JP2000501975A - 生体内の管腔および空隙を充填または遮断するための注射可能または移植可能な生物材料の使用 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 患者の生体内の種々の生物学的管腔および空隙を、完全にまたは部分的に、遮断、増強、封鎖、または充填するための方法が開示される。管腔としては、動脈、静脈、腸、ファローピウス管、および気管が挙げられる。空隙としては、種々の損傷、裂、憩室、嚢胞、フィステル、動脈瘤、または患者の生体内に存在し得る他の所望されない空隙が挙げられる。本発明の最も一般的な方法では、有効量の生物材料が管腔または空隙に投与される(例えば、注射、カテーテル、または外科的移植を介して)。本発明での使用に好ましい生物材料組成物が開示される。

Description

【発明の詳細な説明】 生体内の管腔および空隙を充填または遮断するための 注射可能または移植可能な生物材料の使用 発明の分野 本発明は、医療用インプラントおよび注射剤の分野である。より詳細には、本 発明は、患者の生体内の種々の生物学的管腔および空隙（void）を、完全にまた は部分的に、遮断、増強、封鎖、または充填するための方法に関する。 発明の背景 管腔(単数または複数)は、管状構造(例えば、動脈、静脈、腸、ファローピウ ス管、気管など)の内部の空間である。ある場合では、好ましい生物学的結果を もたらすためにこれらの空間を増強、遮断、または充填することが所望され得る 。さらに、いくつかの生物学的疾患状態、またはこのような疾患状態の処置によ り、生体の種々の組織または器官内に所望されない空隙が生じる。 １つの重要な管腔構造は、ファローピウス管であり、これは雌の生殖系で子宮 を各卵巣の領域へ連結する一対の細い管のどちらか一方である。産児制限の既存 の形態の１つは、両方の管を連結して卵または卵子の子宮への移動を阻止し、そ れにより妊娠を防ぐことである。不幸なことに、産児制限の方法は外科手術を必 要とし、そして管を切断して連結部分を除去し、そして管の残りの部分を再連結 しない限りは不可逆性である。 この外科手術の結果として、女性の患者は合併症または手順の失敗のより重度 の危険を負う。さらに、このタイプの手術は、高価でありかつ入院を必要とする 。従って、危険性が低くかつより経済的であるような、産児制限の他の方法が好 ましい。発明の要旨 本発明は、患者の生体内の生物学的管腔または空隙を完全にまたは部分的に、 遮断、増強、封鎖、または充填するための一般的な方法を開示する。本発明の本 方法は、有効量の生物材料（bio aterial）を管腔または空隙に投与する工程を 包含する。本発明の特に好ましい方法は、生物材料および架橋剤を含む有効量の 生物材料組成物を、生物材料と架橋剤との間で実質的な架橋が起こる前に、注入 によって管腔または空隙に投与する工程を包含する。本発明の好ましい別の方法 は、粒状の脱水し架橋した生物材料および非水性キャリアを含む有効量の生物材 料組成物を管腔または空隙に注入する工程を包含する。別の方法では、架橋され た生物材料を含む有効量の脱水生物材料組成物を含む１つ以上の桿が管腔または 空隙に移植される。本発明の好ましい実施態様の詳細な説明 本発明での使用に好ましい生物材料 本発明の実施における使用のための生物材料は、生体適合性であり、本質的に 非免疫原性であり、および注射可能、通糸可能(threadable)であるか、またはそ うでなければ容易に移植可能でなければならない。このような生物材料は、いか なる顕著な免疫応答も生じることなくヒトの生体内に取り込まれ得るように、薬 学的に純粋な形態であるか、または薬学的に純粋な形態に精製され得ることが必 要である。本発明において使用するための生物材料は、好ましくは３か月以上； より好ましくは６か月以上；最も好ましくは１〜２年以上、配置の部位で存続し 得るべきである。用語「生物材料」および「生物材料組成物」は、本明細書中で 互換的に使用され、そして下記の生物材料の混合物を包含することが意図される 。 本発明の実施における使用のために好ましい生物材料としては、一般に、全て 生体適合性であり、天然に存在するかまたは合成のポリマーであり、そして特に コラーゲンのような天然に存在するタンパク質；ポリ(リジン)のような種々の合 成ポリペプチド；グリコサミノグリカンのような多糖；プロテオグリカン；およ び種々のポリマー性ヒドロゲルが挙げられる。 コラーゲン、フィブリン、およびエラスチンのようなタンパク質が、本発明の 方法における使用に特に適している。本明細書中で使用する用語「コラーゲン」 は、任意の供給源(組織から抽出されたまたは組換え産生されたコラーゲン、コ ラーゲンアナログ、コラーゲン誘導体、改変コラーゲン、およびゼラチンのよう な変性コラーゲンを含むが、それらに限定されない)から得られる任意のタイプ のコラーゲンを包含することが意図される。 コラーゲンは、動物において、骨、軟骨、皮膚、および結合組織の主要なタン パク質成分である。天然の形態のコラーゲンは、典型的には、約300ナノメート ル(nm)の長さおよび1.5nmの直径の、堅い、桿形態の分子である。これは、強力 な３重ヘリックスを形成する３つのコラーゲンポリペプチドから構成される。コ ラーゲンポリペプチドは、反復配列−Gly-X-Y-を有する長い中間部によって特徴 付けられる。ここで、ＸおよびＹは、しばしば、「テロペプチド」領域により各 末端に結合したプロリンまたはヒドロキシプロリンであり、これは、分子の約５ パーセント(％)未満を構成する。コラーゲン鎖のテロペプチド領域は、代表的に は鎖間の架橋およびタンパク質の免疫原性を担う。 一般に、任意の供給源由来のコラーゲンが、本発明の実施において使用され得 る；例えば、コラーゲンは、ヒトまたは他の哺乳動物供給源(例えば、ウシまた はブタの真皮およびヒト胎盤)から抽出され、そして精製され得るか、または組 換え産生され得るかもしくは他の方法で産生され得る。ウシ皮膚由来の溶液中の 精製された、実質的に非抗原性のコラーゲンの精製は、基本的に、米国特許第4, 140,537号および同第4,488,911号(これらは、本明細書中に参考として援用され る)に記載されるように、可溶化、酵素処理、および精製を含む３工程のプロセ スである。共有に係る、特許された米国特許出願第07/921,810号は、ヒト胎盤か らのコラーゲンの抽出および精製方法を開示する。