ITMI20130403A1 - Anticorpi anti-bag3 per uso terapeutico - Google Patents

Description

"Anticorpi anti-BAG3 per uso terapeutico"

La presente invenzione riguarda l’uso di anticorpi anti-BAG3 come medicamento, in particolare per uso nel trattamento dei tumori al pancreas o di altre patologie di tipo immunitario, infiammatorio, neoplastico e/o degenerativo.

STATO DELL’ARTE

La proteina BAG3 à ̈ una proteina citoplasmatica di 74 kDa che appartiene alla famiglia delle co-chaperonine che interagiscono con il dominio ATPasi della proteina HSP70 (Heat Shock Protein) attraverso il dominio strutturale noto come dominio BAG (110-124 aminoacidi). In aggiunta, la proteina BAG3 contiene un dominio WW (Trp-Trp), una regione ricca di proline (PXXP), e due motivi conservati IPV (Ile-Pro-Val), che possono mediare il legame ad altre proteine. La proteina BAG3 quindi, grazie alla natura di adattatore per la presenza di molti domini funzionali, può interagire con diverse proteine.

Negli esseri umani l’espressione genica di bag3 à ̈ costitutiva in pochi tipi di cellule normali, tra i quali i miociti, mentre sue mutazioni sono associate con le malattie del muscolo scheletrico e cardiaco. Inoltre, la proteina BAG3 à ̈ anche espressa in molti tipi di tumori primari o linee cellulari tumorali (leucemie linfoidi o mieloidi, neuroblastoma, tumore al pancreas, tiroide, tumore al seno e alla prostata, melanoma, osteosarcoma, glioblastoma e tumori al rene, colon e all’ovaio).

Nei tipi cellulari normali, come leucociti, cellule epiteliali e gliali e cellule della retina, l’espressione genica di bag3 può essere indotta da agenti stressanti: come gli ossidanti, le alte temperature, la carenza di siero, i metalli pesanti, le infezioni da HIV-1, ecc. Questi ritrovamenti indicano che la regolazione dell’espressione del gene bag3 à ̈ un importante componente nella risposta cellulare allo stress ed à ̈ correlata con la presenza di elementi che rispondono al fattore di trascrizione HSF1 (Heat Shock Trascription Factor), attivato in diverse forme di stress cellulare, nel promotore del gene bag3 (Franceschelli S., et al. J Cell Physiol 215 (2008) 575-577).

Inoltre, grazie alla presenza di molti domini di interazione proteina-proteina nella sua struttura, la proteina BAG3 influenza la sopravvivenza cellulare in diversi tipi di cellule, interagendo con differenti partner molecolari. (A. Rosati et al. Cell Death Dis. (2011) 2:e141). Il primo meccanismo riportato relativamente all’attività anti-apoptotica di BAG3 à ̈ stato identificato nelle cellule di osteosarcoma e di melanoma, dove si à ̈ osservato che la proteina BAG3 modula l’attivazione del fattore di trascrizione NF-kB e la sopravvivenza cellulare (Ammirante M. et al., Proc Natl Acad Sci USA 107 (2010) 7497-7502). Un differente meccanismo molecolare à ̈ stato descritto nelle cellule di glioblastoma, dove la proteina BAG3 coopera in modo positivo con la proteina HSP70 per mantenere la proteina BAX nel citosol e prevenire la sua traslocazione nei mitocondri (Festa M. et al., Am J Pathol 178 (2011) 2504-25). Infine, in alcuni tumori, BAG3 à ̈ stata mostrata regolare proteine che modulano l’adesione cellulare.

La presenza della proteina BAG3 citoplasmatica à ̈ stata descritta anche in molti sistemi cellulari differenti ed à ̈ stata associata non solo a diversi tumori, ma anche più in generale a patologie correlate alla sopravvivenza cellulare.

Inoltre, la domanda di brevetto WO2011/067377 descrive la proteina BAG-3 solubile come un marcatore biochimico nel siero che risulta altamente specifico per la diagnosi di alcune condizioni patologiche, come le patologie cardiache e il tumore al pancreas. In particolare, à ̈ stato dimostrato che nei pazienti affetti da adenocarcinoma pancreatico la concentrazione di BAG-3 solubile à ̈ generalmente maggiore di 10 ng/ml. Inoltre, à ̈ stato recentemente riportato che la proteina BAG3 à ̈ espressa in 346/346 pazienti affetti da adenocarcinoma duttale pancreatico (PDAC) e viene rilasciata dalle cellule del tumore al pancreas, ma non viene espressa nei tessuti non neoplastici circostanti e nemmeno nel pancreas normale, e che i livelli di espressione di BAG3 sono correlati con la sopravvivenza del paziente (Rosati et al., Am J Pathol.2012 Nov;181(5):1524-9).

