JP2000247965A

JP2000247965A - 共役リノール酸エステル、その製造法及びその利用

Info

Publication number: JP2000247965A
Application number: JP11052638A
Authority: JP
Inventors: Kazunao Kanbashi; 一尚芳; Hiroaki Konishi; 寛昭小西; Mototake Murakami; 元威村上
Original assignee: Snow Brand Milk Products Co Ltd
Current assignee: Snow Brand Milk Products Co Ltd
Priority date: 1999-03-01
Filing date: 1999-03-01
Publication date: 2000-09-12
Anticipated expiration: 2019-03-01
Also published as: JP3483197B2

Abstract

(57)【要約】【課題】新規な共役リノール酸エステルの提供。【解決手段】 R₁-COO-R₂ で示される共役リノール酸エ
ステル。R₁はC₁₇H₃₂で表され共役二重結合１個を有する
脂肪族炭化水素基を、R₂は水酸基又はリン脂質、ステロ
ール、糖類、有機酸等のエステル結合を１個以上有する
有機化合物残基を示す。共役リノール酸を前記水酸基又
はエステル結合を１個以上有する有機化合物とエステル
化あるいはエステル交換して製造される。共役リノール
酸よりも高い抗酸化作用を有し、抗酸化剤あるいは飲食
品の抗酸化に用いられる。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【発明の属する技術分野】本発明は、新規な共役リノー
ル酸エステル、その製造法、該共役リノール酸エステル
を有効成分とする抗酸化剤、及び該共役リノール酸エス
テルを添加して脂質成分の酸化抑制作用を賦与した飲食
品に関する。本発明の共役リノール酸エステルは、飲
料、デザート、乳製品、調理食品、菓子類、パン類、麺
類等の一般的な加工食品からソース、ドレッシング等の
調味料や、健康食品、サプリメント食品まで幅広い分野
の飲食品に利用できる。本発明の共役リノール酸エステ
ルを飲食品に添加することにより、飲食品の保存中の脂
質成分の酸化抑制作用を賦与することができ、また、飲
食品摂取後に生体内で起こる脂質成分の酸化をも抑制す
ることができる。

【０００２】

【従来の技術】飲食品の抗酸化成分及び抗酸化剤につい
ては従来より広範囲に研究が進められてきた。ここで、
飲食品の抗酸化とは、飲食品中に存在する脂質成分の酸
化を抑制することを意味する。飲食品中の脂質成分の酸
化を抑制する目的で飲食品の原材料や食品添加物等とし
て使用されている代表的な抗酸化成分及び抗酸化剤とし
ては、トコフェロール（ビタミンＥ）、アスコルビン酸
（ビタミンＣ）、アスコルビン酸パルミテート、ポリフ
ェノール、クエン酸等が挙げられる。また、タンパク質
やアミノ酸と糖質とから生成される褐変物質（メイラー
ド反応生成物）にも抗酸化活性があることが知られてい
る。

【０００３】上記の抗酸化成分及び抗酸化剤は、酸化抑
制対象の飲食品の種類に応じて、適宜選択して使用され
ている。しかしながら、その効果は充分であるとは言え
ず、多くの飲食品においては、遮光容器を用いて光の透
過を低下させたり、窒素ガス等の不活性ガスで容器内の
空気を置換する等の手段により酸化抑制を試みている現
状にある。このような飲食品の抗酸化技術は、飲食品の
賞味期限に影響することから、食品産業上の大きな課題
である。

【０００４】飲食品において流通保存中に生成する酸化
生成物は、飲食品と共に摂取されてヒト生体内の細胞に
損傷を与え、老化を促進したり、悪性腫瘍を引き起こす
原因になると考えられている。また、飲食品を摂取した
後にヒト生体内で生じる脂質成分の酸化生成物も人体を
構成する細胞に対し同様の悪影響を及ぼすと考えられて
いる。従って、流通保存中の飲食品中の脂質成分の酸化
を抑制し、酸化生成物の生体内への摂取を防ぐことと同
様に、飲食品の摂取後に生体内で起こる脂質成分の酸化
を抑制し、細胞の損傷を防ぐことが重要とされ、このよ
うな効果を有する飲食品用の抗酸化剤が望まれている。

