ES3067113T3 - N-phenyl substituted indole derivatives as myt1 inhibitors for the treatment of cancer - Google Patents

Abstract

Se describen compuestos y sus sales farmacéuticamente aceptables que pueden utilizarse en el tratamiento de pacientes que lo requieran. Los compuestos aquí descritos pueden ser inhibidores de la tirosina y treonina de la quinasa inhibidora cdc2 (Myt1). Asimismo, se describen composiciones farmacéuticas que contienen dichos compuestos o sus sales farmacéuticamente aceptables, así como métodos para su preparación y uso. (Traducción automática con Google Translate, sin valor legal)

Description

[0001] DESCRIPCIÓN

[0002] Derivados de indol N-fenil-sustituidos como inhibidores de MYT1 para el tratamiento de cáncer

[0003] Campo de la invención

[0004] La invención se refiere a compuestos y composiciones farmacéuticas, a su preparación y su uso en el tratamiento de una enfermedad o afección, por ejemplo, cáncer, y, en particular, aquellas enfermedades o afecciones (por ejemplo, cánceres que albergan amplificación/sobreexpresión de CCNE1 o cánceres con mutación de FBXW7) que dependen de la actividad de cinasa inhibidora de cdc2 específica de treonina y tirosina asociadas a membrana (Myt1) (nombre de gen PKMYT1).

[0005] Antecedentes

[0006] El ADN se ve sometido continuamente tanto a agresiones endógenas (por ejemplo, horquillas de replicación detenidas, especies reactivas de oxígeno) como a agresiones exógenas (UV, radiación ionizante, productos químicos) que pueden conducir a daños en el ADN. Como resultado, las células han establecido mecanismos sofisticados para contrarrestar estos acontecimientos perjudiciales que, de otro modo, comprometerían la integridad genómica y conducirían a enfermedades de inestabilidad genómica tales como cáncer. Estos mecanismos se denominan colectivamente respuesta al daño del ADN (RDA). Un componente de la RDA global es la activación de diversas rutas de puntos de control que modulan mecanismos de reparación de ADN específicos a lo largo de las diversas fases del ciclo celular, que incluye los puntos de control de G1, S, G2 y mitosis. Una mayoría de las células cancerosas han perdido su punto de control de G1 debido a mutaciones de p53 y, como tales, dependen del punto de control de G2 para realizar las correcciones de daño del ADN necesarias antes de comprometerse a entrar en la mitosis y dividirse en 2 células hijas.

[0007] Existe la necesidad de nuevos enfoques terapéuticos contra el cáncer, por ejemplo, aquellos que utilizan moléculas pequeñas, especialmente terapias que permiten un tratamiento dirigido del cáncer.

[0008] Sumario de la invención

[0009] En un aspecto, la invención proporciona un compuesto de fórmula (I):

[0012]

[0014] o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo,

[0015] en el que

[0016] cada uno de X, Y, y Z es independientemente N o CR<2>;

[0017] R<1>y cada R<2>son independientemente hidrógeno, alquilo C<1-6>opcionalmente sustituido, alquenilo C<2-6>opcionalmente sustituido, alquinilo C<2-6>opcionalmente sustituido, cicloalquilo C<3-8>opcionalmente sustituido, cicloalquenilo C<3-8>opcionalmente sustituido, heterociclilo C<2-9>opcionalmente sustituido, heterociclil C<2-9>opcionalmente sustituido-alquilo C<1-6>, arilo C<6-10>opcionalmente sustituido, heteroarilo C<1-9>opcionalmente sustituido, heteroaril C<1-9>opcionalmente sustituido-alquilo C<1-6>, halógeno, ciano, -N(R<7>)<2>, -OR<7>, -C(O)N(R<8>)<2>, -SO<2>N(R<8>)<2>, -SO<2>R<7A>, o -Q-R<7B>; o R<1>se combina con un R<2>que esvecinala R<1>para formar un alquileno C<3-6>opcionalmente sustituido;

[0018] cada uno de R<3>y R<4>es independientemente alquilo C<1-6>opcionalmente sustituido o halógeno;

[0019] R<5>es H o -N(R<7>)<2>;

[0020] R<6>es -C(O)NH(R<8>), -C(O)R<7A>, o -SO<2>R<7A>;

[0021] cada R<7>es independientemente hidrógeno, alquilo C<1-6>opcionalmente sustituido, aril C<6-10>opcionalmente sustituidoalquilo C<1-6>, cicloalquilo C<3-8>opcionalmente sustituido, arilo C<6-10>opcionalmente sustituido, heterociclilo C<2-9>opcionalmente sustituido, heteroarilo C<1-9>opcionalmente sustituido, heteroaril C<1-9>opcionalmente sustituido-alquilo C<1-6>, o -SO<2>R<7A>; o dos grupos R<7>, junto con el átomo al que están ambos unidos, se combinan para formar un heterociclilo C<2-9>opcionalmente sustituido;

[0022] cada R<7A>es independientemente alquilo C<1-6>opcionalmente sustituido, cicloalquilo C<3-8>opcionalmente sustituido, o arilo C<6-10>opcionalmente sustituido;

[0023] cada R<7B>es independientemente hidroxilo, alquilo C<1-6>opcionalmente sustituido, arilo C<6-10>opcionalmente sustituido, heterociclilo C<2-9>opcionalmente sustituido, heteroarilo C<1-9>opcionalmente sustituido, -N(R<7>)<2>, -C(O)N(R<8>)<2>, -SO<2>N(R<8>)<2>, -SO<2>R<7A>, o alcoxilo opcionalmente sustituido;

[0024] cada R<8>es independientemente hidrógeno, alquilo C<1-6>opcionalmente sustituido, alcoxialquilo C<2-6>opcionalmente sustituido, aril C<6-10>opcionalmente sustituido-alquilo C<1-6>, arilo C<6-10>opcionalmente sustituido, cicloalquilo C<3-8>opcionalmente sustituido, o heteroarilo C<1-9>opcionalmente sustituido; o dos R<8>, junto con el átomo al que están unidos, se combinan para formar un heterociclilo C<2-9>opcionalmente sustituido;

[0025] Q es alquileno C<1-6>opcionalmente sustituido, alquenileno C<2-6>opcionalmente sustituido, alquinileno C<2-6>opcionalmente sustituido, cicloalquileno C<3-8>opcionalmente sustituido, cicloalquenileno C<3-8>opcionalmente sustituido-arileno C<6-10>opcionalmente sustituido, heterociclileno C<2-9>opcionalmente sustituido, o heteroarileno C<1-9>opcionalmente sustituido.

[0026] En algunas realizaciones, el compuesto está enriquecido para el atropoisómero de fórmula (IA):

[0029]

[0031] En algunas realizaciones, X es CR<2>. En algunas realizaciones, el compuesto es de fórmula (II):

[0034]

[0036] En algunas realizaciones, el compuesto está enriquecido para el atropoisómero de fórmula (IIA):

[0039]

[0041] En algunas realizaciones, el compuesto es de fórmula (III):

[0042]

[0044] en el que R<2A>es hidrógeno, alquilo C<1-6>opcionalmente sustituido, alquenilo C<2-6>opcionalmente sustituido, alquinilo C<2-6>opcionalmente sustituido, cicloalquilo C<3-8>opcionalmente sustituido, cicloalquenilo C<3-8>opcionalmente sustituido, heterociclilo C<2-9>opcionalmente sustituido, heterociclil C<2-9>opcionalmente sustituido-alquilo C<1-6>, arilo C<6-10>opcionalmente sustituido, heteroarilo C<1-9>opcionalmente sustituido, heteroaril C<1-9>opcionalmente sustituido-alquilo C<1-6>, halógeno, -N(R<7>)<2>, -OR<7>, -C(O)N(R<8>)<2>, -SO<2>N(R<8>)<2>, -SO<2>R<7A>, o -Q-R<7B>. En algunas realizaciones, el compuesto está enriquecido para el atropoisómero de fórmula (IIIA):

[0047]

[0049] En algunas realizaciones, R<2A>es hidrógeno, alquilo C<1-6>opcionalmente sustituido, o halógeno.

[0050] En algunas realizaciones, R<3>es alquilo C<1-6>opcionalmente sustituido. En algunas realizaciones, R<3>es halógeno. En algunas realizaciones, R<4>es alquilo C<1-6>opcionalmente sustituido. En algunas realizaciones, R<4>es halógeno (por ejemplo, cloro).

[0051] En algunas realizaciones, R<2>es hidrógeno. En algunas realizaciones, R<2>es alquilo C<1-6>opcionalmente sustituido. En algunas realizaciones, R<2>es metilo opcionalmente sustituido o isopropilo opcionalmente sustituido. R<2>es halógeno. En algunas realizaciones, R<1>es hidrógeno. En algunas realizaciones, R<1>es halógeno. En algunas realizaciones, R<1>es cloro o bromo. En algunas realizaciones, R<1>es alquilo C<1-6>opcionalmente sustituido. En algunas realizaciones, R<1>es metilo opcionalmente sustituido, etilo opcionalmente sustituido, isopropilo opcionalmente sustituido, o butilo opcionalmente sustituido. En algunas realizaciones, R<1>es heteroarilo C<1-9>opcionalmente sustituido. En algunas realizaciones, R<1>es 1,3-tiazolilo, 1,2-tiazolilo, 1,3-oxazolilo, benzo-1,3-tiazolilo, benzo-1,3-oxazolilo, indolilo, bencimidazolilo, piridilo, imidazolilo, pirimidilo, pirazinilo, piridazinilo, o pirazolilo, en los que R<1>está opcionalmente sustituido con sustituyentes como los definidos para heteroarilo C<1-9>opcionalmente sustituido. En algunas realizaciones, R<1>es cicloalquilo C<3-8>opcionalmente sustituido. En algunas realizaciones, R<1>es ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopentilo, o ciclohexilo, en los que R<1>está opcionalmente sustituido con sustituyentes como los definidos para cicloalquilo C<3-8>opcionalmente sustituido. En algunas realizaciones, R<1>es heterociclilo C<2-9>opcionalmente sustituido. En algunas realizaciones, R<1>es 1,2,3,6-tetrahidropiridinilo, piperidinilo, morfolinilo, piperazinilo, tiomorfolinilo, oxa-aza-espiro[3,3]heptano, u oxa-aza-biciclo[3.2.1]octano, en los que R<1>está opcionalmente sustituido con sustituyentes como los definidos para heterociclilo C<2-9>opcionalmente sustituido. En algunas realizaciones, R<1>es cicloalquilo C<3-8>opcionalmente sustituido. En algunas realizaciones, R<1>es ciclohexenilo opcionalmente sustituido o ciclopentenilo opcionalmente sustituido. En algunas realizaciones, R<1>es arilo C<6-10>opcionalmente sustituido. En algunas realizaciones, R<1>es fenilo opcionalmente sustituido.

[0052] En algunas realizaciones, R<1>es -Q-R<7B>. En algunas realizaciones, Q es alquinileno C<2-6>opcionalmente sustituido. En algunas realizaciones, Q es alquileno C<1-6>opcionalmente sustituido. En algunas realizaciones, Q es arileno C<6-10>opcionalmente sustituido. En algunas realizaciones, R<7B>es heterociclilo C<2-9>opcionalmente sustituido. En algunas realizaciones, R<7B>es arilo C<6-10>opcionalmente sustituido.

[0053] En algunas realizaciones, R<1>está opcionalmente sustituido con uno, dos, o tres grupos seleccionados independientemente del grupo que consiste en metilo, difluorometilo, trifluorometilo, flúor, cloro, bromo, amino, hidroxilo, ciano, oxo, -C(O)NH<2>, -C(O)NH(Me), -C(O)N(Me)<2>, -(CH<2>)<n>-C(O)OH, y -(CH<2>)<n>-C(O)Ot-Bu, en los que n es 0 ó 1.

[0054] En algunas realizaciones, R<1>es -N(R<7>)<2>. En algunas realizaciones, R<1>es dietilamino.

[0055] En algunas realizaciones, R<5>es hidrógeno. En algunas realizaciones, R<5>es -N(R<7>)<2>. En algunas realizaciones, R<5>es -NH<2>. En algunas realizaciones, R<6>es -C(O)NH(R<8>). En algunas realizaciones, R<6>es -C(O)NH<2>. En algunas realizaciones, R<6>es -C(O)NH(Me). En algunas realizaciones, R<6>es -SO<2>R<7A>. En algunas realizaciones, R<6>es -SO<2>Me.

[0056] En algunas realizaciones, el compuesto seleccionado del grupo que consiste en los compuestos 1-328 (por ejemplo, los compuestos 1-288) y sales farmacéuticamente aceptables de los mismos.

[0057] En otro aspecto, la invención proporciona una composición farmacéutica que comprende el compuesto divulgado en el presente documento, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, y un excipiente farmacéuticamente aceptable. En algunas realizaciones, la composición está enriquecida isotópicamente en deuterio. Las referencias a métodos de tratamiento en los párrafos posteriores de esta descripción deben interpretarse como referencia a los compuestos, las composiciones farmacéuticas y los medicamentos de la presente invención para su uso en un método para el tratamiento del cuerpo humano (o animal) mediante terapia (o para diagnóstico).

[0058] En aún otro aspecto, la invención proporciona un método de inhibir Myt1 en una célula que expresa Myt1, comprendiendo el método poner en contacto la célula con el compuesto divulgado en el presente documento.

[0059] En algunas realizaciones, la célula sobreexpresa CCNE1. En algunas realizaciones, la célula está en un sujeto. En todavía otro aspecto, la invención proporciona un método de tratar un sujeto que lo necesita que comprende administrar al sujeto el compuesto divulgado en el presente documento, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, o la composición farmacéutica divulgada en el presente documento.

[0060] En algunas realizaciones, el sujeto padece, y necesita un tratamiento para, una enfermedad o afección que tiene el síntoma de hiperproliferación celular. En algunas realizaciones, la enfermedad o afección es un cáncer. En algunas realizaciones, el cáncer es un cáncer que sobreexpresa CCNE1.

[0061] En todavía otro aspecto, la invención proporciona un método de tratar un cáncer en un sujeto, comprendiendo el método administrar al sujeto que lo necesita una cantidad terapéuticamente eficaz de un inhibidor de Myt1, en el que el cáncer se ha identificado previamente como un cáncer que sobreexpresa CCNE1.

[0062] En otro aspecto, la invención proporciona un método de tratar un cáncer en un sujeto, comprendiendo el método administrar al sujeto que lo necesita una cantidad terapéuticamente eficaz de un inhibidor de Myt1, en el que el cáncer es un cáncer que sobreexpresa CCNE1.

[0063] En aún otro aspecto, la invención proporciona un método de inducir muerte celular en una célula cancerosa que sobreexpresa CCNE1,comprendiendo el método poner en contacto la célula con una cantidad eficaz de un inhibidor de Myt1.

[0064] En algunas realizaciones, la célula está en un sujeto. En algunas realizaciones, el inhibidor de Myt1 es el compuesto divulgado en el presente documento o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo. En algunas realizaciones, el cáncer que sobreexpresa CCNE1 es cáncer de útero, cáncer de ovario, cáncer de mama, cáncer de estómago, cáncer de esófago, cáncer de pulmón, o cáncer de endometrio.

[0065] En todavía otro aspecto, la invención proporciona un método de tratar un cáncer en un sujeto, comprendiendo el método administrar al sujeto que lo necesita una cantidad terapéuticamente eficaz de un inhibidor de Myt1, en el que el cáncer se ha identificado previamente como un cáncer que tiene una mutación inactivante en el genFBXW7. En otro aspecto, la invención proporciona un método de tratar un cáncer en un sujeto, comprendiendo el método administrar al sujeto que lo necesita una cantidad terapéuticamente eficaz de un inhibidor de Myt1, en el que el cáncer tiene una mutación inactivante en el genFBXW7.

[0066] En aún otro aspecto, la invención proporciona un método de inducir muerte celular en una célula cancerosa con mutación de FBXW7, comprendiendo el método poner en contacto la célula con una cantidad eficaz de un inhibidor de Myt1.

[0067] En algunas realizaciones, la célula está en un sujeto. el cáncer es cáncer de útero, cáncer colorrectal, cáncer de mama, cáncer de pulmón, o cáncer de esófago. En algunas realizaciones, el inhibidor de Myt1 es el compuesto divulgado en el presente documento, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

[0068] ABREVIATURAS

[0069] Se usan en el presente documento, abreviaturas y términos que se usan habitualmente en los campos de la química orgánica, química farmacéutica, farmacología, y medicina y se conocen bien por los profesionales en estos campos. Se proporcionan a continuación abreviaturas y definiciones representativas:

[0070] Ac es acetilo [CH<3>C(O)-], Ac<2>O es anhídrido acético; AcOH es ácido acético; APC es célula presentadora de antígeno; ac. es acuoso; 9-BBN es 9-borabiciclo[3.3.1]nonano; BINAP es (2,2’-bis(difenilfosfino)-1,1’-binaftilo); Bn es bencilo; BOC esterc-butiloxicarbonilo; CDI es carbonildiimidazol; DCM es diclorometano; DIAD es diisopropilazodicarboxilato; DIBAL es hidruro de diisobutilaluminio; DIPEA es diisopropiletil-amina; DMA es dimetilacetamida; DMAP es 4-dimetilaminopiridina; DMF es N,N-dimetilformamida; DMSO es dimetilsulfóxido; dppf es 1,1’-bis(difenilfosfino)ferroceno; EDAC (o EDC) es 1-etil-3-[3-(dimetilamino)propil]-carbodiimida HCl; ESI es espectrometría de masas con ionización por electropulverización; Et<2>O es dietil éter; Et<3>N es trietilamina; Et es etilo; EtOAc es acetato de etilo; EtOH es etanol; 3-F-Ph es 3-fluorofenilo, HATU es hexafluorofosfato de 3-óxido de (1-[bis(dimetilamino)metilen]-1H-1,2,3-triazolo[4,5-b]piridinio; HCl es ácido clorhídrico; HOBt es 1-hidroxibenzotriazol; HPLC es cromatografía de líquidos de alta resolución; CL-EM es HPLC con detección espectral de masas; LiHMDS es bis(trimetilsilil)amiduro de litio; LG es grupo saliente; M es molar; mCPBA es ácido metacloroperbenzoico; mmol es milimol; Me es metilo; MeCN es acetonitrilo; MeOH es metanol; EM es metanosulfonilo; EM es espectrometría de masas; N es normal; NaHMDS es hexametildisiliaziduro de sodio; NaOAc es acetato de sodio; NaOtBu esterc-butóxido de sodio; NMO es N-óxido de N-metilmorfolina; NMP es N-metil-pirrolidinona; RMN es espectroscopía de resonancia magnética nuclear; Pd<2>(dba)<3>es tris(dibencilidenacetona)dipaladio; PdCl<2>(PPh<3>)<2>es diclorobis-(trifenilfosfeno)paladio; PG indica un grupo saliente no especificado; Ph es fenilo; PhMe es tolueno; PPh<3>es trifenilfosfina; PMB es para-metoxibencilo; t.a. es temperatura ambiente; MFR es matraz de fondo redondo; RuPhos Pd G1 es cloro-(2-diciclohexilfosfino-2’,6’-diisopropoxi-1,1’-bifenil)[2-(2-aminoetil)fenil]paladio(ll); SEM es [2-(trimetilsilil)etoxi]metilo; CFS es cromatografía con fluidos supercríticos; S<N>Ar es sustitución nucleófila aromática; TBAB es bromuro de tetrabutil-amonio; TBAF es fluoruro de tetrabutil-amonio; TBS esterc-butildimetilsililo; tBu esterc-butilo; Tf es triflato; TFA es ácido trifluoroacético; THF es tetrahidrofurano; THP es tetrahidropirano; CCF es cromatografía en capa fina; TMAD es tetrametilazodicarboxamida; TMS es trimetilsililo; TPAP es perrutenato de tetrapropilamonio; Ts esp-toluenosulfonilo; UPLC es cromatografía de líquidos de ultra rendimiento.

[0071] DEFINICIONES

[0072] El término “aberrante”, tal como se usa en el presente documento, se refiere a diferente de lo normal. Cuando se usa para describir la actividad, aberrante se refiere a una actividad que es mayor o menor que un control normal o el promedio de muestras de control sin enfermedad normales. Actividad aberrante puede referirse a una cantidad de actividad que da como resultado una enfermedad, donde devolver la actividad aberrante a una cantidad normal o no asociada a enfermedad (por ejemplo, administrando un compuesto o usando un método tal como se describe en el presente documento), da como resultado una reducción de la enfermedad o uno o más síntomas de la enfermedad. El término “acilo”, tal como se usa en el presente documento, representa un grupo -C(=O)-R, donde R es alquilo, alquenilo, alquinilo, cicloalquilo, cicloalquenilo, cicloalquinilo, arilo, heteroarilo, o heterociclilo. Acilo puede estar opcionalmente sustituido tal como se describe en el presente documento para cada grupo R respectivo.

[0073] El término “adenocarcinoma”, tal como se usa en el presente documento, representa un tumor maligno de los que surgen a partir de las células glandulares que revisten órganos dentro de un organismo. Los ejemplos no limitativos de adenocarcinomas incluyen cáncer de pulmón no microcítico, cáncer de próstata, cáncer de páncreas, cáncer de esófago, y cáncer colorrectal.

[0074] El término “alcanoílo”, tal como se usa en el presente documento, representa un hidrógeno o un grupo alquilo que se conecta al grupo molecular parental a través de un grupo carbonilo y se ejemplifica mediante formilo (es decir, un grupo carboxialdehído), acetilo, propionilo, butirilo, e iso-butirilo. Los grupos alcanoílo no sustituidos contienen desde 1 hasta 7 carbonos. El grupo alcanoílo puede no estar sustituido o estar sustituido (por ejemplo, alcanoílo C1-7 opcionalmente sustituido) tal como se describe en el presente documento para el grupo alquilo. La terminación “-oílo” puede añadirse a otro grupo definido en el presente documento, por ejemplo, arilo, cicloalquilo, y heterociclilo, para definir “ariloílo”, “cicloalcanoílo”, y “(heterociclil)oílo.” Estos grupos representan un grupo carbonilo sustituido con arilo, cicloalquilo, o heterociclilo, respectivamente. Cada uno de “ariloílo”, “cicloalcanoílo”, y “(heterociclil)oílo” puede estar opcionalmente sustituido tal como se define para “arilo”, “cicloalquilo”, o “heterociclilo”, respectivamente. El término “alquenilo”, tal como se usa en el presente documento, representa grupos hidrocarbonados de cadena lineal o ramificada monovalentes no cíclicos de contener uno, dos, o tres dobles enlaces carbono-carbono. Los ejemplos no limitativos de los grupos alquenilo incluyen etenilo, prop-1-enilo, prop-2-enilo, 1-metiletenilo, but-1-enilo, but-2-enilo, but-3-enilo, 1-metilprop-1-enilo, 2-metilprop-1-enilo, y 1-metilprop-2-enilo. Los grupos alquenilo pueden estar opcionalmente sustituidos tal como se define en el presente documento para alquilo.

[0075] El término “alquenileno”, tal como se usa en el presente documento, se refiere un grupo alquenilo divalente. Un alquenileno opcionalmente sustituido es un alquenileno que está opcionalmente sustituido tal como se describe en el presente documento para alquenilo.

[0076] El término “alcoxilo”, tal como se usa en el presente documento, representa un sustituyente químico de fórmula -OR, donde R es un grupo alquilo C<1-6>, a menos que se especifique de otro modo. En algunas realizaciones, el grupo alquilo puede estar sustituido adicionalmente tal como se define en el presente documento. El término “alcoxilo” puede combinarse con otros términos definidos en el presente documento, por ejemplo, arilo, cicloalquilo, o heterociclilo, para definir unos grupos “aril-alcoxilo”, “cicloalquil-alcoxilo”, y “(heterociclil)alcoxilo”. Estos grupos representan un alcoxilo que está sustituido con arilo, cicloalquilo, o heterociclilo, respectivamente. Cada uno de “arilalcoxilo”, “cicloalquil-alcoxilo”, y “(heterociclil)alcoxilo” puede sustituirse opcionalmente tal como se define en el presente documento para cada porción individual.

[0077] El término “alcoxialquilo”, tal como se usa en el presente documento, representa un sustituyente químico de fórmula -L-O-R, donde L es alquileno C<1-6>, y R es alquilo C<1-6>. Un alcoxialquilo opcionalmente sustituido es un alcoxialquilo que está opcionalmente sustituido tal como se describe en el presente documento para alquilo.

[0078] El término “alquilo”, tal como se usa en el presente documento, se refiere un grupo hidrocarbonado saturado de cadena lineal o ramificada acíclico que, cuando no está sustituido, tiene desde 1 hasta 12 carbonos, a menos que se especifique de otro modo. En ciertas realizaciones preferidas, un alquilo no sustituido tiene desde 1 hasta 6 carbonos. Los grupos alquilo se ejemplifican mediante metilo; etilo;n- eiso-propilo;n-,sec-,iso- yterc-butilo; neopentilo, y similares, y puede estar opcionalmente sustituido, si la valencia lo permite, con uno, dos, tres, o, en el caso de los grupos alquilo de dos carbonos o más, cuatro o más sustituyentes seleccionados independientemente del grupo que consiste en: amino; alcoxilo; arilo; ariloxilo; azido; cicloalquilo; cicloalcoxilo; cicloalquenilo; cicloalquinilo; halo; heterociclilo; (heterociclil)oxilo; heteroarilo; hidroxilo; nitro; tiol; sililo; ciano; alquilsulfonilo; alquilsulfinilo; alquilsulfenilo; =O; =S; -C(O)R o -SO<2>R, donde R es amino; y =NR’, donde R’ es H, alquilo, arilo, o heterociclilo. Cada uno de los sustituyentes a su vez puede no estar sustituido o, si la valencia lo permite, estar sustituido con sustituyente(s) no sustituido(s) definido(s) en el presente documento para cada grupo respectivo. El término “alquileno”, tal como se usa en el presente documento, se refiere un grupo alquilo divalente. Un alquileno opcionalmente sustituido es un alquileno que está opcionalmente sustituido tal como se describe en el presente documento para alquilo.

[0079] El término “alquilamino”, tal como se usa en el presente documento, se refiere a un grupo que tiene la fórmula -N(R<N1>)<2>o -NHR<N1>, en las que R<N1>es alquilo, tal como se define en el presente documento. La porción de alquilo de alquilamino puede estar opcionalmente sustituida tal como se define para alquilo. Cada sustituyente opcional en el alquilamino sustituido puede a su vez no estar sustituido o, si la valencia lo permite, estar sustituido con sustituyente(s) no sustituido(s) definido(s) en el presente documento para cada grupo respectivo.

[0080] El término “alquilsulfenilo”, tal como se usa en el presente documento, representa un grupo de fórmula -S-(alquilo). Alquilsulfenilo puede estar opcionalmente sustituido tal como se define para alquilo.

[0081] El término “alquilsulfinilo”, tal como se usa en el presente documento, representa un grupo de fórmula -S(O)-(alquilo). Alquilsulfinilo puede estar opcionalmente sustituido tal como se define para alquilo.

[0082] El término “alquilsulfonilo”, tal como se usa en el presente documento, representa un grupo de fórmula -S(O)2-(alquilo). Alquilsulfonilo puede estar opcionalmente sustituido tal como se define para alquilo.

[0083] El término “alquinilo”, tal como se usa en el presente documento, representa grupos hidrocarbonados de cadena lineal o ramificada monovalentes de desde dos hasta seis átomos de carbono que contiene al menos un triple enlace carbono-carbono y se ejemplifica mediante etinilo, 1-propinilo, y similares. Los grupos alquinilo pueden no estar sustituidos o estar sustituidos (por ejemplo, alquinilo opcionalmente sustituido) tal como se define para alquilo. El término “alquinileno”, tal como se usa en el presente documento, se refiere un grupo alquinilo divalente. Un alquinileno opcionalmente sustituido es un alquinileno que está opcionalmente sustituido tal como se describe en el presente documento para alquinilo.

[0084] El término “amino”, tal como se usa en el presente documento, representa -N(R<N1>)<2>, donde, si el amino no está sustituido, ambos R<N1>son H; o, si el amino está sustituido, cada R<N1>es independientemente H, -OH, -NO<2>, -N(R<N2>)<2>, -SO<2>O<R>N2

, -SO<2>R<N2>, -SOR<N2>, -C(O)OR<N2>, un grupo protector de N, alquilo, alquenilo, alquinilo, alcoxilo, arilo, arilalquilo, ariloxilo, cicloalquilo, cicloalquenilo, heteroalquilo, o heterociclilo, siempre que al menos un R<N1>no sea H, y donde cada R<N2>es independientemente H, alquilo, o arilo. Cada uno de los sustituyentes a su vez puede no estar sustituido o estar sustituido con sustituyente(s) no sustituido(s) definido(s) en el presente documento para cada grupo respectivo. En algunas realizaciones, el amino es amino no sustituido (es decir, -NH<2>) o amino sustituido (por ejemplo, -NHR<N1>), donde R<N1>es independientemente -OH, SO<2>OR<N2>, -SO<2>R<N2>, -SOR<N2>, -COOR<N2>, alquilo opcionalmente sustituido, o arilo opcionalmente sustituido, y cada R<N2>puede ser alquilo opcionalmente sustituido o arilo opcionalmente sustituido. En algunas realizaciones, el amino sustituido puede ser alquilamino, en que los grupos alquilo están opcionalmente sustituidos tal como se describe en el presente documento para alquilo. En algunas realizaciones, un grupo amino es -NHR<N1>, en el que R<N1>es alquilo opcionalmente sustituido.

[0085] El término “arilo”, tal como se usa en el presente documento, representa un sistema de anillos carbocíclico mono, bicíclico, o multicíclico que tiene uno o dos anillos aromáticos. El grupo arilo puede incluir desde 6 hasta 10 átomos de carbono. Todos los átomos dentro de un grupo arilo carbocíclico no sustituido son átomos de carbono. Los ejemplos no limitativos de grupos arilo carbocíclicos incluyen fenilo, naftilo, 1,2-dihidronaftilo, 1,2,3,4-tetrahidronaftilo, fluorenilo, indanilo, indenilo, etc. El grupo arilo puede no estar sustituido o estar sustituido con uno, dos, tres, cuatro, o cinco sustituyentes seleccionados independientemente del grupo que consiste en: alquilo; alquenilo; alquinilo; alcoxilo; alquilsulfinilo; alquilsulfenilo; alquilsulfonilo; amino; arilo; ariloxilo; azido; cicloalquilo; cicloalcoxilo; cicloalquenilo; cicloalquinilo; halo; heteroalquilo; heterociclilo; (heterociclil)oxilo; hidroxilo; nitro; tiol; sililo; -(CH<2>)<n>-C(O)OR<A>; -C(O)R; y -SO<2>R, donde R es amino o alquilo, R<A>es H o alquilo, y n es 0 ó 1. Cada uno de los sustituyentes a su vez puede no estar sustituido o estar sustituido con sustituyente(s) no sustituido(s) definido(s) en el presente documento para cada grupo respectivo.

[0086] El término “aril-alquilo”, tal como se usa en el presente documento, representa un grupo alquilo sustituido con un grupo arilo. Las porciones de arilo y alquilo pueden estar opcionalmente sustituidas como los grupos individuales tal como se describe en el presente documento.

[0087] El término “arileno”, tal como se usa en el presente documento, se refiere un grupo arilo divalente. Un arileno opcionalmente sustituido es un arileno que está opcionalmente sustituido tal como se describe en el presente documento para arilo.

[0088] El término “ariloxilo”, tal como se usa en el presente documento, representa un sustituyente químico de fórmula -OR, donde R es un grupo arilo, a menos que se especifique de otro modo. En un ariloxilo opcionalmente sustituido, el grupo arilo está opcionalmente sustituido tal como se describe en el presente documento para arilo.

[0089] El término “azido”, tal como se usa en el presente documento, representa un grupo -N<3>.

[0090] El término “cáncer”, tal como se usa en el presente documento, se refiere a todos los tipos de cáncer, neoplasia o tumores malignos que se encuentran en mamíferos (por ejemplo, humanos).

[0091] El término “carbocíclico”, tal como se usa en el presente documento, representa una estructura monocíclica, bicíclica, o tricíclica C3-16 opcionalmente sustituida en la que los anillos, que pueden ser aromáticos o no aromáticos, están formados por átomos de carbono. Las estructuras carbocíclicas incluyen cicloalquilo, cicloalquenilo, cicloalquinilo, y ciertos grupos arilo.

[0092] El término “carbonilo”, tal como se usa en el presente documento, representa un grupo -C(O)-.

[0093] El término “carcinoma”, tal como se usa en el presente documento, se refiere a un nuevo crecimiento maligno compuesto por células epiteliales que tienden a infiltrarse en los tejidos circundantes y dar lugar a metástasis.

[0094] El término “ciano”, tal como se usa en el presente documento, representa un grupo -CN.

[0095] Los términos “CCNE1” y “ciclina E1”, tal como se usan indistintamente en el presente documento, se refieren a la ciclina E1 específica de G1/S (nombre de gen: CCNE1).Una célula que sobreexpresa CCNE1 es una que presenta una mayor actividad de CCNE1 que una célula que expresa de manera normal CCNE1. Por ejemplo, una célula que sobreexpresa CCNE1 es una célula que presenta un número de copias de al menos 3 en comparación con una célula normal diploide con 2 copias. Por tanto, una célula que presenta un número de copias mayor de 3 de CCNE1 es una célula que sobreexpresa CCNE1. La sobreexpresión de CCNE1 puede medirse identificando el nivel de expresión del producto génico en una célula (por ejemplo, recuento de transcritos de ARNm de CCNE1 o nivel de proteína CCNE1).

[0096] El término “cicloalquenilo”, tal como se usa en el presente documento, se refiere a un grupo carbocíclico no aromático que tiene al menos un doble enlace en el anillo y desde tres hasta diez carbonos (por ejemplo, un cicloalquenilo C<3-10>), a menos que se especifique de otro modo. Los ejemplos no limitativos de cicloalquenilo incluyen cicloprop-1-enilo, cicloprop-2-enilo, ciclobut-1-enilo, ciclobut-1-enilo, ciclobut-2-enilo, ciclopent-1-enilo, ciclopent-2-enilo, ciclopent-3-enilo, norbornen-1-ilo, norbornen-2-ilo, norbornen-5-ilo, y norbornen-7-ilo. El grupo cicloalquenilo puede no estar sustituido o estar sustituido (por ejemplo, cicloalquenilo opcionalmente sustituido) tal como se describe para cicloalquilo.

[0097] El término “cicloalquenil-alquilo”, tal como se usa en el presente documento, representa un grupo alquilo sustituido con un grupo cicloalquenilo, cada uno tal como se define en el presente documento. Las porciones de cicloalquenilo y alquilo pueden estar sustituidas como los grupos individuales definidos en el presente documento.

[0098] El término “cicloalquenileno”, tal como se usa en el presente documento, representa un grupo cicloalquenilo divalente. Un cicloalquenileno opcionalmente sustituido es un cicloalquenileno que está opcionalmente sustituido tal como se describe en el presente documento para cicloalquilo.

[0099] El término “cicloalcoxilo”, tal como se usa en el presente documento, representa un sustituyente químico de fórmula -OR, donde R es grupo cicloalquilo, a menos que se especifique de otro modo. En algunas realizaciones, el grupo cicloalquilo puede estar sustituido adicionalmente tal como se define en el presente documento.

[0100] El término “cicloalquilo”, tal como se usa en el presente documento, se refiere un grupo alquilo cíclico que tiene desde tres hasta diez carbonos (por ejemplo, un cicloalquilo C<3->C<10>), a menos que se especifique de otro modo. Los grupos cicloalquilo pueden ser monocíclicos o bicíclicos. Los grupos cicloalquilo bicíclicos pueden ser de tipo biciclo[p.q.0]alquilo, en el que cada uno de p y q es, independientemente, 1, 2, 3, 4, 5, 6, o 7, siempre que la suma de p y q sea 2, 3, 4, 5, 6, 7, u 8. Alternativamente, los grupos cicloalquilo bicíclicos pueden incluir estructuras de cicloalquilo con unión de tipo puente, por ejemplo, biciclo[p.q.r]alquilo, en el que r es 1, 2, o 3, cada uno de p y q es, independientemente, 1, 2, 3, 4, 5, o 6, siempre que la suma de p, q, y r sea 3, 4, 5, 6, 7, u 8. El grupo cicloalquilo puede ser un grupo espirocíclico, por ejemplo, espiro[p.q]alquilo, en el que cada uno de p y q es, independientemente, 2, 3, 4, 5, 6, o 7, siempre que la suma de p y q sea 4, 5, 6, 7, 8, o 9. Los ejemplos no limitativos de cicloalquilo incluyen ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopentilo, ciclohexilo, cicloheptilo, 1-biciclo[2.2.1.]heptilo, 2-biciclo[2.2.1.]heptilo, 5-biciclo[2.2.1.]heptilo, 7-biciclo[2.2.1.]heptilo, y decalinilo. El grupo cicloalquilo puede no estar sustituido o estar sustituido (por ejemplo, cicloalquilo opcionalmente sustituido) con uno, dos, tres, cuatro, o cinco sustituyentes seleccionados independientemente del grupo que consiste en: alquilo; alquenilo; alquinilo; alcoxilo; alquilsulfinilo; alquilsulfenilo; alquilsulfonilo; amino; arilo; ariloxilo; azido; cicloalquilo; cicloalcoxilo; cicloalquenilo; cicloalquinilo; halo; heteroalquilo; heterociclilo; (heterociclil)oxilo; heteroarilo; hidroxilo; nitro; tiol; sililo; ciano; =O; =S; -SO<2>R, donde R es amino opcionalmente sustituido; =NR’, donde R’ es H, alquilo, arilo, o heterociclilo; y -CON(R<A>)<2>, donde cada R<A>es independientemente H o alquilo, o ambos R<A>, junto con el átomo al que están unidos, se combinan para formar heterociclilo. Cada uno de los sustituyentes a su vez puede no estar sustituido o estar sustituido con sustituyente(s) no sustituido(s) definido(s) en el presente documento para cada grupo respectivo. El término “cicloalquil-alquilo”, tal como se usa en el presente documento, representa un grupo alquilo sustituido con un grupo cicloalquilo, cada uno tal como se define en el presente documento. Las porciones de cicloalquilo y alquilo pueden estar opcionalmente sustituidas como los grupos individuales descritos en el presente documento.

[0101] El término “cicloalquileno”, tal como se usa en el presente documento, representa un grupo cicloalquilo divalente. Un cicloalquileno opcionalmente sustituido es un cicloalquileno que está opcionalmente sustituido tal como se describe en el presente documento para cicloalquilo.

[0102] El término “cicloalquinilo”, tal como se usa en el presente documento, se refiere un grupo carbocíclico monovalente que tiene uno o dos triples enlaces carbono-carbono y que tiene desde ocho hasta doce carbonos, a menos que se especifique de otro modo. Cicloalquinilo puede incluir un enlace transanular o puente. Los ejemplos no limitativos de cicloalquinilo incluyen ciclooctinilo, ciclononinilo, ciclodecinilo, y ciclodecadiinilo. El grupo cicloalquinilo puede no estar sustituido o estar sustituido (por ejemplo, cicloalquinilo opcionalmente sustituido) tal como se define para cicloalquilo.

[0103] “Enfermedad” o “afección” se refieren un estado físico o estado de salud de un paciente o sujeto que puede tratarse con los compuestos o métodos proporcionados en el presente documento.

[0104] El término “FBXW7”, tal como se usa en el presente documento, se refiere al gen de proteína 7 que contiene repetición de WD/caja F, su transcrito, o proteína. Un gen con mutación de FBXW7, también descrito en el presente documento como gen de FBXW7 que tiene una mutación inactivante, es uno que no puede producir proteína FBXW7 funcional o produce cantidades reducidas de proteína FBXW7 en una célula.

[0105] El término “halo”, tal como se usa en el presente documento, representa un halógeno seleccionado de bromo, cloro, yodo, y flúor.

[0106] El término “heteroalquilo”, tal como se usa en el presente documento se refiere a un grupo alquilo, alquenilo, o alquinilo interrumpido una vez por uno o dos heteroátomos; dos veces, cada vez, independientemente, por uno o dos heteroátomos; tres veces, cada vez, independientemente, por uno o dos heteroátomos; o cuatro veces, cada vez, independientemente, por uno o dos heteroátomos. Cada heteroátomo es, independientemente, O, N, o S. En algunas realizaciones, el heteroátomo es O o N. Ninguno de los grupos heteroalquilo incluye dos átomos de oxígeno o azufre contiguos. El grupo heteroalquilo puede no estar sustituido o estar sustituido (por ejemplo, heteroalquilo opcionalmente sustituido). Cuando el heteroalquilo está sustituido y el sustituyente se une al heteroátomo, el sustituyente se selecciona según la naturaleza y valencia del heteroátomo. Por tanto, el sustituyente unido al heteroátomo, si la valencia lo permite, se selecciona del grupo que consiste en =O, -N(R<N2>)<2>, -SO<2>OR<N3>, -SO<2>R<N2>, -SOR<N3>, -COOR<N3>, un grupo protector de N, alquilo, alquenilo, alquinilo, arilo, cicloalquilo, cicloalquenilo, cicloalquinilo, heterociclilo, o ciano, donde cada R<N2>es independientemente H, alquilo, cicloalquilo, cicloalquenilo, cicloalquinilo, arilo, o heterociclilo, y cada R<N3>es independientemente alquilo, cicloalquilo, cicloalquenilo, cicloalquinilo, arilo, o heterociclilo. Cada uno de estos sustituyentes puede a su vez no estar sustituido o estar sustituido con sustituyente(s) no sustituido(s) definido(s) en el presente documento para cada grupo respectivo. Cuando el heteroalquilo está sustituido y el sustituyente se une a carbono, el sustituyente se selecciona de los descritos para alquilo, siempre que el sustituyente en el átomo de carbono unido al heteroátomo no sea Cl, Br, o I. Se entiende que se encuentran que átomos de carbono en los extremos terminales de un grupo heteroalquilo.

[0107] El término “heteroaril-alquilo”, tal como se usa en el presente documento, representa un grupo alquilo sustituido con un grupo heteroarilo, cada uno tal como se define en el presente documento. Las porciones de heteroarilo y alquilo pueden estar opcionalmente sustituidas como los grupos individuales descritos en el presente documento.

[0108] El término “heteroarileno”, tal como se usa en el presente documento, representa un heteroarilo divalente. Un heteroarileno opcionalmente sustituido es un heteroarileno que está opcionalmente sustituido tal como se describe en el presente documento para heteroarilo.

[0109] El término “heteroariloxilo”, tal como se usa en el presente documento, se refiere a una estructura -OR, en la que R es heteroarilo. Heteroariloxilo puede estar opcionalmente sustituido tal como se define para heterociclilo.

[0110] El término “heterociclilo”, tal como se usa en el presente documento, representa un sistema de anillos monocíclico, bicíclico, tricíclico, o tetracíclico que tiene anillos de 3, 4, 5, 6, 7, u 8 miembros condensados, formando puentes, y/o de tipo espiro, a menos que se especifique de otro modo, que contiene uno, dos, tres, o cuatro heteroátomos seleccionados independientemente del grupo que consiste en nitrógeno, oxígeno, y azufre. En algunas realizaciones, “heterociclilo” es un sistema de anillos monocíclico, bicíclico, tricíclico, o tetracíclico que tiene anillos de 3, 4, 5, 6, 7, u 8 miembros condensados o formando puentes, a menos que se especifique de otro modo, que contiene uno, dos, tres, o cuatro heteroátomos seleccionados independientemente del grupo que consiste en nitrógeno, oxígeno, y azufre. El heterociclilo puede ser aromático o no aromático. El heterociclilo de 5 miembros no aromático tiene cero o un doble enlace, los grupos heterociclilo de 6 y 7 miembros no aromáticos tienen de cero a dos dobles enlaces, y los grupos heterociclilo de 8 miembros no aromáticos tienen de cero a dos dobles enlaces y/o cero o un triple enlace carbono-carbono. Los grupos heterociclilo incluyen desde 1 hasta 16 átomos de carbono a menos que se especifique de otro modo. Ciertos grupos heterociclilo pueden incluir hasta 9 átomos de carbono. Los grupos heterociclilo no aromáticos incluyen pirrolinilo, pirrolidinilo, pirazolinilo, pirazolidinilo, imidazolinilo, imidazolidinilo, piperidinilo, homopiperidinilo, piperazinilo, piridazinilo, oxazolidinilo, isoxazolidiniilo, morfolinilo, tiomorfolinilo, tiazolidinilo, isotiazolidinilo, tiazolidinilo, tetrahidrofuranilo, dihidrofuranilo, tetrahidrotienilo, dihidrotienilo, dihidroindolilo, tetrahidroquinolilo, tetrahidroisoquinolilo, piranilo, dihidropiranilo, ditiazolilo, etc. Si el sistema de anillos heterocíclico tiene al menos una estructura de resonancia aromática o al menos un tautómero aromático, tal estructura es un heterociclilo aromático (es decir, heteroarilo). Los ejemplos no limitativos de grupos heteroarilo incluyen bencimidazolilo, benzofurilo, benzotiazolilo, benzotienilo, benzoxazolilo, furilo, imidazolilo, indolilo, isoindazolilo, isoquinolinilo, isotiazolilo, isotiazolilo, isoxazolilo, oxadiazolilo, oxazolilo, purinilo, pirrolilo, piridinilo, pirazinilo, pirimidinilo, quinazolinilo, quinolinilo, tiadiazolilo (por ejemplo, 1,3,4-tiadiazol), tiazolilo, tienilo, triazolilo, tetrazolilo, etc. El término “heterociclilo” también representa un compuesto heterocíclico que tiene una estructura multicíclica con puente en la que uno o más carbonos y/o heteroátomos forma un puente con dos miembros no adyacentes de un anillo monocíclico, por ejemplo, quinuclidina, tropanos, o diaza-biciclo[2.2.2]octano. El término “heterociclilo” incluye grupos bicíclicos, tricíclicos, y tetracíclicos en los que cualquiera de los anillos heterocíclicos anteriores se condensa con uno, dos, o tres anillos carbocíclicos, por ejemplo, un anillo de arilo, un anillo de ciclohexano, un anillo de ciclohexeno, un anillo de ciclopentano, un anillo de ciclopenteno, u otro anillo heterocíclico monocíclico. Los ejemplos de heterociclilos condensados incluyen 1,2,3,5,8,8a-hexahidroindolizina; 2,3-dihidrobenzofurano; 2,3-dihidroindol; y 2,3-dihidrobenzotiofeno. El grupo heterociclilo puede no estar sustituido o estar sustituido con uno, dos, tres, cuatro o cinco sustituyentes seleccionados independientemente del grupo que consiste en: alquilo; alquenilo; alquinilo; alcoxilo; alquilsulfinilo; alquilsulfenilo; alquilsulfonilo; amino; arilo; ariloxilo; azido; cicloalquilo; cicloalcoxilo; cicloalquenilo; cicloalquinilo; halo; heteroalquilo; heterociclilo; (heterociclil)oxilo; hidroxilo; nitro; tiol; sililo; ciano; -C(O)R o -SO<2>R, donde R es amino o alquilo; =O; =S; =NR’, donde R’ es H, alquilo, arilo, o heterociclilo. Cada uno de los sustituyentes a su vez puede no estar sustituido o estar sustituido con sustituyente(s) no sustituido(s) definido(s) en el presente documento para cada grupo respectivo.

[0111] El término “heterociclil-alquilo”, tal como se usa en el presente documento, representa un grupo alquilo sustituido con un grupo heterociclilo, cada uno tal como se define en el presente documento. Las porciones de heterociclilo y alquilo pueden estar opcionalmente sustituidas como los grupos individuales descritos en el presente documento. El término “heterociclileno”, tal como se usa en el presente documento, representa un divalente heterociclilo. An opcionalmente sustituido heterociclileno es un heterociclileno que está opcionalmente sustituido tal como se describe en el presente documento para heterociclilo.

[0112] El término “(heterociclil)oxilo”, tal como se usa en el presente documento, representa un sustituyente químico de fórmula -OR, donde R es un grupo heterociclilo, a menos que se especifique de otro modo. El (heterociclil)oxilo puede estar opcionalmente sustituido de la manera descrita para heterociclilo.

[0113] Los términos “hidroxilo” e “hidroxi”, tal como se usan indistintamente en el presente documento, representan un grupo -OH.

[0114] El término “enriquecido isotópicamente”, tal como se usa en el presente documento, se refiere al agente farmacéuticamente activo con el contenido isotópico para un isótopo en una posición predeterminada dentro de una molécula que es al menos 100 veces mayor que la abundancia natural de este isótopo. Por ejemplo, una composición que está enriquecida isotópicamente para deuterio incluye un agente activo con al menos una posición de átomo de hidrógeno que tiene una abundancia de deuterio al menos 100 veces mayor que la abundancia natural de deuterio. Preferiblemente, un enriquecimiento isotópico para deuterio es al menos 1000 veces mayor que la abundancia natural de deuterio. Más preferiblemente, un enriquecimiento isotópico para deuterio es al menos 4000 veces mayor (por ejemplo, al menos 4750 veces mayor, por ejemplo, hasta 5000 veces mayor) que la abundancia natural de deuterio.

[0115] El término “leucemia”, tal como se usa en el presente documento, se refiere ampliamente a enfermedades malignas, progresivas de los órganos hematopoyéticos y se caracteriza generalmente por una proliferación y un desarrollo distorsionados de leucocitos y sus precursores en la sangre y la médula ósea. La leucemia se clasifica generalmente a nivel clínico basándose en (1) la duración y el carácter de la enfermedad: aguda o crónica; (2) el tipo de célula implicada; mieloide (mielógena), linfoide (linfógena), o monocítica; y (3) el aumento o la ausencia de aumento del número de células anómalas en la sangre: leucémica o aleucémica (subleucémica).

