ES3058168T3 - Resorcinol derivative as a pharmaceutically active compound and method of preparation thereof - Google Patents

Abstract

La presente invención se refiere a un derivado de resorcinol como compuesto farmacéuticamente activo y a su método de preparación. Los derivados de resorcinol se han utilizado para tratar diversas enfermedades y trastornos. Si bien estos tratamientos son prometedores, persiste la necesidad de tratamientos más eficaces, lo que se ha logrado gracias al derivado de resorcinol de la invención. (Traducción automática con Google Translate, sin valor legal)

Description

[0001] DESCRIPCIÓN

[0002] Derivado de resorcinol como compuesto farmacéuticamente activo y método de preparación del mismo Solicitudes relacionadas

[0003] La presente solicitud está relacionada con, y reivindica el beneficio de, GB 2106786.3 presentada el 12 de mayo de 2021 (12.05.2021).

[0004] Campo de la invención

[0005] La presente invención se refiere a un derivado de resorcinol como compuesto farmacéuticamente activo, a una herramienta de investigación y a un método de preparación del mismo.

[0006] Antecedentes de la invención

[0007] El resorcinol ha sido ampliamente conocido como un compuesto químico versátil utilizado ampliamente en el desarrollo de químicas y tecnologías avanzadas (Durairaj, 2005). Se ha empleado en una amplia gama de aplicaciones, desde las médicas hasta las químicas, incluida la fabricación de resinas, plásticos, tintes, medicamentos y numerosos otros compuestos químicos orgánicos.

[0008] El resorcinol aparece en forma de cristales o polvo blancos y tiene un olor aromático característico y leve, con un sabor amargo dulce, y es fácilmente soluble en agua y alcohol. Otros nombres para el compuesto incluyen resorcina, meta-dihidroxibenceno, 1,3-dihidroxibenceno, 1,3-bencenodiol y 3-hidroxifenol, y su fórmula empírica es C<6>H<6>O<2>. Estructuralmente, el compuesto tiene dos grupos hidroxilo en la estructura del anillo aromático, que se encuentran en las posiciones meta con respecto a cada grupo hidroxilo. La alta reactividad del resorcinol está asociada principalmente con la ubicación de estos dos grupos hidroxilo en el anillo de benceno, siendo los átomos de hidrógeno adyacentes a los grupos hidroxilo particularmente reactivos.

[0009] La producción de resorcinol puede realizarse a través de varias rutas, ya sea utilizando una resina natural como un destilado de palo de Brasil, fundiendo cualquiera de un gran número de resinas (como gálbano y asafétida) y combinándola con hidróxido de potasio, o mediante varios métodos sintéticos. Un método de fabricación sintética es la sulfonación del benceno con ácido sulfúrico y la fusión del ácido bencenodisulfónico resultante con hidróxido de sodio, para posteriormente extraer el resorcinol.

[0010] Uno de los usos del resorcinol es su papel como intermedio químico para la síntesis de productos farmacéuticos y otros compuestos orgánicos. Por ejemplo, se utiliza en la producción de colorantes diazoicos y plastificantes y como absorbente de rayos UV en resinas. Como medicamento, el resorcinol se utiliza como antiséptico y desinfectante en productos farmacéuticos tópicos para el tratamiento de trastornos e infecciones de la piel como acné, dermatitis seborreica, eczema, psoriasis, callos, durezas y verrugas. El resorcinol actúa ayudando a eliminar la piel dura, escamosa o áspera mientras ejerce una actividad queratolítica. Sin embargo, el principal uso del resorcinol es en la producción de resinas. La reacción con formaldehído produce resinas que se utilizan para hacer que el rayón y el nailon sean susceptibles de impregnación con caucho y como adhesivos.

[0011] Solicitud de patente internacional, el documento WO1999/053917 divulga ciertos cannabinoides útiles como antioxidantes neuroprotectores.

[0012] Breve resumen de la invención

[0013] En su forma más general, la presente invención se refiere a un nuevo derivado de resorcinol que es biológicamente activo y, por lo tanto, útil en el tratamiento de enfermedades. Un compuesto novedoso de este tipo puede administrarse mediante una amplia variedad de vías, incluidas, entre otras, la oral, transdérmica, bucal, nasal, pulmonar, rectal u ocular. Dichos compuestos pueden usarse para el tratamiento o la prevención de una condición médica que incluye, entre otras, la epilepsia.

[0014] En un primer aspecto de la invención se proporciona un compuesto de fórmula (I), o una sal o estereoisómero del mismo:

[0017]

[0020] En una realización, el compuesto de fórmula (I) es (1’R,2’R,4’R)-4-bromo-5’-metil-2’-(prop-1-en-2-il)-1’,2’,3’,4’-tetrahidro-[1,1’-bifenil]-2,4’,6-triol, o una sal del mismo.

[0021] En una realización, el compuesto de fórmula (I) es (1’R,2’R,4’S)-4-bromo-5’-metil-2’-(prop-1-en-2-il)-1’,2’,3’,4’-tetrahidro-[1,1’-bifenil]-2,4’,6-triol, o una sal del mismo.

[0022] En un segundo aspecto de la invención, se proporciona una composición farmacéutica que comprende el compuesto del primer aspecto junto con uno o más ingredientes adicionales seleccionados entre vehículos, diluyentes, excipientes, adyuvantes, cargas, tampones, aglutinantes, desintegrantes, conservantes, antioxidantes, lubricantes, estabilizantes, solubilizantes, tensioactivos (por ejemplo, agentes humectantes), agentes enmascaradores, colorantes, agentes aromatizantes y agentes edulcorantes.

[0023] Preferiblemente, la composición farmacéutica de la segunda modalidad se presenta en una forma seleccionada de un líquido, una solución, una suspensión, una emulsión, un jarabe, un electuario, un enjuague bucal, un colirio, un comprimido, un gránulo, un polvo, una pastilla, una gragea, una cápsula, un cachet, una píldora, una ampolla, un bolo, un supositorio, un pesario, una tintura, un gel, una pasta, un ungüento, una crema, una loción, un aceite, una espuma, un espray y un aerosol.

[0024] En un tercer aspecto de la invención se proporciona el compuesto del primer aspecto, o una composición farmacéutica del segundo aspecto, para su uso en un método de tratamiento.

[0025] Preferiblemente, el método de tratamiento del tercer aspecto es un método de tratamiento de la epilepsia, crisis generalizada, crisis de inicio focal o crisis tónico-clónica.

[0026] En un cuarto aspecto de la invención se proporciona un compuesto del primer aspecto, o una composición farmacéutica del segundo aspecto, para su uso como medicamento.

[0027] Preferiblemente, el medicamento del cuarto aspecto es un medicamento para tratar la epilepsia, crisis generalizada, crisis de inicio focal o crisis tónico-clónica.

[0028] Se divulga en este documento, pero no forma parte de la presente invención, un método de tratamiento que comprende administrar a un sujeto que necesita tratamiento una cantidad terapéuticamente eficaz del compuesto del primer aspecto o la composición farmacéutica del segundo aspecto.

[0029] De acuerdo con un quinto aspecto de la presente invención, se proporciona un proceso para la producción de un compuesto de fórmula (I) que comprende las siguientes etapas:

[0030] i) Hacer reaccionar 5-bromobenceno-1,3-diol con 4-isopropenil-1-metil-ciclohex-2-en-1-ol;

[0031] ii) Tratar el compuesto resultante 5-bromo-2-[6-isopropenil-3-metil-ciclohex-2-en-1-il]benceno-1,3-diol con anhídrido acético;

[0032] iii) Tratar el compuesto resultante adicionalmente [3-Acetoxi-5-bromo-2-[6-isopropenil-3-metil-ciclohex-2-en-1-il]fenil] acetato con acetato de manganeso dihidrato;

[0033] iv) Añadir borohidruro de sodio al compuesto resultante adicionalmente [3-Acetoxi-5-bromo-2-[(1R,6R)-6-isopropenil-3-metil-4-oxo-ciclohex-2-en-1-il]fenil] acetato, seguido de los pasos posteriores para producir el compuesto de Fórmula I.

[0034] Estos y otros aspectos y realizaciones de la invención se describen con más detalle a continuación.

[0035] Breve resumen de los dibujos

[0036] La presente invención se describe con referencia a las figuras enumeradas a continuación:

[0037] Figura 1 muestra la evaluación del compuesto de prueba en la prueba mini-MEST en el ratón como se describe en el Ejemplo 2.

[0038] Figura 2 muestra la evaluación del compuesto de prueba en la prueba MEST en el ratón como se describe en el Ejemplo 3.

[0039] Figura 3 muestra el porcentaje (%) de ratones con carrera salvaje cuando se administró el Compuesto I en la prueba de crisis audiogénica en el ratón (control positivo: valproato; control negativo: vehículo) como se describe en el Ejemplo 4.

[0040] Figura 4 muestra el porcentaje (%) de ratones con convulsión clónica cuando se les administró el Compuesto I en la prueba de crisis audiogénica en el ratón (control positivo: valproato; control negativo: vehículo) como se describe en el Ejemplo 4.

[0041] Figura 5 muestra la latencia a las convulsiones clónicas cuando se administra el Compuesto I en la prueba de crisis audiogénicas en el ratón (control positivo: valproato; control negativo: vehículo) como se describe en el Ejemplo 4.

