ES3033634T3 - Multi-kinase inhibitor compound, and crystal form and use thereof - Google Patents

Multi-kinase inhibitor compound, and crystal form and use thereof

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ES3033634T3 ES17879808T ES17879808T ES3033634T3 ES 3033634 T3 ES3033634 T3 ES 3033634T3 ES 17879808 T ES17879808 T ES 17879808T ES 17879808 T ES17879808 T ES 17879808T ES 3033634 T3 ES3033634 T3 ES 3033634T3
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Abstract

La presente invención se refiere a un compuesto representado por la fórmula (I) o una sal farmacéuticamente aceptable y su estereoisómero, donde R1, R2, X, Y, P, W y Ar son como se definen en la descripción. El compuesto de fórmula (I) de la presente invención puede utilizarse en la preparación de un fármaco para el tratamiento de cánceres mediados por anomalías de multiquinasas. También se proporciona una forma cristalina I de un compuesto 4-(5-(2-clorofenil)-3-metil-2,10-dihidropirazol[4,3-b]pirido[4,3-e] [1,4]diazepin-8-il)morfolina, en donde en un patrón de difracción de rayos X en polvo de la forma cristalina I, hay picos característicos a 7,4 ± 0,2°, 17,9 ± 0,2°, 18,9 ± 0,2°, 19,4 ± 0,2°, 21,5 ± 0,2° y 23,7 ± 0,2°. (Traducción automática con Google Translate, sin valor legal)

Description

DESCRIPCIÓN
Compuesto inhibidor multicinasas, y forma cristalina y uso del mismo
CAMPO TÉCNICO
La invención pertenece al campo de la tecnología de la medicina, particularmente se refiere a un compuesto inhibidor multicinasas, una forma cristalina y uso del mismo.
ANTECEDENTES
La división celular normal es esencial para la salud del cuerpo y la supervivencia de los órganos celulares. Durante este proceso, el material intracelular se recombina completamente, y un huso bipolar separa dos copias idénticas del cromosoma en dos células hijas. Cuando ocurre un error en el proceso de mitosis, el número cromosómico en la célula será anormal, que puede conducir a muerte celular o promover el desarrollo de células normales a células tumorales. El proceso de mitosis depende principalmente de tres mecanismos: @ localización de proteínas;@proteólisis; @ fosforilación. Durante los procesos, participan algunas serina/treonina cinasas, también conocidas como cinasas mitóticas.
La cinasa Aurora es un tipo de cinasas mitótica y fue descubierta en 1995. La expresión de la cinasa Aurora se observó por primera vez en tejido de tumor humano en 1998. Ahora se ha convertido en un objetivo de interés para la investigación contra el cáncer. La familia de la cinasa Aurora incluye tres cinasas altamente homólogas: Aurora A, Aurora B y Aurora C. Entre ellas, la Aurora A y la Aurora B son detectables.
Se ha demostrado ahora que la Aurora A es un oncogén, cuya expresión en exceso bloquea el correcto ensamblaje de complejos del punto de control mitótico, dando como resultado la inestabilidad genética y la formación de tumores. Aurora B es una cinasa importante que regula la mitosis de células normales. La expresión en exceso de Aurora B es generalizada en tumores. Las células tumorales se vuelven más sensibles cuando se inhibe Aurora B. En vista de las funciones clave de Aurora A y Aurora B en el proceso de la mitosis celular, la investigación y el desarrollo de fármacos antitumorales que se dirigen a la cinasa Aurora han atraído cada vez más atención. Además, las cinasas Aurora son ineficaces contra células no proliferantes puesto que se expresan y activan en la mitosis. Por lo tanto, los inhibidores de cinasas Aurora pertenecen a fármacos antitumorales selectivos y tendrán mayores ventajas con respecto a otros fármacos citotóxicos no específicos.
Además de estar asociados a la expresión en exceso de cinasas mitóticas, el crecimiento tumoral y la migración también dependen de la producción de un gran número de nuevos vasos sanguíneos, en los que la vía de VEGF/VEGFR (factor de crecimiento endotelial vascular/ receptor del factor de crecimiento endotelial vascular) desempeña una función clave en la neovascularización tumoral. Entre ellos, VEGFR es un tipo de glucoproteína transmembranaria de tirosina cinasa que consiste en una región extracelular compuesta de 7 dominios similares a Ig, un dominio transmembranario y una región estructural de tirosina cinasa citoplásmica. Existen tres subtipos de VEGFR, que son VEGFR1, VEGFR2 y VEGFR3. La conformación de VEGFR cambia después de la unión con VEGF, que conduce a la dimerización del receptor, autofosforilación del sitio de tirosina en el segmento intracelular y activación de la vía de transducción de señales aguas abajo. VEGFR2 (KDR) se distribuye principalmente en células endoteliales vasculares y células madre hematopoyéticas. VEGFR2 (KDR) está relacionado estrechamente con la disfunción del sistema hematopoyético antes de lesiones proliferativas malignas, tales como trombocitemia, trombocitemia primaria, mielofibrosis (MF), mielofibrosis idiopática crónica (IMF), policitemia (PV), síndrome mielodisplásico precanceroso y tumores malignos hematológicos. Entre ellos, los tumores malignos hematológicos incluyen, pero no se limitan a, leucemia (linfoma no hodgkiniano), enfermedad de Hodgkin (también conocida como linfoma de Hodgkin) y mieloma, por ejemplo, leucemia linfoblástica aguda (LLA), leucemia mieloide aguda (LMA), leucemia promielocítica aguda (LPA), leucemia linfocítica crónica (LLC), leucemia mieloide crónica (LMC), leucemia neutrofílica crónica (LNC), etc.
Actualmente, existen inhibidores clínicos contra Aurora A y Aurora B, respectivamente, así como inhibidores contra VEGFR. Sin embargo, no están disponibles simultáneamente inhibidores multicinasas que sean eficaces contra las cinasas anteriores. El documento de patente WO2013123840A1 desvela una clase de derivados de azabenzo[f]azuleno que tienen efectos antitumorales sin mecanismo terapéutico del mismo. El documento de patente EP 2818171 A1 desvela derivados de aza-benzo[f]azuleno y su uso en el tratamiento del cáncer, pero ninguno de los compuestos desvelados cumple los criterios de que R<4>no pueda ser alquilo C<1-6>cuando Y es CR<3>, P es CR<4>y W es N de la presente invención. El documento de patente WO 2006/040036 A1 desvela pirazolobenzodiacepinas como inhibidores para CDK2, y el documento de patente CN 1348455 A desvela compuestos de pirazolobenzodiacepinas. Sin embargo, estos documentos no desvelan el compuesto representado por la fórmula (I) según la presente invención, en la que W se define como N.
SUMARIO DE LA INVENCIÓN
La presente invención es como se define en las reivindicaciones adjuntas. En general, la presente invención proporciona una clase de compuestos (inhibidores multicinasas) mostrados en las fórmulas (I) y (II), o sales farmacéuticamente aceptables o estereoisómeros de los mismos, capaces de inhibir, regular y/o modular la actividad de una o más proteínas cinasas tales como cinasa Aurora y cinasa VEGFR; una forma cristalina I del compuesto mostrado en la fórmula (III); y formulaciones farmacéuticas y composiciones farmacéuticas que comprenden los compuestos anteriores y/o la forma cristalina I, para su uso en el tratamiento de enfermedades mediadas por estas anomalías de cinasa, particularmente enfermedades relacionadas con el cáncer. La invención también proporciona métodos de preparación de los compuestos anteriores y forma cristalina, y los compuestos, forma cristalina, formulaciones farmacéuticas y/o composiciones farmacéuticas para su uso en el tratamiento de las enfermedades descritas anteriormente en mamíferos, particularmente seres humanos.
Con el fin anterior, la presente invención proporciona en primer lugar un compuesto mostrado en la fórmula (I), o sales farmacéuticamente aceptables o estereoisómeros del mismo:
en donde,
X se selecciona de CH o N;
R<1>se selecciona del grupo que consiste en hidrógeno, alquilo C<1-6>, cicloalquilo C<3-6>, alcoxi C<1-6>, alquilo C<1-6>halogenado y alcoxi C<1-6>halogenado;
R<2>se selecciona del grupo que consiste en hidrógeno, alquilo C<1-6>y cicloalquilo C<3-6>;
Y es CR<3>;
P es CR<4>;
W es N;
R<3>se selecciona del grupo que consiste en hidrógeno, hidroxilo, amino, carboxilo, ciano, nitro, halógeno, alquilo C<1-6>, alcoxi C<1-6>, cicloalquiloxi C<3-6>, oxacicloalquiloxi C<5-8>, alcoxi C<1-6>halogenado, alquenilo C<2-8>, alquinilo C<2-8>, cicloalquil C<3-6>-amino, alquil C<1-6>-sulfonilo, cicloalquil C<3-8>-sulfonilo, alquil C<1-6>-carbonilo, cicloalquil C3-6-carbonilo, -NRn-(CH2)n-N(R7)(R8), alquiltio C<1-6>-(CH<2>)n-, -(CH<2>)n-cicloalquilo de (3-14) miembros, -(CH<2>)n-arilo de (6-14) miembros, -(CH<2>)n-heterociclilo de (5-14) miembros y -(CH<2>)n-heteroarilo de (5-14) miembros; en donde, n=0-6; el heterociclilo o heteroarilo tiene al menos un heteroátomo seleccionado de O, S y N, y un átomo de S formador de anillo puede estar opcionalmente oxidado a S(O) o S(O)<2>, un átomo de C formador de anillo en cicloalquilo, arilo, heterociclilo o heteroarilo puede estar opcionalmente oxidado a C(O); y cicloalquilo, arilo, heteroarilo o heterociclilo se pueden sustituir opcionalmente con uno o más alquilo C<1-3>o cicloalquilo C<3-6>independientes;
R<4>es -(CH<2>)n-heterociclilo de (5-14) miembros, en donde, n=0-6; el heterociclilo tiene al menos un heteroátomo seleccionado de O, S y N, un átomo de S formador de anillo puede estar opcionalmente oxidado a S(O) o S(O)<2>, y un átomo de C formador de anillo puede estar opcionalmente oxidado a C(O); y el heterociclilo se puede sustituir opcionalmente con uno o más alquilo C<1-3>o cicloalquilo C<3-6>independientes;
R<7>y R8 se seleccionan independientemente del grupo que consiste en hidrógeno, alquilo C<1-6>, cicloalquilo C<3>-6, alcoxi C<1-6>, alquilo C<1-6>halogenado o alcoxi C<1-6>halogenado;
Ar se selecciona del grupo que consiste en cicloalquilo de 3-14 miembros, arilo de 6-14 miembros, heterociclilo de 5-14 miembros y heteroarilo de 5-14 miembros; el heterociclilo o heteroarilo tiene al menos un heteroátomo seleccionado de O, S y N, y un átomo de S formador de anillo puede estar opcionalmente oxidado a S(O) o S(O)<2>, un átomo de C formador de anillo en cicloalquilo, arilo, heterociclilo o heteroarilo puede estar opcionalmente oxidado a C(O); y Ar se puede sustituir opcionalmente con 1 a 3 R6;
cada R6 se selecciona independientemente del grupo que consiste en hidrógeno, hidroxilo, amino, carboxilo, ciano, nitro, halógeno, alquilo C<1-6>, cicloalquilo C<3-6>, alcoxi C<1-6>, cicloalquiloxi C<3-6>, alcoxi C<1-6>halogenado, alquilo C<1-6>halogenado, cicloalquilo C<3-6>, alquenilo C<2-8>, alquinilo C<2-8>, -NRn-(CH2)n-N(R9)(R10), aminoalquilo C<1-6>, cicloalquil C3-6-amino, alquil C<1-6>-sulfonilo, cicloalquil C3-8-sulfonilo, alquil C<1-6>-carbonilo, cicloalquil C<3-6>-carbonilo, alquiltio C<1-6>, -(CH<2>)n-cicloalquilo de (6-14) miembros, -(CH<2>)n-arilo de (6-14) miembros, -(CH<2>)nheterociclilo de (5-14) miembros y -(CH<2>)n-heteroarilo de (5-14) miembros; en donde n=0-6, y cicloalquilo, arilo, heteroarilo o heterociclilo se pueden sustituir opcionalmente con uno o más alquilos C<1-3>independientes; R<9>y R<10>se seleccionan independientemente del grupo que consiste en hidrógeno, alquilo C<1-6>, cicloalquilo C<3-6>, alcoxi C<1-6>, alquilo C<1-6>halogenado y alcoxi C<1-6>halogenado; y
R<11>se selecciona del grupo que consiste en hidrógeno, alquilo C<1-6>y cicloalquilo C<3-6>.
Una realización de la presente invención se refiere al compuesto mencionado anteriormente mostrado en la fórmula (I) , sales farmacéuticamente aceptables del mismo, o estereoisómeros del mismo, en donde
R<1>se selecciona de alquilo C<1-3>, preferentemente metilo o etilo;
R<2>se selecciona del grupo que consiste en hidrógeno, metilo y etilo;
X es N;
Ar se selecciona del grupo que consiste en arilo de 6-14 miembros o heteroarilo de 5-10 miembros; el heteroarilo tiene al menos un heteroátomo seleccionado de O, S y N, y un átomo de S formador de anillo puede estar opcionalmente oxidado a S(O) o S(O)<2>, y un átomo de C formador de anillo en arilo y heteroarilo puede estar opcionalmente oxidado a C(O), en donde Ar se puede sustituir opcionalmente con 1 a 3 R6; y cada R6 se selecciona independientemente del grupo que consiste en hidrógeno, amino, ciano, halógeno, alquilo C<1-4>, trifluorometilo, metilsulfonilo, -(CH<2>)n-heterociclilo de (5-10) miembros, -(CH<2>)n-heteroarilo de (5 10) miembros, en donde n=0-6, y el anillo de heteroarilo y heterociclilo se pueden sustituir opcionalmente con uno o más alquilos C<1-3>independientes.
Una realización de la presente invención se refiere al compuesto mencionado anteriormente mostrado en la fórmula (II) , sales farmacéuticamente aceptables del mismo, o estereoisómeros del mismo:
en donde,
Ar se selecciona del grupo que consiste en fenilo y heteroarilo de 5-6 miembros; el heteroarilo tiene al menos un heteroátomo seleccionado de O, S y N, y un átomo de S formador de anillo puede estar opcionalmente oxidado a S(O) o S(O)<2>, un átomo de C formador de anillo en arilo y heteroarilo puede estar opcionalmente oxidado a C(O), en donde Ar se puede sustituir opcionalmente con 1 a 3 R6;
cada R6 se selecciona independientemente del grupo que consiste en hidrógeno, amino, ciano, halógeno, alquilo C<1-4>, trifluorometilo y metilsulfonilo, y el halógeno es preferentemente cloro;
R<3>se selecciona del grupo que consiste en hidrógeno, hidroxilo, amino, carboxilo, ciano, nitro, halógeno, alquilo C<1-4>, alcoxi C<1-4>, cicloalquiloxi C<3-6>, oxacicloalquiloxi C<5-8>, alcoxi C<1-4>halogenado, alquenilo C<2-6>, alquinilo C<2-6>, cicloalquil C3-6-amino, alquil C1-4-sulfonilo, cicloalquil C3-8-sulfonilo, C<1-4>alquilcarbonilo, cicloalquil C3-6-carbonilo, -NRn-(CH2)n-N(R7)(R8), -(CH<2>)n-cicloalquilo de (3-14) miembros, -(CH<2>)nheterociclilo de (5-11) miembros y -(CH<2>)n-heteroarilo de (5-10) miembros; en donde, n=0-6; el heterociclilo o heteroarilo tiene al menos un heteroátomo seleccionado de O, S y N, y un átomo de S formador de anillo puede estar opcionalmente oxidado a S(O) o S(O)<2>, y un átomo de C formador de anillo en cicloalquilo, heterociclilo o heteroarilo puede estar opcionalmente oxidado a C(O); y cicloalquilo, heteroarilo y heterociclilo se pueden sustituir opcionalmente con uno o más alquilo C<1-3>o cicloalquilo C<3-6>independientes;
R<4>es -(CH<2>)n-heterociclilo de (5-11) miembros, en donde, n=0-6; el heterociclilo tiene al menos un heteroátomo seleccionado de O, S y N, un átomo de S formador de anillo puede estar opcionalmente oxidado a S(O) o S(O)<2>, y un átomo de C formador de anillo puede estar opcionalmente oxidado a C(O); y el heterociclilo se puede sustituir opcionalmente con uno o más alquilo C<1-3>o cicloalquilo C<3-6>independientes; R<7>y R8 se seleccionan independientemente de hidrógeno, metilo, etilo, isopropilo o ciclopropilo; y
R<11>se selecciona del grupo que consiste en hidrógeno, alquilo C<1-6>y cicloalquilo C<3-6>.
