FR3153252A1 - Extrait hydrosoluble de graines et/ou de calices délipidés de Hibiscus sabdariffa et ses utilisations cosmétiques. - Google Patents
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Abstract
Utilisation cosmétique d’extraits de graines et/ou de calices délipidés de Hibiscus sabdariffa de la famille des Malvaceae aux effets multifonctionnels et destinés à être mis en contact avec les diverses parties superficielles du corps humains.
Description
La présente invention a pour objet une composition cosmétique destinée à être mise en contact avec les diverses parties superficielles du corps humain (épiderme, systèmes pileux et capillaire, ongles, lèvres et organes génitaux externes) ou avec les dents et les muqueuses buccales, en vue, exclusivement ou principalement, de les nettoyer, de les parfumer, d'en modifier l'aspect, de les protéger, de les maintenir en bon état ou de corriger les odeurs corporelles et caractérisée en ce qu’elle comprend au moins un extrait aqueux, glycériné ou hydroalcoolique de graines et/ou de calices délipidés deHibiscus sabdariffade la famille des Malvaceae dans le but d’utiliser avantageusement un actif multifonctionnel permettant:
de réduire les surcharges adipeuses localisées,
de stimuler les défenses antimicrobiennes naturelles de la peau, son microbiote et son microbiome,
de favoriser sa bonne maturation et sa bonne différenciation de la peau lui permettant d’être plus belle en surface, plus résistante aux méfaits des agressions extérieure et du vieillissement car présentant un effet de barrière de meilleure qualité,
d’activer la réponse globale de la peau face aux stress oxydatifs et de favoriser une meilleure réponse face aux xénobiotiques.
de réduire les surcharges adipeuses localisées,
de stimuler les défenses antimicrobiennes naturelles de la peau, son microbiote et son microbiome,
de favoriser sa bonne maturation et sa bonne différenciation de la peau lui permettant d’être plus belle en surface, plus résistante aux méfaits des agressions extérieure et du vieillissement car présentant un effet de barrière de meilleure qualité,
d’activer la réponse globale de la peau face aux stress oxydatifs et de favoriser une meilleure réponse face aux xénobiotiques.
On entend par xénobiotique les différentes catégories de xénobiotiques que la peau, première barrière de notre organisme, est capable de détoxifier et qui comprennent l’alcool, les médicaments, les drogues et les perturbateurs endocriniens ainsi qu’un très grand nombre de produits contenus dans l’atmosphère ou entrant en contact avec la surface cutanée comme les pesticides, les matériaux de construction ou les articles d’ameublement et autres polluants industriels.
On sait que de plus en plus de cosmétiques essayent de revendiquer un mode d’action plus bio, plus écologique, plus naturel avec la nouvelle norme ISO 16128, vegan et même une slow cosmétique (écologique, saine, intelligente et raisonnable) tenant compte des besoins réels de la peau, préconisant l’utilisation de moins d’ingrédients (skinimalisme) pour faire mieux, de frugalité même, des apports positifs pour la peau et des promesses réalistes. Une réponse à cette préoccupation pourrait alors être des extraits végétaux ayant des propriétés multiples, multifonctionnelles et complémentaires se suffisant à eux seuls et ne nécessitant souvent donc pas l’ajout d’autres substances actives dans les compositions cosmétiques.
Dans le cadre de l’invention, on appellera actif multifonctionnel ou extrait multifonctionnel un actif ou un extrait ayant plusieurs efficacités différentes et complémentaires et ce à plusieurs niveaux de la structure cutanée dans le but de permettre de réaliser une composition cosmétique avec le moins d’extrait et d’actif possible.
Beaucoup pensent que la surface de la peau sur laquelle sont appliqués les cosmétiques est une structure morte et inerte. En fait il n’en est rien et l’épiderme, y compris sa couche cornée de surface, est le lieu d’intenses réactions biochimiques où activateurs, inhibiteurs et inhibiteurs d’inhibiteur assurent un équilibre et une homéostasie variant avec le moment de la journée, les saisons et l’âge. Chacune des cellules épidermiques et particulièrement les kératinocytes qui sont les cellules prépondérantes de l’épiderme, présente un métabolisme complexe et fin menant à une maturation et une différenciation cellulaire sous le contrôle de l’expression des 36000 gènes et variants qui les composent.
Il est possible de comparer l’épiderme situé au-dessus du derme, et d’origine ectodermique comme le cerveau, à un tapis roulant avec des kératinocytes se divisant par prolifération cellulaire uniquement à sa base puis migrant vers la surface en se différenciant progressivement pour donner les cornéocytes tout en surface formant la couche cornée avant de normalement desquamer imperceptiblement. Lors de cette migration, une barrière s’installe protégeant la peau et le reste de l’organisme des agressions extérieures et réduisant la perte insensible en eau.
Il est possible de comparer l’épiderme situé au-dessus du derme, et d’origine ectodermique comme le cerveau, à un tapis roulant avec des kératinocytes se divisant par prolifération cellulaire uniquement à sa base puis migrant vers la surface en se différenciant progressivement pour donner les cornéocytes tout en surface formant la couche cornée avant de normalement desquamer imperceptiblement. Lors de cette migration, une barrière s’installe protégeant la peau et le reste de l’organisme des agressions extérieures et réduisant la perte insensible en eau.
Il est alors facile d’imaginer l’intérêt de pouvoir sélectionner et tester des substances et des extraits végétaux sur l’expression de l’ensemble de ces gènes afin de pouvoir sélectionner les extraits les plus intéressants et mettre au point les méthodes d’extraction et de production les plus efficaces.
Parmi toutes les plantes étudiées l’Hibiscus sabdariffade la famille des Malvaceae a des propriétés nombreuses et connues lorsque utilisé dans son ensemble et particulièrement son huile. En effet l'huile de cette plante est traditionnellement utilisée en Afrique de l’Ouest pour redonner douceur et élasticité à la peau, soulager et apaiser les brûlures superficielles et est souvent appliquée sur les cheveux cassants, secs, ternes ou fourchus pour leurs redonner éclat et beauté.
Cette huile est produite à partir de graines et/ou de calices l’Hibiscus sabdariffade la famille des Malvaceae et de ses différentes variétés.
Toutefois, l’utilisation d’huile n’est pas toujours appréciée par les utilisateurs en cosmétique. Aussi, est-il besoin de fournir d’autres formes captives non lipidiques deHibiscus sabdariffadans un but thérapeutique mais aussi cosmétique.
Un des buts de l’invention est de fournir une composition non grasse.
Un autre but de l’invention est de proposer l’utilisation d’une telle composition dans le cadre d’une application cosmétique.
Dans le cadre de l’invention, on entendra par extrait de graines et/ou de calices un extrait réalisé à partir de graines et/ou de calices ou bien un extrait réalisé soit à partir exclusivement de graines soit encore un extrait réalisé exclusivement à partir de calices. Les calices des variétés d’Hibiscus sabdariffa,dont il est question ici,correspondent à l’ensemble des sépales qui deviennent charnus, phénomène remarquable du point de vue botanique, après que la fleur et des graines se soient séparées de la plante. Il faut donc bien faire la différence entre calices et fleurs qui ne sont pas équivalente du point de vue botanique.
C’est en partant de la constatation que très souvent les végétaux, et particulièrement leurs graines, contiennent une partie non négligeable de lipides qui gênent la libération de substances d’intérêt et obligent à utiliser des solvants complexes autres que la simple eau, les solvants hydroéthanoliques ou la glycérine végétale que l’idée est venue de séparer, au préalable, ces lipides du reste de la plante à extraire afin de faciliter l’extraction des composants non lipidiques de ces graines et/ou de calices. L’extraction est plus facile, les rendements sont améliorés et certains composés sont présents alors qu’ils ne le sont pas du tout si cette délipidation préalable n’a pas été entreprise.
C’est en étudiant les propriétés de différents extraits hydrosoluble de graines deHibiscus sabdariffaaprès délipidation obtenue après un ou plusieurs pressages à froid successifs, sur l’expression des gènes de kératinocytes humains normaux que le demandeur a découvert de manière tout à fait inattendue que ces extraits deHibiscus sabdariffaavaient de nombreuses propriétés intéressant la peau saine et donc la cosmétique particulièrement celle se souciant de formules minimalistes utilisant des actifs multifonctionnels puisqu’un extrait donné pouvait avoir de nombreuses propriétés se complétant et réduisant l’emploi de nombreuses substances actives et différentes.
L’invention concerne donc une composition cosmétique comprenant un extrait hydrosoluble de graines et/ou de calices délipidés deHibiscus sabdariffade la famille des Malvaceae et un véhicule cosmétiquement acceptable.
Dans le cadre de l’invention on entend par extrait hydrosoluble de plante ou partie de plante comme des graines, le résultat de toute extraction dans un solvant soluble dans l’eau comme par exemple l’eau elle-même, une solution hydroéthanolique ou de la glycérine et pouvant à la fois servir de véhicule cosmétiquement acceptable et donc formulable directement afin de produire une composition cosmétique finale. Ces extraits pouvant être formulés directement aux alentours de 0,1% à 5% ou bien stockés à l’état sec après évaporation de l’eau ou de l’eau plus éthanol ou bien encore en l’état dans le cas d’un solvant glycériné.
Également ces compositions cosmétiques sont caractérisées en ce que ledit extrait hydrosoluble de graines et/ou de calices délipidés deHibiscus sabdariffade la famille des Malvaceae est un extrait provenant des graines d’une ou plusieurs variétés d’Hibiscus choisies dans le groupe formé parHibiscus sabdariffavariété à fleur blanche,Hibiscus sabdariffavariété vimto,Hibiscus sabdariffavariété koor rouge,Hibiscus sabdariffavariété CTL 92,Hibiscus sabdariffavariété thaï,Hibiscus sabdariffavariété sabdariffa,Hibiscus sabdariffavariété altissima.
Dans le cadre de l’invention et pour en faciliter la rédaction, on entendra donc parHibiscus sabdariffade la famille des Malvaceae n’importe laquelle de ses différentes variétés à savoirHibiscus sabdariffavariété à fleur blanche,Hibiscus sabdariffavariété vimto,Hibiscus sabdariffavariété koor rouge, Hibiscus sabdariffavariété CTL 92,Hibiscus sabdariffavariété thaï,Hibiscus sabdariffavariété sabdariffa,Hibiscus sabdariffavariété altissima.