[0042] Figura 6 muestra el porcentaje (%) de ratones con extensión tónica cuando se les administró el Compuesto I en la prueba de crisis audiogénica en el ratón (control positivo: valproato; control negativo: vehículo) como se describe en el Ejemplo 4.

[0043] Figura 7 muestra la latencia a la extensión tónica cuando se administra el Compuesto I en la prueba de crisis audiogénica en el ratón (control positivo: valproato; control negativo: vehículo) como se describe en el Ejemplo 4.

[0044] Figura 8 muestra el porcentaje (%) de muerte cuando se administró el Compuesto I en la prueba de crisis audiogénica en el ratón (control positivo: valproato; control negativo: vehículo) como se describe en el Ejemplo 4.

[0045] Figura 9 muestra la evaluación del compuesto de prueba en la prueba psicomotora de 6 Hz en el ratón como se describe en el Ejemplo 5.

[0046] Descripción detallada de la invención

[0047] La presente invención proporciona un nuevo derivado de resorcinol que es biológicamente activo y, por lo tanto, útil en el tratamiento de enfermedades.

[0048] Resorcinol novedoso

[0049] La invención proporciona un compuesto de fórmula (I):

[0052]

[0055] El compuesto de fórmula (I) existe en forma de isómeros (epímeros). Los dos isómeros del nuevo resorcinol de la invención son (1’R,2’R,4’R)-4-bromo-5’-metil-2’-(prop-1-en-2-il)-1’,2’,3’,4’-tetrahidro-[1,1’-bifenil]-2,4’,6-triol, al que se hará referencia como Isómero 1, y (1’R,2’R,4’S)-4-bromo-5’-metil-2’-(prop-1-en-2-il)-1’,2’,3’,4’-tetrahidro-[1,1’-bifenil]-2,4’,6-triol, al que se hará referencia como Isómero 2. Los isómeros 1 y 2 se denominarán colectivamente el compuesto de Fórmula I o Compuesto I.

[0056] En una realización, el compuesto de fórmula (I) es (1’R,2’R,4’R)-4-bromo-5’-metil-2’-(prop-1-en-2-il)-1’,2’,3’,4’-tetrahidro-[1,1’-bifenil]-2,4’,6-triol (isómero 1).

[0057] En una realización, el compuesto de fórmula (I) es (1’R,2’R,4’S)-4-bromo-5’-metil-2’-(prop-1-en-2-il)-1’,2’,3’,4’-tetrahidro-[1,1’-bifenil]-2,4’,6-triol (isómero 2).

[0058] Sales

[0059] En algunas realizaciones, el compuesto de fórmula (I) se proporciona en forma de base libre.

[0060] Alternativamente, puede ser conveniente o deseable preparar, purificar y/o manipular una sal correspondiente del compuesto, por ejemplo, una sal farmacéuticamente aceptable. Se discuten ejemplos de sales farmacéuticamente aceptables en “Pharmaceutical Salts: Properties, Selection, and Use”, 2nd Edition, 2002, Stahl and Wermuth (Eds), Wiley-VCH, Weinheim, Germany.

[0061] Por consiguiente, en algunas realizaciones, el compuesto de fórmula (I) se proporciona como una sal, por ejemplo en una forma protonada junto con un contraión adecuado.

[0062] Los contraiones adecuados incluyen aniones orgánicos e inorgánicos. Los ejemplos de aniones inorgánicos adecuados incluyen aquellos derivados de ácidos inorgánicos, incluido el cloruro (Cl-), bromuro (Br), yoduro (I-), sulfato (SO<4>2-

), sulfito (SO<3>2-

), nitrato (NO<3>-), nitrito (NO<2>-), fosfato (PO<4>3-

) y fosfito (PO<3>3-

). Los ejemplos de aniones orgánicos adecuados incluyen 2-acetoxibenzoato, acetato, ascorbato, aspartato, benzoato, canforsulfonato, cinamato, citrato, edetato, etanodisulfonato, etanosulfonato, formiato, fumarato, gluconato, glutamato, glicolato, hidroximalato, carboxilato, lactato, laurato, maleato, malato, metanosulfonato, oleato, oxalato, palmitato, fenilacetato, fenilsulfonato, propionato, piruvato, salicilato, estearato, succinato, sulfanilato, tartarato, toluenosulfonato y valerato. Los ejemplos de aniones orgánicos poliméricos adecuados incluyen aquellos derivados del ácido tánico y la carboximetilcelulosa.

[0063] Alternativamente, en algunas realizaciones, el compuesto de fórmula (I) se proporciona como una sal, por ejemplo en una forma desprotonada junto con un contracatión adecuado.

[0064] Los contracationes adecuados incluyen cationes orgánicos e inorgánico s. Los ejemplos de cationes inorgánicos adecuados incluyen iones de metales alcalinos como Na+ y K<+>, cationes alcalinotérreos como el Ca<2+>y Mg<2+>, y otros cationes como Al<3+>. Los ejemplos de cationes orgánicos adecuados incluyen el ion amonio (es decir, NH<4>+

) e iones de amonio sustituidos (por ejemplo, NH<3>R<+>, NH<2>R<2>+

, NHR<3>+

, NR<4>+

). Los ejemplos de iones de amonio sustituidos incluyen aquellos derivados de etilamina, dietilamina, diciclohexilamina, trietilamina, butilamina, etilendiamina, etanolamina, dietanolamina, piperazina, bencilamina, fenilbencilamina, colina, meglumina y trometamina, así como aminoácidos, como lisina y arginina. Un ejemplo de un ion de amonio cuaternario común es N(CH<3>)<4>+<.>

[0065] Solvatos

[0066] En algunas realizaciones, el compuesto de fórmula (I) se proporciona en forma desolvatada, por ejemplo, en forma deshidratada.

[0067] Alternativamente, puede ser conveniente o deseable preparar, purificar y/o manipular un solvato correspondiente del compuesto.

[0068] Por consiguiente, en algunas realizaciones, el compuesto de fórmula (I) se proporciona en forma de un solvato (un complejo de soluto (por ejemplo, compuesto, sal de compuesto) y disolvente). Los ejemplos de solvatos incluyen hidratos, por ejemplo, un monohidrato, un dihidrato y un trihidrato.

[0069] Métodos de síntesis

[0070] La invención también proporciona un procedimiento para la producción de un compuesto de fórmula (I) que comprende las siguientes etapas:

[0071] i) Hacer reaccionar de 5-bromobenceno-1,3-diol con 4-isopropenil-1-metil-ciclohex-2-en-1-ol;

[0072] ii) Tratar el compuesto resultante 5-bromo-2-[6-isopropenil-3-metil-ciclohex-2-en-1-il]benceno-1,3-diol con anhídrido acético;

[0073] iii) Tratar el compuesto resultante adicionalmente [3-Acetoxi-5-bromo-2-[6-isopropenil-3-metil-ciclohex-2-en-1-il]fenil] acetato con acetato de manganeso dihidrato;

[0074] iv) Agregar borohidruro de sodio al compuesto resultante adicionalmente [3-Acetoxi-5-bromo-2-[(1R,6R)-6-isopropenil-3-metil-4-oxo-ciclohex-2-en-1-il]fenil] acetato, seguido de los pasos posteriores para producir el compuesto de fórmula (I).

[0075] Intermedios

[0076] La invención también proporciona un intermedio formado en el proceso de producción de un compuesto de fórmula (I), en el que el intermedio es:

[0079]

[0081] Composiciones farmacéuticas

[0082] Si bien es posible administrar el compuesto de fórmula (I) solo, es preferible administrar una composición farmacéutica (por ejemplo, una formulación, preparación o medicamento) que comprenda el compuesto de fórmula (I) junto con uno o más ingredientes farmacéuticamente aceptables.

[0083] De acuerdo con lo anterior, la invención proporciona una composición farmacéutica que comprende un compuesto de fórmula (I), o una sal del mismo, junto con uno o más ingredientes farmacéuticamente aceptables.

[0084] Los ingredientes farmacéuticamente aceptables adecuados (por ejemplo, vehículos, diluyentes, excipientes, etc.) se pueden encontrar en textos farmacéuticos estándar, por ejemplo, Remington: The Science and Practice of Pharmacy, 20th Edition, 2000, pub. Lippincott, Williams & Wilkins; and Handbook of Pharmaceutical Excipients, 2nd edition, 1994.

[0085] Los ejemplos de ingredientes farmacéuticamente aceptables adecuados incluyen vehículos, diluyentes (por ejemplo, aceites), excipientes, adyuvantes, rellenos, tampones, aglutinantes, desintegrantes, conservantes, antioxidantes, lubricantes, estabilizantes, solubilizantes, tensioactivos (por ejemplo, agentes humectantes), agentes enmascaradores, colorantes, agentes aromatizantes y agentes edulcorantes farmacéuticamente aceptables.

[0086] En una realización preferida, la composición farmacéutica comprende uno o más de: un excipiente seleccionado entre un vehículo, un aceite, un desintegrante, un lubricante, un estabilizante, un agente aromatizante, un antioxidante, un diluyente y otro compuesto farmacéuticamente eficaz.