【０００５】一方、共役リノール酸は主にチーズや肉加
工製品中に微量に存在し、抗癌性や抗酸化活性を有する
と報告されており、食品成分として有用な物質として期
待されている。共役リノール酸については、飲食品にお
ける存在や含量等について研究が進められているが、飲
食品中での存在形態についてはほとんど研究が進められ
ておらず、わずかに生体内では遊離状態で存在すること
やトリグリセリド画分及びリン脂質画分に存在すること
が明らかにされているにすぎない。

【０００６】脂肪酸の共役化については古くから研究が
進められており、ウシの反芻胃中で微生物的に共役脂肪
酸が生成することや、油脂の代表的な加工工程である水
添反応の中間反応生成物として共役脂肪酸がわずかに生
成することがわかっている。また、光化学反応や単なる
加熱によってもわずかに脂肪酸の共役化が進行すること
がわかっているが、その生成物の主成分が共役リノール
酸であるか否かについては明確にされていない。

【０００７】

【発明が解決しようとする課題】上記の現状に鑑み、本
発明は、共役リノール酸を水酸基又はエステル結合を１
個以上有する有機化合物とエステル化又はエステル交換
することにより得られ、より高い抗酸化活性を有する共
役リノール酸エステルを提供することを課題とする。ま
た、本発明は、該共役リノール酸エステルの製造法、該
共役リノール酸エステルを有効成分とする抗酸化剤、及
び該共役リノール酸エステルを添加して脂質成分の酸化
抑制作用を賦与した飲食品を提供することを課題とす
る。

【０００８】

【課題を解決するための手段】本発明者らは、上記のよ
うに抗酸化活性を有する共役リノール酸を、水酸基又は
エステル結合を１個以上有する有機化合物とエステル化
又はエステル交換することにより、共役リノール酸より
も更に優れた抗酸化活性を有する共役リノール酸エステ
ルに変換できることを見出し、本発明を完成した。

【０００９】以下、本発明を詳細に説明する。本発明に
おいて提供される共役リノール酸エステルは、共役リノ
ール酸と、水酸基又はエステル結合を１個以上有する有
機化合物とがエステル結合した次の一般式で示される新
規な共役リノール酸エステルである。

【００１０】

【化２】R₁-COO-R₂ [I] （式中、R₁は、共役二重結合を１個有し、C₁₇H₃₂で表さ
れる脂肪族炭化水素基であり、R₂は水酸基又はエステル
結合を１個以上有する有機化合物残基である。）

【００１１】また、本発明は、共役リノール酸と、水酸
基又はエステル結合を１個有する有機化合物とをエステ
ル化又はエステル交換することよりなる前記共役リノー
ル酸エステルの製造法に関する。さらに、本発明は前記
共役リノール酸エステルを有効成分とする抗酸化剤に関
する。またさらに、本発明は前記共役リノール酸エステ
ルを添加して脂質成分の酸化抑制作用を賦与した飲食品
に関する。

【００１２】

【発明の実施の形態】本発明で用いられる共役リノール
酸の起源は特に限定されず、例えば、植物油由来のリノ
ール酸をニッケル等の金属やアルカリ等を触媒として用
いて共役化したもの、乳及び乳製品より精製したもの、
肉及び肉製品より精製したものを使用することができ
る。本発明において共役リノール酸とエステル化又はエ
ステル交換するために用いられる水酸基又はエステル結
合を１個以上有する有機化合物としては、例えば、ホス
ファチジルエタノールアミン、ホスファチジルコリン、
ホスファチジルセリン、ホスファチジルイノシトール、
ホスファチジン酸、ホスファチジルグリセロール、スフ
ィンゴミエリン等のリン脂質、コレステロール、β−シ
トステロール等のステロール、ショ糖、乳糖等の糖類、
アスコルビン酸等の有機酸を挙げることができる。