Par conséquent une composition cosmétique ou pharmaceutique destinée à être mise en contact avec les diverses parties superficielles du corps humain (épiderme, systèmes pileux et capillaire, ongles, lèvres et organes génitaux externes) ou avec les dents et les muqueuses buccales, en vue, exclusivement ou principalement, de les nettoyer, de les parfumer, d'en modifier l'aspect, de les protéger, de les maintenir en bon état ou de corriger les odeurs corporelles et caractérisée en ce qu’elle comprend au moins un extrait hydrosoluble de graines et/ou de calices délipidés deHibiscus sabdariffade la famille des Malvaceae dans le but d’utiliser avantageusement un actif multifonctionnel permettant à la fois:
de réduire les surcharges adipeuses localisées,
de stimuler les défenses antimicrobiennes naturelles de la peau son microbiote et son microbiome,
de favoriser sa bonne maturation et sa bonne différenciation de la peau lui permettant d’être plus belle en surface, plus résistante aux méfaits des agressions extérieure et du vieillissement car présentant un effet de barrière de meilleure qualité,
d’activer la réponse globale de la peau face aux stress oxydatifs et de favoriser une meilleure réponse face aux xénobiotiques.
de réduire les surcharges adipeuses localisées,
de stimuler les défenses antimicrobiennes naturelles de la peau son microbiote et son microbiome,
de favoriser sa bonne maturation et sa bonne différenciation de la peau lui permettant d’être plus belle en surface, plus résistante aux méfaits des agressions extérieure et du vieillissement car présentant un effet de barrière de meilleure qualité,
d’activer la réponse globale de la peau face aux stress oxydatifs et de favoriser une meilleure réponse face aux xénobiotiques.
Le demandeur a en effet testé plusieurs extraits aqueux avec ou sans enzyme, ou hydroéthanolique deHibiscus sabdariffasur le génome complet de kératinocytes humains normaux et particulièrement par analyse d’expression de gènes à l’échelle du génome entier (36000 gènes transcrits et variants) de kératinocytes épidermiques normaux humains suite à l’extraction des Acides RiboNucléiques (ARN) totaux transcrits suivi d’une hybridation sur micropuces à Acide DésoxyRibonucléique (ADN). Le principe de la puce à ADN repose sur la propriété que possède l'ADN dénaturé (simple brin) de reformer spontanément sa double hélice lorsqu'il est en présence d'un brin complémentaire (réaction d'hybridation). Puisqu'il est possible de fixer jusqu'à un million de sondes sur une biopuce, les puces à ADN constituent ainsi une approche massive que l’inventeur a utilisée puisqu'elles permettent en une seule expérience d'avoir une estimation sur l'expression de plusieurs dizaines de milliers de gènes.
De manière avantageuse, ledit véhicule pharmaceutiquement acceptable est également celui utilisé comme solvant lors de l’extraction et est choisi parmi l’eau avec ou sans enzyme, une solution hydroéthanolique ou un mélange eau/glycérol.
Compositions cosmétiques selon les revendications 1 et 2 caractérisées en ce que l’extrait hydrosoluble de graines et/ou de calices délipidés deHibiscus sabdariffade la famille des Malvaceae est un extrait provenant des graines et/ou des calices d’une ou plusieurs variétés d’Hibiscus choisies dans le groupe formé parHibiscus sabdariffavariété à fleur blanche,Hibiscus sabdariffavariété vimto,Hibiscus sabdariffavariété koor rouge,Hibiscus sabdariffavariété CTL 92,Hibiscus sabdariffavariété thaï,Hibiscus sabdariffavariété sabdariffa,Hibiscus sabdariffavariété altissima.
De manière également avantageuse, ledit extrait hydrosoluble de graines et/ou de calices délipidés deHibiscus sabdariffade la famille des Malvaceae est réalisé à partir de graines et/ou de calices au préalable délipidés par pressage à froid, de une à trois fois successivement, afin d’obtenir une teneur de 10% ou moins en masse de lipides par rapport à la masse totale des graines et/ou des calices pour qu’au final l’extrait comprenne moins de 1% en masse de lipides par rapport à la masse totale de l’extrait, notamment de 0% à 1% en masse de lipides par rapport à la masse totale de l’extrait.
Dans le cadre de l’invention, on entend par « de 0% à 1% en masse de lipides » le fait que l’extrait peut comprendre 0, 0.25, 0.5, 0.75,1% en masse de lipide par rapport à la masse de l’extrait.
Également dans le cadre de l’invention, ledit extrait de graines et/ou de calices délipidés deHibiscus sabdariffade la famille des Malvaceae a été rendu hydrosoluble par solubilisation dans un solvant choisi parmi l’eau avec ou sans enzyme, une solution hydroéthanolique ou un mélange eau/glycérol avant de pouvoir être utilisé en l’état dans la composition ou stocké après séchage complet avant d’être resolubilisé dans ces mêmes solvants cosmétiquement acceptables avant usage.
De manière avantageuse, la composition cosmétique est caractérisée en ce que ledit extrait hydrosoluble de graines et/ou de calices délipidés deHibiscus sabdariffade la famille des Malvaceae représente de 0,1% à 5% en masse par rapport à la masse totale de la composition.
Dans le cadre de l’invention, on entend par « de 0,1% à 5% en masse » le fait que la composition peut comprendre 0,1, 0,2, 0,3, 0,4, 0,5, 0,6, 0,7, 0,8, 0,9, 1, 1,1, 1,2, 1,3, 1,4, 1,5, 1,6, 1,7, 1,8, 1,9, 2, 2,1, 2,2, 2,3, 2,4, 2,5, 2,6, 2,7, 2,8, 2,9, 3, 3,1, 3,2, 3,3, 3,4, 3,5, 3,6, 3,7, 3,8, 3,9, 4, 4,1, 4,2, 4,3, 4,4, 4,5, 4,6, 4,7, 4,8, 4,9 ou 5% en masse d’extrait délipidé par rapport à la masse totale de la composition.
Les effets de différents extraits végétaux ont été recherchés ainsi sur l’expression de gènes dans des Kératinocytes Epidermiques Humains Normaux (NHEK). Plus précisément, une analyse transcriptomique complète (full transcriptome), c’est-à-dire l’ensemble des gènes exprimés à un instant donné, a été réalisée en utilisant la plateforme Affymetrix GeneAtlas et la puce « full transcriptome humain » U219 contenant 36 000 gènes dits transcrits et variants.
Cette méthode décrite plus en détail dans les exemples ci-dessous permet de choisir en fonction des gènes stimulés, c’est-à-dire dont l’expression est significativement augmentée, ou bien inhibés, c’est à dire dont l’expression est significativement réduite, les plantes les plus intéressantes pour un usage cosmétique et qui a permis de montrer l’intérêt deHibiscus sabdariffade la famille des Malvaceae parmi d’autres plantes ainsi testées.
Ensuite en prenant le gène ou quelques gènes les plus intéressants, cette méthode permet de sélectionner le ou les protocoles optimums afin d’obtenir les meilleurs résultats possibles. Ici pour leHibiscus sabdariffade la famille des Malvaceae le gène ANGPTL4 pour ANGgioPoïéTine Like 4 intervenant dans le métabolisme des lipides comme inhibiteur de la lipoprotéine lipase et de la lipase pancréatique.
La lipoprotéine lipase est une enzyme clé de la pénétration des lipides dans les adipocytes du tissu adipeux et est responsable des surcharges adipeuses localisées que beaucoup de cosmétiques cherchent à réduire par application topique.
Ce gène a été utilisé pour déterminer que c’était les graines et/ou les calices délipidés extraits dans un solvant simple qui permettait d’obtenir une augmentation d’expression de ce gène de plus de 1212 % au contact des kératinocytes humains normaux (NHEK). L’expression relative de ce gène ANGPTL4 dans les kératinocytes contrôles avait une intensité de signal de 30,25 tandis que dans les kératinocytes mis en contact avec l’extrait hydrosoluble deHibiscus sabdariffaainsi sélectionné avait un signal d’intensité de 396,90 soit une stimulation de l’expression de ce gène appelée fold change ou taux de modification, dans les conditions expérimentales, de 13,12 fois.
La lipoprotéine lipase est une enzyme clé de la pénétration des lipides dans les adipocytes du tissu adipeux et est responsable des surcharges adipeuses localisées que beaucoup de cosmétiques cherchent à réduire par application topique.
Ce gène a été utilisé pour déterminer que c’était les graines et/ou les calices délipidés extraits dans un solvant simple qui permettait d’obtenir une augmentation d’expression de ce gène de plus de 1212 % au contact des kératinocytes humains normaux (NHEK). L’expression relative de ce gène ANGPTL4 dans les kératinocytes contrôles avait une intensité de signal de 30,25 tandis que dans les kératinocytes mis en contact avec l’extrait hydrosoluble deHibiscus sabdariffaainsi sélectionné avait un signal d’intensité de 396,90 soit une stimulation de l’expression de ce gène appelée fold change ou taux de modification, dans les conditions expérimentales, de 13,12 fois.
Ce qui a permis de déterminer un optimum lorsque l’extraction se faisait dans des solvants simples comme l’eau, des mélanges hydroéthanoliques dont l’éthanol est ensuite recyclé après évaporation complète ou des mélanges d’eau et glycérine, dont les propriétés hydratantes pour la peau ne sont plus à démontrer.
Ces tests permettent de montrer l’intérêt d’une composition cosmétique caractérisée en ce qu’elle est constituée d’un extrait hydrosoluble de graines et/ou de calices délipidés deHibiscus sabdariffade la famille des Malvaceae réalisé par séparation mécanique des graines des fruits qui sont ensuite moulues puis pressées à froid plusieurs fois successivement, après ou sans torréfaction préalable, suivi encore d’un séchage en étuve de 1 à 5 heures et à une température comprise entre 50°C et 60°C afin d’éviter la prolifération de microorganismes, puis d’une extraction ou d’une macération dans de l’eau additionnée ou non d’enzymes, une solution hydroéthanolique ou d’un mélange eau/glycérol ou encore d’une macération dans du glycérol seul et pouvant ensuite être filtré ou centrifugé et être conservé et utilisé directement dans leur solvant respectif ou bien à nouveau séché ou encore lyophilisé ou même zéodraté, ayant pour effet de permettre, à l’aide d’un seul extrait multifonctionnel :
de réduire les surcharges adipeuses localisées,
de stimuler les défenses antimicrobiennes naturelles de la peau, son microbiote et son microbiome,
de favoriser sa bonne maturation et sa bonne différenciation de la peau lui permettant d’être plus belle en surface, plus résistante aux méfaits des agressions extérieure et du vieillissement car présentant un effet de barrière de meilleure qualité,
d’activer la réponse globale de la peau face aux stress oxydatifs et de favoriser une meilleure réponse face aux xénobiotiques.
