JP2000501079A

JP2000501079A - メタロペプチダーゼ阻害活性を有するホスホン酸誘導体

Info

Publication number: JP2000501079A
Application number: JP9519337A
Authority: JP
Inventors: ノルチーニ，ガブリエル; ボッタ，ダニエラ; サンタンゲロ，フランチェスコ
Original assignee: Zambon Group SpA
Current assignee: Zambon Group SpA
Priority date: 1995-11-23
Filing date: 1996-11-11
Publication date: 2000-02-02
Also published as: AU707570B2; EP0868428B1; DE69626846T2; NO982363D0; ITMI952430A0; KR19990071550A; DK0868428T3; CN1127513C; IT1276161B1; EA000743B1; CA2249343A1; AU7568996A; PT868428E; CN1202901A; US6548480B1; ZA969774B; CZ158898A3; ATE234856T1; EA199800470A1; MX9803760A

Abstract

(57)【要約】化合物（Ｉ）：（式中、Ｒはアルキル基、アリール基又はアリールアルキル基で、該アリール基はフェニル基、ナフチル基、又は芳香族複素環であり；Ｒ₁及びＲ₂は同一又は異なって、水素原子又はアルキル基を示し；Ｒ₃はアルキル基又はアリールアルキル基であって当該アリール基は前記と同様であり；Ｒ₄は複素環若しくはフェニル基で置換されていてもよい複素環又は複素環で置換されたフェニル基であり（但し、Ｒ₄はイミダゾリル又はインドリル基でない）；Ｘは単結合又は−ＯＣＯＮＨ又は−ＣＯＮＨ−基である）、その製造法、及び医薬組成物に関する。化合物（Ｉ）はＡＣＥ阻害活性及びＮＥＰ阻害活性を共に有し、心臓血管疾患の治療に有用である。

Description

【発明の詳細な説明】メタロペプチダーゼ阻害活性を有するホスホン酸誘導体本発明は心臓血管疾病の治療に有用なホスホン酸誘導体、更に特に心臓血管疾病の治療にメタロペプチダーゼ阻害剤として有用なホスホン酸誘導体に関する。メタロペプチダーゼ阻害分子の研究は、前記酵素が心臓循環系のレベルに働くという役割から薬理学的興味を呼んでいる。アンジオテンシン変換酵素（ＡＣＥ）阻害活性を有する化合物は、血圧を上げる物質であるアンジオテンシンIIの生成を阻害するという点で、主に高血圧、心疾患及び心筋梗塞後の治療に有用であることが実際に良く知られている。エンドセリン変換酵素（ＡＣＥ）阻害活性を有する化合物は、血管収縮作用を有する２１アミノ酸ペプチドであるエンドセリンの生成を阻害するという点で、抗血管収縮剤として有用である。これらに代わり、エンケファリナーゼとも呼ばれる中性エンドペプチダーゼ（ＮＥＰ）の阻害活性を有する化合物は、ＮＥＰ酵素が内因性エンケファリナーゼのみならず例えば、心臓から分泌される血管拡張性ホルモンである心房性ナトリウム利尿因子（ＡＮＦ）等のナトリウム利尿因子の不活性化に重要であることから、血管拡張剤及び利尿剤として有用である。それゆえにメタロペプチダーゼ阻害活性を有する各種化合物は、心臓血管系に対する作用機構が異なるとはいえ、高血圧、腎不全、並びにうっ血性心不全及び心筋梗塞後の治療に単独であるいは組合わせて使用されている。米国特許第４４３２９７２号（Ｅ．Ｒ．スクイブ＆サンズ、Ｉｎｃ．）には、ＡＣＥ阻害活性及びエンケファリナーゼ阻害活性を有するアミノ酸のホスホリル化誘導体、特にホスホンアミデートが記述されている。これらの化合物は降圧剤及び鎮痛剤として有用であると記載されている。欧州特許出願第０５１８２９９号（武田薬品工業）には、ＥＣＥ阻害活性を有し、高血圧、心臓又は脳血管疾患及び腎疾患の治療に有用なホスホン酸誘導体が数種記述されている。本発明者らはアンジオテンシン変換酵素（ＡＣＥ）のみならず、中性エンドペプチダーゼに対する阻害活性（ＡＣＥ／ＮＥＰ二重阻害活性）を有するホスホン酸誘導体を見出したが、本発明ホスホン酸誘導体は特に心臓血管治療に有用である。従って、本発明の目的は、式（Ｉ）の化合物及び薬学的に許容されるそれらの塩（式中Ｒは、一個以上のフッ素原子が置換していてもよい直鎖若しくは分枝鎖のＣ₁〜Ｃ₆アルキル基、アリール基又はアルキル部分の炭素数か１〜６のアリールアルキル基を示すが、当該アリール部分はハロゲン原子、ヒドロキシ基、アルキル部分の炭素数が１〜３のアルキル、アルコキシ、アルキルチオ、アルキルスルホニル若しくはアルコキシカルボニル基、カルボキシ基、アミノカルボニル基、アシルアミノ基、アミノスルホニル基、アルキル部分の炭素数が１〜３のモノ若しくはジアルキルアミノカルボニル基から選択される１以上の置換基を有していてもよいフェニル基、１−ナフチル基、２−ナフチル基又は窒素、酸素及び硫黄から選択される一個若しくは二個のヘテロ原子を有する５員若しくは６員の芳香族複素環であり；Ｒ₁及びＲ₂は同一又は異なって、水素原子、又は直鎖若しくは分枝鎖のＣ₁〜Ｃ₄アルキル基を示し；Ｒ₃は、直鎖若しくは分枝鎖のＣ₁〜Ｃ₆アルキル基、又はアルキル部分の炭素数が１〜６のアリールアルキル基を示すが、ここで当該アリール部分は前記Ｒで示した置換基と同じ置換基を有していてもよいフェニル基、１−ナフチル基、２ −ナフチル基、又は窒素、酸素及び硫黄から選択される一個若しくは二個のヘテロ原子を有する５員若しくは６員の芳香族複素環であり；Ｒ₄は、窒素、酸素及び硫黄より選択される一個若しくは二個のヘテロ原子を有する５員若しくは６員の芳香族複素環又はフェニル基が置換していてもよい窒素、酸素及び硫黄より選択される一個又は二個のヘテロ原子を有する５員又は６員の芳香族複素環を示すか、又は窒素、酸素及び硫黄より選択される一個又は二個のヘテロ原子を有する５員又は６員の芳香族複素環が置換していてもよいフェニル基を示し、当該フェニル基及び複素環基はハロゲン原子、アルキル、アルキル部分の炭素数が１〜３のアルコキシ、アルキルチオ又はアルコキシカルボニル基から選択される一個以上の同一又は異なる置換基が置換していてもよく；Ｘは単結合又は−Ｏ−ＣＯＮＨ−又は−ＣＯＮＨ−基を示し；アスタリスク付きの炭素原子は不斉炭素原子を示すが、Ｒ₄はイミダゾリル又はインドリル基でないものとする）を提供することにある。