JP2000210380A - Blood-coagulation inhibitor and blood drawing container housing the same - Google Patents
Blood-coagulation inhibitor and blood drawing container housing the sameInfo
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Abstract
Description
【０００１】[0001]
【発明の属する技術分野】本発明は、新規な血液凝固阻
止剤及びそれを収納した採血容器に関する。さらに詳し
くは、本発明は、血液の凝固を効果的に防止し、特に各
種診断に使用される血液検査用に採取した血液の凝固防
止に好適に用いられる血液凝固阻止剤、及びこのものを
収納させてなる採血容器に関するものである。The present invention relates to a novel anticoagulant and a blood collection container containing the same. More specifically, the present invention provides an anticoagulant which effectively prevents blood coagulation, and is particularly preferably used for preventing coagulation of blood collected for a blood test used for various diagnoses, and contains the same. The present invention relates to a blood collection container obtained by the method.
【０００２】[0002]
【従来の技術】近年、病態の診断、治療効果の判定を行
う上で、臨床検査は不可欠な要素となっている。この臨
床検査は、生体機能の検査が目的で、（１）生体内を対
象とし、直接的な生体情報を調べる検査（生理検査）
と、（２）血液、尿、組織などの生体構成成分の一部を
採取して、生体内変化を調べる検査（検体検査）に大別
することができる。そして、後者の検体検査において
は、特に血液検査の果たす役割は大きい。この血液検査
は、（１）電解質、pHなどを調べる化学項目検査、
（２）血液中の化学成分の測定や、免疫反応を用いた感
染症、血液型、がん関連抗原などの測定、さらには細
菌、ウイルス、病理細胞の検査などを行う生化学項目検
査及び（３）血液細胞の形態と数及び凝固機能などを調
べる血液項目検査に大別することができる。このような
血液検査を行うためには、まず被検者の血液を血液検査
用容器に採取するが、この場合、採取された血液が、検
査に供する前に凝固しないような処置を講じることが肝
要である。血液は、血管内を循環している間は流動性で
あるが、いったん血管外に取出されると、例えば試験管
の中に移されるとやがて流動性を失う。これは、血漿中
のフィブリノーゲーンが繊維状のフィブリンに転換し、
フィブリン網を形成し、血液全体がゲル状になり、凝固
するためである。このような血液凝固は、血漿中の血液
凝固因子XII因子が陰性荷電を有する固相などの表面
（例えばガラスなど）に接触することによって始まる。
すなわち、XII因子は表面に吸着されると活性化XII因子
（XIIa）になり、これがカルシウムイオンを介在して、
各凝固因子に作用し、最終的にトロンビンを生成させ、
このトロンビンがフィブリノーゲンを限定分解してフィ
ブリンにし、さらにフィブリンは、トロンビンとカルシ
ウムイオンにより活性化された血液凝固因子XIII（XIII
a）によって架橋され、フィブリン網を形成して、血液
が凝固する。採取した血液のこのような凝固を防止する
ために、これまで様々なものが開発され、用いられてき
た。例えばエチレンジアミン四酢酸金属塩、クエン酸ナ
トリウム、ヘパリンナトリウム、合成ヒルジン、さらに
は重量平均分子量３０００以上のスルホン化ジエン系重
合体又はその塩（特開平８−４３３７７号公報）など
が、採血用の血液凝固阻止剤として知られている。しか
しながら、これらの血液凝固阻止剤は、前記３項目（化
学項目、生化学項目、血液項目）の中の一部の項目の検
査には適用できるものの、他の項目の検査には適用でき
なかったり、高価であったり、あるいは性能が安定でな
く、また、不充分であるなどの問題を有し、必ずしも充
分に満足しうるものではなかった。2. Description of the Related Art In recent years, clinical tests have become an indispensable element in diagnosing a disease state and judging a therapeutic effect. The purpose of this clinical test is to test biological functions. (1) A test (physiological test) for directly examining biological information in a living body
And (2) a test (specimen test) in which a part of a biological component such as blood, urine, or tissue is collected and biotransformation is examined. In the latter sample test, the blood test plays a particularly large role. This blood test consists of (1) chemical tests to check electrolytes, pH, etc.