Ces tests permettent de montrer l’intérêt d’une composition cosmétique caractérisée en ce qu’elle est constituée d’un extrait hydrosoluble de graines et/ou de calices délipidés deHibiscus sabdariffade la famille des Malvaceae réalisé par séparation mécanique des graines des fruits qui sont ensuite moulues puis pressées à froid plusieurs fois successivement, après ou sans torréfaction préalable, suivi encore d’un séchage en étuve de 1 à 5 heures et à une température comprise entre 50°C et 60°C afin d’éviter la prolifération de microorganismes, puis d’une extraction ou d’une macération dans de l’eau additionnée ou non d’enzymes, une solution hydroéthanolique ou d’un mélange eau/glycérol ou encore d’une macération dans du glycérol seul et pouvant ensuite être filtré ou centrifugé et être conservé et utilisé directement dans leur solvant respectif ou bien à nouveau séché ou encore lyophilisé ou même zéodraté, ayant pour effet de permettre, à l’aide d’un seul extrait multifonctionnel :
de réduire les surcharges adipeuses localisées,
de stimuler les défenses antimicrobiennes naturelles de la peau, son microbiote et son microbiome,
de favoriser sa bonne maturation et sa bonne différenciation de la peau lui permettant d’être plus belle en surface, plus résistante aux méfaits des agressions extérieure et du vieillissement car présentant un effet de barrière de meilleure qualité,
d’activer la réponse globale de la peau face aux stress oxydatifs et de favoriser une meilleure réponse face aux xénobiotiques.
Une manière selon l’invention de réduire les surcharges pondérales localisées, encore appelée cellulite, à l’aide d’un seul extrait multifonctionnel est d’activer l’expression des gènes de l’Angiopoïétine (ANGPTL4), de la Périlipine 2 (PLIN2), du Commutateur GO/G1 (GOS2), de la Carnitine palmitoyl transférase (CPT1A) ;
En effet ANGPTL4 inhibe la lipoprotéine lipase et la lipase pancréatique, ces dernières favorisant le stockage des acides gras dans les adipocytes à l’origine de la dite cellulite
PLIN2, périlipine ou adipophiline assure la maintenance du tissu adipeux.
GOS2 rajoute un effet circadien au stockage des graisses et est très présent dans le tissu adipeux sous-cutané.
Et CPT1A favorise la dégradation des lipides dans les mitochondries.
En effet ANGPTL4 inhibe la lipoprotéine lipase et la lipase pancréatique, ces dernières favorisant le stockage des acides gras dans les adipocytes à l’origine de la dite cellulite
PLIN2, périlipine ou adipophiline assure la maintenance du tissu adipeux.
GOS2 rajoute un effet circadien au stockage des graisses et est très présent dans le tissu adipeux sous-cutané.
Et CPT1A favorise la dégradation des lipides dans les mitochondries.
Selon l’invention une manière de stimuler les défenses antimicrobiennes naturelles de la peau, son microbiote et son microbiome, à l’aide d’un seul extrait multifonctionnel, est d’activer l’expression des peptides antimicrobiens et de leurs gènes (S100A7, 8 9) et celui de la Défensine B1 (DEFB1).En effet les protéine S100 (S100A7, S100A8 et S100A9) ainsi que DEFB1 sont des protéines et des peptides antimicrobiens, aussi bien bactériens que fongiques, assurant la défense immunitaire innée de la peau et régulant efficacement le microbiote et son microbiome cutanés.
Selon l’invention encore, une manière de favoriser, à l’aide d’un seul extrait multifonctionnel, la bonne maturation et la bonne différenciation de la peau, lui permettant d’être plus belle en surface, plus résistante aux méfaits des agressions extérieure et du vieillissement car présentant un effet de barrière de meilleure qualité est de stimuler l’expression des gènes de la Claudine 4 (CLDN4), de l’Occludine (OCLN), de la Small Proline Rich Protéines 2A (SPRR2A), de la Scielline (SCEL), de l’Epiréguline (EREG), des SerpineB1 et B2 (SERPIN B1 et B2) et de réduire l’expression des gènes des Métalloprotéinases matricielles 1 et 10 (MMP3, MMP10)et de la Chimiokine 14 (CXCL14).
En effet CLDNA code pour la Claudine4 un composant essentiel des jonctions serrées de l’épiderme profond et qui joue un rôle important dans l’effet barrière de la peau et le contrôle de sa perte insensible en eau.
De même que OCLN qui code pour l’Occludine localisée également dans ces jonctions serrées dont elle assure à leurs formations, le maintien et les fonctions.
Les PPRR2, EREG, les Serpines G1 et G2 et SCEL, participent, elles, à la différenciation terminale de l’épiderme et permettent à la couche cornée et aux enveloppes cornées de finaliser globalement leur effet barrière et leur protection face aux agressions de tout type.
La réduction des expressions des Métaloprotéinases matricielles comme les MMP3 et MMP 10 détruisant dans certaines situations la matrice extracellulaire et de la CXCL14, chimiokine pro-inflammatoire contribue à maintenir cet effet barrière fonctionnel en association avec l’effet antiprotéinases des Serpines B1 et B2 activées par ailleurs ainsi que décrit ci-dessus.
En effet CLDNA code pour la Claudine4 un composant essentiel des jonctions serrées de l’épiderme profond et qui joue un rôle important dans l’effet barrière de la peau et le contrôle de sa perte insensible en eau.
De même que OCLN qui code pour l’Occludine localisée également dans ces jonctions serrées dont elle assure à leurs formations, le maintien et les fonctions.
Les PPRR2, EREG, les Serpines G1 et G2 et SCEL, participent, elles, à la différenciation terminale de l’épiderme et permettent à la couche cornée et aux enveloppes cornées de finaliser globalement leur effet barrière et leur protection face aux agressions de tout type.
La réduction des expressions des Métaloprotéinases matricielles comme les MMP3 et MMP 10 détruisant dans certaines situations la matrice extracellulaire et de la CXCL14, chimiokine pro-inflammatoire contribue à maintenir cet effet barrière fonctionnel en association avec l’effet antiprotéinases des Serpines B1 et B2 activées par ailleurs ainsi que décrit ci-dessus.
Une manière toujours selon l’invention d’activer la réponse globale de la peau face aux stress oxydatifs et de lui permettre une meilleure réponse face aux xénobiotiques, à l’aide d’un seul extrait multifonctionnel, est d’activer la voie de signalisation dite du Nrf2 qui lorsqu’il est activé joue un rôle cytoprotecteur face aux stress oxydatifs et provenant de certaines expositions aux xénobiotiques.
Cette voie de signalisation cytoprotectrice est particulièrement activées par stimulation de l’expression des gènes du cytochrome P450 (CYP1B1), de Aldo-kétoréductase 1 AKR1C1, de la superoxyde dismutase 2 (SOD2) et de l’Insulin like growth factor binding protein 3 (IGFBP3) jouant ensemble un rôle cytoprotecteur.
Cette voie de signalisation cytoprotectrice est particulièrement activées par stimulation de l’expression des gènes du cytochrome P450 (CYP1B1), de Aldo-kétoréductase 1 AKR1C1, de la superoxyde dismutase 2 (SOD2) et de l’Insulin like growth factor binding protein 3 (IGFBP3) jouant ensemble un rôle cytoprotecteur.
Selon l’invention ledit extrait hydrosoluble de graines et/ou de calices délipidés deHibiscus sabdariffade la famille des Malvaceae réduit fortement l’expression du gène WNT4 qui inhibe la repousse du poil et en ferait un extrait favorable à la repousse lors des débuts de calvitie.
L’invention concerne également un extrait hydrosoluble de graines et/ou de calices délipidés deHibiscus sabdariffade la famille des Malvaceae caractérisé en ce qu’il comprend de l’eau avec ou sans enzyme, une solution hydroéthanolique ou un mélange eau/glycérol et qu’il est préparé à partir de 10% en poids de graines et/ou de calices délipidés puis séchés.
Ce qui permet d’obtenir un extrait hydrosoluble de graines et/ou de calices délipidés deHibiscus sabdariffade la famille des Malvaceae caractérisé en ce qu’il est destiné à être appliqué sur une peau saine pour renforcer et promouvoir d’une part la réduction des surcharges adipeuses localisées et d’autre part de :
stimuler les défenses antimicrobiennes naturelles de la peau, son microbiote et son microbiome,
favoriser sa bonne maturation et sa bonne différenciation de la peau lui permettant d’être plus belle en surface, plus résistante aux méfaits des agressions extérieure et du vieillissement car présentant un effet de barrière de meilleure qualité,
d’activer la réponse globale de la peau face aux stress oxydatifs et de favoriser une meilleure réponse face aux xénobiotiques.
stimuler les défenses antimicrobiennes naturelles de la peau, son microbiote et son microbiome,
favoriser sa bonne maturation et sa bonne différenciation de la peau lui permettant d’être plus belle en surface, plus résistante aux méfaits des agressions extérieure et du vieillissement car présentant un effet de barrière de meilleure qualité,
d’activer la réponse globale de la peau face aux stress oxydatifs et de favoriser une meilleure réponse face aux xénobiotiques.
Ou encore, un extrait hydrosoluble de graines et/ou de calices délipidés deHibiscus sabdariffade la famille des Malvaceae pour le traitement ou la prévention des effets négatifs provoqués par les xénobiotiques, molécules étrangères à l’organisme nécessitant souvent leur détoxification, le stress oxydatif et cellulaire, les microorganismes leurs microbiotes et leur microbiome, les surcharge adipeuses localisées, les radicaux libres oxygénés et le ralentissement de sa bonne maturation et de sa bonne différenciation kératinocytaire, le tout liés à une sous-expression de l’Angiopoïétine (ANGPTL4), de la Périlipine 2 (PLIN2), du Commutateur GO/G1 (GOS2), de la Carnitine palmitoyl transférase (CPT1A), des peptides antimicrobiens (S100A7, 8 et 9) de la DéfensineB1 (DEFB1), de la Claudine 4 (CLDN4), de l’Occludine (OCLN), de la Small Proline Rich Protéines 2A (SPRR2A), de la scielline (SCEL), de l’Epiréguline (EREG), des SerpineB1 et B2 (SERPIN B1 et B2), du cytochrome P450 (CYP1B1), de Aldo-kétoréductase 1 AKR1C1, de la superoxyde dismutase 2 (SOD2) et de l’Insulin like growth factor binding protein 3 (IGFBP3) ou bien encore, à l’opposé, dans le cadre de la sur-expression des gènes favorisant les problèmes de peau, les début de calvitie, l’hyperprolifération cellulaire suite à une irradiation UVs ou son inflammation, telles que les Métalloprotéinases matricielles 1 et 10 (MMP3, MMP10), la Chimiokine 14 (CXCL14) et la Wingless type 4 (WNT4).