共有に係る、同時係属中の米 国特許出願第08/183,648号は、トランスジェニック動物(トランスジェニックウ シを含む)の乳汁中の組換えヒトコラーゲンの生成方法を開示する。本明細書中 で使用する用語「コラーゲン」または「コラーゲン材料」は、コラーゲンの全て の形態(処理されたまたはそうでなければ改変された形態を含む)をいう。 任意のタイプのコラーゲン(I、II、III、IV型またはこれらの任意の組合せを 含むがそれらに限定されない)が使用され得るが、Ｉ型が一般に好ましい。アテ ロ ペプチドまたはテロペプチド含有コラーゲンのいずれかを使用し得る；しかし、 異種供給源由来のコラーゲン(例えばウシコラーゲン)が使用される場合、アテロ ペプチドコラーゲンが一般に好ましい。なぜなら、テロペプチド含有コラーゲン と比較してその免疫原性が減少しているからである。 本発明における使用のためのコラーゲンは、原線維性形態または非原線維性形 態であり得る。原線維性コラーゲンは、非原線維性コラーゲンと比較する場合イ ンビボでの存続性の増加が示されている。しかし、非原線維性コラーゲンの使用 は、本発明の実施において特定の利点を有する。これは、本節の後半において議 論する。本明細書中で使用する用語「非原線維性コラーゲン」は、スクシニル化 コラーゲンおよびメチル化コラーゲンのような化学的に改変されたコラーゲンを 包含することが意図される。この両方は、米国特許第4,164,559号に記載の方法( 本明細書中に参考として援用される)に従って調製され得る。 本発明の実施において使用するためのコラーゲンは、架橋していてもしていな くてもよい。非架橋アテロペプチド原線維性コラーゲンは、Collagen Corporati genの商標の下、35mg/mｌおよび65mg/mlのコラーゲン濃度で市販されている。 コラーゲンは、当該分野で一般に公知の方法(例えば、加熱、放射線照射、ま たは従来の化学架橋剤（例えば、アルデヒド、カルボジイミド、エポキシド、ま たはイミダゾール)の使用)により、架橋され得る。米国特許第4,582,640号およ び同第4,642,117号は、アルデヒド架橋したコラーゲンの調製方法を開示する。 グルタルアルデヒド架橋したアテロペプチド原線維性コラーゲンは、Collagen C ン濃度で市販されている。 本発明における使用のための、非架橋コラーゲンおよび架橋コラーゲンは、一 般に、約20mg/ml〜約120mg/mlの間の濃度、好ましくは約30mg/ml〜約90mg/mlの 間の濃度の、水性懸濁液である。 変性コラーゲン(一般にゼラチンとして知られる)もまた、本発明の方法におい て有用である。 種々の合成的に生成されたポリペプチドがまた、本発明の実施において使用さ れ得る。本明細書中で使用する用語「合成ポリペプチド」は、組換えDNA技術を 使用して生成されたポリペプチド、ならびに他の化学的合成方法によって生成さ れたポリペプチドを含むことが意図される。アミノ酸リジン（145MW）の合成的 に生成されたポリマーであるポリリジンは、特に好ましい合成ポリペプチドであ る。ポリリジンは、約870〜約580,000の分子量に対応する６〜約4,000の１級ア ミノ基を、任意の位置に有するように調製されている。種々の分子量のポリリジ ンは、Peninsula Laboratories，Inc.（Belmont，CA）から市販されている。 本発明における使用のためのグリコサミノグリカンとしては、以下が挙げられ るがそれらに限定されない：ヒアルロン酸、コンドロイチン硫酸A、コンドロイ チン硫酸C、デルマタン硫酸、ケラタン硫酸、ケラト硫酸、キチン、キトサン、 ヘパリン、およびそれらの誘導体または混合物。好ましいグリコサミノグリカン の濃度は、使用される特定のグリコサミノグリカン（またはグリコサミノグリカ ンの混合物）に依存して変化する。 プロテオグリカン（例えば、デコリン、ビグリカン、およびフィブロモジュリ ン(fibromodulin)）がまた、本発明の方法において使用され得る。プロテオグリ カンは、コアタンパク質に結合した１つ以上のグリコサミノグリカン分子からな る。動物の身体内での天然の状態において、多数のグリコサミノグリカンは、一 般的にコアタンパク質に結合して、すなわちプロテオグリカンの形態で見出され る。しかし、特定のグリコサミノグリカン（例えば、ヒアルロン酸）は、コアタ ンパクに共有結合しないが、非共有相互作用によってプロテオグリカンに結合し 得る。ヒアルロン酸はまた、タンパク質と結合せずに単独で存在し得る。 種々の種のグリコサミノグリカンもしくはプロテオグリカンの混合物、種々の タンパク質、または種々のグリコサミノグリカンもしくはプロテオグリカンとタ ンパク質との混合物が、本発明の実施において使用され得る。 種々のポリマー性ヒドロゲルがまた、本発明の方法において使用され得る。共 有に係る同時係属中の米国出願第 号（代理人処理番号95-029）は、第 ２の合成ポリマーを使用して架橋された第１の合成ポリマーを含む、好ましいポ リマー性ヒドロゲル組成物を開示する。ここでは、第１の合成ポリマーは２つ以 上の求核基を含み、そして第２の合成ポリマーは、第１の合成ポリマー上の求核 基と共有結合を形成し得る２つ以上の求電子基を含む。第１の合成ポリマーは、 好ましくは２つ以上のアミノ基またはチオール基を含み、そして好ましくは２つ 以上のリジン残基を含む合成ポリマー（例えば、ポリリジン）；２つ以上のシス テイン残基を含む合成ポリマー；または２つ以上のアミノ基もしくはチオール基 を含むように改変されているポリエチレングリコールである。第２の合成ポリマ ーは、好ましくは２つ以上のスクシンイミジル基を含む、合成親水性ポリマーま たは合成疎水性ポリマーである。架橋ポリマーネットワークを形成するために、 第１の合成ポリマーは、好ましくは３つ以上の求核基を含み、そして第２の合成 ポリマーは、好ましくは３つ以上の求電子基を含む。第１の合成ポリマー上の求 核基は第２の合成ポリマー上の求電子基と反応し、共有結合し架橋されたポリマ ーネットワークを形成する。 本発明の実施における使用のための特に好ましい生物材料組成物は、米国特許 第5,162,430号、同第5,324,775号、および同第5,328,955号（これらの開示は本 明細書中に参考として援用される）に開示されるように、合成親水性ポリマーを 使用して架橋された生物材料（例えば、コラーゲンまたはグリコサミノグリカン ）を含む。本発明における使用のための好ましい合成親水性ポリマーは、官能基 的に活性化されたポリエチレングリコールを含み、より好ましくは二官能基的に 活性化されたポリエチレングリコールを含む。