ES3036143T3 - N-acetylated and non-acetylated dipeptides containing arginine to reduce the viscosity of viscous compositions of therapeutic polypeptides - Google Patents

N-acetylated and non-acetylated dipeptides containing arginine to reduce the viscosity of viscous compositions of therapeutic polypeptides

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ES3036143T3
ES3036143T3 ES18724732T ES18724732T ES3036143T3 ES 3036143 T3 ES3036143 T3 ES 3036143T3 ES 18724732 T ES18724732 T ES 18724732T ES 18724732 T ES18724732 T ES 18724732T ES 3036143 T3 ES3036143 T3 ES 3036143T3
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Abstract

Se proporcionan aquí excipientes capaces de reducir eficazmente la viscosidad de formulaciones de polipéptidos (p. ej., polipéptidos terapéuticos). Los excipientes reductores de viscosidad son dipéptidos que contienen arginina en el extremo carboxilo terminal y serina N-acetilada o prolina N-acetilada en el extremo N-terminal. También se describe glutamato-arginina como un dipéptido reductor de viscosidad. Entre los métodos descritos, se proporcionan métodos para reducir la viscosidad de dichas formulaciones. (Traducción automática con Google Translate, sin valor legal)

Description

DESCRIPCIÓN
Dipéptidos N-acetilados y no acetilados que contienen arginina para reducir la viscosidad de composiciones viscosas de polipéptidos terapéuticos
Listado de secuencias
La presente solicitud se presenta con un listado de secuencias en formato electrónico.
Campo
La materia presentada se refiere al campo de las composiciones farmacéuticas de polipéptidos de unión al antígeno y métodos de reducción de la viscosidad de dichas composiciones. Específicamente, en el presente documento se desvelan excipientes que reducen la viscosidad de composiciones farmacéuticas. Además, la materia desvelada presenta métodos relacionados con la preparación de dichas composiciones farmacéuticas.
Antecedentes
Ciertos polipéptidos terapéuticos pueden ser difíciles de formular de forma que se obtenga una viscosidad óptima, tanto debido a la propia naturaleza del polipéptido terapéutico, como debido a la (alta) concentración del polipéptido terapéutico, o incluso ambos. Las formulaciones de alta viscosidad son difíciles de manipular durante la formulación y el envasado. Además, dichos preparados pueden ser difíciles de administrar óptimamente a un paciente, y dicha administración puede ser incómoda para el paciente. Se conoce bien en las técnicas farmacéuticas la necesidad de identificar compuestos que sean útiles para reducir la viscosidad de formulaciones de proteína altamente concentradas, desarrollar métodos de reducción de la viscosidad de dichas formulaciones, y proporcionar formulaciones farmacéuticas con viscosidad reducida.
En el documento de patente WO 2016/065181 se desvelan N-acetil arginina, N-acetil lisina, N-acetil histidina, N-acetil prolina, y mezclas de las mismas, para reducir la viscosidad de la formulación de proteína, y métodos para ello. El uso de dipéptidos de arginina para reducir la viscosidad de formulaciones líquidas se desvela en los documentos de patente WO 2011/139718, US 6767 892 y WO 2015/196091, y el documento de patente WO 2016/010927 desvela el uso de L-arginina para reducir la agregación de polipéptidos en formulaciones líquidas. El dipéptido N-acetil-prolina-arginina se desveló en Chaturvedi et al., 1993. Peptide Research. 6(6):308-312 como parte de una biblioteca de péptidos usada como inhibidores de la enzima convertidora de angiotensina. Sin embargo, ninguno de estos documentos desvela que los dipéptidos N-acetil-serina-arginina, N-acetil-prolina-arginina o N-acetil-prolinaarginina-NH2 reduzcan la viscosidad de las formulaciones de polipéptidos terapéuticos.
Sumario
En un primer aspecto, en el presente documento se proporcionan composiciones farmacéuticas líquidas que comprenden un polipéptido terapéutico, tal como un anticuerpo o un fragmento de unión al antígeno del mismo; un tampón y al menos un N-acetil-dipéptido, en donde el N-acetil-dipéptido es N-acetil-serina-arginina, N-acetil-prolinaarginina o N-acetil-prolina-arginina-NH2. En un subaspecto, el pH de la composición es 4 a 8. El polipéptido terapéutico, tal como un anticuerpo o fragmento de unión al antígeno del mismo, puede estar presente en una concentración de al menos 70 mg/ml, al menos 85 mg/ml, al menos 100 mg/ml, al menos 140 mg/ml, al menos 160 mg/ml, al menos 180 mg/ml, al menos 200 mg/ml y al menos 210 mg/ml. En el caso en el que el polipéptido terapéutico sea un anticuerpo, el anticuerpo se puede seleccionar del grupo que consiste en adalimumab, bevacizumab, blinatumomab, cetuximab, conatumumab, denosumab, eculizumab, erenumab, evolocumab, infliximab, natalizumab, panitumumab, rilotumumab, rituximab, romosozumab y trastuzumab, o un fragmento de unión al antígeno de los mismos, o es un anticuerpo seleccionado de los presentados en la Tabla 1, o un fragmento de unión al antígeno de los mismos. En algunos subaspectos, el anticuerpo es evolocumab. El N-acetil-dipéptido puede tener una concentración desde 10 mM hasta 500 mM, tal como desde 100 mM hasta 200 mM, 100 mM, 150 mM y 200 mM. El dipéptido N-acetilado puede ser N-acetil-serina-arginina. El dipéptido N-acetilado puede ser N-acetil-prolina-arginina. El dipéptido N-acetilado puede ser N-acetil-prolina-arginina-NH2. El tampón se puede seleccionar del grupo que consiste en tampones acetato, glutamato, histidina y fosfato, o una combinación de los mismos, tal como acetato. El tampón puede estar presente a una concentración de 5 mM a 30 mM, tal como 10 mM. El pH de las composiciones puede tener un pH de 4 a 8, tal como un pH de 4,8 a 6,9, y tal como un pH de 5,2. Las composiciones pueden comprender además un tensioactivo, tal como un tensioactivo seleccionado del grupo que consiste en monooleato de polioxietilensorbitano (polisorbato 80 o polisorbato 20), copolímero de bloque de polioxietileno-polioxipropileno (poloxámeros tales como Pluronic® F-68 y otros Pluronics®), ésteres alquílicos de sorbitano (Span®), octilfenil éteres de polietilenglicol (Triton X-100), alquil éteres de polietilenglicol (Brij), alquil éteres de polipropilenglicol, alquil éteres de glucósido y succinato de D-a-tocoferol polietilenglicol (vitamina E TPGS). En algunos aspectos, el tensioactivo es polisorbato 80, tal como a una concentración de aproximadamente 0,01 % (p/v) de polisorbato 80 o 0,004 % de polisorbato 20. Las composiciones pueden comprender además un segundo oligopéptido que comprende arginina y que consiste en dos a diez residuos de aminoácidos. Las composiciones pueden comprender además un aminoácido, N-acetil-arginina, N-acetil-lisina, N-acetil-histidina, N-acetil-prolina o mezclas de cualquiera de los mismos. El aminoácido puede ser arginina o prolina.
En un segundo aspecto, en el presente documento se proporcionan métodos de reducción de la viscosidad en una composición farmacéutica que comprende un polipéptido terapéutico, tal como un anticuerpo o un fragmento de unión al antígeno del mismo, en donde el método comprende:
a. proporcionar una disolución que comprende (i) el polipéptido terapéutico, (ii) un N-acetil-dipéptido, en donde el N-acetil-dipéptido es N-acetil-serina-arginina, N-acetil-prolina-arginina o N-acetil-prolina-arginina-NH2 y está presente en una concentración reductora de la viscosidad, y (iii) un tampón; y
b. ajustar el pH de la disolución a 4 a 8.
El polipéptido terapéutico, tal como un anticuerpo o fragmento de unión al antígeno del mismo, está presente en una concentración de al menos 70 mg/ml, al menos 140 mg/ml, al menos 180 mg/ml, al menos 200 mg/ml o al menos 210 mg/ml. En casos en los que el polipéptido terapéutico sea un anticuerpo, el anticuerpo se puede seleccionar del grupo que consiste en adalimumab, bevacizumab, blinatumomab, cetuximab, conatumumab, denosumab, eculizumab, erenumab, evolocumab, infliximab, natalizumab, panitumumab, rilotumumab, rituximab, romosozumab y trastuzumab, o un fragmento de unión al antígeno de los mismos, o es un anticuerpo seleccionado de los presentados en la Tabla 1, o un fragmento de unión al antígeno de los mismos. En algunos subaspectos, el anticuerpo es evolocumab. El N-acetil-dipéptido puede tener una concentración desde 10 mM hasta 500 mM, tal como desde 100 mM hasta 200 mM, 100 mM, 150 mM y 200 mM. El N-acetil-dipéptido puede ser N-acetil-serinaarginina. El N-acetil-dipéptido puede ser N-acetil-prolina-arginina. El N-acetil-dipéptido puede ser N-acetil-prolinaarginina-NH2. El N-acetil-dipéptido puede ser un polvo liofilizado antes de ponerse en disolución. El tampón se puede seleccionar del grupo que consiste en tampones acetato, glutamato, histidina y fosfato, o una combinación de los mismos, tal como acetato. El tampón puede estar presente a una concentración de 5 mM a 30 mM, tal como 10 mM. El pH de las composiciones puede tener un pH de 4 a 8, tal como un pH de 4,8 a 6,9, y tal como un pH de 5,2. Las composiciones pueden comprender además un tensioactivo, tal como un tensioactivo seleccionado del grupo que consiste en monooleato de polioxietilensorbitano (polisorbato 80 o polisorbato 20), copolímero de bloque de polioxietileno-polioxipropileno (poloxámeros tales como Pluronic® F-68 y otros Pluronics®), ésteres alquílicos de sorbitano (Span®), octilfenil éteres de polietilenglicol (Triton X-100), alquil éteres de polietilenglicol (Brij), alquil éteres de polipropilenglicol, alquil éteres de glucósido y succinato de D-a-tocoferol polietilenglicol (vitamina E TPGS), tal como polisorbato 20 o polisorbato 80. En algunos aspectos, el tensioactivo es polisorbato 80, tal como a una concentración de aproximadamente 0,1 % (p/v) de polisorbato 80 o 0,004 % (p/v) de polisorbato 20. Las composiciones pueden comprender un segundo oligopéptido que comprende arginina y que consiste en dos a diez residuos de aminoácido. Las composiciones pueden comprender además un aminoácido, N-acetil-arginina, N-acetillisina, N-acetil-histidina, N-acetil-prolina o mezclas de cualquiera de los mismos. El aminoácido puede ser arginina o prolina. La viscosidad de la composición se puede reducir en al menos aproximadamente 30 % o en al menos aproximadamente 50 % cuando se compara con una disolución de control que carece del N-acetil-dipéptido.
Breve descripción de los dibujos
LaFigura 1muestra una representación de gráfico de líneas de la viscosidad de diversas formulaciones farmacéuticas que comprenden las cantidades indicadas de un anticuerpo terapéutico (Anticuerpo 1, "Ab1"; la concentración se muestra como mg/ml) y diversos excipientes a los valores de pH indicados.
LasFiguras 2A y 2Bmuestran un gráfico de líneas de la viscosidad observada de formulaciones farmacéuticas que comprenden tampón ácido glutámico 10 mM a pH 5,2 con 4 % p/v de sacarosa frente a la concentración de un anticuerpo terapéutico (Anticuerpo 1, "Ab1")) con y sin los excipientes indicados en las formulaciones. LaFig.
2Amuestra el gráfico de manera que todos los valores de las muestras se muestran para cada punto a lo largo del eje x; y laFig. 2Bmuestra el detalle de la viscosidad de formulaciones en donde la viscosidad se observó a 100 cP (=mPas) o menos. G52Su, tampón, sacarosa y Ab1 (sin excipiente); G52Su-ArgHCl, ArgHCl 150 mM como excipiente; Pro-Arg, dipéptido N-acetil-Pro-Arg 150 mM como excipiente; Ser-Arg, dipéptido N-acetil-Ser-Arg 150 mM como excipiente; Glu-Arg, Glu-Arg 25 mM como excipiente; ac-Pro-Arg-NH2, N-acetil-Pro-Arg-NH2 150 mM como excipiente.
LasFiguras 3A y 3Bmuestran un gráfico de líneas de la viscosidad observada de formulaciones farmacéuticas que comprenden tampón ácido glutámico 10 mM a pH 5,2 con 4 % p/v de sacarosa frente a la concentración de un anticuerpo terapéutico (Anticuerpo 2, "Ab2") con y sin los excipientes indicados en las formulaciones. LaFig.
3Amuestra el gráfico de manera que todos los valores de las muestras se muestran para cada punto a lo largo del eje x; y laFig. 3Bmuestra el detalle de la viscosidad de formulaciones en donde la viscosidad se observó a 80 cP (= mPa s) o menos. G52Su, tampón, sacarosa y Ab1 (sin excipiente); G52Su-ArgHCl, ArgHCl 150 mM como excipiente; ac-Pro-Arg, dipéptido N-acetil-Pro-Arg 150 mM como excipiente; ac-Ser-Arg, dipéptido N-acetil-Ser-Arg 150 mM como excipiente; Glu-Arg, Glu-Arg 25 mM como excipiente; ac-Pro-Arg-NH2, N-acetil-Pro-Arg-NH2150 mM como excipiente.
LaFigura 4muestra un gráfico de líneas de la viscosidad observada de formulaciones farmacéuticas que comprenden tampón ácido glutámico 10 mM a pH 5,2 con 4 % p/v de sacarosa frente a la concentración de un anticuerpo terapéutico (Anticuerpo 3, "Ab3") con y sin los excipientes indicados. G52Su, tampón, sacarosa y Ab1 (sin excipiente); G52Su-ArgHCl, ArgHCl 150 mM como excipiente; ac-Pro-Arg, dipéptido N-acetil-Pro-Arg 150 mM como excipiente; ac-Ser-Arg, dipéptido N-acetil-Ser-Arg 150 mM como excipiente; Glu-Arg, Glu-Arg 25 mM como excipiente; ac-Pro-Arg-NH2, N-acetil-Pro-Arg-NH2150 mM como excipiente.
LasFiguras 5(A)-5(D)muestran gráficos de líneas comparativos de las viscosidades para los tres anticuerpos, Ab1, Ab2 y Ab3 a las concentraciones indicadas (mg/ml) y excipientes. LaFig. 5(A)muestra los resultados para los tres anticuerpos en presencia de 150 mM de N-acetil-Pro-Arg y las viscosidades observadas. LaFig. 5(B)muestra los resultados para los tres anticuerpos en presencia de 150 mM de N-acetil-Ser-Arg y las viscosidades observadas. LaFig. 5(C)muestra los resultados para los tres anticuerpos en presencia de 150 mM de N-acetil-Pro-Arg-NH2 y las viscosidades observadas. LaFig. 5(D)muestra los resultados para los tres anticuerpos en presencia de Glu-Arg 150 y las viscosidades observadas. G52Su, tampón, sacarosa y Ab1 (sin excipiente); ac-Pro-Arg, dipéptido N-acetil-Pro-Arg 150 mM como excipiente; ac-Ser-Arg, dipéptido N-acetil-Ser-Arg 150 mM como excipiente; ac-Pro-Arg-NH2, N-acetil-Pro-Arg-NH2150 mM como excipiente; Glu-Arg, Glu-Arg 25 mM como excipiente.
