ITMI20100375A1 - Composizione comprendente batteri probiotici per il trattamento di patologie associate con le alterazioni del sistema immunitario. - Google Patents

Composizione comprendente batteri probiotici per il trattamento di patologie associate con le alterazioni del sistema immunitario. Download PDF

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Description

DESCRIZIONE dell'invenzione avente per titolo: "Composizione comprendente batteri probiotici per il trattamento di patologie associate con le alterazioni del sistema immunitario" .
La presente invenzione si riferisce a una composizione comprendente batteri probiotici per il trattamento di patologie associate con le alterazioni del sistema immunitario. In particolare, la presente invenzione si riferisce all'uso di selezionati batteri probiotici per la preparazione di una composizione per il trattamento di allergie, come la dermatite atopica.
E' noto che la Dermatite Atopica (nel prosieguo DA per brevità) à ̈ un disordine cutaneo di tipo cronico con riacutizzazioni che inizia nel periodo neonatale o nell'infanzia e che può perdurare nell'età adulta. Pertanto le fasi della DA si dividono in neonatale, infantile e dell'adulto. La DA à ̈ una malattia infiammatoria della cute che, come l'asma e la rinite allergica, à ̈ associata all'infiltrazione locale di linfociti T che producono interleuchina 4 (IL-4) ed interleuchina-5 (IL-5).
L'IL-4, come à ̈ noto, regola lo sviluppo del fenotipo T helper 2 (Th2) con conseguente iperproduzione di immunoglobuline (Ig) E ed eosinofilia. Elevati livelli di Ig E a livello del siero e skin tests positivi per allergeni alimentari e inalanti possono essere dimostrati nell'80-90% dei soggetti con dermatite atopica.
La DA si basa sia su fattori genetici che su fattori immunologici , anche se un gran numero di fattori esterni può modificare la sua espressione. Nel 60% dei casi di DA si può dimostrare una storia familiare per atopia, in altre parole se un genitore ha una diatesi atopica vi sono il 60% delle possibilità che i figli siano atopici.
L 'atopia e' la predisposizione genetica a sviluppare reazioni anafilattiche localizzate in seguito a contatto, ingestione, inoculazione o inalazione di allergeni.
I fattori immunologici presi in considerazione nell'eziologia della DA sono: l'allergia agli alimenti, l'allergia indotta da allergeni e irritanti da contatto, l'allergia indotta da aeroallergeni e le anomalie dell'immunoregolazione.
Nel panorama dei trattamenti diretti verso la cura e/o prevenzione delle allergie e, in particolare, verso il trattamento della dermatite atopica spiccano molte cure a base di farmaci.
Tuttavia, non esiste una cura, avente efficacia assoluta, ma si può far capo a determinate precauzioni contro l'insorgenza delle allergie o, al bisogno, a rimedi per mitigare i fastidiosi sintomi, come il prurito.
E noto che selezionati ceppi di batteri probiotici sono in grado di interegire con il sistema immunitario. Questa interazione e' in grado di modificare il tipo e il grado di protezione contro i patogeni.
Inoltre, l'alterazione dell'omeostasi della flora intestinale miocrobica (ingerita e residente) Ã ̈ alla base di alcune teorie secondo le quali l'interazione microbi/ospite ha un effetto sulle malattie atopiche.
La Richiedente si à ̈ prefissata lo scopo di valutare gli effetti di una terapia a base di batteri probiotici sul decorso clinico e sulla qualità della vita di pazienti con DA moderata o severa.
La diagnosi di DA moderata/severa à ̈ stata valutata mediante l'utilizzo di un indice standardizzato di severità della DA (SCORAD index = SCORing Atopic Dermatitis). Tale indice à ̈ noto agli esperti del settore.
E' stato trovato che specifici batteri probiotici hanno un elevato effetto ìmmunomodulatore e sono perciò utili per il trattamento di patologie associate con le alterazioni del sistema immunitario.
Forma oggetto della presente invenzione una composizione comprendente almeno una coltura di batteri probiotici, come rivendicato nell'unita rivendicazione indipendente.