[0087] La composición farmacéutica puede presentarse en cualquier forma adecuada. Los ejemplos de formas adecuadas incluyen: líquidos, soluciones (por ejemplo, acuosas, no acuosas), suspensiones (por ejemplo, acuosas, no acuosas), emulsiones (por ejemplo, aceite en agua, agua en aceite), jarabes, electuarios, enjuagues bucales, colirios, comprimidos (por ejemplo, comprimidos recubiertos), gránulos, polvos, pastillas, grageas, cápsulas (por ejemplo, cápsulas duras y blandas de gelatina), sellos, píldoras, ampollas, bolos, supositorios, óvulos, tinturas, geles, pastas, ungüentos, cremas, lociones, aceites, espumas, espráis y aerosoles.

[0088] En una realización preferida, la forma de la composición farmacéutica se selecciona entre una tableta, una cápsula, un gránulo, un polvo para inhalación, un espolvoreado, una solución oral y una suspensión.

[0089] Tratamiento médico

[0090] Los inventores han descubierto que el compuesto de fórmula (I) es biológicamente activo. Los ejemplos trabajados demuestran que el compuesto de fórmula (I) muestra actividad anticonvulsiva en un modelo de ratón. Como tal, el compuesto de fórmula (I) y sus sales, así como las composiciones farmacéuticas que comprenden el compuesto de fórmula (I) o sus sales, serán útiles en el tratamiento médico.

[0091] Por consiguiente, la invención proporciona un compuesto de fórmula (I), o una sal del mismo, para su uso en un método de tratamiento, por ejemplo para su uso en un método de tratamiento del cuerpo humano o animal mediante terapia (es decir, un método de terapia).

[0092] La invención también proporciona un compuesto de fórmula (I), o una sal del mismo, para su uso como medicamento.

[0093] En este documento se describe, pero no forma parte de la presente invención, un método de tratamiento que comprende administrar a un sujeto que necesita tratamiento una cantidad terapéuticamente eficaz del compuesto (I), o una sal del mismo.

[0094] La invención también proporciona el uso del compuesto (I), o una sal del mismo, para la fabricación de un medicamento.

[0095] Condiciones tratadas

[0096] Los inventores han descubierto que el compuesto de fórmula (I) muestra actividad anticonvulsiva en un modelo de ratón crisis generalizada. Por consiguiente, el compuesto de fórmula (I), sus sales, así como las composiciones farmacéuticas que comprenden el compuesto de fórmula (I) o sus sales, serán útiles en el tratamiento de ciertas afecciones asociadas con crisis.

[0097] De manera similar, el compuesto de fórmula (I), sus sales, así como las composiciones farmacéuticas que comprenden el compuesto de fórmula (I) o sus sales, serán útiles como medicamentos para tratar (y en la fabricación de medicamentos para tratar) ciertas afecciones asociadas con crisis.

[0098] En una realización preferida, la condición asociada con la crisis es la epilepsia.

[0099] En una realización, la condición asociada con la crisis es una crisis generalizada, como una crisis generalizada asociada con la epilepsia.

[0100] En una realización, la condición asociada con la crisis son crisis tónico-clónicas, como las crisis tónico-clónicas asociadas con la epilepsia.

[0101] El sujeto/paciente

[0102] El método de tratamiento típicamente comprende administrar un compuesto de fórmula (I), o una sal del mismo, a un sujeto o paciente.

[0103] El sujeto/paciente puede ser un cordado, un vertebrado, un mamífero, un mamífero placentario, un marsupial (por ejemplo, canguro, wombat), un roedor (por ejemplo, un conejillo de indias, un hámster, una rata, un ratón), un murino (por ejemplo, un ratón), un lagomorfo (por ejemplo, un conejo), un aviar (por ejemplo, un ave), un canino (por ejemplo, un perro), un felino (por ejemplo, un gato), un equino (por ejemplo, un caballo), un porcino (por ejemplo, un cerdo), un ovino (por ejemplo, una oveja), un bovino (por ejemplo, una vaca), un primate, un simio (por ejemplo, un mono o simio), un mono (por ejemplo, tití, babuino), un simio (por ejemplo, gorila, chimpancé, orangután, gibón) o un ser humano. Además, el sujeto/paciente puede ser cualquiera de sus formas de desarrollo, por ejemplo, un bebé o un niño.

[0104] En una realización preferida, el sujeto/paciente es un ser humano, más preferiblemente un ser humano adulto. El sujeto/paciente también puede ser un mamífero no humano utilizado en investigaciones de laboratorio, como un roedor. Los roedores incluyen ratas, ratones, conejillos de indias y chinchillas.

[0105] Vías de administración

[0106] El método de tratamiento puede comprender administrar un compuesto de fórmula (I), o una sal del mismo, a un sujeto mediante cualquier vía de administración conveniente, ya sea sistémica/periférica o tópica (es decir, en el sitio de acción deseada).

[0107] La vía de administración puede ser oral (por ejemplo, por ingestión); bucal; sublingual; transdérmica (incluyendo, por ejemplo, mediante un parche, yeso, etc.); transmucosa (incluyendo, por ejemplo, mediante un parche, yeso, etc.); intranasal (por ejemplo, mediante aerosol nasal); ocular (por ejemplo, mediante gotas para los ojos); pulmonar (por ejemplo, mediante terapia de inhalación o insuflación usando, por ejemplo, mediante un aerosol, por ejemplo, a través de la boca o la nariz); rectal (por ejemplo, mediante supositorio o enema); vaginal (por ejemplo, mediante pesario); parenteral, por ejemplo, mediante inyección o infusión, que incluye subcutánea, intradérmica, intramuscular, intravenosa, intraarterial, intracardíaca, intratecal, intraespinal, intracapsular, subcapsular, intraorbitaria, intraperitoneal, intratraqueal, subcuticular, intraarticular, subaracnoidea e intraesternal; o mediante implante de un depósito o reservorio, por ejemplo, por vía subcutánea o intramuscular.

[0108] Dosis

[0109] El método de tratamiento típicamente comprende administrar una cantidad terapéuticamente efectiva de un compuesto de fórmula (I), o una sal del mismo, a un sujeto.

[0110] Las dosis adecuadas del compuesto de fórmula (I), sus sales, así como las composiciones farmacéuticas que comprenden el compuesto de fórmula (I) o sus sales, pueden variar de un paciente a otro. Para determinar la dosis óptima generalmente es necesario equilibrar el nivel de beneficio terapéutico frente a cualquier riesgo o efecto secundario nocivo. El nivel de dosis seleccionado dependerá de una variedad de factores que incluyen, entre otros, la actividad del compuesto particular de fórmula (I), la vía de administración, el momento de administración, la tasa de excreción del compuesto, la duración del tratamiento, otros agentes activos, compuestos y/o materiales utilizados en combinación, la gravedad de la afección y la especie, el sexo, la edad, el peso, la condición, la salud general y el historial médico previo del paciente. La dosis y la vía de administración quedarán en última instancia a criterio del médico, aunque generalmente la dosis se seleccionará para lograr concentraciones locales en el sitio de acción que logren el efecto deseado sin causar efectos secundarios dañinos o perjudiciales sustanciales.

[0111] La administración puede efectuarse en una dosis única, de forma continua o intermitente (por ejemplo, en dosis divididas a intervalos apropiados) a lo largo del tratamiento. Se pueden realizar administraciones únicas o múltiples, seleccionando el nivel de dosis y el patrón el médico tratante.

[0112] Otros aspectos y realizaciones

[0113] Cada una de las combinaciones compatibles de las realizaciones descritas anteriormente se describe aquí explícitamente, como si cada una de ellas se recitara individual y explícitamente.

[0114] Varios aspectos y realizaciones adicionales de la presente invención serán evidentes para aquellos expertos en la materia en vista de la presente divulgación.

[0115] Cuando se utiliza, “y/o” debe tomarse como una divulgación específica de cada uno de los componentes o características relevantes solo, así como una divulgación específica de la combinación de los componentes o características. Por ejemplo, “A y/o B” debe tomarse como una divulgación específica de cada uno de i) A, ii) B, y iii) A y B, tal como si cada uno se estableciera individualmente.

[0116] A menos que el contexto indique lo contrario, las descripciones y definiciones de las características establecidas anteriormente no se limitan a ningún aspecto o realización particular de la invención y se aplican igualmente a todos los aspectos y realizaciones que se describen.

[0117] Definiciones

[0118] Las siguientes definiciones se proporcionan para ayudar a comprender la invención.

[0119] Un “resorcinol” es un compuesto con la siguiente estructura o cualquier superestructura que contenga dicha estructura en su interior:

[0120]

[0122] La epilepsia se considera una enfermedad del cerebro definida por cualquiera de las siguientes condiciones: (1) Al menos dos crisis no provocadas (o reflejas) con más de 24 horas de diferencia; (2) una crisis no provocada (o refleja) y una probabilidad de crisis adicionales similar al riesgo general de recurrencia (al menos 60 %) después de dos crisis no provocadas, que ocurran durante los siguientes 10 años; (3) diagnóstico de un síndrome de epilepsia (Una definición clínica práctica de epilepsia de la Liga Internacional contra la Epilepsia (ILAE), 2014).

[0123] El término “crisis generalizada” (“crisis de inicio generalizado”) se refiere a crisis conceptualizadas que se originan en algún punto dentro del cerebro y que involucran rápidamente redes distribuidas bilateralmente (Clasificación operativa de tipos de crisis de la ILAE, 2017).