特に好ましい二官能基的に活性化 されたポリエチレングリコールは、米国特許第5,328,955号中に開示される。 共有に係る、特許された米国特許出願第08/146,843号に記載されるように、一 般的にグリコサミノグリカンは、合成親水性ポリマー分子と結合可能であるため に、脱アセチル化もしくは脱硫酸化(desulfation)のいずれか（またはその両方 ）によって化学的に改変されなければならない。脱アセチル化および脱硫酸化は 共に、グリコサミノグリカンへの強塩基（例えば、水酸化ナトリウム）の添加に よって達成され得る。脱アセチル化および/または脱硫酸化は、合成親水性ポリ マー（例えば、種々のポリエチレングリコール誘導体）上の官能基と共有結合す ることが可能な、グリコサミノグリカン上の１級アミノ基を提供する。米国特許 出願第08/146,843号はさらに、その中でコラーゲンおよび１種以上のグリコサミ ノグリカンが合成親水性ポリマーを使用して共に架橋され、異種コンジュゲー トを形成するような組成物を開示する。 本発明における使用のための特に好ましい架橋された生物材料組成物は、粒状 の架橋原線維性コラーゲンと非架橋原線維性コラーゲンとの混合物が挙げられる 。次に、後者は、共有に係る同時係属中の米国特許出願第08/344,040号中に開示 されるように、合成親水性ポリマーを使用して架橋される。粒状の架橋原線維性 コラーゲンは、好ましくはグルタルアルデヒド架橋された原線維性コラーゲンで あり、そして好ましくは最終組成物の約25〜約95重量％の間、より好ましくは約 60〜約80重量％の間を含む。非架橋原線維性コラーゲンは、好ましくは最終組成 物の約５〜約75重量％の間、より好ましくは約20〜約40重量％の間を含む。粒状 の架橋原線維性コラーゲンと非架橋原線維性コラーゲンとは最初に結合され、次 いで合成親水性ポリマー（好ましくは、官能基的に活性化されたポリエチレング リコールである）を使用して架橋される。 別の好ましい生物材料組成物は、共有に係る同時係属中の米国特許出願第08/4 03,358号中に開示される。この出願は、親水性架橋剤と疎水性架橋剤との混合物 を使用して架橋された生物材料組成物を開示し、これは酵素分解または加水分解 に対してより抵抗性であり得、そして親水性架橋剤のみを使用して調製された架 橋生物材料組成物よりも優れたインビボ持続性を示す。好ましい疎水性架橋剤は 、２つ以上のスクシンイミジル基を含むか、または含むように化学的に誘導体化 され得る任意の疎水性ポリマーを含む。２つ以上のスクシンイミジル基を含む、 市販されている疎水性架橋剤には、以下が挙げられる：ジスクシンイミジルスベ レート、ビス(スルホスクシンイミジル)スベレート、ジチオビス(スクシンイミ ジルプロピオネート)、ビス(2-スクシンイミドオキシカルボニルオキシ)エチル スルホン、3,3'-ジチオビス(スルホスクシンイミジル)プロピオネート、および それらのアナログおよび誘導体。好ましい親水性架橋剤には、上述のように、合 成親水性ポリマー、特に官能基的に活性化されたポリエチレングリコール誘導体 が挙げられる。このように、本明細書中で使用する用語「架橋剤」は、合成親水 性ポリマーと、２つ以上のスクシンイミジル基を含む疎水性ポリマーとの混合物 のような、架橋剤の混合物を含むことが意図される。 生物材料がインサイチュで加水分解されることを可能にし、それによりコラー ゲン組成物と身体の生物学的な成分との間に堅固な封鎖または強力な接着を作り 出すために、生物材料組成物は親水性であることが望ましい。患者自身の組織へ のそのような接着は、漏出を防ぎ、そして遮断されるべき開口部または空隙の完 全な遮断を可能にする。宿主組織はまた、経時的な内方成長を提供し、さらに組 織への生物材料の接着を強化する。 上で論述される架橋された生物材料組成物の親水性は、以下によって増加され 得る： (a)最適な架橋を達成するためにコラーゲンに対する合成親水性ポリマーのよ り高いモル比を必要とする、生物材料としての非原線維性コラーゲン（特に、メ チル化コラーゲン）の使用；または (b)生物材料を架橋するための、より高い分子量の合成親水性ポリマーの使用 ；または (c)合成親水性ポリマーを共に使用する、親水性グリコサミノグリカン（例え ば、ヒアルロン酸）とコラーゲンとの混合物の架橋。 上の(b)、および本明細書の前部で論述されるように、生物材料としての非原 線維性コラーゲン（好ましくは、メチル化コラーゲン）の使用は、以下の点で本 発明において有利であり得る：メチル化コラーゲンが、最適な架橋を達成するた めにコラーゲンに対する合成親水性ポリマーのより高いモル比を必要とし、原線 維性コラーゲンを使用して調製された組成物に比べてより親水性でありかつイン サイチュでより高い割合で水和する生物材料組成物が得られる。合成親水性ポリ マーを使用する、化学的に誘導体化された非原線維性コラーゲン（メチル化およ びスクシニル化コラーゲンを含む）の架橋方法は、共有に係る特許された米国特 許出願第08/147,227号中に開示される。 任意の上記の架橋された生物材料組成物が、固体生成物を形成するように脱水 され得る。本明細書中で使用する用語「脱水される」は、実質的に非結合水を含 まないように乾燥されている組成物を意味する。１つの好ましい実施態様におい て、生物材料組成物は脱水され、粒状で存在するように刻まれるかまたは切断さ れ、次いで注射による送達のための非水性キャリア中に懸濁される。生物材料組 成物は、好ましくは生物材料と架橋剤との間に実質的な架橋が生じる前に細いス トリングの形状に押し出され、架橋が完了され、次いで脱水される。米国特許第 5,308,889号に記載されるように、脱水された架橋ストリングは、次いで組織部 位への注射のための調製において非水性キャリア中に懸濁される前に、小片へと 刻まれる。 あるいは、生物材料組成物は、実質的な架橋の前に桿型の鋳型へ押し出され、 架橋が完了した後に鋳型から除去され、次いで脱水され得る（または鋳型中で脱 水され得る）。１つ以上の得られる脱水された架橋された桿状生物材料が、カテ ーテルを介してまたは別の適切な方法を使用して、患者の身体に移植され得る。 患者の身体内への注射または移植の後、上記のように調製された、脱水された 架橋された生物材料組成物は、もとの脱水された大きさの約５倍に急速に再水和 される。膨潤物の正確な量は組成物の親水性に依存し、これは上記のような生物 材料および/または架橋剤の変化によって増大され得る。 