ES3026734T3 - A remdesivir compound for use in treating nipah virus infections - Google Patents

A remdesivir compound for use in treating nipah virus infections Download PDF

Info

Publication number
ES3026734T3
ES3026734T3 ES20152978T ES20152978T ES3026734T3 ES 3026734 T3 ES3026734 T3 ES 3026734T3 ES 20152978 T ES20152978 T ES 20152978T ES 20152978 T ES20152978 T ES 20152978T ES 3026734 T3 ES3026734 T3 ES 3026734T3
Authority
ES
Spain
Prior art keywords
compound
mmol
added
mixture
solution
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Active
Application number
ES20152978T
Other languages
English (en)
Inventor
Byoung Chun
Michael Clarke
Edward Doerffler
Hon Hui
Robert Jordan
Richard Mackman
Jay Parrish
Adrian Ray
Dustin Siegel
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Gilead Sciences Inc
Original Assignee
Gilead Sciences Inc
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Family has litigation
First worldwide family litigation filed litigation Critical https://patents.darts-ip.com/?family=54557474&utm_source=google_patent&utm_medium=platform_link&utm_campaign=public_patent_search&patent=ES3026734(T3) "Global patent litigation dataset” by Darts-ip is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.
Application filed by Gilead Sciences Inc filed Critical Gilead Sciences Inc
Application granted granted Critical
Publication of ES3026734T3 publication Critical patent/ES3026734T3/es
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/4353—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom ortho- or peri-condensed with heterocyclic ring systems
    • A61K31/4375—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom ortho- or peri-condensed with heterocyclic ring systems the heterocyclic ring system containing a six-membered ring having nitrogen as a ring heteroatom, e.g. quinolizines, naphthyridines, berberine, vincamine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/53—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with three nitrogens as the only ring hetero atoms, e.g. chlorazanil, melamine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/66—Phosphorus compounds
    • A61K31/661—Phosphorus acids or esters thereof not having P—C bonds, e.g. fosfosal, dichlorvos, malathion or mevinphos
    • A61K31/6615—Compounds having two or more esterified phosphorus acid groups, e.g. inositol triphosphate, phytic acid
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/66—Phosphorus compounds
    • A61K31/665—Phosphorus compounds having oxygen as a ring hetero atom, e.g. fosfomycin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/66—Phosphorus compounds
    • A61K31/675—Phosphorus compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. pyridoxal phosphate
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/66—Phosphorus compounds
    • A61K31/683—Diesters of a phosphorus acid with two hydroxy compounds, e.g. phosphatidylinositols
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/66—Phosphorus compounds
    • A61K31/683—Diesters of a phosphorus acid with two hydroxy compounds, e.g. phosphatidylinositols
    • A61K31/685—Diesters of a phosphorus acid with two hydroxy compounds, e.g. phosphatidylinositols one of the hydroxy compounds having nitrogen atoms, e.g. phosphatidylserine, lecithin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
    • A61K31/7042—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings
    • A61K31/7052—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
    • A61K31/7042—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings
    • A61K31/7052—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides
    • A61K31/7056—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides containing five-membered rings with nitrogen as a ring hetero atom
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
    • A61K31/7042—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings
    • A61K31/7052—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides
    • A61K31/706—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides containing six-membered rings with nitrogen as a ring hetero atom
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
    • A61K45/06—Mixtures of active ingredients without chemical characterisation, e.g. antiphlogistics and cardiaca
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D487/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00
    • C07D487/02—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D487/04—Ortho-condensed systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D519/00—Heterocyclic compounds containing more than one system of two or more relevant hetero rings condensed among themselves or condensed with a common carbocyclic ring system not provided for in groups C07D453/00 or C07D455/00
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07F—ACYCLIC, CARBOCYCLIC OR HETEROCYCLIC COMPOUNDS CONTAINING ELEMENTS OTHER THAN CARBON, HYDROGEN, HALOGEN, OXYGEN, NITROGEN, SULFUR, SELENIUM OR TELLURIUM
    • C07F9/00—Compounds containing elements of Groups 5 or 15 of the Periodic Table
    • C07F9/02—Phosphorus compounds
    • C07F9/06—Phosphorus compounds without P—C bonds
    • C07F9/22—Amides of acids of phosphorus
    • C07F9/24—Esteramides
    • C07F9/2404—Esteramides the ester moiety containing a substituent or a structure which is considered as characteristic
    • C07F9/2429—Esteramides the ester moiety containing a substituent or a structure which is considered as characteristic of arylalkanols
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07F—ACYCLIC, CARBOCYCLIC OR HETEROCYCLIC COMPOUNDS CONTAINING ELEMENTS OTHER THAN CARBON, HYDROGEN, HALOGEN, OXYGEN, NITROGEN, SULFUR, SELENIUM OR TELLURIUM
    • C07F9/00—Compounds containing elements of Groups 5 or 15 of the Periodic Table
    • C07F9/02—Phosphorus compounds
    • C07F9/547—Heterocyclic compounds, e.g. containing phosphorus as a ring hetero atom
    • C07F9/6561—Heterocyclic compounds, e.g. containing phosphorus as a ring hetero atom containing systems of two or more relevant hetero rings condensed among themselves or condensed with a common carbocyclic ring or ring system, with or without other non-condensed hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07F—ACYCLIC, CARBOCYCLIC OR HETEROCYCLIC COMPOUNDS CONTAINING ELEMENTS OTHER THAN CARBON, HYDROGEN, HALOGEN, OXYGEN, NITROGEN, SULFUR, SELENIUM OR TELLURIUM
    • C07F9/00—Compounds containing elements of Groups 5 or 15 of the Periodic Table
    • C07F9/02—Phosphorus compounds
    • C07F9/547—Heterocyclic compounds, e.g. containing phosphorus as a ring hetero atom
    • C07F9/6561—Heterocyclic compounds, e.g. containing phosphorus as a ring hetero atom containing systems of two or more relevant hetero rings condensed among themselves or condensed with a common carbocyclic ring or ring system, with or without other non-condensed hetero rings
    • C07F9/65616—Heterocyclic compounds, e.g. containing phosphorus as a ring hetero atom containing systems of two or more relevant hetero rings condensed among themselves or condensed with a common carbocyclic ring or ring system, with or without other non-condensed hetero rings containing the ring system having three or more than three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members, e.g. purine or analogs
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
    • C07H1/00—Processes for the preparation of sugar derivatives
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
    • C07H1/00—Processes for the preparation of sugar derivatives
    • C07H1/02—Phosphorylation
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
    • C07H11/00—Compounds containing saccharide radicals esterified by inorganic acids; Metal salts thereof
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
    • C07H13/00—Compounds containing saccharide radicals esterified by carbonic acid or derivatives thereof, or by organic acids, e.g. phosphonic acids
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
    • C07H15/00—Compounds containing hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals directly attached to hetero atoms of saccharide radicals
    • C07H15/18—Acyclic radicals, substituted by carbocyclic rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
    • C07H17/00—Compounds containing heterocyclic radicals directly attached to hetero atoms of saccharide radicals
    • C07H17/02—Heterocyclic radicals containing only nitrogen as ring hetero atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
    • C07H19/00—Compounds containing a hetero ring sharing one ring hetero atom with a saccharide radical; Nucleosides; Mononucleotides; Anhydro-derivatives thereof
    • C07H19/02—Compounds containing a hetero ring sharing one ring hetero atom with a saccharide radical; Nucleosides; Mononucleotides; Anhydro-derivatives thereof sharing nitrogen
    • C07H19/04—Heterocyclic radicals containing only nitrogen atoms as ring hetero atom
    • C07H19/14—Pyrrolo-pyrimidine radicals
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
    • C07H7/00—Compounds containing non-saccharide radicals linked to saccharide radicals by a carbon-to-carbon bond
    • C07H7/06—Heterocyclic radicals
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
    • C07H9/00—Compounds containing a hetero ring sharing at least two hetero atoms with a saccharide radical
    • C07H9/02—Compounds containing a hetero ring sharing at least two hetero atoms with a saccharide radical the hetero ring containing only oxygen as ring hetero atoms
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2300/00—Mixtures or combinations of active ingredients, wherein at least one active ingredient is fully defined in groups A61K31/00 - A61K41/00
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02A—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
    • Y02A50/00—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE in human health protection, e.g. against extreme weather
    • Y02A50/30—Against vector-borne diseases, e.g. mosquito-borne, fly-borne, tick-borne or waterborne diseases whose impact is exacerbated by climate change
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02P—CLIMATE CHANGE MITIGATION TECHNOLOGIES IN THE PRODUCTION OR PROCESSING OF GOODS
    • Y02P20/00—Technologies relating to chemical industry
    • Y02P20/50—Improvements relating to the production of bulk chemicals
    • Y02P20/55—Design of synthesis routes, e.g. reducing the use of auxiliary or protecting groups

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Saccharide Compounds (AREA)
  • Nitrogen Condensed Heterocyclic Rings (AREA)
  • Nitrogen And Oxygen Or Sulfur-Condensed Heterocyclic Ring Systems (AREA)
  • Low-Molecular Organic Synthesis Reactions Using Catalysts (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
  • Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
  • Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
  • Plural Heterocyclic Compounds (AREA)

Abstract

Se proporcionan compuestos, métodos y composiciones farmacéuticas para tratar infecciones por el virus Filoviridae mediante la administración de ribosidos, fosfatos de ribosidos y profármacos de los mismos, de Fórmula IV: Los compuestos, composiciones y métodos proporcionados son particularmente útiles para el tratamiento de infecciones por el virus de Marburgo, el virus del Ébola y el virus de Cueva. (Traducción automática con Google Translate, sin valor legal)

