ITTO930423A1

ITTO930423A1 - Sistema per il trattamento di un fluido biologico

Info

Publication number: ITTO930423A1
Application number: IT000423A
Authority: IT
Inventors: Thomas J Bormann; Thomas C Gsell; Vlado I Matkovich; Frank R Pascale
Original assignee: Pall Corp
Priority date: 1992-06-10
Filing date: 1993-06-10
Publication date: 1994-12-10
Also published as: SE9404272D0; AU4631093A; DE4392789T1; CA2137797A1; FR2696938A1; GB2283689B; JPH07507717A; NL9320033A; DE4392789B4; IT1274357B; DK140494A; AU675233B2; FR2692151B1; AT405018B; SE516238C2; WO1993025295A1; SE9404272L; DK176822B1; SE513909C2; CA2137797C

Description

DESCRIZIONE

Campo tecnico:

La presente invenzione si riferisce ad un dispositivo ed un procedimento per il trattamento di un fluido biologico.

Sfondo del 'invenzione

Il sangue ? costituito da un certo numero di componenti aventi differenti caratteristiche ed impieghi. La separazione di una singola unit? di sangue donato intero nei suoi componenti viene tipicamente realizzata adottando la sedimentazione differenziale. I principali componenti cos? raccolti sono eritrociti, normalmente concentrati come eritrociti compattati (PRC), una sospensione di piastrine, normalmente concentrata come concentrato di piastrine (PC), e pla?wa.

Vi sono due metodi principali per la separazione del sangue intero nei suoi componenti. Secondo uno dei metodi, il sangue intero viene centrifugato per ottenere una frazione PRP supernatante ed una frazione sedimentata di PRC, confina zona di transizione tra le due frazioni, nota generalmente come strato fibrinoso, che contiene leucociti, come pure piastrine, eritrociti e plasma. La frazione PRP viene separata dallo strato fibrinoso e dal PRC e centrifugata ottenendo una frazione di plasma supernatante ed una frazione di sedimento contenente piastrine. Le due frazioni vengono quindi separate, e la frazione contenente le piastrine viene elaborata per ottenere il concentrato di piastrine.

Secondo un metodo alternativo, il sangue intero viene centrifugato per produrre una frazione supernantente costituita da plasma povero di piastrine (PPP), ed una frazione di sedimento di PRC, con una zona di transiazione, lo strato fibrinoso, tra le due frazioni, che contiene la maggior parte delle piastrine, come pure leucociti, eritrociti e plasma. Lo strato fibrinoso viene separato dal PPP supernatante e dal sedimento di PRC e centrifugato per formare una frazione supernatante contenente piastrine, ed un sedimento costituito da una frazione contenente gli eritrociti. La frazione supernatante contenente piastrine viene poi separata dalla frazione di sedimento, ed elaborata per ottenere il PC.

Gli inconvenienti di ambedue queste tecniche comprendono il rischio di potenziale contaminazione con eritrociti e leucociti. Per quanto si riferisce alla contaminazi one con eritrociti, la presenza di globuli rossi in alcuni componenti del sangue (per esempio PC) ? tanto indesiderabile che i tecnici che effettuano l'operazione di separazione dei componenti procedono ad un monitoraggio costante del procedimento per garantire l'esclusione del globuli rossi. Per esempio, l'operatore pu? controllare con cura la separazione e bloccare il tubo di collegamento tra i recipienti del sangue quando, a suo giudizio, ? stato trasferito tanto sangue quanto ? possibile senza permettere .il passaggio di globuli rossi. Questa ? una operazione che richiede tempo.

La contaminazione da eritrociti presenta un ulteriore problema. Poich? le piastrine ed il plasma sono componenti di valore del sangue, il personale della banca del sangue pu? tentare di ottenere una quantit? maggiore di PRP o della frazione supernatante contenente piastrine prima di arrestare il flusso dal recipiente del sangue. Questo ? controproducente poich? il fluido ottenuto pu? essere contaminato da globuli rossi,

assogettato a ricentrifugazione, il che aumenta i costi dell'operazione e richiede parecchio la -voro. Al contrario, il personale della banca del sangue pu? errare per un eccesso di precauzione arrestando prematuramente il flusso del fluido contenente piastrine prima che sia stato compietamente raccolto.

Le tecniche suddescritte per la separazione del sangue intero nei suoi componenti possono anche produrre dei componenti contaminati dai leucociti. E desiderabile ridurre la concentrazione di leucociti di ciascuno dei componenti del sangue di almeno il 70%, poich? la presenza di leucociti pu? influenzare negativamente la conservabilit? delle frazioni e/oppure causare effetti indesiderabili quando le frazioni vengono trasfuse in un paziente.

Questi problemi possono portare a rendimenti minori in componenti di valore del sangue, poich? pu? essere difficile eliminare la contaminazione da eritroci e da leucociti massimizzando il rendimento nei vari componenti utili del sangue. Per esempio, quando il materiale della zona di transizione o lo strato fibrinoso contiene piastrine, plasma, e eritrociti, pu? anche contenere leucociti. Poich? pu? essere difficile separare in modo efficiente ed eliminare i leucociti dai vari componenti di valore, questo strato fibrinoso deve essere parzialmente o completamente scartato, con una riduzione del rendimento in componenti utili come il plasma e le piastrine.

La perdite delle piastrine ? specialmente significativa, poich? la parte scartata pu? comprendere le piastrine pi? desiderabili, cio? le piastrine di nuova formazione. Queste piastrine sono pi? grandi e sono normalmente considerate pi? attive. Poich? le piastrine pi? giovani sono pi? grandi ,queste tendono a sedimentare pi? in fretta durante la centrifugazione, per cui vengono concentrate come in una delle realizzazioni descritte nel seguito nel fondo del PRP e nello strato fibrinoso. Quindi, poich? porzioni di queste frazioni o zone possono essere trattate come parte del PRO oppure scartate, questo rappresenta una perdita significativa delle piastrine piu desi derabili.

Per esempio, lo strato fibrinoso pu? essere scartato dopo espressione degli strati di PRP e PRC, oppure, poich? lo strato fibrinoso pu? rimanere nel recipiente di raccolta insieme alle PRC dopo che la frazione PRP ? stata espressa, lo strato fibrinoso pu? essere trattato con le PRC. Analogamente, nei metodi che comprendono la formazione di uno strato fibrinoso tra gli strati PPP e PRC, la parte inferiore dello strato fibrinoso pu? essere trattata con le PRC e/oppure lo strato fibrinoso pu? essere espresso in modo incompleto per impedire la contaminazione da globuli rossi. Inoltre, nella separazione della frazione supernatante contenente piastrine dalla frazione sedimentata contenente eritrociti, la parte inferiore della frazione supernatante contenente piastrine pu? essere espressa in modo incompleto .per evitare la contaminazione da globuli rossi,il che pu? far diminuire il rendimento in piastrine.

Inoltre, la manipolazione del sangue per ottenere i suoi componenti pu? portare alla presenza di gas o aria, in particolare ossigeno, nei componenti ottenuti o nel contenitore di conservazione. Questi comporta un decadimento della qualit? dei componenti e pu? diminuire il loro tempo di conservazione. Pi? particolarmente, l'ossigeno pu? essere associato ad una accresciuta attivit? metabolica (durante la glicoli si), che porta ad una diminuzione del tempo di conservazione, con diminuita vitalit? dei componenti del sangue. Inoltre, la presenza di aria o di gas nel contenitore satellite pu? costituire un fattore di rischio per il paziente al quale si deve trasfondere il componente del sangue.

I metodi precedentemente descritti comportano quindi un compromesso generalmente non soddisfacente tra la necessit? pressante di massimizzare il rendimento del valore storico dei componenti del sangue come PC, plasma e eritrociti, e l'eliminazione del gas, minimizzando nel contempo l'impegno ed i costi necessari.

Questi problemi vengono amplificati quando si trattano volumi maggiori di componenti del sangue (per esempio unit? multiple) che vengon unite o elaborate, poich? parte del fluido pu rimanere nei singoli sistemi di raccolta indivi duale e di elaborazione. Collettivamente, le pic cole quantit? perse in un sistema individuale rappresentano una perdita significativa se i fluido di alto valore non pu? essere recuperato.

Vi ? quindi la necessit? di un metodo e un sistema per diminuire l'importanza dei proble mi suddescritti pur assicurando la massima purezza ed un elevato rendimento in componenti di sangu di qualit? superiore. In particolare, vi ? u bisogno urgente di un sistema e di un procedimen to per la raccolta ed il trattamento dei materia li della zona di transizione o strato fibrinoso che assicura il massimo rendimento e minimizz la presenza di gas pur permettendo di ottenere una maggiore proporzione di piastrine vitali e fisiologicamente attive.

Vi ? pure una necessit? urgente di un metodo ed un sistema per raggruppare in modo efficiente i componenti del sangue, come i materiali della zona di transizione, che massimizzi la quantit? di fluido che pu? essere raccolta. Vi ? poi l'ulteriore necessit? che il metodo ed il sistema per riunire i fluidi minimizzino la presenza di gas .

Inoltre, vi ? pure necessit? di un metodo ed un sistema che riduca l?impegno dell'operatore, per esempio per rallentare o anche arrestare la lavorazione del sangue per impedire o ridurre al minimo la contaminazione del componente desiderato. Inoltre, vi ? necessit? di un metodo ed un sistema che possa essere impiegato con facilit? e consenta la separazione del gas dal componente di sangue desiderato.

Descrizione dell'Invenzione

Nella descrizione della presente invenzione, i termini utilizzati hanno il significato appresso descritto.

(A) Fluido biologico: Con fluido biologico si intende qualsiasi fluido trattato o non trattato associato all'organismo vivente, parti col armente sangue, compreso sangue intero, sangue caldo o freddo, e sangue conservato o fresco; sangue trattato, come sangue diluito con una soluzione fisiologica, comprendente, ma non limitato a questa, la soluzione fisiologica di cloruro di sodio, soluzioni nutrienti e/oppure anticoagulanti; uno o pi? componenti del sangue, come il concentrato di piastrine (PC), il plasma arricchito in piastrine (PRP), il plasma esente da piastrine, il plasma povero di piastrine (PPP), il plasma, globuli rossi compattati (PRC), materiale della zona di transizione, strato fibrinoso; prodotti analoghi del sangue derivati dal sangue o da un componente del sangue oppure derivati da midollo osseo; globuli rossi separati da plasma e risospesi in fluido fisiologico; e piastrine separate da plasma e risospese in fluido fisiologico. Il fluido biologico pu? comprendere leucociti, oppure pu? essere trattato per eliminare i leucociti. Come usata in questa sede, l'espressione fluido biologico si riferisce ai componenti precedentemente descritti, ed a prodotti simili del sangue ottenuti con altri mezzi e con propriet? simili.

Una "unit?" ? la quantit? di fluido biologico prelevata da un donatore o ricavata da una unit? di sangue intero. Essa si pu? anche riferire alla quantit? prelevata durante una singola dona-zione. Tipicamente, il volume di una unit? varia, la quantit? essendo diversa da paziente a paziente e da donazione a donazione. Unit? multiple di alcuni componenti del sangue, particolarmente piastrine, e prodotti della zona di transizione o strato fibrinoso, possono essere riunite o combinate, tipicamente miscelando quattro o pi? unit?.

(B) Prodotti della zona di transizione o strato fibrinoso: i prodotti della zona di transizione o strato fibrinoso comprendono un materiale contenente eritrociti distribuiti nell'interfaccia tra lai frazione povera di cellule supernatante e la frazione di sedimentazione ricca di cellule di fluidi biologici separati . Come usato in questa sede, distribuite nell'interfaccia tra supernatante e strati di sedimentazione comprende una parte inferiore della strato supernatante ed una parte superiore dello strato di sedimentazione, come pure il materiale che si trova tra di queste. Tipicamente, il prodotto della zona di transizione o strato fibrinoso comprende leucociti. Preferibilmente, il prodotto della zona di transizione o strato fibrinoso pu? comprendere una elevata proporzione di piastrine pi? giovani e pi? attive.

Il materiale della zona di transizione o strato fibrinoso pu? essere lasciato da un qualsiasi metodo con il quale si separino i componenti o le frazioni del sangue; per esempio, lo strato fibrinoso pu? essere formato con tecniche di separazione basate sulla densit? e/oppure sul peso molecolare, per esempio sedimentazione e pi? preferibilmente centrifugazione. Il materiale della zona di transizione o strato fibrinoso pu? essere formato mediante centrifugazione a spin moderato o a spin elevato. E' chiaro che la presente invenzione non intende essere limitata dal procedimento di formazione del materiale della zona di transizione o dello strato fibrinoso.

