ES3066499T3

ES3066499T3 - Process for the synthesis of sulfonated triarylmethane compounds

Info

Publication number: ES3066499T3
Application number: ES24162955T
Authority: ES
Inventors: Stéphane Queru; Babak Sayah; Nicolas Drillaud; Nicolas Lopez
Original assignee: Provepharm Life Solutions SA
Current assignee: Provepharm Life Solutions SA
Priority date: 2020-04-10
Filing date: 2021-04-01
Publication date: 2026-05-13
Anticipated expiration: 2041-04-01
Also published as: CN115551830A; CN118851949A; WO2021204712A1; FR3109150A1; IL297181A; EP4361127A3; US12668570B2; CN115551830B; MX2022012620A; IL297181B1; ES2985033T3; BR112022020469A2; FR3109150B1; EP4361127B1; AU2021253118B2; EP4132906A1; US20230159444A1; EP4361127A2; AU2021253118A1; IL297181B2

Abstract

La presente invención se refiere a un proceso para preparar un compuesto correspondiente a la fórmula, caracterizado porque comprende al menos una etapa de oxidación de trifenilmetano sulfonado de fórmula [Chem V] con una quinona seleccionada entre 1,4-benzoquinona, 1,2-benzoquinona, una dialquil(C1 - C4) 1,4-benzoquinona, una dialquil(C1 - C4) 1,2-benzoquinona, una monoalquil(C1 - C4) 1,4-benzoquinona, una monoalquil(C1 - C4) 1,2-benzoquinona. Nueva forma cristalina de Azul Patente, sal sódica. (Traducción automática con Google Translate, sin valor legal)

Description

[0001] DESCRIPCIÓN

[0002] Procedimiento de síntesis de compuestos de triarilmetano sulfonados

[0003] Campo técnico

[0004] La presente invención se refiere a un nuevo procedimiento de síntesis de compuestos que comprenden una estructura de triarilmetano sustituida con grupos sulfonados, específicamente un nuevo procedimiento de síntesis de colorantes de la familia de los compuestos de triarilmetano sulfonados, en particular del azul patente.

[0005] Estado de la técnica anterior

[0006] El azul patente (sal del 4-[[4-(dietilamino)fenil]-(4-dietilazanioilidenciclohexa-2,5-dien-1-iliden)metil]-6-hidroxibenceno-1,3-disulfonato) es un colorante que comprende una estructura triarilmetano que existe en dos formas: la sal de sodio [CAS 20262-76-4] y la sal de calcio [CAS 3536-49-0]. Este colorante fue mencionado por primera vez en 1897 por Ernst Erdmann y Hugo Erdmann,Justus Liebigs Annalen der Chemie, Vol.294 (3), 376-392.

[0007] En las publicaciones al respecto, existe a veces cierta confusión entre el azul patente y el azul de isosulfán (sal de sodio del 2-[[4-(dietilamino)fenil]-(4-dietilazanioilidenciclohexa-2,5-dien-1-iliden)metil]-benceno-1,4-disulfonato, CAS 68238-36-8 y 748080-29-7), aunque estas moléculas tengan estructuras distintas.

[0008] El azul patente está disponible comercialmente, aunque los productos que se pueden encontrar en el mercado se caracterizan por tener un contenido elevado de impurezas. Específicamente, se han encontrado grandes cantidades de compuesto monodesetilado que son difíciles de separar del azul patente mediante métodos de purificación convencionales. Igualmente, estos se caracterizan por una cantidad significativa de NaCl residual. El azul patente y el azul de isosulfán son colorantes de los tejidos biológicos usados específicamente como agentes de contraste para la delimitación de vasos linfáticos y son particularmente útiles como agentes de diagnóstico del cáncer. Se usan habitualmente en un procedimiento de diagnóstico denominado "mapeo de ganglios linfáticos centinela". Este método constituye un complemento de la linfografía para visualizar el sistema linfático drenando el área de inyección. Una aplicación importante consiste en localizar los ganglios linfáticos centinela en los pacientes con cáncer de mama. Igualmente, se efectúa la extirpación quirúrgica de tejidos cancerosos guiada con azul patente o azul de isosulfán.

[0009] Pocos autores se han interesado por la síntesis del azul patente desde la publicación de 1897 por Ernst y Hugo Erdmann. Entre estos autores se pueden citar Hagenbach, Revue des colorants bleus, Helvetica, volumen 6, número 1, 1923, páginas 134-186; Paul Fritsch, Euric, volumen 29, número 2, mayo-agosto 1896, páginas 2290-2301. A partir de las reacciones de base que se enseñan en estos documentos, se puede producir una gran diversidad de colorantes, específicamente compuestos caracterizados por una estructura de triarilmetano sulfonada.

[0010] Los documentos US 1531507, US7534911, US8969616, WO2017118882, WO2017218764 y WO2018008040 exponen diferentes procedimientos de síntesis del azul de isosulfán.

[0011] La mayoría de los métodos de síntesis de la técnica anterior para la fabricación de colorantes de triarilmetano sulfonados comprenden una etapa de condensación de un benzaldehído sulfonado con laN,N-dietilanilina, etapa que implica ácidos fuertes y que lleva a la formación de un compuesto leuco. Esta etapa va seguida generalmente de una etapa de oxidación con agentes oxidantes conocidos, algunos de los cuales son considerados peligrosos (óxido de plomo, ftalocianina de hierro, / oxona), para efectuar la conversión en un colorante de triarilmetano.

[0012] El documento DE46384 describe un procedimiento de síntesis de colorantes del tipo triarilmetano sulfonado por medio de un procedimiento que utiliza una sulfonación de una estructura de triarilmetano mediante tratamiento con ácido sulfónico fumante, seguido de una oxidación con óxido de plomo en presencia de ácido sulfúrico. No se han caracterizado ni el producto ni su pureza. Se ignora qué sustituciones se han efectuado en los anillos aromáticos. Los inventores de la presente solicitud han constatado que el tratamiento con ácido sulfónico fumante (SO<3>gaseoso a saturación en una solución concentrada de H<2>SO<4>) degrada la estructura de triarilmetano muy rápidamente. Las condiciones que se enseñan en este documento no permiten, por tanto, formar la estructura buscada con unos rendimientos y una pureza satisfactorios.

[0013] El documento A.M. Montagut et al., Chem. Eur. J.2017, 23, 3810-3814, describe una síntesis de compuestos de triarilmetano de carácter hidrófobo para el tratamiento de textiles. Después de la formación de la estructura de triarilmetano sustituida con grupos de cadena larga, la última etapa consiste en una oxidación con una quinona, la 2,3-dicloro-5,6-diciano-1,4-benzoquinona (DDQ). Las estructuras correspondientes son significativamente diferentes de las moléculas colorantes convencionales tales como el azul patente o el azul de isosulfán, cuyos núcleos de arilo están sustituidos con grupos de cadena corta y llevan funciones sulfonadas.

[0014] Entre las impurezas que se forman durante la síntesis de estos compuestos dialquilaminotriarilmetilsulfonados, los derivados desalquilados son particularmente irritantes. En el caso del azul patente y el azul de isosulfán, las impurezas se refieren a impurezas de desetilo. En efecto, estas moléculas solo se diferencian de las moléculas objetivo en la ausencia de uno o más grupos alquilo (etilo) en los átomos de nitrógeno. Como su estructura es muy similar a la de los compuestos objetivo, es difícil eliminarlos mediante técnicas de purificación convencionales.

[0015] El documento WO2017/118882 reivindica la síntesis de azul de isosulfán con una pureza > 99.8 % y una cantidad de impureza desetilada < 0.15 %. Sin embargo, el procedimiento descrito lleva a cabo una etapa de oxidación con permanganato potásico que puede llevar a una contaminación por manganeso. Este método, cuando se aplica a la síntesis del azul patente, da un compuesto con un contenido de desetilo mucho más elevado.

