ES3058194T3 - Crystalline fumarate salt of (s)-[3,4-difluoro-2-(2-fluoro-4-iodophenylamino)phenyl][3-hydroxy-3-(piperidin-2-yl) azetidin-1-yl]-methanone - Google Patents

Abstract

Esta divulgación se refiere a la sal fumarato cristalina de (S)-[3,4-difluoro-2-(2-fluoro-4-yodofenilamino)fenil] [3-hidroxi-3-(piperidin-2-il) azetidin-1-il]-metanona. La divulgación también se refiere a composiciones farmacéuticas que comprenden la sal fumarato cristalina de (S)-[3,4-difluoro-2-(2-fluoro-4-yodofenilamino)fenil] [3-hidroxi-3-(piperidin-2-il) azetidin-1-il]-metanona. La divulgación también se refiere a métodos para el tratamiento del cáncer que comprenden la administración a un paciente que lo necesite de la sal fumarato cristalina de (S)-[3,4-difluoro-2-(2-fluoro-4-yodofenilamino)fenil] [3-hidroxi-3-(piperidin-2-il) azetidin-1-il]-metanona. (Traducción automática con Google Translate, sin valor legal)

Description

[0001] DESCRIPCIÓN

[0002] Sal cristalina de fumarato de (S)-[3,4-difluoro-2-(2-fluoro-4-yodofenilamino)fenil][3-hidroxi-3-(piperidin-2-il)azetidin-1-il]-metanona

[0003] Campo técnico

[0004] La presente divulgación se refiere a la sal cristalina de fumarato de (S)-[3,4-difluoro-2-(2-fluoro-4-yodofenilamino)fenil] [3-hidroxi-3-(piperidin-2-il) azetidin-1-il]-metanona. La divulgación también se refiere a composiciones farmacéuticas que comprenden la sal cristalina de fumarato de (S)-[3,4-difluoro-2-(2-fluoro-4-yodofenilamino)fenil] [3-hidroxi-3-(piperidin-2-il) azetidin-1-il]-metanona. La divulgación también se refiere a la sal cristalina de fumarato de (S)-[3,4-difluoro-2-(2-fluoro-4-yodofenilamino)fenil] [3-hidroxi-3-(piperidin-2-il) azetidin-1-il]-metanona para su uso en el tratamiento del cáncer. La divulgación también se refiere a un proceso para preparar una forma cristalina de la sal de fumarato de (S)-[3,4-difluoro-2-(2-fluoro-4-yodofenilamino)fenil] [3-hidroxi-3-(piperidin-2-il) azetidin-1-il]-metanona.

[0005] Estado de la técnica

[0006] Tradicionalmente, las mejoras significativas en el tratamiento del cáncer se asocian con la identificación de agentes terapéuticos que actúan mediante mecanismos novedosos. Un mecanismo que puede aprovecharse en el tratamiento del cáncer es la modulación de MEK (quinasas MAPK/ERK). La inhibición de MEK representa una estrategia prometedora para el tratamiento de cánceres causados por la señalización aberrante de la vía ERK/MAPK (Solit et al., 2006; Wellbrock et al., 2004). La cascada de transducción de señales MEK-ERK es una vía conservada que regula el crecimiento, la proliferación, la diferenciación y la apoptosis celular en respuesta a factores de crecimiento, citocinas y hormonas. Esta vía opera aguas abajo de Ras, que a menudo se encuentra regulado positivamente o mutado en tumores humanos. MEK es un efector crítico de la función de Ras. La vía ERK/MAPK está regulada positivamente en el 30% de todos los tumores, y se han identificado mutaciones activadoras oncogénicas en K-Ras y B-Raf en el 22% y el 18% de todos los cánceres, respectivamente (Allen et al., 2003; Bamford S, 2004; Davies et al., 2002; Malumbres y Barbacid, 2003). Una gran proporción de cánceres humanos, incluyendo el 66% (B-Raf) de melanomas malignos, 60% (K-Ras) y 4% (B-Raf) de cánceres de páncreas, 50% de cánceres colorrectales (colon, en particular, K-Ras: 30%, B-Raf: 15%), 20% (K-Ras) de cánceres de pulmón, 27% (B-Raf) de cáncer papilar y anaplásico de tiroides, y 10-20% (B-Raf) de cánceres de ovario endometrioides, albergan mutaciones activadoras de Ras y Raf. La inhibición de la vía ERK, y en particular la inhibición de la actividad de la quinasa MEK, resulta en efectos antimetastásicos y antiangiogénicos debido principalmente a una reducción del contacto y la motilidad, así como a la regulación negativa de la expresión del factor de crecimiento endotelial vascular (VEGF). Además, la expresión de MEK o ERK dominantes negativos redujo la capacidad de transformación del mutante Ras, tal como se observó en cultivos celulares y en el crecimiento primario y metastásico de xenoinjertos tumorales humanosin vivo.Por lo tanto, la vía de transducción de señales MEK-ERK es una vía adecuada para dirigir una intervención terapéutica, y los compuestos que reconocen MEK presentan un potencial terapéutico considerable.

[0007] Un compuesto que inhibe específicamente la MEK es la (S)-[3,4-difluoro-2-(2-fluoro-4-yodofenilamino)fenil][3-hidroxi-3-(piperidin-2-il)azetidin-1-il]-metanona (Compuesto I), que tiene la estructura química:

[0010]

[0012] Compuesto I

[0013] El documento WO 2007/044515 describe la síntesis de (S)-[3,4-difluoro-2-(2-fluoro-4-yodofenilamino)fenil] [3-hidroxi-3-(piperidin-2-il) azetidin-1-il]-metanona (Ejemplo 22b, página 231) y también divulga la actividad terapéutica de esta molécula para inhibir, regular y/o modular MEK (Ensayo bioquímico, página 268). El documento WO 2008/076415 A1 también describe la síntesis de (S)-[3,4-difluoro-2-(2-fluoro-4-yodofenilamino)fenil][3-hidroxi-3-(piperidin-2-il)azetidin-1-il]-metanona (Ejemplo 22b, página 402). El compuesto I ha sido aprobado en Estados Unidos, Europa y otros países para el tratamiento del melanoma en combinación con vemurafenib (Zelboraf<®>).

[0014] [0004] Además de la eficacia terapéutica, un desarrollador de fármacos se esfuerza por proporcionar una forma adecuada del agente terapéutico con propiedades apropiadas para el procesamiento, la fabricación, la estabilidad durante el almacenamiento y/o su utilidad como fármaco. Por consiguiente, el descubrimiento de una forma que posea algunas o todas estas propiedades deseadas es importante para el desarrollo de fármacos.

[0015] Los solicitantes han descubierto una forma de sal cristalina del Compuesto I que tiene propiedades adecuadas para su uso en una composición farmacéutica para el tratamiento de enfermedades proliferativas, tales como el cáncer.

[0016] Descripción resumida

[0017] La presente divulgación se refiere a la sal cristalina de fumarato del Compuesto I, tal como se describe en el presente documento. La sal de fumarato del Compuesto I tiene la siguiente estructura y se ha identificado como un hemifumarato:

[0020]

[0022] Por tanto, en un aspecto, la presente invención se refiere a una sal cristalina de fumarato del Compuesto I, en donde el Compuesto I es (S)-[3,4-difluoro-2-(2-fluoro-4-yodofenilamino)fenil][3-hidroxi-3-(piperidin-2-il)azetidin-1-il]-metanona, y en donde la sal cristalina de fumarato del Compuesto I tiene la estructura:

[0025]

[0027] En otro aspecto, la presente invención se refiere a una composición farmacéutica que comprende la sal cristalina de fumarato del Compuesto I y un excipiente farmacéuticamente aceptable.

[0028] En otro aspecto, la presente invención se refiere a la sal cristalina de fumarato del Compuesto I para su uso en el tratamiento del cáncer.

[0029] Las referencias a procedimientos de tratamiento en los párrafos posteriores de esta descripción deben interpretarse como referencias a los compuestos, composiciones farmacéuticas y medicamentos de la presente invención para su uso en un procedimiento de tratamiento del cuerpo humano (o animal) mediante terapia (o para diagnóstico) .

[0030] En otro aspecto, la presente invención se refiere a un proceso para preparar la sal cristalina de fumarato del Compuesto I designada como Forma A, tal como se define en las reivindicaciones adjuntas.

[0031] Breve descripción de las figuras

[0032]

[0033] La Figura 1 muestra el espectro infrarrojo de la sal cristalina de fumarato del Compuesto I, designada como Forma A. La Figura 2 muestra el espectro de RMN de<1>H en DMSO-d<6>de la sal cristalina de fumarato del Compuesto I, designada como Forma A.

[0034] La Figura 3 muestra el espectro de RMN de<13>C en DMSO-d<6>de la sal cristalina de fumarato del Compuesto I, designada como Forma A.

[0035] La Figura 4 muestra el espectro en estado sólido de RMN de<13>C de la sal cristalina de fumarato del Compuesto I, designada como Forma A.

[0036] La Figura 5 muestra el espectro de masas de electrospray positivo para la sal cristalina de fumarato del Compuesto I, designada como Forma A.

[0037] La Figura 6 muestra el espectro de masas de electrospray negativo para la sal cristalina de fumarato del Compuesto I, designada como Forma A.

[0038] La Figura 7 muestra el espectro ultravioleta de la sal cristalina de fumarato del Compuesto I, designada como Forma A, en metanol.

[0039] La Figura 8 muestra la traza de calorimetría de barrido diferencial para la sal cristalina de fumarato del Compuesto I, designada como Forma A.

[0040] La Figura 9 muestra la traza de calorimetría de barrido diferencial para la sal de fumarato del Compuesto I, designada como forma amorfa.

[0041] La Figura 10muestra el difractograma XRPD para la sal cristalina de fumarato del Compuesto I, designada como Forma A.

[0042] La Figura 11 muestra el difractograma XRPD para la sal fumarato del Compuesto I, designada como forma amorfa. La Figura 12 representa la isoterma dinámica de sorción/desorción de humedad para la sal cristalina de fumarato del Compuesto I, designada como Forma A, a 25 °C.

[0043] La Figura 13 representa la isoterma dinámica de sorción/desorción de humedad para la sal de fumarato del Compuesto I, designada como forma amorfa, a 25 °C.

[0044] Descripción detallada

[0045] La presente divulgación se refiere a una sal cristalina de fumarato del Compuesto I. La presente invención también se refiere a nuevas composiciones que comprenden la sal cristalina de fumarato del Compuesto I descrita. Los usos terapéuticos de la sal cristalina de fumarato del Compuesto I, tal como se describe, así como las composiciones terapéuticas que la contienen, representan aspectos separados de la divulgación. Las técnicas utilizadas para caracterizar la sal cristalina de fumarato del Compuesto I se describen en los ejemplos a continuación. Estas técnicas, solas o en combinación, pueden utilizarse para caracterizar la sal cristalina de fumarato del Compuesto I. La sal cristalina de fumarato del Compuesto I también puede caracterizarse por referencia a las figuras descritas.

[0046] Se observó que la sal cristalina de fumarato del Compuesto I es termodinámicamente estable, fue la única forma cristalina identificada tras una extensa experimentación, no es higroscópica y se forma consistentemente durante la fabricación. En cambio, la forma amorfa es no cristalina, higroscópica y se convierte en la Forma A cristalina. Además, al intentar fabricar sales del Compuesto I, solo el fumarato proporcionó una forma cristalina única. Otras sales que se pudieron fabricar fueron amorfas o una mezcla de materiales cristalinos y amorfos.

[0047] Sal cristalina de fumarato del compuesto I

[0048] La presente divulgación se refiere a la sal cristalina de fumarato del Compuesto I. La presente divulgación también se refiere a composiciones farmacéuticas de la sal cristalina de fumarato del Compuesto I. La sal fumarato puede prepararse combinando (S)-[3,4-difluoro-2-(2-fluoro-4-yodofenilamino)fenil][3-hidroxi-3-(piperidin-2-il)azetidin-1-il-metanona (Compuesto I) con ácido fumárico, lo que forma una sal con una estequiometría de Compuesto I:ácido fumárico de 2:1. La sal cristalina de fumarato del Compuesto I también puede denominarse hemifumarato.

[0049] El ácido fumárico tiene la siguiente estructura:

[0052]

[0053] Existen varios nombres para el Compuesto I, incluidos XL518, GDC-0973, [3,4-difluoro-2-(2-fluoro-4-yodoanilino)fenil] {3-hidroxi-3-[(2S)-piperidin-2-il]azetidin-1-il}metanona, cobimetinib y Cotellic<™>.

[0054] El compuesto I puede prepararse según diversas metodologías diferentes, ya sea a escala de gramos (<1 kg) o a escala de kilogramos (>1 kg). Un procedimiento a escala de gramos se describe en el documento WO 2007/044515, que describe la síntesis del Compuesto I (Ejemplo 22b). Alternativamente, el Compuesto I puede prepararse a escala de kilogramos utilizando el procedimiento descrito en el documento WO 2014/059422 y como se proporciona en los ejemplos a continuación.

[0055] La Forma A tiene una solubilidad en agua de 1,6 mg/ml a 25 °C. En condiciones de 25 °C/0 % de humedad relativa (HR) y 25 °C/90 % de HR, la Forma A no mostró cambios en el ensayo, la pureza, la humedad ni la disolución. La DSC mostró que la Forma A es estable hasta el punto de fusión de 239 °C. No se observaron pérdidas de disolvente.

[0056] La Forma A tal como se describe en este documento puede caracterizarse por al menos uno de los siguientes: (i) un espectro de RMN de<1>H en DMSO d<6>sustancialmente tal como se muestra en la Figura 2;

[0057] (ii) un espectro de RMN de<13>C en DMSO d<6>sustancialmente tal como se muestra en la Figura 3;

[0058] (iii) un espectro de RMN de<13>C en estado sólido con tres o más picos seleccionados entre 175,3, 173,6, 117,5, 155,5 y 153,5, ± 0,2 ppm;

[0059] (iv) un espectro de RMN de<13>C en estado sólido sustancialmente tal como se muestra en la Figura 4;

[0060] (v) un patrón de difracción de rayos X en polvo (CuKα λ=1,5418Å) que comprende tres o más valores 2θ seleccionados entre 4,6, 12,1, 13,2, 13,6 y 14,5 ±0,2 °2θ, donde la medición de la forma cristalina se realiza a temperatura ambiente; (vi) un patrón de difracción de rayos X en polvo (XRPD) sustancialmente de acuerdo con el patrón mostrado en la Figura 10; y

[0061] (vii) un termograma de calorimetría diferencial de barrido sustancialmente de acuerdo con la Figura 8.

