ITTO20010110A1 - Nuovi derivati benzamidinici dotati di attivita' anti-infiammatoria ed immunosoppressiva. - Google Patents

Nuovi derivati benzamidinici dotati di attivita' anti-infiammatoria ed immunosoppressiva. Download PDF

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ITTO20010110A1
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methyl
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Francesco Makovec
Lucio Rovati
Simona Zanzola
Roberto Artusi
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Rotta Research Lab
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Description

DESCRIZIONE dell'invenzione industriale dal titolo: "Nuovi derivati benzamidinici dotati di attività anti-infiammatoria ed immunosoppressiva"
DESCRIZIONE
La presente invenzione ha per oggetto nuovi derivati amidinici della fenilendiammina che possono essere rappresentati dalla formula generale (I) sotto indicata ed in cui:
A è scelto indipendentemente tra il gruppo carbossamido, il gruppo tiocarbossammido, il gruppo carbonile;
Ri è scelto tra un gruppo alchile avente da 1 a 3 atomi di carbonio ed il gruppo ammino semplice o sostituito con il gruppo nitro o metile;
R2 è scelto indipendentemente tra idrogeno, un gruppo alchile avente da 1 a 4 atomi di carbonio, 11 gruppo metossi, etossi, propossi, un residuo cicloalcanico mono-, bi- o triciclico avente da 5 a 12 atomi di carbonio, il gruppo adamantilico, un gruppo arile, naftile o eterociclico semplice o sostituito con gruppi metile, metossi, idrossi, animino o alogeno;
R3 ed R4 sono scelti indipendentemente tra idrogeno ed un gruppo alchile avente da 1 a 3 atomi di carbonio;
R5 è scelto indipendentemente tra idrogeno, ed i gruppi metile, metossile ed ossidrile;
n è un numero intero da 0 a 6;
il gruppo amidinico è in posizione para o meta al gruppo "-A-NH- ".
I composti della presente invenzione dimostrano di essere dei potenti antagonisti di diversi mediatori dell'infiammazione e sono inoltre dotati di proprietà immunorepressive. In vitro essi dimostrano di essere degli inibitori della Nitrico Ossido Sintasi inducibile (iNOS) e dell'enzima ciclo-ossigenasi (COX). In vivo dimostrano di essere dei potenti inibitori della citochina "tumour necrosis factor" (TNFa). Inoltre molti dei prodotti oggetto dell'invenzione sono in grado di antagonizzare l'attività collagenasica delle metallo-proteasi.
L'ossido nitrico (NO) è formato a livello cellulare dalla L-arginina per mezzo dell'enzima NOS. Esistono tre sotto tipi di questo enzima. L'enzima inducibile (iNOS) in presenza di citochine proinfiammatorie o di endotossine è espresso in molti tipi di cellule tra cui macrofagi e neutrofili.
La vasodilatazione, una caratteristica dell'infiammazione acuta, dipende per molti mediatori del processo infiammatorio, come ad esempio istamina, bradichinina, sostanza P, PAF etc. dal rilascio dì NO. In generale l'NO potenzia le risposte infiammatorie in numerosi modelli sperimentali sia acuti che cronici.
E' da notare che l'NO può essere prodotto massivamente in risposta ad uno stimolo indotto da citochine nelle articolazioni infiammate di pazienti con artrite reumatoide ed osteoartrite e che le concentrazioni piasmatiche nel liquido sinoviale di NO in questi pazienti sono generalmente molto elevate.
E' inoltre interessante il fatto che l'attività della iNOS è molto elevata anche nel colon di pazienti con colite ulcerativa.
Le prostaglandine (PGE) sono dei mediatori dell'infiammazione generati dall'enzima ciclo-ossigenasi (COX). L'isoforma inducibile (COX-2) è sovraprodotta ( "upregulated") nei tessuti infiammati e ciò comporta una aumentata sintesi di PGE.
Esistono delle interazioni tra i sistemi NOS e COX e pertanto il ruolo del NO nell'infiammazione può dipendere non solo dal suo effetto diretto ma anche dal suo effetto modulatorio sulla bio-sintesi delle PGE.
TNFaè una citochina primaria che inizia la cascata di eventi che caratterizzano un processo infiammatorio inducendo la sintesi e la liberazione di citochine secondarie ed enzimi quali le metallo proteasi (MMP, tra cui la collagenasi), iNOS e COX-2. Come già accennato, la mucosa intestinale è una delle sedi più importanti della produzione di citochine prò-infiammatorie, come osservato in patologie quali l'infiammazione cronica del colon (IBS) e la colite ulcerativa.
Si può pertanto ritenere che i composti oggetto della presente invenzione possano essere usati con vantaggio nella terapia di diverse malattie dell'uomo caratterizzate da un'infiammazione non specifica, come ad esempio l'artrite reumatoide, una sindrome a decorso cronico che può evolvere in una distruzione progressiva delle strutture articolari e periarticolari, l'osteoartrosi, una malattia caratterizzata dalla degenerazione della cartilagine articolare accompagnata spesso da un'infiammazione secondaria della membrana sinoviale, oppure in altre forme patologiche come nell'apparato gastrointestinale la colite ulcerosa, la malattia di Crohn, 1'IBS o le allergie e le intolleranze alimentari.
Si può preconizzare un favorevole impiego dei composti oggetto dell'invenzione anche in altri distretti ed apparati, come nel trattamento di patologie dell'apparato cardiovascolare a base infiammatoria o aterosclerotica sensibili al trattamento di inibitori della iNOS.
Inoltre per i composti oggetto dell'invenzione dotati di attività inibente le MMP si può prevederne un favorevole utilizzo nella terapia di forme tumorali, potendo essi potenzialmente prevenire l'invasione localizzata o metastatica di cellule tumorali, sia inibendo l'attivazione di vari fattori di crescita sia bloccando l'angiogenesi.
