FR2676927A1 - Microspheres utilisables pour les occlusions vasculaires therapeutiques et solutions injectables les contenant. - Google Patents

Abstract

L'invention concerne l'utilisation pour l'embolisation de microbilles composées d'un copolymère acrylique hydrophile recouvert d'un agent promoteur de l'adhésion cellulaire.

Description

MICROSPHERES UTILISABLES POUR LES OCCLUSIONS VASCULAIRES
THERAPEUTIOUES ET SOLUTIONS INJECTABLES LES CONTENANT
La présente invention concerne le domaine des matériaux pour l'embolisation.

Plus spécialement, elle concerne de nouvelles particules calibrées et adhésives particulièrement adaptées à l'embolisation.

Les occlusions vasculaires thérapeutiques (embolisations) sont des techniques utilisées pour traiter in situ certaines pathologies. Elles sont pratiquées généralement à l'aide de cathéters permettant, sous contrôle d'imagerie, de positionner dans le système circulatoire des agents particulaires d'occlusion (emboles). Elles peuvent concerner les vaisseaux de processus variés : tumeurs, malformations vasculaires, processus hémorragiques. Notamment, dans le cas des tumeurs, I'occlusion vasculaire peut supprimer les douleurs, limiter les pertes hémorragiques lors de l'intervention chirurgicale qui suivra l'embolisation ou encore entraîner la nécrose tumorale et éviter l'intervention.Dans le cas des malformations vasculaires, elle permet de normaliser le flux sanguin vers les tissus "normaux", aide à la chirurgie, et limite le risque d'hémorragie. Dans les processus hémorragiques, I'occlusion vasculaire provoque une baisse de débit qui favorise la cicatrisation de la (ou des) brèches(s) artérielle(s).

Par ailleurs, selon les pathologies traitées, I'embolisation peut être effectuée soit dans un but temporaire, soit dans un but définitif.

On connaît dans l'art antérieur différents types d'emboles. En particulier, il peut s agir d'agents liquides (colles acryliques, gels, suspensions visqueuses ...) ou particulaires (polymères divers, dure-mère, éponges de gélatine, billes, ballons, spires ...). Les inconvénients majeurs des emboles liquides connus résident dans leur toxicité pour les tissus, qui peut générer des phénomènes de nécrose, et dans le risque de collage des catéthers.

Les inconvénients des emboles solides disponibles sont essentiellement dus à leur forme non sphérique et difficilement calibrable, à leur caractère non hydrophile, à leur dureté ou encore à leur prix de revient très élevé.

La présente invention permet de remédier aux inconvénients mentionnés ci-dessus. La demanderesse a en effet mis en évidence des propriétés de certains matériaux sphériques particulièrement avantageuses, permettant leur utilisation très efficace comme emboles. L'invention réside également dans des nouveaux emboles obtenus par modifications de ces matériaux, en vue de leur application à l'embolisation.

Un objet de l'invention réside plus précisément dans l'utilisation pour l'embolisa- tion de microbilles comprenant un copolymère acrylique hydrophile recouvert d'un agent promoteur de l'adhésion cellulaire.

Plus particulièrement, I'invention concerne l'utilisation de microbilles de diamètre compris entre 10 et 2000 pm.

De manière surprenante, les microbilles définies ci-dessus présentent des propriétés très avantageuses pour l'embolisation. Notamment, ce sont les seuls emboles réunissant des propriétés d'efficacité, de bio-compatibilité et de stabilité.

Plus précisément, les microbilles utilisées dans l'invention permettent une occlusion à 100 % de la lumière vasculaire. Par ailleurs, elles sont aisément calibrées, ce qui permet un contrôle de la distalité de l'occlusion. Enfin, elles sont non-résorbables et non biodégradables, ce qui permet une occlusion durabie.

D'autre part, ces microbilles sont non toxiques, bio-compatibles in vitro (avec de nombreuses lignées cellulaires) comme in vivo, et adhésives à la paroi vasculaire par la croissance cellulaire qu'elles favorisent.

