JP2000275242A - 血液サンプル内の白血球決定用及びヘモグロビン測定用試薬 - Google Patents
血液サンプル内の白血球決定用及びヘモグロビン測定用試薬Info
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Abstract
(57)【要約】
【課題】 全血液サンプル内で白血球の決定と、好塩基
性細胞によって構成された白血球の部分母集団を確認且
つ定量化するための血液学分析的な試薬を提供する。 【解決手段】 本発明は血液サンプル内の白血球決定用
及びヘモグロビン測定用の試薬に関係する。この試薬は
そのｐＨを酸性値に、少なくとも一つの陽イオン型の界
面活性剤に、窒素化合物に、及び任意的に少なくとも一
つの無機塩に選択的に調節するように置かれた緩衝液系
を備えている。この試薬は人間医術の血液学的な分析で
使用され、白血球の部分母集団、特に、好塩基性多形核
白血球の確認を可能とする。
性細胞によって構成された白血球の部分母集団を確認且
つ定量化するための血液学分析的な試薬を提供する。 【解決手段】 本発明は血液サンプル内の白血球決定用
及びヘモグロビン測定用の試薬に関係する。この試薬は
そのｐＨを酸性値に、少なくとも一つの陽イオン型の界
面活性剤に、窒素化合物に、及び任意的に少なくとも一
つの無機塩に選択的に調節するように置かれた緩衝液系
を備えている。この試薬は人間医術の血液学的な分析で
使用され、白血球の部分母集団、特に、好塩基性多形核
白血球の確認を可能とする。
Description
【０００１】
【発明の属する技術分野】本発明は血液分析に関する。
特に、血液サンプル内の白血球決定用及びヘモグロビン
測定用の試薬に関係する。
特に、血液サンプル内の白血球決定用及びヘモグロビン
測定用の試薬に関係する。
【０００２】本発明はまた、白血球の部分母集団、特
に、好塩基性多形核白血球だと確認可能な試薬を提供す
ることを目的とする。
に、好塩基性多形核白血球だと確認可能な試薬を提供す
ることを目的とする。
【０００３】
【従来の技術】人間病理学では、白血球、特に、ある種
の白血球の部分母集団を決定すること、及び、赤血球即
ち赤い血球のヘモグロビン濃度を測定することは診断に
とって非常に重要である。
の白血球の部分母集団を決定すること、及び、赤血球即
ち赤い血球のヘモグロビン濃度を測定することは診断に
とって非常に重要である。
【０００４】ここで思い出されることは、白血球、即ち
人間の白い血球が五つの部分母集団に分割されているこ
とである。要するに、三つのメイン部分母集団はリンパ
球、単球、及び、多形核白血球又は顆粒球である。細胞
質顆粒の特性によれば、後者はそれ自身、中性好性白血
球、好酸球、好塩基球に更に分割される。
人間の白い血球が五つの部分母集団に分割されているこ
とである。要するに、三つのメイン部分母集団はリンパ
球、単球、及び、多形核白血球又は顆粒球である。細胞
質顆粒の特性によれば、後者はそれ自身、中性好性白血
球、好酸球、好塩基球に更に分割される。
【０００５】全白血球を決定すること、及び、それの種
々の部分母集団を確認することは顕微鏡観察の伝統的方
法、又は近代的方法によって達成される。その近代的方
法は、特定の自動装置に対して発展された抵抗力変化の
測定（国際公開第８４／０３７７１号）、又は光学回折
（米国特許第３７４０１４３号）に主として基づいてい
る。
々の部分母集団を確認することは顕微鏡観察の伝統的方
法、又は近代的方法によって達成される。その近代的方
法は、特定の自動装置に対して発展された抵抗力変化の
測定（国際公開第８４／０３７７１号）、又は光学回折
