IT8148780A1 - Composti inibitori dell'enzima aromatasi e procedimento per la loro preparazione - Google Patents

Description

"Composti inibitori dell'enzima aromatasi;.e procedi-

mento per la loro preparazione".

RIASSUNTO

Sono fom iti inibitori di aromatasi aventi

le formule: 4

? *? <

O UJ

R2 cc R1 oO H2C H2C co5 O < luioc Z

<M < 00 ?a r R6 ? o -o Z CN o < ? in cui l'indicazione - rappresenta un singolo op- ?

jr pure un doppio legame; R rappresenta idrogeno oppu-_ "

re un alchile c^-C^; R^ rappresenta metile o etile;

R2 rappresenta (H) (OR8) oppure =0; R3.rappresenta _ _

4

H oppure un alchile H. rappresenta H_oppure_

OR8; R5 rappresenta H, un alchile G^-C^ oppure, quan-5 6

do il legame 5,6 e saturo, R ? =0 bivalente; R_ e_

7

R rappresentano ciascuno H oppure un alchile C^-G^

8

e R rappresenta H oppure un alcanoile C^-C^'? Sono_

. anche fom iti i prodotti intermedi utili per la preparazione dei precedenti composti inibitori di aroma-_ tasi ed i procedimenti per l'impiego degli inibitori .

. di aromatasi della presente invenzione. ._ _

. . . DESCRIZIONE . _ ?_

Gli ormoni del sesso femminile estrone ed

_ estradiolo sono implicati in molti procedimenti fi-.__

. . siologici e sono stati approfonditamente studiati'..

_ .La formazione di questi steroidi ? regolata da nu- . .

merosi enzimi'. L'enzima aromatasi ? l'enzima limi-. tatora di velocit? nella conversione del testosta-. rone e dell'andr?stenedione (ormoni maschili, androgeni) in estradiolo ed estrone (ormoni femminili,

estrogeni). La conversione non revers?bile di questi androgeni in estrogeni implica la ossidazione e

la eliminazione dei gruppi metilici nella posizione

0-10 come acido formico. Gli atomi di idrogeno ibeta- I?BARZnANg&ZANARDOR.OMASAp..,

26VIAPIEMONTE, . e 2beta- dalle posizioni C-1 e 0-2 vengono perduti .. 0108/ROM-A__ con la formazione di un doppio legame in modo tale_

. che, dopo la enolizzazione del 3-chetone, viene pro-. dotto l'anello A aromatico degli estrogeni. Gli an-. drogeni, il testosterone e 1'andr?stenedione, posso-. no essere-interconvertiti da l7beta-idrossi-steroide deidrogenasi e gli estrogeni, estradiolo ed estrone

possono essere analogamente interconvertiti (schema

1). I materiali come gli inibitori di aromatasi che -regolano la conversione da androgeni ad estrogeni

oppure che inibiscono questa conversione, presentano utilit?, terapeutica nel .trattamento di condizioni -cliniche che vengono potenziate dalla presenza degli -estrogeni. Tali composti inibitori di aromatasi sono -stati identificati.impiegando preparati enzimatici _ microsomali dalla placenta umana e 4?idrossi- e 4- _ acetossi-androst-4-ene-3, 17-dione, androsta^l,4?6-trie-< ne-3, 17-dione, ammino glutetimmide e testololattone <?> < sono stati identificati come composti inibitori di a-5

O I?? Tornatasi. o

?o? o SCHEMA 1* Interconversione enzimatica di androgeni < L^J or Z

< cu N

ed estrogeni: . _

C> o z 04 o < NI

< CD

17g-idrossi-steroide cr>

.deidrogenasi

Testosterone Androstenedicne

(Aromatas4) (Aromatasi)

17s-idrossi?stero

O 'deidrogenasi >idexo

Estradiolo Estrone

La condizioni che vengono trattate con i .

composti inibitori di aromatasi possono implicare a- . . . levati livelli di estrogeni che sono essenzialmente- -- -stazionari o che possono soltanto formare dei compi---- temporanei risultanti-dalle funzioni cicliche del -. -. corpo. Perci?, i composti inibitori di aromatasi so- -- no stati usati per il trattamento della iperestroge- - -- nemia, in condizioni quali la ginecomastia e si sono - -ottenuti dei miglioramenti clinici. Essi sono anche

stati usati con successo nel trattamento della,infer^

tilit? maschile associata ad oligospermia che deriva da elevati livelli di estrogeni. I composti inibitori di aromatasi possono anche essere usati nel

trattamento della iperestrogenernia che pu? precedere l'infarto del miocardio.

I composti inibitori di aromatasi sono anche utili nel controllo della fertilit? nel qual ca- -so essi sarebbero efficaci attraverso la riduzione - ? i?BARZnANg&ZANARDORO.MAS\p;..e degli aumenti improvvisi di quantit? degli estrogeni ? 26V?APi:/NOTE,,

0??0-7-un;** che si osservano in vari stadi del ciclo ovulatorio. -Perci?, il 4?acetossiandrost-4?ene-3f17-dione ha di? -mostrato di essere efficace per prevenire la produ? -zione degli estrogeni richiesta per la ovulazione

nei ratti. In aggiunta, poich? la sintesi degli estrogeni ? necessaria per l'impianto degli ovuli ferti?

lizzati in molte specie, la somministrazione post-coitale dei composti inibitori di aromatasi ha la capacit? di regolare la-fertilit?, particolarmente negli -animaletti domestici e negli animali allo stato li- -i bero. In particolare, il composto inibitore di aro- ;

!

?matasi androsta-1,4?6-triene-3,17-dione ha dimostra--to di essere efficace per prevenire 1*impianto degli --ovuli fecondati-nei ratti copulati1. Gli inibitori----di aromatasi dovrebbero anche ridurre il -comporta- ? mento di copulazione di specie maschili che richie-4 d. -dono la aromatizzaziene-del cervello per avere un c/i < tale comportamento. In particolare, una soppressio-??. l~ ne della riproduzione dei-roditori ? stata ottenuta ?acrno 5

O

< impiegando composti?inibitori-di aromatasi nel trat- z a.

M < co -tamento di soggetti-di- sesso maschile e femminile

? 0-o o -durante-controllaii programmi di copulazione.- z ^ INI

ri sono-anche-delle sostanziali dimostra?- m O? zioni-cliniche-per?indicare -che molti-tipi di turno? ?c -ri? sono-associatir-adr-elevarta-produzione di-estrogeni.

La_ovariectomia^?la-adrenalectomia e-la ipofisectomia.BULLO?comunemente?impiegate-nei pazienti?affetti "da"?cancro-aH-a mammeliar-come-mezzo per-ridurre la quantit?~di~estrogeni? -Procedure non chirurgiche? comprendono-trattamenti^con- elevati livelli di stenoidij?antiestrogeni-^? ed-inibitori di-percorsi enzi- -ma-tici steroidali. Il -trattamento con antiestrogeni

si traduca nal risultato che circa un terzo dei pa^- .

.... ? zienti realizzano una obiettiva regressione del tumore.

- ;La adrenalectomia -provoca la regressione del cancro-- della mammella nelle donne in stato postmenopausale? ---- con tumori dipendenti da fattori ormonali, presumibil-- -mente come risultato della riduzione degli estroge---- ni disponibili derivati da andr?stenedione, la cui-- sorgente ? principalmente proveniente dalla capsule .

< surrenali. La crescita di diverse linee di cellule . Q.

vi < -cancerogene della mammella ha dimostrato di dipendeooc ?t- ?t re dagli estrogeni e pu? essere inibita per mazzo di

e; ^ U composti che antagonizzano l'azione degli estrogeni. <z -u ?

< N < co Perci?, i composti inibitori di aromatasi ??afl > -o ? come quelli precedentemente indicati possono effica^? CN < M OC

cernente prevenire agli estrogeni biologicamente atti <

CQ

?> vi di raggiungere i tumori endocrini o di ridurre

. -la biosintesi degLi estrogeni in quei tumori che so- -no capaci di una sintesi estrogenica endogena, pro--ducendo cos? una remissione del cancro alla mammella

- --di tipo metastatico. -. - ? - - - -Il cancro endometriale ? stato messo in --relazione con la presenza di eccessive quantit? di

estrogeni endogeni oppure esogeni'. I tumori delle

gonati ed i tumori trofoblastici provocano una ipe

restrogenizzazione somatica che si traduca in una femminizzazione dei soggetti maschili di misura variabile. Nei soggetti femminili, i sintomi dipendono dall'et? dalla paziente e possono andare da una pseu- . .

1 do pubert? precoce ad anormalit? dei flussi mestica- ?.

vi li fino alle-emorragie postmenopausali1.-I -composti ^

; O ^ \ inibitori di aromatasi possono essere usati nella ;_ ^ r: < q C-o -terapia ausiliaria nel trattamento conservativo,.di _ z pazienti affetti da tali -tumori, poich?,essi ridu-_ ,CD_

=2 ?; ? cono la espressione somatica dell.'intensificata bio~'? Q-si.ntesi. degli. estrogeni.- - r_ . _ _ ?M

CO SOMMARIO DELL1INVENZIONE ?>

? 1 La presente invenzione si riferisce a l0-(2-alchinil)-steroidi. In altre parole, essa .si riferi-- sce a-steroidi aventi-un gruppo 2-alchinilico nella .

- posizione 10 al-posto del gruppo metilico angolare._

- 1 composti potrebbero anche essere considerati come..

19-{-1-alchinil-steroidi-per-il fatto-che -il-gruppo..._ metilico angolare-nella posizione?10 h .ulteriormeni-?

- te sostituito-da-uit-gruppo?1-alchinilicov--Pi??specificamente,.la presenta-invenzione si-riferisce-ad-inibitori-di-aromatasi-a base_di

10-( 2-alehinil)steroidi- aventi,le.formule:-- (seguono-formula)

H~C H^C

II

Q.

?/> in cui il simbolo - rappresenta un singolo oppure -?-

( un doppio legame; R rappresenta idrogeno oppure un ?

alchile C^-Cy R1 rappresenta metile o etile; R2 rapz presenta (H)(OR8) oppure =0; R^-rappresenta H oppure

un alchile G^-Cy R4 rappresenta H oppure OR8; R5 rap-? '? < presenta H, un alchile C^? oppure, quando il legame rvi "

ea m

5,6 ? saturo, R5 pu? rappresentare =0 bivalente; R6

?> 7 -E e R rappresentano ciascuno H oppure un alchile C^-Cy

g

e R rappresenta H oppure un alcanoile C^?Cy

L'invenzione inoltre comprende nuovi compo-

sti intermedi utili per la preparazione dei compo-

sti inibitori di aromatasi ed aventi le seguenti

fonnule: - . . . .- ?

1 1 O

H

hUC

V O Rat

io

II IV

oppure

R

H?C

4 ? 0 ? vi < O LU

oc rin cui R rappresenta idrogeno oppure un alchile ?^- O Q

Ckl o .1 o C^; R rappresenta GH^ oppure CgH ; R^ ra ppresenta as Ni (H)(OR8) oppure =0; R rappresenta H oppure un CO ? - o le G -C-; R^ rappresenta-H oppure un alchile C..-C.; ^ cs 6 Q ?

