ES3062284T3 - Compositions for use in treating psychotic disorders - Google Patents

Compositions for use in treating psychotic disorders

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ES3062284T3 ES15842621T ES15842621T ES3062284T3 ES 3062284 T3 ES3062284 T3 ES 3062284T3 ES 15842621 T ES15842621 T ES 15842621T ES 15842621 T ES15842621 T ES 15842621T ES 3062284 T3 ES3062284 T3 ES 3062284T3
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Description

[0001] DESCRIPCIÓN
[0002] Composiciones para uso en el tratamiento de trastornos psicóticos
[0003] Referencia cruzada con solicitudes relacionadas
[0004] Esta solicitud reivindica el beneficio de la solicitud provisional estadounidense No.62/050,635, presentada el 15 de septiembre de 2014.
[0005] Antecedentes
[0006] Campo de la invención
[0007] La invención se refiere a composiciones y métodos para el tratamiento de trastornos mediados por GPx. En particular, las composiciones comprenden una combinación de un modulador de glutatión peroxidasa y un agente antipsicótico. Las referencias en la descripción a métodos de tratamiento se refieren a los compuestos, composiciones farmacéuticas y medicamentos de la presente invención para su uso en un método de tratamiento del cuerpo humano (o animal) mediante terapia (o para diagnóstico).
[0008] Descripción del estado de la técnica
[0009] Durante décadas, la dopamina fue fundamental en las perspectivas fisiopatológicas y terapéuticas de la esquizofrenia (SZ), seguida de las teorías de la neurotransmisión de GABA y glutamato. Más recientemente, la fisiopatología de la SZ se ha relacionado estrechamente con el estrés oxidativo (Do et al., 2009; Kano et al., 2013). En células activas, como las neuronas del sistema nervioso central, las defensas antioxidantes naturales incluyen el secuestro de radicales libres por el glutatión, mediante la conversión de su forma reducida, es decir, glutatión monomérico (GSH), por la glutatión peroxidasa (GPx) a su forma oxidada, es decir, disulfuro de glutatión (GSSG). La función principal de la GPx y la dirección GSHGPxGSSG del mecanismo redox es reducir los radicales libres, como el peróxido de hidrógeno (H<2>O<2>), el peroxinitrito (ONOO-) y los hidroperóxidos lipídicos (LOOH) a sus correspondientes contrapartes redox-inertes, por ejemplo, agua y alcoholes, y proteger las membranas celulares, las proteínas y otras estructuras del daño oxidativo.
[0010] Se han investigado muchos sustratos y enzimas del sistema antioxidante en la SZ, incluidos los cambios mediados por GPx. Los estudios mostraron cambios en la GPx durante los episodios iniciales de psicosis, cuando los mecanismos compensatorios aún son capaces de combatir el estrés oxidativo. En general, se demostró una fuerte correlación entre la actividad de la GPx y la SZ, aunque actualmente no existe ningún fármaco que actúe directamente sobre el mecanismo redox de la GPx.
[0011] La presente invención aborda estas y otras deficiencias del estado de la técnica, como se describe a continuación.
[0012] Resumen
[0013] La presente invención se describe en las reivindicaciones adjuntas.
[0014] En sus diversas realizaciones, la presente divulgación proporciona combinaciones novedosas de compuestos útiles, por ejemplo, como moduladores de la glutatión peroxidasa (GPx), métodos para preparar dichas combinaciones, composiciones farmacéuticas que comprenden una o más de dichas combinaciones, métodos para preparar composiciones farmacéuticas que comprenden una o más de dichas combinaciones, y métodos para el tratamiento, prevención, inhibición o mejora de una o más enfermedades asociadas con trastornos mediados por GPx utilizando dichas combinaciones o composiciones farmacéuticas.
[0015] Algunas realizaciones de una combinación novedosa comprenden al menos dos compuestos o sales farmacéuticamente aceptables de los mismos, en la que el primer compuesto es un compuesto imitador de la glutatión peroxidasa y el segundo compuesto es un agente antipsicótico.
[0016] En algunas realizaciones, el compuesto modulador de la glutatión peroxidasa se selecciona del grupo que consiste en compuestos imitadores de la glutatión peroxidasa, glutatión (GSH), profármacos de glutatión y profármacos de cisteína.
[0017] En algunas realizaciones, el agente antipsicótico se selecciona del grupo que consiste en clorpromazina (Thorazine), haloperidol (Haldol), perfenazina, flufenazina, risperidona (Risperdal), olanzapina (Zyprexa), quetiapina (Seroquel), ziprasidona (Geodon), aripiprazol (Abilify), paliperidona (Invega), lurasidona (Latuda) y combinaciones de los mismos.
[0018] En algunas realizaciones, un compuesto representativo de un compuesto imitador de la glutatión peroxidasa comprende ebseleno, (2-fenil-1,2-benzisoselenazol-3(2H)-ona) con una fórmula empírica C<13>H<9>NOSe, peso molecular 274.2 y la siguiente fórmula:
[0019]
[0021] En algunas realizaciones, los imitadores de glutatión peroxidasa comprenden 2,2'-diseleno-bis-β-ciclodextrina y ácido 6A,6B-diselenínico-6A’,6B’-β-ciclodextrina con puente de selenio.
[0022] En algunas realizaciones, los profármacos de glutatión representativos comprenden compuestos de la fórmula:
[0025]
[0027] en la que
[0028] R<1>es H, metilo, etilo o isopropilo;
[0029] R<2>es H o etilo; y
[0031] R<3>es H, acetilo, fenilacetilo,
[0032] En algunas realizaciones, un profármaco representativo de cisteína comprende N-acetilcisteína (NAC) con la siguiente fórmula:
[0035]
[0037] Algunas realizaciones de profármacos de cisteína comprenden N,N'-diacetil-cisteína, amida de N-acetilcisteína, ésteres de NAC (ésteres alquílicos, ésteres de glicolamida y ésteres de aciloximetilo), S-alil cisteína, S-metil cisteína, S-etil cisteína, S-propil cisteína o compuestos de la fórmula:
[0040]
[0043] en la que
[0044] R<1>es H, oxo, metilo, etilo, n-propilo, n-pentilo, fenilo, -(CHOH)<n>CH<2>OH y
[0046] en la que
[0047] R<2>es H o -COOH.
[0048] Algunas realizaciones de profármacos de cisteína comprenden ácidos tiazolidina-4-carboxílicos 2-sustituidos con monosacáridos de aldosa, como gliceraldehído, arabinosa, lixosa, ribosa, xilosa, galactosa, glucosa y manosa.
[0049] Otro aspecto de la presente divulgación describe una composición farmacéutica que comprende una combinación novedosa y al menos un portador farmacéuticamente aceptable.
[0050] Otro aspecto de la presente divulgación describe un método para tratar a un sujeto que padece o ha sido diagnosticado con una enfermedad, trastorno o afección mediada por la actividad de GPx, que comprende administrar al sujeto una cantidad terapéuticamente efectiva de una combinación novedosa. Dicha enfermedad, trastorno o afección puede incluir, pero sin limitarse a, estrés oxidativo elevado, esquizofrenia, trastorno bipolar, depresión, manía, trastornos de ansiedad o trastornos psicóticos relacionados, discinesia tardía y sus síntomas o complicaciones asociados. La cantidad terapéuticamente efectiva de cada compuesto incluido en la nueva combinación puede ser de aproximadamente 0.1 mg/día a aproximadamente 5000 mg/día, respectivamente. Otro aspecto de la presente divulgación describe un método para reducir los efectos secundarios de la administración de un agente antipsicótico mediante la coadministración de un compuesto modulador de la glutatión peroxidasa con el agente antipsicótico. En particular, la reducción de los efectos secundarios de la administración de un agente antipsicótico mediante la coadministración de ebseleno con el agente antipsicótico. Aún más particularmente, la reducción de los efectos secundarios de la administración de clorpromazina (Thorazine), haloperidol (Haldol), perfenazina, flufenazina, risperidona (Risperdal), olanzapina (Zyprexa), quetiapina (Seroquel), ziprasidona (Geodon), aripiprazol (Abilify), paliperidona (Invega), lurasidona (Latuda) o combinaciones de los mismos mediante la coadministración de ebseleno. En algunas realizaciones, los efectos secundarios de la administración de un agente antipsicótico comprenden discinesia tardía y otras complicaciones de la administración de un agente antipsicótico a un paciente en dosis altas o durante un período prolongado.
[0051] La presente divulgación presenta además un proceso para la fabricación de una composición farmacéutica que comprende la mezcla de cualquiera de los compuestos de la nueva combinación y un portador farmacéuticamente aceptable.
[0052] Otras realizaciones y sus ventajas se harán evidentes a partir de la discusión detallada, los esquemas, los ejemplos y las reivindicaciones que se presentan a continuación.
[0053] Breve descripción de las diferentes vistas de los dibujos
[0054] Estas y otras características, aspectos y ventajas de la presente invención se comprenderán mejor con la siguiente descripción y los dibujos adjuntos, en la que:
[0055] Las Figuras 1A y 1B muestran (A) una disminución del GSH en sangre y (B) una elevación del GSSG en SZ (barras grises) en comparación con NC (barras negras) (Ballesteros et al. 2013a), de acuerdo con una realización.
[0056] Las Figuras 2A y 2B muestran (A) los espectros de GSH por MRS (en gris) en la ACC y (B) la precisión en la medición de GSH, de acuerdo con una realización.
[0057] Las Figuras 3A-3C muestran (A) una amplitud reducida de la negatividad de discordancia (MMN) en la esquizofrenia (SZ) (n = 29) en comparación con el control normal (NC) (n = 25) (*p = 0.015), (B) una correlación significativa entre MMN y GSH en NC (r = -0.46, p = 0.03), y (C) la ausencia de dicha relación en SZ (r = 0.04, p = 0.85) (Ballesteros et al., 2013a), de acuerdo con una realización.
[0058] La Figura 4 muestra un modelo de mediación multivariante en la que las respuestas oscilatorias neuronales actuaron como mediadores entre GSH y GSSG y la medida de función comunitaria UPSA-2 (Evaluación de habilidades basada en el rendimiento de California tipo 2), de acuerdo con una realización. Las líneas continuas grises indican efectos directos y significativos de GSH y GSSG sobre UPSA-2. Las líneas punteadas grises indican efectos indirectos significativos, en la que la respuesta oscilatoria de 21-40 Hz fue un biomarcador intermedio significativo que vincula GSH con el resultado funcional (UPSA-2).
[0059] Las Figuras 5A-5D muestran los mecanismos propuestos de la acción antioxidante de ebseleno (adaptados de Kil et al., 2007; y Antony et al., 2011), de acuerdo con una realización. (A) Las especies reactivas de oxígeno (ROS, por ejemplo, H<2>O<2>) se reducen mediante GSH y GPx; el ebseleno ayuda a este proceso actuando como un imitador de GPx. (B) Las especies reactivas de nitrógeno (RNS, por ejemplo, peroxinitrito ONOO-) también se reducen mediante el mismo sistema de GSH. (C) Los hidroperóxidos lipídicos (LOOH) experimentan una reducción de dos electrones para formar alcoholes redox-inertes (LOH) mediante GPx, un mecanismo clave de citoprotección/reparación de membrana/mielina, con un efecto de ebseleno en esta reacción redox de peroxidación lipídica bien respaldado. (D) El ebseleno es un sustrato para el sistema de teorredoxina (Trx), otra defensa clave contra la oxidación, en la que el ebseleno se reduce a ebseleno selenol (Ebs-H) por la Trx y la teorredoxina reductasa (TrxR); el Ebs-H actúa entonces como una H<2>O<2>reductasa eficiente.
[0060] Las Figuras 6A y 6B ilustran el efecto del ebseleno en el aumento de los niveles basales de GSH neuronal, de acuerdo con una realización. (A) El tratamiento con ebseleno aumentó los niveles basales de GSH neuronal, de forma similar a su efecto sobre el GSH observado en condiciones de estrés. (B) Efecto neuroprotector del ebseleno contra el agotamiento de GSH inducido por glutamato y la neurotoxicidad con glutamato disminuyó el nivel de GSH celular (triángulos), el ebseleno aumentó el nivel basal de GSH (cuadrados) y el efecto del ebseleno y el glutamato (rombos).
[0061] Las Figuras 7A-7C ilustran cómo la NVHL bloquea el aumento en la marcación de interneuronas con PV en la PFC durante la adolescencia, de acuerdo con una realización. (A) Micrografías representativas de la tinción de PV prefrontal en ratas juveniles (P21) y adultas (P61) de CONTROL (placebo), NVHL y con NVHL tratadas con NAC. La barra de escala es de 80 μm. (B) Gráficos de barras que ilustran el recuento de células de PV utilizando estereología imparcial en P21 (izquierda) y P61 (derecha) en los cuatro grupos de tratamiento. El recuento de células de PV aumentó entre P21 y P61 en el grupo de CONTROL, pero no en las ratas con NVHL. El tratamiento con NAC en la etapa juvenil rescató la progresión en el número de células de PV en las ratas con NVHL. ANOVA F<(5,36)>= 4.7, p = 0.002. Edad: F<(1,36)>= 10.2, p = 0.003, Lesión: F<(1,36)>= 1.36, p = 0.11, Lesión x Edad: F<(1,36)>= 6.7, p = 0.014, Tratamiento: F<(1,36)>= 3.9, p = 0.057, Tratamiento x Edad: n.s. (C) Diagrama que ilustra la cronología del tratamiento con NAC y las evaluaciones en ratas juveniles (P21) y adultas (P61). En esta y en todas las demás figuras, los datos se expresan como la media ± SEM, *p < 0.05.
[0062] Las Figuras 8A-8D ilustran el estrés oxidativo con 8-oxo-dG en la PFC de ratas con NVHL, de acuerdo con una realización. (A) Micrografías representativas que muestran el doble etiquetado de PV (rojo) y 8-oxo-dG (verde) en la PFC en los cuatro grupos a P21. La barra de escala es de 10 μm. (B) Resumen de los datos que muestra que una NVHL causa un aumento masivo en el etiquetado de 8-oxo-dG en la PFC a P21, que se previene con el tratamiento con NAC en la etapa juvenil. El gráfico superior ilustra la intensidad de fluorescencia de 8-oxodG y el gráfico inferior cuantifica el número de vóxeles etiquetados en cada grupo. ANOVA para la intensidad de 8-oxo-dG: F<(3,14)>= 13.7, p = 0.00002, Lesión F<(1,14)>= 18.4, p = 0.008, Tratamiento F<(1,14)>= 9.6, p = 0.008, Interacción Lesión x Tratamiento F<(1,14)>= 13.0, p = 0.003. (C) Micrografías representativas que muestran el doble etiquetado de PV (rojo) y 8-oxo-dG (verde) en la PFC a P61. La barra de escala es de 10 μm. (D) Resumen de los datos que muestra que la lesión NVHL aumenta la 8-oxo-dG en la PFC a P61, lo cual se previene con el tratamiento con NAC en la etapa juvenil. ANOVA para la intensidad de 8-oxo-dG: F<(3,18)>= 7.8, p=0.001, Lesión F<(1,18)>= 12.5, p = 0.002, Tratamiento F<(1,18)>= 0.13, p=n.s., Lesión x Tratamiento F<(1,18)>= 10.8, p = 0.004.
[0063] Las Figuras 9A y 9B ilustran el estrés oxidativo en la PFC de ratas con NVHL adultas con 3-NT, de acuerdo con una realización. (A) Micrografías representativas que muestran el triple etiquetado para 3-NT (verde), WFA (azul) y PV (rojo) en los tres grupos. La barra de escala es de 100 μm. (B) Resumen de los datos que muestra que la NVHL causa un aumento significativo en el etiquetado de 3-NT en la PFC a P61, lo cual se previene con el tratamiento con NAC en la etapa juvenil. El gráfico ilustra la intensidad de fluorescencia de 3-NT en cada grupo. Un ANOVA unidireccional para la intensidad de 3-NT reveló un efecto muy significativo del tratamiento (F<(2.53)>= 85.2, p < 0.0001). Las comparaciones entre cada par mediante la prueba de Tukey-Kramer también mostraron diferencias significativas (p < 0.0001) para de CONTROL frente a NVHL y NVHL frente a NAC. Las Figuras 10A-10C muestran las lesiones NVHL, de acuerdo con una realización. (A) Fotomicrografías de secciones representativas de un cerebro de CONTROL (izquierda), con NVHL sin tratar (centro) y con NVHL tratado con NAC (derecha) a nivel del hipocampo. Las flechas indican la pérdida celular en el hipocampo ventral y las estrellas indican ventrículos agrandados. (B) Esquemas que indican la extensión mínima (negro) y máxima de la lesión en ratas con NVHL sin tratar (agua) en diferentes niveles rostrocaudales a lo largo del hipocampo ventral. (C) Esquemas similares que ilustran la extensión de la lesión en ratas con NVHL tratadas con NAC. Las Figuras 11A y 11B ilustran que la NVHL puede causar un aumento del estrés oxidativo en las interneuronas con PV, pero no en las CR y CB, lo cual se previene con el tratamiento con NAC durante el desarrollo, de acuerdo con una realización. (A) Micrografías que muestran el etiquetado con 8-oxo-dG (verde) de interneuronas positivas para parvalbúmina (PV), calretinina (CR) y calbindina (CB) (rojo) en la PFC de ratas con NVHL de CONTROL, con NVHL y NVHL tratadas con NAC. La barra de escala es de 10 μm. (B) Resumen de los datos. En las interneuronas con PV, el etiquetado con 8-oxo-dG aumentó tras una lesión NVHL, lo que se previno con el tratamiento con NAC (Tratamiento: F<(2,65)>= 212.97, p < 0.0001). ***p < 0.001.
[0064] Las Figuras 12A y 12B ilustran que las redes perineuronales (PNN) pueden estar reducidas en la PFC de ratas adultas con NVHL, pero se recuperan con el tratamiento con NAC en la etapa juvenil, de acuerdo con una realización. (A) Micrografías representativas que muestran el doble etiquetado de PV (rojo) y aglutinina deWisteria floribunda(WFA; verde), que marca las PNN. La barra de escala es de 10 μm. (B) Gráficos que ilustran el recuento de interneuronas con PV (PVI) (arriba) y el número de células con doble etiquetado de PV y WFA (abajo). El recuento de PVI se reduce tras una lesión NVHL, y esta reducción se previene con el tratamiento con NAC en la etapa juvenil. (Efecto general: F<(8,16)>= 3.8, p = 0.01, recuento de PVI: F<(2,11)>= 15.3, p < 0.0007). El número de PVI con WFA disminuye en las ratas con NVHL en comparación con los controles, y esta reducción se previene con el tratamiento con NAC en la etapa juvenil (recuento de PNN: F<(2,11)>= 28.5, p < 0.0001). **p < 0.01, ***p < 0.001.
[0065] Las Figuras 13A-13E ilustran que los déficits electrofisiológicos pueden ser revertidos con el tratamiento con N-acetilcisteína (NAC) en ratas con NVHL, de acuerdo con una realización. (A) Trazas representativas de potenciales postsinápticos excitatorios (EPSP) evocados por estimulación eléctrica de la capa superficial en la PFC adulta antes (traza negra) y después (traza verde) de la aplicación en baño del agonista D2 quinpirol (5 μM). (B) Célula piramidal de la capa V rellena con neurobiotina en la PFC; la posición relativa del electrodo estimulador bipolar y el electrodo de registro se muestran esquemáticamente. (C) Gráficos de barras que ilustran la magnitud de la atenuación de EPSP por quinpirol en secciones de ratas de CONTROL, con NVHL y con NVHL tratadas con NAC. En las ratas de control, el quinpirol reduce la magnitud de la respuesta sináptica, mientras que en las ratas con NVHL esta atenuación está ausente. El tratamiento con NAC durante el desarrollo revierte este déficit en los animales con NVHL (ANOVA: F<(2,39)>= 3.328, p = 0.046). (D) Trazas de registros intracelularesin vivoen neuronas piramidales de PFC que muestran las respuestas a la estimulación eléctrica del área tegmental ventral (VTA) con trenes de 5 pulsos a 20 Hz en ratas de CONTROL (arriba), con NVHL (centro) y con NVHL tratadas con NAC (abajo). Cada panel es una superposición de 5 trazas que ilustran el tipo de respuesta representativa observada en cada grupo, con las ratas con NVHL que muestran un aumento de la actividad neuronal tras la estimulación del VTA, mientras que la actividad es escasa en las ratas von NVHL de CONTROL y con NAC. (E) Gráfico de barras que ilustra los datos de grupo para la actividad de potenciales de acción en el intervalo de 500 ms posterior a la estimulación de la VTA en los tres grupos. ANOVA: F<(2,37)>= 4.5, p < 0.05; la actividad en las ratas con NVHL fue mayor que en las ratas de control (prueba posthoc de Tukey: q = 3.9, p < 0.05) y mayor que en las ratas con NVHL tratadas con NAC (prueba post-hoc de Tukey: q = 3.6, p < 0.05). En todos los experimentos de electrofisiología, los datos de las ratas de CONTROL y las ratas de CONTROL tratadas con NAC se combinaron, ya que no mostraron diferencias.
