GR1009657B - Συνθεσεις για χορηγηση απο το στομα με ανοσοτροποποιητικη δραση στα φυσικα φονικα κυτταρα - Google Patents

Συνθεσεις για χορηγηση απο το στομα με ανοσοτροποποιητικη δραση στα φυσικα φονικα κυτταρα Download PDF

Info

Publication number
GR1009657B
GR1009657B GR20160100572A GR20160100572A GR1009657B GR 1009657 B GR1009657 B GR 1009657B GR 20160100572 A GR20160100572 A GR 20160100572A GR 20160100572 A GR20160100572 A GR 20160100572A GR 1009657 B GR1009657 B GR 1009657B
Authority
GR
Greece
Prior art keywords
composition
fatty acids
oral administration
administration according
esters
Prior art date
Application number
GR20160100572A
Other languages
English (en)
Other versions
GR20160100572A (el
Inventor
Βαρβαρα Γεωργιου Γελαδακη
Original Assignee
Βαρβαρα Γεωργιου Γελαδακη
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Βαρβαρα Γεωργιου Γελαδακη filed Critical Βαρβαρα Γεωργιου Γελαδακη
Priority to GR20160100572A priority Critical patent/GR1009657B/el
Priority to SI201731194T priority patent/SI3534891T1/sl
Priority to NZ753193A priority patent/NZ753193B2/en
Priority to MA46707A priority patent/MA46707B1/fr
Priority to AU2017355235A priority patent/AU2017355235B2/en
Priority to PT178081295T priority patent/PT3534891T/pt
Priority to PCT/GR2017/000064 priority patent/WO2018083508A1/en
Priority to RS20220720A priority patent/RS63458B1/sr
Priority to EP17808129.5A priority patent/EP3534891B1/en
Priority to RU2019117597A priority patent/RU2776373C2/ru
Priority to HRP20220944TT priority patent/HRP20220944T1/hr
Priority to CN201780071828.8A priority patent/CN110035746A/zh
Priority to US16/347,648 priority patent/US20190328695A1/en
Priority to ES17808129T priority patent/ES2924106T3/es
Priority to PL17808129.5T priority patent/PL3534891T3/pl
Priority to LTEPPCT/GR2017/000064T priority patent/LT3534891T/lt
Priority to HUE17808129A priority patent/HUE059425T2/hu
Priority to DK17808129.5T priority patent/DK3534891T3/da
Priority to JP2019546103A priority patent/JP7118986B2/ja
Priority to CA3084504A priority patent/CA3084504A1/en
Publication of GR20160100572A publication Critical patent/GR20160100572A/el
Publication of GR1009657B publication Critical patent/GR1009657B/el
Priority to US17/178,370 priority patent/US12023314B2/en
Priority to CY20221100529T priority patent/CY1125454T1/el

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
    • A61K45/06—Mixtures of active ingredients without chemical characterisation, e.g. antiphlogistics and cardiaca
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/185—Acids; Anhydrides, halides or salts thereof, e.g. sulfur acids, imidic, hydrazonic or hydroximic acids
    • A61K31/19—Carboxylic acids, e.g. valproic acid
    • A61K31/20—Carboxylic acids, e.g. valproic acid having a carboxyl group bound to a chain of seven or more carbon atoms, e.g. stearic, palmitic, arachidic acids
    • A61K31/202—Carboxylic acids, e.g. valproic acid having a carboxyl group bound to a chain of seven or more carbon atoms, e.g. stearic, palmitic, arachidic acids having three or more double bonds, e.g. linolenic
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/045—Hydroxy compounds, e.g. alcohols; Salts thereof, e.g. alcoholates
    • A61K31/047—Hydroxy compounds, e.g. alcohols; Salts thereof, e.g. alcoholates having two or more hydroxy groups, e.g. sorbitol
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/185—Acids; Anhydrides, halides or salts thereof, e.g. sulfur acids, imidic, hydrazonic or hydroximic acids
    • A61K31/19—Carboxylic acids, e.g. valproic acid
    • A61K31/194—Carboxylic acids, e.g. valproic acid having two or more carboxyl groups, e.g. succinic, maleic or phthalic acid
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/185—Acids; Anhydrides, halides or salts thereof, e.g. sulfur acids, imidic, hydrazonic or hydroximic acids
    • A61K31/19—Carboxylic acids, e.g. valproic acid
    • A61K31/195—Carboxylic acids, e.g. valproic acid having an amino group
    • A61K31/197—Carboxylic acids, e.g. valproic acid having an amino group the amino and the carboxyl groups being attached to the same acyclic carbon chain, e.g. gamma-aminobutyric acid [GABA], beta-alanine, epsilon-aminocaproic acid or pantothenic acid
    • A61K31/198—Alpha-amino acids, e.g. alanine or edetic acid [EDTA]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/185—Acids; Anhydrides, halides or salts thereof, e.g. sulfur acids, imidic, hydrazonic or hydroximic acids
    • A61K31/19—Carboxylic acids, e.g. valproic acid
    • A61K31/20—Carboxylic acids, e.g. valproic acid having a carboxyl group bound to a chain of seven or more carbon atoms, e.g. stearic, palmitic, arachidic acids
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/185—Acids; Anhydrides, halides or salts thereof, e.g. sulfur acids, imidic, hydrazonic or hydroximic acids
    • A61K31/19—Carboxylic acids, e.g. valproic acid
    • A61K31/20—Carboxylic acids, e.g. valproic acid having a carboxyl group bound to a chain of seven or more carbon atoms, e.g. stearic, palmitic, arachidic acids
    • A61K31/201—Carboxylic acids, e.g. valproic acid having a carboxyl group bound to a chain of seven or more carbon atoms, e.g. stearic, palmitic, arachidic acids having one or two double bonds, e.g. oleic, linoleic acids
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/21—Esters, e.g. nitroglycerine, selenocyanates
    • A61K31/215—Esters, e.g. nitroglycerine, selenocyanates of carboxylic acids
    • A61K31/22—Esters, e.g. nitroglycerine, selenocyanates of carboxylic acids of acyclic acids, e.g. pravastatin
    • A61K31/23—Esters, e.g. nitroglycerine, selenocyanates of carboxylic acids of acyclic acids, e.g. pravastatin of acids having a carboxyl group bound to a chain of seven or more carbon atoms
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/44—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof
    • A61K31/4415—Pyridoxine, i.e. Vitamin B6
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/44—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof
    • A61K31/455—Nicotinic acids, e.g. niacin; Derivatives thereof, e.g. esters, amides
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/505—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim
    • A61K31/506—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim not condensed and containing further heterocyclic rings
    • A61K31/51—Thiamines, e.g. vitamin B1
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/505—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim
    • A61K31/519—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim ortho- or peri-condensed with heterocyclic rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/505—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim
    • A61K31/519—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim ortho- or peri-condensed with heterocyclic rings
    • A61K31/525—Isoalloxazines, e.g. riboflavins, vitamin B2
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/59—Compounds containing 9, 10- seco- cyclopenta[a]hydrophenanthrene ring systems
    • A61K31/593—9,10-Secocholestane derivatives, e.g. cholecalciferol, i.e. vitamin D3
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
    • A61K31/7004—Monosaccharides having only carbon, hydrogen and oxygen atoms
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K33/00—Medicinal preparations containing inorganic active ingredients
    • A61K33/06—Aluminium, calcium or magnesium; Compounds thereof, e.g. clay
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K33/00—Medicinal preparations containing inorganic active ingredients
    • A61K33/24—Heavy metals; Compounds thereof
    • A61K33/30—Zinc; Compounds thereof
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K33/00—Medicinal preparations containing inorganic active ingredients
    • A61K33/24—Heavy metals; Compounds thereof
    • A61K33/32—Manganese; Compounds thereof
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K33/00—Medicinal preparations containing inorganic active ingredients
    • A61K33/24—Heavy metals; Compounds thereof
    • A61K33/34—Copper; Compounds thereof
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/0012—Galenical forms characterised by the site of application
    • A61K9/0053—Mouth and digestive tract, i.e. intraoral and peroral administration
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/0087—Galenical forms not covered by A61K9/02 - A61K9/7023
    • A61K9/0095—Drinks; Beverages; Syrups; Compositions for reconstitution thereof, e.g. powders or tablets to be dispersed in a glass of water; Veterinary drenches
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P15/00—Drugs for genital or sexual disorders; Contraceptives
    • A61P15/06—Antiabortive agents; Labour repressants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A61P37/06—Immunosuppressants, e.g. drugs for graft rejection

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Inorganic Chemistry (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Gynecology & Obstetrics (AREA)
  • Pregnancy & Childbirth (AREA)
  • Endocrinology (AREA)
  • Reproductive Health (AREA)
  • Transplantation (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Nutrition Science (AREA)
  • Physiology (AREA)
  • Emergency Medicine (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)

Abstract

Συνθέσεις για χορήγηση από το στόμα, που περιλαμβάνουν ως δραστικά συστατικά ένα συνδυασμό λιπαρών οξέων ή/και εστέρες αυτών, για χρήση σε μέθοδο θεραπείας των επαναλαμβανόμενων αυτόματων αποβολών ή επανειλημμένων αποτυχιών εμφύτευσης μετά από εξωσωματική γονιμοποίηση, σε υπογόνιμες γυναίκες με αυξημένο τον αριθμό ή/και την τοξικότητα των φυσικών φονικών κυττάρων (ΝΚ). Οι συνθέσεις αυτές χορηγούνται από το στόμα, για συγκεκριμένο χρονικό διάστημα.