(C) Mezzo poroso: si riferisce ad almeno una struttura porosa attraverso la quale passa un fluido biologico. Il mezzo poroso destinato all'impiego con fluidi biologici pu? essere formato da qualsiasi fibra naturale o sintetica o da una membrana porosa o permeabile (o da altri materiali di area superficiale e dimensione dei pori o diametro dei pori simile) compatibile con il fluido biologico (per esempio sangue o un componente del sangue). La superficie delle fibre o membrana pu? essere non modificata oppure pu? essere modificata per presentare una propriet? desiderata. Per esempio, il mezzo pu? essere sottoposto a trattamento con gas di plasma, uno sco po esemplificativo del quale pu? essere quello i ridurre l'adesione delle piastrine.

Sebbene il mezzo poroso possa rimanere non trattato, le fibre o la membrana sono preferibilmente trattate allo scopo di ridurre o eliminare l'aderenza delle piastrine al mezzo. Qualsiasi trattamento che riduce o elimina l'adesione delle piastrine ? compreso nello scopo della presente invenzione. Per esempio, le fibre possono essere modificate in superficie come descritto nei brevetti US N. 4.880.548; 5.100.564 e 5.152.905, allo scopo di aumentare la tensione superficiale di imbibimento critica (CWST) delle fibre, affinch? aderiscano meno alle piastrine.

Definito in termine di CWST, un campo preferito di CWST per un mezzo poroso secondo l'invenzione ? superiore a circa 70 dynes/cm. Un campo pi? preferito ? compreso tra circa 90 e circa 100 dynes/cm ed un campo ancora pi? preferito ? tra circa 93 e circa 97 dynes/cm.

Un campo preferito per il potenziale zeta (a pH del plasma (7,3) ? compreso circa -3 e circa -30 millivolts, pi? preferibi1mente tra circa -7 e circa -20 millivolts e ancora pi? preferibilmente tra circa -10 e circa -14 millivolts.

Il mezzo poroso pu? essere preformato, multistrato, e/oppure pu? essere trattato per modificare la superficie delle fibre sia prima che dopo formazione dello strato fibroso. Il mezzo poroso pu? comprendere almeno un elemento o strato pre-filtrante e/oppure un elemento o strato filtrante. Il mezzo poroso pu? inoltre comprendere almeno un elemento o strato per assicurare il supporto, il miglior drenaggio, e/oppure migliorate caratteristiche di flusso, come una distribuzione pi? uniforme del flusso. Il mezzo poroso pu? essere conformato in una qualsiasi forma adatta, come foglio piatto, un composito di due o pi? strati, un foglio corrugato, un nastro, un tappeto fibroso, un filtro di profondit?, oppure una membrana, sebbene si intenda che l'invenzione non sia limitata a questi. Il mezzo poroso pu? essere posizionato in un alloggiamento per formare un gruppo filtrante.

(D) Volume vuoto ? il volume totalte di tutti i pori all'interno di un mezzo fibroso. Il volume vuoto ? espresso nel seguito come percentuale del volume apparente del mezzo poroso.

(E) Conversione di densit? quando si usano fibre diverse. PBT: nella seguente esposizione si usa il termine densit?, ed i valori di densit? indicati per i mezzi porosi sono basati sull'uso di fibre PBT. Si possono usare altre fibre che hanno densit? diversa dal PBT, purch? le loro superfici abbiano, o siano state modificate per avere, le caratteristiche precedentemente indicate, cio? un CWST superiore a 70 dynes/cm. Secondo l'invenzione, per usare una fibra alternativa o di densit? diversa, la densit? di un mezzo poroso fabbricato usando una fibra alternativa {cio? di densit? equivalente a PBT) pu? essere calcolata come segue:

indicando con V la percentuale dei vuoti del volume relativo al volume apparente del mezzo PBT (cio? V = {volume di vuoti/volume di mezzo) x 100), lo scopo ? di calcolare la densit? di un mezzo fibroso alternativo che avrebbe un volume di vuoti percentuale uguale a V.

Se F ? 1a densit? della fibra alternativa, e si assume 1,38 g/cc come densit? della fibra MBT, e M.1 ? la densit? del mezzo P3T e ? la densit? necessaria per un mezzo con caratteristiche equivalenti, allora il volume di vuoti V del mezzo fibroso PBT ?

V = .(1 - M1/1,38) x 100

e la densit? necessaria per il mezzo preparato usando la fibra alternativa ?

M2 = F (1 -V/100).

Il diametro pi? preferito per le fibre da usare nella realizzazione della presente invenzione ? di circa tra 2 e 3 um. Il diametro delle fibre pu? essere definito in termini di area superficiale, come descritto nel brevetto U.S. N. 4.880.548 e nel brevetto U.S. N.5.100.564. Questo campo ? preferito poich? molto al di sopra di questo valore, le dimensioni del mezzo poroso e conseguentemente il volume di liquido trattenuto dal gruppo filtrante diventa significativamente maggiore, molto al di sotto di questi valori, il mezzo poroso diventa relativamente meno coerente e viene pi? facilmente compresso.

Il diametro dei pori del mezzo poroso secondo l'invenzione pu? essere determinato usando il metodo OSU F2 modificato, come descritto nel brevetto U.S. 4.925.572. Si preferisce che il diametro dei pori nonjsuperi i 15 um, e pi? preferibilmente sia inferiore a 10 um circa. Il diametro dei fori pi? preferito ? attorno a circa 6 Um .

(F) Secondo l'invenzione una tecnica utile per la misurazione dell'area superf ici ale delle fibre, per esempio mediante assorbimento di azoto gassoso, ? quella sviluppata da Brunauer, Emmet, e Teller nel 1930, spesso indicata come misurazione "BET". Usando come esempio PBT, si pu? utilizzare l'area superficie della rete fusa soffiata per calcolare il diametro medio delle fibre: volume totale di fibre in

Se le unit? di d sono micrometri, le unit? di diventano M /g (metri quadri/grammo ), che verranno usate nel seguito. Per fibre diverse da PBT, bisogna sostituire la densit? per 1,38.

La presente invenzione si riferisce ai procedimenti ed ai sistemi per trattare un fluido biologico allo scopo di separare almeno una frazione dal fluido biologico. Il fluido biologico pu? essere trattato per ottenere uno strato supernatante ed uno strato di sedimento con una zona di materiale di transizione o strato sedimentoso tra le due zone indicate.

Il materiale della zona di transizione o strato sedimentoso pu? essere manipolato per formare una frazione supernatante contenente piastrine ed una frazione di sedimento contenente eritrociti, e la frazione contenente piastrine pu? essere separata dalla frazione contenente eritrociti. Il gas pu? essere separato da un contenitore e/op-pure uno strato o frazione. I processi e i sistemi della presente invenzione possono assicurare il recupero di una proporzione maggiore di piastrine gi ovani ,vitali ,fisiol ogicernente attive.

I procedimenti ed i sistemi della presente invenzione provvedono pure la combinazione di unit? multiple di materiale di zone di transizione o strati sedimentosi in un singolo contenitore.

Breve descrizione dei disegni

La figura 1 ? una reaiizzazione di un sistema di lavorazione di un fluido biologico comprendente un gruppo a collettore secondo l'invenzione. La figura 2. ? una reaiizzazi one di un sistema di lavorazione di un fluido biologico secondo l'invenzione.

La figura 3 ? un'altra realizzazione di un sistema di lavorazione di un fluido biologico secondo l'invenzione.

Modi di realizzazione dell'invenzione

Secondo la presente invenzione, un procedimento per il trattamento di un fluido biologico comprende la separazione di un materiale della zona di transizione dal fluido biologico, l'elaborazione del materiale della zona di transizione per formare uno strato supernatante che comprende piastrine ed uno strato di sedimento che comprende eritrociti, e la separazione dello strato supernatante dello strato di sedimento passando 10 strato supernatante attraverso un mezzo poroso. Il procedimento pu? anche comprendere l'aumento del recupero delle piastrine pi? giovani e pi? desiderabili. Il procedimento pu? anche comprendere la separazione del gas facendo passare 11 gas stesso in un serpentino di raccolta e eliminazi one del gas.

La presente invenzione provvede pure un procedimento per manipolare un materiale di zona di transizione comprendente lo riunire materiale di zone di transizione,i1 manipolare il materiale riunito per formare uno strato supernatante che comprende piastrine ed uno strato di sedimento che comprende eritrociti, e separare lo strato supernatante dallo strato di sedimento facendo passare lo strato supernatante attraverso un mezzo poroso .

Secondo l'invenzione, lo strato supernatante pu? essere separato dallo strato di sedimento passando lo strato supernatante attraverso il mezzo poroso fino a quando il flusso attraverso il mezzo rallenta in modo significativo o addirit-tura si arresta .

La presente invenzione provvede pure un procedimento per trattare un materiale della zona di transizione comprendente il passare il materiale della zona di transizione proveniente da una pluralit? di contenitori originali attraverso un gruppo di riunione per destinarlo ad un contenitore ricevente, manipolare il materiale della zona di transizione riunito per formare uno strato supernatante che comprende piastrine ed uno strato di sedimento che comprende eritrociti, e separare lo strato supernatante dallo strato di sedimento facendo passare lo strato supernatante at traverso un mezzo poroso.

La presente invenzione provvede pure un procedimento per trattare materiale della zona di transizione comprendente l'introduzione di un gas in una pluralit? di contenitori originali di materiale di zona di transizione, far passare il materiale di zona di transizione dai contenitori originali attraverso un gruppo di riunione ad un contenibore ricevente, scaricare il gas in testa al materiale della zona di transizione, introdurre gas dietro il materiale della zona di transizione per massimizzare la riunio^ e recuperare il materiale della zona di transizione, trattare il materiale della zona di transizione riunito per formare uno strato supernatante che comprende piastrine ed uno strato di sedimento che comprende eritrociti, e separare lo strato supernatante dallo strato di sedimento passando lo strato supernatante attraverso un mezzo poroso.

La presente invenzione comporta pure un sistema per lavorare fluido biologico comprendente un gruppo di riunione ed un filtro barriera per eritrociti in comunicazione di fluido condii gruppo di riunione.

La presente invenzione provvede pure un gruppo per il trattamento di un fluido biologico comprendente un filtro oarriera per eritrociti che comprende una estremit? a monte ed una estremit? a valle, ed una serpentina per la raccolta e lo spostamento di gas avente una prima estremit? in comunicazione di fluido con l'estremit? a monte del filtro a barriera degli eritrociti ed una seconda estremit? in comunicazione a fluido con l'estremit? a valle del filtro a barriera degli eritrociti.

La presente invenzione provvede pure un sistema di trattamento di un fluido biologico comprendente un gruppo per il trattamento di un fluido biologico che comprende un filtro a barriera per gli eritrociti ed una serpentina per la raccolta e lo spostamento del gas, ed un contenitore in c ornunicazione a fluido con l'estremit? a valle del filtro a barriera per eritrociti.

Sistemi esemplificativi di lavorazione di un fluido biologico, che sono preferibilmente chiusi, sistemi sterili, sono rappresentati nelle figure. Come illustrato nelle figure 1 e 3, un gruppo a collettore 200 pu? comprendere contenitori 20, ciascuno adatto per contenere

unit? di un fluido biologico come materiale dell a zona di transizione o strato fibrinoso, in comu nicazione di fluido con un gruppo di riunione 21. Nelle realizzazioni i11ustrate, i1 gruppo di riunione 21 comprende una rete o pluralit? di condotti 40 che convergono in un singolo condotto 60 allo scarico e giunzione 50. Qualcuno dei condotti 40 funziona come immissione al gruppo di riunione 21 dai contenitori originali 20. In alternativa, il gruppo di riunione 21 pu? comprendere un alloggiamento avente almeno due immissioni ed uno scarico.

Lo scarico o giunzione 50 del gruppo di riunione 21 ? in comunicazione di fluido con un contenitore ricevente o di trasferimento 22. Nelle realizzazioni illustrate, la comunicazione a fluido con il contenitore ricevente 22 viene preferi bi lmente stabilita mediante un condotto 60. Interposto nel condotto 60, tra lo scarico o giunzione 50 ed il contenitore 22, vi pu? essere almeno un dispositivo o gruppo. Per esempio, come ? illustrato nelle realizzazioni indicate, il gruppo a collettore 200 pu? comprendere una linea di immissione di gas 30, una camera di sgocciolamento 31 ed uno scarico per il gas 33.