本発明における使用のための生物材料組成物は、以下のような、１つ以上の生 体適合性流体潤滑剤をさらに含み得る：例えば、ヒアルロン酸、デキストラン硫 酸、デキストラン、スクシニル化非架橋コラーゲン、メチル化非架橋コラーゲン 、グリコーゲン、グリセロール、デキストロース、マルトース、脂肪酸のトリグ リセリド（例えば、コーン油、ダイズ油、およびゴマ油）、および卵黄リン脂質 。 種々の粒状材料が、本発明における使用のための生物材料組成物中へ取り込ま れ得る。適切な粒状材料には、以下が挙げられるがそれらに限定されない：セラ ミック粒子；粒状の架橋または非架橋原線維コラーゲン；ポリ乳酸（PLA）、ポ リグリコール酸（PGA）、およびそれらのコポリマー（PLGA)；炭酸カルシウム； 硫酸カルシウム；ゼラチンビーズ；ポリテトラフルオロエチレンビーズ；シリコ ンゴムビーズ；種々のヒドロゲルポリマー（例えば、ポリアクリロニトリル-ポ リアクリルアミドヒドロゲル）のビーズ；炭化ケイ素ビーズ；およびガラスビー ズ。 米国特許第4,803,075号は、生体適合性流体潤滑剤中の粒状生物材料の懸濁水 溶液を含む、注射可能な組成物を開示する。米国特許第5,352,715号は、薬学的 に受容可能な流体キャリア中に存在する、50〜250ミクロンの大きさの範囲内の コラーゲンおよび生体適合性セラミック（好ましくはリン酸カルシウム；最も好 ましくはリン酸三カルシウムおよび/またはヒドロキシアパタイト）粒子を含む 、注射可能な組成物を開示する。 本発明における使用のための生物材料組成物はまた、１つ以上の生物学的活性 薬剤を取り込み得る。本明細書中で使用する用語「生物学的活性薬剤」または「 活性薬剤」は、インビボで生物学的効果を及ぼす有機分子をいう。活性薬剤の例 には、以下が挙げられるがそれらに限定されない：酵素、レセプターアンタゴニ ストまたはアゴニスト、ホルモン、成長因子、自原性骨髄、抗生物質、抗菌剤、 および抗体。用語「活性薬剤」はまた、本発明の組成物中に取り込まれ得る種々 の細胞型を包含することが意図される。用語「活性薬剤」はまた、上記の２つ以 上の活性薬剤の組成物または混合物を包含することが意図される。 本発明の方法における使用のために好ましい活性薬剤には、以下のような成長 因子が挙げられる：トランスフォーミング成長因子（TGF）、線維芽細胞成長因 子（FGF）、血小板由来成長因子（PDGF）、上皮成長因子（EGF）、結合組織活性 化ペプチド（CTAP）、骨形成因子、ならびにそのような成長因子の生物学的に活 性なアナログ、フラグメント、および誘導体。トランスフォーミング成長因子（ TGF）スーパー遺伝子ファミリーのメンバー（これらは多機能性調節タンパク質 である）が、特に好ましい。TGFスーパー遺伝子ファミリーのメンバーには、以 下が挙げられる：βトランスフォーミング成長因子（例えば、TGF−β1、TGF-β 2、TGF-β3）；骨形態形成タンパク質（例えば、BMP-1、BMP-2、BMP-3、BMP-4、 BMP-5、BMP-6、BMP-7、BMP-8、BMP-9)；ヘパリン結合成長因子（例えば、線維芽 細胞成長因子（FGF）、上皮成長因子（EGF）、血小板由来成長因子（PDGF）、イ ンスリン様成長因子（IGF））；インヒビン（例えば、インヒビンA、インヒビン B）；成長分化因子（例えば、GDF-1）；およびアクチビン（例えば、アクチビン A、アクチビンB、アクチビンAB）。 TGFスーパー遺伝予ファミリーのメンバーは、多機能性調節タンパク質である 。例えば、分子量25,000のホモダイマーペプチドであるTGF-β2は、コラーゲン の合成および沈着を増加し、ならびに柔組織修復の部位において再造形すること により、部位特異的治癒応答を誘導することが可能である。TGF-β2はまた、イ ンビトロでコラーゲンを合成するように骨芽細胞を活性化する。TGF-β2の最も 豊 富な供給源は、骨および血小板である。 成長因子は、天然または自然の供給源から（例えば、哺乳動物細胞から）単離 され得るか、または合成的に（例えば、組換えDNA技術または種々の化学的プロ セスによって）調製され得る。さらに、それらの因子のアナログ、フラグメント 、または誘導体が、それらが少なくとも天然分子の生物学的活性のいくらかを示 す場合、使用され得る。例えば、アナログは、部位特異的変異誘発または他の遺 伝子工学技術によって改変された遺伝子の発現により、調製され得る。 使用される生物学的活性薬剤のタイプは、処置される特定の部位および症状に 依存する。生物材料組成物中に含まれる生物学的活性薬剤の量は、以下に依存し て変化する：使用される生物材料のタイプ、濃度、および量；患者の性別、体重 、年齢、および医療歴(medical history)；ならびに処置される特定の部位およ び症状。代表的には、生物材料に対する生物学的活性薬剤の重量比は、約１:500 0〜約１:50,000の範囲内である。 抗生物質または抗菌剤が、処置部位における感染の可能性を減少させるために 、生物材料組成物に添加され得る。さらに、局所麻酔薬が、不快感を最小化する ために、注射部位において使用され得る。任意の適切な添加剤が、生物材料なら びに処置される特定の患者および疾患の状態に適合する限り、利用され得る。 生物学的活性薬剤は、調製の間に、または処置の直前に、生物材料に添加され 得る。生物学的活性薬剤は、薬剤が持続型送達を介して放出されるように生物材 料中に取り込まれることが好ましいが、これは必須ではない。このようにして、 薬剤は組織部位および周辺領域に放出され得、そして長期間にわたってそれらの 意図された治療効果を及ぼし得る。 生物学的活性薬剤は、混和により生物材料組成物中に取り込まれ得る。あるい は、薬剤は、架橋剤（例えば、官能基的に活性化されたポリエチレングリコール ）を使用して生物材料に共有結合され得るか、または結合リガンドを使用して生 物材料に親和性結合され得る。合成親水性ポリマー（例えば、官能基的に活性化 されたポリエチレングリコール）を使用して、生物学的活性薬剤（例えば、成長 因子）をコラーゲンに共有結合するプロセスは、共有に係る米国特許第5,162,43 0号に記載される。結合リガンド（例えば、ヘパリン）を介して、生物学的活 性薬剤をコラーゲンに親和性結合させるプロセスは、1995年３月16日に出願され た、共有に係る同時係属中の米国特許出願第08/405,320号に記載される。発明の方法 本発明は、患者の身体内の種々の管腔または空隙を、完全または部分的に遮断 するか、増強するか、密閉するか、または満たすための方法を提供する。