JP2000500751A

JP2000500751A - 血液調節化合物

Info

Publication number: JP2000500751A
Application number: JP9519005A
Authority: JP
Inventors: バトナガール，プラディップ・クマール; キャラハン，ジェイムズ・フランシス; ハルトマン，ミヒャエル; ヒープル，ヨハン; クレミンガー，ペーター; ロヴェンスツキー，フランツ
Original assignee: SmithKline Beecham Corp
Current assignee: SmithKline Beecham Corp
Priority date: 1995-11-13
Filing date: 1996-11-12
Publication date: 2000-01-25
Also published as: NO982151D0; EP0861077B1; CN1209061A; DE69619123D1; ATE212839T1; AU7728296A; NZ323207A; CZ147098A3; NO310656B1; BR9611520A; EP0861077A1; TR199800850T2; PL326631A1; WO1997017964A1; IL124354A0; AU711239B2; NO982151L; KR19990067506A; EP0861077A4

Abstract

(57)【要約】本発明は血液調節活性を有し、造血の刺激ならびにウイルス、真菌および細菌感染症の治療に用いることができる新規化合物に関する。

Description

【発明の詳細な説明】血液調節化合物発明の分野本発明は、血液調節活性を有する化合物であって、造血を刺激し、ウイルス、真菌および細菌感染症の治療に用いることができる新規な化合物に関する。発明の背景造血系は終生に及ぶ細胞再生プロセスであり、このプロセスにより特定の幹細胞集団が少なくとも９種の異なる細胞系統（赤血球、血小板、好酸球、好塩基球、好中球、単球／マクロファージ、破骨細胞およびリンパ球）のより大きな集団の成熟分化血液細胞（Ｄexter ＴＭ.Ｓtem cells in normal growth and diseas e.Ｂr.Ｍed.Ｊ.1987;195:1192-1194）を生じさせる(Ｍetcalf Ｄ.,Ｔhe Ｍolecu lar Ｃontrol of Ｂlood Ｃells.1988;Ｈarvard Ｕniversity Ｐress，Ｃambrid ge,ＭＡ)。さらに、幹細胞は、最終的に、細胞毒性物質で治療した後または骨髄移植後の骨髄の再生に関与している。大部分の標準的な抗腫瘍薬の用量-限定の（dose−limiting）主な毒性は骨髄抑制に関連付けられ、これが重度であるかまたは長引くと、生命を脅かす感染性および出血性合併症を引き起こしうる。骨髄抑制は予測可能であり、単一薬剤のＩ相試験細胞毒性化合物の５０％以上で用量−限定的であると報告されている（Ｍerrouche Ｙ.,Ｃatimel Ｇ.,Ｃlavel Ｍ.,Ｈematopoietic growth factors an d chemoprotectants; should we move toward a two-step process for phase Ｉclinical trails in oncology? Ａnn Ｏncol 1993;4;471-474）。感染の危険性は、好中球減少症の重篤度および期間により測定される骨髄抑制の程度に直接関係する(Ｂrody ＧＰ,Ｂuckley Ｍ,Ｓathe ＹＳ,Ｆreireich ＥＪ.Ｑuantitati ve relationship between circulating leukocytes and infections with acute leukemia.Ａnn ＩnＭed 1965;64:328-334)。造血作用の調節は、初期多機能幹細胞および成熟循環エフェクター細胞を含む、造血カスケードの種々の段階での種々のサイトカインおよび増殖因子の相互作用に影響を与える。これらの調節分子として、顆粒球コロニー刺激因子(Ｇ−ＣＳＦ)、顆粒球−マクロファージ刺激因子(ＧＭ−ＣＳＧ)、マクロファージ−コロニー刺激因子（Ｍ−ＣＳＦ）および宿主防御において主要な役割を果たす重複する、付加的かつ相乗的作用を有する種々のインターロイキンが挙げられる。機構的には、これは、顆粒球およびマクロファージの産生の向上、ならびにエフェクター細胞機能の活性化により達成される(Ｍoore ＭＡＳ．Ｈemopoietic growth factor interactions: in vitro and in vivo preclinical evaluation.Ｃancer Ｓurveys 1990;9:7-80)。