Il contenitore ricevente o di trasferimento 22 pu? essere in comunicazione di fluido con un altro contenitore 30. Nelle realizzazioni illustrate nelle figure 1 e 3, la comunicazione di fluido con l'altro contenitore 80 viene preferibilmente stabilita mediante un condotto 100. Interposto tra il contenitore ricevente o di trasferimento 22 e l'ulteriore contenitore 80, c'? un mezzo poroso quale un mezzo 70 che costituisce barriera per gli eritrociti.

In un'altra realizzazione di un sistema di trattamento di un fluido biologico secondo l'invenzione, un contenitore 90 pu? essere in comunicazione di fluido con un ulteriore contenitore 80. Nella realizzazione illustrata nella figura 2, la comunicazione di fluido con l?ulteriore contenitore viene preferibilmente stabilita da un condotto 100. Interposto tra il contenitore 90 e l'ulteriore contenitore 80 vi ? un mezzo 70 che costituisce barriera per gli eritrociti.

Le realizzazioni dell'invenzione possono poi ancora comprendere una serpentina per la raccolta e lo spostamento del gas per separare il gas dal percorso di flusso del fluido biologico. La serpentina di raccolta e spostamento del gas pu? essere adatta per sisterni chiusi e/oppure sterili

Per esempio, nella realizzazione illustrata nella figura 3, il sistema di trattamento del fluido biologico pu? comprendere una serpentina per la raccolta e lo spostamento del gas 300,. che comprende preferibilmente almeno un condotto. La serpentina per la raccolta e lo spostamento del gas 300 pu? anche comprendere un mezzo liquido di barriera 150. Nella realizzazione illustrata, il mezzo liquido di barriera 150 pu? essere interposto tra le estremit? del serpentino 300 di raccolta e spostamento del gas, cio? tra i condotti 160 e 170.

Il serpentino 300 di raccolta e spostamento del gas pu? compr?ndere un contenitore per la raccolta e spostamento del gas (non illustrato), preferibilmente interposto tra le estremit? del serpentino. Sotto gli aspetti secondo i quali il serpentino di raccolta e spostamento del gas comprende un contenitore di raccolta e spostamento del gas, la raccolta e lo spostamento del gas secondo l'invenzione pu? essere utilizzata per raccogliere gas e, opzionalmente, pu? essere utilizzata per campionare un fluido biologico. In una realizzazione, il gas raccolto pu? essere usato per recuperare altro fluido biologico.

Il serpentino 300 per la raccolta e l'allon-tanamento di gas pu? impedire il rimescolamento o il contatto tra fluido biologico trattato e non trattato. Sotto questi aspetti del serpentino di raccolta e spostamento di gas comprendente un mezzo che costituisce barriera per il liquido 150, il serpentino per la raccolta e lo spostamento di gas costituisce una sicurezza che fluidi biologici contaminati con leucociti possono essere isolati da fluidi biologici elaborati o privati di leucociti, poich? il fluido contaminato non passer? attraverso il mezzo che costituisce barriera per il liquido.

Il serpentino 300 per la raccolta e lo spostamento di gas pu? essere in comunicazione di fluido con vari componenti del sistema di lavorazione del fluido biologico. Preferibilmente, le estremit? del serpentino di raccolta e spostamento di gas sono in comunicazione di fluido con la parte a monte e la parte a valle, rispettivamente, di almeno uno dei gruppi filtranti e barriera per i globuli rossi, un gruppo filtrante a barriera per i globuli rossi oppure un filtro di impoverimento dei leucociti, ed un gruppo filtrante di impovimento dei leucociti. Per esempio, come ? illustrato nella figura 3, una estremit? del serpentino di raccolta e spostamento del gas 300 pu? essere collegata al condotto 100 a monte di un filtro a barriera per eritrociti comprendente un mezzo filtrante per eritrociti 70 , attraverso il condotto 160, e l'altra estremit? del serpentino 300 pu? essere collegato al condotto 100 a valle del filtro a barriera per gli eritrociti attraverso il condotto 170.

Secondo un'altra realizzazione (non illustrata), il serpentino per la raccolta e spostamento del gas pu? essere interposto tra il gruppo di riunione 21 ed il contenitore di trasferimento 22.

Per esempio, una estremit? del serpentino di raccolta e spostamento di gas pu? essere collegata al condotto 60 a valle dello scarico 50, e l'altra estremit? pu? essere collegata al condotto 60 a monte del contenitore di trasfer?mento 22.

Ciascuno dei componenti dell'invenzione verr? ora descritto pi? dettagliatamente in quanto segue.

I contenitori che possono essere usati nel gruppo e/oppure sistema di trattamento del fluido biologico possono essere costruiti con qualsiasi materiale e di qualsiasi forma compatibile con il fluido biologico ed il gas. Un'ampia variet? di questi contenitori sono gi? noti nella tecnica. Per esempio, le borse satellite e per la raccolta di sangue sono tipicamente fabbricate con PCV plastificato, per esempio PVC plastificato con diottil ftalato, dietiesil ftalato o triottil trimellitato . Le borse possono anche essere fabbricata a una poliolefina, poliuretano, poliestere o poiicarbonato .

Come si ? usato finora, si pu? stabilire una comunicazione a fluido per mezzo di una qualsiasi struttura che permetta al fluido biologico e/oppure al gas di passare da un posto ad un altro, come per esempio almeno un condotto o tubo. Un dispositivo di controllo del flusso come una pinza, chiusura, valvola, montante di chiusura a trasferimento o simili, possono essere disposti entro o su almeno uno dei condotti e/oppure dei contenitori. I condotti utilizzati nella presente invenzione possono essere fabbricati con qualsiasi materiale compatibile con il fluido ed il gas-biologico. Preferibilmente, essi possono essere costituiti da materiale flessibili, come cloruro di polivinile (PVC), o PVC plastificato per esempio PVC plastificato con diottilftalato dietilesi1 ftalato o triottil trimellitato. V pu? essere un certo numero di condotti che assicu rano la comunicazione a fluido verso ogni singol contenitore, ed i condotti possono essere dispo sti nel sistema secondo la presente invenzion in una variet? di modi diversi. Per esempio, v pu? essere almeno un condotto di lato, sulla parte superiore, o sul fondo del contenitore, oppur una comdinazione di questi. Almeno un condott pu? estendersi all'interno del contenitore.

Un mezzo a barriera per eritrociti, second la presente invenzione, comprende un mezzo poro so che permette la separazione di una cellul non eritrocita contenente fluido biologico, com una sospensione di piastrine e plasma, da un eri trocita contenente fluido biologico. Il mezz a barriera per eritrociti pu? permettere ad un cellula non eritrocita contenente fluido di at traversarlo, ma rallenta significativamente arresta del tutto il flusso di fluido biologic quando gli eritrociti contenenti fluido si avvici nano alla barriera stessa. Per esempio, il mezz a barriera per eritrociti pu? permettere l'attra versamento da parte di un fluido contenente piastrine, arrestando immediatamente il flusso quando il mezzo viene bloccato da eritrociti.

Rallentando il flusso del fluido biologico, il mezzo a barriera permette all'operatore di arrestare manualmente il flusso prima che i globuli rossi passino attraverso il mezzo a barriera. Questa realizzazione dell'invenzione permette al 1'operatore di avere pi? tempo per intervenire ed arrestare il flusso. Per esempio, un fluido supernatante contenente piastrine pu? fluire attraverso la barriera per eritrociti ad una velocit? iniziale di circa 15 ml/min, ma il flusso decresce a circa 5 ml/min quando al mezzo s <1 >avvicina un sedimento contenente globuli rossi. Una riduzione del flusso, per esempio una riduzione del 33%, pu? dare all'operatore tempo sufficiente per arrestare il flusso al momento giusto. In alcuni casi, per esempio, quando il fluido contenente piastrine ? espresso da una pluralit? di contenitori separati all 'incirca allo stesso tempo, questa riduzione del flusso permette all?operatore di manipolare un numero maggiore di contenitori in modo pi? efficiente.

Una funzione principale del mezzo a barriera per eritrociti ? quella di separare una frazione contenente eritrociti di fluido biologico c; una frazione non contenente eritrociti. Il mezzi a barriera per eritrociti pu? agire come una vevola automatica, rallentando o anche arrestar;;.: il flusso di un fluido biologico contenente globuli rossi. In alcune realizzazioni, il funzionamento della valvola automatica pu? arrestare rac -damente o istantaneamente il flusso di flu biologico contenente eritrociti, evitando cc: la necessit? che l'operatore deoba monitoriquestafase.

L'azione valvola non ? ben compresa, si ritiene che il flusso venga rallentato o ar-; stato per l'aggregazione in o sopra il mezze uno o pi? costituenti del fluido biologico, esempio, attualmente,si ritiene che il fluido : logico contenente cellule non rosse, passi av -verso il mezzo, con impoverimento dei leuco: da questo fluido. Questi leucociti sembrano a:, mularsi in o sopra il mezzo, ma il resto del f do contenente globuli non rossi ripicamente f sce attraverso il mezzo. Tuttavia, una volte, i globuli rossi vengono a contatto direttaneo indirettamente con il mezzo,cio? conte; direttamence il mezzo o contattano leucociti i quali, a loro volta, possono contattare direttamente il mezzo, il flusso attraverso il mezzo rallenta in modo significativo o addirittura si arresta. Senza intendere limitarsi ad alcuna spiegazione particolare per il meccanismo di questa azione a valvola, si ritiene attualmente che il rallentamento o l'arresto del flusso possa essere la conseguenza dell aggregazione dei globuli rossi da soli e/oppure in combinazione con leucociti, formando una barriera che impedisce o blocca l'ulteriore flusso attraverso il mezzo poroso. Pu? anche darsi che altri fattori, quali il potenziale zeta, il CWST, e/oppure altre caratteristiche delle figure o del mezzo poroso, possano contribuire all'azione a valvola.

Questa teoria del meccanismo proposto ? sopportata dall'esistenza di filtri in grado di fermare con alta efficienza i leucociti dalle sospensioni di globuli rossi umani, e che hanno dimensioni di pori piccole quanto 0,5 micrometri, e attraverso questi pori i globuli rossi passano liberamente e completamente senza intasarli, appiicando .pressione della stessa grandezza di qu/e? la usata nella presente invenzione. Al contrario i filtri secondo la presente invenzione, che hanno tipicamente diametro dei pori maggiore di circa 0,5 micrometri, rallentano in modo significativo o arrestano il flusso di globuli rossi quando il mezzo poroso viene contattato o penetrato dai globuli rossi stessi.

Secondo una realizzazione dell'invenzione, l'efficienza di impoverimento dei leucociti da parte del mezzo a barriera per eritrociti aumenta, e cos? il mezzo a barriera per eritrociti pu? anche fungere da mezzo di impoverimento dei leucociti. Esempi di mezzi a barriera per globuli rossi e mezzi a barriera per globuli rossi ed impoverimento di leucociti sono descritti nei Drevetti US N. 5.100.564 e 5.152.905, e nella pubolicazione internanzionale n. W091/04083.

Un mezzo a barriera per eritrociti adatto per far passare le piastrine in circa una unit? di fluido biologico ha preferibilmente un'a-, rea superficiale delle fibre compresa tra circa 0,04 e circa 3,0 m , pi? preferibi1mente tra circa 0,06 e circa 2,0 m . Un campo preferito per l'area di flusso ? compreso tra circa 3 e circa 5 cm , pi? preferibilmente tra circa 4 e circa 6 cm . Un campo preferito per il relativo volume di vuoti ? compreso tra circa il 71 e circa il'83% (corrispondente per le fibre PBT ad una densit? compresa tra circa 0,23 e circa 0,40 g/cc), pi? preferibilmente tra circa il 73 e circa 1 '80% (tra circa 0,27 e circa 0,37 g/cc).