Una realización de la presente invención se refiere al compuesto mencionado anteriormente mostrado en la fórmula (I) o (II), sales farmacéuticamente aceptables del mismo, o estereoisómeros del mismo, en donde,
Ar se puede seleccionar del grupo que consiste en:
R<3>se selecciona del grupo que consiste en: hidrógeno, metilo, etilo, isopropilo,
Una realización de la presente invención se refiere al compuesto mencionado anteriormente de la fórmula (I) o (II), sales farmacéuticamente aceptables del mismo, o estereoisómeros del mismo, en donde,
Ar se selecciona de fenilo o heteroarilo de 5-6 miembros, Ar se puede sustituir opcionalmente con 1-3 R6, cada R6 se selecciona independientemente del grupo que consiste en hidrógeno, amino, ciano, halógeno, alquilo C<1-4>, trifluorometilo o metilsulfonilo;
R<3>se selecciona de hidrógeno o alquilo C<1-4>; y
R<4>es -(CH<2>)n-heterociclilo de (5-11) miembros; en donde, n=0-6; el heterociclilo tiene al menos un heteroátomo seleccionado de O, S y N, y un átomo de S formador de anillo puede estar opcionalmente oxidado a S(O) o S(O)<2>, y un átomo de C formador de anillo puede estar opcionalmente oxidado a C(O); y el heterociclilo se puede sustituir opcionalmente con uno o más alquilo C<1-3>o cicloalquilo C<3-6>independientes. Una realización de la presente invención se refiere al compuesto mencionado anteriormente de la fórmula (I) o (II), sales farmacéuticamente aceptables del mismo, o estereoisómeros del mismo, en donde,
Ar se selecciona de fenilo o piridilo; Ar se puede sustituir opcionalmente con 1 a 3 R6, en donde cada R6 se selecciona independientemente del grupo que consiste en hidrógeno, amino, ciano, halógeno, alquilo C<1-4>, trifluorometilo y metilsulfonilo;
R<3>se selecciona de hidrógeno o alquilo C<1-4>; y
R<4>es -(CH<2>)n- monoheterociclilo de (5-6) miembros o -(CH<2>)n-heterociclilo condensado de (7-11) miembros, en donde, n=0-6; el heterociclilo tiene al menos un heteroátomo seleccionado de O, S y N, y un átomo de S formador de anillo puede estar opcionalmente oxidado a S(O) o S(O)<2>, y un átomo de C formador de anillo puede estar opcionalmente oxidado a C(O); y el heterociclilo se puede sustituir opcionalmente con uno o más alquilo C<1-3>o cicloalquilo C<3-6>independientes; y preferentemente R<4>se selecciona del grupo que consiste en:
n=0-3; en donde el heterociclilo se puede sustituir opcionalmente con uno o más grupos alquilo C<1-3>o grupos cicloalquilo C<3-6>independientes.
En una realización de la presente invención, el compuesto mencionado anteriormente mostrado como fórmula (I) o (II), sales farmacéuticamente aceptables del mismo o estereoisómeros del mismo, se muestra en la Tabla 1:
Tabla 1
Los compuestos específicos desvelados en la Tabla 1 que no se encuentran bajo el alcance de las reivindicaciones adjuntas se proporcionan como ejemplos de referencia.
Puesto que la forma cristalina del compuesto se diferencia enormemente de otras formas en términos de estabilidad y solubilidad, el estudio de la forma cristalina es muy importante en el desarrollo del fármaco. Los presentes inventores estudiaron un compuesto de la fórmula (III) del siguiente modo y obtuvieron una forma cristalina del compuesto. Basándose en esto, la presente invención también proporciona una forma cristalina I del compuesto de la fórmula (III).
La forma cristalina I del compuesto mostrada en fórmula (III), 4-(5-(2-clorofenil)-3-metil-2,10-dihidropirazolo[4,3-b]pirido[4,3-e][1,4]diazepin-8-il) morfolina, tiene picos característicos en 7,4±0,2°, 17,9±0,2°, 18,9±0,2°, 19,4±0,2°, 21,5±0,2° y 23,7±0,2° en el patrón de difracción de rayos X de polvo. En una realización específica de la difracción de rayos X de polvo de la presente invención, se puede usar radiación de Cu-Ka, y los picos característicos se representan en ángulos 20;
En una realización de la invención, además de los picos característicos descritos anteriormente, la forma cristalina I del compuesto mostrado en la fórmula (III) también tiene picos característicos en 14,0 ±0,2 °, 15,0 ±0,2 °, 20,7 ±0,2 ° y 25,4 ±0,2 °.
En una realización de la invención, además de los picos característicos descritos anteriormente, la forma cristalina I del compuesto mostrado en la fórmula (III) también tiene picos característicos en 11,7 ±0,2 °, 22,8 ±0,2 ° y 27,8 ±0,2 ° representados en ángulos 20 en el patrón de difracción de rayos X de polvo.
La invención también proporciona un método de preparación de la forma cristalina I del compuesto de la fórmula (III), que puede comprender:
disolver el compuesto mostrado en la fórmula (III) en un disolvente único o mixto con calentamiento, y enfriar para precipitar la forma cristalina I;
o
suspender el compuesto mostrado en la fórmula (III) en un disolvente único o mixto, agitar y filtrar para obtener la forma cristalina I;
o
disolver el compuesto de la fórmula (III) en un disolvente único o mixto, y concentrar a vacío para obtener la forma cristalina I.
En una realización de la presente invención, el disolvente único o mixto usado en el método anterior para preparar la forma cristalina I puede ser uno o más seleccionados del grupo que consiste en metanol, etanol, tetrahidrofurano, 2-metiltetrahidrofurano, diclorometano, dicloroetano, acetato de etilo, acetonitrilo, sulfóxido de dimetilo, sulfóxido de dimetilo/agua, metanol/tetrahidrofurano, metanol/2-metiltetrahidrofurano, metanol/diclorometano, etanol/2-metiltetrahidrofurano y diclorometano/agua; preferentemente metanol, etanol, tetrahidrofurano, 2-metiltetrahidrofurano, sulfóxido de dimetilo, sulfóxido de dimetilo/agua, metanol/tetrahidrofurano, metanol/2-metiltetrahidrofurano, etanol/2-metiltetrahidrofurano y/o diclorometano/agua.
El "sulfóxido de dimetilo/agua" de la presente invención significa una mezcla de sulfóxido de dimetilo y agua; "metanol/tetrahidrofurano" significa una mezcla de metanol y tetrahidrofurano; "metanol/2-metiltetrahidrofurano" significa una mezcla de metanol y 2-metiltetrahidrofurano, "metanol/diclorometano" significa una mezcla de metanol y diclorometano, "etanol/2-metiltetrahidrofurano" significa una mezcla de etanol y 2-metiltetrahidrofurano, y "diclorometano/agua" significa una mezcla de diclorometano y agua.
En una realización de la presente invención, el disolvente único o mixto mencionado anteriormente se usa en una cantidad requerida para garantizar la disolución de todas las alimentaciones, por ejemplo, el volumen del disolvente único o mixto requerido para 1 g del compuesto mostrado en la fórmula (III) es de 90 ml a 200 ml.
La relación en volumen entre el disolvente mixto que se va a usar puede estar en el intervalo de 0,1-20:1, preferentemente en el intervalo de 1-10:1, y más preferentemente en el intervalo de 1-5:1. Por ejemplo, etanol/2-metiltetrahidrofurano es 5:1, diclorometano/agua es 2:1, metanol/diclorometano es 5:1, y similares.
La invención también proporciona un método de preparación de la forma cristalina I del compuesto mostrado en la fórmula (III), que puede comprender:
lavar el compuesto mostrado en la fórmula (III) con una cantidad apropiada de un disolvente único o mixto, agitar, filtrar (preferentemente filtrar bajo una presión reducida) y secar para obtener la forma cristalina I.
El disolvente único o mixto es uno o más seleccionados de metanol, etanol, tetrahidrofurano, 2-metiltetrahidrofurano, diclorometano, dicloroetano, acetato de etilo, acetonitrilo, sulfóxido de dimetilo, sulfóxido de dimetilo/agua, metanol/tetrahidrofurano, metanol/2-metiltetrahidrofurano, metanol/diclorometano, etanol/2-metiltetrahidrofurano, diclorometano/agua; preferentemente metanol, etanol, tetrahidrofurano, 2-metiltetrahidrofurano, sulfóxido de dimetilo, sulfóxido de dimetilo/agua, metanol/tetrahidrofurano, metanol/2-metiltetrahidrofurano, etanol/2-metiltetrahidrofurano y/o diclorometano/agua.
La invención también proporciona un método de preparación del compuesto mostrado en la fórmula (III), que comprende:
(1) hacer reaccionar un compuesto mostrado en la fórmula (III-A) con un compuesto mostrado en la fórmula (III-B) para dar un compuesto de la fórmula (III-C);
(2) hacer reaccionar el compuesto mostrado en la fórmula (III-C) con un compuesto mostrado en la fórmula (III-D) para dar un compuesto de la fórmula (III-E);
(3) desproteger el compuesto mostrado en la fórmula (III-E) para dar un compuesto mostrado en la fórmula (III-F) o (III-F') como estado de transición;
(4) obtener el compuesto mostrado en la fórmula (III) a partir del compuesto mostrado en la fórmula (III-F) o (III-F');
en donde la abreviatura "PMB" significa p-metoxibencilo.
La invención también proporciona una formulación farmacéutica que comprende los compuestos mencionados anteriormente de la fórmula (I) o (II), y sales farmacéuticamente aceptables o estereoisómeros de los mismos.
En una realización de la invención, la formulación farmacéutica puede comprender uno o más vehículos farmacéuticamente aceptables, y se puede administrar por vía oral, por vía parenteral, por vía rectal o por administración pulmonar a un paciente o sujeto que lo necesita. Para administración por vía oral, la composición farmacéutica se puede formular en una formulación sólida convencional, tal como un comprimido, una cápsula, una píldora y un gránulo, etc.; o una formulación líquida oral, tal como una disolución oral, una suspensión oral y un jarabe, etc. Una carga adecuada, un aglutinante, un agente disgregante, un lubricante, o similares, se puede incorporar cuando se prepara la formulación oral. Para administración parenteral, la composición farmacéutica se puede formular como una inyección, que incluye un líquido para inyección, un polvo estéril para inyección y una disolución concentrada para inyección. Cuando una inyección se formula, la formulación se puede producir por un método convencional en la técnica de la medicina. Es posible formular la inyección con agentes adicionales apropiados según las propiedades del fármaco, o sin agentes adicionales. Para administración rectal, la composición farmacéutica se puede formular como un supositorio o similares. Para administración pulmonar, la composición farmacéutica se puede formular como un inhalante o un espray, etc.
La presente invención también proporciona una composición farmacéutica que comprende el compuesto mencionado anteriormente de la fórmula (I) o (II) o sales farmacéuticamente aceptables o estereoisómeros del mismo, y uno o más segundos agentes terapéuticos activos.
En una realización específica de la presente invención, la composición se puede usar en una administración combinada, en una "cantidad terapéuticamente eficaz", del compuesto mencionado anteriormente de la fórmula (I) o (II) o sales farmacéuticamente aceptables o estereoisómeros del mismo, junto con uno o más segundos agentes activos terapéuticos, tales como administración secuencial, administración simultánea, alternativamente, los principios terapéuticamente activos se formulan en una formulación de compuesto para administración.
El segundo agente activo terapéutico es un antimetabolito, inhibidor del factor de crecimiento, inhibidores de la mitosis, hormonas antineoplásicas, agentes de alquilación, metales, inhibidores de la topoisomerasa, fármacos de hormona, inmunomoduladores, genes supresores de tumores, vacunas contra el cáncer, puntos de control inmunitario o anticuerpos relacionados con la inmunoterapia tumoral o fármacos de molécula pequeña.
La invención también proporciona los compuestos mencionados anteriormente de la fórmula (I) o (II) o sales farmacológicamente aceptables o estereoisómeros de los mismos, o la formulación farmacéutica o composición farmacéutica mencionadas anteriormente, para su uso en el tratamiento de cáncer mediado por multicinasas, tal como cáncer de pulmón, carcinoma de células escamosas, cáncer de vejiga, cáncer gástrico, cáncer de ovario, cáncer de peritoneo, cáncer de mama, carcinoma ductal de mama, cáncer de cabeza y cuello, carcinoma endometrial, cáncer del cuerpo uterino, cáncer de recto, cáncer de hígado, carcinoma renal, tumor pélvico renal, carcinoma esofágico, adenocarcinoma esofágico, glioma, cáncer de próstata, cáncer de tiroides, cáncer de aparato reproductor femenino, carcinoma in situ, linfoma, neurofibromatosis, cáncer de huesos, cáncer de piel, cáncer cerebral, cáncer de colon, cáncer testicular, tumor del estroma gastrointestinal, cáncer de boca, cáncer de faringe, mieloma múltiple, leucemia, linfoma no hodgkiniano, corioadenoma del intestino grueso, melanoma, citoma y sarcoma.
La "cantidad terapéuticamente eficaz" usada en el presente documento se refiere a la cantidad del compuesto mencionado anteriormente, la forma cristalina I y/o la formulación farmacéutica que es capaz de al menos aliviar los síntomas de la afección en un paciente cuando se administra al paciente. La cantidad real que comprende una "cantidad terapéuticamente eficaz" variará dependiendo de una variedad de circunstancias que incluyen, pero no se limitan a, la afección particular que se va a tratar, la intensidad de la afección, la constitución y salud del paciente, y la vía de administración. Los profesionales médicos cualificados pueden determinar fácilmente la cantidad apropiada usando los métodos conocidos en la técnica del tratamiento médico.
DESCRIPCIÓN DETALLADA DE LA INVENCIÓN
El "halógeno", como se usa en la presente invención, significa flúor, cloro, bromo, yodo y similares, preferentemente flúor y cloro.
Como se usa en el presente documento, "oxo" significa que cualquier átomo de C en el sustituyente se puede oxidar a "-C(O)-"; si un heteroátomo está contenido, el heteroátomo puede formar un óxido, por ejemplo,
se puede oxidar a
S se puede oxidar opcionalmente a S(O) o S(O)<2>.
Como se usa en el presente documento, "halogenado" significa que cualquier átomo de hidrógeno en el sustituyente se puede sustituir con uno o más halógenos que son idénticos o diferentes. "Halógeno" se define como antes.
El "alquilo C W , como se usa en la presente invención, significa un grupo alquilo lineal o ramificado obtenido retirando un átomo de hidrógeno de un resto de hidrocarburo que tiene 1 a 6 átomos de carbono, tal como metilo, etilo, n-propilo, isopropilo, n-butilo, isobutilo, sec-butilo, terc-butilo, n-pentilo, isopentilo, 2-metilbutilo, neopentilo, 1 -etilpropilo, n-hexilo, isohexilo, 4-metilpentilo, 3-metilpentilo, 2-metilpentilo, 1 -metilpentilo, 3,3-dimetilbutilo, 2,2-dimetilbutilo, 1,1-dimetilbutilo, 1,2-dimetilbutilo, 1,3-dimetilbutilo, 2,3-dimetilbutilo, 2-etilbutilo y 1 -metil-2-metilpropilo, etc. El "alquilo C<1-4>" significa los ejemplos anteriores que tienen 1 a 4 átomos de carbono.
El "alquenilo C<2 -8>", como se usa en la presente invención, significa un grupo alquenilo lineal o ramificado obtenido retirando un átomo de hidrógeno de un resto de olefina que tiene 2 a 8 átomos de carbono que contiene un doble enlace carbono-carbono, tal como vinilo, 1-propenilo, 2-propenilo, 1-butenilo, 2-butenilo, 1,3-butadienilo, 1-pentenilo, 2-pentenilo, 3-pentenilo, 1,3-pentadienilo, 1,4-pentadienilo, 1-hexenilo y 1,4-hexadienilo, etc.
El "grupo alquinilo C<2 -8>" de la presente invención significa un grupo alquino lineal o ramificado obtenido retirando un átomo de hidrógeno de un resto alquino que tiene 2 a 8 átomos de carbono que contiene un triple enlace carbonocarbono, tal como etinilo, propinilo, 2-butinilo, 2-pentinilo, 3-pentinilo, 4-metil-2-pentinilo, 2-hexinilo, 3-hexinilo, etc. El "alquil C<1 -6>-carbonilamino", "alquil C<1-6>-aminocarbonilo", "alquil C<1-6>-sulfonilo", "alquil C<1-6>-carbonilo", "alquiltio C<1-6>" de la presente invención significa alquil C<1-6>-C(O)-NH-, alquil C<1-6>-NH-C(O)-, alquil C<1-6>-S(O)<2>-, alquil C<1-6>-C(O)-, alquil C<1-6>-S-, respectivamente; el "alquilo C<1-6>" es como se ha definido anteriormente, preferentemente "alquilo C<1-4>".