Description

ΣΥΝΘΕΣΕΙΣ ΓΙΑ ΧΟΡΗΓΗΣΗ ΑΠΟ ΤΟ ΣΤΟΜΑ ΜΕ ΑΝΟΣΟΤΡΟΠΟΠΟΙΗΤΙΚΗ
ΔΡΑΣΗ ΣΤΑ ΦΥΣΙΚΑ ΦΟΝΙΚΑ ΚΥΤΤΑΡΑ
Πεδίο της εφεύρεσης
Η παρούσα εφεύρεση, αφορά σε συνθέσεις για χορήγηση από το στόμα, για τη χρήση σε μια μέθοδο θεραπείας των επαναλαμβανόμενων αυτόματων αποβολών (RSA) ή επανειλημμένων αποτυχιών εμφύτευσης (RIF), μετά από εξωσωματική γονιμοποίηση (IVF), σε υπογόνιμες γυναίκες με αυξημένο αριθμό ή/και τοξικότητα των (ΝΚ) φυσικών φονικών κυττάρων.
Ιστορικό της εφεύρεσης
Τα φυσικά φονικά κύτταρα (ΝΚ) είναι μια συγκεκριμένη ομάδα των μεγάλων κοκκιωδών λεμφοκυττάρων (LGL) που παίζουν σημαντικό ρόλο στην έμφυτη ανοσολογική απόκριση αλλά είναι επίσης σημαντικά στον επηρεασμό των προσαρμοστικών άνοσων αποκρίσεων και στην ανοσολογική ρύθμιση.
Σχηματίζουν το 1-2% του λεμφικού ιστού, που βρίσκεται κυρίως στο σπλήνα. Στο περιφερικό αίμα, τα ΝΚ κύτταρα αποτελούν το 5-15% του συνόλου των λεμφοκυττάρων και 70-95% των μεγάλων κοκκιωδών λεμφοκυττάρων(LGL). (Stites DP, Τer Al, Parslow TG. Basic and clinical immunology. 8th edition, Appleton and Lange, Norwalk, Conn, 1994).
Τα (ΝΚ) κύτταρα εκφράζουν στην επιφάνειά τους μια σειρά δεικτών, τα πιο χαρακτηριστικά των οποίων είναι τα μόρια CD16 και CD56. (Caligiuri Μ. Human natural killer cells. Blood. 2008;112:461-9). Με βάση την σχετική έκφραση του CD16 και CD56, τα κύτταρα ΝΚ μπορούν να υποδιαιρεθούν σε διαφορετικούς υποπληθυσμούς. Οι δύο μεγάλες υποομάδες είναι οι CD56dim CD16bright (χαμηλή έκφραση του CD56, υψηλή έκφραση του CD16), και CD56bright CD16dim / -(υψηλή έκφραση του CD56, χαμηλή ή καθόλου έκφραση TOU CD16) κύτταρα CD56dim CD16bright, οι οποίες αντιπροσωπεύουν τουλάχιστον το 90% του συνόλου των περιφερικών ΝΚ κυττάρων του αίματος και έχουν κυτταροτοξική λειτουργία. Κατά την ενεργοποίηση τους, απελευθερώνουν περφορίνη και granzymes από τους κόκκους τους, ενώ κινούνται προς τις θέσεις φλεγμονής σε απόκριση στις χημειοκίνες που απελευθερώνονται κατά τη διάρκεια της φλεγμονής από τα ενδοθηλιακά και έμφυτα κύτταρα του ανοσοποιητικού. (Moretta A, Marcenaro Ε, Parolini S, Feriazzo G, Moretta L. NK cells at the interface between innate and adaptive immunity. Cell Death Differ 2008; 15:226-33).
Τα CD56bright CD16dim / - κύτταρα αποτελούν την πλειοψηφία των κυττάρων ΝΚ στους δευτερογενείς λεμφοειδείς ιστούς, είναι μόνο ασθενώς τοξικά πριν από την ενεργοποίηση τους, αλλά με την επίδραση των κυτοκινών, παράγουν αμέσως μεγάλες ποσότητες INF-γ και μπορεί να έχουν ανοσορυθμιστικές ιδιότητες. (Poli Α, Michel Τ, Theresine Μ, Andres Ε, Hentges F, Zimmer J, CD56bright natural killer (NK) cells: an important NK cell subset. Immunology 2009 Apr;126(4):458-65).
Τα κύτταρα αυτά αποτελούν το μεγαλύτερο πληθυσμό των λευκοκυττάρων του ενδομήτριου (CD56 eGL: ενδομητριακά κοκκιοκύτταρα), ενδεχομένως μετά από τοπική διαφοροποίηση. (Hiby SE1, King A, Sharkey AM, Loke YW, Human uterine NK cells have a similar repertoire of killer inhibitory and activatory receptors to those found in blood, as demonstrated by RT-PCR and sequencing, Mol Immunol. 1997 Apr; 34(5):419-30).
NK-like κύτταρα, (CD56bright CD16dim / -), είναι ο κυρίαρχος πληθυσμός του φθαρτού από τα πρώτα στάδια της εγκυμοσύνης μέχρι και το πρώτο τρίμηνο. Υπάρχουν στοιχεία ότι ο πολλαπλασιασμός και η διαφοροποίηση τους είναι σε συγχρονισμό με την εκκριτική φάση του έμμηνου κύκλου, όταν τα οιστρογόνα και η προγεστερόνη προετοιμάζουν το ενδομήτριο για μια ενδεχόμενη εγκυμοσύνη. Κατά τη διάρκεια αυτής της φάσης, τα στρωματικά λευκοκύτταρα μήτρας αυξάνουν υψηλά (25% από 5%), ως αποτέλεσμα της κυτταρικής εισροής των ΝΚ από το αίμα ή απο άλλους ιστούς ή απο επαναπρογραμματισμό και διαφοροποίηση των κυττάρων του ενδομήτριου αποενδομητρικά κύτταρα σε κύτταρα (ΝΚ). (Gellersen Β, Brosens ΙΑ, Brosens JJ. Decidua lization of the human endometrium: mechanisms, functions, and clinical perspectives. Semin Reprod Med 2007; 25:445-53.Santoni A, Carlino C, Gismondi A. Uterine NK cell development, migration and function. Reprod Biomed Online 2008; 16:202-10). Εάν προκύψει εγκυμοσύνη, τα NK-like κύτταρα αυξάνονται ραγδαία και διανέμονται ευρέως σε όλο φθαρτό που βρίσκεται σε άμεση γειτνίαση με την εξωλαχνωτή τροφοβλάστη. (King A. Uterine leukocytes and decidualization. Hum Reprod Update 2000; 6:28-36).
Λόγω της αυξημένης παρουσίας τους και την άμεση επαφή με την εισβολή της τροφοβλάστης, έχουν θεωρηθεί ως σημαντικά για τον καθορισμό της φυσιολογικής εγκυμοσύνης.
Υπάρχουν ενδείξεις ότι, όταν συμπίπτουν με την εμφύτευση της βλαστοκύστης και τη φθαρτοποίηση, τα ΝΚ κύτταρα του φθαρτού ενεργοποιούνται, παράγουν IFN-γ, περφορίνη και άλλα μόρια, περιλαμβανομένων αγγειογενετικών παραγόντων, έτσι ώστε να μπορούν να ελέγχουν την τροφοβλάστη εισβολής μέσω της κυτταροτοξική δράση τους, καθώς επίσης να υποκινούν την αστάθεια αγγείων αναδιαμόρφωνοντας τις αρτηρίες του φθαρτού για να αυξηθεί η παροχή αίματος στο εμβρυο-πλακουντική μονάδα. (Ashkar ΑΑ, Di Santo JP, Cray BA. Interferon gamma contributes to initiation of uterine vascular modification, decidual integrity, and uterine natural killer cell maturation during normal murine pregnancy. J Exp Med 2000;192:259-70). Επιπλέον, τα ΝΚ κύτταρα του φθαρτού μπορεί να εμπλέκονται στην ανοσορύθμιτική μεσολάβηση των κυτοκινών της μητρικής ανοσολογικής απόκρισης, παράγοντας κυτοκίνες τύπου Th2 και αυξητικούς παράγοντες, που οδηγούν σε αύξηση του πλακούντα και τοπική α νοσοκαταστολή και ανοσορύθμιση. (Clark D, Arck PC, Jallili R, et al. Psycho-Neuro-Cytokine/Endocrine pathways in immunoregulation during pregnancy. Am J Reprod Immunol 1996;35:330-7Chaouat G, Tranchot Diallo J, Volumenie JL, et al. Immune suppression and Th1/Th2 balance in pregnancy revisited: A (very) personal tribute to Tom Wegmann. Am J Reprod Immunol 1997;37:427-34).
Τα ΝΚ κύτταρα του φθαρτού φαίνεται να είναι ο κύριος πληθυσμός των κυττάρων που εμπλέκονται σε υποθέσεις των λεγάμενων αλλοάνοσων αποβολών, όπου το έμβρυο αναγνωρίζεται ως ξένο και "απορρίπτετε" από τη μητέρα. (Labarrere CA. Allogeneic recognition and rejection reactions in the placenta. Am J Reprod Immunol 1989;21 :94-9 Stem JJ, Coulam CB: Current status of immunologic recurrent pregnancy loss. Curr Opin Obstet Gynecol 1993;5:252-9). Κάτω από την επίδραση των κυτοκινών Th1 τύπου, διεγείρονται για να γίνουν κλασικά ΝΚ κύτταρα που εκφράζουν CD16 (CD56dim CD16bright), τα οποία μπορούν να βλάψουν την τροφοβλάστη είτε άμεσα με την απελευθέρωση κυτταρολυτικών ουσιών είτε έμμεσα με την παραγωγή φλεγμονωδών κυτοκινών. (King A, Wheeler R, Carter NP, et al. The response of human decidual leukocytes to IL-2. Cell Immunol 1992;141:409-42).
Κλινικές μελέτες έχουν αποδείξει ότι οι γυναίκες που έχουν την τάση να αποβάλουν έχουν αυξημένους αριθμούς κυττάρων ΝΚ του συμβατικού τύπου CD3-CD56 CD16 στη μήτρα, (Vassiliadou Ν, Bulmer JN: Immunohistochemical evidence for increased numbers of 'classic' CD57+ natural killer cells in the endometrium of women suffering spontaneous early pregnancy loss. Hum Reprod 1996;11:1569-74 Kwak JY, Beer AE, Kim SH, et al. Immunopathology of the implantation site utilizing monoclonal antibodies to natural killer cells in women with recurrent pregnancy losses. Am J Reprod Immunol 1999;41:91-8), καθώς και αυξημένα υποσύνολα των ΝΚ κυττάρων στο αίμα και /ή τοξικότητα των ΝΚ κυττάρων, τα οποία έχουν όλα έχουν συσχετιστεί με τις αποβολές των χρωμοσωμικά υγιών εμβρύων. (Coulam CB, Goodman C, Roussev RG, et al. Systemic CD56+ cells can predict pregnancy outcome. Am J Reprod Immunol 1995;33:40-6 Aoki K, Kajiura S, Matsumoto Y, et al. Preconceptual natural killer cell activity as a predictor of miscarriage. Lancet 1995;345:1340-2).
Λόγω των παραπάνω δεδομένων, ο αυξημένος αριθμός και/ή η τοξικότητα των περιφερικών κυττάρων ΝΚ στο αίμα (CD56bright CD16dim / -) χρησιμοποιούνται στην πράξη για τη διάγνωση των αλλοάνοσων αποβολών και ως δείκτες για την επιλογή των γυναικών για ανοσοθεραπεία (Coulam CB, Goodman C, Roussev RG, et al. Systemic CD56+ cells can predict pregnancy outcome. Am J Reprod Immunol 1995;33:40-6 Aoki K, Kajiura S, Matsumoto Y, et al. Preconceptual natural killer cell activity as a predictor of miscarriage. Lancet 1995;345:1340-2).