(2) Measurement of chemical components in blood, measurement of infectious diseases, blood types, cancer-related antigens, and the like using immune reactions, and biochemical item tests for testing bacteria, viruses, pathological cells, and ( 3) It can be broadly divided into blood item tests for examining the morphology and number of blood cells, coagulation function, and the like. In order to perform such a blood test, first, the blood of the subject is collected in a blood test container, and in this case, measures must be taken to prevent the collected blood from coagulating before being subjected to the test. It is important. Blood is fluid while circulating in blood vessels, but once it is removed from blood vessels, it loses fluidity, for example, once it is transferred into a test tube. This is because fibrinogen in plasma is converted into fibrin fibrin,
This is because a fibrin network is formed, and the whole blood becomes gel-like and coagulates. Such blood coagulation is initiated when blood coagulation factor XII in plasma contacts a surface such as a solid phase having a negative charge (eg, glass).
That, Factor XII became the adsorbed activated factor XII (XII a) on the surface, which is interposed calcium ions,
Acts on each clotting factor, eventually producing thrombin,
This thrombin degrades fibrinogen to fibrin to a limited extent, and the fibrin is converted to blood coagulation factor XIII (XIII) activated by thrombin and calcium ions.
Crosslinked by a ) to form a fibrin web and blood to coagulate. In order to prevent such coagulation of collected blood, various things have been developed and used so far. For example, ethylenediaminetetraacetic acid metal salt, sodium citrate, sodium heparin, synthetic hirudin, and a sulfonated diene polymer having a weight average molecular weight of 3,000 or more or a salt thereof (Japanese Patent Application Laid-Open No. 8-43377) may be used for blood collection. Known as anticoagulants. However, these anticoagulants can be applied to the examination of some of the three items (chemical items, biochemical items, and blood items), but cannot be applied to the tests of other items. However, they have problems such as being expensive, having unstable performance and being inadequate, and have not always been satisfactory.
【０００３】[0003]
【発明が解決しようとする課題】本発明は、このような
事情のもとで、化学項目、生化学項目及び血液項目のす
べての項目の血液検査に適用でき、万能である上、血液
凝固の防止効果に優れ、かつその効果が安定であり、し
かも安価な血液凝固阻止剤、及びそれを収納した採血容
器を提供することを目的としてなされたものである。SUMMARY OF THE INVENTION Under such circumstances, the present invention can be applied to blood tests of all chemical, biochemical, and blood items, and is versatile. An object of the present invention is to provide an inexpensive blood coagulation inhibitor having an excellent prevention effect, a stable effect, and an inexpensive blood collection container containing the same.
【０００４】[0004]
【課題を解決するための手段】本発明者は、前記の好ま
しい性質を有する血液凝固阻止剤及びそれを収納した採
血容器を開発すべく鋭意研究を重ねた結果、マグネシウ
ムの無機酸塩が、意外にも血液凝固防止効果に優れ、万
能血液凝固阻止剤としてその目的に適合しうることを見
い出し、この知見に基づいて本発明を完成するに至っ
た。すなわち、本発明は、（１）マグネシウムの無機酸
塩を有効成分とする血液凝固阻止剤、（２）マグネシウ
ムの無機酸塩が硫酸マグネシウム又はその含水塩である
第（１）項記載の血液凝固阻止剤、（３）血液検査用に
用いられる第（１）又は（２）項記載の血液凝固阻止
剤、（４）容器内にマグネシウムの無機酸塩を収納させ
てなる採血容器、及び（５）マグネシウムの無機酸塩が
硫酸マグネシウム又はその含水塩である第（４）項記載
の採血容器、を提供するものである。The present inventors have made intensive studies to develop a blood coagulation inhibitor having the above-mentioned preferable properties and a blood collection container containing the same, and as a result, the inorganic acid salt of magnesium was unexpectedly obtained. In addition, they have found that they are excellent in blood coagulation prevention effect and can be adapted to the purpose as a universal blood coagulation inhibitor, and have completed the present invention based on this finding. That is, the present invention provides (1) a blood coagulation inhibitor comprising an inorganic salt of magnesium as an active ingredient, and (2) a blood coagulation according to (1), wherein the inorganic salt of magnesium is magnesium sulfate or a hydrate thereof. (3) the blood coagulation inhibitor according to (1) or (2), which is used for a blood test; (4) a blood collection container in which a magnesium inorganic acid salt is contained in a container; (4) The blood collection container according to (4), wherein the inorganic acid salt of magnesium is magnesium sulfate or a hydrate thereof.