R rappresenta H oppure un alchile C -C-.; R? rappre-i$

1 3 ?

q in ? santa H oppure un alcanoile Gg-C^? mentre R e R .?

q io

rappresentano ciascuno OH oppure R e R insieme rappresentano =0. -- .

- Nell?ambito della presente invenzione rientrano anche i-procedimenti per-la preparazione e per

1?uso-dei composti^ della present?-invenzione?. _ _ - DESCRIZIONE-BE?TA0LIATA-B2LL? INVENZIONE _ ----- Nei-composti delle-formule I e II, R-rappresenta idrogeno-oppure-un-alchile.,C^-C^ coma metile -etile, ?propile o butile, ed ?-preferibilmente idro-- -

A

geno; -R? rappresenta metile-oppure etile ma h pre-

2

feribilmente metile, -R- rappresenta il radicale osso (H)(idrossi) oppure (H)(alcanoilossi mentre

i .gruppi ossidrilici ed alcanoilossilici presentano_ ? preferibilmente la configurazione beta; R^ rappresen- - -_ 4 ta -idrogeno oppure un alchile C^-C^ come metile, -eti~-_ i-le o propile, anche se -? preferibile idrogeno;-R--;?

1 ragresenta idrogeno,-ossidrile oppure un alcanoiloa--. sile C -C?, essendo preferibile.l'idrogeno; R_ rap?

( 1 4 j

-^presenta idrogeno;.-Un alchile.C^-Cy-come-metile, eti-.

...la o propile,..oppure,-quando il -legame-5,6 ?-saturo.,? ?.

< R?-? bivalente e pu?-rappresentare-il-gruppo.osso; Q UJ? fi 7 ? ? R e R' rappresentano ciascuno,idrogeno oppure-un. ? / _5L Q U

Di ? alchile C^-O^, metime metile,.etile o propile, an < i'Z K

Ni et -che se per ambedue i gruppi si preferisce,l'idrogeg o ^ O ? no; R rappresenta idrogeno, oppure un alcanoile.? Z

IN

Qt Cg-C^ come acetile, propionile O-butirriie,-essendo? 2

8

preferibile l'idrogeno per R? ed essendo prefer?-? =? ca;i

- bile acetile quando R,8 rappresenta alcanoile.?X com-? posti presentano-un doppio legame-4,-5,-coma rappresentalo nella formula X-oppure un -5alfa-idrogenor

R?

-come-rappresentato nella-formula-II?*?X-eomposti-dif-oraiula-I-possono ulteriormente avera-un-doppio-l??

-game?1,-2-e/o un doppio-legame di for?

-mula II possono anche avere-un 4oppio-legame-1r? i

T

Sono preferiti i-composti di -formula-X?che enta?

no soltanto un doppio legame 4*5-I-composti -secondo la-presente invenzione

sono otticamente attivi e--la stereochimica_sulle giunzioni -degli anelli-?-identica a quella_della_serie.. andr? stanica -naturale.?Perci?, la configurazione

del gruppo alchinilico ?-la configurazione_Jb.eta,_ come lo ? per l'idrogeno angolare nella-posizione

e per-il -sostituente-angolare nella posizione

C-13"? Nei composti di formule I e IJ, le.giunzioni degli anelli B/c e c/D sono giunzioni di ^tipo

? c| - ^ trans e la giunzione degli anelli A/B ? anche una c <

?<. ' ? cJ & - '-giunzione di tipo trans nei composti di formula

1 ? ?-- rMentre i composti che presentano la configurazio- ^ _ c-* , -? rne di steroide naturale come precedentemente descritti ' ta sono composti inibitori attivi, miscugli di tal-i a? - f composti con i loro antipodi ottici sono anche in-?i elusi nell'ambito della presente invenzione.

- ,- Esempi specifici e rappresentativi dei comr-?

?

- posti secondo l'invenzione, in aggiunta a quelli

i

- j?-rappresentati negli esempi che verranno dati nel se-_ ? ! - r guito, comprendono quelli che seguono, senza tutta^-.

,! ?1 - 1~via esserne limitati:? - - -- - -- L - 7alfa-metil-iO-(2-propinil)estr-4~ene-3, l7-dione_.

- 6alfa,l8-dimetil-l0-(2-propinil)estra-1 ,4-diene-3?17-- dione - - - -. ?~ -- - - - ,-r 4,l7-diidrossi-l6beta-metil-l0-(2-propinil) astra-..

1 4,6-dien-3-one - ... .

-l0-(2-propinil)-estra^-t,4-diene-3,6,17-trione - 4-vl7beta^acetossi-6beta, l6alfa-dimetil-iO-(2-propinil)

^-5alfa-estrari-3-onametil-lO-(2-propinil) 5alfa-estr-l-ene-3,17-diona ,_l7"beta^idrossi~lO(2-p2?opinil)astra-1,4-dien-3-ona

?

-j-4-acetossi-i7beta-idrossi- i0-(2-propinil)astr-4-enone

c. 40- (2-tiutinil-)estr-4?ane-3f17-dione?.

La saria dalle reazioni usate per la pra? tv ?parazione -dei vari composti della presente invenzio? C ~r? ?--ne-?_illustrata nello schema 2?-- - -T* cr ? (seguono fonnule) - - -? c, c

t.

-?.

??? C. c - - -SCHEMA 2

?? fi 4

? t/i

EtOCH=CHg <

?> 5 4- O LxJ <^o Hg OH ^-o < OH ?.

O-CH=CH2 O 6 % oc o ?caXorQ< L-J co C1CH IS ?? M < CO CH MC r**"! -o - H ?CC o Z CN o <? (C6H5)3P=CHC1 SS OC

< ^ 0 <^? CO

acetone? LDA

3 4IV-dione

NS

1) boroidruro 2) Li in NH-

CH

1) m-C1PBA 5,6- dii-" OH

2) HCIOJ, drossi-?^ 17- Hli

H2O/THF d ione

1 ) Reagente

di-Jones

2) p-TosH j

acetone, 4-ene-3?6>17-tr ione Lj ossidazione ,+ 3) {CgH5)3P*aCHCl V \k

SCHEtiA 2(continuazione)

HC

ih 1) CHC 1

c H2?2

i 4_idr.os.si CH

4-ene C

^ ^ boroiditiro

17p-?drossi

6 jdeidTogenazione 8 ?h? ?

ac?d o

f?J-d iene anidride^

^,?-diene o< etilene

ii4*6-tr iene 17'3-estes?a ?-q1ico1, H

3,17-dich??tale

1) LDA

2) acetone,

H+ ....

CL? co

CH 1? <

O ^ oc H~C

et -o < 1-1 Z r rv. M c 00 z o CN

< questo modo,? il -compoeto noto* un-bia(e? oc < co tilenacetale)ciclico di 6beta-idros&iestrw;i(toy-ene>? en c -3-,-17-dione (i)-viene fatte?reagire con un-alchilvi

--etere-in-cui?il-gruppo alchil-ico?contiene?da?l-.

a 4 atomi-di?carbonio-edr?-preferibilmente stila.

-irr-presenza -di un-sale-mercurieo^-per eaempio ace?

tato mercurieo ftgr-fora ire?il? eorrispondente 6?vinil

vini!

-etere-si?ridispone in-seguito-a-risealdamenrto?per-

fornireda 19?carboesaldeide?(-3-)-che-viene?fat-ta-rea*-

gire-eon un?appropriato?ilide cloro?sostituito?con

-una reazione di Witting per fornire il corrisponden-_ ! \ pte 19-(2-cloro-1-alchenil)steroide (4)*? Pi? specifica- _

mente- la -aldeide -viene-fatta reagire-con un fosforaJ-

no-prodotto da-(clorometil)trifenilfosfonio .cloruro

o-difenilclorometilfosfonato e con-una -base forte,. < ?t-

per esempio-litio diisopropilammide, in un -solvente < O UJ

i?inerte-eome-tetraidrofurano per-fom ire_il._i9- OZ br O J ro?1-etenil)steroide^, II composto del-cloro ottenuto.

i2: j-?-usualmente-un miscuglio di isomeri cis e--transt-il-bJ_^_

?? __ iquale-usualmente non viene suddiviso ma viene usato/ip o o < 01 | ?INI - direttamente nell'operazione successiva1? H composta^

I ? - con cloro viene d?idroalogenato impiegando una base .<k

- ?forte come la diisopropilammide litica, t-butossido ??

i

-----di potassio o sodammide per fornire il gruppo alchi--i - -nilico (5)? I-gruppi di protezione /gruppi bis(etilen

? jacetalici)ciclici7 vengono quindi rimossi mediante j_

-1reazione del composto con acetone 0 con butanone in

presenza di-una quantit? catalitica di acido per

esempio acido p-toluen solfonico oppure in un acido

minerale contenente alcool per fornire il desideran??

te composto -i0betar-(2-propinilico)(6)f. -

- Sebbene questo composto sia intrinsecamen-*?_

j-te un utile ed attivo composto secondo la presente

invenzione, esso pu? anche servire come intermedio

I

molto utile per la preparazione di altri composti .J

? relativi. Perci?, il 17-chetone pu? essere ridotto ?

i

? per esempio con un agente riducente a base-di boroidruro per-esempio-boroidruro -di-potassio, -per-fornire il-corrispondente composto-47beta^idrossi,?il

quale-pu??essere-Ulteriorroente fatto reagira-conuna

<

--anidride oppure-con acida-alcanoico,-ciascuno-conte? -?rtn ?nenta-fino-a-4-atorai-di-carbonio*?per-fomi re-il-cor < f

oOc ?rispondente 47-estere.- - O

Q

- Il-lObetar-(2-propinil)estr-4-ene-3,i7-dio? oc -<4~ > z -ne- (6)-pu? anche essere trattato-con-diversi agenti? M<

i deidoganazione-per introdurre-una-ulteriore insa? ?~p -^?.Q?.

CN turazione nei-composti'.-Perci?,-il?trattamento con

CQ

diclorodicianochinone fornisce il composto 1,4?diane- ?? mentre -il trattamento con cloranile-in terz-butanolo

?fornisce il 4,6-diene ed-il-trattamento di -questo

-diane con diclorodicianochinone fornisca il?composte

-1,4,6-triene. In aggiunta-il-chetale-(5) pu? essere

- trattato con metil-litio-e-quindi-con-me tilbromuro ?

- per fornire il? corrispondente butinilchetale-ed i

-gruppi-di-protezione-vengono-allontanati nella maniera

'?

-pracedentamente?descritta-per fomire-il?composto?10?

(2-butinilico)?oorrispondente-alla-fformula-(&)v !

-H*altra parte,-per-attanera-i-composti?in

?cui lo steroide-?-saturo,-??neeessario-impiegare-la

- l9-carbossaldeida (-3)--preeedentemente-ottenuta.-I

- Ingruppi di protezione nelle posizioni 3 e 17-vengono rimossi mediante-trattamento con acetone oppure?

