FR3143356A1 - Association des vitamines B1, B6 et B9 par voie topique - Google Patents

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Abstract

Association des vitamines B1, B6 et B9 par voie topique La présente invention concerne l’utilisation des vitamines B1, B6 et B9, notamment par voie topique, pour lutter contre les signes du vieillissement et/ou améliorer la qualité de la peau. Figure pour l'abrégé : néant

Description

Association des vitamines B1, B6 et B9 par voie topique
La présente invention concerne l’utilisation cosmétique des vitamines B1, B6 et B9 pour prévenir et/ou lutter contre les signes du vieillissement et/ou améliorer la qualité de la peau.
La peau humaine est constituée de deux compartiments à savoir un compartiment superficiel, l'épiderme et un compartiment profond, le derme.
L'épiderme est composé principalement de trois types de cellules qui sont les kératinocytes (majoritaires), les mélanocytes et les cellules de Langerhans, qui jouent un rôle primordial dans la réponse immunitaire et en particulier dans la présentation antigénique.
Le derme fournit à l'épiderme un support solide. C'est également son élément nourricier. Il est principalement constitué de fibroblastes et d'une matrice extracellulaire. On y trouve aussi des leucocytes, des mastocytes et des macrophages tissulaires. Enfin, le derme est traversé par des vaisseaux sanguins et des fibres nerveuses.

La peau constitue une barrière contre les agressions extérieures, notamment chimiques et/ou mécaniques, et à ce titre, un certain nombre de réactions de défense contre les facteurs environnementaux (climat, UV, tabac, pollutions...) et/ou les xénobiotiques (comme par exemple certains médicaments) se produisent à son niveau : la peau est constamment soumise à des stress, qu’ils soient d’origine intrinsèque (vieillissement chronologique, dérégulations hormonales, stress psychologique…) ou externe (UV, pollutions…).
Tous ces stress induisent des altérations métaboliques au niveau cellulaire, qui se traduisent par des changements physiologiques importants au niveau tissulaire et plus largement au niveau de l’organe. Ces phénomènes ont des conséquences directes sur la qualité de la peau et accroissent les signes de l'âge, altèrent ses capacités à se défendre, se régénérer et se réparer.
Il existe donc un besoin pour des actifs capables de restaurer les fonctions métaboliques des cellules cutanées et ainsi améliorer la qualité de la peau et réduire les signes de l'âge.
La Demanderesse a maintenant identifié de façon surprenante l'effet synergique de l'association des vitamines B1, B6 et B9, notamment en application topique sur la peau, pour restaurer la fonction métabolique des kératinocytes. Ces fonctions biologiques sont décrites comme favorisant la régénération épidermique et la fonction barrière cutanée. Ainsi, la restauration de la fonction métabolique des kératinocytes permet d'améliorer la qualité et la texture de la peau (donc de diminuer sa rugosité), mais aussi sa souplesse et sa fermeté, ainsi que de diminuer les rides et ridules.
Plus largement, ces effets ont pour conséquence de prévenir et/ou diminuer les signes de l'âge, de prévenir et/ou diminuer les processus de sénescence et d’améliorer la régénération de la peau.
La présente invention a donc pour objet l’utilisation cosmétique de (i) la vitamine B1 ou l’un de ses sels, (ii) la vitamine B6, l’une de ses formes ou l’un de ses sels, et de (iii) la vitamine B9 ou l’un de ses sels, pour prévenir et/ou lutter contre les signes du vieillissement.
Par « signes du vieillissement », on entend toutes modifications de l'aspect extérieur de la peau dues au vieillissement qu'il soit chronobiologique et/ou photo-induit, comme par exemple les rides et ridules, la peau flétrie, la peau molle, la peau amincie, le manque d'élasticité et/ou de tonus de la peau.
Par « prévenir les signes du vieillissement », on entend empêcher ou retarder l’apparition des signes du vieillissement.
La présente invention a également pour objet l’utilisation cosmétique de (i) la vitamine B1 ou l’un de ses sels, (ii) la vitamine B6, l’une de ses formes ou l’un de ses sels, et de (iii) la vitamine B9 ou l’un de ses sels, pour restaurer la fonction métabolique des kératinocytes et/ou stimuler leur régénération cellulaire.