【０００５】[0005]
【発明の実施の形態】本発明の血液凝固阻止剤は、マグ
ネシウムを有効成分とするものであって、特に血液検査
用に採取した血液の凝固防止に対して、有効である。マ
グネシウムの無機酸塩としては、例えば硫酸マグネシウ
ム、硫酸マグネシウムアンモニウム、硫酸マグネシウム
カリウム、硫酸マグネシウムナトリウム、硫酸マグネシ
ウムカルシウム、硫酸マグネシウムカルシウムカリウ
ム、塩化マグネシウム、塩化マグネシウムアンモニウ
ム、塩化マグネシウムカリウム、塩化マグネシウムナト
リウム、硝酸マグネシウム、リン酸マグネシウム、リン
酸マグネシウムアンモニウム、リン酸水素マグネシウ
ム、オルトホウ酸マグネシウム、メタホウ酸マグネシウ
ム、炭酸マグネシウム、炭酸マグネシウムアンモニウ
ム、炭酸マグネシウムカルシウム及びこれらの含水塩な
どを挙げることができる。これらは単独で用いてもよい
し、２種以上を組合わせて用いてもよいが、性能及び価
格などの面から、特に硫酸マグネシウム及びその含水塩
が好適である。マグネシウムの無機酸塩における血液凝
固防止作用の機序については必ずしも明確ではないが、
フィブリノーゲンを限定分解してフィブリンに転換する
作用を有するトロンビンの生成、及びフィブリンの架橋
によるフィブリン網の形成に関与する血液中のカルシウ
ムイオンが、マグネシウムイオンに置換されるためと推
察される。本発明の血液凝固阻止剤においては、前記マ
グネシウムの無機酸塩と共に、本発明の目的が損なわれ
ない範囲で、所望により、従来公知の血液凝固防止作用
を有する物質、例えばエチレンジアミン四酢酸金属塩、
クエン酸ナトリウム、ヘパリンナトリウム、合成ヒルジ
ン、スルホン化ジエン系重合体又はその塩、さらにはそ
の他のトロンビンインヒビターなどを、適宜用いること
ができる。ここで、その他のトロンビンインヒビターと
しては、例えばメチル酸ガベキサート、ナファモスタッ
トメシレート、（２Ｒ,４Ｒ）−４−メチル−１−［Ｎ2
−（３−メチル−１,２,３,４−テトラヒドロ−８−キ
ノリンスルホニル）−Ｌ−アルギニル］−２−ピペリジ
ンカルボン酸モノヒドレートなどが挙げられる。BEST MODE FOR CARRYING OUT THE INVENTION The anticoagulant of the present invention contains magnesium as an active ingredient and is particularly effective in preventing coagulation of blood collected for a blood test. Examples of the inorganic acid salts of magnesium include magnesium sulfate, magnesium ammonium sulfate, magnesium potassium sulfate, magnesium sodium sulfate, magnesium calcium sulfate, magnesium calcium potassium sulfate, magnesium chloride, magnesium ammonium chloride, magnesium potassium chloride, magnesium magnesium sodium chloride, and magnesium nitrate. , Magnesium phosphate, magnesium ammonium phosphate, magnesium hydrogen phosphate, magnesium orthoborate, magnesium metaborate, magnesium carbonate, magnesium ammonium carbonate, magnesium calcium carbonate and hydrated salts thereof. These may be used alone or in combination of two or more, but from the viewpoints of performance, cost, etc., magnesium sulfate and its hydrate are particularly preferred. Although the mechanism of the anticoagulant effect of inorganic salts of magnesium is not always clear,
It is presumed that calcium ions in blood involved in the generation of thrombin having an action of converting fibrinogen to fibrin by limited decomposition and fibrin cross-linking by fibrin cross-linking are replaced by magnesium ions. In the anticoagulant of the present invention, together with the inorganic acid salt of magnesium, as long as the object of the present invention is not impaired, if desired, a substance having a conventionally known anticoagulant action, for example, metal salt of ethylenediaminetetraacetic acid,
Sodium citrate, sodium heparin, synthetic hirudin, a sulfonated diene-based polymer or a salt thereof, and other thrombin inhibitors can be used as appropriate. Here, as other thrombin inhibitors, for example, gabexate methylate, nafamostat mesylate, (2R, 4R) -4-methyl-1- [N 2
-(3-methyl-1,2,3,4-tetrahydro-8-quinolinsulfonyl) -L-arginyl] -2-piperidinecarboxylic acid monohydrate and the like.