-con 2-butanone in presenza di un-acido comeliacidop-tolu en-solfonica??Gi?-fora isce-il-A ?3H-7-diehet<U ne, -il-(?iale?viene trattato-con un agente riducente preferibilmente -un boroidiuro,?come il?boroidruro-d} sodio per-ridurre iH ^-chetone e--la?19?carbossaldarle in-modo da ottenere i corrispondenti alcoolv <

d II?composto viene quindi ulteriormente-trattato con t? < litio in ammoniaca per ridurre la insaturazione nel-f

OC bla posizione-4 in (7)-ed i-due alcool tengono ossi -?o ?L:*

< o iJ a dati nuovamente per ottenere i gruppi carbonilici ? Z ? Ni ,? o mediante reazione con clorocromato di piridinia.- ?? ? - o Z ? o Come con la aldeide precedentemente,otte- ISI OC

< nuta, questa aldeide viene fatta reagire con un ap09L cn propriato-?lide cloro-sostituito, in una reazione dji.? Wittig per fornire il-corrispondente 19-(2-cloro-lalchenil) steroide {8)f.-Pi? specificamente,-la aldeij? viene -fatta-reagire con un-fosforano-prodotto

(clorometil) trifenilfosfonio-cloruro-e^da una

se forte come la diisopropilammide-di-litio in unsolvente inerte per esempio-tetraidrofurano-per-fornire il-19-(2-cloro-1-etenil)steroide. Per-evitare reazione con uno--qualsiasi degli altri-gruppi chetonici presenti in-qualsiasi altro punto della.

- molecola, si usa soltanto un equivalente del trifenilfosfonio -cloiuro.?Ut-composto con il cloro usuallmente???ottenuto-come-un miscuglio degli isomari cis

e trans-il? quale-miscuglio-non -viene usualmente sud

diviso-ma-^v-iene usato-direttamente-nella oparazio?

ne successiva'.?In-questo-caso, i -gruppi di protezio

ne?vengono-reintrodotti nelle posizioni -3 e?1-7?me

clian-te -reazione-dei?dichetone con glicole etilenico

in -presenza-di-un-acido coma l?acido p-toluensolfo- ?<St- fI-co ! nico. -H-composto -con il?cloro viene quindi deidro- ^<

O?liJ ,r OC halogenato-ed -i-g?upp*?.i-protezione vengono allontana^ "DT T ti nella stessa maniera precedentemente descritta eS ooc 2

< u. per fornire il lObetar-(2-propinil)-5-alfa/-estra-3,Itf- NJ .t \ ? ?H ?tJ~ 08 > ~ dione, Questo composto pu? essere ulteriormente dei ? - o 2? " <

INJ

drogenato per esempio con dielorodicianochinone per oc

C<QT fornire il corrispondente composto vale a dire .?ci? lObetar-(2-propinil)-5alfa-estr-l-ene-3,17-dionar*

-Altri composti ossigenati nella posizione

4 o-6 possono essere preparati dai materiali precedentemente descritti. Perci?,-la reazione del lObetit-(2-propinil)estr-4-ene?3,1-7?dione (6) con perossido

di idrogeno alcalino fornisce il 4,5-e^jossida.H

trattamento dell?epossido con acido acetico e conuna traccia di acido solforico fornisce il corrispondente 4-idrossiestr-4~ene. D?altra parte, la rea

zione dal -bis(etilenacstale)ciclicodi lObata-(2-propi? nil)astr-5-ana?3,47-dione?(-!>)-con-acido-m-cloroperbenzoico?foraisee?it-corrispendente?5alfa,6alfa-epossido-ehe-viene- quindi?idrolizzato?(per?esempioin-presenza-di-aaido-percl orice per-fornire-il corri cpondante-Salfa,6be ta-diolov-Quando -1-'idrolisi-viena aseguita in-prasenza?di-aeidof?i~guappi?di?prote-f Q.

< -ziona-nel-l-e-posizioni?3-e?47-vengono-anche?rimossi O X

per-mazzo-dalla?reazione.?H?trattamento?del?dioloaC3? < <_? L-un agente-ossidante,-per-esempio?il-reagente

,fS ,? Jonas fornisca-il-corrispondante-5alfap-idrossi-6-che-?;:J " tO ^ o tona,-Quasto viene quindi -immediatamente-disidratato^-??^ par-esempio impiegando acido p-toluensolfonico-in ? j2 ? f!_ ? ?OJ

jbenzene per-fornire-il-desiderato -tO-(2-propinil).asti'-4-ane-3,6,17-trione.-H?bis(etileneacetale) ciclica di--6-bata--idrossi-estr-5(40)?ene?3,47-diona-(4)?usata -come

^e-di?partenza -precedentamanta-?-un?i

noto-ad -?-o11anuto?par-mazzo dell^idrolisi-alcalina dal?corrispondente?composto?6beta-acetossilico?.?Eeiw composto a sua volta ?-ot-tenuto?da?bis{et acatale)?cicl-ico-di?l9-idrossiastru.5?ena-3r

diona-medianta? trattamento-con?tetraacatato.-di-i>iom--. Questa stessa serie-di-reazioni-pu?-ancheassara nsata perda- conversione?di-altri?composti?appropria^ tornente sostituiti-per?ottenere?i_corrispondenti_6beta-I

iarassicornposti.-dh.e-poirebbero quindi-essere.-Usati

-in ulteriori?reazioni, coma_sopra-descritttf.

Ber-ottenere -composti alchilati-in_posi?

zione.-C--16, il_ l0-(2TPropinll^sstrw4-an8-3,-17-dione

e-ridotto in-modo-da-Ottenere-il comp-osto? -5-c. ^? ssi impiegando?boroidruro ed il.3-.ch.etone ?

.ne^oonvertito_nel-chetala-impiegandO-gLicole?etil et O -?J O

nico?ed-acido-p-toluensolf.onico in banzene a^ricade- c re.-Il-risultante -corneosto?viene._quindi-Ul.teriormen??

'te-fatto reagire-con-trimetilsililcloiuro-per for- *<?

c> 4-nire il corrispondente .compostogli)-(3-trimetilsilil-?

?

--2-propinilico)v-La ossidazione del-4-7=-alcool..con_ 1- ?eh c -il?compiesso di-triossido -di cromo???piridina-in-dir-I

in conformit?-alla,procedura di Ratcliffe.

et-al.1-J-.--Org.-Chem'. 35, 4000 (-1970-) rigenera -il

-17-chetone-che-pu?-essera .mancaichilato-nella_posizio-_

-na-O-16?per-esempio-mediante.raaziona con,clorofor-_

mato -metilico ?-t-butossido.di-patassio,..a.cui?viene_

fatto- seguire-un-appropriaio_aloganuro alehilico in?i

-feriore per-fornir.ouru_l6--alch.i3.r-1g-matoasicarhonil

steroide. La idrolisi-alcalina-seguita_da acidificazione e-da -riscaldamento,-permette-di_realizzare_una

I

'.decarbossilazione,?dechetalizzazione?e rimozione_

del-giuppo -trimetilsiliiico per?fornire il?deside?

rrato l6-alchile-lO~(2-propinil)estr-4-ene-3,17-dione'.

La alchilaziona-.su_Cg pu? essere effettuar; ta impiegando il 5*6?epossido a_cui ? stato.fatto

-sopra riferimento*? -Questo_composto .viene _fat_to_reagire con un eccesso di-un appropriato reagente di ?rignard alchilico inferiore ?n.tetraidrofurano.a ricadere per fornire il .composto corrispondente 6betar-. alchile-5alfar-idrossiV-I giuppi di protezione.acetal lici- vengono rimossi con un acido minerale_e_la .disi^ drataziona dell?alcool viene eseguita mediante trat-_.SO_ tamento con un acido per esempio acido.prtoluensolfc*-nico in benzene? Ci? fornisce il desiderato.6betaralchile-4-ene-3?17-dionO. - -- - -S-?i - - 1 composti cne contengono

7-alchilico possono essere ottenuti dal 4?ena-3j17?1[-^.0 ^' dione (6) precedentemente descritto*; Seguendo proce^-^

?i dure che sono gi? state discusse in precedenza per

-gli stessi o per analoghi composti,..il .compo.s.to.rirrj sultante viene deidrogenato per ottenere 4,6-diene

che viene quindi ridotto con un boroidiuro per fon-j_ nire il composto l7beta-idrossi e l?alcool jyiene eM sterificato impiegando anidride acetica!? Il risultante composto l7beta-acetossi-lO-(2-propinil)estr-j4,6-die ne-3-one viene quindi fatto reagire con litio,di(al-_ _ chil inferiore)rame per fornire il

-en?3-one.-Quasto-composto pu?-essere-ulteriormente

deidrogenato-come-descritto-per?il?-composto?(-6-)f,

-La-serie-18-matiliea pu?-essere-o-ttenutadei-precursore-noto?(-10)?preparato i

L& ?pr?o8dur8>?d??B&dieiey?et? ?O-rg??Gfefflffrj?3'ty

1026(-1966)v-Per-ottenere -1a-serie??10-(2-propiniliea)

l ?idrossianone-(40)eviene fatto-reagire eome rap--presentato-nello-schema?3?-{seguono-formul e)

Q. c? < 5 ac y? 5 ? Oc < LJ C Z N

C

osdi , o ? CN

E

< co O) c ;SCHEMA 3

QAc t

<

-a.

1

AcO

j < \ d.

w> <r^

'tQo 7^ - 4L; r 12 <f

z i3 ^ ?? ~ ? o Z o CN o <

NI

fi? I -<

OT

-> S

Ac0 il I AcO

Br .s I

15

->

17

-i*? Il-noto-idrossienone (iO)-viene-converti4o

in enoldiacetato-(-4-1-)?con-isopropenil?acetato??--la

riduzione con boroidruro-di?sodio iir-conform-it?-al

1 a-procedura-di?Bauben-efc elv- Chemf. Soo?-,?7-3,

4463 (-4951) produce?enadiolo?(4-2-)? eheviene -oonvarti?

to-nel?suo-diacatato?(-43-)?mediante trattamento?eonvan Or ??7? < zionale-con-anidride?acetica-e-piridina^

0 a, analogica-con-il?composto noto-con?il n -Oo-?O?in-0-13? il?diacetato?(-l3)--viene ul

<r K

-teriormante elaborato-implaganda-la-procedura di-!

o?yr N; jsowers-et-al.,?????Affi?-Gleni.?Soc.?84^-3204? (49?2)?.- O ir* ?f? -- II?diacatato (-43)?viena convertito in.bromo m ! d? -idrina?(44)-con-IT-bromo-succininnnide?.--Il--trattazQanto? c rcon tetraacetato??i?piombo-produce-etere ciclico-(-15)

iehe viene-convartito -in?d etona-(16)?mediante idro- ?

-Ilisi-deli-*acetato ^ mediante-ossidazion i I e"??Il-tratta-i;--mento con-zinco metallico-provoca-una-apertura ridut

tiva dellTetere-e-?a-eoni.ugazione-del? doppio?legame

dell 1enone-per-produrre?il?4?ene?3?one?19?olo?(4-7-)V

Il-19-alcool -(47-)-pu??essere-ossidato-per ottenere

il compost?-??idrossi-dopo?chetalizzazione-nelle?poai

zioni?3-e-47?e-eu??essere ultoriormante-trasforma--to?con-le-procedure?precedentemente?discussev

i?precadenti-sintesi?sono?illustrative e-I

1

-molta??ntre -eonvenzionali?reazioni-e?combinazioni?di

questa reazioni possono essere usate per produrre i composti dell'invenzione d per.ottenere la loro in--terconversione.-Queste reazioni -convenzionali.e.que?|. ste condizioni-possono essere ritrovate ja?esempio

in Fieser et al*., "Steroida'J?(Reinhold,.New Yorkj

-1959)? Djerassi, Ed., ?'-Steroid Reactions'L_(Holden-.