化合物（Ｉ）は少なくとも二個の不斉炭素原子を含有するので立体異性体の形態で存在可能である。従って、本発明の目的は単一の立体異性体の形態のみならず立体異性体の混合物の形態としての化合物（Ｉ）を提供することである。本発明の目的物である化合物（Ｉ）はＡＣＥ／ＮＥＰ二重阻害活性を有し、心臓血管疾患の治療に有用である。本明細書においては、特記しない限りアルキル基という用語はメチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、ｓｅｃ−ブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、イソブチル、ｎ−ペンチル、２−ペンチル、３−ペンチル、イソペンチル、ｔｅｒｔ−ペンチル、ｎ−ヘキシル及びイソヘキシル等の直鎖又は分枝鎖のアルキル基を指し；アルコキシ基という用語はメトキシ、エトキシ、ｎ−プロポキシ及びイソプロポキシ等の直鎖又は分枝鎖のアルコキシ基を指し；ハロゲン原子という用語はフッ素、塩素、臭素及びヨウ素各原子を指し；アシルという用語は酢酸、プロピオン酸、酪酸及び安息香酸等の脂肪族又は芳香族カルボン酸から誘導されるアシル基を指し；アリールという用語はフェニル、１−ナフチル、２−ナフチルを指すか又は窒素、酸素及び硫黄から選択される一個又は二個のヘテロ原子を含むベンゾ縮合していてもよい５員又は６員の複素環基（チアゾール、イソキサゾール、オキサゾール、イソチアゾール、ピラゾール、イミダゾール、チオフェン、ピロール、ピリジン、ピリミジン、ピラジン及びフラン等）を指すものとする。化合物（Ｉ）の薬学的に許容される塩の例としてはアルカリ金属又はアルカリ土類金属の塩及び薬学的に許容される有機塩基の塩が挙げられる。化合物（Ｉ）として好ましいものは、Ｒ₄が４位に複素環基が置換したフェニル基である化合物である。中でも特に好ましいのは、式（Ｉ）中、Ｒ₁及びＲ₂が水素原子、またＲ₃が直鎖又は分枝Ｃ_1-4アルキル基である化合物である。化合物（Ｉ）の薬学的に許容される塩の好ましい例としては、ナトリウム、リチウム及びカリウム等のアルカリ金属の塩が挙げられる。本発明の目的物である化合物（Ｉ）の好ましい例として以下の化合物が挙げられる。Ｎ−（Ｎ’−プロピルホスホニルロイシル）−［４−（２−フリル）］−フェニルアラニン；Ｎ−（Ｎ’−プロピルホスホニルロイシル）−［４−（３−フリル）］−フェニルアラニン；Ｎ−（Ｎ’−プロピルホスホニルロイシル）−［４−（２−チエニル）］−フェニルアラニン；Ｎ−（Ｎ’−プロピルホスホニルロイシル）−［４−（３−チエニル）］−フェニルアラニン；Ｎ−（Ｎ’−プロピルホスホニルロイシル）−［４−（Ｎ”−メチル−２−ピロリル）］−フェニルアラニン；Ｎ−（Ｎ’−プロピルホスホニルロイシル）−［４−（Ｎ”−メチル−３−ピロリル）］−フェニルアラニン；Ｎ−（Ｎ’−プロピルホスホニルロイシル）−［４−（２−チアゾリル）］−フェニルアラニン；Ｎ−（Ｎ’−プロピルホスホニルロイシル）−［４−（２−ピリジル）］−フェニルアラニン；Ｎ−（Ｎ’−プロピルホスホニルロイシル）−［４−（３−ピリジル）］−フェニルアラニン；Ｎ−（Ｎ’−プロピルホスホニルロイシル）−（４−ピラジニル）−フェニルアラニン；Ｎ−（Ｎ’−プロピルホスホニルロイシル）−［４−（５−ピリミジニル）］− フェニルアラニン；Ｎ−（Ｎ’−プロピルホスホニルバリル）−［４−（２−フリル）］−フェニルアラニン；Ｎ−（Ｎ’−プロピルホスホニルバリル）−［４−（３−フリル）］−フェニルアラニン；Ｎ−（Ｎ’−プロピルホスホニルバリル）−［４−（２−チエニル）］−フェニルアラニン；Ｎ−（Ｎ’−プロピルホスホニルバリル）−［４−（３−チエニル）］−フェニルアラニン；Ｎ−（Ｎ’−プロピルホスホニルバリル）−［４−（Ｎ”−メチル−２−ピロリル）］−フェニルアラニン；Ｎ−（Ｎ’−プロピルホスホニルバリル）−［４−（Ｎ”−メチル−３−ピロリル）］−フェニルアラニン；Ｎ−（Ｎ’−プロピルホスホニルバリル）−［４−（２−チアゾリル）］−フェニルアラニン；Ｎ−（Ｎ’−プロピルホスホニルバリル）−［４−（２−ピリジル）］−フェニルアラニン；Ｎ−（Ｎ’−プロピルホスホニルバリル）−［４−（３−ピリジル）］−フェニルアラニン；Ｎ−（Ｎ’−プロピルホスホニルバリル）−（４−ピラジニル）−フェニルアラニン；Ｎ−（Ｎ’−プロピルホスホニルバリル）−［４−（５−ピリミジニル）］−フェニルアラニン；Ｎ−［Ｎ’−（２−チエニルメチル）ホスホニルロイシル］−［４−（２−フリル）］−フェニルアラニン；Ｎ−［Ｎ’−（２−チエニルメチル）ホスホニルロイシル］−［４−（３−フリル）］−フェニルアラニン；Ｎ−［Ｎ’−（２−チエニルメチル）ホスホニルロイシル］−［４−（２−チエニル）］−フェニルアラニン；Ｎ−［Ｎ’−（２−チエニルメチル）ホスホニルロイシル］−［４−（３−チエニル）］−フェニルアラニン；Ｎ−［Ｎ’−（２−チエニルメチル）ホスホニルロイシル］−［４−（Ｎ”−メチル−２−ピロリル）］−フェニルアラニン；Ｎ−［Ｎ’−（２−チエニルメチル）ホスホニルロイシル］−［４−（Ｎ”−メチル−３−ピロリル）］−フェニルアラニン；Ｎ−［Ｎ’−（２−チエニルメチル）ホスホニルロイシル］−［