Come à ̈ noto, i classici trattamenti chemioterapici per la cura delle patologie tumorali, così come i trattamenti con corticosteroidi o FANS (farmaci antiinfiammatori non steroidei) per la cura di malattie infiammatorie e immunitarie presentano numerosi svantaggi legati agli effetti collaterali e non risultano ad oggi definitivi per la cura delle suddette patologie.

Risulta quindi evidente la necessità di un nuovo e migliorato trattamento terapeutico che abbia il vantaggio di essere un trattamento altamente specifico e con effetti collaterali bassi o addirittura assenti, rispetto alle classiche terapie note per la cura della malattie infiammatorie, immunitarie e neoplastiche descritte nella presente invenzione.

DESCRIZIONE DELL’INVENZIONE

E’ stato sorprendentemente dimostrato, per la prima volta, che l’inibizione della proteina BAG-3 mediante l’utilizzo di anticorpi monoclonali anti-BAG-3, compromette lo sviluppo delle cellule tumorali pancreatiche. Il trattamento con anticorpi anti-BAG3 rappresenta quindi un nuovo e migliorato strumento terapeutico per la cura del tumore al pancreas. Inoltre, à ̈ stato anche sorprendentemente trovato che la proteina BAG-3 à ̈ coinvolta nell’attivazione dei macrofagi.

Quindi il trattamento con un qualsiasi anticorpo anti-BAG3 descritto nella domanda di brevetto WO03/055908 che sia in grado di inibire in modo specifico l’attività della proteina BAG3 sui macrofagi, che costituiscono le cellule bersaglio, risulta particolarmente efficace nella terapia di quelle patologie caratterizzate dall’attivazione dei macrofagi, come per esempio le malattie neoplastiche, le malattie infiammatorie, immunitarie e degenerative. Infatti, questi anticorpi specifici per BAG3 sono in grado di legare e di bloccare in modo altamente selettivo e mirato gli effetti patologici legati alla proteina BAG3.

In particolare, l’uso degli anticorpi anti-BAG-3 in questo trattamento ha il sorprendente vantaggio di essere più specifico per gli stati patologici selezionati caratterizzati dall’over-espressione e dal rilascio della proteina BAG3, e meno dannoso in termini di effetti collaterali.

Un oggetto della presente invenzione à ̈ pertanto l’uso di anticorpi anti-BAG3 come medicamento.

Gli anticorpi utilizzabili in accordo con la presente invenzione possono essere sia anticorpi monoclonali che policlonali, preferibilmente sono anticorpi monoclonali.

Ancora più preferibilmente, detti anticorpi monoclonali sono scelti tra anticorpi murini, anticorpi umanizzati, anticorpi chimerici, anticorpi ricombinanti, anticorpi coniugati, frammenti scFv (diabody, triabody e tetrabody), frammenti Fab e frammenti F(ab’)2.

Il termine “anticorpo policlonale†definisce à ̈ una miscela di anticorpi geneticamente diversi in quanto prodotti da plasmacellule diverse e che riconoscono un epitopo diverso dello stesso antigene.

Il termine “anticorpo monoclonale†definisce un insieme di anticorpi identici fra loro in quanto sono prodotti da linee cellulari provenienti da un solo tipo di cellula immunitaria (quindi un clone cellulare).

Il termine “anticorpo umanizzato†definisce un anticorpo di origine umana, la cui regione ipervariabile à ̈ stata sostituita dalla regione omologa di anticorpi monoclonali non umani.

Il termine “anticorpo chimerico†definisce un anticorpo contenente porzioni derivanti da anticorpi differenti.

Il termine “anticorpo ricombinante†definisce un anticorpo ottenuto mediante metodiche di DNA ricombinante.

Il termine “anticorpo coniugato†definisce anticorpi coniugati a farmaci, tossine, sostanze radioattive o altri agenti.

Il termine “frammento scFv†definisce frammenti immunoglobulinici (single chain fragment variable, scFv) capaci di legarsi unicamente con l’antigene di interesse. I frammenti scFv possono anche essere sintetizzati in dimeri (diabody), trimeri (triabody) e tetramery (tetrabody) utilizzando linker peptidici.