Un enorme numero di studi è stato effettuato nella ricerca di farmaci ad attività anti-infiammatoria capaci di esplicare un'azione inibente le citochine prò-infiammatorie e che fossero privi degli effetti collaterali dei farmaci anti-infiammatori classici (COX inibitori).
Recentemente in un lavoro monografico Chiou et al. [Exp. Opin. Ther. Patente 6(1), 41-56 (1996)] hanno recensito un gran numero di pubblicazioni e brevetti in cui sono descritte diverse classi di composti che inibiscono la produzione di citochine, bloccando il loro rilascio oppure i loro recettori o i loro enzimi convertenti. Parimenti sono stati pubblicati molti lavori monografici sugli inibitori delle MMP come ad esempio quello di Summers et al [Annual Reports in Med. Chemistry 3J3i 131-140 (1998)] in cui vengono esaminate diverse classi chimiche di inibitori le MMP e discusso il loro potenziale terapeutico. Tra gli altri sono stati pubblicati dei brevetti in cui viene descritta l'attività NO Sintasi inibitrice di varie amidine come ad esempio nel brevetto PCT/GB/92/02387 e nel brevetto PCT/GB/94/01325 .
I composti descritti sono tuttavia dei derivati amidinici di amminoacidi, molto simili strutturalmente a derivati analoghi della L-arginina come la L-N-monometilarginina, oggetto del brevetto W09l/ 04024, ma diversi sia strutturalmente che come attività farmacologica complessiva delle benzamidine oggetto della presente invenzione.
Tutte queste pubblicazioni e ricerche dimostrano come esista una forte richiesta terapeutica per trovare nuovi farmaci anti-infiammatori sempre più potenti e meglio tollerati. In accordo con tale necessità, l'oggetto della presente invenzione è quello di mettere a disposizione della terapia nuovi farmaci dotati contemporaneamente di attività anti-infiammatorie ed immunorepressive, esplicate mediante la loro attività combinata iNOS e COX antagonista, quella inibente le MMP e quella inibente la produzione di TNF-α e di poter essere quindi usati favorevolmente nella terapia di patologie dell'uomo caratterizzate da un'infiammazione non specifica o su base autoimmune.
Forme farmaceutiche dei composti oggetto dell'invenzione possono essere preparate secondo tecniche convenzionali come ad esempio compresse, confetti, capsule, supposte, sospensioni, soluzioni, cerotti, creme o pomate e possono essere somministrate per via orale, parenterale, rettale, transdermica o transmucosale od altre forme adeguate per ottenere l'effetto terapeutico, come ad esempio preparazioni solide per uso orale ad azione protratta che permettano il rilascio controllato nel tempo della sostanza attiva.
L'ingrediente attivo viene somministrato al paziente di norma con una dose di riferimento variabile da 0,1 a 10 mg/kg di peso corporeo per dose.
Per la somministrazione per via parenterale è preferibile l'impiego di un sale idrosolubile dei composti in oggetto, come il cloridrato oppure un altro sale derivato da un acido inorganico od organico non tossico e farmaceuticamente accettabile. Per i derivati dell'invenzione a carattere lievemente acido, come i derivati in cui Ri è il gruppo nitro-ammino si possono preparare con metodi convenzionali i corrispondenti sali sodici o equivalenti.
Come ingredienti inattivi si possono usare sostanze comunemente impiegate in tecnica farmaceutica come eccipienti, leganti, aromatizzanti, disaggreganti, sostanze stimolanti l'assorbimento transdermico e transmucosale, coloranti, umettanti ecc..
Il procedimento per la preparazione dei derivati oggetto dell'invenzione consiste in una serie di reazioni che comprende:
a) far reagire la 1,3 oppure la 1,4-fenilendiammina di formula (IV) opportunamente sostituita ed in cui R5 ha il significato sopra riportato, con l'opportuno isotiocianato (VA) o cloruro acilico (VB) o isocianato (VC), in cui R2, R3, R* ed n hanno il significato sopra riportato, in presenza di un eccesso di fenilediammina, in un solvente inerte ed ad una temperatura compresa tra 4°C e quella di riflusso del solvente utilizzato, a dare le aniline corrispondenti di formula (III) in cui R2, R3 R4, R5, A ed n hanno il significato sopra riportato ed in cui il gruppo amminico è in posizione meta o para alla catena con il gruppo "A-NH"(vedasi lo schema generale di sintesi, passaggio 1);
b) far reagire le aniline di formula (III) in cui R2, R3, R4, R5, A ed n hanno il significato sopra riportato con l'opportuno imidato di formula II, generalmente salificato sotto forma di cloridrato, in cui Ri ha il significato sopra riportato.
La reazione procede in presenza di un eccesso di (II) rispetto a (III) (preferibilmente di 2 moli a l) ed in presenza di una quantità stechiometrica riferita a (II) di una base terziaria, preferibilmente trietilammina, in un solvente inerte anidro, come ad esempio tetraidrofurano, ad una temperatura compresa tra 4°C e quella di ebollizione del solvente per un tempo compreso tra 2 e 48 ore a dare i corrispondenti derivati finali di formula (I), in cui A, Ri, R2, R3, R4, R5 ed n hanno il significato sopra riportato ed in cui il gruppo amidinico è in posizione para o meta al gruppo "A-NH".
I composti di formula (I) descritti in Tabella 2 (1-30 e 1-31) sono stati ottenuti utilizzando reattivi diversi da quelli di formula generale (II) ed in particolare, rispettivamente, il benzotriazolo-l-carbossammidinio tosilato (vedi Esempio 5) e la N-metil-N-nitroso-N'-nitroguanidina (vedi Esempio 6).
Le fenilendiammine di partenza, così come gli isotiocianati (VA), gli acil cloruri (VB), gli isocianati (VC) e gli imidati di formula (II) sono reperibili in commercio oppure sono stati preparati con metodi convenzionali secondo la letteratura esistente .
