ES3034297T3

ES3034297T3 - New contrast agent for use in magnetic resonance imaging

Info

Publication number: ES3034297T3
Application number: ES22714807T
Authority: ES
Inventors: Thomas Brumby; Jessica Lohrke; Simon Anthony Herbert; Olaf Panknin; Thomas Frenzel; Claudia Green; Gregor Jost; Hubertus Pietsch; Markus Berger; Sven Wittrock
Original assignee: Bayer AG
Current assignee: Bayer AG
Priority date: 2021-03-15
Filing date: 2022-03-14
Publication date: 2025-08-14
Anticipated expiration: 2042-03-14
Also published as: CO2023012137A2; DOP2023000185A; CN116981658A; BR112023017197A2; MA63787B1; PE20240821A1; TW202302543A; US20240182431A1; ECSP23070062A; CR20230433A; KR20230157412A; EP4308551A1; CA3213386A1; MX2023010737A; EP4308551B1; WO2022194777A1; GEP20257722B; JP2024512459A; JOP20230216A1; CL2023002723A1

Abstract

La presente invención se refiere a una nueva clase de compuestos de fórmula general (I), a sus complejos quelatos de Gd3+, a métodos de preparación de dichos compuestos y a su uso como agentes de contraste para resonancia magnética. (Traducción automática con Google Translate, sin valor legal)

Description

DESCRIPCIÓN

Nuevo agente de contraste para utilizar en imágenes por resonancia magnética

Campo de la invención

La presente invención se relaciona con los elementos caracterizados en las reivindicaciones de la patente,es decircon nuevos compuestos de quelato de gadolinio, con procedimientos para preparar dichos compuestos, con el uso de dichos compuestos como agentes de contraste para IRM y con su uso en un cuerpo de mamífero.

Antecedentes

1. Introducción

La técnica de Imágenes por Resonancia Magnética (IRM (MRI, por sus siglas en inglés)) es no invasiva y puede proporcionar información sobre la anatomía, la función y el metabolismo de los tejidos in vivo. Los escaneos de resonancia magnética no mejorados de la anatomía y función de los tejidos utilizan los átomos de hidrógeno en el agua para generar la imagen. Además de las diferencias en el contenido de agua local, el contraste básico en la imagen por RM resulta principalmente de las diferencias regionales en los tiempos de relajación T (1) y T(2) intrínsecos, cada uno de los cuales se puede elegir para dominar el contraste de la imagen. Sin embargo, el contraste intrínseco proporcionado por el T (1) y T(2) del agua y los cambios en sus valores provocados por la patología de los tejidos son a menudo demasiado limitados para permitir un diagnóstico sensible y específico. Para superar estos límites los tiempos de relajación de los protones se pueden ver influenciados por la presencia de iones paramagnéticos. Los Agentes de Contraste basados en Gadolinio (GBCAs, por sus siglas en inglés) comerciales contienen al menos un ión paramagnético del metal de tierras raras Gadolinio (Gd3+), el cual posee el mayor número de electrones no apareados de cualquier ión estable (siete), creando un alto momento magnético que es efectivo para mejorar la relajación de protones.

Los medios de contraste paramagnéticos acortan los tiempos de relajación T 1 (longitudinal) y T2 (transversal) de los protones del agua circundante para producir de manera indirecta un efecto de mejora de la señal. La eficacia de un agente para acortar los tiempos de relajación se denomina relaxividad (r1 y r2 ), la cual depende del ligando que rodea al ión de Gd3+ y está influenciada por factores extrínsecos que incluyen la temperatura, la fuerza del campo magnético y la matriz (agua, tejido sólido, o sangre) (Lauffer RB et al., Paramagnetic metal complexes as water proton relaxation agents for n Mr imaging: theory and design. Chem Rev. 1987;87(5):901-27; Caravan P et al., Gadolinium(III) chelates as MRI contrast agents: structure, dynamics, and applications. Chem Rev. 1999;99(9):2293- 352).

Además de los agentes no dirigidos, hay disponibles dos agentes de contraste lineales (es decir, agentes de contraste donde el ión de Gadolinio está unido a una estructura de ligando lineal) para las Imágenes por Resonancia Magnética (IRM) del hígado: Gd-BOPTA (ácido gadobénico, comercializado como Multihance) y Gd-EOB-DTPA (ácido gadoxético, comercializado como Primovist en Europa y como Eovist en los Estados Unidos). Gd-EOB-DTPA (Bayer AG) y Gd-BOPTA (Bracco) se han aprobado para la detección y la diferenciación de lesiones hepáticas focales a dosis clínicas de 0,025 mmol/kg de peso corporal y 0,05 mmol/kg de peso corporal, respectivamente. Para ambos agentes el efecto T 1 domina y produce un contraste brillante en la imagen. Ambos agentes dirigidos se han utilizado para IRM del hígado, para la detección de lesiones hepáticas focales en pacientes con cáncer de hígado primario conocido o sospechado (por ejemplo carcinoma hepatocelular CHC (HCC, por sus siglas en inglés)) o enfermedad metastásica. Ellos proporcionan información con respecto a la vascularidad de la lesión en las fases arterial y venosa, a la presencia y función de los hepatocitos en la fase hepatobiliar retardada. Los agentes de contraste específicos para el hígado son captados por las células hepáticas (hepatocitos) sanas, mientras que no hay captación en el tejido tumoral maligno debido a la falta de transportadores del polipéptido transportador de aniones orgánicos (OAT, por sus siglas en inglés) intactos. De este modo ellos mejoran la detección de las lesiones hepáticas focales al aumentar el contraste entre la lesión y el hígado. La resonancia magnética mejorada por contraste (CE-MRI, por sus siglas en inglés) proporciona información importante para el diagnóstico diferencial. Los HCCs no expresan los respectivos transportadores de captación y por lo tanto no acumulan el GBCA específico del hígado en la medida en que se observa en el tejido hepático sano.

El Gd-BOPTA se segrega entre un 3 y un 5% en la bilis y permite la captura de imágenes en la fase específica del hígado entre 1 y 2 horas después de su administración (Seale MK et al. Radiographics 2009; 29: 1725 1748).

A principios de la década de 2000, la investigación de nuevos agentes de contraste con tropismo mejorado para las células hepáticas llevó al desarrollo de Gd-EOB-DTPA. Gd-EOB-DTPA se excreta en la bilis hasta aproximadamente el 50% de la dosis administrada. Gd-EOB-DTPA se puede administrar en bolo, garantiza una evaluación satisfactoria de la fase intersticial vascular y posteriormente (después de 10-20 minutos), una evaluación de la fase hepatobiliar. Los estudios de la bibliografía han confirmado que la IRM del hígado con Gd-EOB-DTPA es capaz de detectar y de identificar lesiones hepáticas focales con una alta especificidad y sensibilidad, tanto en pacientes con un hígado sano como en pacientes oncológicos/con cirrosis hepática (Fidler J et al. Hepatology 2011; 53 (2): 678-82; Park Y et al. Korean J Radiol 2010; 11(4): 433-40; Bluemke DA et al. Radiology 2005; 237: 89-98).

El Gd-EOB-DTPA es captado principalmente por los hepatocitos a través de los polipéptidos transportadores de aniones orgánicos (OATP1B1, OATP1B3) y posteriormente es excretado principalmente en los canalículos biliares a través de la proteína 2 asociada a la resistencia a múltiples fármacos (MRP2 (por sus siglas en inglés), sinónimo cMOAT (por sus siglas en inglés): transportador canalicular multiespecífico de aniones orgánicos) (Ringe KI et al. American Journal of Roentgenology. 2010;195: 13-28; Leonhardt M et al. Drug Metab Dispos.

2010 Jul;38(7):1024-8).

La estructura molecular de ambos productos (Gd-EOB-DTPA y Gd-BOPTA) comercializados incluye un grupo hidrofílico y otro lipofílico. El ligando lineal tipo DTPA para la complejación de Gadolinio comprende el grupo hidrofílico y la cadena lateral de benceno (por ejemplo etil-oxi-bencilo, EOB) es el grupo lipofílico. El grupo lipofílico no sólo es responsable de la marcada excreción biliar sino que también resulta en una débil unión a proteínas de aproximadamente el 10% (Weinmann HJ et al. Magn Reson Med 1991; 22:233-237). En comparación con los GBCAs extracelulares disponibles en el comercio, el Gd-EOB-DTPA y el Gd-BOPTA muestran relaxividades r1 y r2 más altas (Rohrer M et al. Invest Radiol. 2005 Nov;40(11):715-24). Los altos valores de relaxividad dependen de la afinidad de las moléculas con las proteínas plasmáticas a través del grupo lipofílico, que también es responsable de la captación específica de los hepatocitos.

Algunos informes recientes han mostrado un aumento de la intensidad de la señal (SI (por sus siglas en inglés)) en las áreas cerebrales del núcleo dentado (DN (por sus siglas en inglés)) y del globo pálido (GP (por sus siglas en inglés)) en imágenes de RM no realzadas ponderadas en T1 (T1w (por sus siglas en inglés)) en pacientes con función renal normal que recibieron múltiples administraciones de agentes de contraste basados en gadolinio (GBCA) lineales. Un aumento visible de la SI está altamente asociado con GBCAs lineales solamente. Hasta ahora, esto no se correlaciona con ningún síntoma clínico. Sin embargo, en Europa, la Agencia Europea de Medicamentos (EMA (por sus siglas en inglés)) propuso retirar del mercado los GBCAs con una estructura lineal, excepto ambos productos de mercado específicos para el hígado Gd-BOPTA - si se utiliza exclusivamente en el hígado - y Gd-EOB-DTPA. En marzo de 2016, el Comité de Evaluación de Riesgos de Farmacovigilancia (PRAC (por sus siglas en inglés)) de la EMA inició un procedimiento de revisión de los GBCAs lineales y recomendó, en marzo de 2017, una suspensión de la autorización de comercialización para todos los GBCAs lineales de uso múltiple en la Unión Europea (UE) mientras que apoyó que se continuaran utilizando los GBCAs macrocíclicos (es decir, los agentes de contraste donde el ión de Gadolinio está unido a una estructura de ligando macrocíclico). Tras esta decisión, el mercado de GBCA se ha alejado ampliamente de los agentes lineales basados en Gadolinio. A principios de 2022, los GBCAs específicos para el hígado (Gd-EOB-DTPA y Gd-BOPTA) aún se aceptan, ya que no hay un GBCA macrocíclico específico para el hígado alternativo disponible en el comercio. El aumento observado de la intensidad de la señal en el núcleo dentado también se observó después de la administración repetida de Gd-EOB-DTPA lineal (Kahn J et al. Radiology.

2017;282(3):708 - 716). Se sabe que los GBCAs macrocíclicos son más estables frente a la liberación de Gd (Frenzel et al. Invest Radiol. 2008 Dic;43(12):817-28.) Por lo tanto, existe una mayor necesidad médica de nuevos agentes de contraste macrocíclicos específicos para el hígado.

2. Descripción de la Técnica Previa, Problema a resolver y su Solución

WO199532741 describe conjugados de ácidos biliares que se han declarado útiles para la obtención de imágenes hepáticas y de los conductos biliares.

WO2001082795 describe un agente de IRM con una fracción de bloqueo terapéutico unida covalentemente que provoca un cambio en la intensidad de la señal de dicho agente cuando el agente terapéutico interactúa con su objetivo previsto.

WO2007009638 divulga complejos metálicos que contienen grupos perfluoroalquilo que se pueden utilizar como agentes de contraste para IRM y rayos X en particular para la linfografía.

WO2004006965 divulga agentes de contraste para IRM que contienen perfluoroalquilo, los cuales presentan una formación de micelas que conduce a una alta relaxividad r1, para representar trombos intravasculares.

WO1997032862 describe una clase de poliquelatos unidos a grupos amino con puente de alqueno para el diagnóstico por imágenes.

WO1999005145 detalla un proceso para la preparación de tetraazamacrociclos. WO1996016677 describe complejos metálicos para utilizar como medios de contraste de rayos X para la obtención de imágenes hepáticas y de los conductos biliares.

WO1995028392 revela el uso de quelatos anfifílicos y su utilización para la obtención de imágenes hepatobiliares.

WO2013083535 describe la preparación de agentes de obtención de imágenes hiperpolarizados para el análisis de diagnóstico por RM.

La necesidad médica de CE-MRI del hígado es elevada y dado que no se dispone de GBCA macrocíclicos aún se utilizan los GBCA lineales por ejemplo para el diagnóstico diferencial de las lesiones hepáticas focales o para la detección de pequeñas lesiones hepáticas. Sin embargo, actualmente no hay disponible ningún producto comercializado que contenga GBCA macrocíclico con captación hepática que muestre los atributos favorables de los GBCAs macrocíclicos con los atributos esenciales de un agente de obtención de imágenes hepáticas. Entre las diferentes propiedades deseables para los compuestos adecuados como agentes de contraste de IRM se encuentran por ejemplo la alta solubilidad en agua, la alta relaxividad, la excreción completa e intacta, la buena tolerabilidad y un buen perfil de seguridad.

EP405704 se relaciona con complejos de Gd3+ con derivados del ácido dietilentriaminopentaacético (DTPA) tales como Gd-EOB-DTPA y su uso como agentes de contraste en imágenes por resonancia magnética del hígado, entre otros. Sin embargo, como se describió anteriormente, estos compuestos y complejos lineales han sido objeto de un mayor escrutinio por parte de las autoridades sanitarias en los últimos años y sólo se siguen utilizando en el ámbito clínico debido a la falta de alternativas adecuadas.

Por lo tanto, existe una necesidad médica insatisfecha de proporcionar GBCAs macrocíclicos para la obtención de imágenes por resonancia magnética, en particular para la obtención de imágenes por resonancia magnética del hígado, los cuales combinen las propiedades beneficiosas de los agentes lineales específicos para el hígado y los GBCAs macrocíclicos. Específicamente, existe una necesidad médica insatisfecha de proporcionar GBCAs específicos para el hígado que muestren la mayor cantidad posible de los criterios enumerados a continuación:

- presenten una alta solubilidad en agua,

- sean químicamente estables,

- sean estables frente a la liberación de metales del quelato,

- presenten una alta relaxividad,

- presenten una elevada captación in vitro en células HEK OATP1B1 transfectadas humanas,

- presenten una elevada captación in vitro en células OATP1B3 HEK transfectadas humanas,

- tengan una baja unión a las proteínas,

- muestran un perfil farmacocinético favorable y una doble vía de eliminación,

- se excreten rápidamente y por completo,

- no presenten una retención a largo plazo de Gd3+ tanto en los tejidos como en los órganos,

- sean estables frente a la degradación metabólica,

- sean bien tolerados,

- son adecuados para la obtención de imágenes hepáticas,

- sean adecuados para la obtención de imágenes biliares,

- sean adecuados para la obtención de imágenes de enfermedades hepáticas

- y puedan presentar una elevada captación in vitro (por ejemplo en hepatocitos de rata).

El estado de la técnica descripto anteriormente no divulga los compuestos de fórmula general (I) de la presente invención como se definen en la presente, o un estereoisómero, un tautómero, un N-óxido, un hidrato, un solvato, o una sal de los mismos, como se describen y se definen en la presente. La técnica tampoco revela los compuestos de fórmula general (I) de la presente invención en la forma de un complejo con Gd3+, y los estereoisómeros, tautómeros, N-óxidos, hidratos, solvatos, o sales de los mismos, o las mezclas de los mismos. De forma conjunta o por separado, de aquí en adelante se hace referencia a los compuestos de fórmula general (I) de la presente invención y a los compuestos de fórmula general (I) de la presente invención en la forma de un complejo con Gd3+, y a los estereoisómeros, tautómeros, N-óxidos, hidratos, solvatos, o sales de los mismos, o a las mezclas de los mismos como “compuestos de la presente invención”. También se puede hacer referencia a los compuestos de fórmula general (I) de la presente invención en la forma de un complejo con Gd3+, y a los estereoisómeros, tautómeros, N-óxidos, hidratos, solvatos, o sales de los mismos, o las mezclas de los mismos como “compuestos que contienen Gd3+ de la presente invención”.

Se ha descubierto, y esto constituye la base de la presente invención, que los compuestos de la presente invención poseen propiedades sorprendentes y ventajosas.

En particular, los compuestos de fórmula general (I) de la presente invención permiten la preparación de complejos con Gd3+,es decirde los compuestos de fórmula general (I) de la presente invención en la forma de un complejo con Gd3+ y de los estereoisómeros, tautómeros, N-óxidos, hidratos, solvatos, o sales de los mismos, o las mezclas de los mismos. Los compuestos que contienen Gd3+ de la presente invención muestran la estabilidad favorable de los GBCAs macrocíclicos y una alta captación en el hígado. Además, los compuestos que contienen Gd3+ de la presente invención muestran una alta tolerabilidad, una mejor relaxividad, una excelente solubilidad en agua y una excreción rápida y completa, lo que los hace muy adecuados para las imágenes por resonancia magnética, en particular para las imágenes por resonancia magnética del hígado.

Síntesis

La presente invención describe una nueva clase de complejos de quelato de gadolinio (no lineales) específicos para el hígado, procedimientos para su preparación y su uso como agentes de contraste para IRM.

Descripción de la invención

De acuerdo con un primer aspecto, la presente invención abarca compuestos de fórmula general (I),

en los cuales:

Ar representa un grupo seleccionado de

en el que # indica el punto de unión a X,

X representa un grupo seleccionado de

CH2, (CH2)2, (CH2)3, (CH2)4 y *-(CH2)2-O-CH2-#,

en el que * indica el punto de unión a Ar y # indica el punto de unión a la fracción de ácido acético,

R 1, R2 y R3 representan, de manera independiente para cada aparición, un átomo de hidrógeno o un grupo seleccionado de alquilo C1-C3-, -CH2OH, -(<c>H2)2OH y -CH2OCH3, R4 representa un grupo seleccionado de

alcoxi C2-C5-, (alcoxi C1-C3-)-(CH2)2-O-, (alcoxi C1-C3-)-(CH2)2-O-(CH2)2-O- y

(alcoxi C1-C3-)-(CH2)2-O-(CH2)2-O-(CH2)2-O-,

en el que dichos grupos alcoxi C1-C3- y grupos alcoxi C2-C5- están opcionalmente sustituidos, una, dos, tres o cuatro veces, con un átomo de flúor,

R5 representa un átomo de hidrógeno o un grupo seleccionado de

alcoxi C2-C5-, (alcoxi Ci-C3-)-(CH2)2-O-, (alcoxi Ci-C3-)-(CH2)2-O-(CH2)2-O- y

(alcoxi Ci-C3-)-(CH2)2-O-(CH2)2-O-(CH2)2-O-,

y

R6 representa un átomo de hidrógeno o un grupo seleccionado de

alcoxi C2-C5-, (alcoxi C1-C3-)-(CH2)2-O-, (alcoxi C1-C3-)-(CH2)2-O-(CH2)2-O- y

(alcoxi C1-C3-)-(CH2)2-O-(CH2)2-O-(CH2)2-O-,

y los estereoisómeros, tautómeros, N-óxidos, hidratos, solvatos, o sales de los mismos, o las mezclas de los mismos.

De acuerdo con un segundo aspecto, la presente invención abarca compuestos de fórmula general (I),supra,en la forma de un complejo con Gd3+, y los estereoisómeros, tautómeros, N-óxidos, hidratos, solvatos, o sales de los mismos, o las mezclas de los mismos.

Por lo tanto, de acuerdo con dicho segundo aspecto, la presente invención abarca compuestos de fórmula general (I),supra,en la forma de un complejo con Gd3+,

en el que:

Ar representa un grupo seleccionado de

en el que # indica el punto de unión a X,

X representa un grupo seleccionado de

CH2, (CH2)2, (CH2)3, (CH2)4 y *-(CH2)2-O-CH2-#,

alcoxi C2-C5-, (alcoxi C1-C3-)-(CH2)2-O-, (alcoxi C1-C3-)-(CH2)2-O-(CH2)2-O- y

(alcoxi C1-C3-)-(CH2)2-O-(CH2)2-O-(CH2)2-O-,

R5 representa un átomo de hidrógeno o un grupo seleccionado de

alcoxi C2-C5-, (alcoxi C1-C3-)-(CH2)2-O-, (alcoxi C1-C3-)-(CH2)2-O-(CH2)2-O- y

(alcoxi C1-C3-)-(CH2)2-O-(CH2)2-O-(CH2)2-O-,

y

R6 representa un átomo de hidrógeno o un grupo seleccionado de

alcoxi C2-C5-, (alcoxi C1-C3-)-(CH2)2-O-, (alcoxi C1-C3-)-(CH2)2-O-(CH2)2-O- y

(alcoxi C1-C3-)-(CH2)2-O-(CH2)2-O-(CH2)2-O-,

Definiciones

El término “sustituido” significa que uno o más átomos de hidrógeno en el átomo o grupo designado se reemplazan con una selección del grupo indicado, siempre que no se exceda la valencia normal del átomo designado bajo las circunstancias existentes. Se permiten las combinaciones de sustituyentes y/o variables.

El término “opcionalmente sustituido” significa que el número de sustituyentes puede ser igual o diferente de cero.

Cuando los grupos en los compuestos de acuerdo con la invención están sustituidos, es posible que dichos grupos estén monosustituidos o polisustituidos con sustituyente(s), a menos que se especifique de otra manera. Dentro del alcance de la presente invención, los significados de todos los grupos que se producen de manera repetida son independientes entre sí. Es posible que los grupos en los compuestos de acuerdo con la invención estén sustituidos con uno, dos o tres sustituyentes idénticos o diferentes, en particular con un sustituyente.

Si un sustituyente compuesto está formado por más de una parte,por ejemplo(alcoxi C1-C3-)-(alquilo C2-C6-)-, es posible que la posición de una parte determinada se encuentre en cualquier posición adecuada de dicho sustituyente compuesto,es decirla parte alcoxi C1-C3- puede estar unida a cualquier átomo de carbono de la parte alquilo C2-C6- de dicho grupo (alcoxi C1-C3-)-(alquilo C2-C6-)-. Un guión al principio o al final de dicho sustituyente compuesto indica el punto de unión de dicho sustituyente compuesto al resto de la molécula.

El término “que comprende” cuando se utiliza en la memoria descriptiva incluye “que consiste en” e “ integrado esencialmente por”.

Si dentro del presente texto se hace referencia a algún elemento como “según se menciona en la presente”, esto significa que éste se puede mencionar en cualquier parte en el presente texto.

Los términos según se mencionan en el presente texto poseen los siguientes significados:

El término “átomo de halógeno” significa un átomo de flúor, cloro, bromo o yodo, en particular un átomo de flúor, cloro o bromo.

El término “alquilo C1-C6-” significa un grupo hidrocarburo lineal o ramificado, saturado, monovalente que tiene 1, 2, 3, 4, 5 o 6 átomos de carbono,por ejemploun grupo metilo, etilo, propilo, isopropilo, butilo, sec-butilo, isobutilo, ferc-butilo, pentilo, isopentilo, 2-metilbutilo, 1 -metilbutilo, 1 -etilpropilo, 1,2-dimetilpropilo, neo-pentilo, 1.1 -dimetilpropilo, hexilo, 1 -metilpentilo, 2-metilpentilo, 3-metilpentilo, 4-metilpentilo, 1 -etilbutilo, 2-etilbutilo, 1.1 -dimetilbutilo, 2,2-dimetilbutilo, 3,3-dimetilbutilo, 2,3-dimetilbutilo, 1,2-dimetilbutilo o 1,3-dimetilbutilo, o un isómero o estereoisómero del mismo. En particular, dicho grupo tiene 1, 2, 3 o 4 átomos de carbono (“alquilo C1-C4-”),por ejemploun grupo metilo, etilo, propilo, isopropilo, butilo, sec-butil isobutilo, o ferc-butilo, más en particular 1, 2 o 3 átomos de carbono (“alquilo C1-C3-”),por ejemploun grupo metilo, etilo, n-propilo o isopropilo.

El término “haloalquilo C1-C3-” significa un grupo hidrocarburo lineal o ramificado, saturado, monovalente en el cual el término “alquilo C1-C3-” es como se definesupra,y en el cual uno o más de los átomos de hidrógeno se reemplazan, de manera idéntica o diferente, con un átomo de halógeno. En particular, dicho átomo de halógeno es un átomo de flúor. Dicho grupo haloalquilo C1-C3- es, por ejemplo, fluorometilo, difluorometilo, trifluorometilo, 2-fluoroetilo, 2,2-difluoroetilo, 2,2,2-trifluoroetilo, pentafluoroetilo, 3,3,3-trifluoropropilo o 1,3-difluoropropan-2-ilo u otro grupo alquilo polifluorosustituido.

El término “hidroxialquilo C2-C6-” significa un grupo hidrocarburo lineal o ramificado, saturado, monovalente en el cual el término “alquilo C2-C6-” se definesupra,y en el cual uno o más, con preferencia 1, 2 o 3 de los átomos de hidrógeno se reemplazan con un grupo hidroxi,por ejemploun grupo 2-hidroxietilo, 3-hidroxipropilo, 2-hidroxipropilo, 1-hidroxipropan-2-ilo, 2,3-dihidroxipropilo, 1,3-dihidroxipropan-2-ilo, 1,3-dihidroxi-2-(hidroximetil)propan-2-ilo, 3-hidroxi-2-metil-propilo, 2-hidroxi-2-metil-propilo.

El término “alcoxi C1-C3-” significa un grupo lineal o ramificado, saturado, monovalente de fórmula (alquil C1-C3-)-O-, en el cual el término “alquilo C1-C3-” es como se definesupra, por ejemploun grupo metoxi, etoxi, n-propoxi o isopropoxi.

El término “cicloalquilo C3-C6-” significa un anillo hidrocarburo saturado, monovalente, mono o bicíclico que contiene 3, 4, 5 o 6 átomos de carbono (“cicloalquilo C3-C6-”). Dicho grupo cicloalquilo C3-C6- es por ejemplo, un anillo hidrocarburo monocíclico,por ejemploun grupo ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopentilo o ciclohexilo.

El término “C1-C6”, como se usa en el presente texto,por ejemploen el contexto de la definición de “alquilo C1-C6-” significa un grupo alquilo que tiene un número finito de átomos de carbono de 1 a 6,es decir1,2, 3, 4, 5 o 6 átomos de carbono.

Además, como se utiliza en la presente, el término “C3-C6”, como se usa en el presente texto,por ejemploen el contexto de la definición de “cicloalquilo C3-C6-”, significa un grupo cicloalquilo que tiene un número finito de átomos de carbono de 3 a 6,es decir3, 4, 5 o 6 átomos de carbono.

Cuando se proporciona un rango de valores, dicho rango abarca cada valor y sub-rango dentro de dicho rango.

Por ejemplo:

"C1-C6" abarca C1, C2, C3, C4, C5, C6, C1-C6, C1-C5, C1-C4, C1-C3, C1-C2, C2-C6, C2-C5, C2-C4, C2-C3, C3-C6, C3-C5, C3-C4, C4-C6, C4-C5, y C5-C6;

"C1-C4" abarca C1, C2, C3, C4, C1-C4, C1-C3, C1-C2, C2-C4, C2-C3 y C3-C4¡

"C1-C3" abarca C1, C2, C3, C1-C3, C1-C2 y C2-C3¡

"C2-C6" abarca C2, C3, C4, C5, C6, C2-C6, C2-C5, C2-C4, C2-C3, C3-C6, C3-C5,

C3-C4, C4-C6, C4-C5, y C5-C6; y

"C3-C6" abarca C3, C4, C5, C6, C3-C6, C3-C5, C3-C4, C4-C6, C4-C5, y C5-C6.

Los compuestos de la presente invención pueden contener uno o más centros asimétricos, dependiendo de la ubicación y de la naturaleza de los diversos sustituyentes deseados. Los átomos de carbono asimétricos pueden estar presentes en la configuración (R) o (S), lo cual puede dar como resultado mezclas racémicas, mezclas en las cuales un enantiómero se encuentra presente en una cantidad mayor que el otro enantiómero, o enantiómeros únicos en el caso de un único centro asimétrico. En el caso de múltiples centros estereogénicos, se pueden sintetizar mezclas diastereoméricas, diastereómeros únicos o enantiómeros únicos. En ciertos casos, la asimetría también puede estar presente debido a la rotación restringida alrededor de un enlace determinado, a la quiralidad axial o la coordinación del centro metálico.

En el contexto de la presente invención, los compuestos de fórmula (I), los compuestos de fórmula (I) en la forma de un complejo con Gd3+, los compuestos de fórmula (II), los compuestos de fórmula (III) así como también cualquier otro compuesto y/o intermedio descripto en la presente puede incluir un grupo X. Dicho grupo X puede,inter alia,representar un grupo seleccionado de CH2, (CH2)2, (CH2)3, (CH2)4 y *-(CH2)2-O-CH2-#, en el que * indica el punto de unión a Ar y # indica el punto de unión a la fracción de ácido acético. Un experto en la técnica reconocería que los términos CH2, (CH2)2, (CH2)3 y (CH2)4 se refieren a grupos alquilo lineales,es decira grupos *CH2-#, *-(CH2)2-#, *-(CH2)3-# y *-(CH2)4-#, en el que* indica el punto de unión aA r y # indica el punto de unión a la fracción de ácido acético.

Los compuestos preferidos son aquéllos que producen la actividad biológica más deseable. También se incluyen dentro del alcance de la presente invención las mezclas racémicas o diastereoméricas o los isómeros y estereoisómeros separados, puros o parcialmente purificados de los compuestos de esta invención. La purificación y la separación de dichos materiales se pueden lograr por medio de técnicas estándar conocidas en la técnica.

Los isómeros ópticos se pueden obtener por medio de la resolución de las mezclas racémicas de acuerdo con los procesos convencionales, por ejemplo, mediante la formación de sales diastereoisoméricas utilizando un ácido o base ópticamente activo o mediante la formación de diastereómeros covalentes. Ejemplos de ácidos apropiados son el ácido tartárico, diacetiltartárico, ditoluoiltartárico y canforsulfónico. Las mezclas de diastereoisómeros se pueden separar en sus diastereómeros individuales sobre la base de sus diferencias físicas y/o químicas por medio de procedimientos conocidos en la técnica, por ejemplo, mediante cromatografía o cristalización fraccionada. Las bases o ácidos ópticamente activos se liberan entonces de las sales diastereoméricas separadas. Un proceso diferente para la separación de los isómeros ópticos involucra el uso de cromatografía quiral(por ejemplo,columnas de HPLC quiral), con o sin derivatización convencional, elegida de manera óptima para maximizar la separación de los enantiómeros. Daicel fabrica columnas de HPLC quiral adecuadas,por ejemplo,Chiracel OD y Chiracel OJ entre muchas otras, todas seleccionables de forma rutinaria. Las separaciones enzimáticas, con o sin derivación, también son útiles. Los compuestos ópticamente activos de esta invención se pueden obtener del mismo modo por medio de síntesis quirales utilizando materiales de partida y/o reactivos y catalizadores ópticamente activos.

Con el objeto de describir los diferentes tipos de isómeros se hace referencia a la Sección E de las Reglas de la IUPAC (Pure Appl Chem 45, 11-30, 1976).

La presente invención incluye todos los posibles estereoisómeros de los compuestos de la presente invención como estereoisómeros únicos, o como cualquier mezcla de dichos estereoisómeros,por ejemplodiastereoisómeros, o isómeros R- o S-, en cualquier proporción. El aislamiento de un único estereoisómero,por ejemplode un único enantiómero o de un único diastereómero, de un compuesto de la presente invención se puede lograr por medio de cualquier procedimiento del estado de la técnica adecuado como se describe en la presente, tal como la cromatografía, en especial la cromatografía quiral, por ejemplo.

Además, los compuestos de la presente invención pueden existir como N-óxidos, los cuales se definen en que al menos un nitrógeno de los compuestos de la presente invención se oxida. La presente invención incluye todos dichos posibles N-óxidos.

La presente invención también se relaciona con formas útiles de los compuestos divulgados en la presente, tales como hidratos, solvatos, sales, en particular sales farmacéuticamente aceptables, y co-precipitados. Los compuestos de la presente invención pueden existir como un hidrato, o como un solvato, en el que los compuestos de la presente invención contienen solventes polares, en particular agua, metanol o etanol por ejemplo como elemento estructural del entramado cristalino de los compuestos. La cantidad de solventes polares, en particular de agua, puede existir en una proporción estequiométrica o no estequiométrica. En el caso de los solvatos estequiométricos, por ejemplo son posibles un hidrato, hemi-, (semi-), mono-, sesqui-, di , tri-, tetra-, penta- etc. solvatos o hidratos, respectivamente. La presente invención incluye todos dichos hidratos o solvatos.

Además, los compuestos de la presente invención pueden existir en la forma de una sal. Dicha sal puede ser una sal de adición o bien inorgánica u orgánica, en particular cualquier sal de adición inorgánica u orgánica farmacéuticamente aceptable, utilizada habitualmente en las formulaciones farmacéuticas.

Además, en el contexto de la presente invención, los compuestos de fórmula general (I) en la forma de un complejo con Gd3+,es decirlos complejos de Gd3+ de los compuestos de fórmula general (I), como se describe a lo largo de este documento, pueden existir como sales en la forma de acuerdo con la fórmula (Ia)

en la que:

Ar, X y R1 a R6 representan los grupos indicados en los diferentes aspectos, realizaciones, ejemplos y cualquier otra descripción y/o representación de los compuestos de fórmula general (I) en la forma de un complejo con Gd3+,es decirlos complejos de Gd3+ de los compuestos de fórmula general (I), como se describe a lo largo de este documento, e Y+ representa un átomo de hidrógeno o un contraión orgánico o inorgánico cargado positivamente. En realizaciones particularmente preferidas, los compuestos de fórmula general (I) en la forma de un complejo con Gd3+,es decirlos complejos de Gd3+ de los compuestos de fórmula general (I), como se describe a lo largo de este documento, pueden existir como sal de un metal alcalino (elemento del grupo 1), tales como las sales de sodio,es decircomo sales en la forma de acuerdo con la fórmula (Ia), supra, en el que Y+ representa un catión de un metal alcalino (elemento del grupo 1),por ejemploun catión de sodio de un metal alcalino cargado positivamente (elemento del grupo 1). En realizaciones más particularmente preferidas, los compuestos de fórmula general (I) en la forma de un complejo con Gd3+,es decirlos complejos de Gd3+ de los compuestos de fórmula general (I), como se describe a lo largo de este documento, pueden existir como sales de sodio,es decircomo sales en la forma de acuerdo con la fórmula (Ia), supra, en el que Y+ representa un catión de sodio,es decirun ión de sodio cargado positivamente.

El término “sal farmacéuticamente aceptable” se refiere a una sal de adición de ácido inorgánico u orgánico relativamente no tóxica de un compuesto de la presente invención. Por ejemplo, véase S. M. Berge,et al.“Pharmaceutical Salts,” J. Pharm. Sci. 1977, 66, 1-19. La producción de sales especialmente neutras se describe en la Patente de EE.UU. No. 5.560.903.

Las sales farmacéuticamente aceptables de los compuestos de acuerdo con la invención incluyen sales con aminoácidos o bases inorgánicos y/u órganicos, en particular cationes fisiológicamente tolerables de aminoácidos o bases inorgánicos y/u orgánicos, tales como, inter alia, aquéllos de aminas primarias, secundarias o terciarias. Los ejemplos pueden ser, sin limitarse a ellos, sales de sodio, litio, potasio, calcio, magnesio, arginina, lisina, amoníaco, creatinina, dietanolamina, etanol amina, morfolina, glucamina, N,N-dimetilglucamina, N-metilglucamina, ornitina, histidina, imidazol, trometamina, meglumina y similares. Las sales farmacéuticamente aceptables particularmente preferidas de los compuestos de acuerdo con la invención son sus correspondientes sales de sodio.

Los expertos en la técnica además reconocerán que las sales de los compuestos reivindicados se pueden preparar por medio de la reacción de los compuestos con la base inorgánica u orgánica apropiada a través de cualquiera de una serie de procedimientos conocidos.

La presente invención incluye todas las posibles sales de los compuestos de la presente invención como sales únicas, o como cualquier mezcla de dichas sales, en cualquier proporción.

En el presente texto, en particular en la Sección Experimental, para la síntesis de los intermediarios y de los ejemplos de la presente invención, cuando se menciona un compuesto en forma de sal con la correspondiente base o ácido, la composición estequiométrica exacta de dicha forma de sal, tal y como se obtiene mediante el respectivo proceso de preparación y/o purificación, es, en la mayoría de los casos, desconocida.

Esto se aplica de manera análoga a los casos en los cuales los intermediarios de síntesis o los compuestos de ejemplo o las sales de los mismos se han obtenido, por medio de los procesos de preparación y/o purificación descriptos, como solvatos, tales como hidratos con (si se define) composición estequiométrica desconocida. De acuerdo con una realización adicional del primer aspecto, la presente invención abarca compuestos de fórmula general (I),supra,en el que:

Ar representa un grupo seleccionado de

en el que # indica el punto de unión a X,

X representa un grupo seleccionado de

CH2, (CH2)2, (CH2)3, (CH2)4 y *-(CH2)2-O-CH2-#,

R1, R2 y R3 representan, de manera independiente para cada aparición, un átomo de hidrógeno o un grupo seleccionado de alquilo C1-C3-, -CH2OH, -(CH2)2OH y -CH2OCH3, R4 representa un grupo seleccionado de

alcoxi C2-C5-, (alcoxi C1-C3-)-(CH2)2-O-, (alcoxi C1-C3-)-(CH2)2-O-(CH2)2-O- y

(alcoxi C1-C3-)-(CH2)2-O-(CH2)2-O-(CH2)2-O-,

R5 representa un átomo de hidrógeno,

y

R6 representa un átomo de hidrógeno,

De acuerdo con una realización adicional del primer aspecto, la presente invención abarca compuestos de fórmula general (I),supra,en el que:

Ar representa un grupo seleccionado de

en el que # indica el punto de unión a X,

X representa un grupo seleccionado de

CH2, (CH2)2, (CH2)3, (CH2)4 y *-(CH2)2-O-CH2-#,

alcoxi C2-C5-, (alcoxi C1-C3-)-(CH2)2-O-, (alcoxi C1-C3-)-(CH2)2-O-(CH2)2-O- y

(alcoxi C1-C3-)-(CH2)2-O-(CH2)2-O-(CH2)2-O-,

R5 representa un átomo de hidrógeno,

y

R6 representa un átomo de hidrógeno,

y los estereoisómeros, tautómeros, hidratos, solvatos, o sales de los mismos, o las mezclas de los mismos. De acuerdo con una realización adicional del primer aspecto, la presente invención abarca compuestos de fórmula general (I),supra,en el que:

Ar representa un grupo seleccionado de

en el que # indica el punto de unión a X,

X representa un grupo seleccionado de CH2 y (CH2)3,

alcoxi C2-C5-, (alcoxi C1-C3-)-(CH2)2-O-, (alcoxi C1-C3-)-(CH2)2-O-(CH2)2-O- y

(alcoxi C1-C3-)-(CH2)2-O-(CH2)2-O-(CH2)2-O-,

R5 representa un átomo de hidrógeno,

y

R6 representa un átomo de hidrógeno,

Ar representa un grupo seleccionado de

en el que # indica el punto de unión a X,

X representa un grupo seleccionado de CH2 y (CH2)3,

R1 y R3 representan, de manera independiente para cada aparición, un átomo de hidrógeno o un grupo -CH2OH,

R2 representa un átomo de hidrógeno o un grupo seleccionado de alquilo C1-C3-, -CH2OH, -(CH2)2OH y -CH2OCH3,

R4 representa un grupo seleccionado de

alcoxi C2-C5-, (alcoxi C1-C3-)-(CH2)2-O-, (alcoxi C1-C3-)-(CH2)2-O-(CH2)2-O- y

(alcoxi C1-C3-)-(CH2)2-O-(CH2)2-O-(CH2)2-O-,

R5 representa un átomo de hidrógeno,

y

R6 representa un átomo de hidrógeno,

Ar representa un grupo seleccionado de

en el que # indica el punto de unión a X,

X representa un grupo seleccionado de CH2 y (CH2)3,

R1, R2 y R3 representan, de manera independiente para cada aparición, un átomo de hidrógeno o un grupo -CH2OH,

R4 representa un grupo seleccionado de

alcoxi C2-C5-, (alcoxi C1-C3-)-(CH2)2-O-, (alcoxi C1-C3-)-(CH2)2-O-(CH2)2-O- y

(alcoxi C1-C3-)-(CH2)2-O-(CH2)2-O-(CH2)2-O-,

R5 representa un átomo de hidrógeno,

y

R6 representa un átomo de hidrógeno,

Ar representa un grupo seleccionado de

en el que # indica el punto de unión a X,

X representa un grupo seleccionado de CH2 y (CH2)3,

R1, R2 y R3 representan un átomo de hidrógeno o un grupo -CH2OH,

R4 representa un grupo seleccionado de

alcoxi C2-C5-, (alcoxi C1-C3-)-(CH2)2-O-, (alcoxi C1-C3-)-(CH2)2-O-(CH2)2-O- y

(alcoxi C1-C3-)-(CH2)2-O-(CH2)2-O-(CH2)2-O-,

R5 representa un átomo de hidrógeno,

y

R6 representa un átomo de hidrógeno,

Ar representa un grupo seleccionado de

en el que # indica el punto de unión a X,

X representa un grupo seleccionado de CH2 y (CH2)3,

R1 y R3 representan un átomo de hidrógeno,

R2 representa un grupo -(CH2)2OH,

R4 representa un grupo seleccionado de

alcoxi C2-C5-, (alcoxi Ci-C3-)-(CH2)2-O-, (alcoxi Ci-C3-)-(CH2)2-O-(CH2)2-O- y

(alcoxi Ci-C3-)-(CH2)2-O-(CH2)2-O-(CH2)2-O-,

R5 representa un átomo de hidrógeno,

y

R6 representa un átomo de hidrógeno,

Ar representa un grupo seleccionado de

en el que # indica el punto de unión a X,

X representa un grupo seleccionado de CH2 y (CH2)3,

R1 y R3 representan un átomo de hidrógeno,

R2 representa un grupo -CH2OCH3,

R4 representa un grupo seleccionado de

alcoxi C2-C5-, (alcoxi C1-C3-)-(CH2)2-O-, (alcoxi C1-C3-)-(CH2)2-O-(CH2)2-O- y

(alcoxi C1-C3-)-(CH2)2-O-(CH2)2-O-(CH2)2-O-,

R5 representa un átomo de hidrógeno,

y

R6 representa un átomo de hidrógeno,

Ar representa un grupo seleccionado de

en el que # indica el punto de unión a X,

X representa un grupo seleccionado de CH2 y (CH2)3,

R1 y R3 representan un átomo de hidrógeno,

R2 representa un grupo seleccionado de alquilo C1-C3-,

R4 representa un grupo seleccionado de

alcoxi C2-C5-, (alcoxi C1-C3-)-(CH2)2-O-, (alcoxi C1-C3-)-(CH2)2-O-(CH2)2-O- y

(alcoxi C1-C3-)-(CH2)2-O-(CH2)2-O-(CH2)2-O-,

R5 representa un átomo de hidrógeno,

y

R6 representa un átomo de hidrógeno,

Ar representa un grupo seleccionado de

en el que # indica el punto de unión a X,

X representa un grupo seleccionado de

CH2, (CH2)2, (CH2)3, (CH2)4 y *-(CH2)2-O-CH2-#,

alcoxi C2-C4-, (H3C-CH2)-O-(CH2)2-O-, (H3C-CH2)-O-(CH2)2-O-(CH2)2-O- y

(H3C-CH2)-O-(CH2)2-O-(CH2)2-O-(CH2)2-O-,

R5 representa un átomo de hidrógeno,

y

R6 representa un átomo de hidrógeno,

Ar representa un grupo seleccionado de

en el que # indica el punto de unión a X,

X representa un grupo seleccionado de

CH2, (CH2)2, (CH2)3, (CH2)4 y *-(CH2)2-O-CH2-#,

R1, R2 y R3 representan, de manera independiente para cada aparición, un átomo de hidrógeno o un grupo seleccionado de alquilo C1-C3-, -CH2OH, -(c H2)2OH y -CH2OCH3, R4 representa un grupo seleccionado de (H3C-CH2)-O-(CH2)2-O-, (H3C-CH2)-O-(CH2)2-O-(CH2)2-O- y (H3C-CH2)-O-(CH2)2-O-(CH2)2-O-(CH2)2-O-,

R5 representa un átomo de hidrógeno,

y

R6 representa un átomo de hidrógeno,

Ar representa un grupo seleccionado de

en el que # indica el punto de unión a X,

X representa un grupo seleccionado de CH2 y (CH2)3,

R1, R2 y R3 representan, de manera independiente para cada aparición, un átomo de hidrógeno o un grupo seleccionado de alquilo C1-C3-, -CH2OH, -(CH2)2OH y -CH2OCH3, R4 representa un grupo seleccionado de (H3C-CH2)-O-(CH2)2-O-,

(H3C-CH2)-O-(CH2)2-O-(CH2)2-O- y (H3C-CH2)-O-(CH2)2-O-(CH2)2-O-(CH2)2-O-,

R5 representa un átomo de hidrógeno,

y

R6 representa un átomo de hidrógeno,

Ar representa un grupo seleccionado de

en el que # indica el punto de unión a X,

X representa un grupo seleccionado de CH2 y (CH2H

R4 representa un grupo seleccionado de (H3C-CH2)-O-(CH2)2-O-,

(H3C-CH2)-O-(CH2)2-O-(CH2)2-O- y (H3C-CH2)-O-(CH2)2-O-(CH2)2-O-(CH2)2-O-,

R5 representa un átomo de hidrógeno,

y

R6 representa un átomo de hidrógeno,

Ar representa un grupo seleccionado de

en el que # indica el punto de unión a X,

X representa un grupo seleccionado de CH2 y (CH2)3,

R4 representa un grupo seleccionado de (H3C-CH2)-O-(CH2)2-O-,

(H3C-CH2)-O-(CH2)2-O-(CH2)2-O- y (H3C-CH2)-O-(CH2)2-O-(CH2)2-O-(CH2)2-O-,

R5 representa un átomo de hidrógeno,

y

R6 representa un átomo de hidrógeno,

Ar representa un grupo seleccionado de

en el que # indica el punto de unión a X,

X representa un grupo seleccionado de CH2 y (CH2H

R1, R2 y R3 representan un átomo de hidrógeno o un grupo -CH2OH,

R4 representa un grupo seleccionado de (H3C-CH2)-O-(CH2)2-O-,

(H3C-CH2)-O-(CH2)2-O-(CH2)2-O- y (H3C-CH2)-O-(CH2)2-O-(CH2)2-O-(CH2)2-O-,

R5 representa un átomo de hidrógeno,

y

R6 representa un átomo de hidrógeno,

Ar representa

en el que # indica el punto de unión a X,

X representa un grupo seleccionado de CH2 y (CH2H

R1, R2 y R3 representan un grupo -CH2OH,

R4 representa un grupo seleccionado de (H3C-CH2)-O-(CH2)2-O-,

(H3C-CH2)-O-(CH2)2-O-(CH2)2-O- y (H3C-CH2)-O-(CH2)2-O-(CH2)2-O-(CH2)2-O-,

R5 representa un átomo de hidrógeno,

Ar representa un grupo seleccionado de

en el que # indica el punto de unión a X,

X representa un grupo seleccionado de CH2 y (CH2H

R1 y R3 representan un átomo de hidrógeno,

R2 representa un grupo -(CH2)2OH,

R4 representa un grupo seleccionado de (H3C-CH2)-O-(CH2)2-O-,

(HaC-CH2)-O-(CH2)2-O-(CH2)2-O -y (HaC-CH2)-O-(CH2)2-O-(CH2)2-O-(CH2)2-O-,

R5 representa un átomo de hidrógeno,

y

R6 representa un átomo de hidrógeno,

Ar representa un grupo seleccionado de

en el que # indica el punto de unión a X,

X representa un grupo seleccionado de CH2 y (CH2)3,

R1 y R3 representan un átomo de hidrógeno,

R2 representa un grupo -CH2OCH3,

R4 representa un grupo seleccionado de (H3C-CH2)-O-(CH2)2-O-,

(H3C-CH2)-O-(CH2)2-O-(CH2)2-O- y (H3C-CH2)-O-(CH2)2-O-(CH2)2-O-(CH2)2-O-,

R5 representa un átomo de hidrógeno,

y

R6 representa un átomo de hidrógeno,

Ar representa un grupo seleccionado de

en el que # indica el punto de unión a X,

X representa un grupo seleccionado de CH2 y (CH2)3,

R1 y R3 representan un átomo de hidrógeno,

R2 representa un grupo seleccionado de alquilo C1-C3-,

R4 representa un grupo seleccionado de (H3C-CH2)-O-(CH2)2-O-,

(HaC-CH2)-O-(CH2)2-O-(CH2)2-O -y (HaC-CH2)-O-(CH2)2-O-(CH2)2-O-(CH2)2-O-,

R5 representa un átomo de hidrógeno,

y

R6 representa un átomo de hidrógeno,

y los estereoisómeros, tautómeros, hidratos, solvatos, o sales de los mismos, o las mezclas de los mismos. De acuerdo con una realización adicional del segundo aspecto, la presente invención abarca compuestos de fórmula general (I),supra,en la forma de un complejo con Gd3+, en el que:

Ar representa un grupo seleccionado de

en el que # indica el punto de unión a X,

X representa un grupo seleccionado de

CH2, (CH2)2, (CH2)3, (CH2)4 y *-(CH2)2-O-CH2-#,

alcoxi C2-C5-, (alcoxi C1-C3-)-(CH2)2-O-, (alcoxi C1-C3-)-(CH2)2-O-(CH2)2-O- y

(alcoxi C1-C3-)-(CH2)2-O-(CH2)2-O-(CH2)2-O-,

R5 representa un átomo de hidrógeno,

y

R6 representa un átomo de hidrógeno,

De acuerdo con una realización adicional del segundo aspecto, la presente invención abarca compuestos de fórmula general (I),supra,en la forma de un complejo con Gd3+, en el que:

Ar representa un grupo seleccionado de

en el que # indica el punto de unión a X,

X representa un grupo seleccionado de

CH2, (CH2)2, (CH2)3, (CH2)4 y *-(CH2)2-O-CH2-#,

alcoxi C2-C5-, (alcoxi C1-C3-)-(CH2)2-O-, (alcoxi C1-C3-)-(CH2)2-O-(CH2)2-O- y

(alcoxi C1-C3-)-(CH2)2-O-(CH2)2-O-(CH2)2-O-,

R5 representa un átomo de hidrógeno,

y

R6 representa un átomo de hidrógeno,

Ar representa un grupo seleccionado de

en el que # indica el punto de unión a X,

X representa un grupo seleccionado de CH2 y (CH2)3,

alcoxi C2-C5-, (alcoxi C1-C3-)-(CH2)2-O-, (alcoxi C1-C3-)-(CH2)2-O-(CH2)2-O- y

(alcoxi C1-C3-)-(CH2)2-O-(CH2)2-O-(CH2)2-O-,

R5 representa un átomo de hidrógeno,

y

R6 representa un átomo de hidrógeno,

Ar representa un grupo seleccionado de

en el que # indica el punto de unión a X,

X representa un grupo seleccionado de CH2 y (CH2H

R4 representa un grupo seleccionado de

alcoxi C2-C5-, (alcoxi C1-C3-)-(CH2)2-O-, (alcoxi C1-C3-)-(CH2)2-O-(CH2)2-O- y

(alcoxi C1-C3-)-(CH2)2-O-(CH2)2-O-(CH2)2-O-,

R5 representa un átomo de hidrógeno,

y

R6 representa un átomo de hidrógeno,

Ar representa un grupo seleccionado de

en el que # indica el punto de unión a X,

X representa un grupo seleccionado de CH2 y (CH2)3,

R4 representa un grupo seleccionado de

alcoxi C2-C5-, (alcoxi C1-C3-)-(CH2)2-O-, (alcoxi C1-C3-)-(CH2)2-O-(CH2)2-O- y

(alcoxi C1-C3-)-(CH2)2-O-(CH2)2-O-(CH2)2-O-,

R5 representa un átomo de hidrógeno,

y

R6 representa un átomo de hidrógeno,

Ar representa un grupo seleccionado de

en el que # indica el punto de unión a X,

X representa un grupo seleccionado de CH2 y (CH2H

R1, R2 y R3 representan un átomo de hidrógeno o un grupo -CH2OH,

R4 representa un grupo seleccionado de

alcoxi C2-C5-, (alcoxi C1-C3-)-(CH2)2-O-, (alcoxi C1-C3-)-(CH2)2-O-(CH2)2-O- y

(alcoxi C1-C3-)-(CH2)2-O-(CH2)2-O-(CH2)2-O-,

R5 representa un átomo de hidrógeno,

y

R6 representa un átomo de hidrógeno,

Ar representa un grupo seleccionado de

en el que # indica el punto de unión a X,

X representa un grupo seleccionado de CH2 y (CH2)3,

R1 y R3 representan un átomo de hidrógeno,

R2 representa un grupo -(CH2)2OH,

R4 representa un grupo seleccionado de

alcoxi C2-C5-, (alcoxi C1-C3-)-(CH2)2-O-, alcoxi (C1-C3-)-(CH2)2-O-(CH2)2-O- y

(alcoxi C1-C3-)-(CH2)2-O-(CH2)2-O-(CH2)2-O-,

R5 representa un átomo de hidrógeno,

y

R6 representa un átomo de hidrógeno,

Ar representa un grupo seleccionado de

en el que # indica el punto de unión a X,

X representa un grupo seleccionado de CH2 y (CH2)3,

R1 y R3 representan un átomo de hidrógeno,

R2 representa un grupo -CH2OCH3,

R4 representa un grupo seleccionado de

alcoxi C2-C5-, (alcoxi C1-C3-)-(CH2)2-O-, (alcoxi C1-C3-)-(CH2)2-O-(CH2)2-O- y

(alcoxi C1-C3-)-(CH2)2-O-(CH2)2-O-(CH2)2-O-,

R5 representa un átomo de hidrógeno,

y

R6 representa un átomo de hidrógeno,

Ar representa un grupo seleccionado de

en el que # indica el punto de unión a X,

X representa un grupo seleccionado de CH2 y (CH2)3,

R1 y R3 representan un átomo de hidrógeno,

R2 representa un grupo seleccionado de alquilo C1-C3-,

R4 representa un grupo seleccionado de

alcoxi C2-C5-, (alcoxi C1-C3-)-(CH2)2-O-, (alcoxi C1-C3-)-(CH2)2-O-(CH2)2-O- y

(alcoxi C1-C3-)-(CH2)2-O-(CH2)2-O-(CH2)2-O-,

R5 representa un átomo de hidrógeno,

y

R6 representa un átomo de hidrógeno,

Ar representa un grupo seleccionado de

en el que # indica el punto de unión a X,

X representa un grupo seleccionado de

CH2, (CH2)2, (CH2)3, (CH2)4 y *-(CH2)2-O-CH2-#,

alcoxi C2-C4-, (H3C-CH2)-O-(CH2)2-O-, (H3C-CH2)-O-(CH2)2-O-(CH2)2-O- y

(H3C-CH2)-O-(CH2)2-O-(CH2)2-O-(CH2)2-O-,

R5 representa un átomo de hidrógeno,

y

R6 representa un átomo de hidrógeno,

Ar representa un grupo seleccionado de

en el que # indica el punto de unión a X,

X representa un grupo seleccionado de

CH2, (CH2)2, (CH2)3, (CH2)4 y *-(CH2)2-O-CH2-#,

R1, R2 y R3 representan, de manera independiente para cada aparición, un átomo de hidrógeno o un grupo seleccionado de alquilo C1-C3-, -CH2OH, -(<c>H2)2OH y -CH2OCH3, R4 representa un grupo seleccionado de (H3C-CH2)-O-(CH2)2-O-,

(H3C-CH2)-O-(CH2)2-O-(CH2)2-O- y (H3C-CH2)-O-(CH2)2-O-(CH2)2-O-(CH2)2-O-,

R5 representa un átomo de hidrógeno,

y

R6 representa un átomo de hidrógeno,

Ar representa un grupo seleccionado de

en el que # indica el punto de unión a X,

X representa un grupo seleccionado de CH2 y (CH2)3,

(H3C-CH2)-O-(CH2)2-O-(CH2)2-O- y (H3C-CH2)-O-(CH2)2-O-(CH2)2-O-(CH2)2-O-,

R5 representa un átomo de hidrógeno,

y

R6 representa un átomo de hidrógeno,

Ar representa un grupo seleccionado de

en el que # indica el punto de unión a X,

X representa un grupo seleccionado de CH2 y (CH2)3,

R4 representa un grupo seleccionado de (H3C-CH2)-O-(CH2)2-O-,

(H3C-CH2)-O-(CH2)2-O-(CH2)2-O- y (H3C-CH2)-O-(CH2)2-O-(CH2)2-O-(CH2)2-O-,

R5 representa un átomo de hidrógeno,

y

R6 representa un átomo de hidrógeno,

Ar representa un grupo seleccionado de

en el que # indica el punto de unión a X,

X representa un grupo seleccionado de CH2 y (CH2)3,

R4 representa un grupo seleccionado de (H3C-CH2)-O-(CH2)2-O-,

(H3C-CH2)-O-(CH2)2-O-(CH2)2-O- y (H3C-CH2)-O-(CH2)2-O-(CH2)2-O-(CH2)2-O-,

R5 representa un átomo de hidrógeno,

y

R6 representa un átomo de hidrógeno,

Ar representa un grupo seleccionado de

en el que # indica el punto de unión a X,

X representa un grupo seleccionado de CH2 y (CH2)3,

R1, R2 y R3 representan un átomo de hidrógeno o un grupo -CH2OH,

R4 representa un grupo seleccionado de (H3C-CH2)-O-(CH2)2-O-,

(H3C-CH2)-O-(CH2)2-O-(CH2)2-O- y (H3C-CH2)-O-(CH2)2-O-(CH2)2-O-(CH2)2-O-,

R5 representa un átomo de hidrógeno,

y

R6 representa un átomo de hidrógeno,

Ar representa

en el que # indica el punto de unión a X,

X representa un grupo seleccionado de CH2 y (CH2)3,

R1, R2 y R3 representan un grupo -CH2OH,

R4 representa un grupo seleccionado de (H3C-CH2)-O-(CH2)2-O-,

(H3C-CH2)-O-(CH2)2-O-(CH2)2-O- y (H3C-CH2)-O-(CH2)2-O-(CH2)2-O-(CH2)2-O-,

R5 representa un átomo de hidrógeno,

Ar representa un grupo seleccionado de

en el que # indica el punto de unión a X,

X representa un grupo seleccionado de CH2 y (CH2)3,

R1 y R3 representan un átomo de hidrógeno,

R2 representa un grupo -(CH2)2OH,

R4 representa un grupo seleccionado de (H3C-CH2)-O-(CH2)2-O-,

(H3C-CH2)-O-(CH2)2-O-(CH2)2-O- y (H3C-CH2)-O-(CH2)2-O-(CH2)2-O-(CH2)2-O-,

R5 representa un átomo de hidrógeno,

y

R6 representa un átomo de hidrógeno,

Ar representa un grupo seleccionado de

en el que # indica el punto de unión a X,

X representa un grupo seleccionado de CH2 y (CH2H

R1 y R3 representan un átomo de hidrógeno,

R2 representa un grupo -CH2OCH3,

R4 representa un grupo seleccionado de (H3C-CH2)-O-(CH2)2-O-,

(H3C-CH2)-O-(CH2)2-O-(CH2)2-O- y (H3C-CH2)-O-(CH2)2-O-(CH2)2-O-(CH2)2-O-,

R5 representa un átomo de hidrógeno,

y

R6 representa un átomo de hidrógeno,

Ar representa un grupo seleccionado de

en el que # indica el punto de unión a X,

X representa un grupo seleccionado de CH2 y (CH2)3,

R1 y R3 representan un átomo de hidrógeno,

R2 representa un grupo seleccionado de alquilo C1-C3-,

R4 representa un grupo seleccionado de (H3C-CH2)-O-(CH2)2-O-,

(H3C-CH2)-O-(CH2)2-O-(CH2)2-O- y (H3C-CH2)-O-(CH2)2-O-(CH2)2-O-(CH2)2-O-,

R5 representa un átomo de hidrógeno,

y

R6 representa un átomo de hidrógeno,

y los estereoisómeros, tautómeros, hidratos, solvatos, o sales de los mismos, o las mezclas de los mismos. De acuerdo con una realización adicional del segundo aspecto, la presente invención abarca compuestos de fórmula general (I),supra,en la forma de una sal de sodio (Na+) de un complejo con Gd3+, en el que Ar, X, R1, R2, R3, R4, R5 y R6 se definen como se describe en cualquiera de las realizaciones anteriores, y los estereoisómeros, tautómeros, hidratos, o solvatos de los mismos, o las mezclas de los mismos

En una realización adicional del primer aspecto, la invención se relaciona con compuestos de fórmula (I), en el que:

Ar representa un grupo seleccionado de

en el que # indica el punto de unión a X,

Ar representa un grupo seleccionado de

en el que # indica el punto de unión a X,

y los estereoisómeros, tautómeros, hidratos, solvatos, o sales de los mismos, o las mezclas de los mismos. En una realización adicional del primer aspecto, la invención se relaciona con compuestos de fórmula (I), en el que:

Ar representa un grupo seleccionado de

en el que # indica el punto de unión a X,

R5 y R6 representan un átomo de hidrógeno,

Ar representa un grupo

en el que # indica el punto de unión a X,

R5 representa un átomo de hidrógeno,

X representa un grupo seleccionado de

CH2, (CH2)2, (CH2)3, (CH2)4 y *-(CH2)2-O-CH2-#,

en el que * indica el punto de unión a Ar y # indica el punto de unión a la fracción de ácido acético, y los estereoisómeros, tautómeros, N-óxidos, hidratos, solvatos, o sales de los mismos, o las mezclas de los mismos.

X representa un grupo seleccionado de CH2 y (CH2)3,

X representa (CH2)3,

R1, R2 y R3 representan, de manera independiente para cada aparición, un átomo de hidrógeno o un grupo seleccionado de alquilo C1-C3-, -CH2OH, -(CH2)2OH y -CH2OCH3, y los estereoisómeros, tautómeros, N-óxidos, hidratos, solvatos, o sales de los mismos, o las mezclas de los mismos.

R1 y R3 representan, de manera independiente para cada aparición, un átomo de hidrógeno o un grupo -CH2OCH3,

R1, R2 y R3 representan un átomo de hidrógeno o un grupo -CH2OH,

R1, R2 y R3 representan un grupo -CH2OH,

R1 y R3 representan un átomo de hidrógeno;

<R2>representa un grupo -CH2OH,

<R1 y R3>representan un átomo de hidrógeno;

<R2>representa un grupo -CH2OCH3,

<R1 y R3>representan, un átomo de hidrógeno

<R2>representa un grupo alquilo C1-C3-,

R4 representa un grupo seleccionado de

alcoxi C2-C5-, (alcoxi C1-C3-)-(CH2)2-O-, (alcoxi C1-C3-)-(CH2)2-O-(CH2)2-O- y

(alcoxi C1-C3-)-(CH2)2-O-(CH2)2-O-(CH2)2-O-,

R4 representa un grupo seleccionado de

alcoxi C2-C4-, (H3C-CH2)-O-(CH2)2-O-, (H3C-CH2)-O-(CH2)2-O-(CH2)2-O- y

(HaC-CH2)-O-(CH2)2-O-(CH2)2-O-(CH2)2-O-,

en el que dicho grupo alcoxi C<2>-C<4>- está opcionalmente sustituido, una, dos, tres o cuatro veces, con un átomo de flúor,

R4 representa un grupo seleccionado de

alcoxi C<2>-C<4>-, (HaC-CH<2>)-O-(CH<2>)<2>-O-, (H<s>C-CH<2>)-O-(CH<2>)<2>-O-(CH<2>)<2>-O- y

(HaC-CH2)-O-(CH2)2-O-(CH2)2-O-(CH2)2-O-,

R4 representa un grupo seleccionado de (H<3>C-CH<2>)-O-(CH<2>)<2>-O-,

(HaC-CH<2>)-O-(CH<2>)<2>-O-(CH<2>)<2>-O -y (HaC-CH<2>)-O-(CH<2>)<2>-O-(CH<2>)<2>-O-(CH<2>)<2>-O-,

R<4>representa (H<3>C-CH<2>)-O-(CH<2>)<2>-O-(CH<2>)<2>-O-,

R<5>representa un átomo de hidrógeno o un grupo seleccionado de

alcoxi C<2>-C<5>-, (alcoxi C<1>-C<3>-)-(CH<2>)<2>-O-, (alcoxi C--C<3>-)-(CH<2>)<2>-O-(CH<2>)<2>-O- y

(alcoxi C<1>-C<3>-)-(CH<2>)<2>-O-(CH<2>)<2>-O-(CH<2>)<2>-O-,

R<5>representa un átomo de hidrógeno,

R<6>representa un átomo de hidrógeno o un grupo seleccionado de

alcoxi C<2>-C<5>-, (alcoxi C<1>-C<3>-)-(CH<2>)<2>-O-, (alcoxi C<1>-C<3>-)-(CH<2>)<2>-O-(CH<2>)<2>-O- y

(alcoxi C<1>-C<3>-)-(CH<2>)<2>-O-(CH<2>)<2>-O-(CH<2>)<2>-O-,

R6 representa un átomo de hidrógeno,

R5 y R6 representan un átomo de hidrógeno,

y los estereoisómeros, tautómeros, hidratos, solvatos, o sales de los mismos, o las mezclas de los mismos. Debe comprenderse que la presente invención también se relaciona con cualquier combinación de las realizaciones descriptas anteriormente.

En el contexto de la presente invención, los compuestos de fórmula (I) pueden contener uno o más centros quirales. Cuando R 1 = R2 = R3 = H, el átomo de carbono unido a X puede estar en la configuración (R) o (S). Por lo tanto, la presente invención incluye los enantiómeros (R) y (S) de los compuestos de fórmula (I) cuando R 1 = R2 = R3 = H, o las mezclas de los mismos.

Además, cuando uno o más de R 1, R2 y/o R3 son diferentes de un átomo de hidrógeno, los átomos de carbono unidos a R 1, R2 y/o R3 pueden estar en la configuración (R) o (S). Por lo tanto, la presente invención incluye todos los posibles estereoisómeros de los compuestos de fórmula (I) cuando uno o más de R 1, R2 y/o R3 son diferentes de un átomo de hidrógeno, o las mezclas de los mismos. Cuando uno de R 1, R2 o R3 es diferente de un átomo de hidrógeno, esto incluye los estereoisómeros RR, SS, RS, SR de los compuestos de fórmula (I), o las mezclas de los mismos. Cuando dos de R 1, R2 o R3 son diferentes de un átomo de hidrógeno, esto incluye los estereoisómeros RRR, SSS, RRS, SSR, SRR, RSS, RSR y SR S de los compuestos de fórmula (I), o las mezclas de los mismos. Cuando R 1, R2 y R3 son diferentes de un átomo de hidrógeno, esto incluye los estereoisómeros RRRR, SRRR, RSRR, RRSR, RRRS, SSRR, SRSR, SRRS, RSSR, RSRS, RRSS, RSSS, SRSS, SSRS, SSSR, SSSS de los compuestos de fórmula (I), o las mezclas de los mismos.

Otra realización del primer aspecto son los compuestos de fórmula (I) seleccionados del grupo que consiste en:

Ácido 3-[2-(4-etoxifenil)etoxi]-2-[4,7,10-tris(carboximetil)-1,4,7,10-tetraazaciclododecan-1-il]propanoico, Ácido 3-{4-[2-(2-etoxietoxi)etoxi]fenil}-2-[4,7,10-tris(carboximetil)-1,4,7,10-tetraazaciclododecan-1-il]propanoico,

Ácido (2S)-3-{4-[2-(2-etoxietoxi)etoxi]fenil}-2-[4,7,10-tris(carboximetil)-1,4,7,10-tetraazaciclododecan-1-il]propanoico,

Ácido (2R)-3-{4-[2-(2-etoxietoxi)etoxi]fenil}-2-[4,7,10-tris(carboximetil)-1,4,7,10-tetraazaciclododecan-1-il]propanoico,

Ácido 2-[7-(1-carboxietil)-4,10-bis(carboximetil)-1,4,7,10-tetraazaciclododecan-1-il]-3-{4-[2-(2-etoxietoxi)etoxi]fenil}propanoico,

Ácido 2-[7-{1-carboxi-2-[4-(2-etoxietoxi)fenil]etil}-4,10-bis(carboximetil)-1,4,7,10-tetraazaciclododecan-1-il]butanoico,

Ácido (2S)-6-(4-butoxifenil)-2-{4,7,10-tris[(1S)-1-carboxi-2-hidroxietil]-1,4,7,10-tetraazaciclododecan-1-il}hexanoico,

Ácido 3-(4-{2-[2-(2-etoxietoxi)etoxi]etoxi}fenil)-2-[4,7,10-tris(carboximetil)-1,4,7,10-tetraazaciclododecan-1-il]propanoico,

Ácido (2S)-3-(4-{2-[2-(2-etoxietoxi)etoxi]etoxi}fenil)-2-[4,7,10-tris(carboximetil)-1,4,7,10-tetraazaciclododecan-1-il]propanoico,

Ácido (2R)-3-(4-{2-[2-(2-etoxietoxi)etoxi]etoxi}fenil)-2-[4,7,10-tris(carboximetil)-1,4,7,10-tetraazaciclododecan-1-il]propanoico,

Ácido 2-{7-[1-carboxi-2-(4-{2-[2-(2-etoxietoxi)etoxi]etoxi}fenil)etil]-4,10-bis(carboximetil)-1,4,7,10-tetraazaciclododecan-1-il}-3-metoxipropanoico,

Ácido 3-(4-butoxifenil)-2-[4,7,10-tris(carboximetil)-1,4,7,10-tetraazaciclododecan-1-il]propanoico, Ácido (2S)-5-{4-[2-(2-etoxietoxi)etoxi]fenil}-2-{4,7,10-tris[(1S)-1-carboxi-2-hidroxietil]-1,4,7,10-tetraazaciclododecan-1-il}pentanoico,

Ácido 3-{6-[2-(2-etoxietoxi)etoxi]piridin-3-il}-2-[4,7,10-tris(carboximetil)-1,4,7,10-tetraazacidododecan-1-il]propanoico,

Ácido 5-{4-[2-(2-etoxietoxi)etoxi]feml}-2-[4,7,10-tris(1-carboxi-2-hidroxietN)-1,4,7,10-tetraazacidododecan-1-il]pentanoico,

Ácido (2R)-5-{4-[2-(2-etoxietoxi)etoxi]feml}-2-{4,7,10-tns[(1S)-1-carboxi-2-hidroxietN]-1,4,7,10-tetraazaciclododecan-1-il}pentanoico,

Ácido (2R)-5-{4-[2-(2-etoxietoxi)etoxi]feml}-2-{4,7,10-tns[(1R)-1-carboxi-2-hidroxietN]-1,4,7,10-tetraazaciclododecan-1-il}pentanoico,

Ácido (2S)-5-{4-[2-(2-etoxietoxi)etoxi]feml}-2-{4,7,10-tns[(1R)-1-carboxi-2-hidroxietN]-1,4,7,10-tetraazaciclododecan-1-il}pentanoico,

Ácido (2S)-5-{4-[2-(2-etoxietoxi)etoxi]feml}-2-[4,7,10-tris(1-carboxi-2-hidroxietN)-1,4,7,10-tetraazaciclododecan-1-il]pentanoico,

Ácido 2,2',2"-{10-[1-carboxi-2-{4-[2-(2-etoxietoxi)etoxi]fenil}etil]-1,4,7,10-tetraazacidododecan-1,4,7-triil}tris(3-hidroxipropanoico),

Ácido 3-{5-[2-(2-etoxietoxi)etoxi]pindin-2-N}-2-[4,7,10-tns(carboximetN)-1,4,7,10-tetraazacidododecan-1-il]propanoico,

Ácido 4-(4-propoxifenil)-2-[4,7,10-tris(carboximetil)-1,4,7,10-tetraazaciclododecan-1-il]butanoico, Ácido 5-{4-[2-(2-etoxietoxi)etoxi]feml}-2-[4,7,10-tris(carboximetN)-1,4,7,10-tetraazacidododecan-1-il]pentanoico,

Ácido (2S)-5-{4-[2-(2-etoxietoxi)etoxi]fenil}-2-[4,7,10-tris(carboximetil)-1,4,7,10-tetraazaciclododecan-1-il]pentanoico,

Ácido (2S)-6-(4-etoxifenil)-2-[4,7,10-tris(carboximetil)-1,4,7,10-tetraazaciclododecan-1-il]hexanoico, Ácido 5-(4-etoxifenil)-2-[4,7,10-tris(carboximetil)-1,4,7,10-tetraazaciclododecan-1-il] pentanoico, Ácido 2-{7-[1-carboxi-2-(4-etoxifenil)etil]-4,10-bis(carboximetil)-1,4,7,10-tetraazaciclododecan-1-il}pentanoico,

Ácido (2S)-5-(4-butoxifenil)-2-[4,7,10-tris(carboximetil)-1,4,7,10-tetraazaciclododecan-1-il]pentanoico, Ácido 3-[4-(2-etoxietoxi)fenil]-2-[4,7,10-tris(carboximetil)-1,4,7,10-tetraazaciclododecan-1-il]propanoico, Ácido (2S)-2-[4,10-bis(carboximetil)-7-{1-carboxi-2-[4-(2,2,3,3-tetrafluoropropoxi)fenil]etil}-1,4,7,10-tetraazaciclododecan-1-il]-3-hidroxipropanoico,

Ácido (2S)-5-(3-butoxifenil)-2-{4,7,10-tris[(1S)-1-carboxi-2-hidroxietil]-1,4,7,10-tetraazaciclododecan-1-il}pentanoico,

Ácido (2S)-2-{7-[(1R)-1-carboxi-2-hidroxietil]-4,10-bis[(1S)-1-carboxi-2-hidroxietil]-1,4,7,10-tetraazaciclododecan-1-il}-5-{4-[2-(2-etoxietoxi)etoxi]fenil}pentanoico,

Ácido (2S)-2-{7-[1-carboxi-3-hidroxipropil]-4,10-bis[1-carboxi-3-hidroxipropil]-1,4,7,10-tetraazaciclododecan-1-il}-5-{4-[2-(2-etoxietoxi)etoxi]fenil}pentanoico,

Ácido 2,2',2"-[10-(1-carboxi-2-{4-[2-(2-etoxietoxi)etoxi]fenil}etil)-1,4,7,10-tetraazacidododecan-1,4,7-triil]tris(4-hidroxibutanoico),

Ácido 2-[7-{1-carboxi-2-[4-(2-etoxietoxi)fenil]etil}-4,10-bis(carboximetil)-1,4,7,10-tetraazaciclododecan-1-il]-3-metoxipropanoico,

Ácido 3-{3,5-bis[2-(2-etoxietoxi)etoxi]fenil}-2-[4,7,10-tris(carboximetil)-1,4,7,10-tetraazaciclododecan-1-il]propanoico,

Ácido 3-(2,4-bis{2-[2-(2-etoxietoxi)etoxi]etoxi}fernl)-2-[4,7,10-tns(carboximetN)-1,4,7,10-tetraazaciclododecan-1-il]propanoico,

Ácido 2-[7-(1-carboxi-2-{4-[2-(2-etoxietoxi)etoxi]fenil}etil)-4,10-bis(carboximetil)-1,4,7,10-tetraazaciclododecan-1-il]-3-hidroxipropanoico,

Ácido 2-{7-[1-carboxi-2-(4-{2-[2-(2-etoxietoxi)etoxi]etoxi}fenil)etil]-4,10-bis(carboximetil)-1,4,7,10-tetraazacidododecan-1-N}-3-hidroxipropanoico,

Ácido 2-[7-(1-carboxi-2-{4-[2-(2-etoxietoxi)etoxi]fenil}etil)-4,10-bis(carboximetil)-1,4,7,10-tetraazacidododecan-1-il]butanoico,

Ácido 3-(4-butoxifenil)-2-[4,7,10-tris(carboximetil)-1,4,7,10-tetraazaciclododecan-1-il]propanoico, Ácido 2-[4,10-bis(carboximetil)-7-{1-carboxi-2-[4-(2,2,3,3-tetrafluoropropoxi) fenil]etil}-1,4,7,10-tetraazaciclododecan-1-il]-3-metoxipropanoico,

Ácido 3-[4-(2,2,3,3-tetrafluoropropoxi)fenil]-2-[4,7,10-tris(carboximetil)-1,4,7,10-tetraazaciclododecan-1-il]propanoico,

Ácido 3-[4-(2,2,2-tnfluoroetoxi)fenil]-2-[4,7,10-tris(carboximetil)-1,4,7,10-tetraazaciclododecan-1-il]propanoico,

Ácido 3-(4-propoxifenil)-2-[4,7,10-tris(carboximetil)-1,4,7,10-tetraazaciclododecan-1-il]propanoico, Ácido (2S)-2-{4,7-bis[(1R)-1-carboxi-2-hidroxietil]-10-[(1S)-1-carboxi-2-hidroxietil]-1,4,7,10-tetraazaciclododecan-1-il}-5-{4-[2-(2-etoxietoxi)etoxi]fenil}pentanoico y

Ácido (2S)-2-{4-[(1R)-1-carboxi-2-hidroxietil]-7,10-bis[(1S)-1-carboxi-2-hidroxietil]-1,4,7,10-tetraazaciclododecan-1-il}-5-{4-[2-(2-etoxietoxi)etoxi]fenil}pentanoico

En una realización adicional del segundo aspecto, la invención se relaciona con compuestos de fórmula (I) en la forma de un complejo con Gd3+, en el que:

Ar representa un grupo seleccionado de

en el que # indica el punto de unión a X,

Ar representa un grupo seleccionado de

en el que # indica el punto de unión a X,

y los estereoisómeros, tautómeros, hidratos, solvatos, o sales de los mismos, o las mezclas de los mismos. En una realización adicional del segundo aspecto, la invención se relaciona con compuestos de fórmula (I) en la forma de un complejo con Gd3+, en el que:

Ar representa un grupo seleccionado de

en el que # indica el punto de unión a X,

R5 y R6 representan un átomo de hidrógeno,

Ar representa

en el que # indica el punto de unión a X,

R5 representa un átomo de hidrógeno,

X representa un grupo seleccionado de

CH<2>, (CH<2>)<2>, (CH2)3, (CH2)4 y *-(CH<2>)<2>-O-CH<2>-#,

X representa un grupo seleccionado de CH<2>, y (CH<2>H

X representa (CH<2>)<3>,

R 1, R2 y R3 representan, de manera independiente para cada aparición, un átomo de hidrógeno o un grupo seleccionado de alquilo C<1>-C<3>-, -CH<2>OH, -(<c>H<2>)<2>OH y -CH<2>OCH<3>, y los estereoisómeros, tautómeros, N-óxidos, hidratos, solvatos, o sales de los mismos, o las mezclas de los mismos.

R 1 y R3 representan, de manera independiente para cada aparición, un átomo de hidrógeno o un grupo -CH<2>OCH<3>,

R2 representa un átomo de hidrógeno o un grupo seleccionado de alquilo C<1>-C<3>-, -CH<2>OH, -(CH<2>)<2>OH y -CH<2>OCH<3>,

R 1 y R3 representan, de manera independiente para cada aparición, un átomo de hidrógeno o un grupo -CH<2>OH,

R 1, R2 y R3 representan, de manera independiente para cada aparición, un átomo de hidrógeno o un grupo -CH<2>OH,

R 1, R2 y R3 representan un átomo de hidrógeno o un grupo -CH<2>OH,

R 1, R2 y R3 representan un grupo -CH<2>OH,

R 1 y R3 representan un átomo de hidrógeno,

R2 representa un grupo -CH<2>OH,

R 1 y R3 representan un átomo de hidrógeno,

R2 representa un grupo -CH<2>OCH<3>,

R 1 y R3 representan, un átomo de hidrógeno,

R2 representa un grupo alquilo C<1>-C<3>-,

R4 representa un grupo seleccionado de

alcoxi C<2>-C<5>-, (alcoxi C t C 3-MCH2)2-O-, (alcoxi C1-C3-)-(CH2)2-O-(CH2)2-O- y

(alcoxi C<1>-C<3>-)-(CH<2>)<2>-O-(CH<2>)<2>-O-(CH<2>)<2>-O-,

en el que dichos grupos alcoxi C<1>-C<3>- y grupos alcoxi C<2>-C<5>- están opcionalmente sustituidos, una, dos, tres o cuatro veces, con un átomo de flúor,

R4 representa un grupo seleccionado de

C<2>-C<4>-alcoxi, (H<3>C-CH<2>)-O-(CH<2>)<2>-O-, (H<3>C-CH<2>)-O-(CH<2>)<2>-O-(CH<2>)<2>-O- y

(H3C-CH2)-O-(CH2)2-O-(CH2)2-O-(CH2)2-O-,

en el que dicho C<2>-C<4>- grupo alcoxi está opcionalmente sustituido, una, dos, tres o cuatro veces, con un átomo de flúor,

R4 representa un grupo seleccionado de

alcoxi C<2>-C<4>-, (H<3>C-CH<2>)-O-(CH<2>)<2>-O-, (H<3>C-CH<2>)-O-(CH<2>)<2>-O-(CH<2>)<2>-O- y

(H3C-CH2)-O-(CH2)2-O-(CH2)2-O-(CH2)2-O-,

R4 representa un grupo seleccionado de (H<3>C-CH<2>)-O-(CH<2>)<2>-O-,

(H3C-CH2)-O-(CH2)2-O-(CH2)2-O-y (H3C-CH2)-O-(CH2)2-O-(CH2)2-O-(CH2)2-O-,

R4 representa (H<3>C-CH<2>)-O-(CH<2>)<2>-O-(CH<2>)<2>-O-,

R5 representa un átomo de hidrógeno o un grupo seleccionado de

(alcoxi Ci-Ca-)-(CH<2>)<2>-O-(CH<2>)<2>-O-(CH<2>)<2>-O-,

R5 representa un átomo de hidrógeno,

R6 representa un átomo de hidrógeno o un grupo seleccionado de

alcoxi C<2>-C<5>-, (alcoxi C1-C3-)-(CH2)2-O-, (alcoxi C1-C3-)-(CH2)2-O-(CH2)2-O- y

(alcoxi C<1>-C<3>-)-(CH<2>)<2>-O-(CH<2>)<2>-O-(CH<2>)<2>-O-,

R6 representa un átomo de hidrógeno,

R5 y R6 representan un átomo de hidrógeno,

En el contexto de la presente invención, los compuestos de fórmula (I) en la forma de un complejo con Gd3+ pueden contener uno o más centros quirales. Cuando R 1 = R2 = R3 = H, el átomo de carbono unido a X puede estar en la configuración (R) o (S). Por lo tanto, la presente invención incluye los enantiómeros (R) y (S) de los compuestos de fórmula (I) en la forma de un complejo con Gd3+ cuando R 1 = R2 = R3 = H, o las mezclas de los mismos.