Avantageusement, l’invention concerne l’utilisation cosmétique non thérapeutique d’une composition, pour une application topique sur une peau saine dans le but d’utiliser avantageusement un extrait multifonctionnel permettant à la fois de réduire les surcharges adipeuses localisées, de stimuler ses défenses antimicrobiennes naturelles, son microbiote et son microbiome, de favoriser sa bonne maturation et sa bonne différenciation lui permettant ainsi d’être plus belle en surface, plus résistante aux méfaits des agressions extérieures et du vieillissement car présentant un effet de barrière de meilleure qualité, d’activer la réponse globale de la peau face aux stress oxydatifs et de favoriser une meilleure réponse face aux xénobiotiques.
Pour un usage cosmétique on voit alors l’intérêt de composition comprenant un extrait hydrosoluble de graines et/ou de calices délipidés deHibiscus sabdariffade la famille des Malvaceae caractérisée en ce que la composition est sous la forme d’une émulsion huile dans eau (H/E) ou eau dans huile (E/H), d’émulsion multiple (H/E/H, E/H/E), de microémulsion, d’émulsion à phase gémellaires, d’émulsion PIT, de nano-émulsion, de pseudoémulsion, de gel aqueux, de gel gras, de gel hydroalcoolique, de suspension, de gel ou d’émulsion lyophilisée ou d’une des formes précédentes contenant de microcapsules , des nanocapsules, des liposomes, des éthosomes et pouvant se présenter en crèmes, sérums, liquides, pâtes, lotions, émulsions, gels, solides, poudres, masques, sticks, sprays, aérosols.
Ainsi que de composition comprenant un extrait hydrosoluble de graines et/ou de calices délipidés deHibiscus sabdariffade la famille des Malvaceae caractérisée en ce qu’elle est sous la forme d’un démaquillant micellaire biphase, d’un gel moussant, d’une lotion gelée, d’un exfoliant, d’une crème hydratante, d’un sérum hydratant, d’un sérum améliorant l’aspect des rides, d’un lait corps hydratant, d’un masque régénérant, d’une crème régénérante, d’une crème pour le corps amincissante, d’une crème anti-âge, d’un sérum régénérant, d’un baume, d’une brume, d’un soin yeux, d’un concentré, ou d’un masque détoxifiant.
Méthode de soin cosmétique de la peau saine pour utiliser avantageusement un actif multifonctionnel permettant à la fois, de réduire les surcharges adipeuses localisées, de stimuler les défenses antimicrobiennes naturelles de la peau, son microbiote et son microbiome, de favoriser sa bonne maturation et sa bonne différenciation de la peau lui permettant d’être plus belle en surface, plus résistante aux méfaits des agressions extérieure et du vieillissement car présentant un effet de barrière de meilleure qualité, d’activer la réponse globale de la peau face aux stress oxydatifs et de favoriser une meilleure réponse face aux xénobiotiques comprenant l’administration par voie topique d’une composition cosmétique d’un extrait hydrosoluble de graines et/ou de calices délipidés deHibiscus sabdariffaoptimisée par l’utilisation de l’analyse de l’expression du génome entier (full génome) de kératinocytes humains en culture (NHEK) afin d’en déterminer l’ensemble des propriétés ainsi que l’optimisation de leurs préparations, l’association d’enzymes ou non lors des étapes d’extraction ou de macération, l’intérêt ou non d’une torréfaction préalable, le % de graines et/ou de calices délipidés et séchés ou la nature du séchage final et caractérisée aussi bien par augmentation de l’expression de certains gènes d’intérêts que par diminution de l’expression d’autres gènes d’intérêts.
Des exemples sont donnés ensuite sans qu’ils soient limitatifs dans le but d’illustrer l’invention avec deux situations d’extraction différentes la première dans l’exemple 1 et 2 avec juste de l’eau comme solvant et la seconde dans l’exemple 3 et 4 où 5% d’enzymes ont été rajoutées à l’eau servant de solvant.
Exemple 1. Obtention des extraits hydrosolubles délipidés de graines et/ou de calices de Hibiscus sabdariffa dans un solvant eau pure.
Les extraits de graines et/ou de calices délipidés deHibiscus sabdariffade la famille des Malvaceae sont réalisés par séparation mécanique des graines à partir des fruits suivi par un séchage de 1 jour minimum puis ensuite par un ou plusieurs pressages à froid de ces graines, après ou sans torréfaction préalable, suivi d’un séchage en étuve de 1 à 5 heures et à une température comprise entre 50°C et 60°C afin d’éviter la prolifération de microorganismes, puis d’une extraction ou d’une macération dans de l’eau ou bien à nouveau séchés ou encore lyophilisés ou même zéodratés.
Il comprend donc de l’eau pure et est préparé à partir de 10% en poids de graines et/ou de calices délipidés puis séchés.
Ces extraits peuvent être testés directement ou bien être séchés, déshydratés, lyophilisés ou zéodratés avant les tests. Dans ces derniers cas ils sont réhydratés ou dilués avec de l’eau purifiée jouant le rôle de solvant.
Nous appellerons EHS (pour Extrait de Hibiscus Sabdariffa) les extraits obtenus et utilisés dans les exemples suivants.
Les extraits de graines et/ou de calices délipidés deHibiscus sabdariffade la famille des Malvaceae sont réalisés par séparation mécanique des graines à partir des fruits suivi par un séchage de 1 jour minimum puis ensuite par un ou plusieurs pressages à froid de ces graines, après ou sans torréfaction préalable, suivi d’un séchage en étuve de 1 à 5 heures et à une température comprise entre 50°C et 60°C afin d’éviter la prolifération de microorganismes, puis d’une extraction ou d’une macération dans de l’eau ou bien à nouveau séchés ou encore lyophilisés ou même zéodratés.
Il comprend donc de l’eau pure et est préparé à partir de 10% en poids de graines et/ou de calices délipidés puis séchés.
Ces extraits peuvent être testés directement ou bien être séchés, déshydratés, lyophilisés ou zéodratés avant les tests. Dans ces derniers cas ils sont réhydratés ou dilués avec de l’eau purifiée jouant le rôle de solvant.
Nous appellerons EHS (pour Extrait de Hibiscus Sabdariffa) les extraits obtenus et utilisés dans les exemples suivants.
Exemple 2.Les tests et exemples de résultats.
Le modèle biologique :
Kératinocytes épidermiques humains normaux (NHEK) au troisième passage, cultivés à 37°C et 5% de CO2. Milieu de culture complémenté avec EGF à 0,25ng/ml et EP à 25ug plus gentamycine 25ug. Le milieu d’essai est lui constitué de kératinocyte SFM avec uniquement de la gentamycine 25 ug/ml
Les conditions expérimentales :
Les kératinocytes ont été ensemencés en plaque 24 puits et cultivés en milieu de culture pendant 24 heures puis en milieu d’essai pendant 24 heures supplémentaires. Le milieu a ensuite été remplacé par du milieu d’essai contenant ou non (témoin) les composés à l’essai puis les cellules ont été incubées pendant 24 heures. Toutes les conditions expérimentales ont été réalisées en triplicate (n=3).
A la fin de l’incubation, les surnageants de culture ont été éliminés et les tapis cellulaires ont été rincés avec une solution de PBS. La plaque a été immédiatement congelée à sec et à -80°C.
Avant l’extraction, les réplicats de culture ont été poolés. L’ARN total de chaque échantillon a été extrait à l’aide de TriPure Isolation Reagent® selon le protocole préconisé par le fournisseur.
La quantité et la qualité des ARN ont été évaluées par électrophorèse capillaire (Bioanalyzer 2100, Agilent).
La synthèse des ARN anti-sens (ARNa) biotinylés a été réalisée à l’aide du kit « GeneChip 3’IVT Express » (Affymetrix®).
Pour chaque échantillon d’ARNa biotinylé, un profil électrophorétique a été réalisé (Bioanalyzer 2100, Agilent) avant et après fragmentation.
L’hybridation des ARNa marqués et fragmentés sur la puce Affymetrix® U219 chip (36 000 transcripts and variants) a été réalisée sur la station d’hybridationGeneAtlas™ fluidics Affymetrix ® hybridization stationpendant 20 heures à 45°C.
Les puces U219 ont ensuite été scannées à l’aide du GeneAtlas™ Imaging station (Affymetrix®- resolution 2 µm) afin de générer les données d’intensité de signal comme montré dans les exemples de résultat ci-dessous.
Les données d’intensité de signal ont été normalisées à l’aide du logiciel Expression Console (Affymetrix®), à partir de l’algorithme RMA. Un contrôle qualité du marquage ainsi que de l’hybridation a ensuite été réalisé.
Les contrôles qualité des étapes d’hybridation et de marquage ont permis de valider le processus expérimental
Une fois normalisées avec le logiciel Expression Console, les données ont été transférées et mises en forme dans un fichier Microsoft Excel.
Des calculs ainsi que des filtres ont été ajoutés dans ces fichiers afin de trier les données et de faciliter leur exploitation.
Les seuils de « fold change » ou taux de modification (valeur correspondant au ratio : valeur d’intensité de signal d’une sonde correspondant à l’échantillon traité / valeur d’intensité de signal d’une sonde correspondant au contrôle) ont été définis et appliqués aux données normalisées.
Les abréviations suivantes sont utilisées dans les fichiers d’analyse :
- UR : Upregulated – sur-expression ou stimulation de la sonde ou du gène lorsque le fold change est supérieur à 2,
- DR : Downregulated – sous-expression ou inhibition de la sonde ou du gène lorsque le fold change est inférieur à 0.5.
Chaque fichier d’analyse est constitué :
- De la valeur d’intensité de signal (RE: Relative Expression) correspondant à chacun des échantillons,
- Des calculs de « fold change » ou taux de modification pour chaque comparaison,
- D’informations relatives à chaque gène.
Les filtres insérés dans ces fichiers permettent de sélectionner les gènes significativement modulés.