Schema generale di sintesi (Schema 1) Passaggio 1
I seguenti esempi vengono qui di seguito riportati per meglio illustrare l'invenzione.
Esempio 1
Preparazione della N-(4-amminofenil)-N'-pentiltiourea (Composto III-4 di Tabella 1).
71.8 g di 1,4-fenilendiammina (0.66 mol) vengono sospesi in 300 mi di tetraidrofurano e 43 g di pentilisotiocianato (0.33 mol), sciolti in 50 mi di tetraidrofurano, sono gocciolati lentamente sotto agitazione ed a temperatura ambiente. Dopo 24 ore il solvente viene evaporato sotto vuoto ed il residuo, ripreso con acetato di etile, viene lavato con acqua, acido citrico 0.1 N, sodio bicarbonato saturo, acqua fino a pH neutro. Il solvente viene anidrificato con sodio solfato anidro ed evaporato sotto vuoto ottenendo 75 g di prodotto grezzo che viene ricristallizzato da toluene. Ottenuti 60 g.
Formula: (P.m. 237.46). Resa 77%.
TLC: (Cloroformio/Metanolo 9/1) rf 0.7. P.f.
125°C .
HPLC : tempo di ritenzione (rt) 4.60 minuti.
Condizioni HPLC: colonna Supelcosil LC-DP, 100 x 4.6 mm, eluente KH2P040.01M 25/MetOH 27/ MetCN 48 (pH 2.1), flusso 0.4 ml/min, detector UV a 248 nm.
0
Tutti i composti intermedi di formula (III) secondo l'invenzione in cui A è il gruppo tiocarbossammido sono stati sintetizzati impiegando la medesima procedura (vedi Schema 1, passaggio la).
Esempio 2
Preparazione della N- (4-animinofenil)-N'-pentilamide (Composto III-22 di Tabella 1).
20.2 g di 1,4-fenilendiammina (0.181 mol) vengono sciolti in 200 mi di tetraidrofurano assieme a 11.1 mi di trietilammina (0.080 mol). La soluzione viene raffreddata a 0°C e 10 mi di caproil cloruro (0.0724 mol) sono gocciolati lentamente in modo che la temperatura non superi 5°C. Finita l'aggiunta si fa salire la temperatura a quella ambiente. Dopo 24 ore di reazione il solvente viene evaporato sotto vuoto ed il residuo, ripreso con acetato di etile, viene lavato con acqua. Il solvente viene anidrificato con sodio solfato anidro ed evaporato sotto vuoto ottenendo 12 g di prodotto grezzo che viene ricristallizzato da toluene. Ottenuti 7.5 g.
Formula: (P.m. 206.28). Resa 51%
TLC: (Cloroformio/Metanolo 9/1) rf 0.51. P.f.
88.5-89°C.
HPLC: tempo di ritenzione (rt) 5.54 minuti.
Condizioni HPLC: vedi esempio 1.
Esempio 3
Preparazione della N-(4-amminofenil)-N'-cicloesilurea (Composto III-28 di Tabella 1).
10.4 g di 1,4-fenilendiammina (0.095 mol) vengono sospesi in 100 mi di tetraidrofurano e 5 mi di cicloesilisocianato (0.038 mol), sciolti in 20 mi di tetraidrofurano, sono gocciolati lentamente sotto agitazione ed a temperatura ambiente. Dopo 24 ore si filtra il solido formatosi lavando con tetraidrofurano freddo, acqua ed etere etilico. Ottenuti 8.8 g.
Formula: (P.m. 233.31). Resa 98% TLC: (Cloroformio/Metanolo 9/1) rf 0.40. P.f.
199.8-202.4°C.
HPLC: tempo di ritenzione (rt) 6.39 minuti.
Condizioni HPLC: vedi esempio 1.
ppm: 0.75-2.00 (m, 10H); 3.47
Nella seguente Tabella 1 vengono riportati alcuni derivati di formula (III), ottenuti secondo quanto descritto, con alcune caratteristiche chimico-fisiche che li identificano.
Nota: Tutti i composti esemplificati hanno R eguale ad H con l’eccezione del composto ΠΙ-9 in cui R è uguale a CH b) Tutti i composti esemplificati hanno il gruppo amminico in para al gruppo "NH-A" con l’eccezione del composto 111-29 in cui il gruppo amminico è in meta al gruppo "NH-A".
c) Tutti i composti esemplificati hanno R eguale ad H eccetto il composto III-21 in cui R è 2,5-dimetile.
d) Solvente di cristallizzazione: A (isopropanolo); B (toluene).
e) Eluente: (I) cloroformio/metanolo (9/1) (v/v); (II) cloroformio/metanolo/ acqua/ammoniaca (85/25/2/1) (v/v).
Esempio 4
Preparazione della N- [4-(N-acetamidino) fenili-N' -pentiltiourea (Composto 1-4 di Tabella 2).
55 g di N- (4-amminofenil) -N'-pentiltiourea (0.23 mol) vengono sciolti in 300 mi di tetraidrofurano. Si aggiungono 64.5 mi di trietilammina (0.46 mol) e 50.7 g di metilacetimmidato cloridrato (0.46 mol) sotto agitazione a temperatura ambiente; il pH della sospensione è circa 9. Dopo 24 ore (il pH scende fino a 7) si filtra il solido lavando con poco tetraidrpfurano ed etere etilico. Il residuo ripreso con acqua viene basificato con soda 4N fino a pH 11 e lasciato sotto agitazione per l ora, poi filtrato, lavato con acqua, etere etilico e purificato a caldo con acetonitrile . Ottenuti 51 g.
Formula: C14H22N4S (P.m. 278.42). Resa 80%.
TLC: (Butanolo/Acido acetico/Acqua 5/2/2) rf 0.70; (Cloroformio/Metanolo saturo di ammoniaca 9/1) rf 0.37. P.f. 191.4°C.