[0062] En una realización, la Forma A se caracteriza por al menos dos de (i), (ii), (iii), (iv), (v), (vi) o (vii).

[0063] En otra realización, la Forma A se caracteriza por al menos tres de (i), (ii), (iii), (iv), (v), (vi) o (vii).

[0064] En otra realización, la Forma A se caracteriza por al menos cuatro de (i), (ii), (iii), (iv), (v), (vi) o (vii).

[0065] En otra realización, la Forma A se caracteriza por al menos cinco de (i), (ii), (iii), (iv), (v), (vi) o (vii).

[0066] En otra realización, la Forma A se caracteriza por al menos seis de (i), (ii), (iii), (iv), (v), (vi) o (vii).

[0067] En otra realización, la Forma A se caracteriza por todos los (i), (ii), (iii), (iv), (v), (vi) o (vii).

[0068] En una realización, la sal cristalina de fumarato de (S)-[3,4-difluoro-2-(2-fluoro-4-yodofenilamino)fenil] [3-hidroxi-3-(piperidin-2-il) azetidin-1-il-metanona designada como Forma A se caracteriza por uno, dos, tres, cuatro o cinco picos seleccionados entre 175,3, 173,6, 117,5, 155,5 y 153,5, ± 0,2 ppm en el espectro de RMN de<13>C en estado sólido.

[0069] En otra realización, la sal cristalina de fumarato de (S)-[3,4-difluoro-2-(2-fluoro-4-yodofenilamino)fenil] [3-hidroxi-3-(piperidin-2-il) azetidin-1-il-metanona designada como Forma A se caracteriza por uno o más picos seleccionados entre 173,6, 117,5, 155,5 y 153,5, ± 0,2 ppm en el espectro de RMN de<13>C en estado sólido.

[0070] En otra realización, la sal cristalina de fumarato de (S)-[3,4-difluoro-2-(2-fluoro-4-yodofenilamino)fenil] [3-hidroxi-3-(piperidin-2-il) azetidin-1-il-metanona designada como Forma A se caracteriza por uno, dos, tres o cuatro picos seleccionados entre 175,3, 117,5, 155,5 y 153,5 ± 0,2 ppm en el espectro de RMN de<13>C en estado sólido.

[0071] En otra realización, la sal cristalina de fumarato de (S)-[3,4-difluoro-2-(2-fluoro-4-yodofenilamino)fenil] [3-hidroxi-3-(piperidin-2-il) azetidin-1-il-metanona designada como Forma A se caracteriza por uno, dos, tres o cuatro picos seleccionados entre 175,3, 173,6, 155,5 y 153,5 ± 0,2 ppm en el espectro de RMN de<13>C en estado sólido.

[0072] En otra realización, la sal cristalina de fumarato de (S)-[3,4-difluoro-2-(2-fluoro-4-yodofenilamino)fenil] [3-hidroxi-3-(piperidin-2-il) azetidin-1-il-metanona designada como Forma A se caracteriza por uno, dos, tres o cuatro picos seleccionados entre 175,3, 173,6, 117,5 y 153,5 ± 0,2 ppm en el espectro de RMN de<13>C en estado sólido.

[0073] En una realización, la sal cristalina de fumarato de (S)-[3,4-difluoro-2-(2-fluoro-4-yodofenilamino)fenil] [3-hidroxi-3-(piperidin-2-il) azetidin-1-il-metanona designada como Forma A se caracteriza por uno, dos, tres o cuatro picos seleccionados entre 175,3, 173,6, 117,5 y 155,5 ± 0,2 ppm en el espectro de RMN de<13>C en estado sólido.

[0074] En una realización, la sal cristalina de fumarato de (S)-[3,4-difluoro-2-(2-fluoro-4-yodofenilamino)fenil] [3-hidroxi-3-(piperidin-2-il) azetidin-1-il-metanona designada como Forma A se caracteriza por uno, dos, tres, cuatro o cinco picos seleccionados entre 4,6, 12,1, 13,2, 13,6 y 14,5 ± 0,2 °2θ en el patrón de difracción de rayos X (CuKα λ=1,5418Å).

[0075] En otra realización, la sal cristalina de fumarato de (S)-[3,4-difluoro-2-(2-fluoro-4-yodofenilamino)fenil] [3-hidroxi-3-(piperidin-2-il) azetidin-1-il-metanona designada como Forma A se caracteriza por uno, dos, tres o cuatro picos seleccionados entre 12,1, 13,2, 13,6 y 14,5 ± 0,2 °2θ en el patrón de difracción de rayos X (CuKα λ=1,5418Å).

[0076] En otra realización, la sal cristalina de fumarato de (S)-[3,4-difluoro-2-(2-fluoro-4-yodofenilamino)fenil] [3-hidroxi-3-(piperidin-2-il) azetidin-1-il-metanona designada como Forma A se caracteriza por uno, dos, tres o cuatro picos seleccionados ente 4,6, 12,1, 13,6 y 14,5 ± 0,2 °2θ en el patrón de difracción de rayos X (CuKα λ=1,5418Å).

[0077] En otra realización, la sal cristalina de fumarato de (S)-[3,4-difluoro-2-(2-fluoro-4-yodofenilamino)fenil] [3-hidroxi-3-(piperidin-2-il) azetidin-1-il-metanona designada como Forma A se caracteriza por uno, dos, tres o cuatro picos seleccionados entre 4,6, 13,6 y 14,5 ± 0,2 °20 en el patrón de difracción de rayos X (CuKα λ=1,5418Å).

[0078] En una realización, la sal cristalina de fumarato de (S)-[3,4-difluoro-2-(2-fluoro-4-yodofenilamino)fenil] [3-hidroxi-3-(piperidin-2-il) azetidin-1-il-metanona designada como Forma A se caracteriza por uno, dos, tres o cuatro picos seleccionados entre 4,6, 12,1, 13,2 y 13,6 ±0,2 °2θ en el patrón de difracción de rayos X (CuKα λ=1,5418Å).

[0079] Otras propiedades en estado sólido que pueden utilizarse para caracterizar la sal cristalina de fumarato de (S)

[0080] [3,4-difluoro-2-(2-fluoro-4-yodofenilamino)fenil] [3-hidroxi-3-(piperidin-2-il) azetidin-1-il-metanona, designada como Forma A, se muestran en las figuras y se describen en los ejemplos a continuación. En una realización, la sal cristalina de fumarato de (S)-[3,4-difluoro-2-(2-fluoro-4-yodofenilamino)fenil] [3-hidroxi-3-(piperidin-2-il) azetidin-1-il-metanona, designada como Forma A, se caracteriza por parámetros de celda unitaria aproximadamente iguales a los siguientes:

[0081] Sistema cristalino: Tetragonal

[0082] Grupo espacial: P43212

[0083] Hábito cristalino: Platos

[0084] Dimensiones de la celda unitaria

[0085] a = 7,8825 Å

[0086] b = 7,8825 Å

[0087] c = 76,846 Å

[0088] α = 90°

[0089] β = 90°

[0091]  = 90°

[0092] Temperatura: 293 K

[0093] Volumen de la celda: 4774,7 Å<3>

[0094] Moléculas por celda unitaria: 8

[0095] Densidad: 1,637 g/cm<3>

[0096] Los parámetros de la celda unitaria de la Forma A se midieron a una temperatura de aproximadamente 25 °C, por ejemplo, temperatura ambiente.

[0097] En otra realización, la divulgación se refiere a la Forma A, tal como se describe en este documento, en cualquiera de los aspectos y/o realizaciones, en forma sustancialmente pura.

[0098] La divulgación también se refiere a un proceso para preparar la sal cristalina de fumarato del Compuesto I designada como Forma A. La preparación, las propiedades del estado sólido y las características de la sal cristalina de fumarato del Compuesto I designada como Forma A se describen en los ejemplos a continuación.

[0099] Composiciones farmacéuticas

[0100] Otro aspecto de esta divulgación se refiere a una composición farmacéutica que comprende la sal cristalina de fumarato del Compuesto I y uno o más excipientes farmacéuticamente aceptables. La cantidad de la sal cristalina de fumarato del Compuesto I puede ser una cantidad terapéuticamente eficaz. Otro aspecto de esta divulgación se refiere a una composición farmacéutica sólida o en dispersión que comprende la sal cristalina de fumarato del Compuesto I, o combinaciones de las mismas, y un excipiente farmacéuticamente aceptable.

[0101] En una realización, la formulación es una formulación en comprimidos. Los comprimidos generalmente se forman a partir del fármaco activo, la carga, el disgregante y el lubricante mediante mezcla, granulación y compresión.

[0102] Las cargas son conocidas en la técnica e incluyen, por ejemplo y sin limitación, azúcares y alcoholes de azúcar, celulósicos y otras cargas. Ejemplos no limitativos de azúcares y alcoholes de azúcar adecuados incluyen dextratos, dextrina, dextrosa, lactosa, maltodextrina, manitol, isomalt, sorbitol, sacarosa, esferas de azúcar, xilitol, fructosa, lactitol, eritritol, maltitol, xilosa, glucosa, manosa, galactosa, maltosa, celobiosa, trehalosa y rafinosa. Ejemplos no limitativos de celulósicos incluyen celulosa microcristalina ("MCC") y MCC silicificada. Ejemplos no limitativos de otras cargas incluyen carbonato de calcio, sulfato de calcio, silicato de calcio, quitina, quitosano, fosfato de calcio dibásico dihidratado, palmitoestearato de glicerilo, aceite vegetal hidrogenado, caolín, silicato de magnesio y aluminio, carbonato de magnesio, óxido de magnesio, polimetacrilatos, cloruro de potasio, celulosa en polvo, almidón pregelatinizado, cloruro de sodio, almidón, talco y fosfato de calcio dibásico y tribásico. En algunos aspectos de la divulgación, la carga es lactosa, MCC, MCC silicificada, fosfato de calcio dibásico, manitol, isomalt, almidón pregelatinizado y combinaciones de las mismas.

[0103] Los disgregantes son conocidos en la técnica. Ejemplos no limitativos incluyen: almidones modificados, tales como el carboximetilalmidón sódico (glicolato sódico de almidón); polivinilpirrolidonas reticuladas, tales como la crospovidona; celulosas modificadas, tales como la croscarmelosa sódica; ácido algínico reticulado; gomas, tales como la goma gellan y la goma xantana; y silicato de calcio. En algunos aspectos de la divulgación, el disgregante es croscarmelosa sódica, crospovidona, glicolato sódico de almidón y combinaciones de los mismos.

[0104] Los lubricantes son conocidos en la técnica. Ejemplos no limitativos incluyen estearato de magnesio, estearato de calcio, ácido esteárico, estearil fumarato de sodio, aceites vegetales hidrogenados, polietilenglicol (4000-6000) y lauril sulfato de sodio. En algunos aspectos de la divulgación, el lubricante es estearato de magnesio, estearil fumarato de sodio y combinaciones de los mismos.

[0105] [0046] En un aspecto de la fabricación de comprimidos de la presente divulgación, la carga, el disgregante y el lubricante se desaglomeran al pasar a través de un tamiz para formar un material de premezcla desaglomerado. Este material de premezcla desaglomerado se combina con un fármaco activo en un aparato de mezcla y se mezcla para formar una premezcla. La premezcla se granula en un aparato de granulación en seco (por ejemplo, mediante granulación, molienda y tamizado) para formar gránulos. La carga, el disgregante y el lubricante están presentes en los gránulos como componentes intragranulares. El disgregante y el lubricante adicionales se desaglomeran al pasar a través de un tamiz para formar un material desaglomerado que se combina con los gránulos en un aparato de mezcla y se mezcla para formar una mezcla final. A partir de la mezcla final se forman comprimidos en un aparato para ello y se forman comprimidos con núcleo. Los comprimidos con núcleo se recubren con una mezcla de recubrimiento en un aparato de recubrimiento pelicular para formar comprimidos recubiertos.

[0107] En el presente documento, intragranular se refiere a un componente que se añade antes de la granulación, de modo que se incorpora el componente a los gránulos. Tal como se utiliza adicionalmente en el presente documento, extragranular se refiere a un componente que se combina con los gránulos antes de la compresión, tal como en una prensa para formar comprimidos.

[0109] En otro proceso de fabricación de comprimidos de la presente divulgación, la carga intragranular y el disgregante intragranular se desaglomeran mediante tamizado y se combinan con un fármaco activo en un aparato de mezcla. A continuación , los componentes se mezclan para formar una premezcla primaria. El lubricante intragranular se desaglomera mediante tamizado y se combina con la premezcla primaria en una aparato de mezcla. A continuación, los componentes se mezclan para formar la premezcla. La premezcla se granula en seco en un aparato granulador mediante granulación, molienda y tamizado para formar gránulos. El disgregante extragranular se desaglomera mediante tamizado y se combina con los gránulos en un aparato de mezcla. A continuación, los componentes se mezclan para formar una mezcla final primaria. El lubricante extragranular se desaglomera mediante tamizado y se combina con la mezcla final primaria en un aparato de mezcla. A continuación, los componentes se mezclan para formar una mezcla final. A partir de la mezcla final se forman comprimidos en un aparato para ello y se forman comprimidos con núcleo. Una mezcla sólida de recubrimiento pelicular se combina con agua y se suspende en un aparato de suspensión para formar la mezcla de recubrimiento pelicular. Los comprimidos con núcleo se recubren con una mezcla de recubrimiento en un aparato de recubrimiento pelicular para formar comprimidos recubiertos.