L’exemple de sondes de gènes correspondants à la variation d’expression de ANGPTL4, CLDN4, PLIN2, S100A7, OCLN, SERPIN B2, IGFBP3, GOS2, EREG, CPT1A, DEFB1, SCEL et de MMP3, CXCL14, WNT4 ainsi obtenue avec cette méthodologie et avec EHS pour l'Extrait de graines et/ou de calices délipidés de Hibiscus Sabdariffa, les nombres indiqués correspondent à l’intensité du signal obtenu pour le témoin et pour l’essai EHS :
Intensité des signaux pour l’Angiopoïétine 4 (ANGPTL4):
- Témoin : 30,65
- EHS : 396,90
- Taux de modification: 13,12
- Régulation : UR
Intensité des signaux pour la Claudine 4 (CLDN4):
- Témoin : 42,57
- EHS : 387,44
- Taux de modification : 9,10
- Régulation : UR
Intensité des signaux pour la Périlipine 2 (PLIN2):
- Témoin : 85,98
- EHS : 475,20
- Taux de modification : 5,53
- Régulation : UR
Intensité des signaux pour la Calcium Binding Protéine A7 (S100A7):
- Témoin : 33,99
- EHS : 133,36
- Taux de modification : 4,17
- Régulation : UR
Intensité des signaux pour l’Occludine (OCLN):
- Témoin : 86,51
- EHS : 320,06
- Taux de modification : 3,70
- Régulation : UR
Intensité des signaux pour la Sérine protéase B2 (Serpine B2):
- Témoin : 417,19
- EHS : 856,55
- Taux de modification : 2.05
- Régulation : UR
Intensité des signaux pour l’Insulin-like Growth Factor Binding Protein 3 (IGFBP3):
- Témoin : 40,00
- EHS : 119,06
- Taux de modification : 2,98
- Régulation : UR
Intensité des signaux pour le Commutateur GO/G1 (GOS2):
- Témoin : 20,00
- EHS : 56,77
- Taux de modification : 2,84
- Régulation : UR
Intensité des signaux pour l’Epiréguline (EREG):
- Témoin : 167,00
- EHS : 451,53
- Taux de modification : 2,70
- Régulation : UR
Intensité des signaux pour la Carnitine palmitoyl transférase (CPT1A):
- Témoin : 351,39
- EHS : 887,17
- Taux de modification : 2,52
- Régulation : UR
Intensité des signaux pour la Défensine (DEFB1):
- Témoin : 42,76
- EHS : 89,76
- Taux de modification : 2,10
- Régulation : UR
Intensité des signaux pour la Scielline (SCEL):
- Témoin : 65,00
- EHS : 118,91
- Taux de modification : 1,83
- Régulation : UR
Intensité des signaux pour la Métalloprotéinase 3, MMP3:
- Témoin : 290,23
- EHS : 37,05
- Taux de modification : 0,13
- Régulation : DR
Intensité des signaux pour la Chimiokine 14 (CXCL14):
- Témoin : 2113,61
- EHS : 356,24
- Taux de modification : 0,17
- Régulation : DR
Intensité des signaux pour de Wingless type 4 (WNT4):
- Témoin : 99,42
- EHS : 27,09
- Taux de modification : 0,27
- Régulation : DR
Le modèle biologique :
Kératinocytes épidermiques humains normaux (NHEK) au troisième passage, cultivés à 37°C et 5% de CO2. Milieu de culture complémenté avec EGF à 0,25ng/ml et EP à 25ug plus gentamycine 25ug. Le milieu d’essai est lui constitué de kératinocyte SFM avec uniquement de la gentamycine 25 ug/ml
Les conditions expérimentales :
Les kératinocytes ont été ensemencés en plaque 24 puits et cultivés en milieu de culture pendant 24 heures puis en milieu d’essai pendant 24 heures supplémentaires. Le milieu a ensuite été remplacé par du milieu d’essai contenant ou non (témoin) les composés à l’essai puis les cellules ont été incubées pendant 24 heures. Toutes les conditions expérimentales ont été réalisées en triplicate (n=3).
A la fin de l’incubation, les surnageants de culture ont été éliminés et les tapis cellulaires ont été rincés avec une solution de PBS. La plaque a été immédiatement congelée à sec et à -80°C.
Avant l’extraction, les réplicats de culture ont été poolés. L’ARN total de chaque échantillon a été extrait à l’aide de TriPure Isolation Reagent® selon le protocole préconisé par le fournisseur.
La quantité et la qualité des ARN ont été évaluées par électrophorèse capillaire (Bioanalyzer 2100, Agilent).
La synthèse des ARN anti-sens (ARNa) biotinylés a été réalisée à l’aide du kit « GeneChip 3’IVT Express » (Affymetrix®).
Pour chaque échantillon d’ARNa biotinylé, un profil électrophorétique a été réalisé (Bioanalyzer 2100, Agilent) avant et après fragmentation.
L’hybridation des ARNa marqués et fragmentés sur la puce Affymetrix® U219 chip (36 000 transcripts and variants) a été réalisée sur la station d’hybridationGeneAtlas™ fluidics Affymetrix ® hybridization stationpendant 20 heures à 45°C.
Les puces U219 ont ensuite été scannées à l’aide du GeneAtlas™ Imaging station (Affymetrix®- resolution 2 µm) afin de générer les données d’intensité de signal comme montré dans les exemples de résultat ci-dessous.
Les données d’intensité de signal ont été normalisées à l’aide du logiciel Expression Console (Affymetrix®), à partir de l’algorithme RMA. Un contrôle qualité du marquage ainsi que de l’hybridation a ensuite été réalisé.
Les contrôles qualité des étapes d’hybridation et de marquage ont permis de valider le processus expérimental
Une fois normalisées avec le logiciel Expression Console, les données ont été transférées et mises en forme dans un fichier Microsoft Excel.
Des calculs ainsi que des filtres ont été ajoutés dans ces fichiers afin de trier les données et de faciliter leur exploitation.
Les seuils de « fold change » ou taux de modification (valeur correspondant au ratio : valeur d’intensité de signal d’une sonde correspondant à l’échantillon traité / valeur d’intensité de signal d’une sonde correspondant au contrôle) ont été définis et appliqués aux données normalisées.
Les abréviations suivantes sont utilisées dans les fichiers d’analyse :
- UR : Upregulated – sur-expression ou stimulation de la sonde ou du gène lorsque le fold change est supérieur à 2,
- DR : Downregulated – sous-expression ou inhibition de la sonde ou du gène lorsque le fold change est inférieur à 0.5.
Chaque fichier d’analyse est constitué :
- De la valeur d’intensité de signal (RE: Relative Expression) correspondant à chacun des échantillons,
- Des calculs de « fold change » ou taux de modification pour chaque comparaison,
- D’informations relatives à chaque gène.
Les filtres insérés dans ces fichiers permettent de sélectionner les gènes significativement modulés.
L’exemple de sondes de gènes correspondants à la variation d’expression de ANGPTL4, CLDN4, PLIN2, S100A7, OCLN, SERPIN B2, IGFBP3, GOS2, EREG, CPT1A, DEFB1, SCEL et de MMP3, CXCL14, WNT4 ainsi obtenue avec cette méthodologie et avec EHS pour l'Extrait de graines et/ou de calices délipidés de Hibiscus Sabdariffa, les nombres indiqués correspondent à l’intensité du signal obtenu pour le témoin et pour l’essai EHS :
Intensité des signaux pour l’Angiopoïétine 4 (ANGPTL4):
- Témoin : 30,65
- EHS : 396,90
- Taux de modification: 13,12
- Régulation : UR
Intensité des signaux pour la Claudine 4 (CLDN4):
- Témoin : 42,57
- EHS : 387,44
- Taux de modification : 9,10
- Régulation : UR
Intensité des signaux pour la Périlipine 2 (PLIN2):
- Témoin : 85,98
- EHS : 475,20
- Taux de modification : 5,53
- Régulation : UR
Intensité des signaux pour la Calcium Binding Protéine A7 (S100A7):
- Témoin : 33,99
- EHS : 133,36
- Taux de modification : 4,17
- Régulation : UR
Intensité des signaux pour l’Occludine (OCLN):
- Témoin : 86,51
- EHS : 320,06
- Taux de modification : 3,70
- Régulation : UR
Intensité des signaux pour la Sérine protéase B2 (Serpine B2):
- Témoin : 417,19
- EHS : 856,55
- Taux de modification : 2.05
- Régulation : UR
Intensité des signaux pour l’Insulin-like Growth Factor Binding Protein 3 (IGFBP3):
- Témoin : 40,00
- EHS : 119,06
- Taux de modification : 2,98
- Régulation : UR
Intensité des signaux pour le Commutateur GO/G1 (GOS2):
- Témoin : 20,00
- EHS : 56,77
- Taux de modification : 2,84
- Régulation : UR
Intensité des signaux pour l’Epiréguline (EREG):
- Témoin : 167,00
- EHS : 451,53
- Taux de modification : 2,70
- Régulation : UR
Intensité des signaux pour la Carnitine palmitoyl transférase (CPT1A):
- Témoin : 351,39
- EHS : 887,17
- Taux de modification : 2,52
- Régulation : UR
Intensité des signaux pour la Défensine (DEFB1):
- Témoin : 42,76
- EHS : 89,76
- Taux de modification : 2,10
- Régulation : UR
Intensité des signaux pour la Scielline (SCEL):
- Témoin : 65,00
- EHS : 118,91
- Taux de modification : 1,83
- Régulation : UR
Intensité des signaux pour la Métalloprotéinase 3, MMP3:
- Témoin : 290,23
- EHS : 37,05
- Taux de modification : 0,13
- Régulation : DR
Intensité des signaux pour la Chimiokine 14 (CXCL14):
- Témoin : 2113,61
- EHS : 356,24
- Taux de modification : 0,17
- Régulation : DR
Intensité des signaux pour de Wingless type 4 (WNT4):
- Témoin : 99,42
- EHS : 27,09
- Taux de modification : 0,27
- Régulation : DR
Exemple 3.Obtention des extraits hydrosolubles délipidés de graines et/ou de calices d’ Hibiscus sabdariffa dans un solvant eau contenant 5% d’enzymes
Les extraits de graines et/ou de calices délipidés deHibiscus sabdariffade la famille des Malvaceae sont réalisés par séparation mécanique des graines à partir des fruits suivi par un séchage de 1 jour minimum puis ensuite par un ou plusieurs pressages à froid de ces graines, après ou sans torréfaction préalable, suivi d’un séchage en étuve de 1 à 5 heures et à une température comprise entre 50°C et 60°C afin d’éviter la prolifération de microorganismes, puis d’une extraction ou d’une macération dans de l’eau avec les enzymes, ou bien à nouveau séché ou encore lyophilisé ou même zéodraté.
Il comprend donc de l’eau avec 5% d’enzymes et est préparé à partir de 10% en poids de graines et/ou de calices délipidés puis séchés.
Ces extraits peuvent être testés directement ou bien être séchés, déshydratés, lyophilisés ou zéodratés avant les tests. Dans ces derniers cas ils sont réhydratés ou dilués avec de l’eau purifiée jouant le rôle de solvant.
Un témoin a également été préparé contenant de l’eau et 5% de ces mêmes Enzymes dans le but de servir de contrôle (témoin E).
Nous appellerons EHS (pour Extrait de Hibiscus Sabdariffa) les extraits obtenus et utilisés dans les exemples suivants.