[0124] Una “crisis tónico-clónica” ocurre en dos fases: una fase tónica que generalmente implica rigidez muscular y pérdida de conciencia, y una fase clónica que generalmente implica sacudidas rítmicas de las extremidades. El término “farmacéuticamente aceptable” se refiere a compuestos, ingredientes, materiales, composiciones, formas de dosificación, etc., que son, dentro del alcance del criterio médico sólido, adecuados para su uso en contacto con los tejidos del sujeto en cuestión (por ejemplo, humano) sin toxicidad excesiva, irritación, respuesta alérgica u otro problema o complicación, acorde con una relación beneficio/riesgo razonable. Cada ingrediente (por ejemplo, vehículo, diluyente, excipiente, etc.) también debe ser “aceptable” en el sentido de ser compatible con los demás ingredientes de la composición.

[0125] El término “cantidad terapéuticamente eficaz” se refiere a aquella cantidad de un compuesto, o un material, composición o forma de dosificación que comprende un compuesto, que es eficaz para producir algún efecto terapéutico deseado, proporcional a una relación beneficio/riesgo razonable, cuando se administra de acuerdo con un régimen de tratamiento deseado.

[0126] Ejemplos trabajados

[0127] Ciertos aspectos y realizaciones de la invención no se ilustrarán a modo de ejemplo y con referencia a las figuras descritas anteriormente.

[0128] Ejemplo 1: Método de producción sintética de derivados de resorcinol

[0129] Este ejemplo describe un nuevo método de síntesis que se utilizó para producir un nuevo resorcinol que demostró actividad farmacológica. El esquema 1 a continuación describe las cuatro etapas de la reacción que se utilizó para producir el nuevo resorcinol, formado a través de varios intermedios.

[0130] Los dos isómeros del nuevo resorcinol de la invención son (1’R,2’R,4’R)-4-bromo-5’-metil-2’-(prop-1-en-2-il)-1’,2’,3’,4’-tetrahidro-[1,1’-bifenil]-2,4’,6-triol, al que se hará referencia como Isómero 1 del Compuesto I, y (1’R,2’R,4’S)-4-bromo-5’-metil-2’-(prop-1-en-2-il)-1’,2’,3’,4’-tetrahidro-[1,1’-bifenil]-2,4’,6-triol, al que se hará referencia como Isómero 2 del Compuesto I, y los Isómeros 1 y 2 se denominarán colectivamente como el compuesto de Fórmula I o Compuesto I en todo momento.

[0131] Los datos analíticos del Isómero 1 del Compuesto I son los siguientes: RMN de<1>H (400 MHz, DMSO) δ 9.37 (s, 2H), 6.39 (s, 2H), 5.17 (s, 1H), 4.63 – 4.58 (m, 1H), 4.51 (s, 1H), 4.47 – 4.46 (m, 1H), 4.08 – 4.01 (m, 1H), 3.87 (s, 1H), 3.74 – 3.72 (m, 1H), 2.01 (d, J=5.0 Hz, 1H), 1.70 – 1.53 (m, 7H).

[0132] Los datos analíticos del Isómero 2 del Compuesto I son los siguientes: RMN de<1>H (400 MHz, DMSO) δ 9.53 (s, 1H), 9.32 (s, 1H), 6.43 – 6.36 (m, 2H), 5.07 – 5.05 (m, 1H), 4.62 (d, J = 6.7 Hz, 1H), 4.49 – 4.44 (m, 2H), 4.12 – 4.06 (m, 1H), 3.88 – 3.84 (m, 1H), 3.20 – 3.12 (m, 1H), 1.90 (ddd, J = 2.4, 5.7, 12.0 Hz, 1H), 1.66 – 1.63 (m, 3H), 1.63 – 1.55 (m, 4H).

[0133] Esquema 1: Síntesis de resorcinol novedoso

[0134]

[0137]

[0140] Etapa 1: Formación del Compuesto c

[0141] Una solución de 5-bromobenceno-1,3-diol (20.88 g, 0.110 mol, 1.00 eq) y ácido p-toluenosulfónico monohidrato (10.51 g, 55.2 mmol, 0.500 eq) en una mezcla de 2-metiltetrahidrofurano (132 ml) y diclorometano (465 ml) se enfrió a 0 °C con un baño de hielo/salmuera bajo nitrógeno. Se añadió (4R)-4-isopropenil-1-metil-ciclohex-2-en-1-ol (13 ml, 77.5 mmol, 0.701 eq) y la solución resultante se agitó durante 5 minutos. Se retiró el baño de enfriamiento y la solución incolora se agitó durante 2 horas, calentándose a 20 °C. La mezcla se diluyó con diclorometano (200 ml) y se basificó a pH 8 mediante la adición cuidadosa de 300 ml de solución acuosa saturada de NaHCO<3>. La capa orgánica se separó y se lavó con agua (50 ml), salmuera saturada (50 ml) y luego se secó (MgSO<4>), filtrado y concentrado en el vacío para dar una goma incolora. Este se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice (800 g, cartucho Interchim), eluyendo con éter dietílico al 0-50 % en ciclohexano para dar 5-bromo-2-[(1R,6R)-6-isopropenil-3-metil-ciclohex-2-en-1-il]benceno-1,3-diol (2.53 g, rendimiento aproximado del 6 %) como una goma/vidrio incoloro. Este se volvió a purificar mediante cromatografía en columna sobre gel de sílice (40 g, columna Interchim de 15 micrones), eluyendo con 5-20 % de éter dietílico en vacío de ciclohexano para dar 5-bromo-2-[(1R,6R)-6-isopropenil-3-metil-ciclohex-2-en-1-il]benceno-1,3-diol (0.92 g) así como algo de material impuro.

[0142] La columna inicial también produjo 5-bromobenceno-1,3-diol recuperado (8.17 g, recuperación aproximada del 39 %) como una goma incolora que se solidificó al reposar. Éste se disolvió en una mezcla de 2-metiltetrahidrofurano (55 ml) y diclorometano (185 ml), tratado con (4R)-4-isopropenil-1-metil-ciclohex-2-en-1-ol (4.9 ml, 30.3 mmol, 0.701 eq), enfriado a 0 °C con un baño de hielo/salmuera bajo nitrógeno. Se añadió ácido p-toluensulfónico monohidrato (4.11 g, 21.6 mmol, 0.500 eq) y la solución resultante se agitó durante 5 minutos. Se retiró el baño de enfriamiento y la solución incolora se agitó durante 2 horas, calentándose a 20 °C. La mezcla se diluyó con diclorometano (100 ml) y se basificó a pH 8 mediante la adición cuidadosa de 300 ml de bicarbonato de sodio acuoso saturado. La capa orgánica se separó y se lavó con agua (50 ml), salmuera saturada (50 ml) y luego se secó (MgSO<4>), filtrado y concentrado en el vacío para dar una goma incolora. El residuo se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice (cartucho Interchim de 40 g), eluyendo con éter dietílico al 0-50 % en ciclohexano para dar el compuesto del título como una goma incolora (1.33 g, rendimiento del 7 %, pureza por LCMS del 81 %). Esto se combinó con material impuro de la primera reacción y se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice (cartucho Interchim de 40 g), eluyendo con 5-20 % de éter dietílico en ciclohexano para dar 5-bromo-2-[(1R,6R)-6-isopropenil-3-metil-ciclohex-2-en-1-il]benceno-1,3-diol como una goma incolora (2.10 g, 91 % de pureza LCMS).

[0143] El rendimiento total de 5-bromo-2-[(1R,6R)-6-isopropenil-3-metil-ciclohex-2-en-1-il]benceno-1,3-diol obtenido fue 3.02 g (9.34 mmol, 8.5 %).

[0144] Datos analíticos del compuesto c: RMN de<1>H (400 MHz, DMSO) δ 9.37 (s, 2H), 6.38 (s, 2H), 5.08 (s, 1H), 4.49 (d, J = 2.8 Hz, 1H), 4.44 (dd, J = 1.6, 2.8 Hz, 1H), 3.86 – 3.83 (m, 1H), 3.06 – 2.,98 (m, 1H), 2.12 – 2.07 (m, 1H), 1.96 – 1.92 (m, 1H), 1.63 – 1.59 (m, 8H).

[0145] Etapa 2: Formación del compuesto d

[0146] El 5-bromo-2-[(1R,6R)-6-isopropenil-3-metil-ciclohex-2-en-1-il]benceno-1,3-diol (1305 mg, 4.04 mmol, 1.00 eq) en acetonitrilo (30 ml) se trató con carbonato de cesio (3289 mg, 10.1 mmol, 2.50 eq) seguido de anhídrido acético (0.95 ml, 10.1 mmol, 2.50 eq). La mezcla de reacción se agitó durante 1 hora y luego se repartió entre acetato de etilo (100 ml) y agua (100 ml). Las capas se separaron, la capa acuosa se extrajo con acetato de etilo (100 ml) y las fases orgánicas combinadas se filtraron a través de papel de filtro hidrófobo y se concentraron. en el vacío para dar el compuesto del título como una goma naranja (1.60 g, 93.4 %). Este se utilizó sin purificación adicional en la siguiente reacción.

