JP2000329770A - トロンビン／アンチトロンビン系の機能性を評価するための包括的試験 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 【課題】 血栓閉塞のあり得る出現を評価できる新規な
分析法を提供することを目的とする。 【解決手段】 （ａ）分析する血漿のサンプルを、アン
チトロンビンの阻害活性を促進する物質と混合し；
（ｂ）ＩＩ因子活性化物質を（ａ）段階で生成した混合
物に添加し；（ｃ）（ｂ）段階で生成した混合物のフィ
ブリノーゲンをフィブリンに変換するのにかかる時間ｔ
_ａを測定する段階を含む、トロンビン／アンチトロンビ
ン系の機能性を評価する分析法を提供する。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【発明の属する技術分野】本発明は、トロンビン／アン
チトロンビン系の機能性を評価するための分析試験に関
する。

【０００２】

【従来の技術】止血系は、簡潔には、凝固能Ｐ_ｃと抗凝
固能Ｐ_ａｎｔの間の平衡と見なし得る。この平衡の変化
は必然的に病理学的状態をもたらし、特にＰ_ａｎｔの減
少は、血栓発現状態をもたらし得、一方、Ｐ_ｃの減少
は、出血の危険性を引き起こす。

【０００３】トロンビン／アンチトロンビン系は、凝固
生化学、特に定量的にみて重要な役割を果たしている。
事実、トロンビン（活性化ＩＩ因子）は以下の機能を遂
行する： −フィブリノーゲンを（ＡおよびＢフィブリノペプチド
の脱離により）、フィブリンモノマー（これはその後重
合してフィブリンとなる）に変換； −ＸＩＩＩ因子（その機能はフィブリンポリマー鎖間の
結合を確立することである）の活性化； −フィードバック機構によるＶ因子およびＶＩＩＩ因子
の直接的活性化（これは系のＰ_ｃをかなり増加させ
る）； −プロテインＣの活性化（この活性化形は、補因子プロ
テインＳと共に、天然抗凝固系の基本酵素である）。

【０００４】トロンビン活性は、基本的に、アンチトロ
ンビン（ＡＴ）、および一部、ヘパリン補因子ＩＩ（Ｈ
Ｃ ＩＩ）の阻害作用により調節される。これらの天然
の抗凝固物質によるトロンビン阻害速度は、ヘパリンお
よび／またはグリコサミノグリカン（例えば、デルマタ
ン硫酸）の存在下でかなり増加することが知られてい
る。

【０００５】トロンビンとＩＩ因子の活性化は、中間体
として知られるメイゾトロンビンによって生理学的に起
こる（Ｊ．Ｒｏｓｉｎｇら、Ｔｈｒｏｍｂ Ｈａｅｍｏ
ｓｔａｓ、６０（３）、３５５−３６０、１９８８）。
この物質はまた、ある蛇の毒の作用によりインビトロで
も産生できる。メイゾトロンビンはまた、トロンビンと
似た酵素活性を有するが、フィブリノーゲンとの反応速
度およびＡＴによる阻害速度はいずれも、トロンビンの
それとはかなり異なる。

【０００６】明らかに、循環中のトロンビン活性の増加
が、適切な抗凝固活性により平衡が保たれない場合、Ｐ
_ｃが増加すると血栓閉塞の危険性が高まる。

【０００７】プロテインＣ／プロテインＳ系の機能性お
よび血漿凝固能の両方を評価する包括的および特異的な
試験が既に使用されているが、これらの方法は、多くの
血栓閉塞の生化学的な説明を提供するには不適当である
ことが判明した。別の言葉でいえば、前の血栓症に罹患
する多くの患者は、上記の試験では完全に正常なパラメ
ーターを示すことが判明した。

【０００８】最近文献に報告された提唱されている生化
学的試験（Ｐ．Ｅ．Ｍａｋｒｉｓら、Ｂｌｏｏｄ Ｃｏ
ａｇｕｌａｔｉｏｎ ａｎｄ Ｆｉｂｒｉｎｏｌｙｓｉ
ｓ１９８８、９：６６５−６６６）は、ヒトアンチトロ
ンビンとヘパリンの複合体を患者の血漿に添加すること
を基本とする。

【０００９】

【発明が解決しようとする課題】著者は、この試験を用
いて、血栓症のあり得る原因と考えられる、ＩＩａ因子
の阻害に対して異常な耐性を有する患者を同定すること
ができると主張する。