【００１３】本発明においてエステル化又はエステル交
換に用いられる触媒の種類は特に限定されず、例えば、
ナトリウムメトキシドや水酸化カリウム等のアルカリ触
媒、塩酸や硫酸等の酸触媒、リパーゼやホスホリパーゼ
等のエステルの加水分解反応を触媒する酵素等を触媒と
して用いることができるが、触媒として上記のエステル
の加水分解反応を触媒する酵素を用いて加水分解反応の
逆反応を利用すると、その反応中に新たな共役化が起き
ず、反応の制御が容易となるので好ましい。また、エス
テルの加水分解反応を触媒する酵素としては反応効率の
点からリパーゼ又はホスホリパーゼが好ましく、例え
ば、ブタ膵臓起源のリパーゼや、Mucor 属、Candida
属、Rhizopus属等のカビ起源のリパーゼ等を用いること
が好ましい。触媒としてリパーゼを用いる場合は、固定
化又は化学的に脂肪酸修飾したものを用いるとリパーゼ
の安定性が高まり、特に好ましい。ここで、リパーゼを
固定化する方法としては、シリカゲル、珪藻土、イオン
交換樹脂等の担体に、共有結合、イオン結合、物理的吸
着等によって酵素を結合させる担体結合法、グルタルア
ルデヒド等の２個又はそれ以上の官能基をもつ試薬を介
して酵素と担体を結合させる架橋法、ゲル格子、半透
膜、リポソーム、中空繊維等に酵素を封じ込める包括法
等が例示できる。また、リパーゼに化学的に脂肪酸を修
飾する方法としては、トリエチルアミン等を触媒とし脂
肪酸クロライドを直接酵素の官能基に結合させる方法、
脂肪酸クロライドからジメチルスルホニオ (ＤＳＰ) と
の活性エステルを調製し穏和な反応で酵素分子のリジン
残基及びＮ−末端に脂肪酸を結合させる方法等が例示で
きる。

【００１４】エステル化又はエステル交換反応は、例え
ば、有機溶媒中又は基質のみの水分が 0.1％以下の微水
系にて、温度を酵素の至適温度に調整し、上記触媒を添
加して、共役リノール酸エステルが生成してくるまで反
応を行えばよい。また、リン酸緩衝液等の適当な緩衝液
中で基質及び触媒を混合攪拌することで共役リノール酸
エステルを生成させることができる。さらに、有機溶媒
と緩衝液を適当な比率で混合した溶液中において基質及
び触媒を混合攪拌して共役リノール酸エステルの生成を
進行させることもできる。

【００１５】エステル化又はエステル交換により得られ
る生成物は基質に比べて極性が低下しているため、例え
ば、シリカゲルカラム、シリカゲル薄層プレート等を用
い、常法にて容易に分画することができ、分画された生
成物を濃縮乾固することにより共役リノール酸エステル
を得ることができる。

【００１６】本発明では、このようにして得られた共役
リノール酸エステルをそのまま粉末の状態で、油脂その
他の溶媒に溶解した状態で、あるいは乳化させた状態
で、抗酸化剤として用いることができる。そして、本発
明の抗酸化剤は、飲食品あるいは飼料に添加したり、生
体に投与される。生体内での酸化抑制に用いる場合は、
カプセル、顆粒、錠剤、乳液、油液等の形状にすればよ
い。生体内での抗酸化剤として用いるときは、成人で１
日２〜50mgを数回に分けて経口投与するとよい。なお、
共役リノール酸エステルには急性毒性はない。

【００１７】さらに、本発明の共役リノール酸エステル
を飲食品に添加して脂質成分の酸化抑制作用を賦与した
飲食品とするには、例えば、食用油、マーガリン、バタ
ーその他の油脂に、共役リノール酸エステルを直接添加
してもよく、また、共役リノール酸エステルを水と混合
して乳化物を調製し、これをソース、ドレッシング、チ
ーズフード、菓子、パン、麺類、飲料、スナック食品等
に添加してもよい。さらに、共役リノール酸エステルを
ゼラチン等を用いてカプセル化し、このカプセルをサプ
リメント食品として用いたり、飲料、菓子、ガム、キャ
ンディー等に添加してもよい。添加量は飲食品中の油脂
含量によって多少変動するが、飲食品の油脂部の５〜80
％となるように添加するとよい。このようにすると常温
乃至冷蔵庫中での脂質成分の酸化を抑制することができ
る。