Κλασικά, οι κύριες θεραπείες για να μειώσουν την καταστρεπτική ενεργοποίηση κυττάρων ΝΚ και να αποτρεπτούν οι αποβολές ή/ και RIF είναι η ενεργός ανοσοποίηση των γυναικών με τη χρήση πατρικών λεμφοκυττάρων ή λεμφοκυττάρων τρίτων Gafter U, Sredni Β, Segal J, Kalechman Y. Suppressed cellmediated immunity and monocyte and natural killer cell activity following allogeneic immunization of women with spontaneous recurrent abortion. J Clin Immunol 1997;17:408-19)), και η παθητική ανοσοποίηση υπό μορφή ενδοφλέβιας χορήγησης της ανοσοσφαιρίνης Γ (IVIg) (Ruiz JE, Kwak JY, Baum L, et al. Intravenous immunoglobulin inhibits natural killer cell activity in vivo in women with recurrent spontaneous abortion. Am J Reprod Immunol 1996;35:370-5). Μερικές γνωστές παρενέργειες ή ανεπιθύμητες ενέργειες της Ενδοφλέβιας ανοσοσφαιρίνη είναι: Άσηπτη μηνιγγίτιδα, νεφρική ανεπάρκεια, θρομβοεμβολή, αιματολυτικές αντιδράσεις, αναφυλακτικές αντιδράσεις, νόσο των πνευμόνων, εντερίτιδα, δερματολογικές διαταραχές και λοιμώδη νοσήματα (Stiehm, 2013).
Μια εναλλακτική θεραπεία που προτείνεται κατά τη διάρκεια των τελευταίων ετών, για την καταστολή της λειτουργικής τοξικότητας των ΝΚ κυτταρων, είναι η ενδοφλέβια χορήγηση γαλακτωμάτων λίπους (ex, Intralipid®) που περιλαμβάνει καθαρό έλαιο σόγιας, καθαρό φωσφολιπίδιο αυγού, άνυδρη γλυκερίνη και νερό για έγχυση, η οποία συνήθως χρησιμοποιείται ως πηγή ενέργειας και απαραίτητων λιπαρών οξέων σε ασθενείς με θρεπτικές ή άλλές διαταραχές που απαιτούν παρεντερική διατροφή (Natural killer cell functional activity suppression by intravenous immunoglobulin, Intralipid and soluble human leukocyte antigen-G. Am J Reprod Immunol 2007;57:262-9, Meng L, Lin J, Chen L, Wang Z, Liu M, Liu Y, Chen X, Zhu L). Η θεραπεία με Intralipid® μειώνει την τοξικότητα των περιφερικών (ΝΚ) κυττάρων του αίματος, αλλά δεν μειώνει τον αριθμό των περιφερικών (ΝΚ) κυττάρων του αίματος.
Η ενδοφλέβια έγχυση των Intralipid® μπορεί να προκαλέσει διάφορες παρενέργειες όπως πόνο της ουροδόχου κύστης, αιματηρά ή θολά ούρα, ρίγη, δυσκολία ούρησης- κάψιμο, ή επώδυνη ούρηση, πυρετό, συχνή ανάγκη για ούρηση, πόνους χαμηλά στην πλάτη ή στο πλάι, πονόλαιμο και έμετο. Πρόσφατες έρευνες έχουν δείξει ότι η ενδοφλέβια χορήγηση Intralipid® μπορεί να προκαλέσει ηπατομεγαλία, ίκτερο, χολόσταση, σπληνομεγαλία, θρομβοκυτταροπενία, λευκοπενία και σύνδρομο υπερφόρτωσης λίπους (<1% σε κλινικές δοκιμές) (FDA, 2007).
Τόσο ο αυξημένος αριθμός όσο και η αυξημένη τοξικότητα των περιφερικών ΝΚ κυττάρων αίματος μπορούν να προκαλέσουν αυτόματες επαναλαμβανόμενες αποβολές (Am J Reprod Immunol. 2007 Νον;58(5):447-59. Decline in number of elevated blood CD3(+) CD56(+) NKT cells in response to intravenous immunoglobulin treatment correlates with successful pregnancy, van den Heuvel MJ1, Peralta CG, Hatta K, Han VK, Clark DA; An Increased NK-cell percentage 5 days after the pregnancy termination could be a marker of immune aetiology of miscarriage, as the probability of an aborter with NK >12% to have an immunemediated abortion is almost 90%. Am J Reprod Immunol. 2008 Apr;59(4):306-15. doi: 10.1111/j. 1600-0897.2007. 00547.x. Epub 2008 Feb 21).
Έχει αποδειχθεί ότι η μέτρηση των ΝΚ κυττάρων του περιφερικού αίματος κατά τη στιγμή της αποβολής είναι πολύτιμη και λόγω της σημαντικού ρόλου του αυξημένου αριθμού των ΝΚ κυττάρων. (Paparistidis Ν1, Papadopoulou C, Chioti A, Papaioannou D, Tsekoura C, Keramitsoglou T, Kontopoulou-Antonopoulou V, Agapitos E, Balafoutas C, Varla-Leftherioti M).
Διάφορες μελέτες έχουν δείξει ότι η μείωση του περιφερικού αριθμού και της τοξικότητας των κυττάρων ΝΚ, οδηγεί σε σημαντική βελτίωση του ποσοστού γεννήσεων που αυξάνεται σε πολύ υψηλά επίπεδα. Am J Reprod Immunol. 2006 Mar;55(3):232-9; High levels of peripheral blood NK cells in women suffering from recurrent spontaneous abortion are reverted from high-dose intravenous immunoglobulins (Perricone R1, Di Muzio G, Perricone C, Giacomelli R, De Nardo D, Fontana L, De Carolis C. Am J Reprod Immunol. 2010 Mar 1;63(3):263-5. doi: 10.111 1/j.1600-0897. 2009. 00790.x. Epub 2010 Jan 8; CD3-CD56+CD16+ natural killer cells and improvement of pregnancy outcome in IVF/ICSI failure after additional IVIG-treatment.Heilmann L1 , Schorsch M, Hahn T. Am J Reprod Immunol. 2007 Apr;57(4):262-9; Natural killer cell functional activity suppression by intravenous immunoglobulin, intralipid and soluble human leukocyte antigen-G.. Roussev RG1, Ng SC, Coulam CB.(Am J Reprod Immunol. 2007 Nov;58(5):447-59; Decline in number of elevated blood CD3(+) CD56(+) NKT cells in response to intravenous immunoglobulin treatment correlates with successful pregnancy. Van den Heuvel MJ1 , Peralta CG, Hatta K, Han VK, Clark DA).
Οι προαναφερθείσες θεραπείες εντούτοις, έχουν διάφορα αρνητικά και μειονεκτήματα. Παραδείγματος χάριν, απαιτούν επαναλαμβανόμενες εισαγωγές των ασθενών σε νοσοκομείο καθώς επίσης και μόνιμη παρακολούθηση γιατρού. Επιπλέον, δεδομένου ότι οι ασθενείς νοσηλεύονται, μπορούν να εκτεθούν στις νοσοκομειακά επίκτητες λοιμώξεις. Επιπλέον, αυτές οι μέθοδοι συνδέονται με τους κινδύνους και τις παρενέργειες των επεμβατικών θεραπειών (συμπεριλαμβανομένων απειλητικών για τη ζωή όπως σηψαιμία από ανθρώπινα παραγόμενα προϊόντα, πήξη του αίματος από τις εγχύσεις λιπαρών γαλακτωμάτων). Επιπλέον, αυτές οι θεραπείες είναι συνδεδεμένες με σοβαρές ανεπιθύμητες ενέργειες. Η παρούσα εφεύρεση αντιμετωπίζει αυτά τα θέματα και παρέχει έναν αριθμό πλεονεκτημάτων σε σύγκριση με τις προηγούμενες θεραπείες.
Περίληψη της εφεύρεσης
Η παρούσα εφεύρεση περιέχει συνθέσεις για χορήγηση από το στόμα που περιλαμβάνουν ένα συνδυασμό λιπαρών οξέων και /η εστέρων αυτών, για χρήση από γυναίκες που βιώνουν επαναλαμβανόμενες αποβολές (RSA) ή επανειλημμένες αποτυχίες εμφύτευσης (RIF) στην in vitro γονιμοποίηση (IVF) και έχουν αυξημένο αριθμό και /η’ τοξικότητα των περιφερικών ΝΚ κυττάρων.
Η σύνθεση της παρούσας εφεύρεσης περιλαμβάνει ως δραστικά συστατικά ένα συνδυασμό λιπαρών οξέων καί/ή εστέρων αυτών, και χορηγούνται σε ορισμένα ποσά και πάνω από ένα ορισμένο χρονικό διάστημα.
Κατά συνέπεια, η παρούσα εφεύρεση έχει ως στόχο να αποτρέψει την υπογονιμότητα που οφείλεται σε ανοσολογικούς παράγοντες, σε μια πολύ σημαντική ομάδα ζευγαριών που αντιμετωπίζουν σχετικά προβλήματα, τα οποία πέρα που στην οικογενειακή κατάσταση, στερούνται τη δυνατότητα να γεννήσουν ένα παιδί, θα μπορούσε επίσης να έχει σημαντικό κοινωνικό, ψυχολογικό και οικονομικό αντίκτυπο.
Λεπτομερής περιγραφή της εφεύρεσης
Έχει τώρα αναπάντεχα βρεθεί ότι μία από του στόματος σύνθεση που περιλαμβάνει ένα μείγμα από συνδυασμό λιπαρών οξέων και /η εστέρων αυτών, που χορηγείται σε ορισμένες ποσότητες και πάνω από ένα ορισμένο χρονικό διάστημα μειώνει τον αριθμό και/η’ την τοξικότητα των περιφερικών φυσικών φονικών κύτταρων σε γυναίκες που βιώνουν επαναλαμβανόμενες αποβολές (RSA) ή επανειλημμένες αποτυχίες εμφύτευσης (RIF) στην in vitro γονιμοποίηση (IVF) και έχουν αυξημένο αριθμό και/η’ τοξικότητα των περιφερικών ΝΚ κυττάρων.
Έτσι, η παρούσα εφεύρεση παρέχει μια σύνθεση για χορήγηση από το στόμα που περιέχει ως δραστικά συστατικά ένα συνδυασμό λιπαρών οξέων και/η εστέρων αυτών, και χρησιμοποιείται μια μέθοδος για την θεραπεία των επαναλαμβανόμενων αυτόματων αποβολών η των επαναλαμβανόμενων επανειλημμένων αποτυχιών εμφύτευσης (RIF) στην in vitro γονιμοποίηση (IVF) οι οποίες έχουν πάνω από 12% περιφερικά φονικά κύτταρα στα συνολικά κύτταρα του περιφερικού αίματος ή / και όπου η τοξικότητα των περιφερικών ΝΚ κυττάρων του θηλυκού υπό έλεγχο είναι τουλάχιστον παρέχει μια σύνθεση για χορήγηση από το στόμα που περιέχει ως δραστικά συστατικά ένα συνδυασμό λιπαρών οξέων και/η εστέρων αυτών, και χρησιμοποιείται μια μέθοδος για την θεραπεία των επαναλαμβανόμενων αυτόματων αποβολών η των επαναλαμβανόμενων επανειλημμένων αποτυχιών εμφύτευσης (RIF) στην in vitro γονιμοποίηση (IVF) οι οποίες έχουν πάνω από 12% περιφερικά φονικά κύτταρα στα συνολικά κύτταρα του περιφερικού αίματος ή / και όπου η τοξικότητα των περιφερικών ΝΚ κυττάρων του θηλυκού υπό έλεγχο είναι τουλάχιστον 10% υψηλότερη από τη μέση τοξικότητα του πληθυσμού έλεγχου υγειών γυναικών αναπαραγωγικής ηλικίας χωρίς αναπαραγωγικές αποτυχίες και οι οποίες έχουν γεννήσει τουλάχιστον ένα παιδί, όπου η στοματική σύνθεση χορηγείται για εώς 70 μέρες και το συνολικό ποσό των λιπαρλων οξέων και των εστέρων αυτών που χορηγείται ανά ημέρα είναι από 0,03g/kg σωματικού βάρους εώς 1 gk/kg σωματικού βάρους , υπολογισμένα ως λιπαρά οξέα.