[0066] Las Figuras 14A y 14B ilustran que los déficits de negatividad de discordancia (MMN) pueden corregirse con el tratamiento con NAC, de acuerdo con una realización. (A) Trazos representativos de potenciales evocados auditivos de estímulos estándar (azul) y desviados (rojo) en ratas de control (n = 6; arriba), con NVHL (n = 3; centro) y con NVHL tratadas con NAC (n = 3; abajo). El recuadro verde resalta el período en el que se midió la negatividad (35-100 ms después del estímulo). Todos los trazos son promedios de al menos 80 repeticiones. (B) Los datos grupales que comparan la MMN, medida como el área bajo la curva en la región resaltada, revelan una diferencia significativa entre los grupos (ANOVA: F<(2,11)>= 9.742; p = 0.006). Los datos ilustrados son promedios de 3 sesiones diferentes en cada rata. Una comparación post-hoc entre NVHL y NVHL+NAC reveló una diferencia significativa (prueba de Bonferroni; p = 0.005).
[0067] Las Figuras 15A-15D ilustran que los déficits de inhibición previos al pulso pueden corregirse con tratamiento antioxidante, de acuerdo con una realización. (A) Se observaron déficits de inhibición previos al pulso en ratas con NVHL cuando se les administró apomorfina (0.1 mg/kg, i.p.). Este déficit se revirtió completamente con el tratamiento con NAC en la etapa juvenil (Lesión: F(<1,42)>= 3.529 p = 0.067, Tratamiento: F<(1,42)>= 1.644, p = 0.207, Lesión x Tratamiento: F<(1,42)>= 5.730, p = 0.021). n = 12-16, * p < 0.05 en comparación con NVHL. (B) En otro grupo de ratas, se administró NAC a partir de P35, se interrumpió en P50 y se evaluaron las ratas para PPI en P61. El gráfico de barras ilustra la PPI en tres intensidades previas al pulso diferentes en este grupo con tratamiento con NAC en la adolescencia. ANOVA: efecto de grupo F<(2,28)>= 3.364, p < 0.045; las pruebas posthoc revelaron solo una tendencia a la diferencia en PPI en NVHL en comparación con el CONTROL (LSD, p = 0.069), y una diferencia significativa entre NVHL y NVHL tratada con NAC (LSD, p = 0.016). (C) Algunos animales recibieron Ebseleno desde P35 y se les realizó la prueba de PPI en P61. Hubo un efecto de lesión significativo (F<(1,28)>= 7.11; p = 0.013) y un estado de lesión significativo por interacción de tratamiento (F<(1,28)>= 7.09; p = 0.013). (D) Otro grupo de animales recibió apocinina y se les realizó la prueba de PPI. Observamos una lesión significativa por interacción de tratamiento (F<(1,25)>= 4.8; p = 0.038).
[0068] Descripción detallada
[0069] Las realizaciones de la presente divulgación se refieren a combinaciones novedosas de al menos dos compuestos, el primer compuesto comprende un modulador de la glutatión peroxidasa y el segundo compuesto es un agente antipsicótico, para el tratamiento, la mejora, la prevención o la inhibición de numerosas afecciones, incluyendo, pero sin limitarse a, trastornos mediados por GPx, estrés oxidativo elevado, esquizofrenia, trastorno bipolar, depresión, manía, trastornos de ansiedad o trastornos psicóticos relacionados, discinesia tardía y los síntomas o complicaciones asociados a los mismos.
[0070] Los compuestos representativos de la combinación novedosa se describen a lo largo de la memoria descriptiva y las reivindicaciones.
[0071] En algunas realizaciones, el agente antipsicótico se selecciona del grupo que consiste en glutatión, profármacos de glutatión, profármacos de cisteína, clorpromazina (Thorazine), haloperidol (Haldol), perfenazina, flufenazina, risperidona (Risperdal), olanzapina (Zyprexa), quetiapina (Seroquel), ziprasidona (Geodon), aripiprazol (Abilify), paliperidona (Invega), lurasidona (Latuda) y combinaciones de los mismos. En algunas realizaciones, un modulador de la glutatión peroxidasa comprende un compuesto seleccionado del grupo que consiste en compuestos que imitan la glutatión peroxidasa, glutatión, profármacos de glutatión y profármacos de cisteína.
[0072] En algunas realizaciones, un compuesto representativo de un compuesto imitador de glutatión peroxidasa comprende ebseleno, (2-fenil-1,2-benzisoselenazol-3(2H)-ona), con fórmula empírica C<13>H<9>NOSe, peso molecular 274.2 y la siguiente fórmula:
[0075]
[0077] En algunas realizaciones, los compuestos imitadores de glutatión peroxidasa comprenden 2,2’-diseleno-bis-βciclodextrina y ácido 6A,6B-diselenínico-6A’,6B’-β-ciclodextrina con puente de selenio.
[0078] Los imitadores de glutatión peroxidasa, al igual que la glutatión peroxidasa, reducen las especies reactivas de oxígeno mediante la unión de radicales libres a su fracción de Se. Al reaccionar con el glutatión, los imitadores de glutatión peroxidasa limitan la toxicidad de los radicales libres, exhibiendo así una fuerte actividad contra el peroxinitrito. El ebseleno, un imitador de glutatión peroxidasa, reduce la liberación de citocromo C de las mitocondrias y el daño nuclear durante la peroxidación lipídica, atenuando así la apoptosis neuronal asociada al estrés oxidativo. Los agentes que reducen la actividad de las especies reactivas de oxígeno pueden mejorar los efectos perjudiciales del estrés oxidativo elevado y las enfermedades causadas por dicho estrés, incluyendo, pero sin limitarse a, el estrés oxidativo elevado, la esquizofrenia, el trastorno bipolar, la depresión, la manía, los trastornos de ansiedad o trastornos psicóticos relacionados, la discinesia tardía y los síntomas o complicaciones asociados.
[0079] El estrés oxidativo en pacientes con esquizofrenia está asociado con un déficit de glutatión (GSH). Las FIGS.
[0080] 1A y 1B ilustran el GSH y disulfuro de glutatión (GSSG) en sangre en ayunas en pacientes con SZ (n = 29) y pacientes de control normales (n = 25). El GSH fue menor (p < 0.001) y el GSSG fue mayor (p = 0.023) en pacientes con SZ, mientras que no se encontró que las fuentes exógenas en la dieta, el tabaquismo o los medicamentos causaran el estado redox anormal del GSH en la SZ, lo que sugiere una anomalía redox intrínseca. También se encontró una GSH reducida en pacientes que tomaban clozapina (p = 0.005) u otros antipsicóticos (p < 0.001) (Ballesteros et al., 2013a).
[0081] En algunas realizaciones, los profármacos de glutatión representativos comprenden compuestos de la fórmula:
[0084]
[0086] en la que
[0087] R<1>es H, metilo, etilo o isopropilo;
[0088] R<2>es H o etilo; y
[0090] R<3>es H, acetilo, fenilacetilo,
[0091] En algunas realizaciones, un profármaco de cisteína representativo comprende N-acetilcisteína (NAC) con la siguiente fórmula:
[0094]
[0095] Algunas realizaciones de profármacos de cisteína comprenden N,N'-diacetil-cisteína, amida de N-acetilcisteína, ésteres de NAC (ésteres de alquilo, ésteres de glicolamida y ésteres de aciloximetilo), S-alilcisteína, S-metilcisteína, S-etilcisteína, S-propilcisteína o compuestos de la fórmula:
[0098]
[0100] en la que
[0102] R<1>es H, oxo, metilo, etilo, n-propilo, n-pentilo, fenilo, -(CHOH)<n>CH<2>OH y en el que n es 1-5, o
y R<2>es H o -COOH.
[0103] Algunas realizaciones de profármacos de cisteína comprenden ácidos tiazolidina-4-carboxílicos 2-sustituidos con monosacáridos de aldosa, como gliceraldehído, arabinosa, lixosa, ribosa, xilosa, galactosa, glucosa y manosa.
[0104] Otro aspecto de la presente divulgación se refiere a una composición farmacéutica que comprende una combinación novedosa y al menos un portador farmacéuticamente aceptable.
[0105] La presente divulgación también se refiere a un proceso para la elaboración de una composición farmacéutica que comprende la mezcla de cualquiera de los compuestos de la combinación novedosa y un portador farmacéuticamente aceptable.
[0106] Otro aspecto de la presente divulgación se refiere a un método para tratar a un sujeto que padece o ha sido diagnosticado con una enfermedad, trastorno o afección mediada por la actividad de la GPx, que comprende la administración al sujeto de una cantidad terapéuticamente efectiva de una combinación novedosa. Dicha enfermedad, trastorno o afección puede incluir, pero sin limitarse a, estrés oxidativo elevado, esquizofrenia, trastorno bipolar, depresión, manía, trastornos de ansiedad o trastornos psicóticos relacionados, discinesia tardía y sus síntomas o complicaciones asociados.
[0107] Otro aspecto de la presente divulgación se refiere a un método para reducir los efectos secundarios de la administración de un agente antipsicótico mediante la coadministración de un compuesto imitador de la glutatión peroxidasa con el agente antipsicótico. En particular, la reducción de los efectos secundarios de la administración de un agente antipsicótico mediante la coadministración de ebseleno con el agente antipsicótico. Aún más particularmente, la reducción de los efectos secundarios de la administración de clorpromazina (Thorazine), haloperidol (Haldol), perfenazina, flufenazina, risperidona (Risperdal), olanzapina (Zyprexa), quetiapina (Seroquel), ziprasidona (Geodon), aripiprazol (Abilify), paliperidona (Invega), lurasidona (Latuda) o combinaciones de los mismos mediante la coadministración de ebseleno. En algunas realizaciones, los efectos secundarios de la administración de un agente antipsicótico comprenden discinesia tardía y otras complicaciones de la administración de un agente antipsicótico a un paciente en dosis altas o durante un período prolongado.
[0108] En otra realización, un método para tratar o mejorar una afección mediada por la GPx en un sujeto que lo necesita comprende la administración al sujeto de una cantidad terapéuticamente efectiva de la combinación novedosa, en la que la cantidad terapéuticamente efectiva de cada compuesto en la combinación es de aproximadamente 0.1 mg/dosis a aproximadamente 5 g/dosis. En particular, la cantidad terapéuticamente efectiva de cada compuesto en la combinación es de aproximadamente 0.5 mg/dosis a aproximadamente 1000 mg/dosis. Más particularmente, la cantidad terapéuticamente efectiva de cada compuesto en la combinación es de aproximadamente 1 mg/dosis a aproximadamente 100 mg/dosis. En otra realización, el número de dosis diarias de la combinación es de 1 a 3 dosis. En otra realización, la cantidad terapéuticamente efectiva de cada compuesto en la combinación es de aproximadamente 0.001 mg/kg/día a aproximadamente 30 mg/kg/día. Más particularmente, la cantidad terapéuticamente efectiva de cada compuesto en la combinación es de aproximadamente 0.01 mg/kg/día a aproximadamente 2 mg/kg/día.
[0109] En otra realización, un método para prevenir o inhibir la progresión de una afección mediada por GPx en un sujeto que lo necesita comprende administrar al sujeto una cantidad terapéuticamente efectiva de la combinación, en la que la cantidad terapéuticamente efectiva de cada compuesto en la combinación es de aproximadamente 0.1 mg/dosis a aproximadamente 5 g/dosis. En particular, la cantidad terapéuticamente efectiva de cada compuesto en la combinación es de aproximadamente 1 mg/dosis a aproximadamente 100 mg/dosis. En otra realización, el número de dosis diarias de la combinación es de 1 a 3 dosis. En otra realización, la cantidad terapéuticamente efectiva de cada compuesto en la combinación es de aproximadamente 0.001 mg/kg/día a aproximadamente 30 mg/kg/día. Más particularmente, la cantidad terapéuticamente efectiva de cada compuesto en la combinación es de aproximadamente 0.01 mg/kg/día a aproximadamente 2 mg/kg/día.
[0110] Definiciones/Términos
[0111] En general, los términos utilizados en las reivindicaciones y la memoria descriptiva se interpretarán con el significado común que les atribuye una persona con conocimientos ordinarios en la materia. Algunos términos se definen a continuación para mayor claridad. En caso de conflicto entre el significado común y las definiciones proporcionadas, se utilizarán las definiciones proporcionadas. Los términos utilizados en las reivindicaciones y la memoria descriptiva se definen como se establece a continuación, a menos que se especifique lo contrario o por su uso a lo largo de esta divulgación.
[0112] A menos que se indique lo contrario, el término "alquilo", tal como se utiliza en el presente documento, ya sea solo o como parte de un grupo sustituyente, se refiere a un radical hidrocarbonado monovalente saturado, ramificado o de cadena lineal, derivado de la eliminación de un átomo de hidrógeno de un átomo de carbono de un alcano de partida. Los grupos alquilo típicos incluyen, pero sin limitarse a, metilo; etilos, como etanilo; propilos, como propan-1-ilo, propan-2-ilo, ciclopropan-1-ilo; butilos, como butan-1-ilo, butan-2-ilo, 2-metilpropan-1-ilo, 2-metil-propan-2-ilo, ciclobutan-1-ilo, y similares. En realizaciones preferidas, los grupos alquilo son alquilo C1-6, siendo C1-3 particularmente preferido. Los radicales “alcoxi” son éteres de oxígeno formados a partir de los grupos alquilo de cadena lineal o ramificada descritos anteriormente. En algunas realizaciones, el alquilo o alcoxi están sustituidos independientemente con uno a cinco, preferiblemente uno a tres grupos que incluyen, pero sin limitarse a, oxo, amino, alcoxi, carboxi, heterociclilo, hidroxilo y halo (F, Cl, Br o I).
[0113] El término “arilo”, tal como se usa en el presente documento, se refiere a grupos aromáticos que comprenden un sistema de anillo aromático monocíclico estable de seis miembros, bicíclico de diez miembros o tricíclico de catorce miembros, que consta de átomos de carbono. Ejemplos de grupos arilo incluyen, pero sin limitarse a, fenilo o naftalenilo. En algunas realizaciones, el “arilo” está sustituido. Por ejemplo, el “arilo” puede estar sustituido con, por ejemplo, alquilo C1-6, alquenilo C2-6, alquinilo C2-6 opcionalmente sustituido, halo, hidroxilo, —CN, —C(O)OH, —C(O)O— alquilo C1-4, —C(O)NR’R’’, —SR’, —OR’, —C(O)R’, —N(R’)(R’’), — S(O)2—R’ y —S(O)2—N(R’)(R’’), en los que R’ y R’’ se seleccionan independientemente entre H, alquilo C1-6, arilo, heteroarilo y/o heterociclilo.
[0114] El término “heterociclilo” o “heterociclo” es un sistema de anillo sencillo o fusionado saturado o parcialmente saturado de 3 a 8 miembros que consta de átomos de carbono y de 1 a 6 heteroátomos seleccionados entre N, O y S. El grupo heterociclilo puede estar unido a cualquier heteroátomo o átomo de carbono que dé como resultado la creación de una estructura estable. Ejemplos de grupos heterociclilo incluyen, pero sin limitarse a, 2-imidazolina, imidazolidina; morfolina, oxazolina, 2-pirrolina, 3-pirrolina, pirrolidina, piridona, pirimidona, piperazina, piperidina, indolina, tetrahidrofurano, 2-pirrolina, 3-pirrolina, 2-imidazolina, 2-pirazolina, indolinona. En algunas realizaciones, “heterociclilo” o “heterociclo” están sustituidos independientemente. Por ejemplo, “heterociclilo” o “heterociclo” pueden estar sustituidos con, por ejemplo, alquilo C1-6 opcionalmente sustituido, alquenilo C2-6, alquinilo C2-6, halo, hidroxilo, —CN, —C(O)OH, —C(O)O—alquilo C1-4, —C(O)NR’R’’, —OR’, —SR’, —C(O)R’, —N(R’)(R’’), —S(O)2—R’ y —S(O)2—N(R’)(R’’), en los que R’ y R’’ se seleccionan independientemente entre H, alquilo C1-6, arilo, heteroarilo y/o heterociclilo.
[0115] El término “oxo”, ya sea que se use solo o como parte de un grupo sustituyente, se refiere a un O= unido a un átomo de carbono o de azufre. Por ejemplo, la ftalimida y la sacarina son ejemplos de compuestos con sustituyentes oxo.
[0116] El término “isómero cis-trans” se refiere a olefinas o cicloalcanos (o heteroanálogos) estereoisoméricos que difieren en las posiciones de los átomos (o grupos) con respecto a un plano de referencia: en el isómero cis, los átomos están en el mismo lado; en el isómero trans, están en lados opuestos.
[0117] El término “sustituido” se refiere a un radical en el que uno o más átomos de hidrógeno se reemplazan independientemente por el mismo o diferente o diferentes sustituyentes.
[0118] Con respecto a los sustituyentes, el término "independientemente" significa que, cuando es posible más de un sustituyente de este tipo, dichos sustituyentes pueden ser iguales o diferentes entre sí.
[0119] Se entiende que la definición de cualquier sustituyente o variable en una ubicación particular en una molécula es independiente de sus definiciones en otras partes de dicha molécula. Se entiende que los sustituyentes y los patrones de sustitución en los compuestos de esta invención pueden ser seleccionados por un experto en la materia para obtener compuestos químicamente estables y que puedan sintetizarse fácilmente mediante técnicas conocidas en la materia, así como mediante los métodos descritos en el presente documento.
[0120] Se conocen en la técnica métodos para determinar las dosis efectivas para fines terapéuticos y profilácticos de las composiciones farmacéuticas o las combinaciones de fármacos divulgadas, ya sea que estén formuladas o no en la misma composición. Para fines terapéuticos, el término "cantidad terapéuticamente efectiva", tal como se utiliza en el presente documento, se refiere a la cantidad de cada compuesto activo o agente farmacéutico, solo o en combinación, que produce la respuesta biológica o medicinal en un sistema tisular, animal o humano que busca un investigador, veterinario, médico u otro especialista clínico, lo que incluye el alivio de los síntomas de la enfermedad o trastorno que se está tratando. Para fines profilácticos (es decir, para inhibir la aparición o la progresión de un trastorno), el término "cantidad terapéuticamente efectiva" se refiere a la cantidad de cada compuesto activo o agente farmacéutico, solo o en combinación, que trata o inhibe en un sujeto la aparición o la progresión de un trastorno, según lo busque un investigador, veterinario, médico u otro especialista clínico. Por lo tanto, la presente invención proporciona combinaciones de dos o más fármacos en los que, por ejemplo, (a) cada fármaco se administra en una cantidad terapéuticamente o profilácticamente efectiva de forma independiente; (b) al menos un fármaco de la combinación se administra en una cantidad sub-terapéutica o sub-profiláctica si se administra solo, pero es terapéutica o profiláctica cuando se administra en combinación con el segundo o los fármacos adicionales de acuerdo con la invención; o (c) ambos (o más) fármacos se administran en una cantidad sub-terapéutica o sub-profiláctica si se administran solos, pero son terapéuticos o profilácticos cuando se administran conjuntamente.
