FR2476652A1 - Derives 3', 4'-anhydro-4'-epi de la kanamycine a et leur procede de preparation - Google Patents

Abstract

CES DERIVES PRESENTENT LA FORMULE GENERALE: (CF DESSIN DANS BOPI) DANS LAQUELLE R EST UN GROUPE ALKYL, ARALKYL OU ARYL ET Y EST UN GROUPE ALKYLIDENE, ARALKYLIDENE, CYCLOALKYLIDENE OU TETRAHYDROPYRANYLIDENE. ILS SONT OBTENUS PAR TRAITEMENT, AVEC UN ALCOLATE DE METAL ALCALIN DANS UN ALCANOL INFERIEUR EN MILIEU ALCALIN, D'UN DERIVE 4-O-SULFONYL DE KANAMYCINE A.

Description

i

La présente invention concerne des dérivés3', 4 '-anhydro-

4'-6pi de la kanamycine A ainsi que leur procédé de prépa-

ration en partant de la kanamycine A. Ces dérivés3',4'-anhydro-4'épisontdes intermédiaires nouveauxet utilespour la synthèse des dérivés désoxy de kanamycine A actifs vis-à-vis d'une variété de souches bactériennes r6sistantes à la kanamycine A.

L'invention a donc pour objet des dérivés 3',4 '-anhydro-

4'-épi de kanamycine A de formule

CH2NHCOOR NHCOOR

0 3

NHCOOR

4' i

OH I

OCH2 0

NCO

311 2"

OH dans laquelle R est un groupe alkyl,aralkyl ou aryl et Y est

un groupe alkylidène, aralkylidène, cycloalkylidène ou tétra-

hydropyranylidéne.

Dans les composés de formule I, le groupe -COOR est un groupe aminoprotecteur connu du typeuréthane dans lequel R est de préférence un groupe alkyl de 1 à 6 atomes de carbone, un groupe benzyl, phényl ou phénylsubstitué tel que le

nitrophényl. Le groupe Y peut être un groupe hydroxy-pro-

tecteur bivalent connu tel que défini ci-dessus et est de préférence un alkylidène inférieur tel que le formylidène, l'éthylidène et l'isopropylidène t un phénylalkylidène tel

que le benzylidéne; un cyclopentylidène et un cyclohéxyli-

dène; et un groupe tétrahydropyranylidéne. Les composés de formule I sont des intermédiaires utiles pour la préparation de la 3',4'didésoxykanamycine A de formule III ou de la 4'-d6soxykanamycine A de formule IV, car ils sont facilement transformables en composés de formule INou IV par ouverture de l'anneau 3', 4'-époxy avec un nuclé6ophile tel qu'un halogène et traitement convenable du d6rivé halogénohydrine suivi de l'élimination des groupes amino-et hydroxy-protec- teurs. N a2 3' III OH NH 0o IV 3' 3o - On sait que la 3',4'-didésoxykanamycine A de formule IIT qui a tout d'abord été pr6parée par voie semi-synthétique à partir de la kanamycine A par H. Umezawa et al. (demande de brevet japonais KOKAI n 105699/80; brevet belge n 881251; brevet US n 4195170; demande de brevet US n 187014) et la 4'-désoxykanamycine A de formule IV qui a tout d'abord 6té préparée par voie semi-synthétique à partir de la kanamycine A par Naito et al.(demande de brevet Japonais KOKAI n 93944/

; brevet US n 3 886 138), présentent une activité anti-

bactérienne améliorée vis-à-vis des organismes sensibles et résistant à la kanamycine, comparativement à la kanamycine