【００１０】従って、現存の方法と並んで、全ての場合
とはいわないまでも、少なくとも高い割合で、血栓閉塞
のあり得る出現を評価できる新規な分析法を提供する必
要が大いにある。

【００１１】

【発明を解決するための手段】この課題は、以下のトロ
ンビン／アンチトロンビン系の機能性の決定法により解
決される。

【００１２】本発明は、（ａ）分析する血漿のサンプル
を、アンチトロンビンの阻害活性を促進する物質と混合
し；（ｂ）ＩＩ因子活性化物質を（ａ）段階で生成した
混合物に添加し；（ｃ）（ｂ）段階で生成した混合物の
フィブリノーゲンをフィブリンに変換するのにかかる時
間ｔ_ａを測定する段階を含む、トロンビン／アンチトロ
ンビン系の機能性を評価する分析法を提供する。

【００１３】さらに、本発明は、（ｄ）（ａ）項目と同
じ血漿サンプルを、アンチトロンビンの阻害活性を促進
する物質を含まない適切な緩衝液と混合し；（ｅ）ＩＩ
因子活性化物質を、（ｄ）項目で生成した混合物に添加
し；（ｆ）（ｄ）項目で生成した混合物のフィブリノー
ゲンを、フィブリンに変換するのにかかる時間ｔ_０を測
定する段階をさらに含む方法を提供する。

【００１４】さらに、本発明は、（ｇ）Δ_サンプル＝ｔ
_ａ−ｔ_０を計算し；（ｈ）対照血漿について一連の段階
（ａ）−（ｇ）を反復し；（ｉ）規格化値Δ_Ｎ＝Δ
_サンプル／Δ_対照を計算し、比Ｒ＝（ｔ_０）_サンプル／
（ｔ_０）_対照を計算する段階をさらに含む方法を提供す
る。

【００１５】さらに、本発明は、アンチトロンビンの阻
害活性を促進する物質は、非塩化形またはナトリウム、
カルシウムまたはリチウム塩の非分画ヘパリン、非塩化
形またはナトリウム、カルシウムまたはリチウム塩のＬ
ＷＭヘパリン、およびデルマタン硫酸、または好ましく
はこれらの混合物からなる群から選択される方法を提供
する。

【００１６】さらに、本発明は、非分画ヘパリンおよび
／またはＬＭＷヘパリンの水溶液中の濃度は、４ないし
８Ｕ／ｍｌであり、デルマタン硫酸の濃度は１５ないし
２５μｇ／ｍｌである方法を提供する。

【００１７】さらに、本発明は、ＩＩ因子活性化物質
は、Ｅｃｈｉｓ Ｃａｒｉｎａｔｕｓ毒またはその精製
画分、好ましくは０．５および２μｇ／ｍｌの濃度の水
溶液である方法を提供する。

【００１８】さらに、本発明は、（ａ）段階で使用した
試薬を、１−２０ｍｍｏｌ／ｌの濃度のＣａ^２＋または
Ｍｇ^２＋塩および５０−２００ｍｍｏｌ／ｌの濃度のＮ
ａ^＋またはＫ^＋塩を含む水溶液中に前以て加えておく方
法を提供する。

【００１９】さらに、本発明は、アンチトロンビンの阻
害活性を促進する物質およびＩＩ因子活性化物質を、溶
液または固体形で前以て混合する方法を提供する。

【００２０】さらに、本発明は、固体形は凍結乾燥形で
ある方法を提供する。

【００２１】さらに、本発明は、（ｄ）段階で使用した
緩衝液は、１−２０ｍｍｏｌ／ｌの濃度のＣａ^２＋また
はＭｇ^２＋塩および５０−２００ｍｍｏｌ／ｌの濃度の
Ｎａ ^＋またはＫ^＋塩を含む水溶液である方法を提供す
る。

【００２２】さらに、本発明は、アンチトロンビンの阻
害活性を促進する物質およびＩＩ因子活性化物質を、別
々の形でまたは混合物として、溶液または固体形で含
む、トロンビン／アンチトロンビン系の機能性を決定す
るキットを提供する。

