ES3052976T3

ES3052976T3 - Anti-pcsk9 inhibitory antibodies for treating patients with hyperlipidemia undergoing lipoprotein apheresis

Info

Publication number: ES3052976T3
Application number: ES16758019T
Authority: ES
Inventors: Robert C Pordy; Garen Manvelian
Original assignee: Regeneron Pharmaceuticals Inc
Current assignee: Regeneron Pharmaceuticals Inc
Priority date: 2015-08-18
Filing date: 2016-08-17
Publication date: 2026-01-16
Anticipated expiration: 2036-08-17
Also published as: EP3337828C0; ZA201800498B; MA42657A; JP2022000443A; PL3337828T3; US10772956B2; JP7744190B2; IL314925A; JP2024016218A; US11904017B2; US20240261400A1; EP3337828B1; MX2022010357A; CN107922507B; WO2017031151A1; US20210100900A1; CN107922507A; AU2016308111A1; US20170049886A1; IL257425A

Abstract

La presente invención proporciona métodos para reducir o eliminar la necesidad de un paciente de terapia de aféresis de lipoproteínas. Los métodos de la presente invención comprenden la administración a un paciente de una composición farmacéutica que comprende un inhibidor de PCSK9. En ciertas realizaciones, el inhibidor de PCSK9 es un anticuerpo anti-PCSK9. Los métodos de la presente invención son útiles para el tratamiento de pacientes con hiperlipidemia y afecciones relacionadas que actualmente reciben tratamiento con un régimen terapéutico que comprende aféresis de lipoproteínas (p. ej., aféresis de LDL o aféresis de Lp(a)). (Traducción automática con Google Translate, sin valor legal)

Description

[0001] DESCRIPCIÓN

[0002] Anticuerpos inhibidores anti-pcsk9 para el tratamiento de pacientes con hiperlipidemia sometidos a aféresis de lipoproteínas

[0003] CAMPO DE LA INVENCIÓN

[0004] La presente invención se refiere al campo de los tratamientos terapéuticos de enfermedades y trastornos que están asociados con niveles elevados de lípidos y lipoproteínas. Más específicamente, la invención se refiere al uso de inhibidores de PCSK9 para tratar pacientes con hiperlipidemia y afecciones relacionadas que actualmente están siendo tratados con un régimen terapéutico que comprende aféresis de lipoproteínas (por ejemplo, aféresis de LDL o aféresis de Lp(a)).

[0005] ANTECEDENTES

[0006] La hiperlipidemia es un término general que abarca enfermedades y trastornos caracterizados o asociados con niveles elevados de lípidos y/o lipoproteínas en la sangre. Las hiperlipidemias incluyen hipercolesterolemia, hipertrigliceridemia, hiperlipidemia combinada, y lipoproteína a elevada (Lp(a)). Una forma particular de hiperlipidemia prevalente en muchas poblaciones es la hipercolesterolemia.

[0007] La hipercolesterolemia, en particular el aumento de los niveles de colesterol de lipoproteínas de baja densidad (LDL) (LDL-C), constituye un riesgo importante para el desarrollo de aterosclerosis y enfermedad cardíaca coronaria (CHD) (Sharrett et al., 2001, Circulation 104:1108-1113). El colesterol de lipoproteína de baja densidad se identifica como la diana principal de la terapia para reducir el colesterol, y se acepta como un criterio de valoración terapéutico sustituto válido. Numerosos estudios han demostrado que la reducción de los niveles de LDL-C reduce el riesgo de CHD con una fuerte relación directa entre los niveles de LDL-C y los eventos de CHD; por cada reducción de 1 mmol/l (~40 mg/dl) en LDL-C, la morbimortalidad por enfermedad cardiovascular (CVD) se reduce en un 22%. Mayores reducciones en el LDL-C producen una mayor reducción en eventos, y los datos comparativos del tratamiento con estatinas intensivo frente a estándar sugieren que cuanto menor sea el nivel de LDL-C, mayor será el beneficio en pacientes con un riesgo cardiovascular (CV) muy alto.

[0008] La hipercolesterolemia familiar (FH) es un trastorno hereditario del metabolismo de los lípidos que predispone a una persona a sufrir una enfermedad cardiovascular (CVD) grave prematura. Los defectos en al menos tres genes diferentes que codifican proteínas implicadas en la depuración hepática del colesterol de lipoproteínas de baja densidad (LDL) (LDL-C) pueden causar FH. Entre los ejemplos de estos defectos se incluyen mutaciones en el gen que codifica el receptor de LDL (LDLR), que elimina el LDL-C de la circulación, y en el gen de la apolipoproteína (Apo) B, que es la principal proteína de la partícula LDL. En ciertos casos de FH, el gen que codifica la proproteína convertasa subtilisina/kexina tipo 9 (PCSK9), una enzima implicada en la degradación del LDLR (mutación de ganancia de función), está mutado. En todos los casos, la FH se caracteriza por una acumulación de LDL-C en el plasma desde el nacimiento y el posterior desarrollo de xantomas tendinosos, xantelasmas, ateromas y CVD. La FH puede clasificarse como FH heterocigótica (heFH) o FH homocigótica (hoFH) dependiendo de si el individuo tiene un defecto genético en una (heterocigótica) o en ambas (homocigótica) copias del gen implicado.

[0009] Los medicamentos actuales para reducir el LDL-C incluyen estatinas, inhibidores de la absorción de colesterol, fibratos, niacina, y secuestradores de ácidos biliares. Las estatinas son un tratamiento comúnmente recetado para reducir el LDL-C. Sin embargo, a pesar de la disponibilidad de estas terapias para reducir los lípidos, muchos pacientes de alto riesgo no alcanzan su nivel diana de LDL-C (Gitt et al., 2010, Clin Res Cardiol 99(11):723-733). Para los pacientes que aún no pueden alcanzar el nivel diana de las pautas de LDL-C, a pesar de la terapia modificadora de lípidos (LMT) disponible, a veces se prescribe la eliminación mecánica de LDL-C mediante aféresis de lipoproteínas (por ejemplo, aféresis de LDL). La aféresis de lipoproteínas elimina las lipoproteínas que contienen apoproteína B100 de la sangre. Generalmente se considera una opción de último recurso para pacientes con enfermedad cardiovascular progresiva y LDL-C persistentemente elevado.

[0010] [0006]Sin embargo, la aféresis de LDL es un procedimiento costoso, invasivo y molesto para los pacientes. La aféresis, en general, implica la extracción mecánica de sangre de un paciente; la sangre se somete a centrifugación, filtración u otras etapas de separación fuera del cuerpo para eliminar los componentes no deseados, y luego se reintroduce en el paciente. La aféresis de lipoproteínas reduce de forma aguda la concentración de LDL-C en un 50-75%, lo que se traduce en una reducción promedio en el tiempo de LDL-C de aproximadamente el 30% entre procedimientos de aféresis. Los procedimientos típicos de aféresis se caracterizan por una reducción transitoria de la concentración de lipoproteínas séricas que es seguida con el tiempo de un retorno casi lineal de los niveles de lipoproteínas al nivel "basal" elevado. Este patrón oscilante de los niveles de lipoproteínas, que es característico de las terapias de aféresis de lipoproteínas, explica la necesidad de tratamientos de aféresis periódicos que se requieren a lo largo de la vida de un individuo. Además, debido a la escasez de centros de aféresis en muchas ubicaciones geográficas, muchos pacientes deben viajar una distancia significativa para este procedimiento, que se administra durante 3 horas y generalmente se realiza cada semana o cada 4 semanas, dependiendo del nivel de LDL-C del paciente y del riesgo cardiovascular. Además, este procedimiento puede requerir la colocación de una derivación para acceso vascular frecuente. La aféresis de lipoproteínas de baja densidad generalmente se tolera bien, pero puede provocar hipotensión, hipocalcemia, reacciones alérgicas, y una disminución aguda de los niveles de proteína sérica. Se ha documentado que la calidad de vida (QoL, según lo determinado mediante un cuestionario) fue menor en pacientes sometidos a aféresis además de medicamentos para reducir los lípidos en comparación con los pacientes tratados sólo con medicamentos para reducir los lípidos (Schiel et al., 1995, Int J Artif Organs 18:786-793). Por lo tanto, los pacientes que no alcanzan el objetivo de LDL-C a pesar de recibir un régimen de LMT optimizado, y que requieren aféresis para reducir el LDL-C, se beneficiarían enormemente de terapias alternativas para reducir el LDL-C que sean capaces de reducir o eliminar la necesidad de aféresis. Moriarty, 10<º>Congreso de la Sociedad Internacional de Aféresis, mayo de 2015, divulga terapias para la hipercolesterolemia familiar y que los anticuerpos anti-PCSK9 bloquean la interacción PCSK9/LDL-R y pueden reducir los niveles de LDL-C.

[0011] BREVE SUMARIO DE LA INVENCIÓN

[0012] La presente invención proporciona un anticuerpo que se une específicamente a PCSK9 para su uso en un método de tratamiento de la hipercolesterolemia, comprendiendo el método seleccionar a un paciente con diagnóstico de hipercolesterolemia familiar heterocigótica (HeFH) o hipercolesterolemia familiar homocigótica (HoFH) y tratarlo con aféresis de lipoproteínas con una frecuencia inicial (previa al tratamiento), y administrar una o más dosis del anticuerpo anti-PCSK9 al paciente, eliminando así la necesidad del paciente de terapia de aféresis de lipoproteínas o reduciendo, en al menos un 50%, la frecuencia de aféresis de lipoproteínas requerida por el paciente para alcanzar un nivel de lipoproteínas diana, en donde:

[0013] el anticuerpo es alirocumab, y el alirocumab se administra al paciente en una dosis de 150 mg con una frecuencia de una vez cada dos semanas; o el alirocumab se administra al paciente en una dosis de 300 mg con una frecuencia de una vez cada cuatro semanas,

[0014] y en donde el nivel de lipoproteína diana es un nivel de LDL-C sérico de menos de 200 mg/dl, menos de 130 mg/dl, menos de 100 mg/dl o menos de 70 mg/dl.

[0015] BREVE DESCRIPCIÓN DE LAS FIGURAS

[0016]

[0017] LaFigura 1es un diagrama que ilustra el diseño general del estudio descrito en el Ejemplo 2 aquí. El estudio incluyó un período de selección de 2 semanas, un período de tratamiento doble ciego de 18 semanas, y un período de extensión de seguimiento/etiqueta abierta opcional de 8 semanas.

[0018] LaFigura 2es un gráfico de cascada que muestra las reducciones en la tasa de tratamientos de aféresis de los pacientes individuales desde la semana 7 hasta la semana 18 en los grupos de pacientes tratados con placebo y alirocumab (población ITT). Sólo se contabiliza como "aféresis no realizada" la omisión del tratamiento de aféresis por valor de LDL-C en el punto de atención. La falta de información sobre el tratamiento de aféresis (por cualquier motivo) de la semana 7 a la semana 18 se imputa a un resultado del tratamiento de aféresis "ocurrido" en la visita. LaFigura 3muestra la tasa de aféresis estandarizada de la semana 7 a la semana 18 en los grupos de pacientes tratados con placebo y alirocumab. Las tasas de aféresis se muestran a lo largo del eje x; el eje y muestra el porcentaje de pacientes que presentan el rango de tasa de aféresis correspondiente.

[0019] La Figura 4 muestra el porcentaje de pacientes que recibieron aféresis en los grupos de pacientes tratados con placebo y alirocumab en diferentes puntos temporales desde la semana 7 hasta la semana 18 del estudio. Los pacientes que se muestran en este gráfico son aquellos que estaban recibiendo aféresis semanalmente (QW) al inicio del estudio.

[0020] LaFigura 5muestra el porcentaje de pacientes que recibieron aféresis en los grupos de pacientes tratados con placebo y alirocumab en diferentes puntos temporales desde la semana 7 hasta la semana 18 del estudio. Los pacientes que se muestran en este gráfico son aquellos que recibían aféresis una vez cada dos semanas (Q2W) al inicio del estudio.

[0021] LaFigura 6muestra el porcentaje de pacientes que recibieron aféresis en los grupos de pacientes tratados con placebo y alirocumab en diferentes puntos temporales desde la semana 7 hasta la semana 18 del estudio. Los pacientes que se muestran en este gráfico representan a todos los pacientes inscritos en el estudio.

[0022] LaFigura 7muestra el cambio porcentual calculado de LDL-C desde el valor inicial en los grupos de pacientes tratados con placebo y alirocumab en diferentes puntos temporales a lo largo del curso del estudio. La flecha negra etiquetada "la aféresis varía" indica el momento en el que se determinó la frecuencia de aféresis futura para pacientes individuales en función del nivel de LDL-C. Antes de este momento, los pacientes recibían aféresis con una frecuencia fija según el cronograma establecido de cada paciente.

[0023] LaFigura 8muestra los niveles de LDL-C calculados (expresados en términos de media de LS [+/- EE] mg/dl) en los grupos de pacientes tratados con placebo y alirocumab en diferentes puntos temporales a lo largo del curso del estudio. La flecha negra etiquetada "la aféresis varía" indica el momento en el que se determinó la frecuencia de aféresis futura para pacientes individuales en función del nivel de LDL-C. Antes de este momento, los pacientes recibían aféresis con una frecuencia fija según el cronograma establecido de cada paciente.

[0024] DESCRIPCIÓN DETALLADA

[0025] Antes de describir la presente invención, debe entenderse que esta invención no se limita a los métodos y condiciones experimentales particulares descritos, ya que dichos métodos y condiciones pueden variar. También se debe entender que la terminología usada en el presente documento es con el fin de describir realizaciones particulares solo, y no pretende ser limitante, ya que el alcance de la presente invención se limitará solo por las reivindicaciones adjuntas.

[0026] A menos que se defina lo contrario, todos los términos técnicos y científicos usados en el presente documento tienen el mismo significado que entiende comúnmente un experto en la técnica a la que pertenece la presente invención. Como se usa en el presente documento, el término "aproximadamente", cuando se usa en referencia a un valor numérico citado particular, significa que el valor puede variar del valor citado en no más del 1 %. Por ejemplo, tal como se utiliza en este documento, la expresión "aproximadamente 100" incluye 99 y 101 y todos los valores intermedios (por ejemplo, 99,1, 99,2, 99,3, 99,4, etc.).

[0027] Aunque se puede utilizar en la práctica de la presente invención cualquier método y material similar o equivalente a los aquí descritos, a continuación se describen los métodos y materiales preferidos.

[0028] Métodos para reducir o eliminar la necesidad de aféresis de lipoproteínas

[0029] La presente invención se refiere en general a métodos y composiciones para reducir los niveles de lipoproteínas en pacientes que se están sometiendo o se han sometido (por ejemplo, dentro de los últimos seis meses o más) a aféresis de lipoproteínas para reducir los niveles séricos de lipoproteínas (por ejemplo, LDL-C y/o Lp(a)). La invención da como resultado una reducción de los niveles de lipoproteínas en el suero de dichos pacientes, de modo que se reduce o elimina la necesidad de aféresis de lipoproteínas.

[0030] Tal como se utiliza en el presente documento, el término "lipoproteína" significa una partícula biomolecular que contiene tanto proteínas como lípidos. Los ejemplos de lipoproteínas incluyen,por ejemplo,lipoproteína de baja densidad (LDL), lipoproteína de muy baja densidad (VLDL), lipoproteína de densidad intermedia (IDL), y lipoproteína (a) (Lp(a)).

[0031] Tal como se utiliza en el contexto de la presente invención, "aféresis de lipoproteínas" significa un procedimiento terapéutico que implica la extracción mecánica de sangre de un paciente, seguida de la eliminación de lipoproteínas (por ejemplo, LDL-C y/o Lp(a)) de la sangre del paciente mediante procedimientos tales como filtración, adsorción, precipitación y similares, y finalmente la reintroducción de la sangre tratada en el torrente sanguíneo del paciente. A los efectos de la presente divulgación, "aféresis de LDL" y "aféresis de Lp(a)" se consideran tipos de aféresis, y por lo tanto están abarcadas por la definición más general de "aféresis de lipoproteínas".

[0032] Los tipos específicos de aféresis de lipoproteínas que se incluyen en el contexto de la presente invención incluyen, por ejemplo, filtración de doble membrana, inmunoadsorción, precipitación de LDL inducida por heparina, adsorción directa de lípidos, adsorción en sulfato de dextrano-celulosa (plasma o sangre completa), sistema de precipitación de LDL extracorpórea con heparina (HELP), plasmaféresis por DFPP y termofiltración, y hemoperfusión.

[0033] [0016]La presente invención, según ciertas realizaciones, incluye métodos para eliminar la necesidad de terapia de aféresis de lipoproteínas. Como se utiliza en este documento, la "necesidad de terapia de aféresis de lipoproteínas" de un paciente en particular es determinada por un médico, asistente médico, diagnosticador u otro profesional médico sobre la base del nivel de una o más lipoproteínas (por ejemplo, LDL-C y/o Lp(a)) medido o detectado de otra manera en el suero del paciente. La "necesidad de una terapia de aféresis de lipoproteínas" de un paciente también puede estar determinada o influida por otros factores tales como los antecedentes familiares del paciente, sus antecedentes médicos, su estado actual del tratamiento terapéutico, así como por las dianas de lipoproteínas generalmente aceptadas o prevalentes adoptadas por las asociaciones médicas nacionales y los grupos de médicos. Por ejemplo, en ciertos contextos, un nivel de LDL-C mayor o igual a aproximadamente 70 mg/dl indica una "necesidad de terapia de aféresis de lipoproteínas" por parte de un paciente. En otros contextos, un nivel de LDL-C mayor o igual a aproximadamente 100 mg/dl indica una "necesidad de terapia de aféresis de lipoproteínas" por parte de un paciente. En ciertos contextos, un nivel de LDL-C mayor o igual a aproximadamente 150 mg/dl, 200 mg/dl, 250 mg/dl, 300 mg/dl, 400 mg/dl o mayor, indica una "necesidad de terapia de aféresis de lipoproteínas" por parte de un paciente. En otros contextos, el hecho de que se alcance o no un porcentaje particular de reducción en el nivel de LDL-C o Lp(a), con respecto al nivel de LDL-C o Lp(a) del paciente en un punto de inicio particular ("valor inicial"), se puede utilizar para determinar si el paciente tiene una "necesidad de terapia de aféresis de lipoproteínas". Por ejemplo, una reducción en el LDL-C o Lp(a) de menos del 50% (por ejemplo, menos del 40%, menos del 35%, menos del 30%, menos del 25%, etc.) desde el valor inicial puede significar una "necesidad de terapia de aféresis de lipoproteínas".

[0035] La presente invención, de acuerdo con ciertas realizaciones, reduce la frecuencia de la terapia de aféresis de lipoproteínas en un paciente. Como lo apreciarán las personas con conocimientos normales en la técnica, un paciente puede ser tratado con aféresis de lipoproteínas a una frecuencia particular para lograr un objetivo de lipoproteínas particular (por ejemplo, un nivel de LDL-C de menos de 100 mg/dl, un nivel de LDL-C de menos de 70 mg/dl, etc.). La frecuencia prescrita se determina en función de la cantidad de tratamientos de aféresis que necesita un paciente durante un período de tiempo particular (por ejemplo, semanal, mensual, etc.) para lograr y mantener el objetivo de lipoproteínas del paciente. Las frecuencias de aféresis de lipoproteínas ejemplares incluyen,por ejemplo, una vez a la semana, una vez cada dos semanas, una vez cada 3 semanas, una vez cada cuatro semanas, una vez cada cinco semanas, una vez al mes, dos veces al mes, una vez cada dos meses, etc. Según ciertas realizaciones de la presente invención, la frecuencia de aféresis después de la administración de una o más dosis de un inhibidor de PCSK9 se reduce en al menos un 50% con respecto a la frecuencia de aféresis previa al tratamiento del paciente. Por ejemplo, si un paciente, antes del tratamiento con un inhibidor de PCSK9, está en un régimen de tratamiento de aféresis de lipoproteínas con una frecuencia de una vez por semana (QW), y después del tratamiento con un inhibidor de PCSK9 la frecuencia de aféresis del paciente se reduce a una vez cada 2 semanas (Q2W), entonces se afirma que el paciente ha logrado una reducción del 50% en la frecuencia de aféresis de lipoproteínas después del tratamiento. En ciertas realizaciones, la frecuencia de aféresis después de la administración de una o más dosis de un inhibidor de PCSK9 según la presente invención, se reduce en un 75% o en un 100% (es decir, eliminación de la necesidad de aféresis de lipoproteínas después del tratamiento).