Descripción detallada
Se descubrió que los dipéptidos N-acetil-serina-arginina, N-acetil-prolina-arginina, N-acetil-prolina-arginina-NH2 y glutamato-arginina reducían la viscosidad de formulaciones de polipéptido terapéutico, tales como las que contienen anticuerpos. Sorprendentemente, mientras que los N-acetil-dipéptidos redujeron la viscosidad en un grado similar a la N-acetil-arginina (NAR), son significativamente más solubles que NAR. Debido a su elevada solubilidad, estos N-acetil-dipéptidos son capaces de reducir la viscosidad de proteínas terapéuticas incluso más que NAR debido a que se pueden formular a concentraciones mucho mayores.
Definiciones
Tanto la general descripción anterior como la siguiente descripción detallada son solo a modo de ejemplo y explicativos y no son restrictivos de la invención. El uso del singular incluye el plural salvo que se indique específicamente de otro modo. El uso de "o" significa "y/o" salvo que se indique de otro modo. El uso del término "incluyendo", así como otras formas, tales como "incluye" e "incluido", no es limitante. Términos tales como "elemento" o "componente" engloban tanto elementos como componentes que comprenden una unidad y elementos y componentes que comprenden más de una subunidad salvo que se indique específicamente de otro modo. El uso del término "porción" puede incluir parte de un resto o el resto completo. Cuando se menciona un intervalo numérico, por ejemplo, 1-5, todos los valores intermedios están incluidos explícitamente, tales como 1, 2, 3, 4 y 5, así como fracciones de los mismos, tales como 1,5, 2,2, 3,4 y 4,1.
"Aproximadamente" o "~" significan, cuando modifican una cantidad (por ejemplo, "aproximadamente" 3 mM), que puede producirse la variación alrededor de la cantidad modificada. Estas variaciones pueden producirse por una diversidad de medios, tales como procedimientos típicos de medición y manipulación, errores inadvertidos, pureza de los ingredientes y similares.
"Que comprende" y "comprende" pretenden significar que las formulaciones y métodos incluyen los elementos enumerados, pero no excluyen otros elementos no enumerados. Los términos "que consiste esencialmente en" y "consiste esencialmente en", cuando se usan para definir formulaciones y métodos, incluyen los elementos enumerados, excluyen elementos no enumerados que alteran la naturaleza básica de la formulación y/o método, pero no excluyen otros elementos no enumerados. Por lo tanto, una formulación que consiste esencialmente en los elementos definidos en el presente documento no excluiría cantidades traza de otros elementos, tales como contaminantes de cualquier método de aislamiento y purificación o vehículos farmacéuticamente aceptables (por ejemplo, solución salina tamponada con fosfato), conservantes y similares, pero excluiría, por ejemplo, aminoácidos no especificados adicionales. Los términos "que consiste en" y "consiste en", cuando se usan para definir formulaciones y métodos, excluyen más que los oligoelementos de otros componentes y etapas de método sustanciales para administrar las composiciones descritas en el presente documento. Realizaciones definidas por cada uno de estos términos de transición están dentro del alcance de esta divulgación.
N-Acetil-serina y N-acetil-prolina son versiones modificadas de los aminoácidos que existen de forma natural serina y prolina, respectivamente. La N-acetil-serina y la N-acetil-prolina incluyen tanto las formas D como L de los aminoácidos, tales como N-acetil-L-serina, N-acetil-D-serina, N-acetil-L-prolina, N-acetil-D-prolina. Estos N-acetilaminoácidos se pueden preparar a partir de dipéptidos que contienen arginina. La estructura del dipéptido N-acetilserina-arginina se muestra como la estructura1;la estructura del dipéptido N-acetil-prolina-arginina se muestra como la fórmula2;la estructura de la N-acetil-prolina-arginina-NH2 se muestra como la fórmula3.También se muestra un dipéptido de glutamato-arginina como la fórmula4.
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Una "composición farmacéutica" o una "formulación farmacéutica" es una composición estéril de (i) un fármaco farmacéuticamente activo, tal como un polipéptido biológicamente activo, que es adecuado para administración parenteral (que incluye administración intravenosa, intramuscular, subcutánea, aerosolizada, intrapulmonar, intranasal e intratecal) a un paciente en necesidad de la misma y (ii) uno o más excipientes farmacéuticamente aceptables, diluyentes, y otros aditivos considerados seguros por la Administración Federal de Fármacos u otras autoridades nacionales extranjeras. Las formulaciones farmacéuticas incluyen disoluciones líquidas (por ejemplo, acuosas) que se pueden administrar directamente, y polvos liofilizados que se pueden reconstituir en disoluciones añadiendo un diluyente antes de la administración. Sin embargo, el término "formulación farmacéutica" excluye específicamente composiciones para administración tópica a pacientes, composiciones para ingestión oral y composiciones para nutrición parenteral.
"Viscosidad" significa la resistencia de un fluido a fluir y se puede medir en unidades de centipoise (cP) o miliPascalsegundo (mPa-s), donde 1 cP=1 mPa-s, a una velocidad de cizallamiento dada. Por lo tanto, en lo sucesivo, una referencia a un valor de medición de la viscosidad en cP se debe entender como el valor de tiempo en mPa-s. La viscosidad se puede medir usando un viscosímetro rotacional, tal como un viscosímetro de lectura de dial de Brookfield Engineering, modelo LVT, tal como un Gemini 200 Rheometer (Malvern Instruments) o un AR-G2 Rheometer (TA Instruments). La viscosidad se puede medir usando cualquier otro método y en cualquier otra unidad conocida en la técnica (por ejemplo, viscosidad absoluta, cinemática o dinámica). Independientemente del método usado para determinar la viscosidad, el porcentaje de reducción en la viscosidad en las formulaciones de excipientes frente a las formulaciones de control sigue siendo aproximadamente el mismo a una velocidad de cizallamiento dada.
Una formulación que contiene una cantidad de excipiente eficaz para "reducir la viscosidad" (o una cantidad o concentración "reductora de la viscosidad" de dicho excipiente) significa que la viscosidad de la formulación en su forma final para administración es al menos 5 % inferior a la viscosidad de una formulación de control apropiada, tal como agua, tampón, otros agentes reductores de la viscosidad conocidos, tales como sal y similares. También se podrían usar formulaciones de control sin excipiente, aunque no puedan ser implementables como formulación terapéutica debido, por ejemplo, a la hipotonicidad.
Asimismo, una formulación de "viscosidad reducida" es una formulación que presenta una viscosidad reducida en comparación con una formulación de control.
Formulaciones "estables" de polipéptidos biológicamente activos son formulaciones que presentan o (i) agregación reducida y/o pérdida reducida de actividad biológica de al menos el 20 % tras el almacenamiento a 2-8 °C durante al menos dos años en comparación con una muestra de fórmula de control, o (ii) agregación reducida y/o pérdida de actividad biológica reducida en condiciones de estrés térmico (por ejemplo, 25 °C durante una semana a 12 semanas; 40 °C durante una a 12 semanas; 52 °C durante siete-ocho días, etc.). Una formulación se considera estable cuando el polipéptido en la formulación retiene la estabilidad física, estabilidad química y/o una actividad biológica.
Se puede decir que un polipéptido "retiene su estabilidad física" en una formulación si, por ejemplo, no muestra signos de agregación, precipitación y/o desnaturalización tras el examen visual de color y/o claridad, o como se mide por la dispersión de luz UV o por cromatografía de exclusión por tamaño (SEC) o electroforesis, tales como con referencia a turbidez o formación de agregados.
Se puede decir que un polipéptido "retiene su estabilidad química" en una formulación si, por ejemplo, la estabilidad química en un momento dado es tal que no resulta ninguna entidad química nueva de la modificación del polipéptido por formación o escisión de enlaces. La estabilidad química se puede evaluar detectando y cuantificando formas químicamente alteradas del polipéptido. La alteración química puede implicar, por ejemplo, modificación del tamaño (por ejemplo, corte), que se puede evaluar usando cromatografía de exclusión por tamaño, SDS-PAGE y/o espectrometría de masas por desorción/ionización láser asistida por matriz/tiempo de vuelo (EM MALDI/TOF). Otros tipos de alteración química incluyen, por ejemplo, alteración de carga (por ejemplo, resultante de desamidación), que se puede evaluar por cromatografía de intercambio iónico. La oxidación es otra modificación química comúnmente observada.
Se puede decir que un polipéptido "retiene su actividad biológica" en una formulación farmacéutica con respecto al polipéptido si, por ejemplo, el porcentaje de actividad biológica del polipéptido formulado (por ejemplo, un anticuerpo) como se ha determinado por un ensayo (por ejemplo, un ensayo de unión al antígeno) en comparación con el polipéptido de control está entre o aproximadamente el 50 % y aproximadamente el 200 %, aproximadamente el 60 % y aproximadamente el 170 %, aproximadamente el 70 % y aproximadamente el 150 %, aproximadamente el 80 % y aproximadamente el 125 %, o aproximadamente el 90 % y aproximadamente el 110 %. En algunos casos, se puede decir que un polipéptido "retiene su actividad biológica" en una formulación farmacéutica si, por ejemplo, la actividad biológica del polipéptido en un momento dado es al menos 1 %, 5 %, 10 %, 15 %, 20 %, 25 %, 30 %, 35 %, 40 %, 45 %, 50 %, 55 %, 60 %, 65 %, 70 %, 75 %, 80 %, 85 %, 90 %, 95 % o 100 %.
Los "anticuerpos" (Ab) y el sinónimo "inmunoglobulinas" (Ig) son glucopolipéptidos que tienen las mismas características estructurales. Mientras que los anticuerpos presentan especificidad de unión por un antígeno específico, las inmunoglobulinas incluyen tanto anticuerpos como otras moléculas de tipo anticuerpo que carecen de especificidad por antígenos. Los polipéptidos del último tipo son producidos, por ejemplo, en bajos niveles por el sistema linfático y en niveles elevados por mielomas. Por lo tanto, el término "anticuerpo" o "péptido(s) de anticuerpo" se refiere a un anticuerpo intacto, un derivado de anticuerpo, un análogo de anticuerpo, un anticuerpo genéticamente alterado, un anticuerpo que tiene una marca detectable, un anticuerpo que compite por la unión específica con un anticuerpo específico, o un fragmento de unión al antígeno (por ejemplo, Fab, Fab', F(ab')2, Fv, anticuerpo de un solo dominio) del mismo que compite con el anticuerpo intacto por la unión específica e incluye anticuerpos quiméricos, humanizados, completamente humanos y biespecíficos. En algunos casos, los fragmentos de unión al antígeno se producen, por ejemplo, por técnicas de ADN recombinante. En otros casos, los fragmentos de unión al antígeno se producen por escisión enzimática o química de anticuerpos intactos. Los fragmentos de unión al antígeno incluyen Fab, Fab', F(ab)2, F(ab')2, Fv y anticuerpos monocatenarios.
Los anticuerpos monoclonales y las construcciones de anticuerpo incluyen específicamente anticuerpos "quiméricos" en los que una porción de la cadena pesada y/o ligera es idéntica u homóloga a secuencias correspondientes en anticuerpos derivados de una especie particular o que pertenecen a una clase o subclase particular de anticuerpo, mientras que el resto de la o las cadenas es idéntico u homólogo a secuencias correspondientes en anticuerpos derivados de otras especies o que pertenecen a otra clase o subclase de anticuerpo, así como fragmentos de dichos anticuerpos, mientras que presenten la actividad biológica deseada. Los anticuerpos quiméricos incluyen anticuerpos "primatizados" que comprenden secuencias de unión al antígeno de dominio variable derivadas de un primate no humano (por ejemplo, mono del viejo mundo, simio superior, etc.) y secuencias de la región constante humana.
Los anticuerpos monoclonales y las construcciones de anticuerpo incluyen anticuerpos denominados "humanos" o "completamente humanos". Los términos "anticuerpo humano" y "anticuerpo completamente humano" se refieren cada uno a un anticuerpo que tiene una secuencia de aminoácidos de una inmunoglobulina humana, que incluye anticuerpos aislados de bibliotecas de inmunoglobulina humana o de animales transgénicos para una o más inmunoglobulinas humanas y que no expresan inmunoglobulinas endógenas; por ejemplo, anticuerpos Xenomouse® y anticuerpos como se describen por Kucherlapati et al. en la patente de EE. UU. n.° 5.939.598.
"Anticuerpos genéticamente alterados" significa anticuerpos en donde la secuencia de aminoácidos ha sido variada de la de un anticuerpo nativo. Debido a la relevancia de las técnicas de ADN recombinante en la generación de anticuerpos, no se necesita estar confinado a las secuencias de aminoácidos descubiertas en los anticuerpos naturales; los anticuerpos pueden ser rediseñados para obtener características deseadas. Las posibles variaciones son muchas y varían de cambios a solo un aminoácido o a algunos aminoácidos para completar el rediseño de, por ejemplo, la región variable y/o constante. Los cambios en la región constante se harán, en general, para mejorar o alterar las características, tales como fijación del complemento, interacción con membranas y otras funciones efectoras, así como fabricabilidad y viscosidad. Los cambios en la región variable se pueden hacer para mejorar las características de unión al antígeno.
Un "fragmento Fab" comprende una cadena ligera y las regiones CH1 y variables de una cadena pesada. La cadena pesada de una molécula de Fab no puede formar un enlace disulfuro con otra molécula de cadena pesada.
Un "fragmento Fab'" contiene una cadena ligera y una cadena pesada que contiene más de la región constante, entre los dominios CH1 y CH2, de manera que se pueda formar un enlace disulfuro intercatenario entre dos cadenas pesadas para formar una molécula de F(ab')2.
Un "fragmento F(ab')2" contiene dos cadenas ligeras y dos cadenas pesadas que contienen una parte de la región constante entre los dominios CH1 y CH2, de manera que se pueda formar un enlace disulfuro intercatenario entre dos cadenas pesadas.
Los términos "fragmento Fv" y "anticuerpo monocatenario" se refieren a polipéptidos que contienen regiones variables del anticuerpo de tanto las cadenas pesadas como ligeras, pero que carecen de regiones constantes. Al igual que un anticuerpo intacto, un fragmento Fv o anticuerpo de una sola cadena son capaces de unirse selectivamente a un antígeno específico. Con un peso molecular de solo aproximadamente 25 kDa, los fragmentos Fv son mucho más pequeños que los anticuerpos comunes (150-160 kD), e incluso más pequeños que los fragmentos Fab (aproximadamente 50 kDa, una cadena ligera y la mitad de una cadena pesada).
Un "anticuerpo de un solo dominio" es un fragmento de anticuerpo que consiste en una única unidad de dominio Fv, por ejemplo, VH o VL. Al igual que un anticuerpo intacto, un anticuerpo de un solo dominio es capaz de unirse selectivamente a un antígeno específico. Con un peso molecular de solo 12-15 kDa, los anticuerpos de un solo dominio son mucho más pequeños que los anticuerpos comunes (150-160 kDa) que están compuestos de dos cadenas pesadas de polipéptido y dos cadenas ligeras, e incluso más pequeños que los fragmentos Fab (aproximadamente 50 kDa, una cadena ligera y la mitad de una cadena pesada) y fragmentos de una sola cadena variable (aproximadamente 25 kDa, dos dominios variables, uno de una cadena ligera y uno de una cadena pesada). También se ha mostrado que los nanocuerpos derivados de las cadenas ligeras se unen específicamente a los epítopos diana.