【００２３】さらに、本発明は、アンチトロンビンの阻
害活性を促進する物質を、非塩化形またはナトリウム、
カルシウムまたはリチウム塩の非分画ヘパリン、非塩化
形またはナトリウム、カルシウムまたはリチウム塩のＬ
ＷＭヘパリン、およびデルマタン硫酸、または好ましく
はその混合物からなる群から選択されるキットを提供す
る。

【００２４】さらに、本発明は、ＩＩ因子活性化物質
は、Ｅｃｈｉｓ Ｃａｒｉｎａｔｕｓ毒またはその精製
画分であるキットを提供する。

【００２５】さらに、本発明は、非塩化形またはナトリ
ウム、カルシウムまたはリチウム塩の非分画ヘパリン、
非塩化形またはナトリウム、カルシウムまたはリチウム
塩のＬＷＭヘパリン、および／またはデルマタン硫酸、
および凍結乾燥形のＥｃｈｉｓ Ｃａｒｉｎａｔｕｓ毒
またはその精製画分の混合物を含む組成物を提供する。

【００２６】

【発明の実施の形態】本発明の分析法は、以下の段階か
らなる： （ａ）分析する血漿のサンプルを、アンチトロンビンの
阻害活性を促進する物質と混合し； （ｂ）ＩＩ因子活性化物質を（ａ）段階で生成した混合
物に添加し； （ｃ）（ｂ）段階で生成した混合物のフィブリノーゲン
を、フィブリンに変換するのにかかる時間ｔ_ａを測定す
る。

【００２７】測定した時間ｔ_ａは、試験下、血漿のＰ_ｃ
およびＰ_ａｎｔの両方に依存する。

【００２８】次いでこの方法は以下の段階へと続く： （ｄ）（ａ）項目と同じ血漿サンプルを、アンチトロン
ビンの阻害活性を促進する物質を含まない適切な緩衝液
と混合し； （ｅ）ＩＩ因子活性化物質を、（ｄ）項目で生成した混
合物に添加し； （ｆ）（ｄ）項目で生成した混合物のフィブリノーゲン
を、フィブリンに変換するのにかかる時間ｔ_０を測定す
る。

【００２９】測定した時間ｔ_０は、試験下、血漿のＰ_ｃ
にのみ依存する。

【００３０】次いで、Δ_サンプル＝ｔ_ａ−ｔ_０を計算す
る。

【００３１】かくして得たΔ_サンプル値を、対照血漿
（正常な患者の血漿混合物）を（ａ）−（ｆ）段階の方
法で処理し、再度、対照差（ｔ_ａ−ｔ_０）_対照を計算す
ることにより得たΔ_対照と関連づけることにより、規格
化することが有利であり得る。規格化した値は以下のよ
うに計算する： Δ_Ｎ＝Δ_サンプル／Δ_対照 （ａ）項目で提供されるアンチトロンビンの阻害活性を
促進する物質は、非塩化形またはナトリウム、カルシウ
ムまたはリチウム塩の非分画ヘパリン（分子量１０００
−１５０００ドルトン）、非塩化形またはナトリウム、
カルシウムまたはリチウム塩の低分子量ヘパリン（分子
量＜５０００ドルトンのＬＭＷヘパリン）およびデルマ
タン硫酸塩からなる群から選択する。

【００３２】適切な希釈剤、例えば水または適切に緩衝
した水に溶解した促進剤の濃度は、非分画ヘパリンおよ
びＬＭＷヘパリンの両方において、好ましくは、４ない
し８Ｕ／ｍｌであり、デルマタン硫酸においては１５な
いし２５μｇ／ｍｌである。

【００３３】好ましくは、全成分の混合物を使用する。
事実非分画ヘパリンは、ＦＩＩａおよびＦＸａ因子に関
連してその作用を遂行するが、ＬＷＭヘパリンは、選択
的にＦＸａ因子にのみ作用する。デルマタン硫酸の作用
は、アンチトロンビンおよびヘパリン補因子ＩＩの両方
により、専らＦＩＩａ因子に向けられる。ＨＣＩＩの阻
害速度は、ＡＴのそれよりも大きい。