[0121] El término "sal farmacéuticamente aceptable" se refiere a sales no tóxicas farmacéuticamente aceptables (Ref. International J. Pharm., 1986, 33, 201-217; J. Pharm. Sci., 1997 (enero), 66, 1, 1). Sin embargo, otras sales bien conocidas por los expertos en la materia pueden ser útiles en la preparación de los compuestos de esta invención o de sus sales farmacéuticamente aceptables. Los ácidos orgánicos o inorgánicos representativos incluyen, pero sin limitarse a, ácido clorhídrico, bromhídrico, yodhídrico, perclórico, sulfúrico, nítrico, fosfórico, acético, propiónico, glicólico, láctico, succínico, maleico, fumárico, málico, tartárico, cítrico, benzoico, mandélico, metanosulfónico, hidroxietanosulfónico, bencenosulfónico, oxálico, pamoico, 2-naftalenosulfónico, p-toluenosulfónico, ciclohexanosulfámico, salicílico, sacarínico o trifluoroacético. Las bases orgánicas o inorgánicas representativas incluyen, pero sin limitarse a, sales básicas o catiónicas como benzatina, cloroprocaína, colina, dietanolamina, etilendiamina, meglumina, procaína, aluminio, calcio, litio, magnesio, potasio, sodio y zinc.
[0122] El término "composición" abarca un producto que comprende los ingredientes especificados en las cantidades especificadas, así como cualquier producto que resulte, directa o indirectamente, de las combinaciones de los ingredientes especificados en las cantidades especificadas.
[0123] El término "sujeto" abarca un organismo, un animal, incluyendo un mamífero, humano o no humano, macho o hembra, que es objeto de tratamiento, observación, ensayo clínico o experimento. El sujeto puede ser un paciente humano. El término "humano" se refiere generalmente aHomo sapiens. El término "mamífero", tal como se utiliza en el presente documento, incluye, pero sin limitarse a, un ser humano, un primate no humano, un ratón, una rata, un conejillo de indias, una chinchilla y un mono. Los mamíferos distintos de los humanos pueden utilizarse ventajosamente como sujetos que representan modelos animales de, por ejemplo, pérdida de audición, esquizofrenia, trastornos bipolares y/o cualquier otro trastorno psicótico.
[0124] El término "porcentaje de identidad" o "porcentaje de identidad de secuencia", en el contexto de dos o más secuencias de ácidos nucleicos o polipéptidos, se refiere a dos o más secuencias o subsecuencias que tienen un porcentaje específico de nucleótidos o residuos de aminoácidos idénticos, cuando se comparan y alinean para obtener la máxima correspondencia, según se mide utilizando uno de los algoritmos de comparación de secuencias descritos a continuación (por ejemplo, BLASTP y BLASTN u otros algoritmos disponibles para expertos en la materia) o mediante inspección visual. Dependiendo de la aplicación, el porcentaje de "identidad" puede existir en una región de la secuencia que se compara, por ejemplo, en un dominio funcional, o, alternativamente, en toda la longitud de las dos secuencias que se comparan.
[0125] Para la comparación de secuencias, normalmente una secuencia actúa como secuencia de referencia con la que se comparan las secuencias de prueba. Al utilizar un algoritmo de comparación de secuencias, las secuencias de prueba y de referencia se introducen en un ordenador, se designan las coordenadas de la subsecuencia, si es necesario, y se designan los parámetros del programa del algoritmo de secuencia. El algoritmo de comparación de secuencias calcula entonces el porcentaje de identidad de secuencia para la secuencia o secuencias de prueba en relación con la secuencia de referencia, basándose en los parámetros del programa designado.
[0126] La alineación óptima de secuencias para la comparación se puede realizar, por ejemplo, mediante el algoritmo de homología local de Smith y Waterman, Adv. Appl. Math.2:482 (1981), mediante el algoritmo de alineación de homología de Needleman y Wunsch, J. Mol. Biol. 48:443 (1970), mediante el método de búsqueda de similitud de Pearson y Lipman, Proc. Nat'l. Acad. Sci. USA 85:2444 (1988), mediante implementaciones informáticas de estos algoritmos (GAP, BESTFIT, FASTA y TFASTA en el Wisconsin, Genetics Software Package, Genetics Computer Group, 575 Science Dr., Madison, Wis.), o mediante inspección visual (véase generalmente Ausubel et al., citado más adelante).
[0127] Un ejemplo de algoritmo adecuado para determinar el porcentaje de identidad de secuencia y la similitud de secuencia es el algoritmo BLAST, que se describe en Altschul et al., J. Mol. Biol. 215:403-410 (1990). El software para realizar análisis BLAST está disponible públicamente a través del sitio web del Centro Nacional de Información Biotecnológica.
[0128] Los trastornos, enfermedades o afecciones prodrómicas psicóticas incluyen, pero sin limitarse a, el estrés oxidativo elevado, la esquizofrenia, el trastorno bipolar, la depresión, la manía, los trastornos de ansiedad o trastornos psicóticos relacionados, la discinesia tardía y los síntomas o complicaciones asociados a estos. El término "estadísticamente significativo" se define como la probabilidad de que un resultado no sea producto del azar.
[0129] Cabe señalar que, tal como se utilizan en la memoria descriptiva y las reivindicaciones adjuntas, las formas singulares "un", "uno, una" y "el, la" incluyen referentes plurales, a menos que el contexto indique claramente lo contrario.
[0130] Las abreviaturas o acrónimos utilizados a lo largo de la memoria descriptiva incluyen:
[0131] • ACC: Corteza cingulada anterior
[0132] • AEC: Lista de verificación de eventos adversos
[0133] • BPRS: Escala resumida de calificación psiquiátrica
[0134] • CAT: Catalasa
[0135] • CDSS: Escala de depresión de Calgary para la esquizofrenia
[0136] • C-SSRS: Escala de gravedad de suicidio de Columbia
[0137] • EOS: Fin del estudio
[0138] • GSH: La forma reducida de glutatión
[0139] • GSSG: La forma oxidada de glutatión
[0140] • GPx: Glutatión peroxidasa
[0141] • GR: Glutatión reductasa
[0142] • MCCB: Batería cognitiva de consenso MATRICS
[0143] • MMN: Negatividad de discordancia
[0144] • MRS: Espectroscopia de resonancia magnética
[0145] • NAC: N-acetilcisteína
[0146] • NC: Controles normales
[0147] • NMDAR: Receptores de N-metil-D-aspartato
[0148] • POC: Prueba de concepto
[0149] • Redox: Reducción/oxidación
[0150] • RNS: Especies reactivas de nitrógeno
[0151] • ROS: Especies reactivas de oxígeno
[0152] • SOD: Superóxido dismutasa
[0153] • SPI: Sound Pharmaceutical Inc.
[0154] • SZ: Pacientes con esquizofrenia o Esquizofrenia
[0155] • UPSA: Evaluación de habilidades basada en el desempeño de California
[0156] • h o hr (hora(s))
[0157] • LCMS (cromatografía líquida de alta presión con espectrómetro de masas)
[0158] • Me (metilo)
[0159] • Mg (miligramo)
[0160] • rt o RT (temperatura ambiente)
[0161] • TLC (cromatografía de capa fina)
[0162] Referencias
[0163] Antony S, Bayse CA. Modeling the mechanism of the glutathione peroxidase mimic ebseleno. Inorg Chem.2011;50:12075-12084.
[0164] Albers, L. J., Ozdemir, V., Marder, S. R., Raggi, M. A., Aravagiri, M., Endrenyi, L., & Reist, C. (2005). Low-dose fluvoxamine as an adjunct to reduce olanzapine Therapeutic doce requirements: a prospective doce-adjusted Drug interaction strategy. Journal of clinical psychopharmacology, 25(2), 170-174.
[0165] Ballesteros A, Jiang P, Summerfelt A, Du X, Chiappelli J, O'Donnell P, Kochunov P, Hong LE. (2013a) No evidence of exogenous origin for the abnormal glutathione redox state in schizophrenia.Schizophre Res.2013;146:184-189.
[0166] Ballesteros A, Summerfelt A, Du X, Jiang P, Chiappelli J, Tagamets, M, O'Donnell P, Kochunov P, Hong LE. (2013b) Electrophysiological Intermediate Biomarkers for Oxidative Stress in Schizophrenia. Clin Neurophysiol.2013 Jun 30. doi:pii: S1388- 2457(13)00695-0.10.1016/j.clinph.2013.05.021. [Epub ahead of print].
[0167] Behrens, M.M., Ali, S.S., Dao, D.N., Lucero, J., Shekhtman, G., Quick, K.L., and Dugan, L.L. (2007). Ketamineinduced loss of phenotype of fast-spiking interneurons is mediated by NADPH-oxidase. Science 318, 1645-1647.
[0168] Berk, M., Copolov, D., Dean, O., Lu, K., Jeavons, S., Schapkaitz, I., Anderson- Hunt, M., Judd, F., Katz, F., Katz, P., et al. (2008). N-acetyl cysteine as a glutathione precursor for schizophrenia--a double-blind, randomized, placebo-controlled trial. Biological psychiatry 64, 361-368.
[0169] Bitanihirwe, B.K., and Woo, T.U. (2011). Oxidative stress in schizophrenia: an integrated approach. Neuroscience and biobehavioral reviews 35, 878-893.
[0170] Cabungcal, J.H., Counotte, D. s., Lewis, E., Tejeda, H. A., Piantadosi, P., Pollock, C., Calhoon, G. G., Sullivan, E., Presgraves, E., Kil, J., Hong, L. E., Cuenod, M., Do, K. Q., & O’Donnell, P. (2014) Juvenile antioxidant treatment prevents adult déficits in a developmental model of Schizophrenia. Neuron, 83(5), 1073-1084. Cabungcal, J.H., Nicolas, D., Kraftsik, R., Cuenod, M., Do, K.Q., and Hornung, J.P. (2006). Glutathione deficit during development induces anomalies in the rat anterior cingulate GABAergic neurons: Relevance to schizophrenia. Neurobiology of disease 22, 624- 637.
[0171] Cabungcal, J.H., Steullet, P., Kraftsik, R., Cuenod, M., and Do, K.Q. (2013a). Early-life insults impair parvalbumin interneurons via oxidative stress: reversal by N- acetylcysteine. Biological psychiatry 73, 574-582. Cabungcal, J.H., Steullet, P., Morishita, H., Kraftsik, R., Cuenod, M., Hensch, T.K., and Do, K.Q. (2013b). Perineuronal nets protect fast-spiking interneurons against oxidative stress. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America 110, 9130-9135.
[0172] Carlen M, Meletis K, Siegle JH, Cardin JA, Futai K, Vierling-Claassen D, Ruhlmann C, Jones SR, Deisseroth K, Sheng M, Moore CI, Tsai LH. A critical role for NMDA receptors in parvalbumin interneurons for gamma rhythm induction and behavior. Mol Psychiatry.2012; 17:537-548.
[0173] Carmeli, C., Knyazeva, M.G., Cuenod, M., and Do, K.Q. (2012). Glutathione precursor N-acetyl-cysteine modulates EEG synchronization in schizophrenia patients: a double-blind, randomized, placebo-controlled trial. PloS one 7, e29341.
[0174] Chambers, R.A., and Lipska, B.K. (2011). A method to the madness: producing the neonatal ventral hippocampal lesion rat model of schizophrenia. In Animal Models of Schizophrenia and Related Disorders, P. O’Donnell, ed. (New York, Humana Press), pp.1- 24.
[0175] Cho RY, Konecky RO, Carter CS. Impairments in frontal cortical gamma synchrony and cognitive control in schizophrenia. Proc Natl Acad Sci U S A.2006; 103:19878-19883.
[0176] Choi YB, Lipton SA. Redox modulation of the NMDA receptor. Cell Mol Life Sci.2000; 57:1535-1541.
[0177] Daiber A, Zou MH, Bachschmid M, Ullrich V. Ebseleno as a peroxynitrite scavenger in vitro and ex vivo. Biochem Pharmacol.2000; 59:153-160.
[0178] das Neves Duarte, J.M., Kulak, A., Gholam-Razaee, M.M., Cuenod, M., Gruetter, R., and Do, K.Q. (2012). N-acetylcysteine normalizes neurochemical changes in the glutathione-deficient schizophrenia mouse model during development. Biological psychiatry 71, 1006-1014.
[0179] Dietrich-Muszalska A, Olas B. Isoprostenes as indicators of oxidative stress in schizophrenia. World J Biol Psychiatry.2009; 10:27-33.
[0180] Do, K.Q., Cabungcal, J.H., Frank, A., Steullet, P., and Cuenod, M. (2009). Redox dysregulation, neurodevelopment, and schizophrenia. Curr Opin Neurobiol 19, 220-230.
[0181] Do, K.Q., Trabesinger, A.H., Kirsten-Kruger, M., Lauer, C.J., Dydak, U., Hell, D., Holsboer, F., Boesiger, P., and Cuenod, M. (2000). Schizophrenia: glutathione deficit in cerebrospinal fluid and prefrontal cortex in vivo. The European journal of neuroscience 12, 3721-3728.
[0182] Ehrlichman, R.S., Gandal, M.J., Maxwell, C.R., Lazarewicz, M.T., Finkel, L.H., Contreras, D., Turetsky, B.I., and Siegel, S.J. (2009). N-methyl-d-aspartic acid receptor antagonist-induced frequency oscillations in mice recreate pattern of electrophysiological deficits in schizophrenia. Neuroscience 158, 705-712.
[0183] Feleder, C., Tseng, K.Y., Calhoon, G.G., and O’Donnell, P. (2010). Neonatal intrahippocampal immune challenge alters dopamine modulation of prefrontal cortical interneurons in adult rats. Biological psychiatry 67, 386-392.
[0184] Fischer H, Terlinden R, Lohr JP, Romer A. A novel biologically active selenoorganic compound. VIII. Biotransformation of ebseleno. Xenobiotica.1988; 18:1347-1359.
[0185] Gawryluk, J.W., Wang, J.F., Andreazza, A.C., Shao, L., and Young, L.T. (2011). Decreased levels of glutathione, the major brain antioxidant, in post-mortem prefrontal cortex from patients with psychiatric disorders. The international journal of neuropsychopharmacology / official scientific journal of the Collegium Internationale Neuropsychopharmacologicum 14, 123-130.
[0186] Geyer, M.A., and Braff, D.L. (1987). Startle habituation and sensorimotor gating in schizophrenia and related animal models. Schizophrenia bulletin 13, 643-668.
[0187] Giovanoli, S., Engler, H., Engler, A., Richetto, J., Voget, M., Willi, R., Winter, C., Riva, M.A., Mortensen, P.B., Schedlowski, M., and Meyer, U. (2013). Stress in puberty unmasks latent neuropathological consequences of prenatal immune activation in mice. Science 339, 1095-1099.
[0188] Gonzalez-Burgos G, Lewis DA. NMDA receptor hypofunction, parvalbumin- positive neurons, and cortical gamma oscillations in schizophrenia. Schizophr Bull.2012; 38:950-957.
[0189] Gysin, R., Kraftsik, R., Sandell, J., Bovet, P., Chappuis, C., Conus, P., Deppen, P., Preisig, M., Ruiz, V., Steullet, P., et al. (2007). Impaired glutathione synthesis in schizophrenia: convergent genetic and functional evidence. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America 104, 16621-16626.
[0190] Haddad, J.J. (2002). Antioxidant and prooxidant mechanisms in the regulation of redox(y)-sensitive transcription factors. Cellular signalling 14, 879-897.
[0191] Hartig, W., Brauer, K., Bigl, V., and Bruckner, G. (1994). Chondroitin sulfate proteoglycan-immunoreactivity of lectin-labeled perineuronal nets around parvalbumin- containing neurons. Brain research 635, 307-311.
[0192] Hensch, T.K. (2005). Critical period plasticity in local cortical circuits. Nature reviews Neuroscience 6, 877-888. Javitt, D.C., Doneshka, P., Zylberman, I., Ritter, W., and Vaughan, H.G., Jr. (1993). Impairment of early cortical processing in schizophrenia: an event-related potential confirmation study. Biological psychiatry 33, 513-519. Herin GA, Du S, Aizenman E. The neuroprotective agent ebseleno modifies NMDA receptor function via the redox modulatory site. J Neurochem.2001; 78:1307-1314.
[0193] Hong LE, Summerfelt A, McMahon R, Adami H, Francis G, Elliott A, Buchanan RW, Thaker GK. Evoked gamma band synchronization and the liability for schizophrenia. Schizophr Res.2004; 70:293-302.
[0194] Imai H, Masayasu H, Dewar D, Graham DI, Macrae IM. Ebseleno protects both gray and white matter in a rodent model of focal cerebral ischemia. Stroke.2001; 32:2149- 2154.
[0195] Javitt DC, Doneshka P, Zylberman I, Ritter W, Vaughan HG, Jr. Impairment of early cortical processing in schizophrenia: an event-related potential confirmation study. Biol Psychiatry.1993; 33:513-519.
[0196] Javitt DC, Grochowski S, Shelley AM, Ritter W. Impaired mismatch negativity (MMN) generation in schizophrenia as a function of stimulus deviance, probability, and interstimulus/interdeviant interval. Electroencephalogr Clin Neurophysiol.1998; 108:143- 153.
[0197] Javitt DC, Doneshka P, Grochowski S, Ritter W, Jonides J, Smith EE, Koeppe RA, Awh E, Minoshima S, Mintun MA, Just MA, Carpenter PA, Huerta MF, Krubitzer LA, Kaas JH, Keating EG, Pierre A, Chopra S. Impaired mismatch negativity generation reflects widespread dysfunction of working memory in schizophrenia. Arch Gen Psychiatry.1996; 76:637-641.
[0198] Johnson, A.W., Jaaro-Peled, H., Shahani, N., Sedlak, T.W., Zoubovsky, S., Burruss, D., Emiliani, F., Sawa, A., and Gallagher, M. (2013). Cognitive and motivational deficits together with prefrontal oxidative stress in a mouse model for neuropsychiatric illness. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America 110, 12462-12467.
[0199] Jones, D.P., and Go, Y.M. (2010). Redox compartmentalization and cellular stress. Diabetes Obes Metab 12 Suppl 2, 116-125.
[0200] Kano S, Colantuoni C, Han F, Zhou Z, Yuan Q, Wilson A, Takayanagi Y, Lee Y, Rapoport J, Eaton W, Cascella N, Ji H, Goldman D, Sawa A. Genome-wide profiling of multiple histone methylations in olfactory cells: further implications for cellular susceptibility to oxidative stress in schizophrenia. Mol Psychiatry.2013;18:740-742. Kasai, H. (1997). Analysis of a form of oxidative DNA damage, 8-hydroxy-2’- deoxyguanosine, as a marker of cellular oxidative stress during carcinogenesis. Mutat Res 387, 147-163.
[0201] Kil, J., Pierce, C., Tran, H., Gu, R., and Lynch, E.D. (2007). Ebseleno treatment reduces noise induced hearing loss via the mimicry and induction of glutathione peroxidase. Hearing research 226, 44-51.
[0202] Kohr G, Eckardt S, Luddens H, Monyer H, Seeburg PH. NMDA receptor channels: subunit-specific potentiation by reducing agents. Neuron.1994; 12:1031-1040.
[0203] Lavoie, S., Murray, M.M., Deppen, P., Knyazeva, M.G., Berk, M., Boulat, O., Bovet, P., Bush, A.I., Conus, P., Copolov, D., et al. (2008). Glutathione precursor, N-acetyl- cysteine, improves mismatch negativity in schizophrenia patients. Neuropsychopharmacology: official publication of the American College of Neuropsychopharmacology 33, 2187-2199.
[0204] Lee, H., Dvorak, D., Kao, H.Y., Duffy, A.M., Scharfman, H.E., and Fenton, A.A. (2012). Early cognitive experience prevents adult deficits in a neurodevelopmental schizophrenia model. Neuron 75, 714-724.
[0205] Lewis, B.L., and O’Donnell, P. (2000). Ventral tegmental area afferents to the prefrontal cortex maintain membrane potential‘up’ states in pyramidal neurons via D1dopamine receptors. Cerebral cortex 10, 1168-1175. Lewis, D.A., Curley, A.A., Glausier, J.R., and Volk, D.W. (2012). Cortical parvalbumin interneurons and cognitive dysfunction in schizophrenia. Trends in neurosciences 35, 57-67.
[0206] Light GA, Hsu JL, Hsieh MH, Meyer-Gomes K, Sprock J, Swerdlow NR, Braff DL. Gamma band oscillations reveal neural network cortical coherence dysfunction in schizophrenia patients. Biol Psychiatry.2006; 60:1231-1240.