[0116] El término “linfoma”, tal como se usa en el presente documento, se refiere a un cáncer que surge a partir de células de origen inmunitario.

[0117] El término “melanoma”, tal como se usa en el presente documento, se toma como que significa un tumor que surge a partir del sistema melanocítico de la piel y otros órganos.

[0118] El término “Myt1”, tal como se usa en el presente documento, se refiere a cinasa inhibidora de cdc2 específica de treonina y tirosina asociada a membrana (Myt1) (nombre de gen PKMYT1).

[0119] El término “inhibidor de Myt1”, tal como se usa en el presente documento, representa un compuesto que tras ponerse en contacto con la enzima Myt1, ya seain vitro, en cultivo celular, o en un animal, reduce la actividad de Myt1, de tal manera que la CI<50>de Myt1 medida es de 10 μM o menos (por ejemplo, 5 μM o menos o 1 μM o menos). Para ciertos inhibidores de Myt1, la CI<50>de Myt1 puede ser de 100 nM o menos (por ejemplo, 10 nM o menos, o 3 nM o menos) y podría ser de tan sólo 100 pM o 10 pM. Preferiblemente, la CI<50>de Myt1 es de 1 nM a 1 μM (por ejemplo, de 1 nM a 750 nM, de 1 nM a 500 nM, o de 1 nM a 250 nM). Incluso más preferiblemente, la CI<50>de Myt1 es de menos de 20 nm (por ejemplo, de 1 nM a 20 nM).

[0120] El término “nitro”, tal como se usa en el presente documento, representa un grupo -NO<2>.

[0121] El término “oxo”, tal como se usa en el presente documento, representa un átomo de oxígeno divalente (por ejemplo, la estructura de oxo puede mostrarse como =O).

[0122] El término “Ph”, tal como se usa en el presente documento, representa fenilo.

[0123] El término “composición farmacéutica”, tal como se usa en el presente documento, representa una composición que contiene un compuesto descrito en el presente documento, formulada con un excipiente farmacéuticamente aceptable, y fabricada o vendida con la aprobación de un organismo regulador gubernamental como parte de un régimen terapéutico para el tratamiento de enfermedad en un mamífero. Pueden formularse composiciones farmacéuticas, por ejemplo, para administración oral en forma de dosificación unitaria (por ejemplo, un comprimido, una cápsula, comprimido oblongo, cápsula de gelatina, o jarabe); para administración tópica (por ejemplo, como una crema, un gel, una loción, o pomada); para administración intravenosa (por ejemplo, como una disolución estéril que carece de émbolos particulados y en un sistema de disolventes adecuado para uso intravenoso); o en cualquier otra formulación descrita en el presente documento.

[0124] El término “excipiente farmacéuticamente aceptable” o “portador farmacéuticamente aceptable”, tal como se usan indistintamente en el presente documento, se refiere a cualquier componente distinto de los compuestos descritos en el presente documento (por ejemplo, un vehículo capaz de suspender o disolver el compuesto activo) y que tiene las propiedades de ser no tóxico y no inflamatorio en un paciente. Los excipientes pueden incluir, por ejemplo: antiadherentes, antioxidantes, aglutinantes, recubrimientos, adyuvantes de compresión, disgregantes, colorantes (coloraciones), emolientes, emulsionantes, materiales de relleno (diluyentes), formadores de película o recubrimientos, aromas, fragancias, deslizantes (potenciadores del flujo), lubricantes, conservantes, tintas de impresión, sorbentes, agentes de suspensión o dispersantes, edulcorantes, o aguas de hidratación. Los excipientes a modo de ejemplo incluyen, pero no se limitan a: hidroxitolueno butilado (BHT), carbonato de calcio, fosfato (dibásico) de calcio, estearato de calcio, croscarmelosa, polivinil-pirrolidona reticulada, ácido cítrico, crospovidona, cisteína, etilcelulosa, gelatina, hidroxipropil-celulosa, hidroxipropil-metilcelulosa, lactosa, estearato de magnesio, maltitol, manitol, metionina, metilcelulosa, metil-parabeno, celulosa microcristalina, polietilenglicol, polivinilpirrolidona, povidona, almidón pregelatinizado, propil-parabeno, palmitato de retinilo, goma laca, dióxido de silicio, carboximetil-celulosa sódica, citrato de sodio, glicolato sódico de almidón, sorbitol, almidón (de maíz), ácido esteárico, ácido esteárico, sacarosa, talco, dióxido de titanio, vitamina A, vitamina E, vitamina C, y xilitol.

[0125] El término “sal farmacéuticamente aceptable”, tal como se usa en el presente documento, representa aquellas sales que son, dentro del alcance de un criterio médico sólido, adecuadas para su uso en contacto con los tejidos de humanos y animales sin excesiva toxicidad, irritación, respuesta alérgica y similares y son acordes con una relación beneficio/riesgo razonable. Se conocen bien en la técnica sales farmacéuticamente aceptables. Por ejemplo, se describen sales farmacéuticamente aceptables en: Bergeet al., J. Pharmaceutical Sciences 66:1-19, 1977 y en Pharmaceutical Salts: Properties, Selection and Use, (eds. P.H. Stahl y C.G. Wermuth), Wiley-VCH, 2008. Las sales pueden prepararsein situdurante el aislamiento y la purificación finales de los compuestos descritos en el presente documento o por separado haciendo reaccionar el grupo de base libre con un ácido orgánico adecuado. Las sales de adición de ácido representativas incluyen sales de acetato, adipato, alginato, ascorbato, aspartato, bencenosulfonato, benzoato, bisulfato, borato, butirato, canforato, canforsulfonato, citrato, ciclopentanopropionato, digluconato, dodecilsulfato, etanosulfonato, fumarato, glucoheptonato, glicerofosfato, hemisulfato, heptonato, hexanoato, bromhidrato, clorhidrato, yodhidrato, 2-hidroxi-etanosulfonato, lactobionato, lactato, laurato, lauril-sulfato, malato, maleato, malonato, metanosulfonato, 2-naftalenosulfonato, nicotinato, nitrato, oleato, oxalato, palmitato, pamoato, pectinato, persulfato, 3-fenilpropionato, fosfato, picrato, pivalato, propionato, estearato, succinato, sulfato, tartrato, tiocianato, toluenosulfonato, undecanoato, valerato, y similares. Las sales de metales alcalinos o alcalinotérreos representativas incluyen de sodio, litio, potasio, calcio, magnesio, y similares, así como de cationes no tóxicos de amonio, amonio cuaternario, y amina, incluyendo, pero sin limitarse a amonio, tetrametilammonio, tetraetilamonio, metilamina, dimetilamina, trimetilamina, trietilamina, etilamina, y similares.

[0126] El término “premaligno” o “precanceroso”, tal como se usa en el presente documento, se refiere a una afección que no es maligna pero que está lista para volverse maligna.

[0127] El término “grupo protector”, tal como se usa en el presente documento, representa un grupo destinado a proteger que un hidroxilo, un amino, o un carbonilo participe en una o más reacciones no deseadas durante la síntesis química. El término “grupo protector de O”, tal como se usa en el presente documento, representa un grupo destinado a proteger que un grupo hidroxilo o carbonilo participe en una o más reacciones no deseadas durante la síntesis química. El término “grupo protector de N”, tal como se usa en el presente documento, representa un grupo destinado a proteger que un grupo que contiene nitrógeno (por ejemplo, un amino, amido, N-H heterocíclico, o hidrazina) participe en una o más reacciones no deseadas durante la síntesis química. Se divulgan grupos protectores de O y N usados comúnmente en Greene, “Protective Groups in Organic Synthesis”, 3ª edición (John Wiley & Sons, Nueva York, 1999).

[0128] Los grupos protectores de O y N a modo de ejemplo incluyen grupos alcanoílo, ariloílo, o carbamilo tales como formilo, acetilo, propionilo, pivaloílo, t-butilacetilo, 2-cloroacetilo, 2-bromoacetilo, trifluoroacetilo, tricloroacetilo, ftalilo, o-nitrofenoxiacetilo, -clorobutirilo, benzoílo, 4-clorobenzoílo, 4-bromobenzoílo, t-butildimetilsililo, tri-isopropilsililoximetilo, 4,4’-dimetoxitritilo, isobutirilo, fenoxiacetilo, 4-isopropilfenoxiacetilo, dimetilformamidino, y 4-nitrobenzoílo.

[0129] Los grupos protectores de O para proteger grupos que contienen carbonilo a modo de ejemplo incluyen, pero no se limitan a: acetales, acilales, 1,3-ditianos, 1,3-dioxanos, 1,3-dioxolanos, y 1,3-ditiolanos.

[0130] Otros grupos protectores de O incluyen, pero no se limitan a: alquil, arilo, y aril-alquil éteres sustituidos (por ejemplo, tritil; metiltiometil; metoximetil; benciloximetil; siloximetil; 2,2,2,-tricloroetoximetil; tetrahidropiranil; tetrahidrofuranil; etoxietil; 1-[2-(trimetilsilil)etoxi]etil; 2-trimetilsililetil; t-butil éter; p-clorofenil, p-metoxifenil, p-nitrofenil, bencil, pmetoxibencil, y nitrobencil); silil éteres (por ejemplo, trimetilsilil; trietilsilil; triisopropilsilil; dimetilisopropilsilil; tbutildimetilsilil; t-butildifenilsilil; tribencilsilil; trifenilsilil; y difenilmetilsilil); carbonatos (por ejemplo, de metilo, metoximetilo, 9-fluorenilmetilo; etilo; 2,2,2-tricloroetilo; 2-(trimetilsilil)etilo; vinilo, alilo, nitrofenilo; bencilo; metoxibencilo; 3,4-dimetoxibencilo; y nitrobencilo).

[0131] Otros grupos protectores de N incluyen, pero no se limitan a, agentes auxiliares quirales tales como D, L o D, L-aminoácidos protegidos o no protegidos tales como alanina, leucina, fenilalanina, y similares; grupos que contienen sulfonilo tales como bencenosulfonilo, p-toluenosulfonilo, y similares; grupos de formación de carbamato tales como benciloxicarbonilo, p-clorobenciloxicarbonilo, p-metoxibenciloxicarbonilo, p-nitrobenciloxicarbonilo, 2-nitrobenciloxicarbonilo, p-bromobenciloxicarbonilo, 3,4-dimetoxibenciloxicarbonilo, 3,5-dimetoxibencil-oxicarbonilo, 2,4-dimetoxibenciloxicarbonilo, 4-metoxibenciloxicarbonilo, 2-nitro-4,5-dimetoxibenciloxicarbonilo, 3,4,5-trimetoxibenciloxicarbonilo, 1-(p-bifenilil)-1-metiletoxicarbonilo, ,-dimetil-3,5-dimetoxibenciloxicarbonilo, benzhidriloxi-carbonilo, t-butiloxicarbonilo, diisopropilmetoxicarbonilo, isopropiloxicarbonilo, etoxicarbonilo, metoxicarbonilo, aliloxicarbonilo, 2,2,2,-tricloroetoxicarbonilo, fenoxicarbonilo, 4-nitrofenoxi-carbonilo, fluorenil-9-metoxicarbonilo, ciclopentiloxicarbonilo, adamantiloxicarbonilo, ciclohexiloxicarbonilo, feniltiocarbonilo, y similares, aril-alquilo grupos tales como bencilo, p-metoxibencilo, 2,4-dimetoxibencilo, trifenilmetilo, benciloximetilo, y similares, grupos de sililalquilacetal tales como [2-(trimetilsilil)etoxi]metilo y grupos sililo tales como trimetilsililo, y similares. Grupos protectores de N útiles son formilo, acetilo, benzoílo, pivaloílo, t-butilacetilo, alanilo, fenilsulfonilo, bencilo, dimetoxibencilo, [2-(trimetilsilil)etoxi]metilo (SEM), tetrahidropiranilo (THP), t-butiloxicarbonilo (Boc), y benciloxicarbonilo (Cbz).

[0132] El término “tautómero” se refiere a isómeros estructurales que se interconvierten fácilmente, a menudo mediante reubicación de un protón. Los tautómeros son especies químicas distintas que pueden identificarse mediante características espectroscópicas diferentes, pero generalmente no pueden aislarse individualmente. Los ejemplos no limitativos de tautómeros incluyen cetona - enol, enamina - imina, amida - ácido imídico, nitroso - oxima, ceteno -inol, y aminoácido - carboxilato de amonio.

[0133] El término “sarcoma” generalmente se refiere a un tumor que está compuesto por una sustancia como el tejido conjuntivo embrionario y se compone generalmente de células estrechamente empaquetadas incorporadas en una sustancia fibrilar u homogénea.

[0134] El término “sujeto”, tal como se usa en el presente documento, representa un humano o animal no humano (por ejemplo, un mamífero) que padece, o corre el riesgo de, una enfermedad o afección, tal como se determina por un profesional cualificado (por ejemplo, un profesional médico o de enfermería) con o sin prueba(s) de laboratorio conocida(s) en la técnica de muestra(s) del sujeto. Preferiblemente, el sujeto es un humano. Los ejemplos no limitativos de enfermedades y afecciones incluyen enfermedades que tienen el síntoma de hiperproliferación celular, por ejemplo, un cáncer.

[0135] “Tratamiento” y “tratar”, tal como se usa en el presente documento, se refieren al manejo médico de un sujeto con la intención de mejorar, producir una mejoría, estabilizar, prevenir o curar una enfermedad o afección. Estos términos definidos incluyen tratamiento activo (tratamiento dirigido a mejorar la enfermedad o afección); tratamiento causal (tratamiento dirigido a la causa de la enfermedad o afección asociada); tratamiento paliativo (tratamiento diseñado para el alivio de los síntomas de la enfermedad o afección); tratamiento preventivo (tratamiento dirigido a minimizar o inhibir parcial o completamente el desarrollo de la enfermedad o afección asociada); y tratamiento de apoyo (tratamiento empleado para complementar otra terapia).

[0136] Breve descripción de los dibujos

[0137] La figura 1A es un gráfico de barras que muestra la amplificación/sobreexpresión de CCNE1 a lo largo de tumores secuenciados a partir de Altas de PanCancer TCGA.

[0138] La figura 1B es un diagrama de dispersión que muestra los datos de expresión del gen CCNE1 del Altas de PanCancer TCGA.

[0139] La figura 2A es un gráfico de barras que muestra las mutaciones de FBXW7 a lo largo de tumores secuenciados a partir del Altas de PanCancer TCGA.

[0140] La figura 2B es un gráfico de piruleta que muestra la frecuencia de mutaciones de FBXW7 a lo largo del gen. Este gráfico destaca tres mutaciones de punto caliente de arginina frecuentes (R465, R479, y R505) dentro de la tercera y cuarta repeticiones WD40 que alteran el reconocimiento del sustrato de ciclina E1 y se clasifican como perjudiciales. La figura 3A es un gráfico de barras que muestra los resultados de un ensayo de proliferación que usa clones que sobreexpresan CCNE1 y RPE1-hTERC Cas9 TP53-/- tratados con diferentes dosis del compuesto 133.

[0141] La figura 3B es una serie de imágenes que representan los resultados de un ensayo de supervivencia clonogénica que usa clones que sobreexpresan CCNE1 y RPE1-hTERC Cas9 TP53-/- transducidos con ARNgs de PKMYT1. Se sembraron en placa células infectadas a baja densidad para medir su capacidad para formar colonias de >50 células. Después de 10 días de crecimiento, se tiñeron las colonias, se obtuvieron imágenes, y se cuantificaron. Los resultados se normalizan con respecto a la supervivencia de clones que sobreexpresan CCNE1 y RPE1-hTERC Cas9 TP53-/- parentales transducidos con un ARNgs de control de LacZ sin selección como diana.

[0142] La figura 3C es un gráfico lineal que muestra los resultados de un ensayo de proliferación que usa clones que sobreexpresan CCNE1 y RPE1-hTERC Cas9 TP54-/- tratados con diferentes dosis del compuesto 133.

[0143] La figura 4A es un gráfico de barras que muestra los resultados de un ensayo de supervivencias clonogénica que usa células que sobreexpresan CCNE1 y FT282-hTERC TP53<R175H>transducidas con ARNgs de PKMYT1. Se sembraron en placa células infectadas a baja densidad para medir su capacidad para formar colonias de >50 células. Después de 10 días de crecimiento, se tiñeron las colonias, se obtuvieron imágenes, y se cuantificaron. Los resultados se normalizan con respecto a la supervivencia de células que sobreexpresan CCNE1 y FT282-hTERC TP53<R175H>transducidas con un ARNgs de control de AAVS1.

[0144] La figura 4B es una serie de imágenes que muestra de colonias teñidas descritas en la figura 4A.

[0145] La figura 4C es un gráfico lineal que muestra los resultados de un ensayo de proliferación que usa clones que sobreexpresan CCNE1 y FT282-hTERC TP53<R175H>tratados con diferentes dosis del compuesto 133.

[0146] Las figuras 5A, 5B, y 5C muestran los resultados de ensayos de supervivencia clonogénica para clones que sobreexpresan y CCNE1 RPE1-hTERC Cas9 TP53-/- parentales estables que expresan o bien un ORF resistente a ARNgs de PKMYT1 con etiqueta FLAG de tipo natural o bien catalíticamente inactivo. Se transdujeron estas líneas celulares estables o bien un ARNgs sin selección como diana de LacZ o bien ARNgs de PKMYT1 #4 y se sembraron en placa a baja densidad para medir su capacidad para formar colonias de >50 células. Después de 10 días de crecimiento, se tiñeron las colonias, se obtuvieron imágenes, y se cuantificaron. Los resultados se normalizan con respecto a la supervivencia de clones que sobreexpresan CCNE1 y RPE1-hTERC Cas9 TP53-/- transducidos con un ARNgs de control de LacZ sin selección como diana y se representa como un gráfico de barras en la figura 5C. Ambos clones 2 y 21 se comportan de manera similar en este estudio.

[0147] La figura 6 es una gráfica que muestra los resultados de ensayos de proliferación para un panel de líneas de células cancerosas que amplifican/sobreexpresan CCNE1 y tipo natural de CCNE1 tratadas con diferentes dosis del compuesto 28. Se representan gráficamente los valores de CI<50>para cada línea celular y demuestran que las líneas celulares que sobreexpresan CCNE1 muestran una sensibilidad mejorada a un inhibidor de Myt1 en comparación con líneas celulares WT de CCNE1.

[0148] La figura 7 es una gráfica que muestra los resultados de ensayos de proliferación para un panel de líneas de células cancerosas de tipo natural de FBXW7 y con mutación de FBXW7 tratadas con diferentes dosis del compuesto 95. Se representan gráficamente los valores de CI<50>para cada línea celular y demuestran que las líneas celulares con mutación de FBXW7 muestran una sensibilidad mejorada a un inhibidor de Myt1 en comparación con líneas celulares WT de FBXW7.

[0149] Descripción detallada

[0150] En general, la invención proporciona compuestos, composiciones farmacéuticas que contienen los mismos, métodos de preparar los compuestos, y métodos de uso. Compuestos de la invención pueden ser inhibidores de Myt1. Estos compuestos pueden usarse para inhibir Myt1 en una célula, por ejemplo, una célula en un sujeto (por ejemplo, una célula que sobreexpresa CCNE1o que tiene una mutación inactivante en el genFBXW7). El sujeto puede necesitar un tratamiento para una enfermedad o afección, por ejemplo, una enfermedad o afección que tiene un síntoma de hiperproliferación celular, por ejemplo, un cáncer. La actividad inhibidora de Myt1 de los compuestos divulgados en el presente documento es útil para tratar a un sujeto que necesita tratamiento para cáncer.

[0151] Myt1 es una cinasa de regulación del ciclo celular localizada predominantemente en el retículo endoplásmico y el complejo de Golgi. Forma parte de la familia Wee de cinasas que incluye Wee1 y Wee1b. Está implicada en la regulación negativa del complejo CDK1-ciclina B que fomenta la progresión de células de la fase G2 a la fase mitótica (fase M) del ciclo celular. Durante el daño a ADN, Myt1 impulsa la fosforilación en CDK1 (tanto Tyr15 como Thr14 de CDK1) que mantiene el complejo de cinasa en un estado inactivo en G2 como parte de la respuesta de punto de control de G2 junto con Wee1 (que media solamente en la fosforilación de Tyr15) e impide la entrada en la mitosis hasta que se ha reparado el daño. Adicionalmente, se ha propuesto que Myt1 interacciona directamente con complejos de CDK1 en el citoplasma e impide su translocación nuclear, inhibiendo por tanto la progresión del ciclo celular.

[0152] Myt1 se ha visto implicada como diana para el cáncer potencialmente importante ya que es esencial en muchas células cancerosas. Se ha observado la sobreexpresión de Myt1 en diversos cánceres incluyendo carcinoma hepatocelular así como carcinoma de células renales de células claras. La regulación por disminución de Myt1 tiene un papel menor en células no perturbadas pero tiene un papel más prominente en células expuestas a daño de ADN. Además, las células que muestran altos niveles de estrés de replicación además de una regulación defectuosa del punto de control de G1 pueden ser particularmente sensibles a la pérdida de la función de Myt1, ya que estas células serán propensas a entrar en la mitosis prematuramente con material genómico comprometido que conduce a catástrofe mitótica.

[0153] Los inhibidores de Myt1, un regulador de la transición G2-M, pueden ser particularmente útiles en el tratamiento de tumores que albergan amplificación de CCNE1o mutaciones con pérdida de función deFBXW7usando una estrategia terapéutica letal sintética.

[0154] La ciclina E1 (codificada por el gen CCNE1) está implicada en la transición del ciclo celular de fase G1 a S. En la fase G1 tardía del ciclo celular, se compleja con la cinasa 2 dependiente de ciclina (CDK2) para fomentar la activación del factor de transcripción E2F y la entrada en la fase S. Los niveles de ciclina E1 están regulados estrechamente durante los ciclos celulares normales, acumulándose en la transición G1/S y degradándose completamente por el final de la fase S. La degradación proteasómica dependiente del ciclo celular de la ciclina E1 está mediada por el complejo de ubiquitina ligasa SCF<FBW7>. Una vez activado en G1 tardía, el complejo ciclina E1/CDK2 fomenta- la transición a la fase S a través de fosforilación e inactivación de RB1 y la posterior liberación de factores de transcripción E2F. La fase S se fomenta por la transcripción mediada por E2F de numerosos genes implicados en la replicación del ADN, incluyendo las subunidades del complejo de pre-replicación ORC1, CDC6, CDT1, y los factores de helicasa MCM.

[0155] CCNE1 se amplifica y/o sobreexpresa frecuentemente en cánceres humanos (figura 1). La amplificación de CCNE1 se ha notificado en varios tipos de cáncer, incluyendo de endometrio, de ovario, de mama y gástrico, que varía en frecuencia del 5-40 %. Es importante destacar que numerosos estudios han confirmado que la ciclina E1 es un impulsor de la tumorigénesis en estas indicaciones y se observa la amplificación de CCNE1 en los subtipos más agresivos que incluyen carcinosarcoma de útero (CSU; ~40 %), carcinoma de útero seroso (CUS; ~25 %), carcinoma de ovario seroso de alto grado (COSAG; ~25 %) y cáncer de mama triple negativo (CMTN; ~8 %). Los pacientes con evidencias de sobreexpresión de ciclina E1 en biopsias tumorales mediante inmunohistoquímica y/o análisis del número de copias genómicas tienen una menor supervivencia global en comparación con pacientes con niveles normales de ciclina E1. Los pacientes con COSAG con sobreexpresión de ciclina E1 tienen una menor tasa de respuesta a cisplatino, el tratamiento de referencia actual.

[0156] La proteólisis regulada por el ciclo celular defectuosa de ciclina E1 por el complejo de ubiquitina ligasa SCF<FBW7>es otro mecanismo de la sobreexpresión de CCNE1 observada en tumores. El gen de la proteína de la caja F,FBXW7, frecuentemente está mutado en varios tipos de cáncer, incluyendo de endometrio, colorrectal y gástrico, variando en frecuencia desde el 5-35 % (figura 2). Al igual que para CCNE1, se observan mutaciones oncoiniciadoras deFBXW7en los subtipos más agresivos de cáncer de endometrio incluyendo CSU (~35 %) y CUS (~ 25 %).FBXW7tiene un espectro diverso de mutaciones con pérdida de función en el cáncer, incluyendo mutaciones truncantes distribuidas a lo largo del gen y mutaciones de cambio de sentido dentro de la ciclina E1 que reconoce repeticiones de WD40. FBW7 funciona como un homodímero dentro del complejo de SCF y muchas mutaciones de cambio de sentido perjudiciales dentro de las repeticiones WD40 son principalmente heterocigotas y dominantes negativas. Notablemente, se encuentran varias mutaciones de cambio de sentido de punto caliente recurrentes en las repeticiones WD40 incluyendo R465, R479, y R505, todas las cuales alteran la unión a y ubiquitilación de ciclina E1. Se cree que la sobreexpresión de ciclina E1 y/o la pérdida de función deFBXW7impulsa la tumorigénesis induciendo la inestabilidad del genoma (por ejemplo, aumento de la activación de puntos de origen, reservas de nucleótidos defectuosos, conflictos de transcripción-replicación, y/o inestabilidad de horquilla). Se ha demostrado que la sobreexpresión de ciclina E1 induce estrés de replicación caracterizado por horquillas de replicación ralentizadas o detenidas y pérdida de heterocigosidad en sitios frágiles. El mecanismo primario mediante el cual la sobreexpresión de ciclina E1 provoca estrés de replicación es el aumento de la activación de puntos de origen en la fase S temprana seguido por agotamiento de factores de replicación incluyendo reservas de nucleótidos. La disminución de las proteínas y nucleótidos de replicación globales disminuye la progresión de la horquilla y provoca detenciones y el posterior colapso o inversión.

[0157] El compuesto de la invención puede ser, por ejemplo, un compuesto de fórmula (I):

[0160]

[0163] o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo,

[0164] donde

[0165] cada uno de X, Y, y Z es independientemente N o CR<2>;

[0166] R<1>y cada R<2>son independientemente hidrógeno, alquilo C<1-6>opcionalmente sustituido, alquenilo C<2-6>opcionalmente sustituido, alquinilo C<2-6>opcionalmente sustituido, cicloalquilo C<3-8>opcionalmente sustituido, cicloalquenilo C<3-8>opcionalmente sustituido, heterociclilo C<2-9>opcionalmente sustituido, heterociclil C<2-9>opcionalmente sustituido-alquilo C<1-6>, arilo C<6-10>opcionalmente sustituido, heteroarilo C<1-9>opcionalmente sustituido, heteroaril C<1-9>opcionalmente sustituido-alquilo C<1-6>, halógeno, -N(R<7>)<2>, -OR<7>, -C(O)N(R<8>)<2>, -SO<2>N(R<8>)<2>, -SO<2>R<7A>, o -Q-R<7B>; o R<1>se combina con un R<2>que esvecinala R<1>para formar un alquileno C<3-6>opcionalmente sustituido;

[0167] cada uno de R<3>y R<4>es independientemente alquilo C<1-6>opcionalmente sustituido o halógeno;

[0168] R<5>es H o -N(R<7>)<2>;

[0169] R<6>es -C(O)NH(R<8>), -C(O)R<7A>, o -SO<2>R<7A>;

[0170] cada R<7>es independientemente hidrógeno, alquilo C<1-6>opcionalmente sustituido, aril C<6-10>opcionalmente sustituidoalquilo C<1-6>, arilo C<6-10>opcionalmente sustituido, heteroarilo C<1-9>opcionalmente sustituido, heteroaril C<1-9>opcionalmente sustituido-alquilo C<1-6>, o -SO<2>R<7A>; o dos grupos R<7>, junto con el átomo al que están ambos unidos, se combinan para formar un heterociclilo C<2-9>opcionalmente sustituido;

[0171] cada R<7A>es independientemente alquilo C<1-6>opcionalmente sustituido, cicloalquilo C<3-8>opcionalmente sustituido, o arilo C<6-10>opcionalmente sustituido;

[0172] cada R<7B>es independientemente hidroxilo, alquilo C<1-6>opcionalmente sustituido, arilo C<6-10>opcionalmente sustituido, heterociclilo C<2-9>opcionalmente sustituido, heteroarilo C<1-9>opcionalmente sustituido, -N(R<7>)<2>, -C(O)N(R<8>)<2>, -SO<2>N(R<8>)<2>, -SO<2>R<7A>, o alcoxilo opcionalmente sustituido;

[0173] cada R<8>es independientemente hidrógeno, alquilo C<1-6>opcionalmente sustituido, alcoxialquilo C<2-6>opcionalmente sustituido, aril C<6-10>opcionalmente sustituido-alquilo C<1-6>, arilo C<6-10>opcionalmente sustituido, cicloalquilo C<3-8>opcionalmente sustituido, o heteroarilo C<1-9>opcionalmente sustituido; o dos R<8>, junto con el átomo al que están unidos, se combinan para formar un heterociclilo C<2-9>opcionalmente sustituido;

[0174] Q es alquileno C<1-6>opcionalmente sustituido, alquenileno C<2-6>opcionalmente sustituido, alquinileno C<2-6>opcionalmente sustituido, cicloalquileno C<3-8>opcionalmente sustituido, cicloalquenileno C<3-8>opcionalmente sustituido-arileno C<6-10>opcionalmente sustituido, heterociclileno C<2-9>opcionalmente sustituido, o heteroarileno C<1-9>opcionalmente sustituido.

[0175] Preferiblemente, el compuesto de fórmula (I) está enriquecido para el atropoisómero de fórmula (IA):

[0178]

[0180] donde todas las variables son tal como se describen en el presente documento.

[0181] El compuesto de la invención puede ser, por ejemplo, un compuesto de fórmula (II):

[0184]

[0186] donde todas las variables son tal como se describen en el presente documento.

[0187] Preferiblemente, el compuesto de fórmula (II) está enriquecido para el atropoisómero de fórmula (IIA):

[0190]

[0192] donde todas las variables son tal como se describen en el presente documento.

[0193] El compuesto de la invención puede ser, por ejemplo, un compuesto de fórmula (III):

[0194]

[0196] donde R<2A>es hidrógeno, alquilo C<1-6>opcionalmente sustituido, alquenilo C<2-6>opcionalmente sustituido, alquinilo C<2-6>opcionalmente sustituido, cicloalquilo C<3-8>opcionalmente sustituido, cicloalquenilo C<3-8>opcionalmente sustituido, heterociclilo C<2-9>opcionalmente sustituido, heterociclil C<2-9>opcionalmente sustituido-alquilo C<1-6>, arilo C<6-10>opcionalmente sustituido, heteroarilo C<1-9>opcionalmente sustituido, heteroaril C<1-9>opcionalmente sustituido-alquilo C<1-6>, halógeno, -N(R<7>)<2>, -OR<7>, -C(O)N(R<8>)<2>, -SO<2>N(R<8>)<2>, -SO<2>R<7A>, o -Q-R<7B>.

[0197] Preferiblemente, el compuesto de fórmula (III) está enriquecido para el atropoisómero de fórmula (IIIA):

[0200]

[0202] El compuesto de la invención puede ser, por ejemplo, un compuesto enumerado en la tabla 1 a continuación o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

[0203] Tabla 1

[0205]

[0206]

[0209] 

[0212] 

[0213]

[0214]

[0215]

[0218] 

[0221] 

[0224] 

[0227] 

[0230] 

[0233] 

[0236] 

[0237]

[0238]

[0239]

[0240]

[0243] 

[0246] 

[0249] 

[0252] 

[0255] 

[0258] 

[0259]

[0260]

[0261]

[0262]

[0263]

[0265] La invención incluye (cuando es posible) diastereómeros, enantiómeros, epímeros, y atropoisómeros individuales de los compuestos divulgados en el presente documento, y mezclas de diastereómeros y/o enantiómeros de los mismos incluyendo mezclas racémicas. Aunque se prefieren las estereoquímicas específicas divulgadas en el presente documento, otros estereoisómeros, incluyendo diastereómeros, enantiómeros, epímeros, atropoisómeros, y mezclas de estos también pueden tener utilidad en el tratamiento de enfermedades mediadas por Myt1. Los diaestereoisómeros y enantiómeros inactivos o menos activos pueden ser útiles, por ejemplo, para estudios científicos relacionados con el receptor y el mecanismo de activación.

[0266] Se entiende que pueden existir ciertas moléculas en múltiples formas tautoméricas. Esta invención incluye todos los tautómeros aunque pueda indicarse un único tautómero en los ejemplos.

[0267] La invención también incluye sales farmacéuticamente aceptables de los compuestos, y composiciones farmacéuticas que comprenden los compuestos y un portador farmacéuticamente aceptable. Los compuestos son especialmente útiles, por ejemplo, en ciertas clases de cáncer y para ralentizar la progresión de cáncer una vez que se ha desarrollado en un paciente.

[0268] Los compuestos divulgados en el presente documento pueden usarse en composiciones farmacéuticas que comprenden (a) el/los compuesto(s) o sales farmacéuticamente aceptables de los mismos, y (b) un portador farmacéuticamente aceptable. Los compuestos pueden usarse en composiciones farmacéuticas que incluyen uno o más de otros principios activos farmacéuticos. Los compuestos también pueden usarse en composiciones farmacéuticas en las que el compuesto divulgado en el presente documento o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo es el único principio activo.

[0269] Isómeros ópticos - diastereómeros - isómeros geométricos - tautómeros

[0270] Los compuestos divulgados en el presente documento pueden contener, por ejemplo, uno o más centros estereogénicos y pueden aparecer como racematos, mezclas racémicas, enantiómeros únicos, diastereómeros individuales, y mezclas de diastereómeros y/o enantiómeros. La invención incluye todas de tales formas isoméricas de los compuestos divulgados en el presente documento. Se pretende que todos los estereoisómeros posibles (por ejemplo, enantiómeros y/o diastereómeros) en mezclas y como compuestos puros o parcialmente purificados estén incluidos dentro del alcance de esta invención (es decir, todas las combinaciones posibles de los centros estereogénicos como compuestos puros o en mezclas).

[0271] Algunos de los compuestos descritos en el presente documento pueden contener enlaces con rotación impedida de tal manera que pueden separarse dos rotámeros independientes, o atropoisómeros, y se halló que tienen diferente actividad biológica, lo que puede ser ventajoso. Se pretende que todos los atropoisómeros posibles estén incluidos dentro del alcance de esta invención.

[0272] Algunos de los compuestos descritos en el presente documento pueden contener dobles enlaces olefínicos, y a menos que se especifique de otro modo, se pretende que incluyan ambos isómeros geométricos E y Z.

[0273] Algunos de los compuestos descritos en el presente documento pueden existir con diferentes puntos de conexión de hidrógeno, denominados tautómeros. Un ejemplo es una cetona y su forma enólica, conocidos como tautómeros ceto-enólicos. Los tautómeros individuales así como mezclas de los mismos están abarcados por la invención. Los compuestos divulgados en el presente documento que tienen uno o más centros asimétricos pueden separarse en diaestereoisómeros, enantiómeros, y similares mediante métodos que se conocen bien en la técnica.

[0274] Alternativamente, pueden sintetizarse enantiómeros y otros compuestos con centros quirales mediante síntesis estereoespecífica usando materiales de partida y/o reactivos ópticamente puros de configuración conocida.

[0275] Metabolitos - profármacos

[0276] La invención incluye metabolitos terapéuticamente activos, donde los propios metabolitos se encuentran dentro del alcance de las reivindicaciones. La divulgación también incluye profármacos, que son compuestos que se convierten en los compuestos reivindicados cuando se administran a un paciente o después de que se hayan administrado a un paciente. Las estructuras químicas reivindicadas de esta solicitud pueden ser, en algunos casos, a su vez profármacos.

[0277] Derivados enriquecidos isotópicamente

[0278] La invención incluye moléculas que se han enriquecido isotópicamente en una o más posiciones dentro de la molécula. Por tanto, compuestos enriquecidos para deuterio se encuentran dentro del alcance de las reivindicaciones.

[0279] Métodos de preparar un compuesto de la invención

[0280] Pueden prepararse compuestos de la presente invención usando reacciones y técnicas conocidas en la técnica y las descritas en el presente documento. Un experto en la técnica apreciará que los métodos de preparar compuestos de la invención descritos en el presente documento no son limitativos y que las etapas dentro de los métodos pueden ser intercambiables sin afectar a la estructura del producto final.

[0281] Método A

[0282] Pueden prepararse compuestos de la presente invención tal como se muestra en el esquema A y se describe en el presente documento. El grupo amino de la 5-bromo-6-cloropirazin-2-amina disponible comercialmente puede convertirse en un hidroxilo que puede bencilarse con bromuro de bencilo en presencia de una base para generar el producto intermedio B clave. El bromo puede sustituirse por una amina aromática en condiciones mediadas por metal. Dependiendo de la naturaleza de la arilamina, puede requerirse que esté presente un grupo protector antes de esta reacción. El cloro puede sustituirse por malononitrilo en condiciones mediadas por metal para proporcionar el producto intermedio de aminopirrol C. El nitrilo puede hidrolizarse para dar la carboxamida tras tratamiento con un ácido con escisión concomitante del grupo bencilo. El hidroxilo resultante puede convertirse en el triflato para generar el producto intermedio de triflato D clave que puede derivatizarse de varias maneras diferentes para proporcionar compuestos de la presente invención. Por ejemplo, puede usarse un acoplamiento mediado por metal o desplazamiento de tipo S<N>Ar para instalar un grupo en R<1>dependiendo de la naturaleza del grupo R<1>, puede requerirse que esté presente un grupo protector antes de la reacción de derivatización de triflato. En el caso en que el grupo R<1>porta una insaturación, puede requerirse una reacción de hidrogenación para dar el compuesto de la presente invención. En el caso en que la arilamina y/o el grupo R<1>portan un grupo protector, puede(n) requerirse una(s) etapa(s) de desprotección usando ácido, base y/o fluoruro para dar compuestos de la presente invención. Dependiendo de la naturaleza de la arilamina, puede obtenerse una mezcla atropoisomérica. En tales casos, puede ser necesario aislar el atropoisómero de interés para dar compuestos de la presente invención. Alternativamente, puede aislarse un producto intermedio atropoisoméricamente puro y puede derivatizarse adicionalmente para dar compuestos de la presente invención. Por ejemplo, el producto intermedio D clave puede purificarse mediante cromatografía quiral para proporcionar un producto intermedio atropoisoméricamente puro que puede manipularse de manera similar al producto intermedio D descrito anteriormente para proporcionar compuestos de la presente invención.

[0283] Esquema A

[0286]

[0289] Método B

[0291] Pueden prepararse compuestos de la presente invención tal como se muestra en el esquema B y se describe en el presente documento. El cloro del producto intermedio B puede desplazarse por una amina aromática en condiciones de S<N>Ar. Dependiendo de la naturaleza de la arilamina, puede requerirse que esté presente un grupo protector antes de esta reacción. El bromo puede sustituirse entonces por malononitrilo en condiciones mediadas por metal para producir un aminopirrol. El OBn puede hidrogenolizarse para proporcionar el producto intermedio E clave que puede derivatizarse de varias maneras diferentes para dar compuestos de la presente invención tras hidrólisis de nitrilo. Por ejemplo, pueden usarse condiciones de Mitsunobu o alquilación para instalar un grupo en R<2>. Alternativamente, el producto intermedio E puede convertirse en el producto intermedio de triflato F clave que puede derivatizarse de varias maneras diferentes para dar compuestos de la presente invención tras hidrólisis de nitrilo. Por ejemplo, puede usarse un acoplamiento mediado por metal para instalar un grupo en R<2>. Dependiendo de la naturaleza del grupo R<2>, puede requerirse que esté presente un grupo protector antes de la reacción de derivatización de hidroxilo o triflato. En el caso en que el grupo R<2>porta una insaturación, puede requerirse una reacción de hidrogenación para dar el compuesto de la presente invención. En el caso en que la arilamina y/o el grupo R<2>portan un grupo protector, puede(n) requerirse una(s) etapa(s) de desprotección usando ácido, base y/o fluoruro para dar compuestos de la presente invención. Dependiendo de la naturaleza de la arilamina, puede obtenerse una mezcla atropoisomérica. En tales casos, puede ser necesario aislar el atropoisómero de interés para dar compuestos de la presente invención. Alternativamente, puede aislarse un producto intermedio atropoisoméricamente puro y puede derivatizarse adicionalmente para dar compuestos de la presente invención.

[0292] Esquema B

[0295]

[0298] Método C

[0300] Pueden prepararse compuestos de la presente invención tal como se muestra en el esquema C y se describe en el presente documento. El 2-cloro de la 3-bromo-2,6-dicloropiridina disponible comercialmente puede sustituirse por malononitrilo en condiciones de S<N>Ar con una base. El bromo puede sustituirse por una amina aromática en condiciones mediadas por metal para producir un aminoazaindol. Dependiendo de la naturaleza de la arilamina, puede requerirse que esté presente un grupo protector antes de esta reacción. Puede(n) eliminarse grupo(s) protector(es) antes de que el nitrilo pueda hidrolizarse para dar la carboxamida tras tratamiento con un ácido para dar lugar al producto intermedio G. El cloro restante puede derivatizarse de varias maneras diferentes para proporcionar compuestos de la presente invención. Por ejemplo, puede usarse un acoplamiento mediado por metal para instalar un grupo en R<1>dependiendo de la naturaleza del grupo R<1>, puede requerirse que esté presente un grupo protector antes de la reacción de derivatización de cloro. En el caso en que el grupo R<1>porta una insaturación, puede requerirse una reacción de hidrogenación para dar un compuesto de la presente invención. En el caso en que la arilamina y/o el grupo R<1>portan un grupo protector, puede(n) requerirse una(s) etapa(s) de desprotección usando ácido, base y/o fluoruro para dar compuestos de la presente invención. Dependiendo de la naturaleza de la arilamina, puede obtenerse una mezcla atropoisomérica. En tales casos, puede ser necesario aislar el atropoisómero de interés para dar compuestos de la presente invención. Alternativamente, puede aislarse un producto intermedio atropoisoméricamente puro y puede derivatizarse adicionalmente para dar compuestos de la presente invención.

[0302] Esquema C

[0305]

[0308] Método D

[0310] Pueden prepararse compuestos de la presente invención tal como se muestra en el esquema D y se describe en el presente documento. El halógeno en la posición 2 de una 5-nitropiridina sustituida de manera adecuada puede sustituirse por una amina aromática en condiciones de S<N>Ar o unas condiciones de acoplamiento C-N mediado por metal. Dependiendo de la naturaleza de la arilamina, puede requerirse que esté presente un grupo protector antes de esta reacción. El 3-bromo puede sustituirse por malononitrilo en condiciones mediadas por paladio para producir un aminoazaindol. El amino grupo resultante puede protegerse con un grupo protector adecuado, por ejemplo BOC. El nitro puede reducirse y el amino resultante puede convertirse en un halógeno en condiciones de Sandmeyer que dan lugar a derivados halogenados. El grupo protector de N del aminopirrol puede escindirse y el nitrilo puede hidrolizarse para dar la carboxamida, para dar lugar al producto intermedio I que puede derivatizarse de varias maneras diferentes para proporcionar compuestos de la presente invención. Por ejemplo, puede usarse un acoplamiento mediado por metal para instalar un grupo en R<1>. En el caso en que el grupo R<1>porta una insaturación, puede requerirse una reacción de hidrogenación para dar un compuesto de la presente invención. Dependiendo de la naturaleza del grupo R<1>, puede requerirse que esté presente un grupo protector antes de la reacción de derivatización de halógeno. En el caso en que la arilamina y/o el grupo R<1>portan un grupo protector, puede(n) requerirse una(s) etapa(s) de desprotección usando ácido, base y/o fluoruro para dar compuestos de la presente invención. Dependiendo de la naturaleza de la arilamina, puede obtenerse una mezcla atropoisomérica. En tales casos, puede ser necesario aislar el atropoisómero de interés para dar compuestos de la presente invención. Alternativamente, puede aislarse un producto intermedio atropoisoméricamente puro y puede derivatizarse adicionalmente para dar compuestos de la presente invención.

[0311] Es uema D

[0314]

[0316] Método E

[0317] Pueden prepararse compuestos de la presente invención tal como se muestra en el esquema E y se describe en el presente documento. Un cloro de 2,3-dicloro-pirazina disponible comercialmente puede sustituirse por malononitrilo en condiciones de S<N>Ar o mediadas por paladio. El cloro restante puede sustituirse por una amina aromática en condiciones de S<N>Ar o mediadas por paladio para producir un aminopirrol. Dependiendo de la naturaleza de la arilamina, puede requerirse que esté presente un grupo protector antes de esta reacción. La hidrólisis del nitrilo puede realizarse en condiciones ácidas o básicas para dar compuestos de la presente invención. En el caso en que el grupo arilamina porta un grupo protector, puede(n) requerirse una(s) etapa(s) de desprotección usando ácido, base y/o fluoruro para dar compuestos de la presente invención. Dependiendo de la naturaleza de la arilamina, puede obtenerse una mezcla atropoisomérica. En tales casos, puede ser necesario aislar el atropoisómero de interés para dar compuestos de la presente invención. Alternativamente, puede aislarse un producto intermedio atropoisoméricamente puro y puede derivatizarse adicionalmente para dar compuestos de la presente invención.

[0318] Esquema E

[0321]

[0323] Método F

[0324] Pueden prepararse compuestos de la presente invención tal como se muestra en el esquema F y se describe en el presente documento. Un cloro de 2,3-dicloropirazina disponible comercialmente puede sustituirse por malononitrilo en condiciones de S<N>Ar o mediadas por paladio. El otro cloro puede sustituirse por una amina aromática en condiciones de S<N>Ar o mediadas por paladio para producir un aminopirrol. Dependiendo de la naturaleza de la arilamina, puede requerirse que esté presente un grupo protector antes de esta reacción. El anillo de pirazina puede bromarse usando un reactivo de bromación adecuado tal como NBS. La hidrólisis del nitrilo puede realizarse en condiciones ácidas o básicas y grupo protector puede escindirse para dar el producto intermedio H clave que puede derivatizarse de varias maneras diferentes para dar compuestos de la presente invención. Por ejemplo, puede usarse un acoplamiento mediado por metal para instalar un grupo en R<2>. Dependiendo de la naturaleza del grupo R<2>, puede requerirse que esté presente un grupo protector antes de la reacción de derivatización de bromo. En el caso en que el grupo R<2>porta una insaturación, puede requerirse una reacción de hidrogenación para dar el compuesto de la presente invención. En el caso en que el grupo arilamina y/o el grupo R<2>portan un grupo protector, puede(n) requerirse una(s) etapa(s) de desprotección usando ácido, base y/o fluoruro para dar compuestos de la presente invención. Dependiendo de la naturaleza de la arilamina, puede obtenerse una mezcla atropoisomérica. En tales casos, puede ser necesario aislar el atropoisómero de interés para dar compuestos de la presente invención. Alternativamente, puede aislarse un producto intermedio atropoisoméricamente puro y puede derivatizarse adicionalmente para dar compuestos de la presente invención.

[0325] Esquema F

[0328]

[0331] Método G

[0332] Pueden prepararse compuestos de la presente invención tal como se muestra en el esquema G y se describe en el presente documento. El cloro de 2-cloro-3-bromopiridinas disponibles comercialmente puede sustituirse por malononitrilo en condiciones de S<N>Ar. El bromo puede sustituirse por una amina aromática en condiciones de S<N>Ar o mediadas por paladio para producir un aminopirrol. Dependiendo de la naturaleza de la arilamina, puede requerirse que esté presente un grupo protector antes de esta reacción. La hidrólisis del nitrilo puede realizarse en condiciones ácidas o básicas para dar compuestos de la presente invención. Para un grupo arilamina que porta un grupo protector, puede(n) requerirse una(s) etapa(s) de desprotección usando ácido, base y/o fluoruro para dar compuestos de la presente invención. Dependiendo de la naturaleza de la arilamina, puede obtenerse una mezcla atropoisomérica. En tales casos, puede ser necesario aislar el atropoisómero de interés para dar compuestos de la presente invención. Alternativamente, puede aislarse un producto intermedio atropoisoméricamente puro y puede derivatizarse adicionalmente para dar compuestos de la presente invención.

[0333] Esquema G

[0336]

[0338] Método H

[0339] Pueden prepararse compuestos de la presente invención tal como se muestra en el esquema H y se describe en el presente documento. El producto intermedio C clave puede bromarse usando un reactivo de bromación adecuado tal como NBS. El nitrilo puede hidrolizarse para dar la carboxamida tras tratamiento con un ácido con escisión concomitante del grupo bencilo. El hidroxilo resultante puede convertirse en el triflato. El bromo y el triflato pueden derivatizarse secuencialmente con diferentes grupos o, alternativamente el bromo y el triflato pueden derivatizarse de manera simultánea con los mismos grupos. El bromo y el triflato pueden derivatizarse de varias maneras diferentes para dar compuestos de la presente invención. Por ejemplo, pueden usarse acoplamientos mediados por metal para instalar un grupo en R<1>y/o R<2>secuencialmente o de manera simultánea. Dependiendo de la naturaleza del grupo R<1>y/o R<2>, puede requerirse que esté presente un grupo protector antes de la reacción de derivatización de bromo o triflato. En el caso en que la arilamina, el grupo R<1>y/o R<2>portan un grupo protector, puede(n) requerirse una(s) etapa(s) de desprotección usando ácido, base y/o fluoruro para dar compuestos de la presente invención. Dependiendo de la naturaleza de la arilamina usada para preparar el producto intermedio C, puede obtenerse una mezcla atropoisomérica. En tales casos, puede ser necesario aislar el atropoisómero de interés para dar compuestos de la presente invención. Alternativamente, puede aislarse un producto intermedio atropoisoméricamente puro y puede derivatizarse adicionalmente para dar compuestos de la presente invención.