Además, cuando uno o más de R 1, R2 y/o R3 son diferentes de un átomo de hidrógeno, los átomos de carbono unidos a R 1, R2 y/o R3 pueden estar en la configuración (R) o (S). Por lo tanto, la presente invención incluye todos los posibles estereoisómeros de los compuestos de fórmula (I) en la forma de un complejo con Gd3+ cuando uno o más de R 1, R2 y/o R3 son diferentes de un átomo de hidrógeno, o las mezclas de los mismos. Cuando uno de R 1, R2 o R3 es diferente de un átomo de hidrógeno, esto incluye los estereoisómeros RR, SS, RS, SR de los compuestos de fórmula (I) en la forma de un complejo con Gd3+, o las mezclas de los mismos. Cuando dos de R1, R2 o R3 son diferentes de un átomo de hidrógeno, esto incluye los estereoisómeros RRR, SSS, RRS, SSR, SRR, RSS, RSR y SR S de los compuestos de fórmula (I) en la forma de un complejo con Gd3+, o las mezclas de los mismos. Cuando R 1, R2 y R3 son diferentes de un átomo de hidrógeno, esto incluye los estereoisómeros RRRR, RRRS, RSRR, RSSR, RSRS, RRSS, RRSR, RSSS, SSSS, SSSR, SRSS, SRRS, SRSR, SSRR, SSRS, SR R R de los compuestos de fórmula (I) en la forma de un complejo con Gd3+, o las mezclas de los mismos.

De acuerdo con una realización adicional del segundo aspecto, la presente invención abarca compuestos de fórmula general (I),supra,en la forma de una sal de sodio (Na+) de un complejo con Gd3+, en el que Ar, X, R 1, R2, R3, R4, R5 y R6 se definen como se describe en cualquiera de las realizaciones anteriores, y los estereoisómeros, tautómeros, hidratos, o solvatos de los mismos, o las mezclas de los mismos.

Otra realización del segundo aspecto son los compuestos de fórmula (I) en la forma de un complejo con Gd3+, seleccionado del grupo que consiste en:

2,2',2"-(10-{1-carboxi-2-[2-(4-etoxifenil)etoxi]etil}-1,4,7,10-tetraazaciclododecan-1,4,7-triil)triacetato de gadolinio,

2,2',2"-{10-[1-carboxi-2-{4-[2-(2-etoxietoxi)etoxi] fenil}etil]-1,4,7,10-tetraazacidododecan-1,4,7-triil}triacetato de gadolinio,

2,2',2"-{10-[(1S)-1-carboxi-2-{4-[2-(2-etoxietoxi)etoxi] fenil}etil]-1,4,7,10-tetraazaddododecan-1,4,7-triil}triacetato de gadolinio,

2,2',2"-{10-[(1R)-1-carboxi-2-{4-[2-(2-etoxietoxi)etoxi] fenil}etil]-1,4,7,10-tetraazaddododecan-1,4,7-triil}triacetato de gadolinio,

2-[7-(1-carboxi-2-{4-[2-(2-etoxietoxi)etoxi]fenil} etil)-4,10-bis(carboxilatoirietil)-1,4,7,10-tetraazaciclododecan-1-il]propanoato de gadolinio,

2-[7-{1-carboxi-2-[4-(2-etoxietoxi)fenil]etil}-4,10-bis(carboxilatometil)-1,4,7,10-tetraazaciclododecan-1-il]butanoato de gadolinio,

(2S,2'S,2MS)-2,2',2"-{10-[(1S)-5-(4-butoxifenil)-1-carboxipentil]-1,4,7,10-tetraazacidododecan-1,4,7-triil}tris(3-hidroxipropanoato) de gadolinio,

2,2',2"-{10-[1-carboxi-2-(4-{2-[2-(2-etoxietoxi)etoxi] etoxi}fenil)etil]-1,4,7,10-tetraazaciclododecan-1,4,7-triil} triacetato de gadolinio,

2,2',2"-{10-[(1S)-1-carboxi-2-(4-(2-[2-(2-etoxietoxi)etoxi]etoxi}fenil)etil]-1,4,7,10-tetraazaddododecan-1,4,7-triil}triacetato de gadolinio,

2,2',2"-{10-[(1R)-1-carboxi-2-(4-{2-[2-(2-etoxietoxi)etoxi]etoxi}fenil)etil]-1,4,7,10-tetraazaddododecan-1,4,7-triil}triacetato de gadolinio,

2-{7-[1-carboxi-2-(4-{2-[2-(2-etoxietoxi)etoxi]etoxi} fenil)etil]-4,10-bis(carboxilatoirietil)-1,4,7,10-tetraazaciclodo decan-1-il}-3-metoxipropanoato de gadolinio,

2,2',2"-{10-[2-(4-butoxifenil)-1-carboxietil]-1,4,7,10-tetraazacidododecan-1,4,7-triil}triacetato de gadolinio, (2S,2'S,2MS)-2,2',2M-(10-[(1S)-1-carboxi-4-{4-[2-(2-etoxietoxi)etoxi] fenil}butil]-1,4,7,10-tetraazaciclododecan-1,4,7-triil}tris(3-hidroxipropanoato) de gadolinio,

2,2',2"-{10-[1-carboxi-2-{6-[2-(2-etoxietoxi)etoxi] piridin-3-il}etil]-1,4,7,10-tetraazaciclododecan-1,4,7-triil}triacetato de gadolinio,

2,2',2"-{10-[1-carboxi-4-{4-[2-(2-etoxietoxi)etoxi] fenil}butil]-1,4,7,10-tetraazaciclododecan-1,4,7-triil}tris(3-hidroxipropanoato) de gadolinio-,

(2S,2'S,2"S)-2,2',2M-{10-[(1R)-1-carboxi-4-{4-[2-(2-etoxietoxi)etoxi] fenil}butil]-1,4,7,10-tetraazaciclododecan-1,4,7-triil}tris(3-hidroxipropanoato) de gadolinio,

(2R,2'R,2"R)-2,2',2M-{10-[(1R)-1-carboxi-4-{4-[2-(2-etoxietoxi)etoxi] fenil}butil]-1,4,7,10-tetraazaciclododecan-1,4,7-triil}tris(3-hidroxipropanoato) de gadolinio,

(2R,2'R,2"R)-2,2',2M-{10-[(1S)-1-carboxi-4-{4-[2-(2-etoxietoxi)etoxi] fenil}butil]-1,4,7,10-tetraazaciclododecan-1,4,7-triil}tris(3-hidroxipropanoato) de gadolinio,

2,2',2"-{10-[(1S)-1-carboxi-4-{4-[2-(2-etoxietoxi)etoxi] fenil}butil]-1,4,7,10-tetraazaciclododecan-1,4,7-triil}tris(3-hidroxipropanoato) de gadolinio-,

2,2',2"-{10-[1-carboxi-2-{4-[2-(2-etoxietoxi)etoxi] fenil}etil]-1,4,7,10-tetraazaciclododecan-1,4,7-triil}tris(3-hidroxipropanoato) de gadolinio,

2,2',2"-{10-[1-carboxi-2-{5-[2-(2-etoxietoxi)etoxi] piridin-2-il}etil]-1,4,7,10-tetraazaciclododecan-1,4,7-triil}triacetato de gadolinio,

2,2',2"-{10-[1-carboxi-3-(4-propoxifenil)propil]-1,4,7,10-tetraazacidododecan-1,4,7-triil}triacetato de gadolinio,

2,2',2"-{10-[1-carboxi-4-{4-[2-(2-etoxietoxi)etoxi] fenil}butil]-1,4,7,10-tetraazaciclododecan-1,4,7-triil}triacetato de gadolinio,

2,2',2"-{10-[(1S)-1-carboxi-4-{4-[2-(2-etoxietoxi)etoxi] fenil}butil]-1,4,7,10-tetraazaciclododecan-1,4,7-triil}triacetato de gadolinio,

2,2',2M-{10-[(1S)-1-carboxi-5-(4-etoxifenil)pentil]-1,4,7,10-tetraazacidododecan-1,4,7-triil}triacetato de gadolinio,

2,2',2M-{10-[1-carboxi-4-(4-etoxifenil)butil]-1,4,7,10-tetraazacidododecan-1,4,7-triil}triacetato de gadolinio, 2-{7-[1-carboxi-2-(4-etoxifenil)etil]-4,10-bis(carboxilatometil)-1,4,7,10-tetraazacidododecan-1-il}pentanoato de gadolinio,

2,2',2"-{10-[(1S)-4-(4-butoxifenil)-1-carboxibutil]-1,4,7,10-tetraazacidododecan-1,4,7-triil}triacetato de gadolinio,

2,2',2"-(10-{1-carboxi-2-[4-(2-etoxietoxi)fenil]etil}-1,4,7,10-tetraazacidododecan-1,4,7-triil)triacetato de gadolinio,

(2S)-2-[4,10-bis(carboxilatometil)-7-{1-carboxi-2-[4-(2,2,3,3-tetrafluoropropoxi)fenil]etil}-1,4,7,10-tetraazaciclododecan-1-il]-3-hidroxipropanoato de gadolinio,

(2S,2'S,2MS)-2,2',2M-{10-[(1S)-4-(3-butoxifenil)-1-carboxibutil]-1,4,7,10-tetraazaddododecan-1,4,7-tnil}tris(3-hidroxipropanoato) de gadolinio,

(2S,2'S)-2,2'-{4-[(1S)-1-carboxi-4-{4-[2-(2-etoxietoxi) etoxi]fenM}butil]-10-[(1R)-1-carboxilato-2-hidroxietil]-1.4.7.10- tetraazaciclododecan-1,7-diil}bis(3-hidroxipropanoato) de gadolinio,

2,2'-{4-[(1S)-1-carboxi-4-{4-[2-(2-etoxietoxi)etoxi] fenil}butil]-10-[1-carboxilato-3-hidroxipropil]-1,4,7,10-tetraazaciclododecan-1,7-diil}bis(4-hidroxibutanoato) de gadolinio-,

2,2'-{4-[1-carboxi-2-{4-[2-(2-etoxietoxi)etoxi] fenil}etil]-10-[1-carboxilato-3-hidroxipropil]-1,4,7,10-tetraazaddododecan-1,7-diil}bis(4-hidroxibutanoato) de gadolinio-,

2-[7-{1-carboxi-2-[4-(2-etoxietoxi)fenil]etil}-4,10-bis(carboxilatometil)-1,4,7,10-tetraazaciclododecan-1-il]-3-metoxipropanoato de gadolinio,

2,2',2"-{10-[2-{3,5-bis[2-(2-etoxietoxi)etoxi]fenil}-1-carboxietil]-1,4,7,10-tetraazacidododecan-1,4,7-triil}triacetato de gadolinio,

2,2',2"-{10-[(1S)-2-(2,4-bis{2-[2-(2-etoxietoxi)etoxi]etoxi}fenil)-1-carboxietil]-1,4,7,10-tetraazaciclododecan-1,4,7-triil}triacetato de gadolinio,

2-{7-[1-carboxi-2-{4-[2-(2-etoxietoxi)etoxi]fenil} etil]-4,10-bis(carboxilatometil)-1,4,7,10-tetraazaciclododecan-1-il}-3-hidroxipropanoato de gadolinio-,

2-{7-[1-carboxi-2-(4-{2-[2-(2-etoxietoxi)etoxi]etoxi} fenil)etil]-4,10-bis(carboxilatometil)-1,4,7,10-tetraazaciclododecan-1-il}-3-hidroxipropanoato de gadolinio-,

2-{4,10-bis(carboxilatometil)-7-[1-carboxipropil]-1,4,7,10-tetraazaddododecan-1-il}-3-{4-[2-(2-etoxietoxi)etoxi]fenil}propanoato de gadolinio-,

2,2',2"-{10-[2-(5-butoxipiridin-2-il)-1-carboxietil]-1,4,7,10-tetraazacidododecan-1,4,7-triil}triacetato de gadolinio,

2-{4,10-bis(carboxilatometil)-7-[1-carboxi-2-metoxietil]-1,4,7,10-tetraazaciclododecan-1-il}-3-[4-(2,2,3,3-tetrafluoropropoxi)fenil]propanoato de gadolinio-,

2,2',2"-(10-{1-carboxi-2-[4-(2,2,3,3-tetrafluoropropoxi) fenil]etil}-1,4,7,10-tetraazaddododecan-1,4,7-triil)triacetato de gadolinio,

2,2',2''-(10-{(1R)-1-carboxi-2-[4-(2,2,2-trifluoroetoxi) fenil]etil}-1,4,7,10-tetraazaddododecan-1,4,7-triil)triacetato de gadolinio,

2,2',2"-{10-[1-carboxi-2-(4-propoxifenil)etil]-1,4,7,10-tetraazacidododecan-1,4,7-triil}triacetato de gadolinio, (2R,2'R)-2,2'-{7-[(1S)-1-carboxi-4-{4-[2-(2-etoxietoxi)etoxi]fenil}butil]-10-[(1S)-1-carboxilato-2-hidroxietil]-1.4.7.10- tetraazaciclododecan-1,4-diil}bis(3-hidroxipropanoato) de gadolinio y

(2S,2'S)-2,2'-{7-[(1S)-1-carboxi-4-{4-[2-(2-etoxietoxi)etoxi]fenil}butil]-10-[(1R)-1-carboxilato-2-hidroxietil]-1.4.7.10- tetraazaciclododecan-1,4-diil}bis(3-hidroxipropanoato) de gadolinio

Otra realización del segundo aspecto son los compuestos de fórmula (I) en la forma de una sal de sodio (Na+) de un complejo con Gd3+, dicho complejo con Gd3+ seleccionado del grupo que consiste en:

2,2',2"-(10-{1-carboxi-2-[2-(4-etoxifenil)etoxi]etil}-1,4,7,10-tetraazacidododecan-1,4,7-triil)triacetato de gadolinio,

2,2',2"-{10-[1-carboxi-2-{4-[2-(2-etoxietoxi)etoxi] fenil}etil]-1,4,7,10-tetraazaciclododecan-1,4,7-triil}triacetato de gadolinio,

2,2',2"-{10-[(1S)-1-carboxi-2-{4-[2-(2-etoxietoxi)etoxi] fenil}etil]-1,4,7,10-tetraazaciclododecan-1,4,7-triil}triacetato de gadolinio,

2,2',2"-{10-[(1R)-1-carboxi-2-{4-[2-(2-etoxietoxi)etoxi] fenil}etil]-1,4,7,10-tetraazaciclododecan-1,4,7-triil}triacetato de gadolinio,

2-[7-(1-carboxi-2-{4-[2-(2-etoxietoxi)etoxi]fenil} etil)-4,10-bis(carboxilatometil)-1,4,7,10-tetraazaciclododecan-1-il]propanoato de gadolinio,

(2S,2'S,2MS)-2,2',2M-{10-[(1S)-5-(4-butoxifenil)-1-carboxipentil]-1,4,7,10-tetraazaciclododecan-1,4,7-triil}tris(3-hidroxipropanoato) de gadolinio,

2,2',2''-{10-[1-carboxi-2-(4-{2-[2-(2-etoxietoxi)etoxi] etoxi}fenil)etil]-1,4,7,10-tetraazaciclododecan-1,4,7-triil} triacetato de gadolinio,

2,2',2"-{10-[(1S)-1-carboxi-2-(4-{2-[2-(2-etoxietoxi)etoxi]etoxi}fenil)etil]-1,4,7,10-tetraazaciclododecan-1,4,7-triil}triacetato de gadolinio,

2,2',2"-{10-[(1R)-1-carboxi-2-(4-{2-[2-(2-etoxietoxi)etoxi]etoxi}fenil)etil]-1,4,7,10-tetraazaciclododecan-1,4,7-triil}triacetato de gadolinio,

2,2',2"-{10-[2-(4-butoxifenil)-1-carboxietil]-1,4,7,10-tetraazaciclododecan-1,4,7-triil}triacetato de gadolinio, (2S,2'S,2MS)-2,2',2M-{10-[(1S)-1-carboxi-4-{4-[2-(2-etoxietoxi)etoxi] fenil}butil]-1,4,7,10-tetraazaciclododecan-1,4,7-triil}tris(3-hidroxipropanoato) de gadolinio,

2,2',2"-{10-[1-carboxi-3-(4-propoxifenil)propil]-1,4,7,10-tetraazaciclododecan-1,4,7-triil}triacetato de gadolinio,

2,2',2"-{10-[1-carboxi-4-[4-[2-(2-etoxietoxi)etoxi] fenil}butil]-1,4,7,10-tetraazaddododecan-1,4,7-triil}triacetato de gadolinio,

2,2',2"-{10-[(1S)-1-carboxi-4-[4-[2-(2-etoxietoxi)etoxi] fenil}butil]-1,4,7,10-tetraazaddododecan-1,4,7-triil}triacetato de gadolinio,

2,2',2"-{10-[(1S)-1-carboxi-5-(4-etoxifenil)pentil]-1,4,7,10-tetraazacidododecan-1,4,7-triil}triacetato de gadolinio,

2,2',2"-{10-[1-carboxi-4-(4-etoxifenil)butil]-1,4,7,10-tetraazacidododecan-1,4,7-triil}triacetato de gadolinio, 2-{7-[1-carboxi-2-(4-etoxifenil)etil]-4,10-bis(carboxilatometil)-1,4,7,10-tetraazaciclododecan-1-il}pentanoato de gadolinio,

(2S,2'S,2"S)-2,2',2M-{10-[(1S)-4-(3-butoxifenil)-1-carboxibutil]-1,4,7,10-tetraazaddododecan-1,4,7-tnil}tns(3-hidroxipropanoato) de gadolinio,

(2S,2'S)-2,2'-{4-[(1S)-1-carboxi-4-{4-[2-(2-etoxietoxi) etoxi]fenM}butil]-10-[(1R)-1-carboxilato-2-hidroxietil]-1.4.7.10- tetraazaddododecan-1,7-diil}bis(3-hidroxipropanoato) de gadolinio,

2,2',2"-{10-[2-{3,5-bis[2-(2-etoxietoxi)etoxi]fenil}-1-carboxietil]-1,4,7,10-tetraazaddododecan-1,4,7-triil}triacetato de gadolinio,

2-{4,10-bis(carboxilatometil)-7-[1-carboxipropil]-1,4,7,10-tetraazaciclododecan-1-il}-3-{4-[2-(2-etoxietoxi)etoxi]fenil}propanoato de gadolinio-,

2,2',2"-(10-{1-carboxi-2-[4-(2,2,3,3-tetrafluoropropoxi) fenil]etil}-1,4,7,10-tetraazaciclododecan-1,4,7-triil)triacetato de gadolinio,

2,2',2''-(10-{(1R)-1-carboxi-2-[4-(2,2,2-trifluoroetoxi) fenil]etil}-1,4,7,10-tetraazaciclododecan-1,4,7-triil)triacetato de gadolinio,

2,2',2"-{10-[1-carboxi-2-(4-propoxifenil)etil]-1,4,7,10-tetraazacidododecan-1,4,7-triil}triacetato de gadolinio, (2R,2'R)-2,2'-{7-[(1S)-1-carboxi-4-{4-[2-(2-etoxietoxi)etoxi]fenil}butil]-10-[(1S)-1-carboxilato-2-hidroxietil]-1.4.7.10- tetraazaciclododecan-1,4-diil}bis(3-hidroxipropanoato) de gadolinio y (2S,2'S)-2,2'-{7-[(1S)-1-carboxi-4-{4-[2-(2-etoxietoxi)etoxi]fenil}butil]-10-[(1R)-1-carboxilato-2-hidroxietil]-1,4,7,10-tetraazaddododecan-1,4-diN}bis(3-hidroxipropanoato) de gadolinio

y los estereoisómeros, tautómeros, N-óxidos, hidratos o solvatos de los mismos, o las mezclas de los mismos.

De acuerdo con otro aspecto, la presente invención abarca procedimientos para preparar los compuestos de la presente invención, comprendiendo dichos procedimientos los pasos según se describen en la Sección Experimental en la presente.

De acuerdo con un aspecto adicional, la presente invención abarca compuestos intermediarios los cuales son útiles para preparar los compuestos de fórmula general (I), y en particular para la preparación de los compuestos de fórmula general (I) en la forma de un complejo con Gd3+,supra.

En particular, la invención abarca los compuestos intermediarios de fórmula general (II):

(II) ,

y los estereoisómeros, tautómeros, N-óxidos, hidratos, solvatos, o sales de los mismos, o las mezclas de los mismos en los cuales Ar, X, R 1, R2 y R3 son como se definen para los compuestos de fórmula general (I),supra,y R7 representa un grupo seleccionado de alquilo C<1>-C<4>- y bencilo.

En particular, la invención abarca los compuestos intermediarios de fórmula general (III):

(III) ,

y los estereoisómeros, tautómeros, N-óxidos, hidratos, solvatos, o sales de los mismos, o las mezclas de los mismos en los cuales Ar y X son como se definen para los compuestos de fórmula general (I),supra,R7 representa un grupo seleccionado de alquilo C<1>-C<4>- y bencilo y R8, R9 y R10 representan, de manera independiente para cada aparición, un grupo seleccionado de -CH<2>O-C(c H<3>)<3>, -(CH<2>)<2>O-C(CH<3>)<3>, -CH<2>O-CH2Ph y-((CH2)2O-CH2)Ph.

En particular, la invención abarca los compuestos intermediarios de fórmula general (IV):

(IV) ,

y los estereoisómeros, tautómeros, hidratos, solvatos, o sales de los mismos, o las mezclas de los mismos en los cuales R7 representa un grupo seleccionado de alquilo C<1>-C<4>- y bencilo y R8, R9 y R 10 representa, de manera independiente para cada aparición, un grupo seleccionado de -CH<2>O-C(CH<3>)<3>, -(CH<2>)<2>O-C(CH<3>)<3>, -CH<2>O-CH2Ph y-((CH2)2O-CH2)Ph.

(IV) ,

y los estereoisómeros, tautómeros, hidratos, solvatos, o sales de los mismos, o las mezclas de los mismos en los cuales R7 representa un grupo seleccionado de alquilo C<1>-C<4>- y bencilo y R8, R9 y R 10 representa, de manera independiente para cada aparición, un grupo seleccionado de alquilo C<1>-C<3>-, -CH<2>O(CH<3>), -CH<2>O-C(CH<3>)<3>, -(CH2)2O-C(CH3)3, -CH2O-CH2Ph y-((CH2)2O-CH2)Ph.

De acuerdo con un aspecto adicional, la presente invención abarca el uso de dichos compuestos intermediarios como se describe anteriormente para la preparación de un compuesto de fórmula general (I) en la forma de un complejo con Gd3+, como se definesupra.

De acuerdo con un aspecto adicional, la presente invención abarca el uso de los compuestos de fórmula general (I):

(I) ,

y de los estereoisómeros, tautómeros, N-óxidos, hidratos, solvatos, o sales de los mismos, o las mezclas de los mismos en los cuales Ar, X, R 1, R2 y R3 son como se definen para los compuestos de fórmula general (I),supra,para la preparación de un compuesto de fórmula general (I) en la forma de un complejo con Gd3+, como se definesupra.

De acuerdo con un aspecto adicional, la presente invención abarca el uso de los compuestos intermediarios de fórmula general (II):

(ii) ,

y de los estereoisómeros, tautómeros, N-óxidos, hidratos, solvatos, o sales de los mismos, o las mezclas de los mismos en los cuales Ar, X, R 1, R<2>y R<3>son como se definen para los compuestos de fórmula general (I),supra,y R<7>representa un grupo seleccionado de alquilo C<1>-C<4>- y bencilo, para la preparación de un compuesto de fórmula general (I) en la forma de un complejo con Gd3+, como se definesupra.

De acuerdo con un aspecto adicional, la presente invención abarca el uso de los compuestos intermediarios de fórmula general (III):

(III) ,

y de los estereoisómeros, tautómeros, N-óxidos, hidratos, solvatos, o sales de los mismos, o las mezclas de los mismos en los cuales Ar y X son como se definen para los compuestos de fórmula general (I),supra, R7 representa un grupo seleccionado de alquilo C<1>-C<4>- y bencilo y R8, R9 y R 10 representa, de manera independiente para cada aparición, un grupo seleccionado de -CH<2>O-C(CH<3>)<3>, -(CH<2>)<2>O-C(CH<3>)<3>, -CH<2>O-CH<2>Ph y -((C H<2>)<2>O-CH<2>)Ph para la preparación de un compuesto de fórmula general (I) en la forma de un complejo con Gd3+, como se definesupra.

(III) ,

y de los estereoisómeros, tautómeros, N-óxidos, hidratos, solvatos, o sales de los mismos, o las mezclas de los mismos en los cuales Ar y X son como se definen para los compuestos de fórmula general (I),supra, R7 representa un grupo seleccionado de alquilo C<1>-C<4>- y bencilo y R8, R9 y R 10 representa, de manera independiente para cada aparición, un grupo seleccionado de alquilo C<1>-C<3>, -CH<2>O(CH<3>), -CH<2>O-C(CH<3>)<3>, (CH<2>)<2>O-C(CH<3>)<3>, -CH<2>O-CH<2>Ph y -((CH<2>)<2>O-CH<2>)Ph para la preparación de un compuesto de fórmula general (I) en la forma de un complejo con Gd3+, como se definesupra.

De acuerdo con un aspecto adicional, la presente invención abarca el uso de los compuestos intermediarios de fórmula general (IV):

(IV) ,

y de los estereoisómeros, tautómeros, hidratos, solvatos, o sales de los mismos, o las mezclas de los mismos en los cuales R7 representa un grupo seleccionado de alquilo C<1>-C<4>- y bencilo y R8, R9 y R10 representa, de manera independiente para cada aparición, un grupo seleccionado de -CH<2>O-C(CH<3>)<3>, -(CH<2>)<2>O-C(CH<3>)<3>, -CH<2>O-CH<2>Ph y -((C H<2>)<2>O-CH<2>)Ph para la preparación de un compuesto de fórmula general (I) en la forma de un complejo con Gd3+, como se definesupra.

(IV) ,

y de los estereoisómeros, tautómeros, hidratos, solvatos, o sales de los mismos, o las mezclas de los mismos en los cuales R7 representa un grupo seleccionado de alquilo C<1>-C<4>- y bencilo y R8, R9 y R10 representa, de manera independiente para cada aparición, un grupo seleccionado de alquilo C<1>-C<3>, -CH<2>O(CH<3>), -CH<2>O-C(CH<3>)<3>, -(CH<2>)<2>O-C(CH<3>)<3>, -CH<2>O-CH<2>Ph y -((CH<2>)<2>O-CH<2>)Ph para la preparación de un compuesto de fórmula general (I) en la forma de un complejo con Gd3+, como se definesupra.

Más en particular aún, la presente invención abarca los compuestos intermediarios que se divulgan en la Sección Experimental de este texto,infra.

Los compuestos de fórmula general (I) en la forma de un complejo de Gd3+,es decirlos complejos de Gd3+ de los compuestos de fórmula general (I) de la presente invención demuestran una valiosa relaxividad, captación en los hepatocitos, solubilidad, estabilidad del complejo y un valioso perfil de tolerabilidad y farmacocinético, lo cual no se podría haber previsto. Se ha descubierto de manera sorprendente que los compuestos que contienen Gd3+ de fórmula general (I) de la presente invención se captan de manera efectiva en los hepatocitos y proporcionan una alta relaxividad manteniendo un perfil farmacocinético, de buena seguridad y tolerabilidad y es posible por lo tanto que dichos compuestos se utilicen para la IRM mejorada por contraste (CE-MRI), con preferencia para la IRM de usos múltiples y a la IRM del hígado y con mayor preferencia para la detección de enfermedades hepáticas como la fibrosis hepática, la cirrosis, las metástasis y el diagnóstico diferencial de lesiones hepáticas focales y la obtención de imágenes funcionales en humanos y animales.

Un aspecto adicional de la invención consiste en el uso de un compuesto de fórmula general (I),supra,para el diagnóstico por imágenes.

Un experto en la técnica reconocería que los compuestos de fórmula general (I) de esta invención se pueden utilizar en combinación con otros iones metálicos activos en la RM en lugar de Gd3+, estando dichos compuestos también comprendidos por la presente invención.

Un aspecto adicional de la invención consiste en el uso de un compuesto de fórmula general (I),supra,en la forma de un complejo con Gd3+ para el diagnóstico por imágenes.

Un aspecto adicional de la invención consiste en el uso de un complejo de Gd3+ de un compuesto de fórmula general (I),supra,para el diagnóstico por imágenes.

Con preferencia, el uso de un compuesto de la invención,es decirde un compuesto de fórmula general (I),supray/o de un compuesto de fórmula general (I),supra,en la forma de un complejo con Gd3+ y/o de un complejo de Gd3+ de un compuesto de fórmula general (I),supra,en el diagnóstico se lleva a cabo utilizando imágenes por resonancia magnética (IRM).

Un aspecto adicional de la invención consiste en el uso de un compuesto de fórmula general (I),supra,para imágenes por resonancia magnética, con preferencia del sistema vascular, renal o hepatobiliar o del tracto gastrointestinal, con mayor preferencia para imágenes por resonancia magnética del hígado.

Un aspecto adicional de la invención consiste en el uso de un compuesto de fórmula general (I),supra,en la forma de un complejo con Gd3+ para imágenes por resonancia magnética, con preferencia del sistema vascular, renal o hepatobiliar o del tracto gastrointestinal, con mayor preferencia para imágenes por resonancia magnética del hígado.

Un aspecto adicional de la invención consiste en el uso de un complejo de Gd3+ de un compuesto de fórmula general (I),supra,para imágenes por resonancia magnética, con preferencia del sistema vascular, renal o hepatobiliar o del tracto gastrointestinal, con mayor preferencia para imágenes por resonancia magnética del hígado.

Un aspecto adicional de la invención consiste en los compuestos de fórmula general (I) para utilizar en el diagnóstico por imágenes.

Un aspecto adicional de la invención consiste en los compuestos de fórmula general (I) en la forma de un complejo con Gd3+ para utilizar en el diagnóstico por imágenes.

Un aspecto adicional de la invención consiste en los complejos de Gd3+ de los compuestos de fórmula general (I),supra,para utilizar en el diagnóstico por imágenes.

Un aspecto adicional de la invención consiste en los compuestos de fórmula general (I) para utilizar en imágenes por resonancia magnética (IRM), con preferencia del sistema vascular, renal o hepatobiliar o del tracto gastrointestinal, con mayor preferencia para imágenes por resonancia magnética del hígado.

Un aspecto adicional de la invención consiste en los compuestos de fórmula general (I) en la forma de un complejo con Gd3+ para utilizar en imágenes por resonancia magnética (IRM), con preferencia del sistema vascular, renal o hepatobiliar o del tracto gastrointestinal, con mayor preferencia para imágenes por resonancia magnética del hígado.

Un aspecto adicional de la invención consiste en los complejos de Gd3+ de los compuestos de fórmula general (I),supra,para utilizar en imágenes por resonancia magnética (IRM), con preferencia del sistema vascular, renal o hepatobiliar o del tracto gastrointestinal, con mayor preferencia para imágenes por resonancia magnética del hígado.

La invención también contiene compuestos de fórmula general (I) para la fabricación de agentes de diagnóstico. La invención también contiene compuestos de fórmula general (I) en la forma de un complejo con Gd3+ para la fabricación de agentes de diagnóstico.

Un aspecto adicional de la invención consiste en el uso de los compuestos de fórmula general (I) o de mezclas de los mismos para la fabricación de agentes de diagnóstico.

Un aspecto adicional de la invención consiste en el uso de los compuestos de fórmula general (I) en la forma de un complejo con Gd3+ o de mezclas de los mismos para la fabricación de agentes de diagnóstico.

Un aspecto adicional de la invención consiste en el uso de los compuestos de fórmula general (I) o de mezclas de los mismos para la fabricación de agentes de diagnóstico para las imágenes por resonancia magnética (IRM).

Un aspecto adicional de la invención consiste en el uso de los compuestos de fórmula general (I) en la forma de un complejo con Gd3+ o de mezclas de los mismos para la fabricación de agentes de diagnóstico para las imágenes por resonancia magnética (IRM).

Un aspecto adicional de la invención consiste en el uso de los compuestos de fórmula general (I) o de mezclas de los mismos para la fabricación de agentes de diagnóstico para las imágenes por resonancia magnética (IRM) del sistema vascular, vascular, renal o hepatobiliar o del tracto gastrointestinal, con preferencia para las imágenes por resonancia magnética del hígado.

Un aspecto adicional de la invención consiste en el uso de los compuestos de fórmula general (I) en la forma de un complejo con Gd3+ o de mezclas de los mismos para la fabricación de agentes de diagnóstico para las imágenes por resonancia magnética (IRM) del sistema vascular, renal o hepatobiliar o del tracto gastrointestinal, con preferencia para las imágenes por resonancia magnética del hígado.

Un aspecto adicional de la invención consiste en el uso de los complejos de Gd3+ de los compuestos de fórmula general (I),supra,o de mezclas de los mismos para la fabricación de agentes de diagnóstico para las imágenes por resonancia magnética (IRM) del sistema vascular, renal o hepatobiliar o del tracto gastrointestinal, con preferencia para las imágenes por resonancia magnética del hígado.

Un aspecto adicional de la invención consiste en un procedimiento de obtención de imágenes de tejido corporal en un paciente, que comprende los pasos de administrar al paciente una cantidad efectiva de uno o más compuestos de fórmula general (I) en la forma de un complejo con Gd3+ en un portador farmacéuticamente aceptable, y someter al paciente a una tomografía de RMN.

Un aspecto adicional de la invención consiste en un procedimiento de obtención de imágenes de tejido corporal en un paciente, que comprende los pasos de administrar al paciente una cantidad efectiva de uno o más complejos de Gd3+ de los compuestos de fórmula general (I) en un portador farmacéuticamente aceptable, y someter al paciente a una tomografía de RMN.

Para la fabricación de agentes de diagnóstico, por ejemplo la administración a sujetos humanos o animales, los compuestos de fórmula general (I) en la forma de complejos con Gd3+,es decirlos complejos de Gd3+ de los compuestos de fórmula general (I) o las mezclas se formularán de manera conveniente conjuntamente con portadores o excipientes farmacéuticos. Los medios de contraste de la invención pueden contener de manera conveniente auxiliares de formulación farmacéutica, por ejemplo estabilizadores, antioxidantes, agentes de ajuste del pH, eliminadores de metales, electrolitos (por ejemplo cloruro de sodio), sabores y similares. Los agentes de diagnóstico de la invención se pueden formular para la administración parenteral o enteral o para la administración directa en las cavidades corporales. Por ejemplo, las formulaciones parenterales contienen una solución o suspensión estéril en una dosis de 0,0001-5 mmol de gadolinio/kg de peso corporal, con preferencia 0,001-0,5 mmol de gadolinio/kg de peso corporal, con mayor preferencia 0,005-0,1 mmol de gadolinio/kg de peso corporal del compuesto de fórmula (I) de acuerdo con esta invención. De este modo, los medios de la invención pueden estar en formulaciones farmacéuticas convencionales tales como soluciones, suspensiones, dispersiones, jarabes, etc. en medios portadores fisiológicamente aceptables, con preferencia en agua para inyecciones. Cuando el medio de contraste está formulado para su administración parenteral, éste será con preferencia isotónico o hipertónico y cercano a un pH de 7,4.

En un aspecto adicional, la invención se dirige a un procedimiento de diagnóstico y seguimiento de la salud de los pacientes. Este procedimiento comprende a) administrar a un humano que necesite dicho diagnóstico un compuesto de la invención para detectar el compuesto en el humano como se describió anteriormente y en la presente, y b) medir la señal que surge de la administración del compuesto al humano, con preferencia por medio de imágenes por resonancia magnética (IRM).

En un aspecto adicional, la invención se dirige a un procedimiento de diagnóstico y seguimiento de la salud de los pacientes. Este procedimiento comprende a) administrar a un humano que necesite dicho diagnóstico un compuesto de la invención,es decirun compuesto de fórmula general (I) en la forma de un complejo con Gd3+ para detectar el compuesto en el humano como se describió anteriormente y en la presente, y b) medir la señal que surge de la administración del compuesto al humano, con preferencia por medio de imágenes por resonancia magnética (IRM).

En un aspecto adicional, la invención se dirige a un procedimiento de diagnóstico y seguimiento de la salud de los pacientes. Este procedimiento comprende a) administrar a un humano que necesite dicho diagnóstico un compuesto de la invención,es decirun complejo de Gd3+ de un compuesto de fórmula general (I) para detectar el compuesto en el humano como se describió anteriormente y en la presente, y b) medir la señal que surge de la administración del compuesto al humano, con preferencia por medio de imágenes por resonancia magnética (IRM).

Síntesis general

Los compuestos de fórmula general (I) descriptos en esta invención, incluyendo los compuestos de fórmula general (I) en la forma de un complejo con Gd3+ se pueden producir utilizando los siguientes procedimientos generales representados en los Esquemas 1 a 9 a continuación. A menos que se especifique de otra manera, los grupos R 1 a R 10 que se muestran en los mismos tienen el significado proporcionado en la descripción anterior. En caso de que se requiera la química de grupos protectores para la introducción de uno o más de los grupos R1, R2 y/o R3, se pueden emplear los grupos R8, R9 y/o R 10 Por lo tanto, si no se necesita ninguna química de grupos protectores, los grupos R8, R9 y R 10 son iguales a los grupos R 1, R2 y R3 En general, pero no de manera exclusiva, los siguientes grupos se seleccionan de R7 = metilo, etilo o terc-Butilo, R 11 = metilo, trifluorometilo o para-nitrofenilo, y R 12 = bencilo.

Por ejemplo, los compuestos de fórmula general (I) descriptos en esta invención, incluyendo los compuestos de fórmula general (I) en la forma de un complejo con Gd3+, en particular cuando R1 = R2 = R3 = hidrógeno, se pueden preparar por medio del procedimiento representado en el Esquema 1.

Esquema 1.

De manera alternativa, los compuestos de fórmula general (I) descriptos en esta invención, incluyendo los compuestos de fórmula general (I) en la forma de un complejo con Gd3+, en particular cuando R 1 = R2 = R3 = hidrógeno, se pueden preparar de acuerdo con el procedimiento representado en el Esquema 2, donde el cicleno (1,4,7,10-tetraazaciclododecano) primero se trialquila seguido por la alquilación del nitrógeno secundario restante.

Esquema 2.

Además, los compuestos de fórmula general (I) descriptos en esta invención, incluyendo los compuestos de fórmula general (I) en la forma de un complejo con Gd3+, en particular cuando R1 = R2 = R3 = hidrógeno, se pueden preparar de acuerdo con el procedimiento representado en el Esquema 3, donde las cadenas laterales de ácido acético se pueden introducir directamente utilizando un ácido cloroacético.

Esquema 3

En general, Esquema 4 muestra una vía para la preparación de los compuestos de fórmula general (I) descriptos en esta invención, incluyendo los compuestos de fórmula general (I) en la forma de un complejo con Gd3+. Esta vía es particularmente adecuada para la preparación de compuestos 1,7 disustituidos, en particular cuando R2 es diferente de R 1 y R3 partiendo por ejemplo del conocido 1,7-bis-terc-butildiacetato cicleno, Cas No: [162148-48-3].

Esquema 4.

De manera alternativa, la secuencia representada en el Esquema 5 se puede emplear para la preparación de los compuestos de fórmula general (I) descriptos en esta invención, incluyendo los compuestos de fórmula general (I) en la forma de un complejo con Gd3+, en particular cuando R2 es diferente de R 1 y R3 partiendo del conocido cicleno protegido con 1,7-bis-Cbz, Cas No: [162148-45-0].

Esquema 5.

De manera alternativa, la secuencia representada en el Esquema 6 se puede emplear para la preparación de los compuestos de fórmula general (I) descriptos en esta invención, incluyendo los compuestos de fórmula general (I) en la forma de un complejo con Gd3+, en particular cuando R 1 = R2 = R3 = hidroximetilo.

Esquema 6

Además, para la preparación de los compuestos de fórmula general (I) descriptos en esta invención, incluyendo los compuestos de fórmula general (I) en la forma de un complejo con Gd3+, se puede utilizar la incorporación de una cadena lateral de alqueno como un punto para la derivatización adicional como se representa en el Esquema 7, en particular cuando R 1 = R2 = R3 = hidroximetilo.

(n = 0, 1, 2).

Esquema 7

En general, la secuencia representada en el Esquema 8 se puede emplear para la preparación de los compuestos de fórmula general (I) descriptos en esta invención, incluyendo los compuestos de fórmula general (I) en la forma de un complejo con Gd3+, en particular cuando R1 = R2 = R3 = hidroxietilo.

Esquema 8.

Finalmente, la secuencia representada en el Esquema 9 se puede utilizar para la preparación de los compuestos de fórmula general (I) descriptos en esta invención, incluyendo los compuestos de fórmula general (I) en la forma de un complejo con Gd3+, en particular cuando se desea que R 1 sea diferente a R2 y R3, partiendo del conocido cicleno protegido con 1,4-bis-bencilo Cas No: [216101-03-0].

Esquema 9.

Los esquemas y procedimientos descriptos anteriormente ilustran las vías de síntesis para los compuestos de fórmula general (I) de la invención y no están destinados a ser limitativos. Sería evidente para el experto en la técnica que el orden de las transformaciones ejemplificadas en los esquemas puede modificarse de diversas maneras. El orden de las transformaciones ejemplificadas en los esquemas por consiguiente no está destinado a ser limitativo. Los grupos protectores apropiados y su introducción y escisión son bien conocidos por el experto en la técnica (véase por ejemplo T.W. Greene y P.G.M. Wuts enProtective Groups in Organic Synthesis,3 ra edición, Wiley 1999). Los ejemplos específicos se describen en los párrafos siguientes.

Los contenidos de los documentos que se citan en la presente se encuentran incorporados por la presente por medio de referencia.

De acuerdo con una realización, la presente invención también se relaciona con un procedimiento para preparar un compuesto de fórmula general (I) en la forma de un complejo con Gd3+,es decirun complejo de Gd3+ de un compuesto de fórmula general (I), como se definesupra,comprendiendo dicho procedimiento el paso de permitir que un compuesto de fórmula general (I):

(I) ,

en el cual Ar, X, R 1, R2 y R3 son como se definen para los compuestos de fórmula general (I),supra,reaccione con una sal de Gadolinio (III),

proporcionando por lo tanto un compuesto de fórmula general (I), en el cual Ar, X, R1, R2 y R3 son como se definen para los compuestos de fórmula general (I),supra,en la forma de un complejo con Gd3+,es decirun complejo de Gd3+ de un compuesto de fórmula general (I).

De acuerdo con una realización adicional, la presente invención también se relaciona con un procedimiento para preparar un compuesto de fórmula general (I) en la forma de un complejo con Gd3+,es decirun complejo de Gd3+ de un compuesto de fórmula general (I) como se definesupra,comprendiendo dicho procedimiento el paso de permitir que un compuesto de fórmula general (I):

(i) ,

en el cual Ar, X, R 1, R2 y R3 son como se definen para los compuestos de fórmula general (I),supra,reaccione con una sal de Gadolinio (III), tal como óxido de gadolinio, cloruro de gadolinio, acetato de gadolinio o carbonato de gadolinio, proporcionando por lo tanto un compuesto de fórmula general (I), en el cual Ar, X, R 1, R2 y R3 son como se definen para los compuestos de fórmula general (I),supra,en la forma de un complejo con Gd3+,es decirun complejo de Gd3+ de un compuesto de fórmula general (I).

(I) ,

en el cual Ar, X, R 1, R2 y R3 son como se definen para los compuestos de fórmula general (I),supra,reaccione con óxido de gadolinio (III),

Descripción de las figuras

Figura 1Estabilidad química de los Ejemplos seleccionados durante la esterilización por calor. Señal normalizada de HPLC-ICP-MS (Gd157) a lo largo del tiempo antes y después de tratarse en autoclave una, dos y tres veces (1 bar, 121°C durante 20 min). Todos los compuestos se investigaron a una concentración de 1 mmol/l en tampón Tris-HCl 10 mM a pH 7,4.

Figura 2Nivel de efecto adverso no observado (NOAEL, por sus siglas en inglés) en ratones para compuestos ejemplificativos en relación con la lipofilicidad (coeficiente de partición log P (butanol/agua, pH 7,4). El NOAEL observado (mmol de Gd/kg de peso corporal) denota el nivel de exposición, al que no se observaron efectos adversos. Los NOAELs del compuesto de referencia 1 (RC1, Gd-EOB-DTPA) y 2 (RC2, Gd-BOPTA) se representan a 2,5 mmol de Gd/kg de peso corporal solamente a título ilustrativo (en realidad ellos son >2,5 mmol de Gd/kg pc).

Figura 3:IRM del hígado mejorada por contraste en ratones sanos antes y después de la aplicación del agente de contraste (~10 min) en comparación con el compuesto de referencia 1 (RC1, dosis: 0,025 mmol/kg pc, Gd-EOB-DTPA) y el compuesto de referencia 2 (RC2, dosis: 0,050 mmol/kg pc de Gd-BOPTA). Los estudios se llevaron a cabo en un escáner de IRM preclínica de 4,7T equipado con una bobina de volumen corporal de ratón dedicada a la transmisión y recepción, utilizando una secuencia FLASH (Disparo Rápido de Ángulo Bajo) ponderada en T1 con gating respiratorio retrospectivo.

Figura 4:IRM del hígado mejorada por contraste en conejos portadores de tumores antes y 7 s, 5 min, 20 min y 40 min después de la inyección intravenosa del agente de contraste. El estudio se llevó a cabo en un sistema de RM de 1,5 T utilizando una secuencia de eco de gradiente 3D con saturación de grasa ponderada en T1 (Examen Volumétrico Interpolado de Respiración en negrita, VIBE, por sus siglas en inglés) secuencia que cubre todo el hígado con 36 cortes de 2 mm de espesor. Inmediatamente después de la detección del mejoramiento del contraste en la arteria pulmonar, se obtuvieron 5 escaneos dinámicos axiales continuos (6s cada uno) en los cuales la 1era y la 2da fases correspondieron a las fases arteriales tempranas y tardías. Las imágenes de 7s muestran altas intensidades de señal dentro de la aorta (estrella blanca). Se representan cortes tumorales ejemplificativos (flecha negra: tumor VX2) como una comparación intraindividual (estudio cruzado de 3 vías) del Ejemplo 15 y del compuesto de referencia 1 (RC1, dosis: 0,025 mmol/kg pc, Gd-EOB-DTPA) y del compuesto de referencia 2 (RC2, dosis: 0,050 mmol/kg pc de Gd-BOPTA).

Figura 5:Comparación intraindividual de la excreción biliar del Ejemplo 15 y del compuesto de referencia 1 (RC1, Gd-EOB-DTPA) en cerdos a 0,025 mmol de Gd/kg pc. El estudio se llevó a cabo en retención de la respiración en un sistema clínico de RM de 1,5T utilizando una IRM de secuencia (A) de eco de gradiente (VIBE) de la fase hepatobiliar dinámica y tardía en el hígado después de la aplicación del agente de contraste. (B). Se representan Proyecciones de Máxima Intensidad (MIPS 2 cm) ejemplificativas para visualizar la eliminación del agente de contraste en la bilis (flecha blanca: Ductus choledochus (Conducto colédoco)).

Sección experimental

(continuación)

Materiales e Instrumentación

Los químicos utilizados para el trabajo de síntesis eran de calidad de grado reactivo y se utilizaron tal como se obtuvieron.

Todos los reactivos, cuya síntesis no se describe en la sección experimental, o bien están disponibles en el comercio, o bien son compuestos conocidos o pueden formarse a partir de compuestos conocidos por medio de procedimientos conocidos por un experto en la técnica.

Los espectros de 1H-RMN se midieron en CDCh, D<2>O o DMSO-d6, respectivamente (temperatura ambiente, espectrómetro Bruker Avance 400, frecuencia de resonancia: 400,20 MHz para 1H o espectrómetro Bruker Avance 300, frecuencia de resonancia: 300,13 MHz para 1H. Los cambios químicos se proporcionan en ppm en relación con (trimetilsilil)propionato de sodio-d<4>(D<2>O) o tetrametilsilano (DMSO-da) como estándares externos (8 = 0 ppm).

Los compuestos e intermediarios producidos de acuerdo con los procedimientos de la invención pueden requerir purificación. La purificación de los compuestos orgánicos es bien conocida por el experto en la técnica y puede haber diversas formas de purificar el mismo compuesto. En algunos casos, puede no ser necesaria la purificación. En algunos casos, los compuestos se pueden purificar por medio de cristalización. En algunos casos, las impurezas se pueden agitar utilizando un solvente adecuado. En algunos casos, los compuestos se pueden purificar por medio de cromatografía, en particular cromatografía en columna ultrarrápida, utilizando por ejemplo cartuchos de gel de sílice preenvasados, por ejemplo cartuchos Biotage SNAP KP-Sil® o KP-NH® en combinación con un sistema autopurificador Biotage (Sp4® o Isolera Four®) y eluyentes tales como gradientes de hexano/acetato de etilo o DCM/metanol. Es especialmente ventajoso en algunos casos el uso de columnas C18 de fase inversa (preparativas) en combinación con mezclas de acetonitrilo/agua o de metanol/agua, las cuales se podrían modificar con ácido o base según sea necesario. En algunos casos, los compuestos se pueden purificar por medio de HPLC preparativa utilizando por ejemplo un autopurificador Waters equipado con un detector de matriz de diodos y/o un espectrómetro de masas de ionización por electropulverización en línea en combinación con una columna de fase inversa preenvasada adecuada y eluyentes tales como gradientes de agua y acetonitrilo los cuales pueden contener aditivos tales como ácido trifluoroacético, ácido fórmico o amoníaco acuoso.

Los compuestos se analizaron y caracterizaron por medio de los siguientes procedimientos analíticos basados en HPLC para determinar el tiempo de retención y el espectro de masas característicos:

Compuestos de Ejemplo

Procedimiento 1:Instrumento: Waters Acquity UPLCMS SingleQuad; Columna: Acquity UPLC BEH C18 1,7 |jm, 50x2,1mm; eluyente A: agua 0,1 vol % ácido fórmico (99%), eluyente B: MeCN; gradiente: 0-1,6min 1-99% B, 1,6-2,0min 99% B; flujo 0,8 ml/min; temperatura: 60°C; escaneo DAD: 210-400 nm.

Procedimiento 2:Instrumento: Waters Acquity UPLCMS SingleQuad; Columna: Acquity UPLC BEH C18 1,7 jm , 50x2,1mm; eluyente A: agua 0,1 vol-% ácido fórmico (99%), eluyente B: MeCN; gradiente: 0-1,7min 1-45% B, 1,7-1,72min 45-99% B, 1,72-2,0min 99% B; flujo 0,8 ml/min; temperatura: 60°C; ELSD.

Procedimiento 3:Instrumento: Agilent 1290 UPLCMS 6230 TOF; columna: BEH C 18 1,7 jm , 50x2,1mm; Eluyente A: agua 0,05 % ácido fórmico (99%); Eluyente B: MeCN 0,05 % ácido fórmico (99%); gradiente: 0- 1,7 2-90% B, 1,7-2,0 90% B; flujo 1,2 ml/min; temperatura: 60°C; escaneo DAD: 190-400 nm.

Procedimiento 4:Instrumento: Waters Acquity UPLCMS SingleQuad; Columna: Acquity UPLC BEH C18 1,7 jm , 50x2,1mm; eluyente A: agua 0,2 vol % amoníaco acuoso (32%), eluyente B: MeCN; gradiente: 0-1,6min 1- 99% B, 1,6-2,0min 99% B; flujo 0,8 ml/min; temperatura: 60°C; escaneo DAD: 210-400 nm.

Procedimiento 5:Instrumento: Waters Acquity UPLCMS SingleQuad; Columna: Acquity UPLC BEH C18 1,7 jm , 50x2,1mm; eluyente A: agua 0,1 vol-% ácido fórmico (99%), eluyente B: MeCN; gradiente: 0-1,7min 1-45% B, 1,7-1,72min 45-99% B, 1,72-2,0min 99% B; flujo 0,8 ml/min; temperatura: 60°C; ELSD.

Procedimiento 6:Instrumento: Waters Acquity UPLCMS SingleQuad; Columna: Acquity UPLC BEH C18 1,7 jm , 50x2,1mm; eluyente A: agua 0,2 vol-% amoníaco acuoso (32%), eluyente B: MeCN; gradiente: 0-1,7min 1-45% B, 1,7-1,72min 45-99% B, 1,72-2,0min 99% B; flujo 0,8 ml/min; temperatura: 60°C; ELSD.

Procedimiento 7:Tipo de instrumento de HPLC: SHIMADZU LC-20AD; columna: Kinetex C18 LC Columna 4,6X50mm,5um; fase móvil A: 0,0375% TFA en agua (v/v), B: 0,01875% TFA en MeCN (v/v); gradiente: 0,0min 0% B ^ 4,2min 60% B ^ 5,3min 60% B ^ 5,31min 0% B ^ 6,0min 0% B; tasa de flujo: 1,5 ml/min; temperatura del horno: 50°C; detección UV: 220 nm & 254 nm & 215 nm.

Procedimiento 8:Tipo de instrumento de MS: SHIMADZU LCMS-2020; Kinetex EVO C18 2,1X30mm,5um; fase móvil A: 0,0375% TFA en agua (v/v), B: 0,01875% TFA en MeCN (v/v); gradiente: 0,0min 5% B ^ 0,8min 95% B ^ 1,2min 95% B ^ 1,21min 5% B ^ 1,55min 5% B; tasa de flujo: 1,5 ml/min; temperatura del horno: 50°C; detección UV: 220 nm & 254 nm.

Procedimiento 9:Tipo de instrumento de MS: SHIMADZU LCMS-2020; columna: Kinetex EVO C18 2,1X30mm,5um; fase móvil A: 0,025% NH<3>H<2>O en agua (v/v) , B: MeCN; gradiente: 0,0min 5% B ^ 0,8min 95% B ^ 1,2min 95% B ^ 1,21min 5% B ^ 1,55min 5% B; tasa de flujo: 1,5 ml/min; temperatura del horno: 40°C; detección UV: 220 nm & 254 nm.

Procedimiento 10:Tipo de instrumento de MS: SHIMADZU LC-20AB; columna: Kinetex EVO C18 2,1X30mm,5um; fase móvil A: 0,0375% TFA en agua (v/v), B: 0,01875% TFA en MeCN (v/v); gradiente: 0,0min 5% B ^ 0,8min 95% B ^ 1,20min 95% B ^ 1,21min 5% B ^ 1,55min 5% B; tasa de flujo: 1,5 ml/min; temperatura del horno: 50°C; detección UV: 220 nm & 254 nm.

Procedimiento 11:Tipo de instrumento de MS: SHIMADZU LCMS-2020; Kinetex EVO C18 2,1X30mm,5um; fase móvil A: 0,0375% TFA en agua (v/v), B: 0,01875% TFA en MeCN (v/v); gradiente: 0,0min 5% B ^ 0,8min 95% B ^ 1,2min 95% B ^ 1,21min 5% B ^ 1,55min 5% B; tasa de flujo: 1,5 ml/min; temperatura del horno: 50°C; detección UV: 220 nm & 254 nm.

Procedimiento 12:Tipo de instrumento de MS: SHIMADZU LCMS-2020; columna: Kinetex EVO C18 2,1X30mm,5um; fase móvil A: 0,025% N H 3H 2O en agua (v/v) , B: MeCN; gradiente: 0,0min 5% B ^ 0,8min 95% B^- 1,2min 95% B^- 1,21min 5% B^- 1,5min 5% B; tasa de flujo: 1,5 ml/min; temperatura del horno: 40°C; detección UV: 220 nm & 254 nm.

Procedimiento 13:Instrumento: SHIMADZU LCMS-2020 SingleQuad; Columna: Chromolith@Flash RP-18E 25-2 MM; eluyente A: agua 0,0375 vol % TFA, eluyente B: MeCN 0,01875 vol % TFA; gradiente: 0-0,8min, 5-95% B, 0,8-1,2min 95% B; flujo 1,5 ml/min; temperatura: 50°C; DAD: 220 nm & 254 nm.

Intermediario 1

3-[2-(4-etoxifenil)etoxi]-2-hidroxipropanoato de metilo

Se añadió 2-(4-Etoxifenil)etan-1-ol (2,99 g, 18,0 mmol, [702-23-8]) a un matraz de reacción de 5 ml, luego se añadió oxiran-2-carboxilato de metilo (1,8 ml, 22 mmol; [4538-50-5]), seguido por perclorato de magnesio (1,11 g, 4,99 mmol; [10034-81-8]). El matraz se selló y se agitó durante 4d a 50°C, luego de lo cual se añadió D<c>M, y la mezcla se lavó dos veces con NaCl (ac. sat.), la fase orgánica se secó sobre Na<2>SO<4>, la mezcla se filtró y se concentró bajo presión reducida, produciendo el compuesto del título como un aceite (Intermediario 1, 4,11 g, 85 % de rendimiento).

LC-MS (Procedimiento 2): Tr= 1,01min; MS (ESIpos): m/z = 286 [M+H]+.

1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 1,30 (t, J=6,97 Hz, 3H), 2,70 (t, J=6,97 Hz, 2H), 3,51 - 3,64 (m, 7H), 3,97 (c, J=6,84 Hz, 3H), 4,14 -4,25 (m, 1H), 5,54 (d, J=6,08 Hz, 1H), 6,76 -6 ,87 (m, 2H), 7,02 -7 ,15 (m, 2 H).Intermediario 2

Paso 1

(2SR,3RS)-3-{4-[2-(2-etoxietoxi)etoxi]fenil}oxiran-2-carboxilato de terc-butilo

En un matraz de tres bocas equipado con agitador mecánico y termómetro 4-[2-(2-etoxietoxi)etoxi]benzaldehído (30,0 g, 126 mmol, [117420-31-2]) se disolvió en THF (670 ml). La mezcla se enfrió hasta 0°C y se añadió hidruro de sodio (6,55 g, 60 % en aceite mineral, 164 mmol).(atención: ¡se produjo una fuerte formación de espuma!).Después de 10min, comenzó la adición gota a gota de cloro-acetato de terc-butilo (24 ml, 97 % de pureza, 160 mmol; [107-59-5]) en THF (60 ml). Luego de completar la adición, la mezcla se dejó calentar hasta TA y se agitó durante la noche. La reacción se inactivó mediante la adición cuidadosa de agua y se extrajo con EtOAc. La fase orgánica se secó y se concentró bajo presión reducida para proporcionar 50,4 g (>100%, conteniendo aceite mineral) del compuesto del título como aceite naranja. El material se utilizó como tal en el paso siguiente.

LC-MS (Procedimiento 1): Tr= 1,35min; MS (ESIpos): m/z = 353,4 [M+H]+.

Se caracterizó una muestra de un experimento anterior:

1H RMN (DMSO-da, 400 MHz): 8 (ppm) 7,25-7,31 (m, 2H), 6,90-6,97 (m, 2H), 4,06-4,11 (m, 2H), 4,02 (d,J= 2,0 Hz, 1H), 3,70-3,75 (m, 2H), 3,67 (d,J= 2,0 Hz, 1H), 3,54-3,59 (m, 2H), 3,47-3,51 (m, 2H), 3,42 (c,J= 7,1 Hz, 2H), 1,46 (s, 8H), 1,09 (t,J= 7,0 Hz, 3H).

Paso 2

terc-butil-3-{4-[2-(2-etoxietoxi)etoxi]fenil}-2-hidroxipropanoato

(2SR,3RS)-3-{4-[2-(2-etoxietoxi)etoxi]fenil}oxiran-2-carboxilato de terc-butilo (50,4 g, 143 mmol) se disolvió en EtOAc (1000 ml) y se añadió paladio (6,01 g, 10 % sobre C, 5,65 mmol; [7440-05-3]). La mezcla se hidrogenó bajo TA y presión ambiente durante 4h, luego de lo cual se había consumido 3,06 l H<2>(0,96 eq). El solvente se eliminó bajo presión reducida, el residuo se recogió en la cantidad mínima de DCM y se sometió a cromatografía (SiO<2>, 750 g SNAP-ULTRA, 250 ml/min, 254 nm, A = n-hexano, B = EtOAc, 0%B 20 CV, 0% a 50%B en 8CV, 50%B 1,7CV, 50% a100%B en 1CV, 100%B 2,5CV) para proporcionar el compuestoIntermediario 2del título, (32,9 g, 65% de rendimiento) como un aceite amarillo claro.

LC-MS (Procedimiento 1): Tr= 1,24min; MS (ESIpos): m/z = 372,5 [M+NH<4>]+.

1H RMN (CDCla, 400 MHz): 8 (ppm) 7,13-7,18 (m, 2H), 6,82-6,87 (m, 2H), 4,28 (td,J= 6,1, 4,8 Hz, 1H), 4,09 4,14 (m, 2H), 3,83-3,89 (m, 2H), 3,70-3,74 (m, 2H), 3,60-3,64 (m, 2H), 3,54 (c,J= 7,1 Hz, 2H), 3,02 (dd,J= 14,2, 4,8 Hz, 1H), 2,88 (dd,J= 14,2, 6,3 Hz, 1H), 2,82 (d,J= 5,8 Hz, 1H), 1,44 (s, 9H), 1,22 (t,J= 7,0 Hz, 3H). La preparación se repitió varias veces de la misma manera con resultados similares.

39,0 g (disueltos en 185 ml de CHCh) de 3-{4-[2-(2-etoxietoxi)etoxi]fenil}-2-hidroxipropanoato de terc-butilo racémico,Intermediario 2, se sometieron a cromatografía (inyección de 37 x 5 ml) sobre una fase quiral (PrepCon Labomatic HPLC-1; Chiralpak IG 5p, 250x50; A = MTBE; 100%A; 100 ml/min; 25°C; 280 nm), produciendo elEnantiómero 1y elEnantiómero 2.

Intermediario 3

(2R)-3-{4-[2-(2-etoxietoxi)etoxi]fenil}-2-hidroxipropanoato de terc-butilo

Enantiómero 1 (Intermediario 2 - Paso 2): 18,2 g (47%), (2R)-3-{4-[2-(2-etoxietoxi)etoxi]fenil}-2-hidroxipropanoato de terc-butilo (Intermediario 3).

LCMS: (Chiralpak IG 3p, 100x4,6; MTBE 0,1 vol % DEA; 1,4 ml/min; 25°C; 280 nm): Tr = 2,20min (98,5%). e.e. >99%.

Rotación Específica: ao20 = 8,38° /-0,28° (c=1, MeOH).

1H RMN (CDCla, 400 MHz): 5 (ppm) 7,12-7,17 (m, 2H), 6,82-6,86 (m, 2H), 4,27 (td,J =6,1, 4,8 Hz, 1H), 4,09 4,13 (m, 2H), 3,82-3,87 (m, 2H), 3,70-3,74 (m, 2H), 3,59-3,63 (m, 2H), 3,54 (c,J= 6,9 Hz, 2H), 3,02 (dd,J= 14,1,4,7 Hz, 1H), 2,87 (dd,J= 13,9, 6,3 Hz, 1H), 2,80 (d,J= 5,8 Hz, 1H), 1,44 (s, 9H), 1,21 (t,J= 7,1 Hz, 3H). En comparación con muchos ejemplos de la bibliografía, al enantiómero con rotación óptica positiva se le asignó la estereoquímica R.

Intermediario 4

(2S)-3-{4-[2-(2-etoxietoxi)etoxi]fenil}-2-hidroxipropanoato de terc-butilo

Enantiómero 2(Intermediario 2 - Paso 2): 16,9 g (43%), (2S)-3-{4-[2-(2-etoxietoxi)etoxi]fenil}-2-hidroxipropanoato de terc-butilo (Intermediario 4).

LCMS (Chiralpak IG 3p, 100x4,6; MTBE 0,1 vol % DEA; 1,4 ml/min; 25°C; 280 nm): Tr = 3,86min (98,8%). e.e. = 99%.

Rotación Específica: ao20 = -9,08° /-0,11° (c=1, MeOH).

1H RMN (CDCla, 400 MHz): 5 (ppm) 7,13-7,18 (m, 2H), 6,83-6,87 (m, 2H), 4,28 (td,J= 6,1, 4,8 Hz, 1H), 4,10 4,14 (m, 2H), 3,83-3,89 (m, 2H), 3,70-3,74 (m, 2H), 3,60-3,64 (m, 2H), 3,55 (c,J= 7,0 Hz, 2H), 3,03 (dd,J= 14,2, 4,8 Hz, 1H), 2,88 (dd,J= 14,2, 6,3 Hz, 1H), 2,82 (d,J= 5,8 Hz, 1H), 1,45 (s, 9H), 1,22 (t,J= 7,0 Hz, 3H). En comparación con muchos ejemplos de la bibliografía, al enantiómero con rotación óptica negativa se le asignó la estereoquímica S.

Intermediario 5

Paso 1

(2SR,3RS)-3-{4-[2-(2-etoxietoxi)etoxi]fenil}oxiran-2-carboxilato de etilo

Hidruro de sodio (2,4 g, 60 % de pureza, 60 mmol; [7646-69-7]),) en THF (200 ml), se enfrió hasta 0°C y cloroacetato de etilo (6,4 ml, 60 mmol, [105-36-2]) se añadió gota a gota bajo N<2>. Se añadió 4-[2-(2-etoxietoxi)etoxi]benzaldehído (9,55 g, 40,1 mmol, [117420-31-2]) disuelto en THF (60 ml) y la reacción se dejó calentar hasta TA durante la noche. La mezcla luego se añadió a una mezcla de hielo-agua, y la fase acuosa se extrajo tres veces con EtOAc, la fase orgánica se lavó con agua y se secó sobre Na<2>SO<4>. El producto se purificó utilizando cromatografía (S O<2>, cartucho SNAP Ultra de 100g de Biotage, con elución en gradiente (A = hexano, B = EtOAc, 0%B a 50%, sobre 20CV) produciendo el compuesto racémico del título (4 g, 30% de rendimiento).

LC-MS (Procedimiento 3): Tr = 1,06min; MS (ESlpos): m/z = 325,2 [M+H]+.

1H RMN (DMSO-d6, 400 MHz): 5 (ppm) 7,27-7,31 (m, 2H), 6,92-6,97 (m, 2H), 4,16-4,22 (m, 2H), 4,07-4,12 (m, 3H), 3,81 (d,J= 2,0 Hz, 1H), 3,69-3,76 (m, 2H), 3,54-3,59 (m, 2H), 3,47-3,50 (m, 2H), 3,42 (c,J= 6,8 Hz, 2H), 1,24 (t,J= 7,1 Hz, 3H), 1,09 (t,J= 7,0 Hz, 3H).

Paso 2

etil-3-{4-[2-(2-etoxietoxi)etoxi]fenil}-2-hidroxipropanoato

Etil-3-{4-[2-(2-etoxietoxi)etoxi]fenil}oxiran-2-carboxilato (4,07 g, 12,5 mmol) se disolvió en EtOH (100 ml), se añadió Pd/C (500 mg, 10 % de pureza, 470 |jmol; [7440-05-3]), y la mezcla se cicló entre vacío y N<2>tres veces. La mezcla luego se hidrogenó utilizando 1 atm de H<2>. Después de 4h, se añadió Pd/C (300 mg, 10 % de pureza, 282 jm ol) adicional y la mezcla se agitó nuevamente bajo H<2>durante la noche. La mezcla luego se filtró a través de un filtro de fibra de vidrio y se concentró bajo presión reducida. El producto se purificó por medio de cromatografía (S O<2>, Biotage, cartucho SNAP Ultra de 50g, A = Hexano, B = EtoAc, 0%B a 100%B), produciendo el compuesto del título (Intermediario 5, 2,44 g, 60% de rendimiento).

LC-MS (Procedimiento 4): Tr = 1,02min; MS (ESlpos): m/z = 327,3 [M+H]+.

1H RMN (400 MHz, DMSO-da) 8 ppm 1,09 (t, J=6,97 Hz, 3H), 1,13 (t, J=7,10 Hz, 3H), 2,72 -2 ,79 (m, 1H), 2,82 - 2,88 (m, 1H), 3,43 (c, J=7,01 Hz, 2H), 3,47 - 3,50 (m, 2H), 3,55 - 3,58 (m, 2H), 3,68 - 3,73 (m, 2H), 4,00 - 4,08 (m, 3H), 5,48 (d, J=6,08 Hz, 1H), 6,80 -6 ,85 (m, 2H), 7,08 - 7 , 13 (m, 2 H).

Intermediario 6

Paso 1

4-(2-etoxietoxi)benzaldehído

4-Fluorobenzaldehído (5,00 g, 40,3 mmol; [459-57-4]), 2-etoxietan-1-ol (12 ml, 120 mmol; [110-80-5]) y carbonato de cesio (15,8 g, 48,3 mmol; [534-17-8]) se añadieron a un matraz de reacción que contenía DMF (100 ml), y la mezcla se agitó a 70°C hasta que el material de partida 4-fluorobenzaldehído se consumió (por medio de monitoreo con LCMS). Se añadió agua, y la fase acuosa se extrajo con MTBE, la fase orgánica se lavó con NaCl (ac. sat.), se secó sobre Na<2>SO<4>, se filtró y el solvente se eliminó bajo presión reducida. Se añadió N-Heptano al producto crudo, luego de lo cual éste se eliminó bajo presión reducida, seguido por cromatografía (S O<2>, columna Ultra de 100 g de Biotage, A = Hexano, B = EtoAc, 0%B a 50%B) produciendo el compuesto del título como un sólido cristalino amarillo pálido (6,83 g, 83 % de rendimiento).

LC-MS (Procedimiento 4): Tr = 0,95min; MS (ESlpos): m/z = 195 [M+H]+.

1H RMN (DMSO-d6, 400 MHz): 8 (ppm) 9,87 (s, 1H), 7,83-7,88 (m, 2H), 7,11-7,17 (m, 2H), 4,19-4,23 (m, 2H), 3,70-3,74 (m, 2H), 3,50 (c, J = 7,1 Hz, 2H), 1,12 (t, J = 7,1 Hz, 3H).

Paso 2

etil-3-[4-(2-etoxietoxi)fenil]oxiran-2-carboxilato

Hidruro de sodio (2,1 g, 60% en aceite mineral, 52 mmol), se añadió a THF (200 ml), y cloroacetato de etilo (5,6 ml, 53 mmol) se añadió gota a gota bajo N<2>. 4-(2-etoxietoxi)benzaldehído (6,83 g, 35,2 mmol) luego se añadió en THF (30 ml) y la reacción se dejó calentar hasta TA y se agitó durante 3d. La mezcla luego se añadió a una mezcla de agua helada, y la capa acuosa se extrajo tres veces con EtOAc. El producto luego se purificó por medio de cromatografía (SÍO<2>, Biotage, columna Ultra de 100g, A = Hexano, B = EtOAc, 0%B a 50%B), produciendo el compuesto racémico del título (6,60 g, 64 % de rendimiento).

LC-MS (Procedimiento 4): Tr= 1,14min; MS (ESIpos): m/z = 281,3 [M+H]+.

1H RMN (DMSO-da, 400 MHz): 8 (ppm) 7,27-7,31 (m, 2H), 6,92-6,97 (m, 2H), 4,15-4,24 (m, 2H), 4,06-4,10 (m, 3H), 3,81 (d,J= 2,0 Hz, 1H), 3,65-3,71 (m, 2H), 3,49 (c,J= 7,0 Hz, 2H), 1,24 (t,J= 7,1 Hz, 3H), 1,12 (t,J= 7,1 Hz, 3H).

Paso 3

3-[4-(2-etoxietoxi)fenil]-2-hidroxipropanoato de etilo

Se disolvió etil-3-[4-(2-etoxietoxi)fenil]oxiran-2-carboxilato (6,60 g, 23,5 mmol) en etanol (110 ml), se añadió paladio (607 mg, 10 % sobre carbono, 571 pmol) y la mezcla se hidrogenó con 1 atm de H<2>durante la noche. La mezcla luego se filtró a través de un filtro de fibra de vidrio y se concentró hasta la sequedad bajo presión reducida. La purificación por medio de cromatografía (S O<2>, Biotage Ultra: columna de 50g, A = Hexano, B = EtOAc, 0%B a 50%B) produjo el compuesto del título,Intermediario 6, como un racemato (5,39 g, 77 % de rendimiento).

1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 0,94 - 1,23 (m, 7H), 2,72 - 2,88 (m, 2H), 3,46 - 3,52 (m, 2H), 3,64 - 3,70 (m, 2H), 3,95 -4 ,18 (m, 5H), 5,48 (d, J=6,08 Hz, 1H), 6,81 -6,91 (m, 2H), 7,08 - 7 ,13 (m, 2H).

Intermediario 7

Paso 1

4-{2-[2-(2-etoxietoxi)etoxi]etoxi}benzaldehído

4-Fluorobenzaldehído (9,2 ml, 85 mmol; [459-57-4]), 2-[2-(2-etoxietoxi)etoxi]etan-1-ol (24 ml, 140 mmol, [111 90-0]), y carbonato de cesio (33,4 g, 102 mmol; [534-17-8]) se calentaron a 70°C durante la noche. La mezcla luego se añadió a agua y la capa acuosa se extrajo tres veces con MTBE, las capas orgánicas combinadas luego se lavaron con agua y se secaron sobre Na<2>SO<4>, produciendo el compuesto del título 20,7 g (86 % de rendimiento).

LC-MS (Procedimiento 6): Tr = 0,99min; MS (ESIpos): m/z = 283,2 [M+H]+.

1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 1,08 (t, J=7,10 Hz, 3H), 3,38 - 3,60 (m, 11H), 3,72 -3 ,83 (m, 2H), 4,17 -4,26 (m, 2H), 7,11 -7 ,18 (m, 2H), 7,83 -7,89 (m, 2H), 9,87 (s, 1 H).

Paso 2

etil-3-(4-{2-[2-(2-etoxietoxi)etoxi]etoxi}fenil)oxiran-2-carboxilato

Hidruro de sodio (2,4 g, 60% en aceite mineral, 60 mmol) se añadió a THF (270 ml), la mezcla se enfrió hasta 0°C y se añadió gota a gota cloroacetato de etilo (6,3 ml, 60 mmol). La solución se calentó hasta 15°C y 4-{2-[2-(2-etoxietoxi)etoxi]etoxi}benzaldehído (11,3 g, 40,0 mmol) se añadió gota a gota en una pequeña cantidad de THF. La mezcla se dejó calentar hasta TA y se agitó durante la noche, luego ésta se añadió a una mezcla de hielo/agua, y la fase acuosa se extrajo tres veces con MTBE, la fase orgánica se lavó con NaCl (ac. sat.), se secó sobre Na<2>SO<4>, se filtró y se evaporó hasta la sequedad. La purificación a través de cromatografía (SiO<2>, columna Ultra de 100g de Biotage, A = Hexano, B = EtOAc, 0%B a 50%B) produjo el compuesto racémico del título (3,79 g, 24 % de rendimiento).

LC-MS (Procedimiento 4): Tr = 1,18min; MS (ESIpos): m/z = 369,1 [M+H]+.

1H RMN (DMSO-d6, 400 MHz): 8 (ppm) 7,26-7,31 (m, 2H), 6,92-6,97 (m, 2H), 4,14-4,23 (m, 2H), 4,05-4,11 (m, 3H), 3,80 (d,J= 2,0 Hz, 1H), 3,70-3,75 (m, 2H), 3,55-3,59 (m, 2H), 3,47-3,55 (m, 4H), 3,38-3,47 (m, 2H), 3,41 (c,J= 7,0 Hz, 2H), 1,24 (t,J= 7,1 Hz, 3H), 1,08 (t,J= 7,0 Hz, 3H).

Paso 3

3-(4-{2-[2-(2-etoxietoxi)etoxi]etoxi}fenil)-2-hidroxipropanoato de etilo

Se disolvió etil-3-(4-{2-[2-(2-etoxietoxi)etoxi]etoxi}fenil)oxiran-2-carboxilato (3,79 g, 10,3 mmol) en etanol (49 ml), se añadió paladio (381 mg, 10% sobre carbono, 358 pmol; [7440-05-3]) y la mezcla se hidrogenó durante la noche a TA y a presión ambiente. La mezcla de reacción luego se filtró a través de un filtro de fibra de vidrio y se concentró hasta la sequedad. La purificación a través de cromatografía (SiO<2>, Biotage Ultra: 50g / A = Hexano, B = EtOAc, 0%B a 50%B) produjo el compuesto del título,Intermediario 7, (2,34 g, 58 % de rendimiento).

LC-MS (Procedimiento 4): Tr= 1,04min; MS (ESIpos): m/z = 371,4 [M+H]+.

1H RMN (DMSO-d6, 400 MHz): 8 (ppm) 7,10 (d,J= 7,5 Hz, 2H), 6,80-6,87 (m, 2H), 5,48 (d,J= 6,1 Hz, 1H), 4,15 (dt,J= 7,9, 5,7 Hz, 1H), 4,00-4,07 (m, 4H), 3,69-3,74 (m, 2H), 3,56-3,59 (m, 2H), 3,49-3,55 (m, 4H), 3,44 3,48 (m, 2H), 3,41 (c,J= 7,1 Hz, 2H), 2,85 (dd,J= 13,7, 5,3 Hz, 1H), 2,75 (dd,J= 13,7, 7,6 Hz, 1H), 1,13 (t,J= 7,1 Hz, 3H), 1,09 (t,J= 7,0 Hz, 3H).

Intermediario 8

Paso 1

terc-butil-3-(4-{2-[2-(2-etoxietoxi)etoxi]etoxi}fenil)oxiran-2-carboxilato

Se añadió a un matraz 4-{2-[2-(2-etoxietoxi)etoxi]etoxi}benzaldehído (Intermediario 7 - Paso 1,7,50 g, 26,6 mmol), seguido por THF (300 ml), e hidruro de sodio (1,49 g, 60 % en aceite mineral, 37,2 mmol; [7646-69-7]) bajo N<2>. La mezcla se agitó a TA durante 5min y luego se añadió cloroacetato de terc-butilo puro (5,0 ml, 35 mmol) a 50 pl/min a TA con la reacción agitada a 250 rpm durante la noche. Se añadió con precaución agua (20 ml), y la mezcla se extrajo con MTBE (2 x 50 ml), la fase orgánica se secó sobre Na<2>SO<4>y el solvente se eliminó bajo presión reducida produciendo el compuesto racémico (11,1 g, 105 % de rendimiento - conteniendo aceite mineral).

LC-MS (Procedimiento 4): Tr = 1,33min; MS (ESIpos): m/z = 419,3 [M+Na]+.

1H RMN (DMSO-da, 400 MHz): 5 (ppm) 7,25-7,32 (m, 2H), 6,91-6,97 (m, 2H), 4,05-4,12 (m, 2H), 4,02 (d,J =1,8 Hz, 1H), 3,71-3,75 (m, 2H), 3,67 (d,J= 1,8 Hz, 1H), 3,55-3,59 (m, 2H), 3,48-3,55 (m, 4H), 3,44-3,47 (m, 2H), 3,41 (c,J= 7,0 Hz, 2H), 1,46 (s, 9H), 1,08 (t,J= 7,1 Hz, 3H).

La estereoquímica trans se asignó de acuerdo con la bibliografía anterior (por ejemplo Tetrahedron 2006, 62, 10255-10270, Chemical & Pharmaceutical Bulletin (1995), 43(10), 1821-3) y las constantes de acoplamiento (1,7 - 2 ,0 Hz) observadas para los protones epóxido.