（米国特許第３７４０１４３号）に主として基づいてい
る。
【０００６】白血球の部分母集団を確認するために、好
塩基性顆粒球の計算法は、健全な個体ではこの母集団が
全白血球母集団のうち僅か０．５％〜１％を示すことを
考えると、特に慎重を要する。
塩基性顆粒球の計算法は、健全な個体ではこの母集団が
全白血球母集団のうち僅か０．５％〜１％を示すことを
考えると、特に慎重を要する。
【０００７】この好塩基性母集団における増加は、重量
で２〜３％の母集団を達成すると、アレルギー反応の間
に観察される。結核及び水痘が、代謝病の広まっている
間に粘液水腫及び高脂質血症を生じさせるのと同様に、
伝染病の広まっている間に好塩基球増加を生じさせる。
その結果、好塩基性顆粒球の計算法は特に重要であると
思われる。
で２〜３％の母集団を達成すると、アレルギー反応の間
に観察される。結核及び水痘が、代謝病の広まっている
間に粘液水腫及び高脂質血症を生じさせるのと同様に、
伝染病の広まっている間に好塩基球増加を生じさせる。
その結果、好塩基性顆粒球の計算法は特に重要であると
思われる。
【０００８】仏国特許第９０ ０１６６０号、及び、そ
れと同等な米国特許第５１９６３４６号には、抵抗力測
定によって決定可能な方法で好塩基性顆粒球を保護した
試薬が記載されている。しかしながら、この試薬によっ
てヘモグロビンは測定できない。
れと同等な米国特許第５１９６３４６号には、抵抗力測
定によって決定可能な方法で好塩基性顆粒球を保護した
試薬が記載されている。しかしながら、この試薬によっ
てヘモグロビンは測定できない。
【０００９】思い出されることは、ヘモグロビンは血液
の赤い血球内、即ち赤血球内に含まれた色素タンパク質
であることである。
の赤い血球内、即ち赤血球内に含まれた色素タンパク質
であることである。
【００１０】それ故、ヘモグロビン濃度の測定は、測定
用ヘモグロビンを遊離するため赤血球の溶解を生じさせ
ることができる細胞溶解用試薬の使用を必要としてい
る。
用ヘモグロビンを遊離するため赤血球の溶解を生じさせ
ることができる細胞溶解用試薬の使用を必要としてい
る。
【００１１】この目的のため、公知であることは、比色
計の測定によって決定可能となるようにヘモグロビンか
ら色素化合物への転化を実行できる少なくとも一つの界
面活性剤とシアン化物イオンとを含んだ試薬を利用する
ことである。
計の測定によって決定可能となるようにヘモグロビンか
ら色素化合物への転化を実行できる少なくとも一つの界
面活性剤とシアン化物イオンとを含んだ試薬を利用する
ことである。
【００１２】
【発明が解決しようとする課題】この種のシアン基を含
んだ試薬は米国特許第３８７４８５２号及び第３８５４
９１４号に記載されている。
んだ試薬は米国特許第３８７４８５２号及び第３８５４
９１４号に記載されている。
【００１３】しかしながら、この試薬はシアン化物の使
用によって重要な欠点を有している。更に、その試薬に
よって分析すべき血液サンプル内に含まれた白血球の部
分母集団の確認と定量化とができなかった。
用によって重要な欠点を有している。更に、その試薬に
よって分析すべき血液サンプル内に含まれた白血球の部
分母集団の確認と定量化とができなかった。
【００１４】注意すべきことは、シアン化物を含まず、
ヘモグロビンの測定に加えて白血球の確認を可能とする
試薬がすでに従来の技術で提案されていたことである。
ヘモグロビンの測定に加えて白血球の確認を可能とする
試薬がすでに従来の技術で提案されていたことである。
【００１５】こうして、国際公開第９６／０２８４１号
によって、シアン化物を含まないが、界面活性剤とヒド