HPLC: tempo di ritenzione (rt) 7.70 minuti.
Condizioni HPLC: vedi Esempio 1.
1HNMR (DMS0-dff), ppm: 0.88 (bt, 3H, J = 5.60
Tutti i derivati di formula (I) in cui RI è metile si preparano analogamente impiegando l'opportuna anilina di formula (III) al posto della N-(4-amminofenil) -N'-pentiltiourea.
Esempio 5
Preparazione della 1-guanidinofenil-4-cicloesiltiourea (Composto 1-30 di Tabella 2).
15 g di N-(4-amminofenil)-N'-cicloesiltiourea (0.06 mol) vengono sospesi in 100 mi di acetonitrile e 20 g di benzotriazolo-l-carbossammidinio tosilato [0.06 mol, Katrizky, A. R. et al. Synth. Comm.
25(8), 1173-1186, (1995)] vengono aggiunti sotto agitazione a temperatura ambiente. Dopo 72 ore il solvente viene evaporato sotto vuoto ed il residuo, ripreso con acetato di etile, viene lavato con sodio idrossido 0.1 N ed estratto con acido citrico 0.1 N. La fase acquosa è portata a pH 9 con sodio idrossido 2N, estratta con acetato di etile e la fase organica lavata con acqua. Il solvente è anidrificato su sodio solfato anidro ed evaporato sotto vuoto ottenendo 8 g di prodotto grezzo, purificato con etere isopropilico. Ottenuti 7.4 g.
Formula 291.42). Resa 43%.
TLC: (Butanolo/Acido acetico/Acqua 5/2/2) rf 0.71. P.f. 188.6°C.
HPLC: tempo di ritenzione (rt) 8.0 minuti.
Condizioni HPLC: vedi Esempio 1.
1HNMR (DMSO-dff), ppm: 0.67-2.17 (m, 10H); 4.05 (m, IH); 5.73 (bm, 6H); 6.71 (d, 2H, J = 8.43 Hz); 7.17 (d, 2H, J = 8.43 Hz).
Esempio 6
Preparazione della l-nitroguanidinofenil-4-cicloesiltiourea (Composto 1-31 di Tabella 2).
9 g di N- (4-amminofenil) -N'-cicloesiltiourea (0.036 mol) vengono sospesi in 140 mi di una miscela etanolo/acqua l/l e 3 g di N-metil-N-nitroso-N' -» nitroguanidina [0.021 mol, McKay, A. F. J. Am. Chem. Soc. 71, 1968-1970,(1949)] vengono aggiunti sotto agitazione a temperatura ambiente. Dopo 2 ore a temperatura ambiente la miscela di reazione è stata scaldata a riflusso per 1 ora, il precipitato che si forma filtrato a caldo, lavato con etere etilico ed essiccato. Ottenuti 3.8 g.
Formula: (P.m. 336.41) . Resa 54%.
TLC: (Butanolo/Acido acetico/Acqua 5/2/2) rf 0.95. P.f. 215.2°C.
HPLC: tempo di ritenzione (rt) 4.16 minuti.
Condizioni HPLC: vedi Esempio 1.
1HNMR (DMSO-dff), ppm: 0.84-1.99 (m, 10H); 4.01 (m, IH); 7.15 (d, 2H, J = 8.76 Hz); 7.42 (d, 2H, J
Esempio 7
Preparazione della N-[4-(N-acetamidino)fenil]-N'-pentiltiourea cloridrato (Cloridrato del Composto 1-4) .
3 g di N-[4-(N-acetamidino)fenil]-N'-pentiltiourea (0.011 mol) vengono sciolti in HCl IN. Dopo 0.5 ore a temperatura ambiente il precipitato che si forma viene filtrato, lavato con poca acqua, con etere etilico ed essiccato. Ottenuti 3.2 g.
Formula: CI4H23C1N4S (P.m. 314.88). Resa 93%.
TLC: (Butanolo/Acido acetico/Acqua 5/2/2) rf
070 P f 1806°C
Nella seguente Tabella 2 vengono riportati alcuni derivati di formula (I), ottenuti secondo l'invenzione, con alcune caratteristiche chimicofisiche che li identificano, senza che per questo essi limitino in alcun modo lo spirito e lo scopo dell'invenzione stessa.
(D
Nota: a) Tutti i composti esemplificati hanno R* eguale ad H con l eccezione del composto 1-9 in cui R* è uguale a CH3
b) Tutti i composti esemplificati hanno il gruppo amminico in para al gruppo "NH-A" con l’eccezione del composto 1-32 in cui il gruppo amminico è in meta al gruppo "NH-A".
c) Tutti i composti esemplificati hanno R5 eguale ad H eccetto il composto 1-22 in cui R5 è 2,5-dimetile.
d) Solvente di cristallizzazione: A (acetonitrile); B (toluene).
e) Eluente: butanolo/acido acetico/ acqua (5/2/2) (v/v).