Description

DESCRIPCIÓN
Un compuesto remdesivir para el tratamiento de las infecciones por el virus Nipah
CAMPO DE LA INVENCIÓN
[0001]La invención se refiere en general a compuestos para su uso en el tratamiento de una infección por el virus Nipah en un ser humano que lo necesite.
FONDO DE LA INVENCIÓN
[0002]El documento WO2012776A1 se refiere en general a métodos y compuestos para tratar infecciones por virus Paramyxoviridae, en particular métodos y nucleósidos para tratar infecciones por virus respiratorio sincitial e infecciones por virus parainfluenza.
[0003]El documento WO2012158643A1 se refiere a composiciones inmunogénicas y vacunales que comprenden una glicoproteína G del virus Hendra (HeV) y/o del virus Nipah (NiV) y a métodos de uso relacionados con las mismas.
[0004]Sigue existiendo la necesidad de tratamientos para el virus Nipah. La presente invención aborda ésta y otras necesidades.
RESUMEN DE LA INVENCIÓN
[0005]La presente invención proporciona un compuesto de fórmula:
o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, para su uso en el tratamiento de una infección por el virus Nipah en un ser humano que lo necesite.
DESCRIPCIÓN DETALLADA DE LA INVENCIÓN
I. DEFINICIONES
[0006]A menos que se indique lo contrario, los siguientes términos y frases utilizados en el presente documento tienen el significado que se indica a continuación:
[0007]Cuando en el presente documento se utilizan nombres comerciales, los solicitantes pretenden incluir de forma independiente el producto de nombre comercial y el ingrediente o ingredientes farmacéuticos activos del producto de nombre comercial.
[0008]Como se usa aquí, "un compuesto de la invención" significa un compuesto de una estructura denotada en la reivindicación 1 o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.
[0009]A menos que se especifique lo contrario, se pretende que los átomos de carbono de los compuestos de la invención tengan una valencia de cuatro. En algunas representaciones de estructuras químicas, si los átomos de carbono no tienen un número suficiente de variables unidas para producir una valencia de cuatro, los sustituyentes de carbono restantes necesarios para proporcionar una valencia de cuatro deben asumirse como hidrógeno. Por ejemplo,
tiene el mismo significado que
[0010]"Grupo protector" se refiere a una fracción de un compuesto que enmascara o altera las propiedades de un grupo funcional o las propiedades del compuesto en su conjunto. La subestructura química de un grupo protector varía mucho. Una de las funciones de un grupo protector es servir de intermediario en la síntesis de la sustancia farmacológica original. Los grupos protectores químicos y las estrategias de protección/desprotección son bien conocidos en la técnica. Ver: " "Protective Groups in Organic Chemistry", Theodora W. Greene (John Wiley & Sons, Inc., Nueva York, 1991. Véase también Protective Groups in Organic Chemistry, Peter G. M. Wuts y Theodora W. Greene, 4a ed., 2006. Los grupos protectores se utilizan a menudo para enmascarar la reactividad de ciertos grupos funcionales, para ayudar en la eficiencia de las reacciones químicas deseadas,p. ej.,haciendo y rompiendo enlaces químicos de una manera ordenada y planificada. La protección de los grupos funcionales de un compuesto altera otras propiedades físicas además de la reactividad del grupo funcional protegido, como la polaridad, la lipofilia (hidrofobicidad) y otras propiedades que pueden medirse con herramientas analíticas comunes. Los productos intermedios protegidos químicamente pueden ser biológicamente activos o inactivos. Por "grupos protectores hidroxi" se entienden aquellos grupos protectores útiles para proteger grupos hidroxi (-OH).
[0011]Los compuestos protegidos también pueden presentar propiedades alteradas y, en algaproximadamente casos, optimizadasin vitroein vivo,como el paso a través de membranas celulares y la resistencia a la degradación enzimática o al secuestro. En este papel, los compuestos protegidos con efectos terapéuticos previstos pueden denominarse profármacos. Otra función de un grupo protector es convertir el fármaco parental en un profármaco, por lo que el fármaco parental se libera tras la conversión del profármacoin vivo.Dado que los profármacos activos pueden absorberse más eficazmente que el fármaco original, los profármacos pueden poseer una mayor potenciain vivoque el fármaco original. Los grupos protectores se eliminanin vitro,en el caso de los intermediarios químicos, oin vivo,en el caso de los profármacos. En el caso de los intermediarios químicos, no es especialmente importante que los productos resultantes tras la desprotección, por ejemplo, alcoholes, sean fisiológicamente aceptables, aunque en general es más deseable que los productos sean farmacológicamente inocuos.
[0012]El término "quiral" se refiere a las moléculas que tienen la propiedad de no superponerse a su pareja de imagen especular, mientras el término "aciral" se refiere a las moléculas que son superponibles a su pareja de imagen especular.
[0013]El término "estereoisómeros" se refiere a compuestos que tienen idéntica constitución química, pero difieren en cuanto a la disposición de los átomos o grupos en el espacio.
[0014]"Diastereómero" se refiere a un estereoisómero con dos o más centros de quiralidad y cuyas moléculas no son imágenes especulares entre sí. Los diastereómeros tienen propiedades físicas diferentes, por ejemplo, puntos de fusión, puntos de ebullición, propiedades espectrales, reactividades y propiedades biológicas. Todos estos diastereómeros y sus usos descritos en el presente documento están incluidos en la presente invención. Las mezclas de diastereómeros pueden separarse mediante procedimientos analíticos de alta resolución como la electroforesis, la cristalización y/o la cromatografía. Los diastereómeros pueden tener diferentes atributos físicos como, por ejemplo, solubilidad, estabilidades químicas y cristalinidad, y también pueden tener diferentes propiedades biológicas como, por ejemplo, estabilidad enzimática, absorción y estabilidad metabólica.
[0015]Los "enantiómeros" se refieren a dos estereoisómeros de un compuesto que son imágenes especulares no superponibles entre sí.
[0016]El modificador "aproximadamente" utilizado en relación con una cantidad incluye el valor declarado y tiene el significado dictado por el contexto(p. ej.,incluye el grado de error asociado a la medición de la cantidad concreta).
[0017]El término "tratar", tal como se utiliza aquí, a menos que se indique lo contrario, significa revertir, aliviar, inhibir el progreso o prevenir el trastorno o afección a la que se aplica dicho término, o uno o más síntomas de dicho trastorno o afección. El término "tratamiento", tal y como se utiliza aquí, se refiere al acto de tratar, tal y como se define "tratar" más arriba.
[0018]El término "cantidad terapéuticamente eficaz", tal como se utiliza en el presente documento, es la cantidad de compuesto de de la presente invención presente en una composición descrita en el presente documento que se necesita para proporcionar un nivel deseado de fármaco en las secreciones y tejidos de las vías respiratorias y los pulmones, o alternativamente, en el torrente sanguíneo de un sujeto a tratar para dar una respuesta fisiológica anticipada o un efecto biológico deseado cuando dicha composición se administra por la vía de administración elegida. La cantidad exacta dependerá de numerosos factores, por ejemplo, el compuesto concreto, la actividad específica de la composición, el dispositivo de administración empleado, las características físicas de la composición, su uso previsto, así como consideraciones relativas al paciente, como la gravedad del estado de la enfermedad, la cooperación del paciente, etc., y puede determinarla fácilmente un experto en la materia basándose en la información proporcionada en el presente documento.
[0019]Por "solución salina normal" se entiende una solución acuosa que contiene 0,9% (p/v) de NaCl.
[0020]El término "solución salina hipertónica" designa una solución acuosa que contiene más del 0,9% (p/v) de NaCl. Por ejemplo, una solución salina hipertónica al 3% contendría un 3% (p/v) de NaCl.
[0021]La "formación de una mezcla de reacción" se refiere al proceso de poner en contacto al menos dos especies distintas de manera que se mezclen y puedan reaccionar. Debe apreciarse, sin embargo, que el producto de reacción resultante puede producirse directamente a partir de una reacción entre los reactivos añadidos o a partir de un producto intermedio de uno o más de los reactivos añadidos que puede producirse en la mezcla de reacción.
[0022] "Agente de acoplamiento" se refiere a un agente capaz de acoplar dos compuestos dispares. Los agentes de acoplamiento pueden ser catalíticos o estequiométricos. Por ejemplo, los agentes de acoplamiento pueden ser un agente de acoplamiento a base de litio o un agente de acoplamiento a base de magnesio, como un reactivo de Grignard. Los agentes de acoplamiento ejemplares incluyen, entre otros, n-BuLi, MgCh, iPrMgCl, tBuMgCl, PhMgCl o combinaciones de los mismos.
[0023]"Agente de desprotección" se refiere a cualquier agente capaz de eliminar un grupo protector. El agente de desprotección dependerá del tipo de grupo protector utilizado. Los agentes de desprotección representativos son conocidos en la técnica y pueden encontrarse en Protective Groups in Organic Chemistry, Peter G. M. Wuts y Theodora W. Greene, 4a Ed., 2006.
II. COMPUESTOS DE LA PRESENTE INVENCIÓN
[0024]Ahora se hará referencia en detalle a ciertas realizaciones de la invención, ejemplos de las cuales se ilustran en la descripción, estructuras y fórmulas adjuntas. Aunque la invención se describirá en relación con las realizaciones enumeradas, se entenderá que no pretenden limitar la invención a dichas realizaciones. Por el contrario, la invención pretende abarcar todas las alternativas, modificaciones y equivalentes que puedan incluirse en el ámbito de la presente invención, siempre que estén comprendidas en la reivindicación.
[0025]Se proporciona un compuesto para su uso en el tratamiento de una infección por el virus Nipah en un ser humano que lo necesite, que comprende la administración de una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto cuya estructura se indica en la reivindicación 1 o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.
[0026]Los nombres de los compuestos de la presente divulgación se proporcionan utilizando el software ACD/Name para nombrar compuestos químicos (Advanced Chemistry Development, Inc., Toronto, Canadá). Otros compuestos o radicales pueden denominarse con nombres comunes o con nombres sistemáticos o no sistemáticos.
[0027] Cualquier referencia a los compuestos de la invención descritos en el presente documento también incluye una referencia a una sal fisiológicamente aceptable de los mismos. Ejemplos de sales fisiológicamente aceptables de los compuestos de la invención incluyen sales derivadas de una base apropiada, como un metal alcalino o alcalinotérreo (por ejemplo, Na+, Li+, K+, Ca+2 y Mg+2), amonio y NR4+ (en el que R se define en el presente documento). Las sales fisiológicamente aceptables de un átomo de nitrógeno o un grupo amino incluyen (a) sales de adición ácida formadas con ácidos inorgánicos, por ejemplo, ácido clorhídrico, ácido bromhídrico, ácido sulfúrico, ácidos sulfámicos, ácido fosfórico, ácido nítrico y similares; (b) las sales formadas con ácidos orgánicos como, por ejemplo, el ácido acético, el ácido oxálico, el ácido tartárico, el ácido succínico, el ácido maleico, el ácido fumárico, el ácido glucónico, el ácido cítrico, el ácido málico, el ácido ascórbico, el ácido benzoico, el ácido isetionico, el ácido lactobiónico, el ácido tánico, el ácido palmítico, el ácido algínico, el ácido poliglutámico, el ácido naftalenosulfónico, el ácido metanosulfónico, ácido p-toluenosulfónico, ácido bencenosulfónico, ácido naftalendisulfónico, ácido poligalacturónico, ácido malónico, ácido sulfosalicílico, ácido glicólico, 2-hidroxi-3-naftoato, pamoato, ácido salicílico, ácido esteárico, ácido Itálico, ácido mandélico, ácido láctico, ácido etanosulfónico, lisina, arginina, ácido glutámico, glicina, serina, treonina, alanina, isoleucina, leucina y similares; y c) sales formadas por aniones elementales, por ejemplo, cloro, bromo y yodo. Las sales fisiológicamente aceptables de un compuesto de un grupo hidroxi incluyen el anión de dicho compuesto en combinación con un catión adecuado como Na+ y NR4+.
[0028] El compuesto de la presente invención y sus sales farmacéuticamente aceptables pueden existir como diferentes polimorfos o pseudopolimorfos. Como se utiliza aquí, polimorfismo cristalino significa la capacidad de un compuesto cristalino de existir en diferentes estructuras cristalinas. El polimorfismo cristalino puede deberse a diferencias en el empaquetamiento del cristal (polimorfismo de empaquetamiento) o a diferencias en el empaquetamiento entre distintos conformadores de la misma molécula (polimorfismo conformacional). En el presente documento, se entiende por pseudopolimorfismo cristalino la capacidad de un hidrato o solvato de un compuesto de existir en diferentes estructuras cristalinas. Los pseudopolimorfos de la presente invención pueden existir debido a diferencias en el empaquetamiento cristalino (pseudopolimorfismo de empaquetamiento) o debido a diferencias en el empaquetamiento entre diferentes conformadores de la misma molécula (pseudopolimorfismo conformacional).... La presente invención comprende todos los polimorfos y pseudopolimorfos de los compuestos de la presente invención y sus sales farmacéuticamente aceptables.
[0029] El compuesto de la presente invención y sus sales farmacéuticamente aceptables también pueden existir como un sólido amorfo. Tal y como se utiliza aquí, un sólido amorfo es un sólido en el que no existe un orden de largo alcance de las posiciones de los átomos en el sólido. Esta definición se aplica también cuando el tamaño del cristal es de dos nanómetros o menos. Pueden utilizarse aditivos, incluidos disolventes, para crear las formas amorfas de la presente invención. La presente invención comprende todas las formas amorfas de los compuestos de la presente invención y sus sales farmacéuticamente aceptables.
[0030] Para uso terapéutico, las sales de los principios activos de los compuestos de la invención serán fisiológicamente aceptables, es decir, serán sales derivadas de un ácido o una base fisiológicamente aceptables. Sin embargo, las sales de ácidos o bases que no son fisiológicamente aceptables también pueden encontrar uso, por ejemplo, en la preparación o purificación de un compuesto fisiológicamente aceptable. Todas las sales, derivadas o no de un ácido o una base fisiológicamente aceptables, están dentro del ámbito de la presente invención.
[0031] Finalmente, debe entenderse que las composiciones aquí contenidas comprenden compuestos de la invención en su forma no ionizada, así como zwitteriónica, y combinaciones con cantidades estequiométricas de agua como en hidratos.
[0032] Cabe señalar que la presente invención abarca todos los enantiómeros, diastereómeros y mezclas racémicas, tautómeros, polimorfos, pseudopolimorfos de los compuestos de la presente invención y sales farmacéuticamente aceptables de los mismos. Todas las mezclas de dichos enantiómeros y diastereómeros están dentro del alcance de la presente invención.
[0033] Los compuestos de la invención tienen centros quirales, por ejemplo, átomos quirales de carbono o fósforo. Así, los compuestos de la invención incluyen mezclas racémicas de todos los estereoisómeros, incluidos enantiómeros, diastereómeros y atropisómeros. Además, los compuestos de la invención incluyen isómeros ópticos enriquecidos o resueltos en cualquiera o todos los átomos quirales asimétricos. En otras palabras, los centros quirales que aparecen en las representaciones se proporcionan como isómeros quirales o mezclas racémicas. Tanto las mezclas racémicas y diastereoméricas, como los isómeros ópticos individuales aislados o sintetizados, sustancialmente libres de sus socios enantioméricos o diastereoméricos, están todos dentro del alcance de la invención. Las mezclas racémicas se separan en sus isómeros individuales, sustancialmente ópticamente puros, mediante técnicas bien conocidas como, por ejemplo, la separación de sales diastereoméricas formadas con adjuntos ópticamente activos, por ejemplo, ácidos o bases, seguida de la conversión de nuevo a las sustancias ópticamente activas. En la mayoría de los casos, el isómero óptico deseado se sintetiza mediante reacciones estereoespecíficas, comenzando con el estereoisómero apropiado del material de partida deseado.
[0034] Las definiciones y convenciones estereoquímicas utilizadas en el presente documento siguen en general a S. P. Parker, Ed., McGraw-Hill Dictionary of Chemical Terms (1984) McGraw-Hill Book Company, Nueva York; y Eliel, E. y Wilen, S., Stereochemistry of Organic Compounds (1994) John Wiley & Sons, Inc., Nueva York. Muchos compuestos orgánicos existen en formas ópticamente activas, es decir, tienen la capacidad de rotar el plano de la luz polarizada plana. Al describir un compuesto ópticamente activo, los prefijos D y L o R y S se utilizan para denotar la configuración absoluta de la molécula respecto a su(s) centro(s) quiral(es). Los prefijos d y l, D y L, o (+) y (-) se emplean para designar el signo de rotación de la luz polarizada plana por el compuesto, con S, (-), o 1 significando que el compuesto es levógiro mientras que un compuesto prefijado con R, (+), o d es dextrógiro. Para una estructura química determinada, estos estereoisómeros son idénticos, salvo que son imágenes especulares entre sí. Un estereoisómero específico también puede denominarse enantiómero, y una mezcla de dichos isómeros suele denominarse mezcla enantiomérica. Una mezcla 50:50 de enantiómeros se denomina mezcla racémica o racemato, que puede darse cuando no ha habido estereoselección o estereoespecificidad en una reacción o proceso químico. Los términos "mezcla racémica" y "racemato" se refieren a una mezcla equimolar de dos especies enantioméricas, desprovista de actividad óptica.
[0035] Los compuestos de la invención también pueden existir como isómeros tautoméricos en ciertos casos. Aunque sólo puede representarse una estructura de resonancia deslocalizada, todas estas formas se contemplan dentro del alcance de la invención. Por ejemplo, pueden existir tautómeros de ene-amina para sistemas de purina, pirimidina, imidazol, guanidina, amidina y tetrazol, y todas sus posibles formas tautoméricas están dentro del alcance de la invención.
[0036] Cualquier fórmula o estructura que se indique en el presente documento, también pretende representar formas no etiquetadas, así como formas isotópicamente etiquetadas de los compuestos. Los compuestos isotópicamente marcados tienen estructuras representadas por las fórmulas dadas en este documento, excepto que uno o más átomos se sustituyen por un átomo que tiene una masa atómica seleccionada o un número másico. Ejemplos de isótopos que pueden incorporarse a los compuestos de la divulgación incluyen isótopos de hidrógeno, carbono, nitrógeno, oxígeno, fósforo, flúor y cloro, tales como, pero no limitados a 2H (deuterio, D), 3H (tritio), 11C, 13C, 14C, 15N, 18F, 31P, 32P, 35S, 36Cl, y 125I. Diversos compuestos marcados isotópicamente de la presente divulgación, por ejemplo aquellos a los que se incorporan isótopos radiactivos como 3H, 13C, y 14C. Dichos compuestos marcados isotópicamente pueden ser útiles en estudios metabólicos, estudios cinéticos de reacción, técnicas de detección o formación de imágenes, como la tomografía por emisión de positrones (PET) o la tomografía computarizada por emisión monofotónica (SPECT), incluidos los ensayos de distribución tisular de fármacos o sustratos, o en el tratamiento radiactivo de pacientes.
[0037] La divulgación también incluye compuestos de la presente invención en los que de 1 a n hidrógenos unidos a un átomo de carbono se sustituyen por deuterio, siendo n el número de hidrógenos en la molécula. Dichos compuestos presentan una mayor resistencia al metabolismo y, por tanto, son útiles para aumentar la semivida de cualquier compuesto de la presente invención cuando se administra a un mamífero, en particular a un ser humano. Véase, por ejemplo, Foster, "Deuterium Isotope Effects in Studies of Drug Metabolism", Trends Pharmacol. Sci. 5(12):524-527 (1984). Tales compuestos son sintetizados por medios bien conocidos en la técnica, por ejemplo empleando empezando materiales en qué uno o más hidrógenos han sido reemplazados por deuterio.
[0038] Los compuestos terapéuticos marcados con deuterio o sustituidos de la divulgación pueden tener propiedades DMPK (metabolismo de fármacos y farmacocinética) mejoradas, relacionadas con la distribución, el metabolismo y la excreción (ADME). La sustitución por isótopos más pesados, como el deuterio, puede ofrecer ciertas ventajas terapéuticas derivadas de una mayor estabilidad metabólica, por ejemplo, una mayor semividain vivo,menores necesidades de administración y/o una mejora del índice terapéutico. Un compuesto marcado con 18F puede ser útil para estudios PET o SPECT. Los compuestos isotópicamente marcados de la presente divulgación y sus profármacos pueden prepararse generalmente llevando a cabo los procedimientos divulgados en los esquemas o en los ejemplos y preparaciones descritos a continuación, sustituyendo un reactivo isotópicamente marcado fácilmente disponible por un reactivo no isotópicamente marcado.
[0039] La concentración de dicho isótopo más pesado, específicamente el deuterio, puede definirse por un factor de enriquecimiento isotópico. En los compuestos de esta divulgación, cualquier átomo no designado específicamente como un isótopo particular se entiende que representa cualquier isótopo estable de ese átomo. A menos que se indique lo contrario, cuando una posición se designa específicamente como "H" o "hidrógeno", se entiende que la posición tiene hidrógeno en su composición isotópica de abundancia natural. En consecuencia, en los compuestos de esta divulgación cualquier átomo específicamente designado como deuterio (D) se entiende que representa al deuterio.
[0040] Las líneas onduladas, « w v w , indican el lugar de los enlaces covalentes con las subestructuras, grupos, fracciones o átomos adyacentes.
[0041] Los compuestos de la presente invención pueden prepararse por métodos conocidos por un experto en la materia. Por ejemplo, los compuestos de la presente invención pueden prepararse según los métodos descritos en Patente de EE. UU. N.° 8,008,264 y Solicitud de Patente de EE.UU. N°. US 2012/0027752.
III. FORMULACIONES FARMACÉUTICAS
[0042] Los compuestos de esta invención se formulan con portadores y excipientes convencionales, que se seleccionarán de acuerdo con la práctica ordinaria. Los comprimidos contendrán excipientes, glidificantes, cargas, aglutinantes y similares. Las formulaciones acuosas se preparan en forma estéril y, cuando se destinan a una administración distinta de la oral, suelen ser isotónicas. Todas las formulaciones contendrán opcionalmente excipientes como los establecidos en el Handbook of Pharmaceutical Excipients (1986). Los excipientes incluyen ácido ascórbico y otros antioxidantes, agentes quelantes como EDTA, carbohidratos como dextrano, hidroxialquilcelulosa, hidroxialquilmetilcelulosa, ácido esteárico y similares. El pH de las formulaciones oscila entre 3 y 11 aproximadamente, pero normalmente es de 7 a 10 aproximadamente. En algunas realizaciones, el pH de las formulaciones oscila entre aproximadamente 2 y aproximadamente 5, pero normalmente es de aproximadamente 3 a aproximadamente 4. En algunas realizaciones, el pH de las formulaciones oscila entre aproximadamente 2 y aproximadamente 10, pero normalmente es de aproximadamente 3,5 a aproximadamente 8,5.
[0043]Aunque es posible que los principios activos se administren solos, puede ser preferible presentarlos como formulaciones farmacéuticas. Las formulaciones, tanto para uso veterinario como para uso humano, de la invención comprenden al menos un ingrediente activo, como se ha definido anteriormente, junto con uno o más portadores aceptables para el mismo y opcionalmente otros ingredientes terapéuticos, particularmente aquellos ingredientes terapéuticos adicionales como se discute en el presente documento. El portador o portadores deben ser "aceptables" en el sentido de ser compatibles con los demás ingredientes de la formulación y fisiológicamente inocuos para el receptor de la misma.
[0044]Las formulaciones incluyen las adecuadas para las vías de administración anteriores. Las formulaciones pueden presentarse convenientemente en forma de dosificación unitaria y pueden prepararse por cualquiera de los métodos bien conocidos en la materia de la farmacia. Las técnicas y formulaciones se encuentran generalmente en Remington's Pharmaceutical Sciences (Mack Publishing Co., Easton, PA). Tales métodos incluyen el paso de poner en asociación el ingrediente activo con el portador que constituye uno o más ingredientes accesorios. En general, las formulaciones se preparan asociando uniforme e íntimamente el principio activo con portadores líquidos o portadores sólidos finamente divididos, o ambos, y luego, si es necesario, dando forma al producto.
[0045]Las formulaciones de la presente invención adecuadas para la administración oral pueden presentarse como unidades discretas tales como cápsulas, cachets o comprimidos que contienen cada uno una cantidad predeterminada del principio activo; como polvo o gránulos; como solución o suspensión en un líquido acuoso o no acuoso; o como emulsión líquida de aceite en agua o emulsión líquida de agua en aceite. El principio activo también puede administrarse en forma de bolo, electuario o pasta.
[0046]Un comprimido se fabrica por compresión o moldeo, opcionalmente con uno o más ingredientes accesorios. Los comprimidos pueden prepararse comprimiendo en una máquina adecuada el principio activo en forma fluida, como polvo o gránulos, mezclado opcionalmente con un aglutinante, lubricante, diluyente inerte, conservante, tensioactivo o agente dispersante. Los comprimidos moldeados pueden fabricarse moldeando en una máquina adecuada una mezcla del principio activo en polvo humedecido con un diluyente líquido inerte. Los comprimidos pueden estar opcionalmente recubiertos o ranurados y opcionalmente están formulados para proporcionar una liberación lenta o controlada del principio activo.
[0047]Para infecciones de los ojos u otros tejidos externos, por ejemplo, la boca y la piel, las formulaciones se aplican preferentemente como ungüento o crema tópica que contiene el ingrediente o ingredientes activos en una cantidad de, por ejemplo, 0,075 a 20% p/p (incluyendo el ingrediente o ingredientes activos en un rango entre 0,1% y 20% en incrementos de 0,1% p/p, como 0,6% p/p, 0,7% p/p, etc.), preferentemente 0,2 a 15% p/p y más preferentemente 0,5 a 10% p/p. Cuando se formulan en pomada, los principios activos pueden emplearse con una base de pomada parafínica o miscible en agua. Alternativamente, los ingredientes activos pueden formularse en una crema con una base de crema de aceite en agua.
[0048]Si se desea, la fase acuosa de la base de crema puede incluir, por ejemplo, al menos un 30% p/p de un alcohol polihídrico, es decir, un alcohol que tenga dos o más grupos hidroxilo, como propilenglicol, butano 1,3-diol, manitol, sorbitol, glicerol y polietilenglicol (incluido PEG 400) y mezclas de los mismos. Es deseable que las formulaciones tópicas incluyan un compuesto que mejore la absorción o penetración del principio activo a través de la piel u otras zonas afectadas. Ejemplos de tales potenciadores de la penetración dérmica incluyen el dimetilsulfóxido y análogos relacionados.
[0049]La fase oleosa de las emulsiones de esta invención puede constituirse a partir de ingredientes conocidos de una manera conocida. Aunque la fase puede comprender sólo un emulsionante (también conocido como emulgente), es deseable que comprenda una mezcla de al menos un emulsionante con una grasa o un aceite, o con ambos. Preferiblemente, se incluye un emulsionante hidrófilo junto con un emulsionante lipofílico que actúa como estabilizador. También se prefiere incluir tanto un aceite como una grasa. Juntos, el (los) emulsionante(s) con o sin estabilizador(es) forman la denominada cera emulsionante, y la cera junto con el aceite y la grasa forman la denominada base untuosa emulsionante que constituye la fase dispersa oleosa de las formulaciones en crema.
[0050]Los emulgentes y estabilizadores de emulsión adecuados para su uso en la formulación de la invención incluyen Tween® 60, Span® 80, alcohol cetostearílico, alcohol bencílico, alcohol miristílico, monoestearato de glicerilo y lauril sulfato de sodio. Otros emulgentes y estabilizadores de emulsión adecuados para su uso en la formulación de la invención incluyen Tween® 80.
[0051] La elección de los aceites o grasas adecuados para la formulación se basa en la consecución de las propiedades cosméticas deseadas. La crema debe ser preferiblemente un producto no graso, que no manche y sea lavable, con una consistencia adecuada para evitar fugas de los tubos u otros recipientes. Pueden utilizarse ésteres alquílicos mono o dibásicos de cadena recta o ramificada, como el diisoadipato, el estearato de isacetilo, el diéster de propilenglicol de ácidos grasos de coco, el miristato de isopropilo, el oleato de decilo, el palmitato de isopropilo, el estearato de butilo, el palmitato de 2-etilhexilo o una mezcla de ésteres de cadena ramificada conocida como Crodamol CAP, siendo los tres últimos los ésteres preferidos. Pueden utilizarse solos o combinados en función de las propiedades requeridas. Alternativamente, se utilizan lípidos de alto punto de fusión como la parafina blanca blanda y/o la parafina líquida u otros aceites minerales.
[0052] Las formulaciones farmacéuticas según la presente invención comprenden una combinación según la invención junto con uno o más portadores o excipientes farmacéuticamente aceptables y opcionalmente otros agentes terapéuticos. Las formulaciones farmacéuticas que contienen el principio activo pueden presentarse en cualquier forma adecuada para el método de administración previsto. Cuando se utiliza para uso oral, por ejemplo, pueden prepararse comprimidos, troqueles, pastillas, suspensiones acuosas o oleosas, polvos o gránulos dispersables, emulsiones, cápsulas duras o blandas, jarabes o elixires. Las composiciones destinadas al uso oral pueden prepararse según cualquier método conocido en la técnica para la fabricación de composiciones farmacéuticas y dichas composiciones pueden contener uno o más agentes, incluidos edulcorantes, aromatizantes, colorantes y conservantes, con el fin de proporcionar una preparación apetecible. Se aceptan comprimidos que contengan el principio activo mezclado con un excipiente no tóxico farmacéuticamente aceptable que sea adecuado para la fabricación de comprimidos. Estos excipientes pueden ser, por ejemplo, diluyentes inertes, como carbonato cálcico o sódico, lactosa, fosfato cálcico o sódico; agentes granulantes y desintegrantes, como almidón de maíz o ácido algínico; agentes aglutinantes, como almidón, gelatina o acacia; y agentes lubricantes, como estearato de magnesio, ácido esteárico o talco. Los comprimidos pueden no estar recubiertos o pueden estar recubiertos mediante técnicas conocidas, incluida la microencapsulación, para retrasar la desintegración y la adsorción en el tracto gastrointestinal y proporcionar así una acción sostenida durante un periodo más largo. Por ejemplo, puede emplearse un material de retardo como el monoestearato de glicerilo o el diestearato de glicerilo solos o con una cera.
[0053] Las formulaciones para uso oral también pueden presentarse como cápsulas de gelatina dura en las que el principio activo se mezcla con un diluyente sólido inerte, por ejemplo, fosfato de calcio o caolín, o como cápsulas de gelatina blanda en las que el principio activo se mezcla con agua o un medio oleoso, como aceite de cacahuete, parafina líquida o aceite de oliva.
[0054] Las suspensiones acuosas de la invención contienen los materiales activos en mezcla con excipientes adecuados para la fabricación de suspensiones acuosas. Tales excipientes incluyen un agente de suspensión, como carboximetilcelulosa sódica, metilcelulosa, hidroxipropilmetilcelulosa, alginato sódico, polivinilpirrolidona, goma tragacanto y goma acacia, y agentes dispersantes o humectantes como un fosfátido natural (p. ej., lecitina), un producto de condensación de un óxido de alquileno con un ácido graso (p. ej, estearato de polioxietileno), un producto de condensación de óxido de etileno con un alcohol alifático de cadena larga (por ejemplo, heptadecaetilenooxicetanol), un producto de condensación de óxido de etileno con un éster parcial derivado de un ácido graso y un anhídrido hexitólico (por ejemplo, monooleato de sorbitán polioxietilenado). Otros ejemplos no limitantes de agentes de suspensión incluyen Captisol® (éter sulfobutílico betaciclodextrina, SBE-p-CD). La suspensión acuosa también puede contener uno o más conservantes, como p-hidroxibenzoato de etilo o n-propilo, uno o más colorantes, uno o más aromatizantes y uno o más edulcorantes, como sacarosa o sacarina.