El "alcoxi C<1-6>" de la presente invención significa un grupo en el que un "alquilo C<1-6>" como se ha definido anteriormente está unido a un átomo de oxígeno, que a su vez está unido a un resto parental, es decir, grupo "alquil C<1-6>-O-", tal como metoxi, etoxi, propoxi, isopropoxi, n-butoxi, terc-butoxi, n-pentiloxi, neopentiloxi y n-hexiloxi, etc. El "alcoxi C<1 -4>" se refiere a los ejemplos mencionados anteriormente que tienen 1 a 4 átomos de carbono, es decir, grupos "alquil C<1-4>-O-".
El "cicloalquilo", "arilo", "heterociclilo" y "heteroarilo" de la presente invención incluyen un sistema monocíclico y un sistema de anillos condensados (sistema bicíclico o sistema policíclico). El sistema monocíclico se refiere a un grupo en forma de un solo anillo, y sistema de anillos condensados se refiere a una estructura de anillos policíclica formada por dos o más estructuras cíclicas conectadas en forma de anillos condensados en orto, espiro o puenteados. El anillo condensado en orto se refiere a una estructura de anillos condensados formada por dos o más estructuras cíclicas que comparten dos átomos de anillo adyacentes entre sí (es decir, que comparten un enlace). El anillo puenteado se refiere a una estructura de anillos condensados formada por dos o más estructuras cíclicas que comparten dos átomos de anillo no adyacentes entre sí. El anillo espiro se refiere a una estructura de anillos condensados formada por dos o más estructuras cíclicas que comparten un átomo del anillo entre sí. El cicloalquilo, arilo, heterociclilo o heteroarilo definido por el número de átomos en la presente invención incluyen las estructuras monocíclicas y de anillos condensados que se pueden formar, a menos que se especifique lo contrario.
El "cidoalquilo" de la presente invención significa un cicloalquilo monocíclico, un sistema de cicloalquMo bicíclico o un sistema de cicloalquilo policíclico. Estos grupos pueden estar saturados o insaturados, pero no son aromáticos. El cicloalquilo monocíclico puede ser cicloalquilo C<3-8>, cicloalquilo C<3-6>, cicloalquilo C<5-8>y similares. Los ejemplos de cicloalquilo monocíclico incluyen, pero no se limitan a, ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopentilo, ciclohexilo, cicloheptilo, ciclooctilo, ciclobutenilo, ciclopentenilo, ciclohexenilo, 1,4-ciclohexadienilo, cicloheptenilo, 1,4-cicloheptadienilo, ciclooctenilo, 1,5-ciclooctadienilo y similares. El cicloalquilo condensado en orto puede ser un cicloalquilo condensado en orto de 6-12 miembros, cicloalquilo condensado en orto de 7-10 miembros y los ejemplos típicos de los mismos incluyen, pero no se limitan a, bicíclico[3.1.1]heptano, bicíclico[2.2.1]heptano, bicíclico[2.2.2]octano, bicíclico[3.2.2]nonano, bicíclico[3.3.1]nonano y bicíclico[4.2.1]nonano. El cicloalquilo espirocíclico puede ser grupos espirocíclicos de 6-12 miembros, grupos espirocíclicos de 7-11 miembros o similares, y los ejemplos de los mismos incluyen, pero no se limitan a,
00<5>co<J>00<7>00■)OO<5>00<7>
OO<y>OO
El cicloalquilo puenteado puede ser grupos de anillo puenteados de 6-12 miembros y grupos de anillo puenteados de 7-11 miembros, y los ejemplos de los mismos incluyen, pero no se limitan a:
El "cicloalquilo de 3-14 miembros", "cicloalquilo de 3-10 miembros" y "cicloalquilo de 3-6 miembros" de la presente invención incluyen estructuras monocíclicas y de anillos condensados que se pueden formar, a menos que se especifique lo contrario.
El "heterociclilo" de la presente invención significa un grupo cíclico no aromático en el que al menos un anillo átomo de carbono está sustituido con un heteroátomo seleccionado de O, S y N, preferentemente sustituido con 1-3 heteroátomos, y en donde un átomo de carbono, un átomo de nitrógeno y un átomo de azufre se pueden oxidar.
"Heterociclilo" significa un sistema heterociclilo monocíclico, heterociclilo bicíclico o heterociclilo policíclico, que incluye heterociclilo saturado, parcialmente saturado, pero excluyendo anillos aromáticos. El monoheterociclilo puede ser heterociclilo de 3-8 miembros, heterociclilo saturado de 3-8 miembros, heterociclilo de 3-6 miembros, heterociclilo de 4-7 miembros, heterociclilo de 5-7 miembros, heterociclilo de 5-6 miembros, heterociclilo que contiene oxígeno de 5-6 miembros, heterociclilo que contiene nitrógeno de 5-6 miembros, heterociclilo saturado de 5-6 miembros o similares. Los ejemplos de monoheterociclilo incluyen, pero no se limitan a, aziridinilo, oxiranilo, tiiranilo, azetidinilo, oxetanilo, tietanilo, tetrahidrofuranilo, tetrahidropirrolilo, tetrahidrotiofenilo, imidazolidinilo, pirazolidinilo, 1,2-oxazolidinilo, 1,3-oxazolidinilo, 1,2-tiazolidinilo, 1,3-tiazolidinilo, tetrahidro-2H-piranilo, tetrahidro-2H-tiopiranilo, piperidinilo, piperazinilo, morfolinilo, 1,4-dioxanilo, 1,4-tioxanilo; los ejemplos de heterociclilo parcialmente saturado incluyen, pero no se limitan a, 4,5-dihidroisooxazolilo, 4,5-dihidrooxazolilo, 2,5-dihidrooxazolilo, 2,3-dihidrooxazolilo, 3,4-dihidro-2H-pirrolilo, 2,3-dihidro-1 H-pirrolilo, 2,5-dihidro-1 H-imidazolilo, 4,5-dihidro-1 H-imidazolilo, 4,5-dihidro-1 H-pirazolilo, 4,5-dihidrógeno-3H-pirazolilo, 4,5-dihidrotiazolilo, 2,5-dihidrotiazolilo, 2H-piranilo, 4H-piranilo, 2H-tiopiranilo, 4H-tiopiranilo, 2,3,4,5-tetrahidropiridilo, 1,2-isooxazinilo, 1,4-isooxazinilo o 6H-1,3-oxazinilo y similares. El heterocíclico de anillos condensados incluye heterociclilo condensado en orto, espiroheterociclilo, heterociclilo puenteado, y puede estar saturado, parcialmente saturado o insaturado, pero no ser aromático. El heterociclilo condensado es un anillo heterocíclico monocíclico de 5 o 6 miembros condensado con el anillo de benceno, es decir, cicloalquilo monocíclico de 5 o 6 miembros, cicloalquenilo monocíclico de 5 o 6 miembros, heterociclilo monocíclico de 5 o 6 miembros, o heteroarilo monocíclico de 5 o 6 miembros. El heterociclilo condensado en orto puede ser heterociclilo condensado en orto de 6-12 miembros, heterociclilo condensado en orto de 7-11 miembros, heterociclilo condensado en orto de 6-10 miembros, heterociclilo condensado en orto saturado de 6-12 miembros y heterociclilo condensado en orto saturado de 7-11 miembros, y los ejemplos de los mismos incluyen, pero no se limitan a, 3-azabiciclo[3.1.0.]hexilo, 3,6-diazabiciclo[3.2.0]heptilo, 3,8-diazabiciclo[4.2.0]octilo, 3,7-diazabiciclo[4.2.0]octilo, octahidropi rrolo[3,4-c]pi rrolilo, octahidropirrolo[3,4-b]pi rrolilo, octahidropirrolo[3,4-b][1,4]oxazinilo, octahidro-1 H-pi rrolo[3,4-c]piridinilo, 2,3-dihidrobenzofuran-2-ilo, 2,3-dihidrobenzofuranil-3-ilo, indolin-1-ilo, indolin-2-ilo, indolin-3-ilo, 2,3-dihidrobenzotiofen-2-ilo, octahidro-1H-indolilo, octahidrobenzofuranilo.
El espiroheterociclilo puede ser espiroheterociclilo de 6-12 miembros, espiroheterociclilo de 7-11 miembros, espiroheterociclilo saturado de 7-11 miembros, espirociclilo saturado de 6-12 miembros, y los ejemplos de los mismos incluyen, no limitados a:
E ol hecterorciclilo puenteoadoo pu.ede ser hoeteorociclilo puenteado de 6-12 miembros, heterociclilo puenteado de 7-11 miembros, heterociclilo puenteado saturado de 6-12 miembros y heterociclilo puenteado saturado de 7-11 miembros, y los ejemplos de los mismos incluyen, pero se limitan a:
El heterociclilo de 5-14 miembros, heterociclilo de 5-11 miembros, heterociclilo de 5-10 miembros, heterociclilo de 6 10 miembros, heterociclilo de 7-11 miembros, heterociclilo saturado de 7-11 miembros de la presente invención incluyen estructuras monocíclicas y de anillos condensados que se pueden formar, a menos que se especifique lo contrario.
El arilo de la presente invención se refiere a un grupo cíclico aromático, que incluye un sistema monocíclico, un sistema bicíclico o un sistema policíclico, y puede ser arilo de 6-14 miembros, que incluye "arilo monocíclico de 6-8 miembros", por ejemplo, fenilo, ciclooctenilo, etc.; y "arilo de anillos condensados de 8-14 miembros", tal como pentalenilo, naftilo, fenantrilo y similares.
El término "heteroarilo", como se usa en el presente documento, se refiere a un grupo cíclico aromático en el que al menos un átomo de carbono del anillo está sustituido con un heteroátomo seleccionado de O, S y N, preferentemente 1 a 3 heteroátomos, que incluye la condición de que un átomo de carbono o un átomo de azufre se oxida, por ejemplo, el átomo de carbono se sustituye por C(O), S(O), S(O)<2>. Heteroarilo incluye heteroarilo monocíclico y heteroarilo condensado, que puede ser heteroarilo de 5-14 miembros, heteroarilo de 5-10 miembros, heteroarilo de 5-7 miembros, heteroarilo de 5-6 miembros, heteroarilo de 8-10 miembros. Los ejemplos representativos de heteroarilo monocíclico incluyen, pero no se limitan a, furanilo, imidazolilo, isoxazolilo, tiazolilo, isotiazolilo, oxadiazolilo, oxazolilo, isoxazolilo, piridilo, piridazinilo, pirimidinilo, pirazinilo, pirazolilo, pirrolilo, tetrazolilo, tiadiazolilo, tiazolilo, tienilo, triazolilo y triazinilo. El heteroarilo condensado se refiere a sistema de anillos bicíclico o policíclico condensado con fenilo, cicloalquilo, cicloalquenilo, heterociclilo o heteroarilo. El heteroarilo condensado puede ser heteroarilo de 8-12 miembros, heteroarilo de 8-10 miembros, heteroarilo de 9-10 miembros. Los ejemplos representativos de heteroarilo condensado incluyen, pero no se limitan a, bencimidazolilo, benzofuranilo, benzotienilo, benzotienilo, benzooxadiazolilo, benzotiazolilo, cinolinilo, 5,6-dihidroquinolin-2-ilo, 5,6-dihidroisoquinolin-1-ilo, indazolilo, indolilo, isoquinolilo, naftiridinilo, purinilo, quinolilo, 5,6,7,8-tetrahidroquinol-2-ilo, 5,6,7,8-tetrahidroquinolilo, 5,6,7,8-tetrahidroquinol-4-ilo, 5,6,7,8-tetrahidroisoquinol-1-ilo, 4,5,6,7-tetrahidro[c][1,2,5]oxadiazol y 6,7-dihidro[c][1,2,5]oxadiazol-4(5H)ceto. En ciertas realizaciones, el heteroarilo condensado es anillo de heteroarilo monocíclico de 5 o 6 miembros condensado con anillo de fenilo, es decir, cicloalquilo monocíclico de 5 o 6 miembros, cicloalquenilo monocíclico de 5 o 6 miembros, heterociclilo monocíclico de 5 o 6 miembros, o un heteroarilo monocíclico de 5 o 6 miembros.
El heteroarilo de 5-14 miembros, heteroarilo de 5-10 miembros, heteroarilo de 6-10 miembros, heteroarilo de 5-6 miembros y heteroarilo de 8-10 miembros de la presente invención incluyen las estructuras monocíclicas y de anillos condensados que se pueden formar, a menos que se especifique lo contrario.
Las "sales farmacéuticamente aceptables", como se usa en el presente documento, significa sales de adición farmacéuticamente aceptables y solvatos de ácidos y bases. Dichas sales farmacéuticamente aceptables incluyen sales de los siguientes ácidos: tales como ácido clorhídrico, ácido fosfórico, ácido bromhídrico, ácido sulfúrico, ácido sulfuroso, ácido fórmico, ácido toluenosulfónico, ácido metanosulfónico, ácido nítrico, ácido benzoico, ácido cítrico, ácido tartárico, ácido maleico, ácido yodhídrico, ácido alcanoico (tal como ácido acético, HOOC-(CH<2>)n-COOH (donde n es 0 a 4)), y similares. Dichas sales farmacéuticamente aceptables también incluyen sales de las bases, tales como sodio, potasio, calcio, amonio y similares. Los expertos en la técnica conocen una variedad de sales de adición farmacéuticamente aceptables no tóxicas.
El "estereoisómero" de los compuestos de la fórmula (I) o (II) de la presente invención significa un enantiómero en caso de que el compuesto de la fórmula (I) o (II) tenga un átomo de carbono asimétrico; un isómero cis-trans en caso de que el compuesto tenga un doble enlace carbono-carbono o una estructura cíclica; los tautómeros en caso de que una cetona u oxima esté presente en el compuesto. Los enantiómeros, diaestereómeros, isómeros racémicos, isómeros cis-trans, tautómeros, isómeros geométricos, epímeros y mezclas de los mismos de los compuestos de la fórmula (I) o (II) están todos incluidos dentro del alcance de la invención.
Los efectos beneficiosos de la invención:
(1) Los compuestos de la fórmula (I) o (II) y la forma cristalina I del compuesto de la fórmula (III) de la presente invención son inhibidores duales contra la mitosis y la angiogénesis.
(2) Los fármacos son más eficaces a través de la coordinación de multicinasas, y muestra mejores actividades farmacológicas tales como enzimología, citología y farmacodinámica, etc.
(3) El compuesto de la presente invención tiene mejores propiedades farmacocinéticas, propiedades fisicoquímicas y/o propiedades toxicológicas, así como capacidad para ser utilizado como fármaco.
BREVE DESCRIPCIÓN DE LOS DIBUJOS
Para ilustrar más claramente las realizaciones de la presente invención y las soluciones técnicas del estado de la técnica, los dibujos usados en las realizaciones y el estado de la técnica se introducen brevemente a continuación.
La Figura 1 es un patrón de difracción de rayos X de polvo (XRPD) de la forma cristalina I del compuesto de la fórmula (III).
La Figura 2 es un patrón de análisis térmico de barrido diferencial (DSC) de la forma cristalina I del compuesto de la fórmula (III).
REALIZACIONES
La presente invención se describirá adicionalmente con detalle a continuación con referencia a los dibujos adjuntos, para ilustrar los fines, soluciones técnicas y ventajas de la presente invención más claramente. Los ejemplos proporcionados a continuación que no se encuentran bajo el alcance de las reivindicaciones adjuntas se proporcionan solo como referencia y no son realizaciones según la invención.
Ejemplo de preparación 1: Síntesis de un producto intermedio 1-(4-metoxibencM)-5-metM-4-nitro-1H-pirazol-3-amina
Se pesó 5-metil-1H-pirazol-3-amina (300 g, 3,09 moles, 1,0 eq) en un matraz redondo de 5 l, se disolvió añadiendo agua (2800 ml) con agitación mecánica a temperatura ambiente. Se añadió bicarbonato sódico (780 g, 9,28 moles, 3 eq) en porciones, seguido de agitación durante otros 30 min después de la adición. A continuación, se añadió gota a gota anhídrido acético (592 ml, 6,2 moles, 2 eq) y lentamente al sistema de reacción durante aproximadamente 1 h a una tasa de goteo controlada. En este momento, se produjo una gran cantidad de sólido blanco espumoso. La temperatura se aumentó hasta 100 °C y el sistema de reacción se agitó durante 2 h. El sólido se disolvió gradualmente, y el sistema se clarificó. A continuación, se detuvo el calentamiento, y el sistema se enfrió hasta temperatura ambiente.
Después de agitar durante la noche, precipitó una gran cantidad de sólido cristalino blanco. Se alimentó otro lote de 5-metil-1H-pirazol-3-amina (300 g) en una reacción paralela. Después de que las reacciones se completaran, los dos lotes se combinaron y se filtraron, y el sólido se lavó con agua (500 ml * 2) y se secó dando un sólido blanco (554 g, rendimiento 62 %).