これらの活性を調整することで、細菌、ウイルスおよび真菌感染症を克服するのに必要な最適宿主防御が支持される。好中球減少症の重篤度および骨髄毒性を予防または軽減させる方法として、造血増殖因子および／または他の造血サイトカインの使用が挙げられる。このような治療法は、抗腫瘍薬の効能を改善させるかもしれない細胞毒性薬の用量を増加させる可能性を付与し、抗腫瘍薬の使用に伴う罹患性を減少させるため、該治療法は一般的に行われるようになってきている(Ｓteward ＷＰ.,Ｇranulocyte and granulocyte-macrophage colony stimulating factors,Ｌancet 1993;342:153- 157)。臨床研究により、Ｇ−、ＧＭ−および／またはＭ−ＣＳＦが、細胞毒性化学療法を受けている悪性腫瘍の患者または骨髄移植後の感染の危険性が高い患者において好中球減少症の期間を減少させ、骨髄性回復を促進し、好中球減少症に伴う感染症および他の感染性合併症を減少させうることがわかった(Ｓteward ＷＰ.,Ｇranulocyte and granulocyte-macrophage colony stimulating factors, Ｌancet 1993;342:153-157およびＭunn ＤＨ,Ｃheung ＮＫＶ.Ｐreclinical stu dies of macrophage colony-stimulating factor.Semin Ｏncol.1992;19:395-40 7)。合成ペプチドは、骨髄基質要素からのｍ−ＣＳＦを含め、造血メディエイターの合成および放出を誘発すると報告されている。米国特許出願番号０８／００１９０５を参照のこと。本発明者らは骨髄造血細胞に対して刺激効果を有するある種の新規な非ペプチド化合物を見いだした。これらは、組織反応を抑制する免疫抑制治療による、すなわち骨髄移植手術における骨髄機能が低下した患者を含め、骨髄損傷、無顆粒球症および再生不能性貧血を含む骨髄造血活性の減少に苦しむ患者における骨髄造血の刺激に有用である。これらはさらに腫瘍およびウイルス病に関する細胞増殖抑制性化学療法および放射療法を行った後の骨髄のより迅速な再生の促進に用いられる。これらは、患者が骨髄不全後の免疫応答の欠如による重い感染症を有する場合に特に有用である。これらはウイルス、真菌および細菌病の治療および予防において有用である。発明の要約本発明は、血液調節活性を有し、造血作用の刺激ならびに細菌、ウイルスおよび真菌病の予防および治療に用いることができる、後記に式（Ｉ）で表す、化合物を含む。これらの化合物は、種々の臨床的状況、例えば手術により誘発された骨髄抑制、ＡＩＤＳ、ＡＲＤＳ、先天性脊髄形成異常、骨髄および臓器移植に由来の細胞数の減少した患者における白血球の回復；白血球減少症の患者の感染症からの防御；重症の火傷患者の治療；いくつかの細胞周期特異性抗ウイルス剤について観察される脊髄抑制の軽減；骨髄移植を受けた患者、特に移植片対宿主疾患の患者における感染症の治療、結核の治療およびヒトおよび動物における原因不明の熱病の治療において有用である。化合物はさらに免疫抑制および「正常」対象の両方におけるウイルス、真菌および細菌感染症、特にカンジダおよびヘルペスの治療および予防においても有用である。これらはグラム陰性およびグラム陽性生物により引き起こされる敗血症の治療において有用である。これらの化合物はさらに同時係属の米国出願番号０７／７９９４６５および米国特許第４４９９０８１号（出典明示により本発明の一部とする）の脊髄抑制剤と組み合わせて用いて、骨髄細胞における活性の高低の交互のピークを得、造血の自然の約２４時間周期のリズムを促進できる。このように、細胞増殖抑制療法を低骨髄活性の期間に適用することができ、かくして骨髄損傷の危険性が軽減され、一方で次の活性のピークにより再生が促進されるであろう。本発明はさらに、式（II）の化合物と医薬上許容される担体とを含んでなる医薬組成物を提供する。本発明はさらに、ヒトを含む動物の骨髄造血系の刺激法であって、これを必要とする動物に、有効量の式（Ｉ）の化合物を投与することからなる方法を提供する。本発明はまた、免疫抑制されたおよび正常な、ヒトを含む動物におけるウイルス、真菌および細菌感染症の予防および治療法であって、これを必要とする動物に有効量の式（Ｉ）の化合物を投与することからなる方法を提供する。本発明はさらに、人を含む動物におけるグラム陽性およびグラム陰性菌により引き起こされる敗血症の予防および治療法であって、これを必要とする動物に有効量の式（Ｉ）の化合物を投与することからなる方法を提供する。