[0340] Esquema H

[0343]

[0345] Método I

[0346] Pueden prepararse compuestos de la presente invención tal como se muestra en el esquema I y se describe en el presente documento. El cloro de 3-bromo-2-cloro-5-(trifluorometil)piridina disponible comercialmente puede sustituirse por una amina aromática en condiciones de S<N>Ar o mediadas por paladio. Dependiendo de la naturaleza de la arilamina, puede requerirse que esté presente un grupo protector antes de esta reacción. El bromo puede sustituirse por malononitrilo en condiciones mediadas por paladio para producir un aminopirrol. La hidrólisis del nitrilo puede realizarse en condiciones ácidas o básicas para dar compuestos de la presente invención. En el caso en que el grupo arilamina porta un grupo protector, puede(n) requerirse una(s) etapa(s) de desprotección usando ácido, base y/o fluoruro para dar compuestos de la presente invención. Dependiendo de la naturaleza de la arilamina, puede obtenerse una mezcla atropoisomérica. En tales casos, puede ser necesario aislar el atropoisómero de interés para dar compuestos de la presente invención. Alternativamente, puede aislarse un producto intermedio atropoisoméricamente puro y puede derivatizarse adicionalmente para dar compuestos de la presente invención.

[0347] Esquema I

[0350]

[0352] Método J

[0353] Pueden prepararse compuestos de la presente invención tal como se muestra en el esquema J y se describe en el presente documento. El producto intermedio C clave puede halogenarse usando un reactivo de halogenación adecuado tal como NBS o NIS. El halógeno puede derivatizarse de varias maneras diferentes. Por ejemplo, puede usarse un acoplamiento mediado por metal para instalar un grupo en R<2>. El nitrilo puede hidrolizarse para dar la carboxamida tras tratamiento con un ácido con escisión concomitante del grupo bencilo. El hidroxilo resultante puede convertirse en el triflato. El triflato puede derivatizarse de varias maneras diferentes para dar compuestos de la presente invención. Por ejemplo, puede usarse un acoplamiento mediado por metal para instalar un grupo en R<1>. Dependiendo de la naturaleza del grupo R<1>y/o R<2>, puede requerirse que esté presente un grupo protector antes de la reacción de derivatización de halógeno y/o triflato. En el caso en que la arilamina, el grupo R<1>y/o R<2>portan un grupo protector, puede(n) requerirse una(s) etapa(s) de desprotección usando ácido, base y/o fluoruro para dar compuestos de la presente invención. Dependiendo de la naturaleza de la arilamina usada para preparar el producto intermedio C, puede obtenerse una mezcla atropoisomérica. En tales casos, puede ser necesario aislar el atropoisómero de interés para dar compuestos de la presente invención. Alternativamente, puede aislarse un producto intermedio atropoisoméricamente puro y puede derivatizarse adicionalmente para dar compuestos de la presente invención.

[0356]

[0358] Método K

[0359] Pueden prepararse compuestos de la presente invención tal como se muestra en el esquema K y se describe en el presente documento. El fluoro de una 3-bromo-2-fluoro-piridina puede sustituirse por una amina aromática en condiciones de S<N>Ar. Dependiendo de la naturaleza de la arilamina, puede requerirse que esté presente un grupo protector antes de esta reacción. El bromo puede sustituirse por malononitrilo en condiciones mediadas por paladio para producir un aminoazaindol. La hidrólisis del nitrilo puede realizarse en condiciones ácidas o básicas para dar compuestos de la presente invención. En el caso en que la arilamina o R<1>porta un grupo protector, puede(n) requerirse una(s) etapa(s) de desprotección usando ácido, base y/o fluoruro para dar compuestos de la presente invención. Dependiendo de la naturaleza de la arilamina, puede obtenerse una mezcla atropoisomérica. En tales casos, puede ser necesario aislar el atropoisómero de interés para dar compuestos de la presente invención. Alternativamente, puede aislarse un producto intermedio atropoisoméricamente puro y puede derivatizarse adicionalmente para dar compuestos de la presente invención.

[0360] Esquema K

[0363]

[0365] Método L

[0366] Pueden prepararse compuestos de la presente invención tal como se muestra en el esquema L y se describe en el presente documento. El triflato del producto intermedio D clave puede derivatizarse de varias maneras diferentes para dar compuestos de la presente invención. Por ejemplo, puede usarse un acoplamiento mediado por metal para instalar un grupo en R<1>. La pirazina puede bromarse usando un reactivo de bromación adecuado tal como NBS. El bromo puede derivatizarse de varias maneras diferentes para dar compuestos de la presente invención. Por ejemplo, puede usarse un acoplamiento mediado por metal para instalar un grupo en R<2>. Dependiendo de la naturaleza del grupo R<1>y/o R<2>, puede requerirse que esté presente un grupo protector antes de la reacción de derivatización de triflato y/o bromo. En el caso en que la arilamina, el grupo R<1>y/o R<2>portan un grupo protector, puede(n) requerirse una(s) etapa(s) de desprotección usando ácido, base y/o fluoruro para dar compuestos de la presente invención. Dependiendo de la naturaleza de la arilamina usada para preparar el producto intermedio D, puede obtenerse una mezcla atropoisomérica. En tales casos, puede ser necesario aislar el atropoisómero de interés para dar compuestos de la presente invención. Alternativamente, puede aislarse un producto intermedio atropoisoméricamente puro y puede derivatizarse adicionalmente para dar compuestos de la presente invención.

[0367] Es uema L

[0370]

[0372] Método M

[0373] Pueden prepararse compuestos de la presente invención tal como se muestra en el esquema M y se describe en el presente documento. El nitrilo del producto intermedio C clave puede dar lugar a una cetona tras tratamiento con un reactivo de Grignard. El grupo bencilo puede escindirse en condiciones ácidas. El hidroxilo resultante puede convertirse en el triflato para generar el triflato que puede derivatizarse de varias maneras diferentes para proporcionar compuestos de la presente invención. Por ejemplo, puede usarse un acoplamiento mediado por metal para instalar un grupo en R<1>. Dependiendo de la naturaleza del grupo R<1>, puede requerirse que esté presente un grupo protector antes de la reacción de derivatización de triflato. En el caso en que el grupo R<1>porta una insaturación, puede requerirse una reacción de hidrogenación para dar el compuesto de la presente invención. En el caso en que la arilamina y/o el grupo R<1>portan un grupo protector, puede(n) requerirse una(s) etapa(s) de desprotección usando ácido, base y/o fluoruro para dar compuestos de la presente invención. Dependiendo de la naturaleza de la arilamina usada para preparar el producto intermedio C, puede obtenerse una mezcla atropoisomérica. En tales casos, puede ser necesario aislar el atropoisómero de interés para dar compuestos de la presente invención. Alternativamente, puede aislarse un producto intermedio atropoisoméricamente puro y puede derivatizarse adicionalmente para dar compuestos de la presente invención.

[0374] Esquema M

[0377]

[0379] Método N

[0380] Pueden prepararse compuestos de la presente invención tal como se muestra en el esquema N y se describe en el presente documento. El amino de un aminopirrol que se describe en el presente documento puede sustituirse por un protón en condiciones de diazotación. El nitrilo puede hidrolizarse para dar la carboxamida en condiciones ácidas o básicas para dar el compuesto de la presente invención. En el caso en que la arilamina, el grupo R<1>y/o R<2>portan un grupo protector, puede(n) requerirse una(s) etapa(s) de desprotección usando ácido, base y/o fluoruro para dar compuestos de la presente invención. Dependiendo de la naturaleza del grupo N-arilo, puede obtenerse una mezcla atropoisomérica. En tales casos, puede ser necesario aislar el atropoisómero de interés para dar compuestos de la presente invención. Alternativamente, puede aislarse un producto intermedio atropoisoméricamente puro y puede derivatizarse adicionalmente para dar compuestos de la presente invención.

[0381] Esquema N

[0384]

[0386] Método O

[0387] Pueden prepararse compuestos de la presente invención tal como se muestra en el esquema O y se describe en el presente documento. La 2-aminopiridina puede convertirse en la 2-hidroxipiridina que puede convertirse en la 2-bromopiridina. El 2-bromo puede sustituirse por una amina aromática en condiciones mediadas por paladio. Dependiendo de la naturaleza de la arilamina, puede requerirse que esté presente un grupo protector antes de esta reacción. The 3-bromo puede sustituirse por malononitrilo en condiciones mediadas por paladio para producir un aminopirrol. La hidrólisis del nitrilo puede realizarse en condiciones ácidas o básicas para dar compuestos de la presente invención. En el caso en que el grupo arilamina porta un grupo protector, puede(n) requerirse una(s) etapa(s) de desprotección usando ácido, base y/o fluoruro para dar compuestos de la presente invención. Dependiendo de la naturaleza de la arilamina, puede obtenerse una mezcla atropoisomérica. En tales casos, puede ser necesario realizar cromatografía quiral para aislar el atropoisómero de interés para dar compuestos de la presente invención. Alternativamente, puede aislarse un producto intermedio atropoisoméricamente puro y puede derivatizarse adicionalmente para dar compuestos de la presente invención.

[0388] Esquema O

[0391]

[0393] Métodos de tratamiento

[0394] Pueden usarse compuestos de la invención para el tratamiento de una enfermedad o afección (por ejemplo, un cáncer que sobreexpresa CCNE1 o que tiene una mutación inactivante en el genFBXW7) que dependen de la actividad de Myt1 (nombre de gen PKMYT1).

[0395] La enfermedad o afección puede tener el síntoma de hiperproliferación celular. Por ejemplo, la enfermedad o afección puede ser un cáncer (por ejemplo, un cáncer que sobreexpresa CCNE1 o que tiene una mutación inactivante en el genFBXW7).

[0396] Los cánceres que tienen una alta incidencia de sobreexpresión de CCNE1 incluyen por ejemplo, cáncer de útero, cáncer de ovario, cáncer de mama, cáncer de estómago, cáncer de esófago, cáncer de pulmón, y cáncer de endometrio.

[0397] Los cánceres que tienen una deficiencia en FBXW7 incluyen, por ejemplo, cáncer de útero, cáncer colorrectal, cáncer de mama, cáncer de pulmón, y cáncer de esófago.

[0398] Un compuesto de la invención puede administrarse por una vía seleccionada del grupo que consiste en administración oral, sublingual, bucal, transdérmica, intradérmica, intramuscular, parenteral, intravenosa, intraarterial, intracraneal, subcutánea, intraorbitaria, intraventricular, intraespinal, intraperitoneal, intranasal, por inhalación, intratumoral, y tópica.

[0399] Composiciones farmacéuticas

[0400] Los compuestos usados en los métodos descritos en el presente documento se formulan preferiblemente en composiciones farmacéuticas para la administración a sujetos humanos en una forma compatible biológicamente adecuada para la administraciónin vivo. Las composiciones farmacéuticas incluyen normalmente un compuesto tal como se describe en el presente documento y un excipiente farmacéuticamente aceptable. Ciertas composiciones farmacéuticas pueden incluir uno o más agentes farmacéuticamente activos adicionales descritos en el presente documento.

[0401] Los compuestos descritos en el presente documento también pueden usarse en forma de la base libre, en forma de sales, zwitteriones, solvatos, o como profármacos, o composiciones farmacéuticas de los mismos. Todas las formas están dentro del alcance de la invención. Los compuestos, sales, zwitteriones, solvatos, profármacos, o composiciones farmacéuticas de los mismos, pueden administrarse a un paciente en una variedad de formas dependiendo de la vía de administración seleccionada, tal como entenderán los expertos en la técnica. Los compuestos usados en los métodos descritos en el presente documento pueden administrarse, por ejemplo, mediante administración oral, parenteral, bucal, sublingual, nasal, rectal, con parche, bomba, o transdérmica, y las composiciones farmacéuticas formuladas por consiguiente. La administración parenteral incluye modos de administración intravenosa, intraperitoneal, subcutánea, intramuscular, transepitelial, nasal, intrapulmonar, intratecal, rectal, y tópica. La administración parenteral puede ser mediante infusión continua a lo largo de un periodo de tiempo seleccionado.

[0402] Para su uso en humanos, un compuesto de la invención puede administrarse solo o en mezcla con un portador farmacéutico seleccionado con respecto a la vía de administración pretendida y la práctica farmacéutica convencional. Por tanto, pueden formularse composiciones farmacéuticas para su uso según la presente invención de manera convencional usando uno o más portadores fisiológicamente aceptables incluyendo excipientes y agentes auxiliares que facilitan el procesamiento de un compuesto de la invención para dar preparaciones que pueden usarse en farmacia.

[0403] Esta invención también incluye composiciones farmacéuticas que pueden contener uno o más portadores farmacéuticamente aceptables. Al producir las composiciones farmacéuticas de la invención, el principio activo se mezcla normalmente con un excipiente, diluido mediante un excipiente o encerrado dentro de tal portador en forma de, por ejemplo, una cápsula, sobre, papel, u otro envase. Cuando el excipiente sirve como diluyente, puede ser un material sólido, semisólido, o líquido (por ejemplo, solución salina normal), que actúa como vehículo, portador o medio para el principio activo. Por tanto, las composiciones pueden estar en forma de comprimidos, polvos, pastillas para chupar, sobres, sellos, elixires, suspensiones, emulsiones, disoluciones, jarabes, y cápsulas de gelatina duras y blandas. Tal como se conoce en la técnica, el tipo de diluyente puede variar dependiendo de la vía de administración pretendida. Las composiciones resultantes pueden incluir agentes adicionales, por ejemplo, conservantes.

[0404] El excipiente o portador se selecciona basándose en el modo y la vía de administración. Se describen portadores farmacéuticos adecuados, así como necesidades farmacéuticas para su uso en formulaciones farmacéuticas, s en Remington: The Science and Practice of Pharmacy, 21ª ed., Gennaro, Ed., Lippincott Williams & Wilkins (2005), un texto de referencia muy conocido en este campo, y en la USP/NF (Farmacopea de los Estados Unidos y el Formulario Nacional). Ejemplos de excipientes adecuados son lactosa, dextrosa, sacarosa, sorbitol, manitol, almidones, goma arábiga, fosfato de calcio, alginatos, goma tragacanto, gelatina, silicato de calcio, celulosa microcristalina, polivinilpirrolidona, celulosa, agua, jarabe, y metil-celulosa. Las formulaciones pueden incluir adicionalmente: agentes lubricantes, por ejemplo, talco, estearato de magnesio, y aceite mineral; agentes de mojado; agentes emulsionantes y de suspensión; agentes conservantes, por ejemplo, hidroxibenzoatos de metilo y propilo; agentes edulcorantes; y agentes aromatizantes. Otros excipientes a modo de ejemplo se describen en Handbook of Pharmaceutical Excipients, 6ª edición, Roweet al., eds., Pharmaceutical Press (2009).

[0405] Estas composiciones farmacéuticas pueden fabricarse de manera convencional, por ejemplo, mediante procesos convencionales de mezclado, disolución, granulación, elaboración de grageas, levigación, emulsionamiento, encapsulación, atrapamiento, o liofilización. Se encuentran métodos que se conocen bien en la técnica para producir formulaciones, por ejemplo, en Remington: The Science and Practice of Pharmacy, 21ª ed., Gennaro, Ed., Lippincott Williams & Wilkins (2005), y Encyclopedia of Pharmaceutical Technology, eds. J. Swarbrick y J. C. Boylan, 1988-1999, Marcel Dekker, Nueva York. Una formulación apropiada depende de la vía de administración elegida. La formulación y preparación de tales composiciones las conocen bien los expertos en la técnica de la formulación farmacéutica. Al preparar una formulación, el compuesto activo puede molerse para proporcionar el tamaño de partícula apropiado antes de combinarse con los demás componentes. Si el compuesto activo es sustancialmente insoluble, puede molerse hasta un tamaño de partícula de menos de 200 de malla. Si el compuesto activo es sustancialmente soluble en agua, el tamaño de partícula puede ajustarse mediante molienda para proporcionar una distribución sustancialmente uniforme en la formulación, por ejemplo, de aproximadamente 40 de malla.

[0406] Dosificaciones

[0407] La dosificación del compuesto usado en los métodos descritos en el presente documento, o sales farmacéuticamente aceptables o profármacos del mismo, o composiciones farmacéuticas del mismo, puede variar dependiendo de muchos factores, por ejemplo, las propiedades farmacodinámicas del compuesto; el modo de administración; la edad, salud, y el peso del receptor; la naturaleza y extensión de los síntomas; la frecuencia del tratamiento, y el tipo de tratamiento concurrente, si lo hubiera; y la tasa de aclaramiento del compuesto en el animal que va a tratarse. Un experto en la técnica puede determinar la dosificación apropiada basándose en los factores anteriores. Los compuestos usados en los métodos descritos en el presente documento pueden administrarse inicialmente en una dosificación adecuada que puede ajustarse según se requiera, dependiendo de la respuesta clínica. En general, una dosis diaria adecuada de un compuesto de la invención será aquella cantidad del compuesto que sea la menor dosis eficaz para producir un efecto terapéutico. Tal dosis eficaz dependerá generalmente de los factores descritos anteriormente.

[0408] Un compuesto de la invención puede administrarse al paciente en una única dosis o en múltiples dosis. Cuando se administran múltiples dosis, las dosis pueden estar separadas entre sí, por ejemplo, por 1-24 horas, 1-7 días, 1-4 semanas, o 1-12 meses. El compuesto puede administrarse según una pauta o el compuesto puede administrarse sin una pauta predeterminada. Un compuesto activo puede administrarse, por ejemplo, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, o 12 veces al día, cada 2, 3, 4, 5, o 6 días, 1, 2, 3, 4, 5, 6, o 7 veces a la semana, 1, 2, 3, 4, 5, o 6 veces al mes, o 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, o 12 veces al año. Ha de entenderse que, para cualquier sujeto particular, deben ajustarse regímenes de dosificación específicos a lo largo del tiempo según la necesidad individual y el criterio profesional de la persona que administra o que supervisa la administración de las composiciones.

[0409] Aunque el médico responsable decidirá, en última instancia, la cantidad y el régimen de dosificación apropiados, una cantidad eficaz de un compuesto de la invención puede ser, por ejemplo, una dosificación diaria total de, por ejemplo, entre 0,05 mg y 3000 mg de cualquiera de los compuestos descritos en el presente documento. Alternativamente, la cantidad de dosificación puede calcularse usando el peso corporal del paciente. Tales intervalos de dosis pueden incluir, por ejemplo, entre 10-1000 mg (por ejemplo, 50-800 mg). En algunas realizaciones, se administran 50, 100, 150, 200, 250, 300, 350, 400, 450, 500, 550, 600, 650, 700, 750, 800, 850, 900, 950, o 1000 mg del compuesto.

[0410] En los métodos de la invención, puede variar el periodo de tiempo durante el que se administran múltiples dosis de un compuesto de la invención a un paciente. Por ejemplo, en algunas realizaciones, se administran dosis de los compuestos de la invención a un paciente a lo largo de un periodo de tiempo que es de 1-7 días; 1-12 semanas; o 1-3 meses. En algunas realizaciones, los compuestos se administran al paciente a lo largo de un periodo de tiempo que es, por ejemplo, 4-11 meses o 1-30 años. En algunas realizaciones, los compuestos se administran a un paciente en la aparición de síntomas. En cualquiera de estos realizaciones, la cantidad de compuesto que se administra puede variar durante el periodo de tiempo de administración. Cuando un compuesto se administra diariamente, la administración puede producirse, por ejemplo, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, o 12 veces al día.

[0411] Formulaciones

[0412] Un compuesto identificado como capaz de tratar cualquiera de las afecciones descritas en el presente documento, usando cualquiera de los métodos descritos en el presente documento, puede administrarse a pacientes o animales con un diluyente, portador, o excipiente farmacéuticamente aceptable, en forma de dosificación unitaria. Los compuestos químicos para su uso en tales terapias pueden producirse y aislarse mediante cualquier técnica convencional conocidas por los expertos en el campo de la química farmacéutica. La práctica farmacéutica convencional puede emplearse para proporcionar formulaciones o composiciones adecuadas para administrar el compuesto identificado a pacientes que padecen una enfermedad o afección. La administración puede comenzar antes de que el paciente sea sintomático.

[0413] Las vías de administración de los compuestos (por ejemplo, un compuesto de la invención), o composiciones farmacéuticas de los mismos, usadas en la presente invención a modo de ejemplo incluyen administración oral, sublingual, bucal, transdérmica, intradérmica, intramuscular, parenteral, intravenosa, intraarterial, intracraneal, subcutánea, intraorbitaria, intraventricular, intraespinal, intraperitoneal, intranasal, por inhalación, y tópica. Los compuestos se administran de manera deseable con un portador farmacéuticamente aceptable. Formulaciones farmacéuticas de los compuestos descritos en el presente documento formulados para el tratamiento de los trastornos descritos en el presente documento también forman parte de la presente invención.

[0414] Formulaciones para administración oral

[0415] Las composiciones farmacéuticas contempladas por la invención incluyen aquellas formuladas para administración oral (“formas de dosificación oral”). Las formas de dosificación oral pueden estar, por ejemplo, en forma de comprimidos, cápsulas, una disolución o suspensión líquida, un polvo, o cristales líquidos o sólidos, que contienen el/los principio(s) activo(s) en una mezcla con excipientes farmacéuticamente aceptables no tóxicos. Estos excipientes pueden ser, por ejemplo, diluyentes o materiales de relleno inertes (por ejemplo, sacarosa, sorbitol, azúcar, manitol, celulosa microcristalina, almidones incluyendo almidón de patata, carbonato de calcio, cloruro de sodio, lactosa, fosfato de calcio, sulfato de calcio, o fosfato de sodio); agentes de granulación y disgregación (por ejemplo, derivados de celulosa incluyendo celulosa microcristalina, almidones incluyendo almidón de patata, croscarmelosa sódica, alginatos, o ácido algínico); agentes aglutinantes (por ejemplo, sacarosa, glucosa, sorbitol, goma arábiga, ácido algínico, alginato de sodio, gelatina, almidón, almidón pregelatinizado, celulosa microcristalina, silicato de aluminio y magnesio, carboximetilcelulosa sódica, metilcelulosa, hidroxipropil-metilcelulosa, etilcelulosa, polivinilpirrolidona, o polietilenglicol); y agentes lubricantes, deslizantes, y antiadhesivos (por ejemplo, estearato de magnesio, estearato de zinc, ácido esteárico, sílices, aceites vegetales hidrogenados, o talco). Otros excipientes farmacéuticamente aceptables pueden ser colorantes, agentes aromatizantes, plastificantes, humectantes, agentes tamponantes, y similares.

[0416] Las formulaciones para administración oral también pueden presentarse como comprimidos masticables, como cápsulas de gelatina duras donde el principio activo se mezcla con un diluyente sólido inerte (por ejemplo, almidón de patata, lactosa, celulosa microcristalina, carbonato de calcio, fosfato de calcio o caolín), o como cápsulas de gelatina blandas donde el principio activo se mezcla con agua o un medio de aceite, por ejemplo, aceite de cacahuete, parafina líquida, o aceite de oliva. Pueden prepararse polvos, granulados, y microgránulos usando los componentes mencionados anteriormente en comprimidos y cápsulas de manera convencional usando, por ejemplo, una mezcladora, un aparato de lecho fluido o un equipo de secado por pulverización.

[0417] Pueden formarse composiciones de liberación controlada para uso oral para liberar el fármaco activo mediante el control de la disolución y/o la difusión de la sustancia farmacológica activa. Cualquiera de varias estrategias pueden seguirse con el fin de obtener una liberación controlada y el perfil de concentración en plasma frente al tiempo seleccionado como objetivo. En un ejemplo, se obtiene liberación controlada mediante la selección apropiada de diversos parámetros de formulación y componentes, incluyendo, por ejemplo, diversos tipos de composiciones y recubrimientos de liberación controlada. Los ejemplos incluyen composiciones de comprimido o cápsula de una única o múltiples unidades, disoluciones en aceite, suspensiones, emulsiones, microcápsulas, microesferas, nanopartículas, parches, y liposomas. En algunas realizaciones, las composiciones incluyen recubrimientos de polímero biodegradables, sensibles al pH, y/o la temperatura.

[0418] Puede lograrse la liberación controlada por disolución o difusión mediante el recubrimiento apropiado de una formulación de comprimido, cápsula, microgránulo, o granulado de compuestos, o mediante la incorporación del compuesto en una matriz apropiada. Un recubrimiento de liberación controlada puede incluir una o más de las sustancias de recubrimiento mencionadas anteriormente y/o, por ejemplo, goma laca, cera de abejas, glicocera, cera de ricino, cera de carnauba, alcohol estearílico, monoestearato de glicerilo, diestearato de glicerilo, palmitoestearato de glicerol, etilcelulosa, resinas acrílicas, poli(ácido dl-láctico), acetato-butirato de celulosa, poli(cloruro de vinilo), poli(acetato de vinilo), vinil-pirrolidona, polietileno, polimetacrilato, metacrilato de metilo, 2-hidroximetacrilato, hidrogeles de metacrilato, 1,3-butilenglicol, metacrilato de etilenglicol, y/o polietilenglicoles. En una formulación de matriz de liberación controlada, el material de matriz también puede incluir, por ejemplo, metilcelulosa hidratada, cera de carnauba y alcohol estearílico, carbopol 934, silicona, triestearato de glicerilo, acrilato de metilo-metacrilato de metilo, poli(cloruro de vinilo), polietileno, y/o fluorocarbono halogenado.

[0419] Las formas líquidas en las que pueden incorporarse los compuestos y composiciones de la presente invención para administración por vía oral incluyen disoluciones acuosas, jarabes con un sabor adecuado, suspensiones acuosas o en aceite, y emulsiones aromatizadas con aceites comestibles, por ejemplo, aceite de semilla de algodón, aceite de sésamo, aceite de coco, o aceite de cacahuete, así como elixires y vehículos farmacéuticos similares.

[0420] Formulaciones para administración parenteral

[0421] Los compuestos descritos en el presente documento para su uso en los métodos de la invención pueden administrarse en una formulación parenteral (por ejemplo, intravenosa o intramuscular) farmacéuticamente aceptable tal como se describe en el presente documento. La formulación farmacéutica también puede administrarse por vía parenteral (intravenosa, intramuscular, subcutánea o similar) en formas de dosificación o formulaciones que contienen portadores y adyuvantes farmacéuticamente aceptables convencionales, no tóxicos. En particular, las formulaciones adecuadas para administración parenteral incluyen disoluciones para inyección estériles acuosas y no acuosas que pueden contener antioxidantes, tampones, bacteriostáticos y solutos que hacen que la formulación sea isotónica con la sangre del receptor pretendidos; y suspensiones estériles acuosas y no acuosas que pueden incluir agentes de suspensión y agentes espesantes. Por ejemplo, para preparar tal composición, los compuestos de la invención pueden disolverse o suspenderse en un vehículo líquido aceptable por vía parenteral. Entre los vehículos y disolventes aceptables que pueden emplearse se encuentran agua, agua ajustada a un pH adecuado mediante la adición de una cantidad apropiada de ácido clorhídrico, hidróxido de sodio o un tampón adecuado, 1,3-butanodiol, solución de Ringer y disolución isotónica de cloruro de sodio. La formulación acuosa también puede contener uno o más conservantes, por ejemplo, p-hidroxibenzoato de metilo, etilo, o n-propilo. Puede hallarse información adicional referente a formulaciones parenterales, por ejemplo, en la Farmacopea de los Estados Unidos-Formulario Nacional (USP-NF).

[0422] La formulación parenteral puede ser cualquiera de los cinco tipos generales de preparaciones identificados por la USP-NF como adecuados para administración parenteral:

[0423] (1) Inyección de fármaco: una preparación líquida que es una sustancia farmacológica (por ejemplo, un compuesto de la invención), o una disolución de la misma;

[0424] (2) Fármaco para inyección: la sustancia farmacológica (por ejemplo, un compuesto de la invención) como sólido seco que se combinará con el vehículo estéril apropiado para administración parenteral como inyección de fármaco;

[0425] (3) Emulsión inyectable de fármaco: una preparación líquida de la sustancia farmacológica (por ejemplo, un compuesto de la invención) que se disuelve o dispersa en un medio de emulsión adecuado;

[0426] (4) Suspensión inyectable de fármaco: una preparación líquida de la sustancia farmacológica (por ejemplo, un compuesto de la invención) en suspensión en un medio líquido adecuado; y

[0427] (5) Fármaco para suspensión inyectable: la sustancia farmacológica (por ejemplo, un compuesto de la invención) como sólido seco que se combinará con el vehículo estéril apropiado para administración parenteral como suspensión inyectable de fármaco.

[0428] Las formulaciones para administración parenteral incluyen disoluciones del compuesto preparadas en agua mezclada de manera adecuada con un surfactante, por ejemplo, hidroxipropilcelulosa. También pueden prepararse dispersiones en glicerol, polietilenglicoles líquidos, DMSO y mezclas de los mismos con o sin alcohol, y en aceites. En condiciones habituales de almacenamiento y uso, estas preparaciones pueden contener un conservante para impedir el crecimiento de microorganismos. Se describen procedimientos y componentes convencionales para la selección y preparación de formulaciones adecuadas, por ejemplo, en Remington: The Science and Practice of Pharmacy, 21ª ed., Gennaro, ed., Lippincott Williams & Wilkins (2005) y en la Farmacopea de los Estados Unidos: El Formulario Nacional (USP 36 NF31), publicado en 2013.

[0429] Las formulaciones para administración parenteral pueden contener, por ejemplo, excipientes, agua estéril, o solución salina, polialquilenglicoles, por ejemplo, polietilenglicol, aceites de origen vegetal, o naftalenos hidrogenados. pueden usarse polímero de lactida, copolímero de lactida/glicolida, o copolímeros de polioxietileno-polioxipropileno biocompatibles, biodegradables para controlar la liberación de los compuestos. Otros sistemas de administración parenteral potencialmente útiles para el compuestos incluyen partículas de copolímero de etileno-acetato de vinilo, bombas osmóticas, sistemas de infusión implantables, y liposomas. Las formulaciones para inhalación pueden contener excipientes, por ejemplo, lactosa, o pueden ser disoluciones acuosas que contienen, por ejemplo, 9-lauril éter de polioxietileno, glicocolato y desoxicolato, o pueden ser disoluciones oleosas para administración en forma de gotas nasales, o como un gel.

[0430] La formulación parenteral puede formularse para liberación inmediata o para liberación sostenida/prolongada del compuesto. Las formulaciones para liberación parenteral del compuesto a modo de ejemplo incluyen: disoluciones acuosas, polvos para reconstitución, disoluciones de codisolventes, emulsiones en aceite/agua, suspensiones, disoluciones basadas en aceite, liposomas, microesferas, y geles poliméricos.

[0431] Combinaciones

[0432] Pueden administrarse compuestos de la presente invención a un sujeto en combinación con uno o más agentes adicionales, por ejemplo:

[0433] (a) un agente citotóxico;

[0434] (b) un antimetabolito;

[0435] (c) un agente alquilante;

[0436] (d) una antraciclina;

[0437] (e) un antibiótico;

[0438] (f) un agente antimitótico;

[0439] (g) una terapia hormonal;

[0440] (h) un inhibidor de la transducción de señales;

[0441] (i) a modulador de la expresión génica;

[0442] (j) an inductor de apoptosis;

[0443] (k) an inhibidor de la angiogénesis;

[0444] (l) un agente inmunoterápico;

[0445] (m) un inhibidor de la reparación del daño de ADN;

[0446] o

[0447] una combinación de los mismos.

[0448] El agente citotóxico puede ser, por ejemplo, actinomicina D, alemtuzumab, alitretinoína, alopurinol, altretamina, amifostina, anfotericina, amsacrina, trióxido de arsénico, asparaginasa, azacitidina, azatioprina, bacilo de Calmette-Guérin (BCG), bendamustina, bexaroteno, bevacuzimab, bleomicina, bortezomib, busulfano, capecitabina, carboplatino, carfilzomib, carmustina, cetuximab, cisplatino, clorambucilo, cladribina, clofarabina, colchicina, crisantaspasa, ciclofosfamida, ciclosporina, citarabina, citocalasina B, dacarbazina, dactinomicina, darbepoetina alfa, dasatinib, daunorubicina, 1-dehidrotestosterona, denileucina, dexametasona, dexrazoxano, dihidroxi-antracina diona, disulfiram, docetaxel, doxorubicina, emetina, epirubicina, erlotinib, galato de epigalocatequina, epoetina alfa, estramustina, bromuro de etidio, etopósido, everólimus, filgrastim, finasunato, floxuridina, fludarabina, flurouracilo (5-FU), fulvestrant, ganciclovir, geldanamicina, gemcitabina, glucocorticoides, gramicidina D, acetato de histrelina, hidroxiurea, ibritumomab, idarubicina, ifosfamida, imatinib, irinotecán, interferones, interferón alfa-2a, interferón alfa-2b, ixabepilona, lactato deshidrogenasa A (LDH-A), lenalidomida, letrozol, leucovorina, levamisol, lidocaína, lomustina, mecloretamina, melfalán, 6-mercaptopurina, mesna, metotrexato, metoxsalen, metoprina, metronidazol, mitramicina, mitomicina C, mitoxantrona, nandrolona, nelarabina, nilotinib, nofetumomab, oprelvekina, oxaliplatino, paclitaxel, pemetrexed, pentostatina, palifermina, pamidronato, pegademasa, pegaspargasa, pegfilgrastim, pemetrexed disódico, plicamicina, porfímero sódico, procaína, procarbazina, propranolol, puromicina, quinacrina, radicicol, isótopos radiactivos, raltitrexed, rapamicina, rasburicasa, salinosporamida A, sargramostim, sunitinib, temozolomida, tenipósido, tetracaína, 6-tioguanina, tiotepa, topotecán, toremifeno, trastuzumab, treosulfano, tretinoína, valrubicina, vinblastina, vincristina, vindesina, vinorelbina, zoledronato, o una combinación de los mismos. Los antimetabolitos pueden ser, por ejemplo, metotrexato, 6-mercaptopurina, 6-tioguanina, citarabina, 5-fluorouracilo decarbazina, cladribina, pemetrexed, gemcitabina, capecitabina, hidroxiurea, mercaptopurina, fludarabina, pralatrexato, clofarabina, citarabina, decitabina, floxuridina, nelarabina, trimetrexato, tioguanina, pentostatina, o una combinación de los mismos.

[0449] El agente alquilante puede ser, por ejemplo, mecloretamina, tiotepa, clorambucilo, melfalán, carmustina (BSNU), lomustina (CCNU), ciclotosfamida, busulfano, dibromomanitol, estreptozotocina, mitomicina C, cis-diclorodiaminaplatino (II) (DDP) cisplatino, altretamina, ciclofosfamida, ifosfamida, hexametilmelamina, altretamina, procarbazina, dacarbazina, temozolomida, estreptozocina, carboplatino, cisplatino, oxaliplatino, uramustina, bendamustina, trabectedina, semustina, o una combinación de los mismos.

[0450] La antraciclina puede ser, por ejemplo, daunorubicina, doxorubicina, aclarubicina, aldoxorubicina, amrubicina, annamicina, carubicina, epirubicina, idarubicina, mitoxantrona, valrubicina, o una combinación de las mismas.

[0451] El antibiótico puede ser, por ejemplo, dactinomicina, bleomicina, mitramicina, antramicina (AMC), ampicilina, bacampicilina, carbenicilina, cloxacilina, dicloxacilina, flucloxacilina, mezlocilina, nafcilina, oxacilina, piperacilina, pivampicilina, pivmecilinam, ticarcilina, aztreonam, imipenem, doripenem, ertapenem, meropenem, cefalosporinas, claritromicina, diritromicina, roxitromicina, telitromicina, lincomicina, pristinamicina, quinupristina, amikacina, gentamicina, kanamicina, neomicina, netilmicina, paromomicina, tobramicina, estreptomicina, sulfametizol, sulfametoxazol, sulfisoxazol, demeclociclina, minociclina, oxitetraciclina, tetraciclina, penicilina, amoxicilina, cefalexina, eritromicina, claritromicina, azitromicina, ciprofloxacino, levofloxacino, ofloxacino, doxiciclina, clindamicina, metronidazol, tigeciclina, cloramfenicol, metronidazol, tinidazol, nitrofurantoína, vancomicina, teicoplanina, telavancina, líneazolid, cicloserina, rifamicinas, polimixina B, bacitracina, viomicina, capreomicina, quinolonas, daunorubicina, doxorubicina, 4’-desoxidoxorubicina, epirubicina, idarubicina, plicamicina, mitomicina c, mitoxantrona, o una combinación de los mismos.

[0452] El agente antimitótico puede ser, por ejemplo, vincristina, vinblastina, vinorelbina, docetaxel, estramustina, ixabepilona, paclitaxel, maitansinoide, una dolastatina, una criptoficina, o una combinación de los mismos.

[0453] El inhibidor de la transducción de señales puede ser, por ejemplo, imatinib, trastuzumab, erlotinib, sorafenib, sunitinib, temsirólimus, vemurafenib, lapatinib, bortezomib, cetuximab panitumumab, matuzumab, gefitinib, STI 571, rapamicina, flavopiridol, mesilato de imatinib, vatalanib, semaxinib, motesanib, axitinib, afatinib, bosutinib, crizotinib, cabozantinib, dasatinib, entrectinib, pazopanib, lapatinib, vandetanib, o una combinación de los mismos.

[0454] El modulador de la expresión génica puede ser, por ejemplo, un ARNip, un ARNhc, un oligonucleótido antisentido, un inhibidor de HDAC, o una combinación de los mismos. Un inhibidor de HDAC puede ser, por ejemplo, tricostatina A, trapoxina B, ácido valproico, vorinostat, belinostat, LAQ824, panobinostat, entinostat, tacedinalina, mocetinostat, givinostat, resminostat, abexinostat, quisinostat, rocilinostat, practinostat, CHR-3996, ácido butírico, ácido fenilbutírico, 4SC202, romidepsina, sirtinol, cambinol, EX-527, nicotinamida, o una combinación de los mismos. Un oligonucleotido antisentido puede ser, por ejemplo, custirsen, apatorsen, AZD9150, trabadersen, EZN-2968, LErafAON-ETU, o una combinación de los mismos. Un ARNip puede ser, por ejemplo, ALN-VSP, CALAA-01, Atu-027, SPC2996, o una combinación de los mismos.

[0455] La terapia hormonal puede ser, por ejemplo, un antagonista de hormona liberadora de hormona luteinizante (LHRH). La terapia hormonal puede ser, por ejemplo, Firmagon, leuprolina, goserelina, buserelina, flutamida, bicalutadmida, ketoconazol, aminoglutetimida, prednisona, caproato de hidroxi-progesterona, acetato de medroxi-progesterona, acetato de megestrol, dietilestil-bestrol, etinil-estradiol, tamoxifeno, propionato de testosterona, fluoximesterona, flutamida, raloxifeno, droloxifeno, yodoxifeno, 4-hidroxitamoxifeno, trioxifeno, ketoxifeno, LY117018, onapristona, citrato de toremifina, acetato de megestrol, exemestano, fadrozol, vorozol, letrozol, anastrozol, nilutamida, tripterelina, histerelina, arbiraterona, acetato de medroxiprogesterona, dietilestilbestrol, premarina, fluoximesterona, tretinoína, fenretinida, troxacitabina, o una combinación de los mismos.

[0456] Los inductores de apoptosis pueden ser, por ejemplo, un ligando de inducción de apoptosis relacionado con TNF (TRAIL) humano recombinante, camptotecina, bortezomib, etopósido, tamoxifeno, o una combinación de los mismos.

[0457] Los inhibidores de la angiogénesis pueden ser, por ejemplo, sorafenib, sunitinib, pazopanib, everólimus o una combinación de los mismos.

[0458] El agente inmunoterápico puede ser, por ejemplo, un anticuerpo monoclonal, vacuna contra el cáncer (por ejemplo, una vacuna de células dendríticas (DC)), virus oncolítico, citocina, terapia adoptiva con células T, bacilo de Calmette-Guérin (BCG), GM-CSF, talidomida, lenalidomida, pomalidomida, imiquimod, o una combinación de los mismos. El anticuerpo monoclonal puede ser, por ejemplo, anti-CTLA4, anti-PD1, anti-PD-L1, anti-LAG3, anti-KIR, o una combinación de los mismos. El anticuerpo monoclonal puede ser, por ejemplo, alemtuzumab, trastuzumab, ibritumomab tiuxetan, brentuximab vedotina, trastuzumab, ado-trastuzumab emtansina, blinatumomab, bevacizumab, cetuximab, pertuzumab, panitumumab, ramucirumab, obinutuzumab, ofatumumab, rituximab, pertuzumab, tositumomab, gemtuzumab ozogamicina, tositumomab, o una combinación de los mismos. La vacuna contra el cáncer puede ser, por ejemplo, Sipuleucel-T, BioVaxID, NeuVax, DCVax, SuVaxM, CIMAvax<®>, Provenge<®>, vacuna de complejo de chaperona hsp110, CDX-1401, MIS416, CDX-110, GVAX Pancreas, HyperAcute<™>Pancreas, GTOP-99 (MyVax<®>), o Imprime PGG<®>. El virus oncolítico puede ser, por ejemplo, talimogene laherparepvec. La citocina puede ser, por ejemplo, IL-2, IFN, o una combinación de las mismas. La terapia adoptiva con células T puede ser, por ejemplo, tisagenlecleucel, axicabtagén ciloleucel, o una combinación de los mismos.

[0459] El inhibidor de la reparación del daño de ADN puede ser, por ejemplo, un inhibidor de PARP, un inhibidor de cinasa de punto de control celular, o una combinación de los mismos. El inhibidor de PARP puede ser, por ejemplo, olaparib, rucaparib, veliparib (ABT-888), niraparib (ZL-2306), iniparib (BSI-201), talazoparib (BMN 673), 2X-121, CEP-9722, KU-0059436 (AZD2281), PF-01367338 o una combinación de los mismos. El inhibidor de cinasa de punto de control celular puede ser, por ejemplo, MK-1775 o AZD1775, AZD7762, LY2606368, PF-0477736, AZD0156, GDC-0575, ARRY-575, CCT245737, PNT-737 o una combinación de los mismos.

[0460] Ejemplos

[0461] Los siguientes ejemplos pretendían ilustrar la invención. No pretendían limitar la invención en modo alguno. Normalmente se realizaron las reacciones a temperatura ambiente (t.a.) bajo una atmósfera de nitrógeno usando disolventes secos (Sure/Seal<™>) si no se describe de otro modo en los Ejemplos a continuación. Se monitorizaron las reacciones mediante CCF o mediante inyección de una pequeña alícuota en un sistema de Waters Acquity-H UPLC<®>Class usando una columna Acquity<®>UPLC HSS C18 2,1x30 mm que se eluye con un gradiente (1,86 min) de acetonitrilo (a del 15 % al 98 %) en agua (que contienen ambos el 0,1 % de ácido fórmico). Se realizaron purificaciones mediante HPLC preparativa en un sistema Teledyne Isco CombiFlash®EZ Prepusando o bien una columna Phenomenex Gemini<®>5 μm NX-C18 110Å 150 x 21,2 mm a un flujo de 40 ml/min a lo largo de 12 min (<100 mg o múltiples inyecciones de <100 mg) o columna HP C18RediSep®Rfgold (>100 mg) que se eluye con un gradiente apropiado de acetonitrilo en agua (que contienen ambos el 0,1 % de ácido fórmico) a menos que se especifique de otro modo. Se seleccionó el gradiente basándose en el tiempo de retención observado mediante la monitorización de la reacción en el sistema de Waters Acquity-H UPLC<®>Class (véase anteriormente). Se combinaron las fracciones que contenían los compuestos deseados y finalmente se liofilizaron. Se realizaron purificaciones mediante cromatografía en gel de sílice en un sistema de Teledyne Isco Combi Flash<®>Rf

usando columnas de gel de síliceRediSep®Rfde tamaños apropiados. Se evaluó la pureza de los compuestos finales mediante la inyección de una pequeña alícuota en un sistema de Waters Acquity-H UPLC<®>Class usando una columna Acquity<®>UPLC BEH C182,1x50 mm que se eluye con un gradiente (7 min) de acetonitrilo (a del 2 % al 98 %) en agua (que contienen ambos el 0,1 % de ácido fórmico).

[0462] Abreviaturas

[0463] Se usan en el presente documento abreviaturas y términos que se usan frecuentemente en los campos de la química orgánica, química farmacéutica, farmacología, y medicina y se conocen bien por los profesionales en estos campos. Se proporcionan a continuación abreviaturas y definiciones representativas:

[0464] Ac es acetilo [CH<3>C(O)-];

[0465] ACN es acetonitrilo;

[0466] Ac<2>O es anhídrido acético;

[0467] AcOH es ácido acético;

[0468] Ar es arilo;

[0469] BOC esterc-butiloxicarbonilo;

[0470] n-BuLi es n-butil-litio;

[0471] compt es compuesto;

[0472] conc. es concentrado;

[0473] DCM es diclorometano;

[0474] DIPEA es diisopropiletil-amina;

[0475] DMAP es 4-(dimetilamino)piridina;

[0476] DME es dimetoxietano;

[0477] DMF es N,N-dimetilformamida;

[0478] DMSO es dimetilsulfóxido;

[0479] EtOAc es acetato de etilo;

[0480] EtOH es etanol;

[0481] h es hora;

[0482] HATU es hexafluorofosfato de 3-óxido de 1-[bis(dimetilamino)metilen]-1H-1,2,3-triazolo[4,5-b]piridinio; HCl es ácido clorhídrico;

[0483] Hex es hexanos;

[0484] HPLC es cromatografía de líquidos de alta resolución;

[0485] IPA es isopropanol;

[0486] CL-EM es HPLC con detección espectral de masas;

[0487] LiHMDS es hexametildisilazano de litio;

[0488] M es molar; mmol es milimol;

[0489] Me es metilo;

[0490] MeCN es acetonitrilo;

[0491] MeMgBr es bromuro de metilmagnesio;

[0492] MeMgCl es cloruro de metilmagnesio;

[0493] MeOH es metanol;

[0494] MOM es metoximetilo;

[0495] min es minuto;

[0496] N es normal;

[0497] NBS es N-bromosuccinimida;

[0498] NCS es N-clorosuccinimida;

[0499] NIS es N-yodosuccinimida;

[0500] NMP es N-metil-pirrolidinona;

[0501] RMN es espectroscopía de resonancia magnética nuclear;

[0502] PdCl<2>(dppf) es [1,1-bis(difenilfosfino)ferroceno]dicloropaladio(II);

[0503] PdCl<2>(dppf).CH<2>Cl<2>es [1,1’-bis(difenilfosfino)ferroceno]dicloropaladio(II), complejo con diclorometano;

[0504] Pd<2>(dba)<3>es tris(dibencilidenacetona)dipaladio(0);

[0505] Pd-PEPPSI<™>-SIPr es dicloruro de (1,3-bis(2,6-diisopropilfenil)imidazoliden)(3-cloropiridil)paladio(II);

[0506] Ph es fenilo;

[0507] PIV-Cl es cloruro de pivaloílo, cloruro de trimetilacetilo;

[0508] alcohol de reactivo es una mezcla del 90 % de etanol, el 5 % de isopropanol y el 5 % de metanol;

[0509] t.a. es temperatura ambiente;

[0510] sat. es saturado;

[0511] tBu esterc-butilo;

[0512] Tf es trifluorometanosulfonato;

[0513] TFA es ácido trifluoroacético;

[0514] THF es tetrahidrofurano;

[0515] TMS es trimetilsililo;

[0516] Ts es p-toluenosulfonilo;

[0517] Xantphos es 4,5-bis(difenilfosfino)-9,9-dimetilxanteno.

[0518] En los ejemplos, 1 pulgada = 2,54 cm y 1 atm = 1013 mbar.

[0519] Ejemplo 1. Preparación de compuestos

[0521]

[0523] Producto intermedio B (5-benciloxi-2-bromo-3-cloro-pirazina)

[0524] Etapa 1. Se añadió en porciones nitrito de sodio (40 g, 580 mmol)a una disolución de 5-bromo-6-cloro-pirazin-2-amina (110 g, 528 mmol) en ácido sulfúrico (770 ml) a 0 ºC con agitación mecánica. Se agitó la mezcla espesa resultante a 0 ºC durante 1 h y luego se vertió lentamente en 6 l de agua fría que contenía hielo picado manteniendo la temperatura por debajo de 30 ºC. Se recogió el precipitado resultante mediante filtración, se lavó con agua luego se secó mediante coevaporación con tolueno a vacío dos veces para dar 5-bromo-6-cloro-pirazin-2-ol (104,6 g, 95 % de rendimiento) como un sólido de color beis pálido.

[0525] Etapa 2. Se añadió bromuro de bencilo (48 ml, 404 mmol) gota a gota a una suspensión de 5-bromo-6-cloro-pirazin-2-ol (80 g, 382 mmol) y carbonato de plata (216 g, 778 mmol) en tolueno (2 l). Después de agitar durante 3 h, se filtró la suspensión sobre Celite. Se evaporó el filtrado hasta sequedad para proporcionar un aceite de color amarillo que se disolvió en EtOH caliente. Después de la adición lenta de agua con sonicación, se recogió el precipitado mediante filtración para proporcionar 5-benciloxi-2-bromo-3-cloropirazina (85,2 g, 75 % de rendimiento) como un sólido de color beis.<1>H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 8,27 (s, 1H), 7,51 - 7,46 (m, 2H), 7,44 - 7,33 (m, 3H), 5,36 (s, 2H).