A; les deux méthodes précédentes nécessitent pourtant plu-

sieurs étapes pour obtenir les dérivés convenablement protégés de kanamycine A dont seul le groupe kydroxy en cause reste

libre. Dans ces deux méthodes, il est nécessaire, afin d'ob-

tenir les d6rivés protégés de kanamycine A qui contiennent le groupe hydroxy libre en 4', d'entreprendre des étapes préparatoires compliquées. C'est ainsi que le groupe amino

en 6' de la kanamycine A est protégé par un groupe amino-

protecteur et que les autres groupes amino sont protégés

par un autre groupe amino-protecteur. Une fois le 4',6'-0,N-

cyclique carbamate formé avec une base, les groupes hydroxy qui ne doivent pas être élimin6s sont protégés par un groupe hydroxy-protecteur. Après ouverture de l'anneau carbamate, le groupe amino en 6' est à nouveau protégé par un groupe amino-protecteur. Le processus général de désoxygénation qui est appliqué

de façon élégante pour la préparation de la 3',4'-didésoxy-

kanamycine B et de la tobramycine à partir de la kanamycine B par l'intermédiaire de leurs d6rivés sulfonyl ne convient pas

pour le dérivé de kanamycine A parce que les étapes protec-

trices avant désoxygénation sont très compliquées. La deman-

deresse a étudié l'application du nouveau procédé qu'elle

a elle-même proposé pour la préparation de la 3',4'-didéso-

xykanamycine B (demande de brevet japonais KOKAI n 71 445/77 brevet angaïs n 1 537 905) à la préparation des dérivés

désoxy de kanamycine A. Ce procédé se base sur le compor-

tement des saccharides -dans une réaction d'acylation, ce qui fait que la réactivité du groupe hydroxy en 4 est nettement inférieure à celle des autres groupes hydroxy, et il consiste à faire r6agir le dérivé 4f,,6,,-Oprotégé de la k.namycfnL ú

penta-N-protégé avec un chlorure d'alcanoyl ou d'aroyl, no-

tamment le chlorure de benzoyl, dans de la pyridine pour acyler les groupes hydroxy en 3' et 2" et laisser libre le groupe hydroxy en 4'. La sulfonylation du groupe hydroxy en 4' du dérivé acyl6 donne un composé de formule gén6rale

CH2NICOORI NHCOOR'

N1 XOOR'

:10

OX' O OH

wO

NHCOOR'

V 0CH2

O

\o NHCOO OX' dans laquelle R' est un groupe alkyl ou aryl; W' est un groupe mésyl, tosyl ou benzylsulfonyl; X' est un groupe alcanoyl, et spécialement un groupe contenant de 2 à 4 atomes de carbone tels que les groupes acétyl ou aroyl, et

spécialement le groupe benzoyl; et Y' est un groupe alky-

lidéne, aralkylidéne, cycloalkylidène ou têtrahydropyrony-

lidène. Le traitement du composé obtenu avec un alcoolate de métal alcalin dans un alcanol inférieur, en milieu alcalin, donne le dérivé 3', 4'-anhydro-4'-épi de kanamycine B de formule gén6rale Il 2NHCOOR' NHCOOR'

S \>:C NHCOO R,

0 Xag VI COOR' o0 OCH O NHCOO dans laquelle R' et Y' ont les significations ci-avant, en tant que produit intermédiaire avec un rendement éleve et

un nombre d'étapes rfativement aible.

La diff6rence de structure chimique entre la kanamycine B et la kanamycine A réside en ce que la première a un groupe amino en position 2' alors que la seconde a, dans cette position, un groupe hydrome. Les inventeurs ont découvert

que la kanamycine A peut être transformée en dérivé 3e,19-

anhydro-4-pi par la méthode décrite ci-après.