En particulier, la présente invention a pour objet l’utilisation cosmétique de (i) la vitamine B1 ou l’un de ses sels, (ii) la vitamine B6, l’une de ses formes ou l’un de ses sels, et de (iii) la vitamine B9 ou l’un de ses sels, pour améliorer la qualité, la texture et/ou l'apparence de la peau, et/ou pour lutter contre le stress induit par l’environnement, de préférence induit par les UV et/ou la pollution. Elle a également pour objet l’utilisation cosmétique de (i) la vitamine B1 ou l’un de ses sels, (ii) la vitamine B6, l’une de ses formes ou l’un de ses sels, et de (iii) la vitamine B9 ou l’un de ses sels, pour diminuer la rugosité de la peau, et/ou prévenir et/ou diminuer les ridules et les rides. Elle a également pour objet l’utilisation cosmétique de (i) la vitamine B1 ou l’un de ses sels, (ii) la vitamine B6, l’une de ses formes ou l’un de ses sels, et de (iii) la vitamine B9 ou l’un de ses sels, pour améliorer la souplesse, le rebond et/ou la fermeté de la peau.
La présente invention a également pour objet l’utilisation cosmétique de (i) la vitamine B1 ou l’un de ses sels, (ii) la vitamine B6, l’une de ses formes ou l’un de ses sels, et de (iii) la vitamine B9 ou l’un de ses sels, pour prévenir et/ou diminuer les signes de l'âge, et/ou prévenir et/ou diminuer les processus de sénescence, et/ou améliorer la régénération de la peau.
Les utilisations cosmétiques selon l’invention sont typiquement par voie topique, i.e. par application sur la peau. En particulier, les utilisations selon l’invention ne sont pas par voie orale.
La présente invention a également pour objet une composition cosmétique topique comprenant, dans un milieu physiologiquement acceptable :
(i) de la vitamine B1 ou l’un de ses sels,
(ii) de la vitamine B6, l’une de ses formes ou l’un de ses sels, et
(iii) de la vitamine B9 ou l’un de ses sels, et
au moins un additif choisi parmi les matières colorantes pigmentaires et les filtres UV.
La présente invention a également pour objet un procédé de maquillage et/ou de soin des matières kératiniques, comprenant l’application sur les matières kératiniques d’une composition topique selon l’invention.
Par « matières kératiniques », on entend la peau et/ou les phanères ; de préférence la peau, de préférence la peau du visage et/ou du cou.
La vitamine B1, ou thiamine, est une vitamine hydrosoluble de la famille des vitamines B. Les animaux la trouvent dans leur alimentation, tandis qu’elle est synthétisée par les bactéries, les plantes et les champignons. Elle est indispensable à la transformation des glucides en énergie par le cycle de Krebs et est nécessaire au bon fonctionnement du système nerveux et des muscles.
La vitamine B1 peut être utilisée telle quelle, ou bien sous forme de sel, de préférence la thiamine monohydratée.
De préférence, on utilise la thiamine monohydratée.
La vitamine B6 est une vitamine hydrosoluble de la famille des vitamines B, représentée par trois formes principales : la pyridoxine, le pyridoxal et la pyridoxamine. Elle est nécessaire au bon fonctionnement du système nerveux et cutané.
La pyridoxine, le pyridoxal et la pyridoxamine sont des formes convertibles entre elles. Elles peuvent être utilisées telles quelles, ou bien sous forme de sels, de préférence la forme chlorhydrate.
De préférence, on utilise le chlorhydrate de pyridoxine.
La vitamine B9, ou acide folique, est une vitamine hydrosoluble de la famille des vitamines B. C’est le précurseur métabolique de la coenzyme tétrahydrofolate, impliqué notamment dans la synthèse des bases nucléiques, et de certains acides aminés.
La vitamine B9 peut être utilisée telle quelle, ou bien sous forme d’ion folate (sel).
De préférence, on utilise l’acide folique.
De préférence, les vitamines (i) à (iii) ou leurs sels sont formulées dans une composition cosmétique topique comprenant un milieu physiologiquement acceptable.
Cette composition cosmétique topique est de préférence liquide. Elle peut être choisie parmi les crèmes, les émulsions, les lotions, les dispersions, les solutions, les gels, les baumes et les sérums; ou bien solide, de préférence choisie parmi les masques et les sticks. De préférence, elle n’est pas sous forme solide, qui convient moins bien à une application topique. Elle peut être utilisée comme produit de soin du visage ou du corps et/ou comme produit de maquillage pour la peau.
De préférence, la composition cosmétique topique comprend :
de 0.001% à 20% en poids par rapport au poids total de composition, de préférence de 0.1% à 5% en poids, de préférence de 1 à 5% en poids, de (i) vitamine B1 ou l’un de ses sels, et/ou
de 0.001% à 10% en poids par rapport au poids total de composition, de préférence de 0.05% à 5% en poids, de préférence de 0.1% à 1% en poids de (ii) vitamine B6, l’une de ses formes ou l’un de ses sels, et/ou
de 0.001% à 10% en poids par rapport au poids total de composition, de préférence de 0.05% à 5% en poids, de préférence de 0.1% à 5%, de préférence de 0.1% à 2% de (iii) vitamine B9 ou l’un de ses sels.