[0037] La frecuencia de aféresis de lipoproteínas, en el contexto de la presente invención, puede expresarse en términos de una frecuencia previa al tratamiento y una frecuencia posterior al tratamiento. "Frecuencia previa al tratamiento" significa la frecuencia de la terapia de aféresis requerida por un paciente para alcanzar y/o mantener un nivel de lipoproteína diana particular antes del comienzo de un régimen terapéutico que comprende la administración de un inhibidor de PCSK9. "Frecuencia posterior al tratamiento" significa la frecuencia de la terapia de aféresis requerida por un paciente para alcanzar y/o mantener un nivel de lipoproteína diana particular después del comienzo de un régimen terapéutico que comprende la administración de un inhibidor de PCSK9. La frecuencia de la terapia de aféresis necesaria para alcanzar y/o mantener un nivel de lipoproteína diana particular para un paciente en particular se determina preferiblemente por un profesional médico cualificado basándose en criterios generalmente aceptados en la técnica, incluido el nivel sérico de lipoproteína que se busca reducir o controlar de otra manera.

[0039] La presente invención, por consiguiente, incluye la administración de una o más dosis de un inhibidor de PCSK9 a un paciente, con lo cual la frecuencia de aféresis de lipoproteínas posterior al tratamiento del paciente es menor que la frecuencia de aféresis de lipoproteínas previa al tratamiento del paciente. Por ejemplo, la presente invención incluye administrar una o más dosis de un inhibidor de PCSK9 a un paciente que está recibiendo o se ha sometido a una terapia de aféresis de lipoproteínas con una frecuencia previa al tratamiento de,por ejemplo, una vez a la semana, en donde, después de recibir una o más dosis del inhibidor de PCSK9, la frecuencia de aféresis de lipoproteínas requerida por el paciente para alcanzar y/o mantener un nivel de lipoproteína diana particular (es decir, frecuencia posterior al tratamiento) es,por ejemplo, una vez cada dos semanas, una vez cada tres semanas, una vez cada cuatro semanas, o con menor frecuencia. En algunos casos, la necesidad de aféresis de lipoproteínas que requiere el paciente para alcanzar y/o mantener un nivel de lipoproteínas diana particular se elimina por completo después de la administración de una o más dosis del inhibidor de PCSK9.

[0041] Según ciertas realizaciones, la presente invención comprende seleccionar un paciente con hiperlipidemia (por ejemplo, hipercolesterolemia) que se ha tratado con aféresis de lipoproteínas en el último mes, los últimos 2 meses, los últimos 3 meses, los últimos 4 meses, los últimos 5 meses, los últimos 6 meses, o durante un período más largo, y administrar una o más dosis de un inhibidor de PCSK9 al paciente. Los métodos dan como resultado la reducción del nivel de al menos una lipoproteína en el suero del paciente, y en consecuencia permiten una reducción o eliminación de la necesidad de terapia de aféresis de lipoproteínas por parte del paciente. Por ejemplo, en ciertas realizaciones de la presente invención, después de la administración de una o más dosis de un inhibidor de PCSK9, el nivel sérico de LDL-C del paciente se reduce a menos de un nivel definido (por ejemplo, menos de 100 mg/dl o menos de 70 mg/dl), de modo que se reduce la frecuencia posterior al tratamiento de la terapia de aféresis de lipoproteínas requerida por el paciente para alcanzar y/o mantener un nivel de lipoproteínas diana particular, o se concluye que ya no se requiere la aféresis de lipoproteínas.

[0043] [0021]En ciertas realizaciones, la tasa (o frecuencia) de aféresis se expresa como la tasa normalizada de aféresis requerida por un paciente para alcanzar y/o mantener un nivel de lipoproteínas diana particular. Como se utiliza en este documento, la tasa normalizada de aféresis para un paciente en particular se define como la cantidad de tratamientos de aféresis reales recibidos por el paciente durante un período de tiempo definido después del inicio de un régimen terapéutico anti-PCSK9, dividido entre la cantidad de tratamientos de aféresis recibidos por el paciente durante un período de tiempo equivalente antes del inicio del régimen terapéutico anti-PCSK9. Por ejemplo, si antes de iniciar un régimen terapéutico que comprendía la administración de un anticuerpo anti-PCSK9, un paciente recibió 8 tratamientos de aféresis durante un período de 8 semanas (por ejemplo, una vez a la semana), y después del inicio del régimen terapéutico anti-PCSK9 el paciente recibió 2 tratamientos de aféresis durante un período de 8 semanas (por ejemplo, una vez cada cuatro semanas), entonces la tasa normalizada de aféresis del paciente es 2/8 = 0,25. En la presente invención, la tasa normalizada de aféresis para un paciente después de la administración de un inhibidor de PCSK9 puede ser,por ejemplo, menos de 0,5, menos de 0,4, menos de 0,3, menos de 0,2 o menos de 0,1.

[0045] Según ciertas realizaciones, el paciente tiene hipercolesterolemia (por ejemplo, una concentración sérica de LDL-C mayor o igual a 70 mg/dl, o una concentración sérica de LDL-C mayor o igual a 100 mg/dl). En ciertas realizaciones, la hipercolesterolemia del paciente no se controla adecuadamente con la terapia con estatinas. Por ejemplo, la presente invención incluye reducir o eliminar la frecuencia de la terapia de aféresis de lipoproteínas en un paciente que tiene hipercolesterolemia que no está controlada adecuadamente con una dosis diaria de una estatina seleccionada del grupo que consiste en atorvastatina (incluyendo atorvastatina ezetimiba), rosuvastatina, cerivastatina, pitavastatina, fluvastatina, lovastatina, simvastatina (incluyendo simvastatina ezetimiba), pravastatina, y combinaciones de las mismas. La presente invención también incluye reducir o eliminar la frecuencia de la terapia de aféresis de lipoproteínas en un paciente que tiene hipercolesterolemia y que presenta intolerancia a las estatinas o que de otra manera experimenta reacciones adversas o indeseables a la terapia con estatinas (por ejemplo, dolor en el músculo esquelético, dolores, debilidad o calambres [por ejemplo, mialgia, miopatía, rabdomiólisis, etc.]).

[0047] Métodos para el tratamiento de lesiones lipídicas

[0049] La presente divulgación se refiere además a métodos y composiciones para tratar, revertir o resolver las manifestaciones físicas de la hipercolesterolemia. De acuerdo con ciertos aspectos, la presente divulgación proporciona métodos para tratar a un paciente que tiene una lesión lipídica asociada con hipercolesterolemia. Por ejemplo, la presente divulgación proporciona un método para tratar a un paciente que tiene uno o más xantelasmas. Los métodos y composiciones según este aspecto de la divulgación comprenden administrar una o más dosis de inhibidor de PCSK9 a un paciente que lo necesita, en donde las lesiones lipídicas que existían en el paciente antes del tratamiento con un inhibidor de PCSK9 se reducen, se resuelven o se eliminan después de la administración de una o más dosis del inhibidor de PCSK9 al paciente. Según ciertos aspectos, la presente divulgación comprende métodos para tratar a un paciente que tiene una lesión lipídica asociada con hipercolesterolemia, en donde los métodos comprenden seleccionar un paciente con una lesión lipídica (por ejemplo, un xantelasma) y administrar una o más dosis de un inhibidor de PCSK9 al paciente.

[0051] Selección de pacientes

[0053] La presente invención incluye el tratamiento de pacientes que se están sometiendo o se han sometido recientemente a una aféresis de lipoproteínas (por ejemplo, dentro de los últimos seis meses, dentro de las últimas 12 semanas, dentro de las últimas 8 semanas, dentro de las últimas 6 semanas, dentro de las últimas 4 semanas, dentro de las últimas 2 semanas, etc.). Los pacientes tratables también pueden presentar uno o más criterios de selección adicionales. Por ejemplo, un paciente se puede seleccionar para tratamiento si se le diagnostica o se identifica que corre el riesgo de desarrollar una afección de hipercolesterolemia, tal como,por ejemplo, hipercolesterolemia familiar heterocigótica (heFH), hipercolesterolemia familiar homocigótica (hoFH), hipercolesterolemia autosómica dominante (ADH,por ejemplo, ADH asociada con una o más mutaciones de ganancia de función en el gen PCSK9), hipercolesterolemia autosómica recesiva (ARH,por ejemplo, ARH asociada con mutaciones en LDLRAP1), así como incidencias de hipercolesterolemia que son distintas de la hipercolesterolemia familiar (nonFH). El diagnóstico de hipercolesterolemia familiar (por ejemplo, heFH o hoFH) se puede realizar mediante genotipificación y/o criterios clínicos. En el caso de los pacientes que no están genotipados, el diagnóstico clínico puede basarse en los criterios de Simon Broome, con criterios para FH definitiva, o en los criterios de la OMS/Red Holandesa de Lípidos, con una puntuación > 8 puntos.

[0055] De acuerdo con ciertas realizaciones, el paciente se puede seleccionar sobre la base de tener antecedentes de enfermedad cardíaca coronaria (CHD). Tal como se utiliza en el presente documento, una "historia de enfermedad coronaria" (o "historial documentado de enfermedad coronaria") incluye uno o más de los siguientes: (i) infarto agudo de miocardio (MI); (ii) MI asintomático; (iii) angina inestable; (iv) procedimiento de revascularización coronaria (por ejemplo, intervención coronaria percutánea [PCI] o cirugía de derivación de la arteria coronaria [CABG]); y/o (v) CHD clínicamente significativa diagnosticada mediante pruebas invasivas o no invasivas (tales como angiografía coronaria, prueba de esfuerzo en cinta rodante, ecocardiografía de esfuerzo o imágenes nucleares).

[0057] [0026]De acuerdo con ciertas realizaciones, el paciente se puede seleccionar sobre la base de tener una enfermedad cardiovascular no coronaria ("CVD no CHD"). Tal como se utiliza en el presente documento, "CVD no CHD" incluye uno o más de los siguientes: (i) accidente cerebrovascular isquémico previo documentado con un déficit neurológico isquémico focal que persistió más de 24 horas, considerado de origen aterotrombótico; (ii) enfermedad arterial periférica; (iii) aneurisma aórtico abdominal; (iv) estenosis aterosclerótica de la arteria renal; y/o (v) enfermedad de la arteria carótida (ataques isquémicos transitorios u obstrucción >50% de una arteria carótida).

[0058] Según ciertas realizaciones, el paciente se puede seleccionar sobre la base de tener uno o más factores de riesgo adicionales tales como,por ejemplo, (i) enfermedad renal crónica moderada documentada (CKD) definida por 30 ≤eGFR <60 ml/min/1,73 m2 durante 3 meses o más; (ii) diabetes mellitus tipo 1 o tipo 2 con o sin daño en órganos diana (por ejemplo, retinopatía, nefropatía, microalbuminuria); (iii) un riesgo calculado de CVD mortal a 10 años SCORE ≥5% (ESC/EAS Guidelines for the management of dyslipidemias, Conroy et al., 2003, Eur. Heart J.

[0059] 24:987-1003).

[0060] Según ciertas realizaciones, el paciente se puede seleccionar sobre la base de tener uno o más factores de riesgo adicionales seleccionados del grupo que consiste en edad (i, mayor de 40, 45, 50, 55, 60, 65, 70, 75 u 80 años), raza, origen nacional, género (masculino o femenino), hábitos de ejercicio (por ejemplo, persona que hace ejercicio regularmente, persona que no hace ejercicio), otras afecciones médicas preexistentes (por ejemplo, diabetes tipo II, tensión arterial alta, etc.), y estado actual de medicación (por ejemplo, actualmente está tomando betabloqueantes, niacina, ezetimiba, fibratos, ácidos grasos omega-3, resinas de ácidos biliares, etc.).

[0061] De acuerdo con la presente invención, los pacientes se pueden seleccionar sobre la base de una combinación de uno o más de los criterios de selección o características terapéuticas anteriores. Por ejemplo, de acuerdo con ciertas realizaciones, un paciente adecuado para el tratamiento, además de someterse, o haberse sometido recientemente (por ejemplo, en los últimos seis meses), a una aféresis de lipoproteínas, puede seleccionarse además sobre la base de tener heFH o no-FH en combinación con: (i) antecedentes de CHD documentada, (ii) CVD no-CHD, y/o (iii) diabetes mellitus con daño en órganos diana; dichos pacientes también pueden seleccionarse sobre la base de tener una concentración sérica de LDL-C mayor o igual a 70 mg/dl.

[0062] Según ciertas otras realizaciones, un paciente adecuado para el tratamiento, además de tener hipercolesterolemia que no está adecuadamente controlada por un régimen terapéutico diario de estatinas en dosis moderadas, se puede seleccionar además sobre la base de tener heFH o no-FH sin CHD, o CVD no-CHD, pero que tiene (i) un riesgo calculado de CVD mortal a 10 años SCORE ≥5%; o (ii) diabetes mellitus sin daño a órganos diana; dichos pacientes también se pueden seleccionar sobre la base de tener una concentración sérica de LDL-C mayor o igual a 100 mg/dl.

[0063] Administración de un inhibidor de PCSK9 como terapia complementaria

[0064] La presente invención incluye algunos casos en los que a un paciente que se está sometiendo, o se ha sometido recientemente, a una aféresis de lipoproteínas se le administra un inhibidor de PCSK9 de acuerdo con una cantidad de dosificación y frecuencia particulares, y en los que el inhibidor de PCSK9 se administra como un complemento a la terapia de reducción de lípidos preexistente del paciente (si corresponde), tal como un complemento al régimen terapéutico diario de estatinas preexistente del paciente.

[0065] Por ejemplo, los métodos incluyen regímenes terapéuticos complementarios en los que el inhibidor de PCSK9 se administra como terapia complementaria al mismo régimen terapéuti

[0066] decir, la misma cantidad de dosis de estatinas) que el paciente estaba tomando antes de recibir el inhibidor de PCSK9. En otras realizaciones, el inhibidor de PCSK9 se administra como terapia complementaria a un régimen terapéutico con estatinas que comprende una estatina en una cantidad que es mayor o menor que la dosis de estatina que recibía el paciente antes de recibir el inhibidor de PCSK9. Por ejemplo, después de iniciar un régimen terapéutico que comprende un inhibidor de PCSK9 administrado con una frecuencia y cantidad de dosificación particulares, la dosis diaria de estatina administrada o prescrita al paciente puede (a) permanecer igual, (b) aumentar, o (c) disminuir (por ejemplo, ajustar hacia arriba o hacia abajo) en comparación con la dosis diaria de estatina que el paciente estaba tomando antes de comenzar el régimen terapéutico con inhibidor de PCSK9, dependiendo de las necesidades terapéuticas del paciente. Cualquier referencia a un método de tratamiento practicado en el cuerpo humano o animal debe interpretarse como sustancias y composiciones para uso en dichos métodos.

[0067] Eficacia terapéutica

[0068] [0033]La presente invención da como resultado la reducción de los niveles séricos de uno o más componentes lipídicos seleccionados del grupo que consiste en LDL-C, ApoB100, colesterol no HDL, colesterol total, VLDL-C, triglicéridos, Lp(a) y colesterol remanente. Los efectos reductores de lipoproteínas de los regímenes terapéuticos de la presente invención conducen en consecuencia a una frecuencia reducida o a la eliminación de la necesidad de aféresis de lipoproteínas para lograr un nivel de lipoproteínas diana por parte del paciente. Por ejemplo, de acuerdo con ciertas realizaciones de la presente invención, la administración de una composición farmacéutica que comprende un inhibidor de PCSK9 a un paciente que se está sometiendo o se ha sometido recientemente a aféresis de lipoproteínas dará como resultado una reducción porcentual media desde el valor inicial en el colesterol de lipoproteínas de baja densidad (LDL-C) sérico de al menos aproximadamente 25%, 30%, 40%, 50%, 60% o mayor; una reducción porcentual media desde el valor inicial en ApoB100 de al menos aproximadamente 25%, 30%, 40%, 50%, 60% o mayor; una reducción porcentual media desde el valor inicial en el colesterol no HDL de al menos aproximadamente 25%, 30%, 40%, 50%, 60% o mayor; una reducción porcentual media desde el valor inicial en el colesterol total de al menos aproximadamente 10%, 15%, 20%, 25%, 30%, 35% o mayor; una reducción porcentual media desde el valor inicial en VLDL-C de al menos aproximadamente 5%, 10%, 15%, 20%, 25%, 30% o mayor; una reducción porcentual media desde el valor inicial en triglicéridos de al menos aproximadamente 5%, 10%, 15%, 20%, 25%, 30%, 35% o mayor; y/o una reducción porcentual media desde el valor inicial en Lp(a) de al menos aproximadamente 5%, 10%, 15%, 20%, 25% o más.

[0070] La presente divulgación incluye métodos para tratar a un paciente con hipercolesterolemia, comprendiendo los métodos administrar múltiples dosis de un anticuerpo anti-PCSK9 al paciente en una cantidad de dosificación de aproximadamente 75 a 150 mg por dosis, y una frecuencia de dosificación de aproximadamente una vez cada dos semanas, (o un régimen de dosificación de acuerdo con un régimen de dosificación de ajuste ascendente como se describe en otra parte del presente documento), en los que el paciente se está sometiendo, o se ha sometido recientemente, a aféresis de lipoproteínas, y en los que, después de aproximadamente 12, 14, 16, 18, 20, 22, 24 o más semanas de tratamiento con el anticuerpo anti-PCSK9, el paciente exhibe una reducción en el nivel de LDL-C desde el valor inicial de al menos 50%, y por lo tanto da como resultado una frecuencia reducida o la eliminación de la necesidad de aféresis de lipoproteínas por parte del paciente. En ciertas realizaciones, después de una o más semanas de tratamiento con el anticuerpo anti-PCSK9, el paciente presenta una reducción en el nivel de LDL-C desde el valor inicial de aproximadamente 55%, 60%, 70% o más.

[0072] Inhibidores de PCSK9

[0074] Los métodos descritos en este documento comprenden administrar a un paciente una composición terapéutica que comprende un inhibidor de PCSK9. Tal como se utiliza en este documento, un "inhibidor de PCSK9" es cualquier agente que se une o interactúa con la PCSK9 humana e inhibe la función biológica normal de la PCSK9in vitrooin vivo.Los ejemplos no limitantes de categorías de inhibidores de PCSK9 incluyen antagonistas de PCSK9 de moléculas pequeñas, inhibidores basados en ácidos nucleicos de la expresión o actividad de PCSK9 (por ejemplo, ARNi o antisentido), moléculas basadas en péptidos que interactúan específicamente con PCSK9 (por ejemplo, pepticuerpos), moléculas receptoras que interactúan específicamente con PCSK9, proteínas que comprenden una porción de unión a ligando de un receptor de LDL, moléculas de andamiaje de unión a PCSK9 (por ejemplo, DARPins, proteínas de repetición HEAT, proteínas de repetición ARM, proteínas de repetición tetratricopeptídicas, construcciones de andamiaje basadas en fibronectina, y otros andamiajes basados en proteínas de repetición de origen natural, etc., [véase,por ejemplo, Boersma y Pluckthun, 2011, Curr. Opin. Biotechnol.22:849-857, y referencias citadas en el mismo]), y aptámeros anti-PCSK9 o porciones de los mismos. En la invención, el inhibidor de PCSK9 es el anticuerpo anti-PCSK9 alirocumab.