"Aminoácido" se refiere a aminoácidos naturales y/o no naturales o sintéticos, que incluyen glicina y tanto los isómeros ópticos D como L, análogos de aminoácidos y peptidomiméticos. En algunos aspectos, el término aminoácido se refiere a aminoácidos monoméricos.
"Aditivo" significa, en el contexto de una composición farmacéutica, una sustancia que no forma parte natural de un material (por ejemplo, principio activo), pero se añade deliberadamente para satisfacer algún fin específico (por ejemplo, conservación, reducción de viscosidad, estabilización).
"Tensioactivo" significa agentes activos en la superficie, que incluyen sustancias comúnmente denominadas agentes humectantes, depresores de la tensión superficial, detergentes, agentes dispersantes, emulsionantes y antisépticos de amonio cuaternario. Los tensioactivos se tratan con más detalle a continuación.
Componentes de las composiciones y métodos
Polipéptidos terapéuticos
Las proteínas, que incluyen las que se unen a uno o más de los siguientes, serían útiles en las composiciones y métodos desvelados. Estas incluyen proteínas CD, incluyendo CD3, CD4, CD8, CD19, CD20, CD22,<c>D30 y CD34; incluyendo las que interfieren con la unión al receptor. Proteínas de la familia de receptores HER, que incluyen, HER2, HER3, HER4 y el receptor de EGF. Moléculas de adhesión celular, por ejemplo, LFA-I, Mol, pl50, 95, VLA-4, ICAM-I, VCAM e integrina alfa v/beta 3. Factores de crecimiento, tales como factor de crecimiento endotelial vascular ("VEGF"), hormona de crecimiento, hormona estimulante de la tiroides, hormona estimulante del folículo, hormona luteinizante, factor liberador de la hormona de crecimiento, hormona paratiroidea, sustancia inhibidora de Müller, proteína inflamatoria de macrófagos humanos (MIP-I-alfa), eritropoyetina (EPO), factor de crecimiento nervioso tal como NGF-beta, factor de crecimiento derivado de plaquetas (PDGF), factores de crecimiento de fibroblastos, incluyendo, por ejemplo, aFGF y bFGF, factor de crecimiento epidérmico (EGF), factores de crecimiento transformantes (TGF), incluyendo, entre otros, TGF-a y TGF-p, incluyendo TGF-p1, TGF-p2, TGF-p3, TGF-p4 o TGF-p5, factores de crecimiento similares a la insulina-I y -II (IGF-I e IGF-II), des(I-3)-IGF-I (IGF-I del cerebro) y factores osteoinductivos. Las insulinas y proteínas relacionadas con la insulina, incluyendo la insulina, cadena A de insulina, cadena B de insulina, proinsulina y proteínas de unión al factor de crecimiento similar a insulina. Proteínas de coagulación y relacionadas con la coagulación, tales como, entre otros, factor VIII, factor tisular, factor de von Willebrand, proteína C, alfa-1 -antitripsina, activadores del plasminógeno, tales como urocinasa y activador tisular del plasminógeno ("t-PA"), bombesina, trombina y trombopoyetina; (vii) otras proteínas sanguíneas y séricas, incluyendo, aunque sin limitación, albúmina, IgE y antígenos de grupos sanguíneos. Factores estimulantes de colonias y receptores de los mismos, incluyendo los siguientes, entre otros, M-CSF, GM-CSF y G-CSF, y receptores de los mismos, tales como el receptor de CSF-1 (c-fms). Receptores y proteínas asociadas a receptor, incluyendo, por ejemplo, receptor flk2/flt3, receptor de obesidad (OB), receptor de LDL, receptores de la hormona del crecimiento, receptores de trombopoyetina ("TPO-R", "c-mpl"), receptores de glucagón, receptores de interleucina, receptores de interferón, receptores de linfocitos T, receptores del factor de células madre, tales como c-Kit, y otros receptores. Ligandos de receptor, incluyendo, por ejemplo, OX40L, el ligando para el receptor OX40. Factores neurotróficos, incluyendo factor neurotrófico derivado de hueso (BDNF) y neurotrofina-3, -4, -5 o -6 (NT-3, NT-4, NT-5 o NT-6). Cadena A de relaxina, cadena B de relaxina y prorelaxina; interferones y receptores de interferón, que incluyen, por ejemplo, interferón-a, -p y -y, y sus receptores. Interleucinas y receptores de interleucinas, incluyendo IL-1 a IL-33 y receptores de IL-1 a IL-33, tal como el receptor de IL-8, entre otros. Antígenos víricos, incluyendo un antígeno vírico de la envoltura del virus del SIDA. Lipoproteínas, calcitonina, glucagón, factor natriurético auricular, tensioactivo pulmonar, factor de necrosis tumoral-alfa y -beta, encefalinasa, RANTES (regulado después de la activación de linfocitos T normales, expresados y secretados), péptido asociado a gonadotropina de ratón, DNasa, inhibina y activina. Integrina, proteína A o D, factores reumatoides, inmunotoxinas, proteína morfogenética ósea (BMP), superóxido dismutasa, proteínas de la membrana superficial, factor acelerador de descomposición (DAF), envoltura del virus del SIDA, proteínas de transporte, receptores de migración dirigida, adresinas, proteínas reguladoras, inmunoadhesinas, anticuerpos. Miostatinas, proteínas TALL, que incluyen TALL-1, proteínas amiloides, que incluyen, pero no se limitan a, proteínas de amiloide-beta, linfopoyetinas del estroma tímico (''TSLP"), ligando RANK ("OPGL"), c-kit, receptores de TNF, que incluyen receptor de TNF tipo 1, TRAIL-R2, angiopoyetinas, y fragmentos biológicamente activos o análogos o variantes de cualquiera de los anteriores.
Los polipéptidos y anticuerpos a modo de ejemplo incluyen Activase® (Alteplase); alirocumab, Aranesp® (darbepoetina-alfa), Epogen® (epoetina alfa o eritropoyetina); Avonex® (interferón (3-Ia); Bexxar® (tositumomab); Betaseron® (interferón-p); bococizumab (anticuerpo monoclonal anti-PCSK9 designado L1L3, véase U.S.P.N. 8.080.243); Campath® (Alemtuzumab); Dynepo® (epoetina delta); Velcade® (bortezomib); MLN0002 (Ab anti-a4p7 ); MLN1202 (Ab receptor de quimiocinas anti-CCR2); Enbrel® (etanercept); Eprex® (epoetina alfa); Erbitux® (cetuximab); evolocumab; Genotropin® (somatropina); Herceptin® (trastuzumab); Humatrope® (somatropina [origen de ADNr] para inyección); Humira® (adalimumab); Infergen® (interferón Alfacon-1); Natrecor® (nesiritida); Kineret® (anakinra), Leukine® (sargamostim); LymphoCide® (epratuzumab); Benlysta™ (belimumab); Metalyse® (tenecteplasa); Mircera® (metoxi polietilenglicol-epoetina beta); Mylotarg® (gemtuzumab ozogamicin); Raptiva® (efalizumab); Cimzia® (certolizumab pegol); Soliris™ (eculizumab); Pexelizumab (complemento anti-C5); MEDI-524 (Numax®); Lucentis® (ranibizumab); edrecolomab (Panorex®); Trabio® (lerdelimumab); TheraCim hR3 (nimotuzumab); Omnitarg (pertuzumab, 2C4); Osidem® (IDM-I); OvaRex® (B43.13); Nuvion® (visilizumab); cantuzumab mertansina (huC242-DMI); NeoRecormon® (epoetina beta); Neumega® (Oprelvekin); Neulasta® (filgastrim pegilado, G-CSF pegilado, hu-Met-G-CSF pegilado); Neupogen® (Filgrastim); Orthoclone OKT3® (muromonab-CD3), Procrit® (epoetina alfa); Remicade® (infliximab), Reopro® (abciximab), Actemra® (mAb anti-receptor de IL6), Avastin® (bevacizumab), HuMax-CD4 (zanolimumab), Rituxan® (rituximab); Tarceva® (Erlotinib); Roferon-A® (interferón alfa-2a); Simulect® (basiliximab); Stelara™ (ustekinumab); Prexige® (lumiracoxib); Synagis® (palivizumab); 146B7-CHO (anticuerpo anti-IL15, véase U.S.P.N. 7.153.507), Tysabri® (natalizumab); Valortim® (<m>D<x>-1303, Ab anti-antígeno protector de B. anthracis); ABthrax™; Vectibix® (panitumumab); Xolair® (omalizumab), ETI211 (Ab anti-MRSA), IL-I Trap (la porción Fc de IgG1 humana y los dominios extracelulares de ambos componentes del receptor de IL-1 (el receptor de tipo I y la proteína accesoria receptora)), VEGF Trap (dominios de Ig de VEGFR1 fusionados con Fc de IgG1), Zenapax® (daclizumab); Zenapax® (daclizumab), Zevalin® (ibritumomab tiuxetan), Zetia (ezetimiba), Atacicept (TACI-Ig), Ab anti-a4p7 (vedolizumab); galiximab (anticuerpo monoclonal anti-CD80), Ab anti-CD23 (lumiliximab); BR2-Fc (proteína de fusión huBR3 / huFc, antagonista soluble de BAFF); Simponi™ (golimumab); Mapatumumab (Ab humano anti-receptor 1 de TRAIL); Ocrelizumab (Ab humano anti-CD20); HuMax-EGFR (zalutumumab); M200 (Volociximab, Ab anti-integrina a5p1); MDX-010 (Ipilimumab, Ab anti-CTLA-4 y VEGFR-1 (IMC-18F1); Ab anti-BR3; Ab anti-toxina A y toxina B C de C. difficile MDX-066 (CDA-I) y MDX-1388); conjugados anti-CD22 dsFv-PE38 (CAT-3888 y CAT-8015); mAb anti-CD25 (HuMax-TAC); anticuerpos anti-TSLP; anticuerpo anti-receptor de TSLP (véase U.S.P.N. 8.101.182); anticuerpo anti-TSLP designado A5 (véase U.S.P.N. 7.982.016); (véase Ab anti-CD3 (NI-0401); Adecatumumab (MT201, Ab anti-EpCAM-CD326); MDX-060, SGN-30, SGN-35 (Ab anti-CD30); MDX-1333 (anti-IFNAR); HuMax CD38 (Ab anti-CD38); Ab anti-CD40L; Ab anti-Cripto; figrógeno de fibrosis pulmonar idiopática de fase I anti-CTGF (FG-3019); Ab anti-CTLA4; mAb anti-eotaxina1 (CAT-213); Ab anti-FGF8; Ab anti-gangliosido GD2; anticuerpos antiesclerostina (véase U.S.P.N. 8.715.663 o U.S.P.N. 7.592.429) anticuerpo anti-esclerostina designado Ab-5 (véase U.S.P.N. 8.715.663 o U.S.P.N. 7.592.429); Ab anti-gangliósido GM2; Ab humano anti-GDF-8 (MYO-029); Ab anti receptor de GM-CSF (CAM-3001); Ab anti-HepC (HuMax HepC); MEDI-545, MDX-1103 03 (Ab anti-IFNa); Ab anti-IGFIR; Ab anti-IGF-IR (HuMax-Inflam); Ab anti-IL12/IL23p40 (Briakinumab); Ab anti-IL-23p19 (LY2525623); Ab anti-IL13 (CAT-354); Ab anti-IL-17 (AIN457); Ab anti-IL2Ra (HuMax-TAC); Ab anti-receptor de IL5; Ab anti-receptores de integrina (MDX-O18, CNTO 95); Ab anti-IPIO para colitis ulcerativa (MDX-1100); anticuerpo anti-LLY; BMS-66513; Ab anti-receptor de manosa/hCGp (MDX-1307); conjugado dsFv-PE38 anti-mesotelina (CAT-5001); Ab anti-PDl (MDX-1106 (ONO- 4538)); anticuerpo anti-PDGFRa (IMC-3G3); Ab anti-TGFp (GC-1008); Ab humano anti-receptor 2 de TRAIL (HGS-ETR2); Ab anti-TWEAK; Ab anti-VEGFR/Flt-1; Ab anti-ZP3 (HuMax-ZP3); anticuerpo contra NVS n.° 1; anticuerpo contra NVS n.° 2; y un anticuerpo monoclonal beta-amiloide que comprende las secuencias SEQ ID NO: 8 y SEQ ID NO: 6 (véase U.S.P.N. 7.906.625).