Paso 2

terc-butil-3-(4-{2-[2-(2-etoxietoxi)etoxi]etoxi}fenil)oxiran-2-carboxilato (2,6 g disueltos en 20 x 0,5 ml inyecciones de 10 ml de DCM/MeOH) se separó en sus componentes enantioméricos a través de HPLC quiral (PrepCon Labomatic HPLC-3; YMC Cellulose SC 5|j, 250x50; A = hexano 0,1 vol % DEA; B = etanol 0,1 vol % DEA; 20%B; 120 ml/min; 25°C; 254 nm).

La pureza enantiomérica se determinó utilizando el siguiente procedimiento (Waters Alliance 2695; YMC Cellulose SC 3 j, 100x4,6; A = hexano 0,1 vol % DEA; B = etanol; 20%B; 1,4 ml/min; 25°C; 254 nm), Enantiómero 1: Tr = 2,68min, enantiómero 2: Tr = 3,29min.

Ambos enantiómeros se obtuvieron después de la concentración de las fracciones combinadas del producto, y de la eliminación del solvente bajo presión reducida.

(2R,3S)-3-(4-{2-[2-(2-etoxietoxi)etoxi]etoxi}fenil)oxiran-2-carboxilato de terc-butilo

Enantiómero 1 (930 mg, 100% e.e.).

HPLC: Tr = 2,68min.

Rotación específica: 124° (c=1, MeOH, 20°C, 589 nm).

1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) 5 ppm 1,08 (t, 3H), 1,46 (s, 8H), 3,38 - 3,55 (m, 8H), 3,55 - 3,59 (m, 2H), 3,67 (d, 1H), 3,71 - 3,75 (m, 2H), 4,02 (d, 1H), 4,07 -4,11 (m, 2H), 6,87 -7,01 (m, 2H), 7,25 -7 ,31 (m, 2H).

(2S,3R)-3-(4-{2-[2-(2-etoxietoxi)etoxi]etoxi}fenil)oxiran-2-carboxilato de terc-butilo

Enantiómero 2 (1040 mg, 100% e.e.)

LC-MS: Tr = 3,29min.

Rotación específica: -110° (c=1, MeOH, 20°C, 589 nm).

1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) 5 ppm 1,08 (t, 3H), 1,46 (s, 8H), 3,38 - 3,55 (m, 8H), 3,55 - 3,59 (m, 2H), 3,67 (d, 1H), 3,71 - 3,75 (m, 2H), 4,02 (d, 1H), 4,07 -4,11 (m, 2H), 6,87 -7,01 (m, 2H), 7,25 -7 ,31 (m, 2 H).

Paso 3

(2R)-3-(4-{2-[2-(2-etoxietoxi)etoxi]etoxi}fenil)-2-hidroxipropanoato de terc-butilo

(2R,3S)-3-(4-{2-[2-(2-etoxietoxi)etoxi]etoxi}fenil)oxiran-2-carboxilato de terc-butilo (Enantiómero 1, Paso 2, 930 mg, 2,35 mmol) se disolvió en EtOAc (11 ml), se añadió paladio (87,0 mg, 10 % sobre carbono, 81,7 |jmol;

[7440-05-3]), la mezcla se cicló entre vacío y N<2>tres veces, luego de lo cual ésta se colocó bajo una atmósfera de H<2>(1 atm) durante la noche. La mezcla se filtró a través de un filtro de fibra de vidrio y se concentró hasta la sequedad bajo presión reducida, produciendo 812 mg (87%) del compuesto del título,Intermediario 8. La estereoquímica del alcohol se asigna como(R)basándose en la rotación óptica positiva con referencia a la serie de ejemplos de la bibliografía estrechamente relacionados.

Rotación Específica: 7,5° (c=1, MeOH, 20°C, 589 nm).

LC-MS (Procedimiento 4): Tr = 1,20min; MS (ESlpos): m/z = 416,2 [M+NH<4>]+.

1H RMN (400 MHz, DMSO-da) 8 ppm 1,09 (t, 3H), 1,34 (s, 9H), 2,70 - 2,85 (m, 2H), 3,39 - 3,59 (m, 10H), 3,68 - 3,75 (m, 2H), 4,01 -4 ,07 (m, 3H), 5,31 (d, 1H), 6,81 -6 ,85 (m, 2H), 7,09 -7 ,14 (m, 2 H).

Intermediario 9

Paso 1

(2S)-3-(4-{2-[2-(2-etoxietoxi)etoxi]etoxi}fenil)-2-hidroxipropanoato de terc-butilo

(2S,3R)-3-(4-{2-[2-(2-etoxietoxi)etoxi]etoxi}fenil)oxiran-2-carboxilato de terc-butilo,Enantiómero 2, Paso 2 del Intermediario 8) (1,04 g, 2,62 mmol) se disolvió en EtOAc (13 ml), se añadió paladio (97,2 mg, 10 % sobre carbono, 91,4 jmol; [7440-05-3]) y la mezcla se cicló entre N<2>y vacío tres veces antes de que la mezcla se hidrogenara bajo 1 atm de H<2>durante la noche. La mezcla se filtró a través de un filtro de fibra de vidrio y se concentró hasta la sequedad bajo presión reducida, produciendo el compuesto del título (Intermediario 9, 749 mg, 72%). La estereoquímica del alcohol se asigna como (S) basándose en la rotación óptica negativa con referencia a la serie de ejemplos de la bibliografía estrechamente relacionados.

Rotación Específica: -6,8° (c=1, MeOH, 20°C, 589 nm).

LC-MS (Procedimiento 4): Tr = 1,20min; MS (ESlpos): m/z = 416,2 [M+NH<4>]+.

1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 1,09 (t, 3H), 1,17 (s, 1H), 1,34 (s, 9H), 2,52 - 2,55 (m, 1H), 2,70 - 2,85 (m, 2H), 3,39 - 3,59 (m, 10H), 3,68 - 3,75 (m, 2H), 4,00 - 4,07 (m, 3H), 5,31 (d, 1H), 6,80 - 6,86 (m, 2H), 7,09 -7,14 (m, 2 H).

Intermediario 10

Paso 1

metil-3-(4-butoxifenil)oxiran-2-carboxilato

Hidruro de sodio (5,05 g, 60% de pureza, 126,2 mmol), se añadió a THF (190 ml), la mezcla se enfrió hasta 0°C y bajo N<2>. Se añadió cloroacetato de metilo (3,7 ml, 42 mmol) y la mezcla se agitó durante 10min, luego de lo cual se añadió 4-butoxibenzaldehído (4,8 ml, 28 mmol [123-11-5]). Después de la reacción durante la noche, la mezcla se llevó hasta 0°C y se añadió HCl (0,5 M, ac.), seguido por la extracción de la mezcla con MTBE, el secado de la fase orgánica sobre Na<2>SO<4>, la filtración y la concentración bajo presión reducida, produciendo el compuesto racémico del título (9,80 g), el cual se utilizó en el paso siguiente sin purificación adicional.

LC-MS (Procedimiento 4): Tr= 1,33min; MS (ESlpos): m/z = 251,2 [M+H]+.

Paso 2

3-(4-butoxifenil)-2-hidroxipropanoato de metilo

3-(4-butoxifenil)oxiran-2-carboxilato de metilo (9,80 g, 27,4 mmol) se disolvió en etanol (130 ml), se añadió paladio (714 mg, 10 % sobre carbono, 671 pmol) y la mezcla se cicló entre N<2>y vacío tres veces antes de que la mezcla se hidrogenara bajo 1 atm de H<2>durante la noche. La mezcla se filtró a través de un filtro de fibra de vidrio y se concentró bajo presión reducida, con purificación utilizando cromatografía (S O<2>, Biotage, columna Ultra de 100g, A = Hexano, B = EtOAc, 0%B a 100%B) produciendo el compuesto del título (Intermediario 10,1,20 g, 17% de rendimiento calc, a partir del paso 1).

LC-MS (Procedimiento 4): Tr = 1,18min; MS (ESlpos): m/z = 270,2 [M+NH<4>]+.

1H RMN (DMSO-da, 400 MHz): 8 (ppm) 7,05-7,12 (m, 2H), 6,78-6,84 (m, 2H), 5,51 (d,J= 6,1 Hz, 1H), 4,17 (ddd,J= 7,9, 6,1, 5,1 Hz, 1H), 3,91 (t,J= 6,5 Hz, 2H), 3,59 (s, 3H), 2,86 (dd,J= 13,7, 5,1 Hz, 1H), 2,74 (dd,J= 13,7, 7,9 Hz, 1H), 1,63-1,71 (m, 2H), 1,36-1,48 (m, 2H), 0,92 (t,J= 7,4 Hz, 3H).

Intermediario 11

Paso 1

6-[2-(2-etoxietoxi)etoxi]piridin-3-carbaldehído

6-bromopiridin-3-carbaldehído (7,00 g, 37,6 mmol, [ 149806-06-4]), 2-(2-etoxietoxi) etanol (10 ml, 75 mmol, [111-90-0]) y carbonato de cesio (14,7 g, 45,2 mmol; [534-17-8]) se añadieron a un matraz de reacción y la mezcla se agitó durante la noche a 70°C. La mezcla se añadió a agua, luego se extrajo con MTBE (3x), las fases orgánicas combinadas se lavaron una vez con agua, se secaron sobre Na<2>SO<4>, se filtraron y se concentraron bajo presión reducida. La purificación por medio de cromatografía (S O<2>, Biotage, columna Ultra de 100g / A = Hexano, B = EtOAc, 0%B a 100%B) produjo el compuesto del título (6,17 g, 69 % de rendimiento).

1H RMN (DMSO-d6, 400 MHz): 8 (ppm) 9,96 (s, 1H), 8,75 (dd,J= 2,4, 0,6 Hz, 1H), 8,12 (dd,J= 8,7, 2,4 Hz, 1H), 7,01 (d,J= 8,9 Hz, 1H), 4,47-4,52 (m, 2H), 3,74-3,79 (m, 2H), 3,55-3,58 (m, 2H), 3,38-3,49 (m, 6H), 1,08 (t,J= 7,0 Hz, 3H).

Paso 2

terc-butil-3-{6-[2-(2-etoxietoxi)etoxi]piridin-3-il}oxiran-2-carboxilato

Se disolvió 6-[2-(2-etoxietoxi)etoxi]piridin-3-carbaldehído (6,17 g, 25,8 mmol) en THF (290 ml), y a TA bajo N<2>, se añadió en porciones hidruro de sodio (1,44 g, 60 % de pureza, 36,1 mmol; [7646-69-7]). La mezcla se agitó durante 5min, luego de lo cual se añadió gota a gota cloroacetato de terc-butilo (4,8 ml, 34 mmol). La reacción se agitó durante la noche, luego de lo cual ésta se añadió a una mezcla de hielo-agua, y la fase acuosa se extrajo con EtOAc (3 x), la fase orgánica se lavó con NaCl (ac. sat.), se secó sobre Na<2>SO<4>, se filtró y el solvente se eliminó bajo presión reducida. La purificación por medio de cromatografía (SiO<2>, Biotage, columna Ultra de 100g / A = Hexano, B = EtOAc, 0%B a 100%B) produjo el compuesto racémico del título (2,35 g, 23%).

LC-MS (Procedimiento 4): Tr = 1,25min; MS (ESIpos): m/z =354,3 [M+H]+.

1H RMN (DMSO-d6, 400 MHz):<8>(ppm) 8,25 (d,J= 2,3 Hz, 1H), 7,62 (dd,J=<8>,<6>, 2,5 Hz, 1H), 6,83 (d,J= 8,9 Hz, 1H), 4,35-4,38 (m, 2H), 4,11 (d,J= 1,8 Hz, 1H), 3,82 (d,J= 2,0 Hz, 1H), 3,72 (dd,J= 5,4, 3,9 Hz, 2H), 3,54-3,57 (m, 2H), 3,46-3,49 (m, 2H), 3,41 (c,J= 6,9 Hz, 2H), 1,46 (s, 9H), 1,08 (t,J= 7,1 Hz, 3H).

Paso 3

3-{6-[2-(2-etoxietoxi)etoxi]piridin-3-il}-2-hidroxipropanoato de terc-butilo

3-{6-[2-(2-etoxietoxi)etoxi]piridin-3-il}oxiran-2-carboxilato de terc-Butilo (2,35 g, 6,65 mmol) se disolvió en EtOAc (32 ml), se añadió paladio (247 mg, 10% sobre carbono, 232 pmol; [7440-05-3]) y la mezcla se cicló entre N<2>y vacío tres veces antes de que la mezcla se hidrogenara bajo 1 atm de H<2>durante la noche. La mezcla se filtró a través de un filtro de fibra de vidrio y se concentró hasta la sequedad bajo presión reducida produciendo el compuesto del título, (Intermediario 11, 2,13 g, 90%) con una pureza de aprox. 80% (H-RMN). LC-MS (Procedimiento 4): Tr = 1,11min; MS (ESIpos): m/z = 356,2 [M+H]+.

1H RMN (DMSO-d6, 400 MHz):<8>(ppm) 7,95 (d,J= 1,8 Hz, 1H), 7,58 (dd,J= 8,5, 2,4 Hz, 1H), 6,74 (d,J= 8,4 Hz, 1H), 4,29-4,34 (m, 2H), 4,08 (dd,J= 7,2, 5,7 Hz, 1H), 3,71 (dd,J= 5,3, 4,1 Hz, 2H), 3,38-3,57 (m,<6>H), 2,83 (dd,J= 13,9, 5,3 Hz, 1H), 2,75 (dd,J= 13,9, 7,4 Hz, 1H), 1,35 (s, 9H), 1,09 (t,J= 7,0 Hz, 3H).

Intermediario 12

Paso 1

(5R)-2,2-dimetil-5-(prop-2-en-1-il)-1,3-dioxolan-4-ona

A una solución de ácido (2R)-2-hidroxipent-4-enoico (35,0 g, 301 mmol, [413622-10-3]) en acetona (700 ml) se le añadieron p-tolueno sulfonato de piridinio (37,9 g, 151 mmol) y 2,2-dimetoxipropano (251 g, 2,41 mol) a temperatura ambiente. La mezcla se agitó a 60°C durante 3h. La mezcla se concentró para proporcionar un residuo. Éste se combinó con el residuo de un experimento idéntico (35 g). Los residuos combinados se diluyeron con EtOAc y se filtraron a través de una almohadilla de Celite. El filtrado se concentró para proporcionar un residuo. El residuo se purificó por medio de cromatografía en columna (SiO<2>,malla 1000, éter de petróleo: EtOAc = 1: 0, luego 20: 1) para proporcionar (5R)-5-alil-2,2-dimetil-1,3-dioxolan-4-ona (51,0 g, 327 mmol, 54%) como aceite amarillo.

<1>H RMN (400 MHz, DMSO-de): 8 [ppm] = 5,84-5,67 (m, 1H), 5,21-5,08 (m, 2H), 4,73-4,67 (m, 1H), 2,60-2,51 (m, 1H), 2,46-2,34 (m, 1H), 1,54 (s, 3H), 1,52 (s, 3H).

Paso 2

(5R)-5-[(2E)-3-{4-[2-(2-etoxietoxi)etoxi]fenil}prop-2-en-1-il]-2,2-dimetil-1,3-dioxolan-4-ona

Una mezcla de (5R)-2,2-dimetil-5-(prop-2-en-1-il)-1,3-dioxolan-4-ona (25,0 g, 160 mmol), 1-[2-(2-etoxietoxi)etoxi]-4-yodobenceno (53,8 g, 160 mmol, [2305345-75-7]), acetato de paladio(II) (3,59 g, 16,0 mmol), tri-2-tolilfosfina (4,87 g, 16,0 mmol) y DIPEA (70 ml, 400 mmol) en MeCN (500 ml) se agitó a 80°C durante 12h. La mezcla se concentró para proporcionar un residuo. Éste se combinó con los residuos de dos experimentos idénticos (25 g y 3 g). Los residuos combinados se diluyeron con EtOAc y se lavaron con NH<4>O (ac. sat.). La fase orgánica se lavó con NaCl (ac. sat.), se secó sobre Na<2>SO<4>anhidro se filtró y se concentró. El residuo se purificó por medio de cromatografía en columna ultrarrápida (S O<2>, éter de petróleo: EtOAc = 1: 0 a 10: 1, luego 10: 1) para proporcionar (5R)-5-[(2E)-3-{4-[2-(2-etoxietoxi)etoxi]fenil}prop-2-en-1-il]-2,2-dimetil-1,3-dioxolan-4-ona (64,0 g, 176 mmol, 73% ) como aceite amarillo.

LC-MS (Procedimiento 13): Tr = 0,951min; MS (ESlpos): m/z = 365,2 [M+H]+.

<1>H RMN (400 MHz, DMSO-de): 8 [ppm] = 7,32 (d,J= 8,8 Hz, 2H), 6,90 (d,J= 8,8 Hz, 2H), 6,46 (d,J= 16 Hz, 1H), 6,12-5,99 (m, 1H), 4,81-4,73 (m, 1H), 4,13-4,05 (m, 2H), 3,79-3,69 (m, 2H), 3,63-3,55 (m, 2H), 3,53-3,47 (m, 2H), 3,43 (c,J= 6,8 Hz, 2H), 2,78-2,65 (m, 1H), 2,60-2,52(m, 1H), 1,55 (s, 3H), 1,55 (s, 3H), 1,10 (t,J= 7,2 Hz, 3H).

Paso 3

(5R)-5-(3-{4-[2-(2-etoxietoxi)etoxi]fenil}propil)-2,2-dimetil-1,3-dioxolan-4-ona

A una solución de (5R)-5-[(2E)-3-{4-[2-(2-etoxietoxi)etoxi]fenil}prop-2-en-1-il]-2,2-dimetil-1,3-dioxolan-4-ona (59,0 g, 162 mmol) en THF (1,2 l) se le añadió paladio (2,9 g, 10% sobre carbono, 5,54 mmol) a TA. La mezcla se agitó a TA bajo atmósfera de H<2>(1,03 bar (15 psi)) durante 12h. La mezcla se filtró, y el filtrado se concentró para proporcionar el compuesto del título (60,0 g) como un aceite amarillo.

LC-MS (Procedimiento 13): Tr = 0,987min; MS (ESlpos): m/z = 367,1 [M+H]+.

Paso 4

(2R)-5-{4-[2-(2-etoxietoxi)etoxi]fenil}-2-hidroxipentanoato de metilo

A una solución de (5R)-5-(3-{4-[2-(2-etoxietoxi)etoxi]fenil}propil)-2,2-dimetil-1,3-dioxolan-4-ona (60,0 g, 164 mmol) en MeOH (600 ml) se le añadió ácido 4-toluenosulfónico (2,82 g, 16,4 mmol) a TA. La mezcla se agitó a TA durante 12h. La mezcla se combinó con un experimento anterior (5,2 g), se concentró y se diluyó con EtOAc. La fase orgánica se lavó con NaHCO<3>(ac. sat.) y NaCl (ac. sat.). La fase orgánica se secó sobre Na<2>SO<4>anhidro, se filtró y se concentró. El residuo se purificó por medio de columna de fase inversa (Agela HP1000; Welch Ultímate XB_C18 100*400mm 20-40 |jm; 200 ml/min; A = agua (0,1% ácido fórmico), B = MeCN; B%: 10%B-45B% en 35min, 50%B 20min; TA; UV 220/254 nm) para proporcionar el compuesto del título (Intermediario 12, 48,4 g, 142 mmol, 80%) como un aceite amarillo.

LC-MS (Procedimiento 13): Tr = 0,630min; MS (ESIpos): m/z = 341,3 [M+H]+.

LC-MS (Procedimiento 3): Tr = 1,00min (91% DAD); MS (ESIpos): m/z = 341 [M H]+.

HPLC quiral (Thermo Fisher UltiMate 3000; YMC Cellulose SB 3|j, 100x4,6; A = hexano 0,1 vol % DEA; B = etanol; 10%B; 1,4 ml/min; 25°C; 280 nm): Tr = 2,85min (4,94%), Tr = 3,57min (85,21%). e.e. = 89%.

Rotación Específica: « d<20>= -7,46° /- 0,58° (c=1, CHCh).

1H RMN (CDCL<3>, 400 MHz):<8>(ppm) 7,05-7,10 (m, 2H), 6,82-6,86 (m, 2H), 4,20 (ddd,J= 7,0, 5,7, 4,1 Hz, 1H), 4,12 (dd,J= 5,6, 4,3 Hz, 2H), 3,86 (dd,J= 5,1,4,1 Hz, 2H), 3,77 (s, 3H), 3,71-3,74 (m, 2H), 3,60-3,64 (m, 2H), 3,54 (c,J= 7,1 Hz, 2H), 2,74 (d,J= 5,6 Hz, 1H), 2,53-2,64 (m, 2H), 1,74-1,86 (m, 2H), 1,61-1,73 (m, 2H), 1,22 (t,J= 7,1 Hz, 3H).

13C RMN (101MHz, CDCL<3>)<8>= 175,67, 156,96, 134,13, 129,21 (2C), 114,49 (2C), 70,87, 70,30, 69,85, 69,80, 67,42, 66,69, 52,53, 34,53, 33,84, 26,68, 15,15.

Intermediario 13

Paso 1

metanosulfonato de<2>-(<2>-etoxietoxi)etilo

Una solución de 2-(2-etoxietoxi)etan-1-ol (10 ml, 75 mmol) en THF (200 ml) se trató con TEA (25 ml, 180 mmol) y se enfrió hasta 0°C, seguido por la adición gota a gota de MsCl (6,9 ml, 89 mmol). La mezcla se agitó a TA durante 16h, luego se vertió en una solución acuosa de NaHCO<3>, luego ésta se extrajo con EtOAc tres veces, las capas orgánicas se lavaron con NaCl (ac. sat.) y se secaron sobre Na<2>SO<4>, con concentración bajo presión reducida produciendo el compuesto del título (15,1 g, 95 % de rendimiento).1

1H RMN (400 MHz, DMSO-d<6>)<8>ppm 1,10 (t, J=6,97 Hz, 3H), 3,18 (s, 3H), 3,43 (c, J=7,01 Hz, 2H), 3,46 - 3,51 (m, 2H), 3,53 - 3,58 (m, 2H), 3,63 - 3,70 (m, 2H), 4,28 - 4,33 (m, 2 H).

Paso 2

3-{4-[2-(2-etoxietoxi)etoxi]fenil}propan-1-ol

Una solución de 4-(3-hidroxipropil)fenol (2,80 g, 18,4 mmol, [10210-17-0]) y carbonato de cesio (5,99 g, 18,4 mmol; [534-17-8]) en DMF (40 ml) se agitó a TA durante 30min. A esta mezcla, se le añadió 2-(2-etoxietoxi)metanosulfonato de etilo (3,90 g, 18,4 mmol) y la mezcla se agitó a 60°C durante 16h. Se añadió agua a la mezcla de reacción y la mezcla se extrajo con MTBE (3x). Las capas orgánicas se lavaron con NaCl sat. (ac.), se secaron sobre Na<2>SO<4>, y se concentraron bajo presión reducida produciendo el compuesto del título (4,90 g, (92% de pureza), 99 % de rendimiento).

LC-MS (Procedimiento 1): Tr = 0,97min; MS (ESIpos): m/z = 269,3 [M+H]+.

1H RMN (400 MHz, DMSO-d<6>)<8>ppm 1,09 (t, J=6,97 Hz, 3H), 1,61 - 1,70 (m, 2H), 2,50 - 2,53 (m, 2H), 3,35 -3,45 (m, 4H), 3,46 - 3,50 (m, 2H), 3,55 - 3,59 (m, 2H), 3,69 - 3,75 (m, 2H), 4,00 - 4,06 (m, 2H), 4,44 (t, J=5,20 Hz, 1H), 6,80 -<6 , 8 6>(m, 2H), 7,05 -7 ,11 (m, 2H).

Paso 3

3-{4-[2-(2-etoxietoxi)etoxi]fenil}propanal

Una solución de 3-{4-[2-(2-etoxietoxi)etoxi]fenil}propan-1-ol (4,90 g, 18,3 mmol) en DCM (120 ml) se trató de manera secuencial con DMSO (32 ml), TEA (12 ml,<8 8>mmol;) complejo de piridina trióxido de azufre (8,72 g, 54,8 mmol; [26412-87-3]) y la mezcla se agitó a TA durante 16h. La mezcla de reacción se vertió en una mezcla de NH<4>O saturado y hielo, y la capa acuosa se extrajo con DCM (3x), las capas orgánicas se combinaron y se lavaron con NaCl (ac. sat.) se secaron sobre Na<2>SO<4>, se filtraron y se concentraron bajo presión reducida. El producto crudo se purificó por medio de cromatografía (S O<2>, Biotage columna Ultra de 100g, A = Hexano, B = EtOAc, gradiente) produciendo el compuesto del título (4,60 g, 95 % de rendimiento).

LC-MS (Procedimiento 1): Tr= 1,05min; MS (ESIpos): m/z = 267,3 [M+H]+.

1H RMN (400 MHz, DMSO-da)<8>ppm 1,09 (t, J=7,10 Hz, 3H), 2,68 - 2,74 (m, 2H), 2,76 - 2,83 (m, 2H), 3,42 (c, J=7,10 Hz, 2H), 3,47 - 3,51 (m, 2H), 3,53 - 3,59 (m, 2H), 3,68 - 3,73 (m, 2H), 3,99 - 4,09 (m, 2H), 6,78 - 6,89 (m, 2H), 7,08 - 7,19 (m, 2H), 9,67 - 9,73 (m, 1 H).

Paso 4

(2EZ)-2-(acetiloxi)-5-{4-[2-(2-etoxietoxi)etoxi]fenil}pent-2-enoato de etilo

A cloruro de litio (1,12 g, 26,5 mmol; [7447-41-8]) se le añadió una solución de (acetiloxi)(dietoxifosforil)acetato de etilo (7,47 g, 26,5 mmol, [162246-77-7]) en THF (30 ml). La mezcla se agitó a TA durante 1h. La mezcla se enfrió hasta 0°C en un baño de hielo-agua y se añadió gota a gota 1,1,3,3-tetrametilguanidina (4,4 ml, 35 mmol;

[80-70-6]) y la mezcla se agitó durante 20min. Se añadió una solución de 3-{4-[2-(2-etoxietoxi)etoxi]fenil}propanal (4,70 g, 17,6 mmol) en THF (30 ml), la mezcla se agitó durante otros 10min. El baño de hielo-agua se retiró, y la mezcla se agitó durante otra 1h a TA. La mezcla de reacción se inactivó por medio de la adición de NH<4>Cl (ac.) sat., las capas se separaron, y la capa acuosa se extrajo con DCM (3x). Las capas orgánicas combinadas se secaron con Na<2>SO<4>, se filtraron y se concentraron bajo presión reducida. La purificación por medio de cromatografía (S O<2>, Biotage, columna Ultra de 50g, eluyente: A = Hexano, B = EtOAc, elución en gradiente) produjo el compuesto del título como una mezcla E:Z (4,65 g ,67 % de rendimiento). LC-MS (Procedimiento 1): Tr= 1,30min; MS (ESIpos): m/z = 395,4 [M+H]+.

<1>H RMN (DMSO-d<6>, 400 MHz):<8>(ppm) 7,08-7,14 (m, 2H), 6,85 (d,J=<8 , 6>Hz, 2H), 6,50 (t,J= 7,6 Hz, 0,3H), 6,01 (t,J= 7,6 Hz, 0,7H), 4,09-4,16 (m, 2H), 4,02-4,06 (m, 2H), 3,69-3,74 (m, 2H), 3,55-3,59 (m, 2H), 3,47-3,50 (m, 2H), 3,42 (c,J= 6,9 Hz, 2H), 2,71-2,81 (m, 1,4H), 2,60-2,68 (m, 2H), 2,38 (c,J= 7,6 Hz, 0,6H), 2,20 (s, 1H), 2,13 (s, 2H), 1,15-1,21 (m, 3H), 1,09 (t,J= 7,0 Hz, 3H). La muestra es una mezcla 7:3 de los isómeros E/Z y contiene EtOAc.

Paso 5

5-{4-[2-(2-etoxietoxi)etoxi]fenil}-2-oxopentanoato de etilo

(2EZ)-2-(acetiloxi)-5-{4-[2-(2-etoxietoxi)etoxi]fenil}pent-2-enoato de etilo (4,65 g, 118 mmol) se disolvió en etanol (150 ml) y se añadió H<2>SO<4>(conc., 5,0 ml, 94 mmol; [7664-93-9]). La mezcla de reacción se agitó a reflujo durante 16h, luego de lo cual la mezcla se concentró bajo presión reducida, el residuo se disolvió en EtOAc, se lavó con NaHCO<3>(ac. sat.), se secó sobre Na<2>SO<4>, se filtró y se concentró bajo presión reducida, produciendo el compuesto del título (2,40 g ,58 % de rendimiento).

LC-MS (Procedimiento 1): Tr = 1,26min; MS (ESIpos): m/z = 370,4 [M H<2>O H]+.

1H RMN (400 MHz, DMSO-da) 5 ppm 1,09 (t, J=7,10 Hz, 3H), 1,25 (t, J=7,10 Hz, 3H), 1,76 (quin, J=7,41 Hz, 2H), 1,72 - 1,72 (m, 1H), 2,50 -2 ,54 (m, 2H), 2,79 (t, J=7,35 Hz, 2H), 3,42 (c, J=7,10 Hz, 2H), 3,46 - 3,50 (m, 2H), 3,54 - 3,59 (m, 2H), 3,67 - 3,74 (m, 2H), 4,01 - 4,06 (m, 2H), 4,20 (c, J=7,10 Hz, 2H), 6,82 -<6 , 8 8>(m, 2H), 7,06 -7 ,11 (m, 2 H).

Paso 6

etil-5-{4-[2-(2-etoxietoxi)etoxi]fenil}-2-hidroxipentanoato

Una solución de 5-{4-[2-(2-etoxietoxi)etoxi]fenil}-2-oxopentanoato de etilo (2,40 g, 6,81 mmol) en etanol (100 ml) se trató con Pd/C (269 mg, 10 % de pureza, 252 jmol; [7440-05-3]) y se enjuagó con N<2>seguido por vacío tres veces. La mezcla se agitó bajo una atmósfera de H<2>a TA durante 96h. La mezcla de reacción se filtró utilizando un filtro de fibra de vidrio y se concentró bajo presión reducida, produciendo el compuesto racémico del título (Intermediario 13, 1,80 g (75 % de rendimiento).

LC-MS (Procedimiento 1): Tr = 1,15min; MS (ESlpos): m/z = 355,4 [M+H]+.

1H RMN (400 MHz, DMSO-d<6>) 5 ppm 1,09 (t, J=7,10 Hz, 3H), 1,17 (t, J=7,10 Hz, 3H), 1,50 - 1,64 (m, 4H), 2,46 - 2,53 (m, 2 H, coalescencia con señal de solvente) 3,42 (c, J=7,01 Hz, 2H), 3,47 - 3,50 (m, 2H), 3,54 - 3,60 (m, 2H), 3,69 -3 ,74 (m, 2H), 3,96 -4,11 (m, 5H), 5,32 (d, J=6,08 Hz, 1H), 6,79 -6 ,87 (m, 2H), 7,04 -7 ,10 (m, 2 H).

Intermediario 14

(2S)-5-{4-[2-(2-etoxietoxi)etoxi]fenil}-2-hidroxipentanoato de etilo

Etil-5-{4-[2-(2-etoxietoxi)etoxi]fenil}-2-hidroxipentanoato racémico (Intermediario 13,3480 mg, disueltos en 25 ml de DCM) se separó en sus dos componentes enantioméricos utilizando el siguiente procedimiento (PrepCon Labomatic HPLC-1; Columna: YMC Cellulose SB 10|j, 250x50; A = hexano/0,1 vol % DEA; B = etanol; 15%B; 100 ml/min; 280 nm; inyecciones de 25 x 1 ml).

Procedimiento analítico para la determinación del e.e.: (Thermo Fisher UltiMate 3000; YMC Cellulose SB 3 j, 100x4,6; A = hexano/0,1 vol % DEA; B = etanol; 10%B; 1,4 ml/min; 25°C, 280 nm). Tr Enantiómero 1 = 3,03min: Tr Enantiómero 2 = 3,58min.

Enantiómero 2: se obtuvo (2S)-5-{4-[2-(2-etoxietoxi)etoxi]fenil}-2-hidroxipentanoato de etilo (Intermediario 14, 1600 mg) después de la combinación de las fracciones recogidas y de la concentración bajo presión reducida a 45°C. La estereoquímica del alcohol se asignó por medio de la correlación de los tiempos de retención a través de HPLC quiral con los compuestos producidos a partir de materiales de partida quirales.

HPLC (procedimiento analítico anterior): Tr = 3,58min.

Rotación específica: -1,6° ± 0,17 (CHCL3, 20°C, 589 nm).

LC-MS (Procedimiento 1): Tr = 1,15min; MS (ESlpos): m/z = 355,4 [M+H]+.

1H RMN (400 MHz, DMSO-d<6>) 5 ppm 1,09 (t, 3H), 1,17 (t, 3H), 1,48 - 1,64 (m, 4H), 1,91 (s, 2H), 3,42 (c, 2H), 3,46 - 3,50 (m, 2H), 3,54 - 3,59 (m, 2H), 3,68 - 3,74 (m, 2H), 3,97 - 4,11 (m, 5H), 5,32 (d, 1H), 6,84 (d, 2H), 7,07 (d, 2H).

Intermediario 15

(2R)-5-{4-[2-(2-etoxietoxi)etoxi]fenil}-2-hidroxipentanoato de etilo

Enantiómero 1,Intermediario 14: se obtuvo (2R)-5-{4-[2-(2-etoxietoxi)etoxi]fenil}-2-hidroxipentanoato de etilo (Intermediario 15, 1560 mg) después de la combinación de las fracciones recogidas y de la concentración bajo presión reducida a 45°C. La estereoquímica del alcohol se asigna como(R)por medio de la correlación de los tiempos de retención a través de HPLc quiral con los compuestos producidos a partir de materiales de partida quirales.

HPLC (procedimiento analítico anterior): Tr = 3,03min.

Rotación específica: 0,71° ± 0,4 (CHCL3, 20°C, 589 nm).

LC-MS (Procedimiento 1): Tr = 1,15min; MS (ESIpos): m/z = 355,4 [M+H]+.

1H RMN (400 MHz, DMSO-da) 8 ppm 1,09 (t, 3H) 1,17 (t, 3H) 1,48 - 1,64 (m, 4H) 1,91 (s, 2H) 3,42 (c, 2H) 3,46 - 3,50 (m, 2H) 3,54 - 3,59 (m, 2H) 3,68 - 3,74 (m, 2H) 3,97 - 4,11 (m, 5H) 5,32 (d, 1H) 6,84 (d, 2H) 7,07 (d, 2H).

Intermediario 16

Paso 1

2-fenil-1,3-dioxan-4-il]metanol

Se disolvió ±-butano-1,2,4-triol racémico (9,3 ml, 100 mmol; [3068-00-6]) en DMF (220 ml) bajo argón. Se añadió a la mezcla agitada Complejo de ácido tetrafluoroborónico-dietil éter (1,4 ml, 10 mmol; [67969-82-8]) seguido por la adición gota a gota de (dimetoximetil)benceno (16 ml, 100 mmol; [1125-88-8]), y la mezcla se agitó durante la noche a TA. La mezcla se neutralizó con NaHCO<3>(sólido) y luego se concentró bajo presión reducida. La mezcla cruda se diluyó con DCM y se filtró a través de Celite, y el filtrado se concentró bajo presión reducida (24,5 g). La purificación por medio de cromatografía (SiO<2>, Biotage; 340 g Ultra; A = Hexano, B = EtOAc, 0%B a 100%B; 150 ml/min) produjo el compuesto del título como una mezcla de diastereómeros (16,0 g, 75 % de rendimiento).

LC-MS (Procedimiento 3): Tr = 0,67min; MS (ESIpos): m/z = 195,2 [M+H]+.

1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 1,48 - 1,55 (m, 1H) 1,57 - 1,68 (m, 1H) 3,36 - 3,52 (m, 2H) 3,83 - 3,95 (m, 2H) 4,13 - 4,21 (m, 1H) 4,72 - 4,79 (m, 1H) 5,52 (s, 1H) 7,31 - 7,47 (m, 1H).

Paso 2

2-fenil-1,3-dioxan-4-carboxilato de terc-butilo

Óxido de cromo (VI) (12,0 g, 120 mmol; [1333-82-0]) se añadió a una mezcla de DCM:DMF (400 ml, 4:1). Se añadió piridina (26 ml) y la mezcla se agitó a TA durante 30min. Se añadieron 2-metilpropan-2-ol (77 ml, 800 mmol) y anhídrido acético (30 ml, 320 mmol; [108-24-7]). Se añadió gota a gota [2-fenil-1,3-dioxan-4-il]metanol (7,80 g, 40,2 mmol) disuelto en DCM:DMF (180 ml, 4:1) durante 90min y la mezcla se agitó durante la noche. La mezcla se enfrió hasta 0-5°C, y se añadieron NaHCO<3>sólido (54,0 g, 643 mmol) y etanol (38 ml) y la mezcla se agitó durante 30min. Se añadió tolueno, y la mezcla se concentró bajo presión reducida. La mezcla luego se disolvió en EtOAc, se filtró y la torta de filtro se lavó con EtOAc. La purificación por medio de cromatografía (SÍO<2>, Biotage 120 g Ultra; A = Hexano, B = EtOAc, C = MeOH, 100%A a 100%B, seguido por 0%C a 15% C) produjo el compuesto del título como una mezcla de diastereómeros (5,53 g, 51 % de rendimiento).

LC-MS (Procedimiento<6>): Tr = 1,25min; MS (ESIpos): m/z = 282,3 [M+NH<4>]+.

1H RMN (400 MHz, DMSO-da)<8>ppm 1,43 (s, 9H) 1,73 - 1,92 (m, 2H) 3,91 -4,05 (m, 1H) 4,13 -4 ,23 (m, 1H) 4,50 (dd, 1H) 5,56 - 5,62 (s, 1H) 7,32 - 7,46 (m, 5H).

Paso 3

terc-butil-4-(benciloxi)-2-hidroxibutanoato

Se añadió trietil silano (17 ml, 100 mmol, [617-86-7]) a DCM (110 ml), seguido por la adición de terc-butil-2-fenil-1,3-dioxan-4-carboxilato racémico (5,53 g, 20,9 mmol). La mezcla se enfrió hasta -5°C y se añadió gota a gota TFA (<8>,1 ml, 100 mmol; [76-05-1]). La mezcla luego se llevó hasta TA y se agitó durante 90min. Se añadió una solución de NaHCO<3>(ac. sat.), hasta que se obtuvo un pH básico, las capas se separaron, y la fase orgánica se secó sobre Na<2>SO<4>. La purificación por medio de cromatografía (S O<2>, Biotage,<1 0 0>g Ultra; A = Hexano, B = EtOAc, 0%B a 35%B, 120ml/min) produjo el compuesto del título (2,16 g, 37 % de rendimiento). LC-MS (Procedimiento<6>): Tr = 1,18min; MS (ESIpos): m/z = 211,2 [M H - C<4>Hb]+.

<1>H RMN (400 MHz, DMSO-d<6>)<8>ppm 1,39 (s, 9H) 1,64 - 1,77 (m, 1H) 1,90 (m, 1H) 3,40 -3,58 (m, 1H) 3,99 (m, 1H) 4,44 (s, 1H) 5,23 (d, 2H) 7,15 - 7,55 (m, 5H).

Paso 4

(2R)-4-(benciloxi)-2-[(metanosulfonil)oxi]butanoato de terc-butilo

Terc-butil-4-(benciloxi)-2-hidroxibutanoato racémico (2,16 g, 8,11 mmol), TEA (2,3 ml, 16 mmol;) y THF (110 ml) se agitaron a 0-5°C. Bajo una atmósfera de N<2>, se añadió MsCl (690 pl, 8,9 mmol; [124-63-0]), la mezcla se dejó calentar hasta TA y se agitó durante la noche. La mezcla se añadió a NaHCO<3>(50 % ac. sat.), y la mezcla se extrajo con MTBE (3x), las soluciones orgánicas se combinaron, se lavaron con una solución (ac. sat.) de NaCl, se secaron sobre Na<2>SO<4>, se filtraron y se concentraron bajo presión reducida produciendo el compuesto del título (Intermediario 16, 2,87 g, 92 % de rendimiento).

LC-MS (Procedimiento<6>): Tr = 1,29min; MS (ESIpos): m/z = 362,3 [M+NH<4>]+.

<1>H RMN (400 MHz, DMSO-d<6>)<8>ppm 1,41 (s, 9H), 1,93 - 2,20 (m, 2H), 3,53 (dd, 2H), 4,47 (s, 2H), 4,98 (dd, 1H), 7,24 -7 ,40 (m, 5H).

Intermediario 17

Paso 1

5-[2-(2-etoxietoxi)etoxi]piridin-2-carbaldehído

Una mezcla de 5-fluoropiridin-2-carbaldehído (5,00 g, 40,0 mmol, [ 31181-88-1]) y 2-(2-etoxietoxi)etan-1-ol (16 ml, 120 mmol) se trató con carbonato de cesio (15,6 g, 48,0 mmol; [534-17-8]), y la mezcla se agitó a 70°C durante 18h. Se añadió agua a la mezcla de reacción y la mezcla se extrajo con MTBE tres veces, las capas orgánicas se lavaron con solución (ac. sat.) de NaCI y se secaron sobre Na<2>SO<4>, se filtraron, y se concentraron bajo presión reducida. El producto crudo se purificó por medio de cromatografía (S O<2>, Biotage columna Ultra de 50g eluyente: A = Hexano, B = EtOAc, elución en gradiente) produciendo el compuesto del título (1,99 g, 21 % de rendimiento).

LC-MS (Procedimiento 1): Tr=0,85m in; MS (ESIpos): m/z = 240,1 [M+H]+.

<1>H RMN (400 MHz, DMSO-da)<8>ppm 1,08 (t, J=6,97 Hz, 3H), 3,42 (c, J=6,93 Hz, 2H), 3,46 - 3,50 (m, 2H), 3,56 - 3,61 (m, 2H), 3,76 - 3,81 (m, 2H), 4,29 - 4,33 (m, 2H), 7,59 - 7,62 (m, 1H), 7,93 (d, J=8,62 Hz, 1H), 8,51 (d, J=2,79 Hz, 1H), 9,89 (s, 1 H).

Paso 2

terc-butil-3-{5-[2-(2-etoxietoxi)etoxi]piridin-2-il}oxiran-2-carboxilato

Una solución de 5-[2-(2-etoxietoxi)etoxi]piridin-2-carbaldehído (2,00 g, 8,36 mmol) en THF (100 ml) se trató en porciones con hidruro de sodio (468 mg, 60 % de pureza, 11,7 mmol; [7646-69-7]), la mezcla se agitó durante 5min, luego se añadió gota a gota cloroacetato de terc-butilo (1,6 ml, 11 mmol), la mezcla se agitó a TA durante 16h. La mezcla de reacción se vertió en una mezcla de hielo y agua, ésta se extrajo con EtOAc tres veces, las capas orgánicas se lavaron con NaCl (ac. sat.) y se secaron sobre Na<2>SO<4>, luego se concentraron bajo presión reducida. El producto crudo se purificó por medio de cromatografía (Biotage columna Sfar de 50g eluyente: A = Hexano, B = EtOAc, elución en gradiente) produciendo las formas cis y trans del producto del compuesto del título (compuesto del título “trans” - 550 mg (19%) compuesto del título “cis” - 1250 mg (42%).

Compuesto del título “trans”.

LC-MS (Procedimiento 4): Tr = 1,19min; MS (ESIpos): m/z = 354,1 [M+H]+.

<1>H RMN (DMSO-d<6>, 500 MHz):<8>(ppm) 8,28 (dd,J= 2,5, 1,0 Hz, 1H), 7,41-7,46 (m, 2H), 4,17-4,21 (m, 2H), 4,09 (d,J= 1,9 Hz, 1H), 3,82 (d,J= 1,9 Hz, 1H), 3,73-3,77 (m, 2H), 3,56-3,59 (m, 2H), 3,47-3,50 (m, 2H), 3,42 (c,J= 7,0 Hz, 2H), 1,46 (s, 9H), 1,09 (t,J= 7,0 Hz, 3H).

<13>C RMN (DMSO-d<6>, 126 MHz):<8>(ppm) 166,8, 154,9, 145,2, 137,7, 122,6, 121,5, 82,0, 69,9, 69,1, 68,7, 67,6, 65.5, 56,8, 54,7, 27,5 (3C), 15,0.

Compuesto del título “cis”.

LC-MS (Procedimiento 4): Tr = 1,13min; MS (354,1): m/z = [M+H]+.

<1>H RMN (DMSO-d<6>, 400 MHz):<8>(ppm) 8,25 (d,J= 2,5 Hz, 1H), 7,43 (dd,J=<8>,<6>, 2,8 Hz, 1H), 7,28 (d,J=<8 , 6>Hz, 1H), 4,28 (d,J= 4,8 Hz, 1H), 4,14-4,18 (m, 2H), 3,91 (d,J= 4,8 Hz, 1H), 3,71-3,75 (m, 2H), 3,55-3,58 (m, 2H), 3,46-3,50 (m, 2H), 3,42 (c,J= 7,0 Hz, 2H), 1,19 (s, 9H), 1,09 (t,J= 7,1 Hz, 3H).

<13>C RMN (DMSO-d<6>, 126 MHz):<8>(ppm) 165,4, 154,5, 145,1, 137,1, 121,8, 121,0, 81,6, 70,0, 69,2,<6 8>,<8>, 67,7, 65.6, 56,7, 55,2, 27,4 (3C), 15,1.

Paso 3

terc-butil-3-{5-[2-(2-etoxietoxi)etoxi]piridin-2-il}-2-hidroxipropanoato

Una solución de terc-butil-3-{5-[2-(2-etoxietoxi)etoxi]piridin-2-il}oxiran-2-carboxilato racémico (1,25 g, 3,54 mmol) en EtOAc (15 ml) se trató con paladio/C (131 mg, 10 % de pureza, 123 pmol; [7440-05-3]) y la mezcla se cicló entre N<2>y vacío tres veces. La mezcla se agitó bajo una atmósfera de H<2>de (1 atm) a TA durante 72h. La mezcla de reacción se filtró utilizando un filtro de fibra de vidrio y se concentró bajo presión reducida. La purificación por medio de cromatografía (S O<2>, columna ULTRA de 25g de Biotage eluyente: A = Hexano, B = EtOAc, elución en gradiente), produjo el compuesto racémico del título (Intermediario 17, 1,05 g, 84%de rendimiento).

LC-MS (Procedimiento 1): Tr= 0,84min; MS (ESIpos): m/z = 356,2 [M+H]+.

1H RMN (DMSO-da, 400 MHz):<8>(ppm) 8,18 (d,J= 2,8 Hz, 1H), 7,31 (dd,J=<8>,<6>, 3,0 Hz, 1H), 7,18 (d,J=<8 , 6>Hz, 1H), 5,36 (d,J= 6,3 Hz, 1H), 4,24 (dt,J= 8,0, 5,9 Hz, 1H), 4,10-4,16 (m, 2H), 3,71-3,76 (m, 2H), 3,54-3,60 (m, 2H), 3,47-3,50 (m, 2H), 3,42 (c,J=<6 , 8>Hz, 2H), 2,97 (dd,J= 13,7, 5,3 Hz, 1H), 2,87 (dd,J= 13,9, 8,1 Hz, 1H), 1,35 (s, 9H), 1,09 (t,J= 7,1 Hz, 3H).

Intermediario 18

Paso 1

Ácido (3E)-2-oxo-4-(4-propoxifenil)but-3-enoico

Bajo una atmósfera de N<2>, a una mezcla de 4-propoxibenzaldehído (5,00 g, 30,4 mmol, [5736-85-6]) en MeOH (4 ml), se le añadió ácido 2-oxopropanoico (2,68 g, 30,4 mmol; [127-17-3]). A esta mezcla se le añadió una mezcla de hidróxido de potasio en MeOH (solución al 25 % en peso, 45,7 mmol) mientras se mantenía la temperatura de la reacción por debajo de 15°C. Se añadió una pequeña porción de MeOH adicional y la mezcla se dejó calentar hasta TA y se agitó durante la noche. La mezcla se concentró bajo presión reducida, se añadió a una solución (1,5 M ac.) de HCl y la mezcla acuosa se extrajo con EtOAc. Las fases orgánicas se combinaron, se lavaron con una solución (ac. sat.) de NaCl, se secaron sobre Na<2>SO<4>y se concentraron bajo presión reducida produciendo el compuesto crudo del título (3,24 g, (80% de pureza), 45 % de rendimiento). El gran valor de acoplamiento J para las señales de alqueno sugiere la asignación de la configuración (E).

LC-MS (Procedimiento 1): Tr= 1,06min; MS (ESIpos): m/z = 235,1 [M+H]+.

1H RMN (400 MHz, DMSO-d<6>)<8>ppm 0,98 (t, J=7,48 Hz, 3H), 1,68 - 1,79 (m, 2H), 3,97 - 4,04 (m, 2H), 6,97 -7,03 (m, 2H), 7,13 (d, J=16,22 Hz, 1H), 7,70 (d, J=16,22 Hz, 1H), 7,74 - 7,80 (m, 2H).

Paso 2

Ácido 2-hidroxi-4-(4-propoxifenil)butanoico

Se disolvió ácido (3E)-2-xo-4-(4-propoxifenil)but-3-enoico (6,89 g, 29,4 mmol) en etanol (200 ml), se añadió Pd/C (1,56 g, 10 % de pureza, 1,47 mmol; [7440-05-3]), la mezcla se cicló entre N<2>y vacío tres veces y se hidrogenó (1 atm H<2>) durante la noche. La mezcla se filtró a través de un filtro de fibra de vidrio, y se concentró bajo presión reducida, luego de lo cual la cromatografía (SiO<2>, Biotage, columna Ultra de 100g, A = Hexano, B = EtOAc,<0>%B a<1 0 0>%B) produjo el compuesto racémico del título (6,50 g, 93 % de rendimiento).

LC-MS (Procedimiento 1): Tr= 1,01min; MS (ESlneg): m/z = 237 [M-H]-.

1H RMN (400 MHz, DMSO-d<6>)<8>ppm 0,96 (t, J=7,48 Hz, 3H), 1,64 - 1,92 (m, 4H), 2,54 - 2,62 (m, 2H), 2,58 (t, J=7,86 Hz, 2H), 3,87 (t, J=6,46 Hz, 3H), 5,20 - 5,27 (a, s, 1H), 6,80 -6 ,85 (m, 2H), 7,05 -7 ,11 (m, 2H), 12,21 -12,58 (a, s, 1 H).

metil-2-hidroxi-4-(4-propoxifenil)butanoato

Se disolvió ácido 2-hidroxi-4-(4-propoxifenil)butanoico racémico (6,50 g, 27,3 mmol) en MeOH (50 ml) y se agitó con una gota de H<2>SO<4>conc. a TA durante la noche. La mezcla se concentró bajo presión reducida, se añadió NaHCO<3>(ac. sat.), la mezcla se extrajo con EtOAc, se secó sobre Na<2>SO<4>y se concentró bajo presión reducida produciendo el compuesto del título (Intermediario 18, 3,85 g, 56 % de rendimiento).

LC-MS (Procedimiento 1): Tr= 1,14min; MS (ESIpos): m/z = 254 [M+H]+.

1H-RMN (400MHz, DMSO-da):<8>[ppm]= 0,96 (t, 3H), 1,65 - 1,90 (m, 4H), 2,52 -2,60 (m, 2H), 3,61 (s, 3H), 3,87 (t, 2H), 3,94 -4,04 (m, 1H), 5,47 (d, 1H), 6,79 -<6 , 8 6>(m, 2H), 7,05 -7 ,11 (m, 2H).

Intermediario 19

metanosulfonato de 2-oxooxolan-3-ilo

3-hidroxioxolan-2-ona (2,50 g, 24,5 mmol, [19444-84-9]), THF (82 ml) y TEA (7,5 ml, 54 mmol;) se agitaron a 0°C bajo N<2>. Se añadió gota a gota MsCl (2,1 ml, 27 mmol; [124-63-0]), y la mezcla se agitó durante 30min a 0°C seguido por agitación durante la noche a TA. La mezcla se filtró, y el filtrado se concentró bajo presión reducida, obteniendo el compuesto del título (Intermediario 19, 5,15 g, 82 % de rendimiento) que también contenía algo de sal clorhidrato de TEA.

1H RMN (400 MHz, DMSO-d<6>)<8>ppm 2,39 (m, 1H), 2,73 (dddd, J=12,71, 8,40, 6,15, 1,90 Hz, 1H), 3,33 (s, 3H), 4,26 (ddd, J=10,14, 8,74, 6,21 Hz, 1H), 4,43 (td, J=8,93, 1,90 Hz, 1H), 5,55 (dd, J=9,76, 8,49 Hz, 1H).

Intermediario 20

Paso 1

(2S)-2-(terc-butoxicarbonilamino)-5-(4-etoxifenil)pentanoato

A una solución de (2S)-2-[[(1,1-dimetiletoxi)carbonil]amino]-4-pentenoato de metilo (60,0 g, 261 mmol, [89985 87-59]) en THF (600 ml) se le añadió 9-B<n>(0,50 M, 1,05 l, [280-64-8]) a 0°C durante 30min. La mezcla de reacción se agitó a 20°C durante 1 h. Luego se añadió a la reacción K<3>PO<4>(3,00 M, ac., 87,2 ml), seguido por la adición a una mezcla de 4-Bromofenetol (57,8 g, 287 mmol, [588-96-5]), Pd(OAc)<2>(2,94 g, 13,0 mmol, [3375-31-3]) y SPhos (10,7 g, 26,2 mmol, [657408-07-6]) en DMF (900 ml) a 20°C. Después de que la mezcla de reacción se agitó a 60°C durante 12 h, se añadió KCl (195 g, 2,62 mol) y NaHCO<3>sat. (1000 ml) y se agitó a 20°C durante 1 h. TLC (PE : EtOAc = 5 : 1) mostró que el material de partida (Rf = 0,8) se consumió y se detectó una nueva mancha grande (Rf = 0,4). La mezcla de reacción cruda se elaboró conjuntamente con un (2S)-2-[[(1,1-dimetiletoxi)carbonil]amino]-4-pentenoato de metilo de un experimento anterior (74 g, 323 mmol). La mezcla de reacción combinada se vertió en agua (4,0 l) y se extrajo con EtOAc (1,0 x 3). La fase orgánica combinada se lavó con NaCl (ac. sat. 1,0 l x 3), se secó sobre Na<2>SO<4>, se filtró y se concentró bajo presión reducida para proporcionar un residuo. El producto crudo se purificó por medio de cromatografía (SiO<2>, A = PE, B = EtOAc, A:B = 30:1 a 20:1) para proporcionar el compuesto del título (162 g, 79%) como un aceite amarillo. LC-MS (Procedimiento 7): Tr = 0,824min, m/z = 252 [M H - C<4>H<8>- CO<2>]+.

<1>H RMN:(400 MHz CDCla)<8>7,04-7,06 (m, 2H), 6,80-6,82 (m, 2H), 3,99 (dd,J= 14, 14 Hz, 2H), 3,72 (s, 3H), 2,55-2,57 (m, 2H), 1,84-1,87 (m, 4H), 1,63-1,66 (m, 7H), 1,44 (s, 9H), 1,38-1,42 (m, 3H).

Paso 2

Sal clorhidrato de ácido (2S)-2-amino-5-(4-etoxifenil)pentanoico

A una solución del (2S)-2-(terc-butoxicarbonilamino)-5-(4-etoxifenil)pentanoato de metilo (95,0 g, 270 mmol) se le añadió HCl ac. (6,00 M, 2,25 l) a 20°C. La mezcla de reacción se agitó a 100°C durante 3 h. La mezcla de reacción se concentró bajo presión reducida para proporcionar el compuesto del título (128 g, ><1 0 0>%) como un sólido amarillo.

LC-MS: (Procedimiento<8>): Tr = 0,513min, MS = 238 [M+H]+.

1H RMN: EW16671-49-P1B1, 400 MHz MeOD)<8>7,08-7,11 (m, 2H), 6,81-6,83 (m, 2H), 3,94-4,02 (m, 3H), 2,61 2,64 (m, 2H), 1,72-1,94 (m, 4H), 1,34-1,38 (m, 3H).

Paso 3

Ácido (2S)-5-(4-etoxifenil)-2-hidroxi-pentanoico

A una solución de sal clorhidrato de ácido (2S)-2-amino-5-(4-etoxifenil)pentanoico (32,0 g, 117 mmol) en H<2>SO<4>(0,50 M, ac., 320 ml) y THF (320 ml) se le añadió NaNO<2>(23,4 g, 338 mmol, 160 ml) a 0°C durante 3 h. La mezcla de reacción se agitó a 0°C durante 2h y se agitó a 20°C durante 12 h. La mezcla de reacción se combinó con otra preparación idéntica (30 g) y la mezcla de reacción combinada se extrajo con EtOAc (1,0 L x 3). La fase orgánica combinada se lavó con NaCl sat. (500 ml x 3), se secó sobre Na<2>SO<4>, se filtró y se concentró bajo presión reducida para proporcionar ácido (2S)-5-(4-etoxifenil)-2-hidroxi-pentanoico (66,0 g, ><1 0 0>%) como aceite amarillo.

LC-MS: (Procedimiento 9): Tr = 0,178min, = 237 [M-H]-.

Paso 4

(2S)-5-(4-etoxifenil)-2-hidroxipentanoato de metilo

A una solución de ácido (2S)-5-(4-etoxifenil)-2-hidroxi-pentanoico (28,0 g, 117 mmol) en DCM (60,0 ml) y MeOH (30,0 ml) se le añadió TMSCHN<2>(2,00 M, 235 ml, [18107-18-1]) gota a gota a 0°C durante 30min. La mezcla de reacción se agitó a 20°C durante 2 h. TLC (PE : EtOAc = 3 : 1) mostró que el material de partida (Rf= 0,25) se consumió por completo y se detectó una nueva mancha grande (Rf = 0,6). La mezcla de reacción se combinó con una reacción idéntica (10 g). A la mezcla de reacción combinada se le añadió gota a gota CH<3>COOH (50 ml). La mezcla se inactivó con NaHCO<3>ac. 10% (500 ml) y se extrajo con DCM (500 ml x 3). La fase orgánica combinada se lavó con NaCl sat. (500 ml x 3), se secó sobre Na<2>SO<4>, se filtró y se concentró bajo presión reducida. El producto crudo se purificó por medio de cromatografía en columna (SiO<2>, A = PE, B = EtOAc, A:B = 30:1 a 20:1) para proporcionar el compuesto del título (Intermediario 20, 19,0 g, 75,3 mmol, 47% de rendimiento) como aceite amarillo.

LC-MS: (Procedimiento 10): Tr = 0,850min, = 253 [M+H]+.

SFC: (Chiralpak AD-3 50*4,6mm I.D., 3pm, A = CO<2>, B = MeOH(0,05%DEA); 5% B a 40% B; 3ml/min; DAD; 35°C; 100Bar): Tr =1,10m in (100%).1

<1>H RMN : (400 MHz CDCh)<8>7,07-7,09 (m, 2H), 6,81-6,84 (m, 2H), 4,20-4,21 (m, 1H), 3,99-4,04 (m, 2H), 3,77 (s, 3H), 2,74 (d,J=<6>Hz, 1H), 2,57-2,62 (m, 2H), 1,63-1,84 (m, 4H), 1,42 (t,J=<6 , 8>Hz, 3H).

Intermediario 21

3-(4-etoxifenil)-2-hidroxipropanoato de etilo

Se disolvió 2-hidroxi-3-(4-hidroxifenil)propanoato de etilo (2,50 g, 11,9 mmol, [62517-34-4]) en DMF<( 8 6>ml) y se añadió carbonato de cesio (4,26 g, 13,1 mmol; [534-17-8]). La mezcla se colocó bajo N<2>y se enfrió hasta 0°C. Se añadió gota a gota yodoetano (1,24 ml, 15,5 mmol; [75-03-6]) y la reacción se agitó a TA durante la noche. Se añadió solución de NaCl (3,1 M, ac.) y la mezcla se extrajo con MTBE (3x). Las fases orgánicas combinadas se lavaron con NaCl (ac. sat.), se secaron sobre Na<2>SO<4>y se concentraron bajo presión reducida. El producto crudo obtenido se purificó por medio de cromatografía (S O<2>, A = Hexano, B = EtOAc, 0%B a 100%B) para proporcionar el compuesto del título (Intermediario 21, 1,19 g, 40 % de rendimiento).

LC-MS (Procedimiento 4): Tr = 1,04min; MS (ESIpos): m/z = 239 [M H]+.

<1>H RMN (DMSO-d<6>, 400 MHz):<8>(ppm) 7,06-7,13 (m, 2H), 6,73-6,88 (m, 2H), 5,48 (d,J= 6,1 Hz, 1H), 4,15 (dt,J= 7,8, 5,7 Hz, 1H), 4,04 (c,J= 7,1 Hz, 2H), 3,97 (c,J=<6 , 8>Hz, 2H), 2,85 (dd,J= 13,7, 5,3 Hz, 1H), 2,75 (dd,J= 13,7, 7,6 Hz, 1H), 1,30 (t,J= 7,0 Hz, 3H), 1,13 (t,J= 7,1 Hz, 3H).

Intermediario 22

Paso 1

(2R)-[5-[4-butoxi]fenil]-2-[[(1,1-dimetiletoxi)carbonil]amino]-pentanoato de metilo

A una solución de (2R)-2-[[(1,1-dimetiletoxi)carbonil]amino]-4-pentenoato de metilo (20,1 g,<8 8>mmol, [150652 96-3]) en THF (200 ml) se le añadió 9-BBN (0,50 M, 349 ml) a 0°C. La mezcla de reacción se agitó a 16°C durante 1h. Luego se añadió K<3>PO<4>(3 M, 29,2 ml), seguido por la adición a una mezcla de 1-bromo-4-butoxibenceno (20,0 g, 87,3 mmol, [39969-57-8]), Pd(oAc)<2>(980 mg, 4,37 mmol), SPhos (3,60 g, 8,77 mmol, [657408-07-6]) en DMF (500 ml). A la mezcla de reacción después de agitar bajo N<2>a 60°C durante 18h, se le añadió NaHCO<3>ac. (1,00 l) y cloruro de potasio (651 g, 8,73 mol) y se agitó durante 2h a 16°C. La mezcla de reacción se vertió en agua (1,00 l) y se extrajo con EtOAc (500 ml x 3). La fase orgánica combinada se lavó con NaCl (ac. sat.) (500 ml x 3), se secó sobre Na<2>SO<4>, se filtró y se concentró bajo presión reducida para proporcionar el compuesto del título (60,0 g, crudo) como aceite amarillo.

LC-MS (Procedimiento 12): Tr = 1,177min, MS: 379,24 [M+H]+.

Paso 2

Ácido (2R)-2-amino-[5-[4-butoxi]fenil]-pentanoico

A (2R)-[5-[4-butoxi]fenil]-2-[[(1,1-dimetiletoxi)carbonil]amino]-pentanoato de metilo (74,0 g, 195 mmol) se le añadió HCl<( 6>M, ac., 1,63 l) a 16°C. La mezcla de reacción se agitó a 100°C durante 12h. La mezcla de reacción se concentró bajo presión reducida para proporcionar el compuesto del título (49,0 g, 185 mmol, 94,70% de rendimiento) como sólido blanco.1

1H RMN : (400 MHz, CDCh)<8>7,10 (d,J=<8 , 8>Hz, 2H), 6,82 (d,J=<8 , 8>Hz, 2H), 3,96 - 3,91 (m, 2H), 2,64 -2,60(m, 2H), 1,75 - 1,70 (m,<6>H), 1,52 - 1,36 (m, 2H), 1,00 - 0,96 (m, 2H).

Paso 3

Ácido (2R)-[5-[4-butoxi]fenil]-2-hidroxi-pentanoico

A una solución de ácido (2R)-2-amino-[5-[4-butoxi]fenil]-pentanoico (13,0 g, 49,0 mmol) en THF (130 ml) y H<2>SO<4>(0,50 M, 130 ml) se le añadió NaNO<2>(9,50 g, 138 mmol) en H<2>O (65,0 ml) a 0°C durante 3h, luego se agitó durante 12h a 20°C. La mezcla de reacción se concentró bajo presión reducida para proporcionar ácido (2R)-[5-[4-butoxi]fenil]-2-hidroxi-pentanoico (10,0 g, crudo) como un sólido blanco.

LCMS (Procedimiento 11): Tr = 1,19min, MS = 265,1 [M-H]-.

Paso 4

(2R)-5-(4-butoxifenil)-2-hidroxipentanoato de metilo

A una solución de ácido (2R)-[5-[4-butoxi]fenil]-2-hidroxi-pentanoico (33,0 g, 124 mmol) en DCM/MeOH (3/1, 440 ml) se le añadió TMSCHN<2>(55,0 g, 482 mmol, [18107-18-1]) a -10°C y se agitó durante 12h a 20°C. TLC (PE: EA=20:1) mostró que el ácido se consumió por completo. La mezcla de reacción se concentró bajo presión reducida para proporcionar un residuo. El producto crudo se purificó por medio de prep-HPLC (Phenomenex Luna C18 250 x 80mm x 10 um; A = [agua(0,05%HCl), B = MeCN, 45B% a 75%B en 19min) para proporcionar el compuesto del título (Intermediario 22,7,00 g, 25,0 mmol, 20% de rendimiento) como aceite amarillo. LC-MS (Procedimiento 7): Tr= 0,931min, MS: 281,1 [M+H]+.

SFC: (Chiralpak AD-3 50*4,6mm I.D., 3pm; A = CO<2>, B = MeOH (0,05%DEA); 5%B a 40%B, 3ml/min; DAD; 35°C; 100Bar): Tr= 1,20min (94%), Tr = 1,27min (<6>%); e.e. =<8 8>%.

Rotación específica: ao<20>= -5,4° /- 0,24° (c=1, CHCh).

1H RMN (400 MHz, CDCla)<8>7,04-7,10 (m, 2H), 6,78-6,84 (m, 2H), 4,20 (dd, J=4,06, 7,10 Hz, 1H), 3,93 (t, J=6,59 Hz, 2H), 3,77 (s, 3H), 2,75 (a, s, 1H), 2,51-2,64 (m, 2H), 1,60-1,86 (m,<6>H), 1,48 (ct, J=7,40, 7,60 Hz, 2H), 0,97 (t, J=7,48 Hz, 3H).

13C RMN (101 MHz, CDCL<3>)<8>175,7, 157,3, 133,7, 129,2 (2C), 114,3 (2C), 70,3, 67,7, 52,5, 34,5, 33,9, 31,4, 26,7, 19,3, 13,9.

Intermediario 23

Paso 1

(2RS,3SR)-3-[4-(2,2,3,3-tetrafluoropropoxi)fenil]oxiran-2-carboxilato de etilo

Hidruro de sodio (1,78 g, 60% en aceite mineral, 44,5 mmol) se suspendió en THF (190 ml), colocado bajo N<2>y se enfrió hasta 0°C. Se añadió gota a gota cloroacetato de etilo (4,7 ml, 44 mmol) seguido por la adición de 4-(2,2,3,3-tetrafluoropropoxi)benzaldehído (7,00 g, 29,6 mmol, [103962-17-0]) en THF (10 ml). La reacción se agitó a TA durante la noche. La reacción se vertió en agua helada y se extrajo con EtOAc (3 x). Las fases orgánicas combinadas se lavaron con NaCl (ac. sat.), se secaron sobre Na<2>SO<4>y se concentraron bajo presión reducida. La cromatografía (SÍO<2>, SNAP Ultra de 100 g, A = Hexano, B = EtOAc, 0%B a 50%B en 30min, 80 ml/min,) proporcionó 5,21 g (52%) del compuesto del título.

LC-MS (Procedimiento 4): Tr = 1,23min; MS (ESIpos): m/z = 323,1 [M H]+.

<1>H RMN (DMSO-da, 400 MHz):<8>(ppm) 7,32-7,37 (m, 2H), 7,00-7,12 (m, 2H),<6 , 6 8>(tt,2Jhf= 51,7,3Jhf= 5,6 Hz, 1H), 4,60 (t,3Jhf= 13,4 Hz, 2H), 4,15-4,24 (m, 2H), 4,12 (d,J= 1,8 Hz, 1H), 3,82 (d,J= 1,8 Hz, 1H), 1,24 (t,J= 7,1 Hz, 3H).

<19>F RMN (DMSO-d<6>, 377 MHz):<8>(ppm) -125,27 (ct,J= 13,7, 5,7 Hz, 1F), -139,69 (dt,J= 52,4, 5,3 Hz, 2F).

<13>C RMN (DMSO-d<6>, 101 MHz):<8>(ppm) 167,9, 157,8, 128,4, 128,0 (2C), 115,2 (2C), 115,0 (tt, J<cf>=248,8,<2>J cf=26,3 Hz), 109,3(tt, J cf=247,8,<2>J cf=32,7 Hz), 64,7 (t,<2>J cf=27,6 Hz), 61,3, 56,8, 55,7, 14,0.

Paso 2

2-hidroxi-3-[4-(2,2,3,3-tetrafluoropropoxi)fenil]propanoato de etilo

3-[4-(2,2,3,3-tetrafluoropropoxi)fenil]oxiran-2-carboxilato de etilo (5,21 g, 16,2 mmol) se disolvió en etanol (73 ml) y se añadió paladio (417 mg, 10 % sobre carbono, 392 pmol). La mezcla se hidrogenó a TA y a presión ambiente durante la noche. El catalizador se eliminó por medio de filtración y el filtrado se concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó por medio de cromatografía (S O<2>, SNAP Ultra de 50 g, 40min/min, A= n-hexano, B = EtOAc, 0%B a 50%B en 30min) para proporcionar el compuesto del título (Intermediario 23, 4,42 g, 80%).

<19>F RMN (DMSO-d<6>, 377 MHz):<8>(ppm) -125,32 (ttd, J = 13,8, 5,7, 5,4 Hz, 2F), -139,78 (dt, J = 52,6, 5,7 Hz, 2F).

<1>H RMN (DMSO-d<6>, 400 MHz):<8>(ppm) 7,14-7,18 (m, 2H), 6,92-6,97 (m, 2H), 6,67 (tt,J= 52,0, 5,6 Hz, 1H), 5,51 (d,J= 6,1 Hz, 1H), 4,53 (t,J= 13,4 Hz, 2H), 4,17 (dt,J= 7,8, 5,6 Hz, 1H), 4,05 (c,J= 7,1 Hz, 2H), 2,88 (dd,J= 13,7, 5,3 Hz, 1H), 2,78 (dd,J= 13,7, 7,9 Hz, 1H), 1,14 (t,J= 7,1 Hz, 3H).

<13>C RMN (DMSO-d<6>, 101 MHz):<8>(ppm) 173,5, 155,9, 131,1, 130,5 (2C), 115,2 (tt,1Jcf=249,2,2Jcf26,3 Hz), 114,5 (2C), 109,3 (tt,1Jcf=247,8,2Jcf32,8 Hz), 71,3, 64,7 (t,2Jcf=27,6 Hz), 60,0, 39,2, 14,1.

Intermediario 24

Paso 1

(2R)-2-hidroxipent-4-enoato de metilo

A una solución de complejo de sulfuro de dimetilo bromuro de cobre(I) (20,1 g, 98,0 mmol; [54678-23-8]) en THF (400 ml) se le añadió bromido(etenil)magnesio (240 ml, 240 mmol, 1 M en THF; [1826-67-1]) a -70°C. La mezcla se agitó a -70°C durante 0,5h. Luego a la mezcla anterior se le añadió una solución de (2R)-oxiran-2-carboxilato de metilo (20,0 g, 196 mmol; [111058-32-3]) en THF (200 ml) a -70°C. La mezcla se agitó a -70°C durante 1h. La mezcla se inactivó con NH<4>Cl (ac. sat.) y se extrajo con EtOAc. La fase orgánica se secó sobre Na<2>SO<4>anhidro, se filtró y se concentró para proporcionar un residuo. El residuo se purificó por medio de cromatografía en columna ultrarrápida (SiO<2>, A = PE, B = EtOAc, 1 : 0 a 9 : 1, luego 9 : 1 A:B) para proporcionar (2R)-2-hidroxipent-4-enoato de metilo (6,30 g, 25% de rendimiento) como aceite amarillo.

1H RMN (400 MHz, DMSO-de)<8>[ppm] = 5,87-5,69 (m, 1H), 5,54-5,43 (m, 1H), 5,11-4,99 (m, 2H), 4,15-4,06 (m, 1H), 3,62 (s, 3H), 2,45-2,25 (m, 2H).

Paso 2

(2R,4E)-5-(3-butoxifenil)-2-hidroxipent-4-enoato de metilo

Una mezcla de 1-butoxi-3-yodobenceno (12,7 g, 46,1 mmol; [103030-54-2]), (2R)-2-hidroxipent-4-enoato de metilo (6,00 g, 46,1 mmol), diacetato de paladio(II) (1,04 g, 4,61 mmol; [3375-31-3]), tri-2-tolilfosfina (1,40 g, 4,61 mmol; [6163-58-2]) y DIPEA (20 ml, 120 mmol; [7087-68-5]) en MeCN (150 ml) se agitó a 80°C durante 12h. TLC (PE : EtOAc = 2 :1) mostró que el yoduro se consumía y se formaba una nueva mancha principal. La mezcla se concentró y se diluyó con EtOAc. La mezcla se lavó con solución de NH<4>Cl (ac. sat.) y NaCl (ac. sat.). La fase orgánica se secó sobre Na<2>SO<4>anhidro se filtró y se concentró para proporcionar un residuo. El residuo se purificó por medio de cromatografía en columna ultrarrápida (SiO<2>, PE : EtOAc = 10 : 1, a 4 : 1, luego 4 : 1) para proporcionar el compuesto del título como un aceite amarillo. El material se combinó con el material de un experimento precedente: 6,80 g (50 % de rendimiento).

LCMS: (Procedimiento 13): Tr = 1,001min; MS (ESIpos): m/z = 279,2 [M+H]+.

<1>H-RMN (400 MHz, DMSO-de)<8>[ppm] = 7,20 (t,J= 8,0 Hz, 1H), 6,95-6,88 (m, 2H), 6,80-6,74 (m, 1H), 6,44 6,36 (m, 1H), 6,30-6,19 (m, 1H), 5,57 (d,J= 6,0 Hz, 1H), 4,22-4,15 (m, 1H), 3,95 (t,J= 6,4 Hz, 2H), 3,63 (s, 3H), 2,60-2,52 (m, 1H), 2,48-2,37 (m, 1H), 1,75-1,61 (m, 2H), 1,50-1,37 (m, 2H), 0,93 (t,J= 7,6 Hz, 3H).Paso 3

(2R)-5-(3-butoxifenil)-2-hidroxipentanoato de metilo

A una solución de (2R,4E)-5-(3-butoxifenil)-2-hidroxipent-4-enoato de metilo (6,30 g, 22,6 mmol) en metanol se le añadió paladio (10% sobre carbono) a temperatura ambiente. La mezcla se agitó a temperatura ambiente bajo atmósfera de H<2>(1,03 bar (15 Psi)) durante 5 h. La mezcla se filtró y se combinó con el experimento piloto. Los filtrados combinados se concentraron bajo presión reducida para proporcionar el compuesto del título (Intermediario 24, 5,80 g, 82 % de rendimiento) como un aceite amarillo.

LCMS: (Procedimiento 9): Tr = 0,997min; MS (ESIpos): m/z = 281,2 [M+H]+.

Rotación Específica: ao<20>= -6,54° /- 0,16° (c=1, CHCl3).

1H RMN (CDCla, 400MHz):<8>(ppm) 7,15-7,20 (m, 1H), 6,70-6,77 (m, 3H), 4,21 (dd, J=7,1, 3,8 Hz, 1H), 3,95 (t, J=<6 , 6>Hz, 2H), 3,77 (s, 3H), 2,55-2,68 (m, 2H), 1,61-1,88 (m,<6>H), 1,44-1,55 (m, 2H), 0,98 (t, J=7,4 Hz, 3H).

13C RMN (CLOROFORMO-d, 101MHz):<8>(ppm) 175,6, 159,2, 143,4, 129,2, 120,6, 114,8, 111,6, 70,3, 67,5, 52,5, 35,5, 33,9, 31,4, 26,4, 19,3, 13,9.

Intermediario 25

Paso 1

Etil-2-hidroxi-3-metoxipropanoato

Se disolvió oxiran-2-carboxilato de etilo (2,5 g, 21,5 mmol, [4660-80-4]) en MeOH (1 ml, 32 mmol) en un vial sellado a presión. Se añadió triflato de magnesio (1,74 g, 5,38 mmol; [60871-83-2]), el vial se cerró a presión y la mezcla se agitó a 40°C hasta que ocurrió el consumo de los materiales de partida (16h). La mezcla se filtró y se purificó por medio de cromatografía (SiO<2>, A = Hexano, B = EtOAc, elución en gradiente), produciendo el compuesto del título (771 mg, 24% de rendimiento).1

1H RMN (400 MHz, DMSO-d<6>)<8>ppm 1,19 (t, 3H), 3,25 (s, 3H), 3,50 (dd, 2H), 4,10 (c, 2H), 4,17 (dt, 1H), 5,51 (d, 1 H).

Paso 2

etil-2-[(metanosulfonil)oxi]-3-metoxipropanoato

Se añadieron etil-2-hidroxi-3-metoxipropanoato racémico (771 mg, 5,20 mmol) y TEA (1,6 ml, 11 mmol;) a una solución de THF (15 ml) y la mezcla se enfrió hasta 0-5°C. Bajo N<2>, se añadió gota a gota MsCl (440 pl, 5,7 mmol; [124-63-0]), la mezcla se calentó hasta T A y se agitó durante 3h. La mezcla se añadió a solución acuosa de N aH cÜ<3>(saturación al 50% a TA), seguido por la extracción con MTBE (3 x), las fases orgánicas se combinaron y se lavaron con NaCl (ac. sat.) (2x), se secaron sobre Na<2>SÜ<4>, se filtraron y se concentraron bajo presión reducida produciendo el compuesto del título (Intermediario 25, 780 mg, 63 % de rendimiento). 1H RMN (400 MHz, DMSO-da)<8>ppm 1,21 (t, J=7,10 Hz, 3H), 3,26 (s, 3H), 3,29 (s, 3H), 3,64 - 3,74 (m, 1H), 3,75 - 3,82 (m, 1H), 4,11 - 4,27 (m, 2H), 5,26 - 5,34 (m, 1H).

Intermediario 26

Paso 1

(2R)-3-terc-butoxi-2-hidroxipropanoato de metilo

En un matraz de fondo redondo de tres bocas equipado con agitador mecánico se colocaron 2-metilpropan-2-ol (370 ml, 3,9 mol) y se añadieron trifluormetanosulfonato de magnesio (79,0 g, 245 mmol; [60871-83-2]) y EtOAc (370 ml). La reacción se colocó bajo N<2>y se llevó hasta 50°C (medido en el matraz). Luego se añadió gota a gota (<2>R)-oxiran-<2>-carboxilato de metilo<( 2 1>ml, 240 mmol, [111058-32-3]) y la mezcla se agitó a 60°C durante 3,5d. Después del enfriamiento hasta TA, se añadió EtOAc. La mezcla de reacción se lavó dos veces con NaCl (3,1 M ac.) y la fase orgánica se concentró bajo presión reducida. El residuo se destiló conjuntamente con tolueno 3 veces para eliminar el glicidato de metilo sin reaccionar. El producto crudo resultante se purificó por medio de cromatografía (Isolera LS, Sfar 350 g, A = Hexano, B = DCM, C = EtOAc, A = 3CV, A a B en 5 CV, B 4 CV, B a 50%C en<6>CV). Las fracciones interesantes se agruparon, se concentraron bajo presión reducida y se destilaron conjuntamente con tolueno una vez para proporcionar 37,3 g<( 6 8>como un aceite claro.

1H RMN (CDCla, 400 MHz):<8>(ppm) 3,77 (s, 3H), 3,60-3,66 (m, 2H), 1,15 (s, 9H).

Paso 2

(2R)-3-terc-butoxi-2-[(trifluorometanosulfonil)oxi]propanoato de metilo

(2R)-3-terc-butoxi-2-hidroxipropanoato de metilo (5,00 g, 28,4 mmol) en DCM (4,0 ml) se enfrió hasta -70°C bajo N<2>y se añadió lutidina (4,0 ml, 34 mmol). Se añadió gota a gota anhídrido trifluorometanosulfónico (30 ml, 1,0 M en DCM, 30 mmol), luego de lo cual la mezcla se agitó a -70°C durante 2,5 h. Luego se dejó que la mezcla se calentara hasta -20°C y se inactivó con hielo-agua. Las fases se separaron, y la fase acuosa se extrajo con DCM. Las fases orgánicas combinadas se filtraron a través de un filtro repelente al agua y se concentraron bajo presión reducida. El compuesto Intermediario 26 del título (9,45 g (>100%)), se utilizó sin purificación adicional.