On protège tout d'abord avec un groupe amino-protecteur les quatre groupes amino de kanamycine Ao Après réaction

de la kanamycine A têtra-N-protégée avec un réactif hydro-

xy-protecteur bivalent, on traite le dérivé 4",6"-O-protégé

obtenu avec un halogénure d'alcanoyl ou d'aroyl, spécia-

lement un halogénure de benzoyl, pour acyler les groupes hydroxy en 3' et 2" et laisser libre et sans acylation le groupe hydroxy en 4', on sulfony1 le groupe hydroxy en 4'

et on traite le dérivé sulfonylé ainsi formé avec un al-

coolate de métal alcalin dans un alcanol. Le dérivé 3',4'-

anhydro-4'-épi obtenu peut être transformé, de façon connue en soi en 3', 4'-didésoxykanamycine A. L'invention a donc pour objet un procédé de préparation du d6rivé 3',4'-anhydro-4'-épi de kanamycine A de formule g6nérale

NHCOOR

I dans laquelle R est un groupe alkyl, aralkyl ou aryl et Y est un groupe alkylidène, aralkylidène, cycloalkylidène ou têtrahydropyranylidène qui consiste à traiter un d6rivé 4'-O-sulfonyl de kanamycine A de formule générale

2NHCOOR

NHCOOR

OX II dans laquelle R et Y ont les d6finitions ci-avant, W est un groupe mésyl, tozyl ou benzylsulfonyl et X un groupe alcanoyl ou aroyl avec un alcoolate de m6tal alcalin dans un alcanol

inférieur en milieu alcalin.

Dans la pratique, la kanamycine A est tout d'abord trait6e pour prot6ger ses quatre groupes amino par un groupe

type uréthane, de façon connue en soi, ce qui donne un dé-

rivé tétra-N-protégé de kanamycine A de formule générale

CH2NHCOOR NHCOOR

0 ONHCOOR

OH

HO

VII HOCH2 H dans laquelle R a les significations ci-avant. Le composé de formule VII est ensuite traité pour protéger sélectivement les groupes hydroxy en 4" et 69' par réaction avec un agent

d'alkylid6nylation, d'aralkylidénylation, de cycloalkyli-

d6nylation ou de t6trahydropyranylidénylation, en tant qu'agent hydroxyprotecteur connu. La réaction est, de pr6f6rence, effectuée en traitant le compos6 de formule VII avec un agent hydroxy-protecteur dans un solvant tel que la diméthylformamide en pr6sence d'une quantit6 catalytique d'acide p-toluènesulfonique, âtempérature ambiante (15-25 C) pendant 15 à 20 heures, l'agent hydroxy-protecteur 6tant un agent d'alkylidénylation ou d'aralkylid6nylation connu

tel quel'ac6tald6hyde. Le 2,2-diméthoxypropane, l'anisal-

déhyde, le benzaldéhyde et le di6thylac6tal ou un agent de

cycloalkylid6nylation connu tel que le 1,1-diméthoxycyclo-

hexane ou un agent de t6trahydropyranylidénylation connu tel que le 1,1diméthoxyt6trahydropyranylidène. Les 6tapes

d'amino-protection et d'hydroxy-protection ci-avant men-

tionn6es peuvent être effectuées comme d6crit dans la demande de brevet japonais KOKAI n 71 445/77 ou le brevet anglais n 1 537 905. Il se forme un dérivé 4",6"-O-protégé de formule g6n6rale

CH2NHCOOR NHCOOR

A O X NHCOOR

O O VIII

H

0CH2 /D/

HOR

OH dans laquelle R et Y ont les significations ci-avant. Le

composé de formule VIII est traité pour protéger sélecti-

vement les groupes hydroxy en 2',3' et 2" avec un groupe

hydroxy-protecteur du type acyl. Cette 6tape peut habituel-

lement être effectuée en faisant réagir le composé de for-

mule VIII avec un agent d'acylation tel qu'un chlorure d'acyl dans la pyridine à basse température, en dessous de 5 C. On peut utiliser comme agent d'acylation un chlorure

d'acide d'un acide carboxylique convenable particulière-

ment d'un acide alcanoique ayant de 2 à 4 atomes de carbone tel que le chlorure d'acétyl ou le chlorure de benzoyl. Le chlorure de benzoyl est un agent d'acylation préféré dans cette 6tape. Puisque, dans cette étape, le groupe hydroxy

en 4' n'est pas acylé, il se forme un dériv6 2',3',2"-tri-O-

acyl de formule générale.-

CH2NHCOOR NHCOOR

o

X OCOOR

OX OH IX

HO OCH2 lOO /e/ X dans laquelle R et Y ont les significations ci-avant et

X est un groupe acyl, par exemple un groupe alcanoyl infé-

rieur tel que le groupe acétyl ou un groupe aroyl tel que

le groupe benzoyl.