４−（２−チアゾリル）］−フェニルアラニン；Ｎ−［Ｎ’−（２−チエニルメチル）ホスホニルロイシル］−［４−（２−ピリジル）］−フェニルアラニン；Ｎ−［Ｎ’−（２−チエニルメチル）ホスホニルロイシル］−［４−（３−ピリジル）］−フェニルアラニン；Ｎ−［Ｎ’−（２−チエニルメチル）ホスホニルロイシル］−（４−ピラジニル）−フェニルアラニン；Ｎ−［Ｎ’−（２−チエニルメチル）ホスホニルロイシル］−［４−（５−ピリミジニル）］−フェニルアラニン；Ｎ−［Ｎ’−（２−チエニルメチル）ホスホニルバリル］−［４−（２−フリル）］−フェニルアラニン；Ｎ−［Ｎ’−（２−チエニルメチル）ホスホニルバリル］−［４−（３−フリル）］−フェニルアラニン；Ｎ−［Ｎ’−（２−チエニルメチル）ホスホニルバリル］−［４−（２−チエニル）］−フェニルアラニン；Ｎ−［Ｎ’−（２−チエニルメチル）ホスホニルバリル］−［４−（３−チエニル）］−フェニルアラニン；Ｎ−［Ｎ’−（２−チエニルメチル）ホスホニルバリル］−［４−（Ｎ”−メチル−２−ピロリル）］−フェニルアラニン；Ｎ−［Ｎ’−（２−チエニルメチル）ホスホニルバリル］−［４−（Ｎ”−メチル−３−ピロリル）］−フェニルアラニン；Ｎ−［Ｎ’−（２−チエニルメチル）ホスホニルバリル］−［４−（２−チアゾリル）］−フェニルアラニン；Ｎ−［Ｎ’−（２−チエニルメチル）ホスホニルバリル］−［４−（２−ピリジル）］−フェニルアラニン；Ｎ−［Ｎ’−（２−チエニルメチル）ホスホニルバリル］−［４−（３−ピリジル）］−フェニルアラニン；Ｎ−［Ｎ’−（２−チエニルメチル）ホスホニルバリル］−（４−ピラジニル） −フェニルアラニン；Ｎ−［Ｎ’−（２−チエニルメチル）ホスホニルバリル］−［４−（５−ピリミジニル）］−フェニルアラニン；Ｎ−［Ｎ’−（ベンジルオキシカルボニルアミノメチル）ホスホニルロイシル］ −［４−（２−フリル）］−フェニルアラニン；Ｎ−［Ｎ’−（ベンジルオキシカルボニルアミノメチル）ホスホニルロイシル］ −［４−（３−フリル）］−フェニルアラニン；Ｎ−［Ｎ’−（ベンジルオキシカルボニルアミノメチル）ホスホニルロイシル］ −［４−（２−チエニル）］−フェニルアラニン；Ｎ−［Ｎ’−（ベンジルオキシカルボニルアミノメチル）ホスホニルロイシル］ −［４−（３−チエニル）］−フェニルアラニン；Ｎ−［Ｎ’−（ベンジルオキシカルボニルアミノメチル）ホスホニルロイシル］ −［４−（Ｎ”−メチル−２−ピロリル）］−フェニルアラニン；Ｎ−［Ｎ’−（ベンジルオキシカルボニルアミノメチル）ホスホニルロイシル］ −［４−（Ｎ”−メチル−３−ピロリル）］−フェニルアラニン；Ｎ−［Ｎ’−（ベンジルオキシカルボニルアミノメチル）ホスホニルロイシル］ −［４−（２−チアゾリル）］−フェニルアラニン；Ｎ−［Ｎ’−（ベンジルオキシカルボニルアミノメチル）ホスホニルロイシル］ −［４−（２−ピリジル）］−フェニルアラニン；Ｎ−［Ｎ’−（ベンジルオキシカルボニルアミノメチル）ホスホニルロイシル］ −［４−（３−ピリジル）］−フェニルアラニン；Ｎ−［Ｎ’−（ベンジルオキシカルボニルアミノメチル）ホスホニルロイシル］ −（４−ピラジニル）−フェニルアラニン；Ｎ−［Ｎ’−（ベンジルオキシカルボニルアミノメチル）ホスホニルロイシル］ −［４−（５−ピリミジニル）］−フェニルアラニン；Ｎ−［Ｎ’−（ベンジルオキシカルボニルアミノメチル）ホスホニルバリル］− ［４−（２−フリル）］−フェニルアラニン；Ｎ−［Ｎ’−（ベンジルオキシカルボニルアミノメチル）ホスホニルバリル］− ［４−（３−フリル）］−フェニルアラニン；Ｎ−［Ｎ’−（ベンジルオキシカルボニルアミノメチル）ホスホニルバリル］− ［４−（２−チエニル）］−フェニルアラニン；Ｎ−［Ｎ’−（ベンジルオキシカルボニルアミノメチル）ホスホニルバリル］− ［４−（３−チエニル）］−フェニルアラニン；Ｎ−［Ｎ’−（ベンジルオキシカルボニルアミノメチル）ホスホニルバリル］− ［４−（Ｎ”−メチル−２−ピロリル）］−フェニルアラニン；Ｎ−［Ｎ’−（ベンジルオキシカルボニルアミノメチル）ホスホニルバリル］− ［４−（Ｎ”−メチル−３−ピロリル）］−フェニルアラニン；Ｎ−［Ｎ’−（ベンジルオキシカルボニルアミノメチル）ホスホニルバリル］− ［４−（２−チアゾリル）］−フェニルアラニン；Ｎ−［Ｎ’−（ベンジルオキシカルボニルアミノメチル）ホスホニルバリル］− ［４−（２−ピリジル）］−フェニルアラニン；Ｎ−［Ｎ’−（ベンジルオキシカルボニルアミノメチル）ホスホニルバリル］− ［４−（３−ピリジル）］−フェニルアラニン；Ｎ−［Ｎ’−（ベンジルオキシカルボニルアミノメチル）ホスホニルバリル］− （４−ピラジニル）−フェニルアラニン；Ｎ−［Ｎ’−（ベンジルオキシカルボニルアミノメチル）ホスホニルバリル］− ［４−（５−ピリミジニル）］−フェニルアラニン；Ｎ−［Ｎ’−（アセチルアミノメチル）ホスホニルロイシル］−［４−（２−フリル）］−フェニルアラニン；Ｎ−［Ｎ’−（アセチルアミノメチル）ホスホニルロイシル］−［４−（３−フリル）］−フェニルアラニン；Ｎ−［Ｎ’−（アセチルアミノメチル）ホスホニルロイシル］−［４−（２−チエニル）］−フェニルアラニン；Ｎ−［Ｎ’−（アセチルアミノメチル）ホスホニルロイシル］−［４−（３−チエニル）］−フェニルアラニン；Ｎ−［Ｎ’−（アセチルアミノメチル）ホスホニルロイシル］−［４−（Ｎ”− メチル−２−ピロリル）］−フェニルアラニン；Ｎ−［Ｎ’−（アセチルアミノメチル）ホスホニルロイシル］−［４−（Ｎ”− メチル−３−ピロリル）］−フェニルアラニン；Ｎ−［Ｎ’−（アセチルアミノメチル）ホスホニルロイシル］−［４−（２−チアゾリル）］−フェニルアラニン；Ｎ−［Ｎ’−（アセチルアミノメチル）ホスホニルロイシル］−［４−（２−ピリジル）］−フェニルアラニン；Ｎ−［Ｎ’−（アセチルアミノメチル）ホスホニルロイシル］−