【００３４】例えば、ＬＭＷヘパリンのみの添加は、Ｆ
ＩＩａ因子またはヘパリン補因子ＩＩに関連した機能的
異常を示さないことが判明した。

【００３５】ＩＩ因子活性化物質は、好ましくは、Ｅｃ
ｈｉｓ Ｃａｒｉｎａｔｕｓの毒またはその精製画分で
ある。この試薬を使用する利点は、Ｅｃｈｉｓ Ｃａｒ
ｉｎａｔｕｓの毒がＦＩＩを直接的および選択的に活性
化することである。

【００３６】水などの適切な溶媒に溶解した、ＩＩ因子
活性化物質の濃度は、好ましくは、０．５ないし２μｇ
／ｍｌである。

【００３７】（ａ）項目および（ｂ）項目、および
（ｅ）項目で使用した試薬は、それぞれ、一般的に、分
析する血漿と混合する前に、１−２０ｍｍｏｌ／ｌの濃
度のＣａ ^２＋またはＭｇ^２＋塩および５０−２００ｍｍ
ｏｌ／ｌの濃度のＮａ^＋またはＫ ^＋塩を含む水溶液に添
加する。この水溶液はまた、（ｄ）段階で使用した緩衝
液も構成する。

【００３８】本発明の方法の好ましい実施形態におい
て、アンチトロンビンの阻害を促進する物質およびＩＩ
因子活性化物質を上記で指示した量で前以て混合し、次
いでこの混合物を分析する血漿サンプルに添加する。こ
の変法において、このように（ａ）および（ｂ）段階を
単一の操作段階に合わせる。同様に、（ｄ）および
（ｅ）段階を、単一の操作段階に合わせる。事実、その
後にＦＩＩ因子を活性化する物質を添加する前に、ヘパ
リンと共に血漿サンプルを前以てインキュベートするこ
とは厳密に必要ではないことが判明している。

【００３９】本法に使用した試薬は、好ましくは凍結乾
燥形で使用する。

【００４０】本発明の分析法は、以下の実施例によりさ
らに説明される。

【００４１】実施例１ １００μｌの血漿（これはプロセスを通じて３７℃に維
持した）に、４．０Ｕ／ｍｌのナトリウムヘパリン、
５．０ｍｍｏｌ／ｌのＣａ^２＋塩および１５０ｍｍｏｌ
／ｌのＮａ^＋塩の水溶液１００μｌを補足した。次い
で、１．０μｇ／ｍｌの濃度のＥｃｈｉｓ Ｃａｒｉｎ
ａｔｕｓ毒の水溶液１００μｌを添加した。血漿の凝固
に必要な時間ｔ_ａを記録した。

【００４２】１００μｌの同血漿に、再び３７℃で、
５．０ｍｍｏｌ／ｌのＣａ^２＋塩および１５０ｍｍｏｌ
／ｌのＮａ^＋塩を含む水溶液１００μｌおよび、その
後、１．０μｇ／ｍｌの濃度のＥｃｈｉｓ Ｃａｒｉｎ
ａｔｕｓ毒の１００μｌ水溶液を補足した。血漿の凝固
に必要な時間ｔ_０を記録した。

【００４３】次いで差 Δ_サンプル＝（ｔ_ａ−ｔ_０）_サンプル を計算した。対照血漿について上記した段階を反復する
ことにより、値 Δ_対照＝（ｔ_ａ−ｔ_０）_対照 を得た。以下のパラメーター： Ｒ＝（ｔ_０）_サンプル／（ｔ_０）_対照 および次いで Δ_Ｎ＝Δ_サンプル／Δ_対照 を計算した。

【００４４】実施例２ １００μｌの血漿（これはプロセスを通じて３７℃に維
持した）に、２．０Ｕ／ｍｌのナトリウムヘパリン、
０．５μｇ／ｍｌのＥｃｈｉｓ Ｃａｒｉｎａｔｕｓ
毒、２．５ｍｍｏｌ／ｌのＣａ^２＋塩および７５ｍｍｏ
ｌ／ｌのＮａ^＋塩の水溶液２００μｌを補足した。血漿
の凝固に必要な時間ｔ_ａを記録した。