発明の詳細な記載本発明の化合物は、構造式（Ｉ）：［式中、Ｒ₁は、独立して、環中に４個までのヘテロ原子Ｎ、Ｏ、Ｓを含有する４ないし１０員単環または二環式複素環系である（ここで、少なくとも１個のヘテロ原子はＮであり、環は１または２個のＣ_1-4アルキル、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、Ｃ_1-4 アルコキシ、(ＣＨ₂)_mＲ₆、オキソ、オキシム、Ｏ−Ｃ_1-4アルキルオキシム、ヒドロキシ、Ｎ(Ｒ₅)₂、アシルアミノまたはアミノアシル基で置換されているかまたは置換されておらず、８、９、１０員単環系は除外する）；Ｒ₂は、独立して、水素、Ｃ_1-4アルキルＣ(Ｏ)Ｒ₆、Ｃ_1-4アルキルであるかまたはＲ₂は、１または２個のＣ_1-4アルキル、Ｃ_1-4アルコキシ、Ｆ、Ｃｌ、Ｉ、Ｂｒ、ＯＨ、またはＮ(Ｒ₅)₂で所望により置換されていてもよいベンジルであり；Ｙは、(ＣＨ₂)_n（ここで、少なくとも一つの炭素はＲ₃およびＲ₄によりｇｅｍ −置換されている）であり；Ｒ₃およびＲ₄は、独立して、Ｃ_1-4アルキル、Ｃ_2-4アルケニル、Ｃ_2-4アルキニル(これらはすべて、１個または２個のＣ_1-4アルキル、ＯＨ、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、Ｎ(Ｒ₅)₂、(Ｒ₅)₂ＮＣ(Ｏ)−、−(ＣＨ₂)_mＲ₆、−(ＣＨ₂)_mＲ₅、−(ＣＨ₂ )_mＣＯＲ₆または−(ＣＨ₂)_mＣ(Ｏ)Ｒ₅により置換されていてもよい)であるか；またはＲ₃およびＲ₄は、Ｆ、ＣｌまたはＢｒであるか；またはＲ₃およびＲ₄は、一緒になって式(Ｉａ)：（ここで、ｐおよびｑは、独立して０ないし３の整数であり；Ｘは、Ｏ、Ｓ、ＣＨ₂またはＮ(Ｒ₅)である）の環または複素環を形成してもく；Ｒ₅は、独立して、水素、Ｃ_1-4アルキルまたはベンジルであり；Ｒ₆は、独立して、ＯＲ₅、Ｎ(Ｒ₅)₂またはＳＲ₅であり；ｎは３ないし８の整数であり；ｍは０ないし４の整数である；ただし、ｐおよびｑは、ともに０ではなく；Ｒ₃およびＲ₄がＦ、ＣｌまたはＢｒであるとき、これらは窒素に隣接する炭素上にない］で示される化合物またはその医薬上許容される塩である。Ｃ_1-4アルキル基は直鎖であっても分枝鎖であってもよい。本発明の化合物は１またはそれ以上の不斉炭素原子を含有し、ラセミおよび光学活性な形態で存在してもよい。これらのすべての化合物およびジアステレオマーは本発明の範囲内にあると考えられる。前記の式（Ｉ）におけるＲ₁は、置換されていてもよいピロリル、イソピロリル、ピラゾリル、イソイミダゾリル、トリアゾリル、イソキサゾリル、オキサゾリル、チアゾリル、イソチアゾリル、オキサジアゾリル、ピリジニル、ピリダジニル、ピリミジニル、ピラジニル、ピロリジニル、ピペラジニル、トリアジニル、モルホリニル、インドリル、インドレニニル、イソベンザゾリル、ピリンジニル、イソインダゾリル、インドキサジニル、ベンズオキサゾリル、キノリニル、イソキノリニル、シンノリニル、キナゾリニル、ナフチリジニル、ピリドピリジニル、テトラヒドロキノリニル、テトラヒドロイソキノリニル、キノキサリニル、インドリニル、２−ピロリドニル、イミダゾリル、イミダゾリジニル、イミダゾリニル、ピペリジル、テトラゾリル、キヌクリジニル、アゼチジニル、またはプリニルを意味する。好ましい化合物は、Ｒ₁がピリジニル、ピリミジニル、ピラジニル、ピリダジニル、キノリニル、テトラヒドロキノリニル、アゼチジニルまたはピロリジニルであり；ｎが３ないし５であり；Ｒ₃およびＲ₄がＣ_1-4アルキル、ＯＨ、Ｎ(Ｒ₅)_1-2 、−(ＣＨ₂)_mＲ₆、または−(ＣＨ₂)_mＣ(Ｏ)Ｒ₅により置換されたＣ_1-4アルキルであるか；またはＲ₃およびＲ₄が一緒になって式（Ｉａ）（式中ＸがＯ、ＳまたはＣＨ₂であり、ｐおよびｑが１ないし３である）の環または複素環を形成してもよく；Ｒ₅が水素またはＣ_1-4アルキルであり；およびＲ₆がＯＲ₅またはＮ( Ｒ₅)_1-2である化合物である。より好ましい化合物は、Ｒ₁が２−ピリジニル、２−ピリミジニル、２−ピラジニル、２−ピロリドン−５−イルまたは２−ピロリジニルであり；ｎが３または５であり；Ｒ₃およびＲ₄がＣ_1-2アルキル、ＯＨ、Ｎ(Ｒ₅)₂、または−(ＣＨ₂) mＲ₆により置換されたＣ_1-2アルキルであるか；またはＲ₃およびＲ₄が一緒になって式（Ｉａ）（式中ＸがＯであり、ｐおよびｑが１または２である）の複素環を形成してもよく；Ｒ₅が水素またはＣ_1-4アルキルであり；およびＲ₆がＯＲ₅またはＮ(Ｒ₅)_1-2である化合物である。好ましい化合物は：３，３−ビス（ピコリンアミドメチル）オキセタン；４，４−ビス（ピコリンアミドメチル）テトラヒドロ−４Ｈ−ピラン；２，２−ビス（ピコリノイルアミドメチル）−１，３−プロパンジオール；Ｎ，Ｎ’−ビス（ピコリノイル）−１，５−ジアミノ−２，２−ジメチルプロパン；Ｎ，Ｎ’−ビス（ピコリノイル）−１，５−ジアミノ−３，３−ジメチルペンタン；および１，１−ビス（ピコリンアミドメチル）シクロプロパンである。本発明はまた、医薬担体または賦形剤と組み合わせて、活性成分として一つまたはそれ以上の式（Ｉ）の化合物を含む医薬組成物に関する。本発明はまた、ヒトを含む動物の骨髄造血の刺激法であって、これを必要とする動物に、有効量の式（Ｉ）の化合物を投与することからなる方法を提供する。