Ces microbilles sont également stables. Ainsi, elles sont à la fois souples et déformables pour passer dans de petits cathéters sans subir d'altération, mais parfaitement résistantes aux pressions engendrées par les opérations d'embolisation. De même, elles sont stables thermiquement pour être stérilisés ou congeiées, et stables en suspension pour être conservées en suspension et injectées avec différents liquides.

Enfin, leur caractère hydrophile permet leur mise en suspension, notamment sous forme de solutions injectables stériles et apyrogènes, sans formation d'agrégats ni adhésion aux parois des cathéters, seringues, aiguilles, et autres matériels employés en embolisation.

Préférentiellement, le copolymère acrylique hydrophile comprend sous forme copolymérisée 25 à 98 % en poids de monomère acrylique hydrophile neutre, 2 à 50 % en poids de monomère bifonctionnel et 0 à 50 % en poids d'un ou plusieurs monomères portant une charge cationique.

La présence d'une charge cationique à la surface de la microsphère permet d'initier et d'améliorer l'adhésion cellulaire.

A titre d'exemple, les copolymères décrits dans le brevet FR 2,378,808 peuvent convenir dans la présente invention, dans la constitution du copolymère de base.

Comme monomère acrylique hydrophile, on peut citer plus spécifiquement l'acrylamide et ses dérivés, le méthacrylamide et ses dérivés, ou l'hydroxyméthylméthacrylate.

Comme exemple de monomère bifonctionnel, on peut citer le N,N'-méthylène-bisacrylamide, le N,N'-diailyltartradiamide ou encore le glyoxal-bis-acrylamide.

Finalement, comme monomère ayant une charge cationique, on préfère ceux portant une fonction amine tertiaire ou quaternaire, tels que le diéthylaminoéthyl-acrylamide, le méthacrylamidopropyl-triméthyl-ammonium ou encore l'acrylamidoéthyl-triéthylammonium.

D'une manière particulièrement avantageuse, on utilise un copolymère comprenant 25 à 98 % en poids de méthacrylamide, 2 à 50 % en poids de N,N-méthylène-bisacrylamide et 1 à 50 % en poids de diéthylaminoéthyl-acrylamide.

Différents types d'agents promoteurs de l'adhésion cellulaire peuvent être employés. II peut s'agir particulièrement de collagène, gélatine, glucosaminoglycans, fibronectine, lectines, polycations (polylysine) ou tout autre agent biologique naturel ou synthétique d'adhésion cellulaire.

Avantageusement, L'agent promoteur de l'adhésion cellulaire représente dans la microsphère entre 1 et 50 % p/v du copolymère acrylique hydrophile.

Dans un mode particulièrement avantageux de l'invention, il est possible pour augmenter la stabilité des microbilles de réticuler l'agent d'adhésion. Ceci peut être effectué en traitant les microbilles en présence d'un agent réticulant. A titre d'exemple, dans le cas de la gélatine, L'agent réticulant peut être choisi parmi les agents chimiques bifonctionnels et réactifs sur les amines de la gélatine (glutaraldéhyde, formol, glyoxal, etc...).

Par ailleurs, la demanderesse a également mis au point de nouvelles microsphères dérivées de celles précédemment décrites, permettant une application dans l'embolisation beaucoup plus aisée. Notamment, I'un des inconvénients des matériaux décrits dans l'art antérieur est la difficulté pour l'utilisateur de les visualiser, avant, pendant et après injection, à l'oeil nu ou en imagerie.

Ce problème est résolu par une variante de l'invention consistant en des microsphères repérables comprenant un copolymère acrylique hydrophile recouvert d'un agent promoteur de l'adhésion cellulaire, et un agent de marquage. Cette propriété des microsphères peut être obtenue par modification pendant leur synthèse ou après leur synthèse.

Pendant leur synthèse, les modifications peuvent être obtenues par incorporation avec les autres co-monomères d'un monomère fonctionnalisé portant une fonction repérable permettant la détection de la microsphère.