Un mezzo di barriera per eritrociti e di impoverimento dei leucociti, adatto per passare le piastrine in circa una unit? di fluido biologico, ha preferibi1mente una superficie delle fibre compresa tra circa 0,3 e circa , preferibilmente tra 0,25 e circa , pi? preferibilmente tra circa 0,35 e circa cio? da 0,3 a Un limite preferito per l'area di flusso ? compreso tra circa 2,5 e circa , preferibilmente tra circa 3 e circa , pi? preferibilmente tra circa 3 e circa , cio? tra 4 e Un campo preferito per il relativo volume di vuoti ? compreso tra circa 71% e circa 83% (cio?, se si impiega fibra PBT, corrispondente ad una densit? del mezzo compresa tra circa 0,23 e circa 0,40 g/cc), preferibilmente tra circa 72 e circa 83% (per PBT, tra circa 0,23 e circa 0,35 g/cc), pi? preferibilmente tra circa 75% e circa 80%, cio? tra 73 e 80% (per PBT, tra circa 0,28 e circa 0,35 g/cc, cio? tra 0,25 e 0,33 g/cc). I limiti superiori dell'area di flusso riflettono il desiderio di effettuare la filtrazione in un periodo relativamente breve, e possono essere aumentati se sono accettabili tempi di filtrazione pi? lunghi.

Secondo l'invenzione, il mezzo poroso pu? essere configurato in modo da rimuovere una quantit? desiderata di leucociti, preferibilmente superiore a circa il 70%, pi? preferibilmente superiore al 99,S% fino a circa il 99,99%, il che corrisponde ad un contenuto medio residuo di leucociti per unit? inferiori a circa 0,005 x 10<7>.

In altre realizzazioni che possono comportare volumi diversi di fluido biologico, per esempio materiale di zona di transizione riunito, la barriera per gli eritrociti ed il mezzo di barriera per eritrociti e di impoverimento di leucociti precedentemente descritto pu? essere, se necessario, modificato. Quindi, se necessario, l'area della superficie fibrosa,l'area di flusso, la densit? ed il volume di vuoti possono essere cambiati. Per esempio, i campi limite precedentemente indicati per l'area superficiale delle fibre e l'area di flusso adatta per far passare le piastrine di circa una unit? di fluido biologico pu? essere variata, per esempio, di un fattore di circa 6, per far passare le piastrine di circa 6 unit? di materiale di zona di transizione o strato fibrinoso riunito.

Sebbene il mezzo barriera per gli eritrociti secondo la presente invenzione possa avere una densit? sostanzialmente uniforme, un'altra realizzazione della presente invenzione pu? essere tale che una parte superiore del mezzo presenti una densit? generalmente pi? bassa rispetto alla parte a valle. Per esempio, la densit? del mezzo barriera per globuli rossi pu? variare in modo continuo o a gradini pur mantenendo dei limiti di densit? media adatti per la separazione di uno strato supernatante che comprende le piastrine da uno strato di sedimento che comprende gli aritrociti. Un mezzo barriera esemplificativo per gli eritrociti pu? comprendere un campo di densit? nella parte a monte compresa tra circa 0,1 g/cc e circa 0,23 g/cc, ed un campo di densit? nella parte a valle compreso tra circa 0,23 g/cc e circa 0,40 g/cc. In un'altra realizzazione dell'invenzione, il mezzo barriera

pu? comprendere due o pi? strati, preferibilmente di densit? diversa o variante. Un esempio di mezzo fibroso a zone o stratificato, che impiega PBT come fibra, pu? comprendere uno strato superiore avente limiti di densit? compresi tra circa 0,1 g/cc e circa 0,2 g /cc, uno strato mediano avente un campo di densit? compreso tra circa 0,20 g/cc e circa 0,25 g/cc ed uno strato inferiore avente limiti di densit? compresi tra circa 0,23 g/cc e circa 0,40 g/cc.

Rientra nello scopo della presente invenzione l'impiego di altri valori di densit?, in una zona o strato particolare, come pure per tutto il mezzo barriera per eritrociti. Questi campi di densit? alternativi possono essere scelti basandosi sul risultato che si desidera ottenere, oltre alla separazione di uno strato di sedimento da uno strato supernatante, cio? il rapporto di flusso, il tipo di fibra usato, la quantit? di leucociti eliminati, come pure altre considerazi oni .

Il mezzo barriera per eritrociti pu? essere posto nel sistema della presente invenzione in una variet? di luoghi. Per esempio, come illustraesso pu? essere interposto tra due contenitori, come il primo contenitore 90 ed un contenitore addizionale 80. Come illustrato nella figura 1, esso pu? essere disposto a valle del contenitore ricevente o di trasferimento, per esempio interposto tra il contenitore ricevente o di trasferimento 22 ed un ulteriore contenitore 80, nel condotto 100.

Un mezzo di impoverimento dei leucociti che pu? essere usato secondo la presente invenzione pu? comprendere un mezzo poroso adatto per l'impoverimento dei leucociti facendo passare il fluido attraverso il mezzo stesso.Un mezzo di impoverimento dei leucociti adatto per far passare le piastrine di circa una unit? di fluido biologico presenta prefer ibi1mente una area della superficie fibrosa compresa tra circa 0,08 e circa 1,0 m , pi? preferibilmente tra circa 0,1 e circa 0,7 m . I limiti preferiti per il relativo volume di vuoti ? compreso tra circa 50% e circa 89%, pi? preferibilmente tra circa 60% e circa 85%. Come descritto in precedenza con riferimento al mezzo barriera per eritrociti, questi limiti possono essere cambiati, se necessario, per quelle realizzazioni che comportano volumi diversi di fluido biologico. Per esempio , i limiti su indicati per l'area della superficie fibrosa possono essere cambiati per permettere il passaggio delle piastrine di circa 6 unit? di materiale di zona di transizione o strato fibrinoso riunite. Esempi di mezzi di impoverimento dei leucociti sono descritti nei brevetti US N.5.100.564 e 4.880.548, come pure nella pubblicazione internazional e N. W0 91/04088.

Nel sistema della presente invenzione, il mezzo di impoverimento dei leucociti pu? essere inserito in una variet? di locazioni. Preferibilmente esso ? disposto a valle del mezzo barriera per eritrociti 70, cio? interposto tra il mezzo barriera per eritrociti 70 e l'ulteriore contenitore 80.

Si pu? impiegare un mezzo poroso inserito in un alloggiamento per formare un gruppo filtrante. Di preferenza, il mezzo poroso ? preformato per controllarne le dimensioni ed il diametro dei pori prima di montarlo nell'alloggiamento costituendo un tutto unico. L'alloggiamento pu? essere di qualsiasi forma adatta per permettere una immissione ed uno scarico. L'alloggiamento pu? essere costruito con qualsiasi materiale rigido impervio, compreso qualsiasi materiale impervio termoplastico, purch? sia compatibile con il fluido che deve essere trattato. L'alloggiamento pu? compredere una disposizione di uno o pi? canali, scanalature, condotti, passaggi, alette o simili, che possono essere a serpentina, paralleli, curvi, circolari, oppure avere una variet? di altre configurazioni.

Esempi di alloggiamenti adatti sono descritti nei brevettiUS N. 5.100.464, 4.923.620, 4.880.548 e 4.925.572, come pure nella pubblicazione internazionale n. WO 91/04088. Si intende che la presente invenzione non ? limitata a questi tipi, forme o costruzioni di alloggiamento.

La serpentina di raccolta e spostamento del gas secondo l'invenzione pu? comprendere almeno un condotto. Essa pu? pure comprendere almeno un recipiente di raccolta e spostamento del gas ed un mezzo barriera per il liquido. La serpentina di raccolta e spostamento del gas pu? comprendere altri elementi.come un dispositivo per il controllo del flusso, come pure condotti e/oppure connettori, per esempio per collegarla a monte ed a valle di un gruppo filtrante.

Come si vede nella figura 3, una serpentina per lo spostamento e la raccolta del gas 300 comprendere un primo ed un secondo condotto e 170, con una estremit? di ciascun condotto in comunicazione di fluido con il mezzo barriera per il liquido 150. In alternativa, una serpentina per la raccolta e spostamento del gas pu? comprendere un primo ed un secondo condotto, con una estremit? di ciascun condotto in comunicazione di fluido con il recipiente di raccolta e spostamento del gas (non i l lusstrato).

Una serpentina preferita per la raccolta e lo spostamento del gas secondo l'invenzione comprende sia un mezzo barriera per il liquido che un recipiente per la raccolta e spostamento del gas, con un condotto che assicura la comunicazione a fluido tra questi due elementi.

Un recipiente per la raccolta e lo spostamento del gas ? un contenitore adatto per raccogliere e conservare gas. Il recipiente per la raccolta e lo spostamento del gas pu? anche essere adatto per raccogliere e conservare fluido biologico. Il recipiente per la raccolta e spostamento del gas pu? anche essere usato per aumentare la raccolta di fluido biologico. Recipienti adatti per la raccolta e spostamento del gas comprendono i contenitori di fluido biologico del tipo precedentemente descritto. In una reaiizzazione preferita esso pu? essere un contenitore flessibile che pu? essere schiacciato,in modo che il gas nel contenitore possa essere avviato ad una destinazione desiderata.

La serpentina 300 per la raccolta e spostamento del gas pu? anche comprendere un mezzo barriera per liquido 150 attraverso il quale passa il gas ma non passa il fluido biologico. Il mezzo barriera per liquido pu? essere un mezzo qualsiasi scelto tra una variet? di mezzi e dispositivi che sono in grado di separare i gas che pu? essere presente nel sistema di trattamento del sangue dal fluido biologico che viene trattato nel sistema stesso.

Un mezzo barriera per liquido 150 comprende almeno un mezzo poroso che respinge il liquido. Il mezzo barriera per liquido pu? anche comprendere almeno un mezzo poroso che lascia passare il liquido. Mezzi porosi liquofobi e liquefili adatti comprendono, senza essere limitati a questi, quelli descritti nella pubblicazione internazionale n. WO 91/17809 e nel brevetto US N. 5.126.054.

Il mezzo barriera per liquido pu? anche essere inserito in un contenitore. Contenitori adatti comprendono, senza essere limitati a questi, quelli descritti nella pubblicazione interna zionale n. WO 91/17809 e nel brevetto US N.

5.126.054.

Le condutture usate nel serpentino per la raccolta e spostamento del gas possono essere del tipo precedentemente descritto. Un dispositivo di controllo di flusso del tipo precedentemente descritto pu? essere inserito all'interno o su almeno una delle condutture e/oppure dei conteni-tori di raccolta e spostamento del gas.

Tipicamente, il serpentino di raccolta e allontanamento del gas ? collegato a condotti a monte ed a valle di un gruppo filtrante che pu? essere almeno uno tra un gruppo barriera per i globuli rossi, un gruppo barriera per globuli rossi e impoverimento dei leucociti e un gruppo di impoverimento dei leucociti. Il gruppo filtrante ed il serpentino per la raccolta e l'allontanamento del gas possono essere collegati in modo da formare un dispositivo unico, e questo dispositivo pu? essere collegato ai contenitori nel modo desiderato. Per esempio, nella realizzazione illustrata nella figura 3, il condotto 100 a valle del gruppo filtrante che comprende il mezzo barriera per gli eritrociti 70, pu? essere in comunicazione di fluido con un contenitore quale un contenitore satellite 80. Un contenitore quale il contenitore ricevente o di trasferimento 22, che contiene uno strato che contiene piastrine, pu? essere in comunicazione di fluido con il condotto 100 a monte del gruppo filtrante.

La locazione del sistema barriera per il liquido 150 deve essere scelta in funzione di un risultato desiderato. Preferibilmente, quando la serpentina per la raccolta e l'allontanamento del gas ? collegata mediante una giunzione al condotto 100 a monte di un filtro barriera per eritrociti comprendente un mezzo barriera per globuli rossi 70, e per mezzo di una giunzione al condotto 100 a valle del filtro barriera per eritrociti, il sistema a barriera per il liquido ? disposto presso la giunzione a monte del gruppo filtrante a barriera per gli eritrociti. Nelle realizzazioni in cui il serpentino per la raccolta e l'allontanamento del gas comprende pure un contenitore per la raccolta e l'allontanamento del gas (non illustrato), il contenitore ? preferibilmente disposto presso la giunzione a valle del gruppo filtrante a barriera per gli eritrociti. Nelle realizzazioni che comprendono un gruppo filtrante a barriera per gli eritrociti e di impoverimento dei leucociti, oppure un gruppo filtrante per l'impoverimento dei leucociti (non illustrato) il mezzo a barriera per il liquido, con o senza il contenitore per la raccolta e l'allontanamento del gas, pu? essere disposto in un posto simile.