【００１８】以下に実施例を挙げて本発明を更に詳しく
説明する。

【実施例１】水飽和ｎ−ヘキサン１ml中にジパルミトイ
ルホスファチジルコリン５mgと共役リノール酸20mgを溶
解し、Mucor miehei起源のリパーゼを珪藻土に吸着し調
製した固定化リパーゼ (NOVO社製）10mgを加え、反応温
度40℃で48時間、エステル交換反応を行った。反応終了
後、濾過により固定化リパーゼと反応液とを分離し、反
応液をＯＤＳカラムに供給した。そして、クロロホルム
／メタノール／水の混合溶媒を用いて分画し、遊離脂肪
酸画分、ジパルミトイルホスファチジルコリン画分、１
−コンジュケイテッドリノレイル２−パルミトイルホス
ファチジルコリン・１−パルミトイル２−コンジュケイ
テッドリノレイルホスファチジルコリン混合画分、ジコ
ンジュケイテッドリノレイルホスファチジルコリン画分
を得た。なお、反応で生成したエステルの各画分につい
ては、(1) 常法 (３フッ化ホウ素−メタノール法）に従
ってメチルエステル化して、目的成分に結合している脂
肪酸組成をガスクロマトグラフィーにて測定し、また、
(2) ホスホリパーゼＡ２を反応させてリン脂質の２位に
結合している脂肪酸を遊離させ、１位のみに脂肪酸が結
合しているリゾリン脂質を調製し、このリゾリン脂質を
常法に従ってメチルエステル化して、目的成分の１位に
結合している脂肪酸組成をガスクロマトグラフィーにて
測定した。そして、(1) と(2) の測定結果を比較するこ
とで、各画分に含まれるエステルの結合様式を決定し
た。上記で得られたジコンジュケイテッドリノレイルホ
スファチジルコリン画分について、成分に結合している
脂肪酸組成をガスクロマトグラフィーにて測定した結
果、共役リノール酸含量が99％以上であった。

【００１９】

【実施例２】共役リノール酸に対して塩化チオニルを５
当量添加し、加熱還流した後、減圧濃縮して共役リノー
ル酸クロライドを得た。10％ＤＳＰ及び0.05％トリエチ
ルアミンのエーテル溶液を調製し、氷温下で1/3 当量の
共役リノール酸クロライドを徐々に添加し、次いで減圧
濃縮して、共役リノール酸ＤＳＰエステルを得た。この
共役リノール酸ＤＳＰエステルを市販のRhizopus delem
ar起源リパーゼに対して25当量加え、４℃にて24時間反
応を行った。反応終了後、透析によって未反応物を除去
した後、凍結乾燥して、共役リノール酸修飾リパーゼの
乾燥物を得た。次に、水飽和ｎ−ヘキサン10ml中にコレ
ステロール 100mg及び共役リノール酸100mg を溶解し、
上記で得られた共役リノール酸修飾リパーゼ10mgを加
え、37℃で24時間、エステル合成反応を行った。反応終
了後、反応液をシリカゲルカラムに供給し、クロロホル
ム／メタノール／水の混合溶媒を用いて分画し、コレス
テロール共役リノール酸エステル画分を得た。反応で生
成したエステル画分は、図１に示すように、シリカゲル
薄層プレートを用いたクロマトグラフィー（ＴＬＣ、展
開溶媒：ヘキサン／エーテル／酢酸＝80/30/1 、発色：
5 ％硫酸エタノール) によって、原料である共役リノー
ル酸及びコレステロールとは分離されており、新規なコ
レステロール共役リノール酸エステルであることが確か
められた。上記で得られたコレステロール共役リノール
酸エステル画分について、常法（水酸化カリウム−メタ
ノール法）に従ってメチルエステル化し、成分に結合し
ている脂肪酸組成をガスクロマトグラフィーにて測定し
た結果、共役リノール酸含量が98％以上であった。

【００２０】

【実施例３】0.05M リン酸緩衝液(pH7.0)1mlに、微細に
粉砕した乳糖粉末100mg を分散させ、さらに共役リノー
ル酸100mg を加えた酢酸エチル１mlと混合し、実施例２
で調製した共役リノール酸修飾リパーゼ10mgを加え、37
℃で24時間、反応を行った。反応終了後、反応液をシリ
カゲルカラムに供給し、クロロホルム／メタノール／水
の混合溶媒を用いて分画し、ラクトース共役リノール酸
エステル画分を得た。反応で生成したエステル画分は、
図２に示すように、ＴＬＣ（展開溶媒：クロロホルム／
メタノール／水＝60/35/8 、発色：オルシノール試薬)
によって、原料である共役リノール酸及びラクトースと
は分離されており、新規なラクトース共役リノール酸エ
ステルであることが確かめられた。なお、図２は、ヨウ
素により、共役リノール酸を確認（点線）した後、オル
シノール試薬により発色させたものである。上記で得ら
れたラクトース共役リノール酸エステル画分について、
常法（３フッ化ホウ素−メタノール法）に従ってメチル
エステル化し、成分に結合している脂肪酸組成をガスク
ロマトグラフィーにて測定した結果、共役リノール酸含
量が98％以上であった。