Il termine “frammento Fab†(Frammento di legame all’antigene) e “frammento Fab2†definisce frammenti immunoglobulinici costituiti da una catena leggera legata al frammento Fc della catena pesante contigua, à ̈ un anticorpo monovalente. Quando le porzioni Fab sono a coppie il frammento viene chiamato Fab2.

Il termine “ibridoma†definisce una cellula producente anticorpi monoclonali.

Gli anticorpi monoclonali utilizzati negli esempi sono stati ottenuti immunizzando i topi contro quattro distinti peptidi della proteina BAG3 e utilizzando una qualsiasi metodica nota all’esperto nel settore. Tali peptidi sono stati scelti in quanto sono specifici della proteina BAG3 e non sono condivisi con nessun altra proteina, incluse le proteine BAG.

Le sequenze dei 4 peptidi sono comprese nella sequenza aminoacidica di BAG3 (RefSeq: NP_004272; Gene ID 9531) e sono scelte tra le seguenti: SEQ ID NO 1 DRDPLPPGWEIKIDPQ; (comprende gli aminoacidi 18-33 della proteina BAG3);

SEQ ID NO 2: SSPKSVATEERAAPS; (comprende gli aminoacidi 385-399 della proteina BAG3);

SEQ ID NO 3: DKGKKNAGNAEDPHT; (comprende gli aminoacidi 533-547 della proteina BAG3);

SEQ ID NO 4: NPSSMTDTPGNPAAP (comprende gli aminoacidi 561-575 della proteina BAG3).

Preferibilmente, detti anticorpi possono essere ottenuti mediante l’approccio del Multiple Antigene Peptide (Peptide Antigenico Multiplo) (MAP) (Keah HH et al., J Pept Res (1988); 51: 2. Tam JP; Proc Natl acad Sci USA (1988), 85: 5409. Ota S, et al., Cancer Res (2002), 62: 1471), utilizzando i seguenti costrutti map:

- MAP-BAG3-1: nh2- DRDPLPPGWEIKIDPQ- MAP (che contiene la sequenza SEQ ID NO: 1);

- MAP-BAG3-2: nh2- SSPKSVATEERAAPS - MAP (che contiene la sequenza SEQ ID NO: 2);

- MAP-BAG3-3: nh2- DKGKKNAGNAEDPHT - MAP (che contiene la sequenza SEQ ID NO: 3);

- MAP-BAG3-4: nh2- NPSSMTDTPGNPAAP - MAP (che contiene la sequenza SEQ ID NO: 4);

Secondo una forma di realizzazione preferita della presente invenzione detti anticorpi policlonali anti-BAG3 sono ottenuti immunizzando gli animali contro uno dei quattro peptidi di SEQ ID NO.1- 4 indicati sopra.

Secondo una forma di realizzazione preferita gli anticorpi monoclonali anti-BAG3 della presente invenzione sono ottenuti mediante una procedura standard (Tassone P., et al., Tissue Antigens 51: 671 (1998)) utilizzando i 4 peptidi MAP-BAG3 descritti sopra e sono prodotti da almeno uno dei 9 cloni madre scelti tra AC-1, AC-2, AC-3, AC-4, AC-5, AC-6, AC-7, AC-8 o AC-9, che contengono ibridomi specifici per ognuno dei 4 costrutti MAP-BAG3 utilizzati.

Secondo un ulteriore forma di realizzazione vengono utilizzati gli anticorpi monoclonali anti-BAG3 ottenuti da almeno uno dei suddetti cloni madre, preferibilmente almeno uno scelto tra AC-1, AC-2, AC-3, AC-4 o AC-5. Più preferibilmente detti anticorpi monoclonali sono ottenuti da almeno un clone madre scelto tra AC-1, AC-2 o AC-3.

Secondo un’ulteriore forma di realizzazione preferita, con la procedura standard (Ceran C, Cokol M, Cingoz S, Tasan I, Ozturk M, Yagci T. Novel anti-HER2 monoclonal antibodies: synergy and antagonism with tumor necrosis factor-α.BMC Cancer. 2012 Oct 4;12:450) e mediante immunizzazione dei topi con una proteina BAG3 ricombinante gli anticorpi monoclonali anti-BAG3 della presente invenzione sono ottenuti da almeno uno dei seguenti cloni scelto tra AC-rb1, AC-rb2, AC-rb3 o AC.rb4 e/o da almeno uno dei seguenti sottocloni scelto tra AC-rb1a, AC-rb1b, AC-rb2a, AC-rb2b, AC-rb3a, AC-rb3b, AC-rb4a o AC-rb4b. Gli anticorpi monoclonali prodotti da tutti questi cloni e sottocloni riconoscono la proteina ricombinante BAG3 in un test ELISA. (Esempio 2).