[0111] Un aspecto particular de la fabricación de la presente divulgación comprende las siguientes etapas de premezclado, granulado/molido y cribado, mezclado final, formación de comprimido y recubrimiento. La premezcla se forma en dos etapas. En una primera etapa, se tamizan la lactosa monohidrato intragranular, la croscarmelosa sódica intragranular y la celulosa microcristalina intragranular para desaglomerarse y se cargan en una mezcladora. La desaglomeración puede realizarse mediante procedimientos conocidos por los expertos en la materia, tal como pasar el material a través de un tamiz de malla de 1,0 mm, utilizando un colador vibratorio o un colador en línea. A continuación, se carga la Forma A de hemifumarato de cobimetinib en la mezcladora, y el contenido de la mezcladora se mezcla a una velocidad de 6 rpm durante 30 minutos. En una segunda etapa, el estearato de magnesio intragranular se tamiza para su desaglomeración a través de un tamiz de 0,5 mm de malla y se carga en la mezcladora y el contenido se mezcla a una velocidad de mezclado de 6 rpm durante 8 minutos para producir la premezcla. En algunos de dichos aspectos, se fabrica un lote de premezcla adecuado para producir 420.000 comprimidos, donde la premezcla comprende 22,982 kg de celulosa microcristalina, 15,322 kg de lactosa monohidrato, 1,008 kg de croscarmelosa sódica y 0,126 kg de estearato de magnesio. La premezcla se granula en seco mediante compactación con rodillos, se muele y se tamiza a través de un tamiz de 1 mm. En algunos de dichos aspectos, para un fármaco activo con un tamaño de partícula D [v, 0,5] inferior a 38 µm, la fuerza de compactación con rodillos se establece en 2 kN/cm y el tamaño de la abertura es de 5 mm. En algunos de otros de dichos aspectos, para un fármaco activo con un tamaño de partícula D [v, 0,5] de al menos 38 µm, la compactación con rodillo se ajusta de 2 kN/cm a 4 kN/cm, y el tamaño de la abertura es de 4 mm a 5 mm. La mezcla final se forma en dos etapas. En una primera etapa, la croscarmelosa sódica extragranular se tamiza a través de un tamiz de 1,0 mm para su desaglomeración, tal como se describió anteriormente, y se combina con el granulado en una mezcladora. El contenido de la mezcladora se mezcla a una velocidad de 6 rpm durante 10 minutos. En una segunda etapa, el estearato de magnesio extragranular se tamiza a través de un tamiz de 0,5 mm para su desaglomeración y se carga en la mezcladora y el contenido se mezcla a 6 rpm durante 8 minutos para formar la mezcla final. En los aspectos en los que se fabrica un lote de mezcla final adecuado para producir 420.000 comprimidos, la cantidad de croscarmelosa sódica extragranular es de 1,008 kg y la de estearato de magnesio extragranular, de 0,63 kg. La mezcla final se comprime en una prensa, tal como una prensa rotatoria para comprimidos, con una fuerza de compresión principal de 14 kN a 19 kN para formar los núcleos de los comprimidos. Los núcleos de los comprimidos se recubren mediante pulverización con una suspensión de recubrimiento utilizando un aparato de recubrimiento en bandeja conocido en la técnica. En algunos de dichos aspectos, en los que se fabrica un lote de mezcla final adecuado para producir 420.000 comprimidos, la suspensión de recubrimiento comprende 0,806 kg de alcohol polivinílico, 0,504 kg de dióxido de titanio, 0,407 kg de Macrogol/PEG 3350, 0,298 kg de talco y una cantidad adecuada de agua purificada para formar la suspensión de recubrimiento. En algunos de otros de dichos aspectos, la composición del recubrimiento es Opadry II Blanco 85F18422. Se pueden preparar lotes distintos a los adecuados para preparar 420.000 comprimidos con las mismas proporciones de ingredientes.

[0113] [0050] Se conocen mezcladoras adecuadas en la técnica e incluyen cualquier aparato empleado habitualmente en la industria farmacéutica para mezclar uniformemente dos o más componentes, incluyendo mezcladoras en forma de V, mezcladoras de doble cono, mezcladoras de bin (contenedores) y mezcladoras de tambor rotatorio. El volumen, el llenado, la velocidad y el tiempo de rotación de la combinación de mezcladoras pueden ser determinados adecuadamente por expertos en la técnica, basándose en experimentos rutinarios, para lograr una mezcla esencialmente homogénea de los componentes. El volumen de la mezcladoa es de manera adecuada de 50 L, 100 L, 200 L, 250 L o superior. La selección del llenado de la mezcladoa permite la convección y el movimiento tridimensional del material, y es de manera adecuada de aproximadamente el 25 %, aproximadamente el 30 %, aproximadamente el 35 %, aproximadamente el 40 %, aproximadamente el 50 %, aproximadamente el 60 % o aproximadamente el 70 %, y en intervalos de los mismos, tales como de aproximadamente el 30 % a aproximadamente el 60 %, de aproximadamente el 45 % a aproximadamente el 65 %, del 32 % al 53 % o del 32 % al 40 %. El tiempo de mezclado es de manera adecuada de 5 min, 10 min, 15 min, 20 min, 30 min, 40 min, 50 min, 60 min o más. La velocidad de rotación es, por ejemplo, de 2 rpm, 3 rpm, 4 rpm, 5 rpm, 6 rpm, 7 rpm, 8 rpm, 9 rpm o 10 rpm.

[0115] Los equipos de granulación, molienda y tamizado en seco son conocidos en la técnica y están disponibles comercialmente de diversos fabricantes, incluyendo Gertis, Fitzpatrick<®>y Fruend -Vector. Dichos equipos generalmente proporcionan un control de la fuerza de compactación de los rodillos, el ancho de la abertura, la velocidad de los rodillos y la velocidad de alimentación. Las superficies de los rodillos pueden ser lisas, moleteadas, o una superficie del rodillo puede ser lisa y la otra superficie del rodillo puede ser moleteada. En cualquiera de los diversos aspectos, la premezcla se carga en una tolva de alimentación de un compactador de rodillos. La compactación de los rodillos se realiza con una fuerza y un tamaño de abertura específicos, y el proceso se ejecuta preferiblemente bajo control de abertura. Las tiras formadas se muelen a través de una malla para producir gránulos. En algunos aspectos de la divulgación, el tamiz forma parte integral del molino. El tamaño adecuado de la abertura es de aproximadamente 2 mm, aproximadamente 3 mm, aproximadamente 4 mm o aproximadamente 5 mm, e intervalos entre ellos, tal como de aproximadamente 2 mm a aproximadamente 5 mm, de aproximadamente 2 mm a aproximadamente 4 mm, de aproximadamente 3 mm a aproximadamente 5 mm o de aproximadamente 4 mm a aproximadamente 5 mm. La fuerza de compactación de los rodillos es de forma adecuada de aproximadamente 1 kN/cm, aproximadamente 2 kN/cm, aproximadamente 3 kN/cm, aproximadamente 4 kN/cm, aproximadamente 5 kN/cm, aproximadamente 6 kN/cm, aproximadamente 7 kN/cm o aproximadamente 8 kN/cm, e intervalos entre ellos, tales como de aproximadamente 1 kN/cm a aproximadamente 8 kN/cm, de aproximadamente 2 kN/cm a aproximadamente 5 kN/cm o de aproximadamente 2 kN/cm a aproximadamente 4 kN/cm. El tamaño del tamiz de molido es de manera adecuada de 0,5 mm, 0,75 mm, 1,0 mm, 1,25 mm, 1,5 mm, 1,75 mm, 2,0 mm, 2,25 mm o 2,5 mm, e intervalos entre ellos, tal como de aproximadamente 0,5 mm a aproximadamente 2,5 mm, de aproximadamente 0,5 mm a aproximadamente 2,0 mm, de aproximadamente 0,5 mm a aproximadamente 1,5 mm, de aproximadamente 0,5 mm a aproximadamente 1,25 mm, de aproximadamente 0,75 mm a aproximadamente 2,5 mm, de aproximadamente 0,75 mm a aproximadamente 2,0 mm, de aproximadamente 0,75 mm a aproximadamente 1,5 mm, y de aproximadamente 0,75 mm a aproximadamente 1,25 mm. En algunos aspectos específicos de la divulgación, se utiliza una tamiz de molido de 1,0 mm.

[0117] Se conocen prensas para compresión adecuadas en la técnica y están disponibles comercialmente, por ejemplo, en Riva-Piccola, Fette, Bosch Packaging Technology, GEA y Natoli Engineering Company. Generalmente, cada comprimido se fabrica prensando los gránulos dentro de una matriz de acero endurecido. La matriz tiene forma de disco con un orificio en su centro. El polvo se comprime en el centro de la matriz mediante dos punzones de acero endurecido que encajan en la parte superior e inferior de la matriz, formando así el comprimido. La compresión del comprimido puede realizarse en dos etapas: la primera etapa, de precompresión, implica apisonar el polvo y compactar ligeramente la mezcla antes de aplicar la fuerza de compresión principal para la formación del comprimido. El comprimido se expulsa de la matriz después de la compresión. En algunos aspectos de la divulgación, la fuerza de compresión es de aproximadamente 5 kN, aproximadamente 6 kN, aproximadamente 7 kN, aproximadamente 8 kN, aproximadamente 9 kN, aproximadamente 10 kN, aproximadamente 11 kN, aproximadamente 12 kN, aproximadamente 13 kN, aproximadamente 14 kN, aproximadamente 15 kN, aproximadamente 16 kN, aproximadamente 17 kN, aproximadamente 18 kN, aproximadamente 19 kN o aproximadamente 20 kN, e intervalos entre ellos, tal como de aproximadamente 5 kN a aproximadamente 20 kN, de aproximadamente 14 kN a aproximadamente 19 kN, de aproximadamente 14 kN a aproximadamente 18 kN, o de aproximadamente 8 kN a aproximadamente 13 kN. En algunos aspectos de la divulgación, se pueden formar comprimidos que comprenden aproximadamente 60 mg del fármaco activo con una fuerza de compresión de aproximadamente 14 kN a aproximadamente 18 kN. En otros aspectos de la divulgación, se pueden formar comprimidos que comprenden aproximadamente 20 mg del fármaco activo con una fuerza de compresión de entre aproximadamente 8 kN y aproximadamente 13 kN.

[0119] En algunos aspectos, el núcleo del comprimido comprende los componentes e intervalos de concentración en % en peso, tal como se indica en la Tabla A.

[0121] Tabla A

[0123]

[0124] En algunos aspectos de la presente divulgación, el núcleo del comprimido comprende los componentes y los intervalos de concentración en % en peso, tal como se indican en la Tabla B, en base a un comprimido que contiene 20 mg del fármaco activo. Para comprimidos con una cantidad distinta a 20 mg del fármaco activo, por ejemplo, 40 mg o 60 mg, se mantienen las proporciones de los diversos componentes descritas a continuación para los comprimidos de 20 mg.

[0125] Tabla B

[0127]

[0129] En algunos aspectos de la presente divulgación, el núcleo del comprimido comprende los componentes e intervalos de concentración en % en peso, tal como se indica en la Tabla C, en base a un comprimido que contiene 20 mg del fármaco activo.

[0130] Tabla C

[0132]

[0134] En algunos otros aspectos de la presente divulgación, los núcleos de los comprimidos comprenden los componentes y concentraciones en % en peso, tal como se indican en la Tabla D en base a un comprimido que contiene 20 mg del fármaco activo.

[0136] TABLA D

[0138]

[0140] En algunos otros aspectos de la presente divulgación, los núcleos de comprimidos recubiertos comprenden los componentes y las concentraciones en % en peso, tal como se indican en la Tabla E, en base a un comprimido que contiene 20 mg del fármaco activo. Los componentes y las concentraciones en % en peso de una composición de recubrimiento pelicular se indican en la Tabla F.

[0142] TABLA E

[0144]

[0145]

[0148] TABLA F

[0151]

[0153] Procedimientos de tratamiento

[0154] Otro aspecto de esta divulgación se refiere a procedimientos para tratar cánceres que comprenden administrar a un sujeto que lo necesita la sal cristalina de fumarato del Compuesto I. En una realización particular, la sal cristalina de fumarato del Compuesto I es la Forma A. La cantidad de la sal cristalina de fumarato del Compuesto I que se administra puede ser una cantidad terapéuticamente eficaz.

[0155] En otro aspecto de esta divulgación, el procedimiento de tratamiento puede practicarse administrando a un paciente que lo necesite una composición farmacéutica que comprende la sal cristalina de fumarato del Compuesto I, tal como se mencionó anteriormente, y un excipiente farmacéuticamente aceptable. Otro aspecto de esta divulgación se refiere a procedimientos para el tratamiento de cánceres, tal como se mencionó anteriormente, donde el cáncer tratado es melanoma (incluido el melanoma con mutación BRAF V600), cáncer de mama (incluido el cáncer de mama triple negativo), cáncer colorrectal (incluido el cáncer colorrectal con mutación KRAS), cáncer de pulmón de células no pequeñas, leucemia mieloide aguda y cáncer de páncreas.

[0156] Los inhibidores de BRAF se han utilizado para tratar el melanoma, y vemurafenib es un inhibidor de BRAF que se utiliza actualmente para el tratamiento de melanoma. Por lo tanto, otro aspecto de esta divulgación se refiere a un procedimiento para tratar el melanoma en un sujeto, comprendiendo el procedimiento administrar al sujeto que necesita el tratamiento una cantidad terapéuticamente eficaz de la sal cristalina de fumarato del Compuesto I, sola o en combinación con vemurafenib. En una realización, la sal cristalina de fumarato del Compuesto I se administra antes, después o simultáneamente con vemurafenib. En otra realización, el melanoma es un melanoma con mutación BRAF V600. En una realización particular, la sal cristalina de fumarato del Compuesto I se administra a un paciente con melanoma irresecable o metastásico con mutación BRAF V600. Otro aspecto de esta divulgación se refiere a un procedimiento para el tratamiento del melanoma con mutación BRAF V600 en un sujeto, comprendiendo el procedimiento administrar al sujeto que necesita el tratamiento una cantidad terapéuticamente eficaz de la sal cristalina de fumarato del Compuesto I, sola o en combinación con vemurafenib. En una realización, la sal cristalina de fumarato del Compuesto I se administra antes, después o simultáneamente con vemurafenib. En una realización particular, la sal cristalina de fumarato del Compuesto I se administra en combinación con Zelboraf<®>(vemurafenib) para el tratamiento de pacientes con melanoma irresecable o metastásico con mutación BRAF V600.

[0157] Los inhibidores de la tirosina quinasa se han utilizado para tratar el cáncer de pulmón de células no pequeñas (CPNM). El gefitinib y el erlotinib son inhibidores de la angiogénesis que reconocen los receptores de un factor de crecimiento epidérmico llamado tirosina quinasa, y que se utilizan actualmente para tratar el CPNM. Otros compuestos, como el MEHD7945A, se encuentran en desarrollo clínico para el tratamiento del cáncer de pulmón de células no pequeñas. Por lo tanto, otro aspecto de la presente divulgación se refiere a un procedimiento para tratar el cáncer de pulmón de células no pequeñas (CPNM) en un sujeto, comprendiendo el procedimiento administrar al sujeto que necesita el tratamiento una cantidad terapéuticamente eficaz de la sal cristalina de fumarato del Compuesto I, opcionalmente en combinación con erlotinib o gefitinib. En otra realización, la combinación se realiza con erlotinib. En otra realización, la combinación se realiza con MEHD7945A.