[0055] Las suspensiones oleosas pueden formularse suspendiendo el principio activo en un aceite vegetal, como el aceite de arachis, el aceite de oliva, el aceite de sésamo o el aceite de coco, o en un aceite mineral como la parafina líquida. Las suspensiones orales pueden contener un agente espesante, como cera de abejas, parafina dura o alcohol cetílico. Pueden añadirse edulcorantes, como los mencionados anteriormente, y aromatizantes para obtener un preparado oral apetecible. Estas composiciones pueden conservarse mediante la adición de un antioxidante como el ácido ascórbico.
[0056] Los polvos y gránulos dispersables de la invención adecuados para la preparación de una suspensión acuosa mediante la adición de agua proporcionan el ingrediente activo en mezcla con un agente dispersante o humectante, un agente de suspensión y uno o más conservantes. Los agentes dispersantes o humectantes y los agentes de suspensión adecuados son, por ejemplo, los descritos anteriormente. También puede haber excipientes adicionales, como edulcorantes, aromatizantes y colorantes.
[0057] Las composiciones farmacéuticas de la invención también pueden presentarse en forma de emulsiones de aceite en agua. La fase oleosa puede ser un aceite vegetal, como el aceite de oliva o el aceite de arachis, un aceite mineral, como la parafina líquida, o una mezcla de éstos. Los agentes emulsionantes adecuados incluyen gomas naturales, como la goma acacia y la goma tragacanto, fosfátidos naturales, como la lecitina de soja, ésteres o ésteres parciales derivados de ácidos grasos y anhídridos de hexitol, como el monooleato de sorbitán, y productos de condensación de estos ésteres parciales con óxido de etileno, como el monooleato de sorbitán polioxietilenado. La emulsión también puede contener agentes edulcorantes y aromatizantes. Los jarabes y elixires pueden formularse con agentes edulcorantes, como glicerol, sorbitol o sacarosa. Dichas formulaciones también pueden contener un demulcente, un conservante, un aromatizante o un colorante.
[0058] Las composiciones farmacéuticas de la invención pueden presentarse en forma de una preparación inyectable estéril, como una suspensión acuosa u oleaginosa inyectable estéril. Esta suspensión puede formularse según la técnica conocida utilizando los agentes dispersantes o humectantes y los agentes de suspensión adecuados que se han mencionado anteriormente. La preparación inyectable estéril también puede ser una solución o suspensión inyectable estéril en un diluyente o disolvente no tóxico aceptable para los padres, como una solución en 1,3-butano-diol o preparada como un polvo liofilizado. La preparación inyectable estéril también puede ser una solución o suspensión inyectable estéril en un diluyente o disolvente parenteralmente aceptable. Entre los vehículos y disolventes aceptables que pueden emplearse se encuentran el agua, la solución de Ringer y la solución isotónica de cloruro sódico. Además, los aceites fijos estériles pueden emplearse convencionalmente como disolvente o medio de suspensión. Para ello puede emplearse cualquier aceite fijo insípido, incluidos los mono o diglicéridos sintéticos. Además, los ácidos grasos como el ácido oleico también pueden utilizarse en la preparación de inyectables. Entre los vehículos y disolventes aceptables que pueden emplearse se encuentran el agua, la solución isotónica de cloruro sódico de Ringer, la solución hipertónica de cloruro sódico y la solución hipotónica de cloruro sódico.
[0059] La cantidad de ingrediente activo que puede combinarse con el material de soporte para producir una forma de dosificación única variará según el huésped tratado y el modo particular de administración. Por ejemplo, una formulación de liberación prolongada destinada a la administración oral a seres humanos puede contener aproximadamente de 1 a 1000 mg de material activo compuesto con una cantidad adecuada y conveniente de material portador que puede variar de aproximadamente 5 a aproximadamente 95% de las composiciones totales (peso:peso). La composición farmacéutica puede prepararse para proporcionar cantidades fácilmente mensurables para su administración. Por ejemplo, una solución acuosa destinada a infusión intravenosa puede contener de aproximadamente 3 a 500 |jg del principio activo por mililitro de solución para que pueda producirse la infusión de un volumen adecuado a una velocidad de aproximadamente 30 mL/hora.
[0060] Las formulaciones adecuadas para la administración tópica al ojo también incluyen gotas oculares en las que el principio activo se disuelve o suspende en un portador adecuado, especialmente un disolvente acuoso para el principio activo. El ingrediente activo está preferentemente presente en tales formulaciones en una concentración de 0,5 a 20%, ventajosamente de 0,5 a 10%, y particularmente alrededor de 1,5% p/p.
[0061] Las formulaciones adecuadas para la administración tópica en la boca incluyen pastillas que comprenden el ingrediente activo en una base aromatizada, generalmente sacarosa y acacia o tragacanto; pastillas que comprenden el ingrediente activo en una base inerte como gelatina y glicerina, o sacarosa y acacia; y enjuagues bucales que comprenden el ingrediente activo en un portador líquido adecuado.
[0062] Las formulaciones para administración rectal pueden presentarse en forma de supositorio con una base adecuada que comprenda, por ejemplo, manteca de cacao o un salicilato.
[0063] Las formulaciones adecuadas para la administración intrapulmonar o nasal tienen un tamaño de partícula, por ejemplo, en el intervalo de 0,1 a 500 micras, como 0,5, 1, 30, 35, etc., que se administra por inhalación rápida a través del conducto nasal o por inhalación a través de la boca para alcanzar los sacos alveolares. Las formulaciones adecuadas incluyen soluciones acuosas o aceitosas del principio activo. Las formulaciones adecuadas para la administración en aerosol o en polvo seco pueden prepararse según los métodos convencionales y pueden administrarse con otros agentes terapéuticos, como los compuestos utilizados hasta ahora en el tratamiento o la profilaxis de las infecciones porFiloviridae,como se describe a continuación.
[0064] Las formulaciones adecuadas para la administración vaginal pueden presentarse como pesarios, tampones, cremas, geles, pastas, espumas o formulaciones en aerosol que contengan, además del ingrediente activo, los portadores adecuados conocidos en la técnica.
[0065] Las formulaciones adecuadas para la administración parenteral incluyen soluciones de inyección estériles acuosas y no acuosas que pueden contener antioxidantes, tampones, bacteriostáticos y solutos que hacen que la formulación sea isotónica con la sangre del receptor previsto; y suspensiones estériles acuosas y no acuosas que pueden incluir agentes de suspensión y espesantes.
[0066] Las formulaciones se presentan en envases unidosis o multidosis, por ejemplo, ampollas y viales sellados, y pueden almacenarse en estado liofilizado (liofilizado) requiriendo únicamente la adición del portador líquido estéril, por ejemplo, agua para inyección, inmediatamente antes de su uso. Las soluciones y suspensiones inyectables extemporáneas se preparan a partir de polvos, gránulos y comprimidos estériles del tipo descrito anteriormente. Las formulaciones de dosificación unitaria preferidas son las que contienen una dosis diaria o una subdosis diaria unitaria, tal como se ha mencionado anteriormente, o una fracción adecuada de la misma, del principio activo.
[0067] Debe entenderse que, además de los ingredientes particularmente mencionados anteriormente, las formulaciones de esta invención pueden incluir otros agentes convencionales en la técnica teniendo en cuenta el tipo de formulación en cuestión, por ejemplo, las adecuadas para administración oral pueden incluir agentes aromatizantes.
[0068] La invención proporciona además composiciones veterinarias que comprenden al menos un ingrediente activo como se ha definido anteriormente junto con un portador veterinario para el mismo.
[0069]Los portadores veterinarios son materiales útiles para el propósito de administrar la composición y pueden ser materiales sólidos, líquidos o gaseosos que son por lo demás inertes o aceptables en el arte veterinario y son compatibles con el ingrediente activo. Estas composiciones veterinarias pueden administrarse por vía oral, parenteral o por cualquier otra vía deseada.
[0070]Los compuestos de la invención se utilizan para proporcionar formulaciones farmacéuticas de liberación controlada que contienen como ingrediente activo uno o más compuestos de la invención ("formulaciones de liberación controlada") en las que la liberación del ingrediente activo se controla y regula para permitir una dosificación menos frecuente o para mejorar el perfil farmacocinético o de toxicidad de un ingrediente activo dado.
IV. VÍAS DE ADMINISTRACIÓN
[0071]Uno o más compuestos de la invención (en lo sucesivo denominados principios activos) se administran por cualquier vía adecuada a la afección a tratar. Las vías adecuadas incluyen la oral, rectal, nasal, pulmonar, tópica (incluyendo la bucal y sublingual), vaginal y parenteral (incluyendo la subcutánea, intramuscular, intravenosa, intradérmica, intratecal y epidural), y similares. Se apreciará que la ruta preferida puede variar con, por ejemplo, la condición del receptor. Una ventaja de los compuestos de esta invención es que son biodisponibles por vía oral y pueden dosificarse por vía oral.
[0072]La dosis efectiva de principio activo depende al menos de la naturaleza de la afección tratada, de la toxicidad, de si el compuesto se utiliza profilácticamente (dosis más bajas) o contra una infección viral activa, del método de administración y de la formulación farmacéutica, y será determinada por el clínico mediante estudios convencionales de escalado de dosis. Puede esperarse que sea de aproximadamente 0,0001 a aproximadamente 100 mg/kg de peso corporal por día; típicamente, de aproximadamente 0,01 a aproximadamente 10 mg/kg de peso corporal por día; más típicamente, de aproximadamente 0,01 a aproximadamente 5 mg/kg de peso corporal por día; más típicamente, de aproximadamente 0,05 a aproximadamente 0,5 mg/kg de peso corporal por día. Por ejemplo, la dosis candidata diaria para un ser humano adulto de aproximadamente 70 kg de peso corporal oscilará entre 1 mg y 1000 mg, preferiblemente entre 5 mg y 500 mg, y puede adoptar la forma de dosis única o múltiple.
[0073]Se contempla cualquier periodo de tiempo adecuado para la administración de los compuestos de la presente invención. Por ejemplo, la administración puede ser de 1 día a 100 días, incluyendo 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 15, 20, 25, 30, 40, 50, 60, 70, 80 o 90 días. La administración también puede ser de 1 semana a 15 semanas, incluyendo 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13 o 14 semanas. También se contemplan periodos de administración más largos.
V. TERAPIA COMBINADA
[0074]Las composiciones de la invención también se utilizan en combinación con otros ingredientes activos. Ejemplos no limitantes de estos otros agentes terapéuticos activos son ribavirina, palivizumab, motavizumab, r SV-IGIV (RespiGam®), MEDI-557, A-60444, MDT-637, BMS-433771, amiodarona, dronedarona, verapamilo, plasma de convalecientes de ébola (ECP), TKM-100201, BCX4430 ((2S,3S,4R,5R)-2-(4-amino-5H-pirrolo[3,2-d]pirimidin-7-yl)-5-(hidroximetil)pirrolidin-3,4-diol), favipiravir (también conocido como T-705 o Avigan),T-705 monofosfato, T-705 difosfato, T-705 trifosfato, FGI-106 (1-N,7-N-bis[3-(dimetilamino)propil]-3,9-dimetilquinolino[8,7-h]quinolona-1,7-diamina), JK-05, TKM-Ebola, ZMapp, rNAPc2, VRC-Eb Oa DC076-00-v P, OS-2966, MVA-BN filo, brincidofovir, vacuna contra el ébola basada en el vector adenovírico 5 Vaxart, Ad26-ZEBOV, vacuna FiloVax, GOVX-E301, GOVX-E302, inhibidores de la entrada del virus del ébola (inhibidores NPC1), y rVSV-EBOV, y sus mezclas. Los compuestos y composiciones de la presente invención también pueden utilizarse en combinación con oligómeros morfolinos de fosforamidato (PMO), que son análogos sintéticos de oligonucleótidos antisentido diseñados para interferir con los procesos traslacionales mediante la formación de dúplex de pares de bases con secuencias específicas de ARN. Algunos ejemplos de PMO son AVI-7287, AVI-7288, AVI-7537, AVI-7539, AVI-6002 y AVI-6003. Los compuestos y composiciones de la presente invención también están destinados para su uso en la atención general brindada a pacientes con infecciones virales por Filoviridae, incluyendo líquidos parenterales (como solución salina con dextrosa y lactato de Ringer) y nutrición, profilaxis antibiótica (incluyendo metronidazol y antibióticos cefalosporínicos, como ceftriaxona y cefuroxima) y/o antifúngica, medicamentos para la fiebre y el dolor, agentes antieméticos (como metoclopramida) y/o antidiarreicos, suplementos vitamínicos y minerales (incluyendo vitamina K y sulfato de zinc), agentes antiinflamatorios (como ibuprofeno), analgésicos y medicamentos para otras enfermedades comunes en la población de pacientes, como agentes antipalúdicos (incluyendo arteméter y terapia combinada de artesunato-lumefantrina), fiebre tifoidea (incluyendo antibióticos quinolónicos, como ciprofloxacina, antibióticos macrólidos, como azitromicina, antibióticos cefalosporínicos, como ceftriaxona, o aminopenicilinas, como ampicilina), o shigelosis.
[0075]También es posible combinar cualquier compuesto de la invención con uno o más agentes terapéuticos activos adicionales en una forma de dosificación unitaria para su administración simultánea o secuencial a un paciente. La terapia combinada puede administrarse como un régimen simultáneo o secuencial. Cuando se administra secuencialmente, la combinación puede administrarse en dos o más administraciones.
[0076]La coadministración de un compuesto de la invención con uno o más agentes terapéuticos activos generalmente se refiere a la administración simultánea o secuencial de un compuesto de la invención y uno o más agentes terapéuticos activos, de manera que cantidades terapéuticamente eficaces del compuesto de la invención y uno o más agentes terapéuticos activos estén presentes en el cuerpo del paciente.
[0077]La coadministración incluye la administración de dosis unitarias de los compuestos de la invención antes o después de la administración de dosis unitarias de uno o más agentes terapéuticos activos, por ejemplo, la administración de los compuestos de la invención en segundos, minutos u horas de la administración de uno o más agentes terapéuticos activos. Por ejemplo, puede administrarse primero una dosis unitaria de un compuesto de la invención, seguida en segundos o minutos por la administración de una dosis unitaria de uno o más agentes terapéuticos activos. Alternativamente, puede administrarse primero una dosis unitaria de uno o más agentes terapéuticos, seguida de la administración de una dosis unitaria de un compuesto de la invención en cuestión de segundos o minutos. En algunos casos, puede ser deseable administrar primero una dosis unitaria de un compuesto de la invención, seguida, después de un período de horas (por ejemplo, 1-12 horas), por la administración de una dosis unitaria de uno o más agentes terapéuticos activos. En otros casos, puede ser deseable administrar primero una dosis unitaria de uno o más agentes terapéuticos activos, seguida, tras un periodo de horas (por ejemplo, de 1 a 12 horas), de la administración de una dosis unitaria de un compuesto de la invención.
[0078]La terapia de combinación puede proporcionar "sinergia" y "sinérgico", es decir, el efecto logrado cuando los ingredientes activos utilizados juntos es mayor que la suma de los efectos que resultan del uso de los compuestos por separado. Puede lograrse un efecto sinérgico cuando los ingredientes activos son: (1) coformulados y administrados o administrados simultáneamente en una formulación combinada; (2) administrados por alternancia o en paralelo como formulaciones separadas; o (3) mediante algún otro régimen. Cuando se administran en terapia de alternancia, puede lograrse un efecto sinérgico cuando los compuestos se administran o se administran secuencialmente, por ejemplo, en comprimidos, píldoras o cápsulas separadas, o mediante inyecciones diferentes en jeringas separadas. En general, durante la terapia de alternancia se administra una dosis eficaz de cada principio activo de forma secuencial, es decir, en serie, mientras que en la terapia combinada se administran conjuntamente dosis eficaces de dos o más principios activos. Un efecto antivírico sinérgico denota un efecto antivírico que es mayor que los efectos puramente aditivos previstos de los compuestos individuales de la combinación.
[0079]También se proporciona un kit que incluye un compuesto de la presente invención, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo. Cada uno de los kits individuales descritos en el presente documento puede incluir una etiqueta y/o instrucciones para el uso del compuesto en el tratamiento de una enfermedad o afección en un sujeto (por ejemplo, humano) que lo necesite. En otras realizaciones, cada kit separado también puede contener instrucciones para el uso de agentes médicos adicionales en combinación con el compuesto de la invención en el tratamiento de una enfermedad o afección en un sujeto (por ejemplo, humano) que lo necesite. En cada uno de los kits aquí descritos hay una realización adicional en la que el kit comprende unidades de dosis individuales de un compuesto como el descrito aquí, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo. Los ejemplos de unidades de dosificación individuales pueden incluir píldoras, comprimidos, cápsulas, jeringas precargadas o cartuchos de jeringas, bolsas intravenosas, etc., cada uno de los cuales comprende una cantidad terapéuticamente eficaz del compuesto en cuestión, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo. En algunas realizaciones, el kit puede contener una sola unidad de dosificación y en otras están presentes múltiples unidades de dosificación, como el número de unidades de dosificación requeridas para un régimen o período específico.
[0080]También se proporcionan artículos de fabricación que incluyen un compuesto de la presente invención, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo; y un envase. En un aspecto, el artículo de fabricación comprende un compuesto de la presente invención, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, y un envase. En otras realizaciones, el envase del artículo de fabricación puede ser un vial, un tarro, una ampolla, una jeringa precargada, un blíster, una lata, un frasco, una caja o una bolsa intravenosa.
VI. PREPARACIÓN DE COMPUESTOS
EJEMPLOS
[0081]En la descripción de los detalles experimentales se utilizan algunas abreviaturas y acrónimos. Aunque la mayoría de ellas serían comprensibles para un experto en la materia, la Tabla 1 contiene una lista de muchas de estas abreviaturas y acrónimos.
Tabla 1. Lista de abreviaturas y acrónimos.
A. Preparación de Compuestos
Ejemplo 1. 2-(cloro(fenoxi)fosforilamino)propanoato de (2S)-etilo (Cloridato A)
[0082]
[0083]La sal de hidrocloruro de éster de etil-alanina (1,69 g, 11 mmol) se disolvió en CH<2>CI<2>anhidro (10 mL) y la mezcla se agitó con enfriamiento a 0 °C bajo N<2>(g). Se añadió diclorofosfato de fenilo (1,49 mL, 10 mmol) seguido de la adición gota a gota de Et<3>N durante aproximadamente 10 min. La mezcla de reacción se calentó lentamente hasta RT y se agitó durante aproximadamente 12 h. Se añadió Et<2>O anhidro (50 mL) y la mezcla se agitó durante aproximadamente 30 min. El sólido formado se eliminó por filtración y el filtrado se concentró a presión reducida. El residuo se sometió a cromatografía en gel de sílice eluyendo con 0-50% de EtOAc en hexanos para proporcionar el intermedioA.<1>H NMR (300 MHz, CDC<h>) 87.39-7.27 (m, 5H), 4.27 (m, 3H), 1.52 (m, 3H), 1.32 (m, 3H).<31>P NMR (121.4 MHz, CDCl<a>) 88.2, 7.8.
Ejemplo 2. 2-(cloro(fenoxi)fosforilamino)propanoato de (2S)-2-etilbutilo (Cloridato B)
[0084]
[0085]El éster clorofosforamidato de 2-etilbutil alaninaBse preparó utilizando el mismo procedimiento que el cloridatoA, excepto sustituyendo el éster de 2-etilbutil alanina por el éster de etil alanina. El material se utiliza crudo en la siguiente reacción. El tratamiento con metanol o etanol forma el producto desplazado con la señal LCMS requerida.Ejemplo 3. 2-(cloro(fenoxi)fosforilamino)propanoato de (2S)-isopropilo (Cloridato C)
[0086]
[0087]El éster de clorofosforamidato de isopropil alaninaCse preparó utilizando el mismo procedimiento que el cloridatoA, excepto sustituyendo el éster de etil alanina por el éster de isopropil alanina. El material se utiliza crudo en la siguiente reacción. El tratamiento con metanol o etanol forma el producto desplazado con la señal LCMS requerida.
Ejemplo 4. (2R. 3R, 4S, 5R)-2-(4-am¡nop¡rrolH.2-f1H.2.4]tr¡az¡n-7-¡l)-3.4-d¡h¡droxi-5-(h¡drox¡met¡l)tetrah¡drofurano-2-carbonitrilo (Compuesto 1)
[0088]
[0089]A continuación se describe la preparación de (2R, 3R, 4S, 5R)-2-(4-aminopirrol[1,2-f][1,2,4]triazin-7-il)-3,4-dihidroxi-5-(hidroximetil)tetrahidrofurano-2-carbonitrilo.
[0090]El lactol comercial (10 g, 23,8 mmol) se disolvió en DMSO anhidro (30 mL) bajo N<2>(g). Se añadió Ac<2>O (20 mL) y la mezcla de reacción resultante se agitó a RT durante aproximadamente 48 h. La mezcla de reacción se vertió sobre hielo H<2>O (500 mL) y la mezcla se agitó durante 20 min. La mezcla se extrajo con EtOAc (3 x 200 mL) y los extractos orgánicos combinados se lavaron con H<2>O (3 x 200 mL). El extracto orgánico se secó sobre MgSO<4>anhidro, se filtró y se concentró a presión reducida. El residuo se disolvió en CH<2>Cl<2>y se sometió a cromatografía en gel de sílice eluyendo con EtOAc al 25% en hexanos para proporcionar la lactona.<1>H NMR (400 MHz, DMSO) 87.30-7.34 (m, 13H), 7.19-7.21 (m, 2H), 4.55-4.72 (m, 6H), 4.47 (s, 2H), 4.28 (d,J =3.9 Hz,1H), 3.66 (m, 2H). LCMS m/z 436.1 [M+H<2>O], 435.2 [M+OH]- Tr = 2.82 min. Hp Lc Tr = 4.59 [2-98% ACN in H<2>) durante 5 min a un flujo de 2 mL/min.
[0091]El bromopirazol (preparado según documento WO2009/132135) (0,5 g, 2,4 mmol) se suspendió en THF anhidro (10 mL) bajo N2 (g). La suspensión se agitó y se añadió TMSCI (0,67 mL, 5,28 mmol). La mezcla se agitó durante 20 min. a RT y después se enfrió a aproximadamente -78 °C, tras lo cual se añadió lentamente una solución de n-BuLi (6 mL, 1,6 N en hexanos, 9,6 mmol). La mezcla de reacción se agitó durante 10 min. a aproximadamente -78 °C y después se añadió la lactona (1 g, 2,4 mmol)viajeringa. Cuando se completó la reacción, medida por LCMS, se añadió AcOH para extinguir la reacción. La mezcla se concentró a presión reducida y el residuo se disolvió en una mezcla de CH2Ch y H2O (100 mL, 1:1). La capa orgánica se separó y se lavó con H2O (50 mL). A continuación, la capa orgánica se secó sobre MgSO4 anhidro, se filtró y se concentró a presión reducida. El residuo se sometió a cromatografía en gel de sílice eluyendo con 0-50% EtOAc en hexanos para proporcionar el producto como una mezcla 1:1 de anómeros. LCMSm/z553 [M+H].
[0092]El nucleósido hidroxilado (1,1 g, 2,0 mmol) se disolvió en CH<2>Ch anhidro (40 mL) y la solución se enfrió con agitación hasta aproximadamente -78 °C bajo n2 (g). Se añadió TMSCN (0,931 mL, 7 mmol) y la mezcla se agitó durante otros 10 min. Se añadió lentamente TMSOTf (1,63 mL, 9,0 mmol) a la reacción y la mezcla se agitó durante 1 h. A continuación, la mezcla de reacción se diluyó con CH<2>Ch (120 mL) y se añadió NaHCO<3>acuoso (120 mL) para extinguir la reacción. La mezcla de reacción se agitó durante otros 10 min y se separó la capa orgánica. La capa acuosa se extrajo con CH<2>Cl<2>(150 mL) y los extractos orgánicos combinados se secaron sobre MgSO<4>anhidro, se filtraron y se concentraron a presión reducida. El residuo se disolvió en una cantidad mínima de CH<2>Ch y se sometió a cromatografía en gel de sílice eluyendo con un gradiente de 0-75% de EtOAc y hexanos para proporcionar el tribencil ciano nucleósido como una mezcla de anómeros.<1>H NMR (300 MHz, CD<3>CN) 87.94 (s, 0.5H), 7.88 (s, 0.5H), 7.29-7.43 (m, 13H), 7.11-7.19 (m, 1H), 6.82 6.88 (m,1H), 6.70-6.76 (m, 1H), 6.41 (bs, 2H), 5.10 (d, J = 3.9 Hz, 0.5H), 4.96 (d, J = 5.1 Hz, 0.5H), 4.31-4.85 (m, 7H), 4.09-4.18 (m, 2H), 3.61-3.90 (m, 2H).
LCMSm/z562 [M+H].
[0093]El tribencil ciano nucleósido (70 mg, 0,124 mmol) se disolvió en CH<2>Ch anhidro (2 mL) y se enfrió a aproximadamente -20 °C bajo N<2>(g). Se añadió una solución de BCh (1N en CH<2>Ch, 0,506 mL, 0,506 mmol) y la mezcla de reacción se agitó durante 1 h. a -78 °C. Cuando la reacción se completó por LC/MS, se añadió MeOH para extinguir la reacción. La mezcla de reacción se dejó calentar hasta RT y el disolvente se eliminó a presión reducida. El residuo se sometió a HPLC de fase inversa C18, eluyendo durante 5 min con H<2>O (0,1 % de TFA), seguido de un gradiente de 0-70% de MeCN en H<2>O (0,1 % de TFA) durante 35 min, para eluir el a-anómero, y el p-anómero1. (a-anómero)<1>H NMR (300 MHz, D<2>O) 87.96 (s, 1H), 7.20 (d,J =4.8 Hz, 1H), 6.91 (d,J =4.8 Hz, 1H), 4.97 (d,J =4.4 Hz, 1H), 4.56-4.62 (m, 1H), 4.08-4.14 (m, 1H), 3.90 (dd, J = 12.9, 2.4 Hz, 1H), 3.70 (dd, J = 13.2, 4.5 Hz, 1H). (P-anómero)<1>H NMR (400 MHz, DMSO) 87.91 (s, 1H), 7.80-8.00 (br s, 2H), 6.85-6.89 (m, 2H), 6.07 (d,J =6.0 Hz, 1H), 5.17 (br s, 1H), 4.90 (br s, 1H), 4.63 (t,J =3.9 Hz, 1H), 4.02-4.06 (m, 1H), 3.94 (br s, 1H), 3.48-3.64 (m, 2H). LCMS m/z 292.2 [M+H], 290.0 [M-H]. Tr= 0.35 min. 13C NMR (400 MHZ, DMSO), 156.0, 148.3, 124.3, 117.8, 117.0, 111.2, 101.3, 85.8, 79.0, 74.7, 70.5, 61.4. HPLC Tr = 1.32 min
Preparación____________ de____________ (3R.4R.5R)-2-(4-am¡nop¡rrol[2.1-fl[1.2.4]tr¡az¡n-7-¡l)-3.4-b¡s(benc¡lox¡)-5-((benciloxhmetihtetrahidrofurano-2-ol utilizando LaCl3-2LiCl
[0094]
[0095]Se preparó una solución de 7-iodopirrolo[2,1-f][1,2,4]triazin-4-amina (7,5 g, 28,8 mmol, 1,0 equiv) en THF (67 mL). La solución se enfrió hasta aproximadamente 0 °C y se añadió TMSCl (3,3 mL, 30,3 mmol, 1,05 equiv). La mezcla de reacción se agitó durante aproximadamente 30 min y después se añadió PhMgCl (2 M en THF; 28 mL, 56,8 mmol, 1,97 equiv) mientras se mantenía una temperatura interna inferior a 5 °C. La mezcla de reacción se agitó a aproximadamente 0 °C durante aproximadamente 35 min, y después se enfrió a aproximadamente -15 °C. A continuación, se añadió /PrMgCl (2 M en THF, 14 mL, 30,2 mmol, 1,05 equiv) mientras se mantenía una temperatura interna inferior a aproximadamente -10 °C. Después de aproximadamente 15 minutos a aproximadamente -15 °C, se añadió LaCh-2LiCl (0,6 M en THF, 50 mL, 14,4 mmol, 0,5 equiv) mientras se mantenía una temperatura interna inferior a aproximadamente -15 °C. La mezcla de reacción se agitó durante aproximadamente 25 min a aproximadamente -20 °C.
[0096]En un matraz separado, se preparó una solución de (3R,4R,5R)-3,4-bis(benciloxi)-5-((benciloxi)metil)dihidrofurano-2(3H)-ona (10,0 g, 23,9 mmol, 0,83 equiv) en THF (45 mL). La solución se enfrió a aproximadamente -20 °C, y después se transfirió a la solución de Grignard manteniendo una temperatura interna inferior a aproximadamente -15 °C. La mezcla de reacción resultante se agitó a aproximadamente -20 °C durante aproximadamente 30 min.
[0097]La reacción se extinguió con HCl 2 M (53 mL) y la mezcla se calentó a aproximadamente 15 °C. Se añadió /PrOAc (38 mL) y se separaron las fases orgánica y acuosa. La capa acuosa inferior se descargó y la capa orgánica superior se lavó secuencialmente con NaHCO3 al 2,5% en peso (53 mL), NaHCO3 al 2,5% en peso (53 mL) y NaCl al 10% en peso (53 mL).
[0098]La fase orgánica se concentró hasta aproximadamente 45 mL y luego se diluyó con iPrOAc (75 mL). La solución se concentró de nuevo hasta aproximadamente 45 mL y se diluyó con iPrOAc (23 mL). La solución se concentró hasta aproximadamente 45 mL y se filtró sobre una almohadilla de Celite. La solución filtrada se concentró hasta aproximadamente 26 mL y se diluyó con MTBE (75 mL). Después de 2 h, se añadió lentamente heptano (23 mL) y la mezcla se agitó a aproximadamente 25 °C durante aproximadamente 2 h, y después se enfrió a aproximadamente -5 °C durante aproximadamente 8 h. Los sólidos se aislaron por filtración y la torta de filtración se lavó con MTBE/heptano (4:1, 23 mL). Los sólidos se secaron en estufa de vacío a no más de 35 °C para obtener (3R,4R,5R)-2-(4-aminopirrol[2,1-f][1,2,4]triazin-7-il)-3,4-bis(benciloxi)-5-((benciloxi)metil)tetrahidrofurano-2-ol.
Preparación____________ de____________ (3R.4R.5R)-2-(4-am¡nop¡rroir2.1-firi.2.41tr¡az¡n-7-¡l)-3.4-b¡s(benc¡lox¡)-5-((benciloxhmetihtetrahidrofurano-2-ol utilizando CeCl3
[0099]
[0100]El yodopirazol (5,02 g, 19,3 mmol) se disolvió en THF (45 g) y la solución se enfrió a aproximadamente 0 °C con agitación. Se añadió TMSCl (2,04 g, 18,7 mmol), y después de aproximadamente 1 h se añadió cloruro de fenil magnesio (2,0 M en THF, 19,9 g, 38,2 mmol). La mezcla de reacción se enfrió a aproximadamente -20 °C y se añadió lentamente cloruro de/so-prop/lmagnesio (2,0 M en THF, 9,99 g, 20,5 mmol). Tras aproximadamente 30 min, la mezcla de reacción se transfirió a una mezcla de cloruro de cerio anhidro (4,75 g, 19,3 mmol) en THF (22 g) a aproximadamente -20 °C. Tras aproximadamente 1,5 h, se añadió lentamente una solución de lactona (6,73 g, 16,1 mmol) en THF (22 g), y la mezcla de reacción resultante se agitó durante aproximadamente 1 h. Se añadió HCl 2 M (41 g), se calentó la mezcla hasta aproximadamente 15 °C y se añadió acetatode /so-prop/lo(35g). Las capas se separaron y la capa orgánica se lavó con NaHCO3 al 2,5% (2 x 40 g), NaCl al 10% (1 x 35 g) y se concentró a aproximadamente 30 mL de volumen. Se cargó acetato deiso-propilo(44g) y la solución se concentró a aproximadamente 30 mL de volumen. La solución se filtró y el filtrado se concentró hasta un volumen de aproximadamente 18 mL. Se añadió ferc-Butilmetiléter (37 g) seguido de los cristales de semilla de producto (10,7 mg). Tras aproximadamente 14 h, se añadió n-heptano (10,5 g) y la mezcla se enfrió a aproximadamente -5 °C y se filtró. Los sólidos se lavaron con ferc-butilmetiléter (9 g) a aproximadamente -5 °C y se secaron al vacío a aproximadamente 34 °C durante aproximadamente 15 h para obtener el producto.
Preparación____________ de____________ (3R.4R.5R)-2-(4-am¡nop¡rrol[2.1-f1[1.2.41tr¡az¡n-7-¡l)-3.4-b¡s(benc¡loxh-5-((benciloxhmetihtetrahidrofurano-2-ol utilizando CeCl3 y iPrMgCl-LiCl
[0101]
[0102]El yodopirazol (5,03 g, 19,3 mmol) se disolvió en THF (45 g) y la solución se enfrió hasta aproximadamente 0 °C con agitación bajo N2 (g). Se añadió TMSCl (2,06 g, 19,0 mmol), y después de aproximadamente 1 h se añadió cloruro de fenil magnesio (2,0 M en THF, 20,23 g, 38,8 mmol). La mezcla de reacción se enfrió a aproximadamente -20 °C y se añadió lentamente el complejo de cloruro de iso-propil-magnesio-cloruro de litio (2,0 M en THF, 15,37 g, 21,0 mmol). Tras aproximadamente 1 h, la mezcla de reacción se transfirió a una mezcla de cloruro de cerio (4,77 g, 19,4 mmol) en THF (22 g) a aproximadamente -20 °C. Tras aproximadamente 1 h, se añadió lentamente una solución de lactona (6,75 g, 16,1 mmol) en THF (23 g), y la mezcla de reacción resultante se agitó durante aproximadamente 1,5 h. Se añadió HCl 2 M (40 g), se calentó la mezcla hasta aproximadamente 15 °C y se añadió acetatodeiso-propilo (35 g). Las capas se separaron y la capa orgánica se lavó con NaHCO3 al 2,5% (2 x 40 g), NaCl al 10% (1 x 36 g) y se concentró a aproximadamente 30 mL de volumen. Se añadió acetatode isopropilo(44g) y la solución se concentró a aproximadamente 30 mL de volumen. La solución se filtró y el filtrado se concentró hasta un volumen de aproximadamente 18 mL. Se añadió ferc-Butilmetiléter (37 g) seguido de los cristales de semilla de producto (10,5 mg). Tras aproximadamente 14 h, se añadió n-heptano (11 g) y la mezcla se enfrió a aproximadamente -5 °C y se filtró. Los sólidos se lavaron con ferc-butilmetiléter (9 g) a aproximadamente -5 °C y se secaron al vacío a aproximadamente 34 °C durante aproximadamente 15 h para obtener el producto.
Preparación____________ de____________ (3R.4R.5R)-2-(4-am¡nop¡rrol[2.1-fl[1.2.41tr¡az¡n-7-¡l)-3.4-b¡s(benc¡lox¡)-5-((benciloxhmetihtetrahidrofurano-2-ol mediante YCl3
[0103]
[0104]El yodopirazol (4,99 g, 19,2 mmol) se disolvió en THF (44 g) y la solución se enfrió a aproximadamente 0 °C con agitación. Se añadió TMSCl (2,45 mL, 19,4 mmol), y después de aproximadamente 30 min se añadió cloruro de fenil magnesio (2,0 M en THF, 20,29 g, 39,0 mmol). La mezcla de reacción se enfrió a aproximadamente -20 °C y se añadió lentamente cloruro de iso-propil magnesio (2,0 M en THF, 9,85 g, 20,1 mmol). Tras aproximadamente 30 min, la mezcla de reacción se transfirió a una mezcla de cloruro de itrio anhidro (3,76 g, 19,3 mmol) y lactona (6,68 g, 16,0 mml) en THF (24 g) a aproximadamente -20 °C. Tras aproximadamente 2,5 h, se añadió HCl 2 M (30 g), se calentó la mezcla hasta aproximadamente 15 °C y se añadió acetato de iso-propilo (22 g). Las capas se separaron y la capa orgánica se lavó con NaHCO3 al 2,5% (2 x 40 g), NaCl al 10% (1 x 35 g) y se concentró a aproximadamente 30 mL de volumen. Se cargó acetato de iso-propilo (44 g) y la solución se concentró a aproximadamente 30 mL de volumen. La solución se filtró y el filtrado se concentró hasta un volumen de aproximadamente 18 mL. Se añadió ferc-Butilmetiléter (37 g) seguido de los cristales de semilla de producto (11,5 mg). Después de aproximadamente 1 h se añadió n-heptano (15 mL) y la mezcla se enfrió a aproximadamente -5 °C y se agitó durante aproximadamente 17 h. La suspensión se filtró y los sólidos se lavaron con una mezcla de ferc-butilmetiléter (8 g)/n-heptano (2 g) preenfriada a -5 °C aproximadamente. Los sólidos resultantes se secaron al vacío a aproximadamente 34 °C durante aproximadamente 22 h para obtener el producto.