［４−（３−ピリジル）］−フェニルアラニン；Ｎ−［Ｎ’−（アセチルアミノメチル）ホスホニルロイシル］−（４−ピラジニル）−フェニルアラニン；Ｎ−［Ｎ’−（アセチルアミノメチル）ホスホニルロイシル］−［４−（５−ピリミジニル）］−フェニルアラニン；Ｎ−［Ｎ’−（アセチルアミノメチル）ホスホニルバリル］−［４−（２−フリル）］−フェニルアラニン；Ｎ−［Ｎ’−（アセチルアミノメチル）ホスホニルバリル］−［４−（３−フリル）］−フェニルアラニン；Ｎ−［Ｎ’−（アセチルアミノメチル）ホスホニルバリル］−［４−（２−チエニル）］−フェニルアラニン；Ｎ−［Ｎ’−（アセチルアミノメチル）ホスホニルバリル］−［４−（３−チエニル）］−フェニルアラニン；Ｎ−［Ｎ’−（アセチルアミノメチル）ホスホニルバリル］−［４−（Ｎ”−メチル−２−ピロリル）］−フェニルアラニン；Ｎ−［Ｎ’−（アセチルアミノメチル）ホスホニルバリル］−［４−（Ｎ”−メチル−３−ピロリル）］−フェニルアラニン；Ｎ−［Ｎ’−（アセチルアミノメチル）ホスホニルバリル］−［４−（２−チアゾリル）］−フェニルアラニン；Ｎ−［Ｎ’−（アセチルアミノメチル）ホスホニルバリル］−［４−（２−ピリジル）］−フェニルアラニン；Ｎ−［Ｎ’−（アセチルアミノメチル）ホスホニルバリル］−［４−（３−ピリジル）］−フェニルアラニン；Ｎ−［Ｎ’−（アセチルアミノメチル）ホスホニルバリル］−（４−ピラジニル）−フェニルアラニン；Ｎ−［Ｎ’−（アセチルアミノメチル）ホスホニルバリル］−［４−（５−ピリミジニル）］−フェニルアラニン。本発明の目的物である化合物（Ｉ）は、ホスホリル化誘導体（II）（式中、Ｒ、Ｒ₁及びＸは前述の基を意味し、Ｗはハロゲン原子、好ましくは塩素を表し、Ｙは保護基、好ましくはＣ_1-4アルキル基、フェニル基又はアルキル部分の炭素数が１〜４のフェニルアルキル基を表す）とジペプチド誘導体（III ）（式中、Ｒ₂、Ｒ₃及びＲ₄は前述の基を意味する）との反応により製造することができる。ホスホリル化誘導体（II）は対応する化合物（IV）（式中、Ｒ、Ｒ₁及びＸは前述の基を意味し、ＺはＷ又はＯＹを表し、Ｗ及びＹは前述の基を意味する）から製造することができる。化合物（II）は、対応する化合物（IV）を用い、ハロゲン化剤又は式ＹＯＨ（式中、Ｙは前述の基を意味する）で表される化合物との反応により、従来の技法によって製造される。化合物（II）（式中、Ｘが単結合又は−Ｏ−ＣＯＮＨ−基のもの）の調製については、例えばＤ．Ｓ．カラネフスキーら、Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．１９８８，３１，２０４−２１２及びＢ．Ｐ．モーガンら、Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．１９９１，１１３，２９７−３０７を参照されたい。化合物（II）（式中、Ｘが−ＣＯＮＨ−基のもの）は、対応する化合物（II）（式中、Ｘは−Ｏ−ＣＯＮＨ−基及びＲはベンジル基）のカルバミック基（Ｒ− Ｏ−ＣＯＮＨ−）を水素化分解した後、化合物（Ｖ） R-COW₁ （Ｖ）（式中、Ｒは前述の基を意味し、Ｗ₁塩素原子又は臭素原子を示す）と反応させて製造することができる。これに対しジペプチド誘導体（III）は、アミノ酸（VI）（式中、Ｒ₂及びＲ₃は前述の基を意味する）とアラニン誘導体（VII）（式中、Ｒ₄は前述の基を意味する）との縮合により製造することができる。本縮合反応はペプチド化学の従来の技法により行われる。この反応を実施するに先立ち、本反応を妨害する可能性を有する任意の官能基を適切に保護することが有用であろう。この任意の保護は従来の技法により行われる。例えばホスホリル化誘導体（II）とジペプチド誘導体（III）との反応においては、化合物（III）の遊離のカルボキシ基並びにホスホン酸基のヒドロキシ基を保護することが有用であろう。同様にアミノ酸（VI）とアラニン誘導体（III）との反応においては、誘導体（VI）のアミノ基及び誘導体（VII）のカルボキシ基を保護することが有用であろう。任意の保護の有用性の評価、並びに行われる反応及び保護すべき官能基により採用される保護方法の種類は当業者にとって通常の知識の範囲内である。任意の保護基の除去は従来の技法により行われる。有機化学における保護基の利用に関しては、一般にＷ．グリーン及びピーターＧ．Ｍ．ウッツの「有機合成における保護基」、ＪｏｈｎＷｉｌｅｙ＆Ｓｏｎｓ，Ｉｎｃ．、第二版、１９９１を参照されたい。式（VI）及び式（VII）の化合物は既知であるか、既知の方法により簡単に製造される。化合物（VII）の調製については、例えばＷ．Ｃ．シエー及びＴ．Ｒ．バイリーのＪ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．１９９２，５７，３７９−３８１及びＴｅｔｒａｈｅｄｒｏｎＬｅｔｔｅｒｓ，２７，４４０７−４４１０，１９８６にそれぞれ記載の合成法を参照されたい。本発明の目的物である化合物（Ｉ）は更に、ホスホリル化誘導体（VIII）（式中、Ｒ、Ｒ₁、Ｒ₂、Ｒ₃、Ｘ及びＹは前述の基を意味する）とアラニン誘導体（VII）との反応を含む別の合成法によって製造することができる。先の記述と同様に、前記の反応においても結果的に本反応を妨害する可能性を有する官能基を従来の技法によって保護することが有用であろう。化合物（VIII）は既知であるか、既知の方法により簡単に製造される。例えば化合物（VIII）は、ペプチド化学の従来法によるホスホリル化誘導体（ II）とアミノ酸（VI）との反応によって製造することができる。前述の記載に鑑み、化合物（Ｉ）（式中、Ｘが−ＣＯＮＨ−基のもの）は対応する化合物（Ｉ）（式中、Ｘが−Ｏ−ＣＯＮＨ−基及ひＲがベンジルのもの）を出発化合物として、前述の合成法の一つによっても製造できることは当業者にとって明白である。