[0207] Lipska, B.K., Swerdlow, N.R., Geyer, M.A., Jaskiw, G.E., Braff, D.L., and Weinberger, D.R. (1995). Neonatal excitotoxic hippocampal damage in rats causes post- pubertal changes in prepulse inhibition of startle and its disruption by apomorphine. Psychopharmacol 132, 303-310.
[0208] Lynch ED, Kil J. Development of Ebseleno, a Glutathione Peroxidase Mimic, for the Prevention and Treatment of Noise-Induced Hearing Loss. Semin Hear.2009; 30:47-55.
[0209] Miller E, Mrowicka M, Saluk-Juszczak J, Ireneusz M. The Level of Isoprostanes as a Non-invasive Marker for in vivo Lipid Peroxidation in Secondary Progressive Multiple Sclerosis. Neurochem Res.2011;36:1012-1016. Moussawi, K., Pacchioni, A., Moran, M., Olive, M.F., Gass, J.T., Lavin, A., and Kalivas, P.W. (2009). N-Acetylcysteine reverses cocaine-induced metaplasticity. Nature neuroscience 12, 182-189.
[0210] Muller, A., Cadenas, E., Graf, P., and Sies, H. (1984). A novel biologically active seleno-organic compound--I. Glutathione peroxidase-like activity in vitro and antioxidant capacity of PZ 51 (Ebselen). Biochemical pharmacology 33, 3235-3239.
[0211] Muller A, Gabriel H, Sies H, Terlinden R, Fischer H, Romer A. A novel biologically active selenooorganic compound--VII. Biotransformation of ebseleno in perfused rat liver. Biochem Pharmacol.1988; 37:1103- 1109. Nakazawa K, Zsiros V, Jiang Z, Nakao K, Kolata S, Zhang S, Belforte JE.
[0212] GABAergic interneuron origin of schizophrenia pathophysiology. Neuropharmacology.2012; 62:1574-1583.
[0213] Nehru B, Kanwar SS. Modulation by N-acetylcysteine of lead-induced alterations in rat brain: reduced glutathione levels and morphology. Toxicol Mech Methods.2007;17:289-293.
[0214] Niwa, M., Kamiya, A., Murai, R., Kubo, K., Gruber, A.J., Tomita, K., Lu, L., Tomisato, S., Jaaro-Peled, H., Seshadri, S., et al. (2010). Knockdown of DISC1 by in utero gene transfer disturbs postnatal dopaminergic maturation in the frontal cortex and leads to adult behavioral deficits. Neuron 65, 480-489.
[0215] Noguchi N, Yoshida Y, Kaneda H, Yamamoto Y, Niki E. Action of ebseleno as an antioxidant against lipid peroxidation. Biochem Pharmacol.1992; 44:39-44.
[0216] Nwokocha, C.R., Baker, A., Douglas, D., McCalla, G., Nwokocha, M., and Brown, P.D. (2013). Apocynin ameliorates cadmium-induced hypertension through elevation of endothelium nitric oxide synthase. Cardiovascular toxicology 13, 357-363.
[0217] O’Donnell, P. (2011). Adolescent onset of cortical disinhibition in schizophrenia: insights from animal models. Schizophrenia bulletin 37, 484-492.
[0218] O’Donnell, P. (2012a). Cortical disinhibition in the neonatal ventral hippocampal lesion model of schizophrenia: New vistas on possible therapeutic approaches. Pharmacology & therapeutics 133, 19-25.
[0219] O’Donnell, P. (2012b). Cortical interneurons, immune factors and oxidative stress as early targets for schizophrenia. The European journal of neuroscience 35, 1866-1870.
[0220] O’Donnell, P. (2013). How can animal models be better utilized? In Schizophrenia: Evolution and Synthesis, S.M. Silverstein, B. Moghaddam, and T. Wykes, eds. (Cambridge, MA: MIT Press), pp.205-216.
[0221] O’Donnell, P., Lewis, B.L., Weinberger, D.R., and Lipska, B.K. (2002). Neonatal hippocampal damage alters electrophysiological properties of prefrontal cortical neurons in adult rats. Cerebral cortex 12, 975-982.
[0222] Otte, D.M., Sommersberg, B., Kudin, A., Guerrero, C., Albayram, O., Filiou, M.D., Frisch, P., Yilmaz, O., Drews, E., Turck, C.W., et al. (2011). N-acetyl cysteine treatment rescues cognitive deficits induced by mitochondrial dysfunction in G72/G30 transgenic mice. Neuropsychopharmacology: official publication of the American College of Neuropsychopharmacology 36, 2233-2243.
[0223] Pawlas, N., and Malecki, A. (2007). Effects of ebseleno on glutathione level in neurons exposed to arachidonic acid and 4-hydroxynonenal during simulated ischemiain vitro. Pharmacological reports: PR 59, 708-714. Paxinos, G., and Watson, C. (1998). The rat brain in stereotaxic coordinates, Fourth Edition edn (San Diego: Academic Press).
[0224] Radi, R. (2004). Nitric oxide, oxidants, and protein tyrosine nitration. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America 101, 4003-4008.
[0225] Reiter R, Wendel A. Selenium and drug metabolism--II. Independence of glutathione peroxidase and reversibility of hepatic enzyme modulations in deficient mice. Biochem Pharmacol.1984; 33:1923-1928.
[0226] Satoh T, Ishige K, Sagara Y. Protective effects on neuronal cells of mouse afforded by ebseleno against oxidative stress at multiple steps. Neurosci Lett.2004; 371:1-5.
[0227] Schmitz, C., and Hof, P.R. (2005). Design-based stereology in neuroscience. Neuroscience 130, 813-831. Sies H. Ebselen: a glutathione peroxidase mimic. Methods Enzymol.1994;234: 476-482.
[0228] Spencer KM, Nestor PG, Perlmutter R, Niznikiewicz MA, Klump MC, Frumin M, Shenton ME, McCarley RW. Neural synchrony indexes disordered perception and cognition in schizophrenia. Proc Natl Acad Sci U S A.2004; 101:17288-17293.
[0229] Steullet, P., Cabungcal, J.H., Kulak, A., Kraftsik, R., Chen, Y., Dalton, T.P., Cuenod, M., and Do, K.Q. (2010). Redox dysregulation affects the ventral but not dorsal hippocampus: impairment of parvalbumin neurons, gamma oscillations, and related behaviors. The Journal of neuroscience: the official journal of the Society for Neuroscience 30, 2547-2558.
[0230] Steullet, P., Neijt, H.C., Cuenod, M., and Do, K.Q. (2006). Synaptic plasticity impairment and hypofunction of NMDA receptors induced by glutathione deficit: relevance to schizophrenia. Neuroscience 137, 807-819. Tosic, M., Ott, J., Barral, S., Bovet, P., Deppen, P., Gheorghita, F., Matthey, M.L., Parnas, J., Preisig, M., Saraga, M., et al. (2006). Schizophrenia and oxidative stress: glutamate cysteine ligase modifier as a susceptibility gene. Am J Hum Genet 79, 586-592.
[0231] Tseng, K.Y., Chambers, R.A., and Lipska, B.K. (2009). The neonatal ventral hippocampal lesion as a heuristic neurodevelopmental model of schizophrenia. Behavioural brain research 204, 295-305.
[0232] Tseng, K.Y., Lewis, B.L., Hashimoto, T., Sesack, S.R., Kloc, M., Lewis, D.A., and O’Donnell, P. (2008). A neonatal ventral hippocampal lesion causes functional deficits in adult prefrontal cortical interneurons. The Journal of neuroscience: the official journal of the Society for Neuroscience 28, 12691-12699.
[0233] Tseng, K.Y., and O’Donnell, P. (2007). D2 dopamine receptors recruit a GABA component for their attenuation of excitatory synaptic transmission in the adult rat prefrontal cortex. Synapse 61, 843-850.
[0234] Uhlhaas PJ, Singer W. Abnormal neural oscillations and synchrony in schizophrenia. Nat Rev Neurosci.2010; 11: 100-113.
[0235] Ullrich V, Weber P, Meisch F, von Appen F. Ebselen-binding equilibria between plasma and target proteins. Biochem Pharmacol.1996; 52: 15-19.
[0236] Umbricht, D., Schmid, L., Koller, R., Vollenweider, F.X., Hell, D., and Javitt, D.C. (2000). Ketamine-induced deficits in auditory and visual context-dependent processing in healthy volunteers: implications for models of cognitive deficits in schizophrenia. Archives of general psychiatry 57, 1139-1147.
[0237] Wendel A, Fausel M, Safayhi H, Tiegs G, Otter R. A novel biologically active seleno-organic compound--II. Activity of PZ 51 in relation to glutathione peroxidase. Biochem Pharmacol.1984; 33: 3241-3245.
[0238] Wijtenburg S A, Gaston FE, Spieker E A, Forenic S A, Kochunov P, Hong LE, Rowland L M. Reproducibility of phase rotation STEAM at 3T: Focus on glutathione. Magn Reson.Med.2013 Oct 22. doi: 0.1002/mrm.24959.
[0239] [Epub ahead of print]
[0240] Wirth EK, Conrad M, Winterer J, Wozny C, Carlson BA, Roth S, Schmitz D, Bornkamm GW, Coppola V, Tessarollo L, Schomburg L, Kohrle J, Hatfield DL, Schweizer U. Neuronal selenoprotein expression is required for interneuron development and prevents seizures and neurodegeneration. FASEB J.2010; 24:844-852. Yao, J.K., and Keshavan, M.S. (2011). Antioxidants, redox signaling, and pathophysiology in schizophrenia: an integrative view. Antioxidants & redox signaling 15, 2011-2035.
[0241] Zhao R, Masayasu H, Holmgren A. Ebselen: a substrate for human thioredoxin reductase strongly stimulating its hydroperoxide reductase activity and a superfast thioredoxin oxidant. Proc Natl Acad Sci U S A. 2002; 99:8579-8584.
[0242] Compuestos
[0243] Los compuestos representativos de la presente invención se describen a lo largo de la memoria descriptiva y las reivindicaciones.
[0244] Un compuesto representativo de los imitadores de la glutatión peroxidasa (GPx) incluye ebseleno, (2-Fenil-1,2-benzisoselenazol-3(2H)-ona) con fórmula empírica C<13>H<9>NOSe, peso molecular 274.2 y la siguiente fórmula:
[0247]
[0249] El ebseleno es el único principio activo administrado en la formulación. El ebseleno es ligeramente soluble en soluciones acuosas a 25° Celsius. El ebseleno actúa como catalizador y no se consume durante las reacciones de desintoxicación (Muller et al., 1988). Una realización de la formulación de ebseleno tiene una pureza > 99 %, confirmada por HPLC. La síntesis de esta formulación es proporcionada por Rhodia Pharma Solutions e incluye cápsulas selladas herméticamente en blísteres. Cada cápsula contiene 200 mg de la formulación de ebseleno o SPI-1000 (placebo).
[0250] Otros compuestos representativos de los imitadores de la glutatión peroxidasa (GPx) incluyen 2,2’-diselenobis-β-ciclodextrina y ácido 6A,6B-diselenínico-6A’,6B’-β-ciclodextrina con puente de selenio.
[0251] Los compuestos representativos del segundo compuesto de la combinación incluyen glutatión (GSH), profármacos de glutatión enumerados en la Tabla 1 y profármacos de cisteína enumerados en la Tabla 2.
[0252] Tabla 1 – Profármacos de glutatión
[0253]
[0254] Tabla 2 – Profármacos de cisteína
[0255]
[0256]
[0258] Otras realizaciones de profármacos de cisteína incluyen ácidos tiazolidina-4-carboxílicos 2-sustituidos con monosacáridos de aldosa, como gliceraldehído, arabinosa, lixosa, ribosa, xilosa, galactosa, glucosa y manosa.
[0259] Cuando los compuestos de acuerdo con esta invención tienen al menos un centro quiral, pueden existir como enantiómeros. Cuando los compuestos poseen dos o más centros quirales, pueden existir además como diastereómeros. Cuando los procesos para la preparación de los compuestos de acuerdo con la invención dan lugar a mezclas de estereoisómeros, estos isómeros pueden separarse mediante técnicas convencionales, como la cromatografía preparativa. Los compuestos pueden prepararse en forma racémica o como enantiómeros o diastereómeros individuales mediante síntesis estereoespecífica o por resolución. Los compuestos pueden, por ejemplo, resolverse en sus enantiómeros o diastereómeros componentes mediante técnicas estándar, como la formación de pares estereoisoméricos mediante la formación de sales con una base ópticamente activa, seguida de cristalización fraccionada y regeneración del ácido libre. Los compuestos también pueden resolverse mediante la formación de ésteres o amidas estereoisoméricos, seguida de separación cromatográfica y eliminación del auxiliar quiral. Alternativamente, los compuestos pueden resolverse utilizando una columna de HPLC quiral. Debe entenderse que todos los estereoisómeros, mezclas racémicas, diastereómeros, isómeros geométricos y enantiómeros de los mismos están comprendidos dentro del alcance de la presente invención.
[0260] Además, algunas de las formas cristalinas de los compuestos pueden existir como polimorfos y, como tales, se incluyen en la presente invención. Además, algunos de los compuestos pueden formar solvatos con agua (es decir, hidratos) o disolventes orgánicos comunes, y dichos solvatos también están comprendidos dentro del alcance de esta invención.
[0261] Administración general, formulación y dosificación
[0262] Los compuestos presentes son moduladores de GPx y, por lo tanto, son útiles para el tratamiento, la prevención o la inhibición de la progresión de afecciones mediadas por GPx, incluyendo, pero sin limitarse a, esquizofrenia, trastorno bipolar, trastornos psicóticos y otros trastornos, enfermedades o afecciones relacionadas.
[0263] Una realización presenta un método para tratar a un sujeto con una enfermedad mediada por GPx, comprendiendo dicho método la administración al sujeto de una cantidad terapéuticamente efectiva de una composición farmacéutica que comprende un compuesto divulgado en el presente documento. En particular, la realización también proporciona un método para tratar o inhibir la progresión de la esquizofrenia, el trastorno bipolar, los trastornos psicóticos, la discinesia tardía y los síntomas o complicaciones asociados en un sujeto, en el que el método comprende la administración al sujeto de una cantidad terapéuticamente efectiva de una composición farmacéutica que comprende un compuesto divulgado en el presente documento.
[0264] Las realizaciones también incluyen profármacos de los compuestos divulgados en el presente documento. En general, dichos profármacos serán derivados funcionales de los compuestos que se convierten fácilmentein vivoen el compuesto requerido. Por lo tanto, en los métodos de tratamiento de la presente invención, el término "administrar" abarcará el tratamiento de los diversos trastornos descritos con el compuesto específicamente divulgado o con un compuesto que puede no estar específicamente divulgado, pero que se convierte en el compuesto especificadoin vivodespués de su administración al sujeto. Los procedimientos convencionales para la selección y preparación de derivados de profármacos adecuados se describen, por ejemplo, en "Design of Prodrugs", ed. H. Bundgaard, Elsevier, 1985.
[0265] Algunas de las formas cristalinas de los compuestos pueden existir como polimorfos y, como tales, se incluyen en la presente invención. Además, algunos de los compuestos pueden formar solvatos con agua (es decir, hidratos) o disolventes orgánicos comunes, y dichos solvatos se incluyen en algunas realizaciones.
[0266] Cuando los procesos para la preparación de los compuestos divulgados en el presente documento dan lugar a mezclas de estereoisómeros, estos isómeros pueden separarse mediante técnicas convencionales, como la cromatografía preparativa. Los compuestos pueden prepararse en forma racémica o como enantiómeros o diastereómeros individuales, ya sea mediante síntesis estereoespecífica o por resolución. Los compuestos pueden, por ejemplo, resolverse en sus enantiómeros o diastereómeros componentes mediante técnicas estándar, como la formación de pares de estereoisómeros mediante la formación de sales con una base ópticamente activa, seguida de cristalización fraccionada y regeneración del ácido libre. Los compuestos también pueden resolverse mediante la formación de ésteres o amidas estereoisoméricos, seguida de separación cromatográfica y eliminación del auxiliar quiral. Alternativamente, los compuestos pueden resolverse utilizando una columna de HPLC quiral. Debe entenderse que todos los estereoisómeros, mezclas racémicas, diastereómeros, isómeros cis-trans y enantiómeros de los mismos están comprendidos en algunas de las realizaciones.
[0267] Dosis
[0268] Los expertos en el tratamiento de trastornos, enfermedades o afecciones mediadas por GPx pueden determinar la cantidad diaria efectiva a partir de los resultados de las pruebas que se presentan a continuación y otra información. La dosis exacta y la frecuencia de administración dependen del compuesto particular de la invención utilizado, la afección específica que se está tratando, la gravedad de la afección que se está tratando, la edad, el peso y el estado físico general del paciente particular, así como de otros medicamentos que pueda estar tomando, como es bien sabido por los expertos en la materia. Además, es evidente que dicha cantidad diaria efectiva puede reducirse o aumentarse dependiendo de la respuesta del paciente tratado y/o de la evaluación del médico que prescribe los compuestos de la presente invención. Por lo tanto, los rangos de cantidad diaria efectiva mencionados en este documento son solo orientativos para la práctica de la presente invención.
[0270] Para los métodos de tratamiento de trastornos mediados por GPx divulgados en el presente documento, utilizando cualquiera de los compuestos divulgados en el presente documento, la forma farmacéutica contendrá un portador farmacéuticamente aceptable que contenga entre aproximadamente 0.1 mg a aproximadamente 5000 mg; en particular, de aproximadamente 0.5 mg a aproximadamente 1000 mg; y, más particularmente, de aproximadamente 1 mg a aproximadamente 100 mg del compuesto, y puede presentarse en cualquier forma adecuada para la vía de administración seleccionada. Sin embargo, las dosis pueden variar de acuerdo con las necesidades de los sujetos, la gravedad de la afección que se está tratando y el compuesto que se esté utilizando. Se puede emplear la administración diaria o la administración posterior periódica.
[0272] Las composiciones farmacéuticas descritas en este documento contendrán, por unidad de dosis (por ejemplo, comprimido, cápsula, polvo, inyección, supositorio, cucharadita, etc.), de aproximadamente 0.001 mg/kg/día a aproximadamente 10 mg/kg/día (en particular, de aproximadamente 0.01 mg/kg/día a aproximadamente 1 mg/kg/día; y, más particularmente, de aproximadamente 0.1 mg/kg/día a aproximadamente 0.5 mg/kg/día) y pueden administrarse a una dosis de aproximadamente 0.001 mg/kg/día a aproximadamente 30 mg/kg/día (en particular, de aproximadamente 0.01 mg/kg/día a aproximadamente 2 mg/kg/día, más particularmente de aproximadamente 0.1 mg/kg/día a aproximadamente 1 mg/kg/día e incluso más particularmente de aproximadamente 0.5 mg/kg/día a aproximadamente 1 mg/kg/día).
[0274] Estas composiciones se presentan en formas de dosificación unitaria, tales como comprimidos, píldoras, cápsulas, polvos secos para reconstitución o inhalación, gránulos, pastillas, soluciones o suspensiones parenterales estériles, aerosoles o pulverizadores líquidos dosificados, gotas, ampollas, dispositivos autoinyectores o supositorios para administración oral, intranasal, sublingual, intraocular, transdérmica, parenteral, rectal, vaginal, mediante inhalador de polvo seco u otros medios de inhalación o insuflación. Alternativamente, la composición puede presentarse en una forma adecuada para la administración una vez por semana o una vez al mes; por ejemplo, una sal insoluble del compuesto activo, como la sal de decanoato, puede adaptarse para proporcionar una preparación de depósito para inyección intramuscular.