[0016] El documento RU 2654862 describe un procedimiento de purificación de compuestos colorantes de diaminotrifenilmetano disulfonados. Este procedimiento se refiere en particular al azul patente. El procedimiento descrito en este documento se basa en una absorción sobre un soporte de PDMS y una recuperación del azul patente con una solución salina acuosa. El producto obtenido de este procedimiento tiene un gran contenido de sales.

[0017] El documento Journal of chromatography A 1499 (2017) 183-189 describe un procedimiento de separación electromagnética aplicado a compuestos colorantes, específicamente al azul patente. La operación se efectúa con respecto a una mezcla que comprende otros dos colorantes de estructuras diferentes. No se contempla usar tal procedimiento para eliminar el compuesto desetilado o otros compuestos de estructura análoga. Sigue existiendo, por tanto, la necesidad de un procedimiento de síntesis de compuestos de triarilmetano sulfonados que permita obtener el azul patente aunque también otras estructuras tales como el azul de isosulfán (isosulfan blue), específicamente. En particular, se ha buscado desarrollar un procedimiento que sea reproducible, aplicable a escala industrial, con buenos rendimientos y que proporcione productos de pureza elevada. En particular, sigue existiendo la necesidad de un procedimiento que produzca una composición en la que el compuesto objetivo esté sustancialmente desprovisto de derivados desalquilados, en particular derivados desetilados en el caso del azul patente y del azul de isosulfán, pero también que no requiera el uso de metales pesados. Sigue existiendo también la necesidad de un método de preparación del azul patente que lleve a un producto sustancialmente desprovisto de sales.

[0018] De manera sorprendente, el presente solicitante ha descubierto un procedimiento que permite acceder a compuestos de estructura de triarilmetano sulfonado a partir de moléculas sencillas y fácilmente disponibles, mediante una etapa de oxidación con quinonas, con unos rendimientos y una pureza elevados. El procedimiento de la divulgación permite obtener productos que tienen a la vez una pureza orgánica y una pureza con respecto a los metales pesados satisfactorias, teniendo al mismo tiempo buenos rendimientos.Sumario de la invención

[0019] La divulgación se refiere a un procedimiento de preparación de un compuesto que responde a la fórmula (I)

[0022]

[0025] en la que

[0026] R1, R2, R3 representan, de manera independiente entre sí, un grupo seleccionado entre: -H, -OH, -SO<3>H, -SO<3>-, al menos uno de R1, R2, R3 representa un grupo seleccionado entre (-SO<3>H, -SO<3>-),

[0027] R4, R5, idénticos o diferentes, representan un grupo seleccionado entre: alquilo C<1>-C<8>, alquenilo C<1>-C<8>, fenilo, bencilo, entendiéndose que dos grupos R4, R5 en el mismo átomo de nitrógeno pueden formar juntos un anillo que incluye este átomo de nitrógeno,

[0028] Y representa un catión orgánico o inorgánico seleccionado entre las sales farmacéuticamente aceptables; t representa un número t = 0; 1/2; 1,

[0029] estando caracterizado este procedimiento por que comprende al menos una etapa de oxidación del trifenilmetano sulfonado de fórmula (V) con una quinona seleccionada entre 1,4-benzoquinona, 1,2-benzoquinona, dialquil(C<1>-C<4>) 1,4-benzoquinona, dialquil(C<1>-C<4>) 1,2-benzoquinona, monoalquil(C<1>-C<4>) 1,4-benzoquinona, monoalquil(C<1>-C<4>) 1,2-benzoquinona:

[0032]

[0035] De acuerdo con una realización preferente, la quinona es 1,4-benzoquinona.

[0036] De acuerdo con una realización preferente, el tratamiento se lleva a cabo en un disolvente prótico apolar. De acuerdo con una realización preferente, el tratamiento se lleva a cabo a una temperatura que varía de 40 a 130 °C, de manera ventajosa a una temperatura que varía de 60 a 120 °C, de manera aún más ventajosa a una temperatura que varía de 70 a 110 °C.

[0037] De acuerdo con una realización preferente, al final de la etapa de tratamiento con una quinona, el compuesto objetivo de fórmula (I) se separa del medio de reacción mediante precipitación.

[0038] De acuerdo con una realización preferente, el procedimiento comprende además una etapa en la que el compuesto objetivo de fórmula (I) con t = 0 se transforma en la sal de fórmula (I) con t = 1 o t = 1/2.

[0039] De acuerdo con una realización preferente, el compuesto de fórmula ((Quím. I) responde a la fórmula (Quím. IA)

[0042]

[0044] De acuerdo con una realización preferente, el compuesto (Quím. IA) se obtiene mediante un procedimiento que comprende al menos las etapas siguientes:

[0045] a) condensación del compuesto benzaldehído de fórmula (Quím. IIA) con la dialquilanilina de fórmula(Quím. III) para dar el trifenilmetano de fórmula (Quím. IVA),

[0046]

[0049] b) tratamiento del trifenilmetano de fórmula (IVA) con ácido sulfúrico para formar el trifenilmetano sulfonado de fórmula (VA)

[0052]

[0055] De acuerdo con una realización más preferente, el compuesto que responde a la fórmula (Quím. I) se selecciona entre:

[0058]

[0061] azul patente, sal de sodio

[0064]

[0067] azul patente, sal de calcio

[0068]

[0071] azul patente, sal de potasio

[0072] De acuerdo con otra variante, el compuesto que responde a la fórmula (Quím. I) responde a la fórmula (Quím. IB)

[0075]

[0077] De acuerdo con una realización preferente de esta variante, el compuesto que responde a la fórmula (Quím. I) es el compuesto (Quím. VIII)

[0080]

[0082] azul de isosulfán (isosulfan blue)

[0083] La divulgación se refiere además al uso del procedimiento tal como se ha descrito anteriormente y como se describe con más detalle a continuación, para obtener una composición que comprende al menos un 99.0 % del compuesto que responde a la fórmula (Quím. I), habiendo medido el % mediante cromatografía líquida de alta resolución (HPLC) con una detección a 230 nm.

[0084] De acuerdo con una realización preferente, el uso está dirigido a producir una composición en la que no hay presente ninguna impureza aparte del derivado monodesalquilado en una cantidad superior al 0.1 %, habiendo medido el % mediante cromatografía líquida de alta resolución con una detección a 230 nm.

[0085] La invención se refiere además a un procedimiento de fabricación de un medicamento o de un producto de diagnóstico que comprende la fabricación del compuesto que responde a la fórmula (Quím. I), preferentemente del azul patente, mediante el procedimiento tal como se ha descrito anteriormente y como se describe con más detalle a continuación, y la introducción del compuesto que responde a la fórmula (Quím. I), en un vehículo farmacéuticamente aceptable.

[0086] La invención permite obtener a una composición que comprende al menos un 99.0 % del compuesto que responde a la fórmula (Quím. VI) o a la fórmula (Quím. VII) o a la fórmula (Quím. X), habiendo medido el % mediante cromatografía líquida de alta resolución con una detección a 230 nm:

[0087] (Quím. VI)

[0090]

[0092] azul patente, sal de sodio

[0093] (Quím. VII)

[0096]

[0098] azul patente, sal de calcio.

[0099] (Quím. X)

[0100]

[0102] azul patente, sal de potasio

[0103] De manera ventajosa, en esta composición no hay presente ninguna impureza aparte del derivado monodesalquilado en una cantidad superior al 0.1 %, habiendo medido el % mediante cromatografía líquida de alta resolución con una detección a 230 nm. El procedimiento de la divulgación presenta la ventaja de que permite obtener una composición sustancialmente desprovista de NaCl, preferentemente totalmente desprovista de NaCl residual.

[0104] La invención se refiere además a una forma cristalina del compuesto azul patente, sal de sodio, que responde a la fórmula (Quím. VI), caracterizada por el diagrama de difracción de rayos X en polvo siguiente, medido en un difractómetro y expresado en términos de las distancias inter-reticulares d, el ángulo de Bragg 2-theta, la intensidad y la intensidad relativa (expresada en porcentaje con respecto a la línea más intensa):

[0107]

[0109] Entendiéndose que los valores de la intensidad (I) y de la intensidad relativa (I rel) de los picos anteriores, pueden variar en /- un 15 %.