Day,--San Francisco,-4963)?-Kirk-et al*?, HSteroid_ Reaction Mechaniama"-<EIsevier, Amsterdam,.J.968); .

, "Some Modem Methods of Qrganic Synthesis" (Cambridge IP.-Press, Cambridge, 1971)? ed Harrison

< et al-.; "Compendium of Organic Synthe.tic Methods". ??.? vi (V/iley-InterScience, New York, 1971)??- <

S -i O UJ , -I composti della presente invenzione sono,, ? 5 -" ^!inibitori di aromatasi e come tali sono utili per r1-<l ^e ?. T~ < ??N. il trattamento della iperestrogenemia. Perci?, i t? <?..OO 03 > -composti sono utili per controllare livelli (anor- O -o CN

< NI

-malmente) elevati di estrogeni sia quando tali li- oc

co velli elevati osservati sono relativamente stazio-. -1-4-nari sia quando essi sono brevi incrementi Jmprowi- _ si che si verificano come-parte di funzioni cicliche del-corpoV-Sia soggetti femminili sia^soggetti maschili possono essere trattati anda se,owiamente la quantit? assoluta dell'estrogeno che sarebbe -considerata elevata nei soggetti maschili sarebbe , molto inferiore della quantit? necessaria nei sog

femminili. Goinposti par.ticolai?entapr_eferiti

sono quelli in cui il nucleo steroideo contiene gnl-l

tanto un doppio legame, ubicato nella posizione 4f.

?

Tali composti A sono inibitori di arginatasi irrever sibili per il fatto ch? il legame con 1*enzima

_arornatasi ? irreversibile1.

X composti risultano perci? utili come agenti_anti-f ertilit?.per prevenire la ovulazione o l'im-1pianto in soggetti femminili oppure par ridurra.il_

comportament Q_pel1a copulazione nei soggetti maschi- <

~tt? ?/> .li,__nel__ca.so?.in_cui_la aromatizzazione del cervello <

O

sia richiest? per un tale._comportamento.?__I_composii.

avrebbero.anche _yal.ore_.per.il'_trattamento_dell.a gine?_ 8of ai z comastia, dellliniertilit?jaei__s.oggetti_maschil.i.ri- < ?3- N.

TO" > -i_sultante.da.elevati livelli_di_.es.trogeni_e._della_iper-?__ ? 3 ? i < .estrogenernia-che.pu?...precedere l?infarto del miocar- _ nM?

< CO

idi0?.-! .composti,possono.-.anche..ess_ere_ut.ili_per_il__trat- -?*-?

tament.o_del_oancro_.della._mammelia___e_di_vari .turnori

_stimolati_o_indot_ti_dagli_e.sir_ogeni. L1azione inibijtric.e__delIL,_Qnziiiia_arQmatasi_.dei__c_ompo.sti_dec.pndo_._la_L

presente invenzione pu? essere determinata impiegando

;un.saggio_radio_enzimatico'. Un preparato enzimatico

.a_bas.e-.dl_.arornatasi dalla.frazione mierosolale!1so?

-lata-dalla.placenta..umana-_viene_JLmpiegatQ_per_..qUe_stp

scopo La eliminazione _s_terso.sp.e.cifica delle,e_tic.he_tta

i

-ture di tritio ibeta e 2beta dai sottostrati.a base di androgeni come il -testosterone o_l*andr?stenedip-. ? e la succassiva comparte_dell -aoqua..trifiata yqrtj-_ gono utilizzati per-misurare.la velocit?_della._rea& j-zione enzimatica durante-le incubazioni .in^vitrof._ - ^ -La affinit? enzimatica -dei presenti,inibii -tori-di aromatasi-viene-d?terminata.misurando _la loi _

3

ro inibizione?competitiva-sulla-conversione,di_ H- < a. co testosterone in estrogeni.-Il-composto...l_beta,2beta-O ? testosterone (40-60 Ci/mM attivit? .specifica).vie-?^_ ne disoleito in tampone di.saggio per fornire.una ?? <?

CL

concentrazione di saggio di circa 1f7-X 1.0_ M con. NI-^ approssimativajnenta-200.000 disintegrazioni per mi??? SJ CSi ?-nuto in 100 microlitri?? Il tampone .di saggio contie-^

c<o rne 100 rati di KC1f 10 mM di KH^PO^, 10.mM di ditiotrei? - |--tolo ed imM di EDTA-con pH-8T0..1 -composti inibitori-__ (circa 10 mg) vengono discioltd? in etanolo,e/o.di-_ metilsolfossido-e -diluiti con.tampone,di.saggio per/

-4 -fornire concentrazioni di saggio-comprese_fra_lQ_ M e 1G?9 M? Il 1?stosterone marcato con.tritio_.Xsotto^-.

-strato) in quantit? di -100 microlitr:L_(circa 2*6 x

-10~- M) e l?inibitore dell*enzima.(100.microlitri.) vengono aggiunti ad un tubo.di-centrifuga da 35 mi 'con-, tenente 600 microlitri di un sistema generatore di j_ ! NADPH. La aromatasi richiede NADPH come co-fattore

-e pertanto-viena.incluso.un sistema generatore.-cha

util izza-NADpt-in?concertraziona?0,-5 mM 2t5-nM_di

osio-fi-fOS -to deidroganasi in

.-?anzima?viena?iniziata-medianta.,llaggiunta

-?0Q-microlitri?del?preparato.di.aroma-tasiy_usueLl.i^_

m ente-50-mierogrammi Hi proteina jnicro.soma!a_pe.r_Qgbi

-mi di-tampone.di? saggio...Quasti_.praparati.vengono. f C/>

?mescolati,impiagando-un..misealatora a vortic?__< yen- <

O

D? t--gono incubati-par-dO-minuti_alla iamparatura.._di?37?-CL.con. ~7 o o I a:

95^ 0-^-'$ -00-_.fasa_gassosa-in?incubat.ore _ad_agitazio-2 i Z -< ?* N di--Dubinoff- ^ ^ ofi ^ ? ^ u -La reazione enzimatica .viane.fatta termi-. =*??' yCSjoI" nara mediante-1-*aggiunta?di_CHCi^??Dopo.il.trattar-.?

c? amento con-vortice -per.20-secondif-le.,emulsioni...ac-.. ?i quo se/organiche?vengono?dispersa.-a la separazione?.

delle- fasi-viene realizzata-dopo la .cenirifugazio.n.e

!a 600 x -g-par-dO-minuti.?Campioni?duplicati_di__500

?OA microlitri -dalia-fase.-acquosa-.supariore_di_ciascun

-campiona-di-incubaziona-vengono aggiunti._a_J&bi_di_

col-tura-di^U? x-75mm..A quastl-tu..bi_ai_aggiungono

-500-microiitri-di-sosp.ensiona_di_.car_bona__xiyastito_

di -dastrano-allo_0^25^-iroddaf_ si_jaff.e.t_tua?il?tratta--manto?Gon-vortice,-si?sot?opona._ad_incubaziona_p.er_

15-minu.td_ alla?temperatura .di.4?G e quindi si cantrifuga a 2$00 x g in una centrifuga refrigerata (40C)'.

La frazione supernatanta viene decantata in una fia--i

la di scintillamento da 20 mi e si aggiungono 15 mi

di prodotto di coda-di-scintillamento acquosov La radioattivit? -di ? -risultante dagli atomi-di tritio ibeta e -2beta liberati-durante la-reazione enzi-< ?r matica viene determinata mediante-il conteggio per *?

<

10 minuti inrun-contatore di scintillamenti in-li -o in.-!

OC < quido. Questa procedura di saggio ? adattata dalle ??J < ? os oc procedure di Read et-al^?, JV -Biol?. Chem!?, 251? 1625T- Z

?a (1976) e Thompson et al'., JF. Biol?, Chem!., 249, 5364- oQ

'??7

CN 1 e 5374 (1974)- - ^- - -- M oc < - Lfattivit? enzimatica viene messa in rela- *

?? c zione con la percentuale di tritio liberata dal ? --testosterone che appare come La attivit? di eia?

Z [

J

scuna concentrazione del composto inibitore viene ? calcolata come percentuale del controllo di veicolo,

t

che ? arbitrariamente regolata al 100$. La concentra--zione molare di ciascun composto inibitore che riducala-attivit? dell?enzima nella misura-del 50# ?-de-- nominata concentrazione di inibizione al 50$, 10,-J;

Questi valori per~un composto inibitore secondo la presente invenzione,-10?(2-propinil)?estr-4?ene-3?17? dione e dei composti di riferimento amminoglutetimJ hmide, androstar-1,4,6?triene?3,15?trione e 1?deidro-^

i

j testololattone, sono rappresentati nella tabella

t. Il composto 10-(2-propinilico) presenta una maggiore affinit? per -l'enzima in confronto con altri

noti ..composti inibitori, .che..sono stati usati come

agenti anti-fertilit?_nei._roditori..oppure ^jerlbloccapr

re.la .aromatizzazione.-periferica^nei pazisnti-.aff.Qt7-< ti da cancro_alla mammella. d ~tc~ < TABELLA 4:.-Inibizione,competitiva .degli .inibitori... -e-XLT dlaromatasi _ uo O--Composti .inibitori le 50~ j< ? NJ < 10-(2-propini!) es?r^-4-ane-3,17-dione co -4,2 XL.10??_M sB - alfa-(p-ammin ofenil-alfa-atilglutarim-_ -_ zO ? CN o < NJ

e= - i1-mide)? (amminoglutetimmide)_ _ _ lr0....x 10?~*6_ < O) - !LAndfosta^-1,4,6-triene-3f17-dione_ 1,0 x 101-?7 . c - 1Acido 1f2,3?4,4a,7?-9f10,lOa-decaidro-2- - - .|-- - l-idrossi-2,4b-dimetil-7-osso-1-fenantre- _ i . ...

' _5

-- .? j-ne-propionico- Q-lattone- - -. 2,5 x 10~ _

- 1_composti -dalla presenta invenzione, che-pro-.

?

sentano una tuona inibizione,.IC^0_^.- sono

stati valutati per accertare-la loro azione inibitrice. dipendente dal tempoV In questo saggio, il composto_

inibitore viene sottoposto-ad -incubazione.-prelimina-_

? re con 1^enzima-primsu dal saggio,per 1'.attivit??en-_

? zimatica in presenza di elevati-livelli di substrato*'?._

TjUna diminuzione dell'attivi-t? enzimatica dipenden-.I_

.i.te dal tempo ? indicativa di una unione irreversibi- _

i-del-l-?-inibitore?con-llenzima,

Nel saggio dipendente_da3_ tampof_q|Uaniit?.

Ll-'-inibitore-delli-enzima-inu-tOO-microlitri

-pone-d-i? saggio-precedentemente?dascritto__che??omnici. ranno -concentrazioni-di?saggi0?che_sono appro.ssi_ma? ci < t-i-vamente una-vol-ta-e dieci volte maggiori?dei vaio?