[0158] Otro aspecto de esta divulgación se refiere a un procedimiento para tratar enfermedades o trastornos asociados con actividades celulares incontroladas, anormales y/o no deseadas que comprende administrar a un sujeto que lo necesita una cantidad terapéuticamente eficaz de la sal cristalina de fumarato del Compuesto I designada como Forma A. Este procedimiento de tratamiento puede practicarse administrando una composición farmacéutica de sal cristalina de fumarato del Compuesto I designada como Forma A.

[0159] [0063] Otro aspecto de esta divulgación se refiere al uso de la sal cristalina de fumarato del Compuesto I, designada como Forma A, según cualquiera de las realizaciones anteriores, para la fabricación de un medicamento para el tratamiento de una enfermedad o trastorno descrito anteriormente. Una composición farmacéutica puede ser cualquier forma farmacéutica que contenga la sal cristalina de fumarato del Compuesto I. La composición farmacéutica puede ser, por ejemplo, un comprimido, una cápsula, una aplicación tópica o transdérmica. Las composiciones farmacéuticas generalmente contienen de aproximadamente el 1 % a aproximadamente el 99 % en peso del compuesto o compuestos activos, o una forma cristalina del compuesto o compuestos activos, y del 99 % al 1 % en peso de uno o más excipientes farmacéuticos adecuados. En un ejemplo, la composición tendrá entre aproximadamente el 5 % y aproximadamente el 75 % en peso del compuesto activo, y el resto serán excipientes farmacéuticos adecuados, tal como se describe más adelante.

[0161] Una cantidad "terapéuticamente eficaz" de la sal cristalina de fumarato del Compuesto I se refiere a una cantidad suficiente para tratar a un paciente con cánceres. Una cantidad terapéuticamente eficaz, según esta divulgación, es una cantidad terapéuticamente útil para el tratamiento o la prevención de las enfermedades y trastornos aquí descritos. La sal cristalina de fumarato del Compuesto I aquí divulgada posee actividad terapéutica para inhibir, regular y/o modular la transducción de señales de las quinasas, en particular, MEK 1/2, tal como se describe en el documento WO 2007/044515.

[0163] La cantidad real requerida para el tratamiento de un paciente en particular dependerá de diversos factores, incluidos la enfermedad a tratar y su gravedad; la composición farmacéutica específica empleada; la edad, el peso corporal, el estado general de salud, el sexo y la dieta del paciente; el modo de administración; el momento de administración; la vía de administración; y la tasa de excreción del compuesto o compuestos activos, o de una forma cristalina del compuesto o compuestos activos, según esta divulgación; la duración del tratamiento; cualquier fármaco utilizado en combinación o simultáneamente con el compuesto específico empleado; y otros factores similares bien conocidos en la medicina. Estos factores se describen en "The Pharmacological Basis of Therapeutics” de Goodman y Gilman, décima edición, A. Gilman, J. Hardman y L. Limbird, eds., McGraw-Hill Press, 155-173, 2001. El o los compuestos activos, o una forma cristalina del o los compuestos activos, según esta divulgación, y las composiciones farmacéuticas que los comprenden, pueden usarse en combinación con agentes anticancerígenos u otros agentes que generalmente se administran a pacientes en tratamiento contra el cáncer. También pueden coformularse con uno o más de dichos agentes en una única composición farmacéutica.

[0165] Dependiendo del tipo de composición farmacéutica, los excipientes farmacéuticamente aceptables pueden seleccionarse entre cualquiera o una combinación de excipientes conocidos en la técnica. La elección de los excipientes farmacéuticamente aceptables depende en parte del procedimiento de administración deseado. Para una composición farmacéutica de esta divulgación, es decir, uno del compuesto o compuestos activos, o una forma cristalina del compuesto o compuestos activos, de esta divulgación, un excipiente debe seleccionarse de manera que mantenga sustancialmente la forma particular del compuesto o compuestos activos, ya sea cristalino o no. En otras palabras, ningún excipiente debe alterar sustancialmente la forma del compuesto o compuestos activos. El vehículo tampoco debe ser incompatible con la forma del compuesto o compuestos activos, tal como produciendo un efecto biológico indeseable o interactuando de forma perjudicial con cualquier otro componente o componentes de la composición farmacéutica.

[0167] Las composiciones farmacéuticas de esta divulgación se pueden preparar mediante procedimientos conocidos en la técnica de formulación farmacéutica, por ejemplo, véase Remington’s Pharmaceutical Sciences, 18.ª edición (Mack Publishing Company, Easton, Pensilvania, 1990). En formas de dosificación sólidas, el Compuesto I se mezcla con al menos un excipiente farmacéuticamente aceptable, tal como citrato de sodio o fosfato dicálcico o (a) otros excipientes, tales como cargas o extensores, como por ejemplo, almidones, lactosa, sacarosa, glucosa, manitol y ácido silícico; (b) aglutinantes, como por ejemplo, derivados de celulosa, almidón, alginatos, gelatina, polivinilpirrolidona, sacarosa y goma arábiga; (c) humectantes, como por ejemplo, glicerol; (d) agentes disgregantes, como por ejemplo, agar-agar, carbonato de calcio, almidón de patata o tapioca, ácido algínico, croscarmelosa sódica, silicatos complejos y carbonato de sodio; (e) retardantes de solución, como por ejemplo parafina; (f) aceleradores de absorción, como por ejemplo, compuestos de amonio cuaternario; (g) agentes humectantes, como por ejemplo, alcohol cetílico, y monoestearato de glicerol, estearato de magnesio y similares; (h) adsorbentes, como por ejemplo, caolín y bentonita; e (i) lubricantes, como por ejemplo, talco, estearato de calcio, estearato de magnesio, polietilenglicoles sólidos, lauril sulfato de sodio o mezclas de los mismos. En el caso de cápsulas, comprimidos y píldoras, las formas farmacéuticas también pueden comprender agentes tampón.

[0169] En las composiciones farmacéuticas de esta divulgación también se pueden utilizar excipientes farmacéuticamente aceptables, comúnmente denominados adyuvantes, conocidos en la técnica de formulación farmacéutica. Estos incluyen, pero sin limitación, agentes conservantes, humectantes, suspensores, edulcorantes, aromatizantes, perfumantes, emulsionantes y dispensadores. La prevención de la acción de los microorganismos se puede garantizar mediante diversos agentes antibacterianos y antifúngicos, por ejemplo, parabenos, clorobutanol, fenol, ácido sórbico, etc. También puede ser deseable incluir agentes isotónicos, por ejemplo, azúcares, cloruro de sodio, y similares. Si se desea, una composición farmacéutica de esta divulgación también puede contener pequeñas cantidades de sustancias auxiliares, tales como agentes humectantes o emulsionantes, agentes tamponantes del pH y antioxidantes, tales como, por ejemplo, ácido cítrico, monolaurato de sorbitán, oleato de trietanolamina e hidroxitolueno butilado.

[0171] Las formas de dosificación sólidas descritas anteriormente pueden prepararse con recubrimientos y cubiertas, tales como recubrimientos entéricos y otros bien conocidos en la técnica. Pueden contener agentes calmantes y pueden ser de tal composición que permite la liberación retardada del compuesto o compuestos activos en una parte específica del tracto intestinal. Ejemplos de composiciones embebidas que pueden utilizarse son sustancias poliméricas y ceras. Los compuestos activos también pueden estar microencapsulada, si procede, con uno o más de los excipientes mencionados anteriormente.

[0172] Las suspensiones, además de los compuestos activos, pueden contener agentes de suspensión, como por ejemplo, alcoholes isoestearílicos etoxilados, polioxietilensorbitol y ésteres de sorbitán, celulosa microcristalina, metahidróxido de aluminio, bentonita, agar-agar y tragacanto, o mezclas de estas sustancias, y similares.

[0173] Las composiciones para administraciones rectales son, por ejemplo, supositorios que pueden prepararse mezclando el o los compuestos activos, o una forma cristalina del o los compuestos activos, con, por ejemplo, excipientes o portadores no irritantes adecuados, tales como manteca de cacao, polietilenglicol o una cera de supositorio, que son sólidos a temperaturas ordinarias pero líquidos a temperatura corporal y, por lo tanto, se funden mientras están en una cavidad corporal adecuada y liberan el componente activo en la misma.

[0174] Dado que el o los compuestos activos, o una forma cristalina del o de los compuestos activos, se conservan durante su preparación, se prefieren las formas dosificación sólidas para la composición farmacéutica de esta divulgación. Las formas de dosificación sólidas para administración oral, que incluyen cápsulas, comprimidos, píldoras, polvos y gránulos, son particularmente preferidas. En dichas formas de dosificación sólidas, el o los compuestos activos se mezclan con al menos un excipiente inerte farmacéuticamente aceptable. La administración del o de los compuestos activos, o una forma cristalina del o de los compuestos activos, en forma pura o en una composición farmacéutica apropiada, puede realizarse mediante cualquiera de los modos de administración aceptados o agentes con utilidades similares. Así, la administración puede ser, por ejemplo, oral, nasal, parenteral (intravenosa, intramuscular o subcutánea), tópica, transdérmica, intravaginal, intravesical, intracistemal o rectal, en forma de dosificación sólidas, semisólidas, en polvo liofilizado o líquidas, tales como, por ejemplo, comprimidos, supositorios, píldoras, cápsulas de gelatina blanda elástica y dura, polvos, soluciones, suspensiones o aerosoles, o similares, preferiblemente en dosis unitarias adecuadas para una administración sencilla de dosis precisas. Una vía de administración preferible es la oral, con una pauta posológica conveniente que se puede ajustar según el grado de gravedad de la enfermedad a tratar.

[0175] Preparación de (S)-[3,4-Difluoro-2-(2-fluoro-4-yodofenilamino)fenil] [3-hidroxi-3-(piperidin-2-il) azetidin-1-il]-metanona (Compuesto I)

[0176] El compuesto I se puede preparar como se describe en el documento WO 2014/059422 y como se representa generalmente en el Esquema 1. La reacción del (3S,5R,8aS)-3-fenil-hexahidro-oxazolo[3,2-a]piridina-carbonitrilo VII disponible comercialmente con el terc-butil-3-oxo-1-azetidincarboxilato VIIa disponible comercialmente en presencia de una base proporciona el compuesto VI. El compuesto VI se trata con un agente reductor de hidruro, tal como el cianoborohidruro de sodio en presencia de ácido, seguido de un tratamiento con hidróxido de sodio acuoso, para proporcionar el compuesto V. La desprotección de V utilizando ácido da el compuesto IV, que se acopla al cloruro de ácido IVa en presencia de una cantidad catalítica de piridina para proporcionar el III. La hidrogenación de III proporciona el derivado de piperidina II. Finalmente, el acoplamiento de II con 2-fluoro-4-yodo anilina IIa proporciona el compuesto deseado.

[0177]

[0179] Procedimientos generales de preparación de formas cristalinas

[0180] Las formas cristalinas pueden prepararse mediante diversos procedimientos, pero sin limitación, por ejemplo, la cristalización o recristalización a partir de una mezcla de disolventes adecuada; la sublimación; el crecimiento a partir de una masa fundida; la transformación a estado sólido a partir de otra fase; la cristalización a partir de un fluido supercrítico; y la pulverización a chorro. Las técnicas para la cristalización o recristalización de formas cristalinas de una mezcla de disolventes incluyen, peros in limitación, por ejemplo, la evaporación del disolvente; la disminución de la temperatura de la mezcla de disolventes; la siembra de cristales de una mezcla de disolventes sobresaturada del compuesto y/o una sal del mismo; la liofilización de la mezcla de disolventes; y la adición de antidisolventes (contradisolventes) a la mezcla de disolventes. Se pueden emplear técnicas de cristalización de alto rendimiento para preparar formas cristalinas, incluidos los polimorfos.

[0181] Los cristales de fármacos, incluidos los polimorfos, los procedimientos de preparación y la caracterización de los cristales de fármacos se describen en Solid-State Chemistry of Drugs, S.R. Byrn, R.R. Pfeiffer y J.G. Stowell, 2.ª edición, SSCI, West Lafayette, Indiana (1999)).

[0182] En una técnica de cristalización que emplea disolvente, el o los disolventes se eligen típicamente en función de uno o más factores, incluyendo, pero sin limitación, la solubilidad del compuesto, la técnica de cristalización utilizada y la presión de vapor del disolvente. Se pueden emplear combinaciones de disolventes. Por ejemplo, el compuesto se puede solubilizar en un primer disolvente para obtener una solución a la que se añade un antidisolvente para disminuir la solubilidad del compuesto y precipitar la formación de cristales. Un antidisolvente es un disolvente en el que un compuesto tiene baja solubilidad.

[0183] [0077] En un procedimiento que se puede utilizar para preparar cristales, la sal de fumarato del Compuesto I puede suspenderse y/o agitarse en un disolvente adecuado para obtener una suspensión, que puede calentarse para promover su disolución. El término "suspensión", tal como se utiliza en el presente documento, se refiere a una solución saturada del compuesto, donde dicha solución puede contener una cantidad adicional de compuesto para obtener una mezcla heterogénea de compuesto y disolvente a una temperatura determinada.

[0184] Se pueden añadir cristales de siembra a cualquier mezcla de cristalización para promover la cristalización. La siembra se puede emplear para controlar el crecimiento de un polimorfo específico y/o para controlar la distribución del tamaño de partícula del producto cristalino. Por consiguiente, el cálculo de la cantidad de semillas necesarias depende del tamaño de la semilla disponible y del tamaño deseado de la partícula promedio del producto, tal como se describe, por ejemplo, en "Programmed Cooling Batch Crystallizers”, J.W. Mullin y J. Nyvlt, Chemical Engineering Science, 1971, 26, 3690377. En general, se necesitan semillas de tamaño pequeño para controlar eficazmente el crecimiento de los cristales en el lote. Las semillas de tamaño pequeño pueden generarse tamizando, moliendo o micronizando cristales grandes, o microcristalizando una solución. Durante la molienda o micronización de cristales, se debe tener cuidado de no cambiar la cristalinidad desde la forma cristalina deseada (es decir, cambiar a una forma amorfa u otra forma polimórfica).