1H RMN (400 MHz, DMSO-de) 5 (ppm): 10,32 (s, 1H), 6,21 (s, 1H), 2,18 (s, 3H), 1,97 (s, 3H).
Etapa 2: Síntesis de N-(5-metM-4-mtro-1H-pirazol-3-M)acetamida
Se cargó ácido sulfúrico concentrado (2 l, aproximadamente 36,8 moles, 9,2 eq) en un matraz redondo de 5 l, y se añadió N-(5-metil-1H-pirazol-3-il)acetamida (554 g, 3,98 moles, 1 eq) en porciones durante 1 h con agitación mecánica en presencia de un baño de agua con hielo. La agitación continuó hasta que el sólido se disolvió completamente. A continuación, se añadió ácido nítrico fumante (250 ml, aproximadamente 5,7 moles, 1,4 eq) al sistema durante 2 h a una temperatura controlada inferior a 15 °C. El punto final de la reacción se monitorizó por LC-MS, después la reacción continuó durante otros 15 min. Una gran cantidad de sólido blanco precipitó inmediatamente, tras lo cual el sistema de reacción se vertió lentamente en 5 l de agua con hielo picado con agitación mecánica. La mezcla se dejó reposar durante la noche y se filtró. El sólido obtenido se lavó con agua (1000 ml * 2), obteniéndose un sólido blanco (587 g, rendimiento 80 %) después del secado por infrarrojos.
1H RMN (400 MHz, DMSO-de) 5 (ppm): 10,22 (s, 1H), 2,44 (s, 1H), 2,13 (s, 3H).
Etapa 3: Síntesis de 5-metil-4-mtro-1H-pirazol-3-amma
Se cargaron agua (1,1 l) y ácido clorhídrico concentrado (1 l, aproximadamente 12 moles, 4 eq) a un matraz redondo de cuatro bocas de 5 l, y gradualmente se calentó hasta 80 °C. Se añadió N-(5-metil-4-nitro-1H-pirazol-3-il)acetamida (587 g, 3 moles, 1 eq) en porciones durante aproximadamente 1 h con agitación mecánica. La mezcla continuó a reflujo a 100 °C durante aproximadamente 1 h hasta que el sistema se clarificó. La mezcla se filtró después del enfriamiento hasta retirar la materia insoluble. El filtrado se concentró a presión reducida para conseguir el producto en bruto, que se destruyó con metil terc-butil éter y se filtró. La torta obtenida se secó dando un sólido naranja (610 g de producto en bruto).
Etapa 4: Síntesis de 1-(4-metoxibencil)-5-metil-4-mtro-1H-pirazol-3-amma
Se cargó clorhidrato de 5-metil-4-nitro-1H-pirazol-3-amina (200 g, 1,12 moles, 1 eq) en un matraz redondo de 3 l, se disolvió añadiendo DMF (1,8 l) con agitación mecánica a temperatura ambiente, se añadió carbonato de potasio (335 g, 2,42 moles, 2,1 eq) lentamente en porciones durante aproximadamente 40 minutos, y a continuación se añadió cloruro de 4-metoxibencilo (177 g, 1,13 moles, 1 eq) gota a gota durante 30 min. El sistema de reacción se agitó a temperatura ambiente durante la noche. Se detecta por TLC y LC-MS que quedó una pequeña cantidad de material de partida. Se alimentaron otros dos lotes de clorhidrato de 5-metil-4-nitro-1H-pirazol-3-amina (200 g, 1,12 moles) en reacciones paralelas. Después de completarse las reacciones, las mezclas se filtraron. Los filtrados se combinaron, se concentraron a presión reducida hasta que quedó la mitad del disolvente, se vertieron en agua con hielo (aproximadamente 2,5 l) con agitación para precipitar el sólido amarillo parduzco, y se dejó que reposaran durante la noche. La torta de filtración se lavó con DCM (1000 ml * 3), se concentró a presión reducida, se vertió en agua con hielo (aproximadamente 1000 ml) para precipitar un sólido amarillo parduzco, y se dejó que reposara durante la noche.
El sólido precipitado anteriormente se combinó, se lavó con agua (500 ml x 2). Después del secado a vacío, el sólido se destruyó con acetato de etilo, se filtró y se secó dando un sólido amarillo (268 g, rendimiento 30 %).
1H RMN (400 MHz, DMSO-ds) 5 (ppm): 7,18 (d,J =8,6 Hz, 2H), 6,90 (d,J =8,6 Hz, 2H), 6,18 (s, 2H), 5,09 (s, 2H), 3,73 (s, 3H), 2,56 (s, 3H).
Ejemplo de preparación 2: Síntesis de un producto intermedio (6-bromo-4-yodo-piridin-3-il)(2-clorofenil)metanona
Etapa 1: Síntesis de (6-bromopiridin-3-il)(2-clorofenil)metanol
Se añadieron tetrahidrofurano anhidro (500 ml) y 2,5-dibromopiridina (100,0 g, 0,42 moles, 1,0 eq) en un matraz de cuatro bocas de 2 l, y la mezcla se enfrió hasta 2 °C con agitación en presencia de un baño de agua con hielo. A continuación, se añadió cloruro de isopropilmagnesio (210,5 ml, 2,0 M, 0,42 moles, 1,0 eq) gota a gota durante aproximadamente 0,5 h a una temperatura controlada de no más de 10 °C. El sistema de reacción se agitó a temperatura ambiente (20 °C) durante 1 h, a continuación se enfrió hasta 10 °C con un baño de agua con hielo. Se añadió gota a gota una disolución de 2-clorobenzaldehído (62,3 g, 0,443 moles, 1,05 eq) en tetrahidrofurano (200 ml) durante aproximadamente 0,5 h. Después de agitar a 10 °C durante 2 h, el punto final de la reacción se monitorizó por TLC. La disolución acuosa saturada de cloruro de amonio (300 ml) se añadió en el sistema de reacción. Después de agitar durante 10 min, la fase orgánica se separó de la mezcla y se concentró dando un aceite amarillo. La fase acuosa se extrajo con EtOAc (1,0 l x 2). Lo resultante se combinó a continuación con el aceite amarillo obtenido anteriormente, se lavó con agua (500 ml) seguido de salmuera saturada (500 ml), se secó sobre Na2SO4 anhidro y se concentró dando un aceite marrón (140 g producto en bruto).
Etapa 2: Síntesis de (6-bromopiridin-3-il)(2-clorofenil)metanona
Se añadió (6-bromopiridina-3-il)(2-clorofenil)metanol (140 g producto en bruto) en DCM (1,3 l), a continuación se añadió TEMPO (1,51 g, 9,4 mmoles) y NaBr (1,92 g, 18,8 mmoles). El sistema de reacción se enfrió hasta 3 °C en presencia de un baño de agua con hielo, y se añadió gota a gota una disolución acuosa de NaClO (1,34 moles/l, 600 l, 0,71 moles) neutralizada con NaHCO<3>(45,0 g) a una temperatura de no más de 20 °C. Después de finalizar la adición, la reacción se agitó durante 10 min, y a continuación se monitorizó el punto final de la reacción por TLC. La fase acuosa separada de la mezcla de reacción se extrajo con DCM (1,0 l). Las fases orgánicas se combinaron, se lavaron con agua (1,0 l) seguido de salmuera saturada (1,0 l) y se secaron sobre Na2SO4 anhidro. Se obtuvo aceite amarillo después de la concentración, se destruyó con 150 ml de metil terc-butil éter/500 ml de éter de petróleo obteniéndose un sólido amarillo (50,3 g, rendimiento: 39,7 % para dos etapas).
Etapa 3: Síntesis de (6-bromo-4-yodo-piridin-3-il)(2-clorofenil)metanona
Bajo una atmósfera de nitrógeno, se añadió disolución de tetrametilpiperidina litio/cloruro de magnesio (281 ml, 1,5 moles/l, 0,43 moles, 2,5 eq) en un matraz de cuatro bocas de 2 l y se enfrió hasta -65 °C en presencia de un baño de nieve carbónica/etanol. Se añadió gota a gota una disolución de (6-bromopiridin-3-il)(2-clorofenil)metanona (50,0 g, 0,17 moles, 1,0 eq) en tetrahidrofurano (50 ml) durante aproximadamente 0,5 h. A continuación, la mezcla de reacción se calentó hasta -45 °C con agitación durante 1 h, y a continuación se enfrió nuevamente hasta -65 °C. Una disolución de I<2>(129,3 g, 0,51 moles, 3,0 eq) en tetrahidrofurano (400 ml) se añadió gota a gota durante aproximadamente 1 h.
El sistema de reacción se agitó durante 20 min, y el punto final de la reacción se monitorizó por TLC. A continuación, se añadió una disolución acuosa saturada de cloruro de amonio (500 ml) y una disolución acuosa saturada de NaHSO3 (500 ml) al sistema de reacción, y se agitó durante 15 minutos, a continuación se filtró. Las materias insolubles se lavaron con acetato de etilo (500 ml * 2). Los filtrados se combinaron. La fase acuosa separada se extrajo con EtOAc (1,0 l * 2). Todas las fases orgánicas se combinaron, se lavaron con agua (800 ml) seguido por salmuera saturada (800 ml), se secaron sobre Na2SO4 anhidro y se concentraron obteniéndose un sólido amarillo. El sólido amarillo se destruyó con metil terc-butil éter (500 ml)/éter de petróleo (500 ml) y se secó dando un sólido amarillo (30 g, rendimiento: 41,8 %).
1H RMN (400 MHz, CDCla) 5 (ppm): 7,38-7,50 (m, 2H), 7,51-7,65 (m, 2H), 8,17 (s, 1H), 8,24 (s, 1H).
Ejemplo de preparación 3: Síntesis de un producto intermedio (6-bromo-4-((1-(4-metoxibencil)-5-metil-4-nitro-1H-pirazol-3-il)ammo)piridin-3-il)(2-clorofeml)metanona
Etapa 1: Síntesis de (6-bromo-4-((1-(4-metoxibencil)-5-metil-4-mtro-1H-pirazol-3-il)ammo)piridm-3-il)(2-clorofenil)metanona
Se añadió 1-(4-metoxibencil)-5-metil-4-nitro-1H-pirazol-3-amina (14,92 g, 56,9 mmoles) a tetrahidrofurano anhidro (100 ml), se disolvió con agitación bajo nitrógeno. Se añadió NaH (40 % en masa, 4,82 g, 0,11 moles) en lotes bajo un baño de hielo, y se agitó durante 1 hora después de la adición, a continuación se añadió gota a gota una disolución de (6-bromo-4-yodo-piridin-3-il)(2-clorofenil)metanona (20 g, 47,4 mmoles) en tetrahidrofurano (100 ml). La reacción se realizó durante 16 h a temperatura ambiente. El punto final de la reacción se monitorizó por TLC. Se añadió metanol (30 ml) para enfriar rápidamente la reacción, seguido de disolución saturada de cloruro de amonio (50 ml). La mezcla obtenida se filtró obteniéndose un producto amarillo (25 g, rendimiento 80 %).
1H-RMN (400 MHz, DMSO-de): 12,36 (s, 1H), 8,77 (s, 1H), 8,11 (s, 1H), 7,66-7,53 (m, 4H), 7,33 (d, J=8,8 Hz, 1H), 7,33 (d,J=8,8Hz, 1H), 6,96 (d, J=8,8 Hz, 1H), 5,39 (s, 2H), 3,75 (s, 3H), 2,73(s, 3H).
Ejemplo 1: Síntesis del compuesto 1
Etapa 1: El producto intermedio 1-3 se preparó según el método en el Ejemplo de preparación 2.
Etapa 2: El producto intermedio 1-4 se preparó según el método en el Ejemplo de preparación 3.
Etapa 3: Síntesis del producto intermedio 1-5
Se añadió el producto intermedio 1-4 (5 g, 9 mmoles) a yoduro cuproso (5,13 g, 27 mmoles) y metanosulfinato de sodio (2,76 g, 27 mmoles). A continuación, se inyectó DMSO (100 ml) después de que el reactor se sustituyera tres veces con nitrógeno. El sistema de reacción se calentó hasta 130 °C, y se hizo reaccionar durante 5 h. El punto final de la reacción se monitorizó por TLC. El producto en bruto se purificó por cromatografía en columna de gel de sílice (eluida con diclorometano) dando 1,1 g de sólido amarillo, con un rendimiento del 23 %.
Etapa 4: Síntesis del producto intermedio 1-6
Se añadió el producto intermedio 1-5 (1,1 g, 2,0 mmoles) en diclorometano (3 ml) y se disolvió. Se añadió lentamente gota a gota ácido trifluoroacético (10 ml). La mezcla se calentó hasta 70 ° C, y se hizo reaccionar durante 8 h. La LC-MS mostró el punto final de la reacción. Se evaporaron de forma rotatoria el disolvente y el ácido trifluoroacético dando 1,5 g de sólido marrón, que se usó directamente para la siguiente etapa.
Etapa 5: Síntesis del compuesto 1
Se añadió el producto intermedio 1-6 (1,5 g, 3,4 mmoles) en 2-metiltetrahidrofurano (15 ml) y se disolvió. Se añadió dicloruro de estaño dihidratado (5,4 g, 24,1 mmoles) bajo una atmósfera de nitrógeno. La mezcla se calentó hasta 100 °C, y se hizo reaccionar durante 16 h. La LC-MS mostró el punto final de la reacción. La mezcla se ajustó a pH=10 añadiendo disolución acuosa de hidróxido sódico, y se filtró con Celite. El filtrado se extrajo con 2-metiltetrahidrofurano, y se concentró. El producto en bruto se purificó por cromatografía en columna de gel de sílice (EA: DCM=1:3) obteniéndose el compuesto 1 como un sólido amarillo (60 mg, rendimiento 10 %).
1H RMN (400 MHz, CDCla) 5: 11,84 (s, 1H), 9,12 (s, 1H), 7,43-7,51 (m, 4H), 7,17 (s, 1H), 7,11 (s, 1H), 3,11 (s, 3H), 1,96 (s, 3H).
Ejemplo 2: Síntesis del compuesto 2
Etapa 1: Síntesis del producto intermedio 2-1
Se añadió el producto intermedio 1-4 (3 g, 5,4 mmoles) en tolueno (90 ml), ácido ciclopropilborónico (0,70 g, 8,1 mmoles), acetato de paladio (0,121 g, 0,54 mmoles), triciclohexilfosfina (0,310 g, 1,1 mmoles) y fosfato de potasio (4,0 g, 18,8 mmoles). El reactor se sustituyó 3 veces con nitrógeno. El sistema de reacción se calentó hasta 120 °C y se hizo reaccionar durante 16 h. El punto final de la reacción se monitorizó por TLC. La mezcla se extrajo con EA (100 ml) después del enfriamiento, y la fase acuosa separada se extrajo con EA (20 ml). Las fases orgánicas se combinaron, se lavaron con cloruro sódico acuoso saturado, se secaron sobre sulfato de sodio anhidro, se filtraron, se concentraron y se destruyeron con acetato de etilo: metil terc-butil éter (1:3, 10 ml). La mezcla se secó dando un sólido naranja (3,0 g, rendimiento 86
Etapa 2: Síntesis del producto intermedio 2-2
Se añadió el producto intermedio 2-1 (2,9 g, 5,6 mmoles) en tolueno (60 ml) y se disolvió. Se añadió gota a gota lentamente ácido trifluoroacético (30 ml). La mezcla se calentó hasta 100 °C después de la adición, y se hizo reaccionar durante 8 h. La LC-MS mostró el punto final de la reacción. Se evaporaron de forma rotatoria el disolvente y el ácido trifluoroacético dando 1,9 g de sólido marrón, que se usó directamente para la siguiente etapa.
Etapa 3: Síntesis del compuesto 2
Se añadió el producto intermedio 2-2 (1,9 g, 3,7 mmoles) en 2-metiltetrahidrofurano (35 ml) y se disolvió. Se añadió lentamente dicloruro de estaño dihidratado (5,4 g, 24,8 mmoles) bajo una atmósfera de nitrógeno. La mezcla se calentó hasta 100 °C, y se hizo reaccionar durante 16 h. La LC-MS mostró el punto final de la reacción. La mezcla se ajustó a pH=10 añadiendo disolución acuosa de hidróxido sódico, y se filtró con Celite. El filtrado se extrajo con 2-metiltetrahidrofurano, y se concentró. El producto en bruto se purificó por cromatografía en columna de gel de sílice (se eluyó con EA: DCM=1:3) obteniéndose el sólido amarillo (0,35 g, rendimiento 27 %).
1H RMN (400 MHz, CDCla) 5: 11,65 (s, 1H), 8,42 (s, 1H), 7,33-7,47 (m, 4H), 7,01 (s, 1H), 6,40(s, 1H), 1,96 (s, 3H), 1,71-1,75 (m, 1H), 0,72-0,84 (m, 4H).