[0527]

[0529] Producto intermedio C (6-amino-2-benciloxi-5-(3-metoxi-2,6-dimetil-fenil)pirrolo[2,3-b]pirazin-7-carbonitrilo) Etapa 1. A una disolución del producto intermedio B (90 g, 300 mmol) en tolueno (1350 ml) se le añadieronterc-butóxido de potasio (45,0 g, 401 mmol), 3-metoxi-2,6-dimetil-anilina (48 g, 318 mmol), Pd<2>(dba)<3>(14,4 g, 15,7 mmol) y Xantphos (18,0 g, 31 mmol). Se desgasificó la mezcla a vacío y se rellenó con nitrógeno. Se agitó la mezcla resultante a 80 ºC durante 45 min y luego se concentró a vacío. Se disolvió el residuo en DCM (500 ml), se añadieron 200 g de gel de sílice, y se evaporó la suspensión hasta sequedad a vacío. Se purificó el residuo sobre un lecho de gel de sílice (1 kg de gel de sílice) eluyendo con un gradiente de EtOAc a del 0 al 15 % en hexanos para proporcionar 5-benciloxi-3-cloro-N-(3-metoxi-2,6-dimetil-fenil)pirazin-2-amina (108,4 g, 98 % de rendimiento) como un sólido de color beis pálido.

[0530] Etapa 2. A una disolución de propanodinitrilo (42,1 g, 637 mmol) en DME (1800 ml) se le añadió en porciones NaH (25,0 g, 628 mmol, dispersión al 60 % en aceite mineral). Se agitó la mezcla resultante durante 30 min, luego se añadieron 5-benciloxi-3-cloro-N-(3-metoxi-2,6-dimetil-fenil)pirazin-2-amina (115 g, 311 mmol) en DME (500 ml) y Pd(PPh<3>)<4>(17,7 g, 15,3 mmol). Se agitó la mezcla resultante a reflujo durante 2 h, y luego se concentró a vacío hasta 1 l. Se añadió lentamente agua (1 l) y se agitó la mezcla bifásica resultante durante 18 h con un agitador mecánico. Se recuperó el sólido resultante mediante filtración, se lavó con agua, y se secó a vacío. La trituración en DCM proporcionó el primer lote del material deseado como un sólido de color beis aislado mediante filtración. Se concentraron las aguas madre a vacío, y se purificó el residuo mediante cromatografía en gel de sílice (carga seca) eluyendo con un gradiente de EtOAc a del 10 al 60 % en hexanos para proporcionar un segundo lotes del material deseado. Se combinaron los dos lotes para proporcionar 6-amino-2-benciloxi-5-(3-metoxi-2,6-dimetil-fenil)pirrolo[2,3-b]pirazin-7-carbonitrilo (103,1 g, 83 % de rendimiento) como un sólido de color beis.<1>H-RMN (400 MHz, cloroformod) δ 7,60 (s, 1H), 7,53 - 7,47 (m, 2H), 7,42 - 7,34 (m, 2H), 7,33 - 7,27 (m, 1H), 7,21 = 7,15 (m, 1H), 6,94 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 5,45 (s, 2H), 4,91 (s, 2H), 3,84 (s, 3H), 1,90 (d, J = 0,7 Hz, 3H), 1,83 (s, 3H). EM: [M+1]: 400,4.

[0532]

[0534] Producto intermedio D (trifluorometanosulfonato de [6-amino-7-carbamoil-5-(3-metoxi-2,6-dimetil-fenil)pirrolo[2,3-b]pirazin-2-ilo])

[0535] Etapa 1. Se agitó una disolución del producto intermedio C (83 g, 208 mmol) en ácido sulfúrico (550 ml) con un agitador mecánico durante 18 h. Se vertió lentamente la mezcla espesa de color marrón en agua con hielo (2 l) en un baño de hielo manteniendo la temperatura interna por debajo de 20 ºC mientras se agitaba con un agitador mecánico. Precipitó un sólido de color amarillo pálido. Se neutralizó lentamente la suspensión resultante en un baño de hielo hasta pH básico con hidróxido de amonio acuoso (disolución al 28 %; 850 ml) mientras se mantenía la temperatura interna por debajo de 40 ºC. Se recogió el precipitado mediante filtración, se lavó con agua, y se secó a vacío para proporcionar 6-amino-2-hidroxi-5-(3-metoxi-2,6-dimetil-fenil)pirrolo[2,3-b]pirazin-7-carboxamida (65,1 g, 96 % de rendimiento) como un sólido de color beis pálido.

[0536] Etapa 2. A una disolución de 6-amino-2-hidroxi-5-(3-metoxi-2,6-dimetil-fenil)pirrolo[2,3-b]pirazin-7-carboxamida (30,5 g, 93,2 mmol) y Cs<2>CO<3>(34,9 g, 107 mmol) en DMF (300 ml) se le añadió 1,1,1-trifluoro-N-fenil-N-(trifluorometilsulfonil)metanosulfonamida (36,6 g, 103 mmol). Se agitó la mezcla de reacción durante 1 h, se diluyó con agua (900 ml) y se extrajo con EtOAc (3x300 ml). Se lavaron los extractos orgánicos combinados con agua, salmuera, se secaron sobre Na<2>SO<4>, se filtraron y se concentraron a vacío. Se purificó el residuo mediante cromatografía en gel de sílice eluyendo con un gradiente de EtOAc a del 20 al 100 % en hexanos para proporcionar trifluorometanosulfonato de [6-amino-7-carbamoil-5-(3-metoxi-2,6-dimetil-fenil)pirrolo[2,3-b]pirazin-2-ilo] (28 g, 65 % de rendimiento) como un sólido de color blanquecino.<1>H-RMN (400 MHz, cloroformo-d) δ 7,75 (s, 1H), 7,22 m, 2H), 6,97 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 6,37 (s, 2H), 5,49 (s, 1H), 3,86 (s, 3H), 1,91 (s, 3H), 1,84 (s, 3H). EM: [M+1]: 528,4.

[0538] La separación mediante CFS quiral del producto intermedio D (7,0 g, 15 mmol) (instrumento: CFS-EM Waters Prep 100; columna: Phenomenex Lux Cellulose-2, 30 x 250 mm, 5 μm; condiciones: isocráticas al 25 % de MeOH con el 75 % de CO<2>; velocidad de flujo: 70 ml/min) proporcionó el producto intermedio D1 y el producto intermedio D2.

[0540]

[0543] Producto intermedio D1 de la separación mediante CFS quiral del producto intermedio D. Pico 1 (tiempo de retención 4,95 min, 99,77 %): trifluorometanosulfonato deR-6-amino-7-carbamoil-5-(3-metoxi-2,6-dimetilfenil)-5H-pirrolo[2,3-b]pirazin-2-ilo (1,93 g) como un sólido blanco esponjoso.<1>H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 7,94 (s, 1H), 7,89 (s a, 2H), 7,50 (s a, 1H), 7,28 (dt, J = 8,4, 0,8 Hz, 1H), 7,14 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 6,80 (s a, 1H), 3,85 (s, 3H), 1,82 (d, J = 0,7 Hz, 3H), 1,74 (s, 3H).<19>F-RMN (376 MHz, DMSO-d6) δ - 72,83. EM: [M+1]: 460,0.

[0545]

[0548] Producto intermedio D2 de la separación mediante CFS quiral del producto intermedio D. Pico 2 (tiempo de retención 6,44 min, 99,01 %): trifluorometanosulfonato de S-6-amino-7-carbamoil-5-(3-metoxi-2,6-dimetilfenil)-5H-pirrolo[2,3-b]pirazin-2-ilo (1,95 g) como un sólido blanco esponjoso.<1>H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 7,94 (s, 1H), 7,89 (s a, 2H), 7,50 (s a, 1H), 7,28 (dt, J = 8,5, 0,7 Hz, 1H), 7,14 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 6,80 (s a, 1H), 3,85 (s, 3H), 1,82 (d, J = 0,7 Hz, 3H), 1,74 (s, 3H).<19>F-RMN (376 MHz, DMSO-d6) δ - 72,83. EM: [M+1]: 460,0.

[0550]

[0553] Producto intermedio E (6-amino-3-hidroxi-5-[5-(metoximetoxi)-2-metil-fenil]pirrolo[2,3-b]pirazin-7-carbonitrilo)

[0554] Etapa 1. A una disolución de 5-benciloxi-2-bromo-3-cloro-pirazina (5,08 g, 17,0 mmol) y 5-(metoximetoxi)-2-metilanilina (5,70 g, 34,1 mmol) en THF (40 ml) a 0 ºC se le añadió gota a gotaterc-butóxido de potasio en THF (1 M, 48 ml). Después de agitar durante 90 min a 0 ºC, se extinguió la mezcla de reacción con NH<4>Cl saturado, se diluyó con agua, y se extrajo con EtOAc (3x). Se lavaron los extractos orgánicos combinados con agua, salmuera, se secaron sobre Na<2>SO<4>, se filtraron y se concentraron a vacío. Se purificó el residuo en bruto mediante cromatografía en gel de sílice (carga seca) eluyendo con un gradiente de EtOAc a del 0 al 20 % en hexanos para proporcionar 6-benciloxi-3-bromo-N-[5-(metoximetoxi)-2-metil-fenil]pirazin-2-amina (1,80 g, 25 % de rendimiento) como un sólido de color amarillo pálido.

[0556] Etapa 2. A una suspensión de NaH (631 mg, 16,5 mmol, dispersión al 60 % en aceite mineral) en THF (28 ml) a 0 ºC, se le añadió malononitrilo (556 mg, 8,42 mmol) en THF (12 ml) gota a gota. Después de agitar a 0 ºC durante 30 min, se retiró el baño de hielo y se añadieron 6-benciloxi-3-bromo-N-[5-(metoximetoxi)-2-metil-fenil]pirazin-2-amina (1,80 g, 4,18 mmol) y Pd(PPh<3>)<4>(242 mg, 209 μmol). Se purgó la mezcla resultante con nitrógeno, y se agitó a 60 ºC durante 1 h. Se enfrió la mezcla resultante hasta t.a., se vertió lentamente en acuoso saturado NH<4>Cl y luego se extrajo con EtOAc (2x). Se lavaron los extractos orgánicos combinados con agua, salmuera, se secaron sobre Na<2>SO<4>, se filtraron y se concentraron a vacío. Se purificó el residuo mediante cromatografía en gel de sílice (carga seca) eluyendo con un gradiente de EtOAc a del 0 al 100 % en hexanos para proporcionar 6-amino-3-benciloxi-5-[5-(metoximetoxi)-2-metil-fenil]pirrolo[2,3-b]pirazin-7-carbonitrilo (1,63 g, 94 % de rendimiento) como un sólido de color marrón claro.

[0558] Etapa 3. Se purgó una mezcla de 6-amino-3-benciloxi-5-[5-(metoximetoxi)-2-metilfenil]pirrolo[2,3-b]pirazin-7-carbonitrilo (1,39 g, 3,35 mmol) y paladio sobre carbono (350 mg, 0,329 mmol, al 10 % p/p) con nitrógeno y se añadió MeOH (40 ml). Se purgó la mezcla de reacción con hidrógeno y se agitó bajo una atmósfera de hidrógeno (1 atm) durante 2 h, luego se purgó con nitrógeno, se filtró sobre un lecho de Celite usando DCM y MeOH. Se concentró el filtrado a vacío, luego se secó para proporcionar 6-amino-3-hidroxi-5-[5-(metoximetoxi)-2-metilfenil]pirrolo[2,3-b]pirazin-7-carbonitrilo (1,12 g, 100 %) como un sólido de color ocre. EM: [M+1]: 326,1.

[0560]

[0563] Producto intermedio F (trifluorometanosulfonato de [6-amino-7-ciano-5-[5-(metoximetoxi)-2-metil-fenil]pirrolo[2,3-b]pirazin-3-ilo])

[0565] Etapa 1. A una disolución de 6-amino-3-hidroxi-5-[5-(metoximetoxi)-2-metilfenil]pirrolo[2,3-b]pirazin-7-carbonitrilo (1,12 g, 3,44 mmol) y 1,1,1-trifluoro-N-fenil-N-(trifluorometilsulfonil)metanosulfonamida (1,49 g, 4,17 mmol) en THF (45 ml) se le añadió Et<3>N (1,23 g, 12,2 mmol, 1,70 ml). Se agitó la mezcla de reacción durante 18 h, luego se concentró a vacío. Se purificó el residuo mediante cromatografía en gel de sílice (carga seca) eluyendo con un gradiente de EtOAc a del 0 al 100 % en hexanos para proporcionar trifluorometanosulfonato de [6-amino-7-ciano-5-[5-(metoximetoxi)-2-metilfenil]pirrolo[2,3-b]pirazin-3-ilo] (1,72 g, 100 %) como un sólido de color amarillo oscuro.<1>H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 8,38 (s, 1H), 8,13 (s a, 2H), 7,41 (dd, J = 8,5, 0,9 Hz, 1H), 7,19 (dd, J = 8,5, 2,6 Hz, 1H), 7,11 (d, J = 2,6 Hz, 1H), 5,22 (d, J = 6,8 Hz, 1H), 5,17 (d, J = 6,8 Hz, 1H), 3,38 (s, 3H), 1,90 (s, 3H). EM: [M+1]: 458,0.

[0567]

[0570] Producto intermedio G (2-amino-5-cloro-1-(5-hidroxi-2-metil-fenil)pirrolo[3,2-b]piridin-3-carboxamida)

[0572] Etapa 1. A una disolución de propanodinitrilo (11,8 g, 179 mmol) en DME (200 ml) a 0 ºC se le añadió en porciones NaH (7,0 g, 175,00 mmol, dispersión al 60 % en aceite mineral). Luego se añadió 3-bromo-2,6-dicloro-piridina (20 g, 88,15 mmol) y se agitó la mezcla resultante a 90 ºC durante 6 h. Se enfrió la mezcla de reacción hasta t.a., se neutralizó con HCl 1 M, se diluyó con agua y se extrajo con EtOAc (3x). Se lavaron los extractos orgánicos combinados con salmuera, se filtraron y se concentraron a vacío. Se purificó el residuo mediante HPLC preparativa en múltiples lotes. Se combinaron las fracciones deseadas y se concentraron hasta sequedad para proporcionar 2-(3-bromo-6-cloro-2-piridil)propanodinitrilo (8,0 g, 35 % de rendimiento) como un sólido de color blanquecino.

[0574] Etapa 2. A una disolución de 2-(3-bromo-6-cloro-2-piridil)propanodinitrilo (5 g, 19,5 mmol) en DMF (75 ml) se le añadieron Pd<2>(dba)<3>(1,75 g, 1,91 mmol), 5-(metoximetoxi)-2-metil-anilina (3,6 g, 21,53 mmol), Cs<2>CO<3>(12,7 g) y Xantphos (1,12 g, 1,94 mmol). Se desgasificó la mezcla a vacío y se rellenó con nitrógeno 3 veces. Se agitó la mezcla resultante a 130 ºC durante 8 h, luego se enfrió hasta t.a. Se diluyó la mezcla resultante con agua y se extrajo con EtOAc (3x). Se lavaron los extractos orgánicos combinados con salmuera, se secaron sobre Na<2>SO<4>, se filtraron y se concentraron a vacío. Se purificó el residuo mediante cromatografía en gel de sílice eluyendo con un gradiente de EtOAc a del 10 al 60 % en hexanos. Se concentraron las fracciones deseadas hasta sequedad, y se trituró el residuo con DCM para proporcionar 2-amino-5-cloro-1-[5-(metoximetoxi)-2-metil-fenil]pirrolo[3,2-b]piridin-3carbonitrilo (2,2 g, 33 % de rendimiento) como un sólido de color blanquecino.

[0575] Etapa 3. A la suspensión de 2-amino-5-cloro-1-[5-(metoximetoxi)-2-metilfenil]pirrolo[3,2-b]piridin-3-carbonitrilo (2,20 g, 6,42 mmol) en DCM (5 ml) se le añadió cloruro de hidrógeno 4 M en dioxano (4 M, 5 ml). Se agitó la mezcla durante 30 min. Se eliminaron los componentes volátiles a vacío para proporcionar sal de HCl de 2-amino-5-cloro-1-(5-hidroxi-2-metilfenil)pirrolo[3,2-b]piridin-3-carbonitrilo (2,10 g, 98 % de rendimiento) como un sólido de color blanquecino.

[0576] Etapa 4. Se agitó la disolución de 2-amino-5-cloro-1-(5-hidroxi-2-metil-fenil)pirrolo[3,2-b]piridin-3-carbonitrilo (2,3 g, 7,70 mmol) en ácido sulfúrico conc. (25 ml) a t.a. durante 1 h. Luego se diluyó con hielo picado, se basificó con amoniaco acuoso conc. hasta pH 8. Se filtró la suspensión. Se lavó el precipitado con agua, se secó a vacío para proporcionar una mezcla de color blanquecino que contenía principalmente 2-amino-5-cloro-1-(5-hidroxi-2-metilfenil)pirrolo[3,2-b]piridin-3-carboxamida (2 g, 82 % de rendimiento) que se usó directamente en la siguiente etapa sin purificación adicional.<1>H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 9,77 (s, 1H), 7,42 (s, 1H), 7,30 (d,J= 8,3 Hz, 1H), 7,16 (m, 3H), 6,98 - 6,91 (m, 2H), 6,87 (d,J= 8,1 Hz, 1H), 6,71 (d,J= 2,6 Hz, 1H), 1,81 (s, 3H). EM: [M+1]: 317,1.

[0578]

[0580] Producto intermedio H (6-amino-3-bromo-5-(3-hidroxi-2,6-dimetil-fenil)pirrolo[2,3-b]pirazin-7-carboxamida) Etapa 1. Se añadió gota a gota propanodinitrilo (26,6 g, 403 mmol) con agitación vigorosa a una suspensión de dispersión de NaH al 60 % en aceite mineral (16 g, 418 mmol) en DME (600 ml). Se agitó la mezcla durante 30 min y luego se añadió 2,3-dicloropirazina (30 g, 201 mmol). Se agitó la mezcla de reacción durante 3 h y luego se calentó a reflujo durante 1 h. Se evaporó el DME a vacío y se trató el resultante residuo con HCl 1 M acuoso frío para dar un producto de color amarillo que se recuperó mediante filtración, se lavó con agua y una cantidad mínima de etanol para proporcionar 2-(3-cloropirazin-2-il)propanodinitrilo (34,2 g, 95 % de rendimiento) como un sólido de color amarillo.

[0581] Etapa 2. Se tapó un vial para microondas que contenía 2-(3-cloropirazin-2-il)propanodinitrilo (1,00 g, 5,60 mmol), 3-metoxi-2,6-dimetil-anilina (2,54 g, 16,8 mmol) y NMP (10 ml), se agitó a 150 ºC durante 1 h, luego a 200 ºC durante 8 h. Se enfrió la mezcla de reacción hasta t.a., se vertió en NaHCO<3>acuoso saturado y se diluyó con agua y EtOAc. Se filtró la mezcla a través de un lecho de Celite y se separaron las fases. Se secó la fase orgánica sobre Na<2>SO<4>, se filtró, se adsorbió sobre sílice y se purificó mediante cromatografía en gel de sílice eluyendo con un gradiente de EtOAc a del 0 al 100 % en hexanos. Se combinaron las fracciones apropiadas, se concentraron a vacío. Se purificó el residuo de nuevo mediante cromatografía en gel de sílice eluyendo con un gradiente de MeOH a del 0 al 20 % en DCM. Se combinaron las fracciones apropiadas, se concentraron y se secaron a vacío para proporcionar 6-amino-5-(3-metoxi-2,6-dimetil-fenil)pirrolo[2,3-b]pirazin-7-carbonitrilo (346 mg, 21 % de rendimiento) como un sólido de color beis.

[0582] Etapa 3. A una disolución de 6-amino-5-(3-metoxi-2,6-dimetil-fenil)pirrolo[2,3-b]pirazin-7-carbonitrilo (600 mg, 2,05 mmol) en DMF (10 ml) se le añadió NBS (436 mg, 2,45 mmol). Se agitó la mezcla durante 10 min, se diluyó con agua, se agitó durante 20 min, luego se filtró. Se lavó el sólido con agua y se secó a vacío. La purificación mediante cromatografía en gel de sílice eluyendo con un gradiente de EtOAc a del 0 al 100 % en hexanos proporcionó 6-amino-3-bromo-5-(3-metoxi-2,6-dimetilfenil)pirrolo[2,3-b]pirazin-7-carbonitrilo (350 mg, 46 % de rendimiento).

[0583] Etapa 4. A una disolución de 6-amino-3-bromo-5-(3-metoxi-2,6-dimetil-fenil)pirrolo[2,3-b]pirazin-7-carbonitrilo (350 mg, 940 μmol) en DCM (10 ml) se le añadió H<2>SO<4>(1,88 mmol, 1 ml). Se agitó la mezcla 60 min, se extinguió con hielo picado y se extrajo con DCM. se secó la fase orgánica sobre Na<2>SO<4>, se filtró y se concentró a vacío. Se purificó el residuo sobre gel de sílice usando un gradiente de MeOH a del 0 al 20 % en DCM para proporcionar 6-amino-2-bromo-5-(3-metoxi-2,6-dimetil-fenil)pirrolo[2,3-b]pirazin-7-carboxamida (300 mg, 82 % de rendimiento). Etapa 5. A una disolución de 6-amino-3-bromo-5-(3-metoxi-2,6-dimetil-fenil)pirrolo[2,3-b]pirazin-7-carboxamida (300 mg, 769 μmol) en DCM (3 ml) se le añadió disolución de BBr<3>en DCM (1 M, 2,31 ml). Se agitó la mezcla durante 2 h. Se eliminaron los componentes volátiles a vacío para proporcionar una mezcla en bruto de 6-amino-3-bromo-5-(3-hidroxi-2,6-dimetil-fenil)pirrolo[2,3-b]pirazin-7-carboxamida (263 mg, 91 % de rendimiento) que se usó en la siguiente etapa sin purificación adicional.<1>H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 8,29 (s, 1H), 7,55 (s, 2H), 7,31 (s, 1H), 7,21 (s, 1H), 7,13 - 7,06 (m, 1H), 6,96 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 1,78 (s, 3H), 1,70 (s, 3H). EM: [M+1]: 378,3.

[0584]

[0587] Producto intermedio I (2-amino-5-bromo-1-(3-metoxi-2,6-dimetil-fenil)pirrolo[2,3-b]piridin-3-carboxamida)

[0588] Etapa 1. A una disolución de 2,3-dibromo-5-nitro-piridina (20 g, 63,85 mmol) en NMP (120 ml) se le añadieron 2,6-dimetilpiridina (11,08 g, 103,4 mmol, 12 ml), 3-metoxi-2,6-dimetil-anilina (14 g, 95,23 mmol). Se calentó la mezcla a 130 ºC durante la noche. Después de enfriarse hasta t.a., se diluyó con agua gota a gota, se agitó a t.a. durante 20 min, se filtró. Se lavó el sólido con agua, se secó a vacío. Se purificó el residuo usando 2 x 330 g de gel de sílice eluyendo con un gradiente EtOAc a del 10 al 30 % en heptano para proporcionar 3-bromo-N-(3-metoxi-2,6-dimetilfenil)-5-nitro-piridin-2-amina (12 g, 53 % de rendimiento) como un sólido de color blanquecino.

[0590] Etapa 2. A una disolución de propanodinitrilo (4,4 g, 66,6 mmol, 4,19 ml) en DME (120 ml) se le añadió en porciones NaH (2,90 g, 66,9 mmol, dispersión al 60 % en aceite mineral). Se agitó la mezcla resultante durante 5 min, luego se añadieron 3-bromo-N-(3-metoxi-2,6-dimetil-fenil)-5-nitro-piridin-2-amina (11,6 g, 32,9 mmol) y PdCl<2>(dppf).CH<2>Cl<2>(1,34 g, 1,65 mmol). Se agitó la mezcla 2 h a 110 ºC. Se enfrió la mezcla hasta t.a., se diluyó con agua y se extrajo dos veces con EtOAc. Se lavaron los extractos orgánicos combinados con salmuera, se secaron sobre Na<2>SO<4>, se filtraron y se concentraron a vacío. Se purificó el residuo mediante cromatografía en gel de sílice eluyendo con un gradiente de EtOAc a del 0 al 60 % en hexanos para proporcionar 2-amino-1-(3-metoxi-2,6-dimetilfenil)-5-nitro-pirrolo[2,3-b]piridin-3-carbonitrilo (11 g, 99 % de rendimiento) como un sólido de color amarillo.

[0592] Etapa 3. A una disolución de 2-amino-1-(3-metoxi-2,6-dimetil-fenil)-5-nitro-pirrolo[2,3-b]piridin-3-carbonitrilo (1,130 g, 3,35 mmol) en THF (15 ml) se le añadieron Et<3>N (3,37 mmol, 470 ul), DMAP (45 mg, 368 μmol) y carbonato deterc-butoxicarbonilo yterc-butilo (1,47 g, 6,73 mmol). Se agitó la mezcla a 50 ºC durante 1 h, luego se enfrió hasta t.a. Se añadió etilendiamina (500 μl) y se agitó la mezcla durante 2 h. Se diluyó la mezcla resultante con agua, se extrajo con DCM (2x). Se lavaron los extractos orgánicos combinados con salmuera, se secaron sobre Na<2>SO<4>, se filtraron y se concentraron a vacío. Se purificó el residuo mediante cromatografía en gel de sílice eluyendo con un gradiente de EtOAc a del 20 al 60 % en para proporcionar N-[3-ciano-1-(3-metoxi-2,6-dimetil-fenil)-5-nitro-pirrolo[2,3-b]piridin-2-il]carbamato deterc-butilo (1,27 g, 87 % de rendimiento).

[0594] Etapa 4. A una disolución de N-[3-ciano-1-(3-metoxi-2,6-dimetil-fenil)-5-nitro-pirrolo[2,3-b]piridin-2-il]carbamato deterc-butilo (2,94 g, 6,72 mmol) en DCM (30 ml) y MeOH (30 ml) se le añadió paladio sobre carbono (al 10 % p/p, 400 mg, 376 μmol). Se agitó la mezcla durante 3 h con 1 atm de H<2>. Se filtró la suspensión sobre un lecho de Celite y se concentró a vacío para proporcionar N-[5-amino-3-ciano-1-(3-metoxi-2,6-dimetil-fenil)pirrolo[2,3-b]piridin-2-il]carbamato deterc-butilo (2,7 g, 99 % de rendimiento) como un sólido de color blanquecino.

[0596] Etapa 5. A una disolución de N-[5-amino-3-ciano-1-(3-metoxi-2,6-dimetilfenil)pirrolo[2,3-b]piridin-2-il]carbamato deterc-butilo (15,1 g, 37,1 mmol) en una mezcla de DMF (60 ml) y acetonitrilo (80 ml) se le añadió nitrito deterc-butilo (5,72 g, 55,5 mmol, 6,6 ml) seguido por bromuro de cobre (II) (10 g, 44,8 mmol). Se agitó la mezcla a 60 ºC durante 20 min, luego se diluyó con agua, se trató con amoniaco, se extrajo con EtOAc (3x). Se lavaron los extractos orgánicos combinados con salmuera, se secaron sobre Na<2>SO<4>, se filtraron. Se concentró el filtrado hasta sequedad. Se purificó el residuo usando columna de gel de sílice 3 X 330 eluyendo con un gradiente de EtOAc a del 0 al 5 % en DCM para proporcionar N-[5-bromo-3-ciano-1-(3-metoxi-2,6-dimetil-fenil)pirrolo[2,3-b]piridin-2-il]carbamato deterc-butilo (9,67 g, 55 % de rendimiento) como un sólido de color blanquecino. EM: 471,2 (M+H)<+>. También se aisló el siguiente producto secundario de la purificación: (3-ciano-1-(3-metoxi-2,6-dimetilfenil)-1H-pirrolo[2,3-b]piridin-2-il)carbamato deterc-butilo (350 mg, 2 % de rendimiento).

[0598] Etapa 6. A una disolución de N-[5-bromo-3-ciano-1-(3-metoxi-2,6-dimetilfenil)pirrolo[2,3-b]piridin-2-il]carbamato deterc-butilo (1,05 g, 2,23 mmol) en EtOH (15 ml) a 80 ºC se le añadió HCl acuoso (6 M, 6 ml). Se agitó la mezcla durante 20 min, entonces se concentró hasta sequedad, se coevaporó con MeOH, se trató con Et<3>N y luego se concentró hasta sequedad. Se purificó el residuo mediante cromatografía ultrarrápida de fase inversa en un cartucho C18 eluyendo con CH<3>CN/agua/0,1 % de ácido fórmico para proporcionar 2-amino-5-bromo-1-(3-metoxi-2,6-dimetilfenil)pirrolo[2,3-b]piridin-3-carbonitrilo (515 mg, 60 % de rendimiento) como un sólido de color blanquecino.

[0599] Etapa 7. A una disolución de 2-amino-5-bromo-1-(3-metoxi-2,6-dimetil-fenil)pirrolo[2,3-b]piridin-3-carbonitrilo (580 mg, 1,56 mmol) en una mezcla de EtOH (6 ml) y agua (2 ml) se le añadieron LiOH. H<2>O (500 mg, 11,9 mmol) y H<2>O<2>(disolución ac. al 27 % p/p, 21,02 mmol, 650 ul). Se agitó la mezcla a 60 ºC durante 20 min, se enfrió hasta t.a., se diluyó con agua y se filtró. Se lavó el sólido con agua, se secó a vacío para proporcionar 2-amino-5-bromo-1-(3-metoxi-2,6-dimetilfenil)pirrolo[2,3-b]piridin-3-carboxamida (600 mg, 99 % de rendimiento) como un sólido de color blanquecino.<1>H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 8,21 (d, J = 2,0 Hz, 1H), 7,77 (d, J = 2,0 Hz, 1H), 7,20 (dt, J = 8,4, 0,7 Hz, 1H), 7,13 (s, 2H), 7,05 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 6,83 (s, 2H), 3,73 (s, 3H), 1,75 (d, J = 0,7 Hz, 3H), 1,65 (s, 3H). EM:

[0600] [M+1]: 469,1.

[0602]

[0605] Compuesto 2 (6-amino-5-(3-hidroxi-2,6-dimetilfenil)-2-(2-(pirrolidin-2-il)etil)-5H-pirrolo[2,3-b]pirazin-7-carboxamida)

[0606] Etapa 1. A una disolución del producto intermedio D (0,25 g, 0,55 mmol) en DMF se le añadió 2-etinilpirrolidin-1-carboxilato deterc-butilo (0,213 g, 1,08 mmol) y Et<3>N (234 μl, 1,66 mmol). Se burbujeó gas nitrógeno en la mezcla de reacción durante 10 min. Luego se añadieron Cul (10 mg, 0,054 mmol) y PdCl<2>(PPh<3>)<2>(20 mg, 0,027 mmol) y se calentó la mezcla de reacción a 100 ºC durante 1,5 h. Se enfrió la mezcla de reacción hasta t.a., se diluyó con agua fría y se extrajo con EtOAc (3x). Se secaron las fases orgánicas combinadas sobre Na<2>SO<4>se filtraron y se concentraron a vacío. Se purificó el residuo mediante cromatografía en gel de sílice eluyendo con EtOAc al 60 % en hexanos para proporcionar de 2-((6-amino-7-carbamoil-5-(3-metoxi-2,6-dimetilfenil)-5H-pirrolo[2,3-b]pirazin-2-I)etinil)pirrolidin-1-carboxilato deterc-butilo (0,27 g, 83 % de rendimiento) como un sólido de color amarillo.

[0608] Etapa 2. A una disolución de 2-((6-amino-7-carbamoil-5-(3-metoxi-2,6-dimetilfenil)-5H-pirrolo[2,3-b]pirazin-2-I)etinil)pirrolidin-1-carboxilato deterc-butilo (0,13 g, 0,55 mmol) en metanol se le añadió paladio sobre carbono (al 10 % p/p, 50 % de humedad). Se agitó la suspensión bajo atmósfera de hidrógeno durante 2 h. Se filtró la mezcla de reacción sobre Celite y se lavó con metanol. Se concentró el filtrado a vacío y se purificó el residuo mediante cromatografía en gel de sílice eluyendo con EtOAc al 30 % en hexanos para proporcionar 2-(2-(6-amino-7-carbamoil-5-(3-metoxi-2,6-dimetilfenil)-5H-pirrolo[2,3-b]pirazin-2-il)etil)pirrolidin-1-carboxilato deterc-butilo (0,105 g, 49 % de rendimiento) como un sólido de color blanquecino.

[0610] Etapa 3. Para la desprotección de O-Me usando BBr<3>, el mismo procedimiento usado para el compuesto 35 proporcionó un residuo que se purificó mediante HPLC preparativa para proporcionar 6-amino-5-(3-hidroxi-2,6-dimetilfenil)-2-(2-(pirrolidin-2-il)etil)-5H-pirrolo[2,3-b]pirazin-7-carboxamida (2,7 mg, 3,5 % de rendimiento) como un sólido blanco.<1>H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 9,79 (sa, 1H), 8,40 (s, 1H), 7,65 (s, 1H), 7,47 (s, 1H), 7,35 (s, 2H), 7,27 (s, 1H), 7,07 (d,J= 8 Hz, 1H), 6,95 (d,J= 8,4 Hz, 1H), 3,39 (s, 2H), 3,06 (s, 1H), 2,99 (s, 1H), 2,80 (s, 2H), 2,02 (s, 3H), 1,83 (s, 1H), 1,76 (s, 3H), 1,68 (s, 3H), 1,46 (s, 1H). EM: [M+1]: 395,5.

[0612]

[0615] Compuesto 6 (2-amino-5-(ciclopenten-1-il)-1-(5-hidroxi-2-metil-fenil)pirrolo[3,2-b]piridin-3-carboxamida)

[0617] A una disolución del producto intermedio G (33 mg, 104 μmol) en dioxano (1,5 ml) se le añadieron 2-(ciclopenten-1-il)-4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolano (40 mg, 206 μmol), PdCl<2>(dppf).CH<2>Cl<2>(8 mg, 10 μmol) y Na<2>CO<3>acuoso (2 M, 200 μl). Se agitó la mezcla a 100 ºC durante 5 h. Se eliminaron los componentes volátiles a vacío. Se purificó el residuo mediante HPLC preparativa para proporcionar 2-amino-5-(ciclopenten-1-il)-1-(5-hidroxi-2-metilfenil)pirrolo[3,2-b]piridin-3-carboxamida (5 mg, 14 % de rendimiento) como un sólido de color blanquecino.<1>H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 9,77 (s, 1H), 8,03 (s, 1H), 7,25 (d,J= 8,3 Hz, 1H), 6,99 (d,J= 8,1 Hz, 2H), 6,91 (s, 2H), 6,88 (dd,J= 8,3, 2,6 Hz, 1H), 6,82 (d,J= 8,1 Hz, 1H), 6,66 (d,J= 2,5 Hz, 1H), 6,41 (t,J= 2,1 Hz, 1H), 2,72 (m, 2H), 2,50 (m, 2H), 1,94 (m, 2H), 1,78 (s, 3H). EM: [M+1]: 349,1.

[0618]

[0621] Compuesto 16 (2-amino-1-(5-hidroxi-2-metil-fenil)-5-(3-morfolinoprop-1-inil)pirrolo[3,2-b]piridin-3-carboxamida)

[0622] Se desgasificó una disolución de 4-prop-2-inilmorfolina (40 mg, 0,32 mmol), el producto intermedio G (50 mg, 0,16 mmol), yoduro de cobre (I) (3 mg, 16 μmol), Na<2>CO<3>(70 mg, 0,66 mmol), tetrafluoroborato de tri-terc-butilfosfonio (9 mg, 31 μmol) y PdCl<2>(3 mg, 17 μmol) en DMF (2 ml) a vacío y se rellenó con nitrógeno. Se agitó la mezcla a 100 ºC durante 5 h. Se purificó la mezcla mediante HPLC preparativa eluyendo con CH<3>CN/agua/bicarbonato de amonio 10 mM (pH 10). Se combinaron las fracciones deseadas y se liofilizaron para proporcionar 2-amino-1-(5-hidroxi-2-metilfenil)-5-(3-morfolinoprop-1-inil)pirrolo[3,2-b]piridin-3-carboxamida (22 mg, 35 % de rendimiento) como un sólido de color blanquecino.<1>H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 9,76 (s, 1H), 7,74 (d,J =3,6 Hz, 1H), 7,38 - 7,16 (m, 1H), 7,06 (s, 3H), 6,98 (d,J= 8,1 Hz, 1H), 6,88 (dd,J= 8,4, 2,6 Hz, 1H), 6,83 (d,J= 8,0 Hz, 1H), 6,66 (d,J= 2,5 Hz, 1H), 3,57 (m, 4H), 3,50 (s, 2H), 2,52 - 2,47 (m, 4H), 1,77 (s, 3H). EM: [M+1]: 406,2.

[0624]

[0627] Compuesto 18 (2-amino-1-(5-hidroxi-2-metil-fenil)-5-(3-morfolinopropil)pirrolo[3,2-b]piridin-3-carboxamida)

[0629] A una disolución de 2-amino-1-(5-hidroxi-2-metil-fenil)-5-(3-morfolinoprop-1-inil)pirrolo[3,2-b]piridin-3-carboxamida (20 mg, 49 μmol) en MeOH (2 ml) se le añadió paladio sobre carbono (al 10 % p/p, 6 mg). Se agitó la mezcla bajo una atmósfera de hidrógeno durante 30 min. Se filtró la mezcla resultante y se concentró a vacío para proporcionar 2-amino-1-(5-hidroxi-2-metil-fenil)-5-(3-morfolinopropil)pirrolo[3,2-b]piridin-3-carboxamida (17,8 mg, 88 % de rendimiento) como un sólido blanco.<1>H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 9,74 sa, 1H), 8,01 (d,J =4,0 Hz, 1H), 7,24 (dd,J= 8,3, 0,8 Hz, 1H), 6,97 (d,J= 4,0 Hz, 1H), 6,90 - 6,81 (m, 3H), 6,76 (d,J= 8,0 Hz, 1H), 6,67 (d,J= 8,1 Hz, 1H), 6,63 (d,J= 2,5 Hz, 1H), 3,51 (m, 4H), 2,77 - 2,58 (m, 2H), 2,28 (m, 6H), 1,91 - 1,78 (m, 2H), 1,77 (s, 3H). EM:

[0630] [M+1]: 410,2.

[0632]

[0635] Compuesto 23 (2-amino-1-(5-hidroxi-2-metil-fenil)-5-pirimidin-2-il-pirrolo[3,2-b]piridin-3-carboxamida)

[0637] A una disolución del producto intermedio G (50 mg, 0,158 mmol) en DMF (2 ml) se le añadieron tributil(pirimidin-2-il)estannano (73 mg, 0,199 mmol, 60 μl), Cul (3 mg, 16 μmol), LiCl (7 mg, 165 μmol) y PdCl<2>(dppf).CH<2>Cl<2>(12 mg, 16 μmol). Se desgasificó la mezcla a vacío y se rellenó con nitrógeno tres veces, luego se agitó a 110 ºC durante 18 h. Luego se purificó la mezcla mediante HPLC preparativa para proporcionar 2-amino-1-(5-hidroxi-2-metil-fenil)-5 pirimidin-2-il-pirrolo[3,2-b]piridin-3-carboxamida (8 mg, 14 % de rendimiento) como un sólido de color amarillento.<1>H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 9,79 (s, 1H), 8,90 (d,J= 4,8 Hz, 2H), 8,32 (d,J= 3,9 Hz, 1H), 8,02 (d,J= 8,3 Hz, 1H), 7,43 (t,J =4,8 Hz, 1H), 7,28 (d,J= 8,3 Hz, 1H), 7,16 (d,J= 3,8 Hz, 1H), 7,05 (s, 2H), 7,02 (d,J= 8,3 Hz, 1H), 6,90 (dd,J= 8,4, 2,5 Hz, 1H), 6,72 (d,J= 2,5 Hz, 1H), 1,82 (s, 3H). EM: [M+1]: 361,2.

[0639]

[0642] Compuesto 27 (sal de HCl de 2-amino-1-(5-hidroxi-2-metil-fenil)-5-(1,2,3,6-tetrahidropiridin-5-il)pirrolo[3,2-b]piridin-3-carboxamida)

[0644] A una disolución de 5-[2-amino-3-carbamoil-1-(5-hidroxi-2-metilfenil)pirrolo[3,2-b]piridin-5-il]-3,6-dihidro-2H-piridin-1-carboxilato deterc-butilo (75 mg, 0,162 mmol, preparado de manera similar al compuesto 6) en MeOH (1 ml) se le añadió HCl en dioxano (4 M, 0,5 ml). Se agitó la mezcla durante 2 h. Se eliminaron los componentes volátiles a vacío. Se disolvió el residuo en agua y CH<3>CN, luego se liofilizó para proporcionar sal de HCl de 2-amino-1-(5-hidroxi-2-metil-fenil)-5-(1,2,3,6-tetrahidropiridin-5-il)pirrolo[3,2-b]piridin-3-carboxamida (64 mg, 99 % de rendimiento) como un sólido de color blanquecino.<1>H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 9,76 (s, 1H), 9,20 (s, 2H), 8,01 - 7,41 (m, 1H), 7,26 (d,J= 8,4, Hz, 1H), 7,12 (d,J= 8,3 Hz, 1H), 7,02 (s, 3H), 6,92 - 6,82 (m, 2H), 6,72 - 6,61 (m, 2H), 4,11 (s, 2H), 3,44 (m 2H), 3,19 (m, 2H), 1,77 (s, 3H). EM: [M+1]: 464,2.

[0646]

[0649] Compuesto 28 (6-amino-5-(3-hidroxi-2,6-dimetil-fenil)-2-tiazol-2-il-pirrolo[2,3-b]pirazin-7-carboxamida)

[0651] Etapa 1. Se desgasificó una mezcla de tributil(tiazol-2-il)estannano (345 mg, 0,922 mmol, 290 ul), el producto intermedio D (210 mg, 0,457 mmol), Cul (11 mg, 58 μmol), LiCl (40 mg, 0,943 mmol), PdCl<2>(dppf).CH<2>Cl<2>(35 mg, 45 μmol) en DMF (3 ml) a vacío, luego se rellenó con nitrógeno. Se agitó la mezcla final a 120 ºC durante 4 h. Se eliminaron los componentes volátiles a vacío. Se purificó el residuo mediante cromatografía en gel de sílice eluyendo con un gradiente de EtOAc a del 20 al 100 % en hexanos para proporcionar a 6-amino-5-(3-metoxi-2,6-dimetil-fenil)-2-tiazol-2-il-pirrolo[2,3-b]pirazin-7-carboxamida (136 mg, 75 % de rendimiento) como un sólido de color blanquecino.

[0652] Etapa 2. Para la desprotección de OMe usando BBr<3>, se realizó el mismo procedimiento usado para el compuesto 35 con el producto intermedio apropiado (23 mg, 58 μmol) para proporcionar un residuo que se purificó mediante HPLC preparativa para proporcionar 6-amino-5-(3-hidroxi-2,6-dimetil-fenil)-2-tiazol-2-il-pirrolo[2,3-b]pirazin-7-carboxamida (10 mg, 45 % de rendimiento) como un sólido de color blanquecino.<1>H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 9,63 (s, 1H), 8,49 (s, 1H), 7,91 (d,J= 3,2 Hz, 1H), 7,78 (d,J= 3,2 Hz, 1H), 7,61 (s, 2H), 7,40 (s, 1H), 7,29 (s, 1H), 7,06 (d, ,J= 8,4 Hz, 1H), 6,92 (d,J= 8,3 Hz, 1H), 1,77 (s, 3H), 1,69 (s, 3H). EM: [M+1]: 381,2.

[0654]

[0657] Compuesto 31 (6-amino-5-(3-hidroxi-2,6-dimetil-fenil)-3-metil-2-tiazol-2-il-pirrolo[2,3-b]pirazin-7-carboxamida) Etapa 1. A una disolución de 6-amino-2-benciloxi-5-(3-metoxi-2,6-dimetilfenil)pirrolo[2,3-b]pirazin-7-carbonitrilo, producto intermedio C (4 g, 10 mmol) en DMF (40 ml) se le añadió NBS (4 g, 10 mmol). Se agitó la mezcla durante 1 h, se diluyó con agua, y se agitó finalmente durante 20 min. Se filtró el sólido resultante, se lavó con agua y se secó a vacío, luego se purificó mediante cromatografía en gel de sílice eluyendo con un gradiente de EtOAc a del 20 al 80 % en hexanos para proporcionar 6-amino-2-benciloxi-3-bromo-5-(3-metoxi-2,6-dimetil-fenil)pirrolo[2,3-b]pirazin-7-carbonitrilo (3,86 g, 81 % de rendimiento) como un sólido de color blanquecino.

[0659] Etapa 2. A una disolución de 6-amino-2-benciloxi-3-bromo-5-(3-metoxi-2,6-dimetilfenil)pirrolo[2,3-b]pirazin-7-carbonitrilo (650 mg, 1,36 mmol) en dioxano (10 ml) y agua (3 ml) se le añadieron Pd(PPh<3>)<4>(80 mg, 69 μmol), K<2>CO<3>(800 mg, 5,79 mmol). Se desgasificó la mezcla a vacío y luego se rellenó con nitrógeno tres veces. Entonces se añadió 2,4,6-trimetil-1,3,5,2,4,6-trioxatriborinano (712 mg, 2,84 mmol, 0,8 ml) y se agitó la mezcla final a 100 ºC durante 18 h. Se enfrió la mezcla hasta t.a., se diluyó con EtOAc, se lavó con agua, salmuera, se secó sobre Na<2>SO<4>, se filtró y se concentró a vacío. Se purificó el residuo mediante cromatografía en gel de sílice eluyendo con un gradiente de EtOAc a del 0 al 45 % en hexanos para proporcionar 6-amino-2-benciloxi-5-(3-metoxi-2,6-dimetilfenil)-3-metil-pirrolo[2,3-b]pirazin-7-carbonitrilo (300 mg, 53 % de rendimiento) como un sólido de color blanquecino.

[0660] Etapa 3. Para la hidrólisis de nitrilo usando ácido sulfúrico, se realizó el mismo procedimiento usado para el compuesto 164 con el producto intermedio apropiado (260 mg, 0,629 mmol) para proporcionar 6-amino-2-hidroxi-5-(3-metoxi-2,6-dimetil-fenil)-3-metil-pirrolo[2,3-b]pirazin-7-carboxamida (205 mg, 96 % de rendimiento) como un sólido de color blanquecino.

[0662] Etapa 4. A una disolución de 6-amino-2-hidroxi-5-(3-metoxi-2,6-dimetil-fenil)-3-metil-pirrolo[2,3-b]pirazin-7-carboxamida (206 mg, 0,603 mmol) y Cs<2>CO<3>(390 mg, 1,20 mmol) en DMF (2 ml) se le añadió 1,1,1-trifluoro-N-fenil-N-(trifluorometilsulfonil)metanosulfonamida (235 mg, 0,658 mmol). Se agitó la mezcla durante 1 h, luego se diluyó con agua y se extrajo con EtOAc (4x). Se lavaron los extractos orgánicos combinados con salmuera, se secaron sobre Na<2>SO<4>, se filtraron, y se concentraron a vacío. Se purificó el residuo mediante cromatografía en gel de sílice eluyendo con un gradiente de EtOAc a del 0 al 70 % en hexanos para proporcionar [6-amino-7-carbamoil-5-(3-metoxi-2,6-dimetil-fenil)-3-metil-pirrolo[2,3-b]pirazin-2-ilo] trifluorometanosulfonato de (160 mg, 56 % de rendimiento) como un sólido de color blanquecino.

[0664] Etapa 5. Se desgasificó una mezcla de tributil(tiazol-2-il)estannano (83 mg, 0,223 mmol, 70 ul), trifluorometanosulfonato de [6-amino-7-carbamoil-5-(3-metoxi-2,6-dimetil-fenil)-3-metil-pirrolo[2,3-b]pirazin-2-ilo] (50 mg, 0,106 mmol), Cul (3 mg, 16 μmol), LiCl (7 mg, 0,165 mmol), PdCl<2>(dppf).CH<2>Cl<2>(8 mg, 11 μmol) en DMF (1,5 ml) a vacío, luego se rellenó con nitrógeno. Se agitó la mezcla de reacción a 110 ºC durante 4 h, se enfrió hasta t.a. y se concentró a vacío. Se purificó el residuo mediante HPLC preparativa para proporcionar 6-amino-5-(3-metoxi-2,6-dimetil-fenil)-3-metil-2-tiazol-2-il-pirrolo[2,3-b]pirazin-7-carboxamida (22 mg, 51 % de rendimiento) como un sólido de color blanquecino.

[0666] Etapa 6. Para la desprotección de OMe usando BBr<3>, se realizó el mismo procedimiento usado para el compuesto 35 con el producto intermedio apropiado (22 mg, 53 μmol) para proporcionar un residuo que se purificó mediante HPLC preparativa para proporcionar 6-amino-5-(3-hidroxi-2,6-dimetil-fenil)-3-metil-2-tiazol-2-il-pirrolo[2,3-b]pirazin-7-carboxamida (5 mg, 24 % de rendimiento) como un sólido de color blanquecino.<1>H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 9,64 (s, 1H), 7,94 (d,J= 3,3 Hz, 1H), 7,76 (d,J= 3,3 Hz, 1H), 7,47 (s, 2H), 7,35 (s, 1H), 7,22 (s, 1H), 7,06 (d,J= 8,3 Hz, 1H), 6,92 (d,J= 8,3 Hz, 1H), 2,76 (s, 3H), 1,77 (s, 3H), 1,69 (s, 3H). EM: [M+1]: 395,2.