Rotación específica: ao<20>= 20,9° /- 0,2° (c=1, CHCh).

<19>F RMN (CDCI<3>, 471 MHz): 5 (ppm) -75,86 (s, 1F).

<1>H RMN (CDCI<3>, 500 MHz): 5 (ppm) 5,22 (dd,J = 6,9, 2,8Hz, 1H), 3,86 (s, 3H), 3,85 (dd,J =11,0, 2,8 Hz, 1H), 3,80 (dd,J= 11,0, 6,9 Hz, 1H), 1,20 (s, 9H).

El triflato de lutidina residual se cuantifica con facilidad: 5 (ppm) 8,04 (t,J= 7,9 Hz, 0,11H), 7,41 (d,J= 7,9 Hz, 0,21H), 2,82 (s, 0,66H); -79,62 (s, 0,1 F).

Intermediario 27

Paso 1

etil-3-terc-butoxi-2-hidroxipropanoato

Por motivos de seguridad, la reacción se dividió en 3 partes iguales: 2-metilpropan-2-ol (8,2 ml, 120 mmol, [75 65-0]), oxiran-2-carboxilato de etilo (15,6 g 134 mmol, [4660-80-4]) y perclorato de magnesio (7,53 g, 33,7 mmol, [10034-81-8]) se colocaron en porciones iguales en tres viales sellados a presión, se sellaron y se agitaron a 50°C durante 48h. Los tres lotes se combinaron, se diluyeron con DCM, luego se lavaron con NH<4>O (ac. sat.) seguido por NaCl (ac. sat.). La capa orgánica se secó sobre Na<2>SO<4>y se concentró bajo presión reducida, obteniendo el compuesto racémico del título (12,0 g, 52 % de rendimiento).

1H RMN (400 MHz, DMSO-d<6>) 5 ppm 1,09 (s, 9H), 1,19 (t, 3H), 3,46 (dd, 2H), 4,02 - 4,15 (m, 3H), 5,35 (d, 1H).

Paso 2

etil-3-terc-butoxi-2-[(trifluorometanosulfonil)oxi]propanoato

Una solución de etil-3-terc-butoxi-2-hidroxipropanoato (12,0 g, 63,1 mmol) en DCM (220 ml) se enfrió hasta -60°C, luego se añadió 2,6-dimetilpiridina (<8 , 8>ml, 75,7 mmol, [108-48-5]) y el recipiente se enjuagó con N<2>. Se añadió gota a gota a la mezcla anhídrido trifluorometanosulfónico (1M en DCM, 66,2 mmol, 358-23-6) bajo N<2>y ésta se agitó a -60°C durante 3h. La mezcla se calentó hasta 0°C, luego se extrajo con agua y HCl (1M, ac.), se secó sobre Na<2>SO<4>y la capa orgánica se concentró bajo presión reducida produciendo el compuesto del título (Intermediario 27,19,9 g, 98 % de rendimiento). El producto se almacenó a -20°C.

1H RMN (400 MHz, DMSO-d<6>) 5 ppm 1,15 (s, 9H), 1,25 (t, 3H), 3,74 - 3,87 (m, 2H), 4,19 - 4,33 (m, 2H), 5,42 (m, 1 H).

19F RMN (377 MHz, DMSO-d<6>) 5 ppm -78,13 (s, 3 F).

Intermediario 28

Paso 1

(2S)-3-terc-butoxi-2-hidroxipropanoato de metilo

Se añadieron conjuntamente 2-metilpropan-2-ol (2,1 ml, 22 mmol), (2S)-oxiran-2-carboxilato de metilo (2,1 ml, 24 mmol, [118712-39-3]) y perclorato de magnesio (1,37 g, 6,1 mmol, [10034-81-8]) y se agitó a 50°C durante 48h. La mezcla se trató con DCM, luego se lavó con NH<4>CI (ac. sat.) y NaCI (ac. sat.). La capa orgánica se secó sobre Na<2>SO<4>y se concentró bajo presión reducida produciendo el compuesto del título (2,70 g, 70 % de rendimiento).

Rotación Específica: 10,5° (CHCh, 20°C, 589 nm).

1H RMN (400 MHz, DMSO-da)<8>ppm 1,09 (s, 9H), 3,46 (d, J=5,07 Hz, 2H), 3,62 (s, 3H), 4,10 (dt, J=6,27, 4,97 Hz, 1H), 5,40 (d, J=6,59 Hz, 1 H).

Paso 2

(2S)-3-terc-butoxi-2-[(trifluorometanosulfonil)oxi]propanoato de metilo

Una solución de (2S)-3-terc-butoxi-2-hidroxipropanoato de metilo (2,70 g, 15,3 mmol) en DCM (54 ml) se enfrió hasta -60°C, luego se añadió 2,6-dimetilpiridina (2,1 ml, 18,4 mmol, [108-48-5]) y el recipiente de reacción se enjuagó con N<2>. Se añadió gota a gota a la mezcla anhídrido trifluorometanosulfónico (1M en DCM, 16,1 mmol, [358-23-6]) bajo N<2>y la mezcla se agitó a -60°C durante 3h. La mezcla se calentó hasta 0°C, luego se extrajo con agua y HCl (1M, ac.), la capa orgánica se secó sobre Na<2>SO<4>, se filtró y se concentró bajo presión reducida produciendo 3,66 g del compuesto del título (Intermediario 28, 77 % de rendimiento).

<1>H RMN (DMSO-d<6>, 400 MHz):<8>(ppm) 4,10 (t,J= 4,9 Hz, 1H), 3,62 (s, 3H), 3,46 (d,J= 5,1 Hz, 2H), 1,09 (s, 9H).

Ejemplo 1

Paso 1

3-[2-(4-etoxifenil)etoxi]-2-[(metanosulfonil)oxi]propanoato de metilo

Metil-3-[2-(4-etoxifenil)etoxi]-2-hidroxipropanoato (Intermediario 1, 1,61 g, 6,02 mmol) y TEA (2,1 ml, 15 mmol;

[121-44-8]) en THF (40 ml) se enfriaron hasta 0-5°C bajo N<2>. Se añadió gota a gota MsCl (700 pl, 9,0 mmol;

[124-63-0]), y la mezcla se dejó calentar hasta TA, y ésta se agitó durante la noche. La mezcla se añadió a NaHCO<3>(50% ac. sat.) y ésta se extrajo con EtOAc (3x), la fase orgánica se lavó con NaCl (ac. sat.), se secó sobre Na<2>SO<4>, se filtró y se concentró bajo presión reducida, produciendo el compuesto del título (1,79 g,<8 6>% de rendimiento).

LC-MS (Procedimiento 1): Tr = 1,17min; MS (ESlpos): m/z = 364 [M+H]+.

1H-RMN (400MHz, DMSO-d<6>):<8>[ppm]= 1,30 (t, 3H), 2,71 (t, 2H), 3,22 (s, 3H), 3,52 -3 ,67 (m, 2H), 3,69 (s, 3H), 3,75 - 3 , 87 (m, 2H), 3,97 (c, 2H), 5,31 - 5 , 33 (m, 1H), 6,80 -6 ,82 (m, 2H) 7,09 -7 ,12 (m, 2H).

Paso 2

3-[2-(4-etoxifenil)etoxi]-2-[4,7,10-tris(2-terc-butoxi-2-oxoetil)-1,4,7,10-tetraazaciclododecan-1-il]propanoato de metilo

2,2',2”-(1,4,7,10-tetraazacidododecan-1,4,7-triil)triacetato de tri-terc-butilo (6,52 g, 12,7 mmol, [122555-91-3]), 3-[2-(4-etoxifenil)etoxi]-2-[(metanosulfonil)oxi] propanoato de metilo (6,58 g, 19,0 mmol), K<2>CO<3>(2,63 g, 19,0 mmol) y MeCN (44 ml) se añadieron a un recipiente de reacción y se calentaron a 80°C durante la noche. La mezcla se filtró, y el sólido se lavó con MeCN, las fases orgánicas combinadas se concentran bajo presión reducida produciendo el producto crudo (12,57 g).

LC-MS (Procedimiento 2): Tr = 1,18min; MS (ESIpos): m/z = 765,5 [M+H]+.

Paso 3

Ácido 2,2',2"-(10-{3-[2-(4-etoxifenil)etoxi]-1-metoxi-1-oxopropan-2-il}-1,4,7,10-tetraazaciclododecan-1,4,7-triil)triacético

El producto crudo 3-[2-(4-etoxifenil)etoxi]-2-[4,7,10-tris(2-terc-butoxi-2-oxoetil)-1,4,7,10-tetraazaciclododecan-1-il]propanoato de metilo (15,1 g, 19,7 mmol) y ácido fórmico (320 ml) se calentaron a 50°C durante 2h, luego de ello la temperatura se incrementó hasta 70°C durante 1h. La mezcla se concentró bajo presión reducida produciendo el producto crudo (17,3 g). La purificación por medio de cromatografía RP (2 x inyección de mezcla cruda en 50% MeOH agua, Biotage C18 12o g, A = agua/1% ácido fórmico, B = MeOH/1% ácido fórmico, 0%B a 50% en 15CV) produjo el producto, que contenía aproximadamente 1 equivalente de ácido fórmico (3,38 g, 29% de rendimiento).

LC-MS (Procedimiento 2): Tr = 0,68min; MS (ESIpos): m/z = 597,3 [M+H]+.

1H RMN (400 MHz, DMSO-d<6>)<8>ppm 1,30 (t, 3H) 2,67 - 2,73 (m, 4H) 2,80 - 3,14 (m, 14H) 3,41 - 3,54 (m,<8>H) 3,57 (s, 3H) 3,73 - 3,81 (m, 3H) 3,97 (c, 2H) 6,80 (dd, 2H) 7,11 (dd, 2H).

Paso 4

2,2',2"-(10-{1-carboxi-2-[2-(4-etoxifenil)etoxi]etil}-1,4,7,10-tetraazaciclododecan-1,4,7-triil)triacetato de gadolinio

Se añadieron a un recipiente de reacción ácido 2,2',2”-(10-{3-[2-(4-etoxifenil)etoxi]-1-metoxi-1-oxopropan-2-il}-1,4,7,10-tetraazacidododecan-1,4,7-triil)triacético (990 mg, 1,66 mmol) y Gd<2>O<3>(259 mg, 713 |jmol), se añadió agua (16 ml) y la mezcla se calentó durante 18h a 100°C. El pH de la mezcla se ajustó hasta 5 utilizando NaOH (1M, ac.) y se añadió 2g de Chelex100™ (forma sódica, lavada) la mezcla se agitó durante 2h a TA. Se llevó a cabo la prueba de xilenol-naranja indicando que la mezcla estaba libre de gadolinio no complejado. La mezcla se filtró, luego de lo cual la purificación por medio de cromatografía RP (Biotage, SNAP Ultra C18 de 120 g, 50 ml/min, A = agua, B = MeCN, 5%B a 50%B en 15C) produjo el compuesto del título (1,41 g, conteniendo agua, 115 % de rendimiento).

LC-MS (Procedimiento 2): Tr = 0,71min; MS (ESIpos): m/z = 738 [M+H]+.

LC-MS (Procedimiento 3): Tr = 0,69min; MS (ESIpos): m/z = 369,7 [M+2H]++, 738,3 [M+H]+, 747,3 [2M+2H+H2O]++. El patrón de isótopos observado es acorde con un complejo de gadolinio.

Ejemplo 2

Paso 1

terc-butil-3-{4-[2-(2-etoxietoxi)etoxi]fenil}-2-[(metanosulfonil)oxi]propanoato

Se añadió terc-butil-3-{4-[2-(2-etoxietoxi)etoxi]fenil}-2-hidroxipropanoato (Intermediario 2, 9,68 g, 27,3 mmol) a THF (91 ml) bajo N<2>, seguido por T<e>A (8,4 ml,<6 0>mmol; [121-44-8]) y la mezcla se enfrió hasta 0-5°C. Se añadió gota a gota MsCl (2,3 ml, 30 mmol; [124-63-0]), luego de lo cual la reacción se calentó hasta TA y se agitó durante 3h. La mezcla se añadió a NaHCO<3>(50% ac. sat.) y la capa acuosa se extrajo con EtOAc (3x), las fases orgánicas combinadas se lavaron con NaCl (ac. sat. 2x), se secaron sobre Na<2>SO<4>, se filtraron y se concentraron bajo presión reducida, produciendo el compuesto del título (11,7 g, 94 % de rendimiento). LC-MS (Procedimiento 1): Tr = 1,26min; MS (ESIpos): m/z = 450,4 [M+NH<4>]+.

<1>H RMN (DMSO-d<6>, 400 MHz):<6>(ppm) 7,16-7,22 (m,J=<8 , 6>Hz, 2H), 6,84-6,92 (m, 2H), 5,11 (dd,J= 7,4, 5,8 Hz, 1H), 4,00-4,09 (m, 2H), 3,69-3,74 (m, 2H), 3,55-3,59 (m, 2H), 3,47-3,50 (m, 2H), 3,42 (c,J= 7,0 Hz, 2H), 3,02 (s, 3H), 2,98-3,11 (m, 2H), 1,36 (s, 9H), 1,09 (t,J= 7,0 Hz, 3H).

Paso 2

terc-butil-3-{4-[2-(2-etoxietoxi)etoxi]fenil}-2-(1,4,7,10-tetraazaciclododecan-1-il)propanoato

Se calentaron terc-butil-3-{4-[2-(2-etoxietoxi)etoxi]fenil}-2-[(metanosulfonil)oxi]propanoato racémico (38,5 g, 88,9 mmol), 1,4,7,10-tetraazaciclododecano (18,4 g, 107 mmol) y MeCN (220 ml) bajo N<2>a 70°C durante la noche. La mezcla se filtró y el producto crudo (45,2 g) se utilizó sin purificación adicional.

LC-MS (Procedimiento 2): Tr = 0,63min; MS (ESIpos): m/z = 509,4 [M+H]+.

Paso 3

terc-butil-3-{4-[2-(2-etoxietoxi)etoxi]fenil}-2-[4,7,10-tris(2-terc-butoxi-2-oxoetil)-1,4,7,10-tetraazacidododecan-<1>-il]propanoato

Se disolvió terc-butil-3-{4-[2-(2-etoxietoxi)etoxi]fenil}-2-(1,4,7,10-tetraazacidododecan-1-il)propanoato (45,0 g, 88,5 mmol) en MeCN (450 ml) bajo N<2>. Se añadió DIPEA (77 ml, 440 mmol; [7087-68-5]) seguido por la adición gota a gota de bromoacetato de terc-butilo (46 ml, 310 mmol) disuelto en MeCN (15 ml). La mezcla se agitó durante 5h a 60°C. La mezcla se concentró bajo presión reducida, el residuo se disolvió en EtOAc y se lavó con NaHCO<3>(50% ac. sat.), seguido por NaCl (ac. sat.), se secó sobre Na<2>SO<4>, se filtró y el solvente se eliminó bajo presión reducida produciendo el compuesto crudo del título (88,5 g).

LC-MS (Procedimiento 2): Tr = 1,17min; MS (ESIpos): m/z = 851,4 [M+H]+.

Paso 4

ácido 3-{4-[2-(2-etoxietoxi)etoxi]fenil}-2-[4,7,10-tris(carboximetil)-1,4,7,10-tetraazaciclododecan-1-il]propanoico

Se agitó terc-butil-3-{4-[2-(2-etoxietoxi)etoxi]fenil}-2-[4,7,10-tris(2-terc-butoxi-2-oxoetil)-1,4,7,10-tetraazaciclododecan-1-il]propanoato racémico crudo (88,5 g, 83,2 mmol) con ácido fórmico (530 ml, 14 mol;

[64-18-6]) a 70°C durante 4h. La mezcla se concentró bajo presión reducida y se purificó utilizando cromatografía RP (el compuesto se vertió en dos lotes, Biotage C18 Ultra de 400g, 70 ml/min, A = agua, B = MeCN, 0%B a 50%B en 30min, 100%B 10min) produciendo el compuesto del título (24,8 g, 48 % de rendimiento a lo largo de 4 pasos) y una fracción adicional (8,4 g, máximo 16 % de rendimiento) de producto de menor pureza.

LC-MS (Procedimiento 2): Tr = 0,59min; MS (ESIpos): m/z = 627,3 [M+H]+.

<1>H RMN (400 MHz, DMSO-d<6>)<8>ppm 1,09 (t, 3H) 2,67 - 3,1 (m, 15H) 3,35 - 3,61 (m, 12H) 3,64 - 3,79 (m, 2H) 3,92 - 4,12 (m, 2H) 6,79 - 6,83 (m, 2H) 7,14 - 7,25 (m, 2H).

<13>C RMN (DMSO-d<6>, 101 MHz):<8>(ppm) 172,3, 171,5 (a), 169,9 (a, 2C), 157,2, 130,8 (2C), 130,6, 114,4 (2C), 70,2, 69,5, 69,3, 67,2, 65,9, 65,3 (a), 55,4 (a), 55,2 (a, 2C), 52,0 (a, 2C), 51,7 (a, 2C), 49,3 (a, 2C), 47,1 (a, 2C), 33,1 (a), 15,4.

Paso 5

2,2',2"-{10-[1-carboxi-2-{4-[2-(2-etoxietoxi)etoxi]fenil}etil]-1,4,7,10-tetraazaciclododecan-1,4,7-triil}triacetato de gadolinio

Se calentaron ácido 3-{4-[2-(2-etoxietoxi)etoxi]fenil}-2-[4,7,10-tris(carboximetil)-1,4,7,10-tetraazaciclododecan-1-il]propanoico racémico (24,8 g, 39,5 mmol), agua (310 ml) y Gd<2>O<3>(6,45 g, 17,8 mmol, [12064-62-9]) y se agitaron a 105°C durante 4h. Se añadió Chelex100™ (forma sódica, lavada, 10 g) y el pH se ajustó hasta 5 utilizando NaOH (solución ac., 1M) y se continuó la agitación hasta que la solución probó estar libre de gadolinio. La mezcla se filtró y luego se purificó por medio de cromatografía RP (la mezcla se vertió en dos porciones iguales, C18 Biotage de 120g, 40 ml/min, A = agua, B = MeCN, 0%B a 50%B en 25min, 100%B<1 0>min) luego de lo cual la combinación de las correspondientes fracciones del producto produjo el compuesto del título (16,0 g, 52 % de rendimiento) y una segunda fracción de fracción del producto de menor pureza (11 g, 84% de pureza, 29 % de rendimiento).

LC-MS (Procedimiento 3): Tr = 0,59min; MS (ESIpos): m/z = 391,7 [M+2H]++, 782,4 [M+H]+. El patrón de isótopos observado es acorde con un complejo de gadolinio.

Ejemplo 3

Paso 1

(2R)-3-{4-[2-(2-etoxietoxi)etoxi]fenil}-2-[(metanosulfonil)oxi]propanoato de terc-butilo

Se disolvió elIntermediario 3, (2R)-3-{4-[2-(2-etoxietoxi)etoxi]fenil}-2-hidroxipropanoato (9,20 g, 26,0 mmol) en 2-metil-tetrahidrofurano y se añadió DIPEA (14 ml, 78 mmol; [7087-68-5]). La mezcla se enfrió hasta 10°C y se añadió gota a gota MsCl (6,0 ml, 78 mmol). La reacción se dejó calentar hasta TA y se agitó durante la noche. Se añadió MTBE (400 ml) y la reacción se extrajo con agua (5 x 200 ml), NaHCO<3>sat. (2 x 200 ml) y NaCl (ac. sat., 200 ml) y se secó sobre Na<2>SO<4>. El solvente se eliminó bajo presión reducida para proporcionar 11,5 g (>100%) del compuesto del título como aceite naranja, el cual se utilizó como tal en el paso siguiente. LC-MS (Procedimiento 2): Tr = 1,30min; MS (ESIpos): m/z = 450,5 [M+NH<4>]+.

<1>H RMN (CDCl<3>, 400 MHz):<8>(ppm) 7,13-7,17 (m, 2H), 6,84-6,88 (m, 2H), 4,99 (dd, J = 8,4, 4,6 Hz, 1H), 4,11 (dd, J = 5,8, 5,1 Hz, 2H), 3,85 (dd, J = 5,4, 4,2 Hz, 2H), 3,68-3,73 (m, 2H), 3,60-3,63 (m, 2H), 3,53 (c, J = 7,0 Hz, 2H), 3,17 (dd, J = 14,4, 4,3 Hz, 1H), 3,05 (dd, J = 14,4, 8,4 Hz, 1H), 2,83 (s, 3H), 1,44 (s, 9H), 1,21 (t, J = 7,1 Hz, 3H).

Paso 2

(2S)-3-{4-[2-(2-etoxietoxi)etoxi]fenil}-2-(1,4,7,10-tetraazaciclododecan-1-il)propanoato de terc-butilo

Se disolvió 1,4,7,10-tetraazaciclododecano (5,50 g, 31,9 mmol, 1,2 eq) en MeCN y se añadió carbonato de cesio (<8 , 6 6>g, 26,6 mmol). La mezcla se calentó hasta 50°C y se añadió una solución de (2R)-3-{4-[2-(2-etoxietoxi)etoxi]fenil}-2-[(metanosulfonil)oxi] propanoato de terc-butilo (11,5 g, 26,6 mmol) en MeCN (10 ml). La mezcla luego se calentó hasta 70°C durante la noche. LCMS (Procedimiento 1): Tr = 0,76min (74% ELSD, m/z 509) indicó que la reacción estaba completa. Los sólidos se eliminaron por medio de filtración, se lavaron con MeCN y los filtrados combinados se concentraron bajo presión reducida. Se obtuvieron 13,3 g de (2S)-3-{4-[2-(2-etoxietoxi)etoxi]fenil}-2-(1,4,7,10-tetraazaciclododecan-1-il) propanoato de terc-butilo como aceite naranja, el cual se utilizó como tal en el paso siguiente.

LC-MS (Procedimiento 2): Tr = 0,76min; MS (ESIpos): m/z = 509,6 [M+H+]+.

Paso 3

(2S)-3-{4-[2-(2-etoxietoxi)etoxi]fenil}-2-[4,7,10-tris(2-terc-butoxi-2-oxoetil)-1,4,7,10-tetraazaciclododecan-1-il]propanoato de terc-butilo

Se disolvió (2S)-3-{4-[2-(2-etoxietoxi)etoxi]fenil}-2-(1,4,7,10-tetraazaciclododecan-1-il)propanoato de terc-butilo (13,3 g, 26,1 mmol) en MeCN<( 2 2 0>ml) y se colocó bajo N<2>. Se añadió K<2>CO<3>(11,9 g, 86,3 mmol) y la mezcla se calentó hasta 50°C. Se añadió bromoacetato de terc-butilo (11,7 ml, 15,6 mmol) y la mezcla se agitó a 50°C durante la noche. Los sólidos se eliminaron por medio de filtración y el filtrado se concentró bajo presión reducida. El residuo se recogió en DCM (500 ml) y se extrajo con agua (1 x 200 ml). La fase orgánica se secó y se concentró bajo presión reducida para proporcionar el compuesto del título (24,1 g) como aceite naranjamarrón, el cual se utilizó como tal en el paso siguiente.

LC-MS (Procedimiento 2): Tr = 1,35min; MS (ESIpos): m/z = 852,3 [M+H]+.

Paso 4

ácido (2S)-3-{4-[2-(2-etoxietoxi)etoxi]fenil}-2-[4,7,10-tris(carboximetil)-1,4,7,10-tetraazaciclododecan-1-il]propanoico

Se disolvió (2S)-3-{4-[2-(2-etoxietoxi)etoxi]fenil}-2-[4,7,10-tris(2-terc-butoxi-2-oxoetil)-1,4,7,10-tetraazaciclododecan-1-il]propanoato de terc-butilo (24,1 g, 28,3 mmol) en ácido fórmico (160 ml) y se agitó a 70°C durante 4h y durante la noche a TA. LCMS (Procedimiento 2): Tr = 0,58min (82% ELSD) indicó que la reacción estaba completa. El ácido fórmico se eliminó bajo presión reducida y el residuo se suspendió en tolueno, el cual se eliminó bajo presión reducida. El procedimiento con tolueno se repitió tres veces, durante el cual el residuo se tornó más sólido y se obtuvo como espuma. El material crudo de 22,2 g obtenido de este modo se disolvió en agua / MeCN 98 / 2 (1,2 g permaneció como residuo, el cual se eliminó por medio de filtración) y se purificó por medio de cromatografía RP en porciones de 5 x 20 ml (SNAP C18 de 120g, 50 ml/min, 205 nm. A = agua/0,1% TFA, B = MeCN, 0% a 28% B en<6 , 8>CV, 48%B a 100%B 1CV, 100% B 1,2 CV) Las fracciones interesantes se agruparon, y se liofilizaron para proporcionar 4,9 g del compuesto del título. Otro lote deIntermediario 3(9,0 g) se llevó a través de los pasos 1 a 4 de forma idéntica. El material obtenido (5,6 g) fue idéntico, se combinó con los 4,9 g obtenidos anteriormente. Después del secado (10 mbar) se obtuvo 9,5 g (30%, calc. a partir del paso 1) de ácido (2S)-3-{4-[2-(2-etoxietoxi) etoxi] fenil}-2-[4,7,10-tris(carboximetil)-1,4,7,10-tetraazaciclododecan-1-il]propanoico.

LC-MS (Procedimiento 2): Tr = 0,58min; MS (ESIpos): m/z = 627,7 [M+H]+.

Paso 5

2,2',2M-{10-[(1S)-1-carboxi-2-{4-[2-(2-etoxietoxi)etoxi]fenil}etil]-1,4,7,10-tetraazaciclododecan-1,4,7-triil}triacetato de gadolinio

Se disolvió ácido (2S)-3-{4-[2-(2-etoxietoxi)etoxi]fenil}-2-[4,7,10-tris(carboximetil)-1,4,7,10-tetraazaciclododecan-1-il]propanoico (9,10 g, 14,5 mmol) en agua (120 ml) y se añadió Gd<2>O<3>(2,37 g, 6,53 mmol, 0,9 eq). El pH se ajustó hasta 4 (ácido fórmico) y la mezcla se agitó a 100°C durante<8>h. Se añadió Chelex100™ (forma sódica, aprox. 10 g) y la mezcla se agitó durante la noche a TA, luego de lo cual la prueba de Xilenol-naranja indicó la ausencia de gadolinio libre. El pH se ajustó hasta<8>(hidróxido de amonio al 25%) y la mezcla completa se cargó en un cartucho Biotage vacío y se sometió directamente a cromatografía RP (SNAP C18 de 400g, 100 ml/min, 220 nm. A = agua, B = MeCN, 0%B 5CV, 0% a 15% B en 4,4CV, 15%B 0,3CV, 15% a 16%B en 0,3CV, 16%B 1,3CV, 16%B a 50%B en 10,2CV) Las fracciones interesantes se agruparon, se liofilizaron y se secaron a 50°C para proporcionar 7,44 g (63% del compuesto del título como sólido blanco, esponjoso.

Rotación Específica: « d<20>= 14,42° /- 0,21° (c=1, H<2>O).

Rotación Específica: « d<20>= 12,16° /- 0,25° (c=1, MeOH).

LC-MS (Procedimiento 2): Tr = 0,68min; MS (ESIpos): m/z = 782 [M+H]+.

LC-MS (Procedimiento 3): Tr = 0,60min (100% DAD); MS (ESIpos): m/z = 391 [M 2H]++, 782 [M H]+ y algún [2M 2H]++, 791 [2M H2O 2H]++. El patrón de isótopos observado es acorde con un complejo de gadolinio.

Ejemplo 4

Paso 1

(2S)-3-{4-[2-(2-etoxietoxi)etoxi]fenil}-2-[(metilsulfonil)oxi]propanoato de terc-butilo

(2S)-3-{4-[2-(2-etoxietoxi)etoxi]fenil}-2-hidroxipropanoato de terc-butilo (Intermediario 4, 650 mg, 1,83 mmol) y TEA (560 pl, 4,0 mmol; [121-44-8]) se agitaron en T H F (6,1 ml) bajo una atmósfera de N<2>. La mezcla se enfrió 0-5°C y se añadió gota a gota MsCl (160 pl, 2,0 mmol; [124-63-0]). La mezcla se calentó hasta TA, se agitó durante 3h, luego de lo cual ésta se añadió a una solución de NaH cO<3>(50% ac. sat.), y la mezcla se extrajo con MTBE (3x), las fases orgánicas combinadas se lavaron con una solución de NaCl (ac. sat.), se secaron sobre Na<2>SO<4>, se filtraron y se concentraron bajo presión reducida, produciendo el compuesto del título (831 mg,<1 0 0>% de rendimiento).

LC-MS (Procedimiento 4): Tr = 1,29min; MS (ESlpos): m/z = 450,4 [M+NH<4>T

1H RMN (400 MHz, DMSO-d<6>)<8>ppm 1,09 (t, J=6,97 Hz, 3H) 1,36 (s, 9H) 2,97 - 3,10 (m, 5H) 3,42 (c, J=6,84 Hz, 2H) 3,46 - 3,50 (m, 2H) 3,54 - 3,61 (m, 2H) 3,67 - 3,82 (m, 2H) 4,00 - 4,15 (m, 2H) 5,04 - 5,15 (m, 1H) 6,84 - 6,93 (m, 2H) 7,14 - 7,25 (m, 2H).

Paso 2

(2R)-3-{4-[2-(2-etoxietoxi)etoxi]fenil}-2-(1,4,7,10-tetraazaciclododecan-1-il)propanoato de terc-butilo

(2S)-3-{4-[2-(2-etoxietoxi)etoxi]fenil}-2-[(metanosulfonil)oxi]propanoato de terc-butilo (830 mg, 1,92 mmol) y 1,4,7,10-tetraazaciclododecano (397 mg, 2,31 mmol) se agitaron en MeCN (17 ml) a 55°C durante la noche. La temperatura luego se elevó hasta 70°C y la reacción se agitó durante 18h adicionales. La mezcla luego se concentró bajo presión reducida, proporcionando el producto crudo (977 mg, 80% producto por medio de ELSD).

LC-MS (Procedimiento 2): Tr = 0,66min; MS (ESlpos): m/z = 509,2 [M+H]+.

Paso 3

(2R*)-3-{4-[2-(2-etoxietoxi)etoxi]fenil}-2-[4,7,10-tris(2-terc-butoxi-2-oxoetil)-1,4,7,10-tetraazaciclododecan-1-il]propanoato de terc-butilo

El producto crudo, (2R)-3-{4-[2-(2-etoxietoxi)etoxi]fenil}-2-(1,4,7,10-tetraazaciclododecan-1-il)propanoato (977 mg, 1,92 mmol), se agitó en MeCN (20 ml) bajo N<2>. Se añadió DIPEA (1,7 ml, 9,6 mmol; [7087-68-5]), seguido por la adición gota a gota de bromoacetato de terc-butilo (990 pl, 6,7 mmol) disuelto en MeCN (0,33 ml) y la mezcla se calentó hasta 60°C durante 5h. La mezcla luego se concentró bajo presión reducida, el residuo se disolvió en EtOAc, se lavó con una solución de NaHCO<3>(50% ac. sat.) seguido por el lavado con NaCl (ac. sat.), se secó sobre Na<2>SO<4>, se filtró y la mezcla se concentró bajo presión reducida proporcionando el producto crudo (2,19 g).

LC-MS (Procedimiento 2): Tr = 1,15min; MS (ESlpos): m/z = 851,4 [M+H]+.

Paso 4

ácido (2R)-3-{4-[2-(2-etoxietoxi)etoxi]fenil}-2-[4,7,10-tris(carboximetil)-1,4,7,10-tetraazaciclododecan-1-il]propanoico

El producto crudo (2R)-3-{4-[2-(2-etoxietoxi)etoxi]fenil}-2-[4,7,10-tris(2-terc-butoxi-2-oxoetil)-1,4,7,10-tetraazaciclododecan-1-il]propanoato de terc-butilo (2,19 g, 2,57 mmol) se calentó con ácido fórmico (33 ml) durante 4h a 70°C. La mezcla luego se concentró bajo presión reducida, con purificación por medio de cromatografía RP (Biotage C18 de 60g, 50 ml/min, A = agua, B = MeCN, 0%B a 50%B en 30min, 100%B 10min,) produciendo el compuesto del título (286 mg, 18 % de rendimiento a lo largo de 4 pasos).

Rotación Específica: 5,6° (MeOH, 20°C, 589 nm).

LC-MS (Procedimiento 2): Tr = 0,58min; MS (ESlpos): m/z = 627,1 [M+H]+.

<1>H RMN (DMSO-d<6>, 400 MHz):<8>(ppm) 7,20 (d,J=<8 , 6>Hz, 2H), 6,82 (d,J=<8 , 6>Hz, 2H), 4,01-4,06 (m, 2H), 3,69-3,73 (m, 2H), 3,36-3,61 (m, 14H), 2,63-3,10 (m, 17H), 1,09 (t,J= 7,0 Hz, 3H).

<13>C RMN (DMSO-d<6>, 101 MHz):<8>(ppm) 171,8, 170,9, 169,4 (a, 2C), 156,6, 130,2 (2C), 130,1, 113,8 (2C), 69,7, 69,0, 68,7, 66,7, 65,3, 64,8 (a), 54,9 (a), 54,7 (a, 2C), 51,4 (a, 2C), 51,1 (a, 2C), 48,8 (a, 2C), 46,5 (a, 2C), 32,5 (a), 14,9.

Paso 5

2,2',2"-{10-[(1R)-1-carboxi-2-{4-[2-(2-etoxietoxi)etoxi]fenil}etil]-1,4,7,10-tetraazaciclododecan-1,4,7-triil}triacetato de gadolinio

Ácido (2R)-3-{4-[2-(2-etoxietoxi)etoxi]fenil}-2-[4,7,10-tris(carboximetil)-1,4,7,10-tetraazaciclododecan-1-il]propanoico (286 mg, 456 pmol), Gd<2>O<3>(74,4 mg, 205 pmol) y agua (4,7 ml) se agitaron durante la noche en un vial sellado a 105°C. Luego de ello la mezcla se calentó hasta 120°C durante 5h adicionales. Se añadió Chelex100™ (aproximadamente 5 g, forma sódica, lavada), y el pH se ajustó hasta 5 utilizando NaOH (1M, ac.) y la mezcla se agitó durante 1h. La mezcla se filtró, luego se concentró hasta la sequedad, después de ello ésta se purificó por medio de cromatografía RP (Biotage C18 de 30g, 25 ml/min, A = agua, B = MeCN, 0%B a 50%B en 25min, 100%B 10min) produciendo el compuesto del título (267 mg, 75 % de rendimiento).

Rotación Específica: -14,1° (c=1, MeOH, 20°C, 589 nm.

LC-MS (Procedimiento 2): Tr = 0,66min; MS (ESlpos): m/z = 782,3 [M+H+]+.

LC-MS (Procedimiento 3): Tr = 0,62min; MS (ESlpos): m/z = 391,7 [M+2H<+ ] 2>, 782,3 [M+H+]+, 790 [2M+2H]+ H<2>O]++.

Ejemplo 5

Paso 1

etil-3-{4-[2-(2-etoxietoxi)etoxi]fenil}-2-[(metanosulfonil)oxi]propanoato

Se agitaron etil-3-{4-[2-(2-etoxietoxi)etoxi]fenil}-2-hidroxipropanoato (Intermediario 5, 2,44 g, 7,48 mmol) y TEA (2,3 ml, 16 mmol; [121-44-8]) en THF (25 ml) bajo N<2>a 0-5°C. Se añadió gota a gota MsCI (640 pl, 8,2 mmol; [124-63-0]) a la mezcla y la agitación continuó durante 3h. La mezcla luego se añadió a una solución de NaHCOa (50% ac. sat.), y la capa acuosa se extrajo con MTBE (3x), las capas orgánicas combinadas se lavaron con una solución de NaCl (ac. sat.), se secaron sobre Na<2>SO<4>, se filtraron y se concentraron bajo presión reducida produciendo el compuesto del título (2,82 g, 93 % de rendimiento).

LC-MS (Procedimiento 4): Tr = 1,14min; MS (ESlpos): m/z = 422,3 [M+NH<4>+]+.

1H RMN (400 MHz, DMSO-da)<8>ppm 1,09 (t, 3H) 1,16 (t, 3H) 3,00 -3 ,14 (m, 5H) 3,38 -3,51 (m, 4H) 3,54 -3,59 (m, 2H) 3,69 - 3,75 (m, 2H) 4,05 (dd, 2H) 4,13 (c, 2H) 5,26 (dd, 1H) 6,84 - 6,91 (m, 2H) 7,12 - 7,21 (m, 2H).

Paso 2

etil-2-[4,10-bis(2-terc-butoxi-2-oxoetil)-1,4,7,10-tetraazaciclododecan-1 -il]-3-{4-[2-(2-etoxietoxi)etoxi]fenil}propanoato

2,2'-(1,4,7,10-tetraazaciclododecan-1,7-diil)diacetato de di-terc-butilo (1,86 g, 4,65 mmol, [162148-48-3]), K2CO3(0,71 g, 5,1 mmol), 3-{4-[2-(2-etoxietoxi)etoxi] fenil}-2-[(metanosulfonil)oxi]propanoato racémico (1,88 g, 4,65 mmol) y MeCN (22 ml) se agitaron a 70°C durante 3d. La mezcla se filtró, el sólido se lavó con MeCN y los filtrados se combinaron y se concentraron bajo presión reducida proporcionando el producto crudo (3,30 g).

Paso 3

metil-2-[(metanosulfonil)oxi]propanoato

Metil-2-hidroxipropanoato (5,00 g, 48,0 mmol), TEA (15 ml, 110 mmol; [121-44-8]) y THF (50 ml) se agitaron a 0-5°C. Bajo una atmósfera de N<2>, se añadió gota a gota MsCl (4,1 ml, 53 mmol; [124-63-0]), luego de lo cual la mezcla se llevó hasta TA y se agitó durante 3h. La mezcla luego se añadió a una solución de NaHCO<3>(50% ac. sat.), ésta se extrajo con MTBE (3x), las fases orgánicas combinadas se lavaron con NaCl (ac. sat. 2x), se secaron sobre Na<2>SO<4>, se filtraron y se concentraron bajo presión reducida, obteniendo el compuesto del título (7,17 g, 82 % de rendimiento).

1H RMN (DMSO-da, 400 MHz):<8>(ppm) 5,21 (c,J= 6,9 Hz, 1H), 3,72 (s, 3H), 3,25 (s, 3H), 1,48 (d,J= 7,1 Hz, 3H).

Paso 4

etil-2-{4,10-bis(2-terc-butoxi-2-oxoetil)-7-[1-metoxi-1-oxopropan-2-il]-1,4,7,10-tetraazaciclododecan-1-il}-3-{4-[<2>-(<2>-etoxietoxi)etoxi]fenil}propanoato

Etil-2-[4,10-bis(2-terc-butoxi-2-oxoetil)-1,4,7,10-tetraazaciclododecan-1-il]-3-{4-[2-(2-etoxietoxi)etoxi]fenil}propanoato racémico,Paso 2, (1,10 g, 1,55 mmol), metil-2-[(metanosulfonil)oxi]propanoato (339 mg, 1,86 mmol), K<2>CO<3>(472 mg, 3,41 mmol) en MeCN (2,8 ml) se agitaron conjuntamente a 55°C durante la noche. La temperatura luego se elevó hasta 80°C durante<6>h adicionales. La mezcla luego se filtró, el sólido se lavó con EtOH, las fases orgánicas se combinaron y se concentraron bajo presión reducida, proporcionando el producto crudo como una mezcla de diastereómeros (1,14 g).

LC-MS (Procedimiento 2): Tr = 1,11 - 1,17min; MS (ESlpos): m/z = 795,9 [M+H+]+.

Paso 5

ácido 2,2'-{4-[1-etoxi-3-{4-[2-(2-etoxietoxi)etoxi]fenil}-1-oxopropan-2-il]-10-[1-metoxi-1-oxopropan-2-il]-1,4,7,10-tetraazaciclododecan-1,7-diil}diacético

Etil-2-{4,10-bis(2-terc-butoxi-2-oxoetil)-7-[1-metoxi-1-oxopropan-2-il]-1,4,7,10-tetraazaciclododecan-1-il}-3-{4-[2-(2-etoxietoxi)etoxi]fenil}propanoato (1,14 g, 1,44 mmol) y ácido fórmico (15 ml, 400 mmol; [64-18-6]) se agitaron durante la noche a 60°C, seguido por<6>h adicionales a 70°C. La mezcla se concentró bajo presión reducida. La purificación por medio de cromatografía RP (Biotage C18 Ultra de 60g, 50 ml/min, A = agua/0,5% ácido fórmico; B = EtOH/+0,5% ácido fórmico; 5%B 1CV, 5%B a 40 B 15CV) produjo el compuesto del título como una mezcla de diastereómeros (250 mg, 95 % de pureza, 24 % de rendimiento).

LC-MS (Procedimiento 2): Tr = 0,72min; MS (ESlpos): m/z = 683,7 [M+H+]+.

1H RMN (DMSO-d6, 400 MHz):<8>(ppm) 7,12-7,27 (m, 2H), 6,76-6,86 (m, 2H), 3,91-4,08 (m, 4H), 3,39-3,82 (m, 16H), 2,55-3,27 (m, 18H), 0,99-1,28 (m, 9H).

Paso 6

2-[7-(1-carboxi-2-{4-[2-(2-etoxietoxi)etoxi]fenil}etil)-4,10-bis(carboxilatometil)-1,4,7,10-tetraazaciclododecan-1-il]propanoato de gadolinio

Se agitaron ácido 2,2-{4-[-1-etoxi-3-{4-[2-(2-etoxietoxi)etoxi]fenil}-1-oxopropan-2-il]-10-[1-metoxi-1-oxopropan-2-il]-1,4,7,10-tetraazacidododecan-1,7-diil}diacético (250 mg, 366 |jmol), Gd<2>O<3>(59,7 mg, 165 jm ol) en agua (5 ml) durante 18h a 105°C en un recipiente de reacción sellado a presión, luego de lo cual la temperatura se elevó hasta 120°C durante 18h adicionales. La mezcla se trató con Chelex100™ (forma sódica, lavada, aproximadamente 5 g), y se agitó durante 1h, luego de lo cual ésta se filtró, se concentró bajo presión reducida y se purificó por medio de cromatografía RP (Biotage SNAP Ultra C18 de 30g, 25 ml/min, A = agua, B = MeCN, 0%B a 50% en 25min, 100%B 10min) produciendo dos diastereómeros. Diastereómero 1 (40 mg, 13 % de rendimiento) y Diastereómero 2 (130 mg, 42 % de rendimiento).

Diastereómero 1:

LC-MS (Procedimiento 3): Tr = 0,61min; MS (ESlpos): m/z = 398,6 [M+2H]++, 796,4 [M+H+]+. Los patrones de isótopos coinciden con los valores teóricos para el complejo de gadolinio correspondiente.

Ejemplo 6

Diastereómero 2 del Ejemplo 5 -130 mg (95 % de pureza).

LC-MS (Procedimiento 3): Tr = 0,63min; MS (ESlpos): m/z = 398,7 [M+2H]++, 796,4 [M+H+]+. Los patrones de isótopos coinciden con los valores teóricos para el complejo de gadolinio correspondiente.

Ejemplo 7

Paso 1

etil-3-[4-(2-etoxietoxi)fenil]-2-[(metanosulfonil)oxi]propanoato

Se agitaron etil-3-[4-(2-etoxietoxi)fenil]-2-hidroxipropanoato (5,39 g, 19,1 mmol,Intermediario 6), y TEA (5,9 ml, 42 mmol; [121-44-8]) en THF (56 ml) bajo N<2>a 0-5°C. Se añadió gota a gota MsCl (1,6 ml, 21 mmol; [124 63-0]) a la mezcla y la agitación continuó durante 3h. La mezcla luego se añadió a una solución de NaHCO<3>(50% ac. sat.), y la capa acuosa se extrajo con MTBE (3x), las capas orgánicas combinadas se lavaron con una solución de NaCl (ac. sat.), se secaron sobre Na<2>SO<4>, se filtraron y se concentraron bajo presión reducida produciendo el compuesto del título (6,96 g, 90 % de pureza, 91 % de rendimiento).

LC-MS (Procedimiento 4): Tr = 1,15min; MS (ESlpos): m/z = 378,3 [M+NH<4>+]+.

1H RMN (400 MHz, DMSO-da)<8>ppm 1,09 - 1,18 (m,<6>H) 3,02 (s, 3H) 3,04 - 3,10 (m, 2H) 3,49 (c, 2H) 3,64 -3,70 (m, 2H) 4,02 - 4,07 (m, 2H) 4,13 (c, 2H) 5,26 (dd, 1H) 6,85 - 6,90 (m, 2H) 7,14 - 7,19 (m, 2H).

Paso 2

etil-2-[4,10-bis(2-terc-butoxi-2-oxoetN)-1,4,7,10-tetraazaddododecan-1-N]-3-[4-(2-etoxietoxi)fenN]propanoato

2,2'-(1,4,7,10-tetraazaddododecan-1,7-diN)diacetato de di-terc-butilo(,51g, 11,2 mmol, [162148-48-3]), etil-3-[4-(2-etoxietoxi)fenil]-2-[(metanosulfonil)oxi]propanoato racémico (4,46 g, 12,4 mmol) y K<2>CO<3>(3,42 g, 24,8 mmol) en MeCN (31 ml) se agitaron a 80°C durante 24h. La mezcla se filtró, el sólido se lavó con EtOH, las fases orgánicas se combinaron y se concentraron bajo presión reducida para obtener el compuesto del título crudo (8,40 g, 57% producto por medio de detección ELSD).

LC-MS (Procedimiento 2): Tr = 1,26min; MS (ESlpos): m/z = 665,8 [M+H+]+.

Paso 3

etil-<2>-[(metanosulfonil)oxi]butanoato

Se agitaron etil-2-hidroxibutanoato (5,00 g, 37,8 mmol, [52089-54-0]) y TEA (12 ml, 83 mmol; [121-44-8]) en THF (110 ml) bajo N<2>a 0-5°C. Se añadió gota a gota MsCl (3,2 ml, 42 mmol; [124-63-0]) a la mezcla y la agitación continuó durante 3h. La mezcla luego se añadió a una solución de N aH Co<3>(50% ac. sat.), y la capa acuosa se extrajo con MTBE (3x), las capas orgánicas combinadas se lavaron con NaCl (ac. sat.), se secaron sobre Na<2>SO<4>, se filtraron y se concentraron bajo presión reducida produciendo el compuesto del título (<8 , 2 1>g, 103 % de rendimiento).1

1H RMN (400 MHz, DMSO-d<6>)<8>ppm 0,93 (t, 3H) 1,22 (t, 3H) 1,71 -1,95 (m, 2H) 3,25 (s, 3H) 4,19 (dtt, 2H) 5,05 (dd, 1H).

Paso 4

etil-2-[4,10-bis(2-terc-butoxi-2-oxoetil)-7-{(2SR)-1-etoxi-3-[4-(2-etoxietoxi)fenil]-1-oxopropan-2-il}-1,4,7,10-tetraazaciclododecan-<1>-il]butanoato

Etil-2-[4,10-bis(2-terc-butoxi-2-oxoetil)-1,4,7,10-tetraazaciclododecan-1-il]-3-[4-(2-etoxietoxi)fenil]propanoato, Paso 2, (4,20 g, 6,32 mmol), etil-2-[(metanosulfonil)oxi] butanoato (2,12 g, 10,1 mmol), K<2>CO<3>(1,75 g, 12,6 mmol) en MeCN (21 ml) se agitaron durante 24h a 80°C. La mezcla luego se filtró, el sólido se lavó con EtOH, las fases orgánicas se combinaron y se concentraron bajo presión reducida obteniendo el compuesto del título crudo (6,50 g).

LC-MS (Procedimiento 2): Tr = 1,28min; MS (ESIpos): m/z = 779,9 [M+H]+.

Paso 5

ácido 2,2'-(4-{1-etoxi-3-[4-(2-etoxietoxi)fenil]-1-oxopropan-2-il}-10-[(2SR)-1-etoxi-1-oxobutan-2-il]-1,4,7,10-tetraazaciclododecan-1,7-diil)diacético

Se agitaron conjuntamente etil-2-[4,10-bis(2-terc-butoxi-2-oxoetil)-7-{1-etoxi-3-[4-(2-etoxietoxi)fenil]-1-oxopropan-2-il}-1,4,7,10-tetraazaciclododecan-1-il]butanoato (6,50 g, 8,34 mmol) y ácido fórmico (110 ml) durante la noche a 70°C. La mezcla se concentró bajo presión reducida, y la cromatografía RP (Biotage SNAP Ultra C18 de 120g, 50ml/min, A = agua, B = MeCN, 0%B a 50%B en 30min, 100%B 10min) produjo el compuesto del título como una mezcla de diastereómeros (1,21 g, 95 % de pureza, 22 % de rendimiento a lo largo de 5 pasos).

LC-MS (Procedimiento 2): Tr = 0,76min; MS (ESIpos): m/z = 665,7 [M+H]+.

1H RMN (DMSO-d6, 600 MHz):<8>(ppm) 7,17-7,24 (m, 2H), 6,82 (d,J= 7,8 Hz, 2H), 4,07-4,13 (m, 2H), 3,94 4,04 (m, 4H), 3,74 (dd,J= 9,4, 6,4 Hz, 0,6H), 3,66 (t,J= 4,7 Hz, 2H), 3,63 (a dd,J= 9,0, 6,4 Hz, 0,5H), 3,48 (c,J= 6,9 Hz, 2H), 3,31-3,41 (m, 4H), 2,58-3,28 (m, 19H), 1,64-1,78 (m, 1H), 1,53-1,63 (m, 1H), 1,18-1,23 (m, 3H), 1,03-1,13 (m,<6>H), 0,81-0,89 (m, 3H).

13C RMN (DMSO-d6, 151 MHz):<8>(ppm) 171,5/171,4, 170,7/170,7, 167,9/168,7 (a, 2C), 156,7, 130,3/130,2 (2C), 129,4/129,5, 113,8/113,8 (2C), 68,1, 66,7, 65,4, 65,3/65,2, 64,1 (a), 59,7/59,7, 59,6/59,7, 55,3/54,4 (2C), 52,4/52,7 (2C), 52,0 (a, 2C), 45,9/45,7 (2C), 45,5 (a, 2C), 33,5/33,3, 21,5/21,3, 14,8, 14,0, 13,9, 13,8, 10,7/10,7.

Paso 6

2-[7-{1-carboxi-2-[4-(2-etoxietoxi)fenil]etil}-4,10-bis(carboxilatometil)-1,4,7,10-tetraazaciclododecan-1-il]butanoato de gadolinio

Se agitaron conjuntamente ácido 2,2'-(4-{1-etoxi-3-[4-(2-etoxietoxi)fenil]-1-oxopropan-2-il}-10-[1-etoxi-1-oxobutan-2-il]-1,4,7,10-tetraazacidododecan-1,7-diil)diacético (1,21 g, 1,81 mmol), Gd<2>O<3>(296 mg, 817 |jmol) y agua y se calentaron a 105°C durante 24h en un recipiente sellado a presión, luego de lo cual la mezcla se calentó a 120°C durante 6h adicionales. La mezcla se trató con Chelex100™ (forma sódica, lavada, aproximadamente 5 g), se agitó durante 1h, luego de lo cual ésta se filtró, se concentró bajo presión reducida y se purificó por medio de cromatografía RP (Biotage SNAP Ultra C18 de 60g, 50 ml/min, A = agua, B = MeCN, 0%B a 50%B en 25min, 100%B 10min) produciendo los compuestos del título como mezclas diastereoméricas. Fracción 1 (Ejemplo 7, 575 mg, 41 % de rendimiento) y Fracción 2 (74 mg, 5 % de rendimiento).

Fracción 1

LC-MS (Procedimiento 3): Tr = 0,58min (24% DAD) y 0,63min (74% DAD); MS (ESlpos): m/z = 383,7 [M+2H]++, 766,4 [M+H]+. Los patrones de isótopos coinciden con los valores teóricos para el complejo de gadolinio correspondiente.

Ejemplo 8

Fracción 2 - Paso 6 Ejemplo 7

LC-MS (Procedimiento 3): Tr = 0,63min (100% DAD); MS (ESlpos): m/z = 383,7 [M+2H]++, 766,4 [M+H]+. Los patrones de isótopos coinciden con los valores teóricos para el complejo de gadolinio correspondiente.

Ejemplo 9

Paso 1

(2R)-2-hidroxihex-5-enoato de metilo

Una mezcla de bromuro de cobre(l)-sulfuro de dimetilo (16,8 g, 81,8 mmol; CAS-RN: [54678-23-8]) en THF (80 ml) se enfrió hasta -70°C y se trató gota a gota con clorido(prop-2-en-1-il)magnesio (150 mmol, 74 ml de 2,0 M solución en THF; CAS-RN: [2622-05-1]) manteniendo la temperatura entre -70°C a -60°C. Ésta se agitó a -70°C durante 30min adicionales tras lo cual se añadió gota a gota una solución de (2R)-oxiran-2-carboxilato de metilo (16,7 g, 164 mmol; CAS-RN: [111058-32-3]) en THF (70 ml) y la agitación a -70°C continuó durante 30min. La mezcla de reacción se calentó de manera gradual hasta TA y se inactivó con NH<4>Cl (ac. sat.). La mezcla de reacción se extrajo con EtOAc, la capa orgánica se lavó dos veces con agua y se secó con Na<2>SO<4>. La mezcla se filtró y se concentró con cuidado bajo presión reducida (material volátil) para proporcionar el compuesto del título (22,3 g, 100%).

LC-MS (Procedimiento 3): Tr=0,61m in; MS (ESlpos): m/z = 145,1 [M+H]+.

1H RMN (400 MHz, DMSO-da)<8>ppm 2,05 -2,11 (m, 2H), 2,85 (dd, 1H), 2,96 (dd, 1H), 3,69 (s, 3H), 4,01 -4,07 (m, 1H), 4,94 - 5,05 (m, 2H), 5,41 (d, 1H), 5,75 - 5,85 (m, 1H).

Paso 2

(2R)-2-[(4-nitrobenceno-1-sulfonil)oxi]hex-5-enoato de metilo

Una solución de (2R)-2-hidroxihex-5-enoato de metilo crudo (16,3 g, 113 mmol) en tolueno seco (210 ml) se enfrió hasta 0°C y se trató con cloruro de 4-nitrobenceno-1-sulfonilo (27,6 g, 125 mmol) y TEA (32 ml, 227 mmol; [121-44-8]). La mezcla de reacción se calentó hasta TA y se agitó durante la noche. La mezcla se concentró bajo presión reducida, el residuo se recogió con EtOAc, el precipitado formado se eliminó por medio de filtración (se desechó) y se lavó con EtOAc. El filtrado se lavó con agua y la capa acuosa se extrajo con EtOAc. Las capas orgánicas combinadas se lavaron con NaCl sat., se secaron con Na<2>SO<4>, se filtraron y se concentraron bajo presión reducida. El material crudo obtenido se purificó por medio de cromatografía de Biotage Isolera™ (SNAP Si de 340 g, eluyendo con hexano-EtOAc, 0:1 a 7:3) para proporcionar el compuesto del título (7,2 g, 18%).

LC-MS (Procedimiento 3): Tr = 1,17min; MS (ESlpos): m/z = 330,0 [M+H]+.

1H RMN (400 MHz, DMSO-d<6>)<8>ppm 1,84 - 1,92 (m, 2H), 1,95 - 2,02 (m, 2H), 3,61 (s, 3H), 4,89 - 4,96 (m, 2H), 5,11 (t, 1H), 5,64 -5 ,74 (m, 1H), 8,20 -8,24 (m, 2H), 8,45 - 8,49 (m, 2H).

Paso 3

(2S)-2-(1,4,7,10-tetraazaciclododecan-1-il)hex-5-enoato de metilo

Una solución de 1,4,7,10-tetraazaciclododecano (3,45 g, 20,0 mmol) en MeCN (25 ml) se trató a TA con una solución de (2R)-2-[(4-nitrobenceno-1-sulfonil)oxi]hex-5-enoato de metilo (3,3 g, 10 mmol) en MeCN (15 ml) y K<2>CO<3>(1,38 g, 10,0 mmol). La mezcla de reacción se agitó a 60°C durante 7h y posteriormente a TA durante la noche. El material sólido se eliminó por medio de filtración, se lavó con MeCN y el filtrado se concentró bajo presión reducida. El residuo obtenido se recogió con EtOAc, se lavó con NaOH (0,1 M ac.), NaCl (ac. sat.), se secó con Na<2>SO<4>, se filtró y se concentró bajo presión reducida para proporcionar el compuesto del título crudo (2,6 g, 39%).

Rotación específica: [«]d<20>= -46,6° /- 0,24° (c = 1, CHCla).

LC-MS (Procedimiento 3): Tr = 0,19min; MS (ESlpos): m/z = 299,1 [M+H]+, 150,1 [M+2H]2+.

1H RMN (400 MHz, DMSO-d<6>)<8>ppm 1,57 - 1,75 (m, 2H), 2,01 - 2,22 (m, 2H), 2,26 - 2,35 (m, 5H), 2,41 - 2,44 (m, 3H), 2,54 - 2,57 (m, 2H), 2,60 - 2,65 (m, 4H), 2,73 - 2,78 (m, 2H), 3,35 - 3,37 (m, 1H), 3,61 (s, 3H), 4,96 -5,07 (m, 2H), 5,74 -5,84 (m, 1H).

Paso 4

(2R)-3-(benciloxi)-2-hidroxipropanoato de bencilo

Una solución de ácido (2R)-3-(benciloxi)-2-hidroxipropanoico (2,00 g, 10,2 mmol; [130111-08-9]) en fenilmetanol (1,3 ml, 12 mmol; [100-51-6]) se trató con H<2>SO<4>(conc. 54 pl, 1,0 mmol) a TAtras lo cual ésta se calentó hasta 50°C y se agitó durante la noche. La mezcla de reacción se enfrió hasta T A y se diluyó con DCM. La capa orgánica se lavó con NaHCO<3>(ac. sat.), se concentró bajo presión reducida y el material crudo se sometió a cromatografía de Biotage Isolera™ (SNAP Si de 100 g, eluyendo con DCM-hexano 7:3 seguido por DCM-MeOH 8:2) para proporcionar el compuesto del título (1,75 g, 57%).

Rotación específica: [a]o2° = 21,4° /- 0,58° (c = 1, CHCh).

LC-MS (Procedimiento 3): Tr = 1,10min; MS (ESlpos): m/z = 304,1 [M+H<2>O]+.

1H RMN (400 MHz, DMSO-da) 8 ppm 3,65 (dc, 2H), 4,30 -4 ,33 (m, 1H), 4,46 (d, 1H), 4,52 (d, 1H), 5,13 (d, 1H), 5,17 (d, 1H), 5,66 (d, 1H), 7,26 - 7,35 (m, 10H).

Paso 5

(2R)-3-(benciloxi)-2-[(trifluorometanosulfonil)oxi]propanoato de bencilo

Una solución de (2R)-3-(benciloxi)-2-hidroxipropanoato de bencilo (870 mg, 3,04 mmol) en DCM (10 ml) se enfrió hasta -70°C y se trató gota a gota con 2,6-dimetilpiridina (150 mmol, 410 pl; [108-48-5]) y posteriormente con anhídrido trifluorometanosulfónico (570 pl, 3,3 mmol; [358-23-6]). Ésta se agitó a -70°C durante 2h, luego se calentó hasta -40°C y se agitó durante 2h y finalmente se calentó hasta -20°C y la agitación continuó durante 1h. La mezcla de reacción se diluyó con MTB<e>a 0°C, el precipitado formado se eliminó por medio de filtración (se desechó) y se lavó con MTBE. El filtrado se lavó con agua y 0,1 M HCl acuoso, se secó con Na<2>SO<4>, se filtró y se concentró bajo presión reducida. El compuesto crudo del título obtenido (1,3 g) se utilizó en el paso siguiente sin purificación adicional.

LC-MS (Procedimiento 3): Tr = 1,46min; MS (ESlpos): m/z = 436,2 [M+H<2>O]+.

1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 3,95 (dc, 2H), 4,46 (d, 1H), 4,59 (d, 1H), 5,27 (d, 1H), 5,34 (d, 1H), 5,55 -5,57 (m, 1H), 7,22 - 7,25 (m, 2H), 7,31 - 7,39 (m, 8H).

19F RMN (377 MHz, DMSO-d6) 8 [ppm]: -78,12 (s, 3F).

Paso 6

(2S)-2-{4,7,10-tris[(2S)-1,3-bis(benciloxi)-1-oxopropan-2-il]-1,4,7,10-tetraazaciclododecan-1-il}hex-5-enoato de metilo

Una suspensión de 1 metil (2S)-2-(1,4,7,10-tetraazaciclododecan-1-il)hex-5-enoato,Paso 3(206 mg, 690 |jmol) en MeCN (5 ml) se trató a TA con DIPEA (600 jl, 3,5 mmol; [7087-68-5]) y gota a gota con una solución de (2R)-3-(benciloxi)-2-[(trifluorometanosulfonil)oxi]propanoato de bencilo crudo (1,3 g, 3,1 mmol) en MeCN (25 ml). La mezcla de reacción se agitó a 70°C durante la noche, se enfrió hasta TA y se diluyó con agua. La mezcla se extrajo con DCM (2x), las capas orgánicas combinadas se lavaron con Na<2>CO<3>(ac. sat.), se filtraron con un filtro hidrofóbico y se concentraron bajo presión reducida para proporcionar el compuesto del título crudo (1,08 g) el cual se utilizó en el paso siguiente sin purificación adicional.

LC-MS (Procedimiento 3): Tr= 1,40/1,46min; MS (ESlpos): m/z = 1103,8 [M+H]+, 552,4 [M+2H]2+.

Paso 7

(2S,5E)-6-(4-butoxifenil)-2-{4,7,10-tris[(2S)-1,3-bis(benciloxi)-1-oxopropan-2-il]-1,4,7,10-tetraazaciclododecan-1-il}hex-5-enoato de metilo

Una mezcla de (2S)-2-{4,7,10-tris[(2S)-1,3-bis(benciloxi)-1-oxopropan-2-il]-1,4,7,10-tetraazaciclododecan-1-il}hex-5-enoato de metilo crudo (1,00 g, 906 jm ol) y 1-bromo-4-butoxibenceno (170 jl, 1,0 mmol; [39969-57 8]) en MeCN (90 ml) se desgasificó bajo presión reducida y se puso bajo argón. Se añadieron t Ea (2,5 ml, 18 mol; [121-44-8]), tri-o-tolilfosfina (99 mg, 330 jmol; [6163-58-2]) y acetato de paladio(II) (24 mg, 110 jmol;

[3375-31-3]) y la mezcla se desgasificó bajo presión reducida y se puso bajo argón nuevamente. La mezcla de reacción se agitó a 80°C durante la noche tras lo cual se añadieron otra cantidad de 1-bromo-4-butoxibenceno (77 jl, 0,45 mmol) y acetato de paladio(II) (24 mg, 110 jm ol) y la agitación continuó durante 24h adicionales. La mezcla se enfrió hasta TA, se filtró sobre Celite™ y la torta de filtro se lavó con MeCN. El filtrado se concentró bajo presión reducida, el residuo se recogió con DCM y se lavó con agua. La capa orgánica se secó con Na<2>SO<4>, se filtró, se concentró bajo presión reducida y el material crudo se sometió a cromatografía de Biotage Isolera™ (SNAP Si - 100 g, eluyendo con DCM-hexano 1:1 seguido por DCM-MeOH 85:15) para proporcionar el compuesto del título (866 mg, 46%).

LC-MS (Procedimiento 3): Tr = 1,57min; MS (ESIpos): m/z = 626,5 [M+2H]2+.

Paso 8

ácido (2S,2'S,2"S)-2,2',2"-[10-[(2S)-6-(4-butoxifenil)-1-metoxi-1-oxohexan-2-il]-1,4,7,10-tetraazacidododecan-1,4,7-triil}tris(3-hidroxipropanoico)

Se colocó (2S,5E)-6-(4-butoxifenil)-2-{4,7,10-tris[(2S)-1,3-bis(benciloxi)-1-oxopropan-2-il]-1,4,7,10-tetraazaciclododecan-1-il}hex-5-enoato de metilo (850 mg, 679 |jmol) dentro de un autoclave de acero bajo atmósfera de argón y se disolvió en una mezcla 3:1 de MeOH y<t>H<f>(28 ml). Se añadió Pd sobre carbón vegetal (180 mg, 10% de pureza, 170 jmol, 0,25 eq.; [7440-05-3]) y la mezcla de reacción se calentó a 80°C bajo una presión de H<2>de 40 bar durante 30h produciendo una presión máxima de 42 bar. Dado que la conversión no fue completa se añadió otra cantidad de Pd sobre carbón vegetal (180 mg, 10% de pureza, 170 jmol, 0,25 eq.) y la mezcla se calentó a 80°C bajo una presión de H<2>de 40 bar durante otras 40h. El autoclave se enfrió hasta TA, la presión se liberó, y la mezcla de reacción se filtró. La torta de filtro se lavó con MeOH (20 ml) y THF (20 ml) y el filtrado se concentró bajo presión reducida para proporcionar el compuesto del título crudo (672 mg) el cual se utilizó en el paso siguiente sin purificación adicional.

LC-MS (Procedimiento 3): Tr = 0,92min; MS (ESIpos): ): m/z = 713,6 [M+H]+, 357,3 [M+2H]2+.

Paso 9

ácido (2S)-6-(4-butoxifenil)-2-{4,7,10-tris[(1S)-1-carboxi-2-hidroxietil]-1,4,7,10-tetraazaciclododecan-1-il}hexanoico

Una solución de ácido (2S,2'S,2"S)-2,2',2"-{10-[(2S)-6-(4-butoxifenil)-1-metoxi-1-oxohexan-2-il]-1,4,7,10-tetraazaciclododecan-1,4,7-triil}tris(3-hidroxipropanoico) crudo (670 mg, 940 jm ol) en THF (3 ml) se trató con NaOH (2 M. ac. 5,0 eq., 2,4 ml, 4,7 mmol) a TA durante la noche. La mezcla de reacción se ajustó hasta pH 7 por medio de la adición de HCl (2 M ac.) y se concentró bajo presión reducida. La capa acuosa resultante se lavó con DCM (2x), se concentró hasta un volumen de 4 ml y se sometió a cromatografía de Biotage Isolera™ (SNAP Si-C18 - 60 g, eluyendo con agua-MeCN 1:0 a 0:1) para proporcionar el compuesto del título (7,3 mg). LC-MS (Procedimiento 3): Tr = 0,87min; MS (ESIpos): m/z = 699,5 [M+H]+, 350,4 [M+2H]2+.

Paso 10

(2S,2'S,2"S)-2,2',2"-[10-[(1S)-5-(4-butoxifenil)-1-carboxipentil]-1,4,7,10-tetraazaciclododecan-1,4,7-triil}tris(3-hidroxipropanoato) de gadolinio

Una solución de ácido (2S)-6-(4-butoxifenil)-2-{4,7,10-tris[(1S)-1-carboxi-2-hidroxietil]-1,4,7,10-tetraazacidododecan-1-il}hexanoico (7,3 mg, 10 |jmol) en agua (1 ml) se trató con Gd<2>O<3>(0,49 eq., 1,9 mg, 5,1 jmol; [12064-62-9]) y se agitó a 105°C durante 44h. La mezcla de reacción se enfrió hasta TA, se trató con un exceso de resina quelante Chelex100™ (forma sódica, lavada) (el pH se ajustó por medio de la adición de ácido fórmico desde pH 9 hasta 5), la resina se eliminó por medio de filtración y el filtrado se liofilizó para proporcionar el compuesto del título (5,1 mg, 52%).

LC-MS (Procedimiento 3): Tr = 0,96-0,99min; MS (ESlpos): m/z = 854,4 [M+H]+, 427,7 [M+2H]2+.

Ejemplo 10

Paso 1

etil-3-(4-{2-[2-(2-etoxietoxi)etoxi]etoxi}fenil)-2-[(metanosulfonil)oxi]propanoato

Se agitaron etil-3-(4-{2-[2-(2-etoxietoxi)etoxi]etoxi}fenil)-2-hidroxipropanoato racémico (Intermediario 7, 2,34 g, 6,32 mmol) y TEA (1,9 ml, 14 mmol; [121-44-8]) en THF (21 ml) bajo N<2>a 0-5°C. Se añadió gota a gota MsCl (540 jl, 6,9 mmol; [124-63-0]) a la mezcla y la agitación continuó durante 3h. La mezcla luego se añadió a una solución de NaHCO<3>(50% ac. sat.), y la capa acuosa se extrajo con MTBE (3x), las capas orgánicas combinadas se lavaron con una solución de NaCl (ac. sat.), se secaron sobre Na<2>SO<4>, se filtraron y se concentraron bajo presión reducida produciendo el compuesto crudo del título (2,97 g, 99% de rendimiento). LC-MS (Procedimiento 4): Tr = 1,17min; MS (ESlpos): m/z = 466,2 [M+H]+.

1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 1,09 (t, 3H) 1,36 (s, 9H) 3,00 - 3,08 (m, 4H) 3,38 - 3,48 (m, 2H) 3,44 -3,47 (m, 2H) 3,49 - 3,55 (m, 4H) 3,56 - 3,59 (m, 2H) 3,69 - 3,77 (m, 2H) 4,03 - 4,08 (m, 2H) 5,05 - 5,16 (m, 1H) 6,84 - 6,94 (m, 2H) 7,14 - 7,25 (m, 2H).

Paso 2

etil-3-(4-{2-[2-(2-etoxietoxi)etoxi]etoxi}fenil)-2-(1,4,7,10-tetraazaciclododecan-1-il)propanoato

1,4,7,10-tetraazaciclododecano (384 mg, 2,23 mmol), etil-3-(4-{2-[2-(2-etoxi etoxi)etoxi]etoxi}fenil)-2-[(metanosulfonil)oxi]propanoato racémico (1,00 g, 2,23 mmol), K<2>CO<3>(308 mg, 2,2 mmol) y MeCN (6,2 ml) se agitaron bajo N<2>a 55°C durante 24h. La mezcla se filtró, la torta de filtro se lavó con EtOH, y los filtrados orgánicos se combinaron y se concentraron bajo presión reducida produciendo el compuesto crudo del título como un racemato (1,46 g, 61% producto por medio de ELSD).

LC-MS (Procedimiento 2): Tr = 0,55min; MS (ESIpos): m/z = 525,3 [M+H]+.

Paso 3

etil-3-(4-{2-[2-(2-etoxietoxi)etoxi]etoxi}fenil)-2-[4,7,10-tris(2-terc-butoxi-2-oxoetil)-1,4,7,10-tetraazaciclododecan-<1>-il]propanoato

Se disolvió etil-3-(4-{2-[2-(2-etoxietoxi)etoxi]etoxi}fenil)-2-(1,4,7,10-tetraazaciclododecan-1-il)propanoato racémico (1,40 g, 2,67 mmol) en MeCN (13 ml), se añadió K<2>CO<3>(3,13 g, 22,7 mmol; [584-08-7]). Bajo una atmósfera de N<2>se añadió gota a gota bromoacetato de terc-butilo (1,4 ml, 9,3 mmol, [ 5292-43-3]) en MeCN (3,8 ml) y la mezcla se agitó durante la noche a TA. La mezcla se filtró, la torta de filtro se lavó con EtOH, las fases orgánicas combinadas se concentraron bajo presión reducida obteniendo el compuesto del título crudo (2,40 g, 104 % de rendimiento).

LC-MS (Procedimiento 2): Tr = 1,13min; MS (ESIpos): m/z = 867 [M+H]+.

Paso 4

ácido 2,2',2"-{10-[1-etoxi-3-(4-{2-[2-(2-etoxietoxi)etoxi]etoxi}fenil)-1-oxopropan-2-il]-1,4,7,10-tetraazaciclododecan-1,4,7-triil}triacético

Se agitó etil-3-(4-{2-[2-(2-etoxietoxi)etoxi]etoxi}fenil)-2-[4,7,10-tris(2-terc-butoxi-2-oxoetil)-1,4,7,10-tetraazaciclododecan-1-il]propanoato racémico (2,30 g, 2,65 mmol) en ácido fórmico (15 ml, 400 mmol; [64-18<6>]) durante la noche a 50°C. El solvente se eliminó bajo presión reducida y el compuesto del título se purificó por medio de cromatografía RP (Biotage SNAP Ultra C18 de 60 g, A = agua, B = MeCN, 0%B a 100% B en 12 CV, 50 ml/min), produciendo el racemato (614 mg, 33 % de rendimiento a lo largo de 4 pasos).

LC-MS (Procedimiento 2): Tr = 0,67min; MS (ESIpos): m/z = 700 [M+H]+.

1H RMN (D<2>O, 400 MHz):<8>(ppm) 7,31 (d a,J= 8,4 Hz, 2H), 6,95 (d,J= 8,4 Hz, 2H), 4,26 (dd a,J= 10,0, 4,7 Hz, 1H), 4,15-4,22 (m, 2H), 3,91-4,10 (m, 4H), 3,81-3,89 (m, 4H), 3,52-3,75 (m, 13H), 2,74-3,51 (m, 17H), 1,15 (t,J= 7,1 Hz, 3H), 1,03 (t,J= 7,1 Hz, 3H).

13C RMN (D2O, 101 MHz): 8 (ppm) 174,7, 173,0, 170,1, 169,5, 156,9, 130,8 (2C), 129,8, 115,0 (2C), 69,8, 69,7, 69,6, 69,1,69,0, 67,3, 66,7, 62,0 (2C), 56,8, 56,4, 52,9, 52,5, 51,1 (2C), 49,9, 49,0 (a), 46,7 (a), 45,8, 44,2, 34,2 (a), 14,1, 13,4.

Paso 5

2,2',2"-{10-[1-carboxi-2-(4-{2-[2-(2-etoxietoxi)etoxi]etoxi}fenil)etil]-1,4,7,10-tetraazacidododecan-1,4,7-triil}triacetato de gadolinio

Se agitaron ácido 2,2',2"-{10-[1-etoxi-3-(4-{2-[2-(2-etoxietoxi)etoxi]etoxi}fenil)-1-oxopropan-2-il]-1,4,7,10-tetraazacidododecan-1,4,7-triil} triacético racémico (600 mg, 859 pmol), Gd<2>O<3>(140 mg, 386 pmol) y agua (8,8 ml) a 120°C durante 24h. Se añadió Chelex100™ (forma sódica, lavada, aproximadamente 5 g), el pH se llevó hasta 5 utilizando NaOH (1M, ac.) y la mezcla se agitó durante 1h. La filtración y la purificación utilizando cromatografía RP C18 (Biotage s NAp Ultra C18 de 60g, 50 ml/min, A = agua, B = MeCN, 0%B a 50%B en 25min, 100%B 10min) produjeron el compuesto racémico del título (607 mg, 95 % de pureza, 81 % de rendimiento).

LC-MS (Procedimiento 3): Tr = 0,62min; MS (ESIpos): m/z = 413,6 [M+2H]++, 826,3 [M+H]+. Los patrones de isótopos coinciden con los valores teóricos para el complejo de gadolinio correspondiente.

Ejemplo 11

Paso 1

(2R)-3-(4-{2-[2-(2-etoxietoxi)etoxi]etoxi}fenil)-2-[(metilsulfonil)oxi] propanoato de terc-butilo

Se agitaron (2R)-3-(4-{2-[2-(2-etoxietoxi)etoxi]etoxi}fenil)-2-hidroxipropanoato de terc-butilo (Intermediario 8, 811 mg, 2,04 mmol) y T e a (620 pl, 4,5 mmol; [121-44-8]) en THF (6,8 ml) a 0 - 5 °C bajo una atmósfera de N<2>, se añadió gota a gota MsCl (170 pl, 2,2 mmol; [124-63-0]) a la mezcla y la agitación continuó durante 3h. La mezcla luego se añadió a una solución de NaHCO<3>(50% ac. sat.), y la capa acuosa se extrajo con MTBE (3x), las capas orgánicas combinadas se lavaron con una solución de NaCl (ac. sat.), se secaron sobre Na<2>SO<4>, se filtraron y se concentraron bajo presión reducida produciendo el compuesto crudo del título (1,02 g, 95 % de pureza, 100 % de rendimiento).

LC-MS (Procedimiento 4): Tr = 1,27min; MS (ESIpos): m/z = 494,2 [M+NH<4>]+.

1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 1,09 (t, 3H) 1,36 (s, 9H) 2,97 - 3,11 (m, 5H) 3,37 - 3,47 (m, 4H) 3,48 -3,55 (m, 4H) 3,55 - 3,60 (m, 2H) 3,68 - 3,75 (m, 2H) 4,03 - 4,08 (m, 2H) 5,08 - 5,14 (m, 1H) 6,84 - 6,92 (m, 2H) 7,16 -7,21 (m, 2H).

Paso 2

(2S)-3-(4-{2-[2-(2-etoxietoxi)etoxi]etoxi}fenil)-2-(1,4,7,10-tetraazaciclododecan-1-il)propanoato de terc-butilo

(2R)-3-(4-{2-[2-(2-etoxietoxi)etoxi]etoxi}fenil)-2-[(metanosulfonil)oxi] propanoato de terc-butilo (1,02 g, 2,14 mmol) y 1,4,7,10-tetraazaciclododecano (402 mg, 2,33 mmol) se calentaron y se agitaron durante la noche a 55°C bajo N<2>en MeCN (18 ml), seguido por<6>h a 65°C seguido por 18h adicionales a 70°C. La mezcla luego se concentró bajo presión reducida proporcionando el producto crudo (1,18 g, 67% producto por medio de ELSD).

LC-MS (Procedimiento 5): Tr = 0,69min; MS (ESlpos): m/z = 553,9 [M+NH<4>]+.

Paso 3

(2S)-3-(4-{2-[2-(2-etoxietoxi)etoxi]etoxi}fenil)-2-[4,7,10-tris(2-terc-butoxi-2-oxoetil)-1,4,7,10-tetraazaciclododecan-<1>-il]propanoato de terc-butilo

Se agitaron (2S)-3-(4-{2-[2-(2-etoxietoxi)etoxi]etoxi}fenil)-2-(1,4,7,10-tetraazaciclododecan-1-il)propanoato de terc-butilo (1,18 g, 2,13 mmol) y MeCN (22 ml) bajo N<2>. Se añadió DIPEA (1,9 ml, 11 mmol; [7087-68-5]), seguido por bromoacetato de terc-butilo (1,1 ml, 7,5 mmol) en MeCN (370 jl ) y la mezcla se agitó a 60°C durante 5h. La mezcla se concentró bajo presión reducida. El residuo luego se disolvió en EtOAc y la fase orgánica se lavó con agua, NaHCO<3>(ac.), NaCl (ac. sat.), se secó sobre Na<2>SO<4>, se filtró y se concentró bajo presión reducida proporcionando el producto crudo (2,87 g, 41% producto por medio de ELSD).

LC-MS (Procedimiento 2): Tr = 1,17min; MS (ESlpos): m/z = 895,4 [M+H]+.

Paso 4

ácido (2S)-3-(4-{2-[2-(2-etoxietoxi)etoxi]etoxi}fenil)-2-[4,7,10-tris(carboximetil)-1,4,7,10-tetraazaciclododecan-<1>-il]propanoico

(2S)-3-(4-{2-[2-(2-etoxietoxi)etoxi]etoxi}fenil)-2-[4,7,10-tris(2-terc-butoxi-2-oxoetil)-1,4,7,10-tetraazaciclododecan-1-il]propanoato de terc-butilo (2,87 g, 3,21 mmol) se agitó a 70°C durante 4h en ácido fórmico (41 ml). La mezcla luego se concentró bajo presión reducida, y se purificó por medio de cromatografía RP (Biotage C18 / 60g, 50 ml/min, A = agua, B = MeCN, 0%B a 50%B en 30min, 100%B 10min) produciendo el compuesto del título (337 mg, 95 % de pureza, 16 % de rendimiento).

Rotación Específica: -2,4° ± 0,3 (C=1, MeOH, 20°C, 589 nm).

LC-MS (Procedimiento 2): Tr = 0,62min; MS (ESIpos): m/z = 671,3 [M+H]+.

1H RMN (DMSO-da, 400 MHz): 8 (ppm) 7,20 (d a,J= 8,4 Hz, 2H), 6,82 (d,J= 8,6 Hz, 2H), 3,99-4,07 (m, 2H), 3,68-3,75 (m, 2H), 3,25-3,64 (m, 18H), 2,54-3,19 (m, 18H), 1,09 (t,J= 7,0 Hz, 3H).

13C RMN (DMSO-d6, 101 MHz): 8 (ppm) 172,1, 171,3, 169,7 (a, 2C), 156,9, 130,5 (2C), 130,4, 114,1 (2C), 69,9, 69,9, 69,8, 69,2, 69,0, 67,0, 65,6, 65,1 (a), 55,2 (a), 54,9 (a, 2C), 51,7 (a, 2C), 51,5 (a, 2C), 49,1 (a, 2C), 46,8 (a, 2C), 32,8 (a), 15,2.