ATTIVITA' FARMACOLOGICA
a) L'attività inibente la formazione di NO misurata come N02~(nitriti), PGE2 e proteasi neutre è stata studiata in vitro su terreni di coltura di condrociti articolari di coniglio stimolati con la citochina IL-Ιβ (1 ng/ml) per 48 ore. Per la preparazione dei condrociti si è seguito il metodo descritto da Berenbaum et al. [FEBS Letters 340, 51-55 (1994)]. Brevemente, frammenti di cartilagine asportata in sterilità dai capi articolari di spalla, anca e ginocchio dì coniglio, sono stati sminuzzati finemente e digeriti a 37°C da soluzioni di ialuronidasi, tripsina e collagenasi dando luogo, dopo filtrazione su garza sterile e centrifugazione a 600 x g ed opportuna diluizione con DMEM-FCS 10%, ad una concentrazione per pozzetto di circa 1x10s cellule. Le cellule sono state mantenute in queste condizioni fino a confluenza (circa 15 giorni) , cambiando il terreno ogni 3 giorni. A questo punto ad ogni provetta si sono aggiunti i prodotti in esame sciolti nel medium e dopo 20 minuti si sono aggiunti IL-ΐβ, 350 μΐ, per avere una concentrazione finale di 1 ng/ml. La stimolazione ha una durata di 48 h a 37°C (incubazione aria-C027%) . Successivamente sul surnatante cellulare si è effettuato il dosaggio dei nitriti secondo quanto descritto da Green et al. [Anal. Biochem. 126, 131-138 (1982)] e delle PGE2 mediante dosaggio RIA. Il dosaggio delle proteasi neutre è stato fatto sul surnatante cellulare contenente l'attivatore p-aminophenylmercurio acetato (APMA) utilizzando azocoll come substrato ed incubando a 37°C per 17 h secondo quanto descritto da Chavira et al. [Anal. Biochem. 136, 446-450 (1984)]. Per valutare l'effetto inibitorio diretto dei composti in esame sull'attività idrolitica del surnatante cellulare, essi sono stati aggiunti al surnatante contenente le proteasi indotte da IL-Ιβ e già attivate da AMPA.
I risultati ottenuti sono mostrati in Tabella 3 in cui viene riportata, per alcuni dei composti oggetto dell'invenzione e già esemplificati in Tabella 2, la IC50, cioè la concentrazione (micromolare) di antagonista capace di inibire del 50% la formazione di nitriti, PGE2 e rispettivamente proteasi neutre rispetto al gruppo controllo, cioè alle cellule stimolate con IL-Ιβ ma senza aggiunta di antagonisti.
Nota: a) per l'identificazione strutturale vedi le note a, b e c di tabella 2 b) NO determinato come nitriti
c) MP: metallo proteasi
Dai dati riportati in Tabella 3 si evince che alcuni dei composti testati ed oggetto dell'invenzione esplicano un potente effetto inibitorio, a livello micromolare, sulla produzione di nitriti, PGE2 e metallo proteasi indotta dalla citochina IL-ΐβ in colture di condrociti di coniglio. I composti migliori sono quelli in cui Ri è CH3, R3 ed R* sono H, R2 è CH3 se n è 4 oppure 5, oppure isopropile se n è 2, oppure il gruppo 2,6-difluoro-fenile se n è 2 ed in cui A è uguale a NH-CS (composti 1-4, 1-5, 1-7 e 1-18, rispettivamente). Parimenti molto attivo è anche il composto 1-31 in cui Ri è il gruppo NH-N02, R2 è cicloesile ed A è il gruppo NH-CS. E' interessante notare che l'attività inibitoria sulle metallo proteasi è esplicata solamente dai composti in cui A è il gruppo NH-CS. E' da notare inoltre che il composto di riferimento inibitore delle NO Sintasi L-NAME esplica in generale un'attività circa 30-100 volte meno potente dei composti migliori oggetto dell'invenzione come il composto 1-4, ed è del tutto inattivo nell'inibire le metallo proteasi.
b) Alcuni dei composti oggetto dell'invenzione, come i composti 1-4, 1-11 e 1-31 sono stati valutati in vivo su una serie di modelli sperimentali di stravaso nei quali si è iniettato nell'orecchio di topo per via intradermica 5 μΐ dell'agente flogogeno prescelto disciolto in fisiologica in accordo con quanto descritto da Erdo et al. con lievi modifiche [Agents and Actions 39, 137-142 (1993)].
I prodotti in esame sono stati somministrati per via orale 1 ora prima del challenge, mentre 30 minuti prima del challenge si è iniettato per via endovenosa il colorante Evans Blu alla dose di 100 mg/kg. Gli animali sono stati sacrificati ad un tempo prefissato a seconda del test, 30 min - 2 ore dopo il challenge. Lo stravaso è stato valutato determinando la quantità di colorante presente nell'orecchio estratto dopo omogeneizzazione del tessuto in 2 mi di formamide ed incubando a 50°C per 2 ore. Dopo centrifugazione si è determinato la quantità di colorante misurando l'assorbimento a 620 nm. Il % di effetto massimo (% MPE) è calcolato con la seguente formula:
dove Ey è l'assorbimento medio osservato nel gruppo animali trattati solamente con l'agente flogogeno, ED il gruppo trattato con l'agente flogogeno ed il farmaco, mentre EB è il valore basale, cioè il valore degli animali iniettati con la sola fisiologica.
Come agenti flogogeni si sono usati:
Acido arachidonico (sciolto in EtOH); (lmg/topo; sacrificio 30 min); Istamina (3 nmoli/topo; sacrificio 30 min); PAF (30 pmoli/topo; sacrificio 60 min); Zymosano (10 μg/topo; sacrificio 120 min); Bradichinina (0.6 nmoli/topo; sacrificio 30 min).
I risultati ottenuti con il Composto 1-4 sono riassunti in Tabella 4.
II composto 1-4 si è dimostrato particolarmente efficace nello stravaso indotto da Zymosano, (ED50 3.1 mg/kg); tuttavia anche negli altri modelli di stravaso studiati, già la dose di 5 mg/kg ha prodotto un effetto medio inibitorio di circa il 35%. Come farmaci di confronto si sono utilizzati un inibitore non selettivo della NO Sintasi, la N-nitro-L-arginina metil estere (L-NAME), un COXi inibitore (Piroxicam) ed un COX2 inibitore (Nimesulide).
I risultati ottenuti sono riportati nella seguente Tabella 5.
Tabella 5: Inibizione dello stravaso nell'orecchio di topo indotto da agenti algogeni
(ED50 mg/kg OS)
Note: AA Acido arachidonico () : non testato In generale il Composto 1-4 è risultato essere il più attivo tra i composti studiati. Infatti tra i composti di riferimento L-NAME è circa attivo come il Composto 1-4 sullo stravaso indotta da istamina e bradichinina ma è 2 volte meno attivo nello stravaso da AA ed è molto meno attivo nell'antagonizzare il PAF ed è del tutto inattivo nello stravaso indotto da Zymosano.