[0110] De manera ventajosa, la estructura cristalina está sustancialmente desprovista de NaCl, preferentemente totalmente desprovista de NaCl.

[0111] La invención se refiere a la forma cristalina del compuesto azul patente, sal de sodio, para su uso como medicamento.

[0112] En particular, se refiere a la forma cristalina del compuesto azul patente, sal de sodio, para su uso en diagnóstico, tal como se expone de manera detallada en la descripción siguiente.

[0113] La invención se refiere además a una composición farmacéutica que comprende al menos la forma cristalina del compuesto azul patente, sal de sodio, que responde a la fórmula (Quím. VI) tal como se ha descrito anteriormente y como se describe con más detalle a continuación, en un vehículo farmacéuticamente aceptable.

[0114] De manera sorprendente, se ha constatado que el procedimiento de la divulgación permite obtener directamente una forma cristalina del azul patente, en particular del azul patente, sal de sodio, que no era conocida en la técnica anterior. La obtención directa de una forma cristalina desprovista de cloruro de sodio residual proporciona numerosas ventajas en términos de rendimiento y de pureza, aunque también de eficacia y de reducción de costes para una aplicación del procedimiento a escala industrial. El producto obtenido presenta características cristalinas que le confieren una buena estabilidad. El procedimiento de la divulgación proporciona una mayor facilidad de elaboración en la medida en que lleva de manera reproducible a un producto cristalino, de polimorfismo único, que se requiere en la mayoría de las fórmulas galénicas (secas en particular). La ausencia de NaCl favorece la solubilidad del azul patente en solución acuosa.

[0115] Descripción detallada

[0116] La expresión "consiste esencialmente en" seguida de una o varias características, significa que pueden estar incluidos en el procedimiento o en el material de la invención, además de los compuestos o etapas explícitamente enumerados, compuestos o etapas que no modifican significativamente las propiedades y características de la invención.

[0117] La expresión "comprendido entre X e Y" incluye los extremos, a menos que se indique explícitamente lo contrario. Esta expresión significa, por tanto, que el intervalo buscado comprende los valores X, Y y cualquier valor que va de X a Y.

[0118] Compuestos obtenidos mediante el procedimiento de la invención

[0119] La presente divulgación se refiere a un procedimiento de obtención de compuestos que responden a la fórmula (Quím. I) siguiente:

[0120] (Quím. I)

[0123]

[0125] en la que

[0126] R1, R2, R3 representan, de manera independiente entre sí, un grupo seleccionado entre: -H, -OH, -SO<3>H, -SO<3-,>

[0127] R4, R5, idénticos o diferentes, representan un grupo seleccionado entre: alquilo C<1>-C<8>, alquenilo C<1>-C<8>, fenilo, bencilo, y dos grupos R4, R5 en el mismo átomo de nitrógeno pueden formar juntos un anillo que incluye este átomo de nitrógeno,

[0128] Y representa un catión orgánico o inorgánico seleccionado entre las sales farmacéuticamente aceptables; t representa un número t = 0; 1/2; 1;

[0129] al menos uno de R1, R2, R3 representa un grupo seleccionado entre -SO<3>H, -SO<3>-<.>

[0130] Preferentemente, al menos dos de los grupos R1, R2, R3 se seleccionan entre -SO<3>H, -SO<3>-<.>

[0131] De manera ventajosa, en la fórmula (Quím. I) dos de los grupos R1, R2, R3 se seleccionan entre -SO<3>H, -SO<3>-y el tercer grupo es distinto de -SO<3>H, -SO<3>-<.>

[0132] De manera preferente, en la fórmula (Quím. I):

[0133] R1 = -SO<3>H o -SO<3>-; R2 = H; R3 = -SO<3>H o -SO<3->o

[0134] R1 = -SO<3>H o -SO<3>-; R2 = -SO<3>H o -SO<3>-; R3 = -OH.

[0135] De manera más preferente, en la fórmula (Quím. I):

[0136] R1 = -SO<3>H o -SO<3>-; R2 = -SO<3>H o -SO<3>-; R3 = -OH.

[0137] Cuando dos grupos R4, R5 en el mismo átomo de nitrógeno forman juntos un anillo, estos grupos pueden consistir en una sola cadena de alquilo o alquenilo que forma un anillo que incluye el átomo de nitrógeno. De manera ventajosa, R4, R5, idénticos o diferentes, representan un grupo seleccionado entre: alquilo C<1>-C<6>, fenilo, bencilo, y dos grupos R4, R5 en el mismo átomo de nitrógeno pueden formar juntos una cadena –(CH<2>)p-, con p que es un número entero, p = 2 a 5.

[0138] De manera aún más ventajosa, R4, R5, idénticos o diferentes, representan un grupo seleccionado entre: alquilo C<1>-C<3>, preferentemente entre metilo y etilo. De manera preferente, (R4; R5) se selecciona entre (CH3; CH3), (C2H5; C2H5), (CH3; C2H5).

[0139] De acuerdo con una realización preferente, R4 = R5.

[0140] De manera aún más ventajosa, (R4; R5) se selecciona entre (CH3; CH3) y (C2H5; C2H5).

[0141] De acuerdo con una variante preferente, (R4; R5) representa (C2H5; C2H5).

[0142] De manera ventajosa, las sales farmacéuticamente aceptables se refieren a sales no tóxicas, en las que el catión se selecciona entre iones de metales alcalinos, de metales alcalino-térreos, o un ion amonio. De manera aún más ventajosa, Y representa un grupo seleccionado entre: Na<+>, Ca<2+>, K<+>, Mg<2+>, un grupo amonio NH<4>+<.>De manera aún más preferente, Y representa un grupo seleccionado entre: Na<+>, Ca<2+>.

[0143] De acuerdo con una variante preferente, el procedimiento de la divulgación se refiere a la obtención de compuestos que responden a la fórmula (Quím. IA) siguiente:

[0144] (Quím. IA)

[0147]

[0149] en la que R4, R5, Y y t tienen la misma definición que en la fórmula (Quím. I). Las preferencias expresadas anteriormente para la selección de estas variables en el contexto de la fórmula (Quím. I) se aplican también a la fórmula (Quím. IA).

[0150] En particular, la invención se refiere a los compuestos siguientes:

[0151] (Quím. VI)

[0152]

[0154] azul patente, sal de sodio

[0155] (Quím. VII)

[0158]

[0160] azul patente, sal de calcio

[0161] (Quím. X)

[0164]

[0166] azul patente, sal de potasio

[0167] De manera más preferente, la invención se refiere al azul patente, sal de sodio y al azul patente, sal de calcio. Aún más preferentemente, se refiere al azul patente, sal de sodio.

[0168] En toda la solicitud, cuando se menciona el azul patente se entiende un compuesto que responde a la fórmula (Quím. VI), a la fórmula (Quím. VII) o a la fórmula (Quím. X).

[0169] De acuerdo con otra variante, el procedimiento de la divulgación se refiere a la obtención de compuestos que responden a la fórmula (Quím. IB) siguiente:

[0170] (Quím. IB)

[0173]

[0175] en la que R4, R5, Y y t tienen la misma definición que en la fórmula (Quím. I). Las preferencias expresadas anteriormente para la selección de estas variables en el contexto de la fórmula (Quím. I) se aplican también a la fórmula (Quím. IB).

[0176] En particular, la invención se refiere al compuesto siguiente:

[0177] (Quím. VIII)

[0180]

[0182] azul de isosulfán

[0183] En toda la solicitud, cuando se menciona el azul de isosulfán (isosulfan blue) se entiende un compuesto que responde a la fórmula (Quím. VIII).

