JP2000295996A5 - - Google Patents
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Description
これら呈味性ヌクレオチド類の製法として、酵母菌体から抽出したＲＮＡをリボヌクレアーゼＰ１により加水分解した後に必要な５'−ヌクレオチドを分離精製する方法〔Food Technol., 18, 287 (1964)〕、ＩＭＰを生産する能力を有する微生物を用いて、ＩＭＰを直接発酵生産する方法〔Agricultural and Biological Chemistry, 46, 2257 (1982)〕、イノシンやグアノシン等のヌクレオシド類を化学的リン酸化によりヌクレオチドに変換する方法〔Bulletin of the Chemical Society of Japan, 42, 3505 (1969)〕、バチルス・メガテリウムの変異株を用いて５−アミノ−４−イミダゾールカルボキサミドリボシド（以下、ＡＩＣＡＲと略す）を発酵法で生産し、ＡＩＣＡＲから化学的合成法によって製造する方法〔Biotechnol. Bioeng., 9, 329 (1967)、J. Org. Chem., 32, 1825 (1967)〕、５'−キサンチル酸（以下、ＸＭＰと略す）生産性のコリネバクテリウム・アンモニアゲネスの変異株を培地に培養してＸＭＰを生成蓄積させ、次いでセルフクローニングによりＸＭＰアミナーゼ（別名ＧＭＰ合成酵素）活性を強化した大腸菌菌体を培養して酵素源とし、ＸＭＰから酵素反応によってＧＭＰを製造する方法〔Biosci. Biotech. Biochem., 61, 840 (1997)、特開昭63-233798〕等が知られている。
以上のような酵素反応による製造プロセスは、化学的にリン酸化を行う方法に比べ前述の理由により有利であるものの、転換菌を培養するための小型発酵槽が必要である。また、転換菌を添加する分、前段の発酵工程での液量を減らす必要があり、したがって目的ヌクレオチドのバッチ当たりの得量が低下する等の点で充分に効率的なプロセスとはいえない。
上記３条件を満たすベクターとして、例えば、PLプロモーター/cI857リプレッサー遺伝子を保有し、高温で誘導されるｐＰＡＣ３１（WO98/12343号）、lacプロモーター/lacItsリプレッサー遺伝子を保有し、高温で誘導されるｐＢＢ１〔Gene, 70, 415 (1988)〕、PLプロモーター/cI857リプレッサー遺伝子を保有し、高ｐＨで誘導されるｐＲＫ２４８ｃＩｔｓ〔Gene, 97, 125 (1991)〕、ｐｒｏＵ発現制御領域を保有し、高浸透圧下で誘導されるｐＯＳＥＸ２〔Gene, 151, 137 (1994)〕、trcプロモーター/lacIqリプレッサー遺伝子を保有し、イソプロピル-β-D-チオガラクトシド（ＩＰＴＧ）で誘導されるｐＴｒｃ９９Ａ〔Gene, 69, 301 (1988)〕、araBADプロモーター/araCリプレッサー遺伝子を保有し、L-アラビノースで誘導されるｐＡＬ９１８１〔Appl. Microbiol. Biotechnol., 37, 205 (1992)〕、糖質系の炭素源から非糖質系の炭素源に切り替えることで誘導されるベクター等のエシェリヒア・コリで構築されている誘導発現ベクターをあげることができる。
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