Preparación____________ de____________(3R.4R.5R)-2-(4-am¡nop¡rroir2.1-firi.2.41tr¡az¡n-7-¡l)-3.4-b¡s(benc¡loxh-5-((benciloxhmetihtetrahidrofurano-2-ol utilizando NdCl3
[0105]
[0106]El yodopirazol (5,02 g, 19,3 mmol) se disolvió en THF (38 g) y la solución se enfrió hasta aproximadamente 0 °C con agitación bajo N2 (g). Se añadió TMSCl (2,45 mL, 19,4 mmol), y después de aproximadamente 1 h se añadió cloruro de fenilmagnesio (2,0 M en THF, 19,75 g, 38,0 mmol). La mezcla de reacción se enfrió a aproximadamente -20 °C y se añadió lentamente cloruro de iso-propilmagnesio (2,0 M en THF, 9,40 g, 19,2 mmol). Tras aproximadamente 1,5 h, la mezcla de reacción se transfirió a una mezcla de cloruro de neodimio (III) anhidro (4,03 g, 16,1 mmol) y lactona (6,70 g, 16,0 mml) en THF (22 g) a aproximadamente -20 °C. Tras aproximadamente 1,5 h, la mezcla de reacción se calentó a -10 °C y, tras 2 h adicionales, se añadió HCl 2 M (36 g). La mezcla se calentó hasta aproximadamente 15 °C y se añadió acetato de iso-propilo (23 g). Las capas se separaron y la capa orgánica se lavó con NaHCO3 al 2,5% (2 x 44 g), NaCl al 10% (1 x 41 g) y se concentró a aproximadamente 30 mL de volumen. Se cargó acetato de /so-propilo (44 g) y la solución se concentró a aproximadamente 30 mL de volumen. La solución se filtró y el filtrado se concentró hasta un volumen de aproximadamente 18 mL. Se añadió ferc-Butilmetiléter (37 g) seguido de los cristales de semilla de producto (11,9 mg). Después de aproximadamente 1 h se añadió n-heptano (15 mL) y la mezcla se enfrió a aproximadamente -5 °C y se agitó durante aproximadamente 15 h. La suspensión se filtró y los sólidos se lavaron con una mezcladeferc-butilmetiléter (8 g)/n-heptano (11 g) preenfriada a -5 °C aproximadamente. Los sólidos resultantes se secaron al vacío a aproximadamente 34 °C durante aproximadamente 25 h para obtener el producto.
Preparación___________ de___________ (2R.3R.4R.5R)-2-(4-am¡nop¡rrol[2.1-fl[1.2.41tr¡az¡n-7-¡l)-3.4-b¡s(benc¡lox¡)-5-((benciloxhmetihtetrahidrofurano-2-carbonitrilo
[0107]
[0108]A una solución preenfriada (-40 °C) de (3R,4R,5R)-2-(4-aminopirrol[2,1-f][1,2,4]triazin-7-il)-3,4-bis(benciloxi)-5-((benciloxi)metil)tetrahidrofurano-2-ol (10,0 gramos, 18,1 mmoles, 1,0 equiv.) en d Cm (100 mL) se cargó ácido trifluoroacético (6,19 gramos, 54,3 mmoles, 3,0 equiv.), seguido de una solución preenfriada (-30 °C) de TMSOTf (24,1 gramos, 108,6 mmoles, 6,0 equiv.) y TMSCN (10,8 gramos, 108,6 mmoles, 6,0 equiv.) en Dc M (50 mL) mientras se mantenía la temperatura interna por debajo de -25 °C aproximadamente. La mezcla de reacción se agitó por debajo de aproximadamente -30 °C durante no menos de 10 minutos y se extinguió en una solución previamente enfriada (aproximadamente -10 °C) de KOH al 20 % en peso. (120 mL). La mezcla bifásica se calentó a temperatura ambiente. La capa orgánica se separó y se lavó con NaCl al 10 % en peso. (3 X 50 mL). La fase orgánica se filtró, se concentró al vacío hasta aproximadamente 50 mL, se rediluyó con tolueno (200 mL) y se concentró al vacío hasta 140 mL a aproximadamente 50 °C. La solución se sembró con (2R,3R,4R,5R)-2-(4-aminopirrol[2,1-f][1,2,4]triazin-7-il)-3,4-bis(benciloxi)-5-((benciloxi)metil)tetrahidrofurano-2-carbonitrilo a aproximadamente 55 °C. Se agita a aproximadamente 55 °C durante aproximadamente una hora y se enfría a aproximadamente 0 °C durante aproximadamente 6 horas. Los sólidos se aislaron por filtración y la torta de filtración se lavó con tolueno (30 mL). Los sólidos se secaron al vacío a aproximadamente 50 °C.
Preparación___________ de___________ (2R.3R.4R.5R)-2-(4-am¡nop¡rrol[2.1-fl[1.2.41tr¡az¡n-7-¡l)-3.4-b¡s(benc¡lox¡)-5-((benciloxi)metil)tetrahidrofurano-2-carbonitrilo mediante Química de Flujo
[0109]
[0110]Se bombearon secuencialmente soluciones de (3R,4R,5R)-2-(4-aminopirrolo[2,1-f][1,2,4]triazin-7-il)-3,4-bis(benciloxi)-5-((benciloxi)metil)tetrahidrofurano-2-ol (23,0 g en 460,07 g de DCM), TMSOTf (55,81 g en 138,07 g de DCM) y TMSCN (25,03 g en 138,10 g de DCM) en un reactor tubular a aproximadamente -40 °C. La mezcla de reacción se recogió en un matraz, mantenido en baño de hielo, que contenía una solución acuosa de KOH al 20% (46,91 g de KOH y 210 g de agua). Las capas se separaron y la fase orgánica se lavó secuencialmente con solución acuosa de KOH al 10% (10 g de KOH y 90 mL de agua) y con salmuera al 10% (2 x100 g). La fase orgánica se concentró al vacío hasta aproximadamente 4 volúmenes, se cargó alcohol isopropílico (162,89 g) y la mezcla se concentró al vacío hasta aproximadamente 10 volúmenes. El contenido se calentó a aproximadamente 60 °C, luego se ajustó a aproximadamente 0 °C durante aproximadamente 6,5 h y se agitó a aproximadamente 0 °C durante aproximadamente 15,5 h. La suspensión resultante se filtró, los sólidos se lavaron con alcohol isopropílico (61,79 g) y se secaron a aproximadamente 50 °C a presión reducida durante la noche para obtener el producto.
Preparación_____ de_____ (2R._____ 3R,_____ 4S,_____ 5R)-2-(4-am¡nop¡rrol[1.2-f1[1.2.4]tr¡az¡n-7-¡l)-3.4-d¡h¡drox¡-5-(hidroximetihtetrahidrofurano-2-carbonitrilo
[0111]
[0112]El el nucleósido de tribencilo ciano (48,8 g, 86,9 mmol, 1,0 equiv.) se disolvió en CH2Ch anhidro (244 mL) y se enfrió a -20 °C aproximadamente. Se añadió gota a gota una solución de BCh (1M en CH2Ch, 295 mL, 295 mmol, 3,4 equiv.), manteniendo la temperatura interna por debajo de -15 °C aproximadamente. Tras la adición, la mezcla de reacción se agitó durante 1 h a aproximadamente -20 °C. Se añadió gota a gota MeOH (340 ml), manteniendo la temperatura interna por debajo de -15 °C. La solución resultante se destiló hasta aproximadamente 250 ml y luego se rellenó con aproximadamente 250 ml de MeOH. La solución resultante se destiló de nuevo hasta aproximadamente 250 ml, luego se rellenó con aproximadamente 250 ml de MeOH y finalmente se destiló hasta aproximadamente 125 ml. Se añadió agua (125 ml), seguida de una solución de K2CO3 (20 % en peso en agua, 125 ml). Se comprobó el pH y resultó ser ~3. Se añadió solución de K2CO3 (20 % en peso en agua, 50 ml), y se comprobó que el pH era ~8. La suspensión resultante se agitó durante una noche, se filtró y se lavó con agua (50 ml) y MeOH (50 ml). La torta de producto húmedo se secó durante la noche a aproximadamente 40 °C. 1H NMR (300 MHz, D2O) 87.96 (s, 1H), 7.20 (d,J =4.8 Hz, 1H), 6.91 (d,J =4.8 Hz, 1H), 4.97 (d,J =4.4 Hz, 1H), 4.56-4.62 (m, 1H), 4.08-4.14 (m, 1H), 3.90 (dd, J = 12.9, 2.4 Hz, 1H), 3.70 (dd, J = 13.2, 4.5 Hz, 1H).
Ejemplo 12. 2-((((2R■3S■4R■5R)-5-(4-aminopirrolH■2-f1[1■2■41triazin-7-il)-5-ciano-3■4-dihidroxitetrahidrofurano-2-il)metoxi)(fenoxi)fosforilamino) propanoato de (2S)-2-etilbutilo (Compuesto 9)
[0113]El Compuesto 9 puede prepararse por varios métodos que se describen a continuación.
Procedimiento 1
[0114]
nitrofenoxi)(fenoxi)fosforil)amino)propanoato de (2S)-2-etilbutilo (1,08 g, 2,4 mmol) en DMF anhidro (9 mL) y se agitó bajo atmósfera de nitrógeno a R<t>. Se añadió (2R,3R,4S,5R)-2-(4-aminopirrol[2,1-f][1,2,4]triazin-7-il)-3,4-dihidroxi-5-(hidroximetil)tetrahidrofurano-2-carbonitrilo (350 mg, 1,2 mmol) a la mezcla de reacción en una porción. A continuación, se añadió una solución de clorurodef-butilmagnesio en THF (1M, 1,8 mL, 1,8 mmol) a la reacción gota a gota durante aproximadamente 10 minutos. La reacción se agitó durante aproximadamente 2 h, momento en el que la mezcla de reacción se diluyó con acetato de etilo (50 mL) y se lavó con solución acuosa saturada de bicarbonato sódico (3 x 15 mL) seguida de solución acuosa saturada de cloruro sódico (15 mL). La capa orgánica se secó sobre sulfato sódico anhidro y se concentró a presión reducida. El aceite resultante se purificó con cromatografía en columna de gel de sílice (0-10% MeOH en DCM) para obtener 2-(((((2R,3S,4R,5R)-5-(4-aminopirrol[2,1-f][1,2,4]triazin-7-il)-5-ciano-3,4-dihidroxitetrahidrofurano-2-il)metoxi)(fenoxi)fosforil)amino) propanoato de (2S)-2-etilbutilo (311 mg, 43%, 1:0,4 mezcla diastereomérica en fósforo) como sólido blanco.<1>H NMR (400 MHz, CD<3>OD) 87.85 (m, 1H), 7.34 - 7.23 (m, 2H), 7.21 -7.09 (m, 3H), 6.94 -6.84 (m, 2H), 4.78 (d,J =5.4 Hz, 1H), 4.46 - 4.33 (m, 2H), 4.33 - 4.24 (m, 1H), 4.18 (m, 1H), 4.05 -3.80 (m, 3H), 1.52 - 1.39 (m, 1H), 1.38 - 1.20 (m, 7H), 0.85 (m, 6H).<31>P NMR (162 MHz, CD<3>OD) 8 3.71, 3.65. LCMSm/z603.1 [M+H], 600.9 [M-H]. HPLC (gradiente 2-98% MeCN-H<2>O con modificador 0,1% TFA durante 8,5 min, 1,5mL/min, Columna: Phenomenex Kinetex C18, 2,6 um 100 A, 4,6 x 100 mm)ír =5,544 min, 5,601 min
Separación de los Diastereómeros (S) y (R)
[0118]El 2-(((((2R,3S,4R,5R)-5-(4-aminopirrol[2,1-f][1,2,4]triazin-7-il)-5-ciano-3,4-dihidroxitetrahidrofurano-2-il)metoxi)(fenoxi)fosforil)amino) propanoato de (2S)-2-etilbutilo se disolvió en acetonitrilo. La solución resultante se cargó en la columna quiral Lux Cellulose-2, se equilibró en acetonitrilo y se eluyó con acetonitrilo/metanol isocrático (95:5 vol/vol). El primer diastereómero eluyente tuvo un tiempo de retención de 17,4 min, y el segundo diastereómero eluyente tuvo un tiempo de retención de 25,0 min.
El primer diastereómero de elución es 2-(((R)-(((2R,3S,4R,5R)-5-(4-aminopirrol[2,1-f|[1,2,4]triazin-7-il)-5-ciano-3,4-dihidroxitetrahidrofurano-2-il)metoxi)(fenoxi)fosforil)amino)propanoato de (S)-2-etilbutilo:
[0119]
[0120]<1>HNMR (400 MHz, CD<3>OD) 58.05 (s,1H), 7.36 (d,J = 4.8 Hz,1H), 7.29 (br t,J = 7.8 Hz,2H), 7.19 -7.13 (m, 3H), 7.11 (d,J = 4.8 Hz,1H), 4.73 (d,J = 5.2 Hz,1H), 4.48 -4.38 (m, 2H), 4.37-4.28 (m, 1H), 4.17 (t,J = 5.6 Hz,1H), 4.08 -3.94 (m, 2H), 3.94 - 3.80 (m, 1H), 1.48 (sep,J =12.0, 6.1 Hz, 1H), 1.34 (p,J =7.3 Hz, 4H), 1.29 (d,J= 7.2 Hz, 3H), 0.87 (t,J =7.4 Hz, 6H).<31>PNMR (162 MHz, CD<3>OD) 53.71 (s). HPLC (gradiente 2-98% MeCN-H<2>O con modificador 0,1% TFA durante 8,5 min, 1,5mL/min, Columna: Phenomenex Kinetex C18, 2,6 um 100 A, 4,6 x 100 mm)tR= 5,585 min.
El segundo diastereómero de elución es 2-(((S)-(((2R,3S,4R,5R)-5-(4-aminopirrol[2,1-f][1,2,4]triazin-7-il)-5-ciano-3,4-dihidroxitetrahidrofurano-2-il)metoxi)(fenoxi)fosforil)amino)propanoato de (S)-2-etilbutilo:
[0121]
[0122]<1>HNMR (400 MHz, CD<3>OD) 58.08 (s, 1H), 7.36 - 7.28 (m, 3H), 7.23 - 7.14 (m, 3H), 7.08 (d,J= 4.8 Hz, 1H), 4.71 (d,J = 5.3Hz, 1H), 4.45 - 4.34 (m, 2H), 4.32 - 4.24 (m, 1H), 4.14 (t,J =5.8 Hz, 1H), 4.08 - 3.94 (m, 2H), 3.93 - 3.85 (m, 1H), 1.47 (sep,J= 6.2 Hz, 1H), 1.38 - 1.26 (m, 7H), 0.87 (t,J =7.5 Hz, 6H).<31>PNMR (162 MHz, CD<3>OD) 53.73 (s). HPLC (gradiente 2-98% MeCN-H<2>O con modificador 0,1% TFA durante 8,5 min, 1,5mL/min, Columna: Phenomenex Kinetex C18, 2,6 um 100 A, 4,6 x 100 mm)tR= 5,629 min.
Ejemplo___________ 18.___________ S.S'-2.2'-((((2R.3S.4R.5R)-5-(4-am¡nop¡rrolM.2-f1M.2.41tr¡az¡n-7-m-5-c¡ano-3.4-dihidroxitetrahidrofurano-2-il)metoxi)fosforil)bis(oxi)bis(etano-2.1-diil) bis(2.2-dimetilpropantioato) (Compuesto 15]
[0123]
[0124]El nucleósido1(0,028 g, 0,096 mmol) se disolvió en trimetilfosfato (1 mL). La reacción se agitó bajo N2 (g) y después se trató con 1H-tetrazol (0,021 g, 0,29 mmol). La mezcla de reacción se enfrió a 0 °C y el fosfano (Nucleoside Nucleotides, Nucleic acids; 14; 3-5; 1995; 763 - 766. Lefebvre, Isabelle; Pompon, Alain; Perigaud, Christian; Girardet, Jean-Luc; Gosselin, Gilles; et al.) (87 mg, 0,192 mmol). La reacción se agitó durante 2 h. y luego se extinguió con peróxido de hidrógeno al 30% (0,120 mL). La mezcla se agitó durante 30 minutos a temperatura ambiente y después se trató con tiosulfato sódico acuoso saturado (1 mL). La mezcla se agitó durante 10 min. y después se concentró a presión reducida.
El residuo se sometió a HPLC preparativa para aislar el producto base15.<1>H NMR (300 MHz, CD<3>CN) 87.98 (s, 1H), 6.92 (d, 1H), 6.81 (d, 1H), 6.44 (bs, 2H), 4.82 (m, 2H), 4.47 (m, 1H), 4.24 (m, 2H), 4.00 (m, 4H), 3.80 (bs, 1H), 3.11 (m, 4H), 1.24 (s, 9H).<31>P NMR (121.4 MHz, CD<3>CN) 8-1.85 (s). LCMSm/z661 [M+H].
Ejemplo 20. trifosfato de ((2R. 3S, 4R, 5R)-5-(4-am¡nop¡rroiri.2-firi.2.41tr¡az¡n-7-¡l)-5-c¡ano-3.4-dih¡drox¡tetrah¡drofurano-2-¡l)met¡l tetrahidrógeno (Compuesto 17).
[0125]
[0126]El Compuesto17se preparó a partir del Compuesto1utilizando un procedimiento similar al descrito anteriormente (WO2012012776). El producto se aisló como sal sódica. 1H NMR (400 MHz, D2O) 87.76 (s, 1H), 6.88 (d, J = 4.8 Hz, 1H), 6.73 (d, J = 4.4 Hz, 1H), 4.86 (d, J = 5.2 Hz, 1H), 4.43 (m, 1H), 4.39 (m, 1H), 4.05 (m, 1H), 3.94 (m, 1H). 31P NMR (121.4 MHz, D2O) 8 -5.4 (d, 1P), -10.8 (d, 1P), -21.1 (t, 1P). LCMSm/z530 [M-H], 531.9 [M+H] Tr = 0.22 min. Intercambio de iones por HPLC Tr=9.95 min.
Ejemplo_____ 20-a._____ fosfato_____ de_____ ((2R.3S.4R.5R)-5-(4-am¡nop¡rrol[2.1-f1[1.2.41tr¡azin-7-¡l)-5-c¡ano-3.4-d¡h¡drox¡tetrah¡drofurano-2-il)met¡lo (Compuesto 33)
[0127]
[0128]Una mezcla de aproximadamente 0,05 mmol del compuesto1y aproximadamente 0,5 mL de trimetilfosfato se selló en un recipiente durante aproximadamente una a aproximadamente 48 h. La mezcla se enfrió hasta aproximadamente -10 a aproximadamente 10 °C y se añade aproximadamente 0,075 mmol de oxicloruro de fósforo. Después de aproximadamente una a 24 horas, la reacción se extinguió con aproximadamente 0,5 mL de bircarbonato de tetraetilamonio 1M y las fracciones deseadas se aislaron por cromatografía de intercambio aniónico para obtener el compuesto base.
[0129]El Compuesto33se preparó como sal de bis-trietilamonio a partir del compuesto1como se ha descrito previamente (documento WO2011150288). 1H NMR (400 MHz, D2O) 87.82 (s, 1H), 6.91 - 6.88 (m, 1H), 6.81 - 6.78 (m, 1H), 4.87 -4.84 (m, 1H), 4.40 - 4.30 (m, 2H), 3.95 - 3.77 (m, 2H), 3.10 - 3.00 (m, 6H), 1.20 - 1.10 (m, 9H). 31P NMR (162 MHz, D2O) 8 2.33. MSm/z371.
Ejemplo 20-b. trifosfato de ((2R■3S■4R■5R)-5-(4-am¡nop¡rrolf2■1-f1f1■2■41tr¡az¡n-7-¡l)-5-c¡ano-3■4-d¡h¡drox¡tetrahidrofurano-2-¡l)met¡l trihidrógeno (Compuesto 34).
[0130]
[0131]El Compuesto34se preparó como sal de trilitio a partir del compuesto1como se ha descrito previamente ( WO2002057425). 31P NMR (162 MHz, D2O) 8-5.34 (d), -9.75 (d). MSm/z451.
Ejemplo 35: 2-(((S)-(((2R.3S.4R.5R)-5-(4-aminop¡rrol[2.1-f1[1.2.4] triazin-7-ih-5-ciano-3.4-dihidroxitetrahidrofurano-2-¡l)metox¡)(fenox¡)fosfor¡l)amino)propanoato de (S)-2-etilbutilo)
[0132]
[0133]La preparación de 2-(((SH((2R,3S,4R,5R)-5-(4-aminopirrol[2,1-f][1,2,4]triazin-7-il)-5-ciano-3,4-dihidroxitetrahidrofurano-2-il)metoxi)(fenoxi) fosforil)amino)propanoato de (S)-2-etilbutilo se describe a continuación.Preparación de (3R.4R.5R)-3.4-b¡s(benc¡lox¡)-5-((benc¡lox¡)met¡l)dih¡drofurano-2(3H)-ona.
[0134]
[0135](3R,4R,5R)-3,4-bis(benciloxi)-5-((benciloxi)metil)tetrahidrofurano-2-ol (15,0 g) se combinó con MTBE (60,0 mL), KBr (424,5 mg), solución acuosa de K<2>HPO<4>(2,5M, 14,3 mL) y TEMPO (56 mg). Esta mezcla se enfrió hasta aproximadamente 1 °C. La solución acuosa de lejía (7,9%p.) se cargó lentamente en porciones hasta el consumo completo del material de partida, como se indica mediante una prueba de almidón/yoduro. Las capas se separaron y la capa acuosa se extrajo con MTBE. La fase orgánica combinada se secó sobre MgSO<4>y se concentró a presión reducida para obtener el producto como sólido.
Preparación de (4-amino-7-¡odop¡rrolor2.1-fl H.2.41triazina)
[0136]
[0137]A una solución fría de 4-aminopirrolo[2,1-f][1,2,4]-triazina (10,03 g; 74,8 mmol) en N,N-dimetilformamida (70,27 g), se cargó N-iodosuccinimida (17,01 g; 75,6 mmol) en porciones, mientras se mantenía el contenido a aproximadamente 0 °C. Una vez finalizada la reacción (aproximadamente 3 h a aproximadamente 0 °C), la mezcla de reacción se transfirió a una solución acuosa de hidróxido sódico 1 M (11 g de NaOH y 276 mL de agua) manteniendo el contenido a aproximadamente 20-30 °C. La suspensión resultante se agitó a aproximadamente 22 °C durante 1,5 h y después se filtró. Los sólidos se lavan con agua (50 mL) y se secan a aproximadamente 50 °C al vacío para obtener 4-amino-7-iodopirrolo[2,1-f] [1,2,4]triazina como sólido. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 87.90 (s, 1H), 7.78 (br s, 2H), 6.98 (d, J = 4.4 Hz, 1H), 6.82 (d, J = 4.4 Hz, 1H). 13C NMR (101 MHz, DMSO-d6) 8 155.7, 149.1, 118.8, 118.1, 104.4, 71.9. MS m/z = 260.97 [M+H].
Preparación___________ de___________(3R.4R.5R)-2-(4-am¡nop¡rrolo[2.1-fl[1.2.4]tr¡az¡n-7-¡n-3.4-b¡s(benzoilox¡)-5-((benzo¡lox¡)metil)tetrah¡drofurano-2-ol vía (4-amino-7-¡odop¡rrolo[2.1-fl H.2.41triazina)
[0138]
[0139]En un reactor bajo atmósfera de nitrógeno se cargó yodobase 2 (81 g) y THF (1,6 L). La solución resultante se enfrió a aproximadamente 5 °C y se cargó con TMSCl (68 g). A continuación, se cargó lentamente PhMgCl (345 mL, 1,8 M en THF) mientras se mantenía una temperatura interna de aproximadamente < 5 °C. La mezcla de reacción se agitó a aproximadamente 0 °C durante 30 min, y después se enfrió a aproximadamente -15 °C. Se cargó lentamente /PrMgCl-LiCl (311 mL, 1,1 M en THF) mientras se mantenía una temperatura interna inferior a aproximadamente -12 °C. Tras aproximadamente 10 minutos de agitación a aproximadamente -15 °C, la mezcla de reacción se enfrió a aproximadamente -20 °C, y se cargó una solución de lactona1(130 g) en THF (400 mL). A continuación, la mezcla de reacción se agitó a -20 °C durante 1 h y se extinguió con AcOH (57 mL). La mezcla de reacción se calentó hasta aproximadamente 0 °C y se ajustó a pH 7-8 con NaHCO3 acuoso (5 % en peso, 1300 mL). A continuación, la mezcla de reacción se diluyó con EtOAc (1300 mL) y se separaron las capas orgánica y acuosa. La capa orgánica se lavó con HCl 1N (1300 mL), NaHCO3 acuoso (5 % en peso, 1300 mL) y salmuera (1300 mL), y después se secó sobre Na2SO4 anhidro y se concentró hasta sequedad. El producto se purificó mediante cromatografía en columna de gel de sílice utilizando un gradiente consistente en una mezcla de MeOH y EtOAc.
Preparación de 2-(((perfluorofenox¡)(fenox¡)fosfor¡l)amino)propanoato de ((2S)-2-etilbut¡lo (mezcla de Sp y Rp):
[0140]
[0141]El hidrocloruro de éster 2-etilbutilo de L-alanina (5,0 g, 23,84 mmol) se combinó con cloruro de metileno (40 mL), se enfrió a aproximadamente -78 °C, y se añadió diclorofosfato de fenilo (3,65 mL, 23,84 mmol). Se añadió trietilamina (6,6 mL, 47,68 mmol) durante aproximadamente 60 min a aproximadamente -78 °C y la mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante 3h. La mezcla de reacción se enfrió hasta aproximadamente 0 °C y se añadió pentafluorofenol (4,4 g, 23,84 mmol). Se añadió trietilamina (3,3 mL, 23,84 mmol) durante aproximadamente 60 min. La mezcla se agitó durante aproximadamente 3 h a temperatura ambiente y se concentró a presión reducida. El residuo se disolvió en EtOAc, se lavó varias veces con una solución acuosa de carbonato sódico y se concentró a presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en columna de gel de sílice utilizando un gradiente de EtOAc y hexanos (0 a 30%). Las fracciones que contenían producto se concentraron a presión reducida para dar 2-((perfluorofenoxi)(fenoxi)fosforil)amino)propanoato de (2S)-2-etilbutilo como sólido. 1H NMR (400 MHz, Cloroformo-d) 8 7.41 -7.32 (m, 4H), 7.30 -7.17 (m, 6H), 4.24 -4.16 (m, 1H), 4.13 -4.03 (m, 4H), 4.01 - 3.89 (m, 1H), 1.59 - 1.42 (m, 8H), 1.40 -1.31 (m, 8H), 0.88 (t, J = 7.5 Hz, 12H). 31P NMR (162 MHz, Cloroformo-d) 8-1.52. 19F NMR (377 MHz, Cloroformod) 8 -153.63, -153.93 (m), -160.05 (td, J = 21.9, 3.6 Hz), -162.65 (qd, J = 22.4, 20.5, 4.5 Hz). MS m/z = 496 [M+H].
Preparación de 2-(((perfluorofenoxh(fenox¡)fosforil)am¡no)propanoato de ((2S)-2-etilbut¡lo:
[0142]
[0143]El hidrocloruro de éster 2-etilbutilo de L-alanina (40,10 g, 0,191 mmol) se disolvió en diclorometano
(533 g) y la solución se enfrió con agitación hasta aproximadamente -15 °C bajo N<2>(g). Se añadió diclorofosfato de fenilo (40,32 g, 0,191 mol) seguido de la adición lenta de trietilamina (41,58 g, 0,411 mmol) y la mezcla de reacción se agitó a aproximadamente -15 °C durante aproximadamente 1,5 h. Se añadió pentafluorofenol (35,14 g, 0,191 mol), seguido de trietilamina (19,23 g, 0,190 mol) y la mezcla de reacción se agitó durante aproximadamente 2 h. La mezcla de reacción se calentó hasta aproximadamente 0 °C y se añadió HCl 0,5 M (279,19 g). La mezcla se calentó hasta aproximadamente 22 °C y la capa orgánica se separó y se lavó con solución acuosa de KHCO<3>al 5% (281 g), y después con agua (281 g). Una alícuota de la capa orgánica (453,10 g de la solución de 604,30 g) se concentró hasta un volumen de aproximadamente 120 mL, se añadió acetato de isopropilo (157 g) y la solución se concentró hasta sequedad. El residuo se disolvió en acetato de isopropilo (158 g). La solución resultante se concentró hasta un volumen de aproximadamente 120 mL y la temperatura se ajustó a aproximadamente 45 °C. Se añadió n-heptano (165 g) y la mezcla se enfrió a 22 °C durante aproximadamente 1 h. Se añadió trietilamina (2,90 g, 0,0287 mol) y la mezcla se agitó a 0 °C durante aproximadamente 17 h. La mezcla se filtró, los sólidos se lavaron con n-heptano (145 g) y los sólidos se secaron al vacío a aproximadamente 40 °C durante aproximadamente 15 h para proporcionar 2-etilbutil ((S)-(pentiafluorofenoxi)(fenoxi)fosforil)-L-alaninato.
Preparación de ((S)-(4-n¡trofenox¡)(fenox¡)fosfor¡l)-L-alan¡nato de 2-etilbut¡lo:
[0144]
[0145]Una suspensión de hidrocloruro de éster 2-etilbutilo de L-alanina (20,08 g, 95,8 mmol) y acetato de isopropilo (174 g) se enfrió con agitación hasta aproximadamente -20 °C). Se añadió diclorofosfato de fenilo (20,37 g, 96,5 mmol), seguido de la adición lenta de trietilamina (20,97 g, 207,2 mmol) y la mezcla se agitó a aproximadamente -20 °C durante aproximadamente 1 h. Se añadió 4-nitrofenol (13,23 g, 95,1 mmol), seguido de la adición lenta de trietilamina (10,01 g, 98,8 mmol) y la mezcla de reacción se agitó durante aproximadamente 1,5 h. La mezcla de reacción se calentó hasta aproximadamente 0 °C y se añadió HCl 0,5 M (140 g). La capa orgánica se separó y se lavó con Na2CO3 al 5% (2 x 100 g) y NaCl al 10% (2 x 100 g). A continuación, la capa orgánica se concentró hasta un volumen de aproximadamente 80 mL y se añadió isopropilacetato (4 g), seguido de n-heptano (110 g). Se añadieron cristales de semilla de producto (0,100 g) seguidos de una segunda porción de n-heptano (110 g) y la mezcla se enfrió hasta aproximadamente 0 °C. Se añadió 1,8-Diazabicicloundec-7-eno (1,49 g, 9,79 mmol) y la mezcla se agitó a aproximadamente 0 °C durante aproximadamente 21 h. Los sólidos resultantes se filtraron y se lavaron primero con n-heptano (61 g) y después con H2O (2 x 100 g). Los sólidos se agitaron con H2O (200 g) durante aproximadamente 1,5 h, se filtraron y se lavaron con H2O (3 x 100 g) y después con n-heptano (61 g). Los sólidos obtenidos se secaron al vacío a aproximadamente 40 °C durante aproximadamente 19 h para proporcionar 2-etilbutil ((S)-(4-nitrofenoxi)(fenoxi)fosforil)-L-alaninato.
Preparación del Compuesto Base (mezcla de Sp y Rp):
[0146]
[0147]El nucleósido (29 mg, 0,1 mmol) y la fosfonamida (60 mg, 0,12 mmol) y N,N-dimetilformamida (2 mL) se combinaron a temperatura ambiente. Se añadió lentamente cloruro de ferc-butil-magnesio (1M en THF, 0,15 mL). Después de aproximadamente 1h, la reacción se diluyó con acetato de etilo, se lavó con solución acuosa de ácido cítrico (5%p.), solución acuosa saturada de NaHCO3 y solución saturada de salmuera. La fase orgánica se secó sobre Na2SO4 y se concentró a presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en columna de gel de sílice utilizando un gradiente de metanol y CH2Ch (0 a 5%). Las fracciones que contenían producto se concentraron a presión reducida para obtener el producto.
Preparación_________ de_________(3aR.4R.6R.6aR)-4-(4-am¡nop¡rrolo[2.1-flH.2.4]tr¡az¡n-7-¡l)-6-(h¡drox¡met¡n-2.2-
[0148]
[0149]A una mezcla de (2R,3R,4S,5R)-2-(4-aminopirrol[2,1-f][1,2,4]triazin-7-il)-3,4-dihidroxi-5-(hidroximetil)tetrahidrofurano-2-carbonitrilo (5,8g, 0,02 mol), 2,2-dimetoxipropano (11,59 mL, 0,09 mol) y acetona (145 mL) a temperatura ambiente se añadió ácido sulfúrico (18M, 1,44 mL). La mezcla se calentó hasta aproximadamente 45 °C. Tras aproximadamente 30 min, la mezcla se enfrió a temperatura ambiente y se añadieron bicarbonato sódico (5,8 g) y agua 5,8 mL). Tras 15 min, la mezcla se concentró a presión reducida. El residuo se recogió en acetato de etilo (150 mL) y agua (50 mL). La capa acuosa se extrajo con acetato de etilo (2 x 50 mL). La fase orgánica combinada se secó sobre sulfato sódico y se concentró a presión reducida para dar (2R,3R,4S,5R)-2-(4-aminopirrolo[2,1-f][1,2,4]triazin-7-il)-3,4-dihidroxi-5-(hidroximetil)tetrahidrofurano-2-carbonitrilo crudo.<1>H NMR (400 MHz, CD<3>OD) 87.84 (s, 1H), 6.93 (d,J =4.6 Hz, 1H), 6.89 (d,J =4.6 Hz, 1H), 5.40 (d,J =6.7 Hz, 1H), 5.00 (dd,J =6.7, 3.3 Hz, 1H), 4.48 -4.40 (m, 1H), 3.81 - 3.72 (m, 2H), 1.71 (s, 3H), 1.40 (s, 3H). MS m/z = 332.23 [M+1].
Preparación de Sal TsOH del (3aR.4R.6R.6aR)-4-(4-am¡nop¡rrolo[2.1-flH.2.41tr¡az¡n-7-¡l)-6-(h¡drox¡met¡n-2.2-d¡met¡ltetrah¡drofuro[3.4-d1[1.31d¡oxol-4-carbonitr¡lo:
[0150]
[0151]A una mezcla de (2R,3R,4S,5R)-2-(4-aminopirrol[2,1-f][1,2,4]triazin-7-il)-3,4-dihidroxi-5-(hidroximetil)tetrahidrofurano-2-carbonitrilo (5,0 g, 17,2 mmol, 1,0 equiv.0 equiv.), 2,2-dimetoxipropano (10,5 mL, 86 mmol, 5,0 equiv.) y acetona (25 mL) a temperatura ambiente se añadió ácido p-tolilsulfónico (3,59 g, 1,1 equiv.). La mezcla se agitó a temperatura ambiente. Después de aproximadamente 30 min, se añadió acetato de isopropilo (25 mL) durante aproximadamente una hora. La suspensión resultante se filtró y se lavó con heptano:acetato de isopropilo 2:1 (25 ml). El producto se secó al vacío a aproximadamente 40 °C.
Preparación_________ de_________ (3aR.4R.6R.6aR)-4-(4-am¡nop¡rrolo[2.1-flH.2.4]tr¡az¡n-7-¡l)-6-(h¡drox¡met¡n-2.2-
[0152]
[0153]A una mezcla de (2R,3R,4S,5R)-2-(4-aminopirrol[2,1-f][1,2,4]triazin-7-il)-3,4-dihidroxi-5-(hidroximetil)tetrahidrofurano-2-carbonitrilo (5 g, 17,2 mmol, 1,0 equiv.0 equiv.), 2,2-dimetoxipropano (10,5 mL, 86 mmol, 5,0 equiv.) y acetona (25 mL) a temperatura ambiente se añadió ácido p-tolilsulfónico (3,59 g, 1,1 equiv.). La mezcla se agitó a temperatura ambiente. Después de 30 min, se añadió acetato de isopropilo (25 mL) durante una hora. La suspensión resultante se filtró y se lavó con heptano:acetato de isopropilo 2:1 (25 ml). El producto se secó al vacío a 40 °C. El sólido aislado se añadió a un reactor y se añadieron solución de K<2>CO<3>al 5% (50 ml) y acetato de etilo (50 mL). Las capas se separaron y la capa acuosa se lavó con acetato de etilo (25 ml). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con agua (25 ml) y se concentraron hasta obtener unos 25 ml. El reactor se rellenó con acetato de isopropilo (25 ml) y se concentró hasta unos 25 ml. El reactor se rellenó de nuevo con acetato de isopropilo (25 ml) y se concentró a 25 ml. La solución resultante se sembró, produciendo una pasta espesa. A esto se añadió heptano (25 ml) durante una hora. La suspensión resultante se filtró y se lavó con heptano:acetato de isopropilo 2:1 (25 ml). El producto se secó al vacío a 40 °C. () (2R,3R,4S,5R)-2-(4-aminopirrol[2,1-f][1,2,4]triazin-7-il)-3,4-dihidroxi-5-(hidroximetil)tetrahidrofurano-2-carbonitrilo.<1>H NMR (400 MHz, CD<3>OD) 87.84 (s, 1H), 6.93 (d,J =4.6 Hz, 1H), 6.89 (d,J =4.6 Hz, 1H), 5.40 (d,J =6.7 Hz, 1H), 5.00 (dd,J =6.7, 3.3 Hz, 1H), 4.48 - 4.40 (m, 1H), 3.81 - 3.72 (m, 2H), 1.71 (s, 3H), 1.40 (s, 3H). MS m/z = 332.23 [M+1].
Preparación de 2-(2S)-2-etilbut¡l 2-(((((2R.3S.4R.5R)-5-(4-am¡nop¡rrol[2.1-fl[1.2.41tr¡az¡n-7-¡l)-5-c¡ano-3.4-d¡h¡drox¡tetrah¡drofurano-2-¡l)metox¡)(fenox¡)fosforil)am¡no) propanoato:
[0154]
[0155]Se combinó acetonitrilo (100 mL) con 2-((4-nitrofenoxi)(fenoxi)-amino)propanoato de (2S)-2-etilbutilo (9,6 g, 21,31 mmol), el alcohol de sustrato (6,6 g, 0,02 mol),) cloruro de magnesio ((1,9 g, 19,91 mmol) a temperatura ambiente. La mezcla se agitó durante aproximadamente 15 min y se añadió W,A/-diisopropiletilamina (8,67 mL, 49,78 mmol). Después de aproximadamente 4 h, la reacción se diluyó con acetato de etilo (100 mL), se enfrió a aproximadamente 0 °C y se combinó con solución acuosa de ácido cítrico (5% en peso, 100 mL). La fase orgánica se lavó con solución acuosa de ácido cítrico (5% en peso, 100 mL) y solución acuosa saturada de cloruro amónico (40 mL), solución acuosa de carbonato potásico (10% en peso, 2 x 100 mL) y solución acuosa saturada de salmuera (100 mL). La fase orgánica se secó con sulfato sódico y se concentró a presión reducida para obtener el producto bruto.<1>H NMR (400 MHz, CD<3>OD) 87.86 (s, 1H), 7.31 - 7.22 (m, 2H), 7.17 - 7.09 (m, 3H), 6.93 -6.84 (m, 2H), 5.34 (d,J= 6.7 Hz, 1H), 4.98 (dd,J =6.6, 3.5 Hz, 1H), 4.59 -4.50 (m, 1H), 4.36 -4.22 (m, 2H), 4.02 (dd,J =10.9, 5.7 Hz, 1H), 3.91 (dd,J =10.9, 5.7 Hz, 1H), 3.83 (dq,J =9.7, 7.1 Hz, 1H), 1.70 (s, 3H), 1.50 -1.41 (m, 1H), 1.39 (s, 3H), 1.36 - 1.21 (m, 7H), 0.86 (t,J =7.4 Hz, 6H). MS m/z = 643.21 [M+1].
Preparación___________ de___________2-(((S)-(((2R.3S.4R.5R)-5-(4-am¡nop¡rroir2.1-firi.2.4ltr¡az¡n-7-¡l)-5-c¡ano-3.4-d¡h¡drox¡tetrah¡drofurano-2-¡l)metox¡)(fenox¡)fosfor¡l)amino)propanoato de (S)-2-etilbut¡lo (Compuesto 32)
[0156]
[0157]El acetónido bruto (12,85 g) se combinó con tetrahidrofurano (50 mL) y se concentró a presión reducida. El residuo se recogió en tetrahidrofurano (100 mL), se enfrió a aproximadamente 0 °C y se añadió lentamente HCl concentrado (20 mL). Se dejó que la mezcla se calentara hasta alcanzar la temperatura ambiente. Una vez consumido el acetónido de partida, según indica el análisis por HPLC, se añadió agua (100 mL) seguida de una solución acuosa saturada de bicarbonato sódico (200 mL). La mezcla se extrajo con acetato de etilo (100 mL), la fase orgánica se lavó con solución acuosa saturada de salmuera (50 mL), se secó sobre sulfato sódico y se concentró a presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en columna de gel de sílice utilizando un gradiente de metanol y acetato de etilo (0 a 20%). Las fracciones que contenían producto se concentraron a presión reducida para obtener el producto.
Preparación___________ de___________2-(((S)-(((2R.3S.4R.5R)-5-(4-am¡nop¡rrol[2.1-f1[1.2.4ltr¡az¡n-7-¡l)-5-c¡ano-3.4-d¡h¡drox¡tetrah¡drofurano-2-¡l)metox¡)(fenox¡)fosfor¡l)amino)propanoato de (S)-2-etilbut¡lo (Compuesto 32)
[0158]
[0159]A un vial que contenía 2-(((S)-(((3aR,4R,6R,6aR)-6-(4-aminopirrol[2,1-f][1,2,4]triazin-7-il)-6-ciano-2,2-dimetiltetrahidro[3,4-d][1,3]dioxol-4-il)metoxi)(fenoxi)fosforil)amino)propanoato de (S)-2-etilbutilo (30 mg, 0,05 mmol) se añadió una solución acuosa de ácido fórmico al 80% (1,5 mL).05 mmol) se añadió una solución acuosa de ácido fórmico al 80% (1,5 mL). Tras 18 h a aproximadamente 20 °C se confirmó la conversión completa mediante HPLC y LC-MS. MS (m/z) = 603(M+1)+.
Preparación___________ de___________2-(((S)-(((2R■3S■4R■5R)-5-(4-am¡nop¡rrolf2■1-f1f1■2■4^tr¡az¡n-7-¡l)-5-c¡ano-3■4-d¡h¡drox¡tetrah¡drofurano-2-¡l)metox¡)(fenox¡)fosforil)am¡no)propanoato de (S)-2-etilbut¡lo (Compuesto 32) mediante Acoplamiento Directo.
[0160]
[0161]A una mezcla de (2R,3R,4S,5R)-2-(4-aminopirrol[2,1-f][1,2,4]triazin-7-il)-3,4-dihidroxi-5-(hidroximetil)tetrahidrofurano-2-carbonitrilo (0.5 g, 2 mmol), 2-((S)-(4-nitrofenoxi)(fenoxi)fosforil)amino)propanoato de (S)-2-etilbutilo (0,9 g, 2 mmol), y MgCh (0,2 g, 2 mmol), se cargó N,N-dimetilacetamida (10 mL). La mezcla resultante se calentó a aproximadamente 30 °C con agitación constante. A continuación, se añadió lentamente N,N-diisopropiletilamina (0,7 mL, 4 mmol), y la mezcla de reacción se agitó durante aproximadamente 6 h. Se cargó agua (10 mL) H2O, seguida de 2-MeTHF (10 mL), y se separaron las fases orgánica y acuosa. La capa acuosa se retroextrajo con 2-MeTHF (10 mL). Las capas orgánicas se combinaron y se lavaron con solución de ácido cítrico al 10% en peso (10 mL), seguida de solución de K2CO3 al 10% en peso (10 mL) y H2O (10 mL). Se añadió una pequeña cantidad de salmuera para resolver las emulsiones en el lavado con agua antes de separar las capas. La capa orgánica se evaporó hasta sequedad para obtener 0,65 g de una espuma. A continuación, se añadióÍPrOAc(2,6mL) y la mezcla se calentó a aproximadamente 40 °C para conseguir la disolución. La solución se enfrió a aproximadamente 20 °C y la mezcla se agitó durante aproximadamente 3 días. Los sólidos se aislaron por filtración, y la torta de filtración se lavó con una pequeña cantidad de iPrOAc. Los sólidos se secaron para obtener 2-(((S)-(((2R,3S,4R,5R)-5-(4-aminopirrol[2,1-f][1,2,4]triazin-7-il)-5-ciano-3,4-dihidroxitetrahidrofurano-2-il)metoxi)(fenoxi)fosforil)amino)propanoato de (S)-2-etilbutilo.
[0162]A una mezcla de (2R,3R,4S,5R)-2-(4-aminopirrol[2,1-f][1,2,4]triazin-7-il)-3,4-dihidroxi-5-(hidroximetil)tetrahidrofurano-2-carbonitrilo (0,2 g, 0.7 mmol), 2-((S)-(perfluorofenoxi)(fenoxi)fosforil)amino)propanoato de (S)-2-etilbutilo (0,3 g, 0,7 mmol), y MgCh (0,1 g, 1 mmol), se cargó N,N-dimetilacetamida (4 mL). La mezcla resultante se calentó a aproximadamente 30 °C con agitación constante. A continuación, se añadió lentamente N,N-diisopropiletilamina (0,3 mL, 2 mmol) y la mezcla de reacción se agitó durante 5 h. La conversión al producto se confirmó mediante análisis por UPLC.