L'étape suivante est une sulfonylation du groupe hydro-

y en 4' du composé de formule IX. La sulfonylationr en 4'-0 peut être effectu6e en faisant r&agir le composé de formule IX avec du chlorure de m6syl, de tosyl ou de benzylsulfonyl dans de la pyridine. La température de la réaction peut se situer entre 20 et 50 o C. Comme agent de 4'-Osulfonylation, on préfère le chlorure de mésyl. Il se forme ainsi un dérivé 4'-O-sulfonylé de formule générale

CH NHCOOR NHCOOR

0 NHCOOR

Ox

\--HCOOR

OX dans laquelle R, X et Y ont les significations ci-avant et U est un groupe mésyl, tosyl ou benzylsulfonyl, qui est

utilisé comme composé de départ dans le procédé selon l'in-

vention. Dans le procédé selon l'invention, le composé de formule II est époxydé en 3',4'. L'époxydation en 3',4' peut être effectuée en dissolvant le composé de formule II dans un alcanol inférieur de 1 à 4 atomes de carbone tel que le méthanol et l'éthanol, en le traitant, dans la solution, avec un alcoolate d'un métal alcalin, par exemple, de sodium ou de potassium, particulièrement un alcoxyde inférieur tel qu'un méthoxyde ou un éthoxyde. On préfère utiliser le

méthoxyde de sodium ou l'éthoxyde de sodium. On peut ef-

fectuer l'époxydation en 3', 4' à température ambiante, habituellement entre 15 et 20 c pendant 1 à 3 heures. T1

se forme ainsi un dérivé protégé de 3',4'-anhydro-4'-épi-

kanamycine A de formule I avec élimination hydrolytique

simultanée des groupes acyl en 2' et 2" (X).

Le composé de formule I selon l'invention peut être transformé en 3', 4'didésoxykanamycine A comme décrit dans la demande de brevet japonais KOKAI n 71 445/77 ou le brevet anglais n i 537 905, par traitement avec un xanthate

pour former un dérivé protégé de 3', 4'-didésoxy-3', 4'-

didéhydrokanamycine A, c'est-à-dire la 3', 4'-didésoxy-3'-

énokanamycine A de formule générale

[2NHCOOR

-0

NHCOOR

x dans laquelle R et Y ont les significations ci-avant, par élimination des groupes amino-et hydroxy-protecteurs puis

par hydrogénation de l'insaturation en 3', 4'.

Un autre procédé de conversion du composé de formule I en 3', 4'didésoxykanamycine A consiste à protéger les groupes hydromy en 2' et 2" du composé de formule I avec un chlorure d'acyl, particulièrement un chlorure dOaroyl tel que le chlorure de benzoyl dans la pyridine, à traiter le dériv6 2', 2"-di-0-acyl ainsi formé avec de l'iodure de sodium, de l'acétate de sodium et de l'acide acétique

dans del'acétone selon le procédé décrit dans "Bull. Chem.Soc.

Japan", 52, n 4, 1131-1134 (1979) pour obtenir un d6rivé iodhydrine de formule générale'

CH2NHCOOR

) 0 XI dans laquelle R et Y ont les significations ci-avant et RI' est un groupe acyl, à traiter le composé obtenu avec du chlorure de benzylsulfonyl dans la pyridine,à chauffer le dérivé benzylsulfonyloxy obtenu à 90 C pendant 20 à 30

minutes pour former le dérivé 3-éne correspondant, à élimi-

ner les groupes amino et hydroxy-protecteurs, pour obtenir la 3'-énekanamycine A puis à hydrogènerle composé obtenu pour former la 3', 4'didésoxykanamycine A. On peut obtenir

la 4'-désoxykanamycine A par hydrogénation du dérivé iodhy-

drine en présence de catalyseur nickel de Raney puis en éliminant, de façon connue,les groupes amino-protecteurs

et hydroxy-protecteurs.