De préférence, la composition cosmétique topique comprend au moins un ingrédient choisi parmi les tensioactifs, les matières colorantes pigmentaires, les huiles, les polymères épaississants, les filtres UV, les actifs et leurs mélanges.
Comme tensioactifs utilisables dans l'invention, on peut citer par exemple tensioactifs anioniques et non ionique, et notamment les esters d'acide gras et de polyéthylène glycol tels que le stéarate de PEG-20, et les esters d'acide gras et de glycérine tels que le stéarate de glycéryle.
Les matières colorantes pigmentaires sont typiquement choisies parmi les pigments organiques, les pigments minéraux et les nacres.
Par « pigment minéral », on entend tout pigment qui répond à la définition de l’encyclopédie Ullmann dans le chapitre pigment inorganique. On peut citer, parmi les pigments minéraux utiles dans la présente invention, les oxydes de zirconium ou de cérium, ainsi que les oxydes de zinc, de fer (noir, jaune ou rouge) ou de chrome, le violet de manganèse, le bleu outremer, l’hydrate de chrome et le bleu ferrique, le dioxyde de titane, les poudres métalliques comme la poudre d’aluminium et la poudre de cuivre. Les pigments minéraux suivants peuvent aussi être utilisés : Ta2O5, Ti3O5, Ti2O3, TiO, ZrO2 en mélange avec TiO2, ZrO2, Nb2O5, CeO2, ZnS. Dans le cadre de la présente invention, les pigments minéraux sont plus particulièrement l’oxyde de fer et/ou le dioxyde de titane.
Les nacres peuvent être choisies parmi les pigments nacrés, tels que le mica titane recouvert avec un oxyde de fer, le mica titane recouvert avec de l’oxychlorure de bismuth, le mica titane recouvert avec de l’oxyde de chrome, le mica titane recouvert avec un colorant organique, ainsi que les pigments nacrés à base d’oxychlorure de bismuth. Il peut également s’agir de particules de mica à la surface desquelles sont superposées au moins deux couches successives d’oxydes métalliques et/ou de matières colorantes organiques. On peut également citer, à titre d’exemple de nacres, le mica naturel recouvert d’oxyde de titane, d’oxyde de fer, de pigment naturel ou d’oxychlorure de bismuth. Les nacres peuvent plus particulièrement posséder une couleur ou un reflet jaune, rose, rouge, bronze, orangé, brun, or et/ou cuivré.
Par « pigment organique », on entend tout pigment qui répond à la définition de l’encyclopédie Ullmann dans le chapitre pigment organique. Le pigment organique peut notamment être choisi parmi les composés nitroso, nitro, azo, xanthène, quinoléine, anthraquinone, phtalocyanine, de type complexe métallique, isoindolinone, isoindoline, quinacridone, périnone, pérylène, dicétopyrrolopyrrole, thioindigo, dioxazine, triphénylméthane, quinophtalone.
Le ou les pigments organiques peuvent être choisis par exemple parmi le carmin, le noir de carbone, le noir d’aniline, la mélanine, le jaune azo, la quinacridone, le bleu de phtalocyanine, le rouge sorgho, les pigments bleus codifiés dans le Color Index sous les références CI 42090, 69800, 69825, 73000, 74100, 74160, les pigments jaunes codifiés dans le Color Index sous les références CI 11680, 11710, 15985, 19140, 20040, 21100, 21108, 47000, 47005, les pigments verts codifiés dans le Color Index sous les références CI 61565, 61570, 74260, les pigments oranges codifiés dans le Color Index sous les références CI 11725, 15510, 45370, 71105, les pigments rouges codifiés dans le Color Index sous les références CI 12085, 12120, 12370, 12420, 12490, 14700, 15525, 15580, 15620, 15630, 15800, 15850, 15865, 15880, 17200, 26100, 45380, 45410, 58000, 73360, 73915, 75470, et les pigments obtenus par polymérisation oxydante de dérivés indoliques, phénoliques tels qu’ils sont décrits dans le brevet FR 2 679 771.
Comme huiles utilisables dans l'invention, on peut citer les huiles minérales (huile de vaseline), les huiles d'origine végétale (huile d'avocat, huile de soja), les huiles d'origine animale (lanoline), les huiles de synthèse (perhydrosqualène), les huiles siliconées (cyclométhicone) et les huiles fluorées (perfluoropolyéthers). On peut aussi utiliser comme matières grasses des alcools gras (alcool cétylique), des acides gras, des cires (cire de carnauba, ozokérite).