[0185] Una mezcla de cristalización enfriada puede filtrarse al vacío y el producto sólido aislado puede lavarse con un disolvente adecuado, tal como, por ejemplo, un disolvente de recristalización frío. Tras el lavado, el producto puede secarse con purga de nitrógeno para obtener la forma cristalina deseada. El producto puede analizarse mediante una técnica espectroscópica o analítica adecuada, incluyendo, pero sin limitación, calorimetría diferencial de barrido (DSC), difracción de rayos X en polvo (XRPD) y análisis termogravimétrico (TGA), para asegurar la formación de la forma cristalina del compuesto. La forma cristalina resultante puede producirse en una cantidad superior a aproximadamente el 70 % en peso de rendimiento aislado, con respecto al peso del compuesto empleado originalmente en el procedimiento de cristalización, y preferiblemente superior a aproximadamente el 90 % en peso de rendimiento aislado. Opcionalmente, el producto puede desaglomerar moliéndolo o pasándolo a través de una malla.

[0186] Las características y ventajas de esta divulgación podrán ser comprendidas más fácilmente por los expertos en la materia tras la lectura de la siguiente descripción detallada. Cabe destacar que ciertas características de la invención, descritas anteriormente y posteriormente en el contexto de realizaciones separadas, por razones de claridad, también pueden combinarse para formar una única realización. Por el contrario, diversas características de esta divulgación, descritas, por razones de brevedad, en el contexto de una única realización, también pueden combinarse para formar subcombinaciones de las mismas. La divulgación se ilustra con más detalle mediante los siguientes ejemplos, que no deben interpretarse como una limitación del alcance de la divulgación a los procedimientos específicos descritos en ellos.

[0187] Las definiciones aquí establecidas prevalecen sobre las establecidas en cualquier patente, solicitud de patente o publicación de solicitud de patente a la que se haga referencia en este documento. Todas las mediciones están sujetas a error experimental.

[0188] Tal como se usa en este documento, "amorfo" se refiere a una forma sólida de una molécula y/o ion que no es cristalino. Un sólido amorfo no presenta un patrón de difracción de rayos X definido con máximos nítidos.

[0189] Tal como se utiliza en este documento, el término "sustancialmente puro" significa que la Forma A contiene al menos aproximadamente un 90 % en peso, basado en el peso de dicha forma cristalina. El término "al menos aproximadamente un 90 % en peso", si bien no pretende limitar la aplicabilidad de la doctrina de equivalentes al alcance de las reivindicaciones, incluye, pero sin limitación, por ejemplo, aproximadamente un 90 %, aproximadamente un 91 %, aproximadamente un 92 %, aproximadamente un 93 %, aproximadamente un 94 %, aproximadamente un 95 %, aproximadamente un 96 %, aproximadamente un 97 %, aproximadamente un 98 %, aproximadamente un 99 % y aproximadamente un 100 % en peso, basado en el peso de la forma cristalina a la que hace referencia. El resto de la Forma A puede comprender otra(s) forma(s) de la sal fumarato del Compuesto I y/o impurezas de reacción y/o de procesamiento que surgen, por ejemplo, durante la preparación de la forma cristalina. La presencia de impurezas de reacción y/o impurezas de procesamiento puede determinarse mediante técnicas analíticas conocidas en la técnica, tales como, por ejemplo, cromatografía, espectroscopia de resonancia magnética nuclear, espectroscopia de masas y/o espectroscopia infrarroja.

[0190] En otro aspecto, la presente invención se refiere a un proceso para preparar la sal cristalina de fumarato del Compuesto I designada como Forma A, que comprende:

[0191] añadir ácido fumárico disuelto en un disolvente a una mezcla de Compuesto I disuelto en un disolvente para formar la sal cristalina de fumarato del Compuesto I designada como Forma A; y

[0192] recoger los cristales resultantes de la sal cristalina de fumarato del Compuesto I designada como Forma A.

[0193] [0085] En esta realización, los disolventes que se emplean son disolventes polares. Dependiendo de la solubilidad del ácido fumárico y/o del Compuesto I en un disolvente específico, puede ser necesario un calentamiento suave (40-80 °C) para asegurar su completa disolución. Por ejemplo, el ácido fumárico puede disolverse en un disolvente polar prótico, tal como un alcohol (por ejemplo, metanol, etanol, n-propanol o isopropanol, o similar), solo o como una mezcla con uno o más de otros disolventes o con agua. Alternativamente, el ácido fumárico puede disolverse en un disolvente aprótico, tal como tetrahidrofurano, diclorometano, o similar. De forma similar, el Compuesto I puede disolverse en diclorometano o en un disolvente polar, tal como un alcohol (por ejemplo, metanol, etanol, n-propanol, isopropanol o similar), solo o como una mezcla con uno o más de otros disolventes o con agua. A continuación, se añade la solución de ácido fumárico a la solución del Compuesto I y la mezcla resultante se deja reposar hasta la formación de un precipitado. En algunos casos, para acelerar la formación de cristales, la mezcla resultante se enfría o se añade un cristal semilla. En otros casos, se utiliza un antidisolvente, tal como un disolvente de hidrocarburo no polar, tal como el heptano o similar, para acelerar la formación de cristales.

[0194] De este modo, en otro aspecto, la presente invención se refiere a un proceso para preparar la sal cristalina de fumarato del Compuesto I designada como Forma A, que comprende:

[0195] disolver el Compuesto I en un primer disolvente para formar una primera mezcla;

[0196] disolver ácido fumárico en un segundo disolvente para formar una segunda mezcla;

[0197] añadir la primera mezcla a la segunda mezcla con enfriamiento para formar los cristales como un precipitado; y

[0198] recoger los cristales de la sal cristalina de fumarato del Compuesto I designado como Forma A.

[0199] Al igual que en el aspecto anterior, los disolventes que se emplean son disolventes polares. En una realización particular, el primer y el segundo disolvente son el mismo y son una mezcla de isopropanol y agua. En una realización, la proporción de isopropanol a agua es de 9:1. En otra realización, la proporción de isopropanol a agua es de 4:1. En otra realización, la proporción de isopropanol a agua es de 85:15. Normalmente, se utilizan aproximadamente de 7 a 11 equivalentes en peso del primer disolvente por cada equivalente en peso del Compuesto I, y se utilizan de 2,0 a 3,0 equivalentes en peso del segundo disolvente por cada equivalente en peso de ácido fumárico. Más concretamente, se utilizan aproximadamente de 8 a 10 equivalentes en peso del primer disolvente por cada equivalente en peso del Compuesto I, y se utilizan de 2,4 a 2,7 equivalentes en peso del segundo disolvente por cada equivalente en peso de ácido fumárico.

[0200] Una molécula de ácido fumárico forma una sal con dos moléculas del Compuesto I para formar la sal de hemifumarato del Compuesto I. Por lo tanto, se utilizan aproximadamente 0,5 equivalentes de ácido fumárico por cada equivalente del Compuesto I. Normalmente, se utilizan de 0,51 a 0,53 equivalentes por cada equivalente del Compuesto I.

[0201] En un ejemplo típico , antes de añadir el ácido fumárico, el Compuesto I disuelto en el primer disolvente se filtra, por ejemplo, a través de carbón activado. A continuación, el ácido fumárico disuelto en el segundo disolvente se añade lentamente a la solución del Compuesto I en la primera solución, calentando suavemente a una temperatura de aproximadamente 40-90 °C; más preferiblemente, de 60-85 °C; y aún más preferiblemente, de 75-80 °C. En algunos casos, se pueden añadir cristales de siembra a la mezcla del Compuesto I y el ácido fumárico en el disolvente de propanol/agua. Para completar el proceso de cristalización, la mezcla se puede enfriar a aproximadamente 20 °C. Los cristales resultantes se aíslan por filtración.

[0202] En un aspecto adicional, la divulgación se refiere a un proceso para preparar la sal cristalina de fumarato del Compuesto I designada como Forma A, que comprende:

[0203] añadir ácido fumárico disuelto en un disolvente a una mezcla de Compuesto I disuelto en un disolvente para formar la sal cristalina de fumarato del Compuesto I designada como Forma A como un precipitado.

[0204] En una realización de este aspecto, el proceso comprende además añadir cristales semilla de la sal de fumarato del Compuesto I designado como Forma A a la mezcla.

[0205] En una realización adicional, la invención se refiere a un proceso para preparar la sal cristalina de fumarato del Compuesto I, designada como Forma A, que comprende disolver la forma amorfa del Compuesto I en un disolvente con calentamiento suave a 65-80 °C y, a continuación, se deja enfriar la mezcla resultante hasta la formación de cristales. En una realización, se pueden añadir cristales semilla a la mezcla. En otra realización, la mezcla se puede enfriar a aproximadamente 20 °C. Los cristales resultantes se aíslan posteriormente por filtración.

[0206] Los ejemplos y preparaciones que se presentan a continuación se proporcionan para que los expertos en la materia comprendan y pongan en práctica la presente invención con mayor claridad. No deben considerarse limitativos del alcance de la invención, sino meramente ilustrativos y representativos de la misma.

[0207] Ejemplo 1

[0208] Síntesis de éster terc -butílico del ácido 3-((3S,5R,8aS)-5-ciano-3-fenil-hexahidro-oxazolo[3,2-a]piridin-5-il)-3-hidroxi-azetidina-1-carboxílico

[0209]

[0210]

[0213] Una mezcla de (3S,5R,8aS)-3-fenil-hexahidro-oxazolo [3,2-a]piridina-carbonitrilo (20,0 g, 87,6 mmol, 1,0 eq.) y dimetiltetrahidropirimidona (DMPU, 11,3 g, 87,6 mmol, 1,0 eq.) en THF (95,1 mL) se agitó durante 10 min hasta obtener una solución transparente. A continuación, la mezcla se enfrió a una temperatura de -70 a -80 °C y se añadió diisopropilamida de litio (solución al 28 % en heptano, THF y etilbenceno) (35,2 g, 92 mmol, 1,05 eq.) durante 30 min, manteniendo la temperatura interna entre -70 y -80 °C. Tras completar la adición, la mezcla se agitó a una temperatura de -70 a -80 °C durante 2 h más, y posteriormente se dosificó una solución de ésterterc-butílico del ácido 3-oxoazetidina-1-carboxílico (16,2 g, 94,6 mmol, 1,08 eq.) en THF (16,4 g) durante 30 min, manteniendo la temperatura interna entre -70 y -80 °C. Tras completar la dosificación, la mezcla de reacción se agitó a una temperatura de -70 a -80 °C durante 1 h.

[0214] En un matraz aparte, se preparó una solución de cloruro de sodio (10,3 g), agua desionizada (103,0 g) y ácido acético (5,29 g, 87,6 mmol, 1,0 eq.) y se enfrió a 0 °C. La mezcla de reacción se dosificó sobre la mezcla desactivada durante 30 min, manteniendo la temperatura interna por debajo de 10 °C. El matraz de la mezcla de reacción se enjuagó con THF (26,7 g) y el enjuague se combinó con la mezcla desactivada. Tras agitar vigorosamente durante 20 min a 5 °C, se detuvo la agitación y se dejó que las capas se separaran. Se descartó la fase acuosa inferior. Se añadieron acetato de etilo (61,8 g) y agua desionizada (68,5 g) a la fase orgánica. Tras agitar vigorosamente a 5 °C durante 10 min, se detuvo la agitación, se dejó que las capas se separaran y se descartó la fase acuosa inferior. El procedimiento de lavado se repitió una vez con agua desionizada (68,5 g).

[0215] La fase orgánica se concentró a presión reducida (temperatura de la camisa de aproximadamente 40-45 °C, presión = 200-180 mbar) hasta recoger un volumen total de aproximadamente 120 ml de destilado, obteniéndose una solución amarillenta. Se liberó el vacío y se añadió heptano ( 102,0 g) durante 10 min. Se continuó la destilación a presión reducida (temperatura de la camisa de aproximadamente 35-40 °C, presión = 250-110 mbar) añadiendo heptano (177 g) a una velocidad tal que el volumen residual se mantuvo constante. Tras 10 min de destilación, se obtuvo una suspensión espesa y agitable. Se liberó el vacío y se añadió isopropanol (10,2 g) durante 15 min a 35 °C. La suspensión se calentó a 45 °C y se agitó durante 30 min. Posteriormente, la suspensión se enfrió a 0 °C durante 2 h y se mantuvo a 0 °C durante 1 h. La suspensión se filtró sobre un filtro de vidrio. El matraz y la torta de filtración se enjuagaron con heptano preenfriado (aproximadamente a 5 °C) (46,6 g), y la torta húmeda se secó durante la noche a 40 °C a presión reducida hasta peso constante, obteniéndose el compuesto del título en forma de cristales ligeramente beige. Pureza por HPLC: 91,9 % de área. Punto de fusión (DSC): pico extrapolado: 151,80 °C. RMN de<1>H (600 MHz, CDCl<3>): δ 7,30 - 7,50 (m, 5 H), 4,17 - 4,27 (m, 3 H), 3,94 - 4,01 (m, 2 H), 4,11 - 4,1 (m, 2 H), 4,09 (d, 1 H), 3,95 (d, 1 H), 3,87 (dd, 1 H), 3,76 (dd, 1 H), 3,54 - 3,70 (br, 1 H), 2,85 - 3,03 (a, 1 H), 2,18 - 2,25 (m, 1 H), 2,12 (br, 1 H), 1,97 - 2,04 (m, 1 H), 1,85 - 1,94 (m, 1 H), 1,61 - 1,79 (m, 3 H), 1,41 (s, 9 H). MS (EI): m/z = 400,48 ([M+H]<+>, 100%).