[0276] Para la preparación de composiciones farmacéuticas sólidas, como los comprimidos, el principio activo principal se mezcla con un portador farmacéutico, por ejemplo, ingredientes convencionales para la fabricación de comprimidos, como diluyentes, aglutinantes, adhesivos, desintegrantes, lubricantes, antiadherentes y agentes de recubrimiento. Los diluyentes adecuados incluyen, pero sin limitarse a, almidón (es decir, almidón de maíz, trigo o patata, que puede estar hidrolizado), lactosa (granulada, secada por pulverización o anhidra), sacarosa, diluyentes a base de sacarosa (azúcar glas; sacarosa más aproximadamente del 7 al 10 % en peso de azúcar invertido; sacarosa más aproximadamente el 3 % en peso de dextrinas modificadas; sacarosa más azúcar invertido, aproximadamente el 4 % en peso de azúcar invertido, aproximadamente del 0.1 al 0.2 % en peso de almidón de maíz y estearato de magnesio), dextrosa, inositol, manitol, sorbitol, celulosa microcristalina (es decir, celulosa microcristalina AVICEL™ disponible a través de FMC Corp.), fosfato dicálcico, sulfato de calcio dihidratado, lactato de calcio trihidratado y similares. Los aglutinantes y adhesivos adecuados incluyen, pero sin limitarse a, goma arábiga, goma guar, goma tragacanto, sacarosa, gelatina, glucosa, almidón y derivados de la celulosa (es decir, metilcelulosa, carboximetilcelulosa sódica, etilcelulosa, hidroxipropilmetilcelulosa, hidroxipropilcelulosa y similares), aglutinantes solubles o dispersables en agua (es decir, ácido algínico y sus sales, silicato de magnesio y aluminio, hidroxietilcelulosa [es decir, TYLOSE™ disponible a través de Hoechst Celanese], polietilenglicol, ácidos polisacáridos, bentonitas, polivinilpirrolidona, polimetacrilatos y almidón pregelatinizado) y similares. Los desintegrantes adecuados incluyen, pero sin limitarse a, almidones (maíz, patata, etc.), glicolatos de almidón sódico, almidones pregelatinizados, arcillas (silicato de magnesio y aluminio), celulosas (como carboximetilcelulosa sódica reticulada y celulosa microcristalina), alginatos, almidones pregelatinizados (es decir, almidón de maíz, etc.), gomas (es decir, agar, guar, algarroba, karaya, pectina y goma tragacanto), polivinilpirrolidona reticulada y similares. Entre los lubricantes y antiadherentes adecuados se incluyen, pero sin limitarse a, estearatos (de magnesio, calcio y sodio), ácido esteárico, ceras de talco, estearowet, ácido bórico, cloruro de sodio, DL-leucina, Carbowax 4000, Carbowax 6000, oleato de sodio, benzoato de sodio, acetato de sodio, lauril sulfato de sodio, lauril sulfato de magnesio y similares. Entre los agentes de recubrimiento adecuados se incluyen, pero sin limitarse a, talco, almidón de maíz, sílice (es decir, sílice CAB-O-SIL™ disponible a través de Cabot, sílice SYLOID™ disponible a través de W. R. Grace/Davison y sílice AEROSIL™ disponible a través de Degussa) y similares. Se pueden añadir edulcorantes y saborizantes a las formas farmacéuticas sólidas masticables para mejorar el sabor de la forma de dosificación oral. Además, se pueden añadir o aplicar colorantes y recubrimientos a la forma farmacéutica sólida para facilitar la identificación del fármaco o con fines estéticos. Estos portadores se formulan con el principio activo farmacéutico para proporcionar una dosis precisa y adecuada del principio activo con un perfil de liberación terapéutico.
[0277] Generalmente, estos portadores se mezclan con el principio activo farmacéutico para formar una composición de preformulación sólida que contiene una mezcla homogénea de la forma farmacéutica activa de la presente invención, o una sal farmacéuticamente aceptable de la misma. Generalmente, la preformulación se forma mediante uno de tres métodos comunes: (a) granulación húmeda, (b) granulación seca y (c) mezcla en seco. Cuando se hace referencia a estas composiciones de preformulación como homogéneas, se entiende que el ingrediente activo está disperso uniformemente en toda la composición, de modo que la composición pueda subdividirse fácilmente en formas farmacéuticas de dosis unitarias igualmente efectivas, como comprimidos, píldoras y cápsulas. Esta composición de preformulación sólida se subdivide posteriormente en formas de dosificación unitarias del tipo descrito anteriormente, que contienen desde aproximadamente 0.1 mg hasta aproximadamente 500 mg del ingrediente activo de la presente invención. Los comprimidos o píldoras que contienen las nuevas composiciones también pueden formularse en comprimidos o píldoras multicapa para proporcionar productos de liberación sostenida o de doble liberación. Por ejemplo, un comprimido o píldora de doble liberación puede comprender un componente de dosis interna y un componente de dosis externa, este último en forma de una capa que recubre al primero. Los dos componentes pueden estar separados por una capa entérica, que sirve para resistir la desintegración en el estómago y permite que el componente interno pase intacto al duodeno o que su liberación se retrase. Se pueden utilizar diversos materiales para dichas capas o recubrimientos entéricos, incluyendo una serie de materiales poliméricos como goma laca, acetato de celulosa (es decir, ftalato de acetato de celulosa, trimelitato de acetato de celulosa), ftalato de acetato de polivinilo, ftalato de hidroxipropilmetilcelulosa, succinato de acetato de hidroxipropilmetilcelulosa, copolímeros de metacrilato y acrilato de etilo, copolímeros de metacrilato y metacrilato de metilo, y similares. Los comprimidos de liberación sostenida también pueden fabricarse mediante recubrimiento con película o granulación húmeda utilizando sustancias ligeramente solubles o insolubles en solución (que en la granulación húmeda actúan como agentes aglutinantes) o sólidos de bajo punto de fusión en forma fundida (que en la granulación húmeda pueden incorporar el ingrediente activo). Estos materiales incluyen ceras de polímeros naturales y sintéticos, aceites hidrogenados, ácidos grasos y alcoholes (es decir, cera de abejas, cera de carnauba, alcohol cetílico, alcohol cetearílico, y similares), ésteres de ácidos grasos, jabones metálicos y otros materiales aceptables que pueden utilizarse para granular, recubrir, encapsular o limitar de otro modo la solubilidad de un ingrediente activo para lograr un producto de liberación prolongada o sostenida.
[0279] Las formas líquidas en las que se pueden incorporar las nuevas composiciones divulgadas en el presente documento para su administración oral o por inyección incluyen, pero sin limitarse a, soluciones acuosas, jarabes con sabor adecuado, suspensiones acuosas u oleosas y emulsiones saborizadas a base de aceites comestibles como aceite de semilla de algodón, aceite de sésamo, aceite de coco o aceite de cacahuete, así como elixires y vehículos farmacéuticos similares. Los agentes de suspensión adecuados para suspensiones acuosas incluyen gomas sintéticas y naturales como la goma arábiga, el agar, el alginato (es decir, alginato de propileno, alginato de sodio y similares), el guar, la goma karaya, la goma de algarrobo, la pectina, tragacanto y goma xantana, derivados de la celulosa como la carboximetilcelulosa sódica, la metilcelulosa, la hidroxi metilcelulosa, la hidroxietilcelulosa, la hidroxipropilcelulosa y la hidroxipropilmetilcelulosa, y combinaciones de las mismas, polímeros sintéticos como la polivinilpirrolidona, el carbómero (es decir, carboxipolimetileno) y el polietilenglicol; arcillas como la bentonita, la hectorita, la atapulgita o la sepiolita; y otros agentes de suspensión farmacéuticamente aceptables como la lecitina, la gelatina o similares. Los tensioactivos adecuados incluyen, pero sin limitarse a, docusato sódico, lauril sulfato sódico, polisorbato, octoxinol-9, nonoxinol-10, polisorbato 20, polisorbato 40, polisorbato 60, polisorbato 80, poloxámero 188, poloxámero 235 y combinaciones de los mismos. Los agentes defloculantes o dispersantes adecuados incluyen lecitinas de grado farmacéutico. Entre los agentes floculantes adecuados se incluyen, pero sin limitarse a, electrolitos neutros simples (es decir, cloruro de sodio, cloruro de potasio y similares), polímeros insolubles altamente cargados y especies polielectrolíticas, iones divalentes o trivalentes solubles en agua (es decir, sales de calcio, alumbres o sulfatos, citratos y fosfatos (que pueden utilizarse conjuntamente en formulaciones como tampones de pH y agentes floculantes). Entre los conservantes adecuados se incluyen, pero sin limitarse a, parabenos (es decir, metilo, etilo, n-propilo y nbutilo), ácido sórbico, timerosal, sales de amonio cuaternario, alcohol bencílico, ácido benzoico, gluconato de clorhexidina, feniletanol y similares. Existen muchos vehículos líquidos que pueden utilizarse en formas farmacéuticas líquidas, sin embargo, el vehículo líquido utilizado en una forma farmacéutica particular debe ser compatible con el/los agente(s) de suspensión. Por ejemplo, los vehículos líquidos no polares, como los ésteres grasos y los aceites, se utilizan mejor con agentes suspensivos como tensioactivos de bajo HLB (Balance Hidrófilo-Lipófilo), hectorita de estearalconio, resinas insolubles en agua, polímeros formadores de película insolubles en agua y similares. Por el contrario, los líquidos polares, como el agua, los alcoholes, los polioles y los glicoles, se utilizan mejor con agentes de suspensión como tensioactivos de mayor HLB, silicatos de arcilla, gomas, derivados de celulosa solubles en agua, polímeros solubles en agua y similares. Para la administración parenteral, se desean suspensiones y soluciones estériles. Las formas líquidas útiles para la administración parenteral incluyen soluciones, emulsiones y suspensiones estériles. Se emplean preparaciones isotónicas que generalmente contienen conservantes adecuados cuando se desea la administración intravenosa.
[0281] Además, los compuestos divulgados en el presente documento pueden administrarse en una forma farmacéutica intranasal mediante el uso tópico de vehículos intranasales adecuados o mediante parches transdérmicos, cuya composición es bien conocida por los expertos en la materia. Para ser administrados en forma de un sistema de administración transdérmica, la administración de una dosis terapéutica será, por supuesto, continua en lugar de intermitente durante todo el régimen de dosificación.
[0282] Los compuestos divulgados en el presente documento también pueden administrarse en forma de sistemas de administración de liposomas, como vesículas unilamelares pequeñas, vesículas unilamelares grandes, vesículas multilamelares y similares. Los liposomas pueden formarse a partir de una variedad de fosfolípidos, como colesterol, estearilamina, fosfatidilcolinas y similares.
[0283] La dosis diaria de una composición farmacéutica divulgada en el presente documento puede variar en un amplio rango, desde aproximadamente 0.1 mg hasta aproximadamente 5000 mg; preferiblemente, la dosis estará en el rango de aproximadamente 1 mg a aproximadamente 100 mg por día para un ser humano promedio. Para administración oral, las composiciones se presentan preferiblemente en forma de comprimidos que contienen 0.01, 0.05, 0.1, 0.5, 1.0, 2.5, 5.0, 10.0, 15.0, 25.0, 50.0, 100, 150, 200, 250 o 500 miligramos del principio activo para el ajuste sintomático de la dosis al paciente a tratar. Ventajosamente, un compuesto de la presente invención puede administrarse en una dosis diaria única o la dosis diaria total puede administrarse en dosis divididas de dos, tres o cuatro veces al día.
[0284] La dosis terapéuticamente efectiva para los compuestos activos divulgados en el presente documento o una composición farmacéutica de los mismos puede variar de acuerdo con el efecto deseado. Por lo tanto, las dosis óptimas a administrar pueden ser determinadas fácilmente por los expertos en la materia y pueden variar de acuerdo con el compuesto particular utilizado, la vía de administración, la concentración de la preparación y la etapa de la enfermedad. Además, los factores asociados con el paciente en particular, incluyendo la edad, el peso, la dieta y el momento de la administración, requerirán el ajuste de la dosis a un nivel terapéutico adecuado. Las dosis mencionadas anteriormente son, por lo tanto, ejemplos del caso promedio. Por supuesto, puede haber casos individuales en los que se justifiquen rangos de dosis más altos o más bajos, y dichos casos se encuentran dentro del alcance de esta invención.
[0285] Los compuestos divulgados en el presente documento pueden administrarse en cualquiera de las composiciones y regímenes de dosificación mencionados anteriormente o mediante aquellas composiciones y regímenes de dosificación establecidos en la técnica cuando se requiera el uso de los compuestos divulgados en el presente documento como moduladores de GPx para un paciente que lo necesite.
[0286] Formulaciones
[0287] Para preparar las composiciones farmacéuticas divulgadas en el presente documento, uno o más compuestos divulgados en el presente documento o sus sales, como principio activo, se mezclan íntimamente con un portador farmacéutico de acuerdo con las técnicas convencionales de formulación farmacéutica, cuyo portador puede adoptar una amplia variedad de formas, dependiendo de la forma de preparación deseada para la administración (por ejemplo, oral o parenteral). Los portadores farmacéuticamente aceptables adecuados son bien conocidos en la técnica. Se pueden encontrar descripciones de algunos de estos portadores farmacéuticamente aceptables en The Handbook of Pharmaceutical Excipients, publicado por la American Pharmaceutical Association y la Pharmaceutical Society of Great Britain.
[0288] Los compuestos de la presente invención pueden formularse en diversas formas farmacéuticas para su administración. Los métodos de formulación de composiciones farmacéuticas se han descrito en numerosas publicaciones, tal como Pharmaceutical Dosage Forms: Tablets, Second Edition, Revised and Expanded, Volumes 1-3, edited by Lieberman et al.; Pharmaceutical Dosage Forms: Parenteral Medications, Volumes 1-2, edited by Avis et al.; y Pharmaceutical Dosage Forms: Disperse Systems, Volumes 1-2, edited by Lieberman et al.; published by Marcel Dekker, Inc.
[0289] Se preparó una formulación de ebseleno en forma de cápsula para los ejemplos que se presentan a continuación, en los que se investigó el ebseleno como modulador de GPx, en el que GPx, una enzima desregulada en pacientes con esquizofrenia (SZ) es una nueva diana terapéutica para la SZ. El ebseleno es el único principio activo en esta formulación, que actúa como catalizador y no se consume durante las reacciones de desintoxicación. La formulación tiene una pureza > 99%, determinada por HPLC. Las cápsulas están selladas herméticamente en envases blíster. Cada cápsula contiene 200 mg de ebseleno, que presenta baja toxicidad debido a la estabilidad de su estructura única. Su fracción de selenio (Se) no se libera durante la biotransformación y, por lo tanto, no interviene en el metabolismo del selenio. Es posible que, durante el proceso de fabricación, quede selenio no unido. El criterio de fabricación es que cada cápsula contenga menos de 1 microgramo de selenio inorgánico. En humanos, la toxicidad por selenio, o selenosis, puede ocurrir tras la ingestión crónica de altas cantidades de selenio. La ingesta diaria recomendada (RDA) de selenio para adultos es de 55 microgramos por día. La dosis se ajusta para que la exposición total al selenio sea significativamente menor que la RDA, lo que se monitoriza durante el estudio.
[0290] Métodos de uso
[0291] También se divulgan en el presente documento métodos para el uso de ratas con lesión ventral del hipocampo neonatal (NVHL) y métodos relacionados con el análisis/diagnóstico de modelos animales representativos de trastornos mediados por GPx, incluyendo, pero sin limitarse a, el estrés oxidativo, la esquizofrenia, el trastorno bipolar y otros trastornos psicóticos. Los usos de estos métodos divulgados en el presente documento pueden incluir aplicaciones de investigación, fines terapéuticos, diagnósticos médicos y/o la estratificación de uno o más pacientes o sujetos. Se divulgan métodos para identificar composiciones útiles para la prevención o el tratamiento de trastornos mediados por GPx.
[0292] Algunas realizaciones de estos métodos enfatizan la evaluación en fase temprana de los mecanismos de acción de ebseleno, tal como se divulga en el presente documento, y la implicación de biomarcadores cerebrales en pacientes con esquizofrenia. Una realización utiliza la espectroscopia de resonancia magnética cerebral corroborativa de GSH y otros biomarcadores de GSH en sangre periférica como resultados primarios, por ejemplo, en un ensayo clínico.
[0293] Métodos para el tratamiento del estrés oxidativo, la esquizofrenia y otras enfermedades psicóticas
[0294] Se observó un aumento del nivel de inmunoetiquetado de estrés oxidativo en la PFC de ratas con NVHL juvenil, junto con una disminución en el recuento de células de PV, déficit de PPI, modulación alterada de la dopamina de los circuitos locales de la PFC y déficits en los potenciales evocados relacionados en el EEG de ratas con NVHL adultas. Todos estos déficits se previnieron con el tratamiento con N-acetilcisteína (NAC) desde P5 hasta P50. Los déficits de PPI también se previnieron si el tratamiento con NAC se iniciaba durante la adolescencia (P35) y con otros dos moduladores redox (ebseleno, apocinina). Los datos mostraron que el estrés oxidativo en la corteza prefrontal es una característica central que media las alteraciones inducidas por la NVHL, y que el tratamiento antioxidante previene estas alteraciones. El estrés oxidativo presintomático, altamente presente en PVI y también observado en las neuronas piramidales, es por lo tanto responsable de diversos fenómenos relevantes para la esquizofrenia en un modelo de neurodesarrollo que no implica una manipulación directa de las vías redox.
[0295] El estrés oxidativo puede afectar la función de la PFC a través de varios mecanismos. Con altos niveles de estrés oxidativo, puede producirse daño o muerte celular a través de la peroxidación lipídica de la membrana, la mutagénesis del ADN, las alteraciones en la estructura de la cromatina, la inactivación de enzimas críticas o la activación de cascadas de quinasas y caspasas (Bitanihirwe y Woo, 2011). El desequilibrio redox también puede provocar alteraciones en el desarrollo cerebral al afectar los residuos de cisteína sensibles al redox en los sitios de unión al ADN de los factores de transcripción (Haddad, 2002) y al afectar el ADN mitocondrial, altamente susceptible a la oxidación (Jones y Go, 2010).
[0296] Además, muchas proteínas sinápticas incluyen sitios reguladores redox; por ejemplo, los receptores NMDA se vuelven hipofuncionales tras la oxidación (Steullet et al., 2006). Se detectó estrés oxidativo y nitrosativo en las neuronas piramidales de la PFC y PVI en ratas jóvenes con una NVHL antes del inicio de los déficits electrofisiológicos y conductuales. Esto indica que las PVI aún pueden ser algo funcionales, y que tras su maduración periadolescente, el efecto deletéreo del estrés oxidativo las lleva a un estado patológico, como lo revela la reducción en la marcación de PV y PNN. Nuestros datos indican que las alteraciones redox en el modelo de NVHL abarcan tanto el estrés oxidativo como el nitrosativo, y los tratamientos que aumentan el GSH (NAC y ebseleno) o disminuyen la generación de especies reactivas de oxígeno (ROS) (apocinina) previenen los déficits conductuales de aparición en la edad adulta. Por lo tanto, el modelo de NVHL presenta una alteración generalizada en las vías redox que podría revertirse mediante la modulación de diferentes factores, como el GSH y la NADPH oxidasa.
[0297] También se observa estrés oxidativo en otro modelo animal de esquizofrenia: el ratón con DISC1 dominante negativo (DN-DISC1) (Johnson et al., 2013). Los ratones DN-DISC1 presentan un aumento de la tinción de 8-oxo-dG en la PFC, que se asocia con varios déficits conductuales. Los datos indican un vínculo causal entre el aumento del estrés oxidativo en la PFC y los déficits electrofisiológicos y conductuales asociados con la esquizofrenia, ya que el antioxidante NAC previene tanto el aumento del estrés oxidativo como los déficits electrofisiológicos y conductuales en las ratas con NVHL.
[0298] La fisiología de la PFC era disfuncional en ratas con NVHL adultas, y este déficit se previno con el tratamiento con NAC. Se utilizaron varios parámetros para evaluar la función de la PFC, incluyendo la modulación de la dopamina de las respuestas sinápticas en neuronas piramidales en secciones, registros intracelularesin vivode las respuestas a la estimulación del VTA y potenciales evocados auditivos. Las grabaciones de neuronas piramidales mostraron una pérdida de la atenuación mediada por D2 de los EPSP corticocorticales en secciones cerebrales y una activación exagerada inducida por la estimulación del VTAin vivoen ratas con NVHL adultas, como también informaron O’Donnell et al., 2002; Tseng et al., 2008. Tanto la atenuación de secciones de D2 de respuestas sinápticas de células piramidales como el silenciamientoin vivode neuronas piramidales mediante la estimulación de VTA dependen de la activación de FSI por la dopamina en ratas de control (Tseng y O'Donnell, 2007). La ausencia de alteraciones en estas respuestas en ratas con NVHL tratadas con NAC indica que el estrés oxidativo durante el desarrollo posnatal tiene un efecto perjudicial sobre las interacciones de células piramidales FSI moduladas por dopamina. Estas interacciones son cruciales para un equilibrio adecuado entre excitación e inhibición y para el procesamiento de la información en la PFC. Actualmente, existe un debate sobre si las interneuronas o las neuronas piramidales son el sitio principal de disfunción en la esquizofrenia. Nuestros datos no se inclinan por qué tipo de célula es principalmente afectada y destaca el estrés oxidativo como causa de las interacciones alteradas entre las neuronas piramidales y las interneuronas inhibitorias.