Paso 5

2,2',2"-{10-[(1S)-1-carboxi-2-(4-{2-[2-(2-etoxietoxi)etoxi]etoxi}fenil)etil]-1,4,7,10-tetraazacidododecan-1,4,7-triil}triacetato de gadolinio

Ácido (2S)-3-(4-{2-[2-(2-etoxietoxi)etoxi]etoxi}fenil)-2-[4,7,10-tris(carboximetil)-1,4,7,10-tetraazaciclododecan-1-il] propanoico (339 mg, 505 |jmol), Gd<2>O<3>(82,4 mg, 227 |jmol) y agua (5,2 ml), se agitaron a 105°C durante la noche en un vial sellado a presión, seguido por 5h de agitación adicionales a 120°C. Se añadió Chelex100™ (forma sódica, lavada, aproximadamente 5 g), el pH se llevó hasta 5 utilizando NaOH (1M, ac.) y la mezcla se agitó durante 1h. La filtración y la purificación utilizando cromatografía RP (Biotage C18 de 30g, 25 ml/min, A = agua, B = MeCN, 0%B a 50%B en 25min, 100%B 10min) produjeron el compuesto del título (307 mg, 95 % de pureza, 74 % de rendimiento).

Rotación Específica: 14,9° (c=1, MeOH, 20°C, 589 nm).

LC-MS (Procedimiento 3): Tr = 0,64min; MS (ESIpos): m/z = m/z = 413,6 [M+2H]++, 826,4 [M+H]+. Los patrones de isótopos coinciden con los valores teóricos para el complejo de gadolinio correspondiente.

Ejemplo 12

Paso 1

ácido (2R)-3-(4-{2-[2-(2-etoxietoxi)etoxi]etoxi}fenil)-2-[4,7,10-tris(carboximetil)-1,4,7,10-tetraazaciclododecan-1-il]propanoico

Se produjo ácido (2R)-3-(4-{2-[2-(2-etoxietoxi)etoxi]etoxi}fenil)-2-[4,7,10-tris(carboximetil)-1,4,7,10-tetraazaciclododecan-1-il]propanoico de manera análoga al ácido (2S)-3-(4-{2-[2-(2-etoxietoxi)etoxi]etoxi}fenil)-2-[4,7,10-tris(carboximetil)-1,4,7,10-tetraazaciclododecan-1-il]propanoico (Ejemplo 11 - Paso 4) a partir de (2S)-3-(4-{2-[2-(2-etoxietoxi)etoxi]etoxi}fenil)-2-hidroxipropanoato de terc-butilo (Intermediario 9) produciendo el compuesto del título (310 mg, 16 % rendimiento total a lo largo de los 4 pasos).

Rotación Específica: 1,7° ± 0,53 (c=1, MeOH, 20°C, 589 nm).

LC-MS (Procedimiento 2): Tr = 0,61min; MS (ESIpos): m/z = 671,3 [M+H]+.

1H RMN (DMSO-da, 400 MHz): 5 (ppm) 7,11-7,23 (m, 2H), 6,82 (d,J =8,6 Hz, 2H), 3,99-4,07 (m, 2H), 3,68 3,75 (m, 2H), 3,36-3,62 (m, 17H), 2,53-3,14 (m, 18H), 1,09 (t,J= 7,0 Hz, 3H).

13C RMN (DMSO-d6, 101 MHz): 5 (ppm) 172,1 (a), 171,3 (a), 169,7 (a, 2C), 156,9, 130,5 (2C), 130,4, 114,1 (2C), 69,9, 69,9, 69,8, 69,2, 69,0, 67,0, 65,6, 65,1 (a), 55,2 (a), 54,9 (a, 2C), 51,7 (a, 2C), 51,5 (a, 2C), 49,1 (a, 2C), 46,8 (a, 2C), 32,8 (a), 15,2.

Paso 2

2,2',2"-{10-[(1R)-1-carboxi-2-(4-{2-[2-(2-etoxietoxi)etoxi]etoxi}fenil)etil]-1,4,7,10-tetraazaciclododecan-1,4,7-triil}triacetato de gadolinio

Ácido (2R)-3-(4-{2-[2-(2-etoxietoxi)etoxi]etoxi}fenil)-2-[4,7,10-tris(carboximetil)-1,4,7,10-tetraazaciclododecan-1-il]propanoico (305 mg, 455 |jmol), Gd<2>O<3>(74,2 mg, 205 |jmol) y agua (4,6 ml), se agitaron a 105°C durante la noche en un vial sellado a presión, seguido por 5h de agitación adicionales a 120°C. Se añadió Chelex100™ (forma sódica, lavada, aproximadamente 5 g), el pH se llevó hasta 5 utilizando NaOH (1M, ac.) y la mezcla se agitó durante 1h. La filtración y la purificación utilizando cromatografía RP (Biotage C18 de 30 g, 25 ml/min, A = agua, B = MeCN, 0%B a 50%B en 25min, 100%B 10min) produjeron el compuesto del título (292 mg, 100 % de pureza, 78 % de rendimiento).

Rotación Específica: -13,7° (c=1, MeOH, 20°C, 589 nm).

LC-MS (Procedimiento 3): Tr = 0,64min; MS (ESlpos): m/z = 413,7 [M+2H]++, 826,4 [M+H]+. Los patrones de isótopos coinciden con los valores teóricos para el complejo de gadolinio correspondiente.

Ejemplo 13

Paso 1

Se agitaron etil-3-(4-{2-[2-(2-etoxietoxi)etoxi]etoxi}fenil)-2-hidroxipropanoato racémico,Intermediario 7, 2,34 g, 6,32 mmol) y TEA (1,9 ml, 14 mmol; [121-44-8]) en t Hf (21 ml) a 0-5°C. Bajo una atmósfera de N<2>, se añadió gota a gota MsCl (540 jl, 6,9 mmol; [124-63-0]), la mezcla se calentó hasta T A y se agitó durante 3h. La mezcla se añadió a NaHCO<3>(50% ac. sat.), seguido por la extracción con MTBE (3x), las fases orgánicas se combinaron y se lavaron con solución de NaCl (ac. sat. 2x), se secaron sobre Na<2>SO<4>y se concentraron bajo presión reducida obteniendo el compuesto del título (2,97 g 95 % de pureza, cuantitativo).

LC-MS (Procedimiento 4): Tr = 1,17min; MS (ESlpos): m/z = 466,2 [M+NH<4>]+.

Paso 2

2-[4,10-bis(2-terc-butoxi-2-oxoetil)-1,4,7,10-tetraazaciclododecan-1-il]-3-(4-{2-[2-(2-etoxietoxi)etoxi]etoxi}fenil)propanoato de etilo

etil-3-(4-{2-[2-(2-etoxietoxi)etoxi]etoxi}fenil)-2-[(metanosulfonil)oxi] propanoato racémico (2,79 g, 6,22 mmol), 2,2'-(1,4,7,10-tetraazaciclododecan-1,7-diil)diacetato de di-terc-butilo (2,27 g, 5,65 mmol, [162148-48-3]), K<2>CO<3>(1,56 g, 11,3 mmol) y MeCN (51 ml) se agitaron conjuntamente en un recipiente de reacción a 70°C bajo N<2>durante 4d. La mezcla luego se filtró, se concentró bajo presión reducida obteniendo el compuesto del título crudo (3,60 g, 50% producto por medio de detección ELSD).

LC-MS (Procedimiento 2): Tr = 1,25min; MS (ESIpos): m/z = 753,8 [M+H]+.

Paso 3

etil-2-{4,10-bis(2-terc-butoxi-2-oxoetil)-7-[1-etoxi-3-(4-{2-[2-(2-etoxietoxi)etoxi] etoxi}fenil)-1-oxopropan-2-il]-1,4,7,10-tetraazaciclododecan-1-il}-3-metoxipropanoato

Etil-2-[4,10-bis(2-terc-butoxi-2-oxoetil)-1,4,7,10-tetraazaciclododecan-1-il]-3-(4-(2-[2-(2-etoxietoxi)etoxi]etoxi}fenil)propanoato (1,80 g, 2,39 mmol), etil-2-[(metanosulfonil)oxi]-3-metoxipropanoato (Intermediario 25, 1,24 g, 5,50 mmol), K<2>CO<3>(661 mg, 4,78 mmol; [584-08-7]) y MeCN (9 ml), se agitaron durante 24h a 80°C. La mezcla se filtró, la torta de filtro se lavó con EtOH, las capas orgánicas se combinaron y se concentraron bajo presión reducida obteniendo el compuesto del título crudo como una mezcla de diastereómeros (2,74 g).

LC-MS (Procedimiento 2): Tr= 1,10 - 1,17min; MS (ESIpos): m/z = 884,0 [M+H]+.

Paso 5

ácido 2,2'-{4-[1-etoxi-3-(4-{2-[2-(2-etoxietoxi)etoxi]etoxi}fenil)-1-oxopropan-2-il]-10-[1-etoxi-3-metoxi-1-oxopropan-2-il]-1,4,7,10-tetraazaciclododecan-1,7-diil}diacético

Se agitó etil-2-{4,10-bis(2-terc-butoxi-2-oxoetil)-7-[1-etoxi-3-(4-[2-[2-(2-etoxietoxi) etoxi]etoxi}fenil)-1-oxopropan-2-il]-1,4,7,10-tetraazaciclododecan-1-il}-3-metoxipropanoato crudo (2,73 g, 3,09 mmol) con ácido fórmico (40 ml) durante 4h a 70°C. La mezcla luego se concentró bajo presión reducida seguido por la purificación con cromatografía RP (Biotage, SNAP C18 de 50g, A = agua, B = MeCN, 0%B a 50%B en 30min, 100%B 10min) produciendo el compuesto del título como una mezcla de diastereómeros (229 mg, 10 % de rendimiento a lo largo de 5 pasos).

LC-MS (Procedimiento 2): Tr = 0,76min; MS (ESIpos): m/z = 771,8 [M+H]+.

1H RMN (DMSO-da, 400 MHz): 8 (ppm) 7,10-7,31 (m, 2H), 6,76-6,86 (m, 2H), 3,61-4,16 (m, 12H), 3,37-3,60 (m, 14H), 3,21 (s, 3H), 2,53-3,13 (m, 18H), 0,97-1,25 (m, 9H).

Paso 6

2-{7-[1-carboxi-2-(4-{2-[2-(2-etoxietoxi)etoxi]etoxi}fenil)etil]-4,10-bis(carboxilatometil)-1,4,7,10-tetraazaciclododecan-1-il}-3-metoxipropanoato de gadolinio

La mezcla diastereomérica, ácido 2,2'-{4-[1-etoxi-3-(4-{2-[2-(2-etoxietoxi)etoxi]etoxi}fenil)-1-oxopropan-2-il]-10-[1-etoxi-3-metoxi-1-oxopropan-2-il]-1,4,7,10-tetraazaciclododecan-1,7-diil} diacético (220 mg, 285 jmol), Gd<2>O<3>(46,6 mg, 128 jm ol) y agua (2,9 ml) se agitaron durante 24h a 120°C. Se añadió Chelex100™ (forma sódica, lavada, aproximadamente 5 g), el pH se llevó hasta 5 utilizando NaOH (1M, ac.) y la mezcla se agitó durante 1h. La filtración y la purificación utilizando cromatografía RP (Biotage SNAP Ultra C18 de 30g, 25 ml/min, A = agua, B = MeCN, 0%B a 50%B en 25min, 100% B 10min) produjeron la mezcla diastereomérica racémica del título (45,1 mg, 18 % de rendimiento).

LC-MS (Procedimiento 3): Tr = 0,65min (diastereómero 1, 72% UV), 0,69min (diastereómero 2, 27 % UV); MS (ESIpos): m/z = 435,7 [M+2H]++ ; 870,5 [M+H]+. Los patrones de isótopos coinciden con los valores teóricos para el complejo de gadolinio correspondiente.

Ejemplo 14

Paso 1

metil-3-(4-butoxifenil)-2-[(metanosulfonil)oxi]propanoato

Metil-3-(4-butoxifenil)-2-hidroxipropanoato racémico (Intermediario 10, 919 mg, 3,64 mmol), TEA (1,1 ml, 8,0 mmol; [121-44-8]) y THF (11 ml) se agitaron a 0-5°C bajo una atmósfera de N<2>. Se añadió gota a gota MsCl (310 |jl, 4,0 mmol; [124-63-0]), la mezcla se calentó hasta TA y se agitó durante 3h. La mezcla se añadió a NaHCO<3>(50% ac. sat.), seguido por la extracción con MTBE (3x), las fases orgánicas se combinaron y se lavaron con solución de NaCl (ac. sat. 2x), se secaron sobre Na<2>SO<4>y se concentraron bajo presión reducida obteniendo el compuesto del título (1,25 g, 99 % de rendimiento).

LC-MS (Procedimiento 4): Tr = 1,29min; MS (ESIpos): m/z = 348,2 [M+NH<4>]+.

1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 0,92 (t, 3H) 1,35 - 1,47 (m, 2H) 1,63 - 1,71 (m, 2H) 2,93 - 3,17 (m, 5H) 3,68 (s, 3H) 3,83 - 3,95 (t, 2H) 5,29 (m, 1H) 6,86 (d, 2H) 7,15 (d, 2H).

Paso 2

metil-3-(4-butoxifenil)-2-(1,4,7,10-tetraazaciclododecan-1-il)propanoato

Se disolvió 1,4,7,10-tetraazaciclododecano (1,30 g, 7,57 mmol) en MeCN (28 ml), se añadió K<2>CO<3>(836 mg, 6,1 mmol), y se añadió metil-3-(4-butoxifenil)-2-[(metanosulfonil)oxi]propanoato racémico (2,00 g, 6,05 mmol) en MeCN (8,0 ml) y la mezcla se agitó durante la noche a 55°C. La mezcla se filtró, la torta de filtro se lavó con EtOH, los filtrados orgánicos se combinaron y se concentraron bajo presión reducida produciendo el compuesto crudo del título (2,49 g). También se detectó la presencia del correspondiente éster etílico en el producto crudo. LC-MS (Procedimiento 2): Tr = 0,67min; MS (ESIpos): m/z = 407,3 [M+H]+.

Paso 3

metil-3-(4-butoxifenil)-2-[4,7,10-tris(2-terc-butoxi-2-oxoetil)-1,4,7,10-tetraazaciclododecan-1-il]propanoato

Se disolvió metil-3-(4-butoxifenil)-2-(1,4,7,10-tetraazaciclododecan-1-il)propanoato crudo (2,49 g, 6,12 mmol) en MeCN (24 ml), se añadió K<2>CO<3>(7,19 g, 52,1 mmol; [584-08-7]), y bajo una atmósfera de N<2>, se añadió gota a gota bromoacetato de terc-butilo (3,2 ml, 21 mmol) disuelto en MeCN (7,9 ml). La mezcla se agitó durante la noche a TA, la mezcla se filtró, la torta de filtro se lavó con EtOH y las fracciones orgánicas combinadas se concentraron bajo presión reducida produciendo el compuesto crudo del título (5,12 g). También se detectó la presencia del correspondiente éster etílico en el producto crudo, presumiblemente a través del contacto prolongado con el etanol durante la elaboración.

LC-MS (Procedimiento 2): Tr = 1,38min; MS (ESIpos): m/z = 749,5 [M+H]+.

Paso 4

ácido 2,2',2"-{10-[3-(4-butoxifenil)-1-etoxi-1-oxopropan-2-il]-1,4,7,10-tetraazaciclododecan-1,4,7-triil}triacético

Metil-3-(4-butoxifenil)-2-[4,7,10-tris(2-terc-butoxi-2-oxoetil)-1,4,7,10-tetraazaciclododecan-1-il]propanoato crudo (5,12 g, 6,84 mmol, que también contiene el correspondiente éster etílico) se agitó con ácido fórmico<( 8 8>ml) a 70°C durante 4h y la mezcla se concentró bajo presión reducida. La purificación utilizando cromatografía RP (Biotage Ultra C18 de 60g, 50 ml/min, A = agua, B = MeCN, 0%B a 50%B en 25min, 100%B 10min) produjo el compuesto del título (262 mg,<6>% de rendimiento a lo largo de 4 pasos).

LC-MS (Procedimiento 2): Tr = 0,79min; MS (ESlpos): m/z = 595,3 [M+H]+.

13C RMN (DMSO-da, 101 MHz): 8 (ppm) 171,1, 171,0 (a), 169,7 (a, 2C), 157,3, 130,5 (2C), 129,6, 114,1 (2C), 67,0, 64,7 (a), 59,9, 55,2 (a), 55,0 (a, 2C), 51,6 (a, 2C), 51,3 (a, 2C), 49,1 (a, 2C), 46,8 (a, 2C), 33,7 (a), 30,9, 18,8, 14,2, 13,8.

Paso 5

2,2',2"-{10-[2-(4-butoxifenil)-1-carboxietil]-1,4,7,10-tetraazacidododecan-1,4,7-triil}triacetato de gadolinio

Ácido 2,2',2M-{10-[3-(4-butoxifenil)-1-etoxi-1-oxopropan-2-il]-1,4,7,10-tetraazacidododecan-1,4,7-triil}triacético racémico (253 mg, 425 |jmol), Gd<2>O<3>(69,4 mg, 191 |jmol) y agua (4,3 ml) se agitaron a 105°C durante 3d. Se añadió Chelex100™ (forma sódica, lavada, aproximadamente 5 g), el pH se llevó hasta 5 utilizando NaOH (1M, ac.) y la mezcla se agitó durante 1h mostrando que la mezcla estaba libre de gadolinio. La filtración y la purificación utilizando cromatografía RP (Biotage Ultra C18 de 12 g, 12 ml/min, A = agua, B = MeCN, 0%B a 50%B en 25min, 100%B 10min) produjeron el compuesto del título (196 mg, 64%).

LC-MS (Procedimiento 3): Tr = 0,75min; MS (ESlpos): m/z = 361,7 [M+2H]++, 722,3 [M+H]+. Los patrones de isótopos coinciden con los valores teóricos para el complejo de gadolinio correspondiente.

Ejemplo 15

Paso 1

(2R)-5-{4-[2-(2-etoxietoxi)etoxi]fenil}-2-[(trifluorometanosulfonil) oxi]pentanoato de metilo

ElIntermediario 12, (2R)-5-{4-[2-(2-etoxietoxi)etoxi]fenil}-2-hidroxipentanoato de metilo, (5,00 g, 14,7 mmol) se disolvió en DCM (50 ml), se colocó bajo N<2>y se enfrió hasta -60°C. Se añadió lutidina (2,1 ml, 18 mmol;

[108-48-5]) seguido por la adición gota a gota de anhídrido trifluorometanosulfónico (15 ml, 1,0 M en DCM, 15 mmol; [358-23-6]) a -60°C. La reacción se agitó durante 2h y luego se dejó calentar hasta aprox. 8°C. Se añadió éter dietílico para precipitar el triflato de lutidina, se filtró y la torta de filtro se lavó con éter dietílico. Los filtrados combinados se extrajeron con agua y HCl (1 M, ac.), se secaron (Na<2>SO<4>) y se concentraron bajo presión reducida. Se obtuvieron 6,97 g (85%) del compuesto del título como aceite rojizo, el cual se utilizó directamente en el paso siguiente.

19F RMN (CDCla, 377 MHz): 8 (ppm) -76,04 (s).

1H RMN (CDCla, 400 MHz): 8 (ppm) 7,03-7,07 (m, 2H), 6,82-6,87 (m, 2H), 5,12 (t,J= 6,1 Hz, 1H), 4,10-4,14 (m, 2H), 3,86 (dd,J= 5,6, 4,3 Hz, 2H), 3,82 (s, 3H), 3,70-3,74 (m, 2H), 3,60-3,63 (m, 2H), 3,54 (c,J= 6,9 Hz, 2H), 2,56-2,65 (mc, 2H), 1,95-2,03 (m, 2H), 1,70-1,79 (m, 2H), 1,21 (t,J= 7,0 Hz, 3H). La muestra contiene 1,1 eq (15% ) éter dietílico: 3,48 (c,J= 7,1 Hz, 0,48H), 1,21 (t a,J= 7,0 Hz, 0,69H).

Paso 2

(2S)-5-{4-[2-(2-etoxietoxi)etoxi]fenil}-2-(1,4,7,10-tetraazaciclododecan-1-il)pentanoato de metilo

L C - M S ( P r o c e d i m ie n t o 2 ) : T r = 0 , 72 m i n ; M S ( E S I p o s ) : m /z = 496 [M H ]+ .

Paso 3

( 2 S ) - 5 - { 4 - [ 2 - ( 2 - e t o x ie t o x i ) e t o x i ] f e n i l } - 2 - { 4 , 7 , 10 - t r is [ ( 2 S ) - 3 - t e r c - b u t o x i- 1 - m e t o x i- 1 - o x o p r o p a n - 2 - i l ] - 1 , 4 , 7 , 10 -t e t r a a z a c i c lo d o d e c a n - 1 - i l } p e n t a n o a t o d e m e t ilo

S e d is o lv ió ( 2 S ) - 5 - { 4 - [ 2 - ( 2 - e t o x i e t o x i ) e t o x i ] f e n i l } - 2 - ( 1 , 4 , 7 , 10 - t e t r a a z a c i c l o d o d e c a n - 1 - i l ) p e n t a n o a t o d e m e tilo ( 5 , 81 g , 11 , 7 m m o l) e n M e C N ( 150 m l) y s e a ñ a d ió K 2C O 3 ( 5 , 68 g , 41 , 1 m m o l) . S e a ñ a d ió g o t a a g o t a u n a<s o l u c ió n d e>Intermediario 26<, ( 2 R ) - 3 - t e r c - b u t o x i - 2 - [ ( t r i f l u o r o m e t a n o s u lf o n i l ) o x i ] p r o p a n o a t o d e m e t ilo ( 1 3 , 3 g,>9 0 % d e p u r e z a , 38 , 8 m m o l) , e n M e C N ( 50 m l) y la m e z c l a s e a g it ó d u r a n t e la n o c h e a T A . L a m e z c l a s e filtró ,

F r a c c i ó n 1 : 2 , 38 g

L C - M S ( P r o c e d i m ie n t o 2 ) : T r = 1 , 37 m in ; M S ( E S I p o s ) : m /z = 970 [M H ]+ .

F r a c c i ó n 2 : 5 , 76 g

L C - M S ( P r o c e d i m ie n t o 2 ) : T r = 1 , 24 m in ; M S ( E S I p o s ) : m /z = 970 [M H ]+ .

R o t a c i ó n E s p e c í f i c a : a o 20 = 14 , 60 ° / - 0 , 18 ° ( c = 1 , M e O H ) .

L C - M S ( P r o c e d i m ie n t o 3 ) : T r = 1 , 17 m i n ( 91 % D A D ) ; M S ( E S I p o s ) : m /z = 485 [M 2 H ]+ , 970 [M H ]+.

1 H R M N ( C D C ls , 400 M H z ) : 8 ( p p m ) 8 , 39 ( s , 0 , 3 H , f o r m ia t o ) , 7 , 01 - 7 , 08 (m , 2 H ) , 6 , 82 (d ,J= 7 , 5 H z , 2 H ) , 4 , 07 4 , 13 (m , 2 H ) , 3 , 48 - 3 , 95 (m , 30 H ) , 2 , 49 - 3 , 43 (m , 18 H ) , 1 , 49 - 1 , 88 (m , 4 H ) , 1 , 09 - 1 , 25 (m , 30 H ) .

13C R M N ( C D C la , 101 M H z ) : 8 ( p p m ) 173 , 4 ( a ) , 171 , 9 ( a , 3 C ) , 157 , 5 , 134 , 3 , 129 , 6 ( 2 C ) , 115 , 0 ( 2 C ) , 74 , 4 , 74 , 2 ( 2 C ) , 71 , 3 , 70 , 3 , 70 , 2 , 67 , 8 , 67 , 1 , 63 , 9 ( a ) , 63 , 2 ( a , 3 C ) , 60 , 0 ( a , 2 C ) , 59 , 7 ( a ) , 52 , 5 , 52 , 2 ( 2 C ) , 52 , 1 ( a , 8 C ) , 51,2, 35,2, 29,2, 27,8 (6C), 27,7 (3C), 15,6. Algunas señales son muy amplias, no se observa un C en la cadena de propileno.

El rendimiento combinado calculado a partir del paso 1 es 74%.

Paso 4

(2S)-5-{4-[2-(2-etoxietoxi)etoxi]fenil}-2-{4,7,10-tris[(2S)-3-hidroxi-1-metoxi-1-oxopropan-2-il]-1,4,7,10-tetraazaciclododecan-1-il}pentanoato de metilo

Se disolvió (2S)-5-{4-[2-(2-etoxietoxi)etoxi]fenil}-2-{4,7,10-tris[(2S)-3-terc-butoxi-1-metoxi -1-oxopropan-2-il]-1,4,7,10-tetraazaciclododecan-1-il}pentanoato de metilo (2,38 g, 2,46 mmol) en 1,4-dioxano (60 ml) y se añadió HCl (9,8 ml, 4 M en dioxano, 39,2 mmol). La mezcla se agitó a 80°C durante 4h y luego se evaporó hasta la sequedad bajo presión reducida. El producto crudo, 2,13 g de (2S)-5-{4-[2-(2-etoxietoxi)etoxi]fenil}-2-{4,7,10-tris[(2S)-3-hidroxi-1-metoxi-1-oxopropan-2-il]-1,4,7,10-tetraazaciclododecan-1-il}pentanoato de metilo, se utilizó como tal en el paso siguiente.

Paso 5

ácido (2S)-5-{4-[2-(2-etoxietoxi)etoxi]fenil}-2-{4,7,10-tris[(1S)-1-carboxi-2-hidroxietil]-1,4,7,10-tetraazaciclododecan-1-il}pentanoico

Se disolvió (2S)-5-{4-[2-(2-etoxietoxi)etoxi]fenil}-2-{4,7,10-tris[(2S)-3-hidroxi-1-metoxi-1-oxopropan-2-il]-1,4,7,10-tetraazaciclododecan-1-il}pentanoato de metilo (2,13 g, 2,66 mmol) en THF (13 ml) y se añadió una solución de hidróxido de litio (382 mg, 16,0 mmol) agua (13 ml). Después de agitar a TA durante la noche, la reacción estuvo a punto de completarse.(La presencia de un éster metílico afecta de manera negativa al paso de complejación, puesto que el éster se hidroliza bajo las condiciones de complejación utilizadas. Por lo tanto, la saponificación completa no es obligatoria en este punto.)La mezcla de reacción se evaporó hasta la sequedad bajo presión reducida para proporcionar 2,36 g de material crudo, el cual se utilizó en la siguiente reacción.

Paso 6

(2S,2'S,2"S)-2,2',2"-[10-[(1S)-1-carboxi-4-{4-[2-(2-etoxietoxi)etoxi] fenil}butil]-1,4,7,10-tetraazaciclododecan-1,4,7-triil}tris(3-hidroxipropanoato) de gadolinio

Se disolvió ácido (2S)-5-{4-[2-(2-etoxietoxi)etoxi]fenil}-2-{4,7,10-tris[(1S)-1-carboxi-2-hidroxietil]-1,4,7,10-tetraazaciclododecan-1-il} pentanoico (5,50 g, 7,38 mmol) en agua (400 ml) y el pH se ajustó hasta 4 con ácido fórmico. Se añadió Gd<2>O<3>(1,20 g, 3,32 mmol, 0,9 eq) y la mezcla se agitó a 100°C durante 18h y durante la noche a T A y 4h adicionales a 100°C. Se añadió Chelex100™ (forma sódica, aprox. 10 g) y la mezcla se agitó 2d a TA, luego de lo cual la prueba de Xilenol-naranja indicó la ausencia de gadolinio libre. El pH de la solución se ajustó hasta 7 por medio de la adición de hidróxido de amonio (25%) y se redujo hasta aproximadamente 200 ml bajo presión reducida.(La fracción 2 del paso 3 se llevó a través de los pasos 4 a 6 de la misma manera. A pesar de que los tiempos de retención de las dos fracciones eran diferentes, ellas se comportaron del mismo modo en las reacciones posteriores y se combinaron en este punto.)Las reacciones combinadas (incluyendo la resina) se transfirieron a un cartucho Biotage vacío y se sometieron directamente a cromatografía RP (SNAP C18 de 400g, 100 ml/min, 254 nm. A = agua, B = MeCN, 0% B 5CV, 0% a 45% B en 14CV). Las fracciones interesantes se combinaron y se liofilizaron para proporcionar dos fracciones de (2S,2'S,2"S)-2,2',2M-{10-[(1S)-1-carboxi-4-{4-[2-(2-etoxietoxi)etoxi] fenil} butil]-1,4,7,10-tetraazaciclododecan-1,4,7-triil}tris(3-hidroxipropanoato) de gadolinio:

Fracción 1: 2,49 g

Rotación específica: aD20 = 15,95° /- 0,17° (c=0,84, H<2>O).

LC-MS (Procedimiento 3): Tr = 0,73min (100% DAD); MS (ESIpos): m/z = 450 [M 2H]++, 900 [M H]+ y algún [2M 2H]++; 909 [2M H<2>O 2H]++. El patrón de isótopos observado es acorde con la estructura.

UPLC-MS (Procedimiento 2): Tr = 0,78min (100% ELSD), 0,75min (100% UV 220 nm) MS (ESIpos): m/z = 900 [M H]+.

Fracción 2: 1,99 g

Rotación específica: aD20 = 16,38° /- 0,35° (c=0,84, H<2>O).

UPLC-MS (Procedimiento 2): Tr = 0,78min (100% ELSD), 0,75min (94% UV 220 nm) 0,80min (6%, UV, 220 nm), ambos picos MS (ESIpos): m/z = 900 [M H]+.

La fracción 2 contiene algún estereoisómero, probablemente a través de un evento de racemización en uno de los pasos anteriores. El rendimiento combinado a partir del paso 3 es 42%).

Ejemplo 16

Paso 1

3-{6-[2-(2-etoxietoxi)etoxi]piridin-3-il}-2-[(metilsulfonil)oxi]propanoato de terc-butilo

Terc-butil-3-{6-[2-(2-etoxietoxi)etoxi]piridin-3-il}-2-hidroxipropanoato (Intermediario 11, 2,13 g, 5,99 mmol), TEA (1,8 ml, 13 mmol; [121-44-8]) y T h F (20 ml) se agitaron a 0-5°C bajo una atmósfera de N<2>. Se añadió gota a gota MsCl (510 pl, 6,6 mmol; [124-63-0]), la mezcla se calentó hasta TA y se agitó durante 3h. La mezcla se añadió a NaHCO<3>(50% ac. sat.), seguido por la extracción con MTBE (3x), las fases orgánicas se combinaron y se lavaron con solución de NaCl (ac. sat. 2x), se secaron sobre Na<2>SO<4>y se concentraron bajo presión reducida obteniendo el compuesto del título (2,55 g). La muestra contiene aproximadamente 20% de una impureza y se utilizó como tal en los pasos siguientes.

LC-MS (Procedimiento 4): Tr = 1.21min; MS (ESIpos): m/z = 434.2 [M+H]+.

1H RMN (DMSO-da, 400 MHz): 8 (ppm) 8,02 (d,J= 2,0 Hz, 1H), 7,65 (dd,J= 8,6, 2,5 Hz, 1H), 6,79 (d,J= 8,4 Hz, 1H), 5,16-5,20 (m, 1H), 4,33 (dd a,J= 5,3, 4,1 Hz, 2H), 3,69-3,73 (m, 2H), 3,53-3,57 (m, 2H), 3,45-3,50 (m, 2H), 3,42 (c,J= 7,1 Hz, 2H), 3,11 (s, 3H), 3,04-3,10 (m, 2H), 1,36 (d,J= 0,5 Hz, 9H), 1,09 (t,J= 7,0 Hz, 3H).

Paso 2

terc-butil-3-{6-[2-(2-etoxietoxi)etoxi]piridin-3-il}-2-(1,4,7,10-tetraazaciclododecan-1-il)propanoato

Se agitaron terc-butil-3-{6-[2-(2-etoxietoxi)etoxi]piridin-3-il}-2-[(metanosulfonil)oxi] propanoato racémico (1,27 g, 2,93 mmol), 1,4,7,10-tetraazaciclododecano (551 mg, 3,20 mmol), y MeCN (24 ml) durante la noche bajo N<2>a 55°C, seguido por el calentamiento y la agitación durante 2d a 70°C. La mezcla se concentró bajo presión reducida produciendo el producto crudo (1,49 g).

LC-MS (Procedimiento 2): Tr = 0,65min; MS (ESIpos): m/z = 510,3 [M+H]+.

Paso 3

terc-butil-3-{6-[2-(2-etoxietoxi)etoxi]piridin-3-il}-2-[4,7,10-tris(2-terc-butoxi-2-oxoetil)-1,4,7,10-tetraazaciclododecan-1-il]propanoato

Se agitó terc-butil-3-{6-[2-(2-etoxietoxi)etoxi]piridin-3-il}-2-(1,4,7,10-tetraazaciclododecan-1-il)propanoato racémico (1,49 g, 2,92 mmol) en MeCN (30 ml) bajo una atmósfera de N<2>. Se añadió DIPEA (2,5 ml, 15 mmol;

[7087-68-5]), seguido por bromoacetato de terc-butilo (1,5 ml, 10 mmol) en MeCN (500 jl). La mezcla se agitó durante 5h a 60°C y luego se concentró bajo presión reducida. Se añadió EtOAc, la fase orgánica se lavó con solución de NaHCO<3>(50% ac. sat.), NaCl (ac. sat.), se secó sobre Na<2>SO<4>, se filtró y se concentró bajo presión reducida produciendo el compuesto crudo del título (3,50 g).

LC-MS (Procedimiento 2): Tr = 1,12min; MS (ESIpos): m/z = 852,4 [M+H]+.

Paso 4

ácido 3-{6-[2-(2-etoxietoxi)etoxi]piridin-3-il}-2-[4,7,10-tris(carboximetil)-1,4,7,10-tetraazaciclododecan-1-il]propanoico

Terc-butil-3-{6-[2-(2-etoxietoxi)etoxi]piridin-3-il}-2-[4,7,10-tris(2-terc-butoxi-2-oxoetil)-1,4,7,10-tetraazaciclododecan-1-il]propanoato racémico (12,6 g, 14,8 mmol) se agitó a 70°C durante 4h en ácido fórmico (53 ml), luego de ello la mezcla se concentró bajo presión reducida. La purificación utilizando cromatografía RP (Biotage C18 Ultra de 120g, 50 ml/min, A = agua, B = MeCN, 0%B a 50%B en 25min, 100%B 10min) produjo el compuesto del título (458 mg, 5% de rendimiento a lo largo de 4 pasos).

LC-MS (Procedimiento 2): Tr = 0,50min; MS (ESIpos): m/z = 628,9 [M+H]+.

1H RMN (DMSO-da, 400 MHz):<8>(ppm) 8,04 (d,J= 2,0 Hz, 1H), 7,71 (dd,J=<8>,<6>, 2,3 Hz, 1H), 6,72 (d,J= 8,4 Hz, 1H), 4,27-4,36 (m, 2H), 3,69-3,75 (m, 2H), 3,38-3,62 (m, 15H), 2,81-3,09 (m, 14H), 2,60-2,71 (m, 2H), 1,09 (t,J= 7,0 Hz, 3H).

13C RMN (DMSO-d6, 101 MHz):<8>(ppm) 172,0, 170,9 (a), 169,6 (a, 2C), 161,8, 147,3, 140,6, 126,9, 110,0, 69,9, 69,2, 68,9, 65,6, 64,7, 64,6 (a), 55,2 (a, 3C), 51,4 (a, 2C), 51,1 (a, 2C), 49,3 (a, 2C), 46,9 (a, 2C), 30,2 (a), 15,2.

Paso 5

2,2',2"-{10-[1-carboxi-2-{6-[2-(2-etoxietoxi)etoxi]piridin-3-il}etil]-1,4,7,10-tetraazaciclododecan-1,4,7-triil}triacetato de gadolinio

ácido-3-{6-[2-(2-etoxietoxi)etoxi]piridin-3-il}-2-[4,7,10-tris(carboximetil)-1,4,7,10-tetraazaciclododecan-1-il]propanoico racémico (458 mg, 730 pmol), Gd<2>O<3>(119 mg, 328 pmol) y agua (7,4 ml) se calentaron durante 24h a 105°C, luego de ello la mezcla se calentó durante 5h a 120°C. Se añadió Chelex100™ (forma sódica, lavada, aproximadamente 5 g), el pH se llevó hasta 5 utilizando NaOH (1M, ac.) y la mezcla se agitó durante 1h mostrando que la mezcla estaba libre de gadolinio. La filtración y la purificación utilizando cromatografía RP (Biotage Ultra C<1 8>de 30g, 25 ml/min, A = agua, B = MeCN, 0%B a 50%B en 25min, 100%B 0min) produjo el compuesto del título (355 mg, 62 %).

LC-MS (Procedimiento 3): Tr = 0,50min; MS (ESIpos): m/z = 392,2 [M+2H]++ ; 783,4 [M+H]+. Los patrones de isótopos coinciden con los valores teóricos para el complejo de gadolinio correspondiente.

Ejemplo 17

gadolinio-2,2',2"-{10-[1-carboxi-4-{4-[2-(2-etoxietoxi)etoxi]fenil}butil]-1,4,7,10-tetraazaciclododecan-1,4,7-triil}tris(3-hidroxipropanoato)

El compuesto del título se produjo como una mezcla de estereoisómeros a partir de etil-5-{4-[2-(2-etoxietoxi)etoxi]fenil}-2-hidroxipentanoato racémico (Intermediario 13), y etil -3-terc-butoxi-2-{[(trifluorometil)sulfonil]oxi}propanoato racémico (Intermediario 27) utilizando los procedimientos descriptos en la presente.

LC-MS (Procedimiento 3): Tr = 0,66 - 0,74min; MS (ESlpos): m/z = 450,6 [M+2H]++, 900,2 [M+H]+. Los patrones de isótopos coinciden con los valores teóricos para el complejo de gadolinio correspondiente.

Ejemplo 18

(2S,2'S,2"S)-2,2',2"-[10-[(1R)-1-carboxi-4-{4-[2-(2-etoxietoxi)etoxi] fenil}butil]-1,4,7,10-tetraazaciclododecan-1,4,7-triil}tris(3-hidroxipropanoato) de gadolinio

El compuesto del título se produjo a partir de (2S)-5-{4-[2-(2-etoxietoxi)etoxi]fenil}-2-hidroxipentanoato de etilo (Intermediario 14) y (2R)-3-terc-butoxi-2-{[(trifluorometil)sulfonil]oxi}propanoato de metilo (Intermediario 26). Rotación Específica: -18,5° ± 0,1 (c=1, H<2>O, 20°C, 589 nm).

LC-MS (Procedimiento 3): Tr = 0,65min; MS (ESlpos): m/z = 450,6 [M+2H]++; 900,3 [M+H]+. Los patrones de isótopos coinciden con los valores teóricos para el complejo de gadolinio correspondiente.

Ejemplo 19

(2R,2'R,2"R)-2,2',2"-[10-[(1R)-1-carboxi-4-{4-[2-(2-etoxietoxi)etoxi] fenil}butil]-1,4,7,10-tetraazaciclododecan-1,4,7-triil}tris(3-hidroxipropanoato) de gadolinio

El compuesto del título se produjo utilizando los procedimientos detallados en la presente a partir de (2S)-5-{4-[2-(2-etoxietoxi)etoxi]fenil}-2-hidroxipentanoato de etilo (Intermediario 14) y (2S)-3-terc-butoxi-2-{[(trifluorometil)sulfonil]oxi}propanoato de metilo (Intermediario 28).

Rotación Específica: -12,6° ± 0,14 (H<2>O, 20°C, 589 nm).

LC-MS (Procedimiento 3): Tr = 0,71min; MS (ESlpos): m/z = 450,6 [M+2H]++ ; 900,3 [M+H]+ ; 908,8 [2M+H2O+2H]++. Los patrones de isótopos coinciden con los valores teóricos para el complejo de gadolinio correspondiente.

Ejemplo 20

(2R,2'R,2"R)-2,2',2"-[10-[(1S)-1-carboxi-4-{4-[2-(2-etoxietoxi)etoxi] fenil}butil]-1,4,7,10-tetraazaciclododecan-1,4,7-triil}tris(3-hidroxipropanoato) de gadolinio

El compuesto del título se produjo utilizando los procedimientos detallados en la presente a partir de (2R)-5-{4-[2-(2-etoxietoxi)etoxi]fenil}-2-hidroxipentanoato de etilo (Intermediario 15) y (2S)-3-terc-butoxi-2-{[(trifluorometil)sulfonil]oxi}propanoato de metilo (Intermediario 28).

Rotación Específica: 18,5° ± 0,1 (c=1, H<2>O, 20°C, 589 nm).

LC-MS (Procedimiento 3): Tr = 0,65min; MS (ESIpos): m/z = 450,8 [M+2H]++ ; 900,5 [M+H]+ ; 908,8 [2M+H2O+2H]++. Los patrones de isótopos coinciden con los valores teóricos para el complejo de gadolinio correspondiente.

Ejemplo 21

gadolinio-2,2',2M-{10-[(1S)-1-carboxi-4-{4-[2-(2-etoxietoxi)etoxi]fenil}butil]-1,4,7,10-tetraazaciclododecan-1,4,7-triil}tris(3-hidroxipropanoato)

El compuesto del título se produjo utilizando los procedimientos detallados en la presente a partir de (2R)-5-{4-[2-(2-etoxietoxi)etoxi]fenil}-2-hidroxipentanoato de etilo (Intermediario 15) y metil-3-terc-butoxi-2-{[(trifluorometil)sulfonil]oxi}propanoato racémico (Intermediario 27).

Rotación Específica: 5,97° ± 0,16 (c=1, H<2>O, 20°C, 589 nm)

LC-MS (Procedimiento 3): Tr = 0,65 - 0,72min; MS (ESIpos): m/z = 450,8 [M+2H]++, 900,5 [M+H]+ . Los patrones de isótopos coinciden con los valores teóricos para el complejo de gadolinio correspondiente.

Ejemplo 22

Paso 1

2,2',2M-{10-[1-terc-butoxi-3-{4-[2-(2-etoxietoxi)etoxi]fenil}-1-oxopropan-2-il]-1,4,7,10-tetraazaciclododecan-1,4,7-triil}tris(3-terc-butoxipropanoato) de trietilo

Se disolvió 3-{4-[2-(2-etoxietoxi)etoxi]fenil}-2-(1,4,7,10-tetraazacidododecan-1-il)propanoato de terc-butilo,Ejemplo 2 -P aso 2, (1,80 g, 3,54 mmol) en MeCN (30 ml) y se añadió K<2>CO<3>(1,71 g, 12,4 mmol). Una solución de 3-terc-butoxi-2-[(trifluorometanosulfonil)oxi]propanoato de etilo,Intermediario 27, (3,76 g, 11,7 mmol) en MeCN (20 ml) se añadió gota a gota a T A y la mezcla se agitó durante 20h. La mezcla de reacción se concentró bajo presión reducida. El residuo se disolvió en DCM, luego se trató con agua y se extrajo con DCM (2 x). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con solución de NaCl sat., se filtraron utilizando un filtro repelente al agua y se concentraron bajo presión reducida. El producto crudo (3,88 g) se utilizó en la siguiente reacción. LC-MS (Procedimiento 2): Tr = 1,53min; MS (ESlpos): m/z = 1026,1 [M+H]+.

Paso 2

ácido 3-{4-[2-(2-etoxietoxi)etoxi]fenil}-2-{4,7,10-tris[1-etoxi-3-hidroxi-1-oxopropan-2-il]-1,4,7,10-tetraazaciclododecan-1-il}propanoico

Se disolvió 2,2',2"-{10-[1-terc-butoxi-3-{4-[2-(2-etoxietoxi)etoxi]fenil}-1-oxopropan-2-il]-1,4,7,10-tetraazaciclododecan-1,4,7-triil}tris(3-terc-butoxipropanoato) de trietilo (3,63 g, 3,54 mmol) en 1,4-dioxano (34 ml), se añadieron algunas gotas de agua y HCl (14 ml, 4,0 M en dioxano, 57 mmol). La mezcla se agitó a 80°C durante 6h y se concentró bajo presión reducida produciendo 2,84 g de producto crudo como mezcla de estereoisómeros, la cual se utilizó en el paso siguiente.

LC-MS (Procedimiento 2): Tr = 0,77 - 0,85min; MS (ESlpos): m/z = 801,1 [M+H]+.

Paso 3

ácido 2,2',2M-{10-[1-carboxi-2-{4-[2-(2-etoxietoxi)etoxi]fenil}etil]-1,4,7,10-tetraazaciclododecan-1,4,7-triil}tris(3-hidroxipropanoico)

Se disolvió ácido 3-{4-[2-(2-etoxietoxi)etoxi]fenil}-2-{4,7,10-tris[1-etoxi-3-hidroxi-1-oxopropan-2-il]-1,4,7,10-tetraazaddododecan-1-il}propanoico (2,85 g, 3,56 mmol) en THF (15 ml) y se añadió una solución de hidróxido de litio (682 mg, 28,5 mmol) en agua (15 ml). La mezcla se agitó a TA durante 48h se concentró bajo presión reducida. El residuo se extrajo con MeOH/EtOH (1:3) y el extracto se concentró bajo presión reducida. En el paso siguiente se utilizaron 2,25 g de producto crudo.

LC-MS (Procedimiento 2): Tr = 0,60min; MS (ESIpos): m/z = 717.7 [M+H]+.

Paso 4

2,2',2M-{10-[1-carboxi-2-{4-[2-(2-etoxietoxi)etoxi]fenil}etil]-1,4,7,10-tetraazaciclododecan-1,4,7-triil}tris(3-hidroxipropanoato) de gadolinio

Se disolvió ácido 2,2',2"-{10-[1-carboxi-2-(4-[2-(2-etoxietoxi)etoxi]fenil}etil]-1,4,7,10-tetraazaciclododecan-1,4,7-triil}tris(3- hidroxipropanoico) (2,25 g, 3,14 mmol) en agua (27 ml) y se añadió Gd<2>O<3>(512 mg, 1,41 mmol, 0,9 eq). La mezcla se agitó a 105°C durante 21h y se trató con Chelex100™ (forma sódica) a pH 5 durante 72h. La mezcla se filtró, y el filtrado se cargó directamente en la columna (SNAP ULTRA C18 de 120g, 50 ml/min, 254 nm, A = agua, B = MeCN, 0%B a 50%B en 10 CV, 100%B 5 CV). Las fracciones interesantes se agruparon y se liofilizaron para proporcionar 220 mg (3,5% a partir del paso 1) del compuesto del título. LC-MS (Procedimiento 3): Tr = 0,57 - 0,60min (100% DAD); MS (ESIpos): m/z = 436 [M 2H]++, 872 [M H]+ y algún [2M 2H]++. El patrón de isótopos observado es acorde con la estructura.

Ejemplo 23

Paso 1

3-{5-[2-(2-etoxietoxi)etoxi]piridin-2-il}-2-[(metanosulfonil)oxi]propanoato de terc-butilo

3-{5-[2-(2-etoxietoxi)etoxi]piridin-2-il}-2-hidroxipropanoato de terc-butilo,Intermediario 17, (1,05 g, 2,95 mmol) se disolvió en THF (10 ml), se añadió TEA (990 pl, 7,1 mmol) y se enfrió hasta 0°C. Se añadió MsCl (270 pl, 3,5 mmol) y la mezcla se agitó a TA durante 1h. La mezcla de reacción se vertió en 0,6M NaHCO<3>y se extrajo con EtOAc (3 x). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con NaCl sat., se filtraron utilizando un filtro repelente al agua y se concentraron bajo presión reducida. El residuo obtenido (1,15 g) fue sin purificación adicional.

LC-MS (Procedimiento 1): Tr= 1,08min; MS (ESIpos): m/z = 434,0 [M+H]+.

1H RMN (DMSO-da, 500 MHz): 8 (ppm) 8,23 (d,J= 2,8 Hz, 1H), 7,37 (dd,J= 8,5, 2,8 Hz, 1H), 7,28 (d,J= 8,5 Hz, 1H), 5,26 (dd,J= 7,6, 5,7 Hz, 1H), 4,13-4,16 (m, 2H), 3,72-3,75 (m, 2H), 3,57 (dd,J= 5,7, 3,8 Hz, 2H), 3,47-3,49 (m, 2H), 3,42 (c,J= 6,9 Hz, 2H), 3,16-3,26 (m, 2H), 3,02 (s, 3H), 1,39 (s, 9H), 1,09 (t,J= 7,1 Hz, 3H).

Paso 2

3-{5-[2-(2-etoxietoxi)etoxi]piridin-2-il}-2-(1,4,7,10-tetraazaciclododecan-1-il)propanoato de terc-butilo

Se disolvió 3-{5-[2-(2-etoxietoxi)etoxi]piridin-2-il}-2-[(metanosulfonil)oxi]propanoato de terc-butilo (1,15 g, 2,65 mmol) en MeCN (15 ml), se añadió 1,4,7,10-tetraazaciclododecano (548 mg, 3,18 mmol) y la mezcla se agitó a 70°C durante 20h. El solvente se eliminó bajo presión reducida y the producto crudo (1,35 g) se utilizó directamente en el paso siguiente.

LC-MS (Procedimiento 2): Tr = 0.65min (63% ELSD); MS (ESIpos): m/z = 510 [M H]+.

Paso 3

3-{5-[2-(2-etoxietoxi)etoxi]piridin-2-il}-2-[4,7,10-tris(2-terc-butoxi-2-oxoetil)-1,4,7,10-tetraazaciclododecan-1-il]propanoato de terc-butilo

Se disolvió 3-{5-[2-(2-etoxietoxi)etoxi]piridin-2-il}-2-(1,4,7,10-tetraazaciclododecan-1-il)propanoato de tercbutilo (1,35 g, 2,65 mmol) en MeCN (15 ml), se añadieron DIPEA (2,3 ml, 13 mmol) y una solución de bromoacetato de terc-butilo (1,4 ml, 9,3 mmol) en MeCN (0,70 ml). La mezcla se agitó a 60°C durante 20h luego de lo cual la mezcla se concentró bajo presión reducida. El residuo se disolvió en EtOAc, se lavó con NaHCO<3>(0,6M ac.) y NaCl (ac. sat.). La fase orgánica se filtró utilizando un filtro repelente al agua y se concentró bajo presión reducida. El producto crudo de 3,20 g se utilizó sin purificación adicional.

LC-MS (Procedimiento 2): Tr = 1,20min; MS (ESIpos): m/z = 852,4 [M+H+].

Paso 4

ácido 3-{5-[2-(2-etoxietoxi)etoxi]piridin-2-il}-2-[4,7,10-tris(carboximetil)-1,4,7,10-tetraazaciclododecan-1-il]propanoico

Se disolvió 3-{5-[2-(2-etoxietoxi)etoxi]piridin-2-il}-2-[4,7,10-tris(2-terc-butoxi-2-oxoetil)-1,4,7,10-tetraazaciclododecan-1-il]propanoato de terc-butilo (3,20 g, 3,76 mmol) en ácido fórmico (24 ml, 640 mmol) y se agitó a 70°C durante 20h. La mezcla de reacción se concentró bajo presión reducida y el residuo se obtuvo purificado por medio de cromatografía RP. (SNAP ULTRA C18 de 30g, 50 ml/min, 254 nm, A = agua, B = MeCN, 0% B 3CV, 0% a 50%B en 15 CV, 100%B 5 CV). Las fracciones interesantes se combinaron y se liofilizaron para proporcionar 730 mg (39% calc. a partir del paso 1) del compuesto del título.

LC-MS (Procedimiento 2): Tr = 0,45min; MS (ESIpos): m/z = 628 [M H]+.

Paso 5

2,2',2M-{10-[1-carboxi-2-{5-[2-(2-etoxietoxi)etoxi]piridin-2-il}etil]-1,4,7,10-tetraazaciclododecan-1,4,7-triil}triacetato de gadolinio

Ácido (2S)-3-{5-[2-(2-etoxietoxi)etoxi]piridin-2-il}-2-[4,7,10-tris(carboximetil)-1,4,7,10-tetraazaciclododecan-1-il]propanoico (730 mg, 1,16 mmol, 0,9 eq) se disolvió en agua (10 ml) y se añadió Gd<2>Ü<3>(190 mg, 523 pmol). La mezcla se agitó a 105°C durante 21h. La mezcla de reacción se trató con Chelex100™ (forma sódica) y se agitó a pH 5 durante 72h. La mezcla se filtró y el filtrado se cargó directamente en una columna Biotage para su purificación (SNAP ULTRA C18 de 30g, 25 ml/min, 254 nm, A = agua, B = MeCN, 0% B 2CV, 0% a 50%B en 15 CV, 100%B 5 CV). Las fracciones interesantes se combinaron y se liofilizaron para proporcionar 320 mg (35%) del compuesto del título.

LC-MS (Procedimiento 2): Tr = 0,49min; MS (ESIpos): m/z = 782 [M H]+.

LC-MS (Procedimiento 3): Tr = 0,38min (100% DAD); MS (ESIpos): m/z = 392 [M 2H]+, 522 [2M 3H]3+, 783 [M H]+ y algún [2M 2H]++. El patrón de isótopos es acorde con un complejo de gadolinio.

Ejemplo 24

Paso 1

2-[(metanosulfonil)oxi]-4-(4-propoxifenil)butanoato de metilo

Se disolvió 2-hidroxi-4-(4-propoxifenil)butanoato de metilo, (Intermediario 18, 2,00 g, 7,93 mmol) en THF, se añadió TEA (2,7 ml, 19 mmol) y se enfrió hasta 0°C, se añadió gota a gota MsCl (1,09 g, 9,51 mmol; [124-63 0]) y la mezcla se agitó a TA durante la noche. Se añadió NaHCÜ<3>(0,6 M ac.) y la mezcla se extrajo con MTBE. Las fases orgánicas combinadas se secaron (Na<2>SÜ<4>) y se concentraron bajo presión reducida. El compuesto del título de 2,48 g se utilizó sin purificación adicional.

LC-MS (Procedimiento 4): Tr = 1,28min; MS (ESlpos): m/z = 331 [M+H]+.

1H RMN (DMSO-da, 400 MHz): 8 (ppm) 7,09-7,15 (m, 2H), 6,81-6,87 (m, 2H), 5,08 (dd,J= 7,6, 4,6 Hz, 1H), 3,88 (t,J= 6,6 Hz, 2H), 3,70 (s, 3H), 3,27 (s, 3H), 2,58-2,65 (m, 2H), 2,00-2,15 (m, 2H), 1,70 (sxt,J= 7,0 Hz, 2H), 0,96 (t,J= 7,5 Hz, 3H).

Paso 2

4-(4-propoxifenil)-2-(1,4,7,10-tetraazaciclododecan-1-il)butanoato de metilo

Se disolvió 1,4,7,10-tetraazaciclododecano (1,61 g, 9,37 mmol) en MeCN (30 ml) y se añadió K<2>CO<3>(1,04 g, 7,50 mmol). Una solución de 2-[(metanosulfonil)oxi]-4-(4-propoxifenil)butanoato de metilo (2,48 g, 7,50 mmol) en MeCN (9,3 ml) se añadió gota a gota y la mezcla se agitó a 55°C durante la noche. La mezcla se filtró, se lavó con EtOH y el filtrado combinado se concentró bajo presión reducida. Se obtuvieron 3,10 g (96% calc. a partir del paso 1) del compuesto del título, el cual se utilizó como tal en el paso siguiente.

LC-MS (Procedimiento 2): Tr = 0,77min; MS (ESlpos): m/z = 407 [M+H]+.

1H RMN (DMSO-d6, 400 MHz): 8 (ppm) 7,08-7,14 (m, 2H), 6,80-6,85 (m, 2H), 3,87 (t,J= 6,6 Hz, 2H), 3,61 (s, 3H), 2,51-2,81 (m, 12H), 2,40-2,49 (m, 3H), 2,28-2,37 (m, 4H), 1,65-1,91 (m, 4H), 0,96 (t,J= 7,4 Hz, 3H).Paso 3

4-(4-propoxifenil)-2-[4,7,10-tris(2-terc-butoxi-2-oxoetil)-1,4,7,10-tetraazaciclododecan-1-il]butanoato de metilo

Se disolvió 4-(4-propoxifenil)-2-(1,4,7,10-tetraazaciclododecan-1-il)butanoato de metilo (1,55 g, 3,81 mmol) en MeCN (15 ml), se colocó bajo N<2>y se añadió K<2>CO<3>(4,48 g, 32,4 mmol). Se añadió gota a gota una solución de bromoacetato de terc-butilo (2,0 ml, 13 mmol; [5292-43-3]) en MeCN (10 ml) y la mezcla se agitó a TA durante la noche. La mezcla se filtró, la torta de filtro se lavó con EtOH y los filtrados combinados se concentraron bajo presión reducida. El material crudo (2,85 g) se utilizó sin purificación adicional.

LC-MS (Procedimiento 2): Tr = 1,24min; MS (ESlpos): m/z = 750,3 [M+H]+.

Paso 4

ácido 2,2',2"-{10-[1 -metoxi-1-oxo-4-(4-propoxifenil)butan-2-il]-1,4,7,10-tetraazaciclododecan-1,4,7-triil}triacético

Se disolvió 4-(4-propoxifenil)-2-[4,7,10-tris(2-terc-butoxi-2-oxoetil)-1,4,7,10-tetraazaciclododecan-1-il]butanoato de metilo (2,85 g, 3,80 mmol) en ácido fórmico (50 ml) y se calentó hasta 70°C durante la noche. La mezcla se concentró bajo presión reducida y el residuo obtenido se colocó en una columna C18 Biotage utilizando MeCN y Agua (0 -100 %). Se obtuvieron dos fracciones del compuesto del título:

Fracción 1: 620 mg (1,07 mmol, 28% calc. a partir del paso 3)

LC-MS (Procedimiento 2): Tr = 0,72min (100%, ELSD); MS (ESIpos): m/z = 582 [M+H]+.

1H RMN (DMSO-da, 400 MHz): 8 (ppm) 7,07-7,13 (m,J= 8,6 Hz, 2H), 6,77-6,83 (m,J= 8,6 Hz, 2H), 3,86 (t,J= 6,5 Hz, 2H), 3,62 (s, 3H), 3,34-3,52 (m, 6H), 2,76-3,11 (m, 13H), 2,40-2,61 (m, 6H), 1,78-1,99 (m, 2H), 1,70 (sxt,J= 7,0 Hz, 2H), 0,96 (t,J= 7,4 Hz, 3H).

13C RMN (DMSO-d6, 101 MHz): 8 (ppm) 172,4, 170,8 (a), 170,0 (a, 2C), 156,9, 133,0, 129,3, 114,3, 68,8, 62,3 (a), 55,4 (a), 54,9 (a, 2C), 51,6 (a, 2C), 51,3, 51,2 (a, 2C), 49,0 (a, 2C), 46,7 (a, 2C), 31,2, 30,3, 22,1, 10,5. Fracción 2: 500 mg (0,86 mmol, 23% calc. a partir del paso 3)

LC-MS (Procedimiento 2): Tr = 0,71min (94%, ELSD); MS (ESIpos): m/z = 582 [M+H]+.

Paso 5

2,2',2"-{10-[1-carboxi-3-(4-propoxifenil)propil]-1,4,7,10-tetraazaciclododecan-1,4,7-triil}triacetato de gadolinio

Se disolvió ácido 2,2',2"-{10-[1-metoxi-1-oxo-4-(4-propoxifenil)butan-2-il]-1,4,7,10-tetraazaciclododecan-1,4,7-triil}triacético (620 mg, 1,07 mmol) en agua (10,9 ml) y se añadió Gd<2>O<3>(174 mg, 0,48 mmol, 0,9 eq.). La mezcla se agitó a 100°C durante 2d. Se añadió Chelex100™ (forma sódica, aprox. 5 g) y la mezcla se agitó durante 1h a TA y pH 5. La mezcla se filtró, y el filtrado se concentró bajo presión reducida. La fracción 2 del paso previo se trató de la misma manera y se descubrió que el producto crudo obtenido era idéntico. Ambos productos crudos se combinaron y se purificaron por medio de cromatografía RP (SNAP C18 de 60g, 50 ml/min, A = agua, B = MeCN, 0% B 5min, 0%B a 50%B en 25min, 100% B 10min). Las fracciones interesantes se combinaron y se liofilizaron para proporcionar 1,01 g (1,04 mmol, 66%) del compuesto del título.

LC-MS (Procedimiento 3): Tr = 0,71min (100% DAD); MS (ESIpos): m/z = 361 [M 2H]++, 722 [M H]+y algún [2M 2H]++, 731 [2M H<2>O 2H]++. El patrón de isótopos es acorde con un complejo de gadolinio.

Ejemplo 25

Paso 1

5-{4-[2-(2-etoxietoxi)etoxi]fenil}-2-[(metanosulfonil)oxi]pentanoato de etilo

<S e d is o lv ió 5 - { 4 - [ 2 - ( 2 - e t o x ie t o x i) e t o x i] f e n i l } - 2 - h i d r o x i p e n t a n o a t o d e e t ilo ,>Intermediario 13<, ( 70 0 m g , 1 , 9 7 m m o l)>e n T H F ( 15 m l), s e a ñ a d ió T E A ( 660 j l , 4 , 7 m m o l) y s e e n f r ió h a s t a 0 ° C . L a a d ic ió n g o t a a g o t a d e M s C I ( 180 |j |, 2 , 4 m m o l) s e s e g u i ó p o r la a g it a c ió n a T A d u r a n t e la n o c h e . L a m e z c l a d e r e a c c i ó n s e v e r t ió e n N a H C O 3 ( 0 , 6 M , a c . ) y s e e x t r a jo c o n E t O A c ( 3 x ) . L a s f a s e s o r g á n i c a s c o m b i n a d a s s e la v a r o n c o n N a C l ( a c . s a t . ) , s e s e c a r o n s o b r e N a 2S O 4, s e f i lt r a r o n u t i l iz a n d o u n f iltro r e p e le n t e a l a g u a y s e c o n c e n t r a r o n b a jo p r e s i ó n r e d u c id a . E l c o m p u e s t o d e l t ít u lo o b t e n id o , 790 m g s e u t i liz ó s in p u r if ic a c i ó n a d ic io n a l.

L C - M S ( P r o c e d i m ie n t o 4 ) : T r = 1 , 25 m in ; M S ( E S l p o s ) : m /z = 433 [M H ]+ .

1 H R M N ( D M S O - d a , 400 M H z ) : 8 ( p p m ) 7 , 09 (d ,J= 8 , 6 H z , 2 H ) , 6 , 85 (d ,J= 7 , 2 H z , 2 H ) , 5 , 09 (d d ,J= 7 , 5 , 4 , 7 H z , 1 H ) , 4 , 12 - 4 , 21 (m , 2 H ) , 4 , 04 ( d d ,J= 5 , 4 , 3 , 9 H z , 2 H ) , 3 , 71 ( d d ,J= 5 ,4 , 3 , 9 H z , 2 H ) , 3 , 54 - 3 , 59 (m , 2 H ) , 3 , 46 - 3 , 50 (m , 2 H ) , 3 , 42 ( c ,J= 7 , 0 H z , 2 H ) , 3 , 24 ( s , 3 H ) , 2 , 51 - 2 , 64 (m , 2 H ) , 1 , 70 - 1 , 85 (m , 2 H ) , 1 , 53 - 1 , 70 (m , 2 H ) , 1 , 19 (t,J= 7 , 2 H z , 3 H ) , 1 , 09 (t,J= 7 , 0 H z , 3 H ) .

Paso 2

5 - { 4 - [ 2 - ( 2 - e t o x ie t o x i ) e t o x i ] f e n i l } - 2 - ( 1 , 4 , 7 , 10 - t e t r a a z a c ic lo d o d e c a n - 1 - i l ) p e n t a n o a t o d e e t ilo

S e d is o lv ió 5 - { 4 - [ 2 - ( 2 - e t o x ie t o x i) e t o x i] f e n i l } - 2 - [ ( m e t a n o s u l f o n i l ) o x i ] p e n t a n o a t o d e e t i lo ( 790 m g , 1 , 83 m m o l) e n M e C N ( 30 m l), s e c o l o c ó b a jo N 2 y s e a ñ a d ió 1 , 4 , 7 , 10 - t e t r a a z a c i c l o d o d e c a n o ( 535 m g , 3 , 10 m m o l) . L a m e z c l a s e a g it ó a 55 ° C d u r a n t e la n o c h e . E l s o l v e n t e s e e l im in ó b a jo p r e s i ó n r e d u c i d a , e l r e s i d u o s e d is o lv ió e n D C M ( 100 m l) y s e a g it ó c o n s o l u c ió n d e N a O H ( 1 N , a c . 60 m l) d u r a n t e 15 m in . L a s c a p a s s e s e p a r a r o n , la c a p a o r g á n i c a s e la v ó c o n a g u a ( 2 x 50 m l) y N a C l s a t . (1 x 50 m l), s e s e c ó s o b r e N a 2S O 4 y s e c o n c e n t r ó b a jo p r e s ió n r e d u c i d a . S e o b t u v ie r o n 829 m g d e l c o m p u e s t o d e l t ítu lo .

L C - M S ( P r o c e d i m ie n t o 2 ) : T r = 0 , 70 m in ; M S ( E S l p o s ) : m /z = 510 [M H ]+ .

1 H R M N ( C D C la , 400 M H z ) : 8 ( p p m ) 7 , 06 - 7 , 10 (m , 2 H ) , 6 , 79 - 6 , 84 (m , 2 H ) , 4 , 08 - 4 , 19 (m , 4 H ) , 3 , 85 (d d ,J= 5 ,4 , 4 , 4 H z , 2 H ) , 3 , 70 - 3 , 74 (m , 2 H ) , 3 , 60 - 3 , 63 (m , 2 H ) , 3 , 54 (c ,J= 7 , 0 H z , 2 H ) , 3 , 32 - 3 , 40 (m , 1 H ) , 2 , 39 - 2 , 98 (m , 18 H ) , 1 , 60 - 1 , 84 (m , 4 H ) , 1 , 26 (t,J= 7 , 1 H z , 3 H ) , 1 , 21 (t,J= 7 , 1 H z , 3 H ) .

Paso 3

5 - { 4 - [ 2 - ( 2 - e t o x ie t o x i ) e t o x i ] f e n i l } - 2 - [ 4 , 7 , 10 - t r is ( 2 - t e r c - b u t o x i - 2 - o x o e t i l ) - 1 , 4 , 7 , 10 - t e t r a a z a c i c l o d o d e c a n - 1 -i l ] p e n t a n o a t o d e e t ilo

L C - M S ( P r o c e d i m ie n t o 2 ) : T r = 1 , 25 m in ; M S ( E S l p o s ) : m /z = 852 , 0 [M H ]+ .

Paso 4

á c id o 2 , 2 ' , 2 M- { 10 - [ 1 - e t o x i- 5 - { 4 - [ 2 - ( 2 - e t o x i e t o x i ) e t o x i ] f e n i l } - 1 - o x o p e n t a n - 2 - i l ] - 1 , 4 , 7 , 10 - t e t r a a z a c i c lo d o d e c a n -1 , 4 , 7 - t r i i l } t r ia c é t i c o

S e d is o lv ió 5 - { 4 - [ 2 - ( 2 - e t o x ie t o x i ) e t o x i ] f e n i l } - 2 - [ 4 , 7 , 10 - t r is ( 2 - t e r c - b u t o x i - 2 - o x o e t i l ) - 1 , 4 , 7 , 10 -t e t r a a z a c i c lo d o d e c a n - 1 - i l ] p e n t a n o a t o d e e t i lo ( 1 , 40 g , 1 , 64 m m o l) e n á c id o f ó r m ic o ( 11 m l) y s e a g it ó a 70 ° C d u r a n t e 20 h . E l s o l v e n t e s e e l im in ó b a jo p r e s i ó n r e d u c i d a y e l r e s i d u o s e p u r if ic ó p o r m e d io d e c r o m a t o g r a f ía R P ( S N A P U lt r a C 18 d e 30 g , 25 m l/m in , 254 n m , A = a g u a , B = M e C N , 0 % B a 55 % B e n 10 C V , 100 % B 5 C V ) . L a s f r a c c i o n e s i n t e r e s a n t e s s e c o m b i n a r o n y s e l io f i l iz a r o n p a r a p r o p o r c i o n a r 490 m g ( 0 , 72 m m o l, 37 % c a lc . a p a r t ir d e l p a s o 1 ) d e l c o m p u e s t o d e l t ítu lo .

L C - M S ( P r o c e d i m ie n t o 2 ) : T r = 0 , 74 m i n ; M S ( E S l p o s ) : m /z = 683 [M H ]+.

1H R M N ( D M S O - d 6, 400 M H z ) : 8 ( p p m ) 7 , 08 (d ,J= 7 , 5 H z , 2 H ) , 6 , 80 - 6 , 87 (m , 2 H ) , 4 , 02 - 4 , 10 (m , 4 H ) , 3 , 69 3 , 73 (m ), 3 , 55 - 3 , 59 (m ), 3 , 34 - 3 , 51 ( m ) , 2 , 76 - 3 , 11 (m , 16 H ) , 2 , 40 - 2 , 55 (m , 2 H ) , 1 , 34 - 1 , 72 (m , 4 H ) , 1 , 17 (t,J= 7 , 1 H z , 3 H ) , 1 , 09 (t,J= 7 , 1 H z , 3 H ) . U n a s e ñ a l d e a g u a m u y f u e r t e im p id e la in t e g r a c ió n e n t r e 3 - 5 p p m .

Paso 5

2 , 2 ' , 2 " - { 10 - [ 1 - c a r b o x i- 4 - { 4 - [ 2 - ( 2 - e t o x ie t o x i ) e t o x i ] f e n i l } b u t i l ] - 1 , 4 , 7 , 10 - t e t r a a z a c i c lo d o d e c a n - 1 , 4 , 7 - t r i i l } t r i a c e t a t o d e g a d o l in io

L C - M S ( P r o c e d i m ie n t o 2 ) : T r = 0 , 72 m i n ; M S ( E S l p o s ) : m /z = 809 [M H ]+.

L C - M S ( P r o c e d i m ie n t o 3 ) : T r = 0 , 71 m i n ( 100 % D A D ) ; M S ( E S l p o s ) : m / z = 808 [M H ]+. E l p a t r ó n d e is ó t o p o s e s a c o r d e c o n u n c o m p le j o d e g a d o lin io .

Ejemplo 26

Paso 1

( 2 R ) - 5 - { 4 - [ 2 - ( 2 - e t o x i e t o x i ) e t o x i ] f e n i l } - 2 - [ ( m e t a n o s u l f o n i l ) o x i ] p e n t a n o a t o d e m e t ilo

Intermediario 12,<( 2 , 50 g,>

R o t a c i ó n e s p e c í f i c a : [ a ] o 20 = 16 , 2 ° / - 0 , 20 ° ( c = 1 , C H C h ) .

L C - M S ( P r o c e d i m ie n t o 6 ): T r = 1 , 18 m i n ; M S ( E S l p o s ) : m /z = 436 [ M N H 4]+.

1H R M N ( 400 M H z , D M S O - d 6) 8 p p m 1 , 09 (t, 3 H ) , 1 , 56 - 1 , 68 (m , 2 H ) , 1 , 70 - 1 , 86 (m , 2 H ) , 2 , 53 - 2 , 60 (m , 2 H ) , 3 , 24 (s , 3 H ) , 3 , 43 (c , 2 H ) , 3 , 47 - 3 , 50 (m , 2 H ) , 3 , 56 - 3 , 58 (m , 2 H ) , 3 , 70 - 3 , 73 (m , 5 H ) , 4 , 03 - 4 , 05 (m , 2 H ) , 5 , 10 - 5 , 13 (m , 1 H ) , 6 , 83 - 6 , 87 (m , 2 H ) , 7 , 07 - 7 , 11 (m , 2 H ) .

Paso 2

( 2 S ) - 5 - { 4 - [ 2 - ( 2 - e t o x ie t o x i ) e t o x i ] f e n i l } - 2 - ( 1 , 4 , 7 , 10 - t e t r a a z a c i c lo d o d e c a n - 1 - i l ) p e n t a n o a t o d e m e t ilo

U n a s o l u c ió n d e 1 , 4 , 7 , 10 - t e t r a a z a c i c l o d o d e c a n o ( 1 , 00 g , 5 , 80 m m o l) e n M e C N ( 6 m l) s e t r a t ó a T A c o n u n a s o l u c ió n d e ( 2 R ) - 5 - { 4 - [ 2 - ( 2 - e t o x i e t o x i ) e t o x i ] f e n i l } - 2 - [ ( m e t a n o s u lf o n i l ) o x i ] p e n t a n o a t o d e m e t ilo ( 1 , 2 g , 2 , 9 m m o l) e n M e C N ( 5 m l). L a m e z c l a d e r e a c c ió n s e a g it ó a 70 ° C d u r a n t e 7 h y p o s t e r io r m e n t e a T A d u r a n t e la n o c h e . E l m a t e r ia l s ó l id o s e e l im in ó p o r m e d io d e f ilt r a c ió n , s e la v ó c o n M e C N y e l f i lt r a d o s e c o n c e n t r ó b a jo p r e s ió n r e d u c i d a . E l r e s i d u o o b t e n id o s e r e c o g ió c o n E t O A c , s e la v ó c o n N a O H ( 0 ,1 M a c . ) y N a C l ( a c . s a t . ) , s e s e c ó c o n N a 2S O 4, s e f ilt ró y s e c o n c e n t r ó b a jo p r e s i ó n r e d u c i d a p a r a p r o p o r c i o n a r e l c o m p u e s t o d e l t ít u lo c r u d o ( 1 , 19 g , 37 % ) e l c u a l s e u t i l iz ó e n e l p a s o s ig u ie n t e s in p u r if ic a c ió n a d ic io n a l.

L C - M S ( P r o c e d i m ie n t o 2 ) : T r = 0 , 61 m in ; M S ( E S I p o s ) : m /z = 495 [M H ]+ .

1 H R M N ( 400 M H z , D M S O - d a ) 8 p p m 1 , 09 (t, 3 H ) , 1 , 50 - 1 , 76 (m , 4 H ) , 2 , 27 - 2 , 43 (m , 7 H ) , 2 , 54 - 2 , 67 (m , 9 H ) , 2 , 72 - 2 , 77 (m , 2 H ) , 3 , 38 - 3 , 45 (m , 3 H ) , 3 , 47 - 3 , 50 (m , 2 H ) , 3 , 56 - 3 , 60 (m , 5 H ) , 3 , 70 - 3 , 72 (m , 2 H ) , 4 , 02 -4 , 05 (m , 2 H ) , 6 , 82 - 6 , 86 (m , 2 H ) , 7 , 08 - 7 , 12 (m , 2 H ) .

Paso 3

( 2 S ) - 5 - { 4 - [ 2 - ( 2 - e t o x ie t o x i ) e t o x i ] f e n i l } - 2 - [ 4 , 7 , 10 - t r i s ( 2 - t e r c - b u t o x i- 2 - o x o e t i l ) - 1 , 4 , 7 , 10 - t e t r a a z a c i c l o d o d e c a n - 1 -i l ] p e n t a n o a t o d e m e t ilo

U n a s o l u c ió n d e ( 2 S ) - 5 - { 4 - [ 2 - ( 2 - e t o x i e t o x i ) e t o x i ] f e n i l } - 2 - ( 1 , 4 , 7 , 1 ° - t e t r a a z a c i c l o d o d e c a n - 1 - i l ) p e n t a n o a t o d e m e t ilo ( 250 m g , 455 p m o l) e n M e C N ( 3 m l) s e t ra t ó a T a c o n b r o m o a c e t a t o d e t e r c - b u t i lo ( 230 p l, 1 , 5 m m o l;

[ 5292 - 43 - 3 ] ) y K 2C O 3 ( 220 m g , 1 , 6 m m o l; [ 584 - 08 - 7 ] ) y s e a g it ó a T A d u r a n t e la n o c h e . D e b id o a la c o n v e r s ió n in c o m p le t a , s e a ñ a d ió b r o m o a c e t a t o d e t e r c - b u t i lo a d ic i o n a l ( 0 , 7 e q . , 50 p l, 0 , 3 m m o l) , y la m e z c l a s e a g it ó d u r a n t e la n o c h e a T A . E l m a t e r ia l s ó l id o s e e l im in ó p o r m e d io d e f i lt r a c ió n , s e la v ó c o n M e C N y e l f i lt r a d o s e c o n c e n t r ó b a jo p r e s i ó n r e d u c i d a p a r a p r o p o r c i o n a r e l c o m p u e s t o d e l t ít u lo c r u d o ( 356 m g ) e l c u a l s e u t i l iz ó e n e l p a s o s ig u ie n t e s in p u r if ic a c ió n a d ic io n a l.

L C - M S ( P r o c e d i m ie n t o 3 ) : T r = 1 , 08 m in ; M S ( E S I p o s ) : m /z = 837 , 6 [M H ]+ , 419 , 3 [ M 2 H ] 2+.

R o t a c i ó n e s p e c í f i c a : [ a ] o 2° = - 7 , 3 ° / - 0 , 48 ° ( c = 1 , C H C l a ) .

1H R M N ( D M S O - d 6, 4 ° ° M H z ) : 8 ( p p m ) 7 , 02 - 7 , 12 (m , 2 H ) , 6 , 79 - 6 , 87 (m , 2 H ) , 4 , 02 - 4 , 05 (m , 2 H ) , 3 , 69 - 3 , 75 (m , 2 H ) , 3 , 52 - 3 , 65 (m , 5 H ) , 3 , 46 - 3 , 5 ° (m , 2 H ) , 3 , 42 (c ,J= 7 , 1 H z , 2 H ) , 3 , 03 - 3 , 3 ° (m , 7 H ) , 2 , 55 - 2 , 81 (m , 1 ° H ) , 1 , 49 1 , 73 (m , 4 H ) , 1 , 38 - 1 , 44 (m , 28 H ) , 1 , 09 (t,J= 7 , 0 H z , 3 H ) . 4 c i c l e n o - H e s t á n o c u lt o s b a jo la f u e r t e s e ñ a l d e l s o lv e n t e .

Paso 4

á c id o ( 2 S ) - 5 - { 4 - [ 2 - ( 2 - e t o x ie t o x i ) e t o x i ] f e n i l } - 2 - [ 4 , 7 , 1 ° - t r i s ( 2 - t e r c - b u t o x i- 2 - o x o e t i l ) - 1 , 4 , 7 , 1 ° -t e t r a a z a c i c l o d o d e c a n - 1 - i l ] p e n t a n o ic o

U n a s o l u c ió n d e ( 2 S ) - 5 - { 4 - [ 2 - ( 2 - e t o x ie t o x i ) e t o x i ] f e n i l } - 2 - [ 4 , 7 , 1 ° - t r i s ( 2 - t e r c - b u t o x i- 2 - o x o e t i l ) - 1 , 4 , 7 , 1 ° -t e t r a a z a c i c lo d o d e c a n - 1 - i l ] p e n t a n o a t o d e m e t ilo c r u d o ( 35 ° m g , 42 ° p m o l) e n T H F ( 3 m l) s e t r a t ó c o n 2 M N a O H a c u o s o ( 2 m l, 4 m m o l) a T A d u r a n t e 4 d . L a m e z c l a d e r e a c c ió n s e a ju s t ó h a s t a p H 7 p o r m e d io d e la a d ic ió n d e H C l ( 2 M a c . ) y s e e x t r a jo c o n E t O A c ( 3 x ) . L a s c a p a s o r g á n i c a s c o m b i n a d a s s e s e c a r o n c o n N a 2S O 4, s e f i lt r a r o n y s e c o n c e n t r a r o n b a jo p r e s ió n r e d u c i d a p a r a p r o p o r c i o n a r e l c o m p u e s t o d e l t ít u lo c r u d o ( 55 m g ) e l c u a l s e u t i l iz ó e n e l p a s o s ig u ie n t e s in p u r if ic a c ió n a d ic io n a l.

L C - M S ( P r o c e d i m ie n t o 3 ) : T r = 1 , ° 4 m i n ; M S ( E S I p o s ) : m /z = 823 , 6 [M H ]+ , 412 , 3 [ M 2 H ] 2+.

Paso 5

á c id o ( 2 S ) - 5 - { 4 - [ 2 - ( 2 - e t o x i e t o x i ) e t o x i ] f e n i l } - 2 - [ 4 , 7 , 10 - t r i s ( c a r b o x i m e t i l ) - 1 , 4 , 7 , 10 - t e t r a a z a c i d o d o d e c a n - 1 -i l ] p e n t a n o ic o

L C - M S ( P r o c e d i m ie n t o 2 ) : T r = 0 , 69 m in ; M S ( E S l p o s ) : m /z = 655 [M H ]+ .