Preparación_____ de_____(3R.4R.5R)-2-(4-aminopirrolor2.1-firi.2.41triazin-7-ih-3.4-bis((tercbutildimetilsilihoxi)-5-(((tercbutildimetilsilinoxhmetihtetrahidrofurano-2-ol
[0163]
[0164]Se preparó una solución de 7-iodopirrolo[2,1-f][1,2,4]triazin-4-amina (13,9 g, 53,5 mmol) en THF (280 mL). La solución se enfrió a aproximadamente 0 °C y se añadió TMSCl (13,6 mL, 107 mmol). La mezcla de reacción se agitó durante aproximadamente 20 min y, a continuación, se añadió PhMgCl (2 M en THF; 53,5 mL, 56,8 mmol) mientras se mantenía una temperatura interna inferior a aproximadamente 5 °C. La mezcla de reacción se agitó a aproximadamente 0 °C durante aproximadamente 30 min, y después se enfrió a aproximadamente -20 °C. A continuación, se añadió iPrMgCl-LiCl (1,3 M en THF, 43,1 mL, 56 mmol) mientras se mantenía una temperatura interna inferior a aproximadamente -15 °C. La mezcla de reacción se agitó durante aproximadamente 30 min a aproximadamente -20 °C.
[0165]En un matraz separado, se preparó una solución de (3R,4R,5R)-3,4-bis((terc-butildimetilsilil)oxi)-5-(((tercbutildimetilsilil)oxi)metil)dihidrofurano-2(3H)-ona (25,0 g, 50,9 mmol, 0,83 equiv) en LaCl<3>-2LiCl (0,6 M en THF, 85 mL, 50,9 mmol). A continuación, la solución se transfirió a la solución de Grignard manteniendo una temperatura interna inferior a -20°C. La mezcla de reacción resultante se agitó a aproximadamente -20 °C durante aproximadamente 4 h.
[0166]La reacción se extinguió con HCl 1 M (140 mL) y la mezcla se calentó a temperatura ambiente. Se añadió EtOAc (140 mL) y se separaron las fases orgánica y acuosa. La capa acuosa se extrajo con EtOAc (200 mL). Las capas combinadas de EtOAc se extrajeron secuencialmente con NaHCO<3>acuoso saturado (2 x 200 mL), agua (200 mL) y salmuera (200 mL). La capa orgánica se concentró y se purificó mediante cromatografía en gel de sílice (30% EtOAc/hexano) para obtener (3R,4R,5R)-2-(4-aminopirrolo[2,1-f][1,2,4]triazin-7-il)-3,4-bis((terc-butildimetilsilil)oxi)-5-((((tercbutildimetilsilil)oxi)metil)tetrahidrofurano-2-ol.<1>H NMR (300 MHz, CDCh) 88.15 - 7.88 (m, 1H), 7.51 (d,J =4.8 Hz, 0.5H), 7.02 - 6.92 (m, 0.5H), 6.65 - 6.57 (m, 1H), 5.66 - 5.24 (m, 3H), 4.49 - 3.50 (m, 4H), 0.97 - 0.78 (26H), 0.65 (s, 1.5H), 0.19 -0.00 (m, 15.5H), -0.22 (s, 1H), -0.55 (s, 1H).. MS m/z = 626 (M+H).
Preparación_____ de_____(2R.3R.4R.5R)-2-(4-aminopirroir2.1-firi.2.4ltriazin-7-ih-3.4-bis((terbutildimetilsilihoxi)-5-(hidroximetihtetrahidrofurano-2-carbonitrilo
[0167]
[0168]Una solución de (3R,4R,5R)-2-(4-aminopirrolo[2,1-f][1,2,4]triazin-7-N)-3,4-bis((terbutNdimetNsilN)oxi)-5-(((terbutildimetilsilil)oxi)metM)tetrahidrofurano-2-ol (1,50 g, 2,40 mmol) en CH2Cl2 (15 mL) se enfrió a -40 °C aproximadamente. Se añadió ácido trifluoroacético (0,555 mL, 7,20 mmol) manteniendo la temperatura por debajo de -20°C. En un matraz separado, se añadió trifluorometanosulfonato de trimetilsililo (2,60 mL, 14,4 mmol) a 5 ml de CH2Cl2 (5 mL) a aproximadamente 15 °C, seguido de cianuro de trimetilsililo (1,92 mL, 14,4 mmol), y la solución se enfrió a aproximadamente -30 °C. La solución enfriada se añadió a la solución de (3R,4R,5R)-2-(4-aminopirrol[2,1-f][1,2,4]triazin-7-il)-3,4-bis((terc-butildimetilsilil)oxi)-5-(((terc-butildimetilsil)oxi)metil)tetrahidrofurano-2-ol manteniendo la temperatura por debajo de -25 °C. La mezcla de reacción se agitó durante 15 min a aproximadamente -30 °C. La reacción se extinguió con trietilamina (3,34 mL, 24,0 mmol) y la mezcla se calentó hasta 0 °C aproximadamente. Se añadió agua (50 mL) manteniendo la temperatura por debajo de aproximadamente 20 °C. Una vez completada la adición, la mezcla se agitó durante 15 minutos a temperatura ambiente. Las capas se separaron y la capa orgánica se lavó secuencialmente con KOH (20 mL), agua (20 mL) y salmuera (20 mL). La capa orgánica se secó sobre Na2SO4, se concentró y se purificó mediante cromatografía en gel de sílice (30% EtOAc / hexano) para obtener el producto como una mezcla 3,8:1 de diastereómeros). La mezcla se purificó aún más por HPLC prep. (ACN 0 a 95% en agua) para obtener el producto como un único diastereómero. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 68.14-7.92 (m, 2H), 7.89 (s, 1H), 6.95 (d,J =4.8 Hz, 1H), 6.88 (d,J =4.4 Hz, 1H),5.27 (d, J = 4.6 Hz, 1H), 5.10 (dd, J = 7.7, 4.6 Hz, 1H), 4.31 (dd, J = 4.7, 1.4 Hz, 1H), 4.12 (ddd, J = 5.9, 4.1, 1.4 Hz, 1H), 3.80 - 3.69 (m, 1H), 3.56 (td, J = 7.8, 3.9 Hz, 1H), 0.93 (s, 9H), 0.75 (s, 9H), 0.11 (s, 3H), 0.09 (s, 3H), -0.15 (s, 3H), -0.62 (s, 3H). MS m/z = 520 (M+H).
Preparación de 2-(((SH((2R.3R.4R.5R)-5-(4-am¡nop¡rrolf2.1-flf1.2.4ltr¡az¡n-7-¡n-3.4-b¡s((terc-but¡ld¡met¡ls¡l¡l)oxh-5-cianotetrahidrofurano-2-inmetoxiWfenoxi) fosforihaminofpropanoato de (S)-2-etilbutilo
[0169]
[0170]A una mezcla de (2R,3R,4R,5R)-2-(4-aminopirrol[2,1-f][1,2,4]triazin-7-il)-3,4-bis((terbutildimetilsilil)oxi)-5-(hidroximetil)tetrahidrofurano-2-carbonitrilo (16 mg, 0.03 mmol), 2-((S)-(4-nitrofenoxi)(fenoxi)fosforil)amino)propanoato de (S)-2-etilbutilo (17 mg, 0,04 mmol), y MgCh (4 mg, 0,05 mmol), se cargó THF (0,3 mL). La mezcla resultante se calentó a aproximadamente 50 °C con agitación constante. A continuación, se añadió N,N-diisopropiletilamina (0,013 mL, 0,08 mmol) y la mezcla de reacción se agitó durante 21 h. La conversión al producto se confirmó mediante análisis UPLC y LC-MS. MS m/z = 831 (M+H).
(hidroximetil)tetrahidrofurano-2-carbonitrilo (16 mg, 0,03 mmol) en THF (0,3 mL).3 mL) se enfrió a -10 °C. Se añadió gota a gota tBuMgCl (0,07 mL, 0,07 mmol), seguido de una solución de 2-((S)-(perfluorofenoxi)(fenoxi)fosforil)amino)propanoato de (S)-2-etilbutilo (22 mg, 0,04 mmol) en THF (0,15 mL). La mezcla de reacción se calentó a 5 °C y se agitó durante 16 h. La reacción se extinguió con MeOH, se concentró y se purificó por cromatografía en gel de sílice (EtOAc / hexanos) para obtener el producto. 1H NMR (400 MHz, CDCh) 87.97 (s, 1H), 7.38 - 7.29 (m, 2H), 7.25 - 7.21 (m, 2H), 7.21 - 7.13 (m, 1H), 7.11 (d, J = 4.6 Hz, 1H), 6.65 (d, J = 4.6 Hz, 1H), 5.88 (br s, 2H), 5.35 (d, J = 4.4 Hz, 1H), 4.49 -4.41 (m, 1H), 4.41 -4.35 (m, 1H), 4.32 -4.26 (m, 1H), 4.24 (dd, J = 4.5, 1.7 Hz, 1H), 4.10 -3.99 (m, 2H), 3.96 (dd, J = 10.9, 5.7 Hz, 1H), 3.80 - 3.72 (m, 1H), 1.48 (h, J = 6.2 Hz, 1H), 1.39 - 1.28 (m, 7H), 0.96 (s, 9H), 0.85 (t, J = 7.5 Hz, 6H), 0.80 (s, 9H), 0.08 (s, 3H), 0.07 (s, 3H), -0.13 (s, 3H), -0.56 (s, 3H). 31P NMR (162 MHz, CDCla) 82.74 (s). MS m/z = 831 (M+H).
Preparación___________ de___________2-(((S)-(((2R.3S.4R.5R)-5-(4-am¡nop¡rroir2.1-firi.2.4ltr¡az¡n-7-¡l)-5-c¡ano-3.4-d¡h¡drox¡tetrah¡drofurano-2-¡l)metox¡)(fenox¡)fosfor¡l)am¡no) propanoato de (S)-2-et¡lbut¡lo
[0172]
[0173]Una solución bruta de 2-(((S)-(((2R,3R,4R,5R)-5-(4-aminopirrolo[2,1-f][1,2,4]triazin-7-il)-3.(4-bis((fercbutildimetilsilil)oxi)-5-cianotetrahidrofurano-2-il)metoxi(fenoxi)fosforil)amino)amino)propanoato de (S)-2-etilbutilo se enfrió a aproximadamente 0 °C y se añadió HCl conc. (0.05 mL, 0,62 mmol). La mezcla de reacción se agitó durante aproximadamente 72 horas a aproximadamente 20 °C. La conversión al producto se confirmó mediante análisis UPLC y LC-MS. MS m/z = 603 (M+H).
[0174]Una solución de 2-(((S)-(((2R,3R,4R,5R)-5-(4-aminopirrolo[2,1-f][1,2,4]triazin-7-il)-3-bis((terc-butildimetilsilil)oxi)-5-cianotetrahidrofurano-2-il)metoxi(fenoxi)fosforil)amino)amino,4-bis((terc-butildimetilsilil)oxi)-5-cianotetrahidrofurano-2-il)metoxi)(fenoxi)fosforil)amino)propanoato de (S)-2-etilbutilo en un fluoruro o ácido puede desproteger a una solución de 2-(((S)-(((2R,3S,4R,5R)-5-(4-aminopirrol[2,1-f][1,2,4]triazin-7-il)-5-ciano-3,4-dihidroxitetrahidrofurano-2-il)metoxi)(fenoxi)fosforil)amino)propanoato de (S)-2-etilbutilo. Los fluoruros representativos incluyen, entre otros, TBAF, KF, hidrofluoruro de piridinio, hidrofluoruro de trietilamonio, fluoruro de hidrógeno, ácido clorhídrico, ácido toluenosulfónico o cualquier otra fuente de fluoruro adecuada. Los ácidos representativos incluyen, entre otros, los que se encuentran en Greene, T. W.; Wuts, P. G. M. Protective Groups In Organic Synthesis, 4a edición, John Wiley & Sons: Nueva York, 2006.
Ejemplo 35-a. ((((2R.3S.4R.5R)-5-(4-am¡nop¡rrolf2.1-flf1.2.4ltr¡az¡n-7-¡n-5-c¡ano-3.4-d¡h¡drox¡tetrah¡drofurano-2-¡l)metox¡)ox¡dofosfor¡l)alan¡nato (Compuesto 35).
[0175]
[0176]Se disolvió ((S)-(((2R,3S,4R,5R)-5-(4-aminopirrol[2,1-f][1,2,4]triazin-7-il)-5-ciano-3,4-dihidroxitetrahidrofurano-2il)metoxi)(fenoxi)fosforil)-L-alaninato de 2-etilbutilo (130 mg, 0,216 mmol) en una mezcla de acetonitrilo (6 mL) y agua (2 mL).216 mmol) se disolvió en una mezcla de acetonitrilo (6 mL) y agua (2 mL). Se añadió gota a gota solución acuosa de hidróxido sódico (2N, 0,5 mL) durante 5 min a rt y se agitó la mezcla de reacción. Tras 2 h, la mezcla resultante se concentró a presión reducida y el residuo se purificó por HPLC en una columna C18 eluyendo con agua para obtener el producto deseado como sal bisódica. 1H NMR (400 MHz, D2O) 87.79 (s, 1H), 6.86 (d,J =4.7 Hz, 1H), 6.80 (d,J= 4.7 Hz, 1H), 4.86 (d,J= 5.4 Hz, 1H), 4.40 -4.34 (m, 1H), 4.30 (dd,J= 5.3, 3.0 Hz, 1H), 3.75 (qdd,J =11.6, 4.5, 3.1 Hz, 2H), 3.20 (dq,J= 8.6, 7.1 Hz, 1H), 0.86 (d,J =7.0 Hz, 3H). 31P NMR (162 MHz, D2O) 8 7.30. LCMS m/z 442.95 [M+H]. HPLC (gradiente 2-98% MeCN-H2O con modificador 0,1% TFA durante 8,5 min, 1,5mL/min, Columna: Phenomenex Kinetex C18, 2,6 um 100 Á, 4,6 x 100 mm)tR= 2,694 min.
B. Actividad Antivírica
[0177]Otro aspecto de la invención se refiere a métodos de inhibición de infecciones por el virus Nipah, que comprenden el paso de tratar a un sujeto sospechoso de necesitar dicha inhibición con una composición de la invención.
[0178]En el contexto de la divulgación, las muestras sospechosas de contener un virus incluyen materiales naturales o artificiales, como organismos vivos; cultivos de tejidos o células; muestras biológicas, como muestras de material biológico (sangre, suero, orina, líquido cefalorraquídeo, lágrimas, esputo, saliva, muestras de tejidos y similares); muestras de laboratorio; muestras de alimentos, agua o aire; muestras de bioproductos, como extractos de células, en particular células recombinantes que sintetizan una glicoproteína deseada; y similares. Normalmente, se sospechará que la muestra contiene un organismo que induce una infección vírica, con frecuencia un organismo patógeno como un virus tumoral. Las muestras pueden estar contenidas en cualquier medio, incluyendo agua y mezclas de disolventes orgánicos. Las muestras incluyen organismos vivos, como los seres humanos, y materiales artificiales, como cultivos celulares.
[0179]Si se desea, la actividad antivirus de un compuesto de la invención tras la aplicación de la composición puede observarse por cualquier método, incluidos métodos directos e indirectos de detección de dicha actividad. Se contemplan métodos cuantitativos, cualitativos y semicuantitativos para determinar dicha actividad. Típicamente se aplica uno de los métodos de cribado descritos anteriormente, sin embargo, cualquier otro método como la observación de las propiedades fisiológicas de un organismo vivo también son aplicables.
[0180]La actividad antiviral de un compuesto de la invención puede medirse utilizando protocolos de cribado estándar conocidos. Por ejemplo, la actividad antiviral de un compuesto puede medirse utilizando los siguientes protocolos generales.
Ejemplo 36: Ensayos de actividad antiviral y citotoxicidad del virus del Ébola
[0181]La actividad antiviral del Compuesto 1 y del Compuesto 9 se midió frente al virus del Ébola (EBOV), el virus de Marburgo (MARV) (Tabla 2) y el virus Nipah (NiV) (Tabla 3) utilizando virus informadores de replicación completa que expresaban luciferasa o proteína verde fluorescente (GFP) (Uebelhoer, L.S., 2014. AVR; Hoenen, T., 2013. AVR). Se midió además la actividad antivírica del Compuesto 1 y del Compuesto 9 contra el virus del Ébola (EBOV) y el virus de Marburgo (MARV) (Tabla 2-a), utilizando virus informadores de replicación completa que expresan luciferasa o proteína verde fluorescente (GFP) (Uebelhoer, L.S., 2014. AVR; Hoenen, T., 2013. AVR). Todos los estudios se llevaron a cabo en un confinamiento de bioseguridad de nivel 4 (BSL-4) en los Centros para el Control y la Prevención de Enfermedades (CDC). Se realizaron ensayos antivirales del virus del Ébola en células endoteliales microvasculares humanas primarias inmortalizadas con la proteína catalítica de la telomerasa (HMVEC-TERT) y en células Huh-7 (Shao, R., 2004, BBRC). La actividad antiviral del virus Nipah se midió en células HMVEC-TERT y Hela.
[0182]Los ensayos antivirales se realizaron en placas de 96 pocillos. Se diluyeron de ocho a diez concentraciones de compuesto en incrementos de dilución en serie de 3 veces en medio y se transfirieron 100 uL/pocillo de cada dilución por triplicado a placas que contenían monocapas celulares presembradas. Las placas se transfirieron al confinamiento BSL-4 y se añadió la dilución apropiada de caldo de virus, determinada previamente por titulación y preparada en medio de cultivo celular, a las placas de ensayo que contenían células y compuestos diluidos en serie. Cada placa incluía tres pocillos de células infectadas no tratadas y tres pocillos de células no infectadas que sirvieron como control de inhibición del virus al 0% y al 100%, respectivamente. Tras la infección, las placas de ensayo se incubaron durante 3 o 4 días en una incubadora de cultivo de tejidos. Tras la incubación, la replicación del virus se midió en un lector de placas Envision mediante fluorescencia directa para los virus informadores de GFP o tras la adición posterior de sustrato de luciferasa para los virus informadores de luciferasa. Para los ensayos de rendimiento viral, se extrajo el medio de las células infectadas y se utilizó una porción para cuantificar el ARN viral mediante la reacción en cadena de la polimerasa cuantitativa con transcripción inversa (RT-qPCR). Los medios restantes se diluyeron en serie y la cantidad de virus infeccioso se midió utilizando los medios diluidos para infectar monocapas de células frescas y determinar la dosis infecciosa de cultivo tisular que causaba el 50% de efectos citopáticos (TCID50) utilizando el reactivo Cell TiterGlo (Promega, Madison, WI). Para los ensayos de efecto citopático (ECP) del virus, se midió la viabilidad de las células infectadas utilizando el reactivo Cell TiterGlo.
[0183]Se calculó el porcentaje de inhibición para cada concentración probada en relación con los controles de inhibición al 0% y al 100% y se determinó el valor EC<50>para cada compuesto mediante regresión no lineal como la concentración efectiva de compuesto que inhibía la replicación del virus en un 50%.
Ejemplo Referencia 37. Células HMVEC-TERT EBOV-GFP
[0184]Las células HMVEC-TERT se sembraron en placas de 96 pocillos. Se diluyeron de ocho a diez concentraciones de compuesto en incrementos de dilución en serie de 3 veces en medio y se transfirieron 100 uL/pocillo de cada dilución por triplicado a placas de 96 pocillos que contenían monocapas HMVEC-TERT presembradas. Las placas se transfirieron al confinamiento BSL-4 y se añadió la dilución apropiada de caldo de virus EBOV-GFP, determinada previamente por titulación y preparada en medios de cultivo celular, a las placas de ensayo que contenían células y compuestos diluidos en serie. Cada placa incluía tres pocillos de células infectadas no tratadas y tres pocillos de células no infectadas que sirvieron como control de inhibición del virus al 0% y al 100%, respectivamente. Tras la infección, las placas de ensayo se incubaron durante 3 o 4 días en una incubadora de cultivo de tejidos. Tras la incubación, se midió la replicación del virus en un lector de placas Envision mediante fluorescencia directa para medir la expresión de GFP del virus informador. Se calculó el porcentaje de inhibición para cada concentración probada en relación con los controles de inhibición al 0% y al 100% y se determinó el valor EC<50>para cada compuesto mediante regresión no lineal como la concentración efectiva de compuesto que inhibía la replicación del virus en un 50%.
Ejemplo Referencia 38. Células Huh-7 EBOV-GFP
[0185]Se sembraron células Huh-7 en placas de 96 pocillos. Se diluyeron de ocho a diez concentraciones de compuesto en incrementos de dilución en serie de 3 veces en medio y se transfirieron 100 uL/pocillo de cada dilución por triplicado a placas de 96 pocillos que contenían monocapas Huh-7 presembradas. Las placas se transfirieron al confinamiento BSL-4 y se añadió la dilución apropiada de caldo de virus EBOV-GFP, determinada previamente por titulación y preparada en medios de cultivo celular, a las placas de ensayo que contenían células y compuestos diluidos en serie. Cada placa incluía tres pocillos de células infectadas no tratadas y tres pocillos de células no infectadas que sirvieron como control de inhibición del virus al 0% y al 100%, respectivamente. Tras la infección, las placas de ensayo se incubaron durante 3 o 4 días en una incubadora de cultivo de tejidos. Tras la incubación, se midió la replicación del virus en un lector de placas Envision mediante fluorescencia directa para medir la expresión de GFP del virus informador. Se calculó el porcentaje de inhibición para cada concentración probada en relación con los controles de inhibición al 0% y al 100% y se determinó el valor EC<50>para cada compuesto mediante regresión no lineal como la concentración efectiva de compuesto que inhibía la replicación del virus en un 50%.
Ejemplo Referencia 39. Células Huh-7 EBOV-Luc
[0186]Se sembraron células Huh-7 en placas de 96 pocillos. Se diluyeron de ocho a diez concentraciones de compuesto en incrementos de dilución en serie de 3 veces en medio y se transfirieron 100 uL/pocillo de cada dilución por triplicado a placas que contenían monocapas celulares presembradas. Las placas se transfirieron al confinamiento BSL-4 y la dilución apropiada de la cepa del virus EBOV-Luc, previamente determinada por titulación y preparada en medios de cultivo celular, se añadió a las placas de ensayo que contenían células y compuestos diluidos en serie. Cada placa incluía tres pocillos de células infectadas no tratadas y tres pocillos de células no infectadas que sirvieron como control de inhibición del virus al 0% y al 100%, respectivamente. Tras la infección, las placas de ensayo se incubaron durante 3 o 4 días en una incubadora de cultivo de tejidos. Tras la incubación, se midió la replicación del virus en un lector de placas Envision tras la posterior adición de sustrato de luciferasa. Se calculó el porcentaje de inhibición para cada concentración probada en relación con los controles de inhibición al 0% y al 100% y se determinó el valor ec50 para cada compuesto mediante regresión no lineal como la concentración efectiva de compuesto que inhibía la replicación del virus en un 50%.
Ejemplo Referencia 40. Células MARV-GFP Huh-7
[0187]Se sembraron células Huh-7 en placas de 96 pocillos. Se diluyeron de ocho a diez concentraciones de compuesto en incrementos de dilución en serie de 3 veces en medio y se transfirieron 100 uL/pocillo de cada dilución por triplicado a placas de 96 pocillos que contenían monocapas Huh-7 presembradas. Las placas se transfirieron al confinamiento BSL-4 y se añadió la dilución apropiada de caldo de virus MARV-GFP, determinada previamente por titulación y preparada en medios de cultivo celular, a las placas de ensayo que contenían células y compuestos diluidos en serie. Cada placa incluía tres pocillos de células infectadas no tratadas y tres pocillos de células no infectadas que sirvieron como control de inhibición del virus al 0% y al 100%, respectivamente. Tras la infección, las placas de ensayo se incubaron durante 3 o 4 días en una incubadora de cultivo de tejidos. Tras la incubación, se midió la replicación del virus en un lector de placas Envision mediante fluorescencia directa para medir la expresión de GFP del virus informador. Se calculó el porcentaje de inhibición para cada concentración probada en relación con los controles de inhibición al 0% y al 100% y se determinó el valor EC<50>para cada compuesto mediante regresión no lineal como la concentración efectiva de compuesto que inhibía la replicación del virus en un 50%.
Ejemplo Referencia 41. Ébola Huh-7 (ARN)
[0188]Se sembraron células Huh-7 en placas de 96 pocillos. Se diluyeron de ocho a diez concentraciones de compuesto en incrementos de dilución en serie de 3 veces en medio y se transfirieron 100 uL/pocillo de cada dilución por triplicado a placas que contenían monocapas celulares Huh-7 presembradas. Las placas se transfirieron al confinamiento BSL-4 y la dilución apropiada de la cepa de virus EBOV, determinada previamente por titulación y preparada en medios de cultivo celular, se añadió a las placas de ensayo que contenían células y compuestos diluidos en serie. Cada placa incluía tres pocillos de células infectadas no tratadas y tres pocillos de células no infectadas que sirvieron como control de inhibición del virus al 0% y al 100%, respectivamente. Tras la infección, las placas de ensayo se incubaron durante 3 o 4 días en una incubadora de cultivo de tejidos. Tras la incubación, se extrajo el medio de las células infectadas y se utilizó una porción para cuantificar el ARN viral mediante la reacción en cadena de la polimerasa cuantitativa con transcripción inversa (RT-qPCR). Se calculó el porcentaje de inhibición para cada concentración probada en relación con los controles de inhibición al 0% y al 100% y se determinó el valor EC<50>para cada compuesto mediante regresión no lineal como la concentración efectiva de compuesto que inhibía la replicación del virus en un 50%.
Ejemplo Referencia 42. Ébola Huh-7 (Rendimiento)
[0189]Se sembraron células Huh-7 en placas de 96 pocillos. Se diluyeron de ocho a diez concentraciones de compuesto en incrementos de dilución en serie de 3 veces en medio y se transfirieron 100 uL/pocillo de cada dilución por triplicado a placas que contenían monocapas celulares Huh-7 presembradas. Las placas se transfirieron al confinamiento BSL-4 y la dilución apropiada de la cepa de virus EBOV, determinada previamente por titulación y preparada en medios de cultivo celular, se añadió a las placas de ensayo que contenían células y compuestos diluidos en serie. Cada placa incluía tres pocillos de células infectadas no tratadas y tres pocillos de células no infectadas que sirvieron como control de inhibición del virus al 0% y al 100%, respectivamente. Tras la infección, las placas de ensayo se incubaron durante 3 o 4 días en una incubadora de cultivo de tejidos. Tras la incubación, se retiró el medio de las células infectadas y se diluyó en diluciones seriadas de 10 veces. La cantidad de virus infeccioso se midió utilizando los medios diluidos para infectar monocapas de células frescas y determinar la dosis infecciosa de cultivo tisular que causaba un 50% de efectos citopáticos (TCID50) utilizando el reactivo Cell TiterGlo (Promega, Madison, WI). Se calculó el porcentaje de inhibición para cada concentración probada en relación con los controles de inhibición al 0% y al 100% y se determinó el valor EC<50>para cada compuesto mediante regresión no lineal como la concentración efectiva de compuesto que inhibía la replicación del virus en un 50%.
Ejemplo Referencia 43. Células Ebola HeLa
[0190]La actividad antiviral de los compuestos seleccionados se midió frente a la cepa Zaire del ebolavirus (EBOV) en condiciones de contención de bioseguridad de nivel 4 (BSL-4) en el Instituto de Investigación Médica para Enfermedades Infecciosas del Ejército de los Estados Unidos (USAMRIID). Las células Hela se sembraron en placas de 384 pocillos a 5000 células / pocillo. La actividad antivírica de cada compuesto se midió por cuadruplicado. Se añadieron de ocho a diez concentraciones de compuesto directamente a los cultivos celulares utilizando el dispensador digital HP300 en incrementos de dilución en serie de 3 veces 2h antes de la infección. Las placas se transfirieron al confinamiento BSL-4 y se añadió la dilución apropiada de caldo de virus, determinada previamente por titulación y preparada en medio de cultivo celular, a las placas de ensayo que contenían células y compuestos diluidos en serie. Cada placa incluía tres pocilios de células infectadas no tratadas y tres pocilios de células no infectadas que sirvieron como control de inhibición del virus al 0% y al 100%, respectivamente. Tras la infección, las placas de ensayo se incubaron durante 2 días en un incubador de cultivo de tejidos. Tras la incubación, las células se fijaron en solución de formol y la replicación del virus se midió cuantificando los niveles de glicoproteína del Ébola tras inmunotinción e imágenes de alto contenido utilizando el instrumento de microscopía confocal Perkin Elmer Opera. Se calculó el porcentaje de inhibición para cada concentración probada en relación con los controles de inhibición al 0% y al 100% y se determinó el valor EC<50>para cada compuesto mediante regresión no lineal como la concentración efectiva de compuesto que inhibía la replicación del virus en un 50%.
Ejemplo Referencia 44. Cultivos de Macrófagos del Ébola
[0191]La actividad antiviral de los compuestos seleccionados se midió frente a la cepa Zaire del ebolavirus (EBOV) realizada en contención de nivel de bioseguridad 4 (BSL-4) en el Instituto de Investigación Médica para Enfermedades Infecciosas del Ejército de los Estados Unidos (USAMRIID). Se aislaron cultivos de macrófagos a partir de PBMC humanas frescas y se diferenciaron en presencia de 5ng/ml de GM-CSF y 50uM de B-mercaptoetanol. El medio se cambió cada 2 días y las células que se adhirieron a la placa de cultivo tisular después de 7 días se eliminaron con EDTA 0,5M en 1x PBS, se concentraron por centrifugación a 200 x g durante 10 minutos y se sembraron en placas de ensayo de 384 pocillos a 40.000 células / pocillo. La actividad antivírica de cada compuesto se midió por cuadruplicado. Se añadieron de ocho a diez concentraciones de compuesto directamente a los cultivos celulares utilizando el dispensador digital HP300 en incrementos de dilución en serie de 3 veces 2h antes de la infección. Las placas se transfirieron al confinamiento BSL-4 y se añadió la dilución apropiada de caldo de virus, determinada previamente por titulación y preparada en medio de cultivo celular, a las placas de ensayo que contenían células y compuestos diluidos en serie. Cada placa incluía tres pocillos de células infectadas no tratadas y tres pocillos de células no infectadas que sirvieron como control de inhibición del virus al 0% y al 100%, respectivamente. Tras la infección, las placas de ensayo se incubaron durante 2 días en un incubador de cultivo de tejidos. Tras la incubación, las células se fijaron en solución de formol y la replicación del virus se midió cuantificando los niveles de glicoproteína del Ébola tras inmunotinción e imágenes de alto contenido utilizando el instrumento de microscopía confocal Perkin Elmer Opera. Se calculó el porcentaje de inhibición para cada concentración probada en relación con los controles de inhibición al 0% y al 100% y se determinó el valor EC<50>para cada compuesto mediante regresión no lineal como la concentración efectiva de compuesto que inhibía la replicación del virus en un 50%.
Ejemplo 45: Células Nipah-GFP HMVEC-TERT
[0192]Las células HMVEC-TERT se sembraron en placas de 96 pocillos. Se diluyeron de ocho a diez concentraciones de compuesto en incrementos de dilución en serie de 3 veces en medio y se transfirieron 100 uL/pocillo de cada dilución por triplicado a placas de 96 pocillos que contenían monocapas HMVEC-TERT presembradas. Las placas se transfirieron al confinamiento BSL-4 y se añadió la dilución apropiada de stock de virus NiV-GFP, previamente determinada por titulación y preparada en medio de cultivo celular, a las placas de ensayo que contenían células y compuestos diluidos en serie. Cada placa incluía tres pocillos de células infectadas no tratadas y tres pocillos de células no infectadas que sirvieron como control de inhibición del virus al 0% y al 100%, respectivamente. Tras la infección, las placas de ensayo se incubaron durante 3 o 4 días en una incubadora de cultivo de tejidos. Tras la incubación, se midió la replicación del virus en un lector de placas Envision mediante fluorescencia directa para medir la expresión de GFP del virus informador. Se calculó el porcentaje de inhibición para cada concentración probada en relación con los controles de inhibición al 0% y al 100% y se determinó el valor EC<50>para cada compuesto mediante regresión no lineal como la concentración efectiva de compuesto que inhibía la replicación del virus en un 50%.
Ejemplo 46: NiV-Luc HMVEC-TERT
[0193]Las células HMVEC-TERT se sembraron en placas de 96 pocillos. Se diluyeron de ocho a diez concentraciones de compuesto en incrementos de dilución en serie de 3 veces en medio y se transfirieron 100 uL/pocillo de cada dilución por triplicado a placas que contenían monocapas celulares presembradas. Las placas se transfirieron al confinamiento BSL-4 y la dilución apropiada de la cepa del virus Niv-Luc, previamente determinada por titulación y preparada en medios de cultivo celular, se añadió a las placas de ensayo que contenían células y compuestos diluidos en serie. Cada placa incluía tres pocillos de células infectadas no tratadas y tres pocillos de células no infectadas que sirvieron como control de inhibición del virus al 0% y al 100%, respectivamente. Tras la infección, las placas de ensayo se incubaron durante 3 o 4 días en una incubadora de cultivo de tejidos. Tras la incubación, se midió la replicación del virus en un lector de placas Envision tras la posterior adición de sustrato de luciferasa. Se calculó el porcentaje de inhibición para cada concentración probada en relación con los controles de inhibición al 0% y al 100% y se determinó el valor EC<50>para cada compuesto mediante regresión no lineal como la concentración efectiva de compuesto que inhibía la replicación del virus en un 50%.
Ejemplo 47: NiV Hela (Rendimiento)
[0194]Se sembraron células Hela en placas de 96 pocillos. Se diluyeron de ocho a diez concentraciones de compuesto en incrementos de dilución en serie de 3 veces en medio y se transfirieron 100 uL/pocillo de cada dilución por triplicado a placas que contenían monocapas de células Hela presembradas. Las placas se transfirieron al confinamiento BSL-4 y la dilución apropiada del stock de virus Niv, determinada previamente por titulación y preparada en medios de cultivo celular, se añadió a las placas de ensayo que contenían células y compuestos diluidos en serie. Cada placa incluía tres pocillos de células infectadas no tratadas y tres pocillos de células no infectadas que sirvieron como control de inhibición del virus al 0% y al 100%, respectivamente. Tras la infección, las placas de ensayo se incubaron durante 4 días en un incubador de cultivo de tejidos. Tras la incubación, se retiró el medio de las células infectadas y se diluyó en diluciones seriadas de 10 veces. La cantidad de virus infeccioso se midió utilizando los medios diluidos para infectar monocapas de células frescas y determinar la dosis infecciosa de cultivo tisular que causaba un 50% de efectos citopáticos (TCID50) utilizando el reactivo Cell TiterGlo (Promega, Madison, WI). Se calculó el porcentaje de inhibición para cada concentración probada en relación con los controles de inhibición al 0% y al 100% y se determinó el valor EC<50>para cada compuesto mediante regresión no lineal como la concentración efectiva de compuesto que inhibía la replicación del virus en un 50%.
Ejemplo 48: Niv Hela (ARN)
[0195]Se sembraron células Huh-7 en placas de 96 pocillos. Se diluyeron de ocho a diez concentraciones de compuesto en incrementos de dilución en serie de 3 veces en medio y se transfirieron 100 uL/pocillo de cada dilución por triplicado a placas que contenían monocapas de células Hela presembradas. Las placas se transfirieron al confinamiento BSL-4 y la dilución apropiada del stock de virus Niv, determinada previamente por titulación y preparada en medios de cultivo celular, se añadió a las placas de ensayo que contenían células y compuestos diluidos en serie. Cada placa incluía tres pocillos de células infectadas no tratadas y tres pocillos de células no infectadas que sirvieron como control de inhibición del virus al 0% y al 100%, respectivamente. Tras la infección, las placas de ensayo se incubaron durante 3 o 4 días en una incubadora de cultivo de tejidos. Tras la incubación, se extrajo el medio de las células infectadas y se utilizó una porción para cuantificar el ARN viral mediante la reacción en cadena de la polimerasa cuantitativa con transcripción inversa (RT-qPCR). Se calculó el porcentaje de inhibición para cada concentración probada en relación con los controles de inhibición al 0% y al 100% y se determinó el valor EC<50>para cada compuesto mediante regresión no lineal como la concentración efectiva de compuesto que inhibía la replicación del virus en un 50%.
Tabla 2: Ensayos antivirales de los virus Ébola y Marburgo
continuación
Tabla 3: Ensayos antivirales de los virus Nipah y Hendra
[0196]La invención se ha descrito con referencia a varias realizaciones y técnicas específicas y preferidas. Sin embargo, un experto en la materia comprenderá que pueden realizarse muchas variaciones y modificaciones, siempre que estén incluidas en la reivindicación adjunta.