Comme polymères épaississants, on peut citer les gélifiants hydrophiles, et en particulier les polymères carboxyvinyliques (carbomer), les copolymères acryliques tels que les copolymères d'acrylates/alkylacrylates, les polyacrylamides, les polysaccharides, les gommes naturelles et les argiles ; et les gélifiants lipophiles, en particulier les argiles modifiées comme les bentones, les sels métalliques d'acides gras, la silice hydrophobe et les polyéthylènes.
Comme actifs, on peut utiliser notamment les agents hydratants, les agents dépigmentants, les agents antiâges, les agents anti-radicaux libres et leurs mélanges. En cas d'incompatibilité, certains au moins des actifs peuvent être incorporés dans des sphérules, notamment des vésicules ioniques ou non-ioniques et/ou des nanoparticules (nanocapsules et/ou nanosphères), de manière à ce que les actifs incompatibles entre eux soient isolés les uns des autres dans la composition.
Les filtres UV sont typiquement choisis parmi les filtres UV organiques et les filtres UV minéraux.
Les filtres UV organiques sont notamment choisis parmi les dérivés de dibenzoyl méthane comme l’avobenzone, le Terephthalylidène Dicamphre Acide Sulfonic Acid fabriqué sous le nom "MEXORYL SX" par CHIMEX, les dérivés bis-benzoazolyle tels que décrits dans EP 669 323, et US 2,463,264 et plus particulièrement le composé Disodium Phenyl Dibenzimidazole Tetra-sulfonate vendu sous le nom commercial "NEO HELIOPAN AP" par Haarmann et REIMER, les dérivés d’acide p-aminobenzoïque (PABA) tels que PABA, Glyceryl PABA, et PEG-25 PABA vendu sous le nom "UVINUL P25" par BASF, le Phenylbenzimidazole Sulfonic Acid vendu notamment sous le nom commercial "EUSOLEX 232" par MERCK, l’acide férulique, l’acide salicylique, le DEA methoxycinnamate, le Benzylidène Camphre Acide Sulfonique fabriqué sous le nom "MEXORYL SL" par CHIMEX, et le Camphre Benzalkonium Methosulfate fabriqué sous le nom "MEXORYL SO" par CHIMEX, les dérivés de benzophénone comportant au moins un radical sulfonique, tel que notamment Benzophenone-4 vendu sous le nom commercial " UVINUL MS40" par BASF, Benzophenone-5 et Benzophenone-9.
Les filtres UV minéraux sont notamment choisis parmi le dioxyde de titane, l'oxyde de zinc
et l'oxyde de cérium.
La présente invention a également pour objet une composition cosmétique topique comprenant, dans un milieu physiologiquement acceptable :
(i) de la vitamine B1 ou l’un de ses sels,
(ii) de la vitamine B6, l’une de ses formes ou l’un de ses sels, et
(iii) de la vitamine B9 ou l’un de ses sels, et
au moins un additif choisi parmi les matières colorantes pigmentaires et les filtres UV.
La matière colorante pigmentaire est notamment décrite ci-dessus, et choisie parmi les pigments organiques, les pigments minéraux et les nacres. De préférence, la composition cosmétique topique comprend au moins 1% en poids, de préférence au moins 3% en poids, de préférence au moins 5% en poids par rapport au poids total de composition, d’au moins une matière colorante pigmentaire.
Le filtre UV est notamment décrit ci-dessus, et choisi parmi les filtres UV organiques et les filtres UV minéraux. De préférence, la composition cosmétique topique comprend au moins 1% en poids, de préférence au moins 3% en poids, de préférence au moins 5% en poids par rapport au poids total de composition, d’au moins un filtre UV.
De préférence, dans cette composition cosmétique topique, (i) la vitamine B1 ou l’un de ses sels est la thiamine monohydratée, et/ou (ii) la vitamine B6, l’une de ses formes ou l’un de ses sels est choisie parmi la pyridoxine, le pyridoxal, la pyridoxamine et leurs sels, de préférence le chlorhydrate de pyridoxine, et/ou (iii) la vitamine B9 ou l’un de ses sels est l’acide folique.
