JP2000351739A - アセチルコリンエステラーゼ及びアルツハイマー病のインビボ研究のための放射性トレーサー - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 【課題】 アセチルコリンエステラーゼ追跡用の放射性
トレーサーを提供する。 【解決手段】 式Ｉ： 【化１】 の放射性標識化合物は、アルツハイマー病診断のための
インビボの造影剤として有用である。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【発明の属する技術分野】本発明は、以下の式Ｉの、放
射性標識ヘテロサイクリック−サイクリックアミン誘導
体、及びそのような化合物の製薬学的に許容しうる塩の
使用法に関する。式Ｉの化合物はアセチルコリンエステ
ラーゼ（ＡＣｈＥ）阻害薬であり、痴呆及びアルツハイ
マー病を患う患者の脳ＡＣｈＥの造影剤として有用であ
る。これらの薬剤は、アルツハイマー病の早期診断、及
び当該疾患の経過の追跡に有用である。

【０００２】アルツハイマー病は、記憶を含む認知機能
において基本的役割を演ずる前脳底部のコリン性ニュー
ロンの変性と関係がある。Ｂｅｃｋｅｒら，Ｄｒｕｇ
Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ Ｒｅｓｅａｒｃｈ，１２，１
６３−１９５（１９８８）。そのような変性の結果、該
疾患を患う患者は、アセチルコリン合成、コリンアセチ
ルトランスフェラーゼ活性、アセチルコリンエステラー
ゼ活性及びコリン取り込みに顕著な低下を示す。

【０００３】本発明の化合物はＡＣｈＥの効力ある阻害
薬であり、該酵素と強固に結合する。ポジトロン放出断
層撮影法（ＰＥＴ）及び単光子放射型コンピュータ断層
撮影法（ＳＰＥＣＴ）によるスキャニング技術は、放射
性標識化合物の分布及び対応するＡＣｈＥの分布を測定
するのに有用である。

【０００４】脳の中のコリン作用性機能及びコリン性マ
ーカーの喪失は、アルツハイマー病（ＡＤ）の特徴であ
り、ＡＤ患者がコリン性機能に進行性の防止できない減
退を被ることを示す多くの研究で観察されている^1,2。
さらに、低下したコリン性機能は、ＡＤ患者にみられる
認知低下の原因になり得る³。インビボにおけるコリン
性機能の研究の試みは、必然的に、神経終末における高
親和性のコリン輸送物質であり、ムスカリン受容体及び
ニコチン受容体であるアセチルコリンエステラーゼ（Ａ
ＣｈＥ）を画像化するための放射性医薬品の開発を包含
してきた⁴。現在の治療的戦略は、コリン性の神経伝達
を増大させようとして、効力ある選択的ＡＣｈＥ阻害薬
の開発を包含することが多い^5,6。コリン性ニューロン
はＡＤの経過中衰退を続けるので、このような療法は結
局のところ待期的にすぎないことがはっきりしているの
であろうが、ＡＣｈＥ自体は、疾患のいくつかの診断上
及び予後上の側面にとって、非常に有用なマーカーを提
供し得る。具体的には、適切な放射性標識ＡＣｈＥ阻害
薬は、インビボで、１）ＡＤの早期診断、２）ＡＤにお
けるコリン性喪失の進行の解明（ごく早期疾患の患者
は、疾患の全経過をポジトロン放出断層撮影法（ＰＥ
Ｔ）によって検査することができるため）、３）コリン
性喪失と記憶試験点数（例えばＭＭＳＥ点数）との間の
考えられる相関関係の確立、及び４）ＡＣｈＥ阻害薬を
用いた薬物療法の個別化（例えば、ＡＣｈＥ減退の小さ
い患者は、初期には低薬物用量で処置される、またその
逆）、のために使用され得る。

【０００５】ヒトにおけるインビボ画像化に適切な、高
親和性の脳選択的コリン性マーカーの開発はまだである
が、いくつかの炭素−１１ＡＣｈＥ阻害薬の類似体は合
成されている⁴。炭素−１１で標識された、ＡＣｈＥ阻
害薬のタクリンの類似体である［¹¹Ｃ］ＭＴＨＡが合成
されているが、齧歯類と霊長類の生体分布研究によれ
ば、ＡＣｈＥと［¹¹Ｃ］ＭＴＨＡ結合部位との共局在(c
o-localization)を示さなかった⁹。［¹¹Ｃ］フィゾスチ
グミン分布はＡＣｈＥの分布と重なり合うことがわか
り、この化合物がインビボ（ラット及び霊長類）におけ
るＡＣｈＥをＰＥＴを用いて視覚化するのに使われてき
た^10,11。しかしながら、［¹¹Ｃ］フィゾスチグミンに
関しては、脳のＡＣｈＥの定量と結合動態が入手できな
いので、フィゾスチグミンの短い半減期がＰＥＴ造影剤
としての適切性にどのような影響を持つのかを予測する
のが難しい。別の種類のＡＣｈＥ阻害薬であるピペリジ
ルエステル類が、放射性標識された形態で製造されてい
る¹³。齧歯類を用いた生体分布の予備研究では有望であ
るが、ＰＥＴのデータはまだ公表されていない。