Claims (1)

  1. REIVINDICACIONES 1. Un compuesto de fórmula:
    o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, para su uso en el tratamiento de una infección por el virus Nipah en un ser humano que lo necesite.
ES20152978T 2014-10-29 2015-10-29 A remdesivir compound for use in treating nipah virus infections Active ES3026734T3 (en)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US201462072331P 2014-10-29 2014-10-29
US201562105619P 2015-01-20 2015-01-20

Publications (1)

Publication Number Publication Date
ES3026734T3 true ES3026734T3 (en) 2025-06-12

Family

ID=54557474

Family Applications (5)

Application Number Title Priority Date Filing Date
ES21209687T Active ES3020561T3 (en) 2014-10-29 2015-10-29 Methods for the preparation of ribosides
ES18167340T Active ES2785034T3 (es) 2014-10-29 2015-10-29 Métodos para el tratamiento de infecciones de virus de filoviridae
ES15797205.0T Active ES2674806T3 (es) 2014-10-29 2015-10-29 Métodos para el tratamiento de infecciones del virus filoviridae
ES20152978T Active ES3026734T3 (en) 2014-10-29 2015-10-29 A remdesivir compound for use in treating nipah virus infections
ES15801008T Active ES2904298T3 (es) 2014-10-29 2015-10-29 Métodos para la preparación de ribósidos

Family Applications Before (3)

Application Number Title Priority Date Filing Date
ES21209687T Active ES3020561T3 (en) 2014-10-29 2015-10-29 Methods for the preparation of ribosides
ES18167340T Active ES2785034T3 (es) 2014-10-29 2015-10-29 Métodos para el tratamiento de infecciones de virus de filoviridae
ES15797205.0T Active ES2674806T3 (es) 2014-10-29 2015-10-29 Métodos para el tratamiento de infecciones del virus filoviridae

Family Applications After (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
ES15801008T Active ES2904298T3 (es) 2014-10-29 2015-10-29 Métodos para la preparación de ribósidos

Country Status (45)

Country Link
US (8) US9724360B2 (es)
EP (7) EP3366295B1 (es)
JP (9) JP6220484B1 (es)
KR (6) KR102337664B1 (es)
CN (6) CN113549120B (es)
AR (2) AR102468A1 (es)
AU (8) AU2015339223B2 (es)
BR (2) BR102015027413A2 (es)
CA (4) CA2963832C (es)
CL (2) CL2017001040A1 (es)
CO (1) CO2017003960A2 (es)
CR (2) CR20170165A (es)
CU (2) CU20170145A7 (es)
CY (2) CY1120893T1 (es)
DK (2) DK3212174T3 (es)
DO (1) DOP2017000103A (es)
EA (2) EA032239B1 (es)
EC (2) ECSP17025261A (es)
ES (5) ES3020561T3 (es)
HR (1) HRP20181130T1 (es)
HU (2) HUE049192T2 (es)
IL (2) IL251560A0 (es)
LT (2) LT3366295T (es)
MA (3) MA52506A (es)
MD (1) MD20170046A2 (es)
ME (1) ME03070B (es)
MX (3) MX378299B (es)
MY (1) MY195823A (es)
NZ (3) NZ745328A (es)
PE (2) PE20171439A1 (es)
PH (2) PH12017500631B1 (es)
PL (5) PL3212175T3 (es)
PT (4) PT3695844T (es)
RS (1) RS57425B1 (es)
SA (1) SA517381419B1 (es)
SG (3) SG11201702903TA (es)
SI (4) SI3366295T1 (es)
SM (1) SMT201800381T1 (es)
SV (2) SV2017005424A (es)
TR (1) TR201809518T4 (es)
TW (4) TWI698444B (es)
UA (1) UA121485C2 (es)
UY (2) UY36376A (es)
WO (3) WO2016069825A1 (es)
ZA (1) ZA201800414B (es)