De préférence, la composition cosmétique topique comprend :
de 0.001% à 20% en poids par rapport au poids total de composition, de préférence de 0.1% à 5% en poids, de préférence de 1 à 5% en poids, de (i) vitamine B1 ou l’un de ses sels, et/ou
de 0.001% à 10% en poids par rapport au poids total de composition, de préférence de 0.05% à 5% en poids, de préférence de 0.1% à 1% en poids de (ii) vitamine B6, l’une de ses formes ou l’un de ses sels, et/ou
de 0.001% à 10% en poids par rapport au poids total de composition, de préférence de 0.05% à 5% en poids, de préférence de 0.1% à 5%, de préférence de 0.1% à 2% de (iii) vitamine B9 ou l’un de ses sels.
La présente invention a également pour objet un procédé de maquillage et/ou de soin des matières kératiniques, comprenant l’application sur les matières kératiniques d’une composition topique selon l’invention.
L’invention est maintenant illustrée par les exemples suivants.
Les légendes des figures sont les suivantes :
La présente les effets des Vitamines B1, B6, B9 et de leur association sur l’expression de transcrits (ARNm) impliqués dans la migration des kératinocytes – Analyse par RT-qPCR.
La présente les effets des Vitamines B1, B6, B9 et de leur association sur l’expression de transcrits (ARNm) impliqués dans la migration des kératinocytes – Analyse par RT-qPCR.
La présente les effets des Vitamines B1, B6, B9 et de leur association la protection des kératinocytes vis-à-vis d’un stress oxydant à l’H2O2– Mesure de la concentration de NAD. Non-stimulated control = contrôle non stimulé ; stimulated control = contrôle stimulé.
La présente les effets des Vitamines B1, B6, B9 et de leur association la protection des kératinocytes vis-à-vis d’un stress UV – Mesure de la concentration de NAD. Non-stimulated control = contrôle non stimulé ; stimulated control = contrôle stimulé.
Exemples
Exemple 1 : E valuation de l’efficacité sur la migration et la prolifération des kératinocytes
Principe:
Le but de cette étude est d’évaluer les effets des vitamines sur l’expression de transcrits (ARNm) impliqués dans la migration et la prolifération des kératinocytes, processus-clés de la ré-épithélialisation, par RT-qPCR.
Les vitamines B1, B6 et B9, ont été testées seules ou en association, respectivement à 2, 0.3 et 0.1 mg/ml.
Les différents marqueurs étudiés sont : CEACAM6, RAC2, RASA1, KRT19 et HBEGF.
Matériels et méthodes:
Les kératinocytes ont été ensemencés en plaques 48 puits et cultivés pendant 72 heures avec renouvellement du milieu de culture après 24 heures d’incubation. Le milieu a ensuite été renouvelé par du milieu de culture contenant ou non (Témoin), la Vitamine B1 à 2 mg/ml, ou la vitamine B6 à 0.3 mg/ml, ou la Vitamine B9 à 0.1 mg/ml ou l’association des Vitamines B1, B6 et B9 respectivement à 2, 0.3 et 0.1 mg/ml. Les cellules ont ensuite été incubées pendant 24 heures additionnelles. Toutes les conditions ont été réalisées en n=3.
A la fin des traitements, les milieux de cultures ont été éliminés et les cellules ont été rincées 2 fois en PBS (w/o CaCl2, w/o MgCl2). Les ARN totaux ont ensuite été isolés à l’aide d’un kit d’extraction par billes magnétiques et selon les recommandations du fournisseur (MagMAXTM-96 Total RNA Isolation Kit, Ambion). La quantification des ARN et le contrôle de leur qualité ont été analysés à l’aide du Labchip GX (Perkin Elmer).
L’expression des transcrits sélectionnés a été analysée par PCR quantitative en 2 étapes. Tout d’abord, les ADNc ont été retro-transcrits à partir des ARN en utilisant le kit Quantitect® Reverse transcription (QIAGEN) et selon les recommandations du fournisseur. Les expériences de PCR quantitatives ont ensuite été réalisées à l’aide d’un système LightCycler® 480 Real-Time PCR System en plaque 384 puits (Roche) et selon la technique d’incorporation du SYBR®Green (Roche).
Résultats et conclusions:
Les résultats sont exprimés en facteur de modulation (Fc, fold change) par rapport au témoin non traité après normalisation des expressions relatives par rapport à l’expression de gènes de ménage (GAPDH et RPL13A). L’expression d’un gène est considérée comme stimulée lorsqu’elle est multipliée au minimum par 1.5.