Η παρούσα εφεύρεση επίσης παρέχει μια μέθοδο για την θεραπεία των επαναλαμβανωμενων αυτόματων αποβολών η των επανειλημμένων αποτυχιών εμφύτευσης (RIF) στην in vitro γονιμοποίηση (IVF) οι οποίες έχουν πάνω απο 12% ΝΚ κύτταρα περιφερικού αίματος στα συνολικά κύτταρα περιφερικού αίματος ή / και οπού η τοξικότητα των περιφερικών ΝΚ των γυναικών που ελέγχονται είναι τουλάχιστον 10% υψηλότερη από τη μέση τοξικότητα του πληθυσμού έλεγχου υγιών γυναικών αναπαραγωγικής ηλικίας χωρίς αναπαραγωγικές αποτυχίες και οι οποίες έχουν γεννήσει τουλάχιστον ένα παιδί, η οποία περιλαμβάνει τη χορήγηση στην γυναίακα την από του στόματος σύνθεση που περιέχει ως δραστικά συστατικά ένα συνδυασμό λιπαρών οξέων ή εστέρες αυτών, όπου η σύνθεση χορηγείται από του στόματος για 15 έως 70 ημέρες και όπου η συνολική ποσότητα των λιπαρών οξέων ή εστέρες αυτών χορηγούνται ανά ημέρα είναι από 0,03 g / kg σωματικού βάρους έως 1 g / kg σωματικού βάρους, που υπολογίζεται ως λιπαρά οξέα.
Για να καθορίσουμε την τοξικότητα των ΝΚ κυττάρων, διάφορες μέθοδοι μπορούν να χρησιμοποιηθούν. Αν και η μέθοδος της απελευθέρωσης 51 Cr είναι η κλασική μέθοδος για τον προσδιορισμό τοξικότητας, εναλλακτικές μέθοδοι είναι διαθέσιμες και διάφορες άλλες βρίσκονται σε στάδια ανάπτυξης. Σε εργαστήρια όπου η χρήση ραδιενεργών ισοτόπων δεν είναι επιθυμητή ή επιτρεπτή, ή
όταν χρησιμοποιούνται καρκινικά κύτταρα στόχοι τα οποία δεν προσλαμβάνουν το 51 Cr, τα συστήματα δοκιμών που χρησιμοποιούν ένζυμα και χρωματομετρική ή φθορισμομετρική βαφή θα μπορούσαν να χρησιμοποιηθούν. Σήμερα, η πιο κοινή μέθοδος για τον προσδιορισμό της δραστικότητας των κυττάρων ΝΚ είναι η κυτταρομετρία ροής, μία μέθοδος που μπορεί να τροποποιηθεί σχετικά με τη χρήση των αντιδραστηρίων της , παρ 'όλα αυτά το αποτέλεσμα παραμένει το ίδιο. Σήμερα, η πιο κοινή μέθοδος για τον προσδιορισμό της δραστικότητας των κυττάρων ΝΚ είναι η κυτταρομετρία ροής, μία μέθοδος που μπορεί να τροποποιηθεί σχετικά με τη χρήση των αντιδραστηρίων της, παρ 'όλα αυτά το αποτέλεσμα παραμένει το ίδιο. (Determination of natural killer cell function by flow cytometry. Kimberly I.Kane et al, Clinical and diagnostic laboratory immunology, may 1996, p. 295-300; Evaluation of a Flow Cytometry-Based Assay for Natural Killer Cell Activity in Clinical Settings, R. Valiathan et al. 2011 The Authors. Scandinavian Journal of Immunology).
Ένα άτομο ειδικευμένο στην τεχνική αυτή εκτιμά ότι η τοξικότητα των ΝΚ κυττάρων κανονικά ενδέχεται να διακυμαίνεται σε ένα άτομο από τις πολλές πιθανές ανοσολογικές και ενδοκρινικές επιδράσεις στα ΝΚ κύτταρο. Ως εκ τούτου, μικρές αλλαγές στην τοξικότητα των ΝΚ κυττάρων μπορεί να αναμένονται
όταν εξετάζονται επανειλημμένα, υγιή άτομα. Ένας διαφορετικός πληθυσμός ελέγχου θα μπορούσε να δώσει διαφορετικές μέσες τιμές τοξικότητας των ΝΚ.
Παρόλα αυτά, η παρούσα εφεύρεση εφαρμόζεται σε γυναίκες (human female subjects) οι οποίες έχουν τοξικότητα των περιφερικών ΝΚ κυττάρων τουλάχιστον 10% υψηλότερη από τη μέση τοξικότητα ενός πληθυσμού
έλεγχου υγειών γυναικών αναπαραγωγικής ηλικίας,
χωρίς αναπαραγωγικές αποτυχίες όπως αποβολές ή αποτυχημένες IVFs και που έχουν γεννήσει τουλάχιστον ένα παιδί.
Σύμφωνα με την παρούσα εφεύρεση ο όρος «επαναλαμβανόμενες αποβολές (RSA)» ορίζεται ως δύο ή περισσότερες αυτόματες απώλειες εγκυμοσύνης πριν από την 20η εβδομάδα κύησης.
Σύμφωνα με την παρούσα εφεύρεση ο όρος "Επανειλημμένες αποτυχίες εμφύτευσης (RIF)» ορίζεται ως η απουσία εμφύτευσης μετά από δύο επαναλαμβανόμενους ανεπιτυχείς κύκλους εξωσωματικής γονιμοποίησης (IVF), ή ενδοκυτταροπλασματικής έγχυσης σπέρματος (ICSI) ή κύκλους αντικατάστασης κατεψυγμένων έμβρυων.
Σύμφωνα με την παρούσα εφεύρεση, αυξημένη τοξικότητα ΝΚ
κυττάρων του περιφερικού αίματος ορίζεται ως κάθε δραστηριότητα θανάτωσης η οποία είναι τουλάχιστον 10% υψηλότερη από τη μέση τοξικότητα ενός πληθυσμού ελέγχου υγιών γυναικών αναπαραγωγικής ηλικίας χωρίς αναπαραγωγικές αποτυχίες, όπως αποβολές ή αποτυχημένες IVFs, και οι οποίες έχουν γεννήσει τουλάχιστον ένα παιδί.
Ο όρος «θεραπεία των επαναλαμβανόμενων αυτόματων αποβολών ή επανειλημμένων αποτυχιών εμφύτευσης», σημαίνει τη μείωση του κινδύνου αποβολής του ατόμου που υπόκειται στην θεραπεία σε σύγκριση με τον κίνδυνο που θα είχε εκτεθεί εάν δεν είχε θεραπευτεί, όπως επίσης και την βελτίωση της έκβασης της εγκυμοσύνης.
Σύμφωνα με την παρούσα εφεύρεση, ο όρος «λιπαρό οξύ», σημαίνει ένα αλειφατικό μονοκαρβοξυλικό οξύ που έχει μια κορεσμένη ή ακόρεστη αλυσίδα, που συνήθως περιλαμβάνει από 4 έως 28 άτομα άνθρακα.
Σύμφωνα με την παρούσα εφεύρεση,, ο όρος "λιπαρό οξύ μακράς αλύσου" σημαίνει ένα λιπαρό οξύ που έχει μία αλειφατική αλυσίδα από 13 ή περισσότερα άτομα άνθρακα.
Σύμφωνα με την παρούσα εφεύρεση, ο όρος «λιπαρό οξύ μέσης αλύσου” σημαίνει ένα λιπαρό οξύ που έχει μία αλειφατική αλυσίδα από 6 έως 12 άτομα άνθρακα.
Σύμφωνα με την παρούσα εφεύρεση, ο όρος "λιπαρό οξύ μικρής αλύσου" σημαίνει ένα λιπαρό οξύ που έχει μία αλειφατική αλυσίδα με λιγότερα από 6 άτομα άνθρακα.
Η σύνθεση της παρούσας εφεύρεσης περιλαμβάνει ένα συνδυασμό λιπαρών οξέων και/ή εστέρες αυτών Τα λιπαρά οξέα περιλαμβάνουν λιπαρά μικρής αλύσου, μέσης αλύσου ή μακράς αλύσου, κορεσμένα ή ακόρεστα λιπαρά οξέα. Κατά προτίμηση, η σύνθεση της παρούσας εφεύρεσης περιλαμβάνει μακράς αλύσου λιπαρά οξέα ή μακράς αλύσου και μεσαίας αλύσου λιπαρά οξέα και /η εστέρες αυτών
Τα παραδείγματα κορεσμένων λιπαρών οξέων μακράς αλύσου περιλαμβάνουν παλμιτικό, στεατικό, μυριστικό και αρχιδικό.
Τα παραδείγματα μονοακόρεστων λιπαρών οξέων
μακράς αλύσου περιλαμβάνουν ελαικ’ο, Δοκοσαεξανοϊκο οξύ (DHA) Εικοσαπεντανοικ’ο(ΕΡΑ), παλμιτολεικο, μυριστολεικ’ο και σαπιενικό οξύ.
Τα παραδείγματα πολυακόρεστων λιπαρών οξέων
μακράς αλυσου περιλαμβάνουν λινολεικό, α-λινολενικό και γ λινολενικό οξύ.
Τα παραδείγματα λιπαρών οξέων μεσαίας
αλύσου περιλαμβάνουν λαυρικό, καπρικό και καπριλικό.
Τα παραδείγματα λιπαρών οξέων μικρής αλύσου περιλαμβάνουν βουτανοικό, 2-μεθυλπροπανοικό, πεντανοικό και 3-μεθυλβουτανοικό οξύ.
Οι εστέρες των λιπαρών οξέων της σύνθεσης της παρούσας εφεύρεσης είναι εστέρες των λιπαρών οξέων με τα αλειφατικές αλκοόλες, όπως οι C1-C6 αλκοόλες, γλυκερίδια δηλ. Μονογλυκερίδια, διγλυκερίδια η τριγλυκερίδια, φωσφολιπίδια, όπως τα φωσφατιδικά οξέα ή φωσφογλυκερίδια, σφινγκολιπίδια, σακχαρολιπΐδια, τα κεριά και τα μίγματα εξ' αυτών. Κατά προτίμηση, οι εστέρες λιπαρού οξέος είναι μονογλυκερίδια, διγλυκερίδια, η τριγλυκερίδια, φωσφολιπίδια σφινγκολιπίδια, σακχαρολιπΐδια και μίγματα εξ’ αυτών. Κατά προτίμηση, οι εστέρες λιπαρού οξέος είναι μονογλυκερίδια, διγλυκερίδια, η τριγλυκερίδια, και μίγματα εξ' αυτών.
Σύμφωνα με την παρούσα εφεύρεση ο όρος n υπολογισμένα ως λιπαρά οξέα» σημαίνει ότι, όταν η σύνθεση περιλαμβάνει έναν ή περισσότερους εστέρες λιπαρού οξέος, τα ποσά τους πρέπει να μετατραπούν σε εκείνα των αντίστοιχων λιπαρών οξέων προκειμένου να καθοριστεί η ποσότητα τους στην σύνθεσης που πρέπει να χορηγηθεί από του στόματος.
Κατά προτίμηση η σύνθεση της παρούσας εφεύρεσης αποτελείται τουλάχιστον από ένα κορεσμένο, τουλάχιστον ένα μονοακόρεστο και τουλάχιστον ένα πολυακόρεστο λιπαρό οξύ μακράς αλύσου ή/και ένας εστέρας εξ αυτών.