単一立体異性体の形態の化合物（Ｉ）は従来の技法による立体選択的合成法又は立体異性体混合物の分離により得られる。本発明の目的である化合物（Ｉ）の塩も従来の技法により調製される。本発明の目的である化合物（Ｉ）はＡＣＥ／ＮＥＰ二重阻害活性を有し、心臓血管疾患の治療に有用である。特に化合物（Ｉ）の阻害活性について、インビトロ及び生体外試験で評価した。化合物（Ｉ）のインビトロの阻害活性を、ＡＣＥ阻害又はＮＥＰ阻害活性を有する既知の分子と比較して評価した（実施例３）。カプトプリル（Captopril）は経口活性ＡＣＥ阻害剤として知られた最初の薬剤（メルクインデックス、ＸＩ版−Ｎｏ．１７７３、２６７−２６８ページ）で、ＡＣＥ阻害活性の比較化合物として使用した。これに対し、チオルファン［Thiorphan、ＤＬ−（３−メルカプト−２−ベンジルプロピオニル）グリシン］はＮＥＰ阻害剤の親化合物と考えられている既知の分子で、ロクらにより最初に報告された物質（ネイチャー、第２８８巻、２８６−２８８ページ、１９８０）であり、ＮＥＰ阻害活性の比較化合物として使用した。前述の米国特許第４４３２９７２号に例示されるＮ−［Ｎ’−（４−フェニル）ブチルホスホニル−Ｌ−フェニルアラニル］−Ｌ−フェニルアラニンジリチウム塩（以後化合物Ｒ−１と称する）を、化合物（Ｉ）のインビトロ阻害活性評価のための更なる比較化合物とした。ＩＣ₅₀値で表現される化合物（Ｉ）のインビトロ阻害活性は、ｎＭオーダーの濃度で得られるという点で薬理学的に重要である。前記の活性はＡＣＥ阻害活性に関してカプトプリルの活性と、又ＮＥＰ阻害活性に関してチオルファンの活性と少なくとも同等レベルであった。更に化合物Ｒ−１に関しては、化合物（Ｉ）のＡＣＥ／ＮＥＰ二重阻害活性の方が顕著に高かった。上述の様に、化合物（Ｉ）の阻害活性を、前述の化合物Ｒ−１を比較化合物として使用した生体外試験によっても評価した（実施例４）。生体外における化合物（Ｉ）のＡＣＥ／ＮＥＰ二重阻害活性は比較化合物のものより顕著に高かった。化合物（Ｉ）は治療における実際の使用に際して、経口及び非経口投与に適した固体又は液体医薬組成物に処方することができる。化合物（Ｉ）の治療有効量を薬学的に許容される担体との混合物として含有する医薬組成物は本発明の更なる目的物である。本発明による薬剤組成物の具体的な例として、経口投与に適した錠剤、被覆錠剤、カプセル剤、顆粒剤、溶液剤及び懸濁剤、並びに非経口投与に適した溶液剤及び懸濁剤が挙げられる。化合物（Ｉ）は、そのままでも特定の治療的又は薬学的性質を満足する目的で活性であるが、相当する生物学的前駆体（プロドラッグ）に変換することは有用である。従って、ホスホリル化及びアミド誘導体のプロドラッグ調製に関する従来の技法によれば、例えばカルボキシ官能基又はホスフィン酸官能基のエステル化により適切なプロドラッグを得ることができる。プロドラッグの形態の化合物（Ｉ）及び、特にカルボキシ官能基又はホスフィン酸官能基のエステル化により得られる化合物、並びにプロドラッグの形態の化合物（Ｉ）を含有する医薬組成物、特にカルボキシ官能基又はホスフィン酸官能基がエステル化され得る化合物（Ｉ）を含有する薬剤組成物も本発明の範囲内である。化合物（Ｉ）又は相当するプロドラッグの用量は、病気の重篤度、患者の個々のレスポンス及び処方によって異なるか、通常１日１回から複数回に分けて投与し、体重１kgあたり０．０１mg〜２０mgである。以下、実施例を挙げて本発明を更に説明する。特記しない限り、フラッシュクロマトグラフィーはベーカー社のフラッシュクロマトグラフィーシリカゲル（コード番号：７０２４−００）を用いて行った。参考例１Ｎ−［Ｎ’−（４−フェニル）ブチルホスホニル−Ｌ−フェニルアラニル］−Ｌ −フェニルアラニンジリチウム塩（化合物Ｒ−１）上記化合物を、米国特許第４４３２９７２号に記載の手順（実施例３６）に従って調製した。実施例１Ｎ−（Ｎ’−プロピルホスホニル−Ｌ−ロイシル）−［４−（２−フリル）］− Ｌ−フェニルアラニンジリチウム塩（化合物１）ａ）Ｎ−［Ｎ’−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｌ−ロイシル］−［４− （２−フリル）］−Ｌ−フェニルアラニンメチルエステルの調製ジシクロヘキシルカルボジイミド（１．７５ｇ；８．５０mmol）を、Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｌ−ロイシン一水和物（０．９８ｇ；３．９３ mmol）とＮ−ヒドロキシコハク酸イミド（０．４５ｇ；３．９３mmol）の１，４ −ジオキサン（４０ml）溶液に加えた。反応液を室温で１時間攪拌した後、生成したジシクロヘキシル尿素の結晶を濾別した。Ｗ．Ｃ．シエ（W.C.Shieh）らが記載した合成方法（Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．，１９９２，５７，３７９−３８１）に従って調製した（２−フリル）］−Ｌ− フェニルアラニンメチルエステル（０．７５ｇ；３．２７mmol）を得られた溶液に加えた。反応液を１８時間攪拌した後、溶媒を減圧下で蒸発させた。得られた残渣をエチルエーテルに溶解させ、混合物を再度濾過した。溶媒を減圧下で蒸発させ、粗生成物をシリカゲルフラッシュクロマトグラフィー（石油エーテル：酢酸エチル＝７５：２５；窒素圧０．１気圧）で精製し、Ｎ −［Ｎ’−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｌ−ロイシル］−［４−（２− フリル）］−Ｌ−フェニルアラニンメチルエステル（０．９８ｇ；収率３０％）を、白色固体として得た。