[0184] Procedimiento de preparación de un compuesto de acuerdo con la invención

[0185] - Etapa c) de tratamiento con una quinona:

[0186] La divulgación se refiere a un procedimiento de síntesis de un compuesto que responde a la fórmula (Quím. I)

[0187]

[0189] tal como se ha definido anteriormente, estando caracterizado por que comprende al menos una etapa c) de oxidación del trifenilmetano sulfonado de fórmula (Quím. V) con una quinona seleccionada entre 1,4-benzoquinona, 1,2-benzoquinona, dialquil(C<1>-C<4>) 1,4-benzoquinona, dialquil(C<1>-C<4>) 1,2-benzoquinona, monoalquil(C<1>-C<4>) 1,4-benzoquinona, monoalquil(C<1>-C<4>) 1,2-benzoquinona que sigue el esquema:

[0192]

[0195] En la fórmula (Quím. V), las variables R1, R2, R3, R4, R5 tienen la misma definición que en la fórmula (Quím. I) (con las mismas variantes preferentes).

[0196] En el transcurso de la etapa c) el trifenilmetano sulfonado de fórmula (Quím. V) se oxida en el compuesto objetivo de fórmula (Quím. I) mediante tratamiento con una quinona. En esta etapa, si se busca la obtención de un producto de pureza elevada y rendimientos de conversión elevados, es importante evitar la degradación de la estructura de triarilmetano y la desalquilación, es decir, la sustitución de uno o varios grupos R4, R5 con átomos de hidrógeno.

[0197] La quinona se selecciona entre 1,4-benzoquinona, 1,2-benzoquinona, dialquil(C<1>-C<4>) 1,4-benzoquinona, dialquil(C<1>-C<4>) 1,2-benzoquinona, monoalquil(C<1>-C<4>) 1,4-benzoquinona, monoalquil(C<1>-C<4>) 1,2-benzoquinona. Por "dialquil(C<1>-C<4>) 1,4-benzoquinona" y "dialquil(C<1>-C<4>) 1,2-benzoquinona" se entiende una quinona que lleva dos grupos alquilo C<1>-C<4>idénticos o diferentes, preferentemente idénticos, como, por ejemplo, 3,5-di-tert-butil-1,2-benzoquinona o 2,5-dimetil-1,4-benzoquinona. Por "monoalquil(C<1>-C<4>) 1,4-benzoquinona" y "monoalquil(C<1>-C<4>) 1,2-benzoquinona" se entiende una quinona que lleva un grupo alquilo C<1>-C<4>como, por ejemplo, 2-metil-1,4-benzoquinona.

[0198] Preferentemente, la quinona es 1,4-benzoquinona.

[0199] De manera sorprendente, se ha constatado que estas quinonas dan una elevada tasa de conversión y una baja degradación en impurezas de tipo desalquilo, en particular, en impurezas desetilo en el caso del azul patente. Preferentemente, en la etapa c), el tratamiento se lleva a cabo en un disolvente prótico apolar. Por ejemplo, el disolvente se puede seleccionar entre dimetilsulfóxido (DMSO), N-metilpirrolidona (NMP) y dimetilformamida (DMF).

[0200] Preferentemente, en la etapa c), el tratamiento se lleva a cabo a una temperatura que varía de 40 a 130 °C, de manera ventajosa a una temperatura que varía de 60 a 120 °C, de manera aún más ventajosa a una temperatura que varía de 70 a 110 °C.

[0201] De manera ventajosa, al final de la etapa c) el compuesto objetivo de fórmula (Quím. I) se separa del medio de reacción mediante precipitación. Preferentemente, esta precipitación es provocada por la adición de un disolvente o una mezcla de disolventes seleccionados entre: alcoholes, éteres, agua, acetona y mezclas de estos.

[0202] De manera alternativa, se podría contemplar el aislamiento del compuesto de fórmula (Quím. I) del medio de reacción mediante otras técnicas de purificación tales como la extracción con disolventes o la cromatografía sobre columna de sílice.

[0203] Etapa d) de salificación:

[0204] Cuando t es distinto de 0, el procedimiento comprende, después de la etapa c), una etapa d) de salificación. De una manera bien conocida, esta etapa se lleva a cabo introduciendo el compuesto objetivo de fórmula (Quím. I) obtenido en la etapa c) (t = 0) en un disolvente con el contraión seleccionado.

[0205] En el caso particular del azul patente, el contraión se selecciona de manera ventajosa entre Na<+>, Ca<2+>. Aunque se pueden obtener derivados del azul patente, correspondiente al compuesto objetivo de fórmula (Quím. IA), con otro contraión Y mediante el procedimiento de la divulgación.

[0206] De manera opcional, el procedimiento puede ir seguido de una o varias etapas de purificación convencionales tales como precipitación, cristalización, extracción con disolventes o cromatografía.

[0207] En el caso del compuesto (Quím. IA), la combinación de las etapas c) y d) se puede sintetizar en el esquema siguiente:

[0210]

[0213] En el caso del azul patente (sal de sodio), la combinación de las etapas c) y d) se puede sintetizar en el esquema siguiente:

[0214]

[0216] De manera sorprendente, se ha constatado que la combinación de las dos etapas anteriores permite obtener directamente una forma cristalina del azul patente, en particular del azul patente, sal de sodio, que no era conocida en la técnica anterior. La obtención directa de una forma cristalina proporciona numerosas ventajas en términos de rendimiento y de pureza, aunque también de eficacia y de reducción de costes para una aplicación del procedimiento a escala industrial. El producto obtenido presenta características cristalinas que le confieren una buena estabilidad.

[0217] Obtención del compuesto de fórmula (Quím. V)

[0218] Para llevar a cabo el procedimiento descrito anteriormente, se usa un producto de fórmula (Quím. V) que se oxida con una quinona en la etapa c).

[0219] En determinados casos, el producto de fórmula (Quím. V) está disponible comercialmente, caso en el que el procedimiento de la divulgación comprende una etapa de oxidación con una quinona y, opcionalmente, una etapa de salificación. Es el caso, por ejemplo, del azul de isosulfán, cuyo precursor (IX) siguiente está disponible comercialmente:

[0222]

[0224] En otros casos, el precursor de fórmula (Quím. V) no está disponible en cantidad suficiente o con una calidad satisfactoria, caso en el cual se puede sintetizar de manera ventajosa mediante un procedimiento tal como se describe a continuación.

[0225] El procedimiento de preparación del compuesto de fórmula (Quím. V) comprende de manera ventajosa al menos las etapas siguientes:

[0226] a) condensación del compuesto benzaldehído de fórmula (Quím. II) con la dialquilanilina de fórmula (Quím. III) para dar el trifenilmetano de fórmula (Quím. IV),

[0227]

[0230] en las que

[0231] R1, R2, R3 representan, de manera independiente entre sí, un grupo seleccionado entre: -H, -OH, y al menos uno de R1, R2, R3 representa H,

[0232] R4, R5 tienen la misma definición que en la fórmula (Quím. I).

[0233] b) tratamiento del trifenilmetano de fórmula (Quím. IV) con ácido sulfúrico para formar el trifenilmetano sulfonado de fórmula (Quím. V)

[0234] (Quím. V)

[0237]

[0239] En la fórmula (Quím. V), las variables R1, R2, R3, R4, R5 tienen la misma definición que en la fórmula (Quím. I) (con las mismas variantes preferentes).

[0240] Las preferencias expresadas anteriormente para la selección de las variables R4 y R5 en el contexto de la fórmula (Quím. I) se aplican también a las fórmulas (II), (III), (IV) y (V).

[0241] Los grupos R1, R2 y R3 en las fórmulas (II) y (IV) se corresponden ya sea con R1, R2 y R3 tal como se definen en las fórmulas (I) y (V) o ya sea, para uno o varios de estos grupos, con un átomo de hidrógeno que se sustituye con una función SO<3>H/SO<3>-

en el transcurso de la etapa b). En efecto, en la etapa b) se efectúa la sustitución de uno o varios átomos de hidrógeno entre R1, R2, R3 con una función SO<3>H/SO<3>-<.>

[0242] Etapa a):

[0243] La etapa a) consiste en condensar el compuesto benzaldehído de fórmula (Quím. II) con la dialquilanilina de fórmula (Quím. III) para dar el trifenilmetano de fórmula (Quím. IV). Preferentemente, en las fórmulas (II) y (IV), al menos dos de los grupos R1, R2, R3 representan -H.