[0076] El término "tipo 9 de proproteína convertasa subtilisina/kexina humana" o "PCSK9 humana" o "hPCSK9", como se usa en el presente documento, se refiere a PCSK9 que tiene la secuencia del ácido nucleico mostrada en SEQ ID NO: 197 y la secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 198, o un fragmento biológicamente activo de la misma.

[0078] El término "anticuerpo", tal como se utiliza en el presente documento, se refiere a moléculas de inmunoglobulina que comprenden cuatro cadenas polipeptídicas, dos cadenas pesadas (H) y dos cadenas ligeras (L) interconectadas por enlaces disulfuro, así como multímeros de las mismas (por ejemplo, IgM). Cada una de las cadenas pesadas comprende una región variable de la cadena pesada (abreviada en esta memoria HCVR o V<H>) y una región constante de la cadena pesada. La región constante de la cadena pesada comprende tres dominios,C<H>1, C<H>2 y C<H>3. Cada una de las cadenas ligeras comprende una región variable de la cadena ligera (abreviada en esta memoria LCVR o V<L>) y una región constante de la cadena pesada. La región constante de la cadena ligera comprende un dominio (C<L>1). Las regiones V<H>y V<L>se pueden subdividir, además, en regiones de hipervariabilidad, denominadas regiones determinantes de la complementariedad (CDRs, por sus siglas en inglés), intercaladas con regiones que están más conservadas, denominadas regiones marco (FR, por sus siglas en inglés). Cada una de las V<H>y V<L>está compuesta por tres CDRs y cuatro FRs, dispuestas desde el extremo amino al extremo carboxi en el siguiente orden: FR1, CDR1, FR2, CDR2, FR3, CDR3, FR4. En diferentes casos, las FR del anticuerpo anti-PCSK9 (o su porción de unión al antígeno) pueden ser idénticas a las secuencias de la línea germinal humana, o pueden estar modificadas de forma natural o artificial. Una secuencia consenso de aminoácidos se puede definir basándose en un análisis en paralelo de dos o más CDR.

[0080] [0038]El término "anticuerpo, como se usa en el presente documento, también incluye fragmentos de unión al antígeno de moléculas de anticuerpo completas. Las expresiones "porción de unión al antígeno" de un anticuerpo, "fragmento de unión al antígeno" de un anticuerpo y similares, como se usan en el presente documento, incluyen cualquier polipéptido o glucoproteína que se produce de forma natural, obtenible enzimáticamente, sintético o modificado por ingeniería genética que se une específicamente a un antígeno para formar un complejo. Los fragmentos de unión a antígeno de un anticuerpo pueden derivar,por ejemplo, de moléculas de anticuerpos completas utilizando cualquier técnica estándar adecuada, tal como digestión proteolítica o técnicas de ingeniería genética recombinante que involucran la manipulación y expresión de ADN que codifica dominios variables y opcionalmente constantes del anticuerpo. Dicho ADN es conocido y/o está fácilmente disponible,por ejemplo, en fuentes comerciales, bibliotecas de ADN (incluidas,por ejemplo, bibliotecas de fagos-anticuerpos) o puede sintetizarse. El ADN se puede secuenciar y manipular químicamente o usando técnicas de biología molecular, por ejemplo, para disponer uno o más dominios variables y/o constantes en una configuración adecuada, o para introducir codones, crear residuos de cisteína, modificar, añadir o eliminar aminoácidos, etc.

[0082] Ejemplos no limitantes de fragmentos de unión al antígeno incluyen: (i) fragmentos Fab; (ii) fragmentos F(ab')2; (iii) fragmentos Fd; (iv) fragmentos Fv; (v) moléculas Fv de cadena sencilla (scFv); (vi) fragmentos dAb; y (vii) unidades de reconocimiento mínimas que consisten en residuos de aminoácidos que imitan la región hipervariable de un anticuerpo (por ejemplo, una región determinante de la complementariedad (CDR) aislada, tal como un péptido CDR3), o un péptido FR3-CDR3-FR4 restringido. Otras moléculas diseñadas, tales como anticuerpos específicos de dominio, anticuerpos de dominio único, anticuerpos con dominio eliminado, anticuerpos quiméricos, anticuerpos injertados con CDR, diacuerpos, triacuerpos, tetracuerpos, minicuerpos, nanocuerpos (por ejemplo, nanocuerpos monovalentes, nanocuerpos bivalentes, etc.), inmunofármacos modulares pequeños (SMIP), y dominios IgNAR variables de tiburón, también se incluyen dentro de la expresión "fragmento de unión a antígeno", como se usa en este documento.

[0084] Un fragmento de unión al antígeno de un anticuerpo comprenderá normalmente al menos un dominio variable. El dominio variable puede ser de cualquier tamaño o composición de aminoácidos y generalmente comprenderá al menos una CDR que es adyacente o está en marco con una o más secuencias de la región estructural. En fragmentos de unión al antígeno que tienen un dominio V<H>asociado con un dominio V<L>, los dominios V<H>y V<L>pueden estar situados entre sí en cualquier disposición adecuada. Por ejemplo, la región variable puede ser dimérica y contener dímeros V<H>-V<H>, V<H>-V<L>o V<L>-V<L>. Alternativamente, el fragmento de unión al antígeno de un anticuerpo puede contener un dominio V<H>o V<L>monomérico.

[0086] En ciertos aspectos de la divulgación, un fragmento de unión a antígeno de un anticuerpo puede contener al menos un dominio variable unido covalentemente a al menos un dominio constante. Las configuraciones ejemplares no limitantes de dominios variables y constantes que pueden encontrarse dentro de un fragmento de unión a antígeno de un anticuerpo incluyen: (i) V<H>-C<H>1; (ii) V<H>-C<H>2; (iii) V<H>-C<H>3; (iv) V<H>-C<H>1-C<H>2; (v) V<H>-C<H>1-C<H>2-C<H>3; (vi) V<H>-C<H>2-C<H>3; (vii) V<H>-C<L>; (viii) V<L>-C<H>1; (ix) V<L>-C<H>2; (x) V<L>-C<H>3; (xi) V<L>-C<H>1-C<H>2; (xii) V<L>-C<H>1-C<H>2-C<H>3; (xiii) V<L>-C<H>2-C<H>3; y (xiv) V<L>-C<L>. En cualquier configuración de dominios variables y constantes, incluyendo cualquiera de las configuraciones a modo de ejemplo enumeradas anteriormente, los dominios variables y constantes pueden estar directamente enlazados entre sí o pueden estar enlazados mediante una región bisagra o de conector total o parcial. Una región bisagra puede consistir en al menos 2 (por ejemplo, 5, 10, 15, 20, 40, 60 o más) aminoácidos que dan como resultado un enlace flexible o semiflexible entre dominios variables y/o constantes adyacentes en una sola molécula de polipéptido. Además, un fragmento de unión a antígeno de un anticuerpo puede comprender un homodímero o heterodímero (u otro multímero) de cualquiera de las configuraciones de dominio variable y constante enumeradas anteriormente en asociación no covalente entre sí y/o con uno o más dominios V<H>o V<L>monoméricos (por ejemplo, mediante enlaces o enlaces disulfuro).

[0088] Como ocurre con las moléculas de anticuerpo completas, los fragmentos de unión a antígeno pueden ser monoespecíficos o multiespecíficos (p. ej., biespecíficos). Un fragmento multiespecífico de unión al antígeno de un anticuerpo comprenderá normalmente al menos dos dominios variables diferentes, en donde cada uno de los dominios variables es capaz de unirse específicamente a un antígeno separado o a un epítopo diferente en el mismo antígeno. Cualquier formato de anticuerpo multiespecífico, incluidos los formatos de anticuerpos biespecíficos ejemplares divulgados en este documento, se puede adaptar para su uso en el contexto de un fragmento de unión a antígeno de un anticuerpo utilizando técnicas de rutina disponibles en la técnica.

[0090] La región constante de un anticuerpo es importante en la capacidad de un anticuerpo para fijar el complemento y mediar en la citotoxicidad dependiente de células. Por lo tanto, el isotipo de un anticuerpo puede seleccionarse basándose en si es deseable que el anticuerpo medie en la citotoxicidad.

[0092] El término "anticuerpo humano", como se usa en el presente documento, pretende incluir anticuerpos que tienen regiones variables y constantes derivadas de secuencias de inmunoglobulina de la línea germinal humana. Los anticuerpos humanos de la invención pueden, no obstante, incluir residuos de aminoácidos no codificados por secuencias de inmunoglobulina de línea germinal humana (por ejemplo, mutaciones introducidas por mutagénesis aleatoria o específica del sitioin vitroo por mutación somáticain vivo), por ejemplo en las CDR, y en particular en CDR3. Sin embargo, el término "anticuerpo humano", como se usa en el presente documento, no pretende incluir anticuerpos en los que las secuencias de CDR derivadas de la línea germinal de otras especies de mamífero, tal como un ratón, han sido injertadas en secuencias de la región estructural humana.

[0094] [0045]La expresión "anticuerpo humano recombinante", como se usa en el presente documento, pretende incluir todos los anticuerpos humanos que se preparan, expresan, crean o aíslan por medios recombinantes, tales como anticuerpos expresados usando un vector de expresión recombinante transfectado en una célula hospedadora (descrita más adelante), anticuerpos aislados de una biblioteca recombinante combinatoria de anticuerpos humanos (descrita más adelante), anticuerpos aislados de un animal (por ejemplo, un ratón) que es transgénico para genes de inmunoglobulina humana (véase, por ejemplo, Taylor et al. (1992) Nucl. Acids Res. 20:6287-6295) o anticuerpos preparados, expresados, creados o aislados por cualquier otro medio que implique el corte y empalme de secuencias de genes de inmunoglobulina humana con otras secuencias de ADN. Dichos anticuerpos humanos recombinantes tienen regiones variables y constantes derivadas de secuencias de inmunoglobulinas de la línea germinal humana. En ciertos casos, sin embargo, dichos anticuerpos humanos recombinantes se someten a mutagénesisin vitro(o, cuando se utiliza un animal transgénico para secuencias de Ig humanas, mutagénesis somáticain vivo), y por lo tanto las secuencias de aminoácidos de las regiones V<H>y V<L>de los anticuerpos recombinantes son secuencias que, si bien derivan de y están relacionadas con las secuencias V<H>y V<L>de la línea germinal humana, pueden no existir naturalmente dentro del repertorio de la línea germinal de anticuerpos humanosin vivo.

[0096] Los anticuerpos humanos pueden existir en dos formas que están asociadas con la heterogeneidad de la bisagra. En una forma, una molécula de inmunoglobulina comprende una construcción estable de cuatro cadenas de aproximadamente 150-160 kDa en la que los dímeros se mantienen unidos mediante un enlace disulfuro de cadena pesada entre cadenas. En una segunda forma, los dímeros no están enlazados mediante enlaces disulfuro entre cadenas y se forma una molécula de aproximadamente 75-80 kDa compuesta por una cadena ligera y pesada acopladas covalentemente (medio anticuerpo). Estas formas han sido extremadamente difíciles de separar, incluso después de la purificación por afinidad.

[0098] La frecuencia de aparición de la segunda forma en diversos isotipos de IgG intactos se debe, pero no se limita a diferencias estructurales asociadas con el isotipo de la región bisagra del anticuerpo. Una única sustitución de aminoácido en la región bisagra de la bisagra de IgG4 humana puede reducir significativamente la aparición de la segunda forma (Angal et al. (1993) Molecular Immunology 30:105) a niveles normalmente observados usando una bisagra de IgG1 humana. La presente invención abarca anticuerpos que tienen una o más mutaciones en la región bisagra, C<H>2 o C<H>3 que pueden ser deseables, por ejemplo en la producción, para mejorar el rendimiento de la forma de anticuerpo deseada.

[0100] Un "anticuerpo aislado", como se usa en el presente documento, significa un anticuerpo que se ha identificado y separado y/o recuperado de al menos un componente de su entorno natural. Por ejemplo, un anticuerpo que se ha separado o eliminado de al menos un componente de un organismo, o de un tejido o célula en el que el anticuerpo existe o se produce de forma natural, es un "anticuerpo aislado" para los fines de la presente invención. Un anticuerpo aislado también incluye un anticuerpoin situdentro de una célula recombinante. Los anticuerpos aislados son anticuerpos que se han sometido a al menos una etapa de purificación o aislamiento. Según ciertas realizaciones, un anticuerpo aislado puede estar sustancialmente libre de otro material celular y/o productos químicos.

[0102] La expresión "se une específicamente", o similar, significa que un anticuerpo o fragmento de unión al antígeno del mismo forma un complejo con un antígeno que es relativamente estable en condiciones fisiológicas. Métodos de determinación de si un anticuerpo se une específicamente a un antígeno son bien conocidos en la técnica e incluyen, por ejemplo, diálisis de equilibrio, resonancia de plasmones superficiales y similares. Por ejemplo, un anticuerpo que se une específicamente a PCSK9 incluye anticuerpos que se unen a PCSK9 o una porción de esta con una K<D>de menos de aproximadamente 1000 nM, menos de aproximadamente 500 nM, menos de aproximadamente 300 nM, menos de aproximadamente 200 nM, menos de aproximadamente 100 nM, menos de aproximadamente 90 nM, menos de aproximadamente 80 nM, menos de aproximadamente 70 nM, menos de aproximadamente 60 nM, menos de aproximadamente 50 nM, menos de aproximadamente 40 nM, menos de aproximadamente 30 nM, menos de aproximadamente 20 nM, menos de aproximadamente 10 nM, menos de aproximadamente 5 nM, menos de aproximadamente 4 nM, menos de aproximadamente 3 nM, menos de aproximadamente 2 nM, menos de aproximadamente 1 nM o menos de aproximadamente 0,5 nM, medido en un ensayo de resonancia de plasmones superficiales. Sin embargo, un anticuerpo aislado que se une específicamente a la PCSK9 humana tiene reactividad cruzada con otros antígenos, tales como las moléculas de PCSK9 de otras especies (no humanas).

[0104] [0050]Los anticuerpos anti-PCSK9 pueden comprender una o más sustituciones, inserciones y/o deleciones de aminoácidos en las regiones marco y/o CDR de los dominios variables de cadena pesada y ligera en comparación con las secuencias de línea germinal correspondientes de las que derivaron los anticuerpos. Dichas mutaciones pueden determinarse fácilmente comparando las secuencias de aminoácidos desveladas en el presente documento con secuencias de la línea germinal disponibles, por ejemplo, en bases de datos públicas de secuencias de anticuerpos. La presente divulgación incluye métodos que implican el uso de anticuerpos y fragmentos de unión a antígeno de los mismos, que derivan de cualquiera de las secuencias de aminoácidos divulgadas en este documento, en los que uno o más aminoácidos dentro de una o más regiones marco y/o CDR se mutan al residuo o residuos correspondientes de la secuencia de la línea germinal de la que derivó el anticuerpo, o al residuo o residuos correspondientes de otra secuencia de la línea germinal humana, o a una sustitución de aminoácidos conservativa del residuo o residuos correspondientes de la línea germinal (tales cambios de secuencia se denominan en este documento colectivamente "mutaciones de la línea germinal"). Una persona con conocimientos ordinarios en la técnica, comenzando con las secuencias de la región variable de las cadenas pesada y ligera desveladas en el presente documento, puede producir fácilmente numerosos anticuerpos y fragmentos de unión al antígeno que comprenden una o más mutaciones individuales de la línea germinal o combinaciones de las mismas. En ciertos aspectos de la divulgación, todos los residuos del marco y/o de CDR dentro de los dominios V<H>y/o V<L>se mutan nuevamente a los residuos encontrados en la secuencia de la línea germinal original de la cual derivó el anticuerpo. En otros aspectos, sólo ciertos residuos se mutan de nuevo a la secuencia de la línea germinal original, por ejemplo, sólo los residuos mutados que se encuentran dentro de los primeros 8 aminoácidos de FR1 o dentro de los últimos 8 aminoácidos de FR4, o sólo los residuos mutados que se encuentran dentro de CDR1, CDR2 o CDR3. En otros aspectos, uno o más de los residuos del marco y/o CDR se mutan a los residuos correspondientes de una secuencia de línea germinal diferente (es decir, una secuencia de línea germinal que es diferente de la secuencia de línea germinal de la que derivó originalmente el anticuerpo). Además, los anticuerpos pueden contener cualquier combinación de dos o más mutaciones de la línea germinal dentro de las regiones marco y/o CDR,por ejemplo, en la que ciertos residuos individuales se mutan al residuo correspondiente de una secuencia de línea germinal particular mientras que ciertos otros residuos que difieren de la secuencia de línea germinal original se mantienen o se mutan al residuo correspondiente de una secuencia de línea germinal diferente. Una vez obtenidos, los anticuerpos y los fragmentos de unión al antígenos que contienen una o más mutaciones de la línea germinal pueden analizarse fácilmente para determinar una o más propiedades deseadas, tales como, especificidad de unión mejorada, afinidad de unión aumentada, propiedades biológicas antagonistas o agonistas mejoradas o potenciadas (según sea el caso), inmunogenicidad reducida, etc.

[0105] La presente divulgación también incluye métodos que implican el uso de anticuerpos anti-PCSK9 que comprenden variantes de cualquiera de las secuencias de aminoácidos de HCVR, LCVR y/o CDR divulgadas en este documento que tienen una o más sustituciones conservativas. Por ejemplo, la presente divulgación incluye el uso de anticuerpos anti-PCSK9 que tienen secuencias de aminoácidos de HCVR, LCVR y/o CDR con,por ejemplo, 10 o menos, 8 o menos, 6 o menos, 4 o menos, etc. sustituciones de aminoácidos conservativas con respecto a cualquiera de las secuencias de aminoácidos de HCVR, LCVR y/o CDR divulgadas en este documento.

[0106] El término "resonancia de plasmones superficiales", como se usa en el presente documento, se refiere a un fenómeno óptico que permite el análisis de interacciones en tiempo real mediante la detección de alteraciones en las concentraciones de proteínas dentro de una matriz de biosensores, por ejemplo, usando el sistema BIAcore™ (Biacore Life Sciences Division of GE Healthcare, Piscataway, Nueva Jersey).

[0107] El término "K<D>", tal como se utiliza en este documento, se refiere a la constante de disociación en equilibrio de una interacción anticuerpo-antígeno particular.

[0108] El término "epítopo" se refiere a un determinante antigénico que interactúa con un sitio de unión al antígeno específico en la región variable de una molécula de anticuerpo conocida como parátopo. Un único antígeno puede tener más de un epítopo. Por lo tanto, diferentes anticuerpos pueden unirse a diferentes áreas de un antígeno y pueden tener diferentes efectos biológicos. Los epítopos pueden ser conformacionales o lineales. Un epítopo conformacional se produce mediante aminoácidos yuxtapuestos en el espacio de diferentes segmentos de la cadena polipeptídica lineal. Un epítopo lineal es aquel producido por residuos de aminoácidos adyacentes en una cadena polipeptídica. En ciertas circunstancias, un epítopo puede incluir restos de sacáridos, grupos fosforilo o grupos sulfonilo en el antígeno.