Piroxicam è 2-3 volte meno attivo del Composto 1-4 nei modelli in cui si sono usati PAF e Zymosano, mentre la nimesulide è meno attiva (2 volte) nell'antagonizzare l'AA mentre è inattiva nell'antagonizzare il PAF. Il composto 1-31 presenta un profilo di attività simile a quello del composto I-4, ma è generalmente 2-3 volte meno attivo,
c) Si è valutata l'attività immunosoppressiva del composto 1-4 in un test in vivo nel ratto in cui un lipopolisaccaride (LPS) di origine batterica iniettato per via i.p. alla dose di 6 mg/kg induce uno shock caratterizzato da una diarrea imponente, accompagnata da un forte aumento della concentrazione piasmatica del TNFa.
Agli animali sacrificati 90 minuti dopo il challenge veniva prelevato il sangue, sul cui plasma si è determinato la concentrazione di TNFa mediante Elisa (Kit Amersham cod. RPN2734). I risultati così ottenuti sono riportati in tabella 6.
Tabella 6: Effetti del Composto 1-4 sulla concentrazione di TNFa piasmatica di ratto dopo stimolo con LPS (6 mg/kg/ I.P.)
e
Dai dati sopra riportati, si evince che il composto 1-4 è molto attivo nell'inibire l'aumento di TNFa piasmatico nel corso di shock endotossico indotto da LPS. Ad esempio la dose di 20 mg/kg per via orale inibisce di circa il 50% l'effetto del LPS.
d) attività anti-infiammatoria intestinale
TNFaè una citochina implicata nella patogenesi di una varietà di malattie infiammatorie su base immunologica tra cui l'infiammazione dell'intestino. E' stato dimostrato [(Bertrand et al. Br. J. Pharmacol . 124, 1385-1394 (1998)] che l'induzione di una sovrapproduzione di TNFa indotta da farmaci anti-infiammatori di tipo COXi produce l'attivazione dei neutrofili e l'aumento della produzione di nitriti dovuti all'attivazione della iNOS tissutale che assieme contribuiscono agli affetti tossicoulcerativi sulla mucosa intestinale.
La capacità combinata di alcuni dei composti oggetto l'invenzione di inibire sia l'iNOS che la sintesi di TNFa ha indotto a verificarne l'attività su un modello di colite sperimentale provocato da un aptene chimico, l'acido trinitrobenzensolfonico (TNBS), capace di legarsi alle proteine tissutali e di stimolare l'immunità cellulo-mediata. La somministrazione di TNBS intrarettale in associazione con etanolo provoca un'infiammazione acuta caratterizzata da estese ulcerazioni e necrosi.
Una colite distale è stata pertanto indotta nel ratto mediante instillazione intrarettale di TNBS (40 mg/kg) sciolto in etanolo al 50% (0.5 ml/ratto) . I farmaci sono stati somministrati per via orale 2 volte al giorno ai giorni -2; -1; 0; 1 e gli animali sono stati sacrificati dopo 48 della somministrazione di TNBS.
I parametri esaminati sono stati: peso totale del colon (g), "score" macroscopico del danno tissutale, dosaggio dell'attività mieloperossidasica tissutale (MPO) che è un marker dell'infiltrazione dei neutrofili e dosaggio dell'attività iNOS (pmoli/g tessuto/min).
Lo score macroscopico (MDS) è stato effettuato su circa 10 cm di colon secondo la seguente scala arbitraria:
0 Nessun danno 4 Due siti di ulcerazione
1 Iperemia (no ulcere) 5 Più di due siti di ulcerazione o 1 ulcera > 1 cm
2 1 piccola ulcera od 6-10 Se il danno è > di 2 erosione cm, si aumenta il punteggio di 1 per ogni cm 3 1 ulcera con infiammazione
Il dosaggio MPO tissutale è stato effettuato secondo Velgara et al., JPET 1994. Il dosaggio dei nitriti tissutali è stato effettuato applicando sul sopranatante dell'omogenato tissutale il metodo descritto precedentemente per i condrociti.
Sono stati esaminati somministrandoli per via orale il composto 1-4 somministrato alle dosi di 5, 10 e 20 mg/kg ed il composto 1-11 in confronto con sulfasalazina (250 mg/kg) ed acido 5-amminosalicilico (5-ASA) (100 mg/kg), 2 farmaci largamente impiegati nella terapia della colite ulcerativa.
I risultati così ottenuti sono riportati nella seguente tabella.
Dai dati riportati in tabella si evince che il composto 1-4 ha un forte effetto protettivo sul modello sperimentale di colite nel ratto indotto da TNBS . 1-4 infatti riduce in modo dose dipendente e significativo alla dose media ed alta (10 e 20 mg/kg) sia il danno macroscopico che tutti gli altri parametri infiammatori presi in considerazione. In particolare esso riduce l'aumento del peso del colon indotto dal trattamento con TNBS, riduce alle dosi 10 e 20 mg/kg di circa il 50% il danno macroscopico ed alle stesse dosi riduce l'aumento dell'attività MPO tessutale e della iNOS indotta da TNBS del 40% e del 50%, rispettivamente. Al contrario, dei due farmaci di riferimento selezionati il 5-ASA (100 mg/kg) è risultato inattivo su tutti i parametri, mentre la sulfasalazina alla dose molto elevata di 250 mg/kg è risultata leggermente attiva e non in modo statisticamente significativo solamente sul danno macroscopico (circa 20% di effetto) e sull'attività iNOS (circa 50% di effetto). L'altro composto oggetto dell'invenzione esaminato (Composto 1-11) alla dose di 20 mg/kg è risultato parimenti attivo, anche se gli effetti di riduzione del danno sui parametri aumento del peso del colon ed attività MPO erano meno evidenti di quelli esplicati dal composto 1-4.