Selon un autre aspect, l'invention a pour objet un procédé de préparation d'un dérivé iodhydrine de kanamycine A, N, O-protégée de formule XI!

CH NHCOOR NHCOOR

21 NHCOOR

oO OR" xi O CH2 NHCO OR" dans laquelle R est un groupe alkyl-aralkyl ou arylt Y est

un groupe alkylidène, aralkylidène, cycloalkylidéne ou têtra-

hydropyranylidène et R"' est un groupe acyl spécialement un

groupe aroyl qui consiste à faire réagir un dérivé 3', 4'-

anhydro-4'-épi de kanamycine A, N, O-protégée de formule I avec un chlorure d'acyl spécialement un chlorure d'aroyl, dans de la pyridine pour former le dérivé 2', 2"-di-O-acylé correspondant puis à traiter le dérivé 2', 2"-di-O-acylé avec de l'iodure de sodium, de l'acétate de sodium et de

l'acide acétique dans de l'acétone.

Le procédé selon l'invention fournit une nouvelle voie

de préparation de la 3', 4'-didésoxykanamycine A et de la 4'-

désoxykanamycine A à partir de kanamycine A par l'intermé-

diaire du composé de formule II et du composé de formule I. Ce procédé permet de réduire les étapes réactionnelles à celles de la préparation du composé intermédiaire de formule

I et est spécialement intéressant industriellement par rap-

port aux procédés de la technique antérieure.

La présente invention sera mieux comprise d'ailleurs à l'aide de l'exemple suivant qui décrit l'ensemble des étapes de préparation de la 3', 4'-didésoxykanamycine A ou de la 4'-désoxykanamycine A à partir de la kanamycine A. 1) Préparation de la tétra-N-t-butoxycarbonylkanamycine A

On ajoute, sous agitation, à une solution de mono-

sulfate de kanamycine A (17,5 g) et d'hydroxyde de sodium (2,4 g) dans un mélange d'eau (120 ml) de triéthylamine (36ml) et de dioxanne (200 ml) du t-butyl-S- (4,6-diméthyl-pyrimidine-2-yl)-thiolcar- bonate (43,2g) comme réactif introducteur du groupe t-butoxycarbonyl, et on agite le mélange toute une nuit à température ambiante. On lave le précipité formé avec de l'acide chorhydrique N, puis avec de de l'eau et l'on sèche; onobtient 20 g (75 %) du

compose désiré.

LO] 25 + 74,10 (c = 1,0, diméthylformamide) D Analyse élémentaire Trouvé: C, 50,92; H, 7,58; N, 6,45 % Calculé pour C38 H68 N4 019:

C, 51,56; H, 7,76; N, 6,33 %

2) Préparation de la 4", 6"-0-cyclohexylidène-tétra-N-

t-butoxycarbonylkanamycine A.

On dissout le composé obtenu dans l'étape (1) ci-

dessus (10,5 g) dans du diméthylformamide (200 ml) puis on ajoute du 1,1diméthoxycyclohexane (20ml) et du monohydrate d'acide p-toluènesulfonique (0,4g); on agite le mélange obtenu à temp6rature ambiante

pendant 18 heures. Le mélange réactionnel est neu-

tralisé à la triéthylamine, concentré sous vide, puis versé dans l'eau (200 ml) On filtre le précipité qui se dépose, on le lave à l'eau et on le sèche pour obtenir 11 g (96 %) du

composé recherché.

a]25 + 67,00 (c = 1,0, pyridine) [a] D Analyse élémentaire: Trouvé: C, 53, 82; H, 7,41; N, 5,25 % Calculé pour: C44 H76 N4 019