Preferibilmente, detti anticorpi monoclonali anti-BAG3 sono quelli che riconoscono epitopi della sequenza aminoacidica della proteina BAG3, che includono almeno uno dei seguenti frammenti 18-33, 385-399, 533-547 o 562-575.

Un ulteriore oggetto della presente invenzione à ̈ l’uso degli anticorpi anti-BAG3 di cui sopra, nel trattamento di un particolare stato patologico che coinvolge l’attivazione dei macrofagi. Tale stato patologico à ̈ scelto tra le malattie neoplastiche, le malattie infiammatorie, le malattie immunitarie e/o le malattie degenerative.

Preferibilmente dette malattie neoplastiche sono scelte tra il tumore al pancreas o il tumore alla vescica, più preferibilmente il tumore al pancreas. Preferibilmente dette malattie infiammatorie sono scelte tra le malattie correlate con l’infiammazione della pelle, dei nervi, dell’osso, dei vasi sanguigni e dei tessuti connettivi, più preferibilmente sono psoriasi, artrosi, neurite, connettivite.

Preferibilmente dette malattie immunitarie sono scelte tra le malattie autoimmunitarie come per esempio le malattie reumatiche, le malattie del tessuto connettivo, le malattie neuromuscolari, le malattie endocrine, le malattie gastrointestinali, le malattie ematologiche, le malattie della pelle e le vasculiti, più preferibilmente sono artrite reumatoide, sclerosi multipla, connettiviti, lupus eritematoso, endometriosi e colite ulcerosa. Preferibilmente dette malattie degenerative sono scelte tra le malattie neurodegenerative e le malattie degenerative del muscolo, più preferibilmente sono la malattia di Alzheimer, il Morbo di Parkinson e la distrofia muscolare.

Secondo una forma di realizzazione più preferita dell’invenzione gli anticorpi anti-BAG3 sono utilizzati nel trattamento di malattie neoplastiche, malattie infiammatorie, malattie immunitarie e malattie degenerative.

Un ulteriore oggetto della presente invenzione à ̈ una composizione farmaceutica comprendente il suddetto anticorpo anti-BAG3 in associazione con almeno un eccipiente farmaceuticamente accettabile. Un ulteriore oggetto della presente invenzione à ̈ l’uso di detta composizione come medicamento.

Una forma di realizzazione preferita della presente invenzione à ̈ l’uso della composizione nel trattamento di malattie neoplastiche, di malattie infiammatorie, immunitarie e/o degenerative.

La composizione della presente invenzione può essere formulata in una forma adatta alla somministrazione orale oppure in una forma adatta alla somministrazione parenterale o topica.

In una forma di realizzazione preferita della presente invenzione, detta forma orale à ̈ scelta tra compressa, capsula, soluzione, sospensione, granuli, perla oleosa.

In un’ulteriore forma di realizzazione preferita della presente invenzione, detta forma topica à ̈ scelta tra crema, unguento, pomata, soluzione, sospensione, collirio, ovulo, aerosol, spray, polvere o gel.

In un’altra forma di realizzazione preferita della presente invenzione, detta forma parenterale à ̈ scelta tra soluzione tampone acquosa o sospensione oleosa.

Detta somministrazione parenterale include la somministrazione per via intramuscolare, endovenosa, intradermica, sottocutanea, intraperitoneale, intranodale, intrasplenica.

DESCRIZIONE DELLE FIGURE

Figura 1. Immagine rappresentativa della riduzione della crescita del tumore nei topi trattati con AC-rb2.

Figura 2. Risultati della riduzione della crescita tumorale in situ.

Figura 3. Risultati della riduzione della crescita tumorale nell’area circostante.

ESEMPI

Esempio 1. Trattamento di topi BALB/c con anticorpo anti-BAG3 (AC-rb2).