Les résultats montrent que la Vitamine B1 testée à 2 mg/ml stimule faiblement mais significativement l’expression de RAC2, sans moduler l’expression des autres marqueurs, que la Vitamine B6 testée à 0.3 mg/ml stimule l’expression de CEACAM6, RAC2 et KRT19 et enfin, que la Vitamine B9 testée à 0.1 mg/ml stimule l’expression de CEACAM6, RAC2 et KRT19 (Figures 1 & 2). De façon surprenante et inattendue, l’association des 3 vitamines B1, B6 et B9 testées respectivement à 2, 0.3 et 0.1 mg/ml stimule, de façon synergique l’expression de l’ensemble des marqueurs CEACAM6, RAC2, RASA1, KRT19 et HBEGF. Les facteurs de modulations sont très nettement et significativement supérieurs à la somme des effets observées avec les vitamines testées seules et seule la combinaison des 3 vitamines permet de stimuler significativement l’expression des marqueurs RASA1 et HBEGF. Tous ces éléments démontrent ainsi l’activité synergique du mélange. Les marqueurs CEACAM6 (Akihiko F, Kiyofumi E, Yumi H, Masahide K, Masatoshi J and Hironobu I. CEA (Carcinoembryonic Antigen) and CEACAM6 (CEA-Related Cell Adhesion Molecul 6) are Expressed in Psoriasis Vulgaris. The Open Dermatology Journal, 2013, 7, 47-52), RAC2 (Ridley AJ. Rho GTPase signalling in cell migration. Curr Opin Cell Biol. 2015 Oct;36:103-12) et RASA1 (Fitsialos G, Chassot AA, Turchi L, Dayem MA, LeBrigand K, Moreilhon C, Meneguzzi G, Buscà R, Mari B, Barbry P, Ponzio G. Transcriptional signature of epidermal keratinocytes subjected to in vitro scratch wounding reveals selective roles for ERK1/2, p38, and phosphatidylinositol 3-kinase signaling pathways. J Biol Chem. 2007 May 18;282(20):15090-102) codent pour des protéines impliquées dans la migration des kératinocytes alors que les marqueurs KRT19 (Michel M, Török N, Godbout MJ, Lussier M, Gaudreau P, Royal A, Germain L. Keratin 19 as a biochemical marker of skin stem cells in vivo and in vitro: keratin 19 expressing cells are differentially localized in function of anatomic sites, and their number varies with donor age and culture stage. J Cell Sci. 1996 May;109 (Pt 5):1017-28) et HBEGF (Yoshida A, Kanno H, Watabe D, Akasaka T, Sawai T. The role of heparin-binding EGF-like growth factor and amphiregulin in the epidermal proliferation of psoriasis in cooperation with TNFalpha. Arch Dermatol Res. 2008 Jan;300(1):37-45) sont impliqués dans la prolifération des kératinocytes.
La combinaison des vitamines B1, B6 et B9 présente donc un intérêt dans le vieillissement cutané en favorisant le renouvellement épidermique, l’épaisseur de l’épiderme diminuant avec l’âge(Branchet MC, Boisnic S, Frances C, Robert AM. Skin thickness changes in normal aging skin. Gerontology. 1990;36(1):28-35. doi: 10.1159/000213172. PMID: 2384222),et dans la régénération cutanée et la cicatrisation, la migration et la prolifération des kératinocytes étant des mécanismes clés dans le processus de ré - épithélialisation(Patricia Rousselle, Fabienne Braye, Guila Dayan. Re-epithelialization of adult skin wounds: cellular mechanisms and therapeutic strategies. Advanced Drug Delivery Reviews, Elsevier, 2019, 146, pp.344- 365. ff10.1016/j.addr.2018.06.019ff. ffhal-03035503f).
Exemple 2 : E valuation de l’efficacité sur la production de NAD dans des conditions de stress induit par les UV ou par traitement à l’H 2 O 2
Principe:
Le but de cette étude est d’évaluer les effets des vitamines sur la protection des kératinocytes vis-à-vis de la déplétion en NAD induite par un stress oxydant à la suite d’une irradiation UV ou suite à un traitement à l’H2O2.
Les vitamines B1, B6 et B9, ont été testées seules ou en association, respectivement à 2, 0.3 et 0.1 mg/ml.
Le marqueur étudié est une quantification de la concentration en NAD rapportée à la concentration totale en protéines.
Matériels et méthodes:
Les kératinocytes ont été ensemencés dans des plaques 12 puits et cultivés pendant 72 heures dans du milieu de culture.
- Conditions stimulées par H2O2 :
Le milieu a ensuite été remplacé par du milieu contenant ou non (témoin), la Vitamine B1 à 2 mg/ml, ou la vitamine B6 à 0.3 mg/ml, ou la Vitamine B9 à 0.1 mg/ml ou l’association des Vitamines B1, B6 et B9 respectivement à 2, 0.3 et 0.1 mg/ml et les cellules ont été pré-incubées pendant 24 heures. Après la pré-incubation, le milieu a été collecté et les cellules ont été stimulées pendant 2 heures par 250 µM d’H2O2. Le milieu a ensuite été remplacé par le milieu collecté préalablement et les cellules ont été incubées pendant 48 heures supplémentaires. Toutes les conditions expérimentales ont été réalisées en n=3.