A cet effet, un objet plus particulier de l'invention réside dans des microsphères pour embolisation constituées d'un copolymère comprenant, sous forme copolymérisée, 25 à 98 % en poids de monomère acrylique hydrophile neutre, 2 à 50 % en poids de monomère bifonctionnel, 0 à 50 % en poids d'un ou plusieurs monomères portant une charge cationique, et 1 à 30 % en poids d'un monomère fonctionnalisé permettant la détection de la microsphère, recouvert d'un agent promoteur de l'adhésion cellulaire.

Plus préférentiellement, il s'agit de microsphères ayant un diamètre compris entre 10 et 2000 pm.

Comme monomère acrylique hydrophile neutre, comme monomère bifonctionnel, comme monomères chargés et comme agent d'adhésion cellulaire, on peut utiliser ceux définis précédemment.

Le monomère fonctionnalisé est généralement obtenu par couplage chimique du monomère avec un marqueur, qui peut être:
- un colorant chimique5 tel que le Cibacron Blue ou le Procion Red HE-3B, permettant une visualisation directe des microsphères [Boschetti, J. Biochem-Biophys. Meth., 19 (1989) 21-36]. On peut citer comme monomère fonctionnalisé utilisable pour ce type de marquage le N-acryloyl-hexaméthylène-Cibacron Blue ou le N-acryloyl-hexaméthylène
Procion Red HE-3B.

- un agent de signalisation pour résonance magnétique (erbium, gadolinium, magnétite) ou encore,
- un agent de contraste, tel que les sels de barium ou l'iode. On peut citer à titre d'exemple l'acide (acrylamino-3- propionamido)-3 -triiodo-2,4,6-benzoique, qui peut être préparé dans les conditions décrites par Boschetti et al. (Bull. Soc. Chim. France, 1986 N" 4).

Dans le cas des sels de barium ou de la magnétite, ceux-ci peuvent être introduits directement, sous forme de poudre, à la solution initiale des monomères.

Comme indiqué plus haut, il est également possible de marquer les microsphères après leur synthèse. Ceci peut être effectué par exemple par greffage de marqueurs fluorescents tels que l'érythrosine ou la fluorescéine ou leurs dérivés (FIT, Elle...).

Un autre objet de l'invention concerne des solutions injectables contenant des microsphères telles que définies précédemment. Préférentiellement, elle a pour objet des solutions injectables contenant des microsphères réparties par tranches de calibre de 200 p environ.

La demanderesse a en effet montré que, en utilisant des tranches restreintes de calibres5 I'efficacité de l'occlusion et le contrôle de sa distalité étaient nettement amélioriés. De telles solutions injectables permettent ainsi d'améliorer l'efficacité d'occlusion, et d'adapter le traitement en fonction du diamètre et de la nature du vaisseau à emboliser, et du processus impliqué.

Les microsphères de l'invention peuvent être obtenues par des techniques classiques de polymérisation décrites dans l'art antérieur (brevet FR 2,378,808). Généralement, la polymérisation des monomères en solution est effectuée à une température comprise entre 0 et 100 C et de préférence entre 40 et 60005 en présence d'un initiateur de réaction de polymérisation.

Avantageusement, I'initiateur de polymérisation est choisi parmi les systèmes redox. Notamment il est possible d'utiliser les associations d'un persulfate de métal alcalin avec la N,N,N',N'-tétraméthyléthylènediamine ou avec le diméthylaminopropionitrile, les peroxydes organiques tels que le peroxyde de benzoyle ou encore le 2,2'-azo-bisisobutyronitrile.

La quantité d'initiateur utilisée est adaptée par l'homme de l'art en fonction de la quantité de monomères et de la vitesse de polymérisation recherchée.

La polymérisation peut être réalisée en masse ou en émulsion.

Dans le cas d'une polymérisation en masse, la solution aqueuse contenant les différents constituants dissouts et l'initiateur, est soumise à une polymérisation en milieu homogène. Elle permet d'accéder à un bloc de gel aqueux qui peut alors être fractionné en microsphères, par exemple en le passant à travers les mailles d'un tamis.