ロキシルアミンの塩とを含んだヘモグロビンを測定する
ための試薬が記載されている。全白血球の計算法のため
にこの試薬を使用できるが、白血球を区別することは不
可能である。
によって、シアン化物を含まないが、界面活性剤とヒド
ロキシルアミンの塩とを含んだヘモグロビンを測定する
ための試薬が記載されている。全白血球の計算法のため
にこの試薬を使用できるが、白血球を区別することは不
可能である。
【００１６】米国特許第５２４２８３２号によって、部
分的な白血球の確認を可能とする類似の試薬が記載され
ている。しかしながら、この試薬は好塩基性細胞を確認
できないが、リンパ球、単球、及び顆粒球を唯一評価で
きる。
分的な白血球の確認を可能とする類似の試薬が記載され
ている。しかしながら、この試薬は好塩基性細胞を確認
できないが、リンパ球、単球、及び顆粒球を唯一評価で
きる。
【００１７】国際公開第９８／３２０１６号によって
も、この種の試薬が記載されている。しかしながら、少
数顆粒球の部分母集団、即ち好酸球と好塩基球とは、こ
の出版物に記載された試薬によって確認できない。
も、この種の試薬が記載されている。しかしながら、少
数顆粒球の部分母集団、即ち好酸球と好塩基球とは、こ
の出版物に記載された試薬によって確認できない。
【００１８】
【課題を解決するための手段】本発明の目的は公知試薬
の欠点を顕著に回避することである。
の欠点を顕著に回避することである。
【００１９】本発明は、特に、全血液サンプル内で白血
球の決定と、好塩基性細胞によって構成された白血球の
部分母集団を確認且つ定量化するための血液学分析的な
試薬を提供することを目的とする。
球の決定と、好塩基性細胞によって構成された白血球の
部分母集団を確認且つ定量化するための血液学分析的な
試薬を提供することを目的とする。
【００２０】本発明はまた、白血球の決定とヘモグロビ
ンの測定とのために必要である赤血球、即ち赤い血球の
溶解を顕著に可能とする試薬を提供することを目的とす
る。
ンの測定とのために必要である赤血球、即ち赤い血球の
溶解を顕著に可能とする試薬を提供することを目的とす
る。
【００２１】更に、本発明は、単一試薬であるが、試薬
系でない形で血液学分析的な試薬を提供することを目的
とする。
系でない形で血液学分析的な試薬を提供することを目的
とする。
【００２２】その上、本発明は、シアン基を含んだ化合
物（cyanic compounds）でない血液学分析的な試薬を提
供することを目的とする。
物（cyanic compounds）でない血液学分析的な試薬を提
供することを目的とする。
【００２３】また更に、本発明は、更に詳細には血液学
的な自動化手段に対して適切である血液学的な試薬を提
供することを目的とする。
的な自動化手段に対して適切である血液学的な試薬を提
供することを目的とする。
【００２４】最後に、本発明は上述された種類の血液学
分析的な試薬を提案し、それは本質的に、試薬ｐＨを酸
性値、特に、３より小さな値に選択的に調節するために
置かれた緩衝液系と、少なくとも一つの陽イオン型の界
面活性剤と、窒素化合物とを含んでいる。
分析的な試薬を提案し、それは本質的に、試薬ｐＨを酸
性値、特に、３より小さな値に選択的に調節するために
置かれた緩衝液系と、少なくとも一つの陽イオン型の界
面活性剤と、窒素化合物とを含んでいる。
【００２５】試薬の緩衝液系は主要な構成物である。そ
の理由は、試薬ｐＨが特別に興味を持った好塩基性細胞
によって構成された部分母集団の確認を可能とするから
である。
の理由は、試薬ｐＨが特別に興味を持った好塩基性細胞
によって構成された部分母集団の確認を可能とするから