[0147] Compuesto d datos analíticos:<1>RMN de H (400 MHz, CDCl3) δ, 7.07 (s, 2H), 5.15 (s, 1H), 4.56 (s, 1H), 4.44 – 4.44 (m, 1H), 3.55 – 3.50 (m, 1H), 2.67 – 2.60 (m, 1H), 2.24 – 2.16 (m, 7H), 2.07 – 2.00 (m, 1H), 1.84 – 1.64 (m, 5H), 1.58 – 1.57 (m, 3H).

[0148] Etapa 3: Formación del compuesto e

[0149] [3-Acetoxi-5-bromo-2-[(1R,6R)-6-isopropenil-3-metil-ciclohex-2-en-1-il]fenil]acetato (1560 mg, 3.83 mmol, 1.00 eq) y tamices moleculares (3Å, 5000 mg) en acetato de etilo (31.92 ml) se trataron con acetato de manganeso(III) dihidrato (103 mg, 0.383 mmol, 0.100 eq) seguido de solución de hidroperóxido de terc-butilo 5.5 M en nonano (3.5 ml, 19.2 mmol, 5.00 eq). La mezcla de reacción se agitó a 20 °C durante la noche, luego se diluyó con acetato de etilo (50 ml) y se filtró a través de una capa de celite. El filtrado se lavó con tiosulfato de sodio acuoso saturado (30 ml) y agua (30 ml), se separó y se secó (MgSO<4>), filtrado y concentrado en el vacío. El residuo se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice, eluyendo con éter dietílico al 0-100 % en ciclohexano para dar el compuesto del título como un sólido blanquecino (561 mg, 34.8 %).

[0150] Compuesto d datos analíticos:<1>RMN de H (400 MHz, DMSO) δ 7.39 (s, 2H), 6.38 (t, J = 1.8 Hz, 1H), 4.56 (s, 1H), 4.50 (s, 1H), 4.04 (td, J = 2.3, 10.6 Hz, 1H), 3.20 – 3.11 (m, 1H), 2.85 – 2.76 (m, 1H), 2.35 – 2.19 (m, 7H), 1.71 (dd, J = 1.5, 2.5 Hz, 3H), 1.62 (s, 3H).

[0151] Etapa 4: Formación del isómero 1 del Compuesto I y del isómero 2 del compuesto I

[0152] A una solución de acetato de [3-acetoxi-5-bromo-2-[(1R,6R)-6-isopropenil-3-metil-4-oxo-ciclohex-2-en-1-il]fenilo (1.10 g, 2.61 mmol, 1.00 eq) en alcohol metílico (25.0 ml) a 0 °C se le añadió borohidruro de sodio (0.22 g, 5.74 mmol, 2.20 eq) en cuatro porciones iguales durante un período de 30 minutos y la mezcla se dejó calentar a temperatura ambiente durante la noche. La mezcla de reacción se concentró en el vacío y el residuo se repartió entre acetato de etilo (75 ml) y agua (75 ml). Las capas se separaron y la fase orgánica se lavó con salmuera (50 ml), se secó (MgSO<4>) y concentrado en el vacío. El residuo se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice eluyendo con acetato de etilo al 0-80 % en ciclohexano para dar (1’R,2’R,4’R)-4-bromo-5’-metil-2’-(prop-1-en-2-il)-1’,2’,3’,4’-tetrahidro-[1,1’-bifenil]-2,4’,6-triol (200 mg, 22.5 %) como un sólido blanco y (1’R,2’R,4’S)-4-bromo-5’-metil-2’-(prop-1-en-2-il)-1’,2’,3’,4’-tetrahidro-[1,1’-bifenil]-2,4’,6-triol (508 mg, 57.4 %) como un sólido blanco.

[0153] Ejemplo 2: Evaluación del nuevo resorcinol para la actividad anticonvulsiva mediante la prueba del umbral máximo de crisis generalizada por electrochoque (MEST) en ratones con tamaños de muestra mínimos (mini MEST)

[0154] La eficacia del resorcinol novedoso de acuerdo con el compuesto de Fórmula I se probó en un nuevo modelo de ratón de crisis generalizada, la prueba mini-MEST (umbral máximo de crisis generalizada por electroshock), que utiliza números n más bajos que los que se usan habitualmente.

[0155] La prueba del umbral máximo de crisis generalizada por electroshock (MEST) se utiliza ampliamente en la etapa preclínica para evaluar las propiedades pro o anticonvulsivas de los compuestos de prueba (Loscher et al., 1991).

[0156] En la prueba MEST, la capacidad de un fármaco para alterar la corriente umbral de crisis generalizada necesaria para inducir convulsiones tónicas extensoras de las extremidades traseras se mide de acuerdo con un método de titulación de choque de “arriba y abajo” (Kimball et al., 1957). Un aumento en el umbral de crisis generalizada es indicativo de un efecto anticonvulsivo. Los fármacos antiepilépticos, incluidos los bloqueadores de los canales de sodio (por ejemplo, lamotrigina), con eficacia clínicamente probada contra las crisis tónico-clónicas generalizadas, exhiben propiedades anticonvulsivas en esta prueba en el ratón.

[0157] Por el contrario, una reducción en el umbral de crisis generalizada es indicativa de un efecto proconvulsivo como el observado con agentes convulsivos conocidos como la picrotoxina.

[0158] En el MEST se evalúa la capacidad de un compuesto de prueba para alterar la intensidad del estímulo, expresada como corriente (mA), necesaria para inducir la presencia de convulsiones tónicas extensoras de las extremidades posteriores. El resultado de la presencia (+) o ausencia (0) de crisis generalizada tónicas extensoras de las extremidades traseras observadas a partir de una corriente para producir extensión tónica de las extremidades traseras en el 50 % de los animales en el grupo de tratamiento (CC<50>) determina el umbral de crisis generalizada para el grupo de tratamiento y luego se compararon los efectos con el CC<50>del grupo de control del vehículo.

[0159] Métodos

[0160] Detalles del estudio:

[0161] Los ratones ingenuos se aclimataron a la sala de procedimientos en sus jaulas durante hasta 7 días, con comida y agua disponibles ad libitum.

[0162] Todos los animales fueron pesados al comienzo del estudio y asignados aleatoriamente a grupos de tratamiento según una distribución media del peso corporal entre los grupos. A todos los animales se les administró una dosis de 10 ml/kg mediante inyección intraperitoneal (i.p.), ya sea con vehículo, compuesto de prueba a 50 mg/kg o diazepam a 2.5 mg/kg.

[0163] Se evaluó individualmente a los animales para determinar la producción de una convulsión tónica extensora de las extremidades traseras 30 minutos después de la dosis de vehículo, compuesto de prueba y diazepam, a partir de un único electroshock.

[0164] Al primer animal dentro de un grupo de tratamiento se le administró una descarga eléctrica en el CC<50>esperado o estimado actual. En los animales posteriores, la corriente se redujo o aumentó dependiendo del resultado de las convulsiones del animal anterior en intervalos de escala logarítmica.

[0165] Los datos generados de cada grupo de tratamiento se utilizaron para calcular los valores CC<50>± EEM para el grupo de tratamiento.

[0166] Compuestos de prueba:

[0167] Vehículo: (5 % de etanol, 10 % de solutol en solución salina al 85 %) se preparó de la siguiente manera: Se calentaron 1 ml de etanol, 2 ml de solutol a 60 °C, en 17 ml de solución salina (1:2:17).

[0168] Control positivo: se utilizó diazepam a 2.5 mg/kg.

[0169] El compuesto de prueba, descrito en este documento como Compuesto I, se muestra como Fórmula I. El compuesto de prueba se administró a 50 mg/kg (i.p.) en una formulación de etanol:solutol: solución salina al 0.9 % 1:2:17.

[0170] Colección de muestras:

[0171] Cada animal fue sacrificado de forma humanitaria inmediatamente después de la inducción de una convulsión, mediante la destrucción del cerebro por percusión del cráneo, seguida de la confirmación del cese permanente de la circulación mediante decapitación, de conformidad con lo establecido para el Humane Killing of Animals en el Schedule 1 to the Animals (Scientific Procedures) Act 1986. La recolección terminal de sangre y tejido cerebral se realizó después de la decapitación.

[0172] La sangre se recolectó en tubos con heparina de litio y se centrifugó a 4 °C durante 10 minutos a 1500 x g. El plasma resultante se extrajo (>100 µl) y se dividió en 2 alícuotas de tubos Eppendorf de 0.5 ml con 10 µl de ácido ascórbico (100 mg/ml) para su estabilización. Se extrajeron los cerebros, se lavaron con solución salina y se cortaron por la mitad. Cada mitad se colocó en crioviales separados con tapa de rosca de 2 ml, se pesaron y se congelaron en hielo.

[0173] Análisis estadístico:

[0174] Los datos de cada grupo de tratamiento se registraron como el número de “+” y “0” en cada nivel actual empleado y esta información se utiliza luego para calcular el CC.<50>valor (corriente requerida para que el 50 % de los animales muestren comportamiento de crisis generalizada) ± error estándar.

[0175] Los efectos de los compuestos de prueba también se calcularon como cambio porcentual en CC<50>del grupo de control del vehículo.

[0176] La diferencia significativa entre los animales tratados con fármacos y los controles se evaluó según Litchfield y Wilcoxon (1949).