La polymérisation en émulsion constitue le mode préféré de préparation, puisqu'elle permet d'accéder directement aux microsphères d'une taille désirée. Elle peut être conduite de la manière suivante : la solution aqueuse contenant les différents constituants dissous (différents monomères, agent d'adhésion cellulaire) est mêlée, sous agitation, à une phase organique liquide, non miscible à l'eau, éventuellement en présence d'un agent émulsifiant. La vitesse de l'agitation est modulée de manière à obtenir une émulsion de la phase aqueuse dans la phase organique formant des gouttes de diamètre désiré. La polymérisation est alors déclenchée par ajout de l'initiateur. Elle s'accompagne d'une exothermie et son développement peut donc être suivi par mesure de la température du milieu réactionnel.

II est possible d'utiliser comme phase organique des huiles végétales ou minérales, certains produits de distillation du pétrole, des hydrocarbones chlorés ou un mélange de ces différentes solutions. Par ailleurs, dans le cas où l'initiateur de polymérisation comprend plusieurs composantes (système redox), il est possible d'ajouter l'une d'entre-elles dans la phase aqueuse avant la mise en émulsion.

Les microsphères ainsi obtenues peuvent ensuite être récupérées par refroidissement, décantation et filtration. Elles sont ensuite séparées par catégorie de taille et lavées pour éliminer toute trace de produit secondaire.

L'étape de polymérisation peut être suivie d'une étape de réticulation de l'agent d'adhésion cellulaire, et éventuellement, d'une étape de marquage dans le cas de microsphères rendues repérables par greffage après synthèse.

La présente invention sera plus complètement décrite à l'aide des exemples suivants, qui doivent être considérés comme illustratifs et non limitatifs.

EXEMPLE 1
Dans un bécher contenant 200 ml d'eau déminéralisée, on dissout 58 g de chlorure de sodium et 27 g d'acétate de sodium. On ajoute 400 ml de glycérol puis on ajuste le pH entre 5,9 et 6,1. On dissout ensuite 90 g de N-tris-hydroxyméthyl méthyl acrylamide, 35 g de diéthyl aminoéthylacrylamide et 10 g de N,N-méthylène-bis-acrylamide. On chauffe à 60 70"C et on ajoute 100 ml d'une solution chaude de gélatine à 300 mg/ml. On ajuste le volume total du mélange à 980 ml par addition d'eau chaude puis on ajoute 20 ml d'une solution de persulfate d'ammonium à 70 mg/ml et 4 ml de N,N,N',N'-tétraméthyléthylènediamine.

On verse cette solution dans de l'huile de paraffine à 50-70"C sous agitation.

Après quelques minutes, la réaction de polymérisation des monomères acryliques se manisfeste par une augmentation de la température. Les microbilles sont ensuite récupérées par décantation, lavées soigneusement, tamisées et stérilisées en autoclave en milieu tamponné.

Ces microbilles, après calibrage à l'aide de tamis, possèdent les caractéristiques souhaitées pour l'embolisation y compris une charge cationique marquée et un agent d'adhésion efficace (la gélatine ou collagène dénaturé).

EXEMPLE 2
On procède comme dans l'exemple 1 en utilisant, à la place du diéthylaminoéthylacrylamide du triéthylaminoéthyl-acrylamide.

Après récupération des billes, la gélatine est réticulée à l'aide d'une solution de glutaraldéhyde à 25 % (100 ml pour la totalité des microbilles). Le traitement est réalisé sans agitation à 4"C pendant une nuit. Il est suivi par un lavage à l'eau déminéralisée.

EXEMPLES 3 et4
On procède comme dans les exemples 1 et 2 en remplaçant 10 g de N-trishydroxyméthyl-méthyl-acrylamide par 10 g de N-acryloyl-hexaméthylène-Cibacron Blue.

Les microbilles obtenues possèdent une coloration bleue intense due à l'intégration du colorant acrylique dans le réseau polymérique.