【０００６】実施例２の化合物は、新規で高効力の選択
的なＡＣｈＥ阻害薬の種類の一例である¹²。当該化合物
は、ＡＣｈＥに対して高い親和性（ＩＣ₅₀＝０．４８ｎ
Ｍ）と、前例のない選択性（ＡＣｈＥ：ＢＣｈＥ＝９３
００：１）を有している。実施例２の化合物に基づく放
射性医薬品は、インビボにおけるコリン性神経伝達の研
究のための必要基準を満たしている。すなわち、高い親
和性と選択性、脳取り込みの高さ、インビボにおける安
定性、及び放射化学合成の容易さである。参考文献

【０００７】

【表１】

【０００８】

【表２】

【０００９】

【課題を解決するための手段】本発明は、アセチルコリ
ンエステラーゼを含有するヒト脳の領域を検出する方法
であって、 ａ）式Ｉ：

【００１０】

【化３】

【００１１】［式中、 Ｑは、（ＣＨ₂）_m、−ＣＨ＝ＣＨ−、−ＣＨＣＨ₃、−
Ｃ（ＣＨ₃）₂、酸素、硫黄又はＮＨであり； Ｘは、酸素又は硫黄であり； Ｙは、−（ＣＨ₂）_m−であり； Ｌは、フェニル又はフェニル−（Ｃ₁−Ｃ₆）アルキル
で、前記フェニルは場合により（Ｃ₁−Ｃ₆）アルキル又
はハロ、好ましくはＩ、Ｆ、又はＢｒで置換されてお
り； Ｒ¹は、水素又は（Ｃ₁−Ｃ₆）アルキルであり； ｍは、１〜３の整数である］のポジトロン放出放射性標
識化合物及びその製薬学的に許容しうる塩をヒトの血流
に注入し；そして ｂ）前記ヒトの前記脳をポジトロン放出断層撮影法又は
単光子放射型コンピュータ断層撮影法で画像化して脳画
像を形成し、前記画像が、脳の異なる部分におけるアセ
チルコリンエステラーゼの相対量を示す；ことを含む方
法を提供する。

【００１２】アルツハイマー病及び他の脳障害における
脳のアセチルコリンエステラーゼを画像化するための式
Ｉの好適な放射性標識化合物は、Ｒ¹が［¹¹Ｃ］メチル
の化合物である。画像を図１に示す。

【００１３】脳ＡＣｈＥの画像化に、二番目に好適な式
Ｉの化合物群は、ＹがエチレンでＬがベンジルである化
合物である。

【００１４】脳ＡＣｈＥの画像化に、また更に好適な式
Ｉの化合物群は、Ｘが−Ｏ−であり、Ｑが−ＣＨ₂−で
あり、Ｌがベンジルである化合物である。

【００１５】脳ＡＣｈＥの画像化に、別の好適な式Ｉの
化合物群は、Ｑが−ＣＨ₂−であり、Ｙがエチレンであ
り、Ｌがベンジルである化合物である。

【００１６】特に好適な化合物は、５，７−ジヒドロ−
７−［¹¹Ｃ］メチル−３−［２−［１−（フェニルメチ
ル）−４−ピペリジニル］エチル］−６Ｈ−ピロロ
［４，５−ｆ］−１，２−ベンズイソオキサゾール−６
−オンである、実施例２の化合物である。

【００１７】別の好適な群においては、Ｌがベンジル
で、フェニル基がＩ又はＦで置換されている。

【００１８】本発明の方法は、アルツハイマー病及び他
の脳病理所見の存在又は重症度又は進行を診断するのに
使用できる。

【００１９】

【発明の実施の形態】本発明の放射性標識化合物の合成
法の図を以下のスキーム１に示す。

【００２０】

【化４】

【００２１】実施例２の高比放射能［Ｃ−１１］化合物
は、実施例１の化合物のデスメチル前駆体をＤＭＦ中で
［Ｃ−１１］ヨウ化メチルとテトラブチルアンモニウム
ヒドロキシド（ＴＢＡＨ）で、８０℃で５分間処理する
ことにより合成した（放射化学的収率１４〜２４％、非
崩壊補正）。