[0216] Ejemplo 2

[0217] Síntesis de éster terc-butílico del ácido 3-hidroxi-3-[(S)-1-((S)-2-hidroxi-1-fenil-etil)-piperidin-2-il]azetidina-1-carboxílico

[0218]

[0221]

[0223] [0099] Una mezcla de éster terc-butílico del ácido 3-((3S,5R,8aS)-5-ciano-3-fenil-hexahidro-oxazolo[3,2-a]piridin-5-il)-3-hidroxi-azetidina-1-carboxílico(12,0 g, 30,0 mmol, 1,0 eq.) y cianoborohidruro de sodio (3,18 g, 50,6 mmol, 1,68 eq.) en EtOH (70 mL) se calentó a 30 °C y se añadió lentamente en 2 h a una mezcla caliente (70 °C) de ácido acético (3,63 ml, 63,5 mmol, 2,1 eq.) en EtOH (20 mL). La mezcla resultante se agitó posteriormente durante otras 3 h a una temperatura de 70 a 75 °C. Tras completar la reacción, la mezcla se enfrió a 23 °C y se dosificó lentamente durante 30 min en una mezcla de tolueno (100 mL) y NaOH acuoso (60 g, 10 % p/p) y se agitó durante 15 min. El matraz de reacción se enjuagó con la mezcla desactivada. Se separaron las fases y la fase orgánica se lavó con tolueno (30 mL). Las fases orgánicas combinadas se concentraron al vacío (200-85 mbar a una temperatura de la camisa de 35-40 °C) hasta obtener 80 mL (70,82 g) de una solución de producto amarillenta. Pureza por HPLC: 97,6 % de área.

[0224] Para fines analíticos, la solución del producto se concentró completamente en el rotavapor, se trató con EtOH y se volvió a concentrar completamente, obteniéndose 19,2 g de un producto espumoso. El residuo se disolvió en una mezcla de acetato de etilo (30 mL) y MeOH (15 mL) y se purificó mediante cromatografía ultrarrápida sobre 120 g de gel de sílice, utilizando acetato de etilo como eluyente. Las fracciones 3 a 5 de 6 fracciones de 100 mL cada una se combinaron y se concentraron completamente al vacío en el rotavapor, obteniéndose 14,6 g de una espuma incolora. Este residuo se disolvió nuevamente en un mínimo de una mezcla de heptano/acetato de etilo 2:1 (v/v) y se purificó mediante cromatografía ultrarrápida sobre 190 g de gel de sílice utilizando heptano/acetato de etilo 2:1 (v/v) como eluyente. Tras unforerunde 700 mL, se combinaron diez fracciones posteriores (800 mL en total), se evaporaron completamente en el rotavapor al vacío (temperatura del baño: 35 °C, presión ≥ 20 mbar) y el residuo se secó durante la noche a 35 °C y al vacío hasta peso constante, obteniéndose el compuesto del título como un sólido incoloro. Pf. (DSC): pico extrapolado: 220,9 °C (fusión acompañada de descomposición exotérmica). RMN de<1>H (600 MHz, CDCl<3>)<:>δ 7,38 - 7,41 (m, 2 H), 7,34 - 7,38 (m, 2 H), 7,27 - 7,30 (m, 1 H), 4,28 - 4,50 (br, 1 H), 4,19 (dd, 1 H), 4,11 - 4,1 (m, 2 H), 4,09 (d, 1 H), 3,95 (d, 1 H), 3,87 (dd, 1 H), 3,83 (t, 1 H), 3,08 - 3,16 (m, 1 H), 2,85 (ddd, 1 H), 2,57 (ddd, 1 H), 1,76 - 1,84 (m, 1 H), 1,68 - 1,75 (m, 1 H), 1,53 - 1,58 (m, 1 H), 1,41 - 1,48 (bs, 9 H), 1,31 - 1,41 (m, 2 H), 1,21 - 1,31 (m, 2 H). MS (EI):m/z =377,24 ([M+H]<+>, 100%). EA para C<21>H<32>N<2>O<4>: calc.: C 66,99, H 8,57, N 7,44; encontrado C 67,38, H 8,50, N 7,29.

[0225] Ejemplo 3

[0226] Síntesis de diclorhidrato de 3-[(S)-1-((S)-2-hidroxi-1-fenil-etil)-piperidin-2-il]-azetidin-3-ol

[0227]

[0230]

[0233] Una solución de éster terc-butílico del ácido 3-hidroxi-3-[(S)-1-((S)-2-hidroxi-1-fenil-etil)-piperidin-2-il]azetidina-1-carboxílico (69,8 g, 29,6 mmol, 1,0 eq.) en tolueno se trató a 23-27 °C durante 12 min con una mezcla de agua (30,1 g) y HCl (37 %, 7,22 g, 73,3 mmol, 2,5 eq.) y se agitó durante 10 min. La mezcla bifásica resultante se calentó a 50 °C durante 30 min y se mantuvo en agitación durante 4 h a 50 °C. Tras la conversión completa, la mezcla se enfrió a temperatura ambiente y se dejó que las fases se separaran. La fase acuosa se lavó con tolueno (36 mL) y se dejó que las fases se separaran, obteniéndose 44,2 g de una solución acuosa de producto amarillenta. Pureza por HPLC: 96,3 % de área.

[0234] Para fines analíticos, la solución del producto se concentró completamente en el rotavapor (temperatura del baño: 45 °C). El residuo oleoso amarillo se disolvió en MeOH (190 ml) y se concentró completamente de nuevo en el rotavapor y al vacío. El residuo se recogió en un mínimo de mezcla de MeOH/acetato de etilo 1:1 (v/v) y se purificó mediante cromatografía ultrarrápida sobre gel de sílice (150 g) utilizando una mezcla de MeOH/acetato de etilo 1:1 (v/v) como eluyente. Se tomó unforerunde 400 ml y se descartó, y las fracciones subsiguientes (1,5 L) se combinaron y se concentraron completamente en el rotavapor al vacío (temperatura del baño: 40 °C, presión ≥20 mbar), obteniendo un aceite amarillo que se disolvió en MeOH (20 ml). El aceite se añadió gota a gota a temperatura ambiente a acetato de etilo (80 ml), tras lo cual precipitó el producto. Los sólidos se filtraron y se enjuagaron con acetato de etilo (30 ml). El secado al vacío durante la noche a 30 °C hasta peso constante produjo el compuesto del título (22,0 g) como un sólido incoloro. Punto de fusión (DSC): T<inicial:>114,2 °C; pico extrapolado: 123,4 °C. RMN de<1>H (600 MHz, DMSO-d6

): δ 9,50 - 9,64 (br, 1 H), 8,91 - 9,03 (br, 1 H), 7,78 (s, 1 H), 7,62 - 7,56 (m, 2 H), 7,41 - 7,52 (m, 3 H), 6,03 (bs, 1 H), 4,56 - 4,67 (m, 1 H), 4,45 (dd, 1 H), 4,25 - 4,33 (m, 2 H), 4,23 (dd, 1 H), 4,18 (dd, 1 H), 3,95 - 4,05 (m, 1 H), 3,83 (dd, 1 H), 3,45 - 3,54 (m, 1 H), 3,26 - 3,40 (m, 1 H), 1,67 - 1,86 (m, 4 H), 1,55 - 1,65 (m, 1 H), 1,37 - 1,51 (m, 1 H). MS (EI):m/z= 277 ([M+H]<+>de base libre 100%). EA para C<16>H<26>N<2>O<2>Cl<2>, corregido para agua (9,2 % p/p) y HCl (2,1 eq. en lugar de 2,0 eq.): calc.: C 49,44, H 7,80, N 7,21, O 16,40, Cl 19,15; encontrado C 48,76, H 7,48, N 7,36, O 16,44, Cl 19,11.Ejemplo 4

[0235] {3-Hidroxi-3-[(S)-1-((S)-2-hidroxi-1-fenil-etil)-piperidin-2-il]-azetidin-1-il}-(2,3,4-trifluoro-fenil)-metanona

[0236]

[0239]

[0241] Cloruro de 2,3,4-trifluoro-benzoílo:

[0243] Se suspendió ácido 2,3,4 -trifluorobenzoico (100 g, 568 mmol, 1,0 eq.) en tolueno (1000 mL) y se trató con piridina (0,254 mL, 3,15 mmol, 0,0055 eq.). La suspensión resultante se calentó a una temperatura de 60 a 70 °C, obteniéndose una solución amarillenta transparente. A esta temperatura, se añadió lentamente cloruro de oxalilo (94,4 g, 729 mmol, 1,3 eq.) durante 156 minutos. Tras completar la adición, la mezcla se mantuvo en agitación durante 10 min hasta su completa disolución. El tolueno (360 mL) se eliminó parcialmente mediante destilación al vacío (temperatura de la camisa: de 60 a 70 °C, presión: de 200 a 100 mbar). La solución se enfrió a temperatura ambiente, obteniéndose 636 g de una solución amarillenta y ligeramente turbia, que se almacenó en atmósfera de N₂ y se utilizó en la etapa siguiente sin tratamiento adicional. Pureza por HPLC: 99,2 % de área.

[0245] {3-Hidroxi-3-[(S)-1-((S)-2-hidroxi-1-fenil-etil)-piperidin-2-il]-azetidin-1-il}-(2,3,4-trifluoro-fenil)-metanona:

[0247] La solución acuosa de diclorhidrato de 3-[(S)-1-((S)-2-hidroxi-1-fenil-etil)-piperidin-2-il]-azetidin-3-ol (43,5 g) se trató con EtOH (24 mL) y se agitó durante 10 min a temperatura ambiente. A esta mezcla se le añadió una solución de fosfato tripotásico (28,8 g, 136 mmol, 4,7 eq.) en 261 mL de agua durante 14 min a una temperatura del lote de 10 a 20 °C y se agitó la mezcla durante 15 min a 15 °C (pH 11,9). A esta solución se le añadieron mediante un embudo de goteo 34 g de la solución de cloruro de 2,3,4-trifluoro-benzoilo descrita anteriormente (34,0 g, 29,8 mmol, 1,0 eq.) durante 32 min a una temperatura del lote de 10 a 20 °C mientras se agitaba vigorosamente. El embudo de goteo se enjuagó con tolueno (1,2 ml) y la mezcla bifásica se agitó a temperatura ambiente durante 60 min. Se dejó que las capas se separaran y se descartó la fase acuosa. La fase orgánica se lavó con una solución de carbonato de sodio (3,36 g, 31,5 mmol, 1,09 eq.) en agua (42 g) y se agitó durante 30 min a temperatura ambiente. Se dejó que las capas se separaran y la fase orgánica se lavó con cloruro de sodio acuoso (30 g, 10 % p/p). En el rotavapor (temperatura del baño: 50 °C, presión < 200 mbar), la fase orgánica se concentró hasta un volumen aproximado del 30 %. El residuo se recogió en EtOH (23 ml) y se agitó durante 5 min a una temperatura de 40 a 50 °C. La solución se concentró de nuevo en el rotavapor (temperatura del baño: 50 °C, presión inferior a 200 mbar, 17 ml de destilado), obteniéndose un aceite muy viscoso. El residuo se recogió de nuevo en EtOH (23 ml) y se agitó durante 10 min, y se diluyó de nuevo con EtOH (12 ml) para alcanzar el volumen objetivo (53 ml, 46,06 g). Pureza por HPLC: 85,0 % de área.

[0249] [0107] Para fines analíticos, se filtró la solución del producto (90 ml) y el residuo del filtro se lavó con EtOH (15 ml). En el rotavapor (temperatura del baño: 40 °C, presión < 150 mbar), la solución se concentró completamente y el residuo se absorbió en MTBE (40 ml), posteriormente se concentró completamente de nuevo y se absorbió en una mezcla de acetato de etilo (29 ml) y heptano (40 ml), a continuación se concentró completamente de nuevo, a continuación se absorbió de nuevo en una mezcla de MTBE (20 ml) y heptano (50 ml) y se concentró de nuevo completamente, obteniendo finalmente un sólido espumoso (32,5 g). El residuo sólido (32,0 g) se disolvió en acetato de etilo (20 ml) y se purificó mediante cromatografía ultrarrápida sobre gel de sílice (150 g) utilizando acetato de etilo como eluyente. Tras unforerunde 200 mL, se combinaron 6 fracciones (800 mL) y se concentraron completamente en el rotavapor (temperatura del baño: 40 °C, presión ≥ 20 mbar), obteniéndose 28,0 g de un aceite ligeramente amarillento. A temperatura ambiente, el residuo oleoso se recogió en diclorometano (20 mL), se diluyó con heptano (150 mL) y se concentró completamente de nuevo en el rotavapor, seguido de la disolución del residuo en MTBE (20 mL) y de nuevo mediante la eliminación completa del disolvente en el rotavapor, obteniéndose una espuma gomosa. Esta espuma se disolvió en tolueno (30 mL, temperatura ambiente) y se dosificó durante 20 min, añadiendo gota a gota mediante un embudo de goteo a temperatura ambiente a heptano (400 mL), tras lo cual el producto empezó a precipitar. El embudo de goteo se enjuagó con tolueno (4 mL) y la suspensión se mantuvo en agitación durante 1 h a temperatura ambiente. Los sólidos se separaron por filtración y el reactor y la torta de filtración se enjuagaron dos veces con el filtrado y, posteriormente, con heptano (15 mL). El secado al vacío a 35 °C hasta constancia de peso dio como resultado 17,88 g de un sólido incoloro. Pureza por HPLC: 97,0 % de área; disolventes residuales: tolueno (1,2 % p/p) y heptano (2,3 % p/p). Punto de fusión (visual): T<inicio>: 55-73 °C (fusión acompañada de descomposición exotérmica). RMN de<1>H (400 MHz, DMSO-d6,120 °C): δ 7,41 - 7,47 (m, 2 H), 7,27 - 7,32 (m, 2 H), 7,21 - 7,26 (m, 2 H), 7,12 - 7,19 (m, 1 H), 5,21 (bs, 1 H), 4,35 (bd, 1 H), 4,22 (bs, 1 H), 4,05 (dd, 1 H), 3,91 - 4,01 (m, 1 H), 3,74 - 3,90 (m, 4 H), 3,01 (dd, 1 H), 2,75 2,84 (m, 1 H), 2,49 - 2,59 (m, 1 H), 1,68 - 1,81 (m, 1 H), 1,51 - 1,65 (m, 1 H), 1,23 - 1,50 (m, 3 H), 1,09 - 1,22 (m, 1 H). MS (EI):m/z= 435 ([M+H]<+>, 100%). EA para C<23>H<25>F<3>N<2>O<3>, corregido para tolueno residual (1,2 % p/p) y heptano (2,3 % p/p): calc.: C 64,38, H 6,07, F 12,66, N 6,22; encontrado C 64,01, H 6,04, F 12,63, N 6,35.