Ejemplo 3: Síntesis del compuesto 3
Se añadió el producto intermedio 1-4 (3 g, 5,4 mmoles) en THF (300 ml). Bajo una atmósfera de nitrógeno, se añadió gota a gota disolución de metóxido de sodio-metanol (preparada mediante la reacción de hidruro de sodio (1,4 g, 35 mmoles) y metanol (6 ml)). La mezcla se calentó hasta 50 °C, y se hizo reaccionar durante 16 horas. El punto final de la reacción se monitorizó por TLC. Después del enfriamiento, el sistema de reacción se añadió a disolución acuosa saturada de cloruro de amonio (20 ml), y a continuación se extrajo con 2-metiltetrahidrofurano (50 ml). Las fases orgánicas se combinaron, se lavaron con salmuera saturada, se secaron sobre sulfato de sodio anhidro, se filtraron y se concentraron. El producto en bruto se destruyó con metanol/metil terc-butil éter (1:3) dando el sólido amarillo (2,1 g, rendimiento 77 %).
Etapa 2: Síntesis del producto intermedio 3-2
Se añadió el producto intermedio 3-1 (1,8 g, 3,5 mmoles) en tolueno (30 ml) y se disolvió. Se añadió gota a gota lentamente ácido trifluoroacético (20 ml, 0,268 moles). La mezcla se calentó hasta 110 °C, y se hizo reaccionar durante 16 h. La LC-MS mostró el punto final de la reacción. Se evaporaron de forma rotatoria el disolvente y el ácido trifluoroacético. El residuo se destruyó con metil terc-butil éter (20 ml) y se filtró dando un sólido rojo (0,92 g, rendimiento 52 %).
Etapa 3: Síntesis del compuesto 3
Se añadió el producto intermedio 3-2 (0,92 g, 1,8 mmoles) en 2-metiltetrahidrofurano (15 ml) y se disolvió. Se añadió dicloruro de estaño dihidratado (2,9 g, 12,8 mmoles) bajo una atmósfera de nitrógeno. La mezcla se calentó hasta 100 °C, y se hizo reaccionar durante 16 h. La LC-MS mostró el punto final de la reacción. La mezcla se ajustó a pH=10 añadiendo disolución acuosa de hidróxido sódico, y se filtró con Celite. El filtrado se extrajo con 2-metiltetrahidrofurano, y se concentró. El producto en bruto se purificó por cromatografía en columna de gel de sílice (elución con EA:DCM=1:3) obteniéndose el compuesto 3 como un sólido amarillo (0,32 g, rendimiento 52 %).
1H RMN (400 MHz, CDCla) 5:11,69 (s, 1H), 8,60 (s, 1H), 7,36-7,49 (m, 4H), 6,90 (s, 1H), 5,96(s, 1H), 3,68 (s, 3H), 1,99 (s, 3H).
Ejemplo 4: Síntesis del compuesto 4
Etapa 1: Síntesis del producto intermedio 4-1
Se añadió el producto intermedio 1-4 (3 g, 5,4 mmoles) en carbonato de cesio (6,8 g, 26,5 mmoles), 3,4,7,8-tetrametil-1,10-fenantrolina (0,127 g, 0,54 mmoles), yoduro cuproso (0,080 g, 0,54 mmoles) y 3-hidroxitetrahidrofurano (1,0 g, 10,8 mmoles). El reactor se sustituyó tres veces con nitrógeno, y se añadió tolueno (20 ml). El sistema de reacción se calentó hasta 100 °C y se hizo reaccionar durante 16 horas. El punto final de la reacción se monitorizó por TLC. Después del enfriamiento, el sistema de reacción se añadió en disolución acuosa saturada de cloruro de amonio (20 ml). La fase acuosa separada se extrajo con acetato de etilo (50 ml). Las fases orgánicas se combinaron, se lavaron con salmuera saturada, se secaron sobre sulfato de sodio anhidro, se filtraron y se concentraron. El producto en bruto se destruyó con metanol / metil terc-butil éter (1:3) dando el sólido amarillo (0,7 g, rendimiento 23 %).
Etapa 2: Síntesis del producto intermedio 4-2
Se añadió el producto intermedio 4-1 (0,7 g, 1,3 mmoles) en diclorometano (3 ml) y se disolvió. Se añadió gota a gota lentamente ácido trifluoroacético (10 ml). Después de la adición, la mezcla se calentó hasta 70 °C, y se hizo reaccionar durante 16 h. La LC-MS mostró el punto final de la reacción. Se evaporaron de forma rotatoria el disolvente y el ácido trifluoroacético dando el sólido rojo (0,94 g), que se usó directamente para la siguiente etapa.
Etapa 3: Síntesis del compuesto 4
Se añadió el producto intermedio 4-2 (0,94 g, 2,1 mmoles) en 2-metiltetrahidrofurano (15 ml) y se disolvió. Se añadió dicloruro de estaño dihidratado (3,34 g, 14,8 mmoles) bajo una atmósfera de nitrógeno. La mezcla se calentó hasta 100 °C, y se hizo reaccionar durante 16 h. La LC-MS mostró el punto final de la reacción. La mezcla se ajustó a pH=10 añadiendo en disolución acuosa de hidróxido sódico, y se filtró con Celite. El filtrado se extrajo con 2-metiltetrahidrofurano, y se concentró. El producto en bruto se purificó por cromatografía en columna de gel de sílice (elución con EA: DCM=1:3) obteniéndose el compuesto 4 como un sólido amarillo (0,066 g, rendimiento 10 %).
1H RMN (400 MHz, CDCla) 5:11,69 (s, 1H), 8,65 (s, 1H), 7,37-7,49 (m, 4H), 6,88 (s, 1H), 5,92(s, 1H), 5,29-5,30 (m, 1H), 3,61-3,78(m, 4H), 2,07-2,12 (m, 1H), 2,00(s, 3H), 1,86-1,90 (m, 1H).
Ejemplo 5: Síntesis de 5-(2-clorofenM)-3-metM-8-(4-metMpiperazm-1-M)-2,10-dihidropirazolo[4,3-b]pirido[4,3-e][1,4]diacepina (Compuesto 22)
Etapa 1: Síntesis de (2-dorofeml)(4-((1-(4-metoxibencM)-5-metM-4-mtro-1H-pirazol-3-N)ammo)-6-(4-metilpiperazin-1-il)piridin-3-il)metanona
Se disolvió (6-bromo-4-((1-(4-metoxibencil)-5-metil-4-nitro-1H-pirazol-3-il)amino)piridin-3-il)(2-clorofenil)metanona (producto intermedio 1-4) (0,80 g, 1,4 mmoles) en DMSO (10 ml), se añadió en metilpiperazina (0,431 g, 4,3 mmoles). La mezcla se calentó hasta 110 °C, se hizo reaccionar durante 4 h. La TLC mostró el punto final de la reacción. Después del enfriamiento, el líquido de reacción se vertió en agua (100 ml), y precipitó una gran cantidad de sólido.
La mezcla se filtró. La torta de filtración se disolvió en diclorometano, se secó y se concentró a vacío dando un sólido amarillo (1,0 g producto en bruto).
Etapa 2: Síntesis de (2-clorofeml)(4-((5-met¡l-4-mtro-1H-p¡razol-3-¡l)ammo)-6-(4-met¡lp¡perazm-1-¡l)p¡r¡dm-3-il)metanona
Se disolvió (2-clorofenil-4-((1-(4-metoxibencil)-5-metil-4-nitro-1H-pirazol-3-il)amino)-6-(4-metilpiperazin-1-il)piridin-3-il)metanona (1,0 g, producto en bruto) en diclorometano (3 ml), a continuación se añadió en ácido trifluoroacético (10 ml) gota a gota y lentamente. A continuación, la mezcla se calentó hasta 70 °C, y se hizo reaccionar durante 16 h. La LC-MS mostró el punto final de la reacción. El sistema se concentró a vacío dando un sólido rojo (1,2 g, producto en bruto), que se usó directamente para la siguiente etapa sin purificación.
Etapa 3: Síntes¡s de 5-(2-clorofeml)-3-met¡l-8-(4-met¡lp¡perazm-1-¡l)-2,10-d¡h¡drop¡razolo[4,3-b]p¡r¡do[4,3-e][1,4]d¡acep¡na
Se disolvió (2-clorofenil)(4-((5-metil-4-nitro-1H-pirazol-3-il)amino)-6-(4-metilpiperazin-1-il)piridin-3-il)metanona (1,2 g, producto en bruto) en 2-metiltetrahidrofurano (20 ml), se añadió dicloruro de estaño dihidratado ((4,2 g, 18,6 mmoles) bajo una atmósfera de nitrógeno. La mezcla se calentó hasta 90 °C, y se hizo reaccionar durante 16 h. La LC-MS mostró el final de la reacción. La mezcla se ajustó a pH=10 añadiendo disolución acuosa de hidróxido sódico, y se filtró con Celite. El filtrado se extrajo con 2-metiltetrahidrofurano, y se concentró. El producto en bruto se purificó por cromatografía en columna de gel de sílice (diclorometano: metanol=10:1) obteniéndose el compuesto 22 como un sólido amarillo (0,033 g, rendimiento: 5,8% para tres etapas).
1H RMN (400 MHz, DMSO-de): 11,56 (s, 1H), 8,23 (s, 1H), 7,33-7,45 (m, 4H), 6,88 (s, 1H), 5,96 (s, 1H), 3,37 (m, 4H), 2,33 (m, 4H), 2,19 (s, 3H), 1,97 (s, 3H).
Fórmula molecular: C<21>H<22>ON<7>, peso molecular: 407,91, LC-EM (Pos, m/z)=408 [M+H+].
Ejemplo 6: Síntes¡s de 4-(5-(2-clorofeml)-3-met¡l-2,10-d¡h¡drop¡razolo[4,3-fo]p¡r¡do[4,3-e][1,4]d¡azepm-8-¡l)morfol¡na (Compuesto 29)
Etapa 1: Síntes¡s de (6-bromo-4-((5-met¡l-4-mtro-1H-p¡razol-3-¡l)ammo)p¡r¡dm-3-¡l)(2-clorofeml)metanona
Se disolvió (6-bromo-4-((1-(4-metoxibencil)-5-metil-4-nitro-1H-pirazol-3-il)amino)piridin-3-il)(2-dorofenil)metanona (producto intermedio 1-4) (0,80 g, 1,4 mmoles) en DCM (2 ml), a continuación se añadió ácido trifluoroacético (10 ml). La mezcla se calentó hasta 70 °C y se hizo reaccionar durante 4 h. La LC-MS mostró el punto final de la reacción. La mezcla de reacción se enfrió y se concentró a vacío para conseguir un sólido amarillo (1,0 g, producto en bruto).Etapa 2: Síntesis de 8-bromo-5-(2-clorofenil)-3-metil-2,10-dihidropirazolo[4,3-b]pirido[4,3-e][1,4]diacepina
Se disolvió (6-bromo-4-((5-metil-4-nitro-1H-pirazol-3-il)amino)piridin-3-il)(2-clorofenil)metanona (1,0 g, producto en bruto) en 2-metiltetrahidrofurano (15 ml), a continuación se añadió en dicloruro de estaño dihidratado (3,2 g, 14,2 mmoles). La mezcla se calentó hasta 100 °C y se hizo reaccionar durante 16 h. La LC-MS mostró el punto final de la reacción. La mezcla se ajustó a pH=10 añadiendo disolución acuosa de hidróxido sódico, y se filtró con Celite. El filtrado se extrajo con 2-metiltetrahidrofurano, y se concentró. El producto en bruto se purificó por cromatografía en columna de gel de sílice (diclorometano: metanol=30:1) obteniéndose el producto (60 mg, rendimiento 10,7 % para dos etapas).
Etapa 3: Síntesis de 4-(5-(2-clorofenil)-3-metil-2,10-dihidropirazolo[4,3-b]pirido[4,3-e][1,4]diazepin-8-il)morfolina
Se disolvió 8-bromo-5-(2-clorofenil)-3-metil-2,10-dihidropirazolo[4,3-b]pirido[4,3-e][1,4]diacepina (60 mg, 0,16 mmoles) en DMSO (2 ml), a continuación se añadió morfolina (14 mg, 0,20 mmoles) bajo nitrógeno. La mezcla se calentó hasta 110 °C y se hizo reaccionar durante 6 horas. La LC-MS mostró el punto final de la reacción. El líquido de reacción se vertió en agua (10 ml), se extrajo con diclorometano (20 ml * 2) y se concentró. El producto en bruto se purificó por cromatografía en columna de gel de sílice (diclorometano: metanol=20:1) obteniéndose el producto (16 mg, rendimiento 25 %).
1H-RMN (400 MHz, DMSO-de): 11,56 (s, 1H), 8,29 (s, 1H), 7,33-7,47 (m, 4H), 6,88 (s, 1H), 5,96 (s, 1H), 3,62 (m, 4H), 3,33 (m, 4H), 1,97 (s, 3H).
Fórmula molecular: C<20>H<19>ON<6>O, peso molecular: 394,86, LC-EM (Pos, m/z)=394,96 [M+H+].
Ejemplo 7: Síntesis del compuesto 33
Etapa 1: Síntesis del producto intermedio 33-1
Se añadió el producto intermedio 1-43,5 g (6,3 mmoles) a 3,8 g (19,1 mmoles) de carbonato de potasio y 1,06 g (0,63 mmoles) de tetraquistrifenilfosfina paladio. El reactor se sustituyó tres veces con nitrógeno, a continuación se añadieron 2 ml de trimetilboroxina (6,8 mmoles) a la misma gota a gota, a continuación se añadieron 40 ml de dioxano. La mezcla de reacción se calentó hasta 110 °C y se hizo reaccionar durante 16 horas. El punto final de la reacción se monitorizó por TLC. Después del enfriamiento, el líquido de reacción se vertió en 100 ml de agua, y precipitó una gran cantidad de sólido. Después de la filtración, la mezcla se añadió en gel de sílice, y se sometió a cromatografía en columna, se eluyó con diclorometano: metanol = 100:1 y se evaporó a sequedad de forma rotatoria, dando 1,8 g del producto intermedio 33-1 como un sólido amarillo, con un rendimiento del 58,8 %.
Etapa 2: Síntesis del producto intermedio 33-2
Se añadieron 1,8 g (3,6 mmoles) del producto intermedio 33-1 0,65 g de NBS (3,6 mmoles) y 100 ml de tetracloruro de carbono, se agitó para disolver durante 30 minutos y a continuación se añadieron 89 mg de peróxido de benzoílo (0,36 mmoles). La mezcla de reacción se calentó hasta 100 °C y se hizo reaccionar durante 16 h. La LC-MS mostró el punto final de la reacción. Después de que se evaporara el disolvente, la mezcla se disolvió en 20 ml de cloruro de metileno, se filtró sobre gel de sílice y se evaporó a sequedad, dando 2,0 g del producto intermedio 33-2 como un sólido amarillo, que se usó directamente para la siguiente etapa.
Etapa 3: Síntesis del producto intermedio 33-3
Se añadió el producto intermedio 33-2 (2,0 g, 3,5 mmoles) en 0,55 g de etilpiperazina (4,8 mmoles), 0,73 g de carbonato de potasio (5,2 mmoles) y 20 ml de acetonitrilo. La mezcla se calentó hasta 80 °C y se hizo reaccionar durante 8 h. La LC-MS mostró el punto final de la reacción. El disolvente se evaporó, y se añadieron 100 ml de DCM y 50 ml de disolución acuosa de cloruro de amonio. Después de la separación de líquido, el secado y la concentración, se obtuvieron 1,9 g del producto intermedio 33-3 como un sólido rojo, que se usaron directamente para la siguiente etapa.
Etapa 4: Síntesis del producto intermedio 33-4
Se añadieron gota a gota 1,9 g del producto intermedio 33-3 (3,2 mmoles) a diclorometano (3 ml) para disolverlo. A continuación, se añadió lentamente gota a gota ácido trifluoroacético (10 ml). Después de la adición, la mezcla se calentó hasta 70 °C y se hizo reaccionar durante 16 h. La LC-MS mostró el punto final de la reacción. Se evaporaron el disolvente y el ácido trifluoroacético dando 2,4 g de producto intermedio 33-4 como un sólido rojo, que se usó directamente para la siguiente etapa.
Etapa 4: Síntesis del compuesto 33
Se añadió el producto intermedio 33-4 (2,4 g, 4,9 mmoles) a 2-metiltetrahidrofurano (25 ml) para disolverlo. A continuación, se añadió dicloruro de estaño dihidratado (7,8 g, 34,8 mmoles) bajo una atmósfera de nitrógeno, y la mezcla se calentó hasta 90 °C. Después de 16 h de reacción, la LC-MS mostró el punto final de la reacción. La mezcla se ajustó a pH=10 añadiendo disolución acuosa de hidróxido sódico, y se filtró con Celite. El filtrado se extrajo con 2-metiltetrahidrofurano, y se concentró. El producto en bruto se purificó por cromatografía en columna de gel de sílice (diclorometano: metanol=10:1) obteniéndose el compuesto 33 (0,047 g, rendimiento 10 %).