Inoltre, forma oggetto della presente invenzione l'uso di almeno una coltura di batteri probiotici, come rivendicato nell'unita rivendicazione indipendente.
Altre forme preferite della presente invenzione sono riportate, nella descrizione dettagliata che segue, a titolo esemplificativo e, pertanto, non limitativo della portata della presente invenzione.
La Richiendente ha selezionato le seguenti colture di batteri probiotici :
1) Lactobacillus salivarius (LS01) DSM 22775, depositata il 23.07.2009, dalla Società Probiotical SpA di Novara -Italia;
2) Bifidobacterium breve (BR03) DSM 16604, depositata il 20.07.2004, dalla Società Probiotical SpA di Novara -Italia;
3) Lactobacillus pentosus (LPS01) DSM 21980, depositata il 14.11.2008, dalla Società Probiotical SpA di Novara -Italia;
4) Streptococcus thermophilus (FP4) DSM 18616, depositata il 13.09.2006, dalla Società Mofin Srl di Novara -Italia;
5) Lactobacillus casei ssp. rhamnosus (LR04) DSM 16605, depositata il 20.07.2004, dalla Società Probiotical SpA di Novara - Italia; e
6) Lactobacillus acidophilus (LA02) DSM 21717, depositata il 06.08.2008, dalla Società Probiotical SpA di Novara -Italia.
Le sopra riportate colture sono state tutte depositate presso il Deutsche Sammlung von Mikroorganismen und Zellkulturen GmbH, (DSMZ) in Germania, in accordo con il Trattato di Budapest .
Nel contesto della presente invenzione, le colture di batteri probiotici sopra riportate possono essere sottoforma di batteri vivi, batteri morti o loro componenti cellulari, estratti cellulari o lisati.
In una realizzazione preferita, la composizione comprende almeno una coltura di batteri per uso come composizione immunomodulante in grado di modulare il sistema immunitario.
L'espressione "composizione immunomodulante" significa che la composizione à ̈ in grado di modulare il sistema immunitario nel senso che à ̈ in grado di stimolare/indurre alcune risposte del sistema immunitario rendendolo più reattivo, intervenendo per esempio, attraverso la produzione di specifiche citochine .
Vantaggiosamente, detta composizione immunomodulante induce il sistema immunitario verso una produzione di citochine di tipo 1.
Pertanto, detta composizione immunomodulante e' in grado di curare e/o prevenire le patologie associate con le alterazioni del sistema immunitario quali allergie e immunodeficenze .
In accordo ad una delle sue realizzazioni, la presente invenzione concerne una composizione comprendente almeno una coltura di batteri probiotici scelta tra la coltura di Lactobacillus salivarìus (LS01) DSM 22775, Bìfidobacterium breve (BR03) DSM 16604 e Lactobacillus pentosus (LPS01) DSM 21980.
In una realizzazione preferita, la composizione comprende detta coltura di Lactobacillus salivarìus (LS01) DSM 22775 e detta coltura di Bifidobacterium breve (BR03) DSM 16604 in associazione con almeno un'altra coltura scelta dal gruppo comprendente: Lactobacillus pentosus (LPS01) DSM 21980, Streptococcus thermophilus (FP4) DSM 18616, Lactobacillus casei ssp. rhamnosus (LR04) DSM 16605 e Lactobacillus acidophilus (LA02) DSM 21717.
In accordo a un'altra delle sue realizzazioni preferite, la presente invenzione concerne l'uso di almeno una coltura di batteri probiotici scelta tra la coltura di Lactobacillus salivarìus (LS01) DSM 22775, Bifidobacterium breve (BR03) DSM 16604 e Lactobacillus pentosus (LPS01) DSM 21980, per la preparazione di una composizione per il trattamento preventivo e/o curativo della dermatite atopica.
Preferibilmente, l'invenzione concerne l'uso di detta coltura di Lactobacillus salivarius (LS01) DSM 22775 e detta coltura di Bifidobacterium breve (BR03) DSM 16604 in associazione con almeno un'altra coltura scelta dal gruppo comprendente:
Lactobacillus pentosus (LPS01) DSM 21980, Streptococcus thermophilus (FP4) DSM 18616, Lactobacillus casei ssp. rhamnosus (LR04) DSM 16605 e Lactobacillus acidophilus (LA02) DSM 21717, per la preparazione di una composizione per il trattamento preventivo e/o curativo della dermatite atopica.
