± 0,20°, 24,4° ± 0,20° y 20,1° ± 0,20° usando radiación CuKa.

2. La Forma cristalina CS1 de clorhidrato de ozanimod de acuerdo con la reivindicación 1, en donde el patrón de difracción de polvo de rayos X muestra al menos un pico característico a valores de 2theta de 3,9° ± 0,20°, 21,1° ± 0,20° y 7,9° ± 0,20° usando radiación CuKa.

3. La Forma cristalina CS1 de clorhidrato de ozanimod de acuerdo con las reivindicaciones 1 o 2, en donde el patrón de difracción de polvo de rayos X muestra al menos un pico característico a valores de 2theta de 11,9° ± 0,20°, 19,6° ± 0,20° y 13,8° ± 0,20° usando radiación CuKa.

4. Un proceso para preparar la Forma cristalina CS1 de clorhidrato de ozanimod de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, en donde el proceso comprende el método i) o el método ii) o el método iii) o el método iv),

i) añadir clorhidrato de ozanimod en éteres y agitar a 4-50 °C, filtrar y secar para obtener un sólido de color blanco de la Forma CS1 de clorhidrato de ozanimod; dicho tiempo de agitación es de al menos 0,5 horas; o ii) disolver el clorhidrato de ozanimod en un disolvente seleccionado de alcoholes y ésteres o una mezcla de disolventes de los mismos, evaporar a temperatura ambiente para obtener un sólido de color blanco de la Forma CS1 de clorhidrato de ozanimod; dicho tiempo de evaporación es de al menos 0,5 días; o

iii) disolver el clorhidrato de ozanimod en un disolvente seleccionado de amidas o una mezcla de disolventes de las mismas, a continuación colocar la solución en un sistema que contenga antidisolvente de clorhidrato de ozanimod para la difusión de vapor líquido a temperatura ambiente, filtrar y secar para obtener un sólido de color blanco de la Forma CS1 de clorhidrato de ozanimod; dicho tiempo de difusión es de al menos 1 día; o iv) disolver el clorhidrato de ozanimod en metanol en una concentración de 12 mg/ml, filtrar la mezcla para formar una solución, a continuación evaporar la solución a temperatura ambiente durante 1 semana para obtener un sólido de color blanco de la Forma CS1 de clorhidrato de ozanimod.

5. Una composición farmacéutica, en donde dicha composición farmacéutica comprende una cantidad terapéuticamente eficaz de la Forma cristalina CS1 de clorhidrato de ozanimod de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3 y un portador, un diluyente o un excipiente farmacéuticamente aceptables.

6. La Forma cristalina CS1 de clorhidrato de ozanimod de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3 para su uso en un método para tratar la colitis ulcerosa, que comprende administrar a un paciente que lo necesite una cantidad terapéuticamente eficaz de la Forma cristalina CS1 de clorhidrato de ozanimod.

7. La Forma cristalina CS1 de clorhidrato de ozanimod de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3 para su uso en un método para tratar la esclerosis múltiple, que comprende administrar a un paciente que lo necesite una cantidad terapéuticamente eficaz de la Forma cristalina CS1 de clorhidrato de ozanimod.

8. El uso de la Forma cristalina CS1 de clorhidrato de ozanimod de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3 para la fabricación de un medicamento para el tratamiento de la colitis ulcerosa.

9. El uso de la Forma cristalina CS1 de clorhidrato de ozanimod de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3 para la fabricación de un medicamento para el tratamiento de la esclerosis múltiple.