Il gruppo di riunione secondo l'invenzione provvede comunicazione a fluido tra almeno due contenitori originali ed un contenitore ricevente,prefer? bi1mente tra almeno tre contenitori originali ed un contenitore ricevente, preferibilmente incanalando vari flussi di fluido in un flusso unico. Come ? illustrato nella figura 1, il gruppo di riunione 21 comprende preferibilmente una pluralit? di condotti 40 ed uno scarico o giunzione 50. Sebbene i condotti possano essere configurati in vari modi, il gruppo di riunione comprende preferibilmente una rete o fila di condotti 40, comprendenti preferibilmente una o pi? giunzioni, come uno o pi? connettori a Y. Come usati in questa sede, i condotti provvedono comunicazione a fluido tra la sorgente di fluido biologico, come i contenitori delle singole unit? separate 20, ed un contenitore multiplo, come il contenitore di trasfer imento o ricevente 22. Un dispositivo per il controllo del flusso pu? essere disposto entro o sopra almeno uno dei condotti .

In alternativa, il gruppo di riunione 21 pu? comprendere almeno un dispositivo avente un certo numero di condotti di immissione ed un singolo scarico in comunicazione di fluido con la giunzione 50.

Il gruppo di riunione impiegato nella presente invenzione pu? essere costruito con qualsiasi materiale compatibile con un fluido biologico. Per esempio,il gruppo di riunione pu? essere costituito da materiale non flessibile, per esempio acri1oni tri1e-butadiene-sti rene (ABS), policarbonato, o acciaio inossidabile. In alternativa, esso pu? essere costituito da materiale flessibile, come polivinil cloruro {PVC), o PVC plastificato, per esempio PVC plastificato con diotti?ftalato, dietilesilftalato o triottiltrimeliitato.

Secondo un'altra realizzazione dell'invenzione,il sistema di lavorazione del fluido biologico pu? comprendere una camera di gocciolamento 31. La camera di gocciolamento 31 pu? essere impiegata per controllare la velocit? di flusso e/oppure prevenire che il gas raggiunga un conte-nitore quale il contenitore ricevente o di trasferimento 22 a valle della camera di gocciolamento, e per massimizzare il recupero del fluido biologico.

La camera di gocciolamento che pu? essere utilizzata nel sistema pu? essere costruita con qualsiasi materiale compatibile con il fluido biologico ed il gas. La camera di gocciolamento pu? essere schiacci abi1e. Inoltre, la camera di gocciolamento pu? compredere almeno un elemento poroso, preferibilmente una membrana porosa liquofoba, che permette al gas di penetrare o di uscire dal sistema di lavorazione, ma resiste o impedisce il passaggio del fluido biologico. L'elemento poroso pu? essere posizionato in un condotto o, pi? preferibi1mente , pu? essere compreso nell'alloggiamento della camera di gocciolamento. Inoltre, la superficie dell'elemento pu? essere orientata in vari modi rispetto al flusso del fluido biologico. Per esempio, due elementi porosi possono essere posti alle estremit? opposte o ai lati opposti della camera di gocciolamento, oppure si pu? inserire un singolo elemento all'interno della camera di gocciolamento.

Secondo un?altra realizzazione dell'invenzione, si pu? usare una apertura per l'immissione o il deflusso del gas insieme ad ognuna delle apparecchiature precedentemente descritte per massimizzare il recupero del fluido biologico che deve essere raccolto nel contenitore ricevente o di trasferimento 22 e/oppure nel contenitore addizionale 80. Sistemi esemplificativi di immissione e deflusso del gas e procedimenti per il loro impiego sono quelli descritti nella pubblicazione internazionale n. WO 91/17809 e nel brevetto US. N. 5.126.054.

L'immissione del gas 30 ed il sistema di deflusso del gas 33 possono essere, rispettivamente, a monte ed a valle della camera di gocciolamento 31. Pi? preferibilmente, come ? illustrato nella figura 1, il sistema di immissione del gas 30 ? a valle dello scarico del gruppo di riunione 50 ed a monte della camera di gocciolamento 31, che si trova a monte dello scarico di gas 33, e lo scarico di gas 33 ? interposto tra la camera di gocciolamento 31 ed il contenitore ricevente o di trasferimento 22.

In alternativa, un sistema di immissione o di deflusso del gas pu? essere posizionato una camera di gocciolamento, in un condotto, un gruppo filtrante oppure il contenitore ricevente, originale e/oppure addizionale.

In altre realizzazioni (non illustrate), il sistema di immissione di gas 30 ed il sistema di scarico 33 possono essere rispettivamente disposti a monte ed a valle di almeno uno dei gruppi di impoverimento dei leucociti, un gruppo barriera per gli eritrociti ed un gruppo barriera per gli eritrociti e di impoverimento dei leucociti.

I sistemi di immissione e/o deflusso del gas possono essere posizionati in modo da ottenere un risultato desiderato, per esempio la raccolta di fluido biologico utile e/oppure rimozione di gas, come viene spiegato pi? dettagliatamente nel seguito. Incluso nello scopo dell'invenzione ? l'impiego di pi? di un sistema di immissione e/oppure deflusso del gas.

II mezzo di immissione del gas ? un elemento poroso che permette di immettere gas in un sistema di lavorazione di un fluido biologico. In tal modo, l'immissione del gas pu? costituire un sistema per incrementare la raccolta di un fluido biologico utile (per esempio materiale della zona di transizione) che altrimenti verrebbe trattenuto in vari componenti del sistema durante il trattamento e potrebbe essere perso.

Il sistema di scarico del gas ? un elemento poroso che permette al gas che ? presente in un sistema di trattamento di un fluido biologico di essere scaricato all'esterno del sistema e/oppure permette di separare il gas dal fluido biologico che deve essere trattato. Cosi, lo scarico del gas pu? contribuire a minimizzare il volume di gas che rimane in, o a contatto con, un flu?do biologico durante il trattamento. Il sistema di scarico del gas pu? anche permettere al gas di restare nel sistema di trattamento del fluido biologico.

I mezzi di immissione di scarico del gas vengono scelti preferibilmente in modo che la sterilit? del sistema non venga compromessa.

I mezzi di immissione e di scarico del gas comprendono ciascuno almeno un elemento poroso previsto per permettere l attraversamento da parte del gas. Si pu? usare tutta una variet? di materiali, purch? si raggiungano i requisiti richiesti per l'elemento poroso. Questi requisiti comprendono la resistenza necessaria ad affrontare i vari differenziali di pressioni incontrati nell'impiego e la capacit? a provvedere una filtrazione opportuna pur garantendo la permeabilit? desiderata senza l'applicazione di eccessiva pressione. Gli elementi porosi del sistema di immissione e di scarico del gas avranno preferibilmente un diametro dei pori di circa 0,2 micrometri o meno, per precludere il passaggio dei^batteri all'interno del sistema.

Di preferenza, i mezzi di immissione e di scarico del gas comprendono almeno un elemento poroso liquofobo. Poich? l'elemento poroso liquofobo non ? bagnabile, o lo ? poco, da parte del fluido biologico che deve essere manipolato nel sistema, il gas presente nel sistema che viene a contatto con l'elemento liquofobo lo attraverser?, mentre il fluido biologico non lo attraverser?. Lo scarico del gas pu? anche comprendere almeno un elemento poroso liquofilo, che permette al gas di uscire ma non di entrare nel sistema. In una realizzazione preferita dell'invenzione, il sistema di scarico del gas comprende sia una membrana liquofoba che una membrana liquofila. Inoltre, il sistema di immissione e/oppure di scarico del gas pu? essere compreso in un contenitore, che pu? avere un coperchio o chiusura.

Come si ? detto prima,la posizione del sistema di immissione e/oppure di scarico del gas pu? essere scelta in modo da ottenere un risultato desiderato. Per esempio, il sistema di immissione del gas 30 pu? essere disposto a monte del collettore di scarico o collegamento 50, il che ? pratico allo scopo di massimizzare quanto basta il recupero del materiale della zona di transizione dal gruppo collettore 200. Cos?, i sistemi di immissione del gas possono essere disposti in ciascuno dei contenitori originali 20 del mate-riale della zona di transizione che deve essere riunito. In alternativa, il sistema di immissione del gas 30 pu? essere posto in un condotto 40 o a valle dello scarico della giunzione 50 del gruppo di riunione 21.

Inoltre, pu? essere desiderabile disporre 10 scarico del gas 33 nel condotto 60 valle dello scarico o giunzione 50, e quanto pi? vicino possibile al contenitore di ricezione o trasferimento 22, per massimizzare il volume di gas che viene rimosso dal gruppo collettore 200. In alternativa, 11 sistema di scarico del gas pu? essere disposto nel contenitore di ricezione o

22 e/oppure nello stesso contenitore 80. Il sterna di immissione o di scarico del gas pu? essere locato nella camera di gocciolamento 31. In una realizzazione dell'invenzione, un sistema di immissione e/oppure di scarico del gas pu? essere interposto tra i contenitori originali 20 ed il contenitore ricevente 22, per esempio nel condotto 60.

Nel contesto della presente invenzione, il fluido da trattare o fluido biologico pu? essere introdotto in qualsiasi momento adatto, il che pu? essere appena dopo la donazione. Per esempio, quando il fluido biologico ? donato come sangue intero, esso viene tipicamente trattato il pi? presto possibile allo scopo di massimizzare il numero di componenti derivati e per massimizzare la vitalit? del componente sanguigno e l'attivit? fisiologica. Una rapida lavorazione pu? ridurre in modo pi? efficace o eliminare i fattori di contaminazione compresi, senza limitarsi a questi, leucociti e microaggr egat i. Secondo l'invenzione, il fluido biologico pu? essere trattato entro 20 ore dalla raccolta dal donatore. L'invenzione pu? anche comprendere la lavorazione di un fluido biologico secondo la pratica degli Stati Uniti, in cui la lavorazione del sangue intero avviene generalmente entro otto ore dalla raccolta dal donatore.

Lo spostamento del fluido biologico attraverso il sistema pu? essere effettuato mantenendo un differenziale di pressione tra un contenitore, come una sacca di raccolta o un contenitore originale, e la destinazione del fluido biologico (per esempio, un contenitore quale una sacca satellite o un contenitore ricevente), onde avere la desiderata direzione del flusso di fluido. Il differenziale di pressione pu? essere controllato automaticamente, per esempio come parte di un sistema di trattamento automatico del sangue, oppure pu? essere controllato manualmente. Mezzi esemplificativi per stabilire questo differenziale di pressione possono essere la gravit?, l'applicazione di pressione al recipiente di raccolta o la camera di gocciolamento (per esempio, a mano o mediante schiacciamento), oppure ponendo il contenitore satellite in una camera che stabilisce un differenziale di pressione tra il contenitore satellite ed il contenitore di raccolta (per esempio una camera a vuoto). Pure inclusi nello scopo dell'invenzione possono essere sistemi che generano una pressione sostanzialmente eguale nello intero recipiente di raccolta. Resta inteso che la presente invenzione non deve essere limitata dal mezzo per creare il differenziale di pressione .

In generale, una unit? di fluido biologico (per esempio sangue intero di un donatore) pu? essere raccolta direttamente in un contenitore come una borsa di raccolta, e trattata in modo da formare uno strato supernatante ed uno strato di sedimento del fluido biologico,tipicamente mediante centrifugazione, in modo da ottenere un primo strato supernatante ed un primo strato di sedimento, con un materiale di zona di transizione che interessa l'interfaccia tra gli strati supernatante e di sedimento. Il materiale della zona di transizione pu? essere separato dal primo strato supernatante e dal primo strato di sedimento e trattato, tipicamente mediante centrifugazione, per formare un secondo strato supernatante ed un secondo strato di sedimento. Il secondo strato supernatante pu? essere separato dal secondo strato di sedimento.

Le fasi di lavorazione e le condizioni possono essere regolate come ? noto a coloro che conoscono queste tecniche. Se il fluido biologico viene separato in un supernatante ed uno strato di sedimento mediante centri fugazione, i parametri di centrifugazione possono essere ottimizzati come ? noto per coloro che conoscono queste tecniche. Una tipica centrifugazione ad alta velocit? pu? richiedere circa 3.000 g e fino a circa 4800 g per un tempo compreso tra circa 5 e circa 10 minuti. Una tipica centrifugazione a gravit? ridotta pu? richiedere circa 280 g e fino a circa 1500 g per un tempo compreso tra circa 5 e circa 15 minuti. Resta inteso che la presente invenzione non deve essere considerata limitata ai parametri di centrifugazione.

Secondo una realizzazione preferita.il fluido biologico pu? essere centrifugato con una elevata forza G (centrifugazione veloce) per formare il primo strato supernatante ed il primo strato di sedimento, come pure il materiale della zona di transizione. Per esempio, il sangue intero pu? essere centrifugato ad alta velocit? per forma-re PPP e uno strato di globuli rossi, con lo stra-to fibrinoso che interessa l'interfaccia tra questi due strati.