-r-i?di???? oO 5=?0-^??????-3??? a tubi-di-centrifuga oc < da?35-mi -contenenti 600 microlitri del?sistema__gene-k 2

??? ' Ni . ratore di--NADPH-precedentemente-dascrittoV-ilincu- <?);

? C

2 S.' bazione prelirainare?viene-iniziata-con.XJaggiun_ta_di ?N aNcJ < 700-microlitri-del preparato?a-base._di.._aromatasi_.u? cn cn E

sualmente -600-800-microgrammi di-proteina microso-_^.

-male-per-ogni-mi-del-tampone di.saggiov .Questi.,pre-,_

-f-parati-vangono-mescolati_impiegando..un.miscelatore

j

?-a vortice e-trattati-in-incubazione per .0,10,20-0

-4-0-minuti alla-temperatura di 25?C? Quindi, si ag-. giungono -100-microli-tri-di?testosterone__(circa_6,.8

?fi < x?10- U)--contenente-piccola.-quantit?.di....l.b.e.tat.2bet&-? ?

-K?testosterone?in--tampone,di saggio__per._f.ora ire.una -concentrazione?di?saggio de! sottostrato? (4>5 x .10.7

M-)-che ? almeno-dieci-volte il vaiore.._di._Km di__te-_ stos terone-40,&4-5-micromoli)i?Dopo-il_trattamento.__ con-vortice -li-incubazione.-dell?nzima?viena

per?10-minuti prima^.che-.venga.panninata_con_la -aggiunta-di-oloroformiot-La quantit?_di_gad?oatti^_

vit? nella frazione,acquosa viene determinata con.

.le.procedure di sinotiliamento;.Inattivit? enzimatir-.

_ca.viene calcolata..dalla percentuale-di._?-testosteU

rone .che si.converte._in -?2?. La.attivit?-enzimati-.ca per.ciascuna concentrazione.del composto

's .re.in ciascun periodo di..tempo di incubazione,preli^? Q. .minare..viene..calcolata come percentuale.del_control?--. -S lo di..veicolo a .'iO^?-ioinuti..arbitrariamente stabili-c. C u . os ? V < jto.al...100$?. Pertanto,-la presente inibizione..dell*en-.

< Ni _zima viene espressa come percentuale: /?00.percento- ff'i

1 ] ? ..meno percentuale di attivit? enzimatica dell ?.inibi-!_

N?~ ce -c' -i1-!-(Ji - I composti che presentano una unibizione ? r _ J-- dipendente dal tempo .vengono quindi sottoposti a *?

saggio per stabilire la costante di inibizione ?^- j--la quale rappresenta la costante di dissociazione

apparente per il complesso enzima-inibitor?.-Questa

!

-deteiminazione richiede misurazioni_alle velocit?

. iniziali della reazione enzimatica. La attivit? en-?.

!

zimatica viene determinata dopo diversi.tempi di incu--bazione preliminare?con varie concentrazioni ..del com?.

posto inibitore quando il-saggio viene effettuato? j?

con una concentrazione del substrato almeno dieci volte

-maggiore del valore di Km del testosterone. La se?

mi-vita dellfenzima (t.^ ) a ??1?3?? diverse concen-i

-trazioni del?composto in-ib?it-ore- -viene usata

-per -determinare--il?valore-di-K^?per-mezzo-della-equa--zione?della regressione?1-ineare?d-i?ty^-in funzione?i?1/ /??/.?Il?vaiare?di-?^???equivalente-alla-concentrazione dei-composto?inibitore?quando ?-ugda--1e a-zero.

a - Il--vaiore--di- apparente-per-il--10-(2-pro <

_Q 5 -penil)estr-4?ene-1,-17?dione-?-8,-9?x? 10-??il??-Questi ?Oe-n O -r ^ -dati indicano che questo composto-inibitor?-viene ir? Q O es? --O < ! Z f a affinit? C--L treversibilmente legato allfenzima con un NJ I < CO 00 > --per il-suddetto-enzima-che-??cinque-volte-maggiore? ? o -di Quella del testosterone di substrato naturale che

t

?8 CQ -presenta una affinit? per 1*enzima (Km) di 4*5-it-10? ?> M.

- Questi dati -dimo trano che-il 10?(2-propi? ?

; j

-Htiil)estr-4-ene-3,17-dione ?-superiore ai noti compo--sti-inibitori di aromatasi1. Una singificativa inibizione di aromatasi-irreversibile-?-dimostrata anchedaglial tri composti-dellapre sente invenzione aventi-le formule I e ll?.

Nel trattamento della-iperestrogenemia,?i

-composti della-presente-invenzione-possono essere

somministrati-in-varie maniere-al?paziente-eho -vien?

!

!trattato per ottenere l-1effetto desiderato?. Come usa

? to nella presente -descrizione -per il -trattamento del.

la iperestrogenemia,-il -termine di paziente deve eessere interpretato in mode-da-significare animali a

-sangue-caldo, -per-esempio-anche rattij?cani-ed^esseri umani.?I-composti-possono essere-somministrati-da si li oppure-in-combinazione-uno?con-?-?altro???Inoltre, i?compos-ti-possono essere-somministrati? sotto -forma Q.

vi 41 -preparati farmaceutici.?I -composti?possono-essere

O <J-> ?sonministrati-per via arala,-^parentaraie,-per-esem- Qg i- <j O

Q ? pio endovenosa, intraperitoneale,-intramuscolare, -o

Z ~ subcutanea, inclusa la iniezione del principio atti- <

CO

03 > -vo-direttamenta nel -tessuto oppure nei .posti-dal ? - Q ?? tumore,-per esempio-la ghiandola mammaria. La quanti? m

< CQ

- t? di composto somministrata varier? attraverso un-- -?? c ? - ampio intervallo e pu?-essere una qualsiasi quantit?efficace. A--seconda del -paziente che deve essere trat? -tato,?della condizione che -deve essere trattata a deimodo di somministrazione,-la quantit? efficace-del composto-somministrato varier? da circa--1-a-250-Hig/*?g-\di peso corporeo per giorno-e preferibilmente-da-40

Ia-50 mg/kg di-peso-corporeo per giorno. -I-dosaggi

unitari- per-somministrazione -orale-o parenterale?pos? -sono contenere per-esempio da 40 a-45G mg di-un-com-? 1posto della presente invenzione.- -Per la somministrazione parentarale, i

^composti possono essere somministrati come dosi 1? niettabili di una soluzione o sospensione del compo

-sto in un diluente fisiologicamente-accettabile-con

un?supporto farmaceutico che-pu?-essere-un -liquido

steriley-per-esempio-ac qua^in-olio?con-oppure?senza

-1*aggiunta-di?un tensioattivo-oppure-aliri agentiadiuvanti- farmaceuticamente accettabili??Esempi?m ostrativi-degli-olii? che-possono?essere-impiegati?in

-questi preparati-sono-quelli?che-hanno?origine-dal- -i Q.

?fl petrolio^-origine animale,? vegetale-o-sinteticaj? ? _ ^

O ? esempio olio di arachide,? olio-di?soia-ed-olio-minei- -fe?<? oO p1 ? rale.? In generale^-acqua,-soluzione-salina,-?destro- ?: -? O ? K z r ? sio acquoso e?relative soluzione zuccherine,? etanoli -N<*-^ K co > ? i g?icol per esempio gLieol propilenico o glicol rLL - o CN o lietilenico sono preferiti supporti o-veicoli -liqui^? a

<

CO

di particolarmente per le-soluzioni-iniefctabiliv- -cr - I-composti possono-essere-somministrati sot-'

forma di una"iniezione prolungata o iniezione a-'deposito oppure un-preparato da-iibpianto-che pu?-es^-sere formulato in maniera-tale?da-peimettere un ri

seio-prolungato-del principi'0 'attivo;r'Il principio

"attivo-pu?-essere-compresso in-pastiglie-oppure in

pie coli- cilindri-ed "impiantaio-sottocutaneamente "intramuscolarmente?come iniezioni-a deposit?-o-impiantiT'Gli'impianti-possono-impiegare-materiali ine rti-quali ?i-polimeri?biodegradatili- edr-ir-stliconi

i

sinteticiy per "esempio?silasticj? gomma al? siiicone

prodotta dalla Dow Corning Corporation.

-Quelli che seguono seno esempi illustrati? i di formulazioni farmacauticha-convaniantiper somministrazione orale?o-parantaraie-che?possono-ea? jre---impiegate-nella applicazione-pratica -dalia pra? -

? .

-sente invenzione^- <

d. COMPRESSE - vi < 5 (a) -lObeta-{2-propinH )estr-4-???- Q UJ ?; < - ?3*~17?dione- :- - 7-5-g 0 n 5

!oc ^ O :< u ? (b)iattosio- Ir216:

M ,-j co -(c) amido di-grandureo- ??3 ^g ,Q ^ ? i Z CN o -Si mescolano uniformemente lfingrediente ?

oc < -attivoj-il-lattosio e lfamido di granturco1?-Si gra- m ?

CTi c nula con pasta di amido al 10$. Si essicca fino ad-?

-un-contenuto-di umidit?-di circa-2,5$?. Si-vaglia at~

?traverso un vaglio a rete Ncr.-42. Si aggiungono e-si

i-i--seguenti-ingredienti:

i

ta)? Ste_arato-di magnesio 0,045-kg -^B)-amido di-granturco -quanto basta a- -4,725-kg-I

S? comprime su una conveniente macchina pa? stigliatrice-fino ad un-peso-di 0,115 granmi-par-pa-r stiglia'. - ? ^? :- --CAPSULA DI-GELATINA MORBIDA-(a)-lObetar-(2-propinil)-estr-4-ene-- 3,17-dione - Q,25 kg(*0 Polysorbate 80 _Q,.25.kg

(c) qliq__di granturco_quanto basta a _25?0_kg

Si mescola e si introduce in *50,000 capsule di gelatina torbida;

INI?ZX0NE_A__DEED.SITO

Ciascunjmillilitro__cpntiene .i seguenti componenti:

? V> (_a)_ ;jpbeta-(2~pnppinil)-estiv^-ene-^3r_l_7 ?X-dione 5,0.mg

(b)_ clorobutanqlo_anidro ?O ?ZJ . <

.5*0.mg ?? D ^ ? oe (c) m?nostearato__di .allum.in.i_q_ _5Q,P_,mg? -?54|^? (d) olio di arachidi quanto basta .a_ 1,0_ml ??_

Si_sciolgon.o._o__dlsperdono.gli ingredienti -?5?^ <

CQ

nell *olio di.,arachidi:?. -or .IMPIANTO...A DEPOSITO

(a)__lObeta-(2-propinil)estr-4-;ene-3f.t7-dione .5,0 jng.

|4l))..dimetilsilossano. .240,0.mg

Cc) ..catalizzatore^quanto Jbasta

Siddisparde_la_s.o.S-tanza_inedicinale.naD_ di?

matilsiio ssano .fluido'?_ Si_aggiungeL_i]_ catalizzatora

a..si_ versa in una convenien.ta_s.tiuttura_monolitica1.

Al tem ativamente.,_la_sostanza,.medieinala.pu?

essere ragchiusa.in _.un_involucro_di_p.olidimetilsiij1ossario pr-aliminamnente realizzato per colata'.

Alternativamente la sostanza medicinale

,?u? -essere dispersa-in-una-conveniente_quantit? di -idrossietilacrilato successivamente polimarizzato_a? 4 a tsi reticolato mediante?liaggiunta-di-eiilendimetacrila^

o ||? 1 to,-ed-un-agente ossidante,?per?ottenere?urLgel._staci- as?.??.