[0177] Resultados

[0178] La Figura 1 y la Tabla 1 describen los datos producidos en este experimento.

[0179] En el grupo de vehículos, el valor CC<50>calculado fue 23.5 mA.

[0180] En el grupo tratado con diazepam (2.5 mg/kg), administrado i.p.30 minutos antes de la prueba, el valor CC<50>fue 89.0 mA. Este resultado fue estadísticamente significativo (p<0.001) en comparación con el control del vehículo.

[0181] El compuesto de prueba, administrado i.p. 30 minutos antes de la prueba, se produjo un claro aumento del umbral de crisis generalizada en comparación con el vehículo, con CC<50>> 114 mA para 50 mg/kg; no se calculó un valor exacto ya que no se observó una convulsión tónica de las extremidades posteriores “+” en los 6 animales evaluados. Aunque CC<50>no se determinó, el Compuesto I mostró un claro aumento en el umbral de crisis generalizada en el mini-MEST. Se demostró una clara actividad del Compuesto I ya que los animales de este grupo de tratamiento no tuvieron convulsiones.

[0182] Estos datos indican que este compuesto tendrá beneficios terapéuticos.

[0183] Tabla 1: Evaluación del efecto del Compuesto I en la prueba mini-MEST

[0185]

[0188] Conclusiones

[0189] Estos datos producidos utilizando el modelo mini-MEST demuestran un fuerte efecto terapéutico para el Compuesto I, con CC<50>aumentando en más del 385 % en comparación con el control del vehículo, un cambio porcentual que es incluso mayor que el producido por el control positivo.

[0190] Estos datos son importantes ya que aportan evidencia hasta ahora desconocida de que este nuevo resorcinol puede tener valor terapéutico.

[0191] Ejemplo 3: Evaluación del nuevo resorcinol para la actividad anticonvulsiva mediante la prueba del umbral máximo de crisis generalizada por electrochoque (MEST) en ratones

[0192] La eficacia del nuevo resorcinol según el compuesto de Fórmula I se probó en un modelo de ratón de crisis generalizada, la prueba del umbral máximo de crisis generalizada por electroshock (MEST).

[0193] La prueba del umbral máximo de crisis generalizada por electroshock (MEST) se utiliza ampliamente en la etapa preclínica para evaluar las propiedades pro o anticonvulsivas de los compuestos de prueba (Loscher et al., 1991).

[0194] En la prueba MEST, la capacidad de un fármaco para alterar la corriente umbral de crisis generalizada necesaria para inducir convulsiones tónicas extensoras de las extremidades traseras se mide según un método de titulación de choque de “arriba y abajo” (Kimball et al., 1957). Un aumento en el umbral de crisis generalizada es indicativo de un efecto anticonvulsivo. Los fármacos antiepilépticos, incluidos los bloqueadores de los canales de sodio (por ejemplo, lamotrigina), con eficacia clínicamente probada contra las crisis tónico-clónicas generalizadas, exhiben propiedades anticonvulsivas en esta prueba en el ratón.

[0195] Por el contrario, una reducción en el umbral de crisis generalizada es indicativa de un efecto proconvulsivo como el observado con agentes convulsivos conocidos como la picrotoxina.

[0196] En el MEST se evalúa la capacidad de un compuesto de prueba para alterar la intensidad del estímulo, expresada como corriente (mA), necesaria para inducir la presencia de convulsiones tónicas extensoras de las extremidades posteriores. El resultado de la presencia (+) o ausencia (0) de convulsiones tónicas extensoras de las extremidades traseras observadas a partir de una corriente para producir extensión tónica de las extremidades traseras en el 50 % de los animales en el grupo de tratamiento (CC<50>) determina el umbral de crisis generalizada para el grupo de tratamiento y luego se compararon los efectos con el CC<50>del grupo de control del vehículo.

[0197] Métodos

[0198] Detalles del estudio:

[0199] Los ratones ingenuos se aclimataron a la sala de procedimientos en sus jaulas durante hasta 7 días, con comida y agua disponibles ad libitum.

[0200] Todos los animales fueron pesados al comienzo del estudio y asignados aleatoriamente a grupos de tratamiento según una distribución media del peso corporal entre los grupos. A todos los animales se les administró una dosis de 10 ml/kg mediante inyección intraperitoneal (i.p.), ya sea con vehículo, compuesto de prueba a 1, 5, 20, 50, 100 y 200 mg/kg o diazepam a 2.5 mg/kg.

[0201] Se evaluó individualmente a los animales para determinar la producción de una convulsión tónica extensora de las extremidades posteriores a los 60 minutos después de la dosis del vehículo, entre 15 y 60 minutos después de la dosis del compuesto de prueba y 30 minutos después de la dosis de diazepam, a partir de un único electrochoque.

[0202] Al primer animal dentro de un grupo de tratamiento se le administró una descarga eléctrica en el CC<50>esperado o estimado actual. En los animales siguientes, la corriente se redujo o aumentó dependiendo del resultado de las convulsiones del animal anterior, en intervalos de 5 mA.

[0203] Los datos generados de cada grupo de tratamiento se utilizaron para calcular el CC<50>Valores ± EEM para el grupo de tratamiento.

[0204] Compuestos de prueba:

[0205] Vehículo: (5 % etanol, 5 % Kolliphor<®>EL, 90 % solución salina) se preparó de la siguiente manera: 2 ml de etanol, 2 ml de Kolliphor<®>EL se calentaron a 60 °C, en 36 ml de solución salina (1:1:18).

[0206] Control positivo: se utilizó diazepam a 2.5 mg/kg.

[0207] El compuesto de prueba, descrito en este documento como Compuesto I, se muestra como Fórmula I. El compuesto de prueba se administró a 1, 5, 20, 50, 100 y 200 mg/kg (i.p.) en una formulación de etanol:solutol:0.9 % solución salina 1:2:17.

[0208] Colección de muestras:

[0209] Cada animal se sacrificó de forma humanitaria inmediatamente después de la inducción de una convulsión, mediante la destrucción del cerebro por percusión del cráneo, seguida de la confirmación del cese permanente de la circulación mediante decapitación, conforme a lo establecido en el Humane Killing of Animals del Schedule 1 de la Animals (Scientific Procedures) Act 1986. La recolección terminal de sangre y tejido cerebral se realizó después de la decapitación.

[0210] La sangre se recolectó en tubos de heparina de litio y se centrifugó a 4 °C durante 10 minutos a 1500 x g. El plasma resultante se extrajo (>100 µl) y se dividió en dos alícuotas de tubos Eppendorf de 0.5 ml con 100 µl de ácido ascórbico (100 mg/ml) para su estabilización. Se extrajeron los cerebros, se lavaron con solución salina y se cortaron por la mitad. Cada mitad se colocó en crioviales separados con tapa de rosca de 2 ml, se pesaron y se congelaron en hielo.

[0211] Análisis estadístico

[0212] Los datos de cada grupo de tratamiento se registraron como el número de “+” y “0” en cada nivel actual empleado y esta información se utiliza luego para calcular el valor CC<50>(corriente requerida para que el 50 % de los animales muestren comportamiento de crisis generalizada) ± error estándar.

[0213] Los efectos de los compuestos de prueba también se calcularon como cambio porcentual en CC<50>del grupo de control del vehículo.

[0214] La diferencia significativa entre los animales tratados con fármacos y los controles se evaluó según Litchfield y Wilcoxon (1949).

[0215] Resultados

[0216] La Figura 2 y la Tabla 2 describen los datos producidos en este experimento.

[0217] En el grupo de vehículos, el valor CC<50>calculado fue 23.7 mA.

[0218] En el grupo tratado con diazepam (2.5 mg/kg), administrado i.p.30 minutos antes de la prueba, el valor CC<50>fue 130.0 mA. Este resultado fue estadísticamente significativo (p<0.001) en comparación con el control del vehículo.

[0219] El compuesto de prueba, administrado i.p. 15-60 minutos antes de la prueba, produjo un valor CC<50>estadísticamente significativo comparado con el vehículo a 1, 5, 20, 50 y 100 mg/kg, lo que sugiere que este compuesto exhibe propiedades anticonvulsivas.

[0220] A 200 mg/kg, el Compuesto I produjo un claro aumento del umbral de crisis generalizada en comparación con el vehículo, con CC<50>> 300 mA; no se calculó un valor exacto como una convulsión tónica de las extremidades posteriores “+” ya que no se observó una convulsión tónica de las extremidades traseras en los 12 animales evaluados. Aunque no se determinó CC<50>, 200 mg/kg mostraron un claro aumento en el umbral de crisis generalizada en el MEST.

[0221] Estos datos indican que este compuesto tendrá beneficios terapéuticos.

[0222] Tabla 2: Evaluación del efecto del Compuesto I en la prueba MEST

[0224]

[0226] Conclusiones

[0227] Estos datos producidos utilizando el modelo MEST demuestran un efecto terapéutico para el compuesto de Fórmula I, con CC<50>aumentando en todas las dosis en comparación con el control del vehículo.

[0228] Estos datos son importantes porque aportan evidencia hasta ahora desconocida de que este nuevo resorcinol puede tener valor terapéutico.

[0229] Claramente, el compuesto produjo un aumento relacionado con la dosis en MEST, lo que sugiere que este compuesto exhibe propiedades anticonvulsivas. Se observaron efectos significativos en comparación con el vehículo.