本明細 書中で使用する用語「管腔」は、以下のような身体の種々の陥凹器官または脈管 を含むことが意図される：ファローピウス管、静脈、動脈、腸管、気管など。用 語「空隙」は、先天性異常、疾患、加齢、および/または外科手術（例えば、腫 瘍および他の増殖塊の摘出）によって作製される任意の陥凹腔を含むことが意図 される。そのように、用語「空隙」は、身体の任意の組織または器官に存在する 、損傷、裂、フィステル、嚢胞、憩室、動脈瘤、および任意の他の望ましくない 空隙を含み、これらは先天性異常、疾患、加齢、または外科手術によって生じ得 る。例えば、本発明の方法は、組織または構造（例えば、脈管）内における裂ま たは間隙、あるいは隣接する組織または構造の間の接合点を密閉するために使用 して、血液または他の生物学的流体の漏出を防ぎ得る。 本発明の最も一般的な方法に従い、有効量の生物材料組成物が患者の身体内の 管腔または空隙の部位に投与される。本明細書中で使用する用語「有効量」は、 目的の生物学的構造を増強、遮断、または充填するのに必要である生物材料の量 を意味する。特定の患者に投与される生物材料の有効量は、以下を含む多数の因 子に依存して変化する：患者の性別、体重、年齢、および一般的な健康状態；患 者自身の、生物材料を吸収または分解する能力；生物材料のタイプ、濃度、およ び粘稠度；ならびに処置される特定の部位および症状。生物材料は、多数の処置 セッションにわたって投与され得る。 上記のように、有効量の１つ以上の生物学的活性薬剤（例えば、創傷治癒剤、 抗生物質、または抗菌剤）は、生物材料組成物中に取り込まれ得る。この関連で 、「有効量」は、所望の治療効果（例えば、改善または促進された欠陥または空 隙の治癒）、あるいは投与の部位における感染の防止を得るために必要とされる 生物学的活性薬剤、抗生物質、または抗菌剤の量をいう。 本明細書中で用いる用語「有効量」はまた、生物材料に関連してでも生物学的 活性薬剤に関してでも、処置を受けている特定の患者に薬学的および生理学的に 受容可能である材料の量をいう。 本発明の好ましい方法において、生物材料組成物は、処置の必要な管腔または 空隙への注射により投与される。本発明の特に好ましい方法において、処置部位 への注射の直前に生物材料（異なる生物材料の混合物を含む）および架橋剤が混 合され、次いで生物材料と架橋剤との間に実質的な架橋が生じる前に注射される 。これは、生物材料組成物がインサイチュで架橋し続けることを可能にし、そし てゲル化した生物材料でのシリンジ針の遮断を防止する。さらに、このようなイ ンサイチュ架橋は、宿主組織内に存在するコラーゲン分子で共有結合することに よる、生物材料の宿主組織へのアンカリング（anchoring）を可能にし得る。こ の方法の実施における使用のために好ましい架橋剤は、前の節に記載のように、 合成親水性ポリマーおよび親水性架橋剤と疎水性架橋剤との混合物である。 別の方法において、前の節に記載のように調製された架橋された生物材料組成 物は、所望の形状（例えば、桿状または糸状）に成形され、次いで脱水される。 次いで、脱水された生物材料組成物は、カテーテル、内視鏡、またはその他の手 段を介して、管腔または空隙中に移植される。一旦患者の体内の生物学的流体と 接触すると、脱水された生物材料は再水和し、そして大きさが膨潤して、管腔ま たは空隙を満たす。 なお別の一般的な方法において、前の段落に記載の脱水された架橋された生物 材料組成物は、小さな粒子に刻まれるかまたは切断され、非水性キャリア中に懸 濁され、次いで注射されて、処置の必要な管腔または空隙を満たす。 一般的に上記した本発明の方法は、可逆的形態の女性の産児制限および不妊の ために特に有用である。ここで、生物材料が通されるか、注射されるか、または 移植され、その結果ファローピウス管が生物材料により満たされるかまたは遮断 され、それにより卵子および／または精子が生物材料を通過することまたは生物 材料の周囲を通過することを防止する。このアプローチを使用して妊娠は防止さ れる。なぜなら、ファローピウス管中に位置する卵または卵子は子宮へ出ず、そ して精子と接触しないからである。遮断（およびそれゆえの不妊または産児制 限）は、外科手術後の生物材料の除去または管の切除により可逆的である。ここ で、管の遮断された部分は切り出され、そして管の残りの部分は再連結される。 生物材料で遮断されたファローピウス管の切片が、子宮に直接連結されている切 片かまたは子宮に最も近い切片であることが好ましい。 この治療的適応症のための生物材料は、カテーテルを介してまたは内視鏡（例 えば、ファイバースコープ、子宮鏡など）を介して投与され得る。「Hysterosco pic Approaches for Tubal Closures」，John J．Sciarra，Research Frontiers in Fertility Regulation，1980，第26章，270-286頁を参照のこと。好ましく は、生物材料は、ファローピウス管中に、カテーテル（例えば、Selective Salp ingography Soft Torque^TM Catheter、VS^TM Recanalization Catheter、またはV S^TM Falloposcopy Catheter（全て、Conceptus，Inc.，San Carlos，CAから）） を使用して注射される。 注射または移植を介しての生物材料の送達は、生物材料を特異的な部位または 位置へ効果的に標的化するための手段を提供し、それにより、生物材料を局在化 し、そして全身性の副作用を最小化する。さらに、材料の生体適合性は、患者の 生物材料に対する任意の免疫学的反応を最小化する。さらに、移植または注射を 介しての生物材料の投与は、最小に侵襲性であり、そして通常、外来患者を基礎 として実施され得、その結果不妊または産児制限のその他の外科手術形態より低 コストをもたらす。この手順はまた患者の盲従を排除する。なぜなら、患者はい かなる特別な指示に従う必要も、その他の形態の産児制限（例えば、ピル、避妊 ペッサリーなど）を摂取または挿入することを覚えておく必要もないからである 。しかし、所望であれば、産児制限の補足的形態（特に、疾患の伝染を防止する もの）が利用され得る。 本発明の生物材料および方法はまた、胎児性先天性欠陥（例えば、小児先天性 横隔膜ヘルニア（CDH））の子宮内矯正のための気管閉塞のために利用され得る 。