【００４５】１００μｌの同血漿に、再び３７℃で、
０．５μｇ／ｍｌのＥｃｈｉｓ Ｃａｒｉｎａｔｕｓ
毒、２．５ｍｍｏｌ／ｌのＣａ^２＋塩および７５ｍｍｏ
ｌ／ｌのＮａ^＋塩を含む水溶液２００μｌを補足した。
血漿の凝固に必要な時間ｔ_０を記録した。差 Δ_サンプル＝（ｔ_ａ−ｔ_０）_サンプル を次いで計算した。対照血漿について上記した段階を反
復することにより、値 Δ_対照＝（ｔ_ａ−ｔ_０）_対照 を得た。以下のパラメーター： Ｒ＝（ｔ_０）_サンプル／（ｔ_０）_対照および次いで Δ_Ｎ＝Δ_サンプル／Δ_対照 を計算した。

【００４６】実施例１および２の方法に従って得られた
結果は以下のように解釈し得る：

【表１】 ----------------------------------------------------------------------- 結果 有意 あり得る原因 ----------------------------------------------------------------------- Ｒ＞１．２５ 凝固活性減少 −ＩＩ因子活性減少 −フィブリン血症障害 Ｒ＜０．９０ 凝固活性増加 −ＩＩ因子活性増加 (生理学的または２０２１０ＧＡ変異) Δ_Ｎ＜０．７５ ＦＩＩａの阻害に −ＡＴ活性減少 対する耐性の増加 （後天性または先天性） −ＨＣＩＩ活性減少 （後天性または先天性） −ＩＩ因子活性増加 −フィブリノーゲン含量増加 −ＩＩ因子の機能異常 −Ｘ因子の機能異常 ----------------------------------------------------------------------- 表２は、トロンビン／アンチトロンビン系に生来いくつ
かの異常を有する患者の血症の分析により得た結果を示
す。この場合でも、実施例１および２の方法を行った。

【００４７】

【表２】 ----------------------------------------------------------------------- 欠陥または異常 ｔ_０（秒） ｔ_ａ（秒） Ｒ Δ_Ｎ ----------------------------------------------------------------------- フィブリン血症障害 ９０ ３００ ２．５０ ２．５０ フィブリノーゲン （＞７００ｍｇ／ｄｌ） ４５ １３０ ０．８０ ０．６０ ＡＴ欠損 ５０ １５０ １．００ ０．７０ ＨＣＩＩ欠損 ５０ １５０ １．００ ０．７０ ＩＩ因子（＞１２０％） 生理学的含蓄 ４５ １４０ ０．８０ ０．６０ ２０２１０ＧＡ変異 ４５ １４０ ０．８０ ０．６０ ＩＩ因子（＞１５０％） ９０ ３００ ２．５０ ２．５０ 正常対照 ５０ １９０ １．００ １．００ 全く不明 ５０ １５０ １．００ ０．７０ 全く不明 ４５ １５０ ０．８０ ０．７０ ----------------------------------------------------------------------- 従って、前記並びに表１および２から、本発明の分析法
は、トロンビン／アンチトロンビン系の機能性の完全な
考察を提供できることは明らかである。

【００４８】本発明の方法に使用した試薬、特にＡＴの
阻害活性を促進する物質およびＦＩＩ因子活性化物質
は、それらが別々または混合形、溶液または固体状態、
好ましくは凍結乾燥形で存在し得るキットで提供され得
る。