[0230] Ejemplo 4: Evaluación del nuevo resorcinol para la actividad anticonvulsiva mediante la prueba de crisis generalizada audiogénica DBA/2 en ratones

[0231] La prueba de crisis generalizada DBA/2, que detecta la actividad anticonvulsiva, sigue la descrita por Dürmüller et al. (NeuroReport, vol.4, núm.6, páginas 683-686, 1993).

[0232] Métodos

[0233] Detalles del estudio:

[0234] Se incluyeron en el experimento 60 ratones machos DBA/2 (de 3-4 semanas de edad) (rango de peso de 8 a 11 g al comienzo del experimento). Los animales se aclimataron a las instalaciones de prueba durante 1 día después del parto y se alojaron aleatoriamente en grupos de 5 en jaulas de macrolon sobre lecho de madera con libre acceso a comida y agua.

[0235] El animalario se mantuvo bajo iluminación artificial (12 horas) entre las 7:00 y las 19:00 horas en una temperatura ambiente controlada de 22 ± 2 °C y una humedad relativa entre 30-70 %.

[0236] Los ratones fueron transferidos individualmente (a intervalos de 3 a 5 minutos) desde la sala de preparación a una sala experimental adyacente y se midió la temperatura corporal utilizando un termómetro rectal. Inmediatamente después fueron colocados en un frasco de plexiglás (Diámetro=40 cm; Altura=35 cm) montado con un timbre eléctrico. Al activar la campana, se midieron las ocurrencias y latencias de ataques de carrera salvaje, crisis generalizadas clónicas y tónicas. También se registraron muertes. La campana se activaba hasta que se producía una crisis generalizada tónica o durante un máximo de 60 segundos.

[0237] El experimento incluyó 6 grupos (se estudiaron 10 ratones por grupo). Los experimentadores no tenían conocimiento de los grupos de tratamiento.

[0238] La sustancia de prueba se evaluó en 4 dosis, administradas i.p. (10 ml/kg) 30 o 60 minutos antes de la prueba y comparado con un grupo control con vehículo. Las dosis y los tiempos de pretratamiento se basaron en datos farmacocinéticos previos.

[0239] Tabla 3: Programa de tratamiento

[0241]

[0244] Compuestos de prueba:

[0245] Compuesto de prueba: Compuesto I disuelto en 5 % de etanol, 10 % de Kolliphor HS15, 85 % de solución salina fisiológica.

[0246] Control del vehículo: 5 % etanol, 10 % Kolliphor HS15, 85 % solución salina fisiológica.

[0247] Referencia: Valproato (180 mg/kg), disuelto en 5 % de etanol, 10 % de Kolliphor HS15, 85 % de solución salina fisiológica.

[0248] Análisis estadístico

[0249] Se probó la normalidad de los datos utilizando d'Agostino-Pearson y se encontró que no seguían una distribución normal. No se identificaron ni eliminaron valores atípicos estadísticos porque no se identificaron valores atípicos de comportamiento.

[0250] Los datos cuantitativos (latencias) con la sustancia de prueba se analizaron comparando los grupos tratados con el control del vehículo utilizando la prueba de Kruskal-Wallis seguida de la prueba de comparaciones múltiples de Dunn. Los datos cuantitativos con la sustancia de referencia se analizaron mediante la prueba U de Mann-Whitney.

[0251] Los datos cuánticos (frecuencias) se analizaron comparando los grupos tratados con el control del vehículo utilizando pruebas de probabilidad exacta de Fisher.

[0252] Resultados

[0253] Las figuras 3-8 y las tablas 4-7 describen los datos producidos en este experimento.

[0254] En cuanto al control negativo del experimento, en controles de vehículo se administró i.p.30 minutos antes de la prueba, todos los ratones mostraron convulsiones de carrera salvaje (ver Figura 3, columna más a la izquierda al 100 %), clónicas (la Figura 4 muestra el 100 %) y tónicas (Figura 6). De los 10 ratones examinados, 4 murieron (Figura 8). La latencia media hasta la carrera salvaje fue de 3.3 s (RIC 2.7-4.0) (Tabla 4), la latencia media hasta la convulsión clónica fue de 6.6 s (IQR 6.1-7.7) (Tabla 5) y la latencia media hasta la convulsión tónica fue de 10.7 s (RIC 9.6-12.1) (Tabla 6).

[0255] En cuanto al control positivo del experimento, valproato (180 mg/kg), administrado por vía i.p.30 minutos antes de la prueba, se suprimió la carrera salvaje (ver Figura 3, segunda columna izquierda al 0 %), las convulsiones clónicas (la Figura 4 muestra 0 %) y las convulsiones tónicas (Figura 6), en comparación con los controles del vehículo (-100 %, p<0.001) para cada parámetro. El valproato aumentó significativamente las latencias correspondientes (+1718 %, 809 % y 461 %, respectivamente, p<0.001 para cada parámetro) (Tablas 4-6), en comparación con los controles del vehículo. No se observaron muertes en animales tratados con valproato (Figura 8 y Tabla 9). No se observaron signos adversos en los animales tratados con valproato.

[0256] Cuatro ratones de cada grupo, a los que se les administró el Compuesto I en dosis de 100 y 200 mg/kg, presentaron una temperatura rectal inferior a 35.0 °C. Estos ratones fueron excluidos de todos los análisis. Se observó temblor en 5 ratones tratados con 100 mg/kg y 3 ratones tratados con 200 mg/kg.

[0257] El Compuesto I a 50, 100 y 200 mg/kg disminuyó significativamente el número de ratones que mostraron carrera salvaje (-50 %, p<0.05; -100 %, p<0.001 y -80 %, p<0.01, respectivamente), ver Figura 3.

[0258] Se observó un efecto principal estadísticamente significativo de la dosis del Compuesto I sobre la latencia hasta la carrera salvaje en comparación con el vehículo (p < 0.001, consulte la Tabla 4). La prueba de comparaciones múltiples de Dunn mostró que el Compuesto I a 50, 100 y 200 mg/kg aumentó significativamente la latencia hasta la carrera salvaje en comparación con el vehículo (rango medio -19.10, p < 0.01; -26.55, p < 0.001 y -23.22, p < 0.001, respectivamente).

[0259] El Compuesto I a 50, 100 y 200 mg/kg, disminuyó significativamente el número de ratones que mostraron convulsiones clónicas (-60 %, p<0.05; -100 %, p<0.001 y -80 %, p<0.01, respectivamente), ver Figura 4. Se observó un efecto principal estadísticamente significativo de la dosis del Compuesto I sobre la latencia hasta las convulsiones clónicas, en comparación con el vehículo (p < 0.001, Figura 5). La prueba de comparaciones múltiples de Dunn mostró que el Compuesto I a 20, 50, 100 y 200 mg/kg aumentó significativamente la latencia hasta la convulsión clónica en comparación con el vehículo (rango medio -13.10, p < 0.05; -21.20, p < 0.001; -26.70, p < 0.001 y -22.53, p < 0.001, respectivamente).

[0260] Como lo muestra la Figura 6, en todas las dosis, el Compuesto I disminuyó significativamente el número de ratones que mostraron convulsiones tónicas (-60 %, p<0.05 a 20 mg/kg; -100 %, p<0.001 a otras dosis). Se observó un efecto principal estadísticamente significativo de la dosis del Compuesto I sobre la latencia hasta las convulsiones tónicas (Figura 7), en comparación con el vehículo (p < 0.001). La prueba de comparaciones múltiples de Dunn mostró que el Compuesto I a 20, 50, 100 y 200 mg/kg aumentó significativamente la latencia hasta la convulsión tónica en comparación con el vehículo (rango medio -16.20, p < 0.01 a 20 mg/kg; -22.80, p < 0.001 para las últimas tres dosis).

[0261] Como lo evidencian la Figura 8 y la Tabla 7, el Compuesto I no afectó el número de muertes en ninguna dosis.

[0262] Tabla 4: Latencia a la carrera salvaje

[0264]

[0265]

[0267] Tabla 5: Latencia a la convulsión clónica

[0269]

[0271] Tabla 6: Latencia a la extensión tónica

[0272]

[0274] Tabla 7: Porcentaje (%) de muerte

[0277] Conclusiones

[0278] El valproato mostró actividad anticonvulsiva en este modelo, por lo tanto el experimento se consideró válido. Los resultados muestran la presencia de actividad anticonvulsiva del Compuesto I en el rango de dosis de 20 a 200 mg/kg, i.p. en la prueba de crisis generalizada audiogénica en ratones DBA/2.

[0279] Ni el valproato ni el Compuesto I provocaron cambios significativos en el número de muertes, lo que proporciona evidencia de la seguridad del Compuesto I.

[0280] Ejemplo 5: Evaluación del nuevo resorcinol para la actividad anticonvulsiva utilizando la prueba psicomotora de 6 Hz en ratón

[0281] La prueba psicomotora de 6 Hz, que detecta la actividad anticonvulsiva, sigue la descrita por Brown et al. (J. Pharmacol. Exp. Allí.107, 273-283, 1953).