【００２２】

【化５】

【００２３】当業者であれば、式Ｉの化合物についてＷ
Ｏ９２／１７４７５に示された合成手順は、放射性中間
体を合成の適当な段階で導入することにより、対応する
放射性標識化合物の製造に適応され得ることがわかるで
あろう。

【００２４】実施例２の［Ｃ−１１］化合物をマウスに
用いた予備的なインビボ研究が開示されている（Ｍｕｓ
ａｃｈｅｒら、Ｊ．Ｎｕｃｌｅａｒ Ｍｅｄ．１９９
６，３７（５），Ｓｕｐｐｌｅｍｅｎｔ，Ａｂｓｔｒａ
ｃｔ Ｎｏ．１５５）。

【００２５】ポジトロン放出断層撮影法（ＰＥＴ）は、
当該技術分野で公知である。例えば、コリン性ニューロ
トラモン(neurotrammone)研究のためのＰＥＴのインビ
ボにおける使用について記載しているＭａｚｉｅｒｅ，
Ｐｈａｒｍａｃ．Ｔｈｅｒ．６６．８３（１９９５）、
及びＰＥＴを用いた霊長類の画像化のための方法と改変
装置について教えているＫｉｌｂｏｕｒｎｅら，Ｓｙｎ
ａｐｓｅ ２２，１２３（１９９６）参照。

【００２６】脳の画像化は、コンピュータサイエンスと
物理学の結び付きによって大きく変化し、多くの外的検
出システムが編み出された。中でも、ポジトロン放出断
層撮影法（ＰＥＴ）と単光子放射型コンピュータ断層撮
影法（ＳＰＥＣＴ）は、それぞれβ＋又はγ光子を放出
する放射性核種で標識した化合物の投与後、ポジトロン
（β＋）又はγカメラを用いて、経時的な局所組織の放
射能濃度を非侵襲的にモニターできる。標識化合物（放
射性医薬品）が、神経伝達の既知システム（伝達物質、
輸送物質、受容体、酵素など）と選択的及び特異的に相
互作用することがわかっている場合、該放射性医薬品
は、所定の神経伝達システムを調べるためのインビボの
プローブとして使用できる。

【００２７】ＰＥＴとＳＰＥＣＴの方法論は、インビボ
における逐次的な研究を可能とし、連続画像で得られた
興味の対象の特定領域における放射能ｖｓ時間をプロッ
トすることができる。これらの二方法は、安全且つ非侵
襲的であり、使用する放射性同位体の短い半減期のため
に弱照射である。しかしながら、ＰＥＴとＳＰＥＣＴに
は、固有の利点及び限界がある。

【００２８】ＰＥＴ研究では、コリン性の放射性トレー
サーの標識に使用される主なポジトロン放出放射性核種
は：半減期２０．４分の炭素１１［¹¹Ｃ］、半減期１１
０分のフッ素１８［¹⁸Ｆ］、及び半減期１６時間の臭素
７６［⁷⁶Ｂｒ］である。これらの放射性核種はいずれ
も、サイクロトロン中で非常に高い比放射能を持って製
造されなければならない。

【００２９】ＳＰＥＣＴ研究では、コリン性システムの
研究にヨウ素１２３［¹²³Ｉ］が使用され得る。その半
減期は３１．２時間である。この放射性同位体は、非常
に高い比放射能を持って市販されている。

【００３０】ＰＥＴ研究では、減衰と散乱の補正問題が
解決したため、現在では日常の臨床応用において組織中
の放射性トレーサーの絶対的定量が可能となっている。
しかしながら、ポジトロンを放出する放射性核種（通常
短い半減期を有する）の製造は、ＰＥＴリガンドを製造
できる施設に限定される。

【００３１】ＰＥＴ及びＳＰＥＣＴによる画像化を実施
できる施設は世界中にある。それらの施設のリストがＩ
ＣＰ，Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ ｆｏｒ Ｃｌｉｎｉｃａｌ
ＰＥＴから発行されている。例えば、ＰＥＴセンター
が、カリフォルニア州サクラメントのＮｏｒｔｈｅｒｎ
Ｃａｌｉｆｏｒｎｉａ ＰＥＴ ＩｍａｇｉｎｇＣｅ
ｎｔｅｒ、及びコネティカット州ウエストヘーブンのＹ
ａｌｅ−ＶＡ Ｐｏｓｉｔｒｏｎ Ｉｍａｇｉｎｇ Ｌ
ａｂｏｒａｔｏｒｙにある。