[0109] Según ciertos aspectos, el anticuerpo anti-PCSK9 utilizado en los métodos de la presente divulgación es un anticuerpo con características de unión dependientes del pH. Como se usa en el presente documento, la expresión "unión dependiente del pH" significa que el anticuerpo o fragmento de unión al antígeno del mismo presenta "unión reducida a PCSK9 a pH ácido en comparación con pH neutro" (para los fines de la presente divulgación, ambas expresiones se pueden usar indistintamente). Por ejemplo, los anticuerpos "con características de unión dependientes del pH" incluyen anticuerpos y fragmentos de unión a antígeno de los mismos que se unen a PCSK9 con mayor afinidad a pH neutro que a pH ácido. En ciertos aspectos, los anticuerpos y fragmentos de unión a antígeno de la presente divulgación se unen a PCSK9 con al menos 3, 5, 10, 15, 20, 25, 30, 35, 40, 45, 50, 55, 60, 65, 70, 75, 80, 85, 90, 95, 100 o más veces mayor afinidad a pH neutro que a pH ácido.

[0110] [0056]De acuerdo con este aspecto de la divulgación, los anticuerpos anti-PCSK9 con características de unión dependientes del pH pueden poseer una o más variaciones de aminoácidos con respecto al anticuerpo anti-PCSK9 parental. Por ejemplo, un anticuerpo anti-PCSK9 con características de unión dependientes del pH puede contener una o más sustituciones o inserciones de histidina,por ejemplo, en una o más CDR de un anticuerpo anti-PCSK9 parental. Por tanto, de acuerdo con ciertos aspectos de la presente divulgación, se proporcionan métodos que comprenden administrar un anticuerpo anti-PCSK9 que comprende secuencias de aminoácidos de CDR (por ejemplo, CDR de cadena pesada y ligera) que son idénticas a las secuencias de aminoácidos de CDR de un anticuerpo anti-PCSK9 parental, excepto por la sustitución de uno o más aminoácidos de una o más CDR del anticuerpo parental por un residuo de histidina. Los anticuerpos anti-PCSK9 con unión dependiente del pH pueden poseer, por ejemplo, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 o más sustituciones de histidina, ya sea dentro de una única CDR de un anticuerpo parental o distribuidas en múltiples (por ejemplo, 2, 3, 4, 5 o 6) CDR de un anticuerpo anti-PCSK9 parental. Por ejemplo, la presente divulgación incluye el uso de anticuerpos anti-PCSK9 con unión dependiente del pH que comprenden una o más sustituciones de histidina en HCDR1, una o más sustituciones de histidina en HCDR2, una o más sustituciones de histidina en HCDR3, una o más sustituciones de histidina en LCDR1, una o más sustituciones de histidina en LCDR2, y/o una o más sustituciones de histidina en LCDR3, de un anticuerpo anti-PCSK9 parental.

[0111] Tal como se utiliza en el presente documento, la expresión "pH ácido" significa un pH de 6,0 o menos (por ejemplo, menos de aproximadamente 6,0, menos de aproximadamente 5,5, menos de aproximadamente 5,0, etc.). La expresión "pH ácido" incluye valores de pH de aproximadamente 6,0, 5,95, 5,90, 5,85, 5,8, 5,75, 5,7, 5,65, 5,6, 5,55, 5,5, 5,45, 5,4, 5,35, 5,3, 5,25, 5,2, 5,15, 5,1, 5,05, 5,0, o menos. Como se usa en el presente documento, la expresión "pH neutro" significa un pH de aproximadamente 7,0 a aproximadamente 7,4. La expresión "pH neutro" incluye valores de pH de aproximadamente 7,0, 7,05, 7,1, 7,15, 7,2, 7,25, 7,3, 7,35 y 7,4.

[0112] Los ejemplos no limitantes de anticuerpos anti-PCSK9 que se pueden usar en el contexto de la presente divulgación incluyen,por ejemplo, alirocumab, evolocumab, bococizumab, lodelcizumab, ralpancizumab, o porciones de unión al antígeno de cualquiera de los anticuerpos anteriores. En la invención, el anticuerpo anti-PCSK9 es alirocumab.

[0113] Preparación de anticuerpos humanos

[0114] Se conocen en la técnica métodos de generación de anticuerpos humanos en ratones transgénicos. Cualquiera de estos métodos conocidos se puede utilizar en el contexto de la presente divulgación para producir anticuerpos humanos que se unen específicamente a PCSK9 humano.

[0115] Usando la tecnología VELOCIMMUNE<™>(véase, por ejemplo, el documento de patente US 6.596.541, Regeneron Pharmaceuticals) o cualquier otro método conocido de generación de anticuerpos monoclonales, inicialmente se aíslan anticuerpos quiméricos de alta afinidad contra PCSK9 que tienen una región variable humana y una región constante de ratón. La tecnología VELOCIMMUNE<®>implica la generación de un ratón transgénico que tiene un genoma que comprende regiones variables de la cadena ligera y pesada humana unidas operativamente a loci endógenos de la región constante de ratón de manera que el ratón produzca un anticuerpo que comprende una región variable humana y una región constante de ratón en respuesta a la estimulación antigénica. El ADN que codifica las regiones variables de las cadenas pesada y ligera del anticuerpo se aísla y se une operativamente al ADN que codifica las regiones constantes de las cadenas pesada y ligera humanas. Luego, el ADN se expresa en una célula capaz de expresar el anticuerpo completamente humano.

[0116] Generalmente, un ratón VELOCIMMUNE<®>se expone al antígeno de interés y se recuperan células linfáticas (tales como linfocitos B) de los ratones que expresan anticuerpos. Las células linfáticas pueden fusionarse con una línea celular de mieloma para preparar líneas celulares de hibridoma inmortales, y dichas líneas celulares de hibridoma se examinan y seleccionan para identificar líneas celulares de hibridoma que producen anticuerpos específicos contra el antígeno de interés. El ADN que codifica las regiones variables de la cadena pesada y la cadena ligera puede aislarse y unirse a regiones constantes isotípicas deseables de la cadena pesada y la cadena ligera. Dicha proteína de anticuerpo puede producirse en una célula, tal como una célula CHO. Alternativamente, el ADN que codifica los anticuerpos quiméricos específicos de antígeno o los dominios variables de las cadenas ligera y pesada se puede aislar directamente de linfocitos específicos de antígeno.

[0117] Inicialmente, se aíslan anticuerpos quiméricos de alta afinidad que tienen una región variable humana y una región constante de ratón. Los anticuerpos se caracterizan y seleccionan por sus características deseables, incluyendo afinidad, selectividad, epítopo, etc., utilizando procedimientos estándares conocidos por los expertos en la técnica. Las regiones constantes del ratón se reemplazan por una región constante humana deseada para generar el anticuerpo completamente humano, por ejemplo, IgG1 o IgG4 de tipo salvaje o modificado. Si bien la región constante seleccionada puede variar según el uso específico, las características de alta afinidad de unión al antígeno y especificidad de la diana residen en la región variable.

[0118] En general, los anticuerpos que se pueden utilizar en los métodos descritos en este documento poseen altas afinidades, como se describió anteriormente, cuando se miden por unión al antígeno inmovilizado en fase sólida o en fase de solución. Las regiones constantes del ratón se reemplazan por las regiones constantes humanas deseadas para generar los anticuerpos completamente humanos. Si bien la región constante seleccionada puede variar según el uso específico, las características de alta afinidad de unión al antígeno y especificidad de la diana residen en la región variable.

[0119] [0064]Los ejemplos específicos de anticuerpos humanos o fragmentos de unión a antígeno de anticuerpos que se unen específicamente a PCSK9 incluyen cualquier anticuerpo o fragmento de unión a antígeno que comprende las tres CDR de cadena pesada (HCDR1, HCDR2 y HCDR3) contenidas dentro de una región variable de cadena pesada (HCVR) que tiene una secuencia de aminoácidos seleccionada del grupo que consiste en SEQ ID NOs: 1 y 11, o una secuencia sustancialmente similar de la misma que tiene al menos 90%, al menos 95%, al menos 98% o al menos 99% de identidad de secuencia. Como alternativa, los ejemplos específicos de anticuerpos humanos o fragmentos de unión a antígeno de anticuerpos que se unen específicamente a PCSK9 incluyen cualquier anticuerpo o fragmento de unión a antígeno que comprende las tres CDR de cadena pesada (HCDR1, HCDR2 y HCDR3) contenidas dentro de una región variable de cadena pesada (HCVR) que tiene una secuencia de aminoácidos seleccionada del grupo que consiste en las SEQ ID NOs 37, 45, 53, 61, 69, 77, 85, 93, 101, 109, 117, 125, 133, 141, 149, 157, 165, 173, 181 y 189, o una secuencia sustancialmente similar de la misma que tiene al menos 90%, al menos 95%, al menos 98% o al menos 99% de identidad de secuencia. El anticuerpo o fragmento de unión a antígeno puede comprender las tres CDR de cadena ligera (LCVR1, LCVR2, LCVR3) contenidas dentro de una región variable de cadena ligera (LCVR) que tiene una secuencia de aminoácidos seleccionada del grupo que consiste en las SEQ ID NOs 6 y 15, o una secuencia sustancialmente similar de la misma que tiene al menos 90%, al menos 95%, al menos 98% o al menos 99% de identidad de secuencia. Alternativamente, el anticuerpo o el fragmento de unión a antígeno puede comprender las tres CDR de cadena ligera (LCVR1, LCVR2, LCVR3) contenida dentro de una región variable de cadena ligera (LCVR) que tiene una secuencia de aminoácidos seleccionada del grupo que consiste en las SEQ ID NOs 41, 49, 57, 65, 73, 81, 89, 97, 105, 113, 121, 129, 137, 145, 153, 161, 169, 177, 185 y 193, o una secuencia sustancialmente similar de la misma que tiene al menos 90%, al menos 95%, al menos 98% o al menos 99% de identidad de secuencia.

[0121] La identidad de secuencia entre dos secuencias de aminoácidos se determina en toda la longitud de la secuencia de aminoácidos de referencia, es decir, la secuencia de aminoácidos identificada con un SEQ ID NO, utilizando la mejor alineación de secuencia y/o en la región de la mejor alineación de secuencia entre las dos secuencias de aminoácidos, en la que la mejor alineación de secuencia se puede obtener con herramientas conocidas en la técnica, por ejemplo, Align, utilizando configuraciones estándar, preferiblemente EMBOSS::needle, Matrix: Blosum62, Gap Open 10.0, Gap Extend 0.5.

[0123] En ciertos aspectos de la divulgación, el anticuerpo o la proteína de unión a antígeno comprende las seis CDR (HCDR1, HCDR2, HCDR3, LCDR1, LCDR2 y LCDR3) de los pares de secuencias de aminoácidos de la región variable de cadena pesada y ligera (HCVR/LCVR) seleccionados del grupo que consiste en SEQ ID NOs: 1/6 y 11/15. Como alternativa, en ciertos aspectos de la divulgación, el anticuerpo o la proteína de unión a antígeno comprende las seis CDR (HCDR1, HCDR2, HCDR3, LCDR1, LCDR2 y LCDR3) de los pares de secuencias de aminoácidos de la región variable de cadena pesada y ligera (HCVR/LCVR) seleccionados del grupo que consiste en SEQ ID NOs:37/41, 45/49, 53/57, 61/65, 69/73, 77/81, 85/89, 93/97, 101/105, 109/113, 117/121, 125/129, 133/137, 141/145, 149/153, 157/161, 165/169, 173/177, 181/185, y 189/193.

[0125] En ciertos aspectos de la divulgación, el anticuerpo anti-PCSK9, o proteína de unión a antígeno, que se puede utilizar tiene secuencias de aminoácidos de HCDR1/HCDR2/HCDR3/LCDR1/LCDR2/LCDR3 seleccionadas de SEQ ID NOs: 2/3/4/7/8/10 (mAb316P [también denominado "REGN727" o "alirocumab"]) y 12/13/14/16/17/18 (mAb300N) (véase la publicación de la solicitud de patente de EE. UU. n.º 2010/0166768) y 12/13/14/16/17/18, en el que SEQ ID NO: 16 comprende una sustitución de histidina por leucina en el residuo de aminoácido 30 (L30H).

[0127] En ciertos aspectos de la divulgación, el anticuerpo o la proteína de unión a antígeno comprende pares de secuencias de aminoácidos de HCVR/LCVR seleccionados del grupo que consiste en SEQ ID NOs: 1/6 y 11/15. En ciertos aspectos ejemplares, el anticuerpo o la proteína de unión a antígeno comprende una secuencia de aminoácidos de HCVR de SEQ ID NO:1 y una secuencia de aminoácidos de LCVR de SEQ ID NO:6. En ciertos aspectos ejemplares, el anticuerpo o la proteína de unión a antígeno comprende una secuencia de aminoácidos de HCVR de SEQ ID NO:11 y una secuencia de aminoácidos de LCVR de SEQ ID NO:15. En ciertos aspectos ejemplares, el anticuerpo o la proteína de unión a antígeno comprende una secuencia de aminoácidos de HCVR de SEQ ID NO: 11 y una secuencia de aminoácidos de LCVR de SEQ ID NO: 15 que comprende una sustitución de histidina por leucina en el residuo de aminoácido 30 (L30H).

[0129] Composiciones farmacéuticas y métodos de administración

[0131] La presente invención se refiere a métodos que comprenden la administración de un inhibidor de PCSK9 a un paciente, en los que el inhibidor de PCSK9 está contenido dentro de una composición farmacéutica. Las composiciones farmacéuticas se formulan con vehículos, excipientes y otros agentes adecuados que proporcionan una transferencia, una liberación, una tolerancia y similares adecuadas. Se puede encontrar una multitud de formulaciones apropiadas en el formulario conocido por todos los químicos farmacéuticos: Remington's Pharmaceutical Sciences, Mack Publishing Company, Easton, PA. Estas formulaciones incluyen, por ejemplo, polvos, pastas, pomadas, jaleas, ceras, aceites, lípidos, vesículas que contienen lípidos (catiónicos o aniónicos) (tales como LIPOFECTIN<™>), conjugados de ADN, pastas de absorción anhidras, emulsiones de aceite en agua y de agua en aceite, emulsiones de carbowax (polietilenglicoles de diversos pesos moleculares), geles semisólidos y mezclas semisólidas que contienen carbowax. Véase también Powell et al. "Compendium of excipients for parenteral formulations" PDA (1998) J Pharm Sci Technol 52:238-311.

[0133] Las formulaciones farmacéuticas ejemplares que comprenden anticuerpos anti-PCSK9 que se pueden utilizar incluyen cualquiera de las formulaciones expuestas en el documento US 8.795.669 (que describe,entre otras, formulaciones ejemplares que comprenden alirocumab), o en los documentos WO2013/166448 o WO2012/168491.

[0134] Se conocen varios sistemas de administración que pueden utilizarse para administrar la composición farmacéutica de la invención, por ejemplo, encapsulación en liposomas, micropartículas, microcápsulas, células recombinantes capaces de expresar los virus mutantes, endocitosis mediada por receptores (véase, por ejemplo, Wu et al., 1987, J. Biol. Chem.262:4429-4432). Los métodos de administración incluyen, pero no se limitan a, vías intradérmica, intramuscular, intraperitoneal, intravenosa, subcutánea, intranasal, epidural y oral. La composición se puede administrar por cualquier vía conveniente, por ejemplo mediante infusión o inyección en bolo, mediante absorción a través de revestimientos epiteliales o mucocutáneos (por ejemplo, mucosa oral, mucosa rectal e intestinal, etc.) y se puede administrar junto con otros agentes biológicamente activos.

[0136] Una composición farmacéutica se puede administrar por vía subcutánea o intravenosa con una aguja y una jeringa convencionales. Además, con respecto a la administración subcutánea, un dispositivo de administración tipo pluma tiene fácilmente aplicaciones en la administración de una composición farmacéutica de la presente invención. Dicho dispositivo de administración de pluma puede ser reutilizable o desechable. Un dispositivo de administración de pluma reutilizable utiliza generalmente un cartucho reemplazable que contiene una composición farmacéutica. Una vez que se ha administrado toda la composición farmacéutica dentro del cartucho y el cartucho está vacío, el cartucho vacío se puede desechar fácilmente y reemplazar por un cartucho nuevo que contiene la composición farmacéutica. Entonces se puede reutilizar el dispositivo de administración de pluma. En un dispositivo de administración de pluma desechable, no hay ningún cartucho reemplazable. Más bien, el dispositivo de administración de pluma desechable viene precargado con la composición farmacéutica mantenida en un depósito dentro del dispositivo. Una vez que se vacía el depósito de la composición farmacéutica, se desecha todo el dispositivo.

[0138] Numerosos dispositivos de administración mediante autoinyectores y plumas reutilizables tienen aplicaciones en la administración subcutánea de una composición farmacéutica de la presente invención. Los ejemplos incluyen, pero no se limitan a AUTOPEN<™>(Owen Mumford, Inc., Woodstock, Reino Unido), pluma DISETRONIC<™>(Disetronic Medical Systems, Bergdorf, Suiza), pluma HUMALOG MIX 75/25<™>, pluma HUMALOG<™>, pluma HUMALIN 70/30<™>(Eli Lilly and Co., Indianapolis, IN), NOVOPEN<™>I, II y III (Novo Nordisk, Copenhagen, Dinamarca), NOVOPEN JUNIOR<™>(Novo Nordisk, Copenhagen, Dinamarca), pluma BD<™>(Becton Dickinson, Franklin Lakes, NJ), OPTIPEN<™>, OPTIPEN PRO<™>, OPTIPEN STARLET<™>y OPTICLIK<™>(sanofi-aventis, Frankfurt, Alemania), por nombrar solo algunos. Ejemplos de dispositivos de administración en forma de pluma desechables que tienen aplicaciones en la administración subcutánea de una composición farmacéutica de la presente invención incluyen, pero no se limitan a la pluma SOLOSTAR<™>(sanofi-aventis), la pluma FLEXPEN<™>(Novo Nordisk) y la pluma KWIKPEN<™>(Eli Lilly), el autoinyector SURECLICK<™>(Amgen, Thousand Oaks, CA), la pluma PENLET<™>(Haselmeier, Stuttgart, Alemania), la pluma EPIPEN (Dey, L.P.) y la pluma HUMIRA<™>(Abbott Labs, Abbott Park IL), por nombrar solo unos pocos.

[0140] En ciertas situaciones, la composición farmacéutica se puede administrar en un sistema de liberación controlada. En una realización, se puede usar una bomba (véase Langer, supra; Sefton, 1987, CRC Crit. Ref. Biomed. Eng. 14:201). En otra realización, se pueden usar materiales poliméricos; véase, Medical Applications of Controlled Release, Langer and Wise (eds.), 1974, CRC Pres., Boca Raton, Florida. En aún otra realización, se puede colocar un sistema de liberación controlada cerca de la diana de la composición, requiriendo así sólo una fracción de la dosis sistémica (véase,por ejemplo, Goodson, 1984, en Medical Applications of Controlled Release, más arriba, vol.2, págs.115-138). Otros sistemas de liberación controlada se tratan en la revisión de Langer, 1990, Science 249:1527-1533.

[0142] Los preparados inyectables pueden incluir formas farmacéuticas para inyecciones intravenosas, subcutáneas, intracutáneas e intramusculares, infusiones por goteo, etc. Estos preparados inyectables pueden prepararse mediante métodos conocidos. Por ejemplo, los preparados inyectables se pueden preparar, por ejemplo, disolviendo, suspendiendo o emulsionando el anticuerpo o su sal descritos anteriormente en un medio acuoso estéril o un medio aceitoso usado convencionalmente para inyecciones. Como medio acuoso para inyecciones existen, por ejemplo, solución salina fisiológica, una disolución isotónica que contiene glucosa y otros agentes auxiliares, etc., que se puede usar en combinación con un agente solubilizante apropiado, tal como un alcohol (por ejemplo, etanol), un polialcohol (por ejemplo, propilenglicol, polietilenglicol), un tensioactivo no iónico [por ejemplo, polisorbato 80, HCO-50 (aducto de polioxietileno (50 moles) de aceite de ricino hidrogenado)], etc. Como medio aceitoso se emplea, por ejemplo, aceite de sésamo, aceite de soja, etc., que se pueden usar en combinación con un agente solubilizante, tal como benzoato de bencilo, alcohol bencílico, etc. La inyección así preparada se llena preferentemente en una ampolla apropiada.