Longakerら、「Maternal Outcomer After Open Fetal Surgery: A Review of thｅ Flrst 17 Human Cases」，J ．Amer．Med．Assoc.，265(6):737-741(1991) を参照のこと。CDHは本来、肺発育不全を誘導し、それにより新生児が適切に酸 素を交換する能力を減少させる。この症状は代表的には妊娠中に超音波により診 断 され、そして横隔膜のヘルニア形成に起因する、他の内臓（例えば、腸、胃、お よび肝臓）による発達中の肺の圧迫により引き起こされる。横隔膜の破壊は、内 臓が胸部腔へ移動することを可能にし、これは肺の発達を制限する。なぜなら、 肺成長のためのより少ない空間の存在のためである。 胎児気管を閉塞することにより、肺内圧は、肺中の液体蓄積により徐々に増加 する。この圧増加は、内臓をゆっくりと胸部腔から推進し、そして胎児肺の完全 な発達を可能にして、肺形成不全を防止する。 閉塞方法は誕生に際して容易に可逆的であることが所望され、その結果乳児が 困難なく呼吸し得る。幸運なことに、母体と子供との間の臍帯連結は、乳児が自 身で呼吸しなければならなくなる前に、閉塞を除去するに十分な時間を提供する 。気管閉塞方法が再現性があり、信頼性があり、可逆的であり、そして非外傷性 であり、それにより閉塞の時点および生物材料の除去に際しての両方で、母体お よび乳児に対する閉塞を引き起こす危険を最小にすることが重要である。さらに 、気管の細胞内層または気管それ自体は重篤に損傷されるべきでない。 生物材料は、配置の誘導のための超音波技術またはファイバースコープを使用 して、注射を介して胎児気管へ投与され得る。生物材料は気管内にそれを完全に 満たすように配置されて、材料の柱を形成する。好ましくは、縫合糸（suture） または一針の縫合糸が気管を通して配置されて、生物材料を適所に保持する。胎 児が成熟するにつれて気管は大きさが拡張するので、気管が遮断され続けそして 生物材料が排出されないように、拡張する生物材料を利用することが重要である 。それゆえ、この適応症のために好ましい生物材料は、強度に親水性であり、そ して胎児気管の成長速度と同じ速度で拡張し得るものである。生物材料組成物の 親水性を増加させるための方法は、前の節に記載されている。 この投与の方法は、その他の閉塞アプローチ（例えば、気管を物理的に縛るこ と）（Longakerを参照のこと）に比較した場合、母体および胎児に対する外科手 術的危険を最小にする。この方法はまた、容易な除去を可能にする。なぜなら、 生物材料は、代表的には、インサイチュでゲル化および固化し、そして鉗子また は類似の器具を用いて容易に除去され得るからである。この迅速かつ容易な除去 プロセスは、新生乳児の非呼吸時間を減少する。誕生のタイミングを最適化し、 そして生物材料の除去を容易にするために、出産は代表的には帝王切開による。 本発明はまた、患者の体内に存在する所望されない損傷、裂、憩室、嚢胞、フ ィステル、動脈瘤、および任意のその他の空隙を、生物材料をこれらの症状の部 位に投与することにより、処置するための方法を提供する。例えば、生物材料は 、注射されるか、移植されるか、あるいは、内臓の間のフィステル中に、または 内臓から患者の身体の外部への口もしくは開口中に通され得る。生物材料はこれ らの病理学的状態により形成される欠陥を満たし、そして線維芽細胞浸潤および 治癒を刺激し、組織の内部成長をもたらす。 生物材料は小ゲージ針を通してのフィステル開口の１つへの注射により導入さ れ得、全ての開口の枝を満たし、そしてインサイチュで重合または架橋する。あ るいは、脱水された材料の糸または桿（上記のように調製される）は、損傷中に 開口を通して通され得るか、またはカテーテルにより導入され得る。種々のタイ プのフィステルがこの方法により処置され得、そしてそれは、肛門フィステル、 動静脈フィステル、膀胱フィステル、頸動脈海綿静脈洞フィステル、外フィステ ル、胃フィステル、腸フィステル、体壁フィステル、唾液腺フィステル、膣フィ ステル、肛門直腸フィステルなどを包含する。 憩室もまた本発明の方法により処置され得る。これらの異常な生理学的構造は 嚢（pouche）、または管状もしくは嚢状器官（例えば、腸、膀胱など）からの嚢 口（sac opening）であり、そして生物材料により満たされるかまたは増大され 得る。嚢胞（これは、ガス、液体、または半固体物質を含有する膜内層を有する 異常な嚢である）はまた、偽嚢胞（これは、嚢胞様小胞中の液体の蓄積であるが 、上皮性またはその他の膜性内層を含まない）とともに満たされる。本発明によ り処置され得る嚢胞の例は、漿液性嚢胞、皮脂嚢胞、類皮嚢胞、骨嚢胞などを包 含する。 本発明により提供される別の方法は、不必要なまたは所望されない成長物、流 体、細胞、または組織の外科手術的、化学的、生物学的除去の結果として形成さ れる任意の空隙空間を全体的にまたは部分的に満たすための生物材料の投与であ る。生物材料は空隙の部位において局所的に投与され得、残存しかつ取り囲む組 織を増大させて、治癒プロセスを補助し、そして感染を最小にする。この増大は 、 腫瘍切除の後（例えば、乳ガン外科手術、腫瘍性結合組織、骨組織、または軟骨 組織などの除去のための外科手術の後）に生じた空隙部位のために特に有用であ る。 本発明の方法を使用して処置され得る種々の治療的適応症のすべてのために、 生物材料が目的の身体領域中に適切に配置され、その結果生物材料がこの方法の 実施の間適所に保持されるか、または特定の生物材料をインサイチュでの重合を 可能にするに十分な長さの時間適所に保持されるか、いずれかされることが所望 され得る。生物材料は、クランプ、バルーンカテーテル、アンブレラ（umbrella ）、外科手術器具などの使用により局在化され得る。二重バルーンカテーテル間 での生物材料の注射は、カテーテルチップの前方または後方の管腔を遮断するた めに使用され得る。 さらに、生物材料の極限的除去が所望されるかまたは必要である手順が存在す る。それゆえ、それらの手順において、生物材料は除去の時点で固体形態または 半固体形態で存在するべきである。除去は物理的手段（例えば、外科手術）によ るか、または機械的手段（例えば、圧力または吸引）によりもたらされ得る。生 物材料はまた、糸、ワイヤーなどを使用して管腔から引かれ得、これは、完全な 除去を可能にするために、生物材料に強固に包埋されるかまたは結合される。 