[0668]

[0671] Compuesto 33 (6-amino-3-bromo-5-(3-hidroxi-2,6-dimetil-fenil)-2-tiazol-2-il-pirrolo[2,3-b]pirazin-7-carboxamida)

[0672] Etapa 1. A una disolución de 6-amino-5-(3-metoxi-2,6-dimetil-fenil)-2-tiazol-2-il-pirrolo[2,3-b]pirazin-7-carboxamida (compuesto 28, 60 mg, 0,15 mmol) en DMF (1 ml) se le añadió NBS (30 mg, 0,17 mmol). Se agitó la mezcla 18 h, se diluyó con agua, se trató con Na<2>S<2>O<3>acuoso al 20 %, se extrajo con EtOAc (3x). Se lavaron los extractos orgánicos combinados con agua, salmuera, se secaron sobre Na<2>SO<4>, se filtraron y se concentraron a vacío. Se purificó el residuo mediante cromatografía en gel de sílice eluyendo con un gradiente de EtOAc a del 20 al 100 % en hexanos para proporcionar 6-amino-3-bromo-5-(3-metoxi-2,6-dimetil-fenil)-2-tiazol-2-il-pirrolo[2,3-b]pirazin-7-carboxamida (45 mg, 63 % de rendimiento) como un sólido de color blanquecino.

[0673] Etapa 2. Para la desprotección de OMe usando BBr<3>, se realizó el mismo procedimiento usado para el compuesto 35 con el producto intermedio apropiado (35 mg, 74 μmol) para proporcionar un residuo que se purificó mediante HPLC preparativa para proporcionar 6-amino-3-bromo-5-(3-hidroxi-2,6-dimetil-fenil)-2-tiazol-2-il-pirrolo[2,3-b]pirazin-7-carboxamida (10 mg, 29 % de rendimiento) como un sólido de color blanquecino.<1>H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 9,71 (s, 1H), 7,97 (d,J= 3,3 Hz, 1H), 7,88 (d,J= 3,3 Hz, 1H), 7,75 (s, 2H), 7,45 (s, 1H), 7,19 - 7,00 (m, 2H), 6,94 (d,J= 8,3 Hz, 1H), 1,79 (s, 3H), 1,71 (s, 3H). EM: [M+1]: 460,2.

[0675]

[0678] Compuesto 35 (6-amino-5-(3-hidroxi-2,6-dimetil-fenil)-2-[2-(trifluorometil)-4-piridil]pirrolo[2,3-b]pirazin-7-carboxamida)

[0679] Etapa 1. A una disolución del producto intermedio D (50 mg, 0,109 mmol) en dioxano (1 ml) se le añadieron PdCl<2>(dppf).CH<2>Cl<2>(8 mg, 10 μmol), ácido [2-(trifluorometil)-4-piridil]borónico (40 mg, 0,209 mmol) y Na<2>CO<3>acuoso (2 M, 200 μl). Se desgasificó la mezcla a vacío y se rellenó con nitrógeno. Se agitó la mezcla de reacción a 100 ºC durante 4 h, se enfrió hasta t.a., se diluyó con agua y, luego se filtró. Se lavó el sólido con agua, se secó a vacío y se purificó finalmente mediante cromatografía en gel de sílice eluyendo con un gradiente de EtOAc a del 20 al 100 % en hexanos para proporcionar 6-amino-5-(3-metoxi-2,6-dimetil-fenil)-2-[2-(trifluorometil)-4-piridil]pirrolo[2,3-b]pirazin-7-carboxamida (36 mg, 72 % de rendimiento) como un sólido de color blanquecino.

[0681] Etapa 2. (Procedimiento general para la desprotección de OMe usando BBr<3>) A una disolución de 6-amino-5-(3-metoxi-2,6-dimetil-fenil)-2-[2-(trifluorometil)-4-piridil]pirrolo[2,3-b]pirazin-7-carboxamida (36 mg, 79 μmol) en DCM (1 ml) se le añadió BBr<3>(1 M en DCM, 230 μl). Se agitó la mezcla durante 1 h. Se eliminaron los componentes volátiles a vacío. Se disolvió el residuo en MeOH y se concentró hasta sequedad de nuevo. Luego se disolvió en MeOH, se añadió Et<3>N (100 μl) y se concentró la mezcla hasta sequedad de nuevo. Se purificó el residuo mediante HPLC preparativa para proporcionar 6-amino-5-(3-hidroxi-2,6-dimetil-fenil)-2-[2-(trifluorometil)-4-piridil]pirrolo[2,3-b]pirazin-7-carboxamida (16 mg, 46 % de rendimiento) como un sólido de color blanquecino.<1>H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 9,63 (s, 1H), 8,81 (m, 1H), 8,62 (s, 1H), 8,48 (s, 1H), 8,41 (m, 1H), 7,63 (s, 2H), 7,45 (s, 1H), 7,33 (s, 1H), 7,07 (d,J= 8,3 Hz, 1H), 6,93 (d,J= 8,3 Hz, 1H), 1,77 (s, 3H), 1,69 (s, 3H).

[0683] EM: [M+1]: 443,2.

[0685]

[0688] Compuesto 46 (6-amino-5-(3-hidroxi-2,6-dimetil-fenil)-2-[4-(metilcarbamoil)-1-piperidil]pirrolo[2,3-b]pirazin-7-carboxamida)

[0690] Etapa 1. A una disolución del producto intermedio D (50 mg, 0,109 mmol) en DMSO (1 ml) se le añadió N-metilpiperidin-4-carboxamida (80 mg, 0,563 mmol). Se agitó la mezcla a 130 ºC durante 2 h en un vial sellado, luego se enfrió hasta t.a. y se purificó mediante HPLC preparativa para proporcionar 6-amino-5-(3-metoxi-2,6-dimetil-fenil)-2-[4-(metilcarbamoil)-1-piperidil]pirrolo[2,3-b]pirazin-7-carboxamida (14 mg, 28 % de rendimiento) como un sólido de color blanquecino.

[0691] Etapa 2. Para la desprotección de OMe usando BBr<3>, se realizó el mismo procedimiento usado para el compuesto 35 con el producto intermedio apropiado (15 mg, 32 μmol) para proporcionar un residuo que se purificó mediante HPLC preparativa para proporcionar 6-amino-5-(3-hidroxi-2,6-dimetil-fenil)-2-[4-(metilcarbamoil)-1-piperidil]pirrolo[2,3-b]pirazin-7-carboxamida (10 mg, 69 % de rendimiento) como un sólido de color blanquecino.<1>H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 9,51 (s, 1H), 7,72 (d,J= 4,8 Hz, 1H), 7,35 (s, 1H), 7,27 (s, 1H), 7,14 - 6,96 (m, 4H), 6,87 (d,J= 8,2 Hz, 1H), 4,13 (d,J= 12,4 Hz, 2H), 2,85 - 2,68 (m, 2H), 2,53 (d,J= 4,6 Hz, 3H), 2,35 - 2,20 (m, 1H), 1,74 (m, 5H), 1,65 (s, 3H), 1,64 - 1,50 (m, 2H). EM: [M+1]: 438,2.

[0693]

[0696] Compuesto 97 (1-[6-amino-5-(3-hidroxi-2,6-dimetil-fenil)-2-pirazin-2-il-pirrolo[2,3-b]pirazin-7-il]etenona)

[0698] Etapa 1. A una disolución del producto intermedio C (2,5 g, 6,26 mmol) en THF (20 ml) se le añadió disolución de MeMgBr en THF (3 M, 6,50 ml) a 0 ºC. Se calentó la mezcla y se agitó 18 h. Se añadió una cantidad adicional de disolución de MeMgBr en THF (3 M, 4,00 ml) y se agitó la mezcla 5 h más. Se extinguió la mezcla resultante con NH<4>Cl acuoso sat., se diluyó con agua, se extrajo con EtOAc. Se lavó el extracto orgánico con agua y salmuera, se secó sobre Na<2>SO<4>, se filtró y se concentró a vacío. Se purificó el residuo mediante columna de gel de sílice eluyendo con un gradiente de EtOAc a del 0 al 30 % en hexanos para proporcionar 1-[6-amino-2-benciloxi-5-(3-metoxi-2,6-dimetil-fenil)pirrolo[2,3-b]pirazin-7-il]etanona (120 mg, 5 % de rendimiento).

[0700] Etapa 2. A una disolución de 1-[6-amino-2-benciloxi-5-(3-metoxi-2,6-dimetilfenil)pirrolo[2,3-b]pirazin-7-il]etanona (100 mg, 0,240 mmol) en DCM (1 ml) se le añadió TFA (500 μl). Se agitó la mezcla a 50 ºC durante 10 h. Se eliminaron los componentes volátiles a vacío. Se purificó el residuo mediante HPLC preparativa para proporcionar 1-[6-amino-2-hidroxi-5-(3-metoxi-2,6-dimetil-fenil)pirrolo[2,3-b]pirazin-7-il]etanona (43 mg, 55 % de rendimiento).

[0702] Etapa 3. A una mezcla de 1-[6-amino-2-hidroxi-5-(3-metoxi-2,6-dimetilfenil)pirrolo[2,3-b]pirazin-7-il]etanona (43 mg, 0,132 mmol) y Cs<2>CO<3>(50 mg, 0,153 mmol) en DMF (1 ml) se le añadió 1,1,1-trifluoro-N-fenil-N-(trifluorometilsulfonil)metanosulfonamida (52 mg, 0,146 mmol). Se agitó la mezcla durante 1 h. Se eliminaron los componentes volátiles a vacío. Se purificó el residuo mediante cromatografía en gel de sílice eluyendo con un gradiente de EtOAc a del 0 al 70 % en hexanos para proporcionar trifluorometanosulfonato de [7-acetil-6-amino-5-(3-metoxi-2,6-dimetil-fenil)pirrolo[2,3-b]pirazin-2-ilo] (46 mg, 76 % de rendimiento) como un sólido de color blanquecino.

[0703] Etapa 4. A una disolución de trifluorometanosulfonato de [7-acetil-6-amino-5-(3-metoxi-2,6-dimetil-fenil)pirrolo[2,3-b]pirazin-2-ilo] (46 mg, 0,100 mmol) en DMF (1 ml) se le añadieron LiCl (9 mg, 0,212 mmol), tributil(pirazin-2-il)estannano (74 mg, 0,200 mmol), y PdCl<2>(dppf).CH<2>Cl<2>(7 mg, 9,6 μmol). Se agitó la mezcla a 120 ºC durante 10 h. Se eliminaron los componentes volátiles a vacío. Se purificó el residuo mediante HPLC preparativa para proporcionar 1-[6-amino-5-(3-metoxi-2,6-dimetilfenil)-2-pirazin-2-il-pirrolo[2,3-b]pirazin-7-il]etanona (38 mg, 97 % de rendimiento) como un sólido de color blanquecino.

[0705] Etapa 5. Para la desprotección de OMe usando BBr<3>, se realizó el mismo procedimiento usado para el compuesto 35 con el producto intermedio apropiado (38 mg, 98 μmol) para proporcionar un residuo que se purificó mediante HPLC preparativa para proporcionar 1-[6-amino-5-(3-hidroxi-2,6-dimetil-fenil)-2-pirazin-2-il-pirrolo[2,3-b]pirazin-7-il]etanona (18 mg, 49 % de rendimiento) como un sólido de color blanquecino.<1>H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 9,62 (s, 1H), 9,55 (s, 1H), 8,72 (s, 1H), 8,69 - 8,62 (m, 2H), 8,13 (s, 2H), 7,07 (d,J =8,3 Hz, 1H), 6,93 (d,J= 8,3 Hz, 1H), 2,76 (s, 3H), 1,77 (s, 3H), 1,69 (s, 3H). EM: [M+1]: 375.

[0707]

[0710] Compuesto 102 (6-amino-5-(3-hidroxi-2,6-dimetil-fenil)-3-(trifluorometil)-2-vinil-pirrolo[2,3-b]pirazin-7-carboxamida) Etapa 1. A una disolución del producto intermedio C (800 mg, 2,00 mmol) en DMF (10 ml) se le añadió NIS (450 mg, 2,00 mmol). Se agitó la mezcla durante 30 min, se diluyó con agua y se agitó durante 20 min. Se recogió el precipitado resultante mediante filtración y luego se purificó mediante cromatografía en gel de sílice eluyendo con un gradiente de EtOAc a del 20 al 60 % en hexanos para proporcionar 6-amino-2-benciloxi-3-yodo-5-(3-metoxi-2,6-dimetil-fenil)pirrolo[2,3-b]pirazin-7-carbonitrilo (820 mg, 78 % de rendimiento) como un sólido de color blanquecino.

[0711] Etapa 2. A una disolución de 6-amino-2-benciloxi-3-yodo-5-(3-metoxi-2,6-dimetilfenil)pirrolo[2,3-b]pirazin-7-carbonitrilo (745 mg, 1,42 mmol) en DMF (10 ml) se le añadió (1,10-fenantrolina)(trifluorometil)cobre(I) (900 mg, 2,88 mmol). Se agitó la mezcla a 70 ºC durante 4 h. Se eliminaron los componentes volátiles a vacío. Se purificó el residuo mediante cromatografía en gel de sílice eluyendo con un gradiente de EtOAc a del 20 al 60 % en hexanos para proporcionar 6-amino-2-benciloxi-5-(3-metoxi-2,6-dimetil-fenil)-3-(trifluorometil)pirrolo[2,3-b]pirazin-7-carbonitrilo (300 mg, 45 % de rendimiento).

[0713] Etapa 3. Se agitó una disolución de 6-amino-2-benciloxi-5-(3-metoxi-2,6-dimetil-fenil)-3-(trifluorometil)pirrolo[2,3-b]pirazin-7-carbonitrilo (300 mg, 0,642 mmol) en ácido sulfúrico (1 ml) durante 5 h, se vertió en hielo picado, se neutralizó con disolución de amoniaco y se filtró el precipitado resultante. Se lavó el precipitado con agua, se secó a vacío para proporcionar 6-amino-2-hidroxi-5-(3-metoxi-2,6-dimetil-fenil)-3-(trifluorometil)pirrolo[2,3-b]pirazin-7-carboxamida (232 mg, 91 % de rendimiento) como un sólido de color amarillo.

[0715] Etapa 4. A una disolución de 6-amino-2-hidroxi-5-(3-metoxi-2,6-dimetil-fenil)-3-(trifluorometil)pirrolo[2,3-b]pirazin-7-carboxamida (232 mg, 0,587 mmol) y Cs<2>CO<3>(200 mg, 0,615 mmol) en DMF (2 ml) se le añadió 1,1,1-trifluoro-N-fenil-N-(trifluorometilsulfonil)metanosulfonamida (210 mg, 0,588 mmol). Se agitó la mezcla durante 1 h, se diluyó con agua y se agitó durante 20 min. Se filtró el precipitado resultante, se lavó con agua, se secó a vacío. La purificación adicional mediante cromatografía en gel de sílice eluyendo con un gradiente de EtOAc a del 20 al 100 % en hexanos proporcionó trifluorometanosulfonato de [6-amino-7-carbamoil-5-(3-metoxi-2,6-dimetil-fenil)-3-(trifluorometil)pirrolo[2,3-b]pirazin-2-ilo] (190 mg, 61 % de rendimiento) como un sólido de color blanquecino.

[0717] Etapa 5. A la disolución de trifluorometanosulfonato de [6-amino-7-carbamoil-5-(3-metoxi-2,6-dimetil-fenil)-3-(trifluorometil)pirrolo[2,3-b]pirazin-2-ilo] (90 mg, 0,171 mmol) en dioxano (1 ml) se le añadieron PdCl<2>(dppf).CH<2>Cl<2>(14 mg, 17 μmol), 4,4,5,5-tetrametil-2-vinil-1,3,2-dioxaborolano (30 mg, 0,195 mmol) y Na<2>CO<3>acuoso (2 M, 100 μl). Se agitó la mezcla a 120 ºC durante 18 h. Se eliminaron los componentes volátiles a vacío. Se purificó el residuo mediante HPLC preparativa para proporcionar 6-amino-5-(3-metoxi-2,6-dimetil-fenil)-3-(trifluorometil)-2-vinil-pirrolo[2,3-b]pirazin-7-carboxamida (10 mg, 14 % de rendimiento) como un sólido de color blanquecino.

[0719] Etapa 6. Para la desprotección de OMe usando BBr<3>, , se realizó el mismo procedimiento usado para el compuesto 35 con el producto intermedio apropiado (10 mg, 25 μmol) para proporcionar un residuo que se purificó mediante HPLC preparativa para proporcionar 6-amino-5-(3-hidroxi-2,6-dimetil-fenil)-3-(trifluorometil)-2-vinil-pirrolo[2,3-b]pirazin-7-carboxamida (3 mg, 31 % de rendimiento) como un sólido de color blanquecino.<1>H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 9,67 (s, 1H), 7,85 (s, 2H), 7,41 (m, 2H), 7,10 - 6,89 (m, 3H), 6,50 (m, 1H), 5,60 (m, 1H), 1,76 (s, 3H), 1,68 (s, 3H). EM: [M+1]: 392,2.

[0721]

[0724] Compuesto 110 (6-amino-2-ciclopropil-5-(3-hidroxi-2,6-dimetil-fenil)-3-(trideuteriometil)pirrolo[2,3-b]pirazin-7-carboxamida)

[0726] Etapa 1. A una suspensión de virutas de magnesio (140 mg, 5,76 mmol) en THF (10 ml) se le añadió yodo (13 mg, 52 μmol). Se agitó la mezcla durante 10 min, luego se añadió CD<3>I (5,14 mmol, 320 μl) y se agitó la mezcla durante 18 h bajo atmósfera de nitrógeno para generar una suspensión de color blanquecino. A la mezcla se le añadió ZnCl<2>(0,5 M en THF, 10,5 ml) gota a gota. Después de la adición, se agitó la mezcla durante 20 min, luego se añadieron 6-amino-2-benciloxi-3-bromo-5-(3-metoxi-2,6-dimetilfenil)pirrolo[2,3-b]pirazin-7-carbonitrilo (500 mg, 1,05 mmol) y Pd(PPh<3>)<4>(120 mg, 0,103 mmol). Se agitó la mezcla final a 70 ºC durante 6 h. Se extinguió la reacción con HCl 1 M, se diluyó con agua, y se extrajo con EtOAc (2x). Se lavaron los extractos orgánicos combinados con agua, salmuera, se secaron sobre Na<2>SO<4>, se filtraron y se concentraron a vacío. Se purificó el residuo mediante cromatografía en gel de sílice eluyendo con un gradiente de EtOAc a del 0 al 60 % en hexanos para proporcionar 6-amino-2-benciloxi-5-(3-metoxi-2,6-dimetil-fenil)-3-(trideuteriometil)pirrolo[2,3-b]pirazin-7-carbonitrilo (328 mg, 75 % de rendimiento) como un sólido de color blanquecino.

[0728] Etapa 2. Se agitó una mezcla de 6-amino-2-benciloxi-5-(3-metoxi-2,6-dimetil-fenil)-3-(trideuteriometil)pirrolo[2,3-b]pirazin-7-carbonitrilo (328 mg, 0,788 mmol) en H<2>SO<4>(2 ml) durante 4 h. Se enfrió la mezcla hasta 0 ºC, luego se neutralizó hasta pH 7 usando amoniaco acuoso concentrado. Se liofilizó la mezcla resultante, y se trituró el residuo con agua y se filtró. Se secó el sólido a vacío para proporcionar 6-amino-2-hidroxi-5-(3-metoxi-2,6-dimetil-fenil)-3-(trideuteriometil)pirrolo[2,3-b]pirazin-7-carboxamida (220 mg, 81 % de rendimiento) como un sólido de color blanquecino.

[0730] Etapa 3. A una disolución de 6-amino-2-hidroxi-5-(3-metoxi-2,6-dimetil-fenil)-3-(trideuteriometil)pirrolo[2,3-b]pirazin-7-carboxamida (232 mg, 0,674 mmol) en DMF (3 ml) se le añadieron Cs<2>CO<3>(320 mg, 0,982 mmol) y 1,1,1-trifluoro-N-fenil-N-(trifluorometilsulfonil)metanosulfonamida (360 mg, 1,01 mmol). Se agitó la mezcla durante 1 h. Se eliminaron los componentes volátiles a vacío. Se purificó el residuo mediante cromatografía en gel de sílice eluyendo con un gradiente de EtOAc a del 20 al 100 % en hexanos para proporcionar trifluorometanosulfonato de [6-amino-7-carbamoil-5-(3-metoxi-2,6-dimetil-fenil)-3-(trideuteriometil)pirrolo[2,3-b]pirazin-2-ilo] (200 mg, 62 % de rendimiento) como un sólido de color blanquecino.

[0732] Etapa 4. A la disolución de trifluorometanosulfonato de [6-amino-7-carbamoil-5-(3-metoxi-2,6-dimetil-fenil)-3-(trideuteriometil)pirrolo[2,3-b]pirazin-2-ilo] (200 mg, 0,420 μmol) en DMF (3 ml) se le añadieron cloruro de litio (36 mg, 0,849 mmol) y tributil(ciclopropil)estannano (275 mg, 0,831 mmol). Se agitó la mezcla a 120 ºC durante 10 h. Se eliminaron los componentes volátiles a vacío. Se purificó el residuo mediante HPLC preparativa para proporcionar 6-amino-2-ciclopropil-5-(3-metoxi-2,6-dimetil-fenil)-3-(trideuteriometil)pirrolo[2,3-b]pirazin-7-carboxamida (80 mg, 52 % de rendimiento) como un sólido de color blanquecino.

[0734] Etapa 5. Para la desprotección de OMe usando BBr<3>, se realizó el mismo procedimiento usado para el compuesto 35 con el producto intermedio apropiado (35 mg, 95 μmol) para proporcionar un residuo que se purificó mediante HPLC preparativa para proporcionar 6-amino-2-ciclopropil-5-(3-hidroxi-2,6-dimetil-fenil)-3-(trideuteriometil)pirrolo[2,3-b]pirazin-7-carboxamida (20 mg, 59 % de rendimiento) como un sólido de color blanquecino.<1>H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 9,49 (s, 1H), 7,24 (s, 1H), 7,14 - 6,98 (m, 4H), 6,89 (d,J= 8,2 Hz, 1H), 2,11 (m, 1H), 1,84 - 1,68 (s, 3H), 1,64 (s, 3H), 1,04 - 0,81 (m, 4H). EM: [M+1]: 356,2. La separación mediante CFS quiral del compuesto 110 (20 mg, 0,056 mmol) (instrumento: CFS-EM Waters Prep 15; columna: Phenomenex Lux Cellulose-2, 10 x 250 mm, 5 μm; condiciones: isocráticas al 55 % de MeOH con el 45 % de CO<2>; velocidad de flujo: 10 ml/min) proporcionó el compuesto 111 y el compuesto 112.

[0736]

[0739] Compuesto 111 de la separación mediante CFS quiral de 110. Pico 1 (tiempo de retención 5,33 min, 99,95 %): se obtieneS-6-amino-2-ciclopropil-5-(3-hidroxi-2,6-dimetil-fenil)-3-(trideuteriometil)pirrolo[2,3-b]pirazin-7-carboxamida (7,8 mg) como un sólido de color blanquecino.<1>H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 9,49 (s, 1H), 7,24 (s, 1H), 7,14 -6,98 (m, 4H), 6,89 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 2,11 (m, 1H), 1,84 - 1,68 (s, 3H), 1,64 (s, 3H), 1,04 - 0,81 (m, 4H). EM: [M+1]: 356,2.

[0741]

[0744] Compuesto 112 de la separación mediante CFS quiral de 110. Pico 2 (tiempo de retención 6,00 min, 99,78 %): se obtieneR-6-amino-2-ciclopropil-5-(3-hidroxi-2,6-dimetil-fenil)-3-(trideuteriometil)pirrolo[2,3-b]pirazin-7-carboxamida (5,3 mg) como un sólido de color blanquecino.<1>H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 9,49 (s, 1H), 7,24 (s, 1H), 7,14 - 6,98 (m, 4H), 6,89 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 2,11 (m, 1H), 1,84 - 1,68 (s, 3H), 1,64 (s, 3H), 1,04 - 0,81 (m, 4H). EM: [M+1]: 356,2.

[0745]

[0748] Compuesto 116 (2-amino-5-ciclopropil-1-(3-hidroxi-2,6-dimetil-fenil)pirrolo[2,3-b]piridin-3-carboxamida)

[0750] Etapa 1. A una disolución de N-[5-bromo-3-ciano-1-(3-metoxi-2,6-dimetilfenil)pirrolo[2,3-b]piridin-2-il]carbamato deterc-butilo (descrito en la síntesis del producto intermedio I) (110 mg, 0,233 mmol) en agua (0,5 ml) y dioxano (2 ml) se le añadieron ácido ciclopropilborónico (41 mg, 0,477 mmol), Cs<2>CO<3>(270 mg, 0,829 mmol), PdCl<2>(dppf).CH<2>Cl<2>(18 mg, 22 μmol) en un vial sellado. Se desgasificó la mezcla y se rellenó con nitrógeno 3 veces. Se calentó la mezcla resultante hasta 100 ºC y se agitó 18 h. Se eliminaron los componentes volátiles a vacío. Se purificó el residuo mediante cromatografía en gel de sílice eluyendo con un gradiente de EtOAc a del 0 al 60 % en hexanos para proporcionar 2-amino-5-ciclopropil-1-(3-metoxi-2,6-dimetil-fenil)pirrolo[2,3-b]piridin-3-carbonitrilo (63 mg, 81 % de rendimiento) como un sólido de color blanquecino.

[0752] Etapa 2. A una disolución de 2-amino-5-ciclopropil-1-(3-metoxi-2,6-dimetilfenil)pirrolo[2,3-b]piridin-3-carbonitrilo (73 mg, 0,220 mmol) en EtOH (1,5 ml) y agua (300 μl) se le añadieron LiOH.H<2>O (50 mg, 1,19 mmol) y H<2>O<2>(700 ul, disol. ac. al 27 % p/p). Se agitó la mezcla a 60 ºC durante 20 min, luego se eliminaron los componentes volátiles a vacío. Se purificó el residuo mediante cromatografía en gel de sílice eluyendo con un gradiente de EtOAc a del 20 al 60 % en hexanos para proporcionar 2-amino-5-ciclopropil-1-(3-metoxi-2,6-dimetil-fenil)pirrolo[2,3-b]piridin-3-carboxamida (22 mg, 29 % de rendimiento) como un sólido de color blanquecino.

[0754] Etapa 3. Para la desprotección de OMe usando BBr<3>, se realizó el mismo procedimiento usado para el compuesto 35 con el producto intermedio apropiado (22 mg, 63 μmol) para proporcionar un residuo que se purificó mediante HPLC preparativa para proporcionar 2-amino-5-ciclopropil-1-(3-hidroxi-2,6-dimetil-fenil)pirrolo[2,3-b]piridin-3-carboxamida (15 mg, 71 % de rendimiento) como un sólido de color blanquecino.<1>H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 9,43 (s, 1H), 7,58 (s, 1H), 7,50 (s, 1H), 7,00 (d,J= 8,3 Hz, 1H), 6,86 (m, 3H), 6,69 (s, 2H), 1,88 m, 1H), 1,69 (s, 3H), 1,61 (s, 3H), 0,86 (m, 2H), 0,81 - 0,68 (m, 2H). EM: [M+1]: 337,2.

[0756] La separación mediante CFS quiral del compuesto 116 (410 mg, 1,22 mmol) (instrumento: CFS-EM Waters Prep 100; columna: Phenomenex Lux Cellulose-2, 30 x 250 mm, 5 μm; condiciones: isocráticas al 50 % de ACN/EtOH 1:1 con el 50 % de CO<2>; velocidad de flujo: 70 ml/min) proporcionó el compuesto 117 y el compuesto 118.

[0758]

[0761] Compuesto 117 de la separación mediante CFS quiral de 116. Pico 1 (tiempo de retención 5,60 min, 99,83 %): se obtiene S-2-amino-5-ciclopropil-1-(3-hidroxi-2,6-dimetil-fenil)pirrolo[2,3-b]piridin-3-carboxamida (130 mg) como un sólido de color blanquecino.<1>H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 9,52 (s, 1H), 8,12 (d, J = 2,2 Hz, 1H), 8,08 - 7,92 (m, 2H), 7,46 (s, 1H), 7,00 (d, J = 8,2 Hz, 2H), 6,86 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 2,03 (m, 1H), 1,70 (s, 3H), 1,59 (s, 3H), 0,96 (m, 2H), 0,68 (m, 2H). EM: [M+1]: 337,2.

[0763]

[0766] Compuesto 118 de la separación mediante CFS quiral de 116. Pico 2 (tiempo de retención 7,81 min, 98,81 %): R-2-amino-5-ciclopropil-1-(3-hidroxi-2,6-dimetil-fenil)pirrolo[2,3-b]piridin-3-carboxamida (130 mg).<1>H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 9,52 (s, 1H), 8,12 (d, J = 2,2 Hz, 1H), 8,08 - 7,92 (m, 2H), 7,46 (s, 1H), 7,00 (d, J = 8,2 Hz, 2H), 6,86 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 2,03 (m, 1H), 1,70 (s, 3H), 1,59 (s, 3H), 0,96 (m, 2H), 0,68 (m, 2H). EM: [M+1]: 337,2.

[0767]

[0770] Compuesto 132 (2-amino-5-cloro-1-(3-hidroxi-2,6-dimetil-fenil)pirrolo[2,3-b]piridin-3-carboxamida)

[0772] Etapa 1. A una disolución de 3-metoxi-2,6-dimetil-anilina (3,61 g, 23,9 mmol) y 3-bromo-5-cloro-2-fluoro-piridina (5,02 g, 23,9 mmol) en THF (50 ml) se le añadió disolución de LiHMDS en THF (1 M, 48 ml) gota a gota a lo largo de 18 min. Se observó una exoterma a 16 ºC. Después de 30 min, se diluyó la mezcla de reacción con NH<4>Cl acuoso saturado y se extrajo con EtOAc. Se separó la fase orgánica, se lavó con salmuera, se secó sobre Na<2>SO<4>, se filtró y se concentró. Se purificó el producto en bruto mediante cromatografía ultrarrápida (carga seca) eluyendo con un gradiente de EtOAc a del 0 al 20 % en heptano. Se combinaron las fracciones, se concentraron y se secaron a vacío para proporcionar 3-bromo-5-cloro-N-(3-metoxi-2,6-dimetil-fenil)piridin-2-amina (6,58 g, 81 % de rendimiento) como un sólido de color melocotón.

[0774] Etapa 2. A una suspensión de NaH (1,08 g, 24,9 mmol, dispersión al 60 % en aceite mineral) en DME (60 ml) se le añade propanodinitrilo (1,62 g, 24,6 mmol) en DME (15 ml) gota a gota. Después de agitar durante 30 min, se añadieron 3-bromo-5-cloro-N-(3-metoxi-2,6-dimetil-fenil)piridin-2-amina (4,00 g, 11,7 mmol) en DME (15 ml) y PdCl<2>(dppf).CH<2>Cl<2>(1,08 g, 1,32 mmol). Se purgó la mezcla de reacción con burbujeo de nitrógeno a través de la disolución, luego se agitó a 100 ºC durante 5 h. Se enfrió la mezcla de reacción hasta t.a. y agua con hielo (250 ml) se añadió gota a gota. Se recogió el precipitado resultante mediante filtración y se lavó con agua. Se secó al aire el sólido, luego se coevaporó con tolueno (2x), se secó a vacío para proporcionar 4,67 g de producto en bruto. Purificación mediante cromatografía en gel de sílice (carga seca) eluyendo con un gradiente de EtOAc a del 0 al 100 % en heptano. Se combinaron las fracciones, se concentraron y se secaron a vacío, para proporcionar 2-amino-5-cloro-1-(3-metoxi-2,6-dimetil-fenil)pirrolo[2,3-b]piridin-3-carbonitrilo (3,27 g, 85 % de rendimiento) como un sólido cristalino de color marfil.

[0776] Etapa 3. A una suspensión de 2-amino-5-cloro-1-(3-metoxi-2,6-dimetilfenil)pirrolo[2,3-b]piridin-3-carbonitrilo (7,50 g, 23,0 mmol) en agua (60 ml) y alcohol de reactivo (180 ml) se le añadió LiOH.H<2>O, al 98 % (7,22 g, 172 mmol) y H<2>O<2>(disolución ac. al 27 % p/p, 9,8 ml). Se agitó la mezcla a 60 ºC durante 30 min, luego se enfrió hasta t.a. Se añadió agua gota a gota (500 ml) y se recogió el sólido mediante filtración, se lavó con agua y se secó al aire. Se diluyó el filtrado con agua y se obtuvo una segunda recogida de sólido. Finalmente, se extrajo el filtrado con EtOAc (3x). Se secaron los extractos orgánicos combinados sobre Na<2>SO<4>, se filtraron y se concentraron, luego se secaron a vacío proporcionando una tercera recogida de producto en bruto. Se purificó el material en bruto combinado mediante cromatografía en gel de sílice usando un gradiente de EtOAc a del 50 al 100 % en heptano. Se combinaron las fracciones puras y se concentraron, se secaron a vacío para proporcionar 2-amino-5-cloro-1-(3-metoxi-2,6-dimetil-fenil)pirrolo[2,3-b]piridin-3-carboxamida (3,90 g, 49 % de rendimiento) como un sólido de color amarillo claro. Alternativamente, pudo realizarse la hidrólisis de nitrilo en condiciones de H<2>SO<4>(usando el mismo procedimiento usado para el compuesto 164) proporcionando 2-amino-5-cloro-1-(3-metoxi-2,6-dimetilfenil)pirrolo[2,3-b]piridin-3-carboxamida con rendimiento cuantitativo.

[0778] Etapa 4. Para la desprotección de OMe usando BBr<3>, se usó el mismo procedimiento usado para el compuesto 35 con el producto intermedio apropiado (3,90 g, 11,3 mmol) para proporcionar un residuo que se coevaporó con MeOH (4x), se secó a vacío, se trituró con NaHCO<3>acuoso saturado y se filtró. Se purificó el producto en bruto mediante sílice en cromatografía en gel de sílice usando un gradiente de MeOH a del 0 al 20 % en CH<2>Cl<2>para proporcionar 2-amino-5-cloro-1-(3-hidroxi-2,6-dimetil-fenil)pirrolo[2,3-b]piridin-3-carboxamida (3,54 g, 95 % de rendimiento) como un sólido de color beis claro.<1>H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 954 (s, 1H), 8,14 (d,J= 2,2 Hz, 1H), 7,74 (d,J= 2,1 Hz, 1H), 7,14 (s a, 2H), 7,06 (d,J= 8,3 Hz, 1H), 6,91 (d,J= 8,3 Hz, 1H), 6,86 (s a, 2H), 1,74 (s, 3H), 1,65 (s, 3H). EM: [M+1]: 331,1.

[0780] La separación mediante CFS quiral del compuesto 132 (3,54 g, 10,7 mmol) (instrumento: CFS-EM Waters Prep 100; columna: Phenomenex Lux Cellulose-2, 30 x 250 mm, 5 μm; condiciones: isocráticas al 45 % de ACN/EtOH 1:1 con el 55 % de CO<2>; velocidad de flujo: 70 ml/min) proporcionó el compuesto 133 y el compuesto 134.

[0781] paración mediante CFS quiral de 132. Pico 1 (tiempo de retención 5,37 min, 99,70 %): se o-1-(3-hidroxi-2,6-dimetil-fenil)pirrolo[2,3-b]piridin-3-carboxamida (1,26 g) como un sólido de N (400 MHz, DMSO-d6) δ 9,54 (s, 1H), 8,14 (d, J = 2,2 Hz, 1H), 7,74 (d, J = 2,1 Hz, 1H), = 8,2, 0,7 Hz, 1H), 6,91 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 6,86 (s a, 2H), 1,74 (d, J = 0,7 Hz, 3H), 1,65 (s,

[0783] paración mediante CFS quiral de 132. Pico 2 (tiempo de retención 7,79 min, 99,19 %): R-2-i-2,6-dimetil-fenil)pirrolo[2,3-b]piridin-3-carboxamida (1,26 g).<1>H-RMN (400 MHz, DMSO-d, J = 2,2 Hz, 1H), 7,74 (d, J = 2,1 Hz, 1H), 7,14 (s a, 2H), 7,06 (dt, J = 8,2, 0,7 Hz, 1H), 6,91

(s a, 2H), 1,74 (d, J = 0,7 Hz, 3H), 1,65 (s, 3H). EM: [M+1]: 331,1.

[0785] Compuesto 150 (6-amino-5-(5-hidroxi-2-metil-fenil)-3-fenil-pirrolo[2,3-b]pirazin-7-carboxamida)

[0787] Etapa 1. Se cargaron el producto intermedio F (101 mg, 0,236 mmol), ácido fenil-borónico (29 mg, 0,24 mmol). Pd(PPh<3>)<4>(30 mg, 0,026 mmol) y potasio fosfato tribásico anhidro (176 mg, 0,829 mmol) en un vial para microondas, que se purgó con nitrógeno, luego se añadió dioxano (2 ml), se tapó el vial y se colocó en un bloque térmico ajustado a 90 ºC. Después de 90 min, se enfrió la mezcla de reacción hasta t.a., se diluyó con agua, se extrajo con EtOAc (3x). Se lavaron los extractos orgánicos combinados con salmuera, se secaron sobre Na<2>SO<4>, se filtraron y se concentraron. Se purificó el residuo mediante cromatografía en gel de sílice eluyendo con un gradiente de EtOAc a del 0 al 100 % en hexanos para proporcionar 6-amino-5-(5-metoxi-2-metil-fenil)-3-fenil-pirrolo[2,3-b]pirazin-7-carbonitrilo (30 mg, 36 % de rendimiento) como un sólido de color naranja.

[0789] Etapa 2. Para la hidrólisis de nitrilo usando ácido sulfúrico, se realizó el mismo procedimiento usado para el compuesto 164 con el producto intermedio apropiado (28 mg, 0,079 mmol) para proporcionar 6-amino-5-(5-metoxi-2-metil-fenil)-3-fenil-pirrolo[2,3-b]pirazin-7-carboxamida (20 mg, 68 % de rendimiento) como un sólido de color amarillo pálido.

[0791] Etapa 3. Para la desprotección de OMe usando BBr<3>, se realizó el mismo procedimiento usado para el compuesto 35 proporcionó un residuo que se purificó mediante HPLC preparativa para proporcionar 6-amino-5-(5-hidroxi-2-metil-fenil)-3-fenil-pirrolo[2,3-b]pirazin-7-carboxamida (11 mg, 57 % de rendimiento) como un sólido blanco esponjoso.<1>H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 9,71 (s a, 1H), 8,73 (s, 1H), 7,92 - 7,76 (m, 2H), 7,49 (s a, 2H), 7,45 -7,37 (m, 3H), 7,35 - 7,28 (m, 2H), 7,26 (s a, 1H), 6,92 (dd, J = 8,3, 2,6 Hz, 1H), 6,77 (d, J = 2,5 Hz, 1H), 1,89 (s, 3H). EM: [M+1]: 360,2.

[0792]

[0795] Compuesto 153 (6-amino-5-(5-hidroxi-2-metil-fenil)-3-(3-piridilmetoxi)pirrolo[2,3-b]pirazin-7-carboxamida)

[0796] Etapa 1. A una mezcla del producto intermedio E (51 mg, 0,16 mmol), 3-piridilmetanol (41 mg, 0,38 mmol) y trifenilfosfina (62 mg, 0,24 mmol) en THF (2 ml) se le añadió azodicarboxilato de diisopropilo (47 ul, 0,24 mmol). Se agitó la mezcla resultante 18 h. Se añadieron de manera adicional trifenilfosfina (62 mg, 0,24 mmol), 3-piridilmetanol (41 mg, 0,38 mmol) y azodicarboxilato de diisopropilo (47 ul, 0,24 mmol) y se agitó la mezcla durante otras 2,5 h y se concentró hasta sequedad. Se purificó el residuo en bruto mediante cromatografía en gel de sílice eluyendo con un gradiente de EtOAc a del 0 al 100 % en hexanos para proporcionar 6-amino-5-[5-(metoximetoxi)-2-metilfenil]-3-(3-piridilmetoxi)pirrolo[2,3-b]pirazin-7-carbonitrilo (115 mg) como goma impura de color ámbar (que contenía óxido de trifenil-fosfina), que se llevó a la siguiente etapa sin purificación adicional.

[0798] Etapa 2. A una disolución de 6-amino-5-[5-(metoximetoxi)-2-metil-fenil]-3-(3-piridilmetoxi)pirrolo[2,3-b]pirazin-7-carbonitrilo (65,0 mg, 0,156 mmol) en MeOH (1,5 ml) se le añadió HCl en dioxano (4 M, 1,50 ml). Después de agitar durante 75 min, se concentró la mezcla de reacción y se secó a vacío. El 6-amino-5-(5-hidroxi-2-metil-fenil)-3-(3-piridilmetoxi)pirrolo[2,3-b]pirazin-7-carbonitrilo en bruto que se supuso que era bis-sal de HCl se llevó a la siguiente etapa sin purificación adicional.

[0800] Etapa 3. A una disolución de 6-amino-5-(5-hidroxi-2-metil-fenil)-3-(3-piridilmetoxi)pirrolo[2,3-b]pirazin-7-carbonitrilo en bruto (70 mg, 0,156 mmol, que se supuso que era bis-sal de HCl) en MeOH (1,0 ml) se le añadió disolución acuosa de NaOH (4 M, 1,0 ml). Se transfirió la mezcla de reacción a un bloque térmico precalentado a 90 ºC y se agitó durante 18 h. Después de enfriar hasta t.a., se neutralizó la mezcla con HCl 3 N y se diluyó con agua. Se recogió el precipitado mediante filtración y se lavó con agua, luego se secó al aire. La purificación mediante HPLC preparativa proporcionó 6-amino-5-(5-hidroxi-2-metil-fenil)-3-(3-piridilmetoxi)pirrolo[2,3-b]pirazin-7-carboxamida (4 mg, 7 % de rendimiento) como un sólido blanco esponjoso.<1>H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 9,68 (s a, 1H), 8,48 (d, J = 2,2 Hz, 1H), 8,42 (dd, J = 4,8, 1,7 Hz, 1H), 7,85 (s, 1H), 7,65 (dt, J = 7,8, 2,0 Hz, 1H), 7,26 (ddd, J = 7,9, 4,9, 0,9 Hz, 1H), 7,23 (d, J = 8,6 Hz, 1H), 7,15 (s a, 1H), 7,04 (s a, 1H), 7,00 (s a, 2H), 6,87 (dd, J = 8,3, 2,6 Hz, 1H), 6,66 (d, J = 2,5 Hz, 1H), 5,09 (d, J = 12,2 Hz, 1H), 5,08 (d, J = 12,2 Hz, 1H), 1,72 (s, 3H). EM: [M+1]: 391,2.

[0802]

[0805] Compuesto 160 (6-amino-5-(5-hidroxi-2-metil-fenil)-3-[2-(3-piridil)etinil]pirrolo[2,3-b]pirazin-7-carboxamida)

[0806] Etapa 1. A un vial para microondas cargado con el producto intermedio F (251 mg, 0,549 mmol), Pd(PPh<3>)<4>(65 mg, 0,056 mmol), Cul (43 mg, 0,023 mmol) y purgado con nitrógeno, se le añadió 3-etinilpiridina (72 mg, 0,698 mmol) en DMF (2,5 ml) seguido por Et<3>N (610 μl, 4,39 mmol). Se tapó el vial, luego se transfirió a un bloque térmico precalentado (120 ºC). Después de 1 h, se concentró la mezcla de reacción a vacío, luego se llevó a THF y se adsorbió sobre sílice. Se evaporaron los componentes volátiles a vacío y se purificó el residuo mediante cromatografía en gel de sílice eluyendo con un gradiente de EtOAc a del 0 al 100 % en hexanos, luego de MeOH a del 0 al 20 % en EtOAc, para proporcionar 6-amino-5-[5-(metoximetoxi)-2-metil-fenil]-3-[2-(3-piridil)etinil]pirrolo[2,3-b]pirazin-7-carbonitrilo (260 mg, 99 %) como un sólido de color marrón.

[0808] Etapa 2. A una suspensión de 6-amino-5-[5-(metoximetoxi)-2-metil-fenil]-3-[2-(3-piridil)etinil]pirrolo[2,3-b]pirazin-7-carbonitrilo (225 mg, 0,548 mmol) en MeOH (3 ml) se le añadió HCl en dioxano (4 M, 3 ml). Después de agitar durante 30 min, se concentró la mezcla de reacción hasta sequedad, luego se secó a vacío, proporcionando 6-amino-5-(5-hidroxi-2-metil-fenil)-3-[2-(3-piridil)etinil]pirrolo[2,3-b]pirazin-7-carbonitrilo (319 mg, bis-sal de HCl) como un sólido pegajoso de color marrón que se usó en la siguiente etapa sin purificación adicional.

[0809] Etapa 3. Se agitó la bis-sal de HCl de 6-amino-5-(5-hidroxi-2-metil-fenil)-3-[2-(3-piridil)etinil]pirrolo[2,3-b]pirazin-7-carbonitrilo (241 mg, 0,548 mmol) en H<2>SO<4>conc. (2 ml). Después de 3 días, se extinguió la mezcla de reacción con hielo picado, se puso en un baño de hielo y se alcalinizó (pH de aproximadamente 10) con NH<4>OH/H<2>O 1:1. Se recogieron los sólidos mediante filtración y se secaron al aire durante la noche, proporcionando producto en bruto como un sólido de color amarillo ocre (249 mg). Se purificó una porción (67 mg) mediante HPLC preparativa para proporcionar 6-amino-5-(5-hidroxi-2-metil-fenil)-3-[2-(3-piridil)etinil]pirrolo[2,3-b]pirazin-7-carboxamida (26 mg, 46 % de rendimiento calculado) como un sólido esponjoso de color amarillo claro.<1>H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 9,77 (s a, 1H), 8,75 (dd, J = 2,3, 0,9 Hz, 1H), 8,57 (dd, J = 4,9, 1,7 Hz, 1H), 8,42 (s, 1H), 7,98 (dt, J = 7,9, 1,9 Hz, 1H), 7,73 (s a, 2H), 7,44 (ddd, J = 8,0, 4,9, 0,9 Hz, 1H), 7,35 (d a, J = 4,4 Hz, 2H), 7,29 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 6,94 (dd, J = 8,3, 2,6 Hz, 1H), 6,77 (d, J = 2,6 Hz, 1H), 1,85 (s, 3H). EM: [M+1]: 385,3.

[0811]

[0813] Compuesto 162 (6-amino-5-(5-hidroxi-2-metil-fenil)-3-[2-(3-piridil)etil]pirrolo[2,3-b]pirazin-7-carboxamida) Etapa 1. Se agitó 6-amino-5-(5-hidroxi-2-metil-fenil)-3-[2-(3-piridil)etinil]pirrolo[2,3-b]pirazin-7-carboxamida (102 mg, 0,265 mmol) y paladio sobre carbono (30 mg, 0,028 mmol, al 10 % p/p) en MeOH (3 ml) bajo atmósfera de hidrógeno durante la noche, se filtró sobre filtro de disco usando MeOH, se concentró y se purificó mediante HPLC preparativa para proporcionar 6-amino-5-(5-hidroxi-2-metil-fenil)-3-[2-(3-piridil)etil]pirrolo[2,3-b]pirazin-7-carboxamida (7 mg, 7 % de rendimiento) como un sólido esponjoso de color blanquecino.<1>H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 8,34 (dd, J = 4,8, 1,7 Hz, 1H), 8,31 (dd, J = 2,3, 0,8 Hz, 1H), 7,95 (s, 1H), 7,55 (ddd, J = 7,8, 2,4, 1,7 Hz, 1H), 7,34 (s a, 1H), 7,30 (s a, 2H), 7,28 (dd, J = 8,4, 0,8 Hz, 1H), 7,23 (ddd, J = 7,8, 4,8, 0,9 Hz, 1H), 7,15 (s a, 1H), 6,92 (dd, J = 8,3, 2,6 Hz, 1H), 6,72 (d, J = 2,6 Hz, 1H), 3,01 - 2,93 (m, 2H), 2,92 - 2,84 (m, 2H), 1,82 (s, 3H). EM: [M+1]: 389,2.

[0815]

[0817] Compuesto 164 (6-amino-5-(3-hidroxi-2,6-dimetil-fenil)-2,3-dimetil-pirrolo[2,3-b]pirazin-7-carboxamida)

[0818] Etapa 1. A una suspensión de NaH (3,54 g, 92 mmol, dispersión al 60 % en aceite mineral) en THF (100 ml) a 0 ºC se le añadió malononitrilo (3,99 g, 60,4 mmol) en THF (30 ml) gota a gota a través de un embudo de adición. Se retiró el baño frío al final de la adición y se permitió que agitase la mezcla resultante durante 45 min a t.a. Se añadieron 2,3-dicloro-5,6-dimetil-pirazina (5,49 g, 31,0 mmol) y Pd(PPh<3>)<4>(1,76 g, 1,52 mmol), se puso a reflujo la mezcla de reacción durante 3,25 h, se enfrió hasta t.a., se vertió en 200 ml de hielo picado y HCl 1 N 1:1, y se extrajo con DCM (3x). Se lavaron las fases orgánicas combinadas con salmuera, se secaron sobre Na<2>SO<4>, se filtraron y se concentraron. Se adsorbió el producto en bruto sobre sílice usando DCM/THF y se purificó mediante cromatografía en gel de sílice eluyendo con un gradiente de EtOAc a del 0 al 100 % en hexanos. Volvieron a purificarse las fracciones de mezcla mediante una segunda cromatografía en gel de sílice usando las mismas condiciones. Se combinaron las fracciones limpias de ambas columnas, se concentraron y se secaron a vacío para proporcionar 2-(3-cloro-5,6-dimetil-pirazin-2-il)propanodinitrilo (5,0 g, 78 % de rendimiento) como un sólido de color naranja.