1H RMN (400 MHz, DMSO): 11,50(S,1H), 8,72(S,1H), 7,43-7,47(m, 4H), 7,27 (s, 1H), 6,67(s, 1H), 3,47(s, 2H), 3,06(m, 4H), 2,97(m, 2H), 2,71(s, 4H), 2,12(s, 3H), 1,26-1,29(t, 3H).
Ejemplo 8: Síntesis del compuesto 34
Etapa 1: Síntesis del producto intermedio 34-1
Se añadió el producto intermedio 1-4 (120 mg, 0,216 mmoles, 1 eq) en DMSO (2 ml), a continuación se añadió 1,1-dióxido de tiomorfolina (58,1 mg, 0,43 mmoles, 2 eq) y DIEA (83,6 mg, 0,65 mmoles, 3 eq). La mezcla se calentó hasta 80 °C y se hizo reaccionar durante 3 h. El final de la reacción se monitorizó por TLC. Se añadió gota a gota agua (10 ml) al líquido de reacción, y precipitó el producto intermedio 34-1 sólido (70 mg, bruto), que se usó directamente para la siguiente etapa.
Etapa 2: Síntesis del producto intermedio 34-2
El producto intermedio 34-1 (70 mg, 0,11 mmoles, 1 eq) se añadió en 2 ml de ácido trifluoroacético. La mezcla se calentó hasta 80 °C y se hizo reaccionar durante 5 h. El final de la reacción se monitorizó por TLC. El líquido de reacción se evaporó a sequedad, y se destruyó con MTBE (10 ml) para conseguir el producto intermedio 34-2 como un sólido amarillo (30 mg, producto en bruto).
Etapa 3: Síntesis del compuesto 34
Se añadió el producto intermedio 34-2 (300 mg, 0,62 mmoles, 1 eq) en un matraz de una sola boca de 25 ml, a continuación se añadió 2-metiltetrahidrofurano (20 ml) y cloruro estannoso (966 g, 4,28 mmoles, 7 eq). La mezcla se calentó hasta 90 °C y se agitó durante 5 horas. El final de la reacción se monitorizó por TLC. La disolución de reacción se enfrió y se ajustó a aproximadamente pH 8 con hidrogenocarbonato de sodio. La mezcla se extrajo con DCM (50 ml), y la fase orgánica se separó, se secó, se combinó y se evaporó a sequedad, dando el compuesto 34 (21 mg, rendimiento: 2,1 % para tres etapas) mediante placa de gel de sílice preparativa (DCM: MeOH = 30 :1).
<1>H RMN (400 MHz, DMSO-d<6>):11,60(s, 1H), 8,30(s, 1H), 7,33-7,49(m, 4H), 6,92(s, 1H), 6,11 (s, 1H), 3,88(m, 4H), 3,08-3,10(m, 4H), 1,98(s, 3H).
Ejemplo 9: Síntesis del compuesto 37
Etapa 1: Se pesaron 500 mg del producto intermedio 1-4 y se añadieron en 15 ml de acetonitrilo para disolverlo, entonces se añadieron 200 mg de trietilamina y 200 mg de BOC piperazina. La mezcla se calentó hasta reflujo durante 3 h. El final de la reacción se monitorizó por TLC, y la disolución de reacción se evaporó a sequedad obteniéndose el producto intermedio 37-1 como un sólido amarillo, 400 mg, rendimiento 80 %.
Etapa 2: El producto intermedio 37-1 se disolvió en 15 ml de TFA, y la mezcla se calentó hasta reflujo durante 6 h. El final de la reacción se monitorizó por LC-MS. La mezcla se evaporó a sequedad. Después de la filtración, el producto en bruto se destruyó con metil terc-butil éter obteniéndose el compuesto 37-2 como un sólido amarillo (300 mg, rendimiento >100 %).
Etapa 3: El producto intermedio 37-2 se disolvió en 15 ml de metiltetrahidrofurano, a continuación se añadieron 500 ml de dicloruro de estaño dihidratado. La mezcla se calentó hasta 90 °C y se sometió a reflujo durante 5 horas, y la reacción se completó obteniéndose el compuesto 37 (16 mg, rendimiento 5 %).
1H RMN (400 MHz, DMSO-ds): 11,60(s, 1H), 8,30(s, 1H), 7,33-7,49(m, 4H), 6,92(s, 1H), 6,11 (s, 1H), 3,88(m, 4H), 2,08-2,10(m, 4H), 1,98(s, 3H).
Ejemplo 10: Síntesis del compuesto 38
Etapa 1: Se pesaron Boc piperazina 300 mg, 450 mg del producto intermedio 33-2 y carbonato de potasio 300 mg y se añadieron a 20 ml de acetonitrilo para disolverlo. La mezcla se calentó hasta 60 °C y se hizo reaccionar durante 6 h. El final de la reacción se monitorizó por LC-MS. Se añadieron 300 ml de agua y 50 ml de diclorometano. La fase aceitosa separada se secó y se evaporó a sequedad, dando un producto intermedio 38-1, 300 mg.
Etapa 2: Se vertieron 15 ml de ácido trifluoroacético en 300 mg del compuesto 38-1. La mezcla se calentó hasta 90 °C y se sometió a reflujo durante 4 h. El final de la reacción se monitorizó por LC-MS, y la mezcla de reacción se evaporó a sequedad, dando 200 mg del compuesto 38-2.
Etapa 3: Se pesaron 1,10 g de dicloruro de estaño dihidratado y se añadieron con el producto intermedio 38-2, 15 ml de metiltetrahidrofurano y 0,2 ml de agua. La mezcla se calentó hasta 90 °C y se hizo reaccionar durante 16 h. Después de que la reacción terminara, la mezcla de reacción se ajustó a pH 10, se filtró, se evaporó a sequedad y se secó, obteniéndose 36 mg del compuesto 38 con un rendimiento del 21 %.
1H RMN (400 MHz, DMSO): 11,69(s, 1H), 8,49 (s, 1H), 7,38-7,49(m, 4H), 7,10-7,25(m, 1H), 2,57-2,58(m, 4H), 2,26(s, 2H), 2,35(s, 4H), 1,98(s, 3H).
Ejemplo 11: Síntesis de los compuestos 40, 41, 42, 43, 44, 45, 46, 48
La ruta de síntesis fue del siguiente modo:
Método de síntesis general: Se disolvió 8-bromo-5-(2-clorofenil)-3-metil-2,10-dihidropirazolo[4,3-b]pirido[4,3-e][1,4]diacepina (1 eq) preparada en la etapa 2 del Ejemplo 6 en DMSO (5 ml), y se añadió amina (5 eq) de diferentes estructuras bajo nitrógeno. La mezcla se calentó hasta 100 °C y se hizo reaccionar durante 16 horas. La TLC mostró que la reacción había terminado. El líquido de reacción se vertió en agua con hielo (50 ml), y precipitó un producto en bruto como un sólido amarillo.
11.1 Síntesis del compuesto 41: la estructura de la amina era
el producto sólido en bruto se purificó con placa de gel de sílice preparativa (DCM: MeOH=30: 1) obteniéndose el compuesto 41 (15 mg, rendimiento: 13,8 %).
1H RMN (400 MHz, CDCl3): 8,85(s, 1H), 7,28-7,42(m, 4H), 5,91(s, 1H), 5,62(s, 1H), 3,98-4,02(d, 2H), 2,66-2,72(t, 2H), 2,29(s, 3H), 2,22(s, 4H), 1,14-1,16(m, 6H).
42: la estructura de la amina era
el producto sólido en bruto se disolvió en diclorometano (20 ml), se secó sobre sulfato de magnesio y se evaporó a sequedad obteniéndose el compuesto 42 (22 mg, rendimiento: 20,4 %).
1H RMN (400 MHz, CDCl3): 8,85(s,1H), 7,28-7,42(m, 4H), 5,91(s, 1H), 5,62(s, 1H), 3,98-4,02(d, 2H), 2,66-2,72(t, 2H), 2,29(s, 3H), 2,22(m, 4H), 1,14-1,16(m, 6H).
11.4 Síntesis del compuesto 45: la estructura de la amina era
el producto en bruto se disolvió en diclorometano (10 ml), se secó sobre sulfato de magnesio y se evaporó a sequedad obteniéndose el sólido amarillo, que se lavó con diclorometano: éter de petróleo = 1:1 dando el compuesto 45 (42 mg, rendimiento: 20,1 %).
1H RMN (400 MHz, DMSO): 11,59(s,1H), 8,28(s,1H), 7,32-7,48(m,4H), 6,86(s,1H), 4,62-4,67(m,3H), 3,54-3,71 (dd,2H), 3,07-3,13(m,2H), 1,98(s,3H), 1,77-1,84(m,2H), 0,82-0,87(m,2H).
11.7 Síntesis del compuesto 40: La estructura de la amina era
Se añadió el producto intermedio 1-4 (500 mg, 0,9 mmoles, 1 eq) a DMF (20 ml), a continuación se añadieron fosfato de potasio (573 mg, 2,7 mmoles, 3 eq), 2-(3,6-dihidro-2H-piran-4-il)-4,4,5,5-tetrahidro-1,3,2-dioxaborolano (246 mg, 1,17 mmoles, 1,2 eq), acetato de paladio (10 mg, 0,045 mmoles, 0,05 eq). El reactor se sustituyó tres veces con nitrógeno. La mezcla se calentó hasta 100 °C y se hizo reaccionar durante 16 h. El final de la reacción se monitorizó por TLC. El líquido de reacción se vertió en agua con hielo (50 ml) y se extrajo con acetato de etilo (50 ml * 3). La fase orgánica se separó, se secó, se evaporó a sequedad, dando el producto intermedio 47-1 como un sólido amarillo (500 mg, el producto en bruto se usó directamente para la siguiente etapa).
Etapa 2: Preparación del producto intermedio 47-2
Bajo una atmósfera de nitrógeno, se añadió el producto intermedio 47-1 (1,50 g, 2,67 mmoles, 1 eq) a un matraz de una sola boca de 100 ml, a continuación se añadieron THF (5 ml), metanol (5 ml), paladio sobre carbono (0,15 g). Se añadió gota a gota trietilsilano (3,1 g, 26,7 mmoles, 10 eq) bajo una atmósfera de nitrógeno, y la mezcla se agitó a 15 °C durante 5 min. La conversión completa de los materiales de partida se monitorizó por TLC. Después de la reacción, la mezcla de reacción se filtró, y el filtrado se evaporó a sequedad. El producto en bruto se añadió a MTBE (10 ml) y se filtró obteniéndose el 47-2 (0,67 g, rendimiento 44,67 %).
Etapa 3: Síntesis del producto intermedio 47-3
El producto intermedio 47-2 (0,67 g, 1,2 mmoles, 1 eq) se añadió a un matraz de una sola boca de 25 ml, a continuación se añadió ácido trifluoroacético (S ml). La mezcla se calentó hasta 80 °C y se hizo reaccionar durante 16 h. El final de la reacción se monitorizó por TLC. El líquido de reacción se evaporó a sequedad, dando el producto intermedio 47-3 como un aceite amarillo (1,0 g, el producto en bruto se usó directamente para la siguiente etapa).
Etapa 4: Síntesis del compuesto 47
Se añadió el producto intermedio 47-3 (1,0 g, 1,2 mmoles, 1 eq) a un matraz de una sola boca de 25 ml, a continuación se añadieron 2-metiltetrahidrofurano (5 ml) y cloruro estannoso (1,89 g, 8,6 mmoles). La mezcla se calentó hasta 90 °C y se agitó durante 5 horas. El final de la reacción se monitorizó por TLC. El líquido de reacción se enfrió y se ajustó a pH 8 con hidrogenocarbonato de sodio. La mezcla se extrajo con DCM (50 ml), y la fase orgánica se separó, se secó, se combinó y se evaporó a sequedad, dando el compuesto 47 (36 mg, rendimiento: 6,2 % para dos etapas) mediante placa de gel de sílice preparativa (DCM: MeOH = 30: 1).
1H RMN (400 MHz, DMSO-d6):11,68(s, 1H), 8,45(s, 1H), 7,36-7,49(m, 4H), 7,11(s, 1H), 6,41(s, 1H), 3,86-3,88(d, 2H), 3,35-3,38(m, 2H), 2,55-2,59(m, 3H), 1,97(s, 3H), 1,48-1,63(m, 3H).
Ejemplo 13: Preparación de la Forma cristalina I de la invención
El compuesto 29 (500,0 mg) de la fórmula (III) se añadió a un matraz de una sola boca de 100 ml, a continuación se añadieron 80,0 ml de una mezcla de etanol: 2-metiltetrahidrofurano = 5:1 (v: v). El líquido de reacción se calentó hasta 100 ° C para que clarificara, se añadió lentamente el compuesto 29 en porciones, para un total de 100,00 mg, hasta que el líquido de reacción se clarificó. A continuación, la disolución se enfrió naturalmente hasta temperatura ambiente, se agitó durante la noche, se filtró y se secó dando 320,00 mg de la Forma cristalina I.
Usando radiación de Cu-Ka, la difracción de rayos X de polvo de la forma cristalina I expresada en ángulo 20 (°) mostró fuertes picos característicos a 7,4±0,2°, 17,9±0,2°, 18,9±0,2°, 19,4±0,2°, 21,5±0,2° y 23,7±0,2°; así como picos característicos a 14,0±0,2°, 15,0± 0,2°, 20,7±0,2°, y 25,4±0,2°; y también picos característicos a 11,7±0,2°, 22,8±0,2°, y 27,8±0,2°. El análisis de XRPD se muestra en la Figura 1.
Se midieron la endoterma de la Forma cristalina I que empezaba desde aproximadamente 311 °C y el pico endotérmico a aproximadamente 312 °C por calorimetría diferencial de barrido. El espectro de DSC se muestra en la Figura 2.Ejemplo 14: Preparación de la Forma cristalina I de la invención
El compuesto 29 (500,0 mg) de la fórmula (III) se añadió a un matraz de una sola boca de 100 ml, a continuación se añadieron 6,0 ml de una mezcla de sulfóxido de dimetilo: agua = 2:1 (v: v). La mezcla de reacción se calentó hasta 100 °C, y se añadieron lentamente gota a gota 57 ml de mezcla de sulfóxido de dimetilo: agua = 2:1, hasta que la disolución se clarificó. La mezcla de reacción se enfrió naturalmente hasta temperatura ambiente, se agitó durante la noche, se filtró y se secó dando 320,00 mg de la Forma cristalina I.
Ejemplo 15: Preparación de la Forma cristalina I de la invención
El compuesto 29 (500,0 mg) de la fórmula (III) se añadió a un matraz de una sola boca de 100 ml, se añadió MeOH: DCM = 5:1 (60 ml) y se calentó hasta disolverse completamente. La mezcla se concentró a presión reducida a 35 40 °C en un evaporador rotatorio proporcionando la Forma cristalina I (320,00 mg).
Ejemplo 16: Preparación de la Forma cristalina I de la invención
El compuesto 29 (500,0 mg) de la fórmula (III) se añadió a un matraz de una sola boca de 25 ml, a continuación se añadió MeOH (1,5 ml). La mezcla de reacción se agitó a la temperatura ambiente durante 7 días, se filtró a presión reducida, se secó proporcionando la Forma cristalina I (320,00 mg).
Ejemplo 17: Preparación de la Forma cristalina I de la invención
Etapa 1: Síntesis de (2-clorofenil)(4-((1-(4-metoxibencil)-5-metil-4-nitro-1H-pirazol-3-il)amino)-6-morfolinopiridin-3-il)metanona (producto intermedio III-E)
Se disolvió (6-bromo-4-((1 -(4-metoxibencil)-5-metil-4-nitro-1 H-pirazol-3-il)amino)piridin-3-il)(2-clorofenil)metanona (producto intermedio III-C) (150,0 g, 269 mmoles) en DMSO (300 ml). La mezcla se calentó hasta 50 °C para disolver el sólido, a continuación se añadió gota a gota morfolina (III-D) (70,4 g, 808 mmoles). A continuación, la mezcla se calentó hasta 90 °C y se hizo reaccionar durante 3 h. La TLC mostró el final de la reacción. El líquido de reacción se vertió en agua (3 l), precipitó una gran cantidad de sólido y se filtró. La torta de filtración se lavó con agua (500 ml), se secó dando el producto intermedio III-E como un sólido amarillo (160,0 g de producto en bruto).