【００３２】本発明の方法は、ＡＣｈＥに強固に結合
し、ＰＥＴで検出できる放射性標識化合物の製造法を提
供する。ＰＥＴによって、ＡＣｈＥの位置と相対量を示
すヒトの脳の画像が得られる。アルツハイマー病を含む
ある種の脳障害は、ＡＣｈＥの量が減少する。被検者の
脳画像を、正常の脳画像及びアルツハイマー病であるこ
とがわかっている患者の画像と比較すると、被検者にお
けるアルツハイマー病の存在又は重症度が示される。

【００３３】コリンアセチルトランスフェラーゼとＡＣ
ｈＥは、プラークの数が増加するにつれて著しく減少
し、痴呆の被験者では、コリンアセチルトランスフェラ
ーゼ活性の低下と知的障害が相関していることがわかっ
た。従って、コリン性システムの変化とアルツハイマー
病との間には密接な関係がある。Ｐｅｒｒｙら，Ｂｒｉ
ｔ．Ｍｅｄ．Ｊ．２５，Ｎｏｖ．１９７８，ｐ．１４５
７参照。

【００３４】本発明の方法は、脳障害が疑われる患者
に、非毒性量の上記式Ｉの放射性標識化合物を投与する
ことによって達成される。当該化合物の量は、脳画像を
形成するためにＰＥＴ技術によって検出できるに足る量
でなければならない。正常の脳画像と比べた場合に脳画
像に示されるＡＣｈＥの減少は、患者の脳の病理所見を
示唆する。

【００３５】

【実施例】実施例１ ５，７−ジヒドロ−３−［２−［１−（フェニルメチ
ル）−４−ピペリジニル］エチル］−６Ｈ−ピロロ
［４，５−ｆ］−１，２−ベンズイソオキサゾール−６
−オンマレイン酸塩

【００３６】

【化６】

【００３７】ａ）５−アセチル−１，３−ジヒドロ−６
−ヒドロキシ−２Ｈ−インドール−２−オン 塩化アセチル（４．０９ｍＬ、０．０５７５ｍｏｌ）
を、二硫化炭素（ＣＳ₂）（２５０ｍＬ）中三塩化アル
ミニウム（ＡｌＣｌ₃）（３５．３６ｇ、０．２６５ｍ
ｏｌ）のスラリーに加えた。２〜３分後、６−メトキシ
オキシインドール（７．２２ｇ、０．０４４２ｍｏｌ）
を加えた。得られた混合物を加熱して２．５時間還流し
た。（時間と共に黒色のタールが発生した。）過剰の溶
媒をデカントし、残渣に氷水を注意深く加えた。得られ
た混合物を一晩攪拌した。得られた淡黄色の固体を回収
し、水で洗浄して高真空下で乾燥し、標記化合物を得た
（７．３２ｇ、８７％）。

【００３８】

【数１】

【００３９】ｂ）５−アセチル−１，３−ジヒドロ−６
−ヒドロキシ−２Ｈ−インドール−２−オン，５−オキ
シム 塩酸ヒドロキシルアミン（８．２６ｇ、０．１１９ｍｏ
ｌ）と酢酸ナトリウム三水和物（１６．９ｇ、０．１２
４ｍｏｌ）の水溶液を、ステップａで形成したケトン
（９．８８ｇ、０．０５１７ｍｏｌ）のＥｔＯＨ（６０
０ｍＬ）中混合物に加えた。得られた混合物を加熱して
２０時間還流した。熱反応混合物をろ過し、回収した固
体をＥｔＯＨで濯いだ。乾燥後、標記化合物（１０．１
１ｇ、９５％）を淡黄色固体として得た。

【００４０】

【数２】

【００４１】ｃ）５−アセチル−１，３−ジヒドロ−６
−ヒドロキシ−２Ｈ−インドール−２−オン，５−オキ
シムアセテート ステップｂで形成したオキシム（７．１５ｇ、３４．７
ｍｍｏｌ）の無水酢酸（５５ｍＬ）中不均一混合物を８
０℃で２時間加熱した。冷却した反応混合物をろ過し、
回収した固体を水で濯いだ。乾燥後、標記化合物（４．
６７ｇ、５４％）を淡黄色固体として得た。