除去のための別の方法は、生物材料のインビボにおける分解（例えば、コラゲ ナーゼのような酵素による）である。インビボにおける分解速度および結果とし ての身体による再吸収の速度は、多数の要因（使用される生物材料および／また は架橋剤（あれば）のタイプ、濃度、および量を包含するがそれらに限定されな い）を変動させることにより制御され得る。より高い濃度の材料は、より大きな インビボ持続性を有する傾向がある。架橋された生物材料組成物は、インビボに おいて非架橋処方物よりも長く持続する傾向がある；強固に架橋された生物材料 （すなわち、それのために用いられた特定の架橋剤の濃度が最適化されているも の）は、よりゆるく架橋された材料より長く持続する傾向がある。官能基的に活 性化されたポリエチレングリコールが架橋剤として使用される場合、エーテル結 合を取り込むものは、エーテル結合の加水分解に対するより高い耐性のために、 エステル結合を取り込むものよりインビボにおいて長く持続し得る。ゼラチン （変性されたコラーゲン）のような変性された生物材料は、一般に最も短いイン ビボ寿命を示す。 実験 以下の実験の節は、限定のためではなく例のために提供される。本発明は、以 下で、明瞭さおよび理解の目的のためにいくらか詳細に記載される。しかし、特 定の変化および修飾が添付される請求の範囲の範囲内で実施され得ることは明ら かである。 実施例１ （モルモット膀胱ストレス試験） 架橋コラーゲン桿を以下のように調製した：原線維コラーゲン（65mg/mlのコ ラーゲン濃度、Collagen Corporation，Palo Alto，CAから入手した）を、二官 能基的に活性化したSG-PEG(DSG-PEG、3800 MW，Shearwater Polymers，Huntsill e，ALから入手した）と、１〜10のコラーゲン対DSG-PEGのモル比でシリンジーシ リンジ混合を使用して混合した。コラーゲン／DSG-PEG反応混合物を小直径（内 径約３mm）のチューブ中に押し出した。反応混合物をチューブ中でインキュベー トし、そして一晩37℃で架橋させた。チューブを半分に切断して、長い糸または 桿の形態の架橋コラーゲンゲルを移動させ、これを次にフローフード（flowhood ）中でまっすぐに保つための張力下で風乾した。 架橋コラーゲン桿（上記のように調製した）をモルモット死体の尿管の各々中 に挿入し、そして切断した。フルオレセイン（fluroscein）色素を含む約７ccの 水を膀胱中に尿管を介して細ゲージ針を使用して導入し、次いで尿管を針挿入点 を越えて結紮して、膀胱の漏れを防止した。満たされた膀胱を紫外光下で検査し 、そして架橋コラーゲン桿が移動されなかったことおよび膀胱が漏れなかったこ とを観察した。尿管を細胞内層管状構造（フィステル中で見出され得るような） のためのモデルとして使用した。実施例２ （横隔膜ヘルニアのための架橋コラーゲンを用いる胎児気管閉塞） 妊娠したニュージーランド白雌性ウサギを妊娠期間（期間は31日間である）の 23日目に手術した。一般的な麻酔（anaesthesis）下の母ウサギを用いて、子宮 を露出させ、そして個々の胎児の妊娠嚢を同定した。横隔膜ヘルニアを、１つの 胎児中に、左開胸を通して、鉗子を用いて横隔膜をつかみ、そして精密鋏でそれ を切断することにより作製した。この胎児を縫合し、そして子宮に返した。 同様に作製する横隔膜ヘルニアを第２の胎児に対して実施した；しかし、この 胎児は気管閉塞を有した。閉塞を、胎児気管を正中切開しそして架橋剤と混合し たコラーゲン懸濁液を25ゲージ針を通して切開の肺側の気管中へ直接注射するこ とにより実施した。第２の胎児を縫合し、そして子宮に返した。 第３の胎児に、横隔膜ヘルニアの作製なしに気管閉塞を行った。残りの胎児は 外科手術なしに子宮中で発達させた。 胎児の手術後、子宮を縫合して閉じ、そして妊娠を30日目まで継続して、その 時点で胎児を屠殺した。 個々の胎児湿肺重量および全体重を測定し、そして胎児湿肺重量対全体重比（ LW/BW）を、以下の表１に示すように、算出した。 表１．胎児湿肺重量および全体重 動物 湿肺重量（ｇ） 体重（ｇ） LW/BW DHTO 0.566 17.246 0.0328 DH 0.238 11.580 0.0206 なし 0.271 11.868 0.0271 DHTO＝横隔膜ヘルニアおよび架橋コラーゲンでの気管閉塞 DH ＝横隔膜ヘルニアのみ なし＝手術なし 表１に示す結果は、架橋コラーゲンが気管を閉塞し得、胎児ウサギにおける正 常な肺発達を生じたことを示す。 本出願における全ての論文および参考文献（特許文書を含む）は、本明細書中 に参考として援用される。 上記の記載が例証的であり制限的ではないことが意図されることが理解される べきである。多くの実施態様は、上記の記載を精査した際に当業者に明らかとな る。それゆえ、本発明の範囲は、上記の記載に関連しては決定されるべきでなく 、代わりに添付される請求の範囲（そのような請求の範囲に権利が付与される等 価物の完全な範囲とともに）に関連して決定されるべきである。 本発明は、上記で、明瞭さおよび理解の目的のためにいくらか詳細に記載され た。しかし、特定の変化および修飾が添付される請求の範囲の範囲内で実施され 得ることは明らかである。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者 チュ，ジョージ エイチ. アメリカ合衆国 カリフォルニア 95032, クペルティーノ，ミラ ビスタ アベニュ ー 10530 (72)発明者 デラストロ，フランク エイ. アメリカ合衆国 カリフォルニア 94002, ベルモント，デコーブン アベニュー 2517 (72)発明者 ジョリベッティ，ダン エム. アメリカ合衆国 カリフォルニア 94025, メンロパーク，イースト クリーク プレ イス ７ (72)発明者 マックロウ，キンバリー エイ. アメリカ合衆国 ワシントン 98034，カ ークランド，エヌ．イー．137ティーエイ チ プレイス 10160