Etapa 2: Síntesis de (2-clorofenil)(4-((-5-metil-4-nitro-1H-pirazol-3-il)amino)-6-morfolinopiridin-3-il)metanona (Producto intermedio III-F)
Se añadió (2-clorofen¡l)(4-((1-(4-metox¡benc¡l)-5-met¡l-4-n¡tro-1H-p¡razol-3-¡l)am¡no)-6-morfol¡nop¡r¡d¡n-3-¡l)metanona (Producto ¡ntermed¡o III-E) (160,0 g, producto en bruto) a ác¡do tr¡fluoroacét¡co (500 ml). La mezcla se calentó hasta 80 °C y se h¡zo reacc¡onar durante 8 h. La LC-MS mostró el f¡nal de la reacc¡ón. A cont¡nuac¡ón, la mezcla de reacc¡ón se concentró, el producto en bruto se destruyó con met¡l terc-but¡l éter (800 ml), se f¡ltró para obtener el producto ¡ntermed¡o III-F como un sól¡do de color rojo ladrillo (160 g, producto en bruto).
1H RMN (400 MHz, DMSO-d6)5 ppm: 13,63 (s a., 1H), 12,39 (s, 1H), 7,95-7,93(d, J=10,6 Hz, 2H), 7,62-7,48 (m, 4H), 3,74-3,70 (m, 4H), 3,64-3,63 (m, 4H), 2,58(s, 3H).
En el proceso de preparac¡ón, tamb¡én es pos¡ble obtener un estado de trans¡c¡ón de la fórmula (III-F') a partír de la fórmula (III-E), y el producto en bruto obten¡do se somet¡ó a un proceso ác¡do (por ejemplo, se trató con ác¡do clorhídr¡co) para obtener Analmente la fórmula (III-F) del producto ¡ntermed¡o objet¡vo.
Etapa 3: Síntesis de 4-(5-(2-clorofenil)-3-metil-2,10-dihidropirazolo[4,3-b]pirido[4,3-e][1,4]diazepin-8-il)morfolina
Se d¡solv¡ó (2-clorofen¡l)(4-((5-met¡l-4-n¡tro-1 H-p¡razol-3-¡l)am¡no)-6-morfol¡nop¡r¡d¡n-3-¡l)metanona (Producto ¡ntermed¡o III-F) (160 g, producto en bruto) en 2-met¡ltetrah¡drofurano (1,6 l), a cont¡nuac¡ón se añad¡ó d¡cloruro de estaño d¡h¡dratado (320 g, 1420 mmoles). La mezcla se calentó hasta 90 °C y se h¡zo reacc¡onar durante 4 h. La LC-MS mostró el f¡nal de la reacc¡ón. Después del enfr¡am¡ento hasta la temperatura amb¡ente (10 °C), el líqu¡do de reacc¡ón se vert¡ó en d¡soluc¡ón saturada de h¡drogenocarbonato de sod¡o (4 l), se añad¡ó 2-met¡ltetrah¡drofurano (1 l), se f¡ltró. El f¡ltrado se separó. La fase acuosa se extrajo con 2-met¡ltetrah¡drofurano (1 l). Las fases orgán¡cas se comb¡naron, se lavaron con agua (2 l) segu¡do de salmuera (2 l), se secó sobre sulfato de sod¡o anh¡dro, se concentró a pres¡ón reduc¡da obten¡éndose el producto en bruto. El producto en bruto se destruyó con met¡l terc-but¡l éter (400 ml) y se f¡ltró dando el sól¡do amar¡llo (65,0 g, pureza 95 %), se pur¡f¡có por cromatografía en gel de síl¡ce (d¡clorometano: metanol = 20 : 1) dando el sól¡do amar¡llo pál¡do (55 g). El sól¡do se d¡solv¡ó en DMSO (aprox¡madamente 200 ml) y se calentó hasta 40-50 °C, hasta que el sól¡do se d¡solv¡ó. La d¡soluc¡ón anter¡or se añad¡ó lentamente gota a gota a agua dest¡lada (2 l), a cont¡nuac¡ón prec¡p¡tó una gran cant¡dad de sól¡do, se ag¡tó a temperatura amb¡ente durante la noche, se f¡ltró por succ¡ón. La torta de f¡ltrac¡ón se secó a vacío a 35 °C dando un sól¡do en polvo de color amar¡llo pál¡do (53 g, rend¡m¡ento 49,9 % para tres etapas).
1H-RMN (400 MHz, DMSO-de): 11,58 (s, 1H), 8,29 (s, 1H), 7,33-7,47 (m, 4H), 6,90 (s, 1H), 5,96 (s, 1H), 3,61 (m, 4H), 3,31 (m, 4H), 1,98 (s, 3H).
La forma cr¡stal¡na de esta muestra se determ¡nó por d¡fracc¡ón de rayos X de polvo, y la forma cr¡stal¡na fue la m¡sma que la forma cr¡stal¡na obten¡da en los métodos de preparac¡ón de los Ejemplos 13, 14, 15 y 16, es dec¡r, la Forma cr¡stal¡na I.
La presente ¡nvenc¡ón se puede entender mejor a part¡r de los s¡gu¡entes ejemplos exper¡mentales b¡ológ¡cos. S¡n embargo, los expertos en la técn¡ca entenderán que la descr¡pc¡ón de los ejemplos exper¡mentales sólo está prev¡sta para ¡lustrar la ¡nvenc¡ón, y no debe l¡m¡tar n¡ l¡m¡tará la ¡nvenc¡ón a éstos.
Ejemplo experimental biológico 1: Prueba de actividad enzimática del compuesto de la presente invenciónMuestras de prueba: compuestos 1 a 4 en la presente invención (los números de secuencia y estructuras de los mismos se muestran en la Tabla 1), concentración de dilución: 0,03 pM - 3 pM, un total de 10 gradientes de concentración.
Método de prueba: se realizaron pruebas de actividad enzimática de cinasa Aurora (incluyendo Aurora A y Aurora B) y VEGFR2 (KDR) usando un lector de microplacas multifunción.
Método experimental:
(1) Prueba de actividad de cinasa Aurora A:
Se añadieron uno detrás de otro proteína cinasa Aurora A y los compuestos al siguiente sistema de reacción: MOPS 8 mM pH 7,0, EDTA 0,2 mM, L<r>R<a>SLG 200 pM (Kemptide), acetato de magnesio 10 mM y [<y>-33P]-ATP (la actividad radiactiva fue aproximadamente de 500 cpm/pmol). A continuación, el sistema de reacción anterior se añadió a ATP para empezar la reacción, y se incubó a temperatura ambiente durante 40 minutos. A continuación, la reacción se terminó añadiendo una disolución al 3 % de ácido fosfórico. Se sacaron 10 pl del sistema de reacción, y a continuación se añadieron gota a gota a una membrana de filtración P30 filtermat, se lavó tres veces en disolución 75 mM de ácido fosfórico durante 5 minutos, y a continuación se lavó una vez con metanol. Después de secar la membrana de filtración, se realizó el recuento con un contador de centelleo de cristal líquido.
(2) Prueba de actividad de cinasa Aurora B:
Se añadieron uno detrás de otro proteína cinasa Aurora B y los compuestos al siguiente sistema de reacción: MOPS 8 mM pH 7,0, EDTA 0,2 mM, AKRRRLSSLRA 30 pM, acetato de magnesio 10 mM y [<y>-33P]-ATP (la actividad radiactiva fue aproximadamente de 500 cpm/pmol). A continuación, el sistema de reacción anterior se añadió a ATP para empezar la reacción, y se incubó a temperatura ambiente durante 40 minutos. A continuación, la reacción se terminó añadiendo una disolución al 3 % de ácido fosfórico. Se sacaron 10 pl del sistema de reacción, y a continuación se añadieron gota a gota a una membrana de filtración P30 filtermat, se lavó tres veces en disolución 75 mM de ácido fosfórico durante 5 minutos, y a continuación se lavó una vez con metanol. Después de secar el filtro, se realizó el recuento con un contador de centelleo de cristal líquido.
(3) Prueba de actividad de cinasa KDR:
Se añadieron uno detrás de otro proteína cinasa KDR y los compuestos al siguiente sistema de reacción: MOPS 8 mM pH 7,0, EDTA 0,2 mM, 0,33 mg/ml de proteína básica de mielina, acetato de magnesio 10 mM y [<y>-33P]-ATP (la actividad radiactiva fue aproximadamente 500 cpm/pmol). A continuación, el sistema de reacción anterior se añadió a ATP para empezar la reacción, y se incubó a temperatura ambiente durante 40 minutos. A continuación, la reacción se terminó añadiendo una disolución al 3 % de ácido fosfórico. Se sacaron 10 pl del sistema de reacción, y a continuación se añadieron gota a gota a una membrana de filtración P30 filtermat, se lavó tres veces en disolución 75 mM de ácido fosfórico durante 5 minutos, y a continuación se lavó una vez con metanol. Después de secar el filtro, se realizó el recuento con un contador de centelleo de cristal líquido. Los resultados de la prueba se muestran en la Tabla 2.
Tabla 2 Actividad de inhibición de cinasa Aurora y cinasa KDR por los compuestos 1 a 4 de la presente invención (CI<50>)
Como se puede apreciar de los resultados experimentales en la Tabla 2, los compuestos de la presente invención tienen buena actividad inhibidora contra multicinasas, que indica que los compuestos de la presente invención tienen un buen potencial de aplicación clínica en el tratamiento de enfermedades mediadas por la expresión anormal de cinasa Aurora (incluyendo Aurora A y Aurora B) y VEGFR2 (KDR).
Ejemplo experimental biológico 2: Prueba de actividad enzimática de los compuestos de la presente invenciónMuestras de prueba: los compuestos en la presente invención (los números de secuencia y estructuras de los mismos se muestran en la Tabla 1), concentración de dilución: 0,03 |<j>M - 3 |<j>M, un total de 10 gradientes de concentración.
Fármaco de control: el compuesto 1-2 desvelado en el documento de patente WO2013123840A1
Método de prueba: se realizaron pruebas de actividad enzimática de cinasa Aurora (incluyendo Aurora A y Aurora B) y VEGFR2 (KDR) usando un lector de microplacas multifunción.
Método experimental:
(1) Preparación para la placa de compuesto
a) placas de 96 pocillos, 10 grupos de dosis, diluciones sucesivas al 3 %, a cada pocillo se añadió DMSO, concentración máxima de 500<j>M (compuesto al 50 %).
b) placas de 384 pocillos, diluidas con 1X tampón cinasa (HEPES 50 mM, pH 7,5; 0,0015 % de Brij-35;
DTT 2 mM), conteniendo cada pocillo 5X el compuesto disuelto en 5 j l de 10 % de DMSO. Cada pocillo del control negativo contiene 5 j l de 1X tampón cinasa que contiene 10 % de DMSO.
(2) Procedimiento de prueba
Se disolvieron Aurora A, Aurora B y KDR en 1X tampón cinasa y se prepararon como 2,5X disolución de enzima. Después de que el compuesto en diversas concentraciones se hizo reaccionar con 2,5X disolución de enzima a temperatura ambiente durante 10 min, se añadieron el sustrato peptídico marcado con FAM y ATP para iniciar la reacción. Después de la incubación durante 40 minutos, se añadieron 25 j l de disolución terminal (HEPES 100 mM, pH 7,5; 0,015 % de Brij-35; 0,2 % de Coating Reagent n.° 3; EDTA 50 mM) para detener la reacción, y los datos finales se leyeron por compás calibrador. Los resultados de la prueba se muestran en la Tabla 3.
Tabla 3 Actividad de inhibición de cinasa Aurora y cinasa KDR por compuestos de la presente invención (CI<50>)
Como se puede apreciar de los resultados experimentales en la Tabla 3, los compuestos de la presente invención tienen buena actividad inhibidora contra multicinasas, que indica que los compuestos de la presente invención tienen un buen potencial de aplicación clínica en el tratamiento de enfermedades mediadas por la expresión anormal de cinasa Aurora (incluyendo Aurora A y Aurora B) y VEGFR2 (KDR).
Ejemplo experimental biológico 3: Prueba de actividad citológica del compuesto de la presente invención
Muestra de prueba: los compuestos de la presente invención (los números de secuencia y estructuras de los mismos se muestran en la Tabla 1).
Fármaco de control: compuesto 1-2 desvelado en el documento de patente WO2013123840A1
Método de prueba: El efecto de los compuestos sobre la proliferación celular de diferentes estirpes celulares se examinó por el método Cell Titer-Glo.
Método experimental:
Cada estirpe celular se inoculó en una placa de 96 pocillos un día por adelantado, y después de la incubación durante la noche, los fármacos en diferentes concentraciones se añadieron a una concentración final de 0-10000 nM, dilución al 3-5 %, para un total de 10 puntos de concentración. Después de la incubación durante 72 horas, la mezcla se añadió con el reactivo Cell Titer-Glo equilibrado a temperatura ambiente, y se agitó a incubación durante 10 min, y luego se dejó reposar a temperatura ambiente durante 2 min para estabilizar la señal luminosa. El lector de microplacas multifunción se usó para leer los datos de cada pocillo y analizarlos. Los resultados de la prueba se muestran en la Tabla 4-5:
Tabla 4 Actividad inhibidora celular CI<50>(nM) de los compuestos de la invención
Tabla 5 Actividad inhibidora celular CI<50>(nM) de los compuestos de la invención
Como se puede apreciar de los resultados de los experimentos en las Tablas 4-5, los compuestos de la presente invención tienen buena actividad inhibidora contra diversas células cancerosas y se pueden usar para el tratamiento de enfermedades de cáncer correspondientes.
Ejemplo experimental biológico 4: Determinación de la actividad enzimática de la Forma cristalina I del compuesto de la fórmula (III) (Compuesto 29)
Muestra de prueba: Forma cristalina I preparada en el Ejemplo 13, concentración de dilución: 0,03 pM - 3 pM, un total de 10 gradientes de concentración.
Método de prueba: la prueba de actividad enzimática de la cinasa mostrada en la Tabla 1 se llevó a cabo usando un lector de microplacas multifunción.
Método experimental:
(1) Preparación para la placa de compuesto
a) placas de 96 pocillos, grupos de 10 dosis, diluciones sucesivas al 3 %, DMSO se añade a cada pocillo, hasta una concentración de 500 pM (compuesto al 50 %).
b) placas de 384 pocilios, diluidas con 1X tampón cinasa (HEPES 50 mM, pH 7,5; 0,0015 % de Brij-35;
DTT 2 mM), conteniendo cada pocillo 5X compuesto disuelto en 5 pl de 10 % de DMSO. Cada pocillo del control negativo contiene 5 pl de 1X tampón cinasa que contiene 10 % de DMSO.
(2) Procedimiento de prueba
Las cinasas mostradas en la Tabla 6 se disolvieron en 1X tampón cinasa y se prepararon como 2,5X disolución de enzima, respectivamente. Después de que la Forma cristalina I y 2,5X disolución de enzima se hicieran reaccionar a temperatura ambiente durante 10 min, se añadieron el sustrato peptídico marcado con FAM y ATP para iniciar la reacción. Después de la incubación durante 40 minutos, se añadieron 25 pl de disolución terminal (HEPES 100 mM, pH 7,5; 0,015 % de Brij-35; 0,2 % de Coating Reagent n.° 3; EDTA 50 mM) para detener la reacción. Los datos finales se leyeron por compás calibrador. Los resultados de la prueba se muestran en la Tabla 6.
Tabla 6 Determinación de la actividad inhibidora de cinasa de la Forma cristalina I del compuesto de la fórmula (III) (CI<50>)
A partir de los resultados experimentales en la Tabla 6, la Forma cristalina I del compuesto de la fórmula (III) de la presente invención tiene buena actividad inhibidora contra una variedad de cinasas, que indica que los compuestos de la presente invención tienen un buen potencial de aplicación clínica en el tratamiento de enfermedades mediadas por la expresión anormal de diversas cinasas, tales como Aurora, VEGFR2 (KDR), FGFR, FLT y JAK.
Ejemplo experimental biológico 5: Estudio farmacodinámico in v iv o del compuesto de la presente invención sobre un modelo de tumor de xenoinjerto subcutáneo de células Kasumi-1 de leucemia granulocítica aguda humana
Muestra de prueba: Forma cristalina I preparada en el Ejemplo 17 (Forma cristalina I del compuesto 29)
Animales, células, reactivos e instrumentos: células Kasumi-1, obtenidas de ATCC
Ratones CB17 SCID, 6-8 semanas, hembras, disponibles de Shanghai Lingchang Biotechnology Co., Ltd.
Método experimental:
1. Construcción y agrupación de ratones portadores de tumores
Se cultivaron células Kasumi-1in vitroen una única capa, y las condiciones de cultivo fueron las siguientes: medio RPMI 1640 complementado con 10 % de suero bovino fetal inactivado por calor y 1 % de anticuerpo doble contra penicilina-estreptomicina, 37°C y 5 % de CO<2>. Se logró el pase de dos a tres veces a la semana. Cuando las células estuvieron en fase de crecimiento exponencial, las células se recogieron, se contaron y se inocularon.