Ces microbilles sont avantageusement utilisables par vision directe de l'utilisateur au moment de la manipulation.

EXEMPLES 5 et 6
On procède comme dans les exemples 1 et 2 en remplaçant 10 g de N-tris hydroxyméthyl-méthyl-acrylamide par 10 g de N-acryloyl-hexaméthylène-Procion Red HE-3B.

Les microbilles obtenues possèdent une coloration rouge intense due à l'intégration du colorant acrylique dans le réseau polymérique.

Ces microbilles sont avantageusement utilisables par vision directe de l'utilisateur au moment de la manipulation.

EXEMPLES 7 et 8
100 ml de microbilles obtenues selon les exemples 1 et 2 sont lavés avec un tampon borate 0,1 M, pH 8 et ensuite suspendus dans 50 ml d'une solution d'érythrosine isothiocyanate à 5 mg/ml. La suspension est ensuite agitée pendant au moins 15 heures puis lavée avec un tampon neutre jusqu'à surnageant incolore.

Ces microbilles colorées en rouge sont ensuite calibrées et stérilisées, et peuvent être utilisées en embolisation percutanée.

EXEMPLES 9 et 10
On procède comme dans les exemples 1 et 2 en remplaçant 10 de N-trishydroxyméthyl-méthyl acrylamide par 10 g d'un monomère opaque aux rayons X, I'acide (acrylamido-3-propionamido)-3-trXiodo-2,4,6-benzoTque.

Les microbilles obtenues possèdent la propriété d'absorber les rayons X et donc d'être particulièrement intéressantes dans leur suivi in vivo après embolisation.

EXEMPLES Il À 14
On procède comme dans les exemples 1 et 2 en ajoutant, dans la solution initiale des monomères, 5 g d'un polymère linéaire soluble radioopaque, le polyacide acrylamino-3 triiodo-2,4,6-benzoique (exemples 1 I et 12) ou le polyacide (acrylamino-3-propionamido)3- triiodo-2,4,6-benzoique (exemples 13 et 14).

Ces polymères ayant une masse moléculaire supérieure à 100.000 daltons, ils sont prisonniers du réseau polymérique et, sans perturber les propriétés générales des microbilles pour les applications revendiquées, permettent d'aboutir à une radiocapacité exploitable pour le suivi in vivo des opérations d'embolisation.

EXEMPLES 15 et 16
On procède comme dans les exemples 1 et 2 en ajoutant dans la solution initiale des monomères, 200 g de poudre de sulfate de barium. Les microbilles obtenues sont à la fois opaques à la lumière visible et aux rayons X.

EXEMPLES 17 et 18
On procède comme dans les exemples 1 et 2 en ajoutant dans la solution initiale des monomères5 50 g de magnétite (Fe304).

Les microbilles obtenues ont la propriété d'être détectées en imagerie IRM.

EXEMPLE 19 - Evalutation comparée de deux types de sphères non résorbables
L'étude a consisté à injecter deux types de microsphères calibrées, les unes préparées selon l'exemple 1, les autres en polystyrène (Biosilon Nunc Danemark), dans la vascularisation artérielle pulmonaire du rat, et à observer à JO, J8 et J30, I'importance de la réaction cellulaire et les modalités de remodelage des vaisseaux occlus.

L'étude a mis en évidence quatre faits importants: - la mise en suspension et l'injection vasculaire des billes de polystyrène est difficile, et des agglomérats se forment aux rétrécissements segmentaires que constituent l'embout de la seringue, I'embase du cathéter, et les changements possibles de diamètre des cathéters, - la réaction cellulaire est plus précoce, plus intense et plus durable avec les billes de l'exemple 1 qu'avec le polystyrène.Au 8ème jour, I'épaisseur de la réaction cellulaire recouvrant les billes de l'invention est presque trois fois supérieure à celle recouvrant les billes de polystyrène (34 R contre 13 cri), - il n'y a pas de différence de cinétique dans les remodelages vasculaires avec l'un ou l'autre matériau, - aucun phénomène ne pouvant faire évoquer la toxicité de l'un ou l'autre matériel n'a été observé.