本発明はさらに、ヒトを含む動物におけるウイルス、真菌または細菌感染症の予防および治療法であって、これを必要とする動物に有効量の式（Ｉ）の化合物を投与することからなる方法を提供する。調製法式（Ｉ）：（式中、Ｒ₁、Ｒ₂およびＹは式（Ｉ）において定義したとおりである）の化合物は、スキーム１において概説したように調製される。スキーム１適当に活性化された酸（Ｒ₁−ＣＯＯＨ）を適当なジアミン（Ｒ₂−ＮＨ−Ｙ− ＮＨ−Ｒ₂）またはその塩形態と、適当な溶媒（メチレンクロライド(ＣＨ₂Ｃｌ₂ )またはＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）など）中、反応させて、最終生成物を得る。カルボン酸は、適当な活性化剤（１，３−ジシクロヘキシルカルボジイミド(ＤＣＣ)、ベンゾトリアゾール−１−イルオキシ−トリス（ジメチルアミノ）ホスホニウムヘキサフルオロホスフェート（ＢＯＰ試薬）または２−（１，Ｈ−ベンゾトリアゾール−１−イル）−１，１，３，３−テトラメチルウロニウムテトラフルオロボレート（ＴＢＴＵ試薬）など）により活性化する。反応を適当な触媒（１−ヒドロキシベンゾトリアゾール水和物（ＨＯＢｔ）または４ −ジメチルアミノピリジン（ＤＭＡＰ）など）により触媒する。アミンがその塩形態である場合、適当な塩基（トリエチルアミン、Ｈunig's塩基、またはＮ−メチルモルホリンなど）により中性化しなければならない。別法として、酸を適当な塩基（トリエチルアミン、Ｈunig's塩基、またはＮ− メチルモルホリンなど）の存在下、適当な溶媒（ＣＨ₂Ｃｌ₂、ベンゼンまたはＤＭＦなど）中で、アミンと反応し、式（Ｉ）の化合物を形成する、酸ハライドに転換する。式（II）（Ｒ₂−ＮＨ−Ｙ−ＮＨ−Ｒ₂）のアミンは、スキームIIに示したように、適当に保護されたジアミン（ＮＨ₂−Ｙ−ＮＨ₂）を塩基（ＮａＨなど）の存在下アルキルハライドと反応させて、得ることができる。スキームII 反応は、ジオキサンまたはＤＭＦ中で行うことができる。もつとも一般的に用いられる保護基は、ｔ−ブチルオキシカルボニル（ｔ−Ｂｏｃ−）またはカルボベンジルオキシ（Ｚ−）である。これらの保護基を除去する方法は、当業者において周知である。式中Ｒ₂がＣ_2-4アルキルまたはＣ_2-4アルキルＣ(Ｏ)Ｒ₆である式（II）のアミンは、また、スキームIIIに示したように、式IIIまたはIVのアミンをアルデヒド (Ｒ₂−ＣＨＯ)および適当な還元剤（ナトリウムシアノボロハイドライドなど）と、適当な溶媒（メタノールなど）中で反応させて、得ることができる。スキームIII 式III（ＮＨ₂−Ｙ−ＮＨ₂）のアミンは、商業的に入手可能であり、または適当なビスアルキルハライドとアンモニアとを反応させて調製することができる。式IIIまたはIVのアミンはまた、スキームIVに示したように、ビスアルキルニトリルまたはビスアルキルアジドを還元して調製することもできる。スキームIV 式VIの化合物はスキームＶに示したように、式Ｖの化合物を水性酸および水性塩基と続けて反応させて調製する。スキームＶ式（Ｉ）の化合物またはその医薬上許容される塩をヒトおよび他の哺乳動物の治療に用いるためには、通常、標準的な製薬慣習にしたがって医薬組成物として処方される。本発明の組成物は、たとえば経口、経鼻、非経口または経直腸投与に適した形態で提供してもよい。本明細書において用いる場合、「医薬上」なる用語は、本発明の獣医学的用途を包含する。これらの化合物を経口投与用にカプセル化、錠剤化あるいはエマルジョンまたはシロップに調製する。医薬上許容される固体または液体担体を添加して、組成物を増強したり、安定化したり、あるいは組成物の調製を容易にすることができる。液体担体は、シロップ、落花生油、オリーブ油、グリセリン、食塩水および水を包含する。固体担体は、デンプン、ラクトース、硫酸カルシウム二水和物、白土、ステアリン酸マグネシウムまたはステアリン酸、タルク、ペクチン、アカシア、寒天またはゼラチンを包含する。担体はまた、単独でまたはワックスを含む、グリセリルモノステアラートまたはグリセリルジステアラートなどの徐放性物質を包含する。固体担体の量は変わるが、好ましくは、投与単位当たり約２０ｍｇないし約１ｇの間である。医薬製剤は、錠剤形の場合、粉砕、混合、顆粒化、および必要ならば圧縮を含み；またハードゼラチンカプセル形の場合、粉砕、混合および充填を含む通常の調剤技術にしたがって調製される。１または数種の活性成分を含有するカプセルは、例えば、活性成分をラクトースまたはソルビトールなどの不活性な担体と混合し、混合物をゼラチンカプセル中に充填することにより調製される。液体担体を用いる場合、製剤はシロップ、エリキシル剤、エマルジョンまたは水性または非水性懸濁液の形態である。このような液体製剤は、直接経口投与されるか、またはソフトゼラチンカプセル中に充填される。臓器特異性担体系もまた用いられる。