Topi nudi (nu/nu) femmina BALB/c di 6 settimane (Charles Rivers Wilmington, MA, USA) sono stati stabulati (3 per gabbia) con cibo ed acqua ad libitum e tenuti in ciclo luce/buio di 12 h in condizioni standard e pathogen-free. Il protocollo di ricerca à ̈ stato approvato dal Comitato Etico in accordo con le linee-guida istituzionali del Ministero Italiano per la Salute. Dopo un acclimatamento di una settimana, i topi sono stati sottoposti all’inoculo di cellule cancerose. Sono stati usati in totale 10 topi, identificati individualmente. Tutto l’esperimento à ̈ stato condotto in cappe a flusso laminare e tutte le procedure chirurgiche sono state effettuate in stretta aderenza alle tecniche di asepsi. I topi sono stati anestetizzati con 100 mg/ml di ketamine HCL e 20 mg/ml di xylazina iniettati intraperitonealmente; poi sono stati sottoposti a laparotomia e la coda del pancreas à ̈ stata delicatamente esteriorizzata. Cellule MIA-PaCa 2 RFP (2.5 × 10<6>) sono state risospese in 40 microlitri di PBS 1X in una siringa da 1 ml; usando un ago 25G, le cellule sono state iniettate nella coda del pancreas ed il punto di iniezione à ̈ stato tamponato con cotone sterile. Una volta assicurata l’omeostasi, la coda del pancreas à ̈ stata fatta rientrare nell’addome e la ferita à ̈ stata chiusa. Dopo 2 settimane, i topi sono stati randomizzati in due gruppi: il primo ha ricevuto intraperitonealmente 100 mg/Kg di IgG murine ed il secondo 100 mg/Kg di un anticorpo monoclonale murino anti-BAG3 (AC-rb2). Questo trattamento à ̈ stato condotto complessivamente due volte in una settimana ed i topi sono stati quindi nuovamente anestetizzati per verificare l’area del tumore usando Macro Fluo e LAS V3.7 software Leica Mycrosystems Ltd. Per ogni imaging, la massa tumorale à ̈ stata determinata attraverso la quantificazione dell’area fluorescente.

Risultati

I risultati evidenziati nelle Figure 1-3 dimostrano che il trattamento con l’anticorpo anti-BAG3 AC-rb2 riduce la crescita della massa tumorale di più del 75% in situ e di più del 45% quando viene considerata l’area circostante il tumore, cioà ̈ la disseminazione del tumore.

Risultati analoghi sono stati ottenuti con l’anticorpo monoclonale murino

AC-rb3.

Esempio 2. Test ELISA sugli anticorpi ottenuti dai sottocloni AC-rb1a,

AC-rb1b, AC-rb2a, AC-rb2b, AC-rb3a, AC-rb3b, AC-rb4a e AC-rb4b.

AC-rb1 AC-rb2 AC-rb3 AC-rb4

Diluizione AC-rb1a AC-rb1b AC-rb2a AC-rb2b AC-rb3a AC-rb3b AC-rb4a AC-rb4b

1/10 0,778 0,773 1,051 0,929 0,827 1,141 1,051 0,929 1/100 0,51 0,512 0,759 0,738 0,429 0,422 0,759 0,738 1/1000 0,302 0,31 0,25 0,232 0,276 0,207 0,25 0,232 Le piastre NUNC Maxisorp da 96 pozzetti sono state funzionalizzate con

la proteina ricombinante BAG31µg/ml in PBS 1X a pH 7 (50µl/pozzetto)

ed incubate per 18 ore a 4 °C. Le piastre sono state poi lavate due volte con

un tampone di lavaggio (PBS 1X 0,05% Tween-20), e quindi bloccate per un'ora a temperatura ambiente con gelatina di pesce allo 0,5% in PBS 1X

(150 µl/pozzetto). In seguito, le piastre sono state lavate due volte con il tampone di lavaggio ed i surnatanti degli otto sottocloni sono stati diluiti

1/10, 1/100 e 1/1000 in gelatina di pesce allo 0,5% in PBS 1X e poi incubati (50 µl/pozzetto) in triplicato ed incubati a temperatura ambiente

per 2 ore. Le piastre sono state poi lavate sei volte con tampone di lavaggio.