【００２１】

【実施例４】0.05M リン酸緩衝液(pH7.0)1mlにアスコル
ビン酸100mg を分散させ、さらに共役リノール酸 100mg
を加えた酢酸エチル1ml と混合し、実施例２で調製した
共役リノール酸修飾リパーゼ10mgを加え、37℃で24時
間、反応を行った。反応終了後、反応液をシリカゲルカ
ラムに供給し、クロロホルム／メタノール／水の混合溶
媒を用いて分画し、アスコルビン酸共役リノール酸エス
テル画分を得た。反応で生成したエステル画分は、図３
に示すように、ＴＬＣ（展開溶媒：クロロホルム／メタ
ノール／水＝60／30／1 、発色: ５％硫酸エタノール)
によって、原料である共役リノール酸及びアスコルビン
酸とは分離されており、新規なアスコルビン酸共役リノ
ール酸エステルであることが確かめられた。上記で得ら
れたアスコルビン酸共役リノール酸エステル画分につい
て、常法（水酸化カリウム−メタノール法）に従ってメ
チルエステル化し、成分に結合している脂肪酸組成をガ
スクロマトグラフィーにて測定した結果、共役リノール
酸含量が95％以上であった。

【００２２】

【実施例５】イソオクタン2ml と水8ml の混合液中にコ
レステロール100mg と共役リノール酸 100mgを溶解し、
Lipase MY （Candida cylindracea 起源、Meito 社製）
25mgを加え、反応温度37℃で６時間攪拌し、エステル交
換反応を行った。反応終了後、濾過によりLipase MY と
反応液とを分離した。そして、反応液をシリカゲルカラ
ムに供給し、ヘキサン／ジエチルエーテル／酢酸の混合
溶媒を用いて分画し、コレステロール共役リノール酸エ
ステル画分65mgを得た。反応で生成したエステル画分
は、実施例２と同様に、ＴＬＣによって、原料である共
役リノール酸及びコレステロールとは分離されており、
新規なコレステロール共役リノール酸エステルであるこ
とが確かめられた。上記で得られたコレステロール共役
リノール酸エステル画分について、常法（水酸化カリウ
ム−メタノール法）に従ってメチルエステル化し、成分
に結合している脂肪酸組成をガスクロマトグラフィーに
て測定した結果、共役リノール酸含量が98％以上であっ
た。

【００２３】

【実施例６】イソオクタン2ml と水8ml の混合液中にβ
−シトステロール100mg と共役リノール酸100mg を溶解
し、Lipase MY (Candida cylindracea起源、Meito 社
製）25mgを加え、反応温度37℃で６時間攪拌し、エステ
ル交換反応を行った。反応終了後、濾過によりLipase M
Y と反応液とを分離した。反応液をシリカゲルカラムに
供給し、ヘキサン／ジエチルエーテル／酢酸の混合溶媒
を用いて分画し、β−シトステロール共役リノール酸エ
ステル画分54mgを得た。反応で生成したエステル画分
は、図４に示すように、ＴＬＣによって、原料である共
役リノール酸及びβ−シトステロールとは分離されてお
り、新規なβ−シトステロール共役リノール酸エステル
であることが確かめられた。上記で得られたβ−シトス
テロール共役リノール酸エステル画分について、常法
（水酸化カリウム−メタノール法）に従ってメチルエス
テル化し、成分に結合している脂肪酸組成をガスクロマ
トグラフィーにて測定した結果、共役リノール酸含量が
98％以上であった。