【０００６】本発明の血液凝固阻止剤の血液に対する添
加量は、マグネシウムの無機酸塩の種類及び所望する血
液凝固防止時間により、適宜選定されるが、通常は１〜
５０mg／ml、好ましくは２〜４０mg／mlの範囲である。
この添加量が１mg／ml未満では血液凝固の防止効果が充
分に発揮されないおそれがあるし、５０mg／mlを超える
とその量の割には効果の向上が認められず、むしろ、血
液検査に悪影響を与えるおそれがある。本発明の血液凝
固阻止剤の形態としては特に制限はなく、粉末状であっ
てもよいし、水性媒体に含有させてなる水性溶液状又は
水性懸濁液状であってもよい。水性媒体としては、血液
検査を妨害しない水性媒体、好ましくは生理食塩水を用
いることができる。次に、本発明の採血容器について説
明する。本発明の採血容器は、前記マグネシウムの無機
酸塩を容器内に収納してなるものであって、該マグネシ
ウムの無機酸塩は粉末、水性溶液又は水性懸濁液として
用いられる。また、このマグネシウムの無機酸塩は１種
用いてもよいし、２種以上を組み合わせて用いてもよい
が、前述のように特に硫酸マグネシウム及びその含水塩
が好適である。さらに、本発明の目的が損なわれない範
囲で、前述のように従来公知の血液凝固防止作用を有す
る物質を適宜併用してもよい。本発明の採血容器は、血
液検査のために血液を採取し、または保存するための全
血用、血清分離用、糖分析用等の採血管、採血瓶、採血
バッグ等の容器を意味し、容器自体の形状は特に限定さ
れないが、該容器としては真空採血管が最適である。こ
の真空採血管は、通常、ホルダー、採血針等の付属機器
と組合せた真空採血システムとして実用に供される。こ
れらの採血容器の素材としては、熱可塑性樹脂、熱硬化
性樹脂又は変性天然樹脂などの樹脂、あるいはガラスな
どを用いることができる。[0006] The amount of the anticoagulant of the present invention added to blood is appropriately selected depending on the kind of the inorganic acid salt of magnesium and the desired anticoagulation time.
It is in the range of 50 mg / ml, preferably 2-40 mg / ml.
If the added amount is less than 1 mg / ml, the effect of preventing blood coagulation may not be sufficiently exhibited, and if it exceeds 50 mg / ml, no improvement in the effect is recognized for the amount, but rather an adverse effect on the blood test. May be given. The form of the anticoagulant of the present invention is not particularly limited, and may be in the form of a powder, an aqueous solution or an aqueous suspension contained in an aqueous medium. As the aqueous medium, an aqueous medium that does not disturb the blood test, preferably, physiological saline can be used. Next, the blood collection container of the present invention will be described. The blood collection container of the present invention contains the above inorganic salt of magnesium in a container, and the inorganic salt of magnesium is used as a powder, an aqueous solution or an aqueous suspension. Further, one kind of this inorganic acid salt of magnesium may be used, or two or more kinds thereof may be used in combination. As described above, magnesium sulfate and a hydrate thereof are particularly preferable as described above. Furthermore, as long as the object of the present invention is not impaired, a conventionally known substance having an anticoagulant effect as described above may be appropriately used in combination. The blood collection container of the present invention refers to a container such as a blood collection tube, a blood collection bottle, a blood collection bag, etc., for collecting blood for blood test, or for whole blood for preservation, serum separation, sugar analysis and the like. Although the shape of the container itself is not particularly limited, a vacuum blood collection tube is optimal as the container. This vacuum blood collection tube is usually put to practical use as a vacuum blood collection system combined with accessory devices such as a holder and a blood collection needle. As a material for these blood collection containers, a resin such as a thermoplastic resin, a thermosetting resin or a modified natural resin, or glass can be used.