[0819] Etapa 2. Se dividió la reacción en 3 viales que contenían 1/3 de las cantidades cada uno. Se cargaron los viales para microondas con 2-(3-cloro-5,6-dimetil-pirazin-2-il)propanodinitrilo (3,04 g, 14,7 mmol), 3-metoxi-2,6-dimetil-anilina (6,61 g, 43,7 mmol),terc-butóxido de potasio (3,30 g, 29,4 mmol) y catalizador Pd-PEPPSI<™>-SIPr (513 mg, 0,752 mmol), se purgó con nitrógeno tres veces, se añadió luego NMP seca (30 ml), se purgó de nuevo con nitrógeno, se taparon y se sometieron a irradiación con microondas (100 ºC) durante 30 min. Se combinaron los viales y se diluyeron con EtOAc, NH<4>Cl acuoso saturado y agua. Se separaron las fases, y se extrajo la fase acuosa dos veces con EtOAc. Se lavaron los extractos orgánicos combinados con salmuera, se secaron sobre Na<2>SO<4>, se filtraron y se concentraron a vacío. Se purificó el producto en bruto mediante cromatografía en gel de sílice eluyendo con un gradiente de EtOAc a del 0 al 100 % en heptano. Se combinaron las fracciones deseadas, se concentraron y se secaron a vacío para proporcionar 6-amino-5-(3-metoxi-2,6-dimetil-fenil)-2,3-dimetil-pirrolo[2,3-b]pirazin-7-carbonitrilo (2,57 g, 54 % de rendimiento) como un sólido de color amarillo.

[0821] Etapa 3. (Procedimiento general para la hidrólisis de nitrilo usando ácido sulfúrico): se disolvió 6-amino-5-(3-metoxi-2,6-dimetil-fenil)-2,3-dimetil-pirrolo[2,3-b]pirazin-7-carbonitrilo (7,11 g, 22,1 mmol) en ácido sulfúrico concentrado (70 ml), luego se agitó durante 45 min. Se vertió lentamente la mezcla de reacción en hielo picado (500 cm<3>), luego se puso en un baño de hielo y se neutralizó hasta pH 8-9 con NH<4>OH concentrado (aproximadamente 190 ml), manteniendo la temperatura interna por debajo de 35 ºC. Después de agitar durante 1 h, se filtró el precipitado, se lavó con agua, se secó al aire, luego se secó adicionalmente mediante coevaporación con tolueno a vacío, luego se secó a vacío para proporcionar 6-amino-5-(3-metoxi-2,6-dimetil-fenil)-2,3-dimetil-pirrolo[2,3-b]pirazin-7-carboxamida (7,5 g, rendimiento cuantitativo) como un sólido de color amarillo.

[0823] Etapa 4. A una suspensión de 6-amino-5-(3-metoxi-2,6-dimetil-fenil)-2,3-dimetil-pirrolo[2,3-b]pirazin-7-carboxamida (7,50 g, 22,1 mmol) en DCM (132 ml) se le añadió BBr<3>(66,3 mmol, 6,4 ml) lentamente. Después de agitar durante 70 min, se concentró la mezcla de reacción hasta sequedad, se resuspendió en DCM, y se añadió MeOH (se observó una exoterma). Después de concentración, se coevaporó la mezcla en bruto de nuevo con DCM/MeOH, luego se trituró cuidadosamente con NaHCO<3>acuoso saturado (100 ml), se diluyó con agua y se agitó durante 1,5 h. Se filtró el precipitado, se lavó con agua y se secó al aire, luego se purificó mediante cromatografía en gel de sílice (carga seca) eluyendo con un gradiente de MeOH a del 0 al 20 % en DCM. Se combinaron las fracciones mezcladas y volvieron a purificarse mediante cromatografía en gel de sílice usando las mismas condiciones. Se combinó el material limpio de ambas columnas, se concentró, luego se secó a vacío, proporcionando 6-amino-5-(3-hidroxi-2,6-dimetil-fenil)-2,3-dimetil-pirrolo[2,3-b]pirazin-7-carboxamida (5,3 g, 74 % de rendimiento).<1>H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 957 (s, 1H), 7,45 (s a, 1H), 7,18 - 7,02 (m, 4H), 6,93 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 2,48 - 2,45 (m, 3H), 2,35 - 2,24 (m, 3H), 1,81 - 1,73 (m, 3H), 1,68 (s, 3H). EM: [M+1]: 326,4.

[0825] La separación mediante CFS quiral del compuesto 164 (5,40 g, 16,6 mmol) (instrumento: CFS-EM Waters Prep 100; columna: Phenomenex Lux Cellulose-2, 30 x 250 mm, 5 μm; condiciones: isocráticas al 55 % de ACN/EtOH 1:1 con el 45 % de CO<2>; velocidad de flujo: 70 ml/min) proporcionó el compuesto 165 y el compuesto 166.

[0827]

[0830] Compuesto 165 de la separación mediante CFS quiral de 164. Pico 1 (tiempo de retención 4,07 min, 99,99 %): se obtuvo S-6-amino-5-(3-hidroxi-2,6-dimetil-fenil)-2,3-dimetil-pirrolo[2,3-b]pirazin-7-carboxamida (1,31 g) como un sólido de color beis claro.<1>H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 9,57 (s, 1H), 7,45 (s a, 1H), 7,12 (s a, 1H), 7,09 (s a, 2H), 7,06 (d, J = 8,8 Hz, 1H), 6,93 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 2,47 (s, 3H), 2,31 (s, 3H), 1,76 (s, 3H), 1,68 (s, 3H). EM: [M+1]: 327,3.

[0832]

[0835] Compuesto 166 de la separación mediante CFS quiral de 164. Pico 2 (tiempo de retención 4,81 min, 99,83 %): se obtuvo R-6-amino-5-(3-hidroxi-2,6-dimetil-fenil)-2,3-dimetil-pirrolo[2,3-b]pirazin-7-carboxamida (1,43 g) como un sólido de color beis claro.<1>H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 9,57 (s, 1H), 7,45 (s a, 1H), 7,12 (s a, 1H), 7,09 (s a, 2H), 7,07 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 6,93 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 2,47 (s, 3H), 2,31 (s, 3H), 1,76 (s, 3H), 1,68 (s, 3H). EM: [M+1]: 327,3.

[0836]

[0839] Compuesto 173 (6-amino-2-ciclobutil-5-(3-hidroxi-2,6-dimetil-fenil)pirrolo[2,3-b]pirazin-7-carboxamida)

[0841] Etapa 1. Se cargó un vial para microondas con trifluorometanosulfonato de [6-amino-7-carbamoil-5-(3-metoxi-2,6-dimetil-fenil)pirrolo[2,3-b]pirazin-2-ilo] (200 mg, 0,435 μmol) y Pd(PPh<3>)<4>(56 mg, 49 μmol), se purgó con nitrógeno, se añadió THF (2 ml), se burbujeó nitrógeno a su través, se añadió disolución de bromuro de ciclobutil-zinc (0,5 M, 4,35 ml), se burbujeó nitrógeno a su través, se tapó y se transfirió a un bloque térmico precalentado a 70 ºC. Se agitó la mezcla de reacción 90 min, se enfrió hasta t.a., se extinguió con NH<4>Cl acuoso saturado y se extrajo con EtOAc (2x). Se lavaron los extractos orgánicos combinados con salmuera, se secaron sobre Na<2>SO<4>, se filtraron y se concentraron. Se purificó el residuo mediante cromatografía en gel de sílice eluyendo con un gradiente de EtOAc a del 0 al 100 % en hexanos para proporcionar 6-amino-2-ciclobutil-5-(3-metoxi-2,6-dimetilfenil)pirrolo[2,3-b]pirazin-7-carboxamida (110 mg, 69 % de rendimiento) como un sólido de color blanco/beis.

[0843] Etapa 2. Para la desprotección de OMe usando BBr<3>, se realizó el mismo procedimiento usado para el compuesto 35 con el producto intermedio apropiado (110 mg, 0,301 mmol) para proporcionar un residuo que se purificó mediante HPLC preparativa para proporcionar 6-amino-2-ciclobutil-5-(3-hidroxi-2,6-dimetilfenil)pirrolo[2,3-b]pirazin-7-carboxamida (54 mg, 51 % de rendimiento) como un sólido esponjoso de color blanquecino.<1>H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 9,58 (s, 1H), 7,61 (s, 1H), 7,59 (s a, 1H), 7,32 (s a, 2H), 7,23 (s a, 1H), 7,07 (d,J= 8,3 Hz, 1H), 6,93 (d,J= 8,3 Hz, 1H), 3,66 (p,J= 8,6 Hz, 1H), 2,42 - 2,17 (m, 4H), 2,10 - 1,94 (m, 1H), 1,88 (td, J = 8,5, 4,0 Hz, 1H), 1,76 (s, 3H), 1,68 (s, 3H). EM: [M+1]: 352,4.

[0845]

[0848] Compuesto 178 (6-amino-2-(1-fluoro-1-metil-etil)-5-(3-hidroxi-2,6-dimetilfenil)pirrolo[2,3-b]pirazin-7-carboxamida)

[0849] Etapa 1. A una disolución de 6-amino-5-(3-hidroxi-2,6-dimetil-fenil)-2-(1-hidroxi-1-metiletil)pirrolo[2,3-b]pirazin-7-carboxamida (compuesto 190, 46,0 mg, 0,129 mmol) en DCM (2 ml) a -78 ºC se le añadió disolución Deoxo-fluor<®>(315 mg, 0,712 mmol, al 50 % en THF) gota a gota. Se agitó la mezcla a 0 ºC durante 45 min, se concentró y se purificó mediante HPLC preparativa para proporcionar 6-amino-2-(1-fluoro-1-metil-etil)-5-(3-hidroxi-2,6-dimetilfenil)pirrolo[2,3-b]pirazin-7-carboxamida (23 mg, 50 % de rendimiento) como un sólido esponjoso de color blanquecino.<1>H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 9,63 (s, 1H), 7,92 (d, J = 0,6 Hz, 1H), 7,46 (s a, 2H), 7,37 (s a, 1H), 7,26 (s a, 1H), 7,08 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 6,94 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 1,75 (d, J = 22,4 Hz, 6H), 1,77 (s, 3H), 1,69 (s, 3H).<19>F-RMN (376 MHz, DMSO-d6) δ -137,78 (hept, J = 22,1 Hz). EM: [M+1]: 358,2.

[0851] La separación mediante CFS quiral del compuesto 178 (19 mg, 0,053 mmol) (instrumento: CFS de Mettler Toledo Minigram; columna: Phenomenex Lux Cellulose-2, 10 x 250 mm, 5 μm; condiciones: isocráticas al 45 % de ACN/EtOH 1:1 con el 55 % de CO<2>; velocidad de flujo: 10 ml/min) proporcionó el compuesto 179 y el compuesto 180.

[0853]

[0854] Compuesto 179 de la separación mediante CFS quiral de 178. Pico 1 (tiempo de retención 3,63 min, 99,87 %): S-6-amino-2-(1-fluoro-1-metil-etil)-5-(3-hidroxi-2,6-dimetil-fenil)pirrolo[2,3-b]pirazin-7-carboxamida (5 mg) como un sólido blanco esponjoso.<1>H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 9,63 (s, 1H), 7,92 (s, 1H), 7,46 (s a, 2H), 7,42 - 7,32 (m, 1H), 7,30 = 7,19 (m, 1H), 7,08 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 6,94 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 1,77 (s, 3H), 1,75 (d, J = 22,4 Hz, 6H), 1,69 (s, 3H).<19>F-RMN (376 MHz, DMSO-d6) δ -137,75 (hept, J = 22,1 Hz). EM: [M+1]: 358,2.

[0856]

[0859] Compuesto 180 de la separación mediante CFS quiral de 178. Pico 2 (tiempo de retención 4,00 min, 99,90 %): R-6-amino-2-(1-fluoro-1-metil-etil)-5-(3-hidroxi-2,6-dimetil-fenil)pirrolo[2,3-b]pirazin-7-carboxamida (5 mg) como un sólido blanco esponjoso.<1>H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 9,63 (s, 1H), 7,92 (s, 1H), 7,46 (s a, 2H), 7,37 (s a, 1H), 7,26 (s a, 1H), 7,08 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 6,94 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 1,77 (s, 3H), 1,74 (d, J = 22,4 Hz, 6H), 1,69 (s, 3H).<19>F-RMN (376 MHz, DMSO-d6) δ -137,75 (hept, J = 22,1 Hz). EM: [M+1]: 358,2.

[0861]

[0863] Compuesto 1812-amino-1-(3-hidroxi-2,6-dimetil-fenil)-5,6-dimetil-pirrolo[2,3-b]piridin-3-carboxamida (a partir del método D)

[0865] Etapa 1. Se cargó un recipiente de presión con 3-bromo-2-cloro-6-metil-5-nitro-piridina (10,11 g, 40,2 mmol) y 3-metoxi-2,6-dimetilanilina (anilina A2, 9,20 g, 60,8 mmol). Se añadieron NMP (40 ml) y 2,6-dimetilpiridina (8,58 g, 80,1 mmol, 9,3 ml) y se calentó la mezcla de reacción hasta 130 ºC (baño de sedimento) durante 5 días hasta que se logró una conversión satisfactoria evaluada mediante UPCL-EM. Se enfrió la mezcla de reacción hasta T.A. y se transfirió la pasta resultante a un matraz cónico y se añadió gota a gota 500 ml de HCl 0,5 N mientras se agitaba, lo que dio como resultado una goma pegajosa. Se filtró el sobrenadante sobre un embudo Buchner. Se lavó la goma restante con H<2>O, se disolvió en DCM, y se combinó con el sólido que también se había disuelto en DCM (200 ml en total). Se secó la disolución en DCM sobre Na<2>SO<4>, se filtró y se concentró. Se purificó el residuo en bruto mediante cromatografía en gel de sílice (carga seca) eluyendo con un gradiente de DCM a del 0 al 100 % en heptanos para proporcionar 3-bromo-N-(3-metoxi-2,6-dimetil-fenil)-6-metil-5-nitro-piridin-2-amina (10,5 g, 71 % de rendimiento) como un sólido de color amarillo claro.

[0867] Etapa 2. A un MFR que contenía hidruro de sodio (3,13 g, 72,2 mmol, 60 % p/p en aceite mineral) en DME (150 ml) se le añadió una disolución de propanodinitrilo (4,75 g, 71,9 mmol) en DME (50 ml) lentamente. Después de agitar durante 1 h, se añadieron 3-bromo-N-(3-metoxi-2,6-dimetil-fenil)-6-metil-5-nitro-piridin-2-amina (10,5 g, 28,7 mmol) y Pd(dppf)Cl<2>•DCM (2,31 g, 2,83 mmol). Se desgasificó la mezcla resultante mediante burbujeo de N<2>a través de la disolución, se dotó de un condensador, y se calentó hasta 95 ºC durante 1 h. Se enfrió la mezcla de reacción hasta T.A., se vertió en NH<4>Cl acuoso saturado y se extrajo con DCM (3x). Se lavaron los extractos orgánicos combinados con H<2>O, salmuera, se secaron sobre Na<2>SO<4>, se filtraron y se adsorbieron sobre sílice. Se purificó el residuo en bruto mediante cromatografía en gel de sílice (carga seca) eluyendo con un gradiente de EtOAc a del 0 al 100 % en heptanos. Se combinaron las fracciones apropiadas, se concentraron y se trituró el sólido resultante con DCM, se filtró, y se secó a vacío, proporcionando 2-amino-1-(3-metoxi-2,6-dimetil-fenil)-6-metil-5-nitro-pirrolo[2,3-b]piridin-3-carbonitrilo (7,97 g, 79 % de rendimiento) como un sólido de color amarillo brillante. Se obtuvo una segunda recogida de material a partir del filtrado de la trituración previa mediante purificación por cromatografía ultrarrápida y trituración del mismo modo, proporcionando 2-amino-1-(3-metoxi-2,6-dimetil-fenil)-6-metil-5-nitro-pirrolo[2,3-b]piridin-3-carbonitrilo adicional (1,04 g, 10 % de rendimiento) como un sólido de color amarillo oscuro.

[0869] Etapa 3. A una disolución de 2-amino-1-(3-metoxi-2,6-dimetil-fenil)-6-metil-5-nitro-pirrolo[2,3-b]piridin-3-carbonitrilo (9,0 g, 25,6 mmol) en THF (120 ml) se le añadió trietilamina (7,99 g, 78,9 mmol, 11 ml) , DMAP (312 mg, 2,55 mmol) y carbonato deterc-butoxicarbonilo yterc-butilo (17,0 g, 77,9 mmol) . Se agitó la mezcla a 50 ºC durante 40 min. Se detuvo el calentamiento, y se añadió etilendiamina (6,20 g, 103 mmol, 6,90 ml) y se agitó la mezcla a t.a. durante 45 min, luego se diluyó con H<2>O y DCM. Se separaron las fases y se extrajo la fase acuosa con DCM (2x). Se lavaron los extractos orgánicos combinados con salmuera semisaturada, se secaron sobre Na<2>SO<4>, se filtraron y se concentraron. Se purificó el residuo en bruto mediante cromatografía en gel de sílice eluyendo con un gradiente de EtOAc a del 0 al 60 % en heptanos para proporcionar N-[3-ciano-1-(3-metoxi-2,6-dimetil-fenil)-6-metil-5-nitropirrolo[2,3-b]piridin-2-il]carbamato deterc-butilo (13,94 g, rendimiento cuantitativo) como un sólido de color blanquecino, que estaba contaminado con N-[2-(terc-butoxicarbonilamino)etil]carbamato deterc-butilo (50 % molar mediante<1>H-RMN).

[0871] Etapa 4. A un MFR que contenía N-[3-ciano-1-(3-metoxi-2,6-dimetil-fenil)-6-metil-5-nitro-pirrolo[2,3-b]piridin-2-il]carbamato deterc-butilo (13,94 g, 25,6 mmol) (supuestamente cuantitativo a partir de la etapa anterior) en DCM (280 ml) y MeOH (280 ml) se le añadió paladio sobre carbono (2,08 g, 1,95 mmol, 10 %p/p) como una suspensión en parte de la mezcla de disolventes. Se purgó la mezcla de reacción con H<2>y se agitó bajo atmósfera de H<2>(globo) durante la noche. Se purgó la mezcla de reacción con N<2>, se filtró sobre un lecho de Celite, se enjuagó con DCM y MeOH. Se concentró el filtrado y se secó a vacío, proporcionando un sólido de color amarillo claro que se purificó mediante cromatografía en gel de sílice (carga seca) eluyendo con un gradiente de EtOAc (a del 20 al 100 %) en heptanos. Se combinaron las fracciones apropiadas y se concentraron a vacío para proporcionar N-[5-amino-3-ciano-1-(3-metoxi-2,6-dimetil-fenil)-6-metil-pirrolo[2,3-b]piridin-2-il]carbamato deterc-butilo (9,34 g, 87 % de rendimiento) como un sólido de color blanquecino.

[0873] Etapa 5. A una disolución de N-[5-amino-3-ciano-1-(3-metoxi-2,6-dimetil-fenil)-6-metil-pirrolo[2,3-b]piridin-2-il]carbamato deterc-butilo (10,34 g, 24,5 mmol) en acetonitrilo (100 ml) y DMF (60 ml) se le añadió nitrito deterc-butilo (5,20 g, 50,5 mmol, 6,0 ml), seguido por bromuro de cobre (II) (6,58 g, 29,4 mmol). Se calentó la mezcla hasta 70 ºC durante 35 min, se enfrió hasta T.A., se diluyó con H<2>O (600 ml) y NH<4>OH conc. (30 ml) y se extrajo con EtOAc (3x). Se lavaron los extractos orgánicos combinados con NH<4>Cl saturado (2x), salmuera semisaturada, se secaron sobre Na<2>SO<4>, se filtraron y se concentraron. Se purificó el residuo mediante cromatografía en gel de sílice (carga seca) eluyendo con un gradiente de EtOAc (a del 0 al 100 %) en heptanos. Se combinaron las fracciones apropiadas y se concentraron a vacío para proporcionar N-[5-bromo-3-ciano-1-(3-metoxi-2,6-dimetil-fenil)-6-metilpirrolo[2,3-b]piridin-2-il]carbamato deterc-butilo (6,18 g, 52 % de rendimiento) como un sólido de color marfil.

[0875] Etapa 6. Se trató N-[5-bromo-3-ciano-1-(3-metoxi-2,6-dimetil-fenil)-6-metil-pirrolo[2,3-b]piridin-2-il]carbamato deterc-butilo (6,18 g, 12,7 mmol) en EtOH (60 ml) con HCl acuoso (6 M, 34 ml) y se agitó durante 70 min a 80 ºC, luego se enfrió hasta T.A. y se concentró. Se disolvió el residuo en MeOH, se alcalinizó con Et<3>N en exceso y se concentró de nuevo. Se purificó el residuo mediante cromatografía en gel de sílice (carga seca) eluyendo con un gradiente de EtOAc (a del 0 al 100 %) en heptanos. Se combinaron las fracciones apropiadas y se concentraron a vacío para proporcionar 2-amino-5-bromo-1-(3-metoxi-2,6-dimetil-fenil)-6-metil-pirrolo[2,3-b]piridin-3-carbonitrilo (3,70 g, 75 % de rendimiento) como un sólido de color magenta oscuro.

[0877] Etapa 7. Se agitó 2-amino-5-bromo-1-(3-metoxi-2,6-dimetil-fenil)-6-metil-pirrolo[2,3-b]piridin-3-carbonitrilo (3,70 g, 9,6 mmol) en ácido sulfúrico concentrado (18 M, 25 ml) durante 55 min, luego se extinguió la mezcla de reacción con hielo picado, se puso en un baño de hielo y se alcalinizó hasta pH 8-9 con NH<4>OH saturado añadido lentamente. Se recogió el sólido resultante mediante filtración sobre un embudo Buchner y se lavó con H<2>O. Se secó el material al aire, luego se coevaporó dos veces con tolueno y se secó a vacío, luego se agitó en MeOH al 10 %/DCM y se filtró sobre una capa de sílice, eluyendo con MeOH al 10 %/DCM para retirar sales de amonio residuales. Se concentró el filtrado, luego se secó a vacío, proporcionando 2-amino-5-bromo-1-(3-metoxi-2,6-dimetilfenil)-6-metil-pirrolo[2,3-b]piridin-3-carboxamida (3,80 g, 98 % de rendimiento) como un sólido de color rosa.

[0879] Etapa 8. A una disolución de cloruro de metil-magnesio (3 M, 18,8 ml) en THF (160 ml) en un MFR bajo atmósfera de N<2>se le añadió una disolución de dicloruro de zinc en THF (0,5 M, 112 ml) a t.a. gota a gota a través de un embudo de adición. Después de la adición, se agitó la suspensión blanca resultante a t.a. durante 35 min. A la disolución de zincato se añadió 2-amino-5-bromo-1-(3-metoxi-2,6-dimetil-fenil)-6-metil-pirrolo[2,3-b]piridin-3-carboxamida (4,48 g, 11,1 mmol), se enjuagó el matraz con 20 ml de THF, y se añadió tetrakis(trifenilfosfina)-paladio (0) (1,14 g, 0,987 mmol). Se hizo burbujear N<2>a través de la mezcla, luego se dotó de un condensador y se puso a reflujo (bloque térmico ajustado a 80 ºC) durante 24 h. Se enfrió la mezcla de reacción hasta T.A., luego se diluyó con NH<4>Cl acuoso saturado y se extrajo con EtOAc (3x). Se lavaron los extractos orgánicos combinados con salmuera, se secaron sobre Na<2>SO<4>, se filtraron y se concentraron. Se purificó el residuo mediante cromatografía en gel de sílice (carga seca) eluyendo con un gradiente de EtOAc (a del 0 al 100 %) en heptanos, luego se purificó de nuevo mediante cromatografía en gel de sílice (carga seca) eluyendo con un gradiente de MeOH (a del 1 al 15 %) en DCM. Se combinaron las fracciones apropiadas de las dos columnas y se concentraron a vacío para proporcionar 2-amino-1-(3-metoxi-2,6-dimetil-fenil)-5,6-dimetil-pirrolo[2,3-b]piridin-3-carboxamida (2,22 g, 59 % de rendimiento, 77 % de pureza) como un sólido de color rosa claro, que contenía parte de producto secundario de 2-amino-1-(3-metoxi-2,6-dimetilfenil)-6-metil-pirrolo[2,3-b]piridin-3-carboxamida (19 % mediante UPCL-EM).

[0881] Etapa 9. A una suspensión de 2-amino-1-(3-metoxi-2,6-dimetil-fenil)-5,6-dimetil-pirrolo[2,3-b]piridin-3-carboxamida (2,22 g, 6,56 mmol, 77 % de pureza) en DCM (25 ml) se le añadió tribromoborano en DCM (1 M, 26 mmol, 26 ml) gota a gota. Se agitó la mezcla de reacción a t.a. durante 45 min, luego se concentró hasta sequedad. Se llevó el producto en bruto a DCM y se puso en un baño de hielo y se añadió MeOH cuidadosamente (exoterma). Se concentró la mezcla hasta sequedad, luego se coevaporó dos veces con MeOH. Se trituró el residuo con NaHCO<3>acuoso saturado. Se recogieron los sólidos mediante filtración sobre un embudo Buchner, se lavaron con H<2>O y se secaron al aire. Se disolvió el sólido todavía húmedo en DCM/MeOH, se concentró hasta sequedad y se trituró en MeOH al 20 %/DCM (50 ml). Se recogió el sólido mediante filtración, se lavó con MeOH al 20 %/DCM, se secó al aire, luego se secó a vacío para proporcionar 2-amino-1-(3-hidroxi-2,6-dimetil-fenil)-5,6-dimetil-pirrolo[2,3-b]piridin-3-carboxamida (1,60 g, 75 % de rendimiento) como un sólido de color beis claro. EM: [M+1]: 325,1. Se purificó un lote diferente mediante HPLC preparativa para dar lugar a 2-amino-1-(3-hidroxi-2,6-dimetilfenil)-5,6-dimetil-pirrolo[2,3-b]piridin-3-carboxamida (63 % de rendimiento) como un sólido esponjoso de color blanquecino.<1>H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 951 (s, 1H), 7,82 (s, 1H), 7,05 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 6,90 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 6,71 (s a, 2H), 6,64 (s a, 2H), 2,26 (s, 3H), 2,23 (s, 3H), 1,74 (s, 3H), 1,65 (s, 3H). EM: [M+1]: 325,1.

[0883] La separación mediante CFS quiral del compuesto 181 (1,60 g, 4,93 mmol) (instrumento: CFS-EM de Waters Prep 100; columna: Phenomenex Lux Cellulose-2, 30 x 250 mm, 5 μm; condiciones: isocráticas al 55 % de IPA formiato de amonio 10 mM con el 45 % de CO<2>; velocidad de flujo: 70 ml/min) proporcionó el compuesto 182 y el compuesto 183.

[0885]

[0888] Compuesto 182 de la separación mediante CFS de 181. Pico 1 (tiempo de retención 3,94 min, 99,86 %): se obtuvo (S)-2-amino-1-(3-hidroxi-2,6-dimetil-fenil)-5,6-dimetil-pirrolo[2,3-b]piridin-3-carboxamida (381 mg) como un sólido esponjoso de color blanquecino.<1>H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 9,50 (s, 1H), 7,83 (s, 1H), 7,05 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 6,90 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 6,72 (s, 2H), 6,65 (s, 2H), 2,26 (s, 3H), 2,24 (s, 3H), 1,74 (s, 3H), 1,65 (s, 3H). EM: [M+1]: 325,1.

[0890]

[0893] Compuesto 183 de la separación mediante CFS de 181. Pico 2 (tiempo de retención 4,35 min, 98,09 %): se obtuvo (R)-2-amino-1-(3-hidroxi-2,6-dimetil-fenil)-5,6-dimetil-pirrolo[2,3-b]piridin-3-carboxamida (495 mg) como un sólido esponjoso de color blanquecino.<1>H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 9,50 (s, 1H), 7,83 (s, 1H), 7,05 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 6,90 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 6,72 (s, 2H), 6,66 (s, 2H), 2,26 (s, 3H), 2,24 (s, 3H), 1,74 (s, 3H), 1,65 (s, 3H). EM: [M+1]: 325,1.

[0895]

[0898] Compuesto 1812-amino-1-(3-hidroxi-2,6-dimetil-fenil)-5,6-dimetil-pirrolo[2,3-b]piridin-3-carboxamida (A partir del método O)

[0900] Etapa 1. Se añadió ácido sulfúrico (140,1 ml, 2575 mmol) lentamente a agua (1,15 l) y se enfrió la disolución a 25 ºC. Se añadió 2-amino-3-bromo-5,6-dimetilpiridina (114,8 g, 571,0 mmol) en una porción para obtener una disolución. Se enfrió la disolución hasta 0 ºC - 5 ºC con un baño de hielo-agua para dar una suspensión. Con agitación vigorosa, se añadió una disolución de nitrito de sodio (49,25 g, 713,7 mmol) en agua (175,0 ml) gota a gota a lo largo de 90 minutos. Se retiró el baño de hielo-agua, y se calentó la suspensión lentamente hasta 11 ºC y se agitó durante 1 hora. Se añadió una disolución de hidróxido de sodio (175 g, 4,37 mol) en 400 ml de agua gota a gota para mantener la temperatura por debajo de 20 °C. Se ajustó el pH de la disolución a 7 con K<2>HPO<4>(~58 g, 0,33 mol) en 70 ml de agua. Se filtró la suspensión a 10 ºC. Se trituró la torta de filtración en agua (250 ml) y se filtró. Se lavó la torta de filtración profusamente con agua enfriada con hielo y se secó mediante succión a vacío. Se secó el producto en la estufa a vacío a 60 ºC durante la noche para obtener 3-bromo-5,6-dimetilpiridin-2-ol como un sólido cristalino de color amarillo claro (105,69 g, 91,6 %)<1>H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 11,96 (s a, 1H), 7,73 (s, 1H), 2,11 (s, 3H), 1,96 (s, 3H). EM: [M+1]: 202,0, 204,0.

[0901] Etapa 2. A una disolución de 3-bromo-5,6-dimetilpiridin-2-ol (105,3 g, 521,2 mmol) enN,N-dimetilformamida (316 ml) y tolueno (527 ml) at 90 ºC bajo atmósfera de nitrógeno se le añadió oxibromuro de fósforo (1,3:1, 56,5 % (p/p) en xilenos) (278 ml, 781,7 mmol) gota a gota a lo largo de 90 min. Después de completarse la adición, se agitó la mezcla a 90 ºC durante la noche. Se enfrió la mezcla hasta temperatura ambiente y se añadió lentamente a agua (2 l). Se lavó el matraz con 500 ml de agua. Se extrajeron las fases acuosas combinadas con MTBE (3 x 1 l). Se combinaron las fases orgánicas y se lavaron con NaOH 0,5 N (1 l), agua (3 x 1 l) y salmuera (1 l), luego se secaron con sulfato de sodio y se concentraron. Se disolvió parcialmente el sólido en MTBE (400 ml) y se añadió heptanos (300 ml). Se concentró la mezcla a presión reducida hasta ~1,7 volúmenes para proporcionar un precipitado. Se filtró la mezcla y se enjuagó con heptanos. Se secó el residuo para proporcionar 2,3-dibromo-5,6-dimetilpiridina como un sólido de color beis (114,290 g, 82,8 %). Se concentró adicionalmente el residuo y se filtró para proporcionar una segunda recogida de sólido: (8,73 g, 6,32 %).<1>H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 7,95 (s, 1H), 2,36 (s, 3H), 2,21 (s, 3H). EM: [M+1]: 264,0, 266,0, 268,0.

[0903] Etapa 3. Se cargó un matraz de fondo redondo de 4 bocas de 2000 ml con el producto intermedio A2 (33,0 g, 218,0 mmol), 1,2-dimetoxietano desgasificado (750 ml), 2,3-dibromo-5,6-dimetilpiridina (55 g, 207,6 mmol), 4,5-bis(difenilfosfino)-9,9-dimetilxanteno (10,8 g, 18,68 mmol) y carbonato de cesio (169,1 g, 519,0 mmol). Se sonicó la mezcla de reacción durante 20 minutos mientras se borboteaba la suspensión con nitrógeno. Se añadió tris(dibencilidenacetona)dipaladio(0) (8,55 g, 9,341 mmol) y se calentó la suspensión hasta reflujo. Después de 13 horas de agitación, se enfrió la mezcla de reacción hasta temperatura ambiente y se filtró sobre un lecho de gel de sílice. Se lavó la torta de filtración con acetato de etilo (1,2 l). Se evaporó el filtrado hasta un volumen de ~200 ml y se añadió heptanos (300 ml). Se evaporaron los disolventes para proporcionar una suspensión en ~2 volúmenes de disolvente. Se filtró la suspensión y se lavó con heptanos para proporcionar 3-bromo-N-(3-metoxi-2,6-dimetilfenil)-5,6-dimetilpiridin-2-amina como un sólido de color amarillo claro. (56,2 g, 80,8 %).<1>H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 7,57 (s, 1H), 7,26 (s, 1H), 7,02 (d,J= 8,6 Hz, 1H), 6,77 (d,J= 8,3 Hz, 1H), 3,76 (s, 3H), 2,07 (s, 3H), 2,04 (s, 3H), 2,03 (s, 3H), 1,94 (s, 3H). EM: [M+1]: 335,2, 337,2.

[0905] Etapa 4. A una disolución desgasificada de malononitrilo (33,3 g, 503,5 mmol) en 1,2-dimetoxietano (1000 ml) se le añadióterc-butóxido de sodio (46,3 g, 482,0 mmol) en 4 porciones. Se agitó la mezcla de reacción 30 minutos a temperatura ambiente para obtener una disolución. Se añadieron 3-bromo-N-(3-metoxi-2,6-dimetilfenil)-5,6-dimetilpiridin-2-amina (80 g, 238,6 mmol) y cloruro de 1,1’-bis(difenilfosfino)ferroceno-paladio(II), complejo con diclorometano (14,9 g, 18,26 mmol) en una porción y se calentó la suspensión hasta un reflujo vigoroso. Después de 17 horas de agitación, se transfirió la mezcla de reacción a un matraz de 5000 ml y se añadió acetato de etilo (1,5 l). Se añadió una disolución de N-acetil-L-cisteína (12,1 g, 74 mmol, contenido molar de Pd 4x) y Na<2>CO<3>(15,7 g, 148 mmol) en agua (500 ml). Se agitó la disolución bifásica durante 10 minutos a 60 ºC y luego se enfrió lentamente hasta 40 ºC a lo largo de 75 minutos. En el interior del matraz de 5000 ml, se separaron las dos fases a 40 ºC y se lavó la fase orgánica con agua (2x 250 ml) y salmuera (200 ml) y luego se filtró sobre un lecho de gel de sílice (3 pulgadas, 185 g). Se enjuagó la torta de filtración con DCM/EtOAc. Se evaporó el filtrado, y se cambiaron los disolventes por EtOAc durante la evaporación en rotavapor para proporcionar una suspensión. Se filtró la suspensión a temperatura ambiente y se trituró la torta de filtración en 50 ml de acetato de etilo enfriado con hielo. Se filtró el producto y se enjuagó la torta de filtración con 50 ml de acetato de etilo enfriado con hielo. Se secó el producto en la estufa a vacío a 60 ºC durante la noche para proporcionar 2-amino-1-(3-metoxi-2,6-dimetilfenil)-5,6-dimetil-1H-pirrolo[2,3-b]piridin-3-carbonitrilo como un sólido de color amarillo claro. (65,38 g, 85,5 %, 8 % (p/p) de DME).<1>H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 7,38 (s, 1H), 7,22 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,07 (d, J = 8,6 Hz, 1H), 6,76 (s a, 2H), 3,84 (s, 3H), 2,26 (s, 3H), 2,23 (s, 3H), 1,78 (s, 3H), 1,69 (s, 3H). EM: [M+1]: 321,2.

[0907] Etapa 5. A ácido metanosulfónico (600 ml, 9239 mmol) se le añadió lentamente una disolución de ácido sulfúrico (93 ml) / agua (7,0 ml) a lo largo de 5 minutos a temperatura ambiente. Se añadió 2-amino-1-(3-metoxi-2,6-dimetilfenil)-5,6-dimetil-1H-pirrolo[2,3-b]piridin-3-carbonitrilo (80 g, 249,7 mmol) en porciones a lo largo de 15 minutos para mantener la temperatura de reacción por debajo de 40 ºC. Se agitó la disolución resultante a temperatura ambiente durante 90 minutos. Se añadió DL-metionina (149,028 g, 998,8 mmol) en porciones a lo largo de 20 minutos por debajo de 40 ºC. Se agitó la disolución a 40 ºC. Después de 37 horas de agitación, se enfrió la mezcla de reacción hasta temperatura ambiente y luego se añadió lentamente a lo largo de 1,5 h a una disolución de K<2>HPO<4>(100 g) y NaOH (540 g) en agua (5 l). Se añadió EtOAc (1 l) y se agitó la mezcla bifásica durante 5 min para obtener un precipitado. Se filtró el producto. Se extrajeron las aguas madre con EtOAc (3 x 1 l). Se combinaron las fases orgánicas, se secaron sobre Na<2>SO<4>, se filtraron y se concentraron a presión reducida hasta ~ 100 ml para obtener una suspensión. Se filtró la suspensión y se aclara con EtOAc (50 ml). Se combinaron los sólidos y se trituraron en agua (800 ml) dos veces. Se resuspendió el residuo en EtOAc (500 ml), se agitó durante 10 minutos y se filtró. Se secó el producto en la estufa a presión reducida para obtener 67,8 g de producto en bruto. Se suspendió el compuesto en DMSO (350 ml, 5 vol.) y se calentó la mezcla hasta 65 ºC para obtener una disolución. Se enfrió la disolución lentamente a 28 ºC con un baño de agua. Se añadió agua (1,05 l) gota a gota a lo largo de 2 horas para obtener una suspensión. Después de 5 minutos de agitación a temperatura ambiente, se filtró el producto. Se trituró el sólido en 100 ml de agua y se filtró. Se lavó la torta de filtración con 2 x 100 ml de agua. Se secó en la estufa el producto a 60 ºC a vacío para obtener 2-amino-1-(3-hidroxi-2,6-dimetil-fenil)-5,6-dimetil-pirrolo[2,3-b]piridin-3-carboxamida como un sólido de color amarillo claro. 61,5 g, (75 %, 3 % (p/p) de EtOAc y 6 % (p/p) de DMSO).<1>H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 9,47 (s, 1H), 7,82 (s, 1H), 7,05 (d,J= 8,2 Hz, 1H), 6,90 (d,J= 8,2 Hz, 1H), 6,71 (s a., 2H), 6,64 (s a., 2H), 2,27 (s, 3H), 2,24 (s, 3H), 1,75 (s, 3H), 1,66 (s, 3H). EM: [M+1]: 325,2.

[0909]

[0911] Compuesto 184 y compuesto 190

[0913] Etapa 1. A una disolución del producto intermedio D (1,07 g, 2,33 mmol) en DCM (9 ml) se le añadió disolución de BBr<3>en DCM (1 M, 9,3 ml, 9,3 mmol). Se agitó la mezcla a 0 ºC durante 2 h, se añadió sílice, se concentró la mezcla, luego se purificó mediante cromatografía en gel de sílice (carga seca) eluyendo con un gradiente de MeOH a del 0 al 20 % en DCM para proporcionar trifluorometanosulfonato de [6-amino-7-carbamoil-5-(3-hidroxi-2,6-dimetilfenil)pirrolo[2,3-b]pirazin-2-ilo] (744 mg, 72 % de rendimiento) como un sólido de color blanquecino.

[0915] Etapa 2. Se calentó una disolución de trifluorometanosulfonato de [6-amino-7-carbamoil-5-(3-hidroxi-2,6-dimetilfenil)pirrolo[2,3-b]pirazin-2-ilo] (744 mg, 1,67 mmol), PdCl<2>(PPh<3>)<2>(117 mg, 0,167 mmol) en una mezcla de DMF (8 ml) y MeOH (8 ml) y Et<3>N (1,40 ml, 10,0 mmol) se calentó a 70 ºC bajo una atmósfera de monóxido de carbono (globo). Se purgó previamente el aparato con monóxido de carbono una vez. Después de 2 h, se añadió más cantidad de PdCl<2>(PPh<3>)<2>(117 mg, 0,167 mmol) y se continuó con la mezcla de reacción durante 18 h. Se enfrió la mezcla de reacción hasta t.a., se filtró a través de Celite, enjuagando con MeOH y se concentró el filtrado. Se purificó el residuo mediante cromatografía en gel de sílice (carga seca) eluyendo con un gradiente de MeOH a del 0 al 20 % de MeOH en DCM para proporcionar un sólido pegajoso de color verde oscuro. Se disolvió el sólido en EtOAc, se hizo pasar a través de una capa de sílice usando EtOAc / MeOH (al 5 %) que proporcionó tras evaporación de los componentes volátiles 6-amino-7-carbamoil-5-(3-hidroxi-2,6-dimetil-fenil)pirrolo[2,3-b]pirazin-2-carboxilato de metilo (418 mg, 70 % de rendimiento) como un sólido pegajoso de color pardo claro.

[0917] Etapa 3. Se enfrió una disolución de metilo 6-amino-7-carbamoil-5-(3-hidroxi-2,6-dimetilfenil)pirrolo[2,3-b]pirazin-2-carboxilato (322 mg, 0,906 mmol) en THF (12 ml) hasta -40 ºC y se añadió gota a gota disolución de MeMgCl en THF (3 M, 4,53 ml, 13,1 mmol). Se dejó que se calentase la mezcla hasta t.a. durante la noche, se extinguió con NH<4>Cl acuoso saturado (25 ml), se ajustó el pH a 7-8 con HCl 1 N y se extrajo la mezcla con DCM (3x). Se lavaron los extractos orgánicos combinados con salmuera, se secaron sobre Na<2>SO<4>, se filtraron y se concentraron. Se purificó el residuo mediante cromatografía en gel de sílice eluyendo con un gradiente de MeOH a del 0 al 20 % en DCM para proporcionar 6-amino-5-(3-hidroxi-2,6-dimetil-fenil)-2-(1-hidroxi-1-metil-etil)pirrolo[2,3-b]pirazin-7-carboxamida, compuesto 190 (103 mg, 32 % de rendimiento) como un sólido de color marrón claro.<1>H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 9,61 (s, 1H), 7,99 (s, 1H), 7,50 (s a, 1H), 7,42 (s a, 2H), 7,23 (s a, 1H), 7,08 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 6,94 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 5,95 - 5,81 (m, 1H), 5,30 - 5,17 (m, 1H), 2,19 (s, 3H), 1,78 (s, 3H), 1,70 (s, 3H). EM: [M+1]: 338,1; y 2-acetil-6-amino-5-(3-hidroxi-2,6-dimetilfenil)pirrolo[2,3-b]pirazin-7-carboxamida, compuesto 184 (31 mg, 10 % de rendimiento) como un sólido de color marrón claro.<1>H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 9,83 (s a, 1H), 8,38 (d, J = 1,9 Hz, 1H), 7,68 (s a, 2H), 7,40 (s, 2H), 7,09 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 6,97 (d, J = 8,1 Hz, 1H), 2,68 (s, 3H), 1,77 (s, 3H), 1,69 (s, 3H). EM: [M+1]: 340,1.

[0919] La separación mediante CFS quiral del compuesto 190 (39 mg, 0,110 mmol) (instrumento: CFS de Mettler Toledo Minigram; columna: Phenomenex Lux Cellulose-2, 10 x 250 mm, 5 μm; condiciones: isocráticas al 40 % de IPA formiato de amonio 10 mM con el 60 % de CO<2>; velocidad de flujo: 10 ml/min) proporcionó el compuesto 191 y el compuesto 192.

[0921]

[0924] Compuesto 191 de la separación mediante CFS quiral de 190. Pico 1 (tiempo de retención 3,83 min, 100 %):S-6-amino-5-(3-hidroxi-2,6-dimetil-fenil)-2-(1-hidroxi-1-metil-etil)pirrolo[2,3-b]pirazin-7-carboxamida (10 mg) como un sólido de color blanquecino.<1>H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 9,61 (s a, 1H), 7,99 (s, 1H), 7,52 (d a, J = 3,0 Hz, 1H), 7,32 (s a, 2H), 7,18 (d a, J = 3,1 Hz, 1H), 7,08 (dt, J = 8,2, 0,8 Hz, 1H), 6,93 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 5,26 (s, 1H), 1,77 (s, 3H), 1,68 (s, 3H), 1,51 (s, 6H). EM: [M+1]: 356,2.

[0925]

[0928] Compuesto 192 de la separación mediante CFS quiral de 190. Pico 2 (tiempo de retención 4,07 min):R-6-amino-5-(3-hidroxi-2,6-dimetil-fenil)-2-(1-hidroxi-1-metil-etil)pirrolo[2,3-b]pirazin-7-carboxamida (10 mg).<1>H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 9,62 (s a, 1H), 7,99 (s, 1H), 7,52 (d a, J = 3,2 Hz, 1H), 7,32 (s a, 2H), 7,18 (d a, J = 3,1 Hz, 1H), 7,08 (dt, J = 8,3, 0,8 Hz, 1H), 6,93 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 5,26 (s, 1H), 1,77 (s, 3H), 1,68 (s, 3H), 1,51 (s, 6H). EM: [M+1]: 356,2.

[0930] La separación mediante CFS quiral del compuesto 184 (103 mg, 0,290 mmol) (instrumento: CFS de Mettler Toledo Minigram; columna: Phenomenex Lux Cellulose-2, 10 x 250 mm, 5 μm; condiciones: isocráticas al 40 % de IPA formiato de amonio 10 mM con el 60 % de CO<2>; velocidad de flujo: 10 ml/min) proporcionó el compuesto 185 y el compuesto 186.

[0932]

[0935] Compuesto 185 de la separación mediante CFS quiral de 184. Pico 1 (tiempo de retención 3,87 min, 100 %):S-2-acetil-6-amino-5-(3-hidroxi-2,6-dimetil-fenil)pirrolo[2,3-b]pirazin-7-carboxamida (9 mg) como un sólido esponjoso de color amarillo.<1>H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 9,68 (s a, 1H), 8,38 (s, 1H), 7,69 (s a, 2H), 7,41 (s a, 2H), 7,09 (dt, J = 8,3, 0,7 Hz, 1H), 6,95 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 2,68 (s, 3H), 1,77 (d, J = 0,8 Hz, 3H), 1,69 (s, 3H). EM: [M+1]: 340,2.

[0937]

[0940] Compuesto 186 de la separación mediante CFS quiral de 184. Pico 2 (tiempo de retención 4,21 min, 99,80 %):R-2-acetil-6-amino-5-(3-hidroxi-2,6-dimetil-fenil)pirrolo[2,3-b]pirazin-7-carboxamida (9 mg) como un sólido esponjoso de color amarillo.<1>H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 9,69 (s a, 1H), 8,38 (s, 1H), 7,69 (s a, 2H), 7,41 (s a, 2H), 7,09 (dt, J = 8,2, 0,7 Hz, 1H), 6,95 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 2,68 (s, 3H), 1,77 (d, J = 0,7 Hz, 3H), 1,69 (s, 3H). EM: [M+1]: 340,1.

[0942]

[0945] Compuesto 198 (6-amino-5-(3-hidroxi-2,6-dimetil-fenil)-2-[1-(trifluorometil)ciclopropil]pirrolo[2,3-b]pirazin-7-carboxamida)

[0947] Etapa 1. Se cargó un vial para microondas con el producto intermedio D (500 mg, 1,09 mmol), 4,4,6-trimetil-2-[1-(trifluorometil)vinil]-1,3,2-dioxaborinano (502 mg, 2,26 mmol), dioxano (5 ml) y Na<2>CO<3>acuoso (2 M, 1,63 ml, 3,26 mmol), se purgó con nitrógeno (vacío interno, luego nitrógeno, 3x). Se añadió PdCl<2>(dppf).CH<2>Cl<2>(444 mg, 0,544 mmol), se purgó el vial de nuevo, se tapó y se transfirió a un bloque térmico precalentado (80 ºC) y se agitó durante la noche. Después de enfriar hasta t.a., se filtró la mezcla de reacción sobre Celite, se lavó con agua y DCM y se diluyó con salmuera. Se separaron las fases (separador de fases). Se extrajo la fase acuosa con DCM (2x). Se concentraron los extractos orgánicos combinados y se purificaron mediante cromatografía en gel de sílice eluyendo con un gradiente de EtOAc a del 0 al 50 % en DCM proporcionando 6-amino-5-(3-metoxi-2,6-dimetil-fenil)-2-[1-(trifluorometil)vinil]pirrolo[2,3-b]pirazin-7-carboxamida (169 mg, 38 % de rendimiento) como una goma de color amarillo oscuro.

[0949] Etapa 2. A una disolución de 6-amino-5-(3-metoxi-2,6-dimetil-fenil)-2-[1-(trifluorometil)vinil]pirrolo[2,3-b]pirazin-7-carboxamida (42,0 mg, 0,104 mmol) en DCM (2 ml) a 0 ºC se le añadió disolución de diazometano en Et<2>O (0,5 M, 400 μl) luego se calentó hasta t.a. se añadió otra porción de disolución de diazometano (0,5 M, 400 μl). Después de considerarse completa la reacción mediante UPCL-EM, se extinguió la mezcla de reacción con AcOH (200 μl), se agitó durante unos cuantos minutos y se concentró hasta sequedad, luego se llevó a NaHCO<3>acuoso saturado y DCM. Se separaron las fases (separador de fases). Se extrajo la fase acuosa con DCM (3 x). Se concentraron los extractos orgánicos combinados, luego se secó a vacío, proporcionando 6-amino-5-(3-metoxi-2,6-dimetil-fenil)-2-[5-(trifluorometil)-3,4-dihidropirazol-5-il]pirrolo[2,3-b]pirazin-7-carboxamida (48 mg, rendimiento cuantitativo) como una goma de color amarillo.