Secondo un'altra realizzazi one, il biologico pu? essere centrifugato con una forza' G minore (centrifugazione lenta), per formare il primo strato supernatante ed il primo stato di sedimentazione, come pure il prodotto della zona di transizione. Per esempio, il sangue intero pu? essere centrifugato a bassa velocit? per formare PRP ed uno strato di eritrociti, con lo strato fibrinoso che interessa l'interfaccia tra questi due strati.

Una volta che lo strato supernatante ed il sedimento si separano, e si ? formato il materiale della zona di transizione, gli strati e/oppure il materiale della zona di transizione ver-ranno ulteriormente lavorati.Per esempio,i vari strati e zone possono essere separati l'uno dal-l'altro usando un differenziale di pressione per farli fluire in una direzione desiderata, per esempio dal contenitore di raccolta verso una borsa sateilite.

Il bloccaggio selettivo della borsa di raccolta pu? incrementare l'efficienza della separa-zione. Per esempio.il contenitore pu? essere chiu-so tra il primo strato supernatante (e.g., il PPP o il PRP) e la zona di transizione, e/oppure bloccato tra la prima zona di sedimentazione (per esempio, lo strato di globuli rossi) e la zona di transizione, e i singoli strati e/oppure zone che possono fluire verso borse satelliti separate. Un risultato simile pu? essere ottenuto disponendo selettivamente i condotti rispetto al contenitore di raccolta ed ai suoi contenuti.

I condotti possono essere bloccati selettivamente per impedire o permettere il flusso verse una borsa satel lite.Per esempio, l'operatore puc monitorare visivamente la borsa ed arrestare il flusso bloccando il condotto quando il singole strato o zona ? stato espresso in modo sufficiente. In altre realizzazioni, si pu? usare un sistema automatizzato di trattamento del sangue, peelaborare il fluido biologico. II sistema automatico di trattamento del sangue comprende un dispositivo di mon itoraggio, per esempio un sensore o fotocellula, che monitorizza la velocit? c flusso, la pressione e/oppure la densit? ottic: del fluido che deve essere espresso in modo cht il fluido stesso possa essere arrestato all'avvicinarsi di questo tempo. I mezzo per fissare il differenziale di pressione pu? essere orientato in modo da garantire l'espressione di un volarne desiderato di fluido. Resta inteso che la presente invenzione non si deve considerare limitai.

al modo di monitoraggio del flusso.

Il primo strato supernatante ed il primo strato di sedimento possono essere espressi ambedue, lasciando soltanto il materiale della zona di transizione nel contenitore. In un'altra realizzazione,il materiale della zona di transizione pu? essere espresso ad un altro contenitore, preferibilmente dopo aver passato il primo strato supernatante ed il primo strato di sedimento. In alternativa, il materiale della zona di transizione pu? essere espresso con uno strato, per esempio, del primo strato supernatante, e quindi separato.

Resta inteso che la presente invenzione non ? da considerarsi limitata al modo o all'ordine di separazione e/oppure espressione degli strati e/oppure materiale della zona di transizione.

Di preferenza, si lavorano unit? multiple di fluido biologico come pu? essere per esempio sangue intero, in singoli contenitori, e le risultanti unit? multiple di materiale di zona di transizione vengono separate, e quindi combinate, cio? riunite in almeno un contenitore. Il gruppo multiplo di materiale della zona di transizione pu? essere combinato riunito con un qualsias metodo che assicura l?unione di almeno due unit di un fluido biologico. Per esempio, almeno du contenitori, ciascuno. dei quali comprende materia le della zona di transizione, possono essere co legati in serie, per esempio verticalmente, i modo che il materiale della zona di transizion possa essere riunito in un contenitore a valle preferibilmente il contenitore pi? a valle. I alternativa, due o pi? contenitori di material di zona di transizione possono essere simultanea mente e sequenzialmente svuotati direttamene in un singolo contenitore. In un'altra realizza zione, le unit? multiple di materiale della zon di transizione possono esere passate attravera un gruppo di riunione 21 per combinare o riuni? il materiale della zona di transizione in un si golo contenitore, in modo da ricevere o trasfer? re il contenitore 22.

Per esempio, in una realizzazione, come ill. strato nella figura 1, in cui i componenti se? mostrati in una disposizione verticale pretes ta, con i contenitori originali 20 nel punto r alto, lo strato fibrinoso in una pluralit? contenitori 20 passa attraverso i condotti u n grup po di riunione 21 attraverso lo scarico o le giunzioni 50 per ricevere o trasferire il contenitore 22. Appena lo strato fibrinoso fluisce, esso pu? essere contattato da almeno un dispositivo, gruppo o elemento poroso, per esempio un sistema di immissione del gas 30, una camera di gocciolamento 31 o uno scarico per il gas 33, per impedire che il gas raggiunga il contenitore di ricezione, e per massimizzare il recupero dello strato fibrinoso, che ? interposto tra i contenitori originali 20 ed il contenitore ricevente o di trasferimento 22.

Per massimizzare il recupero del materiale della zona di transizione, si pu? introdurre aria o un gas entro il contenitore originale 20 per mezzo di un gruppo di immissione di gas 30 o del gruppo di scarico del gas 33,prefer?bi1mente usando una siringa (non illustrata). Come usata in questa sede, l'espressione aria o gas si riferisce ad ogni fluido gassoso,come aria steri1e,ossigeno,anidride carbonica e simili; resta inteso che l'invenzione non ? da considerarsi limitata dal tipo di gas impiegato. Sebbene il fluido introdotto sia preferibilmente aria ambiente o gas sterile, si possono considerare adatti anche a?cuni fluidi non gassosi. Per esempio, un fluido che sia pi? leggero del fluido biologico e che non reagisca con questo pu? essere compreso nello scopo della presente invenzione.

L'introduzione dei gas nei contenitori originali 20 pu? essere effettuata aprendo un passaggio dall'apertura di immissione del gas 30 o dallo scarico del gas 33 verso un adeguato contenitore originale 20, mentre si chiude il passaggio del fluido verso il contenitore ricevente o di trasferimento 22. Per esempio, le pinze sui condotti che portano al contenitore ricevente o di trasferimento 22 ed a tuttii contenitori 20-1 possono essere chiuse,per cui quando si introduce il gas nel sistema, il gas nel condotto entrer? nel contenitore aperto. In una rea1izzazione preferita a procedimento prevede l'introduzione sequenziale di gas nei contenitori originali 20. Il percorso verso ciascuno dei contenitori originali pu? essere chiuso dopo che il gas ? stato introdotto in quel contenitore.

Il passaggio del flusso dall'immissione del gas 30 o dallo scarico del gas 33 pu? essere chiuso. Si apre quindi il passaggio del flusso al primo contenitore originale 20, e poich? il materiale della zona di transizione passa dal primo contenitore originale 20 e fluisce attraverso il gruppi di riunione 21 verso il contenitore ricevente o di trasferimento 22, esso sposta il gas che si trova davanti alla colonna di materiale della zona di trasferimento in avanzamento; questo gas pu? essere scaricato allontanante dal sistema. Il gas pu? essere allontanato dal sistema attraverso un elemento poroso che si trova nella camera di gocciolamento o nel condotto o, preferibilmente attraverso uno scarico aperto 33 per il gas. Una volta che il gas ? stato scaricato dal sistema, lo scarico del gas pu? essere inattivit? per impedire che altro gas penetri nel sistema. Per esempio, lo scarico del gas pu? essere inattivato chiudendolo manualmente, mediante un tappo o una pinza. Di preferenza, lo scarico del gas comprende un elemento liquofobo e, pi? preferibilmente, sia un elemento liquofobo che un elemento liquofilo, che inattiva automaticamente lo scarico, quando viene inumidito dal materiale della zona di transizione.

Quando il gas che si trova in testa alla colonna del materiale della zona di transizione ? stato scaricato ed il flusso del materiale della zona di transizione si ? arrestato, le pinze presso gli altri contenitori originali vengono aperte preferibilmente in sequenza, in modo che il materiale della zona di transizione proveniente dagli altri contenitori 20 possa passare attraverso il gruppo di riunione 21 verso il contenitore ricevente o di trasferimento 22. La pinza adiacente il contenitore ricevente o di trasferimento 22 viene aperta in modo che il materiale della zona di transizione possa fluire entro il contenitore 22. Di preferenza, la pinza adiacente il contenitore ricevente o di trasferimento 22 viene aperta prima delle pinze adiacenti agli altri contenitori originali.

L'inizio del fluire del materiale della zona di transizione dagli altri contenitori originali sposta pure il gas davanti alle altre unit? di materiale della zona di transizione. Di preferenza questo gas pu? essere raccolto in una camera di gocciolamento 31 interposta tra lo scarico o giunzione 50 ed il contenitore ricevente o di trasferimento 22. Il passaggio del materiale della zona di transizione attraverso una camera di gocciolamento 31 pu? comprendere la raccolta del gas e/oppure il controllo della velocit? di flusso del materiale della zona di transizione. Tipicamente, la camera di gocciolamento 31 ? invertita fino a quando lo strato fibrinoso riempie la camera stessa, ed a questo punto la camera viene capovolta alla sua posizione normale, e lo strato fibrinoso fluisce verso il contenitore ricevente o di trasferimento 22.

Quando il materiale della zona di transizione passa attraverso il sistema, il gas che si trova davanti al materiale della zona di transizione pu? essere scaricato attraverso lo scarico del gas 33 come precedentemente descritto. Il materiale della zona di transizione riunito viene poi raccolto nel contenitore ricevente o di trasferimento 22 e, secondo l'invenzione, l'introduzione di aria o gas nel contenitore ricevente viene eliminata o minimizzata, in modo che il materiale della zona di transizione viene raccolto senza raccog liere aria.

Per massimizzare il recupero del materiale della zona di transizione, si pu? introdurre gas dietro il materiale della zona di transizione contenuto nel sistema. Il gas che era inizialmente introdotto nei contenitori originali 20 attraverso una delle prese di immissione di gas 30 o attraverso lo scarico di gas 33, seguir? il materiale della zona di transizione mentre questo fluisce attraverso i condotti. Questo aumenta il recupero di materiale della zona di transizione, poich? il gas che segue il materiale della zona di transizione allontana il fluido dai condotti. Inoltre, dopo che il materiale della zona di transizione ? passato attraverso il gruppo di riunione entro il contenitore ricevente o di trasfer imento 22 ed i contenitori originali 20 si sono svuotati, si pu? introdurre gas dietro il materiale della zona di transizione trattenuto attraverso l'apertura di immissione del gas 30. Altro materiale della zona di transizione pu? cos? essere raccolto nel contenitore ricevente o di trasferimento 22.

Quando il recupero del materiale della zona di transizione ? stato completato, il contenitore ricevente o di trasferimento 22 pu? essere chiuso e separato dal sisterna,senza l introduzione di aria al suo interno. Di preferenza, il contenitore ricevente o di trasferimento viene sigillato a caldo, sebbene siano anche adatti altri metodi di chiusura stagna.

Al materiale della zona di transizione si possono aggiungere fluidi, come plasma, una soluzione conservante, una soluzione di additivo o simili, durante o dopo il passaggio di questo materiale nel contenitore ricevente o di trasferimento 22. Singole unit? di materiale della zona di transizione,o materiale della zona di transizione che ? stato combinato in un contenitore con un altro metodo, possono essere lavorate in modo analogo.

Se lo si desidera, le unit? singole o riunite di materiale della zona di transizione possono essere conservate per un periodo di tempo adatto. Il materiale della zona di transizione viene quindi separato in uno strato supernatante ed uno strato di sedimento, tipicamente mediante centrifugazione, per formare un secondo strato di sedimento ed un secondo strato supernatante.

Per esempio, in una reaiizzazione preferita., le unit? singole o riunite di strato fibrinoso possono essere centrifugate per formare uno strato supernatante ed uno di sedimento come indicato pi? sopra. In una reaiizzazione pi? preferita, lo strato fibrinoso pu? essere centrifugato con una V bassa (centrifugazione leggera) per ottenere uno strato supernatante ricco in piastrine ed uno strato di sedimento di globuli rossi.