別法として、本発明の化合物またはその誘導体の医薬組成物は、非経口投与用凍結乾燥粉末の溶液として処方してもよい。粉末は、使用前に適当な希釈剤または他の医薬上許容される担体の添加により復元される。液体処方は、一般に緩衝化された等張水溶液である。適当な希釈剤の例は、通常の等張塩溶液、標準的５％水中デキストロースまたは緩衝酢酸ナトリウムまたはアンモニウム溶液である。このような製剤は非経口投与に特に適しているが、経口投与用に用いることもできるし、吸入用に計量吸入器またはネブライザー中にいれてもよい。ポリビニルピロリドン、ゼラチン、ヒドロキシセルロース、アカシア、ポリエチレングリコール、マンニトール、塩化ナトリウムまたはクエン酸ナトリウムなどの賦形剤を添加するのが望ましい。直腸投与の場合、本発明の化合物の微粉末を、カカオ脂、グリセリン、ゼラチンまたはポリエチレングリコールなどの賦形剤と合し、坐剤に成型する。微粉末はさらに油状製剤、ゲル、クリームまたはエマルションと配合してもよいし、緩衝剤処理してもしなくてもよく、また経皮貼付剤により投与してもよい。鼻スプレーは同様に水溶液中に処方され、エアゾル噴射剤を含むかまたは手動圧縮手段を備えたスプレー容器中に充填する。本発明の化合物を含有する投与単位は好ましくは０．０５−５０ｍｇ、例えば０．０５−５ｍｇの式（Ｉ）および（II）の化合物またはそれらの塩を含有する。本発明のさらに別の態様によると、骨髄造血の刺激法であって、有効量の前記した式（II）の医薬組成物を対象に投与することからなる方法が提供される。本発明の化合物を本発明にしたがって投与した場合に、許容できない毒性はないと考えられる。式（Ｉ）の化合物の生物学的活性を以下の試験により説明する。基質細胞における造血相乗活性の誘発基質細胞系Ｃ６．４由来のネズミ骨髄を１０％ＦＢＳを含むＲＰＭＩ１６４０中１２ウェルプレート中で増殖させる。集密に達すると、Ｃ６．４細胞を洗浄し、培地をＦＢＳ不含の新鮮なＲＰＭＩ１６４０と交換する。ネズミＣ６．４細胞の集密細胞層を化合物で処理する。無細胞上清を１８時間後に集める。上清をＣ entricon−３０分子量カットオフ膜で分画する。Ｃ６．４細胞造血相乗因子（ＨＳＦ）活性をネズミＣＦＵ−Ｃ検定において測定する。ＣＦＵ−Ｃ検定骨髄細胞をＣ５７Ｂ１／６雌マウスから得、１０％ＦＢＳを含むＲＰＭＩ１６４０中に懸濁する。骨髄細胞（７．５Ｅ＋４細胞／ｍＬ）を標準的ネズミソフト寒天ＣＦＵ−Ｃ検定において準最適レベルのＣＦＵ＋前記からの試験Ｃ６．４細胞３０Ｋ−Ｅ上清の希釈物とともに培養する。細胞凝集物＞５０細胞をコロニーとして計数する。計数された寒天コロニー数はＣ６．４骨髄基質系上清中に存在するＨＳＦの量に比例する。エフェクター細胞機能検定雌Ｃ５７Ｂ１マウスに試験化合物を８日間毎日、腹腔内または経口投与する。処置または未処置マウスからのex vivoで用いた残存腹腔浸出細胞（ＰＥＣ）を冷カルシウムならびにマグネシウム不含のヘパリンおよび抗生物質を補足したＤＰＢＳで最終注射後の２−４時間以内に収穫する。付着ＰＥＭ集団を、標準化ＰＥＣ懸濁液をマイクロタイター皿中、２時間３７℃（５％ＣＯ₂）で培養し、ウェルを温緩衝液で洗浄することにより非付着細胞を除去することにより調製する。ホルボールミリステートアセテート（ＰＭＡ）（１００−２００ｎＭ）による in vitro刺激に応答してエフェクター細胞または予めオプソニン処理した（オートローガスな血清）生シー・アルビカンス（Ｅ：Ｔ＝１：１０）により放出されるスーパーオキシドディスムターゼ（ＳＯＤ）の抑制可能なスーパーオキシドをマイクロタイターフェリチトクロムｃ還元検定において定量化する。総体積２００ｕＬ／ウェル中１％ゼラチン／ＨＢＳＳおよび８０ｕＭフェリチトクロムｃの存在下で検定を行う。還元されたチトクロムｃのｎモル数／ウェルを３７℃(５％ＣＯ₂)で１時間インキュベートした後に得た分光分析の読み（５５０ｎｍ）から計算する。還元されたＳＯＤ−抑制可能なチトクロムｃの量をＳＯＤ（２００Ｕ／ウェル）を含むウェルの包含により決定する。基線となるスーパーオキシド放出を、刺激のない状態で測定する。実験データは対照群の百分率として表す。以下の実施例は例示的なものであって、本発明の化合物を制限するものではない。すべての温度は、摂氏で示される。実施例１３，３−ビス（ピコリンアミドメチル）オキセタン３，３−ビスアミノメチルオキセタンジハイドロブロマイド（０．０５ｇ、０．１８ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（３ｍＬ）中溶液に、ピコリン酸（０．０７ｇ、０．５６ｍｍｏｌ）、ＢＯＰ試薬(０．２４ｇ、０．５４ｍｍｏｌ)、ＨＯＢｔ水和物（０．０７ｇ、０．５２ｍｍｏｌ）およびｉＰｒ₂ＮＥｔ（０．１６ｍＬ、０．９２ｍｍｏｌ）を添加した。２４時間後、反応を５０％塩水（１０ｍＬ）に注ぎ、ＥｔＯＡｃで抽出して（３×１５ｍＬ）クエンチした。