In definitiva, su un modello di colite sperimentale nel ratto che imita il più possibile uno stato patologico correiabile alla colite ulcerativa nell'uomo [Morris et al. Gastroenterology 96, 795-803, (1989)] alcuni dei composti oggetto dell'invenzione esplicano un effetto protettivo molto superiore ed a dosi inferiori di quello esplicato dalla sulfasalazina un farmaco largamente impiegato nella terapia della colite ulcerativa ed il morbo di Crohn.

Claims (14)

  1. RIVENDICAZIONI 1. Composti che possono essere rappresentati dalla formula generale (I) sotto indicata ed in cui: (I) A è scelto indipendentemente tra il gruppo carbossamido, il gruppo tiocarbossammido, il gruppo carbonile; Ro. è scelto tra un gruppo alchile avente da 1 a 3 atomi di carbonio ed il gruppo ammino semplice o sostituito con il gruppo nitro o metile; R2 è scelto indipendentemente tra idrogeno, un gruppo alchile avente da 1 a 4 atomi di carbonio, il gruppo metossi, etossi, propossi, un residuo cicloalcanico mono, bi o triciclico avente da 5 a 12 atomi di carbonio, il gruppo adamantilico, un gruppo arile, naftile o eterociclico semplice o sostituito con gruppi metile, metossi, idrossi, ammino o alogeno ; R3 ed 3⁄4 sono scelti indipendentemente tra idrogeno ed un gruppo alchile avente da 1 a 3 atomi di carbonio; R5 è scelto indipendentemente tra idrogeno, ed i gruppi metile, metossile ed ossidrile; n è un numero intero da 0 a 6; il gruppo amidinico è in posizione para o meta al gruppo "-A-NH-".
  2. 2. Composti secondo la rivendicazione 1 di formula generale (I) in cui A è il gruppo tiocarbossammido; RI è un gruppo alchile avente da 1 a 3 atomi di carbonio; R2 è metile od un gruppo cicloalcanico mono, bi o triciclico avente da 5 a 12 atomi di carbonio; R3, R4 ed R5 sono idrogeno; n è un numero intero tra 0 e 6; il gruppo amidinico è in posizione para al gruppo "-A-NH- ".
  3. 3. Composti secondo la rivendicazione 2 in cui A è scelto indipendentemente tra il gruppo carbossamido o il gruppo carbonile al posto del gruppo tiocarbossammido .
  4. 4. Composti secondo la rivendicazione 2 in cui Ri è scelto tra il gruppo ammino semplice o sostituito con il gruppo nitro o metile al posto di un gruppo alchile avente da 1 a 3 atomi di carbonio.
  5. 5. Composti secondo la rivendicazione 2 in cui R2 è scelto tra un gruppo arile semplice o sostituito con gruppi alogeno al posto del gruppo metile o di un gruppo cicloalcanico mono, bi o triciclico.
  6. 6. Composti secondo la rivendicazione 1 di formula generale (I) in cui A è il gruppo tiocarbossammido; Ri è scelto indipendentemente tra il gruppo metile, il gruppo ammino o il gruppo nitro-animino; R2, R3, R4 ed R5 sono idrogeno; n è 5; il gruppo amidinico è in posizione para al gruppo tiocarbossammido.
  7. 7. Uso de composti secondo la rivendicazione 1 o di un loro sale farmaceuticamente accettabile come medicamento per la terapia di situazioni patologiche legate a fenomeni infiammatori od autoimmuni.
  8. 8. Preparato farmaceutico comprendente, come sostanza attiva almeno uno dei composti secondo la rivendicazione 1 o un loro sale farmaceuticamente accettabile .
  9. 9. Preparato farmaceutico secondo la rivendicazione 8 per l'impiego nel trattamento terapeutico di situazioni patologiche legate a fenomeni infiammatori ed autoimmuni.
  10. 10. Preparato farmaceutico secondo la rivendicazione 8 per l'impiego nel trattamento terapeutico di controllo e prevenzione di malattie articolari degenerative come l'artrite reumatoide e l'osteoartrosi .
  11. 11. Preparato farmaceutico secondo la rivendicazione 8 per l'impiego nel trattamento terapeutico di malattie infiammatorie del tratto gastrointestinale come la colite ulcerosa, il colon irritabile ed il morbo di Crohn.
  12. 12. Preparato farmaceutico secondo la rivendicazione 8 per l'impiego nel trattamento terapeutico di controllo antiproliferativo di forme tumorali solide.
  13. 13. Preparato farmaceutico secondo la rivendicazione 8 comprendente inoltre ingredienti inattivi farmaceuticamente accettabili, scelti dal gruppo che consiste di veicoli, leganti, aromatizzanti, edulcoranti, disgreganti, conservanti, umettanti e miscele di questi, o ingredienti che facilitano l'assorbimento rettale, transdermico o transmucosale o che permettano il rilascio controllato nel tempo della sostanza attiva.