¹ H-NMR(200MHz,CDCl₃)：δ(ppm):0.85-0.93(2d,6H); 1.4(s,9H); 1.50-1.70(m,3H); 3.00-3.20(m,2H); 3.70(m,3H); 4.00-4.12(m,1H); 4.70-4.90(m,2H); 6.52(d,1H); 6.41-7.41(m,3H); 7.1-7.6(m,4H). ｂ）Ｎ−（Ｌ−ロイシル）−［４−（２−フリル）］−Ｌ−フェニルアラニンメチルエステル塩酸塩の調製塩化チオニル（０．３１ml；４．２８mmol）を、実施例１ａに記載の方法で調製したＮ−［Ｎ’−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｌ−ロイシル］−［４ −（２−フリル）］−Ｌ−フェニルアラニンメチルエステル（０．９８ｇ；２．１４mmol）のメタノール（２０ml）溶液に０℃で加えた。反応液を室温で２４時間攪拌した後、溶媒を減圧下で蒸発させ、Ｎ−（Ｌ−ロイシル）−［４−（２−フリル）］−Ｌ−フェニルアラニンメチルエステル塩酸塩（０．７９ｇ；収率９３％）を得、これを以後の反応に用いた。ｃ）Ｎ−［Ｎ’−（フェノキシ）（プロピル）ホスホリル−Ｌ−ロイシル］−［４−（２−フリル）］−Ｌ−フェニルアラニンの調製フェノール（０．２８ｇ；３．００mmol）とトリエチルアミン（０．４２ml；３．００mmol）の塩化メチレン（１７ml）溶液を、プロピルホスホン酸ジクロライド（０．３７ml；３．００mmol）の塩化メチレン（４ml）溶液に徐々に滴下して加え、窒素雰囲気下℃で冷却した。実施例１ｂに記載の方法で調製したＮ−（Ｌ−ロイシル）−［４−（２−フリル）］−Ｌ−フェニルアラニンメチルエステル塩酸塩（０．７９ｇ；２．００mm ol）とトリエチルアミン（０．７ml；５．００mmol）の塩化メチレン（５ml）溶液を反応液に滴下して加え、室温で３時間攪拌した後、０℃で冷却した。反応液を室温で３時間攪拌した後、水を加えた。相を分離し、有機相を硫酸ナトリウムで乾燥させた後、減圧下で蒸発させた。残渣をシリカゲルフラッシュクロマトグラフィー（溶離液石油エーテル：酢酸エチル＝１：１；窒素圧０．１気圧）で精製し、Ｎ−［Ｎ’−（フェノキシ）（プロピル）ホスホリル−Ｌ−ロイシル］−［４−（２−フリル）］−Ｌ−フェニルアラニンメチルエステル（０．４ｇ；収率４０％）を、白色固体として得た。¹ H-NMR(200MHz,CDCl₃)：δ(ppm):0.70-1.90(m,16H); 2.90-3.20(m,2H); 3.35-3.51(m,1H); 3.65(s,3H); 3.70-3.90(m,1H); 4.65-4.80(m,1H); 6.70-6.85(m,1H); 6.40-7.40(m,3H); 7.00-7.60(m,9H). ｄ）Ｎ−（Ｎ’−プロピルホスホニル−Ｌ−ロイシル）−［４−（２−フリル）］−Ｌ−フェニルアラニンジリチウム塩の調製水酸化リチウム一水和物（９０mg；２．１６mmol）の水溶液（水：２ml）を、実施例１ｃに記載の方法で調製したＮ−［Ｎ’−（フェノキシ）（プロピル）ホスホリル−Ｌ−ロイシル］−［４−（２−フリル）］−Ｌ−フェニルアラニンメチルエステル（０．４ｇ；０．７２mmol）のテトラヒドロフラン（５ml）溶液に加えた。反応液を室温で１時間攪拌した。次に反応液を減圧下で蒸発させ、得られた残渣をエタノールに溶解した後、再度蒸発させた。この操作を２度繰返した。残渣を酢酸エチルに溶解した後、反応液を室温で２４時間攪拌した。次に反応液を濾過し、Ｎ−（Ｎ’−プロピルホスホニル−Ｌ−ロイシル）−［４−（２−フリル）］−Ｌ−フェニルアラニンジリチウム塩（０．３ｇ；収率９０％）を、白色固体として得た。¹ H-NMR(200MHz,D₂O)：δ(ppm):0.58-0.73(m,9H); 0.98-1.46(m,7H); 2.71-3.11(m,2H); 3.26-3.38(m,1H); 4.27-4.33(m,1H); 6.39(dd,1H); 6.63(d,1H); 7.33(d,1H); 7.10-7.52(m,4H). 実施例２Ｎ−（Ｎ’−プロピルホスホニル−Ｌ−バリル）−［４−（２−チアゾリル）］ −Ｌ−フェニルアラニンジリチウム塩（化合物２）実施例１のステップａ〜ｄに記載の処理を行い、以下の化合物を調製した。ａ）Ｎ−［Ｎ’−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｌ−バリル］−［４−（２−チアゾリル）］−Ｌ−フェニルアラニンメチルエステルの調製 ¹ H-NMR(200MHz,CDCl₃)：δ(ppm):0.80-0.95(m,6H,CH₃-CH-CH₃); 1.42[s,9H,C(CH₃)₃]; 2.00-2.19(m,1H,CH₃-CH-CH₃); 3.03-3.22(m,2H,CH₂-phenylene); 3.70(s,3H,COOCH₃); 3.83-3.93(m,1H,NH-CH-CH); 4.72-5.05(m,2H,NHCOO,CHCOO); 6.40(bd,1H,NH-CH-COO); 7.13-7.90(m,6H,aryl). ｂ）Ｎ−（Ｌ−バリル）−［４−（２−チアゾリル）］−Ｌ−フェニルアラニンメチルエステル塩酸塩の調製 ¹ H-NMR(200MHz,D₂O)：δ(ppm):0.77-0.83(m,6H,CH₃ -CH-CH₃ ); 1.93-2.10(m,1H,CH₃-CH-CH₃); 2.96-3.21(m,2H,CH₂ -phenylene); 3.55(s,3H,COOCH₃); 3.62(d,1H,CH-NH₂); 4.60-4.70(m,1H,CH-COO); 7.25-7.74(m,4H,phenylene); 7.64-7.87(m,2H,thiazolyl). ｃ）Ｎ−［Ｎ’−（フェノキシ）（プロピル）ホスホリル−Ｌ−バリル］−［４ −（２−チアゾリル）］−Ｌ−フェニルアラニンメチルエステルの調製 ¹ H-NMR(200MHz,CDCl₃)：δ(ppm):0.70-1.07(m,9H,CH₃ -CH-CH₃ ,CH₃ -CH₂); 1.50-2.00(m,5H,CH ₂-CH₂ -P-NH-CH-CH); 2.90-3.18(m,2H,CH₂ -phenylene); 3.22-3.70(m,2H,P-NH-CH); 3.64(s,3H,COOCH₃); 4.71-4.87(m,1H,CH-COO); 6.75-6.86(m,1H,NHCO); 7.05-7.89(m,11H,aryl). ｄ）Ｎ−（Ｎ’−プロピルホスホニル−Ｌ−バリル）−［４−（２−チアゾリル）］−Ｌ−フェニルアラニンジリチウム塩の調製 ¹ H-NMR(200MHz,D₂O)：δ(ppm):0.40-0.80(m,9H,CH ₃-CH-CH ₃,CH ₃-CH₂); 1.00-1.70(m,5H,CH₂ -CH₂ -P-NH-CH-CH); 2.75-3.24(m,3H,P-NH-CH,CH₂ -phenylene); 4.25-4.39(m,1H,CH-COO); 7.16-7.70(m,6H,aryl). 実施例３医薬活性のインビトロ評価ａ）ＮＥＰ阻害活性Ｔ．マエダ(T.Maeda)らの方法（Ｂｉｏｃｈｉｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ａｃｔａ１９８３，７３１（１），１１５−１２０）に従って調製したラットの腎皮質膜におけるＮＥＰ阻害活性を評価した。０〜４℃で、雄のＳＤラットから重量約３００ｇの腎臓を摘出した。皮質を慎重に切除し、微細に細断し、均質化緩衝液（１ｍＭＭｇＣｌ₂、３０ｍＭＮａＣl、０．０２％ＮａＮ₃を含有する１０ｍＭリン酸ナトリウム、 pH７．４）の中で懸濁させた（１：１５重量／体積）。次にホモジナイザー（Ｕｌｔｒａ−Ｔｕｒｒａｘ）を用いて、組織を３０秒間ホモジナイズした。ホモジネート約１０mlをショ糖１０ml（４１％重量／体積）上に層状に置き、固定角ロータ中で４℃、３１２００ｒｐｍで３０分間遠心分離した。緩衝液／ショ糖界面から膜を採取し、ＴＲＩＳ／ＨＣｌ緩衝液（５０ｍＭ、pH ７．４）で２回洗浄した後、同じ緩衝液中に再懸濁させて保存した。膜を少量づつに分け、使用時まで−８℃で保存した。Ｃ．ロレンス（C.Llorens）らの方法（Ｅｕｒ．Ｊ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．，６９，（１９８１），１１３−１１６）に従って、ＮＥＰ阻害活性を評価した。結果は後述の通りである。上述のように調製した膜懸濁液の分割量（タンパク質濃度５μｍ／ml）を、アミノペプチダーゼ阻害剤（Ｂｅｓｔａｔｉｎ−１ｍＭ）の存在下、３０℃で１０分間プレインキュベートした。［³Ｈ］［Ｌｅｕ⁵］−エンケファリン（１５ｎＭ）とＴＲＩＳ／ＨＣｌ緩衝液（５０ｍＭ、pH７．４）を加え、最終的に体積を１００/μlとした。ＨＣｌ（０．１Ｍ、１００μｌ）を加えて、インキュベート（３０℃で２０分間）を停止した。クロマトグラフィーによりポリスチレンカラム（ＰｏｒａｐａｋＱ）に残った未反応基質を分離した後、液体シンチレーションによって相対放射能を測定することにより、代謝産物［³Ｈ］Ｔｙｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙの生成を定量した。未反応膜調製物に対する、式Ｉの化合物及び比較化合物で処理した膜調製物における代謝産物生成の阻害率を、ＩＣ₅₀（ｎＭ）値で表した。ｂ）ＡＣＥ阻害活性Ｂ．ホルムクイスト(B.Holmquist)らによる文献記載（ＡｎａｌｙｔｉｃａｌＢｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ９５，５４０−５４８（１９７９））の方法に従って、ＡＣＥ阻害活性を評価した。ＡＣＥ（５０μＭ、２５０mU／ml、ウサギの肺で精製、ＥＣ３．４．１５．１ＳＩＧＭＡ）を、化合物（Ｉ）及び比較化合物を用いて、定温器を備えたキュベット中で３７℃でプレインキュベートした。フリルアクリロイルフェニルアラニルグリシルグリシン０．８ｍＭ（ＦＡＰＧＧ−ＳＩＧＭＡ）を加えて、反応を開始させた。同時に、酵素反応速度曲線におけるΔＡ／分と回帰係数を計算するためのプログラムを備えたスペクトロメータ（ＢｅｃｋｍａｎＤＵ−５０）を用いて、３４０ｎｍでの吸光度を５分間継続して記録した。化合物（Ｉ）及び比較化合物における酵素活性による阻害を、ＩＣ₅₀（ｎＭ）値で表した。化合物（Ｉ）をリチウム塩として試験した。化合物１及び２並びに比較化合物（Ｒ−１、チオルファン及びカプトプリル）のＡＣＥ阻害活性及びＮＥＰ阻害活性を表すＩＣ₅₀（ｎＭ）値を、次表１に示す。上の表１に報告されたデータにより、本発明の目的物質である化合物（Ｉ）が顕著なＡＣＥ／ＮＥＰ二重阻害活性を有することが判る。かかる活性は、ＡＣＥ阻害活性についてのカプトプリルの活性、及びＮＥＰ阻害活性についてのチオルファンの活性と比肩し得るものであった。更に、化合物（Ｉ）のＡＣＥ／ＮＥＰ二重阻害活性は、化合物Ｒ−１の活性より顕著に高いものであった。実施例４医薬活性の生体外評価ａ）ＮＥＰ阻害活性Ｍ．オルロウスキー（M.Orlowsky）らによる文献報告（Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ１９８１，２０，４９４２−４９５０）の方法に従って、生体外ＮＥＰ阻害活性を評価した。自然発症高血圧ラット（ＳＨＲ）腎における化合物（Ｉ）及び化合物Ｒ−１の阻害活性を、当該被検化合物（２１μmol／kg）の静注の５分後に評価した。ＳＨＲから腎臓を摘出した後、腎組織をホモジナイズし、基質としてグルタリル−Ａｌａ−Ａｌａ−Ｐｈｅ−ナフチルアミド（ＧＡＡＰ）を用い、更にアミノペプチダーゼＭの存在下、pH７．６、３７℃で１５分間インキュベートした。１０％のトリクロロ酢酸を加えてインキュベートを停止した。放出された２−ナフチルアミンを、ファストガーネット染料（２ml）を加えて測定した。