Κατά προτίμηση, τουλάχιστον το 50% του βάρους των ενεργών συστατικών στη σύνθεση της παρούσας εφεύρεσης, που υπολογίζονται ως λιπαρά οξέα, είναι μακράς αλύσου λιπαρά οξέα ή/και οι εστέρες εξ' αυτών Κατά προτίμηση, τουλάχιστον το 65% του βάρους των ενεργών συστατικών στη σύνθεση της παρούσας εφεύρεσης, υπολογισμένα ως λιπαρά οξέα, είναι μακράς αλύσου λιπαρά οξέα και/η’ εστέρες αυτών.
Ακόμα προτιμότερα, τουλάχιστον 97% του βάρους των ενεργών συστατικών στη σύνθεση της παρούσας εφεύρεσης, υπολογισμένα ως λιπαρά οξέα, είναι μακράς αλύσου λιπαρά οξέα και/η’ εστέρες αυτών.
Τα λιπαρά οξέα της σύστασης της παρούσας εφεύρεσης δρούν ως ενδοκυτταρικοί και διακυτταρικοί μεσολαβητές που έχουν διάφορες επιδράσεις στο ανοσοποιητικό και στις φλεγμονώδεις αντιδράσεις, όπου εμπλέκονται τα ΝΚ κύτταρα. Τα λιπαρά οξέα συμμετέχουν μέσω διαφόρων μηχανισμών στην διαμόρφωση του ανοσοποιητικού συστήματος, συμπεριλαμβανομένων (i) τη ρευστότητα της μεμβράνης; (Μ) η παραγωγή των υπεροξειδίων των λιπιδίων; (Ιϋ) σύνθεση εικοσανοειδών και (iν) επίδραση στην γονιδιακή ρύθμιση. Είναι πιθανό ότι η ανοσοτροποποίητικη δράση των λιπαρών οξέων λαμβάνει χώρα όχι μόνο μεμονομένα, αλλά και με την συλλογική δράση αυτών των παραγόντων.
Τα συστατικά της παρούσας εφεύρεσης μπορεί να περιέχουν επιπρόσθετα ενεργά συστατικά, όπως βιταμίνες, ιόντα μετάλλων ή αμινοξέα.
Όταν αυτά τα ενεργά συστατικά είναι παρόντα, η συνολική ποσότητά τους είναι κατά προτίμηση μικρότερή από το 6% της συνολικής ποσότητας των δραστικών συστατικών. Παραδείγματα βιταμινών περιλαμβάνουν οι βιταμίνες Β1, Β2, Β3, Β6, D, μυο-ινοσιτόλη, ινοσιτόλη και φολικό οξύ. Τα ιόντα μετάλλων μπορεί να περιλαμβάνουν για παράδειγμα, σελήνιο, μαγνήσιο, χαλκό, ψευδάργυρο ή μαγγάνιο. Τα αμινοξέα μπορεί να περιλαμβάνουν φυσικά αμινοξέα, όπως L-αργινίνη ή L- γλουταμίνη. Οι βιταμίνες, τα ιόντα μετάλλων ή τα αμινοξέα δεν συμβάλλουν άμεσα στη μείωση του αριθμού και /ή της τοξικής δράσης των ΝΚ κυττάρων, αλλά συμβάλλουν στην ανοσολογική άμυνα του οργανισμού στήριζοντας την φυσική ανοσία, την κυτταρική ανοσία και την παραγωγή αντισωμάτων. Παρ 'όλα αυτά υπάρχει η πεποίθηση ότι η στεροειδής ορμόνη 1,25-διυδροξυβιταμίνη D3 {1 ,25-(ΟΗ) 2-Θ3) έχει α νοσοκατασταλτική δράση.
Η παρουσία των βιταμινών στην σύνθεση της παρούσας εφεύρεσης επιδεικνύει άνοσολογικη ρύθμιση και ομοιοστατική επίδραση στο περιβάλλον όπου βρίσκονται τα ΝΚ κύτταρα. Ο στόχος είναι να δημιουργηθεί ένα ευνοϊκό περιβάλλον και να συμβάλει στη βελτίωση ολόκληρης της αναπαραγωγικής διαδικασίας, που διαμορφώνει τη μητρική απάντηση, με την διατήρηση του ανοσοποιητικού συστήματος σε ισορροπία. Εντούτοις, το αυξημένο επίπεδο βιταμινών μπορεί να ωθήσει το ανοσοποιητικό σύστημα και να αυξήσει την επίδραση των ΝΚ κυττάρων. Γ ια αυτό το λόγο όταν υπάρχουν βιταμίνες στην σύνθεση της παρούσας εφεύρεσης, η συνολική τους ποσότητα είναι κατά προτίμηση λιγότερη απο 4% του συνολικού ποσού των ενεργών συστατικών.
Τα συστατικά της παρούσας εφέυρεσης μπορούν να έχουν οποιαδήποτε μορφή κατάλληλη για χορήγηση από το στόμα. Τέτοιες μορφές είναι καλά γνωστές σε ένα πρόσωπο έμπειρο σε αυτή την τεχνική και περιλαμβάνουν υγρές μορφές, όπως διαλύματα από του στόματος, εναιωρήματα ή γαλακτώματα από του στόματος, πηκτές ή στερεές μορφές από του στόματος, όπως δισκία, κάψουλες ή φακελάκια. Τα συστατικά της παρούσας εφέυρεσης μπορούν να χορηγηθούν σαν συμπλήρωμα διατροφής.
Τα συστατικά της παρούσας εφέυρεσης, εκτός από τα δραστικά συστατικά, μπορεί να περιλαμβάνουν ένα ή περισσότερα φαρμακευτικά αποδεκτά έκδοχα καλά γνωστά στην τέχνική αυτή, όπως συνδετικά, αραιωτικά, αποσαθρωτικά, παράγοντες εναιώρησης, λιπαντικά, διαλύτες, γαλακτωματοποιητές, παράγοντες πάχυνσης, ρυθμιστικούς παράγοντες, συντηρητικά, γλυκαντικές ουσίες, χρωστικές, αρωματικές ουσίες και τα παρόμοια.
Οι συνθέσεις μπορούν να παράγονται με μεθόδους καλά γνωστές απο άτομο έμπειρο στην τεχνική αυτή.
Οι συνθέσεις της παρούσας εφεύρεσης χορηγούνται για 15 εώς 70 μέρες. Κατά προτίμηση, οι συνθέσεις χορηγούνται για 30 εώς 60 μέρες. Κατά μεγαλύτερη προτίμηση, οι συνθέσεις χορηγούνται για 40 εώς 50 μέρες. Η πρώτη ημέρα της χορήγησης μπορεί να είναι οποιαδήποτε ημέρα του έμμηνου κύκλου του ατόμου.
Οι συνθέσεις της παρούσας εφεύρεσης μπορούν να χορηγηθούν μία φορά την ημέρα ή περισσότερο από μία φορά ανά ημέρα, π.χ. δύο φορές την ημέρα. Παρ 'όλα αυτά, σύμφωνα με την παρούσα εφεύρεση η συνολική ποσότητα των λιπαρών οξέων και οι εστέρες αυτών που χορηγούνται ανά ημέρα είναι από 0,03 g/kg του σωματικού βάρους εώς 1 g/kg σωματικού βάρους , υπολογισμένα ως λιπαρά οξέα. Κατά προτίμηση, η συνολική ποσότητα των λιπαρών οξέων και εστέρες αυτών που χορηγούνται ανά ημέρα είναι από 0,10 g/kg του σωματικού βάρους εώς 0,70 g/kg του σωματικού βάρους, υπολογισμένα ως λιπαρά οξέα. Ακόμα προτιμότερα, η συνολική ποσότητα των λιπαρών οξέων και οι εστέρες αυτών που χορηγούνται ανά ημέρα είναι από 0,20 g/kg του σωματικού βάρους εώς 0,50 g/kg του σωματικού βάρους, υπολογισμένα ως λιπαρά οξέα.
Οι συνθέσεις της παρούσας εφεύρεσης συγκεκριμένα μειώνουν τον αριθμό και /ή την τοξικότητα των περιφερικών ΝΚ κυττάρων του αίματος χωρίς συνολική καταστολή του ανοσοποιητικού συστήματος.
Με την παρούσα εφεύρεση, και η τοξικότητα των ΝΚ κυττάρων και το ποσοστό των ΝΚ κυττάρων στα συνολικά κύτταρα του περιφερικού αίματος παραμένουν σε χαμηλά επίπεδα για 12-14 εβδομάδες μετά τη διακοπή της θεραπείας, επιτυγχάνοντας μια παρατεταμένη προστασία και πρόληψη των (RSA ή RIF) σε υπογόνιμες γυναίκες που έχουν αυξημένο αριθμό περιφερικών ΝΚ κυττάρων του αίματος και / ή αυξημένη τοξικότητα των ΝΚ κυττάρων του περιφερικού αίματος. Αυτό αντιπροσωπεύει μια μεγάλη βελτίωση σε σχέση ενδοφλέβια χορήγηση του Intralipid<®>, κατά την οποία η επίδραση του παύει μετά από 6-9 εβδομάδες από την διακοπή της θεραπείας (Acacio Β, Ng SC.Coulam CB., Am J Reprod Immunol. 2008 Sep;60(3):258-63. doi: 10.1 111/j.1600-0897.2008. 00621.x. Duration of intralipid's suppressive effect on NK cell's functional activity Roussev RG). Επιπλέον, η ενδοφλέβια έγχυση του Intralipid® μπορεί να προκαλέσει διάφορες παρενέργειες, όπως αιματηρό πόνο της ουροδόχου κύστης ή θολά ούρα, ρίγη, δύσκολία, κάψιμο, ή επώδυνη ούρηση, πυρετό, συχνή ανάγκη για ούρηση, πόνο χαμηλά στην πλάτη ή στο πλάι, πονόλαιμο και έμετο, ενώ η παρούσα εφεύρεση δεν προκαλεί αυτές τις παρενέργειες.
Σε αντίθεση με τις θεραπείες που χρησιμοποιούνται ήδη, οι οποίες εφαρμόζονται με ενδοφλέβιες ή υποδόριες (λεμφοκύτταρική ανοσοποίηση) εγχύσεις, με την παρούσα εφεύρεση οι συνθέσεις χορηγούνται από το στόμα και η πέψη των συστατικών γίνεται μέσω της πεπτικής οδού και ακολουθεί την φυσική διαδικασία κατανάλωσης τροφής και απορρόφησης. Με τον τρόπο αυτό, η θεραπεία των RSA ή RIF γίνεται ευκολότερη και ασφαλέστερη σε σύγκριση με τις προηγούμενες θεραπείες. Επιπλέον, με την παρούσα εφεύρεση δεν υπάρχει ανάγκη για νοσηλεία ή μόνιμη επιτήρηση από γιατρούς και προστατεύει τις γυναίκες από την έκθεση σε νοσοκομειακές λοιμώξεις. Επιπλέον, η παρούσα εφεύρεση δεν σχετίζεται με τους κινδύνους και τις παρενέργειες των παρεμβατικών θεραπειών. Επιπλέον, με την παρούσα εφεύρεση η μείωση του αριθμού και της τοξικότητας των περιφερικών ΝΚ κυττάρων του αίματος διαρκεί περισσότερο μετά την διακοπή της θεραπείας και μια παρατεταμένη προστασία επιτυγχάνεται σε σύγκριση με τις προαναφερθείσες θεραπείες.
Παραδείγματα
Τα παραδείγματα 1-4 απεικονίζουν το αποτέλεσμα των συνθέσεων της παρούσας εφεύρεσης στην μείωση του αριθμού περιφερικών ΝΚ κυττάρων και τη δραστικότητα τους (κυτταροτοξικότητα). Οι συνθέσεις χορηγήθηκαν σε υγιείς γυναίκες της αναπαραγωγικής ηλικίας (μεταξύ 25 - 46 ετών) που αντιμετωπίζουν RSA ή RIF, που είχαν αυξημένο αριθμό των περιφερικών ΝΚ κυττάρων αίματος και αυξημένη τοξικότητα των περιφερικών ΝΚ κύτταρα. Τα δείγματα αίματος από όλες τις γυναίκες ελέγχθηκαν κατά την ημέρα μηδέν πρίν από την έναρξη της θεραπείας, κατά την ημέρα 45ή και την 70ή ημέρα, ανάλογα με την περίπτωση. Όλοι τους έκαναν έλεγχο ρουτίνας 12 εβδομάδες μετά τη διακοπή της θεραπείας.