[0144] Ventajosamente, las composiciones farmacéuticas para uso oral o parenteral descritas anteriormente se preparan en formas farmacéuticas en una dosis unitaria apta para ajustarse a una dosis de los principios activos. Dichas formas farmacéuticas en una dosis unitaria incluyen, por ejemplo, comprimidos, píldoras, cápsulas, inyecciones (ampollas), supositorios, etc.

[0146] Dosis

[0147] La cantidad de inhibidor de PCSK9 (por ejemplo, anticuerpo anti-PCSK9) administrada a un sujeto de acuerdo con los métodos de la presente divulgación es, generalmente, una cantidad terapéuticamente eficaz. Como se usa en este documento, la frase "cantidad terapéuticamente eficaz" significa una dosis de inhibidor de PCSK9 que da como resultado una reducción detectable (al menos aproximadamente 5%, 10%, 15%, 20%, 25%, 30%, 35%, 40%, 45%, 50%, 55%, 60%, 65%, 70%, 75% o más desde el valor inicial) en uno o más parámetros seleccionados del grupo que consiste en LDL-C, ApoB100, colesterol no HDL, colesterol total, VLDL-C, triglicéridos, Lp(a) y colesterol remanente, o una cantidad que reduce o elimina la necesidad de un paciente de aféresis de lipoproteínas o que reduce la tasa normalizada de aféresis de un paciente (como se define en otra parte del presente documento).

[0149] En el caso de un anticuerpo anti-PCSK9, una cantidad terapéuticamente eficaz puede ser de aproximadamente 0,05 mg a aproximadamente 600 mg, por ejemplo, aproximadamente 0,05 mg, aproximadamente 0,1 mg, aproximadamente 1,0 mg, aproximadamente 1,5 mg, aproximadamente 2,0 mg, aproximadamente 10 mg, aproximadamente 20 mg, aproximadamente 30 mg, aproximadamente 40 mg, aproximadamente 50 mg, aproximadamente 60 mg, aproximadamente 70 mg, aproximadamente 80 mg, aproximadamente 90 mg, aproximadamente 100 mg, aproximadamente 110 mg, aproximadamente 120 mg, aproximadamente 130 mg, aproximadamente 140 mg, aproximadamente 160 mg, aproximadamente 170 mg, aproximadamente 180 mg, aproximadamente 190 mg, aproximadamente 200 mg, aproximadamente 210 mg, aproximadamente 220 mg, aproximadamente 230 mg, aproximadamente 240 mg, aproximadamente 250 mg, aproximadamente 260 mg, aproximadamente 270 mg, aproximadamente 280 mg, aproximadamente 290 mg, aproximadamente 300 mg, aproximadamente 310 mg, aproximadamente 320 mg, aproximadamente 330 mg, aproximadamente 340 mg, aproximadamente 350 mg, aproximadamente 360 mg, aproximadamente 370 mg, aproximadamente 380 mg, aproximadamente 390 mg, aproximadamente 400 mg, aproximadamente 410 mg, aproximadamente 420 mg, aproximadamente 430 mg, aproximadamente 440 mg, aproximadamente 450 mg, aproximadamente 460 mg, aproximadamente 470 mg, aproximadamente 480 mg, aproximadamente 490 mg, aproximadamente 500 mg, aproximadamente 510 mg, aproximadamente 520 mg, aproximadamente 530 mg, aproximadamente 540 mg, aproximadamente 550 mg, aproximadamente 560 mg, aproximadamente 570 mg, aproximadamente 580 mg, aproximadamente 590 mg o aproximadamente 600 mg del anticuerpo anti-PCSK9. Según ciertos aspectos ejemplares de la divulgación, una cantidad terapéuticamente eficaz de un anticuerpo anti-PCSK9 es 75 mg, 150 mg o 300 mg (por ejemplo, en el caso de alirocumab), o 140 mg o 420 mg (por ejemplo, en el caso de evolocumab). Para las personas con conocimientos normales en la técnica, resultarán evidentes otras cantidades de dosificación de inhibidores de PCSK9.

[0151] La cantidad de anticuerpo anti-PCSK9 contenida en las dosis individuales puede expresarse en términos de miligramos de anticuerpo por kilogramo de peso corporal del paciente (es decir, mg/kg). Por ejemplo, el anticuerpo anti-PCSK9 se puede administrar a un paciente en una dosis de aproximadamente 0,0001 a aproximadamente 10 mg/kg de peso corporal del paciente.

[0153] Terapias de combinación

[0155] Como se describe en otra parte del presente documento, los métodos pueden comprender la administración de un inhibidor de PCSK9 a un paciente en combinación con ("además de") la terapia de reducción de lípidos prescrita previamente al paciente. Por ejemplo, en el contexto de reducir o eliminar la necesidad de aféresis de lipoproteínas, se puede administrar un inhibidor de PCSK9 a un paciente en combinación con un régimen terapéuti

[0157] De acuerdo con ciertos aspectos, se proporcionan métodos que comprenden administrar un inhibidor de PCSK9 (por ejemplo, un anticuerpo anti-PCSK9 tal como alirocumab, evolocumab, bococizumab, lodelcizumab o ralpancizumab) a un paciente en combinación con un inhibidor de la proteína 3 similar a la angiopoyetina (por ejemplo, un anticuerpo anti-ANGPTL3 tal como REGN1500), un inhibidor de la proteína 4 similar a la angiopoyetina (por ejemplo, un anticuerpo anti-ANGPTL4 tal como el anticuerpo anti-ANGPTL4 al que se hace referencia en la patente de EE. UU. n.º 9.120.851 como "H1H268P" o "H4H284P"), o un inhibidor de la proteína 8 similar a la angiopoyetina (por ejemplo, un anticuerpo anti-ANGPTL8).

[0159] [0082]En el contexto de la presente invención, se pueden administrar componentes terapéuticamente activos adicionales,por ejemplo, cualquiera de los agentes enumerados anteriormente o derivados de los mismos, justo antes, simultáneamente o poco después de la administración de un inhibidor de PCSK9; (para los fines de la presente divulgación, dichos regímenes de administración se consideran la administración de un inhibidor de PCSK9 "en combinación con" un componente terapéuticamente activo adicional). La presente invención incluye composiciones farmacéuticas y métodos de uso de las mismas en los que un inhibidor de PCSK9 se coformula con uno o más del o de los componentes terapéuticamente activos adicionales como se describe en otra parte del presente documento.

[0161] Pautas de administración

[0163] Se pueden administrar múltiples dosis de un inhibidor de PCSK9 (es decir, una composición farmacéutica que comprende un inhibidor de PCSK9) a un sujeto durante un período de tiempo definido (por ejemplo, además de un régimen terapéutico diario con estatinas u otra terapia de base para reducir los lípidos). Los métodos comprenden administrar secuencialmente a un sujeto múltiples dosis de un inhibidor de PCSK9. Como se utiliza en este documento, "administrar secuencialmente" significa que cada dosis de inhibidor de PCSK9 se administra al sujeto en un momento diferente,por ejemplo, en días diferentes separados por un intervalo predeterminado (por ejemplo, horas, días, semanas o meses). La presente invención incluye métodos que comprenden administrar secuencialmente al paciente una dosis inicial única de un inhibidor de PCSK9, seguido de una o más dosis secundarias del inhibidor de PCSK9, y opcionalmente seguido de una o más dosis terciarias del inhibidor de PCSK9.

[0165] Los términos "dosis inicial", "dosis secundarias" y "dosis terciarias" se refieren a la secuencia temporal de administración de las dosis individuales de una composición farmacéutica que comprende un inhibidor de PCSK9. Por lo tanto, la "dosis inicial" es la dosis que se administra al principio de la pauta de tratamiento (también denominada la "dosis basal"); las "dosis secundarias" son las dosis que se administran después de la dosis inicial; y las "dosis terciarias" son las dosis que se administran después de las dosis secundarias. Las dosis inicial, secundaria y terciaria pueden contener la misma cantidad del inhibidor de PCSK9, pero generalmente pueden diferir entre sí en términos de frecuencia de administración. Sin embargo, en ciertas realizaciones, la cantidad de inhibidor de PCSK9 contenida en las dosis inicial, secundaria y/o terciaria varía entre sí (por ejemplo, ajustada hacia arriba o hacia abajo según corresponda) durante el curso del tratamiento. En ciertas realizaciones, se administran dos o más dosis (por ejemplo, 2, 3, 4 o 5) al comienzo del régimen de tratamiento como "dosis de carga", seguido de dosis posteriores que se administran con menor frecuencia (por ejemplo, "dosis de mantenimiento").

[0167] Cada dosis secundaria y/o terciaria puede administrarse de 1 a 26 (por ejemplo, 1, 1½, 2, 2½, 3, 3½, 4, 4½, 5, 5½, 6, 6½, 7, 7½, 8, 8½, 9, 9½, 10, 10½, 11, 11½, 12, 12½, 13, 13½, 14, 14½, 15, 15½, 16, 16½, 17, 17½, 18, 18½, 19, 19½, 20, 20½, 21, 21½, 22, 22½, 23, 23½, 24, 24½, 25, 25½, 26, 26½ o más) semanas después de la dosis inmediatamente anterior. La expresión "dosis inmediatamente precedente", como se usa en el presente documento, significa, en una secuencia de múltiples administraciones, la dosis de molécula de unión al antígeno que se administra a un paciente antes de la administración de la siguiente dosis en la secuencia sin dosis intermedias.

[0169] Los métodos pueden comprender administrar a un paciente cualquier número de dosis secundarias y/o terciarias de un inhibidor de PCSK9. Por ejemplo, sólo se administra una única dosis secundaria al paciente. En otras realizaciones, se administran al paciente dos o más (por ejemplo, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8 o más) dosis secundarias. Asimismo, sólo se administra una única dosis terciaria al paciente. Alternativamente, se administran al paciente dos o más (por ejemplo, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8 o más) dosis terciarias.

[0171] En los casos que implican múltiples dosis secundarias, cada una de las dosis secundarias puede administrarse con la misma frecuencia que las otras dosis secundarias. Por ejemplo, cada dosis secundaria se puede administrar al paciente 1 a 2, 4, 6, 8 o más semanas después de la dosis inmediatamente precedente. De manera similar, en los casos que impliquen múltiples dosis terciarias, cada una de las dosis terciarias podrá administrarse con la misma frecuencia que las otras dosis terciarias. Por ejemplo, cada dosis terciaria se puede administrar al paciente 1 a 2, 4, 6, 8 o más semanas después de la dosis inmediatamente precedente. Alternativamente, la frecuencia con la que se administran las dosis secundarias y/o terciarias a un paciente puede variar durante el transcurso del régimen de tratamiento. Un médico también puede ajustar la frecuencia de administración durante el curso del tratamiento dependiendo de las necesidades de cada paciente después del examen clínico.

[0173] [0088]La presente invención incluye regímenes de administración que comprenden una opción de ajuste ascendente de la dosis (también denominada en el presente documento una "modificación de dosis"). Como se utiliza en este documento, una "opción de aumento de dosis" significa que, después de recibir una cantidad particular de dosis de un inhibidor de PCSK9, si un paciente no ha logrado una reducción específica en uno o más parámetros terapéuticos definidos, la dosis del inhibidor de PCSK9 se aumenta posteriormente. Por ejemplo, en el caso de un régimen terapéutico que comprende la administración de dosis de 75 mg de un anticuerpo anti-PCSK9 a un paciente con una frecuencia de una vez cada dos semanas, si después de 8 semanas (es decir, 5 dosis administradas en la semana 0, semana 2 y semana 4, semana 6 y semana 8) el paciente no ha alcanzado una concentración sérica de LDL-C menor que 70 mg/dl, entonces la dosis de anticuerpo anti-PCSK9 se aumenta a, por ejemplo, 150 mg administrada una vez cada dos semanas a partir de entonces (por ejemplo, comenzando en la semana 10 o semana 12, o más tarde).

[0174] En ciertos aspectos, el anticuerpo anti-PCSK9 se administra a un sujeto en una dosis de aproximadamente 75 mg cada dos semanas, por ejemplo durante al menos tres dosis (o durante el transcurso del régimen de tratamiento que abarca días, semanas, meses o años).

[0175] En ciertas realizaciones, el anticuerpo anti-PCSK9 se administra a un sujeto en una dosis de 150 mg cada dos semanas, por ejemplo durante al menos tres dosis (o durante el transcurso del régimen de tratamiento que abarca días, semanas, meses o años).

[0176] En algunos aspectos, el anticuerpo se administra a un sujeto en una dosis de aproximadamente 75 mg cada dos semanas durante 12 semanas, y la dosis permanece en 75 mg cada dos semanas si, en la semana 8, el valor de LDL-C del sujeto era menor que 100 mg/dl y una reducción del 30% de LDL-C.

[0177] En otros aspectos, el anticuerpo se administra a un sujeto en una dosis de aproximadamente 75 mg cada dos semanas durante 12 semanas, y la dosis se ajusta hasta aproximadamente 150 mg cada dos semanas si, en la semana 8, el valor de LDL-C del sujeto fue mayor o igual a 100 mg/dl.

[0178] En algunos aspectos, el anticuerpo se administra a un sujeto en una dosis de aproximadamente 75 mg cada dos semanas durante 12 semanas, y la dosis permanece en 75 mg cada dos semanas si, en la semana 8, el valor de LDL-C del sujeto era menor que 70 mg/dl y una reducción del 30% de LDL-C.

[0179] En otra realización, el anticuerpo se administra a un sujeto en una dosis de 300 mg cada cuatro semanas.

[0180] En una realización adicional, el anticuerpo se administra a un sujeto en una dosis de 300 mg cada cuatro semanas durante un total de tres dosis, y la dosis se cambia a 150 mg cada dos semanas durante otras 36 semanas si, en la semana 8, el sujeto no alcanzó un objetivo de tratamiento predeterminado o el sujeto no tuvo al menos una reducción del 30% de LDL-C desde el valor inicial.

[0181] En ciertos aspectos, el anticuerpo anti-PCSK9 se administra a un sujeto en una dosis de aproximadamente 150 mg cada cuatro semanas durante al menos tres dosis.

[0182] En algunos aspectos, el anticuerpo se administra a un sujeto en una dosis de aproximadamente 150 mg cada cuatro semanas durante 12 semanas, y la dosis permanece en 150 mg cada cuatro semanas si, en la semana 8, el valor de LDL-C del sujeto era menor que 100 mg/dl y una reducción del 30% de LDL-C.

[0183] En otros aspectos, el anticuerpo se administra a un sujeto en una dosis de aproximadamente 150 mg cada cuatro semanas durante 12 semanas, y la dosis se ajusta hasta aproximadamente 300 mg cada dos semanas si, en la semana 8, el valor de LDL-C del sujeto fue mayor o igual a 100 mg/dl.

[0184] En algunos aspectos, el anticuerpo se administra a un sujeto en una dosis de aproximadamente 150 mg cada cuatro semanas durante 12 semanas, y la dosis permanece en 150 mg cada cuatro semanas durante otras 12 semanas si, en la semana 8, el valor de LDL-C del sujeto era menor que 70 mg/dl y una reducción del 30% de LDL-C.

[0185] En otra realización, el anticuerpo se administra a un sujeto en una dosis de 300 mg cada cuatro semanas.

[0186] En una realización adicional, el anticuerpo se administra a un sujeto en una dosis de 300 mg cada cuatro semanas durante un total de tres dosis, y la dosis se cambia a 150 mg cada dos semanas durante otras 36 semanas si, en la semana 8, el sujeto no alcanzó un objetivo de tratamiento predeterminado o el sujeto no tuvo al menos una reducción del 30% de LDL-C desde el valor inicial.

[0187] EJEMPLOS

[0188] Los siguientes ejemplos se presentan con el fin de proporcionar a aquellos con conocimientos normales en la técnica una descripción y divulgación completa de cómo hacer y utilizar los métodos y composiciones de la invención, y no pretenden limitar el alcance de lo que los inventores consideran como su invención. Se han hecho esfuerzos para garantizar la exactitud con respecto a los números usados (por ejemplo, cantidades, temperatura, etc.), pero se deben tener en cuenta algunos errores experimentales y desviaciones. A menos que se indique lo contrario, las partes son partes en peso, el peso molecular es el peso molecular promedio, la temperatura está en grados centígrados y la presión es atmosférica o cercana a la atmosférica.

[0189] Ejemplo 1. Generación de anticuerpos humanos contra PCSK9 humana

[0190] Se generaron anticuerpos anti-PCSK9 humana como se describe en la patente de EE. UU. n.º 8.062.640. El inhibidor de PCSK9 ejemplar utilizado en el siguiente Ejemplo es el anticuerpo humano anti-PCSK9 denominado "mAb316P", también conocido como "REGN727" o "alirocumab". El mAb316P presenta las siguientes características de secuencia de aminoácidos: una cadena pesada que comprende la SEQ ID NO:5 y una cadena ligera que comprende la SEQ ID NO:9; una región variable de la cadena pesada (HCVR) que comprende la SEQ ID NO:1 y un dominio variable de la cadena ligera (LCVR) que comprende la SEQ ID NO:6; una región determinante de la complementariedad de la cadena pesada 1 (HCDR1) que comprende la SEQ ID NO:2, una HCDR2 que comprende la SEQ ID NO:3, una HCDR3 que comprende la SEQ ID NO:4, una región determinante de la complementariedad de la cadena ligera 1 (LCDR1) que comprende la SEQ ID NO:7, una LCDR2 que comprende la SEQ ID NO:8 y una LCDR3 que comprende la SEQ ID NO:10.

[0191] Ejemplo 2. Estudio aleatorizado, doble ciego, controlado con placebo y de grupos paralelos para evaluar la eficacia y seguridad de alirocumab en pacientes con hipercolesterolemia familiar heterocigótica sometidos a terapia de aféresis lipídica

[0192] INTRODUCCIÓN

[0193] El objetivo del presente estudio fue evaluar el efecto de alirocumab 150 mg administrado una vez cada dos semanas ("Q2W") en comparación con placebo sobre la frecuencia de tratamientos de aféresis de LDL en pacientes con HeFH sometidos a terapia de aféresis de LDL.

[0194] Se inscribieron en este estudio hombres y mujeres adultos diagnosticados con HeFH que estaban recibiendo terapia de aféresis de LDL con una frecuencia de una vez por semana o una vez cada dos semanas. El tratamiento de base de los sujetos con LMT se mantuvo durante todo el estudio. En estos pacientes, la elección de placebo como control es adecuada para los objetivos de este estudio, ya que proporciona la evaluación más sólida de la eficacia y seguridad de alirocumab.

[0195] La reducción promedio del valor de LDL-C oscila entre 30% y 75% dependiendo de la técnica y la duración de la aféresis (Bambauer et al., Scientific World Journal, 2012, 2012:1-19). Con un tratamiento semanal o quincenal, los niveles de LDL-C pueden reducirse entre un 40% y un 50%. Según el presente estudio, no se realizó aféresis cuando el valor de LDL-C en esa visita fue >_30% menor que el valor de LDL-C basal (pre-aféresis). Los niveles de LDL-C aumentan hacia los valores iniciales después de cada procedimiento de aféresis, pero no alcanzan los niveles originales; con aféresis repetidas semanales o quincenales, los niveles iniciales continúan bajando hasta que se alcanza una meseta (Thompsen et al., Atherosclerosis, 2006, 189:31-38). Por tanto, se justifica un criterio para determinar la necesidad de aféresis basado en una reducción del 30% en los niveles de c-LDL, ya que esta reducción, si se observa con la administración de alirocumab, será consistente en el tiempo, lográndose aproximadamente el mismo nivel de reducción de c-LDL que con el procedimiento de aféresis.