O ^ -I Q O ^ pabil a?tridimensionale -di?atilengLicometacrilato_ !.OL ^ i. Ce (Hydron)', < C Tv TS, ?? ?? :? -INIEZIONI-m -iz ; -Tipo oleoso 13

;(a)? tObata-(2-propinil)esti>-4-ana-3,17-diona 25,0 mgT 44b)-BHA, BHT-aa jOAfe..peso/vo t^(c) olio di arachidi oppure olio di sesamo -?

-!- guanto basta a- - 1,0 mi

- Br-Tipo a-sospensione

(a) 10bata-(2-propinil:^esti>-4-ene-3,17-diona 25,0 mg

-(b)-sodio earbossimetilcellulosa _0,5$-paso/volv -( -bi-sol?ito-di?sodio- _0,02#paso/volr* (d) acqua par iniezione,-quando basta _1,0-ml

COMPRESSA ORALE-0--SUBLINGUALE

-(a) lObetar-(2-propinil)estr-4~ene-3,17-diona

(b) stearato di calcio-(c) calcio saccarina ? 0,02#

?-(d) mannitolo granulare cjuanto .basta - Si mescola e si comprime -su-.una convenien- _

-yte macchina pastigliatrice fino ad un peso di 0,115 grammi

i-per pastiglia,-

Senza ulteriore elaborazionej-si-ritiene ?

che un esperto nel ramo possa,-sfruttando la preceden-

Ite descrizione, utilizzare la presente invenzione 4

?. l/> -nella massima misurai Le seguenti specifiche preferi? <_ ! i O --te forme di realizzazione debbono essere pertanto iri- -fiS-Jr <-. 1 O ? ? -terpretate semplicemente a titolo illustrativo e non - _Q?C .?i,;ow < ? ci Z

limitativo della parte restante della dascrizioner. ,. < "^ ?*

<?CO 06 > ^ -Nei seguenti esempi, tutte le temia*ature sono aspo- _'Q Z cs <

?ste senza correzione in gradi Celsius a meno che

< CO

-non sia diversamente indicato, tutte le parti e le - ?c? percentuali sono espresse in peso'? - - ? .

-ESEMPIO 1 - -- - - -

- - 0n miscuglio di 30 mi di etil vinil etere -

-da poco distillato^ 2,1 grammi di-3,3f17-l7-bis(etilen-

-diossi)estr-5(lO)-en-6beta-olo e 800 mg di acetato ?

-mercurico viene trattato a riflusso per 2 ore e quin-

-di si aggiungono 250 mg di-acetato mercurico vergi-

^??? Si riprende il-riscaldamento per altre due -?re,

?a cui si fa seguire l'a?.unta di -250 mg di acetato ---> i

-mercurico vergine, si tratta a riflusso ovvero a ri?

(

-cadere per 2 ore, si aggiungono 250-mg ?i acetato mer

? curic?j;?' ed infine si tratta a riscaldamento a rica^

dera per--16-ortf._Si aggiunge-una soluzione

-di-carbonato di?sodio-al.miscuglio-raffreddato?il -quale,viene^agi-tato-per 15.minuti

diluito-con etere*. Lo?atrato__organico_viene_separato -lavato.con?soluzione.acquosa-di.-cloruro di_sodio ed, essiccato??-quindi- si-lascia-evaporare,il .solventa.1<?-I]_residuo ottenuto?viene.-purificato_per-.cromatogra*^ -fia-ad-evaporazione..rapida^su gel-di.-siiice_.e-con. ^ ^ -,

O

di etil acetato-esano-per fornire -3,3,17-r-17-bi^5 oir S l?5 (etilendiossi)-6betar-vinilossiestr^5(lO)-ene che .

IN < o> fonde a circa 82-830C-dopo-ricristallizzazione.da > ?

< CN esano. .t>

ut < oc

.-soluzione di 950 mg di--3?3?17f17- Cft bis(etilendiossi)6beta-vinil ossiestr-5(10)?ene in-1? 20 mi di-sim-collidina viene riscaldata a 1-70-175?C per -3 ore1. H solvente viene quindi allontanato per distillazione-sotto-pressione rido11a ed-i.1-risultan--te?residuo?viene purificato-per-cromatografia-ad?

9187 evaporazione-rapida-su-gel di-silice-in -etilacetatoesano-al-40^-per?fornire?3f3f17f-1-7-:bis^etilendiossi) sndrost-5?ene?19-carbossaldeide ebe-fonde-a circa

-128-130?C-dopo ricristallizzazione-da etil-acetato -pantano.- ?-Una soluzione^di? diisopropilammide litica -preparata da 0,26 mi-di diisopropilammina-e-0,85-ml? di una soluzione 2,-1-molare di.tutil litio, il_tutto

! 5

'in -5 mi-di-tetraidrofurano,?viene aggiunta.a -64O mg-di

(clorometil-)-trifenilfosf.onio.~cloiuro-in -5 mi di te--traidrofurano alla?-temperatura-.d:U--70?2?-H-miscugLio.

? i

-viene mantenuto-alla?temperatura di--70?C-per_lO_mi?_

-nutiV-Si-aggiungono 56?-mg-di 3,3?-1-7?-1-7-?is(etilen-.

< G?. diossi)androst-5-ene-l-9-carbossaldeide_in -4 mi-di-? L

< -tetraidrofurano-ed?il-miscuglio viene-fatto,.riscal-- ?0-~[?r? i-!r. -dare a -temperatura ambienteV-.Esso viene quindi._v.ersIa^- O v ?> ci - O -to-in acqua ed il-risultante miscuglio-viene estratto. 7 ?-" < *-NMIS Cu con etere. ,L*etere viene fatto?evapora-re..ed.,il resij^ od 4-duo un miscuglio-di isomeri -(-cis-e.trans)-di 3?3?17-*17- * 5 ? bis(etilendiossi)-10-(3-cloroprop- 2-enil)?)??str-5-- - fa- r-?

O) -:-ene viene isolato per cromatografia ad-evaporazione- ?

-r-rapida.su gel di silice in etil-acetato-esano al ? ;-

40?fa* -Il composto contenente cloro?ottenuto nel

-paragrafo-precedente viene disciolto-in 2 ml-di-tetrai-.

rdrofurano ed aggiunto a diisopropilammide-litica -pr.e?^-?

?-parata da 0,-18 mi- di diisopropilamminaj 0j6 ml-di

una soluzione 2,-1^ -di -butilr-litiG-e-^-m^ di tetraidrofUrano -alla tamperatura-di? 70^0*?DopO?1,_5-Ore.

alla temperatura di -70?C,-si-aggiunge una soluzio?

ne acquosa di cloruro di ammonio-ed-il miscuglio_

viene estratto con etere'? La soluzione eterea viene

essiccata ed il solvente viene-fatto-evaporare per .

-lasciare 3,3r17r17?bis(etilendiossi)--lO-.(2-propinil) estr-5-ene come un-residuo-cristallino che_viane u--sato-direttamente nellioperaziona-successiva^-ill composto fondo-a-4-52~1-53?-G-dopo-ricristallizzaziona da eti-l acetato-pantano)'.?Il residuo.-cristallino

ne trattato con -30 -mi-di-acetone-contenente 20mg1 a.

di ^_ acido p-toluen solfonica a -viene lasciato a riposo O LU a-temperatura ambiente -per 16 ore. II.solvente .vie?5 < r ne-quindi fatto -evaporare ed il -residuo viene puri?-<z ~-{S M < 0 oQ ~ _ ficato oer cromatografia ad evaporazione rapida su-,?--'^? lz o gel di silice in atil acetato-esano al 50$j a cui SO? ..

< -1 si fa seguire la rieristaliizzaziona da atil acetatoJ? c esano, per fornire l0-(2-propinil)estr-4?ene-3j17- rdione, che fonde a circa 174?175?0? Questo composto

f ha la seguente formula strutturale: ? - ,?

HC

1-

H?C

-ESIMPIO 2

Un miscuglio di 6.0 mg d? 3?3*17j17-bis_(

.tilendiossi)androst-5-ene-l9-carbossaldaide a 15 mg

i di acido p-toluensolfonico in 30 mi.di.acetone vier-, ne agitato per 16 ore a temperatura ambiente a quin_di_concentrato a secchezza'. II.residuo viene disciol-.

_to in .etere e._la_.soluzione eterea viene.lavata con

_bicarbonato_di_sodio .acquoso.ed_.essiccata ed il_sol-

jreute viene fatto evaporareper_f.omire _3,.i7-diosso_

andr?s- 4-ene-ig-carbossaidaidef*_Questo composto_.vie=_

a ne.trattatO-.con.j8 mg di.-boroidrur.o__di.sodio in 10. .di c? < I ?

netanolo alla.,temperatura di..Q?.C per__1...orai.-Si.aggiun _Q_!U.

OC lge qukidi acido...acetico?(0,05 ml)_ed-il.miscuglio o ?' o ^ " oc : J < viene -fatto.evaporare_a secchezza.-Il._r.esiduo___viene Z -- ^

Ni.; 1% disciolto in etere, la soluzione eterea..viene lavata ?o r~ Z

con una soluzione.di_acido...cloridrico__.1Ii_a_quindi_ CN

< .essiccata ed il .solvente viene fatto evaporare per PO

di c lasciare un residuo che ? costituito da l7beta-idros-I

I

si-10-(2-idrossietil) estr-4-en-3-ona?._ __

Una- soluzione,-di 300 mg.di .l7beta-idrossi?i-

10-(2?idrossietil)estrt-4?en-3-one_iru_500-mi di tetrai--i

drofurano viene aggiunta a -30-mg-di-litio in-ammo-.|-

? niaca liquida -a-riflusso.?Dopo?1-5-minuti a-q$fest?-tem- ?

paratura si-aggiunge cloruro-di ammonio solido?e.la

ammoniacaviene- fatta evaporare*-Il residuo viene-

disciolto?in~etare?*?La-soluzione.,eterea?viene lavat?i

con cloruro-di?sodio_acquoso?e_quindi,essiccata-ed

il -solvente?viene-fatto?evaporare..per-.fornire come

residuo-1-7beta-idrossi-1X3?(2-idrossietil)-5alfa-estran-

3-one^ Ad una soluzione di-500 mg di -questo prodotto

in-cloruro di metilene si-aggiungono-6-50-mg di cloro? cr ornato di piridinio-ed-il--miscugLio viene-agitato.

a-2 5?C-per-46?ore.-Si-aggiunge?quindi etera-ed-il miscugLio-viene-filtrate.--Il-fii-trato-viene-.lavatocon -acido?cloridrico-lN, bicarbonato-di?sodio

so < so- e-soluzione salina-e-quindi viene essiccato-ad-U

O UJ

br solvente viene-fatto-evaporare per -fornire-come re- r\Z-o O -e- ^ o siduo?3147?diosso?5alfa-andr?stane?1-9?carbossaidei? < ^ ~ de.- -j O .-o -Una soluzione di-diisopropilammide -di liti?^ ,?-^o preparata da 0,26 mi di diisopropilammina e da 0,85 mi di una soluzione 2,1 M di butil litio e 5-ml-di te- j? ? 1_ traidrofUrano viene aggiunta ad una soluzione di.640 mg di (clorometil) trifenilfosfonio cloruro in 5 midi tetraidrofurano alla temperatura di -70?O. Dopo

10 minuti alla temperatura di? 70?C, una soluzione i di 560 mg di 3?17?diosso?5alfa-androstane-l9?carbos? saldeide in 4-ml di tetraidrofurano viene-aggiunta

ed il miscuglio viene fatto riscaldare a.temperatura ambiente. Il miscuglio -viene quindi versato.-in acqua - ?-ed estratto con etere; Il -solvente viene fatto-avaporare ed il residuo viene purificato per cromatogra-- tfia ad evaporazione rapida su gel di silice in etil acetato-esano al 50$ per fornire 10-(3-cloroprop?2-. enil)-5alfa-estrano?3,17-dione come un miscuglio di!-.

isomeri

-Il-prodotto.ottenuto,nel paragrafo.prece-?