である。
【００２６】要するに、生化学特性のため、他の白血球
の部分好塩基性細胞は他の白血球の部分母集団より何倍
か大きいので、酸性ｐＨの攻撃に耐えることができる。
それ故、この特性が、抵抗力測定によって顕著に分離及
び確認を可能としている。
の部分好塩基性細胞は他の白血球の部分母集団より何倍
か大きいので、酸性ｐＨの攻撃に耐えることができる。
それ故、この特性が、抵抗力測定によって顕著に分離及
び確認を可能としている。
【００２７】緩衝液系は、試薬のｐＨ値が３より小さ
く、好ましくは２．４に等しくなるように便宜的に選択
される。
く、好ましくは２．４に等しくなるように便宜的に選択
される。
【００２８】緩衝液系は、塩化カリウム及び（又は）塩
酸と、酒石酸及び（又は）水酸化ナトリウムと、クエン
酸及び（又は）水酸化ナトリウムと、フタル酸水素カリ
ウム及び（又は）塩酸と、クエン酸及び（又は）第２リ
ン酸ナトリウムと、ホウ酸及び（又は）クエン酸及び
（又は）リン酸二水素カリウムとから便宜的に選択され
る。
酸と、酒石酸及び（又は）水酸化ナトリウムと、クエン
酸及び（又は）水酸化ナトリウムと、フタル酸水素カリ
ウム及び（又は）塩酸と、クエン酸及び（又は）第２リ
ン酸ナトリウムと、ホウ酸及び（又は）クエン酸及び
（又は）リン酸二水素カリウムとから便宜的に選択され
る。
【００２９】陽イオン型の界面活性剤は、赤い血球、即
ち赤血球の溶解作用を行い、ヘモグロビンの遊離を可能
とし、その後、ヘモグロビンは吸光度測定によって決定
される。一般的に、イオン界面活性剤（陰イオン及び陽
イオン界面活性剤）はタンパク質複合体を乖離し、膜の
タンパク質を溶解するために主として使用される。その
界面活性剤はまた、変性剤として知られている。界面活
性剤の作用は素早く、それ故、自動化手段に特有な拘束
率と共有できる。
ち赤血球の溶解作用を行い、ヘモグロビンの遊離を可能
とし、その後、ヘモグロビンは吸光度測定によって決定
される。一般的に、イオン界面活性剤（陰イオン及び陽
イオン界面活性剤）はタンパク質複合体を乖離し、膜の
タンパク質を溶解するために主として使用される。その
界面活性剤はまた、変性剤として知られている。界面活
性剤の作用は素早く、それ故、自動化手段に特有な拘束
率と共有できる。
【００３０】界面活性剤は、第１級アミン、脂肪族アミ
ンのアセテート、及び脂肪族アミンのヒドロクロリド
と、第４アンモニウム塩及び臭化トリメチルエチルアン
モニウムと、硫酸エチル、ジエタノールアミノプロピル
アミン、又はジエチルアミノプロピルアミドによって陽
イオン化された置換ジアミンのアミドと、環化ジエチレ
ントリアミンのアミドとから便宜的に選択される。
ンのアセテート、及び脂肪族アミンのヒドロクロリド
と、第４アンモニウム塩及び臭化トリメチルエチルアン
モニウムと、硫酸エチル、ジエタノールアミノプロピル
アミン、又はジエチルアミノプロピルアミドによって陽
イオン化された置換ジアミンのアミドと、環化ジエチレ
ントリアミンのアミドとから便宜的に選択される。
【００３１】窒素を含んだ化合物は、ヘモグロビンの酸
化副生成物の物理化学的な安定の作用を行っている。
化副生成物の物理化学的な安定の作用を行っている。
【００３２】この窒素化合物は便宜的にチオ尿素、特
に、１、３−ジメチル−２−チオ尿素である。
に、１、３−ジメチル−２−チオ尿素である。
【００３３】更に、本発明の試薬は少なくとも一つの無
機塩である。
機塩である。
【００３４】もし存在するならば、その塩は界面活性作
用内で介在し、細胞膜レベルで浸透現象を可能とし、好
塩基性細胞の決定にとって重要である規定度制限内で維