Per sviluppare il segnale sono stati utilizzati anticorpi anti-IgG murine (H

L) (Sigma Aldrich) diluiti nello stesso buffer 1/20.000, aggiunti alla piastra

(50 µl/pozzetto) e incubati a 4 ° C per 30 minuti. Dopo l'incubazione, le

piastre sono state lavate sei volte, sviluppate con TMB (50 µl/pozzetto) (eBioscience) e la reazione à ̈ stata arrestata con acido solforico 4,5 M (25 µl/pozzetto). Le piastre sono state poi analizzate allo spettrofotometro alla lunghezza d’onda di 450 nm. I risultati sono espressi O.D. (optical densitometry).

I risultati ottenuti dimostrano che tutti gli anticorpi ottenuti dai sottocloni testati sono in grado di riconoscere la proteina BAG-3.

Claims (15)

1. RIVENDICAZIONI 1. Anticorpo anti-BAG3 per uso come medicamento.
2. 2. Anticorpo anti-BAG3 per uso secondo la rivendicazione 1, nel trattamento di malattie neoplastiche, malattie infiammatorie, malattie immunitarie e/o degenerative.
3. 3. Anticorpo anti-BAG3 per uso secondo la rivendicazione 2, caratterizzato dal fatto che detta malattia neoplastica à ̈ il tumore al pancreas.
4. 4. Anticorpo anti-BAG3 per uso secondo la rivendicazione 2, caratterizzato dal fatto che detta malattia neoplastica à ̈ il tumore alla vescica.
5. 5. Anticorpo anti-BAG3 per uso secondo una qualsiasi delle precedenti rivendicazioni, caratterizzato dall’essere un anticorpo policlonale.
6. 6. Anticorpo anti-BAG3 per uso secondo una qualsiasi delle precedenti rivendicazioni, caratterizzato dall’essere un anticorpo monoclonale.
7. 7. Anticorpo anti-BAG3 per uso secondo la rivendicazione 6, caratterizzato dal fatto che detto anticorpo monoclonale à ̈ un anticorpo murino, un anticorpo umanizzato, un anticorpo chimerico, un anticorpo ricombinante, un anticorpo coniugato, un frammento scFv (diabody, triabody e tetrabody), un frammento Fab o un frammento F(ab’)2.
8. 8. Anticorpo monoclonale anti-BAG3 per uso secondo la rivendicazione 7, caratterizzato dal fatto che detto anticorpo monoclonale à ̈ prodotto da almeno uno dei 9 cloni madre scelto tra AC-1, AC-2, AC-3, AC-4, AC-5, AC-6, AC-7, AC-8 o AC-9; preferibilmente detto anticorpo monoclonale à ̈ ottenuto da almeno uno dei 5 cloni madre scelto tra AC-1, AC-2, AC-3, AC-4 o AC-5.
9. 9. Anticorpo monoclonale anti-BAG3 per uso secondo la rivendicazione 7, caratterizzato dal fatto che detto anticorpo monoclonale anti-BAG3 Ã ̈ prodotto da almeno uno dei seguenti cloni scelto tra AC-rb1, AC-rb2, AC-rb3 o AC-rb4, e da almeno uno dei seguenti sottocloni scelto tra AC-rb1a, AC-rb1b, AC-rb2a, AC-rb2b, AC-rb3a, AC-rb3b, AC-rb4a o AC-rb4b.
10. 10. Composizione farmaceutica comprendente almeno un anticorpo anti-BAG3 secondo una qualsiasi delle precedenti rivendicazioni e almeno un eccipiente farmaceuticamente accettabile.
11. 11. Composizione farmaceutica secondo la rivendicazione 10, caratterizzata dall’essere formulata in una forma adatta alla somministrazione orale oppure in una forma adatta alla somministrazione parenterale oppure topica.
12. 12. Composizione farmaceutica secondo la rivendicazione 10, caratterizzata dal fatto che detta forma di somministrazione orale à ̈ scelta tra compressa, capsula, soluzione, sospensione, granuli o perla oleosa.
13. 13. Composizione farmaceutica secondo la rivendicazione 10, caratterizzata dal fatto che detta forma di somministrazione parenterale à ̈ scelta tra la somministrazione per via intramuscolare, endovenosa, intradermica, sottocutanea, intraperitoneale, intranodale o intrasplenica.
14. 14. Composizione farmaceutica secondo la rivendicazione 10, caratterizzata dal fatto che detta forma di somministrazione topica à ̈ scelta tra crema, pomata, unguento o gel.
15. 15. Composizione farmaceutica secondo la rivendicazione 10, caratterizzata dal fatto che detta forma parenterale à ̈ scelta tra soluzione tampone acquosa o sospensione oleosa. Il Mandatario