Les extraits de graines et/ou de calices délipidés deHibiscus sabdariffade la famille des Malvaceae sont réalisés par séparation mécanique des graines à partir des fruits suivi par un séchage de 1 jour minimum puis ensuite par un ou plusieurs pressages à froid de ces graines, après ou sans torréfaction préalable, suivi d’un séchage en étuve de 1 à 5 heures et à une température comprise entre 50°C et 60°C afin d’éviter la prolifération de microorganismes, puis d’une extraction ou d’une macération dans de l’eau avec les enzymes, ou bien à nouveau séché ou encore lyophilisé ou même zéodraté.
Il comprend donc de l’eau avec 5% d’enzymes et est préparé à partir de 10% en poids de graines et/ou de calices délipidés puis séchés.
Ces extraits peuvent être testés directement ou bien être séchés, déshydratés, lyophilisés ou zéodratés avant les tests. Dans ces derniers cas ils sont réhydratés ou dilués avec de l’eau purifiée jouant le rôle de solvant.
Un témoin a également été préparé contenant de l’eau et 5% de ces mêmes Enzymes dans le but de servir de contrôle (témoin E).
Nous appellerons EHS (pour Extrait de Hibiscus Sabdariffa) les extraits obtenus et utilisés dans les exemples suivants.
Exemple 4.Les tests et exemples de résultats.
Le modèle biologique :
Kératinocytes épidermiques humains normaux (NHEK) au troisième passage, cultivés à 37°C et 5% de CO2. Milieu de culture complémenté avec EGF à 0,25ng/ml et EP à 25ug plus gentamycine 25ug. Le milieu d’essai est lui constitué de kératinocyte SFM avec uniquement de la gentamycine 25 ug/ml
Les conditions expérimentales :
Les kératinocytes ont été ensemencés en plaque 24 puits et cultivés en milieu de culture pendant 24 heures puis en milieu d’essai pendant 24 heures supplémentaires. Le milieu a ensuite été remplacé par du milieu d’essai contenant ou non (témoin) les composés à l’essai puis les cellules ont été incubées pendant 24 heures. Toutes les conditions expérimentales ont été réalisées en triplicate (n=3).
A la fin de l’incubation, les surnageants de culture ont été éliminés et les tapis cellulaires ont été rincés avec une solution de PBS. La plaque a été immédiatement congelée à sec et à -80°C.
Avant l’extraction, les réplicats de culture ont été poolés. L’ARN total de chaque échantillon a été extrait à l’aide de TriPure Isolation Reagent® selon le protocole préconisé par le fournisseur.
La quantité et la qualité des ARN ont été évaluées par électrophorèse capillaire (Bioanalyzer 2100, Agilent).
La synthèse des ARN anti-sens (ARNa) biotinylés a été réalisée à l’aide du kit « GeneChip 3’IVT Express » (Affymetrix®).
Pour chaque échantillon d’ARNa biotinylé, un profil électrophorétique a été réalisé (Bioanalyzer 2100, Agilent) avant et après fragmentation.
L’hybridation des ARNa marqués et fragmentés sur la puce Affymetrix® U219 chip (36 000 transcripts and variants) a été réalisée sur la station d’hybridationGeneAtlas™ fluidics Affymetrix ® hybridization stationpendant 20 heures à 45°C.
Les puces U219 ont ensuite été scannées à l’aide du GeneAtlas™ Imaging station (Affymetrix®- resolution 2 µm) afin de générer les données d’intensité de signal comme montré dans les exemples de résultat ci-dessous.
Les données d’intensité de signal ont été normalisées à l’aide du logiciel Expression Console (Affymetrix®), à partir de l’algorithme RMA. Un contrôle qualité du marquage ainsi que de l’hybridation a ensuite été réalisé.
Les contrôles qualité des étapes d’hybridation et de marquage ont permis de valider le processus expérimental.
Une fois normalisées avec le logiciel Expression Console, les données ont été transférées et mises en forme dans un fichier Microsoft Excel.
Des calculs ainsi que des filtres ont été ajoutés dans ces fichiers afin de trier les données et de faciliter leur exploitation.
Les seuils de « fold change » ou taux de modification (valeur correspondant au ratio : valeur d’intensité de signal d’une sonde correspondant à l’échantillon traité / valeur d’intensité de signal des sondes correspondant aux signaux du mélange enzymes seules servant de contrôle, témoins E) ont été définis et appliqués aux données normalisées.
Les abréviations suivantes sont utilisées dans les fichiers d’analyse :
- UR : Upregulated – sur-expression ou stimulation de la sonde ou du gène lorsque le fold change est supérieur à 2,
- DR : Downregulated – sous-expression ou inhibition de la sonde ou du gène lorsque le fold change est inférieur à 0.5.
Chaque fichier d’analyse est constitué :
- De la valeur d’intensité de signal (RE : Relative Expression) correspondant à chacun des échantillons,
- Des calculs de « fold change » ou taux de modification pour chaque comparaison,
- D’informations relatives à chaque gène.
Les filtres insérés dans ces fichiers permettent de sélectionner les gènes significativement modulés.
L’exemple de sondes de gènes correspondants à la variation d’expression de CYP1B1, IGFBP3, AKR1C1, S100A8, SERPIN B1et B, SOD2, S100A8, SPRR2A, EREG et de MMP10, ainsi obtenue avec cette méthodologie et avec EHS pour l'Extrait de graines et/ou de calices délipidés de Hibiscus Sabdariffa, les nombres indiqués correspondent à l’intensité du signal obtenu pour le témoin E et pour l’essai EHS :
Intensité des signaux pour le Cytochrome P450 (CYP1B1):
- Témoin E : 40,00
- EHS : 484,65
- Taux de modification: 12,12
- Régulation : UR
Intensité des signaux pour l’Insulin-like Growth Factor Binding Protein 3 (IGFBP3):
- Témoin E : 40,00
- EHS : 356,26
- Taux de modification : 6,41
- Régulation : UR
Intensité des signaux pour l’Aldo-kétoréductase 1 (AKR1C1):
- Témoin E : 214
- EHS : 1269
- Taux de modification : 5,94
- Régulation : UR
Intensité des signaux pour la Petite Protéine Riche en Proline (SPRR2A):
- Témoin E : 53,48
- EHS : 150,09
- Taux de modification : 2,81
- Régulation : UR
Intensité des signaux pour la Calcium Binding Protéine A8 (S100A8) :
- Témoin E : 509,76
- EHS : 1556,79
- Taux de modification : 3,05
- Régulation : UR
Intensité des signaux pour la Sérine protéase B1 (Serpin B1):
- Témoin E : 70,21
- EHS : 237,73
- Taux de modification : 3,39
- Régulation : UR
Intensité des signaux pour la Super Oxyde Dismutase 2 (SOD2):
- Témoin E : 403,63
- EHS : 1268,52
- Taux de modification : 3,14
- Régulation : UR
Intensité des signaux pour la Sérine protéase B2 (Serpin B2):
- Témoin E : 478,05
- EHS : 1018,98
- Taux de modification : 2,13
- Régulation : UR
Intensité des signaux pour l’Epiréguline (EREG):
- Témoin E : 186,51
- EHS : 322,23
- Taux de modification : 1,73
- Régulation : UR
Intensité des signaux pour la Métalloprotéinase matricielle10 (MMP10):
- Témoin E : 139,71
- EHS : 41,71
- Taux de modification : 0,30
- Régulation : DR
Le modèle biologique :
Kératinocytes épidermiques humains normaux (NHEK) au troisième passage, cultivés à 37°C et 5% de CO2. Milieu de culture complémenté avec EGF à 0,25ng/ml et EP à 25ug plus gentamycine 25ug. Le milieu d’essai est lui constitué de kératinocyte SFM avec uniquement de la gentamycine 25 ug/ml
Les conditions expérimentales :
Les kératinocytes ont été ensemencés en plaque 24 puits et cultivés en milieu de culture pendant 24 heures puis en milieu d’essai pendant 24 heures supplémentaires. Le milieu a ensuite été remplacé par du milieu d’essai contenant ou non (témoin) les composés à l’essai puis les cellules ont été incubées pendant 24 heures. Toutes les conditions expérimentales ont été réalisées en triplicate (n=3).
A la fin de l’incubation, les surnageants de culture ont été éliminés et les tapis cellulaires ont été rincés avec une solution de PBS. La plaque a été immédiatement congelée à sec et à -80°C.
Avant l’extraction, les réplicats de culture ont été poolés. L’ARN total de chaque échantillon a été extrait à l’aide de TriPure Isolation Reagent® selon le protocole préconisé par le fournisseur.
La quantité et la qualité des ARN ont été évaluées par électrophorèse capillaire (Bioanalyzer 2100, Agilent).
La synthèse des ARN anti-sens (ARNa) biotinylés a été réalisée à l’aide du kit « GeneChip 3’IVT Express » (Affymetrix®).
Pour chaque échantillon d’ARNa biotinylé, un profil électrophorétique a été réalisé (Bioanalyzer 2100, Agilent) avant et après fragmentation.
L’hybridation des ARNa marqués et fragmentés sur la puce Affymetrix® U219 chip (36 000 transcripts and variants) a été réalisée sur la station d’hybridationGeneAtlas™ fluidics Affymetrix ® hybridization stationpendant 20 heures à 45°C.
Les puces U219 ont ensuite été scannées à l’aide du GeneAtlas™ Imaging station (Affymetrix®- resolution 2 µm) afin de générer les données d’intensité de signal comme montré dans les exemples de résultat ci-dessous.
Les données d’intensité de signal ont été normalisées à l’aide du logiciel Expression Console (Affymetrix®), à partir de l’algorithme RMA. Un contrôle qualité du marquage ainsi que de l’hybridation a ensuite été réalisé.
Les contrôles qualité des étapes d’hybridation et de marquage ont permis de valider le processus expérimental.
Une fois normalisées avec le logiciel Expression Console, les données ont été transférées et mises en forme dans un fichier Microsoft Excel.
Des calculs ainsi que des filtres ont été ajoutés dans ces fichiers afin de trier les données et de faciliter leur exploitation.
Les seuils de « fold change » ou taux de modification (valeur correspondant au ratio : valeur d’intensité de signal d’une sonde correspondant à l’échantillon traité / valeur d’intensité de signal des sondes correspondant aux signaux du mélange enzymes seules servant de contrôle, témoins E) ont été définis et appliqués aux données normalisées.
Les abréviations suivantes sont utilisées dans les fichiers d’analyse :
- UR : Upregulated – sur-expression ou stimulation de la sonde ou du gène lorsque le fold change est supérieur à 2,
- DR : Downregulated – sous-expression ou inhibition de la sonde ou du gène lorsque le fold change est inférieur à 0.5.
Chaque fichier d’analyse est constitué :
- De la valeur d’intensité de signal (RE : Relative Expression) correspondant à chacun des échantillons,
- Des calculs de « fold change » ou taux de modification pour chaque comparaison,
- D’informations relatives à chaque gène.