Ο προσδιορισμός του ποσοστού των ΝΚ κυττάρων και της τοξικότητάς τους διεξήχθη σε δειγμάτα περιφερικού αίματος των συνολικών λεμφοκυττάρων με κυτταρομετρία ροής χρησιμοποιώντας τεχνικές που περιγράφηκαν προηγουμένως. (Determination of natural killer cell function by flow cytometry. Kimberly I. Kane et al, Clinical and diagnostic laboratory immunology, may 1996, p. 295-300; Evaluation of a Flow Cytometry-Based Assay for Natural Killer Cell Activity in Clinical Settings, R. Valiathan et al. 2011 The Authors. Scandinavian Journal of Immunology).
Αυτή η μέθοδος δίνει το ποσοστό των κυττάρων στόχων που θανατώνονται από τα κυτταροτοξικά φυσικά κύτταρα που υπάρχουν στα PBL. Δύο βαφές φθορισμού χρησιμοποιούνται για τη διάκριση μεταξύ τελεστή και κύτταρα στόχους και μεταξύ ζώντων και νεκρών κυττάρων στόχων. Το ένα είναι ένα πράσινο φθορίζον χρώμα, 3,3'-διοκταδεκυλοξακαρβο-κυανινο υπερχλωρικό (DIO) το οποίο χρησιμοποιείται για την επισήμανση των μεμβρανών των Κ562, μιας ανθρώπινης ερυθρολευχαιμικης καρκινικης κυτταρικής γραμμής που χρησιμοποιείται ως πληθυσμιακος στόχος. Η δεύτερη βαφή το ιωδιούχο προπίδιο (ΡΙ), μια αδιαπέραστη μεμβράνη, με κόκκινο φθορίζον χρώμα, το οποίο προστίθεται κατά τη διάρκεια της δοκιμασίας όταν οι στόχοι κύτταρα μεμβράνες διασπάστουν απο τα ΝΚ— like κύτταρα. Τα άθικτα κύτταρα-στόχοι που δεν επηρεάστικαν από τους τελεστές ήταν μονά θετικά (και παρουσίασαν μόνο πράσινο φθορισμό), ενώ οι στόχοι που σκοτώθηκαν από εκτελεστές που φέραν διαταράγμένες μεμβράνες είναι διπλά θετικά (και παρουσίασαν πράσινο καθώς και κόκκινο φθορισμό). Οι τελεστές και τα κύτταρα στόχοι προστέθηκαν σε σωλήνες για να δημιουργηθεί διαφορετική τελεστή-προςστόχο αναλογία (Ε: Τ), 1: 50, 1:25 και 1: 12,5. Στα ακόλουθα παραδείγματα τα αποτελέσματα παρουσιάζονται σε Ε: Τ αναλογίες 50:1 .
Τα δείγματα ελέγχου ήταν υγιείς γυναίκες της αναπαραγωγικής ηλικίας χωρίς αναπαραγωγικές αποτυχίες, όπως αποβολές ή αποτυχημένες IVFs και οι οποίες έχουν γεννήσει τουλάχιστον ένα παιδί. Με βάση τον υγιή πληθυσμό ελέγχου, μέση τοξικότητα ΝΚ ήταν 19% στην 50:1 αναλογία.
Οι αλλαγές στην τοξικότητα και τον αριθμό των ΝΚ κυττάρων από την ημέρα 0 έως και την 70ή ημέρα μετρήθηκαν με την παραπάνω μέθοδο. Κατά τη διάρκεια της χορήγησης των συνθέσεων της εφεύρεσης, το βασικό μέσο ποσοστό του αριθμού και της τοξικότητας των ΝΚ κυττάρων μειώθηκε σημαντικά μετά από 45 ημέρες και στη συνέχεια μειώθηκε κοντά στα επίπεδα της γραμμής βάσης, μετά από 70 ημέρες. Η επαναλαμβανόμενη μέτρηση μετά την χορήγηση των συνθέσεων απο το στόμα έδειξε σημαντική πτώση τόσο στον αριθμό όσο και στην τοξικότητα των ΝΚ κυττάρων.
Στα παρακάτω παραδείγματα, χρησιμοποιούνται οι ακόλουθες συντμήσεις:
ΜΑΛΟ - Μακράς αλύσου λιπαρά οξέα
ΚΛΟ - Κορεσμένα λιπαρά οξέα
ΜΛΟ- Μονοακόρεστα λιπαρά οξέα
ΠΛΟ - Πολυακόρεστα λιπαρά οξέα
ΜΑΛΟ - Μέσαίας αλύσου λιπαρά οξέα.
Παράδειγμα 1
Μια ομάδα 15 γυναικών υποβλήθηκε σε θεραπεία μία φορά την ημέρα με την σύνθεση απο το στόμα σε μορφή πόσιμου διαλύματος που περιείχε τα δραστικά συστατικά που φαίνονται στον Πίνακα 1α. Τα λιπαρά οξέα της σύνθεσης είχαν τη μορφή γλυκεριδίων. Η ποσότητα της χορηγούμενης σύνθεσης ήταν τέτοια ώστε η συνολική ποσότητα των λιπαρών οξέων που χορηγήθηκε ανά ημέρα ήταν 0,25g/kg σωματικού βάρους. Δείγματα αίματος συλλέχθηκαν και ελέγχθηκαν εκ των προτέρων και 45 ημέρες μετά την έναρξη της θεραπείας.
Πίνακα 1α.
Τα αποτελέσματα της μέτρησης του αριθμού και της τοξικότητας των ΝΚ κυττάρων του περιφερικού αίματος φαίνονται στον Πίνακα 1β.
Πίνακα 1β : (45 μέρες)
Το μέσο ποσοστό των περιφερικών ΝΚ κυττάρων αίματος σε συνολικά κύτταρα περιφερικού αίματος ήταν, 20,25 την ημέρα 0 πριν τη θεραπεία και 13,59 κατά την ημέρα 45 μετά την έναρξη της θεραπείας. Αυτή η διαφορά είναι στατιστικά σημαντική (p value <0,0001).
Η μέση τοξικότητα των ΝΚ κυττάρων του περιφερικού αίματος σε αναλογία 50:1 ήταν 46,26 την ημέρα 0 πριν από τη θεραπεία και 18,54 την 45η ημέρα μετά την έναρξη της θεραπείας. Αυτή η διαφορά ήταν στατιστικά σημαντική (p value 0,0001).
Πέντε γυναίκες απο το παραπάνω γκρούπ συνέχισαν την θεραπεία για συνολικά 70 ημέρες. Ελέγθηκαν την 70η ημέρα ο αριθμός των περιφερικών ΝΚ κυττάρων και η τοξικότητά τους. Τα αποτελέσματα φαίνονται στον πίνακα 1γ.
Το μέσο ποσοστό των περιφερικών ΝΚ κυττάρων αίματος σε συνολικά κύτταρα περιφερικού αίματος ήταν 18,42 την ημέρα 0 πριν τη θεραπεία και 11 ,45 κατά την ημέρα 45 μετά την έναρξη της θεραπείας. Αυτή η διαφορά είναι στατιστικά σημαντική (p value <0,0001).
Η μέση τοξικότητα των περιφερικών ΝΚ κυττάρων αίματος σε 50: 1 αναλογία ήταν 46,54 την ήμερα 0 πριν απο τη θεραπεία και 13,60 την 45η μέρα μετά την έναρξη της θεραπείας. Αυτή η διαφορά ήταν στατιστικά σημαντική (p value <0,0001).
Όλες οι γυναίκες που πήραν αυτή την θεραπεία είναι σήμερα έγκυες.
Παράδειγμα 2
Μια ομάδα 6 γυναικών ελέχθηκε την ημέρα 0 και την ημέρα 70 για τον αριθμό και την τοξικότητα των ΝΚ κυττάρων, μετά την χορήγηση απο το στόμα της σύνθεσης 2, μία φορά την ημέρα. Η σύνθεση ήταν σε μορφή πόσιμου διαλύματος και περιείχε τα δραστικά συστατικά που φαίνονται στον Πίνακα 2α. Τα λιπαρά οξέα της σύνθεσης είχαν τη μορφή γλυκεριδίων. Η ποσότητα της χορηγούμενης σύνθεσης ήταν τέτοια, ώστε η συνολική ποσότητα των λιπαρών οξέων που χορηγήθηκε ανά ημέρα ήταν 0,25g/kg σωματικού βάρους.
Πίνακας 2α.
Τα αποτελέσματα του αριθμού και της τοξικότητας των ΝΚ κυττάρων του περιφερικού αίματος φαίνονται στον Πίνακα 2β.
Πίνακα 2β
Το μέσο ποσοστό των περιφερικών ΝΚ κυττάρων αίματος σε συνολικά κύτταρα περιφερικού αίματος ήταν 18,45 την ημέρα 0 πριν τη θεραπεία και 12,80 κατά την ημέρα 45 μετά την έναρξη της θεραπείας. Αυτή η διαφορά είναι στατιστικά σημαντική (p value <0,001).
Η μέση τοξικότητα των ΝΚ κυττάρων του περιφερικού αίματος σε αναλογία 50: 1 ήταν 43,32 την ημέρα 0 πριν από τη θεραπεία και 19 την 70η ημέρα μετά την έναρξη της θεραπείας. Αυτή η διαφορά ήταν στατιστικά σημαντική (p value 0,001).
Παράδειγμα 3
Σε αυτήν την ομάδα, πάρθηκαν δείγματα αίματος 6 γυναικών πριν και την 45η ημέρα μετά την χορήγηση απο το στόμα της σύνθεσης 3 μία φορά την ημέρα. Η σύνθεση ήταν σε μορφή πόσιμου διαλύματος και περιείχε τα δραστικά συστατικά που φαίνονται στον Πίνακα 3α. Τα λιπαρά οξέα της σύνθεσης είχαν τη μορφή γλυκεριδίων. Η ποσότητα της χορηγούμενης σύνθεσης ήταν τέτοια, ώστε η συνολική ποσότητα των λιπαρών οξέων που χορηγήθηκε ανά ημέρα ήταν, 0,25g/kg σωματικού βάρους.
Πίνακας 3α,
Τα αποτελέσματα του αριθμού και την κυταρροτοξικότητας των ΝΚ κυττάρων του περιφερικού αίματος φαίνονται στον Πίνακα 3β.
Πίνακας 3β
Το μέσο ποσοστό των περιφερικών ΝΚ κυττάρων του αίματος στα συνολικά κύτταρα περιφερικού αίματος ήταν 17,84 την ημέρα 0 πριν τη θεραπεία και 12,40 κατά την ημέρα 45 μετά την έναρξη της θεραπείας. Αυτή η διαφορά είναι στατιστικά σημαντική (p value <0,001).
Η μέση τοξικότητα των ΝΚ κυττάρων του περιφερικού αίματος, σε αναλογία 50: 1 ήταν 36 την ημέρα 0, πριν από τη θεραπεία και 16,6 την 45η ημέρα μετά την έναρξη της θεραπείας. Αυτή η διαφορά ήταν στατιστικά σημαντική (p value 0,001).
Τρεις από τις έξι γυναίκες στις οποίες χορηγήθηκε αυτή η σύνθεση απο το στόμα έχουν γεννήσει και δύο είναι έγκυες.
Παράδειγμα 4
Σε αυτήν την ομάδα, πάρθηκαν δείγματα αίματος 8 ασθενών πρίν και την 45η ημέρα μετά την χορήγηση απο το στόμα της σύνθεσης (4) μία φορά την ημέρα. Η σύνθεση ήταν σε μορφή πόσιμου διαλύματος και περιείχε τα δραστικά συστατικά που φαίνονται στον Πίνακα 4α. Τα λιπαρά οξέα της σύνθεσης είχαν τη μορφή γλυκεριδίων. Η ποσότητα της χορηγούμενης σύνθεσης ήταν τέτοια, ώστε η συνολική ποσότητα των λιπαρών οξέων που χορηγήθηκε ανά ημέρα ήταν, 0,25g/kg σωματικού βάρους.
Πίνακας 4α
Τα αποτελέσματα του αριθμού των ΝΚ κυττάρων του περιφερικού αίματος φαίνονται στον Πίνακα 4β.
Πίνακας 4β
Το μέσο ποσοστό των περιφερικών ΝΚ κυττάρων αίματος σε συνολικά κύτταρα περιφερικού αίματος ήταν, 18,97 την ημέρα 0 πριν τη θεραπεία και 14,55 κατά την ημέρα 45 μετά την έναρξη της θεραπείας. Αυτή η διαφορά είναι στατιστικά σημαντική (p value <0,017).
Πέντε από τις οκτώ γυναίκες στις οποίες χορηγήθηκε αυτή η σύνθεση απο το στόμα έχουν γεννήσει υγιή παιδιά, δύο είναι σήμερα έγκυες μετά την 25η εβδομάδα και 1 έχει αποβάλει.