Ejemplos de anticuerpos adecuados para los métodos y formulaciones farmacéuticas incluyen los anticuerpos mostrados en la Tabla 1. Otros ejemplos de anticuerpos adecuados incluyen infliximab, bevacizumab, ranibizumab, cetuximab, ranibizumab, palivizumab, abagovomab, abciximab, actoxumab, adalimumab, afelimomab, afutuzumab, alacizumab, alacizumab pegol, ald518, alemtuzumab, alirocumab, alemtuzumab, altumomab, amatuximab, anatumomab mafenatox, anrukinzumab, apolizumab, arcitumomab, aselizumab, altinumab, atlizumab, atorolimiumab, tocilizumab, bapineuzumab, basiliximab, bavituximab, bectumomab, belimumab, benralizumab, bertilimumab, besilesomab, bevacizumab, bezlotoxumab, biciromab, bivatuzumab, bivatuzumab mertansina, blinatumomab, blosozumab, brentuximab vedotin, briakinumab, brodalumab, canakinumab, cantuzumab mertansina, cantuzumab mertansina, caplacizumab, capromab pendetida, carlumab, catumaxomab, cc49, cedelizumab, certolizumab pegol, cetuximab, citatuzumab bogatox, cixutumumab, clazakizumab, clenoliximab, clivatuzumab tetraxetan, conatumumab, crenezumab, cr6261, dacetuzumab, daclizumab, dalotuzumab, daratumumab, demcizumab, denosumab, detumomab, dorlimomab aritox, drozitumab, duligotumab, dupilumab, ecromeximab, eculizumab, edobacomab, edrecolomab, efalizumab, efungomaab, elotuzumab, elsilimomab, enavatuzumab, enlimomab pegol, enokizumab, enokizumab, enoticumab, enoticumab, ensituximab, epitumomab cituxetan, epratuzumab, erlizumab, ertumaxomab, etaracizumab, etrolizumab, exbivirumab, exbivirumab, fanolesomab, faralimomab, farletuzumab, fasinumab, fbta05, felvizumab, fezakinumab, ficlatuzumab, figitumumab, flanvotumab, fontolizumab, foralumab, foravirumab, fresolimumab, fulranumab, futuximab, galiximab, ganitumab, gantenerumab, gavilimomab, gemtuzumab ozogamicin, gevokizumab, girentuximab, glembatumumab vedotin, golimumab, gomiliximab, gs6624, ibalizumab, ibritumomab tiuxetan, icrucumab, igovomab, imciromab, imgatuzumab, inclacumab, indatuximab ravtansina, infliximab, intetumumab, inolimomab, inotuzumab ozogamicin, ipilimumab, iratumumab, itolizumab, ixekizumab, keliximab, labetuzumab, lebrikizumab, lemalesomab, lerdelimumab, lexatumumab, libivirumab, ligelizumab, lintuzumab, lirilumab, lorvotuzumab mertansina, lucatumumab, lumiliximab, mapatumumab, maslimomab, mavrilimumab, matuzumab, mepolizumab, metelimumab, milatuzumab, minretumomab, mitumomab, mogamulizumab, morolimumab, motavizumab, moxetumomab pasudotox, muromonab-cd3, nacolomab tafenatox, namilumab, naptumomab estafenatox, narnatumab, natalizumab, nebacumab, necitumumab, nerelimomab, nesvacumab, nimotuzumab, nivolumab, nofetumomab merpentan, ocaratuzumab, ocrelizumab, odulimomab, ofatumumab, olaratumab, olokizumab, omalizumab, onartuzumab, oportuzumab monatox, oregovomab, orticumab, otelixizumab, oxelumab, ozanezumab, ozoralizumab, pagibaximab, palivizumab, panitumumab, panobacumab, parsatuzumab, pascolizumab, pateclizumab, patritumab, pemtumomab, perakizumab, pertuzumab, pexelizumab, pidilizumab, pintumomab, placulumab, ponezumab, priliximab, pritumumab, PRO 140, quilizumab, racotumomab, radretumab, rafivirumab, ramucirumab, ranibizumab, raxibacumab, regavirumab, reslizumab, rilotumumab, rituximab, robatumumab, roledumab, romosozumab, rontalizumab, rovelizumab, ruplizumab, samalizumab, sarilumab, satumomab pendetida, secukinumab, sevirumab, sibrotuzumab, sifalimumab, siltuximab, simtuzumab, siplizumab, sirukumab, solanezumab, solitomab, sonepcizumab, sontuzumab, stamulumab, sulesomab, suvizumab, tabalumab, tacatuzumab tetraxetan, tadocizumab, talizumab, tanezumab, taplitumomab paptox, tefibazumab, telimomab aritox, tenatumomab, tefibazumab, telimomab aritox, tenatumomab, teneliximab, teplizumab, teprotumumab, TGN1412, tremelimumab, ticilimumab, tildrakizumab, tigatuzumab, TNX-650, tocilizumab, toralizumab, tositumomab, tralokinumab, trastuzumab, TRBS07, tregalizumab, tremelimumab, tucotuzumab celmoleucina, tuvirumab, ublituximab, urelumab, urtoxazumab, ustekinumab, vapaliximab, vatelizumab, vedolizumab, veltuzumab, vepalimomab, vesencumab, visilizumab, volociximab, vorsetuzumab mafodotin, votumumab, zalutumumab, zanolimumab, zatuximab, ziralimumab y zolimomab aritox.
Los anticuerpos más preferidos para su uso en las formulaciones y métodos desvelados son adalimumab, bevacizumab, blinatumomab, cetuximab, conatumumab, denosumab, eculizumab, erenumab, evolocumab, infliximab, natalizumab, panitumumab, rilotumumab, rituximab, romosozumab y trastuzumab, y anticuerpos seleccionados de la Tabla 1.
Tabla 1
Ejemplos de anticuerpos terapéuticos
Diana (nombre Conc. Viscosidad (cP) Tipo de HC ID NO SEQ ID NO informal) (mg/ml) (= mPas) (incluyendo Tipo de SEQ
LC pl de LC de HC alotipos)
Anti-amiloide 142,2 5,0 IgG1 (f) (R;EM) Kappa 9,0 1 2 GMCSF (247) 139,7 5,6 IgG2 Kappa 8,7 3 4 CGRPR 136,6 6,3 IgG2 Lambda 8,6 5 6 RANKL 152,7 6,6 IgG2 Kappa 8,6 7 8 Esclerostina (27H6) 145,0 6,7 IgG2 Kappa 6,6 9 10 IL-1R1 153,9 6,7 IgG2 Kappa 7,4 11 12 Miostatina 141,0 6,8 IgG1 (z) (K;EM) Kappa 8,7 13 14 B7RP1 137,5 7,7 IgG2 Kappa 7,7 15 16 Amiloide 140,6 8,2 IgG1 (za) (K;DL) Kappa 8,7 17 18 GMCSF (3.112) 156,0 8,2 IgG2 Kappa 8,8 19 20 Ejemplos de anticuerpos terapéuticos
Conc. Viscosidad (cP) Tipo de HC EQ ID NO (mg/ml) (= mPas) (incluyendo Tipo de S
LC pl de LC alotipos)
159,5 8,3 IgG2 Kappa 8,7 21 22 161,1 8,4 IgG2 Lambda 8,6 23 24 150,0 9,1 IgG2 Kappa 6,7 25 26 150,0 9,2 IgG2 Kappa 6,9 27 28 155,2 9,6 IgG2 Lambda 8,8 29 30
147,1 9,9 IgG2 Lambda 7,3 31 32
157,0 10,0 IgG2 Kappa 8,2 33 34 144,5 10,0 IgG2 Kappa 8,7 35 36 155,8 10,6 IgG2 Kappa 8,1 37 38 162,5 11,0 IgG2 Kappa 8,1 39 40 146,0 12,1 IgG2 Kappa 8,4 41 42 144,5 12,1 IgG2 Kappa 8,4 43 44
155,0 12,1 IgG2 Kappa 7,8 45 46
143,7 12,2 IgG1 (f) (R;EM) Kappa 8,8 47 48 154,2 12,2 IgG1 (za) (K;DL) Kappa 8,8 49 50 151,5 12,4 IgG2 Kappa 7,4 51 52 158,3 12,5 IgG1 (f) (R;EM) Kappa 8,7 53 54 141,7 14,0 IgG2 Kappa 6,8 55 56 145,8 15,2 IgG2 Kappa 8,6 57 58 149,0 16,3 IgG1 (f) (R;EM) Kappa 8,8 59 60 159,2 17,3 IgG1 (za) (K;DL) Kappa 8,6 61 62 150,9 19,1 IgG2 Kappa 8,6 63 64 159,4 19,6 IgG2 Kappa 8,2 65 66 134,8 20,9 IgG2 Kappa 7,4 67 68 134,2 21,4 IgG2 Lambda 7,2 69 70 145,3 22,5 IgG2 Kappa 8,2 71 72 145,2 22,8 IgG2 Lambda 8,1 73 74
150,0 23,0 IgG1 (z) (K;EM) Kappa 8,1 75 76
133,9 29,4 IgG2 Lambda 7,0 77 78 Ejemplos de anticuerpos terapéuticos
Diana (nombre Conc. Viscosidad (cP) Tipo de HC SEQ ID NO informal) (mg/ml) (= mPas) (incluyendo Tipo de SEQ ID NO
LC pl de LC de HC alotipos)
Esclerostina (2B8) 150,0 30,0 igG2 Lambda 6,7 79 80 Esclerostina 141,4 30,4 igG2 Kappa 6,8 81 82 c-fms 146,9 32,1 igG2 Kappa 6,6 83 84 a4p7 154,9 32,7 igG2 Kappa 6,5 85 86 * Una concentración a modo de ejemplo adecuada para su administración al paciente; AHC - cadena pesada del anticuerpo; LC - cadena ligera del anticuerpo.
Las concentraciones de polipéptido a modo de ejemplo en la formulación pueden variar desde aproximadamente 70 mg/ml hasta aproximadamente 300 mg/ml (o más), aproximadamente 120 mg/ml a aproximadamente 270 mg/ml, desde aproximadamente 140 mg/ml hasta aproximadamente 255 mg/ml, desde aproximadamente 140 mg/ml hasta aproximadamente 240 mg/ml, o desde aproximadamente 140 mg/ml hasta aproximadamente 220 mg/ml, o alternativamente desde aproximadamente 190 mg/ml hasta aproximadamente 210 mg/ml, tal como 210 mg/ml. La concentración de proteína dependerá del uso final de la formulación farmacéutica y un experto en la técnica puede determinarla fácilmente. Las concentraciones de proteína particularmente contempladas son al menos 70, 75, 80, 85, 90, 95, 100, 105, 110, 115, 120, 125, 130, 135, 140, 145, 150, 155, 160, 165, 170, 175, 180, 185, 190, 195, 200, 205, 210, 215, 220, 225, 230, 235, 240, 245, 250, 255, 260, 265, 270, 275, 280, 285, 290, 295 y 300 mg/ml e incluyendo todos los valores intermedios.
Componentes de formulación farmacéutica
Los componentes de formulación aceptables son preferentemente no tóxicos para los pacientes a las dosis y concentraciones usadas. Las formulaciones farmacéuticas pueden comprender agentes para modificar, mantener o conservar, por ejemplo, el pH, la osmolaridad, la viscosidad, la claridad, el color, la isotonicidad, el olor, la esterilidad, la estabilidad, la tasa de disolución o liberación, la adsorción o la penetración de la composición.
En general, los excipientes se pueden clasificar basándose en los mecanismos por los que estabilizan las proteínas contra diversas agresiones químicas y físicas. Algunos excipientes alivian los efectos de una agresión específica o regulan una susceptibilidad particular de un polipéptido específico. Otros excipientes afectan más en general las estabilidades físicas y covalentes de las proteínas.
Los excipientes comunes de formulaciones de proteína líquidas y liofilizadas se muestran en la Tabla 2 (véase también (Kamerzell, Esfandiary, Joshi, Middaugh, & Volkin, 2011)).
Tabla 2
Ejemplos de componentes de excipientes para formulaciones de polipéptidosComponente Función Ejemplos
Tampones Mantener el pH de la disolución Citrato
Mediar en las interacciones específicas de tampón-ion con Succinato polipéptidos
Acetato
glutamato
Aspartato
histidina
Fosfato
Ejemplos de componentes de excipientes para formulaciones de polipéptidosComponente Función Ejemplos
Tris
Glicina
Azúcares e Estabilizar polipéptidos Sacarosa
hidratos de
carbono Tonificar agentes Trehalosa
Actuar como vehículos para fármacos inhalados (por ejemplo, Sorbitol lactosa)
Manitol
Glucosa Proporcionar disoluciones de dextrosa para la administración IV Lactosa
Derivados de ciclodextrina Estabilizadores y Potenciar la elegancia del producto y prevenir el estallido Manitol
agentes de
carga Glicina
Proporcionar resistencia estructura a una torta de liofilización
Osmolitos Estabilizar contra el estrés ambiental (temperatura, deshidratación) Sacarosa
Trehalosa
Sorbitol
Glicina
prolina
glutamato
Glicerol
Urea
Aminoácidos Mediar en interacciones específicas con polipéptidos histidina
arginina Proporcionar actividad antioxidante (por ejemplo, His, Met) Glicina
prolina
Tamponar, tonificar lisina
Metionina
Mezclas de aa (por ejemplo, Glu/Arg)
Polipéptidos y Actuar como inhibidores competitivos de la adsorción de polipéptidos HSA
polímeros
PVA
Proporcionar agentes de carga para la liofilización PVP
Ejemplos de componentes de excipientes para formulaciones de polipéptidosComponente Función Ejemplos
Actuar como vehículos de administración de fármaco PLGA
PEG
Gelatina
Dextrano Hidroxietilalmidón HEC CMC
Antioxidantes Prevenir el daño de polipéptidos oxidativos Agentes reductores Aglutinantes de iones metálicos (si se incluye un metal como cofactor Secuestrantes de oxígeno o se requiere para la actividad proteasa)
Secuestrantes de radicales libres
Agentes quelantes (por ejemplo, E<d>TA, E<g>T<a>, Secuestrantes de radicales libres DTPA)
Etanol
Iones metálicos Cofactores de polipéptidos Magnesio
Complejos de coordinación (suspensiones) Cinc
Ligandos Estabilizadores de conformación nativa contra el desplegamiento Metales
específicos inducido por estrés
Ligandos Proporcionar flexibilidad de la conformación Aminoácidos Polianiones Tensioactivos Actuar como inhibidores competitivos de la adsorción de polipéptidos Polisorbato 20
Polisorbato 80
Actuar como inhibidor competitivo de la desnaturalización de la Poloxámero 188 superficie de polipéptidos
Tensioactivos aniónicos (por ejemplo, sulfonatos y Proporcionar liposomas como vehículos de administración de sulfosuccinatos) fármaco
Tensioactivos catiónicos Inhibir la agregación durante la liofilización Tensioactivos de ion bipolar Actuar como reductores de los tiempos de reconstitución de
productos liofilizados
Sales Tonificar agentes NaCl
Estabilizar o desestabilizar agentes para polipéptidos, especialmente KCl
Ejemplos de componentes de excipientes para formulaciones de polipéptidosComponente Función Ejemplos
aniones NaSÜ4
Conservantes Proteger contra el crecimiento microbiano Alcohol bencílico
m-cresol
Fenol
Se conocen en la técnica otros excipientes (por ejemplo, véase (Powell, Nguyen, & Baloian, 1998)).
Los expertos en la técnica pueden determinar qué cantidad o intervalo de excipiente se puede incluir en cualquier formulación particular para lograr una formulación biofarmacéutica que promueva la retención de la estabilidad del biofármaco. Por ejemplo, la cantidad y el tipo de una sal a incluir en una formulación biofarmacéutica se pueden seleccionar basándose en la osmolalidad deseada (es decir, isotónica, hipotónica o hipertónica) de la disolución final, así como las cantidades y la osmolalidad de otros componentes a incluir en la formulación.
Tampones
El pH de la disolución afecta a la integridad química de los restos de aminoácidos del polipéptido (por ejemplo, desamidación de Asn y oxidación de Met) y el mantenimiento de su estructura de orden superior. Los agentes de tamponamiento se usan para controlar el pH de la disolución y optimizar la estabilidad de la proteína. La máxima estabilidad de un fármaco de polipéptido está frecuentemente dentro de un estrecho intervalo de pH. Varios enfoques (por ejemplo, estudios de estabilidad acelerada y estudios de cribado calorimétrico) son útiles para este fin. Una vez se finaliza una formulación, el medicamento se debe fabricar y mantener dentro de una especificación predefinida durante toda su estabilidad en almacén. Por lo tanto, casi siempre se usan agentes de tamponamiento para controlar el pH en la formulación.
Se pueden usar ácidos orgánicos, fosfatos y Tris como tampones en formulaciones de polipéptido (véase la Tabla 3). La capacidad del tampón de tamponar especies es máxima a un pH igual al pKa y disminuye a medida que el pH aumenta o se aleja de este valor. El noventa por ciento de la capacidad de tamponamiento existe dentro de una unidad de pH de su pKa. La capacidad de tamponamiento aumenta proporcionalmente al aumentar la concentración del tampón.
Tabla 3
Agentes de tamponamiento usados comúnmente y sus valores de pKa
Tampón pKa Ejemplo medicamento
Acetato 4,8 Neupogen®, Neulasta®
Succinato pKa1 = 4,8, pKa2 = 5,5 Actimmune®
Citrato pKa1 = 3,1, pKa2 = 4,8, pKa3 = 6,4 Humira®
histidina (imidazol) 6,0 Xolair®
Tampón pKa Ejemplo medicamento
fosfato pKa1 = 2,15, pKa2 = 7,2, pKa3 = 12,3 Enbrel® (formulación líquida) Tris 8,1 Leukine
Además de lo anterior, algunos polipéptidos terapéuticos pueden ser "autotamponantes" a una concentración farmacéuticamente suficiente. Las formulaciones de dichos polipéptidos pueden dispensarse frecuentemente con un tampón convencional.