Vantaggiosamente, la composizione à ̈ costituita da Lactobacillus salivarius (LS01) DSM 22775 e di Bifidobacterium breve (BR03) DSM 16604 in un rapporto in peso compreso da 1:3 a 3:1, preferibilmente 1:1.
Alternativamente, la composizione à ̈ costituita da Lactobacillus salivarius (LS01) DSM 22775, Bifidobacterium breve (BR03) DSM 16604 e L. pentosus (LPS01) DSM 21980, preferibilmente in un rapporto in peso 1:1:1.
Le colture batteriche oggetto della presente invenzione possono essere considerate come "ingredienti attivi" che possono essere mescolate, nelle dovute proporzioni, con eccipienti fisiologicamente e/o farmaceuticamente accettabili.
Per migliorare la loro attività, gli ingredienti attivi possono essere somministrati per via sistemica, vantaggiosamente per via orale, sottoforma di composizioni allo stato solido, preparate secondo le tecniche note all'esperto del settore.
In una realizzazione preferita, le composizioni sono in forma di liofilizzato, polveri, granuli, compresse, capsule softgel o sospensioni.
Le composizioni della presente invenzione possono essere composizioni farmaceutiche, dietetiche, alimentari o nutraceutiche .
Le composizioni della presente invenzione possono inoltre comprendere fibre alimentari ad attività prebiotica quali frutto-oligosaccaridi (FOS), inulina, gomma di guar parzialmente idrolizzata (PHGG).
Le composizioni farmaceutiche, dietetiche, alimentari o nutraceutiche della presente invenzione comprendono almeno una coltura di batteri probiotici, come sopra indicate. La concentrazione finale della composizione à ̈ compresa da lxl0^ a 1x10<11>UFC/g di composizione, preferibilmente da lxl0^ a 1x10<10>UFC/g di composizione.
Le composizioni della presente invenzione, che comprendono selezionati batteri probiotici, sono utili come composizioni immunomodulanti in grado di modulare il sistema immunitario.
Dette composizioni sono in grado di curare e/o prevenire le patologie associate con le alterazioni delle funzioni delle seguenti citochine: Thl (IFN-γ e IL-12) e Th2 (IL-4, IL-5 e IL-10) .
Inoltre, dette composizioni sono in grado di indurre il sistema immunitario inducendo quest'ultimo verso una produzione di citochine di tipo 1.
Pertanto, le composizioni della presente invenzione trovano valida applicazione per il trattamento preventivo e/o curativo di allergie e stati di immunodeficienza.
Vantaggiosamente, le composizioni della presente invenzione trovano valida applicazione nel trattamento preventivo e/o curativo della dermatite atopica.
Vantaggiosamente, l'assunzione da parte dei pazienti affetti da dermatite atopica DA di una composizione probiotica comprendente la coltura di Lactobacillus salivarius (LS01) DSM 22775 e la coltura di Bifidobacterium breve (BR03) DSM 16604, ad una concentrazione compresa da lxl0^ a 1x10 UFC, preferibilmente 1x10^ UFC/g, determina una diminuzione dell'indice di Scorad (un valore di Scorad inferiore indica una qualità' della vita migliore).
Inoltre, la somministrazione di detta composizione probiotica per un periodo compreso da 12 a 24 settimane, preferibilmente 16 settimane, Ã ̈ in grado di ridurre/bloccare la secrezione della citochina IL-4.
Parte sperimentale
La Richiedente ha testato tutti e sei i ceppi sopra riportati .
Un primo studio clinico à ̈ stato condotto per testare una composizione comprendente la coltura di Lactobacillus salivarius (LS01) DSM 22775 e la coltura di Bifidobacterium breve (BR03) DSM 16604.
Un gruppo di 40 pazienti (di sesso maschile e femminile di età compresa tra i 18 e i a 55 anni) con DA moderata/severa sono stati randomizzati (1:1) in due gruppi.