En conclusion, les microbilles de l'invention sont plus maniables et plus efficaces comme agent adhésif.

EXEMPLE 20 - Evalutation clinique chez 89 patients
100 procédures ont été effectuées sur des processus variés 19 tumeurs, 75 malformations artério-veineuses (12 MAV de face, 40 MAV de moelle, 23 MAV cérébrales) et 6 divers (dont hémorragies).

Les sphères utilisées étaient des sphères préparées selon l'exemple 1, calibrées de manière à obtenir les tranches suivantes (en ,um): 200-400, 400-600, 600-800, 800-1000, et 1000-1200, en suspension dans des flacons prêts à l'emploi.

Au terme de cette étude, plusieurs remarques peuvent être faites: 1- L'injection de ces billes est extrêmement aisée et plus facile qu'avec toutes les autres particules existantes. II ne s'est produit à aucun moment de phénomène comme un blocage des systèmes nécessaires à l'injection (seringue, embout, embase, raccords, cathéter, etc...). Sur les 100 procédures aucun incident n'est survenu qui aurait pu être mis en rapport avec le matériel, de par sa nature ou sa forme. Le suivi de l'injection des microsphères sous scopie est assuré facilement par l'adjonction de produits de contraste à la solution contenant les microsphères dans la seringue d'injection. Aucun phénomène d'incompatibilité entre les microsphères et les différents produits de contraste vasculaire commerciaux n'a été observé.

2 - Dans le cas des tumeurs, la dévascularisation a toujours pu être parfaitement contrôlée avec les deux paramètres qu'étaient la quantité des billes et leur diamètre. La répartition des billes autour de calibres fixes en tranches étroites, permet un meilleur contrôle de la distalité de l'occlusion et la maîtrise des conséquences de cette occlusion : ischémique, nécrose, oedème, etc... Ceci est très important, tout particulièrement dans la conduite des embolisations de certaines tumeurs comme les méningiomes intra-craniens, dont la nécrose tumorale peut s'accompagner d'une poussée oedémateuse grave car comprimant le cerveau sain.L'évolution clinique portant sur les 19 cas de tumeurs, a permis de dégager une nouvelle stratégie de traitement de certaines de ses tumeurs, consistant à emboliser en plusieurs étapes avec des calibres croissants pour dévasculariser la tumeur à titre pré-opératoire.

3 - Dans les malformations artério-veineuses, la taille requise pour les particules variait selon le processus avec, en première approche, les tendances suivantes: -MAVdeface: 300,500 1
- MAV de moelle 700, 900 KL
- MAV cérébrale 900 à 1500 Il 4 - L'étude de corrélation entre la dévascularisation angiographique et les données histologiques pour deux types de dispersion de microsphères dans 16 tumeurs embolisées, 8 avec des sphères réparties en tranches larges (500 +/- 300 cri), et 8 en tranches étroites (200 +1- 50 p, 400 +il 50 p, 600 +/- 100 p, 800 +1- 100 p) a mis en évidence que l'importance de la nécrose et le nombre des sphères intra-tumorales sont significativement plus importants dans le groupe traité avec des sphères réparties sur des tranches étroites, que dans celui traité avec des tranches larges.

En conclusion : les microbilles de l'invention sont faciles à utiliser5 efficaces pour tous les processus et les effets tissulaires de l'occlusion sont contrôlables lorsque les pics de granulométrie sont étroits.

EXEMPLE 21 - Etude comparative de la durabilité de l'occlusion dans les malformations artério-veineuses de moëlle traitées avec des particules non sphériques commerciales et des microsphères préparées selon l'exemple 1.

84 afférences artérielles d'angiomes ont été embolisées :48 avec un matériel non sphérique et 26 avec les microsphères.

Les résultats de l'étude sont: - l'occlusion totale ou quasi totale de la malformation par les microsphères calibrées a été obtenue dans 25 % des cas, une fermeture à 80 % a été obtenue dans 50 % des cas. Par comparaison, I'occlusion à 100 % de la malformation n'a été réalisée que dans 5,4 % des cas avec les agents d'occlusion non sphériques.