Un compuesto de tamponamiento del pH puede estar presente en cualquier cantidad adecuada para mantener el pH de la formulación en un valor predeterminado. Cuando el agente de tamponamiento del pH es un aminoácido, por ejemplo, la concentración del aminoácido es frecuentemente entre 0,1 mM y 1000 mM (1 M). El agente de tamponamiento del pH puede ser al menos 0,1,0,5, 0,7, 0,80,9, 1,0, 1,2, 1,5, 1,7, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 30, 40, 50, 60, 70, 80, 90, 100, 200, 500, 700 o 900 mM. En algunos casos, la concentración del agente de tamponamiento del pH es entre 1, 1,2, 1,5, 1,7, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 30, 40, 50, 60, 70, 80, o 90 mM y 100 mM. En otros casos, la concentración del agente de tamponamiento del pH es entre 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 30, o 40 mM y 50 mM. Por ejemplo, el agente de tamponamiento del pH es 10 mM. En algún caso, el tampón es fosfato 10 mM. En otros ejemplos, el tampón es acetato 10 mM.
Azúcares e hidratos de carbono
Se usan frecuentemente azúcares para estabilizar los polipéptidos en tanto formulaciones líquidas como liofilizadas. Se cree que los disacáridos, tales como la sacarosa y la trehalosa, estabilizan las proteínas por hidratación preferencial a altas concentraciones en el estado líquido y por interacciones específicas con polipéptidos y formación de matrices vítreas viscosas en el estado sólido. Las moléculas de azúcar pueden aumentar la viscosidad de las disoluciones de anticuerpos monoclonales, supuestamente debido a un mecanismo de hidratación preferencial. Los alcoholes de azúcar, tales como el sorbitol, pueden estabilizar los polipéptidos en disolución y en el estado liofilizado. El manitol se usa frecuentemente como agente de carga en formulaciones liofilizadas. La lactosa se puede usar como molécula portadora para formulaciones inhaladas de polipéptidos. Los derivados de ciclodextrina pueden estabilizar las proteínas en formulaciones líquidas de anticuerpos, antígenos de vacuna, y dichas proteínas más pequeñas como factores de crecimiento, interleucina-2 e insulina.
Estabilizadores y agentes de carga
Se usan normalmente agentes de carga en formulaciones liofilizadas para potenciar la elegancia del producto y para prevenir el secado. Las condiciones en la formulación se diseñan, en general, de manera que el agente de carga cristalice en la fase amorfa congelada (ya sea durante la congelación o el recocido por encima de la temperatura de transición vítrea de los solutos concentrados al máximo por congelación (Tg')) dando la estructura de torta y masa. El manitol y la glicina son ejemplos de agentes de carga usados comúnmente.
Los estabilizadores incluyen compuestos que pueden servir de crioprotectores, lioprotectores y agentes formadores de vidrio. Los crioprotectores actúan estabilizando los polipéptidos durante congelación o en el estado congelado a bajas temperaturas. Los lioprotectores estabilizan los polipéptidos en la forma farmacéutica sólida secada por congelación conservando las propiedades conformacionales de tipo nativas de la proteína durante las etapas de deshidratación de la liofilización. Se han clasificado propiedades en el estado vítreo como "fuertes" o "frágiles" dependiendo de sus propiedades de relajación en función de la temperatura. Es importante que los crioprotectores, lioprotectores y agentes formadores de vidrio permanezcan en la misma fase con el polipéptido para conferir estabilidad. Los azúcares, polímeros y polioles se clasifican en esta categoría y algunas veces pueden desempeñar las tres funciones de crioprotectores, lioprotectores y agentes formadores de vidrio.
Los polioles engloban una clase de excipientes que incluyen azúcares (por ejemplo, manitol, sacarosa, sorbitol) y otros alcoholes polihidroxilados (por ejemplo, glicerol y propilenglicol). El polímero polietilenglicol (PEG) se incluye en esta categoría. Los polioles se usan comúnmente como excipientes estabilizantes y/o agentes de isotonicidad en tanto formulaciones de polipéptido parenterales líquidas como liofilizadas. Con respecto a la serie de Hofmeister, los polioles son cosmotrópicos y se excluyen preferentemente de la superficie del polipéptido. Los polioles pueden proteger a los polipéptidos de la degradación tanto física como química. Los codisolventes excluidos preferentemente aumentan la tensión superficial eficaz del disolvente en la interfase del polipéptido, por lo que la mayoría de las conformaciones de polipéptido energéticamente favorables son aquellas con las áreas superficiales más pequeñas.
El manitol se usa frecuentemente como un agente de carga en formulaciones liofilizadas debido a que cristaliza en la fase de proteína amorfa durante la liofilización, confiriendo estabilidad estructural a la torta (por ejemplo, Leukine®, Enbrel® - Lyo, Betaseron®). En general, se usa en combinación con un crio- y/o lioprotector, como la sacarosa. Debido a la tendencia del manitol a cristalizar en condiciones congeladas, el sorbitol y la sacarosa son agentes de tonicidad/estabilizadores preferidos en las formulaciones líquidas para proteger el producto contra los estreses de congelación-descongelación encontrados durante el transporte o cuando se congela la masa antes de la fabricación. El sorbitol y la sacarosa son mucho más resistentes a la cristalización y, por lo tanto, es menos probable que se separen las fases del polipéptido. Se debe evitar preferentemente el uso de azúcares reductores que contienen grupos aldehído o cetona libres, tales como glucosa y lactosa, debido a que pueden reaccionar y glucar los restos lisina y arginina de la superficie de los polipéptidos por la reacción de Maillard de aldehídos y aminas primarias. La sacarosa puede hidrolizarse en fructosa y glucosa en condiciones ácidas y, por consiguiente, puede provocar glucación.
Un estabilizador (o una combinación de estabilizadores) se puede añadir a una formulación de liofilización para prevenir o reducir la agregación inducida por la liofilización o inducida por el almacenamiento y la degradación química. Una disolución neblinosa o turbia tras la reconstitución indica que el polipéptido ha precipitado. "Estabilizador" significa un excipiente capaz de prevenir la agregación u otra degradación física, así como la degradación química (por ejemplo, autólisis, desamidación, oxidación, etc.) en un estado acuoso y sólido. Los estabilizadores que se usan convencionalmente en las composiciones farmacéuticas incluyen sacarosa, trehalosa, manosa, maltosa, lactosa, glucosa, rafinosa, celobiosa, gentiobiosa, isomaltosa, arabinosa, glucosamina, fructosa, manitol, sorbitol, glicina, HCl de arginina, compuestos de poli-hidroxi, que incluye polisacáridos, tales como dextrano, almidón, hidroxietilalmidón, ciclodextrinas, N-metilpirolideno, celulosa y ácido hialurónico, cloruro sódico.
Osmolitos
Ejemplos de osmolitos se presentan en la Tabla A. Otros osmolitos que pueden ser útiles como excipientes incluyen taurina, betaína, trimetilamina N-óxido (TMAO), colina-O-sulfato y sarcosina.
La formulación farmacéutica es preferentemente isotónica, con una osmolalidad que varía desde entre aproximadamente 250 y aproximadamente 400 mOsm/kg, por ejemplo, aproximadamente 250 mOsm/kg, aproximadamente 260 mOsm/kg, aproximadamente 270 mOsm/kg, aproximadamente 280 mOsm/kg, aproximadamente 290 mOsm/kg, aproximadamente 300 mOsm/kg, aproximadamente 310 mOsm/kg, aproximadamente 320 mOsm/kg, aproximadamente 330 mOsm/kg, aproximadamente 340 mOsm/kg, aproximadamente 350 mOsm/kg, aproximadamente 360 mOsm/kg, aproximadamente 370 mOsm/kg, aproximadamente 380 mOsm/kg, aproximadamente 390 mOsm/kg, o aproximadamente 400 mOsm/kg. La osmolalidad es la medida de la relación entre solutos y el volumen de fluido. En otras palabras, es el número de moléculas e iones (o moléculas) por kilogramo de una disolución. La osmolalidad puede ser de 300 mOsm/kg. La osmolalidad se puede medir por un osmómetro, tal como 2020 Multi-sample Osmometer de Advanced Instruments, Norwood, MA. El 2020 Multi-sample Osmometer de Advanced Instruments mide la osmolalidad usando el método de depresión del punto de congelación. Cuanto mayor sea la cantidad de osmolitos en una disolución, menor será la temperatura a la que se congelará. La osmolalidad también se puede medir usando cualquier otro método y en cualquier otra unidad conocida en la técnica, tal como extrapolación lineal. La formulación farmacéutica puede ser isotónica para un glóbulo sanguíneo humano, tal como un glóbulo rojo.
Polipéptidos y polímeros
Los excipientes basados en polipéptido añaden complejidad a la formulación, especialmente en el desarrollo de métodos analíticos para monitorizar la estabilidad del fármaco o vacuna basado en polipéptido en presencia de un excipiente basado en polipéptido. Se han evaluado polímeros como excipientes (por ejemplo, como agentes de carga) en formulaciones de polipéptido liofilizadas. También se pueden preparar formulaciones de liberación controlada de fármacos de polipéptido y vacunas en las que se formulan polipéptidos con polímeros, tales como PLGA (poli(ácido láctico-co-glicólico)) y PEG (polietilenglicol). Se pueden usar muchos polímeros solubles en agua adicionales (por ejemplo, HEC (hidroxietilcelulosa), CMC (carboximetilcelulosa) para formular fármacos de polipéptido para administración tópica.
Antioxidantes
Se usan agentes reductores, secuestrantes de oxígeno/radicales libres y agentes quelantes como antioxidantes en formulaciones farmacéuticas. Los antioxidantes en las formulaciones de polipéptido terapéutico deben ser solubles en agua y seguir activos durante toda la estabilidad en almacén del producto. Los agentes reductores y secuestrantes de oxígeno/radicales libres funcionan destruyendo las especies de oxígeno activo en disolución. Los agentes quelantes (por ejemplo, EDTA (ácido etilendiaminatetraacético)) pueden ser eficaces uniendo contaminantes de oligoelementos que promueven la formación de radicales libres. En la formulación líquida de factor de crecimiento de fibroblastos ácido, por ejemplo, el EDTA inhibe la oxidación catalizada por iones metálicos de restos de cisteína.
Iones metálicos
En general, los iones de metales de transición no se desean en las formulaciones de polipéptido debido a que pueden catalizar reacciones de degradación física y química en medicamentos de polipéptido. En las formulaciones se incluyen iones metálicos específicos, sin embargo, cuando actúan como cofactores para los polipéptidos. También se pueden usar iones metálicos en las formulaciones en suspensión de polipéptidos donde forman complejos de coordinación (por ejemplo, suspensiones de cinc de insulina). Se pueden usar iones magnesio (10 120 mM) para inhibir la isomerización del ácido aspártico a ácido isoaspártico.
Ligandos específicos
Un enfoque para mejorar la estabilidad conformacional de los fármacos de polipéptido terapéutico es aprovechar los sitios de unión a ligando inherentes del polipéptido. Por ejemplo, Pulmozyme® no solo requiere iones metálicos bivalentes para su actividad enzimática, pero tiene estabilidad conformacional mejorada en presencia de iones de calcio. El factor de crecimiento de fibroblastos tanto ácido como básico (aFGF y bFGF) se une naturalmente a los proteoglicanos altamente negativamente cargados sobre superficies celulares. Una variedad de otros compuestos altamente negativamente cargados también se une y estabiliza espectacularmente el aFGF por interacción con el sitio de unión al polianión de la proteína.
Tensioactivos
Las moléculas de polipéptido tienen una alta tendencia a interactuar con superficies, haciendo que sean susceptibles a la adsorción y la desnaturalización en interfases aire-líquido, vial-líquido y líquido-líquido (aceite de silicona). Este fenómeno es inversamente dependiente de la concentración de polipéptido y da como resultado agregados de polipéptido solubles o insolubles o la pérdida de polipéptido de la disolución mediante adsorción superficial. Además de la adsorción superficial al envase, la degradación inducida por la superficie se agrava con agitación física, como puede ser experimentado durante el transporte y la manipulación.
Los tensioactivos se usan comúnmente en formulaciones de polipéptido para prevenir la degradación inducida en la superficie. Los tensioactivos son moléculas anfipáticas con la capacidad de competir con los polipéptidos por las posiciones interfaciales. Las porciones hidrófobas de las moléculas de tensioactivo ocupan posiciones interfaciales (por ejemplo, aire/líquido), mientras que las porciones hidrófilas de las moléculas siguen estando orientadas hacia el disolvente en masa. A concentraciones suficientes (normalmente alrededor de la concentración micelar crítica del detergente), una capa superficial de moléculas de tensioactivo sirve para prevenir que las moléculas de proteínas se adsorban en la interfase, lo que minimiza la degradación inducida por la superficie.
Los tensioactivos más comúnmente usados son los ésteres de ácidos grasos no iónicos de polietoxilatos de sorbitano, es decir, polisorbato 20 y polisorbato 80 (por ejemplo, encontrados en Avonex®, Neupogen®, Neulasta®). Los dos solo se diferencian en la longitud de la cadena alifática que confiere carácter hidrófobo a las moléculas, C-12 y C-18, respectivamente. El polisorbato 80 es más activo en la superficie y tiene una menor concentración micelar crítica que el polisorbato 20. Se ha mostrado que tanto el polisorbato 20 como el polisorbato 80 protegen contra la agregación inducida por la agitación. El polisorbato 20 y 80 también protegen contra el estrés inducido por la congelación, la liofilización y la reconstitución. El tensioactivo poloxámero 188 también se ha usado en varios productos líquidos comercializados, tales como Gonal-F®, Norditropin® y Ovidrel®. Los tensioactivos no iónicos estabilizan los polipéptidos principalmente compitiendo con las moléculas de polipéptido por las superficies hidrófobas (por ejemplo, interfases aire-agua), previniendo así que los polipéptidos se desplieguen en estas interfases hidrófobas. Los tensioactivos no iónicos también pueden bloquear que las moléculas de polipéptido se adsorban a otras superficies hidrófobas presentes durante el procesamiento. Además, los tensioactivos no iónicos pueden interactuar directamente con regiones hidrófobas en moléculas de polipéptido.
Otros ejemplos de tensioactivos incluyen copolímero de bloque de polioxietileno-polioxipropileno (poloxámeros tales como Pluronic® F-68 y otros Pluronics®), otros ésteres alquílicos de sorbitano (Span®), alquil éteres de polietilenglicol (Brij), alquil éteres de polipropilenglicol, alquil éteres de glucósido y succinato de D-a-tocoferol polietilenglicol (vitamina E TPGS).