合した有機抽出物をＮａ₂ＳＯ₄上で乾燥させ、濃縮し、黄色油（０．８２ｇ）を得た。フラッシュクロマトグラフィー（５０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサンから１００％ＥｔＯＡｃの勾配、シリカゲル）により、０．０２ｇ（３４％）の標記化合物を白色固体として得た。¹ＨＮＭＲ(ＣＤＣｌ₃,250ＭＨz)δ8.82(t,2Ｈ,Ｊ=7Ｈz),8.61(m,2Ｈ),8.23(d ,d,2Ｈ,Ｊ=7.7,１Ｈz),7.87(d,t,2Ｈ,Ｊ=7.7,1.6Ｈz),7.45(m,2Ｈ),4.59(s,4Ｈ) ,3.87(d,4Ｈ,J=7Ｈz);ＭＳ(ＥＳ+)m/e327.4[Ｍ＋Ｈ⁺].実施例２２，２−ビス（ピコリノイルアミドメチル）−１，３−プロパンジオール３，３−ビス（ピコリンアミドメチル）オキセタン（実施例１）（２５．６ｍｇ、０．０７８ｍｍｏｌ）を８ｍＬの０．１ＮＨＣｌ（水性）中に溶解し、室温で１８時間攪拌した。反応物を５％ＮａＨＣＯ₃（水性）で塩基性（ｐＨ〜８）とし、蒸発させて乾燥させた。残渣を１０％ＭｅＯＨ／ＣＨＣｌ₃にとり、濾過し、蒸発させ、得られた物質をフラッシュクロマトグラフィー（シリカゲル、３ ×２０ｃｍ、２％ＭｅＯＨ／ＣＨＣｌ₃）により精製し、２つのフラクションを得た。最初のフラクションには５ｍｇ（０．０１５ｍｍｏｌ、１９％）の回収された出発物質が含まれた。ＭＳＥＳm/e327(Ｍ+Ｈ)⁺。２番目のフラクションには、１９．３ｍｇ（０．０５６ｍｍｏｌ、７２％）の標記化合物が含まれた。¹ＨＮＭＲ( ＣＤＣｌ₃，250ＭＨz)δ8.77(t,2Ｈ,Ｊ=7Ｈz),8.61(m,2Ｈ),8.21(d,d,2Ｈ,Ｊ=7. 8,1Ｈz),7.88(t,d,2Ｈ,Ｊ=7.8,1.7Ｈz),7.47(m,2Ｈ),4.44(t,1Ｈ,J=7Ｈz),3.48( d,4Ｈ,Ｊ=7Ｈz),3.37(d,4Ｈ,Ｊ=7Ｈz);ＭＳ(ＥＳ+)m/e345[Ｍ+Ｈ]⁺.実施例３４，４−ビス（ピコリンアミドメチル）テトラヒドロ−４Ｈ−ピランＭｅＯＨ（１０ｍｌ）中のテトラヒドロ−４Ｈ−ピラン−４，４−ジカルボニトリル（０．３３ｇ、０．００２ｍｍｏｌ）および２ＮＮａＯＨ（９ｍｌ）の攪拌混合物に、アルミニウム−ニッケル触媒（０．５９ｇ、０．０１ｍｏｌｅ）を分けて添加した。反応混合物を４時間還流した。冷却した混合物を濃ＨＣｌを滴下してｐＨ２に合わせた。ついで、混合物を４０℃で減圧下濃縮し、オフホワイトの固体を得た。ベンゼン（２５ｍｌ）中のピコリン酸（０．５９ｇ、０．００４８ｍｏｌｅ）および１滴のＤＭＦの溶液に、アルゴン下で、オキサリルクロライド（０．６４ｇ、０．００４８ｍｏｌｅ）を添加した。反応物を３時間室温で攪拌し、ついで０℃に冷却した。これに、ジイソプロピルエチルアミン（２．０６ｇ、０．０１６ｍｏｌｅ）を含むクロロホルム（５ｍｌ）中のジアミノ−テトラヒドロピランジハイドロクロライド塩（０．３５ｇ、０．００１６ｍｏｌｅ）の懸濁液を一度で添加した。反応物をアルゴン下室温で２時間攪拌した。混合物を５０ｍｌの塩水に注ぎ入れ、ＥｔＯＡｃで２回抽出した。ＥｔＯＡｃ抽出物を乾燥させ(Ｎａ₂ ＳＯ₄)、濾過し、４０℃で濃縮し、茶色油を得た。油をフラッシュクロマトグラフィー（シリカゲル上、ＥｔＯＡｃで溶出）に付し、２２．５ｍｇの標記化合物を無色油として得た。¹ ＨＮＭＲ(ＣＤＣｌ₃)δ:8.9(broad t,2Ｈ),8.6(m,2Ｈ),8.3(m,2Ｈ),7.8(m,2Ｈ ),7.5(m,2Ｈ),3.9(t,4Ｈ),3.5(d,4Ｈ),1.6(t,4Ｈ); ＭＳ(ＥＳ+)m/e355[Ｍ+Ｈ]⁺;377[Ｍ+Ｈ+Ｎa]⁺.実施例４１，１−ビス（ピコリンアミドメチル）シクロプロパン実施例３に類似した方法で、１，１−ジアミノメチルシクロプロパン（０．５３ｇ、３．０９ｍｍｏｌ）、ピコリン酸(１．１４ｇ、９．２６ｍｍｏｌ)、ＢＯＰ試薬(４．１０ｇ、９．２６ｍｍｏｌ)、ＨＯＢｔ水和物（１．２５ｇ、９．２５ｍｍｏｌ）およびＥｔ₃Ｎ（２．０６ｍＬ、１８．６ｍｍｏｌ）から０．８３ｇ（８７％）の標記化合物を白色泡として得た。ＭＳ(ＥＳ+)m/e311.4[Ｍ+Ｈ⁺].実施例５Ｎ，Ｎ’−ビス（ピコリノイル）−１，５−ジアミノ−３，３−ジメチルペンタン実施例１に類似した方法で、３，３−ジメチル−１，５−ジアミノペンタン( ０．２２ｇ、１．７０ｍｍｏｌ)、ピコリン酸（０．４６ｇ、３．７４ｍｍｏｌ）、ＢＯＰ試薬(１．６５ｇ、３．７４ｍｍｏｌ)、ＨＯＢｔ水和物（０．５０ｇ、３．７４ｍｍｏｌ）およびｉＰｒ₂ＮＥｔ（２．９６ｍＬ、１７．０ｍｍｏｌ）から黄色油を得た。熱いＥｔＯＡｃからトリチュレーションし、０．２４ｇ（４２％）の標記化合物を白色結晶として得た。ＭＳ(ＥＳ+)m/e341.0[Ｍ+Ｈ⁺].実施例６Ｎ，Ｎ’−ビス（ピコリノイル）−１，３−ジアミノ−２，２−ジメチルプロパン２，２−ジメチル−１，３−プロパンジアミン（５．００ｇ、４８．９ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（５００ｍＬ）中溶液を、ピコリン酸(１２．６ｇ、０．１０ｍｏｌ)、１−ヒドロキシベンゾトリアゾール水和物(１３．９ｇ、０．１０ｍｏｌ) 、１−（３−ジメチルアミノプロピル）−３−エチルカルボジイミドハイドロクロライド（１９．７ｇ、０．１０ｍｏｌ）およびｉＰｒ₂ＮＥｔ（１７．９ｍＬ、０．１０ｍｏｌ）と室温で反応させた。１８時間後、反応混合物を真空下蒸発させ、残渣をフラッシュクロマトグラフィー（７５％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン、シリカゲル）により精製し、１３．９５ｇ（９１％）の標記化合物を澄んだ固体として得た。この生成物の一つのフラクション(５．６３ｇ)を酢酸エチル／ヘキサンからゆっくりな蒸発により再結晶させて、３．９５ｇの純粋な生成物を白色針状物として得た。ＭＳ(ＥＳ+)m/e313[Ｍ+Ｈ⁺].実施例７本発明の化合物を配合した医薬用処方は、種々の形態に、多くの賦形剤を用いて調製できる。このような処方物の例を以下に示す。錠剤／成分一錠剤当たり１．活性成分（式Ｉの化合物）０．５ｍｇ２．コーンスターチ２０ｍｇ３．アルギン酸２０ｍｇ４．アルギン酸ナトリウム２０ｍｇ５．ステアリン酸マグネシウム１．３ｍｇ錠剤化操作工程１成分Ｎo．１、Ｎo.２、Ｎo.３およびＮo.４を適当なミキサー／ブレンダー中でブレンドする。工程２各成分添加後、慎重に混合しながら、工程１からのブレンドに十分な量の水を数回にわけて添加する。塊が湿式顆粒に変わる硬度になるまでそのように水を添加し、混合する。工程３Ｎo.８メッシュ（２．３８ｍｍ）スクリーンを用いて振動グラニュレーターを通すことにより湿式塊を顆粒に変える。工程４ついで該湿式顆粒を１４０°Ｆ（６０℃）のオーブン中で乾燥する。工程５乾式顆粒を成分Ｎo.５で潤滑化する。工程６潤滑化顆粒を適当な打錠プレスで圧縮する。非経口製剤適当量の式Ｉの化合物をポリエチレングリコール中に加熱しながら溶解させることにより、非経口投与用医薬組成物を調製する。この溶液についでＰｈＥｕｒ注射用水で希釈する(１００ｍｌにする)。ついで、溶液を０．２２ミクロンメンブランフィルターで濾過することにより滅菌処理し、滅菌容器中に密封する。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁷ 識別記号ＦＩテーマコート゛(参考）Ｃ０７Ｄ 521/00 Ｃ０７Ｄ 521/00 (81)指定国ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＳ，ＦＩ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，ＩＴ，ＬＵ，ＭＣ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＯＡ(ＢＦ，ＢＪ，ＣＦ，ＣＧ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＭＬ，ＭＲ，ＮＥ，ＳＮ，ＴＤ，ＴＧ)，ＡＰ(ＫＥ，ＬＳ，ＭＷ，ＳＤ，ＳＺ，ＵＧ)，ＵＡ(ＡＭ，ＡＺ，ＢＹ，ＫＧ，ＫＺ，ＭＤ，ＲＵ，ＴＪ，ＴＭ)，ＡＬ，ＡＭ，ＡＵ，ＢＢ，ＢＧ，ＢＲ，ＣＡ，ＣＮ，ＣＺ，ＥＥ，ＧＥ，ＨＵ，ＩＬ，ＩＳ，ＪＰ，ＫＧ，ＫＰ，ＫＲ，ＬＫ，ＬＲ，ＬＴ，ＬＶ，ＭＤ，ＭＧ，ＭＫ，ＭＮ，ＭＸ，ＮＯ，ＮＺ，ＰＬ，ＲＯ，ＳＧ，ＳＩ，ＳＫ，ＴＲ，ＴＴ，ＵＡ，ＵＳ，ＵＺ，ＶＮ (72)発明者バトナガール，プラディップ・クマールアメリカ合衆国19341ペンシルベニア州エクストン、サウス・バルダーストン・ドライブ300番 (72)発明者キャラハン，ジェイムズ・フランシスアメリカ合衆国19111ペンシルベニア州フィラデルフィア、ジーンズ・ストリート 8214番 (72)発明者ハルトマン，ミヒャエルオーストリア、アー−4643ペッテンバッハ、ミッテンドルフ130番 (72)発明者ヒープル，ヨハンオーストリア、アー−4030リンツ、モーヴェンヴェーク７番 (72)発明者クレミンガー，ペーターオーストリア、アー−4481アステン、マルゲリテンシュトラーセ10／16番 (72)発明者ロヴェンスツキー，フランツオーストリア、アー−4020リンツ、ツィーラーシュトラーセ27番

Claims