[0244] De manera ventajosa, dos de los grupos R1, R2, R3 se seleccionan entre H y el tercero se selecciona entre -H y -OH.

[0245] De manera preferente, en las fórmulas (II) y (IV):

[0246] R1 = R2 = H; R3 = -OH.

[0247] De manera ventajosa, en el procedimiento de preparación definido anteriormente, la etapa a) se lleva a cabo con de 1.95 a 3 equivalentes molares de dialquilanilina de fórmula (Quím. III) con respecto a la cantidad de benzaldehído de fórmula (Quím. II).

[0248] De manera ventajosa, en el procedimiento de preparación definido anteriormente, la etapa a) se lleva a cabo en presencia de urea y en medio ácido. Preferentemente, el medio de reacción se acidifica con ácido clorhídrico. De manera más ventajosa, el medio de reacción se acidifica con de 1.2, a 3 equivalentes molares de ácido clorhídrico con respecto a la cantidad de benzaldehído de fórmula (Quím. II). Preferentemente, la etapa a) se lleva a cabo en presencia de 0.25 a 1.5 equivalentes molares de urea con respecto a la cantidad de benzaldehído de fórmula (Quím. II).

[0249] De manera ventajosa, en el procedimiento de preparación definido anteriormente, la etapa a) se lleva a cabo en un disolvente seleccionado entre disolventes próticos, en particular alcoholes. Preferentemente, se lleva a cabo en etanol. Preferentemente, el etanol se introduce en el medio de reacción en una cantidad que varía de 1 a 6 volúmenes en comparación con la masa de aldehído de fórmula (Quím. II).

[0250] De manera ventajosa, la reacción de la etapa a) se lleva a cabo mediante calentamiento a una temperatura que varía de 60 °C a 120 °C durante un periodo de 5 a 30 horas, de manera aún más ventajosa a una temperatura que varía de 75 °C a 100 °C durante un periodo de 10 a 25 horas.

[0251] De manera ventajosa, al final de la reacción de condensación de la etapa a), el medio de reacción se trata para precipitar el compuesto de fórmula (Quím. IV). Preferentemente, esta precipitación es provocada por la adición al medio de reacción de un disolvente seleccionado entre una solución acuosa ácida, acetona y mezclas de estas. De manera ventajosa, el compuesto de fórmula (Quím. IV) se aísla del medio de reacción mediante filtración y se purifica mediante lavado. De manera ventajosa, el lavado se efectúa con un disolvente seleccionado entre una solución acuosa ácida, acetona y mezclas de estas.

[0252] De manera alternativa, se podría contemplar el aislamiento del compuesto de fórmula (Quím. IV) del medio de reacción mediante otras técnicas de purificación tales como la extracción con disolventes o la cromatografía, específicamente la cromatografía sobre columna de sílice.

[0253] En el caso en el que el compuesto (Quím. I) es el compuesto (Quím. IA), la etapa a) se puede sintetizar en el esquema siguiente:

[0256]

[0259] En particular, en el caso del azul patente (BP,bleu patenté), la etapa a) se puede sintetizar en el esquema siguiente:

[0262]

[0263] Etapa b):

[0264] De manera ventajosa, en el procedimiento de preparación definido anteriormente, la etapa b) se lleva a cabo mediante un tratamiento con ácido sulfúrico concentrado. Por ejemplo, se usa una solución de ácido sulfúrico de concentración superior o igual al 90 % en volumen, preferentemente una solución de ácido sulfúrico de concentración superior o igual al 95 % en volumen.

[0265] Preferentemente, el tratamiento comprende la adición del compuesto de fórmula (Quím. IV) a de 1 a 5 volúmenes de ácido sulfúrico.

[0266] De manera ventajosa, la solución del compuesto de fórmula (Quím. IV) en ácido sulfúrico se lleva a una temperatura que varía de 60 a 120 °C durante un periodo que varía de 30 min a 10 h, preferentemente a una temperatura que varía de 80 a 100 °C durante un periodo que varía de 1 h a 5 h.

[0267] De manera ventajosa, al final de la etapa b) el trifenilmetano sulfonado de fórmula (Quím. V) se separa del medio de reacción mediante precipitación. Preferentemente, esta precipitación es provocada por la adición de un disolvente o una mezcla de disolventes seleccionados entre: alcoholes, éteres, agua, acetona y mezclas de estos; aún más preferentemente, por la adición de alcohol (etanol, isopropanol,...), una mezcla de agua/alcohol, de agua/acetona o una mezcla de alcohol/éter (isopropanol/éter isopropílico, etanol/éter isopropílico,...). De manera alternativa, se podría contemplar el aislamiento del compuesto de fórmula (Quím. V) del medio de reacción mediante otras técnicas de purificación tales como la extracción con disolventes o la cromatografía, específicamente la cromatografía sobre columna de sílice.

[0268] De manera sorprendente, se ha constatado que, en las condiciones descritas anteriormente, la sulfonación del anillo aromático que lleva la función hidroxilo en la fórmula (Quím. IVa) se efectúa de manera selectiva en posiciónortooparadel anillo cuando este comprende un grupo -OH en posiciónmeta.

[0269] En el caso en el que el compuesto (Quím. I) es el compuesto (Quím. IA), la etapa b) se puede sintetizar en el esquema siguiente:

[0272]

[0274] La etapa b), por tanto, es particularmente ventajosa para la síntesis de compuestos que responden a la fórmula (Quím. IA) que se ha definido anteriormente. Específicamente, esta permite obtener el azul patente con una selectividad elevada en cuanto a la sustitución del anillo que lleva las funciones sulfonadas.

[0275] Por otro lado, contrariamente a lo observado en otras condiciones de sulfonación, el tratamiento anterior conlleva poca formación de productos secundarios debidos a la degradación de la estructura de triarilmetano o a la desalquilación de las funciones alquilamina.

[0276] En el caso del azul patente, la etapa b) se puede sintetizar en el esquema siguiente:

[0277]

[0280] Características de los compuestos obtenidos

[0281] El procedimiento de la divulgación permite obtener composiciones que comprenden el compuesto objetivo de fórmula (Quím. I), en particular los compuestos (Quím. IA) y (Quím. IB), más en particular los compuestos de fórmulas (Quím. VI), (Quím. VII), (Quím. X) y (Quím. VIII), con rendimientos elevados y una tasa de impurezas muy baja.

[0282] En la práctica, la impureza mono-desalquilada (una sola función alquilo entre los grupos R4, R5 está sustituida con un átomo de hidrógeno y las otras tres son alquilo) es la impureza principal observada durante la síntesis de los compuestos de fórmula (Quím. I). Las otras impurezas desalquiladas que tienen una estructura menos similar tienen propiedades diferentes y, si se forman, son eliminadas en el transcurso del procedimiento. En particular, el procedimiento de la divulgación permite obtener una composición que comprende al menos un 98.0 % del compuesto que responde a la fórmula (Quím. I) y menos de un 1 % de impureza monodesalquilada (compuesto de fórmula (Quím. I) en el que uno de los grupos R4 y R5 representa H), habiendo medido el % mediante cromatografía líquida de alta resolución con una detección a 230 nm.

[0283] Aún más preferentemente, el procedimiento de la divulgación permite obtener una composición que comprende al menos un 99.0 % del compuesto que responde a la fórmula (Quím. I) y menos de un 0.5 % de impureza monodesalquilada, no estando presente ninguna otra impureza en una cantidad superior al 0.15 %, habiendo medido el % mediante cromatografía líquida de alta resolución con una detección a 230 nm.

[0284] En particular, el procedimiento de la divulgación permite obtener una composición que comprende al menos un 98.0 % del compuesto que responde a la fórmula (Quím. IA) o (Quím. IB) y menos de un 1 % de impureza monodesalquilada (compuesto en el que uno de los grupos R4 y R5 representa H), habiendo medido el % mediante cromatografía líquida de alta resolución con una detección a 230 nm. Aún más preferentemente, el procedimiento de la divulgación permite obtener una composición que comprende al menos un 99.0 % del compuesto que responde a la fórmula (Quím. IA) o (Quím. IB) y menos de un 0.5 % de impureza monodesalquilada, no estando presente ninguna otra impureza en una cantidad superior al 0.15% medido el % mediante cromatografía líquida de alta resolución con una detección a 230 nm.