La diagnosi di DA moderata/severa à ̈ stata valutata mediante l'utilizzo di un indice standardizzato di severità della DA (SCORAD index = SCORing Atopic Dermatitis). Tale indice à ̈ noto agli esperti del settore.
T0 rappresenta il tempo zero come punto di inizio del trattamento, mentre T16 rappresenta il periodo di 16 settimane di trattamento. Al T16 Ã ̈ stata eseguita una visita con Scorad e prelievo.
Il gruppo A Ã ̈ stato trattato con una composizione comprendente la coltura di Lactobacillus salivarius (LS01) DSM 22775 e la coltura di Bifidobacterium breve (BR03) DSM 16604, avente una concentrazione di 1x10® UFC (corrispondente a 0,01 g). Le due colture sono state miscelate con 1 g di amido di mais a dare una composizione finale in bustina di 1,01 g. Ai 20 pazienti del gruppo A sono state somministrate 2 bustine al giorno per 16 settimane.
Il gruppo B Ã ̈ stato trattato con placebo rappresentato da 1 g di (solo) amido di mais. Ai 20 pazienti del gruppo B sono state somministrate 2 bustine di placebo al giorno per 16 settimane .
Sono state testate le seguenti citochine: Thl (IFN-γ e IL-12) e Th2 (IL-4, IL-5 e IL-10).
Tutti i dati dei 40 pazienti sono stati accuratamente raccolti e analizzati.
La figura 1 mostra un istogramma relativo allo Scorad index a T0 e T16.
I risultati ottenuti mostrano che l'assunzione, da parte dei 20 pazienti del gruppo A, della composizione probiotica comprendente la coltura di Lactobacillus salivarius (LS01) DSM 22775 e la coltura di Bifidobacterium breve (BR03) DSM 16604, ad una concentrazione di 1x10® UFC, determina una diminuzione dello Scorad nei pazienti affetti da DA (un valore di Scorad inferiore indica una qualità' della vita migliore) .
Inoltre, la somministrazione di detta composizione probiotica per 16 settimane à ̈ in grado di bloccare la secrezione della citochina in esame IL-4, il cui valore medio à ̈ sovrapponibile a quello ottenuto al momento dell'arruolamento. Mentre, la somministrazione del placebo, invece, non à ̈ in grado di bloccare il rilascio della citochina IL- 4 tanto da risultare significativamente aumentata dopo 16 settimane di trattamento (evoluzione della malattia) .
Una serie di studi pre-clinici in vitro sono stati condotti su un gruppo di batteri comprendente, tra gli altri, anche la coltura di Lactobacillus salìvarius (LS01) DSM 22775 e la coltura di Bifidobacterìum breve (BR03) DSM 16604.
Studi pre-clinici in vitro di confronto tra le capacità immunomodulanti dei ceppi di batteri testati hanno dimostrato che la coltura di Lactobacillus salìvarius (LS01) DSM 22775 e la coltura di Bifidobacterìum breve (BR03) DSM 16604 mostrano una capacità superiore nell'indurre la produzione di citochine di tipo 1.
Anche le colture dei batteri Lactobacillus pentosus (LPS01) DSM 21980, Streptococcus thermophilus (FP4) DSM 18616, Lactobacillus casei ssp. rhamnosus (LR04) DSM 16605 e Lactobacillus acidophilus (LA02) DSM 21717, sono state testate .
La coltura del ceppo L. pentosus (LPS01) DSM 22775 ha dimostrato in vitro di indurre un profilo citochinico molto forte pro-Th1 .
Inoltre, tutte le colture dei ceppi Lactobacillus pentosus (LPS 01) DSM 21980, Streptococcus thermophilus (FP4) DSM 18616, Lactobacillus casei ssp. rhamnosus (LR04) DSM 16605 e Lactobacillus acidophilus (LA02) DSM 21717 sono state testate per la loro capacità di induzione della sintesi di IL-12 da parte delle PBMCs in uno studio in vivo. La citochina IL-12 à ̈ di tipo Th1 e rappresenta un tassello chiave nel trattamento delle allergie e di altre patologie atopiche.