- Conditions d'irradiation aux UV :
Le milieu a ensuite été remplacé par du milieu contenant ou non (témoin), la Vitamine B1 à 667 µg/ml, ou la vitamine B6 à 100 µg/ml, ou la Vitamine B9 à 33.3 µg/ml ou l’association des Vitamines B1, B6 et B9 respectivement à 667, 100 et 33.3 µg/ml et les cellules ont été pré-incubées pendant 24 heures. Après la pré-incubation, le milieu a été collecté et remplacé par du milieu d’irradiation et les cellules ont été irradiées avec des UVB à 275 mJ/cm2 (+ UVA à 2,1 J/cm2). La lampe utilisée était un simulateur solaire SOL500 équipé d'un filtre H2 (Dr. Hönle, AG). Le milieu a ensuite été remplacé par le milieu collecté préalablement et les cellules ont été incubées pendant 48 heures supplémentaires. Toutes les conditions expérimentales ont été réalisées en n=3.
A la fin des traitements, les milieux ont été éliminés et la quantité de NAD a été quantifiée à l’aide d’un kit de dosage spécifique et selon les recommandations du fournisseurs (BioVision, #K337-100). La quantité de protéines dans chaque puits de culture a aussi été quantifiée à l’aide d’un kit spécifique et toujours selon les recommandations du fournisseur (BIO-RAD, #500-0116).
Un pourcentage de protection vis-à-vis des stress a été calculé selon la formule :
[NAD] Traitement : concentration en NAD (pmol/mg de protéines) dans les conditions traitées,
[NAD] Témoin stimulé : concentration en NAD (pmol/mg de protéines) dans les témoins stimulés par H2O2ou UVs,
[NAD] Contrôle no n stimulé : concentration en NAD (pmol/mg de protéines) dans les conditions non stimulées.
Résultats et conclusions:
Les résultats montrent que les deux stress, UV et H2O2, ont induit une diminution nette de la concentration intracellulaire en NAD (Figures 3 et 4). Dans ces conditions, seule la Vitamine B6, testée seule à 0.3 mg/ml, a significativement permis de protéger les kératinocytes du stress induit par le traitement à l’H2O2( ). Les autres vitamines, B1 et B9, testées seules n’ont eu aucun effet significatif. De façon surprenante et inattendue, l’association des 3 vitamines B1, B6 et B9 testées respectivement à 2, 0.3 et 0.1 mg/ml a permis de protéger très efficacement les kératinocytes du stress induit par le traitement à l’H2O2( ). La concentration de NAD était même supérieure à celle mesurée dans le contrôle non stimulé. De la même façon, l’association des 3 vitamines B1, B6 et B9 testées respectivement à 667, 100 et 33.3 µg/ml a permis de protéger efficacement les kératinocytes du stress induit par l’irradiation UV ( ). Dans les 2 cas, les effets du mélange étaient nettement supérieurs à la somme des effets des vitamines testées seules, démontrant l’activité synergique entre les 3 vitamines. Le NAD joue un rôle central dans le métabolisme énergétique et est un co-substrat de nombreuses enzymes impliquées dans la modification des signes du vieillissement.
Sachant qu’augmenter le NAD permet de ralentir le vieillissement (Conlon NJ. The Role of NAD+ in Regenerative Medicine. Plast Reconstr Surg. 2022 Oct 1;150(4 Suppl):41S-48S),ces résultats démontrent l’intérêt de la combinaison des vitamines B1, B6 et B9 pour lutter contre les signes du vieillissement.

Claims (17)

  1. Utilisation cosmétique de (i) la vitamine B1 ou l’un de ses sels, (ii) la vitamine B6, l’une de ses formes ou l’un de ses sels, et de (iii) la vitamine B9 ou l’un de ses sels, pour prévenir et/ou lutter contre les signes du vieillissement.
  2. Utilisation cosmétique de (i) la vitamine B1 ou l’un de ses sels, (ii) la vitamine B6, l’une de ses formes ou l’un de ses sels, et de (iii) la vitamine B9 ou l’un de ses sels, pour restaurer la fonction métabolique des kératinocytes et/ou stimuler leur régénération cellulaire.