Les filtres insérés dans ces fichiers permettent de sélectionner les gènes significativement modulés.
L’exemple de sondes de gènes correspondants à la variation d’expression de CYP1B1, IGFBP3, AKR1C1, S100A8, SERPIN B1et B, SOD2, S100A8, SPRR2A, EREG et de MMP10, ainsi obtenue avec cette méthodologie et avec EHS pour l'Extrait de graines et/ou de calices délipidés de Hibiscus Sabdariffa, les nombres indiqués correspondent à l’intensité du signal obtenu pour le témoin E et pour l’essai EHS :
Intensité des signaux pour le Cytochrome P450 (CYP1B1):
- Témoin E : 40,00
- EHS : 484,65
- Taux de modification: 12,12
- Régulation : UR
Intensité des signaux pour l’Insulin-like Growth Factor Binding Protein 3 (IGFBP3):
- Témoin E : 40,00
- EHS : 356,26
- Taux de modification : 6,41
- Régulation : UR
Intensité des signaux pour l’Aldo-kétoréductase 1 (AKR1C1):
- Témoin E : 214
- EHS : 1269
- Taux de modification : 5,94
- Régulation : UR
Intensité des signaux pour la Petite Protéine Riche en Proline (SPRR2A):
- Témoin E : 53,48
- EHS : 150,09
- Taux de modification : 2,81
- Régulation : UR
Intensité des signaux pour la Calcium Binding Protéine A8 (S100A8) :
- Témoin E : 509,76
- EHS : 1556,79
- Taux de modification : 3,05
- Régulation : UR
Intensité des signaux pour la Sérine protéase B1 (Serpin B1):
- Témoin E : 70,21
- EHS : 237,73
- Taux de modification : 3,39
- Régulation : UR
Intensité des signaux pour la Super Oxyde Dismutase 2 (SOD2):
- Témoin E : 403,63
- EHS : 1268,52
- Taux de modification : 3,14
- Régulation : UR
Intensité des signaux pour la Sérine protéase B2 (Serpin B2):
- Témoin E : 478,05
- EHS : 1018,98
- Taux de modification : 2,13
- Régulation : UR
Intensité des signaux pour l’Epiréguline (EREG):
- Témoin E : 186,51
- EHS : 322,23
- Taux de modification : 1,73
- Régulation : UR
Intensité des signaux pour la Métalloprotéinase matricielle10 (MMP10):
- Témoin E : 139,71
- EHS : 41,71
- Taux de modification : 0,30
- Régulation : DR
La présence d’enzymes dans l’eau du milieu d’extraction permet aux gènes de la voie de signalisation du Nrf2 de s’exprimer avec par exemple les gènes CYP1B1, AKR1C1 et SOD2, alors que l’extraction à l’eau pure favorise plus l’expression des gènes de la différenciation épidermique et de son effet barrière comme CLDN4, OCLN, DEFB1et SCEL. L’expression des métalloprotéinases est partiellement inhibée dans les deux situations.
Dans les exemples ci-dessous et qui donnent des exemples de réalisation de ces compositions, sans pour autant que cette liste soit exhaustive, les abréviations suivantes seront utilisées : EHS pour l'extrait de graines et/ou de calices délipidés de Hibiscus Sabdariffa et Huile de Hibiscus pour l’huile de graines et/ou de calices de la variété correspondante.
Exemple 5.
Selon un premier mode de réalisation de l’invention la composition comprend:
Carboxypolyméthylène ou polymère carboxylique……………...0,40 g
Diéthanolamine cétyl phosphate……………………...…………1,50 g
Octyl dodécanol………………………………………......……...5,50 g
Alcool cétylique…………………………......................…...……1,00 g
Huile minérale………………….........……………………...……2,00 g
Acide stéarique…………………………………..............………1,00 g
Alcool stérylique éthoxylé (20 E) ...………...……...........………0,30 g
Alcool céto-stéarylique………………………………..........……1,80 g
Conservateur……………………….......…...........……...…..........0,15
Huile de Hibiscus………………………………..........…………0,50 g
Triéthanolamine……………………………….......…..........……0,60 g
Cyclométhicone………………...………...…………..........……12,00 g
Diméthicone copolyol…………………......…………..........……3,00 g
Phényl triméticone ………………………...……...........………...2,00 g
EHS………………...............……………………..........…………3,00 g
Dextran……...……………………………………......………...…1,00 g
Glycérine……..................………………………...........…………2,00 g
Eau déminéralisée qsp………………………….......…….............100 g
Après 4 semaines d’utilisation sur 25 volontaires, la peau ressort lissée dès 2 h après chaque application. En fin de traitement le nombre des rides, leurs longueurs et leurs largeurs ont diminués significativement et la peau plus hydratée plus belle et moins stressée pour 92% des utilisateurs.
Selon un premier mode de réalisation de l’invention la composition comprend:
Carboxypolyméthylène ou polymère carboxylique……………...0,40 g
Diéthanolamine cétyl phosphate……………………...…………1,50 g
Octyl dodécanol………………………………………......……...5,50 g
Alcool cétylique…………………………......................…...……1,00 g
Huile minérale………………….........……………………...……2,00 g
Acide stéarique…………………………………..............………1,00 g
Alcool stérylique éthoxylé (20 E) ...………...……...........………0,30 g
Alcool céto-stéarylique………………………………..........……1,80 g
Conservateur……………………….......…...........……...…..........0,15
Huile de Hibiscus………………………………..........…………0,50 g
Triéthanolamine……………………………….......…..........……0,60 g
Cyclométhicone………………...………...…………..........……12,00 g
Diméthicone copolyol…………………......…………..........……3,00 g
Phényl triméticone ………………………...……...........………...2,00 g
EHS………………...............……………………..........…………3,00 g
Dextran……...……………………………………......………...…1,00 g
Glycérine……..................………………………...........…………2,00 g
Eau déminéralisée qsp………………………….......…….............100 g
Après 4 semaines d’utilisation sur 25 volontaires, la peau ressort lissée dès 2 h après chaque application. En fin de traitement le nombre des rides, leurs longueurs et leurs largeurs ont diminués significativement et la peau plus hydratée plus belle et moins stressée pour 92% des utilisateurs.
Exemple 6.
Selon un second mode de réalisation de l’invention la composition comprend :
- Acrylate C10-30………………………………………………0,50 g
- Arginine………………………………………………………0,001g
- Glycerine.................................................................................. 1,00 g
- EHS ..........................................................................................0,20 g
- Alcool…………………………………………………………2,00 g
- Carbomère................................................................................ 0,126 g
- EDTA.........................................................................................0,005 g
- Conservateur…….................…………...................……..........0,867 g
- Huile de Hibiscus......................................................................... 0,5 g
- Lécithine hydrogénée ……………….................……………...0,09 g
- Acide hyaluronique.................................................................... 0,20 g
- TEA 99%.................................................................................... 0,62 g
- Colorants………………………......................………………...0,0002 g
- Eau déminéralisée qsp................................................................. 100 g
Après 4 semaines d’utilisation pour 20 volontaires de 20 ans à 70 ans la peau du visage est ressortie significativement plus hydratée et est comme purifiée et plus résistante aux infections occasionnelles et à la déshydratation.
Selon un second mode de réalisation de l’invention la composition comprend :
- Acrylate C10-30………………………………………………0,50 g
- Arginine………………………………………………………0,001g
- Glycerine.................................................................................. 1,00 g
- EHS ..........................................................................................0,20 g
- Alcool…………………………………………………………2,00 g
- Carbomère................................................................................ 0,126 g
- EDTA.........................................................................................0,005 g
- Conservateur…….................…………...................……..........0,867 g
- Huile de Hibiscus......................................................................... 0,5 g
- Lécithine hydrogénée ……………….................……………...0,09 g
- Acide hyaluronique.................................................................... 0,20 g
- TEA 99%.................................................................................... 0,62 g
- Colorants………………………......................………………...0,0002 g
- Eau déminéralisée qsp................................................................. 100 g
Après 4 semaines d’utilisation pour 20 volontaires de 20 ans à 70 ans la peau du visage est ressortie significativement plus hydratée et est comme purifiée et plus résistante aux infections occasionnelles et à la déshydratation.
Exemple 7.
Emulsion H/E :
- Paraffine liquide…………….............…………………… 6 g
- Lanoline liquide................................................................. 3 g
- Arlacel 165 ……………………........................................ 6 g
- Tween 60 ………………...…............................................ 2 g
- Alcool cétylique................................................................ 1,2 g
- Acide stéarique …………….……………………………2,5 g
- Arginine…………............................................................ 0,5 g
- Huile de silicone volatile................................................... 10 g
- Triéthanolamine................................................................ 0,1 g
- Conservateur .................................................................... 0,3 g
- EHS.…….........………………….................................... 5 g
- Acide hyaluronique……………........................................ 0,5 g
- Eau déminéralisée qsp..................................................... 100 g
Après 4 semaines d’utilisation biquotidienne pour 20 volontaires âgés de 33 à 50 ans les surcharges pondérales localisées au niveau de la culotte de cheval sont significativement réduites.
Emulsion H/E :
- Paraffine liquide…………….............…………………… 6 g
- Lanoline liquide................................................................. 3 g
- Arlacel 165 ……………………........................................ 6 g
- Tween 60 ………………...…............................................ 2 g
- Alcool cétylique................................................................ 1,2 g
- Acide stéarique …………….……………………………2,5 g
- Arginine…………............................................................ 0,5 g
- Huile de silicone volatile................................................... 10 g
- Triéthanolamine................................................................ 0,1 g
- Conservateur .................................................................... 0,3 g
- EHS.…….........………………….................................... 5 g
- Acide hyaluronique……………........................................ 0,5 g
- Eau déminéralisée qsp..................................................... 100 g
Après 4 semaines d’utilisation biquotidienne pour 20 volontaires âgés de 33 à 50 ans les surcharges pondérales localisées au niveau de la culotte de cheval sont significativement réduites.
Exemple 8.
Crème aux liposomes :
-Alcool cétylique............................................................................. 4 g
-B-sitostérol..................................................................................... 4 g
-Dicétyl phosphate....................................................................... 0,5 g
-Conservateur .............................................................................. 0,3 g
-Carbopol 981 ………………...……………............................... 0,2 g
-Triéthanolamine........................................................................... 0,2 g
-Phospholipide............................................................................. 0,05 g
-EHS………………………………............................................. 1,5 g
-Eau déminéralisée qsp................................................................ 100 g
Après utilisation sur un panel de 30 volontaires de 18 à 70 ans la peau est ressortie significativement hydratée pendant les 3 heures de la première application plus douce et d’apparence plus jeune pour 85% des utilisateurs après les 4 semaines d’utilisation quotidienne.