Paso 6

2 , 2 ' , 2 M- { 10 - [ ( 1 S ) - 1 - c a r b o x i - 4 - { 4 - [ 2 - ( 2 - e t o x i e t o x i ) e t o x i ] f e n i l } b u t i l ] - 1 , 4 , 7 , 10 - t e t r a a z a c i c l o d o d e c a n - 1 , 4 , 7 -t r i i l } t r ia c e t a t o d e g a d o l in io

U n a s o l u c ió n d e á c id o ( 2 S ) - 5 - { 4 - [ 2 - ( 2 - e t o x ie t o x i ) e t o x i ] f e n i l } - 2 - [ 4 , 7 , 10 - t r i s ( c a r b o x i m e t i l ) - 1 , 4 , 7 , 10 -t e t r a a z a c i c l o d o d e c a n - 1 - i l ] p e n t a n o ic o c r u d o ( 44 m g , 67 j m o l ) e n a g u a ( 5 m l) s e t r a t ó c o n G d 2O 3 ( 0 , 49 e q ., 12 m g , 33 j m o l ; [ 12064 - 62 - 9 ] ) y s e a g it ó a 105 ° C d u r a n t e la n o c h e . L a m e z c l a d e r e a c c ió n s e e n f r ió h a s t a t A , s e t r a t ó c o n u n e x c e s o d e r e s i n a q u e l a n t e C h e l e x 100 ™ ( f o r m a s ó d i c a , la v a d a ) ( e l p H s e a ju s t ó p o r m e d io d e la a d ic ió n d e á c id o f ó r m ic o h a s t a 4 - 5 ) , la r e s i n a s e e l im in ó p o r m e d io d e f i lt r a c ió n y e l f i lt r a d o s e p u r if ic ó p o r m e d io d e H P L C p r e p a r a t iv a p a r a p r o p o r c i o n a r e l c o m p u e s t o d e l t ít u lo ( 3 , 4 m g , 0 , 6 % d e r e n d im ie n t o a lo la r g o d e 5 p a s o s ) .

L C - M S ( P r o c e d i m ie n t o 3 ) : T r = 0 , 73 m i n ; M S ( E S l p o s ) : ): m /z = 810 , 4 [M H ] , m / 2 z = 405 , 7 [ M H ] 2+.

Ejemplo 27

Paso 1

( 2 R ) - 2 - h i d r o x i h e x - 5 - e n o a t o d e m e t ilo

B r o m u r o d e c o b r e ( l ) s u l f u r o d e d im e t ilo ( 16 , 2 g , 78 , 0 m m o l; [ 54678 - 23 - 8 ] ) c o n j u n t a m e n t e c o n T H F ( 150 m l) s e e n f r ia r o n h a s t a - 70 ° C b a jo N 2. S e a ñ a d ió g o t a a g o t a a lil c lo r u r o d e m a g n e s io ( 74 m l, 2 , 0 M e n T H F , 150 m m o l;

[ 2622 - 05 - 1 ] ) y la m e z c l a s e a g it ó a - 70 ° C d u r a n t e 30 m in d e s p u é s d e l f in a l d e la a d ic ió n . U n a s o l u c ió n d e ( 2 R ) -o x i r a n - 2 - c a r b o x i l a t o d e m e t ilo ( 17 , 2 g , 164 m m o l; [ 111058 - 32 - 3 ] ) e n T H F ( 150 m l) s e a ñ a d ió g o t a a g o t a a -70 ° C . D e s p u é s d e la a d ic ió n la m e z c l a s e a g it ó d u r a n t e 30 m in y lu e g o s e d e jó c a le n t a r h a s t a - 5 ° C . L a r e a c c ió n s e in a c t iv ó a e s t a t e m p e r a t u r a p o r m e d io d e la a d ic ió n d e c lo r u r o d e a m o n io s a t . y la m e z c l a s e e x t r a jo c o n E t O A c . L a s f a s e s o r g á n i c a s c o m b i n a d a s s e la v a r o n c o n a g u a ( 2 x ) , s e s e c a r o n s o b r e N a 2S O 4 y s e c o n c e n t r a r o n con cuidado bajo presión reducida(¡bajo punto de ebullición del producto!).El producto crudo (18,1 g) se combinó con el producto crudo de un experimento previo (4,26 g a partir de 7,0 g de glicidato) y se destiló a 4,1 hasta 4,4 mbar.

Fracción 1: 90 - 100°C 2,04 g (26% de producto, 74 % glicidato de metilo por medio de H-RMN)

Fracción 2: 100 - 105°C 9,30 g (74% de producto, 8% glicidato de metilo, 18% impureza desconocida)

Fracción 3: 110 - 130°C 1,88 g (50% de Producto, 50% impureza desconocida)

Una muestra a partir de un experimento a pequeña escala se purificó por medio de cromatografía (Interchim de 120 g, A = DCM, B = Acetato de etilo, 0% B, 2,5 CV, 0% a 20% B en 12,5 CV).

1H RMN (CDCla, 400MHz): 8 (ppm) 5,81 (ddt, J=17,0, 10,3, 6,6 Hz, 1H), 5,06 (dc, J=17,1, 1,7 Hz, 1H), 4,99 (ddt, J=10,3, 2,0, 1,0 Hz, 1H), 4,20 (ddd, J=7,9, 5,6, 4,1 Hz, 1H), 3,77-3,80 (m, 3H), 2,78 (d, J=5,8 Hz, 1H), 2,11-2,27 (m, 2H), 1,89 (dddd, J=13,7, 8,9, 7,3, 4,1 Hz, 1H), 1,73 (dddd, J=13,7, 9,0, 7,8, 5,8 Hz, 1H).

13C RMN (CDCla, 101MHz): 8 (ppm) 175,7, 137,4, 115,5, 69,8, 52,5, 33,5, 28,9.

La fracción principal se utilizó como tal en el paso siguiente.

Paso 2

(2R)-2-[(4-nitrobenceno-1-sulfonil)oxi]hex-5-enoato de metilo

Se disolvió (2R)-2-hidroxihex-5-enoato de metilo (9,10 g, 63,1 mmol) en tolueno seco (120 ml), se enfrió hasta 0°C, TEA (18 ml, 130 mmol) y cloruro de 4-nitrobenceno-1-sulfonilo (15,4 g, 69,4 mmol) se añadieron a esta temperatura. La reacción se dejó calentar hasta TA y se agitó durante la noche. El solvente se eliminó bajo presión reducida y el residuo se trató con EtOAc. El precipitado blanco formado (4-nitrobencenosulfonato de trietilamonio) se eliminó por medio de filtración y el filtrado se extrajo con agua. La fase acuosa se extrajo nuevamente con EtOAc y las fases orgánicas combinadas se lavaron con NaCl (ac. sat.), se secaron (Na<2>SO<4>) y se concentraron bajo presión reducida. El producto crudo (19,32 g) se absorbió sobre Isolute™ y se sometió a cromatografía (S n A p KP-Sil de 340 g, 100 ml/min, 252 nm, A = n-hexano, B = EtOAc, 0%B 3 c V, 0% a 10% B en 9,8 CV, 10%B 1,4 CV, 10% a 19% B en 9,2 CV). Las fracciones interesantes se combinaron para proporcionar el compuesto del título 11,86 g (57%).

1H RMN (CDCh, 400MHz): 8 (ppm) 8,37-8,42 (m, 2H), 8,12-8,18 (m, 2H), 5,71 (ddt, J=17,2, 10,9, 6,6 Hz, 1H), 4,99-5,06 (m, 3H), 3,67-3,70 (m, 3H), 1,92-2,22 (m, 3H).

13C RMN (CDCh, 101MHz): 8 (ppm) 168,7, 150,8, 142,1, 135,5, 129,4 (2C), 124,2 (2C), 116,8, 77,9, 52,8, 31,1, 28,5.

Paso 3

(2S)-2-(1,4,7,10-tetraazaciclododecan-1-il)hex-5-enoato de metilo

Se disolvió 1,4,7,10-tetraazaciclododecano (2,62 g, 15,2 mmol) en MeCN (25 ml), se añadieron K<2>CO<3>(1,05 g, 7,59 mmol) y una solución de (2R)-2-[(4-nitrobenceno-1-sulfonil)oxi]hex-5-enoato de metilo (2,50 g, 7,59 mmol) en MeCN (5 ml). Después de la agitación a TA durante 5h, la mezcla se filtró, y el residuo se lavó con MeCN. Los filtrados combinados se concentraron bajo presión reducida para proporcionar 3,23 g del compuesto del título como producto crudo, el cual se utilizó en el paso siguiente.

Paso 4

(2S)-2-[4,7,10-tris(2-terc-butoxi-2-oxoetil)-1,4,7,10-tetraazaciclododecan-1 -il]hex-5-enoato de metilo

Se disolvió (2S)-2-(1,4,7,10-tetraazaciclododecan-1-il)hex-5-enoato de metilo (3,00 g, 10,1 mmol) en MeCN (150 ml), se añadieron gota a gota K<2>CO<3>(4,86 g, 35,2 mmol) y bromoacetato de terc-butilo (5,0 ml, 33 mmol) y la mezcla se agitó a TA durante la noche. En esta etapa ésta se combinó con el material a partir del experimento piloto (0,23 g). Los sólidos se eliminaron por medio de filtración y el filtrado se concentró bajo presión reducida. El residuo se repartió entre MTBE y agua. La fase orgánica se lavó con agua, NaOH (1M, ac.) y agua (2x) y luego se secó sobre Na<2>SO<4>. Después de la eliminación del solvente bajo presión reducida, el residuo (8,17 g) se absorbió sobre Isolute™ y se sometió a cromatografía (SNAP Ultra de 100 g, 65 ml/min, 254 nm, A = Acetato de etilo, B = DCM, 0%B 2,7CV, 0% a 100%B en 15CV, 100%B 3CV). Las fracciones interesantes se agruparon y se evaporaron para proporcionar 2,25 g (3,34 mmol, 44% calc. a partir del paso 3) del compuesto del título.

Rotación Optica: « d20 = -21,9° /-0,18° (c=1, CHCl3).

LC-MS (Procedimiento 2): Tr = 1,02min; MS (ESIpos): m/z = 642 [M+H]+.

LC-MS (Procedimiento 3): Tr = 0,94min (100% DAD); MS (ESIpos): m/z = 641 [M H]+, 321 [M 2H]++. 1H RMN (400 MHz, CDCl3)<8>5,79 (tdd, J=6,72, 10,33, 17,05 Hz, 1H), 5,02 (dc, J=1,62, 17,20 Hz, 1H), 4,94 4,99 (m, 1H), 3,66 (s, 3H), 3,20-3,32 (m, 7H), 2,67-2,92 (m, 14H), 2,53-2,64 (m, 2H), 2,04-2,25 (m, 2H), 1,76 1,83 (m, 1H), 1,61-1,71 (m, 1H), 1,44 (s, 27H).

Paso 5

(2S,5E)-6-(4-etoxifenil)-2-[4,7,10-tris(2-terc-butoxi-2-oxoetil)-1,4,7,10-tetraazaciclododecan-1-il]hex-5-enoato de metilo

Se disolvió (2S)-2-[4,7,10-tris(2-terc-butoxi-2-oxoetil)-1,4,7,10-tetraazaciclododecan-1-il]hex-5-enoato de metilo (2,06 g, 3,21 mmol) en MeCN (170 ml), TEA (83 ml, 600 mmol) y la mezcla se desoxigenó por medio de burbujeo de N<2>a través de la solución durante 30min. Se añadieron 1-bromo-4-etoxibenceno (450 pl, 3,1 mmol), tri-o-tolilfosfina (355 mg, 1,17 mmol; [6163-58-2]) y acetato de paladio(II) (82 mg, 365pM) y la mezcla se agitó a 100°C durante la noche. La mezcla se filtró a través de Celite® y se evaporó hasta la sequedad bajo presión reducida. El residuo se repartió entre agua y DCM, la fase orgánica se separó y se secó sobre Na<2>SO<4>. El compuesto del título se obtuvo como material crudo (3,13 g), el cual se utilizó en el paso siguiente.

LC-MS (Procedimiento 2): Tr = 1,28min (79% ELSD); MS (ESIpos): m/z = 761 [M+H]+.

Paso 6

( 2 S ) - 6 - ( 4 - e t o x if e n i l ) - 2 - [ 4 , 7 , 10 - t r is ( 2 - t e r c - b u t o x i - 2 - o x o e t i l ) - 1 , 4 , 7 , 10 - t e t r a a z a c ic lo d o d e c a n - 1 - i l ] h e x a n o a t o d e m e t ilo

S e d is o lv ió ( 2 S , 5 E ) - 6 - ( 4 - e t o x i f e n i l ) - 2 - [ 4 , 7 , 10 - t r i s ( 2 - t e r c - b u t o x i - 2 - o x o e t i l ) - 1 , 4 , 7 , 10 - t e t r a a z a c i c l o d o d e c a n - 1 -i l ] h e x - 5 - e n o a t o d e m e t ilo ( 3 , 13 g, 4 , 11 m m o l) e n E t O H ( 250 m l) y s e a ñ a d ió p a la d io ( 320 m g , 10 % s o b r e c a r b ó n a c t iv a d o , 0 , 30 m m o l; [ 7440 - 05 - 3 ] ) . L a m e z c l a s e h id r o g e n ó a T A d u r a n t e la n o c h e b a jo p r e s i ó n a m b ie n t e . E l c a t a l iz a d o r s e e l im in ó p o r m e d io d e la f i lt r a c ió n (f ilt ro d e P T F E ) , s e la v ó c o n E t O H y lo s f i l t r a d o s c o m b i n a d o s s e c o n c e n t r a r o n b a jo p r e s i ó n r e d u c id a . E l p r o d u c t o c r u d o o b t e n id o ( 2 , 99 g ) s e u t i l iz ó e n e l p a s o s ig u ie n t e .

Paso 7

á c id o 2 , 2 ' , 2 M- { 10 - [ ( 2 S ) - 6 - ( 4 - e t o x i f e n i l ) - 1 - m e t o x i - 1 - o x o h e x a n - 2 - i l ] - 1 , 4 , 7 , 10 - t e t r a a z a c i c l o d o d e c a n - 1 , 4 , 7 -t r i i l } t r ia c é t ic o

S e d is o lv ió ( 2 S ) - 6 - ( 4 - e t o x i f e n i l ) - 2 - [ 4 , 7 , 10 - t r i s ( 2 - t e r c - b u t o x i - 2 - o x o e t i l ) - 1 , 4 , 7 , 10 - t e t r a a z a c i c l o d o d e c a n - 1 -i l ] h e x a n o a t o d e m e t ilo ( 2 , 85 g , 3 , 74 m m o l) e n á c id o f ó r m ic o ( 100 m l) y s e c a le n t ó h a s t a 80 ° C d u r a n t e 8 h. E l s o l v e n t e s e e l im in ó b a jo p r e s ió n r e d u c i d a y e l r e s i d u o s e s e c ó in v a c u o ( > 0 , 01 m b a r ) d u r a n t e 3 h . E l r e s i d u o s e d is o lv ió e n a g u a , s e e x t r a jo c o n D C M y la f a s e a c u o s a s e l io f iliz ó ( 2 , 37 g ). E l r e s i d u o s e a b s o r b ió s o b r e Is o lu t e ™ y s e s o m e t ió a c r o m a t o g r a f ía R P ( S N A P C 18 d e 120 g , 45 m l/m in , 254 n m , A = a g u a , B = M e C N , 5 % B 5 C V , 5 % a 65 % B e n 15 C V , 65 % B 2 , 3 C V ) la s f r a c c io n e s in t e r e s a n t e s s e a g r u p a r o n y s e l io f i l iz a r o n p a r a p r o p o r c i o n a r 6 30 m g ( 23 % , c a lc . a p a r t ir d e l p a s o 5 ) d e l c o m p u e s t o d e l t ít u lo .

H - R M N in d ic ó q u e la h id r o g e n a c i ó n ( p a s o 6 ) e s t a b a in c o m p le t a y r e v e ló la p r e s e n c i a d e a p r o x . 30 % d e l c o m p u e s t o d e s h id r o g e n a d o .

13<C R M N ( 101 M H z , D 2O ) 8 1 74 , 4 ( 2 C ) , 170 , 1 , 169 , 1 , 155 , 9 , 135 , 8 , 129 , 8 ( 2 C ) , 1 1 4 , 7 ( 2 C ) , 64 , 4 , 59 , 9 ( a ) , 56 , 6>( a , 2 C ) , 56 , 2 ( a ) , 53 , 0 ( a , 2 C ) , 52 , 3 ( a , 2 C ) , 52 , 0 , 51 , 0 (a , 2 C ) , 45 , 5 (a , 2 C ) , 43 , 9 ( a ) , 33 , 5 , 30 , 6 , 25 , 1 ( a ) , 13 , 9.

Paso 7

2 , 2 ' , 2 " - { 10 - [ ( 1 S ) - 1 - c a r b o x i - 5 - ( 4 - e t o x i f e n i l ) p e n t i l ] - 1 , 4 , 7 , 10 - t e t r a a z a c i c l o d o d e c a n - 1 , 4 , 7 - t r i i l } t r i a c e t a t o d e g a d o l in io

Se disolvió ácido 2,2',2"-{10-[(2S)-6-(4-etoxifenil)-1-metoxi-1-oxohexan-2-il]-1,4,7,10-tetraazaciclododecan-1,4,7-triil}triacético (630 mg, 1,06 mmol) en agua (40 ml) y se añadió Gd<2>O<3>(192 mg, 530 |jmol). La mezcla se calentó hasta 100°C durante 22h. Se añadió Chelex100™ (forma sódica, aprox. 5 g) y la mezcla se agitó a TA durante la noche. La prueba de xilenol naranja indicó la ausencia de gadolinio libre, la mezcla se filtró, y el filtrado se liofilizó. Uno obtuvo 800 mg del compuesto del título.(E l s u b p ro d u c to n o h id ro g e n a d o se p u e d e ve r en la MS, p e ro n o se ob se rvó fac tib le una se p a ra c ió n c ro m a to g rá fic a ).

El material se disolvió en agua (20 ml) y se añadieron EtOH (80 ml) y paladio (80 mg, 10% sobre carbón activado, 75 jM ). La mezcla se hidrogenó a TA durante 72h y se filtró para eliminar el catalizador. El filtrado se concentró bajo presión reducida y se purificó por medio de cromatografía RP (SNAP C18 de 30 g, 20 ml/min, 254 nm, A = agua, B = MeCN, 0%B 9,8 CV, 0% a 14%B en 6,4 CV, 14%B 3,2 CV, 14% a 46%B en 14,4 CV). Uno obtuvo 287,7 mg (0,39 mmol, 12% calc. a partir del paso 6) del compuesto del título, el cual aún contenía la impureza deshidrogenada.

A partir de un experimento diferente, se obtuvo una pequeña cantidad (5,7 mg) pura.

LC-MS (Procedimiento 2): Tr = 0,80min; MS (ESlpos): m/z = 726 [M+H]+.

Ejemplo 28

Paso 1

(2S)-5-(4-etoxifenil)-2-[(trifluorometanosulfonil)oxi]pentanoato de metilo

ElIntermediario 20, (2S)-5-(4-etoxifenil)-2-hidroxipentanoato de metilo, (500 mg, 1,98 mmol) se disolvió en DCM (5,0 ml), se colocó bajo N<2>y se enfrió hasta -60°C. Se añadió 2,6-dimetilpiridina (280 jl, 2,4 mmol; [108 48-5]), seguido por la adición gota a gota de anhídrido trifluorometanosulfónico (2,1 ml, 1,0 M en DCM, 2,1 mmol; [358-23-6]). La mezcla de reacción se agitó a -60°C durante 2h y luego se dejó calentar hasta 8°C. Se añadió éter dietílico, y la sal triflato precipitada se eliminó por medio de filtración. El filtrado y los lavados (Et<2>O) se combinaron y se extrajeron con agua y 1 M HCl. Después del secado (Na<2>SO<4>) el solvente se eliminó bajo presión reducida para proporcionar 746 mg (98%) de (2S)-5-(4-etoxifenil)-2-[(trifluorometanosulfonil)oxi]pentanoato de metilo como producto crudo, el cual se utilizó directamente en el paso siguiente.

19F RMN (377 MHz, CDCla) 8 -76,04 (s).

1H RMN (400 MHz, CDCla) 87,02-7,09 (m, 2H), 6,80-6,85 (m, 2H), 5,13 (t, J=6,21 Hz, 1H), 4,01 (c, J=7,10 Hz, 2H), 3,83 (s, 3H), 2,54-2,67 (m, 2H), 1,95-2,05 (m, 2H), 1,70-1,79 (m, 2H), 1,41 (t, J=7,10 Hz, 3H).

13C RMN (101 MHz, CDCls) 8 167,5, 157,4, 132,5, 129,2, 114,5, 118,4 (c, J cf=319,6 Hz), 83,4, 63,4, 53,2, 33,9, 31,3, 26,2, 14,9.

Paso 2

(2R)-5-(4-etoxifenil)-2-(1,4,7,10-tetraazaciclododecan-1-il)pentanoato de metilo

S e d is o lv ió 1 , 4 , 7 , 10 - t e t r a a z a c i c l o d o d e c a n o ( 382 m g , 2 , 22 m m o l) e n M e C N ( 7 , 0 m l), K 3 C O 3 ( 255 m g , 1 , 85 m m o l) y s e a ñ a d ió u n a s o l u c ió n d e ( 2 S ) - 5 - ( 4 - e t o x i f e n i l ) - 2 - [ ( t r i f l u o r o m e t a n o s u lf o n i l ) o x i ] p e n t a n o a t o d e m e t ilo ( 710 m g , 1 , 85 m m o l) e n M e C N ( 3 , 5 m l). L a m e z c l a s e a g it ó a 60 ° C d u r a n t e 3 h . L o s s ó l i d o s s e e l im in a r o n p o r m e d io d e f i lt r a c ió n . E l f i lt r a d o y lo s l a v a d o s ( M e C N ) s e c o m b i n a r o n y s e c o n c e n t r a r o n b a jo p r e s i ó n r e d u c i d a p a r a p r o p o r c i o n a r 1 , 08 g d e p r o d u c t o c r u d o , e l c u a l s e u t iliz ó e n e l p a s o s ig u ie n t e .

L C - M S ( P r o c e d i m ie n t o 2 ) : T r = 0 , 66 m in ; M S ( E S I p o s ) : m /z = 407 , 5 [M H ]+ .

Paso 3

á c id o 5 - ( 4 - e t o x i f e n i l ) - 2 - [ 4 , 7 , 10 - t r i s ( c a r b o x i m e t i l ) - 1 , 4 , 7 , 10 - t e t r a a z a c i c l o d o d e c a n - 1 - i l ] p e n t a n o ic o

S e d is o lv ió ( 2 R ) - 5 - ( 4 - e t o x i f e n i l ) - 2 - ( 1 , 4 , 7 , 10 - t e t r a a z a c i c l o d o d e c a n - 1 - i l ) p e n t a n o a t o d e m e t ilo ( 1 , 08 g, 2 , 66 m m o l) e n a g u a ( 100 m l), s e a ñ a d ió á c id o c l o r o a c é t i c o ( 1 , 26 g , 13 , 3 m m o l) y e l p H s e a ju s t ó h a s t a 9 - 10 p o r m e d io d e la a d ic ió n d e h id r ó x id o d e p o t a s io ( 50 % e n a g u a ) . L a m e z c l a s e a g it ó a 80 ° C d u r a n t e 8 h, lu e g o d e lo c u a l e l p H s e v o l v i ó a a j u s t a r h a s t a 9 - 10 . S e a ñ a d ió á c id o c l o r o a c é t i c o ( 1 , 26 g , 13 , 3 m m o l) , e l p H s e l le v ó h a s t a 9 - 10 y la m e z c l a s e a g it ó a 100 ° C d u r a n t e la n o c h e . L a m e z c l a s e n e u t r a l iz ó p o r m e d io d e la a d ic ió n d e H C l ( 1 M , a c . ) y s e c o n c e n t r ó b a jo p r e s i ó n r e d u c i d a . E l r e s i d u o s e e x t r a jo c o n E t O H y e l e x t r a c t o s e c o n c e n t r óin vacuo.E l p r o c e d im ie n t o s e r e p it ió c o n e s t e r e s i d u o p a r a p r o p o r c i o n a r 2 , 40 g d e p r o d u c t o c r u d o , e l c u a l s e p u r if ic ó p o r m e d io d e c r o m a t o g r a f ía R P ( S N A P C 18 d e 60 g , 40 m l/m in , 254 n m . A = a g u a / 0 , 1 % á c id o f ó r m ic o , B = M e C N , 2 % B 5 C V , 2 % a 18 % B e n 4 C V , 18 % B 1 , 6 C V , 18 % a 21 % B e n 0 , 7 C V , 21 % B 3. C V , 21 % a 60 % B 10 , 2 C V , 60 % B 2 C V ) . L a s f r a c c i o n e s i n t e r e s a n t e s s e a g r u p a r o n y s e l io f i l iz a r o n p a r a p r o p o r c i o n a r 400 m g ( 35 % a p a r t ir d e l in t e r m e d ia r io 20 ) d e l c o m p u e s t o d e l t ít u lo .

R o t a c i ó n E s p e c í f i c a : a D 20 = - 1 , 6 ° / - 0 , 42 ° ( c = 1 , H 2O ).

L C - M S ( P r o c e d i m ie n t o 3 ) : T r = 0 , 54 m in ( 100 % D A D ) ; M S ( E S I p o s ) : m /z = 284 [M 2 H ]+ , 567 [M H ]+.

1 H R M N ( 400 M H z , D 2O ) 8 7 , 06 - 7 , 15 (m , 2 H ) , 6 , 78 - 6 , 86 (m , 2 H ) , 3 , 98 (c , J = 7 , 01 H z , 2 H ) , 2 , 31 - 3 , 86 (m , 25 H ) , 1 , 40 - 1 , 82 (m , 4 H ) , 1 , 24 (t, J = 6 , 97 H z , 3 H ) .

L a r o t a c ió n e s p e c í f i c a in d ic a q u e s e h a p r o d u c id o la r a c e m iz a c i ó n . E l p r o d u c t o s e c o n s i d e r a c o m o u n r a c e m a t o .

Paso 4

2 , 2 ', 2 " - { 10 - [ 1 - c a r b o x i- 4 - ( 4 - e t o x i f e n i l ) b u t i l ] - 1 , 4 , 7 , 10 - t e t r a a z a c i c l o d o d e c a n - 1 , 4 , 7 - t r i i l } t r ia c e t a t o d e g a d o l in io

L C - M S ( P r o c e d i m ie n t o 3 ) : T r = 0 , 67 m i n ( 100 % D A D ) ; M S ( E S l p o s ) : m /z = 361 [M 2 H ]+ , 722 [M H ]+ y a lg ú n [2 M 2 H ]+ , 731 [2 M H 2O 2 H ]+ . E l p a t r ó n d e is ó t o p o s o b s e r v a d o e s a c o r d e c o n la e s t r u c t u r a .

Ejemplo 29

Paso 1

3 - ( 4 - e t o x i f e n i l ) - 2 - [ ( m e t a n o s u lf o n i l ) o x i ] p r o p a n o a t o d e e tilo

<S e d is o lv ie r o n e l>Intermediario 21<, 3 - ( 4 - e t o x i f e n i l ) - 2 - h id r o x ip r o p a n o a t o d e e t ilo ( 1 , 19 g, 4 , 9 9 m m o l) y M s C l ( 460>j l , 6 , 0 m m o l; [ 124 - 63 - 0 ] ) e n T H F ( 15 m l) a 0 ° C y s e c o l o c a r o n b a jo N 2. S e a ñ a d ió T E A ( 1 , 7 m l, 12 m m o l; [ 121 44 - 8 ] ) y la m e z c l a s e a g it ó a T A d u r a n t e 3 h . L a m e z c l a d e r e a c c ió n s e v e r t ió e n N a H C O 3 ( 0 , 6 M , a c . ) y s e e x t r a jo c o n M T B E ( 3 x ) . L a s f a s e s o r g á n i c a s c o m b i n a d a s s e la v a r o n c o n N a C l ( a c . s a t . 3 x ) , s e s e c a r o n s o b r e N a 2S O 4 y s e c o n c e n t r a r o n b a jo p r e s i ó n r e d u c i d a . S e o b t u v o 1 , 34 g ( 92 % d e p u r e z a p o r m e d io d e R M N , 78 % ) d e 3 - ( 4 - e t o x i f e n i l ) - 2 - [ ( m e t a n o s u lf o n i l ) o x i ] p r o p a n o a t o d e e t i lo c o m o u n s ó l id o a m o r f o .

L C - M S ( P r o c e d i m ie n t o 3 ) : T r = 1 , 11 m i n ( 100 % D A D ) ; M S ( E S l p o s ) : m /z = 339 [M N a ]+ .

1H R M N ( D M S O - d 6, 400 M H z ) : 8 ( p p m ) 7 , 13 - 7 , 20 (m , 2 H ) , 6 , 82 - 6 , 88 (m , 2 H ) , 5 , 26 (d d ,J= 7 , 4 , 5 , 3 H z , 1 H ) , 4 , 13 (c ,J= 7 , 1 H z , 2 H ) , 3 , 98 (c ,J= 7 , 1 H z , 2 H ) , 3 , 11 (d d ,J= 14 , 4 , 5 , 3 H z , 1 H ) , 3 , 04 (d d ,J= 14 , 2 , 7 , 1 H z , 1 H ) , 3 , 01 ( s , 3 H ) , 1 , 30 (t,J= 7 , 0 H z , 3 H ) , 1 , 15 (t,J= 7 , 1 H z , 3 H ) .

Paso 2

2 - [ 4 , 10 - b is ( 2 - t e r c - b u t o x i - 2 - o x o e t i l ) - 1 , 4 , 7 , 10 - t e t r a a z a c i c lo d o d e c a n - 1 - i l ] - 3 - ( 4 - e t o x i f e n i l ) p r o p a n o a t o d e e tilo

S e d is o lv ió 2 , 2 '- ( 1 , 4 , 7 , 10 - t e t r a a z a c i c l o d o d e c a n - 1 , 7 - d i i l ) d i a c e t a t o d e d i- t e r c - b u t i lo ( 978 m g , 2 , 44 m m o l, [ 162148 48 - 3 ] ) e n M e C N ( 6 , 7 m l) s e a ñ a d ie r o n K 2C O 3 ( 743 m g , 5 , 73 m m o l) y 3 - ( 4 - e t o x i f e n i l ) - 2 -[ ( m e t a n o s u lf o n i l ) o x i ] p r o p a n o a t o d e e t ilo ( 850 m g , 2 , 69 m m o l) . L a m e z c l a s e c a le n t ó h a s t a 80 ° C d u r a n t e 3 d . L o s s ó l id o s s e e l im in a r o n p o r m e d io d e f i lt r a c ió n y s e la v a r o n c o n E t O H . L o s f i lt r a d o s c o m b i n a d o s s e c o n c e n t r a r o n b a jo p r e s ió n r e d u c i d a p a r a p r o p o r c i o n a r 1 , 75 g ( > 100 % ) d e p r o d u c t o c r u d o , e l c u a l c o n t ie n e m a t e r ia l d e p a r t id a (26 % ) , p r o d u c t o m o n o a lq u i l a d o ( 40 % ) y p r o d u c t o d ia lq u i la d o ( 34 % ) . L a m e z c l a s e u t i l iz ó e n e l p a s o 4.

L C - M S ( P r o c e d i m ie n t o 2 ) : T r = 1 , 16 m in ; M S ( E S l p o s ) : m /z = 622 , 3 [M H ]+ .

Paso 3

2 - [ ( t r i f lu o r o m e t a n o s u lf o n i l ) o x i ] p e n t a n o a t o d e e tilo

S e d is o lv ió 2 - h id r o x i p e n t a n o a t o d e e t i lo ( 600 m g , 4 , 10 m m o l, [ 52089 - 55 - 1 ] ) e n D C M ( 34 m l), s e c o l o c ó b a jo N 2 y s e e n f r ió h a s t a - 10 ° C . S e a ñ a d ió lu t id in a ( 570 p l, 4 , 92 m m o l) , s e g u id o p o r la a d ic ió n g o t a a g o t a d e a n h íd r id o t r i f lu o r m e t a n o s u lf ó n ic o ( 730 p l, 4 , 3 m m o l; [ 358 - 23 - 6 ] ) . L a r e a c c ió n s e a g it ó a - 10 ° C d u r a n t e 2 h lu e g o d e lo c u a l s e a ñ a d ió M T B E . L a m e z c l a s e e x t r a jo c o n a g u a , H C l ( 0 , 5 N . a c . ) y N a C l ( a c . s a t . ) . L a f a s e o r g á n i c a s e s e c ó s o b r e N a 2S O 4 y s e c o n c e n t r ó b a jo p r e s ió n r e d u c i d a p a r a p r o p o r c i o n a r 1 , 45 g ( > 100 % , [ 168053 - 74 - 5 ] ) d e l c o m p u e s t o d e l t ít u lo , e l c u a l s e u t i l iz ó e n la s ig u ie n t e r e a c c ió n .

19F R M N ( D M S O - d a , 377 M H z ) : 8 ( p p m ) - 78 , 12 ( s ) .

1 H R M N ( D M S O - d a , 400 M H z ) : 8 ( p p m ) 5 , 23 ( d d ,J= 7 , 6 , 4 , 3 H z , 1 H ) , 4 , 19 - 4 , 33 (m , 2 H ) , 1 , 73 - 1 , 92 (m , 2 H ) , 1 , 28 - 1 , 45 (m , 2 H ) , 1 , 25 (t,J= 7 , 1 H z , 3 H ) , 0 , 90 (t,J= 7 , 4 H z , 3 H ) .

Paso 4

2 - { 4 , 10 - b is ( 2 - t e r c - b u t o x i - 2 - o x o e t i l ) - 7 - [ 1 - e t o x i - 3 - ( 4 - e t o x if e n i l ) - 1 - o x o p r o p a n - 2 - i l ] - 1 , 4 , 7 , 10 - t e t r a a z a c ic lo d o d e c a n -1 - i l } p e n t a n o a t o d e e tilo

L C - M S ( P r o c e d i m ie n t o 2 ) : T r = 1 , 35 - 1 , 41 m in ; M S ( E S l p o s ) : m /z = 750 , 1 [M H ]+ .

Paso 5

á c id o 2 , 2 '- { 4 - [ 1 - e t o x i- 3 - ( 4 - e t o x i f e n i l ) - 1 - o x o p r o p a n - 2 - i l ] - 10 - [ 1 - e t o x i- 1 - o x o p e n t a n - 2 - i l ] - 1 , 4 , 7 , 10 -t e t r a a z a c i c l o d o d e c a n - 1 , 7 - d i i l } d i a c é t i c o

S e d is o lv ió 2 - { 4 , 10 - b is ( 2 - t e r c - b u t o x i - 2 - o x o e t i l ) - 7 - [ 1 - e t o x i - 3 - ( 4 - e t o x if e n i l ) - 1 - o x o p r o p a n - 2 - i l ] - 1 , 4 , 7 , 10 -t e t r a a z a c i c lo d o d e c a n - 1 - i l } p e n t a n o a t o d e e t ilo ( 2 , 42 g , 3 , 23 m m o l) e n á c id o f ó r m ic o (41 m l) y s e a g it ó a 70 ° C d u r a n t e la n o c h e . E l á c id o f ó r m ic o s e e l im in ó b a jo p r e s i ó n r e d u c i d a y e l r e s i d u o s e s o m e t ió a c r o m a t o g r a f ía R P ( B i o t a g e S N A P U lt r a C 18 d e 120 g , 50 m l/m in , A = a g u a , B = M e C N , 0 % B a 50 % B e n 25 m in , 100 % B 10 m in ) . L a s f r a c c i o n e s i n t e r e s a n t e s s e a g r u p a r o n y s e l io f i l iz a r o n p a r a p r o p o r c i o n a r 453 m g ( 29 % , c a lc . a lo la r g o d e lo s 5 p a s o s ) d e l c o m p u e s t o d e l t ít u lo .

L C - M S ( P r o c e d i m ie n t o 2 ) : T r = 0 , 77 m i n ( 100 % E L S D ) ; M S ( E S I n e g ) : m /z = 635 [M - H ].

1 H R M N ( D M S O - d a , 400 M H z ) : 8 ( p p m ) 7 , 19 - 7 , 25 (m , 2 H ) , 6 , 79 (d ,J= 8 , 6 H z , 2 H ) , 4 , 09 ( c ,J= 7 , 1 H z , 2 H ) , 3 , 92 - 4 , 02 (m , 4 H ) , 3 , 73 (t a ,J= 7 , 6 H z , 1 H ) , 3 , 29 - 3 , 46 (m , 4 H ) , 2 , 77 - 3 , 20 (m , 15 H ) , 2 , 58 - 2 , 76 (m , 4 H ) , 1 , 45 1 , 70 (m , 2 H ) , 1 , 30 (t,J= 7 , 0 H z , 3 H ) , 1 , 15 - 1 , 26 (m , 5 H ) , 1 , 05 (t,J= 7 , 2 H z , 3 H ) , 0 , 80 - 0 , 89 (m , 3 H ) .

Paso 6

2 - { 7 - [ 1 - c a r b o x i - 2 - ( 4 - e t o x if e n i l ) e t i l ] - 4 , 10 - b i s ( c a r b o x i l a t o m e t i l ) - 1 , 4 , 7 , 10 - t e t r a a z a c i c l o d o d e c a n - 1 - i l } p e n t a n o a t o d e g a d o l in io

S e d is o lv ió á c id o 2 , 2 '- { 4 - [ 1 - e t o x i- 3 - ( 4 - e t o x i f e n i l ) - 1 - o x o p r o p a n - 2 - i l ] - 10 - [ 1 - e t o x i- 1 - o x o p e n t a n - 2 - i l ] - 1 , 4 , 7 , 10 -t e t r a a z a c i c l o d o d e c a n - 1 , 7 - d i i l } d i a c é t i c o ( 450 m g , 707 j m o l ) e n a g u a ( 7 , 2 m l), s e a ñ a d ió G d 2O 3 ( 115 m g , 318 | jm o l, 0 , 9 e q ) y la m e z c l a s e c a le n t ó h a s t a r e f lu jo d u r a n t e 24 h . S e a ñ a d ió C h e l e x 100 ™ ( f o r m a s ó d i c a , a p r o x . 5 g ), e l p H s e a ju s t ó h a s t a 5 y la m e z c l a s e a g it ó a T A d u r a n t e 1 h . L a r e s i n a s e e l im in ó p o r m e d io d e f i lt r a c ió n , e l f i lt r a d o s e c o n c e n t r ó b a jo p r e s i ó n r e d u c i d a y s e p u r if ic ó p o r m e d io d e c r o m a t o g r a f ía R P ( S N A P C 18 d e 60 g, 50 m l/ m in , 254 n m , A = a g u a , B = M e C N , 0 % a 60 % B e n 15 C V , 100 % B 3 , 1 C V ) . L a s f r a c c i o n e s in t e r e s a n t e s s e a g r u p a r o n y s e l io f i l iz a r o n p a r a p r o p o r c i o n a r lo s d o s d ia s t e r e ó m e r o s .

D ia s t e r e ó m e r o 1

22 8 m g ( 44 % d e r e n d im ie n t o )

L C - M S ( P r o c e d i m ie n t o 2 ) : T r = 0 , 71 m i n ; M S ( p o s ) : m /z = 736 [M H ]+.

L C - M S ( P r o c e d i m ie n t o 3 ) : T r = 0 , 65 m i n ( 92 % D A D ) ; M S ( E S l p o s ) : m /z = 368 [M 2 H ]+ , 736 [M H ]+ y a lg ú n [2 M 2 H ]+ , 745 [2 M H 2O 2 H ]+ . E l p a t r ó n d e is ó t o p o s o b s e r v a d o e s a c o r d e c o n u n c o m p le j o d e g a d o lin io .

Ejemplo 30

Diastereómero 2 a partir delEjemplo 29.

25 mg (5%)

LC-MS (Procedimiento 2): Tr = 0,68min; MS (pos): m/z = 736 [M H]+.

LC-MS (Procedimiento 3): Tr = 0,59min (100% DAD); MS (ESIpos): m/z = 368 [M 2H]++, 736 [M H]+ y algún [2M 2H]++. El patrón de isótopos observado es acorde con un complejo de gadolinio.

Ejemplo 31

Paso 1

(2R)-5-(4-butoxifenil)-2-[(trifluorometanosulfonil)oxi]pentanoato de metilo

ElIntermediario 22, (2R)-5-(4-butoxifenil)-2-hidroxipentanoato de metilo, (500 mg, 1,78 mmol) se disolvió en 5,0 ml DCM, se colocó bajo N<2>y se enfrió hasta -60°C. Se añadió lutidina (205 pl, 2,1 mmol) y luego se añadió gota a gota anhídrido trifluormetanosulfónico (1,9 ml, 1,0 M en DCM, 1,9 mmol). La reacción se agitó durante 3h después del final de la adición a -60°C y se permitió el calentamiento hasta aprox. 8°C. Luego se añadió éter dietílico para precipitar el triflato de lutidina. La mezcla se filtró y se lavó con éter dietílico. Los filtrados combinados se extrajeron con agua y 1 M HCl, se secaron sobre Na<2>SO<4>y se concentraron bajo presión reducida. Se obtuvieron 753 mg (>100%) de producto crudo.

19F RMN (377 MHz, CDCh) 8 -76,03 (s).

1H RMN (400 MHz, CDCh) 87,02-7,09 (m, 2H), 6,80-6,85 (m, 2H), 5,13 (t, J=6,08 Hz, 1H), 3,94 (t, J=6,59 Hz, 2H), 3,83 (s, 3H), 2,55-2,66 (m, 2H), 1,96-2,04 (m, 2H), 1,70-1,80 (m, 4H), 1,44-1,54 (m, 2H), 0,97 (t, J=7,35 Hz, 3H).

13C RMN (101 MHz, CDCla) 8167,5, 157,6, 132,4, 129,2 (2C), 114,5 (2C), 118,4 (c, 1J cf=319,6 Hz), 83,4, 67,7, 53,3, 33,9, 31,4, 31,3, 26,2, 19,3, 13,9.

Paso 2

(2S)-5-(4-butoxifenil)-2-(1,4,7,10-tetraazaciclododecan-1-il)pentanoato de metilo

Se disolvió 1,4,7,10-tetraazaciclododecano (377 mg, 2,19 mmol) en MeCN (7 ml) y se añadió K<2>CO<3>(252 mg, 1,83 mmol). Se añadió una solución de (2R)-5-(4-butoxifenil)-2-[(trifluorometanosulfonil)oxi]pentanoato (753 mg, 1,83 mmol) en 3,5 ml de MeCN y la mezcla se agitó durante 3h a 60°C. Los sólidos se eliminaron por medio de filtración y el filtrado se concentró bajo presión reducida. El producto crudo (1,15 g) obtenido, se utilizó directamente en el paso siguiente.

L C - M S ( P r o c e d i m ie n t o 2 ) : T r = 0 , 69 m in ; M S ( E S I p o s ) : m /z = 435 , 4 [M H ]+ .

Paso 3

( 2 S ) - 5 - ( 4 - b u t o x i f e n i l ) - 2 - [ 4 , 7 , 10 - t r i s ( 2 - t e r c - b u t o x i- 2 - o x o e t i l ) - 1 , 4 , 7 , 10 - t e t r a a z a c ic l o d o d e c a n - 1 - i l ] p e n t a n o a t o d e m e t ilo

S e d is o lv ió ( 2 S ) - 5 - ( 4 - b u t o x i f e n i l ) - 2 - ( 1 , 4 , 7 , 10 - t e t r a a z a c i c l o d o d e c a n - 1 - i l ) p e n t a n o a t o d e m e t ilo ( 1 , 15 g, 2 , 65 m m o l) e n M e C N ( 35 m l) y s e a ñ a d ió K 2C O 3 ( 1 , 28 g , 9 , 26 m m o l) . S e a ñ a d ió g o t a a g o t a b r o m o a c e t a t o d e t e r c -b u t i lo ( 1 , 3 m l, 8 , 7 m m o l) y la s u s p e n s i ó n s e a g it ó d u r a n t e la n o c h e a T A . L a r e a c c ió n s e f iltró , y e l f i lt r a d o s e c o n c e n t r ó b a jo p r e s ió n r e d u c i d a . E l r e s i d u o s e d is o lv ió e n M T B E , s e la v ó c o n a g u a , N a O H ( 1 M , a c . ) y a g u a ( d o s v e c e s ) y s e s e c ó s o b r e N a 2S O 4. E l s o l v e n t e s e e l im in ó b a jo p r e s i ó n r e d u c i d a p a r a p r o p o r c i o n a r 2 , 13 g d e m a t e r ia l c r u d o , e l c u a l s e u t i l iz ó c o m o t a l e n e l p a s o s ig u ie n t e .

L C - M S ( P r o c e d i m ie n t o 2 ) : T r = 1 , 37 m in ; M S ( E S I p o s ) : m /z = 777 , 9 [M H ]+ .

Paso 4

á c id o 2 , 2 ' , 2 " - { 10 - [ ( 2 S ) - 5 - ( 4 - b u t o x i f e n i l ) - 1 - m e t o x i - 1 - o x o p e n t a n - 2 - i l ] - 1 , 4 , 7 , 10 - t e t r a a z a c i c l o d o d e c a n - 1 , 4 , 7 -t r i i l } t r ia c é t ic o

S e d is o lv ió ( 2 S ) - 5 - ( 4 - b u t o x i f e n i l ) - 2 - [ 4 , 7 , 10 - t r i s ( 2 - t e r c - b u t o x i - 2 - o x o e t i l ) - 1 , 4 , 7 , 10 - t e t r a a z a c i c l o d o d e c a n - 1 -i l ] p e n t a n o a t o d e m e t ilo ( 2 , 13 g , 2 , 74 m m o l) e n á c id o f ó r m ic o ( 100 m l) y s e c a le n t ó h a s t a 80 ° C d u r a n t e 8 h. E l s o l v e n t e s e e l im in ó b a jo p r e s ió n r e d u c i d a y e l r e s i d u o s e s e c óin vacu op a r a p r o p o r c i o n a r 2 , 13 g d e m a t e r ia l c r u d o . C r o m a t o g r a f í a R P ( S N A P C 18 d e 60 g , 50 m l/m in , 254 n m , A = a g u a , B = M e C N , 5 % B 5 C V , 5 % B a 6 5 % B e n 15 C V , 65 % B 5 , 5 C V ) . L a s f r a c c i o n e s in t e r e s a n t e s s e a g r u p a r o n y s e l io f i l iz a r o n p a r a p r o p o r c i o n a r 576 m g d e l c o m p u e s t o d e l t ít u lo .

R o t a c i ó n E s p e c í f i c a : a D 20 = - 25 , 1 ° / - 0 , 42 ° ( c = 1 , H 2O ).

L C - M S ( P r o c e d i m ie n t o 3 ) : T r = 0 , 76 m i n ( 99 % D A D ) ; M S ( E S I p o s ) : m /z = 305 [M 2 H ]+ , 609 [M H ]+.

1H R M N ( 400 M H z , D 2O ) 8 7 , 09 (d a , J = 8 , 62 H z , 2 H ) , 6 , 84 (d a , J = 8 , 62 H z , 2 H ) , 3 , 92 - 4 , 00 (m , 3 H ) , 3 , 60 - 3 , 87 (m , 6 H ), 3 , 58 ( s , 3 H ) , 2 , 95 - 3 , 44 (m , 12 H ) , 2 , 79 - 2 , 94 (m , 3 H ) , 2 , 54 - 2 , 66 (m , 2 H ) , 2 , 30 - 2 , 41 (m , 1 H ) , 1 , 40 - 1 , 70 (m , 6 H ), 1 , 28 - 1 , 39 (m , 2 H ) , 0 , 82 (t, J = 7 , 35 H z , 3 H ) .

13C RMN (101 MHz, D2O) 8174,3, 174,2, 170,1, 169,1, 156,2, 135,1, 129,8 (2C), 114,9 (2C), 68,6, 59,8, 56,6, 56,3, 52,9, 52,2 (a), 52,0, 51,0 (2C), 49,8 (a), 48,9, (br) 46,7 (a), 45,4, 43,8, 33,8, 30,5, 28,3 (a), 27,6, 18,6, 13,0.

Paso 5

2 , 2 ' , 2 M- { 10 - [ ( 1 S ) - 4 - ( 4 - b u t o x i f e n i l ) - 1 - c a r b o x i b u t i l ] - 1 , 4 , 7 , 10 - t e t r a a z a c i d o d o d e c a n - 1 , 4 , 7 - t r i i l } t r i a c e t a t o d e g a d o l in io

R o t a c i ó n E s p e c í f i c a : a o 20 *25= 0 , 64 ° / - 0 , 30 ° ( c = 1 , H 2O , 20 ° C , 589 n m ).

L C - M S ( P r o c e d i m ie n t o 3 ) : T r = 0 , 90 m in ( 98 % D A D ) ; M S ( E S l p o s ) : m /z = 375 [M 2 H ]+ , 750 [M H ]+ y [2 M 2 H ] 2+, 759 [2 M H 2O 2 H ] 2+. L o s p a t r o n e s d e is ó t o p o s o b s e r v a d o s s o n a c o r d e s c o n la e s t r u c t u r a . L a r o t a c ió n e s p e c í f i c a in d ic a q u e s e h a p r o d u c id o la r a c e m iz a c i ó n , y e l c o m p u e s t o s e c o n s i d e r ó c o m o r a c e m a t o .

Ejemplo 32

Paso 1

3 - [ 4 - ( 2 - e t o x ie t o x i ) f e n i l ] - 2 - ( 1 , 4 , 7 , 10 - t e t r a a z a c ic lo d o d e c a n - 1 - i l ) p r o p a n o a t o d e e t ilo

S e d is o lv ió 1 , 4 , 7 , 10 - t e t r a a z a c i c l o d o d e c a n o ( 1 , 19 g , 6 , 94 m m o l) e n M e C N ( 19 m l), s e a ñ a d ie r o n K 2C O 3 ( 959<m g , 6 , 9 4 m m o l) y 3 - [ 4 - ( 2 - e t o x ie t o x i) f e n i l ] - 2 - [ ( m e t a n o s u l f o n i l ) o x i ] p r o p a n o a t o d e e tilo , (>Ejemplo 7 - Paso 1<, 2 , 5 0>g , 6 , 94 m m o l) y la m e z c l a s e c a le n t ó h a s t a 55 ° C d u r a n t e 24 h . L o s s ó l id o s s e e l im in a r o n p o r m e d io d e f ilt r a c ió n y s e la v a r o n c o n E t O H . L o s f i lt r a d o s c o m b i n a d o s s e c o n c e n t r a r o n b a jo p r e s ió n r e d u c i d a p a r a p r o p o r c i o n a r 3 , 63 g ( > 100 % ) d e l c o m p u e s t o d e l t ít u lo , e l c u a l s e u t i l iz ó c o m o t a l e n e l p a s o s ig u ie n t e .

L C - M S ( P r o c e d i m ie n t o 2 ) : T r = 0 , 60 m in ; M S ( E S l p o s ) : m /z = 438 , 1 [M H ]+ .

Paso 2

3 - [ 4 - ( 2 - e t o x ie t o x i ) f e n i l ] - 2 - [ 4 , 7 , 10 - t r is ( 2 - t e r c - b u t o x i - 2 - o x o e t i l ) - 1 , 4 , 7 , 10 - t e t r a a z a c i c l o d o d e c a n - 1 - i l ] p r o p a n o a t o d e e t ilo

S e d is o lv ió 3 - [ 4 - ( 2 - e t o x ie t o x i ) f e n i l ] - 2 - ( 1 , 4 , 7 , 10 - t e t r a a z a c ic lo d o d e c a n - 1 - i l ) p r o p a n o a t o d e e t ilo ( 3 , 63 g , 8 , 31 m m o l) e n M e C N ( 32 m l) b a jo N 2 y s e a ñ a d ió K 2C O 3 ( 9 , 77 g, 70 , 7 m m o l) . S e a ñ a d ió g o t a a g o t a u n a s o l u c ió n d e b r o m o a c e t a t o d e t e r c - b u t i lo ( 4 , 3 m l, 29 m m o l) e n M e C N ( 11 m l) y la m e z c l a s e a g it ó a T A d u r a n t e la n o c h e . L o s s ó l id o s s e e l im in a r o n p o r m e d io d e f i lt r a c ió n , s e la v a r o n c o n E t O H y lo s f i lt r a d o s c o m b i n a d o s s e c o n c e n t r a r o n b a jo p r e s ió n r e d u c i d a . E l p r o d u c t o c r u d o d e 8 , 46 g ( > 100 % ) s e u t i liz ó c o m o t a l e n e l p a s o s ig u ie n t e .

L C - M S ( P r o c e d i m ie n t o 2 ) : T r = 1 , 13 m in ; M S ( E S I p o s ) : m /z = 780 , 8 [M H ]+ .

Paso 3

á c id o 2 , 2 ' , 2 " - ( 10 - { 1 - e t o x i - 3 - [ 4 - ( 2 - e t o x i e t o x i ) f e n i l ] - 1 - o x o p r o p a n - 2 - i l } - 1 , 4 , 7 , 10 - t e t r a a z a c i c l o d o d e c a n - 1 , 4 , 7 -t r i i l ) t r ia c é t ic o

S e d is o lv ió 3 - [ 4 - ( 2 - e t o x ie t o x i ) f e n i l ] - 2 - [ 4 , 7 , 10 - t r is ( 2 - t e r c - b u t o x i - 2 - o x o e t i l ) - 1 , 4 , 7 , 10 - t e t r a a z a c i c l o d o d e c a n - 1 -i l ] p r o p a n o a t o d e e t ilo ( 8 , 46 g , 10 , 9 m m o l) e n á c id o f ó r m ic o ( 140 m l) y s e c a le n t ó h a s t a 70 ° C d u r a n t e la n o c h e . L a m e z c l a s e e v a p o r ó h a s t a la s e q u e d a d y s e p u r if ic ó p o r m e d io d e c r o m a t o g r a f ía R P ( S N A P C 18 120 g , 50 m l/m in , A = a g u a , B = M e C N , 0 % B a 50 % B e n 30 m in , 100 % B 10 m in ) . L a s f r a c c i o n e s i n t e r e s a n t e s s e c o m b i n a r o n y s e l io f i l iz a r o n p a r a p r o p o r c i o n a r 1 , 75 g ( 2 , 87 m m o l, 41 % c a lc . a p a r t ir d e l p a s o 1 ) d e l c o m p u e s t o d e l t ít u lo .

L C - M S ( P r o c e d i m ie n t o 2 ) : T r = 0 , 68 m in ; M S ( E S I p o s ) : m /z = 611 , 7 [M H ]+ .

1H R M N ( D M S O - d 6, 400 M H z ) : 8 ( p p m ) 7 , 20 (d ,J= 8 , 6 H z , 2 H ) , 6 ,81 (d ,J= 8 , 9 H z , 2 H ) , 4 , 01 - 4 , 04 (m , 2 H ) , 3 , 91 - 3 , 98 (m , 2 H ) , 3 , 62 (t,J= 7 , 9 H z , 1 H ) , 3 , 66 (d d a ,J= 5 ,2 , 3 , 9 H z , 2 H ) , 3 , 48 (c ,J= 7 , 1 H z , 2 H ) , 3 , 42 - 3 , 53 (m , 6 H ), 2 , 80 - 3 , 09 (m , 16 H ) , 2 , 58 (d a ,J= 9 , 9 H z , 2 H ) , 1 , 12 (t,J= 7 , 0 H z , 3 H ) , 1 , 04 (t,J= 7 , 1 H z , 3 H ) .

13C R M N ( D M S O - d 6, 101 M H z ) : 8 ( p p m ) 171 , 1 , 170 , 8 ( a ) , 169 , 6 (a , 2 C ) , 157 , 0 , 130 , 6 ( 2 C ) , 129 , 8 , 114 , 1 ( 2 C ) , 68 , 4 , 67 , 0 , 65 , 7 , 64 , 6 ( a ) , 59 , 9 , 55 , 3 ( a ) , 55 , 1 ( a , 2 C ) , 51 , 5 ( a , 2 C ) , 51 , 2 ( a , 2 C ) , 49 , 1 ( a , 2 C ) , 46 , 7 ( a , 2 C ) , 33 , 8 , 15 , 2 , 14 , 2.

Paso 4

2 , 2 ', 2 " - ( 10 - { 1 - c a r b o x i- 2 - [ 4 - ( 2 - e t o x ie t o x i ) f e n i l ] e t i l } - 1 , 4 , 7 , 10 - t e t r a a z a c ic lo d o d e c a n - 1 , 4 , 7 - t r i i l ) t r i a c e t a t o d e g a d o l in io

S e d is o lv ió á c id o 2 , 2 ' , 2 " - ( 10 - { 1 - e t o x i - 3 - [ 4 - ( 2 - e t o x i e t o x i ) f e n i l ] - 1 - o x o p r o p a n - 2 - i l } - 1 , 4 , 7 , 10 - t e t r a a z a c i c l o d o d e c a n -1 , 4 , 7 - t r i i l ) t r ia c é t i c o ( 1 , 75 g, 2 , 87 m m o l) e n a g u a ( 29 m l) y s e a ñ a d ió G d 2O 3 ( 467 m g , 1 , 29 m m o l, 0 , 9 e q ) . L a m e z c l a s e c a le n t ó a r e f lu jo d u r a n t e 48 h . S e a ñ a d ió C h e l e x 100 ™ ( f o r m a s ó d i c a , a p r o x . 5 g ), e l p H s e a ju s t ó h a s t a 5 y la m e z c l a s e a g it ó a T A d u r a n t e 1 h . C r o m a t o g r a f í a R P ( S N A P C 18 d e 30 g , 25 m l/m in , A = a g u a , B = M e C N , 0 % B a 50 % B e n 30 m in , 100 % B 10 m in ) . L a s f r a c c i o n e s i n t e r e s a n t e s s e c o m b in a r o n y s e l io f i l iz a r o n p a r a p r o p o r c i o n a r 1 , 16 g ( 55 % ) d e l c o m p u e s t o d e l t ít u lo c o m o l io f i l iz a d o e s p o n j o s o .

L C - M S ( P r o c e d i m ie n t o 2 ) : T r = 0 , 60 m in ; M S ( E S I p o s ) : m /z = 738 [M H ]+.

L C - M S ( P r o c e d i m ie n t o 3 ) : T r = 0 , 57 m i n ( 100 % D A D ) ; M S ( E S I p o s ) : m /z = 369 [M 2 H ]+ , 738 [M H ]+ y a lg ú n [2 M 2 H ]++, 747 [2 M H 2O 2 H ]++. E l p a t r ó n d e is ó t o p o s o b s e r v a d o e s a c o r d e c o n u n c o m p le j o d e g a d o lin io .

Ejemplo 33

Paso 1

2 - [ ( m e t a n o s u lf o n i l ) o x i ] - 3 - [ 4 - ( 2 , 2 , 3 , 3 - t e t r a f l u o r o p r o p o x i ) f e n i l ] p r o p a n o a t o d e e tilo

S e d is o lv ie r o n 2 - h id r o x i - 3 - [ 4 - ( 2 , 2 , 3 , 3 - t e t r a f l u o r o p r o p o x i ) f e n i l ] p r o p a n o a t o d e e t ilo ( 4 , 42 g, 13 , 6 m m o l) y T E A ( 4 , 2 m l, 30 m m o l; [ 121 - 44 - 8 ] ) e n T h F ( 40 m l) a 0 ° C y s e c o l o c a r o n b a jo N 2. S e a ñ a d ió g o t a a g o t a M s C l ( 1 , 2 m l, 15 m m o l; [ 124 - 63 - 0 ] ) y la m e z c l a s e a g it ó a T A d u r a n t e 3 h . L a m e z c l a d e r e a c c ió n s e v e r t ió e n N a H C O 3 ( 0 , 6 M , a c . ) y s e e x t r a jo c o n M T B E ( 3 x ) . L a s f a s e s o r g á n i c a s c o m b i n a d a s s e la v a r o n c o n N a C l s a t . ( 2 x ) , s e s e c a r o n s o b r e N a 2 S O 4 y s e c o n c e n t r a r o n b a jo p r e s i ó n r e d u c i d a . S e o b t u v o 5 , 28 g ( 82 % ) d e 2 - [ ( m e t a n o s u lf o n i l ) o x i ] - 3 -[ 4 - ( 2 , 2 , 3 , 3 - t e t r a f lu o r o p r o p o x i ) f e n i l ] p r o p a n o a t o d e e tilo .

1<H R M N ( D M S O - d>6<, 40 0 M H z ) :>8<( p p m ) 7 , 1 9 - 7 , 2 6 (m , 2 H ) , 6 , 9 7 - 7 , 0 2 (m , 2 H ) , 6 , 6 7 (tt,>2J hf<= 51 , 7 ,>3J hf<= 5 , 6 H z ,>1 H ) , 5 , 29 (d d ,J= 7 , 4 , 5 , 3 H z , 1 H ) , 4 , 56 (t a ,J= 13 , 4 H z , 2 H ) , 4 , 13 (c ,J= 7 , 1 H z , 2 H ) , 3 , 14 (d d ,J= 14 , 2 , 5 , 3 H z , 1 H ) , 3 , 07 (d d ,J= 14 , 2 , 7 , 4 H z , 1 H ) , 3 , 03 ( s , 3 H ) , 1 , 16 (t,J= 7 , 1 H z , 3 H ) .

Paso 2

2 - [ 4 , 10 - b i s ( 2 - t e r c - b u t o x i - 2 - o x o e t i l ) - 1 , 4 , 7 , 10 - t e t r a a z a c i c l o d o d e c a n - 1 - i l ] - 3 - [ 4 - ( 2 , 2 , 3 , 3 -t e t r a f lu o r o p r o p o x i ) f e n i l ] p r o p a n o a t o d e e tilo

S e d is o lv ió 2 , 2 '- ( 1 , 4 , 7 , 10 - t e t r a a z a c i c l o d o d e c a n - 1 , 7 - d i i l ) d i a c e t a t o d e d i- t e r c - b u t i lo ( 2 , 06 g , 5 , 15 m m o l, [ 162148 4 8 - 3 ] ) e n M e C N ( 14 m l), s e a ñ a d ie r o n K 2C O 3 ( 1 , 57 g , 11 , 3 m m o l) y 2 - [ ( m e t a n o s u lf o n i l ) o x i ] - 3 - [ 4 - ( 2 , 2 , 3 , 3 -t e t r a f lu o r o p r o p o x i ) f e n i l ] p r o p a n o a t o d e e t ilo ( 2 , 28 g , 5 , 67 m m o l) . L a m e z c l a s e c a le n t ó h a s t a 80 ° C d u r a n t e 24 h .

L o s s ó l id o s s e e l im in a r o n p o r m e d io d e f i lt r a c ió n y s e la v a r o n c o n E t O H . L o s f i lt r a d o s c o m b i n a d o s s e c o n c e n t r a r o n b a jo p r e s i ó n r e d u c i d a p a r a p r o p o r c i o n a r e l p r o d u c t o c r u d o 4 , 12 g ( > 100 % ) , e l c u a l c o n t ie n e m a t e r ia l d e p a r t id a ( 25 % ) , p r o d u c t o m o n o a lq u i l a d o ( 59 % ) y p r o d u c t o d ia lq u i la d o ( 16 % ) . L a m e z c l a s e u t iliz ó e n e l p a s o 4.

L C - M S ( P r o c e d i m ie n t o 2 ) : T r = 1 , 19 m in ; M S ( E S I p o s ) : m /z = 707 , 9 [M H ]+ .

Paso 3

( 2 R ) - 3 - ( b e n c i l o x i ) - 2 - [ ( m e t a n o s u lf o n i l ) o x i ] p r o p a n o a t o d e m e t ilo

S e d is o lv ió ( 2 R ) - 3 - ( b e n c i l o x i ) - 2 - h id r o x i p r o p a n o a t o d e m e t ilo ( 1 , 00 g , 4 , 76 m m o l, [ 209907 - 54 - 0 ] ) e n T H F ( 14 m l), s e c o l o c ó b a jo N 2 y s e e n f r ió h a s t a 0 ° C . S e a ñ a d ie r o n t r ie t i la m in a ( 1 , 5 m l, 10 m m o l) y M s C l ( 400 p l, 5 , 2 m m o l;

[ 124 - 63 - 0 ] ) y la m e z c l a s e a g it ó a T A d u r a n t e 3 h . L a m e z c l a d e r e a c c ió n s e v e r t ió e n N a H C O 3 ( 0 , 6 M , a c . ) y s e e x t r a jo c o n M T B E ( 3 x ) . L a s f a s e s o r g á n i c a s c o m b i n a d a s s e la v a r o n c o n N a C l ( a c . s a t . 2 x ) , s e s e c a r o n s o b r e N a 2S O 4 y s e c o n c e n t r a r o n b a jo p r e s i ó n r e d u c i d a p r o d u c ie n d o 1 , 34 g ( 98 % ) d e l c o m p u e s t o d e l t ít u lo .

L C - M S ( P r o c e d i m ie n t o 4 ) : T r = 1 , 03 m in ; M S ( E S I p o s ) : m /z = 306 , 1 [ M N H 4]+.

1H R M N ( D M S O - d 6, 400 M H z ) : 8 ( p p m ) 7 , 27 - 7 , 39 (m , 5 H ) , 5 , 39 (d d ,J= 4 , 8 , 2 , 8 H z , 1 H ) , 4 , 58 (d ,J= 12 , 2 H z , 1 H ) , 4 , 50 (d ,J= 12 , 2 H z , 1 H ) , 3 , 87 (d d ,J= 11 , 7 , 4 , 8 H z , 1 H ) , 3 , 81 (d d ,J= 11 , 4 , 2 , 8 H z , 1 H ) , 3 , 72 (s , 3 H ) , 3 , 26 ( s , 3 H ) .

Paso 4

( 2 S ) - 3 - ( b e n c i l o x i ) - 2 - [ 4 , 10 - b i s ( 2 - t e r c - b u t o x i - 2 - o x o e t i l ) - 7 - { 1 - e t o x i - 1 - o x o - 3 - [ 4 - ( 2 , 2 , 3 , 3 -t e t r a f lu o r o p r o p o x i ) f e n i l ] p r o p a n - 2 - i l } - 1 , 4 , 7 , 10 - t e t r a a z a c ic lo d o d e c a n - 1 - i l ] p r o p a n o a t o d e m e t ilo

S e d is o lv ió 2 - [ 4 , 10 - b i s ( 2 - t e r c - b u t o x i - 2 - o x o e t i l ) - 1 , 4 , 7 , 10 - t e t r a a z a c i c l o d o d e c a n - 1 - i l ] - 3 - [ 4 - ( 2 , 2 , 3 , 3 -t e t r a f lu o r o p r o p o x i ) f e n i l ] p r o p a n o a t o d e e t ilo ( 2 , 05 g , 2 , 90 m m o l) e n M e C N , ( 9 , 5 m l), s e a ñ a d ie r o n K 2C O 3 ( 802 m g , 5 , 80 m m o l) y ( 2 R ) - 3 - ( b e n c i l o x i ) - 2 - [ ( m e t a n o s u lf o n i l ) o x i ] p r o p a n o a t o d e m e t ilo ( 1 , 34 g , 4 , 64 m m o l) y la m e z c la s e a g it ó a 80 ° C d u r a n t e la n o c h e . L o s s ó l i d o s s e e l i m in a r o n p o r m e d io d e f i lt r a c ió n , s e la v a r o n c o n E t O H y e l f i lt r a d o c o m b i n a d o s e c o n c e n t r ó b a jo p r e s i ó n r e d u c i d a . E l r e s i d u o o b t e n id o d e 3 , 19 g ( > 100 % ) s e u t i l iz ó s in p u r if ic a c ió n a d ic io n a l.

L C - M S ( P r o c e d i m ie n t o 2 ) : T r = 1 , 30 m in ; M S ( E S I p o s ) : m /z = 899 , 9 [M H ]+ .

Paso 5

ácido 2,2'-(4-[(2S)-3-(benciloxi)-1-metoxi-1-oxopropan-2-il]-10-{1-etoxi-1-oxo-3-[4-(2,2,3,3-tetrafluoropropoxi)fenil]propan-2-il}-1,4,7,10-tetraazaciclododecan-1,7-diil)diacético

S e d is o lv ió ( 2 S ) - 3 - ( b e n c i l o x i ) - 2 - [ 4 , 10 - b i s ( 2 - t e r c - b u t o x i - 2 - o x o e t i l ) - 7 - { 1 - e t o x i - 1 - o x o - 3 - [ 4 - ( 2 , 2 , 3 , 3 -t e t r a f lu o r o p r o p o x i ) f e n i l ] p r o p a n - 2 - i l } - 1 , 4 , 7 , 10 - t e t r a a z a c ic lo d o d e c a n - 1 - i l ] p r o p a n o a t o d e m e t ilo ( 3 , 19 g, 3 , 55 m m o l) e n á c id o f ó r m ic o ( 46 m l) y s e c a le n t ó h a s t a 70 ° C d u r a n t e la n o c h e . L a m e z c l a s e c o n c e n t r ó b a jo p r e s ió n r e d u c i d a y s e p u r if ic ó p o r m e d io d e c r o m a t o g r a f ía R P ( S N A P C 18 d e 60 g , 50 m l/m in , A = a g u a , B = M e C N , 0 % B a 50 % B e n 30 m in , 100 % B 10 m in ) . L a s f r a c c i o n e s i n t e r e s a n t e s s e c o m b in a r o n y s e l io f i l iz a r o n p a r a p r o p o r c i o n a r e l c o m p u e s t o d e l t ít u lo 180 m g ( 6 % ) .

1<H R M N ( D M S O - d>6<, 4 00 M H z ) : 6 ( p p m ) 7 , 1 8 - 7 , 4 2 (m , 7 H ) , 6 , 9 3 (d a , J = 8 , 4 H z , 2 H ) , 6 , 6 7 (t a ,>2J hf<= 5 1 , 7 H z ,>1 H ) , 4 , 39 - 4 , 61 (m , 4 H ) , 3 , 93 - 4 , 04 (m , 2 H ) , 3 , 76 - 3 , 88 (m , 2 H ) , 3 , 60 - 3 , 65 (m , 3 H ) , 3 , 15 - 3 , 43 (m , 8 H ) , 2 , 65 - 3 , 07 (m , 16 H ) , 0 , 96 - 1 , 09 (m , 3 H ) . L a m u e s t r a e s u n a m e z c l a d e d ia s t e r e ó m e r o s .

19<F R M N ( D M S O - d>6<, 3 7 7 M H z ) : 6 ( p p m ) - 1 2 5 , 3 3 ( s a , 2 F ) , - 13 9 , 8 0 (d a , J = 52 , 6 H z , 2 F ) .>

Paso 6

á c id o 2 , 2 '- ( 4 - { 1 - e t o x i- 1 - o x o - 3 - [ 4 - ( 2 , 2 , 3 , 3 - t e t r a f lu o r o p r o p o x i ) f e n i l ] p r o p a n - 2 - i l } - 10 - [ ( 2 S ) - 3 - h id r o x i - 1 - m e t o x i - 1 -o x o p r o p a n - 2 - i l ] - 1 , 4 , 7 , 10 - t e t r a a z a c i c l o d o d e c a n - 1 , 7 - d i i l ) d i a c é t i c o

S e d is o lv ió á c id o 2 , 2 '- ( 4 - [ ( 2 S ) - 3 - ( b e n c i l o x i ) - 1 - m e t o x i - 1 - o x o p r o p a n - 2 - i l ] - 10 - { 1 - e t o x i - 1 - o x o - 3 - [ 4 - ( 2 , 2 , 3 , 3 -t e t r a f lu o r o p r o p o x i ) f e n i l ] p r o p a n - 2 - i l } - 1 , 4 , 7 , 10 - t e t r a a z a c ic lo d o d e c a n - 1 , 7 - d i i l ) d ia c é t i c o ( 180 m g , 229 p m o l) e n E t O H ( 1 , 0 m l) y s e a ñ a d ió p a la d io ( 5 , 90 m g , 10 % s o b r e C , 5 , 55 p m o l) y la m e z c l a s e h id r o g e n ó b a jo 1 a t m d e h id r ó g e n o . D e s p u é s d e 5 d , s e a ñ a d ió á c id o a c é t i c o ( 1 , 3 p l, 23 p m o l) . L a m e z c l a s e h id r o g e n ó a d ic i o n a lm e n t e a T A y a p r e s ió n a m b ie n t e d u r a n t e 5 d . E l c a t a l iz a d o r s e e l im in ó p o r m e d io d e f ilt r a c ió n y e l f i lt r a d o s e c o n c e n t r ó b a jo p r e s i ó n r e d u c i d a . E l r e s i d u o d e 79 , 0 m g ( 49 % ) s e u t i l iz ó c o m o t a l e n e l p a s o s ig u ie n t e .

L C - M S ( P r o c e d i m ie n t o 2 ) : T r = 0 , 80 m in ( 97 % E L D ) ; M S ( E S l p o s ) : m /z = 697 [M H ]+.

19F R M N ( D M S O - d 6, 377 M H z ) : 6 ( p p m ) - 125 , 35 (d a ,J= 5 , 7 H z , 2 F ) , - 139 , 79 ( d d a ,J= 51 , 5 , 5 , 7 H z , 2 F ) .

Paso 7

( 2 S ) - 2 - [ 4 , 10 - b is ( c a r b o x i la t o m e t i l ) - 7 - { 1 - c a r b o x i- 2 - [ 4 - ( 2 , 2 , 3 , 3 - t e t r a f lu o r o p r o p o x i ) f e n i l ] e t i l } - 1 , 4 , 7 , 10 -t e t r a a z a c i c lo d o d e c a n - 1 - i l ] - 3 - h i d r o x ip r o p a n o a t o d e g a d o lin io

Se disolvió ácido 2,2'-(4-{1-etoxi-1-oxo-3-[4-(2,2,3,3-tetrafluoropropoxi)fenil]propan-2-il}-10-[(2S)-3-hidroxi-1-metoxi-1-oxopropan-2-il]-1,4,7,10-tetraazacidododecan-1,7-diil)diacético (71,0 mg, 102 |jmol) en agua (1,0 ml) y se añadió Gd<2>Ü<3>(16,6 mg, 45,9 jmol, 0,9 eq). La mezcla se agitó a 105°C durante 24h y otras 24h a 120°C, se enfrió hasta TA y se añadió Chelex100™ (forma sódica, aprox. 1 g). La mezcla se agitó a pH 5 durante 1h, la resina se eliminó por medio de filtración y el filtrado se concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó por medio de cromatografía RP (SNAP C18 de 12g, 12 ml/min, A = agua, B = MeCN, 0%B a 50%B en 30min, 100%B 10min). Las fracciones interesantes se agruparon y se liofilizaron para proporcionar 14,2 mg (17% ) de 2-{7-[1-carboxi-2-hidroxietil]-4,10-bis(carboxilatometil)-1,4,7,10-tetraazaciclododecan-1-il}-3-[4-(2,2,3,3-tetrafluoropropoxi)fenil]propanoato de gadolinio

LC-MS (Procedimiento 2): Tr = 0,72min; MS (ESlneg): m/z = 808 [M - H].

LC-MS (Procedimiento 3): Tr = 0,69min (8% DAD); MS (ESlpos): m/z = 405 [M 2H]++, 809 [M H]+; 0,72min (92% DAD); MS (ESlpos): m/z = 396 [M 2H - F]++, 405 [M 2H]++, 791 [2M 2H -HF -H<2>Ü]++, 800 [2M 2H -HF]+, 809 [M H]+ y algún [2M 2H]++. Los patrones de isótopos observados son acordes con los complejos de gadolinio. Predomina uno de los dos diastereómeros.

Ejemplo 34

Paso 1

(2R)-5-(3-butoxifenil)-2-[(trifluorometanosulfonil)oxi]pentanoato de metilo

ElIntermediario 24, (2R)-5-(3-butoxifenil)-2-hidroxipentanoato de metilo, (2,00 g, 7,13 mmol) en DCM (20 ml) se colocó bajo N<2>y se enfrió hasta -60°C. Se añadió lutidina (1000 jl, 8,6 mmol; [108-48-5]), seguido por la adición gota a gota de anhídrido trifluorometanosulfónico (7,5 ml, 1,0 M en DCM, 7,5 mmol; [358-23-6]). La mezcla se mantuvo a esta temperatura durante 2h y luego se dejó calentar hasta aprox. 8°C. Se añadió éter dietílico, y el precipitado se eliminó por medio de filtración. El filtrado y el lavado (éter dietílico) se combinaron y se extrajeron con agua y HCl (1 M, ac.). La fase orgánica se secó (Na<2>SÜ<4>) y se concentró bajo presión reducida para proporcionar 2,99 g (>100%) de (2R)-5-(3-butoxi-fenil)-2-[(trifluorometanosulfonil)oxi]pentanoato de metilo, el cual se utilizó directamente en el paso siguiente. Se caracterizó la muestra de un experimento anterior:

Rotación específica: « d20 = 17,47° /- 0,25° (c=1, CHCh).

<1>H RMN (CDCl<a>, 400MHz): 8 (ppm) 7,20 (t, J=7,8 Hz, 1H), 6,69-6,77 (m, 3H), 5,13 (t, J=6,1 Hz, 1H), 3,95 (t, J=6,6 Hz, 2H), 3,83 (s, 3H), 2,58-2,70 (m, 2H), 1,97-2,05 (m, 2H), 1,71-1,84 (m, 4H), 1,44-1,54 (m, 2H), 0,98 (t, J=7,4 Hz, 3H).

<13>C RMN (CDCl<a>, 101MHz): 8 (ppm) 167,5, 159,3, 142,2, 129,5, 120,5, 118,4, 114,8 (c, J=319,59 Hz), 112,0, 83,4, 67,6, 53,3, 34,9, 31,4 (2C), 25,9, 19,3, 13,9.

Paso 2

(2S)-5-(3-butoxifenil)-2-(1,4,7,10-tetraazaciclododecan-1-il)pentanoato de metilo

Se disolvió 1,4,7,10-tetraazaciclododecano (1,20 g, 6,96 mmol) en 23 ml de MeCN y se añadió K<2>CO<3>(802 mg, 5,80 mmol). Una solución de (2R)-5-(4-butoxifenil)-2-[(trifluorometanosulfonil)oxi]pentanoato (2,99 g) obtenida anteriormente en MeCN (1,0 ml) se añadió y la mezcla se agitó durante 3h a 60°C y durante la noche a TA. Los sólidos se eliminaron por medio de filtración y el filtrado se concentró bajo presión reducida. El producto crudo (4,56 g) obtenido, se utilizó directamente en el paso siguiente.

LC-MS (Procedimiento 2): Tr = 0,75min; MS (ESIpos): m/z = 436,0 [M+H]+.

Paso 3

(2S)-5-(3-butoxifenil)-2-(4,7,10-tris[(2S)-3-terc-butoxi-1-metoxM-oxopropan-2-il]-1,4,7,10-tetraazaciclododecan-<1>-il}pentanoato de metilo

Se disolvió (2S)-5-(3-butoxifenil)-2-(1,4,7,10-tetraazaciclododecan-1-il)pentanoato de metilo (1,82 g, 70 % de pureza, 2,93 mmol) en MeCN (35 ml) y se añadió K<2>CO<3>(1,42 g, 10,2 mmol). Posteriormente, se añadió gota a gota una solución deIntermediario 26, (2R)-3-terc-butoxi-2-[(trifluorometanosulfonil)oxi]propanoato de metilo (3,72 g, 90 % de pureza, 10,9 mmol) en MeCN (15 ml) y la mezcla se agitó durante la noche a TA. La mezcla se combinó con la reacción piloto (0,2g), se filtró y se lavó con MeCN. Los filtrados combinados se concentraron bajo presión reducida para proporcionar 6,32 g (>100%) de (2S)-5-(3-butoxifenil)-2-{4,7,10-tris[(2S)-3-terc-butoxi-1-metoxi-1-oxopropan-2-il]-1,4,7,10-tetraazaciclododecan-1-il} pentanoato de metilo, el cual se utilizó directamente en el paso siguiente.

LC-MS (Procedimiento 2): Tr = 1,56min; MS (ESIpos): m/z = 910,0 [M+H]+.

Paso 4

(2S)-5-(3-butoxifenil)-2-{4,7,10-tris[(2S)-3-hidroxi-1-metoxi-1-oxopropan-2-il]-1,4,7,10-tetraazaciclododecan-1-il}pentanoato de metilo

S e d is o lv ió ( 2 S ) - 5 - ( 3 - b u t o x i f e n i l ) - 2 - { 4 , 7 , 10 - t r i s [ ( 2 S ) - 3 - t e r c - b u t o x i - 1 - m e t o x i - 1 - o x o p r o p a n - 2 - i l ] - 1 , 4 , 7 , 10 -t e t r a a z a c i c lo d o d e c a n - 1 - i l } p e n t a n o a t o d e m e t ilo ( 5 , 22 g ) e n 1 , 4 - d io x a n o ( 65 m l) y s e a ñ a d ió t r e s g o t a s d e a g u a y H C l ( 11 , 4 m l 4 M e n d io x a n o ) . L a m e z c l a s e a g it ó 4 h a 80 ° C y lu e g o a T A d u r a n t e la n o c h e . E l s o l v e n t e s e e l im in ó b a jo p r e s i ó n r e d u c i d a y e l m a t e r ia l c r u d o o b t e n id o ( 5 , 38 g ) s e u t i liz ó e n e l p a s o s ig u ie n t e .