【００２４】

【実施例７】濃硫酸50ml中にアスコルビン酸2.8gと共役
リノール酸5.6gを混合し、30℃で１時間攪拌した。25℃
で24時間放置した後、反応液を300gの氷中に混合し、す
ばやく攪拌した。この反応液をジエチルエーテル500ml
で抽出し、ジエチルエーテル抽出液を飽和食塩水で洗浄
した。ジエチルエーテル抽出液を蒸発させ、得られた固
形物をヘキサン 400mlで３回抽出し、残った不溶性物を
乾燥後、石油エーテルで抽出し、石油エーテルを蒸発さ
せてアスコルビン酸共役リノール酸エステル画分を得
た。反応で生成したエステル画分は、実施例４と同様
に、ＴＬＣによって、原料である共役リノール酸及びア
スコルビン酸とは分離されており、新規なアスコルビン
酸共役リノール酸エステルであることが確かめられた。
上記で得られたアスコルビン酸共役リノール酸エステル
画分について、常法（水酸化カリウム−メタノール法）
に従ってメチルエステル化し、成分に結合している脂肪
酸組成をガスクロマトグラフィーにて測定した結果、共
役リノール酸含量が95％以上であった。

【００２５】

【実施例８】ｎ−ヘキサン／ジエチルエーテル(1/1) 混
合液10ml中にジパルミトイルホスファチジルエタノール
アミン50mgと共役リノール酸20mgを溶解し、１規定ナト
リウムメトキシド水溶液20mlを加え、攪拌しながら50℃
で２時間、エステル交換反応を行った。反応終了後、反
応液を室温に冷却し、遠心操作によりn-ヘキサン／ジエ
チルエーテル混合液を回収した。この溶液からn-ヘキサ
ン／ジエチルエーテルを減圧蒸留により除去した後、ク
ロロホルム／メタノールの混合溶媒に溶解し、ＯＤＳカ
ラムに供給した。これをクロロホルム／メタノール／水
の混合溶媒を用いて分画し、遊離脂肪酸画分、ジパルミ
トイルホスファチジルエタノールアミン画分、1-コンジ
ュケイテッドリノレイル 2- パルミトイルホスファチジ
ルエタノールアミン・1-パルミトイル 2- コンジュケイ
テッドリノレイルホスファチジルエタノールアミン混合
画分、ジコンジュケイテッドリノレイルホスファチジル
エタノールアミン画分を得た。なお、反応で生成したエ
ステルの各画分については、(1) 常法 (３フッ化ホウ素
−メタノール法）に従ってメチルエステル化して、目的
成分に結合している脂肪酸組成をガスクロマトグラフィ
ーにて測定し、また、(2) ホスホリパーゼＡ２を反応さ
せてリン脂質の２位に結合している脂肪酸を遊離させ、
１位のみに脂肪酸が結合しているリゾリン脂質を調製
し、このリゾリン脂質を常法に従ってメチルエステル化
して、目的成分の１位に結合している脂肪酸組成をガス
クロマトグラフィーにて測定した。そして、(1) と(2)
の測定結果を比較することで、各画分に含まれるエステ
ルの結合様式を決定した。上記で得られたジコンジュケ
イテッドリノレイルホスファチジルエタノールアミン画
分について、成分に結合している脂肪酸組成をガスクロ
マトグラフィーにて測定した結果、共役リノール酸含量
が99％以上であった。

【００２６】

【試験例１】実施例１〜４で得られた共役リノール酸エ
ステルの抗酸化活性を、大澤らの方法（J.Agric.Food C
hem. Vol.35,No.5, p.809-812,1987）により測定した。
すなわち、ウサギ保存血液と等張液(10mM リン酸緩衝液
/152mM NaCl,pH7.4)とを等量混和し、４℃、1500×g(35
00rpm)で20分間遠心分離した（計３回）。洗浄した血球
に低張液 (10mMリン酸緩衝液、pH7.4)をよく混和し、４
℃、20000 ×g(11000rpm) で40分間遠心分離した（計４
回）。ここで得た緩い沈殿部分（ゴースト）を用いて共
役リノール酸エステルの抗酸化活性について検討した。
実施例１〜４で得られた共役リノール酸エステルを10mM
の濃度に調製し、前述の赤血球膜ゴーストと混合し、こ
れに酸化剤としてｔ- ブチルヒドロペルオキシドを1mM
の濃度で加えて酸化反応を行った。次いでＴＢＡ反応を
行い、532nm で吸光度を測定して、酸化生成物を定量し
た。抗酸化活性は、共役リノール酸又は共役リノール酸
エステル無添加のサンプルにおける吸光度を酸化抑制率
０％とし、共役リノール酸又は共役リノール酸エステル
を添加したサンプルにおける吸光度から次式により算出
した。