【００４２】

【数３】

【００４３】ｄ）５，７−ジヒドロ−３−メチル−６Ｈ
−ピロロ［４，５−ｆ］−１，２−ベンズイソオキサゾ
ール−６−オン ステップｃで形成したオキシムアセテート（４．４８
ｇ、１８．０ｍｍｏｌ）とピリジン（１４．６ｍＬ、１
８０ｍｍｏｌ）のジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）（６
６０ｍＬ）中混合物を１２５〜１３０℃で４時間加熱し
た。冷却した反応混合物を水の上に注ぎ、ＥｔＯＡｃで
抽出した（４回）。合わせた有機層を水と食塩水で洗浄
し、乾燥（ＭｇＳＯ₄）、ろ過、及び濃縮した。シリカ
ゲルフラッシュクロマトグラフィー（５０％ＥｔＯＡｃ
／ヘキサン→１００％ＥｔＯＡｃ）で精製し、標記化合
物（２．２０ｇ、６５％）を淡黄橙色固体として得た。

【００４４】融点（ＥｔＯＡｃ）：２６４〜２６５℃
（分解）

【００４５】

【数４】

【００４６】ｅ）４−［２−［５，７−ジヒドロ−６Ｈ
−ピロロ［４，５−ｆ］−１，２−ベンズイソオキサゾ
ール−６−オン−３−イル］エチル］−１−ピペリジン
カルボン酸，１−（１，１−ジメチルエチル）エステル 調製したての１Ｍリチウムジイソプロピルアミド（ＬＤ
Ａ）（４０．９ｍＬ、４０．９ｍｍｏｌ）を、ステップ
ｄで形成したベンズイソオキサゾール（２．３３ｇ、１
２．４ｍｍｏｌ）のＴＨＦ中（４００ｍＬ）冷（−７８
℃）溶液に、一滴ずつ迅速に加えた。添加完了後直ち
に、４−ヨードメチル−１−ピペリジンカルボン酸，１
−（１，１−ジメチルエチル）エステル（４．４２ｇ、
１３．６ｍｍｏｌ）の乾燥ＴＨＦ（１００ｍＬ）中溶液
を一度に加えた。得られた混合物を−７８℃で４時間攪
拌した。飽和塩化アンモニウム（ＮＨ₄Ｃｌ）を加え、
混合物を酢酸エチル（ＥｔＯＡｃ）で抽出した（３
回）。合わせた有機層を食塩水で洗浄し、硫酸マグネシ
ウム（ＭｇＳＯ₄）上で乾燥、ろ過、及び濃縮した。ク
ロマトグラフィー（２０％→３０％ＥｔＯＡｃ／ＣＨ₂
Ｃｌ₂）で精製し、回収された出発物質（０．２１０
ｇ、９％）とオフホワイト色の固体の標記化合物（２．
７５ｇ、５８％）を得た。

【００４７】

【数５】

【００４８】ｆ）５，７−ジヒドロ−３−［２−［１−
（フェニルメチル）−４−ピペリジニル］エチル］−６
Ｈ−ピロロ［４，５−ｆ］−１，２−ベンズイソオキサ
ゾール−６−オンマレイン酸塩 トリフルオロ酢酸（ＴＦＡ（３．３ｍＬ）を、ステップ
ｅで形成したピペリジン（０．５０ｇ、１．３０ｍｍｏ
ｌ）のＣＨ₂Ｃｌ₂中（１３ｍＬ）冷（０℃）溶液に滴下
添加した。３０分後、混合物を濃縮し、過剰のＴＦＡを
トルエンから濃縮することにより除去した（２〜３
回）。粗残渣をＤＭＦ（１２．５ｍＬ）に溶解し、炭酸
ナトリウム（Ｎａ₂ＣＯ₃）（０．６８９ｇ、６．５０ｍ
ｍｏｌ）と臭化ベンジル（０．１８６ｍＬ、１．５６ｍ
ｍｏｌ）を加えた。得られた混合物を室温で４時間攪拌
した。反応をろ過し、ろ液を真空下で濃縮した。残渣を
塩化メチレンに溶解し、食塩水で洗浄、乾燥（ＭｇＳＯ
₄）、ろ過、及び濃縮した。シリカゲルクロマトグラフ
ィー（ＣＨ₂Ｃｌ₂→１０％メタノール／ＣＨ₂Ｃｌ₂）で
精製し、標記化合物（遊離塩基）（０．３４３ｇ、７０
％）を白色固体として得た。