C, 54,25; H, 7,95; N, 5,81 %

3) Préparation de la 2', 3', 2"-tri-0-benzoyl-4", 6"-0-

cyclohexylidène-tétra-N-t-butoxycarbonylkanamycine A. On dissout dans la pyridine (200 ml) le composé obtenu dans l'étape (2) ci-dessus (11,4 g). Une fois la solution refroidie à 0 - 50 C, on y ajoute du

chlorure de benzoyl (5,6 ml) et on poursuit la réac-

tion pendant trois heures entre O et -5 C. La fin de la réaction est confirmée par chromatographie en couche mince (gel de silice, Merck & C ). On ajoute alors de l'eau au mélange réactionnel pour décomposer tout excès de chlorure de benzoyl. Une fois le mélange réactionnel concentré on le verse dans l'eau (300 ml) puis l'on filtre le précipité déposé, on le lave bien avec une solution aqueuse normale de bicarbonate de sodium, puis avec de l'eau

et l'on sèche pour obtenir 14,8 g de produit brut.

Celui-ci est purifié par chromatographie sur gel de silice et l'on obtient 1O,2g (75 %) du composé désire.

[a] 25 + 100,50 (c = 1,1 chloroforme) pt. f. 182 -

188 C.

Analyse élémentaire Trouvé: C, 60,31; H, 6,74; W, 4,09 % Calculé pour: C65 H o N022 C, 61,10; Xl, 6,96; N, 4,39 % 4) Préparation de la 2', 3', 2'-tri=0-bnzoyl-4', 6"0-o

cyclohéxylidene- '-0-mésyl=tetra-N-t-buto:ycarbonyl-

kanamycine A. Le composé obtenu dans l'étape (3) ci-avant (1,9 g) est dissout dans la pyridine (30 ml), puis on ajoute du chlorure de mésyl (0, 4 ml) et l'on poursuit la

réaction à température ambiante pendant trois heures.

On ajoute de l'eau (0,2 ml) au mélange réactionnel pour décomposer tout excès de chlorure de mésyl. Une fois le mélange réactionnel concentré, on le verse dans l'eau (50 ml) et l'on filtre et lave à l'eau le précipité formé que l'on sèche pour obtenir 2,0 g du

composé désiré.

[C] 25 + 103,3 (c = 1,0 choroforme) pt. f.194-?040 C

D avec dec.

Analyse élémentaire: Trouv6: C, 58,45; H, 6,52; N, 4,23; S, 2,20 % Calculé pour C66 H N 024 S

66 90 4 24

C, 58,47; H, 6,71; N, 4,13; S, 2,36 %

5) Préparation de la 3', 4'-anhydro-4'-6pi-4", 6"-o- cyclohéxylidènet6tra-N-t-butoxycarbonylkanamycine A.

Cette étape constitue le proc6dé selon l'invention.

On dissout le composé obtenu dans l'étape (4) ci-

avant (5,1g) dans du méthanol (100 ml) auquel on ajoute du m6thylate de sodium (1,2 g) et on agite

le mélange pendant 2 heures à température ambiante.

Le mélange réactionnel est neutralisé à l'acide chlorhydrique concentr6 sous refroidissement à la

glace, concentré et versé dans de l'eau (200 ml).

Le précipité obtenu est filtré, lavé à l'eau et

séché pour donner 3,1g (88%) de produit brut. Celui-

ci est purifié par chromatographie sur gel de silice

pour donner le composé recherché.

[a] 25 + 54,1 (c= 1,0, diméthylformamide)

pt. f. = 190-207 C (avec d6composition).

Analyse élémentaire: Trouv6: C, 52,14; H, 7,60; N, 6,15 % Calculé pour: C38 H66 4 18

C, 52,63; H, 7,69; N, 6,46 %

6) Préparation de la 3', 4'-anhydro-4'-épi-2', 2"-di-0-

benzoyl-4", 6"-0-cycloh6xylidène-tdtra-N-t-butoxy-

carbonylkanamycine A, et ouverture subséquente de

l'anneau pour formation du d6riv6 3'-hydroxy-4'-

désoxy-4'-iodo, c'est-à-dire l'iodhydrine.