-dente viene disciolto in -20 mi .di?benzene contenente

4 mi -di -glicola-etilenico?e.-30.mg_di acido..p?toluen*--solfonico.?Il-miscuglio?viene -tratta.to.-a riflussnqper

A?- ore-non -rimozione-di -una qualsiasi-acqUa_che?si

-forala. Si aggiunga-etere al-miscuglio raffreddato

-che-viene-lava to-con.acqua, bicarbonato .di-sodio-ac-V) < quoso-e-soluzione -saiine -e*quindi-viene,-essiccate_ L

O ?J . a v- < ed il-solvente viene _fat.ta--e.vaporar-e_psr fornire.3,:3,

a O DZ Zz ^ ?17,l7-bis(etilendiossi)-lO-.(3-cloroprop-^-enil)-5alfa^. < u K ! < ??? estrano che viene,purificato mediante.-cromatografia _ N < O -????;-? ad-evaporazione rapida su gel di silice in etil a- _ ? O'S M

oz cetato-esano.al 50$?- --- - j?? <

I to -. ? Una soluzione di 243 mg ?i 3?3?17,17?bis(e- ?* tilendiossi)-lO-( 3-cloroprop-2-enil)-5alfa-estrano rI

1

-in 2 mi di tetraidrofurano viene aggiunta a diisopro-..

!

pilaramide litica preparata da 0rl8 mi di diisopropil--ammina e-0,6-mi-di una soluzione -2,1 M -di butil li-_

tio e 3 mi di tetraidrofurano alla temperatura di

-70?G. Dopo 1,5 ore.alla temperatura di--!-70oC, .si aggiunge cloniro di-ammonio?acquoso _ed-il-miscuglio,

viene estratto con etere. L*estratto etereo viene

essiccato e concentrato per lasciare un prodotto

cristallino residuo che ? costituito,da 3?3?17?17-bis etilendiossi)-l0-(2-propinil)-5alfa-?strane. QuestoI_

prodotto viaie trattato con 30 mi di acetone-contenente 10 mg di acido p-toluensolfonico a temperatura ? ambiente per 16 ore ed il solvente viene quindi fat?o evaporare. H residuo -viene purificato per-cromatografia ad evaporazione-rapida-su gol-di-silice in e;ilacetato-esano al-50# a eui-si -fa-seguire-ricristal-Vi lizzazione da etil acetato-esanoper fom ire?iO?(2- <

5 -propinil)?5alfar-estrano?3,47?dion#? Quasto?composto

c presenta la -seguente formula -strutturale:- &: :

HC K

0 Ih- --?? O

H_C CN "a a f ? .+ ESEMPIO 3 ?

?? - Una soluzione di-312 mg di l0-(2-propinil)

! estr-4-ene-3f17-dione in -10 mi di-metanolo -assolutojviene trattata~con 15^mg-di boroidiuro di-potassio jalla temperatura di 0?C?per-un1ora.? Si aggiunge-agi*

r

-do acetico (0,05 mi) ed-il--solventa viene fatto evaporarar II residuo viene-disciolto-in etere,?la soluzione eterearviene -lavata-con-aeido?cloridrico

1N e con soluzione salina -e-viene-quindi-essiccato

ed il solvente viene fatto-evaporare'. Il-residua

'-viene ricristallizzato da-metanolo--per -fornire?1-7beta--| I r idrossi-l0-(2-propinil)estr^4-en-3-one.-Questo com-? posto presenta la seguente formula strutturala:

HC

OH

H~C

-4 Td -Ad una soluzione di 500 mg-di l7be-ta-idros- -c-i < si-lO(2-propinil)?estr-4-en-3-one -in-4 mi-di-piridi-.?? hna alla -temperatura-di?2-5?C -si-aggiungono-4-mi-di? a u -? o anidride -acetioa ed il -miscuglio viene lasciato a ri- -i K ^ ^ N -poso-a temperatura ambiente per -16-ora* f N < Esso-viene co ? o quindi concentrato sotto pressione ridotta, il-resi- - Z .e^*.~

.? duo viene diluito con etere e la soluzion^?terea viei? -- t

?ec

3) ?ne lavata con acido cloridrico 1N e con bicarbonato -- C 4 -1 i

-di sodio acquoso e viene quindi essiccato e concentra- ?

-to. Il risultante residuo viene ricristallizzato da- r?

j i

'etil-acetato?esano per fornire t7beta-acetossi?10(2^ . .

!

propinil)-estr-4~en-3-one. Questotcomposto presenta la

seguente formula strutturale:

HC

I? -C-CH

H~C

ESEMPIO 5

Un miscuglio di 150 mg di 10-(2-propinil)

estr-4?ene-3f1$-dione, e 300 mg di diciorodieianochinone in -10 mi di diossano viene trattato a ricadere per 20 ore. Il miscuglio viene raffreddato e -diluito con etere e quindi lavato con carbonato di--sodio acquoso e<i essiccata. Il -solvente viene fatta evaporare ?d il-residuo viene cromatografato-su

?. vi -gel di silice in etil-acetato/esano per fornire 10?

5 o ^ (-2-propinil)-estra-1,4-diene?3,17-dione che-fonde a es _<$.

o z -g -circa-200-201?0.-Questo compostieresenta la seguente reQ ^?-.iO < LJ csz -formula strutturale: - - < Q-X ???? ?? r? _ HC 'O-.",.?2

Z ~CN o Hoc O3S.

< m t-05,

0

tfiSM PIO 6

-Un miscuglio di 190 mg di lO-(2-propinil)--estra-4r6?diene-3?17-dione, 168 mg di diclorodicianochinone e 10 mi-di?diossano-viene riscaldato-a ricadere per-5-ore.?Il miscuglio viene quindi raffreddato e filtrato ed-il filtrato viene diluito-con-^terey-lavato con-una soluzione acquosa-di-idrossido

di-sodio 1N e con soluzione salina,-essiccato e qui*?? -di concentrato.?Il-risultante residuo viene-cromato? grafato su-gel di silice-impiegando etil acetato/dios- --sano al-50^ per fornire lO-(2-propenil)estra-1?4f6l_triene-3,17-dione, .Questo composto fonde ad una tempe--i

; ratura.di circa 185-189?C dopo,ricristallizzazioneda_e.tilacetato/esano..0 presenta-la.seguente formula

strutturale:_ :-HC

H2C <a cL < 5

.ESM PIO 7 Q ? t-l '??' Ce z? O Un miscuglio di 250 mg.di?l0-(2-propinil).? z<

< ^ IN. NI < OQ estr-4-ene-3,17-dione a .46? mg di.cloranila in 17

! ?y o mi -di alcool tarz.-butilico .viene riscaldato a tempe-- ~Z CN 2 ratura di ricaduta per 3 ore. Il miscuglio viene m<

cn . diluito con etil acetato e filtrato, ed il filtrato c .viene lavato con idrossido di sodio in soluzione

.acquosa 1N e con soluzione salina e poi essiccato'? ,

: i

+ Il solvente viene quindi fatto evaporare ed il resi-^ )

.duo viene cromatografato su.gel di silice impiegando

i etil acetato-esano per fornire l0-'(2/-propinil)estra?;

?

J.4,6-diene-3,17-dione. Questo composto presenta laseguente formula strutturale:

HC

H~C

j-ESEMPIO 8

Un miscuglio di 200 mg di 10-(2-propinil)-i 5alfa-estra-3?17-dione e.320 mg di diclorodicianochinone in 4 mi di diossano viene riscaldato a riflusso per 24 ore. Il miscuglio viene diluito con etil acetato e lavato con idrossido di sodio in_soluzio-._ ne acquosa 1N e con soluzione salina e.quindi .essic??? cato. -Il solvente viene fatto evaporare ed il-resi-L? duo viene cromatografato su gel.di-silice impiegandoI?

i etil acetato-esano per fornire l0-(2-propinil)-5alfaestr-1-ene-3,17-dione. Questo composto presenta la A?u vi seguente formula strutturale:? . - - ?

HC 0 ?o y- i?i

H?C ?0o Oo 5

< ^ a?--5 N <"oc 00 i> ? -G -?o( 3SM PI09 - - - -< CQ

Ad una soluzione,di 650 mg di-10-(2-??????

^ c nil)estj>-4-ene-3t17-dione in 5-ini di metanolo alla ... temperatura di 15SC si aggiungono 0,6.mi di perossido di idrogeno al 30$?-Una soluzione di-46.mg-di? idrossido di sodio in 0,4mi di acqua viene..quindi-,-aggiunta goccia a goccia. Dopo un'ora-alla temperar- -t ura di 15?C, la soluzione viene agitata per 2.ore -a 25?C prima di essere versata in soluzione salina - -II-miscuglio acquoso viene quindi estratto con etere

e la soluzione eterea viene essiccata e-concentrata,,

Il materiale residuo-ottenuto viene ricristallizzato--da -metanolo per fornire 4f5beta-epossi-lQ-(2-propin-:Ll-)-!

f astrano?3r1-7~elione.-Questo epossido -viene aggiunto

a-5- mi- di-acido-acetico contenente 0,4 ml-d-i-aeido

solforico-concentrato ed-il miscuglio viene agitata

< d. ^j-a-25?C per 4-ore prima di essere versato su-ghiaccio1.? -?? < -II? solido ohe-si forma viene separato per fil-trazio 3 j ?? J--ne e ricristallizzato da etil acetato per fornire -2OS-5lfO < UJ oc 4?idrossi-lO-(2-propinil) estr^-4?ene-3,17-dione.'Questo -2?? -?< ?? K. ^ < co composto presenta la seguente formula strutturale; ----? - o HC 2~ ?? o < -?N INI OS

rLC ?? -A<B---)

?) ?. 1

ssaapio 10

- Ad una soluzione di -152-mg di-3,3,l7f17--bis(etilendiossi)-l0-(2?propinil) estr-5-ene,. in 7 mi

-di diclorometano si aggiungono 85 mg di acido m-clo-^

r

?roperhenzoico allo 85$? Il miscuglio viene mantemuto alla temperatura di 0?C per116 ore e quindi viene

i

-diluito con diclorometano e lavato con acqua, carbo--nato di sodio in soluzione acquosa al 10$ e soluzi?o-!

l

ne salina prima di essere essiccato e prima che il -1 -li

solvente venga fatto evaporare. Il residuo viene sot

toposto a cromatografia ad evaporazione rapida sa gel di silice, in etil acetato-esano al 60# per fori