Families Citing this family (128)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
NZ599404A (en) 2009-09-21 2014-02-28 Gilead Sciences Inc Processes and intermediates for the preparation of 1’-substituted carba-nucleoside analogs
PT2595980E (pt) 2010-07-22 2014-11-27 Gilead Sciences Inc Métodos e compostos para tratar infeções pelo vírus da família paramyxoviridae
TWI698444B (zh) 2014-10-29 2020-07-11 美商基利科學股份有限公司 製備核糖苷的方法
DK3349758T3 (da) 2015-09-16 2022-06-13 Gilead Sciences Inc Fremgangsmåder til behandling af arenaviridae-virusinfektioner
WO2018089306A1 (en) * 2016-11-10 2018-05-17 Oyagen, Inc. Methods of treating and inhibiting ebola virus infection
CA3043437A1 (en) * 2016-11-18 2018-05-24 Neurovive Pharmaceutical Ab Liver prodrugs of mitochondrial proton ionophores
CN110869028B (zh) 2017-03-14 2023-01-20 吉利德科学公司 治疗猫冠状病毒感染的方法
JP6923112B2 (ja) * 2017-03-31 2021-08-18 国立大学法人北海道大学 フィロウイルスの細胞侵入阻害活性を有するビアリールスルフォンアミド誘導体
EP4219513A1 (en) * 2017-05-01 2023-08-02 Gilead Sciences, Inc. Crystalline form of (s)-2-ethylbutyl 2-(((s)-(((2r,3s,4r,5r)-5-(4-aminopyrrolo[2,1-f] [1,2,4]triazin-7-yl)-5-cyano-3,4-dihydroxytetrahydrofuran2-yl)methoxy)(phenoxy) phosphoryl)amino)propanoate
CN111093627B (zh) 2017-07-11 2024-03-08 吉利德科学公司 用于治疗病毒感染的包含rna聚合酶抑制剂和环糊精的组合物
WO2019053696A1 (en) 2017-09-18 2019-03-21 Alios Biopharma, Inc. SUBSTITUTED NUCLEOSIDES, NUCLEOTIDES AND ANALOGS THEREOF
CN109535200A (zh) * 2017-09-21 2019-03-29 杭州和正医药有限公司 一种核苷类似物的磷酰胺酯前药、药物组合物及其应用
CN109748943A (zh) * 2017-11-03 2019-05-14 中国科学院上海药物研究所 2’-c-甲基取代核苷类化合物及其制备与用途
CN109748944B (zh) * 2017-11-03 2021-12-10 中国科学院上海药物研究所 5’-脱氧-5’-异丙基取代氨基核苷类化合物、其制备方法和用途
CN110330540A (zh) * 2019-08-08 2019-10-15 木天(济南)生物科技有限公司 核苷盐及其制备方法
CN110613726B (zh) * 2019-09-25 2020-10-16 广州六顺生物科技股份有限公司 核苷化合物的应用
WO2021095091A1 (ja) * 2019-11-11 2021-05-20 藤本化学製品株式会社 アミノアリール誘導体及びその中間体、並びにそれらの製造方法
CN110776512A (zh) * 2019-11-28 2020-02-11 成都傲飞生物化学品有限责任公司 一种核苷类似物的制备方法
KR20220132608A (ko) 2020-01-27 2022-09-30 길리애드 사이언시즈, 인코포레이티드 SARS CoV-2 감염증을 치료하기 위한 방법
WO2021158248A1 (en) 2020-02-04 2021-08-12 Oyagen, Inc. Method for treating coronavirus infections
CN113214263B (zh) * 2020-02-06 2022-09-30 北京桦冠医药科技有限公司 瑞德西韦关键中间体的一种合成方法
US20210244705A1 (en) * 2020-02-07 2021-08-12 Centre For Digestive Diseases Therapeutic compositions, products of manufacture and methods for ameliorating or preventing coronavirus infection
CN111205327B (zh) * 2020-02-17 2022-05-31 南京法恩化学有限公司 一种瑞德西韦的制备方法
TWI791193B (zh) * 2020-02-18 2023-02-01 美商基利科學股份有限公司 抗病毒化合物
TWI794742B (zh) 2020-02-18 2023-03-01 美商基利科學股份有限公司 抗病毒化合物
KR20250133471A (ko) 2020-02-18 2025-09-05 길리애드 사이언시즈, 인코포레이티드 항바이러스 화합물
TWI775313B (zh) * 2020-02-18 2022-08-21 美商基利科學股份有限公司 抗病毒化合物
CN113292565B (zh) * 2020-02-24 2023-01-31 浙江森科建设有限公司 核苷类化合物及其制备方法和应用
CN111205294B (zh) * 2020-02-27 2021-10-01 江苏阿尔法药业股份有限公司 一种瑞德西韦中间体的制备方法
CN111187269A (zh) * 2020-02-27 2020-05-22 江苏阿尔法药业有限公司 一种瑞德西韦中间体的合成方法
CN111171078B (zh) * 2020-02-27 2022-04-22 江苏阿尔法药业股份有限公司 一种瑞德西韦的合成方法
WO2021175296A1 (zh) * 2020-03-04 2021-09-10 中国科学院上海药物研究所 瑞德西韦的中间体及其制备方法
CN111233930B (zh) * 2020-03-04 2022-05-13 江苏阿尔法药业股份有限公司 一种瑞德西韦的制备方法
CN111269248A (zh) * 2020-03-05 2020-06-12 江苏福瑞康泰药业有限公司 一种核苷氨基磷酸酯类药物母液回收的新方法
CN111269263A (zh) * 2020-03-09 2020-06-12 上海龙翔生物医药开发有限公司 一种瑞德西韦侧链中间体及其制备方法
CN113387954B (zh) * 2020-03-11 2024-03-19 上海特化医药科技有限公司 一种瑞德西韦中间体的制备方法
CN111233870A (zh) * 2020-03-11 2020-06-05 中国科学技术大学 用于快速制备瑞德西韦药物中间体的方法
TWI785528B (zh) * 2020-03-12 2022-12-01 美商基利科學股份有限公司 1’-氰基核苷之製備方法
CN111233869B (zh) * 2020-03-12 2022-09-16 杭州新博思生物医药有限公司 用于制备瑞德西韦关键中间体的新化合物及其制备方法
CN113402546A (zh) * 2020-03-17 2021-09-17 浙江四维医药科技有限公司 一种瑞德西韦磷酸中间体尾链动态动力学拆分方法
EP4107186A1 (en) 2020-03-23 2022-12-28 Genentech, Inc. Tocilizumab and remdesivir combination therapy for covid-19 pneumonia
JP2023518814A (ja) 2020-03-23 2023-05-08 ジェネンテック， インコーポレイテッド Ｃｏｖｉｄ－１９肺炎における、ｉｌ－６アンタゴニストに対する応答を予測するためのバイオマーカー
CN111233931B (zh) * 2020-03-26 2022-03-22 宿迁盛基医药科技有限公司 一种瑞德西韦的合成方法
CN111398464B (zh) * 2020-04-02 2022-03-08 广州隽沐生物科技股份有限公司 2-乙基丁基（（全氟苯氧基）（苯氧基）磷酰基）-l-丙氨酸酯的检测方法
CN111423443A (zh) * 2020-04-03 2020-07-17 广州科锐特生物科技有限公司 一种4-氨基-7-碘吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪的制备方法
CN113493480B (zh) * 2020-04-03 2025-04-15 南京正大天晴制药有限公司 一种瑞德西韦异构体的制备及其分析方法
JP7482250B2 (ja) * 2020-04-06 2024-05-13 ギリアード サイエンシーズ， インコーポレイテッド １’－シアノ置換カルバヌクレオシド類似体の吸入製剤
US12472197B2 (en) 2020-04-07 2025-11-18 Island Pharmaceuticals, Ltd. Methods, compositions, and dosing regimens for treatment of SARS-CoV-2 infections
WO2021208910A1 (zh) * 2020-04-13 2021-10-21 山东华铂凯盛生物科技有限公司 用于治疗病毒感染的聚合物制剂及制备方法和用途
CN111393494A (zh) * 2020-04-17 2020-07-10 广东帕派恩生物科技有限公司 基于核苷酸结构的化合物、制备方法、用途
CN112778310B (zh) 2020-04-20 2025-05-30 中国科学院上海药物研究所 核苷类似物或含有核苷类似物的组合制剂在抗病毒中的应用
EP4143199B1 (en) * 2020-04-21 2025-11-19 Ligand Pharmaceuticals, Inc. Nucleotide prodrug compounds
CN111471070B (zh) * 2020-04-26 2022-05-13 江苏阿尔法药业股份有限公司 瑞德西韦的合成方法
CN111454270B (zh) * 2020-04-27 2024-05-14 南通伟顺生物科技有限公司 一种含六元环的核苷类化合物及其制备方法
CN111440176B (zh) * 2020-04-28 2022-04-26 江苏大学 金属配合物促进的瑞德西韦中间体的合成方法
US10988503B1 (en) * 2020-05-06 2021-04-27 Nantong Weishun Biotechnology Co., Ltd Six-membered ring-containing nucleoside compound and preparation method thereof
CN113637041B (zh) * 2020-05-11 2024-02-27 上海科胜药物研发有限公司 一种核糖核苷的制备方法
WO2021234554A2 (en) * 2020-05-20 2021-11-25 Lyrus Life Sciences Pvt Ltd Novel composition for the treatment of viral infections
RU2740660C1 (ru) * 2020-05-20 2021-01-19 Общество С Ограниченной Ответственностью "Промомед Рус" Противовирусная композиция
WO2021237109A1 (en) 2020-05-22 2021-11-25 Trailhead Biosystems Inc. Combination therapy for treatment of viral infections
CN111961057A (zh) * 2020-05-26 2020-11-20 李小冬 一种α构型核苷及其在治疗猫冠状病毒感染的应用
EP4157272B1 (en) 2020-05-29 2025-07-02 Gilead Sciences, Inc. Remdesivir for the treatment of viral infections
EP3915548A1 (en) 2020-05-29 2021-12-01 Jubilant Generics Limited Transmucosal pharmaceutical compositions of antiviral drugs
IN202011022634A (es) 2020-05-29 2020-10-09 Jubilant Generics Limited
CN113754694B (zh) * 2020-06-03 2022-10-25 上海交通大学 一种不对称催化无保护基核苷合成瑞德西韦的方法
CN113754693B (zh) * 2020-06-03 2022-09-09 上海交通大学 一种磷手性核苷衍生物的不对称催化合成方法及催化剂
CN113754692B (zh) * 2020-06-03 2022-06-10 上海交通大学 瑞德西韦中间体(s,s)-氨基磷酸酯的不对称催化合成方法
WO2021257569A1 (en) 2020-06-15 2021-12-23 Metro International Biotech, Llc Anti-viral compounds and methods of use
CN111620903A (zh) * 2020-06-17 2020-09-04 安徽贝克联合制药有限公司 C-核苷类似物以及用于合成瑞德西韦合成的含腈c-核苷类化合物的制备方法及其应用
WO2021262715A1 (en) * 2020-06-23 2021-12-30 Anovent Pharmaceutical (U.S.), Llc Pharmaceutical formulation containing active metabolites of remdesivir or its analog for inhalation
IL299202A (en) 2020-06-24 2023-02-01 Gilead Sciences Inc 1'-cyano nucleoside analogs and uses thereof
CN111732618A (zh) * 2020-07-03 2020-10-02 镇江巨杰新材料技术研发中心(有限合伙) 瑞德西韦关键片段的合成方法
CN111961079A (zh) * 2020-07-17 2020-11-20 南京正济医药研究有限公司 一种瑞德西韦有关物质及其制备方法和应用
MX2023001002A (es) * 2020-07-24 2023-03-01 Univ California Farmacos antivirales, composiciones farmaceuticas, y metodos.
LT4192839T (lt) 2020-08-06 2025-11-25 Remdesiviro tarpiniai junginiai
CN113004330A (zh) * 2020-08-22 2021-06-22 齐鲁制药有限公司 一种高纯度瑞德西韦的制备方法
JP7559223B2 (ja) 2020-08-24 2024-10-01 ギリアード サイエンシーズ， インコーポレイテッド リン脂質化合物及びその使用
US11926645B2 (en) * 2020-08-27 2024-03-12 Gilead Sciences, Inc. Compounds and methods for treatment of viral infections
CN114105989A (zh) * 2020-08-31 2022-03-01 中国科学院大连化学物理研究所 一种碘代吡咯并三嗪胺类化合物的制备方法和应用
WO2022060412A1 (en) 2020-09-17 2022-03-24 Genentech, Inc. Results of empacta: a randomized, double-blind, placebo-controlled, multicenter study to evaluate the efficacy and safety of tocilizumab in hospitalized patients with covid-19 pneumonia
CN112321642A (zh) * 2020-09-28 2021-02-05 南京正济医药研究有限公司 一种瑞德西韦有关物质及其制备方法和用途
WO2022074630A1 (en) * 2020-10-09 2022-04-14 Auxilla Pharmaceuticals And Research Llp Liquid oral suspension of favipiravir
CN112194661B (zh) * 2020-10-22 2021-06-08 威海同丰海洋生物科技有限公司 一种4-氨基-7-碘吡咯并[2,l-f][l,2,4]三嗪的制备方法
JP7711900B2 (ja) * 2020-10-26 2025-07-23 蘇州旺山旺水生物医薬股▲ふん▼有限公司 ヌクレオシド類似体の塩及びその結晶形、医薬組成物並びに用途
CN114456212A (zh) * 2020-11-09 2022-05-10 广东东阳光药业有限公司 一种含磷化合物的制备方法
CN114507256B (zh) * 2020-11-16 2025-02-28 上海医药集团股份有限公司 一种瑞德西韦工艺手性异构体、其制备方法及其应用
RU2756921C1 (ru) * 2020-11-20 2021-10-07 Общество С Ограниченной Ответственностью "Технология Лекарств" Способ получения ремдесивира и фосфорамидаты
CA3200885A1 (en) 2020-11-23 2022-05-27 Genentech, Inc. Methods for modulating host cell surface interactions with sars-cov-2
CN112358513A (zh) * 2020-12-02 2021-02-12 上海朴颐化学科技有限公司 一种利用连续流反应器制备瑞德西韦中间体的方法
CN114621229B (zh) * 2020-12-11 2024-07-02 嘉兴金派特生物科技有限公司 治疗或预防猫传染性腹膜炎的化合物或组合物
CN114644666B (zh) * 2020-12-18 2026-03-03 上海特化医药科技有限公司 5’-核苷前药的制备方法及中间体
CN114685511A (zh) * 2020-12-25 2022-07-01 上海科胜药物研发有限公司 一种瑞德西韦中间体的纯化方法
CN114685558A (zh) * 2020-12-28 2022-07-01 尚科生物医药（上海）有限公司 一种瑞德西韦中间体的制备方法
CN113754665B (zh) * 2020-12-30 2022-08-19 南方科技大学 一种核苷类化合物的制备方法
CN116370479B (zh) * 2020-12-30 2024-02-13 南方科技大学 化合物atv014在制备用于治疗新冠病毒感染的产品中的用途
US12558364B2 (en) 2021-01-20 2026-02-24 Regents Of The University Of Minnesota Next generation remdesivir antivirals
US11998562B2 (en) 2021-01-25 2024-06-04 University Of South Florida Ophthalmological formulations for the prevention of a coronavirus infection
WO2022166581A1 (zh) * 2021-02-07 2022-08-11 石家庄迪斯凯威医药科技有限公司 一种核苷酸衍生物及其药物组合物和用途
CN117157081A (zh) * 2021-02-19 2023-12-01 南京赛弗斯医药科技有限公司 一种具有抗肿瘤活性的核苷酸衍生物及其药物组合物和用途
CN112979736B (zh) * 2021-03-04 2022-03-25 南京欧信医药技术有限公司 一种瑞德西韦的制备方法
CN115109077A (zh) * 2021-03-18 2022-09-27 上海医药集团股份有限公司 瑞德西韦中间体的制备方法
TWI845919B (zh) 2021-04-16 2024-06-21 美商基利科學股份有限公司 使用醯胺製備碳核苷之方法
AU2022256476B2 (en) 2021-04-16 2025-06-05 Gilead Sciences, Inc. Methods of preparing carbanucleosides using amides
US12427150B2 (en) 2021-05-26 2025-09-30 Gilead Sciences, Inc. Phospholipid formulations of 1′-cyano substituted carba-nucleoside analogs
CN113683640B (zh) * 2021-08-10 2025-01-14 浙江华海药业股份有限公司 一种丁基瑞德西韦的制备方法
CA3228162A1 (en) 2021-08-18 2023-02-23 Gilead Sciences, Inc. Phospholipid compounds and methods of making and using the same
IL310854A (en) 2021-08-20 2024-04-01 Shionogi & Co Nucleoside compounds and their drug derivatives possessing viral growth inhibitory activity
CN113999237B (zh) * 2021-10-29 2023-08-08 润佳（苏州）医药科技有限公司 一种核苷类前药及其用途
KR102675967B1 (ko) 2021-11-02 2024-06-17 충남대학교산학협력단 렘데시비르를 함유하는 나노지질담체, 이의 제조방법 및 이를 포함하는 약학적 조성물
JP2025508656A (ja) 2022-01-26 2025-04-10 ザ リージェンツ オブ ザ ユニバーシティ オブ カリフォルニア 抗ウイルスプロドラッグ、中期及び長期作用型製剤、並びに方法
CN114409655A (zh) * 2022-01-26 2022-04-29 郑州大学 3′,4′-不饱和核糖c-核苷类似物及其制备方法
KR20240154647A (ko) 2022-03-02 2024-10-25 길리애드 사이언시즈, 인코포레이티드 바이러스성 감염 치료를 위한 화합물 및 방법
CN115028672A (zh) * 2022-06-14 2022-09-09 南京正济医药研究有限公司 瑞德西韦中间体晶体及其制备方法
EP4547665A1 (en) 2022-06-30 2025-05-07 Gilead Sciences, Inc. Solid forms of a nucleoside analogue and uses thereof
CN116874491B (zh) * 2022-07-12 2026-05-26 深圳安泰维生物医药有限公司 一种n-保护的吡咯并三嗪碳苷类化合物及其制备方法
US11655255B2 (en) 2022-10-17 2023-05-23 Sph No.1 Biochemical & Pharmaceutical Co., Ltd. Method for catalytic asymmetric synthesis of phosphorus-stereogenic (P-stereogenic) nucleoside derivative and catalyst used therein
US12357577B1 (en) 2024-02-02 2025-07-15 Gilead Sciences, Inc. Pharmaceutical formulations and uses thereof
JP2025540572A (ja) 2022-11-18 2025-12-16 ギリアード サイエンシーズ， インコーポレイテッド ポックスウイルス感染を治療する方法
CN115737675B (zh) * 2022-11-28 2024-03-08 安徽农业大学 氧化型硒代硫酸钠的制备及其在治疗冠状病毒感染中的应用
CN115947759A (zh) * 2022-12-13 2023-04-11 安徽大学 一种治疗新冠药物瑞德西韦的制备方法
CN116332996B (zh) * 2023-05-04 2025-04-01 南京颐媛生物医学研究院有限公司 L-呋喃核糖型抗冠状病毒化合物及其制备方法和应用
CN116284135B (zh) * 2023-05-04 2025-03-21 南京颐媛生物医学研究院有限公司 抗冠状病毒核苷类化合物的制备方法及其应用
HUP2300153A1 (hu) 2023-05-09 2024-11-28 Rotachrom Tech Zrt Eljárás remdesivir foszfor sztereoizomereinek elválasztására akirális folyadék-folyadék kromatográfiával
CN116554176A (zh) * 2023-05-11 2023-08-08 南京正济医药研究有限公司 一种核苷类化合物的制备方法
CN117126199B (zh) * 2023-05-17 2024-12-06 江西师范大学 一种氟代瑞德西韦合成方法
CN117343114B (zh) * 2023-09-22 2026-05-19 山东大学 一种高立体选择性的α-木糖吡喃糖苷键构建方法
KR20260079626A (ko) 2023-09-28 2026-06-02 길리애드 사이언시즈, 인코포레이티드 바이러스성 감염 치료를 위한 화합물 및 방법
CN117800872A (zh) * 2023-12-25 2024-04-02 海门瑞一医药科技有限公司 一种4-羟基丁腈的合成方法