  3. Utilisation selon la revendication 1 ou 2, pour améliorer la qualité, la texture et/ou l'apparence de la peau, et/ou pour lutter contre le stress induit par l’environnement, de préférence induit par les UV et/ou la pollution.
  4. Utilisation selon la revendication 1 ou 2, pour diminuer la rugosité de la peau, et/ou prévenir et/ou diminuer les ridules et les rides.
  5. Utilisation selon la revendication 1 ou 2, pour améliorer la souplesse, le rebond et/ou la fermeté de la peau.
  6. Utilisation selon la revendication 1 ou 2, pour prévenir et/ou diminuer les signes de l'âge, et/ou prévenir et/ou diminuer les processus de sénescence, et/ou améliorer la régénération de la peau.
  7. Utilisation selon l’une des revendications précédentes, caractérisée en ce que les vitamines (i) à (iii) ou leurs sels sont appliquées par voie topique.
  8. Utilisation selon l’une des revendications précédentes, caractérisée en ce que la vitamine B1 ou l’un de ses sels (i) est la thiamine monohydratée.
  9. Utilisation selon l’une des revendications précédentes, caractérisée en ce que la vitamine B6, l’une de ses formes ou l’un de ses sels (ii) est choisie parmi la pyridoxine, le pyridoxal, la pyridoxamine et leurs sels, de préférence le chlorhydrate de pyridoxine.
  10. Utilisation selon l’une des revendications précédentes, caractérisée en ce que la vitamine B9 ou l’un de ses sels (iii) est l’acide folique.
  11. Utilisation selon l’une des revendications précédentes, caractérisée en ce que les vitamines (i) à (iii) ou leurs sels sont formulées dans une composition cosmétique topique comprenant un milieu physiologiquement acceptable.
  12. Utilisation selon la revendication 11, caractérisée en ce que la composition cosmétique topique est liquide, de préférence choisie parmi les crèmes, les émulsions, les lotions, les dispersions, les solutions, les gels, les baumes et les sérums ; ou bien solide, de préférence choisie parmi les masques et les sticks.
  13. Utilisation selon la revendication 11 ou 12, caractérisée en ce que la composition cosmétique topique comprend :
    de 0.001% à 20% en poids par rapport au poids total de composition, de préférence de 0.1% à 5% en poids, de préférence de 1 à 5% en poids, de (i) vitamine B1 ou l’un de ses sels, et/ou
    de 0.001% à 10% en poids par rapport au poids total de composition, de préférence de 0.05% à 5% en poids, de préférence de 0.1% à 1% en poids de (ii) vitamine B6, l’une de ses formes ou l’un de ses sels, et/ou
    de 0.001% à 10% en poids par rapport au poids total de composition, de préférence de 0.05% à 5% en poids, de préférence de 0.1% à 5%, de préférence de 0.1% à 2% de (iii) vitamine B9 ou l’un de ses sels.
  14. Composition cosmétique topique comprenant, dans un milieu physiologiquement acceptable :
    (i) de la vitamine B1 ou l’un de ses sels,
    (ii) de la vitamine B6, l’une de ses formes ou l’un de ses sels, et
    (iii) de la vitamine B9 ou l’un de ses sels, et
    au moins un additif choisi parmi les matières colorantes pigmentaires et les filtres UV.
  15. Composition selon la revendication 14, caractérisée en ce que (i) la vitamine B1 ou l’un de ses sels est la thiamine monohydratée, et/ou (ii) la vitamine B6, l’une de ses formes ou l’un de ses sels est choisie parmi la pyridoxine, le pyridoxal, la pyridoxamine et leurs sels, de préférence le chlorhydrate de pyridoxine, et/ou (iii) la vitamine B9 ou l’un de ses sels est l’acide folique.
  16. Composition selon la revendication 14 ou 15, caractérisée en ce qu’elle comprend :
    de 0.001% à 20% en poids par rapport au poids total de composition, de préférence de 0.1% à 5% en poids, de préférence de 1 à 5% en poids, de (i) vitamine B1 ou l’un de ses sels, et/ou
    de 0.001% à 10% en poids par rapport au poids total de composition, de préférence de 0.05% à 5% en poids, de préférence de 0.1% à 1% en poids de (ii) vitamine B6, l’une de ses formes ou l’un de ses sels, et/ou
    de 0.001% à 10% en poids par rapport au poids total de composition, de préférence de 0.05% à 5% en poids, de préférence de 0.1% à 5%, de préférence de 0.1% à 2% de (iii) vitamine B9 ou l’un de ses sels.
  17. Procédé de maquillage et/ou de soin des matières kératiniques, comprenant l’application sur les matières kératiniques d’une composition topique selon l’une des revendications 14 à 16.
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