【００２７】

【数１】酸化抑制率（％）＝[1- (添加サンプルの吸光
度／無添加サンプルの吸光度)]×100 （但し、式中、添加サンプルとは、共役リノール酸又は
共役リノール酸エステルを添加したサンプルを、また、
無添加サンプルとは、共役リノール酸又は共役リノール
酸無添加のサンプルをそれぞれ意味する。）

【００２８】結果を図５に示した。実施例１〜４で得ら
れたいずれの共役リノール酸エステルにおいても、共役
リノール酸に比べて高い酸化抑制率が得られており、共
役リノール酸の抗酸化活性がエステル化することにより
大きく向上していることがわかった。ジコンジュケイテ
ッドリノレイルホスファチジルコリン、アスコルビン酸
共役リノール酸エステルでは、特に顕著な抗酸化活性の
向上が見られた。以上の試験結果から、共役リノール酸
エステルは生体内における脂質成分の酸化を抑制する作
用を有することがわかった。

【００２９】

【試験例２】実施例１〜４で得られた共役リノール酸エ
ステルの抗酸化活性を、食用油脂に添加してランシマッ
ト法により測定した。すなわち、精製大豆油と精製カツ
オ油を重量比で１／１になるように混合し、この混合食
用油脂に対して共役リノール酸エステルをそれぞれ50pp
m の濃度で添加した。なお、対照サンプルとして共役リ
ノール酸エステル無添加の混合食用油脂と、実施例１〜
４で出発物質として用いた共役リノール酸を添加した混
合食用油脂を調製した。これらの混合食用油脂3gをラン
シマット試験に供した。ランシマット測定はアメリカ油
化学協会公定法(Cd12b-92)に準じ、測定温度は80℃に設
定した。試験結果を図６に示す。

【００３０】実施例１〜４で得られた共役リノール酸エ
ステルを添加した混合食用油脂は、共役リノール酸添加
混合食用油脂及び無添加混合食用油脂に比較していずれ
も酸化誘導期が伸長しており、共役リノール酸添加混合
食用油脂及び無添加混合食用油脂に比較して高い酸化安
定性を示した。すなわち、この試験結果により、共役リ
ノール酸の抗酸化活性がエステル化することにより大き
く向上していることがわかった。ジコンジュケイテッド
リノレイルホスファチジルコリン、アスコルビン酸共役
リノール酸エステルでは、特に顕著な抗酸化活性の向上
が見られた。

【００３１】

【試験例３】試験例２で用いた各食用混合油脂を使用し
て揚げパン（クルトン）を調製し、揚げパンの酸化安定
性をランシマット法により測定した。すなわち、市販の
トースト用食パンの周辺を除去した後、一辺約 8mmの立
方体になるように食パンをカットした。このカットした
食パン5gを、180 ℃に加熱した各混合食用油脂50g 中で
５分間揚げ、揚げパンを調製した。この揚げパン3gを試
験例２と同様にしてランシマット試験に供した。ランシ
マット測定はアメリカ油化学協会公定法(Cd 12b-92) に
準じ、測定温度は60℃に設定した。試験結果を図７に示
す。

【００３２】実施例１〜４で得られた共役リノール酸エ
ステルを添加した混合食用油脂を用いた揚げパンは、共
役リノール酸添加混合食用油脂及び無添加混合食用油脂
を用いた揚げパンに比較していずれも酸化誘導期が伸長
しており、共役リノール酸添加混合食用油脂及び無添加
混合食用油脂を用いた揚げパンに比較して高い酸化安定
性を示した。すなわち、この試験結果により、共役リノ
ール酸の抗酸化活性がエステル化することにより大きく
向上していることがわかった。ジコンジュケイテッドリ
ノレイルホスファチジルコリン、アスコルビン酸共役リ
ノール酸エステルでは、特に顕著な抗酸化活性の向上が
見られた。

【００３３】

【発明の効果】本発明の共役リノール酸エステルは、飲
食品用の抗酸化剤として幅広い分野の飲食品に利用でき
る。本発明の共役リノール酸エステルを飲食品に添加す
ることにより、飲食品の保存中の酸化が抑制でき、ま
た、飲食品摂取後の生体内酸化をも抑制することがで
き、有用なものである。