[0250] Ejemplo 5

[0251] Síntesis de clorhidrato de ((S)-3-hidroxi-3-piperidin-2-il-azetidin-1-il)-(2,3,4-trifluoro-fenil)-metanona[0108]

[0254]

[0255] Un autoclave de vidrio de 185 mL bajo argón se cargó con Pd/C (3,37 g, 1,3 mmol, 0,04 eq, 60,2 % p/p de agua, 10 % p/p de Pd sobre C), agua (0,22 g) y una solución de {3-hidroxi-3-[(S)-1-((S)-2-hidroxi-1-fenil-etil)-piperidin-2-il]-azetidin-1-il}-(2,3,4-trifluoro-fenil)-metanona en EtOH (53 mL, 46 g, 29 mmol, 1,0 eq.). La mezcla se trató con EtOH (13 mL), ácido acético (4,15 mL, 72 mmol, 2,5 eq.) y ácido clorhídrico acuoso (2,5 ml, 37 % p/p, 30 mmol, 1,0 eq.). El autoclave se volvió inerte, se presurizó con 2 bar de H<2>y la reacción se realizó a 2 bar de presión de H<2>a 25 °C durante 12 h. Se liberó la presión del autoclave y la suspensión se trató con MeOH (25 mL) y se mantuvo en agitación durante 30 min y se filtró bajo protección de argón sobre papel de filtro. El autoclave y el residuo del filtro se enjuagaron con MeOH (4 mL). Los filtrados combinados se evaporaron a presión reducida hasta aproximadamente el 20-30 por ciento del volumen inicial. El residuo se trató con isopropanol (38,5 mL) a 30 a 35 °C, se agitó durante 1 h, se enfrió a 20 a 25 °C y se trató con agua (0,58 g) y con ácido clorhídrico acuoso (2,5 mL, 37 % p/p, 30 mmol, 1,0 eq.). La suspensión resultante se concentró al vacío a una temperatura de 25 a 35 °C hasta alcanzar un volumen aproximado de 22 mL, y se añadió MTBE (31 mL) a una temperatura de 25 a 35 °C. La suspensión final se enfrió a una temperatura de 5 a 10 °C, se agitó durante 1 h y, a continuación, se filtró. La torta de filtración se enjuagó con MTBE frío (12 mL) y se secó al vacío a 35 °C hasta alcanzar la constancia de peso para obtener el compuesto del título (5,08 g) en forma de un sólido incoloro. Pureza por HPLC: 99,6 % de área. Punto de fusión (DSC): T<inicio>: 246,3 °C, pico extrapolado: 248,8 °C (fusión acompañada de descomposición exotérmica). RMN de<1>H (400 MHz, DMSO-d6

, 120 °C): δ 8,59 (bs, 2 H), 7,14 - 7,48 (m, 2 H), 6,54 (bs, 1 H), 4,39 (dd, 1 H), 4,23 (dd, 1 H), 3,85 - 3,97 (m, 2 H), 3,27 - 3,35 (m, 1H), 3,20 - 3,27 (m, 1 H), 2,80 - 2,95 (m, 1 H), 1,78 - 1,88 (m, 2 H), 1,64 - 1,78 (m, 2 H), 1,40 - 1,64 (m, 2 H). MS (EI):m/z= 315 ([M+H]<+>de base libre, 100%). EA para C<15>H<17>F<3>N<2>O<2>x HCl: calculado: C 51,36, H 5,17, N 7,99, F 16,25; encontrado C 51,19, H 4,89, N 7,91, F 16,06.

[0256] Ejemplo 6

[0257] Síntesis de (S)-[3,4-difluoro-2-(2-fluoro-4-yodofenilamino)fenil] [3-hidroxi-3-(piperidin-2-il) azetidin-1-il]-metanona (Compuesto I)

[0258]

[0261]

[0262] [0111] A una solución de clorhidrato de ((S)-3-hidroxi-3-piperidin-2-il-azetidin-1-il)-(2,3,4-trifluorofenil)-metanona (15,0 g, 42,8 mmol, 1,0 eq.) y 2 -fluoro-4-yodo-anilina (11,1 g, 47 mmol, 1,1 eq.) en THF (90 ml), se dosificó una solución de LiHMDS en THF (149 g, 20,7 % p/p, 184 mmol, 4,3 eq.) durante 88 min a una temperatura de 20 a 30 °C. Se continuó agitando durante 2 h. Después de la conversión completa, la mezcla se dosificó a una mezcla de ácido sulfúrico (12,0 g, 96%-p/p, 118 mmol, 2,75 eq.) en agua (75 mL) durante 25 min y se mantuvo en agitación durante 1 h. Se dejó que las capas se separaran y la fase orgánica se lavó con una mezcla de agua (60 mL) y tolueno (96 mL). La fase orgánica se concentró al vacío hasta un volumen de aproximadamente 150 mL. Se añadió tolueno (250 mL) y el THF residual se eliminó por destilación a una temperatura de camisa de 55 °C y a una presión de 84 mbar mientras se mantenía constante el volumen del lote mediante la dosificación continua de tolueno (400 mL), lo que resultó en una precipitación lenta del producto. A continuación, la temperatura del lote se redujo a 10 °C en 2 h y la suspensión se mantuvo en agitación durante la noche a 10 °C. El producto se separó por filtración y la torta se enjuagó con tolueno frío (150 mL). El secado al vacío durante la noche a 35 °C hasta constancia de peso produjo el compuesto del título (20,66 g) como un producto incoloro. Pureza por HPLC: 99,7 % de área. Punto de fusión (DSC): T<inicial>: 166,7 °C, pico extrapolado: 168,2 °C (91,5 J/g). RMN de<1>H (600 MHz, CDCl<3>): δ 8,28 - 8,48 (br, 1 H), 7,39 (dd, 1 H), 7,32 (ddd, 1 H), 7,09 - 7,14 (m, 1 H), 6,75 - 6,86 (br, 1 H), 6,60 (ddd, 1 H), 4,10 (d, 2 H), 4,05 - 4,20 (br, 1 H), 3,93 - 4,04 (br, 1 H), 3,09 (d, 1 H), 2,70 (d, 1 H), 2,56 - 2,67 (br, 1 H), 1,68 - 1,87 (m, 1 H), 1,50 - 1,64 (m, 2 H), 1,25 - 1,38 (m, 2 H), 1,07 - 1,24 (m, 1 H). MS (EI):m/z= 532 ([M+H]<+>, 100%). EA para C<21>H<21>F<3>IN<2>O<3>: calculado: C 47,47, H 3,98, N 7,91, F 10,73; encontrado C 47,68, H 4,00, N 7,66, F 10,80.

[0263] Ejemplo 7

[0264] Preparación de la sal cristalina de fumarato de (S)-[3,4-difluoro-2-(2-fluoro-4-yodofenilamino)fenil][3-hidroxi-3-(piperidin-2-il)azetidin-1-il]-metanona (Compuesto I) designada como Forma A

[0265] Se disolvió (S)-[3,4-difluoro-2-(2-fluoro-4-yodofenilamino)fenil][3-hidroxi-3-(piperidin-2-il)azetidin-1-il]-metanona (80 kg) en una mezcla de 2-propanol/agua 88:12 p/p (9 equivalentes en peso (eq. en peso)) a 77 °C y se filtró sobre carbón activado. Se disolvió ácido fumárico (0,52 eq.) en una mezcla de 2-propanol/agua 88:12 p/p (2,6 eq. en peso). Se añadió una cantidad inicial de la solución de ácido fumárico (8 % de la cantidad total) a la solución filtrada de (S)-[3,4-difluoro-2-(2-fluoro-4-yodofenilamino)fenil][3-hidroxi-3-(piperidin-2-il)azetidin-1-il]-metanona a 77 °C. Se añadieron cristales de siembra (0,023 eq. en peso) como suspensión en una mezcla de 2-propanol/agua 88:12 p/p (0,2 eq. en peso) a 77 °C. La cantidad restante de la solución de ácido fumárico se añadió en 6 horas a la misma temperatura. Para completar la cristalización, la suspensión se enfrió hasta 20 °C en 7 horas. La sal cristalina de fumarato , Compuesto I Forma A, se aisló por centrifugación, se lavó con 2-propanol (por ejemplo, 0,6 eq. en peso), se secó a presión reducida a un máximo de 55 °C y se desgrumó.

[0266] Ejemplos de caracterización de la sal cristalina de fumarato de (S)-[3,4-difluoro-2-(2-fluoro-4-yodofenilamino)fenil][3-hidroxi-3-(piperidin-2-il)azetidin-1-il]-metanona designada como Forma A

[0267]

[0270]

[0272] Análisis elemental

[0273] Los resultados del análisis elemental se calcularon a partir de una masa molecular relativa de 1178,71 g/mol y una composición de C<46>H<46>F<6>I<2>N<6>O<8>y se muestran en la Tabla 1. Los resultados son consistentes con la estructura representada anteriormente.

[0274] Tabla 1: Análisis elemental de C46H46F6I2N6O8

[0276]

[0277]

[0279] Espectroscopia infrarroja

[0280] Se utilizó un espectrofotómetro infrarrojo por transformada de Fourier (FTIR) ThermoScientific iS5 con accesorio iD5 ATR. El espectro infrarrojo (IR) se registró como medición de IR de reflexión en el rango de 4000-650 cm<-1>y se proporciona como la Figura 1. El espectro IR concuerda con la estructura mostrada anteriormente. En la Tabla 2 se presenta un resumen de los estiramientos IR característicos.

[0281] Tabla 2: Asi naciones de IR ara la sal de fumarato del com uesto 1

[0283]

[0285] Espectros de RMN en solución de dimetilsulfóxido

[0286] Las mediciones de resonancia magnética nuclear (RMN) se realizaron en espectrómetros Bruker Avance de 600 y 400 MHz. El aparato de 600 MHz estaba equipado con una criosonda TCI de 5 mm con gradiente z, y el aparato de 400 MHz, con una sonda BBFO de 5 mm con gradiente z. La muestra se preparó disolviendo 6 mg de la sal cristalina de fumarato del Compuesto I, designada como Forma A, en 0,75 mL de DMSO-d6 (D, 99,8 %) para todos los experimentos de detección de protones. Para los estudios de RMN de<13>C y<19>F, se disolvieron 62 mg en 0,75 mL de DMSO-d6.

[0287] RMN de 1H (600 MHz, DMSO-d6 a 25 °C):El espectro de RMN de<1>H a 600 MHz a 25 °C mostró una relación 2:1 entre la base libre y el fumarato, tomando la integral de las señales a 6,62 y 6,42 ppm, lo que demuestra la existencia de un hemifumarato. Se observaron ocho señales de protones para el anillo de azetidina, mientras que solo se esperaban cuatro, lo que indica la existencia de dos conjuntos de señales en una relación 1:1.

[0288] El RMN de<1>H (DMSO d6) se representa en la Figura 2. δ 8,54 (s, 1H) 8,50 (s, 1H), 7,57 (dd, 2H), 7,37 (dd, 2H), 7,31 (m, 2H), 7,18 (m, 2H), 6,67 (t, 2H), 6,42 (s, 2H), 4,25 (d, 1H), 4,15 d, 1H), 4,09 (d, 1H) 4,01 (d, 1H), 3,92 (d, 1H), 3,86 (d, 1H), 3,71 (t, 2H) 3,03 (d, 2H), 2,79 (m, 2H) 8, 38 (t, 2H), 1,62 (m, 6H) 1,24 (m 6H) (2,50 quint 1,9 DMSO).

[0289] El RMN de<13>C (DMSO d6) se representa en la Figura 3. δ 168,0, 167,5, 152,3, 151,4, 143,6, 135,2, 133,2, 131,3, 130,5, 124,6, 123,7, 123,0, 122,7, 119,8, 119,6, 110,7, 81,6, 81,5, 70,3, 70,3, 63,0, 61,8, 60,7, 60,6, 59,0, 58,1, 45,5, 45,4, 24,1, 23,7, 23,1, 39,5 (DMSO-d6).

[0290] Para respaldar los resultados de la espectroscopia de RMN en estado líquido, también se realizó espectroscopia de RMN en estado sólido para determinar la estructura. En la espectroscopia de RMN en estado líquido, algunas señales se duplican debido a las restricciones observadas en la rotación libre, lo que da lugar a una mezcla rotámera, mientras que el resultado de la espectroscopia de RMN en estado sólido no se ve afectado por este impedimento estérico. Por lo tanto, es posible una asignación de picos más inequívoca para la sal fumarato del Compuesto I mediante espectroscopia de RMN en estado sólido.

[0291] La RMN en estado sólido de<13>C de la Forma A se representa en la Figura 4. 175,3, 173,6, 168,9, 155,5, 153,5, 144,4, 142,5, 137,0, 136,0135,5, 132,0, 130,5, 127,2, 125,0, 124,0, 117,9, 108,0, 82,2, 71,7, 64,0, 59,3, 56,2, 45,0, 25,3, 24,0, 22,2.

[0292] La RMN en estado sólido de<13>C de la Forma A confirma los resultados de otras tecnologías analíticas utilizadas para dilucidar la estructura de la (S)-[3,4-Difluoro-2-(2-fluoro-4-yodofenilamino)fenil] [3-hidroxi-3-(piperidin-2-il)azetidin-1-il]-metanona. Todos los carbonos presentes en la estructura de la base libre, así como en la estructura del contraión, se detectan en los espectros.

[0293] 19F-RMN (600 MHz, DMSO-d6 a 25 °C):El RMN de 19-F mostró tres átomos de flúor diferentes.

[0294] Espectrometría de masas

[0295] Se utilizó un espectrómetro Agilent 6520 QTOF para CID MSMS con ESI positivo y MS con ESI negativo. El espectro de masas de electrospray positivo obtenido para la sal fumarato del Compuesto I se muestra en la figura 5. La [M H]<+>a una m/z de 562,0714 concuerda con la fórmula del Compuesto I (la base libre). El comportamiento de fragmentación de M H se estudió mediante disociación inducida por colisión (CID). Se utilizó nitrógeno como gas de colisión. Todos los fragmentos mostraron una buena correlación con la estructura del Compuesto I.

[0296] El espectro de masas de electrospray negativo (Figura 6) obtenido para la sal fumarato del Compuesto I [MH]<->se encontró en m/z = 115,0045 (calculado: m/z = 115,0037; diferencia m/z = 0,0008), indicativo de la presencia del contraión fumarato.