Claims (15)

ΑΞΙΩΣΕΙΣ
1. Σύνθεση για χορήγηση από το στόμα που περιλαμβάνει ως δραστικά συστατικά ένα συνδυασμό λιπαρών οξέων ή/καί εστέρες αυτών, για χρήση σε μια μέθοδο για τη θεραπεία των επαναλαμβανόμενων αυτόματων αποβολλών ή επανειλημμένων αποτυχημένων εμφύτευσεων μετά από εξωσωματική γονιμοποίηση σε υπογόνιμες γυναίκες που έχουν 12% ή περισσότερα ΝΚ κύτταρα στο περιφερικό αίμα ή/και όπου η τοξικότητα των ΝΚ κυττάρων του περιφερικού αίματος των γυναικών είναι τουλάχιστον 10% υψηλότερη από τη μέση τοξικότητα από τον πληθυσμού ελέγχου υγειών γυναικών αναπαραγωγικής ηλικίας, χωρίς αναπαραγωγικές αποτυχίες και που έχουν γεννήσει τουλάχιστον ένα παιδί, όπου η σύνθεση χορηγείται από το στόμα για 15 εώς 70 ημέρες και όπου το συνολικό ποσό των λιπαρών οξέων και εστέρων αυτών που χορηγείται ανά ημέρα είναι από 0,03 g/kg σωματικού βάρους εώς 1 g/kg σωματικού βάρους, υπολογισμένα ως λιπαρά οξέα.
2. Σύνθεση για χορήγηση από το στόμα σύμφωνα με την αξιώση 1, όπου το συνολικό ποσό των λιπαρών οξέων και εστέρων αυτών πού χορηγείται ανά ημέρα είναι από 0,10 g/kg σωματικού βάρους εώς 0,70 g/kg, υπολογισμένα ως λιπαρά οξέα.
3. Σύνθεση για χορήγηση από το στόμα σύμφωνα με την αξιώση 2, όπου το συνολικό ποσό των λιπαρών οξέων και εστέρων αυτών πού χορηγείται ανά ημέρα είναι από 0,20 g/kg σωματικού βάρους εώς 0,50 g/kg, υπολογισμένα ως λιπαρά οξέα.
4. Σύνθεση για χορήγηση από το στόμα σύμφωνα με οποιαδήποτε από τις αξιώσεις 1 εώς 3, όπου η σύνθεση χορηγείται για 30 εώς 60 ημέρες.
5. Σύνθεση για χορήγηση από το στόμα σύμφωνα με οποιαδήποτε από τις αξιώσεις 1 εώς 4, όπου η σύνθεση χορηγείται για 40 εώς 50 ημέρες.
6. Σύνθεση για χορήγηση από το στόμα σύμφωνα με οποιαδήποτε από τις αξιώσεις 1 εώς 5, όπου τα λιπαρά οξέα επιλέγονται από την ομάδα που περιλαμβάνει μακράς αλύσου, μεσαίας αλύσου, μικρός αλύσου λιπαρά οξέα και μείγματα αυτών.
7. Σύνθεση για χορήγηση από το στόμα σύμφωνα με την αξίωση 6, όπου τα μακράς αλύσου λιπαρά οξέα, επιλέγονται από την ομάδα που περιλαμβάνει παλμιτικό, στεατικό, μυριστικό, αραχιδικό, ελαϊκό, δοκοσαεξανοϊκο, εικοσαπεντανοικό, παλμιτελαϊκό, μυριστολεικό, σαπιενικό, λινολεϊκό, α-λινολενικό, γ-λινολενικό οξύ και μείγματα αυτών.
8. Σύνθεση για χορήγηση από το στόμα σύμφωνα με την αξίωση 6, όπου τα μεσαία αλύσου λιπαρά οξέα, επιλέγονται από την ομάδα που περιλαμβάνει λαυρικό, καπρικό, καπριλικό οξύ και μείγματα αυτών.
9. Σύνθεση για χορήγηση από το στόμα σύμφωνα με οποιαδήποτε από τις αξιώσεις 1 εώς 8, όπου η σύνθεση περιλαμβάνει τουλάχιστον, ένα κορεσμένο, τουλάχιστον ένα μονοακόρεστο και τουλάχιστον ένα πολυακόρεστο μακράς αλύσου λιπαρό οξύ, ή εστέρες αυτών.
10. Σύνθεση για χορήγηση από το στόμα σύμφωνα με τις αξιώσεις 1 εώς 9, όπου τουλάχιστον το 50% κατά βάρος των δραστικών συστατικών στη σύνθεση, που υπολογίζονται ως λιπαρά οξέα, είναι μακράς αλύσου λιπαρά οξέα ή εστέρες αυτών.
11. Σύνθεση για χορήγηση από το στόμα σύμφωνα με την αξιώση 10, όπου τουλάχιστον το 65% κατά βάρος των δραστικών συστατικών στη σύνθεση, που υπολογίζονται ως λιπαρά οξέα, είναι μακράς αλύσου λιπαρά οξέα ή εστέρες αυτών.
12. Σύνθεση για χορήγηση από το στόμα σύμφωνα με την αξιώση 11 , όπου τουλάχιστον το 97% κατά βάρος των δραστικών συστατικών στη σύνθεση, που υπολογίζονται ως λιπαρά οξέα, είναι μακράς αλύσου λιπαρά οξέα ή εστέρες αυτών.
13. Σύνθεση για χορήγηση από το στόμα σύμφωνα με οποιαδήποτε από τις αξιώσεις 1 εώς 12, όπου οι εστέρες λιπαρών οξέων επιλέγονται από την ομάδα που αποτελείται από μονογλυκερίδια, διγλυκερίδια, τριγλυκερίδια, φωσφολιπίδια, σφιγγολιπίδια, σακχαρολιπίδια και μείγματα αυτών.
14. Σύνθεση για χορήγηση από το στόμα σύμφωνα με την αξίωση 13, όπου οι εστέρες λιπαρών οξέων επιλέγονται από την ομάδα που αποτελείται από μονογλυκερίδια, διγλυκερίδια, τα τριγλυκερίδια και μείγματα αυτών.
15. Σύνθεση για χορήγηση από το στόμα σύμφωνα με οποιαδήποτε από τις αξιώσεις 1 εώς 15, όπου η σύνθεση περαιτέρω αποτελείται από μία ή περισσότερες βιταμίνες, ιόντα μετάλλων, αμινοξέων ή μείγματα αυτών.
GR20160100572A 2016-11-07 2016-11-07 Συνθεσεις για χορηγηση απο το στομα με ανοσοτροποποιητικη δραση στα φυσικα φονικα κυτταρα GR1009657B (el)