Los tensioactivos también pueden afectar la estabilidad conformacional termodinámica de los polipéptidos. Los efectos de un excipiente dado son específicos del polipéptido. Por ejemplo, los polisorbatos pueden reducir la estabilidad de algunos polipéptidos y aumentar la estabilidad de otros. La desestabilización por tensioactivo de polipéptidos se puede racionalizar en términos de las colas hidrófobas de las moléculas de detergente que pueden cooperar en la unión específica con estados de polipéptido parcialmente o completamente desplegado. Estos tipos de interacciones pueden provocar un desplazamiento en el equilibrio conformacional hacia los estados de polipéptido más expandidos (es decir, aumentando la exposición de porciones hidrófobas de la molécula de polipéptido además de unir el polisorbato). Alternativamente, si el estado nativo del polipéptido presenta algunas superficies hidrófobas, la unión del detergente al estado nativo puede estabilizar esa conformación.
Para tensioactivos, la concentración eficaz para un polipéptido dado depende del mecanismo de estabilización.
Los tensioactivos también se pueden añadir en cantidades apropiadas para prevenir la agregación relacionada con la superficie durante la congelación y el secado. Los tensioactivos a modo de ejemplo incluyen tensioactivos aniónicos, catiónicos, no iónicos, de ion bipolar y anfóteros, que incluyen tensioactivos derivados de aminoácidos que existen de forma natural. Los tensioactivos aniónicos incluyen laurilsulfato de sodio (SDS), dioctil sulfosuccinato de sodio y dioctil sulfonato de sodio, ácido quenodesoxicólico, sal de sodio de N-lauroilsarcosina, dodecil sulfato de litio, sal de sodio de ácido 1 -octanosulfónico, hidrato de colato de sodio, desoxicolato de sodio y sal de sodio de ácido glicodesoxicólico. Los tensioactivos catiónicos incluyen cloruro de benzalconio o cloruro de bencetonio, cloruro de cetilpiridinio monohidratado y bromuro de hexadeciltrimetilamonio. Los tensioactivos de ion bipolar incluyen CHAPS, CHAPSO, SB3-10 y SB3-12. Los tensioactivos no iónicos incluyen digitonina, TRITON™ X-100, TRITON™ X-114, TWEEN®-20 y TWEEN®-80. Los tensioactivos también incluyen lauromacrogol 400, estearato de polioxilo 40, aceite de ricino polioxietilenado hidrogenado 10, 40, 50 y 60, monoestearato de glicerol, polisorbato 40, 60, 65 y 80, lecitina de soja y otros fosfolípidos, tales como 1,2-dioleoil-sn-glicero-3-fosfocolina (DOPC), sal de sodio de 1,2-dimiristoil-sn-glicero-3-fosfo-rac-(1 -glicerol) (DMPG), 1,2-dimiristoil-sn-glicero-3-fosfocolina (DMPC) y sal de sodio de 1,2-dioleoil-sn-glicero-3-fosfo-rac-(1-glicerol) (DOPG); éster de ácido graso de sacarosa, metil celulosa y carboximetil celulosa. El tensioactivo puede estar en una concentración de aproximadamente 0 % a aproximadamente 5 % p/v, tal como en una concentración de al menos aproximadamente 0,001, 0,002, 0,004, 0,005, 0,007, 0,01, 0,05, 0,1, 0,2, 0,3, 0,4, 0,5, 0,6, 0,7, 0,7, 0,8, 0,9, 1,0, 1,5, 2,0, 2,5, 3,0, 3,5, 4,0 o 4,5 % p/v. En otro ejemplo, el tensioactivo se incorpora en una concentración de aproximadamente 0,001 % a aproximadamente 0,5 % p/v. En otro ejemplo adicional, el tensioactivo se incorpora en una concentración de aproximadamente 0,004, 0,005, 0,007, 0,01,0,05 o 0,1 % p/v a aproximadamente 0,2 % p/v. En otro ejemplo más, el tensioactivo se incorpora en una concentración de aproximadamente 0,01 % a aproximadamente 0,1 % p/v.
Sales
Las sales se añaden frecuentemente para aumentar la fuerza iónica de la formulación, que puede ser importante para la solubilidad de polipéptidos, estabilidad física e isotonicidad. Las sales pueden afectar la estabilidad física de los polipéptidos en una variedad de formas. Los iones pueden estabilizar el estado nativo de los polipéptidos uniéndose a restos cargados sobre la superficie del polipéptido. Alternativamente, pueden estabilizar el estado desnaturalizado uniéndose a grupos de péptidos a lo largo del esqueleto del polipéptido. Las sales también pueden estabilizar la conformación nativa del polipéptido protegiendo las interacciones electrostáticas repulsivas entre restos dentro de un polipéptido. Los electrolitos en las formulaciones de polipéptido también pueden proteger las interacciones electrostáticas atractivas entre moléculas de polipéptido que pueden conducir a la agregación e insolubilidad de proteínas.
El efecto de la sal sobre la estabilidad y la solubilidad de polipéptidos varía significativamente con las características de las especies iónicas. La serie de Hofmeister se originó en los años 1880 como una forma de clasificar el orden de los electrolitos basándose en su capacidad para precipitar polipéptidos. Se puede usar la serie de Hofmeister para ilustrar efectos de la estabilización de polipéptidos por cosolutos iónicos y no iónicos, como se muestra en la Tabla 4 (Cacace, Landau, & Ramsden, 1997). En general, las diferencias en los efectos a través de los aniones son muy superiores a las observadas para los cationes, y, para ambos tipos, los efectos son más evidentes a mayores concentraciones que son aceptables en las formulaciones parenterales. Las altas concentraciones de cosmótropos (por ejemplo, sulfato de amonio >1 molar) se usan comúnmente para precipitar polipéptidos en la disolución (precipitación por adición de sal), donde el cosmótropo se excluye preferentemente de la superficie del polipéptido reduciendo la solubilidad del polipéptido en su conformación nativa. La retirada o dilución de la sal devolverá el polipéptido a la disolución. La disolución por adición de sal ocurre cuando se usan iones desestabilizantes para aumentar la solubilidad de los polipéptidos por solvatación de los enlaces peptídicos del esqueleto del polipéptido. El aumento de las concentraciones del caótropo favorece el estado desnaturalizado del polipéptido a medida que aumenta la solubilidad de la cadena del polipéptido. La efectividad relativa de los iones para precipitar por adición de sal y disolver por adición de sal define su posición en la serie de Hofmeister.
Tabla 4
La serie de Hofmeister de las sales
Cosoluto
Anión Catión Estabilización
Otros
F (CH3)4N+ glicerol/sorbitol Estabilizar Cosmotrópico (precipitación por
POq3" (ch3)2n h2+ sacarosa/trehalosa adición de sal)
SO42-<n h>4+ N-óxido de trimetilamina (TMAO)
CHCOO- K+
Cl Na+
Br Cs+
l L¡+
Mg2t guanídina
Ca2+ arginina ^ , ...
Desestabmzar
(dilución por adición _ , .
Ba2+ uread.e sal„ Caotropico
Para mantener la isotonicidad en una formulación parenteral, las concentraciones de sales están limitadas, en general, a menos de 150 mM para combinaciones de iones monovalentes. En este intervalo de concentración, el mecanismo de estabilización de sales es probablemente debido al apantallamiento de fuerzas intramoleculares repulsivas electrostáticas o fuerzas intermoleculares atractivas (apantallamiento de Debye-Hückel). Es interesante señalar que las sales caotrópicas pueden ser más eficaces en la estabilización de la estructura de los polipéptidos que concentraciones similares de cosmótropos por este mecanismo. Los aniones caotrópicos se unen más fuertemente que los iones cosmotrópicos. Con respecto a la degradación de polipéptidos covalentes, se esperan efectos diferenciales de la fuerza iónica sobre este mecanismo mediante la teoría de Debye-Hückel. Los mecanismos por los que las sales afectan la estabilidad de los polipéptidos son específicos del polipéptido y pueden variar significativamente en función del pH de la disolución.
Conservantes
Los conservantes pueden ser necesarios cuando se desarrollan formulaciones multiuso parenterales que implican más de una extracción del mismo envase. Su función principal es inhibir el crecimiento microbiano y asegurar la esterilidad del producto durante la vida útil o el período de uso del medicamento. Los conservantes de uso común incluyen alcohol bencílico, fenol y m-cresol. El desarrollo de formulaciones de polipéptido que incluyen conservantes puede ser desafiante. Los conservantes casi siempre tienen un efecto desestabilizante (agregación) sobre los polipéptidos. También se ha mostrado que el alcohol bencílico afecta la estructura y la estabilidad de los polipéptidos en un modo dependiente de la concentración, la temperatura y el tiempo. Debido a estos efectos desestabilizantes, muchas formulaciones de polipéptido liofilizado se reconstituyen con diluyente que contiene alcohol bencílico para minimizar el tiempo de contacto con el polipéptido antes de la administración.
Se necesita considerar varios aspectos durante el desarrollo de formulaciones de formas farmacéuticas conservadas. Debe optimizarse la concentración eficaz de conservante en el medicamento. Esto requiere probar un conservante dado en la forma farmacéutica con intervalos de concentración que confieren eficacia antimicrobiana sin comprometer la estabilidad del polipéptido.
El desarrollo de formulaciones líquidas que contienen conservantes es frecuentemente más desafiante que las formulaciones liofilizadas. Los productos liofilizados pueden liofilizarse sin un conservante y pueden reconstituirse con un diluyente que contenga conservante en el momento de su uso. Con formulaciones líquidas, la eficacia y la estabilidad del conservante se tienen que mantener durante toda la estabilidad en almacén del producto (normalmente aproximadamente 18 - 24 meses). Frecuentemente necesita demostrarse la eficacia del conservante en la formulación final que contiene el fármaco activo y todos los componentes de excipiente.
Algunos conservantes pueden provocar reacciones del lugar de inyección. Por ejemplo, la percepción del dolor por el paciente puede ser menor en formulaciones que contienen fenol y alcohol bencílico en comparación con las formulaciones que contienen m-cresol. Parece que el alcohol bencílico posee propiedades anestésicas.
Dipéptidos N-acetil-serina-arginina, N-acetil-prolina-arginina y N-acetil-prolina-arginina-NH2 para reducir la viscosidad de formulaciones de polipéptido terapéutico
Reducir la viscosidad de formulaciones de polipéptido terapéutico es de interés en las técnicas farmacéuticas. Se descubrió que los excipientes de dipéptido N-acetil-serina-arginina N-acetil-prolina-arginina y N-acetil-prolinaarginina-NH2 reducían la viscosidad de formulaciones de anticuerpo terapéutico. En el presente documento se proporcionan excipientes reductores de la viscosidad a concentraciones seleccionadas para su uso en reducir la viscosidad de formulaciones de polipéptido terapéutico (tales como anticuerpos terapéuticos). En el presente documento se proporcionan formulaciones de polipéptido y anticuerpo terapéutico y métodos de reducción de la viscosidad de las formulaciones de polipéptido y anticuerpo terapéutico combinando el polipéptido o anticuerpo terapéutico con una concentración reductora de la viscosidad de los dipéptidos N-acetil-serina-arginina, N-acetilprolina-arginina y/o N-acetil-prolina-NH2-arginina.
Los dipéptidos N-acetil-serina-arginina, N-acetil-prolina-arginina y N-acetil-prolina-arginina-NH2 se pueden sintetizar por métodos entendidos en la técnica, tales como por síntesis de péptidos en estado sólido. Sin embargo, es ventajoso usar métodos libres de ácido trifluoroacético (TFA), tales como los que usan, por ejemplo, HCl. En dichos métodos, puede ser ventajoso facilitar la purificación de los N-acetil-dipéptidos sintetizados purificando los dipéptidos protegidos antes de la desprotección.
Un experto habitual puede determinar experimentalmente la concentración de N-acetil-serina-arginina, N-acetilprolina-arginina y N-acetil-prolina-arginina-NH2. En algunos ejemplos, el N-acetil-dipéptido puede tener una concentración desde aproximadamente 10 mM hasta aproximadamente 500 mM, tal como desde aproximadamente 100 mM hasta aproximadamente 200 mM, 100 mM, 150 mM, y aproximadamente 200 mM. Por ejemplo, el N-acetildipéptido puede estar presente desde aproximadamente (en mM) 10, 15, 20, 25, 30, 35, 40, 45, 50, 55, 60, 65, 70, 75, 80, 85, 90, 95, 100, 105, 110, 1115, 120, 125, 130, 135, 140, 145, 150, 155, 160, 165, 170, 175, 180, 185, 190, 195 y 200.
Viscosidad y otras características de las formulaciones que contienen N-acetil-serina-arginina, N-acetil-prolinaarginina,yN-acetil-prolina-arginina-NH2
En un aspecto, las formulaciones farmacéuticas desveladas tienen un nivel de viscosidad inferior a aproximadamente 80 centipoise (cP) como se mide a temperatura ambiente (es decir, 25 °C). La formulación farmacéutica puede tener un nivel de viscosidad inferior a aproximadamente 70 cP, aproximadamente 60 cP, aproximadamente 50 cP, aproximadamente 40 cP, aproximadamente 30 cP, aproximadamente 25 cP, aproximadamente 20 cP, aproximadamente 18 cP, aproximadamente 15 cP, aproximadamente 12 cP, aproximadamente 10 cP; aproximadamente 8 cP, aproximadamente 6 cP, aproximadamente 4 cP; aproximadamente 2 cP; o aproximadamente 1 cP. Puesto que 1 cP = 1 mPas, los valores referidos en cP son iguales que los mismos valores en mPas.
En un aspecto, la formulación farmacéutica es estable como se mide por al menos un ensayo de estabilidad, tal como un ensayo que examina las características biofísicas o bioquímicas del anticuerpo con el tiempo. La estabilidad de la formulación farmacéutica se puede medir usando SEC-HPLC. SEC-HPLC separa proteínas basándose en diferencias en sus volúmenes hidrodinámicos. Las moléculas con volúmenes hidrodinámicos de proteínas más grandes eluyen antes que las moléculas con volúmenes más pequeños. En el caso de SEC-HPLC, una formulación farmacéutica estable presenta no más de aproximadamente un aumento del 5 % en especies de HMW en comparación con una muestra de control, tal como, por ejemplo, no más de aproximadamente un aumento del 4 %, no más de aproximadamente del 3 %, no más de aproximadamente del 2 %, no más de aproximadamente del 1 %, no más de aproximadamente del 0,5 % en especies de HMW en comparación con una muestra de control. Alternativamente, o además, la estabilidad se puede medir usando HPLC de intercambio catiónico (CEX-HPLC). La CEX-HPLC separa proteínas basándose en las diferencias en su carga superficial. A un pH establecido, las isoformas cargadas de un anticuerpo se separan en una columna de intercambio catiónico y eluyen usando un gradiente de sal. El eluyente se monitoriza por absorbancia de luz ultravioleta (UV). La distribución de isoformas cargadas se evalúa determinando el área de los picos de cada isoforma como un porcentaje del área total de los picos. En el caso de CEX-HPLC, una formulación farmacéutica estable presenta no más de aproximadamente una disminución del 5 % en el pico de isoforma principal en comparación con una muestra de control, tal como, por ejemplo, no más de aproximadamente una disminución del 3 % a aproximadamente el 5 % en el pico de isoforma principal en comparación con una muestra de control; no más de aproximadamente una disminución del 4 %, no más de aproximadamente una disminución del 3 %, no más de aproximadamente una disminución del 2 %, no más de aproximadamente una disminución del 1 %, no más de aproximadamente una disminución del 0,5 % en el pico de isoforma principal en comparación con una muestra de control.