- I'évolution de l'occlusion diffère selon que l'agent occlusif est sphérique ou non puisque le taux de réouverture à 9 mois est de 80 % avec les particules non sphériques et de 40 % avec les microsphères.

Claims (16)

REVENDICATIONS

1 - Utilisation pour l'embolisation de microbilles composées d'un copolymère acrylique hydrophile recouvert d'un agent promoteur de l'adhésion cellulaire.

2 - Utilisation selon la revendication 1 de microbilles ayant un diamètre compris entre 10 et 2000 pm.

3 - Utilisation selon la revendication 2 caractérisée en ce que le copolymère acrylique comprend, sous forme copolymérisée, 25 à 98 % en poids de monomère acrylique hydrophile neutre5 2 à 50 % en poids de monomère bifonctionnel et 0 à 50 % en poids d'un ou plusieurs monomères portant une charge cationique.

4 - Utilisation selon la revendication 3 caractérisée en ce que le monomère acrylique hydrophile neutre est choisi parmi les acrylamides, les méthacrylamides et l'hydroxyméthylméthacrylate.

5 - Utilisation selon la revendication 3 caractérisée en ce que le monomère bifonctionnel est choisi parmi le N,N'-méthylène-bis-acrylamide, le N,N'diallyltartradiamide et le glyoxal-bis-acrylamide.

6 - Utilisation selon la revendication 3 caractérisée en ce que le monomère portant une charge cationique est un monomère portant une fonction amine tertiaire et/ou quaternaire.

7 - Utilisation selon la revendication 1 caractérisée en ce que l'agent promoteur de l'adhésion cellulaire est choisi parmi le collagène, la gélatine, les glucosaminoglycans, la fibronectine, les lectines, les polycations ou tout autre agent biologique naturel ou synthétique d'adhésion cellulaire.

8 - Utilisation selon la revendication 7 caractérisée en ce que l'agent promoteur de l'adhésion cellulaire représente entre 1 et 50 % p/v du copolymère acrylique.

9 - Microsphère pour embolisation comprenant un copolymère acrylique hydrophile recouvert d'un agent promoteur de l'adhésion cellulaire, et un agent de marquage.

10 - Microsphère pour embolisation selon la revendication 9 constituée d'un copolymère comprenant, sous forme copolymérisée, 25 à 98 % en poids de monomère acrylique hydrophile neutre, 2 à 50 % en poids de monomère bifonctionnel, 0 à 50 % en poids d'un ou plusieurs monomères portant une charge cationique et 1 à 30 % en poids d'un monomère fonctionnalisé permettant la détection de la microsphère, recouvert d'un agent promoteur de l'adhésion cellulaire.

11 - Microsphère selon la revendication 10 caractérisée en ce que le monomère fonctionnalisé résulte du couplage chimique d'un monomère avec un agent de marquage choisi parmi les colorants, les agents de signalisation et les agents de contraste.

12 - Microsphère selon la revendication il caractérisée en ce que le monomère fonctionnalisé est choisi parmi le N-acryloyl-hexaméthylbne-Cibacron Blue5 le N-acryloylhéxaméthylène-Procion Red HE-3B, I'acide (acrylamido-3-propionamido)-3-triiodo-25456- benzoïque, éventuellement sous forme polymérisée, et le poly-acide acrylamido-3-triiodo 2,4,6-benzoïque.

13 - Microsphère selon la revendication 1 1 caractérisée en ce que l'agent de marquage est introduit directement sous forme de poudre dans la solution initiale des monomères.

14 - Microsphère selon l'une quelconque des revendications 9 à 13 ayant un diamètre compris entre 10 et 2000 pm.

15 - Solution injectable pour embolisation contenant des microsphères telles que définies dans l'une quelconque des revendications 1 à 14.

16 - Solution injectable selon la revendication 15 contenant des microsphères par tranches de calibre de 200 pm environ.