FR3076734A1

FR3076734A1 - Nouvelle utilisation cosmetique d'un extrait de nephelium lappaceum

Info

Publication number: FR3076734A1
Application number: FR1850352A
Authority: FR
Inventors: Isabelle Bonnet; Louis Danoux; Florence HENRI; Lydie MARTIN-TEIXEIRA; Solene Mine
Original assignee: BASF Beauty Care Solutions France SAS
Current assignee: BASF Beauty Care Solutions France SAS
Priority date: 2018-01-16
Filing date: 2018-01-16
Publication date: 2019-07-19
Anticipated expiration: 2038-01-16
Also published as: CN110037949B; FR3076734B1; CN110037949A

Abstract

L'invention est relative à l'utilisation d'un extrait de la plante Nephelium lappaceum pour renforcer le follicule pileux, en maintenant et/ou augmentant l'expression de collagène de type V et/ou de fibrilline-1 et/ou en augmentant la prolifération des fibroblastes du follicule pileux et/ou la viabilité cellulaire et/ou la synthèse d'ATP et/ou l'activité mitochondriale et/ou en diminuant l'endommagement cellulaire et/ou la senescence cellulaire. Un autre objet concerne l'utilisation d'un extrait de N. lappaceum dans une composition cosmétique comprenant au moins un excipient cosmétiquement acceptable, ainsi qu'un procédé de soin cosmétique consistant en l'application par voie topique de l'extrait de N. lappaceum ou d'une composition cosmétique le comprenant.

Description

La présente invention a pour objet l’utilisation cosmétique d’un extrait de la plante Nephelium lappaceum.

Le follicule pileux est composé d’une gaine externe en continuité avec l’épiderme du tissu cutané environnant, correspondant au cuir chevelu, d’une gaine interne et d’une tige pilaire, le cheveu, lequel pousse à partir de cellules d’origine épithéliale hautement prolifératives situées dans la partie inférieure du follicule pileux, le bulbe. Ces fibroblastes sont impliqués dans la régulation de la croissance pilaire et de cette papille dermique partent les signaux qui enclencheront le passage du follicule pileux dans ses phases de croissance, phase anagène, phase de dégradation ou phase catagène et phase de quiescence ou phase télogène. La régulation d’un cycle pilaire dépend de nombreux facteurs et messages moléculaires régissant la prolifération, la migration, la différenciation et les interactions des différentes cellules composant le follicule pileux et son bulbe. Toutefois, de nombreux facteurs externes et environnementaux interviennent aussi bien sur la prolifération de ces cellules que sur leur différenciation. On citera notamment les UV, les variations hormonales, l’âge et des agents toxiques ou polluants. Ces facteurs environnementaux ont des conséquences directes sur la chute des cheveux mais affectent plus généralement la peau, dont le cuir chevelu.

Ces facteurs vont influencer l’expression de certaines cibles moléculaires, géniques, ou leurs protéines de manière notable, parmi lesquelles le collagène, la fibrilline, l’involucrine, ou encore ΓΑΤΡ en tant que nucléotide. L’importance du métabolisme énergétique et en particulier de l’activité mitochondriale dans les follicules lors de la transition de la phase télogène vers la phase anagène a été démontrée. La stimulation de l’ATP dans les fibroblastes de la papille est aussi le témoin de l’activité métabolique des fibroblastes de la papille et pourrait favoriser la pousse des cheveux.

Au niveau du follicule pileux, la fibrilline-1 en liant le LTBP-1, un marqueur reconnu du bulbe. Il joue un rôle important dans la différenciation des cellules souches épithéliales et mésenchymateuses. Au niveau du follicule pileux, la fibrilline-1 est exprimée tout le long de la gaine conjonctive du cheveu, à l’interface entre le follicule pileux et le cuir chevelu. La fibrilline-1 est également exprimée dans la papille dermique et jouerait un rôle dans l’ancrage du cheveu au cuir chevelu.

Les fibroblastes de la papille dermique constituent donc une cible centrale dans la croissance du cheveu, plus généralement dans leur soin. Leur senescence est un marquage de choix pour évaluer le potentiel d’actifs à réduire leur chute ou favoriser leur croissance.

Les stratégies utilisées pour favoriser ou maintenir la densité capillaire peuvent être de trois ordres : stimuler la phase de croissance, diminuer la chute des cheveux existants, par exemple en stimulant l’ancrage du cheveu au cuir chevelu, ou favoriser un nouveau cycle de croissance par la formation et la croissance d’un nouveau cheveu. Des ingrédients du domaine pharmaceutique notamment sont connus pour stimuler la croissance des cheveux et lutter contre l’alopécie. Il s’agit de molécules chimiques spécifiques pour le traitement de l’alopécie, principalement l’alopécie androgénique, ou pathologie hormono-dépendante. Des solutions du domaine de la cosmétique existent par ailleurs. En revanche, peu d’ingrédients sont connus pour stimuler de façon concomitante plusieurs cibles spécifiques localisées au niveau du follicule pileux, permettant de le renforcer.

La plante Nephelium lappaceum, aussi appelée ramboutan, est un arbre que l’on trouve en Asie du sud-est, notamment en Malaisie et Indonésie. Il s’agit d’un arbre de 10 à 20 mètres de hauteur, produisant une grande quantité de fruits. Ce fruit, connu pour ses propriétés organoleptiques, contient des doses importantes de sucres, de vitamine C et de fer. Des décoctions de racines ou de feuilles séchées ont aussi été utilisées pour lutter contre la fièvre.

L’utilisation de la plante N. lappaceum dans des compositions cosmétiques est connue. Ainsi, la demande JP2002145730 décrit un extrait de graines pour son effet antioxydant, blanchissant de la peau ainsi que pour ses propriétés d’hydratation. Toutefois, cette demande ne décrit pas ni ne divulgue de façon particulière l’utilisation d’un extrait de ladite plante pour renforcer le follicule pileux ni pour diminuer la chute des cheveux.

La demande JP2001220344 divulgue la présence possible d’un extrait de graines de A. lappaceum parmi une liste d’extraits de plante obtenus par distillation, dans diverses compositions cosmétiques. Mais cette demande ne divulgue pas l’utilisation d’un extrait de N. lappaceum pour la prévention de la chute des cheveux ni pour renforcer le follicule pileux.

La demande JP 19910189133 divulgue l’utilisation d’un ou plusieurs extraits de plante parmi lesquels un extrait de N. lappaceum, en tant qu’inhibiteur de la testotérone-5-a-réductase pour le traitement de l’alopécie androgénique ou hormono-dépendante. Toutefois, il est divulgué un extrait de péricarpe de N. lappaceum, mais pas un extrait qui agisse par renforcement du follicule pileux, ni en favorisant l’ancrage desdits cheveux au niveau du cuir chevelu.

La demande CN105534812 divulgue une composition possédant des propriétés anti-inflammatoires, anti-âges mais aussi hydratantes de la peau, ladite composition comprenant un mélange de plusieurs extraits de plante dont le ramboutan. Toutefois, aucune partie de plante du ramboutan n’est divulguée. La demande JP2013245172 divulgue rutilisation pour favoriser la croissance du cheveu d’une combinaison d’un extrait de N. lappaceum et d’un extrait de Verbascum thapsus L. L’extrait de N. lappaceum peut être un extrait de péricarpe, de fruit ou de graines, préférentiellement de fruit. Toutefois, il s’agit ici de stimuler la croissance du cheveu. La présente invention en est distincte en ce qu’elle vise à renforcer le follicule pileux, en augmentant l’expression de certaines cibles localisées, et en favorisant l’ancrage du cheveu au niveau du cuir chevelu, permettant ainsi de favoriser une diminution de sa chute. L’objet de l’invention n’est pas de stimuler la croissance des cheveux.

Enfin, les demandes US20170151164, US20170151165 et US20170151166 divulguent des compositions cosmétiques comprenant de l’huile de N. lappaceum pour le traitement des fibres de kératine, notamment du cheveu. Mais ces demandes ne décrivent pas son utilisation pour le renforcement du follicule pileux, ni d’ailleurs pour diminuer la chute du cheveu.

Ainsi à la connaissance de la demanderesse, aucun art antérieur ne divulgue ni ne suggère rutilisation d’un extrait de N. lappaceum pour renforcer le follicule pileux, et ainsi diminuer leur chute.

L’extrait selon l’invention est un extrait de N. lappaceum. La demanderesse a en effet découvert de façon surprenante qu’un tel extrait possédait une efficacité pour renforcer le follicule pileux, en augmentant la prolifération des fibroblastes du follicule pileux, la viabilité cellulaire, la synthèse d’ATP, l’activité mitochondriale et en diminuant l’endommagement cellulaire ainsi que la senescence cellulaire mais aussi en augmentant l’expression de certaines cibles localisées au niveau du follicule pileux.

Un des avantages de l’extrait selon l’invention est qu’il a la capacité d’augmenter l’expression de plusieurs cibles localisées de façon concomitante. Il constitue un ingrédient actif complet pour le soin des cheveux et du cuir chevelu. Un autre avantage est qu’il s’agit d’un actif naturel issu d’une filière de développement durable s’inscrivant dans le respect des règles d’approvisionnement. Il s’agit par ailleurs d’un extrait stable sur le plan chimique, ne présentant pas de propriétés allergisantes et qui peut être facilement produit à l’échelle industrielle.

Un premier objet de l’invention concerne ainsi l’utilisation cosmétique d’un extrait de la plante N. lappaceum pour renforcer le follicule pileux.

On entend ici par « utilisation cosmétique » une utilisation non pharmaceutique, donc qui n’est pas à visée thérapeutique, l’extrait selon l’invention étant destiné à être appliqué sur tout ou partie d’une zone de peau saine, en particulier du cuir chevelu, non pathologique. On entend par « zone de peau saine », une zone de peau sur laquelle est appliquée l’extrait selon l’invention et qualifiée de « non pathologique » par un dermatologue, c’est à dire ne présentant pas d’infection, de cicatrice, de maladie ou d’affection cutanée telle que candidose, impétigo, psoriasis, eczéma, acné ou dermatite, ou de plaies ou de blessures et/ou autres dermatoses. Au sens de l’invention, la peau inclut toute partie du corps et/ou du visage, avantageusement celles comprenant des annexes cutanées, y inclut le cuir chevelu, et préférentiellement le cuir chevelu.

L’utilisation cosmétique de l’extrait selon l’invention peut être par voie orale ou topique, préférentiellement par voie topique. Ainsi dans un mode de réalisation de l’invention, l’utilisation cosmétique de l’extrait selon l’invention consiste en l’application par voie topique de l’extrait ou d’une composition cosmétique le comprenant sur tout ou partie du corps et/ou du visage choisie parmi les jambes, les pieds, les aisselles, les mains, les cuisses, le ventre, le décolleté, le cou, les bras, le torse, le dos, le visage, préférentiellement comprenant des annexes cutanées, et préférentiellement les cheveux, et/ou le cuir chevelu, avantageusement le cuir chevelu.

On entend ici par « annexe cutanée » les poils, les cils, les cheveux. Avantageusement, il s’agit des cheveux.

L’extrait selon l’invention est un extrait topiquement acceptable, le terme « topiquement acceptable » s’entendant d’un extrait non irritant pour la peau, non toxique et n’induisant pas de réaction allergique. On entend par « application par voie topique » l’application directe de l’extrait ou d’une composition cosmétique le comprenant ou leur vaporisation à la surface de la peau, préférentiellement du cuir chevelu, et/ou des cheveux.

On entend au sens de l’invention par « renforcer le follicule pileux », maintenir et/ou augmenter l’ancrage du cheveu au niveau du cuir chevelu, ce d’une part en maintenant et/ou augmentant la prolifération de fibroblastes à la fois du follicule pileux et de la peau, donc du cuir chevelu, et/ou en augmentant l’expression de cibles localisées au niveau du cuir chevelu, et/ou d’autre part en augmentant la viabilité cellulaire et/ou la synthèse d’ATP et/ou l’activité mitochondriale et/ou en diminuant l’endommagement cellulaire et/ou la sénescence cellulaire.

Ainsi dans un premier aspect de l’invention, l’extrait selon l’invention renforce le follicule pileux en augmentant l’expression de cibles localisées au niveau du cuir chevelu, notamment l’expression de collagène de type V et/ou de fibrilline-1, avantageusement au niveau du cuir chevelu.

On entend au sens de l’invention par « maintenir et/ou augmenter l’expression de collagène de type V » une augmentation de l’expression génique et/ou protéique de collagène de type V d’au moins 20%, préférentiellement d’au moins 30%, en présence de l’extrait selon l’invention, en comparaison du niveau d’expression détectée en l’absence de l’extrait. Avantageusement, il s’agit d’une augmentation de l’expression protéique de collagène de type V, encore avantageusement mesurée dans des fibroblastes dermiques sains, c’est-à-dire non pathologiques. Avantageusement, l’augmentation est détectée en présence d’un extrait de graines de N. lappaceum préparé selon l’exemple la), encore avantageusement, la mesure est effectuée par technique immuno-histochimique dans les conditions décrites dans l’exemple 2.

On entend au sens de l’invention par « augmenter l’expression de fibrilline-1 » une augmentation de l’expression génique et/ou protéique de fibrilline-1 d’au moins 50%, préférentiellement au moins 100%, encore préférentiellement au moins 150% en présence de l’extrait selon l’invention, en comparaison de l’expression détectée en l’absence de l’extrait. Dans un mode de réalisation avantageux, il s’agit d’une augmentation protéique de fibrilline-1, avantageusement mesurée au niveau de fibroblastes dermiques sains, encore avantageusement détectée en présence de l’extrait de graines préparé selon l’exemple la). Préférentiellement, la mesure de l’expression protéique est effectuée par immunohistochimie en présence d’un anticorps anti-fibrillin-1 (Méthode BCA), dans les conditions décrites dans l’exemple 3.

Dans un second aspect de l’invention, l’extrait renforce le follicule pileux en augmentant la synthèse d’ATP, avantageusement au niveau du follicule pileux.

Ainsi, on entend par « « augmenter la synthèse d’ATP » augmenter la synthèse d’ATP d’au moins 15%, préférentiellement au moins 25%, encore préférentiellement au moins 40% dans des fibroblastes de la papille du follicule pileux, non pathologiques, en présence de l’extrait selon l’invention, avantageusement un extrait de feuilles, de pulpe, de péricarpe et/ou de graines. Dans un mode de réalisation particulièrement avantageux de l’invention, cette augmentation est mesurée en présence de l’extrait de graines préparé selon l’exemple la), encore avantageusement par méthode enzymatique, dans les conditions telles que décrites dans l’exemple 4.

Dans un 3^ème aspect, l’extrait selon l’invention renforce le follicule pileux en augmentant l’activité mitochondriale et/ou la prolifération des fibroblastes du follicule pileux et/ou la viabilité cellulaire et/ou en diminuant l’endommagement cellulaire et/ou la senescence cellulaire.

On entend par «augmenter l’activité mitochondriale», une augmentation d’au moins 15%, préférentiellement d’au moins 30%, encore préférentiellement d’au moins 40% de ladite activité en présence de l’extrait de graines selon l’invention, avantageusement mesurée dans des fibroblastes de la papille du cheveu normaux, c’est-à-dire non pathologiques, avantageusement encore en présence de l’extrait de graines préparé selon l’exemple la). Préférentiellement, ladite activité est mesurée par densité optique après réduction du MTT (3-[4,5-dimethylthiazol-2-yl]-2,5 diphenyl tétrazolium bromide) en présence de succinate déshydrogénase, dans les conditions décrites dans l’exemple 5.

On entend par « augmenter la prolifération des fibroblastes du follicule pileux » une augmentation cellulaire, c’est-à-dire du nombre de cellules au niveau des fibroblastes d’au moins 30%, avantageusement d’au moins 60%, encore avantageusement d’au moins 90% en présence de l’extrait de graines selon l’invention, en comparaison du nombre de cellules détecté en l’absence de l’extrait. Dans un mode de réalisation de l’invention, cette augmentation cellulaire est mesurée au niveau des fibroblastes d’un modèle de néo-papille dermique, avantageusement mesurée par cytométrie de flux. Encore avantageusement, l’augmentation cellulaire est mesurée en présence de l’extrait de graines préparé selon l’exemple la), dans les conditions décrites dans l’exemple 6.

On entend au sens de l’invention par « diminuer la senescence cellulaire » une diminution de l’auto fluorescence de fibroblastes d’au moins 10%, préférentiellement d’au moins 20% en présence de l’extrait de graines selon l’invention, en comparaison de l’auto fluorescence mesurée dans lesdits fibroblastes sans extrait. Avantageusement, l’autofluorescence est mesurée dans des fibroblastes de la papille du follicule pileux, encore avantageusement d’un modèle de type néo-papille, encore préférentiellement en présence de l’extrait de graines préparé selon l’exemple la). Très avantageusement, l’auto fluorescence est mesurée par cytométrie de flux., dans les conditions de l’exemple 7.

On entend au sens de l’invention par « augmenter la viabilité cellulaire » une augmentation de la viabilité cellulaire d’au moins 5%, avantageusement d’au moins 10%, encore avantageusement d’au moins 20% de la viabilité cellulaire des micro-follicules en présence de l’extrait de graines selon l’invention, en comparaison du niveau détecté sans extrait. Préférentiellement, l’augmentation est mesurée en présence de l’extrait de graines préparé selon l’exemple la), avantageusement encore par méthode colorimétrique, dans les conditions décrites dans l’exemple 8a).

On entend au sens de l’invention par « diminuer l’endommagement cellulaire » diminuer la lyse cellulaire au niveau des micro-follicules, avantageusement du follicule pileux, d’au moins 5%, préférentiellement d’au moins 10%, encore préférentiellement d’au moins 40% en présence de l’extrait de graines selon l’invention. Dans un mode de réalisation avantageux de l’invention, il s’agit d’une diminution de l’endommagement membranaire mesurée en présence de l’extrait de graines préparé selon l’exemple la). Avantageusement encore, cette diminution est mesurée par méthode colorimétrique en présence de lactate déshydrogénase, dans les conditions décrites dans l’exemple 8b).

Dans un mode de réalisation particulièrement avantageusement, l’extrait selon l’invention renforce le follicule pileux, en augmentant la prolifération des fibroblastes du follicule pileux et/ou la viabilité cellulaire et/ou l’activité mitochondriale et/ou en diminuant l’endommagement cellulaire et/ou la senescence cellulaire.

Ainsi selon l’invention, l’extrait permet de diminuer la chute des annexes cutanées, préférentiellement des cheveux. On entend par « diminuer la chute de cheveux » une diminution d’au moins 1%, préférentiellement d’au moins 2%, encore préférentiellement d’au moins 5% de la densité de cheveux en phase télogène, c’est-à-dire en phase de chute. La mesure de la densité des cheveux en phase télogène et en phase anagène pourra être mesurée par mesure vivo, par la technique de phototrichogramme, en présence de l’extrait selon l’invention, en comparaison d’un placebo, au bout par exemple de 2, 4, 5 ou 6, préférentiellement 6 mois d’application dudit extrait.

L’extrait selon l’invention peut être tout ou partie de la plante N. lappaceum choisie parmi l’écorce, les feuilles, les branches, la tige, le fruit entier, la pulpe, les graines, le péricarpe, la racine. Préférentiellement, l’extrait est choisi parmi les feuilles, la pulpe, le péricarpe, les graines. Préférentiellement encore, il s’agit d’un extrait de graines.

On entend au sens de l’invention par « extrait de graines » tout extrait de tout ou partie de la plante N. lappaceum comprenant les graines, avantageusement comprenant les graines seulement. Ainsi, dans un mode de réalisation préférentiel de l’invention, l’extrait de graines n’inclue pas le péricarpe, ni la pulpe. L’extrait de graines n’est donc pas un extrait de fruit. On entend ici par « péricarpe » la coque du fruit.

L’extrait peut être obtenu par différentes méthodes d’extraction connues de l’homme du métier, choisis parmi la macération, la décoction à chaud, par broyage dont le broyage aux ultrasons, à l’aide d’un mixeur, ou encore l’extrait peut être obtenu par extraction dans l’eau en conditions subcritiques ou supercritiques (dioxyde de carbone). Préférentiellement, l’extraction est réalisée par macération. L’extraction pourra être conduite à partir de matière sèche ou fraîche, avantageusement sèche, en quantité de 0,1 % à 20 % en poids, avantageusement de 1 % à 20%, très avantageusement de 5 % à 15 %, encore avantageusement de 10 % à 15 %, et encore plus avantageusement de 10 % en poids par rapport au poids total de la matière et du solvant d’extraction.

L’extraction pourra être réalisée à une température allant de 4°C à 300°C. Dans un mode préférentiel de réalisation de l’invention, l’extraction sera conduite à une température de 4°C à 25°C, encore préférentiellement de 4°C à 20°C, encore avantageusement à température ambiante, c’est-à-dire à 20°C.

Dans un mode alternatif de réalisation de l’invention, l’extraction sera réalisée à une température de 60°C à 90°C, préférentiellement de 70°C à 85°C, encore préférentiellement à une température de 80°C.

Dans un autre mode alternatif de réalisation de l’invention, l’extraction sera réalisée dans l’eau en conditions subcritiques, à une température allant de 100°C à 300°C, avantageusement de 120°C à 250°C, encore avantageusement à 120°C. L’extraction peut être réalisée à une température donnée unique ou à des températures successives croissantes. Dans un mode de réalisation avantageux de l’invention, l’extraction sera réalisée à une température unique de 120°C. Dans un mode alternatif, elle sera conduite selon un gradient de trois températures croissantes comprises entre 100°C et 200°C, tel que 120°C, 140°C puis 160°C ou 110°C, 130°C puis 150°C, ou encore 120°C, 145°C puis 170°C. On entend par extraction en « conditions subcritiques » une extraction en présence d’eau, dans des conditions de température supérieures à 100°C et de pression inférieure à 221 bars, telle que l’eau reste à l’état liquide mais possède une viscosité et une tension de surface inférieures à celle de l’eau à température ambiante, augmentant sa constante diélectrique. Ainsi, la pression d’extraction sera comprise entre 150 bars et 250 bars, préférentiellement entre 200 et 221 bars, avantageusement dans un autoclave d’extraction sous pression.

L’extraction peut être conduite durant une période de 30 minutes à 24 heures, préférentiellement de 30 minutes à 12 heures, encore préférentiellement durant une période de 1 heure à 5 heures, et encore avantageusement durant une période de 1 heure à 2 heures. Très avantageusement, l’extraction sera conduite durant une période de 2 heures.

L’extrait selon l’invention pourra être obtenu par extraction dans un solvant ou mélange de solvant de préférence un solvant polaire protique, et avantageusement dans l’eau, un alcool, un glycol, un polyol, un mélange eau/alcool, eau/glycol ou eau/polyol (tels que l’eau en mélange avec éthanol, glycérol et/ou butylène glycol et/ou autres glycols tel que xylitol et/ou propanediol, etc.) de 99/1 à 1/99 (p/p), avantageusement dans l’eau comme unique solvant.

De façon particulière, l’extrait est obtenu par extraction aqueuse. Au sens de la présente invention, on entend par « extrait obtenu par extraction aqueuse » tout extrait obtenu par extraction avec une solution aqueuse contenant plus de 60% en poids, avantageusement au moins 70% en poids, en particulier au moins 80% en poids, plus particulièrement au moins 90% en poids, de façon particulière au moins 95% en poids, d’eau par rapport au poids total de la solution aqueuse, encore plus avantageusement ne contenant pas de glycol et de façon particulière ne contenant pas d’alcool, plus particulièrement ne contenant que de l’eau.

Dans un mode de réalisation alternatif, l’extrait est obtenu par extraction dans un mélange de propanediol ou d’éthanol, et d’eau en proportion respective (80, 20 ; v/v).

Dans un autre mode alternatif de réalisation de l’invention, l’extraction pourra être réalisée en présence d’un surfactant non ionique, préférentiellement choisi parmi du lauryl glucoside commercialisé sous le nom de Plantacare® 1200UP par BASE ou encore du caprylyl/capryl glucoside (Plantacare® 810 UP), préférentiellement du caprylyl/capryl glucoside (Plantacare® 810 UP). La concentration en poids du surfactant non ionique pourra être comprise entre 0,5% et 5%, avantageusement entre 0,5 et 1%, encore avantageusement elle sera de 1% en poids par rapport au poids total de l’extrait.

Ainsi dans un premier mode de réalisation de l’invention, l’extrait est obtenu par macération d’une quantité de 10% en poids de graines broyées par rapport au poids du solvant et de la matière, durant une période de 2 heures à une température de 20°C. L’extrait brut a été centrifugé, décanté puis filtré dans les conditions décrites dans l’exemple la).

Dans un second mode de réalisation de l’invention, l’extrait est obtenu par macération d’une quantité de 5 % en poids de graines broyées par rapport au poids total du solvant et de la matière, dans l’eau comme solvant, à une température de 20°C, durant une période de 24 heures. L’extrait brut a été centrifugé, décanté puis filtré dans les conditions décrites dans l’exemple lb).

Dans un 3^ème mode de réalisation de l’invention, l’extrait est obtenu par macération d’une quantité de 20% de graines broyées dans l’eau comme solvant, durant une période de 2 heures à une température de 20°C. L’extrait est ensuite centrifugé, décanté, filtré puis atomisé en présence de maltodextrine, en quantité finale de maltodextrine de 80% en poids par rapport au poids total de l’extrait final, dans les conditions décrites dans l’exemple le).

Dans un 4^ème mode de réalisation, l’extrait est obtenu par macération d’une quantité de 10% en poids de graines broyées par rapport au poids total de la matière et du solvant, dans un mélange éthanol : eau (80 :20 ; v/v), à une température de 80°C durant une période de 1 heure. L’extrait est ensuite centrifugé, décanté, filtré puis atomisé en présence de maltodextrine, en quantité finale de maltodextrine de 80% en poids par rapport au poids total de l’extrait final, dans les conditions décrites dans l’exemple ld).

Dans un 5^ème mode de réalisation, l’extrait sera obtenu par macération d’une quantité de 10% en poids de péricarpe séché de N. lappaceum par rapport au poids total de péricarpe et d’eau comme unique solvant durant une période de 1 heure à une température de 20°C. L’extrait obtenu est été décanté, centrifugé et le surnageant a été filtré. L’extrait se présente sous forme de poudre, dans les conditions décrites dans l’exemple le).

Dans un 6^ème mode de réalisation, l’extraction est réalisée par macération dans l’eau comme unique solvant à partir d’une quantité de 10% en poids de pulpe de fruit de N. lappaceum par rapport au poids total de la pulpe et de l’eau, à une température de 80°C durant une période de 1 heure. L’extrait brut est décanté, centrifugé puis filtré, dans les conditions décrites dans l’exemple 1 f).

Dans un 7^ème mode de réalisation, l’extraction est réalisée à partir d’une quantité de 10 % en poids de graines séchées de N. lappaceum en conditions supercritiques, dans un autoclave d’extraction sous pression, en présence d’éthanol (10%) comme co-solvant. L’extrait brut est décanté, centrifugé puis filtré, dans les conditions décrites dans l’exemple lg).

Dans un 8^ème mode de réalisation, l’extraction est réalisée à partir d’une quantité de 10% en poids de feuilles séchées de N. lappaceum par rapport au poids total des feuilles et de l’eau, à une température de 80°C durant une période de 1 heure. L’extrait brut est décanté, centrifugé puis filtré, dans les conditions décrites dans l’exemple lh).

Avantageusement selon l’invention, l’extrait sera filtré à un seuil de coupure de 0,45 pm. Des étapes supplémentaires de décoloration et/ou désodorisation peuvent être effectuées sur l’extrait à n’importe quel stade de l’extraction et selon les techniques connues par l’Homme du métier. De façon particulière, l’extrait pourra être décoloré au charbon actif.

L’extrait obtenu dans les conditions décrites dans les exemples la) à lg) peut être concentré par évaporation du solvant ou séché par exemple par lyophilisation ou par atomisation en présence de maltodextrines. Avantageusement dans ce cas, il sera atomisé en présence de maltodextrines. L’extrait se présentera sous forme de poudre.

Ainsi dans un mode de réalisation particulier de l’invention, l’extrait obtenu selon les exemples la), lb) et ld) à lg) sera atomisé en présence d’une concentration en poids de maltodextrines comprise entre 20% et 90%, préférentiellement entre 40 et 80%, encore préférentiellement de 70 à 80% par rapport au poids total de la poudre obtenue.

Dans un mode particulier de réalisation de l’invention, notamment pour son utilisation en dermatologie, l’extrait de N. lappaceum obtenu est stérilisé.

L’extrait selon l’invention pourra être utilisé seul sous forme d’ingrédient actif cosmétique ou compris dans une composition cosmétique.

Lorsqu’il est utilisé seul sous forme d’ingrédient cosmétique, il est préférentiellement solubilisé dans une solution aqueuse contenant de la glycérine, avantageusement présente à une concentration de 60% à 90%, encore avantageusement de 70% à 85%, très avantageusement à une concentration de 80% en poids par rapport au poids total de la solution aqueuse comprenant l’extrait.

Dans un mode de réalisation alternatif de réalisation de l’invention, l’extrait sera solubilisé et/ou dilué dans un solvant notamment polaire, tel que l’eau, un alcool, un polyol, un glycol, tel que le pentylène glycol et/ou le butylène glycol et/ou l’hexylène glycol et/ou le caprylyl glycol, ou un de leurs mélanges, préférentiellement un mélange hydroglycolique, encore préférentiellement contenant un glycol choisi parmi l’hexylène glycol, le caprylyl glycol et leurs mélanges. Avantageusement l'extrait obtenu est dilué et/ou soluble dans une solution aqueuse contenant de l’hexylène glycol, en particulier contenant entre 0,1 et 10 % en poids de l’hexylène glycol, préférentiellement entre 0,5 et 5 % en poids d’hexylène glycol, par rapport au poids total de l’ingrédient cosmétique. Avantageusement l'extrait obtenu est dilué et/ou soluble dans une solution aqueuse contenant du caprylyl glycol, en particulier contenant entre 0,01 et 5 % en poids de caprylyl glycol, préférentiellement entre 0,1 et 1 % en poids de caprylyl glycol, par rapport au poids total de la solution aqueuse comprenant l’extrait.

De façon particulière, la solution aqueuse dans laquelle est solubilisée l’extrait de N. lappaceum selon l'invention comprend de la gomme xanthane, en particulier entre 0,01 et 5 % en poids de gomme 11 xanthane par rapport au poids total la solution aqueuse, plus particulièrement entre 0,1 et 1 % en poids de gomme xanthane par rapport au poids total de la solution aqueuse comprenant l’extrait.

De façon avantageuse, la solution dans laquelle est solubilisé l’extrait de N. lappaceum selon l'invention comprend de l’hexylène glycol, du caprylyl glycol et de la gomme de xanthane.

Ainsi selon un mode de réalisation particulièrement avantageux de l’invention, l’utilisation de l’extrait pour renforcer le follicule pileux, en maintenant et/ou augmentant la prolifération des fibroblastes du follicule pileux et/ou la viabilité cellulaire et/ou la synthèse d’ATP et/ou l’activité mitochondriale et/ou diminuant l’endommagement cellulaire et/ou la senescence cellulaire, est un extrait de pulpe, de péricarpe et/ou de graines de N. lappaceum, avantageusement encore un extrait de graines.

Un autre objet de l’invention concerne ainsi l’utilisation de l’extrait selon l’invention, dans une composition cosmétique comprenant au moins un excipient cosmétiquement acceptable. On entend par « acceptable » un excipient cosmétique ou non irritant pour la peau, n’induisant pas de réponse allergique, et stable sur le plan chimique.

Ainsi, l’utilisation de la composition cosmétique est pour renforcer le follicule pileux, ce en maintenant et/ou augmentant l’expression de collagène de type V et/ou fibrilline-1 et/ou la prolifération des fibroblastes du follicule pileux et/ou la viabilité cellulaire et/ou la synthèse d’ATP et/ou l’activité mitochondriale et/ou en diminuant l’endommagement cellulaire et/ou la sénescence cellulaire et avantageusement en maintenant et/ou augmentant la prolifération des fibroblastes du follicule pileux et/ou la viabilité cellulaire et/ou l’activité mitochondriale et/ou en diminuant l’endommagement cellulaire et/ou la senescence cellulaire.

La composition cosmétique comprenant l’extrait selon l’invention, préférentiellement un extrait de pulpe, péricarpe et/ou graines, encore préférentiellement un extrait de graines, pourra être utilisée en tant que composition cosmétique pour le soin du cheveu, avantageusement pour diminuer la chute des annexes cutanées, préférentiellement des cheveux.

Dans un mode de réalisation de l’invention, ladite composition cosmétique sera administrée par voie topique ou orale, avantageusement, elle sera appliquée par voie topique sur tout ou partie du corps choisi parmi les jambes, les pieds, les aisselles, les mains, les cuisses, le ventre, le décolleté, le cou, les bras, le torse, le dos, le visage comprenant des annexes cutanées, préférentiellement les cheveux, et/ou le cuir chevelu, plus avantageusement le cuir chevelu.

Dans un mode de réalisation de l’invention, l’extrait selon l’invention sera présent dans la composition cosmétique ou dermatologique à une concentration de lxlO^-4 % à 10 %, préférentiellement de lxlO^-4% à 5 %, et encore préférentiellement de lxlO^-3 % à 3 % en poids, par rapport au poids total de la composition.

Le ou les excipients pourront être choisis parmi des agents tensioactifs et/ou émulsifiants, des conservateurs, des agents tampons, des agents chélatants, des dénaturants, des agents opacifiants, des ajusteurs de pH, des agents réducteurs, des agents stabilisants, des épaississants, des gélifiants, des polymères filmogènes, des charges, des agents matifiants, des agents de brillance, des pigments, des colorants, des parfums, et leurs mélanges. Le CTEA (Cosmetic Ingrédient Handbook, Second Edition (1992)) décrit différents excipients cosmétiques adaptés à une utilisation dans la présente invention. Avantageusement, le ou les excipients sont choisis dans le groupe comprenant les polyglycérols, les esters, les polymères et dérivés de cellulose, les dérivés de lanoline, les phospholipides, les lactoferrines, les lactoperoxidases, les stabilisants à base de sucrose, la vitamine E et ses dérivés, les gommes de xanthane, les cires naturelles et synthétiques, les huiles végétales, les triglycérides, les insaponifiables, les phytostérols, les silicones, les hydrolysats de protéines, les bétaïnes, les aminoxides, les extraits de plantes, les esters de saccharose, les dioxydes de titane, les glycines, et les parabènes, et encore de préférence parmi le groupe consistant en le stéareth-2, le stéareth-21, le glycol 15 stéaryle éther, le cétéaryl alcool, le phénoxyéthanol, le méthylparabéne, l'éthylparabène, le propylparabène, le butylparabène, le butylène glycol, le caprylyl glycol, les tocophérols naturels, la glycérine, le dihydroxycetyl sodium phosphate, l'isopropyl hydroxycétyl éther, le glycol stéarate, la triisononanoine, l'octyl cocoate, le polyacrylamide, l'isoparaffine, le laureth-7, un carbomer, le propylène glycol, l'hexylène glycol, le glycérol, le bisabolol, une diméthicone, l’hydroxyde de sodium, le PEG 30-dipolyhydroxystérate, les triglycérides caprique/caprylique, le cétéaryl octanoate, le dibutyl adipate, l'huile de pépins de raisin, l'huile de jojoba, le sulfate de magnésium, l'EDTA, une cyclométhicone, la gomme de xanthane, l'acide citrique, le lauryl sulfate de sodium, les cires et les huiles minérales, l'isostéaryl isostéarate, le dipélargonate de propylène glycol, l'isostéarate de propylène glycol, le PEG 8, la cire d'abeille, les glycérides d'huile de coeur de palme hydrogénée, l'huile de lanoline, l'huile de sésame, le cétyl lactate, le lanoline alcool, l'huile de ricin, le dioxyde de titane, le lactose, le saccharose, le polyéthylène basse densité, une solution isotonique salée, et leurs mélanges.

La composition cosmétique peut être choisie parmi une solution, aqueuse ou huileuse, une crème ou un gel aqueux ou un gel huileux, notamment un gel douche, un lait, une émulsion, une microémulsion ou une nanoémulsion, notamment huile-dans-eau ou eau-dans-huile ou multiple ou siliconée, un masque, un sérum, une lotion, un savon liquide, un pain dermatologique, une pommade, une mousse, un patch, un produit anhydre, de préférence liquide, pâteux ou solide, un shampoing. De façon avantageuse, il s'agit d'une lotion. Alternativement, il s’agira d’un shampoing.

La composition cosmétique pourra comprendre par ailleurs d’autres agents cosmétiques possédant les mêmes propriétés et induisant un effet synergique ou non avec l’extrait selon l’invention, ou des agents cosmétiques à effets complémentaires.

A titre d’actif anti-chute, on citera l’association de sulfopeptides, acides aminés, aminosaccharides, vitamine du groupe B, zinc et extrait de Panax ginseng et Artium majus commercialisé sous le nom Trichogen ™ LS 8960 par la déposante ou un agent protecteur capillaire tel qu’un extrait de péricarpe de Litchi chinensis commercialisé sous le nom Litchiderm™ par la déposant, un actif apaisant et antidémangeaisons tels que les phytostérols de colza commercialisé sous le nom de Phytosoothe™ LS9766 par la déposante.

D’autres types d’actifs pourront être présents dans la composition, tels qu’un extrait de feuilles de Cassia alata commercialisé sous le nom de DN-Age™ en tant qu’actif anti-oxydant pour le soin des cheveux notamment, d’une combinaison d’un extrait de Salvia miltiorhizza et de niacinamide commercialisé sous le nom de CollRepair ™ en tant qu’agent déglyquant, ou encore d’actifs favorisant la fermeté de la peau tels qu’un tétrapeptide synthétique commercialisé sous le nom de Dermican ™, un extrait & Hibiscus abelmoschus commercialisé sous le nom de Linefactor ™, un extrait purifié de pois commercialisé sous le nom de Proteasyl ™, un extrait de Manilkara multinervis commercialisé sous le nom d’Elestan™, un extrait de Khaya senegalensis commercialisé sous le nom de Collalift™ 18, un extrait de pulpe d’Argan commercialisé sous le nom d’Argassential ™ par la demanderesse, un extrait de Schizandra chinensis commercialisé sous le nom de Sqisandryl ™, un extrait d’Eperuafalcata commercialisé sous le nom d’Eperuline ™, un extrait d’Orthosiphon staminus commercialisé sous le nom de MAT-XS™ Bright commercialisés par la demanderesse. Ces associations d’actifs sont susceptibles de renforcer le follicule pileux et diminuer la chute des cheveux.

Un autre objet concerne encore un procédé de soin cosmétique comprenant l’administration par voie topique ou orale de l’extrait selon l’invention, avantageusement d’un extrait de pulpe, de péricarpe 14 et/ou de graines, encore avantageusement de graines, ou d’une composition cosmétique le comprenant pour maintenir et/ou augmenter l’expression de collagène de type V et/ou fibrilline-1 et/ou pour augmenter la prolifération des fibroblastes du follicule pileux et/ou pour augmenter la viabilité cellulaire et/ou la synthèse d’ATP et/ou l’activité mitochondriale et/ou diminuer l’endommagement cellulaire et/ou diminuer la senescence cellulaire, pour renforcer le follicule pileux et ainsi diminuer la chute des annexes cutanées, préférentiellement des cheveux. Préférentiellement, l’administration est une application par voie topique.

Très avantageusement, le procédé de soin cosmétique consistera en l’application par voie topique de l’extrait de graines pour maintenir et/ou augmenter la prolifération des fibroblastes du follicule pileux et/ou pour augmenter la viabilité cellulaire et/ou la synthèse d’ATP et/ou l’activité mitochondriale et/ou diminuer l’endommagement cellulaire et/ou diminuer la sénescence cellulaire, pour renforcer le follicule pileux et ce faisant pour diminuer la chute des cheveux.

Dans un mode de réalisation de l’invention, le procédé de soin cosmétique consiste en l’application par voie topique de l’extrait selon l’invention ou d’une composition le comprenant sur tout ou partie du corps choisi parmi les jambes, les pieds, les aisselles, les mains, les cuisses, le ventre, le décolleté, le cou, les bras, le torse, le dos, le visage comprenant des annexes cutanées, préférentiellement les cheveux, et/ou le cuir chevelu, plus avantageusement le cuir chevelu.

Des exemples font référence à la description de l’invention et sont présentés ci-après. Ces exemples sont donnés à titre d’illustration et ne limitent en aucun cas la portée de l’invention. Chacun des exemples a une portée générale. Les exemples font partie intégrante de la présente invention et toute caractéristique apparaissant nouvelle par rapport à un état de la technique antérieure quelconque à partir de la description prise dans son ensemble, y compris les exemples, fait partie intégrante de l'invention. Enfin, sauf indication contraire, dans les exemples, la température est exprimée en degré Celsius, les pourcentages en poids par volume et la pression est la pression atmosphérique.

Exemple 1 : Modes de préparation de l’extrait de N. lappaceum selon l’invention.

Exemple la) Une quantité de 10% en poids de graines broyées de N. lappaceum par rapport au poids total du solvant et des graines a été obtenue par macération dans l’eau en tant que solvant, à une température de 20°C durant une période de 2 heures. L’extrait brut a été centrifugé, décanté puis filtré. Exemple lb) Une quantité de 5% en poids de graines broyées de N. lappaceum par rapport au poids total du solvant et des graines a été obtenue par macération dans l’eau en tant que solvant, à une 15 température de 20°C durant une période de 24 heures. L’extrait brut a été centrifugé, décanté puis filtré.

Exemple le) Une quantité de 20% en poids de graines broyées de N. lappaceum par rapport au poids total du solvant et des graines a été obtenue par macération dans l’eau en tant que solvant, à une température de 20°C durant une période de 2 heures. L’extrait brut a été centrifugé, décanté puis filtré. L’extrait a été atomisé en présence de maltodextrine, en quantité finale de maltodextrine de 80% en poids par rapport au poids total de l’extrait final.

Exemple ld) Une quantité de 10% en poids de graines broyées de N. lappaceum par rapport au poids total du solvant et des graines a été obtenue par macération dans un mélange éthanol : eau (80 :20 ; v/v) en tant que solvant, à une température de 80°C durant une période de 1 heure. L’extrait brut a été centrifugé, décanté puis filtré. L’extrait a été atomisé en présence de maltodextrine, en quantité finale de maltodextrine de 80% en poids par rapport au poids total de l’extrait final.

Exemple le) : Une quantité de 10% en poids de péricarpe déché de N. lappaceum par rapport au poids total de péricarpe et d’eau comme unique solvant a été extraite par macération durant une période de 1 heure à une température de 20°C. L’extrait obtenu a été décanté, centrifugé puis le surnageant a été filtré. L’extrait se présente sous forme de poudre.

Exemple 1 f) L’extraction a été réalisée par macération dans l’eau comme unique solvant à partir d’une quantité de 10% en poids de pulpe de fruit de N. lappaceum par rapport au poids total de la pulpe et de l’eau, à une température de 80°C durant une période de 1 heure. L’extrait brut a été décanté, centrifugé puis filtré.

Exemple lg) L’extraction a été réalisée à partir d’une quantité de 10 % en poids de graines séchées de N. lappaceum en conditions supercritiques (CO₂), dans un autoclave d’extraction sous pression, en présence d’un co-solvant (Ethanol) (10%). L’extrait brut a été décanté, centrifugé puis filtré.

Extrait lh) Une quantité de 10% en poids de feuilles séchées de N. lappaceum par rapport au poids total de feuilles et d’eau comme unique solvant a été extraite par macération durant une période de 1 heure à une température de 20°C. L’extrait obtenu a été décanté, centrifugé puis le surnageant a été filtré. L’extrait se présente sous forme de poudre.

Exemple 2 : Augmentation de l’expression de collagène de type V en présence d’un extrait de graines

Protocole : des fibroblastes humains dits « normaux », c’est-à-dire ne présentant pas de pathologie, issus d’une donneuse saine de 34 ans ont été cultivés dans un milieu défini (FGM) durant une période 16 de 48 heures en présence de concentrations finales différentes de différents extraits de N. lappaceum puis le milieu cellulaire éliminé. Le même milieu de culture sans ajout d’extrait selon l’invention a été utilisé comme témoin (Contrôle). Le tapis cellulaire obtenu a été lysé avec une solution d’hydroxyde d‘ammonium, puis le dosage du collagène de type V a été effectué avec un anticorps anti-collagène V, dilué au 1/4000 dans une solution tampon (PBS). Après une période de 60 minutes, un anticorps secondaire dilué au 1/25000 a été appliqué durant une période de 60 minutes. Après lavage, une solution de révélation a été ajoutée et la fluorescence a été mesurée (ENVision, PerkinElmer). Les résultats de fluorescence ont été normalisés par rapport à la fluorescence obtenue avec le même milieu cellulaire en l’absence de l’extrait de N. lappaceum (Contrôle) et ont été rapportés à la quantité d‘ADN obtenue dans chaque condition. Les résultats présentés correspondent à la moyenne de 3 essais (n=3) (ET : Ecart-type).

Résultats :

Tableau 1

	MOY	ET
Contrôle	100	5
Extrait de Nephelium lappaceum 1 % (p/v milieu) préparé selon l’exemple la)	134	25

Conclusion : l’extrait de graines de N. lappaceum a augmenté l’expression de collagène de type V d’au moins 23% dans les fibroblastes analysés, montrant les propriétés de l’extrait de graines à renforcer le follicule pileux et à diminuer la chute des cheveux.

Exemple 3 : Mise en évidence de l’augmentation de la synthèse de fibrilline-1 en présence de l’extrait selon l’invention.

Protocole : Des fibroblastes humains normaux, c’est-à-dire non pathologiques, ont été cultivés pendant 48 heures dans un milieu EGM puis traités avec l’extrait aqueux de graines de N. lappaceum de l’exemple la), à une concentration finale en poids de 1% par rapport au volume final du milieu. Les cellules ont été récoltées puis lysées avec un tampon de lyse afin de réaliser des Western Blot. La concentration protéique a été déterminé par la méthode BCA. Tous les échantillons ont été normalisés sur la quantité totale de protéines (n =3). Un anticorps primaire anti-fibrillin-1 (LS-BIO) a été utilisé ainsi qu’un anticorps secondaire couplé à la péroxydase. Un substrat chimio-luminescent a permis la mise en évidence du signal et sa quantification (ProteinSimple).

Résultats :

Tableau 2

	MOY	ET
Contrôle	100,0	10,0
Extrait de graines de N. lappaceum 1 % (p/v milieu) Ex. la)	272	95,0

Conclusion : l’extrait selon l’invention a montré une augmentation de la synthèse de fibrilline-1 dans les fibroblastes en comparaison du contrôle.

Exemple 4 : Mise en évidence de l’augmentation de la synthèse d’ATP dans des fibroblastes de la papille du follicule pileux en présence de l’extrait selon l’invention

Protocole : Des fibroblastes humains non pathologiques issus de la papille du follicule pileux ont été mis en culture sur milieu DMEM durant 24 heures puis traités durant 6 jours avec l’extrait aqueux de graines de N. lappaceum selon l’invention, aux concentrations finales en volume de 0.03% et 0.01% par rapport au volume total du milieu. La quantité d’ATP a été mesurée au bout de 6 jours par méthode enzymatique (Complexe Luciférine/Luciférase; ATP Bioluminescence kit ROCHE Diagnostics).

Tableau 3

	MOY	ET
Contrôle	100	7
Extrait de graines de N. lappaceum Ex. la) 0,03% % (v/v)	138	6
Extrait de graines de N. lappaceum Ex. la) 0,1% % (v/v)	139	3

Conclusion : les extraits de graines ont montré une augmentation de la synthèse d’ATP en comparaison du contrôle, en faisant un extrait actif pour le renforcement du follicule pileux.

Exemple 5 : Mise en évidence de l’augmentation de l’activité métabolique mitochondriale des fibroblastes de la papille du cheveu par l’extrait selon l’invention.

Protocole : Des fibroblastes humains non pathologiques de la papille du follicule pileux ont été mis en culture durant 24 heures puis traités durant 6 jours avec l’extrait aqueux de graines de N. lappaceum aux concentrations finales de 0,1% et 0,3% par rapport au volume total du milieu. L’activité mitochondriale des fibroblastes a été mesurée par réduction du MTT (3-[4,5-dimethylthiazol-2-yl]2,5 diphenyl tétrazolium bromide) en présence de succinate déshydrogénase. Le précipité obtenu a été extrait par DMSO, puis la densité optique de la solution de DMSO a été mesurée à 540nm.

Résultats :

Tableau 4

	MOY	ET
Contrôle	100	2
Extrait aqueux de graines de N. lappaceum Ex. la) 0,1% (v/v)	121	4
Extrait aqueux de graines de N. lappaceum Ex. la) 0,3% (v/v)	145	4

Conclusion : l’extrait aqueux de graines de N. lappaceum a montré une augmentation de l’activité mitochondriale des fibroblastes de la papille du follicule pileux d’au moins 15% en comparaison du contrôle, jusqu’à 47%. Cette activité mitochondriale participe au renforcement du follicule pileux et permet de diminuer la chute des cheveux.

Exemple 6 : Augmentation de la prolifération des fibroblastes dans un modèle cellulaire de type néo-papille

Protocole :

Des fibroblastes humains non pathologiques issus d’un modèle de néo-papille dermique ont été cultivés sur milieu DMEM comprenant l’extrait selon l’invention à une concentration finale de 0,3% ou 1% par rapport au poids total du milieu, puis centrifugés à 200 g pendant 5 minutes. Les agrégats ont été incubés durant 5 jours à 37°C (CO2 5%) puis rincés dans du tampon PBS. Les cellules ont été lysées durant 1 heure à 37°C dans un mélange de protéases contenant de l’EDTA. L’augmentation cellulaire a été déterminée à l’aide d’un cytomètre de flux.

Résultats : Tableau 5

	MOY	ET
Contrôle	100	22
Extrait aqueux de graines de N. lappaceum Ex. la) 0,3% (v/v)	163	10

Conclusion : l’extrait selon l’invention a montré sa capacité à augmenter la prolifération des fibroblastes de la papille dermique dans un modèle de néo-papille d’au moins 25%, démontrant son effet positif sur le renforcement du follicule pileux, et ses propriétés pour diminuer la chute des cheveux.

Exemple 7 : Diminution des paramètres d’auto-fluorescence dans un modèle cellulaire de type néo-papille

Protocole : Des fibroblastes humains normaux, non pathologiques, ont été mis en suspension dans du milieu DMEM comprenant l’extrait de graines selon l’invention préparé selon l’exemple la) à la concentration finale de 1% par rapport au volume total du milieu. Après centrifugation, les agrégats ont été incubés durant 5 jours à 37°C (CO2 5%). Les agrégats ont été rincés dans du tampon PBS puis les cellules ont été lysées dans un mélange de protéases avec EDTA.

L’autofluorescence des cellules a été déterminée à l’aide d’un cytomètre de flux C6 (BectonDickinson UK) (585 nm+/- 20 nm). Les résultats sont exprimés en % par rapport au contrôle.

Résultats : Tableau 6

	MOY	ET
Contrôle	100	8
Extrait aqueux de graines de N. lappaceum Ex. la) 1% (v/v)	74	2

Conclusion : l’extrait de graines a démontré sa capacité à diminuer l’autofluorescence des fibroblastes, d’au moins 20%, donc à diminuer la senescence des fibroblastes au niveau de la papille du follicule pileux.

Exemple 8 : Mise en évidence de l’effet de l’extrait selon l’invention sur le micro-follicule.

Méthode de reconstruction d’un micro-follicule :

Le modèle de micro-follicule consiste à co-cultiver des fibroblastes de la papille, des kératinocytes issus de la gaine externe du follicule pileux et des mélanocytes en 3 dimensions. Ce modèle cellulaire constitue le modèle d’organe reconstruit le plus proche du follicule pileux en permettant l’intégration des interactions neuro-épidermo-mésenchymateuses entre les différents types cellulaires.

Les micro-follicules ont été cultivés.

Des fibroblastes de la papille non pathologiques ont été cultivés durant 3 jours. Les mélanocytes et kératinocytes de la gaine externe du follicule pileux sont alors ajoutés à la néo-papille pour former le micro-follicule. Après 24h de culture, l’extrait aqueux de graine de Ramboutan. Le même milieu a été cultivé en l’absence de l’extrait selon l’invention (Contrôle). Les milieux de culture et les microfollicules ont été prélevés après 48h de traitement pour les analyses.

Exemple 8a) : Augmentation de la viabilité cellulaire au niveau du microfollicule

Protocole :

La viabilité cellulaire du micro-follicule a été mesurée par la méthode PrestoBlue (Thermo Eisher Scientific). Cette méthode colorimétrique est basée sur la réduction et l’émission de fluorescence d’un réactif de type résazurine par les cellules viables. Les mesures ont été réalisées après 48h de traitement. Les valeurs sont exprimées en % moyen après normalisation par le contrôle non traité.

Résultat : Tableau 7

	MOY	ET
Contrôle	100	6,7
Extrait aqueux de graines de N. lappaceum Ex. la) 0,02% (v/v)	118,0	6,5

Conclusion : l’extrait de graines selon l’invention a la capacité d’augmenter la viabilité cellulaire des microfollicules, en faisant un extrait actif sur le renforcement du follicule pileux.

Exemple 8b) : Diminution de l’endommagement membranaire au niveau du microfollicule

Protocole : L’endommagement cellulaire a été mesuré par méthode colorimétrique en présence de lactate déshydrogénase, permettant de quantifier la cytotoxicité d’un extrait sur la mesure de l’activité de la lactate déshydrogénase au niveau de cellules endommagées dans les milieux de culture. Une augmentation de l’endommagement membranaire des cellules et une lyse cellulaire conduit à une augmentation de l’activité lactate déshydrogénase, proportionnelle au nombre de cellules lysées. L’activité est mise en évidence en présence de formazan, dont la quantité a été évaluée par mesure de la densité optique (500 nm). Les mesures ont été réalisées dans les milieux de culture après 48h de traitement.

Résultat : Tableau 8

	MOY	ET
Contrôle	100	15,9
Extrait aqueux de graines de N. lappaceum Ex. la) 0,02% (v/v)	58,0	16,3

Conclusion: l’extrait de graines selon l’invention a la capacité de diminuer l’endommagement membranaire, en faisant un extrait actif sur le renforcement du follicule pileux, favorisant une diminution de la chute des cheveux.

Exemple 9. Exemple d’ingrédients cosmétiques comprenant l’extrait de N. lappaceum.

Extrait de N. lappaceum Ex. la) à lf) 20% par rapport au poids total

Maltodextrines

80% par rapport au poids total

Exemple 10. Exemples de compositions cosmétiques comprenant l’extrait selon l’invention.

Phase	Ingrédient	%
A	Eumulgin VL 75 (BASF)	4,00
	Lanette 22 (BASF)	2,00
	Cetiol 868 (BASF)	4,00
	Cetiol PGL (BASF)	4,00
	Cetiol Sensoft (BASF)	2,00
	Cosmedia SP (BASF)	1,00
	Xiameter PMX-200 Sil Fluid 50 (Dow Corning)	0,50
B	Eau	Qsp 100
	Elestab 388 (BASF)	2,50
	Glycérine	5,00
	Eumulgin SG (BASF)	0,40
	Rheocare XG (BASF)	0,25
C	Extrait de graines de N. lappaceum Exemple le)	0,50

REVENDICATIONS

Claims

1. Utilisation cosmétique d’un extrait de Nephelium lappaceum pour renforcer le follicule pileux.

2. Utilisation selon la revendication 1, caractérisée en ce que l’extrait de Nephelium lappaceum est un extrait de graines et/ou de pulpe et/ou de péricarpe, préférentiellement un extrait de graines.

3. Utilisation selon l’une quelconque des revendications 1 à 2, caractérisée en ce que l’extrait est obtenu par extraction dans un solvant ou mélange de solvant, de préférence un solvant polaire protique, et avantageusement dans l’eau, un alcool, un glycol, un polyol, un mélange eau/alcool, eau/glycol ou eau/polyol (tels que l’eau en mélange avec éthanol, glycérol et/ou butylène glycol et/ou autres glycols tel que xylitol et/ou propanediol, etc.) de 99/1 à 1/99 (p/p), avantageusement dans l’eau comme unique solvant.

4. Utilisation selon l’une quelconque des revendications 1 à 3 pour maintenir et/ou augmenter l’expression de collagène de type V et/ou de fibrilline-1 et/ou pour augmenter la prolifération des fibroblastes du follicule pileux et/ou pour augmenter la viabilité cellulaire et/ou la synthèse d’ATP et/ou l’activité mitochondriale et/ou diminuer l’endommagement cellulaire et/ou diminuer la sénescence cellulaire.

5. Utilisation de l’extrait selon l’une quelconque des revendications 1 à 4 pour diminuer la chute des annexes cutanées, préférentiellement des cheveux.

6. Utilisation de l’extrait selon l’une quelconque des revendications 1 à 5, caractérisée en ce que l’utilisation est par application topique.

7. Utilisation de l’extrait selon l’une quelconque des revendications 1 à 6, caractérisée en ce que l’extrait est présent dans une composition cosmétique comprenant au moins un excipient cosmétiquement acceptable, à une concentration finale de lxlO^-4 % à 10 %, préférentiellement de lxlO^-4 % à 5 %, encore préférentiellement de lxlO^-3 % à 3 % en poids, par rapport au poids total de la composition cosmétique.

8. Utilisation de l’extrait selon l’une quelconque des revendications 1 à 7, caractérisée en ce que l’extrait est présent dans la composition cosmétique choisie parmi une solution, aqueuse ou huileuse, une crème ou un gel aqueux ou un gel huileux, notamment un gel douche, un lait, une émulsion, une microémulsion ou une nanoémulsion, notamment huile-dans-eau ou eaudans-huile ou multiple ou siliconée, un masque, un sérum, une lotion, un savon liquide, un pain dermatologique, une pommade, une mousse, un patch, un produit anhydre, de préférence liquide, pâteux ou solide, un shampoing, avantageusement une lotion.

9. Procédé de soin cosmétique comprenant l’administration par voie topique ou orale de l’extrait selon l’une quelconque des revendications 1 à 8 ou d’une composition cosmétique le

5 comprenant, pour renforcer le follicule pileux et/ou diminuer la chute des annexes cutanées, préférentiellement des cheveux.

10. Procédé de soin cosmétique selon la revendication 9, caractérisé en ce qu’il maintient et/ou augmente l’expression de collagène de type V et/ou fibrilline-1 et/ou la prolifération des fibroblastes du follicule pileux et/ou la viabilité cellulaire et/ou la synthèse d’ATP et/ou

10 l’activité mitochondriale et/ou diminue l’endommagement cellulaire et/ou la sénescence cellulaire.

11. Procédé de soin cosmétique selon l’une quelconque des revendications 9 à 10, caractérisé en ce qu’il consiste en l’application par voie topique sur tout ou partie du corps choisi parmi les jambes, les pieds, les aisselles, les mains, les cuisses, le ventre, le décolleté, le cou, les bras, le

15 torse, le dos, le visage comprenant des annexes cutanées, préférentiellement les cheveux, et/ou le cuir chevelu, plus avantageusement le cuir chevelu.