[0285] De manera ventajosa, el procedimiento permite obtener una composición en la que no hay presente ninguna impureza aparte del derivado monodesalquilado en una cantidad superior al 0.1 %, habiendo medido el % mediante cromatografía líquida de alta resolución con una detección a 230 nm.

[0286] En el caso del azul patente, las impurezas de tipo desetilado se representan mediante las fórmulas siguientes en las que Y y t tienen la misma definición que antes (en particular Y = Na<+>y t = 1; Y = Ca<2+>y t = ½; Y = K<+>y t = 1):

[0287]

[0289] En la práctica, la impureza mono-desetilada (una sola función etilo sustituida con un átomo de hidrógeno) es la principal impureza observada durante la síntesis del azul patente. Las otras impurezas desetiladas que tienen una estructura menos similar tienen propiedades diferentes y, si se forman, son eliminadas en el transcurso del procedimiento.

[0290] En particular, el procedimiento de la divulgación permite obtener una composición que comprende al menos un 98.0 % del compuesto sal del 4-[[4-(dietilamino)fenil]-(4-dietilazanioilidenciclohexa-2,5-dien-1-iliden)metil]-6-hidroxibenceno-1,3-disulfonato) (azul patente) y menos de un 1 % de impureza monodesetilada, habiendo medido el % mediante cromatografía líquida de alta resolución con una detección a 230 nm.

[0291] Aún más preferentemente, el procedimiento de la divulgación permite obtener una composición que comprende al menos un 99.0 % del compuesto sal del 4-[[4-(dietilamino)fenil]-(4-dietilazanioilidenciclohexa-2,5-dien-1-iliden)metil]-6-hidroxibenceno-1,3-disulfonato y menos de un 0.5 % de impureza monodesetilada, no estando presente ninguna otra impureza en una cantidad superior al 0.15 %, habiendo medido el % mediante cromatografía líquida de alta resolución con una detección a 230 nm.

[0292] De manera ventajosa, el procedimiento permite obtener una composición en la que no hay presente ninguna impureza aparte del derivado monodesetilado en una cantidad superior al 0.1 %, habiendo medido el % mediante cromatografía líquida de alta resolución con una detección a 230 nm.

[0293] En particular, el procedimiento de la divulgación permite obtener una composición que comprende al menos un 98.0 % del compuesto sal de sodio del 2-[[4-(dietilamino)fenil]-(4-dietilazanioilidenciclohexa-2,5-dien-1-iliden)metil]benceno-1,4-disulfonato) (azul de isosulfán) y menos de un 1 % de impureza monodesetilada, habiendo medido el % mediante cromatografía líquida de alta resolución con una detección a 230 nm.

[0294] Aún más preferentemente, el procedimiento de la divulgación permite obtener una composición que comprende al menos un 99.0 % del compuesto sal de sodio del N-[4-[[4-(dietilamino)fenil](2,5-disulfofenil)metilen]-2,5-ciclohexadien-1-iliden)]-N-etiletanaminio y menos de un 0.5 % de impureza monodesetilada.

[0295] De manera ventajosa, el procedimiento de la invención permite obtener una composición en la que no hay presente ninguna impureza aparte del derivado monodesetilado en una cantidad superior al 0.1 %, habiendo medido el % mediante cromatografía líquida de alta resolución con una detección a 230 nm.

[0296] El procedimiento de la divulgación permite obtener igualmente composiciones que comprenden un compuesto que responde a la fórmula (Quím. I), en particular los compuestos (Quím. IA) y (Quím. IB), más en particular los compuestos de fórmulas (VI), (VII) y (VIII), que comprenden muy poco o nada de impurezas metálicas. Ni que decir tiene que las sales de metales alcalinos y alcalino-térreos que pueden corresponder a Y no se consideran impurezas metálicas en el sentido de la invención.

[0297] Específicamente, el procedimiento de la divulgación permite obtener composiciones que comprenden un compuesto que responde a la fórmula (Quím. I), en particular los compuestos (Quím. IA) y (Quím. IB), más en particular los compuestos de fórmulas (Quím. VI), (Quím. VII) y (Quím. VIII), y que comprenden menos de 200 ppm de contaminantes metálicos, de manera ventajosa menos de 100 ppm de contaminantes metálicos, aún mejor, menos de 50 ppm de contaminantes metálicos y, de manera aún más ventajosa, menos de 20 ppm de contaminantes metálicos.

[0298] El contenido de contaminantes metálicos se refiere al contenido de metales medido siguiendo el método ICP/MS (Espectrometría de masas con plasma de acoplamiento inductivo).

[0299] Por "contaminantes metálicos" se entiende todos los metales de la clasificación periódica de los elementos, con exclusión de los metales alcalinos y alcalino-térreos así como sus derivados orgánicos e inorgánicos. Más en particular, por "contaminantes metálicos" se entiende los metales denominados "pesados" y, en particular: Al, As, Cd, Cr, Cu, Fe, Sn, Mn, Hg, Mo, Ni, Pb, Zn, así como sus derivados orgánicos e inorgánicos.

[0300] El procedimiento de la divulgación permite obtener igualmente una forma cristalina del azul patente, sal de sodio, de fórmula (Quím. VI), caracterizada por el diagrama de difracción de rayos X en polvo siguiente, medido en un difractómetro (ánodo de cobre) y expresado en términos de las distancias inter-reticulares d, el ángulo de Bragg 2-theta, la intensidad y la intensidad relativa (expresada en porcentaje con respecto a la línea más intensa):

[0303]

[0305] Debe entenderse que los valores de la intensidad (I) y de la intensidad relativa (I rel) de los picos anteriores, pueden variar en /- un 15 %

[0306] En la tabla anterior, todas las líneas se suponen de orden 1 (n = 1 en la ley de Bragg).

[0307] Medicamento:

[0308] La invención se refiere también a un procedimiento de fabricación de un medicamento o de un producto de diagnóstico que comprende la fabricación del compuesto que responde a la fórmula (Quím. I), en particular los compuestos (Quím. IA) y (Quím. IB), más en particular los compuestos de fórmulas (Quím. VI), (Quím. VII), (Quím. X) y (Quím. VIII), preferentemente el azul patente, sal de sodio, o el azul de isosulfán mediante el procedimiento descrito anteriormente y la introducción del compuesto que responde a la fórmula (Quím. I) en un vehículo farmacéuticamente aceptable.

[0309] Dicho medicamento puede estar en cualquier forma adecuada para su uso en las aplicaciones buscadas. En particular, se pueden mencionar: una forma de comprimido o de cápsula que comprende de 1 a 500 mg del compuesto que responde a la fórmula (Quím. I), una forma de solución acuosa que comprende el compuesto que responde a la fórmula (Quím. I), preferentemente el azul patente o el azul de isosulfán, aún más preferentemente el azul patente, sal de sodio, en una concentración que varía de un 0.05 % a un 2 % en g/l. Específicamente, una formulación preferente consiste en una solución acuosa inyectable.

[0310] Tales composiciones comprenden, además del compuesto que responde a la fórmula (Quím. I), excipientes bien conocidos por el experto en la técnica tales como, por ejemplo, ácido cítrico y/o citratos, un tampón fosfato, polímeros, derivados de celulosa o lípidos.

[0311] En las aplicaciones médicas, el compuesto que responde a la fórmula (Quím. I), preferentemente el azul patente o el azul de isosulfán, aún más preferentemente el azul patente, cuando se obtiene mediante el procedimiento de la divulgación, presenta la ventaja de una pureza elevada, lo que evita introducir en el organismo materiales sin utilidad para la aplicación.

[0312] La eficacia del procedimiento de la divulgación permite acceder a un producto de pureza elevada con costes reducidos, fácilmente reproducible y aplicable a escala industrial. Además, el procedimiento de la invención permite acceder a un producto de estructura cristalina dotado, por tanto, de una buena estabilidad.