Come ? stato descritto con riferimento alle figure, la lavorazione del secondo strato supernatante ,tipi caniente uno strato contenente piastrine e preferibilmente uno strato ricco di piastrine, pu? comprendere il creare un differenziale di pressione per passare lo strato contenente piastrine dal contenitore ricevente o e di trasferimento 22 (figure 1 e 3) o dal contenitore 90 (figura 2) attraverso almeno un mezzo poroso comprendente almeno uno tra un mezzo barriera per eritrociti, un mezzo barriera per eritrociti e di impoverimento dei leucociti ed un mezzo di impoverimento dei leucociti (non illustrati). Di preferenza,il trattamento del secondo strato supernatante comprende la separazione dello strato supernatante contenente piastrine dallo strato di sedimento contenente eritrociti, passando lo strato supernatante attraverso un mezzo barriera per eritrociti oppure un mezzo barriera per eritrociti e di impoverimento di leucociti, fino a quando il flusso attraverso il mezzo rallenta o si arresta. Nelle realizzazioni illustrate nelle figure, 1 fluido ricco in piastrine pu? essere raccolto in un contenitore addizionale 80, quale/ una borsa sateilite.

In altre realizzazioni, una serpentina per la raccolta e l'allontanamento del gas pu? essere incorporata nel sistema ed utilizzata per separare il gas dal fluido contenente le piastrine, mantenendo il sistema chiuso e sterile. Per esempio, come descritto con riferimento alla figura 3, un fluido contenente piastrine pu? essere fatto passare da un contenitore quale il contenitore di ricezione o trasferimento 22 o dal contenitore 90 attraverso almeno un sistema barriera per gli eritrociti, un sistema barriera per gli eritrociti e di impoverimento dei leucociti ed un sistema di impoverimento dei leucociti, e raccolto in un contenitore satellite 80 insieme al gas spostato dal fluido contenente le piastrine. Il gas pu? poi essere separato espellendolo dal contenitore satellite 80 entro una serpentina di raccolta ed allontanamento del gas 300.

Se lo si desidera, il contenitore per la raccolta e l'allontanamento del gas nella serpen-tina per la raccolta e l'allontanamento del gas, pu? essere mantenuto al di sopra del livello del contenitore satellite 80, per raccogliere il flui-do contenente le piastrine nel contenitore satellite 80. Una volta che il fluido ? stato raccolto, si pu? abbassare il contenitore per la raccolta e lo spostamento del gas.

Il contenitore satellite 80 pu? essere schiacciato per espellere il gas in un recipiente per la raccolta e l'allontanamento del gas (chiamato nel seguito borsa del gas) della serpentina di raccolta e allontamento del gas 300. Per esempio, il contenitore satellite 80 pu? essere schiacciato per far passare il gas nella borsa del gas della serpentina di raccolta ed allontanamento del gas fino a quando il fluido contenente le piastrine raggiunge la borsa del gas. Una volta che il gas ? stato espulso dal contenitore satellite 80, il percorso del flusso tra il contenitore satellite 80 e la borsa del gas nella serpentina di raccolta ed allontanamento del gas 300, viene preferibilmente chiuso.

In un'altra realizzazione secondo l'invenzione, il gas pu? essere espulso ed una quantit? desiderata di fluido contenente le piastrine pu? essere isolata per campionamento dal fluido contenente le piastrine nel contenitore satellite 80, raccogliendo nella serpentina per la raccolta e l'allontanamento del gas 300. In questa realizzazione del1'invenzi one, il gas pu? essere espulso nel modo suddescri tto, insieme ad una certa quantit? di fluido contenente piastrine, che pu? essere raccolto nella borsa del gas della serpentina di raccolta ed allontanamento del gas.

Dopo che ? stata raccolta la quantit? desiderata di fluido contenente le piastrine per il campionamento, nella borsa del gas,il gas pu? essere separato dal campione schiacciando la borsa per far passare il gas in un'altra parte del sistema, per esempio attraverso il mezzo barriera del liquido della serpentina di raccolta ed allontanamento del gas entro il contenitore di ricezione o trasf erimento 22. In una realizzazione preferita, la serpentina per la raccolta e l'allontanamento del gas comprende un dispositivo di controllo del flusso disposto presso il mezzo barriera per il liquido 150 e la connessione della serpentina al condotto a monte del gruppo filtrante. Il dispositivo di controllo del flusso pu? essere controllato manualmente (per esempio con una pinza) o automaticamente (per esempio con una valvola di controllo).

Il campione contenente piastrine pu? essere separato o isolato in qualsiasi momento adatto.

Per esempio, il campione pu? essere separato prima della conservazione, o dopo, per esempio appena prima della somministrazione.

Secondo un altro aspetto, la serpentina per la raccolta e l'allontanamento del gas pu? esse re usata insieme ad un mezzo di impover imento dei leucociti per aumentare il recupero dello strato contenente piastrine. Per esempio, un gruppo di impoverimento dei leucociti pu? essere interposto tra i contenitori quale il contenitore di ricezione o trasferimento 22 ed il contenitore satellite 80, ed il gas pu? essere fatto passare entro la borsa del gas ed attraverso il mezzo barriera per il liquido come precedentemente descritto. Il gas pu? quindi essere fatto passare sia dopo spostamento entro il contenitore di ricezione o trasferimento 22, o direttamente dopo il passaggio attraverso il mezzo a barriera per il liquido, entro il condotto a monte del gruppo filtrante, che pu? spostare o allontanare parte del fluido contenente le piastrine trattenuto nel gruppo filtrante e/oppure nella conduttura a valle del gruppo filtrante. Questo fluido spostato contenente le piastrine pu? essere recupera rato nel contenitore satellite 80 senza raccogl re gas, poich? il gruppo filtrante non si svuota completamente .

Per la presente invenzione sono previste ancora altre reaiizzazioni . Per esempio, con riferimento al gruppo di riunione, lo scarico del gas pu? essere usato come immissione del gas e, inversamente, la presa di immissione del gas pu? essere usata come scarico, in fasi diverse della lavorazione del materiale della zona di transizione. Per esempio,il gas pu? essere introdotto e scaricato usando una apertura di immissione ed una apertura di scarico nel modo precedentemente descritto, ed il materiale della zona di transizione viene raccolto in un contenitore di ricezione o trasferimento. Si pu? quindi introdurre gas attraverso lo scarico, in modo da poter raccogliere il materiale della zona di transizione che rimane nei contenitori e/oppure ? trattenuto nel gruppo filtrante. Naturalmente,i l gas pu? anche essere introdotto attraverso la presa di immissione, con un effetto simile.

In un?altra real izzazione, il gruppo a collettore 200 pu? comprendere tutti i componenti illustrati nella figura 1, ad eccezione della presa di immissione del gas 30 e dello scarico del gas 33. In questa realizzazione, la camera di gocciolamento 31 comprende preferibilmente un elemento poroso per scaricare il gas. Inoltre, un'altra realizzazione della presente invenzione pu? comprendere soltante un singolo elemento poroso interposto tra lo scarico del gruppo di riunione 50 ed il contenitore ricevente o di trasferimento 22, che lascia passare il flusso del gas. In ciascuna di queste realizzazioni, al gas che si trova davanti al flusso di materiale della zona di transizione ed alle sacche di gas che si spostano lungo il condotto insieme al flusso di materiale della zona di transizione si pu? impedire l'entrata nel contenitore ricevente o di trasferimento. Inoltre, il gas pu? essere introdotto dietro il flusso di materiale della zona di transizione per massimizzare il recupero di detto materiale.

In altre realizzazioni, il gruppo a collettore 200 pu? comprendere tutti i componenti illustrati nella figura 1, ad eccezione dell'entrata del gas 30 o dello scarico del gas 33, ed il gruppo a collettore 200 pu? comprendere per esempio una serpentina per la raccolta e l'allontanamento del gas, in comunicazione con il condotto 60 a valle della giunzione o scarico 50 ed monte del contenitore ricevente o di trasferimento 22. In queste reaiizzazioni , il gas pu? entrare nel contenitore ricevente o di trasferimento, ed il gas pu? essere spostato da detto contenitore e raccolto nella serpentina di raccolta e allontanamento del gas.

La presente invenzione pu? provvedere un ambiente chiuso e sterile. Preferibi lmente, la frazione o frazioni recuperate devono essere vitali e funzionali, cio? circolare normalmente nel flusso sanguigno del paziente dopo la trasfuzione. Quindi, una volta che si ? completata la lavorazione, la frazione o le frazioni desiderate del fluido biologico debbono essere raccolte in condizioni in cui si pu? mantenere, se desiderato un adeguato ambiente di conservazione. Di preferenza, la frazione o le frazioni sono in un contenitore quale il contenitore satellite, e vengono separate dal sistema dopo che il contenitore ? stato sig illato,senza l'introduzione di contaminanti, parti colarmente batteri, nel sistema. Di preferenza, questo contenitore pu? essere sigillato a caldo, ma sono anche adatti altri metodi di chiusura stagna.

Esempio 1

Si preparano sei unit? di strato fibrinoso che vengono riunite versando ciascuna unit? in un contenitore di dimensioni opportune. Il volume totale dello strato fibrinoso riunito ? di 345 mi.

Il mezzo filtrante e l'alloggiamento (che costituisce un gruppo filtrante) vengono prodotti secondo il brevetto US N. 5.100.564 e la pubblicazione internazionale N. W0 91/04088. Il gruppo filtrante comprende un mezzo preformato a barriera per gli eritrociti e di impoverimento dei leucociti avente una CWST di 93-97 dynes/cm, un diametro di circa 6,4 cm, un'area di flusso di circa 32 cm , uno spessore di circa 0,152 cm, ed una densit? di circa 0,31 g/cc, prodotto con fibre PBT aventi diametri di circa 2,1 micrometri. L'entrata del gruppo viene collegata allo scarico del contenitore satellite contenente lo strato fibrinoso riunito, e lo scarico del gruppo viene collegato ad un contenitore vuoto atto a venire a contatto con le piastrine per formare un siste-ma.

Il sistema viene centrifugato per ottenere uno strato di sedimento di globuli rossi ed uno strato supernatante di fluido contenente piastrine.

Il sistema viene introdotto con cura in uno spremitore convenzionale senza disturbare lo strato depositato di globuli rossi, e si spreme lo strato supernatante.

Dopo sei minuti lo strato di globuli rossi viene a contatto del mezzo filtrante ed il flusso si interrompe. Il fluido contenente piastrine ottenuto risulta fortemente impoverito di leucociti, cio? ne ha meno di 6,8 x 10 /unit?, mentre risulta ricco di piastrine, cio? 3,2x10<11 >/unit?.

Esempio 2

Un gruppo di riunione usato per realizzare questo Esempio pu? utilizzare sei unit? di strato fibrinoso in contenitori singoli da 60 mi, un contenitore di trasferimento da 600 mi ed un contenitore satellite da 600 mi, disposti in modo che generalmente corrisponde a quello illustrato nella figura 1. Il gruppo a collettore deve essere montato generalmente in verticale, con il gruppo di riunione ed il condotto per il contenitore di trasferimento che hanno una lunghezza totale di circa 2-4 pollici.

L'entrata e lo scarico del gas, secondo l a pubblicazione internazionale N. WO 91/17809, possono essere posizionati come nella figura 1.

Il gruppo filtrante pu? essere come illustra-to nell'Esempi o 1.

Le pinze sui condotti adiacenti i sei contenitori di unit? singola di strato fibrinoso.come pure la pinza sul condotto tra il contenitore di trasferimento e lo scarico del gas, debbono essere chiuse.

Lo scarico del gas deve essere tappato e si pu? usare una siringa da 60 cc per introdurre aria attraverso l'entrata del gas ed entro i contenitori originali. Il pistone della .siringa deve essere ritratto fino all'indicazione "60 cc", quindi si apre l'entrata del gas e vi si collega la siringa. La pinza del primo contenitore di unit? singola, che contiene una unit? di strato fibrinoso, deve essere aperta, e lo stantuffo della siringa spinto in avanti per 5-10 cc, introducendo in tal modo aria entro il primo contenitore unitario. La pinza del primo contenitore viene quindi chiusa. La stessa procedura deve essere seguita con gli altri cinque contenitori unitari .

Si rimuove la siringa, si richiude l'entrata del gas e si apre lo scarico del gas. La pinza sul primo contenitore deve essere aperta per permettere allo strato fibrinoso di fluire dal primo contenitore, e la camera di gocciolamento deve essere capovolta e schiacciata per riempirla con 10 strato fibrinoso. Si ritorna la camera di gocciolamento alla sua posizione normale, e lo strato fibrinoso deve fluire attraverso la camera verso 11 contenitore di trasferimento. L'aria pu? essere scaricata attraverso l'uscita del gas aperta, fino a quando lo strato fibrinoso viene a contatto delia membrana liquofoba nello scarico del gas.