Crème aux liposomes :
-Alcool cétylique............................................................................. 4 g
-B-sitostérol..................................................................................... 4 g
-Dicétyl phosphate....................................................................... 0,5 g
-Conservateur .............................................................................. 0,3 g
-Carbopol 981 ………………...……………............................... 0,2 g
-Triéthanolamine........................................................................... 0,2 g
-Phospholipide............................................................................. 0,05 g
-EHS………………………………............................................. 1,5 g
-Eau déminéralisée qsp................................................................ 100 g
Après utilisation sur un panel de 30 volontaires de 18 à 70 ans la peau est ressortie significativement hydratée pendant les 3 heures de la première application plus douce et d’apparence plus jeune pour 85% des utilisateurs après les 4 semaines d’utilisation quotidienne.
Exemple 9.
Emulsion E/H :
- Protégin …………………...………………............................. 19 g
- Glycérine .................................................................................... 3 g
- Huile de vaseline......................................................................... 8 g
- Sulfate de Mg........................................................................... 0,5 g
- EHS………………………………........................................... 0,5 g
- Acide hyaluronique….............................................................. 0,02 g
- Conservateur ……………………………...........……………2 g
- Eau déminéralisée qsp............................................................. 100 g
Emulsion E/H :
- Protégin …………………...………………............................. 19 g
- Glycérine .................................................................................... 3 g
- Huile de vaseline......................................................................... 8 g
- Sulfate de Mg........................................................................... 0,5 g
- EHS………………………………........................................... 0,5 g
- Acide hyaluronique….............................................................. 0,02 g
- Conservateur ……………………………...........……………2 g
- Eau déminéralisée qsp............................................................. 100 g
Exemple 10.
Emulsion gel H/E
- Carbopol 981 ……………………........……………………...... 0,6 g
- Alcool éthylique.......................................................................... 15 g
- Huile de silicone volatile............................................................... 3 g
- Huile de Hibiscus.............................................................................. 7 g
- Conservateur………………....................…...…………………… 0,3 g
- Parfum ………....…………………………………………………0,4 g
- EHS…………………….…............................................................0,1 g
- Triéthanolamine.............................................................................. 0,2 g
- Eau déminéralisée qsp....................................................................100 g
Emulsion gel H/E
- Carbopol 981 ……………………........……………………...... 0,6 g
- Alcool éthylique.......................................................................... 15 g
- Huile de silicone volatile............................................................... 3 g
- Huile de Hibiscus.............................................................................. 7 g
- Conservateur………………....................…...…………………… 0,3 g
- Parfum ………....…………………………………………………0,4 g
- EHS…………………….…............................................................0,1 g
- Triéthanolamine.............................................................................. 0,2 g
- Eau déminéralisée qsp....................................................................100 g
Exemple 11.
Concentré glycériné
-Glycérine ……………………………………………........ 65 g
-EHS....................................................................................... 5 g
- Arginine............................................................................... 1 g
- Acide hyaluronique……...……………………...………… 1 g
- Parfum ………………...………………………...………0,4 g
- Eau déminéralisée qsp...................................................... 100 g
Concentré glycériné
-Glycérine ……………………………………………........ 65 g
-EHS....................................................................................... 5 g
- Arginine............................................................................... 1 g
- Acide hyaluronique……...……………………...………… 1 g
- Parfum ………………...………………………...………0,4 g
- Eau déminéralisée qsp...................................................... 100 g
Claims (10)
- Composition cosmétique comprenant un extrait hydrosoluble de graines et/ou de calices délipidés deHibiscus sabdariffade la famille des Malvaceae et un véhicule cosmétiquement acceptable.
- Composition cosmétique selon la revendication 1, où ledit véhicule cosmétiquement acceptable est également celui utilisé comme solvant lors de l’extraction et est choisi parmi l’eau avec ou sans enzyme, une solution hydroéthanolique ou un mélange eau/glycérol.
- Compositions cosmétiques selon les revendications 1 et 2 caractérisées en ce que ledit extrait hydrosoluble de graines et/ou de calices délipidés deHibiscus sabdariffade la famille des Malvaceae est un extrait provenant des graines et/ou des calices d’une ou plusieurs variétés d’Hibiscus choisies dans le groupe formé parHibiscus sabdariffavariété à fleur blanche,Hibiscus sabdariffavariété vimto,Hibiscus sabdariffavariété koor rouge,Hibiscus sabdariffavariété CTL 92,Hibiscus sabdariffavariété thaï,Hibiscus sabdariffavariété sabdariffa,Hibiscus sabdariffavariété altissima.
- Composition cosmétique selon l’une quelconque des revendications 1 à 3 caractérisée en ce que ledit extrait hydrosoluble de graines et/ou de calices délipidés deHibiscus sabdariffade la famille des Malvaceae est réalisé à partir de graines et/ou de calices au préalable délipidés par pressage à froid, de une à trois fois successivement, afin d’obtenir une teneur de 10% ou moins en masse de lipides par rapport à la masse totale des graines et/ou des calices pour qu’au final l’extrait comprenne moins de 1% en masse de lipides par rapport à la masse totale de l’extrait, notamment de 0% à 1% en masse de lipides par rapport à la masse totale de l’extrait.
- Composition cosmétique selon l’une quelconque des revendications 1 à 4 caractérisée en ce que ledit extrait de graines et/ou de calices délipidés deHibiscus sabdariffade la famille des Malvaceae a été rendu hydrosoluble par solubilisation dans un solvant choisi parmi l’eau avec ou sans enzyme, une solution hydroéthanolique ou un mélange eau/glycérol avant de pouvoir être utilisé en l’état dans la composition ou stocké après séchage complet avant d’être resolubilisé dans ces mêmes solvants cosmétiquement acceptables avant usage.
- Composition selon l’une quelconque des revendications 1 à 5 caractérisée en ce que ledit extrait hydrosoluble de graines et/ou de calices délipidés deHibiscus sabdariffade la famille des Malvaceae représente de 0,1% à 5% en masse par rapport à la masse totale de la composition.
- Composition selon l’une quelconque des revendications 1 à 6, où la composition est sous la forme d’une émulsion huile dans eau (H/E) ou eau dans huile (E/H), d’émulsion multiple (H/E/H, E/H/E), de microémulsion, d’émulsion à phase gémellaires, d’émulsion PIT, de nano-émulsion, de pseudoémulsion, de gel aqueux, de gel gras, de gel hydroalcoolique, de suspension, de gel ou d’émulsion lyophilisée ou d’une des formes précédentes contenant de microcapsules , des nanocapsules, des liposomes, des éthosomes et pouvant se présenter en crèmes, sérums, liquides, pâtes, lotions, émulsions, gels, solides, poudres, masques, sticks, sprays, aérosols.
- Composition selon l’une quelconque des revendications 1 à 6, ladite composition étant sous la forme d’un démaquillant micellaire biphase, d’un gel moussant, d’une lotion gelée, d’un exfoliant, d’une crème hydratante, d’un sérum hydratant, d’un sérum améliorant l’aspect des rides, d’un lait corps hydratant, d’un masque régénérant, d’une crème régénérante, d’une crème pour le corps amincissante, d’une crème anti-âge, d’un sérum régénérant, d’un baume, d’une brume, d’un soin yeux, d’un concentré, ou d’un masque détoxifiant.
- Utilisation cosmétique non thérapeutique d’une composition telle que définie dans l’une quelconque des revendications 1 à 8, pour une application topique sur une peau saine dans le but d’utiliser avantageusement un extrait multifonctionnel permettant à la fois de réduire les surcharges adipeuses localisées, de stimuler ses défenses antimicrobiennes naturelles, son microbiote et son microbiome, de favoriser sa bonne maturation et sa bonne différenciation lui permettant ainsi d’être plus belle en surface, plus résistante aux méfaits des agressions extérieures et du vieillissement car présentant un effet de barrière de meilleure qualité, d’activer la réponse globale de la peau face aux stress oxydatifs et de favoriser une meilleure réponse face aux xénobiotiques.
- Composition selon l’une quelconque des revendications 1 à 8 pour favoriser, à l’aide d’un seul extrait multifonctionnel, la bonne maturation et la bonne différenciation de la peau, lui permettant d’être plus belle en surface, plus résistante aux méfaits des agressions extérieure et du vieillissement car présentant un effet de barrière de meilleure qualité est de stimuler l’expression des gènes de la Claudine 4 (CLDN4), de l’Occludine (OCLN), de la Small Proline Rich Protéines 2A (SPRR2A), de la Scielline (SCEL), du Commutateur GO/G1 (GOS2), de l’Epiréguline (EREG), des SerpineB1 et B2 (SERPIN B1 et B2) et de réduire l’expression des gènes des Métalloprotéinases matricielles 1 et 10 (MMP3, MMP10)et de la Chimiokine 14 (CXCL14).
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| FR2310101A FR3153252A1 (fr) | 2023-09-25 | 2023-09-25 | Extrait hydrosoluble de graines et/ou de calices délipidés de Hibiscus sabdariffa et ses utilisations cosmétiques. |
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| FR2310101A FR3153252A1 (fr) | 2023-09-25 | 2023-09-25 | Extrait hydrosoluble de graines et/ou de calices délipidés de Hibiscus sabdariffa et ses utilisations cosmétiques. |
| FR2310101 | 2023-09-25 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| FR3153252A1 true FR3153252A1 (fr) | 2025-03-28 |
Family
ID=89474677
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| FR2310101A Pending FR3153252A1 (fr) | 2023-09-25 | 2023-09-25 | Extrait hydrosoluble de graines et/ou de calices délipidés de Hibiscus sabdariffa et ses utilisations cosmétiques. |
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| Country | Link |
|---|---|
| FR (1) | FR3153252A1 (fr) |
Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP1179339A2 (fr) * | 2000-08-10 | 2002-02-13 | Hans Schwarzkopf GmbH & Co. KG | Produit cosmétique contenant des extraits de graines de "malvaceae" |
| FR2937545A1 (fr) * | 2008-10-28 | 2010-04-30 | Etienne Soudant | Procede de traitement cosmetique et pharmaceutique destine a reduire a la fois la synthese endogene de sirtuine et de reduire les contractions musculaires et compositions pour sa mise en oeuvre |
| WO2022003056A1 (fr) * | 2020-06-30 | 2022-01-06 | L'oreal | Extrait d'hibiscus sabdariffa et son utilisation pour l'amélioration de la fonction barrière et la promotion de l'hydratation et de la desquamation de la peau |
| EP4046624A1 (fr) * | 2021-02-01 | 2022-08-24 | TCI Co., Ltd. | Utilisations de l'extrait de roselle blanche pour l'hydratation de la peau |
-
2023
- 2023-09-25 FR FR2310101A patent/FR3153252A1/fr active Pending
Patent Citations (4)
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