【００４９】

【発明の効果】本願発明によると、高い割合で、血栓閉
塞のあり得る出現を評価することを可能とする。

【００５０】また、本願発明に方法によると、簡易に、
血栓閉塞の出現を評価することを可能とする。

【００５１】さらに、本願発明のキットによると、簡易
に、トロンビン／アンチトロンビン系の機能性を決定す
ることを可能とする。

Claims (14)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】 （ａ）分析する血漿のサンプルを、アン
   チトロンビンの阻害活性を促進する物質と混合し； （ｂ）ＩＩ因子活性化物質を前記（ａ）段階で生成した
   混合物に添加し； （ｃ）前記（ｂ）段階で生成した混合物のフィブリノー
   ゲンをフィブリンに変換するのにかかる時間ｔ_ａを測定
   する段階を含む、トロンビン／アンチトロンビン系の機
   能性を評価する分析法。
2. 【請求項２】 （ｄ）前記（ａ）項目と同じ血漿サンプ
   ルを、アンチトロンビンの阻害活性を促進する物質を含
   まない適切な緩衝液と混合し； （ｅ）ＩＩ因子活性化物質を前記（ｄ）項目で生成した
   混合物に添加し； （ｆ）前記（ｄ）項目で生成した混合物のフィブリノー
   ゲンを、フィブリンに変換するのにかかる時間ｔ_０を測
   定する段階をさらに含む、請求項１に記載の方法。
3. 【請求項３】 （ｇ）前記ｔ_ａ及びｔ_０から、Δ
   _サンプル＝ｔ_ａ−ｔ_０を計算し； （ｈ）対照血漿について一連の段階（ａ）−（ｇ）を反
   復し； （ｉ）規格化値Δ_Ｎ＝Δ_サンプル／Δ_対照を計算し、比
   Ｒ＝（ｔ_０）_サンプル／（ｔ_０）_対照を計算する段階を
   さらに含む、請求項２に記載の方法。
4. 【請求項４】 前記アンチトロンビンの阻害活性を促進
   する物質は、非塩化形またはナトリウム、カルシウムま
   たはリチウム塩の非分画ヘパリン、非塩化形またはナト
   リウム、カルシウムまたはリチウム塩のＬＷＭヘパリ
   ン、およびデルマタン硫酸、またはこれら混合物からな
   る群から選択される、請求項１ないし３のいずれか１項
   に記載の方法。
5. 【請求項５】 非分画ヘパリンおよび／またはＬＭＷヘ
   パリンの水溶液中の濃度は、４ないし８Ｕ／ｍｌであ
   り、デルマタン硫酸の濃度は１５ないし２５μｇ／ｍｌ
   である、請求項４に記載の方法。
6. 【請求項６】 ＩＩ因子活性化物質は、Ｅｃｈｉｓ Ｃ
   ａｒｉｎａｔｕｓ毒またはその精製画分、好ましくは
   ０．５および２μｇ／ｍｌの濃度の水溶液である、請求
   項１ないし５のいずれか１項に記載の方法。
7. 【請求項７】 前記（ａ）段階で使用した試薬を、１−
   ２０ｍｍｏｌ／ｌの濃度のＣａ^２＋またはＭｇ^２＋塩お
   よび５０−２００ｍｍｏｌ／ｌの濃度のＮａ ^＋またはＫ
   ^＋塩を含む水溶液中に前以て加えておく、請求項１ない
   し６のいずれか１項に記載の方法。
8. 【請求項８】 前記アンチトロンビンの阻害活性を促進
   する物質および前記ＩＩ因子活性化物質を、溶液または
   固体形で前以て混合する、請求項１ないし７のいずれか
   １項に記載の方法。
9. 【請求項９】 前記固体形は凍結乾燥形である、請求項
   ８に記載の方法。
10. 【請求項１０】 前記（ｄ）段階で使用した緩衝液は、
    １−２０ｍｍｏｌ／ｌの濃度のＣａ^２＋またはＭｇ^２＋
    塩および５０−２００ｍｍｏｌ／ｌの濃度のＮａ^＋また
    はＫ^＋塩を含む水溶液である、請求項１ないし９のいず
    れか１項に記載の方法。
11. 【請求項１１】 前記アンチトロンビンの阻害活性を促
    進する物質および前記ＩＩ因子活性化物質を、別々の形
    でまたは混合物として、溶液または固体形で含む、トロ
    ンビン／アンチトロンビン系の機能性を決定するキッ
    ト。
12. 【請求項１２】 前記アンチトロンビンの阻害活性を促
    進する物質を、非塩化形またはナトリウム、カルシウム
    またはリチウム塩の非分画ヘパリン、非塩化形またはナ
    トリウム、カルシウムまたはリチウム塩のＬＷＭヘパリ
    ン、およびデルマタン硫酸、または好ましくはその混合
    物からなる群から選択する、請求項１１に記載のキッ
    ト。
13. 【請求項１３】 前記ＩＩ因子活性化物質は、Ｅｃｈｉ
    ｓ Ｃａｒｉｎａｔｕｓ毒またはその精製画分である、
    請求項１１または請求項１２に記載のキット。
14. 【請求項１４】 非塩化形またはナトリウム、カルシウ
    ムまたはリチウム塩の非分画ヘパリン、非塩化形または
    ナトリウム、カルシウムまたはリチウム塩のＬＷＭヘパ
    リン、および／またはデルマタン硫酸、および凍結乾燥
    形のＥｃｈｉｓ Ｃａｒｉｎａｔｕｓ毒またはその精製
    画分の混合物を含む組成物。