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １．有効量の生物材料を生物学的体腔または空隙に投与する工程を包含する、患 者の生体内の該管腔または空隙を完全にまたは部分的に、遮断、増強、封鎖、ま たは充填するための、方法。 ２．前記生物材料が、タンパク質、合成ポリペプチド、グリコサミノグリカン、 プロテオグリカン、ポリマー性ヒドロゲル、およびこれらの混合物からなる群よ り選択される、請求項１に記載の方法。 ３．前記生物材料が架橋されている、請求項２に記載の方法。 ４．前記生物材料がタンパク質である、請求項２に記載の方法。 ５．前記タンパク質がコラーゲンである、請求項４に記載の方法。 ６．前記コラーゲンが、原線維性コラーゲンである、請求項５に記載の方法。 ７．前記コラーゲンが、粒状の架橋原線維性コラーゲンおよび非架橋原線維性コ ラーゲンを含む、請求項６に記載の方法。 ８．前記粒状の架橋原線維性コラーゲンが、組成物の約25重量％と約95重量％と の間を含み、そして非架橋原線維性コラーゲンが、組成物の約５重量％と約75重 量％との間を含む、請求項７に記載の方法。 ９．前記コラーゲンが、非原線維性コラーゲンである、請求項５に記載の方法。 １０．前記非線維性コラーゲンが、メチル化コラーゲンである、請求項９に記載 の方法。 １１．前記コラーゲンが、変性コラーゲンである、請求項５に記載の方法。 １２．前記生物材料が、ヒアルロン酸、コンドロイチン硫酸Ａ、コンドロイチン 硫酸Ｃ、デルマタン硫酸、ケラタン硫酸、ケラト硫酸、キチン、キトサン、ヘパ リン、およびこれらの誘導体からなる群より選択されるグリコサミノグリカンで ある、請求項２に記載の方法。 １３．前記グリコサミノグリカンが、ヒアルロン酸である、請求項１２に記載の 方法。 １４．前記生物材料が、コラーゲンの架橋混合物および１種以上のグリコサミノ グリカンを含む、請求項２に記載の方法。 １５．前記生物材料が、加熱、放射線照射、またはアルデヒド、カルボジイミド 、エポキシド、およびイミダゾールからなる群より選択される化学的架橋剤を用 いて架橋される、請求項３に記載の方法。 １６．前記生物材料が、合成親水性ポリマーを用いて架橋される、請求項３に記 載の方法。 １７．前記合成親水性ポリマーが、官能基的に活性化されたポリエチレングリコ ールである、請求項１６に記載の方法。 １８．前記合成親水性ポリマーが、二官能基的に活性化されたポリエチレングリ コールである、請求項１７に記載の方法。 １９．前記生物材料が、親水性架橋剤と疎水性架橋剤との混合物を用いて架橋さ れる、請求項３に記載の方法。 ２０．前記親水性架橋剤が官能基的に活性化されたポリエチレングリコールであ る、請求項１９に記載の方法。 ２１．前記疎水性架橋剤が、前記生物材料との結合の前に、２つ以上のスクシン イミジル基を含む疎水性ポリマーである、請求項１９に記載の方法。 ２２．前記疎水性ポリマーが、ジスクシンイミジルスベレート、ビス(スルホス クシンイミジル)スベレート、ジチオビス(スクシンイミジルプロピオネート)、 ビス(2-スクシンイミドオキシカルボニルオキシ)エチルスルホン、3,3'-ジチオ ビス(スルホスクシンイミジル)プロピオネート、およびこれらのアナログおよび 誘導体からなる群より選択される、請求項２１に記載の方法。 ２３．前記生物材料が、第２の合成ポリマーを用いて架橋される第１の合成ポリ マーを含み、ここで、該第１の合成ポリマーが２つ以上の求核基を含み、そして 該第２の合成ポリマーが該第１の合成ポリマーの求核基と共有結合を形成し得る ２つ以上の求電子基を含むポリマー性ヒドロゲルである、請求項３に記載の方法 。 ２４．前記生物材料が、ヒアルロン酸、デキストラン硫酸、デキストラン、非架 橋スクシニル化コラーゲン、非架橋メチル化コラーゲン、グリコーゲン、グリセ ロール、右旋糖、マルトース、脂肪酸のトリグリセリド、および卵黄リン脂質か らなる群より選択される１つ以上の生体適合性の流体潤滑剤をさらに含む、請求 項１に記載の方法。 ２５．前記生物材料が、セラミック粒子、架橋または非架橋粒状原線維性コラー ゲン、ゼラチンビーズ、ポリテトラフルオロエチレンビーズ、シリコンゴムビー ズ、種々のヒドロゲルポリマーのビーズ、シリコンカーバイドビーズ、ガラスビ ーズ、およびこれらの混合物からなる群より選択される粒状物質をさらに含む、 請求項１に記載の方法。 ２６．前記生物材料が、創傷治癒因子、抗生物質、および抗微生物剤からなる群 より選択される１つ以上の生物学的活性薬剤の有効量をさらに含む、請求項１に 記載の方法。 ２７．前記生物学的活性薬剤が、トランスフォーミング増殖因子(TGF)、線維芽 細胞増殖因子(FGF)、血小板由来増殖因子(PDGF)、表皮増殖因子(EGF)、結合組織 活性化ペプチド(CTAP)、骨原性因子、およびこれらの生物学的に活性なアナログ 、フラグメント、および誘導体からなる群より選択される創傷治癒因子である、 請求項２６に記載の方法。 ２８．前記管腔が、ファローピウス管、気管、動脈、および腸からなる群より選 択される、請求項１に記載の方法。 ２９．前記空隙が、動脈瘤、損傷、裂、フィステル、嚢胞、および任意の組織の 憩室からなる群より選択される、請求項１に記載の方法。 ３０．前記空隙が、不要なまたは所望されない増殖物、流体、細胞、または組織 の外科的除去、化学的除去、または生物学的除去の結果として前記患者の生体内 に存在する、請求項１に記載の方法。 ３１．前記生物材料および架橋剤が、該生物材料と該架橋剤との間で実質的に架 橋が起こる前に、前記管腔または空隙に注入によって投与される、請求項１に記 載の方法。 ３２．前記架橋された生物材料が、脱水されている、請求項３に記載の方法。 ３３．前記脱水され、架橋された生物材料が粒状形態で存在し、薬学的に受容可 能な非水性キャリア中に懸濁され、そして前記管腔または空隙に注入によって投 与される、請求項３２に記載の方法。 ３４．前記脱水され、架橋された生物材料が、桿形態で存在し、そしてカテーテ ルまたは内視鏡を介して前記管腔または空隙に投与される、請求項３２に記載の 方法。 ３５．患者の生体内の生物学的管腔または空隙を、完全にまたは部分的に、遮断 、増強、封鎖、または充填するための方法であって、生物材料および架橋剤を含 む有効量の生物材料組成物を、該生物材料と該架橋剤との間で実質的な架橋が起 こる前に、注入によって該管腔または空隙に投与する工程を包含する、方法。 ３６．患者の生体内の生物学的管腔または空隙を、完全にまたは部分的に、遮断 、増強、封鎖、または充填するための方法であって、粒状の脱水され架橋された 生物材料および非水性キャリアを含む生物材料組成物の有効量を、該管腔または 空隙に注入する工程を包含する、方法。 ３７．患者の生体内の生物学的管腔または空隙を、完全にまたは部分的に、遮断 、増強、封鎖、または充填するための方法であって、脱水され架橋された生物材 料組成物の有効量を含む１つ以上の桿を、該管腔または空隙に移植する工程を包 含する、方法。