[0951] Etapa 3. Se disolvió 6-amino-5-(3-metoxi-2,6-dimetil-fenil)-2-[5-(trifluorometil)-3,4-dihidropirazol-5-il]pirrolo[2,3-b]pirazin-7-carboxamida (48,0 mg, 0,107 mmol) en xilenos (3 ml) y se calentó hasta 130 ºC con un condensador de reflujo abierto al aire durante un total de 75 min. Se concentró la mezcla de reacción, luego se purificó mediante cromatografía en gel de sílice eluyendo con un gradiente de EtOAc a del 0 al 100 % en heptano, luego un gradiente de MeOH a del 0 al 20 % en EtOAc para proporcionar 6-amino-5-(3-metoxi-2,6-dimetil-fenil)-2-[1-(trifluorometil)ciclopropil]pirrolo[2,3-b]pirazin-7-carboxamida (35 mg, 81 % de rendimiento) como un sólido de color amarillo claro.

[0953] Etapa 4. Para la desprotección de OMe usando BBr<3>, el mismo procedimiento usado para el compuesto 35 proporcionó un residuo que se purificó mediante HPLC preparativa para proporcionar 6-amino-5-(3-hidroxi-2,6-dimetil-fenil)-2-[1-(trifluorometil)ciclopropil]pirrolo[2,3-b]pirazin-7-carboxamida (17 mg, 50 % de rendimiento) como un sólido blanco esponjoso.<1>H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 9,62 (s, 1H), 7,88 (s, 1H), 7,49 (s a, 2H), 7,36 (s a, 1H), 7,28 (s a, 1H), 7,08 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 6,94 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 1,76 (s, 3H), 1,69 (s, 3H), 1,46 - 1,29 (m, 4H).<19>F-RMN (376 MHz, DMSO-d6) δ -66,85. EM: [M+1]: 406,1.

[0955] La separación mediante CFS quiral del compuesto 198 (14,5 mg, 0,358 mmol) (instrumento: CFS de Mettler Toledo Minigram; columna: Phenomenex Lux Cellulose-2, 10 x 250 mm, 5 μm; condiciones: isocráticas al 40 % de ACN/EtOH 1:1 con el 60 % de CO<2>; velocidad de flujo: 10 ml/min) proporcionó el compuesto 199 y el compuesto 200.

[0957]

[0960] Compuesto 199 de la separación mediante CFS quiral de 198. Pico 1 (tiempo de retención 3,50 min, 99,99 %):S-6-amino-5-(3-hidroxi-2,6-dimetil-fenil)-2-[1-(trifluorometil)ciclopropil]pirrolo[2,3-b]pirazin-7-carboxamida (5 mg) como un sólido blanco esponjoso.<1>H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 9,61 (s, 1H), 7,88 (s, 1H), 7,48 (s a, 2H), 7,36 (s a, 1H), 7,27 (s a, 1H), 7,08 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 6,94 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 1,76 (s, 3H), 1,68 (s, 3H), 1,43 - 1,33 (m, 4H). EM:

[0961] [M+1]: 406,2.

[0963]

[0966] Compuesto 200 de la separación mediante CFS quiral de 198. Pico 2 ((tiempo de retención 3,81 min, 99,95 %):R-6-amino-5-(3-hidroxi-2,6-dimetil-fenil)-2-[1-(trifluorometil)ciclopropil]pirrolo[2,3-b]pirazin-7-carboxamida (5 mg) como un sólido blanco esponjoso.<1>H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 9,61 (s, 1H), 7,87 (s, 1H), 7,48 (s a, 2H), 7,36 (s a, 1H), 7,27 (s a, 1H), 7,08 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 6,94 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 1,76 (s, 3H), 1,69 (s, 3H), 1,43 - 1,35 (m, 4H). EM:

[0967] [M+1]: 406,2.

[0968]

[0971] Compuesto 209 (5-(3-hidroxi-2,6-dimetil-fenil)-2,3-dimetil-pirrolo[2,3-b]pirazin-7-carboxamida)

[0973] Etapa 1. A una disolución de 6-amino-5-(3-metoxi-2,6-dimetil-fenil)-2,3-dimetil-pirrolo[2,3-b]pirazin-7-carbonitrilo (298 mg, 0,927 mmol) en THF (7 ml) se le añadió nitrito deterc-butilo (550 μl, 4,63 mmol). Después de agitar durante 30 min, se puso la mezcla a reflujo durante 3,5 h luego se enfrió hasta t.a. y se concentró hasta sequedad y se purificó mediante cromatografía en gel de sílice eluyendo con un gradiente de EtOAc a del 0 al 100 % en hexanos. Se concentraron las fracciones puras combinadas y se secaron a vacío para proporcionar 5-(3-metoxi-2,6-dimetilfenil)-2,3-dimetil-pirrolo[2,3-b]pirazin-7-carbonitrilo (150 mg, 53 % de rendimiento) como un sólido de color amarillo claro.

[0975] Etapa 2. Para la hidrólisis de nitrilo usando ácido sulfúrico, se realizó el mismo procedimiento usado para el compuesto 164 con el producto intermedio apropiado (150 mg, 0,490 mmol) para proporcionar 5-(3-metoxi-2,6-dimetil-fenil)-2,3-dimetil-pirrolo[2,3-b]pirazin-7-carboxamida (144 mg, 91 % de rendimiento) que se obtuvo como un sólido de color blanquecino.

[0977] Etapa 3. Para la desprotección de OMe usando BBr<3>, el mismo procedimiento usado para el compuesto 35 proporcionó un residuo que se purificó mediante HPLC preparativa para proporcionar 5-(3-hidroxi-2,6-dimetilfenil)-2,3-dimetil-pirrolo[2,3-b]pirazin-7-carboxamida (76 mg, 55 % de rendimiento) como un sólido esponjoso de color blanquecino.<1>H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 9,65 (s a, 1H), 8,13 (s, 1H), 7,86 (s a, 1H), 7,60 (s a, 1H), 7,05 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 6,92 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 2,64 (s, 3H), 1,75 (s, 3H), 1,64 (s, 3H). 1 singlete de Me probablemente escondido bajo el pico de dmso. EM: [M+1]: 311,1.

[0979]

[0982] Compuesto 212 (2-amino-1-(5-hidroxi-2-metil-fenil)-6-(trifluorometil)pirrolo[3,2-b]piridin-3-carboxamida)

[0984] Etapa 1. A una suspensión de NaH (108 mg, 2,83 mmol, dispersión al 60 % en aceite mineral) en DME (3 ml) se le añadió gota a gota 3-bromo-2-cloro-5-(trifluorometil)piridina (300 mg, 1,15 mmol) en DME (3 ml). Después de la adición, se agitó la mezcla durante 25 min, luego se añadió propanodinitrilo (188 mg, 2,85 mmol). Se puso a reflujo la mezcla resultante durante 18 h, se enfrió hasta t.a. y se concentró a vacío. Se purificó el residuo mediante HPLC preparativa para proporcionar 2-[3-bromo-5-(trifluorometil)-2-piridil]propanodinitrilo (100 mg, 30 % de rendimiento).

[0985] Etapa 2. A una disolución de 2-[3-bromo-5-(trifluorometil)-2-piridil]propanodinitrilo (50 mg, 172 μmol) en DMF (2 ml) se le añadieron Pd<2>dba<3>(16 mg, 17 μmol), 5-(metoximetoxi)-2-metilanilina (33,3 mg, 199 μmol), Cs<2>CO<3>(84 mg, 259 μmol) y Xantphos (10,0 mg, 17,3 μmol). Se desgasificó la mezcla a vacío y se rellenó con nitrógeno (3 veces). Se agitó la mezcla a 130 ºC durante 8 h, se enfrió hasta t.a., se diluyó con agua y se extrajo con EtOAc (3x). Se lavaron los extractos orgánicos combinados con salmuera, se secaron sobre Na<2>SO<4>, se filtraron y se concentraron a vacío. Se purificó el residuo mediante cromatografía en gel de sílice eluyendo con un gradiente de EtOAc a del 5 al 100 % en hexanos para proporcionar 2-amino-1-[5-(metoximetoxi)-2-metil-fenil]-6-(trifluorometil)pirrolo[3,2-b]piridin-3-carbonitrilo (30 mg, 46 % de rendimiento).

[0987] Etapa 3. Se agitó 2-amino-1-[5-(metoximetoxi)-2-metil-fenil]-6-(trifluorometil)pirrolo[3,2-b]piridin-3-carbonitrilo (30 mg, 135 μmol) en H<2>SO<4>(1 ml). Después de 90 min, se vertió la mezcla de reacción en hielo picado, se puso en un baño de hielo y se neutralizó con NH<4>OH/H<2>O 1:1. Se filtró el precipitado, se lavó con agua y se secó al aire durante la noche. La purificación mediante HPLC preparativa proporcionó 2-amino-1-(5-hidroxi-2-metil-fenil)-6-(trifluorometil)pirrolo[3,2-b]piridin-3-carboxamida (3,2 mg, 11 % de rendimiento) como un sólido de color naranja.<1>H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 9,76 (s, 1H), 8,45 (s, 1H), 7,77 (s, 1H), 7,34 (s, 2H), 7,31 = 7,13 (m, 2H), 6,98 (s, 1H), 6,91 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 6,71 (s, 1H), 1,78 (s, 3H). EM: [M+1]: 351,3.

[0988]

[0991] Compuesto 214 (6-amino-3-(2-ciclopropiletinil)-5-(3-hidroxi-2,6-dimetil-fenil)-2-tiazol-2-il-pirrolo[2,3-b]pirazin-7-carboxamida)

[0993] Etapa 1. Se agitó una disolución de 6-amino-2-benciloxi-3-bromo-5-(3-metoxi-2,6-dimetilfenil)pirrolo[2,3-b]pirazin-7-carbonitrilo (400 mg, 836 μmol, descrito en la preparación del compuesto 31) en H<2>SO<4>conc. (2 ml) y DCM (2 ml) 10 min. Se añadió NaOH 0,4 M, luego agua y se recuperó el precipitado resultante mediante filtración. Se purificó el producto en bruto mediante cromatografía en gel de sílice usando un gradiente de MeOH a del 0 al 20 % en DCM para proporcionar 6-amino-3-bromo-2-hidroxi-5-(3-metoxi-2,6-dimetil-fenil)pirrolo[2,3-b]pirazin-7-carboxamida (300 mg, 88 % de rendimiento).

[0995] Etapa 2. A una disolución de 6-amino-3-bromo-2-hidroxi-5-(3-metoxi-2,6-dimetilfenil)pirrolo[2,3-b]pirazin-7-carboxamida (300 mg, 739 μmol) y Cs<2>CO<3>(440 mg, 1,35 mmol) en DMF (3 ml) se le añadió 1,1,1-trifluoro-N-fenil-N-(trifluorometilsulfonil)metanosulfonamida (288 mg, 807 μmol). Se agitó la mezcla durante 1 h, se diluyó con agua, se extrajo con EtOAc dos veces. Se lavaron los extractos orgánicos combinados con salmuera, se secaron sobre Na<2>SO<4>, se filtraron y se concentraron. Se purificó el residuo mediante cromatografía en gel de sílice usando un gradiente de EtOAc a del 0 al 100 % en hexanos para proporcionar trifluorometanosulfonato de 6-amino-3-bromo-7-carbamoil-5-(3-metoxi-2,6-dimetilfenil)-5H-pirrolo[2,3-b]pirazin-2-ilo (460 mg, 43 % de rendimiento).

[0997] Etapa 3. Se purgó un vial para microondas cargado con trifluorometanosulfonato de [6-amino-3-bromo-7-carbamoil-5-(3-metoxi-2,6-dimetil-fenil)pirrolo[2,3-b]pirazin-2-ilo] (35 mg, 65 μmol), etinilciclopropano (5,0 mg, 75 μmol), Cul (1,3 mg, 7 μmol) y PdCl<2>(PPh<3>)<2>(5,0 mg, 7 μmol) en DMF (1 ml) con nitrógeno, luego se añadió Et<3>N (520 μmol, 73 ul) y se agitó la mezcla durante 1 h. Se filtró la mezcla y se purificó mediante HPLC preparativa para proporcionar trifluorometanosulfonato de [6-amino-7-carbamoil-3-(2-ciclopropiletinil)-5-(3-metoxi-2,6-dimetil-fenil)pirrolo[2,3-b]pirazin-2-ilo] (10 mg, 29 % de rendimiento).

[0999] Etapa 4. Se desgasificó una mezcla de tributil(tiazol-2-il)estannano (38,5 μmol, 12,1 ul), trifluorometanosulfonato de [6-amino-7-carbamoil-3-(2-ciclopropiletinil)-5-(3-metoxi-2,6-dimetil-fenil)pirrolo[2,3-b]pirazin-2-ilo] (10,0 mg, 19,1 μmol). Cul (0,5 mg, 2,5 μmol), LiCl (1,7 mg, 40 μmol). PdCl<2>(dppf).CH<2>Cl<2>(1,5 mg, 2 μmol) en DMF (3 ml) a vacío, luego se rellenó con nitrógeno. Se agitó la mezcla de reacción a 120 ºC durante 3 h. Se añadió agua, y se recuperó el precipitado resultante mediante filtración para proporcionar 6-amino-3-(2-ciclopropiletinil)-5-(3-metoxi-2,6-dimetil-fenil)-2-tiazol-2-il-pirrolo[2,3-b]pirazin-7-carboxamida en bruto (5 mg, 57 % de rendimiento).

[1001] Etapa 5. Para la desprotección de OMe usando BBr<3>, el mismo procedimiento usado para el compuesto 35 proporcionó un residuo que se purificó mediante HPLC preparativa para proporcionar 6-amino-3-(2-ciclopropiletinil)-5-(3-hidroxi-2,6-dimetil-fenil)-2-tiazol-2-il-pirrolo[2,3-b]pirazin-7-carboxamida (1,1 mg, 23 % de rendimiento).<1>H-RMN (400 MHz, metanol-d4) δ 9,16 (d, J = 4,2 Hz, 1H), 8,47 (d, J = 4,2 Hz, 2H), 7,89 (d, J = 1,1 Hz, 1H), 7,15 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 6,98 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 2,55 - 2,47 (m, 1H), 1,88 (d, J = 21,7 Hz, 6H), 1,37 = 1,31 (m, 2H), 1,11 - 1,05 (m, 2H). EM:

[1003] [M+1]: 445,3.

[1004]

[1007] Compuesto 215 (2-amino-1-(3-hidroxi-2,6-dimetil-fenil)-5-(trifluorometil)pirrolo[2,3-b]piridin-3-carboxamida)

[1008] Etapa 1. Se purgó un vial para microondas cargado con 4-prop-2-inilmorfolina (26 mg, 204 umol), yoduro de cobre (I) (3,5 mg, 19 umol), y trietilamina (1,49 mmol, 207 ul) con N<2>, luego se añadió trifluorometanosulfonato de 6-amino-3-bromo-7-carbamoil-5-(3-metoxi-2,6-dimetilfenil)-5H-pirrolo[2,3-b]pirazin-2-ilo (100 mg, 186 umol) en DMF (1 ml) seguido por PdCl<2>(PPh<3>)<2>(14 mg, 19 umol). Se tapó el vial, se calentó hasta 120 ºC. Después de 1 h, se concentró a vacío, luego se adsorbió sobre sílice (4 g) usando THF. Se purificó mediante cromatografía en gel de sílice eluyendo con un gradiente de EtOAc a del 0 al 100 % en hexanos, luego MeOH a del 0 al 20 % en EtOAc para proporcionar 6-amino-5-(3-metoxi-2,6-dimetil-fenil)-2,3-bis(3-morfolinoprop-1-inil)pirrolo[2,3-b]pirazin-7-carboxamida (16 mg, 15 % de rendimiento).

[1010] Etapa 2. Para la desprotección de OMe usando BBr<3>, el mismo procedimiento usado para el compuesto 35 proporcionó un residuo que se purificó mediante HPLC preparativa para proporcionar 2-amino-1-(3-hidroxi-2,6-dimetil-fenil)-5-(trifluorometil)pirrolo[2,3-b]piridin-3-carboxamida (7 mg, 45 % de rendimiento).<1>H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 9,63 (s, 1H), 7,70 (s, 2H), 7,35 - 7,13 (m, 2H), 7,05 (d,J= 8,3 Hz, 1H), 6,92 (d,J= 8,3 Hz, 1H), 3,62 -3,51 (m, 11H), 3,49 (s, 2H), 2,52 (q,J= 4,3, 3,9 Hz, 4H), 1,74 (s, 3H), 1,66 (s, 3H). EM: [M+1]: 544,5.

[1012]

[1014] Compuesto 219 y compuesto 220

[1016] Etapa 1. Se desgasificó una mezcla del producto intermedio D (150 mg, 327 μmol), Zn(CN)<2>(38,3 mg, 327 μmol) y polvo de Zn (4 mg, 65 μmol) en NMP (3 ml). Se añadió Pd(PPh<3>)<4>(38 mg, 33 μmol), y se agitó la mezcla a 120 ºC durante 24 h, se enfrió hasta t.a., se extinguió con NH<4>Cl acuoso saturado, y se extrajo con EtOAc (3x). Se lavaron los extractos combinados con salmuera, se secaron sobre Na<2>SO<4>, y se concentraron. Se purificó el residuo mediante HPLC preparativa para proporcionar 6-amino-2-ciano-5-(3-metoxi-2,6-dimetil-fenil)pirrolo[2,3-b]pirazin-7-carboxamida (50 mg, 46 % de rendimiento).

[1018] Etapa 2. Para la desprotección de OMe usando BBr<3>, el mismo procedimiento usado para el compuesto 35 proporcionó un residuo que se purificó mediante HPLC preparativa para proporcionar 6-amino-2-ciano-5-(3-hidroxi-2,6-dimetil-fenil)pirrolo[2,3-b]pirazin-7-carboxamida, compuesto 219 (2,6 mg, 9 % de rendimiento)<1>H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 9,64 (s, 1H), 8,28 (s, 1H), 7,88 (s, 2H), 7,38 (s, 1H), 7,05 (d, J = 8,4 Hz, 2H), 6,92 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 1,73 (s, 3H), 1,65 (s, 3H), EM: [M+1]: 324,2; y 6-amino-5-(3-hidroxi-2,6-dimetil-fenil)pirrolo[2,3-b]pirazin-2,7-dicarboxamida, compuesto 220 (10 mg, 33 % de rendimiento).<1>H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 9,57 (s, 1H), 8,67 (s, 1H), 8,35 (s, 1H), 7,64 (s, 3H), 7,41 (s, 1H), 7,13 (s, 1H), 7,11 - 6,97 (m, 1H), 6,91 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 1,73 (s, 3H), 1,65 (s, 3H). EM: [M+1]: 341,4.

[1019]

[1022] Compuesto 221 (2-amino-1-(3-hidroxi-2,6-dimetil-fenil)-5-(trifluorometil)pirrolo[2,3-b]piridin-3-carboxamida)

[1023] Etapa 1. A la disolución de 3-metoxi-2,6-dimetil-anilina (2,02 g, 13,4 mmol) en tolueno (15 ml) se le añadieronterc-butóxido de potasio (1,64 g, 14,6 mmol), 3-bromo-2-cloro-5-(trifluorometil)piridina (3,16 g, 12,1 mmol). Pd<2>dba<3>(582 mg, 635 μmol) y Xantphos (723 mg, 1,26 mmol). Se desgasificó la mezcla a vacío y se rellenó con nitrógeno. Se agitó la mezcla resultante a 120 ºC durante 2 h. Se enfrió la mezcla de reacción hasta t.a., se diluyó con EtOAc, se lavó con agua, salmuera, se secó sobre Na<2>SO<4>, se filtró y se concentró hasta sequedad. Se purificó el residuo mediante cromatografía ultrarrápida en gel de sílice eluyendo con un gradiente de EtOAc a del 0 al 70 % en hexanos para proporcionar 3-bromo-N-(3-metoxi-2,6-dimetil-fenil)-5-(trifluorometil)piridin-2-amina (1,55 g, 34 % de rendimiento).

[1025] Etapa 2. A una disolución de propanodinitrilo (556 mg, 8,41 mmol) en DME (20 ml) se le añadió NaH (361 mg, 8,34 mmol, dispersión al 60 % en aceite mineral). Se agitó la mezcla durante 5 min, luego se añadieron 3-bromo-N-(3-metoxi-2,6-dimetil-fenil)-5-(trifluorometil)piridin-2-amina (1,55 g, 4,13 mmol) y Pd(PPh<3>)<4>(231 mg, 200 μmol). Se agitó la mezcla resultante a 120 ºC durante 17 h en un vial de presión. Se eliminó DME a presión reducida, luego se diluyó la mezcla con EtOAc, se lavó con agua, salmuera, se secó sobre Na<2>SO<4>, se filtró y se concentró hasta sequedad. Se purificó el residuo mediante cromatografía ultrarrápida eluyendo con un gradiente de EtOAc a del 0 al 100 % en hexanos para proporcionar 2-amino-1-(3-metoxi-2,6-dimetil-fenil)-5-(trifluorometil)pirrolo[2,3-b]piridin-3-carbonitrilo (44 mg, 3 % de rendimiento).

[1027] Etapa 3. Para la hidrólisis de nitrilo usando ácido sulfúrico, se realizó el mismo procedimiento usado para el compuesto 164 con el producto intermedio apropiado (44 mg, 0,121 mmol) para proporcionar 2-amino-1-(3-metoxi-2,6-dimetil-fenil)-5-(trifluorometil)pirrolo[2,3-b]piridin-3-carboxamida (40 mg, 87 % de rendimiento).

[1029] Etapa 4. Para la desprotección de OMe usando BBr<3>, el mismo procedimiento usado para el compuesto 35 proporcionó un residuo que se purificó mediante HPLC preparativa para proporcionar 2-amino-1-(3-hidroxi-2,6-dimetil-fenil)-5-(trifluorometil)pirrolo[2,3-b]piridin-3-carboxamida (25 mg, 59 % de rendimiento).<1>H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 9,66 (s, 1H), 8,47 (dt, J = 2,0, 1,0 Hz, 1H), 7,77 (s, 1H), 7,31 (s, 2H), 7,23 (s, 1H), 7,10 (dt, J = 8,3, 0,8 Hz, 1H), 7,00 - 6,80 (m, 2H), 1,82 - 1,57 (m, 6H). EM: [M+1]: 365,3.

[1031]

[1034] Compuesto 242 (6-amino-3-[2-(4,4-difluoro-1-hidroxi-ciclohexil)etinil]-5-(3-hidroxi-2,6-dimetil-fenil)pirrolo[2,3-b]pirazin-7-carboxamida)

[1036] A un vial para microondas cargado con el producto intermedio H (20,0 mg, 53,2 μmol), Cul (1,0 mg, 5,3 μmol), 1-etinil-4,4-difluoro-ciclohexanol (43 mg, 266 μmol) en DMF (1 ml) se le añadió PdCl<2>(PPh<3>)<2>(4 mg, 6 μmol) y Et<3>N (425 μmol, 60 ul). Se tapó el vial y se calentó hasta 80 ºC durante 3 h. Después de enfriar hasta t.a., se filtró la mezcla y se purificó mediante HPLC preparativa para proporcionar 6-amino-3-[2-(4,4-difluoro-1-hidroxiciclohexil)etinil]-5-(3-hidroxi-2,6-dimetilfenil)pirrolo[2,3-b]pirazin-7-carboxamida (5,1 mg, 21 % de rendimiento).<1>H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 9,63 (s, 1H), 8,21 (s, 1H), 7,57 (d, J = 10,6 Hz, 2H), 7,28 (s, 2H), 7,05 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 6,92 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 5,77 (s, 1H), 2,11 - 1,74 (m, 8H), 1,73 (s, 3H), 1,65 (s, 3H). EM: [M+1]: 456,4.

[1037]

[1040] Compuesto 243 (6-amino-5-(3-hidroxi-2,6-dimetil-fenil)-N2-(3-piridil)pirrolo[2,3-b]pirazin-2,7-dicarboxamida)

[1041] Etapa 1. Se calentó Una mezcla del producto intermedio D (1,00 g, 2,18 mmol), PdCl<2>(PPh<3>)<2>(319 mg, 435 □mol) en una mezcla de DMF (5 ml), MeOH (5 ml) y Et<3>N (1,90 ml, 13,6 mmol) a 70 ºC bajo una atmósfera de monóxido de carbono (globo) durante 18 h. Se purgó previamente el aparato con monóxido de carbono una vez. Se evaporaron los componentes volátiles a vacío y se purificó el residuo mediante HPLC preparativa para proporcionar 6-amino-7-carbamoil-5-(3-metoxi-2,6-dimetilfenil)pirrolo[2,3-b]pirazin-2-carboxilato de metilo (689 mg, 86 % de rendimiento).

[1042] Etapa 2. A 6-amino-7-carbamoil-5-(3-metoxi-2,6-dimetil-fenil)pirrolo[2,3-b]pirazin-2-carboxilato de metilo (689 mg, 1,87 mmol) en THF (5 ml) se le añadió NaOH (1 M, 5,60 ml) y se agitó la mezcla durante 1,5 h. Se acidificó el pH usando HCl conc., se añadió DMSO, se eliminaron los componentes volátiles a presión reducida y se purificó el residuo mediante HPLC preparativa para proporcionar ácido 6-amino-7-carbamoil-5-(3-metoxi-2,6-dimetilfenil)pirrolo[2,3-b]pirazin-2-carboxílico (366 mg, 55 % de rendimiento) .

[1044] Etapa 3. A piridin-3-amina (7,95 mg, 84,4 μmol), ácido 6-amino-7-carbamoil-5-(3-metoxi-2,6-dimetil-fenil)pirrolo[2,3-b]pirazin-2-carboxílico (25 mg, 70 μmol) y HATU (29 mg, 77 μmol) en DCM (5 ml) se le añadió DIPEA (211 μmol, 37 μl). Se agitó la mezcla de reacción durante 18 h. Se añadió agua a la mezcla, se separó la fase orgánica, se secó sobre Na<2>SO<4>, se filtró y se concentró a vacío para proporcionar 6-amino-5-(3-metoxi-2,6-dimetil-fenil)-N2-(3-piridil)pirrolo[2,3-b]pirazin-2,7-dicarboxamida en bruto (21 mg, 34 % de rendimiento, 49 % de pureza).

[1046] Etapa 4. Para la desprotección de OMe usando BBr<3>, el mismo procedimiento usado para el compuesto 35 proporcionó un residuo que se purificó mediante HPLC preparativa para proporcionar 6-amino-5-(3-hidroxi-2,6-dimetil-fenil)-N2-(3-piridil)pirrolo[2,3-b]pirazin-2,7-dicarboxamida (3,5 mg, 12 % de rendimiento).<1>H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 10,82 (s, 1H), 9,61 (s, 1H), 8,92 (d, J = 2,5 Hz, 1H), 8,49 (s, 1H), 8,32 (dd, J = 4,8, 1,6 Hz, 1H), 8,20 -8,10 (m, 1H), 7,75 (d, J = 9,0 Hz, 3H), 7,40 (dd, J = 8,3, 4,7 Hz, 1H), 7,30 (s, 1H), 7,07 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 6,93 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 1,75 (s, 3H), 1,67 (s, 3H). EM: [M+1]: 418,3.

[1048]

[1051] Compuesto 257 (6-amino-5-(3-hidroxi-2,6-dimetil-fenil)-3-vinil-pirrolo[2,3-b]pirazin-7-carboxamida)

[1053] Etapa 1. Se desgasificó a vacío una mezcla de tributil(vinil)estannano (37,1 mg, 117 μmol), el producto intermedio H (40,0 mg, 106 μmol), Cul (2,56 mg, 13,4 μmol), LiCl (9,30 mg, 220 μmol), PdCl<2>(dppf).CH<2>Cl<2>(8,1 mg, 10 μmol) en DMF (1 ml), luego se rellenó con nitrógeno. Se agitó la mezcla final a 130 ºC durante 3 h, se enfrió hasta t.a., se filtró y se purificó con HPLC preparativa para proporcionar 6-amino-5-(3-hidroxi-2,6-dimetil-fenil)-3-vinil-pirrolo[2,3-b]pirazin-7-carboxamida (1,4 mg, 4 % de rendimiento).<1>H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 9,59 (s, 1H), 8,29 (s, 1H), 8,19 (s, 1H), 7,38 (d, J = 24,4 Hz, 2H), 7,20 (s, 1H), 7,05 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 6,91 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 6,69 (dd, J = 17,3, 10,8 Hz, 1H), 5,80 (dd, J = 17,3, 1,8 Hz, 1H), 5,15 (dd, J = 10,7, 1,8 Hz, 1H), 1,75 (s, 3H), 1,67 (s, 3H). EM:

[1054] [M+1]: 324,3.

[1055]

[1058] Compuesto 260 (6-amino-2-(ciclopropoxi)-5-(3-hidroxi-2,6-dimetil-fenil)pirrolo[2,3-b]pirazin-7-carboxamida)

[1059] Etapa 1. Se agitó una disolución de ciclopropanol (12 mg, 202 μmol), el producto intermedio D (31 mg, 67 μmol) y Cs<2>CO<3>(66 mg, 202 μmol) en NMP (1 ml) a 140 ºC durante 16 h. Se enfrió la mezcla hasta t.a., se filtró y se purificó mediante HPLC preparativa para proporcionar 6-amino-2-(ciclopropoxi)-5-(3-metoxi-2,6-dimetil-fenil)pirrolo[2,3-b]pirazin-7-carboxamida (3 mg, 12 % de rendimiento).

[1061] Etapa 2. Para la desprotección de OMe usando BBr<3>, el mismo procedimiento usado para el compuesto 35 proporcionó un residuo que se purificó mediante HPLC preparativa para proporcionar 6-amino-2-(ciclopropoxi)-5-(3-hidroxi-2,6-dimetil-fenil)pirrolo[2,3-b]pirazin-7-carboxamida (0,52 mg, 18 % de rendimiento).<1>H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 9,57 (s, 1H), 8,45 (s, 1H), 7,35 (s, 1H), 7,19 (d, J = 19,0 Hz, 3H), 7,02 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 6,88 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 4,25 - 4,14 (m, 1H), 1,73 (s, 3H), 1,65 (s, 3H), 0,73 (t, J = 5,0 Hz, 2H), 0,68 (s, 2H). EM: [M+1]: 354,4.

[1063]

[1066] Compuesto 263 (6-amino-2-(difluorometil)-5-(3-hidroxi-2,6-dimetil-fenil)pirrolo[2,3-b]pirazin-7-carboxamida)

[1067] Etapa 1. Se cargó un matraz para microondas con PdCl<2>(PPh<3>)<2>(79,6 mg, 109 μmol), el producto intermedio D (1,00 g, 2,18 mmol) y formiato de sodio (222 mg, 3,27 mmol). Se purgó el matraz con monóxido de carbono. Se añadió DMF (5 ml) y se hizo pasar una corriente lenta de monóxido de carbono en la suspensión. Se agitó vigorosamente la mezcla a 100 ºC durante 2 h bajo una atmósfera de monóxido de carbono. Se enfrió la mezcla resultante hasta t.a., se filtró y se purificó el sobrenadante mediante HPLC preparativa para proporcionar una mezcla en bruto de 6-amino-2-formil-5-(3-metoxi-2,6-dimetil-fenil)pirrolo[2,3-b]pirazin-7-carboxamida (556 mg, 75 % de rendimiento).

[1069] Etapa 2. A una disolución de 6-amino-2-formil-5-(3-metoxi-2,6-dimetil-fenil)pirrolo[2,3-b]pirazin-7-carboxamida (180 mg, 530 μmol) en DCM (2 ml) a 0 ºC se le añadió disolución Deoxo-Fluor<®>(al 50 % en THF, 1,46 M, 2,00 ml) gota a gota. Se calentó la mezcla hasta t.a. Después de 2 h, se añadió una cantidad adicional de disolución Deoxo-Fluor<®>(al 50 % en THF, 1,17 g, 2,65 mmol). Después de 1 h, se añadió más cantidad de disolución Deoxo-Fluor<®>(al 50 % en THF, 2,35 g, 5,30 mmol) y se agitó la mezcla final durante 4 h, luego se diluyó con DCM y se añadió Na<2>CO<3>acuoso saturado. Se agitó la mezcla bifásica durante 1 h. Se separó la fase orgánica, se secó sobre Na<2>SO<4>, se filtró y se concentró. Se purificó el residuo mediante HPLC preparativa para proporcionar 6-amino-2-(difluorometil)-5-(3-metoxi-2,6-dimetil-fenil)pirrolo[2,3-b]pirazin-7-carboxamida (10 mg, 5 % de rendimiento).

[1071] Etapa 3. Para la desprotección de OMe usando BBr<3>, el mismo procedimiento usado para el compuesto 35 proporcionó un residuo que se purificó mediante HPLC preparativa para proporcionar 6-amino-2-(difluorometil)-5-(3-hidroxi-2,6-dimetil-fenil)pirrolo[2,3-b]pirazin-7-carboxamida (3,0 mg, 31 % de rendimiento).<1>H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 9,66 (s, 1H), 8,29 (s, 1H), 8,00 (s, 1H), 7,65 (s, 2H), 7,30 (d,J= 34,1 Hz, 2H), 7,11 - 6,98 (m, 2H), 6,99 -6,69 (m, 1H), 1,73 (s, 3H), 1,65 (s, 3H). EM: [M+1]: 348,2.

[1072]

[1075] Compuesto 266 (6-amino-5-(3-hidroxi-2,6-dimetil-fenil)-2,3-bis(trideuteriometil)pirrolo[2,3-b]pirazin-7-carboxamida)

[1076] Etapa 1. A una suspensión de virutas de magnesio (380 mg, 15,7 mmol) en Et<2>O (20 ml) se le añadió yodo (33 mg, 130 μmol). Se agitó la mezcla durante 10 min y luego se añadió CD<3>I (975 μl, 15,7 mmol). Se agitó la mezcla 18 h bajo atmósfera de nitrógeno para generar una suspensión de color blanquecino. Se añadió ZnCl<2>(0,5 M en THF, 1,4 ml) gota a gota y se agitó la mezcla durante 20 min. Se añadieron el producto intermedio D (1,2 g, 2,61 mmol) y Pd(PPh<3>)<4>(300 mg, 259 μmol). Se agitó la mezcla a 70 ºC durante 72 h bajo atmósfera de nitrógeno. Se extinguió la reacción con HCl 1 M acuoso, se diluyó con agua, y se extrajo con EtOAc dos veces. Se lavaron los extractos orgánicos combinados con agua, salmuera, se secaron sobre Na<2>SO<4>, se filtraron y se concentraron hasta sequedad. Se purificó el residuo mediante cromatografía en gel de sílice eluyendo con un gradiente de EtOAc a del 0 al 80 % en hexanos para proporcionar 6-amino-5-(3-metoxi-2,6-dimetil-fenil)-2-(trideuteriometil)pirrolo[2,3-b]pirazin-7-carboxamida (400 mg, 46 % de rendimiento).

[1078] Etapa 2. A una disolución de 6-amino-5-(3-metoxi-2,6-dimetil-fenil)-2-(trideuteriometil)pirrolo[2,3-b]pirazin-7-carboxamida (400 mg, 1,22 mmol) en DMF (2 ml) se le añadió NBS (259 mg, 1,46 mmol). Se agitó la mezcla durante 10 min, se diluyó con agua, se agitó durante 20 min y se filtró. Se purificó el precipitado mediante HPLC preparativa para proporcionar 6-amino-3-bromo-5-(3-metoxi-2,6-dimetil-fenil)-2-(trideuteriometil)pirrolo[2,3-b]pirazin-7-carboxamida (400 mg, 81 % de rendimiento).

[1080] Etapa 3. A una suspensión de magnesio (177 mg, 7,3 mmol) en éter (10 ml) se le añadió yodo (16 mg, 61 μmol). Se agitó la mezcla durante 10 min y luego se añadió a la misma CD<3>I (455 μl, 7,31 mmol). Se agitó la mezcla durante 18 h bajo atmósfera de nitrógeno para dar lugar a una suspensión de color blanquecino. Se añadió ZnCl<2>(0,5 M en THF, 14,6 ml) gota a gota. Después de la adición, se agitó la mezcla durante 20 min. Se añadieron 6-amino-3-bromo-5-(3-metoxi-2,6-dimetil-fenil)-2-(trideuteriometil)pirrolo[2,3-b]pirazin-7-carboxamida (496 mg, 1,22 mmol), Pd<2>dba<3>(111 mg, 122 μmol), y tetrafluoroborato de tri-terc-butilfosfonio (71 mg, 244 μmol) y se agitó la mezcla a 70 ºC durante 18 h bajo atmósfera de nitrógeno. Se extinguió la reacción con HCl 1 M acuoso, se diluyó con agua y se extrajo con EtOAc dos veces. Se lavaron los extractos orgánicos combinados con agua, salmuera, se secaron sobre Na<2>SO<4>, se filtraron y se concentraron hasta sequedad. Se purificó el residuo mediante cromatografía en gel de sílice eluyendo con un gradiente de EtOAc a del 0 al 60 % en hexanos para proporcionar 6-amino-5-(3-metoxi-2,6-dimetil-fenil)-2,3-bis(trideuteriometil)pirrolo[2,3-b]pirazin-7-carboxamida (400 mg, 95 % de rendimiento).

[1082] Etapa 4. Para la desprotección de OMe usando BBr<3>, el mismo procedimiento usado para el compuesto 35 proporcionó un residuo que se purificó mediante HPLC preparativa para proporcionar 6-amino-5-(3-hidroxi-2,6-dimetil-fenil)-2,3-bis(trideuteriometil)pirrolo[2,3-b]pirazin-7-carboxamida (65 mg, 17 % de rendimiento).<1>H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 9,55 (s, 1H), 7,41 (s, 1H), 7,22 - 6,98 (m, 4H), 6,89 (d,J= 8,3 Hz, 1H), 1,74 - 1,69 (m, 3H), 1,63 (s, 3H). EM: [M+1]: 332,2.

[1084] Ejemplos de preparación de arilaminas

[1086] Se usaron una variedad de arilaminas para preparar compuestos de la presente invención. Algunas de estas arilaminas estaban disponibles comercialmente y algunas se prepararon. La tabla 2 enumera algunos ejemplos de tales arilaminas para las que se describe la preparación en el presente documento.

[1088] Tabla 2

[1091]

[1092]

[1094] Preparación de la arilamina A1

[1095] Pueden prepararse compuestos de la presente invención a partir de la arilamina A1 que puede prepararse tal como se muestra en el esquema A1 y se describe en el presente documento. Puede protegerse el O del 4-metil-3-nitrofenol disponible comercialmente con un grupo protector adecuado tal como O-MOM. Puede reducirse el nitro para generar la arilamina A1.

[1096] Esquema A1

[1099]

[1101] Etapa 1. A una suspensión de 4-metil-3-nitro-fenol (25 g, 163 mmol) en DCM (250 ml) se le añadió DIPEA (34 ml, 195 mmol) seguido por cloro(metoxi)metano (26,0 g, 323 mmol, 24,5 ml) añadido gota a gota. Después de agitar durante 18 h, se lavó la mezcla de reacción con agua. Se separaron las fases. Se lavó la fase orgánica con HCl 0,2 N (2x), salmuera, se secó sobre MgSO<4>, se filtró y se concentró, luego se secó a vacío proporcionando 4-(metoximetoxi)-1-metil-2-nitro-benceno (31,4 g, 98 % de rendimiento) como un aceite de color rojo oscuro.

[1102] Etapa 2. A una suspensión de 4-(metoximetoxi)-1-metil-2-nitro-benceno (31,4 g, 159 mmol) en EtOH (200 ml) y agua (75 ml) se le añadió cloruro de amonio (43,3 g, 809 mmol), luego polvo de hierro (44,5 g, 796 mmol). Se calentó la mezcla de reacción hasta 80 ºC durante 3,5 h, luego se aumentó la temperatura hasta 90 ºC, agitando durante 4 días. Se enfrió la mezcla de reacción hasta t.a., se filtró y se enjuagó con EtOAc. Se concentró el filtrado y se diluyó con EtOAc y NaHCO<3>acuoso saturado. Se separaron las fases, y se sometió a retroextracción la fase acuosa con EtOAc (2x). Se lavaron los extractos orgánicos combinados con salmuera, se secaron sobre MgSO<4>, se filtraron y se concentraron, proporcionando 26,3 g de producto en bruto como un aceite de color pardo oscuro que se purificó sobre un lecho de gel de sílice eluyendo con EtOAc a del 20 al 30 % en hexanos. Se combinaron las fracciones puras, se concentraron, luego se secaron a vacío, proporcionando 5-(metoximetoxi)-2-metil-anilina (25,4 g, 95 % de rendimiento) como un aceite de color morado.<1>H-RMN (400 MHz, cloroformo-d) δ 6,94 (dd, J = 8,0, 1,7 Hz, 1H), 6,45 - 6,30 (m, 2H), 5,12 (s, 2H), 3,47 (s, 3H), 2,10 (s, 3H). EM: [M+1]: 168,3.

[1103] Preparación de la arilamina A2

[1104] Pueden prepararse compuestos de la presente invención a partir de la arilamina A2 que puede prepararse tal como se muestra en el esquema A2 y se describe en el presente documento (adaptado a partir de Can J Chem 2012, 90, 75-84). Puede bromarse 1,3-dimetil-2-nitrobenceno disponible comercialmente en condiciones de bromación adecuadas. El bromo resultante puede convertirse en un metoxilo tras tratamiento con metóxido de sodio y bromuro de cobre (I). Puede reducirse el nitro para generar la arilamina A2.

[1107]

[1109] Etapa 1. Se dotó un matraz de fondo redondo de 3 bocas de 3 l de un agitador mecánico, condensador de reflujo y embudo de adición y se cargó con 1,3-dimetil-2-nitro-benceno (300 g, 1,98 mol), DCM (900 ml), polvo de hierro (28,0 g, 501 mmol) y bromuro de hierro (III) (11,9 g, 40,3 mmol). Se añadió bromo (112 ml, 2,19 mol) gota a gota a través de un embudo de adición a lo largo de 45-60 min. La monitorización interna de la temperatura mostró una exoterma hasta 30 ºC.90 min después de completarse la adición de bromo, se añadió más cantidad de bromo (5 ml, 97,6 mmol) y se agitó la mezcla de reacción durante otros 45 min para que se completase la conversión. Se diluyó la mezcla de reacción con agua con hielo (1,5 l) y Et<2>O (1,5 l). Se separaron las fases. Se sometió a retroextracción la fase acuosa con Et<2>O (0,5 l). Se lavaron las fases orgánicas combinadas con Na<2>S<2>O<3>al 20 % acuoso (1 l), salmuera (500 ml), se secaron sobre Na<2>SO<4>, se filtraron sobre un lecho de gel de sílice (300 cm<3>), se concentraron, luego se secaron a vacío para proporcionar 1-bromo-2,4-dimetil-3-nitro-benceno (451,5 g, 99 % de rendimiento) como un sólido de color blanquecino.

[1111] Etapa 2. Se cargó un matraz de fondo redondo de 4 bocas de 5 l dotado de un agitador mecánico y un condensador de reflujo con 1-bromo-2,4-dimetil-3-nitro-benceno (451,5 g, 1,96 mol) en DMF (1,6 l). Se añadió CuBr (28,0 g, 195 mmol) seguido por MeONa (1,31 l, 5,89 mol, al 25 % en MeOH). Se calentó lentamente la mezcla de reacción hasta 95 ºC, logrando un reflujo suave. Después de 6 h, se dejó que se enfriase la mezcla de reacción hasta t.a. durante la noche. Se diluyó la mezcla de reacción con Et<2>O y NH<4>Cl acuoso saturado (1,5 l de cada uno). Se separaron las fases, y se sometió a retroextracción la fase acuosa con Et<2>O (750 ml). Se lavaron los extractos orgánicos combinados con salmuera (750 ml), se secaron sobre Na<2>SO<4>y se filtraron sobre un lecho de sílice, se enjuagaron con Et<2>O y se concentraron, se secaron a vacío para proporcionar 1-metoxi-2,4-dimetil-3-nitro-benceno (352 g, 99 % de rendimiento) como un sólido de color ocre.

[1113] Etapa 3. A una disolución de 1-metoxi-2,4-dimetil-3-nitro-benceno (115 g, 635 mmol) en EtOH (1,5 l) en un matraz de 3 bocas de 3 l dotado de un agitador mecánico se le añadió polvo de hierro (213 g, 3,81 mol), luego se añadió en porciones una disolución de cloruro de amonio (204 g, 3,81 mol) en agua (500 ml). Se calentó la mezcla hasta 85 ºC durante 8 h. Se enfrió la mezcla hasta t.a. y se filtró sobre Celite. Se redujo el volumen del filtrado (se evaporó la mayor parte del EtOH) y se diluyó la mezcla resultante con Et<2>O (800 ml) y agua (150 ml). Se separaron las fases, y se sometió a retroextracción la fase acuosa con Et<2>O (500 ml). Se lavaron los extractos orgánicos combinados con salmuera, se secaron sobre Na<2>SO<4>, se filtraron, se concentraron y se secaron a vacío para proporcionar 3-metoxi-2,6-dimetil-anilina (89,1 g, 93 % de rendimiento) como un aceite de color pardo.<1>H-RMN (400 MHz, cloroformo-d) δ 6,88 (dq, J = 8,3, 0,7 Hz, 1H), 6,31 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 3,79 (s, 3H), 3,61 (s a, 2H), 2,14 (d, J = 0,7 Hz, 3H), 2,07 (s, 3H). EM: [M+1]: 152,3.

[1115] Preparación de la arilamina A3

[1117] Pueden prepararse compuestos de la presente invención a partir de la arilamina A3 que puede prepararse tal como se muestra en el esquema A3 y se describe en el presente documento. El metoxilo de 1-metoxi-2,4-dimetil-3-nitrobenceno descrito en la preparación del producto intermedio A2 puede escindirse usando BBr<3>y puede protegerse el O del fenol resultante con un grupo protector adecuado tal como O-MOM. Puede reducirse el nitro para generar la arilamina A3.

[1120]

[1123] Etapa 1. A una disolución de 1-metoxi-2,4-dimetil-3-nitro-benceno (20 g, 110 mmol) en DCM (200 ml), enfriada en un baño de hielo seco/acetonitrilo, se le añadió disolución de BBr<3>en DCM (1 M, 168 ml) gota a gota a través de un embudo de adición. Se dejó que la mezcla se calentase lentamente hasta t.a. durante la noche. Luego se vertió lentamente la mezcla de reacción en una mezcla agitada de hielo, agua (1 l) y KH<2>PO<4>(75 g). Se separaron las fases, y se extrajo la fase acuosa con DCM (2 x 500 ml). Se lavaron los extractos orgánicos combinados con salmuera (500 ml), se secaron sobre MgSO<4>, se filtraron sobre un lecho de sílice (375 g), eluyendo con DCM, se concentraron y se secaron a vacío para proporcionar 2,4-dimetil-3-nitro-fenol (18,0 g, 98 % de rendimiento) como un sólido de color amarillo.

[1125] Etapa 2. A una suspensión de 2,4-dimetil-3-nitro-fenol (18,96 g, 113 mmol) en DCM (200 ml) se le añadió DIPEA (23,7 ml, 136 mmol) luego cloro(metoxi)metano (9,5 ml, 125 mmol) gota a gota. Después de agitar durante 3,5 h, se añadió más cantidad de cloro(metoxi)metano (2,0 ml, 26 mmol) y se agitó la mezcla de reacción durante la noche. Se extinguió la mezcla de reacción con NH<4>Cl acuoso saturado (100 ml) y se diluyó con agua (100 ml). Se separaron las fases, y se sometió a retroextracción la fase acuosa con DCM (100 ml). Se lavaron los extractos orgánicos combinados con HCl 0,2 N (2 x 100 ml), NaOH 1 M (100 ml), salmuera (100 ml), se secaron sobre MgSO<4>, se filtraron sobre sílice (aprox.100 cm<3>), eluyendo con DCM, se concentraron, y se secaron a vacío para proporcionar 1-(metoximetoxi)-2,4-dimetil-3-nitro-benceno (22,1 g, 92 % de rendimiento) como un sólido ceroso de color amarillo pálido.

[1126] Etapa 3. A un matraz que contenía paladio sobre carbono (5,06 g, 4,76 mmol, al 10 % p/p) bajo atmósfera de nitrógeno se le añadió MeOH (300 ml) seguido por 1-(metoximetoxi)-2,4-dimetil-3-nitrobenceno (20,1 g, 95,1 mmol). Se purgó el matraz con hidrógeno y se agitó bajo una atmósfera de hidrógeno durante 2 días. Se purgó la mezcla de reacción con nitrógeno durante 2 h, y se añadió Celite. Se filtró la mezcla sobre un lecho de Celite usando MeOH y DCM. Se concentró el filtrado y se secó a vacío para proporcionar 3-(metoximetoxi)-2,6-dimetil-anilina (17,1 g, 99 % de rendimiento) como un aceite turbio de color naranja pálido.<1>H-RMN (400 MHz, cloroformo-d) δ 6,86 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 6,49 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 5,15 (s, 2H), 3,48 (s, 3H), 2,14 (s, 3H), 2,11 (s, 3H). EM: [M+1]: 182,2.

[1127] Preparación de la arilamina A4

[1128] Pueden prepararse compuestos de la presente invención a partir de la arilamina A4 que puede prepararse tal como se muestra en el esquema A4 y se describe en el presente documento. Puede bromarse ácido 2-cloro-3-metoxibenzoico disponible comercialmente con un reactivo de bromación adecuado y puede convertirse el ácido carboxílico en un NHBoc en condiciones de Curtius. El bromo puede convertirse en un metilo y el NHBoc puede escindirse en condiciones ácidas para generar la arilamina A4.