[0299] La negatividad de discordancia es una medida de gran relevancia traslacional. La MMN evalúa la atribución de prominencia a estímulos auditivos desviados y se encuentra alterada en pacientes con esquizofrenia (Javitt et al., 1993). Dado que la MMN depende de la actividad del receptor de NMDA (Ehrlichman et al., 2009), es probable que el estrés oxidativo altere los mecanismos sinápticos corticales dependientes de NMDA involucrados en el procesamiento de señales prominentes frente a señales comunes.
[0300] Se observaron déficits de MMN en ratas con NVHL, que se previnieron con el tratamiento con NAC. La evaluación funcional del impacto del tratamiento antioxidante se complementó con la prueba de integración sensoriomotora con PPI. Tanto el tratamiento con NAC en la etapa juvenil como en la adolescencia previno los déficits de PPI en adultas en ratas con NVHL. La observación de que el tratamiento con NAC o Ebseleno durante la adolescencia es suficiente para prevenir los déficits de PPI tiene importantes implicaciones para los mecanismos redox como posibles dianas para el tratamiento de la esquizofrenia. Es probable que se prevenga el déficit incluso si el tratamiento antioxidante se inicia después del desarrollo del estrés oxidativo. Dado que los sujetos con riesgo ultraalto de esquizofrenia no se pueden identificar hasta la adolescencia, la modulación redox puede ser beneficiosa incluso si se inicia una vez que se ha identificado el alto riesgo.
[0301] Se demostró que el estrés oxidativo presintomático probablemente causa una función aberrante de la PFC adulta en ratas con NVHL. Esta manipulación del desarrollo es un modelo bien establecido de alteración del equilibrio excitación-inhibición cortical. Aunque el modelo implica una lesión, que no se observa en la esquizofrenia, el modelo de NVHL y otros modelos de desarrollo han sido útiles para probar hipótesis específicas sobre las trayectorias de desarrollo de fenómenos electrofisiológicos y conductuales relevantes para la enfermedad (O'Donnell, 2013). Entre las principales ventajas del modelo de NVHL se incluyen el inicio de los déficits en la adolescencia y la capacidad de reproducir fenómenos observados en la esquizofrenia cuando se evalúan medidas extrapolables (O'Donnell, 2012a). Cabe destacar que el modelo de NVHL converge con varias otras manipulaciones consideradas modelos animales de esquizofrenia al producir pérdida del inmunoetiquetado de PVI y alteración del equilibrio excitación-inhibición (O'Donnell, 2011).
[0302] A pesar de sus limitaciones, los parámetros conductuales y fisiológicos utilizados en los experimentos divulgados se utilizan ampliamente para evaluar la integridad de las redes inhibitorias corticales y su impacto en la actividad de las células piramidales. Las redes inhibitorias, que se desarrollan en el momento de la lesión y posteriormente, desempeñan un papel crucial en el refinamiento de las redes neuronales dependiente de la experiencia (Hensch, 2005) que se extiende hasta la adolescencia. Este papel puede reflejarse en el entrenamiento cognitivo durante la adolescencia, que previene los deterioros cognitivos en ratas con NVHL adultas (Lee et al., 2012), y en el estrés adolescente que desenmascara la neuropatología latente en ratones con activación inmunitaria materna (Giovanoli et al., 2013). Por lo tanto, la adolescencia es una etapa crítica del desarrollo en la que las condiciones fisiopatológicas que implican estrés oxidativo pueden afectar a una PFC aún en desarrollo, pero que a su vez ofrece una ventana de oportunidad para la intervención terapéutica. Esto sugiere que los antioxidantes o los reguladores redox sin efectos secundarios graves podrían ser eficaces para reducir la conversión en sujetos en riesgo de trastornos psiquiátricos al prevenir los cambios fisiopatológicos asociados con la pérdida de la función de PVI cortical.
[0303] Ejemplos
[0304] A continuación se presentan ejemplos de realizaciones específicas para llevar a cabo la presente invención. Los ejemplos se ofrecen únicamente con fines ilustrativos y no pretenden limitar el alcance de la presente invención de ninguna manera. Se han realizado esfuerzos para garantizar la precisión con respecto a los números utilizados (por ejemplo, cantidades, temperaturas, etc.), pero, por supuesto, se deben permitir ciertos errores y desviaciones experimentales.
[0305] La práctica de la presente invención empleará, salvo que se indique lo contrario, métodos convencionales de química de proteínas, bioquímica, técnicas de ADN recombinante y farmacología, dentro del conocimiento de la técnica. Dichas técnicas se explican detalladamente en la bibliografía. Véase, por ejemplo, T.E. Creighton, Proteins: Structures and Molecular Properties (W.H. Freeman and Company, 1993); A.L. Lehninger, Biochemistry (Worth Publishers, Inc., adición actual); Sambrook et al., Molecular Cloning: A Laboratory Manual (2nd Edition, 1989); Methods In Enzymology (S. Colowick and N. Kaplan, eds., Academic Press, Inc.); Remington's Pharmaceutical Sciences, 18th Edition (Easton, Pensilvania: Mack Publishing Company, 1990); Carey y Sundberg, Advanced Organic Chemistry, 3<rd>Ed. (Plenum Press), Vols A y B (1992).
[0306] Ejemplo 1:GSH cerebral, GSH periférico y marcadores de peroxidación lipídica
[0307] Este ejemplo describe los efectos fisiológicos en un paciente tratado con ebseleno solo o en combinación con otro fármaco antipsicótico. Uno de los principales resultados del ebseleno en estudios preclínicos mostró la elevación de los niveles de GSH neuronal, que previamente se había demostrado que estaban reducidos en pacientes con esquizofrenia (SZ) (Do et al., 2000; Wood et al., 2009). Se perfeccionó la espectroscopia de resonancia magnética (MRS) para monitorizar el GSH durante la interacción del ebseleno con su diana cerebral. Para evaluar el tamaño del efecto utilizando un escáner de resonancia magnética, se empleó una secuencia de 1H-MRS de tiempo de eco muy corto para evaluar los niveles de GSH en 11 pacientes con esquizofrenia y 11 pacientes de control sanos. El GSH en la corteza cingulada anterior (ACC), como se muestra en las FIGS.2A y 2B, estaba reducido en los pacientes con SZ en comparación con los pacientes de control sanos (media ± sd = 2.4 ± 0.3 frente a 2.6 ± 0.4, F = 2.0, p = 0.17; d = 0.65). Mediante este método, la cuantificación espectral produjo ajustes excelentes para el GSH y otros componentes con límites inferiores de Cramer-Rao (CRLB) inferiores a 10.
[0309] La reproducibilidad de la evaluación-reevaluación de GSH por MRS para el vóxel espectroscópico se evaluó con una semana de diferencia en cinco participantes. La reproducibilidad fue excelente (rango de CV: 1.0-2.3; GSH=1.0; rango de diferencia porcentual: 1.5-4.2 %; GSH = 1.5 %) con una correlación intraclase ICC = 0.967. Para determinar la precisión en la cuantificación de GSH, se fabricaron cinco fantomas con concentraciones crecientes de GSH (0 mM, 1.0 mM, 2.5 mM, 5 mM y 10 mM). Para probar la especificidad de la separación de GSH de otros metabolitos, cada fantoma también se mezcló con mioinositol, creatina, glucosa, glutamato, glutamina y ácido γ-aminobutírico. Se calculó una regresión lineal para determinar el ajuste a la curva estándar, lo que arrojó una excelente precisión y exactitud en la detección de la concentración de glutatión, en la que la concentración de GSH del fantoma cuantificada por el modelo LC correspondió a la concentración de GSH conocida con r² = 0.994. (Wijtenburg et al., 2013). Para abordar el fondo de macromoléculas, se adquiere el espectro de metabolitos nulos (es decir, espectro de macromoléculas) para cada participante, que se utiliza para el ajuste espectral de cada participante. Además de las comparaciones grupales con placebo, se pueden evaluar los cambios en el GSH cerebral dependientes de la dosis y del nivel plasmático de ebseleno.
[0311] El GSH, GSSG y GPx periféricos proporcionan otra forma de monitorizar los mecanismos por los cuales el ebseleno interviene en la vía redox. Aunque no se han realizado comparaciones directas de GSH/GSSG/GPx en sangre frente a tejido cerebral, la administración de glutatión periférico aumenta el nivel de GSH cerebral. (Nehru et al., 2007). Los efectos del ebseleno pueden transmitirse a través de cambios en GSH o también en GSSG y GPx. Para examinar si el ebseleno ejerce su efecto mediante la reducción de la peroxidación lipídica, se pueden medir los isoprostanos, un marcador de peroxidación lipídica que se forma por la peroxidación de los fosfolípidos de membrana. Los isoprostanos urinarios están elevados en algunas enfermedades de la sustancia blanca (Miller et al., 2011) y en pacientes con SZ (Dietrich-Muszalska et al., 2009). Se pueden utilizar los isoprostanos para indexar el posible efecto de reducción de la peroxidación lipídica por el ebseleno.
[0312] Ejemplo 2:Negatividad de discordancia de biomarcadores electrofisiológicos y oscilaciones gamma
[0313] Este ejemplo describe la negatividad de discordancia (MMN) para los receptores de N-metil-D-aspartato, que son proteínas sensibles a redox contenidas en sitios de modulación redox (Do et al., 2009, Gonzalez-Burgos et al., 2012, Choi et al., 2012, Kohr, et al., 1994, Nakazawa, et al., 2012). El ebseleno modula este sitio de modulación redox y aumenta la viabilidad neuronal. (Herin, et al., 2001). La esquizofrenia (SZ) se asocia con disfunción de los receptores de N-metil-D-aspartato, que se cree que se refleja en la negatividad de discordancia (Javitt, et al., 1993, Javitt, et al., 1998, Javitt, et al., 1996). La administración de n-acetilcisteína mejoró la negatividad de discordancia en la SZ (Berk, et al., 2008, Lavoie, et al., 2008). La MMN y el GSH periférico mostraron una correlación significativa en los controles, como se muestra en la FIG.3. La correlación no fue significativa en la SZ, probablemente debido a relaciones desreguladas, ya que tanto la MMN como el GSH están reducidos en la SZ, como se ilustra en las FIGS.3A-3C. La MMN puede servir como biomarcador para evaluar si los efectos del ebseleno, en caso de existir, están mediados a través de un mecanismo relacionado con NMDAR.
[0315] Oscilaciones neuronales de frecuencia gamma: Las interneuronas de parvalbúmina (PV), células críticas para la generación de oscilaciones gamma (Carlen, et al., 2012), son otro componente celular sensible al estrés oxidativo (Do, et al., 2009, Gonzalez-Burgos et al., 2012, Choi et al., 2012, Kohr, et al., 1994, Nakazawa, et al., 2012). Se han reportado con frecuencia anomalías en la banda gamma y en las interneuronas con PV en SZ (Spencer et al., 2004, Light et al., 2006, Cho et al., 2006, Uhlhaas et al., 2010, Hong et al., 2004). Los ratones mutantes de GPx mostraron una reducción específica en las interneuronas positivas para PV (Wirth, 2010). Los animales con bajos niveles de GSH mostraron déficits pronunciados en las oscilaciones beta y gamma debido a una función alterada de las interneuronas con PV (Steullet et al., 2010). La banda gamma en 21-40 y 41-85 Hz se redujo en pacientes con SZ en comparación con los controles sanos (todos p<0.001) y se correlacionó con el GSH (r=0.40-0.59, p=0.042-0.001). El modelado de mediación multivariante mostró que la respuesta gamma en 20-40 Hz fue un mediador significativo del efecto del GSH sobre la capacidad funcional, medida por UPSA-2, como se ilustra en la FIG. 4 (Ballesteros et al., 2013b). Las oscilaciones gamma podrían utilizarse como biomarcador alternativo para indicar si el ebseleno mejora el resultado clínico, si está presente, mejorando la función de las interneuronas con PV.
[0317] Algunas realizaciones de los métodos de diagnóstico tienen como objetivo identificar biomarcadores que indiquen la interacción del ebseleno con su diana, y proporcionan evidencia empírica para la selección de biomarcadores en ensayos posteriores; o, en caso de un ensayo no significativo, indican dónde podría haber fallado la interacción con la diana.
[0318] Ejemplo 3:Imitadores de la glutatión peroxidasa (GPx) - mecanismo de acción
[0319] El ebseleno es una molécula pequeña que imita a la GPx, que en humanos comprende una familia de 8 isoenzimas con funciones de peroxidasa similares. La mayoría de las isoenzimas GPx reducen las especies reactivas de oxígeno/nitrógeno (ROS/RNS) mediante la unión de radicales libres a su fracción de selenio (Se). Al reaccionar con GSH, GPx es citoprotectora al limitar la toxicidad de los radicales libres mediante la reducción del peróxido de hidrógeno (H<2>O<2>) (FIG. 5A, Wendel et al., 1984, Reiter et al., 1984, Muller et al., 1984), el peroxinitrito (ONOO-), un radical RNS formado por dos radicales libres, el anión superóxido y el óxido nítrico (FIG.5B, Noguchi et al., 1992, Daiber et al., 2000), y el hidroperóxido lipídico (LOOH) a alcoholes redox-inertes (FIG.5C, Sies, 1994). El ebseleno también es un sustrato de la tiorredoxina (Trx), como se muestra en la FIG.
[0320] 5D (Zhao et al., 2002). Sin embargo, la administración de la enzima GPx en sí misma no es práctica debido a su gran tamaño e inestabilidad.
[0321] Como se ilustra en las FIG.5, el imitador de la GPx, el ebseleno, potencia el ciclo redox de GSHGSSGGSH, reciclando así el GSH. Este mecanismo catalítico es diferente del mecanismo de acción de la NAC. La NAC contiene cisteína con un grupo sulfhidrilo que actúa como antioxidante. Sin embargo, la NAC no conserva los niveles de GSH con la misma eficacia que el ebseleno y no induce la actividad de la GPx que ayuda a reciclar el GSH. La NAC proporciona un aminoácido: cisteína. Como cualquier aminoácido, la cisteína desempeña diversas funciones. Claramente, se necesita más investigación para confirmar o refutar si la NAC y/o el ebseleno son una mejor opción para SZ. En comparación, el ebseleno tiene un mecanismo de acción bien definido.
[0322] Los experimentos con animales muestran consistentemente que el ebseleno aumenta el GSH y repone el GSH agotado por mecanismos neurotóxicos, como se ilustra en las FIGS.6. Esta mayor actividad de GPx también puede preservar el GSH generado endógenamente en una enfermedad en la que el estrés oxidativo está aumentado (Do, et al., 2009, Kano, et al., 2013) y la síntesis de GSH está disminuida (Gysin, et al., 2007), lo que resulta en una mayor disponibilidad de GSH. El efecto eficiente de ebseleno sobre el GSH es evidente en múltiples estudios preclínicos que muestran consistentemente que el tratamiento con ebseleno aumenta los niveles de GSH de forma dependiente de la dosis en neuronas, astrocitos y otros tipos de células.
[0323] Las FIGS. 6 ilustran además el aumento dependiente de la dosis de GSH por ebseleno observado tanto en condiciones basales como de estrés en neuronas (Pawlas, et al., 2007). El aumento de glutamato puede ser neurotóxico y agotar el GSH; el propio ebseleno aumentó el GSH, y la combinación de glutamato con ebseleno neutralizó el agotamiento de GSH causado por el glutamato (Satoh, et al., 2004). Al apoyar el mecanismo redox propuesto (FIGS.5), se reduce el consumo de GSH y el GSH disponible se recicla y aumenta (Pawlas, et al., 2007). Por lo tanto, en una condición en la que la actividad de GPx y el nivel de GSH están ambos en déficit, como en la mayoría de las muestras de SZ, ebseleno puede proporcionar un tratamiento para un trastorno mediado por GPx debido a un sistema GPx/GSH deteriorado.
[0324] Ejemplo 4:Metabolismo y farmacocinética del fármaco ebseleno
[0325] El ebseleno tiene una excelente biodisponibilidad oral (Fisher et al., 1988). El nivel cerebral fue aproximadamente el 20% del nivel plasmático (Imai, et al., 2001, Ullrich, et al., 1996). Su efecto neuroprotector se observa a una concentración plasmática de 10 μM (Zhao, et al., 2002). Se realizó un estudio de fase 1 en 32 personas en un diseño aleatorio, controlado con placebo y de dosis única ascendente. La dosis de ebseleno varió de 200 mg a 1600 mg en la formulación. (1) Farmacocinética: Los parámetros Pk del ebseleno y sus tres metabolitos se publicaron (Lynch, et al., 2009). En resumen, la C<máx>. media de ebseleno osciló desde 30.3 ng/mL hasta 83.4 ng/mL; el AUC<0-t>medio osciló desde 117.4 ng*h/mL hasta 880.6 ng*h/mL; la T<máx>mediana osciló entre 1.5 y 2.3 horas; y la semivida media osciló entre 6.4-16.7 horas. La 2-glucuronil selenobenzanilida fue el metabolito predominante. (2) Seguridad: No se registraron eventos adversos graves (AE) ni interrupciones debido a un AE. Todos los AE fueron leves o moderados y se resolvieron sin secuelas. No se observaron tendencias relacionadas con el tratamiento o la dosis en los hallazgos de laboratorio clínico ni en el ECG. Los efectos secundarios tabulados se publicaron en Lynch et al., 2009. Las cápsulas de ebseleno en una dosis oral única de hasta 1600 mg parecieron ser seguras y bien toleradas por hombres y mujeres sanos. Se realizaron siete estudios de toxicología con dosis agudas y repetidas en ratas Sprague-Dawley, cerdos miniatura Sinclair y monos Cynomolgus, y tres estudios de genotoxicología. Las dosis agudas de hasta 2000 mg/kg no se asociaron con evidencia de toxicidad aguda o retardada en estas especies. Los estudios de dosis repetidas de 28 días en monos Cynomolgus establecieron el nivel sin efecto adverso observable (NOAEL) en 2000 mg/kg; sobre 2000 mg/kg en cerdos miniatura y no se identificó NOAEL para las ratas. Los estudios de toxicidad crónica con administración de ebseleno durante 26 y 52 semanas mostraron que el nivel sin efecto tóxico de ebseleno fue de 31.6 mg/kg en ratas y de 178 mg/kg en cerdos miniatura.
[0326] Ejemplo 5:Tratamiento con N-acetilcisteína en un modelo de rata de psicosis/esquizofrenia
[0327] Este ejemplo describe la reversión de la inhibición previa al pulso mediante el tratamiento con ebseleno. Uno de los hallazgos más replicados en la investigación de la esquizofrenia es la reducción de marcadores asociados con las interneuronas inhibitorias corticales (Lewis et al., 2012). Las ratas adultas con lesión neonatal del hipocampo ventral (NVHL) exhiben anomalías electrofisiológicas causadas por una maduración alterada de las interneuronas corticales, caracterizadas por una modulación anormal por la dopamina (Tseng et al., 2008). Se evaluó si las interneuronas positivas para parvalbúmina (PV) en la PFC, incluyendo la corteza prelimbica dorsal y la corteza cingulada anterior (ACC), están alteradas en las ratas con NVHL utilizando técnicas de recuento estereológico imparcial. Entre el día postnatal (P) 21 y P61, el número de interneuronas inmunorreactivas a PV (PVI) aumentó en las ratas operadas de control, pero no en las ratas con NVHL, como se ilustra en las FIG.7A y 1B. En ratas jóvenes (P21), no hubo diferencias significativas en el recuento de PVI entre las ratas con NVHL y las de control, pero las ratas con NVHL adultas (P61) mostraron significativamente menos PVI en la corteza prefrontal (PFC) en comparación con las ratas de control. La reducción de PVI se previno con el tratamiento con N-acetilcisteína (NAC) a partir de P5 (es decir, 2 días antes de la lesión hipocampal) y que se extendió hasta la adolescencia (P50; como se muestra en las FIGS.7A-C), lo que sugiere que el estrés oxidativo juvenil inducido por la lesión neonatal altera la maduración de las PVI. La tinción de caspasa 3 no reveló activación apoptótica en la PFC de las ratas con NVHL (datos no mostrados), lo que sugiere que la inmunorreactividad reducida de PVI probablemente refleja una reducción de la actividad interneuronal más que una pérdida celular.