[0196] Los regímenes de dosificación de alirocumab Q2W (75 mg y 150 mg SC) y Q4W (150 mg y 300 mg SC) se han evaluado en otros ensayos de fase 3 de alirocumab. Con base en los resultados de 2 estudios de búsqueda de dosis, se seleccionó el régimen de dosificación Q2W para mantener una reducción constante de LDL-C durante todo el intervalo entre dosis en todos los pacientes, y la máxima eficacia a las 12 semanas la proporcionó la dosis de 150 mg Q2W. Los pacientes con hipercolesterolemia familiar heterocigótica generalmente presentan niveles basales elevados de LDL-C. Teniendo en cuenta que estos pacientes han estado expuestos durante toda su vida a niveles elevados de LDL-C, su objetivo de LDL-C es 100 mg/dl o 70 mg/dl, dependiendo de sus antecedentes de CVD u otros factores de riesgo. Para alcanzar y mantener su objetivo de LDL-C, se supuso que dichos pacientes muy probablemente necesitarían la dosis más potente de alirocumab y con una frecuencia necesaria para mantener este efecto al final del intervalo de dosificación. Por lo tanto, para este estudio se seleccionó la dosis de 150 mg Q2W.

[0197] En el período de tratamiento doble ciego de este estudio, se evaluó la capacidad de alirocumab 150 mg Q2W administrado durante 18 semanas a pacientes con HeFH que requieren aféresis cada 1 o 2 semanas para reducir el LDL-C para reducir la frecuencia de aféresis desde la semana 7 a la semana 18 en comparación con la frecuencia durante las 8 semanas previas a la selección. Los pacientes recibieron 150 mg de alirocumab Q2W hasta la semana 76 en el período de tratamiento de etiqueta abierta.

[0198] Los datos farmacocinéticos (PK) preliminares de los estudios de fase 2, DFl11565, DFI11566 y R727-CL-1003, mostraron que la exposición al alirocumab disminuyó durante el período de seguimiento de 8 semanas que siguió al período de tratamiento doble ciego, y las concentraciones séricas totales de alirocumab aún eran detectables, pero en niveles muy bajos. Por lo tanto, para garantizar concentraciones séricas de alirocumab suficientemente bajas y no efectivas, se realizó un seguimiento de los pacientes durante un período de seguimiento de 8 semanas (es decir, 10 semanas después de la última dosis).

[0199] OBJETIVOS DEL ESTUDIO

[0200] El objetivo principal del estudio fue evaluar el efecto de alirocumab 150 mg Q2W en comparación con placebo sobre la frecuencia de tratamientos de aféresis de LDL en pacientes con HeFH sometidos a terapia de aféresis de LDL semanal o quincenal.

[0201] Los objetivos secundarios del estudio fueron: (a) Evaluar el efecto de alirocumab 150 mg Q2W sobre los niveles de LDL-C en pacientes con HeFH sometidos a terapia de aféresis de LDL; (b) Evaluar el efecto de alirocumab 150 mg Q2W sobre los siguientes parámetros lipídicos: ApoB, colesterol no HDL, colesterol total, Lp(a), HDL-C, TG y ApoA-1 en pacientes con HeFH sometidos a terapia de aféresis de LDL durante el estudio; (c) Evaluar la seguridad y tolerabilidad de alirocumab 150 mg Q2W en pacientes con HeFH sometidos a terapia de aféresis de LDL; (d) Evaluar la farmacocinética de alirocumab 150 mg Q2W en pacientes con HeFH sometidos a terapia de aféresis de LDL (QW frente a Q2W); (e) Evaluar el desarrollo de anticuerpos anti-alirocumab; (f) Evaluar los niveles de PCSK9 en respuesta a la terapia con alirocumab, así como antes y después de la aféresis; y (g) Evaluar la calidad de vida ("QOL") en estos pacientes.

[0202] DISEÑO DEL ESTUDIO

[0203] El presente estudio fue un estudio aleatorizado, doble ciego, controlado con placebo y de grupos paralelos en pacientes con HeFH sometidos a terapia de aféresis de LDL cada 1 o 2 semanas.

[0204] El estudio consistió en 4 períodos: selección, período de tratamiento doble ciego, período de tratamiento de etiqueta abierta, y seguimiento. El período de tratamiento doble ciego comprendió 2 intervalos: del día 1 a la semana 6 (con administración planificada del medicamento del estudio los días 1, 15 y 29), cuando la frecuencia de aféresis se fijará según el programa establecido de cada paciente, y de la semana 7 a la semana 18 (con administración planificada del medicamento del estudio los días 43, 57, 71, 85, 99 y 113), cuando la frecuencia de aféresis se ajustará en función de la respuesta del paciente al tratamiento.

[0205] Selección:Los pacientes que habían seguido un programa de aféresis estable (cada 7 o 14 días), con configuraciones de aféresis estables durante al menos 4 semanas antes de la visita de selección (semana -2) y LMT médico de fondo estable durante al menos 8 semanas antes de la visita de selección (semana -2), ingresaron a un período de selección de 2 semanas.

[0206] Tratamiento doble ciego:Los pacientes que cumplieron todos los criterios de inclusión y ninguno de los de exclusión fueron asignados aleatoriamente en una proporción de 2:1 para recibir 18 semanas de tratamiento: Alirocumab 150 mg SC Q2W, o Placebo por alirocumab SC Q2W.

[0207] Las inyecciones de tratamiento durante el período de tratamiento doble ciego se administraron Q2W a partir del día de la aleatorización (semana 0 [día 1]/visita 2). Los pacientes se monitorizaron en el sitio clínico durante 30 minutos después de la primera dosis. Si la aféresis de LDL coincidió con la administración del fármaco en estudio, éste se administró inmediatamente después de completar el procedimiento de aféresis de LDL.

[0208] Desde el día 1 hasta la semana 6, la frecuencia de aféresis se fijó según el cronograma establecido de cada paciente (QW o Q2W). A partir de la semana 7, se administró la aféresis de LDL según el valor de LDL-C en esa visita (determinado mediante pruebas en el punto de atención). La aféresis de LDL NO se administró cuando el valor de LDL-C en esa visita fue al menos un 30% menor que el valor de LDL-C pre-aféresis al inicio (día 1). El criterio para determinar la necesidad de aféresis, basado en una reducción del 30% en los niveles de LDL-C, está justificado ya que esta reducción, si se observa con la administración de alirocumab, será consistente en el tiempo, lográndose aproximadamente el mismo nivel de reducción de LDL-C que con el procedimiento de aféresis. Los investigadores siguieron desconociendo el valor de laboratorio en el punto de atención para LDL-C, y sólo recibieron una alerta sobre si se debía administrar o no aféresis de LDL.

[0209] Tratamiento abierto:En el período de tratamiento de etiqueta abierta, los pacientes recibieron alirocumab 150 mg SC Q2W. El tratamiento continuó ininterrumpidamente desde la última dosis del fármaco del estudio durante el período de tratamiento doble ciego (última dosis en la semana 16) hasta la semana 18 (la primera dosis en el período de tratamiento de etiqueta abierta), hasta la semana 76.

[0210] La primera inyección durante el período de tratamiento de etiqueta abierta se administró en la visita de la semana 18 (la primera visita del período de tratamiento de etiqueta abierta) como parte del entrenamiento de inyección del paciente. Las inyecciones posteriores fueron administradas por el paciente o un cuidador designado (cónyuge, familiar, etc.) en el lugar preferido del paciente (por ejemplo, casa o lugar de trabajo). A los pacientes también se les permitió elegir regresar al sitio cada 2 semanas para que el personal del estudio les administrara la inyección.

[0211] [0120]No fue necesario el tratamiento de aféresis en el período de tratamiento de etiqueta abierta del estudio. A discreción del investigador, se permitió que los pacientes continuaran sometiéndose a procedimientos de aféresis, según fuera necesario. En el caso de que un procedimiento de aféresis planificado coincidiera con una visita a la clínica o un día de dosificación de alirocumab, las evaluaciones del estudio se realizaron antes de la aféresis y se administró alirocumab después de la aféresis.

[0212] Seguimiento:Los pacientes fueron evaluados al final de la visita del estudio en la semana 86.

[0213] A lo largo del estudio:Todas las muestras para el laboratorio clínico (paneles de lípidos y lípidos especiales) y las evaluaciones farmacocinéticas se obtuvieron inmediatamente antes y después del procedimiento de aféresis de LDL (si se administra aféresis de LDL en esa visita) y antes de la administración del fármaco del estudio.

[0214] En el caso de aquellos pacientes que no se sometieron a aféresis de LDL en una visita, todas las muestras para la evaluación de laboratorio clínico se obtuvieron antes de la administración del fármaco del estudio.

[0215] La seguridad general se evaluó mediante la monitorización/evaluación de TEAE, exámenes físicos, constantes vitales (frecuencia del pulso y tensión arterial), electrocardiogramas (ECG), y pruebas de laboratorio de seguridad clínica en puntos temporales preestablecidos. Se evaluó la posible aparición de anticuerpos antialirocumab. Los niveles de PCSK9 se evaluaron antes y después de la aféresis.

[0216] Se permitió el uso de todos los medicamentos y suplementos nutricionales (incluido el consumo de productos de levadura roja) que se sabe que alteran los lípidos séricos, incluidos (pero no limitados a) estatinas, ezetimiba, fibratos, niacina y resinas de ácidos biliares, siempre que la terapia hubiera sido estable durante al menos 8 semanas antes de la visita de selección (semana -2). Se instruyó a los pacientes para que continuaran tomando su LMT médico de base durante todo el estudio, desde la selección hasta la visita de finalización del tratamiento.

[0217] Las dietas de los pacientes se mantuvieron estables durante toda la duración del estudio, desde el momento de selección hasta la visita de finalización del tratamiento.

[0218] Los regímenes de ejercicio de los pacientes se mantuvieron estables durante toda la duración del estudio, desde el momento de selección hasta la visita de finalización del tratamiento.

[0219] SELECCIÓN DE PACIENTES

[0220] El protocolo del estudio requirió la inscripción de aproximadamente 63 pacientes en hasta 15 sitios en los EE. UU. y Alemania. Los pacientes fueron aleatorizados de la siguiente manera: aproximadamente un tercio de los pacientes inscritos (~21) recibieron placebo; y aproximadamente dos tercios de los pacientes inscritos (~42) recibieron alirocumab.

[0221] La población del estudio consistió en hombres y mujeres adultos diagnosticados con HeFH que se sometieron a una terapia de aféresis de LDL cada 1 o 2 semanas.

[0222] La aleatorización se estratificó según: Frecuencia de aféresis: QW frente a Q2W; y niveles basales de Lp(a): normales (<30 mg/dl) frente a elevados (≥30 mg/dl). Dado que algunos pacientes con niveles elevados de LDL-C también tienen niveles elevados de Lp(a), la estratificación aseguró una representación adecuada en los grupos placebo/tratamiento.

[0223] Criterios de inclusión: Los pacientes inscritos en este estudio debían cumplir las condiciones 1 a 6 (a continuación) para ser elegibles para su inclusión en el estudio:

[0224] (1) Hombres y mujeres ≥18 años de edad en el momento de la visita de selección

[0225] (2) Diagnóstico de HeFH; [Nota: El diagnóstico de HeFH se realizó mediante genotipificación o mediante criterios clínicos. En aquellos pacientes que no habían sido genotipados, el diagnóstico clínico podría realizarse basándose en los criterios de Simon Broome con un criterio de FH definitiva, o en los criterios de la OMS/Red Holandesa de Lípidos con una puntuación >8 puntos];

[0226] (3) Estar actualmente en terapia con aféresis de LDL QW durante al menos 4 semanas, o Q2W durante al menos 8 semanas antes de la visita de selección (semana -2) y haber iniciado el tratamiento de aféresis durante al menos 5 meses antes de eso; [Nota: Las técnicas de aféresis aceptables son: Filtración de doble membrana, Inmunoadsorción, Precipitación de LDL inducida por heparina, Adsorción directa de lípidos, Adsorción en sulfato de dextrano (plasma), Adsorción en sulfato de dextrano (sangre completa)]; (4) Estar dispuesto y ser capaz de cumplir con las visitas clínicas y los procedimientos relacionados con el estudio;

[0227] (5) Proporcionar la autorización escrita; y

[0228] (6) Capaz de comprender y completar cuestionarios relacionados con el estudio.

[0229] Criterios de exclusión: Se excluyeron del estudio los pacientes prospectivos que cumplieron alguno de los siguientes criterios:

[0230] (1) FH homocigoto;

[0231] (2) LMT médico previo (si corresponde) que no hayan sido estables durante al menos 8 semanas antes de la visita de selección (semana -2);

[0232] (3) Programa de aféresis de LDL/configuraciones de aféresis que no habían sido estables durante al menos 4 semanas antes de la visita de selección (semana -2) para pacientes sometidos a aféresis semanalmente, y al menos 8 semanas antes de la visita de selección (semana -2) para pacientes sometidos a aféresis quincenalmente;

[0233] (4) Un programa de aféresis de LDL distinto de QW a Q2W;

[0234] (5) Inicio de un nuevo programa de ejercicios o ejercicio que no se ha mantenido estable dentro de las 8 semanas previas a la visita de selección (semana -2);

[0235] (6) Inicio de una nueva dieta o una dieta que no ha sido estable dentro de las 8 semanas previas a la visita de selección (semana -2);

[0236] (7) Uso de nutracéuticos o terapias de venta libre que se sabe que afectan los lípidos, en una dosis/cantidad que no ha sido estable durante al menos 8 semanas antes de la visita de selección (semana -2), o entre la visita de selección y la visita de aleatorización;

[0237] (8) Presencia de cualquier enfermedad endocrina no controlada clínicamente significativa que se sabe que influye en los lípidos o lipoproteínas séricas;

[0238] (9) Signos y síntomas de hipotiroidismo (se permite la terapia de reemplazo de tiroides);

[0239] (10) Historial de cirugía bariátrica dentro de los 12 meses previos a la visita de selección (semana -2);

[0240] (11) Peso inestable (variación >5 kg) dentro de los 2 meses previos a la visita de selección (semana -2); (12) Diabetes mellitus de reciente diagnóstico (dentro de los 3 meses anteriores a la visita de aleatorización [día 1]) o diabetes mal controlada (hemoglobina A1c [HbA1c] >9%);

[0241] (13) Uso de corticosteroides sistémicos, a menos que se utilicen como terapia de reemplazo para enfermedad pituitaria/suprarrenal con un régimen estable durante al menos 6 semanas antes de la aleatorización; las terapias con esteroides tópicos, intraarticulares, nasales, inhalados y oftálmicos no se consideran "sistémicas" y están permitidas;

[0242] (14) Uso de terapia con estrógeno o testosterona, a menos que el régimen haya sido estable en las últimas 6 semanas antes de la visita de selección (semana -2) y no haya planes de cambiar el régimen durante el estudio;

[0243] (15) Tensión arterial sistólica >160 mm Hg o tensión arterial diastólica >100 mm Hg en la visita de selección (semana -2) o en el momento de la aleatorización (día 1) [Nota: La evaluación de la tensión arterial para la elegibilidad del estudio se puede obtener en una visita que ocurra entre estas 2 visitas en caso de que el paciente no haya tomado, o haya planeado no tomar, los medicamentos hipertensivos recetados en la visita de selección o aleatorización debido al programa de aféresis];

[0244] (16) Antecedentes de un infarto de miocardio (MI), angina inestable que condujo a hospitalización, cirugía de injerto de derivación de la arteria coronaria (CABG), intervención coronaria percutánea (PCI), arritmia cardíaca no controlada, cirugía o colocación de stents carotídeos, accidente cerebrovascular, ataque isquémico transitorio o revascularización carotídea dentro de los 3 meses anteriores a la visita de selección (semana -2), o procedimiento endovascular o intervención quirúrgica para enfermedad vascular periférica dentro de 1 mes anterior a la visita de selección (semana -2);

[0245] (17) Antecedentes de insuficiencia cardíaca clase III o IV de la New York Heart Association dentro de los 12 meses previos a la visita de selección;

[0246] (18) Historia conocida de accidente cerebrovascular hemorrágico;

[0247] (19) Historial de cáncer en los últimos 5 años, excepto cáncer de piel de células basales tratado adecuadamente, cáncer de piel de células escamosas, o cáncer de cuello uterino in situ;

[0248] (20) Historia conocida de una prueba positiva para el virus de la inmunodeficiencia humana;

[0249] (21) Uso de cualquier fármaco en investigación activo dentro de 1 mes o 5 vidas medias posteriores a la selección, lo que sea más largo;

[0250] (22) Pacientes que hayan sido tratados con al menos 1 dosis de alirocumab o cualquier otro anticuerpo monoclonal anti-PCSK9 en cualquier otro estudio clínico;

[0251] (23) Condiciones/situaciones tales como: (a) Cualquier anomalía clínicamente significativa identificada en el momento de la selección que, a juicio del investigador o de cualquier subinvestigador, impediría la finalización segura del estudio o limitaría la evaluación de los criterios de valoración; por ejemplo, enfermedades sistémicas importantes, pacientes con corta expectativa de vida; o (b) Considerada por el investigador o cualquier subinvestigador como inapropiada para este estudio por cualquier motivo, por ejemplo: (i) Considerado incapaz de cumplir con requisitos específicos del protocolo, tales como visitas programadas; (ii) Considerado incapaz de tolerar inyecciones, según el paciente o el investigador; (iii) Investigador o cualquier subinvestigador, farmacéutico, coordinador del estudio, otro personal del estudio o familiar del mismo directamente involucrado en la realización del protocolo, etc.; (iv) Presencia de cualquier otra condición (por ejemplo, geográfica o social), ya sea real o prevista, que el investigador considere que restringiría o limitaría la participación del paciente durante la duración del estudio;

[0252] (24) Hallazgos de laboratorio durante el período de selección (sin incluir los laboratorios de aleatorización): (a) Prueba positiva para antígeno de superficie de hepatitis B y/o anticuerpo de hepatitis C; (b) Prueba de embarazo positiva en suero beta-hCG o en orina en mujeres en edad fértil; (c) TG >500 mg/dl (>5,65 mmol/l) (se permite 1 repetición de laboratorio); (d) eGFR <15 ml/min/1,73 m2 según la ecuación de 4 variables del estudio de modificación de la dieta en la enfermedad renal (calculada por el laboratorio central); (e) Alanina aminotransferasa (ALT) o aspartato aminotransferasa (AST) >3 x límite superior de lo normal (LSN) (se permite 1 repetición de laboratorio); (f) CPK >3 x LSN (se permite 1 repetición de laboratorio);

[0253] (25) Hipersensibilidad conocida a los anticuerpos monoclonales terapéuticos o a cualquier componente del medicamento;

[0254] (26) Mujeres embarazadas o en período de lactancia;

[0255] (27) Mujeres en edad fértil que no estén protegidas por métodos anticonceptivos altamente efectivos (según se define en el formulario de autorización escrita [ICF] y/o en una adenda del protocolo local) y/o que no estén dispuestas o no puedan hacerse una prueba de embarazo. Las mujeres posmenopáusicas deben estar amenorreicas durante al menos 12 meses.