[1131]

[1133] Etapa 1. A una disolución de ácido 2-cloro-3-metoxi-benzoico (50 g, 268 mmol) en AcOH (250 ml) y agua (250 ml) se le añadió bromo (27,5 ml, 537 mmol) gota a gota. Se agitó la mezcla a 60 ºC durante 18 h, se enfrió hasta t.a., se añadió salmuera, y se extrajo la mezcla dos veces con DCM. Se secaron los extractos orgánicos combinados sobre Na<2>SO<4>, se filtraron y se concentraron a vacío para proporcionar ácido 6-bromo-2-cloro-3-metoxi-benzoico (71 g, rendimiento cuantitativo) como un aceite de color pardo que solidificó tras permanecer en reposo a vacío a lo largo del fin de semana.

[1134] Etapa 2. A una disolución de ácido 6-bromo-2-cloro-3-metoxi-benzoico (23,6 g, 88,9 mmol). Et<3>N (38 ml, 271 mmol) yterc-butanol (42,5 ml, 450 mmol) en tolueno (500 ml) se le añadió [azido(fenoxi)fosforil]oxibenceno (29,5 ml, 136 mmol). Se calentó la mezcla a 100 ºC durante 16 h, se enfrió hasta t.a., luego se eliminaron los componentes volátiles a vacío. Se diluyó el residuo con EtOAc (100 ml), y se lavó la fase orgánica con ácido cítrico al 5 %, agua, NaHCO<3>acuoso saturado, salmuera, se secó sobre Na<2>SO<4>, se filtró y se concentró hasta sequedad. Se purificó el residuo mediante cromatografía en gel de sílice eluyendo con un gradiente de EtOAc a del 0 al 20 % en hexanos para proporcionarN-(6-bromo-2-cloro-3-metoxi-fenil)carbamato deterc-butilo (16,2 g, 54 % de rendimiento) como un sólido de color amarillento.

[1135] Etapa 3. A una disolución de N-(6-bromo-2-cloro-3-metoxi-fenil)carbamato deterc-butilo (25 g, 74,3 mmol) en dioxano (500 ml) se le añadió trimetilboroxina (al 50 % p/p en THF, 20,51 g, 81,7 mmol). PdCl<2>(dppf).CH<2>Cl<2>(5,22 g, 7,43 mmol) y Na<2>CO<3>acuoso (2 M, 111 ml, 223 mmol). Se calentó la mezcla a 100 ºC durante 16 h, se enfrió hasta t.a. luego se eliminaron los componentes volátiles a vacío. Se añadieron EtOAc y agua. Se separó la fase orgánica y se lavó con salmuera, se secó sobre Na<2>SO<4>, se filtró y se concentró hasta sequedad. Se purificó el residuo mediante cromatografía en gel de sílice eluyendo con un gradiente de EtOAc a del 0 al 30 % en heptano para proporcionar N-(2-cloro-3-metoxi-6-metil-fenil)carbamato deterc-butilo (13,8 g, 68 % de rendimiento) como un sólido de color amarillento.

[1136] Etapa 4. Se añadió HCl en dioxano (4 M, 100 ml) a una disolución de N-(2-cloro-3-metoxi-6-metil-fenil)carbamato deterc-butilo (13,8 g, 50,8 mmol) en MeOH (100 ml). Después de 3 h, se evaporaron los componentes volátiles hasta sequedad a vacío para proporcionar un sólido blanco al que se le añadieron con agitación vigorosa 250 ml de EtOAc y 250 ml de NaHCO<3>acuoso saturado. Se separó la fase orgánica. Se sometió a retroextracción la fase acuosa con EtOAc. Se lavaron las fases orgánicas combinadas con salmuera, se secaron sobre Na<2>SO<4>, se filtraron y se concentraron a vacío. Se purificó el residuo mediante cromatografía en gel de sílice eluyendo con un gradiente de EtOAc a del 0 al 30 % en heptano para proporcionar 2-cloro-3-metoxi-6-metil-anilina (7,9 g, 91 % de rendimiento) como un aceite transparente que solidificó tras permanecer en reposo.<1>H-RMN (400 MHz, cloroformo-d) δ 6,95 -6,79 (m, 1H), 6,27 (dd, J = 8,3, 1,5 Hz, 1H), 4,06 (s a, 2H), 3,83 (d, J = 1,6 Hz, 3H), 2,12 (d, J = 0,8 Hz, 3H). EM:

[1137] [M+1]: 172,2.

[1138] Preparación de la arilamina A5

[1139] Pueden prepararse compuestos de la presente invención a partir de la arilamina A5 que puede prepararse tal como se muestra en el esquema A5 y se describe en el presente documento. Puede clorarse 3-metoxi-2-metil-anilina disponible comercialmente con un reactivo de cloración para generar la arilamina A5.

[1142]

[1145] Etapa 1. Se añadió NCS (98 g, 734 mmol) en 4 porciones (15 minutos entre cada adición) a una disolución de 3-metoxi-2-metil-anilina (100 g, 729 mmol) en DCM (500 ml) a 0 ºC.30 min después de la última adición, se añadieron 100 g de gel de sílice, se evaporó la mezcla a vacío y se purificó el residuo de color negro mediante cromatografía en gel de sílice (carga seca) eluyendo con un gradiente de EtOAc a del 0 al 10 % en hexanos para proporcionar 6-cloro-3-metoxi-2-metil-anilina (55,6 g, 44 % de rendimiento) como un sólido de color naranja.<1>H-RMN (400 MHz, cloroformo-d) δ 7,08 (d, J = 8,8 Hz, 1H), 6,28 (d, J = 8,8 Hz, 1H), 4,02 (s a, 2H), 3,78 (s, 3H), 2,07 (s, 3H). EM: [M+1]: 172,3.

[1147] Preparación de la arilamina A6

[1149] Pueden prepararse compuestos de la presente invención a partir de la arilamina A6 que puede prepararse tal como se muestra en el esquema A6 y se describe en el presente documento. Puede protegerse el O de 3-amino-2,4-dicloro-fenol disponible comercialmente con un grupo protector adecuado tal como O-PMB para generar la arilamina A6.

[1152]

[1155] A una suspensión de sal de HCl de 3-amino-2,4-dicloro-fenol (20 g, 93,3 mmol) en DMF (150 ml) se le añadió 1-(clorometil)-4-metoxi-benceno (14,0 ml, 103 mmol), yoduro de tetrabutilamonio (1 g, 3,00 mmol) y Cs<2>CO<3>(64,0 g, 196 mmol). Se agitó la mezcla a 40 ºC durante la noche, luego se diluyó con agua, se agitó durante 20 min, y se filtró. Se lavó el precipitado con agua y se secó a vacío. El producto en bruto resultante se purificó mediante cromatografía en gel de sílice eluyendo con un gradiente de DCM a del 0 al 100 % en hexanos para proporcionar 2,6-dicloro-3-[(4-metoxifenil)metoxi]anilina (20 g, 72 % de rendimiento) como un sólido de color blanquecino.<1>H-RMN (400 MHz, cloroformo-d) δ 7,38 - 7,30 (m, 2H), 7,05 (d, J = 8,9 Hz, 1H), 6,92 - 6,77 (m, 2H), 6,32 (s, 1H), 5,01 (s, 2H), 4,46 (s, 2H), 3,79 (s, 3H). EM: [M+1]: 298,0.

[1157] Preparación de la arilamina A7.

[1159] Pueden prepararse compuestos de la presente invención a partir el producto intermedio A7, A8 o A9 clave que pueden prepararse tal como se muestra en el esquema A7 y se describe en el presente documento (adaptado a partir de J. AM. CHEM. SOC. 2004, 126, 1150-1160). Puede protegerse el N de la 3-metoxianilina disponible comercialmente con un grupo protector adecuado tal como NH-PIV. Puede usarse un enfoque de orto-metalación dirigida para introducir un R<1>adecuado tal como CH<3>o CD<3>. El grupo protector NH-PIV puede escindirse en condiciones ácidas y puede bromarse la parte restante en orto con respecto al nitrógeno con un reactivo de bromación adecuado tal como NBS. En este punto, puede sustituirse el bromo por éster de boronato en condiciones mediadas por metal y derivatizarse adicionalmente mediante un R<2>adecuado tal como CH<3>o CD<3>para generar el producto intermedio A7, A8 o A9 clave. Alternativamente, puede protegerse el N de la bromoanilina con un grupo protector adecuado tal como NH-Boc antes de la sustitución de bromo. En este caso, el NH-Boc puede escindirse en condiciones ácidas para generar el producto intermedio A7, A8 o A9 clave.

[1160]

[1163] Arilamina A7

[1165] Etapa 1. Se añadió lentamente cloruro de 2,2-dimetilpropanoílo (51 ml, 416 mmol) a una disolución de 3-metoxianilina (50 g, 406 mmol, 45,5 ml), piridina (66 ml, 816 mmol) y DMAP (500 mg, 4,1 mmol) en DCM (500 ml). Después de 1 h, se añadió HCl 1 N acuoso y se separaron las fases. Se sometió a retroextracción la fase acuosa con CH<2>Cl<2>. Se combinaron las fases orgánicas, se lavaron con HCl 1 N acuoso, salmuera, luego se secaron sobre Na<2>SO<4>, se filtraron y se evaporaron hasta sequedad para proporcionar N-(3-metoxifenil)-2,2-dimetil-propanamida (84 g, rendimiento cuantitativo).

[1167] Etapa 2. A una disolución de N-(3-metoxifenil)-2,2-dimetil-propanamida (82 g, 396 mmol) en THF (820 ml) a 0 ºC se le añadió nBuLi (2,5 M, 325 ml, 813 mmol) gota a gota. Después de 2 h a 0 ºC, se enfrió la disolución hasta -78 ºC y se añadió CD<3>I (27 ml, 434 mmol) gota a gota. Se agitó la mezcla durante 16 h a t.a. Se vertió la mezcla en HCl 1 N acuoso y se extrajo con EtOAc dos veces. Se secaron las fases orgánicas combinadas sobre Na<2>SO<4>, se filtraron y se concentraron hasta sequedad para proporcionar N-[3-metoxi-2-(trideuteriometil)fenil]-2,2-dimetilpropanamida (82 g, 92 % de rendimiento) como un sólido blanco.

[1169] Etapa 3. Se calentó N-[3-metoxi-2-(trideuteriometil)fenil]-2,2-dimetil-propanamida (81,5 g, 363 mmol) en dioxano (300 ml) y HCl conc. (12 M, 300 ml) hasta reflujo durante 24 h. Se enfrió la mezcla de color oscuro hasta 0 ºC en un baño de hielo, se neutralizó con NaOH 2 N acuoso, se extrajo con EtOAc dos veces. Se lavaron los extractos orgánicos combinados con salmuera, se secaron sobre Na<2>SO<4>, se filtraron y se concentraron hasta sequedad para proporcionar un residuo de color oscuro que se purificó mediante cromatografía en gel de sílice eluyendo con un gradiente de EtOAc a del 0 al 50 % en heptano para proporcionar 3-metoxi-2-(trideuteriometil)anilina (36 g, 71 % de rendimiento) como un aceite transparente.

[1171] Etapa 4. A una disolución de 3-metoxi-2-(trideuteriometil)anilina (35 g, 250 mmol) en DCM (500 ml) a 0 ºC se le añadió NBS (45 g, 253 mmol). Se agitó la mezcla a 0 ºC durante 3 h y se concentró hasta aproximadamente 75 ml y se filtró. Se evaporó el filtrado hasta sequedad y se purificó el residuo mediante cromatografía en gel de sílice eluyendo con un gradiente de EtOAc a del 0 % al 50 % en heptano para proporcionar 6-bromo-3-metoxi-2-(trideuteriometil)anilina (35 g, 64 % de rendimiento).

[1173] Etapa 5. Se añadió carbonato deterc-butoxicarbonilo yterc-butilo (87,2 g, 400 mmol) a una disolución de 6-bromo-3-metoxi-2-(trideuteriometil)anilina (35 g, 160 mmol), DMAP (3,90 g, 32 mmol) y DIPEA (415 mmol, 72,3 ml) en THF (500 ml). Se calentó la mezcla hasta reflujo durante 18 h. Se eliminaron los componentes volátiles a vacío y se filtró el residuo a través de gel de sílice eluyendo con EtOAc al 50 % en heptano para proporcionar una mezcla de N-[6-bromo-3-metoxi-2-(trideuteriometil)fenil]carbamato deterc-butilo y N-[6-bromo-3-metoxi-2-(trideuteriometil)fenil]-N-terc-butoxicarbonil-carbamato deterc-butilo (64 g) como un aceite transparente que se disolvió en metanol (500 ml). Se añadió K<2>CO<3>(110 g, 796 mmol) y se agitó la mezcla a 60 ºC durante 48 h. Se eliminaron los componentes volátiles a vacío. EtOAc y se añadió agua al residuo. Se separó la fase orgánica, se lavó con salmuera, se secó sobre Na<2>SO<4>, se filtró y se concentró. Se purificó el residuo mediante cromatografía en gel de sílice eluyendo con un gradiente de EtOAc a del 0 al 40 % para proporcionar N-[6-bromo-3-metoxi-2-trideuteriometil)fenil]carbamato deterc-butilo (50 g, rendimiento cuantitativo) como un aceite transparente.

[1174] Etapa 6. A una disolución de N-[6-bromo-3-metoxi-2-(trideuteriometil)fenil]carbamato deterc-butilo (33 g, 103 mmol) en dioxano (700 ml) se le añadieron bis(pinacolato)diboro (51 g, 201 mmol), KOAc (35,5 g, 362 mmol) y PdCl<2>(dppf).CH<2>Cl<2>(7,6 g, 10,4 mmol). Se desgasificó la mezcla a vacío, se rellenó con nitrógeno y se agitó a reflujo durante 18 h. Se enfrió la mezcla hasta t.a. y se concentró hasta un menor volumen. Se diluyó residuo de color negro con EtOAc y se filtró a través de un lecho de gel de sílice (250 g) eluyendo con 2 l de EtOAc al 50 % en heptano. Se evaporó el filtrado, y se purificó el residuo mediante cromatografía en gel de sílice eluyendo con un gradiente de EtOAc a del 0 al 20 % en heptano para proporcionar N-[3-metoxi-6-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-2-(trideuteriometil)fenil]carbamato deterc-butilo (22,5 g, 59 % de rendimiento), que solidificó tras permanecer en reposo a vacío.

[1175] Etapa 7. A una disolución de PdCl<2>(dppf).CH<2>Cl<2>(5,3 g, 7,24 mmol) en DMF (500 ml) se le añadió rápidamente de manera consecutiva CD<3>I (60,6 g, 418 mmol, 26 ml), N-[3-metoxi-6-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-2-(trideuteriometil)fenil]carbamato deterc-butilo (52 g, 142 mmol) y fosfato tribásico de potasio acuoso (2 M, 350 ml). Se burbujeó nitrógeno en la disolución durante 2 min, luego se agitó la mezcla a 80 ºC durante 30 min bajo una atmósfera de nitrógeno, luego se enfrió hasta t.a., y se añadió EtOAc. Se lavó la fase orgánica con agua, salmuera, se secó sobre Na<2>SO<4>, se filtró y se concentró hasta sequedad. Se purificó el residuo mediante cromatografía en gel de sílice eluyendo con un gradiente de EtOAc a del 0 al 20 % en heptano para proporcionar N-[3-metoxi-2,6-bis(trideuteriometil)fenil]carbamato deterc-butilo (15 g, 41 % de rendimiento) como un aceite transparente espeso. Etapa 8. Se añadió HCl en dioxano (4 M, 100 ml) a una disolución de N-[3-metoxi-2,6-bis(trideuteriometil)fenil]carbamato deterc-butilo (22,5 g, 87,4 mmol) en MeOH (100 ml). Después de 3 h, se eliminaron los componentes volátiles a vacío para proporcionar un sólido blanco. Se añadieron EtOAc y agua seguido por una disolución acuoso saturada de NaHCO<3>hasta pH básico. Se lavó la fase orgánica con salmuera, se secó sobre Na<2>SO<4>, se filtró y se evaporó hasta sequedad. Se purificó el residuo mediante cromatografía en gel de sílice eluyendo con un gradiente de EtOAc a del 0 al 40 % en heptano para proporcionar 3-metoxi-2,6-bis(trideuteriometil)anilina (7,5 g, 55 % de rendimiento) como un aceite transparente.<1>H-RMN (400 MHz, cloroformod) δ 6,96 (dd, J = 8,3, 2,6 Hz, 1H), 6,38 (dd, J = 8,3, 2,5 Hz, 1H), 3,86 (d, J = 2,4 Hz, 3H), 3,64 (s, 2H). EM: [M+1]: 158,3.

[1176] Ruta alternativa usada para la preparación de arilamina A8 (sin Boc)

[1177] Etapa 1. En un tubo sellado, 6-bromo-3-metoxi-2-metilanilina (3,4 g, 15,7 mmol), bis(pinacolato)diboro (5,58 g, 21,98 mmol) y Cs<2>CO<3>(15,4 g, 47,1 mmol) se llevaron a 1,4-dioxano (68 ml) anhidro y se purgó con gas nitrógeno en la mezcla de reacción durante 15 min. Entonces, se añadió PdCl<2>(dppf) (1,92 g, 2,36 mmol) en la mezcla de reacción y se calentó a 100 ºC durante 2 h. Después de completarse, se extinguió la mezcla de reacción con agua con hielo y se extrajo usando EtOAc (3 x 100 ml). Se secó la fase orgánica combinada sobre Na<2>SO<4>, se filtró y se concentró para dar el producto en bruto que se purificó mediante cromatografía en gel de sílice eluyendo con un gradiente de EtOAc a del 10 al 12 % en hexanos) para proporcionar 3-metoxi-2-metil-6-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)anilina (2,50 g, 60 % de rendimiento).

[1178] Etapa 2. En un tubo sellado, 3-metoxi-2-metil-6-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)anilina (2,5 g, 9,39 mmol), yodometano-d3

(4,08 g, 28,19 mmol) y fosfato tribásico de potasio (9,95 g, 46,9 mmol) se llevaron a DMF anhidra (50 ml) y se purgó con gas nitrógeno en la mezcla de reacción durante 15 min. Entonces, se añadió PdCl<2>(dppf) (0,766 g, 0,939 mmol) y se calentó la mezcla de reacción a 80 ºC durante 2 h. Después de completarse, se extinguió la mezcla de reacción usando agua con hielo y se extrajo usando EtOAc (3 x 50 ml). Se secó la fase orgánica combinada sobre Na<2>SO<4>, se filtró y se concentró para dar el producto en bruto que se purificó mediante cromatografía en gel de sílice eluyendo con un gradiente de EtOAc a del 6 al 8 % en hexanos) para obtener 3-metoxi-2-metil-6-(metil-d3

)anilina pura como un líquido incoloro (0,75 g, 51 % de rendimiento).<1>H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 6,68 (d,J= 7,2 Hz, 1H), 6,31 (d,J= 7,4 Hz, 1H), 4,63 (s, 2H), 3,55 (s, 3H), 1,94 (s, 3H). EM: [M+1]: 155,3.

[1179] Preparación de la arilamina A10

[1180] Pueden prepararse compuestos de la presente invención a partir del producto intermedio A10 clave que puede prepararse tal como se muestra en el esquema A8 y se describe en el presente documento. Puede bromarse el ácido 3-metoxi-2-nitrobenzoico disponible comercialmente. Luego puede esterificarse el ácido, convertirse el bromo en un metilo y reducirse el nitro al amino. El amino resultante puede convertirse en un bromo en condiciones de Sandmeyer y luego puede saponificarse el éster. Luego puede convertirse el ácido resultante en el NHBoc en condiciones de Curtius. En este caso, el NH-Boc puede escindirse en condiciones ácidas para generar el producto intermedio A10 clave.

[1181]

[1183] Etapa 1. A ácido 3-metoxi-2-nitro-benzoico (10,04 g, 50,93 mmol) y Ag<2>SO<4>(8,10 g, 26,0 mmol) en la oscuridad se le añadió ácido sulfúrico conc. (200 ml) y bromo molecular (9,4 g, 58,6 mmol, 3,0 ml) gota a gota. Se agitó la mezcla en la oscuridad durante 3,5 h, luego se extinguió añadiendo hielo picado, se enfrió en un baño de hielo y se agitó. Se recogieron los sólidos mediante filtración, se lavaron con H<2>O y se secaron al aire. Se llevó el sólido resultante a acetona (300 ml), se filtró, se lavó el residuo (sales de plata) con acetona. Se secó el filtrado sobre MgSO<4>, se filtró y se concentró, proporcionando ácido 6-bromo-3-metoxi-2-nitro-benzoico (14,64 g, 100 % de rendimiento) como un sólido de color morado.

[1184] Etapa 2. A una disolución de ácido 6-bromo-3-metoxi-2-nitro-benzoico (14,64 g, 53,0 mmol) en DMF (140 ml) se le añadió carbonato de potasio anhidro (14,66 g, 106,1 mmol) seguido por yoduro de metilo (11,4 g, 80,3 mmol, 5,0 ml). Después de agitar la mezcla de reacción durante 2 h, se añadió H<2>O gota a gota (420 ml). Se recogió el sólido mediante filtración y se lavó con H<2>O, se secó al aire y luego se secó a vacío, proporcionando 6-bromo-3-metoxi-2-nitro-benzoato de metilo (12,89 g, 84 % de rendimiento) como un sólido de color beis claro.

[1185] Etapa 3. En un recipiente de presión, se burbujeó N<2>a través de una disolución de 6-bromo-3-metoxi-2-nitrobenzoato de metilo (6,0 g, 20,7 mmol) en dioxano (100 ml) y disolución acuosa de Na<2>CO<3>(2 M, 31 ml, 62,3 mmol), luego se añadieron Pd(dppf)Cl<2>(1,64 g, 2,01 mmol) y trimetilboroxina (6,74 g, 26,8 mmol, 7,5 ml). Se burbujeó N<2>a través de la disolución. Se tapó el recipiente, se agitó a 100 ºC durante la noche. Se enfrió la mezcla de reacción hasta t.a., se vertió en H<2>O y se extrajo con EtOAc (3x). Se lavaron las fases orgánicas combinadas con salmuera, se secaron sobre Na<2>SO<4>, se filtraron sobre una capa de sílice y se concentraron a vacío. Se purificó el residuo mediante cromatografía en gel de sílice eluyendo con un gradiente de EtOAc (a del 0 al 100 %) en Hep. Se combinaron las fracciones apropiadas y se concentraron a vacío para proporcionar 3-metoxi-6-metil-2-nitro-benzoato de metilo (3,06 g, 66 % de rendimiento) como un sólido ceroso de color beis claro.

[1186] Etapa 4. A una disolución de 3-metoxi-6-metil-2-nitro-benzoato de metilo (3,06 g, 13,6 mmol) en MeOH (225 ml) se le añadió paladio sobre carbono (al 10 % p/p, 1,42 g, 1,33 mmol) formando una suspensión en parte del MeOH. Se purgó la mezcla con H<2>y se agitó bajo una atmósfera de hidrógeno durante 2 h. Se filtró la suspensión a través de Celite y se concentró el filtrado, luego se secó a vacío, proporcionando 2-amino-3-metoxi-6-metil-benzoato de metilo (2,56 g, 97 % de rendimiento) como un aceite de color ámbar claro.

[1187] Etapa 5. A una disolución de 2-amino-3-metoxi-6-metil-benzoato de metilo (2,13 g, 10,9 mmol) en DMF (12 ml) y MeCN (18 ml) se le añadió nitrito deterc-butilo (2,0 ml, 17 mmol) seguido por bromuro de cobre (II) (2,86 g, 12,8 mmol). Se agitó la mezcla de reacción a 55 ºC durante 9 min, luego se enfrió hasta T.A., se diluyó con H<2>O y se extrajo con EtOAc (3x). Se lavaron los extractos orgánicos combinados con NH<4>Cl acuoso saturado, salmuera, se secaron sobre Na<2>SO<4>, se filtraron y se concentraron. Se purificó el residuo mediante cromatografía en gel de sílice (carga seca) eluyendo con un gradiente de EtOAc (a del 0 al 70 %) en Hep. Se combinaron las fracciones apropiadas y se concentraron a vacío para proporcionar 2-bromo-3-metoxi-6-metil-benzoato de metilo (1,52 g, 54 % de rendimiento) como un aceite de color amarillo.<1>H-RMN (400 MHz, cloroformo-d) δ 7,15 - 7,05 (m, 1H), 6,84 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 3,95 (s, 3H), 3,88 (s, 3H), 2,26 (d, J = 0,7 Hz, 3H).

[1188] Etapa 6. A una disolución de 2-bromo-3-metoxi-6-metil-benzoato de metilo (1,52 g, 5,87 mmol) en MeOH (15 ml) y THF (15 ml) se le añadió NaOH acuoso (4 M, 15 ml, 60,0 mmol) y disolución de peróxido de hidrógeno al 30 % (1,5 ml). Se agitó la mezcla de reacción a 70 ºC durante la noche, luego a 90 ºC durante 4 días. Se enfrió la mezcla de reacción hasta T.A. y se eliminaron los componentes volátiles a vacío. Se diluyó el residuo con HCl 3 N (20 ml) y se extrajo con CHCl<3>/iPrOH (4:1, 4x). Se concentraron los extractos orgánicos combinados, luego se secaron a vacío y se purificó el producto en bruto mediante cromatografía en gel de sílice (carga seca) eluyendo con un gradiente de MeOH (a del 0 al 10 %) en CH<2>Cl<2>con modificador de AcOH al 1 %. Se combinaron las fracciones apropiadas y se concentraron a vacío para proporcionar ácido 2-bromo-3-metoxi-6-metil-benzoico (896 mg, 62 % de rendimiento) como un sólido blanco.

[1189] Etapa 7. A una disolución de ácido 2-bromo-3-metoxi-6-metil-benzoico (1,15 g, 4,68 mmol), trietilamina (1,42 g, 14,1 mmol, 2,0 ml), yterc-butanol (1,73 g, 23,4 mmol, 2,25 ml) en tolueno (8 ml) se le añadió DPPA (1,93 g, 7,01 mmol, 1,52 ml) y se calentó la mezcla hasta reflujo durante 1 h y se enfrió hasta t.a. Se eliminaron los componentes volátiles a vacío. Se diluyó el residuo con ácido cítrico ac. al 15 % y se extrajo con EtOAc (3x). Se lavaron las fases orgánicas combinadas con NaOH 1 N acuoso, salmuera, se secaron sobre Na<2>SO<4>, se filtraron y se concentraron a vacío. Se purificó el producto en bruto mediante cromatografía en gel de sílice (carga seca) eluyendo con un gradiente de EtOAc (a del 0 al 30 %) en Hep. Se combinaron las fracciones apropiadas y se concentraron a vacío para proporcionarN-(2-bromo-3-metoxi-6-metil-fenil)carbamato deterc-butilo (1,34 g, 91 % de rendimiento) como un aceite incoloro.

[1190] Etapa 8. A una disolución de N-(2-bromo-3-metoxi-6-metil-fenil)carbamato deterc-butilo (1,34 g, 4,24 mmol) en MeOH (10 ml) se le añadió HCl en dioxano (4 M, 10,5 ml, 42,0 mmol). Se agitó la mezcla de reacción a t.a. durante 75 min. Se evaporó la disolución hasta sequedad a vacío, luego se suspendió en NaHCO<3>acuoso saturado y se extrajo con DCM (3 x, separador de fases). Se concentraron los extractos orgánicos combinados y se purificó el producto en bruto mediante cromatografía en gel de sílice eluyendo con un gradiente de EtOAc (a del 0 al 50 %) en Hep. Se combinaron las fracciones apropiadas y se concentraron a vacío para proporcionar 2-bromo-3-metoxi-6-metil-anilina (807 mg, 88 % de rendimiento) como un sólido ceroso de color blanquecino. EM: [M+1]: 218,0.

[1191] Preparación de la arilamina A11

[1192] Pueden prepararse compuestos de la presente invención a partir del producto intermedio A11 clave que puede prepararse tal como se muestra en el esquema A9 y se describe en el presente documento. Puede convertirse el ácido 6-bromo-3-metoxi-2-metilbenzoico disponible comercialmente en el N-Boc en condiciones de redisposición de Curtius. El NH-Boc puede escindirse en condiciones ácidas para generar el producto intermedio A11 clave.

[1195]

[1197] Etapa 1. A una disolución de ácido 6-bromo-3-metoxi-2-metil-benzoico (1 g, 4,08 mmol), trietilamina (1,23 g, 12,2 mmol, 1,70 ml), yterc-butanol (1,55 g, 20,9 mmol) en tolueno (7 ml) se le añadió [azido(fenoxi)fosforil]oxibenceno (1,72 g, 6,25 mmol, 1,35 ml). Se calentó la mezcla hasta reflujo durante 5 h y se enfrió hasta t.a. Se eliminaron los componentes volátiles a vacío. Se diluyó el residuo con ácido cítrico ac. al 15 % y se extrajo con EtOAc (3x). Se lavaron las fases orgánicas combinadas con salmuera, se secaron sobre Na<2>SO<4>, se filtraron, y se concentraron a vacío. Se purificó el residuo mediante cromatografía en gel de sílice (carga seca) eluyendo con un gradiente de EtOAc (a del 0 al 30 %) en Hep. Se combinaron las fracciones apropiadas y se concentraron a vacío para proporcionar N-(6-bromo-3-metoxi-2-metil-fenil)carbamato deterc-butilo (1,41 g, rendimiento cuantitativo) como un aceite incoloro, que no era puro pero se usó tal cual en la siguiente etapa.

[1198] Etapa 2. A una disolución de N-(6-bromo-3-metoxi-2-metil-fenil)carbamato deterc-butilo (1,41 g, 4,46 mmol) en MeOH (22 ml) se le añadió HCl en dioxano (4 M, 22 ml). Se agitó la mezcla de reacción a t.a. durante 80 min. Se evaporó la disolución hasta sequedad a vacío, luego se suspendió en NaHCO<3>acuoso saturado y se extrajo con DCM (3 x). Se secaron los extractos orgánicos combinados sobre Na<2>SO<4>, se filtraron y se concentraron. Se purificó el residuo mediante cromatografía en gel de sílice (carga seca) eluyendo con un gradiente de EtOAc (a del 0 al 50 %) en Hep. Se combinaron las fracciones apropiadas y se concentraron a vacío para proporcionar 6-bromo-3-metoxi-2-metil-anilina (586 mg, 61 % de rendimiento) como un sólido blanco.<1>H-RMN (400 MHz, cloroformo-d) δ 7,23 (dd, J = 8,8, 0,6 Hz, 1H), 6,26 (d, J = 8,8 Hz, 1H), 4,06 (s a, 2H), 3,78 (s, 3H), 2,09 (t, J = 0,5 Hz, 3H). EM:

[1199] [M+1]: 218,0.

[1200] Separación quiral de compuestos seleccionados

[1201] Se separaron mezclas racémicas de atropoisómeros usando métodos de CFS quiral en un CFS de Mettler Toledo Minigram (MTM), un CFS-EM de Waters Prep 15 (WP15) o un CFS-EM de Waters Prep 100 (WP100) (tabla 3). Se seleccionó una columna apropiada para lograr una resolución satisfactoria de los picos. Se combinaron las fracciones apropiadas para cada pico, se concentraron y habitualmente se llevó a una mezcla de agua y un disolvente orgánico miscible en agua adecuado tal como EtOH, IPA, CH<3>CN o una mezcla de los mismos y se liofilizó. Volvieron a analizarse los productos separados, mediante CFS quiral, para evaluar la pureza quiral.

[1203] C1A es Phenomenex Lux Cellulose-2, 10 x 250 mm, 5 μm; C1B es Phenomenex Lux Cellulose-2, 30 x 250 mm, 5 μm; C2 es Chiral Technologies IA, 10 x 250 mm, 5 μm; C3 es Chiral Technologies IC, 10 x 250 mm, 5 μm; C4 es Chiral Technologies ID, 10 x 250 mm, 5 μm; C5 es Chiral Technologies IG, 10 x 250 mm, 5 μm; C6 es Chiral Technologies AS, 10 x 250 mm, 5 μm; C7 es Phenomenex Lux Cellulose-4, 10 x 250 mm, 5 μm.

[1205] Se confirmaron las asignaciones estructurales de los atropoisómeros separados mediante la actividad biológica donde se asignó que el enantiómero biológicamente activo tenía la configuración (S), lo que se confirmó mediante cristalografía de rayos X de compuestos clave.

[1207] Tabla 3

[1210]

[1211]

[1214] Ejemplo 2. Ensayo enzimático

[1216] La detección de actividad cinasa de Myt1 utilizó un ensayo de cinasa Myt1 humana recombinante que medía la hidrolisis de ATP usando un ensayo ADP-Glo disponible comercialmente (ensayo de cinasa ADP-Glo<™>de Promega, 10.000 ensayos, #V9102). En resumen, se prepararon 5 μl de Myt1 humana recombinante (proteína humana recombinante PKMYT1 de longitud completa expresada en células de insecto de Thermo Fisher #A33387; ~80 % de pureza) en tampón de reacción (HEPES 70 mM, MgCl<2>3 mM, MnCl<2>3 mM, PEG 2000050 μg/ml, ortovanadato de Na 3 μM, DTT 1,2 mM) y se añadió a una microplaca no tratada, de pocillos de fondo plano, de poliestireno blanco de 384 pocillos (Corning #3572). Después de esto, se añadieron 5 μl de compuestos (diluidos en tampón de reacción hasta DMSO al 0,5 %) a la microplaca y se centrifugó la placa brevemente y se incubó a 22 ºC durante 15 minutos. Se diluyó disolución de adenosina trifosfato (ATP) ultrapura (kit ADP-Glo de Promega) en tampón de reacción y se añadieron 5 μl a la microplaca, se centrifugó brevemente y se incubó durante 60 minutos a 30 ºC. La concentración de enzima Myt1 final era de 18 nM y la concentración de ATP final era de 10 μM. Después de la incubación durante 60 minutos, se añadieron 15 μl de reactivo ADP-Glo y se centrifugó la placa brevemente y se selló y se incubó en la oscuridad durante 40 minutos a 22 ºC. Tras esto, se añadieron 30 μl de reactivo de detección de cinasa por pocillo y se centrifugó la placa brevemente, se selló y se incubó durante 45-60 minutos a 22 ºC en la oscuridad. Se leyó la luminiscencia usando Envision (integración de 250 ms). Se calcularon la CI<50>y el % de inhibición máx. para cada compuesto inhibidor sometido a prueba.

[1218] Se muestran compuestos preparados a modo de ejemplo y sus actividades en la tabla 4 a continuación.

[1220] Tabla 4

[1223]

[1224]

[1225]

[1226]

[1227]

[1228]

[1229]

[1231] En la tabla 4, la columna de Método indica un método de preparación descrito anteriormente usado en la preparación de los compuestos.

[1232] Ejemplo 3. Validación genética

[1233] Se transdujeron dos ARNgs paraPKMYT1y un ARNgs para LacZ (control) en los clones que sobreexpresan CCNE1 y RPE1-hTERC Cas9 TP53-/- parentales (WT). Se sembraron en placa células infectadas a baja densidad para medir su capacidad para formar colonias de <50 células. Después de 10 días de crecimiento, se tiñeron las colonias, se obtuvieron imágenes, y se cuantificaron. Usando ensayos de supervivencia clonogénica, se observó un profundo defecto de aptitud celular fitness en células que sobreexpresan CCNE1 en comparación con células parentales transducidas con ARNgs dePKMYT1(figuras 3A y 3B). Se repitió este experimento usando clones que sobreexpresan CCNE1 y FT282-hTERC TP53-/- parentales (WT) y se observaron resultados similares (figuras 4A y 4B).

[1234] Para determinar si la actividad cinasa de PKMYT1 era responsable de mantener la viabilidad de células RPE1-hTERC Cas9 TP53-/- que sobreexpresan CCNE1, se clonó el marco de lectura abierto (ORF) dePKMYT1en un vector de expresión de mamífero inducible. Luego se crearon mutaciones silenciosas resistentes a ARNgs en la secuencia de ORF dePKMYT1mediante mutagénesis por PCR. Se generó una única mutación puntual que dio como resultado un cambio de aminoácido de n asparagina (N) a alanina (A) en el residuo 238. El cambio de aminoácido N238A en el dominio de cinasa dio como resultado un mutante catalíticamente inactivo dePKMYT1. Se generaron líneas celulares estables en los clones que sobreexpresanCCNE1y RPE1-hTERC Cas9 TP53-/-parentales que o bien expresaban el ORF dePKMYT1de tipo natural o bien el mutante de N238A inactivo para cinasa (figura 5A). Se transdujeron estas líneas celulares estables o bien con ARNgs sin selección como diana de LacZ o bien ARNgs #4 de PKMYT1. Luego se sembraron en placas las células a baja densidad para medir su capacidad para formar colonias de >50 células. Después de 10 días de crecimiento, se tiñeron las colonias, se obtuvieron imágenes, y se cuantificaron. La expresión de un ORF dePKMYT1resistente a ARNgs pero no de la versión catalíticamente inactiva rescató el defecto de aptitud inducido por la transducción de ARNgs #4 en ambos clones que sobreexpresanCCNE1(figuras 5B y 5C). Este resultado demostró que la selección como diana de la actividad cinasa de PKMYT1 destruye selectivamente células que sobreexpresanCCNE1.

[1235] Ejemplo 4. Validación farmacológica

[1236] Se trataron clones que sobreexpresanCCNE1y RPE1-hTERC Cas9 TP53-/- parentales (WT) con el compuesto 133 en un ajuste de la dosis y se determinó la viabilidad celular. Se encontró que las células que sobreexpresan CCNE1 son más sensibles al compuesto 133 que las células WT correspondientes (figura 3C). Se observó un efecto similar en clones que sobreexpresan CCNE1 y FT282-hTERC TP53<R175H>WT (figura 4C). Para ensayos de proliferación de dosis-respuesta usando líneas celulares RPE1-hTERC y FT282-hTERT, se sembraron células en placas de 96 pocillos y se les dosificó inhibidor de Myt1 diluido en serie. Se obtuvieron imágenes de las células una vez al día usando el microscopio IncuCyte S3 y se calculó el porcentaje de confluencia por pocillo a lo largo del tiempo. Una vez que las células alcanzaron cuatro duplicaciones de población, se finalizó el experimento y se representaron gráficamente las curvas de CI<50>para el punto de tiempo final. Se calculó el porcentaje de confluencia con relación a la confluencia celular en los pocillos no tratados.

[1237] Se evaluó un panel de 16 líneas de células cancerosas con niveles o bien normales (n=8) o bien elevados de CCNE1 (n=8) para determinar su sensibilidad al compuesto 28 en un ensayo de proliferación celular (figura 6). Se generaron curvas de dosis-respuesta en estos ensayos de proliferación de líneas de células cancerosas tal como sigue. Se sembraron células en placas de 96 pocillos y se les dosificó el compuesto 28 diluido en serie. Después de 7 días, se usó Cell Titer Glo (CTG) para evaluar el estado de proliferación de estas células y se representaron gráficamente los valores de CI<50>.

[1238] Se llevó a cabo un experimento similar en un panel de 8 líneas de células cancerosas con o bien FBXW7 de tipo natural (n=5) o bien mutaciones de FBXW7 (n=3) en el que se evaluaron estas células para determinar su sensibilidad al compuesto 95 en un ensayo de proliferación celular (figura 7). Se generaron curvas de dosisrespuesta en estos ensayos de proliferación de líneas de células cancerosas tal como sigue. Se sembraron células en placas de 96 pocillos y se les dosificó inhibidor de Myt1 diluido en serie. Se obtuvieron imágenes de las células una vez al día usando el microscopio IncuCyte S3 y se calculó el porcentaje de confluencia por pocillo a lo largo del tiempo. Una vez que las células alcanzaron cuatro duplicaciones de población, se finalizó el experimento y se representaron gráficamente las curvas de CI<50>para el punto de tiempo final. Se calculó el porcentaje de confluencia con relación a la confluencia celular en los pocillos no tratados.

Claims (16)

1. REIVINDICACIONES

1. Compuesto de fórmula (I):

o sal farmacéuticamente aceptable del mismo,

en el que

cada uno de X, Y, y Z es independientemente N o CR<2>;

R<1>y cada R<2>son independientemente hidrógeno, alquilo C<1-6>opcionalmente sustituido, alquenilo C<2-6>opcionalmente sustituido, alquinilo C<2-6>opcionalmente sustituido, cicloalquilo C<3-8>opcionalmente sustituido, cicloalquenilo C<3-8>opcionalmente sustituido, heterociclilo C<2-9>opcionalmente sustituido, heterociclil C<2-9>opcionalmente sustituido-alquilo C<1-6>, arilo C<6-10>opcionalmente sustituido, heteroarilo C<1-9>opcionalmente sustituido, heteroaril C<1-9>opcionalmente sustituido-alquilo C<1-6>, halógeno, ciano, -N(R<7>)<2>, -OR<7>, -C(O)N(R<8>)<2>, -SO<2>N(R<8>)<2>, -SO<2>R<7A>, o -Q-R<7B>; o R<1>se combina con un R<2>que esvecinala R<1>para formar un alquileno C<3-6>opcionalmente sustituido;

cada uno de R<3>y R<4>es independientemente alquilo C<1-6>opcionalmente sustituido o halógeno;

R<5>es H o -N(R<7>)<2>;

R<6>es -C(O)NH(R<8>), -C(O)R<7A>, o -SO<2>R<7A>;

cada R<7>es independientemente hidrógeno, alquilo C<1-6>opcionalmente sustituido, aril C<6-10>opcionalmente sustituido-alquilo C<1-6>, cicloalquilo C<3-8>opcionalmente sustituido, arilo C<6-10>opcionalmente sustituido, heterociclilo C<2-9>opcionalmente sustituido, heteroarilo C<1-9>opcionalmente sustituido, heteroaril C<1-9>opcionalmente sustituido-alquilo C<1-6>, o -SO<2>R<7A>; o dos grupos R<7>,junto con el átomo al que están ambos unidos, se combinan para formar un heterociclilo C<2-9>opcionalmente sustituido;

cada R<7A>es independientemente alquilo C<1-6>opcionalmente sustituido, cicloalquilo C<3-8>opcionalmente sustituido, o arilo C<6-10>opcionalmente sustituido;

cada R<7B>es independientemente hidroxilo, alquilo C<1-6>opcionalmente sustituido, arilo C<6-10>opcionalmente sustituido, heterociclilo C<2-9>opcionalmente sustituido, heteroarilo C<1-9>opcionalmente sustituido, -N(R<7>)<2>, -C(O)N(R<8>)<2>, -SO<2>N(R<8>)<2>, -SO<2>R<7A>, o alcoxilo opcionalmente sustituido;

cada R<8>es independientemente hidrógeno, alquilo C<1-6>opcionalmente sustituido, alcoxialquilo C<2-6>opcionalmente sustituido, aril C<6-10>opcionalmente sustituido-alquilo C<1-6>, arilo C<6-10>opcionalmente sustituido, cicloalquilo C<3-8>opcionalmente sustituido, o heteroarilo C<1-9>opcionalmente sustituido; o dos R<8>, junto con el átomo al que están unidos, se combinan para formar un heterociclilo C<2-9>opcionalmente sustituido;

Q es alquileno C<1-6>opcionalmente sustituido, alquenileno C<2-6>opcionalmente sustituido, alquinileno C<2-6>opcionalmente sustituido, cicloalquileno C<3-8>opcionalmente sustituido, cicloalquenileno C<3-8>opcionalmente sustituido-arileno C<6-10>opcionalmente sustituido, heterociclileno C<2-9>opcionalmente sustituido, o heteroarileno C<1-9>opcionalmente sustituido.

2. Compuesto según la reivindicación 1, o sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en el que el compuesto está enriquecido para el atropoisómero de fórmula (IA):

3. Compuesto según la reivindicación 1 o 2, o sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en el que X es CR<2>.

4. Compuesto según la reivindicación 1, o sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en el que el compuesto es de fórmula (II):

5. Compuesto según la reivindicación 4, o sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en el que el compuesto está enriquecido para el atropoisómero de fórmula (IIA):

6. Compuesto según la reivindicación 1, o sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en el que el compuesto es de fórmula (III):

en el que R<2A>es hidrógeno, alquilo C<1-6>opcionalmente sustituido, alquenilo C<2-6>opcionalmente sustituido, alquinilo C<2-6>opcionalmente sustituido, cicloalquilo C<3-8>opcionalmente sustituido, cicloalquenilo C<3-8>opcionalmente sustituido, heterociclilo C<2-9>opcionalmente sustituido, heterociclil C<2-9>opcionalmente sustituido-alquilo C<1-6>, arilo C<6-10>opcionalmente sustituido, heteroarilo C<1-9>opcionalmente sustituido, heteroaril C<1-9>opcionalmente sustituido-alquilo C<1-6>, halógeno, -N(R<7>)<2>, -OR<7>, -C(O)N(R<8>)<2>, -SO<2>N(R<8>)<2>, -SO<2>R<7A>, o -Q-R<7B>.

7. Compuesto según la reivindicación 6, o sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en el que el compuesto está enriquecido para el atropoisómero de fórmula (IIIA):

8. Compuesto según la reivindicación 6 ó 7, o sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en el que R<2A>es hidrógeno, alquilo C<1-6>opcionalmente sustituido, o halógeno.

9. Compuesto según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 8, o sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en el que R<3>es:

(a) alquilo C<1-6>opcionalmente sustituido; o

(b) halógeno, opcionalmente en el que el halógeno es cloro.

10. Compuesto según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 9, o sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en el que R<4>es:

(a) alquilo C<1-6>opcionalmente sustituido; o

(b) halógeno, opcionalmente en el que el halógeno es cloro.

11. Compuesto según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 10, o sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en el que R<2>es:

(a) hidrógeno; o

(b) alquilo C<1-6>opcionalmente sustituido, opcionalmente en el que el alquilo C<1-6>es metilo opcionalmente sustituido o isopropilo opcionalmente sustituido; o

(c) halógeno.

12. Compuesto según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 11, o sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en el que R<1>es:

(a) hidrógeno; o

(b) halógeno; opcionalmente cloro o bromo; o

(c) alquilo C<1-6>opcionalmente sustituido; opcionalmente en el que el alquilo C<1-6>opcionalmente sustituido es metilo opcionalmente sustituido, etilo opcionalmente sustituido, isopropilo opcionalmente sustituido, butilo opcionalmente sustituido; o

(d) heteroarilo C<1-9>opcionalmente sustituido; opcionalmente en el que el heteroarilo C<1-9>opcionalmente sustituido es 1,3-tiazolilo opcionalmente sustituido, 1,2-tiazolilo opcionalmente sustituido, 1,3-oxazolilo opcionalmente sustituido, benzo-1,3-tiazolilo opcionalmente sustituido, benzo-1,3-oxazolilo opcionalmente sustituido, indolilo opcionalmente sustituido, bencimidazolilo opcionalmente sustituido, piridilo opcionalmente sustituido, imidazolilo opcionalmente sustituido, pirimidilo opcionalmente sustituido, pirazinilo opcionalmente sustituido, piridazinilo opcionalmente sustituido, pirazolilo opcionalmente sustituido; o (e) cicloalquilo C<3-8>opcionalmente sustituido; opcionalmente en el que el cicloalquilo C<3-8>opcionalmente sustituido es ciclopropilo opcionalmente sustituido, ciclobutilo opcionalmente sustituido, ciclopentilo opcionalmente sustituido, ciclohexilo opcionalmente sustituido; o

(f) arilo C<6-10>opcionalmente sustituido; opcionalmente en el que el arilo C<6-10>opcionalmente sustituido es fenilo opcionalmente sustituido; o

(g) heterociclilo C<2-9>opcionalmente sustituido; opcionalmente en el que el heterociclilo C<2-9>opcionalmente sustituido es 1,2,3,6-tetrahidropiridinilo opcionalmente sustituido, piperidinilo opcionalmente sustituido, morfolinilo opcionalmente sustituido, piperazinilo opcionalmente sustituido, tiomorfolinilo opcionalmente

sustituido, oxa-aza-espiro[3,3]heptano opcionalmente sustituido, oxa-aza-biciclo[3.2.1]octano opcionalmente sustituido; o

(h) cicloalquenilo opcionalmente sustituido; o

(i) -Q-R<7B>; opcionalmente en el que Q es alquinileno C<2-6>opcionalmente sustituido, alquileno C<1-6>,o arileno C<6-10>;

(j) -Q-R<7B>; opcionalmente en el que R<7B>es heterociclilo C<2-9>opcionalmente sustituido, o arilo C<6-10>opcionalmente sustituido; y/o

(j) -N(R<7>)<2>; opcionalmente en el que -N(R<7>)<2>es dietilamino;

opcionalmente en el que, cuando R<1>está opcionalmente sustituido, el sustituyente es uno, dos, o tres grupos seleccionados independientemente del grupo que consiste en metilo, difluorometilo, trifluorometilo, flúor, cloro, bromo, amino, hidroxilo, ciano, oxo, -C(O)NH<2>, -C(O)NH(Me), -C(O)N(Me)<2>, -(CH<2>)<n>-C(O)OH, y -(CH<2>)<n>-C(O)Ot-Bu, en los que n es 0 ó 1.

13. Compuesto según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 12, o sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en el que R<5>es

(a) hidrógeno; o

(b) -N(R<7>), opcionalmente en el que -NR<7>es -NH<2>.

14. Compuesto según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 13, o sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en el que R<6>es

(a) -C(O)NH(R<8>); opcionalmente en el que -C(O)NH(R<8>) es -C(O)NH<2>_o -C(O)NH(Me); o

(b) -SO<2>R<7A>, opcionalmente en el que -SO<2>R<7A>es -SO<2>Me.

15. Compuesto según la reivindicación 1, en el que el compuesto tiene la estructura:

o sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

16. Composición farmacéutica que comprende el compuesto según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 15, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, y un excipiente farmacéuticamente aceptable, opcionalmente en la que la composición está enriquecida isotópicamente en deuterio.