[0313] Tal composición es particularmente interesante para un uso como agente de contraste para la detección de vasos linfáticos y regiones arteriales y como agente de diagnóstico del cáncer. Específicamente, la composición de la invención se puede usar en un procedimiento denominado "mapeo de ganglios linfáticos centinela". Este procedimiento se refiere muy particularmente al cáncer de mama, al cáncer de colon y al melanoma.

[0314] En particular, la composición es particularmente interesante para la detección del ganglio centinela antes de la biopsia en pacientes con un cáncer de mama operable y en el mapeo preoperatorio de ganglios linfáticos centinela en pacientes que padecen cáncer de colon. Se usa también en la linfoescintigrafía preoperatoria para la biopsia de ganglios linfáticos centinela del melanoma.

[0315] Las diferentes realizaciones, variantes, preferencias y ventajas descritas anteriormente para cada uno de los objetos de la invención se aplican a todos los objetos de la invención y pueden considerarse por separado o combinados.

[0316] La invención viene ilustrada por los ejemplos siguientes dados a título no limitante.

[0317] Figuras

[0318] Figura 1: la figura 1 es un gráfico que representa los diagramas de difracción de rayos X de tres muestras de azul patente, sal de sodio, obtenidas de acuerdo con el procedimiento de la divulgación (designadas como Inv 1, Inv 2 e Inv 3). Son muestras obtenidas de tres lotes de producción distintos. En abscisas: el ángulo 2-theta en grados; en ordenadas: la intensidad en unidades arbitrarias de intensidad.

[0319] Figura 2: la figura 2 es un gráfico que representa los diagramas de difracción de rayos X de seis muestras de azul patente, sal de sodio, disponibles comercialmente (designadas como C 1 a C 6). En esta figura se dan igualmente los diagramas de difracción de rayos X de tres muestras de azul patente, sal de sodio, obtenidas de acuerdo con el procedimiento de la divulgación (designadas como Inv 1 a Inv 3) e ilustradas en la figura 1. En abscisas: el ángulo 2-theta en grados; en ordenadas: la intensidad en unidades arbitrarias de intensidad.

[0320] Ejemplos:

[0321] En estos ejemplos, las partes y los porcentajes se expresan en peso, a menos que se indique lo contrario.Material y métodos

[0322] Análisis HPLC:

[0323] Columna: AGILENT Poroshell 120 SB-C18150 x 4.6 - 2.7 µ (Ref.683975-902)

[0324] Fase móvil A: Tampón de formiato de amonio/ácido fórmico 10 mM (pH = 4.1 ± 0.1)

[0325] Fase móvil B: Acetonitrilo

[0326] Caudal: 1 ml/min

[0327] Temperatura: 30 °C

[0328] Volumen de inyección: 5 µl

[0329] Gradiente: Tiempo de análisis de 40 min 7 min de estabilización tras la operación

[0330] [Tabla 1]

[0333]

[0334] (continuación)

[0337]

[0339] Detector: UV-VIS 230 nm y MS Electropulverización (modo negativo)

[0340] Diagrama de difracción de rayos X en polvo: El diagrama de difracción de rayos X en polvo se efectuó en las condiciones experimentales siguientes:

[0341] - Difractómetro X'Pert Pro MPD Panalytical (DY2764),

[0342] Ánodo de cobre (λ = 1.54 Å), voltaje: 40 kV, intensidad: 40 mA

[0343] - Montajeθ-θ

[0344] - Dominio de medición: 2° a 50°

[0345] - Incremento entre cada medición: 0.026°

[0346] - Tiempo de medición por paso: 20.40 s,

[0347] - Detector PIXcel RTMS (PHD 25.5-7 %, longitud activa 3.347°

[0348] Síntesis del azul patente (de acuerdo con la invención):

[0349] Etapa 1: Preparación del clorhidrato de 3-(bis(4-(dietilamino)fenil)metil)fenol:

[0352]

[0354] Se añadeN,N-dietilanilina (254.0 ml, 1.597 mol, 1.95 eq) a una mezcla de 3-hidroxibenzaldehído (100 g, 0.819 mol, 1.00 eq) y urea (24.6 g, 0.409 mol, 0.50 eq) en 100 ml de etanol.

[0355] Se enfría el medio de reacción a 0 °C y se vierte una solución acuosa de HCl al 37 % (136.5 ml, 1.638 mol, 2.00 eq) manteniendo el medio a una temperatura inferior a 20 °C.

[0356] A continuación, se calienta el medio de reacción a reflujo durante 20 h.

[0357] Se enfría el medio de reacción a 60 °C y después se vierten 800 ml de una solución acuosa de HCl 2 N. Se enfría el medio de reacción a 0 °C y se mantiene en agitación durante 5 horas.

[0358] Se filtra el precipitado obtenido y el sólido se lava con 500 ml de una mezcla acetona/HCl acuoso 2 N (9/1) y después con 500 ml de acetona.

[0359] El sólido se seca en estufa ventilada (50 °C).

[0360] Se obtienen 303 g de diclorhidrato de 3-(bis(4-(dietilamino)fenil)metil)fenol en forma de un sólido blanco. Pureza HPLC: 97.2 %

[0361] Rendimiento: 78 %

[0362] <1>H RMN (300 MHz, D2O) : δ 7.39 (4H, dd,J=8.7 Hz), 7.33 (4H, dd,J=8.7 Hz), 7.22 (1H, t,J=7.9 Hz ), 6.80 (1H, ddd), 6.71 (1H, dd,J=7.8 Hz), 6.67 (1H, t,J=2.0 Hz), 5.67 (1H, s), 3.60 (8H, q,J=6.9 Hz), 1.06 (12H, t,J=7.2 Hz)

[0363] <13>C RMN (75 MHz, D2O) : δ 156.0, 145.5, 144.3, 135.1, 131.2, 130.3, 122.4, 121.4, 116.2, 114.0, 54.9, 53.7, 9.7

[0364] Etapa 2: Preparación del ácido 4-(bis(4-(dietilamino)fenil)metil)-6-hidroxibenceno-1,3-disulfónico:

[0367]

[0369] Se añade el diclorhidrato de 3-(bis(4-(dietilamino)fenil)metil)fenol (150 g, 0.315 mol, 1 eq.) en 600 ml de H<2>SO<4>. Se calienta a 90 °C durante 3 h y después se deja 16 h en agitación a temperatura ambiente.

[0370] Se diluye el medio de reacción con 15 l de una mezcla de etanol/éter isopropílico (75/25) manteniendo una temperatura inferior a 20 °C.

[0371] Se filtra el precipitado obtenido y se lava el sólido con 2 x 600 ml de éter isopropílico.

[0372] El sólido se seca en estufa ventilada (50 °C).

[0373] Se obtienen 183 g de ácido 4-(bis(4-(dietilamino)fenil)metil)-6-hidroxibenceno-1,3-disulfónico en forma de un sólido blanco.

[0374] Pureza HPLC: 98.8 %

[0375] Rendimiento: cuantitativo

[0376] <1>H RMN (300 MHz, DMSO) : δ 10.91 (2H, s a), 8.08 (1H, s), 7.52 (4H, dd,J=8.5 Hz), 7.38 (4H, dd,J=8.6 Hz), 6.95 (1H, s), 6.54 (1H, s), 4.75 (1H, s a ), 3.54 (8H, q,J=7.1 Hz), 0.92 (12H, t,J=6.7 Hz)

[0377] <13>C RMN (75 MHz, DMSO) : δ 153.6, 145.2, 143.0, 137.1, 135.5, 130.8, 128.0, 126.7, 122.3, 118.4, 52.5, 49.2, 10.1

[0378] Etapa 3: Preparación del azul patente:

[0381]

[0383] Se añade ácido 4-(bis(4-(dietilamino)fenil)metil)-6-hidroxibenceno-1,3-disulfónico (1.2 kg, 2.1 mol, 1 eq.) en 6 l deN-metilipirrolidona.