- Le composé obtenu dans l'étape (5) ci-avant (4,3 g) est dissout dans de la pyridine (45 ml) à laquelle

on ajoute du chlorure de benzoyl (3ml) et l'on ef-

fectue la réaction à température ambiante pendant deux heures. On ajoute de l'eau (1 ml) au mélange réactionnel pour décomposer le chlorure de benzoyl en excès, puis on concentre le mélange réactionnel et on le verse dans l'eau (100 ml). Le précipité résultant est filtré, lavé avec une solution aqueuse N de bicarbonate de sodium, de l'eau et séché. Le produit séché est dissous, sans être purifié, dans de l'acétone (4,5 ml) à laquelle on ajoute ensuite de l'acide acétique (3,3 ml), de l'acétate de sodium (0,2 g) et de l'iodure de sodium (5,8 g) et on poursuit la r6action sous reflux pendant 4 heures. On laisse le mélange r6actionnel refroidir à température ambiante, on le concentre et on le verse dans l'eau (200 ml). La masse précipitée est filtrée, lav6e à

l'eau et s6chée pour donner 5,5 g d'un produit brut.

Le produit est purifié6 par chromatographie sur gel de silice et l'on obtient 3,9 g (71 %) du dérivé

iodhydrine recherché.

Analyse élémentaire: Trouvé: I, 9,31 % Calculé pour: C52H 75N4020 I

I, 9,84 %

7) Pr6paration de la 2', 2"-di-O-benzoyl-4",6"-O-cyclo-

héxylidène-3'-éno-tétra-N-t-butoxycarbonylkanamycine A Le compos6 obtenu dans l'étape (6) ci-avant (2,5 g) est dissous dans la pyridine (50 ml); la solution est refroidie à la glace, on y ajoute du chlorure de benzylsulfonyl (1,5 g) et on poursuit la r6action pendant une heure sous refroidissement à la glace. On ajoute de l'eau (0,5 ml) pour décomposer l'excès de chlorure de benzylsulfonyl; le mélange réactionnel est traité à 90 C pendant une heure, on le laisse refroidir à temp6rature ambiante, on le concentre et on le verse dans l'eau (200 ml). Le précipité obtenu est filtré, lavé à l'eau et séché pour donner 2,1 g

d'un produit brut. Celui-ci est purifié par chroma-

tographie sur gel de silice pour donner 1,3 g (56 %)

du composé recherché -- 25 + 19,1 (c = 1,0 chloro-

forme),pt. f. = 221-226 C (avec décomposition).

Analyse élémentaire: Trouvé: C, 61,78; H, 7,31; N, 4,45 % Calculé pour C58H82 N019:

C, 61,13; H, 7,27; N, 4,92 %

8) Préparation de la 3'-éno-kanamycine A. On ajoute à une solution du composé obtenu dans l'étape (7) ci-avant (1,1 g) dans du méthanol (20 mi), du méthoxyde de sodium (0,3 g). La réaction est effectuée à température ambiante pendant 1 heure, puis à 50 C pendant 2 heures avec addition d'acide chlorhydrique 6N (5 ml). Le mélange réactionnel est neutralisé avec une solution aqueuse 2N d'hydroxyde de sodium sous refroidissement à la glace, concentré, dissous dans l'eau (50 ml) et adsorbé sur une colonne de 30 ml d'Amberlite CG-50(NH4+) (Amberlite est une marque déposée par

la Société ROHM & HAAS Co. pour les résines échan-

geuses d'ions). La purification chromatographique est effectuée avec une solution aqueuse 0,3 N d'ammoniaque comme éluent, ce qui donne 0,34 g(75 %) n 25

du composé recherché V"J D + 52,1 (c = 1,0, eau).