持される。この塩はまた、一般的に血液学的な自動化手
段に適用された抵抗力を測定するための方法内で役目を
果たしている。
用内で介在し、細胞膜レベルで浸透現象を可能とし、好
塩基性細胞の決定にとって重要である規定度制限内で維
持される。この塩はまた、一般的に血液学的な自動化手
段に適用された抵抗力を測定するための方法内で役目を
果たしている。
【００３５】無機塩は便宜的にアルカリ金属塩によって
構成されている。塩化物、又は、ナトリウム又はカリウ
ムの硫酸塩は、使用可能な塩として大抵引用されてい
る。
構成されている。塩化物、又は、ナトリウム又はカリウ
ムの硫酸塩は、使用可能な塩として大抵引用されてい
る。
【００３６】好ましい方法では、界面活性剤は濃度０．
２〜２０ｇ／ｌで与えられ、窒素化合物は濃度０．１〜
１０ｇ／ｌで与えられる。
２〜２０ｇ／ｌで与えられ、窒素化合物は濃度０．１〜
１０ｇ／ｌで与えられる。
【００３７】次の限定されない実施の形態に関して発明
が記載される。
が記載される。
【００３８】
【発明の実施の形態】血液学分析的な試薬が以下記載さ
れた化合物から、指定された濃度で準備される。
れた化合物から、指定された濃度で準備される。
【００３９】 化合物 濃度 塩化カリウム ５ 〜１０ ｇ／ｌ １、３−ジメチル−２−チオ尿素 ０．５〜 ３ ｇ／ｌ 塩化ドデシルトリメチルアンモニウム ０．５〜 ５ ｇ／ｌ リン酸水素カリウム ／ ＨＣｌ １．０〜１０ ｇ／ｌ 上の化合物が混ぜられ、ｐＨが３より小さな酸性値、通
常２．４に調節される。
常２．４に調節される。
【００４０】この試薬の助けをかりて、血液学分析が血
液学的な自動化手段を使って全人間の血液サンプルに関
して実行された。
液学的な自動化手段を使って全人間の血液サンプルに関
して実行された。
【００４１】これを行うために、全血液サンプルの１０
μｌが３５℃で上記試薬の２μｌに接触される。
μｌが３５℃で上記試薬の２μｌに接触される。
【００４２】様々な分析が、本発明の試薬を一つ又はそ
れ以上の基準試薬と比較することによって実行される。
れ以上の基準試薬と比較することによって実行される。
【００４３】古典的な非自動化手順、即ちドラブキン
（Drabkin）手順に従って、ヘモグロビンの用量決定を
再生するために、基準試薬が、血液学的な自動化手段で
使用された溶解物質である。それはシアノメトヘモグロ
ビンの用量決定に関する問題である。
（Drabkin）手順に従って、ヘモグロビンの用量決定を
再生するために、基準試薬が、血液学的な自動化手段で
使用された溶解物質である。それはシアノメトヘモグロ
ビンの用量決定に関する問題である。
【００４４】この用法によれば、赤い血球内に含まれた
ヘモグロビン、酸化ヘモグロビン、及びカルボキシヘモ
グロビンにおけるヘムの鉄（II）イオン（Ｆｅ++）が、
メトヘモグロビンを形成するように鉄シアン化物によっ
て鉄（II）イオン（Ｆｅ+++）に酸化される。それか
ら、５４０ｎｍで分光測光によって測定されたシアノメ
トヘモグロビンを形成するように、メトヘモグロビンが
シアン化物イオンに結合する(Drabkin, J. Biol, Chem.
112:51 (1935))。
ヘモグロビン、酸化ヘモグロビン、及びカルボキシヘモ
グロビンにおけるヘムの鉄（II）イオン（Ｆｅ++）が、
メトヘモグロビンを形成するように鉄シアン化物によっ
て鉄（II）イオン（Ｆｅ+++）に酸化される。それか
ら、５４０ｎｍで分光測光によって測定されたシアノメ
トヘモグロビンを形成するように、メトヘモグロビンが
シアン化物イオンに結合する(Drabkin, J. Biol, Chem.