E l m a t e r ia l c r u d o a p a r t ir d e u n e x p e r i m e n t o p r e v io c o n 1 , 00 g d e t e t r a é s t e r s e p u r if ic ó p o r m e d io d e c r o m a t o g r a f ía R P ( s N a P C 18 d e 30 g , 20 m l/ m in , 254 n m , A = a g u a , B = M e C N , 20 % B 5 C V , 20 % B a 100 % B e n 15 C V , 100 % B 2 , 6 C V ) . L a s f r a c c i o n e s i n t e r e s a n t e s s e a g r u p a r o n y s e l io f i l iz a r o n p a r a p r o p o r c i o n a r 143 m g d e l c o m p u e s t o d e l t ítu lo .

L C - M S ( P r o c e d i m ie n t o 3 ) : T r = 0 , 81 m in ( 100 % D A D ) ; M S ( E S I p o s ) : m /z = 371 [M 2 H ]+ , 741 [M H ]+.

1H R M N ( D M S O - d a , 400 M H z ) : 8 ( p p m ) 7 , 15 (t,J= 7 , 9 H z , 1 H ) , 6 , 68 - 6 , 75 (m , 3 H ) , 4 , 79 ( s a , 3 H ) , 3 , 92 (t,J= 6 , 5 H z , 2 H ) , 3 , 42 - 3 , 68 (m , 22 H ) , 2 , 75 - 2 , 99 (m , 8 H ), 2 , 52 - 2 , 71 (m , 2 H ) , 2 , 25 - 2 , 46 (m , 6 H ), 1 , 98 - 2 , 22 (m , 2 H ) , 1 , 34 - 1 , 76 (m , 8 H ), 0 , 89 - 0 , 96 (m , 3 H ) .

13C R M N ( D M S O - d 6, 101 M H z ) : 8 ( p p m ) 172 , 6 , 171 , 5 ( 2 C ) , 171 , 4 , 158 , 8 , 143 , 6 , 129 , 3 , 120 , 4 , 114 , 4 , 111 , 8 , 66. 9 , 62 , 9 ( 2 C ) , 62 , 0 , 61 , 8 , 59 , 4 ( 2 C ) , 58 , 8 , 51 , 0 , 51 , 0 ( 3 C ) , 47 , 9 ( 2 C ) , 47 , 8 ( 2 C ) , 47 , 7 ( 2 C ) , 47 , 5 ( 2 C ) , 35 , 2 , 30.9 , 28 , 7 ( a ) , 28 , 3 ( a ) , 18 , 9 , 13 , 8.

Paso 5

á c id o ( 2 S ) - 5 - ( 3 - b u t o x i f e n i l ) - 2 - { 4 , 7 , 10 - t r i s [ ( 1 S ) - 1 - c a r b o x i - 2 - h i d r o x i e t i l ] - 1 , 4 , 7 , 10 - t e t r a a z a c i c l o d o d e c a n - 1 -i l } p e n t a n o i c o

( 2 S ) - 5 - ( 3 - b u t o x i f e n i l ) - 2 - { 4 , 7 , 10 - t r i s [ ( 2 S ) - 3 - h i d r o x i - 1 - m e t o x i - 1 - o x o p r o p a n - 2 - i l ] - 1 , 4 , 7 , 10 - t e t r a a z a c i c l o d o d e c a n - 1 -i l } p e n t a n o a t o d e m e t ilo ( 5 , 38 g ) o b t e n id o a n t e r io r m e n t e s e d is o lv ió e n T H F ( 30 m l). S e a ñ a d ió u n a s o l u c ió n d e h id r ó x id o d e litio ( 696 m g , 29 , 0 m m o l; [ 1310 - 65 - 2 ] ) e n a g u a ( 30 m l) y la m e z c l a s e a g it ó d u r a n t e la n o c h e a T A . L a r e a c c ió n s e c o n c e n t r ó b a jo p r e s ió n r e d u c i d a p a r a p r o p o r c i o n a r 7 , 56 g d e m a t e r ia l c r u d o . É s t e s e p u r if ic ó p o r m e d io d e c r o m a t o g r a f ía R P ( S N A P C 18 d e 400 g , 65 m l/m in , 254 n m , A = a g u a , B = M e C N , 0 % B 5 C V , 0 % B a 31 % B e n 10 C V ) . L a s f r a c c i o n e s in t e r e s a n t e s s e a g r u p a r o n y s e l io f i l iz a r o n p a r a p r o p o r c i o n a r la f r a c c ió n 1 ( 772 m g ) y la f r a c c ió n 2 ( 490 m g ) d e l c o m p u e s t o d e l t ít u lo , lo s c u a l e s s e u t i l iz a r o n a m b o s p o r s e p a r a d o e n e l p a s o f in a l.

L C - M S ( P r o c e d i m ie n t o 6 ): T r = 0 , 24 / 0 , 39 m in ; M S ( E S I p o s ) : m /z = 685 , 6 [M H ]+ .

Paso 6

( 2 S , 2 ' S , 2 " S ) - 2 , 2 ' , 2 M- { 10 - [ ( 1 S ) - 4 - ( 3 - b u t o x i f e n i l ) - 1 - c a r b o x i b u t i l ] - 1 , 4 , 7 , 10 - t e t r a a z a c i c l o d o d e c a n - 1 , 4 , 7 - t r i i l } t r i s ( 3 -h id r o x i p r o p a n o a t o ) d e g a d o l in io

L a f r a c c ió n 1 a p a r t ir d e l P a s o 5 s e t r a t ó d e la m is m a m a n e r a y a m b a s r e a c c i o n e s s e c o m b in a r o n e n e s t e p u n to .

L a m e z c l a c o m p le t a ( in c lu y e n d o la r e s i n a C h e l e x ) s e t r a n s f ir ió a u n c a r t u c h o B io t a g e v a c í o c o n e c t a d o a la c o l u m n a R P . L a c r o m a t o g r a f ía ( S N A P C 18 d e 120 g , 45 m l/m in , 254 n m , A = a g u a , B = M e C N , 0 % B 5 C V , 0 % B a 21 % B e n 4 , 8 C V , 21 % 0 , 9 C V , 21 % B a 65 % B e n 10 C V , 65 % B 2 , 6 C V ) p r o p o r c io n ó d o s f r a c c io n e s .

F r a c c i ó n 1 52 , 5 m g

R o t a c i ó n e s p e c í f i c a : a D 20 = - 7 , 06 ° / - 3 , 78 ° ( c = 1 , M e O H ) .

L C - M S ( P r o c e d i m ie n t o 3 ) : T r = 0 , 85 m i n ( 100 % D A D ) ; M S ( E S l p o s ) : m /z = 420 [M 2 H ]+ , 840 [M H ]+; 849 [M H 2O 2 H ]+ . E l p a t r ó n d e is ó t o p o s o b s e r v a d o e s a c o r d e c o n u n c o m p l e j o d e g a d o l in io . ( e s t e r e o is ó m e r o d e l p r o d u c t o d ia n a ) .

<F r a c c i ó n 2 : 6 4 5 , 2 m g ( 13 % , c a lc . a p a r t ir d e l in t e r m e d ia r io 24 ) d e>compuesto del Ejemplo 34<.>

R o t a c i ó n e s p e c í f i c a : a D 20 = 16 , 87 ° / - 0 , 28 ° ( c = 1 , H 2O ).

L C - M S ( P r o c e d i m ie n t o 3 ) : T r = 0 , 90 - 0 , 92 m i n ( 100 % D A D ) ; M S ( E S l p o s ) : m /z = 420 [M 2 H ]+ , 840 [M H]+; 84 9 [M H 2O 2 H ]+ . E l p a t r ó n d e is ó t o p o s o b s e r v a d o e s a c o r d e c o n u n c o m p le j o d e g a d o lin io .

Ejemplo 35

Paso 1

4 - [ ( 2 R ) - 3 - t e r c - b u t o x i - 1 - m e t o x i - 1 - o x o p r o p a n - 2 - i l ] - 1 , 4 , 7 , 10 - t e t r a a z a c i c l o d o d e c a n - 1 , 7 - d i c a r b o x i l a t o d e d ib e n c i lo

S e d is o lv ió 1 , 4 , 7 , 10 - t e t r a a z a c i c l o d o d e c a n - 1 , 7 - d i c a r b o x i l a t o d e d ib e n c i lo , ( 10 , 0 g , 22 , 7 m m o l, [ 162148 - 45 - 0 ] ) e n c lo r o f o r m o ( 240 m l), s e a ñ a d ie r o n D I P E A ( 5 , 9 m l, 34 m m o l) y u n a s o l u c ió n d e ( 2 S ) - 3 - t e r c . - b u t o x i- 2 -<[ ( t r i f lu o r o m e t a n o s u lf o n i l ) o x i] p r o p a n o a t o d e m e t ilo ,>Intermediario 28<, ( 4 , 90 g , 15 , 9 m m o l) e n c lo r o f o r m o ( 1 , 0>m l). L a m e z c l a s e a g it ó a 40 ° C d u r a n t e 3 h . S e a ñ a d ie r o n a g u a y D C M , y la s f a s e s s e s e p a r a r o n . L a f a s e o r g á n i c a s e la v ó c o n N a C l s a t . , s e s e c ó s o b r e N a 2S O 4 y s e c o n c e n t r ó b a jo p r e s i ó n r e d u c id a . E l p r o d u c t o c r u d o o b t e n id o ( 14 , 17 g ) s e c o m b in ó c o n e l p r o d u c t o c r u d o a p a r t ir d e u n e x p e r i m e n t o p r e v io ( 3 , 92 g a p a r t ir d e 2 , 39 g , 5 , 43 m m o l) . E l m a t e r ia l c o m b i n a d o ( 19 , 56 g ) s e a b s o r b ió s o b r e Is o lu t e ™ y s e p u r if ic ó p o r m e d io d e c r o m a t o g r a f ía R P ( S N A P C 18 d e 60 g , 50 m l/m in , A = a g u a / 0 , 1 % á c id o f ó r m ic o , B = M e C N , 210 n m , 10 % B 2 C V , 10 % B a 25 % B e n 4 , 9 C V , 25 % B 1 , 3 C V , 25 % B a 70 % B e n 15 C V ) . L a s f r a c c i o n e s in t e r e s a n t e s s e c o m b i n a r o n y s e l io f i l iz a r o n p a r a p r o p o r c io n a r :

F r a c c i ó n 1 : 5 , 45 g ( 12 , 5 m m o l, 46 % ) d e m a t e r ia l d e p a r t id a .

F r a c c i ó n 2 : 4 , 97 g ( 8 , 30 m m o l, 31 % ) d e l c o m p u e s t o d e l t ít u lo .

R o t a c i ó n e s p e c í f i c a : a D 20 = 9 , 21 ° / - 0 , 25 ° ( c = 1 , C H C h ) .

L C - M S ( P r o c e d i m ie n t o 3 ) : T r = 1 , 04 m in ( 100 % D A D ) ; M S ( E S l p o s ) : m /z = 599 [M H ]+.

Paso 2

4 - [ ( 2 R ) - 3 - t e r c - b u t o x i - 1 - m e t o x i - 1 - o x o p r o p a n - 2 - i l ] - 10 - [ ( 2 S ) - 5 - { 4 - [ 2 - ( 2 - e t o x ie t o x i ) e t o x i ] f e n i l } - 1 - m e t o x i- 1 -o x o p e n t a n - 2 - i l ] - 1 , 4 , 7 , 10 - t e t r a a z a c i c l o d o d e c a n - 1 , 7 - d i c a r b o x i l a t o d e d ib e n c i lo

S e d is o lv ió 4 - [ ( 2 R ) - 3 - t e r c - b u t o x M - m e t o x M - o x o p r o p a n - 2 - N ] - 1 , 4 , 7 , 10 - t e t r a a z a d d o d o d e c a n - 1 , 7 - d i c a r b o x N a t o d e d ib e n c i lo ( 4 , 68 g , 7 , 82 m m o l) e n M e C N ( 300 m l) y s e a ñ a d ió K 2 C O 3 ( 2 , 16 g , 15 , 6 m m o l) . S e a ñ a d ió g o t a a g o t a u n a s o l u c i ó n d e ( 2 R ) - 5 - { 4 - [ 2 - ( 2 - e t o x i e t o x i ) e t o x i] f e n i l } - 2 - [ ( t r i f l u o r o m e t a n o s u lf o n i l ) o x i] p e n t a n o a t o d e m e t ilo ( 6 , 00<g , 10 , 2 m m o l) e n M e C N ( 50 m l) (>Paso 1 del ejemplo 15<) y la m e z c l a s e a g it ó a T A d u r a n t e la n o c h e . L a m e z c la>s e c o m b i n ó c o n e l e x p e r i m e n t o p ilo t o ( 107 m g ) y lo s s ó l i d o s s e e l i m in a r o n p o r m e d io d e f i lt r a c ió n . E l f i lt r a d o y

F r a c c i ó n 1 : 2 , 15 g ( m e z c l a d e in t e r m e d ia r io 12 y c o m p u e s t o d e l t ít u lo )

F r a c c i ó n 2 : 3 , 30 g ( 38 % )

13<C R M N ( C D C l>a<, 101 M H z ) : 8 ( p p m ) 173 , 2 , 1 71 , 8 , 156 , 8 , 1 56 , 5 ( 2 C ) , 13 6 , 8 ( 2 C ) , 1 3 4 , 5 ( a ) , 129 , 2 ( 2 C ) , 128 , 4>( 4 C ) , 127 , 9 ( 2 C ) , 127 , 9 ( 4 C ) , 114 , 4 ( 2 C ) , 73 , 3 , 70 , 8 , 69 , 8 , 69 , 8 , 67 , 4 , 66 , 9 ( a , 2 C ) , 66 , 7 , 65 , 2 ( a ) , 62 , 6 ( v b r), 60 , 3 ( a ) , 53 , 6 ( a , 2 C ) , 51 , 2 , 51 , 1 (a , 2 C ) , 50 , 9 , 48 , 2 ( a , 2 C ) , 46 , 5 ( a , 2 C ) , 34 , 9 , 29 , 1 , 28 , 3 , 27 , 4 ( 3 C ) , 15 , 2.

Paso 3

( 2 S ) - 2 - { 7 - [ ( 2 R ) - 3 - t e r c - b u t o x i - 1 - m e t o x i - 1 - o x o p r o p a n - 2 - i l ] - 1 , 4 , 7 , 10 - t e t r a a z a c i c l o d o d e c a n - 1 - i l } - 5 - { 4 - [ 2 - ( 2 -e t o x ie t o x i) e t o x i] f e n i l } p e n t a n o a t o d e m e tilo

S e d is o lv ió 4 - [ ( 2 R ) - 3 - t e r c - b u t o x i - 1 - m e t o x i - 1 - o x o p r o p a n - 2 - i l ] - 10 - [ ( 2 S ) - 5 - { 4 - [ 2 - ( 2 - e t o x ie t o x i ) e t o x i ] f e n i l } - 1 - m e t o x i-1 - o x o p e n t a n - 2 - i l ] - 1 , 4 , 7 , 10 - t e t r a a z a c i c l o d o d e c a n - 1 , 7 - d i c a r b o x i l a t o d e d ib e n c i lo ( 2 , 99 g , 3 , 25 m m o l) e n E t O H ( 70 m l), s e a ñ a d ió p a la d io ( 1 , 20 g , 10 % s o b r e c a r b o n o , 1 , 3 m m o l) y la m e z c l a s e h id r o g e n ó a T A d u r a n t e 6 h b a jo p r e s i ó n a m b ie n t e . L a r e a c c i ó n s e c o m b i n ó c o n e l e x p e r im e n t o p ilo t o ( 180 m g ) y e l c a t a l i z a d o r s e e l im in ó p o r m e d io d e f ilt r a c ió n . E l f i lt r a d o s e c o n c e n t r ó b a jo p r e s ió n r e d u c i d a p a r a p r o p o r c i o n a r e l c o m p u e s t o d e l t ít u lo ( 2 , 0 g , 89 % ) .

L C - M S ( P r o c e d i m ie n t o 3 ) : T r = 0 , 64 m in ( 80 % D A D ) ; M S ( E S I p o s ) : m /z = 327 [M 2 H ]+ , 653 [M H ]+.

1H RMN (CDCl3, 400 MHz): 8 (ppm) 7,02-7,08 (m, 2H), 6,79-6,85 (m, 2H), 4,10 (dd,J= 5,3, 4,6 Hz, 2H), 3,84 (dd,J= 5,4, 4,4 Hz, 2H), 3,49-3,77 (m, 17H), 3,32 (dd a,J= 8,1, 5,3 Hz, 1H), 2,45-3,04 (m, 16H), 1,53-1,71 (m, 4H), 1,23 (t,J= 7,1 Hz, 3H), 1,14 (s, 7H).

13C RMN (CDCla, 101 MHz): 5 (ppm) 173,4, 172,2, 157,1, 134,2, 129,3 (2C), 114,6 (2C), 73,5, 71,0, 70,0, 69,9, 67,5, 66,8, 64,5 (a), 64,1 (a), 61,2 (a), 51,5, 51,4, 49,9 (2C), 49,7 (a, 2C), 46,7 (a, 4C), 34,9, 29,3, 28,8, 27,5 (3C), 15,3.

Paso 4

( 2 S ) - 2 - { 7 - [ ( 2 R ) - 3 - t e r c - b u t o x i - 1 - m e t o x i - 1 - o x o p r o p a n - 2 - i l ] - 4 , 10 - b is [ ( 2 S ) - 3 - t e r c - b u t o x i- 1 - m e t o x i- 1 - o x o p r o p a n - 2 -i l ] - 1 , 4 , 7 , 10 - t e t r a a z a c ic l o d o d e c a n - 1 - i l } - 5 - ( 4 - [ 2 - ( 2 - e t o x ie t o x i ) e t o x i ] f e n i l } p e n t a n o a t o d e m e tilo

S e d is o lv ió ( 2 S ) - 2 - { 7 - [ ( 2 R ) - 3 - t e r c - b u t o x M - m e t o x i - 1 - o x o p r o p a n - 2 - i l ] - 1 , 4 , 7 , 10 - t e t r a a z a c i c l o d o d e c a n - 1 - i l } - 5 - ( 4 -[ 2 - ( 2 - e t o x ie t o x i) e t o x i] f e n i l } p e n t a n o a t o d e m e t ilo ( 800 m g , 1 , 23 m m o l) e n M e C N ( 30 m l), s e a ñ a d ie r o n K 2C O 3 ( 423 m g , 3 , 06 m m o l) y u n a s o l u c ió n d e ( 2 R ) - 3 - t e r c - b u t o x i - 2 - [ ( t r i f l u o r o m e t a n o s u lf o n i l ) o x i ] p r o p a n o a t o d e m e tilo ,Intermediario 26<, ( 1 , 0 9 g , 2 , 82 m m o l) , e n M e C N ( 1 , 9 m l). L a m e z c l a s e a g it ó d u r a n t e la n o c h e a T A y s e>c o m b i n ó c o n e l e x p e r i m e n t o p ilo t o ( 100 m g ). L a m e z c l a s e filtró , s e la v ó c o n M e C N y lo s f i lt r a d o s c o m b i n a d o s s e c o n c e n t r a r o n b a jo p r e s ió n r e d u c id a . E l r e s i d u o s e d is o lv ió e n D C M y s e e x t r a jo c o n a g u a y N a C l s a t .. L a f a s e o r g á n i c a s e c o n c e n t r ó b a jo p r e s ió n r e d u c i d a p a r a p r o p o r c i o n a r e l c o m p u e s t o d e l t ít u lo c o m o r e s id u o m a r r ó n ( 1 , 83 g , > 100 % ) , e l c u a l s e u t i liz ó c o m o t a l e n e x p e r i m e n t o s p o s t e r io r e s .

L C - M S ( P r o c e d i m ie n t o 2 ) : T r = 1 , 45 m in ; M S ( E S I p o s ) : m /z = 970 [M H ]+ .

Paso 5

( 2 S ) - 5 - { 4 - [ 2 - ( 2 - e t o x ie t o x i ) e t o x i ] f e n i l } - 2 - { 7 - [ ( 2 R ) - 3 - h i d r o x i- 1 - m e t o x i- 1 - o x o p r o p a n - 2 - i l ] - 4 , 10 - b i s [ ( 2 S ) - 3 - h i d r o x i - 1 -m e t o x i- 1 - o x o p r o p a n - 2 - i l ] - 1 , 4 , 7 , 10 - t e t r a a z a c ic lo d o d e c a n - 1 - i l } p e n t a n o a t o d e m e t ilo

S e d is o lv ió ( 2 S ) - 2 - { 7 - [ ( 2 R ) - 3 - t e r c - b u t o x i - 1 - m e t o x i- 1 - o x o p r o p a n - 2 - i l ] - 4 , 10 - b is [ ( 2 S ) - 3 - t e r c - b u t o x i- 1 - m e t o x i- 1 -o x o p r o p a n - 2 - i l ] - 1 , 4 , 7 , 10 - t e t r a a z a c i c l o d o d e c a n - 1 - i l} - 5 - { 4 - [ 2 - ( 2 - e t o x ie t o x i) e t o x i] f e n i l } p e n t a n o a t o d e m e t ilo ( 1 , 10 g , 1 , 14 m m o l) e n 1 , 4 - d io x a n o ( 20 m l), s e a ñ a d ie r o n a l g u n a s g o t a s d e a g u a y H C l ( 4 , 54 m l, 4 , 0 M e n d io x a n o , 18 , 2 m m o l) y s e c a le n t ó h a s t a 80 ° C d u r a n t e 4 h . L a m e z c l a s e c o m b in ó c o n e l e x p e r im e n t o p ilo t o ( 100 m g ) y s e e v a p o r ó h a s t a la s e q u e d a d b a jo p r e s i ó n r e d u c id a . S e o b t u v o u n r e s i d u o m a r r ó n ( 1 , 68 g , > 100 % ) , q u e s e u t iliz ó c o m o t a l e n e l p a s o s ig u ie n t e .

L C - M S ( P r o c e d i m ie n t o 2 ) : T r = 0 , 97 m i n ; M S ( E S I p o s ) : m /z = 802 , 2 [M H ]+ .

Paso 6

á c id o ( 2 S ) - 2 - { 7 - [ ( 1 R ) - 1 - c a r b o x i - 2 - h i d r o x i e t i l ] - 4 , 10 - b i s [ ( 1 S ) - 1 - c a r b o x i - 2 - h i d r o x i e t i l ] - 1 , 4 , 7 , 10 -t e t r a a z a c i c lo d o d e c a n - 1 - i l } - 5 - { 4 - [ 2 - ( 2 - e t o x ie t o x i ) e t o x i ] f e n i l } p e n t a n o i c o

S e d is o lv ió ( 2 S ) - 5 - { 4 - [ 2 - ( 2 - e t o x ie t o x i ) e t o x i ] f e n i l } - 2 - { 7 - [ ( 2 R ) - 3 - h i d r o x i- 1 - m e t o x i- 1 - o x o p r o p a n - 2 - i l ] - 4 , 10 - b i s [ ( 2 S ) -3 - h id r o x i - 1 - m e t o x i - 1 - o x o p r o p a n - 2 - i l ] - 1 , 4 , 7 , 10 - t e t r a a z a c i c l o d o d e c a n - 1 - i l } p e n t a n o a t o d e m e t ilo ( 900 m g , 1 , 12 m m o l) e n T H F ( 50 m l) y s e a ñ a d ió u n a s o l u c ió n d e h id r ó x id o d e litio ( 161 m g , 6 , 74 m m o l; [ 1310 - 65 - 2 ] ) e n a g u a ( 50 m l). L a m e z c l a s e a g it ó a T A d u r a n t e la n o c h e . S e a ñ a d ió o t r a p o r c ió n d e h id r ó x id o d e lit io ( 160 m g , 6 , 68 m m o l) e n a g u a y la m e z c l a s e c a le n t ó h a s t a 80 ° C d u r a n t e 6 h y d u r a n t e la n o c h e a T A . É s t a s e c o m b i n ó c o n u n a r e a c c ió n a n t e r io r ( 90 m g ) y s e e v a p o r ó h a s t a la s e q u e d a d b a jo p r e s i ó n r e d u c i d a . E l r e s i d u o ( 2 , 0 g ) s e a b s o r b ió s o b r e I s o lu t e ™ y s e p u r if ic ó p o r m e d io d e c r o m a t o g r a f ía R P ( S N A P C 18 d e 120 g , 50 m l/m in , A = a g u a / 0 , 1 % á c id o f ó r m ic o , B = M e C N , 250 n m , 0 % B 6 C V , 0 % B a 50 % B e n 15 C V ) . L a s f r a c c i o n e s i n t e r e s a n t e s s e c o m b i n a r o n y s e l io f i l iz a r o n . E l c o m p u e s t o d e l t ít u lo s e o b t u v o e n d o s f r a c c io n e s :

F r a c c i ó n 1 : 524 , 3 m g ( 0 , 704 m m o l, 51 % c a lc . a p a r t ir d e l p a s o 4 )

R o t a c i ó n e s p e c í f i c a : a D 20 = 12 , 5 ° / - 0 ,9 ° ( c = 1 , M e O H ) .

L C - M S ( P r o c e d i m ie n t o 2 ) : T r = 0 , 79 m i n ; M S ( E S I p o s ) : m /z = 746 [M H ]

L C - M S ( P r o c e d i m ie n t o 3 ) : T r = 0 , 63 m in ( 100 % D A D ) ; M S ( E S I p o s ) : m /z = 373 [M 2 H ]+ , 745 [M H ]+.

1 H R M N ( D 2O , 600 M H z ) : 8 ( p p m ) 8 , 21 ( s , 0 , 3 H , f o r m ia t o ) , 7 , 13 - 7 , 26 (m , 2 H ) , 6 , 87 - 6 , 99 (m , 2 H ) , 3 , 05 - 4 , 36 (m , 36 H ) , 2 ,61 ( s a , 2 H ) , 1 , 60 - 1 , 96 (m , 4 H ) , 1 , 14 (t,J= 7 , 0 H z , 3 H ) .

F r a c c i ó n 2 : 77 , 3 m g ( 0 , 104 m m o l, 7 , 5 % c a lc . a p a r t ir d e l p a s o 4 ).

R o t a c i ó n E s p e c í f i c a : a D 20 = 12 , 7 ° / - 0 ,9 ° ( c = 1 , M e O H ) .

L C - M S ( P r o c e d i m ie n t o 2 ) : T r = 0 , 80 m in ; M S ( E S I p o s ) : m /z = 745 [M H ]+ .

Paso 7

( 2 S , 2 'S ) - 2 , 2 '- { 4 - [ ( 1 S ) - 1 - c a r b o x i - 4 - { 4 - [ 2 - ( 2 - e t o x ie t o x i ) e t o x i ] f e n i l } b u t i l ] - 10 - [ ( 1 R ) - 1 - c a r b o x i la t o - 2 - h i d r o x ie t i l ] -1 , 4 , 7 , 10 - t e t r a a z a c i c l o d o d e c a n - 1 , 7 - d i i l } b i s ( 3 - h i d r o x i p r o p a n o a t o ) d e g a d o lin io

S e d is o lv ió á c id o ( 2 S ) - 2 - { 7 - [ ( 1 R ) - 1 - c a r b o x i - 2 - h i d r o x i e t i l ] - 4 , 10 - b i s [ ( 1 S ) - 1 - c a r b o x i - 2 - h i d r o x i e t i l ] - 1 , 4 , 7 , 10 -t e t r a a z a c i c lo d o d e c a n - 1 - i l } - 5 - { 4 - [ 2 - ( 2 - e t o x ie t o x i ) e t o x i ] f e n i l } p e n t a n o i c o ( 482 m g , 647 p m o l) e n a g u a ( 15 m l) y s e a ñ a d ió G d 2O 3 ( 106 m g , 291 p m o l, 0 , 9 e q ) . D e s p u é s d e la a g it a c ió n a 100 ° C d u r a n t e 8 h, s e a ñ a d ió C h e l e x 100 ™ ( f o r m a s ó d i c a , a p r o x . 5 g ) y la m e z c l a s e a g it ó a T A d u r a n t e la n o c h e . L u e g o d e q u e la p r u e b a d e x i l e n o l- n a r a n j a in d ic ó la a u s e n c i a d e g a d o l in io lib r e , e l p H s e a ju s t ó h a s t a 8 ( h id r ó x id o d e a m o n io a l 25 % ) y la m e z c l a ( in c lu y e n d o la r e s i n a ) s e c a r g ó e n u n c a r t u c h o B i o t a g e v a c í o y s e s o m e t ió d ir e c t a m e n t e a c r o m a t o g r a f ía R P ( S N A P C 18 d e 60 g , 50 m l/m in , A = a g u a , B = M e C N , 275 n m , 0 % B 6 C V , 0 % B a 13 % B e n 3 , 3 C V , 13 % B 5 , 8 C V , 1 3 % B a 60 % B e n 11 ,6 C V ) . L a s f r a c c i o n e s in t e r e s a n t e s s e c o m b i n a r o n y s e l io f i l iz a r o n p a r a p r o p o r c i o n a r 294 m g ( 51 % d e r e n d im ie n t o ) d e l c o m p u e s t o d e l t ítu lo .

R o t a c i ó n e s p e c í f i c a : a D 20 = 2 , 9 ° / - 0 ,2 ° ( c = 1 , H 2O ).

L C - M S ( P r o c e d i m ie n t o 2 ) : T r = 0 , 80 m in ; M S ( E S I p o s ) : m /z = 900 [M H ]+ .

Ejemplo 36

Paso 1

( 2 S ) - 5 - { 4 - [ 2 - ( 2 - e t o x ie t o x i ) e t o x i ] f e n i l } - 2 - { 7 - [ 2 - o x o o x o la n - 3 - i l ] - 4 , 10 - b i s ( 2 - o x o o x o l a n - 3 - i l ) - 1 , 4 , 7 , 10 -t e t r a a z a c i c l o d o d e c a n - 1 - i l } p e n t a n o a t o d e m e t ilo

B a jo u n a a t m ó s f e r a d e N 2, 3 - h id r o x i o x o la n - 2 - o n a r a c é m ic a ( 350 m g , 3 , 43 m m o l, [ 19444 - 84 - 9 ] ) e n D C M ( 11 m l ) s e a g it ó a - 70 ° C . S e a ñ a d ió 2 ,6 - d im e t i lp i r id in a ( 460 p l, 3 , 9 m m o l; [ 108 - 48 - 5 ] ) , s e g u id o p o r la a d ic ió n g o t a a g o t a d e a n h íd r i d o t r i f l u o r o m e t a n o s u lf ó n i c o ( 640 p l, 3 , 8 m m o l) . L a m e z c l a lu e g o s e c a le n t ó h a s t a - 40 ° C y s e a g it ó d u r a n t e 2 h . E n u n m a t r a z d e r e a c c ió n s e p a r a d o , ( 2 S ) - 5 - { 4 - [ 2 - ( 2 - e t o x ie t o x i ) e t o x i ] f e n i l } - 2 - ( 1 , 4 , 7 , 10 -<t e t r a a z a c i c lo d o d e c a n - 1 - i l ) p e n t a n o a t o d e m e tilo , (>Ejemplo 15 Paso 2,<50 0 m g , 1 , 0 m m o l) , D I P E A ( 4 5 7 m g , 3 , 5>m m o l) y M e C N ( 7 , 1 m l) s e a g it a r o n b a jo N 2 a - 40 ° C . L a s d o s m e z c l a s s e c o m b i n a r o n a - 40 ° C y s e d e ja r o n c a le n t a r h a s t a T A y s e a g it a r o n d u r a n t e 2 d . L a m e z c l a lu e g o s e a ñ a d ió a a g u a , s e e x t r a jo c o n D C M ( 2 x ) , la f a s e o r g á n i c a s e la v ó c o n s o l u c ió n d e N a O H (0 ,1 M , a c . 2 x ) , s o l u c ió n d e N a C l ( a c . s a t . 2 x ) y s e p a s ó s o b r e u n filtro r e p e le n t e a l a g u a , y la m e z c l a s e c o n c e n t r ó b a jo p r e s ió n r e d u c id a . D e b id o a la a lq u i la c ió n in c o m p le t a , la m e z c la c r u d a lu e g o s e v o lv ió a d is o lv e r e n M e C N ( 7 , 1 m l) , s e a ñ a d ió K 2C O 3 ( 540 m g , 3 , 91 m m o l; [ 584 - 08 - 7 ] ) . E n u n s e g u n d o m a t r a z , 3 - h id r o x i o x o la n - 2 - o n a r a c é m ic a ( 250 m g , 4 , 5 m m o l, [ 19444 - 84 - 9 ] ) , T H F ( 8 , 2 m l), y t E a ( 0 , 75 m l, 5 , 38 m m o l) s e a g it a r o n a 0 ° C , s e a ñ a d ió g o t a a g o t a M s C l ( 0 , 21 m l, 2 , 7 m m o l) , y la m e z c l a s e a g it ó d u r a n t e 5 m in . L a s d o s m e z c l a s s e c o m b i n a r o n y s e a g it a r o n d u r a n t e la n o c h e a 60 ° C d u r a n t e 2 d . L a m e z c l a s e filt ró y s e c o n c e n t r ó b a jo p r e s i ó n r e d u c i d a p r o d u c ie n d o e l p r o d u c t o c r u d o c o m o u n a m e z c l a d e d ia s t e r e ó m e r o s y s u b p r o d u c t o s t r i a lq u i l a d o s ( 1 , 02 g ).

L C - M S ( P r o c e d i m ie n t o 2 ) : T r = 1 , 01 m i n ; M S ( E S I p o s ) : m /z = 747 , 7 [M H ]+ .

Paso 2

á c id o ( 2 S ) - 2 - { 7 - [ 1 - c a r b o x i - 3 - h i d r o x i p r o p i l ] - 4 , 10 - b i s [ 1 - c a r b o x i - 3 - h i d r o x i p r o p i l ] - 1 , 4 , 7 , 10 - t e t r a a z a c i c l o d o d e c a n - 1 -i l } - 5 - { 4 - [ 2 - ( 2 - e t o x i e t o x i ) e t o x i ] f e n i l } p e n t a n o i c o

E l p r o d u c t o c r u d o ( 2 S ) - 5 - { 4 - [ 2 - ( 2 - e t o x ie t o x i ) e t o x i ] f e n i l } - 2 - { 7 - [ 2 - o x o o x o la n - 3 - i l ] - 4 , 10 - b i s ( 2 - o x o o x o l a n - 3 - i l ) -1 , 4 , 7 , 10 - t e t r a a z a c i c l o d o d e c a n - 1 - i l } p e n t a n o a t o d e m e t ilo ( 1 , 00 g , 1 , 34 m m o l) s e a g it ó e n T H F ( 21 m l), y s e a ñ a d ió u n a s o l u c ió n d e N a O H ( a c . 2 , 9 m l, 2 , 0 M , 5 , 9 m m o l; [ 1310 - 73 - 2 ] ) y la m e z c l a s e a g it ó d u r a n t e la n o c h e a T A . S e a ñ a d ió N a O H a d ic i o n a l ( 5 , 4 m l, 2 , 0 M , 11 m m o l; [ 1310 - 73 - 2 ] ) y la m e z c l a s e a g it ó d u r a n t e 1 d a d ic io n a l. L a m e z c l a s e n e u t r a l i z ó c o n u n a s o l u c ió n d e H C l ( 2 N , a c . ) y s e c o n c e n t r ó b a jo p r e s i ó n r e d u c i d a p r o d u c ie n d o e l p r o d u c t o c r u d o ( 1 , 0 g ) q u e t a m b ié n c o n t e n ía u n a im p u r e z a t r ia lq u i la d a .

L C - M S ( P r o c e d i m ie n t o 2 ) : T r = 0 , 73 m i n ; M S ( E S l p o s ) : m /z = 787 , 7 [M H ]+ .

Paso 3

g a d o l i n i o - 2 , 2 '- { 4 - [ ( 1 S ) - 1 - c a r b o x i- 4 - { 4 - [ 2 - ( 2 - e t o x ie t o x i ) e t o x i ] f e n i l } b u t i l ] - 10 - [ 1 - c a r b o x i l a t o - 3 - h id r o x i p r o p i l ] -1 , 4 , 7 , 10 - t e t r a a z a d d o d o d e c a n - 1 , 7 - d i i l } b i s ( 4 - h i d r o x i b u t a n o a t o )

L C - M S ( P r o c e d i m ie n t o 2 ): T r = 0 , 59 m in ; M S ( E S l p o s ) : m /z = 942 , 6 [M H ]+ . E l p a t r ó n d e is ó t o p o s s e c o r r e s p o n d e c o n u n c o m p le j o d e g a d o lin io .

Ejemplo 37

g a d o l in i o - 2 , 2 '- { 4 - [ 1 - c a r b o x i - 2 - { 4 - [ 2 - ( 2 - e t o x i e t o x i ) e t o x i ] f e n i l } e t i l ] - 10 - [ 1 - c a r b o x i l a t o - 3 - h id r o x i p r o p i l ] - 1 , 4 , 7 , 10 -t e t r a a z a c i c lo d o d e c a n - 1 , 7 - d i i l } b i s ( 4 - h id r o x i b u t a n o a t o )

E l c o m p u e s t o d e l t ít u lo , p r e s e n t e c o m o u n a m e z c l a d e d ia s t e r e ó m e r o s , s e p r o d u jo p o r m e d io d e lo sIntermediario 2<.>

L C - M S ( P r o c e d i m ie n t o 3 ) : T r = 0 , 60 - 0 , 66 m in ; M S ( E S l p o s ) : m /z = 457 , 6 [M 2 H ]+ , 914 , 3 [M H ]+ . E l p a t r ó n d e is ó t o p o s c o r r e s p o n d e a l c o m p l e j o d e g a d o l in io a n t ic ip a d o .

Ejemplo 38

Paso 1

etil-2-{4,10-bis(2-terc-butoxi-2-oxoetil)-7-[1-etoxi-3-metoxi-1-oxopropan-2-il]-1,4,7,10-tetraazaciclododecan-1-il}-3-[4-(2-etoxietoxi)fenil]propanoato

E t i l - 2 - [ 4 , 10 - b is ( 2 - t e r c - b u t o x i- 2 - o x o e t i l ) - 1 , 4 , 7 , 10 - t e t r a a z a c i c l o d o d e c a n - 1 - i l ] - 3 - [ 4 - ( 2 - e t o x ie t o x i ) f e n i l ] p r o p a n o a t o<(>Ejemplo 7 - Paso 2<, 1 , 9 5 g , 2 , 9 3 m m o l) y e t i l - 2 - [ ( m e t a n o s u l f o n i l ) o x i ] - 3 - m e t o x ip r o p a n o a t o (>Intermediario 25,66 3 m g , 2 , 93 m m o l) , K 2C O 3 ( 810 m g , 5 , 86 m m o l; [ 584 - 08 - 7 ] ) y M e C N ( 9 , 6 m l) s e c a le n t a r o n a 70 ° C d u r a n t e 24 h . L a m e z c l a s e f iltró , y la t o r t a d e filt ro s e la v ó c o n E t O H , lo s f i l t r a d o s o r g á n i c o s s e c o m b i n a r o n y s e c o n c e n t r a r o n b a jo p r e s ió n r e d u c i d a p r o d u c ie n d o e l c o m p u e s t o c r u d o d e l t ít u lo c o m o u n a m e z c l a d e d ia s t e r e ó m e r o s ( 2 , 5 g ).

L C - M S ( P r o c e d i m ie n t o 2 ) : T r = 1 , 20 - 1 , 40 m in ; M S ( E S l p o s ) : m /z = 795 , 9 [M H ]+ .

Paso 2

á c id o 2 , 2 '- ( 4 - { 1 - e t o x i- 3 - [ 4 - ( 2 - e t o x i e t o x i ) f e n i l ] - 1 - o x o p r o p a n - 2 - i l } - 10 - [ 1 - e t o x i- 3 - m e t o x i- 1 - o x o p r o p a n - 2 - i l ] - 1 , 4 , 7 , 10 -t e t r a a z a c i c l o d o d e c a n - 1 , 7 - d i i l ) d i a c é t i c o

S e a g it ó e t i l - 2 - { 4 , 10 - b i s ( 2 - t e r c - b u t o x i- 2 - o x o e t i l ) - 7 - [ ( 2 S R ) - 1 - e t o x i - 3 - m e t o x i- 1 - o x o p r o p a n - 2 - i l ] - 1 , 4 , 7 , 10 -t e t r a a z a c i c lo d o d e c a n - 1 - i l } - 3 - [ 4 - ( 2 - e t o x i e t o x i ) f e n i l ] p r o p a n o a t o c r u d o ( 2 , 50 g , 3 , 14 m m o l) e n á c id o f ó r m ic o ( 25 m l) a 60 ° C d u r a n t e la n o c h e . L a r e a c c ió n s e c o n c e n t r ó b a jo p r e s i ó n r e d u c i d a y s e p u r if ic ó p o r m e d io d e c r o m a t o g r a f ía R P ( B i o t a g e U L T R A C 18 , 60 g , 50 m l/ m in , A = a g u a , B = M e C N , 0 % B a 100 % B ) o b t e n ie n d o e l c o m p u e s t o d e l t ít u lo c o m o u n a m e z c l a d e d ia s t e r e ó m e r o s ( 319 m g , 14 % d e r e n d im ie n t o ) .

L C - M S ( P r o c e d i m ie n t o 2 ) : T r = 0 , 73 m i n ; M S ( E S l p o s ) : m /z = 683 , 6 [M H ]+ .

1 H R M N ( D M S O - d 6 , 400 M H z ) : 6 ( p p m ) 7 , 09 - 7 , 35 (m , 2 H ) , 6 , 75 - 6 , 91 (m , 2 H ) , 3 , 74 - 4 , 23 (m , 8 H ), 3 , 60 - 3 , 71 (m , 4 H ) , 3 , 42 - 3 , 56 (m , 4 H ) , 3 , 14 - 3 , 34 (m , 7 H ) , 2 , 55 - 3 , 13 (m , 16 H ) , 0 , 98 - 1 , 24 (m , 9 H ) .

Paso 3

2 - [ 7 - { 1 - c a r b o x i - 2 - [ 4 - ( 2 - e t o x ie t o x i ) f e n i l ] e t i l } - 4 , 10 - b is ( c a r b o x i la t o m e t i l ) - 1 , 4 , 7 , 10 - t e t r a a z a c ic l o d o d e c a n - 1 - i l ] - 3 -m e t o x ip r o p a n o a t o d e g a d o lin io

Ejemplo 39

2 , 2 ' , 2 M- { 10 - [ 2 - { 3 , 5 - b i s [ 2 - ( 2 - e t o x i e t o x i ) e t o x i ] f e n i l } - 1 - c a r b o x i e t i l ] - 1 , 4 , 7 , 10 - t e t r a a z a c i c l o d o d e c a n - 1 , 4 , 7 -t r i i l } t r ia c e t a t o d e g a d o l in io

E l c o m p u e s t o d e l t ít u lo s e p r o d u jo p o r m e d io d e lo s p r o c e d im i e n t o s d e s c r ip t o s e n la p r e s e n t e a p a r t ir d e 2 - ( 2 -e t o x ie t o x i) E t O H ( [ 111 - 90 - 0 ] ) y 3 , 5 - d i h i d r o x ib e n z a ld e h í d o ( [ 26153 - 38 - 8 ] ) .

L C - M S ( P r o c e d i m ie n t o 3 ) : T r = 0 , 73 m i n ; M S ( E S I p o s ) : m /z = 457 , 8 [M 2 H ]+ , 914 , 6 [M H ] . L o s p a t r o n e s d e is ó t o p o s c o i n c id e n c o n lo s v a l o r e s t e ó r ic o s p a r a e l c o m p le j o d e g a d o l in io c o r r e s p o n d ie n t e .

Ejemplo 40

2 , 2 ' , 2 " - { 10 - [ ( 1 S ) - 2 - ( 2 , 4 - b i s { 2 - [ 2 - ( 2 - e t o x i e t o x i ) e t o x i ] e t o x i } f e n i l ) - 1 - c a r b o x i e t i l ] - 1 , 4 , 7 , 10 - t e t r a a z a c i c l o d o d e c a n -1 , 4 , 7 - t r i i l } t r ia c e t a t o d e g a d o lin io

E l c o m p u e s t o d e l t ít u lo s e p r o d u jo p o r m e d io d e lo s p r o c e d im i e n t o s d e s c r ip t o s e n la p r e s e n t e a p a r t ir d e 2 - [ 2 -( 2 - e t o x ie t o x i) e t o x i] E t O H ( [ 112 - 50 - 5 ] ) y 2 , 4 - d i h i d r o x ib e n z a ld e h í d o ( [ 95 - 01 - 2 ] ) .

L C - M S ( P r o c e d i m ie n t o 3 ) : T r = 0 , 82 m in ; M S ( E S I p o s ) : m /z = 501 , 8 [M 2 H ]+ , 1002 , 6 [M H ] . L o s p a t r o n e s d e is ó t o p o s c o i n c id e n c o n lo s v a l o r e s t e ó r ic o s p a r a e l c o m p le j o d e g a d o l in io c o r r e s p o n d ie n t e .

Ejemplo 41

g a d o l in i o - 2 - { 7 - [ 1 - c a r b o x i - 2 - { 4 - [ 2 - ( 2 - e t o x ie t o x i ) e t o x i ] f e n i l } e t i l ] - 4 , 10 - b i s ( c a r b o x i la t o m e t i l ) - 1 , 4 , 7 , 10 -t e t r a a z a c i c lo d o d e c a n - 1 - i l } - 3 - h id r o x ip r o p a n o a t o

E l c o m p u e s t o d e l t ít u lo , p r e s e n t e c o m o u n a m e z c l a d e d ia s t e r e ó m e r o s , s e p r o d u jo p o r m e d io d e lo sIntermediario 2,<d e l>Intermediario 27<, y d e 2 , 2 '- ( 1 , 4 , 7 , 1 0 ->t e t r a a z a d d o d o d e c a n - 1 , 7 - d i i l ) d i a c e t a t o d e d i- t e r c - b u t i lo [ 162148 - 48 - 3 ] .

L C - M S ( P r o c e d i m ie n t o 3 ) : T r = 0 , 64 m in ; M S ( E S I p o s ) : m /z = 406 , 7 [M 2 H ]+ , 811 , 4 [ M H ] . L o s p a t r o n e s d e is ó t o p o s c o i n c id e n c o n lo s v a l o r e s t e ó r ic o s p a r a e l c o m p le j o d e g a d o l in io c o r r e s p o n d ie n t e .

Ejemplo 42

g a d o l i n i o - 2 - { 7 - [ 1 - c a r b o x i - 2 - ( 4 - { 2 - [ 2 - ( 2 - e t o x i e t o x i ) e t o x i ] e t o x i } f e n i l ) e t i l ] - 4 , 10 - b i s ( c a r b o x i la t o m e t i l ) - 1 , 4 , 7 , 10 -t e t r a a z a c i c lo d o d e c a n - 1 - i l } - 3 - h id r o x ip r o p a n o a t o

E l c o m p u e s t o d e l t ít u lo , p r e s e n t e c o m o u n a m e z c l a d e d ia s t e r e ó m e r o s , s e p r o d u jo p o r m e d io d e lo sIntermediario 4<, y d e l>Intermediario 27<.>

L C - M S ( P r o c e d i m ie n t o 3 ) : T r = 0 , 62 - 0 , 66 m in ; M S ( E S I p o s ) : m /z = 428 , 7 [M 2 H ]+ , 856 , 4 [M H ] . L o s p a t r o n e s d e is ó t o p o s c o i n c id e n c o n lo s v a l o r e s t e ó r ic o s p a r a e l c o m p l e j o d e g a d o l in io c o r r e s p o n d ie n t e .

Ejemplo 43

g a d o l i n i o - 2 - { 4 , 10 - b i s ( c a r b o x i l a t o m e t i l ) - 7 - [ 1 - c a r b o x i p r o p i l ] - 1 , 4 , 7 , 10 - t e t r a a z a c i c l o d o d e c a n - 1 - i l } - 3 - { 4 - [ 2 - ( 2 -e t o x ie t o x i) e t o x i] f e n i l } p r o p a n o a t o

E l c o m p u e s t o d e l t ít u lo , p r e s e n t e c o m o u n a m e z c l a d e d ia s t e r e ó m e r o s , s e p r o d u jo p o r m e d io d e lo sIntermediario 5,<2 , 2 '- ( 1 , 4 , 7 , 10 - t e t r a a z a c i c l o d o d e c a n - 1 , 7 ->d i i l ) d ia c e t a t o d e d i- t e r c - b u t i lo [ 162148 - 48 - 3 ] y e t i l - 2 - h id r o x ib u t a n o a t o r a c é m ic o ([ 52089 - 54 - 0 ] ) .

L C - M S ( P r o c e d i m ie n t o 3 ) : T r = 0 , 60 - 0 , 64 m i n ; M S ( E S I p o s ) : m /z = 405 , 7 [M 2 H ]+ , 810 , 5 [M H ] . L o s p a t r o n e s d e is ó t o p o s c o i n c id e n c o n lo s v a l o r e s t e ó r ic o s p a r a e l c o m p l e j o d e g a d o l in io c o r r e s p o n d ie n t e .

Ejemplo 44

2 , 2 ' , 2 " - { 10 - [ 2 - ( 5 - b u t o x ip i r id i n - 2 - i l ) - 1 - c a r b o x i e t i l ] - 1 , 4 , 7 , 10 - t e t r a a z a c i c l o d o d e c a n - 1 , 4 , 7 - t r i i l } t r ia c e t a t o d e g a d o lin io

E l c o m p u e s t o d e l t ít u lo s e p r o d u jo p o r m e d io d e lo s p r o c e d im i e n t o s d e s c r ip t o s e n la p r e s e n t e a p a r t ir d e 5 -b u t o x i p i r id in - 2 - c a r b a l d e h íd o ([ 66933 - 06 - 0 ] ) .

L C - M S ( P r o c e d i m ie n t o 3 ) : T r = 0 , 44 m in ; M S ( E S I p o s ) : m /z = 362 , 2 [M 2 H ]+ , 723 , 3 [ M H ] . L o s p a t r o n e s d e is ó t o p o s c o i n c id e n c o n lo s v a l o r e s t e ó r ic o s p a r a e l c o m p le j o d e g a d o l in io c o r r e s p o n d ie n t e .

Ejemplo 45

g a d o lin i o - 2 - { 4 , 10 - b i s ( c a r b o x i l a t o m e t i l ) - 7 - [ 1 - c a r b o x i - 2 - m e t o x i e t i l ] - 1 , 4 , 7 , 10 - t e t r a a z a c i c l o d o d e c a n - 1 - i l } - 3 - [ 4 -( 2 , 2 , 3 , 3 - t e t r a f lu o r o p r o p o x i ) f e n i l ] p r o p a n o a t o

E l c o m p u e s t o d e l t ít u lo , p r e s e n t e c o m o u n a m e z c l a d e d ia s t e r e ó m e r o s , s e p r o d u jo p o r m e d io d e lo sIntermediario 23<, d e l>Intermediario 25<y d e 2 , 2 '- ( 1 , 4 , 7 , 10 ->t e t r a a z a c i c l o d o d e c a n - 1 , 7 - d i i l ) d i a c e t a t o d e d i- t e r c - b u t i lo [ 162148 - 48 - 3 ] .

L C - M S ( P r o c e d i m ie n t o 3 ) : T r = 0 , 72 - 0 , 77 m i n ; M S ( E S I p o s ) : m /z = 412 , 6 [M 2 H ]+ , 824 , 2 [M H ] . L o s p a t r o n e s d e is ó t o p o s c o i n c id e n c o n lo s v a l o r e s t e ó r ic o s p a r a e l c o m p l e j o d e g a d o l in io c o r r e s p o n d ie n t e .

Ejemplo 46

2 , 2 ' , 2 " - ( 10 - { 1 - c a r b o x i - 2 - [ 4 - ( 2 , 2 , 3 , 3 - t e t r a f l u o r o p r o p o x i ) f e n i l ] e t i l } - 1 , 4 , 7 , 10 - t e t r a a z a c i c l o d o d e c a n - 1 , 4 , 7 -t r i i l ) t r ia c e t a t o d e g a d o l in io

E l c o m p u e s t o d e l t ít u lo s e p r o d u jo p o r m e d io d e lo s p r o c e d im i e n t o s d e s c r ip t o s e n la p r e s e n t e a p a r t ir d e lIntermediario 23.

Ejemplo 47

2 , 2 ' , 2 " - ( 10 - { ( 1 R ) - 1 - c a r b o x i- 2 - [ 4 - ( 2 , 2 , 2 - t r i f l u o r o e t o x i ) f e n i l ] e t i l } - 1 , 4 , 7 , 10 - t e t r a a z a c i c l o d o d e c a n - 1 , 4 , 7 - t r i i l ) t r ia c e t a t o d e g a d o l in io

El compuesto del título se produjo por medio de los procedimientos descriptos en la presente a partir de 4-(2,2,2-trifluoroetoxi)-benzaldehído ([76579-46-9]).

LC-MS (Procedimiento 3): Tr = 0,66min; MS (ESIpos): m/z = 374,6 [M+2H]++, 748,2 [M+H]+. Los patrones de isótopos coinciden con los valores teóricos para el complejo de gadolinio correspondiente.

Ejemplo 48

2,2',2"-{10-[1-carboxi-2-(4-propoxifenil)etil]-1,4,7,10-tetraazaciclododecan-1,4,7-triil}triacetato de gadolinio

El compuesto del título se produjo por medio de los procedimientos descriptos en la presente a partir de 4-propoxi-benzaldehído ([5736-85-6]).

LC-MS (Procedimiento 3): Tr = 0,64min; MS (ESIpos): m/z = 354,7 [M+2H]++, 708,3 [M+H]+. Los patrones de isótopos coinciden con los valores teóricos para el complejo de gadolinio correspondiente.

Ejemplo 49

Paso 1

(2S)-2-{7-[(2R)-3-terc-butoxi-1-metoxi-1-oxopropan-2-il]-4-[(2S)-3-terc-butoxi-1-metoxi-1-oxopropan-2-il]-1,4,7,10-tetraazaciclododecan-1-il}-5-{4-[2-(2-etoxietoxi) etoxi]fenil}pentanoato de metilo

Se disolvió (2S)-2-{7-[(2R)-3-terc-butoxi-1-metoxi-1-oxopropan-2-il]-1,4,7,10-tetraazaciclododecan-1-il}-5-(4-[2-(2-etoxietoxi)etoxi]fenil}pentanoato de metilo, (Ejemplo 35 - Paso 3), (960 mg, 1,47 mmol) en CHCl3 (40 ml) y se añadió DIPEA( 260 pl, 1,5 mmol). Se añadió (2R)-3-terc-butoxi-2-[(trifluorometanosulfonil)oxi]propanoato de metilo,Intermediario 27, (363 mg, 1,18 mmol) en CHCl3 (1 ml) y la mezcla se agitó a TA durante la noche. La reacción se combinó con el experimento piloto (100 mg), se lavó con agua y NaCl sat, se filtró a través de un filtro repelente al agua y se concentró bajo presión reducida. El residuo (1,66g) se absorbió sobre Isolute y se sometió a cromatografía RP (SNAP C18 de 120 g, 50 ml/min, A = agua/0,1% ácido fórmico, B = MeCN, 10%B 2CV, 10%B a 26%B en 2,6CV, 25%B 3,8CV, 26%B a 45%B en 5,2CV, 45%B 4,4CV, 45%B a 80%B en 10CV, 80%B 2CV, 225/276 nm). Las fracciones interesantes se agruparon, el MeCN se eliminó bajo presión reducida y el producto se extrajo con DCM. Se obtuvieron tres fracciones:

F r a c c i ó n 1 : 330 m g ( 31 % , M a t e r ia l d e p a r t id a s in r e a c c io n a r ) .

F r a c c i ó n 3 : 6 0 m g ( 4 % , p r o d u c t o d e d o b le a lq u i l a c ió n ) .

F r a c c i ó n 2 : 320 m g ( 24 % , c o m p u e s t o d e l t ít u lo ).

R o t a c i ó n e s p e c í f i c a : a D 20 = 13 , 32 ° / - 0 , 40 ° ( c = 1 , C H C l 3 ).

L C - M S ( P r o c e d i m ie n t o 2 ) : T r = 1 , 40 m in ; M S ( E S I p o s ) : m /z = 812 [M H ]+ .

L C - M S ( P r o c e d i m ie n t o 3 ) : T r = 1 , 20 m in ( 96 % D A D ) ; M S ( E S I p o s ) : m /z = 406 [M 2 H ]+ , 811 [M H ]+.

1 H R M N ( C D C la , 400 M H z ) : 6 ( p p m ) 7 , 05 (d ,J= 7 , 3 H z , 2 H ) , 6 , 79 - 6 , 84 (m , 2 H ) , 4 , 10 (d d ,J= 5 ,6 , 4 , 3 H z , 2 H ) , 3 , 84 ( d d ,J= 5 ,6 , 4 , 3 H z , 2 H ) , 3 , 49 - 3 , 76 (m , 21 H ) , 2 , 53 - 3 , 35 (m , 19 H ) , 1 , 81 - 2 , 17 (m , 4 H ) , 1 ,21 (t,J= 7 , 0 H z , 3 H ) , 1 , 17 ( s , 9 H ) , 1 , 13 - 1 , 16 (m , 9 H ) .

13C R M N ( C D C la , 101 M H z ) : 6 ( p p m ) 173 , 3 , 172 , 0 , 171 , 5 , 157 , 4 , 134 , 4 , 129 , 6 ( 2 C ) , 114 , 9 ( 2 C ) , 74 , 5 , 74 , 0 , 71 , 2 , 70 , 2 , 70 , 1 , 67 , 8 , 6 7 , 1 , 65 , 3 ( a , 2 C ) , 62 , 0 ( a ) , 61 , 6 ( a ) , 60 , 6 ( a ) , 53 , 8 ( a ) , 52 , 2 ( a ) , 52 , 1 , 52 , 0 , 51 , 9 , 50 , 1 ( a ) , 49 , 0 ( a ) , 48 , 2 ( a ) , 47 , 7 ( a ) , 46 , 7 ( a ) , 35 , 1 , 30 , 2 ( a ) , 29 , 3 , 27 , 8 , 27 , 8 , 15 , 5.

Paso 2

( 2 S ) - 2 - { 4 , 7 - b is [ ( 2 R ) - 3 - t e r c - b u t o x i- 1 - m e t o x i- 1 - o x o p r o p a n - 2 - i l ] - 10 - [ ( 2 S ) - 3 - t e r c - b u t o x i- 1 - m e t o x i- 1 - o x o p r o p a n - 2 -i l ] - 1 , 4 , 7 , 10 - t e t r a a z a c i c l o d o d e c a n - 1 - i l } - 5 - { 4 - [ 2 - ( 2 - e t o x i e t o x i ) e t o x i] f e n i l } p e n t a n o a t o d e m e t ilo

S e d is o lv ió ( 2 S ) - 2 - { 7 - [ ( 2 R ) - 3 - t e r c - b u t o x i - 1 - m e t o x i - 1 - o x o p r o p a n - 2 - i l ] - 4 - [ ( 2 S ) - 3 - t e r c - b u t o x i - 1 - m e t o x i - 1 -o x o p r o p a n - 2 - i l ] - 1 , 4 , 7 , 10 - t e t r a a z a c i c l o d o d e c a n - 1 - i l } - 5 - { 4 - [ 2 - ( 2 - e t o x i e t o x i ) e t o x i] f e n i l } p e n t a n o a t o d e m e t ilo ( 259 m g , 320 p m o l) e n M e C N , s e a ñ a d ie r o n ^ C o 3 ( 66 , 3 m g , 480 p m o l) y ( 2 S ) - 3 - t e r c - b u t o x i- 2 -<[ ( t r i f lu o r o m e t a n o s u lf o n i l ) o x i] p r o p a n o a t o d e m e t ilo ,>Intermediario 28<, ( 16 0 m g , 4 1 6 p m o l) . L a m e z c l a s e a g it ó a>T A d u r a n t e la n o c h e y s e c o m b i n ó c o n e l e x p e r i m e n t o p ilo t o ( 13 m g ). L o s s ó l i d o s s e e l im in a r o n p o r m e d io d e f i lt r a c ió n , e l f i lt r a d o s e c o n c e n t r ó b a jo p r e s i ó n r e d u c i d a y e l r e s i d u o s e r e p a r t ió e n t r e D C M y a g u a . L a f a s e o r g á n i c a s e la v ó c o n N a C l s a t . , s e s e c ó ( N a 2S O 4) y s e c o n c e n t r ó p a r a p r o p o r c i o n a r 556 , 1 m g d e l c o m p u e s t o d e l t ít u lo c o m o r e s i d u o m a r r ó n . E l m a t e r ia l c r u d o s e u t i l iz ó c o m o t a l e n e l p a s o s ig u ie n t e .

Paso 3

( 2 S ) - 2 - { 4 , 7 - b is [ ( 2 R ) - 3 - h i d r o x i - 1 - m e t o x i - 1 - o x o p r o p a n - 2 - i l ] - 10 - [ ( 2 S ) - 3 - h i d r o x i - 1 - m e t o x i - 1 - o x o p r o p a n - 2 - i l ] -1 , 4 , 7 , 10 - t e t r a a z a c i c l o d o d e c a n - 1 - i l } - 5 - { 4 - [ 2 - ( 2 - e t o x i e t o x i ) e t o x i] f e n i l } p e n t a n o a t o d e m e t ilo

( 2 S ) - 2 - { 4 , 7 - b is [ ( 2 R ) - 3 - t e r c - b u t o x i- 1 - m e t o x i- 1 - o x o p r o p a n - 2 - i l ] - 10 - [ ( 2 S ) - 3 - t e r c - b u t o x i- 1 - m e t o x i- 1 - o x o p r o p a n - 2 -i l ] - 1 , 4 , 7 , 10 - t e t r a a z a c i d o d o d e c a n - 1 - i l } - 5 - { 4 - [ 2 - ( 2 - e t o x i e t o x i ) e t o x i] f e n i l } p e n t a n o a t o d e m e t ilo ( 545 m g ) y H C l ( 1 , 3 m l, 4 , 0 M , e n d io x a n o , 5 , 1 m m o l) y a l g u n a s g o t a s d e a g u a s e a g it a r o n a 80 ° C d u r a n t e 4 h . L a m e z c l a s e c o n c e n t r ó b a jo p r e s i ó n r e d u c i d a y s e c o m b in ó c o n e l p r o d u c t o c r u d o d e u n e x p e r i m e n t o a n t e r io r ( 11 m g ) p a r a p r o p o r c i o n a r 324 m g d e l c o m p u e s t o d e l t ít u lo c o m o s ó l id o r o jo - m a r r ó n , e l c u a l s e u t i l iz ó c o m o t a l e n e l p a s o s ig u ie n t e .

Paso 4

á c id o ( 2 S ) - 2 - { 4 , 7 - b i s [ ( 1 R ) - 1 - c a r b o x i - 2 - h i d r o x i e t i l ] - 10 - [ ( 1 S ) - 1 - c a r b o x i - 2 - h i d r o x i e t i l ] - 1 , 4 , 7 , 10 -t e t r a a z a c i c lo d o d e c a n - 1 - i l } - 5 - { 4 - [ 2 - ( 2 - e t o x ie t o x i ) e t o x i ] f e n i l } p e n t a n o i c o

L C - M S ( P r o c e d i m ie n t o 2 ) : T r = 0 , 75 m in ; M S ( E S l p o s ) : m /z = 745 [M H ]+ .

Paso 5

( 2 R , 2 'R ) - 2 , 2 '- { 7 - [ ( 1 S ) - 1 - c a r b o x i - 4 - { 4 - [ 2 - ( 2 - e t o x ie t o x i ) e t o x i ] f e n i l } b u t i l ] - 10 - [ ( 1 S ) - 1 - c a r b o x i l a t o - 2 - h i d r o x i e t i l ] -1 , 4 , 7 , 10 - t e t r a a z a c i c l o d o d e c a n - 1 , 4 - d i i l } b i s ( 3 - h i d r o x i p r o p a n o a t o ) d e g a d o lin io

Se colocaron ácido (2S)-2-{4,7-bis[(1R)-1-carboxi-2-hidroxietil]-10-[(1S)-1-carboxi-2-hidroxietil]-1,4,7,10-tetraazaciclododecan-1-il}-5-{4-[2-(2-etoxietoxi)etoxi]fenil}pentanoico (116 mg, 156 |jmol) y Gd<2>O<3>(25,4 mg, 70,1 jm ol) en agua (2,0 ml) y se calentaron a 100°C durante 8h. Se añadió Chelex100 (forma sódica, aprox. 3 g) y la mezcla se agitó a TA durante 4h. El pH se ajustó hasta 6 (hidróxido de amonio, 25% en agua) y se filtró. El filtrado se concentró bajo presión reducida y se purificó por medio de cromatografía RP (SNAP C18 de 30 g, 25 ml/min, A = agua, B = MeCN, 0%B 6CV, 0%B a 50%B 15CV, 216/275 nm). Las fracciones interesantes se combinaron para proporcionar el compuesto del título (95,2 mg, 67 %).

LC-MS (Procedimiento 2): Tr = 0,76 min; MS (ESIpos): m/z = 899 [M+H]+.

LC-MS (Procedimiento 3): Tr = 0,69 min (100% DAD); MS (ESIpos): m/z = 450 [M 2H]++, 600 [2M 3H]3+, 891 [2M<2>H - H<2>O]2+, 900 [M H]+, 1349 [3M 2H]2+. Los patrones de isótopos observados son acordes con un complejo de gadolinio.

Ejemplo 50

Paso 1

(2R)-3-terc-butoxi-2-(4,7-dibencil-1,4,7,10-tetraazaciclododecan-1-il)propanoato de metilo

Se disolvió 1,4-dibencil-1,4,7,10-tetraazaciclododecano (1,20 g, 3,40 mmol; [216101-03-0]) en MeCN (20 ml), se añadieron DIPEA (890 jl, 5,1 mmol), trifluormetanosulfonato de sodio (586 mg, 3,40 mmol) y una solución de (2S)-3-terc-butoxi-2-[(trifluorometanosulfonil)oxi]propanoato de metilo,Intermediario 28, (735 mg, 2,38 mmol) en MeCN (1 ml). La mezcla se agitó a TA durante 5h. La mezcla se combinó con el experimento previo (127 mg) y se concentró bajo presión reducida. El residuo (3,5 g) se repartió entre DCM y agua. La fase acuosa se extrajo con DCM, las fases orgánicas combinadas se lavaron con NaCl sat., se filtraron a través de un repelente al agua y se concentraron bajo presión reducida para proporcionar 2,10 g del compuesto del título como producto crudo rojo-marrón. Éste se absorbió sobre Isolute™ y se sometió a cromatografía RP (SNAP C18 de 120 g, 50 ml/min, A=agua/0,1% ácido fórmico, B = MeCN, 5%B 3CV, 5%B a 8%B en 0,9CV, 8%B 2,1V, 8%B a 16%B 2,7CV, 16%B 2,1CV, 16%B a 22%B en 2,1CV, 22%B 1,5CV, 22%B a 25%B en 0,8CV, 25%B 1,2CV, 25%B a 50%B en 8,3CV, 50%B a 60%B en 5CV, 210 nm). Las fracciones interesantes se combinaron y se liofilizaron para proporcionar 1,126 g (65%) del compuesto del título en tres fracciones:

Fracción 1: 227 mg (13%).

Rotación Específica: 1,7° (CHCL3, 20°C, 589 nm).

LC-MS (Procedimiento 3): Tr = 0,69 min (94% DAD); MS (ESIpos): m/z = 256 [M 2H]++, 455 [M H - C<4>Hs]+, 511 [M H]+.

1H RMN (CDCla, 400 MHz): 6 (ppm) 7,23-7,36 (m, 8H), 7,07 (d, a, J = 7 Hz, 2H), 3,59-3,80 (m, 9H), 2,51-3,51 (m, 17H), 1,17 (s, 9H).

13C RMN (CDCla, 101 MHz): 6 (ppm) 171,7, 138,4, 135,4 (a), 129,8 (a, 2C), 129,6 (2C), 128,5 (2C), 128,4 (2C), 127,8, 127,4 (a), 73,6, 67,0 (a), 62,7 (a), 61,4 (a), 51,6 (a, 2C), 51,1 (a), 50,6 (a, 2C), 50,2 (a), 50,0 (a), 49,2 (a), 48,8 (a), 48,0 (a), 27,3 (3C).

Fracción 2: 516 mg (30%)

Rotación Específica: -7,8° (CHCL3, 20°C, 589 nm).

LC-MS (Procedimiento 2): Tr = 0,86 min; MS (ESIpos): m/z = 511 [M+H]+.

LC-MS (Procedimiento 3): Tr = 0,70 min (100% DAD); MS (ESIpos): m/z = 256 [M 2H]++, 455 [M H -C4Hb]+, 511 [M H]+.1

1H RMN (CDCls, 400 MHz): 6 (ppm) 6,94-7,47 (m, 10H), 2,55-4,29 (m, 26H), 1,16 (s a, 9H).

Fracción 3: 383 mg (22%)

Rotación Específica: -7,7° (CHCL3, 20°C, 589 nm).

LC-MS (Procedimiento 2): Tr = 0,85 min; MS (ESIpos): m/z = 511 [M+H]+.

LC-MS (Procedimiento 3): Tr = 0,69 min (95% DAD); MS (ESIpos): m/z = 256 [M 2H]++, 455 [M H - C ^ r , 511 [M H]+.

A pesar de sus diferentes tiempos de retención, todas las fracciones se comportaron de forma idéntica en las transformaciones posteriores.

Paso 2

(2S)-2-{4,7-dibencil-10-[(2R)-3-terc-butoxi-1-metoxi-1-oxopropan-2-il]-1,4,7,10-tetraazaciclododecan-1-il}-5-{4-[<2>-(<2>-etoxietoxi)etoxi]fenil}pentanoato de metilo

Se disolvió (2R)-3-terc-butoxi-2-(4,7-dibencil-1,4,7,10-tetraazaciclododecan-1-il)propanoato de metilo (450 mg, 881 |jmol, Fracción 2, del paso 1) en MeCN en (15 ml) y se añadió carbonato de potasio (207 mg, 1,50 mmol). Se añadió una solución de (2R)-5-{4-[2-(2-etoxietoxi)etoxi]fenil}-2-[(trifluorometanosulfonil)oxi]pentanoato de metilo (Ejemplo 15 -Paso 1), (781 mg, 1,32 mmol) en MeCN (1 ml) y la mezcla se agitó a 60°C durante 3h. La mezcla se combinó con los dos experimentos previos (10,5 mg cada uno), los sólidos se eliminaron por medio de filtración, el filtrado y los lavados (MeCN) se combinaron y se concentraron bajo presión reducida. El residuo (1,2 g) se repartió entre DCM y agua. La fase acuosa se extrajo con DCM, las fases orgánicas combinadas se lavaron con NaCl sat., se filtraron a través de un repelente al agua y se concentraron bajo presión reducida para proporcionar 727 mg del compuesto del título como producto crudo rojo-marrón. Se trataron 541 mg (otras fracciones del paso 1) de la misma manera para proporcionar además 1,51 g de producto crudo, los cuales se utilizaron como tales en el paso siguiente.

Paso 3

(2S)-2-{4-[(2R)-3-terc-butoxi-1-metoxi-1-oxopropan-2-il]-7,10-bis[(2S)-3-terc-butoxi-1-metoxi-1-oxopropan-2-il]-1,4,7,10-tetraazaciclododecan-1-il}-5-{4-[2-(2-etoxietoxi) etoxi]fenil}pentanoato de metilo

Se disolvió (2S)-2-{4-[(2R)-3-terc-butoxi-1-metoxi-1-oxopropan-2-il]-1,4,7,10-tetraazaciclododecan-1-il}-5-{4-[2-(2-etoxietoxi)etoxi]fenil}pentanoato de metilo (1,65 g, 2,40 mmol) en MeCN (30 ml) y se añadió carbonato de potasio (1,16 g, 8,40 mmol), seguido por una solución de (2R)-3-terc-butoxi-2-[(trifluorometanosulfonil)oxi]propanoato de metilo,Intermediario 26, (2,78 g, 7,20 mmol) en MeCN (50 ml). La mezcla se agitó a TA durante la noche, los sólidos se eliminaron por medio de filtración y el filtrado y los lavados (MeCN) se combinaron y se concentraron bajo presión reducida. El residuo (6,3 g) se repartió entre DCM y

R o t a c i ó n e s p e c í f i c a : a o 20 = - 17 , 28 ° / - 0 , 62 ° ( c = 1 , c lo r o f o r m o ) .

L C - M S ( S t a n d a r d A g i le n t ) : T r = 1 , 27 m in ( 67 % D A D ) ; M S ( E S l p o s ) : m /z = 485 [M 2 H ]+ , 970 [M H ]+; 1 , 32 m in ( 22 % D A D ) ; 485 [M 2 H ]+ , 970 [M H ]+.

1 H R M N ( C D C la , 400 M H z ) : 8 ( p p m ) 7 , 06 (d , J = 8 , 6 H z , 2 H ) , 6 , 78 - 6 , 86 (m , 2 H ) , 4 , 08 - 4 , 12 (m , 2 H ) , 3 , 82 - 3 , 87 (m , 2 H ) , 3 , 59 - 3 , 77 (m , 20 H ) , 3 , 47 - 3 , 57 (m , 7 H ) , 3 , 25 - 3 , 34 (m , 1 H ) , 2 , 42 - 3 , 01 (m , 16 H ) , 1 , 89 - 2 , 02 (m , 2 H ) , 1 , 53 1 , 78 (m , 4 H ) , 1 , 21 (t, J = 7 , 0 H z , 3 H ) , 1 , 11 - 1 , 18 (m , 27 H ) .

13C R M N ( C D C la , 101 M H z ) : 8 ( p p m ) 174 , 8 ( a ) , 173 , 3 ( a , 3 C ) , 157 , 8 , 135 , 4 , 130 , 2 ( 2 C ) , 115 , 4 ( 2 C ) , 74 , 0 (a , 2 C ) , 74 , 0 ( a ) , 71 , 8 , 70 , 8 , 70 , 8 , 68 , 4 , 67 , 7 , 64 , 7 ( a ) , 64 , 7 ( a ) , 64 , 2 ( a ) , 64 , 1 ( a ) , 62 , 8 ( a ) , 62 , 7 ( a ) , 62 , 2 ( a ) , 52 , 7 ( a , 2 C ) , 52 , 2 ( a , 2 C ) , 52 , 0 ( a ) , 51 , 9 , 51 , 9 , 51 , 8 ( a , 2 C ) , 51 , 7 ( a ) , 51 , 4 ( a ) , 50 , 8 ( a ) , 35 , 9 ( a ) , 30 , 7 ( a ) , 29 , 5 ( a ) , 28 , 3 ( 3 C ) , 28 , 3 ( 6 C ) , 16 , 1.

Paso 4

( 2 S ) - 5 - { 4 - [ 2 - ( 2 - e t o x ie t o x i ) e t o x i ] f e n i l } - 2 - { 4 - [ ( 2 R ) - 3 - h id r o x i - 1 - m e t o x i - 1 - o x o p r o p a n - 2 - i l ] - 7 , 10 - b i s [ ( 2 S ) - 3 - h i d r o x i - 1 -m e t o x i- 1 - o x o p r o p a n - 2 - i l ] - 1 , 4 , 7 , 10 - t e t r a a z a c ic lo d o d e c a n - 1 - i l } p e n t a n o a t o d e m e t ilo

( 2 S ) - 2 - { 4 - [ ( 2 R ) - 3 - t e r c - b u t o x i- 1 - m e t o x i- 1 - o x o p r o p a n - 2 - i l ] - 7 , 10 - b is [ ( 2 S ) - 3 - t e r c - b u t o x i- 1 - m e t o x i- 1 - o x o p r o p a n - 2 -i l ] - 1 , 4 , 7 , 10 - t e t r a a z a c i c l o d o d e c a n - 1 - i l } - 5 - { 4 - [ 2 - ( 2 - e t o x i e t o x i ) e t o x i] f e n i l } p e n t a n o a t o d e m e t ilo ( 332 m g , 343 j m o l ) s e d is o lv ió e n 1 , 4 - d io x a n o , s e a ñ a d ie r o n u n a s p o c a s g o t a s d e a g u a y H C l ( 1 , 4 m l, 4 , 0 M e n d io x a n o , 5 , 5 m m o l) y la m e z c l a s e a g it ó a 80 ° C d u r a n t e 4 h . L a m e z c l a s e c o n c e n t r ó b a jo p r e s i ó n r e d u c i d a p a r a p r o p o r c i o n a r e l c o m p u e s t o d e l t ít u lo ( 285 m g ) c o m o p r o d u c t o c r u d o , e l c u a l s e u t i l iz ó e n e l p a s o s ig u ie n t e .

Paso 5

á c id o ( 2 S ) - 2 - { 4 - [ ( 1 R ) - 1 - c a r b o x i - 2 - h i d r o x i e t i l ] - 7 , 10 - b i s [ ( 1 S ) - 1 - c a r b o x i - 2 - h i d r o x i e t i l ] - 1 , 4 , 7 , 10 -t e t r a a z a c i c lo d o d e c a n - 1 - i l } - 5 - { 4 - [ 2 - ( 2 - e t o x ie t o x i ) e t o x i ] f e n i l } p e n t a n o i c o

S e d is o lv ió ( 2 S ) - 5 - { 4 - [ 2 - ( 2 - e t o x ie t o x i ) e t o x i ] f e n i l } - 2 - { 4 - [ ( 2 R ) - 3 - h id r o x i - 1 - m e t o x i - 1 - o x o p r o p a n - 2 - i l ] - 7 , 10 - b i s [ ( 2 S ) -3 - h id r o x i - 1 - m e t o x i - 1 - o x o p r o p a n - 2 - i l ] - 1 , 4 , 7 , 10 - t e t r a a z a c i c l o d o d e c a n - 1 - i l } p e n t a n o a t o d e m e t ilo ( 285 m g , 342 | j m o l ) e n T H F ( 2 , 0 m l) y s e a ñ a d ió u n a s o l u c ió n d e h id r ó x id o d e litio ( 49 , 2 m g , 2 , 05 m m o l) e n a g u a ( 2 , 0 m l). L a m e z c l a s e a g it ó a T A d u r a n t e 4 h y lu e g o s e c a le n t ó h a s t a 80 ° C d u r a n t e 3 h . L a m e z c l a s e c o n c e n t r ó b a jo p r e s ió n reducida para proporcionar el compuesto del título como producto crudo rojo-marrón (302,9 mg), el cual se utilizó como tal en el paso siguiente.

Paso 6

( 2 S , 2 'S ) - 2 , 2 '- { 7 - [ ( 1 S ) - 1 - c a r b o x i- 4 - { 4 - [ 2 - ( 2 - e t o x ie t o x i ) e t o x i ] f e n i l } b u t i l ] - 10 - [ ( 1 R ) - 1 - c a r b o x i l a t o - 2 - h id r o x ie t i l ] -1 , 4 , 7 , 10 - t e t r a a z a c i c l o d o d e c a n - 1 , 4 - d i i l } b i s ( 3 - h i d r o x i p r o p a n o a t o ) d e g a d o lin io

R o t a c i ó n E s p e c í f i c a : 1 , 1 ° ( H 2O , 20 ° C , 589 n m ).

L C - M S ( P r o c e d i m ie n t o 2 ) : T r = 0 , 77 m in ; M S ( E S l p o s ) : m /z = 900 [M H ]+ .

L C - M S ( P r o c e d i m ie n t o 3 ) : T r = 0 , 71 m in ( 100 % D A D ) ; M S ( E S l p o s ) : m /z = 450 , 8 [M 2 H ]+ , 900 , 5 [M H ]+; 134 9 [ 3 M 2 H ] 2+. E l p a t r ó n d e is ó t o p o s o b s e r v a d o e s a c o r d e c o n u n c o m p le j o d e g a d o lin io .

Compuestos de Referencia

Compuesto de referencia 1

P r i m o v i s t ® ( G d - E O B - D T P A , g a d o x e t a t o d is ó d ic o , B a y e r A G , A l e m a n i a )

Compuesto de referencia 2

M u l t i H a n c e ® ( G d - B O P T A , á c id o g a d o b é n ic o , B r a c c o , It a lia )

Compuesto de referencia 3

G a d o v i s t ® / G a d a v i s t ® ( G d - D O 3 A - b u t r o l , g a d o b u t r o l , B a y e r A G , A le m a n i a )

Caracterización in vitro e in vivo de los compuestos de ejemplo

L o s e je m p l o s s e p r o b a r o n e n e n s a y o s s e l e c c i o n a d o s u n a o m á s v e c e s . C u a n d o s e p r o b a r o n m á s d e u n a v e z , lo s d a t o s s e in f o r m a n y a s e a c o m o v a l o r e s p r o m e d io o c o m o v a l o r e s d e la m e d ia n a , e n lo s q u e

• e l v a l o r p r o m e d io , a l q u e t a m b ié n s e h a c e r e f e r e n c i a c o m o v a l o r m e d io a r it m é t ic o , r e p r e s e n t a la s u m a d e lo s v a l o r e s o b t e n id o s d iv id id a p o r e l n ú m e r o d e v e c e s q u e s e h a p r o b a d o , y

• e l v a l o r d e la m e d ia n a r e p r e s e n t a e l n ú m e r o m e d io d e l g r u p o d e v a l o r e s c u a n d o s e c l a s i f ic a n e n o r d e n a s c e n d e n t e o d e s c e n d e n t e . S i e l n ú m e r o d e v a l o r e s e n e l c o n ju n t o d e d a t o s e s im p a r , la m e d ia n a e s e l v a l o r m e d io . S i e l n ú m e r o d e v a l o r e s e n e l c o n ju n t o d e d a t o s e s p a r , la m e d ia n a e s la m e d ia a r i t m é t ic a d e lo s d o s v a l o r e s m e d io s .