[0329] Para evaluar el estrés oxidativo, se cuantificó la oxidación del ADN mediante el etiquetado con 8-oxo-7,8-dihidro-2'-desoxiguanina (8-oxo-dG). En P21, las ratas con NVHL exhibieron un aumento masivo en la tinción con 8-oxo-dG en la PFC en comparación con las ratas de control, tanto en neuronas piramidales como en interneuronas, lo que se previno completamente con el tratamiento con NAC (como se muestra en las FIGS.
[0330] 8A y 9B). Cuando las ratas con NVHL alcanzaron la edad adulta (P61), aún presentaban un aumento de 8-oxodG, aunque menor que a los P21 (como se muestra en las FIGS. 8C y 8D). Se observó un aumento en los niveles de 3-nitrotirosina (3-NT) en la PFC de ratas con NVHL adultas. La 3-NT indica la nitración de proteínas debido al estrés oxidativo y nitrosativo (Radi, 2004), y su aumento en las ratas con NVHL se previno con el tratamiento con NAC durante el desarrollo (como se muestra en las FIGS.9A y 9B). Por lo tanto, el tratamiento con NAC en la etapa juvenil disminuyó múltiples marcadores de estrés oxidativo en ratas con NVHL adultas a niveles comparables a los de las ratas de control, sin afectar la extensión de la lesión (como se muestra en las FIGS. 10A-10C). Una posible explicación para los niveles de estrés oxidativo detectados en la PFC adulta después de una NVHL es la reducción de la entrada glutamatérgica del hipocampo ventral durante el desarrollo, ya que el bloqueo de los receptores NMDA induce estrés oxidativo en las PVI (Behrens et al., 2007). Los datos indicaron que el deterioro de las conexiones hipocampales con la PFC durante un período crítico del desarrollo provoca estrés oxidativo en la PFC de ratas jóvenes, lo que tiene efectos perjudiciales en la maduración de las PVI en la adolescencia.
[0332] Para determinar los tipos de interneuronas que expresan estrés oxidativo en las ratas con NVHL, se realizó un etiquetado conjunto de 8-oxo-dG con PV, calbindina (CB) y calretinina (CR). Además de las neuronas piramidales, se observó un aumento de la tinción de 8-oxo-dG en las interneuronas con PV, pero no en las interneuronas CB o CR (como se muestra en las Figuras 11A y 11B). Aproximadamente el 50% de las PVI presentaban etiquetado conjunto con 8-oxo-dG, lo que indica que el estrés oxidativo es generalizado en esta población celular. Un marcador de la maduración de las PVI es la aglutinina de Wisteria floribunda (WFA), una lectina que reconoce las redes perineuronales (PNN) que envuelven las PVI corticales maduras. La lesión NVHL redujo la tinción de WFA (como se muestra en las FIGS 12A-12B), lo que sugiere que las PVI en la PFC adulta de las ratas con NVHL muestran un fenotipo inmaduro. Estas alteraciones de la matriz extracelular se restauraron con el tratamiento con NAC en la etapa juvenil (como se muestra en las FIGS 12A-12B). Las PVI pueden estar altamente expuestas a un mayor estrés oxidativo, ya que constituyen la mayoría de las interneuronas de actividad rápida y su elevado metabolismo energético puede generar más especies reactivas de oxígeno que las neuronas que no presentan este tipo de actividad. Es posible que las PVI juveniles sean funcionales a pesar de presentar estrés oxidativo, con los efectos perjudiciales del estrés oxidativo que se hacen evidentes tras la maduración de las PVI en la periadolescencia.
[0334] Si el estrés oxidativo juvenil es la causa de las anomalías fisiológicas observadas en ratas con NVHL adultas, el tratamiento con NAC puede revertir estas alteraciones. Se realizaron registros de células completas en neuronas piramidales de secciones cerebrales de ratas adultas que contenían la PFC mediales de ratas de CONTROL (n = 12), con NVHL (n = 16) y con NVHL tratadas con NAC (n = 14). Como se demostró previamente en ratas con NVHL adultas y otros modelos de roedores de esquizofrenia (Niwa et al., 2010; Tseng et al., 2008), la modulación dependiente de dopamina D2 de los potenciales postsinápticos excitatorios (EPSP) en las células piramidales de la capa V se perdió en las ratas con NVHL (como se muestra en las FIGS.13A-C). Esta pérdida probablemente se deba a una maduración anormal de las interneuronas de la PFC, ya que la modulación normal de D2 en adultos incluye un componente del receptor GABA-A (Tseng y O'Donnell, 2007), pero el estrés oxidativo en las neuronas piramidales también podría desempeñar un papel. Para determinar si las respuestas sinápticas de la PFC dependientes de PVI alteradas se deben al estrés oxidativo, las ratas fueron tratadas con NAC durante el desarrollo y luego se evaluó la modulación de D2 de la fisiología de la PFC. El tratamiento con NAC restauró la modulación de D2 de las respuestas sinápticas en las ratas con NVHL (como se muestra en las FIGS.13A-13C), lo que indica que el estrés oxidativo juvenil y adolescente en las ratas con NVHL altera el equilibrio excitación-inhibición en la PFC adulta.
[0335] La modulación anormal de la dopamina en la función de la PFC en ratas con NVHL también se observain vivo. Se realizaron registros intracelularesin vivoen 38 neuronas piramidales de ratas adultas (n = 9 de CONTROL (placebo), n = 5 con NVHL y n = 7 con NVHL tratadas con NAC). La actividad basal fue consistente con lo que se ha informado previamente para las neuronas piramidales de la PFC (Lewis y O'Donnell, 2000), y no se vio afectada significativamente por el estado de la lesión o el tratamiento con NAC. Todas las células registradas exhibieron transiciones espontáneas entre el potencial de membrana en reposo (estado bajo; -76.2 ± 1.1 mV) y el estado alto (-67.6 ± 0.7 mV). Los estados altos ocurrieron con una frecuencia de 0.6 ± 0.1 Hz con una duración de 523.6 ± 24.7 ms. La mayoría de las células (n = 21) se dispararon espontáneamente a una tasa de 2.1 ± 0.7 Hz. Como se informó anteriormente (O’Donnell et al., 2002), los registros intracelularesin vivode ratas con NVHL adultas anestesiadas revelaron un aumento anormal en la actividad de las células piramidales en respuesta a la estimulación en ráfagas del área tegmental ventral (VTA) (como se muestra en Las FIGS 13D y 13E) en comparación con las ratas de control. Este aumento anormal en la actividad se previno con el tratamiento con NAC en la etapa juvenil (como se muestra en las FIGS 13D y 13E). Estos datos indican que la función de dopamina anormal en la PFC de las ratas con NVHL depende del estrés oxidativo durante las etapas juvenil y adolescente.
[0336] El desequilibrio anormal entre excitación-inhibición en ratas con NVHL adultas puede provocar un procesamiento de la información alterado que se prevendría con el tratamiento con NAC si dependiera del estrés oxidativo. La negatividad de discordancia (MMN) se evaluó mediante potenciales evocados auditivos en un paradigma de estímulos infrecuentes en ratas de control (n = 6), con NVHL (n = 3) y con NVHL tratadas con NAC (n = 3). La MMN tiene una alta relevancia traslacional, ya que está atenuada en pacientes con esquizofrenia (Javitt et al., 1993) y en modelos animales (Ehrlichman et al., 2009). Se implantaron electrodos de electroencefalografía (EEG) en ratas con NVHL, con NVHL tratadas con NAC y de CONTROL. La MMN fue significativamente diferente entre los grupos, y el tratamiento con NAC mejoró la MMN en las ratas con NVHL (como se muestra en las FIGS.14A y 14B). Esta observación es consistente con el efecto de la NAC sobre la MMN en pacientes (Lavoie et al., 2008), e indica que el modelo de NVHL reproduce un marcador importante de la enfermedad que puede prevenirse con el tratamiento antioxidante en la etapa juvenil. Dado que la MMN depende de la función del receptor NMDA (Umbricht et al., 2000) y se sospecha hipofunción del NMDA en las PVI en la esquizofrenia, es posible que la mejora de la MMN con NAC se deba a la restauración de la actividad de las PVI.
[0337] Para evaluar si el estrés oxidativo juvenil conduce a déficits conductuales, se utilizó un paradigma conductual para realizar pruebas tanto en modelos animales como en pacientes con esquizofrenia. La inhibición previa al pulso de la respuesta de sobresalto acústico (PPI) es una medida del control sensoriomotor que se encuentra reducida en pacientes (Geyer y Braff, 1987) y en ratas con NVHL (Lipska et al., 1995). Se evaluó la PPI en ratas adultas de control (n = 11), de control tratadas con NAC (n = 12), con NVHL (n = 9) y con NVHL tratadas con NAC (n = 17). El tratamiento con NAC en la etapa juvenil previno la reducción de la PPI observada en las ratas con NVHL no tratadas (como se muestra en la FIG.15A). Además de la pérdida de la maduración de las PVI y las anomalías electrofisiológicas, el estrés oxidativo durante el desarrollo en ratas con NVHL en etapa juvenil puede causar déficits conductuales en la edad adulta relevantes para la esquizofrenia.
[0338] El efecto beneficioso del tratamiento con NAC incluye un tratamiento posnatal prolongado que comienza antes de la lesión y finaliza cuando las ratas alcanzan la edad adulta joven. Para una completa validez traslacional, se determina si la NAC es eficaz cuando se inicia a una edad que corresponde al momento en el que se pueden identificar las etapas prodrómicas en humanos. En otro grupo de ratas, se administró NAC en el agua de bebida a partir de P35, una edad que en ratas equivale a la adolescencia temprana. Se evaluaron los déficits de PPI en ratas de CONTROL adultas (n = 15), con NVHL no tratadas (n = 12) y con NVHL tratadas con NAC (n = 14). Si bien se observó una tendencia a un déficit en las ratas con NVHL no tratadas en comparación con las ratas de control de este grupo, hubo una diferencia significativa entre las ratas con NVHL no tratadas y las tratadas (como se muestra en la FIG.15B). Los datos indican que los precursores de GSH, como la NAC, pueden seguir siendo efectivos incluso si se inician después de que haya comenzado el estrés oxidativo.
[0339] Una advertencia importante sobre la NAC es que también altera los niveles de glutamato debido a su acción sobre el transportador de cisteína-glutamato (Moussawi et al., 2009). Para comprobar si la modulación redox y no los cambios en los niveles de glutamato eran responsables de los efectos de la NAC en las ratas con NVHL, se evaluó el efecto de otros dos antioxidantes que no alteran el glutamato.
[0340] Ejemplo 6:Tratamiento con ebseleno/apocinina en un modelo de rata de psicosis/esquizofrenia
[0341] El ebseleno es un imitador de la glutatión peroxidasa (GPx) (Muller et al., 1984) que induce la expresión de GPx (Kil et al., 2007) y aumenta los niveles de GSH en las neuronas, reponiendo el GSH agotado por mecanismos neurotóxicos (Pawlas y Malecki, 2007). Se evaluó la PPI en ratas de CONTROL adultas tratadas con vehículo (n = 10), de CONTROL tratadas con ebseleno (n = 7), con NVHL tratadas con vehículo (n = 8) y con NVHL tratadas con ebseleno (n = 9), y el tratamiento con ebseleno durante la adolescencia revirtió los déficits de PPI en las ratas con NVHL (como se muestra en la FIG.15D).
[0342] En otro grupo de ratas, se evaluaron los efectos del inhibidor de la NADPH oxidasa, apocinina, administrado durante las etapas juvenil y adolescente. Se evaluó la PPI en ratas adultas de CONTROL tratadas con vehículo (n = 10), de CONTROL tratadas con apocinina (n = 11), con NVHL tratadas con vehículo (n = 7) y con NVHL tratadas con apocinina (n = 5). Como se ilustra en la FIG.15C, se observó una reversión de los déficits de PPI. Los datos indicaron que la elevación de GSH, y no del glutamato, durante la adolescencia rescata los déficits de PPI en ratas con NVHL.
[0343] Procedimientos experimentales
[0344] Animales: Se obtuvieron ratas Sprague-Dawley preñadas en los días gestacionales 13-15 de Charles River (Wilmington, MA) y se alojaron individualmente con libre acceso a comida y agua en un ambiente con temperatura y humedad controladas y un ciclo de luz/oscuridad de 12:12 horas (luces encendidas a las 7:00 a. m.). Cuando las crías alcanzaron P5, la mitad de las madres recibieron NAC en el agua de bebida. Las crías permanecieron sin ser perturbadas hasta P7-9, momento en el que las crías sanas se separaron aleatoriamente y se sometieron a cirugía de la NVHL o a un procedimiento de control. En P21, las crías macho y hembra se perfundieron transcardialmente con paraformaldehído al 4% para inmunocitoquímica o se destetaron y se alojaron en grupos de dos o tres, equilibrados de acuerdo con el estado de la lesión. El tratamiento con NAC duró durante toda la adolescencia hasta P50. Después de alcanzar la edad adulta (>P60), los animales se perfundieron con paraformaldehído al 4% parainmunocitoquímica, se perfundieron con líquido cefalorraquídeo artificial (aCSF) para electrofisiología de secciones, se utilizaron para registros intracelularesin vivoo se les realizaron pruebas de PPI o MMN.
[0345] Cirugía de lesión neonatal del hipocampo ventral: Entre P7 y P9, las crías (15-20 g) recibieron una lesión excitotóxica del hipocampo ventral (NVHL) o un procedimiento de control, como se describió anteriormente (Chambers y Lipska, 2011). Las crías se anestesiaron con hipotermia y se fijaron a una plataforma de poliestireno unida a un marco estereotáxico (David Kopf Instruments, Tujunga, CA). Las ratas con NVHL recibieron una infusión bilateral de ácido iboténico (10 μg/μl en aCSF, 0.3 μl/costado; Tocris, Minneapolis, MN) en el hipocampo ventral (3 mm rostral al bregma, 3.5 mm lateral a la línea media y 5 mm desde la superficie) a una velocidad de 0.15 μl/min. Las cirugías de control se realizaron exactamente de la misma manera, pero la cánula guía se introdujo solo 3 mm y sin infusión de líquido para controlar el procedimiento quirúrgico y evitar el daño hipocampal. Después de la cirugía, se suturaron las heridas y, una vez que las crías recuperaron su nivel de actividad normal, se devolvieron a sus madres y permanecieron sin ser molestadas hasta que se retiraron las suturas y se destetaron a P21.
[0346] En todas las ratas, las lesiones se verificaron mediante el seccionamiento (40 μm) del hipocampo dorsal y ventral utilizando un micrótomo de congelación. Las secciones se montaron en portaobjetos de vidrio y se tiñeron con Nissl. El hipocampo se examinó microscópicamente para detectar evidencia de daño bilateral, que típicamente incluía pérdida celular, adelgazamiento, gliosis, desorganización celular y ventrículos agrandados (Chambers y Lipska, 2011).
[0347] Régimen de pretratamiento antioxidante: Se administró NAC (BioAdvantexPharma, Mississauga, Ontario, Canadá) en el agua de bebida a una concentración de 900 mg/l. El tratamiento con NAC comenzó en P5 o en P35, y trabajos previos en ratones han demostrado que la NAC consumida por la madre se transmite a las crías a través de la leche materna (das Neves Duarte et al., 2012). El tratamiento con NAC finalizó en P50. Se prepararon soluciones frescas cada 2-3 días. Se administró ebseleno (Sound Pharmaceuticals Inc., Seattle, WA) i.p.5 días a la semana, comenzando en P35 hasta el día de la prueba de PPI (P60). La solución madre de ebseleno (20 mg/ml de DMSO, alícuotas congeladas) se diluyó 1:5 en agua estéril y se administró a una dosis de 10 mg/kg. Los animales de control recibieron una concentración equivalente de DMSO diluida 1:5 en agua. Se administró apocinina (Sigma-Aldrich, St. Louis, MO) en el agua de bebida a una dosis objetivo de 100 mg/kg (Nwokocha et al., 2013). Antes del destete en P21, el agua de bebida contenía una dosis de 2 g de apocinina por 0,5 l de agua, para asegurar su administración a través de la leche materna. La concentración de apocinina se redujo después del destete a 750 mg/l para aproximarse mejor a la dosis objetivo. El tratamiento duró desde P5 hasta P50, con soluciones frescas preparadas cada dos días.
[0348] Inmunohistoquímica y cuantificación estereológica: Un total de 18 (P21) y 25 (P61) ratas macho fueron anestesiadas, perfundidas y sus cerebros fijados como se describió anteriormente (Cabungcal et al., 2006). Se utilizaron secciones coronales (40 μm) para investigar el circuito inhibitorio de la corteza cingulada anterior (ACC). Las secciones cerebrales se inmunoetiquetaron para parvalbúmina (PV) como se describió anteriormente (Steullet et al., 2010). El recuento de células inmunorreactivas a PV (cuerpos celulares) se cuantificó en la ACC utilizando el software StereoInvestigator 7.5 (MBF Bioscience Inc., Williston, VT, EE. UU.). En resumen, el recuento estereológico comenzó con baja amplificación (objetivo de 2.5x) para identificar y delimitar los límites de la región de interés (ROI) en 2-4 secciones consecutivas de cada animal. La ACC (a una distancia del bregma de aproximadamente 0.70-1.70 mm) se delimitó a partir de las regiones de la corteza motora secundaria (M2) siguiendo las áreas citoarquitectónicas anatómicas descritas por Paxinos y Watson (Paxinos y Watson, 1998). La región de interés (ROI) seleccionada incluyó la mayor parte del área 1 de la corteza cingulada (cg1) y parte del área 2 de la corteza cingulada (cg2). Se estableció un pequeño margen intermedio entre las regiones ACC y M2 para asegurar que la ROI en la ACC no se superpusiera con la corteza motora secundaria. Se utilizó una caja de conteo (disector óptico) dentro del grosor de la sección y marcos de muestreo adaptados a la ACC para analizar y contar las neuronas (Schmitz y Hof, 2005). Las cajas de conteo (40 x 40 μm con 15 μm de profundidad) fueron colocadas por el software en cada marco de muestreo, comenzando desde una posición aleatoria dentro de la ROI de la ACC. El conteo se realizó con mayor amplificación (objetivo de 40x). Las células de PV se contaron cuando estaban enfocadas en la superficie de la caja hasta que dejaban de estar enfocadas a una profundidad de 15 μm. Se utilizó una zona de guarda de 5 μm para evitar artefactos que pudieran verse afectados por la contracción del tejido debido al procesamiento de inmunopreparación. Se utilizaron 25 marcos de conteo en el volumen de la ROI de la ACC para las ratas P21 y P61.