【図面の簡単な説明】

【図１】実施例２のコレステロール共役リノール酸エス
テル生成反応における反応液の反応開始前と反応開始後
６時間のＴＬＣの結果を示す。

【図２】実施例３のラクトース共役リノール酸エステル
生成反応における反応液の反応開始前と反応終了後のＴ
ＬＣの結果を示す。

【図３】実施例４のアスコルビン酸共役リノール酸エス
テル生成反応における反応液の反応開始前と反応終了後
のＴＬＣの結果を示す。

【図４】実施例６のβ−シトステロール共役リノール酸
エステル生成反応における反応液の反応開始前と反応終
了後のＴＬＣの結果を示す。

【図５】試験例１における各共役リノール酸エステルの
酸化抑制率を示す。

【図６】試験例２における各共役リノール酸エステル添
加混合食用油脂の抗酸化活性を示す。

【図７】試験例３における各共役リノール酸エステル添
加混合食用油脂を配合した揚げパンの酸化安定性を示
す。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁷ 識別記号ＦＩテーマコート゛(参考）Ａ６１Ｋ 31/685 ６０２Ａ６１Ｋ 31/685 ６０２４Ｃ０５７ 31/70 ６０６ 31/70 ６０６４Ｃ０８６Ｃ０７Ｃ 69/58 Ｃ０７Ｃ 69/58 ４Ｃ０９１Ｃ０７Ｆ 9/10 Ｃ０７Ｆ 9/10 Ｂ４Ｈ００６Ｃ０７Ｈ 13/06 Ｃ０７Ｈ 13/06 ４Ｈ０２５Ｃ０７Ｊ 9/00 Ｃ０７Ｊ 9/00 ４Ｈ０５０Ｃ０９Ｋ 15/06 Ｃ０９Ｋ 15/06 15/32 15/32 ＣＣ１２Ｎ 9/20 Ｃ１２Ｎ 9/20 11/14 11/14 Ｃ１２Ｐ 7/64 Ｃ１２Ｐ 7/64 Ｆターム(参考） 4B021 LW01 LW05 LW06 LW07 LW08 MC03 MK21 MP01 4B033 NA01 NA27 NB12 NB24 NB62 NB66 NC04 ND02 ND20 4B050 CC10 DD03 GG01 GG10 LL02 4B064 AD68 AD72 AD73 CA21 CA22 CA33 CA37 CA38 CB26 CB30 CD05 CD06 CD12 CE10 DA10 4C037 LA02 LA03 4C057 AA17 BB01 BB03 HH03 4C086 AA01 AA03 AA04 BA18 DA40 EA03 EA19 MA01 MA11 MA52 NA05 4C091 AA01 BB06 CC01 DD01 EE05 FF01 GG01 HH01 JJ03 KK01 LL01 MM03 NN01 PA02 PA05 PB05 QQ01 4H006 AA01 AA02 AA03 AB83 AC48 KA03 KA06 4H025 AA14 AA63 AA81 4H050 AA01 AB83 AC40

Claims

【特許請求の範囲】

【請求項１】次の一般式[I] で表される共役リノール
酸エステル。【化１】R₁-COO-R₂ [I] （但し、R₁はC₁₇H₃₂で表され共役二重結合１個を有する
脂肪族炭化水素基であり、R₂は水酸基又はエステル結合
を１個以上有する有機化合物残基である。）
【請求項２】 R₂がリン脂質残基、ステロール残基、糖
類残基、有機酸残基のいずれかである請求項１記載の共
役リノール酸エステル。
【請求項３】共役リノール酸を、水酸基又はエステル
結合を１個以上有する有機化合物とエステル化又はエス
テル交換することを特徴とする請求項１又は２に記載の
共役リノール酸エステルの製造法。
【請求項４】リパーゼを用いてエステル化又はエステ
ル交換する請求項３記載の製造法。
【請求項５】リパーゼが、固定化されたリパーゼ又は
化学的に脂肪酸修飾されたリパーゼである請求項４記載
の製造法。
【請求項６】請求項１又は２に記載の共役リノール酸
エステルを有効成分とする抗酸化剤。
【請求項７】請求項１又は２に記載の共役リノール酸
エステルを添加して脂質成分の酸化抑制作用を賦与した
飲食品。