【０００７】熱可塑性樹脂としては、例えば、ポリエチ
レン、ポリプロピレン、ポリ−４−メチルペンテン−
１、ポリスチレン、ポリメチルメタクリレート、ポリ塩
化ビニル、ポリエチレンテレフタレート、ポリブチレン
テレフタレート、スチレン−アクリロニトリル共重合
体、スチレン−ブタジエン共重合体、スチレン−イソプ
レン共重合体、スチレン−無水マレイン酸共重合体、ス
チレン−アクリル酸共重合体、スチレン−メチルメタク
リレート共重合体、エチレン−プロピレン共重合体、エ
チレン−アクリル酸共重合体、エチレン−アクリル酸エ
ステル共重合体、ポリビニルアルコールアセタール化
物、ポリビニルアルコールブチラール化物等が、熱硬化
性樹脂としては、例えば、不飽和ポリエステル樹脂、エ
ポキシ樹脂、エポキシ−アクリレート樹脂等が、変性天
然樹脂としては、酢酸セルロース、プロピオン酸セルロ
ース、酢酸酪酸セルロース、エチルセルロース、エチル
キチン等が用いられる。ガラスとしては、例えば、ソー
ダ石灰ガラス、リンケイ酸ガラス、ホウケイ酸ガラス等
のケイ酸塩ガラスや石英ガラス等が好ましく用いられ
る。採血容器の容量は、該容器の使用目的に応じて適宜
選定されるが、通常２〜２０mlの範囲である。本発明に
おいては、採血容器に収納されるマグネシウムの無機酸
塩の量は、採取する血液１ml当たり、通常３〜５０mg、
好ましくは３.１５〜３１.５mgである。本発明の採血容
器は、例えばブチルゴム製のキャップが施され、内部が
真空にされた真空タイプのものであってもよいし、非真
空タイプのものであってもよいが、前記したように真空
タイプのものが好ましい。また、マグネシウムの無機酸
塩を収納する前又は後に、必要に応じて滅菌処理するこ
とができる。As the thermoplastic resin, for example, polyethylene, polypropylene, poly-4-methylpentene-
1, polystyrene, polymethyl methacrylate, polyvinyl chloride, polyethylene terephthalate, polybutylene terephthalate, styrene-acrylonitrile copolymer, styrene-butadiene copolymer, styrene-isoprene copolymer, styrene-maleic anhydride copolymer, styrene -Acrylic acid copolymer, styrene-methyl methacrylate copolymer, ethylene-propylene copolymer, ethylene-acrylic acid copolymer, ethylene-acrylic acid ester copolymer, polyvinyl alcohol acetalized product, polyvinyl alcohol butyralized product, etc. As the thermosetting resin, for example, unsaturated polyester resin, epoxy resin, epoxy-acrylate resin, etc., and as the modified natural resin, cellulose acetate, cellulose propionate, cellulose acetate butyrate Vinegar, ethyl cellulose, Echirukichin or the like is used. As the glass, for example, silicate glass such as soda-lime glass, phosphosilicate glass, and borosilicate glass, and quartz glass are preferably used. The capacity of the blood collection container is appropriately selected depending on the purpose of use of the container, but is usually in the range of 2 to 20 ml. In the present invention, the amount of the inorganic acid salt of magnesium stored in the blood collection container is usually 3 to 50 mg per 1 ml of blood to be collected,
Preferably, it is 3.15 to 31.5 mg. The blood collection container of the present invention may be a vacuum type in which a cap made of, for example, butyl rubber is provided and the inside is evacuated, or may be a non-vacuum type. Types are preferred. Before or after storing the inorganic acid salt of magnesium, sterilization treatment can be performed if necessary.