[0350] Tinción por inmunofluorescencia, microscopía confocal y análisis de imagen: El estrés oxidativo se visualizó utilizando un anticuerpo contra la 8-oxo-7,8-dihidro-20-desoxiguanosina (8-Oxo-dG), un aducto de ADN formado por la reacción de radicales OH con la base guanina del ADN (Kasai, 1997). Debido a la proximidad de la cadena de transporte de electrones, el ADN mitocondrial es propenso al daño oxidativo: los niveles de bases oxidadas en el ADN y los niveles de 8-oxo-dG son más altos en las mitocondrias que en el núcleo. Para evaluar el etiquetado de 8-oxo-dG y 3-nitrotirosina (3NT) en varios tipos de interneuronas, se incubaron secciones coronales entre bregma 0.70-1.70 mm durante aproximadamente 36 horas con anticuerpos primarios policlonales de conejo anti-PV, anti-calbindina-28k (anti-CB) o anti-calretinina (anti-CR) (1:2500; Swant, Bellinzona, Suiza) junto con el anticuerpo primario monoclonal de ratón anti-8-oxo-dG (1:350; AMS Biotechnology, Bioggio-Lugano, Suiza) o el anticuerpo primario monoclonal de ratón anti-nitrotirosina (1:1000; Chemicon International, Temecula, EE. UU.). Para permitir la visualización de la PNN que rodea a las células de PV, las secciones se incubaron en una solución que contenía la lectina conjugada con biotina de aglutinina deWisteria floribunda(WFA) (Hartig et al., 1994). Las secciones se incubaron primero con PBS Triton al 0.3% azida sódica (1 g/l) que contenía suero de caballo normal al 2%, seguido de una incubación de 36 horas con anticuerpo policlonal de conejo anti-PV (1:2500) y WFA conjugada con biotina (1:2000; Sigma). Las secciones se lavaron, se incubaron con los anticuerpos secundarios fluorescentes apropiados (inmunoglobulina G de cabra anti-ratón (1:300; Alexa Fluor 488; Molecular Probes, Eugene, Oregón), inmunoglobulina G anti-conejo (1:300; CY3; Chemicon International, Temecula, California), conjugado de CY2-estreptavidina (1:300; Chemicon) y se contratiñeron con 100 ng/ml de DAPI (4’-6-diamidino-2-fenilindol; Vector Laboratories, California, EE. UU.)). Las secciones se visualizaron con un microscopio confocal Zeiss equipado con objetivos Plan-NEOFLUAR de 10x, 20x, 40x y 63x. Todos los periféricos se controlaron con el software LSM 510 (Carl Zeiss AG, Suiza). Se escanearon pilas Z de 9 imágenes (con un intervalo de 2.13 μm) (1024 x 1024 píxeles) para su análisis con el software IMARIS 7.3 (Bitplane AG, Suiza). Todas las imágenes de las pilas Z se filtraron con un filtro gaussiano para eliminar el ruido de fondo no deseado y perfilar los contornos de los cuerpos celulares. Se creó una ROI de acuerdo con lo definido en el procedimiento estereológico en la ACC. La ROI se enmascaró en todas las pilas Z para aislar subvolúmenes regionales de la ACC en los que se analizaron las interneuronas que expresan PV, CB y CR. Para cuantificar 8-oxo-dG, se midieron la intensidad de la tinción y el número de vóxeles etiquetados dentro de la ROI. Para cuantificar 8-oxo-dG en células de PV, CB y CR, se utilizó el móduloColocdel software IMARIS para calcular la proporción de todos los vóxeles inmunoetiquetados con PV (respectivamente, vóxeles inmunoetiquetados con CB y CR) que también estaban inmunoetiquetados con 8-oxo-dG.Colocproporciona el recuento de vóxeles colocalizados entre los perfiles inmunoetiquetados de interés. Para cuantificar el número de neuronas inmunorreactivas a PV rodeadas por PNN, se utilizó el módulo de puntos para asignar marcas de puntos a los vóxeles de perfiles etiquetados que se encuentran dentro de un tamaño determinado. Se seleccionaron los canales para el inmunoetiquetado de PV y WFA, y se definió el criterio de tamaño del perfil (>9 y 4 μm, respectivamente) para cuantificar los perfiles etiquetados por encima de estos tamaños. Los puntos generados para PV que contactaron con PNN se cuantificaron. Los puntos que hicieron contacto y/o se superpusieron con los puntos generados para WFA se consideraron como PVI rodeados por PNN (PVI positivos para WFA).
[0352] Electrofisiología de secciones: A partir de P60, se anestesiaron ratas macho con hidrato de cloral (400 mg/kg, i.p.) 15 minutos antes de la decapitación. Los cerebros se extrajeron rápidamente del cráneo en CSF artificial (aCSF) enfriado con hielo, oxigenado con 95 % de O<2>-5% de CO<2>y que contenía lo siguiente (en mM): NaCl 125, NaHCO<3>25, glucosa 10, KCl 3.5, NaH<2>PO<4>1.25, CaCl<2>0.5 y MgCl<2>3, pH 7.45 (295-300 mOsm). Se obtuvieron secciones coronales (300 μm de grosor) que contenían la PFC medial con un vibratomo en aCSF helado y se incubaron en solución de aCSF tibia (~35° Celsius) oxigenada constantemente con 95% de O<2>-5% de CO<2>durante al menos 45 minutos antes del registro. El registro de aCSF (con CaCl<2>1 y MgCl<2>2) se administró a la cámara de registro con una bomba a una velocidad de 2 ml/min.
[0354] Los electrodos de parche (7-10 MΩ) se obtuvieron a partir de capilares de vidrio de borosilicato de 1.5 mm (World Precision Instruments) con un estirador horizontal Flaming-Brown (P97; Sutter Instruments) y se llenaron con una solución que contenía Neurobiotina al 0.125% y lo siguiente (en mM): K-gluconato 115, HEPES 10, MgCl<2>2, KCl 20, MgATP 2, Na<2>-ATP 2 y GTP 0.3, pH 7.25-7.30 (280-285 mOsm). El quinpirol (5 μM, Tocris) se mezcló en forma fresca en aCSF de registro oxigenado cada día antes de cada experimento. Tanto el aCSF de control como el que contenía el fármaco se oxigenaron continuamente durante los experimentos.
[0356] Todos los experimentos se realizaron a 33-35° Celsius y las células piramidales de la PFC en la ACC de la capa V se identificaron mediante guía visual utilizando microscopía de vídeo de contraste de interferencia diferencial infrarroja (IR) con un objetivo de inmersión en agua de 40X (Olympus BX-51WI). La imagen se detectó con una cámara CCD sensible al IR y se visualizó en un monitor. Las grabaciones de pinzamiento de corriente de célula completa se realizaron con un amplificador controlado por ordenador (Multiclamp 700A; Molecular Devices), se digitalizaron (Digidata 1322; Molecular Devices) y se adquirieron con Axoscope 9 (Molecular Devices) a una frecuencia de muestreo de 10 kHz. Los potenciales de los electrodos se ajustaron a cero antes del registro sin corregir el potencial de unión líquida. La actividad basal en cada neurona se monitorizó durante 10 minutos, tiempo durante el cual se midieron el potencial de membrana y la resistencia de entrada (medida con la pendiente de una gráfica corriente-voltaje (I/V) obtenida con pulsos despolarizantes e hiperpolarizantes de 500 ms de duración).
[0358] Las respuestas sinápticas se probaron en neuronas piramidales mediante estimulación eléctrica de las capas superficiales con un electrodo bipolar hecho de un par de cables de tungsteno trenzados recubiertos de teflón (puntas separadas por ~200 μm) y colocados a ~500 μm lateralmente al eje vertical de la dendrita apical de la neurona registrada. Se aplicaron pulsos de estimulación (20-400 μA; 0.5 ms) cada 15 segundos. La intensidad se ajustó para evocar EPSP con aproximadamente la mitad de la amplitud máxima. Durante todo el experimento, se monitorizaron los cambios en la resistencia de entrada con etapas hiperpolarizantes repetidas, y la célula se descartó cuando la resistencia de entrada cambió más del 20% durante el transcurso del experimento. La amplitud de los EPSP evocados se midió con Clampfit 9.0 y se promedió en 10 barridos antes y después de 7 minutos de aplicación de quinpirole. Este período se eligió por coherencia con las diferencias reveladas por investigaciones previas sobre la modulación de D2 de la actividad de la PFC en modelos de roedores de esquizofrenia (Niwa et al., 2010; Tseng et al., 2008). Al final de cada experimento, las secciones se colocaron en paraformaldehído al 4% y se procesaron para la tinción con DAB utilizando técnicas histoquímicas estándar para verificar la morfología y la ubicación de las neuronas.
[0360] Registros intracelularesin vivo: Se anestesiaron ratas hembra con hidrato de cloral (400 mg/kg, i.p.) y se colocaron en un aparato estereotáxico (Kopf Instruments). La anestesia se mantuvo durante los procedimientos de registro con hidrato de cloral continuo (24-30 mg/kg/h) a través de un catéter intraperitoneal. La temperatura corporal se mantuvo a aproximadamente 37° Celsius utilizando una almohadilla térmica controlada por sonda (Fine Science Tools). Se introdujeron electrodos de estimulación bipolares concéntricos (0.5 mm de diámetro, 0.5 mm de separación entre polos; Rhodes Medical Instruments Inc.) en el VTA (5.8 mm de caudal al bregma; 0.5-0.8 mm lateral a la línea media; 7-8 mm desde la superficie) para la estimulación. Los microelectrodos de punta fina para registro se extrajeron a partir de vidrio de borosilicato (1 mm de diámetro exterior; World Precision Instruments) en un extractor horizontal Flaming-Brown (Sutter Instruments). Los electrodos de punta fina (50-110 MΩ) se llenaron con Neurobiotina al 2% (Vector Laboratories) en acetato de potasio 2 M. Los microelectrodos se introdujeron en la PFC medial utilizando un manipulador hidráulico (Trent Wells, Coulterville, CA). Los registros se realizaron en modo de pinzamiento de corriente, y las señales se adquirieron utilizando un amplificador Neurodata (Cygnus), digitalizadas a 10 kHz utilizando un convertidor A/D Digidata (Molecular Devices) y el software Axoscope 9 (Molecular Devices) para análisis fuera de línea.
[0362] Los microelectrodos se introdujeron a través de la PFC medial hasta que se empaló una neurona. Las neuronas incluidas en este estudio tenían un potencial de membrana en reposo más negativo que –60 mV y potenciales de acción con amplitudes ≥ 40 mV desde el umbral. Para determinar las respuestas a la dopamina endógena, se estimuló el VTA con trenes de 5 pulsos a 20 Hz, administrados cada 10 segundos. Se utilizaron de ocho a diez barridos para determinar la actividad neuronal en respuesta a la estimulación del VTA. La actividad se midió en el intervalo de 500 ms posterior al último pulso del VTA en todos los barridos y se comparó entre los grupos experimentales. Al final del experimento, los animales fueron sacrificados mediante una sobredosis de anestesia y se les extrajeron los cerebros para la verificación histológica del estado de las lesiones y la colocación de los electrodos.
[0364] Negatividad de discordancia: se implantaron a ratas hembra con NVHL, con NVHL tratadas con NAC y ratas de control electrodos de EEG crónicos bajo anestesia con isoflurano. Los electrodos se construyeron con discos de plata de 2 mm de diámetro recubiertos con cloruro de plata y se pegaron sobre el bregma, una ubicación equivalente al vértice humano, y los contactos se conectaron a un conector Omnetics en la parte superior de la cabeza. Tras un período de recuperación de 4 semanas, las ratas se habituaron primero a la cámara de registro, una caja de plexiglás de 30 x 50 cm encerrada dentro de una caja de acero inoxidable. Las sesiones de MMN consistieron en exponer a la rata a aproximadamente 2,000 tonos a dos frecuencias diferentes (7 o 9 kHz; 30 ms de duración) separadas por 400 ms, con el 95% de las repeticiones a una frecuencia (estándar) y el 5% a la otra frecuencia (desviada). Los tonos se emitieron con un altavoz montado dentro del recinto utilizando un sistema TDT RZ6 (Tucker Davis), y se contrabalancearon de modo que la frecuencia desviada fuera una u otra en la mitad de las ocasiones. Las señales de EEG se adquirieron utilizando un sistema Omniplex de 32 canales (Plexon Instruments) a una frecuencia de muestreo de 1 kHz. Para el análisis, se seleccionaron periodos de 300 ms alrededor del tono, se filtraron a 1-30 Hz, se corrigieron con respecto a la línea base de los 100 ms anteriores al estímulo y se promediaron por separado para los tonos estándar y desviados. Se construyó una onda de diferencia restando la onda estándar de la onda desviada, y la MMN se cuantificó midiendo el área bajo la curva en el período entre 35 y 100 ms después del estímulo. Todas las ratas fueron expuestas a tres sesiones en tres días diferentes, y los valores se promediaron entre las sesiones para cada animal.
[0366] Inhibición prepulso: A partir de P60, se evaluó la PPI en ratas macho y hembra, como se describió anteriormente (Feleder et al., 2010). Dado que los déficits de PPI en ratas con NVHL son más evidentes cuando se les administra apomorfina (Lipska et al., 1995), se inyecto apomorfina (0.1 mg/kg, i.p.) inmediatamente antes de la sesión de prueba de PPI. Se colocaron ratas en una cámara de sobresalto con aislamiento acústico (San Diego Instruments, San Diego, CA) con un ruido blanco de fondo de 70 dB. Tras un período de adaptación de 5 minutos, se inició la prueba de PPI con ensayos pseudoaleatorios cada 15 a 25 segundos. Se administraron pulsos (120 dB), prepulsos (75 dB, 80 dB u 85 dB), sin pulso o prepulso pulso. Los ensayos duraron 23 minutos y se registraron de 8 a 10 repeticiones de los ensayos de pulso o prepulso pulso, mientras que los ensayos nulos o solo prepulso se repitieron cinco veces para cada amplitud de prepulso. La magnitud del sobresalto se midió mediante un transductor sensible a la aceleración, y la PPI se calculó como la relación entre el sobresalto prepulso pulso y el pulso solo, y se expresó como porcentaje de reducción. Los ensayos iniciales (todos los pulso solos) se utilizaron para la habituación y no se incluyeron en el análisis. Se excluyeron del análisis los ensayos en los que el animal se movía dentro de la cámara, y se excluyeron las sesiones en las que la amplitud del sobresalto era baja o se excluyeron más del 50% de los ensayos para cualquier combinación de prepulso pulso. Si se descartaba una sesión de PPI, las ratas se volvían a evaluar una semana después.
[0368] Estadísticas: Los números medios de células inmunorreactivas a PV por volumen de tejido en la ACC se compararon entre los grupos de tratamiento mediante ANOVA unidireccional, seguido de comparaciones múltiples post hoc de Dunnett. El número medio de células de PV, la intensidad de las células de PV, PV positiva para PA y la intensidad positiva para WFA, el total de 8-oxo-dG y el etiquetado con WFA se compararon entre los grupos mediante ANOVA multivariante (Lambda de Wilk), seguido de la prueba post hoc de Dunnett para comparaciones múltiples. Los datos de electrofisiología se compararon mediante ANOVA unidireccional con el grupo como variable entre sujetos. Los datos de PPI se compararon mediante ANOVA bidireccional de medidas repetidas con el estado de la lesión y el tratamiento como variables entre sujetos, y la intensidad del prepulso como variable en el sujeto.

Claims (14)

1. REIVINDICACIONES
1. Un compuesto modulador de la glutatión peroxidasa y un agente antipsicótico para uso en un método para el tratamiento de un trastorno psicótico en el que el trastorno psicótico es un trastorno bipolar o esquizofrenia, en el que el agente antipsicótico se coadministra con el compuesto modulador de la glutatión peroxidasa, y en el que, una dosis efectiva del agente antipsicótico en presencia del compuesto modulador de la glutatión peroxidasa coadministrada es menor que una dosis efectiva del compuesto antipsicótico en ausencia del compuesto modulador de la glutatión peroxidasa, en el que el compuesto modulador de la glutatión peroxidasa es ebseleno.
2. El compuesto modulador de la glutatión peroxidasa y el agente antipsicótico para uso de la reivindicación 1, en el que la coadministración reduce un efecto secundario de la administración del agente antipsicótico.
3. El compuesto modulador de la glutatión peroxidasa y el agente antipsicótico para uso de la reivindicación 1 o 2, en el que el agente antipsicótico se selecciona de un grupo que consiste en: clorpromazina (Thorazine), haloperidol (Haldol), perfenazina, flufenazina, risperidona (Risperdal), olanzapina (Zyprexa), quetiapina (Seroquel), ziprasidona (Geodon), aripiprazol (Abilify), paliperidona (Invega), lurasidona (Latuda) y combinaciones de los mismos.
4. El compuesto modulador de la glutatión peroxidasa y el agente antipsicótico para uso de la reivindicación 1, en el que el trastorno psicótico es trastorno bipolar.
5. El compuesto modulador de la glutatión peroxidasa y el agente antipsicótico para uso de la reivindicación 1, en el que el trastorno psicótico es esquizofrenia.
6. El compuesto modulador de la glutatión peroxidasa y el agente antipsicótico para uso de la reivindicación 3, en el que el agente antipsicótico es risperidona.
7. El compuesto modulador de la glutatión peroxidasa y el agente antipsicótico para uso de la reivindicación 3, en el que el agente antipsicótico es aripiprazol.
8. El compuesto modulador de la glutatión peroxidasa y el agente antipsicótico para uso de la reivindicación 2, en el que el efecto secundario es discinesia tardía.
9. El compuesto modulador de la glutatión peroxidasa y el agente antipsicótico para uso de la reivindicación 3-5, en el que el agente antipsicótico es quetiapina.
10. Una composición farmacéutica que comprende una combinación de agentes terapéuticos, consistiendo dicha combinación en:
(i) ebseleno o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo; y
(ii) un agente antipsicótico o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.
11. La composición farmacéutica de la reivindicación 10, en la que el agente antipsicótico se selecciona de un grupo que consiste en: clorpromazina (Thorazine), haloperidol (Haldol), perfenazina, flufenazina, risperidona (Risperdal), olanzapina (Zyprexa), quetiapina (Seroquel), ziprasidona (Geodon), aripiprazol (Abilify), paliperidona (Invega), lurasidona (Latuda) y combinaciones de los mismos.
12. La composición farmacéutica de la reivindicación 11, en la que el agente antipsicótico es risperidona.
13. La composición farmacéutica de la reivindicación 11, en la que el agente antipsicótico es aripiprazol.
14. La composición farmacéutica de la reivindicación 11, en la que el agente antipsicótico es quetiapina.
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Families Citing this family (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN104884632B (zh) * 2012-12-27 2018-01-02 索尼公司 细胞分析系统及细胞分析方法
CN105683355B (zh) 2013-11-08 2018-07-06 索尼公司 细胞分析系统、细胞分析程序和细胞分析方法
HRP20241559T1 (hr) * 2016-05-18 2025-02-14 Sound Pharmaceuticals Incorporated Ebselen za uporabu u liječenju menierove bolesti
CN107362144B (zh) * 2017-08-03 2020-04-17 华侨大学 一种鲁拉西酮脑靶向脂质体注射剂及其制备方法
GB201717629D0 (en) 2017-10-26 2017-12-13 Univ Oxford Innovation Ltd Treatment of unipolar depressive disorder
MX2020004975A (es) * 2017-11-14 2020-08-24 Sk Biopharmaceuticals Co Ltd Mezcla que contiene compuesto de carbamato para prevencion, mitigacion o tratamiento de esquizofrenia.
KR102927722B1 (ko) * 2020-05-09 2026-02-19 선전 프로파운드 뷰 파마슈티칼 테크놀로지 컴퍼니 리미티드 비정형 항정신병약물에 의해 유발되는 부작용의 치료
US20250128055A1 (en) * 2021-10-08 2025-04-24 Albert Ludwigs Universität Freiburg Treatment of psychiatric disorders with deep brain stimulation

Family Cites Families (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP0957901B1 (en) * 1996-12-31 2009-11-18 Antioxidant Pharmaceuticals Corporation Pharmaceutical preparations of glutathione and methods of administration thereof
US20050032708A1 (en) * 2001-09-27 2005-02-10 Bush Ashley I. Modulation of physiological processes and agents useful for same
US20090234011A1 (en) * 2005-04-21 2009-09-17 Goldstein Glenn A N-acetylcysteine amide (nac amide) for the treatment of diseases and conditions associated with oxidative stress
AU2006308889A1 (en) * 2005-10-31 2007-05-10 Braincells, Inc. GABA receptor mediated modulation of neurogenesis
US20110046090A1 (en) * 2005-10-31 2011-02-24 Braincells Inc. Modulation of neurogenesis with gaba agents and gaba analogs
JP2010507572A (ja) * 2006-10-23 2010-03-11 ザ メンタル ヘルス リサーチ インスティチュート オブ ビクトリア 併用療法
EP2736890A4 (en) * 2011-07-28 2015-07-15 Promentis Pharm Inc Cysteine PRODRUGS

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