[0256] TRATAMIENTOS DEL ESTUDIO

[0257] El tratamiento del estudio consistió en una única inyección subcutánea de 1 ml de una dosis de 150 mg de alirocumab o placebo, administrada en un autoinyector o una jeringa precargada, en el abdomen, el muslo o la zona externa de la parte superior del brazo Q2W.

[0258] Durante el período de tratamiento doble ciego (del día 1 a la semana 18), los pacientes elegibles fueron asignados aleatoriamente para recibir: Alirocumab 150 mg SC Q2W, o Placebo por alirocumab SC Q2W.

[0259] Durante el período de tratamiento de etiqueta abierta, los pacientes recibieron alirocumab 150 mg SC de etiqueta abierta Q2W, a partir de la semana 18, y la última dosis se administró en la semana 76.

[0260] El fármaco alirocumab estéril se suministró a una concentración de 150 mg/ml en histidina, pH 6,0, polisorbato 20 y sacarosa en un autoinyector o una jeringa precargada.

[0261] El placebo correspondiente a alirocumab se suministró en la misma formulación que el alirocumab, sin la adición de proteínas, en un autoinyector o una jeringa precargada.

[0262] Todos los pacientes y/o cuidadores que eligieron inyectarse el fármaco del estudio fuera de la clínica en los días de dosificación recibieron capacitación por parte del personal del estudio antes de administrar las inyecciones. A los pacientes y cuidadores se les instruyó sobre la administración del medicamento del estudio en la visita de la semana 18, y ellos mismos se administraron la primera dosis del período de tratamiento de etiqueta abierta en la visita de la semana 18. Las inyecciones subsiguientes fueron administradas Q2W por el paciente (autoinyección) o por un cuidador designado (cónyuge, familiar, etc.) en el lugar preferido del paciente (por ejemplo, casa o lugar de trabajo).

[0263] A los pacientes también se les dio la opción de regresar al sitio cada 2 semanas para que el personal del estudio les administrara la inyección.

[0264] MÉTODO DE ASIGNACIÓN DEL TRATAMIENTO

[0265] Los pacientes fueron asignados aleatoriamente para recibir placebo o alirocumab 150 mg Q2W en una proporción de 1:2, implementando un diseño de bloques permutados para asegurar una distribución uniforme de las asignaciones del tratamiento. La aleatorización se estratificó según la frecuencia del procedimiento de aféresis (cada 7 o 14 días) y los niveles de Lp(a) (normales o elevados). La inscripción se limitó de modo que no más de dos tercios de los pacientes se sometieran a aféresis.

[0266] Todos los pacientes, independientemente de la asignación del tratamiento en el período de tratamiento doble ciego, recibieron alirocumab 150 mg Q2W durante el período de tratamiento de etiqueta abierta.

[0267] MEDICAMENTOS CONCOMITANTES

[0268] Cualquier tratamiento administrado desde el momento de la autorización escrita hasta el final del período de seguimiento/visita final del estudio se considera medicación concomitante. Esto incluye medicamentos que se iniciaron antes del estudio y que se continuaron tomando durante el mismo. Los medicamentos concomitantes se mantuvieron al mínimo durante el estudio. Si se consideró necesario para el bienestar del paciente y era poco probable que interfiriera con el medicamento del estudio, se permitió administrar medicamentos concomitantes (excepto aquellos que están prohibidos durante el estudio) a discreción del investigador, con una dosis estable (cuando fuera posible).

[0269] Medicamentos prohibidos: Se prohibió cualquier LMT médico previo que no hubiera sido estable durante al menos 8 semanas antes de la visita de selección (semana 2).

[0270] Medicamentos permitidos: Se permitió el uso de todos los medicamentos y suplementos nutricionales (incluido el consumo de productos de levadura roja) que se sabe que alteran los lípidos séricos, incluidos, pero no se limitan a, estatinas, ezetimiba, fibratos, niacina y resinas de ácidos biliares, siempre que la terapia hubiera sido estable durante al menos 8 semanas antes de la visita de selección (semana 2). Se instruyó a los pacientes para que continuaran tomando su LMT médico de base durante todo el estudio, desde la selección hasta la visita de finalización del tratamiento.

[0271] Las dietas de los pacientes se mantuvieron estables durante toda la duración del estudio, desde el momento de selección hasta la visita de finalización del tratamiento.

[0272] Los programas de ejercicio de los pacientes se mantuvieron estables durante toda la duración del estudio, desde el momento de selección hasta la visita de finalización del tratamiento.

[0273] CRITERIOS DE VALORACIÓN DEL ESTUDIO

[0274] Las características iniciales incluirán demografía estándar (por ejemplo, edad, raza, peso, altura, etc.), características de la enfermedad, incluido el historial médico, y el historial de medicación de cada paciente.

[0275] Criterio de valoración principal de eficacia: El criterio principal de valoración de eficacia es la tasa de tratamientos de aféresis durante el período de 12 semanas comprendido entre la semana 7 y la semana 18, normalizada por el número de tratamientos de aféresis planificados según el programa establecido de cada paciente en la selección, de la semana -10 a la semana -2.

[0276] La tasa normalizada de aféresis se define para cada paciente como: Número de tratamientos de aféresis reales recibidos desde la semana 7 hasta la semana 18 dividido entre el número de tratamientos de aféresis planificados por estrato de aleatorización al inicio (6 para Q2W o 12 para QW).

[0277] En caso de abandono del paciente antes de la semana 18, el número real de procedimientos de aféresis (de la semana 7 a la semana 18) se añadirá al número imputado de los tratamientos de aféresis planificados restantes según los estratos de aleatorización para el numerador.

[0278] El impacto de la normalización en los tratamientos de aféresis planificados, de acuerdo con el cronograma establecido para cada paciente al inicio, permite homogeneizar a la misma escala de frecuencia para pacientes que ingresan al estudio con diferentes cronogramas de aféresis (es decir, aféresis QW o Q2W).

[0279] [0152]Criterios de valoración secundarios de eficacia: Para los siguientes puntos finales de lípidos, tales como los cambios porcentuales desde el valor inicial hasta una visita posterior al valor inicial específica durante el período de tratamiento doble ciego, se definen 2 puntos de tiempo: antes y después del procedimiento de aféresis. Para los criterios de valoración de eficacia clave, se analizarán los parámetros lipídicos utilizando las evaluaciones recopiladas antes de cada procedimiento de aféresis. En el caso en que la aféresis no se realiza en una visita especificada en el protocolo, se utiliza la única evaluación de laboratorio planificada para la recolección para ambos puntos de tiempo (es decir, incluidos los criterios de valoración de eficacia clave). El valor basal se define como el último valor disponible para cada uno de los parámetros antes de la primera dosis doble ciego del fármaco en estudio.

[0280] Los criterios de valoración secundarios del presente estudio fueron los siguientes:

[0281] (1) Porcentaje de cambio desde el valor inicial en LDL-C (pre-aféresis) hasta la semana 6, independientemente de la adherencia al tratamiento;

[0282] (2) La tasa estandarizada de tratamientos de aféresis durante el período de 4 semanas desde la semana 15 hasta la semana 18, definida de manera similar a la del criterio de valoración principal de eficacia; (3) Porcentaje de cambio desde el valor inicial en ApoB (pre-aféresis) hasta la semana 6, independientemente de la adherencia al tratamiento;

[0283] (4) Porcentaje de cambio desde el valor inicial en el colesterol no HDL (pre-aféresis) hasta la semana 6, independientemente de la adherencia al tratamiento;

[0284] (5) Porcentaje de cambio desde el valor inicial en el colesterol total (pre-aféresis) hasta la semana 6, independientemente de la adherencia al tratamiento;

[0285] (6) Porcentaje de cambio desde el valor inicial en ApoA-1 (pre-aféresis) hasta la semana 6, independientemente de la adherencia al tratamiento;

[0286] (7) Proporción de pacientes con una reducción ≥30% en el LDL-C (pre-aféresis) en la semana 6, independientemente de la adherencia al tratamiento;

[0287] (8) Proporción de pacientes con una reducción ≥50% en el LDL-C (pre-aféresis) en la semana 6, independientemente de la adherencia al tratamiento;

[0288] (9) Porcentaje de cambio desde el valor inicial en LDL-C (pre-aféresis) hasta la semana 18, independientemente de la adherencia al tratamiento;

[0289] (10) Porcentaje de cambio desde el valor inicial en ApoB (pre-aféresis) hasta la semana 18, independientemente de la adherencia al tratamiento;

[0290] (11) Porcentaje de cambio desde el valor inicial en el colesterol no HDL (pre-aféresis) hasta la semana 18, independientemente de la adherencia al tratamiento;

[0291] (12) Porcentaje de cambio desde el valor inicial en el colesterol total (pre-aféresis) hasta la semana 18, independientemente de la adherencia al tratamiento;

[0292] (13) Cambio porcentual desde el valor inicial en ApoA-1 (pre-aféresis) hasta la semana 18, independientemente de la adherencia al tratamiento;

[0293] (14) Proporción de pacientes con una reducción ≥30% en el LDL-C (pre-aféresis) en la semana 18, independientemente de la adherencia al tratamiento;

[0294] (15) Proporción de pacientes con una reducción ≥50% en el LDL-C (pre-aféresis) en la semana 18, independientemente de la adherencia al tratamiento;

[0295] (16) Cambio en la puntuación del índice W-BQ22 desde el inicio hasta la semana 18, independientemente de la adherencia al tratamiento;

[0296] (17) Cambio porcentual desde el valor inicial en Lp(a) (pre-aféresis) hasta la semana 6, independientemente de la adherencia al tratamiento;

[0297] (18) Porcentaje de cambio desde el valor inicial en HDL-C (pre-aféresis) hasta la semana 6, independientemente de la adherencia al tratamiento;

[0298] (19) Porcentaje de cambio desde el valor inicial en los niveles de TG (pre-aféresis) hasta la semana 6, independientemente de la adherencia al tratamiento;

[0299] (20) Cambio porcentual desde el valor inicial en Lp(a) (pre-aféresis) hasta la semana 18, independientemente de la adherencia al tratamiento;

[0300] (21) Porcentaje de cambio desde el valor inicial en HDL-C (pre-aféresis) hasta la semana 18, independientemente de la adherencia al tratamiento;

[0301] (22) Porcentaje de cambio desde el valor inicial en los niveles de TG (pre-aféresis) hasta la semana 18, independientemente de la adherencia al tratamiento;

[0302] (23) El cambio en la relación ApoB/ApoA-1 (ppre-aféresis) desde el inicio hasta la semana 6, independientemente de la adherencia al tratamiento;

[0303] (24) El cambio en la relación ApoB/ApoA-1 (ppre-aféresis) desde el inicio hasta la semana 18, independientemente de la adherencia al tratamiento;

[0304] (25) Las tasas estandarizadas de tratamientos de aféresis durante el período de 4 semanas desde la semana 7 hasta la semana 10, definidas en consecuencia para el criterio de valoración principal de eficacia; (26) Las tasas estandarizadas de tratamientos de aféresis durante el período de 4 semanas desde la semana 11 hasta la semana 14, definidas en consecuencia para el criterio de valoración principal de eficacia; (27) Evaluación integrada de la frecuencia de aféresis y los valores de LDL-C durante un período de 12 semanas desde el comienzo de la semana 7 hasta el final de la semana 18 (pacientes clasificados según sus valores de LDL-C y tasa de aféresis; se determina el rango medio para todos los pacientes, y la diferencia del nivel de LDL-C o la tasa de aféresis de cada paciente tratado con respecto al rango medio para esa variable se expresa como un porcentaje; la diferencia porcentual de las 2 variables por paciente se suma para proporcionar una diferencia porcentual sumada. Cuando se combinan y analizan por grupo de tratamiento, el número resultante indicará un nivel bajo de LDL-C y/o una tasa reducida de aféresis; (28) Proporción de pacientes que alcanzaron niveles de LDL-C de <200 mg/dl, <130 mg/dl, <100 mg/dl y <70 mg/dl antes de la aféresis en la semana 6, independientemente de la adherencia al tratamiento;

[0305] (29) Proporción de pacientes que alcanzaron niveles de LDL-C de <200 mg/dl, <130 mg/dl, <100 mg/dl y <70 mg/dl antes de la aféresis en la semana 18, independientemente de la adherencia al tratamiento;

[0306] (30) Valores brutos, así como el cambio porcentual y absoluto en LDL-C y otros lípidos, desde el inicio hasta ambos puntos temporales de cada visita, independientemente de la adherencia al tratamiento, en el período de tratamiento doble ciego;

[0307] (31) Valores brutos, así como el cambio porcentual y absoluto en LDL-C y otros lípidos, desde el inicio hasta cada visita, independientemente de la adherencia al tratamiento, en el período de tratamiento de etiqueta abierta;

[0308] (32) Parámetros de seguridad (AE [incluidos eventos cardiovasculares adjudicados], datos de laboratorio, constantes vitales y ECG) evaluados durante todo el estudio.

[0309] Otros criterios de valoración: (1) Anticuerpos anti-alirocumab evaluados durante todo el estudio; (2) El cambio porcentual en la proteína C reactiva de alta sensibilidad (hs-CRP) y HbA1c desde el inicio hasta las semanas 18 y 6; (3) Concentraciones de alirocumab total en suero antes y después de la aféresis; (4) Nivel de PCSK9 libre y total antes y después de la aféresis.

[0310] PROCEDIMIENTOS DEL ESTUDIO

[0311] Todas las muestras de laboratorio se recogieron antes de administrar la dosis del fármaco en estudio. Se recolectaron muestras de sangre de los pacientes en ayunas, si era posible (por ejemplo, durante la noche [al menos 10 horas de ayuno], sólo agua) para todas las visitas clínicas para los paneles lipídicos. Aunque se prefería, el ayuno no era un requisito previo para las muestras para los paneles lipídicos. No se permitió el consumo de alcohol ni fumar dentro de las 48 horas anteriores a la toma de muestra de sangre, ni la realización de ejercicio físico intenso dentro de las 24 horas anteriores a la toma de muestra de sangre.

[0312] El colesterol total, el HDL-C, TG, ApoB, ApoA-1 y Lp(a) se midieron directamente en un laboratorio central. El LDL-C se calculó utilizando la fórmula de Friedewald. Si los valores de TG superaban los 400 mg/dl (4,52 mmol/l), el laboratorio central medía reflexivamente (a través del método de cuantificación beta) el LDL-C en lugar de calcularlo. El colesterol no HDL se calculó restando el colesterol HDL del colesterol total. Se calculó la relación ApoB/ApoA-1.

[0313] Panel lipídico (en ayunas): Se recolectaron muestras de sangre para el panel lipídico (colesterol total, TG, HDL-C, y LDL-C calculado) después de al menos un ayuno de 10 horas en puntos de tiempo preestablecidos.

[0314] Panel lipídico especializado (en ayunas): Las muestras de sangre para el panel lipídico especializado (ApoB, ApoA-1 y Lp[a]) se recolectaron después de al menos un ayuno de 10 horas en puntos de tiempo preestablecidos.

[0315] Cuestionario de bienestar: Se utilizó el W-BQ22 para evaluar el impacto de la hipercolesterolemia y el tratamiento en el bienestar en puntos temporales específicos.

[0316] Tensión arterial y frecuencia cardíaca: Se evaluaron la tensión arterial y la frecuencia cardíaca en puntos de tiempo preestablecidos. La tensión arterial se midió preferiblemente en posición sentada, en condiciones estandarizadas, aproximadamente a la misma hora del día, en el mismo brazo, con el mismo aparato (después de que el paciente haya descansado cómodamente en posición sentada durante al menos 5 minutos). En la primera visita de selección, la tensión arterial se midió en ambos brazos. En esta visita se determinó el brazo con la presión diastólica más alta, y la tensión arterial se midió en este brazo durante todo el estudio. Este valor más alto se registró en el formulario de informe de caso electrónico (eCRF). La frecuencia cardíaca se midió en el momento de la medición de la tensión arterial.

[0317] Examen físico: Se realizó un examen físico completo y minucioso en momentos preestablecidos.

[0318] Peso corporal y altura: El peso corporal se obtuvo con el paciente vistiendo ropa interior o ropa muy ligera y sin zapatos y con la vejiga vacía. Se utilizó preferentemente la misma báscula durante todo el estudio. Se recomendó el uso de básculas calibradas, de ser posible.

[0319] Electrocardiograma: Se realizaron electrocardiogramas antes de extraer sangre durante las visitas que requirieron extracciones de sangre. Se realizó un ECG estándar de 12 derivaciones en puntos de tiempo preestablecidos. Los ECG de 12 derivaciones se realizaron después de al menos 10 minutos de reposo y en la posición supina. Los electrodos se colocaron en el mismo lugar en la medida de lo posible para cada registro de ECG durante todo el estudio. El ECG fue interpretado localmente por el investigador. Cualquier cambio nuevo y/o clínicamente significativo en los parámetros del ECG se revisó inmediatamente para confirmarlo antes de tomar cualquier decisión para el paciente en cuestión. Cualquier anomalía clínicamente significativa se documentó como AE/SAE, según correspondiera. Cada trazo fue analizado en comparación con el trazo registrado en la prueba de selección. Todos los trazos de ECG se conservaron como datos de origen. Se registrará la frecuencia cardíaca a partir de la frecuencia ventricular, y se registrarán los intervalos PR, QRS, RR y QT.

[0320] Pruebas de laboratorio: Todas las muestras de laboratorio (incluidas las muestras de PK y ADA) se recolectaron después de realizar las evaluaciones y antes de administrar una dosis del fármaco de estudio en las visitas que corresponden a un día de dosificación.

[0321] Adjudicación de eventos cardiovasculares: Los eventos cardiovasculares adjudicados incluyeron todos los AE cardiovasculares adjudicados positivamente. Las categorías de adjudicación fueron las siguientes: (1) Muerte por enfermedad coronaria; (2) Infarto de miocardio no mortal; (3) Accidente cerebrovascular isquémico mortal y no mortal; (4) Angina inestable que requiere hospitalización; (5) Insuficiencia cardíaca congestiva que requiere hospitalización; (6) Procedimiento de revascularización coronaria inducido por isquemia (PCI, CABG).

[0322] ANÁLISIS ESTADÍSTICOS

[0323] Se estimó que un tamaño de muestra de 63 pacientes (alirocumab 42: placebo 21) tendría al menos un poder del 85% para detectar una diferencia del 33% en las tasas medias de aféresis utilizando un nivel de significancia bilateral y asumiendo una desviación estándar del 40%.

[0324] La población primaria de análisis de eficacia fue la población primaria por intención de tratar (ITT), definida como todos los pacientes aleatorizados. La población de análisis de eficacia secundaria se basó en pacientes aleatorizados que tenían al menos un valor de LDL-C calculado pre-aféresis antes de la primera dosis del fármaco del estudio (o aleatorización, si el paciente no recibió ningún fármaco del estudio) y al menos un valor de LDL-C calculado en una de las ventanas de análisis pre-aféresis hasta la semana 6. El análisis estadístico se realizó cuando el último paciente completó todas las evaluaciones de eficacia en la semana 18. Los datos de LDL-C se analizaron post hoc utilizando la fórmula de Kroon para estimar las medias del intervalo de LDL-C en las semanas 6 a 18 (después de la posible retirada de la terapia de aféresis).

[0325] [0168]La tasa estandarizada de tratamientos de aféresis se analizó a través de la tasa de tratamientos recibidos durante el período de 12 semanas (semana 7 a semana 18), dividida entre el número de tratamientos planificados (6 para Q2W y 12 para semanales), utilizando el modelo de análisis de covarianza clasificado (ANCOVA). La tasa de aféresis estandarizada podría variar de 0 a 1, en la que 0 indica que el paciente omitió todos los tratamientos de aféresis planificados entre la semana 7 y la semana 18, y 1 indica que el paciente recibió todos los tratamientos planificados. Una tasa de 0,75 indicó que el paciente recibió el 75% de los tratamientos de aféresis planificados (y omitió el 25% de los tratamientos planificados). Los abandonos de pacientes se contabilizaron según criterios predeterminados. La diferencia media de tratamiento se determinó utilizando la estimación de Hodges-Lehmann, y los intervalos de confianza del 95% (CI) utilizando el intervalo de confianza libre de distribución de Moses.