【００４９】マレイン酸塩は、エタノール（ＥｔＯＨ）
（１ｍＬ）中マレイン酸（０．０６１ｇ、０．５２８ｍ
ｍｏｌ）溶液を、ＣＨ₂Ｃｌ₂（１０ｍＬ）中遊離塩基
（０．１８０ｇ、０．４８ｍｍｏｌ）溶液に加えること
によって製造した。濃縮後、該塩をイソプロパノールか
らの再結晶により精製し、オフホワイト色の固体を得
た。収率：０．１７３ｇ、７３％ 融点１９４〜１９５℃

【００５０】

【数６】

【００５１】実施例２ ５，７−ジヒドロ−７−［¹¹Ｃ］−メチル−３−［２−
［１−（フェニルメチル）−４−ピペリジニル］エチ
ル］−６Ｈ−ピロロ［４，５−ｆ］−１，２−ベンズイ
ソオキサゾール−６−オン 材料及び方法 ［¹¹Ｃ］二酸化炭素は、スカンジトロニクスＲＮＰ−１
６バイオメディカルサイクロトロンを用い、窒素ガスタ
ーゲットの１６ＭｅＶプロトンボンバードメントにより
製造した。［¹¹Ｃ］ヨウ化メチルへの転化については既
述した（Ｉ）。放射能の測定は、Ｃａｐｉｎｔｅｃ Ｃ
ＲＣ−１２線量キャリブレータを用いて行った。［¹¹Ｃ］５，７−ジヒドロ−７−［¹¹Ｃ］−メチル−３
−［２−［１−（フェニルメチル）−４−ピペリジニ
ル］エチル］−６Ｈ−ピロロ［４，５−ｆ］−１，２−
ベンズイソオキサゾール−６−オンの放射合成、精製、
及び製剤化 実施例１の化合物のマレイン酸塩（２ｍｇ）を水（０．
５ｍＬ）に溶解し、これにパスツールピペットで２滴の
２Ｎ ＮａＯＨを加えた。水性層をジエチルエーテルで
抽出し（２×１ｍＬ）、抽出物をＮａ₂ＳＯ₄カラム（内
径０．５ｍｍ×２．５ｃｍ） に通した。エーテルをア
ルゴンの緩流下で蒸発させた。白色の膜を２００μＬの
ＤＭＦに再溶解し、セプタムで封をした１ｍＬのバイア
ルに移した。該バイアルを冷却（−７８℃）し、
［¹¹Ｃ］ヨウ化メチルを窒素キャリヤーガス流によって
反応容器に送り込んだ。溶液中の放射能がプラトーに達
したら窒素流を止めた。テトラブチルアンモニウムヒド
ロキシド水溶液（５μＬ、０．４Ｍ）を、ハミルトンマ
イクロシリンジを通して反応混合物に加えた。反応を８
０℃の湯浴中で５分間加熱した後、アセトニトリル：水
＝３０：７０（０．１Ｍギ酸アンモニウム）からなるＨ
ＰＬＣ溶媒０．２ｍＬを加えてクエンチングした。該混
合物を、Ｗａｔｅｒｓ Ｎｏｖａ−Ｐａｋ Ｃ１８ ６
μ（７．８ｍｍ×３０ｃｍ）の半調製カラムに注入し、
７ｍＬ／分の速度で溶出させた。カラムからの流出液を
ＵＶ検出器（２５４ｎｍ、Ｗａｔｅｒｓモジュール４４
０）とインライン放射能検出器（Ｏｒｔｅｃ４４９レー
トメータ、５７５増幅器、５５０シングルチャンネル分
析器、ＮａＩ（ＴＩ）結晶つき）でモニターした。実施
例２の［¹¹Ｃ］化合物に対応する放射能ピーク（ｔ_R＝
５．２分、ｋ’＝３．３）を回転蒸発器に回収し、減圧
下で溶媒を蒸発乾固した。残渣を無菌標準食塩液（７ｍ
Ｌ）に溶解し、０．２２μｍの無菌フィルタを通して、
発熱物質を除去し排気した無菌バイアルにろ過した。次
に、無菌の炭酸水素ナトリウム水溶液（３ｍＬ、８．４
％）を加え、放射能を測定した。比放射能及び放射化学的純度の測定 体積と放射能が既知の最終溶液の一部を、分析用逆相Ｈ
ＰＬＣカートリッジ（Ｗａｔｅｒｓ Ｎｏｖａ−Ｐａｋ
Ｃ１８ ６μ ８ｍｍ×１ｃｍラジアルコンプレッシ
ョンカートリッジ）に適用した。アセトニトリル：水＝
４０：６０（０．１Ｍギ酸アンモニウム）の移動相を流
速４ｍＬ／分で用いて放射性リガンド（ｔ_R＝２．４
分、ｋ’＝２．４）を溶出した。キャリヤー生成物に対
応する２５４ｎｍで測定したＵＶ吸光度の面積を自動積
算記録計（Ｈｅｗｌｅｔｔ Ｐａｃｋａｒｄ ３３９０
Ａ）で計測し、質量対ＵＶ吸光度の標準曲線と比較し
た。