Priority Applications (22)

Application Number Priority Date Filing Date Title
GR20160100572A GR1009657B (el) 2016-11-07 2016-11-07 Συνθεσεις για χορηγηση απο το στομα με ανοσοτροποποιητικη δραση στα φυσικα φονικα κυτταρα
US16/347,648 US20190328695A1 (en) 2016-11-07 2017-11-03 Oral composition with immunomodulating effect on natural killer cells
CN201780071828.8A CN110035746A (zh) 2016-11-07 2017-11-03 对自然杀伤细胞具有免疫调节作用的口服组合物
MA46707A MA46707B1 (fr) 2016-11-07 2017-11-03 Compositions orales à effet immunomodulateur sur des cellules tueuses naturelles
AU2017355235A AU2017355235B2 (en) 2016-11-07 2017-11-03 Oral compositions with immunomodulating effect on natural killer cells
PT178081295T PT3534891T (pt) 2016-11-07 2017-11-03 Composições orais com efeito imunomodulador em células assassinas naturais
PCT/GR2017/000064 WO2018083508A1 (en) 2016-11-07 2017-11-03 Oral compositions with immunomodulating effect on natural killer cells
RS20220720A RS63458B1 (sr) 2016-11-07 2017-11-03 Oralne kompozicije sa imunomodulacijskim efektom na ćelije prirodne ubice
ES17808129T ES2924106T3 (es) 2016-11-07 2017-11-03 Composiciones orales con efecto inmunomodulador sobre células citolíticas naturales
NZ753193A NZ753193B2 (en) 2017-11-03 Oral compositions with immunomodulating effect on natural killer cells
HRP20220944TT HRP20220944T1 (hr) 2016-11-07 2017-11-03 Oralne kompozicije sa imunomodulirajućim učinkom na prirodne stanice ubojice
SI201731194T SI3534891T1 (sl) 2016-11-07 2017-11-03 Peroralni sestavki z imunomodularnim učinkom na naravne celice ubijalke
RU2019117597A RU2776373C2 (ru) 2016-11-07 2017-11-03 Пероральные композиции с иммуномодулирующим эффектом в отношении естественных клеток-киллеров
EP17808129.5A EP3534891B1 (en) 2016-11-07 2017-11-03 Oral compositions with immunomodulating effect on natural killer cells
PL17808129.5T PL3534891T3 (pl) 2016-11-07 2017-11-03 Kompozycje doustne o działaniu immunomodulującym na naturalne komórki cytotoksyczne
LTEPPCT/GR2017/000064T LT3534891T (lt) 2016-11-07 2017-11-03 Geriamoji kompozicija su imunomoduluojančiu poveikiu nk ląstelėms
HUE17808129A HUE059425T2 (hu) 2016-11-07 2017-11-03 Orális készítmények természetes ölõsejtekre gyakorolt immunmoduláló hatással
DK17808129.5T DK3534891T3 (da) 2016-11-07 2017-11-03 Orale sammensætninger med immunomodulerende effekt på naturlige dræberceller
JP2019546103A JP7118986B2 (ja) 2016-11-07 2017-11-03 ナチュラルキラー細胞に対する免疫調節効果を備えた経口組成物
CA3084504A CA3084504A1 (en) 2016-11-07 2017-11-03 Oral compositions with immunomodulating effect on natural killer cells
US17/178,370 US12023314B2 (en) 2016-11-07 2021-02-18 Oral composition with immunomodulating effect on natural killer cells
CY20221100529T CY1125454T1 (el) 2016-11-07 2022-08-02 Στοματικες συνθεσεις με ανοσορυθμιστικη δραση σε φυσικα φονικα κυτταρα

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
GR20160100572A GR1009657B (el) 2016-11-07 2016-11-07 Συνθεσεις για χορηγηση απο το στομα με ανοσοτροποποιητικη δραση στα φυσικα φονικα κυτταρα

Publications (2)

Publication Number Publication Date
GR20160100572A GR20160100572A (el) 2018-08-29
GR1009657B true GR1009657B (el) 2019-11-28

Family

ID=58993156

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
GR20160100572A GR1009657B (el) 2016-11-07 2016-11-07 Συνθεσεις για χορηγηση απο το στομα με ανοσοτροποποιητικη δραση στα φυσικα φονικα κυτταρα

Country Status (19)

Country Link
US (2) US20190328695A1 (el)
EP (1) EP3534891B1 (el)
JP (1) JP7118986B2 (el)
CN (1) CN110035746A (el)
AU (1) AU2017355235B2 (el)
CA (1) CA3084504A1 (el)
CY (1) CY1125454T1 (el)
DK (1) DK3534891T3 (el)
ES (1) ES2924106T3 (el)
GR (1) GR1009657B (el)
HR (1) HRP20220944T1 (el)
HU (1) HUE059425T2 (el)
LT (1) LT3534891T (el)
MA (1) MA46707B1 (el)
PL (1) PL3534891T3 (el)
PT (1) PT3534891T (el)
RS (1) RS63458B1 (el)
SI (1) SI3534891T1 (el)
WO (1) WO2018083508A1 (el)

Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2016113679A1 (en) * 2015-01-13 2016-07-21 Lo.Li.Pharma S.R.L. Lipoic acid for treating or preventing threatened miscarriage or preterm delivery

Family Cites Families (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP6424091B2 (ja) * 2012-03-07 2018-11-14 ザ チルドレンズ メディカル センター コーポレーション 妊孕能または生殖機能を向上させるか、改善するか、または増大させるための方法
JP2014136677A (ja) 2013-01-15 2014-07-28 Univ Of Tokyo 早産治療剤

Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2016113679A1 (en) * 2015-01-13 2016-07-21 Lo.Li.Pharma S.R.L. Lipoic acid for treating or preventing threatened miscarriage or preterm delivery

Non-Patent Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
ROUMEN G. ROUSSEV, SIU CHUI NG, CAROLYN B. COULAM: "Natural Killer Cell Functional Activity Suppression By Intravenous Immunoglobulin, Intralipid and Soluble Human Leukocyte Antigen-G", AMERICAN JOURNAL OF REPRODUCTIVE IMMUNOLOGY, WILEY-BLACKWELL PUBLISHING, INC., US, vol. 57, no. 4, 1 April 2007 (2007-04-01), US, pages 262 - 269, XP055397185, ISSN: 1046-7408, DOI: 10.1111/j.1600-0897.2007.00473.x *
SACHIKO JUMAN, MICHIO HASHIMOTO, MASANORI KATAKURA, TAKAYUKI INOUE, YOKO TANABE, MAKOTO ARITA, TOMOHIRO MIKI, OSAMU SHIDO: "Effects of Long-Term Oral Administration of Arachidonic Acid and Docosahexaenoic Acid on the Immune Functions of Young Rats", NUTRIENTS, vol. 5, no. 6, pages 1949 - 1961, XP055397243, DOI: 10.3390/nu5061949 *
XP055397244 *
YAMASHITA, N. ; SUGIYAMA, E. ; HAMAZAKI, T. ; YANO, S.: "Inhibition of natural killer cell activity by eicosapentaenoic acid in vivo and in vitro", BIOCHEMICAL AND BIOPHYSICAL RESEARCH COMMUNICATIONS, ELSEVIER, AMSTERDAM, NL, vol. 150, no. 1, 15 January 1988 (1988-01-15), AMSTERDAM, NL, pages 497 - 505, XP024842563, ISSN: 0006-291X, DOI: 10.1016/0006-291X(88)90548-7 *
YAQOOB, P. ; NEWSHOLME, E.A. ; CALDER, P.C.: "Inhibition of natural killer cell activity by dietary lipids", IMMUNOLOGY LETTERS., ELSEVIER BV, NL, vol. 41, no. 2-3, 1 July 1994 (1994-07-01), NL, pages 241 - 247, XP023786866, ISSN: 0165-2478, DOI: 10.1016/0165-2478(94)90140-6 *

Also Published As

Publication number Publication date
SI3534891T1 (sl) 2022-10-28
PT3534891T (pt) 2022-07-29
US20210196662A1 (en) 2021-07-01
RU2019117597A (ru) 2020-12-07
US12023314B2 (en) 2024-07-02
EP3534891A1 (en) 2019-09-11
MA46707A (fr) 2019-09-11
DK3534891T3 (da) 2022-08-08
RS63458B1 (sr) 2022-08-31
AU2017355235A1 (en) 2019-05-30
LT3534891T (lt) 2022-08-25
AU2017355235B2 (en) 2023-09-28
CN110035746A (zh) 2019-07-19
US20190328695A1 (en) 2019-10-31
RU2019117597A3 (el) 2021-03-05
HRP20220944T1 (hr) 2022-10-28
ES2924106T3 (es) 2022-10-04
MA46707B1 (fr) 2022-08-31
GR20160100572A (el) 2018-08-29
EP3534891B1 (en) 2022-05-11
PL3534891T3 (pl) 2022-11-21
JP7118986B2 (ja) 2022-08-16
CA3084504A1 (en) 2018-05-11
NZ753193A (en) 2025-05-02
HUE059425T2 (hu) 2022-11-28
CY1125454T1 (el) 2025-05-09
WO2018083508A1 (en) 2018-05-11
JP2019534334A (ja) 2019-11-28

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Kikut et al. Inflammation with the participation of arachidonic (AA) and linoleic acid (LA) derivatives (HETEs and HODEs) is necessary in the course of a normal reproductive cycle and pregnancy
Fatemi et al. Implantation in assisted reproduction: a look at endometrial receptivity
Parasar et al. Contribution of macrophages to fetomaternal immunological tolerance
Wedekind et al. Altered cytokine network in gestational diabetes mellitus affects maternal insulin and placental–fetal development
US20210290578A1 (en) Mixture of fatty acids for use in the treatment of inflammatory pathologies
Akerele et al. A diet enriched in longer chain omega-3 fatty acids reduced placental inflammatory cytokines and improved fetal sustainability of C57BL/6 mice
Bansal et al. The basis and value of currently used immunomodulatory therapies in recurrent miscarriage
Sarkesh et al. The immunomodulatory effect of intradermal allogeneic PBMC therapy in patients with recurrent spontaneous abortion
Komijani et al. Autophagy-mediated immune system regulation in reproductive system and pregnancy-associated complications
Carbone et al. Divergent immunomodulatory effects of recombinant and urinary-derived FSH, LH, and hCG on human CD4+ T cells
Toth et al. NK cell subsets in idiopathic recurrent miscarriage and renal transplant patients
US12023314B2 (en) Oral composition with immunomodulating effect on natural killer cells
Theilla et al. Safety of home parenteral nutrition during pregnancy
Nogueira-de-Almeida et al. II. Consensus of the Brazilian Nutrology Association on DHA recommendations during pregnancy, lactation and childhood
RU2776373C2 (ru) Пероральные композиции с иммуномодулирующим эффектом в отношении естественных клеток-киллеров
Abdoli Salt and miscarriage: Is there a link?
Kraisoon et al. Embryonic development, luteal size and blood flow area, and concentrations of PGF2α metabolite in dairy cows fed a diet enriched in polysaturated or polyunsaturated fatty acid
Danek et al. Changes in domestic animals after endotoxin administration a review
US20180147171A1 (en) Trans10:cis12 isomer of conjugated linoleic acid as a therapeutic and preventative agent for hypertension specific to pregnancy
Hadfield Characterization of the immune response to lipopolysaccharide in early pregnant ewes as a model to study bacterial infection induced embryonic loss
Patel Evaluating the effects of dietary docosahexaenoic acid along with arachidonic acid during the development of the immune system in early life.
Virginkar The effects of a high-fat diet and bacterial lipopolysaccharide (LPS) induced inflammation on pregnancy and fetal development in mice
Breznik Peripheral Monocytes and Intestinal Macrophages during Chronic Inflammation
Barnea The Signaling between Embryo and Mother as a Basis for the Development of Tolerance
Peters et al. Functional differences between human NKp44-and NKp44 RORC innate lymphoid cells

Legal Events

Date Code Title Description
PG Patent granted

Effective date: 20200122

NF Restoration of lapsed right

Effective date: 20210709