También alternativamente, o además, la estabilidad de la formulación se puede medir usando detección de partículas subvisibles mediante oscurecimiento de luz (HIAC). Un sistema electrónico de recuento de partículas transmitidas por líquido (HIAC/Royco 9703 (Hach Company; Loveland, CO) o equivalente) que contiene un sensor oscurecimiento de luz (HIAC/Royco HRLD-150 o equivalente) con un muestreador de líquido cuantifica el número de partículas y su intervalo de tamaño en una muestra de prueba dada. Cuando las partículas en un líquido pasan entre la fuente de luz y el detector, disminuyen u "oscurecen" el haz de luz que incide en el detector. Cuando la concentración de partículas se encuentra dentro del intervalo normal del sensor, estas partículas se detectan de una en una. El paso de cada partícula a través de la zona de detección reduce la luz incidente en el fotodetector y la salida de tensión del fotodetector se reduce momentáneamente. Los cambios en la tensión se registran como impulsos eléctricos que el instrumento convierte en el número de partículas presentes. El método es no específico y mide partículas independientemente de su origen. Los tamaños de partículas monitorizados son, en general, 10 pm y 25 pm. En el caso de HIAC, una formulación farmacéutica estable presenta no más de 6000 partículas de 10 pm por recipiente (o unidad), en comparación con una muestra de control, tal como, por ejemplo, no más de 5000, no más de 4000, no más de 3000, no más de 2000, no más de 1000, partículas de 10 pm por recipiente (o unidad) en comparación con una muestra de control. En otros casos, una formulación farmacéutica estable presenta no más de 600 partículas de 25 pm por recipiente (o unidad) en comparación con una muestra de control, tal como, por ejemplo, no más de 500, no más de 400, no más de 300, no más de 200, no más de 100, no más de 50 partículas de 25 pm por recipiente (o unidad) en comparación con una muestra de control.
La estabilidad de la formulación farmacéutica también se puede evaluar usando evaluación visual. La evaluación visual es un método cualitativo usado para describir las características físicas visibles de una muestra. La muestra se visualiza contra un fondo blanco y/o negro de una cabina de inspección, dependiendo de la característica que se evalúa (por ejemplo, color, claridad, presencia de partículas o materia extraña). También se visualizan muestras contra un patrón de referencia opalescente y patrones de referencia de color. En el caso de evaluación visual, una formulación farmacéutica estable no presenta cambio significativo en el color, la claridad, la presencia de partículas o la materia extraña en comparación con una muestra de control.
Preparación de formulaciones de polipéptido
Las formulaciones farmacéuticas desveladas en el presente documento se pueden preparar por cualquiera de dos procesos designados los procesos 1 y 2. El proceso 1 comprende:
a. dializar o concentrar una disolución de una proteína terapéutica, tal como un Ab monoclonal;
b. dializar o concentrar una disolución de excipientes seleccionados o proporcionar una mezcla seca de excipientes seleccionados;
c. añadir la disolución de excipientes o la mezcla seca de excipientes a la disolución de proteína a un pH seleccionado para lograr una concentración de excipiente final deseada, una concentración de proteína final deseada y un pH final deseado.
d. El proceso de ultrafiltración-diafiltración UF/DF intercambia el tampón y concentra la proteína simultáneamente. Este proceso también se podría usar para introducir los dipéptidos en la proteína.
El proceso 2 comprende:
a. dializar una disolución de proteína terapéutica, tal como un anticuerpo monoclonal;
b. dializar una disolución de excipientes seleccionados o proporcionar una mezcla seca de excipientes seleccionados;
c. añadir la disolución de excipientes o mezcla seca de excipientes a la disolución de proteína dializa a un pH seleccionado y una concentración de excipiente deseada, y
d. concentrar la disolución resultante de la etapa c hasta una concentración de proteína final deseada y pH final deseado.
En el proceso 1, el pH de la proteína concentrada para lograr el pH final deseado puede variar desde aproximadamente 4 hasta aproximadamente 8. En el proceso 2, el pH de la disolución de proteína concentrada para lograr el pH final deseado puede variar desde aproximadamente 4 hasta aproximadamente 8. Donde se informa un excipiente particular en una formulación, por ejemplo, por el porcentaje (%) p/v, los expertos en la técnica reconocen que la concentración molar equivalente de ese excipiente también se contempla.
Almacenamiento y kits
Una vez se ha formulado la formulación farmacéutica, se puede almacenar en viales estériles como una disolución, suspensión, gel, emulsión, sólido, o como un polvo deshidratado o liofilizado. Dichas formulaciones se pueden almacenar en una forma lista para uso o en una forma (por ejemplo, liofilizada) que se reconstituye antes de la administración. En algunos casos, las formulaciones de polipéptido terapéutico se pueden almacenar en envases, tales como bolsas de almacenamiento adecuadas (por ejemplo, como se fabrican por Sartorius (Gottingen, DE)) o en garrafas de policarbonato. Una vez se ha formulado la formulación farmacéutica, también se puede almacenar en jeringas precargadas (PFS; tal como PFS de 2,25 ml) como una disolución o suspensión en una forma lista para uso, así como en viales de vidrio (tales como viales de vidrio de 5 cm3).
Se pueden proporcionar kits para producir una unidad de administración de una sola dosis. El kit puede contener tanto un primer recipiente que tiene una proteína secada como un segundo recipiente que tiene una formulación acuosa. Se pueden incluir kits que contienen jeringas precargadas de una sola cámara y de múltiples cámaras (por ejemplo, jeringas para líquidos y liojeringas).
La siguiente sección de Ejemplos se facilita únicamente a modo de ejemplo.
Ejemplos
Ejemplo 1 - Materiales y métodos
Se compraron N-acetil-arginina y N-acetil-arginina-NH2 de BACHEM (Torrance, CA). Se compró HCl de arginina de SAFC Ajinomoto (Sigma-Aldrich, St. Louis, MO; Itasca, IL). El dipéptido N-acetil-prolina-arginina, N-acetil-prolinaarginina-NH2 y el dipéptido N-acetil-serina-arginina se compraron de AnaSpec (Fremont, CA). El dipéptido glutamato-arginina también se obtuvo de AnaSpec. Se preparó una disolución madre al 0,1 % en peso de polisorbato 80 a pH 5,2 usando ácido acético glacial y se usó NaOH 2 N para la valoración. Esta disolución madre también sirvió de control. Las cinco formulaciones restantes se prepararon para contener 200 mM de cada excipiente. La formulación del dipéptido glutamato-arginina se usó como referencia.
La concentración de proteína de cada muestra se midió usando espectroscopia SoloVPE UV (C Technologies; Bridgewater, NJ). Las muestras se almacenaron a 2-8 °C hasta que se llevaron hasta temperatura ambiente antes de la carga de muestras en el viscosímetro. Las muestras se midieron en 2 semanas desde la preparación (normalmente en de 2-3 días).
La viscosidad de las formulaciones de proteína se midió usando un viscosímetro rotacional estándar de cono y placa (AR-G2 TA instruments (New Castle, DE) usando un diámetro de 25 mm con cono de 2 grados) a una temperatura 25 °C y un intervalo de la velocidad de cizallamiento de 100-1000 s-1). Tras la carga, cada muestra se equilibró durante 2 minutos a 25 °C antes del comienzo de la recopilación de datos. Todas las muestras de formulación probadas mostraron un comportamiento reológico newtoniano. Por lo tanto, los valores de viscosidad informados en el presente documento fueron valores promedio a un intervalo de la velocidad de cizallamiento de 100-1000 s-1.Ejemplo 2 - Los dipéptidos N-acetil-prolina-arginina y N-acetil-serina-arginina reducen la viscosidad de un anticuerpo terapéutico humano formulado a altas concentraciones
El objetivo de este ejemplo era determinar la capacidad de los dipéptidos N-acetil-prolina-arginina y N-acetil-serinaarginina para reducir la viscosidad de un Ab terapéutico de alta concentración. Se usó N-acetil-arginina (NAR, véase, por ejemplo, Sloey y Kanapuram (2016)) para la comparación, ya que era arginina.
Ab1, un anticuerpo monoclonal humano, se formuló a diversas concentraciones, e incluyó muestras que contenían 200 mM de N-acetil-arginina (NAR), arginina, N-acetil-serina-arginina y N-acetil-prolina-arginina, o N-acetil-arginina-NH2 (esta estructura se muestra como la fórmula3) Los resultados se muestran en la Tabla 1.1 y en la Fig. 1.
Tabla 1.1
Viscosidad de disoluciones al 0,1 % de Ab1 que contiene polisorbato 80, pH 5,2Excipiente Concentración de Ab1 (mg/ml) Viscosidad (cP) (=mPas)arginina 208 38,2
N-acetil-arginina 186 27,82
N-acetil-prolina-arginina 179 22,8
N-acetil-serina-arginina 210 28,4
N-acetil-arginina-NH2 (con caperuza de amino) 255 166 Control (sin excipiente) 212 176
La Fig. 1 es una representación de gráfico de líneas de los resultados mostrados en la Tabla 1.1, representados contra los resultados de un experimento previo usando Ab1 formulado en acetato 10 mM / N-acetil-arginina 165 mM / HCl de Arg 75 mM, pH 5,1 (gráfico marcado "pH5,1"); fosfato 10 mM / N-acetil-arginina 165 mM / HCl de Arg 75 mM, pH 6,6 (gráfico marcado "pH6,6"); o fosfato 10 mM / N-acetil-arginina 165 mM / HCl de Arg 75 mM, pH 6,9 (gráfico marcado "pH6,9").
Como se muestra en la Tabla 1.1 y la Fig. 1, se observó que la muestra que contenía el dipéptido N-acetil-prolinaarginina ("PR") tenía una viscosidad de 22,8 cP a 179 mg/ml de Ab1, y se observó que la muestra que contenía el dipéptido N-acetil-serina-arginina ("SR") tenía una viscosidad de 28,4 cP a 210 mg/ml de Ab1. La muestra que contenía N-acetil-arginina ("NAR") tenía una viscosidad de 27,82 cP a 186 mg/ml de Ab1, mientras que la muestra que contenía arginina ("Arg") tenía una viscosidad de 38,2 cP a 208 mg/ml de Ab1. En el caso de la muestra que contenía N-acetil-arginina-NH2 ("xRx"), la viscosidad fue 166 cP a 255 mg/ml de Ab1 , mientras que en el control que no contenía excipientes adicionales (tampón y polisorbato 80; "A52 PS80"), se observó que la viscosidad era 176 cP a 212 mg/ml de Ab1.
Puesto que 1 cP = 1 mPas, los valores referidos en cP son iguales que los mismos valores en mPas.
Ejemplo 3 - Los dipéptidos N-acetil-prolina-arginina, N-acetil-serina-arginina, glutamato-arginina y N-acetil-prolinaarginina-NH2 (dipéptido caperuza de amida) reducen las viscosidades de muestras de proteína terapéutica de alta concentración
El objetivo de este experimento era extender las observaciones mostradas en el Ejemplo 2 ensayando proteínas terapéuticas adicionales y dipéptidos que contienen Arg adicionales.
Usando los métodos descritos en el Ejemplo 1 y la preparación de muestras que se describe en el Ejemplo 2, se probaron dos polipéptidos terapéuticos adicionales, los anticuerpos humanos Ab2 y Ab3, a 210 mg/ml (+/-20 %), 180 mg/ml (+/-10 %), 140 mg/ml (+/-10 %) y 70 mg/ml (+/- 10 %) (+/-10. El plan del experimento se muestra en la Tabla 2.1.
Tabla 2.1
Excipiente Concentración
HCl de arginina 150 mM
N-acetil-prolina-arginina (dipéptido) 150 mM
N-acetil-serina-arginina (dipéptido) 150 mM
glutamato-arginina (dipéptido) 25 mM1
N-acetil-prolina-arginina-NH2 (dipéptido caperuza de amida) 150 mM
1Para las condiciones usadas, esta concentración es aproximadamente la máxima solubilidad
Las viscosidades de los tres polipéptidos terapéuticos (Ab humanos: Ab1, Ab2 y Ab3) a las concentraciones indicadas (véanse las Tablas 2.2-2.4) se midieron en formulaciones que contenían las concentraciones de los cinco excipientes enumerados en la Tabla 2.1, así como la ausencia de un excipiente. Se usaron HCl de arginina y glutamato-arginina como formulaciones de referencia. Los resultados se presentan en las Tablas 2.2 (Ab1), 2.3 (Ab2) y Ab3; así como en los gráficos de líneas mostrados en las Fig. 2 (Ab1), 3 (Ab2) y 4 (Ab3). Las Fig. 2 y 3 incluyen vistas más cercanas (Fig. 2(B) y 3(B)) de los gráficos de líneas, como se indica por los recuadros mostrado en las Fig. 2(A) y 3(A).
Tabla 2.2
Concentraciones y viscosidades observadas para composiciones que comprenden Ab1
[Ab diana] (mg/ml) Excipiente de aminoácido/dipéptido Características medidas 210 180 140 70Ninguno conc. observada (mg/ml) 209,98 168,21 136,52 70,93 Viscosidad (cP) (= mPas) 395,69 77,71 16,14 3,72 Arg-HCl conc. observada (mg/ml) 212,08 183,45 144,46 73,30 viscosidad (cP) (= mPas) 92,87 32,56 11,72 4,11 N-acetil-Pro-Arg conc. observada (mg/ml) 210,57 184,86 144,07 73,60 viscosidad (cP) (= mPas) 50,98 20,46 8,90 3,47 N-acetil-Ser-Arg conc. observada (mg/ml) 207,04 184,52 142,98 72,08 viscosidad (cP) (= mPas) 64,39 26,75 9,13 3,74 Glu-Arg conc. observada (mg/ml) 215,40 202,80 148,89 73,40 viscosidad (cP) (= mPas) 173,41 55,95 11,62 2,31 N-acetil-Pro-Arg-NH2 conc. observada (mg/ml) 210,35 182,81 147,67 73,58 viscosidad (cP) (= mPas) 68,90 30,65 9,99 2,44
Como se muestra para Ab1 (con referencia a las Fig. 2(A) y el recuadro de la Fig. 2(A) mostrado en la Fig. 2(B), mostrando la figura gráficos de los datos de la Tabla 2.2), sin excipientes, la viscosidad aumenta enormemente a medida que la concentración de Ab1 supera 140 mg/ml (círculos rellenos pequeños en la Fig. 2). A 140 mg/ml, la viscosidad es aproximadamente 16 cP, pero a aproximadamente 200 mg/ml, la viscosidad es casi 400 cP. La adición de Arg como Arg-HCl, N-acetil-Pro-Arg, N-acetil-Ser-Arg y Glu-Arg disminuye la viscosidad de todas las muestras probadas a aproximadamente 140 mg/ml de concentración de Ab1, incluso a la mayor concentración de Ab de 200 mg/ml. Sin embargo, Glu-Arg es menos capaz de reducir la viscosidad de las muestras de concentración de Ab1 más alta, que tiene una viscosidad de 173 cP a aproximadamente 215 mg/ml de Ab1; es interesante señalar que, sin embargo, cuando la concentración de Ab1 observada disminuye en aproximadamente 13 mg/ml, el dipéptido Glu-Arg reduce la viscosidad sorprendentemente a aproximadamente 56 cP (recuadro relleno de gris en la Figura 2). Sorprendentemente, también pareció que N-acetil-Pro-Arg-NH2, que contiene una caperuza de amida que reduce la carga global en la molécula, reducía la viscosidad de las muestras de Ab1, incluso a altas concentraciones de Ab1, tal como aproximadamente 200 mg/ml (triángulos vacíos en la Fig. 2).