L o s e je m p l o s s e s in t e t iz a r o n u n a o m á s v e c e s . C u a n d o s e s in t e t iz a r o n m á s d e u n a v e z , lo s d a t o s a p a r t ir d e lo s e n s a y o s r e p r e s e n t a n lo s v a l o r e s p r o m e d io o lo s v a l o r e s d e la m e d ia n a c a l c u l a d o s u t i l iz a n d o c o n j u n t o s d e d a t o s o b t e n id o s a p a r t ir d e la s p r u e b a s d e u n o o m á s lo t e s s in t é t ic o s .

Ejemplo A - Solubilidad en agua

L a s o l u b i l i d a d e n a g u a e x p lo r a t o r i a d e lo s c o m p u e s t o s s e d e t e r m in a a t e m p e r a t u r a a m b ie n t e ( 20 ° C ) e n 0 , 5 m l d e s o l u c ió n t a m p ó n ( 10 m M T r is - H C l , p H 7 , 4 ) e n lo s t u b o s d e m ic r o c e n t r íf u g a ( E p p e n d o r f , 2 , 0 m l t a p a s d e c ie r r e s e g u r o ) . L o s c o m p u e s t o s s ó l id o s s e a ñ a d ie r o n p a s o a p a s o a la s o l u c ió n t a m p ó n . S e a ñ a d e m á s s u s t a n c i a u n a v e z q u e s e d is u e l v e t o d o e l m a t e r ia l e n s u s p e n s i ó n h a s t a q u e s e a l c a n z a u n e q u i l ib r io e n t r e la s u s t a n c i a n o d is u e lt a y la d is u e lt a . L a s u s p e n s i ó n s e m e z c ló u t i l iz a n d o u n a g it a d o r ( H e id o lp h R e a x 2000 ) y s e t r a t ó 5 m in u t o s e n u n b a ñ o d e u l t r a s o n i d o s ( B a n d e l in , S o n o r e x S u p e r R K 255 H ) . L a c o n c e n t r a c i ó n d e G a d o li n i o d e la s u s t a n c i a d e p r u e b a e n la s o l u c ió n c l a r a s e m id e p o r m e d io d e I C P - M S . L o s r e s u lt a d o s s e s in t e t iz a n e n la T a b l a 1.

Tabla 1:<S o l u b i l i d a d e s d e lo s c o m p u e s t o s e n t a m p ó n a c u o s o a 2 0 ° C ( p H 7 , 4 ) .>

n .d . n o d e t e r m in a d a

Ejemplo B - Estabilidad química

Ejemplo C - Estabilidad del Complejo (Transmetalación)

N o s e o b s e r v ó n in g ú n c a m b io e n e l t ie m p o d e r e la ja c i ó n T 1 p a r a lo s c o m p u e s t o s i n v e s t ig a d o s d e s p u é s d e 3 d d e in c u b a c i ó n , lo q u e in d i c a q u e lo s c o m p u e s t o s s o n a lt a m e n t e e s t a b l e s f r e n t e a la d is o c i a c ió n d e l c o m p le jo d e G d b a jo e s t a s c o n d i c i o n e s d e e s t r é s . A e f e c t o s d e c o m p a r a c ió n d e lo s r e s u l t a d o s d e a l g u n o s e je m p l o s , e l c o m p u e s t o d e r e f e r e n c i a 3 ( R C 3 ) m a c r o c íc l i c o a lt a m e n t e e s t a b l e , e l m e n o s e s t a b l e R C 1 y e l m e n o s e s t a b l e R C 2 s e in c lu y e n e n la T a b l a 2. L o s v a l o r e s e n % d e s p u é s d e 72 h d e in c u b a c i ó n s e s in t e t iz a n e n la T a b l a 2.

Tabla 2:<E s t a b i l id a d d e t r a n s m e t a l a c ió n [% ] d e lo s a g e n t e s d e c o n t r a s t e p a r a m a g n é t i c o s d u r a n t e 72 h o r a s ( 2 , 5>m M Z n 2+, 26 m M t a m p ó n f o s f a t o , 37 ° C , p H 7 , 4 ) .

Ejemplo D - Mediciones de relaxividad a 1,4 T

C a d a m e d ic ió n d e r e la x i v i d a d s e l le v ó a c a b o u t i l iz a n d o t r e s c o n c e n t r a c i o n e s d e G d d if e r e n t e s ( 3 c o n c e n t r a c i o n e s e n t r e 0 , 05 y 2 m M ). L o s t ie m p o s d e r e la ja c i ó n T 1 y T 2 d e lo s c o m p u e s t o s d e e je m p lo 1 a 10 s e m id ie r o n e n m e d io s d if e r e n t e s p o r e je m p lo e n a g u a y p l a s m a h u m a n o . P r e p a r a c i ó n d e p l a s m a h u m a n o : P a r a c a d a e x p e r im e n t o s e e x t r a jo s a n g r e f r e s c a d e u n v o lu n t a r io u t i l iz a n d o t u b o s d e c it r a t o d e 10 m l ( S a r s t e d t S -M o n o v e t t e 02.1067.001 , 10 m l, C it r a t o ) . L o s t u b o s d e c it r a t o d e 10 m l s e in v ir t ie r o n c o n c u id a d o 10 v e c e s p a r a m e z c l a r la s a n g r e y e l a n t ic o a g u la n t e y s e c e n t r i f u g a r o n d u r a n t e 15 m in a 1811 g a T A ( E p p e n d o r f , C e n t r í f u g a 58 10 R ) .

L a s r e la x i v i d a d e s r ( d o n d e i= 1 , 2 ) s e c a lc u l a r o n e n b a s e a lo s ín d i c e s d e r e la ja c i ó n R i m e d id o s e n a g u a y p la s m a :

ri = ( R i - R i p ) / CGd

d o n d e R i p r e p r e s e n t a e l ín d i c e d e r e la ja c i ó n d e l s o l v e n t e r e s p e c t i v o y C G d la c o n c e n t r a c i ó n d e l c o m p u e s t o n o r m a l i z a d a c o n r e s p e c t o a l G a d o lin io . L a s c o n c e n t r a c i o n e s d e G a d o l i n i o d e la s s o l u c i o n e s i n v e s t ig a d a s s e v e r i f i c a r o n p o r m e d io d e E s p e c t r o m e t r í a d e M a s a s c o n P l a s m a A c o p l a d o I n d u c t iv a m e n t e ( I C P - M S A g i le n t 750 0 a , W a ld b r o n n , A le m a n i a ) . L o s v a l o r e s d e r e la x i v i d a d d e t e r m in a d o s s e s in t e t iz a n e n la T a b l a 3.

Tabla 3:<R e l a x i v i d a d e s d e lo s c o m p u e s t o s in v e s t ig a d o s e n a g u a y p l a s m a h u m a n o a 1 , 41 T y r e l a x i v i d a d e s d e>lo s C o m p u e s t o s d e r e f e r e n c i a 1 - 3 ( R C 1 - R C 3 ) a 1 , 5 T e n a g u a y p l a s m a b o v in o . T o d o s lo s v a l o r e s s e m id e n a 37 ° C y s e n o r m a li z a n c o n r e s p e c t o a G d y s e p r o p o r c i o n a n e n l m m o l'1 s -1.

( c o n t i n u a c i ó n )

Ejemplo E - Captación en hepatocitos de rata recién aislados

L o s h e p a t o c it o s d e r a t a r e c ié n a i s l a d o s s e r e c ib ie r o n c o m o s e d e s c r ib ió a n t e r io r m e n t e ( P a p e l e u P . e t a l. ( 2006 ) Is o la t io n o f R a t H e p a t o c y t e s . E n : P h i l l ip s I . R . , S h e p h a r d E .A . ( e d s ) C y t o c h r o m e P 450 P r o t o c o ls . M e t h o d s in M o le c u la r B io lo g y , v o l 320. H u m a n a P r e s s , T o t o w a , N J . h t t p s : / / d o i . o r g / 10.1385 / 1 - 59259 - 998 - 2 : 229 ). L o s h e p a t o c it o s d e r a t a s e in c u b a r o n ( 2 , 5 105 c é l u l a s / p o c i l l o ) d u r a n t e 2 , 5 h a s t a 4 h e n p l a c a s d e 24 p o c i l lo s r e c u b i e r t a s d e c o l á g e n o ( F a . B e c k t o n D ic k in s o n B io c o a t , c e l l e n v ir o n m e n t s , C o l l a g e n I C e l l w a r e ) e n m e d io E d e W i l l ia m s ( F a . S i g m a W 1878 ) e n u n a i n c u b a d o r a ( 37 ° C , 5 % C O 2 y 95 % o x í g e n o ) . D e s p u é s d e la in c u b a c ió n , lo s h e p a t o c it o s a d h e r e n t e s s e la v a r o n u n a v e z c o n t a m p ó n d e t r a n s p o r t e d e c a r b o n a t o H e p e s a 37 ° C ( 500 p l / p o c il lo ) . L o s e le m e n t o s d e p r u e b a y R C 1 s e p r e p a r a r o n a p a r t ir d e s o l u c i o n e s m a d r e ( c o n c e n t r a c i ó n d e 180 a 500 m M ) e n t a m p ó n d e t r a n s p o r t e d e c a r b o n a t o H e p e s a p H 7 , 4 p a r a a l c a n z a r u n a c o n c e n t r a c i ó n f in a l d e 100 p m o l G d / l. L a c a p t a c ió n e s p e c í f i c a d e l e le m e n t o d e p r u e b a o R C l e n h e p a t o c it o s d e r a t a a t r a v é s d e O A T P 1 B 1 y O A T P 1 B 3 f u e c u e s t i o n a d a u t i l iz a n d o u n c o n o c id o in h ib id o r d e O A T P 1 B 1 / 1 B 3 ( R if a m p ic in a , F a . S i g m a R 3501 , e le m e n t o d e p r u e b a e in h ib id o r 1 :1 c a d a u n o 100 p M d e c o n c e n t r a c i ó n f in a l) . L a s p l a c a s d e h e p a t o c it o s d e r a t a p r e p a r a d a s s e in c u b a r o n c o n s o l u c i o n e s d e p r u e b a ( 500 p l/ p o c i l lo ) a 37 ° C d u r a n t e 10 m in u t i l iz a n d o u n t e r m o a g it a d o r ( F a . G r a n t B io , P H M P ) . S e r e a l iz a r o n t r i p l ic a d o s p a r a c a d a e le m e n t o d e p r u e b a . D e s p u é s d e la in c u b a c i ó n la s c é l u l a s s e la v a r o n u n a v e z c o n t a m p ó n P B S f r ío ( F a . G ib c o , D u l b e c c o s P B S ( ) ) . D e s p u é s d e l la v a d o lo s h e p a t o c it o s in t a c t o s s e l i s a r o n p o r m e d io d e la a d ic ió n d e 500 p l d e T r it o n - X 100 f r ío a l 0 , 01 % e n a g u a M il l ip o r e d u r a n t e 1 h . E l a g u a f u e r t e m e n t e h ip o o s m o la r p r o v o c ó la r u p t u r a d e la m e m b r a n a c e l u l a r y la l ib e r a c ió n d e l c o m p u e s t o d e G d in t r a c e lu la r . D e s p u é s d e 1 h s e a ñ a d ió 500 p l d e 10 n M E s t á n d a r d e t e r b io I C P - M S e n á c id o n ít r ic o a l 2 % y T r it ó n 100 a l 0 , 01 % a n t e s d e m e d ir la s c o n c e n t r a c i o n e s d e G a d o li n i o e n e l l i s a d o u t i l iz a n d o I C P - M S ( A g i le n t 8900 , S i n g le Q u a d , in t e g r . T ie m p o 0 , 3 s , s in g a s , 5 r e p e t i c io n e s , G d m /z 157 , T b m /z 159 ) . C o m o u n e s t á n d a r d e r e f e r e n c i a s e u t i l iz a R C 1 e n la m is m a p l a c a d e p o c i l lo s . L a c a p t a c ió n d e h e p a t o c it o s d e l c o m p u e s t o d e p r u e b a s e c a l c u l a e n r e la c ió n c o n R C 1 ( lo q u e d a c o m o r e s u lt a d o la u n id a d % d e l R C 1 ) . L o s r e s u lt a d o s d if e r e n t e s s e s in t e t iz a n e n la T a b l a 4.

Tabla 4:<C a p t a c ió n d e c o m p u e s t o s e n h e p a t o c it o s d e r a t a r e c ié n a i s l a d o s e n % e n c o m p a r a c ió n c o n e l>c o m p u e s t o d e r e f e r e n c i a 1 ( R C 1 , G d - E O B - D T P A ) .

( c o n t i n u a c i ó n )

Ejemplo F - Captación en células OATP1B1 HEK 293 transfectadas estables

S e u t i l iz a r o n ( L e o n h a r d t M e t a l. D r u g M e t a b D is p o s . 2010 J u l ; 38 ( 7 ) : 1024 - 8 ) c é l u l a s d e r iñ ó n e m b r io n a r io h u m a n o 293 e s t a b l e s h u m a n a s t r a n s f e c t a d a s c o n O A T P 1 B 1 ( O A T P 1 B 1 H E K 293 , S L C O 1 B 1 , E n t r e z G e n e ID : 10599 ) . S e u t i l iz ó e l s ig u ie n t e m e d io d e c u lt iv o : 500 m l d e D M E M ( M e d io E a g l e M o d if ic a d o d e D u l b e c c o - a lto e n G l u c o s a , D 6429 ) , 50 m l d e F C S ( s u e r o b o v in o f e t a l, F a . S i g m a , F 7524 ) , 5 , 8 m l d e G 418 ( G e n e t i c i n a , F a . G ib c o 10131 - 027 ) y 5 m l d e P e n - S t r e p . ( P e n i c i l i n a - E s t r e p t o m ic in a , F a . G ib c o , R e f 15140 - 122 ) . L a s c é l u la s c r i o p r e s e r v a d a s s e d e s c o n g e l a r o n b r e v e m e n t e e n b a ñ o d e a g u a y s e d ilu y e r o n e n 10 m l d e m e d io d e c u lt iv o c a l i e n t e ( 37 ° C ) . D e s p u é s d e l c a m b io d e m e d io la s c é l u l a s s e c u lt iv a r o n d u r a n t e 3 d e n u n m a t r a z d e c u lt iv o c e l u l a r d e 25 c m 2. D e s p u é s d e 3 a 5 d la s c é l u l a s s e t r a n s f i r i e r o n a m a t r a c e s d e 75 c m 2. P a r a la d iv is ió n , la s c é l u l a s s e in c u b a r o n c o n 1 , 5 m l d e t r i p s in a ( T r i p s i n a - E D T A ( 1 x ) 0 , 05 % , R e f 25300 - 054 100 m l, F a . G ib c o ) d u r a n t e 3 - 5 m i n e n la i n c u b a d o r a ( 37 ° C , 5 % C O 2 y 95 % o x í g e n o . D e s p u é s d e la c e n t r i f u g a c i ó n y e l la v a d o c o n m e d io la s c é l u l a s s e c o n t a r o n ( 50 p l d e s u s p e n s i ó n c e l u l a r y 50 p l d e a z u l d e t r ip a n o ( S o lu c i ó n d e A z u l d e T r ip a n o , 93595 - 50 m l , F a . F lu k a ) . L a s c é l u l a s s e c u lt iv a r o n ( 1 x 105 c é l u la s / p o c i l l o ) e n p l a c a s d e 24 p o c i l lo s r e c u b i e r t a s d e p o l i - D - l i s i n a ( F a . C o r n in g , R e f : 354414 ) e n 1 , 5 m l d e m e d io p o r p o c i l io . D e s p u é s d e 48 h e n la in c u b a d o r a s e c a m b ió e l m e d io y s e a ñ a d ie r o n 1 , 5 m L / p o c i l lo d e m e d io c o n t e n ie n d o b u t ir a t o d e s o d i o ( 40 m l d e m e d io d e c u lt iv o m á s 400 j l d e N a - B u t ir a t o , F a . S i g m a A ld r ic h B 5887 - 5 G , 250 m g e n 2 , 27 m l d e a g u a M illiQ ). D e s p u é s d e 24 h e n la i n c u b a d o r a e l m e d io s e a s p i r ó y s e a ñ a d i ó 1 , 5 m l d e t a m p ó n d e t r a n s p o r t e y s e in c u b ó d u r a n t e 10 m in . E l t a m p ó n d e t r a n s p o r t e c o n t i e n e lo s s i g u ie n t e s in g r e d ie n t e s : 500 m l d e H B S S ( s o l u c ió n s a l in a e q u i l i b r a d a d e H a n k , H y c lo n e , S H 30268.01 ) , 5 m l d e t a m p ó n H E P E S ( á c id o 4 - ( 2 - h i d r o x i e t i l ) - 1 - p ip e r a z i n -e t a n o s u l f ó n ic o , G i b c o 15630 - 056 ) y 3 , 9 m l d e g l u c o s a ( S i g m a , G 8270 - 100 , 90 g / 200 m l d e a g u a M illiQ ) . T o d o s lo s e le m e n t o s d e p r u e b a s e p r e p a r a r o n e n t a m p ó n d e t r a n s p o r t e a u n a c o n c e n t r a c i ó n f in a l d e 100 j M a p a r t ir d e s o l u c i o n e s m a d r e ( c o n c e n t r a c i ó n d e 180 a 500 m M ). L a s c é l u l a s O A T P 1 B 1 H E K 293 s e in c u b a r o n c o n s o l u c i o n e s d e p r u e b a ( e le m e n t o d e p r u e b a e n t a m p ó n d e t r a n s p o r t e d e 500 j l ) d u r a n t e 40 m in e n u n t e r m o a g it a d o r s in a g it a c ió n ( P H M P , F a . G r a n t B io ) . S e r e a l iz a r o n t r i p l ic a d o s p a r a c a d a e le m e n t o d e p r u e b a . D e s p u é s d e la in c u b a c ió n la s c é l u l a s s e la v a r o n c o n 2 m l d e t a m p ó n P B S ( ) f r ío ( D u l b e c c o s P B S , F a . G ib c o ) . L a s c é l u l a s O A T P 1 B 1 H E K 293 s e l i s a r o n p o r m e d io d e la a d ic i ó n d e 500 j l d e T r i t o n - X 100 f r ío a l 0 , 01 % e n a g u a M il l ip o r e d u r a n t e 1 h . E l a g u a f u e r t e m e n t e h ip o o s m o la r p r o v o c ó la r u p t u r a d e la m e m b r a n a c e l u l a r y la l i b e r a c i ó n d e l c o m p u e s t o d e G d in t r a c e lu la r . D e s p u é s d e 1 h s e a ñ a d ió 500 j l d e 1 n M E s t á n d a r d e t e r b io i C P -M S e n á c id o n ít r ic o a l 2 % y T r it ó n 100 a l 0 , 01 % . A n t e s d e m e d ir la s c o n c e n t r a c i o n e s d e G a d o l i n i o e n e l l i s a d o u t i l iz a n d o I C P - M S ( A g i le n t 8900 , S i n g le Q u a d , in t e g r . T ie m p o 0 , 3 s , s in g a s , 5 r e p e t ic io n e s , G d m /z 157 , T b m /z 159 ) l a s m u e s t r a s s e c e n t r i f u g a r o n a 4000 r p m d u r a n t e 2 m in . C o m o u n e s t á n d a r d e r e f e r e n c i a s e u t i l iz a G d -E o B - D T P A ( g a d o x e t a t o , B A Y 864873 ) e n la m is m a p l a c a d e p o c i l lo s . L a c a p t a c ió n d e O A T P 1 B 1 H E K 293 d e l c o m p u e s t o d e p r u e b a s e c a l c u l a e n r e la c ió n c o n e l g a d o x e t a t o ( d a n d o c o m o r e s u lt a d o la u n id a d % d e R C 1 ) . L o s r e s u lt a d o s s e s in t e t iz a n e n la T a b l a 5.

Tabla 5:<C a p t a c ió n d e c o m p u e s t o s e n c é l u l a s O A T P 1 B 1 - H E K 2 9 3 t r a n s f e c t a d a s e s t a b l e s e n % e n c o m p a r a c ió n>c o n e l c o m p u e s t o d e r e f e r e n c i a 1 ( R C 1 , G d - E O B - D T P A ) .

( c o n t i n u a c i ó n )

Ejemplo G - Captación en células OATP1B3 HEK 293 transfectadas estables

S e u t i l iz a r o n ( L e o n h a r d t M e t a l. D r u g M e t a b D is p o s . 2010 J u l ; 38 ( 7 ) : 1024 - 8 ) c é l u l a s d e r iñ ó n e m b r io n a r io h u m a n o 293 h u m a n a s t r a n s f e c t a d a s c o n O A T P 1 B 1 ( O A T P 1 B 3 H E K 293 , S L C O 1 B 3 , E n t r e z G e n e ID : 28234 ) . S e u t i l iz ó e l s ig u ie n t e m e d io d e c u lt iv o : 500 m l d e D M E M ( M e d io E a g l e M o d if ic a d o d e D u l b e c c o - a lt o e n G l u c o s a , D 6429 ) , 50 m l d e F C S ( s u e r o b o v in o f e t a l, F a . S ig m a , F 7524 ) , 5 , 8 m l d e G 418 ( G e n e t i c i n a , F a . G ib c o 10131 - 027 ) y 5 m l d e P e n - S t r e p . ( P e n i c i l i n a - E s t r e p t o m ic in a , F a . G ib c o , R e f 15140 - 122 ) . L a s c é l u l a s c r i o p r e s e r v a d a s s e d e s c o n g e l a r o n b r e v e m e n t e e n b a ñ o d e a g u a y s e d ilu y e r o n e n 10 m l d e m e d io d e c u lt iv o c a l i e n t e ( 37 ° C ) . D e s p u é s d e l c a m b io d e m e d io la s c é l u l a s s e c u lt iv a r o n d u r a n t e 3 d e n u n m a t r a z d e c u lt iv o c e l u l a r d e 25 c m 2. D e s p u é s d e 3 a 5 d la s c é l u l a s s e t r a n s f ir ie r o n a m a t r a c e s d e 75 c m 2. P a r a la d iv is ió n d e la s c é l u l a s é s t a s s e in c u b a r o n c o n 1 , 5 m l d e t r i p s in a ( T r i p s i n a - E D T A ( 1 x ) 0 , 05 % , R e f 25300 - 054 100 m l, F a . G ib c o ) d u r a n t e 3 - 5 m in e n la in c u b a t o r a ( 37 ° C , 5 % C O 2 y 95 % o x í g e n o ) . D e s p u é s d e la c e n t r i f u g a c ió n y e l la v a d o c o n m e d io la s c é l u l a s s e c o n t a r o n ( 50 p l d e s u s p e n s i ó n c e l u l a r y 50 p l d e a z u l d e t r ip a n o ( S o lu c i ó n d e A z u l d e T r ip a n o , 93595 - 50 m l , F a . F lu k a ) . L a s c é l u l a s s e c u lt iv a r o n ( 1 x 105 c é l u la s / p o c i l l o ) e n p l a c a s d e 24 p o c i l lo s r e c u b i e r t a s d e p o l i - D - l is in a ( F a . C o r n in g , R e f : 354414 ) e n 1 , 5 m l d e m e d io p o r p o c illo . D e s p u é s d e 48 h o r a s e n la in c u b a d o r a s e c a m b ió e l m e d io y s e a ñ a d ie r o n 1 , 5 m l/ p o c i l lo d e m e d io c o n t e n ie n d o b u t ir a t o d e s o d i o ( 40 m l d e m e d io d e c u lt iv o m á s 400 p l d e N a - B u t ir a t o , F a . S i g m a A ld r ic h B 5887 - 5 G , 250 m g e n 2 , 27 m l d e a g u a M illiQ ) . D e s p u é s d e 24 h o r a s e n la i n c u b a d o r a e l m e d io s e a s p i r ó y s e a ñ a d ió 1 , 5 m l d e t a m p ó n d e t r a n s p o r t e y s e in c u b ó d u r a n t e 10 m in . E l t a m p ó n d e t r a n s p o r t e c o n t ie n e lo s s ig u ie n t e s in g r e d ie n t e s : 500 m l d e H B S S ( s o l u c ió n s a l in a e q u i l i b r a d a d e H a n k , H y c lo n e , S H 30268.01 ) , 5 m l d e t a m p ó n H E P E S ( á c id o 4 - ( 2 - h i d r o x i e t i l ) - 1 - p ip e r a z i n -e t a n o s u l f ó n ic o , G i b c o 15630 - 056 ) y 3 , 9 m l d e g l u c o s a ( S i g m a , G 8270 - 100 , 90 g / 200 m l d e a g u a M illiQ ) . T o d o s lo s e le m e n t o s d e p r u e b a s e p r e p a r a r o n e n t a m p ó n d e t r a n s p o r t e a u n a c o n c e n t r a c i ó n f in a l d e 100 p M a p a r t ir d e s o l u c i o n e s m a d r e ( c o n c e n t r a c i ó n d e 180 a 500 m M ). L a s c é l u l a s O A T P 1 B 3 H E K 293 s e in c u b a r o n c o n s o l u c i o n e s d e p r u e b a ( e le m e n t o d e p r u e b a e n t a m p ó n d e t r a n s p o r t e d e 500 p l) d u r a n t e 40 m in e n u n t e r m o a g it a d o r s in a g it a c ió n ( P H M P , F a . G r a n t B io ) . S e r e a l iz a r o n t r i p l ic a d o s p a r a c a d a e le m e n t o d e p r u e b a . D e s p u é s d e la in c u b a c ió n la s c é l u l a s s e la v a r o n c o n 2 m l d e t a m p ó n P B S ( ) f r ío ( D u l b e c c o s P B S , F a . G ib c o ) . L a s c é l u l a s O A T P 1 B 3 H E K 293 s e l i s a r o n p o r m e d io d e la a d ic i ó n d e 500 p l d e T r i t o n - X 100 f r ío a l 0 , 01 % e n a g u a M il l ip o r e d u r a n t e 1 h . E l a g u a f u e r t e m e n t e h ip o o s m o la r p r o v o c ó la r u p t u r a d e la m e m b r a n a c e l u l a r y la l i b e r a c i ó n d e l c o m p u e s t o d e G d in t r a c e lu la r . D e s p u é s d e 1 h s e a ñ a d ió 500 p l d e 1 n M E s t á n d a r d e t e r b io i C P -M S e n á c id o n ít r ic o a l 2 % y T r it ó n 100 a l 0 , 01 % . A n t e s d e m e d ir la s c o n c e n t r a c i o n e s d e G a d o l i n i o e n e l l i s a d o u t i l iz a n d o I C P - M S ( A g i le n t 8900 , S i n g le Q u a d , in t e g r . T ie m p o 0 , 3 s , s in g a s , 5 r e p e t ic io n e s , G d m /z 157 , T b m /z 159 ) l a s m u e s t r a s s e c e n t r i f u g a r o n a 4000 r p m d u r a n t e 2 m in . C o m o u n e s t á n d a r d e r e f e r e n c i a s e u t i l iz a G d -E O B - D T P A ( g a d o x e t a t o ) e n la m is m a p l a c a d e p o c i l lo s . L a c a p t a c ió n d e O A T P 1 B 3 H E K 293 d e l c o m p u e s t o d e p r u e b a s e c a l c u l a e n r e la c ió n c o n e l g a d o x e t a t o ( d a n d o c o m o r e s u lt a d o la u n id a d % d e R C 1 ) . L o s r e s u lt a d o s s e s in t e t iz a n e n la T a b l a 6.

Tabla 6<:>Captación de compuestos en células OATP1B3-HEK 293 transfectadas estables en%en comparación con el compuesto de referencia 1 (RC1, Gd-EOB-DTPA).

n .d . n o d e t e r m in a d a

Ejemplo H - Unión a proteínas plasmáticas

L a u n ió n d e l E j e m p lo 1 y 15 a la s p r o t e í n a s p l a s m á t i c a s d e d if e r e n t e s e s p e c i e s ( h u m a n o , p e r r o , m o n o , c o n e jo , r a t ó n y r a t a ) s e in v e s t ig óin v itrou t i l iz a n d o d iá l i s is d e e q u i l ib r io e n D is p o s it iv o s d e D iá l i s is d e M ic r o - E q u i l ib r io d e 96 p o c i l l o s r e u t i l iz a b le s ( d i á l i s i s h t) ( B a n k e r M J e t a l. J P h a r m S c i . m a y o d e 2003 ; 92 ( 5 ) : 967 - 74 ) . L o s d a t o s indican que los compuestos muestran una baja unión a las proteínas plasmáticas de todas las especies probadas (Tabla 7).

Tabla 7:<F r a c c i ó n n o u n id a (fu % ) d e la s d if e r e n t e s e s p e c i e s d e lo s e je m p l o s 1 , 2 y 15.>

Ejemplo I - Farmacocinética In vivo Luego de la Administración i.v. en Ratas

E l a ju s t e d e lo s d a t o s o b t e n id o s a u n m o d e lo d e t r e s c o m p a r t im e n t o s ( P h o e n i x , W in N o n li n 6.4 , m o d o d e 3 c o m p a r t i m e n t o s ) p r o d u jo lo s p a r á m e t r o s f a r m a c o c in é t ic o s q u e s e m u e s t r a n e n la T a b l a 8.

Tabla 8:

Ejemplo J - Eliminación biliar en ratas canuladas por el conducto biliar (BDC, por sus siglas en inglés)

L a s e x c r e c i o n e s b i l ia r e s d e lo s c o m p u e s t o s s e in v e s t ig a r o n e n r a t a s c a n u l a d a s p o r e l c o n d u c t o b i l ia r ( B D C ) ( B u r d e n N e t a l. L a b A n im . 2017 O c t; 51 ( 5 ) : 457 - 464 ) . T o d o s lo s a n i m a l e s s e a n e s t e s i a n in ic ia lm e n t e u t i l iz a n d o u n a in y e c c ió n i n t r a m u s c u l a r a ju s t a d a a l p e s o c o r p o r a l d e u n a m e z c l a ( 1 2 ) d e c lo r h id r a t o d e x i l a c i n a ( 20 m g /m l, R o m p u n 2 % , B a y e r V it a l G m b H , L e v e r k u s e n ) y c lo r h id r a t o d e k e t a m in a ( 100 m g /m l, K e t a v e t , P f iz e r , P h a r m a c ia G m b H , B e r l í n ) u t i l iz a n d o 1 m l/ k g d e p e s o c o r p o r a l . L a a n e s t e s i a c o n t i n u a d e lo s a n i m a l e s s e lo g r a p o r m e d io d e la in y e c c ió n i n t r a v e n o s a d e 1 , 5 m l p o r h o r a ( in f u s ió n d e p e r f u s o r B r a u n d e 1 2 , 1 : 20 s a l in a , c l o r h id r a t o d e x i l a c i n a 20 m g /m l, R o m p u n 2 % , B a y e r V it a l G m b H , L e v e r k u s e n y c lo r h id r a t o d e k e t a m in a 100 m g /m l, K e t a v e t , P f iz e r , P h a r m a c i a G m b H , B e r l í n ) a t r a v é s d e la v e n a d e la c o l a ( In t r o c a n , 24 G , a m a r i l lo ) . L o s a n i m a l e s r e c ib ie r o n 0 ,1 m m o l d e G d / k g p c c o m o in y e c c ió n in t r a v e n o s a e n b o lo a t r a v é s d e la v e n a d e la c o la ( f o r m u la c ió n d e 50 m m o l d e G d / l) . S e t o m a r o n m u e s t r a s d e b il is 0 - 0 , 5 h , 0 , 5 - 1 h , 1 - 2 h , 2 - 3 h y 3 - 4 h d e s p u é s d e la in y e c c ió n . L a s c o n c e n t r a c i o n e s d e G a d o l i n i o e n l a s f r a c c i o n e s b i l ia r e s s e d e t e r m in a r o n p o r m e d io d e E s p e c t r o m e t r í a d e M a s a s c o n P l a s m a A c o p l a d o I n d u c t iv a m e n t e ( I C P - M S A g i le n t 7500 a , W a ld b r o n n , A le m a n i a ) . L a s f r a c c i o n e s b i l ia r e s ( n = 3 v e c e s 10 j l ) s e s e c a r o n d u r a n t e 2 h a 90 ° C y 50 j l d e á c id o n ít r ic o a l 65 % ( H N O 3, F a . F is h e r , O p t im a G r a d e # 1219010 ) y 30 j l d e p e r ó x id o d e h id r ó g e n o a l 30 % ( H 2 O 2 F a V W R C h e m i c a l s , A n a l a R N O R M A P U R , # 18 J 024022 ) s e a ñ a d ie r o n y p r o c e s a r o n e n h o r n o m ic r o o n d a s ( 5 c i c l o s : 5 m in 40 W , 5 m in 120 W , 10 m in 200 W , 10 m in 320 W y 25 m in 400 W , F a . C E M , M a r s 5 X p r e s s ) . D e s p u é s d e q u e la s m u e s t r a s s e h a y a n e n f r ia d o h a s t a t e m p e r a t u r a a m b ie n t e s e a ñ a d ie r o n 920 j l d e d i lu y e n t e I C P ( 1 % H N O 3 0 , 01 % T r it o n T x 100 y e s t á n d a r in t e r n o 50 j M T e r b i o ) , l a s m u e s t r a s s e d i l u y e r o n a d e c u a d a m e n t e y s e m id ie r o n la s c o n c e n t r a c i o n e s d e G a d o l i n i o a t r a v é s d e I C P - M S . L o s r e s u lt a d o s d e la d o s i s a c u m u l a d a s e s in t e t iz a n e n la T a b l a 9.

Tabla 9:<E x c r e c i ó n b il ia r e n r a t a s c a n u l a d a s p o r e l c o n d u c t o b ilia r .>

Ejemplo K - Estudio de excreción en ratas (5 días) y distribución orgánica del Gadolinio residual (7 días)

S e d e t e r m in a r o n la e x c r e c i ó n y la d is t r ib u c ió n o r g á n i c a d e l E j e m p lo 1 y 15 e n r a t a s m a c h o ( H a n - W is t a r , n = 3 ) . E l c o m p u e s t o s e a d m in is t r ó c o m o u n a s o l u c ió n a c u o s a e s t é r i l ( 50 m m o l G d / l ) e n f o r m a d e b o lo e n la v e n a d e la c o l a d e lo s a n i m a l e s . L a d o s i s f u e d e 0 ,1 m m o l G d / k g p c . S e r e c o g ió o r in a e n lo s s ig u ie n t e s p e r io d o s d e t ie m p o : 0 - 1 h , 1 - 3 h , 3 - 6 h , 6 - 24 h , 1 - 2 d y 2 - 5 d d e s p u é s d e la in y e c c ió n y h e c e s 0 - 1 h , 1 - 3 h , 3 - 6 h , 6 - 24 h , 1 - 2 d y 2 -5 d d e s p u é s d e la in y e c c ió n y h e c e s 0 - 1 d , 1 - 2 d y 2 - 5 d d e s p u é s d e la in y e c c ió n . C o m o c o n t r o l, 3 a n i m a l e s s e t r a t a r o n d e la m is m a m a n e r a c o n R C 1. E l d ía 7 s e s a c r i f i c a r o n lo s a n i m a l e s y s e e x t r a je r o n lo s s ig u ie n t e s ó r g a n o s : s a n g r e , h íg a d o , r iñ ó n , b a z o , c o r a z ó n , p u lm ó n , c e r e b r o , m ú s c u lo , p ie l, e s t ó m a g o , in t e s t in o , h u e s o y m é d u l a ó s e a . E l r e s t o d e l c a d á v e r s e l io f i l iz ó y s e t r it u r ó h a s t a o b t e n e r u n p o lv o f in o . L a c o n c e n t r a c i ó n d e G d e n lo s ó r g a n o s y e n e l c a d á v e r s e d e t e r m in ó p o r m e d io d e I C P - M S ( l C P - M S A g i le n t 7500 a , W a ld b r o n n , A le m a n i a ) . L o s r e s u lt a d o s d e la d is t r ib u c ió n o r g á n i c a d e lo s e je m p l o s y d e l C o m p u e s t o d e r e f e r e n c i a 1 i n v e s t ig a d o s s e s in t e t iz a n e n la T a b l a 10. L o s c o m p u e s t o s s e e x c r e t a n a t r a v é s d e u n a v í a d o b le ( h í g a d o y r iñ ó n ) . M e n o s d e l 1 % d e la d o s i s a d m in is t r a d a e s t a b a p r e s e n t e e n e l c u e r p o 7 d í a s d e s p u é s d e la in y e c c ió n .

Tabla 10:<E x c r e c i ó n y d is t r ib u c ió n o r g á n i c a d e l E j e m p lo 1 , 15 y R C 1 e n r a t a s .>

( c o n t i n u a c i ó n )

Ejemplo L - Metabolismo in vitro

E l m e t a b o l is m o in v it r o s e in v e s t ig ó e n h e p a t o c it o s h u m a n o s y d e r a t a c r i o p r e s e r v a d o s (L i A P e t a l. B io m a r k M e d . 2014 ; 8 ( 2 ) : 173 - 83 ) . S e in c u b a r o n h e p a t o c it o s h u m a n o s ( W S S , m a c h o ) y d e r a t a ( r a t a W i s t a r , R W H 137 , m a c h o ) c r i o p r e s e r v a d o s c o n e l c o m p u e s t o d e p r u e b a ( c o n c e n t r a c i ó n d e in c u b a c i ó n : 5 j M ). L a c a n t id a d d e c o m p u e s t o r e s t a n t e s e r e la c io n ó c o n la c a n t id a d in ic ia l ( 0 m in u t o s ) . L a s c é l u l a s s e e x t r a je r o n d e l n it r ó g e n o líq u id o . E l v ia l s e s u m e r g ió e n e l b a ñ o d e a g u a a 37 ° C y s e a g it ó s u a v e m e n t e ( a m a n o ) h a s t a q u e s e d e r r it ió la m a y o r p a r t e d e l h ie lo ( a p r o x . 90 s e g u n d o s ) . L a s s u s p e n s i o n e s c e l u l a r e s s e t r a n s f ir ie r o n p o r e je m p lo a u n t u b o d e c e n t r í f u g a d e 50 m l y s e a ñ a d ie r o n 12 m l d e t a m p ó n f r ío a 4 ° C ( p o r e je m p lo K r e b s - H e n s e l e i t o M e d io E d e W i l l ia m s ) . L a s u s p e n s i ó n c e l u l a r s e c e n t r i f u g ó a 50 x g d u r a n t e 5 m in s . S e a s p i r ó e l t a m p ó n y la s c é l u l a s s e v o l v i e r o n a s u s p e n d e r e n 5 m l d e t a m p ó n c a l i e n t e f r e s c o . S e m e z c l ó u n a a l í c u o t a d e 50 j l c o n 200 j l d e a z u l d e t r ip a n o p a r a d e t e r m in a r la d e n s i d a d c e l u l a r y la v ia b i l id a d c e lu la r . L a s u s p e n s i ó n c e l u l a r s e a ju s t ó h a s t a u n a c o n c e n t r a c i ó n f in a l d e 0 , 8 M io d e h e p a t o c it o s p o r m l. L a s i n c u b a c i o n e s s e l le v a r o n a c a b o e n p l a c a s d e 96 p o c i l lo s ( v o lu m e n d e 1 , 2 m l, c o n t r o l n e g a t iv o s in c é l u la s ) . L a s m u e s t r a s d e 0 m in s e d e t u v ie r o n in m e d ia t a m e n t e a ñ a d ie n d o 250 j l d e m e t a n o l h e la d o . T o d a s la s o t r a s m u e s t r a s s e a g it a r o n e n u n r o t o r H e i d o l p h ® d u r a n t e la in c u b a c i ó n e n u n a i n c u b a d o r a a 37 ° C d u r a n t e e l p e r ío d o in d i c a d o d e 4 h o r a s . S e u t i l iz a r o n a l í c u o t a s d e la s m u e s t r a s p a r a e l a n á l i s i s . T o d a s la s m u e s t r a s s e a n a l i z a r o n u t i l iz a n d o L C - M S a la s 0 h , 1 h , 2 h y 4 h ( L C - M S e je m p l if ic a t iv a : c o l u m n a A c c u c o r e C - 18 , 30 ° C , t a s a d e f lu jo d e 0 , 35 m l/ m in , s o l v e n t e A : 10 m M F o r m ia t o d e a m o n io 5 % M e C N , p H 4 y s o l v e n t e B : M e C N 0 , 1 % á c id o f ó r m ic o ; v o l u m e n d e in y e c c ió n d e 10 m l, g r a d ie n t e : 9 0 % A , 10 % B , 5 m in 70 % A y 30 % B , 8 m in 0 % A y 100 % B ).

N o s e d e t e c t a r o n m e t a b o l it o s p a r a lo s E j e m p lo s 1 , 2 y 15 e n i n c u b a c i o n e s d e h e p a t o c it o s d e o r ig e n h u m a n o y d e r a t a d u r a n t e u n t ie m p o d e in c u b a c i ó n d e 4 h ( 1 x 106 c é l u la s / m l ) .

Ejemplo M - Coeficiente de partición (logP butanol/buffer)

Tabla 11:<C o e f i c i e n t e d e p a r t ic ió n P ( lo g P = lo g ( b u t a n o l / t a m p ó n , p H 7 , 4 ) )>

Ejemplo N - NOAEL

E l n iv e l d e e f e c t o a d v e r s o n o o b s e r v a d o ( N O A E L ) s e p r o b ó e n r a t o n e s u t i l iz a n d o u n p r o c e d im ie n t o m o d if ic a d o d e 4 n iv e le s c o n d o s i s c r e c i e n t e s d e lo s e le m e n t o s d e p r u e b a . E l N O A E L o b s e r v a d o d e n o t a e l n iv e l d e e x p o s ic ió n , e n e l c u a l n o s e o b s e r v a r o n e f e c t o s a d v e r s o s g r a v e s ( D o r a t o e t a l. R e g u l T o x i c o l P h a r m a c o l . a g o s t o d e 2005 ; 42 ( 3 ) : 265 - 74 ) . L o s e le m e n t o s d e p r u e b a s e a p l i c a r o n e n f o r m a d e in y e c c ió n in t r a v e n o s a e n b o lo a t r a v é s d e la v e n a d e la c o la . L a d o s i s d e p a r t id a f u e d e 0 , 2 m m o l/ k g p c ( 8 v e c e s la d o s i s c l í n i c a d e R C 1 ) , y la d o s i s p a r a e l s ig u ie n t e n iv e l s e a u m e n t ó a 0 , 5 m m o l d e G d / k g p c s i lo s a n i m a l e s n o m o s t r a b a n e f e c t o s a d v e r s o s Figura 4 se muestra un ejemplo de IRM de hígado del tumor seccionado como comparación intraindividual en conejos de las diferentes fases de obtención de imágenes del hígado.

Ejemplo Q - IRM Biliar y de Hígado de cerdo Mejorada por Contraste a 1,5T

S e l l e v a r o n a c a b o i m á g e n e s p o r r e s o n a n c i a m a g n é t ic a m e j o r a d a s p o r c o n t r a s t e ( C E - M R I ) d e l h íg a d o y d e la b il is e n c e r d o s e n m in ia t u r a s a n o s d e G o e t t in g e n . E l e s t u d i o s e r e a l iz ó e n u n e s c á n e r d e IR M p r e c l ín ic a a u n a 1 , 5 T e q u i p a d o c o n u n a b o b in a f le x ib le p a r a la c o l u m n a v e r t e b r a l y e l c u e r p o ( S i e m e n s A v a n t o F it , E r l a n g e n , A le m a n i a ) . P a r a la IR M s e in v e s t ig ó a l c e r d o b a jo a n e s t e s i a g e n e r a l in d u c i d a c o n u n a in y e c c ió n in t r a m u s c u l a r d e 2 m g /k g d e a z a p e r o n a ( S t r e s n i l , E l a n c o G m b H , C u x h a v e n , A le m a n i a ) y 15 m g / k g d e k e t a m in a ( K e t a s e t , 100 m g /m l, F a . Z o e t is , B e r l ín , A le m a n i a ) . L a a n e s t e s i a s e m a n t u v o p o r m e d io d e in f u s ió n in t r a v e n o s a d e 12 m g /k g /h d e P r o p o f o l lu e g o d e u n b o lo in ic ia l d e P r o p o f o l d e 3 m g / k g ( P r o p o f o l- L i iu r o , 10 m g / m l, B r a u n , M e ls u n g e n , A le m a n i a ) . L o s a n i m a l e s r e c ib i e r o n 8 m l/ k g / h d e s a l i n a a l 0 , 9 % / h c o m o in f u s ió n in t r a v e n o s a . S e in t u b a r o n p o r v í a o r o t r a q u e a l , s e lo s v e n t iló c o n 50 % d e o x í g e n o , y s e c o l o c a r o n e n e l e s c á n e r e n p o s ic ió n s u p i n a . L a v e n t i l a c ió n s e d e t u v o e n la c o n t e n c i ó n d e la r e s p i r a c ió n a l f in a l d e la e s p ir a c ió n d u r a n t e la s a d q u i s i c i o n e s d e im á g e n e s . L o s c o m p u e s t o s d e l E j e m p lo s e f o r m u la r o n a u n a c o n c e n t r a c i ó n d e 250 m m o l G d / l e n 10 m M T r is -H C l ( p H 7 , 4 ) y 0 ,1 m o l% C a N a - B u t r o l . S e u t iliz ó u n a s e c u e n c i a 3 D D IX O N V I B E p o n d e r a d a e n T 1 ( T R = 6 , 9 m s , T E 1 / 2 = 2 , 39 / 4 , 77 m s , á n g u l o d e g ir o 10 ° , I P A T = C A I P I R I N I A P A T 3 ; P E = 1 / 3 D = 3 ) q u e c u b r ía t o d o e l h íg a d o c o n 88 c o r t e s a 1 , 5 m m ( F O V 350 x 284 , m a t r iz 256 x 156 , r e s o lu c i ó n d e f a s e 75 % , r e s o lu c i ó n e n e l p la n o 1 , 4 x 1 , 4 m m , r e s o lu c i ó n d e d e s l iz a m ie n t o 50 % ) . E l t ie m p o d e a d q u i s i c i ó n p o r im a g e n f u e d e 23 s e g u n d o s y s e in v e s t ig a r o n d if e r e n t e s p u n t o s t e m p o r a le s p o s t e r io r e s a la a p l i c a c i ó n d e l a g e n t e d e c o n t r a s t e . Im á g e n e s r e p r e s e n t a t i v a s d e l h íg a d o a n t e s y d e s p u é s d e la a d m in is t r a c i ó n d e lo s a g e n t e s d e c o n t r a s t e ( A ) y e je m p l a r m e n t e P r o y e c c i o n e s d e M á x im a I n t e n s id a d ( M I P S 2 c m ) d e l E j e m p lo 15 y R C 1 s e r e p r e s e n t a n p a r a v i s u a l i z a r la e l i m in a c ió n d e l a g e n t e d e c o n t r a s t e e n la b il is F ig u r a 5 ( B ) .

Claims

REIVINDICACIONES 1. U n c o m p u e s t o d e f ó r m u la g e n e r a l ( I) ,

( I) e n e l c u a l A r r e p r e s e n t a u n g r u p o s e l e c c i o n a d o d e

e n e l q u e # in d ic a e l p u n t o d e u n ió n a X , X r e p r e s e n t a u n g r u p o s e l e c c i o n a d o d e C H 2, ( C H 2) 2, ( C H 2H ( C H 2) 4 y * - ( C H 2) 2- O - C H 2-#, e n e l q u e * in d ic a e l p u n t o d e u n ió n a A r y # in d ic a e l p u n t o d e u n ió n a la f r a c c ió n d e á c id o a c é t ic o , R 1 , R 2 y R 3 r e p r e s e n t a n , d e m a n e r a in d e p e n d ie n t e p a r a c a d a a p a r i c i ó n , u n á t o m o d e h id r ó g e n o o u n g r u p o s e l e c c i o n a d o d e a lq u i lo C 1- C 3-, - C H 2O H , - ( C H 2) 2O H y - C H 2O C H 3 , R 4 r e p r e s e n t a u n g r u p o s e l e c c i o n a d o d e a lc o x i C 2- C 5-, ( a lc o x i C 1- C 3- ) - ( C H 2) 2- O - , ( a lc o x i C 1- C 3- ) - ( C H 2) 2- O -( C H 2) 2- O - y ( a lc o x i C 1- C 3- ) - ( C H 2) 2- O - ( C H 2) 2- O - ( C H 2) 2- O -, e n e l q u e d ic h o s g r u p o s a lc o x i C 1- C 3- y g r u p o s a lc o x i C 2- C 5- e s t á n o p c i o n a lm e n t e s u s t i t u id o s , u n a , d o s , t r e s o c u a t r o v e c e s , c o n u n á t o m o d e f lú o r , R 5 r e p r e s e n t a u n á t o m o d e h id r ó g e n o o u n g r u p o s e l e c c i o n a d o d e a lc o x i C 2- C 5-, ( a lc o x i C 1- C 3- ) - ( C H 2)2- O -, ( a lc o x i C 1- C 3- ) - ( C H 2) 2- O - ( C H 2) 2- O - y ( a lc o x i C 1- C 3- ) - ( C H 2) 2- O - ( C H 2)2- O - ( C H 2)2- O - , y R 6 r e p r e s e n t a u n á t o m o d e h id r ó g e n o o u n g r u p o s e l e c c i o n a d o d e a lc o x i C 2- C 5-, ( a lc o x i C i - C 3- ) - ( C H 2)2- O -, ( a lc o x i C i - C 3- ) - ( C H 2) 2- O - ( C H 2) 2- O - y ( a lc o x i C i - C 3- ) - ( C H 2) 2- O - ( C H 2)2- O - ( C H 2)2- O -, o u n e s t e r e o is ó m e r o , u n t a u t ó m e r o , u n N - ó x id o , u n h id r a t o , u n s o lv a t o , o u n a s a l d e l m is m o , o u n a m e z c l a d e l m is m o .
2. E l c o m p u e s t o d e a c u e r d o c o n la r e iv in d ic a c ió n 1, e n e l q u e A r r e p r e s e n t a u n g r u p o s e l e c c i o n a d o d e

e n e l q u e # in d ic a e l p u n t o d e u n ió n a X , X r e p r e s e n t a u n g r u p o s e l e c c i o n a d o d e C H 2, ( C H 2)2, ( C H 2) 3, ( C H 2)4 y * - ( C H 2) 2- O - C H 2- #, en el que * indica el punto de unión a Ar y # indica el punto de unión a la fracción de ácido acético, R1, R2 y R3 representan, de manera independiente para cada aparición, un átomo de hidrógeno o un grupo seleccionado de alquilo C<1>-C<3>-, -CH<2>OH, -(C h<2>)<2>OH y -CH<2>OCH<3>, R4 representa un grupo seleccionado de alcoxi C<2>-C<5>-, (alcoxi C<1>-C<3>-)-(CH<2>)<2>-O-, (alcoxi C<1>-C<3>-)-(CH<2>)<2>-O-(CH<2>)<2>-O- y (alcoxi C<1>-C<3>-)-(CH<2>)<2>-O-(CH<2>)<2>-O-(CH<2>)<2>-O-, en el que dichos grupos alcoxi C<1>-C<3>- y grupos alcoxi C<2>-C<5>- están opcionalmente sustituidos, una, dos, tres o cuatro veces, con un átomo de flúor, R3 representa un átomo de hidrógeno, y R6 representa un átomo de hidrógeno, o un estereoisómero, un tautómero, un N-óxido, un hidrato, un solvato, o una sal del mismo, o una mezcla del mismo.
3. El compuesto de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 o 2, en el que Ar representa un grupo seleccionado de

en el que # indica el punto de unión a X, X representa un grupo seleccionado de CH<2>y (CH<2>)<3>, R1 y R3 representan, de manera independiente para cada aparición, un átomo de hidrógeno o un grupo -CH2OH, R2 representa un átomo de hidrógeno o un grupo seleccionado de alquilo C<1>-C<3>-, -CH<2>OH, -(CH<2>)<2>OH y -CH2OCH3, R4 representa un grupo seleccionado de alcoxi C<2>-C<5>-, (alcoxi C i-C<3>-)-(CH<2>)<2>-O-, (alcoxi C i-C<3>-)-(CH<2>)<2>-O-(CH<2>)<2>-O- y (alcoxi C i-C<3>-)-(CH<2>)<2>-O-(CH<2>)<2>-O-(CH<2>)<2>-O-, en el que dichos grupos alcoxi C<1>-C<3>- y grupos alcoxi C<2>-C<5>- están opcionalmente sustituidos, una, dos, tres o cuatro veces, con un átomo de flúor, R5 representa un átomo de hidrógeno, y R6 representa un átomo de hidrógeno, o un estereoisómero, un tautómero, un hidrato, un solvato, o una sal del mismo, o una mezcla del mismo.
4. El compuesto de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 o 2, en el que Ar representa un grupo seleccionado de

en el que # indica el punto de unión a X, X representa un grupo seleccionado de CH<2>, (CH<2>)<2>, (CH<2>)<3>, (CH<2 ) 4>y *-(CH<2>)<2>-O-CH<2>-#, en el que * indica el punto de unión a Ar y # indica el punto de unión a la fracción de ácido acético, R 1 , R 2 y R 3 r e p r e s e n t a n , d e m a n e r a in d e p e n d ie n t e p a r a c a d a a p a r i c i ó n , u n á t o m o d e h id r ó g e n o o u n g r u p o s e l e c c i o n a d o d e a lq u i lo C 1- C 3-, - C H 2O H , - ( C H 2) 2O H y - C H 2O C H 3 , R 4 r e p r e s e n t a u n g r u p o s e l e c c i o n a d o d e a lc o x i C 2- C 4-, ( H 3C - C H 2) - O - ( C H 2) 2- O - , ( H 3C - C H 2) - O - ( C H 2) 2- O -( C H 2) 2- O - y ( H 3C - C H 2) - O - ( C H 2) 2- O - ( C H 2)2- O - ( C H 2)2- O -, R 5 r e p r e s e n t a u n á t o m o d e h id r ó g e n o , y R 6 r e p r e s e n t a u n á t o m o d e h id r ó g e n o , o u n e s t e r e o is ó m e r o , u n t a u t ó m e r o , u n h id r a t o , u n s o lv a t o , o u n a s a l d e l m is m o , o u n a m e z c l a d e l m is m o .
5. E l c o m p u e s t o d e a c u e r d o c o n c u a l q u i e r a d e la s r e i v i n d i c a c i o n e s 1 , 2 o 4 , e n e l q u e A r r e p r e s e n t a u n g r u p o s e l e c c i o n a d o d e
e n e l q u e # in d ic a e l p u n t o d e u n ió n a X , X r e p r e s e n t a u n g r u p o s e l e c c i o n a d o d e C H 2 y ( C H 2) 3, R 1 , R 2 y R 3 r e p r e s e n t a n , d e m a n e r a in d e p e n d ie n t e p a r a c a d a a p a r i c i ó n , u n á t o m o d e h id r ó g e n o o u n g r u p o s e l e c c i o n a d o d e a lq u i lo C 1- C 3-, - C H 2O H , - ( C H 2) 2O H y - C H 2O C H 3 , R 4 r e p r e s e n t a u n g r u p o s e l e c c i o n a d o d e ( H 3C - C H 2) - O - ( C H 2) 2- O - , ( H 3C - C H 2) - O - ( C H 2) 2- O - ( C H 2) 2- O - y ( H 3C -C H 2 ) - O - ( C H 2 ) 2 - O - ( C H 2 ) 2 - O - ( C H 2 ) 2 - O - , R 5 r e p r e s e n t a u n á t o m o d e h id r ó g e n o , y R 6 r e p r e s e n t a u n á t o m o d e h id r ó g e n o , o u n e s t e r e o is ó m e r o , u n t a u t ó m e r o , u n h id r a t o , u n s o lv a t o , o u n a s a l d e l m is m o , o u n a m e z c l a d e l m is m o .
7. U n c o m p u e s t o d e a c u e r d o c o n la r e iv in d ic a c ió n 6 s e l e c c i o n a d o d e l g r u p o q u e c o n s i s t e e n 2 , 2 ', 2 " - ( 10 - { 1 - c a r b o x i- 2 - [ 2 - ( 4 - e t o x if e n i l ) e t o x i ] e t i l } - 1 , 4 , 7 , 10 - t e t r a a z a c ic lo d o d e c a n - 1 , 4 , 7 - t r i i l ) t r i a c e t a t o d e g a d o lin io , 2 , 2 ' , 2 " - { 10 - [ 1 - c a r b o x i- 2 - { 4 - [ 2 - ( 2 - e t o x ie t o x i ) e t o x i ] f e n i l } e t i l ] - 1 , 4 , 7 , 10 - t e t r a a z a c i c l o d o d e c a n - 1 , 4 , 7 -t r i i l } t r ia c e t a t o d e g a d o lin io , 2 , 2 ', 2 " - { 10 - [ ( 1 S ) - 1 - c a r b o x i - 2 - { 4 - [ 2 - ( 2 - e t o x i e t o x i ) e t o x i ] f e n i l } e t i l ] - 1 , 4 , 7 , 10 - t e t r a a z a c i c l o d o d e c a n - 1 , 4 , 7 -t r i i l } t r ia c e t a t o d e g a d o lin io , 2 , 2 ', 2 " - { 10 - [ ( 1 R ) - 1 - c a r b o x i - 2 - { 4 - [ 2 - ( 2 - e t o x ie t o x i ) e t o x i ] f e n i l } e t i l ] - 1 , 4 , 7 , 10 - t e t r a a z a c i c l o d o d e c a n - 1 , 4 , 7 -t r i i l } t r ia c e t a t o d e g a d o lin io , 2 - [ 7 - ( 1 - c a r b o x i - 2 - { 4 - [ 2 - ( 2 - e t o x ie t o x i ) e t o x i ] f e n i l } e t i l ) - 4 , 10 - b i s ( c a r b o x i l a t o m e t i l ) - 1 , 4 , 7 , 10 -t e t r a a z a c i c lo d o d e c a n - 1 - i l ] p r o p a n o a t o d e g a d o lin io , 2 - [ 7 - { 1 - c a r b o x i - 2 - [ 4 - ( 2 - e t o x ie t o x i ) f e n i l ] e t i l } - 4 , 10 - b is ( c a r b o x i la t o m e t i l ) - 1 , 4 , 7 , 10 - t e t r a a z a c ic l o d o d e c a n - 1 -i l ] b u t a n o a t o d e g a d o lin io , ( 2 S , 2 ' S , 2 MS ) - 2 , 2 ' , 2 M- { 10 - [ ( 1 S ) - 5 - ( 4 - b u t o x i f e n i l ) - 1 - c a r b o x i p e n t i l ] - 1 , 4 , 7 , 10 - t e t r a a z a c i c l o d o d e c a n - 1 , 4 , 7 -t r i i l } t r i s ( 3 - h id r o x ip r o p a n o a t o ) d e g a d o lin io , 2 , 2 ' , 2 " - { 10 - [ 1 - c a r b o x i- 2 - ( 4 - { 2 - [ 2 - ( 2 - e t o x ie t o x i ) e t o x i ] e t o x i } f e n i l ) e t i l ] - 1 , 4 , 7 , 10 - t e t r a a z a c i c l o d o d e c a n - 1 , 4 , 7 -t r i i l } t r ia c e t a t o d e g a d o lin io , 2 , 2 ' , 2 " - { 10 - [ ( 1 S ) - 1 - c a r b o x i - 2 - ( 4 - { 2 - [ 2 - ( 2 - e t o x i e t o x i ) e t o x i ] e t o x i } f e n i l ) e t i l ] - 1 , 4 , 7 , 10 - t e t r a a z a c i d o d o d e c a n -1. 4.7 - t r i i l } t r ia c e t a t o d e g a d o lin io , 2 , 2 ' , 2 " - { 10 - [ ( 1 R ) - 1 - c a r b o x i - 2 - ( 4 - { 2 - [ 2 - ( 2 - e t o x i e t o x i ) e t o x i ] e t o x i } f e n i l ) e t i l ] - 1 , 4 , 7 , 10 - t e t r a a z a c i d o d o d e c a n -1. 4.7 - t r i i l } t r ia c e t a t o d e g a d o lin io , 2 - { 7 - [ 1 - c a r b o x i - 2 - ( 4 - { 2 - [ 2 - ( 2 - e t o x i e t o x i ) e t o x i ] e t o x i } f e n i l ) e t i l ] - 4 , 10 - b i s ( c a r b o x i la t o i r ie t i l ) - 1 , 4 , 7 , 10 -t e t r a a z a c i c lo d o d e c a n - 1 - i l } - 3 - m e t o x i p r o p a n o a t o d e g a d o lin io , 2 , 2 ' , 2 " - { 10 - [ 2 - ( 4 - b u t o x i f e n i l ) - 1 - c a r b o x i e t i l ] - 1 , 4 , 7 , 10 - t e t r a a z a c i d o d o d e c a n - 1 , 4 , 7 - t r i i l } t r i a c e t a t o d e g a d o lin io , ( 2 S , 2 ' S , 2 MS ) - 2 , 2 ' , 2 M- ( 10 - [ ( 1 S ) - 1 - c a r b o x i- 4 - { 4 - [ 2 - ( 2 - e t o x ie t o x i ) e t o x i ] f e n i l } b u t i l ] - 1 , 4 , 7 , 10 -t e t r a a z a c i c lo d o d e c a n - 1 , 4 , 7 - t r i i l } t r i s ( 3 - h id r o x ip r o p a n o a t o ) d e g a d o lin io , 2 , 2 ', 2 " - { 10 - [ 1 - c a r b o x i- 2 - { 6 - [ 2 - ( 2 - e t o x ie t o x i ) e t o x i ] p i n d i n - 3 - i l } e t i l ] - 1 , 4 , 7 , 10 - t e t r a a z a d d o d o d e c a n - 1 , 4 , 7 -t r i i l } t r ia c e t a t o d e g a d o lin io , 2 , 2 ', 2 " - { 10 - [ 1 - c a r b o x i- 4 - { 4 - [ 2 - ( 2 - e t o x ie t o x i ) e t o x i ] f e n i l } b u t i l ] - 1 , 4 , 7 , 10 - t e t r a a z a d d o d o d e c a n - 1 , 4 , 7 -t r i i l } t r i s ( 3 - h id r o x ip r o p a n o a t o ) d e g a d o lin io - , ( 2 S , 2 ' S , 2 " S ) - 2 , 2 ' , 2 M- { 10 - [ ( 1 R ) - 1 - c a r b o x i- 4 - { 4 - [ 2 - ( 2 - e t o x i e t o x i ) e t o x i ] f e n i l } b u t i l ] - 1 , 4 , 7 , 10 -t e t r a a z a c i c lo d o d e c a n - 1 , 4 , 7 - t r i i l } t r i s ( 3 - h id r o x ip r o p a n o a t o ) d e g a d o lin io , ( 2 R , 2 'R , 2 " R ) - 2 , 2 ' , 2 M- { 10 - [ ( 1 R ) - 1 - c a r b o x i- 4 - { 4 - [ 2 - ( 2 - e t o x i e t o x i ) e t o x i ] f e n i l } b u t i l ] - 1 , 4 , 7 , 10 -t e t r a a z a c i c lo d o d e c a n - 1 , 4 , 7 - t r i i l } t r i s ( 3 - h id r o x ip r o p a n o a t o ) d e g a d o lin io , ( 2 R , 2 'R , 2 " R ) - 2 , 2 ' , 2 M- { 10 - [ ( 1 S ) - 1 - c a r b o x i- 4 - { 4 - [ 2 - ( 2 - e t o x ie t o x i ) e t o x i ] f e n i l } b u t i l ] - 1 , 4 , 7 , 10 -t e t r a a z a c i c lo d o d e c a n - 1 , 4 , 7 - t r i i l } t r i s ( 3 - h id r o x ip r o p a n o a t o ) d e g a d o lin io , 2 , 2 ', 2 " - { 10 - [ ( 1 S ) - 1 - c a r b o x i - 4 - { 4 - [ 2 - ( 2 - e t o x i e t o x i ) e t o x i ] f e n i l } b u t i l ] - 1 , 4 , 7 , 10 - t e t r a a z a d d o d o d e c a n - 1 , 4 , 7 -t r i i l } t r i s ( 3 - h id r o x ip r o p a n o a t o ) d e g a d o lin io - , 2 , 2 ' , 2 " - { 10 - [ 1 - c a r b o x i- 2 - { 4 - [ 2 - ( 2 - e t o x ie t o x i ) e t o x i ] f e n i l } e t i l ] - 1 , 4 , 7 , 10 - t e t r a a z a c i c l o d o d e c a n - 1 , 4 , 7 - t r i i l } t r i s ( 3 -h id r o x i p r o p a n o a t o ) d e g a d o lin io , 2 , 2 ' , 2 " - { 10 - [ 1 - c a r b o x i- 2 - { 5 - [ 2 - ( 2 - e t o x ie t o x i ) e t o x i ] p i r i d i n - 2 - i l } e t i l ] - 1 , 4 , 7 , 10 - t e t r a a z a c i c l o d o d e c a n - 1 , 4 , 7 -t r i i l } t r ia c e t a t o d e g a d o lin io , 2 , 2 ' , 2 " - { 10 - [ 1 - c a r b o x i - 3 - ( 4 - p r o p o x i f e n i l ) p r o p i l ] - 1 , 4 , 7 , 10 - t e t r a a z a c i d o d o d e c a n - 1 , 4 , 7 - t r i i l } t r i a c e t a t o d e g a d o lin io , 2 , 2 ', 2 " - { 10 - [ 1 - c a r b o x i- 4 - { 4 - [ 2 - ( 2 - e t o x ie t o x i ) e t o x i ] f e n i l } b u t i l ] - 1 , 4 , 7 , 10 - t e t r a a z a c i c l o d o d e c a n - 1 , 4 , 7 -t r i i l } t r ia c e t a t o d e g a d o lin io , 2 , 2 ', 2 " - { 10 - [ ( 1 S ) - 1 - c a r b o x i - 4 - { 4 - [ 2 - ( 2 - e t o x i e t o x i ) e t o x i ] f e n i l } b u t i l ] - 1 , 4 , 7 , 10 - t e t r a a z a c i c l o d o d e c a n - 1 , 4 , 7 -t r i i l } t r ia c e t a t o d e g a d o lin io , 2 , 2 ' , 2 " - { 10 - [ ( 1 S ) - 1 - c a r b o x i - 5 - ( 4 - e t o x i f e n i l ) p e n t i l ] - 1 , 4 , 7 , 10 - t e t r a a z a c i d o d o d e c a n - 1 , 4 , 7 - t r i i l } t r i a c e t a t o d e g a d o lin io , 2 , 2 ', 2 " - { 10 - [ 1 - c a r b o x i - 4 - ( 4 - e t o x i f e n i l ) b u t i l ] - 1 , 4 , 7 , 10 - t e t r a a z a c i d o d o d e c a n - 1 , 4 , 7 - t r i i l } t r i a c e t a t o d e g a d o lin io , 2 - { 7 - [ 1 - c a r b o x i - 2 - ( 4 - e t o x i f e n i l ) e t i l ] - 4 , 10 - b i s ( c a r b o x i l a t o m e t i l ) - 1 , 4 , 7 , 10 - t e t r a a z a c i c l o d o d e c a n - 1 -i l } p e n t a n o a t o d e g a d o lin io , 2 , 2 ' , 2 " - { 10 - [ ( 1 S ) - 4 - ( 4 - b u t o x i f e n i l ) - 1 - c a r b o x i b u t i l ] - 1 , 4 , 7 , 10 - t e t r a a z a c i d o d o d e c a n - 1 , 4 , 7 - t r i i l } t r i a c e t a t o d e g a d o lin io , 2 , 2 ' , 2 " - ( 10 - { 1 - c a r b o x i - 2 - [ 4 - ( 2 - e t o x i e t o x i ) f e n i l ] e t i l } - 1 , 4 , 7 , 10 - t e t r a a z a c i d o d o d e c a n - 1 , 4 , 7 - t r i i l ) t r i a c e t a t o d e g a d o lin io , ( 2 S ) - 2 - [ 4 , 10 - b is ( c a r b o x i la t o m e t i l ) - 7 - { 1 - c a r b o x i- 2 - [ 4 - ( 2 , 2 , 3 , 3 - t e t r a f lu o r o p r o p o x i ) f e n i l ] e t i l } - 1 , 4 , 7 , 10 -t e t r a a z a c i c lo d o d e c a n - 1 - i l ] - 3 - h i d r o x ip r o p a n o a t o d e g a d o lin io , ( 2 S , 2 ' S , 2 " S ) - 2 , 2 ' , 2 M- { 10 - [ ( 1 S ) - 4 - ( 3 - b u t o x i f e n i l ) - 1 - c a r b o x i b u t i l ] - 1 , 4 , 7 , 10 - t e t r a a z a d d o d o d e c a n - 1 , 4 , 7 -t r i i l } t r i s ( 3 - h id r o x ip r o p a n o a t o ) d e g a d o lin io , ( 2 S , 2 'S ) - 2 , 2 '- { 4 - [ ( 1 S ) - 1 - c a r b o x i - 4 - { 4 - [ 2 - ( 2 - e t o x i e t o x i ) e t o x i ] f e n i l } b u t i l ] - 10 - [ ( 1 R ) - 1 - c a r b o x i l a t o - 2 -h i d r o x i e t i l ] - 1 , 4 , 7 , 10 - t e t r a a z a c i d o d o d e c a n - 1 , 7 - d i i l } b i s ( 3 - h i d r o x i p r o p a n o a t o ) d e g a d o lin io , 2 , 2 '- { 4 - [ ( 1 S ) - 1 - c a r b o x i- 4 - { 4 - [ 2 - ( 2 - e t o x ie t o x i ) e t o x i ] f e n i l } b u t i l ] - 10 - [ 1 - c a r b o x i l a t o - 3 - h i d r o x i p r o p i l ] - 1 , 4 , 7 , 10 -t e t r a a z a c i d o d o d e c a n - 1 , 7 - d i i l } b i s ( 4 - h i d r o x i b u t a n o a t o ) d e g a d o lin io - , 2 , 2 '- { 4 - [ 1 - c a r b o x i - 2 - { 4 - [ 2 - ( 2 - e t o x i e t o x i ) e t o x i ] f e n i l } e t i l ] - 10 - [ 1 - c a r b o x i l a t o - 3 - h id r o x i p r o p i l ] - 1 , 4 , 7 , 10 -t e t r a a z a c i c l o d o d e c a n - 1 , 7 - d i i l } b i s ( 4 - h i d r o x i b u t a n o a t o ) d e g a d o lin io - , 2 - [ 7 - { 1 - c a r b o x i - 2 - [ 4 - ( 2 - e t o x ie t o x i ) f e n i l ] e t i l } - 4 , 10 - b is ( c a r b o x i l a t o m e t i l ) - 1 , 4 , 7 , 10 - t e t r a a z a c i c l o d o d e c a n - 1 - i l ] -3 - m e t o x ip r o p a n o a t o d e g a d o lin io , 2 , 2 ' , 2 " - { 10 - [ 2 - { 3 , 5 - b i s [ 2 - ( 2 - e t o x i e t o x i ) e t o x i ] f e n i l } - 1 - c a r b o x i e t i l ] - 1 , 4 , 7 , 10 - t e t r a a z a c i d o d o d e c a n - 1 , 4 , 7 -t r i i l } t r ia c e t a t o d e g a d o lin io , 2 , 2 ', 2 " - { 10 - [ ( 1 S ) - 2 - ( 2 , 4 - b i s { 2 - [ 2 - ( 2 - e t o x i e t o x i ) e t o x i ] e t o x i } f e n i l ) - 1 - c a r b o x i e t i l ] - 1 , 4 , 7 , 10 -t e t r a a z a c i c lo d o d e c a n - 1 , 4 , 7 - t r i i l } t r i a c e t a t o d e g a d o lin io , 2 - { 7 - [ 1 - c a r b o x i - 2 - { 4 - [ 2 - ( 2 - e t o x i e t o x i ) e t o x i ] f e n i l } e t i l ] - 4 , 10 - b i s ( c a r b o x i l a t o m e t i l ) - 1 , 4 , 7 , 10 -t e t r a a z a c i c lo d o d e c a n - 1 - i l } - 3 - h id r o x ip r o p a n o a t o d e g a d o lin io - , 2 - { 7 - [ 1 - c a r b o x i - 2 - ( 4 - { 2 - [ 2 - ( 2 - e t o x i e t o x i ) e t o x i ] e t o x i } f e n i l ) e t i l ] - 4 , 10 - b i s ( c a r b o x i la t o m e t i l ) - 1 , 4 , 7 , 10 -t e t r a a z a c i c lo d o d e c a n - 1 - i l } - 3 - h id r o x ip r o p a n o a t o d e g a d o lin io - , 2 - { 4 , 10 - b i s ( c a r b o x i l a t o m e t i l ) - 7 - [ 1 - c a r b o x i p r o p i l ] - 1 , 4 , 7 , 10 - t e t r a a z a c i c l o d o d e c a n - 1 - i l } - 3 - { 4 - [ 2 - ( 2 -e t o x ie t o x i) e t o x i] f e n i l } p r o p a n o a t o d e g a d o lin io - , 2 , 2 ' , 2 " - { 10 - [ 2 - ( 5 - b u t o x ip i r id i n - 2 - i l ) - 1 - c a r b o x i e t i l ] - 1 , 4 , 7 , 10 - t e t r a a z a c i d o d o d e c a n - 1 , 4 , 7 - t r i i l } t r ia c e t a t o d e g a d o lin io , 2 - { 4 , 10 - b i s ( c a r b o x i l a t o m e t i l ) - 7 - [ 1 - c a r b o x i - 2 - m e t o x i e t i l ] - 1 , 4 , 7 , 10 - t e t r a a z a c i c l o d o d e c a n - 1 - i l } - 3 - [ 4 - ( 2 , 2 , 3 , 3 -t e t r a f lu o r o p r o p o x i ) f e n i l ] p r o p a n o a t o d e g a d o lin io - , 2 , 2 ' , 2 ' ' - ( 10 - { 1 - c a r b o x i- 2 - [ 4 - ( 2 , 2 , 3 , 3 - t e t r a f lu o r o p r o p o x i ) f e n i l ] e t i l } - 1 , 4 , 7 , 10 - t e t r a a z a c i c l o d o d e c a n - 1 , 4 , 7 -t r i i l ) t r ia c e t a t o d e g a d o lin io , 2 , 2 ', 2 ' ' - ( 10 - { ( 1 R ) - 1 - c a r b o x i - 2 - [ 4 - ( 2 , 2 , 2 - t r i f l u o r o e t o x i ) f e n i l ] e t i l } - 1 , 4 , 7 , 10 - t e t r a a z a c i c l o d o d e c a n - 1 , 4 , 7 -t r i i l ) t r ia c e t a t o d e g a d o lin io , 2 , 2 ' , 2 " - { 10 - [ 1 - c a r b o x i - 2 - ( 4 - p r o p o x i f e n i l ) e t i l ] - 1 , 4 , 7 , 10 - t e t r a a z a c i d o d o d e c a n - 1 , 4 , 7 - t r i i l } t r i a c e t a t o d e g a d o lin io , ( 2 R , 2 'R ) - 2 , 2 '- { 7 - [ ( 1 S ) - 1 - c a r b o x i - 4 - { 4 - [ 2 - ( 2 - e t o x ie t o x i ) e t o x i ] f e n i l } b u t i l ] - 10 - [ ( 1 S ) - 1 - c a r b o x i l a t o - 2 - h i d r o x i e t i l ] -1.4. 7.10 - t e t r a a z a c i c l o d o d e c a n - 1 , 4 - d i i l } b i s ( 3 - h i d r o x i p r o p a n o a t o ) d e g a d o l in io y ( 2 S , 2 'S ) - 2 , 2 '- { 7 - [ ( 1 S ) - 1 - c a r b o x i- 4 - { 4 - [ 2 - ( 2 - e t o x ie t o x i ) e t o x i ] f e n i l } b u t i l ] - 10 - [ ( 1 R ) - 1 - c a r b o x i l a t o - 2 - h id r o x ie t i l ] -1.4. 7.10 - t e t r a a z a c i c l o d o d e c a n - 1 , 4 - d i i l } b i s ( 3 - h i d r o x i p r o p a n o a t o ) d e g a d o lin io o u n e s t e r e o is ó m e r o , u n t a u t ó m e r o , u n N - ó x id o , u n h id r a t o , u n s o lv a t o , o u n a s a l d e l m is m o , o u n a m e z c l a d e l m is m o .
( i ) ,
p r o p o r c i o n a n d o p o r lo t a n t o u n c o m p u e s t o d e f ó r m u la g e n e r a l ( I) , e n e l c u a l A r , X , R 1, R 2 y R 3 s o n c o m o s e d e f in e n p a r a lo s c o m p u e s t o s d e f ó r m u la g e n e r a l ( I) , d e a c u e r d o c o n c u a l q u i e r a d e la s r e i v i n d i c a c i o n e s 1 a 5, e n la f o r m a d e u n c o m p le j o c o n G d 3+.
10. U s o d e u n c o m p u e s t o d e u n a c u a l q u i e r a d e la s r e i v i n d i c a c i o n e s 1 a 8 p a r a e l d ia g n ó s t ic o p o r im á g e n e s .
11. U s o d e u n c o m p u e s t o d e u n a c u a l q u i e r a d e la s r e iv in d ic a c io n e s 1 a 8 p a r a im á g e n e s p o r r e s o n a n c i a m a g n é t ic a , c o n p r e f e r e n c ia d e l s i s t e m a v a s c u l a r , r e n a l o h e p a t o b i l i a r o d e l t r a c t o g a s t r o in t e s t in a l , c o n m a y o r p r e f e r e n c ia p a r a im á g e n e s p o r r e s o n a n c i a m a g n é t ic a d e l h íg a d o .
12. L o s c o m p u e s t o s d e a c u e r d o c o n u n a c u a l q u i e r a d e la s r e i v i n d i c a c i o n e s 1 a 8 p a r a u t i l iz a r e n e l d ia g n ó s t ic o p o r im á g e n e s .
13. L o s c o m p u e s t o s d e a c u e r d o c o n u n a c u a l q u i e r a d e la s r e i v i n d i c a c i o n e s 1 a 8 p a r a u t i l iz a r e n im á g e n e s p o r r e s o n a n c i a m a g n é t ic a , c o n p r e f e r e n c ia d e l s is t e m a v a s c u l a r , r e n a l o h e p a t o b i l i a r o d e l t r a c t o g a s t r o in t e s t in a l , c o n m a y o r p r e f e r e n c ia p a r a im á g e n e s p o r r e s o n a n c i a m a g n é t ic a d e l h íg a d o .
14. U s o d e lo s c o m p u e s t o s d e a c u e r d o c o n u n a c u a l q u ie r a d e la s r e i v i n d i c a c i o n e s 1 a 8 o d e m e z c l a s d e lo s m is m o s p a r a la f a b r ic a c ió n d e a g e n t e s d e d ia g n ó s t ic o .
15. U s o d e lo s c o m p u e s t o s d e a c u e r d o c o n c u a l q u ie r a d e la s r e iv in d ic a c io n e s 1 a 8 o d e m e z c l a s d e lo s m is m o s p a r a la f a b r ic a c ió n d e a g e n t e s d e c o n t r a s t e p a r a im á g e n e s p o r r e s o n a n c i a m a g n é t ic a .
16. U n p r o c e d im ie n t o d e o b t e n c ió n d e i m á g e n e s d e t e j id o c o r p o r a l e n u n p a c i e n t e , q u e c o m p r e n d e lo s p a s o s d e a d m in is t r a r a l p a c i e n t e u n a c a n t i d a d e f e c t iv a d e u n o o m á s c o m p u e s t o s d e a c u e r d o c o n c u a l q u i e r a d e la s r e i v i n d i c a c i o n e s 6 a 8 e n u n p o r t a d o r f a r m a c é u t ic a m e n t e a c e p t a b l e , y s o m e t e r a l p a c i e n t e a im á g e n e s p o r r e s o n a n c i a m a g n é t ic a .
17. U s o d e u n c o m p u e s t o d e f ó r m u la g e n e r a l ( I )

( I ) , o d e u n e s t e r e o is ó m e r o , t a u t ó m e r o , N - ó x id o , h id r a t o , s o lv a t o , o s a l d e l m is m o , o m e z c l a s d e l m is m o e n lo s c u a l e s A r , X , R 1 , R 2 y R 3 s o n c o m o s e d e f in e n p a r a lo s c o m p u e s t o s d e f ó r m u la g e n e r a l ( I ) , d e a c u e r d o c o n u n a c u a l q u ie r a d e la s r e i v i n d i c a c i o n e s 1 a 5 , p a r a la p r e p a r a c ió n d e u n c o m p u e s t o d e f ó r m u la g e n e r a l ( I ) e n la f o r m a d e u n c o m p le j o c o n G d 3+ d e a c u e r d o c o n u n a c u a l q u i e r a d e la s r e i v i n d i c a c i o n e s 6 o 7.