【０００８】[0008]
【実施例】次に、本発明を実施例によりさらに詳細に説
明するが、本発明は、これらの例によってなんら限定さ
れるものではない。局方硫酸マグネシウム（ＭｇＳＯ4
・７Ｈ2Ｏ）結晶粉末にて、６.３％等張溶液（局方硫酸
マグネシウム結晶６.３mgを１ml生理食塩水にて溶解し
た溶液）を作成し、栄研化学(株)製チューブ３号（ポリ
エチレン試験管）にこの溶液を添加しておき、５０、１
００、２００、３００、５００μｌ／ml全血（局方硫酸
マグネシウム３.１５、６.３、１２.６、１８.９、２
５.２、３１.５mg／ml全血に相当）となる様に、採取し
た血液と混和し、充分に採り混ぜたのち静置し、血液が
凝固し始めるまでの時間を、目視観察により測定した。
同様に比較実験として硝酸マグネシウム［Ｍｇ(ＮＯ3)2
・６Ｈ2Ｏ、和光純薬工業(株)］、硫酸亜鉛［ＺｎＳＯ4
・７Ｈ2Ｏ、米国シグマ社］による血液凝固の時間を測
定した。それらの結果を第１表に示す。EXAMPLES Next, the present invention will be described in more detail with reference to examples, but the present invention is not limited to these examples. Pharmaceutical magnesium sulfate (MgSO 4
7.3% isotonic solution (solution prepared by dissolving 6.3 mg of magnesium sulfate crystal in 1 ml of physiological saline) with 7H 2 O) crystal powder, and a tube 3 manufactured by Eiken Chemical Co., Ltd. No. (polyethylene test tube), add this solution to 50, 1
00, 200, 300, 500 μl / ml whole blood (magnesium sulfate 3.15, 6.3, 12.6, 18.9, 2
5.2, 31.5 mg / ml corresponding to whole blood), mix with the collected blood, mix well, allow to stand, and measure the time until blood starts to coagulate by visual observation did.
Similarly, as a comparative experiment, magnesium nitrate [Mg (NO 3 ) 2
6H 2 O, Wako Pure Chemical Industries, Ltd.], zinc sulfate [ZnSO 4
7H 2 O, Sigma, USA]. Table 1 shows the results.
【０００９】[0009]
【表１】 [Table 1]
【００１０】また、全血算測定の為の本血液の安定性に
ついて、例えば局方硫酸マグネシウム１２.６mg／ml血
液の時、８時間まで全血算が安定している。また、血液
凝固検査（ＰＴ、ＡＰＴＴ）の利用について、同様に局
方硫酸マグネシウム１２.６mg／ml血液の時、ＰＴ３０
〜５０秒、ＡＰＴＴ約３分で測定が可能である。[0010] Regarding the stability of the present blood for the whole blood count measurement, for example, when the blood is 12.6 mg / ml of magnesium sulfate in the local area, the whole blood count is stable up to 8 hours. In addition, regarding the use of a blood coagulation test (PT, APTT), the same applies to the case of 12.6 mg / ml blood of local magnesium sulfate.
Measurement is possible in about 50 seconds and APTT about 3 minutes.
【００１１】[0011]
【発明の効果】本発明の血液凝固阻止剤は、化学項目、
生化学項目及び血液項目のすべての項目の血液検査に適
用でき、万能である上、血液凝固の防止効果に優れ、か
つその効果が安定で、しかも安価であり、実用的価値が
高い。The anticoagulant of the present invention has chemical items,
It is applicable to blood tests of all biochemical and blood items, is versatile, has an excellent blood coagulation prevention effect, is stable in its effect, is inexpensive, and has high practical value.
Claims (5)
血液凝固阻止剤。An anticoagulant comprising an inorganic salt of magnesium as an active ingredient.
ム又はその含水塩である請求項１記載の血液凝固阻止
剤。2. The anticoagulant according to claim 1, wherein the inorganic acid salt of magnesium is magnesium sulfate or a hydrate thereof.
載の血液凝固阻止剤。3. The anticoagulant according to claim 1, which is used for a blood test.
せてなる採血容器。4. A blood collection container in which a magnesium salt of magnesium is stored in the container.
ム又はその含水塩である請求項４記載の採血容器。5. The blood collection container according to claim 4, wherein the inorganic acid salt of magnesium is magnesium sulfate or a hydrate thereof.
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