112:51 (1935))。
【００４５】他方、本発明の試薬はシアン化物を含まな
い用量決定法の方式で使用される。赤血球ヘモグロビン
は適切な溶解物質の作用によって溶離されている。溶離
されたヘモグロビンのヘムイオンは、溶血性化合物と、
溶液中に溶解された酸素との結合作用によって酸化され
る。遊離したメトヘモグロビンはシアノメトヘモグロビ
ンと比較して分解しやすい。それ故、ヘムイオンを還元
し、メトヘモグロビンを安定させるために、電子供与体
を有する化合物が使用される。
い用量決定法の方式で使用される。赤血球ヘモグロビン
は適切な溶解物質の作用によって溶離されている。溶離
されたヘモグロビンのヘムイオンは、溶血性化合物と、
溶液中に溶解された酸素との結合作用によって酸化され
る。遊離したメトヘモグロビンはシアノメトヘモグロビ
ンと比較して分解しやすい。それ故、ヘムイオンを還元
し、メトヘモグロビンを安定させるために、電子供与体
を有する化合物が使用される。
【００４６】本発明の試薬は、血液学的な自動化手段で
実行される様々な分析のために使用される。 １）白血球の計算法 全ての白血球、即ち白い血球の計算が実行される。
実行される様々な分析のために使用される。 １）白血球の計算法 全ての白血球、即ち白い血球の計算が実行される。
【００４７】本発明の試薬で得られた測定結果と、部分
的な白血球の区別さえ不可能な基準試薬で得られた測定
結果とが比較される。
的な白血球の区別さえ不可能な基準試薬で得られた測定
結果とが比較される。
【００４８】図１は、数千の細胞内で表された測定値で
あり、横座標上で表示された基準試薬に対する一方と、
縦座標上で表示された本発明の試薬に対する他方とを示
す。
あり、横座標上で表示された基準試薬に対する一方と、
縦座標上で表示された本発明の試薬に対する他方とを示
す。
【００４９】グラフは２種類の測定の間で卓越した相関
関係を示している。相関関係の係数値（Ｒ2 ＝０．９
９）と、真っ直ぐな後退線の勾配値（０．９９）とは非
常に良い相関関係を示している。 ２）好塩基性多形核白血球の区別及び計算法 図２は、上述された発明の試薬で全血液サンプルの抵抗
力分析から生じたカーブ（曲線）を示す。この曲線は細
胞サイズに従った細胞分布のヒストグラムを示す。
関係を示している。相関関係の係数値（Ｒ2 ＝０．９
９）と、真っ直ぐな後退線の勾配値（０．９９）とは非
常に良い相関関係を示している。 ２）好塩基性多形核白血球の区別及び計算法 図２は、上述された発明の試薬で全血液サンプルの抵抗
力分析から生じたカーブ（曲線）を示す。この曲線は細
胞サイズに従った細胞分布のヒストグラムを示す。
【００５０】Ｘ軸（横座標）は、抵抗力測定によって計
算された細胞容積（μｍ3 ）を決定することに対応して
いる。好塩基性多形核白血球は中央カーソル（ＢＡＳ）
の右側に置かれている。他の白血球の部分母集団は全て
この中央カーソルの左側に配置されている。その部分母
集団は試薬ｐＨの強力な攻撃の結果によって容積測定に
関して区別されない。
算された細胞容積（μｍ3 ）を決定することに対応して
いる。好塩基性多形核白血球は中央カーソル（ＢＡＳ）
の右側に置かれている。他の白血球の部分母集団は全て
この中央カーソルの左側に配置されている。その部分母
集団は試薬ｐＨの強力な攻撃の結果によって容積測定に
関して区別されない。
【００５１】実施の形態では、白血球の全母集団に関し
て、（容積単位で）６．２％の割合を示す好塩基性多形
核白血球が確認される。 ３）ヘモグロビンの測定 ヘモグロビンの測定が本発明の試薬で行われ、本発明の
試薬でのヘモグロビン濃度測定とシアン基化合物を含ん
だ基準試薬でのヘモグロビン濃度測定とが比較される。
て、（容積単位で）６．２％の割合を示す好塩基性多形
核白血球が確認される。 ３）ヘモグロビンの測定 ヘモグロビンの測定が本発明の試薬で行われ、本発明の
試薬でのヘモグロビン濃度測定とシアン基化合物を含ん
だ基準試薬でのヘモグロビン濃度測定とが比較される。
【００５２】図３は、基準試薬（横座標表示）で得られ
たヘモグロビン濃度値（グラム／リットル（ｇ／ｌ）単
位での表示）と、本発明の試薬（縦座標表示）で得られ