Family Cites Families (155)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4816570A (en) 1982-11-30 1989-03-28 The Board Of Regents Of The University Of Texas System Biologically reversible phosphate and phosphonate protective groups
US4968788A (en) 1986-04-04 1990-11-06 Board Of Regents, The University Of Texas System Biologically reversible phosphate and phosphonate protective gruops
ES2083580T3 (es) 1990-06-13 1996-04-16 Arnold Glazier Profarmacos de fosforo.
DK0481214T3 (da) 1990-09-14 1999-02-22 Acad Of Science Czech Republic Prolægemidler af phosphonater
JPH1017629A (ja) 1996-07-04 1998-01-20 Kayaku Akzo Kk ハードコート用樹脂組成物及びその硬化方法
US6887707B2 (en) 1996-10-28 2005-05-03 University Of Washington Induction of viral mutation by incorporation of miscoding ribonucleoside analogs into viral RNA
KR20010041533A (ko) 1998-03-03 2001-05-25 한센 핀 베네드, 안네 제헤르, 웨이콥 마리안느 (2ｅ)-5-아미노-5-메틸헥스-2-엔오산ｎ-메틸-ｎ-((1ｒ)-1-(ｎ-메틸-ｎ-((1ｒ)-1-(메틸카르바모일)-2-페닐에틸)카르바모일)-2-(2-나프틸)에틸)아미드의신규한 염 형태
US6312662B1 (en) 1998-03-06 2001-11-06 Metabasis Therapeutics, Inc. Prodrugs phosphorus-containing compounds
US6475985B1 (en) 1998-03-27 2002-11-05 Regents Of The University Of Minnesota Nucleosides with antiviral and anticancer activity
DE69936998T2 (de) 1998-10-16 2008-05-21 Merck Sharp & Dohme Ltd., Hoddesdon Pyrazolotriazinderivate als gaba-rezeptorliganden
DE19912636A1 (de) 1999-03-20 2000-09-21 Aventis Cropscience Gmbh Bicyclische Heterocyclen, Verfahren zu ihrer Herstellung und ihre Verwendung als Herbizide und pharmazeutische Mittel
IL145496A0 (en) * 1999-03-24 2002-06-30 Exiqon As Improved synthesis of [2.2.1] bicyclo nucleosides
WO2000075157A1 (en) 1999-06-03 2000-12-14 Abbott Laboratories Oligonucleotide synthesis with lewis acids as activators
AUPQ105499A0 (en) 1999-06-18 1999-07-08 Biota Scientific Management Pty Ltd Antiviral agents
WO2001019375A1 (en) 1999-09-15 2001-03-22 Biocryst Pharmaceuticals, Inc. Inhibiting t-cell proliferation
CA2389745C (en) 1999-11-04 2010-03-23 Shire Biochem Inc. Method for the treatment or prevention of flaviviridae viral infection using nucleoside analogues
SK11922002A3 (sk) 2000-02-18 2003-06-03 Shire Biochem Inc. Použitie analógov nukleozidov na liečenie alebo prevenciu infekcií spôsobených flavivírusom
MY164523A (en) 2000-05-23 2017-12-29 Univ Degli Studi Cagliari Methods and compositions for treating hepatitis c virus
PL359169A1 (en) 2000-05-26 2004-08-23 Idenix (Cayman) Limited Methods and compositions for treating flaviviruses and pestiviruses
HRP20030047B1 (hr) 2000-07-21 2016-02-26 Gilead Sciences, Inc. Prolijekovi koji su fosfonatni analozi nukleotida i metode njihovog odabira te njihova priprava
US20030008841A1 (en) 2000-08-30 2003-01-09 Rene Devos Anti-HCV nucleoside derivatives
KR20090089922A (ko) 2000-10-18 2009-08-24 파마셋 인코포레이티드 바이러스 감염 및 비정상적인 세포 증식의 치료를 위한 변형된 뉴클레오시드
AUPR213700A0 (en) 2000-12-18 2001-01-25 Biota Scientific Management Pty Ltd Antiviral agents
MXPA03006514A (es) 2001-01-22 2004-12-02 Merck & Co Inc Derivados de nucleosidos como inhibidores de polimerasa de acido ribonucleico viral dependiente de acido ribonucleico.
DE10145223A1 (de) 2001-09-13 2003-04-03 Basf Ag Verfahren zur Herstellung von meso-Zeaxanthin
WO2003026675A1 (en) 2001-09-28 2003-04-03 Idenix (Cayman) Limited Methods and compositions for treating flaviviruses and pestiviruses using 4'-modified nucleoside
AT410792B (de) 2001-12-28 2003-07-25 Dsm Fine Chem Austria Gmbh Verfahren zur herstellung von geschützten, enantiomeren-angereicherten cyanhydrinen durch in-situ-derivatisierung
WO2003073989A2 (en) 2002-02-28 2003-09-12 Biota, Inc. Nucleoside 5'-monophosphate mimics and their prodrugs
RU2004128943A (ru) 2002-02-28 2005-04-20 Байота, Инк. (Us) Средства, имитирующие нуклеотиды, и их пролекарственные формы
US20040138170A1 (en) 2002-03-06 2004-07-15 Montgomery John A. Nucleosides, preparation thereof and use as inhibitors of rna viral polymerases
GB0210127D0 (en) 2002-05-02 2002-06-12 Merck Sharp & Dohme Therapeutic agents
GB0210124D0 (en) 2002-05-02 2002-06-12 Merck Sharp & Dohme Therapeutic agents
BR0309581A (pt) 2002-05-06 2005-03-29 Genelabs Tech Inc Derivados de nucleosìdeo para tratamento de infecção por vìrus de hepatite c
AU2003233667A1 (en) 2002-05-23 2003-12-12 Biocryst Pharmaceuticals, Inc. Enhancing the efficacy of reverse transcriptase and dna polymerase inhibitors (nucleoside analogs) using pnp inhibitors and/or 2'-deoxyguanosine and/or prodrug thereof
AU2003298658A1 (en) 2002-11-15 2004-06-15 Idenix (Cayman) Limited 2'-branched nucleosides and flaviviridae mutation
SG182849A1 (en) 2003-04-25 2012-08-30 Gilead Sciences Inc Antiviral phosphonate analogs
EP1646371A4 (en) 2003-06-26 2010-09-22 Biotron Ltd ANTIVIRAL COMPOSITIONS AND METHODS
GB0317009D0 (en) 2003-07-21 2003-08-27 Univ Cardiff Chemical compounds
ATE478886T1 (de) 2003-07-25 2010-09-15 Idenix Pharmaceuticals Inc Purin nucleoside für die behandlung von durch flavividrae verursachten krankheiten, einschliesslich hepatitis c
WO2005021568A2 (en) 2003-08-27 2005-03-10 Biota, Inc. Novel tricyclic nucleosides or nucleotides as therapeutic agents
JP2005185235A (ja) * 2003-12-26 2005-07-14 Univ Of Tokyo ウイルス感染に対する感受性診断のための方法およびキット。
JP2005187428A (ja) * 2003-12-26 2005-07-14 Univ Of Tokyo 抗ｍｇｌ抗体によるフィロウイルス治療薬
EA011158B1 (ru) 2004-03-16 2009-02-27 Бёрингер Ингельхайм Интернациональ Гмбх Замещённые глюкопиранозилом бензольные производные, содержащие эти соединения лекарственные средства, их применение и способ их получения
WO2005123087A2 (en) 2004-06-15 2005-12-29 Merck & Co., Inc. C-purine nucleoside analogs as inhibitors of rna-dependent rna viral polymerase
US7560434B2 (en) 2004-06-22 2009-07-14 Biocryst Pharmaceuticals, Inc. AZA nucleosides, preparation thereof and use as inhibitors of RNA viral polymerases
ES2725457T3 (es) 2004-09-14 2019-09-24 Gilead Pharmasset Llc Preparación de ribofuranosil pirimidinas y purinas 2'fluoro-2'-alquil-sustituidas u otras opcionalmente sustituidas y sus derivados
CN101043893A (zh) 2004-10-21 2007-09-26 默克公司 治疗RNA－依赖性RNA病毒感染的氟化吡咯并[2,3－d]嘧啶核苷
AU2005317081A1 (en) 2004-10-21 2006-06-22 Merck & Co., Inc. Fluorinated pyrrolo[2,3-d]pyrimidine nucleosides for the treatment of RNA-dependent RNA viral infection
AU2005302448B2 (en) 2004-10-29 2012-07-19 Biocryst Pharmaceuticals, Inc. Therapeutic furopyrimidines and thienopyrimidines
JP2008524162A (ja) 2004-12-16 2008-07-10 ベーリンガー インゲルハイム インターナショナル ゲゼルシャフト ミット ベシュレンクテル ハフツング グルコピラノシル置換ベンゼン誘導体、該化合物を含む薬物、その使用及びその製造方法
AU2006222563A1 (en) 2005-03-08 2006-09-14 Biota Scientific Management Pty Ltd. Bicyclic nucleosides and nucleotides as therapeutic agents
CA2602533A1 (en) 2005-03-29 2006-10-05 Biocryst Pharmaceuticals, Inc. Use of c-nucleoside analogs for treatment of hepatitis c related viral infections
WO2006116557A1 (en) 2005-04-25 2006-11-02 Genelabs Technologies, Inc. Nucleoside compounds for treating viral infections
WO2006121820A1 (en) 2005-05-05 2006-11-16 Valeant Research & Development Phosphoramidate prodrugs for treatment of viral infection
WO2007027248A2 (en) 2005-05-16 2007-03-08 Valeant Research & Development 3', 5' - cyclic nucleoside analogues for treatment of hcv
US8669280B2 (en) 2005-06-24 2014-03-11 Biotron Limited Antiviral compounds and methods
ES2436404T3 (es) 2005-10-03 2013-12-30 University Health Network Inhibidores ODCasa para el tratamiento de malaria
EP1945222B1 (en) 2005-11-02 2012-12-26 Bayer Pharma Aktiengesellschaft Pyrrolo[2,1-f] [1,2,4]-triazin-4-ylamines as igf-1r kinase inhibitors for the treatment of cancer and other hyperproliferative diseases
SI1954264T1 (sl) 2005-12-01 2010-01-29 Basilea Pharmaceutica Ag Postopek priprave intermediatov epoksibutanola
PE20070855A1 (es) 2005-12-02 2007-10-14 Bayer Pharmaceuticals Corp Derivados de 4-amino-pirrolotriazina sustituida como inhibidores de quinasas
BRPI0619146A2 (pt) 2005-12-02 2011-09-13 Bayer Pharmaceuticals Corp derivados de 4-amino-pirroltriazina substituìda úteis no tratamento de disordens e doenças hiperproliferativas associadas com angiogênesis
JP5112328B2 (ja) 2005-12-09 2013-01-09 バジリア ファルマスーチカ アーゲー 重度の皮膚科障害の局所的処置のための４−オキソ（イソ）トレチノイン
BRPI0619563A2 (pt) 2005-12-09 2011-10-04 Pharmasset Inc nucleosìdeos antivirais
WO2007097991A2 (en) 2006-02-16 2007-08-30 Pharmasset, Inc. Methods and kits for dosing of antiviral agents
DE102006015378A1 (de) * 2006-04-03 2007-10-04 Ludwig-Maximilians-Universität München Verfahren zur Synthese von Organoelementverbindungen
CL2007001427A1 (es) 2006-05-22 2008-05-16 Novartis Ag Sal de maleato de 5-amino-3-(2',3'-di-o-acetil-beta-d-ribofuranosil)-3h-tiazolo[4,5-d]pirimidin-2-ona; procedimiento de preparacion; composicion farmaceutica que comprende a dicho compuesto; y uso del compuesto para el tratamiento de una infeccion po
WO2008005542A2 (en) 2006-07-07 2008-01-10 Gilead Sciences, Inc., Antiviral phosphinate compounds
US20080161324A1 (en) 2006-09-14 2008-07-03 Johansen Lisa M Compositions and methods for treatment of viral diseases
AR063569A1 (es) * 2006-11-06 2009-02-04 Boehringer Ingelheim Int Derivados de benzil- benzonitrilo sustituidos con glucopiranosilo medicamentos que contienen a compuestos de este tipo su uso u procedimiento para su fabricacion
JP2010513484A (ja) 2006-12-20 2010-04-30 メルク・シャープ・エンド・ドーム・コーポレイション Ｒｎａ依存性ｒｎａウイルス感染治療用ヌクレオシド環状ホスホロアミデート
US7951789B2 (en) 2006-12-28 2011-05-31 Idenix Pharmaceuticals, Inc. Compounds and pharmaceutical compositions for the treatment of viral infections
AU2007342367B2 (en) 2007-01-05 2012-12-06 Istituto Di Ricerche Di Biologia Molecolare P. Angeletti S.P.A. Nucleoside aryl phosphoramidates for the treatment of RNA-dependent RNA viral infection
NZ598927A (en) * 2007-01-12 2013-09-27 Biocryst Pharm Inc Antiviral nucleoside analogs
WO2008116064A2 (en) 2007-03-21 2008-09-25 Bristol-Myers Squibb Company Fused heterocyclic compounds useful for the treatment of proliferative, allergic, autoimmune or inflammatory diseases
US7964580B2 (en) 2007-03-30 2011-06-21 Pharmasset, Inc. Nucleoside phosphoramidate prodrugs
DK2155758T3 (da) 2007-05-10 2012-11-05 Biocryst Pharm Inc Tetrahydrofuro[3,4-d]dioxolanforbindelser til anvendelse i behandlingen af virusinfektioner og cancer
CN100532388C (zh) 2007-07-16 2009-08-26 郑州大学 2’-氟-4’-取代-核苷类似物、其制备方法及应用
ES2614269T3 (es) 2007-08-03 2017-05-30 Biotron Limited Procedimientos y composiciones antivíricas frente a la hepatitis C
KR101502533B1 (ko) 2007-11-22 2015-03-13 에스케이케미칼주식회사 우수한 안정성을 갖는 택산 유도체 함유 주사제용동결건조 조성물 및 이의 제조방법
TW200942243A (en) 2008-03-05 2009-10-16 Biocryst Pharm Inc Antiviral therapeutic agents
US8227431B2 (en) 2008-03-17 2012-07-24 Hetero Drugs Limited Nucleoside derivatives
PL2280973T3 (pl) * 2008-04-23 2013-05-31 Gilead Sciences Inc Analogi karba-nukleozydowe do leczenia przeciwwirusowego
US7863291B2 (en) 2008-04-23 2011-01-04 Bristol-Myers Squibb Company Quinuclidine compounds as alpha-7 nicotinic acetylcholine receptor ligands
WO2010036407A2 (en) 2008-05-15 2010-04-01 Biocryst Pharmaceuticals, Inc. Antiviral nucleoside analogs
EP2313102A2 (en) 2008-07-03 2011-04-27 Biota Scientific Management Bycyclic nucleosides and nucleotides as therapeutic agents
BRPI1013643A2 (pt) * 2009-02-10 2016-04-19 Gilead Sciences Inc análogos de carba-nucleosídeo para tratamento antiviral
AR075584A1 (es) 2009-02-27 2011-04-20 Intermune Inc COMPOSICIONES TERAPEUTICAS QUE COMPRENDEN beta-D-2'-DESOXI-2'-FLUORO-2'-C-METILCITIDINA Y UN DERIVADO DE ACIDO ISOINDOL CARBOXILICO Y SUS USOS. COMPUESTO.
WO2010108140A1 (en) 2009-03-20 2010-09-23 Alios Biopharma, Inc. Substituted nucleoside and nucleotide analogs
MX2011009928A (es) 2009-03-24 2012-03-16 Biocryst Pharm Inc Sales farmaceuticas utiles de 7[(3r, 4r)-3-hidroxi-4-hidroximetil- pirrolidin-1-ilmetil]-3,5-dihidro-pirrol[3,2-d]pirimidin-4-ona.
TWI576352B (zh) 2009-05-20 2017-04-01 基利法瑪席特有限責任公司 核苷磷醯胺
KR20120051022A (ko) 2009-07-21 2012-05-21 길리애드 사이언시즈, 인코포레이티드 플라비비리데 바이러스의억제제
NZ599404A (en) * 2009-09-21 2014-02-28 Gilead Sciences Inc Processes and intermediates for the preparation of 1’-substituted carba-nucleoside analogs
US7973013B2 (en) 2009-09-21 2011-07-05 Gilead Sciences, Inc. 2'-fluoro substituted carba-nucleoside analogs for antiviral treatment
US8455451B2 (en) 2009-09-21 2013-06-04 Gilead Sciences, Inc. 2'-fluoro substituted carba-nucleoside analogs for antiviral treatment
DK2480552T3 (en) 2009-09-21 2017-02-20 Gilead Sciences Inc 2 'FLUOROUS-SUBSTITUTED CARBA NUCLEOSIDE ANALYSIS FOR ANTIVIRAL TREATMENT
WO2011080568A2 (en) 2009-12-28 2011-07-07 Development Center For Biotechnology Novel pyrimidine compounds as mtor and p13k inhibitors
TW201136945A (en) 2010-03-31 2011-11-01 Pharmasset Inc Purine nucleoside phosphoramidate
AP2012006535A0 (en) 2010-03-31 2012-10-31 Gilead Pharmasset Llc Stereoselective synthesis of phosphorous containing actives
TW201201815A (en) * 2010-05-28 2012-01-16 Gilead Sciences Inc 1'-substituted-carba-nucleoside prodrugs for antiviral treatment
EA025311B1 (ru) 2010-07-19 2016-12-30 Гайлид Сайэнсиз, Инк. Способы получения диастереомерно чистых фосфорамидатных пролекарств
PT2595980E (pt) * 2010-07-22 2014-11-27 Gilead Sciences Inc Métodos e compostos para tratar infeções pelo vírus da família paramyxoviridae
TW201305185A (zh) * 2010-09-13 2013-02-01 吉李德科學股份有限公司 用於抗病毒治療之２’－氟取代之碳－核苷類似物
SG188223A1 (en) 2010-09-20 2013-04-30 Gilead Sciences Inc 2' -fluoro substituted carba-nucleoside analogs for antiviral treatment
WO2012040127A1 (en) 2010-09-22 2012-03-29 Alios Biopharma, Inc. Substituted nucleotide analogs
LT2898885T (lt) 2010-10-15 2018-02-26 Biocryst Pharmaceuticals, Inc. Pirolopirimidino dariniai, skirti naudoti virusinių infekcijų gydymui
ES2716158T3 (es) 2010-11-30 2019-06-10 Gilead Pharmasset Llc 2'-spiro-nucleótidos para el tratamiento de hepatitis C
TW201306841A (zh) 2010-12-20 2013-02-16 Gilead Sciences Inc 治療ｃ型肝炎病毒（ｈｃｖ）之方法
EP2697241B1 (en) 2011-04-13 2019-06-12 Gilead Sciences, Inc. 1'-substituted pyrimidine n-nucleoside analogs for antiviral treatment
WO2012142085A1 (en) 2011-04-13 2012-10-18 Merck Sharp & Dohme Corp. 2'-substituted nucleoside derivatives and methods of use thereof for the treatment of viral diseases
ES2639122T3 (es) 2011-05-13 2017-10-25 Zoetis Services Llc Composiciones inmunogénicas de glucoproteína G de virus Hendra y Nipah
EP3384938A1 (en) * 2011-09-12 2018-10-10 Moderna Therapeutics, Inc. Engineered nucleic acids and methods of use thereof
HRP20180237T4 (hr) 2011-09-16 2020-12-11 Gilead Pharmasset Llc Metode za liječenje hcv-a
US8889159B2 (en) 2011-11-29 2014-11-18 Gilead Pharmasset Llc Compositions and methods for treating hepatitis C virus
US20130143835A1 (en) * 2011-12-05 2013-06-06 Medivir Ab HCV Polymerase Inhibitors
WO2013084165A1 (en) * 2011-12-05 2013-06-13 Medivir Ab Hcv polymerase inhibitors
EP2794630A4 (en) * 2011-12-22 2015-04-01 Alios Biopharma Inc SUBSTITUTED PHOSPHORTHIOAT NUCLEOTIDE ANALOGUE
MD20140134A2 (ro) 2012-05-22 2015-04-30 Idenix Pharmaceuticals, Inc. Compuşi ai D-aminoacizilor pentru tratamentul bolilor hepatice
US9556216B2 (en) 2012-08-31 2017-01-31 Novartis Ag 2′-Ethynyl nucleoside derivatives for treatment of viral infections
CA2881322A1 (en) 2012-09-10 2014-03-13 F. Hoffmann-La Roche Ag 6-amino acid heteroaryldihydropyrimidines for the treatment and prophylaxis of hepatitis b virus infection
WO2014042433A2 (en) * 2012-09-14 2014-03-20 Kainos Medicine, Inc. Compounds and compositions for modulating adenosine a3 receptor activity
MX2015005949A (es) 2012-11-16 2015-09-08 Biocryst Pharm Inc Nucleosidos que contienen aza-azucar antiviral.
JP2016501200A (ja) 2012-11-19 2016-01-18 メルク・シャープ・アンド・ドーム・コーポレーションＭｅｒｃｋ Ｓｈａｒｐ ＆ Ｄｏｈｍｅ Ｃｏｒｐ． ウイルス性疾患を処置するための２−アルキニル置換ヌクレオシド誘導体
US9243022B2 (en) * 2012-12-21 2016-01-26 Alios Biopharma, Inc. Substituted nucleosides, nucleotides and analogs thereof
US9283242B2 (en) 2013-01-22 2016-03-15 Massachusetts Institute Of Technology Uses of dihydro bases
US10034893B2 (en) 2013-02-01 2018-07-31 Enanta Pharmaceuticals, Inc. 5, 6-D2 uridine nucleoside/tide derivatives
AU2014250762A1 (en) 2013-04-12 2015-10-29 Achillion Pharmaceuticals, Inc. Highly active nucleoside derivative for the treatment of HCV
US9542154B2 (en) 2013-06-25 2017-01-10 Intel Corporation Fused multiply add operations using bit masks
UA117375C2 (uk) * 2013-09-04 2018-07-25 Медівір Аб Інгібітори полімерази hcv
MX377523B (es) 2013-09-11 2025-03-10 Inst Nat Sante Rech Med Metodos y composiciones farmaceuticas para el tratamiento de la infeccion por el virus de la hepatitis b.
UA119050C2 (uk) 2013-11-11 2019-04-25 Ґілеад Саєнсиз, Інк. ПІРОЛО[1.2-f][1.2.4]ТРИАЗИНИ, ЯКІ ВИКОРИСТОВУЮТЬСЯ ДЛЯ ЛІКУВАННЯ РЕСПІРАТОРНО-СИНЦИТІАЛЬНИХ ВІРУСНИХ ІНФЕКЦІЙ
PE20160686A1 (es) 2014-01-30 2016-07-23 Hoffmann La Roche Nuevas dihidroquinolizinonas para el tratamiento y profilaxis de la infeccion por virus de la hepatitis b
PL3114128T3 (pl) 2014-03-07 2019-06-28 F. Hoffmann-La Roche Ag Nowe skondensowane w pozycji 6 heteroarylodihydropirymidyny stosowane w leczeniu i profilaktyce zakażenia wirusem zapalenia wątroby typu B
CN106459032B (zh) 2014-05-13 2019-04-05 豪夫迈·罗氏有限公司 治疗和预防乙型肝炎病毒感染的新的二氢喹嗪酮类
US9616076B2 (en) * 2014-06-02 2017-04-11 The Board Of Regents Of The University Of Texas Systems Methods for treating viral infections using hydrogen sulfide donors
US9504701B2 (en) 2014-06-02 2016-11-29 The Board Of Regents Of The University Of Texas System Methods for treating viral infections using hydrogen sulfide donors
WO2016012470A1 (en) 2014-07-25 2016-01-28 F. Hoffmann-La Roche Ag New amorphous and crystalline forms of (3s)-4-[[(4r)-4-(2-chloro-4-fluoro-phenyl)-5-methoxycarbonyl-2-thiazol-2-yl-1, 4-dihydropyrimidin-6-yl]methyl]morpholine-3-carboxylic acid
JP6506836B2 (ja) 2014-08-14 2019-04-24 エフ．ホフマン−ラ ロシュ アーゲーＦ． Ｈｏｆｆｍａｎｎ−Ｌａ Ｒｏｃｈｅ Ａｋｔｉｅｎｇｅｓｅｌｌｓｃｈａｆｔ Ｂ型肝炎ウイルス感染症の処置および予防のための新規ピリダゾンおよびトリアジノン
TWI698444B (zh) 2014-10-29 2020-07-11 美商基利科學股份有限公司 製備核糖苷的方法
US9637485B2 (en) 2014-11-03 2017-05-02 Hoffmann-La Roche Inc. 6,7-dihydrobenzo[a]quinolizin-2-one derivatives for the treatment and prophylaxis of hepatitis B virus infection
US9676793B2 (en) 2014-12-23 2017-06-13 Hoffmann-Laroche Inc. Co-crystals of 5-amino-2-oxothiazolo[4,5-d]pyrimidin-3(2H)-yl-5-hydroxymethyl tetrahydrofuran-3-yl acetate and methods for preparing and using the same
WO2016102438A1 (en) 2014-12-23 2016-06-30 F. Hoffmann-La Roche Ag Process for the preparation of 4-phenyl-5-alkoxycarbonyl-2-thiazol-2-yl-1,4-dihydropyrimidine analogues
EP3240537B1 (en) 2014-12-30 2020-09-09 F. Hoffmann-La Roche AG Novel tetrahydropyridopyrimidines and tetrahydropyridopyridines for the treatment and prophylaxis of hepatitis b virus infection
CN107109497A (zh) 2014-12-31 2017-08-29 豪夫迈·罗氏有限公司 通过实时PCR从细胞裂解物定量HBV cccDNA的高通量新方法
MA41338B1 (fr) 2015-01-16 2019-07-31 Hoffmann La Roche Composés de pyrazine pour le traitement de maladies infectieuses
EP3250685A1 (en) 2015-01-27 2017-12-06 F. Hoffmann-La Roche AG Recombinant hbv cccdna, the method to generate thereof and the use thereof
JP6435054B2 (ja) 2015-02-11 2018-12-05 エフ．ホフマン−ラ ロシュ アーゲーＦ． Ｈｏｆｆｍａｎｎ−Ｌａ Ｒｏｃｈｅ Ａｋｔｉｅｎｇｅｓｅｌｌｓｃｈａｆｔ Ｂ型肝炎ウイルス感染の治療及び予防のための新規２−オキソ−６，７−ジヒドロベンゾ［ａ］キノリジン−３−カルボン酸誘導体
DK3349758T3 (da) 2015-09-16 2022-06-13 Gilead Sciences Inc Fremgangsmåder til behandling af arenaviridae-virusinfektioner
WO2017184668A1 (en) 2016-04-20 2017-10-26 Gilead Sciences, Inc. Methods for treating flaviviridae virus infections
BR112019016316A2 (pt) 2017-02-08 2020-03-31 Biotron Limited Métodos para o tratamento da influenza
CN110869028B (zh) 2017-03-14 2023-01-20 吉利德科学公司 治疗猫冠状病毒感染的方法
EP4219513A1 (en) 2017-05-01 2023-08-02 Gilead Sciences, Inc. Crystalline form of (s)-2-ethylbutyl 2-(((s)-(((2r,3s,4r,5r)-5-(4-aminopyrrolo[2,1-f] [1,2,4]triazin-7-yl)-5-cyano-3,4-dihydroxytetrahydrofuran2-yl)methoxy)(phenoxy) phosphoryl)amino)propanoate
CN111093627B (zh) 2017-07-11 2024-03-08 吉利德科学公司 用于治疗病毒感染的包含rna聚合酶抑制剂和环糊精的组合物
CN111265532A (zh) 2020-01-21 2020-06-12 中国人民解放军军事科学院军事医学研究院 取代氨基丙酸酯类化合物在治疗2019-nCoV感染中的应用
KR20220132608A (ko) 2020-01-27 2022-09-30 길리애드 사이언시즈, 인코포레이티드 SARS CoV-2 감염증을 치료하기 위한 방법
TWI785528B (zh) * 2020-03-12 2022-12-01 美商基利科學股份有限公司 1’-氰基核苷之製備方法

Also Published As

Publication number Publication date
MY195823A (en) 2023-02-22
BR102015027413A2 (pt) 2016-05-03
PH12017500631A1 (en) 2017-09-25
EP4588928A2 (en) 2025-07-23
KR20170077167A (ko) 2017-07-05
ES2674806T3 (es) 2018-07-04
JP2018172424A (ja) 2018-11-08
EP3366295B1 (en) 2020-01-22
SV2017005561A (es) 2018-12-05
TWI740546B (zh) 2021-09-21
PE20180202A1 (es) 2018-01-31
NZ730803A (en) 2018-09-28
IL251560A0 (en) 2017-05-29
JP2020097635A (ja) 2020-06-25
AU2021201474A1 (en) 2021-03-25
PH12017500631B1 (en) 2024-01-05
AR102467A1 (es) 2017-03-01
EP3695844B1 (en) 2025-04-02
PL3366295T3 (pl) 2020-08-24
US20210052613A1 (en) 2021-02-25
AU2020203892A1 (en) 2020-07-02
ES3020561T3 (en) 2025-05-23
EP3695844A1 (en) 2020-08-19
EP4588928A3 (en) 2025-09-24
HUE039231T2 (hu) 2018-12-28
JP2020090536A (ja) 2020-06-11
DK3366295T3 (da) 2020-04-06
US9724360B2 (en) 2017-08-08
CA3184285A1 (en) 2016-05-06
KR20170066665A (ko) 2017-06-14
PE20171439A1 (es) 2017-09-29
SA517381419B1 (ar) 2022-07-07
JP6487547B2 (ja) 2019-03-20
PL4036099T3 (pl) 2025-06-23
EP4036099A1 (en) 2022-08-03
KR102694960B1 (ko) 2024-08-14
BR112017007636A2 (pt) 2017-12-19
EP4591935A2 (en) 2025-07-30
CL2017002693A1 (es) 2018-04-20
CU20170145A7 (es) 2018-07-05
HUE049192T2 (hu) 2020-09-28
JP6220484B1 (ja) 2017-10-25
ES2904298T3 (es) 2022-04-04
MX2017005252A (es) 2017-07-26
SG10202008772UA (en) 2020-10-29
SV2017005424A (es) 2018-07-18
JP7158428B2 (ja) 2022-10-21
WO2016069827A1 (en) 2016-05-06
JP2022068297A (ja) 2022-05-09
JP6671424B2 (ja) 2020-03-25
TWI767201B (zh) 2022-06-11
PH12020551055A1 (en) 2021-07-26
US20220354873A1 (en) 2022-11-10
KR20170067898A (ko) 2017-06-16
PL3212174T3 (pl) 2018-09-28
AU2023202679A1 (en) 2023-05-18
EP3366295A1 (en) 2018-08-29
SI3695844T1 (sl) 2025-06-30
DOP2017000103A (es) 2017-05-15
MX2020012560A (es) 2021-02-09
US20190275063A1 (en) 2019-09-12
MA52506A (fr) 2021-03-10
SG11201702903TA (en) 2017-05-30
CN107073005B (zh) 2021-12-24
KR102453808B1 (ko) 2022-10-12
MA40872A (fr) 2021-05-26
SI3212175T1 (sl) 2022-01-31
CA3316189A1 (en) 2026-08-05
CL2017001040A1 (es) 2018-01-19
IL251707B (en) 2019-12-31
CR20170165A (es) 2017-06-19
US10251898B2 (en) 2019-04-09
KR20240125990A (ko) 2024-08-20
US20160122374A1 (en) 2016-05-05
KR20220140656A (ko) 2022-10-18
AU2015339222B2 (en) 2018-11-22
TW201629076A (zh) 2016-08-16
PT3366295T (pt) 2020-04-21
CN114191438A (zh) 2022-03-18
EP4036099B1 (en) 2025-03-19
CU20170056A7 (es) 2017-07-04
ECSP17072474A (es) 2017-12-01
EP3212175A1 (en) 2017-09-06
DK3212174T3 (en) 2018-08-06
NZ745328A (en) 2023-06-30
WO2016069825A1 (en) 2016-05-06
SG11201702904RA (en) 2017-05-30
AR102468A1 (es) 2017-03-01
EP3212174B1 (en) 2018-05-16
US20200197422A1 (en) 2020-06-25
AU2018253483A1 (en) 2018-11-15
RS57425B1 (sr) 2018-09-28
JP2017186358A (ja) 2017-10-12
EP4591935A3 (en) 2026-03-04
CA2963832A1 (en) 2016-05-06
KR20210152015A (ko) 2021-12-14
AU2015339223A1 (en) 2017-04-27
CA2963907A1 (en) 2016-05-06
TWI687432B (zh) 2020-03-11
LT3212174T (lt) 2018-07-10
CN113620992B (zh) 2024-09-03
EA201790630A1 (ru) 2017-11-30
SI3212174T1 (en) 2018-06-29
CA2963907C (en) 2023-04-04
ECSP17025261A (es) 2017-05-31
MA40867A (fr) 2017-09-06
US20180311263A1 (en) 2018-11-01
AU2021201474B2 (en) 2023-02-02
PT3212174T (pt) 2018-06-28
AU2015339222A1 (en) 2017-04-27
ME03070B (me) 2019-01-20
ES2785034T3 (es) 2020-10-05
US10695357B2 (en) 2020-06-30
US11266666B2 (en) 2022-03-08
CY1120893T1 (el) 2020-05-29
EP3212175B1 (en) 2021-11-24
CN118812607A (zh) 2024-10-22
CO2017003960A2 (es) 2017-07-11
EP4036099C0 (en) 2025-03-19
UA121485C2 (uk) 2020-06-10
CN113549120A (zh) 2021-10-26
ZA201800414B (en) 2019-10-30
JP6757294B2 (ja) 2020-09-16
TWI698444B (zh) 2020-07-11
SI3366295T1 (sl) 2020-06-30
CN113549120B (zh) 2025-04-29
US9949994B2 (en) 2018-04-24
AU2022283772A1 (en) 2023-02-02
TW202115098A (zh) 2021-04-16
TW201630925A (zh) 2016-09-01
JP2019048901A (ja) 2019-03-28
KR101822348B1 (ko) 2018-01-25
US11344565B2 (en) 2022-05-31
CR20170483A (es) 2018-01-22
KR102337664B1 (ko) 2021-12-10
EA032239B1 (ru) 2019-04-30
CA2963832C (en) 2020-06-16
AU2018253483B2 (en) 2020-04-16
UY36376A (es) 2016-06-01
PT3695844T (pt) 2025-05-29
MX378299B (es) 2025-03-10
CN107074902A (zh) 2017-08-18
MX2017005250A (es) 2017-07-26
PT3212175T (pt) 2022-01-25
HK1258795A1 (en) 2019-11-22
JP2017534614A (ja) 2017-11-24
NZ730809A (en) 2018-09-28
PL3212175T3 (pl) 2022-02-28
US20160361330A1 (en) 2016-12-15
JP2022065066A (ja) 2022-04-26
CY1122946T1 (el) 2021-10-29
CN113620992A (zh) 2021-11-09
TR201809518T4 (tr) 2018-07-23
LT3366295T (lt) 2020-04-27
UY37464A (es) 2019-04-30
EA201790597A1 (ru) 2017-11-30
IL251707A0 (en) 2017-06-29
CN107073005A (zh) 2017-08-18
US20160122356A1 (en) 2016-05-05
EP3212174A1 (en) 2017-09-06
AU2019201232B2 (en) 2020-12-10
AU2019201232A1 (en) 2019-03-14
JP2017533903A (ja) 2017-11-16
HRP20181130T1 (hr) 2018-09-21
PL3695844T3 (pl) 2025-07-21
SMT201800381T1 (it) 2018-09-13
TW202039526A (zh) 2020-11-01
WO2016069826A1 (en) 2016-05-06
MD20170046A2 (ro) 2017-10-31
AU2015339223B2 (en) 2018-07-26

Similar Documents

Publication Publication Date Title
ES2674806T3 (es) Métodos para el tratamiento de infecciones del virus filoviridae
ES2918585T3 (es) Métodos para el tratamiento de infecciones por el virus Arenaviridae
HK40035367B (en) A remdesivir compound for use in treating nipah virus infections
EA039561B1 (ru) Соединения для лечения вирусных инфекций filoviridae
HK1258795B (en) Methods for treating filoviridae virus infections
HK1242569B (en) Methods for treating filoviridae virus infections
HK1242569A1 (en) Methods for treating filoviridae virus infections
HK40128819A (en) Methods for treating filoviridae virus infections
HK40035367A (en) A remdesivir compound for use in treating nipah virus infections
HK1259657A1 (en) Methods for treating filoviridae virus infections
EA047125B1 (ru) Способ лечения вирусной инфекции coronaviridae