A titolo esemplificativo, vengono riportati i dati relativi a L. pentosus (LPS01) DSM 21980, testato su PBMCs: Th-1 (pg/ml) = 1,754; Th-2 (pg/ml) = 326; Thl/Th2 = 5,38.

Claims (10)

  1. RIVENDICAZIONI 1. Una composizione comprendente almeno una coltura di batteri probiotici scelta dal gruppo comprendente le seguenti colture di batteri depositate presso il Deutsche Sammlung von Mikroorganismen und Zellkulturen GmbH,(DSMZ): Lactobacillus salivarius (LS01) DSM 22775, depositata il 23 .07.2009; Bifìdobacterium breve (BR03) DSM 16604, depositata il 20.072004; Lactobacillus pentosus (LPS01) DSM 21980, depositata il 14.11.2008 ; Streptococcus thermophilus (FP4) DSM 18616, depositata il 13.09.2006 ; Lactobacillus casei ssp. rhamnosus (LR04) DSM 16605, depositata il 20.07.2004; e Lactobacillus acidophilus (LA02) DSM 21717, depositata il 06.08.2008, per uso nel trattamento preventivo e/o curativo della dermatite atopica.
  2. 2. La composizione per uso in accordo alla rivendicazione 1, in cui detta composizione comprende almeno una coltura di batteri probiotici scelta dal gruppo comprendente Lactobacillus salivarius (LS01) DSM 22775, Bifìdobacterium breve (BR03) DSM 16604 e Lactobacillus pentosus (LPS 01) DSM 21980.
  3. 3. La composizione per uso in accordo alla rivendicazione 2, in cui detta composizione à ̈ costituita da Lactobacillus salivarius (LS01) DSM 22775, Bifìdobacterium breve (BR03) DSM 16604 e L. pentosus (LPS01) DSM 21980.
  4. 4. La composizione per uso in accordo a una qualsiasi delle rivendicazioni 1-3, in cui detta composizione à ̈ in forma solida per somministrazione orale.
  5. 5. La composizione per uso in accordo a una qualsiasi delle rivendicazioni 1-4, in cui dette colture di batteri probiotici sono presenti a una concentrazione compresa da 1x10^ a 1x10<11>UFC/g di composizione, preferibilmente da 1x10^ a 1x10<10>UFC/g di composizione.
  6. 6. La composizione per uso in accordo a una qualsiasi delle rivendicazioni 1-5, in cui detta composizione inoltre comprende fibre alimentari ad attività prebiotica scelte tra frutto-oligosaccaridi (FOS), inulina, gomma di guar parzialmente idrolizzata (PHGG).
  7. 7. La composizione per uso in accordo a una qualsiasi delle rivendicazioni 1-5, in cui detta composizione à ̈ una composizione farmaceutica, dietetica, alimentare o nutraceutica .
  8. 8. Uso di almeno una coltura di batteri probiotici scelta dal gruppo comprendente le seguenti colture di batteri depositate presso il Deutsche Sammlung von Mikroorganismen und Zellkulturen GmbH,(DSMZ): Lactobacillus salivarius (LS01) DSM 22775, depositata il 23.07.2009; Bifidobacterium breve (BR03) DSM 16604, depositata il 20.072004; Lactobacillus pentosus (LPS01) DSM 21980, depositata il 14.11.2008 ; Streptococcus thermophilus (FP4) DSM 18616, depositata il 13.09.2006 ; Lactobacillus casei ssp. rhamnosus (LR04) DSM 16605, depositata il 20.07.2004; e Lactobacìllus acidophilus (LA02) DSM 21717, depositata il 06.08.2008, per la preparazione di una composizione per il trattamento preventivo e/o curativo della dermatite atopica.
  9. 9. Uso secondo la rivendicazione 8, in cui detta composizione comprende la coltura di batteri probiotici in accordo alla rivendicazione 2 o 3.
  10. 10. Uso secondo le rivendicazioni 8 o 9, in cui detta composizione à ̈ in accordo a una qualsiasi delle rivendicazioni da 4 a 7.
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