たヘモグロビン濃度値とを示す。そこでもまた、相関関
係の係数値（Ｒ2 ＝０．９９）と、真っ直ぐな後退線の
勾配値（０．９９）とが非常に良い相関関係を示してい
る。
たヘモグロビン濃度値（グラム／リットル（ｇ／ｌ）単
位での表示）と、本発明の試薬（縦座標表示）で得られ
たヘモグロビン濃度値とを示す。そこでもまた、相関関
係の係数値（Ｒ2 ＝０．９９）と、真っ直ぐな後退線の
勾配値（０．９９）とが非常に良い相関関係を示してい
る。
【００５３】こうして、本発明は、シアン基化合物（cy
anic compounds）を使用せずに、白血球の決定、白血球
の部分母集団（特に、好塩基性多形核白血球）の確認、
及びヘモグロビンの測定を可能とする単一試薬を提供し
ている。
anic compounds）を使用せずに、白血球の決定、白血球
の部分母集団（特に、好塩基性多形核白血球）の確認、
及びヘモグロビンの測定を可能とする単一試薬を提供し
ている。
【００５４】本発明の試薬は、公知の試薬に関してかな
りの酸性状態下でヘモグロビン測定を可能とする独特な
特徴を顕著に与えている。
りの酸性状態下でヘモグロビン測定を可能とする独特な
特徴を顕著に与えている。
【００５５】更に、この試薬は、単一試薬の形であり、
幾つかの試薬の体系の形ではない。その試薬は、特に、
血液学的な自動化手段で行われた分析に全く適切であ
る。
幾つかの試薬の体系の形ではない。その試薬は、特に、
血液学的な自動化手段で行われた分析に全く適切であ
る。
【００５６】もちろん、本発明は、上述された本実施の
形態に制限されず、他の実施の形態の変形に及ぶ。
形態に制限されず、他の実施の形態の変形に及ぶ。
【００５７】
【発明の効果】本発明は、シアン基化合物を使用せず
に、白血球の決定、白血球の部分母集団（特に、好塩基
性多形核白血球）の確認、及びヘモグロビンの測定を可
能とする単一試薬を提供している。
に、白血球の決定、白血球の部分母集団（特に、好塩基
性多形核白血球）の確認、及びヘモグロビンの測定を可
能とする単一試薬を提供している。
【００５８】本発明の試薬は、公知の試薬に関してかな
りの酸性状態下でヘモグロビン測定を可能とする独特な
特徴を顕著に与えている。
りの酸性状態下でヘモグロビン測定を可能とする独特な
特徴を顕著に与えている。
【００５９】更に、この試薬は、単一試薬の形であり、
幾つかの試薬の体系の形ではない。その試薬は、特に、
血液学的な自動化手段で行われた分析に全く適切であ
る。
幾つかの試薬の体系の形ではない。その試薬は、特に、
血液学的な自動化手段で行われた分析に全く適切であ
る。
【図１】数千の細胞内で表された測定値であり、横座標
上で表示された基準試薬に対する一方と、縦座標上で表
示された発明の試薬に対する他方とを示す。
上で表示された基準試薬に対する一方と、縦座標上で表
示された発明の試薬に対する他方とを示す。
【図２】発明の試薬で全血液サンプルの抵抗力分析から
生じたカーブ（曲線）を示す。
生じたカーブ（曲線）を示す。
【図３】基準試薬（横座標表示）で得られたヘモグロビ
ン濃度値（グラム／リットル（ｇ／ｌ）単位での表示）
と、発明の試薬（縦座標表示）で得られたヘモグロビン
濃度値とを示す。
ン濃度値（グラム／リットル（ｇ／ｌ）単位での表示）
と、発明の試薬（縦座標表示）で得られたヘモグロビン
濃度値とを示す。
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者 アンリ・シャンゼ フランス国、Ｆ−34980 モンフェリエ・ シュール・レ、シュマン・ドゥ・カンバ、 ２
Claims (10)
- 【請求項１】 血液サンプル内で白血球及び好塩基性多
形核白血球を確認し、ヘモグロビンを測定する試薬であ
って、 前記試薬が、そのｐＨを酸性値、特に、３より小さな値
に選択的に調節するように置かれた緩衝液系と、 陽イオン型の少なくとも一つの界面活性剤と、 窒素化合物とを備えることを特徴とする血液サンプル内
の白血球決定用及びヘモグロビン測定用試薬。 - 【請求項２】 請求項１記載の血液サンプル内の白血球
決定用及びヘモグロビン測定用試薬であって、 前記緩衝液系がｐＨ値を２．４に調節するように置かれ
ることを特徴とする血液サンプル内の白血球決定用及び