[0282] Métodos

[0283] Detalles del estudio:

[0284] Ratones suizos RjOrl machos: de 5 semanas de edad, con un peso de 28 a 38 g al comienzo del experimento. Los animales se aclimataron a las instalaciones de prueba durante al menos 5 días después del parto y se alojaron aleatoriamente en grupos de 3-4 en jaulas de macrolon sobre lecho de madera con libre acceso a comida y agua.

[0285] El animalario se mantuvo bajo iluminación artificial (12 horas) entre las 7:00 y las 19:00 horas en una temperatura ambiente controlada de 22 ± 2 °C y una humedad relativa entre 30-70 %.

[0286] Antes de la estimulación transcorneal, se aplicó una gota de solución de tetracaína (2 %) en cada ojo del ratón para anestesia local. Entre 1 y 10 minutos después, en el tiempo de pretratamiento especificado para el compuesto de prueba, se administró a los ratones una corriente rectangular (44 mA, pulso rectangular: (ancho de pulso de 0.2 ms, duración de 3 s, 6 Hz) a través de electrodos corneales conectados a un generador de choque de corriente constante.

[0287] El número de crisis generalizadas reflejadas en el clonus de las extremidades anteriores se registró inmediatamente después de la administración actual. El clonus de las extremidades anteriores se calificó como ausente (0 = sin clonus de las extremidades anteriores), leve (1 = clonus con una extremidad anterior) y fuerte (2 = clonus con ambas extremidades anteriores).

[0288] Se estudiaron 15 ratones por grupo. Los experimentadores no tenían conocimiento del tratamiento. Las jaulas fueron asignadas aleatoriamente a un código de tratamiento, cada uno designando un grupo de tratamiento. El Compuesto I se administró por vía intraperitoneal a 20 y 50 mg/kg, 30 minutos antes de la prueba, y a 100 y 200 mg/kg, 60 minutos antes de la prueba y se compararon con el control del vehículo (5 % de etanol, 10 % de Kolliphor EL, 85 % de solución salina fisiológica).

[0289] Se utilizó valproato (300 mg/kg ip), administrado 30 minutos antes de la prueba, como sustancia de referencia y se comparó con el control del vehículo (5 % de etanol, 10 % de Kolliphor HS15, 85 % de solución salina fisiológica).

[0290] Tabla 8: Programa de tratamiento

[0292]

[0295] Compuestos de prueba:

[0296] Compuesto de prueba: Compuesto I disuelto en 5 % de etanol, 10 % de Kolliphor HS15, 85 % de solución salina fisiológica.

[0297] Control del vehículo: 5 % etanol, 10 % Kolliphor HS15, 85 % solución salina fisiológica.

[0298] Referencia: Valproato (300 mg/kg), disuelto en 5 % de etanol, 10 % de Kolliphor HS15, 85 % de solución salina fisiológica.

[0299] Análisis estadístico:

[0300] Se asumió que los datos no tenían una distribución normal según los datos de validación, por lo tanto, se utilizaron pruebas no paramétricas. Los datos cuantitativos (puntuaciones) con la sustancia de prueba se analizaron comparando los grupos tratados con el control del vehículo correspondiente utilizando la prueba de Kruskal-Wallis con la prueba de comparaciones múltiples de Dunn cuando la prueba de Kruskal-Wallis fue significativa. Los datos cuantitativos con la sustancia de referencia se analizaron mediante la prueba U de Mann-Whitney.

[0301] Resultados

[0302] La Figura 9 y la Tabla 9 describen los datos producidos en este experimento.

[0303] En cuanto al control negativo, en los controles del vehículo se administró i.p.30 minutos antes de la prueba, 5 ratones tenían una puntuación de crisis generalizada en las extremidades anteriores de 0, 8 ratones tenían una puntuación de crisis generalizada en las extremidades anteriores de 1 y 2 ratones tenían una puntuación de crisis generalizada en las extremidades anteriores de 2 (ver Figura 9, más a la izquierda).

[0304] En cuanto al control positivo, valproato (300 mg/kg), administrado por vía i.p.30 minutos antes de la prueba, disminuyó significativamente la puntuación media de crisis generalizada en las extremidades anteriores, en comparación con el control del vehículo (-88 %, p < 0.001) (Figura 9, segunda a la izquierda). De los 15 ratones examinados, uno presentó una ligera sedación.

[0305] Dos ratones del grupo del Compuesto I 100 mg/kg y 1 ratón del grupo de 200 mg/kg recibieron una dosis incorrecta, por lo que fueron excluidos. De los 14 ratones del grupo tratado con el Compuesto I 200 mg/kg, dos mostraron temblor y todos los ratones mostraron sedación leve (12 ratones) a moderada (2 ratones). De los 13 ratones del grupo de dosis de 100 mg/kg del Compuesto I analizados, dos mostraron una ligera sedación.

[0306] Hubo una diferencia estadísticamente significativa en la prueba de Kruskal-Wallis del puntaje de crisis generalizada en las extremidades anteriores entre todos los grupos de dosis del Compuesto I en comparación con el vehículo (p < 0.01) (ver Tabla 9).

[0307] Compuesto I (100 mg/kg), administrado por vía i.p. 60 minutos antes de la prueba, la puntuación de convulsiones en las extremidades anteriores disminuyó significativamente, en comparación con el control del vehículo (-88 %, p < 0.01) (Figura 9).

[0308] Tabla 9: Efectos del Compuesto I sobre el clonus de las extremidades anteriores

[0310]

[0313] Conclusiones

[0314] Los resultados sugieren la presencia de efectos anticonvulsivos para el Compuesto I a 100 mg/kg i.p. con una tendencia similar a 200 mg/kg en la Prueba de Convulsiones Psicomotoras de 6 Hz (44 mA) en el ratón. Referencias

[0315] Se citan varias publicaciones anteriormente para describir y divulgar más completamente la invención y el estado de la técnica al que pertenece la invención. A continuación se proporcionan citas completas de estas referencias.

[0316] Durairaj 2005. "Resorcinol Structure and Physical Properties." Resorcinol. Springer, Berlin, Heidelberg. https://doi.org/10.1007/3-540-28090-1_1.

Claims (12)

1. REIVINDICACIONES

1. Un compuesto de fórmula (I), o una sal o un estereoisómero del mismo:

2. El compuesto de fórmula (I) de la reivindicación 1, en el que el compuesto es (1’R,2’R,4’S)-4-bromo-5’-metil-2’-(prop-1-en-2-il)-1’,2’,3’,4’-tetrahidro-[1,1’-bifenil]-2,4’,6-triol.

3. Una composición farmacéutica que comprende el compuesto de la reivindicación 1 o la reivindicación 2 junto con uno o más ingredientes adicionales seleccionados entre vehículos, diluyentes, excipientes, adyuvantes, rellenos, tampones, aglutinantes, desintegrantes, conservantes, antioxidantes, lubricantes, estabilizantes, solubilizantes, tensioactivos (por ejemplo, agentes humectantes), agentes enmascaradores, agentes colorantes, agentes aromatizantes y agentes edulcorantes.

4. Composición farmacéutica de la reivindicación 3, en la que la composición farmacéutica está en una forma seleccionada entre un líquido, una solución, una suspensión, una emulsión, un jarabe, un electuario, un enjuague bucal, un colirio, un comprimido, un gránulo, un polvo, una pastilla, una gragea, una cápsula, un cachet, una píldora, una ampolla, un bolo, un supositorio, un pesario, una tintura, un gel, una pasta, un ungüento, una crema, una loción, un aceite, una espuma, un espray y un aerosol.

5. El compuesto de la reivindicación 1 o de la reivindicación 2 para su uso como medicamento.

6. El compuesto para uso de la reivindicación 5, en el que el medicamento es un medicamento para tratar la epilepsia.

7. El compuesto para uso de la reivindicación 5 o la reivindicación 6, en el que el medicamento es un medicamento para tratar convulsiones generalizadas, convulsiones generalizadas de inicio focal o convulsiones generalizadas tónico-clónicas.

8. El compuesto de la reivindicación 1 o la reivindicación 2 para su uso en un método de tratamiento.

9. El compuesto para uso de la reivindicación 8, en el que el método de tratamiento es un método para tratar la epilepsia.

10. El compuesto para uso de la reivindicación 8 o la reivindicación 9, en el que el método de tratamiento es un método para tratar una convulsión generalizada, una convulsión generalizadas de inicio focal o una convulsión generalizadas tónico-clónica.

11. Un proceso para la producción de un compuesto de fórmula (I) que comprende las siguientes etapas: i) Hacer reaccionar 5-bromobenceno-1,3-diol con 4-isopropenil-1-metil-ciclohex-2-en-1-ol;

ii) Tratar el compuesto resultante 5-bromo-2-[6-isopropenil-3-metil-ciclohex-2-en-1-il]benceno-1,3-diol con anhídrido acético;

iii) Tratar el compuesto resultante adicionalmente [3-Acetoxi-5-bromo-2-[6-isopropenil-3-metil-ciclohex-2-en-1-il]fenil] acetato con acetato de manganeso dihidrato;

iv) Agregar borohidruro de sodio al compuesto resultante [3-Acetoxi-5-bromo-2-[(1R,6R)-6-isopropenil-3-metil-4-oxo-ciclohex-2-en-1-il]fenil]acetato, seguido de etapas posteriores para producir el compuesto de fórmula (I).

12. Un intermedio formado en el proceso de producción de un compuesto de fórmula (I), en el que el intermedio es: