FR3132845A1 - Hydrolysat de tourteau de moabi, procédé de préparation et utilisation en cosmétique notamment pour traiter le vieillissement cutané et dépigmenter la peau - Google Patents
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Abstract
Hydrolysat de tourteau de moabi comprenant de 0,50 à 1,50 % en poids de protéines, de 0,50 à 2,00 % en poids de sucres et de 1,5 à 3,0 ppm de polyphénols par rapport au poids total de l’hydrolysat, procédé de préparation, compositions cosmétiques, non thérapeutiques et utilisations en cosmétique en particulier en tant qu’agent pour hydrater, pour prévenir et/ou traiter les signes du vieillissement cutané et pour blanchir, éclaircir et/ou dépigmenter la peau.
Figure à publier avec l’abrégé : Fig. 1
Description
La présente invention se rapporte au domaine de la valorisation du tourteau de moabi. Plus spécifiquement l’invention concerne un extrait de tourteau de moabi hydrolysé ainsi que son utilisation en cosmétique notamment en tant qu’agent pour prévenir et/ou traiter les signes du vieillissement cutané, pour hydrater la peau et pour blanchir, éclaircir et/ou dépigmenter la peau.
La peau est la principale barrière de protection du corps humain à l’égard des agressions extérieures telles que la pollution atmosphérique, les variations climatiques et le rayonnement UV.
La peau est constituée de trois couches : l’épiderme, le derme et l’hypoderme. L’épiderme, qui est en contact avec l’extérieur, est plus particulièrement concerné par les agressions extérieures. L’épiderme est recouvert par un film hydrolipidique et est composé de quatre couches : la couche cornée, la couche granuleuse, la couche épineuse et la couche basale. La peau, et en particulier l’épiderme, est ainsi constamment soumis à des stress qui engendrent son vieillissement.
On distingue généralement le vieillissement intrinsèque et le vieillissement extrinsèque.
Le vieillissement intrinsèque, encore appelé vieillissement physiologique provoque un ralentissement du renouvellement des kératinocytes qui sont les cellules des couches superficielles la peau, en particulier de l’épiderme. La réduction du tissus adipeux sous-cutané et l’apparition de fines rides sont les principales manifestations du vieillissement intrinsèque.
Le vieillissement extrinsèque se caractérise par une perte d’élasticité de la peau, une altération de la fonction barrière de la peau et l’apparition de rides profondes. Le vieillissement extrinsèque est essentiellement dû aux expositions répétées de la peau au soleil, il est également associé à l’apparition de taches plus foncées qui génèrent des zones d’aspect non-homogène. Ce vieillissement est également nommé photo-vieillissement ou vieillissement actinique.
La présente invention vise plus particulièrement le vieillissement intrinsèque.
Ces taches foncées sont généralement dues à une concentration localisée de mélanine à la surface de la peau. La mélanine est le pigment à l’origine de la coloration de la peau, elle est produite par les mélanocytes situés dans l’épiderme.
Le mécanisme de formation de la pigmentation de la peau, c’est-à-dire de la mélanine, est particulièrement complexe et fait intervenir schématiquement les principales étapes suivantes, au niveau des mélanocytes de la couche basale :
Tyrosine → DOPA → Dopaquinone → L eucodopachrome → D opachrome → M élanine
Tyrosine → DOPA → Dopaquinone → L eucodopachrome → D opachrome → M élanine
La tyrosinase (monophénol dihydroxyl phénylalanine : oxygen oxydo- reductase EC 1.14.18.1) est l’enzyme essentielle intervenant dans cette suite de réactions. Elle catalyse notamment la réaction de transformation de la tyrosine en Dopa (dihydroxyphénylalanine) grâce à son activité hydroxylase et la réaction de transformation de la Dopa en dopaquinone grâce à son activité oxydase.
Il demeure par conséquent toujours un besoin de nouvelles compositions cosmétiques destinées à être appliquées sur la peau et qui présentent des propriétés hydratantes, anti-âge et dépigmentantes.
Les inventeurs ont montré qu’une solution à ce problème technique pouvait être apportée au moyen d’un extrait particulier de tourteau de moabi.
Le moabi ouBaillonella toxispermaest une espèce végétale de la famille desSapotaceae. Le moabi est un grand arbre poussant dans les forêts tropicales humides d’Afrique. Il est traditionnellment exploité en tant que bois tropical. Les graines des fruits de moabi sont traditionnellment pressées pour obtenir une huile utilisée dans l’industrie cosmétique locale.
L’huile de moabi, obtenue par pressage puis raffinage plus ou moins poussé, génère une grande quantité de sous-produits solides appelés tourteaux de moabi.
Il demeure toujours un besoin de trouver de nouvelles voies de valorisation du tourteau de moabi à haute valeur ajoutée.
De manière surprenante et avantageuse les inventeurs ont mis en évidence un extrait particulier de tourteau de moabi obtenu par un procédé d’hydrolyse alcaline particulièrement innovant dans le traitement du tourteau de moabi, et présentant des effets avantageux en cosmétique en application sur la peau, plus particulièrement des propriétés cosmétiques notamment hydratantes, anti-âge et dépigmentantes.
La présente invention a pour objet un hydrolysat de tourteau de moabi comprenant de 0,50 à 1,50 % en poids, de préférence 0,83 % en poids, de protéines par rapport au poids total de l’hydrolysat ; de 0,50 à 2,00 % en poids, de préférence 1,19 % en poids, de sucres par rapport au poids total de l’hydrolysat et de 15 à 30 ppm, préférence 23 ppm, de polyphénols par rapport au poids total de l’hydrolysat.
Avantageusement ledit hydrolysat de tourteau de moabi est tel que son spectre UV visible présente un pic à une longueur d’onde λ de 230 nm pour une absorbance de 2,262.
Dans le présent texte, l’hydrolysat est également nommé extrait de tourteau de moabi ou extrait de tourteau de moabi hydrolysé.
La présente invention a aussi pour objet un procédé de préparation de l’hydrolysat selon l’invention comprenant au moins les étapes suivantes, dans cet ordre :
- fournir des graines de moabi ;
- délipider les graines de moabi et récupérer le tourteau ;
- placer le tourteau de moabi en phase aqueuse ;
- soumettre le tourteau à au moins une étape d’hydrolyse au moyen d’une solution alcaline à un pH allant de 13 à 14 pendant une durée allant de 30 minutes à 4 heures,
-ajouter un acide faible de manière à ajuster le pH à une valeur allant de 4,5 à 5,5 ;
- effectuer une séparation solide/ liquide,
- récupérer l’hydrolysat obtenu.
- fournir des graines de moabi ;
- délipider les graines de moabi et récupérer le tourteau ;
- placer le tourteau de moabi en phase aqueuse ;
- soumettre le tourteau à au moins une étape d’hydrolyse au moyen d’une solution alcaline à un pH allant de 13 à 14 pendant une durée allant de 30 minutes à 4 heures,
-ajouter un acide faible de manière à ajuster le pH à une valeur allant de 4,5 à 5,5 ;
- effectuer une séparation solide/ liquide,
- récupérer l’hydrolysat obtenu.
Avantageusement, lors de l’hydrolyse, le ratio masse de tourteau de moabi / masse de la solution alcaline est compris entre 1/12 et 1/8 et de manière préférée d’environ 1/10.
La présente invention vise encore une composition cosmétique, non thérapeutique comprenant au moins un hydrolysat selon la présente invention ou préparé suivant le procédé selon la présente invention, de préférence en une teneur allant de 0,001 à 30 % en poids et de préférence de 0,1 à 20 % en poids par rapport au poids total de la composition.
Selon une variante particulière, la composition cosmétique, non thérapeutique comprend un hydrolysat de tourteau de moabi selon la présente invention et du tétra-isopalmitate d’ascorbyle, de préférence selon un ratio tétra-isopalmitate d’ascorbyle/hydrolysat allant de 1/1 à 1/10 et avantageusement d’environ 1/3.
L’hydrolysat selon l’invention permet de fournir un produit renfermant plusieurs types d’actifs d’intérêt en cosmétique c’est-à-dire à la fois des protéines, des sucres et des polyphénols.
Ainsi l’hydrolysat de tourteau de moabi et la composition cosmétique selon l’invention permettent avantageusement de prévenir et/ou diminuer les signes de vieillissement cutané, en particulier la perte d’élasticité de la peau, l’altération de la fonction barrière de la peau, l’apparition de rides et/ou de ridules. Il a été observé que les peaux traitées sont plus fermes.
L’hydrolysat de tourteau de moabi et la composition cosmétique selon l’invention permettent également de blanchir et/ou éclaircir et/ou dépigmenter la peau du visage et/ou du corps de manière durable. Ils permettent aussi de réduire la taille des taches brunes pigmentaires et donc de rendre plus homogènes des zones précises du visage et/ou du corps.
Il a également été observé que les peaux traitées sont hydratées, repulpées, elles apparaissent plus lumineuses, plus rayonnantes, plus douces, plus souples. Les peaux traitées sont moins sèches, moins ternes.
Ces compositions cosmétiques sont en outre stables, non irritantes, non sensibilisantes, non toxiques, en particulier non phototoxiques, non allergisantes pour la peau.
L’hydrolysat de tourteau de moabi et la composition cosmétique selon l’invention confèrent une amélioration de l'aspect global de la peau ainsi qu’une sensation de confort.
D’autres aspects, avantages, propriétés de la présente invention sont présentés dans la description et les exemples qui suivent.
Définitions
Dans le présent texte, sauf indications contraires spécifiques, les pourcentages sont exprimés en poids d’une composition de référence.
Dans le présent texte, les intervalles sont définis de façon abrégée afin d’éviter de décrire chacune des valeurs et toutes les valeurs de cet intervalle, cependant toute valeur appropriée dans l’intervalle peut être choisie comme la valeur supérieure, la valeur inférieure ou les valeurs terminales de l’intervalle. Par exemple, un intervalle de 0,1 à 1,0 représente les valeurs terminales de 0,1 et 1,0, ainsi que les valeurs intermédiaires de 0,2 ; 0,3 ; 0,4 ; 0,5 ; 0,6 ; 0,7 ; 0,8 ; 0,9 et tous les intervalles intermédiaires compris dans 0,1 à 1,0, tels que 0,2 à 0,5 ; 0,2 à 0,8 ; 0,7 à 1,0... Un intervalle défini comme étant « compris entre la valeur A et la valeur B » inclut les valeurs A et B et est donc équivalent à un intervalle « allant de la valeur A à la valeur B ». En outre, l’expression « au moins » comprend la valeur énoncée après, par exemple, « au moins 5 % » doit être compris comme comprenant également « 5 % ». L’expression « un maximum de » comprend la valeur énoncée après, par exemple, « un maximum de 5 % » doit être compris comme comprenant également « 5 % ».
En outre, dans le présent texte, les valeurs mesurables, telles qu’une quantité, doivent être comprises comme comprenant les écarts types qui peuvent être facilement déterminés par l’homme du métier dans le domaine technique de référence. De préférence, ces valeurs sont destinées à comprendre des variations de ± 5 %.
Dans le présent texte, la forme au singulier d’un mot comprend le pluriel et inversement, sauf si le contexte indique clairement le contraire. Ainsi, les références « un », « une » et « le/la » comprennent généralement les pluriels des termes respectifs. Par exemple, une référence à un « procédé » ou une « composition » comprend une pluralité de ces « procédés » ou « compositions ». En particulier, dans le présent texte, les termes « tourteau de moabi » et « tourteaux de moabi » sont utilisés de manière indifférentiée.
Par « peau » on entend l’épiderme du visage ou du corps et en particulier du visage, du cou, du décolleté et des mains.
Les expressions « blanchiment », « éclaircissement » et « dépigmentation » utilisées pour définir les propriétés des compositions selon l’invention ont la même signification, de même que les expressions « blanchir », « éclaircir » et « dépigmenter ».
Par « prévenir » ou « prévention » on entend le fait de diminuer, au moins en partie, le risque de survenue d’un effet.
Les compositions et procédés mis en oeuvre selon la présente invention sont cosmétiques, non thérapeutiques.
Ces compositions sont destinées à être appliquées sur les peaux saines, par simple massage pour traiter l’épiderme. Elles sont conformes au règlement CE 1223/2009.
Hydrolysat
L’hydrolysat selon la présente invention est préparé à partir de tourteaux de graines de moabi ouBaillonella toxisperma.
Il est connu que les graines de moabi sont utilisées pour l’extraction de leur huile, utile pour l’autoconsommation ou en soins médicinaux traditionnels divers. Le tourteau obtenu après avoir délipidé (déshuilé) la graine est un déchet actuellement peu valorisé.
Selon un mode de réalisation préférentiel, l’hydrolysat selon l’invention est obtenu à partir du tourteau des graines décortiquées de moabi.
Selon la présente invention, les tourteaux de moabi sont récupérés après l’extraction de l’huile des graines puis hydrolysés.
L’hydrolysat selon l’invention comprend de 0,50 à 1,50 % en poids de préférence 0,83 % en poids de protéines par rapport au poids total de l’hydrolysat, de 0,50 à 2,00 % en poids de préférence 1,19 % en poids de sucres par rapport au poids total de l’hydrolysat et de 15 à 30 ppm, de préférence 23 ppm de polyphénols par rapport au poids total de l’hydrolysat.
Procédé de préparation de l’hydrolysat
Comme déjà mentionnné, le procédé de préparation de l’hydrolysat de tourteau de moabi comprend au moins les étapes suivantes, dans cet ordre :
- fournir des graines de moabi ;
- délipider les graines de moabi et récupérer le tourteau ;
- placer le tourteau de moabi en phase aqueuse ;
- soumettre le tourteau à au moins une étape d’hydrolyse au moyen d’une solution alcaline à un pH allant de 13 à 14 pendant une durée allant de 30 minutes à 4 heures,
-ajouter un acide faible de manière à ajuster le pH à une valeur allant de 4,5 à 5,5 ;
- effectuer une séparation solide/ liquide,
- récupérer l’hydrolysat obtenu.
- fournir des graines de moabi ;
- délipider les graines de moabi et récupérer le tourteau ;
- placer le tourteau de moabi en phase aqueuse ;
- soumettre le tourteau à au moins une étape d’hydrolyse au moyen d’une solution alcaline à un pH allant de 13 à 14 pendant une durée allant de 30 minutes à 4 heures,
-ajouter un acide faible de manière à ajuster le pH à une valeur allant de 4,5 à 5,5 ;
- effectuer une séparation solide/ liquide,
- récupérer l’hydrolysat obtenu.
Généralement, les graines destinées à être utilisées dans le procédé selon l’invention sont décortiquées, c’est-à-dire que l’amande est utilisée.
Le tourteau de moabi utilisé dans le procédé selon l’invention est obtenu après délipidation des graines de moabi, de préférence des amandes de moabi. Cette étape vise à extraire l’huile des graines de moabi.
La délipidation peut être effectuée par pressage mécanique des graines ou par extraction au moyen d’un solvant organique apolaire par exemple l’hexane.
De préférence les graines éventuellement sous forme d’amandes sont séchées ou laissées sécher de manière à obtenir un taux d’humidité inférieur à 7%.
Puis elles sont soumises à une délipidation de manière à séparer l’huile du reste de la graine et à obtenir le tourteau. Généralement le tourteau comprend moins de 5% en poids d’huile, dite « huile résiduelle », par rapport au poids total du tourteau.
Selon une variante préférée, le tourteau est ensuite broyé mécaniquement avec tout type de broyeurs mécaniques tels que des systèmes à marteaux, à fléau, à couteaux, à concassage/déchiquetage, à billes ou boulets ou à pilon, mais aussi avec tout type de cryobroyeur.
Le broyage du tourteau permet avantageusement d’obtenir la taille de particule appropriée. Par « taille », on entend la longueur de la plus grande dimension des particules. Généralement, les particules de tourteau de moabi présentent une taille maximale proche de 5 mm, de préférence proche de 3 mm, et de manière préférée comprise entre 1 et 2 mm.
Le tourteau, avantageusement broyé, est ensuite mis en dispersion en phase aqueuse.
L’hydrolysat de tourteau de moabi selon la présente invention est obtenu par hydrolyse au moyen d’une solution alcaline à un pH allant de 13 à 14, de préférence obtenu au moyen d’une base forte.
La base forte est généralement choisie parmi l’hydroxyde de sodium (NaOH), l’hydroxyde de potassium (KOH) et l’hydroxyde de calcium (CaOH) ; de préférence l’hydroxyde de sodium. Avantageusement, la solution de base forte présente une molarité comprise entre 0,8 M et 1,5 M.
L’hydrolyse alcaline est effectuée au moyen d’une solution alcaline à un pH allant de 13 à 14 pendant une durée allant de 30 minutes à 4 heures, de préférence pendant environ 2 heures.
L’hydrolyse alcaline est effectuée à une température allant de 12 à 40°C, de préférence à température ambiante c’est-à-dire entre 15 et 25 °C.
En outre le ratio masse de tourteau de moabi / masse de la solution alcaline est avantageusement compris entre 1/12 et 1/8 et de manière préférée d’environ 1/10.
La dispersion en phase aqueuse et l’hydrolyse alcaline sont avantageusement effectuées sous agitation permettant ainsi une dispersion et une homogénéisation du solide dans le liquide, améliorant ainsi la surface d’échange globale et par conséquent l’hydrolyse.
Après l’étape d’hydrolyse, un acide, de préférence un acide organique faible, est ajouté pour « neutraliser » la solution c’est-à-dire pour ajuster le pH à une valeur allant de 4 à 5 et en conséquence stabiliser l’hydrolysat obtenu.
L’acide faible est de préférence choisi parmi l‘acide citrique, l’acide phosphorique, l’acide lactique, l’acide oxalique, l’acide acétique, l’acide acétique, l’acide glycolique, l’acide ascorbique et leurs mélanges, de manière préférée l’acide citrique. Les acides faibles, notamment citrique et phosphorique, permettent aussi de générer un effet tampon pH recherché dans les compositions cosmétiques.
Après récupération de l’hydrolysat par séparation solide/liquide, c’est-à-dire récupération de la phase liquide, l’hydrolysat est avantageusement purifié par filtration ou ultrafiltration.
Enfin, une lyophilisation de l’hydrolysat peut également être effectuée afin de disposer dudit hydrolysat sous forme solide.
Le procédé selon l’invention peut également comprendre des étapes de purification et d’essorage classiques dont la mise en œuvre relève des compétences de l’homme du métier.
Composition
Comme déjà mentionné, la présente invention vise également une composition cosmétique, comprenant l’hydrolysat de tourteau de moabi selon la présente invention.
Avantageusement, la composition selon la présente invention comprend de 0,001 à 30 % en poids et de préférence de 0,1 à 20 % en poids d’hydrolysat de tourteau de moabi par rapport au poids total de la composition.
Avantageusement, la composition cosmétique, non thérapeutique selon la présente invention comprend, dans un milieu cosmétiquement acceptable, au moins un agent cosmétique choisi parmi les agents humectants, les épaississants, les agents de texture, les émulsifiants, les agents dispersants, les agents moussants, les émolients, les conservateurs, les colorants, les extraits de plantes, les fibres végétales, les minéraux, les agents correcteurs de pH, les principes actifs et les parfums.
Avantageusement, la composition cosmétique selon la présente invention comprend de 0,001 à 20 % en poids d’au moins un agent cosmétique par rapport au poids total de la composition.
Bien entendu, l’homme du métier veillera à choisir ces agents cosmétiques de manière à ne pas altérer les propriétés de la composition selon l’invention.
La composition selon l'invention peut se présenter sous toutes les formes galéniques normalement utilisées dans le domaine cosmétique, et notamment sous forme d’une poudre ou de pastille, en particulier une pastille de dentifrice, d’un syndet en particulier un shampooing solide, d'une solution aqueuse ou hydroalcoolique, éventuellement gélifiée, éventuellement moussante, d'une dispersion du type lotion éventuellement biphasée, d'une émulsion huile-dans-eau ou eau-dans-huile ou multiple (E/H/E ou H/E/H par exemple), d'un gel aqueux, d'une dispersion d'huile dans une phase aqueuse à l'aide de sphérules, ces sphérules pouvant être des nanoparticules polymériques telles que les nanosphères et les nanocapsules ou, mieux, des vésicules lipidiques de type ionique et/ou non ionique; de gel aqueux ou huileux. Ces compositions sont préparées selon les méthodes usuelles.
La composition selon l'invention peut constituer une composition de soin de la peau, et notamment une crème de nettoyage, de protection, de traitement ou de soin pour la bouche, le visage, pour les mains, pour les pieds, ou pour le corps, en particulier la composition peut être une crème de jour, crème de nuit, crème démaquillante, crème de fond de teint, crème antisolaire ; un fond de teint fluide, un lait de démaquillage, un lait corporel de protection ou de soin, un lait anti-solaire; une lotion, gel ou mousse pour le soin de la peau, comme une lotion de nettoyage.
Avantageusement, la composition cosmétique selon la présente invention comprend du tétra-isopalmitate d’ascorbyle encore appelé Vitamine C tetra E. De préférence le ratio tétra-isopalmitate d’ascorbyle/hydrolysat va de 1/1 à 1/10 et avantageusement d’environ 1/3.
Avantageusement, la composition cosmétique selon la présente invention comprend de 0,001 à 20 % en poids de tétra-isopalmitate d’ascorbyle par rapport au poids total de la composition.
La composition selon l’invention comprenant du tétra-isopalmitate d’ascorbyle est particulièrement avantageuse pour ses propriétés éclaircissantes, dépigmentantes.
La composition selon l’invention est avantageusement destinée à être appliquée sur la peau.
La composition cosmétique selon la présente invention est avantageusement utilisée en application topique sur la peau à titre d’agent blanchissant et/ou éclaircissant de la peau et/ou dépigmentant de la peau, ainsi qu’à titre d’agent anti-âge de la peau.
Utilisations
La présente invention vise aussi l’utilisation cosmétique, non-thérapeutique d’au moins un hydrolysat selon l’invention ou préparé selon l’invention ou encore d’au moins une composition cosmétique selon la présente invention en tant qu’actif hydratant de la peau.
La présente invention vise également l’utilisation cosmétique, non-thérapeutique d’au moins un hydrolysat selon l’invention ou préparé selon l’invention ou encore d’au moins une composition cosmétique selon la présente invention en tant qu’actif pour prévenir et/ou diminuer les signes de vieillissement cutané, en particulier la perte d’élasticité de la peau, l’altération de la fonction barrière de la peau, l’apparition de rides et/ou de ridules.
La présente invention vise encore l’utilisation cosmétique, non-thérapeutique d’au moins un hydrolysat selon l’invention ou préparé selon l’invention ou encore d’au moins une composition cosmétique selon la présente invention en tant qu’actif pour blanchir et/ou éclaircir et/ou dépigmenter la peau, notamment pour réduire la taille des taches brunes de pigmentation, atténuer voire supprimer les taches brunes de pigmentation, ou encore prévenir, réduire et/ou traiter une altération du teint de la peau.
Plus particulièrement, ladite utilisation permet de réduire, atténuer, supprimer les défauts de pigmentation de la peau.
La présente invention concerne aussi un procédé cosmétique, non thérapeutique de traitement de la peau, comprenant au moins une étape d'application sur la peau d’au moins un hydrolysat selon l’invention ou préparé selon l’invention ou encore d’au moins une composition cosmétique selon la présente invention.
Selon une première variante, le procédé est un procédé de traitement cosmétique, non thérapeutique destiné à maintenir ou améliorer l’hydratation de la peau.
Selon une deuxième variante, le procédé est un procédé cosmétique, non thérapeutique destiné à prévenir et/ou diminuer les signes de vieillissement cutané, en particulier la perte d’élasticité de la peau, l’altération de la fonction barrière de la peau, l’apparition de rides et/ou de ridules.
Selon une troisième variante, le procédé est un procédé cosmétique, non thérapeutique destiné à dépigmenter, éclaircir et/ou blanchir la peau
Les exemples qui suivent visent à illustrer l’invention sans en limiter la portée.
Exemples
Exemple 1- Extrait de tourteau de moabi hydrolysé
I. Préparation de l’hydrolysat
Une solution alcaline est préparée en mélangeant 84 g d’hydroxyde de sodium 1M et 2017 g d’eau dans un réacteur/hydrolyseur de 3 litres équipé d’un mélangeur à hélice 4 lames (Agitateur IKA RW20).
On introduit dans le réacteur 210 g de tourteau de moabi préalablement broyé avec un broyeur à couteaux (SM100 RETSCH) et préalablement délipidé avec 2,4 L d’hexane.
Le mélange est maintenu sous agitation pendant 2 heures à température ambiante.
A l’issue de ces 2 heures, 178,5 g d’acide citrique monohydraté sont ajoutés et l’agitation est maintenue jusqu’à solubilisation complète de l’acide. Le pH est mesuré, il est égal à 5,12.
Puis 10,5 g de benzoate de sodium sont ajoutés, à titre de conservateur, et l’agitation est maintenue jusqu’à solubilisation complète du benzoate de sodium. Le pH est mesuré, il est égal à 5,15. Après décantation, le mélange a été filtré sur filtre plissé.
On obtient 1689g de filtrat, soit un rendement de 68% en poids.
II. Détermination de la composition de l’extrait de moabi
hydolysé
A. Analyse de la teneur en protéines de l’extrait hydrolysé par la méthode de Lowry
La quantité de protéines totales a été déterminée par dosage colorimétrique selon la méthode de Lowry. Pour ce dosage colorimétrique, une courbe étalon de la densité optique, appelée DO dans la suite du texte, mesurée à 750 nm, en fonction de la quantité de protéines a été réalisée. La protéine de référence utilisée dans cette expérience est la sérum-albumine bovine (BSA).
Cette méthode bien connue de l’homme du métier est notamment décrite dans « Protein measurement with the Folin phenol reagent », Oliver H. Lowry, Nira J. Rosebrough, A Lewis Farr et Rose J. Randall,J. biol . Chem., vol. 193, no 1, 1951, p. 265-275.
Puis la quantité totale en protéines dans chaque échantillon d’hydrolysat à tester a été déterminée en préparant plusieurs exemplaires de l’échantillon à tester selon le même protocole que celui utilisé pour la gamme étalon puis en reportant les valeurs de DO obtenues pour les échantillons à tester sur la courbe étalon.
Préparation de la gamme étalon
Les ingrédients pour préparer la gamme étalon étaient les suivants :
BSA : Serum albumine bovine commercialisé par Sigma Aldrich ® ;
SDS : dodécyl sulfate de sodium 20% commercialisé par Biosolve ® ;
Eau : WATER PLUS commercialisée par Carlo Erba ® ;
Na2CO3, NaOH 1M, CuSO4, Tartrate Na/K et réactif de Folin-Ciocalteu commercialisés par Carlo Erba ® ;
DMSO commercialisé par Sigma Aldrich ®.
BSA : Serum albumine bovine commercialisé par Sigma Aldrich ® ;
SDS : dodécyl sulfate de sodium 20% commercialisé par Biosolve ® ;
Eau : WATER PLUS commercialisée par Carlo Erba ® ;
Na2CO3, NaOH 1M, CuSO4, Tartrate Na/K et réactif de Folin-Ciocalteu commercialisés par Carlo Erba ® ;
DMSO commercialisé par Sigma Aldrich ®.
Les solutions suivantes ont été préparées :
SDS à 0,1 % : dilution de 1 mL de la solution mère à 20% (m/v) dans 200mL (volume final) d’eau WATER PLUS ;
BSA à 2 mg/mL : solubilisation de 2 mg de BSA dans 1mL d’eau WATER PLUS ;
BSA à 0,2 mg/ml : dilution de 100 µL de la solution de BSA à 2 mg/mL dans 1mL (volume final) d’eau WATER PLUS ;
NaOH 0,1 M : dilution de 5mL de NaOH 1M dans 50mL (volume final) d’eau WATER PLUS ;
Réactif A : Na2CO320g/L, NaOH 0,1M : Solubilisation d’1g de Na2CO3dans 50mL de NaOH 0,1M ;
Réactif B : CuSO45g/l, Tartrate Na/K 10g/L : Solubilisation de 25mg de CuSO4et 50mg de Tartrate Na/K dans 5mL d’eau WATER PLUS . Le mélange est maintenu à l’obscurité ;
Réactif C : 1 mL du Réactif B est ajouté aux 50mL de réactif A. Le mélange est maintenu à l’obscurité ;
Réactif D (Réactif de Folin-Ciocalteu dilué) : Dilution de 5mL de réactif de Folin-Ciocalteu commercial dans 5mL de WATER PLUS. Le mélange est maintenu à l’obscurité.
SDS à 0,1 % : dilution de 1 mL de la solution mère à 20% (m/v) dans 200mL (volume final) d’eau WATER PLUS ;
BSA à 2 mg/mL : solubilisation de 2 mg de BSA dans 1mL d’eau WATER PLUS ;
BSA à 0,2 mg/ml : dilution de 100 µL de la solution de BSA à 2 mg/mL dans 1mL (volume final) d’eau WATER PLUS ;
NaOH 0,1 M : dilution de 5mL de NaOH 1M dans 50mL (volume final) d’eau WATER PLUS ;
Réactif A : Na2CO320g/L, NaOH 0,1M : Solubilisation d’1g de Na2CO3dans 50mL de NaOH 0,1M ;
Réactif B : CuSO45g/l, Tartrate Na/K 10g/L : Solubilisation de 25mg de CuSO4et 50mg de Tartrate Na/K dans 5mL d’eau WATER PLUS . Le mélange est maintenu à l’obscurité ;
Réactif C : 1 mL du Réactif B est ajouté aux 50mL de réactif A. Le mélange est maintenu à l’obscurité ;
Réactif D (Réactif de Folin-Ciocalteu dilué) : Dilution de 5mL de réactif de Folin-Ciocalteu commercial dans 5mL de WATER PLUS. Le mélange est maintenu à l’obscurité.
La gamme étalon a été réalisée en trois exemplaires (triplicate), les compositions formant la gamme étalon sont présentées au tableau 1.
| N° de tube | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | 7 |
| Quantité de BSA (µg) | 0 | 2,5 | 5 | 10 | 15 | 20 | 25 |
| SDS 0,1% (µL) | 150 | 137,5 | 125 | 100 | 75 | 50 | 25 |
| Réactif C (µL) | 750 | ||||||
| Réactif D (µL) | 75 |
Préparation de la gamme étalon
Les quantités de BSA, SDS et réactif C indiquées dans le tableau 1 ci-dessus ont été introduites dans les tubes 1 à 7 puis les tubes ont été mélangés par retournement. Après une pause de 10 minutes dans l’obscurité, 75 µL de réactif D ont été ajoutés dans chaque tube. Puis les tubes ont été à nouveau mélangés par retournement. Après une pause de 30 minutes dans l’obscurité, les mesures d’absorbance à 750 nm ont été réalisées.
Les mesures de DO à 750 nm ont été effectuées au moyen d’un spectrophotomètre « Genesys 150 » de la société ThermoFisher Scientific.
Les mesures de DO à 750 nm ont permis de définir une courbe d’équation :y = 0,0178x avecR2= 0,9904.
Préparation des échantillons à mesurer
Puis les échantillons à mesurer ont été préparés selon le protocole suivant : plusieurs prélèvements de l’échantillon à tester ont été introduits dans des puits d’essai et ils ont été dilués à 1/100 dans du SDS à 0,1% pour un volume total de 150µL. Puis 750 µL de réactif C ont été ajoutés dans chaque puit d’essai. Les puits d’essai ont été mélangés par retournement. Après une pause de 10 minutes dans l’obscurité, 75 µL de réactif D ont été ajoutés dans chaque puit d’essai. Puis les puits ont à nouveau été mélangés par retournement, après une pause de 30 minutes dans l’obscurité, des mesures d’absorbance à 750 nm sont réalisées.
Dans le tableau 2 sont présentés les résultats obtenus pour une dilution des échantillons égale à 100. A partir de la courbe étalon, la concentration en protéines de chaque échantillon a été déterminée.
| Volume testé | DO 750 nm | Quantité de protéines (µg) | Concentration en protéines (dilué) (mg/mL) |
| 50 | 0,086 | 4,83 | 9,66 |
| 50 | 0,069 | 3,88 | 7,75 |
| 50 | 0,075 | 4,21 | 8,43 |
| 100 | 0,148 | 8,31 | 8,31 |
| 100 | 0,150 | 8,43 | 8,43 |
| 100 | 0,132 | 7,42 | 7,42 |
A partir du tableau 2, on a déduit que l’extrait hydrolysé présentait une teneur en protéines de 8,33+0,77 mg/mL soit environ 0,83 %. Ce résultat confirme que l’extrait hydrolysé comprend bien des protéines hydrolysées.
B.Analyse de la teneur des polyphénols totaux de l’extrait par la méthode utilisant le réactif de Folin Ciocalteu
Cette analyse a été effectuée à partir de l’extrait de l’exemple 1 dilué à 1/10 dans de l’eau distillée.
Le dosage des polyphénols totaux a été effectué selon la méthode décrite en 1965 par Singleton et Rossi en utilisant le réactif de Folin-Ciocalteu. Le réactif de Folin Ciocalteu est un acide de couleur jaune constitué par un mélange d’acide phosphotungstique (H3PW12O40) et d’acide phosphomolybdique (H3PMo12O40). Il est réduit, lors de l’oxydation des phénols, en un mélange d’oxydes bleus de tungstène et de molybdène (Ribereau, 1968). La coloration produite, dont l’absorption maximale à 720nm, est proportionnelle à la quantité de polyphénols présents dans l’échantillon.
Pour ce dosage colorimétrique, une courbe étalon de la DO, mesurée à 720 nm, en fonction de la quantité de polyphénols a été réalisée.
Le composé de référence utilisé dans cette expérience est l’acide gallique.
Préparation de la gamme étalon
Les ingrédients pour préparer la gamme étalon étaient les suivants :
Solution de Na 2 CO 3 (bicarbonate de soude) à 7,5% : Peser 15g de bicarbonate de soude (commercialisé par Solvay ®) dans une fiole jaugée 200ml et compléter avec de l’eau distillée.
Réactif de Folin-Ciocalteucommercialisé par Sigma ® : Diluer le réactif à 10% dans de l’eau.
Acide gallique: préparation de la solution mère à 0,1g/L : Peser 0,01 g d’acide gallique poudre dans une fiole jaugée de 100ml et ajuster avec l’eau distillée.
Solution de Na 2 CO 3 (bicarbonate de soude) à 7,5% : Peser 15g de bicarbonate de soude (commercialisé par Solvay ®) dans une fiole jaugée 200ml et compléter avec de l’eau distillée.
Réactif de Folin-Ciocalteucommercialisé par Sigma ® : Diluer le réactif à 10% dans de l’eau.
Acide gallique: préparation de la solution mère à 0,1g/L : Peser 0,01 g d’acide gallique poudre dans une fiole jaugée de 100ml et ajuster avec l’eau distillée.
Les compositions formant la gamme étalon sont présentées au tableau 3.
| N° de tube | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 |
| Concentration en acide gallique (µg/mL) | 0 | 20 | 40 | 60 | 80 | 100 |
| Acide gallique à 0,1g/L (µL) | 0 | 300 | 600 | 900 | 1200 | 1500 |
| Eau distillée (µL) | 1500 | 1200 | 900 | 600 | 300 | 0 |
Puis la gamme étalon a été réalisée en triplicat selon le protocole ci-dessous.
On prépare 6 solutions étalons en prélevant 400µL dans chacun des tubes 1 à 6 du tableau 3 auxquelles on ajoute 2000 µL de réactif de Folin Ciocalteu et 1600 µL de solution de Na2CO3à 7,5%. Après incubation pendant 30 minutes à 45°C, les mesures de DO à 720 nm ont été réalisées.
Les mesures de DO à 720 nm ont permis de définir une courbe d’équation :y = 0,0967x - 0,019 avec R² = 0, 9982.
Puis la détermination de la quantité de polyphénols totaux dans chaque échantillon d’hydrolysat à tester (échantillon testé en triplicat) a été obtenue en préparant des échantillons à tester selon le même protocole que celui utilisé pour la gamme étalon puis en reportant les valeurs de DO obtenues pour les échantillons à tester sur la courbe étalon.
Dans le tableau 4 sont présentés les résultats obtenus pour une dilution des échantillons égale à 10. A partir de la courbe étalon, la DO à 720 nm de chaque échantillon a été déterminée puis la concentration en polyphénols totaux a été calculée à partir de la courbe étalon.
| Dilution de l’échantillon | 1/10 |
| DO de l’échantillon 1 à 720nm | 0,196 |
| DO de l’échantillon 2 à 720nm | 0,191 |
| DO de l’échantillon 3 à 720nm | 0,212 |
| Moyenne | 0,200 |
| Ecart-type | 0,011 |
| Concentration en polyphénols totaux (mg/L) | 2,263 |
On en déduit que l’extrait hydrolysé de moabi dilué à 1/10 présente une teneur en polyphénols totaux de 2,263+0,312 mg/L soit une concentration de 22,63 mg/L+3,12 mg/L soit 22,63+3,12 ppm dans l’extrait selon l’invention.
C. Analyse de la teneur en sucres de l’extrait hydrolysé par la méthode de Dubois
La quantité de sucres (saccharides) totaux a été déterminée par dosage colorimétrique selon la méthode de Dubois. Cette méthode est basée sur la formation d'un produit chromogène de dégradation des sucres par l'action d'un acide fort en dérivés du furfural. Ces produits chromogènes sont ensuite condensés avec du phénol pour obtenir un chromophore de couleur orange.
Pour ce dosage colorimétrique, une courbe étalon de la DO, mesurée à 490 nm, en fonction de la quantité totale de sucres a été réalisée. Le produit de référence utilisé dans cette méthode est le glucose.
Puis la détermination de la quantité totale en sucres dans chaque échantillon d’hydrolysat à tester a été obtenue en préparant des échantillons à tester selon le même protocole que celui utilisé pour la gamme étalon de glucose puis en reportant les valeurs de DO obtenues pour les échantillons à tester sur la courbe étalon.
Préparation de la gamme étalon
Les ingrédients pour préparer la gamme étalon étaient les suivants :
Phénol : commercialisé par Jansen Chimica ® ;
H2SO497% : commercialisé par Fluka ® ;
Eau : WATER PLUS commercialisée par Carlo Erba ® ;
Glucose anhydre commercialisés par Panréac.
Phénol : commercialisé par Jansen Chimica ® ;
H2SO497% : commercialisé par Fluka ® ;
Eau : WATER PLUS commercialisée par Carlo Erba ® ;
Glucose anhydre commercialisés par Panréac.
Les solutions suivantes ont été préparées :
Solution de phénol 7,5% (m/v) : Dissoudre sous hotte 3,87g de phénol dans 51,6mL d'eau WATER PLUS.
Solution de glucose à 1mg/mL : Dissoudre 11,1 mg de glucose dans 11,1 mL d'eau WATER PLUS.
La gamme étalon a été réalisée en trois exemplaires, selon le protocole présenté dans le tableau 5.
| N° de tube | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 |
| Quantité de glucose (µg) | 0 | 10 | 20 | 30 | 40 | 50 |
| Glucose 1mg/mL (µL) | 0 | 20 | 40 | 60 | 80 | 100 |
| Eau (µL) | 500 | 480 | 460 | 440 | 420 | 400 |
| Phénol 7.5% (µL) | 250 | |||||
| Fermer les tubes et mélanger | ||||||
| H 2 SO 4 97%(µL) | 1250 | |||||
| Fermer les tubes et mélanger |
Après une pause de 10 minutes à 30°C, les mesures de DO à 490 nm ont été réalisées.
Les mesures de DO à 490 nm ont été effectuées au moyen d’un spectrophotomètre « 1240 » de la société Shimadzu.
Les mesures de DO à 490 nm ont permis de définir une courbe d’équation de glucose :y = 0,0381x avecR2= 0,998.
Puis les échantillons à mesurer ont été préparés selon le protocole suivant, après dilution dans l’eau entre 1/100 et 1/500.
Plusieurs prélèvements de 500µL de l’échantillon à tester ont été introduits dans des puits d’essai puis 250 µL de phénol à 7,5% ont été ajoutés dans chaque puit d’essai. Les puits d’essai ont été mélangés par retournement, puis 1250 µL de H2SO497% ont été ajoutés dans chaque puit d’essai. Les puits ont été mélangés au vortex. Après une pause de 10 minutes à 30°C, les mesures de DO à 49 nm ont été réalisées.
Dans le tableau 6 sont présentés les résultats obtenus pour un volume testé de 500µL. A partir de la courbe étalon, la concentration en sucres de chaque échantillon a été déterminée.
| Dilution | DO 490 nm | Quantité de glucose (µg) | Concentration en glucose (échantillon dilué) (mg/mL) | Concentration en glucose pur (mg/mL) |
| 200 | 1,192 | 31,29 | 0,063 | 12,51 |
| 200 | 1,085 | 28,48 | 0,057 | 11,39 |
| 200 | 1,176 | 30,87 | 0,062 | 12,35 |
| 500 | 0,479 | 12,57 | 0,025 | 12,57 |
| 500 | 0,428 | 11,23 | 0,022 | 11,23 |
| 500 | 0,434 | 11,39 | 0,023 | 11,39 |
A partir du tableau ci-dessus, on a déduit que l’extrait hydrolysé présentait une teneur en sucres de 11,91+0,63 mg/mL soit environ 1,2 %.
L’extrait hydrolysé selon l’invention comprend environ 1,2% (m/m) de sucres totaux, des protéines en une teneur d’environ 0,8% (m/m) et des polyphénols en une teneur d’environ 23 ppm.
D. Caractérisation physicochimique par spectre UV
L’échantillon de l’exemple 1 a été dilué au 1/100edans de l’eau déminéralisée. Puis le spectre UV-Visible a été réalisé au moyen d’un spectromètre UV-Visible Jenway® 6705. Ce spectre est présenté à la : on note la présence d’un seul pic correspondant à une longueur d’onde λ de 230 nm pour une absorbance de 2,262.
Exemple 2 – Activités cosmétiques de l’extrait hydrolysé
Pour effectuer les différentes mesures, des compositions de l’hydrolysat de tourteau de moabi à différentes concentrations ont été préparées en diluant l’hydrolysat préparé à l’Exemple 1.I ci-dessus directement dans le milieu d’incubation à la concentration visée.
Avant de procéder aux mesures, les compositions d’hydrolysat ont été conservées à température ambiante, à l’abri de la lumière.
A.
Synthèse de la bléomycine hydrolase
La propriété de plusieurs compositions de l’hydrolysat de tourteau de moabi à augmenter la synthèse de la bléomycine hydrolase a été évaluée sur des kératinocytes normaux d’épiderme humain cultivés en culture monocouche.
Les kératinocytes normaux d’épiderme humain d’un donneur de 66 ans ont été cultivés en culture monocouche jusqu’à confluence. Puis les kératinocytes ont été incubés pendant 48 heures soit en l’absence de l’extrait à tester (contrôle) soit en présence des différentes compositions de l’extrait à tester. A la fin de la période d’incubation, les cellules ont été récupérées.
La synthèse de la bléomycine hydrolase intra-cellulaire a été déterminée dans les lysats de cellule en utilisant un kit ELISA spécific.
Les protéines contenues dans les lysats de cellules ont été quantifiées par une méthode spectro-colorimétrique dite de « Bradford ».
Dans le tableau 7, les résultats obtenus sont exprimés en 10-12g (pg) de bléomycine hydrolase par 10-3g (mg) de protéines, la moyenne ainsi que la déviation standard (DS) sont également présentées. Les mesures ont été effectuées en triplicat.
Le niveau de signification entre le "contrôle" et le "produit de référence" a été évalué à l'aide d'un testtde Student (* : p<0,05).
Le niveau de signification entre le "contrôle" et "composé testé" a été évalué indépendamment pour chaque composition par une analyse de variance à un facteur (ANOVA à sens unique) suivie d'un test de Holm-Sidak (* : p<0,05).
| Contrôle | Concentration de l’hydrolysat de tourteau de moabi (%v/v) | Référence Ca2+à 1,5 mM | |||
| 0,01% | 0,05% | 0,2% | |||
| pg de bléomycine Hydrolase /mg de protéines | 58,7 | 66,2 | 76,6 | 145,0 | 170,3 |
| 52,7 | 62.0 | 105,8 | 139,4 | 172,4 | |
| 48,6 | 61,7 | 105,1 | 146,7 | 171,8 | |
| Moyenne | 53,3 | 63,3 | 95,8*** | 143,7*** | 171,5*** |
| D.S. | 5,1 | 2,5 | 16,6 | 3,8 | 1,1 |
| % du contrôle | 100 | 118,7 | 179,6 | 269,4 | 321,4 |
*** signifie : moyenne significativement différente du « contrôle » (p<0.001).
Il ressort de cette étude que l’extrait de tourteau de moabi hydrolysé augmente de manière significative la synthèse de la bléomycine hydrolase par les kératinocytes normaux d’épiderme humain en culture monocouche à partir de la concentration 0,05% (v/v). En effet à la concentration de 0,01% (v/v) l’augmentation est de +18,7% par rapport au contrôle (p<0,05), à la concentration de 0,05% (v/v) l’augmentation est de +79,6 % par rapport au contrôle (p<0,001) et à la concentration de 0,2% (v/v) l’augmentation est de +169,4 % par rapport au contrôle (p<0,001).
Les facteurs naturels de l’hydratation sont liés à l’activité de la bléomycine hydrolase. En effet cette enzyme est connue pour son rôle dans la dégradation de la filaggrine deiminée en acides connus pour leur rôle dans la rétention hydrique dans la couche cornée.
L’hydrolysat de moabi selon la présente invention présente donc un effet hydratant de la peau induit par une action physiologique.
B. Synthèse d’acide hyaluronique
La propriété de plusieurs compositions de l’hydrolysat de tourteau de moabi à augmenter la synthèse de l’acide hyaluronique a été évaluée sur des fibroblastes normaux d’épiderme humain cultivés en culture monocouche.
Les fibroblastes normaux d’épiderme humain d’un donneur de 68 ans ont été cultivés en culture monocouche jusqu’à confluence. Puis les fibroblastes ont été incubés pendant 24 heures soit en l’absence de l’extrait à tester (contrôle) soit en présence des différentes compositions de l’extrait à tester.
Le TGF béta (Facteur de croissance transformant béta) à 10ng/mL a été utilisé en tant que référence / contrôle positif pour sa capacité reconnue à stimuler la synthèse de l’acide hyaluronique intra-cellulaire.
A la fin de la période d’incubation, le milieu a été isolé et les mesures ont été effectuées sur le milieu d’incubation.
La quantité d’acide hyaluronique libérée dans le milieu d’incubation a été déterminée en utilisant un kit ELISA spécifique.
Les protéines contenues dans les lysats de cellules ont été quantifiées par une méthode spectro-colorimétrique dite de « Bradford ».
Comme déjà mentionné, les compositions de l’hydrolysat de tourteau de moabi à différentes concentrations ont été préparées en diluant l’hydrolysat préparé à l’Exemple 1.I ci-dessus directement dans le milieu d’incubation à la concentration visée.
Dans le tableau 8, les résultats obtenus sont exprimés en 10-9g (ng) d’acide hyaluronique par 10-6g (µg) de protéines, la moyenne ainsi que la déviation standard (DS) sont également présentées. Les mesures ont été effectuées en triplicat.
Le niveau de signification entre le "contrôle", et le "produit de référence" a été évalué à l'aide d'un testtde Student (* : p<0,05).
Le niveau de signification entre le "contrôle" et "composé testé" a été évalué indépendamment pour chaque composition par une analyse de variance à un facteur (ANOVA à sens unique) suivie d'un test de Holm-Sidak (* :p<0,05).
| Contrôle | Concentration de l’hydrolysat de tourteau de moabi (%v/v) | Référence TGF béta à 10ng/mL | |||
| 0,03% | 0,1% | 0,3% | |||
| ng d’acide hyaluronique/ µg de protéines | 2,5 | 2,8 | 2,1 | 2,3 | 2,8 |
| 2,1 | 2,5 | 2,0 | 2,1 | 3,1 | |
| 2,2 | 3,0 | 2,2 | 2,2 | 2,7 | |
| Moyenne | 2,3 | 2,8* | 2,1 | 2,2 | 2,9* |
| D.S. | 0,2 | 0,2 | 0,1 | 0,1 | 0,2 |
| % du contrôle | 100,0 | 121,8 | 93,3 | 96,3 | 126,0 |
* signifie : moyenne significativement différente du « contrôle » (p>0.05)
Il ressort de cette étude que l’extrait de tourteau de moabi hydrolysé augmente de manière significative la synthèse et la libération d’acide hyaluronique par les fibroblastes normaux d’épiderme humain en culture monocouche à la concentration 0,3% (v/v). Ainsi, l’extrait hydrolysé selon l’invention montre un effet stimulant sur la production d’acide hyaluronique endogène de la peau.
Or l’acide hyaluronique est une molécule reconnue pour ses propriétés anti-âge notamment pour le comblement des rides et ridules, pour son effet de lissage de la surface cutanée et sa capacité à capter et à fixer l’eau présente dans l’épiderme.
L’hydrolysat de moabi selon la présente invention présente donc un effet anti-âge et hydratant de la peau.
Exemple
3
– Compositions cosmétiques
Les compositions cosmétiques selon l’invention suivantes ont été réalisées, leurs composants sont présentés dans les tableaux 9 et 10.
3.1 Crème
dépigmentante
| Composants | g |
| Hydrolysat de tourteau de moabi selon l’exemple 1 | 1,4 |
| Vitamine C tetra E (tétra-isopalmitate d’ascorbyle commercialisé par Ephyla) | 0,5 |
| Acide salicylique | 0,15 |
| Benzoate de sodium | 0,5 |
| Gomme de xanthane (FFPC commercialisé par Jungbunzlauer ®) | 0,2 |
| Glycérine végétale (Palmera G995E commercialisé par Interchimie ®) | 3,5 |
| Triglycérides caprylique/ caprique (DUB MCT 5545) | 18 |
| Bentonite/ gomme de xanthane/stéaroyle de sodium glutamate / acide citrique (Frametime CXG commercialisé par Ephyla) | 3,2 |
| Alcool cétostéarylique 50/50 | 1,0 |
| Parfum | 0,5 |
| Eau | 71,05 |
La composition a été préparée selon le protocole suivant : les triglycérides et l’alcool cétostéarylique ont été mélangés à 70°C, puis ce mélange a été refroidi à 45°C sous agitation. Ensuite, les autres ingrédients ont été incorporés à température ambiante sous agitation avec un rotor-stator tournant à 4000 tours/ minute. L’agitation a été maintenue pendant 5 à 10 minutes après homogénéisation du mélange.
Activité
dépigmentante
L’activité dépigmentante de cette composition a été évaluée par un laboratoire indépendant habilité à réaliser des études cliniques sur volontaires pour l’évaluation de produits cosmétiques, sous le contrôle d’un docteur en pharmacie.
L’activité dépigmentante de cette composition a été évaluée par mesures mexamétriques selon le calcul d’un index mélanique au moyen d’un appareil de mesures Antera 3D intégrant une caméra et un logiciel de traitement de données commercialisé par la société Miravex.
La coloration de la peau au niveau des taches pigmentaires a été mesurée par mexamétrie. Cette mesure est basée sur le principe d’absorption spécifique de la lumière par la mélanine de la peau à une longueur d'onde donnée.
Les mesures mexamétriques sont fondées sur la rétrodiffusion de la lumière diffuse dans les tissus. Une lampe halogène de forte puissance éclaire la peau par l’intermédiaire d’une fibre optique. La sonde de mesure collecte la lumière diffusée par la peau. Cette lumière est analysée par l’appareillage aux trois longueurs d’onde suivantes : verte : 568 nm, rouge : 660 nm, infrarouge : 880 nm.
Dans la présente étude, la sonde du Mexamètre® a permis de déterminer l'index mélanique, lié à l’absorption à 568 nm.
Volontaires
L’étude a porté sur 21 volontaires répondant aux critères suivants : volontaire sain ; âge compris entre 43 et 70 ans ; volontaire ayant déjà utilisé un produit de la même catégorie que celle du produit étudié (dépigmentant) ; femme non enceinte ou non susceptible de l’être, femme non allaitante ; volontaire capable de comprendre les exigences de l’étude.
De plus les volontaires devaient aussi présenter au moins deux taches pigmentaires d’au moins 5 mm de diamètre au niveau du visage, du cou, du décolleté et/ou des mains sans lésion dermatologique sur le visage, le cou, le décolleté et/ ou les mains et devaient présenter un résultat d’examen clinique préalable normal, non allergique et non atopique et être indemne de toute lésion dermatologique sur le visage, le cou, le décolleté et/ ou les mains.
Ces volontaires devaient également ne pas présenter une pathologie générale incompatible, ni une pathologie dermatologique évolutive ; ne pas suivre un traitement à base d’anti-inflammatoires, de corticoïdes, d’anti-histaminiques ou de tout traitement réduisant ou inhibant les réactions inflammatoires ou allergiques ; ne pas présenter d’antécédents allergiques aux produits cosmétiques ou d’usage ménager ; ni être en période d’exclusion pour une autre étude.
Les impératifs, pendant toute la durée de l’étude, étaient les suivants : se présenter à toutes les visites sans avoir appliqué de produit d’hygiène, de soin et/ou de maquillage sur le visage, le cou, le décolleté et/ ou les mains ; ne pas s’exposer volontairement ou involontairement aux U.V. (naturels ou artificiels) ; utiliser une crème de protection solaire avec un indice solaire élevé pour les sorties en extérieur ; ne pas modifier ses habitudes d’hygiène et cosmétiques ; ne pas utiliser de nouveaux produits cosmétiques ; ne pas utiliser un autre produit cosmétique de la même classe que le produit étudié (dépigmentant) ; utiliser le produit étudié en remplacement de son produit habituel ; ne pas réaliser d’actes esthétiques ou dermatologiques ; ne pas prévoir d’intervention chirurgicale.
Protocole
L’étude était monocentrique (i.e.réalisée dans un seul lieu) et a porté sur 28 jours c’est-à-dire de J1 à J28.
L’application du produit a été effectuée de la manière suivante : 2 fois par jour, le volontaire a appliqué une noisette correspondant à une quantité allant de 0,5 à 1 g de produit sur la peau propre du visage, du cou, du décolleté et des mains puis il a massé jusqu'à pénétration complète du produit. Il a été recommandé d’éviter le contact avec les yeux et d’appliquer le produit solaire fourni avant toute exposition au soleil.
A J1, le protocole a consisté à :
Noter dans le cahier d’observation les traitements en cours pris par le volontaire ; définir trois sites : tache pigmentaire traitée, site témoin traité, site témoin non traité ; effectuer les mesures méxamétriques ; prendre des photographies à visée illustrative d’un lentigo ; remettre au volontaire le produit étudié préalablement pesé ainsi que le mode d’emploi, notamment la dose - noisette de produit - à appliquer ; rappeler au volontaire les contraintes liées à l’étude, en particulier d’effectuer la dernière application la veille du rendez-vous à J28 et de se présenter à la visite sans avoir appliqué de produit sur les sites examinés.
A J28, le protocole a consisté à :
Vérifier le respect des impératifs du protocole ; Vérifier l’observation des applications ; Récupérer le reste de produit dans son emballage initial afin d’en vérifier la consommation ; Recueillir les impressions du volontaire sur les qualités cosmétiques du produit ; Noter dans le cahier d’observation les traitements éventuellement pris par le volontaire depuis la dernière visite ; Effectuer les mesures méxamétriques sur les mêmes sites qu’à J1 ; Recueillir les éventuels signes cliniques et/ou fonctionnels du volontaire ; Prendre des photographies standardisées dans les mêmes conditions qu’à J1.
Résultats
La population analysée a consisté en 21 femmes d’âge compris entre 43 et 70 ans et d’âge moyen 61 ans ayant des lentigos au niveau du visage, du cou, du décolleté et/ou des mains.
Les mesures mexamétriques de l’index mélanique exprimées en unités d’absorbance (UA) ont été effectuées par l’appareil Antera 3D commercialisé par la société Miravex.
La présente les mesures de l’index mélanique, en valeurs moyennes, entre J1 et J28 pour les différentes zones étudiées : zone pigmentée traitée, zone non pigmentée traitée, zone non pigmentée non traitée.
L’analyse statistique effectuée sur les deltas des mesures d’index mélanique de chaque zone traitée par rapport à la zone non traitée (témoin) à chaque temps de mesure, a permis de montrer le potentiel dépigmentant du produit testé, à la fois sur la zone pigmentée traitée et sur la zone non pigmentée traitée, à J28 par rapport à J1. Le potentiel dépigmentant a été confirmé visuellement par comparaison des photos effectuées à J1 et J28 sur les mêmes taches pigmentaires.
Il ressort de cette étude que la composition testée comprenant un hydrolysat de moabi selon l’invention présente une activité dépigmentante.
En outre, les volontaires ont évalué les qualités cosmétiques de la composition testée. Cette composition a reçu 76 % d’opinions favorables, en particulier sur les critères suivants : la peau est douce, la peau est hydratée, la peau est souple, la composition testée améliore l'aspect global de la peau, la composition testée apporte une sensation de confort.
3.2 Crème visage hydratante et anti-âge
| Composants | g | Phase |
| Eau déminéralisée | 55,05 | A1 |
| Silicate de sodium magnesium/ gomme de xanthane/acide citrique (Frametime LTX commercialisé par Ephyla) | 0,9 | A1 |
| Stéaroyle de sodium glutamate (Amisoft HS-11P commercialisé par Ajinomoto) | 0,3 | A1 |
| Glycérine / éthyle lauroyle arginate, HCl (Aminat G commercialisé par Seppic) | 1 | A2 |
| Gluconolactone / benzoate de sodium/ gluconate de calcium (Geogard ultra commercialisé par Lonza) | 1 | A2 |
| Propanediol (Propanediol Massocare commercialisé par Masso) | 3 | A4 |
| Glycérine végétale (Palmera G995E commercialisé par Interchimie ®) | 3 | A4 |
| Gomme de xanthane (FFPC commercialisé par Jungbunzlauer ®) | 0,25 | A3 |
| Inuline (Fibrulose F97 commercialisé par Cosucra) | 3 | A3 |
| Xylitol (Xivia c commercialisé par Danisco) | 3 | A3 |
| Amidon de maïs (Maisita 21-000 commercialisé par Adetis) | 0,5 | A3 |
| Bentonite/ gomme de xanthane/stéaroyle de sodium glutamate / acide citrique (Frametime CXG commercialisé par Ephyla) | 4 | B |
| Beurre de cacao (commercialisé par Ephyla) | 2 | B |
| Alcool béhénylique (Lanette 22 commercialisé par BASF ®) | 1,2 | B |
| Ester de karité (EPHYSTER ECK commercialisé par Ephyla) | 6 | B |
| Huile de dattier du désert (Desert date oil commercialisé par Ephyla) | 4,5 | B |
| Beurre de Moabi (commercialisé par Ephyla) | 5 | B |
| Huile de graine d’Helianthus annuus et Résine de Protium heptaphyllum (HTR1 commercialisé par Ephyla) | 1,5 | B |
| Hydrolysat de tourteau de moabi selon l’exemple 1 | 2 | C |
| Vitamine C tetra E (tétra-isopalmitate d’ascorbyle commercialisé par Ephyla) | 2 | C |
| Parfum | 0,8 | C |
La composition de l’exemple 10 a été préparée selon le protocole suivant.
Pour préparer la phase A, les constituants de la phase A1 ont été mélangés à fort cisaillement pendant 12 minutes. Puis ce mélange a été successivement porté à pH 13 par ajout de NaOH puis à pH 3,5 par ajout d’acide lactique. La phase A2 puis la phase A3 puis la phase A4 ont été ajoutées successivement. Le pH a ensuite été ajusté à 5 par ajout de NaOH.
Les ingrédients de la phase B ont été fondus puis ajoutés à la phase A sous agitation puis la phase C a été ajoutée sous agitation.
Claims (15)
- Hydrolysat de tourteau de moabi ou «Baillonella toxisperma »caractérisé en ce qu’il comprend de 0,50 à 1,50 % en poids, de préférence 0,83 % en poids, de protéines par rapport au poids total de l’hydrolysat ; de 0,50 à 2,00 % en poids, de préférence 1,19 % en poids, de sucres par rapport au poids total de l’hydrolysat et de 15 à 30 ppm, préférence 23 ppm, de polyphénols par rapport au poids total de l’hydrolysat.
- Hydrolysat de tourteau de moabi selon la revendication 1 caractérisé en ce que son spectre UV visible présente un pic à une longueur d’onde λ de 230 nm pour une absorbance de 2,262.
- Procédé de préparation de l’hydrolysat selon l’une quelconque des revendications précédentes comprenant au moins les étapes suivantes, dans cet ordre :
- fournir des graines de moabi ;
- délipider les graines de moabi et récupérer le tourteau ;
- placer le tourteau de moabi en phase aqueuse ;
- soumettre le tourteau à au moins une étape d’hydrolyse au moyen d’une solution alcaline à un pH allant de 13 à 14 pendant une durée allant de 30 minutes à 4 heures,
-ajouter un acide faible de manière à ajuster le pH à une valeur allant de 4,5 à 5,5 ;
- effectuer une séparation solide/ liquide,
- récupérer l’hydrolysat obtenu. - Procédé selon la revendication précédente dans lequel, lors de l’hydrolyse, le ratio masse de tourteau de moabi/ masse de la solution alcaline est compris entre 1/12 et 1/8 et de manière préférée d’environ 1/10.
- Composition cosmétique, non thérapeutique caractérisée en ce qu’elle comprend au moins un hydrolysat selon l’une quelconque des revendications 1 ou 2 ou préparé suivant le procédé selon l’une quelconque des revendications 3 ou 4, de préférence en une teneur allant de 0,001 à 30 % en poids et de préférence de 0,1 à 20 % en poids par rapport au poids total de la composition.
- Composition cosmétique, non thérapeutique selon la revendication précédente comprenant du tétra-isopalmitate d’ascorbyle, de préférence selon un ratio tétra-isopalmitate d’ascorbyle/hydrolysat allant de 1/1 à 1/10 et avantageusement d’environ 1/3.
- Composition cosmétique, non thérapeutique selon la revendication 5 ou 6 comprenant, dans un milieu cosmétiquement acceptable, au moins un agent cosmétique choisi parmi les agents humectants, les épaississants, les agents de texture, les émulsifiants, les agents dispersants, les agents moussants, les émolients, les conservateurs, les colorants, les extraits de plantes, les fibres végétales, les minéraux, les agents correcteurs de pH, les principes actifs et les parfums.
- Composition cosmétique non thérapeutique selon l’une quelconque des revendications 5 à 7 caractérisée en ce qu’elle est destinée à être appliquée sur la peau.
- Utilisation cosmétique, non thérapeutique, d’un hydrolysat selon l’une quelconque des revendications 1 ou 2 ou préparé suivant le procédé selon l’une quelconque des revendications 3 ou 4 ou d’au moins une composition cosmétique selon l’une quelconque des revendications 5 à 8 en tant qu’actif hydratant de la peau.
- Utilisation cosmétique, non thérapeutique, d’un hydrolysat selon l’une quelconque des revendications 1 ou 2 ou préparé suivant le procédé selon l’une quelconque des revendications 3 ou 4 ou d’au moins une composition cosmétique selon l’une quelconque des revendications 5 à 8 en tant qu’actif pour prévenir et/ou diminuer les signes de vieillissement cutané, en particulier la perte d’élasticité de la peau, l’altération de la fonction barrière de la peau, l’apparition de rides et/ou de ridules.
- Utilisation cosmétique, non thérapeutique, d’un hydrolysat selon l’une quelconque des revendications 1 ou 2 ou préparé suivant le procédé selon l’une quelconque des revendications 3 ou 4 ou d’au moins une composition cosmétique selon l’une quelconque des revendications 5 à 8 en tant qu’actif pour blanchir et/ou éclaircir et/ou dépigmenter la peau,notamment pour réduire la taille des taches brunes de pigmentation, atténuer voire supprimer les taches brunes de pigmentation, ou encore prévenir, réduire et/ou traiter une altération du teint de la peau.
- Procédé cosmétique, non thérapeutique de traitement de la peau, comprenant au moins une étape d'application sur la peau, d’un hydrolysat selon l’une quelconque des revendications 1 ou 2 ou préparé suivant le procédé selon l’une quelconque des revendications 3 ou 4 ou d'une composition cosmétique selon l’une quelconque des revendications 5 à 8.
- Procédé cosmétique, non thérapeutique selon la revendication 12 destiné à maintenir ou améliorer l’hydratation de la peau.
- Procédé cosmétique, non thérapeutique selon la revendication 12 destiné à prévenir et/ou diminuer les signes de vieillissement cutané, en particulier la perte d’élasticité de la peau, l’altération de la fonction barrière de la peau, l’apparition de rides et/ou de ridules.
- Procédé cosmétique, non thérapeutique selon la revendication 12 destiné à dépigmenter, éclaircir et/ou blanchir la peau.
.
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|---|---|---|---|
| FR2201611A FR3132845B1 (fr) | 2022-02-23 | 2022-02-23 | Hydrolysat de tourteau de moabi, procédé de préparation et utilisation en cosmétique notamment pour traiter le vieillissement cutané et dépigmenter la peau |
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Non-Patent Citations (4)
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