Analyse élémentaire: Trouvé: C, 44,36; H, 7,21; N, 10,54 % Calculé pour C18H34N O9.H2CO3

C, 44,51; H, 7,09; N, 10,93 %

9) Préparation de la 3',4'-didésojxykanamycine A. La 3'-éno-kanamycine A obtenue dans l'étape (8)

ci-avant (200 mg)est dissoute dans l'eau (100 ml).

On ajoute de l'oxyde de platine (15 mg) à la solu-

tion et on fait passer de l'hydrogène au travers de la solution à température ambiante et sous pression atmosphérique pendant 2 heures. Le catalyseur est

éliminé par filtration pour donner 185 mg de 3',4'--

didésoxykanamycine A. 10) Préparation de la 4'-désoxykanamycine A.

* Le dérivé iodhydrine obtenu dans l'étape (6) ci-

avant (550 mg) est dissous dans du méthanol (10 ml); on y ajoute ensuite du dioxane (10 ml) et de l'eau (5ml). On ajoute du nickel de Raney (2,3 g) à la solution pour effectuer la réaction de réduction a pression atmosph6rique. Une fois le catalyseur éliminé par filtration, on ajoute du méthylate de sodium (60 mg) à la solution réactionnelle et on maintient le mélange à temperature ambiante pendant 2 heures, puis on neutralise avec de l'acide chlorhydrique N et l'on concentre a siccitéo Le residu est lavé à l'eau puis ajoute à de l'acide trilúoracxtique 93,a (45 1m) et on maintient le &c ge A %empratue ambiante pendant 30 minutes0 La s lution réactmonnelle est concentrée à sccité et let re&sidu dissous dans l'eau (13 rslo La solution, dont on règle le pH A 7 par addition à une solution %N dhydroeyde de sodium, est adsorb e sur Aberlite CG5; o(?i{%+ L 6 ml}o La résine est la &e a l'eau puis euee a'rec de - daemoniaque 093 No L:&leuat est cocenta a sLcce pour donner 105 mg de ri =dso:ykenamycie A qui correspond à un echantiUon vreritable du composé derit dans la litterature

Claims (4)

REVENDICATIONS

1. Deriv6s de kanamycine A, caractérisés en ce qu'ils sont les dérivés 3', 4'-anhydro-4'-épi de formule générale

NHCOOR

! I dans laquelle R est un groupe alkyl, aralkyl ou aryl et Y est un groupe alkylidène, aralkylidéne, cycloalkylidéne

ou têtrahydropyranylidène.

2. Dérivé selon la revendication 1, caractérisé en ce qu'il

est la 3',4'-anhydro-4'-épi-4", 6"-0-cyclohéxylidéne-

tétra-N-t-butoxycarbonylkanamycine A.

3. Procédé de préparation des dérivés 3', 4'-anhydro-4'-

épi de kanamycine A de formule I caractérisé en ce qu'il consiste à traiter un dérivé 4'-O-sulfonyl de kanamycine A de formule générale 0OOR

NHCOOR

dans laquelle R et Y ont les d6finitions mentionnées pour les composés de formule I, W est un groupe mésyl, tosyl ou benzylsulfonyl et X est un groupe alcanoyl ou aroyl

avec un alcoolate de m6tal alcalin dans un alcanol in-

férieur en milieu alcalin.

4. Application des dérivés selon la revendication 1 à la

préparation d'un dérivé iodhydrine de kanamycine A,N,O-

protégée de formule g6nérale

NHCOOR

OR" II XI

2-476652

dans laquelle R est un groupe alkyl, aralkyl ou aryl, Y est un groupe alkylidène, aralkylidène, cycloalkylidène

ou tétrahydropyranylidène et R" est un groupe acyl, carac-

térisée en ce que l'on fait réagir ledit composé de for-

mule I avec un chlorure d'acyl dans la pyridine pour former le d6riv6 2', 2"-di-0-acylé correspondant, puis l'on traite de d6rivé avec de l'iodure de sodium, de

l'ac6tate de sodium et de l'acide acétique dans l'acétone.