酵素反応率を、ファストガーネットと複合した２−ナフチルアミンによる基準値からの、５２４ｎｍにおける光学密度（ＯＤ₅₂₄）の増加量を測定することにより測定した。化合物（Ｉ）及び化合物Ｒ−１のＮＥＰ阻害活性を、ＳＨＲ腎における阻害率として表わした。ｂ）ＡＣＥ阻害活性Ｊ．Ｗ．ライアン（J.W.Ryan）らによる文献報告（Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｊ．（１９７７），１６７，５０１−５０４）の放射測定法を用いて、生体外ＡＣＥ阻害活性を評価した。自然発症高血圧ラット（ＳＨＲ）の肺における化合物（Ｉ）及び化合物Ｒ−１の阻害活性を、当該被検化合物（２１μmol／kg）の静注の５分後に評価した。ＳＨＲから肺を摘出した後、肺組織をホモジナイズし、基質としての［³Ｈ］Ｈｙｐ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙの存在下、３７℃で２時間インキュベートした。塩酸を加えて反応を停止した。放出された放射線標識馬尿酸を、酢酸エチルで抽出し、液体シンチレーションスペクトロメトリーにより従来法に従ってカウントした。化合物（Ｉ）及び化合物Ｒ−１のＡＣＥ阻害活性を、ＳＨＲ肺における阻害率によって表わした。ＳＨＲ腎及び肺のそれぞれにおける、化合物１及び化合物Ｒ−１のＡＣＥ阻害率及びＮＥＰ阻害率を表２に示す。上の表２のデータから、本発明の目的物である化合物（Ｉ）か、化合物Ｒ−１の活性より顕著に高いＡＣＥ／ＮＥＰ二重阻害活性を有することが明らかである。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (81)指定国ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＳ，ＦＩ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，ＩＴ，ＬＵ，ＭＣ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＵＡ(ＡＭ，ＡＺ，ＢＹ，ＫＧ，ＫＺ，ＭＤ，ＲＵ，ＴＪ，ＴＭ)，ＡＵ，ＢＲ，ＣＡ，ＣＮ，ＣＺ，ＨＵ，ＩＬ，ＪＰ，ＫＲ，ＭＸ，ＮＯ，ＳＩ，ＵＳ (72)発明者サンタンゲロ，フランチェスコイタリア国アイ−20148 ミラノ，ヴィアドングノッチ，33

Claims

【特許請求の範囲】１．次式（Ｉ）で表される化合物及び薬学的に許容されるそれらの塩（式中Ｒは、一個以上のフッ素原子が置換していてもよい直鎖若しくは分枝鎖のＣ₁〜Ｃ₆アルキル基、アリール基又はアルキル部分の炭素数が１〜６のアリールアルキル基を示すが、当該アリール部分はハロゲン原子、ヒドロキシ基、アルキル部分の炭素数が１〜３のアルキル、アルコキシ、アルキルチオ、アルキルスルホニル若しくはアルコキシカルボニル基、カルボキシ基、アミノカルボニル基、アシルアミノ基、アミノスルホニル基、アルキル部分の炭素数が１〜３のモノ若しくはジアルキルアミノカルボニル基から選択される１以上の置換基を有していてもよいフェニル基、１−ナフチル基、２−ナフチル基又は窒素、酸素及び硫黄から選択される一個若しくは二個のヘテロ原子を有する５員若しくは６員の芳香族複素環であり；Ｒ₁及びＲ₂は同一又は異なって、水素原子、又は直鎖若しくは分枝鎖のＣ₁〜Ｃ₄アルキル基を示し；Ｒ₃は、直鎖若しくは分枝鎖のＣ₁〜Ｃ₆アルキル基、又はアルキル部分の炭素数が１〜６のアリールアルキル基を示すが、ここで当該アリール部分は前記Ｒで示した置換基と同じ置換基を有していてもよいフェニル基、１−ナフチル基、２ −ナフチル基、又は窒素、酸素及び硫黄から選択される一個若しくは二個のヘテロ原子を有する５員若しくは６員の芳香族複素環であり；Ｒ₄は、窒素、酸素及び硫黄より選択される一個若しくは二個のヘテロ原子を有する５員若しくは６員の芳香族複素環又はフェニル基が置換していてもよい窒素、酸素及び硫黄より選択される一個又は二個のヘテロ原子を有する５員又は６員の芳香族複素環を示すか、又は窒素、酸素及び硫黄より選択される一個又は二個のヘテロ原子を有する５員又は６員の芳香族複素環が置換していてもよいフェニル基を示し、当該フェニル基及び複素環基はハロゲン原子、アルキル、アルキル部分の炭素数が１〜３のアルコキシ、アルキルチオ又はアルコキシカルボニル基から選択される一個以上の同一又は異なる置換基か置換していてもよく；Ｘは単結合又は−Ｏ−ＣＯＮＨ−又は−ＣＯＮＨ−基を示し；アスタリスク付きの炭素原子は不斉炭素原子を示すか、Ｒ₄はイミダゾリル又はインドリル基でないものとする）。２．Ｒ₄が４位に複素環基が置換したフェニル基である請求項１記載の化合物。３．Ｒ₁及びＲ₂が水素原子であり、Ｒ₃が直鎖又は分枝鎖のＣ₁〜Ｃ₄アルキル基である請求項２記載の化合物。４．ナトリウム、リチウム、及びカリウムから選択されるアルカリ金属塩である請求項１記載の化合物。５．ホスホリル化誘導体（II）（式中、Ｒ、Ｒ₁及びＸは請求項１に記載の通りで、Ｗはハロゲン原子、ＹはＣ₁ _-4 アルキル、フェニル又はアルキル部分の炭素数か１〜４のフェニルアルキルから選択される保護基を表す）とジペプチド誘導体（III）（式中、Ｒ₂、Ｒ₃及びＲ₄は請求項１に記載の通り）とを反応させることを特徴とする請求項１記載の化合物（Ｉ）の製造方法。６．請求項１記載の化合物（Ｉ）の有効量及び薬学的に許容される担体を含有する医薬組成物。７．心臓血管疾患の治療に用いる請求項６記載の医薬組成物。８．請求項１記載の化合物（Ｉ）の治療有効量を投与することを特徴とする心臓血管疾患の治療方法。９．Ｎ−（Ｎ’−プロピルホスホニル−Ｌ−ロイシル）−［４−（２−フリル）−Ｌ−フェニルアラニン及びＮ−（Ｎ’−プロピルホスホニル−Ｌ−バリル） −［４−（２−チアゾリル）−Ｌ−フェニルアラニンから選択される請求項１記載の化合物。