[0326] Se utilizó un enfoque inferencial jerárquico para controlar el error tipo I. Como el análisis del criterio de valoración principal fue significativo en el nivel alfa del 5%, los criterios de valoración secundarios de eficacia clave se probaron secuencialmente.

[0327] RESULTADOS CARACTERÍSTICAS INICIALES

[0328] Las características iniciales de los pacientes incluidos en el estudio se resumen en las Tablas 1 a 4.Tabla 1: Características del paciente al inicio

[0330]

[0333]

[0336]

[0339]

[0341] Tabla 2: LMT previo en la aleatorización

[0343]

[0344]

[0346] Tabla 3: Historia de los tratamientos de aféresis

[0348]

[0350] Tabla 4: Parámetros lipídicos al inicio

[0352]

[0355]

[0358]

[0360] [0171]Setenta y seis pacientes con heFH sometidos a aféresis de lipoproteínas regular semanal o cada 2 semanas dieron su consentimiento para participar y fueron seleccionados. Como se resume en las Tablas 1-4, se aleatorizaron un total de 62 pacientes (edad: media ± DE edad, 58,7 ± 9,7 años). El 58,1% de los pacientes aleatorizados eran varones. En la visita de selección, 28 pacientes no tomaban estatinas debido a la tolerabilidad, y 34 pacientes indicaron que tomaban estatinas diariamente, y 19 de ellos tomaban la dosis diaria máxima. Todos los pacientes tenían enfermedad aterosclerótica (coronaria y/o cerebrovascular y/o periférica), y el 56,5% tenía antecedentes familiares de enfermedad coronaria. En promedio, los pacientes recibieron aféresis de lipoproteínas regularmente durante (media ± DE) 7,6 ± 7,7 años; mediana (mín.: máx.): 4,9 (0,5:32,9) años. La frecuencia de aféresis fue Q2W (56,5%) y QW (43,5%). El 16,1% de los pacientes tenían diabetes. El 1,6% de los pacientes tenían enfermedad renal crónica. La media basal de LDL-C fue de 4,7 mmol/l (180,7 mg/dl); mediana (mín.:máx.): 4,7 (1,4:8,2) mmol/l [179,5 (53,0:316,0) mg/dl]. La media basal de Lp(a) fue de 43,9 mg/dl (mediana [mín.:máx.]: 19,0 [1,5:285,0] mg/dl).

[0361] Sesenta pacientes completaron el período de tratamiento doble ciego de 6 semanas (40 [97,6%] en el grupo de alirocumab y 20 [95,2%] en el grupo placebo) (es decir, cuando la tasa de aféresis se determinó según el programa establecido del paciente), y 57 completaron el período de tratamiento doble ciego de 18 semanas (37 [90,2%] y 20 [95,2%], respectivamente), cuando el programa de aféresis se determinó según el valor de LDL-C alcanzado previamente. De los 5 (8,1%) pacientes que interrumpieron prematuramente el tratamiento del estudio, 1 (4,8%) recibía placebo (se retiró debido a eventos adversos) y 4 (9,8%) recibían alirocumab (2 se retiraron por eventos adversos y 1 por mal cumplimiento; 1 paciente retiró su autorización).

[0362] La edad media ± desviación estándar (DE) de la población fue de 58,7 ± 9,7 años, 36 (58,1%) pacientes eran hombres y 60 (96,8%) eran blancos. La duración media (mínima, máxima) de los tratamientos de aféresis antes de ingresar al estudio fue de 4,9 (0,5, 32,9) años.

[0363] Las características iniciales estaban equilibradas entre los grupos de tratamiento. El nivel basal medio de LDL-C calculado (al ingreso al estudio) fue de 4,5 ± 1,4 mmol/l (175,1 mg/dl) en el grupo de alirocumab y de 5,0 ± 1,8 mmol/l (191,6 mg/dl) en el grupo placebo (P = 0,35). Veintisiete (43,5%) pacientes siguieron un programa de aféresis semanal al inicio y 35 (56,5 %) pacientes siguieron un programa Q2W. El valor medio de LDL-C en pacientes sometidos a aféresis semanal fue de 3,9 ± 1,3 mmol/l (151,3 ± 51,3 mg/dl) frente a 5,3 ± 1,4 mmol/l (204,9 ± 55,7 mg/dl) en pacientes sometidos a aféresis Q2W. Treinta y ocho (61,3%) pacientes tenían niveles iniciales normales de lipoproteína(a) (<30 mg/dl) y 24 (38,7%) tenían niveles elevados. Treinta y cuatro (54,8%) pacientes estaban tomando una estatina en el momento de la selección, 19 (55,9%) de los cuales tomaban una dosis diaria máxima. Los valores iniciales de LDL-C fueron 4,0 ± 1,4 mmol/l (155,0 ± 54,6 mg/dl) entre los pacientes tratados con estatinas, en comparación con 5,4 ± 1,4 mmol/l (208,0 ± 53,2 mg/dl) en los pacientes que no tomaban estatinas. Treinta pacientes (48,4%) eran de Alemania y 32 (51,6%) de Estados Unidos.

[0364] La duración media ± DE de la exposición a la inyección fue de 17,4 ± 2,3 semanas (8,6 ± 1,3 inyecciones) en el grupo de alirocumab y de 17,5 ± 3,1 semanas (8,4 ± 1,7 inyecciones) en el grupo placebo.

[0365] RESULTADOS DE EFICACIA

[0366] Los resultados de eficacia se resumen en las Tablas 5 a 8.

[0367] La Tabla 5 muestra la tasa estandarizada de aféresis de la semana 7 a la semana 18.

[0368] Tabla 5: Análisis de eficacia primaria: Tasa estandarizada de tratamientos de aféresis de la semana 7 a la semana 18 (ITT)

[0370]

[0371] Tabla 6: Tasa estandarizada de tratamientos de aféresis de la semana 7 a la semana 18 (ITT)

[0373]

[0376] El criterio de valoración de eficacia primario logró un beneficio estadísticamente significativo a favor de los pacientes tratados con alirocumab, con una estimación mediana de Hodges-Lehmann de la diferencia de tratamiento frente a placebo de 0,75 (intervalo de confianza del 95%: 0,67-0,83). Por lo tanto, los pacientes tratados con alirocumab tuvieron una reducción adicional de 0,75 (75%) en la tasa estandarizada de tratamientos de aféresis frente a los pacientes tratados con placebo (P < 0,0001). La diferencia media de tratamiento en la tasa estandarizada de tratamientos de aféresis desde la semana 7 a la semana 18, cuando el tratamiento de aféresis se determinó según la concentración de LDL-C alcanzada previamente, fue de 0,75 (IC del 95%: 0,58-0,92) para los pacientes que se habían sometido a aféresis semanal y de 0,67 (IC del 95%: 0,50-1,00) para los que seguían un programa Q2W, a favor del alirocumab.

[0378] La diferencia media de tratamiento en la tasa estandarizada de tratamientos de aféresis durante el período de 4 semanas (semana 15 a semana 18) fue de 0,50 (CI del 95%: 0,50 a 1,00;P< 0,0001) a favor del alirocumab, lo que indica una reducción del 50% en la tasa estandarizada de tratamientos de aféresis frente al placebo.

[0380] Como se muestra en la Tabla 5, la tasa media de tratamientos de aféresis en pacientes tratados con alirocumab fue de 0,128, mientras que la tasa media de tratamientos de aféresis en el grupo placebo fue de 0,806. En la Figura 2 se muestra una representación gráfica del porcentaje de reducción en la tasa de tratamientos de aféresis para pacientes individuales tratados con alirocumab en comparación con pacientes individuales del grupo placebo durante el período de 12 semanas. Durante este período, el 63,4% de los pacientes tratados con alirocumab no se sometieron a procedimientos de aféresis, y el 92,7% evitó al menos la mitad de los procedimientos. Es decir, 26 pacientes del grupo tratado con alirocumab lograron una reducción del 100% en la tasa de tratamientos de aféresis. Por el contrario, ninguno de los pacientes del grupo placebo logró una reducción del 100% en la tasa de tratamientos de aféresis. Estos resultados también se reflejan en la Tabla 6 y las Figuras 3 a 6, que ilustran la tasa de tratamientos de aféresis para pacientes en los grupos tratados con placebo y alirocumab desde la semana 7 hasta la semana 18 del estudio. Los resultados muestran que los pacientes que agregaron alirocumab a su régimen de tratamiento existente pudieron reducir significativamente la frecuencia de su terapia de aféresis estandarizada durante 12 semanas en un 75% en comparación con el placebo (P < 0,0001).

[0382] La Tabla 7 y las Figuras 7 y 8 muestran los efectos del tratamiento con alirocumab en comparación con placebo en términos de cambios en los niveles séricos de LDL-C a lo largo del estudio. En general, los pacientes tratados con alirocumab mostraron una reducción media del LDL-C desde el valor inicial superior al 50% en la semana 6, mientras que los pacientes del grupo placebo no mostraron ningún grado significativo de reducción del LDL-C.

[0384] Tabla 7: Cambio porcentual de LDL-C respecto del análisis inicial en la semana 6 (pre-aféresis): MMRM – ITT

[0386]

[0387]

[0388]

[0390] Los resultados secundarios clave de eficacia para los pacientes tratados con placebo y alirocumab se resumen en la Tabla 8.

[0391] Tabla 8: Resultados clave del análisis de eficacia secundaria

[0392]

[0393]

[0395] El valor medio de LDL-C pre-aféresis disminuyó de 4,5 mmol/l (175 mg/dl) al inicio a 2,3 mmol/l (90 mg/dl) en la semana 6 en el grupo de alirocumab; los datos correspondientes para los pacientes del grupo placebo son 5,0 mmol/l (192 mg/dl) y 4,8 mmol/l (185 mg/dl) (Figura 2). El cambio porcentual de la media LS ± EE (CI del 95%) en el LDL-C pre-aféresis desde el valor inicial en la semana 6 fue de -53,7 ± 2,3 (-58,2 a -49,2) en el grupo de alirocumab y de 1,6 ± 3,1 (-4,7 a 7,9) en el grupo placebo (diferencia porcentual de la media de LS ± EE -55,3 ± 3,9; CI del 95% -63,1 a -47,5; P < 0,0001). En la semana 18, el valor medio de colesterol LDL en el grupo de alirocumab había aumentado ligeramente a 2,9 mmol/l (110 mg/dl), en comparación con 4,9 mmol/l (191 mg/dl) en el grupo placebo (diferencia porcentual media ± EE de LS: -46,4 ± 7,9; CI del 95%: -62,3 a -30,5; P < 0,0001).

[0396] Una validación cruzada, comparando los valores de LDL-C en el punto de atención con los valores del laboratorio central, mostró que ambas medidas estaban altamente correlacionadas (correlación de Pearson 0,86).

[0397] El cambio porcentual desde el valor inicial hasta la semana 18 en la lipoproteína(a) fue del -5,7% para alirocumab frente al -3,0% para placebo entre los pacientes con valores iniciales normales, y del 4,9% frente al 7,6%, respectivamente, en los pacientes con valores iniciales elevados. Durante las semanas 7 a 18, cuando se pudo retirar el tratamiento de aféresis, el tratamiento con alirocumab se asoció con un valor de LDL-C promedio en el tiempo medio ± DE más bajo (utilizando la fórmula de Kroon18) a lo largo del intervalo de aféresis (potencial) de 2,4 ± 1,3 mmol/l (92,7 ± 50,2 mg/dl) frente a 3,8 ± 1,7 mmol/l (146,7 ± 65,6 mg/dl) para placebo (P < 0,0001).

[0398] En un análisis post-hoc, los valores de LDL-C promediados en el tiempo en los pacientes tratados con alirocumab fueron consistentemente inferiores a los de los pacientes tratados con placebo.

[0399] SEGURIDAD

[0400] El 75,6% de los pacientes del grupo alirocumab y el 76,2% de los pacientes del grupo placebo notificaron eventos adversos graves, ninguno de los cuales fue mortal. Las tasas de eventos adversos graves (9,8% para alirocumab y 9,5% para placebo) y eventos que llevaron a la interrupción del tratamiento (4,9% y 4,8%, respectivamente) también fueron similares en ambos grupos.

[0401] Tres pacientes (7,3%) del grupo de alirocumab y ninguno del grupo placebo tuvieron dos valores de LDL-C calculados pre-aféresis consecutivos <0,7 mmol/l (25 mg/dl). Dos de estos pacientes tuvieron al menos un evento adverso, uno de los cuales tuvo varios eventos adversos graves (neumonía, infarto agudo de miocardio, insuficiencia respiratoria aguda, insuficiencia cardíaca congestiva, septicemia y estenosis de la válvula aórtica). Veintisiete pacientes (23 [56,1%] con alirocumab y 4 [19,0%] con placebo) tuvieron dos valores de LDL-C consecutivos <0,7 mmol/l después de la aféresis, de los cuales 15 (65,2%) y 2 (50,0%), respectivamente, tuvieron un evento adverso. Ninguno de los eventos fue grave, pero un paciente (4,3%) interrumpió el tratamiento con alirocumab.

[0402] RESUMEN Y CONCLUSIONES

[0403] El presente estudio muestra que los pacientes que recibieron alirocumab exhibieron una tasa reducida de tratamientos de aféresis y un número reducido de tratamientos de aféresis a lo largo del estudio, en comparación con los pacientes que recibieron placebo. En particular, el tratamiento con alirocumab resultó en una mayor reducción en la tasa de tratamientos de aféresis en comparación con el tratamiento placebo, con una estimación media de 0,75 o 75% (p < 0,0001).

[0404] El presente estudio también demostró que al 63,4% de los pacientes tratados con alirocumab no se les realizó aféresis frente al 0% en los pacientes tratados con placebo (es decir, ningún paciente del grupo tratado con placebo pudo prescindir por completo de los tratamientos de aféresis, mientras que el 63,4% de los pacientes del grupo de tratamiento con alirocumab pudieron eliminar por completo los tratamientos de aféresis después del tratamiento con alirocumab). Además, el 92,7% de los pacientes tratados con alirocumab tuvieron al menos un 50% de reducción en la frecuencia de aféresis frente al 14,3% de los pacientes tratados con placebo. Además, alirocumab redujo el LDL-C en un 55% (en comparación con PBO) en la semana 6, de 175 mg/dl a 89,5 mg/dl. También se observaron reducciones significativas en apoB, colesterol no HDL y TC en pacientes tratados con alirocumab. El tratamiento con alirocumab redujo la tasa estandarizada de tratamientos de aféresis de la semana 15 a la semana 18.

[0405] Respecto a la seguridad, la administración subcutánea de alirocumab en pacientes con HeFH sometidos a terapia de aféresis de LDL cada 1 o 2 semanas fue generalmente segura y bien tolerada. El número de pacientes que informaron TEAE en general y AESI fue comparable entre los grupos de tratamiento.

[0406] Todos los pacientes de este estudio presentaban un alto riesgo cardiovascular y habían tomado LLT previamente, incluidas estatinas. En el momento de la selección, sólo el 54,8% de los pacientes tomaban una estatina y el 55,9% de ellos tomaban la dosis máxima tolerada. Una gran proporción de la población general informó antecedentes de reducción del tratamiento con estatinas debido a problemas de tolerabilidad (43,5%) y el 62,9% informó haber cambiado a una estatina diferente. Se dieron varias razones para no tomar una estatina o para no tomarla en la dosis diaria máxima, desde síntomas musculares hasta ansiedad por los efectos secundarios y prácticas regionales/etiquetado local, lo que indica que los pacientes con heFH en aféresis representan una población diversa y difícil de tratar, con opciones de tratamiento limitadas.

[0407] Los pacientes de EE. UU. mostraron características diferentes a los de Alemania, con niveles iniciales de LDL-C más elevados, mayor prevalencia de intolerancia a las estatinas, y un régimen de aféresis menos frecuente. En los EE. UU., la aféresis de lipoproteínas para la heFH generalmente sólo se considera para pacientes que, después de 6 meses, no tienen una respuesta adecuada a la terapia farmacológica máxima tolerada y tienen niveles elevados de LDL-C además de otros factores de riesgo cardiovascular. En Alemania, donde los centros de aféresis son más comunes, se considera la aféresis dentro de los 12 meses posteriores al fracaso de la dieta y la LLT, y en un umbral de LDL-C más bajo, y se prefiere la aféresis semanal Q2W. Además, las recomendaciones para reducir el LDL-C en Europa se basan en un enfoque de tratamiento para alcanzar el objetivo estratificado por riesgo, mientras que las directrices estadounidenses abogan por un enfoque adaptado a la dosis. Teniendo en cuenta el enfoque adoptado en las directrices europeas, en las que el valor objetivo de LDL-C es <1,8 mmol/l (70 mg/dl), los pacientes alemanes tratados con alirocumab con LDL-C por encima de este valor diana aún cumplirían los criterios para la aféresis. En consecuencia, la LLT con alirocumab puede resultar complementaria a la aféresis de lipoproteínas en pacientes con LDL-C muy alto o que no alcanzan el valor de LDL-C objetivo.

[0408] En conclusión, este estudio logró una reducción significativa en el criterio de valoración principal de eficacia y demuestra que los inhibidores de PCSK9 como alirocumab son una opción terapéutica eficaz para reducir o eliminar la necesidad de un paciente de una terapia de aféresis de lipoproteínas o para retrasar la necesidad de dichos tratamientos.

Claims

1. REIVINDICACIONES

1.Un anticuerpo que se une específicamente a PCSK9 para su uso en un método de tratamiento de la hipercolesterolemia, comprendiendo el método seleccionar a un paciente con diagnóstico de hipercolesterolemia familiar heterocigótica (HeFH) o hipercolesterolemia familiar homocigótica (HoFH) y tratarlo con aféresis de lipoproteínas con una frecuencia inicial (previa al tratamiento), y administrar una o más dosis del anticuerpo anti-PCSK9 al paciente, eliminando así la necesidad del paciente de terapia de aféresis de lipoproteínas o reduciendo, en al menos un 50%, la frecuencia de aféresis de lipoproteínas requerida por el paciente para alcanzar un nivel de lipoproteínas diana, en el que:

el anticuerpo es alirocumab, y el alirocumab se administra al paciente en una dosis de 150 mg con una frecuencia de una vez cada dos semanas; o el alirocumab se administra al paciente en una dosis de 300 mg con una frecuencia de una vez cada cuatro semanas,

y en el que el nivel de lipoproteína diana es un nivel de LDL-C sérico de menos de 200 mg/dl, menos de 130 mg/dl, menos de 100 mg/dl o menos de 70 mg/dl

2.El anticuerpo para uso según la reivindicación 1, en el que la frecuencia inicial (previa al tratamiento) de aféresis es una vez a la semana o una vez cada dos semanas.

3.El anticuerpo para uso según la reivindicación 1, en el que la frecuencia de aféresis después de la administración de una o más dosis del anticuerpo es una vez cada tres semanas, una vez cada cuatro semanas, una vez cada cinco semanas o menos frecuente que una vez cada cinco semanas.

4.El anticuerpo para uso según la reivindicación 1, en el que el paciente, antes o en el momento del tratamiento con una o más dosis del anticuerpo, está en un programa de aféresis de lipoproteínas estable en la frecuencia inicial (previa al tratamiento) durante al menos 2 semanas antes de la administración de la primera dosis del anticuerpo.