A questo punto il flusso si arresta, e la pinza sul condotto che conduce al contenitore di trasferimento deve essere aperta, per cui lo strato fibrinoso pu? fluide entro il contenitore di trasferimento.

Questa procedura deve essere ripetuta per ciascuno degli altri cinque contenitori. Il flusso si arrester? quando i sei contenitori di strato fibrinoso sono stati scaricati.

A questo punto rimane un residuo di strato fibrinoso nella camera di sgocciolamento e nei condotti a valle dell'entrata del gas. Per recupepare parte dello strato fibrinoso trattenuto, si deve aprire l'entrata del gas, ed i condotti dello strato fibrinoso scoleranno entro il contenitori di trasferimento.

I condotti che portano al contenitore di trasferimento debbono essere chiusi e saldati a caldo, ed il contenitore di trasferimento viene separato dal gruppo di riunione per l'ulteriore lavorazione. Il contenitore di trasferimento pu? essere posto in una centrifuga e centrifugato per ottenere una frazione di sedimento di globuli rossi, ed una frazione supernatante contenente piastrine.

Un gruppo filtrante pu? essere collegato ad un contenitore satellite, ed una serpentina per la raccolta e l'allontanamento del gas pu? essere collegata a monte ed a valle del gruppo filtrante. La serpentina per la raccolta e l'allontanamento del gas pu? essere collegata impiegando connettori a Y a monte ed a valle del gruppo filtrante. La serpentina per la raccolta e l allontanamento del gas comprende un contenitore da 100 cc per la raccolta e l'allontanamento gas ed un mezzo barriera per il liquido. Il mez; barriera per il liquido ? disposto entro la serperntina per la raccolta e l allontamento del gas in un condotto tra il connettore a Y a monte del gruppo filtrante ed il contenitore per la raccolta e l'allontanamento del gas. Il mezzo barriera per il liquido comprende una membrana liquofoba prodotta secondo la pubblicazione internazionale N. WO 91/17809.

Vi pu? essere una pinza sul condotto tra la zona a monte del gruppo filtrante ed il connettore (definita nel seguita pinza A), come pure vi pu? essere una pinza sul condotto tra il connettore a monte del gruppo filtrante ed il mezzo barriera per il liquido (definita nel seguito pinza B). Vi pu? pure essere una pinza sul condotto tra il contenitore per la raccolta e l'allontanamento del gas ed il connettore a valle del gruppo filtrante (chiamata nel seguito pinza C), come pure una pinza sulla zona a valle del condotto tra il gruppo filtrante ed il contenitore satellite. Questa pinza (chiamata nel seguito pinza D) pu? essere disposta a valle del connettore che collega la parte a valle del gruppo filtrante alla serpentina di raccolta ed allontanamento del gas.

Le pinze A, B, C e D debbono essere chiuse, ed il contenitore di trasferimento deve essere collegato al condotto a monte del gruppo filtran -te. Il gruppo filtrante pu? essere posizionato verticalmente. Le pinze A e 0 possono essere aperte, ed il fluido supernatante contenente piastrine deve essere spremuto dal contenitore di trasferimento attraverso il gruppo filtrante entro il contenitore satellite, fino a quando il flusso attraverso il gruppo si arresta automaticamente, separando la frazione contenente le piastrine dalla frazione contenente il sedimento di eritrociti. La pinza A deve essere chiusa.

La borsa per la raccolta e l'allontanamento del gas pu? essere sollevata al di sopra del livello del contenitore di trasferimento e la pinza C deve essere aperta. Sollevando il contenitore di raccolta del gas si pu? inviare altro fluido contenente piastrine nel condotto a valle del gruppo fi l trante,per scolare nel contenitore satellite. Una volta che il fluido ? stato scolato, la pinza C pu? essere chiusa ed il contenitore per la raccolta e l'allontanamento del gas pu? essere abbassato. A questo punto il contenitore satellite deve essere schiacciato fino a quando i l gas si raccoglie verso la parte superiore del contenitore stesso. Si apre quindi la pinza C mentre si continua a comprimere il contenitore satellite per espellere il gas entro il contenitore per la raccolta e l'allontanamento del gas. Quando il gas ? stato espulso, la pinza C deve essere chiusa.

Si pu? quindi chiudere e saldare a caldo il condotto dal lato di scarico del gruppo filtrante, ed il contenitore contenente le piastrine pu? essere rimosso.

Si prevede che oltre il 90% delle piastrine passino attraverso il mezzo poroso, e che oltre al 99,9% dei leucociti vengano eliminati.

Esempio 3

Un gruppo comprendente un contenitore di trasferi mento contenente 6 unit? di strato fibrinoso riunite, un gruppo filtrante, un serpentino per la raccolta e l'allontanamento del gas (con un recipiente per la raccolta e l'allontanamento del gas ed un mezzo barriera per il liquido), ed un contenitore satellite, possono avere la configurazione rappresentata nell'Esempio 2. Le pinze A, B, C e D possono essere disposte come in detto esempio. Lo strato fibrinoso pu? essere centrifugato nel contenitore di trasferimento e lo strato supernatante contenente le piastrine viene fatto passare attraverso il gruppo filtrante, mentre il gas del contenitore satellite pu? essere espulso come descritto nell'Esempio 2 Tuttavia, prima di espellere il gas dal contenitore satellite, il contenitore deve essere agitato per miscelare le piastrine, e quando il gas ? stato espulso da detto contenitore, questo deve essere compresso fino a quando le piastrine entrano nel contenitore per la raccolta e l'allontanamento del gas. Quando il contenitore per la raccolta e l'allontanamento del gas contiene una quantit? adeguata di piastrine, detto contenitore pu? essere sollevato fino a quando le piastrine scolano indietro entro il contenitore satellite Questo trasf erimento tra il contenitore satellite ed il contenitore per la raccolta e l'allontanamento del gas deve essere ripetuto altre due vol-te. Quindi il contenitore satellite pu? essere compresso per espellere il gas ed una quantit? desiderata di piastrine per il campionamento entro il contenitore per la raccolta e l'allontanamento del gas. La pinza B (a valle del gruppo filtrante e la pinza C (sul condotto tra il contenitore per la raccolta e l'allontamento del gas ed il contenitore satellite), debbono essere chiuse.

Il contenitore per la raccolta e l'allontanamento del gas deve essere compresso fino a quando il gas si raccoglie verso la parte superiore e la pinza B, che si trova sulla serpentina per la raccolta e l'allontanamento di gas sul condotto tra il connettore a monte del gruppo filtrante ed il mezzo a barriera per il liquido,pu? quindi essere aperta, e l'aria contenuta nel contenitore per la raccolta e l'allontanamento del gas pu? essere espulsa dal contenitore attraverso il mezzo a barriera per il liquido entro il contenitore di trasferimento. La pinza B pu? quindi essere chiusa, ed il tubo dal lato di scarico del gruppo fi1trante ,come pure il condotto che porta da contenitore per la raccolta e l'allontanamento del gas al contenitore di trasferimento, debbon essere chiuse e sigillate a caldo, ed i contenito re satellite e di raccolta ed allontanamento de gas, ciascuno contenente piastrine, debbono essere rimossi. Se lo si desidera,il fluido contenent piastrine nel contenitore per la raccolta e l'al lontanamento del gas pu? essere campionato senz compromettere la sterilit?, nel contenitore satel lite.

Sebbene l'invenzione sia stata descritta in alcuni dettagli per mezzo di illustr azioni ed esempi, si comprender? che all?invenzione ? possibile apportare modificazioni e soluzioni alternative, e non ? limitata alle specifiche realizzazioni descritte. Si comprender? pure che queste specifiche rea! izzazi oni non intendono limitare l'invenzione ma, al contrario, l'intenzione ? di coprire tutte le modifiche, equi valenti, ed alternative che rientrano nello spirito e nello scopo dell'invenzione stessa.

Claims

RIVENDICAZIONI 1. - Procedimento per il trattamento di un fluido biologico comprendente: separare un materiale della zona di transizione dal fluido biologico; trattare il materiale della zona di transizione in modo da ottenere uno strato supernatante che comprende piastrine ed uno strato di sedimento che comprende globuli rossi; e separare lo strato supernatanto dallo strato di sedimento passando lo strato supernatante attraverso il mezzo poroso. 2 . - Procedimento secondo la rivendicazione 1, in cui la separazione del materiale della zona di transizione dal fluido biologico comprende inoltre la separazione del materiale della zona di transizione da ciascuna di almeno due unit? di fluido biologico, ed il trasferimento del materiale della zona di transizione ad un contenitore di ricezione per riunire i materiali della zona di transizione. 3. - Procedimento secondo la rivendicazione 2, in cui il passaggio del materiale della zona di transizione al contenitore di ricezione comprende il passaggio del materiale della zona di transizione attraverso un gruppo di riunione per il contenitore di ricezione. 4. - Procedimento per trattare un materiale di zona di transizione, comprendente: riunire il materiale della zona di transizione ; trattare il materiale riunito della zona di transizione in modo da formare uno strato supernatante che comprende piastrine ed uno strato di sedimento che comprende globuli rossi; e separare lo strato supernatante dallo strato di sedimento passando lo strato supernatante attraverso un mezzo poroso. 5. - Procedimento per trattare un materiale di zona di transizione, comprendente: far passare il materiale della zona di transizione che si trova in una pluralit? di contenitori originali attraverso un gruppo di riunione portandolo ad un contenitore di ricezione; trattare il materiale della zona di transizione riunito in modo da ottenere uno strato supernatante che comprende piastrine ed uno strato di sedimento che comprende globuli rossi; e separare lo strato supernatante dallo strato di sedimento facendo passare lo strato supernatante attraverso un mezzo poroso di barrier gli eritrociti. 6. - Procedimento secondo ognuna dell vendicazioni 1, 4 o 5, in cui la separazione strato supernatante dallo strato di sed comprende il passaggio dello strato supern attraverso il mezzo poroso fino a quando il so attraverso detto mezzo si arresta. 7. - Procedimento secondo la rivendic 6, in cui il passaggio dello strato supern attraverso il mezzo poroso comprende il far re lo strato supernatante fino a quando i g rosso vengono a contatto del mezzo poroso ed stano il flusso. 8. - Procedimento secondo ognuna dell vendicazioni 1, 4 o 5, in cui il passaggio strato supernatante attraverso il mezzo comprende il rallentamento del flusso dello to supernatante attraverso il mezzo poroso. 9. - Procedimento secondo ognuna delle dicazioni 1, 4 o 5, comprendente inoltre la razione del gas facendo passare detto gas una serpentina di raccolta ed allontanament gas. 10. - Procedimento per trattare un mat di zona di transizione, comprendente: introdurre gas entro una pluralit? di contenitori originali di materiale di zona di transizione ; far passare il materiale di zona di transi-zione dai contenitori originali, attraverso un gruppo di riunione, ad un contenitore di ricezione ; scaricare il gas in testa al materiale della zona di transizione; introdurre gas dopo il materiale della zona di transizione per massimizzare il recupero del materiale della zona di transizione; trattare il materiale di zona di transizione riunito in modo da ottenere uno strato supernatante che comprende piastrine ed uno strato di sedimento che comprende globuli rossi;e separare lo strato supernatante dallo starto di sedimento facendo passare lo strato superna-tante attraverso un mezzo poroso fino a quando il flusso attraverso il mezzo rallenta o si arresta . 11. - Sistema per trattare materiale di zona di transizione comprendente: un gruppo di riunione; e un filtro barriera per gli eritrociti in comunicazione di fluido con il gruppo di unione. 12. - Sistema secondo la rivendicazione 11, comprendente inoltre: un contenitore di ricezione interposto tra il gruppo di unione ed il filtro barriera per gli eritrociti. 13. - Gruppo per il trattamento di un fluido biologico, comprendente: un filtro barriera per gli eritrociti comprendente una estremit? a monte ed una estremit? a valle; una serpentina per la raccolta e l'allontanamento del gas avente una prima estremit? in comunicazione di fluido con l'estremit? a monte del filtro barriera per gli eritrociti ed una seconda estremit? in comunicazione di fluido con l'estremit? a valle del filtro barriera per gli eritroci ti. 14. - Metodo secondo una qualunque delle riven dicazioni 1, 4 o 5 comprendente inoltre le fasi di separare piastrine dallo strato supernatante separa to facendo passare gas e piastrine in un anello raccolta e spostamento del gas