[0297] Análisis de la estructura cristalina de la sal fumarato de (S)-[3,4-difluoro-2-(2-fluoro-4-yodofenilamino)fenil][3-hidroxi-3-(piperidin-2-il)azetidin-1-il]-metanona Forma A mediante difracción de rayos X

[0298] Estudios de difracción de rayos X en polvo (XRPD)

[0299] Se montó un monocristal en un bucle y se midió a temperatura ambiente. Los datos se recopilaron en la línea de luz X10SA de Swiss Light Source, equipada con un detector DECTRIS Pilatus 6M con radiación de sincrotrón, y se procesaron los datos con el programa XDS. La estructura cristalina se resolvió y refinó con ShelXTL (Bruker AXS, Karlsruhe).

[0300] La estructura de la sal fumarato del Compuesto I, designada como Forma A, incorpora un centro quiral con configuración (S), según la convención de Cahn-Ingold-Prelog. Para comprobar la estructura, se realizó una determinación de monocristales. Los monocristales se cristalizaron a partir de una solución diluida en acetonitrilo/agua 1:1 mediante evaporación lenta del disolvente. Para comprobar que la conformación no cambiaba durante la cristalización, se realizó además una cromatografía líquida de alta resolución (HPLC) quiral. Los datos de los cristales se resumen en la Tabla 3.

[0301] Tabla 3: Datos del cristal de forma A

[0303]

[0305] La conformación molecular y los parámetros de la estructura cristalina de la Forma A se presentan en la Tabla 3. En la estructura cristalina de la Forma A, el nitrógeno de la piperidina está protonado y el ácido fumárico está desprotonado. El fumarato está coordinado por dos piperidinas y dos grupos OH de diferentes moléculas del compuesto activo. El empaquetamiento cristalino se caracteriza por infinitas cadenas de enlaces de hidrógeno intermoleculares. Se confirmó que la configuración es (S) para el átomo de carbono quiral en el anillo de piperidina, tal como lo demuestra el parámetro de estructura absoluta (parámetro de Flack: 0,048, esd 0,013).

[0306] Espectro ultravioleta de la sal de fumarato de (S)-[3,4-difluoro-2-(2-fluoro-4-yodofenilamino)fenil][3-hidroxi-3-(piperidin-2-il)azetidin-1-il]-metanona

[0307] Los máximos de absorción UV-Vis alrededor de 200 nm, 239 nm, 276 nm y 310 nm son indicativos de las transiciones π-π* de los restos del anillo aromático y los electrones de pares solitarios n-π*, respectivamente. El espectro en la Figura 7 es consistente con la estructura de la sal de fumarato del Compuesto I y muestra las características esperadas de los cromóforos presentes en la estructura.

[0308] Elucidación de la estructura de la sal de fumarato de (S)-[3,4-difluoro-2-(2-fluoro-4-yodofenilamino)fenil][3-hidroxi-3-(piperidin-2-il)azetidin-1-il]-metanona: polimorfismo

[0309] Se evaluaron más de 15 formas de sales del Compuesto I para su idoneidad para el desarrollo clínico, incluyendo, por ejemplo, sales preparadas a partir de ácido benzoico, ácido malónico, ácido fumárico, ácido mandélico, ácido acético y ácido orótico. Cuando el ácido benzoico, el ácido malónico, el ácido mandélico, el ácido acético y el ácido orótico formaron sales amorfas, sales cristalinas o mezclas de sales amorfas y cristalinas, según el disolvente y las condiciones, la sal preparada a partir de ácido fumárico resultó ser la más deseable, tal como se describe a continuación.

[0310] Un cribado exhaustivo de las formas sólidas cristalinas de la sal de fumarato del Compuesto I reveló una forma cristalina (Forma A) y una forma amorfa (la forma amorfa). La Forma A, que está libre de disolventes y es no higroscópica, es la forma termodinámicamente estable y es la forma que se produce consistentemente mediante el proceso de fabricación. La forma amorfa es no cristalina e higroscópica. Se ha observado que la forma amorfa se convierte a la Forma A mediante calentamiento y transición de fase mediada por disolventes en agua. En aproximadamente 3000 experimentos de cristalización realizados durante el cribado de polimorfismos, no se observó ninguna forma polimórfica adicional. Según las mediciones de DSC, así como XRPD a temperatura controlada, no se observa conversión de la forma polimórfica bajo calentamiento hasta que se produce la fusión. En un experimento de suspensión utilizando condiciones de proceso (disolvente 2-propanol/agua 88:12, temperatura: 20 °C), la forma amorfa se convirtió rápidamente en la Forma A. Con calentamiento, la forma amorfa comienza a convertirse en la Forma A entre 90 °C y 200 °C.

[0311] La Forma A y la forma amorfa pueden distinguirse mediante calorimetría diferencial de barrido (DSC) y difracción de rayos X en polvo (XRPD). Además, las diferencias entre la Forma A y la forma amorfa también se han demostrado mediante espectroscopia Raman y espectroscopia de resonancia magnética nuclear (RMN) en estado sólido de<13>C

[0312] <.>

[0313] Calorimetría diferencial de barrido (DSC)

[0314] Los termogramas de DSC se registraron con un instrumento Mettler-Toledo (DSC820/821e/1; sensor FRS05). Se colocaron aproximadamente de 2 a 6 mg de la muestra en recipientes de aluminio y se sellaron con tapas de aluminio. Las tapas se perforaron automáticamente antes del calentamiento. Generalmente, las muestras en atmósfera de nitrógeno se calentaron a una velocidad de 10 K/min hasta un máximo de 250 °C.

[0315] La forma cristalina A experimentó fusión a 239,6 °C (T<inicio>). Dado que la fusión y la descomposición se superponen, no se determinaron el calor de fusión ni la T<extrapol.>(Figura 8).

[0316] La forma amorfa mostró una transición vítrea a 116,2 °C (procedente de molienda) y a 120,6 °C (procedente de liofilización), seguida de un evento exotérmico debido a la cristalización entre 150 °C y 200 °C a la Forma A. Por encima de aproximadamente 225 °C, el material comienza a fundirse (Figura 9).

[0317] Difracción de rayos X en polvo de la forma A y la forma amorfa

[0318] Se registraron patrones de difracción de rayos X a temperatura ambiente en geometría de transmisión con un difractómetro STOE STADI P (radiación Cu K α [1,54 Å], monocromador primario, detector de tira de silicio, rango angular de 3° a 42° 2-θ, tiempo total de medición de aproximadamente 30 minutos). Las muestras se prepararon y analizaron sin ningún procesamiento adicional (por ejemplo, molienda o tamizado) de la sustancia.

[0319] Tal como se muestra en la Tabla 4, la Forma cristalina A se identifica selectivamente mediante un conjunto de posiciones de pico de difracción características expresadas en valor 2-θ. Los difractogramas de XRPD característicos de las formas individuales se muestran en la Figura 10 y la Figura 11.

[0320] Tabla 4

[0323]

[0324]

[0326] Tasa de disolución intrínseca de la forma cristalina A y la forma amorfa

[0327] Para cada medición de disolución intrínseca, se produjo un pellet a partir de la muestra de la forma cristalina A o la forma amorfa utilizando una carga aplicada de aproximadamente 15 kN en un disco plano (área superficial = 0,5 cm<2>). Tras la compactación, cada pellet se verificó mediante XRPD para confirmar que no se había producido ninguna transformación polimórfica durante el proceso de peletización. Las condiciones experimentales empleadas se resumen en la Tabla 5.

[0328] Tabla 5

[0330]

[0332] Se utilizaron lotes de la Forma A y la forma amorfa (procedente de liofilización) para determinar la velocidad de disolución intrínseca de ambas formas sólidas. La disolución intrínseca permite la caracterización de diferentes formas cristalinas mediante la exposición de un área superficial constante al medio de disolución. Los resultados se resumen en la Tabla 6.

[0333] Tabla 6

[0335]

[0337] La velocidad de disolución intrínseca de ambas formas es muy diferente. Según los datos, la forma amorfa posee una velocidad de disolución intrínseca aproximadamente 35 veces mayor que la forma cristalina A.

[0338] Higroscopicidad de la forma cristalina A y la forma amorfa

[0339] Los datos de sorción/desorción de humedad se recopilaron en un sistema de equilibrio de humedad DVS-1/DVS-HT/DVS-intrínseco (SMS Surface Measurements Systems). Las isotermas de sorción/desorción se midieron paso a paso en un rango de 0 % de HR (humedad relativa) a 90 % de HR a 25 °C. Se seleccionó un cambio de peso < 0,002 mg/min como criterio para pasar al siguiente nivel de HR (con un tiempo máximo de equilibrio de 24 horas, si no se cumplía el criterio de peso). Los datos se corrigieron según el contenido de humedad inicial de las muestras; es decir, el peso tras el secado de la muestra a 0 % de HR se tomó como punto cero. La higroscopicidad de una sustancia determinada se caracteriza por el aumento de masa al aumentar la HR de 0 % a 90 % de HR, tal como se indica en la Tabla 7.

[0340] Tabla 7

[0342]

[0344] Los datos de adsorción/desorción de humedad para la Forma A cristalina se proporcionan en la Figura 12. Durante la escala temporal de los experimentos estándar de sorción dinámica de vapor, no se observó conversión. Entre el 0 % y el 90 % de HR, la Forma A presenta una ganancia o pérdida de peso mínima y reversible de ± 0,1 % y, por lo tanto, se clasifica como no higroscópica.

[0345] Los datos de sorción/desorción de humedad de la forma amorfa se proporcionan en la Figura 13 (procedente de liofilización). Durante la escala temporal de los experimentos estándar de sorción dinámica de vapor, no se observó conversión. Entre el 0 % y el 90 % de HR, la forma amorfa presenta una ganancia o pérdida de peso reversible de ± 12,1 % y, por lo tanto, se clasifica como higroscópica.

Claims (14)

1. REIVINDICACIONES

1. Sal cristalina de fumarato del Compuesto I, en la que el Compuesto I es (S)-[3,4-difluoro-2-(2-fluoro-4-yodofenilamino)fenil] [3-hidroxi-3-(piperidin-2-il) azetidin-1-il]-metanona, y en la que la sal cristalina de fumarato del Compuesto I tiene la estructura:

2. Sal cristalina de fumarato del Compuesto I, según la reivindicación 1, designada como Forma A, en la que la sal cristalina de fumarato del Compuesto I secaracteriza poral menos uno de los siguientes:

(i) un espectro de RMN de 13C en DMSO d<6>que tiene los siguientes picos: 168,0, 167,5, 152,3, 151,4, 143,6, 135,2, 133,2, 131,3, 130,5, 124,6, 123,7, 123,0, 122,7, 119,8, 119,6, 110,7, 81,6, 81,5, 70,3, 70,3, 63,0, 61,8, 60,7, 60,6, 59,0, 58,1, 45,5, 45,4, 24,1, 23,7, 23,1, 39,5 (DMSO-d6);

(ii) un espectro de RMN de<13>C en estado sólido con tres o más picos seleccionados entre 175,3, 173,6, 117,5, 155,5 y 153,5, ± 0,2 ppm;

(iii) un patrón de difracción de rayos X en polvo (CuKα λ=1,5418Å) que comprende tres o más valores 2θ seleccionados entre 4,6, 12,1, 13,2, 13,6 y 14,5 ± 0,2 °2θ, en donde la medición de la forma cristalina se realiza a temperatura ambiente; y

(iv) un termograma de calorimetría diferencial de barrido que muestra la fusión a 239,6 °C (Tinicio).

3. Sal cristalina de fumarato del Compuesto I, según la reivindicación 2, designada como Forma A, en la que dicha sal secaracteriza porun espectro de RMN de<13>C en estado sólido con tres o más picos seleccionados entre 175,3, 173,6, 117,5, 155,5 y 153,5, ± 0,2 ppm.

4. Sal cristalina de fumarato del Compuesto I, según la reivindicación 2, designada como Forma A, en la que dicha sal secaracteriza porun patrón de difracción de rayos X en polvo (CuKα λ=1,5418Å) que comprende tres o más valores 2θ seleccionados entre 4,6, 12,1, 13,2, 13,6 y 14,5 ± 0,2 °2θ, en donde la medición de la forma cristalina es a temperatura ambiente.

5. Sal cristalina de fumarato del Compuesto I, según la reivindicación 2, designada como Forma A, en la que dicha sal secaracteriza porun patrón de difracción de rayos X en polvo, tal como se establece en la Tabla 4:

Tabla 4

6. Sal cristalina de fumarato del Compuesto I, según cualquiera de las reivindicaciones 2 a 5, en la que dicha sal es al menos 90 % en peso de Forma A, basado en el peso de dicha sal.

7. Composición farmacéutica que comprende la sal cristalina de fumarato del Compuesto I, según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5; y un excipiente farmacéuticamente aceptable.

8. Sal cristalina de fumarato del Compuesto I, tal como se define en cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5, para su uso en el tratamiento del cáncer.

9. Sal cristalina de fumarato del Compuesto I para su uso, según la reivindicación 8, en la que el cáncer se selecciona del grupo que consiste en melanoma (incluido el melanoma con la mutación BRAF V600), cáncer de mama (incluido el cáncer de mama triple negativo), cáncer colorrectal (incluido el cáncer colorrectal con la mutación KRAS), cáncer de pulmón de células no pequeñas, leucemia mieloide aguda y cáncer de páncreas.

10. Sal cristalina de fumarato del Compuesto I para su uso, según la reivindicación 9, en la que el cáncer es melanoma.

11. Sal cristalina de fumarato del Compuesto I para su uso, según la reivindicación 10, en la que el cáncer es melanoma con la mutación BRAF V600.

12. Sal cristalina de fumarato del Compuesto I para su uso, según la reivindicación 10 o la reivindicación 11, en la que la sal cristalina de fumarato del Compuesto I se administra en combinación con vemurafenib.

13. Sal cristalina de fumarato del Compuesto I para su uso, según la reivindicación 12, en la que la sal cristalina de fumarato del Compuesto I se administra antes o después de, o simultáneamente con, vemurafenib.

14. Proceso para preparar la sal cristalina de fumarato del Compuesto I, designada como Forma A, tal como se define en cualquiera de las reivindicaciones 2 a 5, que comprende:

añadir ácido fumárico disuelto en un disolvente a una mezcla del Compuesto I disuelto en un disolvente para formar la sal cristalina de fumarato del Compuesto I, designada como Forma A; y

recoger los cristales resultantes de la sal cristalina de fumarato del Compuesto I, designada como Forma A.