Se inocularon por vía subcutánea 0,2 ml de suspensión de células que contenía aproximadamente 1 x 107 células Kasumi-1 (célula suspensa en 1:1 de medio RPMI 1640 base y gel nutritivo) en el lomo derecho de ratones CB17 SCID hembra. La administración de las agrupaciones se inició cuando el volumen promedio del tumor alcanzó 100 150 mm3. Método de agrupación: los animales se pesaron antes de la administración y se midió el volumen del tumor. La agrupación se realizó según el volumen del tumor, con 8 ratones por grupo.
2. Pauta posológica
Tabla 7. Pauta posológica
3. Indicadores de observación experimental
Se monitorizaron diariamente la salud y muerte de los animales. Se midió el peso corporal dos veces a la semana, y se recogieron muestras después de la última dosis y se pesó el peso del tumor. La eficacia respecto al peso del tumor se evaluó por % de TGI, inhibición del crecimiento tumoral (TGI)% = (TWc-TW<t>) / TWc x 100%, TWc: peso del tumor del grupo de control, TWT: peso del tumor del grupo de tratamiento. Según las pautas de NIH, el fármaco se considera eficaz si TGI > 58 %.
Tabla 8 Efecto sobre el peso del tumor de ratones portadores de tumor Kasumi-1
A partir de los resultados experimentales en la Tabla 8, se puede observar que el compuesto 29 (Forma cristalina I) tiene un efecto inhibidor significativo sobre el modelo de xenoinjerto de células Kasumi-1, que indica que el compuesto de la presente invención tiene un buen potencial de aplicación clínica de leucemia aguda.
Ejemplo 6: Evaluación FC de perros beagle de la presente invención
Muestra de prueba: Forma cristalina I preparada en el Ejemplo 17 (Forma cristalina I del compuesto 29)
Método experimental:
1. La administración y recogida de muestras de sangre
(1) Administración a animales: todos los animales ayunaron durante más de 12 h antes de la administración, y se alimentaron 4 h después de la administración. No se limitó el agua ni antes ni después de la administración durante el experimento. Se administró a los perros beagle por vía intravenosa 1 mg/kg de la Forma cristalina I del compuesto 29 (prescripción: 10 % de DMA 20 % (30 % de solutol) 70 % de solución salina) en una dosis única, y la sangre se recogió 0 h antes de la administración y 0,083, 0,25, 0,50, 1,0, 2,0, 4,0, 6,0, 8,0, 12 y 24 h después de la administración. Se administró a los perros beagle por vía oral con 2 mg/kg de la Forma cristalina I del compuesto 29 (prescripción: 10 % de DMA 20 % (30 % de solutol) 70 % de solución salina) en una dosis única, y la sangre se recogió 0 h antes de la administración y 0,25, 0,50, 1,0, 2,0, 4,0, 6,0, 8,0, 12 y 24 h después de la administración, y se tomaron 200 gl de sangre a través de una vena safena pequeña, y se pusieron en un tubo de ensayo seco EDTA-K2.
(2) Preparación de plasma: la muestra de sangre completa se separó por centrifugación a baja velocidad (1800 g, 5 min, 4 °C) (la sangre completa se recogió y se dispuso en un baño de hielo, y la separación del plasma debe completarse en el plazo de 30 min) para dar plasma, y el plasma separado se almacenó en un refrigerador a -20 °C para el análisis.
2. Método de análisis de muestras
La muestra a probar (-80 °C) se sacó del refrigerador, se descongeló naturalmente a temperatura ambiente y se agitó con vórtex durante 5 min; se aspiraron con exactitud 20 gl de la muestra de plasma en un tubo de centrifugadora de 1,5 ml; se añadieron 200 gl de disolución de trabajo de patrón interno a una concentración de 50 ng/ml, y se mezclaron bien; después de agitar con vórtex durante 5 min, la mezcla se centrifugó durante 5 min (12000 rpm); se aspiraron con exactitud 50 gl de sobrenadante en placas de 96 pocillos previamente llenadas con 150 gl/pocillo de agua; se agitaron con vórtex durante 5 min, la determinación de LC-MS/MS se realizó en un volumen de inyección de 15 gl.
3. Método de procesamiento de datos
La concentración de muestra de prueba se obtuvo usando Analyst 1.6.1 de AB SCIEX. Se usa Microsoft Excel para calcular la media, desviación estándar, coeficiente de variación y otros parámetros (no se calculan los datos obtenidos directamente por Analyst 1.6.1), se calcularon los parámetros FC usando Pharsight Phoenix 6.1 software NCA.
Resultados experimentales:
Tabla 9. Parámetros FC en perros beagle
Se puede observar de los resultados experimentales en la Tabla 9 que el compuesto 29 (Forma cristalina I) tiene buenas propiedades farmacocinéticas en perros beagle, muestra muy buena capacidad para ser utilizado como fármaco, y tiene un potencial de aplicación clínica muy grande.
Lo anterior es solo las realizaciones preferidas de la presente invención, y no pretende limitar la presente invención.

Claims (7)

  1. REIVINDICACIONES 1. Un compuesto representado por la fórmula (I), sales farmacéuticamente aceptables o estereoisómeros del mismo,
  2. X se selecciona de CH o N; R<1>se selecciona del grupo que consiste en hidrógeno, alquilo C<1-6>, cicloalquilo C<3-6>, alcoxi C<1-6>, alquilo C<1-6>halogenado y alcoxi C<1-6>halogenado; R<2>se selecciona del grupo que consiste en hidrógeno, alquilo C<1-6>y cicloalquilo C<3-6>; Y es CR<3>; P es CR<4>; W es N; R<3>se selecciona del grupo que consiste en hidrógeno, hidroxi, amino, carboxi, ciano, nitro, halógeno, alquilo C<1-6>, alcoxi C<1-6>, cicloalquiloxi C<3-6>, oxacicloalquiloxi C<5-8>, alcoxi C<1-6>halogenado, alquenilo C<2-8>, alquinilo C<2>-8, cicloalquil C<3-6>-amino, alquil C<1-6>-sulfonilo, cicloalquil C<3-8>-sulfonilo, alquil C<1-6>-carbonilo, cicloalquil C<3-6>-carbonilo, -NRn-(CH<2>)n-N(R<7>)(R<8>), alquiltio C<1-6>-(CH<2>)n-, -(CH<2>)n-cicloalquilo de (3-14) miembros, -(CH<2>)n-arilo de (6-14) miembros, -(CH<2>)n-heterociclilo de (5-14) miembros y -(CH<2>)n-heteroarilo de (5-14) miembros; en donde, n=0-6; el heterociclilo o heteroarilo tiene al menos un heteroátomo seleccionado de O, S y N, y un átomo de S formador de anillo puede estar opcionalmente oxidado a S(O) o S(O)<2>, un átomo de C formador de anillo en cicloalquilo, arilo, heterociclilo o heteroarilo puede estar opcionalmente oxidado a C(O); y el cicloalquilo, arilo, heteroarilo o heterociclilo se puede sustituir opcionalmente con uno o más alquilo C<1-3>o cicloalquilo C<3-6>independientes; R<4>es -(CH<2>)n-heterociclilo de (5-14) miembros, en donde, n=0-6; el heterociclilo tiene al menos un heteroátomo seleccionado de O, S y N, un átomo de S formador de anillo puede estar opcionalmente oxidado a S(O) o S(O)<2>, y un átomo de C formador de anillo puede estar opcionalmente oxidado a C(O); y el heterociclilo se puede sustituir opcionalmente con uno o más alquilo C<1-3>o cicloalquilo C<3-6>independientes; R<7>y R8 se seleccionan independientemente del grupo que consiste en hidrógeno, alquilo C<1-6>, cicloalquilo C<3>-6, alcoxi C<1-6>, alquilo C<1-6>halogenado y alcoxi C<1-6>halogenado; Ar se selecciona del grupo que consiste en cicloalquilo de 3-14 miembros, arilo de 6-14 miembros, heterociclilo de 5-14 miembros y heteroarilo de 5-14 miembros, el heterociclilo o heteroarilo tiene al menos un heteroátomo seleccionado de O, S y N, y un átomo de S formador de anillo puede estar opcionalmente oxidado a S(O) o S(O)<2>, un átomo de C formador de anillo en cicloalquilo, arilo, heterociclilo o heteroarilo puede estar opcionalmente oxidado a C(O), y Ar se puede sustituir opcionalmente con 1 a 3 R6; cada R6 se selecciona independientemente del grupo que consiste en hidrógeno, hidroxi, amino, carboxi, ciano, nitro, halógeno, alquilo C<1-6>, cicloalquilo C<3-6>, alcoxi C<1-6>, cicloalquiloxi C<3-6>, alcoxi C<1-6>halogenado, alquilo C<1-6>halogenado, cicloalquilo C<3-6>, alquenilo C<2-8>, alquinilo C<2-8>, -NRn-(CH<2>)n-N(Rg)(R<10>), aminoalquilo C<1-6>, cicloalquil C3-6-amino, alquil C<1-6>-sulfonilo, cicloalquil C3-8-sulfonilo, alquil C<1-6>-carbonilo, cicloalquil C<3-6>-carbonilo, alquiltio C<1-6>, -(CH<2>)n-cicloalquilo de (6-14) miembros, -(CH<2>)n-arilo de (6-14) miembros, -(CH<2>)nheterociclilo de (5-14) miembros y -(CH<2>)n-heteroarilo de (5-14) miembros; en donde, n=0-6, y cicloalquilo, arilo, heteroarilo, heterociclilo se pueden sustituir opcionalmente con uno o más alquilos C<1-3>independientes; R<9>y Río se seleccionan independientemente del grupo que consiste en hidrógeno, alquilo Ci-6, cicloalquilo C<3-6>, alcoxi C<1-6>, alquilo C<1-6>halogenado y alcoxi C<1-6>halogenado; y R<11>se selecciona del grupo que consiste en hidrógeno, alquilo C<1-6>y cicloalquilo C<3-6>. 2. El compuesto, sales farmacéuticamente aceptables o estereoisómeros del mismo según la reivindicación 1, en donde, X es N; R<1>se selecciona de alquilo C<1-3>, preferentemente metilo o etilo; R<2>se selecciona del grupo que consiste en hidrógeno, metilo y etilo; Ar se selecciona del grupo que consiste en arilo de 6-14 miembros o heteroarilo de 5-10 miembros; el heteroarilo tiene al menos un heteroátomo seleccionado de O, S y N, y un átomo de S formador de anillo puede estar opcionalmente oxidado a S(O) o S(O)<2>, y un átomo de C formador de anillo en arilo y heteroarilo puede estar opcionalmente oxidado a C(O), en donde Ar se puede sustituir opcionalmente con 1 a 3 R6; y cada R6 se selecciona independientemente del grupo que consiste en hidrógeno, amino, ciano, halógeno, alquilo C<1-4>, trifluorometilo, metilsulfonilo, -(CH<2>)n-heterociclilo de (5-10) miembros y -(CH<2>)n-heteroarilo de (5 10) miembros; en donde, n=0-6; y el heteroarilo y heterociclilo se puede sustituir opcionalmente con uno o más alquilos C<1-3>independientes. 3. El compuesto, sales farmacéuticamente aceptables o estereoisómeros del mismo según la reivindicación 2, en donde el compuesto se representa por la fórmula (II):
  3. Ar se selecciona del grupo que consiste en fenilo y heteroarilo de 5-6 miembros, el heteroarilo tiene al menos un heteroátomo seleccionado de O, S y N, y un átomo de S formador de anillo puede estar opcionalmente oxidado a S(O) o S(O)<2>, un átomo de C formador de anillo en arilo y heteroarilo puede estar opcionalmente oxidado a C(O), en donde Ar se puede sustituir opcionalmente con 1 a 3 R6; cada R6 se selecciona independientemente del grupo que consiste en hidrógeno, amino, ciano, halógeno, alquilo C<1-4>, trifluorometilo y metilsulfonilo; y el halógeno es preferentemente cloro; R<3>se selecciona del grupo que consiste en hidrógeno, hidroxi, amino, carboxi, ciano, nitro, halógeno, alquilo C<1-4>, alcoxi C<1-4>, cicloalquiloxi C<3-6>, oxacicloalquiloxi C<5-8>, alcoxi C<1-4>halogenado, alquenilo C<2-6>, alquinilo C<2>-6, cicloalquil C3-6-amino, alquil C1-4-sulfonilo, cicloalquil C3-8-sulfonilo, alquil C1-4-carbonilo, cicloalquil C<3-6>-carbonilo, -NRn-(CH2)n-N(R7)(R8), -(CH<2>)n-cicloalquilo de (3-14) miembros, -(CH<2>)n-heterociclilo de (5-11) miembros y -(CH<2>)n-heteroarilo de (5-10) miembros; en donde, n=0-6; el heterociclilo o heteroarilo tiene al menos un heteroátomo seleccionado de O, S y N, y un átomo de S formador de anillo puede estar opcionalmente oxidado a S(O) o S(O)<2>, y un átomo de C formador de anillo en cicloalquilo, heterociclilo o heteroarilo puede estar opcionalmente oxidado a C(O); y el cicloalquilo, heteroarilo y heterociclilo se puede sustituir opcionalmente con uno o más alquilo C<1-3>o cicloalquilo C<3-6>independientes; R<4>es -(CH<2>)n-heterociclilo de (5-11) miembros, en donde, n=0-6; el heterociclilo tiene al menos un heteroátomo seleccionado de O, S y N, un átomo de S formador de anillo puede estar opcionalmente oxidado a S(O) o S(O)<2>, y un átomo de C formador de anillo puede estar opcionalmente oxidado a C(O); y el heterociclilo se puede sustituir opcionalmente con uno o más alquilo C<1-3>o cicloalquilo C<3-6>independientes; R<7>y R8 se seleccionan independientemente del grupo que consiste en hidrógeno, metilo, etilo, isopropilo y ciclopropilo; y R<11>se selecciona del grupo que consiste en hidrógeno, alquilo C<1-6>y cicloalquilo C<3-6>. 4. El compuesto, sales farmacéuticamente aceptables o estereoisómeros del mismo según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, en donde, Ar se puede seleccionar del grupo que consiste en:
  4. R<3>se selecciona del grupo que consiste en: hidrógeno, metilo, etilo, isopropilo,
  5. 5. El compuesto, sales farmacéuticamente aceptables o estereoisómeros del mismo según la reivindicación 3, en donde, Ar se selecciona de fenilo o heteroarilo de 5-6 miembros; Ar se puede sustituir opcionalmente con 1 a 3 R6, cada R6 se selecciona independientemente del grupo que consiste en hidrógeno, amino, ciano, halógeno, alquilo C<1-4>, trifluorometilo y metilsulfonilo; R<3>se selecciona de hidrógeno o alquilo C<1-4>; y R<4>es -(CH<2>)n-heterociclilo de (5-11) miembros; en donde, n=0-6; el heterociclilo tiene al menos un heteroátomo seleccionado de O, S y N, y un átomo de S formador de anillo puede estar opcionalmente oxidado a S(O) o S(O)<2>, y un átomo de C formador de anillo puede estar opcionalmente oxidado a C(O); y el heterociclilo se puede sustituir opcionalmente con uno o más alquilo C<1-3>o cicloalquilo C<3-6>independientes.
  6. 6. El compuesto, sales farmacéuticamente aceptables o estereoisómeros del mismo según la reivindicación 5, en donde, Ar se selecciona de fenilo o piridilo; Ar se puede sustituir opcionalmente con 1 a 3 R6, en donde cada R6 se selecciona independientemente del grupo que consiste en hidrógeno, amino, ciano, halógeno, alquilo C<1-4>, trifluorometilo y metilsulfonilo; R<3>se selecciona de hidrógeno o alquilo C<1-4>; y R<4>es -(CH<2>)n-monoheterociclilo de (5-6) miembros o -(CH<2>)n-heterociclilo de (7-11) miembros condensados, en donde, n=0-6; el heterociclilo tiene al menos un heteroátomo seleccionado de O, S y N, y un átomo de S formador de anillo puede estar opcionalmente oxidado a S(O) o S(O)<2>, y un átomo de C formador de anillo puede estar opcionalmente oxidado a C(O); y el heterociclilo se puede sustituir opcionalmente con uno o más alquilo C<1-3>o cicloalquilo C<3-6>independientes; y preferentemente, R<4>se selecciona del grupo que consiste en:
    n=0-3; en donde el heterociclilo se puede sustituir opcionalmente con uno o más grupos alquilo C<1-3>o grupos cicloalquilo C<3-6>independientes.
  7. 7. El compuesto, sales farmacéuticamente aceptables o estereoisómeros del mismo según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 6, en donde el compuesto se selecciona de:
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