ヘモグロビン測定用試薬。 - 【請求項３】 請求項１又は２記載の血液サンプル内の
白血球決定用及びヘモグロビン測定用試薬であって、 前記緩衝液系が、塩化カリウム及び（又は）塩酸と、 酒石酸及び（又は）水酸化ナトリウムと、 クエン酸及び（又は）水酸化ナトリウムと、 フタル酸水素カリウム及び（又は）塩酸と、 クエン酸及び（又は）第２リン酸ナトリウムと、 ホウ酸及び（又は）クエン酸及び（又は）リン酸二水素
カリウムとから選択されることを特徴とする血液サンプ
ル内の白血球決定用及びヘモグロビン測定用試薬。 - 【請求項４】 請求項１〜３のいずれかに記載の血液サ
ンプル内の白血球決定用及びヘモグロビン測定用試薬で
あって、 前記界面活性剤が、第１級アミン、脂肪族アミンのアセ
テート、及び脂肪族アミンのヒドロクロリドと、 第４アンモニウム塩及び臭化トリメチルエチルアンモニ
ウムと、 硫酸エチル、ジエタノールアミノプロピルアミン、又は
ジエチルアミノプロピルアミドによって陽イオン化され
た置換ジアミンのアミドと、 環化ジエチレントリアミンのアミドとから選択されるこ
とを特徴とする血液サンプル内の白血球決定用及びヘモ
グロビン測定用試薬。 - 【請求項５】 請求項１〜４のいずれかに記載の血液サ
ンプル内の白血球決定用及びヘモグロビン測定用試薬で
あって、 前記窒素化合物が、チオ尿素、特に、１、３−ジメチル
−２−チオ尿素であることを特徴とする血液サンプル内
の白血球決定用及びヘモグロビン測定用試薬。 - 【請求項６】 請求項１〜５のいずれか記載の血液サン
プル内の白血球決定用及びヘモグロビン測定用試薬であ
って、 前記窒素化合物が、少なくとも一つの無機塩を更に含む
ことを特徴とする血液サンプル内の白血球決定用及びヘ
モグロビン測定用試薬。 - 【請求項７】 請求項６記載の血液サンプル内の白血球
決定用及びヘモグロビン測定用試薬であって、 前記無機塩がアルカリ金属塩であることを特徴とする血
液サンプル内の白血球決定用及びヘモグロビン測定用試
薬。 - 【請求項８】 請求項６又は７記載の血液サンプル内の
白血球決定用及びヘモグロビン測定用試薬であって、 前記無機塩が、塩化物と、ナトリウム又はカリウムの硫
酸塩とから選択されることを特徴とする血液サンプル内
の白血球決定用及びヘモグロビン測定用試薬。 - 【請求項９】 請求項１〜８のいずれかに記載の血液サ
ンプル内の白血球決定用及びヘモグロビン測定用試薬で
あって、 前記界面活性剤が濃度０．２〜２０ｇ／ｌで与えられ、
前記窒素化合物が濃度０．１〜１０ｇ／ｌで与えられる
ことを特徴とする血液サンプル内の白血球決定用及びヘ
モグロビン測定用試薬。 - 【請求項１０】 請求項１〜９のいずれかに記載の血液
サンプル内の白血球決定用及びヘモグロビン測定用試薬
であって、 以下の構成によることを特徴とする血液サンプル内の白
血球決定用及びヘモグロビン測定用試薬。 化合物 濃度 塩化カリウム ５ 〜１０ ｇ／ｌ １、３−ジメチル−２−チオ尿素 ０．５〜 ３ ｇ／ｌ 塩化ドデシルトリメチルアンモニウム ０．５〜 ５ ｇ／ｌ リン酸水素カリウム ／ ＨＣｌ １．０〜１０ ｇ／ｌ
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|---|---|---|---|
| FR9903467 | 1999-03-19 | ||
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|---|---|
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Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
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-
1999
- 1999-03-19 FR FR9903467A patent/FR2791138B1/fr not_active Expired - Lifetime
-
2000
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