  14. 14. Procedimento per la preparazione di un derivato di formula generale (I) in cui A, Rlf R2, R3, R4, R5 ed n hanno il significato riportato nella rivendicazione 1 che comprende le operazioni di: a) far reagire la 1,3 oppure la 1,4 fenilendiammina di formula (IV) in cui R5 ha il significato sopra riportato, con 1'isotiocianato di formula (V A) oppure con il cloruro acilico di formula (V B) o con l'isocianato di formula (V C) in cui R2, R3 ed n hanno il significato sopra riportato, in eccesso di fenilendiammina, in un solvente neutro ed ad una temperatura compresa tra 4°C e quella di riflusso del solvente, a dare le aniline corrispondenti di formula (III) : (ΙΠ) in cui R2/ R3, R4, A ed n hanno il significato sopra riportato ed in cui il gruppo amminico è in posizione meta o para alla catena con il gruppo "A-NH"; b) far reagire le aniline di formula (III) con l'opportuno immidato cloridrato di formula II in cui Ri ha il significato sopra riportato, in presenza di un eccesso di II e della corrispondente quantità stechiometrica di una base terziaria come trietilammina, in un solvente inerte anidro, ad una temperatura compresa tra 4°C e quella di ebollizione del solvente, a dare i corrispondenti derivati di formula (I) (I) in cui A, Rlf R2, R3, Ri, R5 ed n hanno il significato sopra riportato ed in cui il gruppo amidinico è in posizione para o meta al gruppo "A-NH". I composti di formula (I) vengono recuperati dalla massa di reazione, come tali oppure come sali farmaceuticamente accettabili e purificati con metodi convenzionali; c) alternativamente nel caso in cui Ri è NH2 oppure NH-N02, i corrispondenti derivati di formula generale I in cui A, R2, R3, R4 R5 ed n hanno il significato sopra riportato sono preparati facendo reagire le aniline di formula (III) rispettivamente con il benzotriazolo-l-carbossamidinio tosilato o con la N-metil-N-nitroso-N'-nitroguanidina.
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ES02718096T ES2311600T3 (es) 2001-02-08 2002-02-06 Derivados de benzadimina novedosos que tienen actividad antiinflamatoria e inmunosupresora.
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Families Citing this family (13)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
ITTO20010110A1 (it) * 2001-02-08 2002-08-08 Rotta Research Lab Nuovi derivati benzamidinici dotati di attivita' anti-infiammatoria ed immunosoppressiva.
DE60316810T2 (de) 2002-08-02 2008-07-17 Ab Science 2-(3-aminoaryl)amino-4-aryl-thiazole und ihre verwendung als c-kit inhibitoren
US8450302B2 (en) * 2002-08-02 2013-05-28 Ab Science 2-(3-aminoaryl) amino-4-aryl-thiazoles and their use as c-kit inhibitors
US7208491B2 (en) * 2003-02-07 2007-04-24 Hoffmann-La Roche Inc. N-monoacylated o-phenylenediamines
SE0301446D0 (sv) 2003-05-16 2003-05-16 Astrazeneca Ab New Compounds
ITTO20030668A1 (it) * 2003-09-02 2005-03-03 Rotta Res Lab S P A O Ra Rottapharm Derivati dell'adamantano dotati di attivita' neuroprotettiva, antidepressiva e anti-ischemica e procedimento per la loro preparazione.
FR2865133B1 (fr) * 2004-01-19 2008-01-18 Rytek Compositions pour le traitement de pathologies digestives
EP1704860B1 (en) * 2005-03-24 2010-10-27 Rottapharm S.P.A. Benzamidine derivatives for treatment and prevention of mucositis
UY30048A1 (es) 2005-12-23 2007-07-31 Astrazeneca Ab Derivados sustituidos de la n,2-(1h-benzimidazol-1-il) acetamida, composiciones farmacéuticas conteniéndolos, procesos de preparación y aplicaciones
TWI433839B (zh) 2006-08-11 2014-04-11 Neomed Inst 新穎的苯并咪唑衍生物290
CA2808582A1 (en) * 2009-08-14 2011-02-17 University Of Virginia Patent Foundation Imidamide sphingosine kinase inhibitors
CN102344391B (zh) * 2011-07-28 2013-12-25 山东新华制药股份有限公司 N-(4-乙酰氨基苯基)-n′，n′-二甲基乙脒的合成方法
WO2013083813A2 (en) * 2011-12-07 2013-06-13 Universität Zürich Modulators of spermine/spermidine n'-acetyltransferase (ssat) and ssat associated proteins for use in prevention or treatment of rheumatoid arthritis

Family Cites Families (13)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE950637C (de) * 1944-05-27 1956-10-11 Hoechst Ag Verfahren zur Herstellung von 4-Aminochinaldinverbindungen
US2559085A (en) * 1948-10-22 1951-07-03 Honorary Advisory Council Sci Preparation of n-substituted-n'-nitroguanidines
GB1311432A (en) * 1971-01-07 1973-03-28 Ici Ltd Guanidine derivatives their preparation and antiviral compositions containing them
FR2456731A1 (fr) * 1979-05-16 1980-12-12 Choay Sa Nouveaux derives substitues d'ary
US5028627A (en) 1989-09-13 1991-07-02 Cornell Research Foundation, Inc. Method of using arginine derivatives to inhibit systemic hypotension associated with nitric oxide production or endothelial derived relaxing factor
US5240694A (en) * 1991-09-23 1993-08-31 University Of Virginia Combined antiviral and antimediator treatment of common colds
GB9127376D0 (en) 1991-12-24 1992-02-19 Wellcome Found Amidino derivatives
GB9312761D0 (en) 1993-06-21 1993-08-04 Wellcome Found Amino acid derivatives
CZ293323B6 (cs) * 1995-08-30 2004-04-14 G. D. Searle & Co. Meta-guanidinové, močovinové, thiomočovinové nebo azacyklické deriváty aminobenzoové kyseliny jako antagonisty integrinů
WO1997036862A1 (en) 1996-03-29 1997-10-09 G.D. Searle & Co. META-SUBSTITUTED PHENYLENE DERIVATIVES AND THEIR USE AS ALPHAvBETA3 INTEGRIN ANTAGONISTS OR INHIBITORS
PT891325E (pt) * 1996-03-29 2002-07-31 Searle & Co Derivados do acido fenilpropanoico para-substituido como antagonistas de integrina
CA2394639A1 (en) 1999-12-15 2001-06-21 Danny Peter Claude Mcgee Salicylamides as serine protease and factor xa inhibitors
ITTO20010110A1 (it) * 2001-02-08 2002-08-08 Rotta Research Lab Nuovi derivati benzamidinici dotati di attivita' anti-infiammatoria ed immunosoppressiva.

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