? j nire 3,3,17,17-bis(etilendiossi)-5alfa,6alfa-epossi--lO-(2-propinil)-estrano'* Il corrispondente composto 5beta,6beta-epossi ?-anche ottenuto?. -< Una soluzione di 126 mg del 5alfa,6alfa-e- ^?.-< possido in 20 ml di tetraedrofurano ? 5 mi di acqua ? OC? viene-trattata con 0,4 mi di acido perclorico al -a 2 ac.? ?70#-e^quindi viene agitata alla temperatura di 25?Cr < u CL

rsi ?? per 48 ore". A questo punto la cromatografia a strar-r

ip o to sottile dimostra l'assenza di epossido. Il risul-^ INI

( a: tante miscuglio viene diluito con etere, lavato con < .?? soluzione acquosa di carbonato di sodio e con soluzione salina e quindi viene essiccato. La evaporazione ?del solvente quindi fornisce 5alfa,6beta-diidrossi? ?10(2-propinil)-estrano-3, 17-dione grezzo. . I ? - - Il diolo grezzo viene disciolto in 25 mi ;

J I

di acetone al^La temperatura di 0?C e si agg^nge ili- ? "{?reagente di Jones goccia a-goccia fino a quando un colore marrone persiste per 15-minuti. Il miscuglio viene quindi estratto con diclorometano e con acqua,- -Lo~strato organico viene separato, lavato con solu? ? zione salina ed essiccato, ed il solvente viene fat? -I I

? e I r to evaporare per fornire, come olio residuo, 5alfa^- - ? : - j idrossi-10?(2?propini!)estrano?3,6?17?trione. Qua? ^ ? stP_olio,viene disciolto in 50.mi.di.benzene, .15 mg.

di acido,p?tolu.ensolfonico vengono.,quindi,aggiunti

_e.d il._miscuglio?yiena .trattato..a ricadere.per__30.

minutijjnp.iegando..una .trappola..Dean-Siark...Il miscur-

.glip..viene .quindijc^fraddato,.lavato con.bicarbonato.

? _di_.sodio in .soluzione.,acquosa,ja con soluzione.sali- V)

< 5 na__e_quin.d?__viene_..essiccato...Il..solvente,viene fatto

OQC b- < evaporare per fornire come residuo__10-(2-prppinil)estzv. 0 :- 5

TJ

t oc i_4r?ene-3.,6,17-trione.Questo _composto presentaJLa.se-r;

! . - '??'

' { co Lguente..formula strutturaie;_ __ ;_ [ ~?* 7~o~

? o HC ?t * L U ?

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c

?t

* Esaapio .11

. - "Ad una soluzione di 400 mg di 3?3?17?17-bis

(etilendiossi) 10-(2-propinil)estr-5? ene-, in 5 ini di

: i tetraidrofurano a temperatura ambiente, si aggiunge

! !

metillitio C1?1 mi-di.una soluzione 4,0 M, in etere)??f?-?

Dopo .10 minuti si aggiungono 200 mg di metil ioduro.._

ed-il miscuglio viene agitato a temperatura ambiente per

circa 8.ore* Il miscuglio .viene quindi...diluito,eoa e-.._

tere, lavato con .soluzione salina o salamoia? ed es-?.

4-siccato, ed il solvente viene fatto evaporare per - ? -

--fornire un residuo che e l0-(2-butinil)-3?-3?17?17

Claims (1)

1. RIVENDICAZIONI- - - ----- "

   t. Composti aventi le-foimule:-

   1 R

   1 R

   C H?C

   H ?7

   in cui rappresenta un singolo oppure un doppio^ - 5$ - ? ;

   legame; R rappresenta idrogeno oppure un alchile C^-C^t' R1 rappresenta metile o etile; R2 rappresenta

   g -(0)(OR ) oppure =0; R?^ rappresenta H oppure un alchi^

   le C^?C^; R4 rappresenta H oppure OR8; R5 rappresene^

   ta ?,-un alchile C? C^, oppure quando il legame 5f6

   ? saturo, R5_pu? essere =0 bivalente; R6 e R7 rap-? -presentano ciascuno H-oppure un alchile C^-C^ e R8

   -rappresenta H oppure un alcanoile C^-C^.? - -- 2. Composti"secondo la rivendicazione T, jl

   ? -in cui R rappresenta idrogeno'. . I-3. Composti secondo la rivendicazione .1 ;?

   ?in cui R,1' rappresenta metile. -? 4. Composti secondo la rivendicazione 1,

   in cui R rappresenta (H) (OH) oppure =0.

   ? 5?. Composti secondo la rivendicazione 1, ~

   4

   avente la formula I in cui R rappresenta H oppure ?-?acetossiie - - - - ? ?? ^?^I2BARAN&ZngNARORAOMAS.p...

   2Mi6VAIEMONTiEI,. - - - 61.- Composti secondo la rivendicazione 1, !L!l00173RQMA----. in cui R^ rappresenta H. - - ---?- - 1-- ? - - 7'. Composti secondo la rivendicazione 1,

   in -cui il simbolo - rappresenta un legame singoloy

   - 8v Composti secondo la rivendicazione 1,

   ;aventi la formula I in cui R -rappresenta H.- -. 9-. Composti secondo la rivendicazione 1,

   aventi la seguente formula: ? - - ? ?

   HC

   il' CH

   H~C

   J<i__ in cui -il simbolo - rappresenta un singolo oppure

   ; 3

   ;un doppio -legame a Rp rappresenta (H) (-OH) oppure ^

   ?K~T=-?c i Z < o -fc*--- 10.-i0-(2-propinil) ast2>-4?ene-3f17-dione,?1z r "

   N oc un composto secondo la rivendicazione 1-v -- 11. i7beta^-idrossi-l0-(2-propinil)estr-4-en-3-one, uun composto secondo la rivendicazione 1.

   - 12. l0-(2-propinil)estrar-1,4-diene-3,17- ?-dione, un composto secondo la rivendicazione 1.

   13. l0-(2-propinil) estra-1,4,6-triane~3, 17-dione, un composto secondo la rivendicazione 1.

   14. 4-idrossi-l&-(2-propinil)estr-4-en-3, 17-dione, un composto secondo la rivendicazione l?.

   R%2AARQIBng.

   15. 6beta-idrossi-l0-(2-propinil)estr-4-en-3,17-dione, un composto secondo la rivendicazione V.

   - . - 16. lO-(2-propinil)estr~4-ene?3f6,17-trio?

   ( ne, un composto secondo la rivendicazione V,- j?

   17+ 10~(2-propinil)-5alfarestra-3* 17-dione, un composto secondo la rivendicazione 1?. - -18. 10~(2-propinil)-5alfa-estr-1-ene-3f 17-dione, un composto secondo la rivendicazione V,

   19. Metodo,per inibire la attivit? della aro- -

   matasi, il quale,consiste nel mettere in contatto un-?

   enzima aromatasi con una quantit? inibitrice efficaJ?-

   ce di un composto secondo la rivendicazione 1V _

   _ 20* Metodo per il?trattamento della iper-

   estrogenemia che.consiste nel_somministrare ad un s?g- _

   i a.

   ?

   getto affetto da.detta condizione una .quantit? .inib?-.

   5 O

   trice di aromatasi_terapeuticamente efficace .del comI?: OC oa o posto secondo..la_rivendicazione-??_ _ __ tx..? -Q.

   < Ui z - C?m _ 21.,Metodo secondo la rivendicazione 19 < n_ i ?e r> . !in cui la inibizione della aromatasi produce un ef- . - O ..c ! . _ : z CN < .fetto anti-fertilit?. - - - - - NI < m

   !. _ 22. Procedimento per la preparazione dei com O)

   posti di formula: ? ? ? ... - -

   R2 R2

   R1

   H2C H2C r

   R6

   l ;

   __,in cui il .simbolo - -rappresenta un singolo-oppure r-| ;

   -.un doppio legame,-Ri-rappresenta,metile oppure-etile,

   5 8 1 ?

   _R rappresenta (H) (OR ) oppure =0; R.-rappresenta ->-

   jii oppure un alehile CL-C,?R5- rappresenta H-oppure ..1

   u1n alchile C.-C ; R6-e Ri- rappresentano ciascuno H_

   ! ? 3

   oppure un.alcbile C??3? e rappresenta H-oppure

   un-alcanoile. -il -quale procedimento,-comprando

   le seguenti -operazionit--(a)--far-reagire-un-composto -cloroetenilico

   a. -di formula t? < O u-i ClCH ClCH cc CH R! CH c ~ Ri a: H2C H2C < ui c Z r -?? ,CL? od > ? -7-

   R6

   R5 Z cs ?< < Con una base forte in un-solvente inerte per.forni CQ ci re il corrispondente composto lO-(2-propinilico) se? -guito dal trattamento con acido per rimuovere i gruppi -di protezione nelle posizioi 3 e 17, con spostamento

   :di una qualsiasi insaturazione in posizione 5?alla .

   I

   posizione 4? . . . .

   (b) questa operazione e facoltativamente . ..

   i [seguita dal trattamento con un agente deidrogenan- --te per introdurre una ulteriore insaturazione nel nu?

   i eleo dello steroide; - -- - - ? - (c) questa operazione ?-facoltativamente seguita da riduzione con idruro per fornire il composto i7beta-idrossi e da facoltativo successivo ?

   jtrattamento con un appropriato derivato dell?acido p per fornire il corrispondente 17beta-estero? - . j

   - 23? Procedimento secondo la rivendicazione

   -22, in cui il composto cloroetenilico ? ottenuto me

   -diante reazione dell'appropriata corrispondente 19-

   carbossaldeide con un fosforano di formula (C^H ) pt

   o 5 3

   < CHCl, i gruppi di protezione etilendiossilici nelle Q.

   to posizioni 3-e-47 essendo facoltativi-durante la-rea-

   zione, ma, se assenti, essendo introdotti dalla reazio- ooc ?~

   (

   Qo O ne del 3,17-dichet?ne,?con glicole etilenico in pre-| O z -LU ca O. senza di un acido. - IS co ufi -

   - 24". Procedimento secondo la rivendicazione o o i Z ? CN o I <

   N

   22, per la preparazione di l0-(2-propinil)estn-4^-ene- - oc < ca 3,17-dione che consiste nel far reagire 3,3,17,17-bis O ! ' h(etilendiossi)-lO-(3--cloroprop-2-8nil)estr-5-ene con

   jUna base forte per fornire il corrispondente composto -

   f10-(2-propinilico) seguito dal trattamento co?i acidi

   | !

   tper-rimuovere i gruppi di protezione con spostamento

   ? dellTinsaturazione in posizione 5-alla posizione 4.

   - ? 25.-Procedimento secondo la rivendicazione

   24, in cui il composto lO-(3-cloroprop-2-enilico) h

   ottenuto mediante -reazione-del -3,3,17,l7-?is(etilen-

   - diossi?androst-5-ene-l9*-carbossaldeide ^on (0CH_)_1P=GHCl:s

   26 GIU. 1981 ? J j

   Roma,

   ?

   ? -p. MERH3LL DOW PHAJMACHJTICALS-INO.

   i

   ? !p.: ING. BARZANO' & ZANARDO ROMA 3.p.A. TA/zf.

   uxv- 7239-i? -

   V