【００５２】実施例２の［¹¹Ｃ］化合物の製造に関する
平均の放射化学収率は、出発物質のＣ−１１ＭｅＩ（非
崩壊補正、ｎ＝４）を基にして２２％であった。平均の
比放射能は１１３６ｍＣｉ／ｕｍｏｌであった。製剤化
と比放射能測定を含めた合成時間は、約２５分であっ
た。

【００５３】いずれの場合も、実施例２の［¹¹Ｃ］化合
物は放射化学的純度が高い（＞９５％）ことが立証さ
れ、無菌で発熱物質を含まないことがわかった。

【００５４】Ｄａｎｎａｌｓ Ｒ．Ｆ．，Ｒａｖｅｒｔ
Ｈ．Ｔ．，Ｗｉｌｓｏｎ Ａ．Ａ．，及びＷａｇｎｅ
ｒ Ｈ．Ｎ．Ｊｒ．，Ａｐｐｌ．Ｒａｄｉａｔ．Ｉｓｏ
ｔ．３７：４３３（１９８６）。実施例３ ヒト脳におけるアセチルコリンエステラーゼの画像化 ＰＥＴスキャンを用いて、３０歳の健常対照における高
選択的ＡＣｈＥ阻害薬である［１１Ｃ］ＣＰ−１２６，
９９８の脳分布を画像化した。ＰＥＴのポジショニング
には熱可塑性マスクを用い、構造的な部位決定のために
ＭＲＩを取った。ベースライン試験、及び可逆的ＡＣｈ
Ｅ阻害薬であるドネゼピル塩酸塩(Donezepil Hydrochlo
ride)（Ａｒｉｃｅｐｔ）５ｍｇを経口投与約３時間後
の遮断試験を得た。両方の試験中に加熱静脈血試料を得
て、血液動態及び代謝の測定をした。

【００５５】

【化７】

【００５６】脳の時間放射能曲線によれば、被殻、尾状
核及び小脳で、注入後４２〜９０分プラトーに達する放
射能を示す。４２〜９０分以降の平均の（［ｎＣｉ／ｃ
ｃ脳／ｎＣｉ／ｃｃ血漿］を用いて、循環親化合物の量
に対して規準化した後、領域ごとのベースラインのラン
ク順は：被殻（６１）、尾状核（５４）、小脳（４
７）、延髄（４０）、橋（３６）、視床（３３）、海馬
（３０）、並びに前頭皮質（２６）、側頭皮質（２
６）、頭頂皮質（２７）及び後頭皮質（２３）であっ
た。遮断試験ではすべての脳領域で結合の低下を示し
た。すなわち、被殻（２６）、尾状核（１９）、小脳
（１３）及び前頭（７）、頭頂（７）皮質で、ベースラ
イン試験から５８〜７２％の低下であった。

【００５７】

【表３】

─────────────────────────────────────────────────────

【手続補正書】

【提出日】平成１２年５月２２日（２０００．５．２
２）

【手続補正１】

【補正対象書類名】明細書

【補正対象項目名】図面の簡単な説明

【補正方法】追加

【補正内容】

【図面の簡単な説明】

【図１】ＰＥＴスキャンを用いて、３０歳の健常対照に
おける高選択的ＡＣｈＥ阻害薬である［１１Ｃ］ＣＰ−
１２６，９９８の脳分布を画像化した画像である。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者 ロバート・エフ・ダンナルズ アメリカ合衆国メリーランド州21287− 0750，ボルチモア，ノース・ウルフ・スト リート 600 (72)発明者 ジェイ・ジェームズ・フロスト アメリカ合衆国メリーランド州21287− 0750，ボルチモア，ノース・ウルフ・スト リート 600 (72)発明者 ジョン・ムサチオ アメリカ合衆国メリーランド州21287− 0750，ボルチモア，ノース・ウルフ・スト リート 600 (72)発明者 アースラ・シェッフェル アメリカ合衆国メリーランド州21205− 2195，ボルチモア，ラットランド・アベニ ュー 720 (72)発明者 アナベラ・ヴィラロボス アメリカ合衆国コネチカット州06340，グ ロトン，イースタン・ポイント・ロード, ファイザー・インク，デパートメント・オ ブ・ニューロサイエンス