Tabla 2.3
Concentraciones y viscosidades observadas para las composiciones que comprenden Ab2
[Ab diana] (mg/ml) Excipiente de aminoácido/dipéptido Características medidas 210 180 140 70Ninguno conc. observada (mg/ml) 235,6 184,8 143,04 75,70 Viscosidad (cP) (= mPas) 179,49 56,96 15,94 2,60 Arg-HCl conc. observada (mg/ml) 197,77 166,96 134,84 77,30 viscosidad (cP) (= mPas) 43,86 20,91 7,62 1,82 N-acetil-Pro-Arg conc. observada (mg/ml) 206,26 179,38 141,67 71,80 viscosidad (cP) (= mPas) 41,88 21,96 9,69 3,60 N-acetil-Ser-Arg conc. observada (mg/ml) 207,21 184,46 140,11 67,70 viscosidad (cP) (= mPas) 65,96 30,24 11,92 4,24 Glu-Arg conc. observada (mg/ml) 216,55 173,68 138,83 67,90 viscosidad (cP) (= mPas) 85,10 40,21 14,31 3,41 N-acetil-Pro-Arg-NH2 conc. observada (mg/ml) 203,62 179,50 143,43 67,64 viscosidad (cP) (= mPas) 22,42 13,07 6,87 3,16
Asimismo, como se muestra para Ab2, ahora con referencia a las Fig. 3(A) y el recuadro de la Fig. 3(A) como se muestra en la Fig. 3(B) (la figura que muestra gráficos de los datos de la Tabla 2.3), sin excipientes, la viscosidad aumenta enormemente a medida que la concentración de Ab2 supera 140 mg/ml (círculos rellenos pequeños en la Fig. 3). A 140 mg/ml, la viscosidad es aproximadamente 57 cP, pero a aproximadamente 200 mg/ml, la viscosidad es aproximadamente 180 cP. Cuando se formula con los diferentes excipientes, la viscosidad se redujo para todas las muestras, aunque menos uniformemente que la observada para Ab1. Todos los dipéptidos N-acetilados, que incluyen el dipéptido con caperuza de amino N-acetil-Pro-Arg-NH2, redujo las viscosidades de todas las muestras que tienen una concentración de anticuerpo superior a aproximadamente 140 mg/ml.
Tabla 2.4
Concentraciones y viscosidades observadas para las composiciones que comprenden Ab3
[Ab diana] (mg/ml) Excipiente de aminoácido/dipéptido Características medidas 210 180 140 70Ninguno conc. observada (mg/ml) 207,20 186,45 148,71 75,61 Viscosidad (cP) (= mPas) 41,34 19,69 8,26 2,23 Arg-HCl conc. observada (mg/ml) 214,18 185,09 148,50 76,06 viscosidad (cP) (= mPas) 35,46 17,33 7,38 2,24 N-acetil-Pro-Arg conc. observada (mg/ml) 214,18 184,98 146,11 76,28 viscosidad (cP) (= mPas) 26,88 14,56 6,71 2,39 N-acetil-Ser-Arg conc. observada (mg/ml) 207,56 181,80 142,80 71,78 viscosidad (cP) (= mPas) 29,65 15,51 7,02 2,33 Glu-Arg conc. observada (mg/ml) 211,35 177,38 135,68 73,29 viscosidad (cP) (= mPas) 35,08 16,93 7,28 2,15 N-acetil-Pro-Arg-NH2 conc. observada (mg/ml) 199,02 182,08 138,24 74,07 viscosidad (cP) (= mPas) 22,38 14,21 6,28 3,14
También se probó un tercer Ab, Ab3. Con referencia a la Fig. 4, que muestra un gráfico de líneas de los datos mostrados en la Tabla 2.4, este Ab no muestra viscosidad tan alta como los Ab 1 y 2, con una viscosidad de aproximadamente 41 cP sin excipientes. Cuando se midió la viscosidad en estas muestras que contenían los dipéptidos indicados y arginina, la viscosidad se redujo, pero no tan notablemente como cuando la viscosidad fue mayor. Aún cuando el efecto de los excipientes probados es menos notable, el alcanzar una viscosidad de, por ejemplo, aproximadamente 30 cP o menos, puede permitir la administración por dispositivos de inyección automatizados.
La Figura 5 junta los resultados de forma que se comparan los tres anticuerpos entre sí en presencia de un excipiente. La Fig. 5A muestra los resultados de los tres anticuerpos en presencia de N-acetil-Pro-Arg; la Fig. 5B muestra los resultados de los tres anticuerpos en presencia de N-acetil-Ser-Arg, mientras que la Fig. 5C muestra los resultados para N-acetil-Pro-Arg-NH2, y la Fig. 5D muestra los resultados para Glu-Arg. Esta figura muestra claramente los efectos reductores de la viscosidad de estos cuatro excipientes, particularmente para polipéptidos terapéuticos que son viscosos, tales como a altas concentraciones de polipéptido terapéutico, en ausencia de estos excipientes.
Referencias
Cacace, M. G., Landau, E. M., & Ramsden, J. J. (1997). The Hofmeister series: salt and solvent effects on interfacial phenomena. Q Rev Biophys, 30(3), 241-277.
Kamerzell, T. J., Esfandiary, R., Joshi, S. B., Middaugh, C. R., & Volkin, D. B. (2011). Protein-excipient interactions: mechanisms and biophysical characterization applied to protein formulation development. Adv Drug Deliv Rev, 63(13), 1118-1159. doi: 10.1016/j.addr.2011.07.006
Powell, M. F., Nguyen, T. y Baloian, L. (1998). Compendium of excipients for parenteral formulations. PDA J Pharm Sci Technol, 52(5), 238-311.
Sloey, C. J. y Kanapuram, S. (2016).REDUCING VISCOSITY OF PHARMACEUTICAL FORMULATIONS. WO2016065181.

Claims (15)

REIVINDICACIONES
1. Una composición farmacéutica líquida que comprende un polipéptido terapéutico, un tampón y al menos un N-acetil-dipéptido, en donde el N-acetil-dipéptido es N-acetil-serina-arginina, N-acetil-prolina-arginina o N-acetil-prolinaarginina-NH2, opcionalmente en donde el polipéptido terapéutico es un anticuerpo o un fragmento de unión al antígeno del mismo.
2. La composición de la reivindicación 1, en donde el anticuerpo o fragmento de unión al antígeno del mismo está presente en una concentración seleccionada del grupo que consiste en: al menos 70 mg/ml, al menos 140 mg/ml, al menos 180 mg/ml, 200 mg/ml y 210 mg/ml.
3. La composición de la reivindicación 1, en donde el anticuerpo se selecciona del grupo que consiste en adalimumab, bevacizumab, blinatumomab, cetuximab, conatumumab, denosumab, eculizumab, erenumab, evolocumab, infliximab, natalizumab, panitumumab, rilotumumab, rituximab, romosozumab y trastuzumab, o fragmento de unión al antígeno del mismo; preferentemente en donde el anticuerpo es evolocumab.
4. La composición de la reivindicación 1, en donde el N-acetil-dipéptido tiene una concentración seleccionada del grupo que consiste en: 10 mM a 500 mM, 100 mM a 200 mM, 150 mM y 200 mM.
5. La composición de la reivindicación 1, en donde el N-acetil-dipéptido es N-acetil-serina-arginina o N-acetil-prolinaarginina.
6. La composición de la reivindicación 1, en donde el tampón se selecciona del grupo que consiste en tampones acetato, glutamato, histidina y fosfato, o una combinación de los mismos.
7. La composición de la reivindicación 1, en donde la composición tiene un pH seleccionado del grupo que consiste en: 4 a 8, 4,8 a 6,9, y 5,2.
8. La composición de la reivindicación 1, que comprende además un tensioactivo, preferentemente en donde el tensioactivo se selecciona del grupo que consiste en monooleato de polioxietilensorbitano (polisorbato 80 o polisorbato 20), copolímero de bloque de polioxietileno-polioxipropileno (poloxámeros tales como Pluronic® F-68 y otros Pluronics®), alquil ésteres de sorbitano (Span®), octilfenil éteres de polietilenglicol (Triton X-100), alquil éteres de polietilenglicol (Brij), alquil éteres de polipropilenglicol, alquil éteres de glucósido y succinato de D-a-tocoferol polietilenglicol (vitamina E TPGS), más preferentemente en donde el tensioactivo es 0,01 % (p/v) de polisorbato 80 o 0,004 % de polisorbato 20.
9. La composición de la reivindicación 1, que comprende además un segundo oligopéptido que comprende arginina y que consiste en dos a diez residuos de aminoácidos o que comprende además un aminoácido, N-acetil-arginina, N-acetil-lisina, N-acetil-histidina, N-acetil-prolina, o mezclas de los mismos, preferentemente en donde el aminoácido es arginina o prolina.
10. Un método de reducción de la viscosidad en una composición farmacéutica que comprende un polipéptido terapéutico, en donde el método comprende:
a. proporcionar una disolución que comprende (i) el polipéptido terapéutico, (ii) al menos un N-acetil-dipéptido, en donde el N-acetil-dipéptido es N-acetil-serina-arginina, N-acetil-prolina-arginina o N-acetil-prolina-arginina-NH2, y está presente a una concentración reductora de la viscosidad, y (iii) un tampón; y
b. ajustar el pH de la disolución a 4 a 8,
opcionalmente, en donde el polipéptido terapéutico es un anticuerpo o un fragmento de unión al antígeno del mismo, preferentemente en donde el anticuerpo o fragmento de unión al antígeno del mismo está presente en una concentración seleccionada del grupo que consiste en: al menos 70 mg/ml, al menos 140 mg/ml, al menos 180 mg/ml, al menos 200 mg/ml y al menos 210 mg/ml.
11. El método de la reivindicación 10, en donde el anticuerpo se selecciona del grupo que consiste en adalimumab, bevacizumab, blinatumomab, cetuximab, conatumumab, denosumab, eculizumab, erenumab, evolocumab, infliximab, natalizumab, panitumumab, rilotumumab, rituximab, romosozumab y trastuzumab, o fragmento de unión al antígeno de los mismos; preferentemente en donde el anticuerpo o fragmento de unión al antígeno del mismo es evolocumab.
12. El método de la reivindicación 10, en donde el N-acetil-dipéptido tiene una concentración seleccionada del grupo que consiste en: 10 mM a 500 mM, 100 mM a 200 mM, 150 mM y 200 mM.
13. El método de la reivindicación 10, en donde el tampón se selecciona del grupo que consiste en tampones acetato, glutamato, histidina y fosfato, o una combinación de los mismos.
14. El método de la reivindicación 10, que comprende además un tensioactivo, preferentemente en donde el tensioactivo se selecciona del grupo que consiste en monooleato de polioxietilensorbitano (polisorbato 80 o polisorbato 20), copolímero de bloque de polioxietileno-polioxipropileno (poloxámeros tales como Pluronic® F-68 y otros Pluronics®), ésteres alquílicos de sorbitano (Span®), octilfenil éteres de polietilenglicol (Triton X-100), alquil éteres de polietilenglicol (Brij), alquil éteres de polipropilenglicol, alquil éteres de glucósido y succinato de D-atocoferol polietilenglicol (vitamina E TPGS).
15. El método de la reivindicación 10, en donde la disolución comprende además un segundo oligopéptido que comprende arginina y que consiste en dos a diez residuos de aminoácidos o en donde la disolución comprende además un aminoácido, N-acetil-arginina, N-acetil-lisina, N-acetil-histidina, N-acetil-prolina o mezclas de cualquiera de los mismos, preferentemente en donde el aminoácido es arginina o prolina.
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Families Citing this family (9)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
TWI856084B (zh) * 2019-04-01 2024-09-21 美商建南德克公司 用於穩定含有蛋白質之配方之組合物及方法
CN113660927A (zh) * 2019-04-23 2021-11-16 安进公司 使用低分子量聚乙烯吡咯烷酮（pvp）降低高浓度蛋白质配制品的黏度
US20230242655A1 (en) 2019-12-03 2023-08-03 Evotec International Gmbh Interferon-associated antigen binding proteins and uses thereof
WO2021243298A1 (en) * 2020-05-29 2021-12-02 Chinook Therapeutics, Inc. Methods of treating iga nephropathy with an april binding antibody
EP4238578A4 (en) * 2020-10-30 2024-09-11 Eisai R&D Management Co., Ltd. PHARMACEUTICAL COMPOSITION
US20220193238A1 (en) * 2020-12-17 2022-06-23 Astrazeneca Ab Anti-il5r antibody formulations
EP4302778A4 (en) * 2021-03-03 2025-03-12 Chia Tai Tianqing Pharmaceutical Group Co., Ltd. PHARMACEUTICAL COMPOSITION CONTAINING AN ANTI-TSLP ANTIBODY
US20240343795A1 (en) * 2021-08-12 2024-10-17 Amgen Inc. Antibody formulations
US12110324B2 (en) 2022-07-22 2024-10-08 Flagship Pioneering Innovations Vi, Llc Antigen binding molecules targeting thymic stromal lymphopoietin (TSLP)

Family Cites Families (14)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE69120146T2 (de) 1990-01-12 1996-12-12 Cell Genesys Inc Erzeugung xenogener antikörper
US6767892B1 (en) 1997-11-07 2004-07-27 Chrion Corporation Compositions providing for increased IGF-I solubility
RS51829B (sr) 2001-08-23 2012-02-29 Genmab A/S. Ljudska antitela specifična za interleukin 15 (il-15)
US7906625B2 (en) 2005-01-24 2011-03-15 Amgen Inc. Humanized anti-amyloid antibody
US7592429B2 (en) 2005-05-03 2009-09-22 Ucb Sa Sclerostin-binding antibody
US8003108B2 (en) 2005-05-03 2011-08-23 Amgen Inc. Sclerostin epitopes
WO2008154014A2 (en) 2007-06-11 2008-12-18 Amgen Inc. A method for culturing mammalian cells to improve recombinant protein production
CN102027012A (zh) 2007-06-20 2011-04-20 Irm责任有限公司 用于治疗变应性疾病的方法和组合物
US7982016B2 (en) 2007-09-10 2011-07-19 Amgen Inc. Antigen binding proteins capable of binding thymic stromal lymphopoietin
TWI516501B (zh) 2008-09-12 2016-01-11 禮納特神經系統科學公司 Ｐｃｓｋ９拮抗劑類
BR112012027828A2 (pt) * 2010-05-03 2016-08-09 Genentech Inc composição de matéria, artigo de fabricação e método de redução da viscosidade de uma formulação contendo proteína e de preparação de uma formulação aquosa contendo proteína
WO2015196091A1 (en) * 2014-06-20 2015-12-23 Reform Biologics, Llc Viscosity-reducing excipient compounds for protein formulations
AU2015289874A1 (en) 2014-07-14 2017-02-02 Amgen Inc. Crystalline antibody formulations
WO2016065181A1 (en) * 2014-10-23 2016-04-28 Amgen Inc. Reducing viscosity of pharmaceutical formulations

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