【特許請求の範囲】１．式（Ｉ）：［式中、Ｒ₁は、独立して、環中に４個までのヘテロ原子Ｎ、Ｏ、Ｓを含有する４ないし１０員単環または二環式複素環系である（ここで、少なくとも１個のヘテロ原子はＮであり、環は１または２個のＣ_1-4アルキル、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、Ｃ_1-4 アルコキシ、(ＣＨ₂)_mＲ₆、オキソ、オキシム、Ｏ−Ｃ_1-4アルキルオキシム、ヒドロキシ、Ｎ(Ｒ₅)₂、アシルアミノまたはアミノアシル基で置換されているかまたは置換されておらず、８、９、１０員単環系は除外する）；Ｒ₂は、独立して、水素、Ｃ_1-4アルキルＣ(Ｏ)Ｒ₆、Ｃ_1-4アルキルであるかまたはＲ₂は、１または２個のＣ_1-4アルキル、Ｃ_1-4アルコキシ、Ｆ、Ｃｌ、Ｉ、Ｂｒ、ＯＨ、またはＮ(Ｒ₅)₂で所望により置換されていてもよいベンジルであり；Ｙは、(ＣＨ₂)_n（ここで、少なくとも一つの炭素はＲ₃およびＲ₄によりｇｅｍ −置換されている）であり；Ｒ₃およびＲ₄は、独立して、Ｃ_1-4アルキル、Ｃ_2-4アルケニル、Ｃ_2-4アルキニル（これらはすべて、１個または２個のＣ_1-4アルキル、ＯＨ、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、Ｎ(Ｒ₅)₂、(Ｒ₅)₂ＮＣ(Ｏ)−、−(ＣＨ₂)_mＲ₆、−(ＣＨ₂)_mＲ₅、−(ＣＨ₂)_mＣＯＲ₆または−(ＣＨ₂)_mＣ(Ｏ)Ｒ₅により置換されていてもよい）であるか；またはＲ₃およびＲ₄は、Ｆ、ＣｌまたはＢｒであるか；またはＲ₃およびＲ₄は、一緒になって式（Ｉａ）：（ここで、ｐおよびｑは、独立して０ないし３の整数であり；Ｘは、Ｏ、Ｓ、ＣＨ₂またはＮ(Ｒ₅)である）の環または複素環を形成してもく；Ｒ₅は、独立して、水素、Ｃ_1-4アルキルまたはベンジルであり；Ｒ₆は、独立して、ＯＲ₅、Ｎ(Ｒ₅)₂またはＳＲ₅であり；ｎは３ないし８の整数であり；ｍは０ないし４の整数である；ただし、ｐおよびｑは、ともに０ではなく；Ｒ₃およびＲ₄がＦ、ＣｌまたはＢｒであるとき、これらは窒素に隣接する炭素上にない］で示される化合物またはその医薬上許容される塩。２．Ｒ₁がピリジニル、ピリミジニル、ピラジニル、ピリダジニル、キノリニル、テトラヒドロキノリニル、またはピロリドニルであり；ｎが３ないし５であり；Ｒ₃およびＲ₄がＣ_1-4アルキル、ＯＨ、Ｎ(Ｒ₅)_1-2、−(ＣＨ₂)_mＲ₆、または −(ＣＨ₂)_mＣ(Ｏ)Ｒ₅により置換されたＣ_1-4アルキルであるか;またはＲ₃およびＲ₄が一緒になって式（Ｉａ）（式中ＸがＯ、ＳまたはＣＨ₂であり、ｐおよびｑが１ないし３である）の環または複素環を形成してもよく；Ｒ₅が水素またはＣ₁ _-4 アルキルであり；およびＲ₆がＯＲ₅またはＮ(Ｒ₅)_1-2である請求項１記載の化合物。３．Ｒ₁が２−ピリジニル、２−ピリミジニル、２−ピラジニル、２−ピロリドン−５−イルまたは２−ピロリジニルであり；ｎが３または５であり；Ｒ₃およびＲ₄がＣ_1-2アルキル、ＯＨ、Ｎ(Ｒ₅)₂、または−(ＣＨ₂)_mＲ₆により置換されたＣ_1-2アルキルであるか；またはＲ₃およびＲ₄が一緒になって式(Ｉａ)（式中ＸがＯであり、ｐおよびｑが１または２である）の複素環を形成してもよく；Ｒ₅が水素またはＣ_1-4アルキルであり；およびＲ₆がＯＲ₅またはＮ(Ｒ₅)_1-2である請求項２記載の化合物。４．３，３−ビス（ピコリンアミドメチル）オキセタン；４，４−ビス（ピコリンアミドメチル）テトラヒドロ−４Ｈ−ピラン；２，２−ビス（ピコリノイルアミドメチル）−１，３−プロパンジオール；Ｎ，Ｎ’−ビス（ピコリノイル）−１，５−ジアミノ−２，２−ジメチルプロパン；Ｎ，Ｎ’−ビス（ピコリノイル）−１，５−ジアミノ−３，３−ジメチルペンタン；および１，１−ビス（ピコリンアミドメチル）シクロプロパンからなる群より選択される請求項１記載の化合物。５．Ｎ，Ｎ’−ビス（ピコリノイル）−１，３−ジアミノ−２，２−ヒドロキシメチルプロパンである請求項１記載の化合物。６．請求項１記載の式（Ｉ）の化合物および医薬担体または賦形剤とからなる医薬組成物。７．ウイルス、真菌または細菌感染症の予防または治療法であって、この予防または治療を必要とする動物に有効量の請求項１記載の式（Ｉ）の化合物を投与することからなる方法。８．請求項１記載の化合物を投与することにより動物における骨髄造血を刺激する方法。９．請求項１記載の化合物を投与することにより動物における敗血症を治療または予防する方法。１０．（ａ）式（II）：ＮＨ(Ｒ₂)−Ｙ−(Ｒ₂)ＮＨ式（II）（式中、Ｒ₂およびＹは式（Ｉ）について定義したものであるかまたはＹは付加的に適当な保護基により保護されていてもよい）のジアミンを式（IV）：Ｒ₁−ＣＯ₂Ｈ式（IV）（式中、Ｒ₁は式（Ｉ）について定義したものである）の化合物と、適当な極性非プロトン性溶媒中、適当な活性化剤を用いてビスアシル化し、ついで、保護基を除去し、所望により、塩形成するか、または別に：（ｂ）式（IV）の酸を酸ハライド：Ｒ₁ＣＯＸ’ （式中、Ｒ₁は式（Ｉ）について定義したものであり、Ｘ’はハロゲン原子である）に転換し、これを式（II）：ＮＨ(Ｒ₂)−Ｙ−(Ｒ₂)ＮＨ式（II）（式中、Ｒ₂およびＹは式（Ｉ）について定義したものであるかまたはＹは付加的に適当な保護基により保護されていてもよい）のジアミンと、適当な塩基の存在下、適当な溶媒中反応させ、ついで保護基を除去し、所望により塩形成することからなる式（Ｉ）の化合物の製造方法。