Claims (12)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】 アセチルコリンエステラーゼを含有する
   ヒト脳の領域を検出する方法であって、 ａ）検出可能量の式Ｉ： 【化１】 ［式中、 Ｑは、（ＣＨ₂）_m、−ＣＨ＝ＣＨ−、−ＣＨＣＨ₃、−
   Ｃ（ＣＨ₃）₂、酸素、硫黄又はＮＨであり； Ｘは、酸素又は硫黄であり； Ｙは、−（ＣＨ₂）_m−であり； Ｌは、フェニル又はフェニル−（Ｃ₁−Ｃ₆）アルキル
   で、前記フェニルは場合により（Ｃ₁−Ｃ₆）アルキル又
   はハロで置換されており； Ｒ¹は、水素又は（Ｃ₁−Ｃ₆）アルキルであり； ｍは、１〜３の整数である］のポジトロン放出放射性標
   識化合物及びその製薬学的に許容しうる塩をヒトの血流
   に注入し；そして ｂ）前記ヒトの前記脳をポジトロン放出断層撮影法又は
   単光子放射型コンピュータ断層撮影法で画像化して脳画
   像を形成し、前記画像が、脳の異なる部分におけるアセ
   チルコリンエステラーゼの相対量を示す；ことを含む方
   法。
2. 【請求項２】 Ｒ¹が［¹¹Ｃ］メチルである、請求項１
   に記載の方法。
3. 【請求項３】 ＹがエチレンでＬがベンジルである、請
   求項２に記載の方法。
4. 【請求項４】 Ｘが−Ｏ−であり；Ｑが−ＣＨ₂−であ
   り；Ｌがベンジルである、請求項２に記載の方法。
5. 【請求項５】 Ｙがエチレンである、請求項４に記載の
   方法。
6. 【請求項６】 前記ポジトロン放出放射性標識化合物
   が、５，７−ジヒドロ−７−［¹¹Ｃ］−メチル−３−
   ［２−［１−（フェニルメチル）−４−ピペリジニル］
   エチル］−６Ｈ−ピロロ［４，５−ｆ］−１，２−ベン
   ズイソオキサゾール−６−オンである、請求項1に記載
   の方法。
7. 【請求項７】 アルツハイマー病を診断し、疾患の重症
   度を確定し、前記疾患の経過又は進行を追跡する方法で
   あって、 ａ）検出可能量の式Ｉ： 【化２】 ［式中、 Ｑは、（ＣＨ₂）_m、−ＣＨ＝ＣＨ−、−ＣＨＣＨ₃、−
   Ｃ（ＣＨ₃）₂、酸素、硫黄又はＮＨであり； Ｘは、酸素又は硫黄であり； Ｙは、−（ＣＨ₂）_m−であり； Ｌは、フェニル又はフェニル−（Ｃ₁−Ｃ₆）アルキル
   で、前記フェニルは場合により（Ｃ₁−Ｃ₆）アルキル又
   はハロで置換されており； Ｒ¹は、水素又は（Ｃ₁−Ｃ₆）アルキルであり； ｍは、１〜３の整数である］のポジトロン放出放射性標
   識化合物及びその製薬学的に許容しうる塩をヒトの血流
   に注入し；そして ｂ）前記ヒトの前記脳をポジトロン放出断層撮影法又は
   単光子放射型コンピュータ断層撮影法で画像化して脳画
   像を形成し；そして ｃ）前記脳画像を、前記アルツハイマー病の存在もしく
   は不在、又は重症度もしくは進行の程度と関連づける；
   ことを含む方法。
8. 【請求項８】 Ｒ¹が［¹¹Ｃ］メチルである、請求項７
   に記載の方法。
9. 【請求項９】 ＹがエチレンでＬがベンジルである、請
   求項８に記載の方法。
10. 【請求項１０】 Ｘが−Ｏ−であり；Ｑが−ＣＨ₂−で
    あり；Ｌがベンジルである、請求項８に記載の方法。
11. 【請求項１１】 Ｙがエチレンである、請求項１０に記
    載の方法。
12. 【請求項１２】 前記ポジトロン放出放射性標識化合物
    が、５，７−ジヒドロ−７−［¹¹Ｃ］−メチル−３−
    ［２−［１−（フェニルメチル）−４−ピペリジニル］
    エチル］−６Ｈ−ピロロ［４，５−ｆ］−１，２−ベン
    ズイソオキサゾール−６−オンである、請求項７に記載
    の方法。