[0384] Se calienta el medio de reacción a 95 °C y se vierte 1,4-benzoquinona (346 g, 3.2 mol, 1.5 eq.) en solución en 1.2 l deN-metilipirrolidona.

[0385] El calentamiento se continúa durante 3 horas y después se deja enfriar a temperatura ambiente.

[0386] Se diluye el medio de reacción con 18 l de acetona.

[0387] El precipitado obtenido se filtra y se lava el sólido con 2 x 6 l de acetona.

[0388] Se recoge el sólido en 6 l de una mezcla H<2>O/metanol (80/20).

[0389] Se calienta 1 h a reflujo y después se deja enfriar a temperatura ambiente.

[0390] Se filtra el sólido y se lava con 2 x 6 l de acetona. Se recoge el sólido en 15 l de metanol en agitación y se vierte una solución acuosa de carbonato de sodio al 22 % (256 ml).

[0391] Se deja en agitación durante 3 horas y después se concentra.

[0392] Se recoge en 10 l de isopropanol.

[0393] Se recupera el sólido mediante filtración y se lava con 2 x 4 l de acetona

[0394] El sólido se seca en estufa ventilada (50 °C).

[0395] Se obtienen 766 g de la sal de sodio del 4-[[4-(dietilamino)fenil]-(4-dietilazanioilidenciclohexa-2,5-dien-1-iliden)metil]-6-hidroxibenceno-1,3-disulfonato) (azul patente) en forma de un sólido violeta.

[0396] Pureza HPLC: 99.3 %

[0397] Rendimiento: 61 %

[0399] <1>H RMN (300 MHz, D2O) : δ 8.29 (1H, s), 7.24 (4H, dd,J=8.8 Hz), 6.72 (4H, dd,J=8.9 Hz), 6.41 (1H, s), 3.49 (8H, q,J=5.8 Hz), 1.12 (12H, t,J=5.9 Hz)

[0400] <13>C RMN (75 MHz, D2O) : δ 170.1, 156.6, 154.9, 141.6, 139.7, 133.2, 128.9, 128.2, 125.6, 121.2, 113.5, 45.8, 12.2

[0401] Síntesis del azul patente (comparativo):

[0402] Se procedió tal como se ha descrito anteriormente para las etapas 1 y 2. Para la etapa 3, se siguió el protocolo descrito anteriormente variando el compuesto oxidante. Este compuesto oxidante podía ser otra quinona o otro reactivo oxidante.

[0403] Los resultados obtenidos se dan en las tablas 2 y 3 siguientes

[0404] [Tabla 2]

[0406]

[0408] (*) medido de acuerdo con el método de HPLC descrito anteriormente;[0409] (a) de acuerdo con la invención;[0410] (b) comparativo;[0411] Se constata que determinadas quinonas permiten obtener tasas de conversión elevadas y llevan al mismo tiempo a un producto que comprende poca impureza monodesetilada. Otras quinonas dan o bien rendimientos muy bajos, o bien un contenido muy elevado de compuesto monodesetilado, difícil de separar.;[0412] [Tabla 3];[0413] ;[0415] (*) medido de acuerdo con el método de HPLC descrito anteriormente

[0416] Se constata que solo algunos reactivos oxidantes distintos a las quinonas permiten transformar el compuesto de fórmula (V) en azul patente. Son pocos los que permiten obtener un contenido de desetilo inferior al 5 % o con una tasa de conversión poco elevada. Además, estos reactivos son a base de metales pesados, cuyo uso es poco recomendado, tanto por razones ecológicas como por el deseo de evitar una contaminación del producto final.

[0417] Difractograma de rayos X en polvo:

[0418] El perfil de difracción de rayos X en polvo (ángulos de difracción) del azul patente, sal de sodio, obtenido en el ejemplo 3 viene dado por las líneas significativas dadas en la tabla 4 con su intensidad y su intensidad relativa (expresada como porcentaje con respecto a la línea más intensa). La medición se llevó a cabo en tres lotes distintos que presentan todos sustancialmente el mismo perfil que el representado en la figura 1. Los lotes Inv 1, Inv 2 e Inv 3 se prepararon a escala piloto (cantidad preparada de 3 a 6 kg). Esta medición confirma que las características cristalinas del producto son constantes al final del procedimiento de preparación. Igualmente confirma la ausencia de NaCl (véanse los picos característicos en la figura 2).

[0419] Tabla 4

[0422]

[0425] Comparación con productos azul patente, sal de sodio, comercializados:

[0426] Se analizaron los productos comerciales de los siguientes productores (Tabla 5) mediante el mismo método de difracción de rayos X:

[0427] Tabla 5: azul patente, sal de sodio, comercializado

[0430]

[0433] Los resultados se dan en la figura 2. Se constata que la mayoría de los picos no se corresponden con los del azul patente, sal de sodio, de la invención que se dan en la tabla 4 y en la figura 1. Esta constatación permite concluir que el azul patente, sal de sodio, de la invención es una forma cristalina nueva con respecto a las formas cristalinas ya conocidas. En la figura 2 se observa igualmente la presencia de picos característicos del NaCl, específicamente los picos en los ángulos 2-theta = 32 y 45.5, lo que permite constatar la presencia de NaCl en todas las muestras de azul patente comercializadas, pero no en el azul patente, sal de sodio, de acuerdo con la invención.

Claims

1. REIVINDICACIONES

1. Composición que comprende al menos un 98 % de azul patente, sal de sodio, y menos del 1 % de impurezas monodesetiladas, porcentaje que se mide mediante cromatografía líquida de alta resolución con una detección a 230 nm,caracterizada porqueel azul patente, sal de sodio, se encuentra en forma cristalina.

2. Composición según la reivindicación 1, en la que la forma cristalina del azul patente, sal de sodiose caracteriza porun patrón de difracción de rayos X en polvo que comprende los siguientes picos:

3. Composición según la reivindicación 2, en la que el patrón de difracción de rayos X en polvo secaracterizaademás por las siguientes distancias inter-reticulares d, las intensidades e intensidades relativas:

Es probable que los valores de intensidad (I) e intensidad relativa (I rel) de los picos varíen en ± 15 %.

4. Composición según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, que comprende al menos un 99 % de azul patente, sal de sodio, y menos del 0,5 % de impurezas monodesetiladas, cuyo porcentaje se mide mediante cromatografía líquida de alta resolución con una detección a 230 nm.

5. Composición según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4, en la que ninguna otra impureza, aparte de las impurezas monodesetiladas, está presente en una cantidad superior al 0,15 %, cuyo porcentaje se mide mediante cromatografía líquida de alta resolución con una detección a 230 nm.

6. Composición según la reivindicación 5, en la que no hay impurezas distintas de las impurezas monodesetiladas presentes en una cantidad superior al 0,1 %, porcentaje que se mide mediante cromatografía líquida de alta resolución con una detección a 230 nm.

7. Composición según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 6, que comprende menos de 200 ppm de contaminantes metálicos, ventajosamente menos de 100 ppm de contaminantes metálicos, más preferiblemente menos de 50 ppm de contaminantes metálicos, e incluso más ventajosamente menos de 20 ppm de contaminantes metálicos.

8. Composición según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 7, que está libre de NaCl.

9. Composición según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 8 para uso como medicamento.

10. Composición según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 8 para uso como producto de diagnóstico.

11. Composición según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 8 para uso como agente de contraste en la localización de vasos linfáticos y territorios arteriales y/o como agente de diagnóstico para cáncer.

12. Composición según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 8 para uso según la reivindicación 11 en la detección del ganglio linfático centinela antes de la biopsia en pacientes con cáncer de mama operable o en el mapeo intraoperatorio del ganglio linfático centinela en pacientes con cáncer de colon.

13. Procedimiento para la fabricación de un medicamento o producto de diagnóstico que comprende la fabricación de la composición según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 8 y la inserción de dicha composición en un vehículo farmacéuticamente aceptable.

14. Composición en forma de comprimido o cápsula que comprende de 1 a 500 mg de una composición según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 8 en un vehículo farmacéuticamente aceptable.